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Tesis > TÍTULO

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"E2, regulador de transcripción y replicación del papilomavirus humano: interacción con ADN, dinámica conformacional y divergencia evolutiva" (2010). Dellarole, Mariano. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Más de 50 tipos de papilomavirus humanos (HPV) infectan epitelio mucoso causando una variedad de lesiones benignas y malignas. El dominio C-terminal de la proteína E2 de HPV (E2C) discrimina entre cuatro sitios de ADN altamente similares regulando el ciclo de vida del virus vía la activación de la replicación y la activación y/o represión de la transcripción. Con el fin de tratar de entender la naturaleza de la interacción entre E2C y ADN, realizamos un análisis detallado del complejo utilizando herramientas bioinformáticas y el contenido de información en las secuencias proteicas y nucleotídicas y usando técnicas biofísicas, proteínas E2C recombinantes y sitios sintéticos de ADN específicos y no-específicos. Antes de estudiar el rol de la interacción E2C-ADN, nos focalizamos en el proceso de polimerización no-funcional de E2C dado que su desarrollo es reprimido por la presencia de ADN específico. Inducida por temperatura, la polimerización de E2C se desencadena mediante la formación de un núcleo estructurado y finaliza en un paisaje morfológico de oligómeros solubles con propiedades amiloideas. El estudio computacional de la interacción E2-ADN de todos los tipos de HPV mucosos indica que las proteínas E2 de distintos tipos poseen propiedades de discriminación de ADN similares. Las diferencias en la interacción E2-ADN se encuentran principalmente en la secuencia de ADN específico, en acuerdo con el análisis de la unión de E2C a diferentes sitios mediante titulaciones isotérmicas de calorimetría. Basado solamente en la secuencia de ADN, logramos predecir diferencias en la energía de unión las cuales se ordenaron en seis grupos de afinidades discretas. Ciertas jerarquías de afinidades como también distancias entre sitios y presencia de sitios de metilación se encontraron estadísticamente asociados con tipos de HPV propensos a ser malignos. Estudiamos la estabilidad y la propiedad de discriminación de secuencia de cinco proteínas E2C homólogas de identidad de secuencia proteica en el rango 44% al 77%. La desnaturalización al equilibrio y la cinética de desplegado en cloruro de guanidinio mostró que todos los dominios son homodímeros estables que se desnaturalizan vía un mecanismo de dos estados. Medimos la unión a distintos sitios de ADN y confirmamos que el mecanismo de unión para todos los complejos es el mismo en base a una genuina compensación entropico-entálpica. Nuestros resultados muestran que la inusual estructura de barril-beta de E2C puede acomodarse a numerosas mutaciones manteniendo las propiedades cruciales de conformación y función. Pero la unión cooperativa a sitios adyacentes de ADN mostró que los componentes entálpicos-entrópicos de la reacción como la deformación del ADN puede divergir entre distintas homólogas en acuerdo con un fuerte acoplamiento entre la dinámica global de la proteína y el reconocimiento del ADN.

Abstract:
More than 50 Human papillomavirus (HPV) types infect mucosal epithelia causing a variety of benign and malign lesions. The C-terminal domain of HPV E2 protein (E2C) discriminates between four highly similar cognate DNA sites in order to regulate the virus life cycle by activating replication and repressing and/or activating transcription. In order to try to understand the nature of the interaction between E2C and DNA, we performed a detailed analysis of the complex using bioinformatics tools and the information content on DNA sequences and using biophysical techniques and recombinant engineered and homologous E2C proteins and synthesized specific and nonspecific DNA sites. Before studying the role of the E2C-DNA interaction, we focused on the nonfunctional polymerization process of E2C as its development is repressed by the presence of DNA binding sites. Triggered by heat, the polymerization of E2C starts by formation of a stable and structured nucleus and ends in an organized morphology landscape of soluble amyloid-like oligomers. The computational study of the E2-DNA interaction of all mucosal HPV types, indicates that E2 proteins have similar DNA discrimination properties. Differences in E2-DNA interaction among HPV types lie mostly in the target DNA sequence, in agreement with the analysis of binding of E2C to different sites using isothermal titration calorimetry. Based on DNA sequences only, we could predict differences in binding energies which clustered into six discrete affinity hierarchies. Finally, certain distances between sites, affinity hierarchies and their eventual changes upon methylation, are statistically associated with high-risk types. We studied the stability and DNA discrimination properties of five homologous E2C proteins with sequence identities ranging from 45% to 77%. Equilibrium denaturation and unfolding kinetics in guanidinium chloride showed that all five domains are very stable homodimers that unfold via a two-state mechanism. We used isothermal titration calorimetry to follow binding of the five proteins to three different DNA sites. Genuine enthalpy-entropy compensation confirms that the binding mechanism is the same for all complexes. The five domains have nearly identical capacities for DNA sequence discrimination despite the high degree of sequence divergence. Our results show that the unusual E2C beta-barrel can accommodate many mutations while retaining its crucial conformational and functional properties. But cooperative binding to tandem DNA E2 site showed that the enthalpic-entropic components of the reaction and DNA deformation can diverge in agreement with a strong coupling between global dynamics and DNA recognition.

"Eco-epidemiología de vectores de Leishmania spp. en el noreste de la Argentina (Provincia de Misiones)" (2012). Fernández, María Soledad. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La leishmaniasis es una enfermedad de transmisión vectorial producida por parásitos tripanosomatídeos del género Leishmania (Kinetoplastida: Trypanosomatidae), los vectores involucrados son flebótomos (Díptera: Psychodidae: Phlebotominae) y los reservorios son mamíferos. En nuestro país el ser humano es considerado un hospedador accidental. En Misiones (noreste de la Argentina), donde se realizó esta tesis, se registran casos de leishmaniasis tegumentaria (LT) y leishmaniasis visceral (LV). El trabajo se llevó a cabo en dos áreas: 1) un área endémica de LT, en una zona de chacras ubicada en un frente de deforestación al sur de la ciudad de Puerto Iguazú donde se registró un brote en los años 2004-2005, con Nyssomyia whitmani como vector de Leishmania braziliensis y con reservorio desconocido; y 2) en un foco de LV (ciudad de Posadas), donde se registró el primer caso humano en el país (2006), con Lutzomyia longipalpis como vector de L. infantum (syn chagasi) y el perro doméstico como reservorio. Para el área endémica de LT se realizaron estudios de la composición de la comunidad de vectores en el tiempo y entre ambientes dentro de las chacras, relacionando a los flebótomos con variables climáticas y ambientales. Además se estudió el papel de los micromamíferos como potenciales reservorios de Leishmania spp. Para la ciudad de Posadas, se describió la distribución de Lu. longipalpis y sus cambios en el tiempo y se relacionó la abundancia con variables ambientales. Para ambos escenarios se encontró que la abundancia de los vectores estaría explicada al menos en parte por variables ambientales (principalmente relacionadas con la cobertura vegetal y la abundancia de animales silvestres y/o domésticos) y en el caso del escenario de transmisión de LT se encontró asociación positiva con variables climáticas (temperatura, precipitación). La abundancia de vectores se asoció con la de micromamíferos, sin embargo no se encontró evidencia suficiente para incriminarlos como reservorios. La distribución espacial de vectores resultó heterogénea en ambos escenarios, en la ciudad de Posadas se encontró un patrón de islas de alta abundancia de vectores, incrementándose la abundancia del vector entre los años 2007 y 2009. Para ambos escenarios (LT y LV) se recomienda alejar sitios de cría y dormideros de animales domésticos de la vivienda y de la ceja de monte (LT) cuando corresponda y reforzar cuidados de protección personal y tenencia responsable de mascotas (LV) en situaciones de riesgo donde exista mayor probabilidad de contacto hombre-vector, siendo la primavera y el verano las estaciones de mayor abundancia de los vectores.

Abstract:
Leishmaniasis is a vector-borne disease caused by parasites of the genus Leishmania (Kinetoplastida: Trypanosomatidae), sandflies are the vectors involved (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae) and mammals are the reservoirs. In our country the man is considered an accidental host. In Misiones (northeastern Argentina), where this thesis were performed, tegumentary leishmaniasis (TL) and visceral leishmaniasis (VL) were recorded. This work was carried out in two areas: 1) an intense deforestated area endemic of LT, composed by farms, in the south of the city of Puerto Iguazú where an outbreak took place in 2004-2005, with Nyssomyia. whitmani as a vector of Leishmania braziliensis and unknown reservoir, and 2) in a focus of VL (Posadas), where the first case were recorded for the country (2006), with Lutzomyia longipalpis as vector and the domestic dog as reservoir. For the LT endemic area studies of the sandfly community were conducted along the time and between habitats within the farms, relating sandflies with climatic and environmental variables. In addition we studied the role of small mammals as potential reservoirs of Leishmania spp. In the city of Posadas, the distribution of Lu. longipalpis and its changes over time and abundance were related to environmental variables. For both scenarios it was found that the abundance of vectors would be explained at least partially by environmental variables (mainly related to vegetation cover and abundance of wildlife and /or domestic animals) and in the case of the LT scenario it was found a positive association between vectors and climatic variables (temperature, precipitation). The abundance of vectors was associated with small mammals, but it was not found enough evidence to incriminate them as reservoirs. The spatial distribution of vectors was heterogeneous in both scenarios and in the city of Posadas it was found vectors concentrated in limited „islands‟ of high abundance, and that the vector abundance increased between 2007 and 2009. For both scenarios (TL, VL, LV) is recommended to remove resting and breeding sites of domestic animals near the house and the forest edge (TL) where it is appropriate and enhance protective care and responsible pet ownership (VL) at risk situations where there is greater probability of man-vector contact, being the spring and summer the seasons of greatest abundance of vectors.

"Ecoepidemiología de Fasciola hepática (Trematoda, Digenea) en el norte de la provincia de Corrientes destacando aspectos ecológicos de Lymnaea columella (Pulmonata, Lymnaeidae) y su rol como hospedador intermediario" (2009). Prepelitchi, Lucila. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La fasciolosis, causada por Fasciola hepatica, es una parasitosis de gran importancia para el ganado doméstico porque ocasiona importantes pérdidas económicas a nivel mundial. En Argentina es endémica y la cuarta enfermedad más importante para el ganado vacuno, su hospedador definitivo. Con el objetivo de describir la dinámica de transmisión de F. hepatica en una región de Argentina con clima subtropical, se realizaron muestreos estacionales entre la primavera de 2002 y de 2005 en un establecimiento en el norte de la Provincia de Corrientes. Se identificó al caracol hospedador intermediario, se caracterizó su hábitat y se estudió su abundancia, estructura y dinámica poblacional en función de las condiciones climáticas y ambientales. Se estimó la prevalencia por F. hepatica en el hospedador intermediario y definitivo. Una sequía de 6 meses en el medio del estudio permitió estudiar su impacto en la población de caracoles y en la dinámica de transmisión de la fasciolosis. En el la zona de estudio se detectó un foco de transmisión de F. hepatica bien establecido con altas prevalencias en ambos hospedadores. Lymnaea columella fue el único hospedador intermediario hallado, siendo éste su primer registro de infección natural por F. hepatica en Argentina. Antes de la sequía la prevalencia de L. columella osciló entre 0 y 9% y la del ganado bovino entre 7,9 y 95%. La mayor prevalencia se observó en otoño e invierno, cuando las variables climáticas no limitaron el desarrollo de los caracoles ni del parásito. Durante la sequía no se encontraron caracoles vivos y la prevalencia en el ganado disminuyó de 3,8% a cero. Cuando mejoraron las condiciones ambientales los caracoles se recuperaron rápidamente. La infección apareció simultáneamente en caracoles y en ganado un año después de la sequía, con prevalencias de 0,1% y 1,6%, respectivamente. Se recolectaron en total 7.851 L. columella en Bañados y Malezales, dos ambientes típicos del Macrosistema del Iberá. Durante los períodos húmedos se hallaron caracoles todo el año, con altas abundancias en invierno, intermedias en otoño y primavera y bajas en verano, siendo esta última la estación más crítica por las altas temperaturas y la falta de agua. Durante los períodos desfavorables los individuos medianos fueron los más resistentes y los que permitieron una rápida recuperación de la población. La dinámica de transmisión de F. hepatica en la zona de estudio estuvo influenciada principalmente por la disponibilidad de agua. Con suficiente humedad en el ambiente la transmisión se produce durante todo el año pero ante una sequía de 6 meses de duración se interrumpió naturalmente. El calor y la falta de agua producirían la muerte de los estadios de vida libre del parásito y de los caracoles infectados, disminuyendo la contaminación de las pasturas. En base a esta información se propone un programa de control de la fasciolosis que podría hacerse extensivo a otras regiones con climas y ambientes semejantes al de la zona de estudio.

Abstract:
The fasciolosis, caused by Fasciola hepatica, is a parasitic disease of great veterinary importance due to major economic losses in livestock, the definitive host. In Argentina, fasciolosis is endemic and the fourth most important livestock disease. To investigate the transmission dynamics of F. hepatica in a subtropical Argentine region, seasonal samplings were performed over a three-year study period between spring 2002 and 2005 in a cattle farm in the north of Corrientes Province. The intermediate snail host was identified and its habitat was characterized. The abundance and population structure and dynamics were analyzed in relation to climate and environmental conditions. The prevalence of F. hepatica infection was determined in both hosts. A 6-month drought occurring in the middle of the study was an opportunity to investigate its impact on the snail population and on the transmission dynamics. A well-established transmission focus of F. hepatica was detected in the study area, with high prevalence values in both hosts. Lymnaea columella was the only intermediate host found, this being the first record of natural infection of this snail with F. hepatica in Argentina. Before the drought, the prevalences of L. columella and cattle ranged between 0-9% and 7.9-95%, respectively. The highest prevalence values were obtained in autumn and winter, when climate conditions favored snail and parasite development. No snails were found during the drought and prevalence in cattle decreased from 3.8% to zero. The snail population achieved full recovery when environmental conditions became milder. Infection appeared simultaneously in snails and cattle one year after the drought, with prevalences of 0.1 and 1.6%, respectively. A total of 7,851 L. columella were collected in Bañados and Malezales, two typical environments of the Iberá Macrosystem. Snails were found throughout the humid periods, with high abundances in winter, intermediate in autumn-spring and low in the hot, dry summer. The medium-sized snails were more tolerant to unfavorable environmental conditions, allowing a rapid population recovery. The transmission dynamics of F. hepatica in the study area was mainly influenced by water availability: transmission occurs all year round in humid periods and it is naturally interrupted by a 6- month drought. High temperature and lack of water may lead to the death of free-living parasite stages and infected snails, thus limiting pasture contamination. A fasciolosis control program is proposed based on the information provided herein, which may be extended to other regions with similar climates and environments.

"Ecofisiología de anuros: aspectos del catabolismo del nitrógeno en condiciones fisiológicas y de estrés ambiental" (1995). Rovedatti, María Gabriela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudiaron aspectos del catabolismo de productos nitrogenados en anuros de diferentes especies, en distintos momentos de su ciclo de vida, en condiciones fisiológicas y de estrés ambiental. Se evaluaron los productos de excreción nitrogenada urinaria (amoníaco, urea y ácido úrico), la urea en plasma y la actividad específica de la arginasa y la uricasa. Se obtuvo el perfil de los productos de excreción nitrogenada urinaria de adultos Bufo arenarum, Leptodactylus ocellatus, Bufo granulosus, y Bufo chilensis de habitat terrestre, semiacuático, cavícola y montañoso respectivamente. La urea fue el componente mayoritario en la orina de todas las especies y se hallaron pequeñas cantidades de ácido úrico en las tres primeras. Se estudió el efecto de la dieta y el ayuno sobre el metabolismo de sustancias nitrogenadas para lo cual se dosó la actividad de la arginasa hepática, los productos de excreción nitrogenada urinaria y la urea en plasma en adultos de Bufo arenarum sometidos al consumo de diferentes cantidades de proteína. El ayuno redujo significativamente la actividad específica de la arginasa y aumentó el contenido total de proteínas hepáticas. La partición de los productos excretados resultó independiente de la ingesta de proteínas. Se realizó un seguimiento de la actividad de la arginasa en homogenatos totales de embriones a lo largo de 17 estadíos y el primer estadío larval de Bufo arenarum incubados en solución de Holtfreter diluída. La enzima fue detectada a partir del estadío de tubo neural y se observó un pequeño incremento en los estadios tempranos, el cual se tornó más pronunciado en la fase embrionaria final. La actividad se duplicó en el primer estadío larval coincidiendo con el momento en que los animales comienzan a alimentarse. La actividad de la arginasa hepática en larvas de Bufo arenarum de estadio 29 fue notablemente más alta que en el homogenato total de larvas de estadio 26; no obstante, la misma se mantuvo dos órdenes de magnitud por debajo de la actividad determinada en el hígado de adultos. Se evaluó la actividad de la arginasa embrionaria de Brgfoarenarum, en homogenatos totales en condiciones de estrés osmótico, desarrollando a los animales desde la fecundación en: agua destilada (simulando una sobrehidratación) y en solución de Holtfreter concentrada (simulando una ligera deshidratación) y se comparó con animales desarrollados en condiciones control (mantenidos en solución de Holtfreter). En los tres grupos la actividad creció a lo largo del tiempo. A partir del estadio de circulación branquial la actividad fue menor en el grupo de solución concentrada. En el último estadío embrionario, opérculo completo, la actividad específica de los tres grupos no presentó diferencias significativas. El estudio de la actividad de la uricasa hepática en homogenatos totales de embriones desde el estadío de opérculo completo, de larvas (estadio 29), juveniles (estadío 35) y adultos de Bufo arenarum indicó que la misma aumentó a medida que avanzó el desarrollo siendo significativa la diferencia entre el adulto y los estadios larvales. En hígado de larvas de estadío 29 mantenidas en solución de Holtfreter, agua destilada y solución de Holtfreter concentrada se encontró que la uricasa aumentó en la situación concentrada. Se comparó la actividad de la uricasa hepática de adultos de Bufo arenarum y Leptodactylus ocellatus siendo significativamente menor la de la segunda especie. Se evaluó la actividad de la arginasa en hígado de adultos de Bufo arenarum inyectados con cadmio, considerando a este metal como otro factor estresante ambiental. La misma disminuyó significativamente después de la inyección de cantidades subletales del metal. Se concluyó: l. El perfil de excreción nitrogenada no sería el mejor indicador de los ambientes que ocupan los anfibios adultos en cuanto a la disponibilidad de agua; la orina de los adultos de todas las especies estudiadas presentó cantidades medibles de ácido úrico. 2. La cantidad de proteínas ingerida por los anuros adultos modifica la actividad de la arginasa. 3. La actividad de la arginasa se detecta tempranamente en los embriones de Bufo arenarum y se incrementa a lo largo del desarrollo. 4. La arginasa embrionaria se ve reducida frente a un estrés osmótico al comienzo del desarrollo. 5. La uricasa aparece mas tardíamente en los embriones de Bufo arenarum que la arginasa y se incrementa a lo largo del desarrollo. 6. La actividad de la uricasa hepática en adultos podría ser considerada como un parámetro indicador del grado de terrestrialidad de los anuros ureotélicos. 7. En hígado de larvas la uricasa aumenta debido al estrés osmótico. 8. El cadmio inyectado a Bufo arenarum adultos provoca una reducción en la actividad de la arginasa hepática.

Abstract:
We studied aspects of nitrogen catabolism of different species of anurans, in varios stages of their life cycle, under physiological and stress conditions. Urinary nitrogen waste products (urea, ammonia and uric acid), plasma urea and the specific activity of arginase and uricase were evaluated; urine of adult of all studied species contained mensurable amounts of uric acid. The nitrogen waste product profile of Bufo arenarum, Leptodactylus ocellalus, Bufo granulosus, and Bufo chilensis of terrestrial, semi-aquatic, fossorial, and mountainous habitats respectively was obtained. Urea was the principal component in the urine of all the species, and small amounts of uric acid were found in the three first ones. The effect of diet and fasting on the nitrogen metabolism was studied. For this purpose, determinations of specific activity of hepatic arginase, urinary nitrogen excretion products and plasma urea were made in adult Bufo arenarum submitted to diets with different levels of protein. Fasting reduced arginase specific activity and increased total hepatic protein content. The distribution of excreted products proved to be independent of the ingested proteins. A screening of arginase activity in total homogenates of embryos was made along l7 stages and in the first larval stage of Bufo arenarum raised in Holtfreter solutions. The enzyme was detected from the stage of neural tube and a gradual increase in the early stages was observed, which became more pronounced at the end of embryonic development. The activity increased two fold at the beginning of larval stages when the animals start to feed. Hepatic arginase activity in Bufo arenarum tadpoles of stage 29 was remarkably higher than in total homogenates of stage 26 tadpoles; however, it remained two magnitude orders below the adult hepatic activity. Embryonic arginase activity of Bufo arenarum was evaluated in total homogenates in mild osmotic stress conditions, developing the animals from fertilization in: distilled water (simulating an overhydratation) and concentrated Holtfreter solutions (simulating slight dehydratation) and was compared with animals in control conditions (raised in Holtfreter solutions). In the three groups the activity increased with time. From the stage of gill circulation on the activity was lower in the group of concentrated solution. In the last embryonic stage, complete operculum, the specific activity of the three groups did not present significant differences. The study of hepatic uricase activity in total homogentes of embryos beginning at the stage of complete operculum, of tadpoles (stage 29), juveniles (stage 35) and adults of Bufo arenarum indicated that it was higher as the development advanced, the difference between the adults with respect to the other two stages being significant. In tadpoles of stage 29 liver mantained in Holtfreter solution, distilled water and concentrated Holtfreter solution it was found that uricase was increased in the concentrated situation. Hepatic uricase activity of adult Bufo arenarum and Leptodactylus ocellatus was compared, the one of the second species being significantly lower. Hepatic arginase activity of adult Bufo arenarum injected with cadmium was evaluated considering this metal as an anthropogenic environmental stressant. It decreased significantly after the injection of sublethal amounts of the metal. It was concluded that: 1. The nitrogen excretion profile would not be the best indicator of the environment of the adult amphibians in terms of water availability. 2. Arginase activity is modified by the amount of proteins taken by adult anuran. 3. Arginase activity is detected early in Bufo arenarum embryos and it increases along its development. 4. Osmotic stress reduced embryonic arginase activity at the beginning of the development. 5. Uricase appears later than arginase in Bufo arenarum embryos, and it increases along the development. 6. Adult hepatic uricase activity could be considered as an indicator parameter of the terretriality of ureotelic anurans. 7. Osmotic stress increased tadpole liver uricase activity. 8. Cadmium injected to adult Bufo arenarum provokes reduction in hepatic arginase activity.

"Ecología de aves playeras migratorias durante la invernada, migración y el sobre-veraneo en Bahía Samborombón, Buenos Aires, Argentina" (2016-06-29). Martínez Curci, Natalia Soledad. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las poblaciones mundiales de aves playeras han disminuido drásticamente en las últimas décadas, principalmente a causa de la degradación de los hábitats sobre los que tienen estrecha dependencia. El objetivo general de esta tesis fue evaluar de manera integral las causas que condicionan la distribución y la abundancia de las aves playeras en la Bahía Samborombón, trabajando en escalas con diferente extensión espacial (escala de hábitat y paisaje) y temporal (largo y corto plazo). Para ello se caracterizaron los ensambles en función a la época del año y el tipo de ambiente que utilizan para alimentarse (Capítulo II); se describieron la dieta y las interacciones tróficas de las especies más abundantes (Capítulo III); se evaluó la importancia del área para el sobre-veraneo de una de las especies de mayor prioridad de conservación (Capítulo IV) y las posibles causas de este comportamiento (Capítulo V); y finalmente se evaluó la capacidad de variables ambientales medidas a escala de paisaje para explicar los patrones de distribución y abundancia observados (Capítulo VI). La Bahía Samborombón albergó los mayores números de aves playeras durante la primavera, otoño y verano, estaciones en las que el ensamble estuvo dominado por migrantes neárticas. Se estimó que utilizan el área porcentajes significativos de las poblaciones globales de Chorlo Pampa, Becasa de Mar, Playerito Rabadilla Blanca, Chorlito Doble Collar y Ostrero Común. Los principales ambientes de alimentación durante la bajamar fueron las planicies de marea estuariales. Allí los patrones de abundancia variaron mostrando una correlación espacio-temporal que indicó mayor similitud entre estaciones consecutivas. De este modo, las áreas con mayores densidades de aves playeras se desplazaron desde el sur hacia el centro de la bahía en el transcurso del año; recibiendo el sector que abarca desde canal 15 hasta Punta Rasa el mayor uso. Los patrones anuales fueron explicados significativamente por una relación negativa con la distancia al mar, variable que también explicó las variaciones en los patrones de abundancia durante el verano y el otoño. En el otoño también fue significativa la distancia a las desembocaduras de cuerpos de agua dulce. Las aves no respondieron a variables asociadas a características del paisaje que rodea a las áreas de alimentación o a la disponibilidad de áreas de descanso. Las especies coexistentes exhibieron diferenciación complementaria en dos dimensiones de su nicho trófico: composición taxonómica y talla del principal ítem presa. Se concluyó que la competencia interespecífica por explotación es capaz de modelar la composición del ensamble durante el otoño y el invierno. Nueve especies de migrantes neárticas permanecieron en el área durante el invierno (comportamiento conocido como sobre-veraneo), estación en la que la mayoría de las aves de este grupo se encuentra en áreas de cría septentrionales. Se identificó que Punta Rasa constituye el sitio de sobre-veraneo de mayor importancia conocido para la amenazada población de playeros rojizos de Tierra del Fuego. Se investigaron las causas de este fenómeno y se concluyó que los sobre-veraneantes son aves tanto adultas como juveniles que presentan al inicio del sobre-veraneo escasa o nula acumulación de reservas pre-migratorias y ausencia o retraso en los patrones de muda esperados para individuos en condiciones de migrar. El porcentaje de playeros rojizos adultos sobre-veraneantes incrementó en los últimos años. Sin embargo, la mayoría de estos individuos lograron reestablecer sus migraciones en años subsiguientes. Este conjunto de resultados permitirá mejorar la conservación y manejo regional de las especies para las cuales la Bahía Samborombón mostró alberga números significativos. Además podrán aplicarse a estrategias locales que permitan un manejo efectivo del área, basando las acciones en información detallada sobre requerimientos tróficos y de uso de hábitat. Específicamente, se destaca la necesidad de incrementar las medidas de protección de Punta Rasa no solo en las épocas de paso migratorio y descanso no reproductivo, sino también en la etapa de sobre-veraneo que no había sido considerada previamente. Asimismo, el conocimiento de la variación temporal en el uso del espacio, permitirá desarrollar estrategias específicas de protección que contemplen la mayor importancia de los sectores sur y centro de la Bahía Samborombón, y especialmente de las áreas cercanas a desembocaduras de arroyos, ríos y canales.

Abstract:
World shorebird populations have declined drastically in recent decades, mainly due to the degradation of the habitats on which they rely on. The main objective of this thesis was to comprehensively evaluate the causes affecting the distribution and abundance of shorebird at Samborombón Bay, considering different spatial (habitat- and landscape-scale) and temporal (short and long term) scales. To achieve this goal, assemblages were characterized according to season and feeding habitat (Chapter II); diet and trophic relationships of the most abundant species were described (Chapter III); the importance of the area for over-summering (Chapter IV) and the plausible causes of this behavior (Chapter V) were evaluated; and the ability of environmental variables measured at landscape scale to explain patterns of shorebirds distribution and abundance was assessed (Chapter VI). Samborombón Bay hosted the largest numbers of shorebirds during spring, autumn and summer, seasons when the assembly was largely dominated by Nearctic migrants. Estimates indicate that the area hosts significant percentages of the global populations of American Golden Plover, Hudsonian Godwit and White-rumped Sandpiper, Two-banded Plover and American Oystercatcher. The main feeding habitats during low tide were the estuarine intertidal mudflats. Abundance patterns in feeding areas do not remained constant through the year, but rather varied showing a spatiotemporal correlation that indicates greater similarity between consecutive seasons. Thus, areas with highest shorebird densities moved from the south to the center of the bay throughout the year. In this sense, the area from Canal 15 to Punta Rasa showed the greatest intensity of use. These annual patterns were significantly explained by a negative relationship with the distance to the sea, variable that also explained the variations in abundance observed during summer and autumn. During the latter season, a negative association with distance to rivers, streams and creeks was also identified. Shorebirds’ abundance was not related to variables associated to the surrounding soil coverage or to the availability of resting areas. Co-occurring species showed complementary differentiation in two dimensions of their trophic niches: taxonomic composition and size-class. It was concluded that interspecific competition for food resources might shape the composition of the assemblage during autumn and winter. Individuals of nine Nearctic migrants’ species remained at Samborombón Bay during the breeding season (phenomenon known as over-summering). In this sense, the southern tip was identified as the most important over-summering site for the endangered Red Knot population of Tierra del Fuego. The causes of this phenomenon were investigated and it was concluded that oversummerers are both juvenile and adult birds with absent or delayed pre-migratory conditions, showing low fat accumulation and delayed moult of flight and body feathers. The percentage of adult oversummering Red Knots increased in recent years. However, most of these individuals were able to resume their migrations in subsequent years. This set of results might help to improve regional management and conservation efforts focused on the species for which Samborombón Bay hold significant numbers. They might also be applied to local strategies that allow an effective management based on detailed information on shorebirds’ requirements. Specifically, this work highlights the need to increase protection measures not only during migration and wintering of Nearctic migrants, but also during over-summering. In addition, the knowledge of the spatio-temporal distribution patterns might allow the development of specific management strategies that consider the importance of southern and central sector of the bay, and particularly of the mouths of streams, channels and creeks.

"Ecología de comunidades microbianas heterótrofas (bacterias y flagelados incoloros) de la turbera de Rancho Hambre, Provincia de Tierra del Fuego" (2014-03-20). Quiroga, María Victoria. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis se caracterizó por primera vez la estructura y variación temporal de las comunidades que componen la trama trófica planctónica, en relación con parámetros ambientales en cinco lagunas de la turbera de Rancho Hambre, Tierra del Fuego. En primavera, la estructura del plancton fue similar en todas las lagunas. Por el contrario, en el verano tardío se observaron diferencias en la abundancia y biomasa de los distintos componentes tróficos entre los cuerpos de agua someros y profundos. Estas diferencias se explicaron parcialmente en función de los patrones característicos de variación de la temperatura, los cuales a su vez estuvieron regulados por la morfometría de los cuerpos de agua. El estudio en mayor profundidad de la comunidad de flagelados heterótrofos reveló un cambio en el tipo de regulación de la abundancia de los mismos en los dos períodos contrastantes, bottom-up en primavera vs. top-down en verano tardío, relacionado con cambios en la abundancia y composición del zooplancton. Además, se realizó un estudio polifásico de las bacterias heterótrofas utilizando microscopía de epifluorescencia, análisis de imágenes y citometría de flujo. De acuerdo con un análisis multivariado (RDA) la composición y abundancia de los distintos morfotipos del bacterioplancton estarían determinadas fundamentalmente por la temperatura, el pH y la calidad del carbono orgánico disuelto (índice a440). Se observaron a su vez patrones citométricos característicos para las bacterias heterótrofas de los distintos ambientes acuáticos dentro de la turbera, regulados principalmente por el pH, la conductividad y la clorofila a. Estos resultados demuestran que la alta diversidad y variabilidad temporal de los hábitats acuáticos de la turbera de Rancho Hambre influye fuertemente sobre la estructura de la comunidad de bacterias heterótrofas.

Abstract:
This is the first characterization of the structure and temporal variation of the communities composing the whole planktonic food web as related to environmental factors over two consecutive ice-free periods in five pools within the Rancho Hambre peat bog, Tierra del Fuego. Although the structures of the planktonic communities in spring were similar, in late summer the abundance and biomass of the different trophic compartments differed among small, shallow water bodies and large ones, partially dictated by distinct pool size-driven patterns of water temperature variation. Detailed analysis of the heterotrophic flagellates revealed a general shift in the regulation of their abundance, changing from bottom-up control in spring to top-down in late summer. This related to variations in zooplankton abundance and composition. Heterotrophic bacteria were studied using a polyphasic approach combining epifluorescence microscopy, image analysis and flow cytometry. A multivariate analysis (RDA) showed that temperature, pH and dissolved organic carbon quality (index a440) mainly regulated the abundance and composition of the different planktonic bacterial morphotypes, whereas the characteristic cytometric patterns of heterotrophic bacteria observed for the different aquatic habitats were influenced by pH, conductivity and chlorophyll a concentration. These results demonstrate that the high environmental diversity and temporal variability of Rancho Hambre peat bog aquatic systems drive the structure of their heterotrophic bacterial communities.

"Ecología de la dispersión de semillas por hormigas en Jatropha excisa Griseb. (Euphorbiaceae)" (2011). Aranda Rickert, Adriana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis se estudia la mirmecocoria o dispersión de semillas por hormigas en Jatropha excisa Griseb. (Euphorbiaceae), una planta nativa del Noroeste de Argentina. Las semillas de esta especie poseen un apéndice rico en lípidos llamado eleosoma y un sistema de dispersión diplocórico (autocoria explosiva seguida por mirmecocoria). Ensayos a campo en la región fitogeográfica del Monte de la Provincia de La Rioja mostraron que las semillas de J. excisa son dispersadas por hormigas, y que la presencia del eleosoma aumenta su remoción por éstas. La estimación de las distancias de dispersión mediadas por el transporte por hormigas mostraron que la mirmecocoria otorga a las plantas el beneficio de la ganancia en distancia per se. Mediante el ofrecimiento experimental de semillas se identificaron 11 especies de hormigas que interactuaron con las semillas de J. excisa en el área de estudio. Mientras que siete especies consumieron el eleosoma in situ sin posterior transporte de la semilla, sólo tres especies removieron las semillas, y una sola de ellas, Pogonomyrmex cunicularius encosensis Forel, fue responsable del 84% de los eventos de remoción observados. La remoción de las semillas se correlacionó positivamente con la abundancia de esta especie en los sitios de muestreo. Dentro de los hormigueros de P. cunicularius, las semillas de J. excisa fueron transportadas verticalmente desde las cámaras de cría, donde el eleosoma fue consumido, hasta los basureros internos superficiales, donde la semilla fue descartada. Las semillas descartadas conservaron su viabilidad, y la germinación fue favorecida por la remoción experimental del eleosoma. Finalmente, diversos aspectos de la biología de P. cunicularius (dieta, ecología de la nidificación, ritmo diario y estacional de actividad, y comportamiento) son asociados a su capacidad para comportarse como la principal dispersora de semillas de J. excisa en el área de estudio. Los resultados aquí presentados apoyan la hipótesis de la mirmecocoria como un mutualismo desigualmente difuso, en donde una única especie mutualista domina el proceso de dispersión, en contraposición a la visión canónica de la mirmecocoria como un mutualismo igualmente difuso, en donde múltiples mutualistas son equivalentes en cuanto a la frecuencia y consecuencias de su interacción.

Abstract:
This dissertation describes myrmecochory or seed dispersal by ants in Jatropha excisa Griseb.(Euphorbiaceae), a native plant of Northwest Argentina. The seeds of this plant species have a lipid-rich appendage called elaiosome and a diplochorous dispersal system (explosive autochory followed by myrmecochory). Field studies conducted in the Monte Desert phytogeographical region of the La Rioja Province, showed that the J. excisa elaiosome–bearing seeds are dispersed by ants, and that the presence of the elaiosome enhances their probability of being removed by them. The estimation of the seed dispersal distances achieved by myrmecocohory showed that the distance per se is an important benefit of the plant associated to the ant-mediated transport. Experimental seed offering assays identified 11 ant species attracted to the J. excisa seeds in the study area. Whereas seven of these ant species consumed the elaiosome in situ without transporting the seeds, only three species removed the seeds, being one of them, P. cunicularius pencosensis Forel, responsible of 84% of the observed seed removal events. Seed removal in the study sites was positively correlated with the abundance of this ant species. Once inside the P. cunicularius pencosensis nests, the J. excisa seeds were transported vertically from the deep brood chambers, where the elaiosome was consumed, up to the superficial refuse chambers, where the seeds were discarded. These discarded seeds conserved their viability, and germination assays showed that the experimental removal of the elaiosome enhanced their germination. Finally, some aspects of the biology of P. cunicularius pencosensis are described (diet, nesting ecology, daily and seasonal activity rhythm and behaviour), and are related to the capability of this ant species to act as the most important seed disperser of the J. excisa seeds in the study area. The results here presented support the hypothesis of myrmecochory as an unevenly diffuse mutualism, where a single mutualist ant species dominates the dispersal process, in contraposition to the canonical view of myrmecochory as an evenly diffuse mutualism, where multiple mutualist partners are similar in terms of the frequency and consequences of their interactions.

"Ecología de la marmosa pálida, Thylamys pallidior (Marsupialia, Didelphidae), en el desierto de Monte Central" (2010). Albanese, María Soledad. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La marmosa pálida es un pequeño marsupial que habita las zonas áridas de Sudamérica y cuya distribución es la más extensa dentro del género. Su historia natural es poco conocida, siendo éste el primer estudio ecológico de un marsupial en el Monte. El objetivo de esta tesis fue analizar la ecología de una población de marmosas en un ambiente árido y con gran heterogeneidad espaciotemporal. Se abordaron cuatro aspectos: la estructuración temporal de la población, la estrategia reproductiva, el uso y selección del hábitat y los hábitos alimentarios. El estudio fue realizado en 3 hábitats diferentes de la Reserva de Ñacuñán, Mendoza, entre los años 2005-2007. El esfuerzo de trampeo fue de 27.600 noches-trampas y se obtuvieron 118 capturas. Las marmosas presentaron una marcada estacionalidad en su abundancia, donde las lluvias juegan un papel importante probablemente al limitar la disponibilidad de artrópodos, su principal fuente de alimento. Su reproducción fue coincidente con la estación más favorable del año, encontrándose evidencias de mortalidad pos-reproductiva de adultos y reemplazo anual de generaciones, lo que daría lugar a una estrategia semélpara, poco común entre vertebrados. T. pallidior mostró hábitos escansoriales usando preferentemente áreas abiertas y de baja complejidad. Los resultados apoyan además un mecanismo de segregación tanto espacial, trófica como temporal del ensamble de micromamíferos al cual esta especie pertenece y sugiere una dimensión adicional: la segregación del espacio vertical. La sincronía de su historia natural con el ambiente, junto con las adaptaciones fisiológicas le permite a T.pallidior hacer frente a las condiciones ambientales heterogéneas y rigurosas que caracterizan al desierto de Monte.

Abstract:
The desert mouse opossum is a small marsupial inhabiting the aridlands of South America with the largest geographic distribution in the genus. Knowledge about its ecology is scarce, this being the first ecological study of a marsupial in the Monte. The objective of this thesis was to analyze the ecology of a mouse opossum population in an arid and heterogeneous environment. Three aspects of its ecology were studied: temporal population structure, habitat utilization and feeding habits. The study was carried out in three habitat types of the Ñacuñan Reserve, Mendoza, during the period 2005-2007. The capture effort was 27.600 trap-nights and 118 individuals were captured. Mouse opossums showed a strong seasonal abundance influenced by rainfall and probably limited by the availability of arthropods, their main food resource. Reproduction was coincident with the most favorable season, and showed some evidence of post-reproductive mortality and an annual replacement of generations, probably implying a semelparous strategy, very uncommon among vertebrates. T. pallidior showed scansorial habits and mostly used open and low complexity areas. The results support spatial, trophic and also temporal segregation mechanisms among species of this assemblage, and suggest an additional mechanism of resource partitioning: vertical spatial segregation. T. pallidior showed synchronicity with the environment in many aspects of its natural history. These strategies, coupled with physiological adaptations, allow the desert mouse opossum to cope with the heterogeneous and rigorous conditions that characterize the Monte desert.

"Ecología de monogenea en el Río de la Plata : patrones y procesos en las comunidades de Pimelodus maculatus y P. albicans" (1997). Gutiérrez, Pablo Andrés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo general de esta investigación fue estudiar los procesos que estructuran las comunidades de Monogenea en peces dulceacuicolas, tomando como modelo los parásitos presentes en las branquias de Pimelodus maculatus y P. albicans (Siluriformes: Pimelodidae) en el Río de la Plata (Puerto de Buenos Aires). En P. maculatus se encontraron 5 especies de Monogenea y 6 en P. albicans. Los Monogenea estudiados corresponden a los géneros Demidospermus, Unibarra, y Anacanthophallus. Los hospedadores compartieron tres especies de parásitos, dos del género Demidospermus y la tercera perteneciente al género Anacanthophalus. El número de Monogenea y la cantidad de sectores branquiales ocupados se correlacionaron positivamente con el largo del hospedador solamente en P. maculatus. En ambos hospedadores la cantidad de espacio disponible (nichos vacantes) fue abundante. En las dos especies hospedadoras se encontró correlación positiva entre el número de especies de Monogenea y la carga parasitaria total. Las asociaciones negativas entre las especies de Monogenea en ambos hospedadores fueron escasas o inexistentes. Se encontraron pocos casos de solapamiento completo de nichos entre las especies de Monogenea. Las especies del género Demidospermus revelaron tener un patrón similar de preferencia por determinadas hemibranquias. Se encontró variación estacional en la caracterización de las infracomunidades de P. maculatus. Los Monogenea que parasitan ambas especies hospedadoras constituyen comunidades componente que no son consecuencia de ensambles estocásticos de especies. Se demuestra que el patrón de encuentros intraespecíficos no se debe a procesos estocásticos. Se analizan los patrones encontrados en base a la hipótesis de segregación no competitiva de especies.

Abstract:
The general goal of this investigation was to examine the processes structuring Monogenea communities in freshwater fishes. Communities of Monogenea occurring on the gills of Pimelodus maculatus and P. albicans (Siluriformes, Pimelodidae) in the Rio de la Plata (Port of Buenos Aires) were used as model system. Five and six species of Monogenea (genus Demidospermus, Unibarra and Anacanthophallus) were found in P. maculatus and P. albicans, respectively. Study hosts shared three of these parasite species, two from the genus Dernidospermus and one from the genus Anacanthophalus. In P. maculatus the total abundance of Monogenea and the number of parasitisized gill sectors were positively correlated with host length. Both host species had large amounts of unoccupied gill space (i.e., vacant niches). The number of Monogenea species increased with total parasite burden per host in both hosts. Strongly negative associations between species of Monogenea were infrequent in the study system; complete niche overlap between parasite species also occurred in only a few cases. Species in the genus Dernidospermus showed similar preferences for some hemibranches. Infracommunities of P. maculatus exhibited strong seasonal variation in structure. Results indicate that the structure of Monogenea component communities in the study hosts is not a consequence of a stochastic assembly of species. In particular, patterns of parasite intraspecific aggregation did not result from random processes. Patterns found in these Monogenea parasite communities are therefore suggested to conform the non-competitive species segregation hypothesis.

"Ecología de pastizales : Descomposición de la materia orgánica" (1981). Landaburu, Argentino Carlos. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Ecología del mejillón Mytilus platensis d’Orb. de bancos circalitorales" (1974). Penchaszadeh, Pablo Enrique. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Ecología del mesozooplancton (Appendicularia y Copepoda) en aguas costeras Norpatagónicas (42°-46°S): ciclo anual y relaciones tróficas" (2013-11-21). Spinelli, Mariela Lorena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudió la estructura trófica del mesozooplancton con énfasis en Appendicularia y Copepoda en la región norpatagónica, poniendo atención en su variación espacial y estacional. Adicionalmente, se realizaron estudios con especies dominantes en esta zona para evaluar cómo factores ambientales pueden afectar las relaciones tróficas en este ecosistema. Para ello, se analizó experimentalmente el efecto subletal de la radiación ultravioleta en las tasas de alimentación de copépodos. En todo el ciclo estacional dominaron los copépodos y la fracción nanoplanctónica de fitoplancton. En verano se destacó una menor diversidad de especies, entre las que dominó Euterpina acutifrons. Asimismo, se observó que la RUV inhibe la alimentación de dicha especie y que en sus estadios larvales son capaces de realizar foto-reparación. En cuanto a la variación espacial, en el sistema frontal de Península Valdés dominaron las menores tallas del mesozooplancton (‹ 500 μm) (copépodos calanoideos, ciclopoideos, nauplii y apendicularias) y las larvas de Engraulis anchoita en la zona homogénea. La distribución de la Chl-a y la estratificación térmica de la columna de agua fueron los principales factores que influyeron en las diferencias observadas en la distribución y composición del mesozooplancton. La apendicularia Oikopleura dioica, presentó una distribución vertical similar de día y de noche en la zona homogénea, en cambio en la zona de transición se encontraron las mayores tallas e individuos maduros por encima de la termoclina durante la noche. Este trabajo brinda nueva información sobre la comunidad mesozooplanctónica que sostiene especies ícticas de alto valor comercial en la zona de estudio. En este sentido, los datos aportados por esta tesis sobre el efecto de la RUV en la alimentación de una especie dominante, plantea un punto de partida para nuestro entendimiento de cómo los factores asociados al cambio global pueden modificar las relaciones tróficas.

Abstract:
The present thesis report studies on the trophic structure of mesozooplankton focusing on Appendicularia and Copepoda in the North Atlantic Patagonian region, with special attention to its spatial and seasonal variations. Furthermore, it studies the dominant species in this area to evaluate how environmental factors can affect trophic relationships in this ecosystem. To do so, the sublethal effect of ultraviolet radiation on feeding rates of copepods, were experimentally examined. Both copepods and the nanoplanktonic fraction of phytoplankton dominated during the whole seasonal cycle. Lower diversity of species was found during summer, being Euterpina acutifrons the dominant one. It was also observed that the UV radiation inhibits the feeding of this species and that they are able to photo-repair in their larval stages. As for the spatial variation in the frontal system of Peninsula Valdés, small sizes (‹ 500 μm) such as mesozooplankton (calanoids, ciclopoyds, nauplii and appendicularians) and Engraulis anchoita dominated in the homogeneous area. The distributions of Chl-a and the thermal stratification of the water column were the main factors influencing the observed differences in the distribution and composition of mesozooplankton. The appendicularian Oikopleura dioica showed a similar vertical distribution both during day and night in the homogeneous area, whereas in the transition area larger sizes and more mature individuals were found above the thermocline at night. This work provides new information about the mesozooplankton community that supports fish species of high commercial value. In this sense, the data provided by this thesis concerning the UVR effect on the feeding of a dominant species represents a starting point for our understanding of how the factors associated with global change can alter the trophic relationships in this region.

"Ecología del mesozooplancton marino en ambientes costeros de altas latitudes: Canal Beagle (extremo sur de Sudamérica) y Caleta Potter (Isla 25 de Mayo, Antártida)" (2015-03-06). Aguirre, Gastón Ezequiel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudiaron las dinámicas temporal y espacial de las comunidades de mesozooplancton del Canal Beagle y de Caleta Potter, con énfasis en la fracción de tamaño más pequeño. Para tal fin, se realizaron muestreos con una red de 100 μm de poro. Además, se investigaron las causas de 3 eventos de mortandad masiva del krill antártico Euphausia superba, observados en las costas de Caleta Potter en 2008 y 2009. La comunidad del Canal Beagle se estudió durante un ciclo estacional entre noviembre-2005 y septiembre-2006. Los copépodos fueron el grupo más abundante, siendo las especies dominantes Oithona similis, Ctenocalanus citer y Drepanopus forcipatus. Otros taxones característicos fueron la apendicularia Fritillaria borealis y el rotífero Synchaeta sp. La comunidad exhibió una marcada variación temporal, presentando una mayor diversidad en septiembre y noviembre, cuando se registraron elevadas abundancias de larvas meroplanctónicas y una mayor concentración de clorofila-a. Esto indicaría un fuerte acoplamiento bento-pelágico. La ausencia de un claro patrón espacial del mesozooplancton, sugiere que el área estudiada se comporta como un cuerpo de agua semicerrado. En Antártida, se estudió el mesozooplancton en los sectores interno y externo de Caleta Potter, entre octubre-2008 y junio-2009. La mayor abundancia se registró en otoño. Las especies características fueron los copépodos O. similis, C. citer, Calanus propinquus, y la apendicularia F. borealis. El krill se halló con mayor frecuencia en el sector externo. Se observó una marcada variación temporal en la comunidad, diferente en cada sector. La diversidad fue superior durante el período octubre-marzo en el sector externo, y durante marzo-junio en el sector interno. Se investigó el contenido estomacal e intestinal de krill hallado muerto durante los eventos de mortandad masiva, y de krill capturado en las aguas de Caleta Potter. El volumen total de partículas en los estómagos del krill hallado muerto estuvo compuesto principalmente por partículas litogénicas, y por diatomeas en los estómagos del krill vivo. Además, las partículas litogénicas encontradas en krill vivo resultaron de menor tamaño. Se concluye que partículas litogénicas de gran volumen en la columna de agua, al ser ingeridas por el krill, podrían obstruir su sistema digestivo, ocasionando los eventos de mortandad masiva observados. Palabras clave: zooplancton, copépodos marinos, krill antártico, mortandad masiva, Canal Beagle, Caleta Potter, Antártida

Abstract:
The temporal and spatial dynamics of the mesozooplankton communities of the Beagle Channel and Potter Cove were studied with emphasis on the smaller size fraction. Mesozooplankton samples were collected with a 100 μm mesh net. In addition, the causes of 3 mass mortality events observed on the coasts of Potter Cove during 2008 and 2009 were investigated. The community of the Beagle Channel was studied during a seasonal cycle between 2008 and 2009. Copepods were the most abundant group. Among them, Oithona similis, Ctenoacalanus citer and Drepanopus forcipatus were the dominant species. Other important taxa were the appendicularian Fritillaria borealis and the rotifer Synchaeta sp. The community showed a strong temporal variation, with a higher diversity in September and November, in coincidence with higher densities of meroplanktonic larvae and chlorophyll-a concentration. This may indicate a strong bentho-pelagic coupling. The absence of a clear spatial pattern, suggests that the studied area behaves as a semi-enclosed water body. In Antarctica, the mesozooplankton community was studied in both the inner and outer areas of Potter Cove, between October 2008 and June 2009. The highest abundance was registered in autumn. The most important species were the copepods O. similis, C. citer, Calanus propinquus, and the appendicularian F. borealis. Krill was found more frequently in the outer cove. The community showed a strong temporal variation, which was different among areas. Diversity was higher during October-March in the outer cove, but it was higher during March-June in the inner cove. The stomach and gut contents of dead krill from the mass mortality events, were investigated in relation to the stomach and gut contents of live krill caught in Potter Cove. The total volumes of particles in the stomachs of dead krill and live krill were mainly composed of lithogenic particles and diatoms, respectively. Moreover, lithogenic particles found in live krill were smaller than in dead krill. It is concluded that the ingestion of large lithogenic particles in the water column may interrupt the passage of food in the digestive tract of krill, causing the mass mortality events studied here. Keywords: zooplankton, marine copepods, Antarctic krill, mass mortality, Beagle Channel, Potter Cove, Antarctica

"Ecología molecular de dos especies de cormoranes endémicas de Patagonia (Phalacrocorax magellanicus y P. atriceps)" (2013-05-30). Calderón, Pablo Luciano S.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la presente tesis se abordarán diversos aspectos de la biología de dos especies hermanas de cormoranes: Phalacrocorax magellanicus (Cormorán cuello negro, CCN) y Phalacrocorax atriceps (Cormorán imperial, CI), utilizándo herramientas moleculares para responder a las preguntas de interés. Estas especies son endémicas de la Patagonia, y comparten muchos de sus requerimientos ecológicos, difiriendo principalmente en lo que respecta a la dispersión post-reproductiva y a los patrones de alimentación. Ambos aspectos han demostrado tener gran influencia en el moldeado de la estructura genética y filogeográfica de otros taxa de aves marinas. Nuestros análisis demostraron que ambas especies presentan una significativa estructuración genética; resultando todo los estimadores (i.e. Fst, Φst) mas altos en el CCN que en el CI, presentando el CI mayores tasas de migración (m) que el CCN, además solo la segunda de éstas especies presentó un clara estructura filogeográfica. Estos resultados son acordes a nuestras hipótesis iniciales, y con lo observado en otros taxa de aves marinas, dado que el CCN es una especie residente anual, que forrajea en las cercanías de su colonia; mientras que el CI es una especie dispersiva con un mayor campo de acción en el mar durante los viajes de forrajeo. Por otro lado, se revisaron aspectos taxonómicos y de la biología reproductiva del CI, la cual es una especie politípica y socialmente monogámica. En éste caso encontramos falta de sustento genético para las subespecies P. atriceps atriceps y P. a. albiventer, aunque si se encontró evidencia soportando la distinción entre P. atriceps y P. bransfieldensis. Además se demostró que el CI presenta una clara correspondencia entre las denominadas monogamia social y monogamia genética, ya que no se encontró evidencia de copulas por fuera de la pareja, como así tampoco de parasitismo intraespecífico de nidada. Palabras clave: Cormoranes, aves marinas, Patagonia, estructura genética, filogeografía, flujo génico, copulas extra pareja.

Abstract:
In this thesis we addressed different aspects of the biology of two sister shag species: Phalacrocorax magellanicus (Rock shag, RS) and Phalacrocorax atriceps (Imperial shag, IS), employing molecular tools to answer our questions. These species are endemic of Patagonia, and share most of their ecological requirements, differing strongly in relation to their non-breeding season dispersion and feeding patterns. These ecological traits have shown to be important at the time of shaping the genetic and phylogeographic structure of other seabird taxa. Our analysis showed that both species have a significant genetic structure, although all estimators (i.e. Fst, Φst) were higher in RS than in IS, the later showed the higher migration rate values (m), also only RS showed a neat phylogeographic structure. These results are in agreement with our staring hypothesis and with the observed in other seabird taxa, because RS is a year-round resident species that forages in the proximities of its colonies (inshore); whereas the IS is a dispersive species with offshore foraging habits. On the other hand, we addressed aspects realted to the taxonomic status and the reproductive biology of P. atriceps, which is a polytypic and socially monogamus species. In this case, we did not find genetic evidence supporting the P. a. atriceps and P. a. albiventer subspecies, although we did find support for the distinction between P. atriceps and P. bransfieldensis. Also, we showed that the Imperial shag presents a clear correspondence between social and genetic monogamy, because we did not find evidence of extra pair paternity, nor intraspecific brood parasitism in it. Key words: shags, seabirds, Patagonia, genetic structure, phylogeography, gene flow, extra pair paternity.

"Ecología pelágica del Pingüino de Magallanes (Spheniscus magellanicus): determinación de áreas de uso, comportamiento y gasto energético, asociados a la obtención de alimento" (2013-03-08). Sala, Juan Emilio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El estudio de la ecología pelágica de los predadores tope marinos avanzó notoriamente durante la última década debido a los avances tecnológicos y la miniaturización de los registradores electrónicos de comportamiento. En el presente trabajo se hizo uso de estas herramientas para identificar los patrones de alimentación y de buceo, la ubicación de las áreas de forrajeo, la cantidad de alimento consumido y el gasto energético durante la permanencia en el mar del Pingüino de Magallanes (Spheniscus magellanicus). Dichas variables constituyeron buenos indicadores de las poblaciones reproductivas de la especie. El trabajo se realizó en cinco colonias de nidificación ubicadas a lo largo del rango de distribución reproductiva del Pingüino de Magallanes en la costa patagónica de Argentina (unos 2200 Km) (i.e. Punta norte , Bahía Bustamante , Puerto Deseado , Puerto San Julián e Isla Martillo . Las Aves de BB y PD fueron las que mostraron un mayor esfuerzo de alimentación en relación a las distancias recorridas y tiempos de permanencia en el mar durante los viajes de forrajeo. El análisis del esfuerzo de alimentación considerando sólo la dimensión horizontal (distancias recorridas en la superficie y tiempos de permanencia) mostró que aquellos sitios cuyos individuos realizaron mayor esfuerzo en el mar, fueron los que presentaron las tasas mas bajas de incremento poblacional. El comportamiento de buceo (y el esfuerzo asociado en la dimensión vertical) difirió sustancialmente entre colonias. Los pingüinos de BB bucearon el doble de profundo que el resto (52 vs. ≈ 22 m), permanecieron hasta un 66% más de tiempo sumergidos, recorrieron más distancia debajo del agua en cada inmersión y realizaron menos buceos por viaje. Los pingüinos de PD en cambio, y en alguna medida los de PSJ, realizaron la mayor cantidad de buceos por viaje, acumularon la mayor cantidad de horas debajo del agua, presentaron altas eficiencias de buceo y permanecieron una alta proporcion de tiempo sumergidos en la fase de fondo. En consecuencia, las aves de ambas colonias fueron las que recorrieron las distancias más largas debajo del agua por viaje de alimentación. Las diferencias observadas entre colonias respecto al patrón de buceo y alimentación parecerían estar asociadas al tipo y característica de las presas consumidas por los pingüinos de cada localidad. Así, las aves de las colonias que obtuvieron presas menos redituables en términos energéticos y de masa húmeda (i.e. PD y PSJ) fueron las que desplegaron el mayor esfuerzo de buceo y alimentación (e.g. porcentaje de tiempo buceando, número de buceos por hora, etc). Lo contrario ocurrió con los pingüinos de PN y BB, quienes obtuvieron presas mas redituables, aunque a un costo energético muy elevado en BB. El estudio directo del gasto energético durante la alimentación mostró valores elevados en PD y BB, cuyas aves gastaron más energía por buceo y por hora de permanencia en el mar. Si bien los biceos desarrollados por los pingüinos de PSJ fueron poco costosos energéticamente, la desproporcionada cantidad de inmersiones que realizan en cada viaje de alimentación, derivó en un elevado gasto energético acumulado durante todo el viaje. Tanto el gasto energético total como la tasa de gasto energético por viaje de alimentación se correspondieron en forma negativa con la tasa de incremento poblacional de las colonias estudiadas. Finalmente, a lo largo de esta tesis doctoral se presentaron argumentos, a partir de resultados robustos, que indican que tanto el coportamiento como el esfuerzo que los pingüinos realizan durante su etapa pelágica de alimentación, podrían ser utilizados como indicadores confiables y a corto plazo del estado y salud de sus poblaciones.

Abstract:
Studies on pelagic ecology of marine top predators progressed significantly during the last decade due to advances in technology and miniaturization of electronic devices to record animal behaviour. In this thesis, it was made use of these tools to identify foraging and diving patterns, foraging locations, amount of food consumed and energy expenditure during the at-sea foraging excursions of breeding Magellanic Penguin (Spheniscus magellanicus). These variables seems good indicators of the effort performed by animals to get food and were associated with trends in the breeding populations of the species. The work was carried out in five colonies located along the breeding distribution of the Magellanic Penguin in the Patagonian coast of Argentina (about 2200 Km) (i.e. Punta norte , Bahía Bustamante , Puerto Deseado , Puerto San Julián and Isla Martillo ). Birds from BB and PD were those who showed the greatest foraging effort in relation to distances traveled and time spent at sea during foraging trips. The analysis of the foraging effort at the level of the horizontal dimension (i.e. distances traveled on the surface and time spent at sea) showed that those sites with high effort at sea, were those with the lowest rates of population increase. The diving behaviour (and its associated effort in the vertical dimension) differed significantly between colonies. Penguins from BB dived twice as deep as the rest (52 vs. ≈ 22 m), remained submerged up to 66% longer, covered more distance underwater per dive, and made less amount of dives per foraging trip. Alternatively, penguins from PD, and to some extent those from PSJ, made the greatest number of dives per trip, accumulated more hours underwater, showed high diving efficiency and remained a high proportion of time submerged in the bottom phase. Accordingly, birds from both colonies were those that traveled longer distances underwater per foraging trip. The differences observed between sites regarding diving and foraging pattern appear to be associated with the type and characteristics of the prey consumed by penguins in each locality. Thus, birds from the colonies that obtained less profitable prey items in terms of energy and wet mass (i.e. PD and PSJ), developed the highest foraging and diving effort(e.g. percentage of time diving, number of dives per hour, etc). The opposite occurred with penguins from PN and BB, who obtained the most profitable prey, although at a very high energy cost in BB. The study of energy expenditure during foraging showed the highest values at PD and BB, where birds spent more energy per dive and hour at sea. While the immersions developed by penguins from PSJ were energetically less expensive, the disproportional number of dives performed per foraging trip. The total energy expenditure and the rate of energy expenditure per foraging trip were negatively correlated with rates of population increase of the study colonies. Finally, during this thesis several arguments, based on robust results, were presented to indicate that the behaviour, as well as the effort made by foraging penguins could be used as reliable shory-therm indicators of the state and health of their populations.

"Ecología pesquera de lagos y embalses patagónicos (Argentina)" (2001). Baigun, Claudio Rafael Mariano. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Esta tesis presenta un análisis de las características ecológico-pesqueras en 54 lagos y embalses patagónicos de Argentina. Mediante Análisis de Componentes Principales se realizó un ordenamiento de los ambientes basado en diferentes características limnológicas, definiéndose tres tipologías básicas de lagos y embalses que definieron ambientes de ecotono, andinos y de meseta, estos dos últimos grupos conteniendo, a su vez, subcategorías. Los lagos y embalses patagónicos exhibieron diferencias a lo largo de un gradiente ambiental definido por las caracteristicas tróficas y edáficas, principalmente y secundariamente por factores morfométricosy climáticos. La composición y abundancia relativa de especies se obtuvieron mediante muestreos intensivos y extensivos, utilizando una batería experimental de enmalladoras. Se analizó el comportamiento de las redes en función de la longitud y peso de los ejemplares capturados y se corrigieron por selectividad, las estructuras de tallas de las especies en aquellos ambientes con muestreos estacionales. Se identificó un total de 10 especies a saber. Odontesthes microlepidotus (pejerrey patagónico), O. bonariensis (pejerrey bonaerense), Percichthys trucha (perca boca chica), P. colhuapiensis (perca bocona), Oncorhynchus mykiss (trucha arco iris), Salmo trutta (trucha marrón), Salvetinus fontinalis (trucha de arroyo), S. namaycush (trucha de lago), Salmo salar sebago (salmón encerrado), Galaxias platei (puyen grande) y Aplochiton sp. (peladila) Los saimónidos, que son especies exóticas en la Patagonia, representaron el 53 % de las capturas experimentales. Los percíctidos, a su vez, constituyeron el 22 % de la captura, mientras el pejerrey patagónico representó el 19 % de las capturas. Dado la importancia que poseen los salmónidos en Patagonia, se analizó el proceso de su introducción y las caracteristicas de sus siembras por tipo de ambiente (lagos, laguna, río y arroyo), provincia y año. Mediante Análisis de Correspondencia se determinó que la trucha de lago y el salmón encerrado estuvieron muy asociados a los ambientes lénticos de grandes dimensiones, mientras la trucha de arroyo resultó caracteristica de los ambientes lóticos de bajo órden y la trucha marrón de ambientes tipo laguna o lénticos someros. La trucha arco iris fue la mas ubicua de las especies. En todos lo ambientes se determinó la longitud y peso medio de las especies y en ambientes con muestreos intensivos se estimaron los factores de condición relativa. Utilizando estructuras de tallas se establecieron los parámetros de crecimiento, tasas de mortalidad natural, edades y longitudes críticas. Tanto la longitud media como infinita estuvieron relacionadas con los niveles de nitrógeno y fósforo total, transparencia y profundidad media, si bien no siempre de manera lineal, sugiriendo la existencia de óptimos ambientales. Para una misma especie, se encontró además, que estos parámetros variaron entre ambientes. El Análisis de Correspondencia mostró la existencia de ambientes con comunidades dominadas por salmónidos y perclctidos-atherínidos respectivamente y también de carácter mixto. La riqueza de especies estuvo correlacionada con el área de los ambientes y se determinó que la abundancia de peces correlacionó positivamente con nitrógeno orgánico total, fósforo total y clorofila y negativamente con la profundidad media y transparencia. Al aplicarse Análisis Discriminante se estableció que la conductividad, temperatura media anual del aire, transparencia del agua, fósforo total y profunddad media resultaron ser las variables que contribuyeron a expficar un 81 % de la variación entre las medas de las abundancias de las especies de las comunidades tipo, siendo el porcentaje de ambientes correctamente clasificado por la función discriminante del 74 %. Los rendimientos pesqueros se obtuvieron mediante el empleo de modelos empíricos derivados de pesquerias deportivas y comerciales de lagos y embalses del hemisferio norte y utizando modelos de producción en aquellos ambientes con mayor información poblacional para estimar el máximo rendimiento sostenible. Se consideró que los ambientes cordileranos generan un rendimiento anual de hasta 5 kg/ha, los de ecotono entre 20-40 kg/ha y los de la meseta de 20a30 kg/ha. Sobre la base de la tipología lacustre desarrollada y de las comunidades definidas se proponen pautas para una gestión que contemple asignar distintas estrategias de uso y aprovechamiento de los recursos, mantener un uso sustentable de aquellas pesquerías con mayor demanda y conservar y mejorar las poblaciones de peces nativos. Se concluyó que la gestión y manejo de los recursos pesqueros patagónicos, a escala regional, debe apoyarse en criterios ambientales y utilizar, a escala local, la información derivada del análisis de poblaciones y de las pesquerías existentes. Asimismo, es necesario modificar los paradigmas de manejo tradicionales que existen en Patagonia, incorporando la conservación dela biodiversidadcomo eje central del uso sustentable de los recursos, así como para desarrollar estrategias de manejo adecuadas.

Abstract:
This thesis presents an analysis of fisheries ecology on 54 Argentine patagonian lakes and reservoirs. An ordination of lakes and reservoirs based on different limnological characteristics was performed using Principal Component Analysis. Three basic types of environments: located on the ecotone, Andean mountains and plateau were defined, having the last two types subcategories. Patagonian lakes and reservoirs exhibited differences across a gradient defined mainly by trophic and edaphic characteristics, and secondarily by morphometry and climatic factors. Species composition and relative abundance were obtained by extensive and intensive sampling designs using experimental gill net gangs. Gill net captures were analyzed as function of length and weight and for those lakes with seasonal information, length structures were corrected by selectivity for the different species. A total 10 species were identified: Odontesthes hatcheri (pejerrey patagónico), O. bonariensis (pejerrey bonaerense), Percichthys trucha (perca boca chica), P. colhuapiensis (perra bocona), Oncorhynchus mykiss (trucha arco iris), Salmo trutta (trucha marrón), Salvelinus fontinalis (trucha de arroyo), S. namaycush (trucha de lago), Salmo salar sebago (salmón encerrado), Galaxias platei (puyen grande) and Aplochiton sp. (peladilla). Salmonids are exotic species in Patagonia and represented 53 % of experimenta capturas. In turn, percictids comprised 22 %, whereas 19 % corresponded to Patagonian pejerrey. Due to the importance of salmonids in Patagonia, the introduction process and stocking characteristics in dfferent waterbodies types (large and small lakes, rivers and creeks) were analyzed. Using Corrrespondence Analysis it was found that S. namaycush and S. salar sebago were strongly associated with large lakes, whereas S. trutta was mostly related to small lakes size. In turn. S. fontinalis appeared mostly associated with creeks, while O. mykiss was the most ubiquitous of the salmonid species. Species mean length and mean weight were estimated for all lakes and reservoirs where extensive information was available and relative condition was determined in those environments with intensive samplings. Using length structure analysis growth parameters, natural mortality rates and critical age and length were estimated. Both mean and infinite length were related to total nitrogen, total phosphorous, transparency and mean depth, although not linearly in all cases, suggesting the existence of ecological optima. It was noted that for same species, natural mortality and critical length varied among environments. Community patterns were analyzed using Correspondence Analysis and showed that several communities were dominated by only salmonids and atherinopsids-percicitids respectively, but other were mixed. Species richness was related to surface lakes and fish abundance was correlated with total organic nitrogen, total phosphorous and clorophyil and negativer with mean depth and transparency. Use of Discriminant Analysis showed that conductivity, mean annual air temperature, transparency and mean depth were the variables that accounted by for 81 % of differences between mean species abundance at each community type. Discriminant function correctly classified 74 % of environments Fish yield were estimated applying empirical models derived from sport and commercial fisheries from Northern Hemisphere lakes and reservoirs. Also production models were used and maximum sustainable yield was estimated for those environments with suitable fishery information. Such estimations allowed to predict that Andean lakes yield up to 5 kg/ha, ecotone lakes may range between 20 and 40 kg/ha and plateau lakes and reservoirs will yield between 20 to 30 kg/ha on annual basis. Based on lake typology and community types, several guidelines were proposed to develop strategies for resource exploitalion, to maintain sustainable use of those fisheries with high fishing pressure and to preserve and enhance natives pecies populations. It was concluded that management of Patagonian fisheries resources requires the application of environmental criteria at a regional scale and use of population parameters and fishery information at a local scale. It is also necessary to modify traditional management paradigms, encompassing the conservation of biodiversity as a main goal for a sustainable resource use and for developing sound management strategies.

"Ecología poblacional del delfin oscuro Lagenorhynchus obscurus (Gray, 1828) en el Litoral Patagónico, Atlántico SudOccidental" (1999). Dans, Silvana L.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo general de esta Tesis comprende el estudio de la biología y ecología de la población de delfines oscuros. Lagenorhynchus obscurus, en Patagonia, Argentina, y particularmente la obtención de los parámetros necesarios para evaluar el estado y tendencia de la población y los efectos dela captura incidentalen pesquerias. Con el objetivo de analizar el rango de distribución de la especie en el litoral patagónico, se recopiló información a partir de: observadores entrenados a bordo de buques pesqueros y oceanográficos o ejemplares capturados accidentalmente en redes de pesca; observadores entrenados durante relevamientos aéreos; capitanes, patrones y marineros de buques pesqueros durante actividades de pesca; observadores menos entrenados y registros previos disponibles en la literatura. Los delfines oscuros se distribuyen desde Porto Alegre, Brasil (30°S), hasta Bahía Nassau (55°26'S 67°18'W), cerca de Cabo de Hornos, y desde la linea de costa hasta las 200mn (límite de la Zona de Exclusión Económica). El tamaño medio de las manadas avistadas en los relevamientos aéreos fue de 3,85 delfines/grupo, y aproximadamente el 95% de las manadas estuvieron formadas por menos de 10 individuos. Los pescadores por el contrario avistaron una mayor proporción de manadas formadas por 20-50 delfines y de más de 50 delfines. Se estudió la abundancia de los delfines oscuros entre los paralelos 40°44' y 47°S, estimando la densidad mediante transectas de línea desde una aeronave, analizando los datos con el programa DISTANCE2.2. La densidad fue estimada en 1.259 delfines/mn2 para el área comprendida entre Punta Ninfas e Isla Rasa (43° a 45°S), y en 0,219 delfines/mn2 en el Golfo San Jorge, y la diferencia fue estadisticamente significativa. El número de individuos y sus coeficientes de variación para los dos estratos fueron 4.570 (CV=32,88%) y 2.058 (CV=31,84%), respectivamente, con una estimación para las dos áreas agrupadas de 6.628 individuos (CV=25.54%). La distribución espacial de los avistajes sugiere la concentración de los animales en determinadas zonas. Se analizaron datos de edad, talla y estado reproductivo de 50 ejemplares de delfines oscuros, provenientes de la captura incidental o hallados muertos en las playas. La edad máxima registrada fue de 27 años en un individuode sexo desconocido. Las longitudes máximas registradas fueron 174 y 173cm en las hembras y en los machos respectivamente. La longitud asintótica en las hembras fue estimada en 167cm. A partir del análisis de gónadas, la edad de madurez sexual en las hembras fue estimada alrededor de los 6 años. La tasa de ovulación fue constante respecto de la edad, y estimada en 0.40 ovulaciones/año. El 45% de las hembras eran maduras, del cual el 44% estaban preñadas. Estos resultados sugieren un ciclo de cria bianual. Con el objetivo de caracterizar a la población de delfines oscuros del litoral patagónico, se analizó la estructura de la comunidad de parásitos gastrointestinales, a partir de una muestra de 23 delfines capturados incidentalmente en la pesquería de arrastre de Patagonia. Todos los delfines estaban infectados con un total de 3.936 individuos. Solamente cinco especies estuvieron presentes, de las cuales tres fueron clasificadas como componentes (Prevalencia ≥ 10%): Anisakis simplex, Braunina cordifonnis y Hadwenius sp. A. símplex presentó una prevalencia de 100%, y mostró las máximas abundancia e intensidad media (104,87 ind./hosp. infectado). B. cordiformis presentó una alta prevalencia de 86,96%. mientras que Hadwenius sp. se presentó con una prevalencia de 52.17%. El indice de diversidad de Brillouinpara la comunidad de helmintos intestinales fue 0,329 nit/individuo, con una equitatividad de 0,393. La diversidad y riqueza de las infracomunidades intestinales están dentro del rango de las de otros pequeños cetáceos. Las más altas tasas de captura incidental de delfines oscuros en la costa de Patagonia, han sido registradas en artes de arrastre pelágico para la pesca de langostino. El uso de este arte comenzó en 1982. Durante 1984, el esfuerzo de pesca ejercido alcanzó su valor máximo y el número de delfines capturados durante ese año fue estimado en 442-560 individuos, disminuyendo paulatinamente luego de este período. El uso de las redes pelágicas fue registrado hasta 1994, cuando las estimaciones de capturas anuales alcanzan un valor minimo igual a 36 delfines. La composición de edades de la muestra de la captura incidental presentó una mayor proporción de hembras que de machos, y la edad media de las hembras fue de 6 años y con poca dispersión. Esta muestra no sería representativa de la estructura de edades de la población, existiendo posiblemente mortalidad selectiva hacia los individuos cercanos a la madurez sexual. La estmctura de edades a la muerte, obtenida de individuosmuertos hallados en las playas, sugiere un patrón de mortalidad edad-especifica constante con la edad. Como último objetivo, se analizó la capacidad potencial de la población de revertir una posible declinación. La Comisión Ballenera Internacional recomienda establecer valores críticos en función de la tasa máxima de incremento poblacional expresada como R=λ-1,donde λ es la tasa finita o anual de incremento. La obtención de este parámetro se basó en la utilizaciónde tablas de vida modelo de otras especies de grandes mamíferos. Se utilizó una simulación de Monte Carlo para incorporar la incertidumbre en los parámetros (edad de primera reproducción, patrón de supervivencia, tamaño poblacional, capturas incidentales). La tasa de incremento se calculó a partir de un modelo basado en la matriz de Leslie, considerando solamente la fracción hembra de la población. Para la fertilidad se asumió una tasa anual de preñez constante can la edad correspondiente a un ciclo de cría de 2 o de 3 años y una relación de sexos al nacer de 1:1. Se consideró la edad de primera reproducción a los 7 años. En el caso de la supervivencia edad-específica, del espacio definido por el conjunto de curvas de supervivencia modelo se seleccionaron al azar curvas para el delfín oscuro. Mediante esta aproximación, se obtuvo una distribución de probabilidades de la tasa anual o finita de incremento. Los valores medianos fueron estimados en 1,79% para un ciclo de cria de 3 años y en 4,30% para un ciclo de cria de 2 años. Los valores obtenidos de tasa potencial de incremento poblacional se compararon con las tasas de captura, teniendo en cuenta las estimaciones de densidad para 1994-1995 y las capturas anuales mínimas y máximas estimadas para el período 1982-1995. Considerando como valor crítico a 1/2R, la tasa máxima de extracción se encontrarla en el orden del 2% del tamaño poblacional, y según el criterio 1/4R seria del 1% del tamaño poblacional, en las mejores condiciones reproductivas y el escenario más optimista de un ciclo de cria de 2 años. La incorporación de la incertidumbre tanto de los parámetros demográficos como de las tasas de captura, permite concluir que existe una probabilidad de 0,56 de que las capturas (estimadas para 1994), excedan el valor criticomás conservador, aún en las mejores condiciones reproductivas. Estos resultados, junto con el carácter dinámico de la pesqueria, la cual incluye un aumento en el esfuerzo de pesca con redes pelágicas, permiten sugerir que la especie presenta un carácter de vulnerable, requiriendo un seguimiento y evaluación continuos, y estimaciones precisas de tasas de captura.

Abstract:
The general objective of this work is the study of the biology and ecology of the dusky dolphin population off the coast of Patagonia, Argentina. In particular the objective included the estimation of parameters needed for the evaluation of the status and trend of the population and the effects of incidental catches in fisheries. Distribution of dusky dolphins off the coasts of Patagonia were reviewed by analysing information gathered by trained observers onboard vessels and aeroplanes, fishermen, entanglements in fishing gears and previous records in the literature. Dusky dolphins have been sighted from Porto Alegre, Brazil (30°S), to Bahía Nassau (55°26'S 67°18'W), near Cape Horn, and from the coast to the 200nmiles. The mean school size sighted from aerial surveys was of 3.42 dolphins/group and nearly 95% of herds (n=64) were equal to or less than 10 individuals. Fishermen sighted a larger proportion of schools ranging from 20 to 50 dolphins or more than 50 dolphins. The abundance of the species along the coasts of Patagonia was studied between 40°44'S and 47°. Line transect methods by means of aerial surveys, were applied to estimate the density of dolphins, and the data were analyzed using the program DISTANCE 2.2. Density was estimated in 1.259 dolphins/nm2 from Punta Ninfas to Isla Rasa (43° to 45°S), and 0.219 dolphins/nm2 for Golfo San Jorge, and they were significantly different. The total number of dolphins were 4,570 (CV=32.88%) and 2.058 (CV=31.84%), for the two areas respectively, with a pooled estimate of 6,628 (CV=25.54%). The spatial distribution of sightings suggests concentration of animals in some areas. A sample of 50 specimens found on the beaches or entangled in fishing gears were used to study age, length and reproductive status. The maximum age was 27 years old recorded in an individual of unknown sex. Maximum length were 174 and 173cm in females and males respectively. Asympthotic length of females was estimated in 167cm. By means of age determination and gonads analysis the age at sexual maturity was estimated close to six years old in the females. Mature females showed an ovulation rate of 0.40 ovulations/year, and 45% of the females were mature and 44% of them were pregnant. These results suggest a calving interval of 2 years. The structure of gastrointestinal helminth community was studied in order to improve the knowledge about population identity. The stomachs and intestines of 23 dusky dolphins were surveyed for helminths. All the dolphins were parasitized, with a total of 3.936 helminth individuals. Only five species occurred. of which three were common (Prevalence ≥ 10%): Anisakis simplex. Braunina cordifonnis and Hadwenius sp. A. simplex was present in all the dolphins and showed the highest abundance and mean intensity (104.9 individuals/infected host). B. cordiformis was next most common (87%). and Hadwenius sp. third (52.2%). Brillouin's diversity and evenness indices for the intestinal helminth community were 0.329 and 0.393. respectively. The diversity values and species richness were within the range for other small cetaceans. Highest rates of incidental catches of dusky dolphins off Patagonian coast, mostly occur in mid-water trawling for shrimp. At present, this fishing type is declining in use, but it was wider used during 80's. The use of this gear for shrimp began in 1982. During 1984, the fishing effort reached a peak and the number of dolphins caught was estimated in 442-560, decreasing during the following years. The use of mid-water nets for shrimp was recorded up to 1994. when mortality estimates by this gear reached a minimum value equal to 36 dolphins per year. The sample recovered from the fishery seems to be biased toward females and young mature classes, showing a mean age of 6 years in the females. This sample would not be representative of the age distribution in the population, suggesting selective mortality of young classes close to sexual maturity. The structure of the ages at death, collected from dead individuals found on the beaches, would suggest constant age-specific mortality pattern. Incidental mortality rates were evaluated by comparing them with critical values established by the International Whaling Commission by means of the potential rates of increase R=λ-1,where λ is the annual or finite rate of increase. This parameter was obtained by means of model life tables from other mammals with similar life histories. A Monte Carlo approach was used for taking into account the uncertainty in the parameters (age of first reproduction, survival rates, population size and incidental mortality rates). The rate of increase was computed by a Leslie matrix population model. Reproductive parameters of the projection matrix were obtained from the estimates of the calving interval and age at sexual maturity, considering two possible scenarios: a calving interval of 2 and 3 years. The space of model life tables was randomly sampled to obtain a survival pattern for the dusky dolphin. A probability distribution of the potential rate of increase was obtained. Median values were estimated in 1.79% if the calving interval is 3 years, and 4.30% if the calving interval is 2 years. Taking into account the criterion of 1/2R, maximum removal rate is 2% of the population size, and 1% for the other criterion 1/4R, if the calving interval is 2 years, representing the best scenario. Taking into account the uncertainty in parameters estimation, the probability that mortality rates estimated for 1994. which can be considered the current rates, exceeds the more conservative critical value were estimated in 0.56 in the best scenario of reproduction. These results suggest that incidental mortality in fisheries is a cause for concern in dusky dolphin population off Patagonia. The monitoring of this population and the improving of catch rate estimates are recommended, taking into account the dynamics of the fishery. which includes the possibility of an increase in the effort of mid-water gears and consequently a potential increase in dolphins mortality.

"Ecología reproductiva del Ñandú común, Rhea americana" (1998). Fernández, Gustavo Javier. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo se realizó un estudio sobre la ecología reproductiva del ñandú común (Rhea americana) en la localidad de General Lavalle (Provincia de Buenos Aires, Argentina). En el mismo se analizó la estructura social, comportamiento reproductivo y el éxito reproductivo de esta especie durante el período 1992-1996. Los resultados obtenidos en este estudio fueron finalmente analizados en relación a la dinámica poblacional y la evolución de las estrategias reproductivas en esta especie. Durante la temporada no reproductiva (enero-julio), los ñandúes son altamente gregarios. El grado de agrupamiento afecta la asignación de tiempo a distintas actividades. En la temporada reproductiva (agosto-diciembre) se formaron los grupos reproductivos (harenes) donde l ó 2 machos defienden un grupo de 2 a 8 hembras. La postura de huevos comienza hacia finales de setiembre y se extiende hasta fines de diciembre. Las hembras ponen sus huevos en un nido comunal, mientras que el macho se encarga de la incubación y cuidado de los pichones una vez que éstos nacen. Una vez que las hembras finalizan la puesta de huevos en un nido pueden aparearse nuevamente con otro macho, constituyendo así, un sistema reproductivo que combina la poliginia y la poliandria secuencial, y cuidado uniparental del macho. El número de huevos puestos en un nido usualmente varió entre 20 y 30 huevos, y el período de puesta duró entre 10 y 15 días. Sin embargo, algunos nidos tuvieron puestas de mayor tamaño (de hasta 56 huevos). El número de pichones producidos se incrementó con el tamaño de puesta hasta 30-35 huevos, pero disminuyó significativamente cuando había más de 35 huevos. Cerca del 30 % de los machos adultos intentaron reproducirse cada año pero más del 65 % de los nidos fueron abandonados durante la incubación. En estos nidos tanto el número de huevos perdidos (producida por rotura accidental de huevos o predación) como el porcentaje de la puesta perdida fue significativamente mayor que en nidos que completaron la incubación. La probabilidad de deserción disminuyó a medida que avanzaba la incubación. Nidos abandonados en el último período de incubación tuvieron una mayor pérdida de huevos que aquellos abandonados más tempranamente. Solamente el 4-6% de los machos adultos de la población se reprodujo exitosamente cada año. Esto puede ser consecuencia del elevado costo energético del cuidado parental. El costo energético estimado de la incubación fue alrededor de 8 veces mayor al que posee la puesta de huevos en el nido que realiza una hembra. Sumado a esto, los machos con pichones invierten más tiempo en vigilar (y menos en alimentarse) que machos en grupos o solitarios, lo cual implica un costo adicional al costo de incubación. El comportamiento reproductivo de esta especie debe ser entonces analizada considerando los factores ecológicos y fisiológicos que determinan su éxito reproductivo, dentro del marco evolutivo del desarrollo de las estrategias reproductivas en las ratites.

Abstract:
I studied the reproductive ecology of a wild population of Greater Rheas (Rhea americana) from 1992 to 1996 at General Lavalle (province of Buenos Aires, Argentina). I studied rheas social structure and dynamics, breeding behavior and nesting success. The results were analyzed in relation to population dynamics and the evolution of reproductive traits in this species. Greater Rheas are gregarious during the non-reproductive season (January-July). Group size affect the time allocate to different activities. During the breeding season (August-December) 1-2 males monopolized a harem of 2-8 females. Egg laying started in late September and lasted to late December. Females laid eggs communally in a single nest, and the male incubated these eggs for 36 to 45 days. Once chicks hatched, the male care for them until they were 6 months old. After laying eggs for one male, females could move on to lay eggs for another male. Then, this mating system combines harem defense polygyny, sequential polyandry and exclusive male parental care. The number of eggs in a nest mostly varied from 20 to 30 eggs, and laying period lasted between 10-15 days. However a few nests had larger clutches (up to 56 eggs). The number of chicks hatched per nest increased with number of eggs up to 30-35 eggs but decreased for larger clutches. This decrease was the result of a lower hatchability in large clutches. About 30 % of adult males nested each year but more than 65% of these nests were deserted during incubation. Egg losses (produced by egg breakage or predation) and the percentage of clutch lost were higher in nests that were deserted than in nests that produced chicks. The probability of deserting the nest was higher during the laying stage and decreased progressively through incubation. Besides, late deserted nests had higher egg losses than those deserted during early incubation. Only 4-6% of the adult male population bred successfully each year. This could be the consequence of the high energetic cost of uniparental care in rheas. The energetic cost of incubation was about 8 times higher than the cost of egg laying for a female. Furthermore, after hatching, the male allocates more time to vigilance (and less time to feeding) than either solitary males or males or females in groups. Then, the reproductive behavior of Greater Rheas must to be analized considering the ecological and physiological constrains that determine their reproductive success, within the broadest frame of the evolution of the reproductive traits in the ratite species.

"Ecología trófica, crecimiento y reproducción en el gasterópodo Adelomelon ancilla en el Golfo Nuevo" (2012). Zabala, María Soledad. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El caracol Adelomelon ancilla (Neogastropoda: Volutidae) se distribuye en el Océano Sudoccidental Atlántico hasta la Bahía de Ushuaia inclusive y por el Pacífico hasta los 23° de latitud. Esta especie ha sido postulada como recurso alternativo para las pesquerías locales de gasterópodos en Chile y los golfos norpatagónicos de Argentina. En esta tesis, el uso de múltiples herramientas (métodos directos e indirectos) permitió abordar cada uno de los distintos objetivos desde una perspectiva integrativa, brindando un análisis más completo del estudio en cuestión. Se describió en detalle la dieta y asociación trófica con la anémona epibionte A. achates, a través de técnicas directas (observación de eventos de alimentación in situ y contenido estomacal) e indirectas (isótopos estables de C y N). La especie A. ancilla consume principalmente moluscos vivos, acorde con su condición de depredador tope en las comunidades bentónicas. No existe solapamiento entre las dietas de ambas especies. A. ancilla se alimenta de organismos infaunales (bivalvos y gasterópodos) mientras que la anémona epibionte se alimenta de organismos epifaunales. Se postula que la asociación trófica existente entre ambos es la “facilitación” por parte de los caracoles hacia las anémonas. Mediante el estudio de isótopos estables de O se estableció que las marcas de crecimiento observadas en el interior de la concha son semianuales, correspondientes a máximas y mínimas temperaturas del agua. La edad máxima registrada de un individuo es de 20 años y el modelo de crecimiento que mejor describe la población es el de Gompertz. La producción somática individual es de 7,4 g PPB año¯¹ a los 120 mm de largo total. La densidad promedio de la población de golfo Nuevo es de 0,022 ind/m² y la proporción de sexos hallada no difiere de 1:1. A. ancilla no presenta dimorfismo sexual respecto a la concha y la descripción de la macroanatomía es similar a otros neogasterópodos, en particular volútidos. Se corrobora la presencia del fenómeno de imposex, el cual estaría relacionado con la presencia de TBT en el ambiente, asociado al alto tráfico marítimo. La presencia de neoformaciones anatómicas como múltiples penes en ambos sexos, indicarían una alta susceptibilidad de la especie y la contaminación crónica del sitio. El estudio del ciclo reproductivo mostró que el periodo de evacuación de gametas para los machos se extiende a lo largo de todo el año. Por lo contrario, las hembras muestran una estacionalidad de liberación de junio a noviembre, en coincidencia con la época de oviposición en el campo. Este patrón en las hembras estaría relacionado a la combinación de los cambios del fotoperiodo y la temperatura. La talla de primera madurez sexual gonádica fue de 93,5 mm y de 73,5 mm de largo total de la concha correspondiente a 7 y 9 años para hembras y machos, respectivamente. El desarrollo embrionario de A. ancilla se estimó entre 5-6 meses y se caracteriza por ser continuo, a medida que se alimenta ocurren los cambios morfológicos de forma simultánea. El número de eclosionantes por ovicápsula varió de 1 a 4 individuos. Los parámetros estudiados sobre la población de A. ancilla tales como: longevidad, crecimiento lento, baja producción somática, baja densidad, alta posición trófica y madurez reproductiva tardía (7-9 años) con desarrollo directo y pocos embriones por ovicápsula, sugieren que esta especie no soportaría una explotación pesquera. Sin embargo, en caso de que se establezca la recolección de A. ancilla como recurso pesquero alternativo, se sugiere una talla mínina de captura de 100 mm para ambos sexos y que la recolección se realice de forma manual por buceo.

Abstract:
The snail Adelomelon ancilla (Neogastropoda: Volutidae) is distributed in the Southwestern Atlantic reaching the Bahia Ushuaia and Pacific oceans until 23° of latitude. This species has been suggested as a potential alternative resource for local gastropod fisheries in Chile and the Argentine North patagonic gulfs. In this study, the use of multiple complementary tools (direct and indirect methods) allowed dealing with each objective from a integrative perspective, obtaining a detailed and more complete analysis of the study. The diet and trophic interaction of A. ancilla with its epibiotic anemone A. achates is described through direct (in situ feeding events observation) and indirect (C and N stable isotopes) techniques. A. ancilla feeds mainly on living molluscs, enforcing its top predator condition in the benthic assemblages. Results did not show evidences of dietary overlap between anemones and snails. The snails feed on infaunal organisms (bivalves, gastropods), while the anemone feed on epifaunal organisms. It is proposed that the trophic interaction between both species is “facilitation”. The analysis of oxygen stable isotopes allowed establishing that the internal growth marks observed in the shell were deposited twice a year, corresponding to maximum and minimum water temperatures. The maximum age for the A. ancilla studied population was 20 years, and the growth is well explained by the Gompertz model. Individual somatic production was 7.38 g year¯¹ at 120 mm in total shell length. Mean density of golfo Nuevo population was 0,022 ind/m² and sex ratio was not significantly different from 1:1. A. ancilla evidence no sexual dimorphism of its shell, and the macroanatomy description is similar to that of other neogastropods, in particular volutids. The occurrence of the imposex phenomenon is corroborated in this study, which might be related to the presence of TBT in the environment, associated to high marine traffic. The occurrence of anatomical neoformation, as multiple penes, in both sexes indicates a high susceptibility of this species to TBT and chronic pollution of the affected localities. The study of the reproductive cycle showed that males evacuate gametes all year round, while females evacuation period was from June to November, coinciding with spawning in the field. This pattern is related with changes in photoperiod and temperature. Size at first maturity was determined by microscopy study of the gonads at 93.5 mm and 73.5 mm in total shell length corresponding 9 and 7 years for females and males, respectively. A. ancilla embryonic developmental time was estimated in 5-6 months and it was characterized by a continuous growth, where feeding and morphological changes occurred simultaneously. The number of hatching embryos per egg capsule ranged between 1-4. All features of the population dynamic of A. ancilla, as its longevity, slow growth, low somatic production, low density, high trophic position, and late reproductive maturity (7-9 years) including direct development with few embryos per egg capsules, situate this species as a not recommendable resource for commercial exploitation. However, in case that the consume of A. ancilla might established as fishery resource, it is suggested a minimum capture size of 100 mm for both sexes with manual recollection by scuba diving.

"Ecología y conservación del Yetapá de Collar (Alectrurus risora, Tyrannidae)" (2010-07-19). Di Giacomo, Adrián Santiago. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En los últimos 100 años el Yetapá de collar (Alectrurus risora, Tyrannidae) ha reducido su distribución original en un 90% debido a la desaparición de los pastizales naturales de Argentina. En la actualidad persisten algunas poblaciones en las provincias de Formosa, Chaco y Corrientes, está considerada globalmente amenazada de extinción (categoría Vulnerable), y se esperan más disminuciones poblacionales debido a la intensificación agrícola. El conocimiento de la reproducción y uso de hábitat de las especies amenazadas es necesario para estimar el riesgo de extinción y efectuar acciones de conservación. Este estudio describe la selección de sitio de nido, la biología reproductiva, los factores que afectan la supervivencia de nidos y la respuesta al fuego de esta especie en la provincia de Formosa. La especie tiene un sistema de apareamiento poligínico, con machos manteniendo territorios contiguos con hasta tres hembras, y el cuidado parental es realizado exclusivamente por la hembra. La supervivencia de nidos es de 0.23 y disminuye con la edad del nido. Los machos y hembras crían 2.6 y 1.5 pichones respectivamente por año. Los patrones de selección de sitio de nido y de respuesta al fuego proveen evidencias del efecto negativo de la ganadería tradicional en los pastizales naturales donde persisten las últimas poblaciones.

Abstract:
The strange-tailed tyrant, Alectrurus risora, is a tyrant flycatcher that inhabits wet grasslands in north-east Argentina. During the last century, its original range has contracted by 90% in association with conversion of natural grasslands to agriculture. At present, it is classified as ‟vulnerable” and further decline in range and number is expected because suitable habitat is subject to current extensive agricultural intensification. Knowledge of the factors that affect the reproductive success and habitat use of threatened species is necessary for accurate assessments of the extinction risk and conservation of their populations. This study shows nest site selection, breeding biology, factors that affect nest survival and fire response of strange-tailed tyrants in a protected area of the humid Chaco, Formosa Province, Argentina. This species has a social polygynous mating system, with males owning contiguous territories with up to three females and parental care is provided exclusively by females. Nest survival was 0.23 and decreased with age of the nest. Males and females fledged 2.6 and 1.6 chicks respectively per breeding season. Nest site selection and fire response patterns provide evidence of the negative effect of the traditional livestock grazing practices in the natural grasslands where last populations remain.

"Ecología y distribución del visón americano (neovison vison) en Tierra del Fuego: efectos de este predador exótico en la fauna nativa" (2011-08-02). Valenzuela, Alejandro Eduardo Jorge. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El visón americano (Neovison vison), mustélido carnívoro semiacuático, fue liberado en Tierra del Fuego en la década de 1940. Su introducción en otros sistemas insulares en el mundo ha generado la reducción, e incluso extinción local, de las poblaciones de algunas especies nativas por depredación o competencia, constituyéndose en una de las principales amenazas para la biodiversidad del área invadida. Los estudios sobre la ecología de este predador introducido establecen el conocimiento de base necesario para diseñar estrategias de manejo de la especie. Los objetivos generales de este trabajo fueron: i) generar y aumentar el conocimiento de la ecología del visón americano en el Archipiélago Fueguino, y ii) evaluar el efecto de dicho mustélido en la fauna nativa fueguina, especialmente en el huillín (Lontra provocax), mustélido nativo amenazado y potencial competidor. Este trabajo se llevó a cabo en distintos ambientes (costas marinas, ríos y lagos) de la Isla Grande de Tierra del Fuego entre los años 2005 y 2009. El visón americano se distribuye de manera heterogénea en el área de estudio y utiliza mayormente hábitats de cobertura boscosa, con pendientes del terreno cercanas a los 20º y dentro de los 30 m de distancia del agua. Asimismo, la influencia humana, la presencia de hábitats modificados por el castor canadiense (Castor canadensis), la presencia del huillín, y el tipo de cuerpo de agua (costa marina, ríos o lagos) no afectan el uso de hábitat por parte del visón. Se comparó la dieta del mustélido exótico entre diferentes ambientes, estaciones del año e incluso en presencia y ausencia del huillín. El comportamiento trófico del visón americano en Tierra del Fuego no presentó diferencias respecto al observado en otros lugares del mundo, reflejando una conducta totalmente generalista y oportunista. Las principales presas nativas afectadas fueron los roedores cricétidos, los peces nototénidos y galáxidos, y las aves. Se estudió la distribución, el uso de hábitat y la dieta del huillín, y se compararon con los del visón americano a fin de evaluar la relación de competencia. En presencia de la nutria, el visón disminuye su comportamiento de marcado y modifica sus hábitos alimenticios, consumiendo más mamíferos y menos peces. El huillín afectaría negativamente al visón y podría limitar su invasión en Tierra del Fuego. Por lo tanto, la conservación y recuperación de esta nutria podría reducir los efectos de la introducción del visón y constituir una forma adicional de controlar la población del exótico. Se propone la implementación de estrategias de control del visón americano basadas en el trampeo selectivo en áreas prioritarias. Estas áreas deben identificarse con la ayuda de las principales conclusiones de este trabajo: 1) a partir del modelo de hábitat favorable definir los sitios con mayor probabilidad de presencia del visón; 2) entre estos sitios priorizar aquellos que revistan importancia en términos de conservación de las especies presa nativas; y 3) además darle prioridad a las áreas con presencia de huillín debido a que en las mismas el control del exótico probablemente sea más exitoso gracias al efecto de interferencia de las nutrias. Se espera que a partir de esta estrategia se pueda generar un plan de manejo del visón americano en Tierra del Fuego que sea exitoso en el control de la población y poder minimizar tiempos y costos.

Abstract:
The American mink (Neovison vison), a semi-aquatic mustelid carnivore, was released on Tierra del Fuego Island in the 1940’s. Its introduction on other insular systems around the world has caused reduction, and even local extirpation, of native species’ population by predation or competition, constituting in this way one of the main threats to biodiversity in those areas. Knowledge of the ecology of this invasive predator is essential for the planning of management strategies. The main objectives of this work were: i) to generate and to increase the information about the ecology of American mink in the Fuegian Archipelago, and ii) to evaluate the effect of this exotic species on the native fauna, with special emphasis on the huillín or southern river otter (Lontra provocax), an endangered native mustelid and potential competitor. This study was conducted in different habitats (marine coast, rivers and lakes) of Isla Grande de Tierra del Fuego between 2005 and 2009. American mink distribution was heterogeneous. The introduced mustelid prefer forested habitat with 20º slope and less than 30 m from water. Human activities, beaver (Castor canadensis) engineered environments, presence of huillín and water body type (e.g. marine coast, rivers and lakes) showed no relationship to mink presence. Trophic status of the American mink was similar to the results found in other parts of the word, reflecting a generalist and opportunistic behavior. The principal native prey items were found to be rodents (Cricetidae), fish (Nototheniidae and Galaxiidae) and birds. Distribution, habitat use and diet of huillín were studied and compared with those of American mink to evaluate competition. When huillín was present, mink decreased its marking behavior and modified its feeding habits, consuming more small mammals and less fishes. The huillín could be adversely affecting the mink and limiting its invasion in Tierra del Fuego. Therefore, conservation and recovery of the native otter may simultaneously reduce the effects of mink introduction and provide an additional way to control the invasive mink population. We propose the implementation of American mink control strategies based on selective trapping in high priority areas. The main conclusions of this work should be used to identify those areas: 1) to define the sites with the greatest probability of mink presence via the habitat suitability model constructed here; 2) among these selected places, to prioritize those that are more important in terms of conservation of native prey species; and 3) also, to give priority to areas with huillín since mink control will probably be more successful due to the additive effects of otters themselves. These findings may help to develop successful management plans for the invasive American mink in Tierra del Fuego minimizing cost and time.

"Ecología y fisiología de Chusquea ramosissima, una especie de bambú monocárpico y los efectos de su floración sobre la dinámica y funcionamiento del Bosque Atlántico semideciduo" (2010). Montti, Lía Fernanda. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Chusquea ramosissima es un bambú monocárpico muy abundante en el Bosque Atlántico semideciduo. Su presencia ocasiona cambios en la estructura y funcionamiento del ecosistema, al inhibir la regeneración de los árboles del dosel y disminuir la capacidad de cicatrización de los claros. La floración de los bambúes monocárpicos puede afectar la dinámica de los ecosistemas debido a su masiva mortalidad. A partir del año 2001 C. ramosissima comenzó a florecer y morir en diversas zonas de la provincia de Misiones (Argentina). El objetivo general de este estudio fue determinar las características ecofisiológicas de C. ramosissima asociadas a su gran capacidad de colonización y analizar si su floración y muerte constituye una oportunidad para la regeneración de las especies arbóreas. Para ello se realizaron estudios que incluyeron descripciones anatómicas y experimentos ecofisiológicos donde se realizaron comparaciones con otra especie de bambú congenérico presente en el área de estudio (Chusquea tenella) y trabajo de campo en parcelas permanentes. Chusquea ramosissima presentó características anatómicas que complementan la fisiología de la especie y le otorgan ventajas a la hora de competir en ambientes dinámicos. La floración ocurrió de forma asincrónica lo cual permitió mantener cierta cobertura de bambú vivo en extensas áreas durante el período de estudio. Luego de este evento, y en las áreas donde el bambú floreció se produjo un aumento en la radiación solar, se establecieron nuevas plántulas de bambú, se incrementó la abundancia de otras especies del sotobosque y se favoreció el crecimiento de los renovales establecidos. Los cambios ocasionados por la muerte de C. ramosissima, no obstante, estuvieron restringidos a un período de pocos años luego de su muerte. En síntesis, la floración y muerte de C. ramosissima no sería un determinante por si solo de la regeneración de árboles del dosel en el Bosque Atlántico semideciduo de Argentina.

Abstract:
Chusquea ramosissima is a monocarpic woody bamboo very abundant in the semideciduous Atlantic Forest, which colonizes gaps and open areas and affects the structure and function of this ecosystem by inhibiting the regeneration of canopy trees. The flowering of monocarpic bamboos can affect the dynamics of ecosystems due to gregarious mortality. During the year 2001 C. ramosissima started flowering in different areas of Misiones province. The general objective of this study was to determine the ecophysiological traits of C. ramosissima that confer to this species a high colonization capacity, and evaluate if the bamboo died-back promotes tree species regeneration. These studies included anatomical descriptions, ecophysiological experiments and comparative analysis of C. ramosissima and C. tenella and field work in permanent plots. Chusquea ramosissima presented anatomical features that complement the physiology of the species and give advantages when competing in dynamic environments. The flowering occurred asynchronously which allowed the persistence of live bamboo coverage over wide areas during the study period. Bamboo died-back resulted in higher levels of solar radiation in the forest understory, the emergence of new bamboo seedlings, increased abundance of other understory species, and higher growth of tree saplings. The changes brought about by the death of C. ramosissima, however, were limited to a period of a few years after the death of the bamboo. Flowering of C. ramosissima, followed by died-back, does not necessarily facilitate the recovery of the structure and function of the forest ecosystem.

"Ecología y fisiología del comportamiento de localización del hospedador en el parasitoide Mallophora ruficauda (Diptera: Asilidae)" (2011). Crespo, José E.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los insectos en su hábitat viven en contacto con una variedad de estímulos de diferente modalidad que tienen influencia sobre sus comportamientos. La búsqueda de alimento es una actividad de suma importancia donde el esfuerzo se concentra en encontrar los alimentos con el mayor retorno energético y el menor riesgo. Los parasitoides son insectos que necesitan de los hospedadores para alimentarse y es por esto que la búsqueda de hospedadores en este caso es considerada como una búsqueda de alimento. El moscardón cazador de abejas, Mallophora ruficauda es una de las plagas más importantes de la apicultura que afecta a la región pampeana argentina y es un parasitoide solitario de algunas especies de coleópteros de la familia Scarabaeidae. En estado adulto es depredador de insectos como abejas melíferas y otros himenópteros, mientras que en estado larvario parasita principalmente a las larvas de tercer estadio (gusanos blancos del suelo) de Cyclocephala signaticollis. Las hembras depositan sus huevos fuera del hospedador en desoves, utilizando vegetación herbácea y sustratos artificiales. En una primera etapa del proceso de localización del hospedador las hembras seleccionan la altura de los sitios de oviposición y este comportamiento contribuye a maximizar la dispersión de las larvas por el viento. Una vez en el suelo, la larva parasitoide muda al segundo estadio y comienza a buscar activamente al hospedador a través de la detección y seguimiento de claves químicas originadas en el intestino posterior del gusano blanco. Se desconocen, sin embargo, los órganos de las larvas involucrados en la detección del hospedador y el mecanismo que utilizan durante esta etapa. Se ha observado en la naturaleza que el superparasitismo es frecuente y que el 50% de los hospedadores parasitados se encuentra atacado por más de una larva. En esta Tesis se estudiaron aspectos ecológicos y fisiológicos del comportamiento de localización del hospedador en la larva del parasitoide M. ruficauda, particularmente la influencia de factores internos y externos sobre las decisiones de búsqueda, detección, orientación, aceptación y uso de hospedador. Considerando que esta especie de parasitoide es solitaria y que el superparasitismo sería desventajoso, se estudió si las larvas de M. ruficauda tienen la capacidad de detectar hospedadores previamente parasitados y las condiciones mediante las cuales el superparasitismo es una estrategia ventajosa, evaluando la capacidad de orientarse, discriminar y parasitar hospedadores de distinta calidad. En cuanto a la búsqueda, se encontró que la larva de segundo estadio posee sensilias en los palpos maxilares que intervienen en la detección y en la orientación del parasitoide hacia su hospedador. Luego, se determinó que la larva de M. ruficauda tiene la capacidad de discriminar el estadio y estado de parasitismo de C. signaticollis por medio de claves químicas. Sin embargo, existen factores como la edad de la larva y la densidad de competidores coespecíficos en el suelo previa al parasitismo que modifican la respuesta del parasitoide, provocando una orientación positiva hacia hospedadores sub-óptimos y su posterior aceptación. En particular, las larvas jóvenes mantenidas en una densidad alta de competidores coespecíficos se orientaron y aceptaron a hospedadores subóptimos de estadio II sanos y de estadio III monoparasitados de C. signaticollis. Por otra parte, se encontró también que el cambio en las condiciones ambientales, particularmente un descenso brusco de la presión ambiental, tienen una marcada influencia en el comportamiento de búsqueda del hospedador provocando una disminución en el desplazamiento de las larvas de M. ruficauda. Por último, se encontró que M. ruficauda hace uso del hospedador de manera variable durante su desarrollo larval, donde el primer y el quinto estadio son independientes y el segundo y tercer estadio larval son totalmente dependientes del hospedador para completar su desarrollo. Por último, en cuanto el cuarto estadio larval se encontró que hace un uso parcial del hospedador y es durante esta fase donde el parasitoide lo mata. En conclusión, en esta Tesis se estudiaron los mecanismos que influyen sobre el proceso de parasitismo en M. ruficauda. La larva de este parasitoide posee diversas estrategias durante su fase larvaria, que le permiten incrementar su éxito reproductivo a través del parasitismo exitoso, como ser una prolongada supervivencia, la discriminación de la calidad del hospedador o la aceptación del superparasitismo. De manera general, el monoparasitismo es la situación ideal para este parasitoide solitario, y el superparasitismo puede entenderse como una estrategia favorable en escenarios con ciertas restricciones, las cuales en conjunto permiten aumentar las probabilidades de persistencia de la especie mediante el parasitismo exitoso por parte de la larva.

Abstract:
Insects live continuously in contact with a wide array of different modality stimuli that influence behaviours. Seeking for food is a central activity where effort is focused in finding food with the highest energy turnover and the lowest risk. Parasitoids feed on hosts, so in this case, host searching is considered to be food searching. The robber fly, Mallophora ruficauda, is one of the most important apiculture pests that affect the Argentinean Pampas, and it is a solitary parasitoid of some Scarabaeidae coleopteran species. As an adult, it predates on honey bees and other himenopterans, while during the larval stage, it mainly parasites third instar Cyclocephala singaticollis (white grubs) larvae. Females place their eggs away form the host, in egg-clutches, using the vegetation or artificial supports to oviposit. In the first stage of the host location process, females choose the height of voiposition places and this behaviour contributes to maximize wind dispersion of larvae. Once larvae drop to the ground, parasitoid larvae moult to the second instar and they begin to actively search for the host by detectiung and following the chemical cues originated in the white grub's posterior intestine. It is unknown, however, wihch are thGrupo de Investigación en Ecofisiología de Parasitoides Departamento de Ecología, Genética y Evolución e sensorial organs involved in the detection and the mechanism used along this stage. Field superparasitism has been studied and it has been found that 50% of parasitized hosts are attacked by more than one larva. In this Thesis, phisiological and ecological aspects of host location in the parasitoid M. ruficauda were studied. Particularly, the influence of both internal and external factors over the searching, detection, orientation, acceptance and host use were studied. Given that this parasitoid species is solitary, it would be a disadvantage to superparasitize, so, the ability to detect previously parasitized hosts as well as the conditions under which superparasitism could be a favourable strategy were studied in M. ruficauda larvae, by evaluating its capability in orienting, discriminating and parasitising hosts of different quality. Regarding host location, it was found that second instar larvae have sensillas in their maxillary palps that are involved in the detection and orientation of the parasitoid to the host. Then, it was determined that M. ruficauda larvae are capable of discriminating the instar and parasitisim degree of C. singacitollis by means of chemical cues. However, there are some factors as age or density of coespecific competitors prior to parasitism that changes the parasitoid's response in a way that, under this scenario, they orientate and accept positively sub-optimal hosts. Particularly, short lived larvae raised in a high coespecific density environment orientated and accepted suboptimal second instar and singly-parasitized third instar C. signaticollis. On the other hand, it was also found that changes in the environmental conditions, specifically a sudden drop in the barometric pressure, have a huge influence in the host seeking behaviour since, under this circumstances, M. ruficauda larvae decrease their displacement. Finally, it was found that M. ruficauda makes a variable host use along its larval development, where the first and fifth instars are independent but the second and third larval instars are completely dependent on the host to complete its development. Regarding the fourth larval instar, it was found that the parasitoid makes a partial use of the host and it is during this instar that the host is killed. In conclusion, in this Thesis the mechanisms influencing the parasitism process in M. ruficauda were studied. The larvae of this parasitoid has different strategies during the larval stage that allows it to increase their reproductive success through a successful parasitism, which are an extended survival, the discrimination of host quality, or the acceptance of superparasitism. In general, the single parasitism is the ideal scenario for this solitary parasitoid, but the superparasitism might be seen as a favourable strategy when there are restrictions, which can, altogether, increase the persistence probabilities of this species through a successful larval parasitism.

"Ecología y sistemática de Tintinnina (Protozoa, Ciliata) y microzoopláncteres asociados de aguas antárticas" (1995). Alder, Viviana A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Ecomorfología de larvas y prerreclutas de merluza (Merluccius hubbsi) como aporte a su conservación" (2011). Betti, Paola. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se describió la ontogenia de la cavidad oromandibular, tubo digestivo, ojos y vejiga gaseosa de larvas y prerreclutas de merluza colectados en la plataforma norpatagónica argentina, entre 1998 y 2009. Para describir el desarrollo de la cavidad oromandibular, se realizó una coloración diferencial de cartílago y hueso, y en el de la vejiga gaseosa, ojo y tubo digestivo, se utilizaron cortes histológicos, registrándose la aparición de las distintas estructuras u órganos que componen estos cuatro sistemas. Todos los eventos se referenciaron a la talla y edad de los individuos. Durante la transición entre la alimentación endógena y exógena, en individuos de 3 mm LS, se registró el comienzo de la funcionalidad de la boca, tubo digestivo y ojos. Entre los 5,5 y 6 mm LS, las larvas dejan de utilizar el mecanismo hiodeo para emplear el opercular, en la alimentación. Asimismo, el inicio de la funcionalidad de la vejiga gaseosa se detectó en ejemplares de 3,50 a 4,00 mm LS. En resumen, el desarrollo de las larvas de merluza es relativamente rápido, evidenciando una temprana adaptación a la autopropulsión y a una alimentación eficiente, permitiéndole una gran autonomía desde tallas pequeñas, aumentando así las probabilidades de supervivencia de la especie.

Abstract:
The ontogeny of the oral cavity, digestive tract, eyes and gas bladder were described in hake larvae and prerecruits collected on the Northern-patagonian Argentine shelf, from 1998 to 2009. In order to describe the oral cavity development, differential staining of cartilages and bones was performed while for the gas bladder, eye and digestive tract, histological sections were used, registering the appearance of the different structures or organs that compose these four systems. All the events were correlated to the size and age of the individuals. During the transition between the endogenous and exogenous feeding (3 mm SL), the beginning of the functionality of the mouth, digestive tract and eyes was registered. Between 5.5 and 6 mm SL, the larvae stop using the hyoid mechanism in the feeding to use the opercular one. Morover, the beginning of the functionality of the gas bladder was detected in individuals of 3.5 to 4 mm LS. In summary, the development of the hake larvae is relatively fast, demonstrating an early adaptation to the self-propulsion and an efficient feeding, allowing a great autonomy since small sizes, and therefore increasing the probabilities of survival of the species.

"Economía muscular cardíaca : Ca y contracciones extrasistólicas" (1994). Marengo, Fernando Diego. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El conocimiento de los procesos energéticos que ocurren en el ciclo contráctil del músculocardiaco es de suma importancia para el establecimiento de un modelode excitación-contracción-relajación más completo y perfeccionado que el existente. A su. vez, tener un modelo bien establecido de los componentes energéticos que se activan durante una contracción facilitaria el estudio comparativo del comportamiento del músculo cardiaco de diferentes especies y/o estados patológicos en una misma especie. Este tipo de estudios comparativos podrian llevarse a cabo simplemente determinando la magnificación, reducción o desaparición de un componente energético particular que esté identificado a un evento que ocurre durante el ciclo contráctil. Hasta el momento otros autores habían logrado determinar como máximo dos componentes energéticos diferenciables cinéticamente más un tercero obtenido por diferencia con el calor total por latido. Asu vez estas mediciones siempre se realizaron en condiciones poco fisiológicas que incluían isquemias transitorias y, para medir el calor de activación, 1a necesidad de trabajar en un estado de no generación de fuerza (logrado a través de soluciones hipertónicas, preacortamiento del músculo o "quick release"). En este trabajo de tesis se utilizaron ventrículos de rata arterialmente perfundidos, y se evaluó con un sistema microcalorimétrico el comportamiento mecánico y energético (Ponce-Hornos, 1982) de contracciones obtenidas luego de un largo reposo o a la frecuencia de estimulación de 0.16 Hz bajo diferentes condiciones experimentales. Tanto los registros mecánicos como los energéticos globales se ubicaron dentro de los valores que registra la literatura (25.47±1.53 mN.mm-2y 14.2±1.0 mJ.g-1 respectivamente, para latidos obtenidos a 0.16 Hz y 0.5 mM Ca). Con la aplicación de un sistema de ecuaciones de difusión para lámina plana ha sido posible la determinación de cuatro componentes de liberación de calor (H1=2.1±0.3, H2=2.3±0.3, H3=9.1±O.7, H4=16.7±.6 mJ.g-1) en los latidos obtenidos luego de un largo reposo (siempre mayor a 5 minutos). En cambio, en latidos obtenidos en un músculo estimulado de 0.16 Hz se manifestaron sólo tres de los cuatro componentes hallados previamente (H1=1.6±0.1, H2: 3.2±0.4, H3=6.3±0.5 mJ.g-1). Se muestran evidencias que indican que estos tres componentesse liberan sobre una fracción de calor (entre 380 y 450 μW.g-1) que se adiciona al calor de reposo durante la actividad contráctil del músculo. Los resultados sugieren que este calor adicional proviene del componente H4 (el de más lenta evolución), que se activa en el primer latido luego de un reposo y sólo aumenta durante las dos contracciones subsiguientes, alcanzando un valor estacionario de potencia que no se diferencia del observado para latidos estacionarios. Este componentese inhibe en ausencia de O2 y es sensible a la concentración de Ca del medio de perfusión, resultados que sugieren un origen mitocondrial del mismo, probablemente asociado al transporte de Ca por esta organela. El componente H3 fue el único dependiente de la generación de fuerza, comportamientoque se repitió tanto en latidos a frecuencia de 0.16 Hz, latidos luego de un largo reposo, extrasistolias y postextrasistolias. Los componentes H1 y H2 resultaron independientes de la generación de fuerza y dependientes de la concentración de Ca del medio. Es la primera vez que se logra una evaluación del calor independiente de la fuerza en presencia de la misma. La suma de los dos es muy similar al calor de activación de músculo esquelético, y por separado sus magnitudes respectivas explican satisfactoriamente la liberación de calor esperable para el "binding" de Ca a sitios intracelulares y para la remoción del Ca que activaria la contracción. El agregado de una estimulación extrasistólica a 200 ms del estímulo que inicia la contracción provoca, en condiciones controles, la prolongación del tiempo de la contracción (y consecuentemente el aumento de la integral de la presión respecto del tiempo) sin modificar la presión máxima de la contracción. El mismo tratamiento en presencia de cafeína provocó (en 3 de los 5 casos analizados) además del aumento del área bajo la curva de la contracción, un aumento de la presión máxima generada. En los casos donde no aumentó la presión máxima, la curva de liberación de calor asociado a la extrasistolia mostró la desaparición de H1; mientras en los casos en que se registró un aumento de la presión máxima las curvas se ajustaron a los tres componentes (H1, H2 y H3). Estos resultados apoyan la vinculación de H1 con los procesos de "binding" de Ca a sitios en el citosol, ya que un aumento en la presión máxima implica que entren en juego sitios de troponina C adicionales y esto deberia manifestarse calorimétricamente. Los dos componentes energéticos y la integral de la presión respecto del tiempo asociados a 1a extrasistolia siguieron una cinética de saturación con la actividad de (Ca). Esto significa que la contracción extrasistólica en si misma (medida por IPt y H3) y 1a fracción de calor asociada a movimientosiónicos durante esta contracción siguieron una relación creciente con el Ca extracelular. Por otro lado la cafeína, un conocido inhibidor de 1a participación del reticulo sarcoplásmico en la contracción, no modificó el valor de la integral de la presión respecto del tiempo de la contracción extrasistólica. Estos resultados tomados en conjunto conducen a pensar en un origen extracelular del Ca asociado a la extrasistolia. La aplicación del estimulo extrasistólico produce la potenciación de la fuerza en el latido siguiente (potenciación post-extrasistólica). El mecanismo involucrado en este proceso es un problema aún no resuelto. En los experimentos presentados en esta tesis se muestra que además de P e IPt se potenciaron los tres componentes energéticos activables latido a latido (H1, H2 y H3). Del incremento de H1 y H2 (ambos dependientes de los movimientos de Ca), puede interpretarse que la potenciación de la fuerza (y de la fracción de calor dependiente de la fuerza) puede deberse a un aumentode la oferta de Ca al citosol durante PTW.La potenciación postextrasistólica de P, IPt, H1, H2y H3 desapareció en presencia de cafeína 1 mM.Esto indica que el reticulo sarcoplásmico tiene una participación preponderante en este proceso. Los resultados presentados permiten postular el siguiente mecanismo: durante la extrasistolia ingresaria a la célula una fracción extra de Ca proveniente del medio extracelular que provocaría un retardo en la remoción del Ca unido a TnC. Esta fracción de Ca se almacenaria en el RS, y se liberaria durante PTWconjuntamente con la fracción de Ca reciclada constantemente latido a latido. La liberación de Ca desde RS, aumentadadurante la postextrasistolia, generaría entonces la potenciación observada. La tesis en su conjunto demuestra como modelando la respuesta energética del músculo es posible analizar los eventos que ocurren durante el ciclo contráctil, y a su vez estudiar alteraciones desencadenadas sobre estos eventos por una situación patológica como lo es la aparición de una extrasistolia.

"Ecotoxicología del arsénico y mecanismos de acción en el desarrollo del anfibio Rhinella arenarum" (2015-03-10). Mardirosian, Mariana Noelia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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El arsénico (As) es un elemento natural de relevancia ecológica que se encuentra en fuentes naturales de agua en toda la Argentina en concentraciones entre 0,001 y 15 mg/L. La especie autóctona de sapo Rhinella arenarum fue seleccionada para estudiar la toxicidad sub-crónica y crónica del arsénico y las respuestas bioquímicas y moleculares provocadas por la exposición a este tóxico durante su desarrollo embrionario y larval, con el objetivo de identificar biomarcadores moleculares y bioquímicos. El valor promedio de la CL50 fue de 24,27 mg As/L y se mantuvo constante a lo largo del desarrollo embrionario. Sin embargo, cuando los embriones fueron expuestos a partir del estadio de “latido cardíaco” (5 días de desarrollo), la toxicidad del arsénico disminuyó drásticamente, lo que sugiere la activación de mecanismos de desintoxicación. El valor de NOEC arrojó un resultado de 10 mg As/L y el de LOEC (efecto: mortalidad) un valor de 20 mg As/L para los distintos experimentos. Dadas las concentraciones ambientales de arsénico en Argentina, hay una probabilidad de exceder los niveles letales en un 1 por ciento de los sitios. El valor de LOEC sería superado en el 1,3 por ciento de los sitios, mientras que el de NOEC en el 3,5 por ciento de los sitios en términos probabilísticos. El arsénico en concentraciones de 10 y 20 mg/L causó una disminución significativa en la capacidad antioxidante total (TRAP), pero generó un aumento en el contenido de glutatión reducido (GSH) endógeno y en la actividad de glutatión S-transferasa (GST) cuando la exposición se realizó en forma subcrónica hasta el final del desarrollo embrionario. Esta respuesta protectora podría estar impidiendo un descenso más profundo en el sistema antioxidante y un mayor daño oxidativo, o estar vinculado a la conjugación del arsénico con GSH para su excreción. Cuando la exposición a arsénico se realizó en forma crónica durante 23 días a concentraciones por debajo de 10 mg/L, se observó la inducción de las actividades de GST y glutatión reductasa (GR). Por su parte, el arsénico disminuyó la actividad de catalasa (CAT) en los estadios embrionarios, mientras que la actividad de la glutatión peroxidasa Sedependiente no se vio afectada con la presencia del tóxico. Si bien se observó una disminución de TRAP durante toda la exposición a 1 y 10 mg/L, no se observó alteración en el contenido de GSH ni en los niveles de peroxidación de lípidos. La actividad de superóxido dismutasa (SOD) se vio inducida a los 9 y 16 días e inhibida al final de la exposición, sugiriendo la inactivación de la enzima. Se detectó la misma tendencia en la expresión de las proteínas CAT, SOD y GST, analizadas por Western blot, que la observada en sus actividades enzimáticas. Se estudiaron los efectos del arsénico sobre vías de transducción de señales y factores de transcripción que podrían estar relacionados a su toxicidad crónica. Las quinasas de la vía MAPK, MEK y ERK y los factores de transcripción c-FOS y c-JUN fueron inducidos por la exposición a arsénico, pudiendo estar modulando la respuesta antioxidante. Además, se evaluó la acumulación de arsénico y la concentración de hierro, zinc y cobre en embriones y larvas expuestos a arsénico. Los resultados mostraron que los embriones expuestos crónicamente a 1 y 10 mg/L acumularon arsénico a partir del día 5, mientras que los embriones expuestos a 0,01 y 0,1 mg/L lo hicieron entre el día 5 y el día 9 de desarrollo. Luego de 23 días de exposición, se determinó una bioacumulación de arsénico de 27 veces en el grupo expuesto a 0,01 mg/L, de 11 veces en el grupo expuesto a 0,1 mg/L, de 44 veces en el grupo expuesto a 1 mg/L, y de solamente 5 veces en el grupo expuesto a 10 mg/L, tomando como referencia el arsénico presente en el medio. La bioacumulación se comportó de manera lineal en el tiempo de la exposición excepto para el valor más alto de 10 mg/L, concentración que podría provocar la saturación de los sistemas de transporte. El arsénico utilizaría el sistema de excreción de transportadores ABC según los estudios ex vivo que realizamos sobre la actividad de proteínas de resistencia a múltiples xenobióticos, MRP, las cuales transportan en forma fisiológica compuestos conjugados con GSH. Asimismo, se observó un aumento en las concentraciones de hierro, zinc y cobre en las larvas expuestas a arsénico, sugiriendo que el arsénico podría estar modulando la retención o acumulación de estos elementos dentro de las larvas expuestas. Los resultados obtenidos nos permiten concluir que los embriones de R. arenarum son más sensibles al arsénico durante las etapas tempranas del desarrollo, probablemente debido a que se requiere la evolución de mecanismos detoxificantes ligados a GSH; asimismo, altas concentraciones de este elemento son necesarias para provocar la mortalidad cuando la exposición se realiza hasta el final del desarrollo embrionario. El arsénico es capaz de alterar el estado oxidativo en embriones y larvas de R. arenarum, afectando el estado redox celular a concentraciones subletales tanto en la exposición subcrónica como crónica, modulando la respuesta antioxidante a través de la vía de MAPK por MEK y ERK y la acción de los factores de trascripción muy tempranos c-FOS y c-JUN. El arsénico en concentraciones de hasta el orden de mg/L se bioacumularía en forma continua desde el medio, probablemente debido a su transformación enzimática a compuestos organoarsenicales, entre ellos la conjugación con GSH para su excreción por MRP. Además, debido a que la actividad de las enzimas GR y GST, los niveles de proteínas de la vía de MAPK MEK y ERK y de los factores de transcripción c-FOS y c-JUN se vieron alterados a bajas concentraciones de arsénico, su respuesta puede ser utilizada como marcador de exposición temprana a dicho tóxico.

Abstract:
Arsenic (As) is a natural element of ecological relevance that is found in natural water sources throughout Argentina in concentrations ranging between 0.001 and 15 mg/L. The autochthonous toad Rhinella arenarum was selected to study the sub-chronic and chronic toxicity of arsenic and the biochemical responses elicited by the exposure to this toxic in water during its embryonic and larval development, with the aim of identifying molecular and biochemical biomarkers. The LC50 value averaged 24.27 mg/L As, and remained constant along the embryonic development. However, arsenic toxicity drastically decreased when embryos were exposed from “heartbeat” stage on (5 days of development), suggesting the onset of detoxification mechanisms. The NOEC yielded a value of 10 mg/L As, while the LOEC (effect: mortality) yielded a value of 20 mg/L As for the different experiments. Given the environmental concentrations of arsenic in Argentina, there is a probability of exceeding lethal levels at one percent of the sites. The LOEC and NOEC values would be exceeded at 1.3 percent and 3.5 percent of the sites, respectively. Arsenic concentrations of 10 and 20 mg/L caused a significant decrease in the total antioxidant potential (TRAP), but generated an increase in endogenous GSH content and glutathione S-transferase (GST) activity when the exposure was performed sub-chronically until the end of the embryonic development. This protective response might prevent a deeper decline in the antioxidant system and further oxidative damage or it might be linked to arsenic conjugation with GSH for its excretion. When the exposure was performed chronically for 23 days at sublethal concentrations (below 10 mg/L), the toxicant caused an induction of GST and glutathione reductase (GR) activities. However, catalase (CAT) activity was reduced by arsenic in embryonic stages and glutathione peroxidase Se-dependent activity was not affected by the presence of the toxicant. While a decrease in the total antioxidant potential was observed throughout the exposure at 1 and 10 mg/L, GSH content and lipid peroxidation levels did not differ from control. SOD activity was induced after 9 and 16 days of exposure and inhibited at the end of exposure (23 days), suggesting the inactivation of the enzyme. Through Western blot analysis, the same trend was found in the expression of the CAT, SOD and GST proteins when compared to their enzymatic activities. MEK and ERK pathway proteins and signal transduction transcription factors c-JUN and c-FOS were studied, showing that arsenic induces the expression of these proteins suggesting that they might be modulating the antioxidant response due to arsenic exposure. It was observed that embryos exposed chronically to arsenic concentrations between 1 and 10 mg/L accumulate arsenic from day 5 on, and embryos exposed to 0.01 and 0.1 mg/L start accumulating arsenic between day 5 and day 9. After 23 days of exposure, bioaccumulation of arsenic was about 27-fold in the group exposed to 0.01 mg/L, 11-fold in the group exposed to 0.1 mg/L, 44-fold in the group exposed to 1 mg/L, and only 5-fold in the group exposed to 10 mg/L, when compared to the arsenic concentration present in the medium. Bioaccumulation of arsenic was linear along time of exposure except for the highest value of 10 mg/L, suggesting that this concentration could lead to saturation of transport systems. Arsenic would use the ABC transporter excretion system according to our ex vivo studies on the activity of the multidrug resistance proteins, MRP, which transport compounds conjugated with GSH. Furthermore, an increase in the concentrations of iron, zinc and copper in larvae exposed to arsenic was observed, suggesting that arsenic could be modulating the retention or accumulation of these elements in the exposed larvae. We conclude that R. arenarum embryos are more sensitive to arsenic during early stages of development, probably because the development of detoxification mechanisms linked to GSH are necessary and that high concentrations of this toxic element are required to cause mortality when the exposure is performed until the end of the embryonic development. Arsenic can alter the oxidative status in R. arenarum embryos and larvae, affecting the cellular redox state at sublethal concentrations in both sub-chronic and chronic exposures, modulating the antioxidant response via the MAPK pathway, by means of MEK and ERK, and through the action of very early transcription factors, c-FOS and c-JUN. Arsenic at concentrations up to the order of mg/L would continuously be bioaccumulated from the medium, probably due to its enzymatic conversion to organoarsenical compounds, including its conjugation with GSH for excretion via MRP. Furthermore, due to the alteration of GR and GST enzymatic activities, and MEK, ERK, c-JUN and c-FOS levels at low arsenic concentrations, their response can be used as an early marker of exposure to this toxic.

"Efecto Mössbauer en complejos inorgánicos de hierro" (1966). Frank, Enrique. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Este trabajo analiza si la espectroscopia de rayos gamma sin retroceso (“Efecto Mössbauer”, EM) es una técnica lo suficientemente sensible para detectar pequeños cambios estructurales en compuestos químicos, particularmente en complejos de hierro. Para ello se utilizaron diversos sistemas. En primer lugar se estudió una serie de nitrosil-bis ditiocarbamatos de Fe (II), en los cuales el sustituyente R es metilo, etilo, isopropilo y fenilo, cuyos parámetros de EM fueron comparados con los respectivos espectros infrarrojo (IR), en especial la frecuencia de estiramiento del grupo NO, y con resultados de espectroscopía electrónica y resonancia paramagnética electrónica (RPE). Se encontró que tanto el EM, como la IR y la RPE dan información que puede ser interpretada en forma coherente sobre la base de un mayor desplazamiento de la densidad de carga del grupo alquílico hacia el átomo de hierro y el grupo NO, en la secuencia Me, Et, iPro mientras que la espectroscopia electrónica no es sensible a esos leves cambios. Adicionalmente se concluye que ninguno de los diagramas de correlación corrimiento isomérico (IS) vs. población de orbitales s, existentes en la literatura es de utilidad para discutir sustancias fuertemente covalentes como éstas. Se hacen numerosas consideraciones sobre el tipo de unión química existente en estos compuestos. La principal conclusión es que los parámetros de la EM, al menos en Fe, son sensibles a variaciones de la estructura química que se producen a una distancia de 4 ó 5 átomos del mencionado núcleo. En segundo lugar se estudió el espectro Mössbauer en soluciones congeladas de ^= y de su producto de reducción electrolítica. Se encontró que dentro de la sensibilidad del equipo no hay diferencia en los parámetros de EM de la solución congelada y de la especie cristalina, probando que es posible medir espectros en matrices congeladas. Esto abre paso a la medición de EM en especies que no se pueden aislar al estado sólido y por lo tanto a la medición de cinética de reacciones en solución. Por el otro lado en base a los parámetros obtenidos se infiere que la especie que se obtiene en la reducción electrolítica es ^= y no ^3- como se supone habitualmente. En tercer lugar se estudió una serie de trisditiocarbamatos de Fe (III), con sustituyentes R= n-butilo, etilo, metilo, bencilo y di-isopropilo, comparándolos con valores de la literatura para los derivados con sustituyentes pirrolidilo, N-etil N-fenil, NN-di-ciclohexil y N-isoamil N- fenil. No se encontraron diferencias sustanciales de IS para el caso que los complejos tuvieran como estado electrónico fundamental el 6^A_1,caso del pirrolidil derivado o el 2^T_2 , que corresponde a los demás casos. Esto implica que no existe la diferencia intrínseca en los parámetros de EM que postulan algunos autores para los complejos de alto spin y bajo spin. Es decir que la transición complejo alto spin a complejo de bajo spin de por si no cambia la distribución de electrones s y d, por lo que no hay variación de IS, o sea que la distribución electrónica está determinada por la naturaleza de los ligantes y el hecho de pasar del caso de spin alto al de spin bajo, manteniendo los mismos ligantes y la geometría de la molécula, no tiene mayor influencia, al menos en este caso. Se encontró también que para estas sustancias existe una correlación entre el momento magnético y el IS, disminuyendo ambos en forma paralela. Esto se puede explicar si se asimila la disminución del IS a un aumento de la covalencia, lo cual se puede indicar como debido a una deformación de la esfera de coordinación, ocasionada por razones electrónicas y estéricas. También se determinó una relación entre el momento magnético y la separación cuadrupolar (QS), correspondiendo un aumento de uno de ellos a una disminución del otro, lo que se puede atribuir a diferentes contribuciones de las estructuras de alto y bajo spin a la QS. Mediante un cálculo muy grosero, a partir de los momentos magnéticos, se encontró que la separación entre los niveles 6^A_1 y 2^T_2 es de aproximadamente 640 cm^-1 para el metil derivado, mientras que para el butil derivado es de alrededor de 275 cm^-1, siendo el triplete orbital en ambos casos el de menor energía. Se demuestra asimismo como una reducción de simetría desdobla el nivel 2^T_2 posibilitando un aumento de la unión Π. Como cuarto tópico de esta tesis se estudiaron los halo-bis ditiocarbamatos de Fe (III) pentacoordinados, producidos accidentalmente y mal caracterizados en la literatura previamente. Se encontró que su IS es muy similar al de los nitrosil-bis ditiocarbamatos de Fe (II) , lo que prueba una vez más la afirmación que un determinado rango de IS no es privativo de un estado de oxidación dado. Por el otro lado el alto valor de sus QS fue el toque de atención que llevó a la identificación de esas sustancias pues valores tan grandes de QS como los hallados, del orden de 0,260 cm/s, solo se podían concebir con una desviación muy grande de la simetría. Esto muestra una vez más que una adecuada interpretación de los parámetros de EM puede ser útil como diagnóstico estructural. El propósito fundamental de este trabajo ha sido demostrar la utilidad del EM como herramienta tanto independiente como complementaria de otras técnicas espectroscópicas para la determinación de estructuras químicas de compuestos de Fe.

Abstract:
This work analyzes if recoilless gamma radiation (Mössbauer Effect, ME) is an enough sensible technique to detect small structural changes in chemical compounds, particularly in iron complexes. For this purposes several systems were used. In first place a series of Fe(II) nitrosil-bis dithiocarbamates, is studied, for which the substituent R is methyl, ethyl, isopropyl and phenyl , whose ME parameters were compared with their infrared spectra (IR), specially with the NO stretching frequency and with the results of electronic spectroscopy and electronic paramagnetic resonance (EPR). It was found that both ME as IR and EPR provide information which can be interpreted in a coherent way on basis of a larger displacement of the charge density of the alkyl group towards the iron atom and the nitrosil group, in the sequence Me, Et, iPro, whereas electronic spectroscopy is not sensible to such small changes. Additionally we conclude that none of the correlation diagrams of isomer shift (IS) vs. s orbital population available in the literature is useful to discuss strong covalent substances like these. Numerous considerations on the kind of chemical bonding existing in these compounds are made. The main conclusion is that the ME parameters, at least in Fe, are sensible to variations of the chemical structure which are produced at a distance of 4 or 5 atoms from the mentioned nucleus. In second place the EM spectra of frozen solutions of ^= and its electrolytic reduction product are studied. It was found that within the sensibility of the equipment there is no difference in the ME parameters of the frozen solution and the crystalline species, proving that it is possible to measure spectra in frozen solutions. This opens the possibility to measure ME in species which can not be isolated at the solid stat and frees the way to the measurement of the kinetics of reactions in solution. On the other hand on base of the obtained ME parameters it is found that the product obtained in the electrolytic reduction is ^= and not ^3- as usually supposed. In third place a series of Fe(III) tris dithiocarbamates, with substituents R =n-butyl, ethyl, methyl, benzyl and di-isopropyl was measured, comparing them with data from the literature for derivatives with substituents pyrrolidil, N-ethyl N-phenyl, NN di-cyclohexyl and N-isoamyl N- phenyl. No substantial differences in the IS were found for the cases were the complexes have an electronic fundamental state of 6^A_1, as in the case of the pyrrolidil derivative or of 2^T_2 , which corresponds to the other cases. This implies that the intrinsic difference in ME parameters which are postulated by several authors for high spin and low spin complexes, does not exist. This means that the transition from a high spin complex to a low spin complex does not change by its own the s and d electron distribution, and therefore there is no change in the IS. Therefore the electronic distribution is determined by the nature of the ligands and that the fact of passing from the high spin case to the low spin case, keeping the same ligands and the geometry of the molecule, has not a major influence, at least in this case. It was found as well that a correlation exists for these substances between the magnetic moment and the IS, decreasing both in a parallel way. This can be explained if the reduction of IS is assimilated to an increase of covalence, which can be assigned to a deformation of the coordination sphere due to electronic and steric effects. A relation between the magnetic moment and the quadrupole splitting (QS) was found. An increase of one of them corresponds to a decrease of the other one, which can be attributed to different contributions of the high spin and low spin structures to the QS. Using a rough calculation, based on their magnetic moments, it was found that the separation between the 6^A_1 y 2^T_2 levels is approximately 640 cm^-1 for the methyl derivative whereas for the butyl derivative it is around 275 cm^-1, being in both cases the orbital triplet the lower energy state. Also it is shown how reduction of symmetry splits the 2^T_2 level allowing an increase of the Π bonding. As a fourth item of this thesis the accidentally produced pent coordinated halo-bis dithiocarbamates Fe (III) were studied. It was found that their IS is very similar to those of the Fe(II) nitrosil-bis dithiocarbamates, which proves once again the affirmation that the determination of a certain range of IS is not privative of a certain oxidation state On the other hand the high value for the QS of the order of 0,260 cm/s, was the warning which allowed the identification of these substances as such large QS values only could be conceived with a very large deviation from symmetry. This shows once again that an adequate interpretation of ME parameters can be useful as a structural diagnosis. The main purpose of this work has been to show the usefulness of the ME as well as an independent tool or as a complementary tool for other spectroscopic techniques for the determination of chemical structures for Fe compounds.

"Efecto biológico de Withanolidos de Salpichroa oroganifolia y Datura ferox (Solanaceae) sobre Tribolium Castaneum (Coleoptera, Tenebrionidae) y Musca domestica (Diptera, muscidae)" (1999). Mareggiani, Graciela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se investigó el efecto biológico de productos extraídos de plantas de Salpichroa origanífolia y Datura ferox sobre Tribolium castaneum y Musca domestica. Los productos evaluados fueron: extractos de S. origanifolia, withanólidos A, C y G (salpicrólidos) aislados de S. origanifolia, cinco análogos modificados a partir de los compuestos A y G, y withaferoxólido aislado de D. ferox. Los productos se incorporaron a la dieta de larvas y adultos o se aplicaron en forma tópica en adultos. Se produjeron demoras significativas en el desarrollo de T. castaneum desde larva a adulto con A, C, G y withaferoxólido, resultando los mejores compuestos A y G, que además produjeron efectos letales. El compuesto A produjo demoras significativas en el desarrollo de M. domestica desde larva a adulto, mientras que la aplicación de A, C y G produjo mortalidad, siendo G el compuesto más activo. Se observaron efectos subletales similares cuando se ofreció como alimento dietas de bajo valor nutritivo sin withanólidos. Cuando se efectuaron tratamientos con salpicrólido A con adultos, se evitó la permanencia de T. castaneum en la proximidad del alimento, produciéndose entonces inhibición de la alimentación. También se observaron efectos letales y subletales con algunos de los análogos modificados. Estos resultados sugieren que la actividad biológica puede deberse a un efecto de disuasividad alimentaria.

Abstract:
The biological effect of products extracted from plants of Salpichroa origanifolia and Datura ferox on Tribolium castaneum and Musca domestica was studied. Products tested were: extracts of S. origanifolia, withanolides A, C and G (salpichrolides) isolated from S. origanifolia, five chemically modified analogs of compounds A and G, and withaferoxolide, isolated from D. ferox. The products were incorporated to the diet of larvae and adults or topically applied to adults. Significant development delay from larva to adult of T. castaneum was produced by A, C, G and withaferoxolide, the best results corresponding to A and G, which also caused lethal effects. Significant development delay from larva to adult of M. domestica was produced by A, while application of A, C and G resulted in mortality, being G the most active compound. Similar sublethal effects were observed when poor nutritional diets without withanolides were offered as food. When salpichrolide A was applied in treatments to adults the permanence of T. castaneum in the proximity of food was avoided, producing in this way feeding inhibition. Similar lethal and sublethal effects with some of the chemically modified analogs were also observed. These results suggests that biological activity may be due to a feedant: deterrant effect.

"Efecto de Carayá (Alouatta caraya) en la dinámica y regeneración de las selvas de inundación del Paraná medio" (2003). Bravo, Susana Patricia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Entre Julio de l996 y Mayo de 2002 estudié el comportamiento de carayá (Alouatra caraya, Primate, Cebidae) y su papel como dispersor de semillas en la selva de inundación de la Isla Brasilera (Prov. del Chaco, Argentina), una de las tantas islas ubicadas a lo largo del Río Paraná. Comencé describiendo los tres tipos de bosques que conforrnaban la selva, y estudiando la fenología de las especies arbóreas con fruto carnoso, potencialmente dispersables por carayá. El bosque que encontré en los albardones más antiguos fue el Bosque de Laureles, tuvo la mayor diversidad y abundancia de especies con fruto carnoso y tres estratos, dos arbóreos y uno herbáceo. El Bosque de Sangre de Drago y Timbó crecía en albardones de similar altura al anterior pero de más reciente formación y el Bosque de Palo itá crecía en los albardones más bajos y era prácticamente monoespecífico. En cuanto a la fenología pude distinguir dos grupos de especies, las que producían frutos en mayor o menor cantidad todo el año y aquellas que tenían la fructificación temporalmente acotada. El segundo paso fue estudiar la dieta, el comportamiento y el uso del espacio que realizaba carayá en cl Bosque de Laureles. La dieta fue rica en frutos flores y hojas nuevas, además un cuarto de los registros de alimentación fueron sobre estructuras vegetales infestadas por artrópodos. Todo esto hizo que carayá no estuviese limitado energéticamente para desplazarse y pudiera utilizar con alta frecuencia todo su territorio. Luego estudié mediante ensayos de laboratorio la germinación de las semillas dispersadas, y en el campo el patrón espacial de la dispersión. Encontré que el pasaje de las semillas por el tracto digestivo de carayá no afectaba la capacidad de germinación y para algunas especies aumentó la velocidad de germinación. Carayá depositó semillas en las zonas de sus dorrmideros y en los bosteaderos puntuales, que a causa de las confrontaciones entre grupos se ubicaban principalmente en los límites de los territorios. Continue estudiando el impacto de la dispersión en este bosque (i. e. escala local) a lo largo de los años, para ello realicé conteos de juveniles y renovales arbóreos en los sitios donde carayá deposita las semillas y fuera de ellos. Así encontré que la mayoría de las especies dispersadas se establecían tanto en los dormideros como en los bosteaderos puntuales, y no lograban hacerlo fuera de ellos. Con muestreos similares, evalue el impacto de la dispersión de larga distancia en los tres tipos de bosque de la isla y el crecimiento de los juveniles con mediciones sucesivas a lo largo de dos años. Observe que la dispersión de semillas que realiza carayá es fundamental para la colonización de los bosques jóvenes por parte de las especies del Bosque de Laureles, principalmente Ocotea diospyrifolia, Eugenia punicifolia y Psychotria carthagenensis. Mientras que estas mismas especies no pueden establecerse en el Bosque de Palo itá, posiblemente por la mayor frecuencia de inundación que presenta. Por último, para conocer si el reclutamiento en los bosteaderos se debía a la ausencia de predadores y patógenos, a la saturación de los mismos debido al gran número de semillas que arribaban, o a una serie de interrelaciones más complejas entre distintos factores. Evalué los daños que sufrían los juveniles, determine que artrópodos visitaban los bosteaderos, la disponibilidad de nitrógeno y fósforo, y la remoción de semillas. Esto me permitió arribar a la conclusión de que sumado al alto número de semillas que arribaban, el mecanismo por el cual se produce el establecimiento de los renovales a lo largo de los años se debería a una baja tasa de remoción de semillas, una disminución de la herbivoría por la presencia de artrópodos predadores y un aumento en la velocidad de crecimiento por una mayor disponibilidad de nitrógeno que facilitaría el escape a la mortalidad por ataque de los patógenos. El efecto de carayá como dispersor de semillas no sólo acelera la regeneración del Bosque de Laureles y la maduración de los bosques jóvenes de la isla, sino que esta aceleración va en aumento debido a que se genera una retroalimentación positiva entre el aumento en la densidad de las especies dispersadas y la densidad del dispersor. Esta puede ser una explicación para la rápida recuperación de estos bosques que se observa luego de las inundaciones extraordinarias.

Abstract:
I studied black howler (Alouatta curaya. Primate, Cebidae) behavior and its role as seed disperser in the flooded forest of Brasilera Island (Chaco, Argentina), one of Paraná River‘s islands, between July l996 and May 2002. I began by describing of the three kinds of forests which make up the flooded forest and by studying the phenology of trees with fleshy fruits. In the oldest and highest areas of Brasilera Island I found the “Laurel Forest", which was the most diverse and had the greatest fleshy fruits species abundance. This forest had three strata, two of them arboreal and one herbaceous. The “Sangre de Drago and Timbó Forest" grew on areas of similar height which had recently been incorporated to the island. The “Palo itá Forest" grew on low areas and had the lowest diversity. I could found two phenological sets of species, one set offered fruits throughout the year, while the other set concentrated its fruit production in only in one or two months. The second step was the study of the black howler's diet, behavior and spatial use, in the Laurel Forest. Fruits, flowers and new leaves represented a high proportion of the diet all year long, and 25 % of feeding records were on arthropods infested items. Thus, black howler's travel distances were not energetically constrained, and groups could use their whole territory with high frequency. Then, I studied dispersed seed germination in the laboratory and the spatial pattern of seed dispersal in the field. I found that passage through black howler's digestive tract did not affect seed germination, but ingested seeds of some species germinated faster than not ingested seeds. Black howlers transported seeds from the parent tree to sleeping trees and to latrines. As black howler groups confronted and defecated with high frequency within their territory limits, latrines were more abundant in these areas. I evaluated the impact of seed dispersal over several years in the Laurel Forest (i. e., local scale) by sampling tree juveniles and renewals in latrines, and around sleeping trees, and outside these areas. In general, trees could grow in the latrines, and around the sleeping trees, but did not grow outside them. I evaluated long distance dispersion between the three kinds of forests with similar methods as the ones used in the Laurel Forest, and the growth of juveniles for two years. Seed dispersal by black howler is fundamental for the colonization of new forests by Laurel Forest species, specially Ocotea diospyrifolia, Eugenia punicifolia y Psychotria carthagenensis. These species could not grow in Palo itá Forest, possibly because of a higher flood frequency. Finally, I studied whether the recruitment of trees was due to the absence of predation and pathogens in the latrines, the saturation by the great number of seeds that arrive, or an growth related to a higher nitrogen availability in the latrines, are important latrines, nitrogen and phosphorus availability, and Seed removal in the latrines. I concluded that added to the great number of seeds that arrived to the latrines, the low rate of seed removal, the attenuated herbivory by the presence of arthropods predators, and the faster for trees recruitment are important as well for trees recruitment. Fast growth could help juveniles to escape at mortality by pathogens. Acceleration in Laurel Forest regeneration and in maturation of new forests is an effect of black howler seed dispersal, Also, as in Brasilera lsland there are a positive feedback between the increase in dispersed species density and disperser density, the acceleration is increasing. It could be an explication for the highest restoration of flooded forest after an extraordinary flood.

"Efecto de compuestos alfa2 y beta-adrenérgicos en modelos experimentales de cáncer de mama humano" (2011). Pérez Piñero, Cecilia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La expresión de receptores β-adrenérgicos (RA-β) es conocida tanto en células tumorales mamarias humanas como en modelos experimentales. Sin embargo, el efecto descripto para agonistas y antagonistas sobre la proliferación celular y crecimiento tumoral es paradójico, impidiendo su utilización como terapia adyuvante, especialmente en tumores refractarios. La expresión de RA-β2 fue confirmada en las células humanas por inmunofluorescencia y RT-PCR. La incorporación de -timidina se encontró aumentada por epinefrina (por acción RA-α2) y disminuida por los agonistas β, isoproterenol o β2 salbutamol. Estos agonistas redujeron el crecimiento de los tumores estudiados (IBH-4 e IBH-6). Este efecto fue revertido por el antagonista β-adrenérgico propanolol. El antagonista α2- adrenérgico rauwolscina y los agonistas β-adrenérgicos isoproterenol y salbutamol fueron igualmente eficaces disminuyendo el crecimiento tumoral y la activación de Erk1/2 (fosforilación analizada por western blot). La señalización de estos RA en cuanto a la disminución de la fosforilación de Erk1/2 demostró ser dependiente de AMPc y de la activacion de la PKA. Cuando se realizaron experimentos de migración, se reveló un efecto modulador de este fenómeno por parte de los compuestos adrenérgicos, tanto por parte de las catecolaminas endógenas epinefrina y norepinefrina como de los agonistas β- adrenérgicos. En los modelos experimentales de cáncer de mama estudiados, los agonistas β- adrenérgicos inhiben la proliferación celular y el crecimiento tumoral. Este efecto está probablemente mediado por la inhibición de la fosforilación de Erk1/2. Estos compuestos fueron tan eficaces como el antagonista α2-adrenérgico rauwolscina, brindando la posibilidad de evaluar nuevas terapias adyuvantes para el tratamiento del cáncer de mama.

Abstract:
β-adrenoceptor (β-AR) expression is known in both human breast cancer cells and experimental animal models. However, the reported effect of the agonists and antagonists on cell proliferation and tumour growth is paradoxical, precluding their utilization as possible adjuvant therapy, mainly in the cases of refractory tumours. β2-AR expression was confirmed in the human cells tested by immunofluorescence and RT-PCR. -thymidine incorporation was increased by epinephrine (by α2-AR action) and decreased in every tested cell line by the β-agonist isoproterenol and/or the β2- agonist salbutamol. Isoproterenol and/or salbutamol reduced tumour growth in both tumours tested (IBH-4, IBH-6). This effect was reversed by the β-adrenergic antagonist propranolol. The α2-adrenergic antagonist rauwolscine and the β-adrenergic agonists isoproterenol or salbutamol performed equally well in lowering tumour growth. Erk1/2 phosphorylation inhibition was mainly mediated by the PKA pathway. When the migration potential was assessed, the endogenous catecholamines and also β- adrenergic compounds were able to modulate the migration of the cells. In the experimental models studied, the β-adrenergic agonists inhibit breast cancer cell proliferation and tumour growth. This effect is probably mediated by Erk1/2 phosphorylation inhibition. The β-adrenergic agonists perform equally well as the α2-adrenergic antagonist rauwolscine, providing possible novel therapeutic adjuvant treatments for breast cancer.

"Efecto de diferentes inmunomoduladores en la respuesta inmune al virus de la fiebre aftosa en un modelo experimental y en el huésped natural" (1996). Pérez Filgueira, Daniel Mariano. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudió la respuesta de isotipos en ratones de la cepa Balb/c luego de la infección experimental con VFA o de la inmunización con vacunas formuladas con virus inactivado con y sin el agregado de adyuvantes. Se utilizaron tres inmunomoduladores para formular diferentes vacunas usando vehículos acuosos y oleosos: la fracción hidrosoluble de pared celular de Micobacterium sp. (PCM), un extracto purificado de lipopolisacárido de Brucella ovis (LPS) y una amina lipoidal sintética, Avridine (AV). Los animales infectados mostraron respuestas dominadas por el isotipo IgG2b y seguidas por IgG1, IgG2a, IgG3, entre los 14 y 60 d.p.i. o se detectó actividad de IgG3 específicas para la VFA en ninguno de los animales vacunados. Las formulaciones conteniendo adyuvantes presentaron altos y persistentes niveles de IgG2b, similares a los de los animales infectados, hasta los 180 d.p.i., mientras que en las vacunas convencionales este isotipo fue detectado sólo hasta los 60 d.p.i. Los animales vacunados con formulaciones conteniendo estos adyuvantes presentaron una resistencia aumentada al desafío viral realizado a los 210 d.p.i., en relación con aquellos inmunizados con vacunas convencionales. Dos de estos inmunomoduladores (PCM y AV) fueron también probados en bovinos, incluidos en vacunas oleosas. Se elaboraron 11 diferentes formulaciones que fueron inoculadas en grupos de 8 animales. Nuestros resultados muestran que la inclusión de cualquiera de estos dos adyuvantes en sus mayores concentraciones a vacunas formuladas con baja cantidad de antígeno viral, indujeron niveles inactivado sin el agregado de adyuvantes. Los isotipos de IgG inducidos en estas vacunas experimentales también diferían de las formulaciones convencionales y control sin adyuvantes. Se discute la posible relación entre estos cambios inducidos y la inmunidad conferida en cada caso.

Abstract:
The IgG isotype response in Balb/c mice infected with FMDV or immunized with different vaccine formulations using inactivated virus particles as antigen was analyzed at various times post-inoculation. Three immunomodulators, were employed to formulate different vaccines using aqueous and oil vehicles: a water-soluble fraction of the cell wall of Mycobacterium sp.(PCM), apurified extract of lipopolysacharide from Brucella ovis (LPS) and a synthetic lipoamide, Avridine (AV). Infected animals between 14 and 60 days post-inoculation (d.p.i.) showed responses dominated by IgG2b, followed by IgG1, IgG2a and IgG3, respectively. No IgG3 activity was detected in vaccinated animals at any time. With formulations including immunomodulators, persisting high levels of IgG2b (similar to those of infected animals) were detected until 180 d.p.i. while with conventional vaccines IgG2b responses were detected up to 60 d.p.i. Animals vaccinated with formulations including these immunomodulators presented an augmented resistance to viral challenge at 210 d.p.i. in relation with thoseimmunized with conventional vaccines. Two of these immunomodulators (PCM and AV) were also tested in oil vaccines in experiments conducted in bovines. Eleven different formulations were used to vaccinate 8 animals per group. Our results showed that the inclusion of these adjuvants in the higher concentrations to vaccines formulated with a low antigen concentration, induced antibody levels similar to those of vaccines containing twice the concentration of virus and no adjuvants. The IgG isotypes profiles induced in these experimental vaccines also differed from the elicited by the control vaccines without immunomodulators. The possible relation ship of these differences in the isotype response and protection is discussed.

"Efecto de diversos factores de "stress" en el Clostridium botulinum con particular referencia al efecto de la actividad acuosa y el pH en el crecimiento y producción de toxina por el tipo G" (1985). Briozzo, Jorge Emilio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Efecto de dos parásitos de cría sobre el cuidado parental de una especie con cría cooperativa, el Músico (Agelaioides badius)" (2016-07-01). Ursino, Cynthia Alejandra. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las crías de las especies parásitas son capaces de manipular el comportamiento de sus hospedadores a través de sus despliegues de pedido de alimento, mimetizando alguna señal del despliegue (acústica o visual) o exagerando una señal no específica. Mediante experimentos de campo y de laboratorio, se estudió el efecto de dos especies parásitas de cría, el Tordo Pico Corto (TPC), Molothrus rufoaxillaris, y el Tordo Renegrido (TR), M. bonariensis, sobre el comportamiento de cuidado parental de los adultos, la dinámica del grupo social y la competencia entre las crías, en un hospedador compartido que presenta cría cooperativa, el Músico (Agelaioides badius). Además, se estudió el sistema de apareamiento del Músico, las relaciones de parentesco de los ayudantes del nido y la pareja reproductiva y el comportamiento de remoción de las larvas de moscas del género Philornis sp., causantes de miasis en pichones. El sistema de apareamiento del Músico se analizó a nivel genético con 7 loci microsatélites. Se observó que el 34% de los nidos tuvo al menos un pichón producto de paternidad por fuera de la pareja (PPP), resultando en un 10% de los pichones con evidencia de PPP. El 50% de los ayudantes estuvo emparentado con la pareja reproductiva y los pichones del nido. Para evaluar el efecto del parasitismo sobre el comportamiento parental del Músico se midió la frecuencia de entrega de alimento al nido controlando el tamaño y composición de las nidadas. Los resultados mostraron que la frecuencia de entrega de alimento fue similar entre nidadas parasitadas con TPC, TR y nidadas no parasitadas. Para complementar estos análisis, se evaluó experimentalmente el efecto de las vocalizaciones de pichones de TPC y TR sobre la frecuencia de entrega de alimento del hospedador. Los resultados mostraron que la frecuencia de entrega de alimento fue mayor en respuesta a llamados de pichones de Músico y TPC que del grupo control (sin llamados), similares entre llamados de Músico y de TPC y similares entre el control y TR. La competencia entre los pichones de la nidada se evaluó en las nidadas controladas. Los pichones de ambas especies parásitas recibieron una mayor proporción del alimento entregado al nido que la esperada por azar y que del pichón de Músico de mayor tamaño de su misma nidada. El TR, pero no el TPC, mostró una mayor habilidad competitiva que el Músico de mayor tamaño de las nidadas no parasitadas. Con respecto al parasitismo de Philornis sp., la prevalencia en los nidos de Músico fue del 57%. La intensidad de parasitismo fue de 5,6 ± 3,6 y de 7,3 ± 5,1 larvas por pichón de Músico y TPC, respectivamente. Se obtuvieron las primeras evidencias directas de remoción de larvas de Philornis por parte del Músico, mostrando que este comportamiento es dirigido indistintamente hacia pichones propios y parásitos. Los resultados muestran que ambos parásitos de cría logran manipular el comportamiento parental del hospedador en la etapa de pichones aunque a través de diferentes mecanismos.

Abstract:
Many young brood-parasitic birds can manipulate host parental behavior via their begging display by mimicking some begging signals (acoustic or visual) of host young or by exaggerating a non-specific cues. By means of field experiments and labwork, we have studied the effect of two brood parasites, the Screaming Cowbird, Molothrus rufoaxillaris, and the Shiny Cowbird, M. bonariensis, on the parental behavior, dynamic of the social group and within-brood competition in a shared cooperatively breeding host, the Baywing (Agelaioides badius). We studied the Baywing’s mating system and the peculiar preening behavior and removal of Philornis sp. larvae, which cause myiasis in chicks. The genetic mating system of Baywings was analyzed using 7 microsatellite loci. It has been observed that 34% of the females were involved in some extra-pair paternity events (EPP), yielding 10% of the chicks derived from EPP. 50% of the helpers were related to the reproductive couple and chicks, being males. To evaluate the effect of parasitism on Baywing’s parental behavior and within-brood competition, we measured the frequency of food delivery to the nest, manipulating experimentally brood size and composition. Results showed that food delivery rates were similar between broods parasitized by Screaming Cowbird and the non-parasitized ones, but lower in nests parasitized with Shiny Cowbird compared to non-parasitized broods. To complement this analysis, we evaluated the effect of Shiny and Screaming Cowbird’s begging calls on the food delivery by Baywings. Results showed that Baywings increased nest provisioning rates in response to Baywing and Screaming Cowbird calls compared to Shiny Cowbird calls, but there was no difference between the feeding rates elicited by Baywing and Screaming Cowbird calls. Regarding the food distribution, parasitic chicks from both species received a higher proportion than the random expected and the biggest Baywing from their nests. Shiny, but not Screaming, showed a higher competitive ability than the biggest Baywing of the non-parasitized nests. Regarding Philornis parasitism, the prevalence on Baywing’s nests was 57%. The parasitism intensity was 5.6 ± 3.6 and 7.3 ± 5.1 larvae per Baywing and Screaming Cowbird chick, respectably. Baywings were recorded for the first time removing Philornis sp. larvae from the brood, showing that this behavior is directed indistinctly towards own and parasite chicks. These results showed for the first time that both parasites are able to manipulate this host in the chick stage by means of different mechanisms.

"Efecto de endofitos Epichloë sobre la micorrización y productividad de gramíneas hospedantes y no hospedantes" (2016-03-23). Vignale, María Victoria. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las plantas a menudo establecen múltiples asociaciones simbióticas simultáneas con diferentes microorganismos; sin embargo, la forma en que cada simbionte afecta a los otros simbiontes y los efectos de estas múltiples interacciones en la productividad de las plantas hospedantes no son bien entendidos. Esta tesis está centrada en contribuir al conocimiento de las interacciones multitróficas entre gramíneas nativas y endofitos Epichloë. Particularmente, está dirigida a la caracterización de la triple asociación mutualista entre gramíneas, endofitos y hongos formadores de micorrizas arbusculares (HMA) y a establecer los mecanismos que expliquen la correlación positiva observada entre la presencia de endofitos Epichloë y la colonización de gramíneas nativas por HMA. Se realizaron ensayos in vitro, donde se analizó el efecto de los exudados de endofitos y de plantas infectadas con endofitos (E+) y no infectadas (E-) sobre la fase extramatrical de los HMA. Se estudiaron, en invernadero, el efecto de exudados de endofitos sobre la micorrización y la productividad vegetal en plantas de Bromus auleticus libres de endofitos (E-) y en plantas vecinas agronómicamente seleccionada: Lolium multiflorum (E+ y E-). Se analizaron, a campo, el efecto simultáneo en simbiosis de los endofitos y los HMA sobre el desarrollo vegetativo y otros caracteres de interés agronómico de gramíneas nativas como Bromus auleticus, seleccionadas agronómicamente: Lolium multiflorum y Schedonorus arundinaceus y sobre una gramínea libre de endofitos en la naturaleza: Bromus catharticus. Este plan comprende estudios básicos para el futuro aprovechamiento y manejo tecnológico de la triple simbiosis mutualista que se relacionan con el mejoramiento de pastos para el forraje y productividad vegetal.

Abstract:
Plants often establish multiple simultaneous symbiotic associations with different microorganisms; however, the way in which each symbiont affects the other symbionts and the effects of these multiple interactions on plant performance are not well understood. This thesis is focused on contributing to the knowledge of multitrophic interactions between native grasses and Epichloë endophytes. Particularly, it is directed to the characterization of the triple mutualist interaction between grasses, endophytes and arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) and to establish mechanisms that explain the observed positive correlation between the presence of Epichloë endophytes and the colonization of native grasses by HMA. In vitro tests where the effect of endophytes exudates and from infected (E+) and endophyte free plants (E-) on the AMF extramatrical phase were performed. Greenhouse experiments were also performed to study the effect of endophyte exudates on the mycorrhization and plant productivity of uninfected (E-) Bromus auleticus and Lolium multiflorum (ryegrass) (E+ and E-) (agronomically selected). We performed field trials to study the simultaneous effect of symbiotic endophytes and AMF on the vegetative development and other traits of agronomic interest of native grasses as Bromus auleticus, agronomically selected as Lolium multiflorum and Schedonorus arundinaceus and endophytE-free grass in nature: Bromus catharticus. This plan includes basic studies for the future development and technological management of a triple mutualistic symbiosis that relate to the improvement of pastures for forage and plant productivity.

"Efecto de la combinación de luz ultravioleta y temperatura en el procesamiento de leche y derivados" (2015-09-29). Vásquez Mazo, Priscilla. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En los últimos años se han implementado tecnologías emergentes de preservación como asistencia o mejora de tecnologías de preservación tradicionales, con el propósito de obtener productos de mejor calidad y reducir tiempos de tratamiento. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la aplicación de Luz UV-C en combinación con calor y vacío, sobre el procesamiento de leche y el yogurt elaborado a partir de la misma, durante su almacenamiento. El equipo de luz UV-C consistió de dos lámparas conectadas en serie (254 nm, UV, Lux 50W/G50 TO, Phillips), cada una dentro de una camisa de vidrio de 0,87m de largo, con un espacio de flujo anular (0.22L) como cámara de irradiación, conectados a través de una bomba peristáltica a un baño termostático. En cada corrida, se procesaron 800mL de leche, los cuales pasaron por el reactor durante 20min a una temperatura de 85°C ± 1°C. Para la aplicación de luz UV-C asistido con vacío, primero se sometió el sistema durante 10min a una presión de -400mmHg y se mantuvo durante los siguientes 20min de proceso. Se realizó un recuento de bacterias aerobias mesófilas y coliformes, medición de oxidación de lípidos (método TBARS) y análisis sensorial olfativo (triángulo) en la leche. El valor de TBARS en la leche T- UVC (0,38 μmoles de MDA Equivalente/L) fue mayor que en la leche T-UVC-vacío (0,29 μmoles de MDA Equivalente/L) y leche control (0,14 μmoles de MDA Equivalente/L). La leche tratada, se inoculó con un cultivo mixto de bacterias ácidolácticas, y se fermentó a 43°C, hasta alcanzar un pH de 4,6 - 4,7 y obtener yogurt, el cual se almacenó a 4°C durante 21 días. Durante la fermentación de la leche se analizaron pH y acidez titulable (AT). En el almacenamiento del yogurt se analizaron: acidez titulable (AT), sólidos solubles, sinéresis, color (L*, a*, b*) y se realizó un perfil de textura. Además, se realizó un test de campo con 46 consumidores al yogurt procesado por la tecnología propuesta T-UVC-Vacío. Se encontró que el yogur elaborado por la tecnología propuesta presentó una notable disminución de la sinéresis, cambios mínimos en acidez, pH, color y sólidos solubles, y leves aumentos en la cohesividad, elasticidad, masticabilidad y gomosidad respecto a las muestras de yogurt control y una aceptación global por parte de los consumidores satisfactoria. Estos resultados indican que la luz UV-C ofrecería una alternativa al procesamiento de leche destinada a la elaboración de yogurt. Palabras clave: leche, luz UV-C, TBARS, yogurt, sinéresis, color, TPA, análisis sensorial.

Abstract:
In recent years, emerging technologies have been implemented as assistance or improvement of traditional preservation technologies, to provide products of better quality and reduce treatment times. The objective of this study was to determine the effect of UV-C light treatment in combination with heat and vacuum, on milk process and yogurt made from the same during storage. The UV-C light device consisted of two serially connected (254 nm, UV, Lux 50W/G50 TO, Phillips), each one inside a 0.87m-long glass tube leaving an annular flow space as irradiation chamber (0.22L) connected through a peristaltic pump to a thermostatized. In each run, 800 mL of milk was processed, which passed through the reactor for 20min at 85°C ± 1°C. For UV-C light treatment assisted vacuum, first, the system was subjected during 10min at a pressure of -400mmHg and maintained for the following 20min of process. Total meshophilic and coliforms counts, lipid oxidation (TBARS assay) and sensory olfactory analysis (Triangle) were quantified in milk. TBARS value in T- UVC milk (0.38 μmoles of MDA equivalent/L) was higher than in T-UVC-vacuum milk (0.29 μmoles of MDA equivalent/L) and control (0.14 μmoles of MDA equivalent/L).Treated milk samples were cooled, inoculated with a commercial symbiotic culture, incubated (43°C) until pH 4.6 - 4.7 and stored (4°C, 21 days). During milk fermentation pH, titratable acidity were monitored and during yogurt storage titratable acidity, soluble solids, syneresis, colour (L*, a*,b*), and Texture Profile Analysis were determined. A sensory field test with 46 consumers was also performed on T-UVC-vacuum yogurt. It was found that the yogurt made by proposed technology presented a significant decrease in syneresis, slight changes in acidity, pH, colour and soluble solids, and slight increases in cohesiveness, springiness, gumminess and chewiness relative to samples of yogurt control, and overall satisfactory acceptance by consumers. These results indicate that UV-C light offer an alternative to the processing of milk for manufacturing of yogurt. Keywords: milk, UV-C light, TBARS, yogurt, syneresis, colour, TPA, sensory analysis.

"Efecto de la diabetes sobre el metabolismo intermedio y síntesis de prostanoides en el útero aislado de rata en gestación" (1994). Jawerbaum, Alicia Sandra. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Efecto de la diversidad funcional de insectos herbívoros en el ciclado de carbono y nitrógeno en bosques andino-patagónicos" (2015-03-30). Oleiro, Marina Inés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La pérdida de biodiversidad afecta las relaciones tróficas y puede modificar los flujos de energía y nutrientes en los ecosistemas. Los consumidores herbívoros pueden afectar el ciclado de C y N en el suelo a través de varios mecanismos. Sin embargo, el rol de la diversidad de insectos defoliadores en el funcionamiento de bosques templados no ha sido aún estudiado en profundidad. El objetivo de esta tesis fue investigar el efecto de la diversidad funcional de insectos herbívoros, medida como diversidad de daños, sobre la descomposición de hojarasca y el ciclado de N en bosques de Nothofagus pumilio del norte de la Patagonia. El análisis químico (C:N) y físico (dureza) de la hojarasca mostró que el daño por insectos mejora la “calidad” del sustrato de descomposición. Ese efecto dependió de la identidad del gremio de insectos (masticador, minador, pegador) considerado. Experimentos a campo y en laboratorio indicaron que la herbivoría aceleró la descomposición de hojarasca en el suelo, pero la riqueza del daño foliar no fue un factor significativo. En microcosmos se demostró que tanto el daño físico de las hojas, como la deposición de heces, aumentaron la tasa de descomposición y la liberación de N de la hojarasca. El tipo de daño en la hojarasca (identidad) no afectó la tasa de descomposición, pero sí la dinámica del N. La hojarasca dañada por minadores y pegadores liberó más N que la hojarasca sana o dañada por masticadores. Durante el transcurso de esta tesis ocurrió la erupción del complejo volcánico Puyehue-Cordón Caulle y la deposición masiva de cenizas enmascaró el efecto de los herbívoros sobre la descomposición, pero no modificó las diferencias observadas en la dinámica del N. Evidencias de campo y laboratorio sugieren que la ceniza volcánica limitó la actividad de la mesofauna de detritívoros del suelo. Los resultados demuestran que la composición funcional de insectos folívoros puede regular procesos clave del ciclado de C y N en el suelo y que esos efectos son modificados por disturbios naturales de gran magnitud.

Abstract:
Biodiversity loss affects trophic interactions and may thus change the fluxes of energy and nutrients within ecosystems. The aim of this thesis was to investigate the effect of functional diversity of folivorous insects on litter decomposition and nitrogen cycling in Nothofagus pumilio forests in northern Patagonia. Chemical (C:N) and physical (toughness) analyses showed that prior insect damage improves leaflitter "quality" as a substrate for decomposition, relative to undamaged leaf litter. This effect depended on the insect guild (leaf chewer, miner or tier). Field and laboratory experiments indicated that herbivory accelerated litter decomposition, but leaf damage diversity had no significant effect. In a microcosm experiment, both the physical damage of senescing leaves and deposition of insect frass increased rates of decomposition and net N mineralization. Folivore guild identity did not affect decomposition rate but enhanced N release from litter. Litter damaged by miners and tiers released more N than undamaged leaves or leaves damaged by chewing insects. Mass deposition of volcanic ashes after the 2011 eruption of the Puyehue- Cordón Caulle complex masked any differences in decomposition between intact and insect damaged tree leaves. Yet, insect-mediated effects on litter N dynamics remained significant even beneath a thick ash layer. Laboratory and field evidence suggests that volcanic ashes limited the activity of soil mesofauna. This thesis shows that the functional composition of folivorous canopy insects can regulate key processes for C and N cycling in forest soils, and that these effects are modified by large-scale natural disturbances.

"Efecto de la estimulación nerviosa en la velocidad de síntesis de la noradrenalina : Posible regulación a través de receptores presinápticos" (1984). Luchelli, María Amalia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Efecto de la fludarabina en la sobrevida y funcionalidad de los linfocitos T de pacientes con leucemia linfática crónica: posibles implicancias en la falla terapéutica de la enfermedad" (2013-12-16). Nannini, Paula Romina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La leucemia linfática crónica (LLC) se caracteriza por la acumulación de linfocitos B (LB) clonales en sangre periférica y órganos linfáticos. La fludarabina es uno de los principales agentes quimioterápicos empleados para su tratamiento y posee claros efectos inmunomoduladores más allá de su tradicional capacidad citotóxica sobre los linfocitos. En la actualidad, la LLC continúa siendo una enfermedad incurable ya que las células leucémicas logran sobrevivir a los efectos pro-apoptóticos de la quimioterapia en los tejidos linfoides. Allí, proliferan en estructuras anatómicas denominadas centros proliferantes (CP) en contacto con linfocitos T (LT) activados, células estromales y células de tipo nodriza (NLC) que les brindan señales indispensables para su acumulación. El objetivo de este trabajo de Tesis fue estudiar los mecanismos que podrían estar involucrados en la falla terapéutica de los pacientes con LLC, centrándonos en el efecto de la fludarabina y el microambiente tumoral en la sobrevida y funcionalidad de los LT de los pacientes. Encontramos que las NLC autólogas protegen a los LT de la apoptosis espontánea e inducida por fludarabina, y que ésta droga es capaz de incrementar la activación y proliferación de los mismos. Estos hallazgos sugieren que luego del tratamiento con fludarabina, algunos LT podrán sobrevivir a sus efectos pro-apoptóticos en los CP en parte gracias a la presencia de las NLC. Dado que los LT brindan señales claves para la acumulación del clon leucémico, la mayor proliferación y activación que poseen luego del tratamiento con la droga podría contribuir a la expansión de las células LLC que han sobrevivido, con la consecuente recaída del paciente. Palabras claves: LEUCEMIA LINFÁTICA CRÓNICA; FLUDARABINA; LINFOCITOS T; CÉLULAS DE TIPO NODRIZA; MICROAMBIENTE TUMORAL.

Abstract:
Chronic Lymphocytic Leukemia (CLL) is characterized by the accumulation of clonal B lymphocytes in peripheral blood and lymphoid organs. Fludarabine is one of the main chemotherapeutic agents employed in the treatment of CLL and it exerts clear immunomodulatory actions besides its traditional cytotoxic effects on lymphocytes. There is still no cure for CLL patients as leukemic cells can overcome the pro-apoptotic actions of chemotherapy in lymphoid tissues within proliferation centers (PC). In these sites, CLL cells are in close contact with activated T lymphocytes (TL), stromal cells and nurse like cells (NLC) which support leukemic cells accumulation through survival and proliferation signals. The aim of this Thesis was to study the mechanisms that could be involved in the therapeutic failure of CLL patients, focusing on the effect of fludarabine and the tumor microenvironment in the survival and functionality of TL. We found that autologus NLC protect TL from spontaneous and fludarabine-induced apoptosis, and that this drug enhances activation and proliferation of TL from CLL patients. These findings suggest that after fludarabine treatment TL could survive in PC, at least in part, due to the presence of NLC. Considering that TL provide key survival signals that support CLL cells accumulation, fludarabine enhancement of TL proliferation and activation would contribute to the expansion of surviving leukemic cells, favoring the relapse of disease. Key words: CHRONIC LYMPHOCYTYC LEUKEMIA, FLUDARABINE, T LYMPHOCYTES, NURSE LIKE CELLS, TUMOR MICROENVIRONMENT.

"Efecto de la progesterona y del acetato de medroxiprogesterona (MPA) sobre el crecimiento de fibrosarcomas murinos : Estudios in vivo e in vitro" (1985). Lanari, Claudia Lee Malvina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo de este trabajo surgió de la observación de que la progesterona tiene efectos antifibromatogénicos en cobayos y en el hombre. Se evaluó el efecto de la progesterona y del acetato de medroxiprogesterona (MPA) sobre el crecimiento de un fibrosarcoma murino tanto in vivo como in vitro. También se estudió su efecto sobre la inducción de sarcomas originados por la implantación subcutánea de un cuerpo extraño. (cilindro de vidrio). In vivo, los resultados obtenidos demuestran que el MPA disminuyó la incidencia tumoral cuando se lo inoculó junto con el transplante de fibrosarcoma. Cuando el tratamiento hormonal se comenzó días después del inóculo tumoral no hubo efecto sobre su crecimiento. Se obtuvieron resultados similares con un transplante de una leucemia linfoblástica mientras que no se observó una disminución en la incidencia tumoral con un carcinoma epidermoide indiferenciado. In vitro, también se demostró que los fibroblastos tanto embrionarios como tumorales fueron más sensibles a concentraciones altas (10-5 - 10-4M) de progestágenos que las células epiteliales que constituyen las líneas celulares WISH y HELA. Sobre fibroblastos normales y tumorales la progesterona no sólo tuvo un efecto citostático sino que también por encima de 10-4M se observó un efecto citolítico. Con MPA sólo se pudo evaluar el efecto citostático ya que no se pudieron obtener concentraciones superiores a 7x10-5M. Este efecto fue específico para fibroblastos ya que las células WISH no se inhibieron aún con las altas concentraciones de hormona. En base a la alta concentración de la hormona se postula una acción directa, no mediada por receptores sobre las células tumorales tanto in vivo como in vitro. En cuanto al efecto del MPA sobre la tumorigénesis por cuerpo extraño, se observó una disminución en la incidencia de sarcomas inducidos por la implantación subcutánea de un cilindro de vidrio. Esta disminución fue más evidente cuando se inoculó la hormona en la vecindad del cuerpo extraño que en el flanco contralateral; en el primer caso no sólo disminuyó la incidencia tumoral sino que también fue menor el ritmo de aparición de los sarcomas. Se postula que el efecto inhibidor del MPA sobre la inducción de sarcomas se debería a una disminución en la fibrosis que rodea al cuerpo extraño. Un resultado inesperado, pero de gran relevancia debido al uso indiscriminado de esta hormona, fue la aparición de adenocarcinomas en hembras portadoras de cilindro de vidrio y tratadas con MPA ya sea in situ o en el flanco contralateral. Se puede concluir que si bien los progestágenos tienen un efecto antifibromatogénico, su administración prolongada pude llevar al desarrollo de adenocarcinomas.

"Efecto de la prometazina (Fenergan) sobre las enzimas que metabolizan tóxicos y fármacos" (1978). Fernandez, Graciela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudió el efecto de la administración única o repetida de prometazina (Fenergan) sobre los componentes del sistema enzimático de microsomas hepáticos que metabolizan tóxicos y fármacos; el citocromo P-450 y la citocromo C reductasa (P-450 reductasa). También se observaron los efectos que la adminis- tración única o repetida de prometazina tiene sobre la acción hipnótica del pentobarbital y se trató de entender las interacciones observadas en términos de los efectos que la prometazina ejerce sobre el metabolismo desintoxicante del pentobarbital mediado por las enzimas antes mencionadas. Se encontró que una única dosis de prometazina prolonga significativamente el tiempo de hipnosis por pentobarbital y no cambia el contenido de P-450 o la actividad de la citocromo C reductasa. EL efecto prolongador observado parece deberse a una acción aditiva de efectos depresores sobre el sistema nervioso central de la prometazina y el pentobarbital. Si la dosis de prometazina fuese alta también podrían actuar efectos inhibidores detectados en este estudio de este compuesto sobre las enzimas que metabolizan fármacos y tóxicos de microsomas hepáticos. Si el animal recibe más de dos dosis (una diaria) de prometazina, entonces el efecto hipnótico del pentobarbital se acorta y ello parece claramente deberse a que en esas condiciones aumenta el contenido de citocromo P-450, citocromo C reductasa y la actividad global del sistema para desintoxicar al organismo de pentobarbital (medida a través de la actividad de la etil-morfina N-demetilasa). EL aumento de contenido de P-450 microsomal se logra por el aporte del proceso de síntesis de proteína aunque éste no esté acelerado tal cual lo demuestran los estudios de incorporación del isótopo 14 de carbono-leucina en animales tratados y controles. Los estudios de efectos de la prometazina sobre el proceso de degradación proteica medidos con isótopo 14 de carbono-guanidino - arginina sugieren que en el aumento de contenido de citocromo P-450 microsomal el bloqueo de los procesos degradativos por la prometazina desempeña un papel importante. El aumento de actividad de la citocromo C reductasa por efecto de la adminitración de prometazina no depende de los procesos de síntesis o degradación proteica y podrá deberse ya sea a una acción tipo detergente de la prometazina sobre la enzima o alternativamente a que ésta funcionaría como acelerador del transporte de electrones entre el NADPH y el citocromo C. Los resultados obtenidos revisten potencial importancia en toxicología y farmacología, puesto que la exposición simultánea de un individuo a tóxicos o fármacos y a prometazina podría generar interacciones que van desde la consecuencia leve hasta una de tipo grave. Ello se debe a que al interactuar la prometazina sobre las enzimas de microsomas hepáticos que desintoxican algunos compuestos y potencian a otros, ella estaría modulando los efectos de los mismos. El uso frecuente de este antihistamínico en terapéutica hace más probable que ocurran este tipo de interacciones y por lo tanto estos resultados sugieren que se tenga particular cautela cuando se la emplea combinada con otros compuestos o cuando el individuo está expuesto a otros agentes tóxicos.

"Efecto de la sobreexpresión de distintas isoformas de la Proteína Quinasa C (PKC) en la modulación del fenotipo maligno de células mamarias epiteliales. Alteración en la sensibilidad al tratamiento con retinoides" (2016-03-28). Díaz Bessone, María Inés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El cáncer de mama representa actualmente el tipo de cáncer más frecuente en mujeres y se calcula que más de un millón de nuevos casos son diagnosticados por año en todo el mundo. Se trata de una enfermedad compleja, que presenta una variedad de subgrupos con características histopatológicas y genéticas diferentes y por lo tanto con diversas respuestas a los tratamientos. De las múltiples vías de señalización comprometidas en la progresión maligna, algunas constituyen prometedores blancos de intervención terapéutica, entre ellas la vía de la proteína quinasa C (PKC), implicada en eventos celulares como proliferación, diferenciación y apoptosis y el sistema retinoideo ampliamente involucrado en diferenciación celular. Dado que los distintos carcinomas mamarios presentan una expresión diferencial de las isoformas de PKC, desarrollamos modelos celulares mamarios (humanos y murinos) que sobreexpresan las isoformas α o δ de PKC. Utilizando estos modelos estudiamos de qué manera la sobreexpresión de PKCα o PKCδ afecta parámetros celulares implicados en la progresión tumoral y diseminación metastásica evaluando al mismo tiempo la respuesta al tratamiento con retinoides (ATRA). Nuestros resultados sugieren que la sobreexpresión de PKCα torna a las células más sensibles a la acción del ácido retinoico, en líneas respondedoras, mediante un arresto en la fase G0/G1 del ciclo celular. La sobreexpresión de PKCδ, en las células MDA-MB231, confirió un fenotipo menos agresivo, disminuyendo significativamente su capacidad invasiva. Por último la falta de respuesta de esta línea celular al ATRA, se debería a la incapacidad de trans-reprimir los sitios AP-1.

Abstract:
Breast cancer represents the most common kind of cancer in women and it is estimated that more than one million new cases are diagnosed each year worldwide. It is a complex disease, which presents a variety of subgroups with different genetic and histopathologic features and therefore with different responses to treatments. Multiple signaling pathways are involved in malignant progression. Some of them are promising targets for therapeutic intervention, including protein kinase C (PKC), involved in cellular events such as proliferation, differentiation and apoptosis and the retinoid system, widely implicated in cell differentiation. Since different mammary malignancies exhibit differential expression of PKC isoforms, we have developed (human and murine) mammary cell models overexpressing α or δ PKC isoforms. Using these models we studied how PKCα or PKCδ alters cell parameters associated with tumor progression and metastatic dissemination while we assessed the response to treatment with retinoids (ATRA). Our results suggest that PKCα overexpression confers to the cells a retinoic acid-sensitive phenotype, through an arrest in the G0 / G1 phase of the cell cycle. Overexpression of PKCδ, in MDA-MB231 cells, induced a less aggressive phenotype, significantly reducing its invasive capability. Finally the lack of response of this cell line to ATRA treatment could be due to the inability to trans-repress AP-1 sites.

"Efecto de la trehalosa sobre la encapsulación de aromas cítricos por secado spray" (2012-07-02). Sosa, Natalia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo fue estudiar la aplicación del azúcar trehalosa en la encapsulación de aromas apuntando a mejorar la calidad sensorial y la estabilidad física de aromas encapsulados por secado spray. Se prepararon formulaciones conteniendo trehalosa, sacarosa, mezclas de los azúcares con maltodextrina y almidones. Los volátiles fueron: etanol, citral y aceite esencial de naranja. Para los volátiles hidrofóbicos se prepararon emulsiones y se analizaron propiedades reológicas y de estabilidad. Se evaluaron propiedades físicas de los polvos. Se cuantificó la retención de volátiles y se realizó la evaluación sensorial de los aromas cítricos. La retención de citral encapsulado fue la misma para todas las formulaciones. Por el contrario, el perfil de volátiles obtenido en el caso del aceite de naranja fue muy diferente para las formulaciones conteniendo sacarosa o trehalosa. Estos resultados indican la importancia del azúcar seleccionado para el desarrollo de aromas encapsulados y la posibilidad de diseñar aromas en polvo diferentes a partir de un mismo aroma. El uso de la trehalosa como matriz en la encapsulación generó ventajas respecto al uso de la sacarosa, tales como incremento de la Tg del producto, y la capacidad de conservar el aroma característico del aceite de naranja en el almacenamiento.

Abstract:
The objective of the present work was to study the application of the sugar trehalose on the encapsulation of aromas, aiming on improving the sensorial quality and the physical stability of the spray-dried aromas. The formulations contained trehalose, sucrose, mixtures of sugars with maltodextrin and modified starches. The volatiles were: ethanol, citral and orange essential oil. In the case of hydrophobic volatiles, emulsions were prepared. Rheological properties and stability were analyzed. Physical properties of the powders were evaluated. Volatiles were quantified and sensorial evaluation was done for citric aromas. The encapsulated volatiles were retained differentially in the different. Citral retention was the same in all the analyzed formulations. The volatiles profile obtained for orange oil was very different for trehalose and sucrose formulations. These results indicate the relevance of the sugar selection for the development of encapsulated aromas, and the possibility of designing different powdered aromas from a single aroma. Also, we found that the use of trehalose as part of the carrier matrix for encapsulation showed advantages as compared to sucrose, higher Tg values were obtained, and the characteristic aroma of orange essential oil was maintained during storage.

"Efecto de las impurezas en la autodifusión de Zr y en la aleación Zr-50 por ciento át. Ti" (1994). Forlerer de Svarch, Elena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los valores de los coeficientes de autodifusión medidos en las dos fases del Zr (HCP a bajas y BCC a altas temperaturas), no siguen una ley de Arrhenius con la temperatura como la mayoria de los metales compactos. En este último caso, hay acuerdo general en que los átomos migran por un mecanismo de intercambio con monovacancias en equilibrio térmico. Las "anomalías" se han explicado cualitativamente mediante mecanismos que modifican distintas propiedades de la vacancia: -En HCP Zr, se propusieron distintos mecanismos: a) Asociación de la vacancia con impurezas rápidas como el Fe (HOOD88). b) Un súper-salto de la vacancia, de magnitud inversa a la concentración de la impureza (FRAN91). -En BCC Zr se propuso, una disminución de la entalpia de migración de la vacancia: a’) Por la formación del embrión de la fase metaestable ω debida a un ablandamiento del modo LA 2/3(111) (SANC78). b’) Por el acoplamiento del modo pre-ω (que no varia con T), con el modo transverso pre-α TA 1/2(110) variable con la temperatura (HERZ93). En este trabajo se analizan críticamente los cuatro modelos y también las medidas de autodifusión, en lo que respecta al contenido de impurezas residuales en las muestras utilizadas. En Zr-HCP, se descarta el modelo de Frank ya que la magnitud del súper-salto es controlada por la energia de unión impureza vacancia. Se adopta el modelo de Miller, que propone un efecto acelerador por la formación del par impureza intersticial(Fe) - vacancia(Zr). La concentración del par, sigue el límite de solubilidad del Fe en α-Zr a cada temperatura y se obtiene buen acuerdo con los resultados experimentales hasta 1003K. Por arriba de esta temperatura proponemosla presencia de fase BCC lo que permite explicar resultados en policristales en función de la fracción de fase BCC en borde de grano (FORL91). En Zr BCC,se analizan críticamente los modelos señalando que: -Ademásde la entalpia de migración, debe ser tenida en cuenta la energia libre de formación de la vacancia. -El cálculo del incremento de los desplazamientos atómicos en función de la disminución de la fecuencia con una aproximación anarmónica realizado por (HERZ93) no alcanza el desplazamiento crítico necesario. -Los picos centrales de dispersión quasielástica de neutrones pueden ser interpretados comoun efecto multifonónico (HERZ93) ó bien como un efecto de impurezas. Se sugiere entonces que también en la fase BCC,podria explicarse la difusión anómala debido a la asociación impureza-vacancia, ya que basta una energia de unión Fe-vacancia de 0.12 eV, para que la disociación del par por efecto térmico disminuya la población de defectos en 1/e a 1100C, bien entrada la fase BCC. De las medidas de difusión en la aleación Zr-50% át.Ti y la misma aleación con alto contenido de Oxigeno y Nitrógeno, se obtiene un efecto de frenado en la autodifusión de Zr. Esto indica que, una mayor concentración de embriones de la fase ω no aumenta la difusión de Zr en la fase BCC,contrariamente a lo predicho por el modelo de Sanchez y De Fontaine.

"Efecto de los complejos inmunes sobre las moléculas de histocompatibilidad (MHC) y otras moléculas asociadas a fenómenos inflamatorios en monocitos humanos" (2004). Barrionuevo, Paula. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Un fenómeno inflamatorio se produce la migración unidireccional (quimiotaxis) de los polimorfonucleares neutrófilos (PMN) hacia el foco inflamatorio, seguidos luego por los monocitos sanguíneos. Esta migración es la respuesta al gradiente de concentración de un agente quimiotáctico determinado, como el leucotrieno B4 o las quimioquinas. También existen productos como los complejos inmunes (Cl), que son quimiotácticos para monocitos y neutrófilos. La formación de Cl circulantes es la consecuencia fisiológica de la respuesta de anticuerpos contra microorganismos u otros antígenos, o bien el resultado de enfermedades autoinmunes como artritis reumatoidea, o lupus eritematoso sistémico. Los Cl son los ligandos fisiológicos de los receptores para la porción Fc de las IgG (FcγRs) y la interacción entre éstos, dispara una variedad de funciones regulatorias y efectoras. Las moléculas de histocompatibilidad (MHC) son glicoproteínas presentes en la superficie celular que participan en la presentación de péptidos antigénicos para la activación de los linfocitos T. Existen dos tipos de moléculas presentadoras de antígenos: las MHC de clase I (MHC-I) y las de clase II (MHC-II). Estas moléculas se expresan constitutivamente en la superficie de los fagocitos mononucleares y su expresión es aumentada por citoquinas como el interferón -γ (IFN-γ). En este trabajo, se ha demostrado que la preincubación de los monocitos humanos con Cl formados por Ovoalbúmina (OA)- IgG anti-OA fue capaz de disminuir la expresión basal e inducida por IFN-γ de las MHC-I y las MHC-II. El efecto de los Cl sobre la expresión de las MHC es mediado a través de la interacción de los Cl con el FcγRI y el FcγRII. La disminución de la expresión de las MHC en los monocitos correlacionó directamente con la capacidad de presentación antigénica de dichas células. Similares resultados fueron obtenidos con sobrenadantes de monocitos tratados con Cl. La inhibición del efecto de los SN sobre las MHC-II por pepstatin y phosphoramidon sugiere que la secresión se proteasas aspárticas y metaloproteasas constituye un mecanismo posible en la regulación de las MHC-II por parte de los Cl. Por otra parte, la inhibición por phosphoramidón para las MHC-I sugiere la participación de metaloproteasas en la regulación de las MHC-I. Además, los sobrenadantes de PMN tratados con el Cl también fueron capaces de disminuir la expresión de las MHC. En el modelos murino de inflamación crónica, los Cl también disminuyeron la expresión basal e inducida por IFN-γ de las MHC-II en macrófagos murinos. Además, los Cl disminuyeron la expresión de otras moléculas de relevancia inmunológica tales como CD14, ICAM-1 y CD40. La disminución de la expresión de CD14 mediada por Cl va acompañada de la inhibición de la producción de factor de necrosis tumoral α (TNF-α) inducida por lipopolisacáridos (LPS). En cuanto al mecanismo, observamos que el efecto de los Cl sobre CD14 podía ser atribuido a la liberación de serinproteasa(s) con especificidad tipo tripsina por parte de los monocitos humanos. Por último, encontramos una forma soluble de CD14 en el sobrenadante de monocitos tratados con Cl, confirmando que la distribución de CD14 en superficie se debe al clivaje y la liberación de la molécula al medio extracelular. Este trabajo contribuye a la comprensión global de los mecanismos mediante los cuales agentes conocidos como pro-inflamatorios pueden tener funciones anti-inflamatorias en determinadas circunstancias. Este efecto anti-inflamatorio de los Cl podría funcionar como mecanismo de atenuación de una respuesta inflamatoria exacerbada por parte del huésped.

Abstract:
Inthe course of the inflammatory phenomenon, polymorphonuclear neutrophils (PMN) migrate unidirectionally (chemotaxis) towards the inflammatory focus, followed by monocytes. This migration occurs in response to the concentration gradient of a chemotactic agent, such as leukotriene B4 or chemokines. Molecules such as inmune complexes (IC) are chemotactic for neutrophils and monocytes. The information of circulating IC is the physiological consequence of antibody response to different antigens, including microorganisms, or lupus erythematosus. IC are the endogeneous agonists of the receptors for the Fc portion of IgG (FCγRs) and their interaction triggers a variety of regulatory and effectors functions. The histocompatibility molecules (MHC) are cell-surface glycoproteins involved in the presentation of peptides for the activation of T lymphocytes. There are two classes of molecules for antigen presentation: the MHC class I (MHC-I) and class II (MHC-II). This molecules are constitutively expressed on the surface of phagocytic mononuclear cells and their and their expression is induced by cytokines such as interferon-γ (IFN-γ). In this study, it has been demonstrated that pre-incubation of human monocytes with ovalbumin (OA)- rabbit IgG anti-OA immune complexes exerted an inhibition of basal and IFN-γ-induced expression of MHC-I and MHC-II. The effect of IC on MHC expression was mediated by the interaction of IC with FcγRI and FcγRII. The down-regulation of MHC expression on monocytes correlated directly with the antigen presentation capacity of this cells. Similar results were obtained with supernatants from IC-treated monocytes. The inhibition of the effects of supernatants on MHC-II by pepstatin and phosphoramidon suggests that the secretion of aspartic proteases and metalloproteases is a possible mechanism that regulates MHC-II. On the other hand, the inhibition of the effect on MHC-I by phosphoramidon supports the role of metalloproteases in this case. In addition, supernatants from IC-treated PMN were also able to reduce the expression of MHC. In a murine model of chronic inflammation, IC also down-regulated the basal and IFN-γ-indiced expression of MHC-II on murine macrophages. In addition, IC down-regulated the expression of other immunologically relevant molecules such as CD14, ICAM-1, and CD40. The down-regulation of CD14 expression mediated by IC correlated with the inhibition of lipopolisacarides (LPS)-induced tumor necrosis factor α (TNF-α) production. Regarding the mechanism, we demostrated that the effect of IC on CD14 could be ascribed to the secretion of serinproteases tripsina-like by human monocytes. Finally, we found a soluble form of CD14 in supernatants from IC-treated monovytes, confirming that the reduction of CD14 on the cell-surface is due to cleavage and release of the molecule into extracellular medium. This study contributes to the understanding of inflammatory phenomena. We have demonstrated that well-known pro-inflammatory molecules could behave, under certain circunstances, as anti-inflammatory agents. This anti-inflammatory effect of IC would attenuate an exacerbated host immune response.

"Efecto de los esteroides testiculares y del órgano de Bidder sobre la actividad del eje hipotálamo-hipófisis-gonadal en el sapo macho Rhinella arenarum (Amphibia, Anura)" (2014-08-13). Volonteri, María Clara. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los machos de anfibios anuros tienen variaciones estacionales en los andrógenos y los estrógenos plasmáticos, aunque poco se conoce acerca de los cambios estacionales en las gonadotrofinas. En Rhinella arenarum, los andrógenos plasmáticos disminuyen durante el período reproductivo y los estrógenos aumentan. Los objetivos de esta tesis fueron: caracterizar la histología de los órganos involucrados y analizar la localización de factores como GnRH y Kispeptinas en el eje hipotálamo-hipófisis-gonadal; caracterizar la secuencia del ADNc de LHβ y FSHβ de la hipófisis del sapo; estudiar los cambios estacionales en los dos mensajeros por RT-PCR en tiempo real, relacionando dichos cambios con la concentración de esteroides sexuales y la espermatogénesis y estudiar el rol de dichos esteroides en la regulación de las gonadotrofinas. El análisis de los marcos de lectura abiertos de los ADNc de LHβ y FSHβ indicó que las proteínas tienen, respectivamente, 113 y 104 aminoácidos. Los alineamientos múltiples de la secuencia de aminoácidos de ambas subunidades β sugieren que los tetrápodos estudiados tienen 12 cisteínas conservadas y uno (LH) y dos (FSH) sitios de N-glicosilación. LHβ de sapo es más cercana a los teleósteos que a los mamíferos y las aves mientras que FSHβ es más parecida a los mamíferos. La expresión del ARNm de LHβ y FSHβ tiene cambios estacionales, con un perfil de expresión opuesto a la concentración de andrógenos y el tratamiento con andrógenos durante el período reproductivo inhibe la expresión de ARNm LHβ. En conclusión, existe una buena correlación entre los andrógenos y estrógenos plasmáticos y la expresión de LHβ, y entre FSHβ y la espermatogénesis.

Abstract:
Male anuran amphibians have seasonal changes in androgens and estrogens. However, information regarding seasonal variations in gonadotropins is scarce, probably due to the lack of a suitable method for the determination. In Rhinella arenarum, plasma androgens decrease during the reproductive season while estrogens increase. The main objectives of this thesis were to characterize the histology of the brain and the pituitary gland as well as to localize the distribution of GnRH and Kisspeptins in the hypothalamus-pituitary-gonadal axis; to characterize the cDNA sequence of LHβ and FSHβ from toad pituitary, to study seasonal variation in both mRNA by using quantitative real-time RT-PCR and to analyze the relationship between both mRNA with plasma steroids and spermatogenesis. Besides, the role of androgens and estrogens in gonadotropin regulation was studied. The open reading frames analysis of LHβ and FSHβ cDNAs indicate that mature proteins have 113 and 104 amino acids, respectively. Multiple alignments of aminoacid deduced sequences of both β subunits showed that all the tetrapods studied conserve 12 cysteins and one (LH) or two (FSH) N-Glycosylation sites. LHβ is closer to teleosts than to mammals and birds while FSHβ is closer to mammals. The analysis of seasonal changes in LHβ and FSHβ mRNA indicates that transcript levels have seasonal variations and that the profile of androgens is opposite to that of the gonadotropins mRNA. As well, androgen treatments inhibit the expression of LHβ during the reproductive season. In conclusion, there is a good correlation between plasma androgens and estrogens and the expression of LHβ, and between spermatogenesis and FSHβ.

"Efecto de los factores físico-químicos y biológicos en la estructura de la comunidad del intermareal rocoso en las provincias de Buenos Aires y Río Negro" (2014-03-17). Arribas, Lorena Pilar. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las comunidades intermareales se encuentran reguladas por factores físicos y biológicos. El objetivo general de este trabajo fue estudiar la estructura de la comunidad del intermareal rocoso, en especial los ingenieros ecosistémicos que allí habitan (e.g. mitílidos) y las especies asociadas a los mismos, en 6 localidades a lo largo de la costa argentina. Se analizó la variación a nivel espacial y estacional de los mitílidos y sus organismos asociados, además de procesos ecológicos como el reclutamiento de las dos especies de mejillines a lo largo de la costa argentina y la competencia de los mismos en la zona de coexistencia. Se encontró un reemplazo de mitílidos a lo largo de la costa, y se observaron diferencias en sus características poblacionales, en las especies asociadas y en el reclutamiento. Las fluctuaciones en la comunidad estuvieron relacionadas con características locales (sedimento y dureza de la roca) y factores físico-químicos (SST, clorofila-a, salinidad, pH). Además, el reclutamiento estuvo influenciado por la presencia de coespecíficos. La competencia dentro y entre mitílidos fue débil, siendo los procesos oceanográficos los que regulan las poblaciones de mitílidos en la zona de coexistencia. Resulta de gran importancia estudiar la comunidad intermareal, ya que preservando la biodiversidad permite a un ecosistema resistir mejor a los cambios ambientales extremos, haciéndolo menos vulnerable.

Abstract:
Intertidal communities are governed by physical and biological factors. The overall objective of this work was to study the community structure of rocky intertidal and especially ecosystem engineers that live there (e.g. mussels) and associated species, in 6 locations along Argentinean coast. The spatial and seasonal variation in mussels and their associated organisms were analyzed, in addition to ecological processes such as along coast recruitment of the two species of small mussels and competition of mussels in the area of coexistence. Replacement of mussels along the coast was found, and differences in population characteristics, associated species and recruitment were observed. Fluctuations in the community were related to local characteristics (sediment and rock hardness) and physical-chemical factors (SST, chlorophyll-a, salinity, pH). In addition, recruitment was influenced by the presence of conspecifics. Competition within and between mussels was weak, being oceanographic processes that regulate populations of mussels in the region of coexistence. It is of great importance to study the intertidal community, preserving the biodiversity allows an ecosystem better withstand extreme environmental changes, making it less vulnerable.

"Efecto de los nutrientes y el pH sobre el crecimiento y la estructura del fitoplancton en ambientes de la llanura aluvial del Paraná Inferior" (2001). Unrein, Fernando. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se evaluó experimentalmente la importancia del N como factor limitante para el desarrollo del fitoplancton en distintos ambientes acuáticos, distribuidos sobre un eje transversal al cauce principal del Paraná Inferior.Se analizaron además las diferencias espaciales en la composición de esta comunidad y el efecto del N y el pH sobre su estructura, principalmente sobre la abundancia de algas mixotróficas y fijadoras de N2. La primer parte del estudio se llevó a cabo en tres ambientes (rio Paraná, laguna Montiel, bañado El Ciego) aledaños a Villa Constitución (Santa Fe). Aquí se analizaron en cuatro ocasiones (mayo'96 - febrero'97) las características limnológicas de estos cuerpos de agua y se realizaron bioensayos in vitro con agregado de N y P. La segunda parte correspondió a un estudio intensivo (octubre'98 - mayo'00)de la laguna Grande (Otamendi, Buenos Aires), donde se realizaron bioensayos in situ con agregado de nutrientes y de Na2CO3 para elevar artificialmente el pH del agua. Desde el cauce principal hacia la planicie de inundación se observó un marcado gradiente limnológico. A lo largo de este eje disminuyeron la concentración de sólidos en suspensión, de NID y la profundidad, y aumentaron la transparencia, la relación Secchi:profundidad, la concentración de nutrientes totales (NT y PT) y la biomasa fltoplanctónica. En el río, donde la luz es limitante, dominaron diatomeas típicamente potamoplanctónica adaptadas a vivir con bajas intensidades lumínicas y alta turbulencia (Aulacoseira granulata y sus variedades), mientras que en el otro extremo del gradiente donde el principal factor limitante es la falta de NID, el fitoplancton estuvo dominado principalmente por fitoflagelados mixotróficos (Cryptomonas, Euglena, Peridinium) de las asociaciones W e Y (sensu Reynolds, 1997) y por pequeñas Chlorococcales C-estrategas de la asociación X1. El grado de conectividad con el cauce principal determina la importancia relativa de la luz y el N como factores limitantes. El NID sería potencialmente limitante cuando su concentración disminuye por debajo de los 100 μg L-1. La ventaja de los fitoflagelados dominantes en los ambientes más alejados del curso principal no sería sólo la mixotrofiasino además su capacidad para mantenerse en suspensión en un ambiente vegetado relativamente calmo, mientras que las algas autotróficas obligadas sin movilidad propia dependen de condiciones de turbulencia para ser dominantes. La abundancia de cianobacterias fijadoras de N2 de la asociación H (Anabaena) en los ambientes donde el N es limitante está condicionada no solo por la baja concentración de NID sino que además requerirían valores de pH elevados. Por otro lado, Cyclotella meneghiniana fue dominante durante el verano'00 en la laguna Grande debido principalmente a los altos valores de pH registrados durante este período.

Abstract:
The aim of this work is to evaluate the importance of N as limiting factor for phytoplankton growth in different environments from a floodplain stretch of the Lower Paraná River. The changes in natural phytoplanktonic community as well as the main physico-chemical parameters were also studied along this section. Experiments were performed in order to assess the effect of N and pH on the phytoplankton structure, principally on the abundance of mixotrophic algae and N2-fixing Cyanobacteria. The first part of the study was carried out in three environments (the main channel, a lake and a swamp) across the Lower Paraná River floodplain opposite to Villa Constitución city (Santa Fe). Each site was seasonally sampled (May'96 - February'97), in vitro bioassays with addition of N and P were also performed. The second part was an intensive study (October'98 - May'00)of the Grande lake (Otamendi). In situ bioassays with addition of nutrients and Na2CO3 (to rise pH) were performed using bottles and mesocosms. A decrease in depth, suspended solids and DIN(dissolved inorganic N)was observed from the main channel towards the swamp. whereas transparency, Secchi:depth ratio. total nutrients (TP and TN) and phytoplankton biomass increased. In the mainstream, where light is the major limiting factor for phytoplankton growth, typical potamoplanktonic species adapted to grow in turbid and turbulent environments dominated (Aulacoseira granulata and its varieties). Oppositely, in the swamp phytoplankton was mainly composed of mixotrophic phytoflagellates (Cryptomonas, Euglena, Peridinium) from associations W and Y (sensu Reynolds. 1997) and small-size green algae, typically C-strategists (association X1). NlD is the main limiting factor in the latter environment. The connectivity degree between floodplain environments and the main channel determines the relative importance of light and N as limiting factors. NID concentration below 100 μg L-1 would indicate potential N-limitation. Phytoflagellates, dominating in low connectivity and N-limiting water bodies. would be favored not only by their mixotrophic behavior, but also by their capacity to maintain suspension in a vegetated and relativer calm environment; whereas autotrophic algae lacking motility depend on turbulent conditions (less macrophytes) to become dominant. The abundance of N2-fixing Cyanobacteria from association H (Anabaena) in N limiting environments depends on the low DIN concentration, as well as on the high pH values. On the other hand, Cyclotella meneghiniana dominated Grande lake during the summer'00 due to the high pH values encountered during this period.

"Efecto de los péptidos formilados en la regulación del receptor para el fragmento Fc de inmunologlobulina G de tipo I (FcyRI) en monocitos humanos" (2002). Beigier Bompadre, Macarena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En un fenómeno inflamatorio se produce la migración unidireccional (quimiotaxis) de los polimorfonucleares neutrófilos hacia el foco inflamatorio, seguidos luego por los monocitos sanguíneos. Esta migración es la respuesta al gradiente de concentración de un agente quimiotáctico determinado, como el leucotrieno B4 o las quimioquinas. También existen productos como los péptidos formilados, que son quimiotácticos para monocitos y neutrófilos. Estos péptidos formilados son productos de clivaje de proteínas bacterianas o mitocondriales. Los receptores para la porción Fc de lgG (FcγRs) son capaces de interconectar la especificidad de los anticuerpos con las funciones efectoras de los monocitos y neutrófilos. Tres clases de FCyRshan sido identificados en los leucocitos humanos: FcγRI, FcγRII y FcγRIII. El FcγRI es un receptor de alta afinidad capaz de mediar Ia fagocitosis y Ia citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC). Este receptor se expresa constitutivamente en la superficie de los fagocitos mononucleares y su expresión es aumentada por citoquinas como el interferón-γ (IFN-γ)y la interleukina-10 (IL-10). En este trabajo, se ha demostrado que la preincubación de los monocitos humanos con el péptido formilado prototipo N-formil-metionil-leucil-fenilalanina (FMLP) fue capaz de inhibir la expresión del FcγRI inducida por IFN-γ e IL-10. Esta inhibición se correlacionó con la inhibición de funciones dependientes del FcγRI como la ADCC y Ia fagocitosis, pero el FMLP no afectó otras funciones mediadas por el IFN-γ o la IL-10. El mecanismo de acción del FMLP cuando fue agregado antes que las citoquinas, involucraría la activación de las Mitogen Activated Kinases (MAPKs) p38 y Erk1/2, pero no de la proteín kinasa C (pKC). A su vez, el FMLP no modificó ni la expresión de los receptores para IFN-γ o IL-1O ni la fosforilación del factor de transcripción STAT-1. Por otra parte, el FMLP también inhibió la expresión del FcγRI en monocitos humanos previamente activados con IFN-γ. Sin embargo, en este caso, el FMLP no modificó la expresión del FcγRI en células pretratadas con IL-10. Sobrenadantes obtenidos de monocitos tratados primero con IFN-γ y luego con FMLP, indujeron la disminución de la expresión del FcγRI en monocitos naive. Este efecto estaria mediado por serin y metaloproteasas. A su vez, sobrenadantes provenientes de neutrófilos tratados con FMLP también fueron capaces de inducir la disminución del FcγRI en monocitos naive. En un modelo murino de inflamación crónica, el FMLP indujo la disminución de la expresión de FcγRs en macrófagos activados con IFN-γ. En pacientes con tuberculosis pulmonar activa, el IFN-γ y la IL-1O indujeron el aumento en la expresión del FCγRI en los monocitos. Sin embargo, el FMLP no fue capaz de disminuir la expresión del FCγRI inducida por estas citoquinas. Además, sobrenadantes de neutrófilos tratados con FMLP provenientes de estos pacientes no alteraron la expresión del FCγRI en monocitos naive. Este trabajo contribuye a la comprensión global de los mecanismos mediante los cuales agentes conocidos como pro-inflamatorios pueden tener funciones anti-inflamatorias en determinadas circunstancias. Este efecto antiinflamatorio del FMLP funcionaría como mecanismo de atenuación de una respuesta inflamatoria exacerbada por parte del huésped. El hecho de que los monocitos de los pacientes con tuberculosis pulmonar activa no presenten estos mecanismos concuerda con esta interpretación.

Abstract:
In the course of the inflammatory phenomenon, polymorphonuclear neutrophils migrate unidirectionally (chemotaxis) towards the inflammatory focus, followed by monocytes. This migration occurs in response to the concentration gradient of a chemotactic agent, such as leukotriene B4 or chemokines. Molecules such as formylpeptides are chemotactic for neutrophils and monocytes. These peptides are cleavage products of bacterial and mitochondrial proteins. The receptors for the Fc portion of IgG (FCγRs) act as a bridge between the specificity of antibodies and the effector functions of monocytes and neutrophils. Three classes of FcγRs have been identified on human leukocytes: FcγRI, FcγRII and FcγRIII. FcγRI is a high affinity receptor that mediates phagocytosis and antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC). This receptor is constitutively expressed on mononuclear phagocytes and its expression is enhanced by interferon-γ (IFN-γ) and interleukine-1O (IL-10). In this study, it has been demonstrated that pre-incubation of human monocytes with the prototypic formyl peptide N-formyI-methionyl-leucyl-phenylalanine (FMLP) inhibited the expression of FcγRI induced by IFN-γ or IL-10. This inhibition correlated with the inhibition of FcγRI-dependent functions such as ADCC and phagocytosis. However, FMLP did not affect other functions modulated by IFN-γ or IL-10. When FMLP was added to human monocytes before these cytokines, Mitogen Activated Kinases (MAPKs) p38 and Erk1/2, but not protein kinase C (pKC), were involved in the FMLP-mediated inhibition. FMLP altered neither the expression of IFN-γ/IL-10 receptors nor the phosphorylation of the transcription factor STAT1. On the other hand, FMLP also inhibited the expression of FcγRI in human monocytes that had been previously treated with IFN-γ. However, FMLP did not alter the expression of FcγRI in monocytes previously treated with IL-10. Supernatants obtained from monocytes treated first with IFN-γ and later with FMLP downregulated the expression of FcγRI on naive human monocytes. This effect was mediated by serine and metalloproteases. Moreover, this effect was also observed when using supernatants from FMLP-treated human neutrophils. In a murine model of chronic inflammation, FMLP downregulated the expression of FcγRd on IFN-γ-activated macrophages. In patients with active pulmonary tuberculosis, IFN-γ and IL-1O upregulated the expression of FcγRI. However, FMLP was not capable of downregulating the expression FcγRI induced by these cytokines. Besides, FMLP-treated neutrophils from these patients did not modify the expression of FcγRI on naive monocytes. This study contributes to the understanding of inflammatory phenomena. We have demonstrated that well-known pro-inflammatory molecules could behave, under certain circumstances, as anti-inflammatory agents. This antiinflammatory effect of FMLP would attenuate an exacerbated host immune response. The fact that monocytes from tuberculosis patients lack these antiinflammatory mechanisms is in agreement with this interpretation.

"Efecto de paration, malation, clordano, lindano y endosulfan sobre el camino metabólico del hemo" (1986). Vila, María del Carmen. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Efecto de prostaglandinas, óxido nítrico y endotelina-1 sobre el metabolismo y desarrollo del embrión en oncogénesis durante la gesta diabética" (2003). Sinner, Débora Inés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El entorno diabético durante la preñez provoca alteraciones en el desarrollo del embrión, sin embargo los mecanismos subyacentes no han sido totalmente clarificados. En este trabajo hemos analizado los efectos de algunos agentes vasoactivos, sobre el desarrollo y metabolismo del embrión de rata durante la organogénesis en dos modelos diferentes de diabetes inducida por estreptozotocina. Ambos modelos presentan anomalías morfológicas y retardo en el crecimiento embrionario, siendo más severo el cuadro en el modelo de diabetes tipo l. En el embrión de rata diabética tipo Il, se hallaron niveles incrementados de Endotelina 1 (ET-1) y de Oxido Nítrico (NO), compuestos que se regulan negativamente entre sí. En forma diferente el embrión de rata diabética tipo 1, presenta niveles disminuidos de ET-1 e incrementados de NO, y no existe modulación entre ambos compuestos. A su vez, estos embriones presentan anomalías en el contenido y la producción de prostaglandina E2 (PGE2) debido a alteraciones en el transporte de dicho prostanoide. La síntesis de lípidos embrionarios es un mecanismo activo, proceso que se encuentra alterado en el embrión de rata diabética, siendo dicha anomalía más severa en el modelo tipo 1, la cual es revertida por acción de PGE; y acentuada por 15 deoxi delta 12,14 prostaglandina J2 (agonista del receptor nuclear PPARγ), ambos moduladores del metabolismo lipídico. Los resultados permiten afirmar que, en respuesta al grado de severidad del entorno materno diabético, se afecta la síntesis, producción y regulación de agentes vasoactivos que alteran en forma directa el desarrollo del embrión.

Abstract:
During pregnancy, diabetic milieu induces anomalies on embryonic development, although underlying mechanisms still remain unclear. In this work we have analyzed the effects of vasoactives agents on embryonic development and metabolism during organogenesis in two different models of diabetes induced by streptozotocin. Both models show morphological anomalies and delayed embryonic growth, being this condition worse in diabetes type 1. Increased levels of Endothelin-1 (ET1) and Nitric Oxide (NO) were found in embryos from diabetic type II rats, where there is a negative modulation between both agents. Differently, embryos from diabetic type I rats show diminished levels of ET-1 and increased levels of NO and no modulation between both compounds. In addition, these embryos show anomalies in embryonic levels and production of Prostaglandin E2 (PGE2) because of the transport alterations of this prostanoid. Embryonic lipid synthesis is an active mechanism, that is impaired in diabetic embryo, being more severe in type 1 model. This alteration is reverted by PGE2 and accentuated by 15 deoxy delta 12,14 prostaglandin J2. (an agonist of nuclear receptor PPARγ), both modulators of lipid metabolism. This results let us to state that, according to severity of maternal diabetic milieu , synthesis, production and regulation of vasoactive agents are affected, altering directly the normal embryonic development.

"Efecto del antiinflamatorio no esteroideo indometacina sobre las células mieloides supresoras en microambientes inflamatorios normales y tumorales" (2012). Blidner, Ada G.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las células mieloides supresoras (CMS) constituyen una población de células con actividad regulatoria que controla las respuestas inflamatorias crónicas y promueve el escape tumoral. En este proyecto de tesis mostramos que el efecto del antiinflamatorio no esteroide indometacina (Indo) sobre las CMS es dependiente del contexto en el que se diferencie esta población celular. Ratones BALB/c inoculados con el adenocarcinoma de pulmón singeneico LP07 (3x105 células) se trataron in vivo con una dosis de 10 μM de Indo en el agua de beber. El tratamiento inhibió la acumulación de CMS en el tumor y en órganos linfáticos secundarios producida durante la progresión tumoral, inhibió la actividad supresora de las CMS esplénicas sobre la respuesta linfocitaria a un aloantígeno e inhibió el crecimiento tumoral en un ensayo de transferencia adoptiva, p<0.001. En línea con estos resultados, observamos la misma actividad en las CMS cuando se trataron in vitro con Indo (10 μM) en presencia de medio condicionado de células LP07, simulando el microambiente tumoral. Sin embargo, en ausencia del microambiente tumoral, la administración de Indo generó un aumento en la capacidad supresora (MLR; p< 0.05) y pro-tumoral (transferencia adoptiva, p<0.01) de las CMS. Además, las CMS de ratones normales tratadas con Indo en ausencia del microambiente tumoral suprimieron el desarrollo de la encefalomielitis aguda experimental (EAE), un modelo de esclerosis múltiple en ratones C57BL/6, mientras que las CMS tumorales tratadas con Indo aumentaron la severidad de los síntomas e impidieron su resolución (p<0.05). Analizando los mecanismos de inmunosupresión, Indo redujo la actividad arginasa (4,794 vs 2,077 μg urea/ mg total proteína, p<0.001) y la producción de óxido nítrico (9.2 vs 4.4 μM; P<0,05) y de especies reactivas de oxígeno (124 vs 87 MFI P<0.05) en CMS tumorales pero no en CMS normales. Este estudio revela el rol dual de un agente antiinflamatorio en el control de una población celular regulatoria con implicancias críticas en cáncer y en desórdenes autoinmunes.

Abstract:
Myeloid-derived suppressor cells (MDSCs) have emerged as a regulatory cell population that controls chronic inflammatory responses and promotes tumor-immune escape. To date no specific immunomodulatory drug has proven efficacy in targeting the expansion and/or function of these cells. Here we show a context-dependent effect of the non-steroidal antiinflammatory drug indomethacin (Indo) on MDSCs. BALB/c mice were injected with 3x105 LP07 lung adenocarcinoma cells and treated with a non-cytotoxic dose of Indo (10 μM; IC50 LP07: 60 μM). Indo treatment inhibited the suppressive activity of splenic MDSCs in mixed lymphocyte reactions (MLR) (p<0.05), and restrained tumor growth in adoptive transfer experiments (p<0.001). Accordingly, the same effect was observed when MDSCs were treated with Indo in vitro (10 μM; IC50 MDSCs: 125 μM) in the presence of conditioned media from LP07 cells. However, in the absence of a tumoral context, Indo administration increased the suppressive activity of these cells (MLR; p< 0.05) and their pro-tumoral effect (p<0.01). In keeping with these observations, Indo-treated normal MDSCs suppressed the development of Experimental Autoimmune Encephalomyelitis (EAE), a model of multiple sclerosis in C57BL/6 mice, while Indo-treated tumoral MDSCs enhanced the severity of EAE and delayed its resolution (p<0.05). Mechanistically, Indo reduced arginase activity (4,794 vs 2,077 μg urea/ mg total protein,p<0.001) and production of nitric oxide (9.2 vs 4.4 μM; p<0,05) and reactive oxygen species (ROS) (124 vs 87 MFI P<0.05) in tumoral MDSCs, but not in normal MDSCs. Our study unveils the dual role of a widely used anti-inflammatory agent in the control of regulatory cell compartments with critical therapeutic implications in cancer and autoimmune disorders.

"Efecto del arsenito de sodio en un modelo de carcinogénesis experimental en piel de ratón" (2011-03-11). Palmieri, Mónica Alejandra. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La exposición ambiental al arsénico es un problema de salud pública debido a que afecta a un gran número de poblaciones en el mundo y a que es un agente carcinogénico para humanos. Por tal motivo surge la necesidad del desarrollo de estudios que permitan comprender el modo de acción para poder prevenir los efectos nocivos relacionados con la ingestión de arsenito a través del consumo de agua. El presente trabajo se desarrolló con la finalidad de detectar la influencia de los compuestos arsenicales en posibles procesos cancerosos pre-existentes o simultáneas al consumo del agua con arsenito. Por lo que se diseñaron los experimentos en ratones a los que se les suministró arsenito de sodio de manera crónica en el agua bebida. Se tomaron en cuenta distintas dosis (2, 20 ó 200 ppm) y distintos momentos de superposición con el proceso clásico de carcinogénesis (antes o después del esquema DMBA/TPA). El efecto del arsenito de sodio en el proceso de carcinogénesis experimental se evidenció en una menor cantidad de tumores en todas las condiciones que bebieron arsenito respecto del control. Pero esas formaciones tumorales evidenciaron una tendencia al aumento del índice de malignidad respecto a los ratones de las condiciones control. Por otro lado es de destacar que la condicón que recibió mayor dosis (200 ppm) bebió un 50% menos que las otras condiciones y que tuvo una tendencia a tener menos peso corporal. Para comprender los efectos sistémicos que puede causar el consumo crónico de arsenito, se estudió ex vivo la población de macrófagos provenientes ya sea de la cavidad peritoneal como del tronco bronqueo-alveolar de dichos ratones. En todas las condiciones la población de macrófagos mantiene la capacidad fisiológica de autorregular si reactividad. Esta característica es más evidente en los macrófagos peritoneales. Por otro lado se observó un aumento sustancial en el npumero de macrófagos respecto a los ratones que no recibieron ningún tipo de tratamiento. En los macrófagos alveolares tratados in vitro no se detectaron cambios significativos en la viabilidad celular y en la apoptosis con las concentraciones menores de a 2 microM para 24-96 hs., pero a concentraciones mayores se observó una marcada disminución en la viabilidad y un significativo aumento en la apoptosis. Para caracterizar el estatus metabólico se estudió la dinámica del proceso de generación de sales de formazona a partir del MTT la cual se modificó a concentraciones mayores a 2 microM y por otro lado, se evaluó la actividad metabólica, sin encontrar modificaciones. Pero la actividad específica del NBT como parámetro de generación de anión superóxido se incrementó significativamente. El arsenito modifica el metabolismo y el estatus oxidativo de los macrófagos alveolares in vitro cuando se encuentran en un medio enriquecido con arsenito. En la líneas celulares se estudiaron in vitro los mismos parámetros. En cuanto a la dinámica de generación de formazona así como en la respuesta apoptótica sólo se observaron cambios significativos con concentraciones mayores a 7,5 microM. Los resultados obtenidos muestran un resultado paradójico, menos tumaores pero mayor malignidad, acorde con las distintas facetas conocidas para éste compuesto, por lo que es necesario hacer hincapié en el tiempo de exposición al mismo, los posibles eventos pre-cancerígenos y la variabilidad interindividual.

Abstract:
Environmental exposure to arsenic is a public health problem because it affects a large number of populations worldwide and arsenic is carcinogenic in human beings. Within this context, the needs arises to perform studies aimed at elucidting the mode of action of arsenic and prevent harmful effects derived from the intake of arsenite in drinking water. The aim of the present study was to asses the influence os arsenic compounds on potential carcinogenic precesses, both pre-existing and concomitant with the intake of water containing arsenite. Experimental protocol werw designed to evaluate the effect of chronic administration of sodium arsenite to mice in the drinking water. Diferent doses of sodium arsenite (2,20 and 200 ppm) were administrated with a varying overlap with the classic carcerogenesis process (namely, before and after the DMBA/TPA carcerogenesis protocol). The effect of sodium arsenite on the process of experimental carcirogenesis involved a reduction in the number of tumors in all the groups exposed to arsenite compared to control. However, the malignancy index of tumors was higher in the experimental group then in the control group. Furthermore, the animals exposed to the highest dose of arsenite (200 ppm) drank 50% less water than the other groups and exhibiter a tendency to lose body weight. Seeking to understand the systemic effects of chronic intake of arsenite, we studied ex-vivo the population of macrophages derived from the peritoneal cavity or the broncheo-alveolar trunk in experimental mice. In all the conditions the macrophages preserved their phisiologic capacity to self-regulate their reactivity. This feature was more evident in peritoneal macrophages. In addition, a robust increase in the number of macrophages was observed in experimental animals compared to animals with no treatment (non-cancerized, not exposed to arsenite) Lastly, in citro studies were performed to characterize the effect of arsenite on cell metabolism of epithelial cell lines and alveolar macrophages. Alveolar macrophages traeted in vitro did not exhibit significant changes in cell viability and apoptosis with concentrations below 2 µM for the 24-96 hs time-point. However, higher concentrations induced a marked rduction in viability and a significant increase in apoptosis. Metabolic status was characterized in terms of the kinetics of the process of generation of formazan salts from MTT (Bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5 difeniltetrazolio). This process was modulated by concentrations above 2µM. In addition, we evaluated the specific activity of MTT as a parameter of metabolic activity, and found no changes. However, the specific activity on NBT (Nitro Blue Tetrazolium) as a parameter of generation of superoxide anions rose significantly. Arsenite modified the metabolism and axidative status of alveolar macrophages in vitro when the cells were cultured in an arsenite enriched medium. The same parameters were studied in vitro in the cell lines. The kinetics of production of formazan salts and the apoptotic response only exhibited changes at concentrations above 7,5 µM. the present results are paradoxical in the sence that they reveal a reduction in the number of tumors but an increase in malignancy in cancerized animals exposed to arsenite compared to cancerized controls. This response was with the different known aspects of the effect of arsenite described in the literature. Within this context, potencial pre-carcirogenic effects and inter-subject variability.

"Efecto del campo eléctrico en la reactividad de porfirinas y hemoproteínas" (2008). De Biase, Pablo Martín. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la presente tesis se ha estudiado cómo afecta el campo eléctrico a las reacciones rédox y de coordinación de ligandos en hemoproteínas de membrana y en porfirinas aisladas. Las porfirinas fueron utilizadas como sistemas modelo del sitio activo de estas proteínas. En principio, a través de cálculos de estructura electrónica, se determinó cómo incluye el campo eléctrico en la energía de reacciones rédox y de coordinación de ligandos en sistemas modelos de sitios activos de hemoproteínas típicas. Con el fin de realizar un estudio experimental, se escogió una reacción en la cual se predijo computacionalmente que el efecto del campo eléctrico sería importante. Por medio de la técnica SERRS (Surface Enhanced Resonance Raman Scattering ), se midió para este sistema la constante de equilibrio de coordinación de un ligando soluble a una porfirina inmovilizada en superficie a distintos potenciales eléctricos aplicados. Posteriormente, utilizando dos estrategias distintas, se estimó la magnitud del campo eléctrico presente a cada potencial de estos experimentos. Finalmente, se estudió utilizando dinámica molecular clásica, el efecto del campo eléctrico en la reacción de disociación de un ligando en la hemoproteína completa citocromo c. Se encontró que no existe efecto del campo eléctrico sobre el sitio activo pero si sobre el resto de la proteína. Se pudo comprender como actúa un campo eléctrico modulando una reacción química tanto en sistemas pequeños y rígidos como las porfirinas, y en sistemas grandes y flexibles como las proteínas. Se identificaron cuáles son las características que debe poseer tal proceso para que sea afectado por el campo eléctrico

Abstract:
The goal of this thesis was to investigate how an electric field affects redox and ligands coordination reactions in membrane hemeproteins and in porphyrins as model systems of the active site of these proteins. In the first place, by means of quantum calculations, it was determined the influence of the electric field over redox and ligands coordination reactions energies in model systems of typical hemeprotein active sites. It was selected a reaction affected by the electric field to prove experimentally the predicted effects. Using the SERRS (Surface Enhanced Resonance Raman Scattering) tecnique, it was measured, for this chosed system, equilibrium constants of ligands coordination to surfaces immobilized porphyrins while applying different electric potentials. Then, using two different strategies, it was determined the electric field magnitudes present in the previous experiments. Finally, it was studied by means of classical molecular dynamics the electric field effects in a ligand disociation reaction in cytochrom c where it was found that there was no electric field effect at the active site but there were significant effects on the protein conformation and dynamics. It was concluded how an electric field modulates a chemical reaction in small and rigid systems as porphyrins, and in big and flexible systems as proteins. It was found which are the characteristics that a process should have to be affected by the field.

"Efecto del hexaclorobenceno sobre la homeostasis de las hormonas tiroideas y parámetros funcionales del tejido adiposo marrón" (2004). Alvarez, Laura. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Ell hexaclorobenceno (HCB)es un contaminante ambiental ampliamente difundido. Se ha demostrado que el tejido epididimal blanco, interscapular marrón (TAM), el hígado y la tiroides son blancos primarios de la toxicidad del HCB. Se ha demostrado que el HCB disminuye los niveles circulantes de tiroxina total (T4) y tiroxina libre (LT4),sin alterar los de triiodotironina (T3). Este efecto diferencial indica que varios mecanismos podrían estar involucrados en la homeostasis de las hormonas tiroideas. En el presente trabajo se realizaron curvas de tiempo para la actividad de la T4 5’ deiodinasa I (5' D-I) en tiroides, hígado y riñón, y T4 5’ deiodinasa II (5' D-II)en TAM de ratas Wistar macho tratadas con HCB (1000 mg/kg p.c.), con el propósito de evaluar si un aumento en la actividad de las deiodinasas podría contribuir al mantenimiento de la T3 sérica. La actividad de la 5’ D-I aumentó en la tiroides desde los 21 dias. Tanto en riñón como en el TAM la actividad de la 5' D-I y 5’ D-II respectivamente disminuyeron en función del tiempo. La actividad total de 5’ D-I corporal aumentaba a los 30 días, sugiriendo que la tiroides y el hígado hipertrofiado por el tratamiento crónico con HCB podrían al menos contribuir en parte al mantenimiento de los niveles normales de T3 sérica. El HCB aumentaba la actividad de la uridin difosfo glucuronil transferasa (UDPGT) involucrada en la glucuronidación de T4 en forma dependiente del tiempo, sugiriendo que los niveles disminuidos de T4 sérica podrían deberse en parte a un aumento en la glucuronidación de la misma. La UDPGT-T3 no se modificaba. El HCB no modificaba los niveles de RNAm de UCP-1 analizados en TAM de ratas en termoneutralidad y con exposición aguda al frío. Previamente demostramos que el HCB aumentaba los depósitos lipídicos en el TAM. En este trabajo medimos la actividad de la acetil-CoA carboxilasa (ACC) que no se alteraba por efecto del HCB. La actividad del la lipoproteinlipasa (LPL) aumentaría de forma post.transcriptacional ya que el contenido de RNAm de la misma no se modificaba por el HCB. Tanto el contenido del transportador de glucosa (GLUT-4), como la captación de 2-deoxiglucosa por el TAM aumentaban en las ratas intoxicadas en forma crónica. Estos resultados sugieren que el aumento en la captación de glucosa junto con el de los ácidos grasos libres, podrían dar cuenta de los depósitos aumentados de lípidos observados histológicamente en el TAM de ratas tratadas cronicamente con HCB.

Abstract:
Hexachlorobenzene (HCB) is one of the most widespread environmental pollutants. It has been shown that epididymal white, interscapular brown adipose tissue (BAT), liver and the thyroid are primary targets of HCB toxicity. Findings in our and others laboratory have indicated that treatment of rats with HCB decreases circulating levels of total thyroxine (T4) and free L-thyroxine (FT4) but does not affect those of triiodothyronine (T3). Different effects of HCB in terms of serum T3 and T4 indicate that several mechanisms are involved in the development of the particular thyroid hormone status. In the present work, time courses were determined for thyroxine 5' deiodinase I (5’ D-I)activity in thyroid, liver, and kidney and T4 5'deiodinase II (5’ D-II) activity in BAT in male Wistar rats treated with HCB (1000 mg/kg B.W),to test the possibility that increased deiodinase activity in these tissues might contribute to the maintenance of the serum T3 level. 5' D-I activity was increased in the thyroid at 21 days and thereafter, and didn't change in the liver. Kidney and BAT5’ D-I activity was decreased in a time dependent manner. Total whole body 5’ D-I activity increased by 30 days, suggesting that increased T. to T3 conversion in the thyroid and in the greatly enlarged liver of chronic treated rats contribute at least in part to the maintenance of serum T3. Uridine diphosphoglucuronosyl transferase (UDPGT) activity involved in the glucuronidation of thyroid hormones was increased in a time dependent manner. suggesting that decreased serum T4 levels of HCB treated rats may be due in part to increased glucuronidation of T4. T3 UDPGT was not altered under the same experimental conditions. UCP-1 mRNA levels analyzed on thermoneutrality and in rats acuter exposed to cold were not modified by HCB treatment. We have previously demonstrated that HCB increased BAT lipid depots. To gain further insight into lipid metabolism we measured the activity of the key rate-limiting enzyme acetyl-CoA carboxilase (ACC). Our results showed that HCB did not modify this parameter. Lipoprotein lipase (LPL) activity might be increased in a post transcriptional manner, as LPL mRNA content was not modified by HCB. In response to HCB, BAT glucose transporter (GLUT-4),as well as 2-deoxygluoose uptake increased. These results suggest that the increase in 2-deoxyglucose uptake as well as free fatty acids derived from plasma circulating triglycerides may account for the increased lipid depots observed in BAT from HCB-treated rats.

"Efecto del hexaclorobenceno sobre la regulación del crecimiento de células foliculares tiroideas. Estudios in vivo e in vitro" (2012). Chiappini, Florencia Ana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El hexaclorobenceno (HCB) es un contaminante ambiental altamente persistente y ubicuo, que produce efectos deletéreos para la salud humana. La exposición de animales de laboratorio al mismo, induce disfunciones endocrinas tiroideas (Kleiman de Pisarev et al., 1990, Alvarez et al., 2004), reproductivas (Foster et al., 1992; Alvarez et al., 2000) e inmunomodulación (Ezendam et al., 2004) entre otros efectos. El HCB se localiza en una variedad de tejidos y fluidos humanos con un amplio rango de concentraciones según el contenido lipídico y el grado de exposición al mismo. En trabajos previos demostramos que el tratamiento de ratas con HCB (1000 mg/kg p.c.) produce una disminución de los niveles circulantes de 3,3’,5,5’-tetraiodotironina (T4) total, y un aumento en la concentración sérica de la hormona estimulante de la tiroides (TSH), sin alterar el peso tiroideo (Kleiman de Pisarev et al., 1989). Estos datos sugerían la existencia de algún mecanismo inhibitorio del crecimiento tiroideo, o pro-apoptotico desencadenado por el HCB. En base a los antecedentes de la literatura y a nuestros resultados previos, nos propusimos como objetivo general, investigar las bases bioquímicas y moleculares del mecanismo de acción del HCB sobre la regulación del crecimiento celular tiroideo. Para ello estudiamos la apoptosis, la proliferación celular, el estado oxidativo y las cascadas de señalización de receptores de factores de crecimiento (RFC), realizando estudios in vivo en ratas hembras Wistar e in vitro en células foliculares tiroideas de rata Fisher (FRTL-5). Demostramos que el HCB administrado a ratas durante 30 días, en dosis que no modifican el status tiroideo (1-100 mg/kg p.c.), aumenta la expresión del factor de crecimiento transformante-β1 (TGF-β1) y la apoptosis a través de la vía mitocondrial, promoviendo la liberación del citocromo c, de la mitocondria hacia el citosol y la activación de la caspasa-9. Los estudios en células FRTL-5, demostraron que el HCB incrementa la expresión de TGF-β1, disminuye la expresión de tiroglobulina (TG) e induce la apoptosis a través de mecanismos dependientes e independientes de caspasas. El aumento en la producción de ROS y subsecuente activación de ERK1/2, están asimismo involucrados en el efecto apoptótico del HCB. Por otra parte, el plaguicida induce un desbalance en proteínas involucradas en el control de la progresión del ciclo celular llevando a un arresto en las fases G1 y G2/M, del mismo. En conclusión, nuestros resultados demuestran por primera vez, que el HCB induce un desbalance en la homeostasis del crecimiento celular y disfunción tiroidea.

Abstract:
Hexachlorobenzene (HCB) is a widespread and persistent environmental pollutant with deleterious effect on human health. Chronic administration of HCB to laboratory animals elicits a number of effects including, thyroid (Kleiman de Pisarev et al., 1990, Alvarez et al., 2004) and reproductive dysfunctions (Foster et al., 1992; Alvarez et al., 2000) and immunopathology (Ezendam et al., 2004). HCB is found in a variety of human tissues and fluids with a wide range of values depending on the dose and time of exposure, and on the tissue lipid content. We have demonstrated that HCB administration (1000 mg/kg b.w), reduced total serum 3,3’,5,5’-tetraiodothyronine (T4) levels, increased thyroid stimulating hormone (TSH) levels, but had no effect on thyroid weight in rats (Kleiman de Pisarev et al., 1989). As TSH stimulates thyroid follicular cell proliferation, our data suggested the existence of a thyroid growth inhibitory mechanism, or a pro-apoptotic effect, triggered by the HCB. The aim of the present study was to determine the biochemical and molecular mechanism of action of HCB, on the regulation of thyroid follicular cells growth. We examined parameters of apoptosis, cell proliferation, oxidative status and growth factor receptor (GFR) signaling pathways in vivo, in female Wistar rats, and in vitro, in Fischer rat thyroid cell line (FRTL-5). Our results showed that HCB administered to Wistar rats during 30 days, at doses that do not disrupt thyroid economy (1-100 mg/kg p.c.), induce transforming growth factor-β1 (TGF-β1) expression and apoptosis in the thyroid gland, involving the mitochondrial pathway. HCB promotes cytochrome c release from the mitochondria and caspase-9 activation. In FRTL-5 cell line, HCB increases TGF-β1 expression, decreases thyroglobulin (TG) protein levels, and induces apoptosis through a caspase dependent and independent mechanism, involving ROS production and ERK1/2 activation. In addition, HCB induces alterations in cell cycle regulatory proteins, and G1 and G2/M cell cycle arrest. In conclusion, our results show for the first time, that HCB induces an imbalance in the homeostasis of follicular thyroid cells growth and thyroid dysfunction.

"Efecto del hiperandrogenismo sobre la fisiología uterina. Acción de la Metformina como tratamiento" (2011). Elia, Evelin Mariel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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El Síndrome del Ovario Poliquístico (SOP) es una de las endocrinopatías más frecuentes en mujeres en edad reproductiva. Su característica principal es el hiperandrogenismo, condición que tiene efectos perjudiciales sobre la función endometrial, contribuyendo a las altas tasas de aborto, de hiperplasia y cáncer endometrial. La administración de Metformina en pacientes SOP presenta numerosos beneficios aunque existe controversia sobre su efectividad para mejorar las tasas de embarazo. Además, muchas pacientes no responden a este tratamiento y en esos casos se obtienen mejores resultados al administrarla junto con Rosiglitazona. En el presente trabajo estudiamos los mecanismos por los cuales el hiperandrogenismo altera la funcionalidad uterina y la capacidad del tratamiento con Rosiglitazona y/o Metformina de prevenir dichas alteraciones. El hiperandrogenismo, a nivel uterino, alteró su histología, el balance apoptosis/proliferación celular, el metabolismo del ácido araquidónico, la activación de los factores de transcripción PPARγ e incrementó el estrés oxidativo. La administración de Metformina evitó muchas de dichas alteraciones excepto el estrés oxidativo uterino. La combinación Metformina+Rosiglitazona, mejoró las defensas antioxidantes. Concluimos que esta sería una de las causas por las cuales la terapia combinada daría mejores resultados en el tratamiento de mujeres SOP, especialmente en aquellas que no responden óptimamente a Metformina.

Abstract:
Polycystic ovary syndrome (PCOS) is one of the most frequent endocrine diseases that affect women in their childbearing age. This syndrome is characterized by hyperandrogenism that shows detrimental effects on the endometrial function, contributing to the high rates of pregnancy loss, hyperplasia and endometrial cancer. Metformin in the treatment of PCOS shows numerous benefits although there is controversy about its effectiveness to improve pregnancy rates. In addition, many patients do not respond to Metformin-treatment and in those patients better results are obtained when Metformin is administered together with Rosiglitazone. In the present work, we studied the mechanisms by which hyperandrogenism alters uterine function and the capacity of Rosiglitazone and/or Metformin treatment/s to prevent such alterations. Hyperandrogenism altered the uterine histology, the balance between apoptosis/cell proliferation, the arachidonic acid metabolism, the activation of the transcription factors PPARγ and increase the oxidative stress. The administration of Metformin avoided many of these alterations except the oxidative stress. The combination Metformin+Rosiglitazone improved the antioxidant defenses. We conclude that this would be one of the reasons because of the fact that the combined therapy would give better results in the treatment of PCOS women, especially in those who do not respond optimally to Metformin.

"Efecto del pastoreo sobre la estructura y dinámica de la comunidad perifítica de arroyos andinos" (2001). Díaz Villanueva, Verónica. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo se analizó la relación de herbivoría en el bentos de arroyos andino-patagónicos. En estos sistemas lóticos, el perifiton es el principal responsable del aporte de materia orgánica autóctona. El objetivo de este trabajo fue determinar cómo es afectado el perifiton en ambientes lóticos ritrónicos como consecuencia del pastoreo que realizan los macroinvertebrados bentónicos. Para ello se investigó la estructura del perifiton así como también la de los herbivoros en tres arroyos andinos (Ñireco, Casa de Piedra y Gutiérrez) con distintas características en cuanto al orden, sombreado y pendiente. En todos ellos, las diatomeas (Bacillariophyceae) fueron las algas perifiticas más abundantes, contribuyendo con más del 80% del total de las especies algales. El tramo superior del arroyo Ñireco es un ambiente de montaña; está densamente cubierto por bosques caducífolios de Nothofagus pumilio (P.& E.) Krasser (lenga) y sostiene una alta proporción de insectos fragmentadores de materia orgánica particulada gruesa. En cambio, en el tramo inferior del arroyo Casa de Piedra y en el arroyo Gutiérrez, ambos ambientes pedemontanos, abundan los macroinvertebrados herbivoros, tanto insectos como moluscos. El efecto de la herbivoría sobre el perifiton fue analizado en los dos tipos de ambientes: de montaña y pedemontanos. Con tal fin, se llevaron a cabo estudios que incluyeron muestreos del perifiton y de los macroinvertebrados, conjuntamente con estudios morfológicos de las piezas bucales y de dieta. En primer lugar se determinó la dieta de larvas del plecóptero Notoperla archiplatae (Illies), abundantes en la sección superior del arroyo Ñireco. Se realizaron estudios de las piezas bucales, del contenido de los tubos digestivos y de selectividad de los distintos ítems alimentarios. Se determinó que era un herbívoro, pues su dieta estaba constituida principalmente por diatomeas (>50%). Además, se encontró que las diatomeas con hábito arborescente poseían una mayor susceptibilidad a ser ingeridas. Luego se realizó un experimento in situ que permitió calcular sus tasas de remoción, tasa de crecimiento y eficiencia de conversión de alimento. En el mismo experimento se estudió su efecto sobre la biomasa y composición específica del perifiton. N. archiplatae redujo la biomasa perifítica significativamente, y produjo cambios en las frecuencias relativas de las especies más abundantes. La diatomea Melosira varians Ag. fue la especie más negativamente afectada mientras que la abundancia de Achnanthes minutissima Kütz. se incrementó como efecto del pastoreo, con lo cual se generó un perifiton ralo y altamente autotrófico. En segundo lugar se analizó el efecto de pastoreo por parte de larvas del efemeróptero Meridialaris chiloeensis (Demoulin) y del caracol Chilína dombeiana (Bruguiere), siendo ambas especies abundantes en el arroyo Gutiérrez. Se realizaron observaciones de sus piezas bucales y de los mecanismos que utilizan para adquirir el alimento. También se llevaron a cabo experimentos en canales artificiales utilizando clausuras para determinar el efecto de cada especie sobre la biomasa y composición específica del perifiton. Ambos herbívoros redujeron la biomasa perifitica significativamente pero no modificaron sustancialmente las frecuencias relativas de las especies algales. Por lo tanto, se estableció que tanto la rádula del caracol como la batería de cerdas presentes en las piezas bucales del efemeróptero pueden actuar como estructuras raspadoras del perifiton. Por otro lado, se calcularon las tasas de remoción algal para ambos herbívoros, determinando que el efecto individual del caracol es mayor que el del efemeróptero pero que por unidad de biomasa Meridíalaris es capaz de remover mayor cantidad de perifiton. Por lo tanto, dado que la biomasa poblacional del efemeróptero puede superar a la del caracol en el ambiente, la reducción de la biomasa perifitica puede ser mayor por efecto de estos herbívoros. Asimismo se observaron distintos patrones en cuanto al uso del sustrato donde pastorean. El insecto posee un comportamiento altamente dependiente del refugio, permaneciendo debajo del sustrato en horas del día. Por el contrario, el caracol permanece expuesto tanto en el día como en la noche. Estas diferencias se tradujeron en una actividad de pastoreo diferente; restringida a los bordes del sustrato en Meridialaris y a toda la superficie del mismo en el caso del caracol. Se postuló que estas diferencias posibilitarían la coexistencia de estos dos herbívoros que utilizan el mismo recurso en el mismo hábitat. Por otra parte, se evaluó el efecto de las larvas de M. chíloeensís variando las densidades del herbívoro y el tiempo de colonización del perifiton previo a la introducción del pastoreador. Como resultado, se determinó que M. chíloeensis puede alimentarse del perifiton siempre y cuando la biomasa sea mayor a 0.3 g m-2. El efecto sobre la composición específica es leve ya que este herbívoro es capaz de acceder a todas las formas de crecimiento algales presentes en el perifiton ofrecido. En cuanto al efecto sobre la sucesión algal, se planteó la hipótesis de que existe una aceleración debido a que se observó un aumento en la frecuencia relativa de especies más típicas de estadios avanzados, como Nitzschia palea (Kütz.) W. Sm. Por último, se llevó a cabo un experimento con Meridialaris, con el objetivo de analizar la digestibilidad algal a partir de la observación del contenido de las heces. La proporción de células vivas es significativamente menor en las heces que en el perifiton, lo cual indica que Meridialaris posee una alta capacidad de digerir las algas que consume (70%). Sin embargo, se hallaron diferencias en la digestibilidad de las especies algales, que conllevarían a cambios en la composición de la comunidad hacia especies que logran atravesar con vida el tubo digestivo de los pastoreadores. A pesar de que los herbívoros resultaron más abundantes en arroyos pedemontanos que en los de cabecera, en ambos tipos de ambientes desempeñan un papel importante en el control de la biomasa perifitica y pueden influir en la composición específica dominante.

Abstract:
Herbivore-periphyton relationship was analysed in the benthos community of three Andean-Patagonian streams. In these lotic systems, periphyton is the main responsible for the autochthonous organic matter input. The main goal of this work was to determine the way in which periphyton is affected by grazing of benthic macroinvertebrates in these rithronic environments. As a first step, the structure of the periphyton and macroinvertebrate community was investigated in three Andean streams (Ñireco, Casa de Piedra and Gutiérrez), with differences in order, canopy and slope. Diatoms (Bacillariophyceae) were the most abundant periphytic algae in all the streams, constituting more than 80% of the total algal species. The upper section of Ñireco stream is a typical mountain environment; it is densely covered by a deciduous forest of Nothofagus pumilio (P.& E.) Krasser (lenga) and bears a high proportion of Shredder insects. In contrast, Casa de Piedra and Gutiérrez streams are both piedmont environments in which herbivores, in particular insects and molluscs, are abundant. Herbivory on periphyton was studied in a gradient of altitude, from the mountain to the piedmont. Periphyton and macroinvertebrates were surveyed concurrently, and herbivores’ mouthpart morphology and gut content were examined. The feeding habit of Notoperla archiplatae (Illies) larvae, an abundant plecopteran from the upper section of Ñireco stream, was determined combining direct observations and selectivity measurements on different food items. N. archiplatae was found to be an herbivore, since its diet consisted mainly of diatoms (>50%), specially those with an arborescent habit. Field experimental work was performed in order to determine the algae removal rates, growth rates and food conversion efficiency of N. archiplatae. In the same experiment, I analysed the effect of this grazer on biomass and species composition of periphyton. Notoperla reduced significantly periphytic biomass and changed the relative abundance of the dominant species. Melosira varians Ag. was the most negatively affected species while Achnanthes minutissima Kütz, seemed to have been favoured. Notoperla’s grazing led to a thin and highly autotrophic periphyton. Grazing patterns of the mayfly Meridialaris chiloeensis (Demoulin) and the snail Chilina dombeiana (Bruguiere), both abundant species from Gutiérrez stream, were analysed through their mouthpart morphology and feeding mechanisms. I performed a series of experiments to determine the effects of each species on periphytic biomass and specific composition. Accordingly, field experiments were carried out in artificial channels manipulating presence and absence of the macroinvertebrates. Both herbivores reduced algal biomass significantly but species relative abundances were not modified. I found that the radula of the snail and the sets of setae present in the mouthparts of the mayfly act similarly as scraping structures. The removal rates measurement showed that the individual effect of the snail is greater than that of the mayfly. However, in terms of biomass, Meridialaris is able to remove a higher periphytic biomass. In natural environments (Gutiérrez Stream) mayfly population biomass is higher than that of the snail and thus, the greatest reduction of periphytic biomass may be attributed to mayfly grazing. Besides, I observed a differential use of the substrate by M. chiloeensis and Ch. dombeiana. The mayfly sought refuge under the substrate during daytime, while the snail remained on the substrate during day and night. These different behaviours, probably responses to differential vulnerability to visual predators, are related with the particular grazing effect of each herbivore. In addition, I studied the effect of different densities of the grazer M. chiloeensis on periphyton communities of different age. Meridialaris fed on periphyton depressing algal biomass up to 0.3 g m-2 but remarkably, its effect on the species composition was negligible since all algal growth habits were consumed. Algal succession was accelerated resulting in an increment on the relative abundance of late-stage species like Nitzschia palea (Kütz.) W. Sm. Algal digestibility was analysed through examination of Meridialaris faeces. The mayfly showed a high capacity (70%) in digesting the algae consumed, however some species were digested better than other. These differences in species digestibility may drive the species composition of the periphyton towards a higher occurrence of the most resistant species. Although in this study herbivores were found to be more abundant in piedmont streams than in headwaters, they appear to control the periphyton biomass in both type of environments.

"Efecto del tratamiento con benznidazol sobre la respuesta celular T específica para Trypanosoma cruzi en pacientes en la etapa indeterminada de la enfermedad de Chagas crónica" (2011). Pérez Mazliah, Damián Eduardo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La enfermedad de Chagas, causada por el parasito protozoario intracelular Trypanosoma cruzi, afecta alrededor de 8 a 10 millones de personas desde el Sur de California hasta Sudamérica y Europa occidental. A pesar de ser la causa más frecuente de cardiomiopatía infecciosa del mundo, pocas personas infectadas reciben tratamiento. La mayor limitación para desarrollar nuevas drogas y evaluar su eficacia reside en la falta de ensayos que permitan determinar de manera confiable la carga parasitaria y la eliminación definitiva del parásito. Diversos estudios de nuestro laboratorio, incluyendo el presente trabajo, han demostrado que los linfocitos T periféricos específicos de T. cruzi en pacientes con enfermedad de Chagas crónica muestran características funcionales y fenotípicas de células efectoras o de memoria efectora con baja capacidad de proliferación homeostática y requieren, por lo tanto, del estímulo antigénico para permanecer en circulación. De esta forma, es de esperar que los cambios en la carga parasitaria inducidos por el tratamiento etiológico se vean reflejados en alteraciones en la respuesta celular T. En el presente trabajo, se determinó en forma periódica la frecuencia de linfocitos T periféricos específicos de T. cruzi, los títulos de anticuerpos específicos de T. cruzi y el estado clínico en 43 voluntarios adultos con infección crónica por T. cruzi bajo tratamiento con benznidazol durante un período de seguimiento de tres años. Estas mediciones fueron comparadas con valores previos al tratamiento y con valores obtenidos a partir de un grupo control no tratado. La frecuencia de linfocitos T periféricos específicos de T. cruzi productores de IFN-γ disminuyó significativamente luego del transcurso de un año de inicio del tratamiento con benznidazol en la mayoría de los pacientes estudiados, alcanzando posteriormente valores por debajo del límite de detección en gran parte de los pacientes tratados. Llamativamente, esta disminución fue en muchos casos precedida por un incremento significativo en la frecuencia de linfocitos T específicos de T. cruzi productores de IFN-γ con fenotipo efector o de memoria efectora entre dos y seis meses luego del tratamiento. Por el contrario, la frecuencia de linfocitos T periféricos específicos de T cruzi permaneció relativamente estable en ausencia de tratamiento. A pesar de las alteraciones significativas en la respuesta celular T, solo 6 de 43 pacientes tratados con benznidazol mostraron seroconversiones a valores negativos de los títulos de anticuerpos específicos de T. cruzi y solo 3 pacientes mostraron progresión hacia estadios clínicos mas avanzados de la enfermedad. Sin embargo, estos últimos son resultados esperables, teniendo en cuenta que el período de seguimiento fue relativamente corto. Un seguimiento similar fue llevado a cabo en un grupo de 15 voluntarios adultos con infección crónica por T. cruzi sometidos a un esquema novedoso de tratamiento combinado secuencial con alopurinol seguido de benznidazol. La frecuencia de linfocitos T periféricos específicos de T. cruzi productores de IFN-γ se vio también significativamente afectada por el tratamiento combinado; observándose una disminución inmediatamente después de la administración de alopurinol, así como luego de la finalización del tratamiento combinado con la administración de benznidazol. Más aún, el tratamiento con alopurinol promovió un aumento significativo en el porcentaje de linfocitos T vírgenes totales en periferia, acompañado de una disminución significativa en los niveles de activación de la población total de linfocitos T determinada por la expresión del marcador de activación HLA-DR. Este fenómeno se mantuvo luego del tratamiento con benznidazol. Si bien ninguno de los pacientes estudiados mostró seroconversión completa a valores negativos durante el período de seguimiento, un análisis más exhaustivo de los datos mostró que los títulos de anticuerpos específicos de T. cruzi disminuyeron significativamente luego de finalizado el tratamiento combinado. Estudios in vitro con una variedad de antígenos y el mitógeno PMA mostraron que el alopurinol ejerce un efecto directo en la activación de linfocitos T humanos. De esta forma, el aumento en el porcentaje de linfocitos T vírgenes totales en periferia y la disminución de la expresión del marcador de activación HLA-DR luego del tratamiento con alopurinol podría explicarse por un efecto inmunomodulador directo del alopurinol sobre el sistema inmune del huésped, una disminución en la carga parasitaria, o por una combinación de ambos efectos. El efecto antiinflamatorio del alopurinol podría ser beneficioso para prevenir el desarrollo de alteraciones cardiacas, previamente asociadas con el proceso de inflamación crónica en la enfermedad de Chagas. En conclusión, tanto el tratamiento clásico con benznidazol así como el esquema novedoso de tratamiento combinado secuencial con alopurinol seguido de benznidazol generaron un marcado impacto sobre el sistema inmune específico de T. cruzi en pacientes con enfermedad de Chagas crónica. Estos resultados son altamente indicativos de eficacia terapéutica y cura parasitológica en un conjunto sustancial de pacientes.

Abstract:
Chagas disease, caused by the intracellular protozoan parasite Trypanosoma cruzi, affects around 8 to 10 million people from Southern California to South America and Western Europe. In spite of being the most common cause of infectious cardiomyopathy in the world, few infected subjects receive any treatment. The major limiting factor in developing and evaluating potential new drugs for their efficacy is the lack of reliable tests to assess parasite burden and elimination. Several studies from our research group, including the present work, have demonstrated that T. cruzi-specific T cells in chronically T.cruzi-infected subjects display phenotypic features of effector/effector memory cells that lack homeostatic proliferation capability and rely on antigenic stimulation to remain in circulation. Therefore, it can be reasoned that changes in parasite-load induced by etiological treatment might be reflected in alterations of T cell responses. T. cruzi-specific T cells and antibodies, as well as the clinical status, were measured periodically over a 3-year follow-up period in 43 adult volunteers with chronic T. cruzi infection under treatment with benznidazole. These measurements were compared with pre-treatment conditions and with values in an untreated control group. The frequency of peripheral IFN-γ-producing T cells specific for T. cruzi declined as early as 12 months after the benznidazole treatment was administered and subsequently became undetectable in a substantial proportion of treated subjects. The shift to negative IFN-γ T cell responses was highly associated with an early increase in IFN-γ-producing T cells with phenotypic features of effector/effector memory cells in a subset of subjects. Conversely, the frequency of peripheral T. cruzi-specific T cells remained relatively stable in the absence of treatment. Not surprisingly, given the relatively short follow-up period, in only 6 out of 43 treated subjects the results of conventional serological tests became negative during the follow-up period. In addition, only 3 subjects exhibited progression in the assessment of disease severity during the follow-up period (2 in the benznidazole-treated group and 1 in the untreated group). A similar follow-up study was also conducted on a group of 15 adult volunteers with chronic T. cruzi infection who submitted to a novel combined sequential treatment with allopurinol followed by benznidazole. The frequency of peripheral IFN-γ-producing T. cruzi-specific T cells was highly affected by the combined treatment; the impact was registered early after allopurinol administration, as well as after the completion of the combined treatment. In addition, the treatment with alopurinol promoted an increase in the frequency of total peripheral naïve T cells and a decrease in the frequency of total T cells expressing the activation marker HLA-DR. These observations were sustained after the completion of the combined treatment with benznidazole administration. Although none of the subjects studied showed complete seronegative conversion during the follow-up period, the levels of T. cruzi- specific antibodies significantly decreased after completion of the combined treatment. In vitro studies using a variety of antigens as well as mitogen showed that allopurinol exerted a direct effect on T cell activation. Thus, the early improvement in total naïve T cells and the decrease in the expression of the activation marker HLA-DR after alopurinol treatment may be explained either as a direct effect of allopurinol on the host immune system or by a decrease in parasite load, or a combination of both effects. The anti-inflammatory effect of alopurinol could be beneficial in preventing the development of cardiac symptoms, previously associated with the process of chronic inflammation in Chagas disease. In summary, benznidazole treatment, as well as a novel combined sequential treatment with allopurinol followed by benznidazole, during chronic Chagas disease have a substantial impact on parasite-specific immune responses that is likely indicative of treatment efficacy and cure.

"Efecto del tratamiento de preservación por depresión de la actividad acuosa en la calidad del alga Porphyra columbina" (2001). Valencia Rodríguez, Manuela Teresa. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Efecto del tratamiento térmico sobre la solubilidad y sorción de agua en proteínas de origen vegetal" (1981). Pilosof, Ana María Renata. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Efecto del ácido salicílico sobre la virulencia de Staphylococcus aureus y su interacción con el huésped" (2010). Alvarez, Lucía Paula. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
S. aureus es una bacteria oportunista capaz de generar infecciones severas en humanos. Entre los factores de virulencia más importantes de S. aureus se encuentran el polisacárido capsular (PC) y la adhesina Eap, cuya expresión está controlada por los reguladores globales sae y mgrA. La expresión de eap es activada por sae, mientras que el PC es activado por mgrA e inhibido por sae. El ácido salicílico (SAL) altera la expresión de diversas moléculas en células procariotas y eucariotas. Este trabajo se propuso estudiar el efecto del SAL sobre la expresión de los factores de virulencia de S. aureus y cómo esto afecta la interacción de la bacteria con el huésped. Al respecto, el SAL provocó un aumento en la capacidad de internalización de la cepa Newman en células epiteliales. Esto correlacionó con una expresión disminuida del PC5 y un aumento de Eap, debido al efecto positivo del SAL sobre sae y negativo sobre mgrA. Por otra parte, el tratamiento de las células endoteliales con SAL, así como también sobre los ratones generó una menor adherencia de S. aureus. Además, se determinó que Eap es esencial para la internalización y colonización de S. aureus tanto in vitro como in vivo. Estos hallazgos demuestran que el SAL altera la expresión de moléculas de S. aureus directamente involucradas en la interacción con el huésped y por lo tanto la progresión de la infección podría verse afectada.

Abstract:
S. aureus is an opportunistic bacterium capable of generating severe infection in humans. Among the most important virulence factors of S. aureus are the capsular polysaccharide (CP) and Eap adhesin, whose expression is modulated by sae and mgrA global regulators. Expression of eap is activated by sae, while CP is activated by mgrA and inhibited by sae. Salicylic acid (SAL) alters the expression of various molecules in prokaryotic and eukaryotic cells. This work proposed to characterize the effect of SAL on hostbacteria interaction. In this regard, SAL caused an increased internalization of strain Newman into epithelial cells. This observation correlated with a decreased expression of CP and an increased expression of Eap, which would be caused by a positive effect of SAL on sae and a negative effect on mgrA. Moreover, the action of SAL on endothelial cells and mice generated a lower adherence of S. aureus. Moreover, it was determined that Eap is essential for internalization and colonization of S. aureus both in vitro and in vivo. These findings demonstrate that SAL is able to alter the expression of molecules directly involved in of host - S. aureus interaction, and therefore the progression of infection would be affected.

"Efecto del óxido nítrico sobre la fisiología de la adenohipófisis de la rata" (2002). Velardez, Miguel Omar. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Antecedentes La regulación de los distintos procesos fisiológicos de la adenohipófisis, tales como desarrollo, diferenciación, secreción hormonal y muerte celular, implica la acción de una variedad de factores provenientes tanto de tejidos periféricos como del sistema nervioso central o de la propias células adenohipofisarias. El óxido nítrico (NO) puede regular la secreción de hormonas hipofisarias. Previamente demostramos que el NO inhibe la secreción basal de prolactina afectando diferentes mecanismos intracelulares. Sin embargo la acción del NO sobre las vías de segundos mensajeros de origen lipídico necesita ser estudiada. Por otro lado, existen diversos estados fisiológicos como la terminación de la lactancia o patofisiológicos como los procesos inflamatorios que pueden inducir muerte celular en la adenohipófisis. A pesar de que la muerte celular parece ser un evento frecuente en la adenohipófisis, son pocos los estudios realizados hasta el momento sobre posibles factores intrahipofisarios inductores de apoptosis. Objetivos Evaluar la acción del NO sobre el metabolismo de mensaieros intracelulares de origen lipídico que afectan la secreción de prolactina adenohipofisaria. Investigar el efecto del NO sobre la viabilidad celular adenohipofisaria. Métodos Se investigó el efecto del NO sobre la actividad de las lipooxigenasas (LOX) y de las ciclooxigenasas (COX) y su relación con la secreción de prolactina mediante la utilización de dadores de NO y sustratos e inhibidores de las NO sintasas (NOS) en adenohipófisis enteras. Se determinó la producción de metabolitos del ócido araquidónico (AA) por la técnica de radioconversión usando como precursor AA radioactivo. También se estudió el efecto del NO sobre el metabolismo de fosfoinosítidos en células adenohipofisarias de rata y su relación con la secreción de prolactina. Se utilizaron dadores de NO e inhibidores de las NOS en cultivos primarios de adenohipófisis premarcados con inositol radioactivo como precursor de los distintos inositoles fosfato (IPs). Se cuantificó la producción de IPs por cromatografía de intercambio iónico. En ambos casos se estudiaron los posibles mecanismos por los cuales el NO afectó la síntesis de dichos segundos mensajeros. Para estudiar la acción del NO sobre la viabilidad celular adenohipofisaria, se examinó la actividad celular (ensayo de MTT)y la morfología nuclear de las células adenohipofisarias en cultivo, utilizando DETA/NO como un dador de acción prolongada. Se estudiaron diferentes mecanismos por los cuales el NO podría afectar la viabilidad celular (capacidad nitrosilante, acción de los peroxinitritos, activación de las caspasas). Ademós, mediante técnicas inmunocitoquímicas, se determinaron los tipos celulares afectados por el NO. En todos los casos se cuantificó la liberación de prolactina por radioinmunoensayo. Resultados El NO inhibió la actividad de la LOX produciendo una disminución de la síntesis de 5-HETE y estimuló la actividad de la COX aumentando la síntesis de prostaglandinas y tromboxanos. Dado que el 5-HETE esta involucrado en la estimulación de la secreción basal de prolactina, y que ésta es la única hormona adenohipofisaria con una liberación basal espontánea, es probable que la disminución de la actividad de la LOX inducida por el NO esté mediando en parte el efecto inhibitorio tónico del NO sobre la liberación basal de prolactina. El NO inhibió la síntesis de IPs estimulada por Angll o TRH, sin afectar su síntesis basal. La inhibición de la actividad de la PLC por NO involucraría un mecanismo independiente de la vía guanilil ciclasa soluble / cGMP / PKG. El NO no tendría una acción directa sobre la PLC, sino que estaría modificando algún factor de la vía de transducción de señales localizado entre el receptor de membrana y la proteína G. Con respecto al efecto del NO sobre la viabilidad celular, demostramos que el NO produce muerte celular con características propias de un proceso apoptótico. En este proceso participarían la caspasa-3 y la caspasa-9 pero no estarían involucrados mecanismos de nitrosilación o la acción de peroxinitritos. Asimismo, la acción proapoptótica del NO parece afectar preferencialemente a los lactotropos. Conclusión El NO al afectar dos procesos fisiológicos fundamentales de la adenohipófisis como son la secreción hormonal y la muerte celular, puede ser considerado como un factor clave dentro los reguladores de la fisiología de la adenohipófisis.

Abstract:
Background The regulation of the physiological processes in anterior pituitary, such as development, differentiation, hormone secretion and cell death, involves a variety of factors coming from peripheral tissues, central nervous system and the pituitary itself. Nitric oxide (NO) is able to regulate anterior pituitary hormone release. Previously, we demonstrated that NO inhibits basal prolactin release by affecting several intracellular pathways. However, NO action on lipidic second messengers in anterior pituitary needs further investigation. On the other hand, there are some physiological -such as termination of lactation-, or pathophysiological states -such as inflammation-, which can induce cell death in the anterior pituitary gland. In spite of the fact that cell death is a frequent event in the anterior pituitary gland, there is little evidence about possible apoptosis inducing factors synthesized by anterior pituitary cells. Objectives To evaluate NO action on lipidic intracellular messengers that affect prolactin secretion. To investigate the effect of NO on anterior pituitary cell viability. Methods NO action on lipooxygenase (LOX)and cyclooxygenase (COX) activities and their relation with prolactin release were investigated by using NO donors and NOS substrate and inhibitors in whole anterior pituitaries. Production of arachidonic acid (AA) metabolites was carried out by a radioconversion technique, using radiolabeled AA as a precursor. Also the effect of NO on phosphoinositides metabolism in rat anterior pituitary cells was studied. We used NO donors and NOS substrate and inhibitors in primary cultures of anterior pituitary cells prelabeled with radioactive inositol as a precursor of inositol phosphates (IPs).Production of IPs was quantified by ionic exchange chromatography. In all cases we studied the mechanisms of action by which NO affected the synthesis of those second messengers. In order to study NO action on anterior pituitary cell viability, we investigated the changes in cellular activity (MTT assay) and nuclear morphology in primary cultures of anterior pituitary cells by using DETA/NO as a long term NO releaser. We studied different mechanisms by which NO could affect cell viability (nytrosylating activity, peroxynitrite action, caspases activation). Besides, we determined the cell types affected by NO by immunocytochemistry. In all cases prolactin release was quantified by radioimmunoassay. Results NO inhibited LOX activity producing a decrease in 5-HETE synthesis, and stimulated COX activity producing an increase of prostaglandins and thromboxanes. Since 5-HETE is involved in the stimulation of basal prolactin release and taking into account that prolactin is the only anterior pituitary hormone with an spontaneously high basal release, it is possible that the decrease in LOX activity induced by NO is mediating, at least in part, the tonic inhibitory effect of NO on prolactin release. NO inhibited Angll- or TRH-stimulated IPs synthesis, without affecting basal synthesis. The inhibition of PLC activity may involve a soluble guanylyl cyclase/cGMP/PKG-independent mechanism. NO seems not to act on PLC, but it could be modifying some factor localized between membrane receptor and G protein. Concerning NO effect on cell viability, we demonstrated that NO produces cell death with characteristics of apoptosis. In this effect, caspase-3 and caspase-9 but not nytrosylation events or peroxynitrites may be participating. Likewise, lactotrophs seem to be preferentially affected by the proapoptotic action of NO. Conclusion NO affected two relevant physiological processes in the anterior pituitary gland, hormonal secretion and cell death. Therefore, it could be considered as a key regulatory factor of the physiology of the rat anterior pituitary gland.

"Efecto inmunomodulador del inhibidor secretorio de proteasas leucocitarias (SLPI)" (2010). Guerrieri, Diego. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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El SLPI es un inhibidor de serino proteasas de 11,7 kDa presente en mucosas y con actividad anti-inflamatoria. El objetivo de este trabajo fue esclarecer la función del SLPI en la respuesta inmune. Los resultados obtenidos in vitro muestran que SLPI disminuye la proliferación linfocitaria inducida por IL-2, anti-CD3 y cultivos mixtos linfocitarios en forma dosis dependiente. El SLPI inhibe la activación linfocitaria disminuyendo los niveles de CD25 e inhibiendo la traslocación al núcleo de NF-κB. La inhibición sobre la proliferación no se observa en ausencia células mononucleares de sangre periférica (CMSP) depletadas de monocitos, y fue restituida en presencia de medio condicionado de monocitos pre-tratados con SLPI. Los monocitos tratados con SLPI producen altos niveles de IL-4, IL-6 e IL-10. Además, el SLPI inhibe la producción de IFN-γ y T-bet inducidos por IL-2 y un lisado de Mycobacterium tuberculosis (Mtb). Por otro lado el SLPI disminuye la cantidad de células CD25+/Foxp3+ y la secreción de TGF-β inducida por la elastasa y aumenta los niveles de IL-17 e IL-6. Estos resultados sugieren que el SLPI modula la respuesta inmune adaptativa inhibiendo la diferenciación de las células hacia un patrón Th1, las Treg y favoreciendo el perfil Th2 y Th17. Sin embargo, en modelos murinos in vivo, la administración de SLPI parece tener un efecto anti-inflamatorio; dado que el SLPI fue capaz de limitar las lesiones en la orquitis autoinmune experimental. Este efecto modulador de la respuesta inmune también se pudo corroborar en pruebas de hipersensibilidad retardada y en trasplante de piel. Por otro lado, los niveles de SLPI plasmático y la capacidad linfoproliferativa fue examinada en donantes sanos, pacientes con enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) y pacientes con cáncer de pulmón. Se pudo probar la existencia de una correlación negativa entre la proliferación linfocitaria y los niveles plasmáticos de SLPI para pacientes con EPOC y cáncer de pulmón pero no así para los dadores sanos. Estos resultados muestran al SLPI como una molécula con capacidad inmunomoduladora y los niveles de SLPI plasmáticos podrían ser un índice indirecto de la capacidad linfoproliferativa en los pacientes con EPOC y cáncer de pulmón.

Abstract:
Human SLPI is an 11.7 kDa cationic non-glycosylated serine protease inhibitor constitutively produced in mucosal surfaces such as airway epithelium and human uterus, but can also be secreted by inflammatory cells. The aim of this work was to evaluate the function of SLPI in the immune response. Results obtained in vitro shows that SLPI decreased the lymphocyte proliferation induced by IL-2, anti-CD3 and mixed lymphocyte reaction (MLR) in a dose-dependent manner. SLPI inhibits lymphocyte activation by decreasing CD25 expression and avoiding IkB degradation. SLPI inhibition was not observed by depleting monocytes from PBMCs and it was restored by adding monocytes or culture supernatant. Monocytes treated with SLPI, produced IL-4, IL-6 and IL-10 and decreased the expression of IFN-γ. Furthermore SLPI decreased CD25+/Foxp3+ cells and TGF-β production but increased IL-17 expression on lymphocytes. To determine the relevance of this effect in vivo, we investigated the immunoregulatory role of SLPI in an experimental autoimmune orchitis (EAO), delayed-type hypersensitivity models and in a skin transplantation model. SLPI significant decreased the EAO incidence. Even more the delayed-type hypersensitivity was reduced by SLPI and the allograft rejection was decreased. Furthermore, we evaluated a putative correlation between SLPI plasma levels and proliferation in healthy donors (HD; n =15), chronic obstructive pulmonary disease (COPD, n =17) and lung cancer (n = 23) patients. Plasma SLPI concentration was correlated with PBMC proliferation in COPD and lung cancer patients but not in HD. Our results demonstrated that SLPI has an immunomodulator effect on lymphocytes and that plasma SLPI concentration might be used as a marker of lymphocyte proliferation to follow up the immune status.

"Efecto inmunomodulador del ácido All-Trans Retinoico (ATRA) como estrategia para la reversión de la inmunosupresión asociada a procesos infecciosos en un modelo murino" (2015-03-06). Martire Greco, Daiana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las infecciones secundarias asociadas a estados de inmunosupresión en pacientes sépticos son la principal causa de muerte en las Unidades de Cuidados Intensivos. Por lo tanto, el desarrollo de estrategias enfocadas a utilizar drogas que reviertan este estado resulta prometedor. En este trabajo utilizamos el Ácido All-trans Retinoico (ATRA) para estudiar la modulación del estado inmunológico en un modelo murino de inmunosupresión (IS) por administración crónica de lipopolisacáridos. Demostramos un rol primordial de las células mieloides supresoras (Gr-1+ CD11b+ supresoras) en la inhibición de la proliferación T en los animales IS. Esta población adquiere sus propiedades inhibitorias en la médula ósea, y en el contexto de inmunosupresión, es direccionada a los ganglios linfáticos para ejercer su función. Asimismo, el ATRA evidenció claros efectos en el restablecimiento de la proliferación de linfocitos T, asociado a una disminución del número de Gr-1+ CD11b+ supresoras vivas en ganglios linfáticos, acompañado también de un aumento en los linfocitos T CD4+. Asimismo, demostramos que la administración del ATRA a los animales IS mejoró tanto la respuesta inmune innata, en términos de eliminación de un foco bacteriano, como la respuesta inmune humoral primaria. Nuestros resultados demuestran que el ATRA modula la respuesta inmune alterada en el estado de inmunosupresión actuando sobre distintos procesos y representa una estrategia posible para el tratamiento de pacientes sépticos que presenten un estado de inmunosupresión.

Abstract:
Secondary infections associated with immunosuppressive states in septic patients are the leading cause of death in Intensive Care Units. Therefore, the development of strategies aimed at using drugs to reverse this state is promising. In this study we used All-Trans Retinoic Acid (ATRA) to study the modulation of the immune response in a murine model of immunosuppression (IS) by chronic administration of lipopolysaccharide. We demonstrated a key role of Myeloid Suppressor Cells (Gr-1+ CD11b+ suppressors) in the inhibition of T cell proliferation in IS animals. This population acquires its inhibitory properties in the bone marrow, and in the context of immunosuppression, migrates to the lymph nodes to exert its function. Furthermore, ATRA showed clear effects in restoring T cell proliferation associated with a decrease in the number of live Gr-1+ CD11b+ suppressor cells in lymph nodes, also accompanied by an increase in CD4 + lymphocytes. In addition, we showed that administration of ATRA to IS animals improved both the innate and immune response, in terms of bacterial clearance and the primary humoral immune response. Our results demonstrate that ATRA modulates the impaired immune response in LPS-induced immunosuppression acting on different processes, and represents a potential strategy for the treatment of septic patients with an immunosuppressive state.

"Efectos biológicos de withanólidos de solanaceae sobre plagas agrícolas" (2004). Bado, Silvina G.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la búsqueda de hallar nuevas sustancias con la actividad insecticida de bajo impacto ambiental se estudiaron los efectos biológicos de un grupo de metabolitos secundarios, denominados withanólidos, extraidos de Salpichroa origanifolia, Jaborosa odonelliana y Nicandra physaloides (Solanaceae), así como de compuestos análogos obtenidos por síntesis química a partir del withanólido mayoritario de S. origanifolia (Salpicrólido A), y de los extractos crudos de Physalis peruviana (Solanaceae) sobre las siguientes plagas agrícolas: Tribolium castaneum (Herbst) (Coleoptera: Tenebrionidae); Ceratitis capitata (Wiedemann (Diptera: Tephritidae); Anticaesia gemmatalis (Hûbner) (Lepidoptera: Noctuidae) y Diabrotica speciosa (Germar) (Coleoptera: Chrysomelidae). Los estudios se llevaron a cabo a través de bioensayos que comprendieron la incorporación de los productos en alimento (dieta artificial, discos foliares y bebederos de adultos, según especie insectil) y por aplicación tópica de larvas. Se realizaron observaciones periódicas registrándose el estado morfológico de los individuos, lo que permitió detectar la aparición de demoras en el desarrollo de los individuos tratados mediante la obtención de los parámetros Tiempo de pupación 50% y Tiempo de desarrollo 50% por el método Probit. Otros datos registrados fueron la presencia de alteraciones morfológicas, mortalidad y talla de los individuos, siendo estos sometidos a análisis de varianza y test de Tukey (p ≤ 0,05). Se realizaron bioensayos de preferencia alimentaria de Lema bilineata (Germar) (Coleoptera: Chrysomelidae) con las solanáceas Salpichroa origanifolia, Physalis peruviana y Solanum gilo, analizándose los resultados teniendo en cuenta la constitución química de metabolitos de las tres especies vegetales. Los resultados obtenidos son producto de una interacción química planta-insecto de alta especificidad, considerándose de gran interés la continuación de estudios acerca de su bioactividad.

Abstract:
In the search of new substances with insecticidal activity of low environmental impact, my dissertation focuses on a new group of secondary metabolites group, named withanolides. The withanolides were exracted from Salpichroa odonelliana, Jaborosa odonelliana and Nicandra physaloides (Solanaceae), and analogue compounds were synthesized from the major natural Salpichroa origanifolia withanolide (salpichrolidae A). Their biological effects of these withanolides and from Physalis peruviana (Solanaceae) crude extracts, were studied on the following agricultural pests: Tribolium castaneum (Herbst) (Coleptera: Tenebrionidae), Ceratitis capitata (Wiedemann) (Diptera: Tephritidae); Anticarsia gemmetalis (Hûbner) (Lepidoptera: Noctuidae) and Diabrotica speciosa (Germar) (Coleptera: Chrysomelidae). The studies involved biotests which consisted in the incorporation of the products into food (artificial diet, foliar discs, adult drinking vessels, depending on insect species) and topic application on larvae. Periodical observations of individual morphological stage registered development delays of treated individuals by fifty percent population time and fifty percent development time through Probit method. Other data obtained were morphological alterations, mortality and individual lenght, which were submitted to variance analysis and Tukey tests (p≤0,05). Preference alimentary biotests of Lema bilineata Germar(Coleoptera: Chrysomelidae), with Salpichroa origanifolia, Physalis peruviana and Solanum gilo solanaceae were caried out, whose results were analyzed taking into account the chemical constitution of these three plant species. The information here obtained indicates a high specificity in chemical plant-insect interaction, which could be considered of great interest for further bioactivity studies.

"Efectos biológicos de material particulado de origen antropogénico proveniente de la combustión del carbón y de derivados del petróleo" (2004). O’Connor, Silvia E.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Numerosos estudios epidemiológicos han descrito asociación entre aumentos de mortalidad y morbilidad humana con la existencia de niveles elevados de material particulado (MP) EN EL AIRE. El tamaño y las características físico-químicas del MP se encuentran intimamente relacionados con su origen y con los procesos que lo generaron. El MP proveniente de combustiones antropogénicas, como la generación de energía y la actividad industrial y urbana, presenta una gran proporción de partículas fine (dae < 2.5 μm) y ultrafine (dae 1 μm), mientras que el MP de origen natural presenta una mayor proporción de partículas coarse (dae <10μm). Si bien existen dispositivos de control para reducir las emiciones de MP, éstos son ineficientes para retener partículas mas pequeñas y no se encuentran disponibles en muchas partes de nuestro país. Los resultados obtenidos en este trabajo indican que los factores pulmonares agudos del CFA (proveniente de la combustión del carbón para la generación de energía eléctrica, con bajo contenido de carbono), se encuentran inversamente relacionados con el tamaño de las partículas y están asociados a un incremento en el contenido de azufre, de cuarzo y de trazas de elementos. Por otra parte, MP obtenidoc luego de un episodio de emisión accidental industrial (coque, proveniente de la combustión de derivados del petróleo, con alto contenido de carbono) generó efectos pulmonares agudos considerables y disminución en las funciones de defensa de macrófagos alveolares. Los efectos del coque crudo son mas pronunciados que los del coque calcinado, indicando una posible participación de los compustos orgánicos adsorbidos en la matriz carbonosa en el primero. La muestra urbana (Ciudad de Buenos Aires) produjo efectos menores que las muestras de coque. Dado que las vías aéreas constituyen la ruta de entrada de los contaminantes del aire al organismo, el conocimiento de los posibles efectos nocivos de los mismos es muy importante para incrementar las medidas de control en ciertas áreas relacionadas con las actividades humanas

Abstract:
Many epidemiologic studies have identified an association between human mortality and morbidity with high air particulate matter (MP) levels. Biologic PM responses are closely related to its physicochemical characteristics and its size. Anthropogenic PM from combustion sources, such as electric power generation and industrial and urban activities, are rich in fine particles (dae <2.5 μm) and ultrafine particles (dae 1 μm), while PM from natural sources have got a great proportion of coarse particles (dae <10μm). Control devices for reducing PM emissions are ineffective in trapping small particles. Besides, they are not available in many parts of our country. Our results indicate that acute pulmonary effects following intratracheal instillation of Coal Fly Ash (CFA-coal combustion product emitted by electric power plants, with low carbon content) are inversely related to particles size and associated with the increase in sulfur, quartz and trace metal content. On the other hand, PM obtained as a result of an occidental emission by an industrial facility (coke with high carbon content) generated in vivo significant acute pulmonary effects and impairment of alveolar macrophages host defenses. As the effects of raw coke were more pronounced than those of calcined coke, the organic fraction adsorbed to the carbonaceous core of raw coke might play a role in these inflammatory effects. The urban PM sample (from Buenos Aires city) exerted inflammatory effects to a lasser degree than coke particles. Because PM raches the human body through the airways but can spread throughout, it is omportant to study its biological and health effects, with a view to controlling its emission in certain areas of human activity

"Efectos cuánticos en la interacción entre átomos con radiación en cavidades" (2003). Berlín, Guido. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La idea central de la presente tesis es poner de manifesto efectos cuánticos que aparecen en la interacción entre átomos de pocos niveles con radiación electromagnética y entre modos de radiación entre sí considerando la radiación cuantificada. Se trataron diferentes sistemas de interés en el ámbito de la elcctrodinámica cuántica de cavidades, utilizando técnicas como la de hallar los operadores relevantes en el marco de la teoría de álgebras dinámicas y también utilizando ecuación maestra para la evolución del operador densidad. Se estudió el problema de un átomo de dos niveles interactuando con dos modos de radiación en presencia de un medio no lineal. Para este sistema se encontró que la presencia del medio no lineal inhibe los efectos típicos de estos sistemas como ser los colapsos y resurrecciones de la inversión de población, y también el antiagrupamiento. También se estudió un hamiltoniano de Jaynes-Cummings generalizado que no toma en cuenta la aproximación de onda rotante y además en presencia de un campo externo. Se pudo encontrar un conjunto de operadores adecuado para estudiar este sistema que permite evaluar la evolución temporal del valor medio de cualquier cantidad de relevancia. En la presente tesis se hace una propuesta para poder utilizar un divisor dc haz como discriminador de entrelazamiento entre dos modos del campo electromagnético; además en algunos casos podemos identificar diferentes elementos de la base de Bell. También en este trabajo se hace un estudio de factibilidad de una propuesta para generar en forma condicional estados de Fock en una cavidad. Para ello se relajan aproximaciones y se tienen en cuenta las pérdidas dentro de la cavidad, encontrándose que el esquema es robusto antes condiciones reales, siendo entonces promisoria su realización experimental.

Abstract:
The main idea of this thesis is to expose quantum effects that appear on the interaction between few level atoms and electromagnetic radiation, and between radiation modes, considering that the electromagnetic field is quantized. Different problems of interest on the field of Cavity Quantum Electrodynamics were studied, using techniques such us finding the relevant operators in the scenario of dynamical algebras theory, and also the density matrix approach. We studied the problem of a two level atom interacting with two modes of radiation in the presence of a non-linear medium. We found that, for this particular system, the nonlinear medium inhibits the decay of the population of the excited level, and the antibunching effect on the radiation field. We also studied a generalized Jaynes-Cummings hamiltonian that does not take into account the Rotating Wave Approximation, and also in the presence of an external driving field. We found a set of relevant operators suitable for studying this problem, that allows us to solve the temporal evolution of the mean value of the mean value of any quantity of interest. In this thesis, a proposal is made for using a beam-splitter as a state and entanglement detector between two modes of the electromagnetic field. We also found that in some cases we can discriminate between different elements of the Bell basis. We also tackle the problem of the factibility of a proposal for conditionally generating Fock states of the radiation in a cavity. We modified a previously proposed model, account for cavity losses, take into account levels that were adiabatiacally eliminated, and concluded that the proposal is robust under experimental conditions.

"Efectos cuánticos en modelos cosmológicos inflacionarios" (2016-03-29). Trombetta, Leonardo Giuliano. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La expansión del universo durante la etapa in acionaria puede ser descripta en una primera aproximación con la métrica de De Sitter. El cálculo de las funciones de correlación cuánticas de los campos en esta geometría es importante para contrastar los modelos con las observaciones de precisión del fondo cósmico de microondas. En el caso de campos muy livianos comparados con la curvatura del espacio tiempo, estos cálculos estan plagados con efectos infrarrojos, los cuales podrían estar indicando una falla en la teoría de perturbaciones. En este sentido, algunos cálculos no perturbativos han mostrado que las interacciones generan una masa dinámica, que tiene el efecto de regular las posibles divergencias infrarrojas. En esta tesis se estudian algunos aspectos de la teoría cuántica de campos en De Sitter mediante diversos métodos no perturbativos, con el objetivo de comprender los efectos infrarrojos asociados a campos livianos o no masivos en el universo temprano. Por un lado se considera la Acción Efectiva de dos partículas Irreducible (2PIEA) en la aproximación de Hartree, que si bien es exacta en el límite de N grande para un modelo con simetría O(N), para un número finito de campos deja de ser completamente consistente. Para recuperar en parte algunas propiedades de la 2PIEA exacta, se deben imponen ciertas relaciones de consistencia en el proceso de renormalización, lo cual afecta las partes finitas de los contratérminos. Se ha prestado particular atención a este proceso, generalizándolo a espacios curvos para obtener las ecuaciones de evolución del valor medio del campo renormalizadas. Se estudió el potencial efectivo en la aproximación de Hartree, buscando las condiciones para la existencia de soluciones con ruptura espontánea de simetría. Resultados previos en la literatura muestran que estas soluciones no existen en el límite de N grande, así como tampoco para N finito con el esquema de renormalización usual. Por otro lado, adoptando la renormalización consistente, se encuentran soluciones con ruptura de simetría, cuya existencia sin embargo depende del punto de renormalización. Luego, se consideraron las ecuaciones de Einstein Semiclásicas en la aproximación de Hartree, renormalizándolas con el método consistente. Se buscaron soluciones autoconsistentes de éstas ecuaciones en combinación con las ecuaciones del campo, estudiando si el efecto de los campos sobre la curvatura puede generar o no una restauración de la simetría. En particular se encontraron soluciones donde los efectos cuánticos son los responsables de la expansión acelerada del universo, en ausencia de constante cosmológica. Estos resultados también dependen del punto de renormalización. Otro método no perturbativo muy poderoso proviene de formular la Teoría de Campos en el espacio De Sitter Euclídeo, el cual tiene la propiedad de ser compacto. Debido a esto, el campo admite una descomposición en modos discreta que pone en evidencia que las divergencias infrarrojas provienen de las contribuciones del modo constante, o modo cero. Es posible formular una teoría sin problemas infrarrojos tratando no perturbativamente al modo cero, y de manera perturbativa a los modos inhomogéneos. Las correcciones provenientes de éstos últimos son de orden superior en una expansión infrarroja. Consideramos la generalización de esta formulación a la teoría con simetría O(N), calculando la masa dinámica y el potencial efectivo. Esto permite realizar una comparación adecuada con los resultados provenientes de la 2PIEA donde el límite de N grande permite obtener resultados más confiables.

Abstract:
The expansion of the Universe during the inflationary stage can be described, as a first approximation, with the De Sitter metric. It is important to calculate quantum correlation functions of fields living in this geometry in order to compare the different models with the high-precision observations of the Cosmic Microwave Background. For light fields compared to the space-time curvature, these calculations are plagued by infrared effects, which might be an indication of the breakdown of perturbation theory. In this regard, some non-perturbative calculations have shown that a mass is dynamically generated by the interactions, effectively regulating the possible infrared divergences. In this thesis, we study some aspects of the Quantum Field Theory in De Sitter space by means of non-perturbative methods, with the goal of better understanding the infrared effects associated with light and massless fields in the early Universe. On the one hand, we considered the Two-Particle Irreductible Effective Action (2PIEA) in the Hartree approximation, which, although being exact in the large-N limit of a model with O(N) symmetry, in the case of a finite number of fields it is no longer fully consistent. In order to partially recover some properties of the exact 2PIEA, some consistency conditions must be imposed on the renormalization procedure, which in turn affects the finite parts of the counterterms. We focused on this process, generalizing it to curved backgrounds in order to find the renormalized evolution equation for the mean value of the field. We studied the Effective Potential, looking for the conditions for the existence of spontaneous-symmetry- breaking solutions. Previous results in the literature show that there are no such solutions in the large-N limit, as well as for finite N under the usual renormalization scheme. Nevertheless, we found that these solutions can exist when adopting the consistent renormalization scheme, although their existence is dependent on the renormalization point. Then we studied the Einstein Semiclassical Equations in the Hartree approximation with the consistent renormali- zation procedure. We looked for self-consistent solutions of these equations together with the field equations, studying whether the quantum effects over the space-time curvature can induce a symmetry restoration or not. In particular, we found some solutions where the quantum effects are solely responsible for the accelerated expansion of the Universe, without the presence of a Cosmological Constant. This results are also dependent on the renormalization point chosen. Another very powerful non-perturbative method comes from the formulation of the Quantum Field Theory in euclidean De Sitter space, which has the characteristic property of being compact. Due to this, the field has a discrete mode decomposition which allows to identify the contributions of the constant -or zero- mode, as the origin of the infrared divergences. It is then possible to formulate a theory with no infrared problems by treating the zero mode non-perturbatively, while dealing with the inhomogeneous modes perturbatively. The corrections coming from the latter are of higher order in an infrared expansion. We considered the generalization of this formulation to a model with O(N) symmetry, calculating the dynamical mass and the Effective Potential. This allows for a comparison with the results obtained with the 2PIEA, for which the large-N limit is needed for the results to be trusted.

"Efectos cuánticos nucleares en ambientes acuosos" (2015-11-13). Videla, Pablo E.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Mediante la realización de simulaciones computacionales, hemos llevado a cabo un análisis de las influencias derivadas de la inclusión explícita de efectos cuánticos nucleares en la estructura y la dinámica de diferentes ambientes acuosos. En primer lugar, examinamos dos aspectos dinámicos fundamentales del agua en fase condensada, en condiciones ambientes: por un lado, la respuesta de solvatación del solvente frente a un cambio abrupto en las características electrónicas de un soluto modelo; por el otro, la dinámica de ruptura y reconstrucción de uniones hidrógeno. Los resultados obtenidos revelan que la inclusión de efectos de “tuneleo” y de energía de punto cero en la descripción del agua produce una disrupción y un debilitamiento en la arquitectura de las uniones hidrógeno. En el ámbito dinámico, estos efectos sobre las uniones intermoleculares se manifiestan en la disminución de los tiempos característicos que describen los diferentes modos dinámicos del solvente. El análisis de nanoagregados a temperaturas intermedias entre 100 K y 50 K también resultó instructivo, debido a que los efectos cuánticos se ven exacerbados en este ámbito térmico. Un análisis realizado sobre el octámero de agua 8 confirmó que la incorporación explícita de fluctuaciones cuánticas nucleares promueve un debilitamiento global de las uniones hidrógeno en el sistema. Por otro lado, las características de las deslocalizaciones cu´anticas espaciales de los diferentes protones presentan fuertes correlaciones con el ambiente local de las uniones intermoleculares en las que participan. Todas estas características son detectables mediante corrimientos en los espectros infrarrojos de los agregados, en cuyo modelado, la inclusión de cuanticidad nuclear resulta imprescindible para lograr un acuerdo razonable con información experimental directa. Por último, se llevó a cabo un estudio de la segregación isotópica de H y D, en nanoagregados que combinan HDO y H2O, como componentes mayoritarios. El análisis mecánico estadístico llevado a cabo en nanoagregados a bajas temperaturas reveló que existe una segregación superficial de isótopos livianos en sitios superficiales, que no participan en uniones hidrógeno. Análisis similares llevados a cabo en nanoagregados que contienen distintos haluros mostraron que, en estos sistemas, existe también una clara solvatación isotópica preferencial de los diferentes solutos, controlada por las características de la particular coordinación soluto/solvente considerada. Nuestros resultados predicen que dichos efectos pueden ser perceptibles incluso en fases condensadas acuosas en condiciones ambientes, lo cual fue corroborado por resultados experimentales de fraccionamiento isotópico en soluciones de electrolitos simples acuosos.

Abstract:
Using computer simulation experiments we investigate effects derived from the explicit inclusion of nuclear quantum fluctuations upon the structure and dynamics of different aqueous environments. We first analyze two fundamental dynamical aspects of bulk water at ambient conditions: on the one hand, the solvation response upon a sudden change in the electronic distribution of a tagged model solute; on the other hand, we examined the dynamics of hydrogen bond breaking and reconstruction. Our results reveal that zero point energy and tunneling effects lead to a disruption and a global weakening of the architecture of the hydrogen bond network. From a dynamical perspective, these effects are translated into sensible reductions in all the characteristic timescales that describe the dynamics of the liquid. The analysis of clusters at temperature of the order of 50 - 100 K allowed for the identification of more marked quantum effects. In particular, the analysis of the water octamer 8 revealed a softening in hydrogen bonding. On the other hand, quantum spatial fluctuations showed a clear connection with the different local characteristics of the intermolecular bonding prevailing in the cluster. These features are translated into modifications of the predicted quantum IR spectra, which show important modifications compared to the classical results. Finally, we have carried out an analysis of the isotopic segregation of H and D atoms in nanoclusters combining HDO and H2O. The thermodynamic analysis show a clear propensity of light H atoms to lie at dangling positions localized at the cluster surface. Similar analysis performed on aqueous clusters containing simple anionic species show similar preferential solvation structures, controlled by the quantum kinetic energies at different connective positions. These effects can be also detected in bulk phases at ambient conditions and are accordant with direct experimental information of isotopic fractionation ratios in aqueous electrolyte solutions.

"Efectos de 100 años de pastoreo ovino sobre la vegetación y suelos del norte de Tierra del Fuego" (1999). Cingolani, Ana María. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la estepa de Tierra del Fuego se realizó un estudio retrospectivo en líneas de alambrado para discriminar las influencias ambientales de las antrópicas, sobre la composición floristica, la fisonomía y los suelos. Se hicieron 26 pares de muestreos de vegetación, suelos e indicadores de disturbio en líneas de alambrado. Los pares fueron usados para clasificar tipos de hábitat en base a variables ambientales que tienen valores similares en los dos lados de cada par (o sea, variables inalteradas o poco modificadas por el régimen de uso). Utilizando el valor máximo de cada especie dentro de cada par muestreado se combinaron los dos censos en una única unidad de análisis, y con un Análisis de Correspondencias Canónicas se determinó cuáles de las variables ambientales son las más influyentes sobre la vegetación. Los gradientes floristico-ambientales obtenidos se dividieron en tres sectores bien definidos sobre el eje 1 del análisis. Resultaron tres ambientes tróficos con diferente fertilidad de los suelos que se analizaron separadamente en su variabilidad floristica con Análisis de Correspondencia. La influencia del disturbio sobre los gradientes floristicos se puso a prueba correlacionando los gradientes con variables relativas al régimen de uso, comportamiento animal y degradación del suelo, y analizando las diferencias entre los censos apareados según la posición de los mismos en los gradientes. Los tres tipos de ambientes tróficos han sufiido grandes cambios florísticos y fisonómicos por causa del uso ganadero, con cambios importantes en la impedancia de los suelos y algunos cambios menores en sus propiedades químicas. Bajo regímenes intensivos y persistentes, en los tres ambientes se originan céspedes, en algunos casos acompañados de cierto grado de eutrofización en los suelos, aunque en el ambiente más pobre (hábitat oligotrófico) los Céspedes son poco frecuentes y en muchos casos están muy erosionados. Se sugiere que en la mayoria de los casos de este ambiente, el pastoreo ha retroalimentado la acidificación del suelo y acentuado la fisonomía de murtillar o brezal enano. Información histórica sobre el aspecto de la vegetación antes de la colonización europea avalan esta hipótesis. Se hizo un análisis espacial con imágenes SPOT en el que se relacionó la heterogeneidad a nivel de cuadro alambrado con variables relativas al régimen de uso de los mismos. Este análisis corroboró lo obtenido mediante el análisis de gradientes, en general los cuadros que han tenido usos más intensivos tienen mayor superficie cubierta por céspedes, para los casos de los hábitats de fertilidad intermedia a alta (mesotrófico y eutrófico), mientras que para el hábitat oligotrófico se detectaron grandes áreas cubiertas por murtillares, que se asocian a usos tradicionales normales, pero tienen muchas evidencias de erosión. Mapas y censos actuales de vegetación en sitios descriptos por viajeros y científicos antes de la introducción del ganado apoyan la idea de que los Céspedes y algunos murtillares son de origen antrópico, y de que muchos sitios conservan la fisonomía original.

Abstract:
In order to discriminate environmental and human influences on the floristic composition, physiognomy and soils of the steppes of Tierra del Fuego, we made a retrospective study along fencelines. In 26 pairs of fence contrasts we sampled vegetation, soils and disturbance indicators. We use environmental variables that showed similar values on both sides of each contrast (i. e. variables scarcely influenced by human disturbance) to classify habitat types. Using the higher value of species for each pair of samples we combined the two samples in one unit of analysis. With Canonical Correspondence Analysis the environmental variables more related to floristic composition were chosen. The floristic-environmental gradients obtained were divided in three sectors along the first axis extracted by the analysis. These sectors resulted in three trophic habitats with different soil fertility which were analyzed in their floristic variability with Correspondence Analysis. Influences of disturbance on the floristic gradients were tested by correlating the gradients with variables related to grazing regimes, animal behaviour and soil degradation, and analyzing the differences between paired samples with contrasting scores on the axes. The three trophic habitat types have changed drastically in composition and physiognomy because of grazing disturbance. Soils have also changed notably in impedance, and in a lesser extent in some chemical variables. With persistent heavy stocking rates, lawns of grasses and forbs were originated in the three habitats, together, in some cases, with a certain degree of soil eutrophication. However, in the poorest environment (oligotrophic habitat) lawns are infrequent and generally very eroded. We think that in most cases of the oligotrophic habitat type grazing caused a positive feedback in soil acidification favoring the heathland physiognomy. This last hypothesis has been supported by historic information about vegetation aspect before European colonization. A spatial analysis using SPOT images was performed in order to relate vegetation heterogeneity and variables related to use regimes at paddock level. The analysis corroborate the results obtained by gradient analysis; in general, the paddocks with more intensive use have more surface covered by lawns for the habitats with high and intermediate fertility (mesotrophic and eutrophic), while for the oligotrophic habitat, extensive areas were detected to be covered by heathlands which are associated to normal traditional use but are very much eroded. Maps and present phytosociological relevés in sites described by travelers and scientists before sheep introduction support the idea that lawns and some heathlands' origin is anthropic, and that many sites have the original physiognomy.

"Efectos de cambios en el uso de la tierra sobre ensambles de roedores en agroecosistemas pampeanos" (2011). Fraschina, Jimena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo general de esta tesis fue analizar el efecto del uso de la tierra y de variables climáticas sobre las comunidades de roedores en un agroecosistema pampeano a distintas escalas temporales y espaciales. Para ello se realizaron muestreos estacionales de roedores durante 2006-2008 en los distintos ambientes presentes en el área de estudio y se analizaron datos de abundancia de roedores y de variables climáticas desde 1984 hasta 2008. También se compararon las abundancias de roedores y características de la vegetación entre los periodos anterior y posterior a la expansión de la soja. Las fluctuaciones en las abundancias de roedores estuvieron relacionadas con la precipitación, pero la tendencia a la disminución observada en .Calomys laucha y Calomys musculinus fue mejor explicada por cambios en el uso de la tierra que por las variables climáticas. Excepto las granjas avícolas, que serían las principales responsables del mantenimiento de M. musculus en el área, el resto de los ambientes estudiados presentaron composición similar de especies, aunque con abundancia variable. Los terraplenes de vía, los arroyos y los bordes de pastizal y cultivo, jugarían un papel importante en el mantenimiento de O. flavescens y O. rufus, y en gran medida de A. azarae, aunque esta última también hace uso de los campos de cultivo. A una escala de paisaje, los campos de cultivo son el ambiente que más aporta a la abundancia total de roedores ya que si bien no presentan una alta densidad, ocupan más del 88% del área total.

Abstract:
The goal of this work was to assess the effect of land use and environmental variables on rodent communities of pampean agroecosystems. We conducted rodent samplings during 2006-2008 in different habitats of the Exaltación de la Cruz Department, Buenos Aires Province, Argentina. We also analyzed rodent abundance and climatic data from a time series for the period 1984 to 2008 in order to assess if there were trends of change in rodents or climatic variables, and we compared rodent abundance and vegetation data between the years after and before the expansion of the soybean.. Fluctuations in rodent abundance were related to precipitation, but the trend to decrease observed in Calomys laucha and Calomys musculinus was better explained by land use changes than by climatic variables. Poultry farms were the more distinct habitat with regard rodent species, and the presence of Mus musculus was fully dependent on this habitat. The other habitats presented similar species composition but with variable abundance. Borders of cropfields, grasslands, and streams, and railway terraces were fundamental for maintaining Oligoryzomys flavescens and Oxymycterus rufus populations, and in less degree Akodon azarae, because this species may also use the cropfields. Although rodent abundance is low in cropfields, at a landscape level this habitat has the highest contribution to abundance, because it occuppies more than 88 % of the total area.

"Efectos de estructuras a gran escala en lentes gravitacionales" (1997). Surpi, Gabriela Clara. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Estudiamos el efecto de fluctuaciones a gran escala en la distribución de materia y ondas gravitacionales de origen cosmológico, sobre la propagación de la luz en sistemas de lentes gravitacionales. Al actuar sobre imágenes múltiples de un mismo objeto encontramos que las estructuras a gran escala producen un cambio importante en la magnitud de los observables de la lente. Al orden más relevante, el mismo es formalmente equivalente a un cambio en la geometría del sistema y no compromete la determinación de la constante de Hubble ni la reconstrucción del potencial del deflector. Al orden siguiente, el efecto equivale a la presencia de un shear externo a la lente, pero tiene consecuencias observacionales pequeñas. Las fluctuaciones a gran escala en el potencial gravitatorio también operan como lentes gravitacionales débiles deformando la imagen de fuentes lejanas. Observando que el shear generado por inhomogeneidades de materia a gran escala da lugar a una significativa rotación aparente del ángulo de posición de fuentes elongadas, analizamos las implicancias de este efecto sobre las propiedades de polarización de radio galaxias. Proponemos que la dispersión que se detecta en la dirección de polarización lineal respecto de la perpendicular al eje mayor de la imagen en radio fuentes lejanas puede ser interpretada como una consecuencia del shear cosmológico.

Abstract:
We analyze the effects of large-scale density fluctuations and long-wavelength gravitational waves upon light propagation in gravitational lens systems. When the large-scale inhomogeneities act upon multiple images of a source they bring about an important change of magnitud in the lens observables. To the leading order, the effect is equivalent to a change in the geometry of the system which does not compromise the program to determine the Hubble constant and reconstruct the lens potential. The next to leading order correction results in the presence of shear external to the lens, but it has small observational consequences. Moreover, large-scale fluctuations in the gravitational potential behave like weak gravitational lenses distorting the images of distant sources. Taking notice of the cosmological shear produced by density fluctuations leads to a significant apparent rotation of the position angle in elongated sources, we analyze the consecuences of this effect upon the polarization properties of radio galaxies. We put forward the hypotesis that the dispersion observed in the direction of integrated linear polarization of cosmologically distant radio sources away from the perpendicular to their mayor axis may be caused by cosmic shear.

"Efectos de interferencia en la producción del bosón de Higgs en el LHC" (2017-03-22). Fidanza Romani, Nerina Andrea. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta Tesis se estudiaron los efectos de la interferencia entre la se~nal correspondiente a un bosón de Higgs decayendo a dos fotones en el LHC, y su respectivo background continuo de QCD. En primer lugar, se completó el cálculo de esta interferencia a orden O(α 2 S) para la producción inclusiva de un bosón de Higgs, incluyendo los canales de producción qg y qq que representan hasta un 35% de la contribución dominante del subproceso partónico gg. En particular, se estudió el efecto que tiene dicha interferencia en la posición aparente de la resonancia del bosón de Higgs en el espectro de masa invariante de los dos fotones. Luego, se analizó el caso correspondiente a la producción de un bosón de Higgs en asociaci ón con dos jets, un proceso que recibe contribuciones importantes tanto del mecanismo de fusión de gluones, como de la fusión de bosones vectoriales. Nuevamente se estudió el corrimiento del pico de la distribución en masa invariante del par de fotones, encontrando que este es más peque~no que el de la muestra inclusiva. Debido a esto, y teniendo en cuenta que este corrimiento puede ser utilizado para restringir el ancho total de decaimiento del bosón de Higgs, se propuso utilizar el canal de H(-->ϒϒ) + 2 jets como referencia para medir el corrimiento en la masa invariante inclusiva. Finalmente se estudió el efecto de la interferencia en el espectro de impulso transverso qT del bosón de Higgs. Para poder proveer predicciones confiables para este observable, y en particular en la región de impulso transverso peque~no, se realizó la denominada resumaci ón de qT , que consiste en la suma a todo orden en teoría de perturbaciones de las contribuciones dominantes en el límite qT --> 0. Dicha resumación permite la cancelación de divergencias que de otro modo arruinan la convergencia de las predicciones perturbativas para el observable mencionado.

Abstract:
In this Thesis we studied the effects of the signal-background interference for the Higgs diphoton decay channel at the LHC. In the first place, we present a complete O(α 2 S) computation of the interference in the inclusive Higgs production, including the qg and qq production channels, which amount up to 35% of the dominant gg partonic subprocess. In particular, the effects of the interference on the position of the resonance peak of the Higgs boson in the diphoton invariant mass spectrum was studied. Later, we analized the production of a Higgs boson plus two jets channel, a process which receives important contributions, both from the gluon fusion mechanism, as well as from the vector boson fusion mechanism. Once again, we studied the apparent shift in the position of the diphoton invariant mass peak generated by the interference contributions, finding it to be much smaller than the shift in the inclusive sample. For this reason, and considering that this shift may be used to measure, or bound, the Higgs decay width, we proposed using this channel as a reference mass for measuring the inclusive mass shift. Finally, we studied the interference effects on the transverse momentum qT spectrum of the Higgs boson. In order to provide reliable predictions of this observable, and in particular in the low transverse momentum region, we carried out the so-called qT resummation, which consists on summing to all orders in perturbation theory the dominant contributions in the qT --> 0 limit. This resummation allows the cancellation of divergences which would otherwise ruin the convergence of the perturbative predictions for the said observable.

"Efectos de la contaminación por metales pesados sobre anfípodos de agua dulce y su aplicación en estudios de toxicidad de sedimentos" (2015-04-07). Giusto, Anabella. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las evaluaciones ecotoxicológicas son herramientas fundamentales en las estimaciones de riesgo ambiental y la toma de decisiones de políticas de control y prevención de daños ecológicos. A nivel regional la caracterización ecotoxicológica de sedimentos se determina principalmente evaluando en ellos niveles de contaminantes considerados como prioritarios, sin tener en cuenta factores tales como biodisponibilidad, resuspensión posibles interacciones o impacto sobre estructura y funcionamiento de las comunidades asociadas a sedimentos. En ese sentido los bioensayos son herramientas esenciales para evaluar la calidad del ambiente porque responden de manera integrada a los efectos adversos de mezclas químicas complejas con las que están en contacto y cuya ecotoxicidad interesa conocer. Los bioensayos con anfípodos tienen considerable relevancia en la evaluación toxicológica de agua dulce, siendo Hyalella azteca, de amplia distribución en el hemisferio norte, la especie más utilizada. Los protocolos para bioensayos estandarizados fueron diseñados en el hemisferio norte en función de los requerimientos y biología de esta especie. Además, estos protocolos se centran primordialmente en la evaluación de parámetros tradicionales (mortalidad y crecimiento) sobre los anfípodos, asumiendo que la ausencia de efecto indica que el medio de ensayo es ecotoxicológicamente aceptable. Sin embargo, hay una tendencia mundial a evaluar el impacto de los contaminantes en un sistema acuático particular a través del monitoreo ecotoxicológico con especies nativas. La necesidad de utilizar especies locales se hace evidente, entre otras razones, porque el uso de las mismas adaptadas a las características del ambiente, pueden proporcionar resultados mucho más cercanos a la realidad que los obtenidos con una especie exótica. Por lo tanto, debido a que las especies propuestas en los protocolos internacionales no son las mismas que encontramos en nuestros ecosistemas acuáticos, es muy importante evaluar el efecto de los contaminantes sobre especies autóctonas sobre la base del conocimiento biológico, ya que estas pueden mostrar requerimientos y características diferentes a las de las especies estandarizadas en dichos protocolos. Es recomendable que cada región geográfica tenga protocolizado diversos métodos de ensayo donde las especies autóctonas estén representadas. Este trabajo presenta resultados obtenidos a partir de la evaluación de efectos de matriz acuosa y sedimentos contaminados sobre dos especies de anfípodos dulceacuícolas presentes en la región: Hyalella curvispina y Hyalella pseudoazteca, por medio de bioensayos de toxicidad en condiciones controladas de laboratorio. Utilizando organismos de dos estadios de vida, se realizaron ensayos de exposición aguda y subcrónica a dos metales pesados, tóxicos referentes (cobre y cadmio) en matriz acuosa, sedimento procesado y agua de poro extraída del mismo, adaptando una metodología estandarizada para H. azteca. Los puntos finales fueron concentración de metal en tejidos, sobrevivencia y crecimiento, siendo los dos últimos parámetros tradicionales para estos protocolos experimentales. A su vez, se investigó la utilidad del Índice de Masa Corporal (IMC) como nuevo parámetro evaluador de efecto subletal. Con el objetivo de utilizar nuevos puntos finales de evaluación de efecto temprano por exposición a metales en H. curvispina, se determinaron efectos sobre el contenido de glucógeno, proteínas totales, lípidos totales, triglicéridos, arginina fosfato, niveles de peroxidación lipídica (TBARS) y actividad de catalasa (CAT), superóxido dismutasa (SOD) y Na+/K+ ATPasa, en matriz sólida y acuosa. Además se ajustó e implementó para esta especie la técnica de sistema de transporte de electrones (ETS) como biomarcador de estado metabólico. Se llevó a cabo la evaluación de la ecotoxicidad de sedimentos ambientales realizando ensayos con sedimento completo y agua de poro, utilizando a H. curvispina como organismo prueba, evaluando como puntos finales parámetros tradicionales de efecto. A su vez, sobre muestras de sedimento completo se investigó la utilidad de biomarcadores de efecto temprano (niveles de lipoperoxidación y actividad de SOD, CAT y ETS). En relación al efecto del cadmio y cobre en solución H. curvispina probó ser sensible a concentraciones ecológicamente relevantes de ambos metales. Los resultados reafirman su importancia como una especie adecuada para ensayos de evaluación ecotoxicológica en cuerpos de agua dentro de su área de distribución. Con respecto a la toxicidad de ambos metales en bioensayos en matriz sólida, se demostró que ambas especies sufren efectos negativos sobre el crecimiento a concentraciones de Cd y Cu cercanas a los Niveles Guía de Calidad de Sedimentos (SQGs), desarrollados para el hemisferio norte, siendo el IMC el mejor parámetro discriminador de efecto. En cuanto al desarrollo de nuevos puntos finales de efecto temprano para ensayos con anfípodos se confirmó que la exposición a Cu ó Cd, tanto en solución como en sedimento, afectó de manera significativa a la mayoría de los parámetros metabólicos y bioquímicos evaluados. Se postula al ETS como nuevo biomarcador de efecto en bioensayos ecotoxicológicos con H. curvispina. El protocolo aplicado, los parámetros determinados y la especie test elegida, resultaron ser aptos para monitorear la calidad toxicológica de sedimentos ambientales. El uso de biomarcadores demostró una mayor sensibilidad y un más preciso ajuste de evaluación de efectos que el obtenido por el ensayo estándar de sobrevivencia y crecimiento, y se revelan más contundentes en relación a la evaluación de efectos proponiéndose su implementación en estudios de biomonitoreo de sedimentos. Por último, se estableció una línea de base como contribución al incremento del conocimiento biológico de las especies de ensayo, utilizando como criterio el IMC y parámetros del metabolismo energético, comparando el estado general de los animales en medio acuoso y sedimento en situaciones control. Se concluyó que H. curvispina puede ser empleada en bioensayos tanto en matriz sólida como acuosa, pero la especie resulta más apropiada para la realización de bioensayos en presencia de sedimentos. Con respecto a H. pseudoazteca resulta una especie apropiada para su uso en bioensayos en matriz sólida, pero no es recomendada para su utilización en ensayos en matriz acuosa.

Abstract:
Ecotoxicology assays are fundamental tools for assessing environmental risks and making political to control and prevent environmental damage. At a regional level, ecotoxicological characterization of sediments is determined mostly by analysing the toxic levels present in them that are prioritized, not taking into account variables such as bioavailability, resuspension, possible interactions or impact on the structure and functioning of the communities associated to the sediments. In this sense, bioassays are essential tools for assessing environmental quality because they respond in an integral way to adverse effects of complex chemical mixtures with which they come in contact and of which there is an interest in knowing their ecotoxicity. Bioassays with amphipods are of remarkable relevance for toxicological assessment in freshwater, being Hyalella azteca, widely distributed across the northern hemisphere, the most employed species. Standardized bioassay protocols were designed in the northern hemisphere based on the requirements and biology of this species. Moreover, these protocols are focused mainly on the assessment of traditional parameters (growth and mortality) of amphipods, assuming the absence of an effect implies that the assay medium is ecotoxicologically acceptable. However, there is a worldwide trend to assess toxic impact in a particular aquatic system through ecotoxicological monitoring with native species. The need to use local species becomes evident, among other reasons, because using these adapted to the environmental characteristics can give results which are much closer to reality than those obtained using an exotic species. Therefore, considering the species proposed by international protocols are not the ones we find in our aquatic ecosystems, it is extremely important to assess the effect of pollutants on native species on the basis of biological knowledge, since native species may present requirements and characteristic that are different to those of the standardized species in said protocols. It is advisable that each geographic region have a diversity of standardized assay protocols where native species are represented. This work presents results obtained from the assessment of the effects of polluted sediments and liquid matrix on two freshwater amphipod species present in the region: Hyalella curvispina and Hyalella pseudoazteca, through toxicity bioassays in controlled laboratory conditions. Acute and subchronic exposure to two heavy metals, reference toxics (copper and cadmium) in liquid matrix, processed sediment and groundwater assays were performed, adapting a methodology standardized for H. azteca, using organisms at different life stages. Endpoints were metal tissue concentration, survival and growth, being these last two the traditional parameters for these experimental protocols. At the same time, utility of the body mass index (IMC) as a new parameter to evaluate sublethal effects was assessed. Aiming to use new endpoints to evaluate early effects of metal exposure in H. curvispina, the effects on glycogen, total proteins, total lipids, triglycerides, phosphate arginine, lipids peroxidation levels (TBARS) and catalase activity (CAT), superoxide dismutase (SOD) and Na+/K+ ATPase were determined in both solid and liquid matrix. In this work, the electron transportation system (ETS) technique was adjusted and implemented for this species as a metabolic state biomarker. Environmental sediment ecotoxicity assessment was carried out with complete sediment and pore water assays using H. curvispina as test organism, taking as endpoint the traditional effect parameters. Utility of early effect biomarkers (lipoperoxidation levels and SOD, CAT and ETS activity) was also assessed using complete sediment samples. With regard to the effect over cadmium and copper in solution, H. curvispina showed sensitivity to concentrations of both ecologically relevant metals. The results reasserted its significance as an adequate species for ecotoxicological assessment assays in water bodies inside their area of distribution. As for the toxicity of both metals in bioassays with solid matrix, it showed that both species suffer negative effects on growth when using concentrations of Cd and Cu close to the Sediment Quality Guideline (SQG) levels (developed for the North hemisphere), with the IMC being the best parameter for effect discrimination. With regard to developing new early effect endpoints for assays with amphipods, it was confirmed that the exposition to both metals significantly affected most of the intermediary metabolism parameters and biochemical oxidative damage evaluated, both in solution and in sediment. ETS is presented as a biomarker of effect in ecotoxicological bioassays with H. curvispina. The applied protocol, the determined parameters and the test species chosen were adequate for monitoring the toxicological quality of environmental sediments. The use of biomarkers showed a higher sensitivity and a more precise effect evaluation adjustment than the one obtained through the use of the standard survival and growth assay. Since they are also more telling in regards to the effects evaluation, its implementation in sediment biomonitoring studies is proposed. Finally, a baseline was established as contribution to the increment of biological knowledge of the test species, using the IMC and parameters from the energetic metabolism as criteria, comparing the general state of the animals in water and sediment media in control situations. It is concluded that H. curvispina can be used in bioassays with both solid and water matrix, but the species is more adequate for carrying out bioassays in presence of sediments. With regard to the H. pseudoazteca, it is an adequate species to be used in solid matrix bioassays, but it is not recommended for its use in water matrix trials.

"Efectos de la cromodinámica cuántica en la física del bosón de Higgs" (2016-07-22). Mazzitelli, Javier. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
A lo largo de la presente tesis hemos llevado a cabo el cálculo de las correcciones predichas por la cromodinámica cuántica para distintas secciones eficaces que son relevantes para la caracterización del bosón de Higgs descubierto en el LHC, hasta el momento compatible con aquel del modelo estándar. En particular, hemos analizado la producción de uno y dos bosones de Higgs a través del mecanismo de fusión de gluones, principal canal de producción en el LHC. En todos los casos, trabajamos en el límite en que la masa del quark top es grande, a través del cual se obtiene un Lagrangiano de interacción efectivo entre el bosón de Higgs y gluones. Para la sección eficaz correspondiente a la producción de un bosón de Higgs, uno de los procesos más relevantes en el LHC, hemos obtenido expresiones aproximadas a tercer y cuarto orden, mejorando los resultados disponibles anteriormente, y observando una reducción de las incertezas teóricas respecto de órdenes anteriores. En el caso de la producción de dos bosones de Higgs, cuyo interés reside en la posibilidad de medir en el futuro la auto-interacción del bosón de Higgs y por lo tanto el potencial escalar del modelo estándar, hemos calculado las correcciones a segundo orden, obteniendo la predicción más precisa disponible hasta el momento. Además, hemos considerado la emisión de gluones soft a todo orden en la expansión perturbativa, a través de la denominada resumación de umbral, alcanzando de esta forma resultados aún más confiables. Nuestras predicciones, incluídas en el informe anual del Higgs Cross Section Working Group del LHC, son utilizadas por las colaboraciones experimentales ATLAS y CMS.

Abstract:
In this Thesis we have carried on the calculation of the corrections predicted by quantum chromodynamics for different cross sections which are relevant for the characterization of the Higgs boson discovered at the LHC, so far compatible with that of the standard model. In particular, we have analysed the production of one and two Higgs bosons through the gluon fusion mechanism, which is the main production channel at the LHC. We worked in the large top-quark mass limit, in which an effective Lagrangian arises for the interaction between the Higgs boson and the gluons. For the cross section corresponding to the production of a single Higgs boson, one of the most relevant processes at the LHC, we have obtained approximate expressions for the third and fourth order corrections, improving the previously available results, and observing a reduction of the theoretical uncertainties with respect to previous orders. For the case of the double Higgs production, which gives the opportunity to measure in the future the Higgs self-interaction and therefore the scalar potential of the standard model, we have obtained the second order corrections, reaching the most precise prediction available for the moment. Furthermore, we have considered the all-orders soft gluon emission, through the so called threshold resummation, obtaining even more reliable results. Our predictions, which are included in the annual report of the LHC Higgs Cross Section Working Group, are used by the experimental collaborations ATLAS and CMS.

"Efectos de la exposición prenatal al agonista cannabinoide WIN55,212-2 sobre la proliferación, la migración y el citoesqueleto neuronal de la rata" (2012). Saez, Trinidad María de los Milagros. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El sistema endocannabinoide (eCB), compuesto por los receptores cannabinoides (rCB1 y rCB2), ligandos endógenos (endocannabinoides), y enzimas de síntesis y degradación, está presente en el cerebro desde etapas muy tempranas de su desarrollo. En este periodo, el sistema eCB está involucrado en la regulación de la proliferación de progenitores neuronales, en la especificación, la migración y la diferenciación de neuronas piramidales e interneuronas y también en la sinaptogénesis. El consumo de marihuana durante la gestación representa un gran riesgo para el desarrollo del sistema nervioso central de los fetos, dado que el Δ9‐ tetrahidrocannabinol, el principal compuesto activo del cannabis, atraviesa la placenta y la barrera hemato‐encefálica. Estudios realizados en niños y adolescentes cuyas madres consumieron marihuana durante el embarazo, documentaron anormalidades cognitivas y comportamentales. En este trabajo se demostró la expresión del rCB1 durante la corticogénesis en neuronas postmitóticas en migración, así como en diversas poblaciones neuronales. Además, el presente trabajo aporta evidencias sobre los efectos que produce la exposición materna a un agonista cannabinoide sobre las neuronas postmitóticas en migración y la diferenciación de neuronas del linaje glutamatérgico. Estos resultados contribuyen al conocimiento sobre los sustratos neurobiológicos que determinarían los cambios neuro‐comportamentales que persistentes en las funciones cerebrales durante la vida postnatal. Asimismo, se demostró que ratones CB1 knockout mostraron una disminución en el número de progenitores intermedios y un aumento en el número de neuronas postmitóticas glutamatérgicas. Durante la vida postnatal, la deleción del rCB1 indujo una distribución de interneuronas anormal. En suma, los resultados obtenidos en este trabajo constituyen avances originales sobre el papel del sistema endocannabinoide en el desarrollo de la corteza cerebral.

Abstract:
The endocannabinoid system (eCB), formed by the cannabinoid receptors (rCB1 and rCB2), endogenous ligands (endocannabinoids) and synthesis and degradation enzymes, is present since early stages of brain development. During this period, the eCB is involved in the regulation of proliferation of neural progenitors and in specification, migration and differentiation of pyramidal neurons and interneurons as well as in synaptogenesis. Marihuana consumption during pregnancy represents a serious risk for the proper development of the fetus´s brain since Δ9‐ tetrahidrocannabinol, main active compound of cannabis, can reach the fetus through placenta and hemato‐encephalic barrier. Cohort studies performed on children and adolescents of mothers who consumed marihuana during pregnancy, reported cognitive and comportamental abnormalities in these subjects. In the present study, we demonstrated the expression of the rCB1 during corticigenesis in migrating postmitotic neurons as well as in other neuronal populations. Moreover, this Thesis work provides evidence on the effects accounted by prenatal exposure to a cannabinois agonist on migrating post‐mitotic neurons and the differentiation of glutamatergic neurons. The present results contribute to the knowledge on neurobiologic substrates that determine neuro‐comportamental changes that will persist through post‐natal life. Finally, it was also proved that CB1 knockout mice showed a diminished number of intermediate progenitors and a higher number of glutamatergic post‐mitotic neurons. During post‐natal life, the deletion of rCB1 induced an abnormal distribution of interneurons. In summary, the results presented in this Thesis work represent an original advance in the understanding of the role played by the eCB system in the development of the cerebral cortex.

"Efectos de la fragmentación del bosque de caldén sobre las comunidades de aves en el centro-este de La Pampa" (2008). Sosa, Ramón Alberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Entre agosto de 2000 y febrero de 2005 se estudiaron la organización de los ensambles de aves en fragmentos de caldenal en la Estancia La Primavera, ubicada en el centro este de la provincia de La Pampa. Los objetivos generales de este trabajo fueron: 1) analizar los cambios en los ensambles de aves producidos por la fragmentación del bosque y por la incorporación de una matriz agrícola; y 2) determinar los efectos de borde tanto en sus aspectos abióticos (mediante análisis de variables microambientales), como bióticos (a partir del análisis de los ensambles de aves y de un experimento con nidos artificiales). Para ello se trabajó en seis fragmentos de bosque maduro cuyas superficies fueron: 2.1; 10.4; 13.6; 26.3; 27.9; y 117.6 ha. En la primera parte del trabajo se describe el área de estudio y cuales fueron las posibles causas de la fragmentación del caldenal. En la segunda parte del trabajo se evaluó la riqueza específica y la abundancia de las aves, en función del tamaño de los fragmentos y de la estructura de la vegetación de los mismos. La estructura gremial de los ensambles cambió entre estaciones, debido a las especies migratorias estivales. Tanto la densidad como la riqueza fueron afectadas por el área. Por otro lado la estructura de la vegetación fue un factor importante en la distribución de las especies en los fragmentos. En la tercera parte se analizaron los diferentes efectos de borde, en primer lugar se analizaron los cambios físicos ocasionados por éste. En este caso las temperaturas del aire, del suelo, la humedad ambiente y de la broza, la radiación fotosintéticamente activa y la lluvia fueron las variables que cambiaron conforme la distancia la borde aumentaba. Posterior a los cambios microambientales, se estudiaron los cambios en los ensambles de aves en función del efecto de borde como así también de la estructura de la vegetación. No hubo evidencia de un efecto de borde, ya que no se encontró ninguna especie rechazadora ni explotadora de borde. Como la estructura de la vegetación fue similar, tanto en el borde y en el interior, esta pudo haber sido la causa de la falta de efecto de borde. Por último en el Capítulo 6 se realizó una evaluación del efecto de borde a partir de un experimento con nidos artificiales. En este caso hubo un efecto de borde significativo, aunque sólo para los nidos ubicados en el suelo, mientras que los colocados en los árboles tuvieron una predación cercana al 100%. Si bien existieron varias especies de potenciales predadores, sólo se pudieron registrar tres mamíferos y tres aves. Los resultados en su conjunto indican que las aves que habitan en el caldenal se verían más afectadas por las variables microambientales, la estructura de la vegetación y la predación de nidos. Sin embargo, los efectos biológicos indirectos causados por las variaciones microambientales, el parasitismo de cría (ausente este estudio), la predación sobre nidos naturales, constituyen evaluar con mayor profundidad.

Abstract:
The study of the bird assemblage organization in the fragmented calden forest was carried out at La Primavera Ranch, located in central-eastern La Pampa province between August 2000 and February 2005. The general objectives of this study were: 1) to analyze the changes in the bird assemblage after forest fragmentation; 2) to determine the edge effects in their abiotic and biotic aspects. With this purpose in mind, six calden fragments of mature forest sizing 2.1, 10.4, 13.6; 26.3; 27.9; and 117.6 ha were studied. First, the study area was described and the possible causes of the caldenal fragmentation were analyzed. Second, the specific riches and abundance of birds were evaluated as a function of the fragments size and the vegetation structure. The bird assemblage showed seasonal changes, due to the ocurrence of summer migratory species. The density and species riches were affected by the fragments size. On the other hand the vegetation structure was an important factor influencing species distribution in forest fragments. The microenvironmental changes, bird assemblage and artificial nest predation were the edge effects considered. The microenvironmental changes included the air and the soil temperatures, the air and the litter humidity, the photosyntetic active radiation and the rain, variables which changed according to the distance from the edge. No edge effects were found on the bird assemblage. The artificial nests experiment showed a stronger edge effect only for the ground nests, while those placed on trees had nearly 100% predation. The obtained results suggest that birds inhabiting the caldenal would be more affected by microenvironmental variables, vegetation structure and nests predation. However, indirect biological effects caused by the microenvironmental changes, brood parasitism and natural nests predation, need to be evaluated in future studies.

"Efectos de la granívora/herbivoría sobre la invasión de especies leñosas en pastizales de la pampa interior" (2012-12-13). Muschetto, Emiliano. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las invasiones biológicas son uno de los procesos que más están contribuyendo a la pérdida de la diversidad en algunos sistemas, sin embargo la magnitud de su efecto depende en muchos casos de las características de las comunidades invadidas y de la presencia de enemigos naturales. En este marco, el objetivo general de esta tesis fue avanzar en el conocimiento del rol que tiene la comunidad de pequeños roedores en la resistencia a la invasión de especies de árboles en la región Pampeana, en particular de G. triacanthos y R. pseudoacacia. Un experimento de 4 años de duración de exclusión de roedores, que incluyó la generación de disturbios para simular etapas sucesionales tempranas, obtuvo resultados que demuestran que tanto el efecto de los roedores como el del disturbio varió según la especie de leñosa considerada. Los roedores solo ejercieron un efecto positivo en la germinación de G. triacanthos en las parcelas disturbadas y no tuvieron efecto sobre la mortalidad de las plántulas germinadas. El disturbio afectó únicamente a las plántulas de G. triacanthos, disminuyendo la mortalidad en el primer año de estudio para luego aumentarla en el último periodo cuando se produjo un cambio en las especies vegetales dominantes. El nivel de precipitaciones durante la época de crecimiento de las plántulas fue un factor determinante en las posibilidades de invasión de ambas especies de leñosas y afectó también a la población de roedores. Las semillas de G. triacanthos permanecieron viables en el banco por más tiempo que las de R. pseudoacacia. El estudio de remoción de semillas en distintas comunidades vegetales registró un mayor consumo en las estaciones del año donde los roedores registran mayor abundancia (otoño) y varió según los sitios estudiados. En pastizales, la disponibilidad de alimento alternativo sería el principal factor que explicaría las diferencias en la depredación de semillas, principalmente a través de interacciones indirectas como el mutualismo aparente. A su vez, los experimentos bajo condiciones controladas determinaron que los roedores disminuirían el consumo de G. triacanthos en presencia de alimento alternativo compuesto por semillas de herbáceas nativas y exóticas de pequeño tamaño. Los resultados de esta tesis sugieren que el éxito en la invasión estaría dado por la interacción entre los factores extrínsecos (fluctuaciones en las condiciones ambientales) e intrínsecos de las comunidades vegetales y de las poblaciones de roedores.

Abstract:
Biological invasions are one of the processes that are contributing to the loss of diversity in many systems; although the magnitude of the effect depends on the characteristics of the invaded communities and the presence of natural enemies. In this context, the general objective of this thesis was to advance in the knowledge of the role of small rodents in the resistance to tree species invasion, particularly G. triacanthos and R. pseudoacacia, in the Pampas region. A rodent exclusion experiment of 4-year duration, which included disturbances generation to simulate early successional stages, showed that both the effect of rodents and disturbances varied depending on the woody species considered. Rodents only had a positive effect on the germination of G. triacanthos in disturbed plots and had no effect on the mortality of seedlings. The disturbances affected only G. triacanthos seedlings, decreasing the mortality in the first year of study and then causing an increase in the last year, when there was a change in the dominant plant species of the community. Precipitations during the growing season of the seedlings affected the chances of invasion of both woody species and also affected the rodent population. G. triacanthos seeds remained viable in the seed bank during a longer period than those of R. pseudoacacia. The comparison of seed removal along seasons and in plant communities that differed in structure and alternative food availability showed higher consumption in the season where rodents recorded greater abundances (autumn) and varied according to study sites. Alternative food availability would be the main factor explaining differences in seed predation, mainly through indirect interactions like apparent mutualism. In turn, the experiments under controlled conditions determined that rodents would decrease the consumption of G. triacanthos seeds in the presence of alternative food composed by native and exotic herbaceous seeds of small size. The results of this thesis suggest that the invasion success of woody species would be given by the interaction between extrinsic factors (fluctuations in environmental conditions) and those intrinsic of plant communities and rodent populations.

"Efectos de la presión en las propiedades eléctricas, magnéticas y superconductoras de la familia FeTe1-xSe x y derivados" (2015-03-26). Rodríguez, Maricel Gabriela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Recientemente , se ha encontrado que, al dopar un óxido nitrogenoide de hierro (“iron pnictide”) de fórmula ReFeAsO (Re: tierras raras) tanto con huecos como con electrones, reemplazando parcialmente el oxígeno o la tierra rara, este presenta un estado superconductor con altas temperaturas . De esta manera, estos compuestos conforman una nueva clase de superconductores de alta temperatura crítica (Tc). Estudios adicionales mostraron la existencia de otras familias de nitrogenoides de hierro superconductores, como AeFe2As2 (Ae: Ca, Sr, Ba) y AFeAs (A: Li, Na) y de una nueva familia llamada calcogenuros de hierro (“iron chalcogenide”), dadas por el compuesto FeSe/Te, cuya familia más conocida es FeTe1-xSex . Estos compuestos tienen la estructura más sencilla entre los superconductores basados en hierro, debido a que están conformados sólo por capas de Fe y Se/Te. En cuanto al mecanismo de la superconductividad en los ya conocidos cupratos superconductores de alta temperatura crítica (SATC), existen muchas nuevas teorías pero ningún consenso al respecto, por lo que los nuevos SATC de arseniuro o calcogenuro de hierro podrían acercar nuevos enfoques que ayuden a entender aspectos adicionales de la superconductividad en los cupratos, o bien a develar un nuevo tipo de superconductividad. Es en esta línea de pensamiento que esta Tesis doctoral se enfocó, buscando introducir deformaciones estructurales en calcogenuros superconductores con el fin de modificar la aparición del estado superconductor como las propiedades del estado normal, y discriminar así cuáles son los parámetros relevantes que debieran ser tenidos en cuenta para la formulación de una teoría sobre el estado superconductor en estos materiales. Esto se llevó a cabo mediante dos estrategias: * En la primera se modificó el dopaje “x” en la familia FeTe1-xSex (FTSe), con 0≤x≤1 y adicionalmente se incorporaron otros elementos químicos que deforman la estructura, utilizando el azufre (S) que tiene un radio iónico mucho menor que el teluro (Te) y el selenio (Se). De esta forma, se sintetizaron muestras cerámicas y en algunos casos monocristalinas de la familia FTSe así como de una nueva familia de superconductores FeTe1-x-ySexSy (FTSeS). Posteriormente, se realizaron las caracterizaciones estructurales mediante el uso de diferentes técnicas (EDX, SEM y difracción de Rayos X) y se estudiaron las propiedades eléctricas, magnéticas y superconductoras de ambas familias, buscando establecer correlaciones entre las mismas. En particular, en el caso de la familia FTSeS, se realizó el estudio de la influencia del desorden estructural producido al incorporar en el sitio del calcógeno átomos con distintos radios iónicos, pero sin modificar el nivel de dopaje del material. Se observó que el desorden tenía una clara influencia en las propiedades del transporte eléctrico y en el estado superconductor. * La segunda estrategia consistió en producir modificaciones estructurales sin introducir cambios químicos, mediante la aplicación de presiones externas. Para ello, en el caso específico de la familia FTSe, se enfocó el estudio de la resistividad en un rango de temperaturas de 4 K a 300 K y bajo presiones de hasta 15 GPa, analizando particularmente el comportamiento de la Tc con la presión externa aplicada. Se observó que en las muestras que componen este sistema, la Tc alcanza un máximo en una cierta presión y luego se deprime. Sorprendentemente, para una de las muestras se logró medir la reemergencia de la fase superconductora. Estos resultados se interpretaron gracias a un modelo fenomenológico que permitió relacionar la Tc con las propiedades estructurales de las muestras. El modelo permite predecir la evolución de ciertos parámetros estructurales (como el ángulo entre ligaduras y la distancia al anión) cuando se aplican altas presiones, y correlacionarlos con las propiedades superconductoras, a partir de un nuevo parámetro de control, dependiente de la regularidad de los octaedros Fe-calcógeno que conforman la estructura, y cuyo origen microscópico está aún en discusión. Para ahondar en el estudio del diagrama de fases de la familia FTSe, se analizaron las propiedades de transporte en todo el rango de temperatura al variar la presión aplicada, poniéndose en evidencia la aparición de regiones del tipo líquido de Fermi y no-líquido de Fermi asociadas a la evolución de las interacciones electrónicas en un entorno de fluctuaciones magnéticas. Para el rango de presiones donde se obtiene la Tc máxima, se observaron evidencias de la proximidad de un punto crítico cuántico. Adicionalmente, se extendió el estudio del transporte eléctrico bajo presión al calcogenuro superconductor GaTa4Se8 (GTS). Este compuesto es uno de los ejemplos más sencillos de aislante de Mott, cuyas fuertes correlaciones electrónicas determinan su baja conductividad. En particular el estudio se centró en develar las características de la transición metal-aislante del GTS, que puede inducirse bajo presión. Estudios teóricos de los años ‘90 habían predicho que esta transición, para un aislante de Mott, debía ser de primer orden, pero hasta la fecha no se había podido encontrar un sistema que la mostrara claramente. De esta forma, se estudió la dependencia de la resistividad con la temperatura bajo presión, observando la fase aislante/metálica para presiones por debajo/arriba de una cierta presión crítica (3.5 GPa), determinándose, por primera vez, su condición de transición de primer orden, manifestada por una histéresis en la resistencia en un cierto rango de temperatura y presión. Finalmente, en cuanto a desarrollos experimentales, con el fin de poder realizar estudios de propiedades magnéticas bajo presión en un rango de 2 K a 300 K, aplicando campos magnéticos de hasta 7 T, se diseñó y construyó una celda de presión hidrostática que fuera compatible con el entorno experimental que provee un magnetómetro de tipo SQUID. En forma preliminar, se lograron medir las transiciones superconductoras de algunos materiales (Pb, Nb0.4Zr0.6, Hg1223) con señales magnéticas bajas, del orden de los 10-5 emu, y cuya evolución con la presión indicó la obtención de presiones del orden de 2 GPa.

Abstract:
Recently , a new type of superconductor was discovered in the iron pnictides system, ReFeAsO (Re: rare earth), when it’s dopped by chemical substitution on the Re or in the O site . These compounds are a new class of superconductors with high critical temperature (Tc). Other studies showed the existence of more superconducting families of iron pnictides, like AeFe2As2 (Ae: Ca, Sr, Ba), AFeAs (A: Li, Na) and a related family of superconductors, the iron chalcogenides, which FeSe and FeTe1-xSex , are the most representatives compounds. This system has the simplest structure among the Fe-based superconductors because they are formed just with two layers of Fe and Se/Te. There are many theories about the mechanism of superconductivity in cuprates with high critical temperature (Tc) but no consensus between them. Thus, this new type of superconductors with high Tc, the iron arsenide or iron chalcogenides, could bring new approaches to help understand additional aspects of superconductivity in cuprates or unveil a new type of superconductivity. In this PhD Thesis, we focus in this train of thought, introducing structural deformations in chalcogenide superconductors in order to modify the appearance of the superconducting state and also the normal state properties. Therefore, the idea is to identify the parameters that are relevant for a new theory formulation about superconductivity in these materials. To achieve this objective we use two strategies: * In the first one, we modify “x” doping in the family compound of FeTe1-xSex (FTSe), with 0≤x≤1, and additionally, we incorporate others chemical elements, which deform the structure. We use sulfur (S), which ionic radius is much smaller than in the case of tellurium (Te) and selenium (Se). Hence, we synthesize ceramics samples and, in some cases, single crystals of the FTSe family, as well as a new family of superconductors FeTe1-x-ySexSy (FTSeS). Subsequently, we characterize their structural parameters by using different techniques (EDX, SEM, x-ray diffraction) and we study electrical, magnetic and superconducting properties in both families, aiming to find correlations between them. In particular, in the case of FTSeS, we study the influence of structural disorder, produced by the incorporation of different ionic radius in the chalcogenide site, but without modification of the doping level of the material. We observed that disorder had a marked influence in the electrical transport properties and on superconductor state. * The second strategy consisted in producing structural modifications without introducing chemical changes, by applying external pressures. For this objective, we studied resistivity in a range of temperatures of 4 K to 300 K and under pressures up to 15 GPa for the family FTSe. In particular, we analyzed the Tc behavior by applying high pressure. We observed that Tc reached a maximum for a certain pressure and then, it decreases with increasing pressure. Surprisingly, for a particular composition, we measured reemergence of a superconducting phase. We interpreted these results with a phenomenological model, which links Tc with structural parameters. The model can predict structural changes in certain parameters (such as the angle between bonds and anion height) when high pressures are applied and it correlates with superconducting properties, using a new control parameter, which depends on the regularity of Fe-chalcogen octahedra that form the structure and whose microscopic origin is still under discussion. To deepen in phase diagram studies of the FTSe family, we investigated the transport properties in the whole range of temperature by varying the pressure. This study evidenced the appearance of regions, like Fermi liquid and non-Fermi Fermi liquid, associated with the evolution of electronic interactions in an environment of magnetic fluctuations. In the pressure range where Tc reaches its maximum value, we observed evidences of the proximity of a quantum critical point. In addition, we extended the transport studies under pressure to the chalcogen superconductor GaTa4Se8 (GTS). This compound is one of the simplest examples of Mott insulator, where its strong electrons correlation determines its low conductivity. In particular, we focus the research to reveal the characteristics of the metal-insulator transition GTS, which can be induced under pressure. Theoretical studies in the 90’s had predicted that this transition, for a Mott insulator, should be of first order, but to date no experimental evidences were observed. Thus, we examined the dependence of resistivity with temperature under pressure, by observing insulator / metal phases for pressures below / above a certain critical pressure (3.5 GPa). This allowed us to determine, for the first time, its transition status of first order, manifested by an hysteresis in the resistance in a certain range of temperature and pressure. Finally, in relation to experimental development and in order to perform studies of magnetic properties under pressure in a range of 2 K to 300 K by applying magnetic fields up to 7 T, we designed and constructed an hydrostatic pressure cell which is compatible with the experimental setting of a magnetometer type SQUID. Preliminarily, we achieved to measure the superconducting transitions of some materials (Pb, Nb0.4Zr0.6, Hg1223) with a low magnetic signals, of the order of 10-5 emu, and whose evolution with pressures, seems to indicate that we produce pressures of about 2 GPa.

"Efectos de la radiación X neonatal sobre el hipocampo de rata. Estrategias de neuroprotección" (2013). Caceres, Lucila Guadalupe. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La radioterapia es un tratamiento utilizado en humanos como herramienta para eliminar células tumorales mediante el uso de radiaciones ionizantes; sin embargo, éstas también puede dañar tejidos sanos debido a la inducción de estrés oxidativo. Dada la alta radiosensibilidad del Sistema Nervioso Central en desarrollo, el objetivo del presente trabajo fue profundizar en el estudio de sus efectos sobre el hipocampo de animales jóvenes expuestos en el período neonatal. Más aún, el esclarecimiento del mecanismo de acción de la radiación ionizante podría permitir proponer intervenciones terapéuticas que prevengan sus efectos, siendo el 17β-estradiol una herramienta ideal por poseer múltiples mecanismos de acción neuroprotectora. Los resultados encontrados sugieren que los cambios observados en la memoria asociativa a P30 se deberían a modificaciones en el hipocampo a nivel molecular e histológico, siendo el sistema GABAérgico uno de los componentes afectados. Asimismo, la expresión de estas alteraciones en el animal joven ocurriría debido a cambios en la PKCβ1 a P15. Por otro lado, el tratamiento con estradiol fue capaz de prevenir la mayoría de los cambios inducidos por la radiación, permitiendo postular que ejercería su acción neuroprotectora tanto a través de un mecanismo antioxidante como de uno mediado por receptor. Por consiguiente, la vulnerabilidad del hipocampo frente a las radiaciones ionizantes podría prevenirse mediante el uso de fármacos que actúen mediante mecanismos semejantes al estradiol.

Abstract:
Radiation therapy is a widely used tool to kill tumor cells in humans through the use of ionizing radiations. Unfortunately, they can also damage healthy tissue by the induction of oxidative stress. Due to the high radiosensitivity of developing Central Nervous System, the aim of the present work was to search more comprehensively about its effects on the hippocampus of young animals exposed to radiation in the neonatal period. Indeed, the elucidation of the action mechanism of radiation would allow proposing therapeutic interventions to prevent its effects, being 17β -estradiol an ideal tool due to its multiple mechanisms of neuroprotection. Results obtained in the present work suggest that the changes observed in the associative memory at P30 could be related to hippocampal changes at the molecular and histological level, being the GABAergic system one of the components affected by the radiation. Furthermore, the expression of these alterations in the youth would occur due to changes in the PKCβ1 at P15. On the other hand, the treatment with estradiol was able to prevent most of the radiation-induced changes, allowing us to postulate that both an antioxidant and a receptor-mediated mechanism might underlie its neuroprotective action. Accordingly, the vulnerability of the hippocampus to ionizing radiation could be prevented by the use of drugs that exert similar neuroprotection mechanisms than 17β-estradiol.

"Efectos de la radiación ultravioleta sobre las interacciones entre zooplancton e ictioplancton en lagos patagónicos" (2004). Rocco, Vanina E.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Esta tesis investiga los efectos de la radiación ultravioleta sobre organismos acuáticos. En particular se estudiaron los efectos sobre el zooplancton, sobre sus principales depredadores, las larvas de peces, y sobre la interacción entre presa y depredador. Este trabajo se realizó en distintos ambientes y diferentes escalas. Los ambientes incluyeron varios lagos del Noroeste Patagónico y la Península Antártica. Las ecalas variaron desde experimento de laboratorio hasta muestreos de campo. Los resultados indican que la radiación ultravioleta tiene efectos negativos, tanto sobre el zooplancton, como sobre sus depredadores. Dichos efectos son claramente dependientes de la dosis a la que los organismos son expuestos, y por lo tanto, varían con la profundidad y la transparencia de cada ambiente en particular. Se anaizó también las distintas estrategias utilizadas por los organismos para contrarrestar los efectos negativos de la RUV. Los resultados sugieren fuertemente que dichas estrategia están condicionadas por el ambiente físico y el entorno ecológico. Por ejemplo, en ambientes profundos, como los grandes lagos pedemontanos Patagónicos,el zooplancton puede encontrar refugio en profundidad durante el verano. Por el contrario en ambientes menos profundos, muchos organismos recurren a otro tipo de estrategias, tales como la fotorrespiración mediante la acumulación de ompuestos capaces de bloquear la radiación, o la foto-reparación, a través de mecanismos enzimáticos. La posibilidad de foto-reparación parece estar muy limitada en ambientes fríos, presumiblemente debido a la baja eficiencia de la enzima fotoliasa a baja temperatura. Por otra parte, el empleo de compuestos fotoprotectores parece estar condicionado, al menos en parte, por la presencia de depredadores visuales, como los estadios juveniles de peces. Se investigó también la posibilidad de que los peces pudieran utilizar las longitudes de onda dentro del espectro ultravioleta para localizar a sus presas. Estos estudios se llevaron a cabo con juveniles de trucha arco iris, los cuales se sabe que cuentan con receptores de UV en sus retinas. Sin embargo, nuestros experimentos produjeron resultados negativos. La falta de utilización de longitudes de onda dentro del UV para la localización de presas no resulta llamativa, dado que en ambientes transparentes, tanto los peces, como sus presas evitan las aguas superficiales, refugiandose en aguas relativamente profundas donde no penetra la RUV.

Abstract:
In this work, we investigated the effects of ultraviolet radiation on aquatic organisms. Particulary, we studied the effects on zooplankton and their main predators, namely larval fish, as well as on the interactions between preys and predators. This work was performed on various environments and at different scales. The study sites included a number of lakes located in North-western Patagonia and the Antartic Peninsula. The scales ranged from laboratory experiments to whole-lake field samplings. The results show that ultraviolet radiation has negative effects on both zooplankton and their predators. Such effects are remarkably dependant on the doses to which the organisms are exposed, and consequently vary with lake depth and water transparency. The study also considered the different counteracting strategies used by the organisms to cope with high ultraviolet radiation levels. The results suggest that such strategies are strongly constrained by the physical environment and the ecological assembly. For example, in the large lakes typical of low elevation valleys of Patagonia the zooplankton appears to seek a deep refuge during summertime. In contrast, in more shallow lakes, many organisms use other strategies, such as photoprotection through the accumulation of sun blocking compounds, or photorecovery through photoenzymatic repair. In Turn, the extent of photorecovery appears to be very limited in cold habitats, presumably because of the low efficiency of the photolyase enzyme at low temperatures. On the other hand, the use of photoprotective compounds appears to be constrained by the presence of visual predators, such as the early life stages of fish. Qe also explored the possibility that fish predators could take advantage for ultraviolet radiation wavelength to locate their preys. These experiments were conducted using rainbow trout juveniles, which are known to posses retinal UV detectors. However, our investigation produced negative results. The lack of reliance on UV wavelength to locate preys is not comletely unexpected, given that in transparent habitats both fish and their preys avoid the surface waters and refuge at depth were UV radiation has already been depleted by the absorption of the water.

"Efectos de la radiación ultravioleta- B solar sobre Gunnera magellanica, una planta nativa de Tierra del Fuego" (2003). Giordano, Carla Valeria. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los ecosistemas de Tierra del Fuego se encuentran sometidos a aumentos estacionales de radiación ultravioleta-B (UV-B: 280-315 nm) durante la primavera, debido al pasaje del agujero de ozono sobre la región. En la presente Tesis estudiamos los efectos del UV-B y UV-A (315-400 nm) solares sobre el crecimiento, la generación de daño molecular (dímeros en el ADN y daño oxidativo componentes celulares), y la inducción de respuestas de aclimatación (reparación de dímeros del ADN y acumulación de compuestos fotoprotectores foliares), en la flora nativa de Tierra del Fuego. Para ello utilizamos la herbácea perenne Gunnera magellanica como modelo de estudio. Realizamos ensayos con dos acercamientos experimentales: exclusión de distintas porciones del UV solar en el campo mediante el uso de filtros plásticos, y utilización de dosis controladas de UV-B suministradas con lámparas en invernáculo. En los experimentos a campo encontramos un efecto inhibitorio del UV-B en la expansión foliar de G. magellanica, en forma consistente durante tres estaciones de crecimiento. En relación a las respuestas de aclimatación al UV, la fotorreparación fué el principal mecanismo de remoción de dímeros de pirimidina del tipo ciclobutano (CPDs) en esta especie. La capacidad de fotorreparación fué inducida por UV, y la velocidad varió en función de la temperatura, siendo mayor a 25 °C que 8 °C. La velocidad de reparación de CPDs en G. magellanica fué menor que la presentada por otras especies vegetales, particularmente al compararla con A. thaliana en idénticas condiciones experimentales. El UV solar no reguló los niveles de compuestos fotoprotectores foliares (flavonoides) ni la masa foliar específica en esta especie. El principal componente de la radiación solar generador de CPDs fué el UV-B. Sin embargo, el contenido de CPDs no varió durante el día acompañando las fluctuaciones naturales de UV-B, sino que fué levemente menor al mediodía que al atardecer y al amanecer. Este perfil diario de CPDs puede explicarse al considerar la fluctuación diaria de factores ambientales que favorecen la reparación de los dímeros (radiación UV-A, visible, temperatura). En los experimentos realizados en invemáculo, encontramos que todas las dosis de UV-B ensayadas (correspondientes a dosis de UV-B bajas, medias y altas registradas normalmente en Ushuaia durante la primavera) redujeron la expansión foliar de G. magellanica. Esta reducción en el crecimiento estuvo acompañada por aumentos en el contenido de CPDs (en forma dependiente de la dosis de UV-B). La mayor dosis de UV-B ensayada produjo un estado de estrés oxidativo transitorio (evaluado mediante la relación entre el contenido de radical ascorbilo y ácido ascórbico), que fué rápidamente controlado por un aumento en los niveles de ascorbato. El daño celular que mejor explicó la inhibición en la expansión foliar fue la acumulación de CPDs en el ADN, pero no el nivel de peroxidación lipídica. En conjunto, nuestros resultados indican que los niveles actuales de UV-B tienen un impacto principalmente negativo sobre G. magellanica, que se ve reflejado en la reducción del crecimiento. Las modestas velocidades de fotorreparación a temperaturas relativamente elevadas (y bajas a temperaturas menores), junto con la falta de inducción en los compuestos fotoprotectores foliares, indicarían que futuros aumentos del UV-B (debidos a la erosión de la capa de ozono) producirían mayormente efectos negativos en G. magellanica, sin la inducción concomitante de respuestas de protección eficientes. La reducción de la expansión foliar inducida por UV-B, estuvo acompañada por daño al ADN en la forma de CPDs, pero no por daño oxidativo a componentes celulares (por ejemplo, lípidos de membrana). Esto sugiere que el daño al ADN está implicado en los procesos que llevan a la reducción de la expansión foliar causada por el UV-B en esta especie.

Abstract:
The ecosystems in Tierra del Fuego are seasonally subjected to elevated ultraviolet-B radiation (UV-B: 280-315 nm) during the spring, due to the passage of the ozone hole over the region. In the present Thesis, we studied the effects of solar UV-B and UV-A (315-400 nm) on growth, production of molecular damage (dimers in DNA and oxidative damage to cellular components), and induction of acclimation responses (dimer repair in DNA and accumulation of photoprotective compounds in leaves) in native plants of Tierra del Fuego. We used the perennial herb Gunnera magellanica as a model organism. We carried out two different experimental approaches: exclusion of different portions of solar UV with plastic filters in the field, and exposure of plants to different UV-B doses using lamps inside a greenhouse. In the field experiments, we found an inhibitory effect of UV-B radiation on G. magellanica leaf expansion, which was consistently detected throughout three growing seasons. Regarding acclimation responses to UV, photorrepair was the main pathway of cyclobutane pyrimidine dimer (CPD) removal in this species. Photorepair was slightly up regulated in plants exposed to solar UV. CPD photorepair was higher at 25 °C than at 8 °C. The rates of DNA repair in G. magellanica were modest compared to published values for other species, and were lower than those of Arabidopsis thaliana plants, grown under equivalent experimental conditions. The accumulation of UV-B absorbing compounds in leaves and the specific leaf mass were not affected by solar UV. UV-B was the main component of solar radiation that induced CPD formation in G. magellanica leaves. However, CPD levels did not fluctuate during the day tracking UV-B radiation, and were lower at noon than at dawn or in the morning. This daily CPD profile might be a consequence of the diurnal fluctuation of enviromental factors that promote CPD removal (UV-A, visible radiation, temperature). In the greenhouse experiments, realistic UV-B doses inhibited G. magellanica leaf expansion. This growth reduction was accompanied by high levels of CPDs. The higher UV-B dose induced oxidative stress (evaluated using the ascorbyl radical /ascorbate index), which was rapidly controlled by increments in ascorbate levels. The inhibition of leaf expansion correlated well with the CPD content, but not with levels of lipid peroxidation. Taken together, our results indicate that present-day levels of solar UV-B have mainly negative impacts on G. magellanica, with detrimental effects on growth. Modest photorepair rates at relatively high temperatures (and even lower at low temperatures), together with the lack of induction of UV-screening compounds in leaves, suggest that future increments in UV-B levels (caused by ozone reduction) would produce mainly damaging effects in G. magellanica, without sufficient enhancement of protective mechanisms. Inhibition of leaf expansion was well correlated with CPD levels, but not with oxidative damage to cellular components (such as membrane lipids), which sugests that DNA damage is involved in the inhibition of leaf expansion induced by UV-B in this species.

"Efectos de la solvatación sobre procesos reactivos en medios acuosos no convencionales" (1997). Re, Mario. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo, hemos estudiado aspectos de equilibrio y dinámicos relacionados con procesos reactivos que toman lugar en medios acuosos bajo condiciones bien diferenciadas de las ambientes mediante técnicas de dinámica molecular. En particular, se investigó la respuesta dieléctrica dinámica de estados supercríticos del modelo de carga puntual simple a lo largo de la isoterma correspondiente a T=645 K, cubriendo el intervalo de densidades que va desde 1 g cmˉ³ hasta 0,3 g cmˉ³. Hemos encontrado que la respuesta global del agua en condiciones supercríticas y alta densidad es un orden de magnitud más rápida que la hallada a T=298 K, volviéndose gradualmente más lenta a medida que se consideran densidades menores. En todos los casos hemos verificado que la respuesta presenta un carácter bimodal caracterizado a tiempos cortos por un breve régimen inercial, seguido por una segunda etapa difusional mucho más lenta. Asimismo, hemos verificado la validez de teorías lineales para predecir la respuesta de no-equilibrio y hemos realizado un análisis de la solvatación basado en una aproximación armónica para la dinámica. Esto último, nos ha permitido corroborar el marcado carácter rotacional de la respuesta de solvatación. Como primera aproximación para abordar el estudio de procesos reactivos en medios de bajísima densidad y para investigar los efectos de la microsolvatación sobre procesos reactivos, hemos considerado también una reacción modelo de substución nucleofilica del tipo Clˉ+CH3Cl→ClCH3+Clˉ en nanoagregados acuosos líquidos conteniendo 6, 16 y 32 moléculas de agua. También en este caso, hemos analizado aspectos de equilibrio y dinámicos. Los efectos de microsolvatación inducen importantes aumentos en la barrera de energía libre aun en agregados conteniendo sólo 6 moléculas de solvente. Se investigaron correlaciones espaciales y orientacionales que caracterizan a las estructuras de solvatación. En los estados de reactivos/productos el ion Clˉ se presenta totalmente solvatado mientras que el ClCH3 permanece en la superficie de los agregados; en el estado de transición, el complejo se encuentra en la superficie y se orienta tangencialmente. Hemos considerado además la relajación de las estructuras de solvatación mientras que el sistema evoluciona desde el estado de transición hacia el estado estable de productos. Nuetras simulaciones muestran que el proceso reactivo evoluciona mediante una serie de movimientos altamente coordinados entre los diferentes componenentes del complejo reaccionante. Finalmente, hemos estimado las constantes de velocidad y analizado los mecanismos de relajación energética para agregados de diferentes tamaño.

Abstract:
We present equilibrium and dynamical aspects of reactive processes taking place in different aqueous environments well differentiated from the usual room temperature conditions using Molecular Dynamics techniques. In particular, we have investigated the dielectric response of supercritical states of the SPC model along the T=645 K isotherm, covering the density interval spanning from 1 g cmˉ³ down to 0.3 g cmˉ³ . Compared to room temperature conditions, the global response at supercritical conditions is one order of magnitud faster and becomes progressively slower as we consider smaller densities. In all cases, we have verified that the solvent response presents a bimodal behavior characterized by an initial brief inertial regime followed by a second diffusional stage much slower that dominates the response at longer times. We have also tested the validity of linear response theories to predict the non-equilibrium response and a recent model based on a harmonic approximation for the dynamics of the solvent. Our results show that in all cases, the solvation response is dominated by rotational motions. To gain additional insight about reactive processes at very low densities and to further investigate the effects of microsolvation upon reactive processes, we have also considered the model reaction Clˉ+CH3Cl→ClCH3+Clˉ in nanoclusters containing 6, 16 and 32 water molecules. Equilibrium and dynamical aspects of the reactive process were investigated. Solvation effects lead to significant enhancements of the computed free energy barriers even in aggregates containing only six water molecules. The equilibrium spatial and orientational correlations describing the changes in solvation structure along the reaction path are also presented. The reactive/ product states are characterized by a fully solvated Clˉ embedded within the cluster, while the ClCH3 remains on the surface; at the transition state, the complex lies at the cluster surface adopting a linear geometry tangential to the cluster boundary. We have also monitored the time relaxation of the solvation structure as the system evolves from the transition to the stable product state. Our results show that the reaction proceeds by a series of highly coordinated motions involving the different components of the reagent. Finally, estimates for the rate constantes are computed and mechanisms for energy relaxations in cluster of different sizes are investigated.

"Efectos de los plaguicidas organofosforados sobre la expresión génica de embriones de Rhinella arenarum. Mecanismos de acción y vías de señalización" (2011). Sotomayor, Verónica. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Nuestro laboratorio ha demostrado previamente los efectos adversos de plaguicidas organofosforados (OF) en estadios embrionarios y larvales de Rhinella arenarum . Estudiamos aquí los efectos de la exposición a distintas concentraciones del OF clorpirifos (Clp), focalizándonos a nivel molecular. Se determinó una CL50 mayor para brote caudal (BC) respecto de la CL50 obtenida para opérculo completo, causando malformaciones de manera dosis- dependiente. En concentraciones subletales tendió a disminuir las actividades de catalasa y glutatión S-transferasa, incrementar el contenido endógeno de GSH y la actividad específica de acetilcolinesterasa en embriones en BC. La ornitina descarboxilasa disminuyeron pero los niveles de poliaminas (PAs) endógenas se mantuvieron constantes. La unión de AP-1 al ADN también se encontró disminuida en embriones en BC expuestos y se observaron alteraciones en los patrones de fosforilación de proteínas nucleares, demostrándose posteriormente que c-Fos disminuye en embriones en BC expuestos a 2 mg/l, a diferencia de lo que observamos en GT. Por su parte c-Jun también se vio disminuida en embriones expuestos en BC, así como su forma fosforilada. Los niveles de ERK 1/2 disminuyeron frente a la exposición subletal al OF pero JNK2 aumentó, lo que indicaría que la regulación de c-Jun se estaría dando por la vía de ERK. Esto sugiere que AP-1, actuando al menos como heterodímero (c-Fos-c-Jun), estaría viendo afectada su unión al sitio TRE del ADN debido al OF. El estrés oxidativo es sugerido por los niveles de GSH endógeno y las actividades de catalasa y GST luego de la exposición al OF, mientras que una respuesta aún más temprana se observa en la regulación negativa de la unión de AP-1 al ADN y en la biosíntesis de PAs, reflejando otros mecanismos, probablemente relacionados a retraso del desarrollo y a teratogénesis.

Abstract:
Our laboratory has previously showed the adverse effects of organophosphorus pesticides (OP) in several embryonic stages and larvae of Rhinella arenarum. We study here the effects caused by the exposure to several concentrations of chlorpyrifos, analyzing specifically the molecular level. We obtained an LC50 much higher in embryos at tailbud stage (TB) in respect with the LC50 obtained for embryos at complete operculum, observing malformations in a time-dose dependent manner. The pesticide, at sublethal concentrations, tended to diminish catalase and glutathion S-transferase ́s specific activities, increase the levels of endogenous GSH and acetylcholinesterase ́s specific activity in embryos at TB stage. The ornithine decarboxilase ́s specific activity was decreased and the levels of endogenous polyamines remained stable. AP-1 binding to the DNA, in treated embryos at TB stage, were diminished and we observed altered patterns in the phosphorylation status of total proteins, showing later that c-Fos protein is decreased in exposed embryos at TB but increased in late gastrula. The c-Jun protein and its phosphorilated form, p-c-Jun, was found to be decreased after exposure to the OP. The level of ERK 1/2 diminished in exposed embryos but JNK2 increased, thus indicating that c-Jun regulation would be due to the ERK 1/2 pathway. This suggests that AP-1 (acting at least as an heterodimer c- Jun-c-Fos) binding to the TRE site of the DNA would be affected by the OP. The oxidative stress is suggested by the levels of endogenous GSH and the activities of catalase and GST, after the exposure to the OP; while an even earlier response is observed with the negative regulation of the AP-1 binding to the DNA and the biosynthetic pathway of polyamines, thus reflecting other mechanism of action, probably related to a delayed development and theratogenesis.

"Efectos de metales pesados sobre la síntesis y secreción hormonal en el cangrejo de estuario Chasmagnathus granulatus, DANA 1851 (Decapoda, Varunidae)" (2004). Medesani, Daniel Alberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo se evaluó en el cangrejo de estuario Chasmagnathus granulatus el posible efecto de los metales pesados cadmio y cobre, a concentraciones subletales, sobre el control hormonal de la glucemia y de la reproducción. La exposición crónica de cangrejos intactos a ambos metales, provocó un severo y significativo descenso de la glucemia. Se observó una tipica relación dosis-respuesta al exponer estos animales a diferentes concentraciones de cadmio y cobre, con una mayor sensibilidad a este último metal. El bajo nivel de glucosa detectado en los animales intactos expuestos, fue similar al registrado en animales ablacionados de sus pedúnculos oculares, lo cuál está indicando un posible efecto inhibitorio de ambos metales sobre la secreción y/o sintesis de la hormona hiperglucemiante, CHH, que se produce y secreta en tales pedúnculos. La ausencia de diferencias entre los animales ablacionados controles (sin metal) y ablacionados expuestos a cada metal, está indicando por otra parte que no existe un efecto directo de los tóxicos sobre el nivel basal de glucosa (no regulado por CHH peduncular). Cuando el extracto de pedúnculo ocular de cangrejos previamente expuestos a cadmio o cobre se inyectó en animales intactos, provocó un incremento significativo de la glucemia similar al que provocó la inyección de extractos de animales controles, indicando que no existe un efecto de los tóxicos sobre el contenido de CHH en los pedúnculos oculares, lo que sugiere a su vez que la síntesis hormonal no se veria afectada. Por otra parte, la inyección de CHH purificada de Cancer pagurus, sobre animales intactos expuestos crónicamente a los tóxicos, provocó la reversión del efecto hipoglucémico causado por los metales. Los animales expuestos a cadmio alcanzaron un nivel de glucemia elevado y similar al registrado en cangrejos inyectados con CHH pero no expuestos, demostrando que éste metal no interfiere con la interacción hormona-receptor y/o la transducción de la señal hormonal en los tejidos blanco. Los animales expuestos a cobre incrementaron también la glucemia pero alcanzando un nivel similar al medido en cangrejos no expuestos inyectados con solución salina, lo cuál indica que el cobre afectaría en alguna medida la interacción hormona-receptor, y/o algún paso en la transducción de la señal hormonal máxima. En consecuencia, los resultados obtenidos en esta primera parte de la Tesis apoyan la Hipótesis de que la hipoglucemia observada en animales intactos por exposición a los metales estudiados, se debe a una inhibición que esos metales ejercen sobre la secreción de CHH por parte del centro neuroendocrino ubicado en los pedúnculos oculares, sumado, para el caso de cobre en particular, a una interferencia con los efectos hormonales a nivel de órganos blanco. Con respecto a los ensayos sobre el control de la reproducción, se realizaron ensayos in vivo (14 días) e in vitro (24 horas), con hembras adultas de C. granulatus. En los ensayos in vivo, no se observaron cambios significativos en el indice gonadosomático (IG) de hembras intactas de sus pedúnculos oculares expuestas a cadmio o cobre, mientras que ambos metales provocaron un descenso significativo en el IG de los cangrejos ablacionados. En función de estos resultados, pusimos a prueba la Hipótesis de que esos metales estén interfiriendo con la via estimuladora extrapeduncular del crecimiento gonadal. Para esto, se realizaron ensayos in vitro coincubando ovario con ganglio torácico, fuente de la hormona estimuladora gonadal; como resultado, no se detectaron diferencias entre los grupos control y expuestos a los metales pesados. Sin embargo, cuando el ovario fue incubado con metil farnesoato o l7-hidroxiprogesterona, ambas hormonas estimuladoras del crecimiento gonadal, la incorporación de leucina tritiada fue significativamente menor en los grupos expuestos, corroborando la Hipótesis planteada en términos de una interferencia de cadmio y cobre con los mecanismos de transducción de tales hormonas estimulatorias a nivel gonadal. Por otro lado, ovarios coincubados con tejido peduncular y expuestos a ambos metales pesados, mostraron una incorporación de leucina tritiada significativamente mayor que en los controles (ovario y pedúnculos, pero sin metales en el medio de incubación), sugiriendo un efecto inhibitorio de los tóxicos ensayados sobre la secreción de la hormona inhibidora gonadal (GIH) desde los pedúnculos oculares. La interferencia de cadmio y cobre con los mecanismos de transducción de GIH a nivel ovárico fue descartada como hipótesis alternativa, ya que el agregado de extracto de pedúnculo ocular al medio de incubación fue capaz de revertir por completo el efecto causado por cada tóxico. Por último, el conjunto de resultados obtenidos in vitro con ambos metales, i.e., interferencia con el efecto de hormonas estimulantes (metil famesoato y l7-hidroxiprogesterona) e inhibición de la secreción de la hormona inhibibora GIH, permiten explicar el similar crecimiento gonadal observado en animales intactos, entre controles y expuestos a los metales.

Abstract:
The present study was aimed at studying the effect of chronic exposure to cadmium and cooper on hormonal control of CHH-mediated glycemia and of reproduction in the estuarine crab Chasmagnathus granulatus. For both heavy metals assayed, the exposed male intact crabs showed a significant (p<0.05) decrease of glycemia, as compared to the intact crabs in clean water. The clear hypoglycemia produced by both cadmium and copper was in fact verified in intact crabs exposed to a wider concentration range. A typical dose-response relationship was observed for both heavy metals; crabs showed a higher sensitivity to copper than to cadmium, according to the concentrations that produced a significant drop of glycemia, with respect to the control. This response was consistent with the lower acute LC50 value for copper than for cadmium, although the difference in the chronic toxicity on glycemia between both heavy metals (a factor of ╧ 2) was not as high as the difference in lethal acute toxicity (a factor of 5). A slow glucose level in exposed intact crabs is similar to that of the control and heavy metals-exposed eyestalkless crabs. Since no differences (p>0.05) were detected in any case between control and heavy metals-exposed eyestalkless crabs, no direct effect of the assayed pollutants on basal glycemia levels (not regulated by CHH) seems to have occurred. The very significant differences (p<0.01) detected between the group injected with saline solution and the group injected with eyestalk extract from crabs in clean water, clearly show the high hyperglycemic effects of the CHH normally present in the sinus glands of the control animals. The group injected with eyestalk extract from crabs previously exposed to cadmium or copper showed the same level of glycemia as that of the respective groups, indicating that no apparent effect of either cadmium or copper in the content of CHH in the eyestalks seems to have occurred. Although, the hypoglycemia produced by both metals was probably due to inhibition of CHH secretion, any consequent accumulation of this hormone in the sinus gland was not apparent, perhaps there was a compensatory decreased rate of CHH synthesis in the exposed crabs. The regulatory mechanisms of CHH turnover in the neurons that synthesize CHH could also be maintaining a steady state of CHH availability, i.e., reducing synthesis when secretion of the hormone decreases; however, the possibility of some interaction of cadmium or copper with CHH receptors in several tissues should not be discarded for explaining the hypoglycemic responses. We analyzed the effect of different inyected dosis of purified CHH of Cancer pagurus, onto heavy metals-exposed intact crabs. The inyection produce a reversion in the hypoglycemic effect generated when it was previously exposed to the heavy metals. This effect was dosis independent. In the cadmium-exposed crabs, a similar glucose level to that of the control crabs also injected with CHH was attained, demonstrating that this heavy metal is not interfering with hormonal reception and/or transduction in the target tissues. ln the case of the copper-exposed crabs, the increase of glycemia after CHH injection was less than in the control crabs injected with CHH, suggesting that some interference with hormonal transduction or with the enzymes involved in glucose mobilization could have occurred to some extent. The effects of cadmium and copper on the hormonal control of ovarian growth were evaluated on the same specie, by means of both in vivo (14 days exposure) and in vitro (24 h) assays. No significant (p>0.05) change of the gonadosomatic index was observed in the in vivo assays with intact females exposed to HM, while eyestalk-ablated exposed females showed significantly (p<0.05) lower GSI values than their respective controls. This latter result led us to consider the possibility that the HM interfered with extra-eyestalk hormones. ln this sense, no differences were noted between control and HM exposed groups after coincubating ovary with thoracic ganglion (the source of the gonad stimulating hormone). However, when ovary was incubated with methyl famesoate or l7-hydroxyprogesterone, ³H-leucine incorporation was significantly lower in the HM-exposed groups than in the controls, indicating a possible interference of cadmium and copper with the transduction pathway of those hormones. On the other hand, ovaries coincubated in vitro with eyestalk tissue (ET) and exposed to either HM, showed significantly higher ³H-leucine incorporation than did the controls, suggesting an inhibitory effect of the HM on the secretion of the gonad inhibiting hormone (GIH) from the ET. Interference by copper and cadmium with the transduction mechanisms of GIH at the ovarian level does not appear to be a viable hypothesis, because the addition of eyestalk extracts to the incubation medium reversed the effect caused by each HM.

"Efectos de nanoconfinamiento de agua en óxidos mesoporosos: de la simulación molecular al diseño y la síntesis de materiales" (2014-04-16). González Solveyra, Estefanía. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo de tesis se emplearon herramientas de simulación molecular clásica junto con distintas estrategias de síntesis y caracterización para explorar la relación entre nanoconfinamiento y propiedades de agua en materiales mesoporosos. Los óxidos mesoporosos son materiales que presentan poros monodispersos (2-50 nm) altamente ordenados y de elevada área específica (100-1000 m2/g). La precisión con que pueden controlarse las dimensiones, la interconectividad y la morfología de los poros en la escala nanométrica, da lugar a propiedades sumamente particulares, de interés en multitud de aplicaciones tecnológicas: (foto)catálisis, sorción, sensores, biomateriales, involucrando casi todas ellas la inteacción con H2O. En base a ello, se decidió investigar los aspectos físico-químicos del agua confinada en estos entornos, haciendo foco en fenómenos de equilibrio de fase (equilibrio líquido-vapor y sólido-líquido), estructura y transporte. Además de la motiva- ción tecnológica, estos sistemas son de interés desde el punto de vista fundamental, pues ofrecen un modelo donde estudiar los efectos del confinamiento en la nanoescala. Se emplearon en primer lugar herramientas de simulación molecular de distinta escala (Dinámica Molecular atomística y coarse-grained), caracterizando el comportamiento de agua confinada en matrices porosas de 1-8 nm de diámetro. De esta manera, fue posible describir, desde una perspectiva molecular, la estructura y dinámica del agua, sus propiedades ópticas, así como los diferentes mecanismos de llenado de los nanoporos y los fenómenos de histéresis. También se logró una descripción microscópica del equilibrio sólido-líquido en estos entornos altamente confinados. Se estudió la incidencia del radio del poro, la filicidad y la rugosidad de las paredes sobre los fenómenos mencionados y en particular sobre las isotermas de sorción. Asimismo, se recurrió a un esquema experimental para complementar los resultados computacionales. Los óxidos mesoporosos se sintetizaron en forma de películas delgadas y xerogeles mediante estrategias de síntesis sol-gel y procesos de autoensamblado inducido por evaporación, que combinan la polimerización del óxido inorgánico junto con el autoensamblado de moléculas anfifílicas, que actúan como agentes moldeantes del arreglo poroso. Para la caracterización estructural de los sistemas sintetizados se utilizaron diver- sas técnicas: TEM, SEM, SAXS-2D, GISAXS, XRR, WAXRD. Las propiedades de sorción de agua en mesoporos fueron investigadas en películas delgadas obtenidas por spin y dip coating, mediante Porosimetría Elipsométrica Ambiental y XRR. El aporte original de esta tesis reside en la complementación de técnicas experimentales avanzadas con herramientas de simulación computacional para atender cuestiones de gran interés para la comunidad experimental pero de difícil elucidación dadas las limitaciones de resolución espacio-temporales de las técnicas actuales. Esta estrategia dual constituye una vía extremadamente poderosa para la descripción de fenómenos físicos y químicos en estos sistemas.

Abstract:
In this thesis, classical molecular dynamics along with several synthesis and characterization techniques were employed to explore the relation between nanoconfinement and properties of water in mesoporous materials. Mesoporous oxides present highly ordered monodisperse pores (2-50 nm) and high surface area (100-1000 m2/g). The precision achieved in controlling pore dimensions, interconnectivity, and morphology in the nanometer range gives rise to unique properties with several technological applications, such as (photo) catalysis, sorption, sensors, biomaterials, all of which involve water interactions. Based on this fact, we decided to investigate the physical-chemical aspects of water confined in such environments, focusing on phase transitions phenomena (solid-liquid and liquid-vapor equilibria), structure and transport. Besides the technological motivations, these systems are also very interesting from a fundamental point of view, given that they offer a model in which to study confinement effects in the nanoscale. Firstly we employed molecular simulation techniques at different scales (atomistic and coarse-grained Molecular Dynamics) to characterize the behavior of water confined in porous matrices of 1-8 nm diameter. In his way, we were able to describe from a molecular perspective, water structure and dynamics, its optical properties as well as different filling mechanisms and hysteresis in the nanopores. We also achieved a microscopic description of the liquid-solid equilibrium in these highly confining environments. We study the effect of pore radius, hydrophilicity/hydrophobicity, and surface roughness on the mentioned phenomena, particularly on the sorption isotherms. We also resorted to an experimental scheme to encompass our computational findings. Mesoporous oxides were synthesized as thin films and xerogels by sol-gel reactions and evaporation-induced self-assembly processes, which combine inorganic oxide polymerization with the self-assembly of amphiphilic molecules that act as a template of the porous arrange. Structural characterization of the synthesized materials involved several techniques: TEM, SEM, SAXS-2D, GISAXS, XRR, WAXRD. Water sorption properties in thin films obtained by spin and dip-coating were investigated by Environmental Ellipsometric Porosimetry and XRR. The original contribution of this thesis lies in the complementation of state of the art experimental techniques with computational simulation tools to address issues of great deal of interest for the experimental community but difficult to elucidate given the temporal and spatial limitations of existing techniques. This dual strategy represents a very powerful scheme for the description of physical-chemical phenomena in these systems.

"Efectos de ondas de choque en el medio interestelar" (2013). Petriella, Alberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta Tesis, se estudian desde el punto de vista observacional algunos de los efectos que producen sobre el medio interestelar las ondas de choque asociadas con estrellas de gran masa en diferentes etapas de su vida. Se investiga la interacción de regiones HII, burbujas interestelares y remanentes de supernova con el entorno y se analiza la actividad de formación estelar en sus alrededores con el objetivo de establecer si son agentes disparadores del nacimiento de estrellas nuevas. A partir del estudio de la distribución del gas molecular alrededor de los remanentes de supernova G20.0-0.2 y G24.7+0.6, se encuentran nubes moleculares posiblemente afectadas por los frentes de choque y que presentan actividad de formación estelar. El estudio del medio interestelar alrededor de tres regiones HII (un complejo de regiones HII cercano al remanente de supernova G18.8+0.3, y las regiones HII N65 y G35.673-0.847) muestra la presencia de cáscaras de gas molecular barridas por sus frentes de choque y sobre las cuales se están formando estrellas. Por último, se halla evidencia de la interacción entre los vientos estelares de las estrellas LBV G24.73+0.69 y G26.47+0.02 en distintas etapas de su evolución y el gas molecular circundante. Esta investigación fue realizada analizando observaciones dedicadas de varias transiciones moleculares obtenidas con el Atacama Submillimeter Telescope Experiment (ASTE) y a través del procesamiento de observaciones de archivo no publicadas obtenidas con el telescopio espacial de rayos X Chandra y con el interferómetro en ondas de radio VLA. Estas observaciones se complementaron con datos de relevamientos públicos en las bandas de radio, infrarroja, milimétrica y submilimétrica del espectro.

Abstract:
In this Thesis, we study the effects on the interstellar medium of shock waves produced by massive stars during different stages of their evolution.We investigate the interaction between HII regions, interstellar bubbles, and supernova remnants and the surrounding medium and we analize the star forming activity to establish if they can trigger star formation around them. We study the distribution of the molecular gas around the supernova remnants G20.0-0.2 y G24.7+0.6 and we find molecular clouds probably shocked by the remnants. These clouds host star forming regions, which suggest a connection between the birth of the new stars and the expansion of the supernova remnants. We analyze the distribution of the interstellar medium around three HII regions (an HII region complex near the supernova remanant G18.8+0.3 and the HII regions N65 and G35.673-0.847) and we find shells of molecular material swept up by their front shocks. These shells show signs of star forming activity probably triggered by the expanding HII regions. Lastly, we find evidence of the interaction between the stellar winds of the LBV stars G24.73+0.69 y G26.47+0.02 and the surrounding molecular gas. The data used in this Thesis were obtained through dedicated observations of several molecular transitions with the Atacama Submillimeter Telescope Experiment (ASTE) and through the calibration of unpublished archival observations of the Chandra X-ray telescope and the VLA interferometer. Additional data were extracted from public surveys in the radio, infrared, millimeter and submillimeter bands.

"Efectos de solvatación en agregados supramoleculares" (2010). Pomata, Matías H.H.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la primera parte de esta tesis presentamos simulaciones de dinámica molecular sobre micelas inversas inmersas en ciclohexano. Consideramos tres interiores polares diferentes: agua (W), formamida (FM) y una mezcla equimolar de ambos solventes. En todos los casos, el surfactante utilizado fue bis(2-etilhexil)sulfoccinato de sodio (usualmente conocido como AOT). El radio inicial de las micelas fue deR ∼ 15 Å , mientras que los cocientes molares (w0=/) correspondientes fueronintermedios entre w0 = 4;3 para FM y w0 = 7 paraW. La forma global de las micelas se asemeja a elipsoidesdistorsionados, con una excentricidad media del orden de ∼ 0;75. Las correlaciones de densidadlocal dentro de las micelas muestran una solvatación preferencial de la especie iónica sodio por el agua,en contraposición con el comportamiento encontrado en mezclas equimolares en fase condensada. Comparadocon los resultados en fase condensada, los modos traslacionales y rotacionales de los solventesconfinados, exhiben una desaceleración importante, que se hace más notable en los movimientos rotacionales donde las escalas temporales características pueden ser hasta 50 veces más largas. también se discuten las modificaciones en la conectividad intramolecular, expresadas en términos del número medio de uniones hidrógeno y sus tiempos de vida media. En la segunda parte, presentamos resultados de simulaciones de dinámica molecular sobre sistemas de fructosa en solución, a concentraciones que llegan hasta 70 wt% (5 M). Encontramos que la red de uniones hidrógeno de las moléculas de fructosa se extiende con el aumento de la concentración de azúcar y forma un sistema estructuralmente heterogéneo alrededor y por arriba de una concentración 45 wt% (3 M), caracterizado por un dominio del soluto que se asemeja a un sistema percolado. La presencia de estos agregados en soluciones concentradas promueve la desaceleración de las dinámicas traslacionales, rotacionales y de las uniones hidrógeno, lo cual es típico en muchos ambientes biomoleculares. Como en el caso de la superficie de una proteína, los desórdenes topológico y energético de los agregados de azúcar contribuyen a la dinámica traslacional anómala. Sin embargo, a diferencia de lo observado en las cercanias de la superficie de una proteína, la relajación rotacional también se ve impedida por el desorden topológico creado por el conglomerado de azúcar en soluciones concentradas. Para completar el análisis de esta última parte de la tesis, obtuvimos resultados sobre el sistema ternario "electrolitos+fructosa+agua". Encontramos que para el caso de las solucines más concentradas de fructosa (4-5 M), el agregado de cloruro de sodio promueve una fragmentación del conglomerado de fructosas "percoladas" en otros de tamaño más pequeño. Asimismo, observamos que en todo el rango de concentraciones de fructosa investigado, los iones están solvatados preferencialmente por el agua. En cuanto a los aspectos dinámicos de estos sistemas observamos que, de manera general, la dinámica traslacional de todas las especies, disminuye en un orden de magnitud aprox. al aumentar la concentración de fructosa de 1 M a 5 M.

Abstract:
In the first part or this thesis we present results from molecular dynamics simulations performed on reverse micelles immersed in cyclohexane. Three different inner polar phases are considered: water (W), formamide (FM), and an equimolar mixture of the two solvents. In all cases, the surfactant was sodium bis (2-ethylhexyl) sulfosuccinate(AOT). The initial radii of the micelles were R ∼ 15 Å, while the corresponding polar solvent-to-surfactant molar ratios were intermediate between w0 = 4,3 for FM and w0 = 7 for W. The resulting overall shapes of the micelles resemble distorted ellipsoids, with average eccentricities of the order of ∼ 0,75. Local density correlations within the micelles indicate preferential solvation of sodium ionic species by water, in contrast to the behavior found in bulk equimolar mixtures. Compared to bulk results, translational and rotational modes of the confined solvents exhibit important retardations, most notably those operated in rotational motions where the characteristic timescales may be up to 50 times larger. Modifications of the intra-molecular connectivity expressed in terms of the average number of hydrogen bonds and their lifetimes are also discussed. In the second part molecular dynamics simulations have been carried out to investigate the dyna- mics of fructose aqueous solutions up to 70 wt % concentration. We find that the hydrogen(H)-bonded network of fructose molecules extends with increasing sugar content and forms a structurally heteroge- neous system around and above 45 wt % concentration, characterized as a percolated-like solute domain. The presence of such aggregates in concentrated solutions promotes the slowing down of water transla- tional, reorientational, and H-bonding dynamics, typical of many biomolecular environments. Analysis of the effects of the topological and energetic disorder of the sugar aggregates on vicinal water dynamics, similar to that recently carried out for the hydration layer of proteins by Pizzitutti et al. , reveals many similarities between the dynamical anomaly of the hydration layers of both systems. Like a protein surface, topological and energetic disorders of the sugar aggregates both contribute to the translational diffusion anomaly. However, unlike in the vicinity of a protein surface, the rotational relaxation is also hindered by the topological disorder created by the intertwined, percolating sugar clusters in concentrated solutions. To complete the analysis developed in the last part of this thesis, we obtained results on the three species sistem “electrolytes+fructose+water”. We found that for the most concentrated sistems (fructose 4-5 M), the adition of sodium chloride promotes the fragmentation of the “percolated” cluster of fructose, in smaller fragments. Besides, we observed that in the whole concentration range studied, the ionic species was mainly solvated by water. Regarding the translational dynamics of theese solutions, we noticed that de self-diffusion coefficients of all species decrease by roughly one order of magnitude in going from fructose 1 M to 5 M.

"Efectos de superficie en la difusión de hidrógeno en hierro y aleaciones ferrosas" (2003). Bruzzoni, Pablo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se ha estudiado el intercambio de hidrógeno entre un medio hidrogenante y láminas de hierro cubiertas de delgadas películas de níquel o paladío. Para tal fin se usaron técnicas de permeacíón de hidrógeno y análisis de respuesta en frecuencias, ya sea empleando carga catódica modulada o carga en fase gaseosa con presión modulada. Las películas de Ni y Pd fueron caracterizadas por diversas técnicas en cuanto a sus propiedades fisicas y su interacción con el hidrógeno. El intercambio de hidrógeno entre el medio y el sustrato de hierro es un proceso en varias etapas que incluye la difusión en el interior de la película metálica y el pasaje a través de las interfases. El pasaje a través de la interfase medio hidrogenante-material de la película juega un papel clave y se han determinado los coeficientes de transferencia correspondientes. Esta velocidad de transferencia finita, combinada con la capacidad de retención de hidrógeno de la propia película, determina en gran medida la respuesta del sistema en estado transitorio. Se propone que la transición de estado adsorbido a estado absorbido o soluto intersticial es la etapa determinante de la velocidad de pasaje a través de la interfase medio hidrogenante-material de la película. En el caso de la película de paladio, dicha velocidad de transferencia se reduce marcadamente con largos tiempos de exposición de la película al medio hidrogenante, lo cual se atribuye a la acumulación de hidrógeno subsuperficial. Finalmente se discuten estos resultados en relación con la técnica de permeacíón de hidrógeno aplicada a aleaciones de base hierro.

Abstract:
Hydrogen exchange between a hydrogenating medium and iron membranes covered with thin palladium or nickel films has been studied. For this purpose, techniques of hydrogen permeation and frequency response analysis were used, either with modulated cathodic chargíng or modulated gas phase chargíng. The nickel and palladium films were characterised through different techniques regarding their physical properties and their interaction with hydrogen. Hydrogen exchange between the medium and the iron substrate is a process of several steps that includes both the bulk diffusion in the metallic film and the transfer across the interphases. The transfer of hydrogen across the hydrogenating medium - film material interphase plays a key role; the corresponding transfer coefficient has been determined. This finite transfer rate, combined with the hydrogen retention capacity of the film itself, determines the transient response of the system to a great extent. It is proposed that the transition between adsorbed state and absorbed state or interstitial solute is the rate determining step for he transfer across the hydrogenating medium-film material interphase. In the case of the palladium film, this transfer rate is markedly reduced after long exposures of the film to the hydrogenating medium, which is attributed to subsurface hydrogen. Finally, these results are discussed in relation with the hydrogen permeation technique applied to iron base alloys.

"Efectos de términos anarmónicos de la fuerza cuadrupolar en los isótopos de Cd" (1967). Dussel, Guillermo Gaspar. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El presente trabajo ha tenido como objeto extraer conclusiones sobre la influencia de los términos anarmónicos del hamiltoniano cuadrupolar en los núcleos esféricos. Los cálculos se realizaron para los isotopos del Cd por la gran cantidad de información experimental de que ellos se conoce y por la ventaja que representa el hecho que tengan dos protones menos que capa cerradas, lo que permite tratarlos en acoplamiento intermedio. En la introducción y en la primera sección se hace un pequeño resumen del método de cuasibosones, que es el método usual de tratar los estados colectivos de los núcleos esféricos. En la sección 2 se estudia una manera de introducir los términos anarmónicos de tercer orden. En la sección 3 se ve el modelo de Raz como fuente de anarmonicidades, mientras que en la sección 4 se expone una manera alternativa para su tratamiento. Se verifica que ambos métodos, el modelooo de Raz y ldescripciónnfenomenológicaaa presentan ciertacaracterísticasss comunes: tales como el refuerzo entre las transiciones debidas a la partarmónica y a la partanarmónicaaa del operador cuadrupolar para el momentestadísticoco del primer estado dos más, y las contribuciones con signo distinto para las transiciones prohibidas en la aproximación armónica. En la sección 5 se calculan los primeros estados excitados utilizando el modelo de Raz y se verifica que con la excepción del nivel 23 y las transiciones M1 se obtiene un acuerdo muy razonable con los resultados experimentales. A partir de una estructura microscópica se calculan los coeficientes que dan la magnitud de los términos cúbicos; puede observarse que aparecen en un rango razonable, aunque su valor es una función muy dependiente de las energías de los niveles de partícula independiente y por lo tanto no se pueden predecir con certeza cambios de núcleo a núcleo. Se estudia también la posibilidad de superponer el modelo de Raz con términos anarmónicos para los neutrones, y se observa que eso permitiría dar una descripción bastante coherente con los resultados observados al variar el numero de masa A, para ello seria necesario que las energías de los niveles de neutrones fuesen diferentes de los resultados utilizados previamente.

"Efectos del arsénico sobre la adenohipófisis. Mecanismos de acción" (2014-12-15). Ronchetti, Sonia Alejandra. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Introducción: El arsénico es un metaloide ampliamente distribuido en el ambiente el cual presenta potentes efectos tóxicos. La contaminación provocada por arsénico inorgánico (iAs) es uno de los mayores problemas sanitarios a nivel mundial. Si bien se han reportado efectos adversos del iAs sobre la función reproductiva, poco se conoce de sus acciones sobre la liberación hormonal y la fisiología adenohipofisaria. Objetivos: 1) Estudiar el efecto citotóxico del iAs sobre la fisiología adenohipofisaria y caracterizar los mecanismos de acción. 2) Investigar el papel del iAs como agente xenoestrogénico en la adenohipófisis y el útero. Resultados: 1) La exposición al iAs, a través del agua de bebida en diferentes concentraciones (5, 25 o 100 ppm) durante 30 días en ratas machos, disminuyó los niveles plasmáticos de prolactina (PRL) en forma dosis dependiente, mientas que la hormona luteinizante (LH) se vio afectada sólo con la máxima concentración utilizada. La administración del metaloide in vivo alteró la expresión del ARNm de genes de respuesta al estrés oxidativo en la adenohipófisis sugiriendo que, en estas condiciones, el iAs induce estrés oxidativo en la glándula. Confirmando los resultados in vivo, el iAs, en concentraciones micromolares, disminuyó la liberación de PRL en forma tiempo-dependiente sin afectar la de LH en cultivos primarios de células adenohipofisarias. Además, el iAs redujo la viabilidad celular adenohipofisaria, efecto debido principalmente a la inducción de apoptosis. Este proceso se caracterizó por un incremento de las especies reactivas del oxígeno, la despolarización del potencial de la membrana mitocondrial y un aumento en la expresión del ARNm de MT-1 y HO-1. El tratamiento con el antioxidante Nacetilcisteína previno el efecto citotóxico y la inhibición de la liberación de PRL inducida por iAs. 2) La administración del iAs a dosis bajas (0,1 ppm) durante 30 días a ratas hembras ovariectomizadas (OVX) indujo la aparición de proestros y estros respecto al control OVX. En la adenohipófisis, se observó un estímulo en la proliferación celular, especialmente de los lactotropos y un incremento en la secreción de PRL. Este metaloide también reguló la expresión proteica del REa y de su variante truncada. En el útero, la exposición al metaloide causó modificaciones citoestructurales mostrando un incremento del área glandular y de la altura del epitelio. Además, el iAs alteró la expresión del REa en las células epiteliales y en el estroma. Conclusiones: El iAs es un disruptor endocrino cuyos efectos varían con la dosis y el tiempo de exposición. A concentraciones micromolares, el iAs induce apoptosis e inhibe la secreción de prolactina. La generación de estrés oxidativo parece ser el principal mediador de los efectos tóxicos del metaloide. Por otro lado, a concentraciones más bajas, el iAs reproduce las acciones del estrógeno, estimulando la proliferación celular en tejidos hormona-dependientes.

Abstract:
Introduction: Arsenic is a metalloid ubiquitously present in the environment with potent toxic effects. Inorganic arsenic (iAs) contamination is considered one of the top environmental health threats worldwide. Many reports have shown that iAs affects reproductive system, however, little is known about the effect of iAs on hormone release and anterior pituitary physiology. Objectives: 1) To study the cytotoxic effect of iAs on anterior pituitary physiology and describe its mechanisms. 2) To investigate iAs xenoestrogenic role on anterior pituitary and uterus. Results: 1) iAs exposure (5, 25 or 100 ppm) to male rats through drinking water for 30 days decreased prolactin (PRL) serum levels in a dose-dependent manner whereas luteinizing hormone (LH) levels were affected only at the highest concentration used. In vivo iAs administration increased mRNA expression of several oxidative stress-responsive genes in anterior pituitary gland, suggesting that this metalloid induces oxidative stress in pituitary gland. iAs, at micromolar concentrations, significantly decreased PRL release in a timedependent fashion whereas LH levels remained unaltered in anterior pituitary cells in culture. Besides, iAs reduced cell viability mainly by apoptosis. This process is characterized by increased levels of reactive oxygen species, early depolarization of mitochondrial membrane potential and augmented expression of some key oxidative stress-responsive genes such as HO-1 and MT-1. The antioxidant N-acetylcysteine prevented iAs-induced cytotoxic effects and prolactin release inhibition. 2) iAs administration at lower doses (0,1 ppm) to female ovariectomized rats (OVX) for 30 days induced the apparition of proestrus and estrus. In the pituitary gland iAs stimulated cell proliferation, especially of lactotroph and increased PRL secretion. This metalloid also regulated protein expression of ERa and its truncated variant. In uterus, iAs exposure caused cytoarchitectural changes by increasing both glandular area and uterine epithelium height. Besides, iAs altered ERa expression in epithelial cells and stroma. Conclusions: iAs is an endocrine disruptor whose effects vary with dose and exposure time. At micromolar concentrations iAs induces apoptosis and inhibits PRL secretion. Oxidative stress generation seems to be the main mediator of the metalloid’s toxic effects. On the other hand, at lower concentrations, iAs mimics estrogen actions by stimulating cell proliferation on hormone-dependent tissues.

"Efectos del cultivo hipóxico sobre la reprogramación de fibroblastos humanos a células madre pluripotentes inducidas" (2015-10-14). Questa, María. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las células somáticas pueden ser reprogramadas a células pluripotentes denominadas Células Madre Pluripotentes Inducidas (CMPi) y éstas, a su vez, pueden diferenciarse a cualquier tipo celular adulto. Esto es de gran importancia en los campos de la medicina regenerativa, las pruebas farmacológicas in vitro y la investigación de trastornos genéticos, dado que pueden obtenerse células pluripotentes sin enfrentar la barrera ética de la manipulación de embriones y con el valor agregado de ser genéticamente idénticas al donante de células somáticas. Por lo tanto, el estudio del proceso de reprogramación se ha vuelto cada vez más importante para mejorar los métodos en eficiencia, rapidez y seguridad. Teniendo en cuenta su interacción con factores de transcripción implicados en el estado pluripotente de la célula, los factores inducibles por hipoxia, HIF por su sigla en inglés, podrían ser de interés en el proceso de reprogramación. En el presente trabajo hemos aislado distintos tipos de células somáticas humanas, como fibroblastos, queratinocitos y células mononucleares de sangre periférica, los hemos cultivado, y hemos intentado reprogramarlos. Además estudiamos distintas condiciones de generación de CMPi, utilizando distintos vectores necesarios para la reprogramación, moléculas que modifican la estructura de la cromatina como Ácido Valproico y Butirato de Sodio, y diferentes protocolos, hasta llegar a un método confiable y reproducible. A partir de ello, hemos generado CMPi en condiciones de normoxia e hipoxia, y posteriormente las hemos cultivado a largo plazo también en ambas condiciones. Hemos validado la legitimidad bona fide de las líneas celulares generadas, evaluando la expresión de genes marcadores de estado indiferenciado y por otra parte, la pluripotencia, mediante protocolos de diferenciación in vitro, e in vivo, por formación de teratomas. Asimismo, encontramos que ambas líneas exhiben características morfológicas y proliferativas, y patrones de metilación del ADN propios de células madre pluripotentes. Estudiamos además el comportamiento de las líneas celulares en cultivo en cuanto a eficiencia de reprogramación, expresión de factores del estado pluripotente, proliferación y apoptosis. Encontramos que la hipoxia aumentó la cantidad de colonias generadas pero éstas resultaron más pequeñas en tamaño, en comparación con las colonias generadas en normoxia. Además, fue menor la expresión de marcadores del estado pluripotente en colonias de CMPi evaluadas en estadios tempranos luego de ser establecidas en hipoxia, que en las colonias generadas en normoxia. Esta expresión no aumentó cuando las colonias fueron establecidas y cultivadas a largo plazo, y luego expuestas a hipoxia aguda, pero se indujo después de una hipoxia crónica. Por otro lado, encontramos una mayor tasa de proliferación celular en CMPi cultivadas en hipoxia sin diferencias en los niveles de apoptosis. Finalmente, a fin de sentar las bases para la continuación del proyecto, generamos vectores retrovirales para poder introducir los genes de los factores HIF-1α y HIF-2α en células a reprogramar, junto con los vectores de reprogramación. Los factores HIF clonados en los plásmidos retrovirales fueron wild type y también formas mutadas que le confieren a las proteínas HIF una mayor estabilidad, y en algunos casos también una mayor capacidad de activación de la transcripción. En último lugar, investigamos el efecto de los vectores generados, en células somáticas plausibles de ser reprogramadas, y encontramos un posible efecto tóxico, probablemente debido a la acumulación de altas cantidades de proteína HIF en la célula, o de una actividad transcripcional de los genes blanco tan alta que conlleva muerte celular. Dado que la expresión del gen introducido por el vector retroviral se puede controlar debido a que utilizamos un sistema modulable Tet-Off, encontramos que un tratamiento con el agente represor disminuye la muerte celular, y podría ser necesario a la hora de co-transducir con estos vectores y los vectores de reprogramación. Esperamos que los resultados y las herramientas generadas en este trabajo contribuyan a la comprensión de los mecanismos moleculares involucrados en la reprogramación y al desarrollo de protocolos para la generación de CMPi de alta calidad y con alta eficiencia. PALABRAS CLAVE células madre, células madre embrionarias humanas, células madre pluripotentes inducidas, hipoxia celular, reprogramación nuclear, pluripotencia, estado pluripotente, diferenciación

Abstract:
Somatic cells can be reprogrammed into pluripotent cells called Induced Pluripotent Stem Cells (iPSC) and these, in turn, can be differentiated into adult cell type. This is of great importance in the fields of regenerative medicine, pharmacological in vitro testing and genetic disorder research, as pluripotent stem cells can now be obtained without facing the ethical barrier of embryo manipulation, and with the added value that these are genetically identical to the somatic cell donor. Hence, through the study of the reprogramming process itself, it has become increasingly important to improve reprogramming methods in terms of efficiency, speed and safety. Given their interaction with transcription factors involved in stemness, Hypoxia Inducible Factor, HIF, may be of interest in the reprogramming process. In the present work we isolated different types of human somatic cells, like fibroblasts, keratinocytes and peripheral blood mononuclear cells, we have cultured them and tried to reprogram them. Moreover, we have studied different conditions for the generation of iPSC, using different vector necessary for reprogramming, molecules that modify the structure of chromatin like Valproic Acid and Sodium Butyrate, and different protocols, until we obtained a reliable and reproducible method. Based on this, we have generated iPSC in normoxia and in hypoxia, and subsequently cultured them long-term in both conditions as well. We validated the bona fide legitimacy of the cell lines generated, by evaluating the expression of stemness marker genes and, on the other hand, by evaluating pluripotency, through in vitro differentiation protocols, and in vivo, by teratoma formation. Also, we have found that both lines exhibited morphological and proliferative characteristics and DNA methylation patterns typical of pluripotent stem cells. Furthermore, we studied the cell lines’ behavior in culture regarding reprogramming efficiency, expression of stemness factors, proliferation and apoptosis. We found that hypoxia increased the amount of colonies generated but these turned out to be smaller in size, when compared to colonies generated in normoxia. Moreover, stemness marker expression was lower in iPSC colonies evaluated in early stages after being established in hypoxia, than in colonies established in normoxia. This expression did not increase when colonies were established and cultured in the long-term, and then exposed to acute hypoxia. Nevertheless, these markers’ expression was up-regulated after chronic hypoxic culture. In addition, we also found a higher proliferation rate for stem cells in hypoxia and no differences in apoptosis levels. Finally, in order to provide a continuation to the project, we generated retroviral vectors to be able to introduce HIF-1α and HIF-2α genes in cells to be reprogrammed, together with the reprogramming vectors. The HIF cloned in the retroviral plasmids were wild type and also mutated forms, which provide the HIF proteins with more stability and in some cases, also increased transcriptional activation ability. Lastly, we investigated the effect of these vectors, on somatic cells capable of being reprogrammed, and we found a possible toxic effect, probably due to the accumulation of high amounts of HIF proteins in the cell, or such a an elevated target gene transcriptional activity, that it generated cell death. Given the fact that the gene introduced by the retroviral vector can be controlled, since we used a modulable Tet-Off system, we found that a treatment with the repressor agent decreases cell death, and might be necessary for the co-transduction with these vectors and the reprogramming vectors. We hope that the results obtained and the tools generated in this work will contribute to the understanding of the molecular mechanisms involved in reprogramming, and to the development of high quality and highly efficient iPSC generation protocols. KEYWORDS stem cells, human embryonic stem cells, induced pluripotent stem cells, cell hypoxia, nuclear reprogramming, pluripotency, stemness, differentiation

"Efectos del entorno sobre la formación y evolución de galaxias" (2011). Tecce, Tomás Enrique. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo se estudia la influencia del medio ambiente en el que se encuentran las galaxias sobre su formación y evolución, a través de la interacción entre la galaxia y el gas caliente y difuso del medio intracúmulo (intracluster medium, ICM). Las galaxias en cúmulos pueden moverse a velocidades casi supersónicas, experimentando una considerable presión dinámica ejercida por el ICM sobre el medio interestelar de la galaxia en movimiento. Este efecto se denomina ram pressure stripping (RPS), y puede remover una fracción significativa del contenido de gas frío de la galaxia. Implementamos este proceso dentro de un modelo híbrido de formación de galaxias, que combina simulaciones hidrodinámicas no disipativas de cúmulos de galaxias con un modelo semianalítico de formación y evolución de galaxias que contempla los procesos físicos que afectan a los bariones. Para ello fue necesario desarrollar un método para calcular los tamaños de los discos galácticos, teniendo en cuenta los efectos del halo de materia oscura anfitrión y la presencia de bulbos galácticos. Una importante innovación respecto a trabajos anteriores es el uso de las partículas de gas de las simulaciones hidrodinámicas para obtener las propiedades cinemáticas y termodinámicas del ICM, logrando así un método autoconsistente. Caracterizamos las distribuciones de RP obtenidas con nuestro nuevo modelo para cúmulos de galaxias simulados de distintas masas, encontrando que la RP media crece con la masa del cúmulo y la edad del Universo. Los perfiles de RP en función de la distancia al centro del halo obtenidos con nuestra nueva implementación pueden aproximarse mediante perfiles analíticos, con parámetros que dependen de manera sencilla de la masa del halo y el corrimiento al rojo. Los ajustes determinados serán de gran utilidad para incluir RPS en otros modelos de formación de galaxias. Finalmente, cuando se considera la posibilidad de que las galaxias conserven su halo de gas caliente al convertirse en satélites, mostramos que la implementación de RPS como un proceso de dos etapas, afectando en primer lugar al halo de gas caliente y luego al gas frío, permite obtener una distribución de colores para las galaxias simuladas en mejor acuerdo con las observaciones, resolviendo un defecto común a los modelos semianalíticos actuales.

Abstract:
In this work we study the influence of the ambient medium in which a galaxy resides on its formation and evolution, through the interaction between the galaxy and the hot, diffuse gas of the intracluster medium (ICM). Galaxies in clusters can move through the ICM at velocities close to supersonic, and thus experience a considerable ram pressure (RP) exerted by the ICM on the interstellar medium of the moving galaxy. This effect is called ram pressure stripping (RPS), and it can remove a significant fraction of the cold gas content of a galaxy. We implement the RPS process within a hybrid model of galaxy evolution, which combines hydrodynamical non-radiative simulations of galaxy clusters with a semi-analytic model of galaxy formation and evolution which handles the baryonic physics. This required the development of a method to calculate the sizes of galactic discs, taking into account the effects of their host dark matter halo and the presence of galactic bulges. An important innovation with respect to previous works is the use of the gas particles in the hydrodynamical non-radiative simulations to obtain the kinematical and thermodynamical properties of the ICM. This allows a self-consistent estimation of the RPS experienced by satellite galaxies. We characterize the distributions of RP obtained with our new model in simulated galaxy clusters of different masses, and we find that the mean RP grows with the cluster mass and the age of the Universe. The RP profiles as a function of distance to the centre of the system obtained with our new implementation can be well fitted by analytic profiles, with parameters that depend on system mass and redshift in a simple fashion. The fits provided here will prove very useful to include RPS in galaxy formation models which do not include gas physics. Finally, considering the possibility that galaxies keep their hot gas reservoir when becoming satellite systems, we show how implementing RPS as a two-stage process, which affects first the hot gas haloes of galaxies and then the cold disc gas, allows to recover a distribution of simulated galaxy colours which is in better agreement with observations, solving a defect common to current semi-analytic models.

"Efectos del envejecimiento en la maduración e integración funcional de células granulares nacidas en el hipocampo adulto" (2015-08-25). Trinchero, Mariela Fernanda. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Existen dos zonas neurogénicas en el cerebro adulto. Una es la zona subventricular que da origen a interneuronas del bulbo olfatorio y otra es la zona subgranular del giro dentado del hipocampo que genera células granulares (CGs). Las CGs nacidas en animales jóvenes se desarrollan y maduran por varias semanas, durante las cuales establecen conexiones funcionales aferentes y eferentes, adquiriendo la capacidad de procesar información. Para estudiar de qué manera este proceso es alterado por la edad se marcaron células progenitoras neurales (CPNs) de ratones de distintas edades con la proteína fluorescente verde y se analizó su morfología a distintos tiempos post-inyección, obteniéndose así las curvas de maduración para neuronas nacidas en en distintos momentos. A partir de este análisis se pudo observar que a medida que avanza la edad, la tasa de maduración se ralentiza, notándose un mayor efecto en las primeras semanas del desarrollo de estas neuronas. A medida que el ratón envejece presenta niveles decrecientes de actividad basal del giro dentado que correlaciona con un desarrollo neuronal más lento. A pesar de dicho retraso, experimentos de electrofisiología demostraron que estas neuronas son capaces de integrar un estímulo excitatorio y disparar potenciales de acción de modo comparable a la de neuronas nacidas en el animal adulto joven. Para comprender las bases del efecto del envejecimiento en el desarrollo neuronal se plantearon diversas manipulaciones experimentales para modular su tasa de maduración. En primer lugar se sometió a los ratones envejecidos a ejercicio voluntario y se observó que este tratamiento aceleró la maduración neuronal en animales envejecidos, con efectos más dramáticos en animales más viejos. Los niveles del factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF) se encuentran disminuidos en hipocampos de animales envejecidos, y los hipocampos de ratones corredores presentan mayores niveles de BDNF comparados con los sedentarios, indicando un posible efecto de este factor neurotrófico en el desarrollo neuronal de ratones envejecidos que realizan ejercicio físico. Para determinar si un efecto de aceleración de la maduración puede estar relacionado con la propia actividad eléctrica de las neuronas en desarrollo, se utilizó la transducción retroviral de receptores sintéticos acoplados a proteína G para activarlas en forma intrínseca. Esta manipulación también revirtió el efecto provocado por el envejecimiento. Para investigar el rol del BDNF en el desarrollo neuronal de animales envejecidos se utilizó la técnica de ARN de interferencia (short hairpin ARN) para Lrig1, un modulador negativo de la vía de BDNF. Se observó un aumento en el efecto dendritogénico en las CGs que sobreexpresan el shLrig1 en animales envejecidos. Esto sugiere un rol clave de la vía del BDNF en el desarrollo neuronal. Estos resultados demuestran que tanto la actividad del nicho neurogénico como la propia actividad de la célula cumplen un rol crucial en la tasa de maduración de las CGs. Palabras claves: Envejecimiento, neurogénesis adulta, desarrollo neuronal, plasticidad neuronal, ejercicio voluntario, actividad neuronal, BDNF.

Abstract:
Neurogenesis exists in two restricted zones in the adult brain: the subventricular zone that gives rise to interneurons in the olfactory bulb, and the subgranular zone of the dentate gyrus that generates granule cells (GCs). In the young adult brain, new GCs develop for several weeks. As they mature they establish functional afferent and efferent connections thus becoming able to process information. To study how aging affects this process, neural progenitor cells (NPCs) were labeled mice at different ages from young adult to middle age using retroviral expression of the green fluorescent protein (GFP), and their morphology was analyzed at different times post-injection. We observed that maturation rate decreases as mice get older. During the first weeks of neuronal development there is a striking delay in the maturation of GCs born in aging mice compared to young ones. Moreover, older mice present lower levels of basal activity in the dentate gyrus that correlate with a slower development of newborn GCs. Despite the observed delay in neuronal maturation in aging mice, electrophysiological recordings showed that 6-weekold neurons are able to integrate an excitatory stimulus and fire action potentials. To better understand the effect of aging in neuronal development we used different approaches to modulate neuronal maturation in the aged hippocampus. First, voluntary exercise in the running wheel accelerated the rate of maturation in aging mice, with more dramatic effects in older animals. Brain-derived-neurotrophic factor (BDNF) levels in the hippocampus also decay as mice get older. However, the hippocampus of running mice presents higher levels of BDNF compared to sedentary mice. These results suggest a connection between BDNF levels and the effects of the running wheel. To determine whether an acceleration of maturation is related to an increase in intrinsic electrical activity of developing neurons, NPCs were transduced with a retrovirus expressing G-coupled synthetic receptors to activate neurons. Chronic neuronal activation also prevented the effects of aging on the newborn GCs. In order to study the participation of BDNF in neuronal development in aging mice, shRNA was used against Lrig1, a negative regulator of BDNF. An increase in dendritogenesis was observed in GCs overexpressing shLrig1 in aging mice. This finding suggests a key role of BDNF signaling in the development of GCs born in aging mice. These results show that both the state of the neurogenic niche and the intrinsic activity of the cells have a crucial role in the rate of maturation of GCs. Key Words: Aging, adult neurogenesis, neuronal development, neuronal plasticity, running, neuronal activity, BDNF.

"Efectos del envejecimiento y la neurodegeneración sobre la plasticidad neuronal en el hipocampo" (2011). Morgenstern, Nicolás A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
A medida que envejece, el cerebro de los mamíferos sufre modificaciones bioquímicas, estructurales y funcionales que disminuyen la plasticidad de sus circuitos. Estos cambios han sido propuestos como responsables del déficit cognitivo y del aumento en la incidencia de las enfermedades neurodegenerativas que se presentan con la edad. El giro dentado del hipocampo cuenta con una forma de plasticidad singular dada por la producción de nuevas neuronas granulares a lo largo de toda la vida. Mediante transducción retroviral con proteínas reporteras y/o transgenes relacionados con la patogénesis de la enfermedad de Alzheimer se logró utilizar a estas neuronas como vehículo para monitorear los efectos del envejecimiento normal y patológico sobre la plasticidad neuronal. Utilizando inmunofluorescencia y microscopía confocal en ratones wild type envejecidos y en transgénicos modelando la enfermedad de Alzheimer pudimos observar que, aunque el número de neuronas generadas disminuye a lo largo de la vida, estas no se ven afectadas en su migración ni en la densidad de los contactos sinápticos aferentes que desarrollan durante el envejecimiento normal o patológico. Por otro lado, combinando registros electrofisiológicos con análisis morfológico encontramos que la expresión autónoma de célula de diferentes variedades de la proteína precursora de amiloide (APP) altera transitoriamente la forma en que estas neuronas se conectan al circuito del giro dentado. Llamativamente, este efecto parecería no estar mediado por el péptido β amiloide, sino por algún dominio contenido en el extremo C-terminal de APP. En conjunto estos resultados estarían indicando que a pesar de la diversidad de los cambios que se presentan en el cerebro durante el envejecimiento y la neurodegeneración, las neuronas granulares que se desarrollan en el giro dentado bajo tales circunstancias pueden incorporarse anatómica y funcionalmente al circuito. Sin embargo, la dinámica con que se da esta integración se ve afectada por la sobreexpresión de APP en forma autónoma de célula. Alteraciones sutiles como esta podrían subyacer a las manifestaciones cognitivas iniciales encontradas en la enfermedad de Alzheimer.

Abstract:
Biochemical, structural and functional changes occurs to the mammalian brain as it ages. These modifications are thought to contribute to the decrease in the plasticity of neuronal circuits. This latter situation has been proposed to underlie the cognitive decline and the increase of neurodegenerative disorders found during ageing. A particular form of plasticity is found in the dentate gyrus of the hippocampus where the continuous addition of new granular neurons takes place through all life. Using retroviral transduction of fluorescent proteins and/or transgenes related to Alzheimer’s disease these neurons were experimentally used as probes to study the effects of normal and pathological ageing on neuronal plasticity. Immunofluoresce labeling and confocal microscopy of wild type aged mice and transgenic models of Alzheimer´s disease showed a strong reduction in the number of newly generated neurons during life. However, nor migration neither afferent synaptic connectivity was affected during ageing or neurodegeneration. Electrophysiological recordings and morphological analyses revealed that cell autonomous expression of different forms of amyloid precursor protein (APP) affect the way that these neurons integrate to the circuit of the dentate gyrus. Notably, this effect seems to be mediated by a domain in the C-terminal region of APP rather than by Aβ peptide itself. Altogether these observations should be indicating that despite the diversity in the changes found in the brain during ageing and neurodegeneration, newlyborn neurons are able to functionally and anatomically incorporate to the circuit. However, the timing of this integration was found to be affected by the cell autonomous overexpression of APP. This kind of subtle alterations would be underlying the early cognitive decline found in Alzheimer’s disease.

"Efectos del fMLP y de los antioxidantes sobre funciones inducidas por lipopolisacáridos bacterianos" (1997). Vulcano, Marisa. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente tabajo de Tesis se evaluaron las consecuencias de las interacciones de los lipopolisacáridos (LPS) y de los péptidos formilados de las bacterias Gram negativas sobre la activación de distintas funciones celulares involucradas en el desencadenamiento de la respuesta inflamatoria a la infección. En particular, se analizaron los efectos de estos dos componentes bacterianos sobre la activación del estallido respiratorio y la producción de TNF-α en células fagocíticas humanas. Los resultados presentados en este trabajo demuestran que para una más precisa interpretación de los procesos inflamatorios causados por bacterias Gram (-) se debe tener en cuenta el desencadenamiento de la cascada de eventos en respuesta a los distintos componentes bacterianos. Así, los LPS y los péptidos formilados, presentes en la circulación sanguínea desde el comienzo de la infección pueden inducir el incremento o la disminución de distintas funciones celulares llevadas a cabo por los neutrófilos y por las células mononucleares periféricas, dependiendo en la secuencia en que estos agonistas entran en contacto con las células. Aquí, se demuestra que el fMLP, un péptido formilado prototipo, cuando interacciona con las células antes que el LPS, es capaz de ejercer un efecto inhibitorio de las funciones celulares relacionadas con el metabolismo oxidativo y además bloquea la secreción de TNF-a. Esta observación. que en principio resulta paradójica, dado que el fMLP es un potente agente quimiotáctico que contribuye al proceso inflamatorio reclutando células en el foco infeccioso, sugiere la existencia de mecanismos de regulación que controlarían la intensidad y la duración de la inflamación. Estos hechos señalan un rol dual del fMLP, demostrando su capacidad de actuar como un agente antinflamatorio, bajo determinadas condiciones. Estos estudios sugieren que los mecanismos a través de los cuales el fMLP ejerce este rol estarían relacionados con la alteración del desencadenamiento de eventos intracelulares y/o transduccionales. En este trabajo se demuestra, además que la generación de intermediarios reactivos del oxígeno (IRO) está involucrada en la producción de TNF-α. El uso de agentes secuestradores de radicales libres permitió establecer la participación de los radicales OH en la producción de TNF-α mediada por células mononucleares, no así en la mediada por PMN, hecho que indica la existencia de distintos mecanismos involucrados en la producción de esta citoquina en los diferentes tipos celulares. Teniendo en cuenta que, el TNF-α es un mediador central responsable de los fenómenos patofisiológicos observados en los cuadros sépticos, la regulación de su producción mediante el uso de secuestradores de IRO, se presenta como una herramienta potencial, con actividad coayuvante, en el tratamiento de los fenómenos sépticos provocados por bacterias Gram (-).

Abstract:
The purpose of the current Thesis was the evaluation of the interactions between lipopolysaccharides (LPS) and formylated peptides from Gram negative bacteria on the activation of different cellular functions involved in the triggering of the inflammatory response to infection. To this aim, the effects of both components on respiratory burst activation and TNF-a production by human phagocytes were analized. Results presented herein show that the development of events in response to each bacterial component should be taken into account for a precise interpretation of inflammation induced by Gram (-) bacteria. Thus, LPS and formylated peptides, present in circulation from the beginning of the infection, are able to induce the up and down regulation of different cellular functions mediated by neutrophils and mononuclear cells depending on which of them become in contact to the cells first. Here, it is shown that fMLP, a prototype formilated peptide, is able to inhibit cellular functions related to oxidative metabolism as well as the release of TNF-α when cells are exposed to it before LPS. This unexpected observation, considering the well-knwon chemotactic effect of fMLP suggests the existence of regulatory mechanisms able to modulate the time course and the intensity of inflammation. These findings indicate a dual role of fMLP, showing its antinflammatory capacity under certain circumstances. The data presented suggest that fMLP exerts these effects by affecting the triggering of intracellular and/or transductional events. Moreover, results in this Thesis show that reactive oxygen intermediates (ROI) are involved in TNF-α production. The use of oxygen scavengers show that OH radicals participate in TNF-α generation by mononuclear cells but not by neutrophils, suggesting the existence of different mechanisms involved in the production of this cytokine by distintic cells types. Considering that TNF-α is a central mediator of pathological events observed in sepsis, the modulation of its production by ROI scavengers appears as a potential tool in the treatment of septic phenomena caused by Gram (-) bacteria.

"Efectos del glifosato en peces dulceacuícolas. Biomarcadores de estrés ambiental" (2013-03-27). Menéndez Helman, Renata J.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La expansión de la frontera agrícola ha involucrado un notable incremento en el uso de biocidas en la Argentina. En este trabajo nos propusimos evaluar los impactos del glifosato (N-fosfonometilglicina, PMG) sobre dos especies no blanco: Cnesterodon decemmaculatus y Odontesthes bonariensis. Los resultados obtenidos indicarían que el PMG (en su forma ácida y grado analítico) no presenta un nivel significativo de toxicidad letal aguda (CL50-96h > 100 mg.L-1) para C. decemmaculatus. Sin embargo, la toxicidad de un formulado de PMG resultó notablemente mayor (CL50-96h = 29 mg.L-1). Al evaluar efectos subletales en esta especie, la exposición aguda a PMG provocó un aumento en la actividad de catalasa (defensas antioxidantes) e inhibición de la actividad de acetilcolinesterasa (biomarcador de neurotoxicidad). Por otra parte, la exposición crónica al formulado produjo una disminución significativa en la Carga Energética de Adenilatos (CEA) en hígado y músculo de O. bonariensis, manifestando efectos a nivel del metabolismo energético. Las branquias de estos animales, examinadas por MEB, mostraron alteraciones en su ultraestructura. Por último, se estudió el efecto de la exposición al formulado sobre la motilidad espermática y el desarrollo embrionario y larval de O. bonariensis, estableciéndose un aumento de la mortalidad de las larvas. Los resultados de este trabajo constituyen una contribución a los estudios sobre los efectos del glifosato en peces de agua dulce, así como a la evaluación y desarrollo de biomarcadores de estrés ambiental.

Abstract:
The agricultural frontier of Argentina is spreading out and this phenomenon has involved a significant increase in the use of biocides. In this work we propose to evaluate the impact of glyphosate herbicide on two non-target species: Cnesterodon decemmaculatus and Odontesthes bonariensis. Experimental results would indicate that glyphosate (PMG, analytical grade, acid form) does not present a significant level of acute lethal toxicity (LC50-96h > 100 mg.L-1) on C. decemmaculatus. However, the toxicity of one of the glyphosate-based herbicide was found significantly higher (LC50-96h = 29 mg.L-1). The sublethal effects on this species were evaluated. Acute exposure to PMG caused an increase in the activity of catalase (antioxidant defenses) and an inhibition of the activity of acetylcholinesterase (biomarker of neurotoxicity). On the other hand, chronic exposure to glyphosate-based herbicide resulted in a significant decrease in the Adenylate Energy Charge (AEC) in liver and muscle of O. bonariensis, showing effects on the energy metabolism. The gills of these animals, examined by SEM, showed changes in their ultrastructure. Finally, the effect of exposure to glyphosate-based herbicide on sperm motility, embryonic and larval development of O. bonariensis were studied and an increased mortality of the larvae was determined. The results presented on this PhD Thesis is a contribution to the knowledge of the effects of glyphosate on freshwater fishes, as well as the evaluation and development of biomarkers of environmental stress.

"Efectos del manejo sobre la dinámica de poblaciones de guanacos silvestres (Lama guanicoe) y mortalidad por enganches en alambrados en campos ganaderos de Patagonia Norte, Argentina" (2010). Rey, Andrés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La esquila en vivo de guanacos silvestres se vislumbra como una actividad complementaria a la ganadería que podría contribuir a conservar sus poblaciones. El objetivo de esta tesis fue evaluar los efectos de la esquila de guanacos silvestres. Para ello se trabajó en forma sucesiva en dos campos ganaderos del norte de la Patagonia, que realizaron esquilas de guanacos silvestres, mediante relevamientos de abundancia y estructura social por medio de transectas de línea, estimación de supervivencia mediante marcado y recaptura de los guanacos esquilados, seguimiento de ejemplares por telemetría y registros conductuales desde puntos fijos de observación. En el sur de Neuquén (Estancia Alicura), se comparó la abundancia y estructura social de una población, dentro y fuera del área manejada, y se analizaron las actividades individuales antes y después de un evento de manejo, entre agosto de 2004 y diciembre de 2005. La abundancia de guanacos no varió luego de los eventos de manejo. La estructura social no difirió de la descripta para otras poblaciones. Los grupos familiares fueron la estructura social más frecuente y el tamaño de los grupos de machos fue menor en primavera que en invierno. La alimentación fue la principal actividad desarrollada durante el día y el reposo se asoció positivamente con la temperatura en verano. En el centro de Río Negro (Estancia Cabeza de Vaca), se estimó la abundancia y supervivencia de una población manejada en forma reiterada (7 eventos) durante 5 años, y se comparó su reproducción y tendencia poblacional con la de una población que convive con ganado, entre enero de 2003 y enero de 2009, durante un período climático normal y uno de sequía (a partir de diciembre de 2006). No se observaron desplazamientos de guanacos hacia fuera del área manejada y solo en un evento la abundancia de guanacos mostró una disminución temporaria inmediatamente posterior al manejo, atribuible al diseño de muestreo y un comportamiento de evasión. La supervivencia en la población manejada no difirió entre sexos y edades, fue constante durante el estudio y resultó menor a la reportada en poblaciones sin manejo. La tasa de reproducción de la población bajo manejo no difirió de la estimada en la población que convive con el ganado y otras poblaciones sin uso. La tendencia de la población bajo manejo no difirió de la estimada para la población que convive con el ganado en el mismo campo y resultó estable durante un período climático normal y negativa durante el período de sequía. Adicionalmente, en este campo, se estudió la mortalidad de guanacos por enganches en alambrados mediante el registro de carcasas y características del alambrado en el sitio de enganche. El impacto de la mortalidad por enganches resultó mayor en crías que en adultos. Las crías murieron principalmente por enganches en alambrados tipo ovino (93 cm), mientras que los adultos murieron enganchados fundamentalmente en alambrados tipo bovino (113 cm). Los resultados sugieren que el manejo reiterado no produjo desplazamientos de guanacos fuera del área manejada, aumento de la mortalidad ni reducción de la reproducción que produzcan tendencias poblacionales declinantes durante un período climático normal. No obstante, se desaconseja la realización de eventos post-parto (verano) y en momentos de condiciones ambientales adversas (como sequías), y la utilización de estructuras de manejo no desmontables. La continuidad de estos estudios es esencial para evaluar la sustentabilidad de esta actividad y su valor como herramienta de conservación del guanaco.

Abstract:
Live-shearing effects of wild guanacos could work as a complementary activity to livestock ranching and contribute to conserve their populations. The objective of this thesis was to evaluate the effects of live-shearing wild guanacos. The study was conducted successively in two ranches of Northern Patagonia, where live-shearing of wild guanacos was conducted, through line transects to estimate abundance and social structure, capture-recapture data to estimate survival, radio-tracking of captured guanacos, and behavioural observations. In Southern Neuquén (Alicura ranch), abundance and social structure was compared between areas with and without shearing, and individual activities were analysed before and after a shearing event, between August 2004 and December 2005. Abundance of guanacos remained similar after the shearing event. Social structure did not differ from other populations. Family groups were the most frequent social structure and the size of male groups was smaller in spring than in winter. Foraging was the main activity throughout the day and resting was positively associated with temperature in summer. In the centre of Rio Negro (Cabeza de Vaca ranch), abundance and survival was estimated in a repetitively managed population (7 events) throughout 5 years, and its reproduction and population trend was compared with a guanaco population coexisting with livestock, between January 2003 and January 2009, during normal climatic conditions and a drought (since December 2006). No movements of guanacos outside the managed area were observed and in only one occasion abundance decreased immediately after shearing, related to sampling design and evasive behaviour. Survival of the managed population was similar between sexes and ages, was constant throughout the study, and was lower than survival in non-managed populations. Reproduction in the managed population did not differ with reproduction in the population coexisting with livestock, and other non-managed populations. Population trend was similar between the managed population and the one coexisting with livestock, being stable during normal climatic conditions but declining during a drought. Additionally, in this ranch, mortality associated with wire fences was estimated by registering all carcasses found on fences and its characteristics. Mortality due to fences had a higher impact on juveniles than on adults. Juveniles died mainly on sheep fences (93 cm) while adults mainly died when trying to jump on cattle fences (113 cm). Results suggest that repeated management caused no movements outside the area, nor higher mortality or reduction in reproduction that could generate declining population trends during normal climatic conditions. However, shearing events should be avoided during post-partum periods (summer) and adverse climatic conditions (e.g. drought). Further studies are necessary to evaluate sustainability of live-shearing and its value as a conservation tool for guanaco populations.

"Efectos del molusco invasor Limnoperna fortunei (Dunker) sobre el zooplancton del Paraná Medio" (2010). Rojas Molina, Florencia Mercedes. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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El objetivo de esta tesis es analizar el efecto del molusco asiático invasor Limnoperna fortunei sobre el zooplancton del Paraná Medio, a través de estudios de campo y de laboratorio. Se analizaron y compararon parámetros ambientales, concentraciones de clorofila‐ a y densidades del zooplancton de los ríos Santa Fe y Colastiné, cauces secundarios del río Paraná, en períodos anteriores a la invasión (río Colastiné: 21/09/1971 a 19/01/1973 y 03/03/1981 a 12/01/1982; río Santa Fe: 03/06/1974 a 12/11/1975) con un período posterior a la invasión (20/09/2004 a 26/09/2005). Se analizó la dieta natural de L. fortunei y la oferta disponible en siete ambientes leníticos del área del Paraná Medio. Para evaluar el impacto de L. fortunei sobre el zooplancton se realizaron experiencias en mesocosmos con dos concentraciones de moluscos y un control (sin moluscos). Mediante experimentos en microcosmos se analizó la vulnerabilidad de microcrustáceos de diferentes tallas, frecuentes en ambientes lóticos y leníticos del valle aluvial del río Paraná, a la depredación por adultos de L. fortunei. Los resultados mostraron que los adultos de L. fortunei son activos consumidores de zooplancton. Los pláncteres de 50 a 1200 μm de longitud constituyen el mayor aporte de biomasa a la dieta del molusco. L. fortunei ejerce una depredación selectiva sobre el zooplancton forzando cambios en la composición de especies y en la estructura de tallas de la comunidad. Se observaron importantes disminuciones en la concentración de clorofila y en las densidades de rotíferos en los cauces estudiados durante el período de post‐invasión, en comparación con la pre‐invasión, que podrían atribuirse a la presencia del bivalvo invasor

Abstract:
The aim of this dissertation is to analyze the effects of invasive Asian mollusk Limnoperna fortunei on the zooplankton of the Middle Paraná river system with the aid of field and laboratory studies. We describe and compare the environmental parameters, concentrations of chlorophyll‐a and zooplankton densities of two secondary channels of the Middle Paraná River in periods before the invasion (Colastiné River: 21/09/1971 to 19/01/1973 and 03/03/1981 to 12/01/1982; Santa Fe River: 03/06/1974 to 12/11/1975) with a post‐invasion period (20/09/2004 to 26/09/2005). The diet of L. fortunei and available planktonic food sources from seven lentic environments of the Paraná River floodplain, were analyzed. In order to assess the impact of L. fortunei on the zooplankton, mesocosm experiments were conducted with two bivalve concentrations and a control (no mollusks). Vulnerability of microcrustaceans, common in lotic and lentic environments of the Paraná River flooplain, to predation by adult Limnoperna fortunei was assessed in microcosms experiments. The results show that adults of L. fortunei are active consumers of zooplankton. Plankters 50 to 1200 μm in length are the primary biomass contributors to the diet of the mussel. Limnoperna fortunei is a selective grazer, forcing changes in species composition and size structure of the community. During the post‐invasion period, significant decreases in the concentration of chlorophyll‐a and rotifer densities were observed in both rivers compared to the pre‐invasion periods, which could be attributed to the presence of the invasive bivalve.

"Efectos del receptor de progesterona sobre la elongación transcripcional del gen bcl-x humano" (2012-08-06). Bertucci, Paola Yanina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los Receptores de Esteroides (SRs) regulan la expresión génica mediante su interacción con Elementos de Respueta a Hormona (HREs) ubicados en las regiones promotoras de sus genes blanco. Según el modelo clásico de activación transcripcional, los SRs reclutan complejos que relajan el estado de la cromatina favoreciendo, así, los pasos tempranos de la transcripción. Sin embargo, a partir del uso de la técnica de inmunoprecipitacion de cromatina seguida de secuenciación masiva (ChIP-seq), se encontró que una gran parte de los sitios de unión de los SRs al ADN se encuentra ubicada en regiones intragénicas. Adicionalmente, algunos de los complejos modificadores de la cromatina asociados a los efectos de los SRs en las regiones promotoras de sus genes blanco, también fueron encontraron favoreciendo la elongación transcripcional a lo largo de las regiones transcribibles. El objetivo de esta tesis es estudiar el posible efecto de los SRs unidos a las regiones intragénicas sobre la elongación de la Pol II en genes endógenos. Para ésto se utilizaron células humanas T47D tratadas con el progestágeno sintético R5020 y al gen bcl-x como modelo de estudio. Los resultados mostraron que el Receptor de Progesterona (PR) se recluta únicamente a sitios intragénicos, conjuntamente con las histonas acetiltransferasas CBP y GCN5 y el factor positivo de elongación P-TEFb. El reclutamiento de estos factores correlaciona con un aumento en la acetilación de las histonas, el desplazamiento parcial de los nucleosomas, un aumento en la abundancia de la Pol II principalmente en el extremo 3´del gen y una mayor procesividad de la Pol II a lo largo del mismo. En su conjunto los resultados presentados en este trabajo sugieren que la modulación de elongación de la Pol II en bcl-x humano supondría un nuevo mecanismo de regulación de la expresión génica mediada por el PR.

Abstract:
Steroid Receptors (SRs) regulate gene expression througth their interaction with the Hormone Response Elements (HREs) located in the promoter regions of their target genes. The classical mechanism of SR transcriptional activation explains that the SRs recruit modifying complexes to these regions, which in turn open the target chromatin thus, favoring the first steps of gene transcription. However, recently developed genome wide technologies, as ChIP-seq, revealed that a main part of SRs binding sites are located in intragenic regions. Additionaly, some chromatin modifying complexes classically found in the promoter regions of the SRs target genes were also found favoring the elongation process. In this sense, it was propossed that changes in the chromatin context in intragenic regions would affect Pol II elongation. The aim of this thesis is to analyze the putative effect of the SRs bound to their intragenic sites on Pol II elongation in hormone-regulated endogenous genes. To tackle this, we used T47D human breast cancer cell line treated with the synthetic progestin R5020 and bcl-x as a gene model. The results showed that, after the progestin addition, the Progesterone Receptor (PR) is recruited together with the acetyltransferases CBP and GCN5 and with the elongation factor PTEFb to different binding sites distributed along the intragenic region of bcl-x gene. The recruitment of these factors correlates with an increase of histone acetylation levels, the pantial decrease in nucleosome occupancy and the improvement of Pol II processivity along this gene. All together, these results suggest a new mechanism which involves the PR control of endogenous Pol II elongation.

"Efectos del sistema regulador CreBC sobre el flujo de carbono en Escherichia coli y su manipulación para incrementar la síntesis de compuestos de interés industrial" (2014-03-28). Godoy, Manuel Santiago. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La supervivencia de un organismo depende, al menos en parte, de su habilidad para sensar y responder a cambios en el ambiente. En las bacterias, los cambios en las características físicas y nutricionales del ambiente generan respuestas inmediatas, a través de la regulación de conjuntos de genes en respuesta a un estímulo específico del ambiente y a señales metabólicas. En el presente trabajo se evaluó el efecto de cambios en CreC, el sensor del sistema regulador de dos componentes CreBC, sobre el metabolismo central de E. coli. Se estudió el efecto de mutaciones en el gen creC en cepas crecidas en medio mineral M9 con glucosa y glicerol como fuente de carbono, y en distintas condiciones de aerobiosis. La ausencia de CreC generó mayores efectos en M9 glucosa y en bajas tensiones de oxígeno tanto para la secreción de metabolitos (acetato, formiato, lactato y succinato) como para las actividades enzimáticas acetato quinasa (ACK) y lactato deshidrogenasa (LDH). De los cuatro metabolitos mencionados, la cepa ΔcreC (DC1060) produjo más acetato, formiato y succinato y menos lactato, y reportó una mayor actividad ACK y menor actividad LDH. El estudio de los niveles de transcripción a través de fusiones trascripcionales del gen gfp (codifica la proteína verde fluorescente, Gfp) a los promotores de los genes de las enzimas estudiadas ackA (ACK) y ldhA (LDH) confirmaron que la menor actividad LDH de la cepa DC1060 se correspondía con niveles inferiores de transcripto del gen (en la fase exponencial). Para la fusión ackA-gfp, en cambio, los niveles de transcripción fueron leve pero significativamente menores en la cepa mutante respecto a la salvaje (K1060) en esta fase, en contraposición a lo observado para la actividad ACK. La trascripción de este gen en la fase estacionaria, pasó a ser mayor en la cepa DC1060, demostrando un alto nivel de complejidad en la dinámica regulatoria de CreC sobre ackA. Mediante estudios similares a los antes descriptospero realizados con mutantes para los genes ΔcreB, ΔcreC y la doble mutante ΔcreBC, se estableció que los efectos de CreC están mediados exclusivamente por CreB. Se realizaron ensayos fisiológicos en los que se observó que la cepa mutante es más sensible a agentes oxidantes como el peróxido de hidrógeno y el paraquat, probablemente como resultado de un estado intracelular más oxidado respecto de la cepa salvaje (como se pudo establecer a partir de los coeficientes /, y los niveles de NADH/NAD+ intracelulares). También se observó que esta cepa tiene un consumo de oxígeno más bajo (- 30%) que la salvaje. Se realizaron ensayos en biorreactor con diferentes niveles de aireación (bajo, medio y alto) y dos fuentes de carbono (glicerol y glucosa) para caracterizar fermentativamente a las cepas K1060 y DC1060, a fin de establecer una estrategia para mejorar la producción de succinato y PHB, en conjunto con los resultados mencionados. Las mayores diferencias entre ambas cepas se observaron nuevamente a bajas concentraciones de oxígeno. De estas diferencias se destacan los siguientes resultados: (i) No hubo producción de lactato, y los niveles de etanol fueron muy bajos para ambas cepas y fuentes de carbono; (ii) el succinato fue detectable sólo en la cepa mutante con glucosa, pero a niveles inferiores que los obtenidos en los cultivos de frasco agitado; (iii) el formiato y el acetato, en medio mineral con glucosa, se produjeron en mayor cantidad para la cepa ΔcreC; (iv) la relación / volvió a reflejar un estado de mayor oxidación intracelular en la cepa ΔcreC (sólo con glucosa); (v) en glicerol como fuente de carbono, se observó un lag más pronunciado y una mayor energía de mantenimiento en la cepa DC1060 respecto a la K1060. Cuando se evaluó la producción de PHB mediante la expresión heteróloga de los genes phaCAB de R. eutropha, se vio que en glucosa la cepa mutante produce casi un 50% más de este polímero. Al probar los efectos del bicarbonato sobre la producción de succinato, vimos que la síntesis de este último aumentaba sólo en la cepa mutante. Para ver si era posible mejorar la producción de estos metabolitos, construimos una colección de cepas con distintas mutaciones de forma de anular las vías metabólicas competitivas. Estas mutaciones involucraron a los genes ackA, ldhA, ptsG, adhE y, por su puesto, creC. En el caso del PHB, ninguna de las cepas mejoró el desempeño de la simple mutante ΔcreC, quizás debido a que ya se alcanzó el máximo nivel de polímero tolerable por la célula. En el caso del succinato, además se sobre-expresaron dos carboxilasas de E. coli (la PEP carboxilasa y la PEP carboxiquinasa), cada una en combinación con la enzima formiato deshidorgenasa (Fdh1) de Candida Boidinii. De las distintas combinaciones estudiadas, la cepa que tuvo mayor producción de succinato fue la triple mutante ΔcreC, ΔackA, ΔadhE, sobreexpresando las enzimas PEP carboxilasa y la Fdh1, llegando a alcanzar una concentración de 6 mM de succinato.

Abstract:
The survival of an organism depends, at least in part, on its ability to sense and respond to changes in the environment. In bacteria, changes in the physical and nutritional characteristics of the environment generate immediate responses, controlled through the regulation of sets of genes in response to specific environmental stimuli and metabolic signals. The effect of changes in CreC, the sensor of the two component CreBC control system, on the central metabolism of E. coli was evaluated In this work. The effect of mutations in creC on central metabolism, were analyzed in M9 mineral medium with glucose and glycerol as the carbon source, and under different oxygen availability conditions. The absence of CreC generated more changes in glucose and low oxygen tensions for the secretion of metabolites (acetate, formate, lactate and succinate) and for the activity of the enzyme acetate kinase (ACK) and lactate dehydrogenase (LDH). Of the four metabolites mentioned, the ΔcreC (DC1060) strain produced more acetate, formate and succinate and less lactate, and reported a higher activity of ACK and lower activity of LDH. The study of the transcription levels via transcriptional fusions of gfp (coding for the green fluorescent protein, Gfp), to the promoters of the genes of the enzymes studied: ackA (ACK) and ldhA (LDH), confirmed that the reduced LDH activity of strain DC1060 matched lower levels of gene transcript (in exponential phase) For the ackA-gfp fusion, however, transcript levels were slightly but significantly lower in the mutant strain compared to the wild type (K1060) at this stage, as opposed to the enzymatic activity observed for ACK. The transcript of this gene in the stationary phase became higher in the DC1060 strain, demonstrating a high level of complexity in the regulatory dynamics of CreC over ackA. On similar studies using a ΔcreB mutant, and a ΔcreBC double mutant, it was established that the observed effects are exclusively mediated by CreB. Physiological studies indicated that the mutant strain is more sensitive to oxidizing agents such as hydrogen peroxide and paraquat, probably resulting from a more oxidized intracellular state when compared to the wild type (as could be established through the / ratio, and the intracellular levels of NADH / NAD+). It was also noted that this strain has a lower oxygen consumption rate than the wild type (-30 %). Tests were performed in a bioreactor with different aeration levels (low, medium and high) and two carbon sources (glycerol and glucose) to characterize the fermentation behavior of K1060 and DC1060 strains in order to establish a strategy to improve the production of succinate and PHB. The largest differences between the two strains were again observed at low oxygen concentrations. These differences can be summarized as : (i) there was no lactate production, and ethanol levels were very low for both strains and carbon sources , (ii) succinate was detectable only in the mutant strain with glucose, but to lower levels than in shake flask cultures , (iii) acetate and formate were produced in greater quantities by the ΔcreC strain in mineral medium with glucose, (iv) the ratio /

"Efectos del tratamiento prolongado con AZT sobre células tumorales : acortamiento telomérico, inducción de senescencia y apoptosis, y reducción de tumorigenicidad" (2002). Tejera, Agueda Mercedes. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Efectos estructurales en el transporte de materia durante el secado de frutas" (2004). Nieto, Andrea Bibiana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El secado comercial de frutas involucra usualmente tratamientos de presecado (escalcado y deshidratación osmótica utilizando azúcares) dirigidos ya sea a mejorar la calidad del producto final o a mejorar la cinética de secado. La literatura sobre el efecto de estos tratamientos en la velocidad de transporte de humedad durante el secado convencional es aparentemente contradictoria. Ello puede atribuirse a la complejidad del proceso simultáneo de transferencia de calor y de masa durante el secado; a la gran variación en las propiedades físicas y estructurales entre frutas y vegetales y a la heterogeneidad estructural de los materiales biológicos. Los tejidos celulares son sistemas multifase y el agua puede migrar hacia fuera de las células por tres caminos posibles: por transporte transmembrana, por transporte simplástico y/o por transporte apoplástico, siendo este último la vía preferida por especies pequeñas como el agua. La impregnación con azúcares y el tratamiento térmico afectan, en mayor o menor grado de acuerdo a la severidad del proceso, la estructura del tejido vegetal, variando las características de la matriz y alterándose en consecuencia sus propiedades de transporte. El objetivo general de esta tesis fue analizar el efecto de las características estructurales en el transporte de agua durante la deshidratación en corriente de aire de frutas, aportando al conocimiento de los fenómenos de transporte en tejidos biológicos . Específicamente, se estudió el efecto del escalado y/o la impregnación con glucosa a presión atmosférica o bajo vacío en la cinética de secado de manzana. La evolución de los valores de densidad aparente, y en consecuencia, de la porosidad, fue correlacionada con las alteraciones micro y ultraestructurales sufridas por el tejido durante el tratamiento osmótico observadas en MO y ESEM. Los pretratamientos de escalcado y/o de deshidratación con glucosa (a presión atmosférica o bajo vacío) decrecieron significativamente la velocidad de secado en corriente de aire a 60°C durante el primer período de velocidad de secado decreciente de placas de manzana. El análisis de los cambios histológicos y ultraestructurales por microscopía óptica y microscopía electrónica de transmisión indicó que los distintos tratamientos no parecieron alterar las paredes celulares en forma severa (excepto en el escaldado). Pero hubo diferencias según el pretratamiento en la cantidad de glucosa incorporada, el encogimiento volumétrico, la ganancia de sólidos, la pérdida de agua y la pérdida de peso y la disrupción de las membranas celulares. La conducta durante el secado de las manzanas frescas, escaldadas, osmotizadas y escaldadas-osmotizadas fue comparada y explicada en base a los fenómenos citados, los que modificarían en mayor o menor grado la resistencia del tejido al flujo de agua, ya sea aumentándola o disminuyéndola.

Abstract:
Industrial drying of fruits usually involves predrying treatments (blanching, osmotic dehydration) to improve quality of final product and/or drying kinetics. The effects of these treatments on conventional drying rate reported in the literature are apparently not in agreement. This fact could be attributed to the high complexity of the simultaneous mass and heat transfer drying process, the wide variation in physical and structure properties among fruits and vegetables and the structural heterogeneity of biological materials. Cellular tissues are multiphase systems and water can flow out of cells by three ways: the transmembrane transport; the symplastic transport or the apoplastic transport, this last being the preferred way for small species like water. Sugar impregnation and thermal treatment change tissue structure, modifying matrix characteristics and consequently transport properties. General objetive of this thesis was to analyse the effect of structural characteristics on water transport during air drying of fruits, contributing to the knowledge of mass transport phenomena in biological tissues. The effect of blanching and/or glucose impregnation at atmospheric pressure or under vacuum on apple drying kinetis was specifically studied. During osmotic treatment, evolution of apparent density and porosity were correlated with the micro and ultrastructure modifications of the tissue as observed in LM and ESEM. Blanching and glucose osmotic dehydration significantly decreased air drying rate of apple plates at 60°c during the first falling rate period. LM and MET observations indicated that treatments (excepting blanching) did not alter in a severe way the cell walls. But, according to treatment, there were differences in glucose uptake, shrinkage, solids gain, water loss, weight loss and membranes disruption. Drying behaviours of fresh, blanched, osmotic dehydrated and blanched-osmotic dehydrated apples were compared and explained taking into account these phenomena, which would modify in different degree the tissue resistance to water flow, increasing or decreasing it.

"Efectos genómicos y no genómicos de progestágenos en carcinomas mamarios murinos en estadíos diferentes de hormono-dependencia" (2008). Bottino, María Cecilia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los estrógenos y la progesterona se unen a sus respectivos receptores para ejercer su acción. Los receptores para hormonas esteroides fueron históricamente considerados nucleares, sin embargo existen evidencias en la actualidad de un rol no-genómico de los mismos, ejercido a través de su localización en membrana. Si bien ya se ha descripto la presencia de receptores clásicos en membrana para estrógenos y glucocorticoides, aún no se han encontrado para la progesterona. El estudio del mecanismo de acción de los hormonas esteroideas sexulaes así como también de sus receptores específicos, receptores de estrógenos (RE) y de progesterona (RP), es sumamente importante en el campo de la oncología mamaria ya que en la clínica, la expresión de estos receptores es un parámetro esencial para determinar el tratamiento a seguir. En nuestro laboratorio se ha desarrollado el modelo experimental de obtención de adenocarcinomas mamarios murinos de origen ductal inducidos por administración prolongada de acetato de medroxiprogesterona (MPA) en ratones hembra BALB/c. Se establecieron líneas tumorales hormono-dependientes (HD) y hormono-independientes (HI) que expresan altos niveles de RE y RP. En estudios previos describimos dos sitios de unión a progesterona, el sitio clásico de alta capacidad, y otro nóvel de mayor afinidad y baja capacidad. El objetivo de este trabajo fue estudiar la presencia de los RP en la membrana celular de tumores HD y HI, y su participación en efectos genómicos y no- genómicos. Observamos la localización en membrana de ambas isoformas del RP y demostramos que, tanto agonistas como el antagonista RU-486, regulan por igual la distribución de los RP en la membrana y en el núcleo celular a tiempos cortos. Además, demostramos la expresión de los receptores nóveles para progesterona, recientemente descriptos, que también tienen localización en la membrana: mPRα, mPRβ y mPRγ. Se ha demostrado que la activación de los mismos induce una disminución de AMPc. Estudiamos dos vías paradigmáticas de señalización, como la activación de ERK 1/2 y la regulación de AMPc, que resultaron ser activadas tanto por MPA como por RU-486. Teniendo en cuenta que los receptores nóveles no se activan con estos ligandos, se sugiere la participación del RP clásico localizado en la membrana celular. Además detectamos que la progesterona, el agonista natural del RP, es capaz de desencadenar los mismos efectos que el MPA. Por último, analizamos el efecto biológico desencadenado por el antagonista y observamos que el tratamiento de un cultivo primario con RU-486 a concentraciones menores al Kd del receptor generó un efecto proliferativo, mientras que a concentraciones iguales o mayores que el Kd clásico, su efecto fue inhibitorio. Resumiendo, los efectos finales de la activación de RP localizado en la membrana celular difieren según la concentración de la hormona utilizada. En el caso del MPA, su efecto biológico es siempre proliferativo, sin importar la concentración utilizada. Cuando el tratamiento se realiza con RU-486, el resultado de la activación de estas vías depende de la concentración de hormona utilizada. Los resultados obtenidos en esta tesis sugieren el uso de dosis de antiprogestágenos en el tratamiento del cáncer que garanticen la obtención de efectos genómicos.

Abstract:
Estrogen and progesterone bind to their respective receptors to initiate their action. The steroid receptors were historically considered as nuclear, however, nowadays, many evidences suggest they may play a non-genomic role through their membrane localization. The understanding of the mechanisms related to hormone action has become a very important issue in the breast cancer field since the level of estrogen (ER) and progesterone receptors (PR) determine the therapy selection. In our laboratory, we have developed an experimental model of murine ductal mammary adenocarcinomas induced by the administration of medroxyprogesterone acetate (MPA), in BALB/c mice. We have established hormone-dependent (HD), and hormone-independent (HI) lines, both expressing high levels of ER and PR. In previous studies, we have described two binding sites to progesterone, the classical one, with a high capacity, and a novel site with higher affinity and lower capacity. The aim of this work was to study the presence of PR at the cell membrane of HD and HI tumors, and to study their role mediating genomic and non-genomic effects. We have detected both PR isoforms located at the cell membrane. We also demonstrated a similar distribution of membrane and nuclear PR after priming with MPA or with the antagonist RU-486. We have also detected the presence of the novel progesterone receptors mPR α, mPR β and mPR γ. The activation of these receptors has been reported to be associated with a decrease in cAMP levels. We have studied two paradigmatic signaling pathways, ERK 1/2 activation and cAMP regulation, that were similarly activated by MPA and RU-486, suggesting that the classical PR located at the cell membrane might be responsible for this effect. Progesterone was as efficient as MPA inducing ERK activation. These data, showing similar rapid effects mediated by agonist and antagonist prompted us to investigate the role of low concentrations of antagonist in cell proliferation. As expected, concentrations of RU-486 lower than those able to bind the classical PR to elicit the genomic effects, were able to stimulate cell proliferation, while higher concentrations were inhibitory. To sum up, our results suggest the presence of classical PR at the cell membrane of murine mammary carcinomas. The activation of these receptors with agonists or antagonists regulates non genomic pathways and PR distribution. In the case of MPA and progesterone, their biological effect is always proliferative, no matter the concentration used to treat the cells. RU-486, on the other hand, at low concentrations, not high enough to activate the classical binding site, will elicit only the proliferative signals, at higher concentrations, in spite of activating MAPK it will induce an inhibition of cell proliferation. These results suggest that in the clinic, concentrations high enough to activate the classic nuclear PR should be use to inhibit tumor growth.

"Efectos inhibitorios sobre el aprendizaje olfativo en la abeja doméstica (Apis mellifera)" (2012). Fernández, Vanesa Maribel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Entre los múltiples estímulos percibidos del entorno, los animales deben ser capaces de seleccionar aquellos que les sean útiles para sobrevivir. A tal efecto, las experiencias previas permiten diferenciar los estímulos relevantes de aquellos que no lo son; en especial esta Tesis se focalizará en los relacionados con la búsqueda y obtención de alimento. Cuando se pretende asociar un estímulo, que ha sido preexpuesto en el ambiente, a una recompensa, puede resultar difícil establecer una contingencia entre ellos. Este fenómeno ha sido definido como inhibición latente (IL) y se lo ha explorado a lo largo de esta Tesis usando como modelo experimental a la abeja Apis mellifera. A partir de ensayos de condicionamiento olfativo se evaluaron los efectos de volátiles preexpuestos tanto en el contexto social de la colmena como bajo condiciones experimentales controladas. Los volátiles preexpuestos en una colmena reducen las preferencias de las abejas hacia una fuente de alimento aromatizada con ese olor. Además, durante un condicionamiento clásico evaluado bajo el protocolo de extensión de probóscide, la preexposición olfativa dificulta la adquisición de una relación predictiva entre el olor preexpuesto y una recompensa. Esta reducción en el aprendizaje varía con la identidad del olor, siendo olor-específica. Si bien este fenómeno fue evidenciado para todas las categorías de edades de la casta obrera, en ninguna de ellas este efecto duró más de 24 hs. Asimismo, la preexposición de volátiles no provocó ningún cambio en la sensibilidad gustativa al azúcar de individuos de edades pre-recolectoras. Sin embargo, sí se observó que exposiciones prolongadas o mayores concentraciones del volátil afectan la persistencia de la IL. Finalmente, se estudiaron las vías aminérgicas involucradas en la IL de la abeja melífera; para lo cual se realizaron tratamientos farmacológicos que involucraron el uso de antagonistas de algunas aminas biogénicas (octopamina, dopamina y serotonina). Los resultados sugieren que la vía serotoninérgica podría estar involucrada en la modulación de la IL en la abeja melífera. Los resultados de esta Tesis muestran, por un lado, que los olores preexpuestos pueden reducir el rendimiento del aprendizaje asociativo si el mismo es subsecuentemente pareado con el alimento. Esta situación puede tener implicancias a nivel social, pudiendo influir en la propagación de información floral olfativa dentro de la colmena. Por otro lado, el hecho de que por primera vez se haya mostrado una interrupción de la IL mediante tratamientos farmacológicos abre nuevas perspectivas con relación al estudio de las vías neurales involucradas en este fenómeno en insectos.

Abstract:
Among all the stimuli perceived by animals in the environment, they must be able to select those that are useful for survival. In this context, previous experiences with the stimuli allow animals to differentiate those stimuli that are relevant from those that are not. This Thesis will focus on the olfactory experiences related to seeking and obtaining food. The retardation of associative learning as a function of prior stimulus exposure has been named Latent inhibition (LI) phenomenon, and it has been explored throughout this thesis by using the honey bee, Apis mellifera, as experimental model. The effects of volatile pre-exposure have been studied by using an olfactory conditioning procedure, both in the social environment of the hive and under controlled laboratory conditions. The pre-exposition to a volatile compound in a hive reduces the preferences of the bees for a certain food source scented with this odour. Furthermore, during a classical conditioning protocol assessed under the proboscis extension, olfactory preexposure reduces the acquisition of a predictive relationship between the pre-exposed odour and the reward. The LI effect varies with the odour identity and it has been found for the whole range of ages of workers bees. However, its effect did not last more than 24 h., unless the odour concentration was increased or its exposure prolonged. Moreover, the pre-exposition odour did not cause any changes in the gustative responsiveness for pre-foraging age bees. Finally, putative aminergic pathways involved in the LI- phenomenon in honey bees have been studied. Previously pharmacological treated individuals with antagonists of biogenic amines were exposed to a volatile compound, after which, their learning performances were studied. The results suggest that serotonergic pathway may be involved in the modulation of this phenomenon in honey bees. On one hand, the results of this Thesis show that pre-exposed odors may reduce the performance of associative learning if it is subsequently paired with food. This may have implications for the social level, because it may influence the spread of floral scent information within the hive. On the other hand, the fact that for the first time it has been shown a disruption of the IL by drug treatments opens new perspectives on the study of neural pathways involved in this phenomenon in insects.

"Efectos inmunomoduladores de extractos acuosos de hojas de Melia azedarach L." (1994). Courrèges, María Cecilia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Efectos inmunomoduladores del extracto acuoso de hojas de Trichilia Glabra" (1996). Benencia, Fabián. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Efectos letales y subletales de monoterpenos sobre vectores de Chagas y su posible uso como herramientas de control" (2015-04-14). Moretti, Ariadna Noelia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El control de vectores de la Enfermedad de Chagas se realiza en Argentina mediante la aplicación de insecticidas piretroides. En las últimas décadas, la aparición del fenómeno de resistencia a los piretroides y la necesidad de identificar sustancias menos peligrosas para los humanos y el ambiente, motivaron la búsqueda de alternativas naturales para el desarrollo de nuevas herramientas de control y diagnóstico entomológico (presencia de insectos vectores en viviendas). El objetivo de esta tesis doctoral fue explorar la bioactividad de sustancias de origen natural sobre los triatominos vectores de la Enfermedad de Chagas Triatoma infestans y Rhodnius prolixus. Para tal fin se evaluaron los síntomas visibles de intoxicación, la repelencia, el volteo, el efecto sobre la actividad locomotora y la capacidad expurgante, de once monoterpenos componentes de aceites esenciales (el éter cíclico 1,8-cineol, también conocido como eucaliptol, y diez alcoholes). Se describieron por primera vez en insectos los síntomas visibles de intoxicación por exposición a un monoterpeno (1,8-cineol). En ambas especies, este monoterpeno produjo síntomas similares a los que ocasionan insecticidas neurotóxicos como organofosforados y piretroides, y se registró por primera vez el fenómeno de distensión abdominal en insectos expuestos a un monoterpeno. Se evaluó por primera vez en triatominos la repelencia producida por los monoterpenos de origen botánico carvacrol, (-)-carveol, 1,8-cineol, citronelol, eugenol, linalool, mentol, α-terpineol, timol y (S)-cis-verbenol. La mayoría de los monoterpenos mostró un buen efecto repelente, similar al de la dietiltoluamida (DEET). La toxicidad de los once monoterpenos, aplicados como filmes sobre papel de filtro, siguió la tendencia observada por otros autores en otros insectos: fueron menos tóxicos que los insecticidas convencionales; el timol se destacó de los demás monoterpenos por su mayor toxicidad y las moléculas cíclicas fueron más tóxicas que las lineales. Cuando se aplicó en forma tópica en ninfas del primer estadio de ambas especies, el 1,8-cineol presentó una toxicidad muy baja en comparación con la de deltametrina, siguiendo también la tendencia esperable. La aplicación conjunta de BP no sinergizó la toxicidad de este monoterpeno. Se cuantificó por primera vez el efecto de monoterpenos sobre la actividad locomotora en triatominos. En ambas especies, la tetrametrina no resultó hiperactivante para el primer estadio (por esta razón, la deltametrina fue utilizada como control positivo) pero hiperactivó al quinto estadio (a concentraciones varios órdenes de magnitud menores que los monoterpenos). En el primer estadio de ambas especies, la mayoría de los once monoterpenos mostró efecto hiperactivante a partir de una concentración tres órdenes de magnitud superior a la del control positivo. Eugenol, 1,8-cineol, linalool, mentol, α-terpineol y timol resultaron buenos hiperactivantes y, por tanto, fueron seleccionados para su evaluación en ninfas del quinto estadio. Linalool y mentol hiperactivaron solamente al quinto estadio de T. infestans; 1,8-cineol y α-terpineol, solamente al quinto estadio de R. prolixus. Se evaluó por primera vez la capacidad de expurgue de monoterpenos en triatominos. Los monoterpenos que hiperactivaron a las ninfas del quinto estadio de T. infestans (linalool y mentol), también resultaron expurgantes. El linalool se destacó como expurgante en condiciones de laboratorio, si bien fue necesario aplicar una concentración trescientas veces mayor para obtener un tiempo equitóxico al del control positivo (tetrametrina). Al aplicar linalool y mentol, las ninfas abandonaron los refugios a una tasa aproximadamente constante a lo largo de treinta minutos. El eugenol, en cambio, presentó una dinámica de expurgue particular: en promedio cerca del 40% de las ninfas fue expurgado en menos de cuatro minutos y este valor se mantuvo constante hasta el fin del tiempo experimental. Los bioensayos de expurgue en condiciones de semi-campo, si bien preliminares, permitieron observar el fenómeno en condiciones más cercanas al futuro campo de aplicación de estos compuestos y alientan a continuar explorando la potencialidad de linalool, eugenol y sus mezclas como potenciales principios activos de un formulado expurgante. Los resultados de esta tesis apoyan la idea de que el desarrollo de herramientas para el monitoreo y control de triatominos con monoterpenos es factible. Sería de gran valor continuar esta línea de investigación mediante el estudio de diferentes formulaciones (incluyendo el agregado de sinergistas) de los monoterpenos destacados (fundamentalmente 1,8-cineol, eugenol, linalool y timol) y los métodos de aplicación más eficaces para cada caso (repelencia, volteo o expurgue). Palabras clave: monoterpenos, 1,8-cineol, Triatoma infestans, Rhodnius prolixus, repelencia, volteo, actividad locomotora, expurgue.

Abstract:
Vector control of Chagas disease in Argentina is performed by applying pyrethroid insecticides. In recent decades, the emergence of the phenomenon of resistance to pyrethroids and the need to identify less hazardous substances for human and the environment, led to the search for natural alternatives for the development of new control and entomological diagnosis (presence of insect vectors in houses) tools. The aim of this PhD thesis was to explore the bioactivity of natural substances on the triatomines, Chagas’ Disease vectors, Triatoma infestans and Rhodnius prolixus. To this end, the visible symptoms of intoxication, the repellency, the knock-down, the effect on locomotor activity and the flushing-out capacity of eleven monoterpenes components of essential oils (the cyclic ether 1.8-cineole, also known as eucalyptol, and ten alcohols), were evaluated. The visible symptoms of intoxication of insects exposed to a monoterpene (1,8-cineole) were, for the first time, described. On both species, this monoterpene produced symptoms resembling the ones caused by neurotoxic insecticides like organophosporates and pyrethroids, and the phenomenom of abdomen distension in insects exposed to a monoterpene, was for the first time registered. The repellency produced by the monoterpenes of botanical origin carvacrol, (-)-carveol, 1,8- cineole, citronellol, eugenol, linalool, menthol, α-terpineol, thymol y (S)-cis-verbenol; was for the first time evaluated. The mayority of the monoterpenes showed a good repellent effect, similar to the one of diethyl toluamide (DEET). The toxicity of the eleven monoterpenes, applied as films on filter papers, followed the tendency observed by other authors on other species: they were less toxic than conventional insecticides, thymol highlighted because of its higher toxicity and cyclic molecules were more toxic than linear ones. When applied topically on first instar nymphs of both species, 1,8-cineole presented a very low toxicity compared to the one of deltamethrin, also following the expected tendency. The joint application of BP did not synergize the toxicity of these monoterpene. The locomotor activity of monoterpenes in triatomines was for the first time quantified. On both species, tetramethrin did not result hyperativant for first instars (for this reason, deltamethrin was used as positive control) but hyperactivated fifth instars (at concentrations several order of magnitude lower than the ones for monoterpenes). The mayority of the evaluated monoterpenes on first instar nymphs of both species showed hyperativant effect from a concentration three orders of magnitude superior to the one of positive control. Eugenol, 1,8-cineole, linalool, menthol, α-terpineol and thymol resulted good hyperactivants and, because of that, were chosen for evaluation on fifth instars. Linalool and menthol hyperactivated only fifth instars of T. infestans, 1,8-cineole and α-terpineol only fifth instars of R. prolixus. The flushing-out capacity of monoterpenes on triatomines was for the first time evaluated. The monoterpenes which hyperactivated fifth instars of T. infestans (linalool y menthol), also showed flushing-out effect. Linalool highlighted as flushing-out agent in lab conditions, although it was necessary to apply a concentration three hundred times higher to obtain an equitoxic time to positive control (tetramethrin). Applying linalool and menthol, nymphs left their refuge at a rate aproximatly constant during thirty minutes. Eugenol, in contrast, presented a particular flushing-out dynamic: a percentage of near 40% of the nymphs was flushed-out in less than four minutes and this value kept constant till the end of the experimental time. The semi-field flushing-out bioassays, although preliminary, allowed to observe the phenomenom in conditions more close to the future field of application of these compounds and so encourage to continue exploring the potential of linalool, eugenol and their mixes as potential active ingredients of a flushing-out formulate. The results of this thesis support the idea that the development of control and monitoring tools for triatmines with monoterpenes is feasible. It would be valuable to continue this line of research by studying different formulations (including the addition of synergists) of the highlighted monoterpenes (mainly1.8-cineole, eugenol, linalool and thymol) and the methods of application more accurate for each case (flushing-out, repellence or knock-down). Keywords: monoterpenes, 1.8-cineole, Triatoma infestans, Rhodnius prolixus, repellency, knock-down, locomotor activity, flushing-out.

"Efectos letales y subletales de una pastilla fumígena conteniendo permetrina y pyriproxyfen sobre Aedes aegypti (Díptera: Culicidae)" (2011-12-14). Harburguer, Laura V.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El dengue es una infección viral aguda y sistémica, producida por un flavivirus. En América solamente ha sido demostrada la transmisión del dengue a través de mosquitos de la especie Aedes aegypti. En ausencia de una vacuna efectiva, la única forma de controlar la transmisión del dengue, es el control del vector. Durante este trabajo se estudió la estabilidad térmica de los insecticidas pyriproxyfen y un piretroide (permetrina o cis-permetrina) como parte de una formulación fumígena y sus efectos letales y subletales sobre las formas inmaduras y los adultos del mosquito Ae. aegypti. Se obtuvo una recuperación de los ingredientes activos en los humos de alrededor del 95% para el pyriproxyfen y del 50% para los piretroides. Estos mostraron una gran efectividad sobre las larvas y los adultos de Ae. aegypti. Se produjo una inhibición de la emergencia de los adultos de más del 95% con una dosis de 2 g/kg de pyriproxyfen; la mortalidad de los individuos ocurrió principalmente durante el estadio de pupa. Además, se encontró que este activo es capaz de reducir la fertilidad y la fecundidad de las hembras, aunque no interferiría con el desarrollo de las ovariolas. Se evaluó la efectividad de esta formulación en forma de pastilla en un ensayo de campo en la provincia de Misiones. Los resultados mostraron que su aplicación redujo las poblaciones del vector dentro de las viviendas. Por otro lado, la formulación fue ampliamente aceptada por la comunidad demostrando que ésta es capaz de participar en un programa de control de los mosquitos a través de la aplicación de herramientas de control de uso no profesional, como la pastilla fumígena.

Abstract:
Dengue disease is an acute viral and systemic infection, caused by a flavivirus. In America, only has been demonstrated dengue transmission by mosquitoes of the species Aedes aegypti. In the absence of an effective vaccine, the only way to control the transmission of dengue is vector control. In this work we studied the thermal stability of the insecticides pyriproxyfen and a pyrethroid (permethrin or cis-permethrin) as part of a smoke-generating formulation together with their lethal and sublethal effects on the immature stages and adults of Ae. aegypti. We obtained a recovery of the active ingredients in the smoke of about 95% for pyriproxyfen and 50% for pyrethroids. When released in the fumes of the smokegenerating formulation showed a great efficacy on the larvae and adults of Ae. aegypti. There was an inhibition of adult emergence over 95% with a dose of 2 g/kg pyriproxyfen, mortality occurred mainly during the pupal stage. It was found that pyriproxyfen is capable of reduce fertility and fecundity of females but not interfere with the development of the ovarioles. We evaluated the efficacy of this formulation in a field trial in the province of Misiones. The results showed that its application reduced vector populations inside the dwellings. On the other hand, the formulation was widely accepted by the community demonstrating that it is able to participate in a program of mosquito control through the application of non-professional control tools, such as the smoke-generating tablet.

"Efectos no-lineales en cosmología clásica y cuántica." (1994). El Hasi, Claudio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Una de los rasgos salientes de la Teoría de la Relatividad General es que las ecuaciones que gobiernan el campo gravitatorio son de caracter no-lineal. Debido a que los sistemas no lineales presentan una gran riqueza de comportamiento, aplicaremos nociones de Teoría de Sistemas Dinámicos a situaciones donde analizar estos efectos se hace ineludible en el Universo Primitivo. Comenzaremos con el estudio de un Universo de Friedmann - Robertson - Walker acoplado a un campo escalar, real y masivo. Dividiremos el Hamiltoniano del sistema en una parte integrable más una perturbación, analizando los límites de estabilidad y la existencia de resonancias de la dinámica no perturbada. Calcularemos el Espectro de Exponentes de Lyapunov en las regiones regular y caótica del espacio de fases. Dado que la noción de Exponente de Lyapunov es dependiente de la noción de medida, implementaremos el método de las Secciones de Poincaré como confirmación, independiente, de la aparición de caos. Para ampliar nuestra bateria de ejemplos consideraremos un modelo más completo, incluyendo constante cosmológica y autointeracción del campo escalar. Estudiando la estabilidad lineal de la dinámica, confirmaremos la posible existencia de caos en estos modelos generalizados. Implementaremos el método de las curvas Frecuencia - Frecuencia como forma sistemática de hallar condiciones iniciales para construir las Secciones de Poincaré en un entorno de las regiones resonantes. Al considerar un modelo de mayor relevancia cosmológica, confirmaremos la validez del Principio de Calvicie Cósmica en el mismo y verificaremos la aparición de estructuras en el espacio de fases (cantoros e islas de estabilidad), debido a cuya existencia el comportamiento del sistema dista mucho de ser trivial. Incluiremos un modo no homogéneo al campo escalar, para estudiar la reacción de estos modelos a1 incrementarse el número de grados de libertad del sistema, mostraremos que los resultados obtenidos son compatibles con un proceso de Difusión de Arnold. En un modelo semiclásico y autoconsistente, del Universo Primitivo, estudiaremos el proceso de creación de partículas. Confirmaremos que el mismo se debe a la presencia de interacciones resonantes entre los distintos grados de libertad. Esto muestra la estrecha relación entre caos a nivel clásico y creación de particulas a nivel semiclásico y la importancia de las contribuciones no lineales como fuente de efectos no triviales en Cosmología

"Efectos polares de los sustituyentes en la reacción de 5-R-2-nitroclorobencenos con tiofenato de sodio en metanol" (1964). Castro, Alfredo J.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se sintetizaron y purificaron para medidas cinéticas nueve compuestos que responden a la fórmula general 5-R-2-nitroclorobenceno y donde R representa un sustituyente variable: ciano, bromo, cloro, yodo, carboximetilo, metoxilo, metilo, t-butilo y amino. De ellos el carboximetilo no habia sido descripto previa mente en la literatura. Se midieron las velocidades especificas a diferentes temperaturas usando tiofenato de sodio como nucleófilo y metanol anhidro como solvente de reacción. Las técnicas utilizadas para la medida de la constante de velocidad fueron variadas de acuerdo con la reactividad del sustrato en estudio. Así, el 3-cloro-4-nitrobenzonitrilo, y el 3-cloro-4-nitrobenzoato de metilo fueron medidos por técnicas espectrofotométricas; mientras que el 2-cloro4- yodonitrobenceno, 2,4-dicloronitrobenceno, 5-bromo-2cloronitrobenceno, 3-cloro-4-nitroanisol, 3-cloro-4-ni trotolueno, 4-cloro-3-nitro-t-butilbenceno, 3-cloro-4-ni troanilina y o-cloronitrobenceno fueron medidos por técni cas de titulación álcali-acidimétricas. Se verificó, asimismo, la constante de velocidad específica del o-cloronitrobenceno por medida del ion cloruro liberado en el transcurso de la reacción. Se han calculado los parámetros termodinámicos: energía, entropía y energia libre de activación. Los va lores de kᴿ2 / kᴴ2 a 35° C calculado para cada sustituyente dió el siguiente orden de influencia total desde la posición meta al centro de reacción: CN > Br > I > Cl > CO2CH3 > OCH3 > C(CH3)3 > CH3 > H > NH2 El orden encontrado se puede relacionar con las energías de activación para cada grupo y con los efectos polares totales de los sustituyentes desde la posición meta al centro de reacción. Se ha puesto nuevamente de manifiesto en el presente trabajo, la alta reactividad nucleofílica del tiofenato de sodio. La comparación de los parámetros termodinámicos del o-cloronitrobenceno en sus reacciones con el tiofenato de sodio en metanol y el metilato de sodio en metanol, permi tió asociar a la energía de activación con el factor termodinámico que refleja la mayor reactividad del tiofenato de sodio, ya que la entropía de activación, permanecería constante dentro de ciertos límites. Una confirmación de lo anterior se tiene por comparación de los parámetros termodinámicos de las series 4-R-2-nitroclorobenceno con metilato de sodio en metanol y con tiofenato de sodio en metanol. También como en el caso precedente la energía de activación es el factor asociado a la mayor reactividad del tiofenato de sodio con respecto al metilato de sodio. La menor energía de activación de las reacciones del tiofenato de sodio que las del meti lato de sodio se asoció a la polarizabilidad del átomo de azufre presente en el tiofenato de sodio. Se ha correlacionado la reactividad de esta serie y también la correspondiente a las reacciones de 5-R-2-nitroclorobenceno con piperidina en benceno y 5-R-2-nitro-clorobenceno con piperidina en metanol, mediante una ecuación del tipo log Kr/ log ko = σρ. El método estadístico utilizado para tales correlaciones es el indicado por Jaffé y tanto los criterios de selección de los grupos, como también las limitaciones correspondientes, son los establecidos por Taft y colaboradores y Van Bekkum, Verkade y Wepster. Para todas las series estudiadas de esta manera se dan los valores de ρ, coeficiente de correlación r, desviación media del promedio ∆σ, y la desviación media, "s". Se han sintetizado ocho sulfuros sustituidos de fórmula general 5-R-2-nitrodifenilsulfuro en donde R comprende los siguientes grupos: ciano, carboximetilo, bromo, cloro, yodo, metoxilo, metilo e hidrógeno. Los correspondientes a los sustituyentes, ciano, carboximetilo, bromo, yodo y metoxilo son compuestos no descriptos previamente en la literatura. Para cada uno de los sulfuros mencionados se efectuó el correspondiente espectro ultravioleta usando metanol como solvente. Ocasionalmente se varió a un solvente hidrocarbonado (ciclohexano). Los espectros tienen caracteristicas generales muy semejantes. Presentan una banda en la zona de 2400-2500 Å - (Є =~ 4.300), otra en 2600-2700 Å (Є =~ 3.950) y finalmente una en la zona superior a los 3000 Å (Є =~ 3.700). La banda superior a los 3000 Å, asociada según diversos autores a la conjugación azufre-nitro, ha sido correlacionada mediante una relación del tipo λ max. ~valores de sigma de los sustituyentes. Los valores de sigma que mejor se correlacionaron son los correspondientes a ( σ ᴿp - σ I ) siendo σᴿp el valor de sigma para cada grupo en la serie de reactividad del 4-R-2- nitroclorobenceno con tiofenato de sodio en metanol y σ I el valor de los parámetros inductivos de Taft y colaboradores. Se encontró mediante esta correlación que grupos con efecto -M producen corrimientos hipsocrómicos y grupos con efecto +M corrimientos batocrómicos; en ambos casos con respecto al λ max. del 2-nitrodifenilsulfuro. Este comportamiento se explica en base a una alteración en la conjugación azufre-grupo nitro producida por la presencia del sustituyente en posición para con respecto al grupo nitro.

"Efectos térmicos en microscopía túnel asistida por láser" (1999). Landi, Sandra Marcela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la mayoria de los experimentos de microscopía túnel asistida por láser, se modula la intensidad de la luz incidente, a fin de discriminar la señal fotoinducida de la corriente túnel normal, y obtener la información adicional producida por la radiación. Al iluminar la muestra con un haz modulado en intensidad, la absorción no resonante de la luz produce la dilatación térmica de la punta y de la muestra a la frecuencia de modulación, oscureciendo otros posibles efectos inducidos por la radiación. Este ruido térmico limita el empleo de luz modulada, en los experimentos de fluorescencia u óptica no lineal de campo cercano, en los que se desea una alta resolución espacial. En esta tesis se propone un método en el cual la expansión térmica a la frecuencia de modulación puede ser reducida varios órdenes de magnitud. El método se basa en la iluminación de la muestra con la interferencia producida por dos haces con diferentes direcciones de propagación y frecuencias de modulación. El patrón de interferencia así formado da lugar a variaciones espacialmente periódicas de temperatura en la superficie de la muestra. Al variar la frecuencia de modulación de uno de los haces respecto al otro, la fase del patrón de interferencia se mueve dando lugar a ondas viajeras dentro de la zona iluminada. Se midió la reducción en la señal inducida con este esquema de ondas viajeras, obteniendo una reducción de más de tres órdenes de magnitud en la componente térmica de la señal.

Abstract:
Modulating the light intensity is a common technique for extracting the light induced information from background signal and noise in laser assisted scanning tunneling microscopy. When irradiating the sample with a modulated light intensity. nonresonant light absorption results in tip and sample heating and expansion at the modulation frequency, obscuring other possible laser induced mechanisms. This thermal noise limits the use of light modulation when very high spatial resolution is desired in fluorescence or nonlinear optics near field experiments. In this thesis we describe a method in which the thermal expansion at the modulation frequency can be reduced by orders of magnitude. The method is based on the irradiation of the sample with two interfering laser beams at different frequencies and incidence direction. When two light waves with different directions are superimposed, the interference pattern gives rise to spatially periodic temperature variations (thermal gratings). If the frequency of one of the beams is slightly shifted from that of the other beam, the phase of the interference pattem will move, giving light fringes travelling in the illuminated zone. In order to measure the quenching of the thermal expansion with this travelling fringe scheme, the reduction of the signal induced in a scanning tunneling microscope at the modulation frequency due to the optical heating was measured. With this setup, the thermally induced current was reduced more than three orders of magnitude.

"Efectos y adaptaciones inducidos por el tratamiento prolongado con agonistas dopaminérgicos en un modelo animal de la enfermedad de Parkinson" (2011). Larramendy, Celia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Levodopa y pramipexol son drogas de uso frecuente en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson. Levodopa es el fármaco más efectivo para aliviar las deficiencias motoras pero en la mayoría de los casos induce disquinesias (movimientos involuntarios anormales). Pramipexol ha sido relacionado con efectos neuroprotectores y con una menor inducción de disquinesias. Sin embargo, su eficacia disminuye a medida que progresa la enfermedad. Con el objetivo de analizar si estas diferencias se reflejan a nivel de la expresión de genes, inyectamos ratas con 6-hidroxidopamina en el estriado y caracterizamos un modelo de lesión moderada de la vía nigroestriatal. Luego de la cirugía los animales fueron tratados con levodopa o pramipexol, en dosis que produjeron un beneficio terapéutico similar, determinado como la disminución de la aquinesia, inducida por la lesión, de la pata delantera contralateral al hemisferio lesionado. Un grupo control recibió vehículo. Mediante la tecnología de microarreglos de ADN analizamos 3 tandas independientes de animales a fin de comparar los cambios en la expresión de genes inducidos por los tratamientos de los grupos: normal/vehículo, lesionado/vehículo, lesionado/levodopa, y lesionado/pramipexol. Encontramos que el tratamiento crónico con levodopa y pramipexol indujo cambios en la expresión de numerosos genes, demostrando que, además de las diferencias observadas en el perfil farmacológico y en los efectos clínicos (tanto anti-parkinsonianos como adversos), estas drogas también inducen importantes diferencias a nivel de la expresión génica. La exploración de los genes expresados diferencialmente permitió elaborar nuevas hipótesis, siendo éste el valor principal del análisis masivo de genes.

Abstract:
Levodopa and pramipexole are frequently used drugs in the treatment of Parkinson's disease. Levodopa is the most effective to alleviate motor disability but induces abnormal involuntary movements (dyskinesias). Pramipexole have been proposed to have neuroprotective effects and less induction of dyskinesias. In order to evaluate possible differences at the gene expression level, rats were injected with 6- hydroxydopamine in the striatum and a partial nigrostriatal lesion model was characterized. After surgery, animals were treated with levodopa or pramipexole at doses that produced similar therapeutic benefit, evaluated by the reversal of akinesia, induced by the lesion, of the forepaw contralateral to the lesioned hemisphere. A control group received vehicle alone. We analyzed 3 independent groups of normal and lesioned rats by DNA microarray technology in order to compare the genetic profile of the groups: normal/vehicle, lesioned/vehicle, lesioned/levodopa, and lesioned/pramipexole. We have found that cronic treatment with levodopa and pramipexole induced changes in gene expression. We have demostrated that besides the differences seen in the pharmacological profile and the clinic effects (antiparkinsonian and colateral effects) of levodopa and pramipexole, these drugs also have important differences at the gene expression level. The analysis of differentially expressed genes induced by these drugs allowed us to elaborate new hypothesis, being the most valuable result of massive gene analysis.

"Eficacia terapéutica y toxicidad de la terapia por captura neutrónica en boro (BNCT) en tejido con cancerización de campo: Estudio radiobiológico en un modelo experimental de cáncer bucal" (2012). Monti Hughes, Andrea. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
BNCT se basa en la reacción de captura entre el boro depositado preferencialmente en tumor y los neutrones térmicos, generando partículas letales de corto alcance que dañan al tumor, preservando el tejido normal. Previamente, demostramos el éxito terapéutico del BNCT en tumores de la bolsa de la mejilla del hámster. El desafío pendiente era inhibir el desarrollo de segundos tumores primarios (STP) a partir de tejido con cancerización de campo, minimizando la mucositis limitante de dosis. Los STP son frecuentemente la causa del fracaso terapéutico clínico en tumores de cabeza y cuello. El objetivo general de la presente tesis doctoral fue evaluar, por primera vez, la radiotoxicidad y potencial inhibitorio a largo plazo de BNCT sobre el desarrollo tumoral en un modelo de mucosa bucal con cancerización de campo desarrollado en la bolsa de la mejilla del hámster para seguimiento a largo plazo (8 meses). Estudiamos la radiotoxicidad y capacidad inhibitoria de diferentes protocolos de BNCT, variando las dosis y los protocolos de fraccionamiento. Por primera vez, evidenciamos el efecto inhibitorio de BNCT en un tejido con cancerización de campo a largo plazo. Para optimizar BNCT, determinamos la influencia de las condiciones de tratamiento sobre la ventaja terapéutica y radiotoxicidad.

Abstract:
BNCT combines selective accumulation of 10B carriers in tumor tissue with subsequent neutron irradiation, giving rise to lethal, short-range particles. Damage is limited largely to cells containing 10B. Previously, we demostrated the therapeutic efficacy of BNCT to treat tumors in the hamster cheek pouch. However, the inhibition of tumor development from field-cancerized tissue was still an unresolved challenge. In a clinical scenario, tumor development from field-cancerized tissue is frequently the cause of therapeutic faliure. The aim of the present PhD thesis was evaluate, for the first time, BNCT-induced potential radiotoxicity and long-term inhibition of tumor development in a model of oral field-cancerized tissue. We developed an oral precancer model in the hamster cheek pouch for long-term studies (8 months). We studied radiotoxicity and the potential inhibitory effect of different BNCT protocols, evaluating different dose levels, dose fractionation and interval between applications. For the first time, we evidenced the long-term inhibitory effect on tumor development of BNCT in field-cancerized tissue and showed that treatment conditions are pivotal to therapeutic advantage and radiotoxicity. The knowledge of BNCT radiobiology for experimental oral precancer contributes to the optimization of the technique.

"El Factor Natriurético Atrial en el páncreas exocrino: papel en eventos tempranos que conducen al desarrollo de pancreatitis aguda" (2016-05-30). Najenson, Ana Clara. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La pancreatitis aguda constituye una entidad nosológica prevalente caracterizada por la autodigestión del páncreas exocrino provocada por la activación in situ de las mismas enzimas que el páncreas produce. Se expresa como una forma leve autolimitada, o bien como una forma severa con elevada mortalidad principalmente como resultado de falla multiorgánica. Las causas y/o mecanismos que llevan a una u otra expresión son desconocidos, por lo que debido a su curso incierto constituye una preocupación clínica. Los eventos tempranos que conducen a su desarrollo no se hayan aún esclarecidos, si bien la activación del tripsinógeno y de la respuesta inflamatoria constituyen dos mecanismos disparadores independientes. En este trabajo de tesis abordamos el estudio del posible papel protector del factor natriurético atrial (ANF) en los eventos temprano que disparan la patología, particularmente la respuesta inflamatoria que lleva a la muerte de las células acinares eventualmente por necrosis y apoptosis mediante la utilización de un modelo animal (rata) validado de pancreatitis aguda. Asimismo, evaluamos la posibilidad de que el páncreas exocrino constituya una fuente extracardíaca de ANF. El presente estudio se sustenta en trabajos previos en los que observamos que el ANF regula fisiológicamente la funcionalidad del páncreas exocrino y atenúa la pancreatitis aguda experimental al estimular la exclusión de AMPc a través de proteína asociada a resistencia a multidrogas tipo 4 (MRP4). No obstante, este mecanismo no explicaría en su totalidad el papel protector del ANF. Los resultados mostraron que el ANF disminuye la respuesta inflamatoria desencadenada durante la pancreatitis aguda al reducir la expresión de los principales mediadores inflamatorios. El ANF redujo la activación del factor de transcripción NF-κB, íntimamente relacionado con la activación de genes que codifican para citoquinas pro-inflamatorias. En este sentido, disminuyó asimismo los niveles intrapancreáticos del factor de necrosis tumoral α (TNF-α), citoquina que juega un papel clave en la propagación de la respuesta inflamatoria. Por otra parte, disminuyó la expresión de enzimas inducibles durante la inflamación como la enzima óxido nítrico sintasa (iNOS) y ciclo oxigenasa 2 (COX-2) así como también su principal producto, la prostaglandina E2 (PGE2). La atenuación de la respuesta inflamatoria se correlacionó con modificaciones de la ultraestructura de las células acinares observada mediante microscopía electrónica de transmisión. El ANF atenuó el daño generado en la ultraestructura celular ya que disminuyó el swelling del retículo endoplásmico, el edema intra e intercelular y la presencia de autofagolisosomas. El ANF asimismo estimula la muerte celular por apoptosis y disminuye la necrosis, lo que constituye un efecto beneficioso, ya que en la pancreatitis aguda la apoptosis se correlaciona inversamente con la necrosis y así con la severidad de la patología. El ANF incrementa las células TUNEL positivas y la activación de las caspasas, lo que se relaciona la morfología de los núcleos observados por microscopia electrónica. Se observó asimismo que el ANF se expresa en el páncreas exocrino tanto a nivel de su ARN mensajero como a nivel de proteína, lo que implica que el páncreas sintetiza y expresa ANF maduro. Mediante la técnica de inmuno-oro se observó que el ANF se localiza en el retículo endoplásmico, mitocondrias y gránulos de zimógeno. En resumen, en este trabajo de tesis demostramos que el ANF atenúa la respuesta inflamatoria y estimula la apoptosis en la pancreatitis aguda experimental lo sustenta su papel protector en el desarrollo de la patología. Asimismo, observamos que el páncreas exocrino sintetiza y expresa ANF maduro, sugiriendo que tendría funciones paracrinas y/o autocrinas a nivel de las células acinares pancreáticas, en las que hemos demostrado la presencia de sus receptores.

Abstract:
Acute pancreatitis is a prevalent disease characterized by the pathologic autodigestion of the gland promoted by the digestive enzymes synthesized and secreted by the pancreas as a result of premature intra-pancreatic activation. The condition is usually mild and selflimiting, but in 10–15% of cases, it can be severe with associated multiorgan dysfunction and high mortality. The causes leading to one or other form of pancreatitis are presently unknown and due to its uncertain course, the disease still remains a clinical concern. The early events in the development of pancreatitis are not fully understood yet, although trypsinogen activation and the inflammatory response are two independent triggering mechanisms associated with the onset of the disease. In the present thesis we investigated the possible protective role of atrial natriuretic factor (ANF) in the early events triggering acute pancreatitis, particularly the inflammatory response that leads to acinar cell death either by necrosis, apoptosis or both. We also evaluated the exocrine pancreas as a possible extra cardiac source of ANF production. The present study is based on previous works from our laboratory showing that ANF regulates pancreatic functionality and attenuates acute pancreatitis by stimulating cAMP extrusion through multidrug resistance associated protein type 4 (MRP4). However, this mechanism would partially explain ANF beneficial role in the disease. Results showed that ANF attenuated the inflammatory response triggered in acute pancreatitis by reducing the expression and/or level of the major inflammatory mediators. ANF reduced the activation of the transcription factor NF-κB, intimately involved in the stimulation of genes encoding pro-inflammatory cytokines. In this sense, ANF also diminished tumor necrosis factor α (TNF-α) intrapancreatic levels, a key cytokine involved in the propagation of the inflammatory response. The atrial factor also reduced the expression of inducible enzymes like nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase 2 (COX-2) and its main metabolite, prostaglandin E2 (PGE2). The attenuation of the inflammatory mediators correlated well with the ultrastructural changes observed in pancreatic acinar cells by transmission electron microscopy. ANF reduced acinar cell damage, it diminished endoplasmic reticulum swelling, intra and intercellular edema, and the presence of autophagosomes. ANF also stimulated programmed cell death (apoptosis) and diminished necrosis, which is a beneficial effect, given that in acute pancreatitis apoptosis inversely correlates with necrosis and with the severity of the disesase. ANF increased the number of positive TUNEL cells and caspases activation. These findings correlate well with the morphology of the nuclei observed by transmission electron microscopy. In the present study it was also observed that ANF mRNA and protein are expressed in the exocrine pancreas, supporting that the gland synthetizes and expresses mature ANF. Immunogold labeling electron microscopy studies showed that ANF localizes to endoplasmic reticulum, mitochondria and zymogen granules. In summary, this thesis shows that in experimental acute pancreatitis ANF attenuates the inflammatory response and stimulates apoptosis, supporting the protective role of this peptide in the development of the disease. Furthermore, the exocrine pancreas synthetizes and expresses mature ANF, suggesting that the atrial peptide may act in a paracrine and/or autocrine fashion on the acinar cells where we have previously reported the presence of natriuretic factor receptors expression.

"El Helminthosporium turcicum Pass. en la República Argentina" (1938). Campi, María Dolores. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"El Heparán Sulfato y la descondensación del núcleo espermático humano: estudio de su rol específico en dicho proceso y caracterización molecular de la interacción Heparán Sulfato-ADN-Protaminas" (2012). Julianelli, Vanina Laura. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
A diferencia de las células somáticas, el espermatozoide posee su cromatina empaquetada principalmente por protaminas en lugar de histonas. Las protaminas son proteínas pequeñas y básicas, debido a su alto contenido de residuos lisina, arginina y cisteína. Las cisteínas forman puentes disulfuro intra e intercatenarios, lo que le proporciona al núcleo espermático gran estabilidad y resistencia para poder atravesar el tracto masculino, el femenino y llegar con su ADN intacto hasta el sitio de fecundación. Una vez que el espermatozoide penetra en el ovocito, es imprescindible que se produzca la descondensación de su cromatina, es decir el desempaquetamiento del ADN para poder reemplazar las protaminas por histonas ovocitarias. La descondensación de la cromatina consiste en dos eventos, deben reducirse los puentes disulfuro (tiorreducción) y removerse las protaminas. Las moléculas involucradas en estos procesos son el glutatión reducido (GSH) y el heparán sulfato (HS) ovocitarios. Hasta el momento se consideraban eventos independientes y sucesivos: primero el GSH tiorreduce las protaminas, y luego el HS las remueve. Sin embargo, nuestros resultados indican que estos procesos podrían ser simultáneos y cooperativos. El objetivo de esta tesis fue avanzar en el estudio del mecanismo de la descondensación de la cromatina del espermatozoide humano in vitro en presencia de heparina (análogo estructural del HS) y GSH y su extrapolación al mecanismo in vivo durante la fertilización. Al coincubar espermatozoides humanos o núcleos espermáticos aislados con heparina y GSH, se produce un mayor porcentaje de descondensación de la cromatina, con respecto a la incubación en forma secuencial con los mismos agentes, independientemente del orden de los mismos. Utilizando naranja de acridina como técnica para evaluar en forma indirecta el estado de tiorreducción de los núcleos espermáticos, se observa que la heparina colabora con el GSH en la tiorreducción, durante la descondensación. Estos resultados fueron confirmados utilizando monobromobimane como método directo para evaluar tiorreducción. Los resultados aportados por esta tesis indican que la tiorreducción producida por el GSH, y la remoción de las protaminas producida por la heparina, durante la descondensación de la cromatina de espermatozoides humanos in vitro, ocurriría en forma simultánea, y no secuencial, ya que ambos factores cooperarían entre sí.

Abstract:
Unlike somatic cells, sperm have a highly packed chromatin due to the presence of protamines instead of histones. Protamines are small basic proteins, very rich in cysteine, lysine and arginine. Cysteine residues form disulfide bonds, both intra and interchain, rendering the sperm nucleus high stability and resistance during transit along the male and female reproductive tracts, thus enabling the spermatozoon to arrive at the fertilization site intact. Once the sperm penetrates the oocyte, chromatin decondensation must occur, implying the unpacking of DNA through the replacement of protamines by oocyte histones. Decondensation comprises two steps: disulfide bonds must be reduced (thioreduction) and protamines must be removed. The molecules involved in these steps are reduced glutathione (GSH) and heparan sulfate (HS) from the oocyte. Until now, these events were considered independent and consecutive: first GSH thioreduced protamines and, then HS removed them. Our results indicate otherwise, suggesting that both processes could be simultaneous and cooperative. The aim of this thesis was to advance in the study of the mechanism of nuclear decondensation of human sperm in vitro, using heparin (HS structural analog) and GSH and the extrapolation to the in vivo mechanism during fertilization. A higher degree of decondensation was observed upon coincubating of human sperm or isolated nuclei with heparin and GSH, compared to sequential incubation with the same agents, regardless of the order in which they were added. Use of an acridine orange staining technique as a means to indirectly evaluate the thioreduced status of sperm chromatin, revealed that heparin enhanced GSH thiol reducing activity, suggesting the existence of a cooperative effect between both reagents during decondensation. These results were confirmed by direct thiol reduced status evaluation uthrough labeling of free thiols in sperm chromatin with monobromobimane. The results presented herein indicate that protamine thiol reduction by GSH and removal of protamines by heparin during chromatin decondensation of human sperm in vitro, occur simultaneously rather than sequentially, since a cooperative effect could be observed between both decondensing agents.

"El Lab - fermento" (1922). De Miranda, Rosalía D. M.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"El Río Paraná como modelador del ambiente de la distribución marginal sur de Alouatta caraya (Primates, Platyrrhini)" (2000). Szapkievich, Valeria Beatriz. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En Primates, la distribución geográfica se asocia a diversos factores entre los cuales, los hábitos alimentarios y el tamaño corporal pueden ser considerados como los más importantes al momento de determinar su capacidad para superar posibles barreras ecológicas. Diversos estudios han tratado de caracterizar la posible relación entre la distribución geográfica y determinados parámetros biológicos. El genoma de las formas actuales de Platyrrhini y en especial el de ceboideos de distribución marginal sur, parecen mostrar diferentes estrategias adaptativas en su distribución. Es así como cobran importancia el estudio de las variantes alozímicas y su probable asociación con la distribución geográfica. La relación entre reordenamientos eucromáticos y heterocromáticos, como dos variables vinculadas con el proceso especiogénico no presentan los mismos patrones ya que mientras los cébídos muestran importantes regiones del cariotipo con secuencias altamente repetidas de tamaño y ubicación variables, detectables por bandas C, los atélidos exhiben una mínima proporción siendo el ejemplo paradigmático el de los aulladores. En especial la especie monotípica que muestra menor variabilidad estructural resulta ser Alouatta caraya cuya distribución marginal sur es la más austral dentro de los límites de nuestro país y se vincula con la cuenca del río Paraná. Esclarecer la posible relación entre Primates y grandes ríos en Argentina se consideró indispensable para comprender el proceso especiogénico. Para ello se caracterizó genéticamente poblaciones de Alouatta caraya y se la comparó con otros cinco ceboideos y en particular con Cebus apella de localidades argentinas y paraguayas cercanas al río Paraná. Para concretar los análisis comparativos se abordaron metodologías citogenéticas: técnicas de bandas G y C, y bioquímicas: electroforesis de proteínas. Siendo A. caraya una especie de gran tamaño, con dieta amplia y capacidad colonizadora, se esperaba que el río no se constituyera en una barrera, distnbuyéndose libremente en ambas márgenes. Esta especie constituyó así un modelo único para poner a prueba la hipótesis sobre los grandes ríos como barreras efectivas para la distribución en los Primates. En la distribución marginal sur de esta especie, el Paraná, por sus caracteristicas particulares de rio caudaloso podría comportarse como determinante del aislamiento reproductivo en la distribución marginal de Primates en Argentina. De allí que los objetivos fundamentales del trabajo de tesis fueron: Caracterizar la variabilidad genética de Alouatta caraya de Argentina y poner aprueba la hipótesis sobre los grandes ríos como barreras geográficas. Para ello se estudiaron 69 individuos de vida silvestre provenientes de 5 localidades y más de 70 individuos de Alouatta caraya, Cebus apella, Saimiri boliviensis, Aotus azarae y Ateles paniscus provenientes de diversos centros de cautiverio. Se observaron 4 loci polimórficos en Alouatta caraya, sobre 15 estudiados. Se compararon los perfiles electroforéticos de las 5 especies y los valores de diversidad y distancia genética de Alouatta caraya. A nivel citogenético se determinó el 2n de los individuos estudiados y se analizaron los patrones de bandas G y C. La similitud de los valores de las frecuencias alélicas y de la diversidad genética de las poblaciones, el bajo nivel de diferenciación observado entre las poblaciones y la homogeneidad cariotípica hallada, permitió decir que: en el límite austral de la distribución, el río Paraná no constituirá un barrera para los aulladores sino más bien actuaría como corredor, promoviendo la dispersión de la especie. La caracterización genética de las poblaciones de cautiverio pueden servir como reservorios de variabilidad para utilizar en programas de reproducción en cautiverio y reintroducción de especies amenazadas o en peligro de extinción.

Abstract:
In Primates, geographic distribution is associated to several factors among which, diet and body size can be considered as the most important ones when determining their ability to cross possible ecological barriers. Different studies have attempted to characterise the possible relationship between geographic distribution and certain biological patterns. The genome corresponding to the present Platyrrhini, specially the one of Ceboidea of southern marginal distribution, seems to show different adaptative strategies in its distribution. Thus the importance of the alozymic variability study and its probable association with geographic distribution. The relationship between the euchromatic and heterochromatic rearrangements, as two variables related to the speciogenic process, do not have the same pattern. While Cebidae shows important regions of the caryotype with highly repeated sequences of variable size and distribution, detected by C band pattern, Atelidae shows it in a minimun proportion, turning the howlers into the paradigmatical example. Alouatta caraya is a monotipic specie that shows less structural variability, whose distribution of the stream river banks is the southemmost within our country frontiers and is connected with the Paraná river. To understand the speciogenic process, the possible relationship between Primates and big rivers in Argentina was considered indispensable. To concrete the compared analysis, cytogenetic methodologies: G and C banding techniques and biochemical techniques: protein electrophoresis. Being Alouatta caraya a big species, with a huge diet and colonizing capacity, it was expected that the river wouldn't be a barrier, letting the species being freer distributed in both sides. This species became in that way an unique model to test the hypothesis about the big rivers as effective barriers for the distribution of the Primates. On the southern marginal distribution of this species, the Paraná river, because of their particular characteristics of being a river with strong currents could appear as the determining cause of the reproductive isolation in the marginal distribution of Primates in Argentina, So the objectives of this thesis were: characterise the genetic variability of Alouatta caraya of Argentina and to test the hypothesis about big rivers as geographic barriers. For that 69 Wildlife individuals from 5 localities and more than 70 captive specimens of A. caraya, Cebus apella, Saimiri boliviensis, Aotus azarae and Ateles paniscus from different breeding centres. From 15 loci studied, four of them were polymorphic in Aloualta caraya. Electrophoretic profiles from the 5 species were compared and diversity and genetic distances values from Alouatta caraya were obtained. To the cytogenetical level, 2n was determined for al the studied individuals and G and C banding patterns were analysed. The similar values of the allelic frequencies and those of the genetic diversity of the populations, the low level of differentiation observed between populations and the caryotipic homogeneity founded, allowed to say that: in the southernmost limit of black howlers distribution, the Paraná river wouldn't be a barrier, but a corridor , promoting the species dispersion. The genetic characterisation of captive populations could serve as variability reservoirs to use in reproductive programs in captivity and to reintroduce threatened species or in danger to extinction.

"El S no proteico sanguíneo" (1935). De Meio, Romano Humberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"El Smilodón Bonaërensis, Muñiz : estudio osteológico y osteométrico del gran tigre fósil de la Pampa comparado con otros félidos actuales y fósiles" (1933). Méndez Alzola, Rodolfo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"El Tabaco : Contribución al estudio de los tabacos argentinos" (1906). Comín, José. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"El Tasiómetro" (1888). Quiroga, Atanasio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"El aceite castor deshidratado : su fabricación y control" (1942). Margheritis, Horacio José. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"El arsenito de sodio, un disruptor endócrino que afecta el eje reproductivo y la homeostasis de la glucosa" (2014-12-18). Bourguignon, Nadia Soledad. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La contaminación con As (As) en el agua de bebida se considera una amenaza para la salud en todo el mundo, ya que está asociado a un mayor riesgo de contraer enfermedades como cáncer de piel y pulmón, provocar efectos indeseables sobre el desarrollo, la reproducción las secreciones internas y alteraciones cardiovasculares. Debido a que el As puede actuar como un disruptor endócrino aquí investigamos el efecto de la exposición a As, durante períodos críticos del desarrollo neuroendócrino como es la gestación y las semanas postparto, sobre el eje reproductivo y el metabolismo de la glucosa, en las madres y sus crías. Se administraron 5 (A5) o 50 ppm (A50) de arsenito de sodio en el agua de bebida a ratas Sprague Dawley preñadas, desde el día 1 de gestación hasta el sacrificio (2 meses postparto). Al destete, se dividieron las crías en dos grupos: uno continuó recibiendo el mismo tratamiento que la madre y el otro recibió agua destilada hasta el día del sacrificio (4 meses). En las madres, la exposición a As produjo alteraciones en la homeostasis de la glucosa durante la preñez, probablemente alterando la funcionalidad de las células β, incrementando el riesgo de desarrollar diabetes gestacional. Además, alteró la fisiología reproductiva, sugiriendo el desarrollo de una falla ovárica prematura. Las crías expuestas a As durante el desarrollo presentaron alteraciones en la fisiología reproductiva, principalmente las hembras, mientras que el metabolismo de la glucosa no se vio afectado.

Abstract:
Arsenic contamination in drinking water is considered a worldwide threat to health, that is associated with an increased risk of diseases such as skin and lung cancer, cause undesirable effects on development, internal reproduction secretions and cardiovascular disorders. Because As can act as an endocrine disruptor, here we investigated the effect of As exposure, during critical periods of neuroendocrine development as gestation and postnatal weeks, on the reproductive axis and metabolism of glucose in dams and their offspring. We administered 5 (A5) or 50 ppm (A50) of sodium arsenite in drinking water to Sprague Dawley rats from gestational day 1 until sacrifice (two months postpartum). At weaning the offspring were divided in two groups: one of each continued to receive the same treatment and the other one received distilled water until sacrifice (4 months of age). In dams, As exposure induces glucose homeostasis alterations during pregnancy, probably by altering β-cell function, increasing the risk of developing gestational diabetes. In addition, profoundly impaired reproductive physiology, suggesting premature ovarian failure due to arsenic exposure, may have developed. Offspring rats exposed to arsenic during development present altered reproductive physiology, mainly females, while metabolism is not affected.

"El cadmio como disruptor endocrino. Estudios de la exposición al cadmio sobre la adenohipófisis de rata" (2012). Miler, Eliana Andrea. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Introducción: El cadmio (Cd2+) es un contaminante ambiental que produce numerosos efectos tóxicos en los organismos. Este metal puede actuar como un disruptor endocrino en diferentes tejidos. La adenohipófisis es la glándula directriz y presenta una alta sensibilidad al Cd2+. Objetivos: 1) Investigar posibles formas de tratamiento que reviertan los efectos inducidos por la exposición crónica al Cd2+ en la adenohipófisis de rata in vivo. 2) Investigar el papel xenoestrogénico del Cd2+ a nivel adenohipofisario. Resultados: 1) La exposición al Cd2+ in vivo induce estrés oxidativo y disminuye los niveles séricos de prolactina (PRL) y de hormona luteinizante (LH). La melatonina, administrada a posteriori de la exposición al Cd2+, revierte los efectos del metal sobre la expresión de la hemo-oxigenasa-1, mientras que tiene un efecto per se sobre la expresión de la metalotioneína-1 y de la óxido nítrico sintasa 1. El cese de la exposición al Cd2+, en cambio, revierte totalmente los efectos del metal sobre los marcadores de estrés oxidativo y sobre los niveles séricos de PRL y LH. 2) El Cd2+, en concentraciones nanomolares, es capaz de inducir la proliferación celular y la secreción de PRL en las células adenohipofisarias. Ambos efectos son mediados por el receptor de estrógenos alfa (REα). Este metal también regula la expresión proteica del REα y de sus variantes truncadas. El Cd2+ y el estradiol muestran un efecto cooperativo sobre la expresión del mensajero del REα y del de PRL. Conclusión: El Cd2+ es un disruptor endocrino que inhibe o estimula la secreción hormonal adenohipofisaria, efecto que depende del mecanismo involucrado: generación de estrés oxidativo o efecto xenoestrogénico.

Abstract:
Introduction: Cadmium (Cd2+) is an environmental contaminant that produces many toxic effects on organisms. This metal can act as an endocrine disruptor in different tissues. The anterior pituitary gland is the directive gland and presents high sensitivity to Cd2+. Objetives: 1) To investigate possible forms of treatments those reverse the effects induced by Cd2+ chronic exposure in the rat anterior pituitary gland in vivo. 2) To investigate Cd2+ xenoestrogenic role at anterior pituitary level. Results: 1) Cd2+ exposure in vivo induces oxidative stress and decreases prolactin (PRL) and luteinizing hormone (LH) serum levels. Melatonin, administered a posteriori of Cd2+ exposure, reverses metal effects on heme oxygenase-1 expression, while having a per se effect on metallothionein-1 and nitric oxide synthase 1 expression. Suspension of Cd2+ exposure, instead, completely reverses metal effects on oxidative stress markers and serum levels of PRL and LH. 2) Cd2+, in nanomolar concentrations, is able to induce cellular proliferation and PRL secretion in anterior pituitary gland cells. Both effects are mediated by the estrogen receptor alpha (ERα). The metal also regulates protein expression of ERα and its truncated variants. Cd2+ and estradiol show a cooperative effect on ERα and PRL mRNA expression. Conclusion: Cd2+ is an endocrine disruptor that inhibits or stimulates anterior pituitary gland hormonal secretion and its action depends on the involved mechanism: oxidative stress generation or xenoestrogenic effect.

"El citoesqueleto cortical apical en células epiteliales : función de los filamentos intermedios" (1994). Rodríguez, Marcelo Luis. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"El complejo Rhizoctonia en la Argentina : Distribución, patogenicidad y biocontrol" (1994). Gasoni, Amelia Laura. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"El complejo de ubiquitinación SCF en Trypanosoma brucei y su función en la regulación del ciclo celular" (2010). Rojas, Federico. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El sistema ubiquitina-proteasoma es una vía reguladora fundamental para controlar la estabilidad de las proteínas dentro de varios procesos celulares, como la señalización y el ciclo celular. En respuesta a señales particulares, proteínas reguladoras específicas son marcadas con una cadena de moléculas de ubiquitina a través de la acción de una cascada enzimática compuesta por una enzima activadora de la ubi- quitina (E1), una enzima conjugadora de la ubiquitina (E2), y una ubiquitina ligasa (E3). Las E3 son responsables de unir los sustratos y acercarlos a la E2 cargada con ubiquitina, la cual luego transfiere la ubiquitina al sustrato y a la siguiente ubiqui- tina de la cadena en una reacción secuencial. Una de las ubiquitina ligasa E3 res- ponsables en el control directo de proteínas involucradas en el ciclo celular es el complejo SCF (SKP1-CUL1-F-box). En esta tesis se estudió cuál es la función de las proteínas que forman parte del complejo SCF en la regulación del ciclo celular de Trypanosoma brucei. El análisis de los genomas de Tripanosomátidos mostró que las cuatro proteínas que forman parte del complejo se encuentran conservadas, a excepción de las proteínas F-box. Utilizando la técnica de ARN de interferencia en los dos estadios del ciclo de vida de Trypanosoma brucei, se determinó en que fase del ciclo celular estas proteínas tienen una función preponderante. Los resultados obtenidos muestran que las subunidades del complejo actúan en diferentes momen- tos del ciclo celular. No solo se demostró que la actividad del complejo SCF es im- portante para el crecimiento de los parásitos in vitro, sino que la enzima conjugadora de ubiquitina es necesaria para que los parásitos establezcan una infección en un hospedador mamífero. A su vez, se utilizó la técnica de Electroforesis bidimensional diferencial en gel (2D-DIGE) con el objetivo de identificar posibles sustratos del complejo de ubiquitinación. Este trabajo describe por primera vez la actividad de las subunidades homólogas del complejo SCF en el parásito Trypanosoma brucei.

Abstract:
The ubiquitin–proteasome system (UPS) is a fundamental regulatory pathway for controlling protein stability that underlies many cellular processes, such as signaling and cell cycle progression. In response to particular signals, specific regulatory pro- teins are tagged with a chain of ubiquitin molecules through the action of an enzyma- tic cascade composed of an E1 ubiquitin activating enzyme, an E2 ubiquitin conjuga- ting enzyme (Ubc), and an E3 ubiquitin ligase. E3s are responsible for binding subs- trates and for bringing substrates into the proximity of a ubiquitin-charged E2, which then transfers ubiquitin to the substrate and to the ensuing ubiquitin chain in a pro- cessive reaction. One of the E3 responsible for the ubiquitination of cell cycle regula- tors is the SCF complex (SKP1-CUL1-F-box). In this thesis, we have studied the function of the proteins that form the core of the SCF complex in the Trypanosoma brucei cell cycle. The analysis of the Trypanosome genomes showed us that the four core subunit homologs are conserved, with the exception of the F-box proteins. Using RNA interference in both life cycle stages of Trypanosoma brucei, we were able to determine the cell cycle stages in which these proteins have important roles. The obtained results show that the subunits of the complex act at diferent points in the cell cycle. Not only we demonstrated that the activity of the complex is important for the parasites growth in vitro, but we showed that the ubiquitin conjugating enzyme is indispensable for establishing an infection in a mammalian host. At the same time, we utilized the Two-dimensional gel electrophoresis (2D-PAGE) technique for the purpose of identifiying possible substrates of the ubiquitination complex. This work analizes for the first time the activity of the subunits of the SCF complex in a lower eukaryote organism.

"El criterio científico en la industria quesera" (1921). Warnes, Manuel Ignacio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"El decaimiento libre de flujos turbulentos rotantes" (2012). Teitelbaum, Tomás. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis se presenta un estudio detallado del decaimiento libre de flujos turbulentos rotantes tridimensionales (3D), y de flujos rotantes y estratificados en la aproximación cuasi-geostrófica de superficie, sometidos a distintas condiciones iniciales. En el caso de la turbulencia rotante 3D se usa la conocida cuasi- bidimensionalización para predecir los distintos decaimientos, proponiendo un método original que consiste en estudiar la energía presente en modos bidimensionales (2D) y 3D de manera independiente. Con el mismo fin, se introduce el uso de dos nuevas magnitudes conservadas anisótropas, relacionadas con el momento lineal y angular en la dirección paralela al eje de rotación. Los resultados indican que las leyes del decaimiento de la energía no son universales, dependiendo de la forma en que los flujos son excitados inicialmente. Las leyes de potencia observadas para el decaimiento son afectadas por las correlaciones en las escalas grandes, por la cantidad neta de helicidad presente inicialmente, por el grado inicial de anisotropía, y por la formación de estructuras coherentes. Para todos los casos estudiados se logra predecir las leyes de potencia observadas en las simulaciones mediante modelos fenomenológicos, conocidas las condiciones iniciales. Los flujos estratificados fuertemente rotantes se estudian utilizando la aproximación cuasi-geostrófica de superficie, derivada a partir de las ecuaciones de Navier-Stokes. Se presentan soluciones estadísticas de equilibrio para las ecuaciones ideales, verificando su validez en simulaciones numéricas. Las soluciones estadísticas del sistema ideal permiten predecir el sentido de la transferencia y cascadas de las dos magnitudes cuadráticas (la pseudoenergía y la pseudo-enstrofía) conservadas por el sistema. A partir de estos resultados se predice la tasa de decaimiento de la pseudo-enstrofía, teniendo en cuenta el efecto de las estructuras coherentes en el flujo. La predicción es verificada para número de Reynolds muy alto en simulaciones del sistema viscoso y en simulaciones ideales.

Abstract:
In this thesis we present a numerical study of freely decaying turbulent rotating three dimensional (3D) flows, and of rotating and stratified fluids under the surface quasi-geostrophic approximation. In both cases we explore a wide variety of initial conditions. In the case of 3D rotating turbulence we propose an original approach considering the energy contained in 2D and 3D modes separately, and take advantage of the well known bidimensionalizating process common in these systems. Also, we introduce two new anisotropic conserved quantities related to the angular and linear momentum parallel to the rotation axis. The results show that the energy decay rates are sensitive to the initial conditions and no single universal solution appears to exist. The different decay laws observed indicate that rotating turbulence is affected by initial large scale correlations in the flow, by the initial content of helicity, by the anisotropy in the initial conditions, and by the formation of coherent structures. For every initial condition studied, we use phenomenological models to predict the decay laws observed in the simulations. We then study stratified flows under strong rotation using the surface quasi-geostrophic (SQG) approximation derived from the Navier-Stokes equations. We derive statistical equilibrium solutions of the inviscid equations, and verify the validity of these solutions in numerical simulations. The statistical solutions of the inviscid equations allow us to predict the direction in which the two quadratic invariants of the system (the pseudo-energy and pseudo-enstrohpy) cascade in the viscous case. Using these results, we predict the decay rate of the pseudo-enstrophy considering also the effect of coherent structures in the flow evolution. These predictions were validated using numerical simulations of viscous and inviscid systems.

"El efecto dínamo y la generación de campos magnéticos en astrofísica" (2003). Mininni, Pablo Daniel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la presente tesis estudiamos la teoría de dínamo en diferentes regímenes de interés astrofísico. La teoría de campo medio, utilizada para obtener el coeficiente de generación de energía magnética por efecto de la turbulencia, es generalizada para incluir efectos cinéticos. Para el caso particular del Sol, construimos un modelo basado en los perfiles medidos de rotación diferencial con el fin de explicar las características globales del campo magnético. Con el fin de individualizar las causas de las irregularidades observadas y de introducir correctamente estos efectos en el modelo, llevamos a cabo un estudio detallado de los datos existentes sobre el campo magnético solar. Presentamos estudios de correlación de amplitud y fase, así como reconstrucción del espacio de fases a partir de la serie temporal del número de manchas solares. También realizamos una descomposición en modos biortogonales de la distribución espacial y temporal del área cubierta por las manchas, y de los campos magnéticos observados en la superficie solar. Los resultados de todos estos estudios son utilizados como indicadores de la fuente de las irregularidades e introducidos finalmente en el modelo. Finalmente, presentamos simulaciones numéricas tridimensionales con el fin de verificar la validez de la mencionada generalización de la teoría. Según el caso, los resultados pueden ser aplicados en regiones convectivas estelares, en regiones pequeñas de discos de acreción y discos galácticos, o en estrellas compactas.

Abstract:
In this thesis we study the dynamo theory in different regimes of astrophysical interest. The mean field theory, used to obtain the magnetic energy generation coefficient by effect of the turbulent motion, is generalized to include kinetic effects. In the particular case of the Sun, we build a model based on measured profiles of differential rotation to explain the global features observed in its magnetic field. To identify the sources of the observed irregularities, and to introduce these effects in the model, we carry out a detailed study of the existing data of the solar magnetic cycle. We present studies of amplitude and phase correlation, as well as reconstruction of the phase space from the time series of the sunspot number. Also, we carry out a bi-orthogonal decomposition of the temporal and spatial distribution of the area covered by sunspots, and of the observed magnetic field in the solar surface. The results obtained are used to identify the source of irregularities and have been introduced in the model. Finally, we present direct simulations in three dimensions to validate the results obtained in the extension of the theory mentioned above. Depending on the case, the results can be used in stellar convective regions, in small regions of accretion disks, or in compact stars.

"El efecto overhauser nuclear ante relajación escalar : análisis y aplicaciones" (1984). Balonga, Pablo Enrique. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"El empleo de mercurio y difenilcarbazida en la determinación volumétrica de ión cloruro" (1950). Bayer, José Rodolfo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"El equilibrio en el sistema tantalio-hidrógeno en la región 400°C-700°C y 0-1 Atm." (1976). Zuzek, Estanislao. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"El espectro Raman de las soluciones clorofórmicas de la ß y delta-fagarina : (el espectro Raman del benceno y del cloroformo)" (1944). Mittelman, Naum. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"El espectro normal del cinc y el corrimiento isotópico en el cadmio" (1969). Contreras, Rubén Horacio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"El espectro y los procesos no-lineales de la energía en el movimiento atmosférico de gran escala" (1973). Barros, Vicente Ricardo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"El fenómeno de tiempo de espera en corrientes de gravedad en fluídos y difusión no lineal" (1998). Vigo, Claudio Lionel Martín. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La presente investigación de Tesis trata sobre el fenómeno de tiempo de espera en corrientes de gravedad en fluidos y difusión no lineal. Muchos fenómenos se describen mediante la ecuación de difusión no lineal unidimensional (EDNL): h1 = δx(hᵐδxh) (1) en donde los subíndices t y x indican derivadas parciales respecto del tiempo y del espacio, respectivamente. Entre ellos se pueden citar: (a) flujos en acuíferos no confinados en la aproximación de Dupuit-Forchheimer (Polubarinova-Kochina 1962, Eagleson 1970, Peletier l981, m=l), (b) flujos de gases en medios porosos (Muskat 1937, Gilding y Peletier l977a, l977b, Vázquez 1983, m=γ), (c) conducción térmica en plasmas (Zel’dovich y Raizer 1966, m=5/2) (d) conducción del calor por radiación en gases multiplemente ionizados (Zel’dovich y Raizer 1966, Pert 1977, m=4,5-5,5). (e) conducción del calor por radiación en gases completamente ionizados (Marshak 1958, Zel’dovich y Raizer 1966, Larsen y Pomraning 1980, m=l3/2), (f) corrientes viscogravitatorias (CVG, m=3). Las CVG son un tipo particular de corrientes de gravedad en líquidos, e interesan en las ciencias naturales y por sus aplicaciones a la tecnología y al medio ambiente (Simpson, 1982, Huppeit, 1986). Son flujos que se derraman sobre una superficie plana horizontal y rígida en el régimen en que los esfuerzos viscosos balancean la gravedad (bajo número de Reynolds y efectos de capilaridad despreciables) descriptos por la aproximación de lubricación (Buckmaster 1977, Huppert 1982, Gratton y Minotti 1990). Por la facilidad con que se las puede estudiar en el laboratorio, son una herramienta muy útil para el estudio de la difusión no lineal. Una característica de la difusión no lineal es la presencia de frentes que separan dominios donde h>0 de otros en donde h=0 (recordar la velocidad finita de propagación de una onda térmica fuerte); otra característica es la existencia de soluciones con tiempo de espera (STE), cuyo frente queda inmóvil durante un lapso finito tw, mientras ocurren cambios detrás de él (Aronson 1970, Kamin 1980, Knerr 1977, Lacey et al. 1982, Kath y Cohen 1982, Lacey 1983, Aronson et al. 1983, 1985, Vázquez 1984, Thomas et al. 1991, Gratton et al. 1992, Marino et al. 1995). Las soluciones autosemejantes de la ecuación (1) fueron estudiadas extensamente en el caso unidimensional, en el que dependen de una única variable ξ=x/tδ, donde x representa a una coordenada cartesiana (simetría plana) o a una radial (simetría axial). Su interes radica en que se obtienen fácilmente y que representan el comportamiento asintótico intermedio de muchos problemas no autosemejantes (Barenblatt 1952, Barenblatt y Zel’dovich 1957, Pattle 1959, Pen 1977, Grundy 1979, etc.). También se conocen bien las CVG autosemejantes (Buckmaster, 1977, Huppen, 1982, Gratton y Minotti, 1990, Maxworhy 1982, 1983, Huppert 1982, etc.). Reseñas sobre las propiedades de la ecuación (1) y de las STE se encuentran en Gratton (1991a) y Gratton et al. (1992). Una reseña sobre la autosemejanza, sus aplicaciones y las corrientes de gravedad en fluidos, incluyendo las CVG, puede encontrarse en Gratton (1991b). En esta investigación de Tesis Doctoral se investigan STE para CVG planas con condiciones iniciales del tipo h c xp. El proceso comienza en t=—t(...); inicialmente el frente está en x=0 y hǂ0 para 02/m aparece un corner layer en la solución (un CL, es un pequeño intervalo Δx en el que hx varía fuertemente). Vázquez (1984) extendió este resultado para todo m>0. (b) La asintótica de las STE cerca del frente y para tiempos próximos al momento del arranque (ǀxǀ<l y son de tres clases: si l<δl3/l0 (clases E y N) no hay CL. La nomenclatura proviene del comportamiento de la singularidad en el plano de fase que les da origen (el ciclo límite L o el punto B, quien de acuerdo al valor de δ, es un punto Espiral o Nodo). Las soluciones A tienen δ≤1, y representan la evolución del corner layer fuerte que está llegando al frente; el caso δ=1 es la solución de onda viajera (0V, ver Gratton y Minotti 1990). Las soluciones numéricas muestran que si p<2/3 el frente arranca de inmediato y si p>2/3 se obtienen soluciones con tiempo de espera con un CL móvil, de acuerdo con la teoría. El CL se refuerza (Δx se reduce y aumenta la variación de hx) mientras avanza hacia el frente que espera, y cuando lo alcanza, éste se pone en movimiento. Se estudia en detalle el movimiento del CL y del frente y otras propiedades de las soluciones. Se determina tw(p) y se compara con las cotas teóricas, viendo que en muchos casos estas no son buenos estimadores de tw. La asintótica de las STE muestra un comportamiento sorprendente. En primer lugar sólo las soluciones clase L y la OV son relevantes. Tan sólo la parte de las soluciones L que está detrás del primer CL de la sucesión representa la asintótica de las soluciones numéricas, y lo hace en un dominio que está detrás del corner layer, y para un intervalo de tiempo que excluye el entorno del arranque (se observa un solo CL, porque cerca del frente la solución verdadera converge demasiado lentamente a la solución L). En cambio la asintótica en el entorno del CL y para tiempos próximos al arranque (e incluyéndolo) está descripta por la 0V (δ=1), de forma tal que el movimiento del CL empalma con continuidad con el del frente, luego del arranque. Los flujos viscogravitatorios son un privilegio para el investigador puesto que constituyen un caso modelo altamente viable para su implementación experimental a escala de laboratorio; en ese sentido la verificación experimental de la teoría fue realizada en colaboración con el grupo del Instituto de Física de Arroyo Seco (IFAS), de la Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires (UNCPBA), Tandil, dirigido por el Profesor R. Gratton, en donde se realizaron experimentos de derrames de aceites de siliconas con perfiles iniciales en forma de cuña (correspondientes a p=l), que presentan tiempo de espera (Marino et al. 1996). Se presenta una reseña de estos resultados experimentales y una comparación con algunos de los resultados obtenidos en esta Tesis.

Abstract:
The present Thesis Investigation address with the waiting-time viscous gravity currents phenomena and non linear diffusion. A wide range of phenomena are described by the one-dimensional non linear diffusion equation (NLDE): h1 = δx(hᵐδxh) (l) where the t and x subscripts indicate partial time and spatial derivatives, respectively. Among them, we can mention: (a) unconfined groundwater flows, in the Dupuit Forchheimer approximation (Polubarinova-Kochina 1962, Eagleson 1970, Peletier 1981, m=l), (b) gas flow through porous media (Muskat 1937 Gilding y Peletier l977a, l977b, Vázquez 1983, m=γ), (c) thermal conduction in plasmas (Zel’dovich y Raizer 1966, m=5/2) (d) thermal conduction by radiation in multiply ionized gas (Zel’dovich y Raizer 1966, Pert 1977, m=4,5-5,5), (e) thermal conduction by radiation in a fully ionized gas (Marshak 1958, Zel’dovich y Raizer 1966, Larsen y Pomraning 1980, m=l3/2), (f) viscous gravity currents (VGC, m=3). The VGC are a special case of viscous currents in liquids, and are of particular interest in technology applications and natural and environmental sciences, (Simpson, 1982, Huppen, 1986). VGC refers to flows over a horizontal rigid plane surface in the regime where viscous forces balance gravity (low Reynolds number and capillary effects are negligibles), and are described by the lubrication approximation. (Buckmaster 1977, Huppert 1982, Gratton y Minotti 1990). They are a useful tool for the study of non linear diffusion, because they are inexpensive and simple to set up in the laboratory. A characteristic of the non linear diffusion is the presence of fronts that divide domains where h>0 from others where h=0 (remember the finite propagation velocity of the strong thermal wave); another characteristic is the existence of waiting-time solutions (WTS), which have a front that remains motionless during a finite time tw, while some changes occur behind it. (Aronson 1970, Kamin 1980, Knerr 1977, Lacey et al. 1982, Kath y Cohen 1982, Lacey 1983, Aronson et al. 1983, 1985, Vázquez 1984, Thomas et al. 1991, Gratton et al. 1992, Marino er al. 1995). Self similar solutions of equation (l) were studied extensively in the one dimensional case in which they depend on a single variable ξ=x/tδ, where x is a Cartesian coordinate (plane symmetry) or a radial coordinate (axial symmetry). They are interesting because can be easily constructed and represent the intermediate asymptotic behavior of a wide range of non self similar problems. (Barenblatt l952, Barenblatt y Zel’dovich 1957, Pattle 1959, Pert 1977, Grundy 1979, etc.). The self-similar VGC are well known (Buckmaster, 1977, Huppert, 1982, Gratton y Minotti, 1990, Maxworthy 1982, 1983, Huppert 1982, etc.). Reviews about the properties of equation (1) and WTS can be found in Gratton (1991a) and Gratton et al, (1992). Other reviews about self-similarity, its aplications, and the gravity currents in fluids, including VGC, can be found in Gratton (l99lb). In this PHD Thesis Research, we investigate WTS for plane VGC with initial conditions of the type h c xp. The process begins at t=—tw, initially the front is at x=0 y hǂ0 for 02/m, a corner layer (CL) developed in the solution (a CL, is a small interval Δx where hx suffers strong variations). Vazquez (1984) extended this result for all m>0. (b) The asymptotic regime of WTS near the front and close to the startup time (ǀxǀ<l and are of three classes: when 1<δl3/10 (clases E y N) there is no CL at all. The nomenclature comes from the behavior of the singularity in the phase plane, a limit cycle L or a spiral or nodal (according to the value of δ ) point B. The A solutions have δ≤1, and represent the evolution of a strong corner layer that is arriving to the front; the δ=1 case corresponds to the travelling wave (TW, see Gratton y Minotti, 1990). The numerical solutions show that if p<2/3 the front starts to move inmediately and that if p>2/3, we obtain waiting-time solutions with a moving CL, according to the theory. The CL reinforces (Δx decrease and hx increase) while it moves toward the front, and when it reaches it, the front it begins to move. We study in detail the movement of the CL and of the front and another properties of the solutions. We determine tw(p) and compare it with the theoretical bounds, and observe that in many cases, these are not a good estimator of tw. The asymptotic regime of the WTS shows a surprising behavior. First, only the L and TW classes are relevant to the problem. Only the part of the L solutions that is behind the first CL of the series represents the asymptotic of the numerical solutions, and it does so in a domain that is behind the CL, for a time interval that excludes the startup, (only one CL can be observed because near the front, the real solution converges too slowly to the L solution). On the other hand, the asymptotic in a region around the CL for times close to the startup time (including it), is described by the TW (δ=1), in such a way that CL joins smoothly with the front after startup. The viscous gravity flows are a privilege for the researchers, because they constitute a model case of wide experimental implementation in the laboratory; in this sense, the experimental check of the theory was made in conjunction with the group of the Instituto de Física de Arroyo Seco (IFAS), from the Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires (UNCPBA), Tandil, directed by Professor R. Gratton. They make experiments on the spreading of silicone oils with initial wedge-like profiles (corresponding to p=l), that presents waiting-time behavior (Marino et al. 1996). We show a review of these experimental results and a comparation with some of the results obtained in this Thesis.

"El formalismo de contextos generalizados y sus aplicaciones" (2016-03-28). Losada, Marcelo Adrián. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo se presenta un enfoque de historias cuánticas, alternativo a la teoría de Historias Consistentes, denominado formalismo de Contextos Generalizados y se demuestra que es adecuado para definir probabilidades a expresiones que involucran propiedades a distintos tiempos. Además se analizan las relaciones existentes entre estos dos formalismos y se prueba que cuando la condición de consistencia de Historias Consistentes se impone para todo estado, se obtiene la condición de compatibilidad del formalismo de Contextos Generalizados. En este caso se demuestra que ambos formalismos son equivalentes para describir propiedades a distintos tiempos. También se discute el problema de las retrodicciones de propiedades contrarias en ambos formalismos de historias cuánticas. Se muestra que en el caso de las Historias Consistentes es posible la retrodiccón de propiedades contrarias, mientras que en el formalismo de Contextos Generalizados esto no es posible. Por último, se presentan algunas aplicaciones del formalismo de Contextos Generalizados a situaciones físicas: el proceso de medición, el experimento de la doble rendija y el proceso de decaimiento.

Abstract:
We develop a quantum history approach, alternative to the theory of Consistent Histories, called formalism of Generalized Contexts and we prove that it is suitable to define probabilities of expressions involving properties at different times. We also analyze the relationships between these two formalisms and we show that when the consistency condition of Consistent Histories theory is imposed for all states, the compatibility condition of the formalism of Generalized Contexts is obtained. In this case we obtain that both formalism are equally useful to describe properties at different times. Furthermore, we discuss the retrodiction of contrary properties in both quantum histories formalisms. We show that in the Consistent Histories formulation it is possible to retrodict contrary properties, while in the formalism of Generalized Contexts this is not possible. Finally, we apply the formalism of Generalized Contexts to some physical situations: the measurement process, the double-slit experiment and the decay process.

"El fósforo y el calcio en los vinos del Valle del Río Negro" (1939). Puelles, Gabino F.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"El género Hypocrea Fr. (Hypocreales, Ascomycota) en la Argentina. Estudio de la variabilidad molecular de su estado anamórfico Trichoderma" (2012). Barrera, Viviana Andrea. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la presente tesis se informan los resultados de un estudio polifásico integral del género Hypocrea/Trichoderma de Argentina. El estudio se encaró desde varios puntos de vista: biodiversidad, morfología, filogenia, incluyendo el análisis de la variabilidad de cepas biocontroladoras de T. harzianum. Para mostrar los resultados de forma ordenada se ha organizado el texto en dos capítulos. El Capítulo I trata sobre la identificación de ejemplares coleccionados y depositados en herbarios nacionales e internacionales. En el Capítulo II se analiza una colección de cepas bicontroladoras nativas de T. harzianum para reconocer caracteres útiles para su aplicación en el campo del control biológico. Como consecuencia de este estudio se identificaron 38 especies de las cuales se incorporan 4 especies nuevas para la ciencia, 2 especies que se citan por primera vez para Sudamérica, 17 especies que se citan por primera vez para la Argentina y por primera vez se cita la relación teleomorfo-anamorfo para T. longibrachiatum. Se caracterizaron 25 cepas nativas biocontroladoras de T. harzianum, se observaron diferencias en cuanto a sus requerimientos nutricionales y alta similitud entre sus caracteres genéticos. Se encontraron 291 marcadores moleculares polimórficos de RAPD de los cuales 15 fueron específicos para 5 cepas y 58 marcadores moleculares polimórficos de UP-PCR de los cuales 5 resultaron específicos para una cepa.

Abstract:
In this thesis we report the results of a comprehensive multi-phase study of the genus Hypocrea/Trichoderma in Argentina. The study was faced from several points of view: biodiversity, morphology and phylogeny, including analysis of the variability of biocontrol strains of T. harzianum. To display the results in an orderly way, the text is organized into two chapters. Chapter I deals with the identification of specimens collected and deposited in national and international herbaria. Chapter II discusses a collection of native biocontrol T. harzianum strains to recognize characters useful for application in the field of biological control. As a result of this study 38 species were identified of which are incorporated 4 new species to science. Two species are recorded for the first time for South America, 17 species recorded for the first time for Argentina and for the first time cited the teleomorph-anamorph relationship to T. longibrachiatum. Twenty five native biocontrol T. harzianum strains were characterized, showing differences in their nutritional requirements and high genetic similarity between their characters. We found 291 polymorphic RAPD molecular markers of which 15 were specific for 5 strains and 58 polymorphic molecular markers of UP-PCR of which 5 were specific for one strain.

"El hábitat de Aedes aegypti (Diptera : Culicidae) en Buenos Aires para distintas escalas espaciales de estudio" (2003). Vezzani, Darío. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El estudio del hábitat de Aedes aegypti es de gran importancia para el desarrollo e implementación de acciones de control efectivas. Con el objetivo de caracterizar el hábitat de este mosquito e identificar los factores que influyen en su calidad, se realizaron estudios para las siguientes escalas espaciales: los cementerios como macrohábitats, los parches dentro de un mismo cementerio, los microhábitats dentro de un mismo parche, y los recipientes donde cría. Entre 1998 y 2001 se llevaron a cabo monitoreos de actividad de oviposición de las hembras y de sitios de cría. Se estudió la asociación entre el nivel de infestación y la oferta de recipientes, la cobertura vegetal, la proximidad de otros sitios favorables, la sombra, la temperatura del agua, el orden y la limpieza del ambiente, y distintas características de los recipientes. En todas las escalas estudiadas se observaron gradientes del nivel de infestación del vector. Los ambientes que alcanzaron los mayores niveles de infestación, también fueron los que permanecieron infestados durante más tiempo. Entre las variables estudiadas, la vegetación y la proximidad a otras áreas favorables demostraron una asociación positiva con la calidad del hábitat de Ae. aegypti. La variable oferta de recipientes no se halló asociada con los niveles de infestación, en ambientes con más de 100 recipientes por hectárea. El material de los recipientes influyó en la calidad como hábitat de cría, dependiendo de las características del ambiente. Los recipientes de plástico fueron los más favorables y los de metal los menos favorables para la proliferación del vector. El nivel de infestación no se halló asociado con la capacidad de los recipientes. Los resultados sugieren que en áreas urbanas los ambientes más favorables para Ae. aegypti son aquellos de gran acumulación de recipientes con agua, protegidos de las condiciones ambientales extremas por la vegetación o por estructuras antrópicas. Estos ambientes actuarían como focos de proliferación y dispersión hacia el resto de la ciudad y sobre ellos habría que concentrar los esfuerzos para reducir la abundancia del mosquito. Los cementerios en Buenos Aires son sitios adecuados para ser utilizados como modelo en estudios ecológicos de culícidos urbanos que crían en recipientes artificiales.

Abstract:
The study of the habitat of Aedes aegypti is of great importance for the development and implementation of effective control measures. In order to characterize the habitat of this mosquito species and to identify factors affecting its quality, studies were conducted at the following spatial scales: cemeteries as macrohabitats, patches within a same cemetery, microhabitats within a same patch, and breeding containers. Female oviposition activity and breeding sites were monitored from 1998 to 2001. The associations between the infestation level and different environmental variables were evaluated. Those variables were container availability, vegetation cover, proximity to other favourable sites, shade, water temperature, cleanness of the environment, and container characteristics. The vector infestation level showed a gradient at all scales studied. Those environments with highest infestation levels also remained infested for a longer period. Among the studied variables, vegetation and proximity to other favourable sites showed a positive association with the habitat quality of Ae. aegypti. The infestation level was not associated with container availability in environments with more than 100 containers per hectare. Containers made of different materials showed a variable suitability as breeding sites of Ae. aegypti, according to environmental characteristics. Plastic and metal containers were the most and less favourable breeding sites, respectively. The infestation level was not associated with the capacity of containers. Results suggest that in urban areas the most favourable environments for Ae aegypti are sites with a large number of water-filled containers, sheltered from extreme environmental conditions by vegetation or manmade structures. Efforts to reduce the mosquito abundance should be focused on these sites, which represent potential proliferation and dispersal foci towards the rest of the city. Cemeteries in Buenos Aires are suitable areas to be used as a model in ecological studies of urban culicids breeding in artificial containers.

"El incremento de la ingesta materna de grasas saturadas programa alteraciones hepáticas en la descendencia de rata: rol de la desregulación en el accionar de leptina" (2016-12-15). Mazzucco, María Belén. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estableció un modelo de sobrepeso mediante la alimentación de ratas Wistar con una dieta con exceso de grasas saturadas previamente y durante la gestación y la lactancia (grupo DGS). El grupo DGS presentó un aumento de los niveles plasmáticos de triglicéridos, insulina y leptina en madres y fetos, y un incremento en el peso placentario y fetal, respecto del grupo control. Se estudió el hígado de fetos y crías de 21 y 140 días de edad. En los hígados de fetos y crías provenientes del grupo DGS se observó un aumento de parámetros indicadores de ambiente prooxidante. Además, el grupo DGS presentó una disminución de los niveles de ARN mensajero de genes asociados a la detoxificación hepática y un aumento en la actividad de enzimas hepáticas en circulación. Los hígados del grupo DGS presentaron sobreacumulación de triglicéridos, una disminución de los niveles de ARN mensajero de genes involucrados en el catabolismo de lípidos y una alterada expresión del receptor de leptina. La administración de leptina a fetos control a término moduló los niveles placentarios de ARN mensajero del receptor de leptina y de la lipoproteína lipasa (LPL), clave en la transferencia de lípidos placentarios. Asimismo, la leptina administrada moduló los niveles de ARN mensajero del receptor de leptina y de LPL en el hígado fetal. Sin embargo, los hígados de fetos del grupo DGS no mostraron alteraciones en los niveles de ARN mensajero del receptor de leptina y de LPL a pesar de estar expuestos a hiperleptinemia fetal. Más aún, los resultados del cultivo de hígados fetales con leptina evidenciaron una falta de respuesta a las acciones lipolíticas de la leptina en el grupo DGS. Estos resultados sugieren que las alteraciones en el metabolismo lipídico hepático fetal observadas en el grupo DGS estarían asociadas a una desregulación del accionar de leptina. La persistencia de alteraciones hepáticas en las crías sugiere una programación de anomalías de manera intrauterina, desafiando la salud metabólica de la descendencia.

Abstract:
An overweight model was established by feeding Wistar rats with an overload of saturated fat previously and during pregnancy and lactation (DGS group). The DGS group showed increased maternal and fetal triglyceridemia, insulinemia and leptinemia, and increased placental and fetal weight when compared to the control group. The liver from fetuses and offspring of 21 and 140 days old was studied. The liver from fetuses and offspring from the DGS group showed an increase in the indicators of a pro-oxidant environment and a decrease in the levels of mRNA of genes associated with detoxifying functions. In addition, the DGS group showed an increase in the activity of hepatic enzymes in plasma. Besides, the livers from the DGS group showed triglyceride overaccumulation, decreased levels of mRNA of genes involved in lipid catabolism and altered expression of leptin receptor. The administration of leptin to control fetuses modulated placental mRNA levels of leptin receptor and of a key gene in placental lipid transfer, the lipoprotein lipase (LPL). Also, we found that the administration of leptin modulated the mRNA levels of LPL and leptin receptor in the fetal liver. Despite the fetuses from the DGS group are inmerse in a hyperleptinemic environment, the levels of the mRNA of LPL and leptin receptor in fetal liver showed no changes when compared to control. In addition, the culture of fetal livers with leptin showed no response to the lipolytic actions of leptin in the DGS group. These results suggest that the alterations in the lipid metabolism of fetal liver observed in the DGS group could be associated with the dysregulation of leptin action. The persistence of hepatic alterations in the offspring suggests that these anomalies are programmed during the intrauterine life, challenging the metabolic health of the offspring.

"El papel de la interacción entre neuronas y glía mediada por S100B/RAGE en la propagación del daño luego de la isquemia cerebral" (2014-06-18). Villarreal, Alejandro. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La isquemia cerebral es un grave problema para la Salud Pública en países emergentes como la Argentina. Aún no se conocen completamente los mecanismos celulares y moleculares que participan de la propagación del daño desde la zona del infarto isquémico (core) hacia las zonas cercanas del cerebro que se definen como área de la penumbra isquémica. Esta expansión del daño hacia zonas distales a la lesión isquémica original es lo que define el mal pronóstico de los pacientes. Las moléculas asociadas al daño o DAMP (del inglés Damage Associatted Molecular Pattern) como la proteína astroglial S100B aumentan en el espacio extracelular luego de la isquemia y son capaces de activar la respuesta inmune innata mediada por los receptores de patrones moleculares (PRR, del inglés Pattern Recognition Receptor). Considerando que S100B ha demostrado tener acciones sobre astrocitos y neuronas en cultivo, nuestra hipótesis de trabajo propuso que la liberación local de S100B desde el core isquémico activaría el PRR RAGE, facilitando la respuesta inflamatoria, y extendería así el daño hacia el tejido cerebral circundante. Utilizando un modelo de isquemia cerebral en animales de experimentación, administraciones intra-corticales de S100B purificada, cultivos puros neuronales y cultivos enriquecidos en astrocitos pudimos establecer que: i) S100B induce la sobrevida o muerte neuronal en neuronas expuestas a excitotoxicidad por glutamato en una forma dependiente de la dosis, de la expresión de RAGE y de la activación del factor de transcripción NF-κB; ii) S100B facilita la conversión de los astrocitos hacia el fenotipo reactivo proinflamatorio en forma RAGE/NF-κB dependiente; iii) S100B liberada desde un foco en el parénquima cerebral induce cambios en astrocitos similares a los observados días después de la lesión isquémica. En función de nuestros resultados proponemos que en las zonas vecinas al core isquemico S100B tendría efectos neurodegenerativos directos o en forma secundaria promoviendo la conversión astroglial hacia un fenotipo proinflamatorio activando la ruta RAGE/NF-κB. Esta cascada intracelular emerge como un tentador blanco molecular para futuras estrategias terapéuticas.

Abstract:
Brain ischemia represents a serious problem for Public Health in developing countries such as Argentina. The molecular and cellular mechanisms that participate in damage propagation from the ischemic infarct region (core) towards neighbor regions of the brain (defined as ischemic penumbra) are not fully understood. The penumbra damage determines the bad prognosis for patient outcome. Damage associated molecular patterns (DAMPs) like astroglial protein S100B are increased in the extracellular space after ischemia and are capable of activating innate immune response by engaging pattern recognition receptors (PPR). Considering that S100B has shown to have effects on astrocytes and neurons in vitro, our work hypothesis proposed that local release of S100B from the ischemic core could activate the PRR receptor named RAGE, facilitating inflammatory response and expanding damage to the limiting regions of brain tissue. Using an experimental model of brain ischemia in laboratory animals, intra-cortical infusions of purified S100B and neuronal or astroglial cultures we have been able to establish that: i) S100B promotes death or survival in neurons exposed to glutamate induced excitotoxicity in a dose dependent manner and requiring, RAGE expression and activation of transcription factor NF-κB ii) S100B facilitates astrocyte conversion towards a reactive and proinflamatory phenotype in a RAGE/NF-κB dependent manner; iii) S100B released from a focal spot in brain parenchyma induces changes on astrocytes that are similar to those observed in ischemic injury in vivo. Based on our results we propose that S100B might have neurodegenerative effects directly on neurons or indirectly by promoting the astroglial conversion towards a pro-immflamatory phenotype after engaging the RAGE/NF-κB pathway. This intracellular pathway emerges as a tempting molecular target for future therapeutic strategies.

"El papel de la selección natural y la demografía histórica sobre la variabilidad nucleotídica de los genes Xdh (Xantín deshidrogenasa) y alfaEst-5 (alfa esterasa 5) en Drosophila buzzatii y D. koepferae" (2004). Piccinali, Romina V.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis, estudiamos los patrones de variabilidad nucleotídica de los genes Xdh (Xantín deshidrogenasa) y α-Est-5 (Alfa esterasa 5) en Drosophila buzzatii y D. koepferae, e investigamos si los mismos son compatibles con modelos de evolución neutra o adaptativa. Para ello analizamos mediante diversas pruebas estadísticas un fragmento de cada gen en muestras poblacionales de D. buzzatii y D. koepferae de Argentina, pertenecientes al área de origen de estas especies, y en muestras de D. buzzatii de Australia, un área de colonización reciente. Nuestros resultados muestran que: l) las diferencias en los niveles de polimorfismo entre genes y entre especies serían el resultado de diferencias en el ambiente recombinacional, probablemente debido al ligamiento diferencial de ambos loci con los polimorfismos de inversión del cromosoma 2; 2) las inversiones de D. buzzatii exhiben ciena diferenciación a nivel de la secuencia de nucleótidos de αEst-5; 3) existen polimorfismos compartidos entre especies en el gen Xdh los cuales podrian ser el resultado de eventos de introgresión más o menos recientes; 4) los alelos electroforéticos de Xdh detectados en estudios previos son clases heterogéneas resultantes de fenómenos de convergencia de carga, mientras que en los alelos electroforéticos de αEs1-5 tendrían un origen histórico común; 5) en D. koepferae ambos genes muestran patrones de estructuración poblacional concordantes con las Regiones Fitogeográficas de Argentina, que contrastan con la ausencia de estructura en D. buzzatii. Estas diferencias podrían estar relacionadas con las características ecológicas y la distribución histórica de los cactus a los que cada especie se encuentra asociada en la naturaleza; 6) ha existido un efecto fundador moderado en D. buzzatii asociado a la colonización de Australia; 7) existen excesos de mutaciones únicas en D. buzzatii, respecto de lo esperado bajo neutralidad selectiva en ambos genes, que sugieren que esta especie habría experimentado una expansión reciente en su área de origen; 8) existe un exceso de polimorfismos no sinónimos en el gen α-EsI-5 de D. buzzatii tanto en las muestras de la Argentina como de Australia, el cual probablemente se deba a la acción de selección natural episódica; 9) por el contrario. D. koepferae es una especie cuyas poblaciones están en aparente equilibrio deriva-mutación.

Abstract:
In this thesis we analyze patterns of nucleotide variatíon in the Xdh (Xanthine dehydrogenase) and α-Est-5 (alpha esterase 5) genes of the cactophilic Drosophila buzzatii and D. koepferae, and investigate whether these patterns are in agreement with expectations of models of neutral or adaptative evolution. We applied several statistical tests to natural population samples of D. buzzalii y D. koepferae from the native area and to samples of Australian populations of D. buzzarii, a recently colonized area. Our results show that: l) the disparities in the levels of nucleotide polymorphism between genes and species could be explained by differences in the recombinational environment to which each gene is exposed, and this environment is probably influenced by the differential distribution of polymorphic inversions along the second chromosome of both species; 2) paracentric polymorphic inversions in D. buzzatii exhibit certain degree of differentiation for the αEst-5 gene region; 3) the presence of shared polymorphisms between species in the Xdh locus can be the result of introgression events; 4) the electrophoretic alleles of Xdh are heterogeneous classes that share a similar electrophoretic mobility due to charge convergence, whereas some alleles of αEst-5 alleles appear as monophyletic; 5) patterns of population in D. koepferae are coincident with Argentinían Phytogeographical Regions for both genes and contrast with the absence of population structure in its sibling D. buzzatii. DifTerences in population structure can be due to ecological and historical differences in the distribution of cactus hosts to which each species is mainly associated; 6) there are evidences of a moderate founder effect in D. buzzatii during the colonization of Australia; 7) there is an excess of singletons in D. buzzatii, that suggests a recent population expansion of this species in its original area; 8) there is an excess of non synonymous polymorphisms in the αEst-5 gene of D. buzzatii that can be accounted for by episodic selection; 9) D. koepferae populations seem to be in equilibrium genetic drift-mutation.

"El polen atmosférico como indicador de la vegetación y de su fenología floral" (1999). Latorre, Fabiana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta Tesis Doctoral se aborda a la Aerobiología de una manera integral, evaluando todos los aspectos involucrados en el proceso aerobiológico. Este incluye el estudio de los granos de polen desde su producción en la vegetación hasta su registro en la atmósfera, además de todos los factores que intervienen tanto biológicos como físicos. Para ello, se analizaron los datos cuantitativos de la vegetación, de su floración, de los tipos polínicos emitidos y presentes en la atmósfera y de las condiciones de ésta antes, durante y después de la floración. En principio, se estudió la composición de la flora urbana de Mar del Plata, caracterizando el tipo de estrategia reproductiva de sus componentes, y la diversidad, abundancia y distribución. Se determinó el período de floración de las especies y se estudió cuantitativamente la floración de las mismas. Especial atención y detalle tuvo la vegetación arbórea implantada. Se analizaron las diferencias interanuales en las fenofases florales principales y se determinaron las condiciones climáticas estacionales previas al inicio de la floración responsables de esa variabilidad interanual. Fue posible describir el comportamiento reproductivo general del conjunto de especies emisoras y su relación con el clima. Se estudió el contenido de polen de la atmósfera de Mar del Plata. Se confeccionó el calendario polínico de la zona que permite una caracterización precisa de la aeroflora y de su dinámica y la identificación de las tendencias generales. Se compararon las productividades polínicas relativas de cada taxón y los períodos de polinización entre especies y entre años. La estacionalidad del espectro polínico a lo largo del año responde a la fenología floral de las distintas formas de vida de las especies vegetales. Se analizó la relación polen-meteorología ya que la dispersión de partículas biológicas como la de los granos de polen, puede considerarse gobernada por los parámetros físicos atmosféricos de las masas de aire. En particular, se estudiaron los rasgos estacionales y diarios de la nube polínica para establecer el efecto de las variables meteorológicas instantáneas sobre los granos en suspensión. Se estableció que para elucidar de qué manera operan los factores responsables de la variación interanual del polen atmosférico, se requiere un estudio detallado separando el efecto de las condiciones climáticas estacionales previas o ritmos endógenos cíclicos sobre la productividad polínica, de los efectos instantáneos de las condiciones meteorológicas durante la emisión y dispersión. La vegetación local y extralocal resulta ser la fuente principal del polen que se registra en la atmósfera y sus atributos determinan la composición y abundancia de los tipos polínicos. Se determinó que para las especies anemófilas la concentración de polen depende de la abundancia de la vegetación. En la representatividad de la vegetación en el espectro de polen atmosférico, deben considerarse efectos particulares como cercanía y ubicación relativa de las principales fuentes potencialmente emisoras y la estrategia reproductiva de las especies. Se analizó la expresión de la variabilidad fenológica en el registro polínico, observándose que los porcentajes de floración se corresponden con los porcentajes de granos de polen emitidos. Se evaluó la efectividad del registro polínico como indicador de las tendencias fenológicas florales de la vegetación. Se verificó que los factores que determinan la no correspondencia entre el polen y la floración, en algún momento dentro de los períodos correspondientes, son principalmente, las precipitaciones y los vientos, además de la influencia de las características y tipo de fuentes emisoras del polen. La visión integradora de la problemática aerobiológica que se propuso, la rigurosidad y detalle que se planteó aquí para una aproximación de la relación polen-vegetación-floración-clima-meteorología no había sido abordado hasta ahora. En definitiva, se interpretó a la concentración de polen en la atmósfera como un complejo multidimensional de interacciones entre variables ecológicas y climático-meteorológicas. En resumen, los patrones de polen en la atmósfera reflejan los patrones fenológicos florales de la vegetación emisora por lo Cual la dinámica de la vegetación puede ser investigada a partir del análisis aerobiológico. Las condiciones climáticas determinan el momento e intensidad de la floración, y por lo tanto, la concentración de polen en el aire; las condiciones meteorológicas pueden modificar momentáneamente la cantidad de polen emitido, aunque no alteran el patrón general.

Abstract:
In this Doctoral Thesis, Aerobiology is considered in an integral way, evaluating all the aspects involved. The aerobiological pathway includes the study of pollen grains since they are produced by the vegetation until they are registered in the atmosphere, as well as all the biological and physical factors involved in the process. To achieve this purpose, quantitative data of plant source, floral phenology, pollen types emitted and present in the air, and weather conditions before, during and after the flowering period, were analysed. At the beginning, the urban vegetation composition of Mar del Plata city was studied. The reproductive strategies, the abundance and distribution of its components were also characterised. The flowering periods of species present in the urban flora were determined and their flowering developments were quantitatively studied. The principal floral phenophases of arboreal vegetation were analysed and interannual differences established. Seasonal weather conditions before the flowering start were responsible of such variabilities. It was possible to describe the general reproductive behaviour of the emitting species considered as an assemblage and its relation with the climate. The airborne pollen content of Mar del Plata atmosphere was studied. The pollen calendar of this area was constructed; it makes possible to characterise the aeroflora, its dynamics and the identification of the general trends. The relative pollen productivities and the pollination periods between species and between years were compared. The pollen seasonal trend along the year respond to the seasonal flowering phenology of the different plant species: arboreal and herbaceous types. Since the airborne pollen grains are influenced by the physical parameters of the atmosphere, pollen-meteorology relationship was analysed. To establish the effects of the instantaneous meteorological variables on airborne pollen, the seasonal and diurnal features of the pollen cloud were studied. A detailed analysis studying separately the seasonal climatic effects before the flowering or the endogenous rhythms effects on the pollen productivity, and the instantaneous effects of the meteorological conditions during the emission and dispersion phases, was required. Local and extralocal vegetation are the principal poIIen sources and its attributes determine the composition and abundance of pollen types. In anemophyllous species, the pollen concentration depends directly on the vegetation abundance. When the vegetation representativity in the airborne pollen spectrum is evaluated, particular effects like proximity and location of the potential emitting sources and their reproductive strategies, should be considered. The expression of phenological variability in the pollen record was analysed. The flowering percentages are in accordance with the emitted pollen grains percentages. The pollen record effectivity as indicator of floral phenological tendencies of vegetation was evaluated. It was verified that factors determining the lack of correspondence between pollen and flowering are mainly, precipitation and winds. Particular characteristics of emitting pollen sources also affect this relationship. In conclusion, airborne pollen patterns reflect floral phenological patterns of the emitting flora, so the vegetation dynamics could be investigated with the aid of aerobiological analysis. Climatic conditions determine the timing and intensity of flowering periods and then the airborne pollen concentration. Meteorological conditions could modify instantaneously the amount of emitted pollen but they do not alter the general pattern.

"El receptor acoplado a proteína G del herpes virus asociado al sarcoma de Kaposi (Kaposi’s Sarcoma associated herpevirus o KSHV) es una oncoproteína viral y un activador angiogénico" (2000). Bais, Carlos E.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Abstract:
The Kaposi's Sarcoma-associated herpesvirus (KSHV-HHV-8)is a γ-2 herpesvirus that is implicated in the pathogenesis of Kaposi's sarcoma and of primary effusion B-cell lymphomas (PELs), it encode putative oncogenes, and genes that may cause Kaposi's sarcoma lesions by stimulating angiogenesis. The G-protein-coupled receptor encoded by an open reading frame (ORF 74) of KSHV is expressed in Kaposi's Sarcoma lesions and in PELs, and stimulates signaling pathways linked to cell proliferation in a constitutive (agonist-independent) way. Here we show that signaling by this G-Protein Coupled Receptor leads to cell transformation an tumorigenicity, and induces a switch to an angiogenic phenotype mediated by vascular endothelial growth factor (VEGF), an angiogenesis and Kaposi's-spindle cell growth factor. We find that this receptor can activate ( in HEK293T) two protein kinases, JNK/SAPK and p38MAPK, by triggering signaling cascades like the ones induced by inflammatory cytokines that are angiogenic activators and mitogens for Kaposi's sarcoma-cells and B cells. Although this is a suggestive result, when we express KSHV-GPCR in different cell types it activate different signaling cascades, and induces different phenotypes. Using pathway specific dominant negatives and pharmacological inhibitors we show that, in the cell line NIH3T3, the activation of JNK and p38 play a major rol in the molecular mechanism of KSHV-GPCR induced cell transformation. Endothelial cells play a central rol in kaposi's sarcoma pathogenesis. KSHV infects endothelial cells and spindle-like cells, of suspected endothelial origin, wich are present in the kaposi's sarcoma lesions. Therefore, in the context of viral infection, KSHV-GPCR is expressed in endothelial cells. As the expression of KSHV-GPCR has different biological and biochemical effects in different cell types we decide to study the consecuences of KSHV-GPCR expression in human primary endothelial cells. KSHV-GPCR expression in endothelial cells induce strong morphologic changes, modifications in the citoskeleton structure, secretion of metaloproteases and resistence to serum starvation mediated by activation of the PI3K/AKT pathway's. All those changes are reminiscent of the transformed phenotype. Usually, the expression of transforming oncogenes in primary cells induces shortage of telomeres, premature senescence, and cell death. In sharp contrast the expression of KSHV-GPCR in primary endothelial human cells stabilize telomere length, by an alternative mechanism independent of telomerase activity (Alternative Lengthening of Telomeres or ALT ), and inmortalize endothelial cells. To our knowledge this is the first demostration that a protein encoded by KSHV is able to inmortailize primary human cells. Thus using a KSHV oncogenic protein we created a new inmortilized endothelial cell line that we call Ecs-KSGPCR. As predicted by the multistep carcinogenesis hypotesis, our preliminary experiments suggest that the mechanisms of Terminal Proliferation Arrest (TPA) are not completelly supressed by KSHV-GPCR and that additional oncogenic events are necessary in order to fully transform human primary endothelial cells. Further research will determine wether other KSHV's oncogenes can cooperate oncogenicaly with KSHV-GPCR. KDR/VEGFR-2 and Tie-2 are endothelial specific tyrosine kinase receptors that play key roles in vascular biology. These two receptors regulate cell survival and proliferation of endothelial cells during angiogenesis, as a consequence of this they appear to be minimally expressed in quiescent endothelium in vivo, and they are down regulated after a few passages, in vitro, of primary endothelial cells. Surprisingly KDR and Tie-2 are overexpressed in long term cultures of Ecs-KSGPCR. Altough in this work we show that the sustained expression of those receptors is functional, further experiments are required to determine if they play any rol in the inmortalization process. We conclude that KSHV-GPCR is a viral oncogene that can exploit cell signaling pathways to induce oncogenesis and angiogenesis in KSHV-mediated oncogenesis.

"El recuperado térmico de los aglomerados de defector producidos por irradiación neutrónica en monocristales de cobreThermal annealing of defect clusters induced by neutron irradiation in copper single crystals" (1998). Miralles, Mónica T.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La irradiación con particulas energéticas es una de las técnicas mas utilizadas para introducir. en forma controlada, defectos, en las redes cristalinas metalicas. La presencia de defectos altera sensiblemente las propiedades fisicas de los materiales. Si se eligen obserables físicos lo suficientemente sensibles a estas estructuras de defectos, se puede obtener información acerca del tipo, de la configuración espacial, de la concentración, y de las cineticas de reacción entre los mismos. La aplicación de tratamientos térmicos postirradiación permite proprocionar, en forma gradual, las energias de activacion necesarias para lograr la recombinación de los defectos y la consecuente recuperación de la propiedad fisica elegida. De este modo se obtienen las llamadas “Etapas de Recuperación" del observable fisico en cuestión, cuyos rasgos generales, si bien son comunes a todos los metales, identifican en forma univoca a cada uno de ellos. El tema del presente Trabajo de Tesis es: “El Recuperado Térmico (T > 450 K) de los Aglomerados de Defectos producidos por Irradiación Neutrónica a Bajas Dosis y a 77 K en Cu de alta pureza, a través de la Tensión Critica Resuelta de Corte, medida a 77 K". El recuperado térmico mencionado corresponde a la ultima etapa de recuperación del Cu, la Etapa V, la cual ha sido muy poco estudiada. La misma se asocia generalmente a la disociación de los aglomerados de vacancias con la aniquilación sistemática de los aglomerados de intersticiales por vacancias térmicas. Pero los detalles de este proceso no estan bien establecidos y su esclarecimiento, desde un punto de vista basico, es de fundamental importancia para la comprensión y predicción de los fenómenos asociados a las inestabilidades estructurales que ocurren en los materiales expuestos a severos entornos de radiación. En este trabajo, los aglomerados de defectos se introducen en las probetas de tracción monocristalinas de cobre, mediante la irradiación neutronica en el criostato instalado dentro del reactor RA-1 de la CNEA, a 77 K y dosis inferiores a la de saturación (4.5 x 10^6 n/cm^2). Esta elección de las condiciones experimentales asegura la no superposición de las cascadas de desplazamientos atómicos y la estabilidad de los defectos creados a la deformación plastica (ausencia de canalización de dislocaciones). La Tensión Critica Resuelta de Corte medida a 77 K. TCRC-k, es un observable físico ideal para el estudio de la Etapa V Los aglomerados de defectos actuan como obstáculos al movimiento de las dislocaciones dando lugar a un enorme incremento de esta propiedad, conocido como fenomeno de endurecimiento El 75 % del daño introducido durante la irradiaicón es recuperado en la Etapa V. medida por esta propiedad, mientras que sólo el 15% es retenido en esta Etapa cuando la recuperación se mide a traves del incremento de la resistividad electrica A partir de los recuperados isócronos e isotérmicos de la TCRC-k en el presente trabajo, se pudo establecer, por primera vez y con esta técnica, la existencia de, al menos, tres subetapas de recuperacion ubicadas en los intervalos de temperatura: ~ 220-250 °C (Va), ~ 250-290 °C (Vb) y ~ 290-325 °C, demostrando en forma concluyente que el proceso de disolución de los aglomerados que tiene lugar en esta etapa es multiactivado.

Abstract:
The irradiation with energetic particles is one of the most common techniques to introduce defects in a controlled way in metallic lattices. Defects alter sensitively the physical properties of the materials. By choosing physical observables sensitive enough to these defect structures it is possible to obtain knowledge about the type, space configuration, concentration and kinetic reactions involved. Post-irradiation thermal annealings provide the activation energies necessaries to recombine defects and the consequent recovery of the choosed physical property. In this way, the so called “Recover Stages” of the physical observable could be obtained, whose general characteristics identify univocaly the studied metal. The subject of this Ph. D. thesis is: “Thermal annealing (T > 450 K) of the defect clusters induced by neutron irradiation at low dose at 77 K in high purity copper, through the Critical Resolved Shear Stress mesured at 77 K, CRSS77k". This thennal annealing corresponds to the least studied last recovery stage of copper: the Stage V which is generally associated with the dissociation of the vacancy clusters with the systematic annihilation of the interstitial clusters by thermal vacancies. It is fundamental to know the details of this process in order to understand and to predict the phenomena associated with the structural inestabilities that occur in materials exposed to severe irradiation environments. In the present work, the defect clusters were introduced into copper single crystals by neutron irradiation at liquid nitrogen in the RA-l reactor of the Comisión Nacional de Energía Atómica (CNEA) up to a fast neutron dose of 4.5 x 10^6 n/cm^2. These experimental conditions prevent any superposition of the atomic displacements cascades and the stability of the plastic defonnation of the defects (abscence of dislocation channeling). The CRSS77k is an ideal physical observable to study the Stage V. The defect clusters act like obstacles to the dislocation movement producing an enormous increment of the CRSS: the radiation hardening. When the recovery is mesured through the increment of the CRSS, the 75 % of the radiation damage is recovered in Stage V, while only the 15 % is recovered when it is measured by the increment of the electrical resistivity. From the isochronal and isothermal annealings of the CRSS77k, it was possible to establish in the present work,for the first time and with this technique, the existence of at least three recovery substages in the temperature intervals: ~ 220-250 °C (Va), ~ 250-290 °C (Vb) y ~ 290-325 °C. In this way, it is conclusively demonstrated that the disolution of the clusters process of this stage is multiactivated, i.e., exists a spectrum of activation energies.

"El rol de las proteínas tirosina quinasas ZAP-70 y Syk en la activación de las células T: Estudios preclínicos de terapia génica para la deficiencia en ZAP-70" (2003). Steinberg, Marcos Wenceslao. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las proteínas ZAP-70 y Syk componen la familia Syk de tirosina quinasas. Estas dos proteínas presentan secuencias de amino ácidos y estructuras similares, sin embargo ZAP-70 y Syk son reguladas diferentemente en términos de expresión y probablemente de función. En los linfocitos T, estas quinasas intervienen en la diferenciación y la activación celular mediada por el receptor de células T (TCR). En este trabajo hemos sido capaces de realizar un estudio comparativo del rol de ZAP-70 y de Syk en los eventos precoces de señalización via el TCR, utilizando células T primarias y líneas celulares T transformadas expresando separadamente niveles equivalentes de ZAP-70 y de Syk. En dicho estudio demostramos que ZAP-70 y Syk contribuyen de manera diferencial a la señalización vía e TCR, en particular a la fosforilación de la cadena C del receptor. Además, Syk es menos eficaz que ZAP-70 para asociarse al TCR. Nuestro estudio demuestra que Syk funciona de manera diferente a ZAP-70 en la señalización precoz via el TCR. La deficiencia humana en ZAP-70 constituye una forma rara de inmunodeficiencia combinada severa (SCID) caracterizada por la ausencia de células T CD8+ y la presencia de células T CD4+ anormales. Utilizando la terapia génica basada en la transferencia de genes mediada por un vector retroviral, en este trabajo hemos sido capaces introducir el gen wild-type de ZAP-70 dentro de células T CD4+ primarias aisladas de pacientes deficientes en ZAP-70. En las células T CD4+ de pacientes transducidas, la expresión ectópica de ZAP-70 fue suficiente para reconstituir las funciones defectuosas de las mismas. Además, la introduccón del gen wildtype de ZAP-70 dentro de células progenitoras de la médula ósea “lin”, aisladas de ratones ZAP-70 KO, y su posterior transplante en estos mismos ratones, resultó en la reconstitución del desarrollo y las funciones de los linfocitos T CD4+ y CD8+. Nuestros descubrimientos proporcionan una importante información para el establecimiento de protocolos de terapia génica, no solo para la inmunodeficiencia en ZAP-70 sino también para diferentes tipos de inmunodeficiencias primarias.

Abstract:
The ZAP-70 and Syk proteins are the two members of the Syk family of protein tyrosine kinase. These two proteins share important similarities of sequence and structure, however, ZAP70 and Syk differ in terms of expression and probably of function. In T lymphocytes, these kinases are involved in cellular differentiation and activation. In this work, we have been able to compare both tyrosine kinases participation in TCR signaling pathway in human primary T cells obtained from ZAP-70 deficient patients, which expressed important levels of Syk in absent of ZAP-70. In addition, we performed the same study in transformed-T cell lines expressing stable equivalent levels of ZAP-70 and/or Syk. These results demonstrate that upon TCR stimulation, ZAP-70 and Syk differ in their capacity to support C-chain phosphorylation. Moreover, we have shown that Syk is less efficient than ZAP-70 in the association to the TCR. Our results suggest a differential role for ZAP-70 and Syk in the early signaling events after TCR stimulation. The human ZAP-70 deficiency is a rare severe combined immunodeficiency (SCID), characterized by a selective inability to produce CD8+ single positive T cells and a signal transduction defect in peripheral CD4+ T cells. A gene therapy approach may prove to be an alternative treatment for ZAP-70-deficient patients. In the present study we have been able to successfully introduce the wild-type ZAP-70 gene into primary T cells from ZAP-70-deficient infants with a reconstitution of T cell function. Moreover, introduction of the wild-type ZAP-70 gene was into murine ZAP-70ˉ/ˉ hematopoietic stem cells and subsecuent ZAP-70-transduced bone marrow cells transplantation, restored the development and function of CD4 and CD8 T Lymphocytes. Altogether, our studies offer important information to the establishment of new gene therapy-based protocols as an alternative treatment for ZAP-70 and other immunodeficient patients.

"El rol de las trazas fósiles de tetrápodos en los modelos de icnofacies continentales en ambientes de climas áridos-semiáridos" (2010). Krapovickas, Verónica. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El modelo de icnofacies provee el marco conceptual principal sobre el que los datos icnológicos pueden ser interpretados ambientalmente. Tradicionalmente focalizado en el empleo de trazas fósiles de invertebrados, el modelo de icnofacies continentales se expandió sólo recientemente incluyendo a las huellas de tetrápodos. El objetivo de esta tesis es el de analizar el rol de las huellas de tetrápodos en la elaboración de modelos de icnofacies continentales así como en la reconstrucción de paleoambientes sedimentarios en ambientes de climas áridos-semiáridos. Para ello, se abordó la problemática desde una perspectiva integradora incorporando la información de los ambientes depositacionales, así como la proveniente del campo de la icnología de vertebrados y de invertebrados. Los distintos ejemplos particulares que constituyen la base empírica de este estudio representan una nueva contribución al conocimiento icnofaunístico de distintas unidades litoestratigráficas aflorantes en localidades argentinas (Formación Patquía, Paganzo, provincia de La Rioja; Formación Candeleros, área Villa El Chocón, provincia del Neuquén; Formación Anacleto, Sierra Barrosa, provincia del Neuquén; Formación Vinchina, Vinchina, provincia de la Rioja). La primera de las unidades estudiadas corresponde a la Formación Patquía (Pérmico inferior) en la provincia de la Rioja. Esta presenta una asociación de trazas fósiles presente en cuerpos de agua poco profundos de planicies de inundación caracterizada por trazas de locomoción, descanso y habitación asignados a Cruziana problematica, Rusophycus carbonarius y Palaeophycus tubularis. En los depósitos de mantos de arena de la misma formación se encuentran preservados trazas fósiles de tetrápodos asignados a Chelichnus duncani, trazas de habitación de invertebrados (Palaeophycus tubularis, Skolithos isp.) y locomoción de de artrópodos. El estudio de la Formación Candeleros (Cretácico Superior) incluye las localidades clásicas de Villa el Chocón y Balneario Villa el Chocón, así como una nueva localidad (Cañadón de las Campanas). La asociación icnológica está preservada en depósitos de interdunas húmedas y lagos de playa de bolsón y contiene trazas de invertebrados (Arenicolites isp., Arenicolites carbonarius, Diplocraterion parallelum, Palaeophycus tubularis, Scoyenia gracilis, Skolithos verticalis, Taenidium barretti), huellas de dinosaurios terópodos (Irenesauripus isp.) y saurópodos (cf. Brontopodus birdi). La asociación de trazas fósiles de la Formación Anacleto (Cretácico Superior) incluye huellas de terópodos avianos y no avianos (Ignotornis mcconnelli, Barrosopus slobodai, huella tridáctila mediana) y trazas de invertebrados (Arenicolites tipo1, tipo2, Palaeophycus tubularis, cf. Digitichnus laminatus, tubos horizontales grandes). Esta asociación se encuentra en cuerpos de agua efímeros desarrollados en zonas deprimidas de la planicie de inundación. Ciertas estructuras asociadas incluyen a megarizolitos, preservados en los depósitos de canales fluviales. La asociación de trazas fósiles de la Formación Toro Negro (Mioceno) en muy diversa. Los depósitos de lóbulos de desbordamiento presentan trazas de alimentación meniscadas y trazas de habitación (Taenidium barretti, Scoyenia gracilis y Palaeophycus tubularis). Los depósitos de barras arenosas emergidas incluyen huellas de aves y mamíferos (Fuscinapeda sirin, Macrauchenichnus rector, cf. Venatoripes riojanus, huellas heterópodas pequeñas, huella incumbente grande, huella anisodáctila delicada, impresiones ariñonadas e impresiones monodáctilas ovales) y escasos especímenes de Palaeophycus tubularis y Helminthopsis hieroglyphica. Finalmente, se evalúa el patrón de distribución de trazas fósiles de vertebrados e invertebrados en ambientes sedimentarios desarrollados bajo condiciones climáticas áridas-semiáridas. Este análisis se basa en las asociaciones de trazas fósiles estudiadas en esta tesis, en conjunto con otras asociaciones icnológicas clásicas de otras partes del mundo y de la columna estratigráfica. Los modelos de icnofacies de tetrápodos propuestos hasta el momento establecen una entre las asociaciones de huellas fósiles y los paleoambientes sedimentarios, pero carecen de una definición clara de los parámetros ambientales que explican la distribución de las huellas fósiles. Se sugiere que la distribución de huellas de tetrápodos y trazas de invertebrados no están controladas por los mismos parámetros paleoambientales. La distribución de trazas fósiles de tetrápodos en ambientes terrestres parecería estar más ligada a ciertos parámetros ambientales clave de escala regional como: el clima y la disponibilidad de recursos.

Abstract:
The ichnofacies model provides the main framework to understand the paleoenvironmental significance of trace fossils. Traditionally focused on invertebrate trace fossil, the ichnofacies model has only recently expanded to include tetrapod footprints. The purpose of this thesis is to study the role of tetrapod footprints in the development of continental ichnofacies models, as well as in the reconstruction of sedimentary paleoenvironments in arid and semiarid climate environments. An integrative perspective was employed to tackle this problem, taking into account depositional environments, as well as vertebrate and invertebrate trace fossil data. The various examples that constitute the empiric base of this study represent a new contribution to the ichnofaunistic knowledge of different lithostratigraphic units that outcrop in Argentinean localities -Patquía Formation, Paganzo, La Rioja province; Candeleros Formation, Villa El Chocón area, Neuquén province; Anacleto Formation, Sierra Barrosa, Neuquén province; Vinchina Formation, Vinchina, La Rioja province -. The trace-fossil assemblage of the Lower Permian Patquía Formation consists of locomotion, resting and dwelling traces assigned to Cruziana problematica, Rusophycus carbonarius and Paleophycus tubularis, and occurs in floodplains deposits. In sand sheet deposits of the same formation, tetrapod fossil footprints, dwelling traces of invertebrates and locomotion arthropod traces are preserved and assigned to Chelichnus duncani in the case of tetrapods and Palaephycus tubularis and Skolithos isp. for invertebrates. Study of the Upper Cretaceous Candeleros Formation includes the classic localities of Villa El Chocón and Balneario Villa El Chocón, as well as a new locality (Cañadón de las Campanas). The trace-fossil association consists of invertebrates trace fossils (Arenicolites isp., Arenicolites carbonarius, Diplocraterion parallelum, Paleophycus tubularis, Scoyenia gracilis, Skolithos verticalis, Taenidium barretti), theropod dinosaur footprints (Irenesauripus isp.), and sauropods footprints (cf. Brontopodus birdi). It occurs in damp interdune and playa-lake deposits. The trace-fossil assemblage from the Upper Cretaceous Anacleto Formation includes avian and non-avian theropod footprints (Inotornis mcconnelli, Barrosopus slobodai, medium tridactyl footprints) and invertebrate trace fossils (Arenicolites type 1, type 2, Palaeophycus tubularis, cf. Digitichnus laminatus, large horizontal tubes). This assemblage occurs in deposits interpreted as formed in ephemeral water bodies developed in floodplain depressions. Associated structures attributed to megarizoliths occur in river-channels deposit. The trace-fossil assemblage from the Miocene Toro Negro Formation is very rich. Crevasse-splay deposits mainly contain meniscate feeding and dwelling traces (Taenidium barretti, Scoyenia gracilis and Paleophycus tubularis). Emerged-sandbar deposits include avian and mammalian footprints (Fuscinapeda sirin, Macrauchenichnus rector, cf. Venatoripes riojanus, small heteropod footprints, large incumbent footprint, slender anisodactyl footprint, kidney-like impressions, and oval monodactyl impressions), and scarce Palaeophycus tubularis and Helminthopsis hieroglyphica specimens. Finally, the pattern of distribution of vertebrate and invertebrate trace fossils in sedimentary environments developed under arid-semiarid climate conditions is evaluated. This analysis is based on the trace-fossil associations studied for this thesis, together with other classic ichnologic associations reported elsewhere, which have been compiled in a database. Previous tetrapod ichnofacies models established a relationship between fossil footprint associations and sedimentary paleoenvironments, but no insight on the controlling environmental parameters was provided. It is suggested that the distribution of tetrapod footprints and invertebrate trace fossils are not controlled by the same paleoenvironmental factors. The distribution of tetrapod trace fossils in terrestrial environments seems to be more related to certain key environmental regional-scale parameters, such as climate and resources availability.

"El rol de los genes LSM en la regulación de los ritmos circadianos" (2016-03-17). Perez-Santangelo, Ma. Soledad. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los relojes circadianos son mecanismos auto-regulatorios endógenos que controlan la periodicidad de múltiples procesos biológicos. Éstos proporcionan a los organismos una ventaja adaptativa que permite sincronizar distintos eventos fisiológicos y del desarrollo al momento más adecuado del día. La regulación del reloj circadiano ocurre principalmente mediante circuitos de retroalimentación transcripcional. Sin embargo, estudios recientes muestran que se requiere de mecanismos post-transcripcionales para el correcto funcionamiento del reloj. Uno de estos mecanismos es el splicing alternativo, mediante el cual se producen múltiples variantes de ARNm a partir de un único gen. En esta tesis se caracterizó el comportamiento circadiano de mutantes de factores de splicing cuyos transcriptos están regulados por el reloj. Se encontró que mutaciones en los genes LSM5 y LSM4, que codifican para componentes del complejo spliceosomal U6 snRNP, alteran el período circadiano. Un análisis global del transcriptoma de ambas mutantes reveló enriquecimiento en genes implicados en la regulación de la transcripción y respuestas de estrés, así como alteraciones en el splicing alternativo de un subconjunto de genes, incluyendo genes centrales y de vías de salida del reloj. Los genes LSM también forman parte de otro complejo involucrado en el decaimiento del ARNm. Dado que LSM4 y LSM5 son parte de los dos complejos nos preguntamos si parte del efecto circadiano observado era debido a su rol sobre el decaimiento de ARNm. Se encontró que mutaciones en varios genes involucrados en decaimiento de ARNm también generan alteraciones en los ritmos circadianos. Estos resultados apoyan la idea de que ciertos genes LSM desempeñan un rol en los ritmos circadianos, mediante la regulación del splicing alternativo y del decaimiento de ARNm, lo cual contribuye a la sincronización de los ritmos biológicos con cambios ambientales.

Abstract:
Circadian clocks are endogenous self-regulatory mechanisms that control the periodicity of multiple biological processes. These provide organisms with an adaptive advantage that allows them to synchronize different physiological and developmental events to the most appropriate time of day. The regulation of the biological clock occurs mainly through transcriptional feedback loops. However, recent studies show that post-transcriptional mechanisms are required for proper functioning of the clock. One of these mechanisms is alternative splicing, a process through which multiple mRNA variants are produced from a single gene. In this thesis we characterized the circadian behavior of splicing factors mutants, affected in genes whose transcripts are regulated by the clock. We found that mutations in LSM5 and LSM4 genes, encoding U6 snRNP spliceosomal complex components, change the circadian period. Genome-wide transcriptome analysis of both mutants revealed enrichment in genes involved in transcriptional regulation and stress responses, as well as changes in alternative splicing of a subset of genes, including central and output clock genes. The LSM genes are also part of another complex involved in mRNA decay. Since LSM5 and LSM4 are part of both complexes, we wondered if part of the circadian effect observed in the mutants was due to their role on mRNA decay. We found that mutations in other genes involved in mRNA decay also generate changes in circadian rhythms. These findings support the idea that some LSM genes play a role in circadian rhythms through the regulation of alternative splicing and mRNA decay, which helps synchronize biological rhythms with environmental changes.

"El sistema fibrinolítico en pacientes sépticos" (1997). Duboscq, Cristina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Sepsis es la respuesta inflamatoria sistémica a la infección, que cursa con una lesión endotelial, producto de la activación de diversos sistemas plasmáticos y celulares, los que conducen, entre otras alteraciones, a un desbalance hemostático. Estudios previos de la Dra. Kordich, en un gupo pequeño de pacientes sépticos, han demostrado que los niveles plasmáticos del plasminógeno (Plg) estaban disminuidos, mientras que los de α2-antiplasmina (APL) se mantenían normales. Los objetivos de este trabajo fueron: a) Estudiar en forma seriada los componentes del sistema hemostático (especialmente si el Plg estaba disminuido) y cuáles de ellos estaban relacionados con la probabilidad de sobrevida en 45 pacientes sépticos consecutivos. b) Investigar si la acción de las proteasas leucocitarias ( que degradan in vitro al Plg generando, entre otros fragmentos, miniplasminógeno) podrían ser la causa del descenso de los niveles plasmáticos del plasminógeno. c) Estudiar in vitro si el miniPlg presenta actividad fibrinolítica. La actividad plasmática de Plg fue significativamente menor (p<0,000l) en el plasma de los pacientes sépticos que en los grupos controles. La probabilidad de sobrevida puede expresarse en función de los niveles de Plg o de la relación Plg/APL (p<0,003). La curva ROC permitió establecer un punto de corte para el Plg de 65%, la sensibilidad fue 90% y la especificidad, 66,7%; para un punto de corte Plg/APL=0,65, la sensibilidad fue 95,2% y la especificidad fue 70,8%. La concentración del complejo elastasa - α1-inhibidor de proteinasa fue mayor en los sépticos que en los grupos controles. El Plg humano purificado es degradado in vitro por elastasa leucocitaria, por extracto de enzimas leucocitarias y por polimorfonucleares degranulados. El proceso proteolítico origina fragmentos entre 45 y 30 kD analizados por Western blot. El fragmento de alrededor de 38 kD reacciona con un anticuerpo monoclonal anti-miniPlg. El 33 % de los plasmas de los pacientes sépticos mostraro por Western blot una banda de 38 kD correspondiente a miniPlg, no presente en el plasma normal, sugiriendo la acción in vivo de las proteasas leucocitarias. El miniPlg presentó menor capacidad fibrinolítica en todos los rangos de concentraciones estudiados (0,1-1,3 μM) cuando es activado por el activador tisular del Plg (t-PA). El tiempo de lisis de un coágulo de fibrina fresco fue (2,3 ± 0,06) min. para el Plg y (9,8 ± 0,1)min para el miniPlg. El sistema miniPlg/rt-PA fue incapaz de lisar completamente un coágulo formado por acción de trombina sobre plasma humano depletado de Plg. En resumen los pacientes sépticos presentan un estado hipofibrinolíico, por descenso de los niveles plasmáticos de Plg y porque el miniPlg, generado por acción de las enzimas leucocitarias, es activado sólo parcialmente por el t-PA.

Abstract:
Sepsis is a systemic inflammatory response to infection, with endothelin damage and alteations in the coagulation and fibrinolysis systems. Dr. Kordich previous studies of, in few septic patients, showed low plasminogen levels and normal α2-antiplasmina (APL) levels. The aims of these thesis were: a) To study hemostatic system (specially Plg in the 45 septic consecutive patients during a week) and to investigated propectively which hemostatic parameters has a prognostic value for survival from sepsis. b) To investigate if leukocyte protease action in vitro, (which degrades Plg, producing several fragments one of them called miniplasminogen) causes the decrease of Plg plasmatic levels. c) To study if miniPlg is able to produce clot lysis when it is activated by rt-PA, urokinase and streptokinase. Plasminogen levels were significantly lower (p<0,001) in plasma of septic patients than control group. Plasminogen alone on the ratio ogf Plg/antiplasmin were good markets for survival from septicemia (p<0,03), studing by logistic regression. The ROC curve allows to stablish a cut off value of 65% for the plasminogen with a sensitivity of 95,2% and specificity of 70,8%. Purified human Plg was degraded in vitro by elastase, leucocyte extract and degranulated polymorphonuclear producing several fragments between 45-30 kD studing by Western blot. The band of 38 kD reacts with miniplasminogen selective monoclonal antibody. MiniPlg is less efficient than Plg to produce clot lysis in all the studied concentrations (0,1-2 μM). Clot lysis time was (2,3 ± 0,06) min. for Plg and (9,8 ± O,1) min for miniPlg. In Plg depleted human plasma miniPlg is unable to produce the complete clot lysis in presence of rt-PA. Septic patients show a hipofibrinolytic state due to decreasing of plasmatic Plg levels and because of miniPlg, producing by leukocyte protease Plg digestion, has a poor fibrinolytc activity when it is activated by rtPA.

"El sistema olfatorio y vomeronasal en larvas de anfibios anuros y su participación en la detección de estímulos químicos en el ambiente" (2012). Jungblut, Lucas David. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La mayoría de los tetrápodos poseen dos órganos quimiosensoriales nasales: el epitelio olfatorio (EO) y el órgano vomeronasal (OVN). Ambos sistemas sensoriales, olfatorio (SO) y vomeronasal (SVN), presentan diferencias morfológicas, bioquímicas y moleculares lo que indica que participan en procesos fisiológicos diferentes. Usualmente se asocia al SVN con la detección de feromonas, mientras que el SO participaría en la detección de “olores comunes” no vinculados a la comunicación intraespecífica. Sin embargo, varias evidencias contradicen esta hipótesis y actualmente no está claro cuáles serían las funciones diferenciales de ambos sistemas sensoriales, o qué tipo de estímulos son detectados en cada uno de ellos. Más aún, inclusive el propio origen de este sistema “dual” de quimiodetección, durante la evolución de los vertebrados, presenta algunas controversias. Generalmente se interpreta que el SVN apareció en tetrápodos como consecuencia de la adaptación al ambiente terrestre. Sin embargo, las evidencias moleculares y morfológicas actuales sugieren que tanto el SO como el SVN aparecieron tempranamente en la filogenia de los vertebrados, probablemente en un ancestro común acuático de los tetrápodos; aunque nada se sabe de la funcionalidad del SVN en este ambiente. En este contexto, los anfibios constituyen un grupo sumamente interesante para el estudio de los sistemas quimiosensoriales en tetrápodos ya que poseen una etapa larval acuática. Las pocas especies estudiadas hasta la actualidad sugieren que las larvas de anuros poseen tanto SO como SVN, pero nunca se ha realizado un análisis comparado abarcando un número considerable de especies. Por otra parte, los renacuajos presentan un repertorio muy variado de comportamientos mediados por detección de claves químicas, como: detección de comida, predadores, señales de alarma liberadas por coespecíficos, etc. Curiosamente, nada se sabe de la participación de los distintos sistemas quimiosensoriales en la detección de estos estímulos. En la presente tesis se analizaron larvas de catorce especies de anuros, en las cuales se demuestra que, tanto el SO como el SVN, se desarrollan tempranamente y están presentes durante toda la etapa larval. Las características morfológicas, histológicas y bioquímicas observadas en varias de estas especies, sugieren que un grado importante de maduración, se alcanza en ambos sistemas sensoriales durante la etapa larval. Las neuronas del EO y el OVN expresan marcadores específicos descriptos en neuronas quimiosensoriales de otros vertebrados. Además, sus axones proyectan a zonas específicas de telencéfalo: el bulbo olfatorio principal y accesorio, respectivamente, donde establecen conexiones sinápticas. Estas características nos hacen suponer que ambos sistemas sensoriales son funcionales en renacuajos. Finalmente, se ha caracterizado, en larvas del sapo común Rhinella arenarum, las respuestas comportamentales a dos tipos de estímulos diferentes mediados por detección de claves químicas. Por un lado, la detección de estímulos que indican la presencia de una fuente de alimento, y por otro, la detección de señales de alarma liberadas por otros renacuajos, un fenómeno de comunicación social conocido en larvas de otras especies de anuros. Ambos estímulos parecen estar mediados por el SO en R. arenarum, ya que las larvas con OVN ablacionado responden igual que los controles, mientras que si se ablaciona el EO las respuestas comportamentales a ambos estímulos desaparecen. Además, los análisis cuantitativos de activación neuronal mostraron que el número de neuronas sensoriales activadas aumenta en el EO luego de la exposición a ambos estímulos, mientras que en el OVN no varía respecto a los controles.

Abstract:
Most tetrapods have two nasal chemosensory organs: the olfactory epithelium (OE) and the vomeronasal organ (VNO). Both sensory systems, olfactory (OS) and vomeronasal (VNS), are morphologically, biochemically and molecularly different, indicating that they are involved in different physiological processes. The VNS is usually associated with pheromone detection, while the OS would detect “common odours”, which may not be involved in intraspecific communication. This hypothesis, however, has been contradicted by several data, and it is not clear, at this time, which would the relative functions of the OS and the VNS or what kinds of stimuli are detected by each sensory system. Moreover, even the evolutionary origin of this “dual” chemosensory system during vertebrates’ evolution is still controversial. It is generally believed that the VNS arose in tetrapods as an adaptation to terrestrial environment. However, the current molecular and morphological evidence, suggest that both OS and VNS appeared early in vertebrate evolution, probably in a common aquatic ancestor of tetrapods, but nothing is known about the functionality of VNS in aquatic environment. In this context, amphibians represent an extremely interesting group to study chemosensory systems among tetrapods, as they have an aquatic larval stage. The few species analysed to the present suggest that anuran larvae have both an OS and a VNS, but a comparative analysis involving a considerable number of species has never been carried out. By the other hand, tadpoles show a diverse repertoire of chemodetection mediated behaviors, such as food detection, predators’ recognition, alarm signals released by conspecifics, etc. Curiously, nothing is known about the involvement of the different chemosensory systems in detecting these stimuli. In this thesis, the analysis of 14 different anuran larvae species demonstrates that both, the OS and the SVN, are early developed in anurans, and both sensory system are present throughout the entire larval stage. The morphological, histological and biochemical characteristics founded in many of these species, suggest that a significant level of maturity is reached in both sensory systems during the larval stage of anurans. Chemosensory neurons of the EO and the VNO express specific markers described in chemosensory neurons of other vertebrates. Moreover, axons from olfactory and vomeronasal chemosensory neurons project to specific areas in the telencephalon: the main and accessory olfactory bulb, respectively, where they establish synaptic connections. These features led us to speculate that both sensory systems are functional in tadpoles. Finally, the behavioural responses to two different stimuli, mediated by chemical cues detection, has been characterized in larvae of the common toad Rhinella arenarum: First, the chemodetection of cues that indicate the presence of a food source. And second, the chemodetection of alarm signals released by other tadpoles, a social communication phenomenon widely known in other anuran larvae species. Both stimuli appear to be mediated by the OS in R. arenarum as larvae without VNO responded equally to the control animals, while if the EO is removed the behavioural responses to both stimuli was not observed. In addition, the quantitative analyses of activated neurons shows that the number of chemosensory neurons activated increases in the EO after exposure to both stimuli, while there is no detectable variation in the VNO compared to control animals.

"El uso de información olfativa durante la recolección colectiva de recursos en la abeja Apis mellifera" (2012). Balbuena, María Sol. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En insectos sociales como la abeja Apis mellifera, una eficiente recolección colectiva de recursos requiere de una precisa transferencia de información. La ubicación, productividad y tipo floral a explotar son esenciales para poder encontrar rápidamente el alimento descubierto. Las abejas combinan la transmisión de señales acústico-vibratorias y olfativas con la transferencia de información quimio-sensorial para alcanzar ese objetivo. En esta Tesis se evaluó la correlación entre las interacciones sociales que ocurren durante el reclutamiento hacia un nuevo tipo floral (nueva información olfativa) con las preferencias recolectoras de las abejas reclutadas. Se observó que el tipo de interacción más frecuente es el contacto corporal y que, incluso, no es necesario un contacto trofaláctico directo (transferencia de alimento boca a boca) con la reclutadora para que las abejas reclutadas arriben a la fuente de alimento señalada, como se sugería hasta el presente. Además, las abejas reclutadas mostraron una alta preferencia por aterrizar en los alimentadores que presentaron el mismo olor que el llevado por la danzarina. Por otro lado, con el fin de vincular semioquímicos cuticulares y actividad recolectora, se analizaron los perfiles de los compuestos cuticulares presentes en abejas recolectoras de néctar expuestas a fuentes de alimento de productividad variable. Estos perfiles variaron con la productividad de la fuente explotada, lo cual podría tener implicancias en el reclutamiento de nuevos individuos al sitio recolector. Además, se propuso desarrollar un bioensayo que permita cuantificar la sensibilidad quimiosensorial de abejas de colmena que pueden ser potencialmente activadas por abejas recolectoras a salir al exterior en busca de recursos. Estas abejas fueron capturadas en la colmena y tanto sus umbrales de respuestas al azúcar como sus respuestas espontáneas a olores cuantificadas. Finalmente, se estudió el rol de las experiencias olfativas, adquiridas a edades pre recolectoras dentro de la colmena, sobre el subsiguiente proceso de reclutamiento. Estos resultados indican que las memorias de abejas que aprendieron la asociación olor-recompensa dentro de la colmena, durante el desempeño de tareas de colmena, no relacionadas con la recolección, pueden ser evocadas incluso 8 días después de haber ocurrido el aprendizaje olfativo. En resumen, la transferencia y propagación de información referida al recurso afectaron a distintos grupos operativos de obreras, incluso a los que no estaban involucrados en la recolección. Esto permite suponer que la información floral puede persistir por periodos prolongados dentro de la colonia. A partir de estos resultados se concluye que la abeja Apis mellifera resulta un buen modelo para evaluar el establecimiento de información social a corto y largo término.

Abstract:
Social insects such as the honey bee Apis mellifera rely on accurate information transfer to collectively achieve an efficient gathering of resources. Location, productivity and floral type are essential for finding known food sources rapidly. Honey bees achieve this by combining the transmission of acoustic-vibratory and olfactory cues with the transfer of quimio-sensory information. In this thesis, the correlation between social interactions during recruitment involving new olfactory information and the gathering preferences of the recruited bees was studied. The most frequent type of interaction resulting of recruitment to a novel food source was found to be body contact with the recruiter. This is contrary to what had been previously suggested, direct trophallactic contact (mouth to mouth food transfer) is apparently not necessary. Recruited honey bees showed high preference for landing on feeders that presented the same odor as that borne by the dancer. I also analyzed the profiles of cuticular compounds present in bees from sources with different productivity, aiming to relate recruitment activity with cuticular semiochemicals. These cuticular profiles varied with the productivity of the exploited food source. This could have an effect on the recruitment of new individuals to the gathering site. Furthermore, I proposed the development of a bioassay to quantify the quimiosensory sensitivity of hive bees, taken as the likelihood to leave the hive in search of resources due to activation by foragers. Hive bees were captured and their sugar response thresholds and spontaneous response to odors quantified. Finally, I studied the role of olfactory experiences, acquired inside the hive at preforaging ages in the recruitment process. The results imply that odor-reward associative memories established inside the hive whilst carrying out hive tasks unrelated to gathering can be evoked even 8 days after the olfactory learning occurs. In summary, transfer and propagation of information related to the resource affected different operative groups of worker bees, even those that were not involved in food gathering. Thus, it can be assumed that floral information can persist for prolonged periods inside the colony. In conclusion, the honeybee Apis mellifera is an excellent model for the study of short and long term establishment of social information.

"El volcanismo cretácico alcalino de la Sierra Chica de Córdoba: geoquímica, petrogénesis e implicancias geodinámicas" (2003). Lagorio, Silvia Leonor. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se realizó la caracterización petrológica, geoquimica y petrogenética del volcanismo básico alcalino del Cretácico Inferior de la sierra Chica de Córdoba. Éste forma parte de un complejo volcánico-sedimentario que constituye el relleno de sinrift depositado en hemigrábenes restringidos dentro de una cuenca transtensional, cuya formación está relacionada con el desmembramiento de Gondwana. En las diferentes áreas se reconocieron distintos grupos sobre la base del quimismo de los elementos mayores: ankaratritas, basanitas, suite basalto alcalino —traquifonolita/traquita y suite basalto transicional - latibasalto. El carácter general del volcanismo es potásico a potásico transicional; el grado de alcalinidad es moderado, sin verificarse litotiposperalcalinos. Las características geoquímicas junto a los datos paleomagnéticos de estudios previos para el norte de la sierra de los Cóndores, indican que los niveles lávicos se distribuyeron diacrónicamente a lo largo de toda la sucesión, con variaciones laterales entre las localidades, no resultando posible convalidar los dos ciclos volcánicos propuestos por autores precedentes. El rift tipifica como de baja volcanicidad, con actividad de tipo estromboliana. En las áreas en donde la sedimentación fue más importante se registran niveles brechosos de tipo peperítico. Episodios freatomagmáticos han tenido lugar en forma muy subordinada. Fenómenos de remoción en masa, de tipo debn's flow, han sido en cambio frecuentes. Los contenidos de Al2O3 y las composiciones normativas que presentan los magmas de tipo primario indican que la fusión del manto tuvo lugar a 35-70 km (13-18 kb). Las anomalías negativas para el K Rb obtenidas sugieren posible flogopita o anfíbol como fases residuales en la fuente mantélica portadora de granate. Los magmas de tipo primario de los diferentes grupos se caracterizan además por poseer diversas relaciones Th/La. La/Ta, La/Nb y contenidos de Zr, Hf y LREE. Los porcentajes de fusión (5 - 7%) a partir de un manto fuertemente enriquecido (con flogopita residual), son consistentes con la ubicación periférica respecto a la gran anomalía térmica (sobre la base del Geoide residual) que desencadenó los voluminosos derrames tholeíticos de Paraná. Los afloramientos ubicados al este (faja oriental), con mayor frecuencia de productos transicionales, podrían representar porcentajes ligeramente superiores a los de la faja occidental; no obstante, el comportamiento de algunos elementos traza revela anomalías consistentes con heterogeneidades en la fuente mantélica. Además, un distinto contenido en volátiles (H2O,C02) pudo haber condicionado la formación de magmas con distinto grado de saturación, particularmente en áreas de coexistencia de dichos productos.

Abstract:
A petrological and geochemical study of the Lower Cretaceous basic volcanism of the Sierra Chica of Córdoba has been done. It belongs to a volcanic-sedimentary complex, which defines a synrift fill in small half-grabens within a transtensional basin, due to tectonics which led to Gondwana break-up. In the different areas four groups of volcanic rocks were recognized from the major elements: ankaratrites, basanites, alkaline basalt - trachyphonolite/trachyte suite and transitional basalt - latibasalt suite. The general character of this volcanism is potassic transitional to potassic. Alkalinityis moderate, according to the absence of peralkaline types. Geochemical characteristics, with previous paleomagnetic data. indicate that lavas are distributed diachronically throughout the whole succession of the north of Sierra de los Cóndores, with lateral variations between the localities. So that the distinction of two volcanic cycles as was previously proposed by other authors, is not supported in this work. The Lower Cretaceous basin of Sierra Chica is a low volcanicity rift type, with strombolian activity. Several peperite type breccias were formed where the sedimentation was more important. Freatomagmatic events were very scarce. Instead, viscous mass flows, as debris flows, were frequent in the area. Al2O3 contents and normative compositions of the primary type magmas point out that melting took place under 35-70 km (13-18 kb). Negative anomalies in K and Rb suggest phlogopite or amphibole as a residual phase in the garnet bearing mantle source. Primary type magmas of the different groups also have diverse Th/La, La/Ta and La/Nb ratios and Zr, Hf and LREE contents. Melting degrees (5 - 7%) from an enriched mantle source (with residual phlogopite) are in accordance with the peripherical position related to the great thermal anomaly (from the residual Geoid) which triggered the voluminous flood tholeiites of Parana. Eastern outcropts of Sierra Chica, of more frequently transitional character, could represent slightly higher melting degrees than the western ones; nevertheless, certain anomalies in trace element compositions point out heterogeneities in the mantle source. Also, a diverse volatile content (H2O,C02) could have favoured magmas with distinct silica saturation, particularly where coexistence of those products has taken place. Trace element diagrams suggest that the more evolved rocks (volumetrically subordinated) were not genetically linked to the primitive magmas by fractional crystallization, so that they must have evolved from diverse parental ones. Likewise, textures involving resorption and reaction with the liquid showed by some clinopyroxene and plagioclase phenocrysts, specially from the more evolved rocks, and the slight but rather general increase in the Mg contents of clinopyroxene from the rim of the phenocrysts to the microlites of the groundmass, indicate frequent recharge with more primitive magmas. This also must have promoted mixing between diverse batches, so that an open-system behaviour is characterized, in which crustal contamination must have also taken part, though it does not seem to have been significant from the geochemical data. Differentiation processes would have taken place under low pressure, in accordance with Al^VIof the clinopyroxene phenocrysts. From the comparison with other alkaline localities also peripherical respect to Parana flood basalts, the Sierra Chica volcanism is coeval and lithologically similar to that of central-eastern Paraguay, also of potassic character. Nevertheless, while basic rocks from Córdoba are high-Ti, those from Paraguay are low-Ti and show striking Ta-Nb-Ti anomalies. The magmas of Sierra Chica are comparable hence to the younger ones from southeastern Brazil, for example those from Alto Paranaíba, though these have higher LILE, LREE contents and (La/Yb)n ratios, consistent with the ultrapotassic rocks that prevail in that area. Chemical similarities reflect therefore analogies between both sources, that could be due to resemblances in the metasomatic events. While low-Ti magmas reflect a metasomatic event during the Late Archean to the Middle Proterozoic in the Rio de la Plata craton, high-Ti ones represent a mantle enrichment episode that occurred in Middle to Late Proterozoic related to mobile belts, according to the model ages obtained by other authors. Hence, it seems probable that mantle beneth Sierra Chica, as that of Alto Paranalba, must have verified metasomatism during Brasiliano orogeny. The presence of low-Ti flood basalts and low-Ti potassic magmas from Paraguay, to the east and northeast of Córdoba, seems therefore to reflect the transition from the oldest to the younger metasomatic events, consistent with terrane accretion in the western margin of Gondwana. Tectonic models geologically supported by the presence of Cambrian calcalkaline granitos in the region, do no correlate with Cretaceous alkaline Chemistry. Ba/Nb vs. La/Nb, Ta/Yb vs. Th/Yb, Ba/La ratios and the absence of a Nb-Ta depletion on a normalized multielement plot do not reveal metasomatism by fluids or melts derived from a downgoing slab in the past. It seems probable that melting must have affected portions of the mantle that were not contaminated by the subduction processes. This is consistent with the heterogeneous nature of the lithospheric mantle, whose non-convective geodynamics, would have preserved the heterogeneities over long periods of the geological time.

"El ácido linolénico como componente menor y normal de aceites de oliva" (1958). Crespo, Fernando. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"El ángulo de Brewster y el comportamiento del vector polarización eléctrica en la óptica de cristales birrefringentes" (2001). Gottschalk, Karin Virginia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis se investiga el comportamiento de la polarización eléctrica de una interfaz entre un medio isótropo y un cristal birrefringente uniaxial. En primer lugar, se consideran los casos en que el eje óptico está contenido en el plano de incidencia y se produce por lo tanto la separación de modos. Cuando el ángulo de incidencia es el de Brewster, se demuestra que el vector polarización eléctrica efectiva tiene la dirección del rayo reflejado, tanto cuando la luz incide desde el medio isótropo como cuando incide desde el cristal. Tambien se considera el caso en que el plano de incidencia no coincide con un plano principal. Como en este caso no se produce la separación de modos, aparecen en el cristal ambos rayos refractados: el ordinario y el extraordinario. Para esta interfaz, mostramos que existe una polarización del rayo incidente para la cual el vector polarización eléctrica efectiva total correspondiente a ambas ondas refractadas, está contenido en el plano de incidencia y tiene la dirección del rayo reflejado cuando el ángulo de incidencia es el de Brewster. Los resultados obtenidos se discuten desde el punto de vista del modelo dipolar.

Abstract:
The behaviour of the electric polarization of an interface between an isotropic medium and a birefringent crystal is investigated. In first place, the cases in which the optical axis lies on the incidence plane are considered. When the incidence angle is Brewster angle is shown that the effective electric polarization of the interface has the direction of the reflected ray in both cases, when the first medium is the isotropic medium and when the first medium is the birefringent crystal. It is also considered, the case in which the incidence plane is not a principal plane. As the separation into modes is not produced, both refracted rays appear in the crystal: the ordinary- and the extraordinary-ray. It is shown that a polarization of the incident ray exists, for which the resulting effective electric polarization vector lies on the incidence plane and has the direction of the reflected ray, when the incidence angle is that of Brewster. The obtained results are discussed from the point of view of the dipolar model.

"El órgano Vomeronasal del armadillo Chaetophractus villosus (Xenarthra): Estudios sobre su morfología y papel fisiológico : Exploración de una posible nueva función" (2000). Carmanchahi, Pablo Daniel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El órgano vomeronasal (OVN) es una estructura quimiorreceptora presente en la mayoría de los mamíferos. No hay estudios sobre este órgano en el Orden Xenarthra. En la presente Tesis Doctoral, se realiza un estudio de las características ultraestructurales y lectinohistoquímicas de este órgano. Se propone el uso del diclobenil como instrumento útil para el estudio de la dinámica celular del mismo. También se propone a la Proteína G como marcadora de neuronas en diferente estado de desarrollo. Además, se caracteriza cualitativa y cuantitativamente la actividad bioeléctrica de los bulbos olfatorios y la neocorteza frontal de animales con desaferentación vomeronasal. Los hallazgos morfológicos y fisiológicos presentados, constituyen la base indispensable para ulteriores estudios sobre los factores que regulan la dinámica celular y la neoformación neuronal. Por último, se suministran evidencias de una nueva función del OVN relacionada con la neurofisiología del Sueño. Esto abre nuevas e inesperadas perspectivas para la investigación del papel fisiológico de este órgano.

Abstract:
The vomeronasal organ is a chemorreceptive structure present in most of the mammalian species. There are no studies of this organ in the order Xenartha. In this Doctoral Thesis we studied the ultrastructural features and the lectinhistochemístry of the organ. We propose the use of the herbicide diclobenil as a valuable tool for the study of the VNO cellular dynamics. We also propose to adopt protein G as a marker of the vomeronasal neurons in different developmental stages. Additionally, we studied the effect of vomeronasal deafferentation on the bioelectrical patterns of the olfactory bulb and frontal neocortex during wakefulnes and sleep. We provide evidence suggesting the existence of a new function of the VNO related to the display of brain electrical activity during Sleep. Our morphological and physiological findings provide a sound basis for the study of factors governing the cellular dynamics and neuronal regeneration of this organ.

"Electrocatálisis y fotocatálisis para la producción de hidrógeno a partir de agua, utilizando metalocorrolatos y metalopofirinas" (2016-03-18). Morales Vásquez, Miguel Angel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Debido al incremento de la población mundial y la creciente industrialización de muchos países, el desarrollo de fuentes de energía renovable se ha vuelto un campo científico y tecnológico muy importante. Entre las diversas tecnologías (solar, eólica, hidroeléctrica, biocombustibles), la producción de H2 a partir de H2O es muy atractiva como método de almacenamiento de energía provista por cualquiera de las otras fuentes, incluyendo la conversión directa de energía lumínica en energía química en la forma de H2. En la fotosíntesis natural, la energía de la luz solar se utiliza para reorganizar los enlaces presentes en el agua para producir oxígeno e hidrógeno. Los distintos sistemas artificiales que realizan disociación del agua requieren catalizadores que ayudan a la producción de hidrógeno a partir de agua, sin el uso de un potencial de reducción excesivo. Todos estos esquemas que existen para el almacenamiento de energía por la reducción electroquímica o fotoquímica del agua a hidrógeno requieren de un catalizador, dada la energía de activación necesaria para la ruptura del enlace O-H. El platino es un excelente catalizador para este fin y es ampliamente utilizado en estudios de ruptura de agua. Pero el platino es un metal muy costoso y también puede ser fácilmente envenenado por los contaminantes en el agua, tales como moléculas que contienen azufre. Las metaloporfirinas han sido ampliamente estudiadas para el uso en aplicaciones técnicas como, sensores de gas y catálisis acoplados a superficies, a diferencia de sus “primos”; los metalocorroles, que son moléculas que han sido estudiadas muy poco en el campo de la catálisis, y presentan una gran oportunidad para usarlos como catalizadores para la obtención de hidrógeno (H2) a partir de agua. Es por ello que decidimos estudiar el uso de metalocorrolatos y metaloporfirinas con centros metálicos de Fe y Co para la producción de hidrógeno a partir de agua por vías electroquímicas y/o fotoquímicas, en solución, ancladas y/o adsorbidas sobre superficies, en presencia de trietilamina (TEA) como donor de electrones y p-terfenilo (TP), como sensibilizador, mostrando una excelente actividad en la producción de hidrógeno y una alta capacidad catalítica. Esto se logró mediante la reducción de los catalizadores promovida por la irradiación con una lámpara UV, asi como electroquímicamente y fotoelectroquímicamente. En algunos casos estos procesos son MIIIP → MIIP y en otros MIIP → MIP; siendo estas las cuplas que dan pie a la formación de H2, el cual se detectó y cuantificó y por distintos métodos.

Abstract:
Due to the increase in world population and the industrialization of many countries, the development of renewable energy sources has become an important scientific and technological field. Among the available technologies (solar, wind, hydroelectricity, biofuels), producing H2 from H2O is very attractive as a method of storing energy provided by any other sources, including direct conversion of light energy into chemical energy In natural photosynthesis, the energy from sunlight is used to rearrange the bonds present in water to produce oxygen and hydrogen. Artificial systems that perform water splitting require catalysts that assist hydrogen production from water without using an excessive reduction potential. All of these schemes that exist for storing energy by electrochemical or photochemical reduction of water to hydrogen require a catalyst, given the activation energy needed for breaking the O-H bond. Platinum is an excellent catalyst for this purpose and it is widely used in water-splitting studies However, platinum is a very expensive metal and can be easily contaminated by pollutants in water, such as sulfurcontaining molecules. Metalloporphyrins have been extensively studied for their many technical applications such as gas sensors and catalysis coupled surfaces. This is not the case for their "cousins", the metallocorrols, which are molecules that have few or no studies in the field of catalysis. Therefore they present a great opportunity to be used as catalysts for the production of hydrogen (H2) from water. That is why we decided to take advantage of metallocorrols and metalloporphyrins with Fe and Co centers to produce hydrogen from water by electrochemical and/or photochemical pathways, in solution, anchored and/or adsorbed on surfaces in the presence of triethylamine (TEA) as an electron donor, and pterphenyl (TP), as a sensitizer. Both compounds have shown excellent activity in the production of hydrogen and high catalytic ability. This was achieved by reducing the catalyst by irradiation with an UV-lamp, electro or photochemically. In some cases these processes are MIIIP → MIIP and in others MIIP → MIP. These are the couples that give rise to the formation of H2, which is in turn detected and quantified by different methods.

"Electrodos modificados y sus aplicaciones en electrocatálisis" (2013). Völker, Edgar. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La investigación básica y aplicada en electrodos funcionalizados ha ido incrementándose en los últimos 30 años debido a su diversidad de aplicaciones en catálisis, óptica, electrónica, protección contra la corrosión, etc. Existen diversas maneras en las cuales se puede modificar un electrodo, ya sea por deposición de películas por spin o dip coating, adsorción de monocapas autoensambladas, drop casting, autoensamblado capa‐por‐capa, etc. En esta tesis estudiamos la modificación química controlada de superficies de electrodos y sus aplicaciones en reacciones electrocatalíticas y redox. Materiales diversos como Au, Cu, aleaciones Au‐Cu, polioxomolibdatos y polímeros redox fueron utilizados como electrodos funcionalizados. Estos materiales fueron caracterizados exhaustivamente y se estudiaron sus aplicaciones en reacciones electrocatalíticas de importancia en medio ambiente (reducción de CO2, nitritos, cloratos y peroxodisulfatos), así como también en reacciones redox. Durante esta tesis se desarrolló un nuevo método para la síntesis de nanoaleaciones Au‐Cu soportadas en negro de carbón. La síntesis produce nanopartículas aleadas, estables y robustas. Las nanopartículas Au‐Cu fueron caracterizadas por espectroscopía UV‐visible, DRX, ICP, XPS y HR‐TEM; que juntas dan evidencia que las partículas están realmente aleadas. En paralelo, se prepararon aleaciones Au‐Cu macizas que también fueron caracterizadas por diversas técnicas experimentales (DRX, ICP, XPS) y cuyas propiedades superficiales fueron estudiadas. Mediante XPS con resolución angular (ARXPS) se observó que, en ausencia de adsorbatos, la superficie de las aleaciones Au‐Cu está enriquecida en Au. Al exponer la aleación Au‐Cu a una atmósfera de O2 puro, la superficie se reorganiza y se enriquece en Cu, mostrando que los catalizadores no son estáticos ya que el medio en el que el electrodo está presente puede afectar su organización superficial. También hicimos cálculos DFT que corroboran ambas observaciones. Además, se estudió la segregación hacia la superficie de impurezas que se encontraban en el seno de los electrodos macizos. Encontramos que pequeñas concentraciones de impurezas que inevitablemente se encuentran en los materiales constitutivos de las aleaciones afectan a los sistemas macizos, pero dejan inalterados a los sistemas nanoparticulados. Se estudió la actividad electrocatalítica de electrodos macizos Au‐Cu con el foco en la reducción de CO2 hacia hidrocarburos y alcoholes. Encontramos que los electrodos macizos Au‐Cu reducen CO2 a CO pero sin conversión a productos líquidos. También se estudió la actividad catalítica orientada a la reducción de CO2 con nanopartículas Au‐Cu soportadas en negro de carbón depositadas en electrodos de carbono vítreo (GC). Mediante cromatografía líquida (LC‐UV) se detectó producción de etanol. También se funcionalizaron electrodos de Au con películas de polielectrolitos autoensamblados capa‐por‐capa modificados con aniones de polioxometalatos (POM). Las películas fueron caracterizadas por elipsometría, XPS, FTIR y microbalanza de cuarzo (QCM). Encontramos que hay una delaminación parcial de las películas autoensambladas al sumergirlas en solución, pero luego de esa primer delaminación la película remanente es estable y duradera. Las películas tienen buena actividad catalítica para la reducción de nitratos, cloratos y peroxodisulfatos. Por último, se estudiaron películas de polielectrolitos autoensambladas capa‐por‐capa modificadas con un complejo de Os que presenta una cupla redox, depositadas sobre sustratos de acero pasivado. Las películas fueron caracterizadas por elipsometría in situ y ex situ y por XPS. La respuesta electroquímica del complejo de Os fue estudiada. Encontramos que dicha respuesta es enlentecida debido a la transferencia electrónica a través de la capa pasiva. Se estimó que la constante de transferencia electrónica es de 4 a 6 órdenes de magnitud más lenta que para el mismo complejo de Os adsorbido sobre superficies de Au. El trabajo presentado en esta tesis muestra ejemplos relevantes de electrodos modificados químicamente, orientados a reacciones electrocatalíticas de importancia ambiental. Desarrollamos un método simple para la síntesis de nanopartículas Au‐Cu estables, duraderas y de composición controlada que sirven como catalizadores para la electroreducción de CO2. El conocimiento adquirido servirá para futuras investigaciones ya que mostramos que las nanoaleaciones Au‐Cu no sufren desactivación como los catalizadores basados puramente en Cu. También mostramos que moléculas grandes como los polioxomolibdatos pueden ser incorporados en películas autoensambladas capa‐por‐capa mediante intercambio iónico. Esto es un hallazgo importante ya que permite la funcionalización controlada de electrodos con estas moléculas de alta relevancia en el campo de la electrocatálisis. A pesar de las potenciales aplicaciones de películas de polielectrolitos autoensamblados capa‐por‐capa, existen pocas publicaciones de películas autoensambladas sobre superficies oxidadas. En esta tesis extendimos este concepto a superficies de relevancia industrial. Demostramos la capacidad de modificar superficies de acero pasivadas autoensamblando multicapas de polielectrolitos usando como sonda una molécula redox unida a la cadena de poli(alilamina). Por último, investigamos el proceso de transferencia electrónica entre el metal y el polímero de osmio a través de estados electrónicos en la película pasiva con un espesor mayor a la distancia de tuneleo directo.

Abstract:
Basic and applied research on functionalized electrodes have been constantly increasing in the last 30 years due to the diverse applications in catalysis, optics, electronics, corrosion protection, etc. There are diverse ways in which an electrode can be modified, such as film deposition via spin and dip coating, deposition of selfassembled monolayers, drop casting, layer‐by‐layer self‐assembly (LbL), etc. In this thesis we studied the controlled chemical modification of electrode surfaces and their applications towards electrocatalytic and redox reactions. Different materials, such as Au, Cu, Au‐Cu alloys, polyoxomolybdates and redox polymers were used as functionalized electrodes. These materials were thoroughly characterized and their applications in the electrocatalysis of environmentally important reactions (CO2, nitrite, chlorate and peroxodisulfate reduction) as well as redox reactions were analysed. A new one‐step method for synthesizing Au‐Cu nanoalloys supported on carbon black was developed. Our synthetic approach yields stable, robust and truly alloyed metallic nanoparticles. Au‐Cu nanoparticles were characterized by UV‐Visible spectroscopy, XRD, ICP, XPS and HR‐TEM, which give evidence of true alloying in the particles. In parallel, Au‐Cu bulk alloys were prepared and thoroughly characterized with several experimental techniques (XRD, XPS, ICP) and their surface properties were studied. Firstly, it was observed via angle resolved XPS (ARXPS) that the surface of the Au‐Cu alloys are Au enriched in absence of any adsorbates. When subjected to an atmosphere of pure O2, the surface reorganizes and becomes Cu enriched, demonstrating that the environment is responsible for surface reorganizations and that catalysts are not static. We also carried out DFT calculations that corroborate both observations. Furthermore, segregation of bulk impurities was also studied. We found out that low concentration impurities that are inevitably present in the starting up materials affect bulk systems but not nanoparticulate systems. The catalytic activity of Au‐Cu bulk electrodes towards the reduction of CO2 into longer chain hydrocarbons and alcohols was studied. We found out that Au‐Cu bulk electrodes reduce CO2 into CO without the production of liquid products. Carbon blacksupported Au‐Cu nanoparticles were deposited onto glassy carbon (GC) electrodes and their catalytic activity towards CO2 reduction was studied. Ethanol production was detected using LC‐UV. Electrode functionalization was also achieved using the layer‐by‐layer technique. In this case, LbL selfassembled polyelectrolyte films modified with polyoxometalates anions (POM) were deposited on Au substrates. The films were characterized with ellipsometry, XPS, FTIR and quartz crystal microbalance (QCM). We found that initially there is partial delamination of the films when submerged in solution, but after this first delamination, the remaining film is stable and durable. The films have good catalytic activity for the electroreduction of nitrite, chlorate and peroxodisulfate. Finally, LbL self‐assembled polyelectrolyte films modified with a redox active Os complex on passivated carbon steel substrates were studied. The films were characterized by in situ and ex situ ellipsometry and XPS. The electrochemical response of the Os complex was studied. We found that the response is slowed down by the sluggish electron transfer through the passive layer. The electron transfer rate constant was calculated to be 4 to 6 orders of magnitude slower than for the same Os complex attached to Au substrates. The work presented in this thesis shows relevant examples of chemically modified electrodes oriented toward electrocatalytic reactions of environmental importance. Firstly we developed a one‐step method for the synthesis of stable and robust Au‐Cu nanoparticles of controlled composition which serve as good catalysts for CO2 electroreduction. The knowledge gained will serve for future investigations as we have shown that Au‐Cu nanoalloys do not suffer from the deactivation observed on Cu‐based catalysts. We have also shown that large and important molecules such as polyoxomolybdates could be incorporated into LbL films via ion‐exchange. This is an important finding as it allows for the controlled functionalization of electrodes with these instrumental molecules. Despite the great potential applications of LbL self‐assembled polyelectrolyte films, there are only a few reports of LbL films on oxide‐covered surfaces. In this thesis we have extended this technology to industrially relevant surfaces. We demonstrated the feasibility of modifying a passive steel surfaces by LbL self‐assembling polyelectrolyte multilayers using as reporting molecule a redox osmium complex tethered to a poly(allylamine) backbone. Furthermore, we investigated the electron transfer process between the metal and the adsorbed osmium polymer through electronic states in the passive oxide film with a thickness larger than that of direct tunnelling distance.

"Electroterapia y electroporación en el tratamiento de tumores: modelos teóricos y experimentales" (2011). Turjanski, Pablo Guillermo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El cáncer es una de las primeras causas de muerte por enfermedad en el mundo y su incidencia sigue creciendo con el aumento de la contaminación y la expectativa de vida. A pesar de los grandes avances científicos logrados en la lucha contra esta enfermedad, aun es necesario buscar soluciones más integrales, económicas y con menos efectos secundarios adversos que las terapias tradicionales. Aquí estudiamos el uso de campos eléctricos para la eliminación de tumores sólidos, lo que podría representar una alternativa o enfoque complementario a la cirugía la radio o la quimioterapia. En particular, estudiamos el tratamiento electroquímico de tumores (EChT) y la electroporación reversible (ECT). El EChT consiste en la aplicación de una corriente eléctrica continua a través de dos o más electrodos insertos localmente en el tejido tumoral, con el objeto de eliminarlo por necrosis. Se cree que el principal mecanismo de destrucción del tumor son los cambios extremos de pH inducidos por el tratamiento. La ECT, o electroquimioterapia, es una técnica basada en la electropermeabilización de la célula combinada con el uso de quimioterapia, permitiendo así una mayor eficiencia, dado que de esta manera una mayor cantidad de droga puede penetrar la célula. Algunas de las ventajas del EChT y de la ECT son su simplicidad, efectividad, bajo costo y efectos secundarios mínimos. Quedan aun muchos interrogantes por develar sobre los mecanismos fundamentales de la interacción de los campos eléctricos con los tejidos vivos. Para lograr dicho objetivo, se presenta aquí un estudio interdisciplinario mediante la formulación de modelos in silico o matemático-computacionales, y su validación con modelos experimentales (in vivo e in vitro). La validación in vivo fue lograda a través de los resultados obtenidos de aplicar la terapia a ratones. La validación in vitro, fue obtenida a partir de aplicar la terapia a geles de colágeno I y agar-agar, siendo ambos buenos modelos de la matriz extracelular. Esta metodología interdisciplinaria del estudio de los efectos del EChT y la ECT, nos ha permitido obtener las siguientes contribuciones en esta tesis: 1. La formulación de dos nuevos modelos in silico de EChT unidimensionales, basado el primero en la descripción del transporte iónico y el campo eléctrico mediante las ecuaciones de Nernst-Planck y Poisson, respectivamente, y el segundo, basado en las ecuaciones de Nernst-Planck y la condición de electroneutralidad. Ambos modelos validados con modelos in vivo e in vitro, revelan que: Un estado inicial con valores de pH fisiológicos evoluciona entre los electrodos hacia un frente cat ́dico alcalino extremo y un frente anódico ́ácido extremo moviéndose uno en dirección al otro hasta colisionar. Estos frentes dejan abierta la posibilidad de la existencia −en caso de un tratamiento aplicado en un lapso menor al necesario− de una región entre ellos con pH fisiológico. El avance del frente de pH durante la EChT se correlaciona muy bien con el área necrótica final. Esto revela que el seguimiento del frente de pH puede ser utilizado para predecir el grado de destrucción del tumor y, por tanto, evaluar la eficacia del EChT. El modelo permite calcular la velocidad de los frentes de pH, información extremadamente util para la predicción de la extensión del tejido tratado, lo cual tiene implicancias significativas en la planificación de la dosis y las condiciones óptimas de operación del EChT. En particular, puede predecir la manera en que la evolución de los frentes de pH cubren, en un tumor, el casquete esférico constituido por células activas. 2. La formulación de un nuevo modelo in silico de ECT unidimensional, conformado por dos submodelos: el primero, denominado ON Time, es utilizado durante la aplicación del pulso eléctrico y está basado en la solución numérica de las ecuaciones de Nernst-Planck para el transporte iónico, asumiendo la condición de electroneutralidad. El segundo modelo, denominado OFF Time, es utilizado cuando el pulso no está siendo aplicado, y está basado en las ecuaciones de difusión-reacción. El modelo final fue validado con un modelo in vitro y revela que: El método de dos pasos (o de split) del sistema de ecuaciones diferenciales original permitió la integración de dos submodelos de escalas temporales disímiles: una micro (ON Time) y otra macro (OFF Time), dando como resultado un algoritmo extremadamente robusto. Las mediciones muestran que los frentes de pH son inmediatos y significativos. Dado que éstos pueden producir necrosis del tejido −efecto no deseado tanto en aplicaciones clíınicas de la ECT, como en la electroporación irreversible (IRE) y la electroterapia génica (EGT)−, es muy importante cuantificar la extensión y evolución del pH. La técnica utilizada para el seguimiento espacio-temporal de los frentes de pH, muestra que escalan en el tiempo como t^1/2, característico de procesos predominantemente difusivos. Esta información es relevante para predecir la extensión del tratamiento. La comparación de frentes de pH de la ECT con los del EChT muestra un resultado sorprendente: al aplicar una misma dosis de corriente eléctrica, la acidificación anódica en la ECT es mayor que en el EChT, lo que sugiere que la necrosis del tejido puede ser también mayor. Se sugieren maneras de minimizar estos efectos adversos en la ECT. 3. La formulación de un nuevo modelo in silico radial esférico de ECT del transporte iónico en un tejido tumoral utilizando una geometría esférica y un electrodo (ánodo) situado en el centro del tejido a tratar, y el cátodo ubicado a una distancia suficientemente lejana del ánodo como para asegurar que el producto de las reacciones cat ́dicas no afecten al tejido a analizar. El modelo teórico debe ser validado con un modelo experimental cuyo desarrollo se encuentra pendiente. No obstante ello los resultados preliminares muestran que: Los frentes de pH se mueven más lentos que en el caso del modelo ECT unidimensional. Esta diferencia posiblemente se origine en la cantidad de corriente eléctrica que necesita cada modelo (in silico) para mantener, durante la aplicación del pulso, el voltaje constante. En el caso del modelo radial esférico, dicha cantidad es mucho menor dado que el área es mayor, lo que se traduce en una menor generación de protones alrededor del ánodo con la consiguiente menor acidificación. Si bien este modelo de ECT no toma en cuenta la interacción ́ánodo-cátodo, toma en cuenta la naturaleza tridimensional del tejido tumoral, lo que constituye un modelo más realista que una aproximación unidimensional. En síntesis, se espera que los resultados de esta tesis ayuden significativamente a mejorar la habilidad para diseñar planes de tratamiento efectivos del EChT y la ECT. Se confía que la inclusión del EChT y la ECT, solas o en combinación con otras terapias en la clínica médica, tenga beneficios significativos a nivel socioeconómico y mejore la calidad y duración de la vida de muchos pacientes.

Abstract:
Cancer is one of the main causes of death by sickness in the world and its incidence grows in time due to the increase in pollution and life expectancy. In spite of great scientific advances obtained in the fight against this disease, is still necessary to search for new more integral solutions, less costly and with minor side effects than traditional ones. Here we study the use of electric fields in the elimination of solid tumors, that may represent an alternative or complementary approach to surgery, radio or chemotherapy. In particular, we study the electrochemical treatment of tumors (EChT) and the reversible electroporation (ECT). The EChT consists in the passage of a direct electric current through two or more electro- des inserted locally in the tumor tissue, with the aim of erasing it by necrosis. The extreme pH changes induced are believed to be the main tumor destruction mechanism. The ECT, or electrochemotherapy, is a technique based on cell electropermeabilization combined with the use of chemotherapy, thus allowing greater therapy efficiency, as much more drug can penetrate the cell. Some of the advantages of EChT and ECT are their simplicity, effectivity, low cost and minimal side effects. There are yet many open questions about the fundamental interaction mechanisms between electric fields and living tissues that there is need to un- veil. To address this objective we present an interdisciplinary study through the formulation of in silico or mathematical-computational models, and their validation with experimental modelling (in vivo and in vitro). In vivo validation was achieved by results obtained applying the treatment to mice. In vitro validation, was achieved by results obtained applying the treatment to collagen type I and agar-agar gels, being both good models of extracelular matrix. This interdisciplinary methodology of the study of the effects of EChT and ECT, has permitted us to obtain the following contributions in this thesis: 1. The formulation of two new in silico one-dimensional EChT models, first based in the description of ion transport and the electric field through the Nernst-Planck and Poisson equations, respectively, and the second, based on the Nernst-Planck equations and electroneutrality condition. Both models are validated with in vivo and in vitro models, reveal that: An initial state with neutral pH values evolves between electrodes into extreme cathodic alkaline and anodic acidic fronts moving towards each other until they collide. This leaves the possible existence, if sufficient time has not elapsed, of a physiological pH region between them. The pH front advance during the EChT correlates very well with the final necrotic area. This indicates that pH front tracking can be used to predict the extent of tumor destruction and thus, the assessment of EChT effectiveness. The model allows the calculation of the pH front velocity, useful information for predicting the extension of the treated tissue and with significant implications in EChT optimal operative conditions and dose planning. In particular, it can predict the way in which the evolving pH fronts will cover, in a typical spherical tumor, the active cell spherical casket. 2. The formulation of a new in silico one-dimensional ECT model, consists of two submo- d0els: the first model, called ON Time, is used during application of electrical pulse, and is based on the numerical solution of the Nernst-Planck equations for ion transport, as- suming the condition of electroneutrality. The second model, called OFF Time, is used when the pulse is not being applied, and is based on the diffusion-reaction equations. The final model was validated with an in vitro model and reveals that: The two-step method (or split) of the original differential equations system allowed the integration of two submodels of different time scales: a micro (ON Time) and a macro (OFF Time), resulting in an extremely robust algorithm. Results suggest that pH fronts during the ECT are immediate and substantial. Since they might give rise to tissue necrosis, an unwanted condition in clinical applications of ECT as well as in irreversible electroporation (IRE) and in electro- genetherapy (EGT), it is important to quantify their extent and evolution. The tracking technique used to follow the space-time evolution of these pH fronts shows that they scale in time as t 2 , characteristic of a predominantly diffusive process. This is relevant information for predicting the extension of the treatment. Comparing ECT pH fronts with those arising in EChT, a striking result is observed: at the same electric dose applied, anodic acidification is larger in ECT than in EChT, suggesting that tissue necrosis could also be greater. Ways to minimize these adverse effects in ECT are suggested. 3. The formulation of a new in silico spherical radial ECT ion transport model in tumor tissue, using spherical geometry and one of the electrodes (anode, for instance) located in the center of the tumor, and the cathode located at a distance far enough from the anode to ensure that the cathodic reactions do not affect the region of the tissue being analyzed. The theoretical model should be validated with an experimental model whose development is still pending. Nevertheless preliminary results show that: pH fronts move slower than in the case of the one-dimensional ECT model. This difference may be originated in the amount of electric charge required by each model to maintain the voltage constant during the duration of the pulse. In the case of the spherical radial model, this quantity is much smaller since the area is larger. This results in a lower generation of protons around the anode, and thus, lower acidification. Although the ECT spherical radial model does not take into account anode-cathode interaction, it takes into account the three-dimensional nature of the tumor tissue, which is more a realistic model than a one-dimensional approximation. In brief, it is expected that results from this study will help to improve the ability of designing effective EChT and ECT treatments. It is also expected that the inclusion of EChT and ECT alone or in combination with other therapies in medical clinic have significative benefits at a socioeconomical level and improve the quality and length of time of many patients.

"Emergencia de tubos de flujo en la atmósfera solar: su impacto desde la fotósfera hasta la corona" (2017-03-22). Poisson, Mariano. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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La distribución fotosférica del campo magnético provee información sobre el proceso de formación en el interior solar de los tubos de flujo que dan origen a las regiones activas (RAs), así como de los efectos presentes durante su tránsito por la zona convectiva. Estudiamos la emergencia de RAs para determinar como la torsión del campo en los tubos de flujo afecta la evolución de las polaridades magnéticas fotosféricas observadas en magnetogramas longitudinales. Una de las manifestaciones observables de la torsión de los tubos de flujo que emergen atravesando la fotósfera, es la presencia de las llamadas "lenguas magnéticas". Estas son producidas por la proyección en la dirección de la visual de la componente azimutal del campo del tubo de flujo. Caracterizamos la evolución de las lenguas magnéticas en un conjunto de 187 RAs bipolares observadas a lo largo del Ciclo Solar 23 y el comienzo del Ciclo 24. Usando magnetogramas de estas RAs, determinamos y estudiamos la evolución de una serie de parámetros, como el ángulo de tilt, la orientación de la línea de inversión de polaridad (LIP), su flujo magnético, al igual que el tamaño y la forma de las polaridades y sus lenguas. Desarrollamos un procedimiento para identificar la LIP y usamos su inclinación como un indicador del signo de la helicidad magné- tica. Comparamos este método con la estimación de la helicidad obtenida a partir de extrapolaciones libres de fuerzas del campo coronal. También desarrollamos modelos analíticos de tubos de flujo toroidales, con torsión uniforme y no uniforme, para describir la evolución de los parámetros de las RAs afectados por la presencia de lenguas magnéticas intensas. Finalmente, encontramos que las lenguas modifican significativamente la determinación del ángulo de tilt durante la fase de emergencia y probamos diferentes métodos para reducir este efecto. Los resultados de este trabajo contribuyen a la comprensión de cómo la helicidad de los tubos en emergencia determinan la evolución del flujo magnético fotosférico observado y la formación de las RAs; por otra parte, condicionan a los modelos de generación del campo en el interior solar.

Abstract:
The photospheric magnetic-field distribution provides information about the generation in the solar interior of the flux tubes that originate the ARs, and the effects present during their transit through the convective zone. We study the emergence of ARs to determine how the twist of the magnetic field in these flux-tubes affect the evolution of the photospheric magnetic polarities observed in longitudinal magnetograms. One of the manifestations of these twisted flux-tubes, observed as they emerge through the photosphere, are the so called "magnetic tongues". They are produced by the line of sight projection of the azimuthal component of the magnetic field in the flux-tubes. We characterize the evolution of the magnetic tongues in a set of 187 bipolar ARs observed during the Solar Cycle 23 and the beginning of Cycle 24. Using magnetograms of these ARs we determine and study the evolution of a series of parameters, such as the tilt angle, the polarity inversion line (PIL) orientation, their magnetic flux, as well the size and the shape of the polarities and their tongues. We develop a procedure to identify the PIL and we use its inclination as a proxy of the magnetic helicity sign. We compare this method with the helicity estimation obtained from coronal force-free field extrapolations. We also develop analitical models of toroidal flux-tubes, with uniform and non-uniform twist, to describe the evolution of the AR parameters affected by the presence of strong magnetic tongues. Finally, we find that the tongues modify significantly the determination of the tilt angle during the emergence phase and we test several methods to reduce this effect. The results of this work contribute to the understanding of how the helicity of the emerging flux-tubes determines the evolution of the photospheric magnetic flux and the formation of ARs; moreover, they provide constraints to models of the generation of the magnetic field in the solar interior.

"Emergencia, evolución y eyección de flujo magnético en la atmósfera solar" (2011). Luoni, María Luisa. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
A lo largo de esta Tesis se ha estudiado la emergencia y evolución de estructuras magnéticas (tubos de flujo) en la atmósfera solar; estas estructuras son los componentes básicos de las regiones activas. La dinámica coronal de estos tubos de flujo da lugar a fenómenos violentos de liberación de energía, tales como las fulguraciones solares y las eyecciones coronales de masa. Sólo los tubos de flujo que poseen torsión sobreviven al cruce de la zona convectiva y emergen a través de la fotósfera. Esta torsión conserva el signo que tenía el tubo de flujo cuando se generó en la tacoclina. La presencia de torsión en un tubo de flujo resulta en una elongación de las polaridades fotosféricas, a la que se llama lengua magnética. Esta elongación se debe a la contribución de la componente azimutal al campo en la dirección de la visual. La distribución espacial de estas elongaciones está relacionada con el signo de la helicidad magnética de la región activa, mientras que su extensión indica el grado de torsión del tubo. Por lo tanto, la identificación de las lenguas magnéticas constituye una herramienta util para determinar el signo de la helicidad magnética usando unicamente ob servaciones. El signo de la helicidad dado por las lenguas ha sido verificado por comparación con el determinado por otros indicadores en 40 regiones activas. Como contribución al estudio de la dinámica coronal, se ha modelado el campo magnético de una región activa compleja. Se calculó su topología encontrando que la misma está determinada por la presencia de un punto de campo magnético nulo en la corona. Las observaciones de tres fulguraciones homólogas, que ocurrieron en un lapso de 29 horas en esta región, sugieren que las mismas se deben a un proceso de reconexión magnética que ocurre en el entorno de este punto. Este proceso de reconexión es forzado por la emergencia continua de flujo magnético.

Abstract:
n this Thesis we study the emergence and evolution of magnetic structures (flux tubes), that are the basic components of active regions, into the solar atmosphere. The coronal dynamics of these flux tubes lies at the origin of violent energy release phenomena, such as solar flares and coronal mass ejections. Only twisted flux tubes survive the crossing of the convective zone and emerge through the photosphere. The flux tube twist preserves the sign with which it was created in the tachocline. The presence of twist in the tube is seen at the photospheric level as an elongation of the polarities, which we call magnetic tongues. This elongation is due to the contribution of the flux tube azimuthal field component to the line-of-sight magnetic field. The spatial distribution of these elongations is related to the active region magnetic helicity sign, while their extensions indicate the degree of torsion in the tube. Therefore, the identification of magnetic tongues is a useful tool to determine the helicity sign of a magnetic configuration, based only in observations. The helicity sign given by the tongues has been verified by comparing it with that determine by other features in 40 active regions. As a contribution to the understanding of the coronal dynamics, we have modeled the magnetic field of a complex active region. We have calculated its topology finding that it is determined by the presence of the coronal magnetic null point. The observations of three homologous flares, that occurred along 29 hours, suggest that they originated by magnetic field reconnection in the null point neighborhood. This reconnection process is forced by continuous flux emergence. Finally, we have computed the magnetic helicity variation due to an ejective event, and we have compared this value to the helicity content in the associated interplanetary magnetic cloud. We have found that both values were in good agreement, indicating that magnetic helicity is a well preserved quantity even under no ideal conditions. These quantitative comparisons, as the more qualitative ones using tongues, are useful tools to find the solar source of an interplanetary event.

"Emisión de ondas por Resonancia Iónica Ciclotrónica en Plasmoides Interplanetarios expulsados por el sol" (2000). Dasso, Sergio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis se realiza un estudio teórico de las condiciones de excitación de las ondas electromagnéticas iónicas ciclotrónicas (EICWs) en los plasmoides interplanetarios expulsados por el Sol (o eyecciones de masa coronal, CMEs). Cuando el viento solar es perturbado por estas eyecciones de plasma provenientes del Sol, la actividad de ondas cambia radicalmente. Mientras que en las condiciones típicas correspondientes al viento solar rápido están dadas las condiciones para la actividad de las ondas de polarización izquierda, cuando el viento es reemplazado por plasmoides interplanetarios de origen solar, el cambio de los parámetros físicos relevantes favorece la actividad de la rama de polarización derecha. Hemos caracterizado el espacio de parámetros típico de estos plasmoides y estudiamos, mediante la teoría cinética en plasmas magnetizados, las condiciones para la emisión y absorción de estas ondas. Hemos determinado fronteras del espacio de parámetros entre regiones estables e inestables. Para considerar la presencia de partículas supratérmicas hemos modelado la función de distribución de una fracción de la población de partículas del plasma con funciones Kappa. En un plasma de protones y electrones la inestabilidad resonante de las EICWs requiere ordinariamente grandes valores para el beta del plasma (beta aproximadamente 1 o mayor), sin embargo, hemos encontrado que las CMEs a pesar de su bajo valor de P son objetos con otras propiedades cinéticas favorables para el desarrollo de esta inestabilidad. Dada la gran heterogeneidad que caracteriza a estos objetos no todos ellos serán emisores de EICWs, sino que existe un subconjunto de CMEs con propiedades térmicas propicias para la amplificación de estas ondas. Se han encontrado configuraciones de parámetros, consistentes con las observaciones, en las que los tiempos característicos de crecimiento de la inestabilidad son mucho menores que los tiempos típicos de la evolución de la estructura interplanetaria, y en las cuales es posible la amplificación de las ondas en tiempos en los que la configuración de parámetros de la estructura interplanetaria se mantiene esencialmente constante. Estos resultados son de gran importancia para comprender la microturbulencia que ha sido observada en estos objetos por el satélite Wind. Hemos realizado un estudio estadístico de los parámetros de configuración de los CMEs, con el objetivo de seleccionar aquellos eventos con propiedades favorables para el desarrollo de la inestabilidad de los EICMs. Se analizaron datos aún no publicados de la sonda espacial Wind y específicamente se estudiaron: un conjunto de Halo-CMEs y un conjunto de nubes magnéticas interplanetarias. Los eventos que se consideran para este estudio han sido observados en forma continuada por la sonda Wind desde diciembre de 1996 hasta noviembre de 1997 (para Halo-CMEs) y desde febrero de 1995 hasta noviembre de 1998 (para nubes magnéticas). Finalmente, en base a los resultados de nuestro estudio estadístico, se selecciona la nube magnética que observó Wind el 7 y 8 de agosto de 1996 y se examinan las posibilidades de emisión de EICWs en este evento.

"Emisión de radiación en colisiones ión-átomo en altas energías" (1987). González, Alejandro Daniel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Esta tesis trata sobre la teoría de la emisión de radiación continua de un sistema de tres partículas cargadas en colisión: un proyectil pesado, un núcleo blanco y un electrón activo. En el capitulo 2 se desarrolla el formalismo general con en tratamiento no relativista. El elemento de matriz de interacción materia-radiación se calcula en primer orden perturbador, entre funciones de onda que satisfacen exactamente el Hamiltoneano mecánico, el cual incluye sólo las interacciones entre las partículas. Se encuentra que este elemento de matriz está compuesto por tres términos que representan: bremsstrahlung del centro de masa, el bremsstrahlung entre sistemas y bremsstrahlung electrónico. En cada paso imponemos la propiedad de ortogonalidad de las funcionas de onda. La teoría se desarrolla considerando el impulso del fotón, y luego, para tratar los casos particulares se realiza la aproximación dipolar. En esta aproximación el centro de masa no emite radiación. El bremsstrahlung electrónico se calcula usando distintas funciones de onda aproximadas. Estas son elegidas teniendo en cuenta su capacidad para describir correctamente el proceso mecánico. Considerando un electrón activo en la colisión, la radiación emitida se identifica como alguno de los siguientes cuatro procesos, a saber: captura electrónica radiativa, ionización radiativa, dispersión elástica radiativa y excitación y desexcitación radiativa. El capítulo 3 trata sobre la captura radiativa. Ésta resulta ser, para determinados sistemas, el proceso dominante en altas energías de impacto. Se calculan espectros fotónicos de captura radiativa, considerando las transiciones entre distintas capas electrónicas, del proyectil y del blanco. Se compara la teoría con resultados experimentales, y se concluye que ciertas estructuras que aparecen en los experimentos se explican satisfactoriamente en términos de transiciones de estados excitados de proyectil. En la sección 3.9 comparamos resultados teóricos con experimentales utilizando distintas aproximaciones para describir blancos electromecánicos. Encontramos que existen grandes diferencias entre los distintos modelos a nivel de secciones eficaces diferenciales, aun cuando las secciones eficaces totales son similares. El capitulo 4 trata sobre los procesos radiativos directos. Se obtiene el elemento de matriz del bremsstrahlung electrónico en la aproximación eikonal simétrica. Se compara la dispersión elástica radiativa con los resultados experimentales correspondientes a protones sobre láminas de aluminio. Se encuentra un buen acuerdo con los experimentos y con resultados teóricos previos, para los espectros fotónicos. También se presentan secciones eficaces diferenciales y totales para los procesos de excitación y desexcitación radiativa. Se encuentra que el primero provee secciones eficaces pequeñas comparadas con las del proceso mecánico. El espectro asociado a la desexcitación produce la emisión continua alrededor de la línea característica, inducida por el paso del proyectil. Se muestran resultados de espectros, en donde se aprecia el llamado ensanchamiento por colisión.

"Emisión de rayos gamma en microcuásares" (2004). Kaufman Bernadó, María Marina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los microcuásares son sistemas de binarias de rayos x que pueden generar jets relativistas y que fueron descubiertos en nuestra Galaxia en la última década del sigle XX. Su nombre indica que junto con los cuásares son manifestaciones de la misma física pero en una escala muy diferente. Paralelamente a este descubrimiento, el instrumento EGRET a bordo del Observatorio Compton de Rayos Gamma, detectó 271 fuentes puntuales de rayos gamma de las cuales 170 no pudieron ser claramente identificadas con ningún objeto conocido. Esto marcó el comienzo del estudio de poblaciones de rayos gamma en nuestra Galaxia. En esta tesis se presentan modelos para la producción de rayos gamma en microcuáceres, con el objetivo de mostrar que pueden ser responsables de algunos subgrupos de fuentes EGRET no identificadas. Estos modelos son desarrollados para una variedad de escenarios posibles tomando en cuenta distintas combinaciones, i.e. agujeros negros o estrellas de neutrones como el objeto compacto, estrellas compañeras de baja y alta masa, así como también procesos de producción de rayos gamma leptónicos o hadrónicos. Los modelos de emisión de rayos gamma en microcuásares aquí presentados, pueden ser usados para explicar también obsrvaciones en fuentes conocidas detectadas en rangos de energías diferentes que las de EGRET. Se incluye al final, una situación de producción de rayos gamma alternativa en objetos compactos que no involucra a los microcuásares, estudiándose una fuente EGRET no identificada en particular, a la que proponemos como asociada a un pulsar magnetizado con acreción.

Abstract:
Microquasars, X-ray binary systems that can generate relativistic jets, were discovered in our Galaxy in the last decade of the XXth century. Their name indicates that they are manifestations of the same physics as but on a completely different scale. Parallel to this discovery, the EGRET instrument on board of the Compton Gamma Ray Observatory, detected 271 points like gamma-ray sources from which 170 were not clearly identified with known objects. This marked the beginning of gamma-ray source population studies in our Galaxy. We present in this thesis models for gamma-ray production in microquasars with the aim to propose them as possible parent populations for different groups of EGRET unidentified sources. These models are developed for a variety of scenarios taking into account several possible combinations, i.e. black holes or neutron stars as the compact object, low mass or high mass stellar companion, as well as leptonic or hadronic gamma-ray production processes. We also show that the presented models for gamma-rays emitting microquasars can be used to explain observations from well known sources that are detected in energy ranges other than EGRET´s. Finally, we include an alternative gamma-ray producing situation that does not involve microquasars but a specific unidentified EGRET source possibly linked to a magnetized accreting pulsar.

"Empleo de coordenadas motoras para decodificar el sistema motor en el canto de aves" (2014-12-15). Sanz Perl Hernández, Yonatan. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El trabajo que relata esta tesis se basa en la implementación de herramientas de análisis provenientes de la física en áreas vinculadas a las neurociencias. En particular esta tesis se encarga de mostrar la validez de estas herramientas y su capacidad de ser incorporadas como nuevas técnicas de analisis para abordar problemáticas típicas en neurociencias con otro punto de vista. Las aves canoras, modelo animal empleado en esta tesis, tienen la capacidad de aprender y generar un comportamiento complejo que es el canto. Para ello cuentan con un sofisticado órgano fonador, llamado Siringe, que es controlado mediante instrucciones provenientes del sistema nervioso. Durante la última década el Laboratorio de Sistemas Dinámicos ha realizado numerosos trabajos sobre el funcionamiento la Siringe, buscando comprender cuánto de la complejidad del canto se debe a la complejidad propia del organo fonador y cuánto se debe a complejidad en las instrucciones. Para ello se han realizado modelos matemáticos de baja dimensión, operacionales y predictivos capaces de generar sonidos sintéticos muy similares a los del ave, permitiendo asimismo comprender cuáles son las instrucciones necesarias para la obtención de dichos sonidos. Esta tesis se encarga en primera instacia de mostrar la pertinencia de dichos modelados para el caso del Diamante mandarín en términos de 3 observables distintos, para luego ir tras la pregunta de cómo están organizadas las instrucciones en el sistema nervioso. En términos de características acústicas se comprobó los sonidos generados con el modelo presentan la misma relación entre frecuencia fundamental y contenido espectral que los sonidos reales del ave, sonidos de baja frecuencia fundamental presentan alto contenido espectral y viceversa. Por otro lado, en términos de los gestos motores se comprobó que los gestos de presión y tensión que emplea el ave durante su canto para controlar la siringe, están fuertemente correlacionados con los parámetros del modelo que dan cuenta de la presión y la tensión. Finalmente, se confirmo la pertinencia del modelo en términos de respuesta neuronal en neuronas selectivas al canto propio en núcleos vinculados al aprendizaje y generación del canto. Para ello se realizaron experimentos de electro fisiología tanto en aves despiertas como dormidas mostrando que la respuesta neuronal presentada ante el estímulo de su propio canto grabado era muy similar a la presentada ante el estímulo del canto sintético. Vale aclarar que para lograr ese resultado fue necesario realizar una serie de mejoras al modelo, como la inclusión de un tracto vocal superior que actuara como filtro dinámico del sonido permitiendo incorporar mejoras tímbricas canto sintético. Finalmente con el modelado validado se abordo la pregunta de cómo codifica el cerebro la generación del canto. Para ello, se propuso realizar un cambio de coordenadas, de las acústicas (donde se venía estudiando el problema desde años) a las motoras. En estas coordenadas, se pudo observar una fuerte relación entre los disparos neuronales en el HVc (núcleo vinculado al aprendizaje y generación del canto) y los extremos de los gestos motores que se obtienen a partir del modelado del canto. Este resultado abrió un debate en el área, ya que hasta entonces el paradigma establecido afirmaba que los disparos en HVc eran cómo un "reloj" que dispara equidistante sin relación con la generación del canto. Este resultado, asimismo se suma a otros resultados que aparecen en la literatura de los últimos años que muestran observaciones contradictorias con el paradigma del "reloj". En esta tesis se plantea el debate como algo abierto aún y a la espera de la existencia de un modelo de sistema motor en el canto de ave que integre todas estas observaciones recientes.

Abstract:
This thesis is based on the implementation of analysis tools from physics in areas related to neuroscience. In particular, this thesis seeks to show the validity of these tools and their ability to be incorporated as new analytical techniques to approach typical problems in neuroscience from a different point of view. Songbirds, animal model used in this thesis, have the ability to learn and generate a complex behavior which is singing. In order to sing, they have a sophisticated vocal organ called Syrinx, which is controlled by instructions from the nervous system. During the last decade the Dynamical Systems Lab has performed extensively on the Syrinx operation, seeking to understand how much of song complexity is due to the complexity of the vocal organ and how much is due to complexity in the instructions. This has been done, operational and predictive low dimensional mathematical models capable of generating very similar to those of synthetic bird sounds, allowing also understand what the instructions for obtaining these sounds are. This thesis is responsible in the first instance to show the relevance of those modeled for the case in terms Zebra finch 3 different observables, then go after the question of how instructions are organized in the nervous system. In terms of acoustic characteristics of sounds generated was found to have the same pattern relationship between the fundamental frequency and the actual spectral content of the bird sounds, sounds of low fundamental frequency and vice versa at high spectral content. On the other hand, in terms of motor gestures it was found that the pressure and tension gestures employing the bird for its song to control the syrinx, are strongly correlated with the model parameters that account for the pressure and tension. Finally, the relevance of the model was confirmed in terms of selective neuronal response to own singing in nuclei related to song learning and generation of neurons. This electrophysiology experiments were conducted in both awake and asleep birds showing that the neural response to the stimulus presented their own recorded song was very similar to that presented to the stimulus of synthetic singing. It is clear that to achieve this result it was necessary to make a number of improvements to the model, the inclusion of an upper vocal tract act as dynamic filter allowing incorporate timbral sound improvements synthetic singing. Finally modeling validated with the question of how encoding celebrated singing generation board. To do this, it was proposed to make a change of coordinates, acoustic (where the problem had been studying for years) to the motor. In these coordinates, we observed a strong relationship between neuronal firing in HVC (nucleus linked to learning and singing generation) and the ends of the motor gestures obtained from the modeling of singing. This result opened a debate in the area, because until then the established paradigm claimed that the shots were HVc how a " clock 'equidistant firing unrelated to the generation of singing. This result also adds to other results reported in the literature in recent years that show contradictory observations with the paradigm of " clock '. In this thesis the discussion as open still and waiting for the existence of a power model in the singing bird that integrates all these recent observations system arises.

"Empleo del hidrosulfito sódico en el reconocimiento de compuestos de tungsteno" (1941). Castiglioni, Julio F.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Encapsulación de licopeno empleando polielectrolitos. Influencia del secado y congelado sobre su estabilidad" (2013-12-09). Aguirre Calvo, Tatiana Rocío. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo del presente trabajo de tesis fue estudiar la estabilidad de un extracto de licopeno obtenido de una fuente natural no convencional como el pomelo rosado a partir de su encapsulación en cápsulas de polielectrolitos sometidas a procesos de congelación y deshidratación. Se emplearon distintos polielectrolitos como alginato, pectina, quitosano con la adición de varias gomas y azúcares como trehalosa y β- ciclodextrina para estudiar la influencia de la composición de las cápsulas sobre las propiedades fisicoquímicas y sobre la estabilidad del licopeno encapsulado, buscando establecer vínculos de estructura/función relacionados a la estabilidad. Se evaluó el efecto de distintos métodos de congelado y secado, y se analizó el contenido y la estabilidad del licopeno en función de los distintos tratamientos, tanto en sistemas húmedos como en deshidratados, así como los efectos de la composición en la liberación. Los resultados obtenidos muestran que la mejor matriz para realizar la extracción de licopeno fue pulpa de pomelo liofilizada, con el uso de aceite de oliva como agente extractor. Las cápsulas de alginato conteniendo trehalosa con β- ciclodextrina, goma guar, arábiga o espina corona mantuvieron un alto contenido de licopeno luego de la congelación y deshidratación, independientemente de los métodos empleados. Los resultados de esta tesis pueden contribuir a la selección de excipientes para la formulación de cápsulas de polielectrolitos conteniendo no sólo licopeno sino biomoléculas lábiles en general, y pueden ser utilizados como punto de partida en varias aplicaciones tecnológicas.

Abstract:
The objective of this thesis was to study the stability of a lycopene extract obtained from an unconventional-natural source as pink grapefruit through its encapsulation in polyelectrolyte beads which were subjected to freezing and to drying. Different polyelectrolytes as alginate, pectin, chitosan with the addition of gums, and sugars as trehalose and β-cyclodextrin were used to study the influence of the composition on the physicochemical properties and stability of the lycopene beads, in order to establish structure/function relationships related to stability. The effect of different methods of freezing and drying was evaluated and the concentration and lycopene stability depending of treatments was analyzed, in both wet and dried systems. In addition, the effects of the composition on the release were analyzed. The results show that the best matrix to extract lycopene was liophilized pulp from pink grapefruit, using olive oil as extracting agent. Alginate beads containing trehalose with β-cyclodextrin, guar, arabic or espina corona gums retained a high lycopene content after freezing and drying, regardless of the methods used. The results of this thesis can contribute to the selection of excipients to formulate polyelectrolyte beads containing not only lycopene, but also labile biomolecules being a starting point for technological applications.

"Encolado de hilado de rayon viscosa a base de emulsiones" (1942). Mazar Barnett, Jaime. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Endocitosis rápida en células cromafines de ratón: mecanismos asociados, su regulación por Ca2+ y su participación en el reciclado vesicular" (2016-09-22). Belingheri, Ana Verónica. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En las células cromafines se han descripto varios tipos de endocitosis (clatrina dependiente, kiss and run, bulk endocitosis), las cuales contribuyen a la recuperación y el reciclado de la membrana plasmática, de sus proteínas, y de las vesículas que se han fusionado por exocitosis. En esta Tesis doctoral se ha medido electrofisiológicamente la endocitosis rápida en células cromafines de ratón, observándose dos modalidades. Por un lado, una endocitosis compensatoria que evoluciona con una única constante temporal rápida de ~8 seg, e internaliza aproximadamente la misma cantidad de membrana que fue exocitada durante la estimulación. Esta modalidad se dispara en respuesta a una entrada de Ca2+ menor a 79 pC (grupo LCG, por “low current group”). Por otro lado, se identificó una endocitosis en exceso que internaliza una cantidad de membrana mayor a la exocitada previamente, evolucionando con dos constantes temporales, una rápida de cinética similar a la del LCG y una ultra-rápida de ~0,6 seg. Esta última modalidad es disparada por una entrada de Ca2+ mayor a 79 pC (grupo HCG, por “high current group”). Por medio de la utilización de fármacos específicos, se demuestra en esta Tesis que la endocitosis rápida depende específicamente tanto de la entrada de Ca2+ a través de canales dependientes de voltaje (CCDV) de tipo L como del Ca2+ liberado desde el retículo endoplasmático. Además, la utilización de BAPTA demostró que la endocitosis rápida sería dependiente de una señal de Ca2+ localizada. Por otro lado, dos inhibidores del reclutamiento de clatrina inhibieron totalmente la endocitosis en el grupo LCG, y parcialmente en el grupo HCG. Esto sugiere que en este último grupo, se activaría un mecanismo clatrino-independiente. En HCG ambos componentes cinéticos se vieron afectados por los inhibidores de clatrina, sugiriendo que cuando la entrada de Ca2+ es muy alta la endocitosis clatrina-dependiente puede evolucionar a velocidades aún no reportadas en la literatura. Finalmente, experimentos de imaging con FM1-43 mostraron que la endocitosis en exceso inducida por una despolarización con alto K+ se compone de una fracción reciclable a vesículas liberables y de otra no reciclable en un período de 30 minutos, siendo la primera inhibida parcialmente por un bloqueante del reclutamiento de clatrina. Estos resultados en su conjunto nos permiten sugerir un modelo en el cual: (a) la entrada localizada de Ca2+ por CCDV tipo L induce la liberación de más Ca2+ del retículo endoplásmico. (b) El consecuente aumento de este catión induce la activación de una endocitosis clatrina dependiente, que debido a su Ca2+ dependencia se muestra muy rápida al comienzo mientras el Ca2+ alto persiste en el citosol, y más lenta luego de que la concentración citosólica del catión ha disminuido. Esto explicaría la clatrino dependencia de ambos componentes. (c) Esta endocitosis clatrina dependiente resulta parcialmente en la generación de nuevas vesículas liberables. (d) La gran entrada de Ca2+ en el grupo HCG induciría además la activación de un proceso clatrina independiente, que no se recicla en vesículas liberables en los tiempos del experimento.

Abstract:
Chromaffin cells have various types of endocytosis (clathrin-dependent, kiss and run, bulk endocytosis), which allow the recovery and recycling of membrane and proteins of the previously fused vesicles. We measured two modes of rapid endocytosis in mouse chromaffin cells. On one hand, compensatory endocytosis (compensates approximately the same amount of membrane that was added during stimulation) is associated with a Ca2+ entry lower than 79 pC (LCG group) and a single time constant of ~8 sec. On the other hand, excess retrieval (the endocytosis surpasses the amount of the previously exocytosed membrane), is triggered by a Ca2+ entry bigger than 79 pC (HCG group) and has two time constants, a fast one (~8 sec) and an ultrafast one (~0,6 sec). The results of this Thesis show that the activation of rapid endocytosis is dependent on a localized Ca2+ signal, and specifically depends on Ca2+ influx through L-type voltage dependent Ca2+ channels (VDCC) and Ca2+ released from the endoplasmic reticulum. Additionally, we found that rapid endocytosis is clathrin dependent, almost entirely for the LCG group, and partially for the HCG group. Particularly in HCG, it is interesting that clathrin specific blockers inhibited the fast, but also the ultrafast component, what suggests that clathrin dependent endocytosis can progress at rapid speeds not previously reported when the Ca2+ entry is very big. The electrophysiological study on endocytosis was complemented with experiments of imaging using the membrane fluorescent probe FM1-43. After applying a high K+ depolarization that allows a large Ca2+ influx, we recorded an endocytosis that surpassed the previous exocytosis. We found that the internalized membrane was partially recycled to releasable vesicles, by a mechanism that is at least in part clathrin dependent. There was also a large internalized membrane fraction which was not releasable during the experimental period. We propose a tentative model in which: (a) Ca2+ entry through L-type VDCC triggers the release of more Ca2+ from endoplasmic reticulum; (b) the resulting increase of Ca2+ activates a rapid clathrin dependent endocytosis, and particularly in HCG the higher Ca2+ concentration during the first hundreds of milliseconds after the stimulus provokes the appearance of the ultrafast component; (c) clathrin dependent endocytosis partially results in the generation of new releasable vesicles in less than 30 min; (d) in HCG, the high Ca2+ entry also provokes the activation of a clathrin independent endocytosis that does not produce releasable vesicles in the experimental period.

"Endofitos de Blepharocalyx salicifolius: diversidad y factores que modulan el ensamble de las comunidades fúngicas" (2014-10-17). Español, Esteban. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se conoce como endofítos fúngicos a los hongos que viven asociados a los distintos tejidos de las plantas. Estos organismos no ocasionan síntomas aparentes de infección y, en esta asociación, se reconoce o sospecha una relación mutualista entre sus integrantes. Un modelo interesante desde el punto de vista ecológico y aplicado son los endofítos No-Clavicipitaceos (tipo III). Estos son transmitidos horizontalmente y colonizan casi todos los linajes de plantas, comprendiendo una enorme riqueza específica. En este marco, este trabajo tuvo como objetivo el estudio de la diversidad de endófitos fúngicos tipo III en diferentes poblaciones de Blepharocalyx salicifolius (planta nativa) analizando la diversidad de la comunidad endofítica foliar y el posible impacto de diferentes factores sobre el ensamble. Por otro lado se llevaron a cabo diferentes análisis a fin de establecer si los endofítos fúngicos provienen de inóculos que circulan a través del corredor biológico, manteniendo el flujo genético entre las comunidades y, que la filiación de estas poblaciones puede ser detectada por el estudio poblacional mediante métodos moleculares. Se seleccionaron cuatro áreas, asociadas con el corredor biológico del Rio Paraná-Río de la Plata. Se estudiaron las comunidades fúngicas endofíticas foliares mediante: aislamiento de cepas y su posterior cultivo e identificación por métodos de análisis macro, micro morfológicos y a través de una aproximación multigénica. Se describen un total de 18 especies, solo 2 de ellas no habían sido previamente descriptas sobre este hospedante y una tercera constituye una nueva especie para la ciencia. El análisis de la composición de las distintas comunidades a través de sus índices de riqueza y diversidad, permitió reconocer que sitio con menor disturbio antropogénico presentaban mayor riqueza de organismos endófitos. Entre las cepas obtenidas, se seleccionó aquellas pertenecientes al género Colletotrichum como indicador, para el estudio de la influencia del corredor biológico sobre el ensamblaje de la comunidad fúngica, por ser el que presentó más cepas en común entre los sitios asociados al corredor. Los resultados indican la presencia de distintas especies de Colletotrichum asociadas a los diferentes sitios estudiados. Entre las conclusiones más relevantes de este trabajo se destaca que las comunidades fúngicas foliares de B. salicifolius poseen una importante riqueza de endófitos foliares que varía entre 5 y 13 especies, que los corredores biológicos no parecen tener una influencia clave en el ensamblaje de la comunidad y que el disturbio antropogénico podría ser un factor adicional a los ya considerados, modulando la comunidad endofítica foliar. Por lo expuesto, este estudio aporta datos que permiten entender alguno de los factores que determinan cómo se establecen las comunidades fúngicas en la naturaleza.

Abstract:
Fungal endophytes are associated with different living plant tissues. They do not present any external manifestation of their presence, and do not cause apparent symptoms of infection. This association is recognized as or suspected to be a mutualistic relationship between its members. From the ecological and applied point of view the Non-Clavicipitaceous (TypeIII) endophytes are an interesting model. They are transmitted horizontally and colonize almost all lineages of plants, comprising huge species richness. For these reasons, this study aimed to study the diversity of fungal endophytes type III on a native plant (Blepharocalyx salicifolius) analyzing the diversity of foliar endophytic community and the potential impact of different factors on the assembly. various analyzes was conducted to determine whether the fungal endophytes come from inoculums that flow through the biological corridor, maintaining a gene flow between populations, and that the relation of these populations can be detected by molecular methods. Four areas were selected related to the biological corridor of the Rio Paraná-Río de la Plata. Endophytic fungal foliar communities were studied by: isolation of strains and subsequent cultivation and identification methods of macro and micro analysis morphological and through a multigenic approximation. A total of 18 species are described, only 2 of them had been previously described on this host and one of them is a new species to science. The analysis of the composition of different communities allowed us to recognize, through richness and diversity indices, that sites with less anthropogenic disturbance had higher richness of endophytic organisms. Among the isolated organisms, the genus Colletotrichum was selected as a indicator, in order to study the influence of the biological corridor on fungal community assemblages, because this genus was one of the most common between the sites associated with the corridor. The results indicate that the presence of different species of Colletotrichum is associated with the different sites studied. The overall analysis of the results indicate that foliar endophytic fungal communities of B. salicifolius show significant richness of foliar endophytes that varies between 5 and 13 species, that biological corridors do not seem to have a key influence on the assemblage of the endophytic community and that anthropogenic disturbance could be an additional factor to those already considered, and that could modulates the foliar endophytic community. This study provides information that allows us to understand some of the factors that determine how fungal communities are established in nature.

"Enfoques de programación entera para el Problema del Viajante de Comercio con costos en función del tiempo" (2012). Miranda Bront, Juan José. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El Problema del Viajante de Comercio Dependiente del Tiempo (PVCDT) es una generalización del clásico Problema del Viajante de Comercio (PVC) en el cual se busca un circuito de costo mínimo que recorra todos los clientes, donde los tiempos (o costos) de viaje entre ellos no son constantes y pueden variar dependiendo de diversos factores. Una de las motivaciones para considerar la dependencia del tiempo es que nos permite tener una mejor aproximación a muchas aplicaciones de la vida real, dentro de la industria y en el sector de servicios. En la literatura relacionada, existen distintas versiones del PVCDT que consideran que las variaciones se producen por diversos motivos y sobre distintos parámetros. Algunas de ellas estipulan que las variaciones se producen sobre los tiempos (y/o costos) de viaje mientras que otras asumen que las variaciones se producen sobre la velocidad de viaje. Más aún, para el primer caso, una variante asume que el tiempo de viaje depende de la posición del arco en el circuito mientras que otra asume que depende del instante en el que se comienza a atravesar el arco. Al igual que el PVC, el PVCDT pertence a la clase NP-Difícil y por lo tanto no se conoce un algoritmo que encuentre una solución en tiempo polinomial. En esta tesis abordamos dos de las variantes antes mencionadas mediante la formulación de modelos de Programación Lineal Entera. Para cada formulación, realizamos un estudio teórico enfocado en derivar familias de desigualdades válidas que exploten las características particulares del problema. En particular, para una de las variantes, demostramos que varias de ellas definen facetas del poliedro. Desde el punto de vista práctico, para las variantes consideradas desarrollamos algoritmos exactos de tipo Branch and Cut que incorporan estas familias de desigualdades válidas y los evaluamos considerando instancias propuestas en la literatura, obteniendo buenos resultados que muestran que ambos enfoques son factibles para ser utilizados en la práctica.

Abstract:
The Time Dependent Travelling Salesman Problem (TDTSP) is a generalization of the well known Travelling Salesman Problem (TSP) in which we look for a minimum cost tour that visits each client exactly once where the travel times (or costs) among them are not assumed to be constant and may vary depending on many different factors. The motivation to consider the time dependence factor is that it enables to have better approximations to many problems from practice, mainly from the industry and the service sector. In the related literature there are different versions of the TDTSP that consider that variations occur for different reasons and over distinct parameters. For example, some of them consider that variations affect travel times (and/or costs) while others assume that variations influence travel speeds. Moreover, in the first case, one version assumes that the travel time depends on the position of the arc in the tour while another one assumes that it depends on the particular starting instant for travelling the arc. As well as the TSP, the TDTSP belongs to the class NP-Hard and therefore it is not known an algorithm that solves it in polynomial time. In this thesis we approach two of the versions mentioned above by means of Integer Linear Programming formulations. For each formulation, we perform a theoretical study focused on deriving families of valid inequalities that exploit the particular characteristics of the problem. In particular, for one of the variants, we prove that some of them are facet defining. From a practical standpoint, for the versions considered we develop exact Branch and Cut algorithms that incorporate these families of valid inequalities and we evaluate them on instances from the related literature, obtaining good computational results that show that both approaches are feasible to be used in practice.

"Enfriamientos de núcleos telencefálicos para testear la relación de escalas temporales en un modelo de canto de aves" (2013). Goldin, Matías Alejandro. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo estudiamos los mecanismos neuronales en el cerebro de las aves involucrados en la generación de los gestos motores del canto. Exploramos este sistema utilizando herramientas de análisis experimentales, teóricas y computacionales. La naturaleza del control telencefálico sobre los circuitos premotores y motores se encuentra en debate. Las hipótesis de funcionamiento van desde la usurpación completa de circuitos a los que conecta “río abajo” (downstream en inglés) a mecanismos interactivos de control. En este trabajo, mostramos teórica y experimentalmente, que el control motor telencefálico del canto en canarios (Serinus canaria) es consistente con una estrategia interactiva. Utilizamos predicciones de un modelo teórico de control respiratorio, para mostrar que el enfriamiento leve de un núcleo del telencéfalo (HVC) conlleva al estiramiento en el canto, pero que un enfriamiento adicional causa la reestructuración progresiva del mismo. Esto es consistente con la hipótesis de que los gestos respiratorios son respuestas subarmónicas a una escala de tiempo presente a la salida de HVC. Construimos un dispositivo enfriador que nos permitió realizar un enfriamiento controlado, local y bilateral de la zona del cerebro donde se encuentra el HVC. Logramos medir simultáneamente el canto y la presión dentro de los sacos aéreos, para diferentes temperaturas de enfriamiento de este núcleo bilateral. Como resultado obtuvimos estiramientos y luego rompimientos de las estructuras silábicas del canto, lo cual sugiere la existencia de al menos una escala temporal adicional en la ruta motora, que interactúa con la que se halla en HVC. Encontramos también evidencia en los patrones de presión de canarios de la existencia de bifurcaciones que ocurren naturalmente entre transiciones de distintos tipos de sílabas. Estas pudieron ser interpretadas como modificaciones suaves de dos parámetros que describen la actividad de HVC en nuestro modelo interactivo, y una de ellas pudo ser manipulada con enfriamiento. La interacción entre una función motora vital, como la respiración, y el control motor del telencéfalo sobre el canto sugiere la existencia de mecanismos más generales de cómo la integración no lineal de estructuras cerebrales evolutivamente nuevas con los circuitos preexistentes dan lugar a comportamientos nuevos y diversos. Estos resultados ayudan a construir confianza en un punto de vista que considera la actividad motora generada por el sistema del canto como el resultado de al menos dos escalas de tiempo no lineales interactuando, y sugieren que la diversidad puede surgir de cambios suaves en instrucciones muy sencillas.

Abstract:
In this work we study the neuronal mechanisms in the brain of birds involved in the generation of the motor gestures responsible for singing. We explore this system with experimental, theoretical and computational analytical tools. The nature of telencephalic control over premotor and motor circuits is debated. Hypotheses range from complete usurping of downstream circuitry to highly interactive mechanisms of control. We show theoretically and experimentally, that telencephalic song motor control in canaries is consistent with a highly interactive strategy. Using predictions from a theoretical model of respiratory control, we show that mild cooling of a forebrain nucleus (HVC) led to song stretching, but further cooling caused progressive restructuring of song, consistent with the hypothesis that respiratory gestures are subharmonic responses to a timescale present in the output of HVC. We built a cooling device that allowed us to perform a controlled and local temperature decrease of the bilateral zone of the brain where HVC is. We measured simultaneously the song and the intra air sac pressure for different cooling temperatures of this bilateral nucleus. This allowed us to find stretching and then breaking of the syllabic structure of song, which suggests the existence of at least an additional timescale in the motor pathway, interacting with the one present in HVC. We also found evidence of naturally occurring bifurcations in the transitions between different type of syllables of the pressure patterns of canary song. These could be interpreted as smooth modifications of two parameters that describe the activity of HVC in our interactive model, and one of them could be manipulated by means of cooling. This interaction between a life-sustaining motor function (respiration) and telencephalic song motor control suggests a more general mechanism of how nonlinear integration of evolutionarily new brain structures into existing circuitry gives rise to diverse, new behavior. These results allow to build confidence on a view that considers the motor activity generated by the song system as the result of at least two nonlinearly interacting timescales, and suggests that diversity may arise from slight changes of very simple instructions.

"Enriquecimiento de manzana con calcio: efecto en las propiedades físico-químicas y estructurales durante el secado en corriente de aire" (2011). Casim, Silvina Mariel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo general de esta investigación ha sido evaluar la respuesta de una matriz frutícola porosa (manzana) sometida previamente a diferentes tipos de impregnación (bajo vacío, IV, y a presión atmosférica, IA) con calcio como componente fisiológicamente activo, a lo largo del proceso de deshidratación en corriente de aire, en términos de sus propiedades físico-químicas y estructurales, con el fin de desarrollar nuevos productos frutícolas que, además de mantener características sensoriales de excelencia, contribuyan a mejorar la salud y/ó reducir el riesgo de enfermedades en la población. La cantidad de calcio presente en 200 g de fruta IA ó IV satisfizo alrededor del 11-17% de la ingesta diaria recomendada (1000 mg) respectivamente, mientras que en 50 g de fruta IA ó IV y deshidratada a presión de vapor relativa ≈ 0,30 se satisfizo alrededor del 18-26% de dicha ingesta respectivamente. Respecto a la porosidad, las muestras IA presentaron valores similares al tejido fresco, desarrollando altos valores al final del secado; sin embargo las muestras IV se caracterizaron por valores despreciables, desarrollando bajos valores durante el secado. Las muestras impregnadas y no impregnadas presentaron el mismo comportamiento mecánico durante el secado: un aumento de la fuerza máxima de ruptura con la disminución de la humedad, y una disminución y posterior incremento de la rigidez; estos efectos fueron más pronunciados en las muestras impregnadas. Tanto en las muestras impregnadas como en las no impregnadas, la disminución de la movilidad del agua durante el secado siguió un perfil similar: una disminución severa de la misma, caracterizada por tres poblaciones a humedades altas, dos a humedades intermedias y una a bajas humedades; no se observaron diferencias importantes entre los tratamientos. Los procesos de impregnación provocaron el pardeamiento de los productos, siendo el mismo más evidente a medida que transcurría el secado, y más severo en las muestras tratadas al vacío. Todos estos cambios pudieron ser correlacionados, en parte, con las observaciones ultra y micro-estructurales de los tejidos. El agregado de trehalosa al medio de impregnación resultó en productos deshidratados con menores daños estructurales, mejores características texturales y menor pardeamiento. El importante aporte de calcio y los resultados obtenidos de los diferentes estudios sugieren que estos métodos de impregnación pueden ser utilizados para diseñar alimentos funcionales en base a matrices de frutas y vegetales con calcio incorporado.

Abstract:
The objective of this research was to evaluate the response of a apple tissue previously subjected to impregnation (under vacuum (IV) or at atmospheric pressure (IA)) with calcium as physiological active component, along the air dehydration process, in terms of their physicochemical and structure properties, in order to develop new apple products that, besides keeping excellent sensory characteristics, contribute to improve health and/or reduce population disease risks. The amount of calcium present in 200 g of fruit IA or IV would satisfy about 11-17% of the recommended daily intakes (1000 mg) respectively, meanwhile in 50 g of impregnated and dehydrated fruit to relative water pressure ≈ 0,30, would satisfy about 18-26 % of the recommended daily intakes respectively. The IA products presented porosity values similar to those of fresh tissue, developing high values at the end of the dehydration process. On the other hand, the porosity values of IV products were negligible, developing lower values during drying. Fortified and non-fortified samples presented the same behavior with regard to mechanical properties during drying: an increment on maxim rupture force with moisture decrease, and a diminution and a subsequent increase in rigidity. These effects were more pronounced in impregnated samples. The decrease in water mobility in impregnates samples during drying followed a similar profile to non-impregnated ones: a severe decrease, characterizes by three big populations at high moisture content, by two populations at intermediate moisture, and by only one at low moisture; there were no important differences in water mobility between treatments. Impregnation process induced browning, being more evident during drying, and more severe in IV samples. All these changes could be correlated, in part, with ultra and micro-structural features. Adition of trehalose to the impregnation medium resulted in dehydrated products with less structural damages, better textural characteristics and less browning. Present results suggest that these impregnation methods could be used to design functional foods employing fruit and matrices with added calcium.

"Ensamblando operaciones mentales. Desarrollo de un marco teórico y computacional para la toma de decisiones humanas" (2016-03-15). Paz, Luciano. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
A lo largo de esta tesis, estudiamos el problema de la toma de decisiones en el cerebro. Nuestro enfoque fue abarcativo, intentando analizar las diversas escalas del problema, desde modelos neurofisiológicos para decisiones sencillas hasta el encadenamiento de decisiones individuales para formar programas complejos. Es claro que el cerebro es una máquina capaz de realizar cómputos de manera flexible y versátil, pero que además presenta circuitos especializados en ciertos cómputos específicos como el trazado visual de una curva, la detección de la orientación, del contraste, del mo- vimiento, etc. Estos circuitos configuran una red de procesadores especializados, capaces de operar en paralelo pero que para realizar los cómputos flexibles y versátiles, a veces deben encadenarse de forma serial. Los mecanismos específicos detrás del encadenamiento de las operaciones `elementales' del cerebro son mayormente desconocidos. Durante esta tesis ex- ponemos los requisitos computacionales que deben ser satisfechos para que las operaciones configuren programas comportamentales flexibles y complejos. Actualmente se tiene un conocimiento bastante detallado del mecanismo subyacente a las decisiones perceptuales. A partir de registros electrofisiológicos en monos y ratas que fueron entrenados para hacer tareas de discriminación perceptual, se observó que existen neuronas sensibles a las categorías que se deben responder, cuya actividad rampea hasta un nivel donde señalan la decisión. Esto se interpreta como que las neuronas integran evi- dencia sensorial ruidosa hasta alcanzar un nivel de certeza suficiente como para decidir. Esta interpretación se deriva de la estrategia de inferencia bayesiana óptima para toma de decisiones en presencia de ruido, que reproduce varias de las observaciones experimenta- les. Sin embargo, no está claro cómo es que esta inferencia se instancia en el cerebro, ni a nivel algorítmico ni neurofisiológico. En esta tesis estudiamos una propuesta particular, la inferencia aproximada por un proceso de muestreo de una distribución de probabilidad. Estudiamos este mecanismo al nivel neurofisiológico, implementando una red de neuronas que forman varios atractores dinámicos. En particular, nos enfocamos en cómo es que esta implementación permite codificar de forma natural la medida de la confianza que tienen los sujetos en la elección que tomaron. La confianza, junto al tiempo de respuesta y la tasa de errores, es uno de los observables del proceso de toma de decisión que fueron estudiados por psicólogos y neurocientíficos cognitivos. Se considera que es una medida interna crucial para el comportamiento, desde la política de toma decisiones hasta la modulación del aprendizaje en tareas complejas, cuyas bases neurofisiológicas siguen siendo mayormente desconocidas. Por último, extendemos la implementación del proceso de muestreo para explicar, al nivel algorítmico, una forma de encadenamiento de decisiones individuales. En particular, estudiamos cómo es que chicos de entre 6 y 7 años se desempe~nan en un juego sencillo de planeamiento. Proponemos un mecanismo de encadenamiento de acciones individuales (proceso de planeamiento o de búsqueda) que nos permite ajustar el desempe~no de los chicos en la tarea. Más importante aún, nos permite sondear las estrategias de los chicos para orientar o sesgar la búsqueda de cadenas de acciones (el mecanismo de asignación de valor de las acciones o la heurística). Palabras clave: Toma de decisiones, confianza, planeamiento, inferencia, computabili- dad

Abstract:
During this thesis, we studied decision making in the brain. We used a broad approach, attempting to analyze the various scales of decision making, from neurophysiological models for simple decision to chains of many individual decisions that form complex behavioral programs. It is clear that the brain is capable of performing flexible and versatile computations on demand, but also has specialized circuits devoted to specific operations such as curve visual tracing, orientation detection, contrast or movement sensing, etc. These circuits form a network of specialized processors, capable of parallel operations but to retain flexibility, they must sometimes work in serial manner. The specific mechanisms that underly the chaining of the brain's `elemental' operations is mostly unknown. During this thesis, we expose the computational requirement that must be satisfied to allow the operations to configure flexible and complex behavioral programs. Presently, the underlying mechanism behind perceptual decisions is known with a lot of detail. It was seen in electrophysiological recordings in monkeys and rats that were trained to perform perceptual discrimination tasks, that there are neurons, sensitive to the response category, whose activity ramps to a level that signals the decision. The neurons' ramping is interpreted as a noisy sensory evidence integration, which continues up to a level of certainty that is sufficient to decide. This interpretation derives from the optimal bayesian inference decision strategy, which is also able to reproduce various experimental observations. However, it is still unclear how the inference is instantiated in the brain at both the algorithmic and neurophysiological levels. In the present thesis, we study a particular proposal: inference is approximated by a sampling process. We study this mechanism at the neurophysiological level by implementing a network of neurons that form dynamic attractors. In particular, we study how this implementation is able to naturally encode a measure of the confidence subjects have in their decision. Confidence, along with response time and error rates, is one of the behavioral observables of the decision making process that have been studied by psychologists and cognitive neuroscientists for many decades. Confidence is considered a measure that subjects rely on to shape their behavior, from the decision making policy to the modulation of complex task learning, and whose neurological underpinning is mostly unknown. Finally, we extend the implementation of the sampling process to explain, at the algo- rithmic level, a form of simple decision chaining. In particular, we study how children, that have between 6 and 7 years of age, play a simple planning game. We propose a mechanism of action chaining (planning process or search process) that allows us to fit children's task accuracy. More importantly, we are able to probe the strategies that children use to shape their plans of action chains (the action value assignment mechanism or heuristic). Keywords: Decision making, confidence, planning, inference, computability

"Ensambles de aves en agroecosistemas de la provincia de Buenos Aires: su relación con los patrones de uso de la tierra y las características del paisaje" (2010). Codesido, Mariano. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Entre enero de 2006 y enero de 2008 se estudió estacionalmente la estructura de los ensambles de aves en los agroecosistemas de las diferentes unidades ecológicas de la Región Pampeana comprendidas dentro de la provincia de Buenos Aires (Pampa Ondulada, Pampa Interior Plana, Pampa Interior Arenosa, Pampa Deprimida y Pampa Austral). Los objetivos generales de la tesis son: a) describir la estructura de los ensambles de aves terrestres de los agroecosistemas de la provincia de Buenos Aires, b) comparar la estructura de los ensambles de aves terrestres entre las diferentes unidades y analizar su asociación con los patrones de uso de la tierra; c) evaluar la asociación entre la composición y abundancia de los ensambles de aves y las características del paisaje, y d) evaluar la relación funcional entre la riqueza específica con la composición y la heterogeneidad del paisaje. Se registraron un total de 115 especies de aves terrestres. La mayor parte de las especies que forman parte del ensamble de aves de los agroecosistemas de la provincia de Buenos Aires son especies de estatus residente, en su mayoría insectívoras y generalistas en cuanto a su grado de especialización en los usos de hábitats de nidificación; a este numeroso conjunto de especies se le agrega un grupo de especialistas (de pastizal, de arboledas y palustres), siendo más numeroso el de las especialistas de pastizal, cuyas especies, en general, presentan menores abundancia y reducidas áreas de ocupación (lo que sugiere una distribución restringida). Este grupo de especialistas de pastizal le confiere al ensamble un rasgo distintivo. En síntesis, los resultados muestran que tanto la pertenencia gremial como el grado de especialización en el uso del hábitat de nidificación influyen sobre el grado de dominancia o rareza de las especies que componen los ensambles de aves en los agroecosistemas de la provincia de Buenos Aires lo que, en principio, sugiere que ciertos grupos de especies, como las especialistas de pastizal son más propensas a poseer especies raras y, por lo tanto, podrían ser más susceptibles a las actividades antrópicas. En términos relativos, las especies migrantes evidenciaron menores áreas de ocupación que las residentes, podrían tornarse potencialmente más raras, aunque en este caso sus respuestas también dependen de lo que ocurra fuera de la región. Los resultados de la comparación entre las diferentes unidades ecológicas de la Región Pampeana incluidas en la provincia de Buenos Aires mostraron consistencia, por un lado, con la hipótesis del pool de especies, que sostiene que la composición y riqueza del ensamble local es una fracción del tamaño o pool de especies potencialmente disponibles a escala regional. El pool de especies regional es filtrado por el ambiente a través de los patrones de uso de la tierra (asociado a factores de manejo) y los patrones del paisaje (asociado a factores ambientales) con el resultado que algunas especies son suprimidas porque no se adecuan a estas restricciones ambientales impuestas por el filtro todo lo cual, en última instancia, determina la composición del ensamble de aves del agroecosistema a escala del paisaje. Si bien los efectos de estos filtros se extienden sobre toda la provincia de Buenos Aires, en términos relativos, no actúan con igual intensidad entre las unidades ecológicas: a) los factores de manejo, como la mayor cobertura de cultivos, explican la menor riqueza, abundancia total de especies y de especies de pastizal en la Pampa Ondulada y b) los factores ambientales, como la presencia de ambientes acuáticos, explican gran parte de las variaciones en la abundancia de las especies del ensamble de la Pampa Interior Plana y la Deprimida, en donde algunas especies asociadas a áreas ganaderas y a ambientes acuáticos, parecen tener un protagonismo más acentuado. Por otro lado, las diferencias en las estructuras de los ensambles en las diferentes unidades también estuvieron relacionadas con aspectos biogeográficos, de historia de uso y con los patrones de migración y movimientos locales de las aves residentes. Nuevamente, si bien los efectos de estos procesos se extienden sobre toda la provincia de Buenos Aires, en términos relativos, no actúan con igual intensidad entre las unidades ecológicas: a) los factores biogeográficos son más importantes en la Pampa Ondulada (se observó una mayor proporción de especies raras que ingresan al área procedentes del bosque ribereño); b) los factores de historia de uso son más importantes en la Pampa Ondulada (una mayor historia agrícola se refleja en una menor riqueza y abundancia de especies de pastizal); y c) los efectos de los movimientos migratorios son más importantes en la Pampa Austral (se observó una menor cantidad de especies migrantes invernales), en tanto que los movimientos locales de especies residentes son más importantes en la Pampa Deprimida (gran variación estacional en la abundancia de especies palustres). En total, un conjunto de 26 especies mostraron una alta sensibilidad a las coberturas de uso de la tierra que integran el paisaje rural de los agroecosistemas pampeanos incluidos en la provincia de Buenos Aires. La combinación de las diferentes coberturas de los hábitats bajo manejo agrícola - ganaderos como así también la presencia de otros hábitats con baja cobertura (arboledas, borde de camino y ambiente acuático), influyeron sobre la composición y la abundancia de las aves del ensamble, tanto en el período reproductivo, como en el no reproductivo. Las respuestas de las aves fueron del tipo especie-específicas más que por el tipo de estatus de residencia o la pertenencia gremial de las especies. No obstante, tal como se esperaba, un gran número de especies de pastizal se asoció fuertemente a paisajes con ambientes de pastos cortos y altos, lo que evidencia, en este caso, un tipo de respuesta grupal por parte de un conjunto de especies a la composición del paisaje. Los resultados indicaron que la heterogeneidad del paisaje y las diferentes coberturas de uso de la tierra explican una parte significativa de la variación de la riqueza de especies de los grupos estudiados en los agroecosistemas de la Región Pampeana. Este resultado concuerda con la Hipótesis de la heterogeneidad de hábitat, que postula que un mayor número de tipos de coberturas y heterogeneidad del paisaje aportan una mayor diversidad de nichos y de formas de explotar los recursos, lo que en última instancia permite satisfacer las necesidades de diferentes grupos de especies. No obstante esta coincidencia en general con la hipótesis, se encontró que la relación funcional entre la riqueza y la heterogeneidad fue afectada por la estacionalidad, siendo la respuesta de la riqueza a la heterogeneidad del paisaje más sensible durante el período reproductivo que durante el no reproductivo. Por otro lado, sendos análisis de regresión indicaron que la riqueza aumenta sensiblemente con el incremento de las coberturas de pastizal y de bordes de caminos y disminuye sensiblemente con el aumento de los cultivos de soja. El conjunto de los resultados indica que tanto el uso de la tierra como las características del paisaje influyen sobre la riqueza, la composición y la abundancia del ensamble de aves en los agroecosistemas de la provincia de Buenos Aires y que, actualmente, estos ensambles cuentan con un grupo de especies fuertemente asociadas a las características del paisaje original (pastizales y céspedes) y, sumado a ello, un nuevo grupo de especies provenientes del Espinal y del Chaco, que habrían ingresado a la región siguiendo los nuevos elementos del paisaje introducidos en la Pampa, como las arboledas y los peridomicilios, en donde encuentran hábitats apropiados en donde establecerse. Las características de los ensambles nos permiten proponer que si se mantiene la actual intensificación de la agricultura y sus factores asociados, en particular los cambios en las cobertura de uso de la tierra basado en la expansión del cultivo de soja y una mayor tendencia hacia la homogeneización del paisaje, es probable que se afecte severamente a las especies especialistas de pastizales, que históricamente han sido comunes en los ensambles de aves de la Región Pampeana.

Abstract:
During January 2006 – 2008, I studied on a seasonal basis the structure of bird assemblages in agroecosystems comprising the different ecological units of the Pampean Region included in Buenos Aires province (the Rolling Pampa, the Flat Inland Pampa, the Sandy Inland Pampa, the Flooding Pampa and the Southern Pampa). The aims of this Thesis are: a) to describe the structure of landbird assemblages in agroecosystems of Buenos Aires province, b) to compare the structure of landbird assemblages among the different ecological units and to analyze their associations with land use patterns in each unit, c) to assess the association between the abundance and composition of bird assemblages with landscape characteristics, and d) to assess the functional relationship between species richness with landscape heterogeneity and composition. I recorded a total of 115 landbird species. Most of the species included in the landbird assemblage of the agroecosystems of Buenos Aires province are resident and insectivorous species with general nesting habits, even though there is also a group of habitat specialist species (mainly grassland birds, but also some wetland and woodlot birds), with a low constancy on transect samplings (suggesting a more restricted geographical distribution). Comparison among the ecological units of the Pampean Region included in Buenos Aires province showed consistency with the Pool Species Hypothesis, which states that the species composition and richness of a local assemblage is only a fraction of the potential pool of species available at a regional scale, since this regional pool receives the action of several “filters” related to management and environmental factors. Even if these filters extend all over the Pampas, their relative effects act with different intensity across the ecological units of the Pampas: management factors linked to agriculturization act stronger at the Rolling Pampas (reducing species richness, particularly grassland species), whereas environmental factors, such as the presence of wetlands, act more strongly at the Flat Inland Pampa and the Flooding Pampa (increasing species richness and bird abundance). Moreover, differences in bird assemblages among ecological units are related to biogeographic, historical and migration factors, and again, their relative effects vary among units: biogeographic and historic effects were more evident in the Rolling Pampas (where many rare species enter to the area from the Paraná-Plata system and some grassland species are missing), whereas migratory effects acted strongly at the Southern Pampa (where less wintering migrants are missing), and local movement effects were more evident at the Flooding Pampa (with a great seasonal variation in wetland bird species). In total, a group of 26 species showed a great sensitivity to the land covers in the rural landscape included in the agroecosystems of Buenos Aires province. Most responses were species-specific rather than related to a certain status or trophic guild. However, as expected, many grassland specialists showed a great association with both short and tall grassland cover. Both landscape heterogeneity and the different land covers explained a significant fraction of species richness variation. These results are in agreement with the Habitat heterogeneity hypothesis, which states that higher habitat heterogeneity provides greater niche diversity, thus increasing chances for more species richness. However, it should be noted that the functional response of species richness to habitat heterogeneity varied seasonally, being more evident during the breeding season. Moreover, species richness significantly increased with grassland cover and with the amount of spontaneous vegetation along dirty roads and fence lines, and strongly decreased with the amount of soybean crops. All these evidences indicate that land use patterns along with landscape characteristics influence on species composition, richness and abundance of bird assemblages in agroecosystems of Buenos Aires province. At present, these assemblages has a group of bird species deeply related to the original grassland landscape, and a more recent group of species which entered to the Pampean region from the biogeographic regions of the Chaco and the Espinal following the introduction of woodlots and peridomestic areas in the Pampean landscape. Finally, these results show that if this trend of soy expansion and habitat homogenization continues in the agroecosystems of the Pampas, it is highly probable that many bird species will be affected, particularly many of the grassland specialists that were formerly common species in this region.

"Ensayos de eliminación de fluor y vanadio, en aguas de consumo, empleando bauxita activada" (1939). Bach, José María. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Ensayos de purificación del antígeno heterogenético" (1937). Somoza, Ramón D.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Ensayos ecotoxicológicos para la evaluación del impacto de plaguicidas en suelos agrícolas de Argentina" (2011). Piola, Lucas. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudió el impacto del uso de glifosato y clorpirifos en la estructura y función de suelos agrícolas de nuestro país, mediante bioensayos integrados laboratoriocampo, a través de una batería de biomarcadores, empleando un enfoque por niveles. Lombrices Eisenia andrei se seleccionaron como bioindicadores para ensayos de laboratorio. En estudios preliminares, éstas se expusieron a los plaguicidas en papel de filtro o suelo artificial (SA). Se optimizaron biomarcadores celulares/subcelulares, y parámetros de relevancia ecológica, que se aplicaron al monitoreo de suelos agrícolas, en cultivo de soja o trigo, rociados con los plaguicidas a las concentraciones recomendadas. Algunos biomarcadores fueron sensibles a las bajas concentraciones de plaguicidas. Los ensayos de tiempo de retención del rojo neutro y Cometa fueron más sensibles al clorpirifos que los de reproducción y evasión. Estos últimos resultaron buenos indicadores del efecto de glifosato. La actividad alimentaria en laboratorio y campo presentó un patrón similar de respuesta. Los bioensayos en SA suplementado con los plaguicidas a las concentraciones ambientales previstas mostraron una respuesta similar a la obtenida en campo, pudiendo resultar útiles para evaluar efectos de los plaguicidas en estos organismos no blanco. Se enfatiza la importancia de realizar ensayos laboratorio-campo en condiciones locales.

Abstract:
We studied the impact of glyphosate and chlorpyrifos on structure and function of Argentine agricultural soils, through integrated laboratory-field bioassays. For assessing the ecotoxicological impact of both pesticides, a battery of biomarkers was studied, using a tiered approach. Earthworms Eisenia andrei were selected as bioindicator organisms in laboratory tests. In preliminary studies, they were exposed to both pesticides on filter paper and artificial soil (AS). Cellular/subcellular and ecologically relevant biomarkers were optimized. The selected biomarkers were applied for monitoring soya or wheat cultured agricultural soils, sprayed with the pesticides at recommended doses. Some biomarkers were responsive to the low concentrations of pesticides. Neutral red retention time (NRRT) and Comet assays were more sensitive to chlorpyrifos than reproduction and avoidance tests. The latter were good indicators of the presence of glyphosate. Laboratory and field feeding activity exhibited a similar pattern of response. Bioassays on AS spiked with the pesticides at the predicted environmental concentrations showed a similar response to that obtained in the field, and may be useful to evaluate the effects of pesticides on these non-target organisms. We emphasize the relevance to perform laboratory-field bioassays in local conditions.

"Ensayos experimentales en el grupo de los monosacáridos" (1939). Restelli de Labriola, Elena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Ensayos pre-clínicos de dos vacunas inmunoterapéuticas con actividad antitumoral desarrolladas a partir de gangliósidos" (2004). Gabri, Mariano Rolando. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Para el año 1934 la toxina de Coley era el único tratamiento sistémico para el tratamiento de cáncer. Este preparado fue desarrollado unos años antes por el prestigioso cirujano del Memorial Hospital de New York, William B. Coley, utilizando toxinas bacterianas de los géneros Serratia y Streptococcus. Este producto se convirtió así en la primera vacuna oncológica y en uno de los primeros tratamientos sistémicos del cáncer. A pesar de los experimentos iniciales del siglo pasado, luego de los ensayos de Coley la inmunoterapia oncológica fue dejada de lado por el advenimiento de las drogas quimioterapéuticas y las mejoras en la radioterapia. En las últimas décadas se ha vuelto a observar a la inmunoterapia como una estrategia complementaria válida para el tratamiento de cáncer. Este nuevo interés sobre este tipo de tratamientos, tiene sus bases en el gran avance alcanzado en el entendimiento de los mecanismos inmunológicos y de los procesos que dominan la biología tumoral. En esta tesis se presentan resultados relativos a dos vacunas desarrolladas a partir de gangliósidos, moléculas de membrana anfipáticas que pertenecen a la familia de los glicoesfingolípidos con por lo menos, un residuo de ácido siálico lo cual es una característica distintiva de estos compuestos. Los resultados se centran en la evaluación de los efectos tóxicos, la respuesta antitumoral y la modulación inmunológica desencadenados por la aplicación de vacunas inmunoterapéuticas a base de gangliósidos, consistentes en un anticuerpo anti-idiotipo dirigido a gangliósidos glicolilados (anticuerpo 1E1O) y de una vacuna molecular del gangliósido NacGM3 conjugado a proteínas externas de membrana de N. Meningitidis proteoliposomas de muy pequeño tamaño (NacGM3/VSSP). Con este fin se evaluará también el perfil de los modelos murinos experimentales de cáncer mamario y melanoma a emplearse para cada vacuna, respectivamente. Los resultados demuestran que los modelos animales elegidos presentan características adecuadas para ser utilizados como herramientas de evaluación de los efectos y mecanismos desencadenados por la inmunización con las vacunas. La línea celular de cancer mamario murino F3II crece en el espacio subcutáneo desarrollando un fenotipo tumoral altamente maligno. Su portación produce un cuadro inmunoestimulatorio posiblemente ligado a la secreción de GM-CSF, citoquina ante la cual se modifica su respuesta proliferativa. Además estas células son reactivas al anticuerpo P3, precursor del 1E10, lo que la convierte en un modelo apropiado para la evaluación de la respuesta antitumoral de 1E10. La inmunización de ratones con el preparado 1E10-KLH no produce efectos tóxicos de magnitud en los animales, desarrollando una respuesta tumoral que es capaz de reconocer a las células F3II. Utilizando este proceso de inmunización se puede observar un retardo en el crecimiento tumoral y una disminución significativa en el recuento de metástasis espontáneas en los ratones tratados. Además se evaluó a la línea B16 crecida en animales singénicos como modelo de estudio de los efectos producidos por la vacunación con NacGM3/VSSP. Las células B16 presentan en su membrana al gangliósido NacGM3, reaccionando positivamente ante la presencia del mismo en el medio de cultivo. La vacunación de ratones C57 con NacGM3/VSSP desarrolla una respuesta inmunológica humoral que es capaz de reconocer a los componentes de la vacuna y a las células de melanoma B16. La aplicación de la vacuna no produce efectos tóxicos de importancia. La vacunación con NacGM3/VSSP genera una respuesta antitumoral que se manifiesta en el rechazo del desafío tumoral en el 100% de los animales vacunados. Esta respuesta se mantiene en el tiempo hasta tres meses luego de finalizada la misma. La respuesta antitumoral obtenida es dosis dependiente ya que se pudo observar una actividad antitumoral creciente en lotes de ratones inmunizados con una concentración vacunal de hasta 360 μg/dosis y específica hacia células que expresan el gangliósido NacGM3). La vacunación con NacGM3/VSSP desarrolla una respuesta de anticuerpos con preponderancia del isotipo IgG2b. Estos anticuerpos reconocen cortes de tumor B16 siendo su epítope reactivo el residuo de ácido sialico presente en las células. La investigación básica en vacunas provee un mejor entendimiento de los mecanismos inmunológicos involucrados en el rechazo tumoral inducidos por la vacunación. Los ensayos preclínicos con modelos animales de cáncer son de importancia capital en el estudio de los efectos inmuno modulatorios de estas vacunas y en la evaluación de sus capacidades terapéuticas a nivel clínico.

Abstract:
By 1934 Coley's toxin was the only systemic treatment for cancer. This compound was developed few years before for the famous surgeon from The Memorial Hospital of New York, William B. Coley, using bacterial toxins from Serratia and Streptococcus. This product become the first cancer vaccine and one of the first systemic treatments for cancer. Despite the initial experiments carried out in the last century, after Coley attempts cancer immunotherapy was abandoned due to the appearance of quimiotherapeutic drugs and improvements in radiotherapy. In the last decades, immunotherapy is seeing again as a valid adiuvant therapy for cancer treatment. This new interest in this kind of treatments, is based in the important advance reached in the understanding of immunology and the processes that govern tumor biology. In this thesis, results related with two vaccines based in gangliosides are presented. Gangliosides are amphipatic membrane molecules that belong to the glicoesfingolipid family, having at least one residue of sialic acid, which is a distinctive characteristic of this kind of compounds. The results focus in the evaluation of toxicity, antitumoral response and the immunological modulation due to the application of this two vaccines, one an antiidiotypic antibody against glycolilated gangliosides (1E1o antibody) and other a molecular vaccine composed by the ganglioside NacGM3 conjugated to proteins from the outer membrane of N. Meningitidis in proteoliposomes of very small size (NacGM3/VSSP). With this reasoning in mind, the profile of the experimental murine models of breast cancer and melanoma to be employed with each vaccine, was also evaluated. Results demonstrated that the animal models chosen have the characteristics needed to be used as evaluation tools of the effects and mechanisms developed by the immunization with the vaccines. F3II murine breast cancer cell line grows in the subcutis developing a highly malignant tumor phenotype. Its bearing produce an immunoestimulatory effect probably related to the secretion of GM-CSF, a cytoquine able to modify its proliferative response. Furthermore, this cells are reactive to P3 antibody, a precursor of 1E10, becoming a very adequate model for the evaluation of 1E10 antitumor response. Immunization of mice with the preparation 1E10-KLH did not produce relevant toxic effects in the animals, developing a humoral response able to recognize F3II cells. Using this immunization process it can be observed a delay in tumor growth an a significant decrease in the number of spontaneous metastasis in treated animals. Also, the B16 line, growing in singenic animals, as a study model of the effect produced by vaccination with NacGM3/VSSP, was evaluated. B16 cells have in its membrane NacGM3 ganglioside. Vaccination of C57 mice with NacGM3/VSSP developed a humoral immunologic response able to recognize both, components of the vaccine and B16 melanoma cells. Administration of the vaccine did not produce relevant toxic effects. Vaccination with NacGM3/VSSP generated an antitumoral response that translated in the rejection of the tumor challenge in 100% of the vaccinated animals. This response is sustained in the time up to three months after final inoculation. The antitumoral response obtained is dose-dependent since was observed an increasing antitumoral activity in mice immunized with a vaccine concentration of up to 360 μg/dose, being specific towards cells expressing NacGM3 ganglioside. Vaccination with NacGM3/VSSP developed an antibody response mostly based in the isotype IgG2b. This antibodies recognize B16 tumor slides being its reactive epitope the sialic acid residue which is present in the cells. Basic research in vaccines provide a better understanting of the immunologic mechanisms involved in tumor rejection induced by vaccination. Preclinical experiments with animal models of cancer are of utmost importance in the study of the immunomodulatory effects of this vaccines and the evaluation of its therapeutic capabilities at the clinical level.

"Ensayos sobre la microdeterminación de selenio por iodometría" (1945). Vara, Raúl P. J.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Enzima ramificante de hígado de rata : aislamiento, purificación y propiedades" (1963). Krisman de Fischman, Clara Rebeca. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Enzimas ligninolíticas en Fomes sclerodermeus" (2003). Papinutti, Víctor Leandro. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Abstract:
White rot fungi are the only organisms capable to mineralize the lignin to CO2. These fungi posses at least three enzymes impicated in the process: lignin peroxidase, manganese dependent peroxidase and laccase. The screening of 13 strains of white-rot fungi showed that F. sclerodermeus was the more efficient ligninase producer fungus and the decolorization of the polymeric dye poly R was fast. Lip activity was not detected in any of the media tested. Optimal media conditions for laccase and MnP production in synthetic liquid media were found. The Doehlert uniform factorial experimental design was applied to study the effect of MnSO4, CuSO4 and asparagine. Among the aromatic compounds evaluated in GA medium, vanillin and fenilic acid were the more efficient laccase and MnP inducers. On the other hand, in semidefined medium (YPG) aromatic compounds had not effect on any activity. Under this conditions only copper and Mn increased laccase and MnP activities, respectively. Solid state fermentation on wheat or soy bran, high laccase and MnP were produced. Neither aromatic compounds, MnSO4 nor CuSO4 increased none of the activities. The effect on known ligninolytic inducers was studied on a crystalline cellulose (CC) based medium. Cellulolytic activities decreased 3-fold when CuSO4 or MnSO4 were added to the medium. MnP activity was only detected in the media containing MnSO4 as inducer, while the laccase activity was constitutiver expressed under all the conditions tested, and it was increased to a major extent when copper was added to the medium. Wood blocks of poplar incubated during six months with F. sclerodermeus registered dry weight losses of 51%. Differential hydrolysis of the wood blocks revealed that the remaining content of cellulose and lignin were 58 y 56%, respectively. On the other hand, the hydrosolubles increased 3-fold, due to the degradation products. Observation of the wood showed the degradation of parenchyma rays and thinning of the cell walls. Growing on sawdust medium, enzyme activities were produced only with poplar, whereas on cedar laccase and MnP were inhibited. Laccase and MnP produced in YPG medium by F. sclerodcrmeus were purified to electrophoretic homogeneity and characterized biochemically. Two isoenzymes of laccase (Lac I y Lac II) and two MnP (MnP I y MnP II) were found. Isoforms of both systems showed slight differences in their isoelectric points. Laccase activity produced on wheat bran based medium revealed three bands in PAGE with differential patterns of inactivation. Among the compounds tested, the CuSO4 1,25 mM was the best stabilizer. The combination of both CuSO4 and glycerol 0,2% further increased the stability of the enzyme. Laccase activity produced in the optimized conditions was used in assays of decoloration and detoxification of the fungicide malachite green. P. chrysosporium was used as biotest, this Fungus showed a high sensitivity to the fungicide, while degradation by F. sclerodermeus laccase rendered a not toxic compound. The presence of I-HBT accelerated the detoxification. The detoxification response of other white-rot fungi was similar to that observed for P. chrysosporium.

"Enzimas lisosomales. Biosíntesis y translocación hacia los lisosomas en invertebrados : estudio de la presencia parcial o total del camino metabólico de la manosa 6-fosfato en Chasmagnatus granulata" (1994). Alvarez, Vivian Alejandra. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se conocen varios sistemas de dirección de proteínas desde su lugar de síntesis hacia donde cumplen su función. Entre los mejor estudiados está el que permite que las enzimas lisosomales recién sintetizadas alcancen su destino final dentro de la célula: los lisosomas. Las células de mamíferos utilizan para la localización de las hidrolasas ácidas principalmente el marcador manosa 6-P . Este sistema de transporte se basa de cuatro componentes :a) un dominio proteico específico común presente en todas las enzimas lisosomales que lo utilizan ; b) la enzima clave UDP-N-acetilglucosamina: enzima lisosomal-N-acetilglucosamina-1-fosfotransferasa (GlcNAc-fosfotransferasa) que reconoce dicho dominio y transfiere N-acetilglucosamina a determinadas manosas sobre los oligosacáridos de alta manosa de los aceptores ; c) una N-acetilglucosamina-1-fosfodiester α-N-acetilglucosaminidasa (GlcNAc-fosfodiesterasa), que hidroliza la N-acetilglucosamina generando el marcador manosa 6-P ; y d) receptores de manosa 6-P que median el transporte de las hidrolasas ácidas hacia los lisosomas. Las membranas de dos eucariotas unicelulares , la Acanthamoeba castellanii y Dytiostellium discoideum tienen una actividad enzimática capaz de transferir N-acetilglucosamina 1-fosfato a partir de UDP-N-acetilglucosamina a residuos de manosa sobre oligosacáridos de alta manosa . La ausencia de la segunda enzima de este camino metabólico y de un receptor capaz de reconocer el marcador manosa 6-P, sugiere que la GlcNAc-fosfotransferasa sirve en estos organismos para una diferente función celular. No se ha detectado en el protozoo Trypanosoma cruzi actividad de GlcNAc-fosfotransferasa, ni se han encontrado residuos de fosfato sobre los oligosacáridos de alta manosa de glicoproteínas totales o de una enzima lisosomal purificada. En plantas y levaduras las hidrolasas ácidas están en las vacuolas, equivalentes morfológicos y funcionales de los lisosomas de mamíferos . Las evidencias indican que en estos sistemas la señal para la localización de las hidrolasas ácidas en dichas organelas es independiente del marcador manosa 6-P y que la misma está codificada dentro de la secuencia aminoacídica primaria de las proteínas allí destinadas. Está bien establecida la existencia de lisosomas en los invertebrados, pero hasta el momento no había datos bibliográficos acerca del transporte de las enzimas lisosomales hacia esas organelas. En invertebrados se había informado de la presencia de fosfato hidrolizable por endo-N-acetilglucosaminidasa H en la vitelogenina de la larva de la mariposa del tabaco, Manduca sexta, marcada con . También se había encontrado manosa 6-P en hidrolizados de vitelina aislada de los oocitos de la vinchuca venezolana, Rhodnius prolixus, luego de alimentar los insectos con sangre conteniendo . Chao y Raikhel encontraron que el cDNA de una proteasa aspártica ácida (lisosomal) del mosquito Aedes aegypti tiene una secuencia homóloga a la que en la catepsina D, enzima lisosomal de mamíferos, está implicada en la formación del dominio protéico para el reconocimiento por la GlcNAc-fosfotransferasa y la formación de manosa 6-P. Recientemente Guillén y colaboradores (1993) informaron por primera vez de la presencia de una actividad de GlcNAc-fosfotransferasa, primera enzima de la vía metabólica en la formación del marcador manosa 6-P, en las membranas de un díptero, la mosca mediterranea de la fruta, Ceratitis capitata La GlcNAc-fosfotransferasa de Ceratitis capitata presenta propiedades cataliticas similares a las de la enzima de mamíferos . Esta enzima transfiere N-acetilglucosamina 1-fosfato a manosas presentes en los oligosacáridos de alta manosa tanto de glicoproteínas endógenas como de la uteroferrina, una enzima lisosomal de mamíferos. Además al igual que la GlcNAc-fosfotransferasa de mamíferos es capaz de discriminar entre enzimas lisosomales y las que no lo son pero que poseen idénticos oligosacáridos de alta manosa La GlcNAc-fosfotransferasa de Acanthamoeba castellanii también fosforila mejor enzimas lisosomales que glicoproteínas no lisosomales, sin embargo no existe en estos organismos direccionamiento de hidrolasas ácidas a través del marcador manosa 6-P. Por lo tanto, la existencia de la GlcNAc-fosfotransferasa específica en Ceratitis capitata no indicaba necesariamente que estuviera toda la vía. Para estudiar la presencia del sistema de translocación de enzimas lisosomales que utiliza el marcador manosa 6-P en invertebrados se utilizó como modelo experimental un crustáceo, el cangrejo de estuario Chasmagnatus granulata. El hepatopáncreas de Chasmagnatus granalata se utilizó como fuente de hidrolasas ácidas. Se purificó a homogeneidad una de ellas, la α-L-fucosidasa. Sobre los oligosacáridos de alta manosa de glicoproteínas solubles totales y en particular sobre los de la α-L-fucosidasa, se determinó la presencia de manosa-P. También sobre los oligosacáridos de alta manosa de glicoproteínas totales se encontró N-acetilglucosamina unida externamente a los mismos través del C1, ya que pudo ser removida por un tratamiento de hidrólisis ácida suave. En las membranas del hepatopáncreas se encontraron además actividades de GlcNAc-fosfotransferasa y GlcNAc-fosfodiesterasa, primera y segunda enzima de la vía que utiliza el marcador manosa 6-P y una posible molécula receptora para la fosfomanosa. UDP-N-acetilglucosamina: enzima lisosomal-N-acetilglucosamina-1-fosfotransferasa (GlcNAc-fosfotransferasa). La actividad de GlcNAc-fosfotransferasa de Chasmagnatus granulata es capaz de transferir in vitro N-acetilglucosamina 1-fosfato a α-metilmanósido. El producto que se forma a partir de esta reacción es GlcNAc-(α1,6) P-(α 1-metilmanósido), similar al descripto para otras GlcNAc-fosfotransferasas . La actividad específica de la GlcNAc-fosfotransferasa de Chasmagnatus granalata está entre las más bajas descriptas hasta el momento. Esta enzima, al igual que la de mamíferos y la de Ceratitis capitata , fosforila mejor enzimas lisosomales que glicoproteínas no lisosomales. La GlcNAc-fosfotransferasa de Chasmagnatus granulata tiene requerimientos de pH y de catiomes similares a los informados para las enzimas de mamíferos y de Ceratitis capitata . N-acetilglucosamina-1-fosfodiester α-N-acetilglucosaminidasa (GlcNAc-fosfodiesterasa) Hasta este momento no se había descripto una actividad de GlcNAc-fosfodiesterasa en organismos distintos de los vertebrados. La GlcNAc-fosfodiesterasa de Chasmagnatus granulata es capaz de liberar GlcNAc a partir de GlcNAc-(α 1,6) P-(α 1-metilmanósido). Esta enzima, al igual que su contraparte de mamíferos es una enzima integral de membrana, y su actividad no requiere de la presencia de cationes divalentes. Receptores para manosa 6-fosfato En las membranas del hepatopáncreas se encontraron dos proteínas de pesos moleculares aproximados de 215.000-220.000 Da y 205.000 Da capaces de unirse a una columna de afinidad preparada a partir de fosfomanano de levadura unido a Sepharosa 4-B y eluirse especificamente con manosa 6-P. Estas proteínas fueron reconocidas por antisueros preparados contra los receptores para manosa 6-P de 275.000-300.000 Da ( Man-6-P/IGF-II) y de 46.000 Da (CD-MPR)de mamíferos . Dichas proteínas serían las responsables de unir los residuos de fosfomanosa presentes sobre los oligosacáridos de las hidrolasas ácidas de Chasmagnatus granulata. Por lo tanto, en este trabajo de tesis se demostró por primera vez que el camino que usa el marcador manosa 6-P para la translocación de enzimas lisosomales, tal como se Io describió inicialmente en mamíferos, está presente también en invertebrados.

"Epidemiología molecular de HIV, HBV, HCV y HTLV-1/2 en población de trabajadores sexuales hombres y trans (travestis, transexuales o transgénero) de Argentina" (2011). dos Ramos Farias, María Sol. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo general de esta tesis fue aportar conocimiento sobre las infecciones de transmisión sexual (ITS) en poblaciones de alta vulnerabilidad y en las que la información era casi inexistente como son los hombres trabajadores sexuales (HTS) y trans (travestis, transexuales o transgénero, hombre a mujer) trabajadoras sexuales (TTS). La incidencia de HIV fue mayor en TTS que en HTS (10,7 y 2,3 por 100 personas-año, respectivamente). Las TTS (N= 273) mostraron una prevalencia significativamente mayor que los HTS (N= 114) de HIV (34,1 vs. 11,4%), HBV (40,2 vs. 22,0%) y Treponema pallidum (50,4 vs. 20,4%). Las prevalencias de HCV y HTLV-1/2 no fueron significativamente diferentes entre TTS y HTS (HCV: 4,5 y 6,1%; HTLV-1/2: 1,8 y 1,0%, respectivamente). Las variantes de HIV más frecuentes fueron el subtipo B y la recombinante BF. En el caso de HBV, se detectó una muestra de genotipo F, dos muestras de genotipo A y una de genotipo C. Respecto al HCV, se detectaron cinco muestras con genotipo 1, tres con genotipo 3 y tres con genotipo 4. Además, en un grupo de TTS fue posible determinar la prevalencia de HPV y Chlamydia trachomatis y sus variantes. Las TTS resultaron positivas para HPV en 111/114 casos y para C. trachomatis en 5/113 casos. Los genotipos más frecuentes de HPV fueron el 16, 42, 81 y 58 (el primero y el último de alto riesgo oncogénico). En las muestras positivas para C. trachomatis se detectaron dos con genotipo D, una con genotipo E y una con genotipo L2 correspondiente a linfogranuloma venéreo. La alta prevalencia de ITS y la alta incidencia de HIV demuestran la gran vulnerabilidad de estas poblaciones e indican la urgente necesidad de implementar estrategias preventivas y de facilitar el acceso a programas de salud para las mismas

Abstract:
The general objective of this thesis was to generate knowledge on sexually transmitted infections among highly vulnerable groups which information is scarce, namely male sex workers (MSW) and male-to-female trans sex workers (TSW). HIV incidence among TSW was higher than MSW (10.7 and 2.3 per 100 person-years respectively). TSW (N= 273) showed a significantly higher prevalence of HIV (34.1 vs. 11.4%), HBV (40.2 vs. 22.0%) and Treponema pallidum (50.4 vs. 20.4%) than MSW (N= 114). HCV and HTLV-1/2 prevalence was not significantly different among TSW and MSW (HCV: 4.5 and 6.1%; HTLV-1/2: 1.8 and 1.0% respectively). The most frequently found HIV variants were subtype B and BF recombinant. Regarding HBV, one genotype F was detected as well as two genotype A samples and one genotype C. HCV detected types were one genotype 1, three genotype 3 and three genotype 4. Besides, it was possible to determine HPV and Chlamydia trachomatis prevalence and variants in one group of TSW. TSW tested positive for HPV in 111/114 cases and for C. trachomatis in 5/113 cases. The most frequent HPV genotypes were 16, 42, 81 y 58 (the first and the last corresponding to high risk or oncogenic types). Among C. trachomatis positive samples two genotypes D, one genotype E and one genotype L2 (Lymphogranuloma venereum type) were detected. The high prevalence of STIs and the high incidence of HIV demonstrate the great vulnerability of these high risk populations and indicate the urgent need for preventive strategies on intervention and facilitation of access to healthcare programs.

"Epidemiología molecular de los virus influenza humanos circulantes en la Argentina en el período 1995-2002" (2003). Pontoriero, Andrea. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se realizó un estudio de aislamiento de virus (virus respiratorios sincicial, adenovirus, parainfluenza, influenza A y B) causantes de infecciones respiratorias, en muestras de pacientes menores de cinco años internados por infección respiratoria aguda baja, entre los años l995 a l999. Se pudo demostrar que alrededor del 6% de los casos son debidos al virus influenza. Para ese mismo período las curvas de mortalidad por influenza y neumonía muestran que los grupos de riesgo de la población son los menores de cuatro años y los mayores de 65, siendo muy importante la mortalidad por esta causa para los mayores de 75 años. El análisis de los datos recolectados por el SINAVE durante el período l995-1999 permitieron correlacionar los máximos de aislamientos positivos de virus influenza con los picos de morbilidad por síndrome tipo influenza notificados para toda la población. El análisis antigénico y genómico de aislamientos de virus Influenza humano provenientes de distintas localidades de la República Argentina durante el periodo l995- 2002 permitió establecer que las cepas circulantes de virus influenza A (H3N2) se relacionaron en forma cercana antigénicamente con las correspondientes cepas vacunales sólo a partir del año l999, mientras que las cepas HlNl se relacionaron con las componentes vacunales durante los años l998, 2000, 2001 y el 2002. Las cepas de influenza B no se relacionaron con las vacunales en los años l995, 2002 y lo hicieron parcialmente en el 2001. En la mayoría de los años estudiados hubo co-circulación de cepas de influenza A (HlNl), (H3N2) e influenza B. El análisis de la epidemiología del virus influenza en la Argentina permite concluir que el patrón epidemiológico es similar a lo que ocurre en el resto de los países del mundo desconociendo por el momento si nuestras aves también actúan como reservorios del virus así como el papel de los cerdos y otros mamíferos en el ciclo de vida de estos virus. Este estudio demuestra también que una situación similar ocurre en los países del Cono Sur, especialmente para la cepas de virus influenza A.

"Epidemiología molecular del virus de la Fiebre Aftosa serotipo C" (1995). Feigelstock, Dino Ariel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Epidemiología molecular del virus linfotrópico T-humano tipo 1 (HTLV-1) en Argentina: análisis étnico-geográfico y variabilidad viral" (2011). Eirin, María Emilia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo principal de esta tesis fue profundizar los conocimientos sobre la infección por HTLV-1 en Argentina. Con tal fin, se estimó la prevalencia de infección en comunidades originarias de las provincias de Jujuy, San Juan, Misiones, Formosa y Chaco, detectándose una prevalencia en Kollas de 9.8% que confirmó un área naturalmente endémica en Jujuy con una restricción étnico-geográfica ya descripta. El análisis filogenético determinó que las secuencias HTLV-1, tanto de Jujuy como de Buenos Aires, eran subtipo Cosmopolita subgrupo Transcontinental (aA) a excepción de dos, cuyas muestras provenían de individuos residentes de Buenos Aires nacidos en Perú (Neu2 y Neu6) que fueron clasificados en un nuevo subgrupo denominado F. Por otro lado, se detectaron 4 secuencias evolutivamente relacionadas con referencias de Sudáfrica, demostrando la circulación de cepas virales de origen africano en Buenos Aires. Al estudiar el origen étnico de los individuos HTLV-1 positivos, se evidenció la presencia de un componente autóctono predominante, detectándose los cuatro haplogrupos panamericanos (A2, B2, C1, D1) en los Kollas y en el 73% de los residentes de Buenos Aires. En el resto se identificaron haplogrupos alóctonos con un 17,9% de origen Euroasiático Occidental (H, J, T, U, N1b), un 4,5% de origen Africano (L0 y L1) y un 1,5% de origen Asiático Oriental (M7a). Las cepas clasificadas filogenéticamente como de origen africano pertenecieron a individuos con haplogrupo B2 amerindio, mientras que una secuencia de Buenos Aires que agrupó junto a las de Jujuy provenía de un donante con haplogrupo de origen africano. Estos datos sugieren el contacto entre estas poblaciones y sustenta la hipótesis de introducción de la infección con la llegada de esclavos africanos en la época pos-colombina. El análisis in sílico de las secuencias LTR reveló una menor variabilidad en individuos asintomáticos en comparación con pacientes con HAM/TSP y ATL(p menor 0,05), mientras que la variabilidad de la proteína viral Tax fue significativamente menor en secuencias de portadores de Jujuy que en individuos asintomáticos o con enfermedad de Buenos Aires. De todos modos, no se detectó un polimorfismo determinado asociado con la presencia de patología.

Abstract:
The aim of this thesis was to gain an in-depth knowledge of HTLV-1 infection in Argentina. In order to achieve this, HTLV-1 prevalence was estimated in aboriginal populations of Jujuy, San Juan, Misiones, Formosa and Chaco provinces, yielding a 9.8% among Kollas and confirming a naturally endemic area in Jujuy, associated to an ethnic-geographic restriction as previously described. The phylogenetic analysis determined that HTLV-1 sequences, both from Jujuy and Buenos Aires, were Cosmopolitan subtype Transcontinental (aA) subgroup with the exception of two sequences belonging to residents of Buenos Aires city but born in Peru (Neu2 y Neu6) who were classified in a new subgroup named F. On the other hand, 4 sequences evolutionally related to South Africa were detected, demonstrating the presence of viral strains with African origin in Buenos Aires city. Regarding the ethnic origin of all HTLV-1 positive individuals, the presence of a predominant autochthonous component (Pan-American haplogroups A2, B2, C1, D1) was detected, being all four present in Kollas and in 73% of Buenos Aires inhabitants. In the other populations alloctonous haplogroups were identified with a 17,9% Occidental Eurasian origin (H, J, T, U, N1b), a 4,5% African origin (L0 y L1) and a 1,5% de Oriental Asian origin (M7a). The strains phylogenetically classified as African belonged to individuals with Amerindian B2 haplogroup, while a sequence from Buenos Aires which grouped together with sequences from Jujuy belonged to a blood donor with an African origin haplogroup. This data suggests contact between these populations and sustains the hypothesis of the introduction of HTLV-1 infection with the arrival of African slaves in the post-Columbian era. The analysis in sílico of LTR sequences revealed a lower variability in asymptomatic individuals compared to HAM/TSP and ATL patients (p < 0,05), while the variability of Tax viral protein was significantly lower in asymptomatic individuals from Jujuy compared to asymptomatic or HAM/TSP and ATL patients from Buenos Aires. Regardless this situation, not a specific polymorphism was detected in association to the presence of pathologies.

"Epidemiología molecular y caracterización genética del hantvirus Andes causante de síndrome pulmonar en Argentina" (2003). Edelstein, Alexis. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
A partir de una zoonosis emergente en el año 1995, se determinó la presencia de un hantavirus asociado al sindrome pulmonar en la Argentina, desconociéndose la magnitud del problema. Este trabajo tiene como objetivo aportar al conocimiento de la infección por hantavirus, su replicación, transmisibilidad ecoepidemiología y caracterización de virus circulantes. El estudio de la caracterización viral de las muestras humanas provenientes de distintas regiones geográficas determinó la existencia de 3 regiones endémicas asociadas a hantavirosis responsables del SPH en nuestro país: La región Norte (Salta y Jujuy) donde se estableció la existencia del linaje viral AND Nort., la región Sur (Rio Negro, Chubut y Neuquén) donde circula el linaje AND Sout,. y la región Central (Provincia de Buenos Aires) donde se detectaron los linajes AND Cent. Lec, AND Cent Plata y AND Cent Bs.As Los distintos análisis filogenéticos realizados sobre las secuencias nucleotídicas de los segmentos genómicos S y M mostraron claramente la evolución monofilética de los hantavirus. En esta evolución, el antecesor del virus Andes sería el virus Laguna Negra. Este análisis filogenético es apoyado por el aparente desplazamiento migratorio realizado por los Sigmodontinos desde América del Norte hasta el extremo sur del continente. Dentro del grupo Andes, la divergencia evolutiva no resultó tan clara, probablemente debido a que este grupo monofilético es de reciente radiación. Se obtuvo por primera vez la secuencia completa del virus Andes amplificándose y secuenciándose los segmentos S y M correspondientes al genoma viral y una porción del segmento L. Del análisis de dicho genoma se identificó al virus Andes como una nueva especie viral. Se determinó además para los 3 segmentos virales, la composición nucleotídica no putativa de sus extremos, responsables de la estabilidad del ARN viral y asociados además a su replicación /trascripción. A diferencia del segmento S, los segmentos M y L presentaron deleciones en ambos extremos posiblemente asociadas a la regulación de la persistencia viral. El análisis del brote ocurrido en El Bolsón en el año 1996, demostró por primera vez en el mundo, la existencia de un hantavirus capaz de transmitirse a través de contacto interhumano. Esta vía de contagio representó un evento único entre los hantavirus del grupo renal y pulmonar, solamente asociada hasta el momento al linaje Andes Sout. Con el objeto de determinar las posibles alteraciones genéticas asociadas a la vía de contagio interhumano hallada en Andes Sout, se amplificaron y secuenciaron en forma completa los segmentos S y M de un hantavirus perteneciente al linaje Andes Cent Plata, hasta el momento no asociado a contagio interhumano. La comparación de los segmentos S y M de las cepa transmisora y no transmisora no presentó diferencias estructurales significativas. La transmisión interhumana no parecería ser dependiente de la cepa viral requiriéndose la evaluación de factores alternativos como la carga viral o la respuesta inmune dependiente del huésped. Los hallazgos del presente trabajo de tesis aportaron las bases para el estudio de los mecanismos que influyen en la interrelación genética-viral y los aspectos biológicos tales como factores ambientales y ecológicos, cuyos efectos provocan alteraciones demográficas en huéspedes infectados y susceptibles, que conducen a la emergencia de enfermedades zoonóticas humanas.

Abstract:
From an emergent zoonosis in 1995, it was determined the presence of hantavirus associated to the pulmonary syndrome in Argentina, not knowing the magnitude of the problem. This work takes as target to reach to the knowledge of the infection with hantavirus, its replication, contagiousness, ecoepidemiology and characterization of circulating viruses. Viral characterization of human samples from different geographic regions determined the existence of 3 endemic regions associated to hantavirus illness responsible for the hantavirus pulmonary syndrome in our country: north region (Salta and Jujuy) where settled down the existence of viral lineage AND Nort., south region (Rio Negro, Chubut and Neuquén) where circulates lineage AND Sout. and central region (Province of Buenos Aires) where cocirculate lineages AND Cent. Lec, AND Cent Plata and AND Cent Bs.As. The different phylogenetic analyses realized on the sequences of the genomic segments S and M clearly showed a monophyletic evolution of the hantavirus. In this evolution, the predecessor of the virus Andes would be the virus Laguna Negra. This phylogenetic analysis is supported by the apparent migratory displacement realized by the sigmodontines from North America up to the south end of the continent. Inside the group Andes, the evolutionary difference did not turn out to be so clear, probably due to the fact that this monophyletic group is of recent radiation. The complete sequence of Andes virus was obtained for the first time through complete S and M segments amplification corresponding to the viral genome and a portion of segment L. The analysis of this genome identified Andes virus as a new viral species. It was determined in addition for the 3 viral segments, the non putative nucleotidic extremes sequences, which are responsible of RNA viral stability and associated in addition to its replication/trascription. Unlike S segment, segments M and L displayed deletions in both extremes possibly associated to the regulation of viral persistence. Analysis of the outbreak happened in El Bolsón in the year 1996, demonstrated for the first time in the world, the existence of a hantavirus capable of being transmitted across interhuman contact. This route of contagion represented a unique event between hantaviruses of renal and pulmonary group, only associated up to the moment with the lineage Andes Sout. In order to determine the possible genetic alterations associated with the route of interhuman infection found in Andes Sout, the complete S and M segments of a hantavirus belonging to the lineage Andes Cent Plata, not associated to interhuman infection until the moment, were amplified and sequenced. The comparison of segments S and M of the transmitting and nontransmitting lineages did not display significant structural differences. The interhuman transmission would not seem to be dependent of the viral lineage requiring the evaluation of alternative factors like viral load or immune response dependent of the guest. The findings of the present thesis work contributed the bases for the study of the mechanisms that influence in the genetic-viral interrelation and the biological aspects such as environmental and ecological factors, whose effects cause demographic alterations in infected and susceptible guests, who lead to the emergency of human zoonotic diseases.

"Epidemiología molecular y genómica comparativa de Leptospira spp. en Argentina" (2015-03-30). Varni, Vanina Delia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La leptospirosis es una enfermedad infecciosa causada por bacterias del género Leptospira y constituye una zoonosis de amplia distribución mundial. La enfermedad puede ser contraída a través del contacto con ambientes contaminados con orina de animales infectados, donde la principal vía de transmisión es el agua. Los brotes de leptospirosis en Argentina están asociados a cambios climáticos y en particular a inundaciones. A pesar de ello, en nuestro país existe escasa información de la situación epidemiológica actual de la enfermedad, principalmente debido a la subnotificación de casos y a su persistencia de tipo endémico en los animales. En los últimos años se han reforzado los análisis tendientes al conocimiento epidemiológico de esta enfermedad. En el campo de la epidemiología molecular, se desarrollaron distintos enfoques basados en PCR para la identificación y tipificación de aislamientos de Leptospira, siendo las más utilizadas: MLVA (análisis de VNTRs en múltiples loci) y MLST (tipificación por secuenciación de múltiples loci). Ambas tecnologías se basan en la amplificación por PCR, con la diferencia de que en el primer caso se trata de elementos de tipo minisatélite (unidades repetitivas en un rango de 8 a 100 pares de bases) y en el segundo caso los blancos de amplificación constituyen fragmentos de genes conservados o housekeeping que son secuenciados para su posterior análisis. Esta última se ha convertido en una técnica líder entre los métodos de tipificación molecular, debido a su alto poder discriminatorio entre distintos aislamientos bacterianos, su fácil aplicación y estandarización, además de la posibilidad de transmitir la información obtenida en distintos laboratorios a través de bases de datos públicas. Asimismo, las secuencias génicas obtenidas son aplicables a estudios poblacionales y epidemiológicos. En este trabajo se evaluaron y desarrollaron los principales métodos para la tipificación de Leptospira; la evaluación y aplicación de las técnicas MLVA y MLST permitieron identificar genotipos circulantes de manera mayoritaria entre aislamientos argentinos, tanto provenientes de animales de producción como en humanos. Se logró generar un nuevo esquema de MLST (7LA) para leptospiras patógenas a partir de la combinación de dos esquemas existentes, optimizando y unificando la metodología de tipificación. Las secuencias génicas generadas en este trabajo se encuentran publicadas en una base de datos disponible en internet (http://pubmlst.org/leptospira/), donde además de acceder a las mismas, puede aplicarse la metodología para la determinación de genotipos a partir de nuevos aislamientos, posibilitando la comparación de cepas a nivel mundial. El nuevo esquema se aplicó no solamente a los aislamientos argentinos, sino que se utilizó en la tipificación in silico a partir de 283 secuencias genómicas de aislamientos y cepas de referencias mundiales que fueron generadas en el marco de un proyecto de secuenciación genómica de este género. Se establecieron 199 genotipos diferentes donde el perfil de MLST denominado ST47 agrupó el 34 % de los aislamientos estudiados, similarmente a lo ocurrido para las muestras argentinas. Como consecuencia de los análisis filogenéticos y de formación de complejos clonales, se logró establecer una correlación entre genotipos y serogrupos al que pertenecen los aislamientos, aportando de esta manera una alternativa complementaria al diagnóstico serológico actual. En este sentido, se logró también la generación de un esquema de MLST reducido utilizando tan sólo tres de los siete marcadores del esquema 7LA. El esquema reducido (3LA) permitió la tipificación molecular directamente a partir de muestras clínicas, sin necesidad de contar con el aislamiento, que muchas veces es sumamente difícil de lograr debido a las características propias de esta bacteria. Este trabajo permitió entonces profundizar en el conocimiento de la variabilidad genética del género Leptospira y así generar información epidemiológica adecuada que pueda ser utilizada en programas de control y métodos de diagnóstico de esta enfermedad, constituyendo el primer trabajo en su tipo realizado en nuestro país. PALABRAS CLAVE: Leptospira, epidemiología, Multilocus Sequence Typing, serogrupos, genotipos, diversidad genética.

Abstract:
Leptospirosis is an infectious disease caused by bacteria of the genus Leptospira, and constitutes a zoonosis of worldwide distribution. The water becomes the main route of transmission when it is contaminated by the urine of infected animals. The outbreaks of leptospirosis in Argentina are associated to climate changes and particularly to the occurrence of floods. However, there is little information on the current epidemiological situation of the disease in our country, mainly due to underreported cases and the persistence of endemicity in animals. Recently, epidemiological analyses have strengthened the understanding of this disease. In the field of molecular epidemiology, PCR-based approaches for the identification and typing of isolates of Leptospira have been developed. Currently, the most frequently used approaches are MLVA (Multiple Locus VNTRs Analysis) and MLST (Multilocus Sequence Typing). Both technologies are based on PCR amplification. However, for MLVA the amplification targets are minisatellite elements (repeats in a range of 8 to 100 base pairs), whereas MLST targets fragments of housekeeping genes that are sequenced for further analysis. MLST has become a leading technique among the molecular typing methods, because of its high discriminatory power between different bacterial isolates, easy application and standardization, plus the ability to share information obtained in different laboratories through public databases. Besides, the gene sequences generated by this method area applicable to population and epidemiological studies. In this work, we evaluated and developed the main methods for typing Leptospira. The implementation of MLVA and MLST techniques led to the identification of major genotypes circulating among Argentine isolates from both livestock and humans. A new MLST scheme (7LA) was generated for pathogenic leptospires by optimizing and unifying two pre-existing MLST strategies. The gene sequences generated through this work have been published in a database available online (http://pubmlst.org/leptospira/). The methodology can also be applied for the genotyping of new isolates, enabling the comparison of genotypes worldwide. In addition, the new scheme was applied not only to Argentine isolates, but was used in silico for the characterization of 283 genomic sequences of isolates and strains of global distribution, which were generated as part of a genome sequencing project dedicated to this genus. A total of 199 different genotypes were established, and the MLST allelic profile named ST47 grouped 34% of the studied isolates, in agreement with the previous studies on Argentine samples. As a result of the phylogenetic and clonal complexes analyses, we could establish a correlation between genotypes and serogroups, thus providing a complementary alternative to the current serological diagnosis. In this regard, the generation of a reduced MLST scheme was also achieved, by selecting only three of the seven markers from the 7LA scheme. The reduced MLST scheme (3LA) was applied to the molecular typing from clinical sample without the need of isolation, which is often difficult to achieve because of the particular characteristics of this bacterium. In summary, this work allowed us to deepen the understanding of the genetic variability of the genus Leptospira, thus contributing with suitable epidemiologic information useful to apply in the design of control strategies and also diagnostic methods for this illness. Thus, this study constitutes the first work of its kind conducted in our country. KEYWORDS: Leptospira, epidemiology, Multilocus Sequence Typing, serogroups, genotypes, genetic diversity.

"Equilibrio hidromineral de larvas de Bufo arenarum : respuestas compensatorias al "stress" osmótico y al cadmio" (1995). Ferrari, Lucrecia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las larvas de anfibios se enfrentan con un medio hipotónico en relación a sus fluidos corporales, viviendo en contacto con cuerpos de agua temporales muchas veces cambiantes en su concentración y composición. Por ello los mecanismos para responder al «stress» osmótico son importantes para su sobrevivencia y comprenden la regulación acoplada del intercambio de agua y de solutos. Nuestros objetivos fueron: 1) determinar la capacidad de sobrevivenciade la larvas de Bufo arenarum en medios de osmolaridades diferentes a la de su ambiente natural; 2) cuantificar la respuesta de los animales al «stress» osmótico; 3) predecir dicha respuesta mediante la confección de modelos de regresión múltiple para cada parámetro analizado; 4) evaluar la respuesta a «stress» osmótico en medio contaminado por cadmio y analizar sus efectos. Para evaluar la sobrevivencia de las larvas en medios de osmolaridades superiores a las de su ambiente natural, se determinó la Osmolaridad Letal madia (OLSO) de manitol y ClNa. No se hallaron diferencias en la supervivencia ni por composición química ni por «stress» de densidad, estableciéndose la OLSO 144hs en 220 mOsm y 0150 48 hs a 279 mOsm. Con la finalidad de cuantificar la respuesta al «stress» osmótico, las larvas se expusieron en forma aguda y con aclimatación a soluciones de diferente osmolaridad y composición quimica (desde 0 a 271 mOsm) y en forma prolongada a soluciones de agua dulce artificial concentrada y a agua destilada. La respuesta de los animales se evaluó utilizando MANOVA, análisis discriminante múltiple y regresiones múltiples. Independientemente de la composición quimica del medio de incubación, las larvas no fueron capaces de osmorregular por encima de 200 mOsm. Este resultado no se modificó con aclimatación previa. En todos los casos la respuesta de las larvas es de deshidratación gradual. Se comprobó que los estadios jóvenes de desarrollo de Bufo arenarum son capaces de sobrevivir durante aproximadamente un mes en agua destilada y en medio salino de 30 mOsm sin indicios de alteraciones en su equilibrio hídrico. Analizando en forma integrada, la respuesta fisiológica de los animales a diferentes osmolaridades, el peso seco surge como principal parámetro de la función discriminante, en la mayor parte de los casos, hecho que se manifiesta cuando el medio de incubación es superiores a 200 mOsm. Se evaluó mortalidad por Cd en larvas jóvenes y prometamórficas (C150) a dos temperaturas de ensayo. Se estableció para larvas jóvenes, tanto a 20 como a 25°C un intervalo de CLSO (de 24 a 96 hs de exposición) entre 3.5 y 2 ppm y para larvas prometamórficas entre 5 y 3 ppm a 20°C y entre 10 y 6 ppm a 25°C. Se comprobó un efecto protector de la temperatura sobre la intoxicación por cadmio en larvas prometamórficas. Se verificó que la presencia de Cd en concentración subletal (1 ppm) en medios de incubación de diferente composición química no modifica la respuesta de las larvas al «stress» osmótico ni altera la sobrevida. Sin embargo en medios carentes de iones se produce un 100% de mortalidad en pocas horas, independientemente de la osmolaridad del medio. Se concluye que existe un efecto protector de los iones sobre la toxicidad por cadmio. Se comprobó que la mortalidad en medio aiónico en presencia de concentración subletal de Cd se halla asociada a importantes alteraciones de la estructura epidérmica semejante a las encontradas en larvas expuestas a concentraciones letales de Cd en medio iónico. Se efectuaron determinaciones referidas a la incorporación de Cd desde diferentes soluciones.

"Eriptosis. Mecanismos involucrados y efecto protector de la eritropoyetina" (2012). Vota, Daiana Marina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los procesos inflamatorios, frecuentemente asociados a anemia de enfermedades crónicas, podrían cumplir un rol en la inhibición de la eritropoyesis. La existencia de señales intracelulares comunes entre los procesos que regulan la eritropoyesis y la respuesta inflamatoria sugiere que la desregulación de un sistema podría explicar la disminución de la función del otro. Por otro lado, un daño directo sobre los eritrocitos maduros en circulación, causado por factores presentes en dichos procesos, podría contribuir también al desarrollo de anemia. Teniendo en cuenta que la identificación de factores que pueden afectar la sensibilidad de células eritroides a las diferentes señales recibidas permitiría conocer la interferencia de la inflamación en la eritropoyesis, se planteó como primer objetivo, dilucidar la interrelación entre diferenciación eritroide y apoptosis. Se observó una mayor sensibilidad de la línea eritroleucémica humana K562 a la acción proapoptótica de citoquinas proinflamatorias, como TNF-α e IL-1β, cuando las células se encontraban en etapa de diferenciación eritroide. El estudio de los mecanismos involucrados permitió sugerir, por primera vez, una posible explicación del efecto de TNF-α e IL-1β basada en la disminución de los niveles de la proteína antiapoptótica c-FLIP observada durante la diferenciación con hemina. Más aún, el tratamiento previo con el factor de crecimiento eritropoyetina (Epo) de las células inducidas a diferenciación eritroide las protegió de la acción proapoptótica a la vez que se detectó la modulación positiva de c-FLIP. La Epo contrarrestaría los cambios en las vías de señalización producidos durante el proceso de diferenciación eritroide permitiendo a las células mantener su resistencia a la apoptosis mediada por citoquinas proinflamatorias. Bajo ciertas circunstancias, eritrocitos maduros pueden sufrir autodestrucción prematura presentando alteraciones celulares similares a las de la apoptosis de una célula nucleada, razón por la que se denominó a este proceso eriptosis. Además de citoquinas, durante los procesos inflamatorios es frecuente encontrar incrementados los niveles de compuestos prooxidantes. Por ello, a continuación se enfocó el trabajo hacia la evaluación de un posible efecto directo de estos agentes sobre eritrocitos maduros. Se estudió el desarrollo de signos de eriptosis en los eritrocitos expuestos a citoquinas proinflamatorias (TNF-α, IL-1β e IFN-γ) y a agentes prooxidantes (NaNO2 y H2O2). Se encontró que éstos pero no las citoquinas indujeron traslocación de fosfatidilserina (PS) en la membrana del eritrocito. Para investigar los posibles mecanismos involucrados en la autodestrucción prematura de los eritrocitos, se analizaron cambios morfológicos y bioquímicos en el glóbulo rojo expuesto a dos condiciones: aumento masivo de calcio intracelular y exposición celular a NaNO2 y H2O2. Además de la externalización de PS, los eritrocitos bajo ambos tratamientos mostraron un incremento del nivel intracelular de calcio, ambas características típicas del desarrollo de eriptosis. Sólo en el modelo de estrés oxidativo se observó, además, el incremento de especies reactivas de oxígeno (ROS) y la disminución de glutation (GSH). La activación de la proteína PI3K parecería ser relevante en la eriptosis inducida por ambos modelos mientras que la activación de la fosfatasa PTP1B estaría favorecida en el modelo de sobrecarga de calcio. Las modificaciones de proteínas de membrana y los cambios en la morfología celular fueron también signos diferenciales entre ambos tratamientos. La Epo fue capaz de disminuir significativamente la inducción de la alteración en el estado redox celular por NaNO2 y H2O2. En cambio, no fue capaz de inhibir la traslocación de PS en el modelo de incremento de calcio. Las diferencias en los mecanismos involucrados en los dos modelos estudiados podrían explicar la acción diferencial de Epo sobre los eritrocitos inducidos a eriptosis por los diferentes agentes. En base a los resultados obtenidos y a otros trabajos realizados previamente en nuestro laboratorio, se decidió, en el siguiente paso, investigar si compuestos de aluminio pueden actuar como factores proeriptóticos. Experiencias in vivo e in vitro permitieron asociar la sobrecarga de aluminio con anemia. En este trabajo, se estudiaron mecanismos de acción del metal, utilizando un modelo de eritrocitos humanos sometidos a tratamiento prolongado in vitro con cloruro de aluminio. La aparición de eritrocitos con morfología anormal sugirió una interacción del metal con la superficie celular, sustentado por el hallazgo de elevada concentración de Al en la membrana celular. Se demostró que el Al induce signos de eriptosis, como externalización de PS, aumento de calcio intracelular y degradación de banda 3. El hallazgo de un incremento significativo de ROS en conjunto con una disminución de la concentración de GSH mostró un estado de estrés oxidativo. Un punto interesante es que la acción prooxidante del aluminio fue contrarrestada por la Epo. El hecho de que este resultado fuera similar a la prevención del desbalance óxido-reducción por la acción del antioxidante N-acetilcisteina (NAC), sugiere un rol antioxidante de la Epo. El efecto antieriptótico de la Epo podría contribuir a enriquecer el conocimiento acerca del rol fisiológico de esta hormona sobre células eritroides. Independientemente de cuál sea su mecanismo antioxidante, el efecto de Epo demostrado en este modelo de exposición a aluminio, así como en el modelo de estrés oxidativo, nos permite sugerir potenciales beneficios del tratamiento con la hormona en pacientes con anemia asociada a patologías con un ambiente redox alterado.

Abstract:
The first part of this study focused on the modulation of factors that would affect the sensitivity of erythroid differentiated cells to proinflammatory citokines, such as TNF-α and IL- 1β. The tumor necrosis factor alpha (TNF-α) affects a wide range of biological activities, such as cell proliferation and apoptosis. Cell life or death responses to this cytokine might depend on cell condition. Therefore, it was interesting to study whether erythroid differentiation may affect erythroid progenitors to apoptosis induced by proinflammatory cytokines. Hemin-differentiated K562 cells showed higher sensitivity to TNF-induced apoptosis than undifferentiated cells. At the same time, hemin-induced erythroid differentiation reduced c- FLIP expression. However, this negative effect was prevented by previous treatment with erythropoietin, which allowed the cell line to maintain c-FLIP levels. The results suggest that erythroid differentiation might deregulate the balance between growth promotion and death signals induced by TNF-α, depending on cell type and environmental conditions. The role of c-FLIP seemed to be critical in the protection of erythroid differentiated cells from apoptosis or in the determination of their sensitivity to TNF-mediated programmed cell death. Epo, which for the first time was found to be involved in the prevention of c-FLIP downregulation, proved to have an antiapoptotic effect against the proinflammatory factor. The identification of signals related to cell life/death switching would have significant implications in the control of proliferative diseases, and would contribute to the understanding of mechanisms underlying the anemia associated to inflammatory processes. Proinflammatory factors may not only affect the erythropoiesis process but also cause direct injury upon mature erythrocytes. Eryptosis is a process by which red blood cells can undergo self-destruction sharing several features with apoptosis. Since premature programmed erythrocyte death may be induced by different agents, in this work mechanisms involved in two eryptotic models (oxidative stress and cell calcium overload) were compared. Phosphatidylserine (PS) translocation and increased calcium content were common signs observed in erythrocytes exposed to sodium nitrite plus hydrogen peroxide or calcium ionophore A23187, while increased reactive oxygen species (ROS) and decreased reduced gluthation (GSH) levels were detected in the oxidative model. Protein kinase activation seemed to be an outstanding feature in eryptosis induced by oxidative stress whereas phosphatase activation was favored in the calcium overload model. Cell morphology and membrane protein alterations were also differential signs between both models. Erythropoietin was able to prevent cell oxidative unbalance, thus blunting PS translocation. However, the hormone favored intracellular calcium influx which could be the reason why it could not completely counteract the induction of eryptosis. Instead, erythropoietin was unable to inhibit PS externalization in the increased calcium model. The different mechanisms involved in the eryptotic models may explain the differential action of erythropoietin upon erythrocytes induced to eryptosis by different agents. Previous works developed in our laboratory suggested that aluminum compounds could be proeryptotic agents. The widespread use of aluminum provides easy exposure of humans to the metal and its accumulation remains a potential problem. In vivo and in vitro assays have associated Al overload with anemia and erythrocyte morphological and biochemical changes. To better understand the mechanisms by which aluminum affects human erythrocytes, these cells were exposed to long-term treatment with the metal using an in vitro model developed in our laboratory that mimic in vivo effects. The appearance of erythrocytes with abnormal shapes suggested metal interaction with cell surface, supported by the fact that high amounts of aluminum were found attached to cell membrane. Long-term incubation of human erythrocytes with Al induced signs of premature erythrocyte death (eryptosis), such as phosphatidylserine externalization, increased intracellular calcium, and band 3 degradation. Signs of oxidative stress, such as significant increase in ROS in parallel with decrease in the amount of GSH, were also observed. Interestingly, Epo protected erythrocytes from the prooxidative action of aluminum. Since this result was similar to that of the antioxidant N-acetylcysteine, it can be suggested an antioxidant ability of Epo. In conclusion, results provide evidence that chronic aluminum exposure may lead to biochemical and morphological alterations similar to those shown in eryptosis induced by oxidant compounds in human erythrocytes. The antieryptotic effect of Epo may contribute to enhance the knowledge of its physiological role on erythroid cells. Irrespective of the mechanism involved in its antioxidant action, this property of Epo shown in this model of aluminum exposure, let us suggest additional benefits of the Epo treatment in patients with anemia associated to altered redox environment.

"Escalas de variación de la diversidad de macrófitas en arroyos de la provincia de Buenos Aires" (2015-08-14). Ranieri, María Constanza. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Esta Tesis propone identificar patrones de variación en la diversidad de macrófitas en relación con la escala espacial, en dos ecorregiones de la provincia de Buenos Aires: la Pampa Ondulada y la Pampa Austral, trabajando en cuatro escalas anidadas: tramo, arroyo, cuenca y ecorregión. El estudio abarcó 52 tramos de arroyos pertenecientes a 5 cuencas de la Pampa Ondulada y 4 cuencas de la Pampa Austral. Se realizaron cuatro campañas de muestreo, dos en invierno y dos en verano entre 2009 y 2011. Durante los muestreos de invierno se registraron variables ambientales y durante los veranos, además, se tomó nota de la cobertura de especies vegetales y se recolectaron ejemplares para su determinación taxonómica y realización de un herbario. Los resultados de esta tesis se dividen en cuatro capítulos, dos donde se describen y analizan las variables ambientales y bióticas (Sección I, Capítulos III y IV) y dos donde se utilizan estos datos en función de los objetivos de la Tesis (Sección II, Capítulos V y VI). Los principales resultados de la Tesis sugieren que: (1) tanto para las variables ambientales como bióticas, existen diferencias significativas tanto inter regional como inter estacional, pero no existen diferencias significativas interanuales, (2) en cuanto al análisis intrarregional, en general, no se observó una separación de las cuencas de cada ecorregión, (3) existe una correlación significativa entre las variables ambientales y la comunidad de plantas según el grupo biológico y no así para la totalidad de la comunidad, (4) la diversidad presente en los arroyos pampeanos es muy elevada, y (5) en general la riqueza aumenta con la escala pero la diversidad y la equitatividad llegan a un máximo, indicando que las comunidades muestreadas son uniformes. Finalmente, en el Capítulo VII se realiza una integración y discusión general de los resultados obtenidos en los capítulos previos. Palabras clave: macrófitas, escalas, diversidad, arroyos, Buenos Aires.

Abstract:
This thesis aims to identify variation patterns in macrophyte diversity in relation to the spatial scale in two ecoregions of Buenos Aires province: Pampa Ondulada and Pampa Austral, at four nested scales: reach, stream, watershed and ecoregion. The study included 52 reaches of streams belonging to five Pampa Ondulada watersheds and 4 Pampa Austral watersheds. Sampling was performed at four field surveys, two at winter and two at summer between 2009 and 2011. Environmental variables were recorded at four field surveys, and during summers also coverage of plant species was recorded, and plants were collected for taxonomic identification and implementation of a herbarium. The results of this thesis were divided into four chapters, two which describes and analyzes the environmental and biotic variables (Section I, Chapters III and IV) and two where these data are used depending on the objectives of the thesis (Section II, chapters V and VI). The main results of this thesis suggest that: (1) for both environmental and biotic variables, there are both interregional and interseasonal significant differences, but no interannual significant differences, (2) with regard to intraregional analysis, in general a separation of the watersheds of each ecoregion was not observed, (3) there is a significant correlation between environmental variables and the community of plants according to the biological group and not for the entire the community, (4) the diversity present in the Pampas streams is very high, and (5) overall, richness increases with the scale but diversity and evenness reach a maximum, indicating that communities sampled were uniform. Finally, in Chapter VII integration and general discussion of the obtained results in previous chapters is performed. Keywords: macrophytes, scales, diversity, streams, Buenos Aires.

"Escalas temporo-espaciales de variabilidad del fitoplancton costero Antártico" (1997). Schloss, Irene R.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo se estudiaron la dinámica del fitoplancton en función de algunos parámetros ecológicos y fisiológicos en un ambiente costero antártico de aguas someras (Caleta Potter, Isla 25 de Mayo, Shetlands del Sur, Antártida). Se presentan resultados obtenidos con diferente resolución temporal y espacial durante 6 campañas (de primavera-verano y anuales). Grandes cantidades de materiales particulados de origen terrígeno afectaron significativamente la penetración de la luz en el agua durante la estación de crecimiento. A esto se sumaron las altas intensidades de los vientos (promedio > 8 ms-1), que caracterizaron todas las temporadas estudiadas. Estos parámetros fueron cuantificados (por primera vez para un ambiente de este tipo) considerando la relación entre la profundidad crítica de Sverdrup Z(c) y la profundidad de desplazamiento vertical de las partículas debida a la energía cinética turbulenta generada por los vientos Z(t). A la extrema estacionalidad del ambiente se sumó la relación desfavorable entre Z(c) y Z(t) (Z(c)/Z(t)<1) durante la mayor parte del período de crecimiento del fitoplancton. Se concluye que durante la temporada en que el sistema se encuentra libre de hielos, las malas condiciones de luz y la inestabilidad generada por los vientos determinaron las bajas concentraciones de microalgas observadas.

Abstract:
The present work investigates phytoplankton growth dynamics as a function of several ecological and physiological parameters in an Antarctic shallow coastal environment: Potter Cove (King George Island, South Shetland Islands). Results are based on data on different temporal and spatial scales obtained during 6 field campaigns (both during the spring-summer season and year-round). High loadings of terrigenous particulated materials significantly influence light penetration in the water column, especially during the growth season, and strong winds (average >8 m s-1) characterize the area at all times of the year. Detailed quantification of these parameteres (the first in its type for these environments) allowed estimates of the relationship between Sverdrup's critical depth (Z(c)) and the depth of vertical transport of particles due to wind-induced turbulent kinetic energy Z(t). Strongly inhibiting relationships between Z(c) and Z(t) (Z(c)/Z(t) < 1 ) were identified during most of the phytoplankton growth season. It is concluded that, during ice-free periods, poor light conditions and wind-induced water column instability are responsible for the low microalgal concentrations observed in Potter Cove.

"Escenarios cosmológicos en expansión acelerada" (2011). Forte, Mónica. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Estudiamos escenarios de expansión acelerada en cosmologías de Bianchi I(BI) y Friedmann-Robertson-Walker (FRW) con distintos componentes. En la métrica de BI encontramos modelos de universos con K esencia que disipaban la anisotropía primordial y modelos que eludían la singularidad inicial. Encontramos soluciones exactas para diversas fuentes y vimos que la K esencia impulsada por un potencial cuadrá́tico inverso y la quintaesencia impulsada por un potencial exponencial compartían la misma geometría. En la métrica de FRW, la K esencia permitió construir modelos que interpolaban entre una era dominada por materia oscura, y una era de expansión acelerada. Introdujimos el N-quintom que generalizaba el quintom construido con quintaesencia y campo fantasma. Estudiamos la dualidad, la estabilidad de las soluciones ley de potencias y obtuvimos la solución general del N-quintom impulsado por un potencial exponencial. Para otros potenciales investigamos modelos en espacios internos bi y tridimensionales. Asociamos una representación escalar a un sistema de dos fluidos interactivos que modificó la ecuación de Friedmann, denominada “quintaesencia exótica”. Ajustamos estadísticamente los par ́metros del modelo exótico, estimamos cuando el universo comenzaba a acelerarse, calculamos su edad, estudiamos las perturbaciones lineales y encontramos la solución general con tres fluidos. Finalmente, analizamos modelos con materia barió́nica conservada y con interacciones del sector oscuro limitadas a cocientes asintóticamente estables de las densidades de energía oscuras.

Abstract:
In this thesis we study cosmological scenarios in the metrics of Bianchi I (BI) and Friedmann-Robertson-Walker (FRW) with different contents. In the BI metric we investigate a universe with K essence and find some models that dissipate the primary anisotropy and others that avoid the initial singularity. We find exact solutions with various sources and find that the K essence driven by an inverse square potential and a quintessence driven by exponential potential share the same geometry. In the FRW metric we see that the K essence allows us to build transient models representing universes that interpolate between a non-accelerated expansion era dominated by dark matter, and a stage of accelerated expansion, dominated by dark energy. Alternatively, we introduce the N-quintom model with an internal structure that generalizes different realizations of quintom based on quintessence and ghost fields. We study the duality and show that the power-law type solutions are stable when the N-quintom is driven by an exponential potential, for which we obtain the general solution. Also, we consider models with other potentials and solve for the two and three-dimensional internal spaces. We present the problem of interacting fluids and define a scalar representation of the interaction called ”exotic quintessence”. This led us to a modified Friedmann equation with which we model a universe with baryonic matter, dark matter and dark energy contents. We made statistical adjustment of the parameters of this exotic model. In addition to this, we calculated the age of the universe and the redshift when it begins to accelerate, and also made a study of linear perturbations. Moreover we exactly solve the modified Einstein equation obtained in the exotic case with three fluids. Finally, we analyze models with conserved baryonic matter and dark matter in interaction with dark energy, where interaction is limited to produce ratios of energy densities of both dark components, asymptotically stable.

"Esferocitosis hereditaria: avance en la metodología diagnóstica, estudios demográficos e investigación de mecanismos involucrados" (2014-12-18). Crisp, Renée Leonor. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Esferocitosis Hereditaria (ESH) es una anemia hemolítica de observación frecuente, caracterizada por alteraciones cuali y/o cuantitativas –genéticamente determinadas– de las proteínas de la membrana eritrocitaria. Consecuentemente, se debilita la unión entre la membrana eritrocitaria y el citoesqueleto subyacente, produciéndose la pérdida progresiva de la membrana con formación de hematíes de forma esférica, osmóticamente frágiles, que son selectivamente atrapados y destruidos en el bazo. Muchas alteraciones en diferentes genes pueden generar la misma enfermedad. Clínicamente se caracteriza por anemia, ictericia y esplenomegalia. La ESH es la anemia hemolítica hereditaria más frecuente en Argentina. A pesar de ello, es muy escasa la información sobre su comportamiento en nuestro país. Los objetivos de esta tesis son: a) Investigar avances en la metodología de diagnóstico a partir del análisis e implementación de nuevas pruebas que han sido desarrolladas durante la última década; b) Establecer aspectos demográficos de la ESH en la población atendida por nuestro grupo de trabajo; c) Dilucidar algunos mecanismos involucrados en la enfermedad. En este trabajo se utilizaron las pruebas tradicionales (fragilidad osmótica eritrocitaria y prueba de autohemólisis) y se desarrollaron por primera vez en nuestro país las nuevas pruebas diagnósticas (citometría de flujo con 5’eosina maleimida, criohemólisis hipertónica y fragilidad osmótica por citometría de flujo) estableciendo sus puntos de corte, sensibilidad, especificidad y valores predictivos. El análisis de los resultados de los ensayos electroforéticos de las membranas eritrocitarias permitió establecer que las deficiencias de espectrina y ankirina son las prevalentes en nuestra población. En los casos en que fue posible, el estudio se extendió al grupo familiar primario pudiendo detectar portadores sanos y establecer el patrón de herencia. Para poder realizar el diagnóstico en forma precoz, se desarrollaron las nuevas pruebas utilizando sangre capilar, estableciendo la presencia de la patología en neonatos de hasta 2 días de vida. El seguimiento clínico permitió observar la alta frecuencia de crisis hemolíticas asociadas a episodios febriles por lo que se decidió evaluar la posibilidad de que el agravamiento de la anemia fuera debido, en parte, a un efecto directo de la temperatura sobre los esferocitos. Se pudo observar que la hipertermia induce eriptosis mediada por la entrada de calcio a la célula, lo que podría contribuir al empeoramiento de la anemia o al desarrollo de la misma en individuos asintomáticos. La heterogeneidad clínica no pudo relacionarse al tipo de alteración proteica ni a los resultados de las pruebas diagnósticas. En la búsqueda de una alteración en común que pudiera correlacionar con la severidad de la anemia encontramos una expresión disminuida de acuaporina 1 (AQP-1), canal responsable del flujo de agua en el eritrocito, independientemente de la proteína de membrana afectada. El trabajo de tesis presentado implica un avance metodológico por haber desarrollado las nuevas técnicas diagnósticas en nuestro país y haber establecido la equivalencia para realizar los estudios con sangre capilar, conduciendo a un diagnóstico certero y precoz en los neonatos. Los antecedentes y el seguimiento clínico permitieron describir el comportamiento de la enfermedad en los pacientes pertenecientes a nuestra población. Por otra parte, los estudios in vitro, que mostraron sensibilidad de los eritrocitos de los pacientes a la temperatura y asociación de la disminución de AQP-1 en eritrocitos con la severidad de la enfermedad, abren un nuevo camino en la investigación de la esferocitosis hereditaria con una potencial aplicación terapéutica a futuro.

Abstract:
Hereditary spherocytosis (HS) is a common hemolytic anemia, characterized by genetically determined quantitative and/or qualitative abnormalities of the red cell membrane proteins. As a consequence, the connection of skeleton and bilayer gets weakened, loss of membrane surface occurs and changes in red cell lead to the formation of spherical, osmotically fragile erythrocytes, which are selectively trapped and destroyed in the spleen. Diverse mutations in different genes can generate the same disease. HS is characterized by anemia, jaundice, and splenomegaly. Although HS is the most common hereditary hemolytic anemia in Argentina, information concerning its behavior in our country is very scarce. Aims of this thesis are: a) To evaluate advances on diagnostic methodology since the development of new diagnostic tests described throughout the last decade; b) To establish demographics characteristics of HS in the population attended by our working group; c) To elucidate some mechanisms involved in the disease. In this study, standard screening tests –osmotic fragility and autohemolysis– and novel diagnostic tests –eosin-5’maleimide flow cytometry, hypertonic cryohemolysis, and flow cytometric osmotic fragility– were carried out. As these new diagnostic techniques were developed for the first time in our country, their cut-off points, sensitivity and specificity were established. Electrophoresis of membrane proteins established that spectrin and ankyrin are the most frequently found deficiencies in our population. As far as possible, direct relatives were also studied, allowing to detect silent carriers and to establish the inheritance pattern. Novel tests were also developed using capillary blood, to accomplish an earlier diagnosis. So, HS could be diagnosed in neonates aged only 2 days. Patients’ follow-up showed a high frequency of hemolytic crisis associated to febrile diseases. Therefore, we decided to evaluate whether the temperature increment on spherocytes may be one factor responsible for the worsening of hemolysis. Results showed that hyperthermia induced eriptosis mediated by calcium influx to the erythrocyte, which could play a role either for anemia worsening or for anemia development in previously asymptomatic individuals. No correlation between severity of the disease and either deficient protein or results of diagnostic tests could be demonstrated. Searching for an unique factor associated with severity of anemia, a decreased expression of aquaporin-1 (AQP-1), the channel responsible of water influx in the erythrocyte, was found irrespectively of the type of protein deficiency. This thesis implies a methodological advance due to the development for the first time in Argentina of the novel diagnostic tests, as well as the demonstration that they can also be performed with capillary blood, allowing an early and accurate diagnosis in neonates and small infants. Antecedents and clinical follow-up enabled to establish the behavior of the disease in the population of our country. Furthermore, results of in vitro studies showing a harmful effect of hyperthermia on erythrocytes of patients, and association of AQP-1 decrease with severity of the disease, open a new way on HS research with potential future applications.

"Esferoides como modelo predictivo de respuesta tumoral a la terapia génica : Estudio de los efectos de la transferencia génica no viral del sistema gen suicida y del gen de interferón-beta en esferoides derivados de melanoma espontáneo canino" (2011). Gil Cardeza, María Lourdes. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los esferoides constituyen un modelo experimental que se asemeja más al comportamiento de los tumores in vivo que sus respectivas monocapas. Por lo tanto su estudio e implementación en el desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas para combatir el cáncer es de suma importancia. En el presente estudio demostramos que la respuesta a la transferencia no viral del sistema gen suicida HSVtk/GCV de esferoides formados a partir de líneas celulares derivadas de tumores de melanoma espontáneo canino correlaciona mejor con la respuesta de los pacientes que sus respectivas monocapas. También observamos que la resistencia multicelular (MCR) al sistema HSVtk/GCV presente en los esferoides probablemente se deba a una rápida repoblación de las células resistentes al tratamiento en esta configuración espacial. La gran cantidad de líneas cuyos esferoides resultaron ser sensibles al sistema HSVtk/GCV y/o a la transferencia no viral del gen cIFN-β (80% sobre un total de 15 líneas) y el mantenimiento de la sensibilidad al ser co-transferidos demuestran la gran potencialidad terapéutica de la co-administración de ambos genes. Como alternativa a la electroporación, encontramos una forma menos agresiva de aumentar la penetración intracelular de bleomicina: la lipofección. Encontramos que el sistema lipoplexes/bleomicina es altamente efectivo pues la presencia de los lipoplexes sensibiliza a las células al efecto citotóxico de la bleomicina, posiblemente estimulando el ingreso de la droga a las células mediante un transporte activo.

Abstract:
Spheroids are an experimental model in vitro that resembles more accurately the tumor behavior observed in vivo than monolayers. So the study and implementation of spheroids in the development of new therapeutic strategies to fight cancer is very important. At the present study we demonstrated that the response to the non viral gene transfer of the suicide gene system HSVtk/GCV on spheroids derived from spontaneous canine melanoma tumors better correlates to the patient’s response than their monolayers counterparts. We also observed that the multicellular resistance (MCR) to the HSVtk/GCV system when cells are cultured as spheroids is probably due to a rapid re-population of the cells that were resistant to the therapy. The high amount of spheroids which were sensitive to the HSVtk/GCV system and/or to the non viral transfer of the cIFN-β gene (80% over a total of 15) together with the maintenance of the sensitivity when the genes were co-transferred, demonstrates the high therapeutic potentiality of the coadministration of both genes. We then studied the sensitivity to the lipoplexes/bleomycin system. We found that the new therapeutic strategy is highly effective since the lipoplexes sensitizes the cells to the citotoxic effect of bleomycin, presumably by stimulating an active incorporation of the drug inside the cells.

"Espacios asociados a funciones maximales parabólicas y potenciales de Hp, O p 1 (p mayor a 0 y menor o igual a 1)" (1981). Durán, Ricardo Guillermo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Espacios clasificantes de categorías fibradas" (2009). del Hoyo, Matías L.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Esta tesis se desarrolla en torno al estudio de los espacios clasificantes de fibraciones de categorías. Toda categoría pequeña tiene asociado de un modo natural un espacio topológico, su espacio clasificante. Introducimos variantes de esta construcción para el caso en que la categoría tiene estructura fibrada. A partir de estas nuevas construcciones obtenemos nuevos resultados en la teoría de homotopía de categorías, e interpretamos desde un nuevo punto de vista y de un modo conceptual varios de los teoremas clásicos de Quillen, Segal y Thomason. Entre los resultados obtenidos destacamos una versión relativa del Teorema A de Quillen, una versión homológica de ese mismo Teorema y una sucesión espectral, análoga a la clásica sucesión espectral de Serre, para calcular la homología de fibraciones de Grothendieck. Exponemos también una construcción novedosa para la subdivisión de una categoría, y derivaciones de esta construcción en teoría de homotopía de posets y en teoría de categorías. Por último, estudiamos la generalización de espacios clasificantes a 2-categorías, e implementamos los resultados expuestos en homotopía de categorías fibradas para caracterizar los espacios de lazos de las 2-categorías. Parte de los resultados obtenidos fueron publicados en los artículos y , mientras que los referentes a homotopía de 2-categorías peque~nas serán incluídos en .

Abstract:
This thesis deals with classifying spaces of fibred categories. A topological space is associated in a natural way to a every small category, namely its classifying space. We introduce alternative constructions for categories endowed with a fibred structure, obtaining new results in homotopy of categories and placing those of Quillen, Segal and Thomason into our framework. Among the obtained results, we emphasize a relative version of Quillen's Theorem A, a homological version of the same theorem and a Serre-style spectral sequence. As an application, we propose a new construction for subdivision of small categories, and derive consequences in homotopy of posets and in category theory. Finally, we study classifying spaces of 2-categories, and we apply the results in homotopy of fibred categories to give a characterization of loop spaces of 2-categories. Most part of the results exposed here were published in and , while the others will appear in .

"Espacios de Lipschitz" (1976). Caputti, Telma. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Espacios de jets en característica p 0" (1976). Villamayor, Orlando Eugenio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Espacios homogéneos infinito-dimensionales" (2015-06-16). Miglioli, Martín Carlos. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Espacios métricos homogéneos de Lie-Banach" (2013-03-27). Di Iorio y Lucero, María Eugenia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Especiación en passeriformes neotropicales de ambientes abiertos" (2012). Campagna, Leonardo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El Neotrópico es la región con mayor diversidad de aves a nivel mundial. Este trabajo estudia el proceso de especiación, focalizándose en grupos de passeriformes de ambientes abiertos, con el objetivo de comprender los procesos que generaron esta gran diversidad de aves. Se utilizaron herramientas moleculares y una perspectiva filogenética/filogeográfica, en conjunto con el análisis de sonogramas derivados de vocalizaciones, para estudiar la radiación de los capuchinos del sur (Sporophila) en los pastizales de Sudamérica, la diversificación del género Phrygilus en los ambientes abiertos de la cordillera de los Andes y la existencia de linajes endémicos de passeriformes en las islas Malvinas. Se encontró una marcada variación fenotípica pero pocas diferencias genéticas neutras entre especies de capuchinos del sur, resultado consistente con una radiación reciente que comenzó en el Pleistoceno. Los resultados indican que Phrygilus es polifilético, comprendido por cuatro clados distantemente relacionados, que se diversificaron en la altura de los Andes pero también asociados a cambios en los rangos altitudinales, durante el Pleistoceno. Por último, los patrones genéticos sugieren que las islas Malvinas fueron colonizadas a diferentes tiempos por las especies de passerifomes que las habitan. Finalmente, se discuten estos resultados en el contexto de la literatura existente al respecto de la especiación en aves, particularmente con respecto al papel de la selección natural, la deriva genética, el flujo génico, la predominancia de la alopatría y la función de la especialización ecológica en el proceso de especiación.

Abstract:
The Neotropics hold the largest avian diversity in the world. This thesis studies the process of speciation, focusing on groups of open habitat passerines, with the objective of understanding what factors have contributed to generating the vast avian diversity of the region. A combination of molecular tools and a phylogenetic/phylogeographic approach, together with the analysis of sonograms derived from vocalizations, was used to study the radiation of the southern capuchinos (Sporophila) in the grasslands of South America, the diversification of the genus Phrygilus in open habitats of the Andes Mountains and the existence of endemic passerine lineages in the Malvinas islands. The southern capuchinos show marked phenotypic variation despite few neutral genetic differences, a result that is consistent with a recent radiation that started in the Pleistocene. The genus Phrygilus proved to be polyphyletic, composed of four distantly related clades that have diversified in the Andean highlands but also associated with changes in altitudinal ranges, during the Pleistocene. The observed genetic patterns suggest that the Malvinas islands were colonized at different periods in time by the passerine species that inhabit them. Finally, these findings are discussed within the context of the existing literature on speciation in birds, focusing on the relevance of these results with respect to the roles of selection, genetic drift, gene flow, the prevalence of allopatry and the function of ecological specialization in the process of speciation.

"Especificación formal y verificación de propiedades temporales de procesos de negocios" (2014). Regis, Germán Enrique. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El uso de diferentes métodos y herramientas que asistan en la organización y el control de procesos, ha tomado relevancia debido a la necesidad constante de eficiencia por parte de la industria y a la adecuación de sus prácticas a las emergentes y novedosas técnicas de desarrollo y producción. Como producto de estas necesidades, diversos lenguajes para la descripción de procesos de negocios capturaron el interés tanto del sector productivo, para su aplicación en sus actividades, como así también del sector académico, con el fin de aportar conocimiento y generar nuevas herramientas para tal fin. Si bien la mayor parte de los lenguajes para la especificación de procesos de negocios son informales, existen algunos fundados en formalismos matemáticos. Esto brinda a estos lenguajes formales para procesos de negocios la eliminación de ambigüedades en la interpretación de especificaciones, y la posibilidad de realizar diferentes análisis formales, como chequeos de sanidad. Sin embargo, las alternativas existentes poseen en general limitaciones, o bien en poder expresivo, o, para las alternativas más expresivas, la imposibilidad de realizar algunas tareas de análisis automáticamente. En este trabajo presentamos un enfoque formal para la especificación y el análisis de procesos de negocios, que permite dar semántica a construcciones complejas de procesos de negocios, a la vez que admite el análisis de chequeos de sanidad usuales de manera automática mediante model checking. Más aún, nuestra propuesta abarca la posibilidad de que el usuario especifique y analice propiedades de interés acerca de las especificaciones, mediante lógicas temporales, un mecanismo con frecuencia ausente en los lenguajes existentes. Además del desarrollo de una semántica formal para un lenguaje de proceso de negocios sumamente expresivo, nuestro trabajo toma como base para la especificación de propiedades de procesos de negocios el uso de lógicas temporales. Identificamos algunos elementos que hacen particularmente complicada la expresión de algunos tipos de propiedades, en particular cuando las mismas demandan expresar repeticiones de eventos o tareas, y proponemos una lógica temporal que permite describir tales propiedades con mayor facilidad. Con el fin de no perder capacidad de análisis, desarrollamos traducciones que nos permiten capturar los elementos novedosos de esta lógica en términos de otros elementos, soportados por lógicas temporales tradicionales, con soporte de herramientas. Por otra parte, observamos la tendencia de los lenguajes de descripción de procesos de negocios a no tratar formalmente la descripción de los productos que manipulan. Tomamos un formalismo excepcional en este sentido, PPML, y definimos a partir del mismo un lenguaje de especificaciones, una semántica simplificada para el mismo, y una técnica de análisis de especificaciones basada en una caracterización de sus modelos en UPPAAL. Nuestro enfoque está claramente orientado a la producción de herramientas de soporte al proceso de especificación. Para los lenguajes tratados brindamos herramientas de especificación y análisis de procesos de negocios, como así también la posibilidad de construir descripciones de procesos de negocios a partir de las propiedades que los mismos deben cumplir. Estas tareas son evaluadas en este trabajo a través del desarrollo de casos de estudio tomados de la literatura del área, en lo que respecta a descripción de procesos y chequeos de sanidad de los mismos, y en base a variantes de estos casos en las cuales se enfatiza la necesidad de contar con propiedades descriptas por el usuario, y de dar más relevancia a la descripción de los productos manipulados por los procesos de negocios.

Abstract:
The use of methods and tools to assist in process organization and control is receiving increasing attention. This is due to the constant need for efficiency in industry, and the pressure on industry to adopt emergent development and production techniques, and adapt current practices to these emergent technologies. As a consequence, various languages for describing business processes have attracted both industry, which applies them in its activities, and academia, which can contribute knowledge and help provide novel tools for these languages. Even though most languages for business process specification are informal, some of these languages are founded on mathematical formalisms. Formal business process specification languages profit from the elimination of ambiguities in the interpretation of their specifications, and the possibility of performing different kinds of formal analyses, such as soundess checks. However, the available formal alternatives have limitations, either in expressive power, or, in the case of the more expressive formalisms, the impossibility of performing some analysis tasks fully automatically. In this work we present a formal approach for the specification and analysis of business processes, that allows us to provide suitable semantics to complex constructions in business process specifications, while at the same time allowing us to perform typical soundness checks fully automatically via model checking. Moreover, our approach includes the possibility of enabling users to specify and analyze properties of their interest about specifications, using temporal logics, a mechanism often missing from existing languages. Besides the development of a formal semantics for a very expressive business process language, our work is based on the use of temporal logics for specifying properties of business processes. We identify some elements that make it difficult to express some kinds of properties, in particular those demanding referring to repetitions of events or tasks, and propose a temporal logic that allows us to specify these properties more conveniently. In order to maintain the possibility of automatically analyzing specifications, we develop translations that enable us to capture the novel elements in our logic in terms of other elements, supported by traditional temporal logics with tool support. Also, we observe a tendency in business process languages to disregard, in their formalizations, the description of the products that processes manipulate. We take a formalism that is exceptional in this respect, PPML, and define a formal specification language in terms of it, a simplified semantics for it, and an analysis technique for its specifications, based on a characterization of its models in UPPAAL. Our approach is clearly oriented towards producing tool support for business process specification. For the languages that we deal with in this work, we provide tools for business process specification, property specification, and automated analysis. We also enable the user to build business process descriptions from the properties these processes are required to fullfil. These tasks are assessed in our work via case studies taken from the literature, for the case of business process description and soundness checks, and variants of these case studies in which the need of referring to event repetitions, and the role of products in process descriptions, are emphasized.

"Especificidad de la proteína quinasa A en Saccharomyces cerevisiae vía fosforilación y localización de las isoformas catalíticas" (2011). Tudisca, Vanesa Romina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Proteína Quinasa dependiente de cAMP (PKA) participa en una amplia variedad de procesos fisiológicos. En Saccharomyces cerevisiae un único gen codifica para la subunidad regulatoria (BCY1) y tres genes para las subunidades catalíticas (TPK1, TPK2 y TPK3). El desarrollo de esta tesis permitió comprender parte del mecanismo por el cual la vía de transducción de señales cAMP-PKA logra especificidad espacio-temporal en respuesta a variaciones en el medio ambiente. Particularmente, nos propusimos establecer si las tres isoformas de PKA son reguladas diferencialmente por fosforilación y localización subcelular en respuesta a diferentes condiciones nutricionales y de estrés. Hemos determinado que Tpk2 y Tpk3, pero no Tpk1, se localizan en gránulos de procesamiento de mRNA en respuesta al arresto traduccional evocado por estrés nutricional y fase estacionaria. Estos resultados sugieren que la vía de PKA conecta el estado nutricional de la célula con la regulación de la traducción de proteínas. Además hemos identificado a Pkh1 como una quinasa común a Tpk1, Tpk2 y Tpk3 cuya fosforilación diferencial regula la interacción con la subunidad regulatoria y la localización subcelular. Los resultados obtenidos en esta tesis contribuyen a ampliar el conocimiento sobre la especificidad temporal y espacial de la vía de transducción de señales.

Abstract:
cAMP dependent Protein Kinase (PKA) is involved in a wide variety of physiological processes. In Saccharomyces cerevisiae one gene encodes for the regulatory subunit (BCY1) and three genes encode for the catalityc subunits (TPK1, TPK2 and TPK3). This thesis has allowed us to understand some aspects of the mechanism involved in the spatio-temporal regulation of PKA in response to specific stimuli. Our main aim was to determine if specificity of action of PKA catalytic isoforms is achieved through differential phosphorylation and subcelular localization in response to different nutritional and stress conditions. We found that Tpk2 and Tpk3, but not Tpk1, localize in mRNA processing granules in response to translational inhibition induce by nutritional stress and stationary phase. These results indicate that PKA pathway connects the nutritional state of the cell with protein translation regulation. Even more, we have identified Pkh1 as a common kinase of the three Tpks, which differential phosphorylation regulates the interaction with the regulatory subunits and the subcelular localization. The results obtained in this thesis improve our knowledge of the spatio-temporal specificity of signal transduction pathways.

"Especificidad tisular de la expresión de genes Eucariotas en ratones transgénicos : 1) 3,8 kilobases del promotor de beta-caseína bovino dirigen la expresión de proteínas recombinantes a la glándula mamaria y 2) expresión específica del gen de proopiomelanocortina en el sistema nervioso central" (1999). Cerdán, Marcelo Guido. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Durante este trabajo se estudio la regulación tejido especifica de dos genes mediante la utilización de ratones transgénicos. l) Se estudio con que eficacia un fragmento de 3,8 kb del promotor bovino de β-caseina puede dirigir una expresión tejido especifica a la glándula mamaria. El patrón de expresión espacial, temporal y hormonal del gen de fusión, resultó altamente regulado y confinado estrictamente a celulas epiteliales de la glándula mamaria lactante. En estudios previos realizados sobre una línea celualar de glándula mamaria de ratón, se había demostrado que con 1,7 kb del promotor bovino de β-caseína era posible obtener expresión celular específica, a su vez regulada hormonalmente. Esta misma construcción no funcionó al intentar dirigir la expresión específica a glándula mamaria de ratones transgénicos. En este trabajo utilizamos un promotor de mayor tamaño del mismo gen, 3.8 kb, para direccionar la expresión del gen de la hormona de crecimiento humana (hGH) a glándula mamaria de ratones transgénicos. Por medio de un ensayo de Northern blot se determinó la presencia de ARNm de hGH únicamente en glándula mamaria de hembras en período de lactancia. Este ARNm no se detectó en glándula mamaria de hembras vírgenes. Un análisis durante el desarrollo de la glándula mamaria demostró que el transgén sigue un patrón de expresión que se asemeja mucho más al bovino que al murino. En estudios de hibridización in situ, realizados sobre secciones de glándula mamaria, se observó que el patrón de expresión del transgén resultó homogeneo en todos los lóbulos, tanto en animales heterocigotas como homocigotas. La cantidad de granos de plata contados sobre tejido mamario se correlacionó áltamente con el contenido de hGH en leche, previamente determinado por radioinmunoensayo (r=0 996). Por lo tanto, las 3,8 kb del promotor bovino de β-caseína pueden direccionar altos niveles de expresión de proteínas terapéuticas a la glándula mamaria de ratones transgénicos con especificidad celular y regulación correcta durante el desarrollo. 2) Se evaluó la expresión celular especifica del gen de Pro-Opiomelanocortin (POMC) en neuronas. El gen de POMC se expresa en una serie de neuronas del hipotálamo y tracto solitario, y en corticotrofos y melanotrofos hipofisarios. En estudios previos se determinó que una porción proximal del promotor de POMC de rata o ratón era suficiente para dirigir expresión celula-específica, regulada hormonalmente y en forma correcta durante el desarrollo, a melenotrofos y corticotrofos, pero no a neuronas. Más recientemente se identificó la presencia de posibles activadores de la transcripción dentro de una zona de 11 kb en la región 5’flanqueante del gen de POMC (entre —13kb y —2kb). En el presente trabajo, por medio de un análisis delecional se ubicó el elemento neuronal específico a una resolución de 4 kb. Se generaron 3 construcciones conteniendo secuencias genómicas de POMC (6 kb de la unidad transcripcional y 2 kb de la región 3’flanqueante) con diferentes longitudes de la región 5’flanqueante, 13 kb (-13/+8POMC-EGFP), 9 kb (—9/+8POMC-EGFP) y 5 kb (-5/+8POMC-EGFP). A estas secuencias se les introdujo en el exón 2, previo al sitio ATG, una versión mamiferizada de la proteína verde fluorescente de medusa (EGFP). Esta innovación permitió visualizar la expresión transgénica en el cerebro e hipófisis en forma inmediata luego de realizar los cortes de los tejidos. En tres de un total de cuatro lineas de animales transgénicos generados para las construcciones -5/+8POMC-EGFP y -9/+8POMC-EGFP se observó fluorescencia en corticotropos y melanotropos. Estos transgenes se expresaron en neuronas. Contrariamente, la construccion -13/+8POMC-EGFP se expresó correctamente en hipófisis y neuronas de POMC Este resultado nos sugiere que la presencia del elemento neuronal específico buscado se encuentra entre —9 y —l3kb del inicio de la transcripción. En experimentos futuros, nuestro objetivo será clonar e identificar el factor de transcripción neuronal que interactúa con los elementos en cis. Nosotros proponemos inmortalizar un linea celular neuronal que exprese POMC mediante oncogénesis dirigida en ratones transgénicos. Hemos generado 4 lienas de ratones transgénicos con una construcción similar a —l3/+8POMC-EGFP, pero conteniendo una versión termo-sensible del antígeno T largo (AgT-tsA58) insertada en el segundo exón del gen de POMC de ratón. En estas 4 líneas se desarrollaron tumores prematuramente en la región hipofisaria-lúpotalámica, a pesar de que la temperatura corporal del ratón es no permisiva. Tres de estos ratones murieron antes de reporoducirse. Sólo una líena pudo ser mantenida con un programa de aparcamientos utilizando machos jóvenes. En estudio realizado con un Northern blot se observó una expresión considerable de POMC en esos tumores. En próximos experimentos evaluaremos la prsencia de marcadores neuronales e hipofisafios para determinar la naturaleza de dichos tumores.

Abstract:
During this study the tissue specific regulation of two different promoter genes were studied using transgenic mice. 1) The ability of a 3.8-kilobase promoter of the bovine β-casein gene to drive cell specific expression to the mammary gland was evaluated in transgenic mice. The spatial, temporal, and hormonal pattern of expression of the fusion gene is highly regulated and confined to the epithelial cells of the lactating mammary gland. Previous studies have shown that l.7 kb of the bovine β-casein promoter were able to drive cell-specific and hormone-dependent expression in a mouse mammary cell line but failed to induce accurate expression to the mammary gland of transgenic mice. We investigated here the ability of a larger sequence consisting of 3.8 kb of the bovine β-casein gene promoter to drive the expression of the human growth hormone (hGH) gene in transgenic mice. A Northern blot analysis using total RNA obtained from different tissues of lactating and non lactating females revealed the presence of hGH mRNA only in the mammary gland of lactating females. hGH mRNA was not detectable in the mammary gland of Virgin females. A developmental analysis showed that hGH mRNA only peaked on parturition, resembling more closely the bovine β-casein temporal expression pattern rather than the murine. In situ hybridization studies performed on mammary gland sections showed that the cellular pattern of hGH expression was homogeneous in all lobules from heterozygous and homozygous transgenic mice. Silver grain counts on the tissue sections highly correlated with the hGH contents in the milk determined by radio immunoassay (r = 0.996). Thus 3.8 kb of the bovine β-casein promoter direct a high-level expression of therapeutic genes to the lactating mammary gland of transgenic mice in a tissue-specific and developmentally regulated manner. 2) The cell-specific expression of the Pro-Opiomelanocortin (POMC) gene in hypothalamic neurons was evaluated in transgenic mice. The POMC gene is expressed in a subset of hypothalamic and hindbrain neurons and in pituitary melanotrophs and conicotrophs. Previous studies demonstrated that the presence of a proximal promoter of the rat or mouse POMC gene was sufficient to drive cell-specific, developmentally and hormonally regulated expression in melanotrophs and conicotrophs of transgenic mice, but not in neurons. More recently we identified the presence of a putative neuron-specific enhancer/s within 11 kb of 5‘flanking sequences of the mouse POMC gene (-l3 kb to —2 kb). In the present work, by using a deletional analysis in transgenic mice we localised this site/s within a 4 kb resolution. Three different constructs were generated containing genomic sequences of the POMC gene (6 kb of the transcription unit and 2 kb of the 3’flanking region) with different lengths of the 5’flanking region, 13 kb (-13/+ 8POMC-EGFP), 9 kb (-9/+8POMC-EGFP) and 5 kb (-5/+8POMC-EGFP). We also introduced in the exon 2 of the POMC gene, previous to the ATG site, a “mammalianized” version of the green fluorescent protein (EGFP). This innovation allowed us to visualise transgenic expression in the brain and the pituitary immediately after tissue sectioning. Three out of four lines of transgenic mice generated with each of the constructs, -9/+8POMC-EGFP and -5/+8POMC-EGFP showed green fluorescence in pituitary melanotrophs and conicotrophs. These transgenes failed to direct expression of EGFP to POMC neurons. However, the construct —l3/+8POMC-EGFP showed correct expression in pituitary and hypothalamic neurons, suggesting that a specific neurone element is located between -9 kb and —l3 kb from the transcription initiation point. In future experiments our goal is to clone and identify the neuronal transcription factor that interacts with the cis-acting elements. We propose to immortalise neuronal cell lines expressing POMC by targeted oncogenesis in transgenic mice. We have generated 4 transgenic mouse lines with a construct similar to the —l3/+8POMC-EGFP, but containing the temperature sensitive version of the oncogenic large T antigen (tsA58-Tag) inserted into the second exon of the mouse POMC gene. These four lines showed premature tumors in the pituitary-hypothalamic region despite the non-permissive temperature of the mouse body. Three of these mice died before breeding. Only one line could be maintained by mating young males. Interestingly, Northern blots experiments showed high POMC expression in these tumors. In further experiments we are going to evaluate the presence of neuronal and pituitary markers to establish the nature of these tumors.

"Espectro y composición de los rayos cósmicos en el rango de energía de la transición galáctica-extragaláctica" (2010). Tamashiro, Alejandro Andrés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La atmósfera terrestre está siendo continuamente bombardeada por partículas que viajan a gran velocidad, las cuales contribuyen a la radiactividad observada en la superficie terrestre. A principios del siglo pasado, se pensó que esta radiación era originada por rayos gamma, ya que éstos constituían la radiación extraterrestre más energética y penetrante conocida en aquella época. Es por ello que los entes responsables de generar esta radiación fueron bautizados como “Rayos Cósmicos”. Hoy en día se sabe que la mayoría de estos rayos, son núcleos de átomos y sólo una pequeña porción son rayos gamma y electrones. Su espectro de energía se extiende a lo largo de once décadas desde 10 E9 eV hasta energías del orden de 10 E20 eV, energías mucho mayores a las alcanzadas por partículas en cualquier acelerador creado por el hombre. La zona de los rayos cósmicos con energías mayores a ~ 10 E 17 eV es objeto de estudio en la actualidad, debido a que todavía existen muchas preguntas sin responder acerca de su naturaleza, su composición química y espectro, los mecanismos que les permiten alcanzar energías macroscópicas, la ubicación y característica de los objetos astrofísicos donde se generan, su propagación a través del espacio, e inclusive cuestiones más trascendentales para la física, como su sección eficaz con nucléolos y fotones, temas aún cuestionados para estas energías tan elevadas. El Observatorio Pierre Auger es un experimento actualmente activo dedicado al estudio de los rayos cósmicos altamente energéticos, cuyo objetivo es brindar información destinada a responder los enigmas aún vigentes para estas energías. El observatorio fue originalmente diseñado para detectar rayos cósmicos aproximadamente mayores a 10 E18 eV. El flujo de los rayos cósmicos en este rango de energías es muy bajo (aproximadamente menor a una partícula/Km2 /sr/año). Es por ello que se planificó que el área de colección del Observatorio Pierre Auger alcance los 6000 Km2, para poder disponer de una cantidad de eventos con una estadística sin precedentes en este rango de energías. La característica distintiva de este observatorio es la de ser híbrido, disponiendo de dos tipos de detectores: el detector de telescopios de Fluorescencia y el arreglo de estaciones Cherenkov de Superficie, que le permite registrar el desarrollo longitudinal y las partículas al nivel de la superficie terrestre respectivamente, pertenecientes a la lluvia de partículas generadas por los rayos cósmicos en la atmósfera terrestre. El Observatorio Pierre Auger consta de un sitio en el hemisferio sur y otro en el norte. El Observatorio norte está en la fase de investigación y desarrollo y será construido en Larmar en el estado de Colorado en Estados Unidos. El observatorio sur se ubica en el departamento de Malargüe en la provincia de Mendoza y está formado por un arreglo triangular de 1600 estaciones Cherenkov de superficies espaciadas a 1500 metros, cubriendo un área de 3000 Km2, y por 24 telescopios de fluorescencia apuntando hacia el interior del arreglo de superficie distribuidos en cuatro emplazamientos en su perisferia. La etapa de construcción del Observatorio sur ha finalizado y ahora se encuentra en una etapa de incorporación de extensiones para bajar el umbral de detección a energías del orden del ~ 10 E17 eV, con el fin de poder estudiar la zona del espectro de energía donde existe una gran riqueza física, ya que se supone se encuentra la transición galáctica-extragaláctica del origen de los rayos cósmicos. Las extensiones mencionadas son dos, AMIGA y HEAT. La primera consiste en agregar dos nuevos arreglos más pequeños de estaciones de superficie con espaciamientos de 433 metros y 750 metros. La segunda de las extensiones ya está en funcionamiento y consiste en el agregado de tres telescopios de fluorescencia apuntando a la parte más alta del desarrollo de las lluvias atmosféricas. Las estaciones Cherenkov de los nuevos arreglos estarán acompañadas por contadores de muones que serán enterrados a sus lados. Esto permitirá medir directamente la componente muónica de las lluvias, información que será destinada a realizar estudios de composición del rayo cósmico primario. La calibración del Observatorio es fundamental para obtener el espectro de energía de los rayos cósmicos detectados. Durante mi tesis doctoral he trabajado en la calibración tanto de los detectores de fluorescencia como así también de las estaciones Cherenkov de superficie. La calibración absoluta del detector de fluorescencia consiste en excitar cada uno de los telescopios mediante una fuente de luz artificial extensa que se coloca sobre su apertura. He caracterizado esta fuente determinando el grado de uniformidad de su emisión de luz. Mediante el desarrollo de una simulación de trazado de rayos he estudiado los efectos de la desviación respecto de la emisión perfectamente uniforme y he desarrollado un método para corregir estos efectos. La calibración del detector de superficie se realiza utilizando la información de las señales generadas por los muones atmosféricos de fondo. Para ello he participado en estudios que utilizan cálculos de Monte Carlo y semi-analíticos para reproducir y entender estas señales. Explotando la característica híbrida del Observatorio Pierre Auger he desarrollado un método para obtener la aceptancia del detector de superficie a través de la utilización de datos reales del detector de fluorescencia, como alternativa a los métodos tradicionales que se basan en resultados obtenidos a través de simulaciones numéricas, las cuales dependen de los modelos de interacción hadrónica adoptados. Las simulaciones del proceso de adquisición y reconstrucción de los eventos producidos por los rayos cósmicos involucran: la generación de la lluvia, la respuesta de los instrumentos del observatorio, y la reconstrucción de los parámetros del evento. Disponer de una cadena de simulación y reconstrucción de los eventos es fundamental para entender y evaluar el comportamiento del Observatorio. Por ello implementé una simulación completa del Observatorio, que contempla los telescopios de HEAT, las estaciones del nuevo arreglo AMIGA, y la propagación de las partículas a través de la tierra hasta llegar a la profundidad de los contadores de muones. Los estudios realizados con este programa de simulación han contribuido con la etapa de investigación y desarrollo de los contadores de muones de la extensión AMIGA, proporcionando información para la determinación del lugar óptimo para la instalación de los nuevos arreglos de superficie, como así también para determinar a que profundidad deben ser enterrados los contadores de muones. Finalmente he realizado un estudio para determinar los observables más relevantes para la discriminación de la composición de los rayos cósmicos, basados en técnicas del análisis estadístico multivariado y del ámbito de la inteligencia artificial, hasta ahora no muy difundidos en el campo de la astrofísica. Con este análisis pude evaluar la importancia de los observables aportados por distintos tipos de detectores, el de fluorescencia, el de superficie y los contadores de muones, a la hora de distinguir la composición química del rayo cósmico primario.

"Espectroscopia de hidrógeno por resonancia magnética en resonadores clínicos y químicos de alto campo. Estudio de caracterización y seguimiento de tumores cerebrales" (2013). Calvar, Jorge Andrés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La espectroscopia por resonancia magnética (ERM) es una técnica que utiliza las propiedades magnéticas de los núcleos y moléculas para estudiar estructuras químicas. Una de sus aplicaciones es brindar información metabolómica de tejidos y soluciones. En particular, la ERM clínica permite analizar el metabolismo de los tejidos “in-vivo”, sin interferir con los procesos bioquímicos de los mismos. En este trabajo de tesis, se analizó la utilidad de la ERM de alto campo en la clasificación y caracterización de tumores gliales cerebrales y el valor de la ERM clínica en el análisis de la evolución de los tumores gliales. Siendo la ERM clínica una técnica de adquisición de espectros muy dependiente de la ubicación, tamaño de la lesión y la homogeneidad de campo, la primera parte del estudio consistió en analizar distintos métodos de cuantificación de espectros clínicos en tumores cerebrales, teniendo en cuenta estas variables y el tiempo de adquisición. Este análisis permitió establecer que para el análisis cuantitativo, un método paramétrico con una base de metabolitos individuales es más fiable y estable que uno con una base modelada con Lorentzianas-Gaussianas puras. Además, se estimó el tiempo mínimo necesario de adquisición de un espectro clínico que se quiera cuantificar a partir del espectro sin cancelación del agua. En el caso de una clasificación cualitativa se vio que existe un número fijo de adquisiciones a partir del cual el espectro no cambia significativamente. Siendo hoy la ERM de alto campo con HR-MAS (High Resoution Magic Angle Spinning) una técnica muy utilizada en el estudio metabólico de tejidos, en particular de tumores, se analizó la posibilidad de caracterizar tumores gliales con un equipo de alto campo sin la facilidad de HR-MAS. Aquí, a través de una técnica de preparación sencilla y repetitiva, se consiguió adquirir espectros de muy buena calidad y obtener patrones de espectros que clasifican los tumores, tanto por su anatomía patológica como por su genética, los dos métodos de referencia en la clasificación tumoral actual. En particular con el gen IDH1, un nuevo e importante marcador en tumores gliales asociado con la sobrevida de los pacientes, se identificó una clara relación cualitativa entre metabolitos. Se detectó además la presencia de 2-hidroxiglutarato (2HG) en los espectros, producto de la mutación IDH1. Las conclusiones de este trabajo con ERM de alto campo se utilizaron en un análisis retrospectivo con espectros clínicos de bajo campo. Conocida la limitación de la ERM clínica en la clasificación de tumores cerebrales, se analizó su utilidad en el seguimiento de tumores gliales de distintos niveles de agresividad. Del análisis no fue posible establecer por ERM un patrón de comportamiento definido de los tumores menos agresivos. En particular y de considerable importancia, la ERM no permite identificar claramente cuando un tumor va a malignizar y progresar. Sin embargo, sí permite definir cuando el tumor responde al tratamiento al cambiar el patrón del espectro a menos agresivo o mantenerse estable. Finalmente, se analizaron los cambios necesarios en la planificación y adquisición para hacer reproducibles y comparables los espectros en estudios clínicos longitudinales como los de tumores cerebrales.

Abstract:
Magnetic resonance spectroscopy (MRS) is a technique that uses the magnetic properties of nuclei and molecules to study chemical structures. One of its applications is to provide metabolomic information of tissues and solutions. In particular, the clinical MRS allows analyzing the metabolism of different tissues "in vivo", without interfering with their biochemical processes. In this thesis, the usefulness of high-field MRS in the classification and characterization of glial brain tumors and the clinical value of MRS in analyzing the evolution of glial tumors, are examined. As a clinical MRS acquisition is a technique highly dependent on the location and size of the lesion and on field homogeneity, the first part of the study consisted in the analysis of different methods for quantifying clinical brain tumor spectra, taking in account these variables and the acquisition time. This analysis established that for a quantitative analysis, a parametric method with a database of individual metabolites is more reliable and stable than modeling with plain Lorentzian-Gaussian functions. It also established the minimum time necessary to acquire a clinical spectrum, given a quantification method, from the spectrum without water cancellation. In the case of a qualitative classification, it could be established that a fixed number of acquisitions exists, after which the spectrum does not change significantly. Nowadays being high-field MRS with HR-MAS (High Resolution Magic Angle Spinning) a technique widely used in metabolic studies of tissues, including tumors, we examined the possibility of characterizing glial tumors with a high-field spectrometer without the HR-MAS facility. Thus, by using a simple and repetitive preparation technique, it was possible to obtain good quality spectra and find spectral patterns that classify tumors according its pathological anatomy and its genetics, the two reference methods currently used for ranking tumors. In particular with the IDH1 gene, an important new marker in glial tumors associated with patient survival, a clear qualitative relationship was identified among metabolites. Also, the presence of 2-hydroxyglutarate (2HG), a product of IDH1 mutation, was detected in the spectra. We also used the findings of this high-field study in a retrospective analysis of clinical low-field spectra. Knowing the limitation of MRS in the clinical classification of brain tumors, their usefulness in monitoring progression in glial tumors of different levels of aggressiveness was then analyzed. This showed that a defined behavior pattern could not be established by MRS in the less aggressive tumors. In particular and quite importantly, MRS does not clearly identify when a tumor will become malignant and grow. However it does allow defining when the tumor responds to treatment by changing the pattern of the spectrum to a less aggressive one or remaining stable. Finally, an analysis is made of the necessary changes required in the planning and acquisition of spectra in clinical MRS, to make them reproducible and comparable in longitudinal clinical studies as those used for brain tumors.

"Espectroscopía de correlación de fluorescencia en la nanoescala" (2009). Estrada, Laura Cecilia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta Tesis se propone una nueva técnica que combina las ventajas de las microscopías basadas en la fuorescencia, con la altísima resolucióon espacial de las microscopías de campo cercano. El principio de funcionamiento de la Espectroscopía de Correlación de Campo Cercano que se presenta en este trabajo, se basa en la existencia de campos electromagnéticos fuertemente intensificados y confinados alrededor de nanopartículas metálicas, NPs. Este efecto aparece cuando la NP se ilumina con un haz cuya frecuencia corresponde a alguna de las frecuencias de resonancia de los electrones en el metal. Experimentos utilizando NPs esféricas de oro de 40 nm de radio, y una solución de Rosa de Bengala 150 microM en glicerol 80% en agua, demuestran una reducción del volumen de observación de alrededor de 4 órdenes de magnitud. Se mostró que es posible extender el uso de la Espectroscopía de Correlación de Campo Cercano al estudio de células vivas. Finalmente, se estudian exhaustivamente las propiedades de emisión de moléculas fluorescentes a distancias nanométricas de NPs metálicas. Se analiza el efecto de la separación NP-molécula; la eficiencia cuántica de fluorescencia, la orientación, las propiedades de absorción y emisión de la molécula; y el tamaño y la geometría de las NPs sobre la emisión de las moléculas.

Abstract:
In this Thesis we present a new technique which combine the advantages of the fluorescence based spectroscopies with the super resolution of the near field microscopies. This technique is based on the strong electromagnetic field localized in the proximity of metallic nanoparticles, NPs. This effect appears when a NP is irradiated with the resonance frequency of the electrons in the metal. Our experimental results using gold NPs and a 150 microM Rose Bengal solution in glycerol confirm a 4 orders of magnitude reduction in the observation volume. Experiments in cell membranes show that it is possible to use this technique even in living cells. Finally, we studied intensively the emission properties of fluorescent molecules at nanometric distances from metallic NPs. We analysed carefully the effect of NP-molecule separation, intrinsic molecule quantum yield, and molecule absorption and emission spectra to design new probes based on molecules coupled to MNPs

"Espectroscopía in vivo por resonancia magnética : Capacidad de un resonador clínico de 1.5 Teslas de estimar grado de malignidad de tumores por espectroscopía" (2000-03). Calvar, Jorge Andrés. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El presente trabajo analiza la posibilidad de establecer una relación entre los espectros de hidrógeno de resonancia magnética nuclear de tumores cerebrales obtenidos de un resonador clínico de 1.5 Teslas y el grado de malignidad de estos tumores. Los espectros de resonancia magnética nuclear (RMS) en cerebro son espectros que permiten identificar una serie de sustancias, de un volumen particular de cerebro, que caracterizan a este tejido. Las sustancias más fáciles de detectar y cuantificar por su buena señal respecto del ruido de fondo son lípidos (Lip), lactato (Lac), Nacetilespartato (NAA), creatina/fosforocreatina (Cr), colina (Co) y mioinositol (Mio). La concentración de estas sustancias en el tejido se refleja en el área debajo de cada pico. Cada una de estas sustancias tiene una función en el metabolismo cerebral y sus variaciones permiten estimar ciertas patologías y enfermedades. La utilidad de la RMS se basa en ofrecer una nueva herramienta de análisis diagnóstico, complementaria a las imágenes de resonancia magnética. Esto es así ya que a partir de las variaciones (respecto de valores normales) de las áreas de los picos de estas sustancias en un espectro, se puede confirmar ciertas patologías vistas en las imágenes. Es por esto que la RMS a tomado un papel de suma importancia en los centros de diagnóstico de imágenes del mundo que cuentan con un resonador magnético. En particular, desde hace muy pocos años se ha visto a la RMS como un medio preciso, rápido y no invasivo de poder caracterizar ciertos tumores cerebrales por su grado de malignidad y hasta por tipo de tumor. La reproducibilidad de esta técnica también le permite hacer el seguimiento del tumor para evaluar la respuesta al tratamiento y su evolución. En esta línea se centra este trabajo; ver si un equipo resonador de 1.5 Teslas permite, a pesar del pobre procesamiento de los datos, puede diferenciar distintos tipos de tumores. Este resonador es parte del instrumental de diagnóstico del centro de imágenes de FLENI (Fundación Lucha Enfermedades Neurológicas Infantiles), una institución médica especializada en cerebro de la Capital Federal, Argentina. Para eso se analizaron 9 pacientes con distintos tipos de tumores cerebrales a los cuales se les había realizado espectros de los tumores previo a ser operados o biopsiados. Los cocientes de las áreas de los picos más importantes de espectros (NAA/Co, NAA/Cr, NAA/Cr+Co y NAA/Mio) se compararon con los resultados anátomo patológicos que se realizaron del tejido obtenido de la cirugía. El objetivo era ver si existía algún tipo de correlación entre estos datos. De este modo se pudo determinar en nuestro caso, aun con la limitación dada por el equipo al no dejar procesar las señales fuera del resonador, los espectros permitieron diferenciar tumores de bajo grado (benignos) y tumores de alto grado (malignos) de un modo tal que solo existió solapamiento de valores en el cociente NAA/Cr entre tumor de bajo grado y normal. Con el resto de los cocientes se verificó que no hay solapamiento en los cocientes de los dos tipos de grados de tumores analizados y de ellos con los normales. Y si bien la cantidad de pacientes evaluados no es buena, los resultados hallados claramente muestran que aun sin mucho análisis de señal, la RMS puede diferenciar grandes grupos (alto y bajo grado) de tumores. Por último, dado los resultados de esta investigación, considerado de tipo preliminar, FLENI a decidió ampliar este trabajo para contrastar la información de estos espectros médicos con espectros de mayor campo a partir de preparados de tejido tumoral, junto con el seguimiento (espectros e imágenes de RM y SPECT) de los pacientes para evaluar la evolución del tumor al tratamiento.

"Espermatogénesis, ciclo anual e inducción hormonal de la espermiación en el pez protogínico diándrico, Synbranchus marmoratus Bloch, 1795 (Teleostei, synbranchidae)" (2000). Lo Nostro, Fabiana Laura. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente estudio se ha determinado que, en las zonas muestreadas en Argentina, la anguila criolla, S. marmoratus, es una especie protogínica diándrica, presentando dos tipos de machos: los primarios, que nacen como tales y los secundarios que provienen de la reversión sexual de hembras funcionales. La población estudiada presentó un 20% de machos primarios y un 80% de secundarios. Utilizando técnicas para microscopía óptica y electrónica, se caracterizaron anatómica e histológicamente las gónadas de ambos tipos de machos y de los revertantes así como la espermatogénesis y el ciclo testicular anual. Ambos machos poseen testículos de tipo lobular irrestricto y la espermatogénesis se desarrolla a lo largo del año. Las gónadas poseen un compartimiento germinal, organizado en lóbulos donde la diferenciación celular es sincrónica dentro de cada espermatocisto. En el compartimiento intersticial se observan células de Leydig, células mioides, fibras colágenas y vasos sanguíneos. El ciclo anual fue dividido en 5 clases reproductivas: regresada, maduración temprana, maduración media, maduración final y en regresión, basándose en los cambios del epitelio germinal y en la preponderancia de los distintos tipos de células germinales. Se observó la presencia de un epitelio germinal permanente y no se han encontrado diferencias entre ambos tipos de machos. Se identificaron las formas de GnRH en cerebro (salmón y chicken-II). Se indujo artificialmente la esperrniación utilizando un análogo superactivo de GnRH y un antagonista dopaminérgico, obteniéndose un 100% de liberación de esperma a la tercera semana de tratamiento. Esto se corroboró a nivel histológico. Se observó un aumento significativo de los niveles de testosterona y estradiol en sangre respecto de los animales control.

Abstract:
The swamp eel, Synbranchus marmoratus, is a protogynic, diandric fish having two types of males: primary males, constituting only 20% of the population studied, develop directly as males. Secondary males made up 80% of the population and develop from sex reversal of functional females. Light and electron microscopy were used to study the anatomy of testes in both types of males, spermatogenesis, and changes during the annual reproductive cycle. Testes were unrestricted, with respect to the distribution of spermatogonia, and lobular. Within the lobules, the germinal epithelium had distinct annual changes in spermatogenesis. When reproductive, spermatogenesis was confined to spermatocysts whose borders were composed of Sertoli cell processes and within which sperm maturation was synchronous. During the annual reproductive cycle, five maturation classes were observed that were defined by changes in the germinal epithelium: early maturation, mid maturation, late maturation, regression, and regressed. Sertoli and germ cells formed a permanent germinal epithelium, i. e. it was present throughout the year. The testis interstitial compartment was composed of Leydig cells, myoid cells, collagen, and blood vessels. Two gonadotropin releasing-hormone (GnRH) brain forms were characterized: salmon (sGnRH) and chicken II (cGnRHII). Hormonal induction of spermiation were carried out using a superactive GnRH analogue and a dopaminergic antagonist. Histological analysis demonstrated that the treatment induced 100% spermiation within three weeks. Serum testosterone and estradiol levels were significantly higher in treated than in control swamp eels.

"Espermatogénesis, ciclo reproductivo anual y parámetros hematológicos de Cichlasoma dimerus (Teleostei, Perciformes). Efecto de la exposición a 4-tert-octilfenol" (2012-06-28). Rey Vázquez, Graciela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo se analizó primeramente la espermatogénesis y el ciclo reproductivo anual del pez Cichlasoma dimerus, un perciforme representativo de la ictio-fauna de la Cuenca del Río de La Plata. Los estudios realizados con microscopía óptica y electrónica permitieron determinar que los testículos pertenecen al tipo lobular irrestricto. La espermatogénesis es de tipo cística y se estudiaron las características de los distintos estadios de las células germinales durante este proceso, desde espermatogonia hasta espermatozoide. Los espermatozoides en esta especie corresponden a la categoría acuasperma anacrosomal tipo I y se determinó que son biflagelados, carácter excepcional entre los cíclidos. Se estableció que la estación de alta actividad reproductiva se extiende a lo largo de siete meses (desde septiembre hasta marzo) durante los cuales las puestas tienen lugar cada 29,4 ± 16,2 días. Se describieron los cambios del epitelio germinal a lo largo de todo el año, estableciéndose cinco clases reproductivas: proliferación, maduración temprana, media y tardía (final) y regresión. Además, se caracterizaron a nivel óptico y electrónico los distintos tipos celulares de la sangre y se determinaron los valores de referencia de los índices hematológicos (RGR, RGB, HTC, Hb, VCM, HCM, CHCM) de esta especie bajo condiciones estandarizadas. En una segunda etapa, utilizando métodos semiestáticos se evaluó el efecto de la exposición de C. dimerus a concentraciones subletales de octilfenol (OF), uno de los surfactantes más comúnmente utilizado, que puede contaminar el ambiente acuático. Se determinó en primer lugar la toxicidad aguda del compuesto y posteriormente, se realizaron ensayos de exposición subcrónica. Se observó que el OF tiene acción estrogénica consistente en la inducción de la síntesis de Vtg y daño en la morfología testicular que determina la infertilidad de los machos de esta especie. Por otra parte, produce estrés hemodinámico que lleva a anemia normocrómica, normocítica, con un aumento significativo de eritroblastos y presencia de eritrocitos amitóticos como patología eritrocítica. Todos los efectos resultaron ser dependientes de la concentración y reversibles tras un proceso de depuración.

Abstract:
The first step in the present study was the analysis of spermatogenesis and annual reproductive cycle in Cichlasoma dimerus, a typical perciform of the Río de la Plata basin ichthyiofauna. The studies performed under light and electron transmission microscopy revealed that the testicular structure corresponds to an unrestricted lobular type. Spermatogenesis is of cystic type and the characteristics of the different stages of the germ cells during this process, from spermatogonia to spermatozoa, were studied. Sperm in this species correspond to the anacrosomal type I aquasperm and they are biflagellate, an exceptional character among cichlids. It was established that the season of highest reproductive activity extends over seven months, from September to March, during which spawning took place on average every 29.4 ± 16.2 days. The changes that occur in the germinal epithelium throughout the year were described, determining five reproductive classes: proliferative, early, mid-, and late maturation and regression. The different blood cell types were characterized under light and electron microscopy, and reference values of the hematological indexes (RBC, WBC, HCT, Hb, MCV, MCH, MCHC) were determined for this species under standardized conditions. In a second step, under semistatic conditions, the effects of exposure of C. dimerus to sublethal concentrations of octylphenol (OP), one of the surfactants most widely used that can pollute the aquatic environment, were evaluated. First, the acute toxicity of OP was assessed, and afterwards subchronic essays were performed. It was observed that OP acts as a xenoestrogen, since there was Vtg synthesis in males and testicular damage which determined infertility. Besides, it produces hemodynamic stress that leads to normochromic and normocytic anemia, a significant increase of erythroblasts and amitotic erythrocytes as erythrocytic pathology. All effects were concentrationdependent and reverted after a depuration process.

"Esquemas regulares para la gravitación con estructura teleparalela" (2010). Fiorini, Franco Luis. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Esquisomicetas" (1882). Pando, Pedro J.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estabilidad de benzodiazepinas : estudios de Alprazolam y compuestos derivados" (2000). Gallardo Cabrera, Cecilia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se ha estudiado la estabilidad de l,4 benzodiazepinas frente a diferentes factores ambientales. En primer lugar se estudian cinéticamente las reacciones de solvólisis de varias 0-aminobenzofenonas, los principales productos de degradación hidrolítica de Diazepam, (en estudios previos se había caracterizado cinco 0-aminobenzofenonas de la degradación por hidrólisis ácida de diazepam). El mecanismo de formación de estas cinco 0-aminobenzofenonas sigue un esquema complejo, en el presente estudio se describen los resultados de mediciones cinéticas realizados bajo diferentes condiciones de reacción, cálculo de las constantes de velocidad mediante la aplicación de un programa de calculo iterativo para proponer mecanismos de reacción consistentes con los resultados encontrados y diversas experiencias adicionales para confirmar los mismos. Por otra parte, también se presentan los resultados de los estudios de estabilidad de Alprazolam, (8-cloro-1-metil-6-fenil-4H-s-triazo-benzodiazepina), cuyo mecanismos de degradación es completamente diferente a las anteriores 1,4 benzodiazepinas ya que no es susceptible a la hidrólisis. Se estudió la estabilidad de este compuesto en diferentes condiciones de descomposición severas, mostrándose lábil solamente a la acción de la luz. Se aislaron los múltiples productos formados de este proceso de fotodegradación en soluciones de Alprazolam en medio acuoso y metanólico, mediante la aplicación de cromatografia de capa preparativa y se caracterizó los principales. Los resultados encontrados indican que el mecanismo de fotólisis es diferente de acuerdo al solvente. En solución acuosa se encontraron productos provenientes de la contracción del anillo diazepínico a un anillo de seis miembros, otro proveniente de la decloración de Alprazolam y otro de hidrólisis; mientras que en metanol predominaron dos compuestos provenientes de solvólisis. Se estudio mediante HPLC y Espectrofotometria de Fluorescencia la influencia del pH de las soluciones en la velocidad de descomposición, en orden a determinar las (kobs). Observándose que la fotodegradación es dependiente del pH de la solución: la velocidad de descomposición aumenta a medida que se disminuye el pH bajo condiciones naturales de estrés. Para concluir este trabajo se estudio la fotodegradación de Alprazolam en comprimidos comerciales, mediante un método de HPLC previamente validado. Dos de los productos aislados se forman bajo condiciones de radiación en estado sólido y bajo el influjo de la radiación solar.

Abstract:
The stability of 1,4-benzodiazepines was studied under several environmental conditions. First of all, kinetic solvolytic studies were carried out with several 0-aminobenzophenones, which are the main hidrolytic degradation products of diazepam (in previous studies five 0-aminobenzophenones were characterized from diazepam under acidic hydrolysis conditions). The present study describes kinetic determinations carried out under different reaction conditions to elucidate the complex mechanism of formation of these five o-aminobenzophenones. An iterative procedure was developed for the calculation of the several reaction constants involved in the reaction of each 0-aminobenzophenone, a complete reaction scheme consistent with all the observed results was proposed and new experiences carried out to confirm the proposed steps and the likely intermediate involved. On the other hand, studies carried out on the stability of Alprazolam, (8-chlorol- 1-methy l-6-phenyl-4H-s-triazolo- bcnzodiazepine), are described. The behaviour of this triazolobenzodiazepine is completely different from other 1,4-benzodiazepines, since it is not sensitive to hydrolysis. The stability of alprazolam was studied under several stress condition; it was found that this drug is only sensitive to light irradiation. The several products formed uner the photodegradative processes of alprazolam solutions in aqueous as well as methanolic solutions were isolated by thin layer chromatography and the main degradation products were fully characterized. The observed results indicate that the photolysis mechanism is highly dependent of the solvent. In aqueous solution products arisen from the diazepine ring contraction to a more stable six-membered ring, other formed by alprazolam dichlorination and another from hydrolysis were observed. On the contrary, two different products were obtained from the methanolic photodegradation. The influence of pH on the rate of degradation was studied by HPLC and by fluorescence spectrometry. The kobs is pH dependent, it was observed that the rate of degradation increases as the pH decreases. Finally, the photodegradation of Alprazolam tablets was studied by an HPLC method previously validated. It was observed that the two main products are formed by irradiation by sun light in the solid state.

"Estabilidad de emulsiones y encapsulación de aceites con propiedades nutraceúticas" (2013-03-27). Alvarez Cerimedo, María Soledad. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo se estudió la estabilidad de emulsiones de aceites ricos en ácidos grasos Omega-3 en soluciones de trehalosa y su utilización como precursores de polvos conteniendo el aceite encapsulado. Los aceites ricos en ácidos grasos Omega-3 son muy valiosos nutricionalmente pero fácilmente oxidables. El énfasis del trabajo se centró en determinar los mecanismos de desestabilización de las emulsiones en función de su composición, buscando correlaciones entre la estabilidad y la eficiencia de encapsulación. Las emulsiones se formularon empleando distintas concentraciones de trehalosa y de caseinato de sodio (NaCas) como emulsificante. Se analizó su estabilidad en el tiempo, su morfología y el tamaño de las gotas de aceite. Los resultados obtenidos mostraron que los mecanismos de desestabilización de las emulsiones son dependientes de la concentración de emulsificante y que la incorporación de trehalosa aumenta la estabilidad de las dispersiones. Los sistemas con menor concentración de NaCas se desestabilizaron por mecanismos de cremado. Para concentraciones intermedias, se obtuvieron fenómenos de desestabilización mixtos. A concentraciones aún mayores de emulsificante se observó la formación de flóculos. Para concentraciones muy altas de NaCas y en presencia de trehalosa se encontró un intervalo de estabilidad (5,0-7,0% p/p NaCas) en el cual las emulsiones presentaron una microestructura homogénea con un tamaño de gota pequeño. En base a los resultados de estabilidad de emulsiones, se prepararon polvos deshidratados con el aceite de pescado microencapsulado mediante liofilización. Las emulsiones que cremaban o floculaban presentaron poca eficiencia de retención del material encapsulado en la matriz. La emulsión con 5,0% p/p de NaCas y 20% p/p de trehalosa correspondió al polvo con más eficiencia de encapsulación. En esta emulsión se encontró una relación estrecha entre el tipo de sólido de la matriz de los polvos y la eficiencia de retención del aceite. El sistema con mayor retención fue el único que permaneció no cristalino (amorfo) luego del proceso de deshidratación. El mismo tampoco presentó cambios en el tamaño de gota con los procesos de congelado y liofilización. Otra propiedad que se estudió en los polvos encapsulados es el grado de oxidación del aceite de pescado ya que al tratarse de ácidos grasos muy insaturados presentan una alta susceptibilidad a la oxidación, en detrimento de su valor nutricional. Se desarrolló una nueva técnica de estudio de la oxidación del aceite sin extraerlo de la matriz de trehalosa, mediante la espectrometría de masas MALDI-TOF. Este método presenta grandes ventajas frente a las técnicas usuales en el análisis de oxidación de lípidos, y sus resultados mostraron que la encapsulación de aceites lábiles es una herramienta muy útil a la hora de protegerlos contra la oxidación.

Abstract:
In this work, the stability of emulsions prepared with oils rich in Omega-3 fatty acids and trehalose solutions and their use as precursors of oil encapsulated powders was investigated. Oils rich in Omega-3 fatty acids are nutritionally valuable but easily oxidized. The emphasis of the work focused on determining the mechanisms of destabilization of emulsions depending on their composition, looking for correlations between stability and encapsulation efficiency. The emulsions were formulated using different concentrations of trehalose and sodium caseinate (NaCas) as emulsifier. We analyzed the stability over time, morphology and size of the oil droplets. The results showed that the mechanisms of destabilization of emulsions are dependent on the concentration of emulsifier, and that the incorporation of trehalose increases the stability of the dispersions. Systems with lower concentration of NaCas were destabilized by creaming. For intermediate concentrations mixed destabilization phenomena were obtained. At even higher concentrations of emulsifier the formation of flocs was observed. For very high concentrations of NaCas and in the presence of trehalose it was found a stability range (5.0 to 7.0% p/p NaCas) in which the microstructure showed homogeneous emulsions with a small droplet size. Based on the results of stability of emulsions, dried powders were prepared with fish oil microencapsulated by lyophilization, for different formulations of trehalose and caseinate. Emulsions that destabilized by creaming or flocculation showed little retention efficiency of the encapsulated material in the matrix. The emulsion with 5 wt.% NaCas and 20 wt.% trehalose corresponded to the powder with the highest encapsulation efficiency. In this emulsion, a close relationship between the type of solid matrix powders and the oil retention efficiency was found. The system with the highest retention was the only that remained noncrystalline (amorphous) after the dehydration process. In addition, these systems did not show changes in droplet size with freezing and lyophilization processes. Another property that was studied in encapsulated powders is the degree of oxidation of fish oil since these consisted of highly unsaturated fatty acids having a high susceptibility to oxidation, detrimental of their nutritional value. We developed a new technique for the study of oxidation of the oil without extracting it from the trehalose matrix, by MALDI-TOF. This method has great advantages over conventional techniques in the analysis of lipid oxidation, and their results showed that encapsulation of labile oils is a very useful tool at the time to protect them against oxidation.

"Estabilidad de enzimas en medios de distinta movilidad molecular. Impacto de interacciones con azúcares y biopolímeros y de la encapsulación" (2010). Santagapita, Patricio Román. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo del presente trabajo fue analizar la estabilidad enzimática en medios de distinta movilidad molecular y las interacciones intermoleculares específicas que la favorecen. Se estudió el efecto de azúcares (trehalosa), sales y biopolímeros modificados con β-ciclodextrinas (CD) sobre las propiedades fisicoquímicas de la matriz y sobre la actividad enzimática. Se analizó también el uso de un dendrímero basado en polietilenglicol funcionalizado con CD como excipiente de matrices continuas, y se estudió la influencia de la confinación en cápsulas de polielectrolitos sobre la estabilidad enzimática y su liberación. Las enzimas utilizadas como sistemas modelo (lactasa, catalasa e invertasa) son de importancia biotecnológica. La estabilidad enzimática se analizó en distintas condiciones de humedad y temperatura de almacenamiento, en relación con la temperatura de transición vítrea y el estado físicoquímico de la matriz. La presencia de electrolitos afectó la cinética de varios fenómenos de relajación en los sistemas de trehalosa. El retraso de la cristalización de trehalosa con sales debe realizarse con mucha precaución ya que una vez que ésta cristaliza, la enzima permanece en un medio amorfo enriquecido en sales, lo que lleva a la pérdida de su actividad. Los estudios realizados mostraron cómo combinaciones covalentes relativamente simples de biopolímeros con CD pueden afectar significativamente sus propiedades y permitieron profundizar acerca del papel que juegan interacciones específicas biopolímero-enzima sobre la estabilidad enzimática en modelos deshidratados. Estas interacciones involucrarían uniones tanto de tipo electrostáticas como hidrofóbicas, siendo el efecto sobre la estabilización influenciado también por el estado físico de la matriz. Las cápsulas de polielectrolitos representaron una alternativa interesante para la conservación enzimática, especialmente mediante su deshidratación con la adición de trehalosa. Además, mediante cambios en el pH, en la composición, y el grado de hidratación es posible controlar la liberación de la enzima. Los resultados de esta tesis pueden contribuir a la selección de excipientes para la formulación de medios de preservación, que son valiosos para varias aplicaciones tecnológicas, y además para recomendar condiciones propicias para obtener comportamientos óptimos en sistemas complejos.

Abstract:
The objective of present work was to analyze the stability of enzymes as a function of the molecular mobility and specific intermolecular interaction. The effect of sugars (trehalose), salts and biopolymers modified with β-cyclodextrins (CD) was analyzed over the enzymatic activity and over the physico-chemical properties of the medium in which they are immersed. A dendrimer based on polyethylenglycol and later functionalized with CD was tested as excipient in continuos matrices. The influence of the enzyme encapsulation in polyelectrolyte capsules was studied over the enzyme stability and its release. Enzymes of biotechnological interest were used as model systems (lactase, catalase and invertase). Enzyme stability was analyzed under different conditions of humidity and temperature of storage, in relation to the glass transition temperature and the physico-chemical state of the matrix. The kinetics of relaxation phenomena of trehalose systems were affected by the presence of electrolytes. The delay of trehalose crystallization must be carefully conducted, since when trehalose crystallizes, a concentration of the salt in the amorphous matrix unstabilized the enzyme. The results showed how a relatively simple covalent combination of biopolymers with CD can significantly affect their properties and provide further insights about the role played by specific interactions biopolymer-enzyme on enzyme stability in dehydrated models. These interactions would involve both electrostatic and hydrophobic bonds, being the effect on the stabilization also influenced by the physical state of the matrix. Polyelectrolyte capsules also represented an interesting alternative to enzyme conservation, especially through its dehydration with trehalose. Besides, it is possible to control enzyme release changing pH of the release medium, capsule composition and its hydration degree. The results of the present thesis contribute to select adequate materials to generate preservation media, which are valuable for many technological applications and for recommending adequate conditions to obtain optimum behaviour in complex systems.

"Estabilidad de la circulación termohalina bajo perturbaciones atmosféricas" (1985). Krepper, Carlos M.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estabilidad de plasmas inhomogéneos con radio de larmor grande" (1984). Sicardi Schifino, Aníbal Carlos. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estabilidad del ácido sórbico durante la preservación y el almacenamiento de alimentos" (1995). Campos, Carmen Adriana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estabilidad térmica y actividad insecticida de compuestos piretroides y metoprene en formulaciones fumígenas" (1998). González Audino, Paola Andrea. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las formulaciones fumígenas insecticidas son actualmente importantes en el control de vectores de la Enfermedad de Chagas impulsadas por trabajos previos de nuestro laboratorio. En esta Tesis se evaluaron el destino y los procesos de descomposición térmica de insecticidas piretroides a partir de la combustión de formulados fumígenos. Se estableció que la descomposición e isomerización térmica de los piretroides liberados en humos se revierte significativamente por agregado de agentes espumígenos (cianoguanidina y azodicarbonamida). Se demostró que uno de los componentes de la mezcla fumígena, el clorato de potasio, cataliza la isomerización térmica cis-trans de los piretroides, fenómeno también observado para otras sales de oxiácidos. Para la permetrina y β-cipermetrina se identificaron una serie de productos de descomposición comunes a distintos procesos de termólisis estudiados. Estos productos provienen de rupturas del enlace éster, oxidación y posible aromatización de los productos formados. La evaluación biológica de las formulaciones sobre T. infestans (vinchucas) determinó que la más efectiva fue la mezcla conteniendo azodicarbonamida como agente espumígeno y β-cipermetrina como principio activo. En la segunda parte de esta Tesis se planteó como objetivo evaluar las posibilidades de metoprene, un insecticida inhibidor del crecimiento de insectos de alta labilidad térmica, como activo en formulaciones fumígenas. A los fines de estabilizarlo se lo complejó con β-ciclodextrina y el complejo se caracterizó por difracción por rayos X, termogravimetría y Modelado Molecular. El complejo incorporado a formulaciones fumígenas permitió buenas recuperaciones en humos. Estos formulados mostraron un alto efecto insecticida sobre larvas de moscas, característico de compuestos inhibidores de crecimiento de insectos. El análisis conformacional del complejo demostró que la ciclodextrina adopta una forma elipsoide y que su estequiometría es 1:1.

Abstract:
Fumigant insecticide formulations are nowadays very important tools for the control of Chagas disease vectors owing to our laboratory work. In this work, we report the fate and thermal decomposition of pyrethroid insecticides in fumigant formulations. It was established that decomposition and thermal isomerization of pyrethroids in fumes are significantly decreased by incorporation of smoking agents to the mixture (cyanoguanidine and azodicarbonamide). It was demonstrated that potassium chlorate, one of the fumigant mixture components, catalyzes cis-trans thermal isomerization of pyrethroid insecticides. The same was observed for other oxoacids salts. We analysed decomposition products of permethrin and β-cypermethrin in fumigant smokes formed by thermolysis. These products mainly arise from ester bond cleavage and oxidation of the products. Mixtures containing β-cypermethrin as insecticide and azodicarbonamide as smoking agent showed the greatest insecticidal activity against T. Infestans. In the second part of this work, the aim was to evaluate methoprene, a juvenoid insecticide of low thermal stability, as the active ingredient in fumigant compositions. In order to increase its stability, it was included in β-cyclodextrin and the complex was characterised by X Ray diffraction, thermoanalytical techniques and molecular modelling. This complex when incorporated to fumigant mixtures allowed a significant increase in methoprene recovery in fumes as well as a significant improvement in its larvicidal activity against M. domestica. On the other side, the geometry of the inclusion complex was studied by conformation analysis and Molecular Modelling. it was observed that the β-cyclodextrin molecules are elliptically distorted and stoichiometry showed to he 1:1.

"Estabilidad y dinámica en materiales granulares : comportamiento aislado y colectivo de granos" (2001). Aguirre, María Alejandra. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudia el comportamiento de un flujo de granos sobre la pendiente de un apilamiento. El trabajo se divide en dos partes: 1) Movimiento de una esfera sobre un lecho granular Se analiza el movimiento individual de un grano aislado sobre un lecho rugoso fijo. Dicha interacción se modeló experimentalmente a través del movimiento de una esfera de diametro D sobre un lecho inclinado constituido por granos dc diametro medio (d < D). Según el valor del angulo de inclinación de la superficie respecto de la horizontal, se pueden observar tres regímenes de movimiento diferentes: dcsacelerado. con velocidad constante y acelerado. Los resultados experimentales permitieron comprender en mayor detalle los mecanismos involucrados en la disipación de la energía que una esfera gana en su descenso por un plano inclinado. Estos mecanismos permiten a su vez comprender el regimen dcsacelerado que se observa a ángulos de inclinación pequeños. En la región de velocidad constante donde la fuerza que actúa sobre la partícula es de tipo viscosa, se determinan mediante técnicas de sonido y video, la frecuencia de choque de la esféra móvil con las bolitas de vidrio de la superficie a fin de comprender la forma en que dicha esfera disipa energía por colisiones. Se observa como varía esta fuente de disipación en función del ángulo de inclinación. 2) Estabilidad y dinámica en empaquetamientos granulares Se estudia el proceso de avalancha donde existe una interacción colectiva entre los granos. Un empaquetamiento de esferas monodispersas colocadas en una caja cerrada con humedad controlada se inclina suavemente hasta que el sistema se desestabiliza dando lugar a una avalancha. Dicho proceso se caracteriza mediante la masa desalojada y dos ángulos característicos: maximo angulo de estabilidad: es el que forma la superficie libre del empaquetamiento con la horizontal cuando el sistema se desestabiliza y comienza la avalancha. - ángulo de reposo: es el que forma la superficie libre del empaquetamiento con la horizontal cuando la avalancha concluye. Se analizó la influencia de la cantidad de capas granulares (N), la humedad relativa ambiente, la fracción de compactación inicial y el tamaño del empaquetamiento en la variación de estos ángulos críticos y de la masa de la avalancha. Se encuentra que para empaquetamientos con un número dc capas mayor que un cierto valor crítico Nc,el proceso de avalanchas sólo afecta a las Nc,capas superficiales y tanto los ángulos críticos como la masa desplazada, son independientes de N. Finalmente se verifica la relación que para sistemas abiertos existe entre el angulo de reposo y el denominado angqu neutro donde un flujo de granos (avalancha) no produce erosión ni sedimentación sobre la superficie de un empaquetamiento granular.

Abstract:
The behavior of a flow of grains over the slope of a granular packing is studied. This work is presented in two parts: l) Motion of a sphere over a granular bed. Individual motion of an isolated grain over a granular bed is studied. This interaction is experimentally modeled by means of the motion of a sphere of diameter D over an inclined bed constituted of grains with mean diameter d < D. According to the slope of the granular surface, three different regimes are observed: decelerated, constant velocity and accelerated motions. Experimental results lead to understand in detail the energy dissipation mechanisms involved when a sphere gains energy rolling down an inclined rough plane. This mechanisms also allow us to understand the decelerated motion that occurs at low inclination angles. In the constant velocity regime where there is a viscous dissipative force acting over the sphere its collision frequency with the grains that constitute the bed is determined using acoustic and video techniques. This helps to understand the way in which the sphere dissipates energy by collisions. The variation of this dissipative source with the inclination angle of the granular bed is studied. 2) Stability and dynamics in granular packings. The avalanche process where there is collective interaction between grains is studied. A monodisperse glass sphere packing under controlled humidity is slowly inclined until the system loose its stability and an avalanche takes place. This process is characterized by the avalanche mass and two characteristics angles: - Maximum angle of stability: the angle between the packing free surface and the horizontal at which the system looses its stability and when the avalanche begins. - Angle of repose: the angle between the packing free surface and the horizontal when the avalanche ends. The influence of the number of granular layers (N), relative humidity, initial packing fraction and packing size on the critical angles and the avalanche mass is analyzed. It is found that for packing with more than a certain critical number of layers Nc. the avalanche process only involves the Nc superficial layers and both the critical angles and the avalanche mass are independent on N. Finally, for open systems, the relation between the angle of repose and the neutral angle where a granular flow (avalanche) produces no erosion nor sedimentation over the granular packing surface is verified.

"Estabilidad y estabilización de sistemas de control a datos muestreados" (2001). Mancilla Aguilar, José Luis. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo estudiamos la estabilidad y estabilización de sistemas de control a datos muestreados. Con tal fin introducimos un tipo de ecuación híbrida que permite modelar estos sistemas en toda la escala temporal, y estudiamos la estabilidad del sistema dinámico híbrido determinado por las soluciones de una de tales ecuaciones. Obtenemos así caracterizaciones de las distintas propiedades de estabilidad en términos de funciones de Lyapunov. Luego analizamos la estabilidad de sistemas híbridos lineales perturbados con perturbaciones evanescentes o persistentes y caracterizamos la estabilidad exponencial del sistema híbrido en términos de la estabilidad exponencial de su linealización (una extensión del Primer Método de Lyapunov). Aplicando estos resultados al estudio del problema de la estabilización exponencial de una planta no lineal mediante un controlador digital, obtenemos condiciones necesarias y suficientes para la existencia de estabilizadores exponenciales y demostramos la robustez de estos controladores. También estudiamos la implementación digital de leyes de control estabilizantes vía muestreo y retención de orden cero. Demostramos que tal implementación estabiliza semiglobalmente al sistema a un entorno del origen. La técnica de demostración que empleamos nos permite por un lado obtener cotas para el paso de muestreo y por el otro derivar una condición suficiente para la estabilización asintótica. Por último estudiamos la implementación digital de soluciones del problema de seguimiento de trayectorias. Mostramos un ejemplo en el cual la implementación digital vía muestreo y retención de orden cero produce un error de seguimiento inaceptable. Inspirados en construcciones desarrolladas por Krasovskii y Subbotin en el contexto de la teoría de juegos posicionales, presentamos un algoritmo de control que, a partir de una solución del problema de seguimiento de trayectorias y, empleando los datos muestreados del sistema, asegura la estabilidad práctica semiglobal del error de seguimiento, con error final arbitrariamente pequeño si el período de muestreo es suficientemente pequeño. También demostramos que el controlador propuesto es robusto respecto de pequeñas perturbaciones y de pequeños errores en los actuadores y en las mediciones, aún si la ley original no lo era.

Abstract:
In this work we study the stability properties and the stabilization of sampled-data control systems. With this aim we introduce a class of hybrid equations that enables us to model these systems in the whole time scale and we study the stability properties of the hybrid dynamical system originated from the solutions of any of these equations. In this way we obtain, in terms of Lyapunov functions, characterizations of the various stability properties of this class of systems. Next, we analyze the stability of perturbed hybrid linear systems for both non-evanescent and evanescent perturbations, and we characterize the exponential stability of the hybrid system in terms of the exponential stability of its linearization (an extension of the Indirect Lyapunov Method). These results enable us to obtain necessary and sufficient conditions for the existence of digital exponential stabilizers for nonlinear continuous-time plants and to prove the robustness of these controllers. We also study the digital implementation of stabilizing control laws via Sampling and Zero-order Hold (SZH), and we show that with this implementation practical semiglobal stabilization to the origin is obtained. The technic used in the derivation of these results enables us, on one hand, to obtain bounds for the sampling ratio and on the other, to establish a sufficient condition for the asymptotic stabilization of the origin. Finally, we study the digital implementation of continuous-time trajectory tracking laws. We present an example where the SZH-implementation of one of these laws results in an unacceptable tracking error. Then, and based on certain results obtained by Krasovskii and Subottin in the context of positional games, we develop a control algorithm that guarantees semiglobal practical stability of the tracking error, with final error arbitrarily small for small enough sampling periods. This algorithm uses a known continuous-time solution of the tracking problem and the sampled-data of the system. We show that this controller is robust to small perturbations and to small errors in the measurements and in the actuators, even if the original continuous-time law is not so.

"Estabilidad y propiedades electrónicas de agregados de metales de transición" (1998). Guevara, Alejandro Javier. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Durante los últimos años ha habido un gran interés en el estudio de pequeños agregados (clusters) metálicos. En particular, los clusters de metales de transición (MT) son muy atractivos por su magnetismo y reactividad química en conección con los procesos catalíticos. En esta tesis mostramos que es posible estudiar propiedades electrónicas de pequeños agregados de MT teniendo como punto de partida parámetros del estado sólido. Proponemos primero un porencial modelo semiempírico para simular propiedades de materiales y clusters de MT. La parte atractiva del potencial se obtiene a partir de un Hamiltoniano de uniones fuertes que tiene en cuenta la simetría de los orbitales d y conduce a una dependencia con la potencia 2/3 de la coordinación efectiva (o segundo momento de la densidad local de estados) en lugar de la dependencia usual de la raíz cuadrada. Para el uso de este modelo de potencial en materiales especificos, se deben ajustar cuatro parámetros con datos experimentales del volumen. Presentamos dos tipos de parametrización y calculamos propiedades del volumen, defectos, superficies, y de clusters, comparando con experimentos, cálculos ab initio, y la aproximación usual del segundo momento. En una segunda etapa mostramos que nuevamente el uso de parámetros del volumen con un buen tratamiento de las superficies da las herramientas necesarias para cálculos de estructura electrónica de clusters de MT, en el marco de un Hamiltoniano Hubbard parametrizado en la aproximación de Hartree-Fock irrestricta. El Hamiltoniano modelo tiene en cuenta el ”spillover” electrónico que se produce en la superficie del cluster. Hacemos los cálculos para clusters fcc y bcc de hasta 260 átomos haciendo uso de propiedades de simetría. Obtenemos momentos magnéticos (por átomo y capa) y potenciales de ionización para clusters de Ni, de Co y de Fe. También calculamos las propiedades magnéticas de clusters mixtos, específicamente clusters de Co recubiertos de Ag. Mostramos como el momento magnético total de estos sistemas presenta un amplio rango de posibles valores dependiendo de la distibución de los átomos de Ag en la superficie. Esto último podría tener importantes consecuencias en la magnetorresistencia de sistemas granulares. Comparamos con cálculos ab initio (FP-LAPW) periódicos hechos para algunas estructuras particulares.

Abstract:
During the last decade there has been great interest in the study of small metallic clusters. In particular, transition-metal (TM) clusters are very attractive because of their magnetic and chemical reactivity in connection with catalytic processes. In this thesis we show that it is possible to study the properties of small TM clusters by taking as starting point parameters from the bulk state. We propose first a semiempirical model potential to simulate properties of fcc TM materials and clusters. The attractive part of the potential is obtained from a tight-binding Hamiltonian that takes into account the symmetry of the d orbitals and leads to a 2/3 power dependence on the effective coordination (or second moment of the local density of states) instead of the usual square-root dependence. In order to use this potential for specific materials, four parameters are adjusted with bulk experimental data. We present two different parametrizations and calculate hulk. defect, surface, and cluster properties comparing with experiment, ab initio calculations. and the usual second-moment approximation. In a second step we show that. again. the use of bulk parameters with a good treatment of the surfaces gives the necessary tools for electronic structure calculations of TM clusters within a parametrized Hubbard Hamiltonian in the unrestricted Hartree-Fock approximation. The model Hamiltonian takes into account electron spillover on the cluster surface. We perform calculations for fcc and bcc clusters of up to 260 atoms making use of symmetry properties. We obtain magnetic moments per atom and shell. and ionization potentials for Ni, Co and Fe clusters. We also calculate the magnetic properties of mixed clusters, specifically, Co clusters covered by Ag atoms. We show that the total magnetic moment of these systems presents a wide range of possible values depending on the distribution of Ag atoms on the surface. This last finding could have important consequences for the Giant Magnetoresistance Effect of granular systems. We compare with 3D FP-LAPW calculations done for some particular structures.

"Estabilidad y propiedades fisicoquímicas de complejos de inclusión de ß-ciclodextrinas y sus derivados" (2013-08-07). Ponce Cevallos, Peggy Alejandra. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Un paso muy importante en el desarrollo de ingredientes funcionales activos es el diseño de formulaciones que permitan la estabilización, solubilización y liberación controlada de componentes activos en los productos alimenticios, farmacéuticos y cosméticos, a los cuales son añadidos. Esto puede ser logrado por la encapsulación en matrices amorfas de carbohidratos o polímeros obtenidos por congelación y deshidratación (vitrificación) o mediante sistemas novedosos de encapsulación a través de la formación de nanopartículas, mediante la utilización de ciclodextrinas, debido a la propiedad de las mismas de formar complejos de inclusión por un mecanismo totalmente diferente al de encapsulación en una matriz amorfa. Se analizarán los mecanismos físico-químicos involucrados en la efectividad de una ciclodextrina natural, la β-ciclodextrina, y de dos ciclodextrinas modificadas en la estabilización de biomoléculas lábiles de distintas características. La información derivada de este estudio y, paralelamente, el conocimiento de las reacciones de deterioro más frecuentes sufridos por los compuestos de interés analizados proporcionará distintas estrategias para perfeccionar y ampliar la efectividad de los agentes protectores. Se analizará además, el efecto de las variables tradicionales temperatura y contenido acuoso para establecer la incidencia en la conservabilidad de los productos. Los resultados de este estudio pueden contribuir al conocimiento de las interacciones moleculares y factores fisicoquímicos que afectan la conservabilidad de moléculas lábiles incluidas en ciclodextrinas o matrices continuas. Además puede ser útil para seleccionar las condiciones óptimas de almacenamiento, permitir la liberación controlada o predecir la vida útil de productos funcionales formulados con compuestos encapsulados en matrices continuas o en ciclodextrinas.

Abstract:
An important step in the development of functional ingredients is the design of formulation procedures for the stabilization, solubilization and delivery of the active components in food, cosmetic and pharmaceutical products in which they are added. This can be achieved by the encapsulation in amorphous matrices of carbohydrates, gums obtained by dehydrate and frozen processes (vitrification) or by novel encapsulation systems through the formation of nanoparticles using amphiphilic cyclodextrin molecules (CD), because of their ability to form inclusion complexes with active compounds by a mechanism totally different to the encapsulation in a continuous matrix. The physicochemical mechanism involved in the efficiency of a natural cyclodextrin, the β- cyclodextrina, and two modified cyclodextrins on the stabilization of the labile biomolecules encapsulated, have been analyzed. The effect of traditional variables (moisture content and temperature) has been analyzed to establish the best conditions to protect the labile molecule. The information obtained from this study and in parallel, the knowledge of deterioration chemical reactions experimented by the labile biomolecule encapsulated could be helpeful to increase the performance and the effectiveness of the protection agents. The efficiency of encapsulation by the continuous matrix or the formation of inclusion complexes are a function of physical and chemical properties of matrix and cyclodextrins as also of the nature of the encapsulated compounds. Expected results may contribute to the knowledge of molecular interactions and physical factors that affect the kinetics of retention of labile biomolecules encapsulated in amorphous matrices or cyclodextrins. Moreover, results could be useful to establish the best conditions to protect labile molecules, increase solubility of lypophilic compounds and for release-control of drugs.

"Establecimiento de la línea celular IIB-BR-G como modelo para el estudio del carcinoma de mama humano" (1995). Bover, Laura del Carmen. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis se investigaron algunas características de las células stem de cáncer de mama humano, para lo cual se utilizaron diversos sistemas de estudio: a) cortes histológicos de tumores. b) biopsias frescas de tumores. c) líneas celulares tumorales. Sobre cortes histológicos de tumores de mama humanos se investigó la relación entre la síntesis de ADN y la expresión de un antígeno de diferenciación (antígeno carcinoembrionario, CEA), observándose que el índice de marcación con timidina (TLI), resultó inversamente proporcional a la presencia de CEA y al grado de diferenciación del tumor. Aún en los tumores CEA-positivos, la mayoría de las células que estaban sintetizando ADN fueron CEA-negativas. Utilizando células obtenidas por disgregación enzimática de tumores de mama y mediante un sistema de centrifugación en gradientes de densidad, se logró separar subpoblaciones celulares en las que se analizó la capacidad clonogénica como indicativa de célula stem. En base a los resultados obtenidos con los tumores y teniendo en cuenta distintas características de los mismos (grado de diferenciación, tamaño, etc.), se seleccionó uno de ellos para establecer una línea celular a la que se denominó IIB-BR-G. Con la inyección subcutánea de células de dicha línea en ratones atímicos, se logró también establecer una línea in vivo (IIB-BR-Gnude). La línea in vitro presentó características de indiferenciación y agresividad, además de ser negativa su expresión de receptores hormonales, lo que resultó particularmente interesante, teniendo en cuenta que no es demasiada la información disponible sobre los mecanismos que gobiernan el crecimiento de las líneas celulares que no expresan receptores hormonales. Por lo tanto, se estudió su perfil antigénico, la expresión de diversos oncogenes asociados con carcinomas mamarios, la citogenética de la misma y su morfología ultramicroscópica. Además, ambas líneas fueron utilizadas para diversos proyectos del laboratorio a saber: 1) ensayo de drogas que inhiben proliferación celular; 2) radioinmunolocalización de tumores IIB-BR-Gnude mediante la utilización de AcM; 3) obtención de nuevos AcM utilizando como inmunógeno células enteras de IIB-BR-G; 4) establecimiento de metástasis experimentales mediante la inyección de células IIB-BR-G en el bazo de ratones atímicos.

"Establecimiento y estudio in vitro de células madre/progenitoras tumorales derivadas de gliomas de alto grado como fuente renovable para desarrollos terapéuticos" (2014-04-16). Videla Richardson, Guillermo Agustín. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los gliomas de alto grado son los tumores cerebrales primarios más frecuentes y son altamente agresivos e invasivos. Éstos parecen exhibir una organización jerárquica y se ha postulado que su generación ocurre a partir de células madre tumorales (CMT), las cuales corresponderían a una subpoblación minoritaria capaz de generar y propagar tumores al ser inyectadas en ratones inmunodeficientes. De esta forma, el aislamiento y la caracterización de células tumorales derivadas de pacientes con fenotipo de células madre o progenitoras permite contar con un valioso modelo de estudio para comprender en mayor profundidad la biología de los gliomas. En el presente trabajo logramos establecer con éxito nueve líneas de células madre/progenitoras tumorales (CMPT) a partir de biopsias de gliomas de alto grado. Éstas fueron capaces de generar tumores luego de ser inyectadas en el sistema nervioso central en ratones inmunodeficientes y presentaron las mismas alteraciones genéticas que se encontraron en los tumores parentales. Además, todas ellas fueron positivas para los marcadores de CMT: Nestina, Vimentina, CD44 y Sox2. Sin embargo, el grado de expresión de CD133 resultó ser variable en todas las líneas analizadas. A pesar de las similitudes entre las CMPT y las células madre neurales, es concebible pensar que pueden existir diferencias en sus respectivos potenciales de diferenciación. Para responder este interrogante hemos sometido a estas líneas celulares a diversos protocolos de diferenciación basados principalmente en el agregado de BMP4 recombinante humano y en la deprivación de factores de crecimiento. Luego de analizar la expresión de distintos marcadores de diferenciación y de evaluar cambios en la morfología celular, determinamos que estas líneas de CMPT poseen un grado variable de multipotencia, en donde cada una de ellas presenta un grado de compromiso particular hacia los linajes astroglial y neuronal. Además, pudimos observar que la adición de BMP4 recombinante redujo marcadamente la tasa de proliferación de todas las líneas celulares estudiadas. Por último, hemos determinado los niveles de expresión del ARNm de distintos ligandos y receptores involucrados en la señalización dependiente de BMPs en seis líneas de CMPT, encontrando en ellas ciertos patrones de expresión característicos. Dado que las CMT probablemente dependan de determinadas señales del microambiente tumoral para mantener su identidad, un tratamiento efectivo podría basarse en el bloqueo de mediadores generados en el nicho perivascular. Por este motivo y dado el gran potencial de este modelo experimental para el testeo de drogas, decidimos estudiar los niveles de expresión de los ARNm de los componentes del eje endotelinérgico en diferentes líneas de CMPT. Pudimos observar que todas las líneas celulares analizadas mostraron una expresión elevada de los transcriptos del receptor ETRB, mientras que el grado de expresión de los componentes restantes del sistema fue dependiente de cada línea celular. Más aún, en dos de cuatro líneas analizadas, el agregado de endotelinas recombinantes produjo una disminución significativa de los niveles de apoptosis generados en condiciones de deprivación de factores de crecimiento y nutrientes. Dada la variabilidad observada en las respuestas celulares a diferentes tratamientos en las distintas líneas de CMPT, este trabajo pone de menifiesto la relevancia de contar con un modelo in vitro basado en cultivos derivados de gliomas que permita contribuir al desarrollo de terapias personalizadas.

Abstract:
High grade gliomas are the most frequent and malignant primary brain tumors in adults and appear to have a hierarchical organization suggestive of a stem cell foundation. Glioma stem cells (GSC) have been recently isolated from tumors of patients and were characterized as a small subset of stem-like tumor cells capable of initiating and sustaining tumor growth when grafted into mice. Thus, isolation and expansion of these putative cancer stem/progenitor cells, harboring tumor-specific phenotypes, constitutes a powerful model to study glioma biology. Significantly, GSC lines from different tumors exhibit divergent gene expression signatures and distinct differentiation behavior. In the present study, we successfully established nine glioma stem/progenitor cell (GSPC) lines obtained from malignant gliomas which display stem cell properties and initiate high-grade gliomas following xenotransplantation. Importantly, all the established cell lines presented the same genomic alterations as parental tumors. Additionally, they were all positive for the stem cell markers: Nestin, Vimentin, CD44 and Sox2. In contrast, CD133 expression levels widely varied among GSPC lines. Despite similarities between GSPC and normal neural stem cells, we hypothesized that there may be differences in their differentiation potentials. To address this issue, first, we exposed these cell lines to several differentiation conditions that principally include BMP4 treatment and growth factors withdrawal. After analyzing the expression of various markers of differentiation and assessing changes in cell morphology, we determined that these GSPC lines possess a varying degree of multipotency. Moreover, we observed that the addition of recombinant BMP4 markedly reduced the rate of proliferation of all the studied cell lines. Finally, we determined the expression levels of different ligands and receptors involved in BMP-signaling, and found that the GSPC lines show characteristic patterns of expression. As many cancer stem cells might depend on a niche to maintain their identity, targeting molecules triggered by the perivascular niche could be a strategy to deplete or differentiate them. For this reason and given the potential of the present experimental model for drug screening, we studied the expression profile of the endothelin (EDN) axis members in different GSPC lines grown in vitro. Our findings revealed that all tested cell lines robustly express ETRB receptor. Nevertheless, the expression levels of the other components of this axis resulted cell line specific. Furthermore, in two from four GSPC lines, the addition of recombinant EDNs (1, 2 and 3) reduced apoptotic rates upon qrowth factors and nutrients withdrawal. Given the diversity of the responses displayed by patient-derived CSC lines, the present study highlights the relevance of the in vitro model presented herein for the development of tailor-made therapies.

"Estado químico del arsénico formado por transformaciones nucleares en compuestos inorgánicos de germanio, selenio, bromo y arsénico" (1961). Baró, Gregorio Bonifacio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Abstract:
The distribution of radioactive arsenic among trivalent and pentavalent states of arsenic produced by nuclear transformations has been investigated in simple inorganic compounds of germanium, selenium, bromine and arsenic. In some cases we have studied the change of this distribution by annealing processes. The nuclear transformations we have studied are the following: Ge77-—β—> As77 Se76 (n,p) As76 Br81 (n,α) As78 Br79 (n,α) As76 As75 (n,γ) As76 The compounds were irradiated with neutrons in the RAI reactor in Buenos Aires and later with neutrons obtained by bombarding beryllium with 26 MeV deuterons in the Philips synchrocyclotron of Amsterdam. The chemical separations used consisted of the dissolution of the irradiated compound in a solution containing AsIII and AsV carriers. The arsenate fractions were separated from the arsenite fractions by precipitation as magnesium ammonium arsenate. The arsenite was then oxidized to arsenate which in turn was precipitated as magnesium ammonium arsenate. All fractions were converted to magnesium piro-arsenate. The radioactive samples were counted with an end-window G.M. counter under conditions of standard geometry. Annealing was carried out in constant-temperature baths during specified periods of time. It is evident from our experimental results that chemical conditions in the aqueous medium, and specially the pH, have little or no influence on the distribution of the arsenic activity among the two oxidation states. This suggests that the final form in which the radioactive arsenic will be found is already determined inside the target lattice. It is even more striking that the distribution observed in GeO2 is very nearly equal to that in SeO2. This suggests that the structure of the oxide is the determining factor for the distribution of the arsenic activity among arsenite and arsenate fractions. It is very curious that the AsV: total As of radioactive arsenic in the oxides of germanium and selenium and in the oxides of arsenic may be represented as a linear function of the oxygen: parent element ratio for the irradiated compound. This is true for some other compounds as Na2Se04 and Na2Ge03. In the other compounds that we have investigated the linear relationship does not hold very well. In part this maybe the reflection of the differences in the lattice arrangement, but reducing and oxidizing tendencies of the irradiated compounds may also possibly play a role. The differences found between Na2Se03 and H2Se03 can be ascribed to bound hydrogen present inside the latter compound. The results in the bromine compounds indicate that the distribution of radioactive arsenic among the arsenite and arsenate fractions depends on the amount of oxygen contained in the irradiated compounds. Even in the bromides the percentage of radioarsenic is fairly directly correlated with the oxygen present as water in the crystal. Annealing turned out to be quite slow, even at temperatures appreciably higher than those required to increase the retention in most neutron irradiated solid salts. The first part of this thesis presents a survey of the field of Szilard-Chalmers and similar phenomena with emphasis on inorganic systems. It will not cite all the literature published until now, but will try to review some of the most significant recent work.

"Estadística y procesamiento de información en sistemas excitables con ruido" (2002). Eguia, Manuel Camilo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Este trabajo se centra en el estudio de los sistemas excitables bajo la acción del ruido. Aun los sistemas canónicos más simples presentan propiedades estadísticas no triviales que dan cuenta de la estructura topológica de su espacio de fases determinista. Algunos aspectos estructurales de estos sistemas se revelan en presencia de ruido y en proximidad de las bifurcaciones que los caracterizan. En particular las dos clases básicas de excitabilidad (tipo I y II) presentan huellas distintivas diferenciadas en los histogramas de tiempos entre pulsos cerca de sus respectivas bifurcaciones. En la primera parte de este trabajo se derivan expresiones analíticas y semianalíticas para los histogramas de tiempos entre pulsos excitables de dos sistemas clásicos: el péndulo con torque y el modelo de FitzHugh-Nagumo. Las aproximaciones abrevan de la teoría de escapes de un estado metaestable de Kramers y otros elementos de la teoría de procesos estocásticos. Se discute un posible impacto de los resultados en el estudio de la actividad espontánea estacionaria de neuronas. En la segunda parte de esta tesis abordamos algunos aspectos del acople de sistemas excitables. En particular mostramos cómo es posible realizar operaciones lógicas con sistemas excitables con ruido, sin sincronización externa. Para ello utilizamos las propiedades de saturación e integración temporal de un modelo simplificado de sinapsis qímicas rápidas. Finalmente aplicamos algunos elementos de teoría de la información a un modelo de neuronas que producen ráfagas con el propósito de poner en evidencia justamente algunas limitaciones de la aplicacion estándar de dicha teoría (concebida originalmente para elementos pasivos de trasducción) a los sistemas neuronales que son fuertemente no lineales y activos.

Abstract:
This thesis focuses on the behavior of excitable systems subjected to the action of external noise. Even the simplest systems display nontrivial statistical properties that account for the topological structure of its phase space. These features arise in the presence of noise and close to a characteristic bifurcation. For instance, the two basic types of excitability (class I and II) can be discriminated by means of the intespike histograms close to their respective bifurcations. In the first part of this work, we derive analytical and semianalytical expressions for the interspike histograms of two clasical models: the pendulum with friction and torque and the FitzHugh-Nagumo equations. The aproximations arise from Kramers’ escape theory and from the theory of stochastic processes. We discuss the potential impact of our results on the study of the spontaneous activity of neurons. In the second part of this thesis, we address the issue of coupling excitable systems. We show how to perform all the logical operations with excitable systems in a noisy environment and without external synchronization. In order to achieve this, we make use of the saturation and integration properties of a Simplified model of fast chemical synapse. Finally, we apply information theory to a bursting neuron model with the aim of revealing some limitations of a straightforward aplication of the information measures (originally concieved for pasive transducers) to a neural system, which is active and strongly nonlinear.

"Esterificación extractiva" (1950). Reti, Mario T.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estilos estructurales del Subandino Sur de Bolivia" (2013). Rocha, Emilio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El Subandino Sur de Bolivia es una típica faja plegada y corrida de lámina delgada, con una notable regularidad en la geometría de las estructuras. Esta es una característica típica de las fajas plegadas en las que no se involucra el basamento en la deformación. Sin embargo, cuando se analiza en detalle la geometría y evolución de la deformación del Subandino Sur, se verifica que existen numerosas desviaciones de dicha regularidad. En el presente trabajo se estudiaron los diferentes procesos que habrían condicionado el desarrollo de las estructuras del Subandino Sur, y se puso especial énfasis en el análisis de aquellos factores que podrían explicar las irregularidades que se identifican en la geometría y evolución de la deformación de las diferentes estructuras. Del análisis realizado se destaca la relevancia que tienen los niveles de despegue involucrados en la deformación. En particular, se analiza la importancia que habría tenido el nivel de despegue superior en el desarrollo de los diferentes estilos estructurales que se observan en el Subandino Sur. Este análisis se enfocó en el desarrollo de sobrepresiones, factor determinante para el funcionamiento del nivel de despegue en las pelitas devónicas de la Formación Los Monos. Para esto se realizaron una serie de modelos de sistemas petroleros 1D, mediante los cuales se pudo modelar la generación primaria de gas y el craqueo secundario, procesos que se relacionan con la existencia de sobrepresiones y, por lo tanto, con la eficiencia del nivel de despegue superior. Los modelos permitieron relacionar la evolución térmica de la cuenca de antepaís y la generación de gas, con los diferentes estilos estructurales que se observan en la actualidad en el frente de deformación. De esta manera se pudo dividir al frente de deformación del Subandino Sur en dos segmentos bien diferenciados. Por un lado, en el segmento norte, donde los modelos indican que la generación de gas y las sobrepresiones de la Formación Los Monos estarían bien desarrolladas, se verifica la existencia de estructuras de dúplex de techo compuesto en las cuales el nivel de despegue superior se encuentra activo. Por el contrario, en el segmento sur del frente de deformación, donde los modelos sugieren que la generación de gas en las pelitas devónicas de la Formación Los Monos sería escasa, se desarrollan estructuras de pliegues de flexión de falla donde el despegue superior no estaría involucrado en la deformación. Con un abordaje similar al que se describe en el párrafo anterior, se realiza el análisis de los distintos estilos estructurales que se observan en los diferentes trenes de estructuras. Este análisis permite relacionar las diferentes historias térmicas que habrían existido en la cuenca de antepaís durante la evolución de la deformación, con los estilos estructurales desarrollados en los distintos trenes de la faja plegada y corrida del Subandino Sur. Se proponen tres situaciones en las que se habrían desarrollado las diferentes estructuras del Subandino Sur. Una primera situación donde el despegue superior no estaría bien desarrollado, y donde se generarían estructuras de pliegues de flexión de falla; una segunda situación donde el despegue superior estaría limitado a una estrecha franja cercana al frente de deformación, y donde las estructuras favorecidas serían dúplex de techo pasivo; y una tercera situación donde el despegue superior estaría ampliamente desarrollado, y donde se favorecerían las estructuras de dúplex de techo activo. Para complementar el análisis de los estilos estructurales, se realizaron diferentes modelos análogos con los que se logró reproducir algunas de las características que se observan en la deformación interna de los niveles pelíticos de la Formación Los Monos en los núcleos de los anticlinales típicos del Subandino Sur de Bolivia y Argentina. Otro de los rasgos que llama la atención cuando se analiza la geometría en planta de la faja plegada del Subandino Sur es la existencia de zonas de transferencia e inflexiones que se alinean en sucesivos trenes estructurales. Para analizar este fenómeno, en el presente trabajo se estudiaron los factores que condicionan el espaciamiento entre estructuras y se realizó una medición del espaciamiento actual que se observa entre los diferentes trenes estructurales del Subandino Sur. Se propone un modelo de evolución en el que las zonas de transferencia e inflexiones que se replican en trenes estructurales sucesivos se generarían de forma tal de mantener un espaciamiento regular entre las diferentes estructuras. Particularmente se analiza el caso de la estructura de La Vertiente, que es un pliegue de flexión de falla relativamente pequeño y de escaso rechazo. De acuerdo a la interpretación de líneas sísmicas 2D, el comienzo de la deformación de esta estructura fue datado por diferentes autores en 6 Ma. La restitución de las secciones estructurales indicaría que la misma fue generada a un espaciamiento de alrededor de 65 km, lo cual representa entre 2 y 3 veces el espaciamiento máximo que se verifica en el resto de las estructuras del Subandino Sur. Para explicar esta “anomalía”, se analizaron los diferentes factores que podrían generar un aumento del espaciamiento de este orden. Se presenta un modelo en el que el aumento en la capacidad de erosión del Rio Pilcomayo, producto de la captura de una vasta región que previamente habría drenado al Río Parapetí, habría generado una drástica disminución del coeficiente de fricción basal efectivo en las pelitas silúricas de la Formación Kirusillas. Este cambio, a su vez, sería responsable del aumento en el espaciamiento entre estructuras que se verifica para la estructura de La Vertiente.

Abstract:
The Southern Subandean Zone of Bolivia is a typical thin-skinned fold and thrust belt with a remarkable regularity in the geometry of the structures. This is a typical characteristic of fold and thrust belts where the basement is not involved into deformation. However, when the structural geometry and evolution are analyzed in detail, it is verified that there are many deviations from such regularity. In this paper it has been studied the processes that might have affected the development of the structures along the Southern Subandean Zone, and special emphasis was placed on analyzing those processes that could explain the irregularities identified in the geometry and evolution of the deformation of the different structures. The analysis highlights the relevance of the detachment levels involved in the deformation. Particularly, it is analyzed the role that may have played the upper detachment level in the development of the different structural styles observed throughout the Southern Subandean Zone of Bolivia. This analysis is focused on the development of overpressures, which may have been essential for the activation of the detachment level at the Devonian shales of the Los Monos Formation. To do this, a series of 1D petroleum system models were done at different positions along the present deformation front. This analysis allows to model primary gas generation and secondary cracking, processes that are related to the overpressure development, and therefore, with the efficiency of the upper detachment level. The models suggest a relationship between thermal evolution of the foreland basin and generation of gas, with different structural styles observed in the present deformation front. In this way, it was possible to divide the deformation front of Southern Subandean Zone in two distinct segments. In the northern segment, where models suggest that gas generation and overpressure of the Los Monos Formation would be well developed, it is verified the existence of structures of composite roof duplex where the upper detachment level has been active. On the other hand, in the southern segment of the deformation front, where the models suggests that generation of gas in the Devonian shales of Los Monos Formation would be limited, it is verified the existence of structures of fault bend folds where upper detachment level is not involved in the deformation. Using a similar approach to that described in the previous paragraph, an analysis was performed at the different structural styles observed throughout the study area. This analysis allows relating the thermal evolution of the foreland basin during development of the deformation, with the different structural styles defined throughout the entire fold and thrust belt of Southern Subandean Zone of Bolivia. The results suggest three scenarios under which may have been developed the different structural styles observed at the Southern Subandean Zone. A first scenario is defined where the upper detachment level would not be well developed, and where fault bend folds were generated. A second scenario is defined where the upper detachment level would be limited to a narrow strip near the deformation front, and where the favored structures would have been passive roof duplex. And a third situation is defined where the upper detachment level would be widely developed. Under this scenario active roof duplex structures are preferentially generated. In order to complement the structural style analysis, different analogue models were done to reproduce some of the features related to the internal deformation of the pelitic intervals of the Los Monos Formation at the cores of several anticlines developed along the Southern Subandean Zone of Bolivia and northern Argentina. Another feature that highlights when analyzing the plan view geometry of the structures of the Southern Subandean Zone is the existence of relay zones and inflections that align at successive structures. To analyze this feature, it have been studied the different factors that define the spacing between structures, and a measurement of the existing spacing between structures were performed throughout the different structures of the Southern Subandean Zone. It is proposed a model of evolution which considers that relay zones and inflections that are replicated at successive structures would have been generated in order to maintain regular spacing between the structures. Special attention is given to La Vertiente structure, a small fault bend fold with low relief developed at Rio Pilcomayo latitude. According to 2D seismic interpretation, the beginning of the deformation of this structure has been dated by several authors around 6 Ma. A structural reconstruction of cross sections suggest that La Vertiente structure was generated at a spacing of 65 km, which represents between 2 and 3 times the maximum spacing that characterize the rest of the structures of the Southern Subandean Zone. With the aim of explaining this "anomaly", different factors that could lead to an increase in the maximum spacing of this order have been analyzed. It is presented a model in which increased capacity of erosion of the Rio Pilcomayo, as a result of the drainage basin capture of some of the area that previously was part of the Río Parapetí drainage network, would have generated a dramatic decrease of the effective basal friction coefficient of the Kirusillas Formation. This change, in turn, would be responsible for the increased spacing between structures which holds for the structure of La Vertiente.

"Estimaciones de Error para aproximaciones obtenidas usando cuadrados mínimos con peso variable" (2000). Armentano, María Gabriela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo de esta tesis es obtener estimaciones de error en RN para aproximaciones obtenidas usando cuadrados mínimos con peso variable. Probaremos que, bajo hipótesis apropiadas sobre la función de peso y la distribuución de puntos, se tienen estimaciones de error de orden óptimo en L∞ y L² para la aproximación de la función y sus derivadas. Estas estimaciones son importantes en el análisis de aproximaciones de Galerkin basadas en cuadrados minimos con peso variable. En particular, los resultados proveen estimaciones de error, óptimas en orden y regularidad, para problemas coercivos de segundo orden. También, nuestras estimaciones de error proveen la consistencia de los esquemas que resultan cuando el método es usado para generar fórmulas de diferencias finitas o colocación a partir de un conjunto arbitrario de puntos. Además, se introduce el método de cuadrados mínimos continuos y se obtienen también estimaciones de error de orden óptimo para este método. Finalmente, como ejemplo de aplicación de estos métodos se considera la ecuación de convección-difiusión y se propone una manera de introducir up-wind mediante el uso de una función de peso no simétrica. Se presentan varios ejemplos numéricos que muestran el buen comportamiento del método.

Abstract:
The aim of this thesis is to obtain error estimates for moving least square approximations in RN. We prove that, under appropriate hypotheses on the weight function and the distribution of points, the method produces optimal order error estimates in L∞ and L² for the approximations of the function and its derivatives. These estimates are important in the analysis of Galerkin approximations based on the moving least square method. In particular, the results provides error estimates, optimal in order and regularity, for second order coercive problems. Also, our estimates allows to control the consistency error of finite difference or collocation methods obtained from an arbitrary set of points by the moving least square method. Moreover, we introduce the continuous moving least square method and obtain the error estimates for this method too. Finally, as an application of these methods we consider a convection-diffusion equation and propose a way of introducing up-wind by means of a non-symmetric weight function. We present several numerical results showing the good behavior of the method.

"Estimaciones de dimensión para conjuntos de tipo Furstenberg y teoremas de restricción para medidas de Hausdorff" (2010). Rela, Ezequiel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis se estudian dos problemas del Análisis Armónico clásico desde el punto de vista de las medidas de Hausdorff. El primero es el problema de Furstenberg, que en su versión clásica se refiere a la determinación de la dimensión de Hausdorff (dim_H ) de los conjuntos de la clase F_α : dado α ∈ (0, 1], un conjunto E ⊆ R^2 está en la clase Fα si para cada e ∈ S existe un segmento unitario l_e en la dirección de e tal que dim_H (l ∩ E) ≥ α. En el caso α = 1, este problema resulta equivalente al problema de Kakeya. Si notamos γ(α) = inf {dim_H (E) : E ∈ Fα }, entonces vale que max {1/2 + α; 2α} ≤ γ(α) ≤ (1 + 3α)/2. (1) En este trabajo se estudia este problema desde una perspectiva más general, en términos de las medidas de Hausdorff h-dimensionales H^h asociadas a funciones de dimensión. Definimos los conjuntos de la clase de Furstenberg F_h asociados a una función h. La hipótesis natural para cada dirección es que H^h (l_e ∩ E) > 0. Generalizamos los resultados conocidos en términos de “saltos logarítmicos” y obtenemos resultados análogos a las cotas clásicas que permiten, además, extender la desigualdad (1) al caso extremo α = 0. Precisamente, se prueba que la función de dimensión apropiada para los conjuntos de la clase F_h no puede ser mucho más chica que h^2 o que la raiz cuadrada de h. Para las cotas superiores exhibimos explícitamente conjuntos en la clase F_h suficientemente chicos. Usamos para eso algunos resultados sobre Aproximación Diofántica,acerca de la dimensión de conjuntos de números “bien aproximables”. Obtenemos resultados acerca de la dimensión de conjuntos en la clase Fαβ, definida como Fα pero sólo para un conjunto L ⊂ S tal que dim_H (L) ≥ β. Probamos una versión de (1) que refleja la interacción entre los parámetros α y β. Este problema fue estudiado también en el conexto general. En segundo lugar se estudió con el mismo enfoque el problema de la Restricción de la Trasformada de Fourier, que se refiere a la posibilidad de darle sentido a la restricción de f a un subconjunto E de R^n . La respuesta depende de la existencia de una medida μ en E con ciertas propiedades de dimensiona- lidad y de decaimiento para su transformada μ. En este contexto se reformuló el teorema de restricción de Stein-Tomas en términos de medidas de Hausdorff.

Abstract:
In this thesis we study two problems in classical Harmonic Analysis. The first is the Furstenberg problem, which in its classical form concerns the de termination of the Hausdorff dimension (dim_H) of the sets in the F_α -class: for a given α ∈ (0, 1], a set E ⊆ R^2 is in the Fα-class if for each e ∈ S there exists a unit line segment l_ e in the direction of e such that dim_H (l ∩ E) ≥ α. For α = 1, this problem is essentially equivalent to the “Kakeya needle problem”. If we define γ(α) = inf {dim_H (E) : E ∈ F_α }, then max {1/2 + α; 2α} ≤ γ(α) ≤ (1 + 3α)/2. (1) In this work we approach this problem from a more general point of view, in terms of h-dimensional Hausdorff measures H^h associated to dimension functions. We define the class F_h of Furstenberg sets associated to a given dimension function h. The natural requirement for a set E to belong to F_h , is that H^h (l_e ∩ E) > 0 for each direction. We generalize the known results in terms of ‘logarithmic gaps” and obtain analogues to the estimates given in (1). Moreover, these analogues allow us to extend our results to the endpoint α = 0. Precisely, we prove that the correct dimension function for the class F_h can not be much smaller than h^2 or square root of h. For the upper bounds we exhibit an explicit construction of F_h-sets which are small enough. To that end we prove some results from Diophantine Approximation about the the dimension of the set of “well approximable numbers”. We obtain results about the dimension of Furstenberg sets in the class F_αβ , defined analogously to the class Fα but only for a fractal set L ⊂ S such that dim_H (L) ≥ β. We prove an inequality like (1) which reflects the interplay between α and β. This problem is also studied in the general scenario of Hausdorff measures. The second problem studied in this work, in the same general scenario as before, is the Restriction Problem for the Fourier transform. Here the problem is to give a meaningful sense to the restriction of f to a subset E of R^n . The answer depends on the existence of a measure μ supported on E with precise conditions on the dimensionality of μ and decay properties of μ. In this context we reformulate the Stein-Tomas restriction theorem for Hausdorff measures.

"Estimaciones para el Error de Interpolación en elementos finitos Anisitrópicos" (1998). Acosta Rodríguez, Gabriel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo estudiamos diferentes tipos de operadores de interpolación sobre elementos finitos anisotrópicos. Obtenemos estimaciones óptimas para el error, en la interpolación de Lagrange sobre P1 y en W(1,P) con p > 2, para tetraedros bajo la asi llamada condición del ángulo máximo. Para la interpolación de Lagrange sobre Q1, en cuadriláteros, hallamos una condición geométrica muy poco restrictiva bajo la cual obtenemos estimaciones óptimas para el error en H1. Esta condición admite elementos anisotrópicos y generaliza todos los resultados conocidos. También presentamos un nuevo interpolador de promedios sobre P1 y probamos que posee orden óptimo en W(1,2), en 3D, para tetraedros bajo la condición del ángulo máximo. En particular, posee un comportamiento mejor que el de Lagrange. Finalmente demostramos que la condición del ángulo máximo para tetraedros es necesaria y suficiente para obtener cotas óptimas del error en L2 para la interpolación de Raviart-Thomas. Damos además algunas aplicaciones de este resultado para ciertos métodos mixtos y no-conformes, tanto para problemas escalares elipticos como para las ecuaciones de Stokes.

Abstract:
In this work we study different kind of interpolant operators over anisotropic finite elements. We obtain Optimal order error estimates in W(1,p) with p > 2, for the P1-Lagrange interpolation, under the so called maximum angle condition for tetraedra. For Q1-isoparametric quadrilateral elements, we define a weak geometric condition which ensures optimal order error in H1. This condition allows anisotropic elements and generalize all the previously known results. We present, also, a new P1-average interpolant operator which has optimal order in W(1,2), in 3D, for tetraedra under the maximum angle condition. In particular, this operator, has a better behaviour than the Lagrange interpolation. Finally we prove that the maximum angle condition for tetraedra gives neccesary and sufficient conditions to obtain optimal order error, in L(2), for the Raviart-Thomas interpolation. We show some applications of this result for certain mixed and nonconforming methods, both, for scalar elliptic problems, and the Stokes equations.

"Estimaciones para el Teorema de Ceros de Hilbert" (1998). Sombra, Martín. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estimaciones satelitales de clorofila y los frentes oceánicos del Atlántico sudoccidental" (2008). Romero, Silvia Inés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis se cuantifican las variaciones estacionales e interanuales en la distribución y concentración de clorofila en la plataforma continental del Atlántico Sudoccidental entre 25 y 55ºS, un área de gran importancia biológica y biogeoquímica. Combinando datos satelitales con observaciones in situ se describe la variabilidad en la extensión meridional de la pluma del Río de la Plata a lo largo del litoral bonaerense, de Uruguay y sur de Brasil. Dichas variaciones dependen de la dirección e intensidad de la componente de la tensión del viento paralela a la costa. Las variaciones del caudal son importantes cerca de la boca del estuario. En el sector sur del dominio de estudio los resultados revelan una estrecha relación entre áreas de alta concentración de clorofila y varios tipos de frentes oceánicos. Si bien existen importantes variaciones interanuales de clorofila, las posiciones de los frentes y los máximos de clorofila asociados son relativamente estables lo que sugiere una fuerte influencia de la topografía del fondo. Presumiblemente, la circulación vertical y los flujos de nutrientes a la capa eufótica, necesarios para sustentar el crecimiento del fitoplancton, son inducidos por rasgos topográficos del fondo marino.

Abstract:
In this thesis we quantify the seasonal and interannual variability of chlorophyll concentration on the continental shelf of the western South Atlantic between 25 and 55ºS, a region of biological and biogeochemical importance. Based on the combined analysis of satellite and insitu observations the meridional variations of the Río de la Plata plume at seasonal and interannual time scales along the continental shelf are described. These variations depend primarily on the strength and direction of the along-shore wind stress variability, while the impact of changes in river discharge is limited to the neighborhood of the estuary mouth. In the southern part of the domain the results reveal a tight relationship between high chlorophyll concentration and various types of ocean fronts. Although there are large chlorophyll interannual variations, the locations of the fronts and associated chlorophyll maxima are relatively stable suggesting a strong influence of bottom topography. Presumably, vertical circulations and nutrient fluxes into the euphotic layer, necessary to sustain phytoplankton growth, are induced by topographic features.

"Estimaciones y resultados de existencia de puntos racionales de variedades singulares sobre cuerpos finitos y aplicaciones" (2014-07-15). Privitelli, Melina Lorena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El primer objetivo de esta tesis es proporcionar estimaciones y resultados de existencia de puntos racionales de intersecciones completas singulares definidas sobre el cuerpo finito Fq. Nuestros resultados se basan en la obtención de nuevas versiones efectivas del segundo teorema de Bertini que garantizan la existencia de secciones lineales no singulares de una variedad singular, definidas sobre Fq. Así, aplicando la conocida estimación de P. Deligne para variedades no singulares, obtenemos estimaciones y resultados de existencia para intersecciones completas cuyo lugar singular tiene codimensión al menos dos o tres. Dichas estimaciones se expresan en términos de la dimensión del lugar singular, el grado y la dimensión de la variedad. Además, proporcionamos una versión explícita de la estimación de Hooley para variedades singulares. En la segunda parte de este trabajo aplicamos nuestras estimaciones a dos problemas concretos de teoría de códigos y combinatoria. En ambos casos las variedades involucradas son intersecciones completas simétricas, es decir, están definidas por polinomios invariantes bajo la acción del grupo de permutaciones de sus coordenadas. Es por esto que, en primer lugar, estudiamos las propiedades geométricas de dichas variedades, más concretamente la dimensión del lugar singular de las mismas. El problema de teoría de códigos que abordamos es el de determinar la existencia de deep holes en un código de Reed-Solomon estándar. En lo que respecta a problemas de combinatoria, analizamos el comportamiento del valor promedio del conjunto de valores (o “value set”) de ciertas familias de polinomios definidas sobre Fq. En ambos casos, mejoramos los resultados existentes en la literatura.

Abstract:
The first aim of this thesis is to obtain estimates and existence results for rational points of singular complete intersections defined over a finite field Fq. Our results rely on obtaining new effective versions of the second Bertini theorem. This theorem asserts that there exists a nonsingular linear section defined over Fq of a singular variety defined over Fq. Thus, by applying the well known Deligne estimate, we provide estimates and existence results for rational points of singular complete intersections for which the singular locus has codimension at least two or three. Our estimates are expressed in terms of the dimension of the singular locus, the degree and the dimension of the variety. Furthermore, we obtain an explicit version of the Hooley estimate for singular complete intersections. In the second part of this thesis we apply our estimates to concrete problems of coding theory and combinatorics. In both cases, the varieties under consideration are symmetric complete intersections, namely, they are defined by polynomials which are invariant under the action of the group of permutations of their coordinates. Hence, we first study some geometric properties of symmetric complete intersections; more precisely, we obtain information about the dimension of the singular locus of these varieties. Concerning coding theory, we study the existence of deep holes of the standard Reed-Solomon code. With respect to combinatorics, we analyze the average value set of families of univariate polynomials with coefficients in Fq. In both cases, we improve the existing results in the literature.

"Estimación de la biomasa fitoplanctónica mediante el sensoramiento remoto del color del mar y datos de campo en la plataforma continental patagónica" (2007). Dogliotti, Ana Inés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo de tesis se utilizaron imágenes del color del mar para estimar la concentración de clorofila-a (Cla) como indicador de la biomasa fitoplanctónica para caracterizar regiones de importancia biológica en la plataforma continental patagónica (PCP). Se realizó un análisis exhaustivo de los principales pasos necesarios para el procesamiento de las imágenes del color del mar: la corrección atmosférica, la evaluación de la estimación satelital de la Cla, y el análisis de una serie de tiempo de mapas de Cla, como una posible aplicación. Se desarrolló por primera vez un algoritmo para corregir los efectos de la atmósfera de las imágenes de color obtenidas por el sensor MMRS a bordo del satélite argentino SAC-C. La performance teórica del algoritmo fue buena, aunque los valores de reflectancia marina obtenidos resultaron bajos en comparación con los correspondientes al sensor SeaWiFS. Las diferencias pueden estar relacionadas con el no cumplimiento de una de las suposiciones del modelo, errores en la calibración radiométrica de los sensores y ruido en los datos. Se evaluó por primera vez la precisión de tres algoritmos globales y dos regionales, aplicados a imágenes SeaWiFS y MODIS, con datos de campo obtenidos en la PCP durante campañas oceanográficas realizadas en verano y otoño entre los años 2001 y 2004. El algoritmo global OC4v4 fue el que mejor estimó la concentración medida in situ. En general se observó una sistemática sobreestimación a bajas concentraciones y una subestimación en altas concentraciones de Cla para todos los algoritmos evaluados. Un análisis regional mostró que, dependiendo de la región analizada en la PCP, puede existir una diferencia importante en la estimación satelital de la Cla. Se utilizó una serie de 6 años de imágenes SeaWiFS para caracterizar temporalmente la distribución de la Cla pudiéndose identificar cuatro zonas en la PCP. La evolución temporal del promedio espacial de la Cla sobre toda la plataforma mostró la importancia biológica (aumento de biomasa fitoplanctónica) de las zonas frontales, a pesar de su reducida extensión espacial.

Abstract:
In the present thesis ocean color images were used to estimate chlorophyll-a concentration (Chla), as a proxy to phytoplankton biomass, to characterize ecological regions within the Patagonian Continental Shelf (PCS). A comprehensive analysis of the main steps required to process ocean color images was performed, i.e. the atmospheric correction scheme, the evaluation of the satellite-derived Chla, and a temporal series analysis of Chla maps. An algorithm was developed to correct ocean color images from the MMRS sensor, onboard the argentine satellite SAC-C. The theoretical performance was good, but the marine reflectance values obtained after correcting MMRS data were low compared to the corresponding SeaWiFS reflectance. The discrepancies may be due to failure in one of the models assumptions, radiometric calibration errors, and to the large noise in the data. Uncertainties in the retrieval of satellite-derived surface Chla have been evaluated in the Patagonian Continental Shelf for the first time. Two global and two regional ocean color products, applied to SeaWiFS and MODIS imagery, have been compared to in situ Chla measurements collected on summer and autumn oceanographic cruises between 2001 and 2004. The OC4v4 standard global algorithm performed better than the other algorithms analyzed; a systematic error was found in the satellite-derived Chla showing a general overestimation at low Chla and an underestimation at high Chla. A regional analysis showed that there was a substantial difference in the performance of the SeaWiFS and MODIS algorithms regarding the location of the sampled sites. A 6- year time series of SeaWiFS Chla derived images were analyzed in order to characterize the temporal evolution of the Chla. The analyzed images permitted to identify a differential distribution pattern of pigment concentrations in four regions in the PCS. The temporal evolution of the spatial mean Chla values averaged over the PCS showed the biological importance (increased biomass) of the frontal zones, even though restricted to small regions.

"Estimación de la densidad relativa" (2003). Iturmendi, Nilda Susana. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Dadas dos variables aleatorias independientes, X0 y X, que llamaremos de referencia y de comparación respectivamente, se define la variable relativa como R = F0(X), siendo Fo la función de distribución acumulada de la variable X0. Existe abundante bibliografía sobre métodos para estimar la densidad de una variable a partir de observaciones independientes. En esta tesis consideramos el problema de estimar la densidad de la variable R, llamada densidad relativa, a partir de muestras independientes, X0,1,...X0,n y X1,...Xm, de ambas poblaciones. Para ello construimos predictores de la variable relativa obtenidos a partir de un estimador de la función F0 calculada en observaciones de la variable X. El conocimiento de la densidad de R, nos permite representar las similitudes o diferencias entre las distribuciones de X y X0. Para estimar la densidad relativa hemos combinado dos estimadores de la función de distribución, la función de distribución empírica y un estimador suavizado de la núsma, con estimadores de la densidad basados en núcleos y basados en vecinos más cercanos con núcleos. Respecto de la elección del parámetro de suavizado hemos considerado la ventana óptima y distintos procedimientos de validación cruzada. Mediante un estudio de simulación, se estudió el comportamiento para muestras pequeñas de los estimadores de la densidad relativa propuestos. Como medida del error de estimación se consideró una aproximación del error cuadrático medio integrado. El estimador basado en núcleos utilizando una ventana de validación cruzada sesgada y el que utiliza la ventana óptima, son los procedimientos con el mejor comportamiento.

Abstract:
Let X0 and X be given independent random variables, called reference variable and comparison variable, respectively. The relative variable is defined by R = F0 (X), where F0 is the accumulated distribution function of the variable X0. There is an extense bibliography dedicated to the estimation of the density of a given variable from the knowledge of independent observations. In this thesis, we will deal with the question of estimating the density of the variable R, called relative density, from the knowledge of independent samples, X0,1,...X0,n y X1,...Xm of the two populations under consideration. To achieve this, we build predictors of the relative variable, obtained from an estimator of the function F0 calculated at observations of the variable X. Knowledge of the density of R provides a way to represent similitudes and differences between the distributions of X0 and X. To estimate the relative density, we have used two estimators of the distribution function, the empiric distribution function, and a smoothed estimator of it, with estimators based on kernels, and on nearest neighbours with kernels. Regarding the choice of the soothing parameter, we have considered the optimal window and several cross-validation proceedures. By performing a simulation study, we have studied the behaviour for small samples of the proposed estimators of relative density. Wehave measured the error of estimation through an approximation of the meanintegrated squared error. The best perfomance of the error corresponds to the kernel method with biased cross-validation window, and the optimal window procedure comes in the second place.

"Estimación de la exposición a micotoxinas a través de dos técnicas: ocratoxina A en plasma y biodisponibilidad de fumonisina B1 en copos de maíz" (2009). Motta, Estela Leonor. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La presencia de ocratoxina A (OTA) en sangre humana ha sido informada en muchos países, especialmente Europa. Sin embargo, hasta el momento no existen estudios que refieran su presencia en la Argentina. El objetivo de este estudio fue evaluar la concentración de OTA en plasma humano en dos localidades de la provincia de Buenos Aires. Las determinaciones de OTA en 199 muestras de donantes de sangre en Mar del Plata y 236 de General Rodríguez fueron realizadas por HPLC. La limpieza de las muestras se realizó con una columna Bakerbond® C-18 y una purificación final con columna de inmunoafinidad Ochraprep®. El límite de cuantificación de la OTA fue de 0,019 ng/ml. La confirmación de la presencia de la OTA fue realizada a través de la formación del metil éster de la OTA. El análisis reveló que 63,8 % y 62,3 % de las muestras plasmáticas de Mar del Plata y de General Rodríguez respectivamente fueron positivas para OTA. Se determinó un promedio winsorizado de 0,15 ng/ml y 0,43 ng/ml respectivamente. La encuesta alimentaria realizada permitió observar que la principal fuente de ingesta son los cereales y panificados, utilizando valores de ocurrencia de otros países se obtuvo un valor ingesta de OTA promedio de 2,21 ng/kg p.c./día, similar al determinado en Francia. Es importante continuar la investigación para detectar aquellos alimentos responsables de la presencia de OTA en plasma. Se han encontrado bajos niveles de fumonisinas libres en cereales para desayuno con maíz en Mar del Plata y General Rodríguez y también fumonisnas unidas a proteínas y a otros componentes de la matriz. El rango de contaminación de FB1 en copos de maíz en la ciudad de Mar del Plata fue entre nd y 74.5 Lg/kg y en Otawa entre 15 y 126 Lg/kg. Después de la incubación de muestras de copos de maíz molidas con soluciones que simulan los líquidos del tracto gastrointestinal, saliva y los jugos estomacales y duodenales. El quimo fue analizado para FB1, fumonisina B1 completamente hidrolizada (HFB1) y fumonisina B1 parcialmente hidrolizada (PHFB1). El promedio de la bioaccesibilidad de FB1 (porcentaje de FB1 liberado de los copos de maíz hacia el quimo) fue 53 %. HFB1 y PHFB1 no fueron detectados. Si FB1 fue extraído previamente con solventes de las muestra FN12, no se detectó FB1 en el quimo, lo que indica que la cantidad de FB1 que queda bioaccesible, no provino de TB FB1 presente en la muestra (TB FB1 = 125 ng/g). La bioaccesibilidad determinada de TBFB1 en el quimo fue de 51 %.

Abstract:
The presence of ochratoxin A (OTA) in human blood has been reported for many countries, especially in Europe. However, so far no report exits concerning such presence in Argentina. The aim of this study was to assess OTA concentration in human plasma in two different areas of Buenos Aires province. The determinations of OTA in 199 plasma samples from blood donors in Mar del Plata and 236 from General Rodríguez were done by HPLC. The extractive procedure used solid phase extraction with Bakerbond® C-18 cartridge and a final purification with immunoaffinity columns Ochraprep®. The limit of quantification of ochratoxin A was 0.019 ng ml-1 and the confirmation of OTA presence was done through the formation of ochratoxin A methyl ester. The analysis revealed that 63.8% from Mar del Plata and 62.3% from General Rodríguez of human plasma sampled were positive for OTA, as a result, a winsorized mean of 0.15 ng ml-1 and 0.43 ng ml-1 respectively, were found. It is important to continue the research to detect the foods responsible of the presence of OTA in plasma. Low levels of fumonisins have been found in corn based breakfast cereals in Mar del Plata and General Rodríguez and can occur bound to protein and other matrix components. The range of contamination of FB1 in corn flakes, in Mar del Plata city was nd-74.5 Lg /kg and in Ottawa was 15-126 Lg /kg. After incubation of the ground samples of corn flakes with gastrointestinal tract solutions simulating saliva plus stomach and duodenal juices, chyme was analyzed for FB1, hydrolyzed FB1 (HFB1) and partially hydrolyzed fumonisin B1 (PHFB1 ). The average bioaccessibility of FB1 (percentage of the FB1 released from corn flakes in the chyme) was 53 %. HFB1 and PHFB1 were not detected. If free FB1 was first extracted from sample FN12 (TB FB1 = 125 ng/g), no FB1 was detected in the chyme, indicating no contribution from TB FB1. Nevertheless, the average bioaccessibility of TBFB1 in the chyme was 51 %.

Título :	Estimación de la exposición a micotoxinas a través de dos técnicas: ocratoxina A en plasma y biodisponibilidad de fumonisina B1 en copos de maíz = Exposition estimation to mycotoxins by two techniques: ochratoxin a in plasma and bioaccesibility of fumonisin B1 from corn flakes
Autor :	Motta, Estela Leonor
Director :	Resnik, Silvia Liliana Scott, Peter Michael
Consejero de estudios :	Bordenave, Ursula
Jurados :	Buera, P. ; Fernández Pinto, V. ; López, A.
Año :	2009
Editor :	Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación :	Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Departamento de Química, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad Nacional de Mar del Plata, (7600) Funes 3350, Mar del Plata, Argentina Centro de Investigación en Micotoxinas, Universidad Nacional de Luján, Luján, Argentina Fundación de Investigaciones Científicas Teresa Benedicta de la Cruz, Dorronzoro 141, Luján, Argentina Bureau of Chemical Safety, Health Canada, Address Locator 2203D, Ottawa, Ontario, K1A 0K9,Canada
Grado obtenido :	Doctor de la Universidad de Buenos Aires en el área de Industrias
Ubicación :	Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_4447_Motta
Idioma :	Español
Area Temática :	Industrias / Seguridad Alimentaria Industrias / Microbiología Alimentaria
Palabras claves :	EXPOSICION; ENCUESTA; CONCENTRACION PLASMATICA; OTA; MODELO DE DIGESTION IN VITRO; QUIMO; FUMONISINAS UNIDAS TOTALES; FB1 LIBRE; FUMONISINA B1 PARCIALMENTE HIDROLIZADA; FUMONISINA B1 TOTALMENTE HIDROLIZADA; EXPOSITION; QUESTIONNAIRE; PLASMATIC CONCENTRATION OF OTA; CHYME; DIGESTION MODEL IN VITRO; FREE FB1; PARTIAL HYDROLYZED FB1; TOTAL HYDROLYZED FB1
URL al Documento :	http://digital.bl.fcen.uba.ar/Download/Tesis/Tesis_4447_Motta.pdf
URL al Registro :	http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_4447_Motta

"Estimación de la productividad primaria mediante el modelo de eficiencias y sensores remotos" (2010). Cristiano, Piedad María. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Uno de los modelos más utilizados para estimar la Productividad Primaria Neta (PPN) a escala regional es el de eficiencias de Kumar and Monteith que permite la inclusión de información satelital. Uno de los parámetros clave es la eficiencia en su utilización (EUR), afectado por los factores de estrés. El objetivo fue mejorar las estimaciones a escala regional de la PPN en pastizales, bajo distintas condiciones de estrés proponiendo una cartografía temática de EUR para la región pampeana, teniendo en cuenta los factores de estrés predominantes (hídrico y nutricional). A través de ensayos manipulativos, se determinaron los cambios en la EUR en 4 gramíneas y en una pastura multiespecífica donde se incluyó el efecto del pastoreo. Para regionalizar los resultados, se generó una cartografía temática de las condiciones hídricas y nutricionales de la región. Para validar este mapa se estimó la PPNA mensual y anual utilizando imágenes MODIS que se compararon con datos de PPNA estimados a campo y con los resultados de otros dos modelos comúnmente utilizados. En los ensayos monoespecíficos la EUR varió entre 2.3-5.2 g/MJ bajo condiciones óptimas de crecimiento y entre 1.02-1.75 g/MJ en las plantas con estrés. En el ensayo multiespecífico, la EUR varió entre 0.63-1.94 g/MJ. La PPNA estimada anual presentó los menores valores en el suroeste de la región (menor a 5800 kg/ha.año) y fue aumentando hacia el noreste hasta alcanzar valores de 14500 kg/ha.año. La validación con datos de PPNA observados y estimados por otros modelos indican que nuestro modelo de EUR variable presenta mayor nivel de ajuste que el de EUR fija.

Abstract:
One of the most commonly models used to estimate net primary productivity (NPP) at regional level is that of Kumar and Monteith efficiencies that allows the inclusion of satellite information. One of the key parameters is the radiation use efficiency (RUE), affected by different stresses. The aim was to improve regional estimates of NPP in grasslands under different stress conditions suggesting a thematic mapping of RUE for the Pampas region, taking into account the prevailing factors of stress (water and nutrition). Through manipulative experiments, changes in the EUR were identified in 4 grasses and a multispecies pasture where the effect of grazing was included. To regionalize these results, we generated a thematic mapping of water and nutritional conditions of the region. To validate this map, the monthly and annual aerial NPP (ANPP) was estimated using MODIS images. Data were compared with ANPP from field data and the results of two other commonly used models. In monospecific experiments, RUE ranged from 2.3-5.2 g/MJ under optimal growth conditions and between 1.02-1.75 g/MJ in plants under stress. In the multispecies experiment, the RUE varied between 0.63-1.94 g/MJ. The estimated annual PPNA presented the lowest values in the southwestern region (minor than 5800 kg/ha.year) and was increasing towards the northeast to reach values of 14,500 kg/ha.year. The validation results indicate that our variable RUE model presents adjustment higher than the fixed RUE model.

"Estimación de movimiento en secuencias de imágenes RGB y RGB-D" (2016-03-30). Gómez Fernández, Francisco Roberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El movimiento es una característica fundamental para el procesamiento de video y sus posteriores aplicaciones. La estimación de movimiento en video es de gran utilidad para definir la correspondencia de puntos en una escena, calcular sus velocidades y así poder discriminar objetos, acciones, segmentar movimiento, etc. El objetivo de este trabajo es realizar un seguimiento preciso y una estimación de movimiento de un gran conjunto de puntos. Esto se conoce como estimación densa de movimiento. Para ello, se proponen dos líneas principales de estudio: modelos estadísticos de movimiento utilizando texturas dinámicas y el cálculo del flujo óptico minimizando la energía con graph cuts, en ambos casos considerando secuencias de imágenes RGB y RGB-D. El modelo de texturas dinámicas está muy bien condicionado para la segmentación de movimiento, y dentro de este contexto desarrollamos una aplicación con características novedosas: (i) proceso de aprendizaje desacoplado y (ii) algoritmos optimizados para trabajar en placas gráficas GPU (Graphic Process Unit). Además, el modelo ha sido extendido para contemplar secuencias de imágenes RGB-D, el cual no había sido estudiado hasta el momento, permitiéndonos identificar procesos visuales en 3D. Experimentos sobre la base de datos DynTex muestran resultados exitosos de performance y de clasificación para la mayoría de las casos. Luego, nuestros análisis sobre secuencias RGB-D revelan la viabilidad de este modelo para aplicaciones 3D. El problema de la estimación del flujo óptico (optical flow) fue abordado mediante la minimización de la energía del campo de vectores utilizando la técnica de graph cuts con una formulación novedosa de la energía. Ampliamos esta formulación para tener en cuenta la profundidad y así calcular el flujo de la escena (scene flow). Hasta donde sabemos, en la literatura, nunca se había utilizado graph cuts para estimar el scene flow. Los resultados obtenidos sobre el dataset Middlebury muestran que nuestros algoritmos son competitivos comparados con los presentes en el estado del arte y los mejores con en términos de error angular.

Abstract:
Motion is a fundamental cue for video processing and its further applications. Video motion estimation is very useful to find correspondences of points in a scene, computing their velocities, discriminate objects, actions, segment motion, etc. The aim of this work is to accurately track the motion of a large set of points in videos. This is known as dense motion estimation. To this end, two main lines of study were proposed: statistical models of motion using dynamic textures and optical flow calculation using graph cuts for energy minimization, considering in both cases sequences of RGB and RGB-D images. The dynamic textures model is well suited for motion segmentation, and in this context we develop an application with novel features: (i) a decoupled learning step (ii) GPU-translated algorithms optimized to work on GPU (Graphic Process Unit). Also, the model has been extended to process RGB-D sequences, which had not been studied so far, allowing us to identify visual processes in 3D. Experiments on the Dyntex dataset show successful results of performance and classification for most cases. Then our analysis of RGB-D sequences reveal the viability of this model for 3D applications. The problem of optical flow estimation was addressed by minimizing the energy of the vector field using the graph cuts method with a novel formulation of energy. We extend this formulation to take depth into account and thus estimate the Scene Flow. To the best of our knowledge, scene flow estimation using graph cuts has never been used in the literature. The results obtained on the Middlebury dataset show that our algorithms are competitive with the state of the art and the best performing in terms of angular error.

"Estimación de parámetros en modelos biológicos complejos. Aplicación a modelos de crecimiento tumoral" (2010). Fernández Slezak, Diego. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las ciencias de la vida comprenden todos los campos de la ciencia que estudian organismos vivos y procesos biológicos. Tradicionalmente, la biología y la medicina han sido los campos centrales de las ciencias de la vida. Los avances tecnológicos en biología molecular y biotecnología trajeron consigo un crecimiento sin precedentes de campos interdisciplinarios, tales como la bioinformática, biología computacional, biología de sistemas, y neuroinformática por nombrar algunas. En particular, el estudio computacional del cáncer y terapias asociadas se ha transformado en una rama muy importante dentro de la biología computacional. Resultados provenientes de la biología ́de sistemas están siendo utilizados para todo tipo de investigación que comprenden tanto descubrimientos biológicos como avances para el diagnósticoy la medicina clínica. En muchas aplicaciones, los datos provenientes de estudios clínicos, biológicos o moleculares son condensados en modelos matemáticos con cierto poder predictivo. No es infrecuente que estos modelos incluyan gran cantidad de parámetros libres cuyos valores deben ser estimados para obtener un completa determinación del modelo. El proceso de determinación de parámetros presenta un gran desafío en el desarrollo de modelos matemáticos o computacionales de procesos biológicos. En consecuencia, un paso necesario para la utilización efectiva de modelos en la predicción de fenómenos biológicos es la estimación de parámetros libres. El ajuste de parámetros es un área muy estudiada en ciencia, tecnología, economía estadística, y otras disciplinas, por lo cual existen muchos enfoques para resolverlo. En la mayoría de estos enfoques, uno de los desafíos más difíciles de confrontar es la enorme demanda de poder de cómputo requerida tanto en la resolución delmodelo como en el proceso de estimación de parámetros. Dado que la simulación numérica cuenta entre las aplicaciones más fértiles de la Ciencia de la Computación, no debe resultar extraño que un número considerable de estudiosos de la computación científica se hayan volcado al campo de simulación numérica de procesos biológicos. Con el crecimiento exponencial en la potencia computacional de los sistemas modernos, se han ampliado los desarrollos y resolución de sistemas cada vez más grandes y complejos que han permitido atacar el modelado de sistemas biológicos de alta complejidad. En esta tesis nos proponemos estudiar el problema de estimación de parámetros y evaluación de las soluciones encontradas en el modelado de crecimiento tumoral en etapa avascular, utilizando computación de alto rendimiento. Para ello, hemos extendido un modelo de crecimiento de esferoides multicelulares, modelo que abar ca una gran variedad de casos experimentales. Para la evaluación de este modelo de ecuaciones diferenciales en derivadas parciales con condiciones de borde dependientes del tiempo, se desarrollá una solución numérica utilizando el todo de diferencias finitas. Este modelo resultó tener una considerable versatilidad en las soluciones encontradas, mostrando un rango muy amplio de comportamientos que permiten la explicación de una amplia gama de posibles experimentos. A partir de datos experimentales y sintéticos hemos ajustado los parámetros del modelo mediante técnicas de optimización no lineal, utilizando una función decosto de cuadrados mínimos. Mediante el uso de computación de alto rendimiento con miles de procesadores disponibles, exploramos el espacio de parámetros del problema analizado, evaluando dicha función de costo a partir de distintos puntos iniciales y con distintos algoritmos de optimización. De esta forma, se realizó un barrido exhaustivo del espacio de parámetros, lo que nos permitió encontrar una multiplicidad de mínimos locales en el ajuste de parámetros, como así también lo que a todas luces parece ser el mínimo global de la función de costo. El resultado sorprendente de esta búsqueda exhaustiva es que el valor de los parámetros en el tan buscado mínimo global corresponde a valores de parámetros que carecen de sentido desde un punto de vista biológico. Esta tesis muestra un ejemplo en el cual los parámetros del modelo que optimizan el ajuste a los datos experimentales no son necesariamente los mejores en términos biológicos, un fenómeno que es similar al problema de sobreajuste, conocido en el ámbito de aprendizaje estadístico. De esta manera, ponemos de manifiesto la necesidad de una doble verificación de los parámetros encontrados para identificar posibles soluciones fuera del rango realista en términos biológicos dado la complejidad del espacio de par ́metros. Para evitar dicho sobreajuste del modelo a los datos, proponemos la utilización de parámetros sub-óptimos que, no obstante, son explicativos de comportamientos biológicos no tomados en cuenta en el ajuste, pero que podrán ser utilizados para restringir la enorme cantidad de soluciones sub-óptimas encontradas. De esta forma llegamos a una solución de compromiso entre la función de costo óptima y valores biológicamente realistas. Concluimos que la mejor estrategia para el ajuste de un modelo a un experimento dado es el diseño simultáneo del modelo y los experimentos acordes. Algunos experimentos pueden permitir la determinación de parámetros mejor que otros, por lo que una estrategia posible para el ajuste será la generación de experimentos independientes que permitan contrastar y acotar los valores de los distintos parámetros, especialmente de aquellos que la optimización no ha podido ajustar convincentemente. En la ausencia de un modelo basado en primeros principios, la estimación de parámetros no puede simplemente confiar en la optimización de una función de costo. Proponemos que el enfoque presentado en esta tesis deber ser un procedimiento estándar a la hora de ajustar los parámetros de modelos biológicos complejos, y presentamos una formalización del procedimiento como generalización de la estrategia.

Abstract:
Computational Life Sciences include all areas of science that study biology processes and living organisms. Computational Life Sciences is helping to provide a fundamental understanding of complex biological systems and offers the potential to significantly impact a wide variety of technologies, including drug discovery, novel therapies for human, animal and plant diseases,metabolic engineering and efficient production of traditional and high-value foodstuffs. In particular, the computational study of cancer and associated therapies has become in a very proliferative and important section of com- putational biology. The vast computational resources that became available during the past decade enabled the development and simulation of increasingly complex math- ematical models of cancer growth. These models typically involve many free parameters whose determination is a substantial obstacle to model develop- ment. Direct measurement of biochemical parameters in vivo is often difficult and sometimes impracticable, while fitting them under data-poor conditions may result in biologically implausible values. In this thesis, we extended a model of avascular tumor growth covering a great amount of experimental cases. We discuss different methodological approaches to estimate parameters in complex biological models. We make use of the high computational power of the Blue Gene technology to perform an extensive study of the parameter space in a model of avascular tumor growth. We explicitly show that the landscape of the cost function used to optimize the model to the data has a very rugged surface in parameter space. This cost function has many local minima with unrealistic solutions, including the global minimum corresponding to the best fit. The case studied in this thesis shows one example in which model parameters that optimally fit the data are not necessarily the best ones from a biological point of view. To avoid force-fitting a model to a dataset, we propose that the best model parameters should be found by choosing, among suboptimal parameters, those that match criteria other than the ones used to fit the model. We also conclude that the model, data and optimization approach form a new complex system, and point to the need of a theory that addresses this problem more generally.

"Estimación robusta en modelos arma multivariados" (1999). Martínez, Elena Julia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estimación robusta en modelos parcialmente lineales generalizados" (2007). Rodríguez, Daniela A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis, introducimos una nueva clase de estimadores robustos para las componentes paramétricas y noparamétricas bajo dos modelos parcialmente lineales generalizados. En el primero, las observaciones independientes (yi, xi, ti), 1 = i = n satisfacen yi| (xi, ti) ~ F (·, µi) con µi = H (n(ti) + xti ß), para una función de distribución F y una función de vínculo H conocidas, donde ti e IR, xi e IR^p. La función n : IR --IR y el parámetro ß son las cantidades a estimar. Los estimadores robustos se basan en un procedimiento en dos pasos en el que valores grandes de la deviance o de los residuos de Pearson se controlan a través de una función de escores acotada. Los estimadores robustos de ß resultan ser n^1/2-consistentes y asintóticamente normales. El comportamiento de estos estimadores se compara con el de los estimadores clásicamente usados, a través de un estudio de Monte Carlo. Por otra parte, la función de influencia empírica permite estudiar la sensibilidad de los estimadores. El modelo generalizado parcialmente lineal de índice simple, generaliza el anterior pues las observaciones independientes son tales que yi| (xi, ti) ~ F (·, µi) con µi = H (n(a tti) + xtiß), donde ahora ti e IR^q, xi e IR^p y la función ß : IR -- IR y los parámetros ß y a (|| a|| =1) son desconocidos y se desean estimar. Introducimos dos familias de estimadores robustos que resultan ser consistentes y asintóticamente normales. Calculamos también su función de influencia empírica. Todas las propuestas dadas mejoran el comportamiento de los estimadores clásicos en presencia de observaciones atípicas.

Abstract:
In this thesis, we introduce a new class of robust estimates for the parametric and nonparametric components under two generalized partially linear model. In the first one, the data (yi, xi, ti), (yi, xi, ti), 1 = i = n, are modeled by yi| (xi, ti) ~ F (·, µi) con µi = H (n(ti) + xti ß), for some known distribution function F and link function H, where ti e IR, xi e IR^p. The function n : IR--IR and the parameter ß are unknown and to be estimated. The robust estimators are based on a two step procedure, where large values of the deviance or Pearson residuals are bounded through a score function. It is shown that the estimates of ß are root-n consistent and asymptotically normal. Through a Monte Carlo study, we compare the performance of these estimators with that of the classical ones. Besides, through their empirical influence function we study the sensitivity of the estimators. The generalized partially linear single index model generalizes the previous one since the independent observations are such that yi| (xi, ti) ~ F (·, µi) con µi = H (n(a tti) + xtiß), where now ti e IR^q, xi e IR^p and ß : IR -- IR, ß y a (|| a|| =1) are the unknown parameters to be estimated. Two families of robust estimators are introduced which turn out to be consistent and asymptotically normally distributed. Their empirical influence function is also computed. The robust proposals improve the behavior of the classical ones when outliers are present.

"Estimadores robustos para el modelo de regresión lineal con datos de alta dimensión" (2016-09-13). Smucler, Ezequiel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los estimadores de regresión penalizados son una herramienta popular para analizar conjuntos de datos ralos y de alta dimensión. Sin embargo, los estimadores de regresión penalizados definidos utilizando funciones de pérdida no acotadas, como la pérdida cuadrática, pueden verse muy afectados por la presencia de observaciones atípicas en la muestra, especialmente aquellas de alto leverage, y por lo tanto no son robustos. Esta tesis consiste de dos partes. En la primera, proponemos una familia de estimadores penalizados para la estimación robusta en modelos lineales ralos y de alta dimensión basados en los MM-estimadores de Yohai (1987). Estudiamos las propiedades asintóticas de estos estimadores en modelos lineales con una cantidad fija de variables predictoras aleatorias. Proponemos un algoritmo para computar una subfamilia de los estimadores propuestos. Las ventajas relativas que ofrecen los estimadores propuestos son demostradas mediante un extenso estudio de simulación y el análisis de un conjunto de datos reales. Esta primer parte está basada en Smucler and Yohai (2015 b). En la segunda parte, estudiamos las propiedades asintóticas de los estimadores propuestos en modelos lineales con un número de variables predictoras fijas que diverge, dentro del régimen p << n. Probamos la consistencia de los estimadores asumiendo solo p/n → 0, y que si la función de penalización es elegida convenientemente entonces los estimadores resultantes tienen la propiedad oráculo definida en Fan and Li (2001). La misma técnica de demostración nos permite probar la consistencia y derivar la distribución asintótica de M-estimadores de regresión definidos utilizando una función de perdida acotada y un estimador de escala, en modelos lineales con un número de variables predictoras fijas que diverge. En particular, probamos la consistencia y derivamos la distribución asintótica de los S-estimadores (Rousseeuw and Yohai (1984)) y MM-estimadores de regresión.

Abstract:
Penalized regression estimators are a popular tool for the analysis of sparse and high-dimensional data sets. However, penalized regression estimators defined using unbounded loss functions, such as the quadratic loss, can be very sensitive to the presence of outlying observations, especially high leverage outliers, and hence are not robust. This thesis consists of two parts. In the first one, we propose a family of penalized estimators for robust estimation in sparse and high-dimensional linear models based on the MM-estimators of Yohai (1987). We study the asymptotic properties of these estimators in linear models with a fixed number of random predictor variables. We propose an algorithm to compute a subset of this family. The relative advantages of these estimators are demonstrated through an extensive simulation study and the analysis of a real high-dimensional data set. This first part is based on Smucler and Yohai (2015 b). In the second part, we study the asymptotic properties of the proposed estimators in linear models with a diverging number of fixed predictor variables in the p << n regime. We prove the consistency of the estimators assuming only p/n → 0 and that if the penalty function is chosen appropriately then the resulting estimators have the oracle property of Fan and Li (2001). The same proof technique allows us to prove the consistency and derive the asymptotic distribution of regression M-estimators defined using a bounded loss function and an estimate of scale, in linear models with a diverging number of fixed predictor variables. In particular, we prove the consistency and derive the asymptotic distribution of S-estimators (Rousseeuw and Yohai (1984)) and MM-estimators.

"Estimadores robustos y eficientes para el modelo de Regresión Lineal" (1999). Gervini, Daniel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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En esta Tesis presentamos una nueva clase de estimadores (que llamaremos REWLS) para el modelo de Regresión Lineal. Son estimadores de mínimos cuadrados pesados, con pesos que se calculan de manera adaptiva a partir de la distribución empírica de los residuos de un estimador robusto inicial. Se demuestra que el punto de ruptura de los REWLS no es menor que el del estimador inicial, de modo que pueden alcanzar el punto de ruptura máximo 1/2. Para el caso particular del estimador de mínima mediana de cuadrados (LMS) como estimador inicial y pesos “hard rejection”, se muestra numéricamente que los sesgos máximos del REWLS para contaminaciones puntuales son prácticamente iguales los del LMS. Pero además, y esto constituye el aporte original de la Tesis, se demuestra que bajo el modelo los REWLS son asintóticamente equivalentes al estimador de mínimos cuadrados y entonca alcanzan la máxima eficiencia asintótica para el modelo de errores normales En conclusión, los estimadores que proponemos logran alcanzar la máxima eficiencia asintótica bajo el modelo sin afectar las cualidades de robustez del estimador inicial.

Abstract:
In this Thesis we introduce a new class of estimators (that we will call REWLS) for the Linear Regession model. They are weighted least squares estimators, with weights adaptively computed from the empirical distribution of the residuals of some initial robust estimator. It is shown that the breakdown point of the REWLS is not smaller than the breakdown point of the initial estimator, so that they can attain the maximum 1/2 breakdown point. For the particular case of the least median of squares (LMS) as the initial estimator and hard rejection weights, it is shown that the maximum biases of the REWLS for point mass contaminations are practically equal to those of the LMS. Moreover —and this is the original contribution of this Thesis- it is shown that the REWLS are asymptotically equivalent to the least squares estimator under the model and hence they attain the maximum asymptotic efficiency for the normal error model. To summarize, the estimators we propose attain the maximum asymptotic efficiency under the model with no damage to the robust qualities of the initial estimator.

"Estocasticidad en sistemas armónicos cuánticos bajo interacciones lineales y no lineales con termostatos extensos" (1991). Despósito, Marcelo Arnaldo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estrategia de reprogramación traduccional del virus Junín en infecciones in vitro: estudio de las principales vías de regulación del inicio de la traducción" (2011). Linero, Florencia N.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Dentro de los factores que determinan el éxito de una infección viral la eficiencia en la traducción de las proteínas del virus constituye un factor clave a la hora de definir tanto la citopatogenicidad como la virulencia de estos agentes. Los virus son parásitos intracelulares obligados, por lo cual dependen completamente de la maquinaria traduccional de la célula hospedadora para sintetizar sus proteínas. Esta dependencia los ha llevado a desarrollar distintas estrategias de reprogramación traduccional a fin de asegurar la competencia efectiva de sus mARNs con los mARNs celulares por la maquinaria de traducción. En este trabajo de tesis doctoral se analizó la estrategia de reprogramación traduccional utilizada por el virus Junín (JUNV) para lograr la traducción de sus mARNs. El estudio se centró fundamentalmente en el proceso de inicio de la traducción, evaluándose la participación del complejo eIF (eIF4E, eIF4A y eIF4GI) y del factor eIF2 y la modulación de sus principales mecanismos de regulación. En este trabajo se demostró que JUNV es capaz de traducir las proteínas virales aún en ausencia del factor de unión al cap, eIF4E, a pesar de que sus mRNAs presentan dichas estructuras en sus extremos 5´. Esto fue comprobado mediante el empleo de inhibidores de la vía de PI3K/Akt/mTOR, principal vía regulatoria de la traducción dependiente del cap, observándose que la inhibición de PI3K posterior a la entrada del virus no tuvo efectos significativos en la replicación de JUNV. Estos resultados fueron corroborados mediante el tratamiento con la droga rapamicina, un inhibidor del complejo mTOR/raptor, la cual no afectó la síntesis de antígenos virales. La expresión de una proteína dominante negativa de 4E-BP, proteína reguladora de eIF4E, tampoco afectó la replicación de JUNV, reforzando la idea de que el factor eIF4E no sería necesario en la replicación de JUNV. Asimismo, la inhibición de la vía de PI3K/Akt en un cultivo persistentemente infectado con JUNV tampoco afectó la síntesis de los antígenos virales. Por otro lado, se demostró un bloqueo en la fosforilación de eIF2α ejercido por JUNV. La fosforilación de este factor constituye uno de los principales mecanismos de la respuesta celular antiviral, mediante el cual la célula induce el bloqueo global de la traducción con el fin de impedir la replicación viral. La consecuencia de esta fosforilación es el secuestro de los factores de inicio de la traducción en estructuras citoplasmáticas denominadas gránulos de estrés (SGs). Los resultados obtenidos demostraron que el bloqueo en la fosforilación de eIF2α inducido por JUNV inhibe la formación de SGs cuando las células infectadas son tratadas con un inductor de estrés oxidativo. Este impedimento sería mediado fundamentalmente por la expresión de los antígenos virales N y GPC y tendría por finalidad mantener activo al factor eIF2 como así también asegurar el acceso a los factores de inicio de la traducción, que de otra manera podrían quedar secuestrados en los SGs. Esta modulación de la respuesta a la estrés celular no fue observada en los cultivos persistentemente infectados con JUNV, indicando que la ausencia de expresión de G1 y probablemente los bajos niveles de la proteína N en su forma completa serían responsables de que estos cultivos persistentemente infectados no logren bloquear la respuesta celular al estrés. Por otro lado, se demostró el requerimiento de los factores de inicio de la traducción del complejo eIF: eIF4A y eIF4G, mediante ensayos de silenciamiento y el empleo de inhibidores específicos, indicando una estrategia de traducción alternativa en la cual la participación de eIF4E, integrante canónico de dicho complejo, no sería requerida. Probablemente la participación de una proteína viral en reemplazo del factor de unión al cap eIF4E, favorecería la traducción de los mARNs de JUNV, sin inducir un bloqueo en la síntesis de las proteínas celulares. La interacción de N con los factores eIF4A y eIF4GI, evaluada mediante ensayos de inmunoprecipitación y microscopía confocal, sugiere que esta proteína viral estaría formando parte de los complejos de traducción de los mARNs virales. En función de los resultados expuestos se plantea un modelo de reprogramación traduccional para JUNV en el cual el factor de unión al cap, eIF4E, no sería mayoritariamente requerido para la traducción de los antígenos virales. La actividad de este factor sería reemplazada por la proteína N que mediante su interacción con los factores eIF4A y eIF4GI constituiría los complejos de traducción del virus. Sin embargo, no puede descartarse la participación de eIF4E en la traducción inicial de los mARNs de N, hasta que los niveles de esta proteína puedan competir efectivamente con dicho factor.

Abstract:
Translation efficiency of viral proteins is a key factor in defining both cytopathogenicity and virulence of viruses, which are obligate intracellular parasites and entirely dependent on the cellular translational machinery to synthesize their proteins. This dependence has led them to develop different strategies of translational reprogramming to ensure effective competition of viral mRNAs with cellular mRNAs. In this doctoral thesis the translational reprogramming strategy used by Junin virus (JUNV) to achieve the translation of its mRNAs, was analyzed. The study was focused primarily on the process of translation initiation, to evaluate the involvement of eIF complex (eIF4E, eIF4A and eIF4GI) and the eIF2 factor and the modulation of main regulatory mechanisms. Results suggest that JUNV might be able to translate viral proteins even in the absence of the cap-binding factor, eIF4E, although its mRNAs have cap structures in their 5 'ends. This is supported by the fact that inhibitors of PI3K/Akt/mTOR pathway, the main regulatory pathway of capdependent translation were effective only during virus entry but not on JUNV protein translation. Treatment of infected cells with rapamycin, an mTOR complex/raptor inhibitor and the expression of a dominant negative protein 4E-BP, eIF4E regulatory protein, had no effect on JUNV replication, reinforcing the idea that the eIF4E factor would not be required for JUNV replication. Furthermore, inhibition of PI3K/Akt pathway in a JUNV persistently infected culture did not affect the synthesis of viral antigens. On the other hand, a blockage on the eIF2α phosphorylation exerted by JUNV was observed. Phosphorylation of this factor is one of the main mechanisms of the antiviral cellular response, by which cell induces a global translation blockade to prevent viral replication. The consequence of this phosphorylation is the sequestering of the initiation translation factors in cytoplasmic structures named stress granules (SGs). The results showed that blockage in the phosphorylation of eIF2α induced by JUNV inhibits the formation of SGs when infected cells are treated with an oxidative stress inductor. This blockage would be mediated primarily by the expression of viral antigens N and GPC and would aim to keep eIF2 factor active to ensure virus access to initiation translation factors which might otherwise be sequestered into SGs. This modulation on the cellular stress response was not observed in cultures persistently infected with JUNV, indicating that the absence of expression of G1 and probably low levels of the complete form of N protein would be responsible for these persistently infected cultures inability to block the cellular stress response. Requirement of initiation translation complex eIF: eIF4A and eIF4G has been assessed by ARN interfering assays and the use of specific inhibitors. Results indicate an alternative translation strategy in which the involvement of eIF4E, a canon member of this complex would not be required. Probably, the involvement of a viral protein to replace the cap binding factor eIF4E, would favor the translation of JUNV mRNAs without inducing a blockage in cellular proteins synthesis. N interaction with eIF4A and eIF4GI factors was assessed by immunoprecipitation assays and confocal microscopy suggesting that this viral protein would be part of the translation complex of viral mRNAs. Based on the above results a model for JUNV translational reprogramming is presented. In this model, the cap-binding factor, eIF4E, would be replaced by N protein through its interaction with eIF4A and eIF4GI factors constituting the translation complex for viral proteins. However, it cannot be ruled out the involvement of eIF4E at the initial translation step of N mRNA, until the level of this protein can be high enough to compete effectively with this factor.

"Estrategia integrada basada en procesos, requerimientos, medición y evaluación para la construcción de almacenes de datos" (2016-02-22). Avalos Serrano, Verónica Nathalí. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estrategias antivirales para la prevención y tratamiento de infecciones con arenavirus: actividad inhibitoria contra virus Junín de disulfuros y acridonas" (2012). Sepúlveda, Claudia Soledad. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo se realizó la evaluación de la actividad biológica de diversos compuestos que incluyeron disulfuros aromáticos, disulfuros de tiuramo, tiosulfonas y acridonas, encontrándose compuestos con una muy selectiva actividad antiviral y potente efecto virucida contra varios miembros de la familia Arenaviridae. El disulfuro aromático NSC4492 mostró el efecto virucida más potente, y los más efectivos agentes antivirales resultaron el disulfuro de tiuramo NSC14560 y la acridona 3f, las tiosulfonas fueron totalmente inactivas. Los compuestos antivirales NSC14560 y 3f resultaron igualmente efectivos en distintos tipos celulares. Estudios mecanísticos de la actividad antiviral indicaron que la acción de estos compuestos parecería afectar pasos tempranos e intermedios de la infección viral, sin bloquear la entrada del virus a la célula. La síntesis del RNA viral se vio inhibida con ambos compuestos, y, para el caso de 3f, fue posible recuperar parcialmente la infectividad y los niveles de RNA por el agregado de guanosina exógena. Los compuestos inactivantes mostraron ser efectivos también contra varios arenavirus, con una cinética de inactivación rápida y dependiente de la temperatura. El tratamiento con NSC4492 no mostró efectos sobre el autoensamblaje y la brotación de partículas tipo virales (VLPs) pero sí una alteración en el patrón electroforético de la proteína Z y una fuerte inhibición en la síntesis del RNA viral. En conclusión, se han detectado nuevos compuestos con potente y selectiva acción antiviral contra los arenavirus que parecen interferir con procesos relacionados a la síntesis de RNA viral así como agentes con fuerte capacidad inactivante de los viriones que alteran irreversiblemente proteínas virales de JUN lo que conduciría a la pérdida de la infectividad viral.

Abstract:
In the present study we evaluated the biological activity of various compounds including aromatic disulfides, thiuram disulfide, thiosulfones and acridones finding compounds with highly selective antiviral activity and potent virucidal effect against several members of the family Arenaviridae. The aromatic disulfide NSC4492 showed the most potent virucidal effect, and the most effective antiviral agents were thiuram disulfide NSC14560 and acridone 3f, the thiosulfones were totally inactive. Antiviral compounds NSC14560 and 3f were equally effective in different cell types. Mechanistic studies of antiviral activity indicated that these compounds affect early and intermediate steps of viral infection, without blocking viral entry into cells. Viral RNA synthesis was inhibited with both compounds and, in the case of 3f, it was possible to partially restore the infectivity and RNA levels by adding of exogenous guanosine. Inactivating compounds shown to be effective also against several arenavirus, with fast inactivation kinetics and temperature dependent. NSC4492 treatment showed no effect on the self-assembly and budding of virus-like particles (VLPs) but an alteration in the electrophoretic pattern of protein Z and a strong inhibition of viral RNA synthesis were evidenced. In conclusion, we have identified new compounds with potent and selective antiviral action against arenavirus that seem to interfere with processes related to the synthesis of viral RNA as well as inactivating agents with strong capacity of virions that alter JUNV viral proteins and lead to the loss of viral infectivity.

"Estrategias de control de la contaminación del Maíz por micotoxinas de Fusarium. Situación actual en la Argentina" (1997). Peralta Sanhueza, Carmen Eugenia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los tricotocenos y las fumonisinas (FB), micotoxinas producidas por diferentes especies fúngicas del género Fusarium, han sido halladas como contaminantes naturales en maíz en todo el mundo. Con excepción de las aflatoxinas (AFLA), sean posiblemente las micotoxinas que representan una mayor amenaza para la salud de seres humanos y animales. Estos hechos, juntamente con la importancia económica del maiz para la Argentina, plantean la necesidad de conocer la situación en la que se encuentra el maíz argentino y de estudiar la posibilidad de implementar estrategias útiles de control. En tal sentido, este trabajo analizó distintos enfoques. Primero, y debido a la importancia de los tratamientos térmicos en la elaboración de alimentos y piensos, se inició un estudió sobre la estabilidad térmica de los tricotocenos del grupo B (deoxinivalenol -DON- y 3-acetildeoxinivalenol - 3ADON-). Segundo, se investigó la posibilidad de que el maíz argentino estuviera contaminado por toxinas de Fusarium sección Liseola (FB y moniliformina -MON-) y que éstas coocurrieran con otras micotoxinas. Tercero, y dentro del marco del control biológico, se investigó el rol de las FB en la relación patógeno (Fusarium) - huésped (maíz). Cuarto, se evaluaron distintos metodos de prevención y/o inactivación de la contaminación por tricotocenos y FB con miras a determinar su aplicabilidad como posibles estrategias de control. Las principales conclusiones de las distintas líneas de trabajo seguidas fueron: (1a) se observó un comportamiento térmico marcadamente diferente para DON y 3-ADON; (1b) la labilidad frente al calor observada para el 3-ADON indicaría que el tratamiento térmico de las materias primas contaminadas podria conducir a través de una reducción en los niveles de 3-ADON, a una disminución dc los tricotocenos totales; (2a) se halló en maíz a campo, proveniente de la Zona Núcleo de Producción de Maiz, contaminación por F. moniliforme, F. proliferatum, FB, AFLA y zearalenona (ZEA); (2b) F. moniliforme fue el contaminante fúngico predominante; (2c) los niveles de FB hallados fueron altos; (2d) se halló una correlación positiva significativa entre los niveles concurrentes de F. maniliforme y FB hallados; (2e) se halló coocurrencia de FB y AFLA, y de FB y ZEA en muestras de maiz provenientes de la misma estación experimental; (2f) se observó una tendencia a un mayor nivel de FB en maiz expuesto a la falta de agua en los meses de verano; (2g) del análisis de la capacidad productora de MON de cepas de Fusarium sección Liseola aisladas de maíz de la Zona Núcleo de Producción, se deduce que la probabilidad de hallar ocurrencia natural de MON en maíz en la Argentina es baja; (2h) sin embargo, existe la posibilidad de coocurrencia de FB y MON; (3a) el estudio acerca del rol de las FB en las interacciones fúngicas parecería indicar que la FB1 no inhibe cl crecimiento de las especies Fúngicas F. moniliforme, F. sporotrichioides, F. graminearum, F. sambucinum, Myrothecium roridum, Aspergillus nidulans) estudiadas ni es metabolizada por éstas; (3b) éstos resultados no apoyan la hipótesis según la cual las FB ofrecerían una protección o ventaja competitiva a F. moniliforme frente a otras especies Fúngicas en la invasión del maíz huésped; (4) si bien la prevención de la contaminación y/o la completa detoxificación de los granos contaminados requiere pensar en estrategias de control integradas; ciertos procedimientos tales como el empleo de variedades de maiz resistentes, la limpieza y remoción de los “fines” por tamizado, la dilución de los granos contaminados con granos no contaminados, y el empleo de secuestrantes químicos de las micotoxinas en la formulación de las dietas animales parecen ser, por el momento, las soluciones más viables.

Abstract:
Trichothecenes and fumonisins (FB) are mycotoxins produced by different fungal species of the genus Fusarium that have been found to contaminate corn worldwide. With the exception of aflatoxins (AFLA), they probably are the mycotoxins that represent the greatest threat to human and animal health. These facts, together with the finacial importance of corn for Argentina, raise the necessity to know the situation of corn in Argentina and to analyse possible strategies of control. To do so, different approaches were analysed in this study. First, and due to the importance of thermal treatments in the manufacture of foods and feeds, we started a study about the thermal stability of the trichothecenes belonging to the group B (deoxynivalenol -DON- and 3-acetyldeoxynivalenol -3ADON-). Second, we investigated the possibility that Argentine corn was contaminated by mycotoxins of Fusarium section Liseola (FB and moniliformin -MON-) and that they could occurred with other mycotoxins. Third, and in the area of biological control, we investigated the rol of FB in the relationship pathogen (Fusarium) - host (corn). Fourth, we evaluated different methods of prevention and/or inactivation of the contamination due to trichothecenes and FB with a view to determine their applicabilily as possible strategies of control. The main conclusions of the different approaches were: (1a) a markedly different thermal behavior was observed for DON and 3-ADON; (1b) the heat unstability of 3-ADON might show that a thermal treatment of contaminated raw materials could lead, through the reduction of the 3-ADON levels, to a decrease of total trichothecenes; (2a) corn from the main production area was found to be contaminated by F. moniliforme, F. proliferatum, FB, AFLA and zearalenone (ZEA); (2b) F. maniliforme was the predominant fungal contamination; (2c) the levels of FB found were high; (2d) a significant positive correlation between the concurrent levels of F. maniliforme and FB was found; (2c) cooccurrence of FB and AFLA, and of FB and ZEA was found in samples belonging to the same experimental field station; (2f) a trend that showed a greater level of FB in corn exposed to the shortage of water during the summer months was observed; (2g) from the analysis of the MON-producing ability of strains of Fusarium section Liseola isolated from corn belonging to the main production area, we deduce that the probability of finding natural occurrence of MON in corn in Argentina is low; (2h) however, the possibility of the cooccurrence of FB and MON exists; (3a) with regard to the rol of FB in fungal interactions, this study seems to show that FB1 does not inhibit the growth of any of the fungal species (F. moniliforme, F. sporotrichioides, F. graminearum, F. sambucinum, Myrothecium roridum, and Aspergillus nidulans) tested nor is FBI metabolized by them; (3b) these results do not support the hypothesis that FB gave F. moniliforme protection or a competitive advantage with regard to other fungi in the invasion of corn; (4) the prevention of the contamination and/or the complete detoxification of the contaminated grains requires to think of integrated strategies of control; certain procedures such as the use of resistant varieties of corn, cleaning and screening of fines, the dilution of contaminated grains with no contaminated grains, and the use of mycotoxin binding agents in the formulation of feeds seem to be, for the moment, the most viable solutions.

"Estrategias de inmunoterapias contra tumores murinos durante el estado de inmunosupresión inducido por el tumor" (2012-02-16). Chiarella, Paula. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Aunque los animales pueden ser inmunizados contra el crecimiento de algunos tumores, la mayoría de los intentos por aplicar estas inmunoterapias para causar la regresión en tumores humanos y de animales una vez que estos se encuentran establecidos no has sido exitosos, aun cuando los tumores son fuertemente inmunogénicos. En esta tesis, nosotros demostramos que el inicio de la refractariedad a los tratamientos inmunológicos coincidió con el comienzo de un estado de inmunosupresión conocido como “eclipse inmunológico” caracterizado por una pérdida o bloqueo de la respuesta inmune antitumoral después que el tumor ha superado cierto volumen crítico (500 mm3). A su vez el inicio del eclipse se correspondió con el comienzo de un proceso de inflamación sistémica progresiva caracterizado por un aumento en el número de neutrófilos circulantes y en bazo, un alto número células mieloides inmaduras (GR1/CD11b) y una elevada concentración sérica de citoquínas proinflamatorias como TNF-α, IL-1β e IL-6, proteína C reactiva y proteína A Amieloide. En ratones portadores de tumor, la aplicación de una sola dosis (0.75 mg/Kg) de un corticoide sintético como la dexametasona (DX) redujo significativamente los parámetros de inflamación sistémica y revirtió simultáneamente el eclipse inmunológico, lo cual fue demostrado por la recuperación de ciertos indicadores de respuesta inmune antitumoral. Otros dos tratamientos anti-inflamatorios (inodmetacina o receptor para TNF-α) revirtieron parcialmente el eclipse inmunológico, aunque el efecto no fue tan efectivo que el observado con DX. La reversión del eclipse inmunológico no fue suficiente por si solo para inhibir el crecimiento de un tumor primario. Sin embargo, cuando usamos la estrategia de dos pasos inoculando DX para revertir el eclipse inmunológico y células dendríticas (CDs) estimuladas con antígeno tumoral, como un Booster de inmunización, se observó una inhibición significativa tanto en el crecimiento de tumores establecidos como en células remanentes luego de una operación de un tumor grande establecido, a pesar de que la vacunación con CDs solamente no tuvo efecto o incluso, a veces, produjo un aumento del crecimiento tumoral. Asimismo, cuando a la estrategia de dos pasos le adicionamos un tratamiento adicional (transferencia pasiva de linfocitos näive o administración de ATRA), si bien se observó una mayor inhibición del crecimiento de los tumores, la sobrevida de los animales no fue significativa. Por lo tanto, los datos presentes en esta tesis demuestran que es necesario eliminar o mejorar el eclipse inmunológico como condición previa para permitir que una terapia inmunológica anti-tumoral pueda ser efectiva.

Abstract:
Although animals can be immunized against the growth of some tumor implants, most of the attempts to use immunotherapy to cause the regression of animal and human tumors once they have become established have been disappointing even when strongly immunogenic tumors were used as target. In this paper, we demonstrate that the failure to achieve an efficient immunological treatment against an established strongly immunogenic murine fibrosarcoma was paralleled with the emergence of a state of immunological unresponsiveness (immunological eclipse) against tumor antigens observed when the tumor surpassed the critical size of 500 mm3. In turn, the onset of the immunological eclipse was coincidental with the onset of a systemic inflammatory condition characterized by a high number of circulating and splenic polymorphonucleated neutrophils displaying activation and myeloid suppressor cell (Gr1/CD11b) and an increasing serum concentration of the proinflammatory cytokines TNF-α, IL-1β and IL-6 cytokines and C-reactive protein and serum A amyloid phase acute proteins. Treatment of tumor-bearing mice with a single low dose (0.75 mg/kg) of the synthetic corticoid dexamethasone (DX) significantly reduced all the systemic inflammatory parameters and simultaneously reversed the immunological eclipse. Two other antiinflammatory treatments by using indomethacin or dimeric TNF-α receptor, also partially reversed the immunological eclipse although the effect was not as striking as that observed with DX. The reversion of the immunological eclipse was not enough on its own to inhibit the primary growing tumor. However, when we used the two-step strategy of inoculating DX to reverse the eclipse and then dendritic cells loaded with tumor antigens (CDs) as an immunization booster, a significant inhibition of the growth of both established tumors and remnant tumor cells after excision of large established tumors was observed, despite the fact that the vaccination alone (CDs) had no effect or even enhanced tumor growth in certain circumstances. Also, when we add an additional treatment (passive transfer of naive lymphocytes or administration of ATRA), although there was a greater inhibition of tumor growth, but survival was not significant. Therefore, these data that we present is based on the rationale that it is necessary to eliminate or ameliorate the immunological eclipse as a precondition to allow an otherwise ineffective anti-tumor immunological therapy to have a chance to be successful.

"Estrategias moleculares para la expresión combinada de genes en plantas transgénicas" (1996). Ceriani, María Fernanda. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estrategias para revertir la inmunosupresión en el fenómeno de tolerancia a endotoxinas" (2011). Rearte, María Bárbara. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los fenómenos de sepsis y shock séptico pueden ser causados por bacterias Gram- positivas y negativas como también por otros microorganismos. En el caso de las bacterias Gram-negativas, las endotoxinas, componentes normales de la pared bacteriana, también conocidas como lipopolisacáridos (LPS), han sido consideradas como uno de los principales agentes causales de los efectos indeseables de estas enfermedades. La respuesta a LPS implica, en principio, la generación de un estado inflamatorio, caracterizado por la rápida secreción de citoquinas proinflamatorias como el factor de necrosis tumoral (TNF)-α, interleuquina (IL) -1, IL-6, e interferón (IFN)-γ, seguido por un estado anti-inflamatorio en donde predominan mediadores como la IL-10, el factor de transformación del crecimiento-β (TGF)-β o glucocorticoides (GC), los cuales conducen al huésped a un estado de refractariedad temporal frente a una nueva exposición al LPS, un proceso conocido como tolerancia a LPS o tolerancia a endotoxina. Si bien se ha considerado como un mecanismo de protección frente al desarrollo de una sepsis o una inflamación sistémica, la tolerancia a endotoxina ha sido también señalada como una de las causas principales de la inmunosupresión inespecífica tanto humoral como celular descrita en dichos pacientes. En este trabajo demostramos, mediante un modelo murino, que si bien el mantenimiento de la tolerancia depende de los GC, el establecimiento del fenómeno puede ser inhibido por un GC sintético como la dexametasona (Dex). Por el contrario, demostramos que el mifepristone (RU486), un conocido antagonista de receptores para GC, fue capaz de inducir una desarticulación transitoria y reversible de la tolerancia a endotoxina, permitiendo también una restauración parcial de tanto la respuesta inmune adaptativa humoral como celular en ratones inmunosuprimidos inducido por LPS, sugiriendo el involucramiento de los GC endógenos en este fenómeno. Por otro lado, mediante el uso de ciclofosfamida y gemcitabina, demostramos que las células supresoras GR-1^+/CD11b^+ y las células T regulatorias CD4^+CD25^+FoxP3^+ no juegan un rol principal ni en el establecimiento ni en el mantenimiento de la tolerancia a endotoxina, un mecanismo central en la inducción de un estado de inmunosupresión. Estos resultados permiten considerar una nueva perspectiva para el manejo de la inmunosupresión en sepsis y en shock no infecciosos y merecen de mayores estudios e investigaciones en el futuro.

Abstract:
Sepsis and septic shock can be caused by Gram-positive and -negative bacteria and other microorganisms. In the case of Gram-negative bacteria, endotoxin, a normal constituent of the bacterial wall, also known as lipopolysaccharide (LPS), has been considered as one of the principal agents causing the undesirable effects in this critical illness. The response to LPS involves a rapid secretion of proinflammatory cytokines such as tumour necrosis factor (TNF)-a, interleukin (IL)-1, IL-6, interferon (IFN)-g and the concomitant induction of anti-inflammatory mediators such as IL-10, transforming growth factor (TGF)-b or glucocorticoids (GC), which render the host temporarily refractory to subsequent lethal doses of LPS challenge in a process known as LPS or endotoxin tolerance. Although protective from the development of sepsis or systemic inflammation, endotoxin tolerance has also been pointed out as the main cause of the non-specific humoral and cellular immunosuppression described in these patients. In this report we demonstrate, using a mouse model, that while the maintenance of tolerance is dependent upon GC, the establishment of tolerance by LPS could be inhibited by dexamethasone (Dex), a synthetic GC. Conversely, we demonstrated that mifepristone (RU486), a known GC receptor antagonist, was capable of inducing a transient and reversible disruption of endotoxin tolerance, also permitting partial restoration of both adaptive humoral and cellular immune response in LPS immunosuppressed mice, suggesting the involvement of endogenous GC in this phenomenon. On the other hand, using cyclophosphamide and gemcitabine, we demonstrated that regulatory/suppressor CD4^CD25^+FoxP3^+ and GR-1+CD11b^+ cells do not play a major role in the establishment or the maintenance of endotoxin tolerance, a central mechanism for inducing an immunosuppression state. These results are encouraging for the management of immunosuppression in sepsis and/or noninfectious shock, and deserve further investigation in the future.

"Estrategias reproductivas de Eufausiaceos (Euphausiacea, crustácea) antárticos como mecanismo regulador de la distribución" (1996). Marschoff, Enrique R.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estrategias reproductivas de las especies de peces óseos más conspicuas y abundantes en los arrecifes rocosos costeros de la Patagonia norte" (2015-03-23). Villanueva Gomila, Gabriela Luján. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los peces exhiben una gran diversidad de patrones reproductivos en comparación con el resto de los vertebrados. Los rasgos reproductivos que presentan todos los individuos de una misma especie constituyen su estrategia reproductiva, mientras que las tácticas reproductivas son aquellas variaciones del patrón típico que los individuos llevan a cabo en respuesta a las condiciones locales. Estas estrategias y tácticas en los peces de arrecife presentan características particulares. Los arrecifes rocosos de los golfos norpatagónicos San Matías (GSM), San José (GSJ) y Nuevo (GN), ofrecen grietas, cuevas y aleros que un ensamble de peces particular, de alrededor de 30 especies, utilizan como refugio. El objetivo general de esta tesis es caracterizar las estrategias reproductivas de las cuatro especies de peces óseos más conspicuas y abundantes que habitan los arrecifes rocosos costeros en la Patagonia norte: mero Acanthistius patachonicus (Jenyns 1840), salmón de mar Pseudopercis semifasciata (Cuvier 1829), escrófalo Sebastes oculatus Valenciennes 1833 (en Cuvier y Valenciennes 1833) y turco Pinguipes brasilianus (Cuvier 1829). Los objetivos particulares incluyen: la descripción de los primeros estadios de A. patachonicus, desde el huevo hasta el juvenil post-transicional (Capítulo I); el estudio de los patrones espacio-temporales de presencia de larvas de P. semifasciata y S. oculatus en el GSJ (Capítulo II), así como el patrón temporal de presencia de los juveniles post-transicionales en GSJ y GN (Capítulo III); y la caracterización de la biología reproductiva de P. brasilianus (Capítulo IV). Sobre la base de los resultados obtenidos y de la información preexistente recopilada se corroboró que las cuatro especies presentan características reproductivas comunes a otras de aguas templadas. Sin embargo, difieren en otros aspectos, tal como se discute a lo largo de esta tesis, lo que da lugar a estrategias diferentes que representan respuestas adaptativas alternativas igualmente exitosas frente a presiones ambientales similares.

Abstract:
Marine fishes have several different reproductive strategies compared to other vertebrates. The reproductive pattern of a species is its reproductive strategy, while reproductive tactics are variations in the pattern as a response to local conditions. These strategies and tactics in the reef fishes present special characteristics. Rocky reefs of Northpatagonian gulfs, San Matias (SMG), San José (SJG) and Nuevo (NG) have cracks, caves and eaves used as shelter by an assemblage of about 30 species of fish. The most conspicuous and abundant species that inhabit these reefs are Acanthistius patachonicus (Argentine sea bass), Sebastes oculatus (Patagonian redfish), Pseudopercis semifasciata (Argentine sandperch) and Pinguipes brasilianus (Brazilian sandperch). The general objective of this thesis was to characterize the reproductive strategies of those species. The particular objectives were to describe the early stages of A. patachonicus from eggs to posttransitional juveniles (Chapter I); to describe the spatio-temporal pattern of larval distribution in P. semifasciata y S. oculatus in SJG (Chapter II) and the temporal pattern of presence in post-transitional juveniles in SJG and NG (Chapter III), and to characterize the reproductive biology of P. brasilianus (Chapter IV). Based on our results and on previous information, we corroborated that the four species have reproductive characteristics similar to species from template waters. However, they differ in other aspects, which are discussed throughout this thesis. Those differences confer them alternative and equally successful adaptive responses to similar environmental pressures.

"Estrategias reproductivas y cuidado parental en Akodon azarae (Rodentia, Muridae)" (1996). Suárez, Olga Virginia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudió el comportamiento materno-filial en Akodon azarae en condiciones de semicautividad desde la gestación hasta la independencia alimenticia de las crias. Se compararon las estrategias reproductivas de las hembras en función de la estación de nacimiento de las crías y por último, se interpretaron los resultados en el marco de la dinámica poblacional e historia de vida de la especie. Las hembras preñadas mantienen un máximo distanciamiento con el macho. Durante la estación no reproductiva se reduce la distancia entre individuos y aumenta la cohabitación. El patrón copulatorio corresponde a un sistema de aparcamiento poliginico. La hembra se ocupa del cuidado de las crías. El tamaño de carnada disminuye al avanzar la estación reproductiva. De acuerdo a la historia de vida materna y a la estación de nacimiento de las crías se observaron diferencias en las estrategias reproductivas. Dichas diferencias se reflejaron en el tiempo dedicado al cuidado de las crias, duración de la lactancia y en el peso de las crías al destete. Finalmente, en el período de destete la madre aporta a la transmisión de las preferencias alimenticias. Las variaciones expuestas indican que A. azarae responde a las condiciones ambientales de forma tal de maximizar su éxito reproductivo. Los individuos de cada etapa del ciclo poblacional tienen un comportamiento característico que sólo se puede comprender teniendo en cuenta las condiciones fenológicas previas y actuales del momento en que se los estudia.

Abstract:
Maternal-filial behavior was studied in Akodon azarae individuals since pregnancy to dietary independence of the offspring. Reproductive strategies of females were compared according to the season of parturition. These results were analyzed in relation to population dynamic and life history strategy of the species. Pregnant females showed higher distances with respect to males than non pregnant and reproductively inactive females. During the non reproductive season interindividual distances diminished and there was an increased cohabitation. Copulatory pattern agreed with a polygynous system. Females took care of the offspring. Litter size decreased since the beginning towards the end of the reproductive season. Reproductive strategies changed according to female’s life history and the season of parturition. Such differences were expressed in changes in the time expended in Offspring care, lactancy period and offspring weight at weaning. During weaning period there was a transfer of dietary preferences from the females to the offspring. According to my results A. azarae changes its reproductive strategy in order to maximize the reproductive success under different ambient conditions. Reproductive individuals have characteristic behaviors in different moments of the year that need to be explained taking in account actual conditions and those suffered by females along their lives.

"Estratigrafía y sedimentología de las formaciones Patquía (Pérmico) y Talampaya (Triásico Inferior), en las Sierras Pampeanas Noroccidentales y Precordillera Central (Provincias de La Rioja y San Juan)" (1998). Caselli, Alberto Tomás. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Mediante el levantamiento de doce perfiles de detalle realizados en las sierras de Maz, Famatina, Sañogasta, Valle Fértil, Cerro Bola y Precordillera oriental (Huaco) se han estudiado las características sedimentológicas y estratigráficas de las Formaciones Patquía (Pérmico) y Talampaya (Triásico inferior), como también se mejoró el conocimiento acerca de la distribución regional de ambas unidades, obteniendo precisiones sobre sus relaciones estratigráficas. Estas columnas, inicialmente divididas en unidades de sedimentación o “facies”, fueron estudiadas mediante el análisis de los cuerpos tridimensionales en los que se organizan (elementos arquitecturales), analizando principalmente la distribución espacial de las litofacies. La Formación Patquía constituye un conjunto de bancos rojos continentales, sedimentados en un ambiente sujeto a una progresiva aridización, en los que se han reconocido seis facies sedimentarias. Dentro de las tres que se ubican en la base de la unidad, la de grano más grueso está compuesta por “aglomerados, conglomerados y areniscas groseramente estratificados” (facies Pa), correspondiente a depósitos de limitada extensión regional de abanicos aluviales proximales a distales (Cerro Noqués). Por ono lado, la facies de “areniscas con intercalaciones conglomerádicas” (facies Pb), también de carácter local (Cerro Guandacol), producto de sistemas fluviales entrelazados con importante participación de planicies arenosas mantiformes, posiblemente corresponde a depósitos distales de abanicos aluviales provenientes del noroeste. Sin dudas, la más extendida regionalrnente es la facies de “pelitas y areniscas rojas con intercalaciones lentiformes de conglomerados y sabulitas rosadas” (facies Pc), la cual muestra importantes depósitos finos de llanura de inundación, que incluyen cuerpos de agua someros, interpretados como sistemas anastomosados de climas semiáridos a áridos. Otra de las facies es la de “areniscas pelitas finamente estratificadas” (facies Pd), la cual se presenta recurrentemente en los perfiles analizados. Sólo la recurrencia basal incluye abundantes piroclastitas de caída, correspondiendo estas sedimentitas a depositos de cuerpos de agua someros. Potentes sucesiones de “areniscas con estratificación entrecruzada de gran escala” (facies Pe) de origen eólico, están ampliamente distribuidas en el área analizada y muestra además doble recurrencia en el extremo sur de Sierra de Maz. Por último, la facies de “pelitas con intercalaciones lenticulares de areniscas” (facies Pf), muestra importante participación de planicies de inundación con cuerpos de agua someros, en muchos casos con precipitación de evaporitas, corresponde a sistemas fluviales anastomosados áridos. En lo que respecta a la Formación Talampaya, también se encuentra constituida por extensas sucesiones de bancos rojos continentales, depositadas en un ambiente árido, en los que se reconocieron un total de diez facies sedimentarias. La de “areniscas y pelitas con intercalaciones de tobas blancas” (facies Ta), aflorante en el extremo sur de los Nevados del Famatina, comprende un conjunto de bancos arenosos tabulares de arreglo grano y estratodecreciente. Estas rocas resultan de flujos mantiformes, interpretados como sistemas efímeros medios a distales con importante participación de depósitos de lluvias de cenizas. La facies de “conglomerados, areniscas y pelitas rojas con intercalaciones tobáceas” (facies Tj) aflora en Sierra de Maz y muestra gran similitud con la anterior a diferencia de presentar cuerpos de agua someros, seguramente producto de endicamientos por el gran aporte de lluvias de cenizas o tal vez el derrame de lavas mesosilícicas y básicas presentes en las cercanías. Las dos facies anteriormente descriptas son seguidas por “areniscas y pelitas finamente estratificadas” con abundantes moldes de grietas de desecación (facies Te), correspondiente a depósitos de barreal. Estos son cubiertos por facies de “areniscas en bancos tabulares con intercalaciones pelíticas” (facies Td), con fuerte carácter grano y estratocreciente y moldes de grietas de desecación, que conforman un conjunto de lóbulos efímeros distales que progradan sobre la facies de barreal. Regularmente estos depósitos son seguidos por facies de “areniscas medianas con conglomerados intraformacionales basales y escasas pelitas” (facies Tb) constituyendo grandes espesores de depósitos de sistemas fluviales efímeros proximales confinados y no confinados. La facies de “areniscas y areniscas conglomerádicas rosadas” (facies Tc), sin dudas la más extendida regionalmente y que traslapa a todas las facies apoyándose incluso sobre el basamento sedimentario (Grupo Paganzo), es interpretada como depósitos de sistemas fluviales “entrelazados” efímeros, no confinados. Localmente (Agua de la Peña), la facies Tc está estrechamente vinculada con depósitos de “conglomerados y areniscas conglomerádicas” (facies Th) que corresponden a ríos entrelazados efímeros confinados. También en forma conspicua y en la misma localidad anterior, se intercala en Tc facies de “areniscas con estratificación entrecruzada de gran porte” (facies Ti) de indudable origen eólico. Finalmente, depósitos de abanicos aluviales proximales a distales ha sido convenientemente divididas por su génesis en dos facies: por un lado la de “conglomerados y brechas con clastos de vulcanitas básicas e intercalaciones de derrames lávicos” (facies Tf) cuyo origen se debería a la diferencia de relieve generada principalmente por el vulcanismo (Sierra de Maz); y por otro, la de “aglomerados, conglomerados, areniscas y pelitas” (facies Tg) apoyada directamente sobre el basamento cristalino (La Torre). A partir del estudio microscópico de secciones delgadas de areniscas de siete de los perfiles levantados para esta Tesis (Guandacol, Cerro Bola, Cerro Noqués, Quebrada Las Cuchillas, La Torre, Agua de la Peña y Huaco), se definieron siete petrofacies, tres correspondientes a la Formación Patquía y cuatro a la Formación Talampaya. Las petrofacies correspondientes a la Formación Patquía, con su composición (Q,F,L), son: litomíxtica (16,11,73), cuarzoféldica (63,36,1) y cuarzofeldlítica (64,30,6), mientras que las reconocidas para la Formación Talampaya son: litovolcánica (15,23,62), feldcuarcítica (43,55,2), cuarzofeldlítica (46,35,19) y cuarzolitoféldica (52,23,25). Al analizar la evolución de estas con el estudio de facies y paleocorrientes se pudieron establecer “discordancias petrográficas” que ayudaron, como una herramienta más, al estudio secuencial de las sucesiones en cuestión, como también a detectar cambios de procedencia por inversión de pendientes. Es de destacar que para dicha interpretación fue necesaria la subdivisión de los fragmentos líticos volcánicos presentes en intra y extracuencales como también en paleo y neovolcánicos. En base al análisis de facies y petrofacies efectuado se reconocieron dos Unidades Tectosedimentarias (UTS Patquía y UTS Talampaya) limitadas por superficies de discontinuidad de primer y segundo orden, ambas UTS han sido divididas en Unidades Eventosedimentarias (UES) separadas por superficies de tercer orden. A partir de los datos obtenidos se propone para la región de estudio un modelo de evolución paleoclimática durante el Pérmico y Triásico inferior. Durante la depositación de la Formación Patquía se produce un importante y definitivo cambio en las características del ambiente, pasando rápidamente de condiciones húmedas y reductoras durante buena parte de la sedimentación carbonífera, a un ambiente netamente oxidante y más seco. Estas condiciones se mantuvieron hasta el final del ciclo sedimentario pérmico observándose dos pulsos de máxima aridez con la formación de importantes campos eólicos. Durante la sedimentación de la Formación Talampaya continuaron las condiciones áridas, reflejadas principalmente en los sistemas fluviales de tipo efímero y los depósitos de barreales, ambos con importantes rasgos de exposición subaérea. En lo referente a la constitución paleogeográfica, y para la época en que se depositó la UTS Patquía, la región estudiada presentaba un paisaje maduro, caracterizado por un muy bajo gradiente topográfico regional, con pequeño coeficiente de sedimentación (UES P1) y que progresó hacia un importante “mar de arena” (UES P2). En la región de Guandacol, se propone la existencia de un depocentro relativamente pequeño, asociado al lineamiento de Valle Fértil, producto de reactivaciones de los depocentros ya existentes en las primeras etapas de la apertura de la Cuenca Paganzo. Con posterioridad al establecimiento de las eolianitas antes mencionadas se produce un lento basculamiento de la cuenca, con el establecimiento de lagos someros y posterior progradación de sistemas fluviales desde el oeste-noroeste (UES P3) que culminan con otro clímax árido y establecimiento de un nuevo “mar de arena” eólico (UES P4). Respecto a la Formación Talampaya, la relajación extensional que se generó en el oeste argentino, formó en el área de estudio un depocentro relativamente pequeño, probablemente del tipo hemigraben, limitado hacia el oeste por el lineamiento de Valle Fértil, dando lugar a la depositación de extendidos lagos efímeros (barreales) en el sector sudeste de Sierra de Maz - sur de Sierra del Famatina (UES T1). Sobre estos depósitos, se produce la progradación de sistemas fluviales efímeros arenosos (UBS T2), los que luego son cubiertos por sistemas fluviales entrelazados eflmeros arenosos-conglomerádicos, que cubren y sobrepasan ampliamente los límites de cuenca (UES T3). Finalmente, a partir de la información sedimentológica-secuencial obtenida se propone un modelo tectosedirnentario de evolución del relleno para cada una de las unidades analizadas. Los bancos rojos correspondientes a la UTS Patquía, son interpretados como la culminación de la etapa de subsidencia de la Cuenca Paganzo e inversión de la paleopendiente por el crecimiento de la faja volcánica en la región occidental de la cuenca. Por otro lado, la UTS Talampaya, corresponde a un estilo de acumulación que se propone podría atribuirse a la presencia de un campo de esfuerzos transtensivos-transpresivos del tipo de “disipación” (Releasing band), con altos estructurales transpresivos en la región sur (Sierra de Valle Fértil) y transtensivos, con derrames de mantos traquibasálticos, en la región norte (Sierra de Maz-Cerro Bola).

Abstract:
The sedimentological and stratigraphical characteristics of Patquía (Permian) and Talampaya (Lower Triassic) formations are described and a depositional model for each lithostratigraphic unit is proposed in the present Doctoral Thesis. The Patquía Formation is mainly composed of sandstones, mudstones and conglomerates with intercalations of thin layers of gypsum and cherts. The unit has been divided in six sedimentary facies. The marginal basin deposits are characterized by crudely stratified aglomerates and conglomerates (Pa facies), interpreted here as alluvial fan deposits, and a sandstone and conglomerate sequence (Pb facies) deposited by sandy braided fluvial systems. These margin sequences are related basinward into the more extended Pc facies, characterized by mudstones and sandstones interbedded with lenticular conglomerates and very coarse sandstone. The Pc facies corresponds to anastomosing fluvial system deposits. Asociated with the later is the Pd facies, composed of finely suatified sandstones and mudstones deposited in small and shallow water bodies. The fluvial sedimentation was interrumped overall the basin by eolian sandstones (Pe facies) represented by dune, interdune and extradune deposits. In one locality, probably related to the margin basin, this Pe facies is followed by the installation of a new shallow lacustrine deposit (Pd facies), which is covered to the top by alternating mudstones and sandstones related to anastomosing fluvial system developed under arid-semiarid climatic conditions (Pf facies). The Talampaya Formation comprises mainly a sucession of sandstones and mudstones related to fluvial sytems. The unit has been divided in ten sedimentary facies. Alluvial fans deposits, related to the basin margin, are represented by Tg and Tf facies. The latter, include basaltic and traquibasaltic lava flows. Basinward, ephemeral fluvial systems (Tj and Ta facies) are deloped. The Tj and Ta facies correspond to the proximal and distal ephemeral deposits, respectively. Upwards, these facies turn gradually to a playa lake sequence (Te facies), characterized by finely laminated mudstones and sandstones. The middle part of the Talampaya Formation is dominated by progradating coarsening upward sequences of ephemeral distal (Td facies) to proximal (Tb facies) deposits. In the whole basin, the top of the Talampaya Formation shows cross-bedded pebbly sandstones (Tc facies), deposited by ephemeral sandy braided rivers. In one locality, Tc facies begins with conglomerates and pebbly sandstones (Th facies) that correspond to braided river deposits. In the same locality, the sequence is finished by the eolian sandstones of the Ti facies. Petrographic analysis of both lithostratigraphic units allowed to recognized seven petrofacies. Upwards, the compositional evolution of the detritical modes, interpreted together with the facies and paleocurrents analysis, allowed to identify different petrosomes related to changes in the provenance and thus suggesting variations in the slope of the basin. Finally, a stratigraphic sequence analysis, resulted in the recognition of two major tecto-sedimentary units, Patquía and Talampaya UTS. The red beds of the Patquía UTS are interpreted as the end of the subsidence stage of the Paganzo Basin during the end of the Paleozoic. On the other hand, Talampaya UTS could be atributed to the filling under a realeasing-bend basin conditions, possibly during the Early Triassic.

"Estratigrafía y sedimentología del mesozoico superior-paleógeno de la Sierra de Beauvoir y adyacencias, Isla Grande de Tierra del Fuego, Argentina" (2010). Martinioni, Daniel Roberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El interior de la isla Grande de Tierra del Fuego es un área montañosa con accesos limitados, está densamente cubierta de vegetación boscosa y cuenta con un importante relleno de sedimentos glaciarios y post-glaciarios jóvenes. Su geología preglaciaria está ensombrecida por estos últimos dos rasgos que la cubren y, en relación con la superficie total del área de estudio, las buenas exposiciones son exiguas y se reconocen como parches y/o franjas en el fondo de algunos valles fluviales y en algunas de las crestas de las más altas cumbres de los cordones situados al oeste del la laguna Chepelmut, entre el lago Fagnano y la margen sur del Río Grande. En las sierras de Beauvoir, de Apen, de las Pinturas y aledaños se reconocieron asomos de dos paquetes principales de roca: a) uno, más antiguo, del Jurásico Superior-Cretácico Inferior (s.l.) que comienza con volcanitas ácidas, pero está dominado por meta- sedimentitas fangolíticas plegadas, parcialmente deformadas internamente y atravesado por rocas ígneas, y b) otro más joven del Cretácico Superior-Paleógeno con unidades sedimentarias falladas y plegadas constituido por rocas fangolíticas en sus horizontes más bajos, que gradualmente pasan a unidades con interestratificación de fangolita y arenisca, hasta tener participación dominante de arenisca y abundancia de conglomerado en los niveles superiores. El conjunto de unidades del Jurásico Superior-Cretácico Inferior (s.l.) está compuesto por la siguiente sucesión de unidades: 1) Formación Lemaire, unidad dominantemente volcanógena (Jurásico Superior); 2) Pizarras del Lago Fagnano, unidad meta-sedimentaria dominada por arcilita (¿Jurásico Superior-Cretácico Inferior bajo?; 3) Formación Beauvoir, unidad meta-sedimentaria dominada por fangolitas, con inocerámidos y Aucellina spp. (Cretácico Inferior alto; Aptiano-Albiano, con una posible extensión hasta el Cenomaniano basal); 4) Formación Hito XIX, unidad meta-sedimentaria epiclástica, sutilmente más areniscosa que la Formación Beauvoir, con participación de areniscas margosas, con inocerámidos, Aucellina spp. y belemnites (Cretácico Inferior alto, Albiano); y 5) rocas ígneas, constituidas por un cuerpo plutónico y diversos diques leucocráticos y básicos (uno de los diques básicos arrojó una edad isotópica de 104 ± 4 Ma, Albiano superior bajo), intruyen a las Pizarras del Lago Fagnano y a la Formación Beauvoir, respectivamente. Las rocas sedimentarias del Cretácico Superior-Paleógeno comprenden a las siguientes unidades: 1) Capas del Arroyo Castorera, sedimentitas fangolíticas con escasos y delgados niveles de toba intercalados, con inocerámidos (Cretácico Superior, ¿Cenomaniano superior?-Turoniano); 2) Capas del Río Rodríguez, sucesiones grano- y estrato- crecientes de fangolita, limolita y arenisca muy fina limosa, con inocerámidos (Cretácico Superior, Coniaciano-¿Campaniano?); 3) Capas del Cerro Fumando, sedimentitas dominadas por fangolita arenosa en sus términos basales con mayor participación arenosa en los cuspidales, dividida en un miembro fangolítico y un miembro areniscoso, con amonites y dinoquistes diagnósticos, sin inocerámidos (Cretácico Superior-¿Paleoceno?; Maastrictiano-¿Daniano?); 4) Capas del Cerro Apen, sedimentitas areniscosas hasta conglomerádicas con participación de fangolita y ritmitas heterolíticas apoyadas en discordancia erosiva sobre las Capas del Cerro Fumando, integradas por un miembro inferior areniscoso y un miembro superior conglomerádico a areniscoso, con dinoquistes diagnósticos (Paleoceno; miembro inferior Daniano y miembro superior Daniano-Thanetiano); y 5) Formación Ballena, sedimentitas conglomerádicas con arenisca y fangolita intercalada, desconectadas de las anteriores, portadora de dinoquistes diagnósticos (Paleógeno, Eoceno medio). Cada uno de los paquetes registra una de las dos fases principales en la evolución de las cuencas del extremo austral de América del Sur para el Jurásico Superior-Paleógeno medio. Las rocas del Jurásico Superior-Cretácico Inferior -hasta Cenomaniano basal- corresponden a unidades acumuladas durante etapas iniciales de extensión y luego de relleno de la cuenca marginal de Rocas Verdes hasta su cierre definitivo en el Cretácico Tardío más temprano. Las sedimentitas del Cretácico Superior-Paleógeno medio son los depósitos que resultaron del desarrollo de la cuenca de antepaís (Austral o de Magallanes), que tuvo una etapa inicial de transición con sedimentación marina profunda y subsidencia térmica, luego del cierre e inversión tectónica de la cuenca marginal, seguida de la progresiva elevación del orógeno de los Andes Fueguinos a expensas de la faja plegada y corrida que se formó por el régimen compresivo instalado en el área. El ascenso orogénico y el avance de esta faja fueron produciendo sucesivas acumulaciones sedimentarias que en conjunto representan una sucesión compuesta grano-creciente, que pasó de unidades dominadas por fangolitas a intercalar progresivamente unidades areniscosas y conglomerádicas.

Abstract:
The inner part of Tierra del Fuego Island is a rugged mountainous area with only limited access, dense Nothofagus forests, and a profuse quaternary sedimentary cover, constituted mainly of glacial and post-glacial deposits. Thereafter, the pre-glacial geological composition remains obscured and somewhat hidden underneath. In relation to the whole surface of the study area, the good exposures are scanty and can be identified mainly as patches or stripes that show up along some of the fluvial valleys or follow the upper crests of the mountain chains located west of Chepelmut Lake, between the Fagnano Lake and the southern margin of the Grande River. In Sierra de Beauvoir, Sierra de Apen, Sierra de las Pinturas, and their neighboring areas the geological units can be grouped into two packages: a) an older Upper Jurassic-Lower Cretaceous (s.l.) set of units that starts with acidic volcanic rocks, but is largely mudstone dominated, forming a meta-sedimentary package, that is folded, internally deformed, and cut across by igneous rocks, and b) a younger Upper Cretaceous-Paleogene folded and faulted sedimentary succession constituted by an up-section mudstone-to-sandstone-to- conglomerate dominated set of units. The Upper Jurassic-Lower Cretaceous (s.l.) package comprises the following units: 1) Lemaire Formation, mainly volcanogenic rocks (Upper Jurassic); 2) Lago Fagnano Slates, clay-rich meta-sedimentary rocks (Upper Jurassic?- lower Lower Cretaceous?); 3) Beauvoir Formation, mudstone dominated meta-sedimentary unit, with inoceramids and Aucellina spp. (upper Lower Cretaceous; Aptian-Albian with a possible extension to the lowermost Cenomanian); 4) Hito XIX Formation, epiclastic meta-sedimentary unit, with sandy marls and a subtle sandier composition than Beauvoir Formation, and with inoceramids, Aucellina spp., and belemnites (upper Lower Cretaceous; Albian); and, 5) igneous rocks, a plutonic body and several leucocratic and basic dikes (one of the basic dikes gave an isotopic age of 104 ± 4 My, lower upper Albian), respectively, intrude and crosscut the Lago Fagnano Slates and the Beauvoir Formation. The Upper Cretaceous-Paleogene sedimentary rocks comprise the following units: 1) Arroyo Castorera Beds, mudstone dominated sedimentary rocks with interbedding of a few thin tuff layers, with inoceramids (Upper Cretaceous, upper Cenomanian?-Turonian); 2) Río Rodríguez Beds, coarsening- and thickening-upward successions consisting of mudstone, siltstone, and very fine silty sandstone, with inoceramids (Upper Cretaceous, Coniacian-Campanian?); 3) Cerro Fumando Beds, sedimentary unit dominated by sandy mudstone in the lower sections and increasingly sandier in the upper levels, divided into two members (miembros Fangolítico –i.e. muddy- and Areniscoso -i.e. sandy-), with diagnostic ammonites and dinocysts, with no inoceramids (Upper Cretaceous-Paleocene?; Maastrichtian-Danian?); 4) Cerro Apen Beds, sandy to conglomeratic sedimentary rocks with intercalated mudstone and heterolithic packages that rest on an erosive unconformity over the Cerro Fumando Beds, a lower (Inferior) member is sandstone dominated and an upper (Superior) member is conglomerate to sandstone dominated, with diagnostic dinocysts (Paleocene; lower member Danian, and upper member Danian-Thanetian); and 5) Ballena Formation, conglomeratic sedimentary rocks with intercalated sandstone and mudstone intervals, disconnected of the other units, with diagnostic dinocysts (Paleogene, mid Eocene). Each of the two packages records one of the two main phases in the evolution of the marine sedimentary basins in the southernmost part of South America from the Late Jurassic to the mid Paleogene. The Upper Jurassic-Lower Cretacosus -until lowermost Cenomanian- units where accumulated during the initial extensional period and subsequent fill of the Rocas Verdes Marginal Basin until its final closure during the earliest Late Cretaceous. The Upper Cretaceous-Paleogene sedimentary rocks are the deposits produced after the development of the Austral (or Magallanes) Foreland Basin that had an initial transitional period with deep marine sedimentation and thermal subsidence, right after the closure and tectonic inversion of the marginal basin, followed by the progressive orogenic elevation of the Fuegian Andes since the folded and thrusted belt started to evolve in the area under a regime of compression. The orogenic uplift and the advance of this belt produced successive sedimentary accumulations that respresent as a whole a coarsening upward succession that begun with the deposition of mudstone dominated units and continued with increasingly coarser, sandy to conglomeratic, sedimentary units.

"Estratigrafía y tectónica de la región de Pachaco - Río San Juan, Provincia de San Juan" (1950). Quarleri, Paulina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estratigrafía, petrología y alteración hidrotermal en el Cerro Cuche, Departamento Futaleufú, Chubut" (1998). Massaferro, Gabriela Isabel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las investigaciones geológicas realizadas en el área del cerro Cuche permitieron reconocer y mapear las distintas unidades aflorantes y elaborar, a través del estudio geoquímico, un modelo petrogenético para las unidades más importantes. El cerro Cuche se encuentra ubicado en el centro-oeste de la Provincia del Chubut, aproximadamente a 43° 30' de latitud sur y 71°12' longitud oeste y constituye el extremo sur de la Sierra de Caquel, en el límite entre la Cordillera Patagónica Central y la denominada Precordillera del Chubut. La unidad más antigua reconocida en el sector corresponde a lo que se designa informalmente como Vulcanitas del Cerro Cuche. Esta entidad está compuesta por lavas. piroclastitas y sedimentitas intercaladas, asignadas sobre la base de su contenido fosilífero al Pliensbachiano. Las vulcanitas son de composición intermedia y naturaleza calcoalcalina, típicas representantes de un vulcanismo de arco continental. Por sus características pueden ser correlacionadas con la Formación Lago La Plata o bien con la Formación El Córdoba. Las sedimentitas intercaladas constituyen secuencias silicoclásticas y carbonáticas, depositadas en ambientes marinos litorales. Posiblemente correspondan a pequeñas cuencas aisladas desarrolladas dentro del arco magmático. Por encima se encuentran afloramientos de vulcanitas más silíceas que fueron asignados tentavimente al Cretácico. Todo el conjunto volcánico se halla intruido por granitoides asignados al Batolito Andino. Son cuerpos de carácter epizonal, cuya fuente se ubicaría en el manto superior y habría recibido aportes de la placa subductada. Se caracterizan por la presencia de enclaves microgranulares máficos que evidenclan la existencia de fenómenos de “mingling” durante su ascenso. Estos cuerpos han sido asignados al Cretácico sobre la base de dataciones radimétricas. El Terciario estuvo dominado por sedimentación clástica continental que conforma los afloramientos de las Formaciones Huitrera y La Mimosa. La facies sedimentaria de la Formación Huitrera porta restos de flora fósil que permitieron asignarla al Eoceno inferior. Estas sedimentitas están intruidas por diques que se asignan a la fase volcánica de esta misma formación. Los depósitos glaciarios que constituyen el Drift Tecka y los depósitos aluviales y coluviales completan la columna estratigráfica. Las vulcanitas más antiguas (Jurásico-Cretácico) se encuentran afectadas por diversos fenómenos de alteración y metamorfismo, que en algunos casos se hallan superpuestos. En primer lugar, existe una alteración hidrotermal regional con características similares a un metamorfismo de bajo grado, caracterizada por la presencia de epidoto, clorita, calcita, cuarzo, albita, sericita y prehnita. Los estudios de termometría de inclusiones fluidas en la calcita, señalan una temperatura promedio de 226° C para los fluidos responsables de esta alteración. La intrusión de los cuerpos asignados al Batolito Andino habría generado zonas de mayor temperatura, donde esta asociación alcanzó el grado de esquistos verdes, con la aparición de actinolita y desaparición de prehnita. En las zonas de contacto con los mencionados intrusivos se generaron, según la composición de la roca de caja, hornfels o asociaciones de tipo skarn, estas últimas caracterizadas por la presencia de hornblenda y diópsido. Asimismo se verifica la existencia de fenómenos de alteración hidrotermal, dada la presencia en algunos sectores restringidos, de zonas de alteración potásica y venas epitermales de cuarzo. El estudio de termometría de inclusiones fluidas sobre las venas de cuarzo indican una temperatura promedio de 322° C.

Abstract:
Geologic investigations carried on in the Cerro Cuche area allowed to recognize and map the different outcropping units and to propose a petrogenetic model for the most important units. Cerro Cuche is located in the center-west of Chubut Province, approximately at 43° 30' South latitude and 71°12 ' West longitude and constitutes the Southern end of the Sierra de Caquel, in the border between the Cordillera Patagonica Central and the so called Precordillera of Chubut. The oldest recognized unit corresponds to the informally called Cerro Cuche Vulcanites. Lavic rocks, piroclastites and sedimentites, assigned on the base of its fossiliferous content to the Pliensbachian, compose this unit. The vulcanites are of intermediate composition and have calc-alkaline affinities. They are typical representatives of a continental arc volcanism. The Cerro Cuche Vulcanites can be correlated with the Lago La Plata and El Cordoba Formations. The interlayered sedimentites form silicoclastic and carbonatic sequences, deposited in coastal marine environment. They possibly correspond to small isolated basins developed within the magmatic arc. Volcanic rocks of more siliceous composition and assigned to the Cretaceous occur above. The volcanic assembly is intruded by Andean Batholith granitoids. They are bodies of epizonal characteristics, whose source could be located in the upper mantle with contributions of the subducted slab. They are characterized by the presence of mafic microgranular enclaves that show the existence of mingling processes during their ascent. These bodies have been assigned to the Cretaceous on the base of radimetric data. The Tertiary was characterized by continental clastic sedimentation that conforms the outcrops of the Huitrera and La Mimosa Formations. The sedimentary facies of the Huitrera Formation holds fossil flora that allowed to assign it to the Early Eocene. Dikes assigned to the volcanic phase of this Formation intrude the sedimentites. The glaciary deposits that constitute the Tecka Drift and the alluvial and coluvial deposits complete the stratigraphic column. The oldest vulcanites (Jurassic-Cretaceous age) are affected by diverse alteration and metamorphism phenomena that in some cases are superimposed. A regional hydrothermal alteration with similar characteristics to low grade metamorphism, characterized by the presence of epidote, chlorite, calcite, quartz, albite, sericite and prehnite exists. Calcite fluid inclusion thermometry studies indicate an average temperature of 226° C for the fluids responsible for this alteration. The intrusion of bodies related to the Andean Batholith would have generated zones of greater temperature, where this association reached the green schist grade, with the appearance of actinolite and disappearance of prehnite. Hornfels and skarn type associations were generated in the contact zones. The skarn type associations are characterized by the presence of hornblende and diopside. Hydrothermal alteration phenomena are also verified, given the presence of potassium alteration zones and epithermal quartz veins in some restricted sectors. Fluid inclusion thermometry studies on the quartz veins indicate an average temperature of 322° C.

"Estratigrafía, sistemas depositacionales y aspectos composicionales del relleno neógeno de la cuenca Rodeo-Iglesia, San Juan, Argentina" (2011). Alonso, María Susana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo se estudió el relleno neógeno de la Cuenca de Rodeo- Iglesia, que comprende una potente sucesión continental. Estos depósitos pueden separarse en dos formaciones, Cuesta del Viento y Rodeo. La primera es una nueva unidad, definida originalmente para la vecina Cuenca de La Tranca, que registra la sedimentación proximal relacionada directamente con el levantamiento de la Sierra Negra. En este trabajo, se propone la separación de los términos basales de la secuencia neógena, anteriormente asignados a la Formación Rodeo y su nueva asignación a la Formación Cuesta del Viento. Esta unidad corresponde a depósitos de sistemas proximales, de alta pendiente y energía y a intervalos pelíticos y areno-pelíticos, correspondientes a una sedimentación distal de sistemas que drenan desde el Oeste. La Formación Rodeo ha sido dividida en dos Miembros: Lomas del Campanario, conformado por depósitos relacionados con actividad volcánica intracuencal y su retrabajo y Las Flores, que registra el impacto sobre la cuenca del levantamiento de la Cordillera de Colanguil, y la consecuente progradación de cuñas clásticas Hacia el techo de la unidad, un episodio evaporítico de importancia ha dado origen a depósitos de yeso de espesores considerables. El Miembro Lomas del Campanario, comprende cuatro Asociaciones de Facies y el Miembro Las Flores, seis. Se han obtenido dataciones para los tramos piroclásticos. Un nivel del área de Cuesta del Viento arrojó una edad de 9,5+/- 0,2 Ma, en tanto que en la zona de Las Flores se obtuvo otra de 11,1+/-0,3 Ma. Algunos hallazgos de troncos fósiles se han producido en el Miembro Las Flores, así como también parte de un cráneo correspondiente a un ejemplar de Pseudotypotherium Se han analizado detalladamente las areniscas y pelitas y se llevó a cabo una caracterización geoquímica general de estos depósitos. Las areniscas, que son mayoritariamente lítico-feldespáticas se han agrupado en cuatro petrofacies, que se han interpretado como provenientes de diferentes áreas fuentes con distintas influencia de cada una. El estudio de los niveles pelíticos ha permitido detectar niveles bioturbados con efectos pedogénicos y presencia de niveles con microfósiles. El estudio por Difracción de Rayos X d elos mienrales de arcilla presentes en las pelitas han permitido identificar tres Argilofacies cuyo origen se ha relacionado con las distintas etapas evolutivas de la Cuenca de Rodeo-Iglesia. Se han evaluando contenidos de elementos mayoritarios, minoritarios y trazas, incluyendo Tierras Raras. Este estudio pemitió completar las interpretaciones realizadas a partir de las areniscas y pelitas con respecto a la procedencia de los depósitos y los procesos responsables de su ocurrencia. Finalmente, la información obtenida se integró en un esquema de evolución estratigráfico genético que permite sintetizar la historia del relleno neógeno de la Cuenca de Rodeo-Iglesia en cinco Secuencias Depositacionales, definidas a partir de cambios drásticos en los patrones de sedimentación o de conspicuas superficies de discontinuidad de carácter regional. Además del estudio de los depósitos de edad neógena, se aporta en este trabajo, el hallazgo fehaciente para esta Cuenca, de depósitos homologables a la Formación Valle del Cura, datados en 43 +/- 0,1 Ma, así como también restos de un cráneo fósil de Pseudotypotherium, nunca mencionado para la Cuenca ni para los depósitos terciarios de la región.

Abstract:
The Neogene deposits of the Rodeo-Iglesia Basin, San Juan province, Argentina, comprises a thick continental sedimentary succesion. These deposits can be assigned to two different Formations: Cuesta del Viento and Rodeo. The first one is a new formation, defined to include the La Tranca thrust-related proximal deposits in the La Tranca Basin. The basal deposits of the here studied Neogene sequence, previously included in the Rodeo Formation, are now assigned to Cuesta del Viento Formation. It includes deposits of proximal systems, related to steep slopes and high energy, as well as more distal muddy and sandy deposits supplied from the West. Rodeo Formation was divided into two Members. The lower one, Lomas del Campanario, bears deposits related to intrabasinal volcanic episodes, and the upper one, Las Flores, which clearly records the uplifting of the Cordillera de Colangüil and the progradation of clastic wedges. To the top, an evaporitic episode has given rise to significant gypsum deposits. The upper member, Lomas del Campanario, comprises four Facies Associations and Las Flores Member, six. Two radiometric ages were obtained for the pyroclastic interval. One sample from Cuesta del Viento yielded an age of 9,5+/-0,2 Ma while, near Las Flores, another one of 11,1+0,3 M was achieved. Some fossil remains were found: trunks and part of a vertebrate skull both in the Las Flores Member beds. Sandstones and shales were studied, and a general geochemical evaluation was carried of shales throughout the unit. Sandstones resulted mostly feldarenties and lithic-feldarenites. Four petrofacies were defined and its provenance interpreted as related to different source areas. Shale levels were studied, some pedogenic intervals were recognized as well as some others microfossils-beaing. X-Ray DIffraction studies were performed on clay minerals. Three argilofacies have been identified and its origin was related to the different evolutive stages of the Basin. As for the Geochemistry evaluation, major and trace elements were anayzed including Rare Earth. It allowed to complete the initial petrography-based interpretations of provenance and involved processes for these deposits. Finally, as a result of all the tasks and studies carried out in this Thesis, an integrated genetical stratigraphic scheme is proposed to synthesize the whole history of the Neogene deposits of the Rodeo Iglesia Basin through five Depositional Sequences, defined upon the basis of dramatic changes of sedimentation patterns or conspicuous regional surfaces of discontinuity. Beyond the study of the Neogene deposits, the first finding for these Basin of deposits of the Valle del Cura Formation, (43 +/- 0,1 Ma) as well as a first finding of the fossil skull of Pseudotypotherium, not mentioned before for the Tertiary deposits of the Basin are presented.

"Estructura de la comunidad perifítica y sus interacciones con la comunidad fitoplanctónica en lagunas turbias y claras de la llanura Pampeana (Provincia de Buenos Aires, Argentina)" (2012). Sánchez, María Laura. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la llanura pampeana se han descripto tres tipos de lagunas, clasificadas según sus características ópticas: claras vegetadas, turbias orgánicas (con elevada biomasa fitoplanctónica) y turbias inorgánicas (alta concentración de abioseston). Las lagunas claras vegetadas y las turbias orgánicas representan estados opuestos de equilibrios alternativos en este tipo de sistemas. En esta tesis se estudió a través de variadas aproximaciones al perifiton desarrollado bajo estos distintos escenarios, analizándose su estructura y sus interacciones con el fitoplancton, evaluándose sus posibles implicancias en el pasaje de un estado de equilibrio al otro. Se describió la composición algal perifítica resultando dominantes las diatomeas, clorofitas y cianobacterias en los tres tipos de lagunas. Se analizó la composición pigmentaria por HPLC para ambas comunidades, registrándose una variación de los pigmentos acorde a la disponibilidad lumínica en las lagunas. Se estudió la composición bacteriana planctónica y perifítica mediante la técnica molecular CARD-FISH, siendo el grupo de las alfaproteobacterias dominante en ambas comunidades y en los tres tipos de lagunas. Se midió en forma comparativa la producción primaria fitoplanctónica y perifítica, resultando las lagunas turbias orgánicas las más productivas. Además, se estudiaron experimentalmente las interacciones entre las comunidades algales, encontrándose el perifiton mejor adaptado a condiciones limitantes de nutrientes y el fitoplancton a condiciones de limitación lumínica.

Abstract:
Three types of shallow lakes have been described in Pampean plain according to their optical characteristics: clear-vegetated, organic-turbid (with high phytoplanktonic biomass) and inorganicturbid (with high concentration of inorganic material). In these systems, clear-vegetated and organic-turbid shallow lakes represent alternative steady states. Different approximations about periphyton developed under these scenarios were carried out in this study, analyzing its structure and the interactions with phytoplankton community, taking into account its potential effects on the shift between the two alternative steady states. Algal periphytic composition was described in the three types of shallow lakes, being diatoms, clorophytes and cyanobacteria the dominant groups in all types of systems. Pigments were determined using HPLC technique for both communities, observing different pigment composition according to light availability in the lakes. Plankton and periphyton bacterial composition was studied with molecular CARD FISH technique, resulting alphaproteobacteria group dominant in both communities of the three types of lakes. Primary production was comparatively measured in phytoplankton and periphyton communities, being organic turbid shallow lakes the most productive systems. Moreover, interactions between algal communities were experimentally studied observing that the periphyton is better adapted to limiting nutrient conditions whereas phytoplankton is better adapted to light limitation.

"Estructura comunitaria de parásitos en Galaxias maculatus (Pisces, Galaxiidae) y Percichthys trucha (Pisces, Percichthyidae) de lago Escondido (Río Negro, Argentina)" (1999). Semenas, Liliana Graciela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudiaron durante 2 años los ecto y los endoparásitos de Galaxias maculatus y de Percichthys trucha en un ambiente andino oligotrófico, el lago Escondido, para caracterizar comunidades de parásitos en peces autóctonos de Patagonia. Los peces presentaron buen estado sanitario y características tales como sexo, peso, talla y edad fueron similares a las registradas en otras poblaciones de estas especies en lagos andinos. Se registraron un total de 26 taxones, de los cuales 16 parasitaron al puyen y 17 a la perca. Diplodon chilensis (Mollusca). Ergasilus síeboldi (Crustacea), Derogenes patagonicus, Tylodelphys barilochensis (Digenea) y Camallanus corderoí (Nematoda) se encontraron en ambos; Phílureter trigonopsis, Gymdactylus sp (Monogenea), Posthodiplostomum sp, metacercarias de Acanthostomoídes apophalliformis (Digenea), Contracaecum sp (Nematoda) y Nippotaenia sp (Cestoda) en puyen y adultos de Acanthostomoídes apophalliformis, Polylekithum sp (Digenea). Philonema percihthydis, Hysterothylacium patagonense (Nematoda), Acolpenteron sp y Tetracleídus sp (Monogenea) en perca. El gloquidio de D. chilensis ocupó el mayor número de localizaciones en ambos peces y la branquia fue el órgano con el mayor número de especies parásitas. De un total de 8 gremios, reconocidos en el presente trabajo, los parásitos del puyen conformaron 7 y los de las percas, 6. Las distribuciones presentaron un buen ajuste a la Binomial Negativa y las especies mayoritariamente endoparásitas y autogénicas. tienen ciclos heteroxenos. Los reclutamientos presentaron 2 máximos y uno de ellos se produjo durante los meses más cálidos. La abundancia y la intensidad media presentaron diferencias significativas en todas las especies. Las variaciones de la edad fueron importantes para las variables infrapoblacionales, infracomunitarias y de las comunidades componentes. La presencia de especies centrales fue escasa. Los valores de la dominancia, la riqueza, la diversidad, la equitabilidad, la similitud y la estabilidad fueron intermedios. Las características analizadas indicaron que los parásitos de peces del lago Escondido estarían en el continuo entre comunidades aislacionistas e interactivas, de modo que sus patrones no son totalmente estructurados ni totalmente estocásticos.

Abstract:
Ecto and endoparasites of Galaxias maculatus and Percíchthys trucha from lake Escondido, an oligotrophic andean lake, were studied during two years in order to charactenze parasite communities in autochthonous freshwater fishes from Patagonia. Fishes had a good sanitary condition and their population characteristics (sex, length, weigh and age) were similar to those registered for these species in other andean lakes. A total of 26 parasite species were registered, of these 16 were in puyen and 17 in perca. Diplodon chilensis (Mollusca), Ergasilus sieboldí (Crustacea), Derogenes patagonicus, Tylodelphys barilochensis (Digenea) and Camallanus corderoi (Nematoda) were ¡n both hosts, Philureter trigonopsis, Gymdactylus sp. (Monogenea), Posthodiplostomum sp., metacercariae of Acanthostomoídes apophalliformis (Digenea), Contracaecum sp. (Nematoda) and Nippotaenía sp. (Cestoda) in puyen and adult of Acanthostomoides apophallifonnis, Polylekithum sp. (Digenea), Philonema percíhthydis, Hysterothylacium patagonenese (Nematoda), Acolpenteron sp. and Tetracleidus sp. (Monogenea) in perca. The glochidium of D. chilensis had the greatest distribution among sites and, gills were the site parasitized by more species. Parasites defined 8 guilds, 7 of these were in puyen and 6 in perca. ln general, cycles were heterexoneous with autogenic endoparasites and distribution of species had a good fit to Negative Binomial. Recruitments had 2 maximums, one of which took place during the warm period. Significative differences were registered for median abundance and intensity for all the species. Variations of age were an important factor not only for infrapopulations variables but for infracommunities and component communities, too. There were few core species. Values of dominance, diversity, richness, equitability, similarity and stability were medium. All these characteristics showed parasites in lake Escondido were in the continuum between interactive and aislacionist communities so patterns found were neither structured nor stochastic.

Título :	Estructura comunitaria de parásitos en Galaxias maculatus (Pisces, Galaxiidae) y Percichthys trucha (Pisces, Percichthyidae) de lago Escondido (Río Negro, Argentina)
Autor :	Semenas, Liliana Graciela
Director :	Ostrowski, Margarita de Núñez
Año :	1999
Editor :	Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación :	Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Departamento de Biología
Grado obtenido :	Doctor en Ciencias Biológicas
Ubicación :	Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_3160_Semenas
Idioma :	Español
Area Temática :	Biología / Parasitología Biología / Ecología
Palabras claves :	GALAXIAS MACULATUS (PUYEN CHICO); PERCICHTHYS TRUCHA (PERCA DE BOCA CHICA); MONOGENEA (PHIURETER TRIGONOPSIS, GYRODACTYLUS SP, ACOLPENTERON SP, TETRACLEIDUS SP); DIGENEA (DEROGENES PATAGONICUS, TYLODELPHYS BARILOCHENSIS, T. CRUBENSIS, ACANTHOSTOMOIDES APOPHALLIFORMIS, POSTHODIPLOSTOMUM SP, POLYLEKITHUM SP); CESTODA (NIPPOTAENIA SP); NEMATODA (CAMALLANUS CORDEROI, CONTRACAECUM SP, PHILONEMA PERCIHTHYDIS, HYSTEROTHYLACIUM PATAGONENSE); MOLLUSCA (DIPLODON CHILENSIS); CRUSTACEA (ERGASILUS SIEBOLDI); DISTRIBUCION; LOCALIZACION; GREMIO; CICLO DE VIDA; INFRAPOBLACION; INFRACOMUNIDAD; COMUNIDAD COMPONENTE; CONJUNTO ESTOCASTICO; CONJUNTO ESTRUCTURADO; GALAXIAS MACULATUS (PUYEN CHICO); PERCICHTHYS TRUCHA (PERCA DE BOCA CHICA); MONOGENEA (PHIURETER TRIGONOPSIS, GYRODACTYLUS SP, ACOLPENTERON SP, TETRACLEIDUS SP); DIGENEA (DEROGENES PATAGONICUS, TYLODELPHYS BARILOCHENSIS, T. CRUBENSIS, ACANTHOSTOMOIDES APOPHALLIFORMIS, POSTHODIPLOSTOMUM SP, POLYLEKITHUM SP); CESTODA (NIPPOTAENIA SP); NEMATODA (CAMALLANUS CORDEROI, CONTRACAECUM SP, PHILONEMA PERCIHTHYDIS, HYSTEROTHYLACIUM PATAGONENSE); MOLLUSCA (DIPLODON CHILENSIS); CRUSTACEA (ERGASILUS SIEBOLDI); DISTRIBUTION; SITE; GUILDS; LIFE CYCLES; INFRAPOPULATIONS; INFRACOMMUNITIES; COMPONENT COMMUNITIES; SOCHASTIC - STRUCTURED ASSEMBLAGES
URL al Documento :	http://digital.bl.fcen.uba.ar/Download/Tesis/Tesis_3160_Semenas.pdf
URL al Registro :	http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_3160_Semenas

"Estructura de compuestos de coordinación conteniendo oxoaniones de azufre y metales de transición" (2002). Freire, Eleonora. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo original de este trabajo fue la preparación, caracterización y determinación de las estructuras cristalinas de nuevos compuestos de coordinación de metales de transición con el ion tiosulfato y moléculas orgánicas nitrogenadas como ligandos. Entre estas últimas, el estudio se centró particularmente en aquellas que actúan como ligandos polidentados a través del nitrógeno como átomo donor (bipiridina, terpiridina, fenantrolina y otros). Los oxoaniones de azufre son buenos ligandos de metales de transición. El ion tiosulfato (S2O32-) en particular, había sido poco estudiado al momento de comenzar de este trabajo. La presencia en su estructura de átomos donores "duros" y "blandos", de acuerdo con la clasificación de Pearson, hace que pueda coordinarse a una amplia gama de iones metálicos mostrando una gran versatilidad en sus modos de coordinación. Prueba de ello es que entre los veintidós compuestos estudiados, se encontraron además de las coordinaciones más esperables (monodentado a través del azufre y bidentado por azufre y oxígeno) otras no reportadas anteriormente donde el anión se presenta como polidentado y puente, utilizando para tal fin el azufre y/o los oxígenos. En muchos casos la coordinación afecta muy significativamente los parámetros estructurales del anión (distancias y ángulos) corroborando lo encontrado en estudios anteriores. En algunos casos particulares (Ni(II) y Mn(II) como cationes, biquinolina y terpiridina ligandos orgánicos), además de obtenerse complejos con el ión tiosulfato se produjeron reacciones colaterales tipo redox que llevaron a la formación de especies del tipo 2'con n 2 ó 3. El estudio de este nuevo grupo de compuestos, que no es muy común en la literatura, permitió ampliar el objetivo inicial del trabajo. En todos los casos, se estudiaron las propiedades y caracteristicas de los ligandos poliatómicos intervinientes en lo que hace tanto al tipo de unión como a los eventuales efectos debidos a la coordinación, aportando abundante información sobre un terreno hasta el momento poco explorado. El estudio estructural incluyó el análisis de los poliedros de coordinación, así como el de las fuerzas secundarias determinantes del empaquetarniento cristalino, tales como las uniones puente hidrógeno y las interacciones tipo van der Waals.

Abstract:
The original aim of the project was the synthesis, characterization and structure determination of novel transition metal coordination compounds with thiosulfate and nitrogenated bases as ligands. Among the latter, we focussed specially in the polydentate ones containing donor nitrogens (bipyridine, terpyridine, etc). Sulfur oxoanions are good ligands for transition metals. The thiosulfate ion (S2O3 2-) in particular, had been scarcely studied at the beginning of this work. As it contains hard and soft donors atoms, according to Pearson classification, it is likely for the anion to coordinate to a wide range of metallic cations displaying a high versatility in its coordination modes. This property was largely confirmed throughout this work: among the twenty two compounds studied, not only the more common coordination modes were found (S-monodentate and S, O bidentate), but also a couple of new ones not already reported in the literature, where the anion acts as polydentate and bridge through sulfur and/or oxygen. In most cases the coordination largely affects the structural parameters of the anion (angles and distances), as already shown in previous works. In the presence of either Ni(II) or Mn(II) as cations, and some of the organic ligands (biquinoline, terpiridine), in addition to the expected thiosulfate complexes, collateral redox reactions led to the formation of 2'species with n = 2 or 3. The study of these new group of compounds, scarce in the literature, allowed us to broaden the initial scope of the work. In all cases, basic knowledge about the properties and characteristics of the polyatomic ligands about bond types and possible modificatíons eventually introduced by coordination was obtained, contributing to a field so far basically unexplored. Besides the structural analysis of coordination polyhedra, secondary coordination forces (van der Waals interactions and hydrogen bonds) which determine the crystal lattice were studied.

"Estructura de la lámina de corriente en equipos plasma focus" (1994). Grondona, Diana Elena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estructura de las comunidades de mosquitos de cuerpos de agua en el suelo en el Bajo Delta del Río Paraná: un enfoque multiescalar considerando la heterogeneidad ambiental y las estrategias de oviposición" (2012). Cardo, María Victoria. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los humedales son ecosistemas muy favorables para los insectos con estadios acuáticos, y dada su compleja dinámica del agua, son escenarios ideales para evaluar la influencia de las características ecofisiológicas de las especies en la estructuración de las comunidades en función del ambiente. En esta tesis, se investigó cómo se estructuran las comunidades de mosquitos (Diptera: Culicidae) que habitan en cuerpos de agua en el suelo (CAS) en función de la heterogeneidad ambiental a tres escalas espaciales de un humedal considerando sus efectos sobre distintas estrategias de oviposición. Entre los 1.689 CAS inspeccionados durante 2008- 2012 en el Bajo Delta del Río Paraná, se colectaron en total 10.626 inmaduros de mosquitos pertenecientes a 32 especies de siete géneros. Mediante el uso de modelos lineales generalizados y análisis de nicho se identificaron variaciones en la estructura de distintas comunidades en respuesta a la estacionalidad, a las características propias de los CAS, al uso de la tierra y al paisaje. Dichas respuestas dependieron de la estrategia de oviposición, siendo distintas las asociaciones entre la dinámica del agua (lluvia y mareas) y el uso de la tierra para mosquitos de inundación y de balsa. La composición del ensamble en CAS temporarios varió en función del paisaje, no así los otros atributos comunitarios; los patrones de recambio de especies estuvieron dominados por mosquitos de inundación. El conjunto de resultados sugiere que la heterogeneidad ambiental a distintas escalas espaciales afecta distintos atributos de las comunidades de mosquitos, y que las estrategias de oviposición tienen un rol central en dicha relación.

Abstract:
Wetlands are highly favorable ecosystems for insects with aquatic stages and, given their complex water dynamics, they are the ideal setting to assess the influence of ecophysiological characteristics of the species in the structuring of the communities as a function of the environment. In this thesis, the structuring of mosquito (Diptera: Culicidae) communities breeding in ground-water habitats (GWH) as a function of environmental heterogeneity in a wetland was evaluated, considering its effects at three spatial scales on different oviposition strategies. A total of 10,626 mosquito immatures of 32 species from seven genera were collected among 1,689 GWH inspected during 2008-2012 in the Paraná Lower Delta. Using generalized linear models and outlying mean index analysis, variations in the structure of different communities were identified in response to seasonality, the characteristics intrinsic to each GWH type, the landuse and the landscape. Such variations depended on the oviposition strategy, with floodwater and raft-laying mosquitoes showing distinct associations between water dynamics (precipitation and tidal regime) and landuse. In contrast to all other community attributes evaluated, the composition of the assemblage of temporary GWH varied as a function of the landscape, with floodwater mosquitoes dominating species replacement patterns. These results suggest that the environmental heterogeneity at different spatial scales affect different attributes of mosquito communities, and that oviposition strategies play a central role in this relation.

"Estructura de las comunidades planctónicas y análisis de sus interacciones tróficas en un humedal de la cuenca del Paraná Inferior (Reserva de Otamendi, Buenos Aires, Argentina)Structure of the planktonic communities and analysis of their trophic interactions in a wetland from the basin of the lower Paraná (Natural Reserve Otamendi, Buenos Aires, Argentine)" (2007). Sinistro, Rodrigo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El estudio se centra en el análisis de las comunidades planctónicas y sus interacciones tróficas en un humedal de la cuenca del Paraná Inferior (Reserva Natural de Otamendi). Se analizó la variación de las variables ambientales y las comunidades algales en una transecta transversal, desde meandros abandonados hacia la laguna principal, resultando la cobertura de plantas flotantes uno de los factores principales en la regulación de la estructura de las comunidades planctónicas. Mediante experimentos en microcosmos se simuló el efecto de la atenuación de la luz debido a plantas flotantes sobre la estructura de las comunidades planctónicas microbianas, observándose cambios en la relación autótrofos /heterótrofos + mixótrofos de acuerdo a la penetración de la luz. Experimentos con bacterias marcadas (FLB), revelaron la presencia de especies fitoplanctónicas mixotróficas. Experimentos en mesocosmos permitieron evaluar el impacto de la predación del zooplancton sobre el fitoplancton, analizándose su efecto sobre abundancia, estructura de tamaños y la composición de especies. Se evaluaron también las respuestas en cascada a nivel de las cadenas microbianas (nanoflagelados heterotróficos, ciliados y picoplancton). Se estudió simultáneamente el efecto de los nutrientes (bottom-up) y el de predación (top-down) sobre las comunidades planctónicas. En lo que respecta al efecto top-down, se analizó el impacto de la predación de peces planctívoros sobre el zooplancton, y el sucesivo efecto en cascada sobre el fitoplancton. Por otro lado se evaluó el efecto del aporte de nutrientes por parte de los sedimentos naturales de la laguna

Abstract:
The study focuses in the analysis of the planktonic communities and their trophic interactions in a wetland from the Low Paraná (Otamendi Natural Reserve). The variation in the environmental parameters and in the algal communities were analyzed along a transversal transect, from relict oxbow lakes to the main lake. The free-floating plants cover was one of the driving forces in the regulation of the structure of planktonic communities. Using microcosms experiments, the light attenuation effect posed by the free- floating plants on the structure of the microbial planktonic communities was simulated. Changes in the relationship autotrophs/heterotrophs + mixotrophs were observed depending on light penetration. Experiments with fluorescent- labeled bacteria (FLB), revealed the presence of mixotrophic phytoplankton species. Experiments at mesocosm scale allowed to assess the zooplankton predation impact on phytoplankton, analyzing their effect in the abundance, size fraction structure and species composition. The cascading responses of the microbial chains were also assessed (heterotrophic nanoflagellates, ciliates and picoplankton) The effect of nutrients (bottom up) and predation (top down) on the phytoplankton communities, were simultaneously assessed. Regarding the top down effect, the impact of planktivorous fish predation over zooplankton was analyzed, as well as the consecutive cascading effect on phytoplankton. On the other hand, the effect of nutrient input by natural lake sediments, was assessed.

"Estructura de las fracciones del fitoplancton de lagos antárticos de Bahía Esperanza con estado trófico contrastante. Variaciones estivales e interanuales, e interacciones con otros componentes planctónicos" (2004). Allende, Luz. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudiaron tres cuerpos de agua con estado trófico contrastante de Bahía Esperanza (Península Antártica) durante los veranos de 1998, 1999 y 2001, con los objetivos de analizar la estructura y dinámica estival del fitoplancton y del bacterioplancton, y de analizar su relación con los factores ambientales y con otros componentes de la trama trófica. Se planteó la hipótesis general de que los cuerpos de agua muestran diferencias en los atributos del fitoplancton, abundancias del bacterioplancton, y en las interacciones entre los componentes planctónicos, asociadas a su estado trófico. El estudio reveló que el lago Chico (Oligotrófico) presentó bajas densidades de fitoplancton y estuvo dominado por algas nanoflageladas mixotróficas (Chrysophyceae) y por picocianobacterias. La laguna hipereutrófica Pingûi presentó altas densidades de fitoplancton dominado por especies nanoflageladas autróficas (Chlorophyceae). El lago Boeckella (meso-eutrófico) mostró abundancias intermedias y dominancias alternadas de uno u otro grupo algal, según la presencia/ausencia de una capa de hielo superficial; el picoplancton autotrófico fue muy abundante. Los tres cuerpos de agua mostraron similitudes en cuanto a la riqueza, estrategias ecológicas y grupos funcionales de fitoplancton. La densidad del bacterioplancton no evidenció diferencias importantes entre los tres ecosistemas. El tipo de control ejercido, por recursos o por pastoreo, sobre las comunidades estudiadas difirió enrte los tres lagos. Se concluye que la etructura y dinámica del fitoplancton, y la abundancia del bacterioplancton de cuerpos de agua antárticos se encuentra determinada no sólo por su estado trófico, sino que por factores físicos, interacciones biológicas y el aislamiento propio del continente antártico. Esta tesis provee el primer estudio sobre las distintas fracciones de tamaño del fitoplancton y de bacterioplancton de cuerpos de agua de Bahía Esperanza, Antártida, analizando de forma experimental las interacciones entre componentes planctónicos.

Abstract:
Three lakes of contrasting trophic status located at Hope Bay (Antartic Peninsula) were studied during summers 1998, 1999, and 2001, in order to analyse the structure and dynamics of phytoplankton and bacterioplankton, and their relationship with environmental factors, and other components of the food web. A general hypothesis was stated: the different water bodies show differences in their phytoplankton communities, bacterioplankton abundances and the interactions among the planktonic components, associated with their trophic conditions. Results revealed that the oligotrophic Lake Chico exhibited the lowest phytoplankto densities, dominated by mixotrophic nanoflagellates (Chrysophyceae) and picocyanobacteria. In the hypertrophic pond Pingûi, phytoplakton was abundant, mainly represented by strictly autotrophic nanoflagellates (Chlorophyceae). In the meso-eutrophic Lake Boeckella, phytoplanlton showed intermediate densities, and was alternatively dominated by both groups of nanoflagellates, according to the presence/absence of a superficial ice-layer. Autotrophic picoplankton was highly abundant. The three lakes exhibit similarities in relation to the species richness, ecological strategies and functional groups of the phytoplankton. Bacterioplankton densities did not show important differences among lakes. The importance of the top-down vs. bottom up control over these communities differed among the water bodies. It is concluded that the structure and dynamics of the ohytoplankton, and the bacterioplankton abundance of Antartic wate bodies are not only affected by their trophic conditions but also by physical factors, biological interactions and the isolation of the Antartic Continent. This thesis constitutes the first survey concerning different size fractions of the phytoplankton and bacterioplankton of continental water bodies of different trophic status at Hope Bay (Antartica), analysing with experiments the interactions among the plankton components.

"Estructura de los Andes Patagónicos Septentrionales entre los 41°30´ y los 42° 30´ S" (2016-03-28). Tobal, Jonathan Elías. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se presentan en esta tesis los resultados del estudio del sector andino de los Andes Patagónicos Septentrionales ubicados entre los 41º30´ y los 42º30´S, en las provincias de Río Negro y Chubut. La región estudiada no contaba, hasta el momento, con levantamientos geológicos detallados debido a la dificultad de acceso que presenta este sector de los Andes. El análisis estratigráfico y morfoestructural del área constituyen los ejes principales del trabajo de investigación realizado. Las imágenes satelitales disponibles, así como los datos gravimétricos y relevamientos magnéticos con los que se pudo contar, complementan la información disponible y contribuyen a dar solidez a las interpretaciones realizadas. Además, se llevaron a cabo análisis petrográficos, geoquímicos y radimétricos. El análisis estratigráfico ha permitido realizar una caracterización de las unidades volcánicas y plutónicas jurásico-cretácicas que resulta considerablemente más precisa que las descripciones preexistentes. En particular, se ha reconocido además la existencia de una unidad volcánica miocena, previamente desconocida, que aflora en el sector interno de los Andes entre los 41º 30´ y los 41º 50´S. El análisis morfoestructural revela, a escala local, el carácter sinextensional de estas rocas y, a escala regional, la existencia de un importante evento de extensión. Las precisas dataciones radimétricas (U-Pb LAICPMS en circones) que se presentan en esta tesis permiten asignar este evento al Mioceno Medio a Superior. El análisis morfoestructural realizado permite postular que la faja plegada y corrida desarrollada a estas latitudes estuvo sometida a condiciones de evolución singulares que no han sido reconocidas en otros segmentos andinos. A la etapa compresiva que se inició durante el Mioceno Inferior a Medio, y continuó desarrollándose al menos hasta el Mioceno Superior en la zona de antepaís, se sobreimpusieron fenómenos extensionales en el sector occidental interno, de modo que ambos fenómenos podrían incluso haber coexistido durante una parte del proceso de estructuración de los Andes. El análisis morfoestructural aporta, por lo tanto, datos valiosos que permiten evaluar, en un sentido más amplio, el desarrollo de la deformación en el tiempo y el espacio. Adicionalmente, se discuten una serie de indicios que podrían indicar la existencia de uno o más eventos de deformación desarrollados durante el Jurásico-Cretácico, que deberán ser investigados a futuro.

Abstract:
This thesis is focused on the study of the Andean sector of the North Patagonian Andes located between 41º30´ and 42º30´S, in Río Negro and Chubut provinces. This area is characterized by a difficult access, reason by which no previous detailed geological surveys were done. A stratigraphical and morphostructural analysis of the study area was done on the basis of field mapping and interpretation of satellite images. The interpretations presented in this thesis were also complemented with gravity and magnetic data, and also with petrographical, geochemical and geochronological analysis. The stratigraphical analysis allowed a precise characterization of the Jurassic-Cretaceous to Cenozoic volcanic and plutonic units. Additionally, a previously unknown, Miocene volcanic unit outcropping at the inner sector of the Andes, between 41º30´ and 41º50´S, was recognized. A morphostructural analysis reveals, at a local scale, the synextensional character of these rocks. The new radiometric ages presented in this work constrain this event to the middle to late Miocene. The morphostructural analysis allows us to postulate that the fold and thrust belt was subjected to unique conditions during its evolution, which are not recognized through other neighbor Andean segments. After the beginning of the compression in the late Miocene, and during its progression to the foreland zone, middle to late Miocene extensional phenomena occurred in the inner Andean sector. Additionally, morphostructural analysis provides valuable information in order to evaluate spatial and temporal development of the deformation. Finally, the existence of one or more deformational events acting in Jurassic-Cretaceous times is discussed.

"Estructura del basamento cristalino del área Yaminue-Nahuel Niyeu, macizo nordpatagónico, Provincia de Río Negro" (1994). Chernicoff, Carlos Jorge. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estructura del borde occidental de la Precordillera, en el área comprendida entre la Sierra del Tontal y el río Castaño, desde el río San Juan hasta la base del Cerro Colorado" (1991). Selles Martinez, José. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El estudio estructural de las unidades del Paleozoico inferior y medio del borde occidental de la Precordillera ha sido demorado durante largo tiempo debido a la complejidad de las estructuras presentes, a la superposición de al menos tres episodios deformativos y a la dificultad para identificar y separar las diferentes unidades aflorantes, muy semejantes todas en algunos tramos de su perfil. En el presente trabajo se señalan las características estructurales más importantes de las secuencias aflorantes en el área comprendida entre el rio Castaño por el Oeste, la falla Tontal por el Este, la margen sur del rio San Juan y que se extiende hacia el Norte hasta la latitud del Co. Colorado. Se han identificado fallas regionales y menores, ejes de pliegues y actitudes de planos axiales en escala areal y actitudes de repliegues, planos de clivaje y fractura, bandas kink, estriaciones, venas de cuarzo y venas escalonadas en el campo del análisis meso y microtectónico. El analisis de esta información ha sido considerado dentro de un esquema regional que ha permitido separar los bloques que han seguido historias geológicas diferentes y señalar la importancia del cizallamiento vertical en la deformación. Con respecto a la evolución geodinámica de la región, el análisis de la geología de la Precordillera ha llevado a postular un modelo diferente a los preexistentes, en el que se sugiere un origen común para las unidades presentes en la Precordillera y en los Apalaches del Este de los Estados Unidos de América. Criterios estratigráficos, paleogeográficos, paleontológicos, etc, son coincidentes en señalar 1a probabilidad de dicha vinculación. El modelo propuesto indica la evolución de una cuenca desarrollada por atenuación cortical y el desarrollo de una dorsal oceánica caracterizada por la presencia de una serie ofiolitica. La obducción por compresión en un régimen probablemente transpresivo y el desarrollo de frentes de sobrecorrimiento que dan origen a cuencas restringidas y generan en parte los relieves necesarios para que sean erodados los sedimentos que se depositan en ellas marcan ya en el Ordovício superior la acción tectónica en el área. Durante el Silúrico la deformación parece concentrarse en fajas de rumbo meridiano, probablemente vinculadas a transcurrencia, que definen a partir de ese entonces las tres areas que aún hoy pueden ser identificadas en la Precordillera, un área oriental, un área central y un área occidental. Muy deformadas las dos laterales, casi sin deformación la central. Con la orogenía del Devónico superior, en el cual se produce el amalgamamiento total del area y el comienzo de la continentalización definitiva de toda la región culmina la historia evolutiva propuesta.

"Estructura del flujo medio del aire afectado por rompevientos" (1989). Gardiol, Jesús María. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estructura electrotónica de neuronas motoras de sanguijuela" (2011). Daicz, Sergio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las neuronas son células con estructuras tridimensionales complejas adaptadas a su función. Poseen extensos árboles neuríticos, en los que pueden recibir señales de otras neuronas en distintos puntos de su estructura. Las neuritas funcionan como cables, cuyas propiedades morfológicas y las propiedades eléctricas de la membrana determinan cómo se propagarán las señales. Los registros electrofisiológicos intracelulares nos permiten conocer con gran precisión la evolución en el tiempo del potencial de membrana para un punto de la neurona. La actividad registrada puede provenir desde distintos puntos del árbol neurítico. Las señales originadas en el punto de registro o cerca de él serán registradas con gran fidelidad, mientras que las señales originadas en puntos lejanos sufrirán una atenuación. Dada la extensión de los árboles neuríticos, las complejas transformaciones que sufren las señales al propagarse por ellos, y nuestra limitada capacidad de observación, un modelo biofísico puede resultar muy útil para entender e interpretar las observaciones realizadas. El efecto de la atenuación de señales dentro de una neurona es particularmente notable en el caso de las neuronas motoras de la sanguijuela, en las que los potenciales de acción que se registran en el soma llegan con una amplitud de unos pocos milivolts. En este trabajo estudiamos la transmisión de señales graduales dentro de las neuronas motoras AE, a partir de la construcción de modelos morfoeléctricos de las mismas. En los Capítulos 2 y 3 analizamos su anatomía y fisiología, obteniendo los modelos morfológicos detallados y los parámetros necesarios para construir un modelo biofísico. En el Capítulo 4 construimos modelos a partir de los datos obtenidos. Simulamos la propagación de corriente a lo largo del tronco principal de la neurona y analizamos su atenuación en ambos sentidos. A través de alteraciones en la morfología analizamos qué aspectos de la misma son los más relevantes en determinar la atenuación. En el Capítulo 5 desarrollamos una técnica novedosa de deconvolución del potencial observado que nos permite estimar la corriente en un punto remoto que dio lugar a la observación, y la aplicamos a los potenciales de acción registrados para estimar su forma en el origen. Nuestros resultados sugieren que la morfología puede ser responsable de gran parte de la atenuación observada.

Abstract:
Neurons are cells with complex three dimensional structures adapted to their function. They have extensive neuritic trees, in which they can receive signals from other neurons at different points of their structure. Neurites function as cables, whose morphology and the electrical properties of the membrane establish how signals propagate. Intracellular electrophysiological recordings allow us to know with great precision the temporal evolution of the membrane potential at a point of the neuron. The recorded activity may come from different points of the neuritic tree. Signals originated at the recording point or near it will be recorded with great fidelity, while signals originated in distal points will suffer attenuation. Given the extent of neuritic trees, the complex transformations that signals suffer when they propagate through them, and our limited capacity of observation, a biophysical model can be a very useful tool to understand and interpret the observations made. The effect of signal attenuation within a neuron is particularly notable in the case of the motor neurons of the leech, where action potentials reach the soma with an amplitude of only a few millivolts. In this work, we study gradual signal transmission within the AE motor neurons, basing us on the construction of morphoelectrical models of the neurons. In Chapters 2 and 3 we analyze their anatomy and physiology, obtaining detailed morphological models and the parameters necessary for building a biophysical model. In Chapter 4 we build models using the data obtained. We simulate current propagation through the main trunk of the neuron and we analyze its attenuation in both directions of propagation. Using variations of the morphology we analyze what aspects of it are most relevant in establishing the attenuation. In Chapter 5 we develop a novel technique consisting in deconvolving the observed potential, which allows us to estimate the current at a remote point where the signal originated. We apply it to the recorded action potentials to estimate their shape at the origin. Our results suggest that morphology may be responsible for most of the observed attenuation.

"Estructura electrónica y reactividad de nitrosilos en complejos de metales de transición" (2004). Roncaroli, Federico. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estructura espacial, temporal y trófica de las comunidades acuáticas del río Santa Cruz" (2014-03-06). Tagliaferro, Marina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis se presenta el primer estudio integral de las comunidades acuáticas del río Santa Cruz. Se caracterizó la hidrología del río Santa Cruz enmarcado entre los grandes ríos de la Patagonia evidenciando una condición de baja variabilidad en el régimen de descargas hídricas y térmicas. Los ensambles comunitarios, incluyendo biofilms, macroinvertebrados bentónicos y peces fueron descriptos en función de la complejidad espacial y temporal del ambiente. Los peces mostraron un patrón de distribución con mayor riqueza de especies y mayor abundancia en la cuenca alta. Los macroinvertebrados no mostraron un patrón definido a gran escala y a lo largo del río. Temporalmente, se observó una menor abundancia y riqueza de los diferentes ensambles en el período de aguas altas (verano). Las tramas tróficas, estudiadas a través del contenido estomacal y los análisis de isótopos estables, exhibieron relaciones más complejas en la cuenca alta, donde la trucha arco iris, Oncorhynchus mykiss, tuvo un rol de presa o depredador tope según el período ontogenético. Además, en estadios tempranos presentó una gran superposición en la dieta con la especie nativa Galaxias maculatus, consumiendo principalmente macroinvertebrados bentónicos. La línea de base aquí encontrada podrá ser utilizada para futuras evaluaciones ante posibles cambios antropogénicos como los emprendimientos hidroeléctricos.

Abstract:
This thesis presents the first comprehensive study of the aquatic communities of the Santa Cruz River. The Santa Cruz River hydrology was characterized within the context of the largest rivers of Patagonia, revealing a condition of extremely low variability in the discharge and thermal regime. Community assemblages, including biofilms, benthic macroinvertebrates and fish were described in terms of spatial and temporal environmental complexity. Fish showed a greater species richness and abundance in the upper basin. Macroinvertebrates showed no clear pattern at the large scale along the river. Temporarily, there was a lower abundance and richness of the different assemblages in the high water period (summer). Food webs, studied using stomach contents and stable isotope analyzes, exhibited more complex relationships in the upper basin, where rainbow trout, Oncorhynchus mykiss, had a role as prey or top predator along its ontogeny. In addition, in early stages it overlapped in diet with the native Galaxias maculatus, consuming mainly benthic macroinvertebrates. The baseline created could be used for future analysis of antropogenic effect like the implementation of hydroelectric projects.

"Estructura genética poblacional, historia demográfica y variación fenotípica del róbalo, Eleginops maclovinus (Perciformes)" (2011). Ceballos, Santiago Guillermo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Para comprender los fenómenos involucrados en la evolución de las especies es importante estudiar los patrones de variación geográfica de los atributos genéticos y fenotípicos de las poblaciones. El presente trabajo analiza la estructura genética y la variación fenotípica en el pez marino, Eleginops maclovinus (róbalo), una especie endémica del sur de Sudamérica que constituye uno de los recursos marinos costeros de mayor importancia socioeconómica de la región. El estudio genético se realizó con individuos colectados a lo largo de casi todo el rango latitudinal de la especie en la costa atlántica y pacífica. Se obtuvieron secuencias parciales del gen mitocondrial citocromo b de un total de 261 individuos provenientes de 9 localidades y también se analizaron 9 loci de microsatélites en 239 individuos provenientes de 5 localidades. El estudio de la variación fenotípica se realizó mediante morfometría geométrica en 140 individuos provenientes de 4 localidades ubicadas a lo largo de la costa atlántica. El ADN mitocondrial reveló un patrón general de baja estructuración poblacional y una clara señal de expansión demográfica ocurrida, probablemente, durante el Pleistoceno Medio. El análisis de microsatélites sugirió la existencia de dos grupos genéticos, uno principalmente de origen pacífico y otro atlántico. Considerando ambos tipos de marcadores fue posible modelar la historia de la especie a lo largo de diferentes ciclos glaciares. El estudio fenotípico permitió discriminar todas las poblaciones estudiadas. Futuros análisis serán necesarios para establecer la importancia relativa de los factores ambientales y genéticos en la variación fenotípica.

Abstract:
In order to understand the evolution of species it is important to study the patterns of geographic variation in phenotypic and genetic attributes of populations. This Thesis analyzes the genetic structure and phenotypic variation in the marine fish, Eleginops maclovinus (sea bass), an endemic species of southern South America and one of the most important coastal marine economic resources in the region. The genetic study was conducted with individuals collected throughout almost the entire latitudinal range of the species in the Atlantic and Pacific coasts. We obtained partial sequences of the mitochondrial gene cytochrome b from a total of 261 individuals from 9 localities, and we also analyzed 9 microsatellite loci in 239 individuals from 5 localities. The study of the phenotypic variation was performed using geometric morphometrics in 140 individuals from 4 localities along the Atlantic coast. The mitochondrial DNA revealed a general pattern of low population structure and a clear signal of population expansion occurred probably during the Middle Pleistocene. The microsatellite analysis suggested the existence of two genetic groups, one mainly from a Pacific origin and the other Atlantic. Taking into account both markers we were able to model the history of the species along different glacial cycles. The phenotypic study was able to discriminate all the populations studied. Future analysis will be required to establish the relative importance of environmental and genetic factors on phenotypic variation.

"Estructura genómica y diseño de nuevos vectores de transfección para Trypanosoma cruzi" (2001). Lorenzi, Hernán Alejandro. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Trypanosoma cruzi es un parásito protozoario causante de la enfermedad de Chagas. Dentro del marco del proyecto genoma de T. cruzi y como un activo aporte a su concreción, se ha caracterizado un nuevo tipo de marcador genético asociado a la secuencia repetida SIRE denominado SAS, que condujo a la identificación de cuatro nuevos genes y de las secuencias repetidas TCREL y VIPER. Para contribuir a la construcción del mapa fisico, se construyó y caracterizó una biblioteca de ADN genómico de T. cruzi en vectores YAC con un tamaño promedio de inserto de 365 kpb, que fue utilizada para construir el mapa fisico de una región de ~900 kpb del cromosoma XVI y comenzar la construcción del mapa fisico del cromosoma XX. También se construyeron cromosomas circulares en levaduras por el método de clonado RAT utilizando las secuencias repetidas como base del clonado, y se probó la utilidad de un vector de fragmentación que sirvió para ubicar el gen TcP2β cerca de una región telomérica de un cromosoma de ~1 Mpb. Para contribuir con los estudios genómicos funcionales se diseñó y construyó el vector necesario para obtener cromosomas artificiales de T. cruzi. Finalmente, estos estudios llevaron a utilizar comparaciones de secuencia para definir las características de sintenía de extensas regiones genómicas de T. cruzi, Trypanosoma brucei y Leishmania major.

Abstract:
Trypanosoma cruzi is a parasitic protozoan that causes Chagas disease. As part of the T. cruzi genome project and to contribute to its concretion we have characterized a new type of chromosomal marker associated to the repetitive element SIRE named SAS, that allowed the identification of four novel genes and two repetitive sequences, TcREL and VIPER. To accomplish the construction of the physical map of the T. cruzi genome, we constructed and characterized a genomic YAC library of T. cruzi with an average insert-size of 365 kbp that was used to get the physical map of a ~900 kbp region from chromosome XVI and to start the assembly of contigs from chromosome XX. In addition, we also constructed circular artificial chromosomes in yeast, based on a T. cruzi repetitive sequence by RAT cloning, and verified the utility of a fragmentation vector in the position of the TcP2β gene near a telomeric region of a chromosome of ~1 Mbp. To perform functional genomic studies we designed and constructed a vector that can be used as an artificial chromosome in T. cruzi. Finally, comparison and sequence analysis allowed us the identification of large genomic sintenic regions among T. cruzi, Trypanosoma brucei and Leishmania major.

"Estructura gremial y organización de un ensamble de aves del Desierto del Monte" (2001). Lopez de Casenave, Javier Nestor. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Entre mayo de 1993 y febrero de 2000 se estudiaron la estructura gremial y la organización del ensamble de aves de la Reserva de la Biosfera de Ñacuñán, ubicada en la porción central del desierto del Monte, en la provincia de Mendoza. Los objetivos generales del trabajo fueron: (1) analizar la estructura en gremios del ensamble, su asociación con factores ecológicos y sus variaciones; y (2) evaluar la importancia de la competencia interespecífica como proceso organizador del ensamble. En la primera parte del trabajo se cuantificaron los patrones de alimentación de 18 especies de aves y se las clasificó en cuatro gremios (del suelo, herbívoras arborícolas, de la vegetación y cazadoras al vuelo). El uso del suelo y de los estratos en altura, así como la utilizaci ón de ciertas especies de plantas, fueron las características que determinaron la clasificación obtenida. A continuación, se examinaron las diferencias estacionales en los patrones de alimentaci ón. La estructura gremial del ensamble cambió entre estaciones (tres gremios estuvieron presentes durante la estación no reproductiva y cuatro durante la estación de cría), debido a la presencia estacional de las especies migratorias y a los cambios en la ecología de alimentación de las especies residentes. En la segunda parte del trabajo se compararon los patrones observados en el ensamble de Ñacuñán con predicciones derivadas de la hipótesis que la estructura del ensamble es consecuencia de la acción de la competencia interespecífica. Se evaluaron las variaciones a mediano y largo plazo de la avifauna de la reserva, comparando los registros de presencia y ausencia de especies en los últimos 30 años, analizando las variaciones de la densidad de aves durante diez años y el grado de asociación en las fluctuaciones de la abundancia de las especies. Los resultados no fueron compatibles con la hipótesis de competencia, postulándose la hipótesis alternativa que el ensamble está organizado de acuerdo al modelo de .cuello de botella.. A continuaci ón, se evaluaron las diferencias morfológicas entre seis especies de aves granívoras de Ñacuñán. No hubo evidencia de desplazamiento comunitario de caracteres en ninguno de los caracteres morfológicos estudiados. Tampoco se halló relación entre las características de las semillas consumidas por las aves y ninguno de los caracteres, ni a nivel poblacional ni a nivel individual. Otra vez, los resultados fueron mejor explicados bajo el modelo de .cuello de botella.. Finalmente, se evaluó la hipótesis .derivada de ese modelo. que las aves granívoras no están limitadas por el alimento en inviernos de años con una abundancia promedio de semillas. Se calcularon los requerimientos alimentarios de las poblaciones mediante modelos bioenergéticos y se los comparó con la disponibilidad de alimento. Los resultados indicaron que las aves no están habitualmente limitadas en invierno. En el mejor de los casos, podrían estar solo ocasionalmente limitadas, tal como propone el modelo. El conjunto de los resultados indica que es improbable que la competencia interespecífica sea un factor de organización importante en este ensamble. El modelo de .cuello de botella. constituye una hipótesis alternativa digna de ser evaluada con mayor profundidad

Abstract:
Guild structure and organisation of the avian assemblage of Ñacuñán Biosphere Reserve (central Monte desert, Mendoza Province, Argentina) were studied between May 1993 and February 2000. General objectives of the study were: (1) to analyse the guild structure of the avian assemblage, its association with ecological factors, and its variations; and (2) to assess the role of interspecific competition as an organising process of this assemblage. In the first part of the study, foraging patterns of 18 bird species were quantified, and on this base they were classified into four guilds (ground foraging birds, arboreal herbivores, foliage foraging birds, and aerial foragers). The use of the ground and height strata, along with the utilisation of certain plant species, were the features determining the classification. Then, seasonal differences in the foraging patterns were assessed. The guild structure showed seasonal changes (three guilds were present during the nonbreeding season, and four guilds were present during the breeding season), due both to the seasonal occurrence of migratory species and to changes in the foraging ecology of resident species. In the second part of the study, observed patterns at Ñacuñán were compared to predictions derived from the hypothesis that interspecific competition is responsible of the structure of the avian assemblage. Medium and long.term variations of the avifauna were evaluated, by comparing presence.absence records for bird species during the last 30 years, and by analysing bird density variations and the degree of association in the species. abundance fluctuations during ten years. Results were no compatible with the competition hypothesis, and the alternative hypothesis that the assemblage is organised in accordance with the .crunch model. was postulated. Then, morphological differences among six granivorous species of Ñacuñán were evaluated. There was no evidence of community.wide character displacement for the studied morphological characters. There was no relationship between the characteristics of seeds consumed by birds and bird morphological characters, neither to population nor to individual level. Again, results were better explained under the .crunch model.. Finally, the hypothesis .derived from the model. that granivorous birds are not limited by food in winters with average seed abundance was evaluated. Populations. food requirements were estimated with bioenergetic models, and then compared to food availability. Results indicate that birds are not usually limited by food during winter. At best, birds could be only occasionally limited, as proposed in the model. Overall, results indicate that interspecific competition is not an important organising process in this assemblage. The .crunch model. appears to be a better hypothesis and deserves a deeper evaluation.

"Estructura métrica y diferencial del conjunto de operadores autoadjuntos en un espacio de Hilbert" (2010). Fongi, Guillermina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo estudiamos aspectos métricos y geométricos del conjunto de operadores autoadjuntos en un espacio de Hilbert H. Extendemos la relación de equivalencia definida por A. C. Thompson en un cono convexo de un espacio de Banach, al conjunto de operadores autoadjuntos. Definimos una métrica completa en cada clase de equivalencia o componente de Thompson, que resulta compatible con la estructura diferencial de la componente. Estudiamos además la órbita de congruencia de un operador autoadjunto a. Describimos la órbita de a en términos de su descomposición polar y de su descomposición positiva ortogonal. Si a es de rango cerrado, dotamos a la órbita de a de una estructura de variedad diferencial. Finalmente, estudiamos descomposiciones de operadores autoadjuntos como diferencia de dos operadores positivos de manera que el ángulo mínimo entre sus rangos sea positivo, que llamamos descomposiciones positivas. Mostramos que las descomposiciones positivas de un operador autoadjunto a están relacionadas con las descomposiciones canónicas del espacio (H, menor , mayor a), donde menor , mayor a es una métrica indefinida asociada al operador a. Como aplicación, caracterizamos la órbita de congruencia de a en términos de sus descomposiciones positivas.

Abstract:
In this thesis, we study metrical and geometrical aspects of the set of selfadjoint operators on a Hilbert space H. We extend the equivalence relation, defined by A.C. Thompson on a closed convex cone of a Banach space, to the set of selfadjoint operators. We define a complete metric on each equivalence class or Thompson component, compatible with the differential structure of the component. We also study the orbit of congruence of a selfajoint operator a. We describe the orbit of a in terms of its polar decomposition and its positive ortogonal decomposition. If a is a closed range operator, we provide the orbit of a with a structure of differential manifold. Finally, we study decompositions of selfadjoint operators as a difference of two positive operators such that the minimal angle of their ranges is positive, called positive decompositions. We show that the positive decompositions of a selfadjoint operator a are related to the canonical decompositions of the space (H, menor , mayor a), where menor , mayor a is an indefinite metric associated to a. As an application, we characterize the orbit of congruence of a in terms of its positive decompositions.

"Estructura poblacional y relaciones filogenéticas (Distancia y Parsimonia) en especie de Prosopis (Leguminosae) en base a marcadores moleculares" (2001). Bessega, Cecilia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Prosopis es un género que presenta gran importancia desde el punto de vista económico, ecológico y evolutivo. Habita en las principales zonas áridas y semiáridas del mundo y en base a su morfología ha sido dividido en cinco secciones denominadas Prosopis, Anonychium, Monilicarpa, Strombocarpa y Algarobia. Esta última incluye 30 especies de las cuales la mayor parte habitan en América, con el principal centro de diversidad en Argentina. Algunas especies de esta sección hibridan frecuentemente en la naturaleza dando lugar a individuos con fenotipos intermedios, difíciles en algunos casos de determinar. En este trabajo se analizaron marcadores bioquímicos y moleculares en poblaciones de P. glanadulosa, P. velutina, P. alba, P. nigra, P. vinalillo, P. alpataco, P. caldenia, P. ruscifolia, P. flexuosa, P. chilensis, P. affinis, P. kuntzei de Algarobia, P. reptans de Strombocarpa y P. argentina de Monilicarpa. Se estudiaron poblaciones naturales mediante las técnicas de electroforesis de isoenzimas y RAPD con el objeto de identificar loci diagnóstico, estimar la variabilidad y analizar la estructura poblacional. Se compararon poblaciones naturales de diferente subcontinentes pertenecientes a Algarobia junto con P. reptans (Strombocarpa) y P. argentina (Monilicarpa). Los resultados señalaron que P. velutina y P. kuntzei son las únicas que presentaron loci isoenzimóticos diagnósticos. Las especies Norteamericanas P. grandulosa y P. velutina no presentaron bandas RAPD diagnósticas con los “primers” ensayados. Los niveles de variabilidad genética estimados en las poblaciones Norteamericanas son semejantes a los de las especies Sudamericanas de la misma sección; y las poblaciones presentan las misma variantes isoenzimóticas. Los niveles de variabilidad genética de P. reprans (Strombocarpa) y P. argentina (Monilicarpa) no difieren entre sí, aunque son significativamente menores que las de las especies de Algarobia. La diferenciación genética entre las poblaciones de la sección Monilicarpa es menor a la presentada por las especies de Algarobia estudiadas. Como consecuencia, el flujo génico estimado entre las poblaciones de P. argentina es mayor que el de las especies de Algarobia. Un estudio de individuos agrupados por familias fue realizado mediante electroforesis de isoenzimaspara inferir el sistema de apareamiento en siete especies de la sección Algarobia. Los resultados mostraron que las especies presentan en la mayoría de los casos fecundación cruzada pero que hasta un 28% de autofecundación puede ocurrir (tm varió entre 0.72 y 1). El valor promedio en todas las especies aquí estudiadas es de 15%. Las tasas de fecundación cruzada variaron entre los árboles dentro de las poblaciones y la mayoría de los individuos analizados (semillas) dentro de cada familia eran hermanos completos. Se realizó un estudio de RFLP utilizando como sonda 27.7 kb de cpDNA heterólogo de Nicotina tabacum en 11 especies del género. Los resultados no mostraron variación intraespecífica en ningún caso y sólo permitieron diferenciar a P. reptans y a P. kuntzei de las restantes especies de Algarobia estudiadas (P. alba, R nigra, P. vinalillo, P. alpataco, P. caldenia, P. ruscifolia, P. flexuosa, P.glandulosa, P. affinis). Por último, las relaciones filogenéticas entre las especies fueron reconstruidas mediante métodos de distancia y parsimonia a partir de las frecuencias alélicas isoenzimáticas, de las secuencias correspondientes al intergén TrnD-TrnT(cpDNA) y de las secuencias de los espaciadores internos transcriptos de ADN ribosómico (ITS-1 e ITS-2). Los fenogramas obtenidos a partir de los datos de enzimas señalaron que P. reptans (Strombocarpa), P argentina (Monilicarpa) y P. kuntzei son las especies mas diferenciadas. A pesar de que los cladogramas de cpDNA y de ADNr resultaron incongruentes, presentan consistencia. El orden relativo de divergencia señalado en ambos cladogramas concuerda con el nivel de diferenciación genética en los fenogramas. Además, ni los fenogramas ni los cladogramas están de acuerdo con la clasificación morfológica en series propuesta para este grupo.

Abstract:
Prosopis is a very important genus from the economic, ecological and evolutionary point of view. It occupies the main arid and semi-arid areas of the world and, based on the morphology, its species have been divided into five sections denominated Prosopis, Anonychium,Monilicarpa, Strombocarpa and Algarobia. The latter includes 30 species, most of which are American, with the main diversity center in Argentina. Some species of this section frequently hibridise in the nature producing individuals with intermediate phenotypes that sometimes are difficult to determine. In this work biochemical and molecular markers were analyzed in populations of P. glandulosa, P. velutina, P. alba, P. nigra, P. vinalillo, P. alpataco, P. caldenia, P. ruscifolia, P. flexuosa, P. chilensis, P. affinis, P. kuntzei of Algarobia, P. reptans of Strombocarpa and P. argentina of Monilicarpa. Natural populations were studied by means of isoenzyme electrophoresis and RAPD techniques, in order to identify diagnostic loci, to estimate the variability and to analyze the structure of populations. Populations of species from different subcontinents belonging to Algarobia were compared, together with P. reptans (Strombocarpa) and P. argentina (Monilicarpa).The results indicated that P. velutina and P. kuntzei are the only ones which showed isoenzymatic diagnostic loci. The North American species, P. glandulosa and P. velutina, did not present diagnostic RAPD bands with the primers here used. Genetic variability estimates in populations of North American species of Algarobia are similar to those of the South American ones of the same section, and they share most isoenzymatic alleles. P. reptans (Strombocarpa) and P. argentina (Monilicarpa)do not differ from each other in genetic variability, but their variability is significantly lower than that of species of Algarobia. The genetic differentiation among populations in the section Monilicarpa is lower than in the species studied of Algarobia. Thus, the estimated gene flow among populations of P. argentina is higher than those of Algarobia species. A study of individuals grouped by families was carried out by isoenzyme electrophoresis to estimate parameters of the mating system in seven species of the section Algarobia. The results showed that species are mostly outcrosser but up to 28% of selfing can occurs (tm varied between 0.72 and 1). The average value in all the species here studied is of 15%. Outcrossing rates vary among the trees within the populations and most of the analyzed individuals(seeds) within each family are full sibs. A study of RFLP using a heterologous cpDNA probe of Nicatiana tabacum (27.7 kb) was carried out in 11 species of the genus. The results did not show intraspecific variation in any of the species studied. Only P. reptans and P. kuntzei could be distinguished from the remaining studies species of Algarobia (P. alba, P. nigra, P. vinalilla, P. alpataco, P. caldenia, P. ruscifolia, P. flexuosa, P.glandulosa, P. affinis). Finally, the phylogenetic relationships among species were reconstructed through distance and parsimony methods from isoenzymatic allelic frequencies, the sequences corresponding to the intergenic region TrnT-TrnD(cpDNA) and the sequences of internal transcribed spacers from ribosomic DNA (ITS-1 and ITS-2). The phenograms obtained from the enzyme data indicated that P. reptans (Strombocarpa), P. argentina (Monilicarpa)and P. kuntzei are the most differentiated species. Although the cpDNA and rDNA cladograms were incongruent, they present some consistence. The relative divergences of basal nodes in both cladograms are consistent with the level of genetic differentiation in the phenograms. Furthermore, none of the trees agrees with the morphological classification of proposed series for this group.

"Estructura topológica de flujos caóticos" (2001). Sciamarella, Denisse. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estructura y dinámica de comunidades bacterianas en sistemas de barros activados que degradan fenol" (2009). Basile, Laura Ana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La forma en la que las comunidades responden a las alteraciones suelen manifestarse a través de cambios en la composición o en la abundancia relativa de las especies. Frecuentemente estos cambios pueden ser atribuídos a caracteres funcionales o adaptativos. La búsqueda de modelos que expliquen los patrones de composición de especies y la coexistencia de especies similares dentro de comunidades ecológicas, pueden aportar datos sobre los mecanismos subyacentes que regulan la biodiversidad y su relación con el funcionamiento del ecosistema. En este trabajo se estudió la dinámica de las comunidades bacterianas, a nivel taxonómico y funcional, y el funcionamiento de sistemas de barros activados especializados en la degradación de fenol. Se evaluó en primer lugar la dinámica de las comunidades bacterianas en función del tiempo de aclimatación al fenol, operando bioreactores a escala de laboratorio bajo condiciones constantes a lo largo de 9 meses. En una segunda etapa se analizó el modo en que las comunidades bacterianas respondían a un aumento escalonado en la concentración de fenol. El funcionamiento de los reactores se analizó por mediciones de biomasa, niveles de turbidez y de fenol en el sobrenadante y velocidades de degradación de fenol. La estructura de la comunidad bacteriana se estudió por medio de geles de gradiente desnaturalizantes (DGGEs) del dominio variable V3 del ADN ribosomal 16S. La estructura a nivel funcional se determinó mediante la cuantificación por ensayos de PCR en tiempo real de las distintas variantes del gen de la subunidad mayor de la enzima fenol hidroxilasa multicomponente (LmPH), que cataliza la oxidación de fenol a catecol, paso limitante de la vía de degradación de fenol. Finalmente, buscando relacionar los patrones de abundancia de los grupos LmPH con sus propiedades cinéticas, se estudiaron representantes de los grupos LmPH obtenidos mediante técnicas de cultivo y aislamiento. Los resultados demuestran que la actividad de degradación de fenol en el sistema es debida a la acción combinada de un número de organismos funcionalmente redundantes. La comparación de los patrones de abundancia de las poblaciones que degradan fenol sugiere un grado de determinismo considerable, donde la abundancia relativa de cada especie parece determinada por la concentración de fenol en el alimento. Las características cinéticas de representantes de siete de los ocho genotipos LmPH, obtenidos utilizando un amplio rango de condiciones de cultivo, exhibieron un intervalo relativamente acotado de variabilidad fisiológica, indicando que la capacidad de una bacteria particular de volverse un miembro predominante de la comunidad bajo condiciones ambientales cambiantes no puede ser inferida únicamente de las propiedades de degradación de fenol.

Abstract:
Communities' responses to disturbance are commonly manifested as changes in species composition or relative species abundances. These changes are often attributed to functional or adaptive traits. The understanding of the patterns of species abundance, and the coexistence of similar species within ecological communities can provide important insights into the underlying mechanisms that regulate biodiversity and its relationship with ecosystem function. In this work we studied bacterial communities dynamics, using both taxonomic and functional approaches, and its relationship with the activity of phenol degrading acitvated sludge systems. Firstly, we evaluated bacterial communities dynamics as a function of phenol acclimation time, over 9 months of reactor operation under constant conditions. In a second stage, we analyzed the responses of bacterial communities to a step-increase in phenol concentration. Reactors performance was analyzed by biomass concentration, turbity and phenol concentration in supernants, and degradation rates. The structure of bacterial communities was studied using denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) of the variable domain V3 of PCR-amplified 16S ribosomal DNA. Functional structure was determined by real time quantitative PCR on different gene variants of the major subunit of the multicomponent phenol hydroxylase enzyme (LmPH), which catalyzes the oxidation of phenol to catechol, the rate limiting step in phenol biodegradation pathway. Finally, looking for a relationship between LmPH abundance patterns and kinetic properties, we studied representatives of LmPH groups, which were obtained through cultivation and isolation techniques. We concluded that phenol degradation activity in our systems depend on the combinated action of a number of functional redundant organisms. Comparison of the abundance patterns of phenol degrading populations suggests a considerable degree of determinism, where the relative abundance of each species seems to be determined by the concentration of phenol in the feed. The kinetics characteristics of representatives of seven from eight LmPH groups, obtained using a wide range of culture conditions, exhibited a rather narrow range of physiological variability, suggesting that the ability of a particular bacteria to became a predominant member of the community under changing ambiental conditions cannot be infered exclusively from the phenol-degrading properties.

"Estructura y función del dominio D/D de la subunidad regulatoria de la proteína quinasa A de Saccharomyces cerevisiae" (2015-03-25). González Bardeci, Nicolás Diego. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La proteína quinasa dependiente de cAMP (PKA) es una quinasa de serina y treonina de amplio espectro que fosforila a sus proteínas blanco en respuesta a estímulos específicos. Se encuentra involucrada en la regulación de una gran diversidad de procesos fisiológicos en una amplia variedad de organismos, motivo por el cual es un miembro modelo de estudio de la superfamilia de las Proteínas Quinasa. En la mayoría de los organismos, en condiciones de baja concentración de cAMP existe como una holoenzima inactiva heterotetramérica conformada por dos subunidades catalíticas (C) y un dímero de subunidades regulatorias (R). En respuesta a estímulos extracelulares específicos, las concentraciones intracelulares del segundo mensajero aumentan; como consecuencia, dos moléculas de cAMP se unen a cada subunidad R, generando un cambio conformacional que disocia la holoenzima en un dímero de subunidades R y dos subunidades C activas. En mamíferos existen cuatro isoformas de la subunidad R, que presentan una estructura de dominios bien conservada entre los distintos organismos. Ésta consiste de dos dominios de unión a cAMP hacia el extremo C-terminal, y una región responsable de la dimerización hacia el extremo N-terminal. Esta pequeña región de apenas 50 aminoácidos se denomina dominio de dimerización y anclaje (D/D), ya que constituye además una superficie de interacción para una familia de proteínas denominadas AKAPs (A-Kinase Anchoring Proteins). Estas proteínas tienen como función proporcionar a la holoenzima de la PKA la localización subcelular necesaria para garantizar la propagación adecuada de las señales disparadas por cAMP. Todas ellas presentan una hélice anfipática de unos 20 aminoácidos cuya cara no polar interactúa con alta afinidad con una superficie hidrofóbica proporcionada por los dominios D/D. Se conocen las estructuras de alta resolución de los dominios D/D de mamíferos, tanto en su forma apo como en complejo con péptidos derivados de distintas AKAPs. Sin embargo, hasta la fecha no se han llevado a cabo estudios estructurales de estos dominios en otros organismos. El objetivo principal de este trabajo consiste en obtener una caracterización estructural y funcional del dominio D/D de Bcy1, la subunidad R de la PKA de S. cerevisiae. La motivación principal radica en contribuir con el primer estudio de estos dominios en organismos no mamíferos, a efectos de establecer una comparación con éstos. S. cerevisiae es un organismo modelo por excelencia en bioquímica y biología molecular, y resulta muy pertinente para este trabajo dado que en este organismo la PKA es una enzima fundamental involucrada en la regulación de los procesos relacionados con la respuesta a la disponibilidad de nutrientes, respuesta a estrés, desarrollo y entrada en fase estacionaria. En primer lugar, se realizó un mapeo del dominio D/D de Bcy1 por análisis bioinformático de secuencias y experimentos de entrecruzamiento químico utilizando mutantes de deleción de Bcy1 en su extremo N-terminal. En segundo lugar, se procedió al clonado, sobreexpresión en bacterias, y desarrollo de un protocolo de purificación del fragmento recombinante Bcy1 1-50. Posteriormente, se procedió a su caracterización estructural, para lo cual se utilizaron dos abordajes generales: estudiar la estructura en solución y elucidar la estructura cristalina. Para la primera parte, se determinó el estado oligomérico en solución y se obtuvieron parámetros hidrodinámicos característicos utilizando cromatografía de exclusión molecular (SEC), dispersión estática de la luz (SLS) y dispersión de rayos X a bajo ángulo (SAXS). Por otro lado, se estudió la estructura secundaria utilizando dicroísmo circular (CD). Finalmente, se construyó un modelo de la estructura en solución consistente con los datos experimentales, mediante herramientas de modelado molecular. En segundo lugar, se logró resolver la estructura cristalina utilizando difracción por rayos X (XRD). Recientemente, en nuestro grupo de investigación se han identificado varias proteínas interactoras de Bcy1. Estas proteínas son consideradas “candidatas” a ser las primeras AKAPs reportadas en levaduras. Para concluir este trabajo, se estudió la interacción entre el fragmento Bcy1 1-50 y un péptido sintético derivado de una de estas proteínas, Ira2. Para ello se utilizaron técnicas de dicroísmo circular y espectroscopía de fluorescencia.

Abstract:
The cAMP dependent protein kinase (PKA) is a broad spectrum serine/threonine kinase which phosphorylates its target proteins in response to specific stimuli. It is involved in the regulation of a great diversity of physiological processes in many organisms. Therefore, it is a model member of study of the Protein Kinase superfamily. In most organisms, when cAMP levels are low, it exists as an inactive heterotetrameric holoenzyme which is formed by two catalytic (C) subunits and a regulatory (R) subunit dimer. In response to specific extracellular stimuli, the intracellular concentrations of the second messenger rise; as a consequence, two molecules of cAMP bind each R subunit, thus triggering a conformational change that dissociates the holoenzyme in an R subunit dimer and two active C subunits. In mammals there exist four isoforms of the R subunit, which present a well conserved domain structure among many organisms. It consists of two cAMP binding sites at the Cterminus, and a region responsible for dimerization at the N-terminus. This small region of 50 amino acids is called the dimerization and docking (D/D) domain since it presents a surface for interaction with proteins of the AKAP (A-Kinase Anchoring Proteins) family. These proteins are responsible for the appropriate subcellular localization of the holoenzyme, which is required for the propagation of the signaling events triggered by cAMP. They all present an amphipathic helix of 20 amino acids with a non-polar face that interacts with high affinity with a hydrophobic surface in the D/D domains. The high resolution structures of mammalian D/D domains are well known, both in their apo forms and in the AKAP peptide complex. However, to date no structural studies of these domains in other organisms have been performed. The main goal of this work consists in performing a structural and functional characterization of the D/D domain of Bcy1, the R subunit of PKA from S. cerevisiae. The motivation for this work consists in contributing with the first structural study of these domains in non-mammalian organisms, in order to compare with mammalian features. S. cerevisiae is a prototypic organism in biochemistry and molecular biology, and it is of great interest for this work because PKA is a key enzyme involved in the regulation o nutrient availability, stress response, development and entry into stationary phase. As a first approach, we performed a mapping of the D/D domain of Bcy1 using sequence analysis and chemical crosslinking experiments with deletion mutants of the N-terminus of Bcy1. Secondly, we cloned, overexpressed, and purified a recombinant fragment, Bcy1 1-50. Finally, we proceeded with its structural characterization, which consisted of two general approaches: to study the solution structure and the crystal structure. For the solution structure analysis, we determined the oligomeric state and obtained hydrodynamic parameters using size-exclusion chromatography (SEC), static light scattering (SLS), and small-angle X-ray scattering (SAXS). On the other hand, we studied the secondary structure using circular dichroism (CD). Finally, we generated a model of the solution structure which is consistent with the experimental data, using molecular modelling tools. Finally, we solved the crystal structure using X-ray diffraction (XRD). Recently, in our group, several proteins that interact with Bcy1 have been identified. These proteins are considered “candidates” to be the first AKAPs reported in yeast. To conclude this work, we studied the interaction between the fragment Bcy1 1-50 and a synthetic peptide derived from one of these proteins, Ira2. To accomplish this goal, we used CD and fluorescence spectroscopy techniques.

"Estructura y función en las tiorredoxinas factores que determinan su especificidad por enzimas del ciclo de fijación de CO sub 2" (1998). Mora García, Santiago. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las Tiorredoxinas (Trx) son proteínas citoplasmáticas halladas en todos los sistemas biológicos, que catalizan con alta eficiencia la reducción de puentes disulfuro en otras proteínas por medio de un par de cisteínas en su centro activo. En los organismos fotosintéticos oxigénicos, la reducción mediada por Trxs modula la actividad de numerosas enzimas de las vías asimilativas. En el estroma de los cloroplastos se encuentran dos tipos de Trxs, filogenéticamente distantes: Trx-f, de linaje eucariótico, y Trx-m, emparentada con las Trxs bacterianas. La actividad de la Fructosa-1,6-bisfosfatasa (cFBPasa), una enzima clave del ciclo de fijación de CO2, es estimulada selectivamente por la Trx-f, mientras que la Trx-m resulta ineficaz. Para caracterizar los factores involucrados en la interacción entre la Trx-f y la cFBPasa, y para indagar en la relación entre estructura y función en las Trxs, se utilizó como modelo la Trx de Escherichia coli, ineficaz en la activación de la enzima, pero muy estudiada funcional y estructuralmente, y se siguió una estrategia de mutagénesis dirigida. Un aspecto considerado fue la contribución de las cargas superficiales, ya que las interacciones electrostáticas son importantes para la afinidad entre proteínas. La introducción de cargas positivas alrededor del centro activo de la Trx de E.coli, sin modificar la estructura o la capacidad de reducción, aumentó considerablemente la capacidad de activar la enzima. Con altas concentraciones salinas en el medio, la afinidad de todas las Trxs por la enzima resultó similar, lo que corrobora la importancia de las interacciones electrostáticas. Las cisteínas reactivas de la cFBPasa se encuentran, de hecho, en una zona cargada negativamente, y regiones de carga negativa rodean el centro activo de la Trx-m y de E.coli, mientras que en la Trx-f la contribución de cargas positivas es mayor. Ciertas posiciones cercanas al centro activo, de importancia estructural en las Trxs, se han conservado estrictamente. Sin embargo. las Trx-f presentan desviaciones únicas. Se reemplazaron sucesivamente los residuos en la zona hasta alcanzar la secuencia encontrada en las Trx-f. Los cambios alteraron la conformación de un residuo triptofano conservado, y llevaron a una disminución tanto en la estabilidad estructural de las proteínas como en la capacidad reductora, que afectó a la activación de la enzima. La conformación de la zona inmediata al centro activo y la capacidad reductora son pues importantes para la activación de la enzima. En las Trx-f se deben dar cambios que permitan compensar los cambios, pero el significado funcional de los mismos permanece oscuro. Se aisló la secuencla codificante para la Trx-f de colza (Brassica napus), y la proteína se sobreexpresó y purificó. Si bien son potentes activadores de la cFBPasa, las Trx-f son pobres reductoras de puentes disulfuro en otras proteínas, y tampoco muestran una mayor actividad en la isomerización estos enlaces, lo que demuestra que el componente cinético es fundamental en la interacción con la enzima. Estos resultados sugieren que las interacciones electrostáticas y los aspectos conformacionales juegan un papel preponderante en la interacción entre las Trxs y (algunas de) sus proteínas sustrato, y que en los cloroplastos este factor podría determinar la especialización funcional de ambos tipos de Trx. Sin embargo, el significado fisiológico de la presencia de dos Trxs diferentes es aún esquivo.

Abstract:
Thioredoxins (Trx) are cytoplasmic proteins found in all living organisms. They efficiently catalyse the cleavage of disulfide bridges in other proteins through a pair of reactive cysteines in their active centre. In oxygenic photosynthetic organisms, Trx-mediated reduction modulates the activity of several assimilative enzymes. Two types of phylogenetically divergent Trxs coexist in the chloroplasts' stroma: Trx-f, of eukaryotic lineage, and Trx-m, akin to prokaryotic counterparts. The activity of Fructose-1,6-bisphosphatase (cFBPase), a key enzyme in the CO2 fixation cycle, is selectively stimulated by Trx-f, whereas Trx-m is inefficient. Escherichia coli Trx barely activates the enzyme, but instead is the most thoroughly studied Trx in both structure and function. Taking it as a model, we set out to characterise factors involved in the interaction between Trx-f and cFBPase, following a site-directed mutagenesis strategy. Surface charges are relevant features determining the association rate between proteins. Positive charges introduced around the active centre of E.coli Trx did not alter its structure nor its reductive capacity, but significantly enhanced its ability to activate the enzyme. At high salt concentrations, the affinity of all Trxs towards cFBPase converged to a limiting value, which stresses the importance of electrostatic interactions. Reactive cysteines in cFBPase are in fact included in a negatively charged region. Also, negative charges surround the active centre of E.coli and m type Trx, whereas in Trx-f there is a significant contribution from positive charges. In Trxs, several positions around the active site have been strictly conserved. Trx-f display however some peculiar deviations from consensus. Aminoacids were replaced so as to match the sequence found in Trx-f. Changes altered the conformation of a conserved tryptophan residue, and brought about a decrease in the structural stability of mutant proteins and in their reducing strength, damaging the activation of cFBPase. Conformation near the active centre, as well as reducing ability, are thus important for the activation of the enzyme. Compensatory shifts should take place in Trx-f, but their functional meaning, if any, remains obscure. Tha coding sequence of rapeseed (Brassica napus) Trx-f was determined, and the protein was overexpressed and purified. Though highly proficient in the activation of cFBPase, Trx-f are feeble in the reduction or isomerisation of disulfide bridges in other proteins. These facts suggest that there is a crucial kynetic component in the interaction with the enzyme. In brief, electrostatic interactions and the conformation of the active site seem to play a central role in the interaction between Trxs and (some of) its target proteins. This feature could be responsible for the functional specificity of both Trxs. Nonetheless, the physiological significance of two different Trxs in chloroplasts is still elusive.

"Estructura y mecanismo de acción de peroxirredoxinas: estudio teórico y experimental" (2015-12-11). Zeida Camacho, Ari F.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las peroxirredoxinas (Prxs) constituyen una familia de proteínas encargadas de catalizar la reducción de peróxidos, con función antioxidante y de señalización redox, entre otras. Estas enzimas se encuentran ampliamente distribuidas entre los organismos procariotas y eucariotas, y están usualmente presentes en altas concentraciones. Todas ellas comparten el mismo primer paso en su mecanismo catalítico básico, en el cual la cisteína del sitio activo se oxida a ácido sulfénico por sustratos peróxidos tales como peróxido de hidrógeno (H2O2), peroxinitrito, y una gran variedad de hidroperóxidos orgánicos, lo que ocurre con constantes de velocidad varios órdenes de magnitud mayores que para cisteína libre. Particularmente, la alquil hidroperóxido reductasa E (AhpE) de Mycobacterium tuberculosis es una Prx que reacciona más rápido con peroxinitrito que con H2O2 y que presenta una reactividad particularmente alta frente a hidroperóxidos derivados de ácidos grasos. El presente trabajo de tesis aporta información microscópica acerca de los mecanismos de reducción de peróxidos mediada por tioles, tanto en solución acuosa como en el contexto de la reacción catalizada por Prxs. Para tal fin se emplearon una combinación de técnicas de simulaciones computacionales clásicas, cuánticas e híbridas cuántico-clásicas, en combinación con estudios experimentales de cinética rápida de flujo detenido y de equilibrio. En primer lugar se estudiaron las reacciones de oxidación de tioles de bajo peso molecular por H2O2 y peroxinitrito en solución acuosa, determinando los parámetros termodinámicos de activación y describiendo a nivel molecular el proceso reactivo. Posteriormente se investigaron los determinantes moleculares de la capacidad catalítica de Prxs, utilizando como modelo de trabajo la MtAhpE. En último lugar se analizó la especificidad por el sustrato oxidante para el caso particular de la MtAhpE, comparando la interacción y reactividad con H2O2 y diferentes hidroperóxidos orgánicos.

Abstract:
Peroxiredoxins (Prxs) constitute a protein family that catalyzes the reduction of peroxides, with antioxidant and redox signaling functions, among others. These enzymes are ubiquitous and widely distributed in prokaryote and eukaryote organisms, and are usually found at high concentrations. They all share the same first step of their basic catalytic mechanism; the cysteine residue in the active-site gets oxidized by peroxides such as hydrogen peroxide (H2O2), peroxynitrite and a variety of organic hydroperoxides, which occurs several orders of magnitude faster than in the case of free cysteine. In particular, alkyl hydroperoxide reductase (AhpE) from Mycobacterium tuberculosis is a Prx that reacts faster with peroxynitrite than with H2O2 and shows a particularly high reactivity versus fatty acid derived hydroperoxides. The present thesis work is focused in providing molecular insights about peroxide reduction mechanisms by thiols, both in aqueous solution and in the context of the catalyzed reaction by Prxs. For this purpose, a combination of classical, quantum and hybrid quantum-classical simulations, together with fast stopped-flow kinetics and equilibrium experiments was performed. First, we studied the reactions of low molecular weight thiols with H2O2 and peroxynitrite in aqueous solution, determining the thermodynamic activation parameters and describing the reactive process at the molecular level. Afterwards, we investigated the molecular basis of Prxs catalytic ability, using MtAhpE as a model. Finally, the substrate specificity of MtAhpE was analyzed via the comparison of the interaction and reactivity with H2O2 and different organic hydroperoxides.

"Estructura y producción primaria del fitoplancton y perifiton en un humedal del bajo Paraná" (2008). Rodríguez, Patricia Laura. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudió la estructura y producción primaria del fitoplancton y del perifiton en cuerpos de agua húmicos de la Reserva Natural Otamendi, humedal de la llanura de inundación del bajo Paraná, Argentina. Inicialmente, se analizó estacionalmente la composición algal perifítica sobre sustratos naturales y se vio que la forma de vida del sustrato afectó la estructura algal. Los estudios de producción primaria, realizados a través de curvas P-I (método de 14^C), tuvieron diferentes aproximaciones. En primer lugar se compararon los parámetros fotosintéticos y los patrones de productividad anuales del fitoplancton y perifiton sobre sustratos artificiales en la Laguna Grande. El fitoplancton contribuyó en un 96 % a la producción primaria microbiana y su dinámica anual estuvo fuertemente influenciada por la temperatura. Luego, se comparó la productividad de ambas comunidades en dos cuerpos de agua con ambientes lumínicos contrastantes. El perifiton en el ambiente limitado lumínicamente presentó valores más altos de producción primaria. Después, se estudió la variación de los parámetros fotosintéticos y el aporte de las fracciones de tamaño > 3 μm y picoplanctónica a la producción fitoplanctónica de tres cuerpos de agua. El picofitoplancton presentó en general los mayores valores de asimilación y eficiencia fotosintética y no se encontraron diferencias en la contribución de ambas fracciones de tamaño a la producción total. Con el aumento del estado trófico de los cuerpos de agua, la tendencia fue a la disminución del aporte del picoplancton a la producción y biomasa fotosintética fitoplanctónica. Finalmente, se estudió en mesocosmos el efecto de atenuación lumínica producida por las macrófitas flotantes en la producción fitoplanctónica de la Laguna Grande. Los valores de producción disminuyeron progresivamente en condiciones de 2 % de transmitancia de luz. En estos escenarios los organismos aclimatados a bajas intensidades lumínicas mostraron mayor eficiencia fotosintética.

Abstract:
The structure and primary production of phytoplankton and periphyton were studied in humic water bodies from the Natural Reserve Otamendi, wetland from the Lower Paraná River Basin, Argentina. First, the algal periphytic composition on natural substrata was analyzed and we observed that life form of the substrata affected the algal structure of the community. The different approximations of primary production studies were carried out trough P-I curves (14^C method). Formerly, phytoplankton and periphyton annual photosynthetic parameters and productivity patterns were analyzed on artificial substrata in Laguna Grande shallow lake. Phytoplankton accounted the highest contribution to total microbial primary production (96 %) and temperature was the main environmental factor affecting their annual dynamics. Moreover, we compared the productivity of both communities in two water bodies with contrasting light environments. Periphyton in the more restricted light environment reached highest values of primary production. Next, dynamics of photosynthetic parameters and the contribution of phytoplankton size fractions > 3 μm and picoplankton to total production was analyzed in three shallow lakes. Overall, picophytoplankton showed highest assimilation and efficiency values, but no significant differences were found in terms of the input of both size fractions to total phytoplankton production. Notwithstanding a trend to a lowest contribution of picoplankton to total photosynthetic biomass and production with the increase in trophic status of the systems was observed. Finally, we studied in mesocosms the effects of light attenuation triggered by free floating plants on phytoplankton primary production in Laguna Grande. Primary production decreased under such scenarios where only 2 % of incident irradiance was transmitted. Moreover, low light acclimated organisms were the most light efficient.

"Estructura y propiedades de espacios invariantes por traslaciones en grupos abelianos localmente compactos" (2011). Paternostro, Victoria. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis se estudian los espacios invariantes por traslaciones en el contexto de grupos localmente compactos y abelianos (grupos LCA). Para un grupo LCA G y un subgrupo cerrado H ⊆ G, se introduce la noción de espacio H-invariante o espacio invariante por traslaciones en H. En el caso en que H es un subgrupo discreto y numerable de G, se muestra que el concepto de función rango y las técnicas de fibración son válidos en este contexto. Combinando estas dos herramientas, se prueba una caracterización de los espacios H-invariantes en término de las fibras de sus elementos. Como consecuencia, se obtienen caracterizaciones de marcos y bases de Riesz de estos espacios, extendiendo así resultados previos y conocidos para el caso R y el reticulado Z. Por otro lado, se estudia el problema de la extra invariancia de los espacios H-invariantes. Los resultados obtenidos de la extra invariancia establecen condiciones necesarias y suficientes para que un espacio H-invariante sea además invariante por traslaciones en un subgrupo cerrado M de G que contiene a H. También, se prueba que dado un subgrupo cerrado M de G que contiene a H existe un espacio H-invariante V que es exactamente M-invariante. Es decir, V no es invariante por traslaciones en ningún otro subgrupo M que contiene a M. Además, se obtienen estimaciones de los tamaños de los soportes de la transformada de Fourier de los generadores de los espacios H-invariantes en relación a su M-invariancia. Finalmente, se investigan los subespacios de L2 (G) que son invariantes por traslaciones en un subgrupo K de G y también invariantes por modulaciones en Λ, siendo Λ un subgrupo del grupo dual de G. Se prueba una caracterización de estos espacio para el caso en que K y Λ son discretos.

Abstract:
In this thesis we study shift invariant spaces in the context of locally compact abelian (LCA) groups. For G an LCA group and H ⊆ G a closed subgroup of G we introduce the notion of H-invariant space or shift invariant space under translations in H. In case when H is a countable discrete subgroup of G, we show that the concept of range functions and the techniques of fiberization are valid in this context. Combining these tools, we provide a characterization for H-invariant spaces in terms of the fibers of its elements. As a consequence, we prove characterizations of frames and Riesz bases of these spaces extending previous results that were known for the classical case of Rd and the lattice Zd . On the other hand, we study the problem of extra invariance of H-invariant spaces. Our results of extra invariance state several necessary and sufficient conditions for an H- invariant spaces to be invariant along translations in a closed subgroup of G, M, containing H. In addition we show that for each closed subgroup M of G which contains H there exists an H-invariant space V that is exactly M-invariant. That is, V is not invariant under any other subgroup M ′ containing M. We also obtain estimates on the support of the Fourier transform of the generators of the H-invariant spaces, related to its M-invariance. Lastly, we investigate the structure of those closed subspace of L2 (G) which are invari- ant by translations along K and also invariant under modulations in Λ, begin K and Λ closed subgroups of G and the dual group of G respectively. We obtain a characterization of these spaces when K and Λ are discrete.

"Estructuración poblacional del Cardenal Amarillo (Gubernatrix cristata): implicancias para su conservación" (2015-12-21). Domínguez, Marisol. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El Cardenal Amarillo (Gubernatrix cristata) es un passeriforme endémico de América del Sur, que está categorizado como ―En peligro‖ por la Unión Internacional para la Conservación de la Naturaleza como consecuencia de la alta tasa de captura para su comercio ilegal como ave de jaula y la modificación de su hábitat. Su distribución actual es altamente discontinua, con escasas regiones donde se registra la especie, separadas por zonas donde su presencia es muy escasa o nula.Los objetivos del trabajo fueron: 1) Estudiar los principales parámetros reproductivos del Cardenal Amarillo; 2) analizar la estructuración poblacional de la especie en Argentina y Uruguay; y 3) estudiar el efecto que tiene la hibridación con la especie emparentada Diuca diuca minor en la región sur de su distribución. A través de un seguimiento de parejas reproductivas en la provincia de Corrientes se describieron los parámetros reproductivos para el Cardenal Amarillo y se observó una disminución en la supervivencia de los nidos a medida que avanza la temporada reproductiva y como consecuencia del parasitismo por el tordo renegrido Molothrus bonariensis y por larvas de moscas del género Philornis. El impacto del parasitismo no había sido considerado previamente como una posible amenaza para esta especie. Para estudiar la estructuración poblacional se analizaron individuos provenientes de cuatro regiones que se ubican en los extremos norte (Litoral, provincia de Corrientes) y sur (Provincias de Río Negro y La Pampa) y en el centro (Provincia de San Luis) de su distribución en Argentina. Además, se estudiaron individuos de la República Oriental del Uruguay. Las poblaciones fueron analizadas a nivel genético (736 pb de la región control de ADNmt y 10 loci microsatélites), morfológico (11 medidas morfométricas) y comportamental (vocalizaciones). Se encontraron diferencias entre poblaciones en todas las características estudiadas. En base a estos resultados se pudieron definir cuatro unidades de manejo para el Cardenal Amarillo, compuestas por la población de Uruguay, la población de Corrientes, la población de San Luis y norte de La Pampa, y la población de Río Negro y sur de La Pampa. En la población austral, se estudió cómo la hibridación con la Diuca Común (Diuca diuca minor) afecta la variabilidad de estos caracteres y aunque no se encontró una introgresión genética entre especies, se observó una mayor similitud de los cantos de Diuca Común con los de la población sur del Cardenal Amarillo.La caracterización de las poblaciones existentes del Cardenal Amarillo podrá utilizarse para delimitar áreas protegidas que permitan mantener una representatividad adecuada de la variabilidad poblacional a lo largo de su distribución geográfica. Estos resultados permitirán, además, asignar la proveniencia de individuos incautados por las Direcciones de Fauna, lo cual podrá servir como base para delinear futuros programas de reintroducción.

Abstract:
The Yellow Cardinal (Gubernatrix cristata) is an endemic South American passerine, which is categorized as "endangered" by the International Union for Conservation of Nature as a result of illegal traffic and habitat modification. Its current distribution is highly discontinuous, with few areas where the species is present separated by areas with scarce or null records. The objectives of this thesis were to: 1) study the main reproductive parameters of the Yellow Cardinal; 2) analyze the population structure of the species in Argentina and Uruguay; and 3) study the effect of the hybridization with the related species Diuca diuca minor in the southern part of its distribution. Through monitoring of breeding pairs in the province of Corrientes, reproductive parameters were described and a decrease in nest survival was observed as the breeding season advances and as a result of parasitism by the Shiny Cowbird (Molothrus bonariensis) and fly larvae of the genus Philornis. The impact of parasitism had not been previously considered as a potential threat to this species. In order to study Yellow Cardinal population structure individuals from four regions at the extremes and center of the distribution were analyzed. The southern region is located in the provinces of La Pampa and Río Negro, the central region in the province of San Luis and the northern region in the province of Corrientes. In addition, individuals from Uruguay were studied. Populations were analyzed at genetic (736 bp of mtDNA control region and 10 microsatellite loci), morphological (11 morphometric measurements) and behavioral level (vocalizations). Differences between populations were found in all the characters that were studied. Based on these results, it was possible to define four management units for the Yellow Cardinal, composed by the populations of Uruguay, Corrientes, San Luis and northern La Pampa, and Río Negro and southern La Pampa. We also studied whether hybridization with the Common Diuca (Diuca diuca minor) affects the variability of these characters. Even though a genetic introgression between species was not found, a greater similarity of the songs of Common Diucas with the southern Yellow Cardinal population was observed. The description of the remaining populations of the Yellow Cardinal can be used to delineate protected areas in order to maintain a proper representation of population variability throughout its range. These results will also help to identify the origin of confiscated individuals, which may serve as a basis for outlining future reintroduction programs.

"Estructuras de alto momento angular en isótopos doblemente impares de la zona deformada de las tierras raras pesadas" (1990). Hojman, Daniel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estructuras de recirculación en un contenedor cilíndrico" (2000). Piva, Marcelo Fabián. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo se presenta un estudio experimental sobre el flujo producido por un rotor en el fondo de un cilindro vertical lleno parcialmente con un líquido. Esta configuracion geométrica genera un flujo rotante en el plano paralelo al eje de simetría y un flujo recirculante en planos meridionales. De entre los parámetros que gobiernan el proceso el número de Reynolds es, quizás, el más importante por lo que el estudio abarca una extensa gama de valores de este parámetro, cubriendo prácticamente cinco décadas. Se ha dividido el campode estudio en tres regiones: Reynolds pequeños, medianos y grandes. Trabajando en el primer régimen se observó el fenómeno de ruptura del vórtice (vortex breakdown)sólo en la configuración experimental en la que el disco cubre totalmente el fondo del recinto. Esta observación motivó la realización de experiencias numéricas que demuestran que la relación entre el radio del disco y el radio del cilindro es un factor muy importante en el umbral de ruptura del vórtice. En el rango de Reynolds medios se comprobó que el flujo pierde la simetría axial y transita a un estado caracterizado por la aparición de vórtices verticales encadenados al eje de rotación. Se caracteriza la inestabilidad a través de diferentes técnicas experimentales. En el rango de Reynolds grandes se observa la formación de un filamento vorticoso que presenta fluctuaciones en su intensidad. Analizando el movimiento de particulas en la superficie libre se identifica un movimiento corrotativo de precesión y mediante la colocación de una paleta deflectora se estudia la destrucción del filamento y la subsiguiente redistribución de la vorticidad.

Abstract:
An experimental study on the flow produced by a rotating disk at the bottom wall of a vertical cylinder partially filled with a liquid is presented. This geometrical configuration generate a rotating flow in a plane parallel to the symmetry axis and a recirculating flow in meridian planes. Several parameters govern the dynamics of the flow, among them the Reynolds number can be considered as one of the most important. Taking this into account this study covers a wide range of Reynolds numbers with values up to five decades. The working field has been divided into three regions: small, medium and large Reynolds numbers. In the first regime, vortex breakdown phenomena was observed only when the disk radius was equal to the cylinder radius. Numerical simulations demonstrated that the ratio between the disk radius and the cylinder radius is an important factor determining the onset of vortex breakdown. In the second region it was observed that the flow becomes unstable with a transition to a state with n vertical vortex around the symmetry axis. This shear instability was characterized with different experimental techniques. In the third region the formation of a vortical filament with fluctuating intensity is observed. with particles at the free surface a precessing motion of the filament was identified. By placing a deflective blade the destruction of the filament and the vorticity redistribution was studied.

"Estructuras poliméricas con anillos triazólicos. Síntesis, caracterización y aplicaciones" (2012). Lamanna, Melisa Elsa. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo general de esta Tesis Doctoral es la síntesis de nuevos polímeros que contengan heterociclos en su cadena principal o como sustituyentes, y el estudio de sus posibles aplicaciones. En virtud de este objetivo se propuso la polimerización del 3-amino-1,2,4-triazol (3ATA), así como la modificación sintética de policloruro de vinilo (PVC) y alcohol polivinílico (PVA) con anillos heterocíclicos. Los materiales resultantes se caracterizaron mediante métodos físicos, térmicos, reológicos y espectroscópicos. En principio se estudió la polimerización de la anilina para extenderla al 3-amino-1,2,4-triazol. A partir de la polimerización de anilina en presencia de diferentes partículas como agentes nucleantes se lograron desarrollar nuevos materiales híbridos. Por otra parte, al polimerizar el 3ATA hemos logrado obtener un oligómero (OATA). Se confirmó que el OATA se trata de un tetrámero con carácter de semiconductor. Se estudió su capacidad para interactuar con metales. Asimismo, se verificó que la capacidad de interacción con cobre aumentaba considerablemente cuando era insertado dentro de la vermiculita. Debido a las singulares propiedades ácido base del OATA y luego de un estudio exhaustivo de las mismas, se concluyó que dicho material puede ser aplicado satisfactoriamente como indicador de punto final de una titulación ácido base y como sensor de amoníaco. En cuanto a la modificación química del PVC, se realizó eficientemente la transformación, tanto por métodos tradicionales, así como por empleo de energía de microondas. Esta última técnica permitió obtener los mayores porcentajes de conversión. De todos los heterociclos estudiados, el 1,2,4-triazol-3-tiol resultó el más eficiente en la reacción de sustitución. Se determinó la capacidad de interacción con cobre, se vio que existe una interacción positiva entre la muestra con mayor porcentaje de conversión y dicho metal. Se logró la síntesis de nuevos copolímeros, obtenidos por modificación química del PVA. Las estrategias de síntesis aplicadas permitieron la obtención de copolímeros con grupos heterocíclicos unidos directamente a la cadena polimérica, así como sustituyentes heterocíclicos unidos a la cadena mediante un heteroátomo. Se realizaron ensayos de interacción para aplicar los nuevos copolímeros en la remoción de metales en aguas contaminadas. La interacción se evaluó en función del pH, tiempo y concentración. Se obtuvieron resultados muy promisorios en particular para la remoción de Hg (II), pero también para iones Cd (II), Zn (II) y Cu (II). Se realizaron ensayos de selectividad competitiva y no competitiva, y se evaluó la posibilidad de reutilización de los nuevos materiales.

Abstract:
The main goal of this Thesis is the synthesis of new polymeric materials containing heterocyclic groups in their main chain or as substituent, and the study of their possible applications. For that purpose, the polymerization of 3-amino-1,2,4-triazole (3ATA) was proposed. Moreover, we studied the synthetic modification of polyvinyl chloride (PVC) and polyvinyl alcohol (PVA) with heterocyclic as pendant groups. The new materials were characterized by physical, thermal, rheological and spectroscopical techniques. The polymerization of aniline was studied in depth and then we extended the methodology to 3ATA. From the polymerization of aniline in the presence of different nucleating particles we developed new hybrid materials with a wide range of applications. Furthermore, when the polymerization of 3ATA was carried out an oligomer (OATA) was obtained. It was confirmed by different techniques that OATA is a semiconductor tetramer. We studied its ability to interact with heavy metals. It was observed that when OATA was inserted into vermiculita, its ability to interact with copper (II) was considerably increased. The unique acid base properties, and after a thorough study of them, we have applied OATA as indicator of endpoint acid base titration. The PVC modification was successfully performed by traditional techniques and microwave irradiation. The latter technique yields the highest conversion rates. From all the heterocyclic substituent studied, 1,2,4-triazol-3-thiol was the most efficient in the substitution reaction. We determined the capability of the new copolymers to interact with cooper (II); we found that there was an interaction between the sample with the highest conversion and this metal. The synthesis of novel copolymers was achieved by chemical modification of PVA. The synthetic pathways applied let us to obtain copolymers with heterocyclic groups attached directly to the polymer chain or attached by a heteroatom. We performed interactions studies with heavy metals in order to remove them from contaminated waters. The sorption of Hg (II), Cd (II), Zn (II), Cu (II) were evaluated as function of pH, time and concentration. Besides, competitive and non competitive conditions were analyzed. Promising results were obtained in particular for mercury removal but also for cadmium, zinc and cooper. Their capability to be reused was also studied.

"Estructuras quimiorreceptoras en las fosas nasales de la rata : Su relación con la regulación endocrina de la reproducción" (1985). Settembrini, Beatriz Patricia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estructuras y transiciones de fase en complejos de coordinación de Zn y de Cd" (1995). Vega, Daniel Roberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estructuras, simetrías y paisajes energéticos en la familia de proteínas con repeticiones de Ankirina" (2016-03-23). Parra, Rodrigo Gonzalo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las proteínas repetitivas están compuestas por repeticiones en tándem de motivos estructurales. Estas unidades interaccionan entre sí de forma tal que coalescen en arquitecturas del tipo solenoidal o toroidal. Por su simplicidad topológica constituyen modelos útiles para el estudio del plegado de proteínas. Esta tesis se centra en el estudio de los miembros de la familia de proteínas con repeticiones de Ankirina (ANKs) que contienen entre 3 y 34 copias de un motivo de 33 residuos de largo. Siendo principalmente descriptas como mediadoras de interacciones proteína-proteína, las ANKs poseen una versatilidad para el reconocimiento de otras moléculas comparable a la de los anticuerpos. A pesar de su simplicidad estructural, las proteínas repetitivas presentan varios desafíos inherentes a su no globularidad. Las repeticiones pueden ser muy degeneradas en sus secuencias dificultando la deteccióon y definición de límites entre ellas, siendo este un problema aún no resuelto en este campo de estudio. Dado que las estructuras están mucho más conservadas que las secuencias, hemos desarrollado un método, llamado Teselado proteico" capaz de detectar repeticiones estructurales de forma objetiva, rigurosa y eficiente. Dicho algoritmo es independiente de la secuencia de las moléculas analizadas y es además generalizable a todos los tipos de proteínas repetitivas. Su aplicación a distintas clases de proteínas nos permitió caracterizar sus periodicidades y espectro de simetrías. Hemos aplicado nuestro algoritmo a todos los miembros de la familia ANK. Haciendo uso de nociones de la teoría de paisajes energéticos y con la hipótesis de que las repeticiones constituyen unidades de plegado, fuimos capaces de definir el largo y la fase de las repeticiones en todos los casos. Este estudio representa el primer caso reportado en que una estrategia de anotación de las unidades repetitivas consistente es aplicada a lo largo de toda una familia, lo cual permite realizar análisis comparativos al nivel de las repeticiones individuales. Los análisis subsiguientes muestran que las repeticiones ANKs pueden clasificarse en 3 tipos diferentes que corresponden a las repeticiones ubicadas en la región N-terminal, interna o C-terminal. Cada tipo de repetición muestra patrones de conservación en secuencia y en su energía de plegado específicos de su tipo. Pudimos observar además que los niveles de conservación de la secuencia y de la energía de plegado se encuentran correlacionados de forma lineal y positiva, lo cual indica que aquellas secuencias parecidas al consenso que se obtiene a partir del alineamiento múltiple de secuencias son más plegables que aquellas que se alejan del mismo. Existe una red de interacciones conservadas y energéticamente favorables en todas las repeticiones internas de las ANKs que conectan aquellos residuos más conservados en secuencia y que por tanto constituyen un núcleo de estabilidad estructural de las mismas. Al analizar en cambio todos los elementos que no forman parte de la estructura canónica de las repeticiones (inserciones y deleciones), las regiones cercanas a las mismas, se encuentran enriquecidas en interacciones frustradas, es decir, son desfavorables para el plegado de las mismas. Lo anterior sugiere que la presencia de inserciones y deleciones indica adaptaciones funcionales de las proteínas en que se encuentran. Este enriquecimiento de interacciones frustradas se observa también en los sitios de interacción con otras proteínas. Finalmente hemos estudiado la dinámica de plegado de estas moléculas usando métodos basados en estructura. Hemos caracterizado los mecanismos de plegado de varios miembros de la familia ANK y relacionando los mismos con los patrones energéticos previamente descriptos a partir de los estados nativos. Nuestros resultados ofrecen nuevas perspectivas acerca del funcionamiento de las proteínas de la familia ANK y pueden ser de gran utilidad para aquellos interesados en el dise~no de este tipo de moléculas para diferentes fines y el entendimiento biofísico de estas moléculas en forma general.

Abstract:
Repeat proteins are composed of specific structural motifs that are tandemly repeated. These units interact between each other leading to solenoidal or toroidal architectures. Given their topological simplicity these molecules constitute useful models to study the protein folding problem. This thesis is focused in studying the Ankyrin Repeat Protein Familiy (ANKs). Proteins from this family contain between 2 and 34 copies of a structural motif of 33 residues long. Being mainly described as protein-protein interactors, the ANKs have a high versatility to recognize other molecules, comparable to that of antibodies. Despite their structural simplicity, repeat proteins present several challenges that are inherent to their non-globularity. Repeats can be highly degenerated in their sequences difficulting their detection and the definition of limits in between them. Given that the structure is more conserved than the sequence, we have developed a method called Protein tiling" that is able to detect structural repetitions in an objective, rigorous and efficient manner. This algorithm is independent from the sequences of the proteins being analyzed and also it is generalizable to other repeat protein families and types. Its application to different protein classes allowed us to characterize their periodicities and symmetry spectra. We have applied the Protein Tiling algorithm to all the members in the ANK family. Using notions from the energy landscapes theory and the hypothesis of repeats as protein folding units, we were able to define the length and phase for the repeating units in all the ANKs. This study represents the first reported case in which a consistent repeats annotation strategy is applied to a whole family which allows to perform comparative analysis of repeats as individual units. Subsequent analysis showed that ANK repeats can be classified into 3 different types that correspond to repetitions localized at the N-terminal, internal or C-terminal regions. Each repeat type shows specific sequence and energy conservation patterns. We observed that the conservation degree at the sequences and the energy patterns are linearly and positively correlated, indicating that those sequences that are similar to the consensus obtained from the multiple sequence alignment are more foldable than those that have more differences with it. There exists a network of conserved interactions along all internal ANK repeats that connect those residues that are highly conserved in sequence and hence constitute a structural stability core for the overall structure. On the contrary, when analyzing those elements that do not belong to the canonical repeats structure (insertions and deletions), those regions that are close to them are enriched in frustrated interactions, i.e. where local folding is unfavorable. The latter suggests that the presence of insertions and deletions indicate functional adaptations of the proteins in which they are contained. This enrichment of frustrated interactions is also observed at the interaction sites of ANKs with other proteins. Finally we have studied the folding dynamics of several ANK members using state of the art computational methods. We have characterized the folding mechanisms of several members in the ANK family and related those with the energetic patterns previously described from the native states. Our results offer new insights into how ANK proteins function and can be of great value to those researchers that are interested in using these type of molecules for protein design with different aims and for the biophysical understanding of these molecules in general.

"Estudio de mecanismos de pre y post-condicionamiento como estrategia de inducción de tolerancia isquémica retiniana" (2012). Fernandez, Diego Carlos. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La isquemia es un componente central de diversas enfermedades retinianas que pueden provocar ceguera irreversible. Al presente, no existen tratamientos efectivos frente al daño isquémico retiniano. En este trabajo de Tesis se demostró por primera vez, que el post-condicionamiento isquémico (PostC) inducido por la aplicación de pulsos breves de isquemia en forma posterior a una isquemia prolongada, revierte significativamente las alteraciones funcionales e histológicas provocadas por una isquemia retiniana deletérea. En cuanto a los mecanismos involucrados en este fenómeno, los resultados obtenidos sugieren la participación de la síntesis de novo de proteínas y la actividad de la isoforma inducible de la óxido nítrico sintasa. Además, se demostró que el daño isquémico, al menos en parte, es causado por un aumento en las concentraciones sinápticas de glutamato y que el PostC podría proteger a la retina al disminuir este parámetro. A continuación, se realizó una caracterización del daño de la retina y la vía visual en un modelo de retinopatía diabética experimental inducido por la inyección de estreptozotocina (STZ). A nivel retiniano, se observaron alteraciones funcionales, vasculares y morfológicas significativas. En estadíos tempranos luego de la inyección de STZ se observaron alteraciones axo-gliales en la porción distal del nervio óptico, que podrían constituir el primer cambio estructural en la vía visual diabética. El condicionamiento isquémico (aplicación de pulsos semanales de isquemia) revirtió significativamente todas estas alteraciones, tanto a nivel de la retina como de la vía visual. Asimismo, los resultados obtenidos sugieren que la disminución en los niveles de VEGF y la restauración de la actividad de glutamina sintetasa podrían participar activamente en la protección inducida por el condicionamiento isquémico frente a las alteraciones provocadas por la retinopatía diabética. Finalmente, se demostró que las células ganglionares retinianas intrínsecamente fotosensibles en particular, y el sistema visual no formador de imagen en general, se preservan en etapas avanzadas de diabetes. En suma, los resultados obtenidos en este trabajo constituyen avances originales en la comprensión de los mecanismos involucrados en la lesión retiniana inducida por isquemia aguda y por diabetes, así como en la posibilidad de prevenir ambos procesos a través de la inducción de tolerancia isquémica. La demostración de que el sistema visual no formador de imagen es menos susceptible al daño diabético representa una valiosa pieza de información respecto a este sistema no canónico de transducción de la información luminosa.

Abstract:
Ischemia is a central component of several retinal diseases that can result in irreversible blindness. At present, there are no effective treatments to protect the retina from ischemic damage. For the first time, in this Thesis work, we have demonstrated that ischemic post-conditioning (PostC) induced by brief episodes of ischemia/reperfusion applied at the onset of reperfusion, significantly protected the retina against functional and histological alterations induced by ischemia. As for the involved mechanisms, the results suggest the participation of de novo synthesis of proteins and the inducible isoform of nitric oxide synthase activity in the protective mechanism triggered by PostC. We have also demonstrated that ischemic damage is, at least in part, caused by an increase in glutamate synaptic concentrations and that PostC protected the retina by decreasing this parameter. Moreover, we have analyzed the alterations at retinal and visual pathway level provoked by experimental diabetes induced by streptozotocin (STZ). Al retinal level, diabetes caused significant functional, vascular, and morphological alterations. In addition, significant axo-glial alterations were observed at the distal portion of the optic nerve at early stages of diabetes that could be the first structural change in the diabetic visual pathway. Ischemic conditioning (weekly application of brief pulses of ischemia) significantly reversed all these alterations. Furthermore, the results suggest that a decrease in VEGF levels and the restoration of glutamine synthetase activity could be key aspects in the protective mechanism triggered by ischemic conditioning against diabetic retinopathy. Finally, we showed that intrinsically photosensitive retinal ganglion cells and the non-forming image visual system are preserved at advanced stages of diabetes. In summary, the results presented in this Thesis provide original insights for unraveling the mechanisms involved in the retinal damage induced by acute ischemia and diabetes, as well as in the possibility of preventing these processes through the induction of ischemic tolerance. The demonstration that the non-forming image visual system is less susceptible to diabetic damage is a valuable piece of information about this non canonical system of light transduction.

"Estudio Mössbauer de óxidos e hidróxidos de Fe : aplicación al estudio de suelos" (1997). Mijovilovich, Ana Esther. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudian la mineralogia de los compuestos de Fe y la estabilidad de los compuestos magnéticos de tipo espinel en dos suelos de mineralogía y condiciones de manejo del suelo muy diferentes, y bajo la acción de climas y regímenes hídricos muy distintos (Molisoles de Bahía Blanca y Ultisoles de un yerbatal de Misiones) usando la espectroscopía Mossbauer a temperatura ambiente y a 15K. También se realizan mediciones de magnetización y se llevan a cabo las técnicas tradicionales para el estudio de suelos: DRX y los métodos químicos de disolución selectiva. Se hacen sugerencias para la implementación de la espectroscopía Mossbauer al estudio de los suelos pobres en Fe (Molisoles) y se estudia la eficiencia del tratamiento de disolución de Fe Ditionito -EDTA en comparación con los tratamientos químicos tradicionales. No obstante el bajo contenido de Fe del Molisol, los resultados obtenidos por la espectroscopía Mossbauer indican que los óxidos de Fe se presentan en tamaños pequeños pero sin ser superparamagnéticos y podrían estar cementando otras particulas no ferrosas. Los resultados para los Ultisoles sugieren que la mineralogía del Fe se ve afectada por las modificaciones del ecosistema en un proceso muy dinámico. A su vez en esta tesis se ha verificado la estabilidad de la magnetita en los Ultisoles de Misiones proporcionando elementos acerca de la controversia en la literatura sobre la estabilidad de la magnetita derivada de rocas maficas en suelos tropicales de areas vecinas de Brasil. Resultados similares se encuentran para la magnetita de un suelo muy poco desarrollado como es el Molisol.

Abstract:
The mineralogy of the Fe compounds and the stability of the spinel magnetic compounds are studied in two soils making use of the Mossbauer spectroscopy at room temperature and 15K. These soils with different mineralogy and management conditions are under different climates and hidric regime (Molisols from Bahia Blanca and Ultisoles from a Yerba Mate plantation from Misiones). Moreover, measurements of magnetization are done and traditional techniques for the study of soils like XRD and chemical dissolution treatments are carried out. Suggestions for the implementation of Mossbauer spectroscopy applied to the study of the poor- Fe soils (Molisols) are done. The performance of the Fe dissolution treatment Ditionite- EDTA is compared with the traditional chemical treatments. In spite of the low Fe content of the Molisol, the obtained results by Mössbauer spectroscopy show that small sized particles of Fe oxides are present in the soil without being superparamagnetic but probably agglutinating non- ferrous particles. The results suggest that the Fe mineralogy is affected by the modifications of the ecosystem in a very dynamic process. A result is obtained about the controversy related to the stability of magnetite derived form mafic rocks in the tropical soils of neighbour areas in Brazil; the stability of magnetite in Ultisols from Misiones is verified in this thesis. Similar results are obtained for the magnetite of a less developed soil like the Molisol.

"Estudio a nivel individual de las estrategias de parasitismo del tordo renegrido (Molothrus bonariensis)" (2013). de la Colina, María Alicia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El Tordo Renegrido Molothrus bonariensis es un ave parásita de cría extremadamente generalista y como consecuencia de la ausencia de un nido propio y su alta movilidad, se conoce muy poco sobre el comportamiento individual de puesta. El objetivo de esta tesis fue estudiar las estrategias individuales del Tordo Renegrido en la elección de nidos para realizar los eventos de parasitismo. A partir del análisis genético con microsatélites de muestras provenientes de huevos y pichones parásitos encontrados en dos de sus hospedadores frecuentes, la Calandria Grande Mimus saturninus y la Ratona Común Troglodytes aedon, y por medio de la reconstrucción de grupos de hermanos completos, se infirió el comportamiento de puesta individual de 26 hembras a posteriori. En particular, se estudió la elección de la especie hospedadora, el patrón temporal de puesta y el patrón espacial de puesta en cuanto al territorio y los nidos utilizados. Además, se estudió el polimorfismo en la coloración de los huevos de las hembras, con el objetivo de poner a prueba la hipótesis planteada para éste y otros parásitos de cría de que las hembras ponen huevos de coloración constante. También se analizó cómo influye el polimorfismo de huevos del Tordo Renegrido en el mecanismo de reconocimiento y rechazo de huevos parásitos en uno de sus principales hospedadores. Se encontró que las hembras de Tordo Renegrido tuvieron un período de puesta que duró hasta 79 días y que utilizaron preferencialmente una especie hospedadora, aunque se observaron hembras utilizando más de una especie. La mayoría de los huevos de cada hembra se encontraron próximos espacialmente, a una distancia máxima de 600 metros, evidenciando fidelidad al sitio de puesta. Además, se encontró que existe una similitud entre los huevos pertenecientes a una misma hembra tanto en la coloración como en el tamaño, lo cual apoya la hipótesis de constancia en la morfología de los huevos. Por último, se encontró que la probabilidad de rechazo del huevo parásito por parte de la Calandria Grande disminuye con la presencia de manchas y aumenta con altos niveles de brillo, y que el rechazo de un huevo parásito depende exclusivamente de las características intrínsecas del huevo y no se ve afectado por el contexto de la puesta. Se discute cómo esta defensa imperfecta influye en la evolución de la variabilidad en la coloración de los huevos parásitos y cómo la estrategia individual de selección de nidos afecta el éxito de parasitismo de la especie.

Abstract:
The Shiny Cowbird Molothrus bonariensis is a brood parasite that parasitizes an extreme range of hosts. As it has no nest of its own and high mobility, little is known about its reproductive behavior at the individual level. The aim of this thesis was to study individual strategies in host nest choice. Using microsatellite analysis of cowbird eggs and chicks found in nests of the two most frequent hosts, the Chalk-browed Mockingbird Mimus saturninus and the House Wren Troglodytes aedon, and by reconstructing full sibling groups, I inferred the laying behavior of 26 females a posteriori. More specifically, I analyzed host species selection and the spatial and temporal patterns of egg laying and host nest use. In addition, I studied the polymorphism in females' egg coloration to test the hypothesis that individual brood parasites lay eggs of constant color. I also studied how this polymorphism affects egg recognition and rejection in one of the major hosts. I found that shiny cowbird females had a laying period of up to 79 days and that they preferentially, but not exclusively, used only one host species. The majority of a female's eggs were found within a maximum distance of 600 meters from each other, showing nest site fidelity. Eggs of the same female were similar in color and size, supporting the hypothesis of constancy in egg morphology per female. Lastly, I found that the probability of egg rejection by mockingbirds decreased with the presence of spots and increased with high levels of brightness. Moreover, the rejection of a parasitic egg depends only on the egg's intrinsic characters and is not context-dependent. I discuss how this imperfect defense affects the evolution of variability of cowbird egg coloration and how the parasite's individual nest choice strategy affects the success of parasitism in this species.

"Estudio aeropalinológico del Parque Nacional Lihué Calel" (2004). Naab, Ofelia Ana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Fue llevado a cabo el estudio palinológico de las especies nativas y la interpretación aeropalinológica de la dinámica poblacional vegetal, del Parque Nacional Lihué Calel (provincia de La Pampa, Argentina). El parque está localizado al SO de la provincia y comprende las formaciones montañosas de las sierras de Lihué Calel. Está incluido en la provincia fitogeográfica del Monte. Las diferencias topográficas, de altura, exposición a los vientos y suelos, determinan localmente un mosaico de hábitats que soportan un alto grado de diversidad biológica en comparación con las áreas circundantes.Esa diversidad incluye comunidades vegetales distintivas, con arbustos micrófilos xerófilos, algunas especies endémicas, bosquecillos de Prosopis, gramíneas y helechos. El estudio palinológico comprende la descripción morfológica del polen de 278 especies correspondientes a 60 familias, obtenidas sobre la base de las observaciones microscópicas realizadas con el microscopio óptico y el microscopio electrónico de barrido. Son presentadas 47 láminas ilustrando el polen de las especies estudiadas. Teniendo en cuenta los caracteres polínicos fue realizada una clave taxonómica. El estudio aeropalinológico fue llevado a cabo por medio de análisis anuales y estacionales de los espectros polínicos obtenidos, con sus taxones representativos y las variables de su producción polínica, relacionadas con los factores climáticos/meteorológicos. Las muestras estudiadas fueron obtenidas de trampas Tauber, de suelo superficial y de "fluxage". Estos diferentes métodos fueron aplicados con el propósito de obtener una interpretación integrada de los espectros polínicos del Parque. Para caracterizar al Parque mediante los espectros polínicos, éstos fueron analizados a escala temporal (interanual y estacional) y espacial (local y regional). A escala temporal, los análisis identificaron fluctuaciones interanuales en la intensidad de la lluvia polínica (a pesar de la estabilidad de la riqueza) y las variaciones estacionales, en la riqueza taxonómica y en la abundancia del polen, marcadas por las especies con floración en primavera y verano. Por medio de los espectros polínicos fue posible identificar a la provincia fitogeográfica del Monte a través del polen de los taxones con alta representatividad pertenecientes a las especies de arbustales micrófilos xerófilos. También pudo identificarse la influencia de la vegetación halófila, proveniente de salitrales y lagunas próximas. El índice PA/PNA, con predominancia de vegetación de monte, especialmente arbustiva, demostró ser un indicador polínico de la vegetación. A escala espacial, los análisis permitieron reconocer las comunidades locales como las de pastizales con helechos, cortaderal y pastizal con caldén, mientras que otras comunidades fueron enmascaradas por el aporte del polen regional, representativo de la vegetación del Monte. La relación polen - vegetación - factores meteorológicos, corroboró que la producción polínica anual diferencial aparece vinculada con las variables pluviométricas, mientras que la temperatura no tendría incidencia en los cambios registrados. La vegetación arbustiva respondió positivamente a condiciones de aridez acaecidas en el ciclo anual precedente y la vegetación herbácea respondió positivamente frente a precipitaciones pluviales superiores a la media. La dinámica poblacional estaría regida por las variaciones pluviométricas, siendo más arbustiva en los ciclos secos y más herbácea en los ciclos altamente lluviosos.

Abstract:
Pollen of native species of Lihué Calel National Park (La Pampa Province, Argentina) was studied along with the aeropalynological interpretation of the vegetation dynamics. The Park is located in the South-West of the province and comprises the Lihué Calel mountain formations and is included within the "Monte" Phytogeographical Province. Differences in topographic position, height, wind exposure, insolation and soil properties determine a local mosaic of habitats, which support a higher degree of biological diversity compared to the neighboring areas. This diversity includes distinctive vegetal communities with small-leafed and xerophytic shrubs, some endemic species, Prosopis caldenia woodland, grass and ferns. The palynological study comprises the morphological pollen description of 268 species belonging to 60 plant families. The observations were made using optical and scanning electron microscopes. Forty-seven plates, with several illustrated pollen species, are presented. A taxonomic key was obtained on the base of pollen characters. The aeropalynological study was carried out through annual and seasonal analysis of the pollen rain spectra. Its representative taxa and its pollen production variables were related to climatic/meteorological factors. Pollen samples were obtained with Tauber traps, surface soil, and "fluxage". These three different methods were applied with the aim of obtaining an integrated interpretation of the Park pollen spectra. In order to characterize the Lihué Calel National Park through pollen spectra, they were analyzed at temporal (inter-annual and seasonal) and spatial (local and regional) levels. The temporal level analysis has identified inter-annual fluctuations in pollen rain intensity (despite the richness stability) and seasonal variations in the taxonomic richness and the pollen abundance, marked by the species with spring and summer blossom. The pollen spectra allowed the identification of "Monte" Phytogeographical Province with those taxa with highest representation, which belongs to small-leafed and xerophytic shrubs species. The influences of halophytic vegetation that comes from neighboring salty flats areas and nearby lagoons were also identified. The PA/PNA relation was interpreted as a good pollen index, marking the predominance of "Monte" vegetation, especially shrub-like plants. From spatial level analysis pollen of the local vegetal communities such as grassland/ferns, "pampas" grass, and grassland/"caldenes" were recognized. Other communities were masked by the regional pollen supply that represents the "Monte" vegetation. The relationship pollen/vegetation/meteorological factors in Lihué Calel showed that the different annual pollen production is related to rainfall variables, and the temperature would not have incidence in this variation. The shrub-like vegetation had a positive response to dryness conditions of the previous cycle, and the herbaceous vegetation had a positive response when the rainfall was above average. Population dynamics of the Park vegetation is ruled for pluvial annual fluctuation, being shrubbier in dried cycles and more herbaceous in rainy cycles.

"Estudio anatómico y ultraestructural comparado de Pteridófitas (frondes) y Gimnospermas (hojas) actuales y fósiles de la Formación Baqueró, provincia de Santa Cruz, Argentina" (1995). Villar de Seoane, Liliana Mónica. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio antigénico e inmunogénico de tres proteínas aisladas del virus de la diarrea viral bovina (BVDV): su aplicación al diagnóstico y al desarrollo de vacunas experimentales" (2004). Chimeno Zoth, Silvina Andrea. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El virus de la diarrea viral bovina (BVDV)es el agente etiológico de una importante enfermedad que afecta al ganado ocasionando grandes pérdidas económicas a nivel mundial. La infección por BVDV es a menudo subclínica o causa sintomatología clínica leve y poco específica, sin embargo, la infección transplacentaria puede ocasionar desórdenes reproductivos, malformaciones congénitas y nacimiento de animales persistentemente infectados (PI). La vacuna empleada actualmente en Argentina se formula con virus inactivado químicamente. Sin embargo, los datos existentes sobre su efectividad para inducir anticuerpos neutralizantes son contradictorios y la protección frente a la infección no resulta plenamente satisfactoria. En nuestro país, la prevalencia de anticuerpos anti BVDV en el ganado bovino es de 40-90%, según los reportes; aproximadamente el 2% de la población total de animales se encuentra persistentemente infectado. En esta compleja situación epidemiológica, la técnica de referencia utilizada para la detección de anticuerpos anti BVDV es la seroneutralización en cultivo celular. Si bien esta técnica resulta muy especifica y sensible, requiere de un laboratorio de diagnóstico de mediana-alta complejidad y resulta económicamente desventajosa para analizar un número alto de muestras. En el presente trabajo se abordaron ambas problemáticas centrales para el control de la enfermedad. Por un lado, se desarrollaron y evaluaron ensayos de ELISA para detectar anticuerpos anti BVDV en el suero de los bovinos. Los ensayos se diseñaron utilizando cada una de las tres proteínas más inmunogénicas del virus, E0, E2 y NS3, expresadas en el sistema baculovirus / células de insecto. Los ensayos de ELISA demostraron ser altamente sensibles y específicos en la detección de anticuerpos anti BVDV, de manera similar a la neutralización. Más aún, la inclusión de la proteína no estructural NS3 permitió detectar anticuerpos anti BVDV en animales tipificados como negativos en ensayos de seroneutralización. Por otro lado, se ensayó una vacuna experimental basada en la glicoproteína E2. Para ello se llevó a cabo una prueba de vacunación y desafío en la que se evaluó la respuesta inmune humoral y la protección conferida por la vacuna experimental frente a una de las vacunas comerciales usada actualmente. El nivel de anticuerpos neutralizantes presentes en el suero de los animales vacunados con la vacuna recombinante E2 fue significativamente mayor que el inducido por la vacuna inactivada convencional. Al momento del desafío, los animales vacunados con E2 presentaron altos niveles de anticuerpos neutralizantes, mientras que en los animales de los grupos vacunados con vacuna inactivada o con placebo, éstos fueron indectables. Coincidentemente, la sintomatología clínica desarrollada por los bovinos vacunados con la vacuna E2 recombinantes después del desafío viral fue más leve. Los resultados obtenidos demuestran que es posible mejorar las actuales vacunas contra BVDV, así como diseñar nuevos ensayos diagnósticos sencillos, sensibles, específicos y económicos basados en la utilizaciónde las proteínas recombinantes E2 y E2/E0/NS3, respectivamente. Este trabajo puede considerarse como un primer paso hacia la resolución de ambos problemas.

Abstract:
Bovine viral diarrhea virus (BVDV)is the ethiological agent of an important disease that affects cattle producing elevated economic Iosses worlwide. Usually, BVDV infection is subclinical or causes mild disease. However, transplacental infection may result in reproductive desorders, teratogenic effects or persistent infection in the neonatal calf (PI animals). Vaccines used nowadays in Argentina are based on chemically inactivated virus, however, existent data on their effectivity as neutralizing antibodies inducers are contradictory and protection against viral infection is not entirely satisfactory. In our country, prevalence of anti-BVDV antibodies of 40-90% has been reported, and near the 2% of the cattle population is considered persistently infected. In the context of this complex epidemiological situation, the reference technique employed for the detection of anti BVDVantibodies is the seroneutralization assay in cell culture. This technique is very specific and sensible, but it requires a middle-high complex laboratory equipment and results economically unproductive when a high number of samples must be processed. In the present work, both central concerns for the disease control were considered. On one hand, ELISA assays for anti-BVDV antibodies detection in cattle sera were developed and evaluated. Assays were designed using the most immunogenic proteins of BVDV, EO, E2 and NS3 expressed in the baculovirus / insect cells system. ELISA assays showed to be highly sensible and specific for anti-BVDV antibodies detection. Moreover, the inclusion of non structural protein NS3 made possible the detection of specific antibodies in animals classified as negative by seroneutralization assays. On the other hand, a recombinant subunit vaccine based on E2 glycoprotein was tested. Humoral immune response and protection conferred in cattle vaccinated with the experimental vaccine or a commercialy available vaccine were evaluated. The level of neutralizing antibodies in sera of animals vaccinated with the recombinant E2 vaccine was significantly higher than the one induced by the conventional vaccine. At challenge, animals experimentally vaccinated showed high levels of neutrallizing antibodies whereas animals vaccinated with the inactivated vaccine or the negative control group showed undetectable neutrallizing antibody levels. The results obtained showed that it is possible to improve current used BVDV vaccines and to design better diagnostic assays based on the use of recombinants E2 and E2/E0/NS3 proteins respectively. This work may be considered as a first step towards the resolution of both problems.

"Estudio bacteriológico y microquímico de la sangre obtenida de los focos hiper-hémicos estrangulados tuberculosos" (1932). Tessieri, Iris. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio biofísico del movimiento de agua en membranas biológicas: de las monocapas celulares a las membranas aisladas de ovocitos de Xenopus laevis" (2008). Ozu, Marcelo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo de esta tesis fue profundizar, con enfoque biofísico, el estudio del transporte de agua a través de membranas biológicas impulsado por gradientes osmóticos o hidrostáticos, o por el acoplamiento con el movimiento de solutos. El contenido de esta tesis se divide en dos partes: 1) El estudio del movimiento de agua y solutos a través de una barrera epitelial, tomando como modelo, el de células T84 (de origen intestinal humano) y 2) El análisis de las propiedades osmóticas del primer canal hídrico clonado, la acuaporina-1 (AQP-1), en condiciones de control de las composiciones de los medios que bañan ambos extremos de la proteína insertada en una membrana biológica. La primera parte lleva a la conclusión de que no es posible estimar directamente el flujo de agua a partir del movimiento electrogénico de iones, aún en condiciones de hiperestimulación, como se probó con potentes secretagogos. La segunda parte presenta una nueva tecnología que permite, por primera vez, controlar las condiciones experimentales a ambos lados de una acuaporina expresada de manera natural en una membrana biológica. También presenta los resultados experimentales obtenidos, que fueron complementados con simulaciones computacionales sobre la base de modelos matemáticos. Se aportan nuevos datos sobre el comportamiento osmótico de la AQP-1, así como su regulación.

Abstract:
The objective of this thesis was to deepen, from a biophysical approach, into the study of water transport through biological membranes driven by osmotic or hydrostatic gradients, or by its coupling to solute movements. The content of this thesis is divided into two parts: 1) The study of water and solute movements through an epithelial barrier, using the T84 cells (from human intestine origin) as model; and 2) The analysis of the osmotic properties of the first cloned water channel, the aquaporin-1 (AQP-1), controlling the compositions of the media on both sides of the protein inserted into a biological membrane. The first part arrives to the conclusion that is not possible to suppose that estimating the magnitude of the transepithelial ions movements from electrical records it could be possible to estimate the associated water movement, even under conditions of electrogenic hyper-stimulation. The second part presents a new methodology that allows, for the first time, controlling the experimental conditions on both sides of an aquaporin expressed on a natural way into a biological membrane. In addition, it presents the obtained experimental results, which were complemented with computational simulations based on mathematical models. New data contribute to the acknowledgement of the osmotic behaviour of AQP-1, just as its regulation.

"Estudio biológico y molecular del proceso de infección de un virus de la granulosis de Epinotia aporema y evaluación de su potencial como agente de control biológico" (2003). Goldberg Cavalleri, Alina Viviana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El “barrenador de los brotes", Epinotia aporema, es una de las principales plagas de leguminosas en América del Sur. Las larvas de esta plaga, son infectadas por un granulovirus (EpapGV) el cual representa una de las principales causas de epizootias esporádicas en poblaciones de E. aporema. En el trabajo de tesis, se realizaron estudios biológicos y patológicos sobre EpapGV en larvas del insecto huésped, los cuales establecieron una base de conocimientos importante para determinar distintos aspectos de la interacción virus-huésped. Ensayos en laboratorio demostraron que el virus es altamente virulento y especie específico, lo que indica que es un buen candidato para ser utilizado en el control biológico de la plaga. Larvas infectadas con EpapGV sufrieron un retraso en el desarrollo, siendo inhibido el proceso de muda. Además, exhibieron un incremento en el peso mayor al observado en larvas sin infectar. Esto pudo deberse a la expresión del gen viral egt cuyo producto altera la fisiología de los insectos. Mediante exámenes de tejidos al microscopio óptico y electrónico, por medio de las técnicas de inmunohistoquimica e hibridación in situ (ARN-ARN), se observó que EpapGV causa infecciones de tipo poliorganotrópicas. Los principales tejidos afectados fueron el adiposo, la epidermis y la matriz traqueal. Luego de infectar el intestino medio, la diseminación del virus hacia otros tejidos se produce aparentemente vía hemolinfa. Los viriones producidos en células infectadas se acumulan entre la membrana plasmática y la lámina basal, lo que indica que dicha lámina constituye una barrera efectiva para diseminación de la infección. Mediante la técnica de inmuno-oro se detectó expresión de granulina dentro del núcleo, lo cual indica que la expresión de genes tardíos ocurre luego de la ruptura de la membrana nuclear. Análisis computacional de las secuencias de los extremos de clones de la biblioteca genómica de EpapGV generada en el laboratorio, permitieron identificar una posible proteína de fusión (Epap-F). El gen completo fue subclonado, secuenciado y analizado mostrando motivos característicos de las proteinas F de Nucleopolyhedrovirus (involucradas en la entrada del virus a una nueva célula). Sin embargo, no se había demostrado la funcionalidad de proteínas F de Granulovirus. Mediante la técnica de Northern blot se confirmó la expresión de dicho gen y se estudió su expresión temporal. Posteriormente, a través de la técnica de RACE, se mapeó el extremo 5' no codificante demostrándose que la transcripción del gen se realiza a partir de un motivo típico de transcripción tardío (CAGT) y también a partir de un motivo no convencional ATGC. Para demostrar la actividad fusogénica de dicha proteína se realizó un ensayo de actividad transiente in vitro. Para ello, se transfectó un cultivo de células (Spodoptera frugiperda. Sf21) con un plásmido conteniendo el ORF completo de Epap-F bajo el promotor ie-1 de Anticarsia gemmatalis MNPV, se modificó el pH del medio a 5 y se registró formación de sincicios. Con el fin de producir anticuerpos que reconozcan a Epap-F, se expresó dicha proteína utilizando un sistema de expresión de baculovirus. Los anticuerpos serán utilizados para la determinación de la ubicación subcelular de dicha proteína.

Abstract:
The bean shoot borer, Epinotia aporema, is a major pest of legume crops in South America. Larvae of this pest are infected by a granulovirus (EpapGV) that is the most important cause of sporadic epizooties in E. aporema populations. This PhD dissertation deals with the biological and pathogenesis studies on EpapGV on the host larvae that provide the basic information of the virus-host interaction. The high specificity and pathogenicity indicate that EpapGV is a good candidate for the biological control of this pest. Larvae infected by EpapGV, suffered a retardation of development and typically failed to pupate, but exhibited a weight increase greater than that of healthy larvae. It is possible that the effect observed was due to the expression of the egt viral gene whose product alters the insect physiology. Using immunohistochemistry and in situ hybridization (by both, light and electron microscope) we observed that EpapGV caused a polyorganotropic infection. We found that the fat body, epidermis and tracheal matrix were the main tissues infected. Virions liberated from the midgut may gain entry to other tissues via circulation through hemolymph. Virions produced by infected cells accumulated between the plasma membrane and basal lamina, this indicated that the basal lamina is an effective barrier for the spread of the infection. Granulin was detected in the nucleus by immuno-gold staining. indicating that late gene expression occurred prior to nuclear membrane disruption. Computer-assisted analysis of the sequence of the end sequences EpapGV clone library produced in our lab, revealed a putative fusion protein (Epap F). The complete gene was subcloned, sequenced and analyzed revealing aminoacids motif of characteristic for Nucleopolyhedrovirus F proteins (involved in virus entry to a new cell). However no functional F protein had been demostrated in any Granulovirus. Northern blots were used to confirm the transcription of this gene and to study its temporal expression. Employing the RACE technique we mapped the 5' untranslated region and we found that the transcription starts at a typical late gene (CAGT) motif and also at an unconventional (ATGC) motif. In order to demonstrate the fusion activity of Epap-F, we carried out a transient expression assay. To this end, a Spodoptera frugiperda (Sf 21) cell line was transfected with an expression plasmid containing the Epap-F ORF under the control of the Anticarsia gemmatalis MNPV ie-1 promoter and, alter lowering the pH to 5 many extensive syncytia were observed. With the aim of producing antibodies against Epap-F, the protein was expressed using a baculovirus expression system. The antibodies will be used to determine the subcelular localization of this protein.

"Estudio bioquímico de las isoformas de las subunidades R y C de la proteína quinasa A de Mucor circinelloides y sus efectos en el desarrollo y la diferenciación" (2010). Ocampo, Josefina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La vía de señalización por cAMP-proteína quinasa A (PKA) juega un rol importante en la regulación del desarrollo, crecimiento y virulencia en un variado número de hongos. La PKA está compuesta por un dímero de subunidades regulatorias (R) y dos subunidades catalíticas (C). La subunidad R posee una estructura modular con un dominio de dimerización y anclaje (D/D) en el extremo Nterminal y dos dominios de unión de cAMP en el extremo C-terminal, entre ambos se encuentra una zona bisagra que incluye el sitio inhibitorio (IS). A ambos lados del IS se definen el linker I y linker II. Nuestro modelo de estudio es el hongo Mucor circinelloides cuya holoenzima PKA se diferencia de las de otras especies por su mayor fuerza de interacción R-C. En esta tesis demostramos la participación del linker I en la interacción R-C y la importancia de su naturaleza química, dada por la presencia de un grupo residuos ácidos, para establecer la alta fuerza de interacción entre las subunidades. Definimos por primera vez en hongos la existencia de cuatro isoformas de subunidad R, PKAR1, PKAR2, PKAR3 Y PKAR4, las cuales se expresan en forma diferencial a lo largo del desarrollo de M. circinelloides. Mediante la construcción de dos cepas que poseen anulados los genes de pkaR1 y pkaR2 demostramos que cada una de las isoformas posee roles diferentes en la diferenciación y morfología del hongo. M. circinelloides también presenta múltiples isoformas de subunidad C, de las cuales hemos ahondado en el estudio de una en particular denominada PKAC. Caracterizamos la isoforma como una posible pseudoquinasa por las características de su secuencia aminoácidica y por la falta de actividad catalítica. Finalmente demostramos la existencia de variantes de R modificadas posttraduccionalmente por ubiquitinación, en particular se definieron isoformas multiubiquitinadas de alto PM y la monoubiquitinación de PKAR2.

Abstract:
The PKA signal transduction pathway plays an important role in growth, development, morphology and virulence of many fungi. PKA is composed of a dimer of regulatory subunits (R) and two catalytic subunits (C). The R subunits has a modular structure: a dimerization docking domain (D/D) at the N-terminus; two tandem cAMP binding domains at the C-terminal region (CNB) and a hinge variable region that includes an inhibitory sequence (IS). At both sides of the IS the regions linker I and linker II are defined. Our experimental model is the fungus Mucor circinelloides with a PKA holoenzyme that differs from other species for its high affinity interaction between R and C subunits. In this work we show the importance of linker I region in the R-C interaction and also the importance of its chemical nature in determining the high affinity interaction between its subunits. The existence of four R subunits isoforms, PKAR1, PKAR2, PKAR3 and PKAR4 is reported. These isoforms show a differential expression through M. circinelloides development. The construction of two strains with deletions in pkaR1 and pkaR2 genes, allowed to demonstrate the role of PKA in the regulation of morphological and cellular development.in M. circinelloides. This fungus also has multiple genes coding for C subunits; we have particularly studied the characteristics and the role of PKAC. This isoform has been characterized as a putative pseudokinase since it is catalytically inactive and has unusual aminoacidic sequence. Finally, we show that some R isoforms are modified post-translationally by ubiquitination, particularly the multiubiquitinated high molecular weight isoforms and the monoubiquitinated PKAR2.

"Estudio bioquímico y estructural de la muerte celular propia del desarrollo y la inducida por un evento hipóxico en el SNC durante el desarrollo" (2012). Pozo Devoto, Victorio Martín. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los eventos de hipoxia tienen consecuencias nocivas que se manifiestan de múltiples formas en el SNC durante el desarrollo. El presente estudio analiza los daños generados en el tectum óptico por una hipoxia aguda normobárica sobre embriones de aves. Encontramos que tanto la vulnerabilidad diferencial como el retraso temporal de la muerte celular son dos fenómenos producto del evento hipóxico. Dicho daño se caracteriza por ser independiente de aferencias de la retina y por presentar una muerte celular mediada por la vía apoptótica intrínseca. Esto fue determinado ultraestructuralmente y bioquimicamente mediante la inmunomarcación de proteínas involucradas en la cascada apoptótica. Por otro lado, se determinó que la muerte celular propia del desarrollo presenta un perfil morfológico y bioquímico apoptótico similar al observado en condiciones de hipoxia. Frente a la evidente semejanza entre estos dos procesos de muerte postulamos que la hipoxia en nuestro modelo genera un desequilibrio transitorio en la homeostasis del tectum óptico, incrementando la muerte celular propia del desarrollo. Además, observamos una disminución transitoria en la actividad de la vía de supervivencia PI3K/Akt durante el evento hipóxico. Los resultados preliminares derivados de la administración de drogas que logran estimular esta vía de supervivencia en cultivos de embriones ex ovo, sugieren un rol ejecutor de esta vía en la muerte hipóxica. Por último, hemos determinado que la administración de estradiol posterior al evento hipóxico presenta efectos neuroprotectores a través de la unión a receptores y posiblemente mediante acciones no genómicas a través de PI3K/Akt.

Abstract:
Hypoxic insults during CNS development have multiple deleterious outcomes. In the present thesis, we analize the cell death evolution in the chick optic tectum layers after an acute normobaric hypoxia, showing two important features: differential vulnerability of optic tectum layers and delayed neuronal death. Our results show that hypoxic cell death is independent of retinal inputs and we found that this cell death is mediated by the apoptotic intrinsic pathway. This was determined by ultrastructural analysis and immunofluorescence against apoptotic pathway proteins. With minor differences, developmental cell death itself presents a morphological and biochemical apoptotic profile. The similarity between these two cell death processes lead us to postulate that hypoxia generates a temporary imbalance in the homeostasis of the optic tectum, increasing developmental cell death. In addition, we observed a transient decrease in the activity of the PI3K/Akt survival pathway during the hypoxic event, suggesting an important role as executor of hypoxic cell death. This is supported by the results obtained from the administration of drugs in a model of cultured ex ovo embryos, where the stimulation of pAkt levels reverts the hipoxic cell death. Finally, we have determined that administration of estradiol after the hypoxic event exerts neuroprotective effects through estrogen-estrogen receptor interaction and possibly through nongenomic actions via PI3K/Akt pathway.

"Estudio bioquímico y estructural de la quinasa de proteínas CK2 del hongo Candida Albicans y su participación en la fosforilación del proteasoma 20S homólogo : Clonado de la subunidad regulatoria (beta) de la enzima" (1998). Walz, Katherina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio cinético de la formación fotoquímica de mono- y trifluoruro de cloro en el sistema fluor-cloro-monofluoruro de cloro" (1977). San Roman, Enrique A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio climático de la precipitación del Brasil Meridional asociado con fenómeno extrarregionales" (1996). Nery, Jonas Teixeira. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Fluctuaciones en escala estacional e interanual de la precipitación en Brasil Meridional correspondientes a los Estados de San Pablo, Paran , Santa Catarina y Río Grande del Sur fueron estudiadas, utilizando datos del DAEE y DNAEE. El período utilizado fue de 1948-1988 para el estudio estacional y en la escala interanual se utilizó el mayor período posible para cada Estado. San Pablo por ejemplo, fue estudiada teniendo en cuenta el período de 1940 a 1988. En la escala estacional se buscó tipificar la precipitación en cada provincia y entender la variabilidad de la misma en el período de verano (6 meses) e invierno (6 meses), utilizando distintos parámetros estadísticos. Se buscó filtrar los procesos determinísticos, como por ejemplo, la onda anual muy marcada en San Pablo y en la costa de Paran y Santa Catarina. A través del Análisis armónico se elegió el mejor filtro para obtener una serie donde otros procesos no conocidos estuviesen presentes. Se realizó el estudio de persistencia a través de la función de autocorrelación. En la escala internaba, se estudió la relación de la precipitación en San Pablo, Paran, Santa Catarina, Río Grande del Sur, Sur de Brasil y Brasil Meridional, con la Oscilación Sur (OS). Los resultados mostraron que virtualmente todas las fluctuaciones interanuales más significativas en la precipitación en la rea de estudio estuvieron asociadas con las fases extremas de la OS. La característica más importante en la manisfestación de la OS fue la persistencia de anomalías débiles y moderadas por varios meses. Aunque la señal de Oscilación Sur resultó estadísticamente significante, se verificó que una única fase de la OS, sea positiva o negativa, puede resultar tanto en precipitación sobre o abajo lo normal.

Abstract:
The interanual, seasonal fluctuations of precipitation in the Meridional Brazil (S. Paulo, Paran , Santa Catarina and Rio Grande do Sul) were analysed. The meteorological data were collected at 127 station by Departamento Nacional de Agua e Energia Electrica, DNAEE. These data, comprising the years 1948 to 1988, of the seasonal study and interanual scale is the long record posible of each State. São Paulo, for example were studied in the years 1940 to 1988. The seasonal scale were studied to classify the precipitation in each State and to understand the winter (six months) and summer (six months) variabilities. We have used different statistical methods, such as mean, correlation, standard deviation. Several filters were used to obtain the series without annual wave. Through Fourier transform we have chosen the best filter to get a series with other unknown process. In these new series, the persistence was studied with the autocorrelation function. The interanual fluctuations were studied through the relation of the precipitation in São Paulo, Paran , Santa Catarina, Rio Grande do Sul, South of Brazil and Meridional Brazil with South Oscilation (SO). Virtually all significant variations were associaed with extreme phases of the SO. It has also been verified that the most important caracteristic of the SO effect is the persistence of weak precipitation anomalies for several months. Although statisticaly significant the SO signal can be associated with either above or below normal precipitation.

"Estudio combinado de erupciones de tubos de flujo magnético solares y su manifestación interplanetaria" (2009). Nakwacki, María Soledad. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El medio interplanetario se conforma de un plasma tenue que fluye desde el Sol llamado viento solar (VS). El VS transporta estructuras magnéticas expulsadas desde la corona solar (por ej. eyecciones coronales de masa, ECMs). En este trabajo, se estudian teórica y observacionalmente algunos aspectos de la evolución de las ECMs en el medio interplanetario (MI); en particular, del subconjunto llamado nubes magnéticas (NMs). Se modela la evolución dinámica de varios eventos ocurridos entre 1997-2004, se cuantifica su expansión y se calculan, con los modelos desarrollados, cantidades globales invariantes (flujo y helicidad magnética), relevantes en un análisis combinado de eventos solares y sus contrapartes interplanetarias. Los modelos desarrollados se basan en la descripción magnetohidrodinámica del plasma. Se propone una evolución autosimilar de la estructura de las NMs con tasas de expansión diferentes en cada una de sus direcciones principales (radial y axial). Se comienza sólo con expansión radial y se avanza hasta incluir la expansión axial. Finalmente, se amplía la descripción con un formalismo general, basado en las observaciones, derivado en un orden jerárquico y aplicable, incluso, a estructuras más generales que las NMs. Se muestra la robustez de los invariantes globales cuando se los calcula con diferentes modelos de expansión. Se cuantifica por primera vez la cantidad típica de energía magnética perdida por unidad de tiempo en la evolución de una NM. Para algunas de las NMs estudiadas se analizan también observaciones del evento solar asociado y de su región activa (RA) fuente. Se identifican características de la zona de erupción que permiten cuantificar los invariantes globales en el Sol. Se dan cuantificaciones del flujo magnético involucrado en la eyección y estimaciones de la variación de helicidad magnética de la RA fuente. A partir de la comparación de las cantidades globales en el Sol y en el MI se proponen modelos para las erupciones y se restringen los modelos existentes. Por último se estudia la evolución de una NM particular desde que es observada cerca de la Tierra hasta más de 5 unidades astronómicas con datos de dos sondas alineadas con el Sol. Se cuantifican los invariantes globales en ambos puntos de observación. Se comparan dichas cantidades y se da una interpretación de la estructura magnética distorsionada por interacción con el VS ambiente lejos del Sol. Se extiende la comparación hasta el Sol identificando la fuente solar con lo que se tiene una descripción completa de su evolución a través de la heliósfera.

Abstract:
The interplanetary medium is filled with a low density plasma that flows from the Sun and is called the solar wind. This wind transports the magnetic structures that are ejected from the solar corona (e.g. coronal mass ejections, CMEs). In this Thesis, we study from a theoretical and observational point of view some aspects of the evolution of CMEs in the interplanetary medium; in particular, of a subset called magnetic clouds (MCs). We model the dynamical evolution of several events that occurred between 1997 and 2004, we quantify their expansion and we compute, using models developed as part of this Thesis, the global invariant quantities (flux and magnetic helicity) that are relevant to a combined analysis of solar events and their interplanetary counterparts. The models we develop are based in a magnetohydrodynamic description of the plasma. We propose a self similar evolution for the cloud structures with different expansion rates in each of their main directions (radial and axial). We start considering only a radial expansion and we proceed to include an axial expansion. Finally, we broaden the description towards a more general formalism, based on observations, that is derived in a hierarchical order and can be applied to more general structures. We show the robustness of global invariants when computed using different expansion models. We quantify for the first time the typical amount of energy lost per unit time in the evolution of a MC. For some of the studied MCs we also analyze observations of the associated solar event and of its source active region. We identify the characteristics of the eruptive regions that allow us to quantify the global invariants in the Sun. We quantify the magnetic flux involved in the ejection and the magnetic helicity variation of the source active region. Finally, we study the evolution of a particular MC from its observation close to Earth until farther than 5 astronomical units using data from two spacecraft aligned with the Sun. We quantify the global invariants in both observational points. We compare these quantities and we provide an interpretation for the origin of the magnetic structure distorted because of its interaction with the solar wind far from the Sun. We extend this comparison to the Sun and we identify the solar source, in this way we achieve a complete description of the MC evolution along the heliosphere.

"Estudio comparado de la alimentación entre algunos predadores de alto nivel trófico de la comunidad marina del norte y centro de Patagonia" (1999). Koen Alonso, Mariano. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El estudio comparado de la alimentación de predadores de alto nivel trófico permite evaluar la forma en que estas especies utilizan los recursos tróficos, posibilitando así el análisis de las potenciales relaciones de competencia y el papel que estos predadores pueden tener en la regulación y estructuración de la comunidad a la cuál pertenecen. La comunidad marina del norte y centro de Patagonia se estructura alrededor del sistema tritrófico conformado por la anchoita (Engraulis anchoíta), el calamar común (Illex argentínus) y la merluza (Merluccius hubbsi). En este sentido, varias especies de mamíferos marinos y elasmobranquios utilizan a estas especies como recursos tróficos. Por esta razón, el objetivo de este trabajo es analizar comparativamente la dieta del lobo marino de un pelo (Otaria flavescens), el delfin oscuro (Lagenorhynchus obscurus), la tonina overa (Cephalorhynchus commersonni), la raya picuda (Raja flavirostris), el tiburón espinoso (Squalus acanthias) y el tiburón vitamínico (Galeorhinus galeus). Para ello, se estudió la dieta de estas especies sobre la base de los contenidos del tracto digestivo. Se utilizaron los restos hallados en los contenidos (huesos y otolitos de peces, picos y plumas de cefalópodos, exoesqueletos de crustáceos, etc.) para identificar y cuantificar a las presas. Las tallas y pesos de las presas al momento de la ingesta fueron reconstruidos empleando regresiones alométricas. La importancia relativa de las presas fue evaluada mediante el índice de importancia relativa IRI=(PH%+N%)FO%, donde PH% es el porcentaje en peso húmedo, N% es el porcentaje en número y FO% es la frecuencia de ocurrencia porcentual de la presa en la dieta. Este indice fue relativizado a 100% (IRI%). Las diferencias intraespecificas en la dieta permitieron determinar especies tróficas dentro de algunas de las especies biológicas estudiadas. Estas diferencias en la dieta fueron determinadas empleando dos índices de solapamiento, el solapamiento general (GO) y el solapamiento específico (SO). Estos índices fueron calculados utilizando las ocurrencias de aquellas presas que presentaron valores de IRI% mayores de 1% en la muestra total de cada especie biológica estudiada. Las diferencias en las tallas consumidas por las especies tróficas determinadas fueron estudiadas empleando la prueba de Mann-Whitney o el análisis de la varianza unifactorial por rangos de Kruskal-Wallis y contrastes de a pares. La dieta del lobo marino de un pelo fue estudiada a partir de muestras obtenidas de individuos hallados muertos en la costa y de animales recuperados de las capturas incidentales de la pesquería. Se identificaron 41 especies presa en los 59 contenidos estomacales estudiados. Las presas más importantes fueron la merluza, el pulpo colorado (Enteroctopus megalocyathus), el calamar común, la raneya (Raneya brasiliensis), el calamar patagónico (Loligo gahi) y la anchoíta. Sobre la base de las ocurrencias de estas presas y empleando el GO y el SO se estudiaron las diferencias en la dieta asociadas con la fuente de muestreo (ejemplares enmallados y ejemplares muertos en la costa) y sexo. Sólo se detectaron diferencias significativas en la dieta entre los sexos. Las hembras se alimentaron fundamentalmente de especies bentónicas (pulpo colorado), mientras que los machos se alimentaron mayormente de especies demersales-pelágicas (merluza). Estas diferencias en la dieta fueron asociadas con áreas diferentes de alimentación y/o diferentes rangos de acción (“home range") para cada sexo. Los resultados obtenidos sugieren que las hembras se estarian alimentando en aguas más costeras y someras, mientras que los machos se alimentarían en aguas más profundas y alejadas de la costa. Con referencia a las especies de importancia comercial consumidas por el lobo marino de un pelo, la merluza fue consumida mayormente en tallas no comerciales (largo total <30cm), mientras que el calamar común fue consumido mayormente en tallas comerciales (largo dorsal del manto >15cm). Aún así, las distribuciones de talla de las principales presas sugieren que los lobos marinos estarian utilizando a estos recursos de acuerdo a la oferta existente en el ambiente. La dieta del delín oscuro fue estudiada sobre la base de 25 ejemplares capturados, en su mayoría, en lances nocturnos pelágicos para la pesca de langostino (Pleoticus muelleri). Debido al pequeño tamaño muestral, no se analizaron las diferencias intraespecífrcas en la dieta de esta especie. Las principales presas del delfín oscuro fueron la anchoita, el calamar común, el calamar patagónico y la merluza. Las tallas consumidas de estas especies, tales como adultos de anchoíta, juveniles de calamares y juveniles primarios de merluza, permiten caracterizar a esta especie como un predador típicamente pelágico, predando sobre especies pelágicas o estadios pelágicos de especies demersales que forman cardúmenes. La dieta de la raya picuda fue estudiada a partir de una muestra de 274 ejemplares, obtenidos fundamentalmente de las capturas incidentales de la pesquería de merluza. Las presas más importantes para la raya picuda fueron la merluza, la nototenia (Patagonotothen ramsayi), el calamar común, el isópodo (Serolis schythei), la raneya y la anchoita, identificándose un total de 45 especies presa en la dieta de este predador. Los resultados obtenidos a partir de los análisis de solapamiento indicaron que no existen diferencias en la dieta entre sexos pero sí entre ejemplares maduros e inmaduros. La nototenia y la merluza fueron las presas más importantes de las rayas picudas inmaduras, aunque los crustáceos alcanzaron también altas importancias. En el caso de los ejemplares maduros, la merluza y el calamar común fueron las presas más importantes, disminuyendo notoriamente la importancia de los crustáceos. En términos generales, las rayas picudas inmaduras oonsumieron presas en tallas significativamente menores que las consumidas por los animales maduros. Asimismo, se encontraron correlaciones significativas entre el tamaño del predador y el tamaño de sus presas, tanto para los ejemplares inmaduros y maduros por separado, como para la muestra total. Puede concluirse que la raya picuda cambia su dieta a medida que crece y madura. Los ejemplares pequeños e inmaduros consumen fundamentalmente crustáceos, incorporando a los peces en su dieta a medida que crecen. A partir de la maduración sexual, la dieta de esta especie está constituida básicamente por peces y calamares. Asimismo, se evidencia un cambio del dominio del ambiente donde se alimentan, siendo las rayas inmaduras predadores típicamente demersales-bentónicos, mientras que los ejemplares maduros se alimentan predominantemente de especies demersales-pelágicas. La dieta del tiburón espinoso fue estudiada sobre la base de 132 ejemplares provenientes en su mayor parte de capturas incidentales en lances comerciales dirigidos a merluza y colectados en el período 1996-1998. Se estudió la alimentación de esta especie teniendo en cuenta las potenciales diferencias en la dieta relacionadas con el sexo y el estado de madurez sexual. Mediante el GO y el SO, se detectaron diferencias en la dieta entre ejemplares inmaduros (SAinm), machos maduros (SAmm) y hembras maduras (SAhm). Los resultados obtenidos indican que el calamar común, los ctenóforos y la merluza fueron las presas más importantes de los SAinm. En el caso de los ejemplares maduros, el calamar común y la merluza fueron las presas más importantes tanto para SAmm como para SAhm. Aún así, se detectaron diferencias en la dieta entre estas tres especies tróficas. Los SAinm son predadores fundamentalmente pelágicos, luego de la madurez sexual se produce un cambio en la dieta y los tiburones espinosos maduros (SAmm y SAhm) tienden a alimentarse más asociados al fondo, disminuyendo el consumo de los ctenóforos (IRI%SAinm=l8%,IRI%SAmm=4% y IRI%SAhm=0.4%) y aumentando el consumo de especies demersales-pelágicas y demersales-bentónicas. Comparativamente, los estudios de la dieta del tiburón espinoso en el período 1985-1994 indican que la merluza era la principal presa para esta especie en el área, seguida del calamar común (Garcia de la Rosa y Sánchez, 1997; García de la Rosa, 1998). En este trabajo, que abarca el periodo 1996-1998, los resultados indican que este orden de importancia se invierte, siendo el calamar común la presa más importante, seguida por la merluza. Este hecho, parece confirmar el carácter de predador generalista y oportunista del tiburón espinoso, dado que entre ambos periodos de estudio la abundancia de la merluza en la región ha disminuido drásticamente como consecuencia de la sobre-explotación. La dieta de la tonina overa fue estudiada a partir de 9 ejemplares capturados incidentalmente en redes de pesca. Si bien la muestra es pequeña y sólo permite un análisis preliminar, la merluza y el calamar común fueron las presas más importantes para esta especie. Las tallas consumidas de estas presas indican claramente que la tonina overa se alimento de juveniles primarios de merluza y juveniles pequeños de calamar. De esta forma, es posible caracterizar a esta especie, en el norte y centro de Patagonia, como un predador pelágico que se alimenta de especies o estadios de especies que forman cardúmenes. La dieta del tiburón vitamínico fue analizada a partir de 23 contenidos estomacales provenientes de animales capturados incidentalmente en lances de pesca. Las presas más importantes para el tiburón vitaminíco fueron la merluza, el calamar común y el pulpo colorado, además de la nototenia y el calamar patagónico. En términos de grupos ecológicos, las presas principales del tiburón vitaminíco fueron especies demersales-pelágicas y bentónicas, sugiriendo asi que esta especie se estaría alimentando asociada al fondo marino. En términos de tallas consumidas los resultados obtenidos sugieren que esta especie se estaría alimentando de acuerdo a la disponibilidad ambiental. Para el análisis comparativo interespecifico se utilizaron los IRI%, calculados tanto para las especies presa corno para los grupos ecológicos de las presas. Sobre la base de la información obtenida y de los tamaños muestrales, las especies de predadores fueron divididas en especies tróficas. Estas fueron los machos (OFm) y hembras (OFh) del lobo marino de un pelo, el delfin oscuro (LO), los ejemplares inmaduros (RFinm) y maduros (RFmad) de la raya picuda, los individuos inmaduros (SAinm), machos maduros (SAmm) y hembras maduras (SAhm) del tiburón espinoso, la tonina overa (CC) y el tiburón vitaminico (GG). Para determinar si la muestra de cada especie trófica era representativa de la población de la cuál proviene se empleó el método de cuadrados acumulados de Pielou y basado en el indice de diversidad de Brillouin. Asimismo, se empleó este procedimiento para estimar la diversidad trófica poblacional (Hp) de cada especie trófica. Las Hp fueron comparadas empleando la prueba de Kruskal-Wallis y contrastes de a pares. Además, se realizaron análisis de agrupamiento jerárquico utilizando los valores del IRI% obtenidos para las especies presa y los grupos ecológicos de las presas. Los resultados obtenidos indican que todas las muestras analizadas fueron representativas de las poblaciones de las cuáles provienen con la excepción de CC. Por esta razón, esta especie fue excluida del análisis. Asimismo, se detectó un gradiente de Hp, siendo OFh y L0 las especies tróficas que presentaron la máxima y minima Hp respectivamente. Este gradiente de Hp esta positivamente correlacionado con el IRI% de las presas bentónicas y demersales-bentónicas, sugiriendo asi que la diversidad trófica está reflejando la diversidad de los ambientes donde las distintas especies tróficas se alimentan. Asimismo, este resultado indica que todos los predadores estudiados pueden considerarse generalistas y oportunistas en el contexto del dominio del ambiente que utilizan para alimentarse. El análisis de agrupamiento considerando el IRI% de los grupos ecológicos de las presas permitió distinguir 3 grupos de predadores, aquellos que consumen presas demersales-pelágicas (OFm, RFmad, SAmm, SAhm y GG), aquellos donde las presas pelágicas son relevantes (SAinm y LO) y aquellos donde las presas bentónicas y demersales-bentónicas adquieren altas importancias (OFh y RFinm). El análisis de agrupamiento considerando el IRI% de las especies presa pemiitió distinguir 6 grupos de predadores. El grupo “OFm y RFmad”, está caracterizado por una alta importancia de la merluza en su dieta; el grupo “GG” está caracterizado por una distribución relativamente equitativa de la importancia de la merluza, el calamar común y el pulpo colorado; el grupo “RFinm” presenta alta importancia de nototenia, seguida por merluza e isópodos; el grupo “SAinm, SAmm y SAhm” esta asociado a altas importancias de calamar común y a la presencia de ctenóforos; el grupo “LO” esta definido por una alta importancia de anchoita, seguida de calamar común y calamar patagónico; y el grupo “OFh” está definido por la alta importancia del pulpo colorado en la dieta. Los análisis de solapamiento entre estas especies tróficas indican que los solapamientos tróficos son bajos y siempre significativamente diferentes del solapamiento total. De esta forma, estos predadores de alto nivel trófico estarían usando los mismos recursos, abundantes y frecuentes en el medio, pero en formas distintas y dependiendo del hábitat trófico que utilizan. De esta manera, este uso diferencial de los recursos implica una separación de sus nichos tróficos y una disminución de la posibilidad de competencia entre ellas.

Abstract:
The comparative analysis of the food habits between top predator allows the evaluation of how these species use the trophic resources. They also make possible the study of potentially competitive relationships and the role of these predators in the regulation and structure of the community. The marine community of northern and central Patagonia is structured on the tri-trophic system composed by the Argentine anchovy (Engraulis anchoita), the Argentine shortfin squid (Illex argentinus), and Argentine hake (Merluccius hubbsi). Several marine mammals and elasmobranchs use these species as food resources. For this reason, the objective of this work was to analyze comparatively the diet of the South American sea lion (Otaria flavescens), the dusky dolphin (Lagenorhynchus obscurus), the Commerson’s dolphin (Cephalorhynchus commersonii), the beaked skate (Raja flavirostris), the spiny dogfish (Squalus acanthias) and the school shark (Galeorhinus galeus). The diet of these predators was studied by stomach content analysis. The prey remains found in the contents (fish bones and otoliths, cephalopod beaks, crustacean exoskeletons, etc.) were used to identify and quantify the preys. The length and weight of prey at the moment of the ingestion were estimated by alometric regressions. The relative importance of prey species was evaluated by the relative importance index IRI=(PH%+N%)FO%, where PH% is the percent in wet weight, N% is the percent in number, and F0% is the frequency of occurrence of the prey species in the diet. This index was relativized to 100% (IRI%). Intraspecific differences in diet allow the determination of trophospecies within a biological species. These differences were evaluated using the general overlap (GO) and the specific overlap (SO) index. These index were calculated using the occurrences of those prey species which had IRI% values greater than 1% in the total sample of the biological species. Differences in the sizes consumed by the trophospecies were evaluated using the Mann-Whitney test or the Kruskal-Wallis non-parametric one way ANOVA and paired comparisons. The diet of the South American sea lion was studied using samples obtained from animals found dead on the beach and incidentally caught by the fishery. Forty-one prey species were identified from the 59 stomachs analyzed. The most important prey were the Argentine hake, the red octopus (Enteroctopus megalocyathus), the raneya (Raneya brasiliensis), the Patagonian squid (Loligo gahi), and the Argentine anchovy. The differences in the diet associated with the source of sampling (dead on beach or entangled) and sex were evaluated using the GO and SO. Only differences between sexes were found. Females fed mostly on benthic species (red octopus) while males fed mostly on demersal-pelagic species (Argentine hake). These differences were associated with different feeding grounds and/or different home ranges between sexes. The results suggest that females could be feeding in more coastal and shallow waters, while males could be feeding farther in deeper waters. With reference to commercial species, the Argentine hake was consumed mostly in non-commercial sizes (total length <30cm) while the Argentine shortfin squid was eaten mostly in commercial sizes (dorsal mantle length>15cm). Nevertheless, the size frequency distributions of the principal preys suggest that the South American sea lion use the food resources according to their environmental availability. The dusky dolphin diet was studied from a sample of 25 dolphins. Most of this sample was obtained from incidental catches in nocturnal midwater hauls directed to the capture of Argentine red shrimp (Pleoticus muelleri). Intraspecific differences in the diet were not analyzed due the small sample size. The most important prey of the dusky dolphin were the Argentine anchovy, the Argentine shortfin squid, the Patagonian squid, and the Argentine hake. The sizes of prey indicated that the dusky dolphin fed on adult anchovies, primary juveniles of hake, and juveniles of both species of squid. These results indicate that dusky dolphin is a pelagic predator, consuming pelagic species or pelagic stages of demersal species which have schooling behavior. The diet of the beaked skate was studied from a sample of 274 individuals obtained from the incidental catches of the hake fishery. The most important prey were the Argentine hake, the Southern cod (Patagonotothen ramsayi), the Argentine shortfin squid, the isopod (Serolis schythei), the raneya, and the Argentine anchovy. A total of 45 prey species were identified. The overlap analysis indicated no differences in the diet between sexes, but significant differences in the diet between immature and mature individuals. The Southern cod and the Argentine hake were the most important prey for the immature beaked skates, but the crustaceans showed high values of importance too. The most important prey for mature beaked skates were the Argentine hake and the Argentine shortfin squid, while the importance of crustaceans decreased. In general terms, the immature beaked skates consumed preys in sizes significantly smaller than the mature ones. Significant correlations were found between the size of the predator and the size of the prey, considering the immature individuals, the mature individuals or the total sample. This results indicate that the beaked skate change its diet with growth and sexual maturity. The small and immature individuals feed mostly on crustaceans, including fishes in the diet along its growth. When the beaked skate reach the sexual maturity, switch its diet and consume mostly fishes and cephalopods. Also, this diet switching imply a change in the trophic habitat. The immature individuals are benthic predators while the mature ones feed on demersal-pelagic species. The diet of the spiny dogfish was studied from a sample of 132 individuals obtained from the incidental catches of the hake fishery between 1996 and 1998. The food habits were analyzed taking into account the potential differences in diet related to sex and maturity condition. Using the GO and SO index, differences in diet were found between immature individuals (SAinm), mature males (SAmm) and mature females (SAhm). The Argentine shortfin squid, ctenophores, and the Argentine hake were the most important prey for SAinm. ln the cases of SAmm and SAhm, the Argentine shortfin squid and the Argentine hake were the most important prey species. Nevertheless, differences in diet were found between these trophospecies. The SAinm are pelagic predators. After the sexual maturity, the spiny dogfish switch its diet and the mature individuals tend to feed more associated to the bottom, reducing the consumption of ctenophores (IRI%SAinm=18%, IRI%SAmm=4% y IRI%SAhm=0.4%)and increasing the consumption of demersal-pelagic and demersal-benthic species. Previous studies of the diet of the spiny dogfish in the period 1985-1994 indicated that the Argentine hake was the most important prey in the area, followed by the Argentine shortfin squid (García de la Rosa and Sánchez, 1997; García de la Rosa, 1998). In this work, carried out within the period 1996-1998, the order of importance of these prey showed an inversion. The Argentine shortfin squid was the most important prey, followed by the Argentine hake. This result confirms the character of generalist and opportunistic predator of the spiny dogfish, because the abundance of Argentine hake decreased as a oonsequence of overfishing between these study periods. The diet of the Commerson’s dolphin was studied from 9 stomach contents obtained from incidentally caught individuals. Even that this sample is small and only allows a preliminary analysis, the Argentine hake and the Argentine shortfin squid were the most important prey species. The sizes of prey indicate that the Commerson’s dolphin fed on primary juveniles of hake and small juveniles of squid. Then, it is reasonable to consider that this species, in the north and central Patagonia, is a pelagic predator which feed on pelagic species or pelagic stages of species which exhibit schooling behavior. The diet of the school shark was analyzed from 23 stomach contents obtained from individuals incidentally caught in commercial hauls. The most important prey were the Argentine hake, the Argentine shortfin squid and the red octopus, followed by the Southern cod and the Patagonian squid. Considering the ecological groups of the prey, the school shark fed mostly on demersal-pelagic and benthic species, suggesting that this predator feeds associated to the bottom. The sizes of the prey suggest that the school shark consume its prey according to their environmental availability. The inter-specific comparative diet analysis was made using the IRI%, calculated for prey species and ecological groups of prey. Considering the previous results and the sample sizes, the predator species were divided in trophospecies. These trophospecies were the males (OFm) and females (OFh) of the South American sea lion, the dusky dolphin (LO), the immature (RFinm) and mature (RFmad) individuals of the beaked skate, the immature (SAinm), mature males (SAmm) and mature females (SAhm) of the spiny dogfish, the Commerson’s dolphin (CC) and the school shark (GG). In order to determine if the sample size of each trophospecies was representative of the putative population, the Pielou’s pooled quadrat method and the Brillouin’s diversity index were employed. Also, this procedure was used to estimate the population trophic diversity (Hp) for each trophospecies. The Hp were compared using the Kruskal-Wallis test and paired comparisons. Additionally, two cluster analysis were performed using the IRI% for the prey species and the ecological groups of prey. The results indicate that all the sample sizes were representative of the populations, with the exception of the CC sample. For this reason, this species was excluded from the analysis. A gradient of Hp was detected, where OFh and LO were the trophospecies which showed the maximum and minimum values for Hp respectively. This gradient was positively correlated with the IRI% of the benthic and demersal-benthic prey. It suggests that the trophic diversity is reflecting the biological diversity of the environments where the trophospecies are feeding. Moreover, this result indicates that all these predators could be considered as generalist and opportunistic in the context of the environmental patch that they use as trophic habitat. Considering the cluster analysis based on the IRI% of the ecological groups of prey, three groups were identified. These groups were related to the consumption of demersal-pelagic preys (OFm, RFmad, SAmm, SAhm and GG), the high importance of pelagic preys (SAinm and LO), and the high importance of demersal-benthic preys (OFh and RFinm). Considering the IRI% of the prey species, the cluster analysis allowed the identification of 6 groups of predators. The “OFm and RFmad” group was characterized by the high importance of Argentine hake in the diet. The “GG” group was characterized by a relatively even distribution of the importance of Argentine hake, Argentine shortfin squid, and red octopus. The “RFinm” group presented high importance of Southem cod, followed by Argentine hake and isopods. The “SAinm, SAmm and SAhm” was related to the high importance of Argentine shortfin squid and the presence of ctenophores. The “LO” group was defined by the high importance of Argentine anchovy, followed by Argentine shortfin squid and Patagonian squid. The “OFh” group was defined by the high importance of red octopus in the diet. The overlap analysis between trophospecies indicated that the overlaps were low, and always significantly different to the complete overlap. Then, these top predators will used the same, abundant and frequent, trophic resources, but in different ways according to their trophic habitats. These differential uses of the food resources lead to a separation of their trophic niches and to reduce the possibility of ecological competition between them.

"Estudio comparado del papel de la epigenética en distintas fases de la memoria de largo término" (2010). Federman, María Noel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La consolidación de las memorias de largo término (MLT) necesita de la síntesis de novo de ARNm y proteínas. Trabajos recientes proponen la existencia de una nueva fase de consolidación en memorias estables y consolidadas, denominada reconsolidación. Esta nueva fase tiene lugar luego de la reactivación de la MLT inducida por la evocación de la MLT. La reconsolidación de la MLT también depende de eventos transcripcionales y traduccionales. La transcripción génica es controlada por factores de transcripción, cofactores y correpresores. Los cofactores y correpresores regulan la expresión génica mediante su interacción directa con la maquinaria de transcripción basal, remodelando la estructura de la cromatina y/o modificando químicamente las histonas. Una de las modificaciones post-traduccionales de histonas más estudiada es la acetilación. Este proceso es regulado por acetilasas (KATs) y desacetilasas de histonas (KDACs). En este trabajo de tesis se presentan evidencias acerca del papel fundamental que cumple la acetilación de histonas durante la consolidación y reconsolidación de la memoria contexto-señal en el cangrejo Chasmagnathus granulatus, así como también durante la consolidación de la memoria de reconocimiento de objeto novedoso en el ratón Mus musculus. En el cerebro central de Chasmagnathus se observó un aumento en los niveles de acetilación de histona H3 durante la consolidación, 1 hora luego de un entrenamiento fuerte. Asimismo, se observó un incremento similar en la acetilación de la histona H3 durante la reconsolidación, 1 hora después de la reactivación de la memoria. En este modelo, el bloqueo farmacológico de la acción de las KDACs mediante la administración del inhibidor butirato de sodio (NaB), durante la consolidación de una memoria débil, induce la facilitación de esta memoria. No se encontró un efecto facilitador de la memoria mediante la administración de esta droga durante la reconsolidación. Por otro lado, en el hipocampo de Mus musculus, se observó un aumento en los niveles de acetilación de histona H3 durante la consolidación, 1 hora luego de un entrenamiento fuerte, no así luego de entrenamientos de menor magnitud. Además, la memoria fue mejorada mediante la administración intra-hipocampal del inhibidor de KDACs NaB. En conjunto, estos datos sostienen que la acetilación de histonas es un mecanismo fundamental en la consolidación y reconsolidación de la MLT. Este proceso epigenético funcionaría como una característica molecular de memorias fuertes. Este mecanismo molecular regulador de la expresión génica durante la formación de la memoria se encuentra evolutivamente conservado.

Abstract:
Consolidation of long-term memories (MLT) requires de novo synthesis of mRNA and protein. Recent studies suggest the existence of a new consolidationlike phase of stable and already consolidated memories, which is called reconsolidation. This phase occurs by the reactivation of the MLT, induced by memory retrieval. Reconsolidation also depends on transcriptional and translational events. Transcriptional activation is controlled by transcription factors, their cofactors and repressors. Cofactors and repressors can regulate gene expression by interacting with basal transcription machinery, remodeling chromatin structure and/or chemically modifying histones. The acetylation is the most studied modification of histones related to gene expression regulation. This process is regulated by histone acetylases (KATs) and histone deacetylases (KDACs). This thesis presents evidences about the critical role of histone acetylation during consolidation and reconsolidation of context-signal memory in the crab Chasmagnathus granulatus, as well as during consolidation of novel object recognition memory in the mouse Mus musculus. In Chasmagnathus, it is shown an increase in the acetylation level of histone H3 in the central brain during consolidation, 1 hour after a strong training protocol. Moreover, that increased acetylation of histone H3 was also observed during reconsolidation, 1 hour after memory reactivation. In this invertebrate model, pharmacological blockade of the action of KDACs by administration of the inhibitor sodium butyrate during the consolidation of a weak memory, induces memory facilitation. We found no memory enhancement effect by administering the drug during reconsolidation. Moreover, in the hippocampus of Mus musculus, there was an increase in the histone H3 acetylation level during consolidation, 1 hour after a strong training. This change is not observed after weaker training protocols. Furthermore, memory was improved by intra-hippocampal administration of KDACs inhibitor sodium butyrate. Together, these data argue that acetylation of histones is a key mechanism in the consolidation and reconsolidation of the MLT. This epigenetic process functions as a molecular feature of stronger memories. This mechanism regulating gene expression during memory formation is evolutionarily conserved.

"Estudio comparativo de diversas técnicas analíticas aplicadas a la determinación de óxido de cromo" (1942). Cairo, Arturo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La industria de los pigmentos y de los colores minerales en general (para ceramica, pinturas, vidrios, baldosas, tejidos, etc.) prepara muchas composiciones de color verde. Una buena parte de ellas eatán constituidas por óxido de cromo, o sales de este óxido, o por lo menos tienen formando parte de la composición el óxido de cromo o un derivado. El químico tiene que contemplar y resolver a menudo el análisis de los mismos, sea para comprobar su naturaleza o para controlar una fabricación, o establecer si son genunos o "cargados" con sustancias extrañas más baratas o qua le modifican el color, o comprobar si están de acuerdo con algunas especificación pre-establecida, o si cumplen con las condiciones químicas y físicas que pueden convenir las partes de un contrato, o determinar simplemente el tenor de alguna de los componentes. Es indudable que el análisis puede hacerse con exactitud siguiendo las líneas clásicas: pero la determinación total de la composición y hasta sólo del óxido de cromo insume bastante tiempo. Está fuera de duda que los verdes a bace de óxido de cromo deben su valor a la presencia de este componente, justamente con la propiedad de ciertas cualidades físicas apreciables, consideradas más abajo en extenso. Es natural pues que la determinación de su contenido en óxido de cromo sea útil y además corriente durante el examen de estos productos. Ello es cierto principalmente durante un control de fábrica o en los casos en que se analizan para saber si cumplen ciertos requicitos respecto a composición, por ejemplo análisis rutina para fines aduaneros. Por ello es necesario disponer de un método rápido y suficientemente exacto para determinar el óxido de cromo; un método así, si reuniera además la condición de ser económico, resultaría valioso. Entiendo que estas condiciones se presentan en los métodos volumétricos de determinación de cromo y es dentro de ellos que este trabajo trata de encontrarlos. Abarca así el estudio y comparación de varios métodos volumétricos de determinsción de cromo, todos los cuales tienen las características (derivadas lógicamente de la naturaleza del material al cual se desea aplicarlos) de comenzar con la solubilización de aquel, con la simultánea o posterior transformación del cromo en cromato, seguido de la medición de éste.

"Estudio comparativo de estructura, espectroscopía y reactividad en especies mono- y oligo- nucleares conteniendo fragmentos que incorporan NO y/o CO" (2015-06-12). Marcolongo, Juan Pablo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo de tesis se presenta un estudio comparativo de sistemas moleculares que poseen coordinadas las moléculas isoelectrónicas CO y NO+. Se explora un conjunto de sistemas moleculares consistentes en la unidad fundamental trans-{RuII(py)4}2+ (py = piridina) y otros sistemas de menor simetría basados en el fragmento {RuII(tmtacn)(bpy)}2+ (tmtacn = N,N’,N’’- trimetil-1,4,7-triazaciclononano ; bpy = 2,2’-bipiridina). Se generan de esta manera sistemas moleculares en donde el diferente grado de interacción π entre los ligandos aceptores y el centro metálico induce variaciones graduales en las propiedades químicas y espectroscópicas de los sistemas presentados. El estudio de la estructura electrónica de estas especies se enmarca en el contexto de un extenso análisis comparativo con sistemas relacionados, y permite poner a prueba herramientas de cálculo desarrolladas por nuestro grupo de trabajo mediante las cuales se cuantifican magnitudes tales como la donación σ y la retrodonación π presente entre los ligandos incorporados y el fragmento metálico para los diferentes casos. Se estudia la reactividad diferencial de las especies estudiadas y de sistemas binucleares que las contienen haciendo foco en sus propiedades fotoquímicas. Para ello se exploran los procesos que conllevan a la fotoliberación de ligandos en base a experimentos de fotólisis estacionaria, complementados con cálculos de DFT de los estados excitados que se presumen responsables de los procesos y analizando la estabilidad térmica y fotoquímica de los productos formados. El tratamiento de los datos en estos experimentos se realiza empleando metodologías de análisis a múltiples longitudes de onda desarrolladas por nuestro grupo de trabajo, y representa una estrategia novedosa para la obtención de rendimientos cuánticos.

Abstract:
This Manuscript reports a comparative study of molecular systems containing the isoelectronic fragments CO and NO+. The species are derived either from trans-{RuII(py)4}2+ (py = pyridine) or the less symmetric {RuII(tmtacn)(bpy)}2+ (tmtacn = N,N’,N’’-trimethyl-1,4,7- triazacyclononane ; bpy = 2,2’-bipyridine). These fragments yield coordination compounds with different degree of π-interaction between the acceptor CO and NO+ moieties and metal fragment, with impact on their spectroscopy and chemical reactivity. To deepen our understanding of the electronic structure picture derived from the DFT computations, we implement a toolbox that allows for the quantification of several indicators, for instance the magnitude of the σ- donation exerted by the ligands and the π-backbonding from the metal center. The experiments, which involve the mononuclear systems described above and other dinuclear compounds derived from the latter, are focused on those reactions that originate from the absorption of light. Stationary photolysis experiments, monitored by means of the spectral changes along time employing a novel multi-wavelength approach allow identifying the different processes and photoproducts, also yielding the quantum efficiency of the different steps. A theoretical investigation of the lowest energy excited state presumably involved in the photo- processes complements the experiments and allows rationalizing the variations observed in the series of compounds under study.

"Estudio comparativo de la diversidad genética de germoplasma comercial de soja (Glycine max (L.) Merr.) y variedades tradicionales" (2002). Vicario, Ana Laura. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La soja (Glycine max (L) Merr.) es uno de los cultivos más importantes para los cuales la variabilidad genética es particularmente limitada debido a que es exótico en los principales países productores (USA, Brasil y Argentina). Los objetivos propuestos dentro del marco de esta tesis fueron la caracterización y cuantificación de la variabilidad genética del germoplasma de soja de uno de sus sitios de origen (China) para su comparación con el argentino y el boliviano mediante el uso de marcadores moleculares y, estudiar la posibilidad de utilizar a los SSR en el registro de variedades de soja en Argentina (y en general), específicamente mediante su adaptación al análisis DHE. Se utilizaron más de 120 genotipos que se analizaron con hasta 33 microsatélites. Como resultado se observó que la diversidad de las variedades comerciales de soja es menor que en el caso de variedades tradicionales. Las variedades chinas mostraron mayor número de alelos por locus, mayores valores de similitud e índices de diversidad genética. La mayoría de las variedades argentinas se agruparon separadas de las chinas, sin embargo algunas se relacionaron con estas últimas mostrando que hubo introgresiones de germoplasma chino en el argentino. Se analizaron 10 caracteres morfológicos para las variedades chinas a fin de compararlos con los datos de microsatélites, evidenciándose que cada tipo de marcador explica las relaciones entre las variedades de diferente manera. Ninguno de ellos mostró correlación con los requerimientos fotoperiódicos de las variedades chinas. Los análisis de homogeneidad y estabilidad muestran que es necesario establecer el número mínimo de marcadores a estudiar y cuáles serán éstos antes de aplicarlos en estudios de DHE, ya que las variaciones de los tipos alélicos de los SSR en el tiempo y el carácter selectivamente neutro de estos marcadores pueden modificar los umbrales de diferenciabilidad entre las variedades.

Abstract:
Soybean (Gycine max (L) Merr.) is one of the world most important crops for which the genetic variability is particularly limited, because it is exotic for the most important producing countries (USA, Brazil and Argentina). The principal aims of this work were to characterize and quantify the genetic variability of soybean germplasm form China (center of origin), Argentina and Bolivia using microsatellites markers and to test the possibility of using this kind of markers for DUS testing purposes. More than 120 genotypes were analyzed with up to 33 microsatellites. Commercial soybean varieties showed lower variability than traditional ones. Traditional soybean varieties showed larger allele number per locus, similarity index and diversity values. Most of Argentine varieties clustered separately form Chinese ones, but some mixes were found showing that there were Chinese introgressions into Argentine germplasm. Ten morphological traits were analyzed for Chinese germplasm to compare their genetic diversity description with that derived from micorsatellite profiles showing that different markers explain variety relationships in a different way. None of markers showed correlation with photoperiodic requirements among the Chinese varieties. The homogeneity and stability testing showed that it is needed to carefully establish a minimum number of very well characterized markers before their application to DUS testing, because variability in the allelic SSR profiles and its generally neutral selective nature could modify the distinguishing ability between varieties.

"Estudio comparativo de la variabilidad del potencial toxicogénico de cepas de Fusarium graminearum aislados de trigo, cebada y maíz cultivados en Argentina" (2014-09-24). Sepúlveda Díaz, Mónica Leonor. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El complejo de la especie Fusarium graminearum (FGSC) infecta el trigo, cebada, maíz y otros cultivos de cereales en todo el mundo, causando enfermedades como la Fusariosis de la espiga (FHB) y Pudrición de la mazorca (GER). Estas enfermedades reducen significativamente el rendimiento de grano y su calidad. Además, ocasionan problemas de seguridad alimentaria porque el grano infectado suele estar contaminado con micotoxinas que inhiben la síntesis de proteínas y producir complicaciones de salud en los seres humanos y animales. Se obtuvieron aislamientos de F. graminearum sembrando granos de trigo, cebada y maíz desinfectados superficialmente en medio Dicloran Cloranfenicol Malta Agar (DCMA), incubado a 25°C de 3 a 5 días. Para su identificación los aislamientos fueron sembrados en medio Spezieller Nährstoffarmer Agar (SNA), incubado a 25°C de 5 a 6 días. Las toxinas se extrajeron con una mezcla de acetonitrilo:acetato de etilo:agua (50:41:9, v/v) realizándose el clean-up en una columna con carbón activado:alúmina neutra:celite. La detección de tricotecenos se realizó por CG con detector de captura de electrones (ECD), previa derivatización con anhídrido trifluoroacético. Además los tricotecenos fueron confirmados por CG-MS. Todos los aislamientos estudiados produjeron al menos una sola toxina y la mayoría de ellos produjeron dos o más. NIV fue la toxina producida en menor cantidad y por un menor número de aislamientos. Casi la totalidad de los aislamientos produjeron 15-ADON en mayor cantidad que NIV, pero en menor proporción que 3-ADON y DON. Una gran proporción de aislamientos fue capaz de sintetizar 3-ADON en cantidades mucho mayores que las de las otras toxinas. Los aislamientos de maíz fueron los que produjeron los máximos valores de DON (290 μg/g) y 3-ADON (9218 μg/g). Los perfiles de producción de toxinas variaron según el sustrato de aislamiento. En trigo fue ampliamente dominante el perfil DON 3- y 15-ADON (89%) seguido por DON 3-ADON (8%) y DON 15-ADON (1,33%). En cebada los perfiles dominantes fueron los mismos que para trigo, pero con diferencias en las proporciones de incidencia DON 3- y 15-ADON (47%) y DON 3-ADON (33%). No se encontró el perfil DON 15-ADON en cebada. En maíz el perfil de mayor incidencia fue DON 3-ADON (36%) seguido por DON 3- y 15-ADON (30%). El perfil DON 15-ADON estuvo presente en maíz en un número mayor de aislamientos (10%) que en trigo y en cebada. Los perfiles que incluyen NIV se encontraron en cebada (NIV DON 3- y 15-ADON) y en maíz (NIV DON 15-ADON). Los perfiles NIV DON 3-ADON, NIV 3- y 15-ADON, NIV 15-ADON, 3- y 15-ADON, 3- ADON, DON presentaron una incidencia baja (menor al 6%). En todas las muestras se encontró 3-ADON en altas cantidades, seguido por DON. La mayor acumulación de toxina se produjo en las muestras de trigo. NIV y 15-ADON estaban presentes en menor cantidad. En todos los casos 15-ADON fue encontrado en valores mucho más bajos que 3-ADON. El monitoreo de las cosechas y el estudio de la influencia de los factores climáticos permitirá predecir el riesgo micotoxicológico al que están expuestos los cultivos.

Abstract:
The Fusarium graminearum species complex (FGSC) infects wheat, barley, maize and other cereal crops worldwide, causing diseases such as Fusarium head blight (FHB) and ear rot (GER). These diseases significantly reduce grain yield and quality. Moreover, they cause food safety problems because the infected grains are often contaminated with mycotoxins that inhibit protein synthesis and cause in human and animal diseases complications. F. graminearum isolates were obtained from wheat, barley and maize grains superficially disinfected, directly planted on Dicloran Chloramphenicol Malt Agar (DCMA), and incubated at 25°C for 3 to 5 days. For identification, the isolates were grown in medium Spezieller Nährstoffarmer Agar (SNA) and incubated at 25°C for 5-6 days. Toxins were extracted with acetonitrile:ethyl acetate:water (50:41:9, v/v) performing the clean-up in a column with activated charcoal:neutral alumina:celite. Detection of trichothecenes was performed by GC with electron capture detector (ECD) after derivatization with trifluoroacetic anhydride. Furthermore trichothecenes were confirmed by GC-MS. All isolates were able to synthesize at least one toxin and most of them two or more. NIV was the toxin produced in a lower proportion and by few isolates. Almost all of the isolates produced 15-ADON in greater proportion than NIV, but to a lesser extent than 3-ADON and DON. A high proportion of isolates were able to synthesize 3- ADON in much larger amounts than of the other toxins. Corn isolates were which accumulated the maximum values of DON (290 μg/g) and 3-ADON (9218 μg/g). The toxin production profiles varied with the isolation substrate. In wheat the DON 3- and 15-ADON (89%) was prevalent, followed by the DON 3-ADON (8%) and DON 15-ADON (1,33%) profiles. In barley the dominant profiles were the same as for wheat, but with differences in the incidence rates, DON 3- and 15-ADON (47%) and DON 3-ADON (33%). No profile DON 15-ADON was found in barley. In maize the profile of highest incidence was DON 3-ADON (36%) followed by DON 3- and 15- ADON (30%). The profile DON 15-ADON was present in corn (10%) in a greater proportion than in wheat and barley isolates. Profiles including NIV were found in barley (NIV DON 3- and 15-ADON) and maize (NIV DON 15-ADON). Profiles NIV DON 3-ADON, NIV 3- and 15-ADON, NIV 15-ADON, 3- and 15-ADON, 3-ADON, DON showed a low incidence (less than 6%). In all samples 3-ADON was found in high amounts, followed by DON. The greatest accumulation of toxin occurred in wheat samples. NIV and 15-ADON were present in smaller amounts. In all cases, 15-ADON was found at much lower values than 3- ADON. Crop monitoring and studies of the influence of climatic factors will predict the mycotoxicological risk at what crops are exposed.

"Estudio comparativo de las condiciones ambientales que influencian la producción de tricotecenos en cepas de Fusarium graminearum aislados de trigo cultivado en Argentina" (2014-04-29). Ramírez Albuquerque, L. Diana. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El trigo es uno de los cultivos de mayor importancia en Argentina ya sea para consumo local o como producto de exportación. Una de las principales enfermedades que afectan el cultivo es la “Fusariosis de la Espiga de Trigo” (FET). Es una enfermedad endémica en nuestro país causada por Fusarium graminearum, el agente más común de la Fusariosis de la espiga (FET) en muchas partes el mundo. La infección está fuertemente influenciada por parámetros ambientales y ocurre principalmente cuando se dan las condiciones favorables de humedad y temperatura durante la antesis o floración del trigo. Esta destructiva enfermedad afecta al trigo, cebada y otros granos pequeños y tiene la capacidad de destruir cultivos, causando grandes pérdidas económicas debido a la reducción de la calidad de los granos pudiéndose además acumular niveles significativos de micotoxinas, como los tricotecenos. La presente Tesis abarcó el estudio de la influencia de la temperatura y la aw sobre el crecimiento y la biosíntesis de micotoxinas utilizando una cepa de Fusarium graminearum productora de deoxinivalenol (DON), 3- y 15-acetildeoxinivalenol (3- y 15-ADON). El análisis en este estudio mostró que los factores ambientales tuvieron gran influencia en la síntesis relativa de los derivados acetilados, siendo esta influencia más marcada en el caso de la temperatura. Las interacciones entre estos factores: aw, temperatura y el tiempo de incubación, resultaron significativos sobre la producción de DON y 3-ADON. En cambio, la aw no produjo un efecto significativo sobre la producción de 15-ADON, aunque sí lo hicieron la temperatura, y el tiempo de incubación, así como sus interacciones. Las diferentes condiciones estudiadas mostraron que, para DON, no existen diferencias significativas entre las cantidades producidas en las condiciones óptimas (0.99 aw, 30 ºC, 14 días) y las observadas a la misma aw a 25 y 20 ºC, luego de 14 días de incubación, o la producción a 0,95 aw, 25 ºC y 21 días de incubación. El resto de las condiciones resultaron en una acumulación significativamente menor de DON. En cambio, para 3-ADON, las condiciones de máxima producción (0,99 aw, 30 ºC y 21 días) resultaron en una cantidad de toxina significativamente mayor que para el resto de las condiciones estudiadas. Lo mismo se observó para 15-ADON, para el cual las condiciones óptimas de producción fueron de 0,99 aw, 10 ºC y 7 días de incubación y la cantidad de toxina acumulada difirió significativamente con la que se detectó en el resto de las condiciones de estudio. De acuerdo a estudios realizados los últimos años, se demostró que el quimiotipo 3- ADON está desplazando rápidamente al quimiotipo 15-ADON en poblaciones de F. graminearum del oeste de Canadá. Estudios efectuados en invernadero demostraron que aislamientos pertenecientes al quimiotipo 3-ADON producían concentraciones de DON superiores a los aislamientos pertenecientes al quimiotipo 15-ADON, lo cual es motivo de preocupación para los productores de granos y las industrias relacionadas. Tanto la distribución geográfica de las especies como de los quimiotipos está influenciada fuertemente por los factores climáticos, el calentamiento global tendrá entonces un gran impacto en esta distribución. Por este motivo, el estudio del efecto de los factores climáticos (temperatura y actividad acuosa) sobre la producción relativa de tricotecenos por Fusarium graminearum permitirá predecir el riesgo al que están expuestos los cultivos susceptibles en este nuevo escenario.

Abstract:
Wheat is one of the most important crops in Argentina, either for local consumption or export. One of the major diseases affecting the crop is the Fusarium Head Blight (FHB). It is an endemic disease in our country caused by Fusarium graminearum, the most common agent of Fusarium head blight (FHB) around the world. The infection is strongly influenced by environmental parameters and occurs mostly when there are favorable conditions of moisture and temperature during wheat anthesis or flowering. This destructive disease affects wheat, barley and other small grains and has the capability of destroying crops, causing great economic losses due to reduced grain quality, and accumulating significant levels of mycotoxins such as trichothecenes. This thesis involved the study of the influence of temperature and aw on growth and mycotoxins biosynthesis, using a strain of Fusarium graminearum producing deoxynivalenol (DON), 3- and 15 acetyldeoxynivalenol (3- and 15-ADON). The analyses showed that environmental factors greatly influenced the relative synthesis of the acetylated derivatives, this influence being more pronounced in the case of temperature. The interactions between these factors: aw, temperature and incubation time were significant on DON production and 3-ADON. However, aw showed no significant effect on the production of 15-ADON, although temperature and incubation time incubation were significant, as well as their interactions. The different conditions studied showed that there are no significant differences between the amount of DON produced under optimal conditions (0.99 aw, 30 °C, 14 days) and those at the same aw, 25 and 20 °C, after 14 days of incubation, or 0.95 aw, 25 °C and 21 days of incubation. The rest of the conditions resulted in significantly lower accumulation of DON. In contrast, for 3-ADON, the maximum production conditions (0.99 aw, 30 and 21 days) resulted in a significantly greater amount of toxin than for the rest of the conditions studied. The same effect was observed for 15-ADON, for which the optimal production conditions were 0.99 aw, 10 °C and 7 days of incubation, and the amount of accumulated toxin differed significantly with those detected in the rest of the studied environmental conditions. According to studies conducted in recent years, it was demonstrated that the 3-ADON chemotype is rapidly displacing the 15-ADON chemotype of F. graminearum populations from western Canada. Greenhouse studies showed that isolates belonging to 3-ADON chemotype produced higher concentrations of DON than isolates belonging to the 15-ADON chemotype, which is of concern to grain producers and related industries. Both the geographical distribution of species and chemotypes is strongly influenced by climatic factors, and thus global warming will have a major impact on this distribution. For this reason, the study of the effect of climatic factors (temperature and water activity) on the relative production of trichothecenes by Fusarium graminearum will allow to predict the risk to which susceptible crops are exposed in this new scenario.

"Estudio comparativo de los métodos de obtención de dehidroandrosterona" (1941). Schreyer, Sarah. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio comparativo filogenético de los patrones de variación vocal y de coloración del plumaje en los Cardinalinos Azules (Passeriformes: Cardinalidae)" (2016-03-23). García, Natalia Cristina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El canto y la coloración del plumaje son dos de las formas de comunicación más explotadas por los paseriformes. El objetivo de este proyecto doctoral fue estudiar los patrones de variación vocal y de coloración del plumaje en un grupo de paseriformes oscines cercanamente emparentados, los Cardinalinos Azules. Se pusieron a prueba diferentes hipótesis sobre la influencia de diversos factores -como la morfología y el hábitat- en la evolución de dichas señales. Entre los Cardinalinos Azules, se encontró un notable grado de diversificación en estos caracteres, y niveles variables de diferenciación entre machos y hembras en el caso de la coloración. El tamaño corporal y del pico explicarían parte de las diferencias vocales entre las especies, y el tamaño corporal también estaría relacionado con el grado de dicromatismo sexual. Las características del hábitat, en cambio, no habrían tenido efecto en la evolución del canto o de la coloración del plumaje dentro del grupo en estudio. A su vez, el grado de complejidad del canto y de la coloración habrían evolucionado de manera independiente. Por último, la diversificación en estos caracteres a nivel intraespecífico en dos representantes del clado, Cyanocompsa cyanoides y C. brissonii, mostró diferentes grados de congruencia con la variación geográfica en marcadores moleculares. De esta manera, este estudio integrativo permite un mejor entendimiento del rol de diferentes factores en la evolución de señales acústicas y visuales, a la vez que aporta evidencia para resolver el status taxonómico de representantes de la avifauna neotropical, lo que es fundamental para una mejor comprensión de su historia evolutiva.

Abstract:
Song and plumage coloration are two of the most exploited forms of communication among passerines. The objective of this doctoral project was to study the patterns of vocal and plumage color variation in a group of closely related oscines, the Blue Clade of the Cardinalidae family. Different hypotheses about the influence of factors such as morphology and habitat in the evolution of acoustic and visual signals were tested. Among the Blue Clade, a remarkable degree of diversification in these characters was found, as well as varying levels of differentiation between males and females in the case of plumage coloration. Body and beak sizes partially explain vocal differences between species, and body size would also be related to the degree of sexual dichromatism. Habitat characteristics, however, would have had no effect on the evolution of song or plumage coloration within the study group. In turn, the degrees of complexity of song and plumage coloration evolved independently. Finally, diversification in these characters at the intraspecific level in two representatives of the clade, Cyanocompsa cyanoides and C. brissonii, showed varying degrees of consistency with geographical variation in molecular markers. This integrative study allows a better understanding of the role of different factors in the evolution of acoustic and visual signals. It also provides evidence to help resolve the taxonomic status of representatives of the neotropical avifauna, which is essential for a better understanding of their evolutionary history.

"Estudio computacional de la relación estructura-función en globinas" (2011). Boechi, Leonardo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las globinas son una familia de proteínas solubles, que poseen un grupo hemo unido generalmente de manera no covalente a la proteína. Sus representante má famosos son la hemoglobina y la mioglobina, responsables del transporte y almacenamiento de oxígeno en mamíferos Las globinas se clasifican en varias subfamilias, una de ellas se denominan hemoglobinas truncadas (trHb) y se las ha encontrado en plantas, hongos y bacterias. En muchos casos pertenecen a microorganismos patógenos para el hombre como M. tuberculosis, M. leprae, y C jejuni entre otros. Las globinas poseen la capacidad de reaccionar frente a ligandos diatómicos (O 2, NO, etc) que les permite actuar como reservorios de dichos ligandos, transporte o detección de los mismos o realizando reacciones de óxido reducción en procesos fundamentales para la supervivencia de los microorganismos patógenos en los organismos donde se alojan. Por esta razón, en la presente tesis se estudiaron los determinantes moleculares que regulan la reactividad de las globinas (fundamentalmente trHbs) frente a ligandos diatómicos, utilizando métodos de simulación computacional. Por un lado se realizaron estudios de los diferentes mecanismos mediante los cuales se regula la migración de los ligandos hacia el sitio activo. Y por el otro, los mecanismos de estabilización de los ligandos cuando se encuentran coordinados al grupo hemo, dentro de la proteína. El estudio de ambos procesos mencionados, resulta fundamental para comprender la función que estas proteínas desempeña en los organismos a los cuales pertenecen. Con el objeto de alcanzar una visión global de los fenómenos estudiados, se investigaron diferentes miembros de la misma sub familia, emparentados evolutivamente entre si. De esta forma se logró una comprensión más amplia de cada uno de los fenómenos. Las herramientas computacionales utilizadas están basadas principalmente en dos metodologías: aquellas basadas en la mecánica clásica para analizar procesos dinámicos de los sistemas, combinado con un novedoso esquema (teorema de Jarzynski) que permite obtener perfiles de energía libre de los procesos; y esquemas híbridos clásico/cuánticos (QM/MM) que permiten simular reactividad química en sistemas grandes como son las hemoproteínas. Dado que las simulaciones computacionales son herramientas muy poderosas cuando se las encuentran combinadas con resultados experimentales, se ha trabajado en colaboración con grupos experimentales para potenciar los alcances de las simulaciones, y a su vez validar los modelos utilizados. Los resultados de la presente tesis, permitieron comprender la estructura de canales internos que poseen las globinas; así como también, la dinámica del sitio activo que regula la afinidad y la reactividad en las mismas. En particular, se reconciliaron resultados aparentemente contradictorios, respecto de la relación entre la estructura de canales internos y las constantes cinéticas de asociación; se identificaron residuos críticos altamente conservados en esta familia, que resultan fundamentales para los procesos de migración de ligandos; se encontraron y caracterizaron fenómenos de hexacoordinación interna dual en una trHb de una bacteria antártica; se caracterizó la estabilización de diferentes ligandos (CO, O2 SH, F) en estas proteínas; y finalmente se encontró una relación muy importante entre la protonación de un residuo de histidina y la migración de O2 en la mioglobina.

Abstract:
Globins are soluble proteins that have a heme prosthetic group non covalently bound to the protein matrix. The most important members are hemoglobin and myoglobin, which are responsible for the oxygen transport and storage in mammals. The globin family is classified in different sub families: one of them is called truncated hemoglobin (trHb) and its members are widely distributed in plants, fungi and bacteria kingdoms. In many cases, these proteins belong to pathogen microorganism like M. tuberculosis, M. leprae, y C jejuni among others. These proteins are able to react with diatomic ligands like O2 and NO. This confers upon them the ability to act as storage, transporters or ligand detectors. In many cases they are also involved in redox processes which are critical for the survival of the microorganism in the host organism. In the present Thesis we studied the molecular basis of globins reactivity (mainly trHbs) with diatomic ligands. Specifically, we studied both the different mechanisms used by these proteins to control ligand migration to the active site, and the stabilization of the coordinated ligand once the ligand is inside. These processes are crucial to understand the role of these proteins in the organisms to which they belong. In order to reach a global vision of the processes, we studied different members of the same family, which are evolutively related. The computational tools used in the present Thesis are mainly based on two approaches. Those based on classical mechanics, to study processes associated with the dynamics of the system, combined with “State of the Art” techniques (Jarzynski's equation) that provide us with the free energy profile of the process desired. We also used a novel quantum/classical approach (QM/MM) reactive processes in large systems. Since computer simulations are very powerful tools combined with experimental results, different collaborations were made with experimental groups to reach a better understanding of the processes, and even as an important way to validate our models. The overall results provide new insight into the structure of internal tunnels for ligand migration, as well as the active site dynamics. In particular, we conciliated controversial results about the relationship of the structure of internal tunnels and the association kinetic constants; we identified critical residues highly conserved in this family involved in the ligand migration process; we found internal hexacoordination phenomena in an antarctic bacteria trHb; we also characterized the stabilization of different ligands such as CO, O2 SH, F coordinated to the heme group; and finally we found an important relationship between the protonation of a particular histidine and the O2 uptake in myoglobin

"Estudio computacional de reacciones químicas en entornos acuosos" (2002). Elola, María Dolores. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo hemos estudiado aspectos dinámicos y de equilibrio relacionados con procesos reactivos que toman lugar en agregados acuosos, mediante técnicas de simulación de Dinámica Molecular. La metodología empleada consiste en un esquema mixto cuántico-clásico, que involucra un cálculo de estructura electrónica sobre una porción del sistema -aquella en la cual la densidad electrónica cambia sustancialmente durante la reacción- en conjunto con potenciales empíricos de campo medio para modelar el solvente. Investigamos en primer lugar la dinamica del desprendimiento electrónico en Ioduro producido por una excitación electrónica, en agregados acuosos, Iˉ(H2O)n, con N entre 6 y 100. Nuestro objetivo estuvo focalizada en el análisis de los efectos térmicos y de tamaño sobre los mecanismos microscópicos que gobiernan la reacción de desprendimiento. Nuestras simulaciones indican que la excitación electrónica genera estados electrónicos altamente difusos en los agregados más pequeños, favoreciendo la estabilización del solvente. Los tiempos característicos del proceso de relajación del solvente resultaron ser del orden de 0.05-0.1 p8. En segundo lugar estudiamos la reacción de disociación de ácido nítrico en agregados acuosos, HNO3(H20)n. Para ello utilizamos la metodología mixta, resolviendo el problema de estructura electrónica a través del formalismo de los Funcionales de la Densidad (DFT). Un aspecto importante de nuestra motivación fue saber el número mínimo de moléculas de agua necesarias para convertir la disociación del ácido en un proceso espontáneo. Al respecto, nuestras simulaciones muestran la existencia de un valor umbral por debajo del cual la disociación no ocurre, que se encuentra entre 3 ≤ N ≤ 10. Finalmente estudiamos la dinamica de la reacción de transferencia de protón entre ácido bromhídrico y el ion hidroxilo que toma lugar en agregados acuosos pequeños, con N = 2 y 6 moléculas de agua. En este último caso agregamos un ingrediente más en la modelización del solvente, incorporando explícitamente los efectos de polarización.

Abstract:
We have studied dynamical and equilibrium aspects of reactive processes taking place in aqueous clusters, using Molecular Dynamics techniques. The methodology employed consists in a mixed quantum-classical scheme that combines an electronic structure calculation for a portion of the system —where there is a substantial change in the electronic density- with empirical mean field potentials for the solvent. We have first investigated the solvation dynamics following electron photodetachment from Iodide in aqueous clusters, Iˉ(H2O)n, with N ranging between 6 and 100. Our main interest was focused on the analysis of thermal and size effects on the microscopic mechanisms that drive the electron photodetachment. Our simulations seem to indicate that the electronic excitation generates highly diffuse states in the smaller clusters, favoring solvent stabilization. The characteristic times of the solvent relaxation process were of the order of 0.05-0.1 ps. We have also studied the dissociation of nitric acid in aqueous clusters, HN03(H20)n, using a mixed quantum-classical methodology. The electronic structure was solved within the Density Functional formalism (DFT). A key question was how many water molecules are necessary to bring the acid dissociation of HN03 a spontaneous process? In this sense, our simulations show the existence of a threshold size of water molecules below which the reaction is not observed, in an intermediate value between 3 ≤ N ≤ 10. Finally we have studied the proton transfer reaction of bromidic acid with the hydroxile group taking place in small clusters, containing N = 2 and 6 water molecules. In this case we have included explicitly the solvent polarization degrees of freedom in the classical force field potentials.

"Estudio cuali y cuantitativo de los hongos del suelo del bosque de Nothofagus dombeyi" (1977). Godeas, Alicia Margarita. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio cuantitativo de dos nuevos ritmos bioeléctricos de los bulbos olfatorios registrados en el Armadillo Sudamericano, Chaetophractus villosus (Mammalia, Dasypodidae)" (1997). Cervino, Claudio Osvaldo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Un nuevo ritmo bioeléctrico del bulbo olfatorio, registrado únicamente durante la vigilia, fue detectado en este animal. Para que dicho ritmo se manifieste son necesarias las aferencias periférica y central. Por medio del análisis aplicando la Transformada Rápida de Fourier (FFT) se caracterizó al ritmo en condiciones normales y bajo la influencia del clorhidrato de ketamina, etanol y melatonina. Estas drogas incrementaron la amplitud y duración del ritmo en el EEG. Se discuten los posibles mecanismos intervinientes en su producción y el significado neurofisiológico de su aparición. Se detectaron diferencias entre sexos en cuanto a las caraterísticas de dicho ritmo. Se describe también la expresión cuali y cuantitativa de otro ritmo bioeléctrico del bulbo olfatorio no descripto hasta ahora y solo visto durante el sueño lento y paradójico. Este ritmo es producido exclusivamente por influencias centrífugas. Su banda frecuencial coincide con la actividad sinusoidal inducida. Se sugiere que esta actividad puede ser útil en la investigación de los mecanismos productores de las alucinaciones olfatorias.

Abstract:
A novel bioelectrical rhythm of the olfactory bulb, exclusively observed during wakefulness, was detected in this animal. In order to appear it needs the contribution of both peripheral and centrifugal influences. A Fast Fourier Transform (FFT) analysis was performed to characterize this rhythm in normal conditions and under the influence of ketamine hydrochloride, ethanol and melatonin. These substances greatly increase the amplitude and percentage of time occupied by the rhythm. Possible mechanisms of action are discussed together with the neurophysiological significance of its appearance. Sexual differences regarding the characteristics of the rhythm were detected. The qualitative and quantitative expression of another rhythm not previously known and only seen during both slow an paradoxical sleep are described. This rhythm is exclusively elicited by centrifugal influences. Its frequency appears within the same band than the classical Adrian's induced waves. We suggest that this activity could useful for research on the mechanisms of olfactory hallucinations.

"Estudio cuántico y semiclásico de billares clásicamente caóticos" (1995). Vergini, Eduardo Germán. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Luego de casi un siglo, la relación entre la mecánica cuántica y la mecánica clásica no es aún completamente entendida. Esta incomprensión se extiende a la fundamentación de la cuántica: no se sabe en general si o cómo es posible especificar unívocamente la mecánica cuántica de un sistema cuya mecánica clásica es dada: Sin embargo, este problema fundamental de cuantización no es el que ocupa al "Caos Cuántico”. En realidad, el estudio se realiza habitualmente sobre sistemas bastante simples, donde se sabe plantear la mecánica cuántica. En estos sistemas, se intenta entender el límite semiclásico; es decir, el comportamiento de las funciones de onda y los niveles de energía cuando la constante de Planck Ћ tiende a cero. Este límite no es igual al límite clásico, para el cual Ћ es precisamente cero pues, en general, las funciones de onda cuánticas no son analíticas en Ћ para Ћ → 0 . Es así que el límite semiclásico no se puede relacionar al límite clásico, teoría de perturbaciones mediante; por el contrario, retiene una rica e interesante estructura en su seno. No obstante, debe haber una suerte de principio de correspondencia, de acuerdo con el cual, el límite semiclásico refleje la naturaleza del movimiento clásico subyacente. Lo que ha quedado bien establecido en estas últimas décadas de exitosas y prolíferas investigaciones en la materia, es que la mecánica semiclásica depende crucialmente del tipo de movimiento clásico; si éste es regular (predecible, integrable) o irregular (impredecible, caótico, no integrable). Desde luego, estos problemas tienen una amplia variedad de aplicaciones en mecánica cuántica, y más generalmente en todas las ramas de la física y matemática aplicada que trabajen en el límite de onda corta. Por ejemplo, el espectro de vibración de moléculas no simétricas, los modos de oscilación acústica en habitaciones con formas típicas y la óptica de las guías de onda . Sin embargo, sólo nos ocuparemos de los aspectos más formales del problema, sin buscar aliados que nos resguarden de revelar nuestro más oculto propósito, el entendimiento. Los sistemas que vamos a estudiar son los billares, y como su nombre lo indica estamos hablando de "billares", aunque nos vamos a permitir cambiar el contorno rectangular típico por formas menos recomendables para los ases de las tres bandas. Entre los sistemas hamiltonianos conservativos, los biliares planos constituyen una subcategoría que ha recibido especial atención. En primer lugar, a nivel clásico cubren un amplio espectro de comportamientos, desde completamente integrables a totalmente caóticos, pudiéndose observar además la estructura tan intrincada que presenta la transición. En segundo lugar, son más simples que los hamiltonianos suaves pues la interacción se concentra en el borde del billar y esto permite plantear de manera natural una formulación unidimensional. El trabajo de investigación presentado en esta tesis ha consistido en el estudio de métodos de cuantización, que permitan obtener las propiedades estacionarias de billares planos en el límite semiclásico. Es decir, obtener autoestados con longitudes de onda varios órdenes de magnitud inferior a la longitud típica del sistema. Disponer de tal herramienta nos permitirá estudiar efectos de difracción en el borde del billar y efectos de localización alrededor de trayectorias periódicas, en regiones de energía muy elevadas. Los efectos de difracción son tenidos en cuenta mediante la incorporación de ondas planas evanescentes a las soluciones estacionarias del sistema. Las ondas evanescentes se caracterizan por oscilar rápidamente según una dirección y tener un decaimiento exponencial en la dirección ortogonal. Se estudiará la posibilidad de representar dichas soluciones como superposición de ondas planas reales. Dicha representación constituye una generalización en dos dimensiones de funciones superoscilantes de una variable. Hemos observado las autofunciones en la representación estelar, recientemente introducida en este contexto. Los ceros de esta representación caracterizan completamente a las funciones de onda. Verificamos ciertas conjeturas respecto a la distribución de ceros en la regiones clásicamente permitida y prohibida. Los efectos de localización conocidos con el nombre de "scars" se caracterizan por un aumento de la densidad de probabilidad, en un entorno de ciertas trayectorias periódicas inestables. Según una conjetura de Berry y Voros, dichos efectos tienden a desaparecer en el límite semiclásico. Se estudiará la validez de dicha conjetura. En este trabajo de investigación hemos obtenido dos resultados de relevancia. Desarrollamos un método novedoso para hallar los autoestados de billares clásicamente caóticos, el cual esperamos poder generalizarlo a hamiltonianos suaves y conectarlo con la teoría de las trayectorias periódicas. Pudimos entender más profundamente la naturaleza de las soluciones estacionarias al separar la contribución debida a la difracción; esto nos permitió probar que no es posible alcanzar el límite semiclásico sin tener en cuenta los efectos de difracción. En cuanto a los fenómenos de localización, las conclusiones al presente son solo cualitativas. Sin embargo, hemos ajustado y dispuesto la maquinaria pesada necesaria, estando en inmejorables condiciones para tratar de ensamblar las piezas de este rompecabezas clásico-cuántico. Si bien este trabajo se ha sustentado en gran cantidad de estudios analíticos y numéricos, hemos intentado una presentación concisa, en un lenguaje coloquial que esperamos sea amena y clara (al menos en líneas generales) al lector.

"Estudio de Lumazina Sintasa de Brucella como proteína transportadora de antígenos: relación entre estructura, estabilidad e inmunogenicidad" (2011). Ainciart, Natalia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La proteína lumazina sintasa de Brucella abortus (BLS) tiene características estructurales, de estabilidad y de inmunogenicidad que la convierten en un candidato interesante para su utilización como carrier o proteína transportadora de distinto tipo de moléculas (péptidos, dominios proteicos, azúcares, etc) BLS tiene una estructura de dímero de pentámero en solución y los estudios realizados en el laboratorio establecieron que tiene una temperatura de melting aparente de 89 °C y un ΔG de desnaturalización de 320 ± 22 kJ/mol. Además, genera una alta respuesta tanto celular como humoral cuando la proteína recombinante es administrada en ratones o conejos (inclusive sin adyuvante) o como vacuna a DNA en un vector de expresión eucariota. La fusión de distintos péptidos y dominios proteicos en su extremo amino terminal da lugar a quimeras de BLS y permite utilizarla como proteína transportadora y aumentar la inmunogenicidad contra las moléculas transportadas en distintos modelos animales. BLS se disocia en dos pentámeros plegados cuando es incubada con cloruro de guanidinio 2M o en buffer fosfato a pH 5. Si la concentración de desnaturalizante aumenta por encima de 2,3 M, se produce una disociación y desnaturalización concertadas que dan lugar a monómeros desplegados. Conocer en detalle estos equilibrios nos permitió diseñar dos estrategias para obtener proteínas mixtas de BLS que contuvieran una mezcla de péptidos provenientes de dos quimeras diferentes. Obtuvimos proteínas mixtas con diferente cantidad de péptido OMP31 y pudimos establecer una relación lineal entre la inmunogenicidad y la densidad de epitopes en la presentación antigénica. Al mismo tiempo, obtuvimos mutantes de estabilidad de BLS y estudiamos el efecto que tiene la estabilidad de la proteína transportadora en la inmunogenicidad contra el péptido transportado. Mediante el estudio de este modelo pudimos establecer que la densidad local de epitopes que se consigue con las quimeras de BLS y las elevadas estabilidad e inmunogenicidad intrínseca de BLS son las principales características que hacen que esta proteína funcione tan eficientemente como carrier de moléculas.

Abstract:
The enzyme lumazine synthase from Brucella spp. is highly immunogenic. This decameric protein is remarkably stable to thermal or chemical denaturation, suggesting a correlation between thermodynamic stability, polymeric arrangement and immunogenicity. The three-dimensional structure of this protein shows that is possible to insert foreign peptides or full-length proteins at the amino terminus without disrupting its general folding. These peptides are presented to the immune system in a polymeric way and in the context of a high specific immune response. BLS is a dimer of pentamers in solution, has a melting temperature of 89 °C and a ΔG of denaturation of 320 ± 22 kJ/mol. BLS induces a high humoral and cellular response when the recombinant protein is inoculated in mice and rabbits (even in the absence of adjuvants) or when is used as a DNA vaccine in an eukaryotic expression vectors. The decoration with peptides or protein domains (chimeras) show that of BLS acts as an efficient carrier and enhances the immunogenicity against the transported molecules. BLS dissociates into two folded pentamers when is incubated in 2 M guanidinium chloride in phosphate buffer at pH 5. Guanidinium chloride concentrations above 2.3 M produce a concerted dissociation and denaturation process resulting in unfolded monomers. The knowledge of these equilibria allowed us to design two different strategies to obtain mixed proteins of BLS with peptides from different chimeras. We obtained mixed chimeras decorated with different number of OMP31 peptides and established a linear relationship between the immunogenicity against the peptide and the epitope density. At the same time, we obtained mutants of BLS with decreased stability and studied the effect of the stability of the carrier protein in the immunogenicity of the peptide. This experimental model allowed us to demonstrate that the local density of epitopes and the high stability and intrinsic immunogenicity of BLS are the main features that make BLS an efficient carrier for vaccine design.

"Estudio de adenilato quinasas de tripanosomas. Desarrollo de herramientas de manipulación genética" (2010). Bouvier, León Alberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las adenilato quinasas son fosfotransferasas que participan en la homeostasis intracelular de nucleótidos de adenosina. Se postula que constituyen los componentes clave de las redes enzimáticas de fosfotransferencia. Las mismas comunicarían, de forma espacial, los sitios de generación con los de consumo de ATP. Los kinetoplástidos, entre los que se incluye el parásito causante del mal de Chagas, el Trypanosoma cruzi, representan a los organismos con mayor número de isoformas de adenilato quinasas del que se tenga conocimiento. En este trabajo se desarrolló una herramienta de rastreo de bases de datos con la que se pudo identificar a seis isoenzimas codificadas en el genoma de Trypanosoma cruzi. Se estudiaron diferentes aspectos de cada una de las mismas. Algunas variantes fueron localizadas en la estructura flagelar, en el lumen glicosomal, solubles en el citosol y posiblemente asociadas a reservosomas. Adicionalmente se estudiaron los dominios y motivos responsables de su respectiva localización. Por otro lado se investigaron tres de las isoformas presentes en Trypanosoma brucei. Se determinó la esencialidad de la isoforma candidata mitocondrial, los patrones de expresión estadío específicos para la isoenzima glicosomal y además la potencial presencia de una señal críptica de localización a esta organela, en otra de las variantes. Finalmente se evaluaron metodologías de reemplazo génico dirigido en Trypanosoma cruzi y se desarrollaron numerosas herramientas que permiten la manipulación genética de este tripanosoma. Entre estas se encuentran vectores de expresión con diferentes marcadores de selección, plásmidos mínimos con marcadores de selección de sencilla transferencia y secuencias codificantes para múltiples epítopes, proteínas fluorescentes y sitios de proteasas. Se espera que estas herramientas sean de utilidad para futuras investigaciones de tripanosomas y otros organismos.

Abstract:
Adenylate kinases are phosphotransferases involved in intracellular homeostasis of adenosine nucleotides. They are thought to be key components of enzymatic phosphotransfer networks. These would spatially communicate sites of ATP synthesis with those involved in the consumption of this molecule. To the present knowledge kinetoplastids, which include the causative agent of Chagas' disease, Trypanosoma cruzi, are among the organisms with the highest number of adenylate kinase isoenzymes. In this work, a database screening tool was developed, which allowed us to identify six different isoenzymes present in the genome of Trypanosoma cruzi. For every one identified, various aspects where analyzed. Some variants where localized to the flagellum, inside the glycosomal lumen, soluble in the citosol and possibly associated to reservosomes. Additionally the domains and motifs responsible for their respective localization where studied. On the other hand three variants present in Trypanosoma brucei where investigated. The mitochondrial candidate was determined to be an essential enzyme, stage specific expression patterns for the variant localized inside glycosomes where established and the presence of a putative cryptic glycosomal targeting signal where found in another isoform. Finally methodologies for targeted gene replacement in Trypanosoma cruzi where evaluated and numerous tools for the genetic manipulation of this trypanosome where developed. Among them, expression vectors with different selectable markers, minimal plasmids with easy to transfer selectable markers and sequences which code for multiple epitopes, fluorescent proteins and protease cleavage sites. Hopefully these tools will be useful in future investigations regarding trypanosomes and other organisms.

"Estudio de aislamientos nacionales y desarrollo de una vacuna a subunidad, direccionada a células presentadoras de antígenos, para el Virus de la Lengua Azul" (2014-04-03). Legisa, Danilo Mario. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Lengua Azul es una enfermedad que afecta principalmente rumiantes salvajes y doméstico, y representa una importante barrera para el comercio internacional de animales y sus subproductos. El Virus de la Lengua Azul es el causante etiológico de la enfermedad y es transmitido por insectos hematófagos del género Culicoides. El Virus de la Lengua Azul , es el miembro prototipo del género Orbivirus dentro de la familia Reoviridae. El virión está compuesto por una doble capa proteica desnuda que envuelve un genoma de 10 segmentos lineales de ARNdc, los cuales codifican para al menos diez proteínas, 7 proteínas estructurales y al menos 4 no estructurales. La distribución del Virus de la Lengua Azul es global aunque en ciertas zonas la información es escasa. En Sudamérica, evidencia serológica de la presencia del virus fue encontrada todos los países menos Uruguay y Bolivia. Argentina y Brasil son los únicos países donde ha sido aislado el virus. En Argentina han sido obtenidos 5 aislamientos de Virus de la Lengua Azul serotipo4 en ganado bovino. Tres de estos aislamientos fueron logrados entre los años 1999-2001, mientras los dos restantes fueron obtenidos en los años 2009 y 2010 como parte del presente trabajo de tesis. La medida de control más práctica y eficaz es la inmunización profiláctica de los animales susceptibles. Desde principios del siglo XX se han desarrollado vacunas atenuadas e inactivadas eficientes para la Lengua Azul. Sin embargo, las desventajas en cuanto a bioseguridad y efectos adversos impulsan el desarrollo de vacunas a subunidad, no infecciosas como alternativa a las vacunas convencionales. En este trabajo de tesis se abordó un análisis epidemiológico molecular de los aislamientos argentinos del VLA y el desarrollo de una vacuna a subunidad direccionada a células presentadoras de antígeno. El análisis epidemiológico molecular se basó en la obtención y análisis de las secuencias de 5 de los 10 segmentos virales (Segmentos 2, 3, 6, 7 y 10). El análisis de los segmentos 2 y 6 resultó en un cluster de secuencias argentinas dentro del clado del serotipo 4 y también dentro del grupo del nucleotipo A (definido para cada segmento). El análisis de los segmentos 3, 7 y 10 mostró que los aislamientos argentinos agrupan dentro del cluster de aislamientos de topotipo occidental o western, indicando que su origen se remontaría a África/Europa. El análisis filogenético reveló que, además de este origen, las secuencias argentinas representaron un fuerte linaje Sudamericano de evolución independiente. El desarrollo de la vacuna a subunidad se basó en la expresión de la proteína VP2, mayoritaria de la cápside externa e inmunodominante, sola o fusionada a la molécula APCH (Antigen Presenting Cell Homing) capaz de dirigir moléculas a células presentadoras de antígeno, utilizando el sistema de expresión de baculovirus. Los ensayos de inmunogenicidad en cobayos y bovinos utilizando estos dos antígenos, resultaron en altos títulos de anticuerpos neutralizantes similares a los evocados por la vacuna formulada con virus inactivado. Más aún, se obtuvieron títulos comparables para VP2 y dosis 4 veces menores de APCH-VP2 demostrando la capacidad APCH de potenciar la generación de anticuerpos. Como caracterización de la respuesta inmune asociada se analizó el perfil de inmunoglobulinas G y la presencia de células T de memoria. El perfil de IgG en los bovinos inmunizados con APCH-VP2 mostró una mayor proporción de IgG1 en comparación con los grupos vacunados con VP2 sola o con el virus inactivado. Por otro lado, la inmunización con las vacunas experimentales, mostró generación de células T de memoria para VP2 sola. Además, se comprobó la capacidad de las vacunas recombinantes de diferencias animales vacunados de infectados. Esta sección constituye un aporte en el desarrollo de vacunas a subunidad, capaces de generar una respuesta inmune comparable a vacunas inactivadas pero con características emergentes.

Abstract:
Bluetongue disease affects principally wild and domestic ruminants and represents a major barrier to animal trade and their sub products. The etiological agent is the Bluetongue Virus, it is transmitted by hematophagous arthropods from the genus Culicoides. Bluetongue Virus is the prototype member of genus Orbivirus and it belongs to Reoviridae family. The non enveloped virión is composed by two concentric protein layer which contents the viral genome, composed by ten dsRNA segments. This genome codifies for 7 structural proteins and at least, 4 non structural proteins. Bluetongue Virus is worldwide distributed, although there is a lack of information in certain regions. In Southamerica, serologic evidences of Bluetongue Virus were recorded in all countries except Uruguay and Bolivia. Argentina and Brazil are the only two countries where the virus was isolated. In Argentina, five Bluetongue Virus serotype 4 isolates have been obtained from asymptomatic cattle. Three isolates were obtained in years 1999-2001, and two in years 2009 and 2010 as result of this thesis work. Prophylactic immunization of susceptible animals is the most practical and effective measure to prevent Bluetongue disease. From beginning of XX century, attenuated and inactivated vaccines against Bluetongue Virus have been developed, however, biosafety issues and the well known adverse effects lead to the development of subunit vaccines as an alternative to classic ones. In this work, we performed a molecular epidemiology study of Argentinean Bluetongue Virus isolates and we also developed a subunit vaccine delivered to antigen presenting cells. The molecular epidemiology approach was based on the sequence analysis from 5 out of 10 genome segments (Segments 2, 3, 6, 7, and 10). Segments 2 and 6 analysis showed that Argentinean sequences grouped into the serotype 4 cluster and nucleotype A group, and even more, they grouped in a unique Argentinean cluster whit high bootstrap value. Segments 3, 7 and 10 analysis, showed that Argentinean isolates grouped into a western topotype cluster, along with sequences already classified as originated in Africa and/or Europe. Phylogenetic analysis revealed that all Argentinean sequences formed a well supported Southamerican lineage with independent evolutionary history. The subunit vaccine development was based on the baculoviral expression of VP2 protein, the major and immunodominant component of the outer capsid, alone or fussed to a molecule named APCH (antigen presenting cell homing), capable to deliver peptides or molecules to antigen presenting cells. Immunogenicity assays conducted in guinea pigs and cattle showed that both antigens were able to induce high neutralizing antibodies titers similar to those evoked by the inactivated vaccine. Moreover, VP2 antibody titers were comparable to APCH-VP2 titers which were generated using a 4 times lower dose of antigen, demonstrating the ability of APCH molecule to enhance the generation of antibodies. As part of the immune response characterization, immunoglobulin G profile and the presence of memory T cells were analyzed. IgG profile in animals vaccinated whit APCH-VP2 showed a higher proportion of IgG1 in comparison with VP2 and inactivated BTV groups. On the other hand, immunization with both candidate vaccines showed the generation of memory T cells specific to VP2. In addition, the capacity of the recombinant vaccine to differentiate vaccinated animal from infected ones was confirmed. This section represents a contribution in the development of Bluetongue Virus subunit vaccines capable of generating an immune response comparable to inactivated vaccines but with new and advance features.

"Estudio de algunos suelos argentinos : análisis químico comparado con algunas propiedades físicas" (1941). Repetto, Juan Carlos. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de antocianas presentes en flores de especies argentinas" (1971). Pomilio, Alicia Beatriz. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de aspectos estructurales y propiedades antigenicas de la cistein proteinasa principal (cruzipaina) de Trypanosoma cruzi" (1995). Martinez, Javier Augusto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de bacterias del género Pseudomonas en la degradación de hidrocarburos y síntesis de biosurfactantes: análisis del efecto de los polihidroxialcanoatos" (2015-04-29). Di Martino, Carla. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Uno de los problemas ecológicos más relevantes en la actualidad es la contaminación ambiental. La biorremediación se ha convertido en una estrategia de gran utilidad, la cual requiere de microorganismos capaces de sobrevivir y adaptarse a estos ambientes contaminados. Ha sido descrito, que la acumulación de polihidroxialcanoatos (PHA) mejora la sobrevida, competitividad y la tolerancia al estrés. Debido a esto, se analizaron microorganismos capaces de acumular PHA aislados de ambientes naturales: P. extremaustralis, aislada de la Antartida; y Pseudomonas sp. KA-08 y Pseudomonas sp. KB- 08, aisladas de ambientes con presencia de altas concentraciones de hidrocarburos. Pseudomonas sp. KA-08 se destacó por su capacidad de degradar hidrocarburos monoaromáticos (BTEX), tolerar altas concentraciones de los mismos y sintetizar compuestos tensioactivos. La búsqueda de los genes claves involucrados en la degradación de BTEX mostró la presencia de las vías TOL y TOD lo cual es un evento poco frecuente en el género Pseudomonas, alcanzando una alta tasa de degradación de xileno como ejemplo de BTEX. Este resultado la destaca como agente degradador de dicho contaminante. Finalmente se decidió analizar la resistencia y capacidad complejante de esta cepa metales pesados como el cobre el cual puede coexistir en algunos sitios contaminados con hidrocarburos. KA-08 toleró concentraciones cercanas a 4 mM de cobre y presentó una alta biosorción que ajusta al modelo de Langmuir. Dado que la presencia de PHA favorece la adaptabilidad bacteriana al ambiente, se analizó el efecto que este polímero posee sobre diversas variables involucradas en la capacidad biorremediadora las cepas KA-08 y Pseudomonas extremaustralis. Los resultados de estos ensayos demostraron que la presencia de PHA en los inóculos de P. extremaustralis favorece la disgregación de biofilms e incrementa la producción de agentes que disminuyen la tensión superficial (TS). En concordancia con esto, se observó que en KA-08 el PHA también afecta favorablemente la síntesis de compuestos que disminuyen la TS. También se determinó que la acumulación de PHA afecta a la adherencia bacteriana al xileno y que dicho efecto podría ser extrapolable a otras Pseudomonas. Así mismo, la acumulación del polímero modificaría características de la superficie celular y produciría un efecto pequeño pero significativo sobre la degradación de xileno especialmente en su isómero más recalcitrante: o- xileno. Los resultados presentados en este trabajo muestran por primera vez la implicancia de la capacidad de acumular PHA sobre características deseables en organismos biorremediadores y evidencian la potencialidad de Pseudomonas sp. KA-08 para ser utilizada como un nuevo agente de degradación de xileno y remoción de cobre de ambientes contaminados.

Abstract:
One of the most important environmental problems is pollution. Bioremediation has become a useful strategy, which requires microorganisms that can survive and adapt to these contaminated environments. It has been reported that the accumulation of polyhydroxyalkanoates (PHAs) improves survival, competitiveness and stress tolerance. Because of this, microorganisms capable of accumulating PHA isolated from natural environments were analyzed: P. extremaustralis, isolated from Antarctica; and Pseudomonas sp. KA-08 and Pseudomonas sp. KB-08, isolated from hydrocarbon contaminated environment. Pseudomonas sp. KA-08 exhibits a high ability to degrade monoaromatic hydrocarbons (BTEX), to tolerate high concentrations thereof and synthesize surfactants. Searching of key genes involved in BTEX degradation showed the presence of both TOD and TOL pathways, which is a rare event in the genus Pseudomonas. Copper tolerance and complexing ability was also tested in KA-08 showing a MIC of 4 mM and high biosorption levels that fits the Langmuir model. Due to PHA promotes bacterial adaptability to the environment; the effect of this polymer was analyzed. Our results showed that the presence of PHA in P. extremaustralis’ inocula promotes biofilms dispersion and increases the production of biosurfactants. In concordance, we observed that PHA synthesis also increase biosurfactant production in KA-08. It was also determined that the accumulation of PHA affects bacterial adherence to xylene. This effect could be extrapolated to other Pseudomonas. Finally, polymer accumulation induced cell surface modifications and produced a small but significant effect on xylene degradation, especially the most recalcitrant isomer: o- xylene. The results presented in this study showed for the first time the implication of PHA accumulation on bioremediation agents‟ desirable characteristics, and showed the potential of Pseudomonas sp. KA-08 as a new agent of xylene degradation and removal of copper from contaminated environments.

"Estudio de compositos magnetoelásticos estructurados. Síntesis y caracterización de partículas magnéticas y conductoras para obtener propiedades de Piezo y Magneto resistencia" (2016-03-10). Ruiz, Mariano Manuel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudiaron propiedades magnéticas, elásticas y eléctricas de compositos magneto-elásticos estructurados. Los mismos están formados por dispersiones de material inorgánico magnético en una matriz orgánica elastómera, preparando el composito en presencia de un campo magnético uniforme. Como material inorgánico se utilizaron agregados formados por nanopartículas magnéticas sobre las cuales se redujo plata metálica, los cuales son simultáneamente magnéticos y conductores eléctricos. El hecho de que sean magnéticos permite alinearlos dentro del medio orgánico fluido cuando se aplica el campo magnético. Este proceso se realiza juntamente con el curado térmico o la evaporación del solvente. La preparación en presencia de campo magnético, mientras la matriz es aún fluida, induce la agregación del material inorgánico en estructuras de tipo cadenas, que se ubican una tras otra en la dirección del campo. Los compositos así obtenidos son magnéticos, conductores de la electricidad y elásticos (pues las matrices utilizadas son polímeros elastómeros). Dichas propiedades son anisotrópicas, pues el sistema está estructurado. Las condiciones de preparación, concentración y naturaleza de las partículas, condiciones de curado y tipo de polímero fueron variadas para obtener compositos con distintas propiedades. La tesis comprendió la síntesis y caracterización de nanopartículas de magnetita y ferritas de cobalto (5-15 nm). El paso posterior consistió en obtener agregados de dichas nanopartículas y plata (Ag) por reducción de Ag+ sobre las nanopartículas obtenidas. De esta forma se obtuvieron micro agregados (1-5 μm) que resultaron conductores óhmicos y magnéticos. Se emplearon distintas técnicas de caracterización química, morfológica, magnética y eléctrica, entre ellas DRX, SAXS, SEM, EDS, TEM, Espectroscopía Mossbauer, VSM, SQUID, FMR, STM, potenciometría, etc. Se utilizaron dos tipos de elastómeros: poli-dimetil-siloxano (PDMS) con distinto grado de entrecruzamiento y goma de estireno-butadieno (SBR, por sus siglas en inglés). En el caso de PDMS se obtuvieron cortes milimétricos cuya superficie se puede mecanizar para obtener conductividad a través de los cortes. El curado térmico con las micropartículas incluidas se realizó en moldes rotantes ubicados entre los polos de un electroimán. En el caso de SBR se obtuvieron películas de 100-150 μm utilizando un dispositivo especialmente diseñado. Los compositos se caracterizaron por FTIR, TGA, RMN, DSC, curvas deformación-tensión, profilometría, etc. Se estudiaron las propiedades de magnetoresistencia y piezoresistencia de los compositos obtenidos, analizando la variación de la conductancia eléctrica con campos magnéticos externos (magnetoresistencia) y con tensiones mecánicas aplicadas (piezoresistencia). Siempre se observó aumentó de la conducción eléctrica al aplicar dichos campos en la dirección de las cadenas formadas en el material. La reversibilidad de las respuestas obtenidas es dependiente del tipo de partícula magnética empleada (superparamagnéticas o ferromagnéticas). Estos aspectos, fundamentales para el diseño de sensores piezo y/o magneto resistivos, son discutidos en la presente tesis.

Abstract:
Magnetic, elastic and electrical properties of magneto-elastic structured composites were studied. They are formed by magnetic inorganic material dispersions in an organic elastomeric matrix, preparing the composite in the presence of a uniform magnetic field. The inorganic material is formed by clusters of magnetic nanoparticles and metallic silver, which are simultaneously magnetic and electrical conductors. These clusters can be aligned within the organic medium when the magnetic field is applied during preparation. This process is performed in conjunction with thermal curing or solvent evaporation. The preparation in the presence of magnetic field, while the array is still fluid, induces aggregation of inorganic material in chain structures, which are located one after another in the direction of the field. The composites thus obtained are magnetic, electrically conductive and elastic (for the matrices used are elastomeric polymers). These properties are anisotropic as the system is structured. The preparation conditions, concentration and nature of the particles, curing conditions and type of polymer were varied to obtain composites with different properties. The thesis includes the synthesis and characterization of nanoparticles of magnetite and cobalt ferrites (5-15 nm). The subsequent step was to obtain aggregates of those nanoparticles and silver (Ag) by reduction of Ag + on the nanoparticles. Thus micro aggregates (1-5 μm) ,which are magnetic and ohmic conductors, were obtained. Several techniques of chemical, morphological, magnetic and electric characterization were used, including XRD, SAXS, SEM, EDS, TEM, Mossbauer spectroscopy, VSM, SQUID, FMR, STM, potentiometry, etc. Poly-dimethyl-siloxane (PDMS) with different degrees of cross-linking, and styrene-butadiene rubber (SBR) were used as elastomers. For PDMS millimetre slides were obtained whose surface was machined to obtain conductivity through the material. Thermal curing was performed (after adding the microparticles) using rotating moulds placed between the poles of an electromagnet. In the case of SBR, films of 100-150 μm were obtained using a specially designed device. The composites were characterized by FTIR, TGA, NMR, DSC, stress-strain curves, profilometry, etc. Magnetoresistance and piezoresistance of the composites were studied by analyzing the change in electrical conductance with external magnetic field (magnetoresistance) and applied mechanical stress (piezoresistance). The electrical conductance increases when applying those fields in the direction of the chains formed in the material. The reversibility of the responses depends on the type of magnetic particle (superparamagnetic or ferromagnetic). These aspects, which are essentials to the design of piezo and / or magneto resistive sensors, are discussed in this thesis.

"Estudio de correlaciones angulares" (1976). Silbergleit, Virginia Mabel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El presente estudio involucra una serie de trabajos teóricos y experimentales que cubren parte de los procesos de desintegración nuclear y de su interacción con las capas electrónicas. Como ejemplo de estudio de la desintegración nuclear se ha tomado el caso Pd109→ Ag109. Con respecto al estudio de la interacción núcleo-corteza electrónica se ha considerado la desintegración del Bi207→Pb207 y del Ce139→La139. Mediante la desintegración del Pd109 se ha determinado el carácter de algunos niveles excitados de la Ag109, basado en el método experimental de correlaciones angulares gamma - gamma. Se ha arribado a la presentación de una discusión de la estructura de niveles del núcleo de Ag109, la cual se compara con modelos realizados por diferentes autores. Con respecto a la desintegración del Bi207 y del Ce139 se ha realizado un estudio experimental de correlaciones angulares LX - gamma el cual es analizado de acuerdo con las predicciones teóricas del modelo desarrollado por Dolginov. Por razones de completicidad en el Capítulo I se hace una reseña de la teoría de emisión de radiación electromagnética nuclear. En el Capítulo II se detalla la teoría correspondiente a las correlaciones angulares de radiaciones en cascada, para los casos de transiciones radiativas y no radiativas. En el Capítulo III se describe el tratamiento estadístico de datos indispensable para determinar la validez de los resultados experimentales. En los Capítulos IV y V se describen los montajes experimentales para realizar las mediciones de espectros simples y en coincidencia de las radiaciones gamma y de fluorescencia y de correlaciones angulares gamma - gamma y X - gamma. El Capítulo IV está dedicado a los estudios realizados sobre la desintegración del Pd109→Ag109. El Capítulo V presenta el desarrollo de las experiencias sobre correlaciones angulares no perturbadas X - gamma provenientes de la desintegración del Bi207 por medio de la captura L3 al Pb207. En el Capítulo VI se describen las experiencias análogas de la correlación angular X - gamma proveniente de la desintegración de Ce139 al La139. En estas tres últimos capítulos se presentaron los resultados experimentales y se comparan con los obtenidos por otros autores. Este trabajo de tesis ha sido el fruto de seis años de labor contínua, lo que ha permitido sustentarlo con diversos estudios realizados secuencialmente. Cada uno de estos estudios ha sido debidamente documentado en las publicaciones que figuran en el Apéndice I.

"Estudio de daño genético inducido en esperma de Drosophila melanogaster : análisis de letales recesivos ligados al sexo inducidos por neutrones de 3 MEV." (1992). Muñoz, Enzo Ruben. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esperma de Drosophila melanogaster la frecuencia de mutaciones letales recesivas ligadas al sexo inducida por neutrones o por rayos X crece linealmente, lo que significa que cada letal es el resultado de un impacto. A pesar de ésto hay evidencias conflictivas según las cuales a igualdad de dosis los neutrones serían menos eficientes o más eficientes que los rayos x en la inducción de este tipo de daño. Es decir que se encontraron Eficiencias Biológicas Relativas (RBE) (dosis de rayos x/dosis de neutrones, para una determinada cantidad de daño) menores y mayores de 1. Para explicar la menor eficiencia de los neutrones, se han propuesto dos hipótesis: 1) Como la fina traza de ionizaciones que se origina cuando se usan radiaciones de baja Transferencia Lineal de Energía (LET) como los rayos X, es suficiente para inducir un letal, parte de las ionizaciones presentes en las gruesas trazas de ionizaciones originadas durante la irradiación con neutrones (alto LET), resultarían superfluas. De esta forma, a igual cantidad total de ionizaciones producidas por ambos tipos de radiación, los neutrones aparecerían como menos eficientes. 2) Las gruesas trazas de ionizaciones producidas por los neutrones inducirían mutaciones letales muy próximas unas de otra, que serían contabilizadas comouna sola debido al método de detección y de allí su aparente menor eficiencia. Para explicar la mayor eficiencia de los neutrones, se ha sugerido que la mayoría de las mutaciones letales recesivas se deberían a daño en dos segmentos cromosómicos, que por plegamientos del cromosoma quedarían muy próximos. La mayor eficiencia de los neutrones para producir rupturas en los dos segmentos cromosómicos adyacentes, daría como resultado una mayor frecuencia de letales respecto de los rayos X. El desconocimiento de la real naturaleza de las lesiones inducidas por neutrones que son detectadas como letales recesivos en Drosophila, deja las hipótesis mencionadas en un plano puramente especulativo. Atento a ello y a fin de caracterizar el daño, en este trabajo se encaró el análisis, mediante pruebas de alelismo, de letales recesivos inducidos por neutrones. En una primera etapa se seleccionaron mutaciones letales recesivas en el cromosoma X inducidas por 3 MeV de neutrones. La frecuencia obtenida con una dosis media de 21,7 Gy fué de 7,9% en 13.679 cromosomas probados. Se calculó que para obtener la misma frecuencia de letales se hubieran requerido 34,34 Gy de rayos X, lo que indica que los neutrones resultaron más eficientes que los rayos X. El valor del RBE fué de 1,58 que está en línea con lo encontrado por otros autores en las mismas condiciones de experimentación. El análisis de los letales se circunscribió a aquellos localizados en un segmento del cromosoma X, comprendido entre las Secciones 18 F4-5 y 20 F4 y que corresponde a las 53 bandas más proximales del cromosoma polité nico. Para su selección se usó una duplicación del segmento a estudiar unida al cromosoma Y. La frecuencia de letales localizados íntegramente dentro del segmento fué de 5,5% del total de letales inducidos en el cromosoma X. Esta frecuencia está en relación al tamaño del segmento (53 bandas) y es similar a las encontradas con rayos x en regiones más alejadas del centrómero. Con los letales seleccionados se hicieron pruebas de complementación cruzándolos entre si y con duplicaciones, deficiencias y mutaciones visibles y letales de otros orígenes. Para la interpretación de estas pruebas se consideró que: a) dos letales no alélicos afectan unidades funcionales diferentes; b) dos letales alélicos comparten por lo menos una unidad funcional; c) un letal alélico a dos letales que no son alélicos entre si, afecta como mínimo a dos unidades funcionales que pueden ser adyacentes o no. El estudio permitió ubicar los letales en un mapa del segmento analizado que, con la adición de tres nuevas unidades de complementación identificadas en este trabajo (dos con efecto letal y una con efecto visible), consta de 33 unidades. Del mapa de complementación obtenido surgió que: i) sólo el 3,7% de los letales son dobles, es decir que consisten de dos mutaciones muy próximas una de otra, por lo que se descarta este tipo de lesión comocaracterístico del daño inducido por neutrones; ii) el 49%de los letales inducidos por neutrones afectan una unidad de complementación y el 51% dos o más, es decir que son deficiencias. Cuandose aplican los mismoscriterios seguidos en este trabajo a los datos existentes sobre letales inducidos por rayos X, surge que con este agente sólo el 21%de los letales se debe a deficiencias cromosómicas. De los resultados presentados puede concluirse que del total de daños producidos a una determinada dosis de radiación, los neutrones inducen una mayor proporción de deficiencias cromosómicas que los rayos x. Estas lesiones tienen prácticamente siempre efecto letal en Drosophila y seguramente son menos reparables por un sistema libre de error. Comoconsecuencia, en pruebas de inducción de mutaciones letales recesivas, se recupera una mayor frecuencia de letales cuando se usan neutrones y su RBE respecto de los rayos X es mayor de 1. Se postula que lo mismo debería observarse usando rayoso α u otras partículas pesadas de alto LET.

"Estudio de doble y triple resonancia magnética nuclear" (1981). Etcheverry de Milou, Marta I.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de efectos conformacionales y estructurales en moléculas : desarrollo de métodos basados en interacciones orbitales para analizar sus mecanismos electrónicos" (2003). Sproviero, Eduardo Marcelo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se desarrolló un esquema derivado del formalismo de orbitales localizados NBO, en el que las interacciones intramoleculares se interpretan como interacciones entre orbitales moleculares localizados. A través de un análisis de tipo perturbativo, se evalúa la contribución de las interacciones entre orbitales a cualquier propiedad molecular. Esta descomposición permite interpretar la forma en que un cambio en una parte de la molécula se transmite a otras partes y determina la variación de cualquier propiedad. Se muestran varias aplicaciones entre las que se incluye, cómo las variaciones de geometría molecular o la adición de sustituyentes modifican, por medio de interacciones entre orbitales, varios parámetros de resonancia magnética nuclear. Como una alternativa al análisis anterior, se propone un descriptor basado en una generalización de la densidad de carga electrónica que incluye a los orbitales canónicos vacantes. Este descriptor permite analizar interacciones estereoelectrónicas en forma directa o a través de parámetros asociados con la densidad de carga. La aplicación combinada del efecto de las interacciones orbitales sobre propiedades moleculares y el de éstas sobre propiedades macroscópicas, se puede utilizar para individualizar cuáles son las interacciones intramoleculares que determinan una respuesta macroscópica particular. Orientado al estudio de la actividad biológica, se combinó el método del propagador de polarización (que permite evaluar contribuciones orbitales a propiedades moleculares), con el esquema GAPT de partición de propiedades moleculares en contribuciones atómicas (usualmente importantes para estudiar efectos biológicos), a nivel RPA-INDO. Se identificaron, además, parámetros de geometria y flexibilidad intramolecular que se utilizaron para interpretar la actividad biológica de compuestos esteroidales.

Abstract:
A scheme derived from the NBO formalism of localized orbitals was developed, in which the intramolecular interactions are interpreted as interactions between orbitals. The contribution of orbital interactions to any molecular property is evaluated through a perturbative type analysis. This decomposition allows interpreting the way in which a change in a region of the molecule is transmitted to other parts and determines the variation of any property. Several applications are shown that include the study of how changes in molecular geometry or the addition of substituents modify, by means of molecular orbital interactions, several nuclear magnetic resonance parameters. As an alternative to the previous analysis, a descriptor based on a generalization of the electronic charge density that includes canonical vacant orbitals is presented. This descriptor allows analyzing stereoelectronic interactions in direct form or through parameters associated with the charge density. The combined application of the effect of orbital interactions on molecular properties and of the latter on macroscopic properties can be used to individualize which are the intramolecular interactions that determine a particular macroscopic response. Oriented to the study of the biological activity, the method of the polarization propagator (that allows evaluating of orbital contributions to molecular properties) was combined with the GAPT scheme of partitioning of molecular properties into atomic contributions (usually important to study biological effects), at RPA-INDO level. In addition, parameters of intramolecular geometry and flexibility were identified, and were used to interpret the biological activity of steroidal compounds.

"Estudio de efectos de estímulos inflamatorios periféricos sobre un modelo de enfermedad de Parkinson" (2013). Tarelli, Rodolfo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Enfermedad de Parkinson (EP) es una de las enfermedades neurodegenerativas de mayor incidencia en personas mayores de 65 años. Es de progresión lenta y su rasgo distintivo es la degeneración neuronal en la región de la sustancia nigra pars compacta (SN). Un hallazgo pato-fisiológico uniformemente observado tanto en modelos animales como en pacientes con EP es que la muerte de las neuronas de la SN se encuentra acompañada por activación de la microglía. Numerosa evidencia apunta a un efecto neurodegenerativo de la microglía activada, sin embargo, también se ha observado que la microglía podría tener efectos neuroprotectores, por ejemplo a través de la secreción de factores neurotróficos. Por lo tanto, el rol funcional de esta activación es aún un tema de amplio debate. En publicaciones previas de nuestro laboratorio hemos descripto una activación microglial atípica en la que la misma se encuentra parcialmente activada o “cebada” como consecuencia de la degeneración neuronal (Depino, Earl et al. 2003). En este estadío de activación atípica, las células son capaces de transcribir citoquinas proinflamatorias pero no de sintetizar la proteína en sí. Este concepto sugiere que una célula en estado cebado requeriría de un segundo estímulo menor al que requeriría una célula en reposo hasta quedar clásicamente activada. En esta tesis, hemos evaluado la hipótesis de que la inflamación pueda exacerbar la neurodegeneración en un modelo animal de EP (inyección de 6OHDA en el cuerpo estriado) con la consiguiente progresión de la enfermedad. Para ello, se procedió a la inyección endovenosa de un estímulo pro-inflamatorio periférico (Adenovector productor de interleuquina 1) a animales previamente denervados con la neurotoxina 6OHDA. El estímulo pro-inflamatorio fue capaz de exacerbar la neurodegeneración en progreso en la SN. Los efectos exacerbantes del estímulo inflamatorio fueron asociados con un aumento en la activación morfológica microglial y expresión de MHC clase II en superficie. Debido a que la patología se presenta en pacientes añosos y a que los cerebros de personas ancianas presentan microglía cebada (Cunningham, Konsman et al. 2002) realizamos el mismo diseño experimental en ratas ancianas. En este modelo, también, el estímulo pro-inflamatorio fue capaz de exacerbar la neurodegeneración presentando la microglía activación morfológica aumentada. Por otro lado, se estudiaron los mecanismos moleculares de la exacerbación de la neurodegeneración sobre un modelo de aumento de la inflamación con un estímulo pro inflamatorio en SN. Mediante la técnica de microarrays buscamos los genes candidatos a ser los responsables de estar participando en la exacerbación de muerte neuronal. Se encontraron genes diferencialmente expresados, cuatro de los cuales fueron validados técnicamente por RT-PCR en tiempo real. Esta tesis provee evidencia de los efectos perjudiciales de la inflamación en la progresión de la EP. Además, propone que las infecciones o inflamaciones podrían ser consideradas como un factor de riesgo en la exacerbación de la neurodegeneración en la EP. Así también, sugiere una asociación entre la activación de la microglía y los efectos neurotóxicos observados en la SN. Finalmente, propone candidatos a mediar estos efectos.

Abstract:
Parkinson's disease (PD) is the second most common neurodegenerative disease in people over 65. It´s progression is slow and one of its distinctive features is the degeneration of neurons in the substantia nigra pars compacta (SN). A pathophysiological finding uniformly observed in both animal models and in patients with PD is that the death of SN neurons is accompanied by activation of microglia. Numerous evidence suggests a neurodegenerative role for activated microglia; however, microglia has also been shown to have neuroprotective effects. This may be through the secretion of neurotrophic factors. Therefore, the functional role of this activation is still a matter of intense debate. Previous publications from our laboratory have described an atypical microglial activation in which it is partially activated or "primed" as a result of neuronal degeneration (Depino, Earl et al. 2003). At this stage of atypical activation atypical cells are capable of pro-inflammatory cytokine transcription but not synthesis of the protein itself. This concept suggests that a primed microglial cell would require a smaller second stimulus to become classically activated when compared to the stimulus required for a resting microglial cell to achieve this same state. In this thesis, we evaluated the hypothesis that inflammation might exacerbate neurodegeneration in an animal model of PD (6OHDA injection into the striatum) with subsequent disease progression. To achieve this, we proceeded to the intravenous injection of a peripheral pro-inflammatory stimulus (interleukin 1 producing adenoviral vector) to previously denervated animals (with 6OHDA neurotoxin). The proinflammatory stimulus was able to exacerbate ongoing neurodegeneration in the SN. The inflammatory stimulus exacerbating effects were associated with an increased morphological microglial activation and surface expression of MHC class II. As PD is a disease in aging patients, and primed microglia is known to be an present in the elderly brain (Cunningham, Konsman et al. 2002), the same experimental design was carried out in aged rats. In this model, the pro-inflammatory stimulus was able to exacerbate neurodegeneration and morphological microglia activation also increased. In addition, we studied the molecular mechanisms of exacerbation of neurodegeneration on a model of augmented inflammation with a pro-inflammatory stimuli in the SN. Using microarray technology we looked for genes that might be candidates for being involved in the exacerbation of neuronal death. Differentially expressed genes were found, four of which were validated technically by RT-PCR in real time. This thesis provides evidence of the harmful effects of inflammation in the progression of PD. It also proposes that infections or inflammations could be considered as a risk factor in the exacerbation of neurodegeneration in PD. It also, suggests an association between the activation of microglia and the neurotoxic effects observed in the SN. Finally, it proposes candidates to mediate these effects.

"Estudio de especies de Thrypticus (Insecta, Diptera, Dolichopodidae) asociadas con Eichhornia crassipes y otras Pontederiáceas en América del Sur" (2007-06-26). Hernández, María Cristina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Thrypticus es un género de pequeñas moscas cuyas larvas se alimentan de plantas monocotiledóneas. Los restantes miembros de esta familia son predadores. Se describen nueve especies nuevas: Thrypticus truncatus, T. sagittatus, T. yanayacu, T. chanophalus, T. circularis, T. romus, T. azuricola, T. formosensis y T. taragui. Éstas conforman una unidad taxonómica, el grupo truncatus. Son especies Neotropicales colectadas en las cuencas Paraguay-Paraná y Amazonas, Perú y este de Brasil. Cinco de estas especies están asociadas a Eichhornia crassipes, dos a E. azurea, una especie asociada a Pontederia cordata y otra a P. subovata, todas hospedadoras en la familia Pontederiaceae. Se describe la morfología y bionomía de adultos y estadios inmaduros de dos especies: T. truncatus y sagittatus. Se describe por primera vez el modo de alimentación y el comportamiento de las larvas. El hábitat que ocupan las larvas es el conjunto de celdas del aerenquima de la hospedadora que quedan comunicadas con la construcción de la mina. En relación con esto, se realizó una recopilación de la información existente sobre la morfología de las plantas hospedadoras para relacionarlas con el grupo truncatus. En los muestreos en el campo y en las pruebas de elección múltiple con especies de Pontederiaceae y Commelinaceae, T. truncatus mostró completa especificidad con E. crassipes. Además del daño mecánico y el devenido por la alimentación de las larvas, se aislaron 32 especies de hongos en las minas de T. truncatus y T. sagittatus.

Abstract:
Thrypticus is a genus of small flies whose larvae feed on monocots. All of the other members of this family are predators. Nine new species are described: Thrypticus truncatus, T. sagittatus, T. yanayacu, T. chanophalus, T. circularis, T. romus, T. azuricola, T. formosensis and T. taragui. They form a taxonomic unit, the truncatus group. They are Neotropical species found in the basins of the Paraná-Paraguay and Amazon Rivers, and east of Brazil. Five of them are associated with E. crassipes, two with E. azurea, one with P. cordata and one with P. subovata. All the host plants belong to the Pontederiaceae. The anatomy and bionomy of adults and immature stages of T. truncatus and T. sagittatus are described. For the first time, the modality of feeding and behavior of the larvae are characterized. The larval habitat is the sequence of aerial cells in the aerenchyma joined by the tunnel of the mine. A morphological review of the Pontederiaceae host plants and the aerenchyma characteristics that describe the larval habitat is given. Thrypticus truncatus was monospecific on E. crassipes in the field host range and multiple choice tests with Pontederiaceae and Commelinaceae species. In addition, 32 fungal species were isolated from the larval mines of T. truncatus and T. sagittatus.

"Estudio de estabilidad termodinámica del Ag7PO4I4 en presencia de Iodo y procesos de transporte relacionados" (1999). Casanova, Jorge Ramón. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Sales sólidas con conducción iónica han sido utilizadas para la obtención de pilas galvánicas y sensores de gases. El compuesto Ag7PO4I4, (API) es un electrolito conductor por ión Ag+ de conductividad elevada y baja movilidad difusional del I2(g) en el volumen del electrolito. Se ha estudiado en este trabajo la absorción de I2(g) por API considerando al fenómeno desde el punto de vista de una reacción química acoplada con un proceso de difusión del gas en el sólido. La cantidad de I; absorbida resulta ser hasta 1,8 moles de gas por mol de API (aún mayor que la absorción de hidrógeno por paladio). Se realizaron mediciones gravimétricas y de difracción de rayos X en función del tiempo, utilizando muestras en polvo y compactadas. La evolución con el tiempo es distinta si la atmósfera que contiene I2(g) está formado por aire húmedo o seco. En ambos casos, se observa una marcada dependencia con la fugacidad del yodo en el gas. La humedad juega un papel catalítico ya que se observa la misma reacción global en ambos casos (atmósfera seca o húmeda). Se interpretaron los resultados experimentales con modelos de difusión con reacción química, calculándose las constantes cinéticas y los coeficientes de difusión, para muestras compactadas. El coeficiente de difusión resultó dos órdenes menores que el obtenido por otros autores que no tomaron en consideración la posibilidad de una reacción quimica.

Abstract:
Solid salts with ionic conduction have been used to obtain galvanic cells and gas sensors. The Ag7PO4I4 compound (API) is a solid elecrolyte with high electric conductivity by Ag+ ion and of low iodine (12)diffusional mobility in the solid state. In the present work, the absorption of I2(g) by API has been studied. The investigated phenomena is considered as a gas diffusional process in the solid simultaneous with a chemical reaction. The absorbed amount of iodine results as high as 1.8 gas moles per API mole, being this absorption even larger than the hydrogen absorption by paladium Time dependent gravimetric measurements as well as of X-rays diffraction have been performed using powder and pressed specimens. The evolution with time is different according to that the iodine atmosphere is made up with dry or with wet air. En both cases, a marked dependency on the iodine fugacity is observed. Humidity plays a catalytic role, but the global reaction is the same for both dry and wet atmospheres. The experimental results habe been are analysed in terms of models of diffusion with chemical reaction; numerical values of the kinetic constants and the diffusion coefficients are obtained in case of pressed specimens. The diffusion coefficient is two order of magnitude lower than the one reported by other authors, who did not take into account the probability of a simultaneous chemical reaction.

"Estudio de estímulos pro-inflamatorios secundarios sobre una lesión desmielinizante en un modelo de inflamación crónica asociado a esclerosis múltiple" (2013-08-27). Murta, Veronica. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La esclerosis múltiple (EM) es un desorden inflamatorio autoinmune del sistema nervioso central, caracterizado por desmielinización, inflamación y pérdida axonal. La etiología de la enfermedad es aún desconocida, pero muchos trabajos en modelos animales han puesto en evidencia un rol importante de la neuroinflamación en su patogénesis y progresión. La mayoría de los pacientes presentan episodios de recaídas y remisiones. A medida que la enfermedad evoluciona el proceso de remielinización comienza a fallar, lo cual resulta en la eventual pérdida de funciones en los pacientes. El rol de la inflamación en la regeneración de la mielina es aún incierto. Considerando la heterogeneidad y complejidad que presenta la EM es importante generar modelos apropiados que recapitulen la enfermedad, pero también otros modelos de estudios más sencillos que faciliten la comprensión de los mecanismos involucrados. En la presente tesis nos propusimos estudiar el efecto de estímulos inflamatorios repetidos mediante la reinyección de un estímulo pro-inflamatorio crónico, en eventos similares a episodios de recaída. También nos propusimos estudiar la influencia de inflamaciones periféricas sobre las lesiones desmielinizantes en el SNC. Para ello utilizamos un adenovector que expresa interleuquina 1β en forma crónica. Hemos demostrado que la respuesta a un estímulo central secundario varia dependiendo de si la lesión primaria está activa o no. Así, la presencia de una lesión inflamatoria central aún activa disminuye la respuesta a un estímulo pro-inflamatorio secundario dentro del SNC. Sin embargo, esta repuesta secundaria disminuida no se observa cuando el segundo estímulo se aplica con la lesión primaria completamente recuperada. Por otro lado, un estímulo pro-inflamatorio proveniente de la periferia recrudece la respuesta inflamatoria central previa, incluso cuando la BHE se encuentra intacta. Los estímulos inflamatorios, tanto centrales como periféricos, deberían ser considerados como factores de riesgo al momento de estudiar la etiología y progresión de la EM. Una mejor comprensión de los mecanismos que intervienen en la recaída/remisión, y de la influencia de infecciones periféricas sobre la misma colaboraría con la identificación y el desarrollo de nuevas terapias para un mejor tratamiento de la EM.

Abstract:
Multiple sclerosis (MS) is an autoimmune inflammatory disorder of the central nervous system characterized by demyelination, inflammation and axonal damage. The etiology of the disease is still unknown, but many studies have shown a role of neuroinflammation in the pathogenesis and progression of MS. Throughout the development of the disease most patients present relapsing and remitting episodes, while others progress to a chronic stage. The role of inflammation in myelin regeneration is still uncertain. As the disease progresses remyelination fails, resulting in the eventual loss of function in patients. It is as important to generate appropriate models that recapitulate the disease, as well as other more simplistic ones that facilitate the understanding of the mechanisms involved. There are few suitable models for the study of demyelination as a result of chronic inflammation. In this thesis we studied the effect or repeated inflammatory demyelinating events by re-injecting a chronic pro-inflammatory stimulus, thus mimicking the relapsing-remitting episodes of MS. We also studied the influence of peripheral inflammation on these phenomena in the CNS. For the generation of the chronic inflammatory event we used an adenovector expressing interleukin-1β. We have shown that the response to a secondary central stimulus varies depending on whether the primary lesion is still active or not: The presence of a previous active injury decreases the response to the second pro-inflammatory stimuli within the CNS. However, this secondary response does not change when the primary lesion is completely recovered. Furthermore, pro-inflammatory stimuli from the periphery exacerbate the central lesion. Inflammatory stimuli, both central and peripheral, should be considered as risk factors when studying the etiology and progression of MS.

"Estudio de factores que afectan la ionización de los hidratos de carbono en espectrometría de masa UV-Maldi" (2011). Giudicessi, Silvana Laura. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo de tesis se estudió el efecto de la presencia del Ca2+ (y/o Mg2+) en el análisis por UV-MALDI MS de hidratos de carbono, utilizando el EDTA como un reactivo auxiliar. Este análisis mostró un claro efecto de la presencia de Ca2+ en los espectros obtenidos cuando se utilizó nor-harmano (nHo) como matriz. Dicho efecto se basaría en la interacción del ion Ca2+ con los grupos HO- presentes en los hidratos de carbono. Con matrices ácidas el efecto observado fue menor y se debería a que los grupos HO- y –COOH de las mismas pueden unirse al catión Ca2+ y además por su carácter prótico inhibir la interacción de éste con el azúcar. El estudio comparativo por espectrometría de masa ESI mostró que el comportamiento de los hidratos de carbono en presencia del Ca2+ (y/o Mg2+) no es uniforme, dependiendo éste del tamaño molecular y de la estructura del compuesto. En ambos casos, la presencia del EDTA compitió con la formación de los complejos metalhidrato de carbono y mostró ser una herramienta útil para la restitución de las señales sodiadas de los analitos y la obtención de espectros de masa de mejor calidad. También se analizó la formación de la especie - en el proceso de desorción/ionización de hidratos de carbono neutros, utilizando diferentes técnicas de incorporación del ion Cl- a las muestras. Para ello se utilizó la mezcla de la matriz nHo y la sal NH4Cl, una matriz clorada sintetizada en nuestro laboratorio (6-cloro-nor-harmano) y el clorhidrato de nor-harmano. Las especies - se formaron eficientemente, especialmente utilizando esta última matriz. La formación de estas especies cloradas es una alternativa a tener en cuenta al momento de estudiar hidratos de carbono neutros cuyo proceso de ionización no es eficiente. Finalmente, se analizó la capacidad de nanopartículas (NPs) de actuar como matrices en el análisis por UV-MALDI MS de azúcares neutros. Dichas NPs mostraron ser eficientes matrices para la detección de azúcares tanto comerciales como los presentes en extractos de tejidos y en tejidos intactos (análisis in situ), a diferencia de las matrices orgánicas clásicas que no resultaron útiles como tales para este último tipo de análisis.

Abstract:
In the present Project the effect of Ca2+ (and/or Mg2+) on the UV-MALDI MS analysis of carbohydrates and that of EDTA as auxiliary reagent have been studied. These cations showed a very clear effect when nor-harmane (nHo) was used as matrix. This fact can be explained taking into account the interaction between the Ca2+ (and/or Mg2+) with the hydroxyl groups present in the carbohydrate structure. When matrix with hydroxy and carboxy functional groups were used the observed effect was quite mild probably because these groups interact preferentially with the discharged cations and because their hydrogen donor capability inhibits the carbohydrate-Ca2+ interaction. Comparative studies conducted by ESI MS showed that the carbohydrate- Ca2+ (and/or Mg2+) interaction is not the same for all the sugars studied depending strongly on the molecular size and structure. EDTA addition to the sample competes with the sugar because its Ca2+ and Mg2+ quelating properties showing to be a useful tool to enhance the intensity of the carbohydrate signals yielding higher quality mass spectra. The detection of neutral carbohydrates as the anion - species was also studied by means of different Cl- addition methods to the sample. With this purpose the mixture of the matrix nHo and the NH4Cl salt, a chloroderivative of nor-harmane prepared in our laboratory (6-chloro-nor-harmane) and nor-harmane hydrochloride were used. The - were efficiently formed specially when nor-harmane hydrochloride was used. Formation of the chlorinated anions is a possibility to take into account when neutral carbohydrates with low UV-MALDI desorption/ionization are analyzed. Finally, the capability of nanoparticles (NPs) to behave as UV-MALDI matrices for neutral carbohydrate analysis was studied. Those studied showed to be efficient for the analysis of neutral sugars commercially available and those present in extracts from tissues as well as present in intact tissues (analysis in situ), on the contrary than the classical organic matrices that were not useful at all for in situ analysis.

"Estudio de films nanoestructurados obtenidos mediante técnicas de autoensamblado capa por capa" (2009). Tagliazucchi, Mario Eugenio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los electrodos modificados químicamente son sustratos conductores recubiertos con una película delgada que les confiriere propiedades funcionales de interés: electrocatálisis, electrocromismo, protección de la corrosión y otras. El método de autoensamblado capa por capa es una técnica para preparar películas de polielectrolitos de espesor nanométrico sobre todo tipo de sustratos. En esta Tesis se estudian las propiedades fisicoquímicas y la respuesta electroquímica de electrodos modificados mediante este método y su dependencia de las condiciones de deposición y medición y de la arquitectura molecular de la película. Los polielectrolitos redox empleados en esta Tesis son una poli(alilamina) modificada con el complejo Os(bpy)2pyCl2+/+ (PAH-Os) y nuevos polímeros conteniendo el complejo 3-/2- . Se estudió la estructura, composición y propiedades electroquímicas de equilibrio de multicapas de polielectrolitos redox empleando una combinación de técnicas espectroscópicas y electroquímicas y modelado teórico. A parir del modelo de Donnan se relacionó el potencial de interface medido por voltametria cíclica con la composición interna y las propiedades de intercambio iónico. Se propuso un conjunto de reglas de diseño para controlar las permselectividad iónica de películas multicapa redox y no-redox controlando la relación entre el pH de ensamblado y de medición y la capa terminal. El caso de una única capa de PAH-Os sobre un electrodo tiolado se estudió con una teoría molecular que considera en forma explícita el tamaño, forma, carga y conformaciones de las todas las moléculas en la interfase, sus interacciones y la presencia de los equilibrios químicos. La teoría describe cuantitativamente la respuesta electroquímica del sistema bajo distintas condiciones experimentales y el espesor de la capa y puede usarse para estudiar propiedades no accesibles a los experimentos. La teoría predice que la estructura, el potencial electrostático y el potencial redox aparente de la cupla redox dependen de la distancia al electrodo y que los equilibrios redox y ácido-base se encuentran acoplados debido a la regulación de carga. Las propiedades de transporte y transferencia de carga en las multicapas se estudiaron con distintas técnicas electroquímicas. Para películas terminadas en polianión, se observa un impedimento al proceso redox. Mediante un análisis con voltametria cíclica y un modelo de difusión modificado, se mostró que el coeficiente de difusión para el transporte de carga cae aproximadamente 3 órdenes de magnitud al adsorber el polianión y que es posible revertir este fenómeno aumentando la fuerza iónica de la solución. Se atribuyó el efecto a cambios en los movimientos segmentales del polímero. Se empleó la técnica de microbalanza de cristal de cuarzo con control electroquímico para estudiar el transporte de iones y solvente en las películas redox. Se observó un aumento de la masa de la película durante la oxidación y una disminución durante la reducción. Este proceso es afectado por la última capa ensamblada y efectos específicos de aniones. Se discute el origen del aumento en la masa de la película que se observa con el número de ciclos de oxidaciónreducción. Se prepararon electrodos modificados con nanopartículas de Pd para reducción electrocatalítica mediante la reducción electroquímica de iones Pd confinados en el interior de una multicapa depositada sobre un electrodo de tela de carbono. El análisis de los materiales preparados mediante XPS, elipsometría y microscopía SEM demostró que las nanopartículas se forman preferencialmente en la interfase electrodo/película. La selectividad y eficiencia de los nanocatalizadores superan con creces la de los electrodos depositados por electroreducción directa de sales de Pd, tradicionalmente usados en la literatura de electrosíntesis. Las películas electroactivas nanoestructuradas preparadas por el método capa por capa presentan algunos comportamientos que no se observan en películas desordenadas depositadas por métodos tradicionales. Estas diferencias surgen de las nuevas variables de proceso disponibles, que pueden ser ajustadas para optimizar las propiedades funcionales.

Abstract:
Chemically modified electrodes are conductive substrates coated with a thin layer that introduces functional properties of interest: electrocatalysis, electrochromism, corrosion protection and so on. Layer by layer self-assembly is a novel method for the preparation of nanometer-thick polyelectrolyte films. In this thesis we address the physicochemical properties and electrochemical response of layer by layer modified electrodes and their dependence on the assembly, testing conditions and the molecular architecture of the film. The redox polyelectrolytes used in this Thesis are a poly(allylamine) modified with the complex Os(bpy)2pyCl2+/+ (PAH-Os) and new polymers bearing the complex 3-/2- . The structure, composition and equilibrium electrochemical properties of redox polyelectrolyte multilayers were studied with a combination of spectroscopic and electrochemical techniques and theoretical models. The Donnan partition model was used to link the interfacial potential measured by cyclic voltammetry with the inner composition and ionic exchange. We proposed a set of design rules to control ionic permselectivity in redox and non-redox multilayers by means of the relationship between assembly and testing pH and the polyelectrolyte in the outmost layer. In order to study a single layer of PAH-Os on a thiolated electrode we developed a molecular theory which explicitly considers the size, shape, charge and conformations of all the molecular species at the interface, their interactions and the chemical equlibria. It quantitatively describes the electrochemical response under different experimental conditions as well as the thickness of the layer. Moreover, the theory can be used to study properties that are difficult to address experimentally. It predicts that the structure, electrostatic potential and apparent redox potential of the couple depend on the distance to the electrode. The theory shows the coupling between the redox and acid-base equilibria that arises due to charge regulation, as well as its experimental manifestations. Charge transfer and transport in multilayer films were studied with different electrochemical techniques. For polyanion capped multilayers, we observe a hindrance for the redox process. Based on cyclic voltammetry measurements and a modified diffusion model, we showed that the diffusion coefficient for charge transport decreases by 3 orders of magnitude upon the assembly of the polyanion and that this hindrance for the redox process can be eliminated by increasing solution ionic strength. The effect was attributed to changes in polymer segmental mobility. In order to study ion and solvent fluxes in the films we used electrochemical quartz crystal microbalance. An increase of film mass during oxidation and a decrease upon reduction was observed. This process is affected by the outmost layer and specific anionic effects. We discuss why the mass of the film increases with the number of oxidation-reduction cycles. We prepared electrodes modified with Pd nanoparticles for electrocatalytical hydrogenation. This material was prepared by electroreduction of Pd ions confined inside a multilayer deposited on a carbon felt electrode. The as prepared electrodes were characterized with XPS, ellipsometry and SEM. These techniques showed that the nanoparticles preferentially grow at the electrode/film interface. The selectivity and performance of the nanocatalyzers greatly surpasses those of the electrodes prepared by direct electroreduction of Pd salts in solutions, which are a standard in the electrosynthesis literature. Electroactive nanostructured multilayer fims can behave differently to random films prepared by traditional techniques. The differences arise from the new process variables available in the layer by layer technique, which can be tuned to optimize film functional properties.

"Estudio de fuerzas electrostáticas en cristales moleculares" (1984). Gamba, Zulema B.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de genes expresados diferencialmente en el cáncer de colon humano" (1997). Mallo, Gustavo V.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de la Síntesis de flavinas en Brucella abortus como potencial blanco terapéutico contra la brucelosis" (2015-11-18). Serer, María Inés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los miembros del género Brucella son bacterias Gram-negativas intracelulares facultativas que se adaptan a la vida intracelular en una gran variedad de mamíferos. Brucella spp causan brucelosis, la zoonosis de mayor incidencia en el mundo que afecta al ganado y a humanos, y para la cual aún no se dispone de una vacuna segura y confiable. A pesar de que Brucella no presenta factores de virulencia clásicos, exhibe una gran flexibilidad metabólica la cual le permite adaptar su fisiología en respuesta a los distintos microambientes encontrados durante su ciclo de vida intracelular. Esta adaptación fisiológica se basa en un ágil ajuste de la expresión de distintos subconjuntos de genes, entre los que se encuentran aquellos involucrados en el metabolismo de flavinas. La riboflavina (vitamina B2) es el precursor de FMN y FAD, dos cofactores esenciales que están implicados en una amplia variedad de procesos celulares en todos los organismos. Esta vitamina es sintetizada en microorganismos y plantas, pero no en humanos y animales, los cuales deben adquirirla a través de su dieta. Los dos últimos pasos de la biosíntesis de riboflavina son catalizados por las enzimas Lumazina Sintasa (LS) y Riboflavina Sintasa (RS). Debido a la ausencia de esta vía metabólica en animales y el hecho de que las bacterias patógenas muestran una estricta dependencia de su biosíntesis de riboflavina, se ha propuesto a LS y RS como dianas potenciales para el desarrollo de fármacos antimicrobianos. En este trabajo se presentan datos que sugieren una regulación diferencial de los genes involucrados en la biosíntesis de riboflavina en B. abortus. Asimismo, se resolvió la estructura cristalográfica de RS de B. abortus unida al producto de reacción riboflavina y a dos análogos de producto. Para complementar estos resultados, se realizaron también estudios cinéticos y de unión sobre RS; y se llevó a cabo un ensayo de high throughput screening de microelectroforesis capilar de una biblioteca de 44.000 compuestos en colaboración con la empresa farmacéutica Novartis en Suiza. A partir de éste se identificaron diez compuestos con potencia micromolar del cual se identificó una serie de cinco compuestos con actividad in vivo contra B. abortus en cultivo bacteriano. En conclusión, la determinación de nuevas estructuras de RS unida a ligandos, su caracterización bioquímica y el hallazgo de nuevos inhibidores con actividad contra B. abortus in vivo representan un avance en la búsqueda de los antimicrobianos contra la brucelosis.

Abstract:
Brucella spp. are facultative intracellular Gram-negative bacteria, which are adapted to intracellular life within cells of a large variety of mammals. They cause brucellosis, a zoonotic infection with the highest incidence in the world affecting livestock and humans and for which a safe and completely reliable vaccine is still unavailable. Although Brucella has not classical virulence factors, it exhibits high metabolic flexibility, which allows it to adapt its physiology in response to different microenvironments found during its intracellular life cycle. This physiological adaptation is based on a flexible adjust of the expression of different subsets of genes, among which are those involved in the metabolism of flavins. Riboflavin (vitamin B2) is the precursor of FMN and FAD, two essential cofactors for all organisms that are involved in a wide variety of cellular processes. This vitamin is biosynthesized in microorganisms and plants but not in humans and animals, which must acquire it through their diet. The last two steps of riboflavin biosynthesis are catalyzed by Lumazine Synthase (LS) and Riboflavin Synthase (RS). Owing to the absence of this pathway in animals and the fact that most pathogenic bacteria show a strict dependence on riboflavin biosynthesis, it has been proposed that these enzymes may be promising targets for the development of new antimicrobial agents for the treatment of brucellosis. In this work, we show data that suggest a differential regulation of genes involved in the biosynthesis of riboflavin in B. abortus. Furthermore, we present the crystallographic structure of RS from B. abortus. In order to describe its substratebinding sites, we solved the structure of the enzyme in the presence of bound ligands, namely one of the products of the reaction (riboflavin) and two product analogues. To complement these findings, we performed kinetic and binding studies on the enzyme. A newly High-throughput Screening capillary electrophoresis assay of 44.000 compounds library was developed in collaboration with Novartis in Switzerland, which identified 10 compounds with micromolar potency. From this subset we identified a series of 5 compounds with in vivo activity against B. abortus. In conclusion, these newly determined structures, biochemical characterization of RS and finding of novel inhibitors with activity against B. abortus represent a progress in the pursuit of antimicrobial compounds against brucellosis.

"Estudio de la Vicariancia en alguna especies de anémonas de mar (CNIDARIA, ACTINIARIA) del intermareal de Brasil y Argentina con el uso de datos morfológicos y genéticos" (2001). Braga Gomes, Paula. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Estudio de la vicariancia en algunas especies de anémonas de mar (Cnidaria, Actiniaria) del interrnareal de Brasil y de Argentina con el uso de datos morfológicos y genéticos. Se realizaron estudios morfológicos y genéticos con la anémona de mar Bunadosoma cangicum de Brasil. Para los estudios morfológicos se utilizaron cuatro poblaciones provenientes de: Piedade y Tamandaré en Pemambuco, Aracruz en Espírtu Santo y Buzios en Río de Janeiro. Se estudiaron 14 caracteres morfológicos cuyas variaciones fueron analizadas con el test no parametrico de Kruskal-Wallis. Siete variables no presentaron la misma media en las cuatro localidades: número de vesículas por fila, número de tentáculos y de acrorhagi, diámetro de los acrorhagi, peso húmedo, altura de la columna y diámetro del margen. La población de Buzios fue la que más se diferenció, indicando la presencia de ecotipos. Se utilizó el test de correlación de Pearson para evaluar si los caracteres variaban de forma concomitante. Entre los caracteres estimadores de la talla, el peso húmedo fue el que mejor se correlacionó oon los demás, resultando ser éste el carácter más representativo del tamaño real del individuo. El largo y ancho del esfinter se relacionaron significantemente entre sí pero con independencia de la talla. Asimismo se realizaron estudios genéticos comparando las especies B. cangícum de Brasil (Buzios y Tamandaré), B. zamponianum n. sp. de Argentina (Santa Clara del Mar y Punta Cantera), B. caissarum de Brasil (Buzios) y B. granuliferum de Curacao (Caracas baai y Boka Saint Mitchel). Los estudios aloenzimátieos confirmaron que B. zamponianum pertenece al género en estudio, y es diferente de todas las demás especies. Esta especie y B. cangicum mostraron la identidad génica más elevada. Considerando las similitudes morfológicas y ecológicas, se discute la posible vicariancia de estas dos especies.

Abstract:
Studies on vicariance of some sea anemone species (Cnidaria: Actiniaria) from the intertidal zone of Brazil and Argentina using morphologic and genetic data. The present work carries out a morphologic and genetic study on Bunodosoma cangicum, a species of sea anemone from Brazil. Four populations were used for the morphologic studies: Piedade and Tamandaré in Pemambuco, Aracruz in Espírito Santo and Buzios in Rio de Janeiro. Fourteen characters were studied and the results analized by the Kruskall-Wallis Test. Seven characters did not present the same average in the four localities: number of vesicles by row, number of tentacles and acrorhagi, acrorhagi diameter, wet weight, height of the column and diameter of the margin. The population of Buzios was the most different, indicating the presence of ecotypes. The Pearson Correlation Test was used to evaluate whether the characters varied in a concomitant way. The wet weight related positiver to all the other characters estimators of the stature, verifying itself to be the most representative character of the real size of the individual. The length and width of the sphincter were related significantly, but independent of the stature. Genetic studies were also done comparing the species, B. cangicum from Brazil (Buzios and Tarmndaré), B. zamponianum (new species described in this work) from Argentina (Santa Clara del Mar and Punta Cantera), B. caissarum from Brazil (Buzios) and B. granuliferum from Curacao (Caracas Baai and Boka Saint Mitchel). The allozyme analysis confirmed that B. zamponianum belongs to the genus under study, and it is different from all the other species. In addition, this species and B. cangicum had the highest genetic identity. Thus, considering the morphological and ecological similarities, the possibility of these two species to be vicariants is discussed.

"Estudio de la acción del etileno y acetileno sobre el ioduro y cloruro de cianógeno" (1944). Pardo, Luis L.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de la adsorción de aniones sobre electrodos metálicos sólidos" (1985). Molina, Fernando Víctor. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de la anatomía ecológica de 14 especies de Astragalus de IRAN" (1994). Zarrinkamar, Fatemeh. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de la aplicación de luz UV pulsada y su combinación con otras tecnologías emergentes en matrices frutales" (2016-03-18). Ferrario, Mariana Inés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo principal de este trabajo residió en evaluar la eficiencia de la aplicación de luz pulsada (LP) en modo estanco (LPe) y en flujo continuo (LPc) y su combinación con ultrasonido de alta intensidad (US) y temperatura moderada (44-56 °C) para preservar jugos frutales. Se estudió la cinética de inactivación y la dinámica del crecimiento en el almacenamiento refrigerado de diversos microorganismos patógenos y deteriorativos inoculados y la flora nativa de varios jugos frutales (manzana, frutilla, naranja y melón) tratados por las tecnologías simples o combinadas mediante los modelos de Weibull, bifásico y doble Weibull. La efectividad de los tratamientos dependió de la absorbancia en el rango UV y turbidez de los jugos y del microorganismo evaluado. Estudios de citometría de flujo mostraron que células de S. cerevisiae, evidenciaron desestabilización de la integridad de la membrana y presencia de una subpoblación con daño subletal a bajas dosis de LP (12 J/cm2) y mediante microscopía electrónica de transmisión, presencia de vacuolas expandidas, pérdida y coagulación del contenido intracelular, y menor densidad electrónica. Los estudios de flora nativa, color y análisis sensorial concluyeron en la definición de un jugo de manzana preservado por LPc (0,73 J/cm2; 155 mL/min) combinado con US (30 min) y temperatura moderada, seguro y de buena calidad organoléptica, cuya vida útil refrigerada fue de 6 días. El producto propuesto evidenció mediante un análisis de conglomerados aceptabilidad por un grupo específico de consumidores interesados en la acidez y el intenso sabor a manzana del producto.

Abstract:
The overall objective of this study was to evaluate the efficacy of pulsed light technology (PL) in a static (PLs) or continuous flow (PLc) modes in combination with high intensity ultrasound (US) to preserve fruit juices. The inactivation kinetics and growth dynamics under refrigeration conditions of relevant microorganisms and native flora in apple, strawberry, orange and melon juices treated by the proposed single or combined technologies were studied by Weibull, biphasic and double Weibull models. The antimicrobial efficiency of the applied treatments depended on absorptivity and turbidity of juices as well as the strains. Flow cytometry studies revealed sub-lethal damage at low PL doses (< 12 J/cm2) and loss of membrane integrity in PL treated S. cerevisiae cells, while transmission electron microscopy observations showed expanded vacuoles, loss of inner content by puncture sites, less electronic density, among others. The combination US and PLs showed additive effects in S. cerevisiae inactivation in apple juice. Analysis of native flora, colour and sensory properties of apple juice processed by the combined PLc (0.73 J/cm2, 155 mL/min) and US (30 min) treatment ratified a product microbiologically safe with good organoleptic quality, with a 6 day shelf life. Apple juice treated by the combined PL/US method exhibited high acceptability by a group of consumers interested in the acidity and intense apple flavour of the juice.

"Estudio de la biodiversidad de Ostrácodos actuales y su aplicación en la elaboración de funciones de transferencia para reconstrucciones paleoambientales del Holoceno en la provincia de Santa Cruz (50-52° S)" (2015-03-20). Ramón Mercau, María Josefina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El extremo austral de la región Patagónica es un área de gran interés para la reconstrucción paleoambiental del Holoceno por su situación geográfica y climática única dentro del Hemisferio Sur. El objetivo de la presente investigación fue estimar variaciones pasadas en parámetros ambientales climáticamente controlados durante el Holoceno Medio y Tardío mediante estudios paleolimnológicos basados en un bioproxy, los ostrácodos (Crustacea: Ostracoda). Se analizó la hidroquímica de más de 30 cuerpos de agua lénticos actuales del sur de Santa Cruz, con el objetivo de caracterizar el gradiente ambiental subyacente. A su vez, se evaluó la distribución de los ostrácodos patagónicos en función de la concentración y composición de solutos de sus aguas huésped. Los datos generados fueron utilizados para elaborar una función de transferencia para la reconstrucción cuantitativa de variaciones pasadas en la salinidad, la cual fue aplicada a testigos sedimentarios lacustres cuyo registro abarca los últimos miles de años. Asimismo, se realizaron inferencias semi-cuantitativas sobre la composición de solutos (tipo de agua) en dichos ambientes. Esta información, junto con datos obtenidos a partir de otros proxies - biológicos, sedimentológicos y/o magnéticos – fue utilizada para reconstruir variaciones pasadas en el balance hídrico de los cuerpos de agua estudiados, las cuales a su vez permitieron evaluar cambios en los regímenes de precipitaciones y patrones de circulación atmosférica sobre la Patagonia Astral durante la segunda mitad del Holoceno.

Abstract:
The southermost part of the Patagonian region constitutes a key area for the paleoenvironmental reconstruction of the Holocene, due to its unique geographical setting and climatic characteristics within the Southern Hemisphere. The present investigation aimed to estimate past variations in climatically-driven environmental parameters during the Middle and Late Holocene by means of a paleolimnological approach, using ostracods (Crustacea: Ostracoda) as bioproxies. The hidrochemistry of over 30 lentic waterbodies located in southern Santa Cruz province was analyzed in order to characterize the underlying environmental gradient. In turn, Patagonian ostracods distribution was evaluated with respect to the solute concentration and composition of their host waters. This data was used to develop a transfer function for cuantitative reconstruction of past variations in salinity, which was applied to the ostracod record of several lacustrine sediment records spanning the last few milennia. Additionally, semi-quantitative inferences on past solute composition (water type) variations were drawn. This information, together with data inferred from other proxies – biological, sedimentological and/or magnetic – allowed the reconstruction of past variations in the hydrological balance of the waterbodies under study, which in turn provided insight into precipitation regimes and atmospheric circulation patterns shifts over Southern Patagonia during the second half of the Holocene.

"Estudio de la biodiversidad, fisiología y cultivo de las especies silvestres del género Pleurotus (Basidiomycetes, Agaricales) en la República Argentina" (2002). Lechner, Bernardo E.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo se estudió el género Pleurotus (Fr.) P. Kumm. en la República Argentina. Para conocer su biodiversidad, se analizaron los caracteres macro- y micromorfológicos de colecciones obtenidas a campo y de distintos herbarios nacionales (BAFC, LPS, LIL). Se utilizaron los cruzamientos intra- e interespecíficos entre cultivos monospóricos, obtenidos a partir de las fructificaciones de los aislamientos depositados en el cepario BAFC y de basidiocarpos coleccionados, como herramienta para la correcta delimitación de especies. Se concluyó que en la Argentina hay, hasta el momento, 6 especies, una de ellas representada por tres variedades: P. albidus, P. cystidiosus, P. djamor var. djamor, P. djamor var. cyathiformis, P. djamor var. roseus, P. ostreatus, P. pulmonarius y P. rickii. Se estudió la temperatura y el medio de cultivo óptimo de 28 cepas del género. Se caracterizaron los cultivos en medio sólido mediante la reacción enzimática con ácido gálico, ác. tánico, tirosina, p-cresol y guayacol, así como la degradación de Poly R-478 y Azure B. Se hizo el estudio de cultivo con base en la metodología propuesta por Nobles y en otros medios como agar papa glucosado, agar grano y medio sintético completo. Se utilizaron las técnicas de cultivo para la obtención de basidiocarpos con tres aplicaciones: 1) permitir que las fructificaciones pudieran ser estudiadas macro y micromorfológicamente en estado fresco; 2) obtener de ellas la esporada necesaria para lograr cultivos monospóricos y 3) analizar la capacidad productiva. Se ensayaron especies nativas en distintos sustratos artificiales con el fin de verificar su potencial productivo, encontrando diferencias entre las distintas cepas y sustratos ensayados.

Abstract:
To learn about the biodiversity of the genus Pleurotus (Fr.) P. Kumm. in Argentina, macro- and micromorfological characters of collections obtained in the field and from different national herbaria (BAFC, LPS, LIL)were analysed. Intra- and interspecific pairings between monosporic cultures, obtained from the fruit bodies of strains deposited in the BAFC culture collection and of collected fruit bodies were used as tool for the correct delimitation of species. We concluded that in Argentina there are, so far, 6 species. one of them represented by three varieties: P. albidus, P. cystidiosus, P. djamor var. djamor, P. djamor var. cyathifonnis, P. djamor var. roseus, P. ostreatus, P. pulmonarius and P. rickii. Optimum temperature and culture media of 28 strains of the genus were studied. Solid cultures were characterized by the enzymatic reaction with gallic and tannic acid. tyrosine, p-cresol and guaiacol, as well as the degradation of Poly R-478 and Azure B.Cultural study was based on Nobles’ protocol as well as on media such as potato glucose agar, grain agar and synthetic complete agar. Cultivation techniques used for obtaining basidiomata had three applications: 1) allowing macro- and micromorphological study of fresh developing fruitbodies, 2) to obtain spore prints and 3) to learn about their productive capacity. Native species were tested on different artificial substrates with the purpose of verifying their productive potential, and differences between the different strains and substrates were found.

"Estudio de la capacidad adyuvante de la proteína Omp19 de Brucella spp. sobre la respuesta inmune adaptativa" (2014). Coria, Mirta Lorena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En nuestro laboratorio nos encontramos investigando la utilidad de la porción proteica de la lipoproteína de membrana externa de 19 kiloDalton de Brucella abortus (U-Omp19) como adyuvante vacunal. Resultados previos proponían a U-Omp19 como un inhibidor de serin proteasas de estómago e intestino. En esta tesis hemos comprobado que U-Omp19 posee actividad de inhibidor de cisteín proteasas lisosomales y que la co-administración de U-Omp19 inhibe parcialmente la degradación del antígeno (Ag) dentro de las células presentadoras de Ag incrementando su vida media y promoviendo su presentación cruzada a las células T CD8+. UOmp19 también es capaz de activar células dendríticas (DCs) induciendo un aumento en la expresión de moléculas co-estimulatorias y secreción de citoquinas pro-inflamatorias. Por último, estudiamos la respuesta inmune inducida en ratones luego de la co-administración de OVA y U-Omp19 por vía subcutánea. Observamos que U-Omp19 como adyuvante de OVA induce una eficiente respuesta inmune celular de tipo T CD8+ y citotóxica con producción de IFN-γ. Los resultados obtenidos indican que la actividad adyuvante de U-Omp19 está dada, por un lado, por su capacidad de activar DCs y por otro lado, por promover la estabilidad y la presentación de Ags a través de su acción como inhibidor de proteasas, éste último representa un novedoso mecanismo aún no descripto para un adyuvante vacunal.

Abstract:
In our laboratory we are investigating the usefulness of the protein moeity of the outer membrane lipoprotein of 19 kiloDalton from Brucella abortus (U-Omp19) as a vaccine adjuvant. Previous results proposed U-Omp19 as a serine protease inhibitor. In this thesis we found that U-Omp19 possesses inhibitory activity of lysosomal cysteine proteases, and that the coadministration of U-Omp19 partially inhibits the antigen (Ag) degradation in Ag presenting cells increasing its half life and promoting its cross presentation to CD8+ T cells. U-Omp19 is also capable of activating dendritic cells (DCs) inducing the upregulation of co-stimulatory molecules and secretion of pro-inflammatory cytokines. Finally, we studied the immune response induced in mice after subcutaneously co-administration of U-Omp19 and OVA. We observed that UOmp19 as adjuvant of OVA induces an effective T CD8+ and cytotoxic cellular immune response with IFN-γ production. These results indicate that the adjuvant activity of U-Omp19 is given, in one hand, by its ability to activate DCs and in the other hand, by promoting Ag stability and presentation through its action as a protease inhibitor, the latter represents a novel mechanism not yet described for a vaccine adjuvant.

"Estudio de la cinética de gelatinización y de las variables operativas en el parbolizado de arroz" (1998). Ojeda, Carlos Alberto. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El proceso de parbolizado de arroz requiere de una etapa que gelatinice el almidón presente en el grano. Para lograrlo, muchos de los sistemas de uso industrial recurren al vapor de agua. La gelatinización del almidón tiene por objeto darle al arroz parbolizado sus peculiares características, tales como su alto rendimiento durante la molienda y sus propiedades culinarias: flavour, mayor dureza, menor pegajosidad, y mayor resistencia a la sobrecocción. La generación de vapor de agua acarrea un costo de producción, por lo tanto cuanto mayor sea el conocimiento y la optimización de esta etapa mayor será el ahorro para la industria arrocera. Los objetivos de este trabajo son: a) Estudiar la cinética de gelatinización del arroz a partir de ensayos dinámicos de calorimetría diferencial de barrido (D.S.C.). Obtener los parámetros cinéticos del proceso de gelatinización: constantes de velocidad de reacción, energia de activación y orden de reacción usando dos modelos cinéticos propuestos en la bibliografia (Ozawa, 1970 ; Borchardt y Daniels, 1957). En base a estos resultados proponer una explicación teórica que los respalde. b) Estudiar la influencia de las variables operativas del proceso de cocción con V vapor tiempo y presión, sobre el porcentaje de gelatinización del grano de arroz. El desarrollo del item (a) requirió la puesta a punto del método calorimétrico. Este paso involucró la selección del grado de pulido del grano y la granulometria de la harina de arroz. También fue necesario determinar la relación de agua / harina más conveniente y la velocidad óptima de calentamiento, para lo cual se realizaron ensayos previos que fueron analizados mediante la metodologia de superficies de respuestas. Por otro lado la realización de los ensayos de cocción con vapor mencionados en el item (b) comprendió el diseño y construcción de un equipo experimental provisto de un control preciso de la presión de vapor. Al igual que en el item (a) se recurrió a la metodologia de superficies de respuesta para analizar la acción de los parámetros operativos del proceso de cocción sobre el porcentaje de gelatinización. Esta metodologia permite determinar la óptima combinación de parámetros para lograr la máxima gelatinización con el menor gasto (tiempo y energia) posible.

"Estudio de la codificación de las características temporales del sonido mediante experimentos psicofísicos y modelado computacional de la periferia auditiva" (2016-03-29). Etchemendy, Pablo Esteban. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El sistema auditivo utiliza dos mecanismos fundamentales para la percepción de altura tonal. Uno de ellos (conocido como "tonotópico", "espectral" o "de lugar") se basa en la capacidad de separar frecuencias que posee la membrana basilar: la misma muestra un patrón de excitación con máxima amplitud en un determinado lugar, en función de la frecuencia del estímulo sonoro. El otro (conocido como "mecanismo temporal") se basa en la capacidad de las neuronas del nervio auditivo de generar potenciales de acción sinápticos sincronizados con la fase del estímulo sonoro ("enganche de fase"). Existe un debate abierto respecto a cuál mecanismo interviene en la percepción de altura tonal para diferentes estímulos y rangos de frecuencia. Para el caso de tonos modulados en frecuencia, típicos en el contexto musical (vibratos) y en ciertos lenguajes tonales como el chino mandarín, se sabe que la modulación en frecuencia introduce modulaciones en amplitud en la forma del patrón de excitación de la membrana basilar. Además, existen resultados perceptuales que pueden ser explicados en función del tiempo que la señal pasa en los extremos de la modulación. Estos resultados muestran que la información temporal participa en la percepción de la altura tonal y que el mecanismo que la procesa muestra cierta "inercia" o "lentitud" ("sluggishness" en inglés), que dificulta la detección de la frecuencia cuando la modulación es rápida. En este trabajo utilizamos dos metodologías para estudiar la codificación de la altura tonal. En la primera parte se describen experimentos de percepción de altura tonal realizados con tonos puros modulados en frecuencia (vibratos) con perfiles asimétricos. Además se realiza una revisión de una variedad de modelos aplicables a la percepción de altura tonal. Se incluyen modelos basados en la información espectral, en la temporal, modelos mixtos y modelos fenomenológicos propuestos específicamente para explicar resultados de experimentos con vibratos. Se comparan las predicciones de dichos modelos con los resultados de los experimentos realizados. Se incluye también una revisión de resultados previos de experimentos similares y una contrastación de dichos resultados con las predicciones de los modelos. En la segunda parte se estudiaron algunos mecanismos biológicos que son importantes para explicar la codificación de la información temporal en la periferia auditiva. Se describe un modelo biofísico realista de la sinapsis de cinta de las células ciliadas internas, las células responsables de la transducción de las vibraciones mecánicas de la membrana basilar a impulsos neuronales en los nervios auditivos. Dicha sinapsis se destaca por su baja latencia, lo cuál es un requisito necesario para poder conservar en forma fidedigna la información de fase. Analizamos los parámetros del modelo y estudiamos diferentes mecanismos propuestos en la literatura para explicar su baja latencia. Finalmente estudiamos la capacidad para el enganche de fase de dicho modelo, en particular para tonos modulados en frecuencia, para comprender de qué modo se ve afectada por la rapidez de la modulación y cómo puede in uir en la percepción de la altura.

Abstract:
The auditory system employs two main mechanisms for the perception of pitch. The first mechanism (known as "tonotopic", "spectral" or "rate-place") is based on the frequency selectivity present at the basilar membrane: as the stimulus frequency varies, the basilar membrane displays an excitation pattern whose point of maximum amplitude also varies. The second mechanism (known as "temporal") is based on the ability of the auditory nerve fibers to generate spikes in synchrony with the phase of the auditory stimulus ("phase-locking"). There is an ongoing debate about which mechanism is responsible for the perception of pitch for different stimuli and frequency ranges. In the case of frequency-modulated tones, present in music (vibratos) and in some tonal languages as Mandarin Chinese, the modulation of frequency introduces a modulation of amplitude in the shape of the excitation pattern on the basilar membrane. Also, there is perceptual evidence of an effect of the time that the signal spents at the extremes of the modulation profile on the perception of pitch. These evidence suggests that the temporal information is involved in the perception of pitch and that the underlying mechanism displays some degree of "sluggishness", difficulting the perception of pitch for rapid modulations. In these work we used two methodologies in order to study the codification of pitch. In the first part we describe psychoacoustical pitch perception experiments with asymmetrical frequency-modulated tones. The work includes a review of several diverse models proposed in the literature for the perception of pitch. The predictions of the models are compared with the results of the experiments and also with a review of recent experiments on the same subject. In the second part, we studied some biological mechanisms that are key to the codification of the temporal information at the auditory periphery. We describe a realistic biophysical model of the internal hair cell ribbon synapse, the structure responsible for the transduction of the oscillations on the basilar membrane into neural impulses at the auditory fibers. The ribbon synapse displays a very low latency, which is a requisite for ensuring a faithful transmission of the temporal information of the stimulus. We analyzed the parameters of the model and studied mechanisms proposed in the literature to explain this characteristic. Finally, we analyzed the phase-locking capability of the model, in particular for frequency-modulated tones, in order to understand the effect of the modulation in the synchronization and its influence on pitch perception.

"Estudio de la composición genómica de forrajeras mediante técnicas electroforéticas y de citogenética clásica y molecular" (2004). Ferrari, María Rosa. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Tricepiro es un cereal sintético de alto valor forrajero, que fue obtenido por el Ing. Covas en 1972. Lo logró cruzando triticale Don Santiago INTA(2n=42) por trigopiro Don Noé INTA(2n=56). Luego de varios años de mejoramiento logró la linea 3-40 que fue inscripta en 1994 como cultivar con el nombre de tricepiro Don René INTA.Esta línea, que presenta resistencia a enfermedades y es tolerante al frío y a la salinidad del suelo, constituye un material apto para ser usado en programas de mejoramiento. Dentro de los objetivos de la presente tesis estuvieron. Establecer y comparar los patrones electroforéticos de gluteninas de alto peso molecular (HMW)de tricepiro Don René INTA y de sus progenitores, así como determinar la existencia de variabilidad para dichas proteínas en lineas hermanas del cultivaren estudio. Determinar la estabilidad meiótica de tricepiro Don René INTA mediante el estudio de la meiosis masculina. Establecer la relación entre la rugosidad de las semillas y el contenido de heterocromatina telomérica de los cromosomas de centeno, en lineas de tricepiro Determinar la composición genómica de tricepiro Don René INTA e individualizar sus cromosomas mediante técnicas de citogenética clásica y molecular. La electroforesis de proteinas seminales (SDS-PAGE) mostró que tricepiro Don René INTA tiene cinco bandas correspondientes a gluteninas (HMW), ninguna de las cuales le es propia. De las cinco bandas, cuatro las comparte con ambos progenitores y la quinta la comparte sólo con trigopiro Don Noé INTA. Esta banda podría provenir de Thinopyrum. Las 9 lineas hermanas de tricepiro Don René INTA que se estudiaron tienen las cinco bandas que presenta el cultivar. Dos de estas líneas, tienen una banda adicional, FA-L2 la comparte con trigopiro Don Noé INTA y FA-L66 tiene una banda propia. Los estudios meióticos de tricepiro Don René INTA mostraron la formación de 21 II en diacinesis. Sin embargo, en Metafase I se observaron asincronías en el comportamiento cromosómico tales como bivalentes que segregaban tempranamente y presencia de univalentes fuera de la placa ecuatorial. El comportamiento meiótico no reveló la presencia de heterocigosis para alteraciones numéricas ni estructurales. El número de micronúcleos presentes en las tetradas osciló entre 0 y 9 y se calculó un Índice Meiótico de 66,47. Se hizo bandeo C y DAPI en cromosomas mitóticos de tricepiro Don René INTA. Se observaron 14 cromosomas con importantes bandas teloméricas atribuibles a cromosomas de centeno y 14 cromosomas con numerosas bandas intersticiales, supuestamente pertenecientes al genoma B de trigo, de acuerdo con patrones usados internacionalmente. Tricepiro Don René INTA posee semillas rugosas, mientras que la línea FA-L2 tiene semillas lisas. Se determinó que el tamaño de las bandas teloméricas del genoma R es similar en ambas lineas. Por lo tanto, las caracteristicas rugosidad de las semillas y tamaño de las bandas teloméricas de los cromosomas de centeno no muestran asociación . Los estudios de hibridación in situ con ADN genómico total de Secale cereale y Thinopyrum bessarabicum como sondas y Triticum aestivun var Chinese Spring como bloqueante (GISH) mostraron que Tricepiro Don René INTA tiene 14 cromosomas de centeno y 28 de trigo. En un par de estos últimos se detectó introgresión de Thinopyrum. La identificación de todos los cromosomas del hibrido se logró haciendo hibridación con las sondas pSc 119.2 y pAs1 (FISH). La composición genómica y la constitución cromosómica de tricepiro Don René INTA es la siguiente: 7 pares de cromosomas de centeno (1R, 2R, 3R, 4R, 5R, 6R, 7R); 7 pares de cromosomas del genoma A de trigo (1A, 2A, 3A, 4A, 5A, 6A, 7A); 7 pares de cromosomas del genoma B de trigo (1B, 2B, 3B, 4B, 5B, 6B, 7B). Introgresión del genoma J de Thinopyrum (posiblemente Th. ponticum 2n=70) en un par cromosómico del genoma A, que por su morfología y su tamaño podría ser el 6A.

Abstract:
Tricepiro is a synthetic cereal of high forage value obtained by G. Covas in 1972 in Argentina by crossing hexaploid triticale (2n=6x=42) and octoploid trigopiro (2n=8x=56). Several years of self pollination resulted in a line, 3-40, that was registered as a cultivar under the name tricepiro Don René INTA. This line possesses high potential as a parent in breeding programmes due to its marked disease resistance and freezing and drought tolerance. Inside the objectives of the present thesis they were: to find homologies between tricepiro Don René INTA and its ancestors through high molecular weight glutenines (HMW) analysis and to compare the variability between advanced lines; to study the meiotic behavior in order to determine the meiotic stability of tricepiro Don René INTA; to correlate kernel shrivelling in tricepiro with the size of terminal heterochromatin blocks on the rye chromosomes; to characterize the genome constitution of tricepiro Don René lNTA and identify its chromosomes using clasical and molecular cytogenetical techniques. Glutenines were fractionated by sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis ( SDS- PAGE) and bands of Triticum aestivum var. Chinese Spring were used for comparison. Tricepiro has five bands, four of them shared with both progenitors and one only with trigopiro Don Noé INTA. With the exception of two lines (FA L2 and FA L66) the advanced lines of tricepiro show very low variability among them. Meiotic studies showed the presence of 21 II in diacinesis but in metaphase I an asincronic chromosome behavior was observed: some bivalents segregated early and univalents were detected. Tetrades have between 0 and 9 micronuclei and the Meiotic Index was 66.47. No heterocigosis for structural rearrayement or numerical alterations were detected. C-bands and DAPI showed 14 chromosomes with large terminal heterochromatic band that are putative rye chromosomes and 14 chromosomes with intersticial bands that are putative 14 wheat chromosomes (genome B). Tricepiro Don René INTA (shrivelling kernel) and FA-L2 (smooth kernel) didn't show statistical differences between the size of their rye telomeric heterocromatin bands. So no relation were detected between shrivelling kernel and rye telomeric heterocromatin bands in these tricepiro lines. The in situ hybridization using total DNA of Seca/e, Triticumand Thinopyrum as a probe (GISH) labelled with biotin and/or digoxigenin showed that tricepiro Don René INTA consists of 14 rye chromosomes and 28 wheat chromosomes. Small introgression zones of Thinopyrum in wheat chromosomes were detected. FISH using the repetitive DNA probes pSc 119.2 and pAs1 labelled with biotin, leads us to state that the genomic composition and the chromosomes identification of tricepiro Don René INTA are the folowing: 7 rye chromosomes pairs (1R, 2R, 3R, 4R, 5R, 6R, 7R). 7 wheat chromosomes pairs belonging to the B genome (1B, 2B, 3B, 4B, 5B, 6B, 7B). 7 wheat chromosomes pairs belonging to the A genome (1A, 2A, 3A, 4A, 5A, 6A, 7A). Introgression of a region from Thinopyrum in a wheat chromosome pair belonging to the A genome (putative chromosome 6A).

"Estudio de la composición química de la semilla y de los aceites de semilla de frutos cítricos de producción nacional : Harinas de extracción y aislamiento de proteínas" (1976). Tortosa, Alicia E.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de la composición química de la semilla y de los aceites de semilla de frutos de especies de "Prunus" de producción nacional. Harinas de extracción y aislamiento de proteínas" (1978). Funes, Jorge Armando. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de la deformación litosférica de la cuenca Neuquina: estructura termal, datos de gravedad y sísmica de reflexión" (2012). Sigismondi, Mario Emilio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En las últimas dos décadas especialmente, la atención de los científicos hacia trabajos de campo, geofísica y geoquímica, ha servido para el estudio de la estructura profunda de la corteza y del manto y su relación con la génesis y evolución de las cuencas sedimentarias. Es claro que estos resultados no son sólo de valor académico, sino que tienen importancia práctica ya que el mejor conocimiento de la geología y la geofísica profunda llevan a un entendimiento acabado de los fenómenos geológicos y las condiciones de formación y distribución de los espacios de acomodación para alojar depósitos minerales de interés económico. Consecuentemente, parece lógica la decisión de intentar reunir la mayor parte de los datos geofísicos disponibles tanto a escala de detalle como regional, y proveer una síntesis de la evolución de la cuenca Neuquina en su contexto geodinámico. La investigación presentada es un esfuerzo dirigido a hacia esos objetivos. Como un método geofísico en particular ilumina sólo una parte del problema, el empleo de técnicas combinadas ha permitido encontrar soluciones más cercanas a la realidad, teniendo en cuenta sus relaciones, semejanzas y diferencias. Debido a que los relevamientos geofísicos para estudios regionales y de detalle han sido ejecutados mayormente por organismos gubernamentales o privados y muchas veces no son accesibles para docentes e investigadores universitarios, una de las contribuciones de esta tesis es la cooperación entre la universidad y la industria, tomando las fortalezas de ambas vertientes. La premisa fundamental en esta tesis ha sido examinar la relación existente entre elementos que condicionan el régimen tectónico por medio de observaciones geofísicas. El ambiente tectónico de tipo andino de la cuenca Neuquina está controlado por tres factores fundamentales: estado térmico, volcanismo y apilamiento tectónico. El régimen térmico está regido por el flujo de calor, el cual muestra como cuadro de primer orden un sector norte alineado entre la localidad de Chos Malal y el volcán Auca Mahuida que exhibe un gradiente promedio mayor al resto de la cuenca Neuquina, especialmente respecto al sur de la dorsal de Huincul donde el flujo es el menor. Simultáneamente, el régimen térmico es el principal responsable de la existencia de tres escenarios nítidos de rigidez flexural, que han condicionado la deformación a escala cortical pero transmitiendo su impronta en la deformación del basamento: la dorsal de Huincul se comporta como un elemento de elevada resistencia mecánica relativa, que limita la propagación de la deformación hacia el sur de la comarca; la faja plegada del Agrio – Chos Malal y el volcán Auca Mahuida son las zonas más propensas a la deformación pues es la de menor rigidez relativa; y por último, el sector oriental o de plataforma, el cual presenta una rigidez flexural intermedia. Una observación muy importante es la anisotropía de la rigidez que se comporta en dirección oeste – este al norte de la dorsal de Huincul, para transformarse casi norte – sur desde la dorsal de Huincul hacia abajo. Como resultado de los cambios en la distribución de rigidez, la partición de la deformación asociada a un régimen de convergencia oblicuo que cambia su trayectoria en el tiempo, no ha permanecido invariable, sino que se ha resuelto de dos formas: al norte de la dorsal de Huincul la deformación se propaga casi sin partición, dando origen a la existencia de la faja plegada y corrida del Agrio y Chos Malal, a la deformación de arco y antearco, y a una zona sismogénica más amplia y trabada que ha ocasionado dos megasismos recientes en la región. Mientras, al sur de la dorsal de Huincul, el vector de convergencia andino se descompone en segmentos aproximadamente perpendiculares entre sí y sometidos a transpresión y transtensión, que dan origen a dos megaestructuras con mecanismo dominante de transcurrencia: la zona de falla de Liquiñe – Ofqui con dirección preferencial norte – sur y la dorsal de Huincul oeste – este. Acerca del volcanismo al cual hicimos referencia como un factor de control tectónico, en esta investigación se ha prestado especial atención al aparato volcánico del Auca Mahuida. Se postula aquí que por su edad pliocena – pleistocena, el control isostático que ejerce actualmente es casi exclusivamente local, pero aún así, sus consecuencias son fundamentales: debilita la corteza, eleva las transiciones frágil– dúctiles y permite la propagación de la deformación a sectores de borde de cuenca, relativamente retirados del frente orogénico. En cuanto al volcanismo de arco propiamente dicho, este coincide regionalmente con una zona de baja rigidez flexural para su emplazamiento, lo cual ha facilitado los mecanismos de acortamiento orogénico, el debilitamiento de la litosfera, y la migración del magmatismo por empinamiento y horizontalización de la placa subducida, procesos que se retroalimentan en sí. Con respecto al apilamiento tectónico, la faja plegada y corrida del Agrio – Chos Malal se halla emplazada sobre una zona de muy baja rigidez flexural y al menos su influencia como carga topográfica de superficie, habría facilitado la propagación de la deformación hacia el antepaís de la cuenca Neuquina por mecanismos básicamente flexurales, si bien se reconoce a partir del análisis de subsidencia en pozos, que la componente térmica es más importante que la tectónica, prevaleciente en la mayoría de las cuencas del Subandino. La cuenca Neuquina posee descompensación isostática residual positiva asociada a anomalías magnéticas corticales negativas localizadas en su depocentro sedimentario, que avalan la hipótesis de adelgazamiento cortical. El mecanismo de apertura de la cuenca Neuquina en su etapa de rifting localizado, se puede explicar satisfactoriamente y de forma coherente a las observaciones si se recurre a la hipótesis de cizalla simple, con una falla maestra de enraizamiento cortical que trae como consecuencia la distribución asimétrica de flujo de calor. Este modelo, que además predice atenuamiento cortical confirmando las anomalías observadas, no necesariamente coincide con la zona de levantamiento térmico, y por tanto, el área por debajo no acomoda toda la subsidencia térmica. La distribución de la deformación y la fábrica del basamento, que condiciona la existencia de espacios de acomodación sedimentarios, está íntimamente sujeta a los cambios del flujo de calor, la rigidez flexural y el estado isostático, como elementos de primer orden. La cuenca Neuquina conserva un gradiente geotérmico ligeramente mayor al promedio mundial de regiones continentales, cuyo origen se atribuye esencialmente a fenómenos de refracción térmica del basamento y volcanismo reciente, los cuales afectan las condiciones reológicas de la corteza, favoreciendo la deformación de intraplaca en el antepaís. Entre tanto, los cambios en la rigidez flexural, se interpretan fundamentalmente como cambios en la resistencia mecánica a la deformación. A pesar de la abundante información recopilada en esta tesis, la correlación de las anomalías geofísicas y de los datos provenientes de perforaciones y afloramientos está en una etapa inicial, por lo cual sigue existiendo ambigüedad en las interpretaciones, especialmente cuando se trabaja con métodos potenciales no ajustados con datos independientes. La fortaleza de esta tesis está basada en la interpretación geofísica interdisciplinaria sobre un marco de referencia generalizado, que se espera contribuya en la comprensión de la evolución geodinámica de la región, y más importante aún, estimule el desarrollo de nuevas investigaciones para mitigar las incertezas encontradas.

Abstract:
The attention of scientists working in the fields of geology, geophysics and geochemistry was very much attracted during the last two decades, to the study of the deep structure of the earth’s crust and mantle and their relationships to the genesis and evolution of sedimentary basins. Obviously, these results are not only of pure scientific value, but also have practical significance since the best knowledge of geology and geophysics lead to a better understanding of geological phenomena and the conditions of formation and distribution of mineral resources. Consequently, it seems logical the decision to try collecting most of the geophysical data available, for understanding the Neuquén Basin evolution in a geodynamics framework. This thesis is an effort towards these goals. Due to that if we use exclusively one geophysical method it illuminates only one part of the problem; the use of combined techniques has allowed us to find solutions closer to reality, taking into account their relationships, similarities and differences. Because geophysical surveys have been carried out mostly by government and private agencies, seldom these data are straightforward available to academic researchers. One character of this thesis is the link between universities and industry, trying to mitigate the weaknesses of both sides. A primary principle was to study the relationship between the factors that determine the tectonic regime throughout geophysical observations. Geophysical data indicate that the crust is not a homogeneous rigid layer over the Neuquén Basin. The crucial reason for crustal in homogeneity is that Neuquén Basin is in an Andean-type tectonic regime that is controlled by three factors: thermal state, volcanism, and tectonic load. It has been suggested that thermal state is governed by current heat-flow. In the study-case a first-order feature, a lineament between Chos Malal and Auca Mahuida volcano, has a higher average thermal-gradient at the northern zone, mainly when compare with the south Huincul system where the heat-flow is lower. Likewise, it has been argued from this thesis that thermal regime has conditioned the crustal and basement deformation, due to rigidity is strongly dependent on temperature and deformation rate. Consequently, lithosphere rigidity is expected to vary laterally as a function of geothermal gradient; a cold lithosphere is probable to be stronger and/or thicker and a hot lithosphere is expected to be weaker and/or thinner. This is the main reason for the existence of three scenarios of flexural rigidity: 1) the Huincul-system as a regional edge limiting the develop of basement ductile deformation to the south of the Neuquén Basin; 2) the Agrio - Chos Malal fold thrust belt and Auca Mahuida volcano with lower rigidity values, predisposed to thin–skinned deformation and structural control of volcanism respectively, and 3) the Eastern Platform with an intermediate flexural rigidity value. I propose two non-exclusive processes that take into account the play between crustal and basement deformation in Neuquén Basin: response to changes in distribution of flexural-rigidity, and divergence in plate convergence vector related to an oblique subduction against the plate boundary. As a result, there are two background-structural scenarios connected with the partition of the deformation: − A low partition-system north of the Huincul-axis, associated with the deformation in the arc, forearc, fold and thrust belt, and a wider locked seismogenic zone. − A high partition-system from the Huincul-trench to the south, a place where the vector of convergence splits in two perpendicular movements: the north - south Liquiñe - Ofqui fault zone, and the west - east Huincul high structural feature, both with dominant mechanisms of strike-slip displacement. Therefore, rigidity layering has the largest effect on horizontal deformation under the Andean type subduction system. A key observation in this context was the congruity with a next aspect; it is referred to the nature of the relationship between volcanism as a control factor in the tectonic regime and deformation. In this particular case, a key role plays the interaction between crustal structures of the basement and ongoing regional stress field on the Pliocene – Pleistocene Auca Mahuida volcanic complex. This effect is followed by crustal weakening, raise of the limits of brittleductile zones, and expansion of the deformation far away from the Andean orogenic front. On the other hand, a third aspect is connected with tectonic load. As we have affirmed, the influence of surface topography in the Agrio - Chos Malal fold and thrust belt have facilitated the foreland region deformation by flexural mechanisms, although it is recognized from borehole subsidence analysis time-depths cross plots that thermal component is besides tectonics, prevailing in most Sub-Andean basins. In this context, the development of geophysical methods to determine the lithospheric structure gave direct evidence from the pair associated positive residual isostatic anomaly - negative crustal magnetic anomaly, that Neuquén Basin has a thinned crustal structure in the deepest sedimentary alignment. During the rifting stage, the opening mechanism of Neuquén Basin can be adequately explained by the simple shear model, with a crustal master fault like Entre Lomas – Estancia Vieja and an asymmetric heat-flow array. The distribution of deformation patterns and basement fabrics play a key role in relation to changes in heat-flow and flexural rigidity. These changes in rigidity, can be attributed to variations in the geochemical properties of rocks, or differences in temperature and pressure conditions between the upper and lower crust, but here are interpreted as changes in the mechanical strength. The correlation of geophysical anomalies and outcrops or boreholes examples are at early stage, therefore there is still ambiguity in some of the interpretations, especially when working with potential methods.

"Estudio de la deformación pre-cretácica en la región de Gastre, sector sur del Macizo Norpatagónico" (2011). Zaffarana, Claudia Beatriz. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo de esta tesis fue conocer el tipo y la edad de la deformación en la zona de Gastre, sector sur del Macizo Norpatagónico, donde se ha sugerido aflora la expresión de un sistema de fallas transcurrentes de escala intercontinental que habría controlado movimientos dextrales de gran magnitud entre el sur de Patagonia y la plataforma estable sudamericana. Se realizó un mapeo detallado de la estructura interna de las rocas intrusivas de la región (conocidas como Batolito de la Patagonia Central) combinando estudios petrográficos, microestructurales, de anisotropía de susceptibilidad magnética (ASM) y de magnetismo de rocas. Se propone que las mismas pueden dividirse en dos asociaciones de granitoides, donde la primera contiene enclaves máficos microgranulares y titanita como mineral accesorio y la segunda es intrusiva en la anterior y posterior al magmatismo máfico de la región. Se mantienen los nombres que les habían otorgado Rapela et al. (1992) (Superunidad Gastre para la unidad más antigua y Superunidad Lipetrén para la más joven), pero el criterio de clasificación de este trabajo es diferente. Asimismo, se caracterizó la mineralogía magnética de cada facies granítica. El mapeo de la estructura interna de las rocas permitió delinear la presencia de un angosto corredor estructuralsubvertical de foliaciones magmáticas de rumbo noroeste-sudeste con lineaciones magnéticas empinadas, someras e intermedias que es común a todas las litologías. Las áreas ubicadas afuera del lineamiento tienen fábrica magnética discordante. Los representantes del magma máfico en la región de Gastre adoptan la forma de enclaves, diques o pequeños stocks debido a la mezcla de magmas de diferente composición en diferentes estadíos de cristalización del magma félsico hospedante. Este proceso permitió también explicar algunas texturas de desequilibrio como oikocristales, xenocristales y cristales corroídos. Se describieron enjambres de enclaves monogénicos hasta ahora no mencionados en la literatura geológica de la zona. Los estudios de ASM en enclaves máficos y su roca hospedante indican que los enclaves constituyen marcadores pasivos de la deformación magmática. Se encontraron diques máficos con fábrica magnética anómala debido a la sobreimposición de deformación tectónica. Se describieron afloramientos de rocas de basamento que registran una foliación metamórfica previa al desarrollo de la foliación tectónica NO-SE subvertical. La deformación tectónica se concentra en afloramientos pequeños dispersos entre granitoides tectónicamente indeformados, y los planos de foliación tectónica y la lineación de estiramiento son altamente heterogéneos entre sí y con respecto al corredor. Se obtuvo un polo paleomagnético a partir de las rocas volcánicas jurásicas de la zona cuya ubicación coincide con la de otros polos de áreas estables de Sudamérica de similar edad, así que se descarta la posibilidad de grandes rotaciones tectónicas en el período Jurásico Temprano-reciente. Se concluye que el Sistema de Fallas de Gastre fue una estructura que controló el emplazamiento diacrónico de algunos cuerpos ígneos tabulares pertenecientes al Batolito de la Patagonia Central, y que también canalizó deformación subsólida post-emplazamiento, pero no fue una zona de movimientos transcurrentes de gran magnitud. Debe recurrirse a otros modelos para reconstruir la paleogeografía jurásica de Gondwana Occidental.

Abstract:
The aim of this work was to explain the history of deformation in the Gastre Fault System, Central Patagonia. Some authors had proposed that this was an intercontinental strike-slip system that accommodated important dextral displacements in the Jurassic between the patagonian and the stable South American blocks. A detailed mapping of the internal structure of the granitoids of the region (the Central Patagonian Batholith) was performed combining petrographic, microstructural, anisotropy of the magnetic susceptibility (AMS) and rock magnetic studies. These granitoids can be divided in two groups: an older set of granitoids, which has mafic microgranular enclaves and titanite as an accessory mineral, and an intrusive set of granitoids which postdates the mafic magmatism of the region. The intrusive groups are still called Gastre Superunit and Lipetrén Superunit, because the names formerly given by Rapela et al. (1992) are kept, although the classification scheme of this work is different. The magnetic mineralogy of each granitoid facies was also characterized. The mapping of the internal structure of the magmatic rocks showed the existence of a narrow structural corridor of subvertical NW-SE foliation planes shared by all granitoid facies. Magnetic lineations inside this corridor are of shallow, subvertical and intermediate inclination. The areas outside the lineament have discordant magnetic fabric. The mafic magma in the Gastre region is represented by enclaves, dikes and small stocks; the different morphologies arise from magma mingling at different crystallization stages of the felsic magma host. Magma mingling also explains some disequilibrium textures such as oikocrysts, xenocrysts and crystal corrosion. Undescribed spectacular monogenic enclave swarms were found and described. AMS studies of mafic microgranular enclaves and their host rock showed that enclaves constitute passive markers of magmatic deformation. Anomalous magnetic fabric that can be ascribed to tectonic deformation was found in mafic dikes and felsic veins. Small basement outcrops having metamorphic foliation prior to the development of the NW-SE tectonic foliation were described. Tectonic deformation is constrained to small outcrops scattered among tectonically undeformed granitoids. Foliation planes and stretching lineations are highly heterogeneous. A paleomagnetic pole was calculated from the overlying Jurassic rocks of the region and its position coincides with other paleomagnetic poles of similar age coming from stable areas of South America. Major tectonic rotations did not occur from the Lower Jurassic to recent (only small counterclockwise rotations would be expected). In conclusion, the Gastre Fault System was a structure which controlled the diachronic emplacement of some tabular igneous bodies of the Central Patagonian Batholith, and which also channeled some subsolid post-emplacement deformation, but it was not a major transcurrent fault zone and consequently other tectonic models need to be considered when reconstructing the Jurassic paleogeography of Western Gondwana.

"Estudio de la deleción de tres genes inmunomoduladores del genoma de MVA: efecto sobre su inmunogenicidad" (2017-02-10). Holgado, María Pía. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El virus Vaccinia Ankara modificado (MVA, del inglés Modified Vaccinia Ankara) es un vector viral atenuado que aún conserva numerosos genes inmunomoduladores en su genoma. Nuestro grupo reportó anteriormente la optimización de este vector luego de eliminar el gen viral C12L, el cual codifica para la proteína de unión a IL-18. En este trabajo se analizó la inmunogenicidad del vector MVA al cual se le delecionaron de manera simultánea los genes A44L, relacionado con la síntesis de esteroides, y A46R, un inhibidor de la señalización mediada por receptores Toll (MVAΔA44L-A46R); o también incluyendo la deleción del gen C12L, previamente descripto (MVAΔC12L/ΔA44L-A46R). Para ello, se evaluó la respuesta celular T contra epítopes de Vaccinia tanto en bazo como en ganglios inguinales, drenantes al sitio de inoculación, en ratones de la cepa C57BL/6. Se observó que la magnitud de la respuesta adaptativa, tanto en la etapa aguda como de memoria, fue mayor en los animales inmunizados con los vectores delecionados en relación a aquellos que recibieron el vector de la cepa salvaje (MVAwt). Asimismo, el vector MVAΔC12L/ΔA44L-A46R indujo una respuesta celular T específica de memoria de mayor calidad, caracterizada tanto por la bifuncionalidad de las células T-CD8+ (expresión simultánea de CD107a/b e IFN-γ) como por la capacidad de proliferación específica de las células T-CD4+ y CD8+. Al estudiar la respuesta innata generada por el MVAΔC12L/ΔA44L-A46R, se observó que este vector indujo una mayor producción de citoquinas relacionadas con la generación de una respuesta celular T, tales como IL-12 e IFN-γ, así como mediadores pro inflamatorios y antivirales como IL-1β e IFN-β. En conclusión, este estudio describe por primera vez que la deleción simultánea de los genes inmunomoduladores del genoma de MVA, cuyas funciones se encuentran inter-relacionadas, tales como A44L, A46R y C12L constituye una metodología adecuada para incrementar la inmunogenicidad del vector generando de esta manera una mayor respuesta inmune tanto innata como adaptativa. Esto convierte al vector MVA en una herramienta útil y versátil para ser utilizada en el campo del desarrollo de vacunas.

Abstract:
Modified Vaccinia Ankara virus (MVA) is an attenuated vector that still retains many immunomodulatory genes in its genome. Our group previously reported the optimization of this viral vector after removing the C12L gene, coding for the IL-18 binding protein. In this work, we analyzed the immunogenicity of MVA vectors harboring the simultaneous deletion of A44L gene, related to steroid synthesis, and A46R, a TLR-signaling inhibitor (MVAΔA44L-A46R); or also including a deletion of C12L (MVAΔC12L/ΔA44L-A46R), previously described. For this, T-cell responses against Vaccinia virus epitopes were evaluated in C57BL/6 mice in spleen and inguinal lymph-nodes, draining to the site of inoculation. The results showed that the magnitude of the adaptive response, in both the acute and memory phases, was higher in mice immunized with the deleted vectors in relation to those that received the MVAwt. Furthermore, MVAΔC12L/ΔA44L-A46R induced specific memory T cell responses of higher quality, characterized by the CD8 T-cell bifunctionality (simultaneous expression of CD107a/b and IFN-γ) and the specific proliferation capacity of CD4+ and CD8+ T-cells. The study of innate immune responses generated by the MVAΔC12L/ΔA44L-A46R indicated that this vector induced an increased production of cytokines associated with the generation of a specific Tcell response, such as IL-12 and IFN-γ and also, pro inflammatory and antiviral mediators like IL-1β and IFN-β. In summary, this study describes for the first time that the simultaneous deletion of immunomodulatory genes from MVA genome, whose functions are inter-related, such as A44L, A46R and C12L is an appropriate methodology to enhance the immunogenicity of the vector, enhancing both innate and adaptive immune responses. This type of strategies converts MVA vector in a useful and versatile tool to be used in the vaccine development field.

"Estudio de la desferrización de los vinos blancos por el ferrocianuro de potasio" (1936). Nazar Anchorena, Alberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de la destrucción de materia orgánica con agua oxigenada y ácidos nítrico y sulfúrico, y aplicación a la determinación de sodio y potasio en alimentos" (1941). Marin, Fulgencio R.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de la dinámica de la infección perinatal con BLV en un rodeo de tambo de alta prevalencia" (2010). Gutiérrez, Gerónimo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo se estudió la progresión de la infección natural con BLV en un rodeo con alta prevalencia, desde el nacimiento hasta el ingreso al ciclo productivo. El objetivo central fue proponer una alternativa para interrumpir el ciclo epidemiológico de transmisión, debido a que en la actualidad parece no haber soluciones factibles para el control de esta infección. Como objetivo complementario, se estandarizó un ensayo de ELISA que permitirá confirmar el estado de infección. Se expresó la proteína p24 de BLV en Escherichia coli, se purificó por columna de afinidad, y se la utilizó como antígeno en un ensayo de ELISA (rp24-ELISA). Se evaluó la performance del ensayo según recomendaciones internacionales, observándose evidencia de que el rp24-ELISA es una herramienta exacta y precisa en la detección de anticuerpos contra la p24 de BLV como para ser utilizada en el tamizaje de animales infectados en nuestro país. En el estudio de la progresión de la infección se observó que alrededor del 11% de los animales se encuentra infectado desde los primeros días de vida y que este porcentaje se mantiene constante durante el primer año. Se evidenciaron nuevas infecciones a partir de los 15 meses y se observó un salto brusco de la prevalencia, del 24 a más del 60% de animales infectados, durante la parición y entrada al tambo. Al analizar la carga proviral se encontró que alrededor del 30% de los animales tiene una carga proviral en sangre baja o indetectable. Se detectó provirus en el 50% de los calostros y 40% de las leches, siendo esta detección más frecuente en animales con carga proviral alta o media en sangre, y se observó que tanto los calostros como las leches poseen una bajo nivel de carga proviral. El hallazgo más importante de este trabajo fue que aún cuando se aplican prácticas de manejo que previenen la transmisión sanguínea de BLV, no se observaron cambios significativos en la prevalencia luego de 3 años. Por último, se propuso una estrategia alternativa de control, basada en la segregación selectiva de los animales de acuerdo a su carga proviral en sangre periférica; interpretándola como un marcador del riesgo de transmisión de la infección. Esta estrategia permitirá la segregación de animales jóvenes, seronegativos, y animales adultos, infectados, con carga proviral baja o indetectable, que en conjunto con la aplicación de prácticas que previenen el contacto iatrogénico de sangre y el testeo de BLV al nacimiento, podría reducir potencialmente la infectividad del BLV y prevenir futuras transmisiones del virus.

Abstract:
In this work, the progression of natural BLV infection from birth to the entry into the milking herd, in a highly infected dairy herd, was assessed. The main goal was to suggest alternative control measures to effectively break the BLV cycle of transmission, based in the fact that there is no current practical solution for the control of this infection. As a complementary objective of this work, an ELISA test that will confirm the sanitary status was standardized. The BLV-p24 protein was expressed in Escherichia coli, affinity purified and used as antigen in an ELISA test (rp24-ELISA). The performance of the assay was assessed following international recommendations, showing evidence that rp24-ELISA is an accurate and precise tool in the detection of anti-p24 antibodies and could be used in the screening of infected animals in Argentina. The progression of infection study showed that about 11% of the animals are already infected during the first days of life and that this rate remained constant during the first year. New infections were detected since 15 months old, but the higest increase in the rate of infection, from 24 to more than 60% of infected animals, was observed during parturition and entrance of the animals into the milking herd. Proviral load analysis showed that about 30% of the animals had either low or undetectable peripheral-blood proviral load. BLV provirus was detected in 50% of colostrum and 40% of milk samples, being more frequently detected in animals with high or medium peripheral-blood proviral load. All colostrum and milk samples showed low levels of provial load. The most important finding was that even when management procedures to prevent BLV iatrogenic transmission were followed, no significant change was observed in the prevalence after three years. Finally, an alternative control strategy was proposed, based on selective segregation of the animals according to their peripheral-blood proviral load as a potential indicator of risk transmission. This strategy will allow to segregate young non-infected animals and adult infected animals with low or undetectable levels of proviral load, that coupled with the application of management practices to prevent iatrogenic blood contact and BLV early testing from birth, could potentially reduce the infectivity of BLV and prevent further transmission of the virus.

"Estudio de la dinámica de los sistemas memristivos : efecto del ruido y la temperatura en el fenómeno de la conmutación resistiva" (2014-12-19). Patterson, Germán A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo de esta Tesis es el de estudiar el efecto del ruido eléctrico y la temperatura en sistemas memristivos. Este tipo de sistemas presenta el fenómeno conocido como conmutación resistiva (CR), en el cual se basan las memorias electrónicas ReRAM. Básicamente, la CR se caracteriza por el cambio abrupto de la resistencia eléctrica del material ante la presencia de un campo eléctrico externo. Se comienza por estudiar la influencia del ruido, tanto interno como externo, con un modelo memristivo sencillo. Según este modelo, solo el ruido interno produce un efecto beneficioso, esto es, aumenta el contraste resistivo. Luego, se presentan resultados de experimentos en una muestra del tipo manganita donde el ruido externo aumenta el contraste resistivo. Utilizando otro modelo que se encuentra en la literatura, se reproducen cualitativamente los resultados observados. A partir de este estudio, se encuentran las características generales que un modelo de la dinámica de la CR debe cumplir para que el ruido agregado externamente mejore el contraste resistivo tal como resulta en los experimentos. A continuación, se estudia el efecto combinado del ruido y la temperatura sobre la dinámica de la manganita. Se realizan experimentos a distintas temperaturas encontrando que el ruido aumenta el contraste en todo el rango considerado. Se logran reproducir los resultados experimentales, combinando un modelo que describe la CR con uno que da cuenta del cambio resistivo con la temperatura. Se estudian, también, tiempos de relajación luego de excitar la muestra. Asociando dicha relajación a la difusión de vacancias de oxígeno, se estiman el coeficiente de difusión y la energía de activación, obteniéndose valores consistentes a los encontrados en la literatura. Finalmente, en esta Tesis se demuestra que el ruido produce un efecto beneficioso en el fenómeno de la CR. Este resultado puede ser relevante en el área de los sistemas de almacenamiento y procesamiento de información, donde los altísimos niveles de integración electrónica hacen que la presencia del ruido no pueda ser soslayada.

Abstract:
The objective of this Thesis is to study the effect of electrical noise and temperature on memristive systems. These systems exhibit the phenomenon of resistive switching (RS), which ReRam electronic memories are based on. Basically, RS is characterized by an abrupt change of the resistance under the presence of an external electric field. We begin by studying the influence of both internal and external noise using a simple memristive model. In this model, only internal noise produces a beneficial effect, that is, leads to an increase in the resistive contrast. Then, results of experiments performed on a manganite sample are presented, showing that external noise does indeed increase the resistive contrast. These results are qualitatively reproduced by using another model found in the literature. From this study, some general characteristics are found for a model aimed at describing the RS phenomenon in the presence of noise. Further on, we study the influence of both noise and temperature on the dynamics of the manganite sample. Experiments are performed at different temperatures, and noise is found to increase the resistive contrast in the full temperature range. Experimental results are succesfully reproduced by combining a model that describes RS with another model that accounts for the change of the resistance with temperature. Relaxation times after pulsing are studied. Relating the relaxation process to oxygen-vacancy diffusion, the estimated activation energies and diffusion coefficients are found consistent with published results. Finally, in this Thesis it is shown that noise has a beneficial effect on the phenomenon of RS. This finding may prove relevant in the area of memory devices and data processing, where the high levels of electronic integration render the presence of noise unavoidable.

"Estudio de la dinámica y función de la ¨Proteína Heterocromática 1 gama¨ durante el proceso de diferenciación celular" (2010). Desbats, María Andrea. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La diferenciación celular es un proceso complejo en el cuál un grupo específico de genes se activa y el resto permanece silenciado. HP1γ se asocia a genes activos, pero se desconoce su rol durante la diferenciación celular. En los preadipocitos HP1γ localiza tanto en heterocomo eucromatina, pero cuando se induce la diferenciación HP1γ rápidamente se concentra en un polo del núcleo excluyéndose de regiones heterocromáticas. La polarización de HP1γ no se observa en células que no se diferencian. La fosforilación de HP1γ en Ser93 se induce durante la adipogénesis y también se localiza polarizadamente. La polarización de HP1γ depende de la transcripción, de la integridad del RNA y DNA, y de la señalización por PKA. Interesantemente, marcas epigenéticas que marcan activa transcripción y la RNA pol II colocalizan con HP1γ en dicho polo nuclear. Este dominio muestra altos niveles de incorporación de BrUTP y de acumulación de mRNAs. La inhibición de HP1γ con siRNAs disminuye la incorporación de BrUTP y la expresión de marcadores de diferenciación adipocítica. Este dinámico patrón nuclear polarizado no se ha descripto antes, y proponemos que podría constituir un nuevo mecanismo para regular la expresión de genes requeridos durante el inicio de la diferenciación celular.

Abstract:
Cell differentiation is a complex process in which a specific subset of genes is activated while the rest of genes are silenced. HP1γ is associated to actively transcribed genes, however little is known about its role during cell differentiation. In preadipocytes HP1γ localizes in heterochromatic and euchromatic domains, but when preadipocytes are induced to differentiate HP1γ rapidly concentrates in one pole of the nucleus being transiently excluded from heterochromatin. HP1γ polarization is not observed in cells that do not differentiate. HP1γ PSer93 is induced upon adipogenesis and also concentrates in a polarized manner. HP1γ polarization depends on transcription, RNA and DNA integrity, and on PKA signalling. Noteworthy, epigenetic marks that correlate with active transcription and RNA polymerase II co-localizes with HP1γ in the nuclear pole. This domain shows high level of BrUTP incorporation and mRNAs accumulation. Knock down of HP1γ by siRNAs causes a decrease in BrUTP incorporation and a decrease in the expression of markers of adipocyte differentiation. Importantly, to our knowledge this dynamic nuclear polarization has not been described before, and we propose that it may constitute a novel mechanism for regulating the expression of a determined subset of genes required during the initial steps of cell differentiation.

"Estudio de la distribución de la micoflora contaminante de arroz recién cosechado : Riesgo potencial de aparición de micotoxinas en la Región Arrocera Argentina" (1998). Broggi, Leticia Elvira. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de la distribución de la microflora contaminante de maíz recién cosechador : riesgo potencial de aparición de microtoxinas en la Región Maicera Argentina" (1995). Gonzalez, Héctor Horacio Lucas. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de la emisión acústica generada por deformación en tubos, sus fuentes y características" (1999). López Pumarega, María Isabel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente Trabajo de Tesis, se diseñó e implementó un sistema experimental para estudiar la Emisión Acústica (EA) producida durante la deformación triaxial de probetas en forma de aros. Se construyeron todos los componentes necesarios para los ensayos. Se diseñaron y construyeron distintos tipos de probetas, cortadas transversalmente de tubos de acero microaleado sin costura, usados en la industria petrolera, a fin de inducir distintas fuentes de EA (deformación, creación y propagación de fisuras, rotura de la capa de óxido). Se caracterizaron química, mecánica y metalográficamente los materiales de las probetas ensayadas. Las superficies de rotura de los materiales empleados, fueron observadas en un microscopio electrónico de barrido (MEB), identificándose los distintos tipos de fractura. Se realizaron 22 ensayos, sirviendo los 10 primeros, para poner a punto todo el sistema de medición, eligiéndose los parámetros óptimos. Se logró caracterizar cada tipo de probeta por el comportamiento medio de los parámetros Amplitud, Duración y Risetime de las señales de EA, obteniéndose una clara separación en "clusters". Esto permitiría en ensayos en campo sobre tubos similares, hacer una identificación general de las posibles fuentes de EA. No se encontró un comportamiento temporal definido en la evolución de los parámetros de las señales de EA, a medida que avanzaba cada ensayo. Estadísticamente se demostró que dentro de cada tipo de probeta, los ensayos son réplicas entre sí. Se calcularon los coeficientes de correlación entre los tres parámetros de las señales de EA, para todos los ensayos, encontrándose la mayor correlación entre la Amplitud y la Duración. Para cada ensayo, se estudiaron estadísticamente las distribuciones de los parámetros Duración, Risetime y Amplitud. No encontrándose una única función de distribución que ajustase todos los histogramas experimentales de los dos primeros. En el caso de la Amplitud, primero, de acuerdo a la ley potencial, se obtuvieron valores del exponente comprendidos entre los citados en la literatura publicada. Luego, se encontró que una única función de distribución ajustaba todos los histogramas experimentales, dicha función fue la Log-normal, que ya aparecía citada en la literatura publicada. Buscando alguna explicación física al hecho anterior, se analizó primero la influencia del sistema de detección, demostrándose que el transductor piezoeléctrico de banda ancha empleado para recoger la EA producida, mantiene la linealidad entre la amplitud de los impulsos mecánicos incidentes en el sensor (deformación de la superficie del material) y la amplitud de las señales eléctricas salientes (Amplitud de las señales de EA). Luego, se demostró, teniendo en cuenta el comportamiento estadístico de los fenómenos físicos involucrados, que las amplitudes de las deformaciones dentro del material obedecen a una distribución Log-normal. Teniendo en cuenta la linealidad del sistema de registro de la EA, se concluyó que las Amplitudes de las señales de EA deben seguir la misma distribución Log-normal. Por último, se hacen algunos comentarios destinados a relacionar dos fenómenos que aunque ocurren a escalas muy diferentes, parecen responder a la misma dinámica, la E A a escala microscópica, y los terremotos a escala varios ordenes de magnitud mayor. Finalmente, se sugiere para estudios posteriores, la aplicación de los nuevos conceptos como criticalidad auto-organizada, fractales y ruido 1/f al fenómeno de la Emisión Acústica.

"Estudio de la endocitosis y señalización mitogénica y metabólica de las dos variantes de splicing del receptor de insulina" (2011). Giudice, Jimena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La señalización por insulina comprende una compleja cascada de eventos que llevan a la regulación del metabolismo de la glucosa y al crecimiento celular. Fallas en la respuesta a insulina conducen a diabetes mientras que en ciertos tipos de cáncer se encontraron aumentos en la actividad de esta vía se señalización. En mamíferos el gen del receptor de insulina (IR) adquirió un exón adicional junto con la capacidad de procesarlo alternativamente originando dos isoformas, IR-A e IR-B. En esta tesis se presenta el desarrollo de herramientas que permitieron visualizar procesos celulares in vivo por técnicas de microscopía. Esto permitió estudiar la endocitosis de las dos isoformas del IR en células individuales en respuesta a insulina y al factor de crecimiento similar a la insulina II (IGF-II). Una mayor internalización para el IR-A que para el IR-B en respuesta a ambos ligandos fue demostrada. Esto condujo a estudiar la señalización río abajo del receptor observando que la insulina desencadena una cascada mitogénica a través del IR-A y una predominantemente metabólica a través del IR-B. Cuando el estudio se extendió al IGF-II, pudo mostrarse que un mismo receptor sea mitogénico (IR-A) o metabólico (IR-B) se comporta diferente en respuesta a un ligando mitogénico (IGF-II) o metabólico (insulina). La existencia de los híbridos IR-A/IR-B en la membrana fue estudiada generando una quimera del IR capaz de ser modificada extracelularmente y que actúa como dominante negativo selectivo del efecto mitogénico. Esto permitió detectar los dímeros en membrana, analizar su formación y estudiar la señalización diferencial de cada isoforma. Por microscopía de fuerza atómica se midió la interacción molecular entre la insulina y cada IR mostrando que la misma es mayor para el IR-A. Se propone a la dinámica de internalización como el mecanismo responsable de la señalización diferencial de las dos isoformas del IR en respuesta a un mismo ligando. Se plantea un modelo de activación diferencial donde el IR-A se activa más y de forma más sostenida internalizándose más rápido, activando así la vía mitogénica desde los endosomas. Por otro lado, la isoforma B se internaliza de forma más lenta, permitiendo mayor señalización desde la membrana, reclutando moléculas efectoras de esta vía, gatillando la fosforilación de Akt, regulando la actividad de enzimas metabólicas.

Abstract:
Insulin signalling comprises a complex cascade of events playing a key role in the regulation of glucose metabolism and cellular growth. Failures in its function lead to diabetes and disregulations of these pathways were described in many cancer types. In mammals, the insulin receptor (IR) gene acquired an additional exon together with the ability to alternatively skip it in a developmental and tissue-specific manner leading to two isoforms, IR-A and IR-B. This thesis presents the design and development of different tools which allow the visualization of cellular processes in vivo by microscopy. This strategy allowed the study of endocytosis in individual cells after insulin and insulin like growth factor II (IGF-II) binding. The quantitative study revealed a higher rate of endocytosis of IR-A than IR-B induced by both ligands. These differences leaded to study the downstream signaling. It was possible to demonstrate that insulin triggers a mitogenic cascade via IR-A and a more metabolic signaling through IR-B. The study of IGF-II showed that each receptor behaves differently upon activation by a mitogenic ligand (IGF-II) or a metabolic one (insulin). The existence of IR-A/IR-B hybrids in the plasma membrane was studied in this thesis by the generation of an IR chimera that could be modified at the cell surface. This chimera showed behaviour of a selective dominant negative of the mitogenic effect. It was possible to detect the dimers in the plasma membrane, analyze their formation and study the isoform differential signaling. Atomic force microscopy was used to measure the molecular interaction between each IR and insulin. Single molecule force spectroscopy showed that interaction of insulin with IR-A is stronger than with IR-B. This thesis proposes the internalization dynamics as a responsible mechanism for the differential signaling of IR isoforms. By this model, IR-A gets activated and internalized faster triggering mitogenic cascade from the endosomes. On the other hand, IR-B is internalized in a slower manner allowing a higher signaling from the membrane, recruiting effector molecules, triggering Akt phosphorylation, regulating metabolic enzymes and GLUT4 translocation to the plasma membrane.

"Estudio de la eritropoyetina como agente neuroprotector" (2008). Pregi, Nicolás. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La eritropoyetina (Epo) es una hormona cuya función mas conocida es su participación en el proceso de eritropoyesis, aunque, cada vez adquieren mas trascendencia otras funciones. En particular, a través de una acción antiapoptótica, aseguraría la supervivencia para que las células eritroides puedan cumplir con su programa de diferenciación. Una actividad similar cumpliría en otros tejidos. Así, el efecto de Epo a nivel del sistema nervioso central tendría un efecto neurotrófico y neuroprotector, previniendo la muerte de las neuronas ante el estimulo hipoxico o de shock. Aunque el mecanismo por el cual Epo ejercería el efecto neuroprotector no se conoce con exactitud, han sido implicados distintos mecanismos de activación celular. En el presente trabajo de tesis buscamos dilucidar algunos de los caminos de señalización de la actividad antiapoptotica atribuida al a Epo. Para ello, se estudio la acción de la hormona en modelos de apoptosis en una linea celular de origen neuronal, así como también algunas de sus potenciales vías de acción, a nivel de procesos que involucran la inactivación de caspasas, la modulación de factores de la familia Bcl-2 y de receptores de muerte y caminos mediados por JAK/STAT y PI3K7Akt. En este estudio se evaluó, inicialmente, una potencial acción protectora de la Epo en la linea celular SH-SY5Y inducida a diferenciación con staurosporina (STP), sustancia que, ademas, constituye un potente agente proapoptótico. El pretratamiento de las células con Epo previno el desarrollo de células apoptoticas por mecanismos mediados por la regulación positiva de la expresión de receptores de Epo (REpo) y la inducción de Bcl-XL. La Epo ha sido también postulada como factor anti inflamatorioo, ya que existen evidencias que le adjudican un efecto deneutralizaciónn de los efectos de algunas citoquinaspro inflamatorias.. En base a estos hallazgos, y una vez demostrada la acción antiapoptotica de la Epo en nuestro modelo celular, enfocamos la siguiente etapa a describir una potencial accion protectora frente al daño celular inducido por la citoquina pro inflamatoria TNF-α. Observamos un efecto proapoptotico de la citoquina con resultados cuali y cuantitativos coincidentes entre la aparición de células apocalípticasas, lcondensaciónón de cromatina, ldegradaciónón del ADNasísí como el aumento de la actividad de las caspasas 8 y 3 y ldegradaciónon de PARP. La sensibilidad de las células a la acción del TNF-α se encontró relacionada con un aumento de la expresión del receptor 1 de TNF. Cuando las células fueron incubadas en presencia de Epo previo a la inducción de apoptosis por TNF-α, se observó un efecto protector similar al encontrado en ensayos con STP. La Epo impidió la modulación positiva de los receptores de muerte e inhibió la activación de caspasas por mecanismos que involucran caminos de señalización mediados por JAK/STAT y PI3K, e inducen aumento de Bcl-2 y activación de NF-κB. La activación de este ultimo también fue inducida por acción de TNF-α, aunque este efecto no alcanzo para impedir el efecto proapoptotico de la citoquina. En conclusión, en el presente trabajo se describen mecanismos relacionados con el efecto antiapoptotico de la Epo frente a la muerte celular programada de células de origen neuronal inducida por STP y por TNF-α. Además, se detectó posible cross-talk entre caminos de señalización mediadores de la activacion de NF-κB que involucran tanto a receptores de muerte como la activacion por Epo/REpo. Los resultados sugieren que la sensibilidad celular a la apoptosis inducida por receptores de muerte puede ser regulada por diversos factores y que modificaciones del balance llevarían a supervivencia o muerte celular. El estudio realizado sustenta la capacidad de la Epo en su acción como factor anti inflamatorio, lo que podría marcar un rol muy importante como agente neuroprotector.

Abstract:
Since apoptosis appears to be related to neurodegenerative processes, neuroprotection has been involved in investigation of therapeutic approaches focused upon pharmacological agents to prevent neuronal programmed cell death. In this regard, erythropoietin (Epo) seems to play a critical role. Initially, the present work was focused on the study of Epo protective effects upon human neuroblastoma SH-SY5Y cells subjected to differentiation by staurosporine. Under this condition, profuse neurite outgrowth due to cell differentiation was associated to programmed cell death induced by staurosporine (STP) A previous treatment with recombinant human Epo prevented apoptosis and this effect proved to be acccompanied by an increased expression of the specific receptor for Epo (REpo) and the induction of Bcl-XL. It has been reported that Epo is capable of dealing with cellular inflammation by inhibition of several proinflammatory cytokines. Therefore, it was attractive to investigate the Epo potential antiapoptotic ability in the presence of these cytokines. We looked further into the possibility that cell death would be also triggered by the inflammatory cytokine TNF-alfa , a potent cytokine that exerts pleiotropic functions related to immunity, inflammation, and apoptosis. We have identified apoptosis as the type of cell death induced by TNF-alfa . Congruent results were found among qualitative and quantitative data, such as those detecting chromatin condensation and DNA fragmentation, as well as activation of caspases 8 and 3, and PARP degradation. Similar Epo protective effect as that observed in assays of apoptosis induced by STP was also detected when SH-SY5Y cells were preincubated with Epo before cultured in the presence of TNF-alfa. In order to gain further insight into the mechanisms involved in this antiapoptotic effect of Epo, modulation of death receptors and expression of transcription factors have been evaluated. A significant Epo-prevention of the TNFR1 expression upregulation induced by TNF-alfa coincided with an attenuated deleterious effect of the proinflammatory cytokine. This means that the sensitivity shown by SH-SY5Y cells to TNF-alfa may be due to the increase in TNFR1 expression after cell incubation with the cytokine. Therefore, at least one mechanism leading to the Epo neuroprotective effect may be related to prevention of the increase in number sites of this receptor. On the other hand, JAK/STAT and PI3K signalling pathways were found to be involved in the Epo protective action on SH-SY5Y cells induced to apoptosis. As regards the regulation of antiapoptotic factors induced by Epo neuroprotection, we detected upregulation of Bcl-2 and nuclear translocation of NF-kappa B. It is known that the proinflammatory cytokine TNF plays a key role in a wide variety of physiological processes, and that it is capable of activating two pathways simultaneously, leading to both the induction of apoptosis and the activation of NF-kappa B. We found increased nuclear localization of NF- B not only due to cell activation by Epo but also caused by the presence of TNF-alfa . Moreover, additivenuclear levels of NF-kappa B were observed when cell cultures were developed in the presence of both factors, Epo and TNF-alfa . Nevertheless, the protective effect of NF- B was not enough to impede the TNF-alfa-induced apoptosis of the SH-SY5Y cell line. In conclusion, we have described mechanisms related to the antiapoptotic effect of Epo against STP- and TNF-alfa -induced cell death as well as cross-talk between death receptor and Epo/EpoR signalling pathways. The results let us suggest that cell sensitivity to death receptor-induced apoptosis can be regulated by several factors and their balance might decide between survival and death of the cell. That is why, in our experimental design, the incubation of SH-SY5Y cells with TNF-alfa leads to apoptosis in spite of the cytokine ability to induce NF-kappa B nuclear translocation. The high expression of TNF receptor 1 and the lack of contribution of the Bcl-2 family members may explain cell sensitivity to TNF-alfa . On the other hand, cell activation by Epo becomes resistant to cell death through mechanisms that prevent upregulation of death receptors, block caspase activation and induce high expression of protective factors, such as Bcl-2 and NF-kappa B. This study underlined the Epo capacity as an anti-inflammatory factor which may play a significant role in stimulating neuroprotection.

"Estudio de la estabilidad de diferentes configuraciones de plasma y fluídos" (1995). Gonzalez, Rafael. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de la estructura de fases de la Cromodinámica Cuántica (QCD) en presencia de campos magnéticos fuertes mediante modelos efectivos" (2016-12-02). Allen, Pablo Guillermo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis se estudian los efectos de campos magnéticos intensos sobre las propiedades de la materia fuertemente interactuante en el marco de modelos efectivos del tipo Nambu-Jona-Lasinio, haciendo especial énfasis en el análisis de los diagramas de fases y el comportamiento de los parámetros de orden. En el Cap.1, se realiza una introducción a los temas que se desarrollan en esta tesis, presentándose las motivaciones y los objetivos. En el Cap.2, se hace una revisión breve de algunos aspectos básicos de la Cromodinámica Cuántica (QCD), los cuales son usados como punto de partida para la construcción de los modelos efectivos utilizados. Luego se introducen el modelo de Nambu-Jona-Lasinio y las distintas extensiones a ser estudiadas en este trabajo. En el Cap.3, se introduce campo magnético en el modelo, prestando especial atención a los diferentes procedimientos de regularización posibles. Se realiza una comparación entre dichos procedimientos y además se comparan estos resultados con los correspondientes de Lattice QCD (Cromodinámica cuántica en red). En el Cap.4, se estudia la estructura de fases del modelo con campo magnético y potencial químico finito. Se realiza además un estudio exhaustivo de la dependencia de los diagramas de fase con la parametrización. Se analiza el comportamiento de los parámetros de orden y se discute el efecto de catálisis magnética inversa. En el Cap.5, se presentan los resultados correspondientes a una extensión del modelo que incluye interacciones generalizadas. Se tienen en cuenta interacciones de mezcla de sabor y de carácter vectorial. Luego, se imponen condiciones de neutralidad de carga y equilibrio β, relevantes al estudio de estrellas compactas. En el Cap.6, se analiza el modelo al considerar interacciones efectivas del tipo quark-quark, las cuales reproducen el efecto de superconductividad de color. Se detalla el procedimiento de regularización y se discute el comportamiento del parámetro de orden de simetría quiral y del gap superconductor. Nuevamente, se estudian los diagramas de fase en función de los parámetros del modelo. En el Cap.7, finalmente, se resume el trabajo realizado y se exponen las conclusiones.

Abstract:
In this thesis we study the effects of intense magnetic fields on the properties of strongly interacting matter within effective models of the Nambu-Jona-Lasinio type, emphasizing on the analysis of the corresponding phase diagrams and the behaviour of the relevant order parameters. In Chap.1, we briefly introduce the subjects to be developed in this thesis, and present the motivations and objectives. In Chap.2, we summarize some of the basic aspects of Quantum Chromodynamics (QCD), which are used as a starting point for the construction of the effective models used in this work. Then, we introduce the Nambu-Jona-Lasinio model and the different extensions to be studied. In Chap.3, we introduce magnetic field in the model, paying special attention to the different possible regularization procedures. We carry out a comparison between such procedures and also compare these results with the corresponding ones from Lattice QCD. In Chap.4, we study the phase structure of the model under finite magnetic field and chemical potential. We carry out an exhaustive study of the dependence of the phase diagram on the parameter choice. We analyse the behaviour of the dressed mass, order parameter for chiral symmetry breaking, and the density. The effect of inverse magnetic catalysis is also discussed. In Chap.5, we extend the model to include generalized interactions. We consider flavour mixing effects and vector interaction channels. Afterwards, charge neutrality and β equilibrium conditions are imposed, which are relevant to the study of compact stars. In Chap.6, we take into consideration effective quark-quark type interactions, which reproduce the effect of color superconductivity. The regularization procedure is shown in detail for this case, and the behaviour of the chiral symmetry breaking order parameter and superconducting gap are presented. Once again, we study the phase diagrams and their dependence on the parameter choice. In Chap.7, finally, we summarize the results of this work and the conclusions are presented.

"Estudio de la estructura y regulación de la expresión de los genes Cab en plantas superiores" (1996). Fernández, Sandra Viviana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se aislaron seis genes Lhc a partir de una biblioteca genómica de papa(Solanum tuberosum). Estos genes codifican polipéptidos que formarían parte de los complejos que captan la luz que luego es utilizada en la fotosíntesis. Estos genes se hallan en tandem y están separados por regiones de 1.3-1.4 kb. Todos poseen la misma orientación 5'( 3' y cada uno de ellos tiene su propio promotor localizado 5' río arriba de la región de código. Las proteínas deducidas a partir de las secuencias de bases, poseen todos los aminoácidos característicos de las proteínas CAB del PSII, Tipo I, las cuales están codificadas por los genes Lhcb1. Por lo tanto los genes aislados fueron denominados: Lhcb1*1, Lhcb1*2, Lhcb1*3, Lhcb1*4, Lhcb1*5 y Lhcb1*6. La región codificante de estos genes posee 798 pb excepto el Lhcb1*6 el cual fue aislado en forma incompleta (411 pb). Estos genes codifican proteínas de 265 aminoácidos, incluyendo el péptido señal. Los genes estudiados poseen un 94-98 por ciento de homología en sus secuencias de bases y codifican proteínas que poseen entre un 97.5 por ciento a 99.75 por ciento de identidad. Las regiones 5' flanqueantes de los seis genes poseen secuencias conservadas y que están presentes en otros genes cuya expresión es regulada por la luz (el fragmento de 62 pb localizado entre las cajas CAAT y TATA contiene tres secuencias GATA). La expresión de los genes Lhcb1 en las plantas de papa mostró ser específica de órgano. Diferentes transcriptos fueron detectados en las hojas de las plantas mientras que solo uno se detectó en los tallos y no hubo expresión en las raíces. Se determinó el sitio de iniciación de la transcripción para el gen Lhcb1*2. El mismo esta localizado a 69 nucleótidos río arriba del codón de iniciación de la traducción (codón ATG). Los resultados indicaron que la C en la secuencia CTTCAT constituye el primer nucleótido en el ARNm correspondiente al gen Lhcb1*2. La región localizada río arriba del gen Lhcb1*2 que se extiende hasta -1300pb fue secuenciada. Esta región contiene un motivo "G" (5'TGGTTGTGTC3') localizado entre las bases -162 a -171 con respecto al sitio de iniciación de la transcripción. Recientemente fue demostrado que el factor citosólico GBF, el cual se une al motivo "G", se transloca al núcleo en presencia de luz, mientras que en la oscuridad permanece en el citoplasma (Harter et al, 1994). Las funciones regularais de la región 5' flanqueaste del gen Lhcb1*2 fueron analizadas en plantas transgénicas de tabaco. En la construcción realizada, la región promotora del gen Lhcb1*2 dirige la expresión del gen reportero uidA, el cual codifica la enzima (-glucuronidasa (GUS). El análisis de las plantas transgénicas reveló que la región 5' flanqueante (-1300 a +10) del gen Lhcb1*2 es suficiente para conferir una respuesta a la luz a través del fotoreceptor fitocromo así como también una respuesta específica de órgano. Por otra parte, la expresión del gen uidA fue detectada en las plántulas transgénicas de tabaco a partir de las 72 hs luego de la germinación de las semillas. Este resultado se correlaciona con el tiempo de maduración de los cloroplastos (Oemüller et al,1986). Además, no se detectó expresión del gen uidA cuando las plántulas de tabaco transgénicas fueron cultivadas en presencia de un herbicida que impide el desarrollo de los cloroplastos. Por lo tanto, estos resultados indican que la presencia de cloroplastos maduros es necesaria para la expresión del GUS dirigida por el promotor del gen Lhcb1*2 aislado de plantas de papa. Se realizaron deleciones de la región promotora las cuales fueron fusionadas al gen uidA. De estos experimentos se pudo concluir que la región del promotor comprendida entre las bases -690 a +10 es suficiente para conferir una respuesta específica de órgano así como también una respuesta a la luz a través del fotoreceptor fitocromo.

Abstract:
A potato (Solanum tuberosum) genomic library was used to isolate five full-length genes and part of a sixth one, encoding the apoproteins of a light-harvesting complex (LHC). These genes are arrange in tandem with a spacing of 1.3-1.4 kb between neighboring genes. They present the same orientation and they have their own promoters 5'-upstream of the coding regions. All the Lhcb1 genes have 798 bp open reading frame coding for a protein of two hundred and sixty-five amino acids, including a transit peptide. The nucleotide homology among the five genes is between 94-98 per centum. The nucleotide sequences showed that they encoded very similar proteins (99.75 per centum o 97.50 per centum identities). The deduced amino acid sequences were homologous to the PSII Type I CAB proteins encoded by the Lhcb1 genes, so these genes were named Lhcb1*1, Lhcb1*2, Lhcb1*3, Lhcb1*4, Lhcb1*5 and Lhcb1*6, respectively. The 5'-flanking regions of the six potato genes shared conserved sequences already detected in other light-responsive genes (62 bp fragment located between the CAAT and TATA boxes containing three GATA motifs). The expression of Lhcb1 genes in potato was organ-specific. At least nine different transcripts can be recognized in leaves by the primer extension method. A unique transcript could be detected in stems and not in roots. The transcription start site for the Lhcb1*2 gene was determinated. It is located 69 nucleotides upstream from the ATG codon. Our results indicated that the C in the sequence CTTCAT would be the first nucleotide in the Lhcb1*2 mRNA. The 5' upstream region of Lhcb1*2 extending from -1300 bp to the cap site was sequenced. This region contained a G-box motif (TGGTTGTGTC) located between -162 and -171 from the transcription start site. It has been recently demonstrated that the translocation of the cytosolic GBFs (G-box binding factor) to the nucleus is light-regulated (Harter et al, 1994). The regulatory function of the 5'-flanking region of the potato Lhcb1*2 was analyzed in transgenic tobacco plants. The construct used contained the uidA gene which was under the control of the potato Lhcb1*2 promoter. Analysis of transgenic plants revealed that the 5'-flanking region (-1300 to +10, relative to the transcription start site) of the Lhcb1*2 gene is sufficient to confer a phytochrome response as well as organ-specific expression. In ours experiments, the expression of the uidA gene was detected in the transgenic tobacco seedlings around 72 h after germination. This result correlates well with the time of maturation of the chloroplasts (Oemüller et al, 1986). Furthermore, the expression of uidA was not detected when transgenic seedlings were grown in presence of Norflurazon. These results correlates the presence of mature chloroplasts with the GUS expression directs by the Lhcb1*2 promoter. We have obtained constructs in which the uidA gene was under the control of deletions of the 5'-flanking region of potato Lhcb1*2. The -690 to +10 flanking region of the Lhcb1*2 is enough to confer organ-specific and phytochrome-regulated expression on the uidA coding sequence.

"Estudio de la evasión de la respuesta inmune citotóxica por el Virus de la Inmunodeficiencia Humana Tipo-1 (HIV-1) y su relación con el tratamiento antirretroviral" (2010). Dilernia, Darío A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Introducción. El HIV es el agente causal del SIDA. Entender las formas en las que evade la respuesta inmune del hospedador es crítico para el desarrollo racional de una vacuna efectiva. Aunque la amplia extensión del tratamiento antirretroviral es capaz de impactar significativamente en los procesos naturales de selección y escape, pocos trabajos han estudiado esta temática. El objetivo de esta tesis fue identificar aquellas regiones virales sometidas a presión de selección inmune y evaluar el impacto del tratamiento antirretroviral en su selección y persistencia. Metodología y resultados. Mediante análisis estadístico se identificaron 12 mutaciones virales asociadas a escape inmune, 6 de ellas en regiones no caracterizadas previamente como epítopes. El análisis de secuencias obtenidas en los últimos 20 años de epidemia sugirió que varias de ellas han incrementado su frecuencia hasta estar presentes en la mayoría de las cepas virales actuales. La evaluación de la respuesta inmune péptido específica mostró reconocimiento principalmente de dos péptidos con restricción para el alelo HLA A02 (A02P65 y A02P84), uno para el alelo HLA A03 (A03P28) y uno para el alelo HLA B07 (B07P357). Para los dos últimos y para A02P65 se demostró que la variante de escape disminuía el reconocimiento por la respuesta inmune mientras que, para todos los casos, se evidenció la capacidad de inducir una respuesta polifuncional secretora tanto de IFN como de IL 2 y MIP 1 . Se evaluó también el nivel de agotamiento inmune y, aunque la técnica de tetrámeros presentó varios inconvenientes, se detectó una mayoría de respuesta no exhausta en los casos exitosos. La secuenciación del gen viral gag mostró la presencia de escape viral en la mayoría de los epítopes analizados y sugirió que la positividad de la respuesta inmunológica estaba asociada a una mayor afinidad del epítope por el alelo HLA que lo presenta. Al mismo tiempo, el análisis de secuencia de dicho gen viral en muestras repetidas de 50 pacientes separadas por un promedio de 3 años, demostró la presencia de recambio activo de variantes virales hacia el estado de escape durante el período de muestreo. Se encontró también que la selección activa resulta menos frecuente en los pacientes bajo tratamiento y el análisis del virus en dichos pacientes sugirió que esto sería debido a una reducción significativa de la capacidad evolutiva del virus en el contexto del tratamiento altamente efectivo. Finalmente, un análisis filogenético más profundo de las secuencias estudiadas permitió datar el inicio de la epidemia del HIV 1 en Argentina en la primera mitad de la década de 1970. Conclusiones. El presente trabajo de tesis permitió caracterizar regiones de la proteína viral Gag de frecuente reconocimiento inmune sobre las cepas del HIV 1 circulantes en nuestra región y caracterizar su dinámica a nivel poblacional a lo largo de veinte años de epidemia. El conjunto de datos obtenido de los ensayos inmunológicos confirma la aproximación estadística para identificar sitios de reconocimiento inmune demostrando respuestas citotóxicas polifuncionales mientras que el estudio de muestras seriadas en pacientes, la mayoría de ellos en estados clínicos avanzados, sugiere que la selección del escape viral se extiende más allá de los primeros momentos de la infección. En este sentido, el inicio del tratamiento puede tener un beneficio adicional al prevenir dicho escape por reducción significativa de la evolución viral.

Abstract:
Introduction. HIV is the etiological agent of AIDS. To understand the way the virus evade the immune response of the host is critical for the rational development of an effective vaccine. Although the expansion of treatment access is able to shape the natural process of selection and escape, few studies have analyzed this phenomenon. The objective of the present thesis was to identify viral genomic regions where the virus undergoes selective immune pressure and to evaluate the impact that the antiretroviral therapy may have in their selection and persistence. Methodology and results. A total of 12 viral mutations associated to immune escape were identified, six of them in regions not previously characterized as epítopes. The analysis of a set of viral sequences obtained from samples collected in the last twenty years suggested that many of them have increased their prevalence in time until become the most prevalent state of circulating viral strains. The evaluation of peptide specific immune response showed that the main targets of immune recognition were located in two HLA A02 restricted epítopes (A02P65 and A02P84), in a HLA A03 restricted one (A03P28) and in a HLA B07 restricted one (B07P357). For the last two and also for A02P65 we found that the escape mutations significantly impair recognition by the immune response. For all of them, the capacity of stimulating a polyfunctional response able to release IFN , IL 2 and MIP 1 was shown. Also, the evaluation of immune exhaustion through tetramer technique showed, in spite of many technical inconveniences, a low level of exhaustion in the majority of successfully analyzed samples. The sequencing of viral gene gag showed the presence of escape in the majority of the epítopes analyzed and suggested that detection of immune response was associated to a greater affinity of the epítope for the HLA allele. At the same time, the analysis of the same region in repeated samples collected from 50 patients within a time period of 3 years showed the presence of active replacement of viral sequences toward the escape state. That active replacement seems to be associated to the lack of antiretroviral therapy and the analysis of the virus quasispecies in under therapy patients suggested that the significant reduction of evolutive capacity of the virus in the context of the effective therapy is likely the reason for that observation. Finally, a deeper phylogenetic analysis of the sequences under study allowed us to locate the initiation of the HIV epidemic in Argentina at the first half of the 1970s decade. Conclusions. The present thesis allowed us to characterize the regions of the viral protein Gag under frequent immune recognition at the population level and to characterize their dynamics in the last twenty years of epidemic. The set of data obtained from the immunologic assays confirms the statistical approach of the identification of sites under immune recognition showing polyfunctional cytotoxic responses while the study of repeated samples from patients that were in their majority in advanced stages of infection show that selection of escape not only occurs in the first stages of infection. In this sense, the initiation of treatment could have an additional benefit in preventing the immune escape by significantly reducing the evolutive capacity of the virus.

"Estudio de la evolución tectónica de la Cordillera principal de Mendoza, en el sector comprendido entre los 33°30’ y los 33°45’ S" (2000). Giambiagi, Laura Beatriz. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de la expresión de glicanos y glicosiltransferasas en el cerebro de ratas expuestas a paradigmas de aprendizaje" (2011). Burgos, Valeria Laura. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Dado el carácter dinámico de la maquinaria de glicosilación y su participación en el sistema nervioso, en la presente Tesis estudiamos la expresión de estructuras oligosacáridas y la expresión génica de glicosiltransferasas en el cerebro de ratas luego de la exposición a dos modelos inductores de plasticidad neural: el Enriquecimiento Ambiental y el aprendizaje de Evitación Inhibitoria.. La estimulación ofrecida por el Enriquecimiento Ambiental claramente modificó el perfil génico de algunos componentes de la O-glicosilación tipo mucina. Por otra parte, luego del entrenamiento en Evitación Inhibitoria la expresión génica de varias O-glicosiltransferasas pareció ser regulada de manera diferencial en respuesta al aprendizaje. Además, los perfiles génicos de algunas de estas glicosiltransferasas parecieron estar diferencialmente reguladas dependiendo de qué fase de la formación de la memoria estaba siendo estudiada. Esta tesis doctoral se ha enfocado principalmente en la O-glicosilación del cerebro de rata y se han observado resultados interesantes sobre el perfil de algunos genes de glicosiltransferasas asociados previamente a patologías en humanos, como distrofias musculares congénitas. El entendimiento de los factores que modulan a los glicanos neurales en respuesta a modelos inductores de plasticidad podría aportar una mayor comprensión sobre la fisiología de un organismo, especialmente en casos de deficiencias en la glicosilación que involucran defectos y anormalidad en el cerebro.

Abstract:
Given the highly dynamic character of the glycosylation machinery and its involvement in the nervous system, in the present dissertation we studied the expression of oligosaccharide structures and gene expression of O-glycosyltransferases in the rat brain after exposure to two neural plasticity-inducing models, the Environmental Enrichment model and the Inhibitory Avoidance Task. The stimulation offered by the Enriched Environment clearly modified the gene profile of some components of the mucin-type O-glycosylation, some of which were previously known to be involved in certain pathological conditions of neural plasticity. On the other hand, after training in the Inhibitory Avoidance task the gene expression of several O-glycosyltransferases seemed to be differentially regulated in response to learning. Furthermore, the gene profiles of some of these glycosyltransferases seemed to be differentially regulated depending on which phase of memory formation was being studied (consolidation or reconsolidation). This dissertation has focused mainly on the O-glycosylation in the rat brain and interesting results have been obtained regarding the gene profile of some glycosyltransferases known to be associated to neural pathological conditions in humans, such as congenital muscular disorders. Understanding the regulation of the brain glycosylation pathways in response to plasticity-inducing models could provide mechanistic insights into the physiology of an organism, especially in those cases where glycosylation deficits engage abnormal brain defects.

"Estudio de la expresión del gen CISD1 mediada por la actividad del CFTR" (2010). Taminelli, Guillermo Luis. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Fibrosis Quística (FQ) es una enfermedad autosómica recesiva producida por mutaciones en el gen que codifica el canal de cloruro CFTR. Muy poco se sabe sobre los mecanismos moleculares involucrados en el daño celular producido por la falla del canal CFTR. Mediante la metodología de “Display Diferencial” o “Differential Display” (DD) observamos que la expresión del gen de origen nuclear CISD1 (CDGSH Iron Sulfur Domain 1) estaba disminuída en un modelo celular de FQ. Dado que el DD es una técnica que aporta evidencias pero es susceptible a falsos positivos y negativos, se decidió que el primer enfoque de esta Tesis fuera corroborar los resultados del DD. Para ello se utilizaron técnicas como RT-PCR semi cuantitativas y RT seguida de PCR en tiempo real para medir los niveles de expresión de CISD1 en distintos modelos celulares de FQ o con células que expresasen CFTR wt en presencia de inhibidores o activadores del CFTR. Ya que CISD1 es un gen que se encuentra en el genoma nuclear, el siguiente enfoque de esta Tesis fue determinar la localización subcelular de su producto. En este caso, se utilizó la expresión de una quimera unida a EGFP y mediante microscopía confocal pudimos demostrar que CISD1 codifica una proteína de localización mitocondrial. La localización mitocondrial fue confirmada por Wiley y col. Ellos además reportaron que CISD1 posee un grupo prostético del tipo 2Fe-2S en lugar de Zinc, como postulamos en un principio debido a su estructura primaria. La función de esta proteína es desconocida, pero estudios hechos en mitocondrias aisladas de células cardíacas de un ratón nulo (-/-) para mitoNEET (CISD1 en humanos) presentaban disminuída en un 30 % la capacidad máxima de la fosforilación oxidativa medida en estado 3. Además, en un trabajo anterior de Colca y colaboradores, se reportó que la proteína Minner-1 de ratón (producto de splicing alternativo de CISD1) co-inmuno precipitó con proteínas pertenecientes al complejo l de la cadena de transporte de electrones. Luego de que comprobamos su localización mitocondrial mediante la quimera GFP-CISD1, nuestro siguiente objetivo fue determinar si la actividad del complejo I mitocondrial se encontraba afectada por la expresión diferencial de CISD1 (un efecto observado en FQ por Grabriel Valdivieso en su Tesis, aún no publicado). Para tal fin medimos la actividad in gel del CIm mediante la técnica “Blue Native-PAGE” (BN-PAGE), en mitocondrias extraídas desde diferentes modelos experimentales de células FQ transfectadas con CISD1 salvaje y células Caco-2 (no FQ) transfectadas con un variante mutada de CISD1 obtenida por mutagénesis dirigida en las cisteínas 72 y 74 que fueron reemplazadas por serinas en un plásmido de expresión para eucariotas pcDNA 3.1(-). Así, observamos que la disminución significativa de la actividad del CIm reportada por Valdivieso y col. en distintos modelos FQ era restaurada por la expresión ectópica de CISD1, mientras que la variante mutada de CISD1 moduló negativamente la actividad normal del Clm en células Caco-2 (no FQ).

Abstract:
Cystic fibrosis (CF) is an autosomal recessive disease caused by mutations in the gene encoding the CFTR chloride channel. Very little is known about the molecular mechanisms involved in the disease. Using the methodology of "Differential Display" (DD), we observed that the expression of the nuclear gene CISD1 (CDGSH Iron Sulfur Domain 1) was decreased in a cell model of CF. Since DD is a technique that might provide false positive or negative results, the results has to be validated by using other methods. Thus, the first objetive of this Thesis was to corroborate the DD results. For this purpose, we used semi-quantitative RT-PCR and RT followed by real-time PCR to measure the expression levels of CISD1 in different CF cell models. We also used non-CF cells in presence of CFTR inhibitors or activators. Since CISD1 is a gene found in the nuclear genome, the following focus of this thesis was to determine the subcellular location of the CISD1 product. We used the expression of a chimera containing CISD1 linked to EGFP and by using confocal microscopy we could show that CISD1 indeed encodes for a protein of mitochondrial localization, as the program PSORT previosuly predicted. The mitochondrial location was also confirmed by Wiley et al. They reported that CISD1 has a 2Fe-2S type prosthetic group instead of zinc as we originally thought. The function of this protein is unknown yet, but studies done in isolated mitochondria of cardiac cells from a null (-/-) mouse for mitoNEET (CISD1 in humans) had decreased by 30% the maximal capacity of oxidative phosphorylation measured in state 3. Furthermore, in a previous work, Colca et al. reported that the mouse protein Minner-1 co-immune precipitated with proteins belonging to the mCl of the electron transport chain (ETC). We also showed previously (Valdivieso et al), that the mitochondrial protein ND4, which belong to the mitocondrial complex I, was reducen in FQ. Therefore, our next goal was to determine whether mitochondrial complex I activity was affected by the differential expression of CISD1. To this end, we measured the in gel mCl activity using the "Blue Native-PAGE (BN-PAGE) technique, in mitochondria extracted from different experimental models of CF cells, transfected with CISD1 wt, and non- CF cells transfected with a mutated variant of CISD1. We observed that the significant decrease in the mCl activity reported by Valdivieso et al. in different CF models, can be partially restored by the CISD1 ectopic expression, while the mutated variant of CISD1 down modulated the normal mCl activity in non-CF Caco-2 cells.

"Estudio de la expresión diferencial de genes inducidos por el tratamiento crónico con levodopa en el estriado de ratas con lesiones del sistema nigroestriatal" (2004). Ferrario, Juan Esteban. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La levodopa constituye la terapia principal para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson. En modelos animales de la enfermedad se reportó que el tratamiento crónico con levodopa induce una serie de efectos compensatorios, entre los que se destaca el aumento de terminales axonales de las neuronas dopaminérgicas en el núcleo estriado. Con el objetivo de conocer mejor los mecanismos celulares y moleculares que median los principales cambios compensatorios construimos una biblioteca de expresión diferencial enriquecida en transcriptos del estriado de ratas con lesión del haz nigroestriatal, tratadas con levodopa durante 6 meses. Para identificar los transcriptos presentes en la biblioteca utilizamos un atlas de expresión de genes que representa las principales funciones celulares. Identificamos varios genes que habían sido previamente relacionados con los mecanismos de plasticidad y trofismo. Posteriormente confirmamos la expresión diferencial de tres transcriptos por medio de hibridación in situ y encontramos que el factor trófrco pleiotrofma, la proteína básica de la mielina y la calmodulina están sobreexpresados en el estriado desnervado de las ratas tratadas con levodopa. Además, analizamos el grado de inervación dopaminérgica estriatal mediante la detección inmunoautorradiográfica del transportador de dopamina. En conjunto nuestros resultados obtenidos a partir de aproximaciones moleculares e histológicas, sugieren la participación de determinados genes en la reinervación dopaminérgica estriatal inducida por el tratamiento crónico con levodopa.

Abstract:
Levodopa, the major treatment for patients with Parkinson’s disease, has been shown to induce a variety of compensatory effects, including facilitation of sprouting by dopaminergic neurons in experimental animals with lesions leading to denervation of the striatum. To better understand the cellular and molecular environment where most of these compensatory changes take place, in particular elements that might contribute to the recovery of dopaminergic innervation, we constructed a differential expression library enriched in transcripts from the striata of rats with lesions of the nigrostriatal dopaminergic pathway, orally-treated with levodopa for 6 months. We used this library to screen an expression array of rat genes representing the major cell functions, and have identified several that are involved in neurotrophic mechanisms and plasticity. We confirmed the differential expression of selected transcripts by non-radioactive in situ hybridization, and report that the growth factor pleiotrophin, myelin basic protein and calmodulin are overexpressed in the denervated striatum of levodopa-treated rats. In addition, we analyzed the levodopa-induced dopaminergic reinnervation in the denervated striatum of lesioned rats by immunoautoradiographic detection of the dopamine transporter (DAT). Together, from a combination of molecular and histochemical approaches, our results suggest a possible functional role of several genes in dopaminergic neurons sprouting during levodopa treatment.

"Estudio de la familia génica Asr de tomate (Lycopersicon esculentum)" (2003). Maskin, Laura. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo se estudiaron los miembros de la familia génica Asr de tomate (Asr1, Asr2 y Asr3). Por métodos computacionales se compararon las secuencias aminoacídicas de las proteinas codificadas y se realizó una búsqueda de proteinas homólogas que reveló la existencia de moléculas proteicas conservadas que se acumulan en situaciones de variados tipos de estrés y/o en fruto. La comparación de todas estas proteínas "tipo ASR", provenientes de muy distintas especies, mostró que la homología se encuentra concentrada en dos dominios particulares. Además, todas comparten caracteristicas estructurales como la alta hidrofilicidad,alta carga, sitios conservados de miristoilación y dos regiones hidrofóbicas. Por otro lado, se evaluó la expresión de cada uno de los miembros conocidos de esta familia génica en tomate (L. esculentum), determinándose que poseen un nivel de expresión variable en condiciones basales en los órganos analizados y que se inducen diferencialmente en respuesta al estrés hídrico, al daño, al frio y durante la maduración del fruto. Se observó que la expresión basal de Asr1 y Asr2 en hoja se limita especificamente a células acompañantes del floema. En condiciones de falta de agua, la expresión en hoja y en raíz se visualiza también en las células parenquimáticas adyacentes. Se muestran evidencias de que ASR forma agregados in vitro (dímeros y trímeros). Finalmente, ensayos preliminares de expresión en sistemas heterólogos demuestran que ASR1 provoca un aumento de la viabilidad de levaduras sometidas a estrés salino.

Abstract:
This work reports the study of the members of the tomato Asr gene family (Asr1, Asr2 and Asr3). Using computational methods, the amino acidic sequences were compared. A search of homologous proteins reveled the presence of conserved molecules that accumulate in responses to various types of stress and/or in fruit. Comparison of all these ASR-like proteins from different plant species showed that homology is concentrated at two particular domains. Besides, all of them share structural features like high hydrophilicity, high charge, a conserved myristoylation signal and two hydrophobic zones. In addition, the expression of each known member of the Asr family in tomato (L. esculentum) were evaluated. The results showed variable basal expression level in all the analyzed organs and differential induction in response to water stress, wounding, cold and during fruit ripening. In leaves, Asr1 and Asr2 basal expression was restricted to the companion phloem cells. Under water deficit conditions, this expression was also visualized in leaf and root parenchyma adjacent cells. Evidences that ASR form aggregates in vitro (dimers and trimers) are shown. Finally, preliminar assays in heterologous expression systems showed that ASR1 causes an increment in viability of yeast subjeted to salt stressed.

"Estudio de la fase de reconsolidación de la memoria declarativa en humanos" (2011). Forcato, Cecilia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La hipótesis de la reconsolidación postula que una memoria consolidada puede devenir nuevamente lábil y susceptible a la acción de agentes amnésicos o facilitadores, por un período de tiempo, luego de la reexposición a un recordatorio. Este fenómeno ha sido demostrado en una gran variedad de especies y en diferentes tipos de memoria, incluyendo memorias motoras en el hombre. En este trabajo diseñamos y pusimos a punto un protocolo que involucra el aprendizaje de una lista de sílabas sin sentido, asociada a un contexto específico formado por una luz, imagen y música. Por primera vez, demostramos la existencia de la fase de reconsolidación de la memoria declarativa en el hombre. A su vez, demostramos que no cualquier evocación dispara este fenómeno, por el contrario, se requiere un recordatorio con características específicas, siendo el no cumplimiento de la expectativa un componente fundamental del mismo. Más aún, este trabajo evidencia las dos funcionalidades postuladas para el fenómeno de reconsolidación: el reforzamiento de la memoria original y la incorporación de nueva información en la memoria reactivada.

Abstract:
The reconsolidation hypothesis states that a consolidated memory could again become unstable and susceptible to facilitation or impairment for a discrete period of time after a reminder presentation. The phenomenon has been demonstrated in very diverse species and types of memory, including the human procedural memory of a motor skill task. Here we design a new paradigm that involves learning a list of non-sense syllable pairs, associated to a specific context (light, image and sound). We demonstrate for the first time, the human declarative memory reconsolidation. Moreover, we demonstrate that the reconsolidation process does not always occur when a memory is retrieved. On the contrary, it requires a reminder with a specific structure, and it seems that the mismatch between what the subject expects and what actually happens to be crucial. Furthermore, we provide evidence to the potential functionality of this fenomenon: the strengthening of the original trace and the incorporation of new information into the reactivated memory (memory updating).

"Estudio de la fauna de roedores de la formación pinturas, Mioceno medio inferior de la Provincia de Santa Cruz" (2001). Kramarz, Alejandro G.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La fauna "Astrapothericulense" fue reconocida por Ameghino en 1906 en base a los primeros y escasos registros de mamíferos fósiles procedentes de los sedimentos continentales del Mioceno, aflorantes en el valle inferior del río Pinturas. Tanto éste, como luego Frenguelli y Castellanos, sugirieron que esta fauna sería distinta y más antigua que la proveniente de las localidades costeras de la Formación Santa Cruz, por compartir elementos en común con la del Colhuehuapense. Sin embargo, autores posteriores adjudicaron causas biogeográficas más que temporales a las diferencias entre ambas faunas. Los escasos restos de roedores provenientes de esta unidad que se conocían hasta la actualidad carecen de una procedencia geográfica y estratigráfica precisa. Además, muchos de estos materiales no han sido correctamente distinguidos de otros taxones mejor conocidos de la Formación Santa Cruz, posiblemente por la presunción de la contemporaneidad de ambas faunas. Se estudian aquí nuevas y abundantes colecciones de roedores Caviomorpha de la Fm. Pinturas, su diversidad, su sistemática y su significado bioestratigráfico y paleoambiental. Se diferencian dos asociaciones de distintas procedencias estratigráficas. En las secuencias inferior y media de la Formación se reconoce el registro de las siguientes especies: Prostichomys bowni gen. et sp. nov., Acarechimys sp., Galileomys eurygnathus sp. nov., Eostelromys annectens oomb. nov., Eosteiromys cf. homogenidens, Branisamyopsis presigmoides sp. nov., "Steiromys" principalis, Steiromys duplicatus, Scleromys quadrangulatus sp. nov., Neoremys pinturensis sp. nov., Luantus propheticus y Perimys intermedias sp. nov. Esta asociación constituye la fauna típicamente "Pinturense". En la secuencia superior se registran: Stichomys spp., Adelphomys candidus, Spaniomys modestas, Acarechimys minuttissimus, Acaremys cf. A. murinus, Luantus toldensis sp. nov., Phanomys mixtus , Perimys erutus y Perimys 3p., mayormente conocidas también para los típicos afloramientos costeros de la Fm. Santa Cruz. Neoreomys australis y Prolagostomus sp. se registran positivamante en ambas asociaciones. En base al conjunto de roedores fósiles, y en particular de Spaniomys modestas, la secuencia superior de la Fm. Pinturas sería correlacionable con los niveles inferiores de la Fm. Santa Cruz aflorantes en Monte Observación y Monte León, a los niveles "Notohippidenses" aflorantes en la región de Karaiken y, tentativamente, a los niveles inferiores del Miembro Ea. La Costa de la Fm. Santa Cruz. Por lo tanto, las secuencias inferior y media de Pinturas deben ser necesariamente más antigüas que la base de la Fm. Santa Cruz en Monte Observación y Monte León. La mayoría de las especies del "Pinturense inferior"parecen estar muy estrechamente relacionadas a la ancestralidad de sus aliadas santacrucenses. Aunque sutiles, las diferencias son concordantes en indicar un estado más primitivo para los taxa propios de Pinturas, en general, relacionadas a un menor desarrollo de la hipsodoncia que los del Santacrucense. Estas relaciones reafirman la idea de la mayor antigüedad de esta fauna, como lo sugieren también recientes estudios de los marsupiales caenolestoideos de la misma procedencia y las últimas dataciones radimétricas. La fauna de roedores "Pinturense" es muy rica en grupos asociados a ambientes boscosos y de clima cálido (erethizóntidos y cavioideos protohipsodontes) y muy pobre en diversidad de formas euhipsodontes y de pequeños octodontoideos. Sin embargo, hacia el techo de la Formación, aumenta la proporción de las formas hipsodontes, lo que sugiere un deterioro climático concordantemente con los datos litológicos.

Abstract:
The "Astrapothericulan" fauna was recognized by Ameghino in 1906 based on the first and scarce record of fossil mammals found in the continental Miocene deposits at the lower valley of the Pinturas river. Then he, as later Frenguelli and Castellanos, suggested that this fauna would be different from and older than that found in the coastal localities of the Santa Cruz Formation, because it sheared elements in common with that of the Colhuehuapian. However, later authors awarded biogeographical more than temporal causes to the differences between both faunas. The scarce remains of rodents so far known from this unit lack a precise geographic and stratigraphic provenance. Moreover, many of these materials have not been correctly distinguished from other better known taxa from the Santa Cruz Formation, probably due to the presumption of the contemporaneity of both faunas. New and abundant collections of Caviomorph rodents from the Pinturas Formation are here studied in order to analyze their diversity, systematics and bioestratigraphic and palaeoenviromental meaning. Two associations from different stratigraphic origin are recognized. The following species were recorded in the lower and middle sequences of the Pinturas Formation: Prostichomys bowni gen et sp. nov., Acarechimys sp., Galileomys eurygnathus sp. nov., Eosteiromys annectens comb. nov., Eosteiromys cf. homogenidens, Branisamyopsis presigmoídes sp. nov., "Steiromys" principalis, Steíromys duplicatus, Scleromys quadrangulatus sp. nov., Neoremys pinturensis sp. nov., Luantus propheticus and Perimys intermedias sp. nov. This association constitutes the typically "Pinturean" fauna. While the following species were recorded in the upper sequences: Stichomys spp., Adelphomys candidus, Spaníomys modestus, Acarechimys minuttissimus, Acaremys cf. A. murinus, Luantus toldensis sp. nov., Phanomys mixtus, Perimys erutus and Perimys sp.; most of them are also well-known taxa from the typical coastal localities of the Santa Cruz Formation. Neoreomys australis and Prolagostomus sp. are positiver recorded in both associations. Based on the fossil rodents, and especially on Spaniomys modestus, the upper sequences of the Pinturas Formation may be correlated with the lower levels of the Santa Cruz Formation at Monte Observación and Monte León, the "Notohippidean" levels at Karaiken and, tentatively, with the lower levels of the Ea. La Costa Member of the Santa Cruz Formation. Therefore, the lower and middle sequences of the Pinturas Formation should be necessarily older than the base of the Santa Cruz Formation at Monte Observación and Monte León. Most of the "Pinturean" species seem to be very closely related to the ancestrality of their Santacrucian allied. Although subtle, the differences are consistent with a more primitive state for the characteristic taxa of Pinturas, related in general to a lesser development of the hypsodonty than those of the Santacrucian. These relationships reaffirm the idea of the greater antiquity of this fauna, as it is also suggested by recent studies on caenolestoid marsupials from the same origin and the last radiometric dates. The "Pinturean" rodent fauna is very rich in those groups associated with warm forested environments (erethizontids and protohypsodont cavioids) and very poor in diversity of euhypsodont species and small octodontoids. However, toward the top of the formation, the proportion of hypsodont forms increases, suggesting a climatic deterioration consistent with the lithological data

"Estudio de la fisiología y metabolismo en plantas de Solanum Tuberosum obtenidas por variación somaclonal" (1998). Marconi, Patricia Laura. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La presente Tesis se basa en la caracterización fisiológica, bioquímica y genómica de plantas de papa (Solanum tuberosum spp. tuberosum). Las mismas fueron obtenidas por cultivo in vitro luego de aplicar un mecanismo de selección recurrente con ClNa. A partir de los callos tolerantes a 150 mM de cloruro de sodio agregado al medio de cultivo se regeneraron plantas por embriogénesis somática denominadas clon 150 (Ochatt et al, 1998). El crecimiento, la distribución de asimilados y de los iones sodio y potasio fueron diferentes entre ambos clones. El clon 150 fue más tolerante a elevadas concentraciones externas de ClNa que el clon T. Los medios de cultivo con elevadas concentraciones de ClNa provocaron un estrés oxidativo. Las plantas del clon 150 mostraron una rápida y eficiente respuesta antioxidante a diferencia del clon T. Los análisis comparativos entre ambos clones a nivel de callos mostraron un patrón parecido al de los de planta entera, a excepción de la respuesta antioxidante. Además, se observó una correlación positiva para la acumulación de Na+ y K+ entre ambos niveles de organización. Los patrones de isoenzimas y RAPD,sumados a las diferencias anatómicas y fisiológicas descriptas, sugieren que el clon 150 difiere genéticamente del cultivar Kennebec. Estas diferencias son particularmente importantes para el crecimiento y la respuesta fisiológica de ambos genotipos cuando son cultivados en condiciones de estrés salino.

Abstract:
This Thesis attempt to made a physiological, biochemical and genomical characterization of potatoes plants (Solanum tuberosum spp. tuberosum) that were obtained by in vitro culture through recurrent selection. Cell line originated from Kennebec cultivar showed to be able to growth on a medium with 150 mM NaCI. Plants obtained by somatic embryogenesis from this cell line were named as 150 clone (Ochatt et al, 1998). Plant growth, assimilate and sodium and potassium distributions differed between the 150 clone and the control Kennebec cultivar. The 150 clone was also salt-tolerant at relatively high NaCl concentrations. Oxidative stress was observed when plants of both clones grown on saline medium. Plants of clone 150 showed a rapid and efficient response to oxidative stress, a pattern that was not observed for the Kennebec clone. Comparative analysis between clones at the callus level shown a similar pattern than that observed for whole plants, although the oxidative defense was not detected. Likewise, a positive correlation was obtained for the accumulation of Na+ and K+ between both organization levels. The pattern here describe for isozymes and RAPD's analyses, in addition to the anatomical and physiological differences above outlined, strongly suggest that the clone 150 differs genetically from the control Kennebec cultivar. These differences are likely to be especially relevant for the growth and the whole physiological response of both genotypes under salt stress conditions.

"Estudio de la fosforilación de péptidos asociados a membranas fotosintéticas en Rhodovulum sulfidophilum" (2003). Raiger-Iustman, Laura J.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Durante más de 10 años, nuestro grupo ha estudiado la relación que existe entre la fosforilación de péptidos asociados a las membranas fotosintéticas de bacterias fototróficas pertenecientes a distintos géneros y la síntesis del aparato fotosíntético. Estudios similares han sido llevados a cabo por diferentes grupos de investigación tanto en organismos fotosintéticos como en cloroplastos de plantas superiores. En Rhodobacter capsulatus se demostró la existencia de péptidos del complejo antena, sobre todo de los péptidos α2 y β1 de, que sufrían una modificación postraduccional por fosforilación y que dicha modificación estaba regulada por las condiciones ambientales en que el cultivo bacteriano se desarrollaba. Esta modificación estaba también relacionada con la regulación genética de la síntesis de los componentes del aparato fotosíntético y el mecanismo de inserción del mismo en las membranas. En el transcurso de este trabajo de tesis se ha observado que en Rhodovulum sulfidophilum existe un péptido de un peso molecular aparente de 6 kDa, al que se lo denominó péptido P, que se fosforila in vivo exclusivamente en tirosina. A pesar de que este péptido resultó no corresponder a ninguna de las proteínas que unen bacterioclorofila descriptas hasta el momento, su fosforilación parece depender de condiciones que regulan, en genreal, la sintesis del aparato fotosíntético, o sea que responde a los cambios en las condiciones de crecimiento: luz-oscuridad, aerobiosis-anaerobiosis. Es probable que este péptido fosforilable esté relacionado con los sitios de iniciación del crecimiento de las membranas intracitoplasmáticas. Durante este trabajo de tesis se también se construyó y caracterizó una mutante LH1- , no polar, denominada rsLRI. Dicha mutante se obtuvo por deleción de los genes pufBA, que codifican para las apoproteínas LH1β y LHIα.

Abstract:
During the last ten years, our group has studied the relationship existing between phosphorylation of peptides of photosynthetic membranes in phototrophic bacteria belonging to different genera, and the synthesis of the photosynthetic apparatus. Similar studies have been performed in chloroplast of higher plants. In Rhodobacter capsulatus the LH2α and LH1β polypeptides were phosphorylated in vivo and the process was regulated by ambient growth conditions. This postranslational modification was related to the gene expression of the antenna polypeptides and their insertion in the membrane The present thesis work has revealed that in Rhodovulum sulfidophilum a small polypeptide of apparent MW of 6 kDa (P peptide) was phosphorylated exclusively in tyrosine This peptide could not be identified as a belonging to the photosynthetic apparatus although its phosphorylation depends on those conditions that regulates the synthesis of the photosynthetic apparatus. Thus it was govemed by changes in light-dark or aerobiosisanaerobiosis conditions. It is possible that peptide P was related with the initiation sites present in the intracitoplasmic membranes. In this work we have obtained and characterised a mutant resulting in a non-polar LH1- mutant was obtained by deleting pufBA genes codifying for LHl and βLH1α polypeptides

"Estudio de la función de los polipéptidos reversiblemente glicosilados (Reversibly Glycosylated Polypeptide) en plantas de interés agro-económico" (2010). De Pino, Verónica. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las plantas explotan una variedad de mecanismos para regular la producción y el acceso a los azúcares en respuesta al desarrollo, al ambiente, y al estado metabólico. La síntesis de polisacáridos a partir de fotosintatos, como la sacarosa, es un proceso muy regulado en el que están involucradas invertasas y glicosiltransferasas. La estructura y destino de los polisacáridos es bien conocida, pero el mecanismo de biosíntesis particularmente la síntesis de novo y las enzimas que transfieren los azúcares siguen siendo un enigma a resolver. En este trabajo de tesis nos focalizaremos en unas proteínas muy particulares que fueron descubiertas intentando identificar componentes de la pared celular. Estas proteínas se denominan RGP, por “reversibly glycosylated polypeptide”, y tienen capacidad de autoglicosilarse, a partir de UDP-Glc, UDP-Gal, UDP-Xyl y UDP-Ara dando como producto la proteína glicosilada y regenerando el nucleótido azúcar. Las RGPs están presentes en plantas superiores tanto en monocotiledóneas como en dicotiledóneas, pero están ausentes en otras especies, lo que indicaría que su función está muy conservada en las plantas, aunque se sabe poco de su rol fisiológico (Moreno & Tandecarz 1982; Moreno et al. 1986; Delgado et al. 1998; Bocca et al. 1999). Un análisis filogenético (Wald et al. 2003) muestra que hay dos clases, clase 1, la mayoría de las RGps pertenece a esta clase, que es muy activa, y la clase 2, a la cual no se le asoció actividad, pero sí capacidad de interactuar con la clase 1. Se encontró una multiplicidad de isoformas en todas las especies donde está presente, aspecto asociado con su capacidad de formar homo y heterodímeros. Anteriormente se demostró que la expresión de la RGP se produce en los tejidos donde hay activa síntesis de pared celular, durante este trabajo mostramos que la expresión esta modulada por el desarrollo, la inducción hormonal y el estrés, clarificando el rol fisiológico de la RGP en la remodelación/reconstrucción de novo de la pared celular vegetal, en donde uno de los caminos metabólicos claves en dicho proceso de la célula vegetal es la síntesis de polisacáridos.

Abstract:
Plants exploit diversity of mechanisms to regulate the production and the access to sugars in response to developmental cues, the environment and to the metabolic sate. Polysaccharide synthesis upon photosynthates as sucrose is a highly regulated process, in which invertases and glycosyltransferases are implicated. Although the structure and destination of polysaccharides is well established, mechanisms of de novo synthesis as well as the identification of glycosyltransferases are yet an enigma to be resolved. This work is focused on a group of proteins called reversibly glycosylated polypeptide, RGP which have the unique capability to perform self-glycosylation upon incubation with UDP-Glc, UDP-Gal, UDP-Xyl and UDP-Ara given as product the glycosylated protein and the regeneration of the nucleotide diphosphate. RGPs are present in higher plants; in monocotyledons as well as in dicotyledons, indicating that their functions is highly conserved, although little is known about their physiological role (Moreno & Tandecarz 1982; Moreno et al. 1986; Delgado et al. 1998; Bocca et al. 1999). A phylogenetic analysis of RGP (Wald et al. 2003) showed that there are two classes, class 1, the majority of RGP belongs to this class, which is highly active, and class 2, which is inactive but it has the capability to interact with the class 1 forming heteromultimers. It was found a multiplicity of forms of RGP in all species; this fact is associated with its ability to form homo and heterodimers. Previously, it was found that the expression of the RGP is particularly relevant in tissues where an active synthesis of cell wall take place. Here we demonstrate that the expression of the RGP is modulated by development, elongating involved hormones, germination as well by stress, clarifying the physiological role of the RGP in the remodeling/de novo synthesis of the plant cell wall, where the synthesis of polysaccharide is a key metabolic pathway.

"Estudio de la función del receptor dopaminérgico D4 en el sistema nervioso central a través del análisis de ratones modificados genéticamente" (2002). Falzone, Tomás Luis. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de la fusión fagolisosomal monocítica en pacientes con enfermedades asociadas a inmunodeficiencias secundarias, como la infección por HIV y la talasemia mayor" (1995). Pittis, María Gabriela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de la gasificación de Carbones Nacionales devolatilizados" (1996). Ochoa, Javier. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de la heterogeneidad de ácidos húmicos en el enlace de cationes" (2010). Orsetti, Silvia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las sustancias húmicas son componentes fundamentales del suelo y aguas naturales, siendo mezclas complejas y heterogéneas de materiales polidispersos formados por reacciones químicas y bioquímicas durante la descomposición y transformación de restos de plantas y microorganismos. En este trabajo de Tesis se estudia el fenómeno de enlace de cationes (protones y metales) a dichas sustancias, en particular ácidos húmicos, dado que el mismo es fundamental en cuanto a la biodisponibilidad y transporte de xenobióticos en ambientes naturales. En las reacciones de enlace a otras especies como cationes se manifiesta claramente la heterogeneidad de las sustancias húmicas, por lo tanto el estudio de la naturaleza de estos enlaces es un paso fundamental para comprender la heterogeneidad de dichas sustancias. Para ello, se comenzó utilizando un método numérico de regularización para obtener distribuciones de constantes de enlace condicionales para el enlace de protones y metales pesados. Luego, se desarrolló un modelo para describir el enlace inespecífico, denominado Modelo de Red Polielectrolítica Elástica (EPN), que describe las sustancias húmicas como geles polielectrolíticos, en el marco de la teoría de redes poliméricas de Flory. Este modelo fue combinado con el modelo NICA para describir las uniones específicas, ajustando con el resultante modelo NICA-EPN datos de titulaciones ácido-base y con Pb(II). De esta manera se obtuvieron las distribuciones “verdaderas” que describen el enlace de estos cationes a los ácidos húmicos estudiados, y que luego fueron comparadas con las distribuciones condicionales obtenidas a partir de medidas de fluorescencia. Así, se observa que por fluorescencia solamente se detecta un tipo de sitio de enlace para el metal, mientras que la distribución “verdadera” es bimodal. Se complementaron estos estudios con el análisis por métodos quimiométricos de matrices de emisión-excitación fluorescente de los ácidos húmicos en ausencia y presencia de Pb(II). Se obtuvieron así los espectros de emisión y excitación de los 3 componentes que contribuyen al comportamiento fluorescente, coincidiendo con lo reportado en literatura. Por otro lado, se obtuvo la concentración relativa de cada componente en muestras con distinta cantidad de Pb(II) agregado, mostrando que la desactivación fluorescente es más marcada cuanto mayor es el grado de aromaticidad de la sustancia. La complementación con estudios de espectroscopía IR-ATR mostró un aumento en la dimerización de grupos –COOH en presencia del metal. En base a estos resultados se plantea la formación de un enlace AH-Pb en el cual el metal está puenteando dos moléculas de ácido húmico, lo cual favorece la agregación intermolecular.

Abstract:
Humic substances are major components of soils and groundwaters, being complex and heterogeneous mixtures of polydisperse materials formed by chemical and biochemical reactions during decomposition and transformation of plants and microorganism remains. In this Thesis, the binding of cations (protons and metals) to such substances is studied, particularly to humic acids, since it is fundamental regarding bioavailability and transport of xenobiotics in natural environments. It is in these binding reactions to other species as cations that the heterogeneity of humic substances is clearly manifested, therefore the study of the nature of these bonds is a crucial step to understand the heterogeneity of these substances. To do so, in a first step a numerical constrained method was used to obtain conditional binding constant distributions for binding of protons and heavy metals. Then, a model to describe the unspecific binding was developed, named Elastic Polyelectrolyte Network model (EPN), which describes humic substances as polyeletrolitical gels in the framework of the Flory polymer network theory. This model was combined with the NICA model to describe the specific binding, adjusting acid-base and Pb(II) tritation data to the resulting NICA-EPN model. By doing so, “true” distributions were obtained, which describe the binding of these cations with the studied humic acids, and then they were compared to the conditional distributions obtained from fluorescence measurements. It was observed that by fluorescence techniques only one type of binding site is detected, while the “true” distribution is bimodal. These studies were complemented with the analysis by chemometric tools of emission-excitation fluorecence maps of the humic acids in the presence and absence of Pb(II). Emission and excitation spectra of 3 distinct components that contribute to fluorescence behavior were obtained, in good agreement to the results reported in literature. On the other hand, the relative concentration of those components in samples with different amounts of Pb(II) was also obtained, showing that the fluorescence quenching is more marked as the aromaticity degree of the component increases. The complementation with IR-ATR spectroscopic studies showed an increase in the dimerization of –COOH groups in the presence of the metal. Based on these results, the formation of a AH-Pb bond where the metal is acting as a bridge between two humic acid molecules, which promotes intermolecular aggregation, is proposed. Thus, the binding of Pb(II) to humic acids has two contributions: one due to single humic-Pb binding and another one due to humic-Pb- humic binding.

"Estudio de la hidrología de la región de Belle-Ville : Datos para la depuración de aguas arsénico-vanádicas" (1919). Trelles, Rogelio Adolfo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de la influencia del medio sobre las propiedades de monocristales de halogenuros alcalinos" (1964). Grinberg, Adolfo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la primer parte de esta tesis se resumen las principales teorías elaboradas durante el desarrollo de la física de cristales, para explicar el crecimiento cristalino. La mayoría de las teorías trata del crecimiento a partir de solución, otras comprenden también el creimiento a partir de fase vapor, mientras que el crecimiento a partir de fundido, pese a presentar fundamental importancia científica y tecnológica, carece todavía de una teoría satisfactoria. Esta primer parte provee los elementos necesarios para interpretar los resultados obtenidos sobre el ataque termico que se presenta en la segunda parte. segunda parte una descripción detallada de las observaciones realizadas sobre ataque térmico de ClNa en aire, atmósfera de H2 y en vacío, de superficies de diferente orientación cristalográfica. Se pone énfasis en el carácter dinámico del proceso presentando, por primera vez, una interpretación completa y coherente del ataque térmico basada en las teorías clásicas del crecimiento cristalino (Kossel, Stranski, Frenkel), ofreciendo así una confirmación directa, quizas la única hasta el presente, de dichas teorías. Se completa esta tesis con la presentación de los resultados obtenidos en el estudio de la ruptura dieléctrica de ClNa. Este estudio tuvo como fin el determinar si la ruptura dieléctrica inhomogenea de dislocaciones a lo largo de los canales superficiales de ruptura, tal como lo sostienen algunos investigadores, se demuestra que no existe relación biunívoca entre la propagación de los caminos superficiales de ruptura y la generación o presencia de dislocaciones. También se presenta en esta parte un estudio microscópico detallado de la ruptura a través del cristal, comprendiendo la descripción de la estructura interna del canal de ruptura, la zona de deformación plástica que lo rodea y una discusión de los resultados experimentales que sugieren una velocidad no uniforme para la propagación de la ruptura a través del cristal.

"Estudio de la interacción hospedante-patógeno entre el Mal de Río Cuarto virus (MRCV) y el delfácido transmisor Delphacodes kuscheli" (2011). Maroniche, Guillermo Andrés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El virus del Mal de Río Cuarto (MRCV, Reoviridae, Fijivirus) causa la principal enfermedad que afecta al maíz en la Argentina. Su genoma consiste en diez segmentos de ARN de doble cadena (S1 a S10) que codifican para un total de trece proteínas. El virus es transmitido de manera persistente y propagativa por insectos de la familia Delphacidae. Luego de adquirir el virus, sólo una pequeña proporción de los insectos vectores pueden transmitir la enfermedad al alimentarse de plantas sanas. Se desconocen aún las bases moleculares de la transmisión de MRCV y en general de las funciones que las proteínas virales cumplen durante la infección. Para establecer si existe una correlación entre la acumulación viral y la transmisión, se desarrolló un protocolo útil para la cuantificación de MRCV u otros ARN endógenos en insectos individuales mediante RT‐qPCR. Se optimizaron los pasos a seguir desde el almacenamiento de muestras hasta la cuantificación viral. Debido a que la técnica de RT‐qPCR requiere la previa validación de controles internos invariables en los tratamientos a estudiar, se seleccionaron, clonaron y secuenciaron 7 genes de mantenimiento del delfácido transmisor Delphacodes kuscheli y se evaluó la estabilidad de su expresión durante la infección con MRCV. Se determinó que, de los 7 genes estudiados, el gen de la ubiquitina es el más establemente expresado y por lo tanto adecuado para ser utilizado como control interno de referencia. La plataforma desarrollada no sólo permitirá la cuantificación precisa del título de MRCV en individuos D. kuscheli, sino que además abre el camino a futuros estudios del cambio en la expresión de genes endógenos de los insectos infectados con MRCV. Esto permitirá aportar datos moleculares para lograr una compresión más integral de la interacción MRCV‐delfácido vector. En paralelo, se decidió estudiar la función que cumplen las proteínas de MRCV durante la replicación viral en el insecto expresándolas en células Sf9 (de insecto no hospedante) y se analizó su localización subcelular por inmunofluorescencia y en células vivas. Se determinó que tanto las proteínas estructurales P3, P4 y P8 como la proteína no estructural P7‐1, se distribuyen en el núcleo y el citoplasma celular. Dado que el tamaño de estas proteínas excede el límite permitido por el complejo del poro nuclear, los resultados sugieren que las mismas serían transportadas activamente al núcleo celular. Asimismo, se observó que la proteína P5‐2 se localiza exclusivamente en el núcleo. Es posible que estas proteínas de MRCV capaces de ingresar al núcleo celular jueguen un rol en la regulación transcripcional de las células del hospedante. Se observó que la proteína P5‐1 posee una distribución citoplasmática heterogénea de aspecto granuloso y que dicha distribución se torna homogénea en ausencia del tripéptido carboxilo terminal TKF, el cual es un presunto motivo de unión a proteínas PDZ o de importación a peroxisomas. Por otro lado, se determinó que P6 forma grandes cúmulos perinucleares amorfos y es capaz de relocalizar parte de la tubulina celular a éstas formaciones. Esto sugiere un posible rol para P6 en la formación del material fibrilar que se observa en células de insecto y planta infectadas con MRCV. La proteína P9‐2 fue capaz de localizar en la membrana plasmática e indujo la formación de filopodios membranosos en la superficie de las células, por lo que esta proteína podría estar involucrada en el transporte del virus a través de la membrana durante la infección del insecto vector. Por su lado, la proteína de cápside externa P10 fue capaz de localizar en el retículo endoplasmático y de colocalizar completamente con tubulina, sugiriendo que el MRCV explota el sistema de secreción y el citoesqueleto de tubulina para el ensamblado y/o transporte viral. Finalmente, P9‐1 fue capaz de formar inclusiones citoplasmáticas conspicuas similares a cuerpos de inclusión virales (VIBs) o viroplasmas. A continuación, se utilizaron algunas combinaciones de fusiones fluorescentes de proteínas del MRCV para analizar su colocalización subcelular. No se logró observar colocalización entre la proteína P9‐2 y P5‐1, P7‐1, P7‐2, P9‐1 o P10. Tampoco se observó colocalización entre P9‐1 y P10 o P5‐2. Por otro lado, se determinó que P6 colocaliza con P10, P9‐1 y P7‐2, indicando que P6 podría cumplir algún rol en la formación del viroplasma y/o reclutamiento de otras proteínas a estas estructuras, así como en el movimiento intracelular de los viriones. Dado que la localización subcelular de P9‐1 es similar a la distribución característica de las proteínas mayoritarias de viroplasma de reovirus, decidimos estudiar más en profundidad sus propiedades funcionales y bioquímicas. Observamos que, al igual que otras proteínas mayoritarias de viroplasmas de reovirus, P9‐1 se auto asocia en complejos de alto peso molecular al ser expresada en bacterias, auto interacciona in vivo localizadamente en los cuerpos de inclusión que forma en células de insecto, tiene la capacidad de unir ácidos nucleicos de simple cadena, posee actividad ATPasa y alberga un dominio importante para la formación de cuerpos de inclusión en su mitad carboxilo terminal. Estos resultados indican que P9‐1 es el componente mayoritario de los viroplasmas y por lo tanto juega un rol fundamental en la replicación y ensamblado del MRCV en las células hospedantes.

Abstract:
Mal de Río Cuarto virus (MRCV, Reoviridae, Fijivirus) causes the most important maize disease in Argentina. Its genome consists of ten double‐stranded RNA segments (S1 to S10) that encode a total of thirteen proteins. The virus is persistently and propagatively transmitted by planthoppers of the family Delphacidae. Planthoppers acquire the virus by feeding on infected plants and after a 10 days latency period (during which the virus replicates and moves) a small proportion of them become infective and can transmit the virus to healthy plants. The molecular basis of the transmission and the general function of MRCV proteins during infection are still unknown. To establish whether the differences in transmission between individuals are due to differences in viral accumulation, a protocol useful for quantification of MRCV or endogenous RNAs in individual insects by RT‐qPCR was developed. The protocol steps, from the sample storage to the viral quantification were optimized. Since the RT‐qPCR technique requires the previous validation of invariable internal controls in the studied conditions, 7 housekeeping genes from the planthopper vector Delphacodes kuscheli were selected, cloned, sequenced and evaluated for their expression stability during MRCV infection. Out of the 7 studied genes, the polyubiquitin gene was the most stably expressed and consequently the most reliable as a reference internal control. The platform developed along this work will be useful for the precise quantification of MRCV titers in individual D. kuscheli insects as well as for future gene expression studies in MRCV infected delphacids. In parallel, we studied the role of MRCV proteins during the insect viral infection by expressing them in Sf9 non‐host insect cells and analyzing their subcellular localization by immunofluorescence and live imaging. We determined that the structural proteins P3, P4, and P8, and the non‐structural protein P7‐1, are distributed in the nucleus and cytoplasm. Because the size of these proteins exceeds the limits allowed by the nuclear pore complex, the results suggests that they are actively transported to the cell nucleus. Likewise, we observed that P5‐2 is located exclusively in the nucleus. Those MRCV proteins able to enter the cellular nucleus may perhaps be involved in transcriptional regulation of the host genes. We also observed that P5‐1 displays a heterogeneous granular cytoplasmic distribution that turns into a homogeneous localization when the C‐terminal tripeptide TKF, which in turn is a putative PDZ protein interaction motif and/or a peroxisomal import motif, is absent. On the other hand, it was shown that P6 accumulates in big amorphous perinuclear inclusions, being able to relocalize some of the cellular tubulin to these structures. This suggests that P6 might be involved in the formation of the fibrillar material observed in MRCV‐infected insect and plant cells. The P9‐2 protein was able to localize to the plasma membrane of cells and induced the formation of superficial filopodia‐like formations, suggesting that this protein might be involved in the viral transport across the plasma membrane during the insect vector cells infection. The putative outer capsid protein P10 was located in the endoplasmic reticulum and completely co‐localized with tubulin, suggesting that MRCV might also exploit the secretion pathway and the microtubules cytoskeleton for assembly and/or viral transport. Finally, P9‐1 was able to form conspicuous cytoplasmic VIB‐like structures. Next, some of the fluorescent fusions of MRCV proteins were used to analyze its subcellular co‐localization. We could not observe co‐localization between P9‐2 and P5‐1, P7‐1, P7‐2, P9‐1 or P10. Similarly, co‐localization of P9‐1 with P10 or P5‐2 was not detected. On the other hand, we showed that P6 co‐localize with P10, P9‐1 and P7‐2, which suggests that P6 might play a role in viroplasm formation and/or recruitment of other proteins to this structure as well as in the viral intracellular movement. Given that P9‐1 subcellular localization is similar to the distribution characteristically displayed by reovirus major viroplasm proteins, we carried out a more comprehensive study of its functional and biochemical properties. We observed that, like other reoviral major viroplasm proteins, P9‐1 self‐associates to form high molecular weight complexes when expressed in bacteria, displays a localized in vivo self‐interaction in the inclusion bodies formed in insect cells, has the ability to bind single stranded nucleic acids, has ATPase activity and contains an important domain for the formation of inclusion bodies at its C‐terminal half. These results suggest that P9‐1 is the major component of viroplasms, and thus plays a fundamental role in MRCV replication and assembly during the infection of host cells.

"Estudio de la interfase mercurio - solución acuosa de ioduro de potasio y cloruro de potasio" (1984). Gordillo, Gabriel Jorge. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La importancia del conocimiento de la estructura interfacial reside en el hecho de que en ella se producen los fenómenos de transferencia electroquímica y adsorción. La comprensión de estos últimos es de relevancia en áreas tales cinética electroquímica, coloides, corrosión, membranas biológicas, química física de componentes de suelos, etc. En el presente trebajo se estudia el fenómeno de adsorción iónica sobre mercurio en contacto con soluciones acuosas rnezcla de electrolitos. Los estudios sobre la adsorción se han realizado en su mayoría a partir de sistemas binarios 122, comprobándose para ellos un cumplimiento satisfactorio del modelo aceptado (Grahame-Stern-Gouy-Chapmam 28) para su interpretación 52 53. Los estudios sobre este fenómeno.apartir de mezclas de electrolitos se han realizado bajo la suposición, no comprobada para estos sistemas, de que el anión fluoruro no se adsorbe específicamente. Sin embargo, existen evidencias de que dicho anión muestra un comportamiento inverso al indicado, tanto en sistemas binarios 134 como en mezclas de electrolitos acuosos 79 156 , aunque en el último caso esto no ha sido determinado fehacientemente. Por otra parte, en general, las cantidades específicamnte adsorbidas, a carga sobre el metal constante, muestran diferencias cuando se comparan sistemas binarios con mezclas. En el estudio de la adsorción a partir de mezclas acuosas de electrolitos se presenta el problema de tener que regular dos variables de concentración independientes, y existe controversia a cerca de cual es el conjunto de estas más adecuado a utilizar en la isoterma de adsorción específica 134 129 125. Se han propuesto para estos casos la fuerza iónica y la molalidad de uno de los electrlitos, así como las actividades de las sales 115. En el presente trabajo se propone también la utilización de las actividades individuales de los aniones , ya que estos son los que se adsorben específicamente. Hasta el presente no ha sido publicado ningún estudio de la adsorción específica competitiva de aniones. El estudio de la adsorción a partir de mezclas de dos electrolitos acuosos en las que ambos aniones son capaces de adsorberse específicamente, permite investigar varios de los aspectos mencionados 9 130. Por esta razón, en el presente trabajo, se estudia la interfase mercurio- KCL(aq) + Kl (aq). En este caso ambos aniones presentan una adsorción específica elevada (fuerte), aunque en distinto grado, sobre dicho metal a partir de sus soluciones binarias individuales. También en las soluciones mezcla de estas sales es posible estimar los coeficientos de actividad iónica con bastante exactitud, lo cual permite analizar el sistema bajo distintas variables de concentración con el fin de intentar hallar la más adecuada. En el capítulo I se desarrollan los puntos teóricos referentes al tema en cuestión, en el II se detalla la parte experimental, en el III se presentan los resultados obtenidos y los cálculos realizados. El análisis de aquellos se realiza en el capítulo IV.

"Estudio de la interleuquina-1 en modelos fisiológicos y patológicos del sistema nervioso central" (2003). Depino, Amaicha Mara. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las citoquinas pro-inflamatorias son inducidas en condiciones patológicas en el sistema nervioso central (SNC) en situaciones de trauma o infección, y se ha demostrado que son capaces de exacerbar y/o disminuir una lesión (Rothwell and Luheshi, 2000). Asimismo, son expresadas de manera constitutiva e inducible por las células del SNC y actúan fisiológicamente sobre las neuronas en el cerebro normal adulto, modulando la plasticidad sináptica, la transmisión sináptica, etc. (Vitkovic et al., 2000). El sistema de la interleuquina-l (IL-1) juega un rol decisivo en la respuesta inflamatoria. La expresión de sus ligandos (IL-1α, lL-1β e IL-1ra) y de sus receptores ha sido demostrada en varias regiones del SNC y bajo diversas condiciones (Rothwell and Luheshi, 2000). Otros trabajos han demostrado no sólo una variedad de efectos de la lL-1 en el cerebro o en neuronas y glia in vitro, sino que los resultados publicados hasta la fecha resultan muchas veces contradictorios, demostrando efectos opuestos en el mismo sistema de estudio. El objetivo general de esta tesis es estudiar de manera sistemática y profunda los roles fisiológicos y los efectos farmacológicos de la IL-1 en el cerebro. Para ello se investigó a la molécula en cuatro modelos diferentes en los cuales se estudiaron las respuestas de la glia, las citoquinas, la neurodegeneración y las variaciones en el comportamiento, de forma de obtener una visión global de la fisiología de la IL-1 en el SNC. (1) Observamos similitudes y diferencias regionales en la respuesta aguda a la IL-1β. Por ejemplo, detectamos reclutamiento de neutrófilos en todas las regiones inyectadas, pero neurodegeneración sólo en el giro dentado. (2) En un modelo en rata de la enfermedad de Parkinson observamos Ia activación atípica de la microglia en la región lesionada, con una regulación particular de la expresión de citoquinas. (3) Demostramos que la neurogénesis en el mesencéfalo no es un fenómeno fisiológicamente relevante. (4) Demostramos que la IL-1α endógena hipocampal tiene un rol modulador del aprendizaje aversivo. De esta manera, caracterizamos funciones y/o efectos de la IL-1 en el SNC, obteniendo evidencia empírica no sólo de funciones especificas de la IL-1 sino también de características más generales de la gliosis/inflamación en el SNC. Así, observamos que los efectos de la IL-1 dependen tanto de las concentraciones utilizadas como de la región que se está estudiando y, probablemente, de la densidad glial en la misma. Por ejemplo, observamos que la IL-1 endógena modula el aprendizaje, pero que, cuando se inoculan cantidades farmacológicas de la misma, causa degeneración en la misma región (hipocampo).

Abstract:
Pro-inflammatory cytokines are induced in pathological conditions of the central nervous system (CNS) both after trauma and infection, and it was shown that they can exacerbate and/or diminish the lesion (Rothwell and Luheshi, 2000). Moreover, they are expressed by brain cells both constitutiver and after induction, and act physiologically on neurons in the adult nonnal brain, modulating synaptic plasticity, synaptic transmission, etc. (Vitkovic et al., 2000). The interleukin-l (IL-l) system plays an important role in the inflammatory response. The ligands (IL-1α, IL-1β and IL-1ra) and their receptors are expressed in many regions of the CNS and under different conditions (Rothwell and Luheshi, 2000). IL-l agonists have many effects both in the brain and in neurons and glia in vitro. Nevertheless, many reported effects are contradictory and even opposing. The main aim of this thesis is to gain a deep insight into the physiological roles and pharrnacological effects of IL-l in the brain. We used four different models to study the glial response, cytokine expression, neurodegeneration and behavior, to achieve a global idea of the physiology of IL-l in the CNS. (l) We observed similarities and differences in the regional response of the CNS to the acute administration of IL-1β. For example, we detected neutrophil recruitment in all injected regions, but neurodegeneration only in the dentate gyrus. (2) ln a rat model of Parkinson's disease we observed an atypical microglial activation in the lesioned region, with a tight regulation of cytokine expression. (3) We showed that there is no physiologically relevant neurogenesis in the adult rat mesencephalon. (4) We demonstrated a modulatory role of endogenous hippocampal IL-1α in aversive learning. In summary, we characterized the function and/or effects of IL-l in the brain, finding evidence not only for specific functions of IL-l but also for more general effects of gliosis/inflammation in the CNS. Indeed, we observed effects of IL-l that depend both on the concentration used and on the region under study, and probably on the glial density in it. For example, we observed that the endogenous IL-l modulates learning but exogenous IL-l causes degeneration in the same region (the hippocampus).

"Estudio de la leucemia linfoblástica aguda: Interferón, genes supresores de tumor y el receptor T" (1998). Sternik, Gabriel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En líneas celulares de origen leucémico se han encontrado deleciones en el brazo corto del cromosoma 9, donde se localizan los genes del interferón de tipo I, lo que en un principio hizo suponer que el interferón se comportaba como un gen supresor de tumor. Se propuso ver si la producción de interferón estaba alterada en las leucemias linfoblásticas agudas (LLA), y si esas alteraciones génicas estarían relacionadas con la capacidad de producción de interferón a por las células malignas al ser inducidas con virus Sendai. Se determinó la capacidad de las células leucémicas de 21 pacientes de LLA, de la línea celular establecida K 562 y de dadores normales de producir interferón a "in vitro" al ser inducidos con virus Sendai con un priming de interferón α. La producción de interferón a por los blastos leucémicos y células normales fue muy variable oscilando entre 633 a 8850 pg/ml/5x10 6 células, no siendo estadísticamente significativo, tampoco se hallaron diferencias entre los subgrupos de LLA. En 4 de los 7 casos estudiados por Southern blot se pudo estudiar la producción de interferón α, presentando uno de ellos deleción de genes de interferón α. De las 21 leucemias en dos casos produjeron una cantidad de interferón α mínima. Esto sugiere que la malignidad en las LLA con baja producción de interferón α podría deberse a la pérdida de algún gen supresor de tumor. Se investigó la frecuencia y asociación de alteraciones del p 16, el interferón α y el interferón β en un total de 39 casos de LLA. De ellos, diez pacientes (25,6 %) presentaron anormalidades de al menos uno de los tres genes estudiados. Se encontró en un porcentaje del 13% deleciones en los genes del interferón α y β, así como también en los recientemente identificados genes supresores de tumor p15 y p16 (23%) los cuales se encuentran próximos a los genes el interferón. Estos datos indican que en las LLA, representando un cuarto de las LLA totales estudiadas el gen p16 está delecionado con mayor frecuencia que los genes de los interferones de tipo 1. Además de p16, el 37,5% está asociado con deleciones del interferón, sugiriendo una asociación entre ambas. Estos datos sugieren que la ausencia de p16, inhibidor de las ciclinas, podría modificar el ciclo celular normal y favorecer la transformación blástica. Su asociación con la deleción de los genes de los interferones de tipo I podría constituir eventos de la leucemogénesis. El porcentaje de deleciones, a su vez dependió del fenotipo de la célula leucémica, siendo mayor en los casos de LLA T que en aquellas precursoras B. Para un mejor tratamiento de la enfermedad es necesario partir de un buen diagnóstico, para lo cual se buscó detectar clonalidad, de tipo B o T por medio de la identificación de fragmentos reordenados, ya sea de la cadena pesada de las inmunoglobulinas (clonalidad B) o de la cadena γ del receptor de los linfocitos T (clonalidad T). A su vez por medio de un mapeo de restricción se llegó a una correcta identificación del subtipo de reordenamiento Vγl en las LLA T. Esto cobra importancia, sobre todo para el seguimiento posterior de la enfermedad mínima residual, sin embargo no es suficiente para la determinación del linaje celular.

Abstract:
Type I Interferon genes are located in the short arm of chromosome 9, where deletions have been found in cell lines originated from leukemia patients. This arised the idea of interferon acting as a tumor suppressor gene in acute lymphoblastic leukemia (ALL). Interferon production was measured in ALL and compared to normal healthy donors. No significative differences were found between groups. By Southern blot analysis α and β interferon gene deletions were found in 13% of ALL patients. The putative tumor-suppressor gene p16 was mapped to human chromosome 9p2l, close to the interferon α cluster. The frequency and association of gene alterations of pl6, interferon α and interferon β were investigated in a total of 39 Acute Lymphoblastic Leukemia (ALL) patients. Of them, ten patients (25.6%) presented abnormalities of at least one of the three genes studied. We also found p15 and p16 gene deletions in a higher frequency (23%). These fidings supports the idea that the role of the interferon as tumor suppressor gene is more related to its location than its function. To have a more accurate diagnosis of acute leukemias, we investigated B and T cell clonality by identifying PCR segments of rearranged immunoglobulin heavy chain genes and γ T cell receptor (TCR) genes, respectively. In order to identify the rearranged Vγl TCR gene to further detect minimal residual disease a restriction analysis was performed. Although we can detect clonality by PCR amplification of IgH and/or γTCR gene rearrangement, in ALL, it can not be use for cell lineage identification.

"Estudio de la microestructura y su influencia en propiedades físicas del caucho polibutadieno y caucho poliisopreno reticulado con peróxido" (2015-08-19). Rodríguez Garraza, Ana Lucía. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo de la presente investigación es analizar las relajaciones estructurales que se producen en caucho polibutadieno (BR) y en caucho cis-poliisopreno (IR), cuando se encuentran reticulados mediante un proceso de curado con peróxido de dicumilo como agente reticulante. Las propiedades de los compuestos vulcanizados dependen principalmente de la microestructura del polímero sin curar, de la formulación del compuesto y de las condiciones de cura, debido a que éstas determinan la estructura de red formada durante el proceso de vulcanización. En esta tesis, se estudiaron tres polibutadienos de diferente estructura molecular (97% de contenido cis, 37 % de contenido cis y 70% de contenido vinilo) y un caucho cis-poliisopreno. Con la finalidad de lograr materiales con diversas estructuras de red se prepararon compuestos con concentraciones de peróxido de dicumilo entre 0.25 y 4.00 phr (partes por cien de caucho), los cuales fueron vulcanizados entre 150°C y 180°C, que son temperaturas normalmente empleadas en procesos tecnológicos que involucran este tipo de elastómeros. Mediante ensayos reométricos se caracterizó el proceso de vulcanización. Las propiedades mecánicas de los cauchos reticulados dependen fuertemente de la densidad de entrecruzamientos (crosslink) generados en la vulcanización. Para estimar la densidad de entrecruzamientos se utilizó la técnica de hinchamiento en solvente y el formalismo de Flory- Rehner. Al usar este formalismo, es necesario contar con el valor correcto del parámetro de interacción polímero/solvente χ, el cual se calculó para cada uno de los sistemas caucho/tolueno. La técnica de hinchamiento en solvente también fue empleada para estudiar la difusión de tolueno en el material reticulado. Los estudios de densidad de entrecruzamiento se complementaron con experimentos de RMN de doble coherencia cuántica, que permitieron caracterizar la distribución espacial de la densidad de entrecruzamientos. Por otro lado, se efectuaron estudios de espectroscopía infrarroja con los que se determinaron las variaciones que se producen en la composición isomérica (cis, trans, vinilo) de los BR durante la vulcanización, y a partir de esto se caracterizaron los mecanismos que operan durante este proceso. También se estudiaron las propiedades térmicas de cada compuesto por calorimetría diferencial de barrido. Las variaciones en la temperatura de transición vítrea y la cristalización se analizaron en función de la densidad de entrecruzamientos para cada uno de los elastómeros. Utilizando espectroscopía de aniquilación de positrones se determinó el volumen libre de los materiales vulcanizados con la finalidad de obtener correlaciones con la respectiva densidad de entrecruzamiento. Finalmente, se analizaron las relajaciones estructurales mediante espectroscopía dieléctrica de banda ancha. En particular, para el BR, se analizó la influencia de la reticulación y de la composición isomérica en los procesos de relajación α y β. Para el caso del IR, se estudió el efecto de la reticulación en la relajación α y el modo normal. El análisis integral de los resultados obtenidos permitieron caracterizar exhaustivamente la estructura de red de cada uno de los compuestos vulcanizados y de esta manera establecer un vínculo microestructura-propiedades dieléctricas para estos sistemas. Esta información intenta aportar una visión más amplia en cuanto al entendimiento del comportamiento de los elastómeros BR e IR vulcanizados y sus propiedades.

Abstract:
The objective of the present research is to study the structural relaxations that are produced on polybutadiene rubber and cis-polyisoprene rubber when being vulcanized by dicumyl peroxide as crosslinking agent. Vulcanized material properties strongly depend on the microstructure of the uncured polymer, material formulation and curing conditions, since these characteristics determine the network structure that is produced during vulcanization. In this thesis, three different polybutadiene isomers (cis 97%, cis 37%, vinyl 70%) and cispolyisoprene were studied in order to obtain materials bearing different network structures. The systems were prepared with a dicumyl peroxide content in the range of 0.25 to 4.00 phr (parts per hundred of rubber) and cured between 150°C and 180°C, which are temperatures normally used for technological purposes in these elastomers. Rheometric analysis were performed to analyze the vulcanization process. Since the mechanical properties of the crosslinked rubbers strongly depend on the crosslink density generated during the curing process, swelling experiments were performed in the frame of Flory-Rehner relationship to estimate the crosslink density of each vulcanized network. In order to use Flory-Rehner relationship, first it was necessary to evaluate the Flory-Huggins interaction parameter χ, between each of the rubber/toluene systems. The swelling technique in solvent was also employed to study toluene diffusion within crosslinked materials. These studies were complemented with experiments of double quantum coherence NMR, which were used for measuring the crosslinks spatial distribution of each material network. Fourier infrared spectroscopy experiments were performed to determine changes in the isomeric composition (cis, trans, vinyl) that were produced after the vulcanization process and from this analysis, the operating mechanisms during BR curing were characterized. Furthermore, thermal properties of the crosslinked materials were studied by means of differential scanning calorimetry. The variation of the glass transition temperature and the crystallization process and its relation with the crosslink density was analyzed for each type of rubber isomer. Positron annihilation lifetime spectroscopy was employed to measure free nanohole volume which was correlated with the crosslink density. Finally, structural relaxations were studied by broad band dielectric spectroscopy. Particularly, the influence of curing and isomeric composition on α and β relaxation processes was analyzed for BR samples. For the case of IR, the effect of crosslinking on α and normal mode relaxations was studied. A comprehensive analysis of the obtained results allowed a fully characterization of each vulcanized network structure and to establish a link between microstructure and dielectric properties for these systems. This contribution aims to provide a more complete picture of BR and IR vulcanized elastomer behavior and their properties.

"Estudio de la modulación de la expresión a largo plazo de una memoria durante la fase de consolidación" (2015-05-28). Suárez, Luis Daniel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Experimentos previos en el Laboratorio de Neurobiología de la Memoria mostraron que memorias que no se expresaban a causas de entrenamientos insuficientes o tratamientos con drogas amnésicas podían ser rescatadas si se las facilitaba durante su reconsolidación. Estos experimentos fueron interpretados, bajo la visión canónica de la teoría de modulación endógena de la consolidación, como casos de facilitación de la reconsolidación de memorias que no fueron completamente consolidadas. Sin embargo, una revisión de los experimentos publicados mostró que los resultados requerían para ser explicados apropiadamente asumir el acceso a la memoria cuya consolidación se consideraba incompleta, así como la generación y subsiguiente evaluación de una predicción; situación que no es compatible con los modelos clásicos de amnesia. El paradigma de memoria contexto-señal en el cangrejo de ría Neohelice granulata es un paradigma de memoria asociativa estudiado desde hace varios años en el Laboratorio de Neurobiología de la Memoria. La reciente caracterización en este paradigma de la fase de reconsolidación ha permitido desarrollar herramientas para controlar ciertos aspectos de la reactivación de la memoria durante la recuperación, en particular la realización de una predicción. En esta Tesis se empleó dicho paradigma para caracterizar algunos de los posibles mecanismos que controlan la expresión de memorias reactivadas. Se emplearon aproximaciones comportamentales y farmacológicas, utilizando drogas cuyos blancos de acción son a nivel subcelular (el factor de transcripción NF-κB) y a nivel de comunicación intercelular (receptores de acetilcolina de tipo muscarínicos), lo que permitió disociar algunos de los mecanismos que afectan diferencialmente la persistencia y la expresión de la memoria. Ante la dificultad de los modelos clásicos de explicar los fenómenos observados, propusimos un nuevo modelo de procesamiento de la información durante el aprendizaje que nos permite interpretar nuestros resultados en el marco de un posible valor funcional. Para fortalecer esta propuesta, exploramos también una serie de condiciones naturalistas que permitirían modular la capacidad de expresarse de una memoria durante la consolidación y durante la recuperación.

Abstract:
Previous experiments in the Laboratory of Neurobiology of Memory have shown that unexpressed memories after undertraining or treatments with amnesic drugs could be rescued if they were facilitated during their reconsolidation. These experiments were interpreted under the canonic view of the theory of endogenous modulation of memory consolidation as cases of enhancement of reconsolidation after a deficient consolidation. However, our later review of those experiments revealed that, in order to explain the results, it was necessary to assume the access to the memory as well the generation and evaluation of a prediction. This is incompatible with classic models of amnesia. The context-signal memory paradigm in the estuarine crab Neohelice granulata is an associative memory paradigm studied for several years in the Laboratory. The recent characterization in this paradigm of the reconsolidation phase has allowed the development of experimental tools to control some aspects of memory reactivation during retrieval, specially performing a prediction. These tools which did not exist in other paradigms at the beginning of this Thesis, make the context-signal memory paradigm ideal to answer this issue. This paradigm was used to characterize some of the potential mechanisms that control the expression of reactivated memories. We use behavioral and pharmacological approaches, with drugs that target processes at sub-cellular level (the activation of the transcription factor NF-κB) and at the level of interneuronal communication (muscarinic receptors of acetylcholine). Therefore, we were able to dissociate some of the mechanisms that differentially affect the persistence and expression of memory. Furthermore, because of the difficulty of classical models to explain the observed phenomena, we proposed a novel model of information processing during learning in order to interpret our results in the frame of a potential functional role. To strengthen this proposal, we studied also some naturalistic conditions that would allow modulating, during consolidation and retrieval, the capability of expression of a memory.

"Estudio de la modulación de la fase de reconsolidación de la memoria declarativa en humanos" (2014-11-28). Coccoz, Verónica. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El redescubrimiento de la reconsolidación de la memoria desafió la clásica visión de las memorias fijas al mostrar que una memoria ya consolidada puede volverse lábil y susceptible a interferencia por agentes amnésicos. La teoría de la modulación endógena de la memoria propone que sistemas moduladores extrínsecos a los procesos de memoria actuarían sobre estos determinando el almacenamiento de la información. La administración de un estresor leve o de una bebida con alta concentración de azúcar permitió facilitar una memoria declarativa (una lista de 5 pares de sílaba clave-sílaba respuesta) luego de que esta fuera olvidada, durante la fase de reconsolidación. Puesto que ni el recordatorio ni los estímulos facilitadores empleados implican un re-entrenamiento de los sujetos, se descarta que el olvido se haya producido como consecuencia de la pérdida de la información. Controles específicos del proceso de reconsolidación permitieron probar que el acceso a la información olvidada es necesario para que el efecto facilitador ocurra, lo que descarta la falta de acceso a la información como un mecanismo para el olvido. Se propone un modelo alternativo a la clásica dicotomía "almacenamiento/acceso" para explicar este fenómeno.

Abstract:
The rediscovery of memory reconsolidation challenged the classical concept of fixed memories by showing that a consolidated memory can become labile again and susceptible to interference by amnesic agents. The theory of endogenous modulation of memory proposes that extrinsic modulatory systems would act on memory systems, determining the storage of information. The administration of a mild stressor or a sweet drink can enhance declarative memory (association between five cue-syllables and their respective responsesyllables) during reconsolidation, after forgetting had occurred. Since neither the reminder nor the facilitatory stimuli used involve retraining of the subjects, it is discarded that forgetting is the result of a loss of information. Specific controls over the reconsolidation process allowed proving that access to forgotten information is necessary for the occurrence of the facilitatory effect. That discards a deficit in access to information as a mechanism of forgetting. A new model, alternative to the classical "storage/access" dichotomy, is proposed to explain this phenomenon.

"Estudio de la morfometría de las sagittae en poblaciones de sciaenidos marinos de aguas cálidas del Perú y aguas templado-frías de Argentina." (2001). Volpedo, Alejandra. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los otolitos (sagitta. asteriscus y lapillus) son estructuras complejas compuestas por carbonato de calcio, otros minerales y una matriz proteica. Los otolitos se encuentran en el oído interno de los teleósteos. La forma y estructura de los otolitos son específicas de cada taxón. Por esta razón se los utiliza para identificar especies en estudios biológicos y ecológicos. Los sciaenidos son un grupo de peces de importancia comercial y el manejo de este recurso es un tema prioritario para las economías locales y nacionales de los países que explotan estas especies. La propuesta de este trabajo es estudiar diferentes aspectos de las sagittae de sciaenidos marinos de Argentina y Perú. Analizando la morfología, la morfometría y la composición química de las sagittae en relación al ambiente. Los sciaenidos estudiados de la costa de Buenos Aires son: Cynoscíon guatucupa, Macrodon ancylodon, Menticirrhus americanus, Micropogonias fumieri, Paralonchurus brasiliensis y Umbrina canosai, y de Grau (Perú) son: Cynoscion analis. Lan’mus acclivis, Micropogonias altipinnis, Paralonchurus brasiliensis y Sciaena deliciosa. Se evalúa la identificación de stocks pesqueros de las especies a través de la morfología, morfometría y composición de elementos traza de la sagittae. Además la composición de elementos de las sagittae es evaluada como bioindicador de las condiciones ambientales. Se elaboraron claves dicotómicas para la identificación específica de los otolitos utilizando caracteres de la topografía de la cara interna, externa y vista lateral de la sagitta. Se analizaron los patrones morfológicos genéricos y las variaciones intraespecíficas relacionadas con cambios en el desarrollo de los peces. Las variaciones en la morfología del desarrollo de la sagitta encontradas en C. guatucupa, C. analis, M. americanus, M. fumieri y P. brasiliensis se asociaron a cambios en los parámetros físico-químicos de los diversos hábitats, que producirían cambios en la acumulación del carbonato de calcio en la sagitta durante el ciclo de vida del pez. En las sagittae de adultos de M. fumieri provenientes de las diferentes localidades bonaerenses. se registró variabilidad morfológica y morfométrica, lo que permite inferir la presencia de por lo menos dos stocks pesqueros que posiblemente corresponderían a dos grupos poblacionales diferentes. El análisis morfométrico no mostró diferencias entre las sagittae derecha e izquierda de cada espécimen. Las dimensiones de las sagittae están influenciadas por factores ambientales (temperatura, salinidad y latitud) y el crecimiento somático del pez, mientras que las dimensiones del ostium y la cauda estarían influenciadas principalmente por un patrón genético. Para los caracteres morfométricos de las sagitfae de C. guatucupa, M. americanas, M. fumieri y C. analis se halló una correlación negativa con la temperatura y una correlación positiva con la salinidad y con la latitud, en otras palabras las sagittae de grandes tamaños se presentan a bajas temperaturas y estas áreas corresponden a altas latitudes. Del análisis de los elementos traza de las sagittae se estableció que estos elementos precipitan homogéneamente sobre la superficie del otolito. Las sagittae de M. fumieri presentaron elementos comunes a todas las localidades costeras de Buenos Aires estudiadas (estroncio y potasio) y elementos particulares de las sagittae de los peces del Partido de La Costa (fósforo y cromo) y de San Blas (cadmio). La presencia de elementos particulares estaría estrechamente relacionada con el tipo de fuentes de contaminación antrópica que influencian las zonas de cría de ambos grupos de peces. En consecuencia, las sagittae pueden ser utilizadas como bioindicadores de la calidad del agua. Las sagittae de C. guatucupa, M. ancylodon, M. americanus y M. fumieri poseen una mayor concentración relativa de estroncio en San Blas con respecto a las del Partido de La Costa. Esto puede asociarse a las diferencias de temperatura entre ambas áreas que afectaría la precipitación del estroncio. Esta característica sería una herramienta útil para la identificación de stocks pesqueros bonaerenses.

Abstract:
Otoliths (sagitta, asteriscus and lapillus) are complex structures composed of calcium carbonate, other minerals, and a protein matrix. Otoliths are located in the internal ear of the teleost fishes. The shape and structure of otoliths are specific for each species. For this reason, otoliths are used to identify species in biological and ecological studies. Sciaenids conform a group of fishes of commercial importance, so the handling of this resource is a high-priority topic for the local and national economies of countries that exploit these species. The purpose of this work is to study different aspects of the sagittae of marine sciaenids from Argentina and Peru. The morphology, morphometry and chemical composition has been analyzed in relation to the environment. The sciaenids studied from Buenos Aires coast are: Cynoscion guatucupa, Macrodon ancylodon, Menticirrhus americanus, Micropogonias fumieri, Paralonchurus brasiliensis and Umbrina canosai, while from Grau (Peru) they are: Cynoscion analis, Larimus acclivis, Micropogonías altipinnis, Paralonchurus brasiliensis and Sciaena deliciosa. The identification of fishing stocks species through the morphology, morphometry and elemental composition of the sagittae is evaluated. Moreover, the elemental composition has been evaluated in order to be used as bioindicator of environmental conditions. An otolith specific identification key has been elaborated using the characteristics of the topography of internal and external faces and of the lateral view of sagitta. Generic morphological patterns and intraespecific variations related with changes in the development of the fish have been analyzed. Morphological variations have been found in the sagittae of C. guatucupa, C. analis, M. americanas, M. fumieri and P. brasíliensis associated to changes in physical and chemical parameters of the habitats that would produce changes in the deposition of the calcium carbonate on the sagitta during the life cycle. Morphological and morphometrical variability has been recorded in the sagittae of M. fumieri adults coming from different coastal localities from Buenos Aires, which allows to infer the presence of at least two population groups. The morphometric analysis showed no differences in the right and left sagittae of each species. The dimensions of the sagittae are mainly influenced by environmental factors (temperature, salinity and latitude) and somatic growth of the fish, while the dimensions of ostium and cauda would be mainly influenced by the genetic pattern, the evolutionary history of the species and the ontogeny. For C. guatucupa, M. americanus, M. fumieri and C. analis, a negative correlation of the temperature and a positive one of the salinity and latitude with the morphometric characteristics of the sagittae were recorded (i.e. sagittae of bigger size at low temperature, and high latitude environments). The analysis of trace elements of the sagittae showed that they precipitate homogeneously on the surface of the otolith. The sagittae of M. fumieri have some elements (strontium and potassium) in common in all the coastal localities studied from Buenos Aires, while phosphorus and chromium were present only in otoliths from Partido de La Costa, and cadmium in the ones from San Blas. The presence of particular elements might related with the type of antropic pollution that would influence the nursery areas of fishes. As a consequence, sagittae could be used as bioindicadors of water quality. The sagittae of C. guatucupa, M. ancylodon, M. americanus and M. fumieri have higher relative concentration of strontium in San Blas than in Partido de La Costa. This may be associated to differences in temperature between both areas that would affect the precipitation of strontium. This characteristic could be an useful tool for the identification of fishing stocks from Buenos Aires.

"Estudio de la muerte celular programada durante el desarrollo de la semilla de quinoa" (2014). López Fernández, María Paula. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En semillas de quinoa, el perisperma, junto al embrión y al endosperma, constituyen los tres compartimentos del grano donde se almacenan las diferentes reservas de la semilla madura. Aun cuando de origen diferente, el perisperma de quinoa comparte con el endosperma amiláceo de las Gramíneas las características de ser el principal tejido reservante de la semilla, estar formado por células muertas a la madurez y almacenar almidón como la principal reserva. En la presente tesis se estudió el desarrollo del perisperma de quinoa y el programa de muerte celular (MCP) que lo afecta. Este análisis se extendió al desarrollo del endosperma, del suspensor, de los tegumentos seminales y del pericarpio. La caracterización de la MCP se evaluó mediante estudios sobre la degradación del ADN nuclear, la expresión de proteasas tipo caspasas y de nucleasas, la endo-reduplicacion y los cambios morfológicos que se producen en el núcleo y en el citoplasma. Adicionalmente se comprobó, mediante técnicas inmunológicas, la presencia de ricinosomas como marcador asociado a la MCP de las células del suspensor y del endosperma predestinadas a morir durante el desarrollo de la semilla; los resultados de estos estudios demostraron la correspondencia entre la presencia de CysEP con la fragmentación del ADN. Como parte del desarrollo del perisperma, se analizaron aspectos relacionados con la síntesis del almidón de reserva en granos compuestos y se identificaron algunas de las enzimas involucradas en su síntesis. A partir de estos estudios fue posible concluir que en la semilla de quinoa: (i) diferentes tipos de muerte celular ocurren de forma simultánea, en los diferentes tejidos; (ii) el perisperma acumula almidón y degenera simultáneamente, durante el desarrollo; (iii) la detección muy temprana de ricinosomas prevé con anticipación la ocurrencia de la MCP; (iv) los granos de almidón compuesto del perisperma se originan en amiloplastos; en los últimos estados del desarrollo, los granos de almidón simple que llenan espacio entre los granos compuestos tienen origen extra- plastídico. Los resultados obtenidos constituyen aportes a la construccion de la sistemática filogenética de la familia Amaranthaceae.

Abstract:
In mature quinoa seeds, the perisperm is one of the three compartments that store reserves, in addition to the embryo and endosperm. Despite their different origins, the quinoa perisperm and starchy cereal endosperm share some characteristics, such as being the main reserve tissue, formed by dead cells at maturity and having starch as their main reserves. In this thesis we studied quinoa perisperm development and the program cell death (PCD) that affects this tissue. This study included the development of the endosperm, suspensor, seed integuments and pericarp. PCD was assessed by studies of nuclear DNA degradation, expression of caspase like-proteases and nucleases, endoreduplication and morphological changes in the nuclei and cytoplasm. Additionally, using immunological techniques we were able to identify associations between the presence of ricinosomes and other PCD hallmark in suspensor and endosperm cells predestined to die during quinoa seed development. These studies showed the relationship between the presence of CysEP and DNA fragmentation in the endosperm, the only seed tissue that dies without leaving a "corpse". As part of perisperm development, we analyzed aspects related to starch synthesis in simple and compound grains, including the detection of starch synthesis enzymes and starch pattern accumulation, among others, and concluded that: (i) simultaneous different cell death programs occurring simultaneously in different tissues of the same seed (ii) the quinoa perisperm accumulates starch while it degenerates, both processes occurring during quinoa seed development, (iii) the early detection of ricinosomes predicts the occurrence of the PCD; (iv) monitoring the development of perisperm can prove the plastidic and extra-plastic origin of the starch grains. The findings generated here are invaluable as they provide novel insight into the Amaranthaceae, as well as a starting point for phylogenetic studies.

"Estudio de la organización genómica de elementos de ADN de Taxoplasma gondii y su aplicación al diagnóstico directo de la toxoplasmosis humana" (1997). Matrajt, Mariana Laura. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Toxoplasma gondii es uno de los parásitos protozoarios más ampliamente distribuidos a nivel mundial, y usualmente causa una enfermedad asintomática en los humanos. Sin embargo, la reactivación de la infección crónica en pacientes inmunocomprometidos, y la toxoplasmosis congénita de una infección primaria adquirida durante el embarazo, presentan cuadros clínicos muy severos e incluso puede causar la muerte del paciente. Además, debido a que T. gondii causa mortalidad de los neonatos en ovejas, también representa una causa importante de pérdida económica en las granjas. En este trabajo dos familias de ADN repetitivas de T. gondii fueron caracterizadas. ABGTg7 (721 bp) presenta dos monómeros repetidos completos y 55 nt de un tercero, mostrando una disposición de tandems directos cuya unidad repetida es de aproximadamente 340 bp. ABGTg8 (1002 bp) contiene dos elementos repetidos distintos: uno denominado ABGTg8.2 y un elemento ABGTg7. ABGTg7 y ABGTg8.2 muestran patrones de hibridación muy similares en Southern-blots de ADN de T. gondii digerido con distintas endonucleasas de restricción, sugiriendo que ambos elementos principalmente se encuentran en la misma estructura repetitiva en tandem en el genoma. Análisis de PFGE mostraron que estos elementos repetidos se encuentran en al menos tres de los 4 cromosomas más grandes de T. gondii. Ensayos de sensibilidad a la endonucleasa Bal 31 indicaron que se encuentran localizados cerca de los telómeros de los cromosomas así como también en otras regiones de los mismos. Cinco fagos lambda recombinantes genómicos fueron aislados y dos clusters diferentes completos de la estructura repetitiva fueron analizados. Ambos clusters contienen uno de sus extremos conservados con un fragmento de 4.4 Kbp donde se halla ubicado ABGTg8.2, ligado a numerosos fragmentos Sal I conteniendo todos al menos una copia de los monómeros de ABGTg7. Dentro de estos clusters ambos elementos repetidos forman parte de una estructura compleja en tandem, donde los monómeros de ABGTg7 se encuentran dispuestos tanto como tandems directos como flanqueados por otros elementos repetitivos sin o con baja homología entre ellos. Esta estructura repetitiva en tandem cumple los requerimientos asignados al ADN satelital. Por otra parte, se evaluó el uso potencial de la secuencia ABGTg7 para el diagnóstico de la toxoplasmosis humana. Se realizaron ensayos de hibridación mediante la técnica de Dot-blot en muestras de sangre de pacientes con toxoplasmosis cerebral (CT), linfoadenopatía toxoplásmica (ATL) y toxoplasmosis diseminada en pacientes trasplantados (TR). Se estudió un total de 84 individuos. Se encontraron señales positivas por Dot-blot en 12 (66.7%) de 18 casos con CT confirmada, 9 (52.9%) de 17 casos con ATL y 2 (66.7%) de 3 casos con TR con toxoplasmosis. En paralelo se realizaron ensayos de PCR en los pacientes con ATL, resultando en la detección de ADN de T. gondii en 10 casos (58.8%). Un estudio comparativo entre el Dot-blot y la PCR fue realizado también en ratones experimentalmente infectados con taquizoitos, el cual arrojó resultados similares: 60% y 70% de valores positivos respectivamente. Finalmente la suma de valores positivos obtenidos con ambos tests (Dot-blot más PCR) incrementó el número de sospechas de infección toxoplásmica en los pacientes con ATL a un 76.4% de casos. Por otro lado, si se consideran los resultados positivos obtenidos simultáneamente por las dos técnicas, se confirmó el resultado en el 35.2% de los casos. Estos resultados indican que la sonda repetitiva ABGTg7 es un recurso adicional útil para el diagnóstico de la toxoplasmosis humana. Finalmente, teniendo en cuenta los resultados obtenidos en los estudios básicos sobre la organización genómica de estos elementos repetidos, se desarrolló un ensayo de PCR basado en la secuencia ABGTg7 con el objeto de ser evaluado como herramienta diagnóstica.

Abstract:
Toxoplasma gondii is one of the most widely distributed protozoan parasites in the world, and usually causes asymptomatic disease in humans. However, reactivation of chronic infection in immunocompromised patients, and congenital toxoplasmosis resulting from primary infection acquired during pregnancy, present severe and life threatening clinical events. In addition, since T. gondii causes neonatal mortality in sheep, it also represents a major cause of economic loss in the farming industry. In the present work two T. gondii repetitive DNA elements were characterized. ABGTg7 (721 bp) exhibited two complete repeat monomers and 55 nt of a third one, showing an array of direct tandems with a repeat monomer of about 340 bp long. ABGTg8 (1,002 bp) contains two different repetitive DNA elements: one named ABGTg8.2 and an ABGTg7-like element. ABGTg7 and ABGTg8.2, displayed very similar hybridization patterns in Southern blots of T. gondii DNA digested with different restriction endonucleases suggesting that both repeats are mainly present in the same tandem repeat structure. PFGE analysis showed that these repeats are present in at least three of the four largest chromosomes of T. gondii. Bal 31 sensitivity assays indicated that these elements are located near the telomeres and along other regions too. Five genomic lambda phages were isolated and two different completed clusters of the repeated structure were analyzed. Both clusters have a conserved border of about 4.4 Kbp where ABGTg8.2 is situated, linked to several Sal I fragments, all containing at least one copy of an ABGTg7 monomer. Inside these clusters both repeats are members of a more complex tandem structure where ABGTg7-like monomers can be arranged either as direct tandems or flanked by other repeats which have no or low homology among them. This novel tandemly repeated structure meets the requirements assigned for satellital DNA. Besides, the potential diagnostic use of ABGTg7 is reported. A Dot-blot hybridization assay in blood samples for diagnosis of cerebral toxoplasmosis (CT), acute toxoplasmic lymphadenopathy (ATL) and disseminated toxoplasmosis in transplant recipients (TR), was applied. A total of 84 individuals were studied. We found positive hybridization signals in 12 (66.7%) out of 18 cases of confirmed CT, 9 (52.9%) out of 17 of ATL and 2 (66.7%) out of 3 of TR. PCR assays were performed in parallel in patients with ATL resulting in T. gondii DNA detection of lO cases (58.8%). A comparative study between Dot-blot and PCR assays performed in blood of mice that had been experimentally infected with tachyzoites gave similar results: 60% and 70% of positives respectively. Finally the sum of positive values obtained with both DNA tests (Dot-blot plus PCR) increased the number of patients with suspected toxoplasmic infection in ATL patients, up to 76.4%. On the other hand, positive values obtained simultaneously by both tests, allow to confirm the results in 35.2% of the cases. These results demonstrate that T. gondii ABGTg7 repetitive DNA element is an additional useful resource for diagnosing Toxoplasma parasitemia. Finally, taking into account the genome organization basic studies of the repetitive elements, a PCR based on ABGTg7 sequence was developed in order to be evaluated as a diagnostic tool.

"Estudio de la participación de la citoquina LIF en el proceso de diferenciación de células madre embrionarias humanas a cardiomiocitos" (2015-06-29). Blüguermann, Carolina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las células madre embrionarias humanas (CMEh) se caracterizan por su capacidad para auto-renovarse, sin perder sus propiedades, casi ilimitadamente. Una de las principales propiedades de estas células es la pluripotencia, es decir la capacidad para diferenciarse y dar origen a las tres capas germinales: ectodermo, mesodermo y endodermo. Debido a su capacidad de autorenovación y a su naturaleza pluripotente las CMEh representan un modelo experimental único para numerosas áreas de investigación en biología y medicina. Estudios recientes realizados para dilucidar los mecanismos que dirigen la diferenciación de CMEh a cardiomiocitos in vitro, han recapitulado muchos de los procesos que ocurren in vivo durante el desarrollo cardíaco temprano. Numerosos trabajos han demostrado que el factor inhibitorio de leucemia (LIF por su nombre en inglés) puede promover la proliferación o inducir la diferenciación celular de manera específica, dependiendo del tipo celular o estadío del desarrollo en el que actué. No obstante, poco se sabe acerca de la relevancia biológica de esta citoquina durante el proceso de diferenciación cardíaca humana. El objetivo principal de nuestro proyecto de investigación consistió en estudiar el rol de LIF durante la generación y el mantenimiento de cardiomiocitos a partir de CMEh. Para ello, en primera instancia, desarrollamos un nuevo protocolo de diferenciación de CMEh a cardiomiocitos, que incluye el uso de un medio de composición definida y el agregado secuencial de factores específicos que dirigen la diferenciación hacia mesodermo cardíaco. A continuación, evaluamos el efecto del agregado de LIF en diferentes etapas de la diferenciación cardiaca. Nuestros resultados nos permiten postular que la presencia de LIF a lo largo de la diferenciación cardíaca ejerce un efecto citoprotector que estaría asociado a una diminución de los niveles de apoptosis. En una segunda etapa logramos generar en nuestro laboratorio una línea de células pluripotentes inducidas (CMPIs) a partir de la reprogramación de fibroblastos dérmicos y evaluamos su rendimiento al ser sometidas al protocolo de diferenciación cardíaca. Las CMPIs presentan expresión génica, proteica y modificaciones epigenéticas muy similares a las CMEh. Estas características las equiparan a las CMEh, y por ende son vistas como substitutos accesibles. Palabras clave: Células madre embrionarias humanas, mesodermo, diferenciación cardíaca, LIF, gp130/STAT3, células madre pluripotentes inducidas.

Abstract:
Human embryonic stem cells (hESCs) are commonly defined as undifferentiated cells that can proliferate indefinitely and have the capacity of both self-renewal and differentiation, giving rise to all three germ layers: ectoderm, mesoderm and endoderm. Because of their capacity for self-renewal and their pluripotent nature, hESCs represent a unique experimental model for many areas of research in biology and medicine. Recently, numerous studies on the mechanisms that direct the differentiation of hESCs into cardiomyocytes in vitro, have recapitulated many of the processes that occur in vivo during early cardiac development. However, one of the most important challenges that the application of stem cells in cardiovascular regenerative medicine faces, is the great difficulty to obtain these specialized cells in sufficient quantity and purity. Numerous studies have shown that leukemia inhibitory factor (LIF) can promote proliferation or induce cell differentiation, depending on the cell type or stage of development in which it acts. However, little is known about the biological relevance of this cytokine during human cardiac differentiation. The main objective of our research was to study the role of LIF in the generation and maintenance of cardiomyocytes from hESCs. To this end, we developed a new differentiation protocol of hESCs into cardiomyocytes, which includes the use of a defined composition medium and the sequential addition of specific factors (in restricted time windows) that direct differentiation into cardiac mesoderm. Finally, we evaluated the effect of the addition of LIF at various stages of cardiac differentiation. Our results allow us to postulate that the presence of LIF during cardiac differentiation exerts a cytoprotective effect as a consequence of the reduction in the level of apoptosis. As a second objective, we generate in our laboratory, a line of induced pluripotent stem cells (hiPSC) from dermal fibroblasts and evaluate its performance when subjected to the cardiac differentiation protocol. hiPSC have very similar gene, protein and epigenetic expression profile when compared to hESCs, and therefore, are considered as accessible substitutes. Key words: Human embryonic stem cell, mesoderm, cardiac differentiation, LIF, gp130/STAT3, Induced pluripotent stem cells.

"Estudio de la participación de la melatonina en la fisiología de la retina de Hámster Dorado" (1996). Faillace, María Paula. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La melatonina caracterizada originalmente en la glándula pineal fue más tarde identificada en la retina de diversas especies, así como las enzimas involucradas en su síntesis, la serotonina-N-acetiltransferasa (NAT) y la hidroxiindol-O-metiltransferasa (HIOMT). El hámster dorado ha sido considerado frecuentemente el modelo clásico para el estudio de la melatonina pineal, sin embargo, la melatonina retiniana en esta especie ha recibido relativamente poca atención. El objetivo de este trabajo de tesis consistió en examinar la biosíntesis del metoxiindol en la retina del hámster, así como elucidar algunos de los mecanismos involucrados en la regulación de su síntesis y su posible rol fisiológico a nivel local. En este sentido, se describe por primera vez la presencia de un ritmo en el contenido retiniano de melatonina en el hámster dorado, con valores máximos en la segunda mitad de la noche. La síntesis de melatonina en la retina del hámster es independiente de la actividad pineal. Asimismo, se demuestra la capacidad de las retinas aisladas de sintetizar melatonina. La síntesis de melatonina es regulada directamente por la señal fótica ambiental, sin indicación de la existencia de un ritmo de naturaleza endógena en los experimentos realizados en este trabajo. El GABA, postulado como un neurotransmisor retiniano regulatorio de procesos asociados a oscuridad, estimula la producción in vitro de melatonina retiniana, probablemente a través de receptores de tipo A, en tanto que antagonistas específicos del receptor GABAA suprimen el incremento in vitro de melatonina en oscuridad. El "turnover" de GABA es máximo en la fase de oscuridad y precede al aumento en el contenido de melatonina. En conjunto, estas evidencias sugieren que el GABA actúa como intermediario entre la señal de oscuridad y la inducción de la síntesis del metoxiindol. El AMPc ha sido postulado como la señal intracelular involucrada en la inducción génica de la NAT retiniana. La existencia de una correlación temporal entre el ritmo en el contenido de AMPc y el de melatonina (ambos regulados de manera análoga por la señal fótica ambiental) avala resultados previos. Sin embargo, en este trabajo se postula adicionalmente que el GMPc participa en la regulación de la síntesis de melatonina retiniana, tanto por sus efectos in vitro, como por la correlación temporal entre las variaciones diarias de ambas moléculas. Considerando que el GABA estimula la acumulación de GMPc, pero inhibe la de AMPc, se sugiere que el efecto gabaérgico sobre la síntesis de melatonina podría estar mediado por el incremento en los niveles de GMPc retinianos. Por otra parte, se demuestra que la melatonina estimula la producción de GMPc, a través de una acción dual sobre la síntesis y degradación, ambos efectos tendientes al incremento en los niveles del nucleótido cíclico. La activación de la enzima de síntesis, así como la inhibición de la enzima de degradación podrían ocurrir a través de la disminución de los niveles de calcio citoplasmático. En este sentido, la melatonina inhibe en forma inmediata (luego de 10 seg) la captación de 45Ca2+ en fracciones sinaptosomales crudas. La melatonina incrementa la captación de 3H-glutamato, a través de un mecanismo independiente del calcio extracelular, así como la liberación de 3H glutamato, por un mecanismo dependiente del catión. La exposición más prolongada a melatonina (durante 20 min) estimula la captación de 45Ca2+ por fracciones crudas sinaptosomales. Considerando que análogos permeables del GMPc provocan efectos similares a los de la melatonina sobre estos parámetros, el metoxiindol podría actuar a través del incremento en el contenido del nucleótido. En este trabajo de tesis, se describe también la presencia de receptores específicos, de alta afinidad, con un perfil farmacológico compatible con el descripto para receptores de melatonina de tipo ML-1. Los resultados sugieren además que estos receptores podrían estar acoplados con una proteína G inhibitoria. De este modo, la melatonina disminuye significativamente los niveles retinianos de AMPc, quien a su vez podría actuar como un segundo mensajero del metoxiindol y/o regular negativamente su propia síntesis. En todos los casos, los efectos de la melatonina fueron dependientes del horario, mostrando una alta correlación con la variación diaria en la concentración de receptores al metoxiindol. La densidad máxima se observó a la medianoche, coincidiendo con el horario de máxima sensibilidad. La variación diaria en la concentración de sitios receptores podría deberse a mecanismos de "up y down-regulation" inducidos por el ligando endógeno. En conjunto, los resultados obtenidos permiten postular la participación de la melatonina retiniana en los mecanismos de transducción y procesado de la información fótica como una señal "senso-parácrina", es decir una molécula sintetizada y liberada por los fotorreceptores en respuesta a un estímulo sensorial (la oscuridad) y que actúa localmente modulando diversos aspectos de la fisiología retiniana.

Abstract:
Melatonin was initially characterized in the pineal gland and later identified in the retina of several species, along with its synthesizing enzymes serotonin N-acetyltransferase (NAT) and hydroxyindole-O-methyltransferase (HIOMT).% Although the Golden hamster is one of the most widely used models in the investigation of pineal melatonin physiology, retinal melatonin in this species has received relatively little attention. The aim of this work was to examine the biosynthesis of melatonin in the hamster retina, as well as to elucidate the mechanisms involved in the regulation of its synthesis. Additionally, some aspects of the physiological role of retinal melatonin were tudied. A daily rhythm in hamster retinal melatonin levels, which peaks late in the night, as well as the ability of the hamster retina to regulate melatonin synthesis in isolated conditions, were found. Melatonin synthesis was independent on pineal activity. and was directly regulated by photic stimuli. In fact, a circadian rhythm was absent in the ex vivo experiments performed under free running conditions. GABA, a retinal transmitter that mediates dark-related processes, stimulated melatonin synthesis in vitro, probably acting through a GABAA receptor.% Moreover, the dark-induced increase in melatonin production was blocked by a specific GABAA antagonist receptor (bicuculline). Retinal GABA turnover was maximal at night and preceded the increase of melatonin levels by about 4 hours. These results indicate that GABA could be the intercellular message linking darkness with melatonin biosynthesis. Cyclic AMP has been postulated as the intracellular messenger involved in the genomic induction of retinal NAT. A temporal correlation between melatonin and cAMP content (mainly influenced by the photic stimulus), which supports previous studies, was observed. A significant increase of melatonin synthesis stimulated by cGMP analogs, and a temporal relationship between rhythms in cGMP levels and melatonin content were also described. Considering that GABA stimulates cGMP and decreases cAMP accumulation, GABA effects on melatonin synthesis could be mediated by an increase in cGMP levels. A dual effect of melatonin on cGMP biosynthesis was described, i.e. by increasing its synthesis and by inhibiting its degradation, both resulting in an increase of cGMP levels. This effect could occur by rapid (about 10 sec) melatonin inhibition of calcium uptake, since calcium could inhibit retinal guanylate cyclase and stimulate retinal phosphodiesterase activities. Melatonin significantly increased 3H-glutamate uptake, this effect persisting in a Ca2+-free medium. On the other hand, melatonin increased 3H-glutamate release through an effect that was Ca2+ sensitive. Melatonin significantly increased 45Ca2+ uptake by a crude synaptosomal retinal fraction, after a 20 min incubation. Taking into account that melatonin affects the cGMP system and that 3H-glutamate uptake and release and 45Ca2+ uptake were stimulated by cGMP analogs, these results suggest that melatonin could increase 3H-glutamate release by increasing cGMP levels. The presence of specific high-affinity receptors, showing a pharmacological profile consistent with a ML-1-like site, was also demonstrated. In addition, an equipotent decrease in the total specific binding of 2--melatonin caused by GTP and GDP suggested that these binding sites could be G inhibitory protein-coupled receptors. Likewise, melatonin significantly decreased cAMP accumulation. This cyclic nucleotide might act as a second messenger for melatonin action, and/or regulate melatonin biosynthesis by a negative feed-back mechanism. In all cases, melatonin effects occurred in a time-dependent manner, showing a high correlation with daily variations in 2--melatonin specific binding sites density found in hamster retina. Maximal density was observed at 24.00 h in coincidence with the maximal sensitivity window for the melatonin effects. Daily variations in the density of melatonin binding sites is probably regulated through up- and down-regulation mechanisms, induced by melatonin on its own binding sites. Collectively, the foregoing results suggest that in the hamster retina, melatonin could participate in the photic information transduction or processing mechanisms, as a "sensory-paracrine" signal. In fact, melatonin is released by photoreceptor cells in response to a sensorial stimulus (darkness), and acts locally by modulating several aspects of retinal physiology.

"Estudio de la participación del receptor de dopamina D2 en la regulación de lactotropodos hipofisarios y su influencia en el desarrollo de prolactinomas mediante la generación de un ratón transgénico tejido específico" (2010). Pérez Millán, María Inés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Con el objetivo de estudiar la participación del receptor dopaminérgico D2 (RD2) en células hipofisarias productoras de prolactina hemos desarrollado ratones mutantes incapaces de expresar el gen de RD2 (Drd2) selectivamente en lactotropos. Para producir estos ratones con mutaciones nulas de Drd2 restringidas a lactrotropos generamos ratones transgénicos que expresan la recombinasa Cre bajo el control transcripcional del promotor de prolactina de ratón (Prl-Cre) y luego los cruzamos con ratones mutantes condicionales para el gen del RD2 (Drd2^flox/flox) para producir ratones mutantes y transgénicos compuestos (Drd2^flox/flox.Tg Prl-Cre). La caracterización molecular y bioquímica mostró que los ratones Drd2^flox/flox.Tg Prl-Cre no expresan Drd2 en el lóbulo anterior de la hipófisis pero sí en el lóbulo intermedio y en todas las áreas del cerebro donde Drd2 se expresa normalmente. En consecuencia, esta nueva cepa de ratones con mutaciones nulas de Drd2 restringidas a lactotropos fue denominada pitD2RKO. Los ratones pitD2RKO presentan niveles elevados de prolactina que resultan extremadamente altos en hembras adultas que desarrollan prolactinomas hipofisarios. Como consecuencia de la falta de receptores RD2 lactotrópicos, los niveles de prolactina de los ratones pitD2RKO no aumentan luego de la administración aguda del antagonista de RD2s, haloperidol. Las curvas de crecimiento corporal de los ratones pitD2RKO resultaron normales así como los distintos parámetros asociados al eje de la hormona de crecimiento (GH), en marcado contraste con lo estudiado en ratones mutantes totales del RD2 (Drd2^+) que son enanos. Esta observación indica que la ausencia de RD2s de los lactotropos hipofisarios no es responsable del déficit severo presente en el eje de GH de los ratones Drd2^+. Sorprendentemente, las hembras pitD2RKO presentan un aumento considerable de la ingesta de alimento y del peso corporal a partir de los 90 días de edad, probablemente como consecuencia de los elevados niveles crónicos de prolactina. Finalmente, analizamos los prolactinomas experimentales resultantes en nuestro nuevo modelo y ampliamos el estudio a adenomas hipofisarios humanos; en ambos casos, de manera interesante, observamos un aumento en la proliferación celular y en la angiogénesis de los adenomas respecto a las hipófisis controles, contrariamente a lo publicado.

Abstract:
To study the participation of the dopamine D2 receptor (D2R) on pituitary lactotropes we have generated mutant mice that are unable to express the D2R gene (Drd2) selectively in lactotropes. We first generated transgenic mice expressing Cre recombinase under the transcriptional control of the mouse prolactin promoter (Prl-Cre). Prl-Cre transgenic mice were mated with mutant mice carrying conditional null mutations of Drd2 (Drd2^flox/flox) to produce compound mutant/transgenic mice (Drd2^flox/flox.Tg Prl-Cre). Molecular and biochemical characterization of these mice showed they lack Drd2 expression in the anterior lobe of the pituitary while normally expressing Drd2 in the pituitary intermediate lobe and in all brain areas. Thus, we designated this novel lactotrope-specific Drd2 mutant mouse strain pitDrd2^+ o pitD2RKO. PitD2RKO mice had elevated serum prolactin levels that were extremely high in adult females which eventually developed pituitary prolactinomas. As a result of lactototrope D2R disruption, the acute administration of the D2R antagonist haloperidol failed to raise prolactin levels in pitD2RKO mice. Body growth curves in pitD2RKO mice were normal as well as several parameters related to the growth hormone (GH) axis, in clear contrast to what had been shown in null Drd2 mutant mice (Drd2^+ or D2RKO). This observation indicates that the absence of D2Rs in pituitary lactotropes is not responsible for the severe GH axis deficit found in D2RKO mice. Strikingly, pitD2RKO female mice developed a considerable increase in food intake and body weight starting at 90 days old, probably as a consequence of their chronically elevated prolactin levels. Finally, we analyzed the resulting experimental prolactinomas in our new model and extended the study to human pituitary adenomas. In both cases we observed a rise in cell proliferation and angiogenesis in the pituitary adenomas respect to the normal pituitary.

"Estudio de la patogenia del Virus de Influenza Aviar de baja patogenicidad en aves de corral inmunosuprimidas por la afección con el virus de la Anemia Infecciosa Aviar" (2014-12-22). Rimondi, Agustina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Influenza Aviar es considerada una zoonosis con potencial pandémico. El agente etiológico responsable de esta enfermedad es el Virus de Influenza A, cuyo reservorio natural son las aves silvestres acuáticas. En ellas, la infección con el Virus de Influenza Aviar (AIV) generalmente es asintomática, mientras que en las aves de corral la infección con AIV puede producir una variedad de síntomas que se extienden desde presentaciones asintomáticas o suaves a una enfermedad aguda y fatal. En consecuencia, se generan grandes pérdidas económicas asociadas al control y erradicación de este agente en las aves domésticas. Por ello, en la presente tesis nos propusimos estudiar, primero, la presencia del AIV en las aves silvestres acuáticas de la Argentina y, luego, su introducción y difusión en aves de corral con diferente estado inmunológico. Los resultados obtenidos permitieron evidenciar la circulación de veinte Virus de Influenza Aviar de Baja Patogenicidad (LPAIV) de diversos subtipos en las aves silvestres que habitan en la Argentina. Estos LPAIV aislados presentaron características genéticas particulares en sus genes que los diferencian de los AIV aislados en otras regiones. En particular, se evidenció la existencia de un linaje Sudamericano con evolución independiente para los seis genes que codifican las proteínas internas del Virus de Influenza Aviar. Debido a que la mayoría de los LPAIV aislados en nuestro país fueron de subtipo H6, se estudió la patogenia de estos virus en las aves de corral. Los resultados demostraron que estos virus de subtipo H6 tienen capacidad de infectar pollos y de transmitirse por contacto, evidenciando el riesgo potencial de introducción de estos virus en las aves de corral. Por otra parte, se sabe que en la Argentina, como en cualquier país con una producción avícola intensiva, existe una alta incidencia del Virus de Anemia Infecciosa Aviar (CAV) dentro de los planteles de aves domésticas. Actualmente, se carece de conocimiento acerca de la importancia que puede tener el estado de inmunosupresión provocado por este agente en la evolución de la patogenia del AIV. Por ello, en el trabajo de tesis que se presenta a continuación se estudió de patogenia del LPAIV subtipo H6 en pollos inmunosuprimidos experimentalmente por la infección con una cepa de CAV autóctona. Los resultados obtenidos demostraron que el AIV utilizado, aislado de aves silvestres en la Argentina, tiene igual capacidad de infectar pollos y de transmitirse por contacto directo en aves inmunocompetentes e inmunosuprimidas con CAV. En conjunto, los resultados presentados en esta tesis permiten colaborar con mejores análisis de riesgo para el diseño de estrategias de control y prevención con el objetivo de proteger las aves domésticas de nuestro país. Además, haber aumentado la información acerca de la epidemiología de la Influenza Aviar en la región es de suma importancia para comprender en mayor profundidad las potenciales consecuencias de esta enfermedad, tanto en las aves silvestres como en las aves domésticas. Sumado a esto último, es importante destacar que la Influenza Aviar es una zoonosis, con lo cual el aumento de la información disponible sobre este agente infeccioso es de relevancia para el sistema de Salud Pública nacional.

Abstract:
Avian influenza is considered a zoonosis with pandemic potential. The etiologic agent responsible for this disease is influenza A virus, whose natural reservoir are aquatic wild birds. In this species, the infection with Avian Influenza Virus (AIV) is generally asymptomatic, while in poultry AIV infection can cause a variety of symptoms ranging from asymptomatic or mild presentations to an acute and fatal disease. Consequently, there are large economic losses associated with control and eradication of this agent in commercial sheds. Therefore, in this thesis we intended to study the presence of AIV in wild aquatic birds circulating in Argentina and their possible introduction and spread in poultry with different immunologic status. The results obtained showed the circulation of twenty Low Pathogenic Avian Influenza Virus (LPAIV) from wild birds in Argentina. These viruses were from different subtype and all showed particular genetic characteristics in their genes that differ from AIV isolated in other regions. Particularly, genetic and phylogenetic analyses of their internal gene segments revealed a close relationship with influenza viruses from South America, forming a unique clade and supporting the notion of independent evolution from influenza A viruses in other latitudes. Due to AIV from H6 subtype were most consistently isolated in Argentina, we investigated the replication and transmission of these Argentine H6 AIV in poultry. The results suggested that these Argentine H6 viruses could replicate and transmit in chickens, demonstrating the potential risk of introduction of these viruses in poultry. It is known that in Argentina, as in any country with intensive poultry production, there is a high incidence of Chicken Infectious Anemia Virus (CAV) in commercial flocks. Currently, there is a lack of knowledge about the importance of the immunosuppression caused by this agent in the evolution of the pathogenesis of AIV. Therefore, in this thesis we studied the pathogenesis of LPAIV H6 subtype in chickens experimentally immunosuppressed by infection with an Argentinean field CAV strain. The results obtained showed that, under our experimental conditions, Argentinean H6 AIVs have equal ability to infect chickens and be transmitted as a result of direct contact, either in immunocompetent chickens or immunosuppressed chickens with CAV. Overall, the results presented in this thesis allow cooperate with better risk analysis for the design of prevention and control strategies to protect commercial poultry farms in our country. Also, it has increased the information about the epidemiology of AIV in South America, critical to understand in greater depth the potential consequences of this disease in both wild birds and domestic poultry. In addition, it is noteworthy that avian influenza is a zoonosis, thereby our results increase the information available on this infectious agent which is relevant to the national public health system.

"Estudio de la percepción tímbrica en sonidos con modulación mediante experimentos psicofísicos y modelado de la periferia auditiva" (2015-03-30). Riera, Pablo Ernesto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La percepción tímbrica es uno de los fenómenos más complejos que realiza el sistema auditivo. El timbre, originalmente establecido como la cualidad que permite discriminar instrumentos musicales entre sí, en la actualidad se encuentra más vinculado con el concepto ecológico de identificación de las fuentes sonoras en un entorno natural. Su inherente carácter multidimensional, hace que la relación entre la forma de onda de un sonido y el timbre percibido sea una relación compleja, en la cual distintas partes del sistema auditivo están involucradas. A pesar de estas limitaciones, es sabido que hay ciertos atributos acústicos temporales y espectrales que suelen destacarse en la percepción tímbrica. Los más relevantes son, por un lado, el tiempo de ataque de la envolvente como característica temporal y por otro el brillo o centroide espectral como característica espectral. En este trabajo se utilizaron dos metodologías para estudiar el timbre. Por un lado, se realizaron dos experimentos psicofísicos de comparación de pares de sonidos y, por otro, los timbres fueron estudiados mediante técnicas de procesamiento de se~nales y el modelado de la periferia auditiva. Uno de los experimentos fue realizado utilizando sonidos de amplitud modulada sinusoidalmente como estímulos y llevado a cabo masivamente a través de Internet, mientras que para el otro experimento, se utilizaron multifónicos del saxo alto en un ambiente controlado. Estas dos familias de sonidos poseen modulaciones como atributo temporal característico a diferencia de los que son utilizados en muchos de los estudios de percepción tímbrica donde la principal característica temporal es el tiempo de ataque. Los experimentos demostraron que la modulación temporal fue un atributo saliente junto con el centroide espectral para ambos conjuntos de sonidos. Además, se observó que sonidos que se encontraban agrupados en un espacio de parámetros de control se encontraban agrupados también, en la mayor parte de los casos, en los correspondientes espacios perceptuales. En cambio, las distancias entre los grupos en estos espacios se vieron modificadas. Por otra parte, los sonidos fueron analizados en base al procesamiento de sus se~nales y mediante simulaciones de la periferia auditiva. Para esto se desarrolló un modelo de la periferia auditiva con énfasis en la mecánica coclear, donde se optó por un modelo dinámico no lineal y con alimentación lateral. Este modelo fue desarrollado teniendo en consideración la capacidad de reproducir los factores dominantes de la transducción coclear como la saturación en intensidad, el mecanismo activo de amplificación y las curvas de enmascaramiento entre otros. Los parámetros fueron ajustados de manera satisfactoria para reproducir respuestas clásicas de experimentos psicoacústicos en humanos y datos de experimentos fisiológicos in vivo en mamíferos.

Abstract:
Timbre perception is one of the most complex tasks the auditory system performs. Timbre, originally defined as the quality that allows the discrimination of musical instruments, it is nowadays more related to the ecological concept of the identification of sound sources in natural environments. Because of its inherently multidimensional character, the relationship between the sound wave and the perceived timbre is a complex matter, where different parts of the auditory systems are involved. Besides this limitations, it is known that there are certain temporal and spectral acoustic features that are fundamental to the perception of timbre. The most relevant are the attack time of the envelope as a temporal feature and the brightness or spectral centroid as a spectral feature. In this work we use two methodologies for studying timbre. Firstly, two psychophysical experiments of sound pairs comparison were done, and secondly the timbres were analyzed by signal processing techniques and through a model of the auditory periphery. One of the experiments was carried out using sinusoidally amplitude modulated sounds as stimuli, massively through internet and the other experiment was done using alto saxophone multiphonics but in a controlled environment. These two families of sounds have modulations as a characteristic temporal feature which is not present on many timbre studies, where the attack time is more common. The experiments showed that the temporal modulation was a salient feature, along with the spectral centroid for both sound families. In addition, it was observed that sounds grouped in a control parameter space were also grouped, in most cases, in the corresponding perceptual spaces. In contrast, it were the distances between the groups within these spaces that changed. Also the sounds were analysed by signal processing techniques and through auditory periphery simulations. To this end, we developed an auditory periphery model with emphasis on the cochlear mechanics, using a non linear dynamical model with feedforward and feedbackward properties. This model was developed with the aim of reproducing dominant factors of cochlear transduction, for example, the saturation with intensity, the active mechanism of amplification and the masking curves among other capabilities. The parameters where successfully adjusted to reproduce typical human psychoacoustical experiments and data from physiological in vivo mammals experiments.

"Estudio de la regulación de la expresión y activación de factores relevantes en la involución mamaria y el desarrollo tumoral. El rol del estrés mecánico en estos procesos" (2009). Quaglino, Ana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la mama normal, LIF es el principal activador del factor de transcripción STAT3,responsable de inducir la apoptosis del epitelio secretorio durante la involución. En el cáncer de mama STAT3 se encuentra frecuentemente activo aunque su rol biológico es aún controversial. En este trabajo nos propusimos evaluar si el LIF producido localmente es responsable de la activación de STAT3 en tumores mamarios murinos. Por estudios in vivo e in vitro determinamos que LIF se sobre-expresa en estos tumores, donde actúa como principal activador de STAT3. Encontramos además que LIF ejerce un efecto opuesto en células normales y tumorales, inhibiendo e induciendo, respectivamente, la supervivencia celular. A continuación, decidimos evaluar si el estrés mecánico inducido por la acumulación de leche al final del amamantamiento dispara la expresión de factores relevantes en la involución y tumorigénesis mamaria. Para ello, diseñamos un dispositivo que permite “estirar” radialmente células creciendo en cultivo sobre membranas elásticas. Encontramos que el estímulo mecánico es capaz de disparar en células mamarias la activación de cascadas de señales y la expresión de genes fundamentales en la involución y el desarrollo tumoral. En conjunto, nuestros resultados brindan nuevas evidencias de la importancia de los factores locales en la regulación de procesos normales y patológicos de la glándula mamaria.

Abstract:
It has been demonstrated that LIF induces epithelium apoptosis through STAT3 activation during mouse mammary gland involution. Although STAT3 is frequently activated in breast cancer, its biological role is controversial. In this work, we evaluated if locally produced LIF can be responsible for STAT3 activation in mouse mammary tumors. In in vivo and in vitro studies we observed that LIF is over- expressed in mouse mammary tumors, where it acts as the main STAT3 activator. Furthermore, we found that LIF has opposite effects on normal and tumor epithelial cells by inhibiting or inducing cell survival, respectively. Then, we decided to evaluate if cell stretching caused by milk accumulation after weaning, triggers the expression of relevant factors in mammary gland involution and tumorigenesis. To address this issue, we designed a practical device that radially stretches mammary epithelial cells growing on elastic membranes in culture. We found that mechanical strain is able to trigger signaling cascades activation and gene expression relevant in involution and tumor development. Together, these findings provide new evidence about the critical role of local factors in regulating normal and pathological processes in the mammary gland.

"Estudio de la regulación de la expresión y de la relevancia de la metiltransferasa PRMT8 en células madre pluripotentes" (2013-03-26). Luzzani, Carlos Daniel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las células madre embrionarias (ESCs) son células derivadas del macizo celular interno (ICM) del blastocisto. Poseen la capacidad de auto-renovarse indefinidamente en cultivo y de dar origen a células de las tres capas germinales, propiedad conocida como pluripotencia. Existen tres factores de transcripción fundamentales para la regulación génica de las células madre pluripotentes, Oct4, SOX2 y Nanog. Estudios de inmunoprecipitación de la cromatina (ChIP) han revelado que estos factores ocupan al mismo tiempo las regiones promotoras de diversos genes a lo largo de todo el genoma, sugiriendo que estos factores actúan como el núcleo de una red regulatoria que modula la expresión de genes involucrados en la diferenciación celular. Mientras que in vitro las ESCs pueden ser mantenidas indefinidamente en estado indiferenciado, in vivo, conforme progresa el desarrollo, las células del ICM abandonan su estado pluripotente para seguir diversos programas de diferenciación. El inicio de dichos programas depende, en gran medida, de la regulación de la expresión de genes tejidoespecíficos. Sin embargo, entender cuáles son estos genes y cómo son regulados no es suficiente para explicar el comienzo del proceso de diferenciación celular. Existen además, cambios en la organización de la cromatina a nivel global y de loci específicos, registrándose múltiples evidencias que relacionan la estructura de la cromatina de los genes marcadores de estadio indiferenciado con el mantenimiento de la pluripotencia. Nuestra hipótesis postula que existiría una relación bidireccional entre los niveles y la actividad de proteínas que remodelan la cromatina y de los factores de transcripción críticos en el mantenimiento de las propiedades de las células pluripotentes. El objetivo general de este trabajo es contribuir al esclarecimiento de la regulación epigenética que ocurre en las ESCs durante la diferenciación y el estado epigenético de éstas cuando son mantenidas en estado indiferenciado. Para ello, nos propusimos, en primer lugar analizar el patrón de expresión de proteínas modificadoras de la cromatina en ESCs indiferenciadas y en distintos estadios de diferenciación. Luego, una vez detectados genes de interés,evaluar el efecto de la modificación de sus niveles de expresión sobre el mantenimiento del estado indiferenciado y en la diferenciación de las ESCs. Por último, nos propusimos estudiar si los factores de transcripción relevantes en la preservación de la pluripotencia regulan la expresión los genes en estudio. Para nuestro primer objetivo, analizamos la expresión de enzimas relacionadas con el remodelado de la cromatina mediante RT-qPCR en ESCs indiferenciadas y las comparamos con la de células terminalmente diferenciadas. Posteriormente, diferenciamos ESCs mediante un protocolo no dirigido y analizamos la expresión de estos genes lo largo del proceso de diferenciación. Esta búsqueda arrojó una serie de genes candidato que podrían tener un rol en el mantenimiento de las propiedades básicas de las ESCs. Posteriormente, elegimos uno de estos genes, la metiltransferasa Prmt8, para continuar nuestros estudios. Los otros genes que surgieron de este análisis forman parte de otros proyectos de tesis. Utilizando tanto un protocolo de diferenciación no dirigido como uno dirigido hacia linaje neural, comprobamos que el gen de Prmt8 se regula negativamente durante el proceso de diferenciación. Por otra parte, construimos una línea estable de mESCs que contiene en su genoma un shRNA inducible contra Prmt8. Probamos que al inducir este shRNA los niveles de mensajero de esta enzima disminuyen, y que esto en un principio no afecta la capacidad de autorenovación de las células. Mediante análisis de inmunofluorescencia estudiamos la presencia y localización de marcadores del estado indiferenciado. No encontramos diferencias sustanciales en los marcadores analizados al comparar las células cultivadas en presencia del inductor del shRNA con las células control. Por otro lado, diferenciamos la línea que sub-expresa Prmt8 y encontramos que estas células parecen diferenciarse de forma diferente al control. Por último, analizamos si la expresión forzada de los factores de transcripción de pluripotencia modula la expresión de Prmt8 en un sistema heterólogo. En conjunto los datos sugieren que Prmt8 es regulado positivamente por los factores de transcripción de pluripotencia, y modulado durante la diferenciación, hecho que podría ser clave en la determinación del tipo celular de destino. En el futuro planeamos realizar estudios de inmunoprecipitación de la cromatina para estudiar la interacción de estos factores con el promotor de Prmt8. Por otra parte, nos interesa estudiar con mayor profundidad si la presencia de esta metiltransferasa es vital para la diferenciación hacia algún tipo celular en particular. Creemos que los conocimientos generados en el campo de la epigenética de células madre pueden contribuir a plantear estrategias que ayuden, en un futuro, a diseñar nuevas terapias celulares.

Abstract:
Embryonic stem cells (ESCs) are cells derived from the inner cell mass (ICM) of the blastocyst. They have the ability to self-renew indefinitely in culture and to give rise to cells of all three germ layers, property known as pluripotency. There are three basic transcription factors that regulate gene pluripotent stem cells, Oct4, Sox2 and Nanog. Studies using chromatin immunoprecipitation (ChIP) have shown that these factors are simultaneously recruited to promoter regions of various genes throughout the genome, suggesting that these factors act as a core regulatory network that modulates the expression of genes involved in cell differentiation. While ESCs can be maintained in vitro in the undifferentiated state indefinitely, in vivo, as development progresses, ICM cells leave their pluripotent state to follow various programs of differentiation. The beginning of such programs depends largely on the regulation of expression of tissue-specific genes. However, understanding who these genes are and how they are regulated is not enough to explain the beginning of the process of cell differentiation. There also changes in global chromatin organization and in specific loci, registering evidence that link the chromatin structure of marker genes of the undifferentiated stage with the maintenance of pluripotency. Our hypothesis is that there is a bidirectional connection between the levels and the activity of chromatin remodeling proteins and transcription factors that are critical for the maintenance of pluripotent cell properties. The overall objective of this work is to contribute to the elucidation of epigenetic regulation that occurs in ESCs during differentiation and the epigenetic state of these when maintained in an undifferentiated state. For this purpose, we sought, first to analyze the expression pattern of chromatin modifying proteins in undifferentiated ESCs and at different stages of differentiation. Then, once detected genes of interest, we will assess the effect of changing their expression levels on the maintenance of the undifferentiated state and in the differentiation of ESCs. Finally, we decided to study whether the relevant pluripotency core transcription factors regulate the expression of the studied genes. For our first objective, we analyzed the expression of the enzymes involved in chromatin remodeling by RT-qPCR in undifferentiated ESCs and compared it with that of terminally differentiated cells. Subsequently, using the hanging drop differentiation protocol we analyzed the expression of these genes during the differentiation process. This search yielded a number of candidate genes that may play a role in maintaining the basic properties of ESCs. Then, we chose one of these genes, the methyltransferase Prmt8 to continue our studies. The other genes that emerged from this analysis are part of other thesis projects. Utilizing both an undirected differentiation protocol as well as one directed towards neural lineage, we found that the Prmt8 gene is negatively regulated during the differentiation process. Furthermore, we constructed a mESCs stable line containing in its genome an inducible shRNA against Prmt8. We prove that this shRNA inducing messenger levels of this enzyme decreases, and this does not affect the ability of self-renewing cells. By immunofluorescence analysis we studied the presence and location of the undifferentiated state markers. No substantial differences were found when comparing the analyzed markers cells cultured in the presence of inducer of control cells shRNA. Furthermore, differentiate the sub-express line Prmt8 and found that these cells appear to differ from the control differently. Finally, we examined whether forced expression of transcription factors modulates expression of pluripotency Prmt8 in a heterologous system. Taken together these data suggest that Prmt8 is positively regulated by the transcription factors of pluripotency, and modulated during differentiation, which could play a key role in determining the target cell type. In the future we plan to study the interaction of these factors with the promoter Prmt8. Moreover, we want to explore further whether the presence of this methyltransferase is vital for differentiation into a particular cell type. We believe that the knowledge generated in the field of stem cell epigenetics can help create strategies that help in the future, to design new cell therapies.

"Estudio de la regulación transcripcional y funcional del gen de proopiomelanocortina en el sistema nervioso central de ratones transgénicos" (1998). Young, Juan I.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de la relación del virus de la Bursitis Infecciosa con su hospedador. Análisis de la respuesta inmune y de la función y localización de la proteína viral VP5" (2015-03-25). Carballeda, Juan Manuel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las aves representan un eslabón fundamental en la economía internacional. A nivel mundial, alrededor del 40% de la carne consumida es de origen aviar. La industria avícola ha experimentado en los últimos años un crecimiento muy importante tanto dentro del mercado local como del internacional, permitiendo ubicar a la Argentina en el octavo lugar como exportador mundial de carne de pollo junto con otros productos. El tipo de crianza intensiva utilizada dentro de la producción avícola facilita la aparición de factores que perjudican la estabilidad de los planteles, afectando si status sanitario. Por otra parte, tanto las enfermedades respiratorias como las inmunosupresoras suelen estar íntimamente asociadas con este tipo de crianza. El virus de la Bursitis Infecciosa Aviar (IBDV) es un patógeno de alta relevancia en la producción avícola debido a que causa, entre otros efectos, inmunosupresión, dejando así a los animales propensos a nuevas infecciones. El blanco principal del IBDV es la bursa de Fabricio, órgano exclusivo de las aves, donde se desarrollan y maduran los linfocitos B. En el presente trabajo de tesis doctoral se abordó el estudio de la respuesta inmune inducida por cepas de virulencia intermedia, habitualmente utilizadas como vacunas, en el hospedador natural. Se analizaron distintas facetas como la inducción de la expresión de citoquinas en distintos órganos, la capacidad de proliferación de linfocitos y las poblaciones celulares involucradas. Se estudiaron las vías de inoculación oral e intramuscular, habitualmente utilizadas en la vacunación comercial siendo la oral la vía de entrada natural del virus. Los resultados mostraron que altas dosis de virus de cepas intermedias son capaces de imitar efectos reportados con cepas de mayor virulencia como son: una fuerte infiltración de linfocitos T en la bursa de Fabricio (analizada por citpmetría de flujo), junto con una sobreexpresión de interleuquina 6 e inter ferón gama en este órgano (analizado por RT-PCR en tiempo real) e inmunosupresión (corroborada en ensayos de coinfección con otro agente viral aviar). La segunda parte del presente trabajo de tesis se abocó al estudio de la proteína no estructural VP5 de IBDV. Su función ha sido ampliamente discutida en la bibliografía respecto a su actividad apoptótica, ya que parece tener efectos opuestos en distintos estadíos del ciclo de replicación viral. Por otra parte, también existen reportes ambiguos respecto a su localización subcelular. En el presente trabajo, mediante ensayos in vitro y utilizando técnicas de Imaging, se determinó la localización de la proteína en la membrana plasmática no exponiendo ningún dominio al espacio extracelular, contradiciendo reportes que indicaban que se trataba de una proteína de transmembrana de clase dos. Los resultados obtenidos en el presente trabajo de tesis permitieron desarrollar un método de desafío sin utilizar cepas virulentas de IBDV. Asimismo se caracterizó una amplia variedad de efectos de cepas de virulencia intermedia del virus que, aunque son habitualmente utilizadas como vacuna, no habían sido descriptos hasta el presente trabajo de tesis. En la segunda parte, se determinó la localización de la proteína viral VP5. Estos resultados brindan un abanico de posibles mecanismos de acción de la misma, que luego de ser abordados posibilitarán el desarrollo de herramientas y estrategias sanitarias para combatir este importante patógeno aviar.

Abstract:
Birds play an important role in the international economy. Globally, about 40% of the meat consumed is of avian origin. In recent years, the poultry industry has exhibited a significant growth both in the local and international market, being Argentina the eighth largest exporter of chickens along with other avian products. The intensive breeding in poultry production facilitates the emergence of factors that affect the stability of the farms diminishing their health status. Moreover, both respiratory and immunosuppressive diseases are other closely associated with this type of production. Infectious bursal disease virus (IBDV) is a highly relevant avian pathogen in poultry production because it causes, among other effects, immunosuppression, leaving the animal susceptible to new infections. The main target of IBDV is the bursa of Fabricius, which is the organ where B-lymphocytes develop and mature. In the present work, we studied the immune response elicited by IBDV strains of intermediate virulence, commonly used as vaccines, in the natural host. Several parameters, such as the induction of cytokine expression in different organs, the ability of lymphocyte proliferation and the involved cell populations in inoculated chickens were analyzed. The oral and intramuscular routes, usually employed in conventional immunization procedures (the oral route being natural virus entry) were analyzed. The results showed that high doses of intermediate IBDV strains are able to mimic the effects caused by virulent strains, such as a strong infiltration of T lymphocytes in the bursa os Fabricius (assessed by flow cytometry), together with an overexpression of interleukin 6 and interferon gamma in this organ (analyzed by real time RT-PCR) and immunosuppression (demonstrated) by coinfection assays with another avian viral pathogen). The second part of this thesis focuses on the study of VP5, a non-structural protein of IBDV. Its role has been widely discussed in the literature regarding its apoptotic or anti-apoptotic function because it could have opposite effects at different stages of the viral replication cycle. Additionally, there are ambiguous reports concerning VP5 subcellular localization. By in vitro assays using Imaging techniques, we determined the localization of the protein in the plasma membrane of avian cells. Results showed that VP5 did not expose any domain to the extracellular space even though previous reports had indicated that it was a class two transmembrane protein. The results obtained in this thesis allowed the development of a method for viral challenge without using virulent strains of IBDV. Also, the characterization of a wide variety of effects induced by intermediated IBDV strains, which had not been described so far, although these strains are commonly used as a vaccine, were described. In the second part, the localization of VP5 viral protein was determined. Taken together, the results obtained in the present work provide a broad range of possible mechanisms of action for this protein that will contribute to the development of new sanitary tools and strategies to fight against this important avoan pathogen.

"Estudio de la relación entre el parásito Leidya Distorta (isopoda: bopyridae) y su hospedador Uca Uruguayensis (brachyura: ocypodidae), y descripción de los estadíos larvales de L. Distorta" (2003). Torres Jordá, Martín. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En 1994 se descubrió que algunos cangrejos Uca uruguayensis de Punta Rasa, bahía Samborombón, estaban infestados por el isópodo bopírido Leidya distorta. Este parásito había sido previamente encontrado en otras especies del género Uca y en el cangrejo Ucides cordatus, sobre la costa atlántica entre New Jersey (EE.UU.) y Rio de Janeiro (Brasil). Con el fin de estudiar la interacción entre L. distorta y su hospedador, se recolectaron mensualmente ejemplares de Uca uruguayensis en Punta Rasa, bahía Samborombón, desde febrero de 1995 hasta marzo de 1996. Se emplazaron 5 estaciones; en cada fecha de muestreo y en cada estación se trazaron dos transectas de 5 m de largo por 0,2 m de ancho, orientadas en la dirección de la pendiente de la playa. Las transectas fueron excavadas hasta una profundidad de 30 cm. Los cangrejos fueron separados a mano, fijados en formalina 5% y conservados en etanol 70%. De un total de 12.033 cangrejos recolectados a lo largo de los 14 meses de muestreo, 1.115 (9,3%) estaban infestados por algún estadio de L. distorta. El estudio de estos estadios permitió seguir el desarrollo del parásito en su hospedador definitivo. Cuando una larva criptonisquia invade una cámara branquial desocupada, se asienta en el espacio limitado por dos laminillas branquiales contiguas. Un tiempo después la criptonisquia muda al estadio bopyridium, el que permanece entre las laminillas branquiales. Este último es sucedido por varios estadios juveniles hembra, que se fijan al techo de la cámara branquial. Al alcanzar un cierto grado de desarrollo la hembra juvenil atrae a otra criptonisquia, que a poco de asentarse sobre su cuerpo deviene macho. Los machos van cambiando de posición sobre las hembras a medida que éstas crecen. Las hembras adultas son asimétricas y ocupan la mayor parte de la cámara branquial; se orientan con la cabeza hacia atrás, el vientre hacia arriba y el dorso contra las branquias del cangrejo. Estas hembras obtienen hemolinfa de un gran vaso horizontal que corre por debajo del epitelio interno del branquiostegito del cangrejo. El porcentaje de cangrejos infestados (prevalencia) por L. distorta varió entre 5,24% y 17,8% a lo largo de los l4 meses de muestreo. Todos los estadios del parásito fueron más abundantes en los cangrejos grandes. Siendo que los machos de U. uruguayensís alcanzan mayor talla que las hembras, la prevalencia fue mayor entre los primeros. Los cangrejos macho infestados mayores que 10,5 mm, si bien representaron solo 5,92% de los cangrejos recolectados, hospedaron 68,8% del total de parásitos. Las larvas criptonisquias fueron mucho más frecuentes entre los cangrejos que estaban mudando (blandos) que entre los cangrejos en intermuda (duros). La distribución estadística de las criptonisquias en los cangrejos en intermuda fue “agrupada” o “contagiosa”, en conformidad con el modelo binomial negativo. Los cangrejos infestados sufren varias alteraciones morfológicas. Aquellos que albergan un parásito hembra adulto a menudo presentan un área despigmentada sobre la pared lateral del caparazón. Un área despigmentada adicional se observa algunas veces en el fondo del surco ocular. Las hembras adultas del parásito producen un ligero abultamiento de la cámara branquial del hospedador, siendo esta deformación más marcada en los cangrejos pequeños. Las branquias de los cangrejos parasitados pueden estar deformadas: la hembra adulta de L. distorta tiene una robusta carena dorsal que encaja entre las branquias 4ta. y 5ta. del cangrejo, desplazándolas lateralmente. Por último, L. distorta inhibe el crecimiento alométrico del quelípedo mayor de los cangrejos macho: en los machos parasitados por hembras adultas el quelípedo mayor fue en promedio 6,5% más corto que en los no parasitados. La densidad de U. uruguayensis varió entre 133 y 207 ind./m² a lo largo del año. Los machos representaron 61,6% del total de individuos recolectados. Entre los cangrejos pequeños la razón de sexos fue 1:1, entre los medianos predominaron las hembras y entre los grandes prevalecieron los machos. La población presenta un componente de individuos adultos de tamaño grande que permanece estable a lo largo de todo el año. Los cangrejos se reproducen desde noviembre hasta febrero, dando lugar cada año a una nueva cohorte. Las hembras de L. distorta se reprodujeron activamente durante la primavera tardía y el verano. En otoño la actividad reproductiva fue decreciendo, de tal suerte que para el invierno todas las hembras adultas tenían sus marsupios vacíos. El crecimiento de los parásitos inmaduros se detuvo en invierno y recomenzó en primavera. En octubre-noviembre ya no quedaban criptonisquias en los cangrejos; aquellas larvas que sobrevivieron al invierno mudaron al estadio bopyridium al comienzo de la primavera y luego crecieron con rapidez, para reproducirse en diciembre o enero. La taxonomía de la superfamilia Bopyroidea ha sido establecida sobre la base de la forma de los adultos, sin prestar mayor atención a los estadios larvales. Sin embargo, la clasificación de los Bopyroidea está lejos de ser estable, dado que los individuos adultos muestran amplias variaciones aun dentro de una misma especie. En un esfuerzo por encontrar criterios más confiables para la clasificación de las especies del grupo, se describen en detalle las larvas epicarídea y criptonisquia de Leidya distorta. La larva criptonisquia de L. distorta tiene pleópodos unirramosos y urópodos con una larga seda caudal. En la literatura se encuentran descriptas tres criptonisquias que comparten estas características. Una es Cancricepon elegans que, al igual que L. distorta, pertenece a la subfamilia Ioninae. Otra, no identificada, fue encontrada en la desembocadura del río Tocantins, Brasil. La tercera fue asignada a Probopyrus bithynis, aunque su identidad específica es dudosa. El género Leidya contiene 4 especies, siendo Leidya bimini de las islas Bermudas la más próxima a L. distorta. Los adultos de estas dos especies se diferencian principalmente por la posición, más central o lateral, de los tubérculos que conforman la carena torácica dorsal. Las criptonisquias de L. bimini y L. distorta difieren en la longitud de las sedas caudales, hecho que refuerza la validez de estas especies.

Abstract:
In 1994, some specimens of the fiddler crab Uca uruguayensis from Punta Rasa, Samborombón Bay, Argentina, were found housing the bopyrid isopod Leidya distorta in their branchial Chambers. This parasite was previously reported from other species of Uca and Ucides cordatus, ranging from New Jersey (USA) to Rio de Janeiro (Brazil). In order to study the relationship between L. distorta and U. uruguayensis, fiddler crabs were monthly collected in Punta Rasa, Samborombón Bay, from February 1995 to March 1996. The sampling program included five stations; on each sampling date, two transects 5 m long and 0.2 m wide were delimited in each station. Transects were dug with shovels to a depth of 30 cm, and the chunks of sediment were examined for crabs. These were picked by hand, fixed in 5% formaldehyde and preserved in 70% ethanol. Throughout the study, 1,115 of 12,033 crabs (9.3%) were infested by different developmental stages of L. distorta. The inspection of these stages allowed me to follow the development of the parasite in the definitive host. When a cryptoniscus larva arrives in an unoccupied branchial chamber, it settles in the space between two contiguous gill lamellae. Then the cryptoniscus molts into bopyridium, which stays between the gill lamellae. The bopyridium is followed by several juvenile female instars that are attached to the roof of the branchial chamber. As a female grows, it becomes attractive to new arriving cryptonisci, which settle on the female’s body and develop into males. These males change their position on the female as the latter develops. Adult females occupy the branchial chamber almost completely, with the head directed backwards and the dorsurn in contact with the crab gills. They suck hemolymph from a large horizontal vessel that runs below the internal epithelium of the crab’s branquiostegite. Prevalence of L. distorta varied between 5.24% and 17.8% throughout the study. All parasite stages were more abundant among the larger crabs. Since the males of U. uruguayensis attain larger sizes than females, parasite prevalence was higher among the former. Infested male crabs larger than 10.5 mm carapace width, which represented only 5.92% of the crabs collected, housed 68.8% of all the parasites recovered. Cryptoniscus larvae were much more frequent among molting (soft) crabs than intermolt (hard) crabs. The frequency distribution of cryptonisci among hard crabs was contagious and could be fitted by a negative binomial model. Infected crabs showed several morphological pathologies. Those that housed an adult female parasite frequently bore an unpigmented area on the lateral wall of the carapace. An additional faded area was sometimes observed on the bottom of the eye orbit. Adult female parasites usually produced a subtle lateral swelling on the carapace of the host, this deformation being more marked in smaller crabs than in larger ones. Alterations of the host’s gills were noticed: the adult female parasite has a strong dorsal carina that fits between the fourth and fifth gills of the crab, displacing them laterally. Finally, L. distorta inhibits the allometric growth of the mayor cheliped of male crabs. In males that harbored adult female parasites, the chela was on average 6.5% shorter that in non-parasitized males. Density of U. uruguayensis ranged from 133 to 207 ind/m² throughout the study period. Males represented 61.6% of the crabs collected. Sex ratio among the smaller crabs was 1:1, however females outnumbered males in the medium-size classes, whereas the opposite was true in the larger size classes. The crab population presented a component of large adults that remained stable throughout the year. Reproduction extended from November to February, yielding a new cohort each year. Females of L. distorta bred actively during late spring and summer. In autumn reproductive activity decreased and by winter all the adult females had empty marsupia. The growth of immature parasites stopped in winter and resumed in spring. By October-November no cryptonisci remained in the crabs. Overwintered larvae molted to the bopyridium stage in early spring and then grew rapidly, attaining the ovigerous condition in December or January. The taxonomy of the Superfamily Bopyroidea has been based mainly on adults, whereas the larval instars have been paid little attention. However, adult bopyroids show high intraspecific variability and thus their classification is rather unstable. In order to provide more rigorous criteria for the classification of the species of this group, the epicaridium and cryptoniscus larvae of L. distorta are herein described in detail. The cryptoniscus larva of L. distorta has unirameous pleopods and uropods with long caudal setae. There are three other cryptonisci that share these features. One is Cancricepon elegans which, like L. distorta, belongs to the subfamily Ioninae. Another one, still unidentified, was collected in the plankton at the mouth of the Tocantins River, Brazil. The third was identified as Probopyrus bithynis; however, its taxonomical status remains questionable. The genus Leidya contains four species, of which L. bimini is the most closely related to L. distorta. The adults of these two quite similar species differ mainly by the position of the dorsal carina, which can be more lateral or more medial. In contrast, an unambiguous criterion can be drawn from their cryptoniscus larvae, which markedly differ in the lengths of the caudal setae of their uropods.

"Estudio de la relación entre transcripción y Splicing alternativo de mRNAs eucarióticos" (1999). Cramer, Paula. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo de tesis nos hemos propuesto buscar evidencias sobre la coordinación entre los procesos de transcripción y splicing alternativo. Nuestro modelo de estudio consistió en construir una batería de minigenes α-globina/ fibronectina que incluyen al exón EDI de la fibronectina capaz de sufrir splicing alternativo, clonados río abajo de diferentes promotores. Con estos minigenes se transfectaron líneas celulares en cultivo, analizándose luego el patrón de splicing alternativo por medio de las técnicas de Northern blot y/o RTPCR. Encontramos así que el tipo de promotor determina el patrón de splicing alternativo. Este efecto del promotor sobre el splicing alternativo no depende de la fuerza del promotor ni de la secuencia de la región 5' no codificante de los mRNAs, sino de la calidad de factores de transcripción reclutados en el promotor. Posteriormente intentamos dilucidar el mecanismo subyacente a este fenómeno. Para ello sobreexpresamos proteínas que participan del splicing general y/o alternativo en otros modelos. Encontramos que sólo las proteínas SF2/ASF, SRp40, SRp55 y SC-35 son capaces de modificar el patrón de inclusión de EDI, mientras que las proteínas SRp20, SRp30c y Tra2βno tienen efecto alguno. El efecto de SF2/ASF, la proteína con mayor actividad estimulatoria, es específico de promotor y opera a través de las secuencias regulatorias en cis presentes en EDI, tal como lo demuestran los experimentos con minigenes mutantes en estas regiones. Los resultados mencionados constituyen la primera evidencia de coordinación entre transcripción y splicing alternativo. A partir de los mismos proponemos un modelo de interacción entre el dominio carboxiterminal (CTD ) de la RNA polimerasa II y los factores de splicing, compatible con los resultados observados en nuestro laboratorio y en otros grupos de investigación.

Abstract:
In this work we searched for evidence of coupling between transcription and alternative splicing. Our model consisted in the construction of a series of alphaglobin/ fibronectin minigenes including the fibronectin alternative ED1 exon, cloned downstream of different promoters. Cell lines were transfected with the minigenes and the alternative splicing pattern was analyzed either by Northern blot and/or RT-PCR. We found that the type of promoter controls the pattern of alternative splicing. This effect is neither dependent on promoter strength nor on the 5' non-coding region of the mRNAs, but on the quality of the transcription factors recruited by the promoter. We then tried to elucidate the mechanism underlying this phenomenon. For this purpose, we overexpressed splicing factors involved in general and/or alternative splicing in other models. We found that SF2/ASF, SRp40, SRp55 y SC-35 were the only the splicing factors with ability to stimulate ED1 inclusion, whereas SRp20, SRp30c y Tra2β had no effect. The effect yielded by SF2/ASF, the protein with the highest stimulation activity, is promoter specific and is mediated by exon regulatory sequences, as revealed by experiments performed with mutants in these regions. The mentioned results comprise the first evidence of coupling between transcription and alternative splicing. Based on our results and evidences presented by other laboratories, we propose a model in which the carboxyterminal domain (CTD) of the RNA polymerase II interacts with the splicing factors.

"Estudio de la semilla y de los aceites de semilla de Gevuina Avellana mol (proteacea) y de Colliguaya Intergerrima Gillies-Hooker (euforbiacea) : Harinas de extracción (hexano) y aislados proteicos" (1984). Malec, Laura Sara. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de la serina hidroximetiltransferasa de tripanosomátidos (Crithidia Fasciculata y Trypanosoma cruzi) : Purificación y propiedades cinéticas y físico-químicas" (1997). Capelluto, Daniel G.S.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La serina hidroximetiltransferasa (SHMT) cataliza la interconversión de serina y glicina transfiriendo una unidad carbonada al tetrahidrofolato requerida para la síntesis de purinas, timidilato, metionina y colina. La mayor parte de las SHMTs estudiadas son dependientes de piridoxal-5'-fosfato(PLP). La SHMT en eucariontes existe como isoformas mitocondrial y citosólica, codificadas por genes diferentes. También ha sido demostrada una tercera SHMT, presente en cloroplastos. El presente trabajo es el primero que informa la purificación y caracterización de una SHMT a partir de tripanosomátidos y en particular, se demuestra la presencia de tres formas moleculares de la enzima (las cuales se designaron SHMT I, II y III) en Crithidia fasciculata. Las isoformas fueron purificadas a homogeneidad de acuerdo al análisis por SDS-PAGE. Los pesos moleculares nativos de las SHMTs I, II y III, calculados por el método de Andrews, dieron valores de 226, 173 y 211 kDa, respectivamente. Los pesos moleculares de sus subunidades fueron: 53,8, 50,7 y 51,7 kDa respectivamente, sugiriendo una estructura homotetramérica de las proteínas, coincidente con las SHMTs de hongos, plantas y mamíferos. Las tres isoformas fueron dependientes de PLP, aunque presentaron diferentes comportamientos cinéticos. También fue parcialmente purificada y caracterizada la SHMT de Trypanosoma cruzi. Se ha detectado una sola forma de la enzima en este parásito, utilizando la misma metodología. La SHMT, de 69 kDa, fue altamente inestable, aunque presentó,en algunos casos, similares propiedades a las estudiadas en C.fasciculata. Por otra parte, fue parcialmente purificado y caracterizado un inhibidor endógeno de la SHMT a partir de T.cruzi, similar al aislado de semillas de Vigna radiata.

Abstract:
Serine hydroxymethyltransferase (SHMT) catalyzes the interconversion of serine and glycine, with tetrahydrofolate serving as the C1 acceptor, the latter is required for the biosynthesis of purines, thymidylate, methionine and choline. Most SHMTs studied require pyridoxal-5'-phosphate (PLP) as a cofactor. SHMT exists as both cytosolic and mitochondrial isoforms encoded by separate genes. A third isoform has been shown in chloroplasts from plants. The present work reports on the first isolation and characterization of SHMT from Trypanosomatids, and particularly the evidence for the presence of three isoforms of the enzyme (SHMTs I, II and III) in Crithidia fasciculata, which were purified to homogenity according to SDS-PAGE analysis. The native molecular weight of SHMTs I, II and III, calculated by Andrews’ method, gave values of 226, 173 and 211 kDa respectively. The subunit molecular weights of them were 53.8, 50.7 y 51.7 respectively, suggesting a homotetrameric structure, similar to those of yeast, fungi, plants and mammalian SHMTs. All molecular forms were dependent on PLP, but they exhibited different kinetic behaviour. We have also partially purified and characterized the SHMT from Trypanosoma cruzi; we have been able to detect only one molecular form from this source using the same method. The 69 kDa SHMT was very unstable, but it had similar properties to those of C.fasciculata. A naturally occurring inhibitor of SHMT in T.cruzi was also partially purified and characterized, and it was similar to that reported in Vigna radiata seedlings.

"Estudio de la síntesis de precursores de óxidos mixtos de Cu-Ni y Cu-Zu por el método de alcanización homogénea" (1998). Soler Illia, Galo Juan de Avila Arturo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo se exploran las posibilidades de la técnica de hidrólisis de urea a temperaturas moderadas (80-90°C) para la preparación de precursores de óxidos mixtos cobre-zinc y cobre níquel. En primer lugar, se caracteriza el comportamiento de precipitación de los sistemas simples de los tres metales: Ni(II), Cu(II) y Zn(II). Mas adelante, se establecen las condiciones para una coprecipitación controlada, regulando la relación Cu(II):M(II) -M Ni o Zn-, la estructura, la morfología y el tamaño de las particulas obtenidas. Desde un punto de vista básico, se estudia la compatibilidad de iones d8 y d¹°,con el Cu(II). Los entornos de coordinación son completamente diferentes, tanto en la solución como en los sólidos. Por otro lado, estos sistemas tienen un definido interés en Química de Materiales, como algunos de los precursores (hidróxidos de Ni(II), ZnO, o CuO). Los óxidos CuO-ZnO tienen aplicación en la síntesis de metanol. La actividad de los mismos depende de la estructura de los carbonatos básicos precursores. Los óxidos Cu-Ni también tienen interés en catálisis. En la primera parte se estudia la evolución de los sistemas simples de Cu, Zn y Ni. Se describen los procesos que llevan de la solución a los sólidos, y su evolución a lo largo del envejecimiento en las soluciones de partida. Estos procesos involucran una compleja interrelación de las químicas acuosa y coloidal de cada metal. La segunda parte describe los mecanismos de precipitación de fases mixtas. En el caso del sistema Cu-Zn, un hidróxido amorfo mixto puede evolucionar a auricalcita, (Zn1-xCux)5(OH)6(CO3)2, malaquita zinciana Cu2-XZnx(CO3)(OH)2 (x<0,l), o tenorita sustituida (Cu1-xZnxO) (x<0,05), o mezclas, según la proporción de Zn/Cu. Los precursores obtenidos en el sistema Cu-Ni en condiciones de alta proporción de Ni(II) corresponden a α-Ni1-xCux(OH)2 turbostrático, malaquita niqueleana, Cu2-xNix(CO3)(OH)2(x<0,06). Los sistemas intermedios conducen a mezclas. El α-Ni1-xCux(OH)2 se revela como un excelente precursor de óxidos mixtos de Cu-Ni, generando CuxNi1-xO (x≤0.3).

Abstract:
In the present work, the possibilities of urea hydrolysis (thermal ageing, at 80-90°C) as a low supersaturation method for the synthesis of mixed Cu-Zn and Cu-Ni oxide precursors are explored. First of all, the precipitation behaviour of the three single metal systems (Ni(II), Cu(II), Zn(II)) is characterised. The second step is to establish the conditions for a controlled coprecipitation, therefore controlling the structure, morphology and size of the particles. From a basic point of view, the compatibility of the d8 and d¹° ions with Cu(II) is studied. The coordination environments in solution and the solid phase are quite different in the three cases. Furthermore, these systems are very interesting in the field of Materials Chemistry: some precursors (nickel hydroxide, ZnO, CuO), or the mixed Cu-Zn oxides, mainly employed as catalysts in methanol synthesis. The activity of these catalysts is strongly determined by the precursor from which they were prepared. The first part is devoted to the single systems of Cu(II), Zn(II) and Ni(II). The processes leading form solution to the precipitated solids are followed, and the evolution in the mother liquors is discussed These behaviours involve a complex relationship of aqueous Chemistry and colloidal phaenomena. The second part describes the precipitation mechanisms of mixed phases. In the case of Cu-Zn, an amorphous mixed (hydrous) oxide is readily converted into aurichalcite, (Zn1-xCux)5(OH)6(CO3)2, zincian malachite, Cu2-xZn(CO3)(OH)2 (x<0,l), or zincian tenorite (Cu1-xZnxO) (x<0,05), upon ageing. Mixtures of two solid phases may turn out, depending on the Cu:Zn ratio. In the case of Cu-Ni systems, the amorphous precursor turns into a mixed turbostratic α-Ni1-xCux(OH)2 (x<0,4), or Ni(II) malachites, Cu2-xNix(CO3)(OH)2 (x<0,06), intermediate systems leading to segregation. The α-Ni1-xCux(OH)2 reveals itself as an excellent precursor of CuxNi1-xO (x≤O,3).

"Estudio de la síntesis y estructura de Complejos del Ni(NCS)2 con tioureas sustituidas" (1967). Puglisi, Celia María. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El presente trabajo se llevó a cabo a los efectos de determinar los factores que condicionan la adopción de una estructura determinada en complejos de Ni(II) que contienen ligantes del tipo de la ticurea. Se estudió la preparación y las propiedades de complejos de Ni(NCS)2 con tiourea (TU); N-metiltiourea (MTU); N,N'-dimetiltiourea (DMTU); N,N'-etilentiourea (ETU); N,etiltiourea (NETU); N,N'-dietiltiourea (DETU); N-feniltiourea (PTU); N,N'—diciclohexiltiourea (DCTU) y N,N'-dibutiltiourea (DBTU). Se obtuvieron complejos octaédricos, con estructura polimérica, de fórmula Ni(NCS)2 2L con L = TU, MTU, DMTU, NETU y PTU, que involucra: puentes a través del átomo de azufre de la tiourea correspondiente, y con L = ETU y DCTU con puentes a través del tiocianato. Los ligantes ETU, PTU, DETU y DBTU reaccionan con el Ni(NCS)2 para dar compuestos octaédricos mononucleares, de fórmula general Ni(NCS)2 4L. La configuración de los complejos se dedujo a partir de los espectros electrónicos y momentos magnéticos, interpretados en función de la teoría de campoligante, y con la información adicional obtenida por espectros infrarrojos y medidas de conductividad en soluciones no acuosas. Se encontró que los factores estéricos juegan un papel importante en la adopción de un número de coordinación dado, especialmente en los complejos po, para los cuales se encontró que el del parámetro del campo li Δₒ aumenta al pasar de Ni(NCS)2 TU2 (Δₒ = 8ₒ400 cm-¹) a Ni(NCS)2 MTU2 (Δₒ=8.900 cm-¹) como consecuencia del efecto inductivo del grupo metilo que aumenta el caracter básico del átomo de azufre, mientras que dicho parámetro disminuye en el complejo Ni(NCS)2(DMTU)2 (Δₒ= 8ₒ000 cm-¹) debido a impedimentos estéricos intramoleculares. Con ligantes que contienen sustituyentes (como DBTU o PTU) no se obtienen compuestos con número de coordinación menor, como sería de esperar, sino que continúa manteniéndose la estructura octaédrica, la cual, si bien presenta mayores impedimentos intramoleculares, permite una mayor distancia metal-ligante. En solución, todos los compuestos presentan cambios estructurales marcados, reteniendo al ión NCS como ligante coordinado y reemplazándose los ligantes por moléculas del solvente. Los compuestos de fórmula Ni(NCS)2 4L presentan equilibrios del tipo octaédrico—plano cuadrado. Los equilibrios de ste tipo que implican un cambio de configuración a otra número de coordinación menor es poco frecuente para complejos de Ni(II), aunque los compuestos de formula (ClO4)2 y presentan un comportamiento similar.

"Estudio de la tasa de reacción 30P(alfa, p)33S de interés astrofísico en erupciones de rayos X" (2012). Figueira, Juan Manuel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los procesos que ocurren en la superficie de una estrella de neutrones durante erupciones de rayos X incluyen cientos de reacciones (p, γ) y (α, p) diferentes, la mayoría de las cuales involucran núcleos radiactivos de corta vida media. Las estimaciones de la mayoría de las tasas de reacción están aún basadas en cálculos realizados utilizando el modelo estadístico de Hauser-Feshbach, ya que en el pasado no eran posibles las mediciones directas de estas reacciones. Sin embargo, la aplicabilidad de un tratamiento estadístico con núcleos de masa liviana y media es cuestionable. Unicamente en los ultimos años los haces de núcleos radioactivos se han vuelto accesibles experimentalmente y se han llevado a cabo las primeras mediciones directas de este tipo de reacciones. Debido a que las intensidades de los haces disponibles en las instalaciones actuales de haces radiactivos siguen siendo 3–5 órdenes de magnitud menores que las disponibles con haces estables, estas mediciones no pueden aún llevarse a cabo en el rango de energías astrofísicas. En consecuencia los experimentos son realizados a mayores energías y luego se extrapolan a la región de interés. Otras dificultades se originan debido la a presencia de impurezas en el haz, que a veces pueden incluso ser la parte dominante del mismo. Por estas razones es necesario que sean desarrolladas técnicas experimentales novedosas. En este trabajo se desarrolló una nueva técnica utilizando un espectrómetro magnético lleno de gas, la cual permite el estudio de reacciones (α, p) de interés astrofísico en cinemática inversa y por medio de las reacciones temporales inversas. Además se midieron las secciones eficaces de la reacción 30 P(α, p)33 S, de relevancia en modelos de nucleosíntesis en explosiones de rayos X, en el rango de energía Ec.m. = 2,83 a 4,38 MeV y se compararon con cálculos de Hauser-Feshbach. Las secciones eficaces experimentales resultaron ser un factor de alrededor de 7 a 8 menores que los resultados teóricos. A partir de estas secciones eficaces experimentales, se calculó la tasa de reacción estelar en función de la temperatura en el rango de aproximadamente 0,1–10 GK relevante para las erupciones de rayos X. Se discuten las posibles consecuencias para la nucleosíntesis en ese tipo de erupciones

Abstract:
The processes occurring on the surface of a neutron star during X-ray bursts usually include hundreds of different (p, γ) and (α, p) reactions, the majority involving short-lived radioactive nuclei. The estimates of most reaction rates are based on statistical Hauser-Feshbach calculations since direct measurements of these reactions were not possible in the past. The applicability of a statistical treatment for light and medium mass nuclei, however, is questionable. Only in recent years have beams of short-lived nuclei become experimentally accessible and the first direct measurements of these reactions been performed. Because the beam intensities available at existing radioactive beam facilities are still 3–5 orders of magnitude smaller than what is available with stable beams, these measurements can not yet be done at astrophysical energies. Consequently experiments are usually studied at higher energies, which are then extrapolated into the region of interest. Other difficulties originate from the presence of beam impurities which sometimes can be the dominant part of the incident beam. For these reasons novel experimental techniques need to be developed. In this work, a new technique has been developed using a gas-filled magnetic spectrograph which enables the study of (α, p) reactions of astrophysical interest in inverse kinematics and by means of the time-reverse reactions. Using this technique, cross sections of the 30 P(α, p)33 S reaction, relevant to X-ray burst nucleosynthesis models, were measured in the energy range Ec.m. = 2.83–4.38 MeV and compared with Hauser-Feshbach calculations. The experimental cross sections were found to be a factor of around 7–8 smaller than the theoretical results. From these experimental cross sections, the stellar reaction rate was calculated as a function of temperature in the range relevant to X-ray bursts of about 0.1–10 GK. Possible implications for nucleosynthesis in X-ray bursts are discussed

"Estudio de la toma de decisiones en un invertebrado: elección del lado de escape ante un estímulo de peligro de aproximación dorsal" (2015-06-18). Molinas, Julieta. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La comprensión de las bases neurales de la toma de decisiones es un reto importante en la neurobiología actual. Por la menor complejidad en sus comportamientos y sus cerebros, algunos invertebrados ofrecen buenas oportunidades para identificar e investigar principios neuronales subyacentes al proceso de toma de decisiones. En el cangrejo Neohelice granulata, por ejemplo, la actividad de neuronas cerebrales individuales frente a estímulos visuales que evocan claras respuestas comportamentales puede ser registrada intracelularmente en el animal vivo. La presentación de un estímulo looming (imagen de expansión bidimensional correspondiente a un objeto que se avecina) desde un costado del animal evoca escapes que de forma muy predecible se realizan con dirección opuesta al estímulo. Sin embargo, ante un objeto que se aproxima exactamente desde arriba o looming dorsal (LD), el animal responde más tardíamente y su dirección de escape hacia uno u otro lado parece ser impredecible. Tanto la impredictibilidad del comportamiento como el retardo del inicio de la respuesta sugieren un proceso de decisión en la elección por el lado hacia el cual escapar. Esto, conjuntamente con las posibilidades de indagar en los mecanismos neuronales en que se sostiene al menos parte de ese comportamiento, estimularon el desarrollo de un paradigma para el estudio de toma de decisiones. En el transcurso de esta tesis, hemos desarrollado y luego utilizado tal paradigma para investigar diversos aspectos del proceso de la elección por el lado de escape que efectúa el animal. Los principales resultados muestran: a) una caracterización meticulosa del comportamiento de elección del lado de escape ante el LD; b) la persistencia en la elección de lado en decisiones sucesivas a nivel grupal o individual; c) los efectos de asimetrías visuales contextuales de variables tales como el grado de iluminación, polarización de la luz y formas de objetos, sobre la elección del lado de escape; d) la modificación de la elección por el lado de escape como resultado del aprendizaje (condicionamiento de evitación activa); e) la posible participación de un grupo particular de neuronas del cerebro del animal en el proceso de la elección por el lado de escape. Finalmente, formulamos un modelo sencillo de competencia interocular para la decisión del lado de escape que conforma y permite interpretar el conjunto de los principales resultados comportamentales y electrofisiológicos que hemos obtenido a lo largo de esta tesis.

Abstract:
Understanding the neural basis of decision-making is an important challenge in today´s neurobiology. For the less complexity of their behavior and brains, some invertebrates offer good opportunities to identify and investigate underlying neural principles of the decision- making process. In the crab Neohelice granulata, for example, the activity of individual brain neurons evoked from visual stimuli that provokes clear behavioral responses, can be registered intracellularly in the live animal. The presentation of a looming stimulus (two-dimensional image expansion corresponding to an object approach) from one side of the animal, evokes highly predictable escape runs directly away from the stimulus. However, when an object approaches straight from above or dorsal looming (LD), the animal takes longer to respond and the escape direction seems to be unpredictable. Both the unpredictability of the behavior and the delay to respond suggests that the escape direction involves a decision making process. This, together with the possibility to investigate the neural mechanisms that holds at least part of this behavior, stimulated the development of a paradigm for the study of decision making. In the course of this thesis, we developed and then used this paradigm to investigate various aspects of the election process for the side choice made by the animal. The main results show: a) a thorough characterization of side escape behavior to the LD; b) persistence in choosing side in successive decisions at group or individual level; c) the effects of visual contextual asymmetries of different variables (such as the degree of illumination, polarization of light and the shape of objects) on the choice of side escape; d) modification of the election by the side escape as a result of learning (active avoidance conditioning); e) the possible involvement of a particular group of neurons of the brain, during the process of side escape choice. Finally, we formulate a simple model of interocular competence for the decision of side escape choice that conforms and allows us to interpret all the major behavioral and electrophysiological results we have obtained throughout this thesis.

"Estudio de la traducción a escala genómica y métodos de manipulación genética en el parásito de la Malaria, Plasmodium falciparum" (2012-08-01). Caro, Florence. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Plasmodium falciparum es el parásito que causa la malaria más severa en humanos, enfermedad que afecta mundialmente a 200–300 millones de individuos al año. La descripción del genoma, del transcriptoma y del proteoma son un recurso importante para poder entender la función y la regulación de la expresión génica. En el caso del parásito P. falciparum, el 60% de los genes anotados siguen siendo hipotéticos, debido a la gran distancia evolutiva del parásito respecto de organismos modelo. Por otro lado, la presencia y abundancia de un ARNm no necesariamente se correlaciona con la abundancia de la proteína correspondiente y la cuantificación de estos parámetros son por lo tanto representaciones imperfectas de la regulación génica y proteómica subyacente. En esta tesis se establece la conexión entre ARNm y proteína midiendo directamente la traducción a nivel genómico usando la técnica de perfilamiento ribosomal, revelando por primera vez la dinámica de este proceso durante los estadíos intraeritrocíticos del parásito. Los resultados obtenidos demuestran que los procesos de transcripción y traducción están estrechamente acoplados, que el 11% del transcriptoma está regulado traducciónalmente y que este tipo de regulación juega un rol importante en genes con funciones de egreso e invasión del merozoito. Además, se presenta un conjunto de métodos mejorados para la manipulación genética a escala genómica de P. falciparum. Este conjunto de protocolos puede ser aplicado para la investigación y descubrimiento de la función de los genes del parásito.

Abstract:
Plasmodium falciparum is the causative agent of the most burdensome form of human malaria, affecting 200–300 million individuals per year worldwide. For the study of P. falciparum, the description of the genome, the transcriptome and the proteome are a tremendous resource for understanding gene function and gene expression regulation. However, 60% of the annotated genes in the genome remain hypothetical due to the evolutionary distance of this parasite to model organisms, and mRNA and protein abundance measurements remain imperfect representations of the underlying genetic and proteomic regulation, since the presence and abundance of an mRNA species does not necessarily correlate with the abundance of the corresponding protein. The work presented in this thesis bridges this disconnect by measuring whole genome translation, using the ribosome profiling technique, revealing for the first time translation dynamics throughout the asexual intraerythrocytic developmental cycle. The findings show that transcription and translation are tightly coupled in this parasite, that 11% of the transcriptome is translationally regulated and that this type of regulation plays a major role on genes related to merozoite egress and invasion. Additionally, presented here is an improved set of methods for 96-well plate-based transfection and culture that facilitate genome-scale genetic manipulation of P. falciparum. This set of protocols can be applied to investigation and discovery gene functions in this parasite.

"Estudio de la transferencia de materia en lechos fluidizados" (1972). Xifra, Hortensio Alfredo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de la transición SOL-GEL y de la estructura de geles de titania con sondas fotofísicas" (2001). Marchi, María Claudia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la presente Tesis se utilizan diversas técnicas experimentales, principalmente fotofïsicas, para estudiar la transición sol-gel de sistemas basados en titania. La sintesis de los mismos se realizó en diversos medios -acuoso, alcohólico y en micelas inversas- a partir de la hidrólisis de Ti(OBnu)4. Se empleó una variedad de sondas ópticas en estudios de anisotropía de fluorescencia y optoacústica, obteniéndose información sobre cambios de microviscosidad y de la evolución de las cavidades formadas al desarrollarse redes de polímeros o de nanopartículas de titania, según el tipo de gel. Complementariamente se utilizaron técnicas de caracterización de los materiales obtenidos: espectoscopía IR y UV-visible, difractometría de RX, mediciones con balanza de cuarzo y de viscosidad macroscópica. Las características del material obtenido dependen del medio en el que se realiza la síntesis. En cada caso se discute el tipo de estructura obtenida. La variación de los parámetros viscoelástícos, microscópicos y macroscópicos, durante la transición sol-gel se analiza empleando modelos de percolación.

Abstract:
Different experimental methods, with emphasis on photophysical experiments using optical probes, were performed to study the sol-gel transition in titania. The synthesis were done in several media: water, buthanol and reversed micelles, using Ti(OBnu)4 as precursor. A variety of optical probes were used for measurements of fluorescent anisotropy and laser-induced optoacoustic. Information about the changes of viscoelastic parameters and the evolution of microcavities through the sol-gel transition was obtained. Characterization techniques, such as IR and UV-visible spectroscopy, X-ray diffractometry and quartz microbalance were also employed. Polymeric or nanoparticle-based gels were obtained depending on the synthetic media. The variation of the microscopic and macroscopic viscoelastic parameters is discussed on the basis of percolation models.

"Estudio de la variabilidad hidrológica de la Cuenca del Plata en respuesta a diferentes forzantes climáticos locales y regionales" (2014-03-28). Gulizia, Carla Natalia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La relación entre el cambio climático y los recursos de agua dulce es una de las principales preocupaciones de la comunidad científica y la sociedad en general. Sin embargo, el cambio climático es sólo uno de los diversos factores que ponen en riesgo los recursos hídricos. Los cambios en el uso de suelo, el manejo de agroquímicos y la instalación de represas, entre otros factores, también pueden alterar el sistema hidrológico. El presente trabajo se centra en Sudamérica, en particular en la cuenca del Plata, dado que esta región es sumamente relevante por ser una de las principales fuentes de agua dulce en el mundo y por tener una gran importancia socio-económica. Una mejor comprensión de la variabilidad hidrológica de la cuenca en el contexto de la variabilidad y el cambio climático es imprescindible para generar información que pueda ser relevante para hidrólogos y responsables de la gestión de los recursos hídricos. En consecuencia, el objetivo general en el que se enmarca la presente Tesis Doctoral consiste en avanzar en el conocimiento y caracterización estadística de la variabilidad hidrológica de los grandes ríos de la cuenca del Plata en respuesta a diferentes forzantes climáticos locales y regionales y realizar una evaluación de la habilidad de Modelos Climáticos Globales (MCGs) para representar dichos forzantes. Los MCGs analizados en cuanto a su habilidad para representar el clima presente (precipitación, transporte y convergencia de humedad) fueron los que conforman las bases denominadas WCRP/CMIP3 y CMIP5. En esta tarea se utilizaron los valores mensuales provistos por cada MCG para el clima presente (experimentos 20C3M para CMIP3 e historical para CMIP5) y se realizó un estudio comparativo del desempeño de ambas generaciones de MCGs. Asimismo, se elaboraron escenarios futuros de precipitación y transporte/convergencia de humedad a partir de los MCGs que mejor habilidad demostraron para representar el clima presente. En particular las simulaciones que se utilizaron correspondieron a los escenarios SRESA1B para CMIP3, y RCP4.5, para CMIP5. El principal objetivo de este último estudio fue el de analizar si la convergencia de humedad podría ser el principal mecanismo que permita explicar los escenarios futuros de precipitación. Por otra parte, se realizó una caracterización estadística de la precipitación y de los caudales de diferentes ríos que conforman la cuenca del Plata en términos de escalas espaciales y temporales. Más aún, se estudió exhaustivamente la variabilidad temporal de los caudales correspondientes a los puntos de cierre de 6 sub-cuencas definidas dentro de la Cuenca del Plata a través de un análisis espectral realizado en el marco MEM (en inglés, Maximum Entropy Method). Finalmente se propuso evaluar en qué medida la variabilidad de la precipitación permitía explicar la variabilidad de los caudales. Para este propósito se diseñaron dos modelos estadísticos de relación entre el caudal y la precipitación (RRM, rainfall-runoff model) a partir del planteo de balance de agua para escalas temporales donde el almacenaje de agua en el suelo es despreciable. A partir de la regresión lineal entre la información histórica de la precipitación caída en cada sub-cuenca y los caudales en los puntos de cierre correspondientes, se dedujeron los hidrogramas unitarios en cada caso para estudiar el retardo de los caudales y se compararon los espectros correspondientes a los caudales simulados y observados. Finalmente, la evapotranspiración se estimó a través de diversas parametrizaciones propuestas en la literatura, entre ellas una que considera el efecto de la vegetación con el objetivo de estimar las consecuencias de los cambios en el uso de suelo sobre los caudales. Palabras claves: Cuenca del Plata, Cambio Climático, Variabilidad Climática, Modelos Climáticos Globales, Modelo Estadístico, Precipitación, Transporte de Humedad, Caudales Superficiales

Abstract:
The link between climate change and freshwater resources is a major concern of the scientific community and the society as a whole. However, climate change is only one of several factors that threaten water resources. Land use changes, agrochemicals management and dams’ installation, among others, may also alter the hydrological system. The present study focuses in South America, particularly in La Plata basin, since this region is extremely important for being one of the main sources of freshwater in the world and because it has a great socio-economic importance. A better understanding of hydrological variability of the basin in the context of climate change and variability is essential to generate information that may be relevant to hydrologists and water resources managers. Consequently, the overall objective, in which this PhD thesis is framed, is to advance in the knowledge and statistical characterization of hydrological variability of the great rivers of the Plata Basin in response to different local and regional climate forcings and to evaluate the ability of Global Climate Models (GCMs) to represent these forcings. The GCMs which were assessed for their ability to represent the present climate (precipitation, moisture transport and convergence) were those which are part of the known multi-model datasets WCRP/CMIP3 and CMIP5. In this task monthly values provided by each GCM for present climate (experiments were 20C3M for CMIP3 and historical for CMIP5) were used to perform a comparative study of the ability of both generations of GCMs. Precipitation and moisture convergence/transport future scenarios were also developed from those GCMs that had shown the best representation of the present climate. The particular analyzed scenarios were SRESA1B for CMIP3 and RCP4.5 for CMIP5. The main objective of the latter study was to assess if the moisture convergence could be the main mechanism to explain the precipitation projections. On the other hand, a statistical characterization of precipitation and runoff data from different rivers within La Plata basin was assessed in terms of spatial and temporal scales. Moreover, runoff temporal variability corresponding to the closing points of 6 defined subbasins within La Plata Basin was studied extensively through spectral analysis based on the maximum entropy method (MEM). Finally, it was aimed to evaluate to what extent the precipitation variability helps to explain the runoff variability. For this purpose two runoff-rainfall statistical models were designed based on the water balance equation for temporal scales where the soil water storage can be considered negligible. In order to study the river discharges delay, unit hydrographs for each sub-basin were deduced from the linear regression between the areal mean of historical precipitation and the corresponding closing point’s runoff data. Spectral densities derived from observed and simulated runoff time series were compared. Finally, the evapotranspiration was estimated through various parameterizations proposed in the literature, including one that considers the effect of vegetation in order to assess the runoff response to land use changes. Key words: La Plata Basin, Climate Change, Climate Variability, Global Climate Models, Statistical Model, Precipitation, Moisture Transport, Surface Discharges

"Estudio de la variabilidad sinóptica extratropical del hemisferio Sur durante la primavera y el invierno. Su influencia en las variaciones de ozono." (2003). Vigliarolo, Paula K.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La variabilidad de escala sinóptica que se observa en la vecindad de Sudamérica durante el invierno y la primavera es analizada en detalle en esta tesis con el fin de mostrar el impacto que la misma produce en los cambios de ozono y de radiación ultravioleta, en particular en la vecindad de Ushuaia. El análisis de la distribución espacial de la variabilidad media de las perturbaciones sinópticas (storm-tracks) sobre el Hemisferio Sur mostró que presenta una gran correlación con la distribución correspondiente a la variabilidad de las perturbaciones de ozono de alta frecuencia (ozone-tracks). Los modos principales de variabilidad atmosférica de escala sinóptica sobre América del sur extratropical son identificados y caracterizados para seis inviernos (1983-88) y quince primaveras (1979-93). Dichos modos surgen luego de aplicar la técnica de funciones ortogonales empíricas extendidas y rotadas (REEOFs) a la perturbación temporal de alta frecuencia(que se obtiene luego de remover el campo medio climatológico y su variabilidad interanual) de la componente meridional del viento en 300 hPa. Los patrones asociados a los principales REEOFs muestran un tren de ondas desplazándose a lo largo de las latitudes del jet subpolar, sobre 50º-55º S en invierno y 55º-60º S en primavera. En ambas estaciones se observa que se trata de ondas baroclínicas con sus máximos en la alta tropósfera; aunque para los meses de primavera dichas ondas se hallan más extendidas en la vertical con amplitudes significativas hasta 30 hPa. La distribución de ozono asociada a los modos sinópticos más activos muestra que durante el invierno la correspondencia entre mínimos (máximos) de ozono y cuñas (vaguadas) es directa y por lo tanto indica una modulación dinámica del campo de ozono por las perturbaciones sinópticas. Durante la primavera, la distribución de temperatura y viento del estado medio propicia una mayor propagación en la vertical hacia la estratósfera de la energía emanante de la tropósfera. Además también en esta época, las variaciones de ozono son mayores en valor absoluto a las del invierno y adoptan una forma de "S" invertida y alargada en la dirección zonal. Se encontró que una perturbación negativa (positiva) de ozono, se asocia en su porción meridional, a la parte norte de un sistema anticiclónico (ciclónico), que típicamente ondula la tropopausa hacia arriba (abajo) y causa que la densidad del ozono en la baja estratósfera alcance un mínimo (máximo). En cambio, la porción más austral de la perturbación de ozono se asocia al extremo sudoeste del sistema ciclónico (anticiclónico) ubicado corriente abajo, que durante esta época está relacionado con la advección de aire estratosférico pobre (rico) en ozono y por lo tanto el contenido total de la columna disminuye (aumenta) en dicha región. Asimismo, también presentamos un análisis de las variaciones de radiación ultravioleta sobre la ciudad de Ushuaia para el período 1991-1998. En particular, la banda de 340 mostró una influencia netamente local en las primeras capas de la atmósfera de los sistemas de tiempo de escala submensual. En contraste, la banda de 305 que se asocia a la variabilidad sinóptica. Los patrones espaciales de correlación y regresión mostraron para la banda de 305 con respecto a los correspondientes a la banda de 340, una mayor extensión horizontal y mayores valores absolutos, con niveles de significancia máximos en la alta tropósfera y en la estratósfera media y baja, que se atribuye a la dependencia de dicha banda del contenido de ozono. En tal sentido, estos análisis confirmaron que la generación de perturbaciones de ozono por actividad de ondas sinópticas descripto previamente, producen cambios significativos en la UV sobre Ushuaia y su vecindad.

"Estudio de la variabilidad y la diferenciación genética por medio de técnica de Isoenzimas y RAPD en poblaciones naturales de especies de pejerreyes de la República Argentina, género Odontesthes (Atherinopsidae, Atherinopsinae, Sorgentinini)" (2002). Abel, María Cecilia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudió por medio de electroforesis de Isoenzimas y RAPD la variabilidad, diferenciación y estructura genética en poblaciones naturales de 0. argentinensis, 0. bonariensis y 0. hatcheri. Se analizó asimismo si la diferenciación genética entre poblaciones, detectada por Isoenzimas y RAPD, podria estar asociada con las distancias geográficas entre las mismas. La técnica de Isoenzimas permitió el análisis de 22 loci (19 para cada especie), de los cuales 8 fueron variables. Si bien las frecuencias alélicas de las poblaciones de cada especie para estos 8 loci mostraron algunas diferencias, la población de 0. bonariensis del Río de la Plata se destacó netamente entre las poblaciones de su especie por la presencia de un alelo fijado y diagnóstico (LDH-1*3). La comparación de frecuencias alélicas entre las distintas especies reveló importantes diferencias, siendo la especie más diferenciada 0. hatcheri. Esta especie se diferenció de 0. bonariensis y O. argentinensis por la presencia de 3 loci GOT exclusivos (diagnósticos) (GOT-2*, GOT-3*, GOT-5*). Además la expresión tisular diferencial permitió distinguir las 3 especies por los patrones de expresión de 3 loci (MEP-1*, MEP-2* y MEP3*). La técnica de RAPD permitió el análisis de 220 bandas. De éstas, sólo 4 resultaron monomórficas. La mayoría de las bandas amplificadas fueron compartidas por las especies y poblaciones variando sólo en sus frecuencias. Del análisis de estas frecuencias se deduce que existen 2 importantes grupos: uno conformado por las poblaciones de O. hatcheri y el otro compuesto por las poblaciones de 0. bonariensis y 0. argentinensis. Al igual que en el análisis isoenzimático la población de 0. bonariensis del Rio de la Plata fue las más diferenciada dentro de las de su especie. Los valores de variabilidad genética promedio por especie, calculados por Isoenzimas, fueron menores para 0. bonariensis (P= 6.31%, H=0.034) que para 0. argentinensis (P= 10.5%, H= 0.045) y 0. hatcheri (P= 10.5%, H=0.047). Esta disminución en los índices de variabilidad fueron asociados al tipo de distribución y a la alta presión pesquera que sufre 0. bonariensis. La población de 0. bonariensis de la laguna Salada Grande, fue la excepción a lo antedicho, registrando valores altos de variabilidad (P= 10.5%, H= 0.06). Siembras periódicas con alevinos obtenidos por inseminación artificial a partir de gametas parentales de dicha laguna mitigarían la disminucón de la variabilidad La estructura genética intrapoblacional estimada por el estadístico FIS de Wright (FIS promedio = 0.004 NS p>0.05) indicó que las frecuencias genotípicas en todas las poblaciones se ajustarían a lo esperado por la ley de Hardy-Weinberg; por ende el apareamiento sería aleatorio. El comportamiento promiscuo en el apareamiento, durante el cual muchos machos pueden fertilizar los huevos de una única hembra (descripto para otras especies de pejerreyes) ha sido sugerido para las especies en estudio, dado que este favorecería la panmixia. La diferenciación genética entre poblaciones de la misma y diferentes especies fue estimada por el índice de fijación FST para ambas metodologías, mientras que los índices de Distancia e Identidad de Nei solo fueron obtenidos para Isoenzimas. Los niveles de diferenciación genética entre poblaciones obtenidos a partir de los datos de Isoenzimas y RAPD fueron similares (FST promedio para todas las poblaciones igual a 0.807 y 0.78 respectivamente) e indicaron una diferenciación altamente significativa entre poblaciones de diferentes especies. Con ambas metodologías, el flujo génico estimado (Nm= 0.06 y 0.07) fue menor que 1 individuo por generación cuando se consideraron todas las poblaciones. La diferenciación entre poblaciones dentro de cada especie mostró valores de FST significativos a altamente significativos tanto para isoenzimas (FST= 0.022-0.130) como para RAPD (FST= 0.553-0.687) pero fue menor que la observada al incluir poblaciones de distintas especies (más evidente en Isoenzimas). Consecuentemente, la estimación indirecta del flujo génico a partir de la diferenciación isoenzimática fue mayor que un migrante por generación (Nm>1). Sin embargo, el Nm estimado a partir de los datos de RAPD (Nm= 0.114-0.202), si bien fue más alto que el obtenido considerando todas las poblaciones, no superó l migrante por generación. RAPD permitió una mayor diferenciación entre poblaciones de la misma especie que la observada mediante la técnica de lsozimas., como consecuencia del alto polmorfismo (bandas muy variables) encontrado por esta técnica. En Isoenzimas, la diferenciación también se estimó mediante los índices de Identidad y Distancia de Nei promedio entre especies. Los intervalos de distancias promedio para poblaciones coespecificas y de distintas especies se ajustaron a los valores encontrados por Shaklee y col. (1982) para peces. En cambio, el intervalo de distancia encontrado entre 0.bonariensis y 0. argentinensis (D=0.07 - 0.112) correspondería, según Thorpe (1979), al de poblaciones coespecificas. De acuerdo al intervalo de distancia genética de Nei (D) obtenido por Thorpe (1979) para especies congenéricas, tal vez sería necesario una revisión sistemática de estas poblaciones para dilucidar este problema. Sin embargo, si se tiene en cuenta el intervalo de distancias genéticas de Nei encontrado por Shaklee y col. (1982), para poblaciones de distintas especies, los valores de las asociaciones entre especies se ajustan a lo esperado por la taxonomía. La varianza genética total fue mayor para RAPD (49.58) que para isoenzimas (3.99). Esto se debió al mayor número de bandas analizadas para RAPD (220 ) que para isozimas (22 loci). A partir del análisis de la distribución de la variabilidad genética se determinó que la variación entre especies (variación especifica) fue la proporción mayor tanto para isoenzimas como para RAPD (73.9% y 44% respectivamente). De la comparación del porcentaje de variación especifica obtenido por ambos métodos se desprende que Isoenzimas detecta mejor este tipo de variación, pudiendo separar especies con mayor precisión. El porcentaje de variación entre poblaciones de la misma especie (variación poblacional) fue mayor para RAPD (34%) que para isoenzimas (6.8%), indicando que la variación poblacional fue mejor detectada por la primer técnica. El porcentaje de varianza dentro de las poblaciones (variación individual) fue similar para ambos métodos (19.3% y 22% para Isoenzimas y RAPD respectivamente). Asumiendo la hipótesis del reloj molecular, se estimó que 0. hatcheri divergió de su antecesor durante el Plioceno tardío; en cambio la divergencia obtenida entre 0.argentinesis y 0. bonariensis indicaría que ésta fue reciente, alrededor de 490.000 años (Pleistoceno medio). Dado el origen de la laguna Salada Grande donde se muestreo una de las poblaciones de O. bonariensis y la fuerte asociación entre esta población y 0. argentinensis obtenida mediante las técnicas de Isoenzimas como de RAPD, se postula un posible evento ancestral de hibridización introgresiva de 0. bonariensis proveniente de lagunas litorales con 0. argentinensis. La falta de correlación entre las distancias geográficas de las poblaciones de cada especie y la diferenciación genética obtenida tanto por RAPD como por Isoenzimas sugirió que la divergencia de las poblaciones de cada especie podría ser explicada por dos mecanismos evolutivos: la Selección o por Eventos fundadores recientes, no habiendose aún alcanzado el equilibrio entre deriva y migración. En cambio al incluir todas las poblaciones de las distintas especies la correlación positiva, tanto para Isozimas como RAPD, sugiere que pudo existir diferenciación de las mismas por Deriva Genética, aunque no se descarta a la Selección como probable fuerza operante. Al incluir todas las poblaciones de las diferentes especies se plantean distancias geográficas importantes, con ambientes muy disímiles donde las presiones selectivas podrían ser muy diferentes determinando una importante diferenciación génica que se correlacionaría con la distancia geográfica. El fenograma obtenido por Isoenzimas dejó visualizar 3 clusters correspondientes a las 3 especies estudiadas, permitiéndo este método una buena agrupación de las poblaciones de cada especie. El fenograma obtenido a partir de RAPD corroboró 2 de los cluster (O. hatcheri versus O. bonariensis y O. argentinensis) pero no tuvo buena resolución al momento de separar las poblaciones de 0. bonariensis y 0. argentinensis. La técnica de Isoenzimas permitió una mejor agrupación de las poblaciones de cada especie, indicando ser mejores marcadores que los RAPD al momento de comparar diferentes especies.

Abstract:
Isoenzyme electrophoresis and RAPD techniques were applied to analyze the genetic variability, differentiation and structure of natural populations of 0. argentinensis, 0. bonariensis y 0. hatcheri. The present study also evaluated if the genetic distances between populations are associated with geographic distances. Isozyme technique allowed analyzing 22 loci (19 for each specie), 8 of which were variables. Allelic frequencies of the populations of each species, for these 8 loci, showed some differences. Río de la Plata population was the most differentiated 0. bonariensis 'population, showing one fixed and diagnostic allele (LDH-1*3). The comparison of allelic frequencies among the different species revealed important differences, 0. hatcheri being the most differentiated one. This species differed from 0. bonariensis and 0. argentinensis by the presence of 3 GOT diagnostic loci (GOT-2 *, GOT-3 *, GOT-5 *). The analysis of tisular specificities also allowed to differentiate the 3 species by the relative expression of 3 loci (MEP-1*,MEP-2* and MEP-3*). RAPD technique allowed the analysis of 220 bands. Among them, 4 were monomorphic. Most of the amplified bands were shared by the species and populations, varyíng only in their frequencies. Two major groups emerged from RAPD analysis: one integrated by populations of O hatcheri and the other including populations of. 0. bonariensis and 0. argentinensis. Río de la Plata population was the most differentiated within O. bonariensis in both Isozyme and RAPD analyses. The average values of genetic variability for species, based on Isozyme data, were smaller in O. bonariensis (P = 6.31%, H = 0.034) than in 0. argentinensis (P = 10.5%, H = 0.045) and 0. hatcheri (P = 10.5%, H=0.047). The decrease of the genetic variability in 0.bonariensis could be associated with its distribution type and the fisheries pressure. The 0. bonariensis population belonging to the "Salada Grande" lagoon was the exception to the abovementioned, showing higher values of variability (P = 10.5%, H = 0.06). Periodic fingerlíngs sowing, obtained by artificial insemination from parental gametes of this lagoon, would mitigate the decrease of variability. The population 's genetic structure estimated by FIS Wright statistical (Average Fls = 0.004 NS p>0.05) indicated that all the populations would adjuste to Hardy-Weinberg, so there would be in random union of gametes. Panmixia could be reinforced through promiscuous behavior during the mating (many males fertilizing the eggs of one female) as was described for other silversides. The genetic differentiation among populations of the same and different species was estimated by the FST fixation index for both methods. Nei's Distance and Identity indexes were obtained only for Isozymes. The levels of genetic differentiation among populations obtained by means of Isozymes and RAPD data were similar (average FST for all populations was 0.807 and 0.78 respectively) and indicated a highly significant differentiation among populations of different species. With both methodologies, the genic flow (Nm = 0.06 and 0.07) was smaller than l individual for generation when all the populations were considered. The genetic differentiation among populations of each species showed significant to highly significant FST values, both for the Isozyme (FST=0.022-0.130) and RAPD (FST=0.553-0.687) analysis. However these values were smaller than the ones observed when including populations of different species (more evident in Isozymes). Consequently, for Isozymes, the estimation of gene flow among populations of the same species was bigger than a migrant for generation (Nm>l). For RAPD, although it was higher (Nm = 0.114-0.202) than the one obtained considering all the populations, it didn't reach l migrant for generation. RAPD allowed a higher differentiation among populations of the same species that the one observed by means of the Isozyme technique, as a consequence of the high polymorphism (very variable bands) found by this technique. In Isozymes, the differentiation also was estimated by means of the Nei average Identity and Distance indexes among species. The ranges of average distances for coespecific populations and for different species were similar to the values found by Shaklee el al. (1982) for fishes. On the other hand, according to Thorpe (1979) the range of average distance between 0.bonariensis and O. argentinensis (D=0.07 - 0.112) would correspond to that of coespecific populations. According to the range of average Nei distance obtained by Thorpe (1979) it would be necessary a systematic revision of these populations to elucidate this problem. However, applying the range of average Nei distance found by Shaklee et al. (1982) for populations of different species,the values adjust perfectly with the taxonomie. The total genetic variance was higher for RAPD (49.58) than for isozymes (3.99). This was due to the higher number of bands analyzed for RAPD (220) that for isozymes (22 loci). The analysis of the genetic variability's showed that the variation among species (specific variation) was the highest proportion, as much for isozymes as for RAPD (73.9% and 44% respectively). The variation percentage among species was higher for Isozyme (73,9%) than for RAPD (44%), indicating that the species variation is detected better by Isozyme analysis. The variation percentage within species (population variation) was higher for RAPD (34%) than for isozymes (6.8%), indicating that the population variation is detected better by RAPD. The percentage of variance within the populations (individual variation) was similar for both methods (19.3% and 22% for Isozymes and RAPD respectively). Assuming the hypothesis of the molecular clock, the divergence time was estimated. 0. hatcheri would have diverged from its predecessor during the late Plioceno; on the other hand, the divergence obtained between 0.argentinensis and 0. bonariensis would indicate that this was recent, around 490.000 years (Mid-Pleistoceno). A possible ancestral event of introgresive hibridazation is postuled for litoral lagoons. This could be the case of "Salada Grande" lagoon population (0. bonariensis) with 0. argentinensis., according to the origin of this lagoon and the strong association among the same ones, showed by means of Isozymes and RAPD techniques. The lack of correlation between geographical distances and genetic differentiation of the populations of each species obtained by RAPD and Isozyme, suggested that the divergence of the populations of each species could be explained by two evolutionary mechanisms: the Selection or by recent Founder Events, yet not having reached the balance between drift and migration. On the other hand, when all the populations of the different species were included, a positive correlation was showed, so much for Isozymes as for RAPD. Then it is suggested that the differentiation of these populations could have taken place by genetic drift, although the Selection could have been another operating force. Important geographical distances with very dissimilar environmental conditions should be consider when all the populations of different species were included. In these areas, the selective pressures could be very different determining an important genetic differentiation that would be correlated with the geographical distance The phenogram obtained by Isozymes showed 3 clusters corresponding to the 3 studied species. So this method allowed a good grouping of the populations of each species. The phenograms obtained by RAPD confirmed 2 of these clusters (O. hatcheri versus 0. bonariensis and 0. argentinensis) but didn't have good resolution to separate the populations of O. bonariensis and 0. argentinensis. Isozymes allowed a better grouping of the populations of each species, indicating to be better markers that the RAPD when comparing different species.

"Estudio de la variabilidad y la diferenciación genética por medio de técnicas de Isoenzimas y RAPD en poblaciones naturales de especies e híbridos del Género Prosopis (Leguminosae)" (2000). Ferreyra, Laura Inés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudió por medio de la electroforesis de isoenzímas y RAPDs la variabilidad, diferenciación y estructura genética en poblaciones naturales de P. alba, P. nigra, P. ruscifolia, P. flexuosa y P. vinalillo y poblaciones de híbridos interespecificos (P. alba x P. nigra y P. alba x P. flexuosa). Se estudió además la posible correlación entre variables ambientales con loci isoenzimáticos y de RAPDs y si la diferenciación genética entre poblaciones podría estar asociada con las distancias geográficas entre las mismas. Las técnicas de isoenzímas permitieron el análisis de 21 loci de los cuales 16 fueron polimórficos. No se encontraron loci diagnósticos de especies. Estas sólo se diferenciaron por sus fiecuencias alélicas. La técnica de RAPDs identificó 28 locí de los cuales 5 permitieron reconocer inequívocamente las especies. Los valores de variabilidad genética promedio observados para isoenzímas (P = 37.5 — 66.7%; H = 0.14- 0.332) y para RAPDs (P = 32.1- 46.4 % ; H = 0.123- 0.246) fueron similares entre sí y con respecto a los estimados en estudios previos con ambas metodologías en especies de Algarobia. Se observó un exceso de homocigotas (F IS >0) en todos los loci polimórficos estudiados. Esto podría deberse a la existencia de cruzamientos endogámicos dentro de las poblaciones como consecuencia de la limitada dispersión de las semillas y el polen y a la autogamia parcial estimada en estudios previos (hasta un 28 %). Los niveles de diferenciación genética obtenidos entre poblaciones a partir de los datos de isoenzímas y RAPDs fueron similares (F ST-0.36 y 0.4 respectivamente) e indicaron una diferenciación altamente significativa entre poblaciones de diferentes especies. En ambos casos el flujo génico estimado (Nm = 0.8 y 0.3) fue menor que l individuo por generación, mientras que el flujo génico entre poblaciones de igual especie fue mayor que uno. Tanto para datos de isoenzímas y RAPDs la mayor diversidad ocurre dentro de las poblaciones (54-69%), es intermedia entre especies (23-42%) y baja entre poblaciones (416%). Se observaron correlaciones significativas entre frecuencias alélicas isoenzimáticas y algunas variables geográfico-climáticas mientras que no se observaron correlaciones significativas entre las variables geográfico-climáticas y las bandas RAPDs. También se observaron diferencias en los resultados cuando se evaluó la correlación entre las matrices de distancias genéticas y geográficas a partir de los datos de isoenzímas (correlación significativa) y RAPDs (correlación no significativa). La asociación de las variables de algunos loci isoenzimáticos con variables geográficas y/o climáticas sugiere un efecto selectivo de los mismos. El intervalo de distancias genéticas entre poblaciones coespecíficas obtenidas a partir de los datos de isoenzímas (0.04 y 0.12) fue similar al obtenido a partir de los datos de RAPDs (0.02 a 0.10). Tanto las isoenzímas como los RAPDs muestran una alta afinidad entre las especies estudiadas de Algarobia, ya que estas comparten la mayoría de los loci con similares frecuencias alélicas. La diferenciación entre especies medida por las distancias de Nei fueron en promedio con ambas metodologías relativamente bajas (0.10-0.27). Estos valores son esperados para sub o semiespecies según Ayala (1974). Los fenogramas obtenidos con ambas metodologías fueron similares entre sí y mostraron a poblaciones coespecíficas agrupadas. Las poblaciones hibridas analizadas no fueron en ningún caso intermedias entre sus progenitores putativos.

Abstract:
Isoenzyme electrophoresis and RAPD techniques were applied to analyze the genetic variability, differentiation and structure of natural populations of P. alba, P. nigra, P. flexuosa, P. vinalillo, P. ruscifolia and interspecific hybrid populations (P. alba x P. nigra and P. alba x P. flexuosa). The present study also evaluated if genetic variables (isozyme and RAPD loci) are correlated with environmental variables and if the genetic distances between populations are associated with geographic distances. Isozyme technique allowed analyzing 21 loci, 16 of which were polymorphic. Diagnostic loci of species were not found. Species were differentiated only by allelic frequencies. RAPD technique identified 28 loci. Only 5 of them allowed unequivocal species recognition. Estimates of genetic variability obtained from isozyme (P =37.5 —66.7 % ; H = 0.14 — 0.32) and RAPD (P = 32.1- 46.4 % ; H =0.123 —0.246) were similar to each other, and to previous estimates obtained using both techniques in other Algarobia species. Significant homozygote excess (F IS > 0) was observed in all polymorphic loci studied. It might be caused by endogamic crosses within populations, due to limited pollen and seed dispersal, and/or partial selfing, which, according to previous works, may reach a rate of 28%. The genetic differentiation among populations obtained from RAPD and isozyme data were similar (F ST = 0.36 and 0.40 respectively) and indicated highly significant differentiation among populations of different species. In both cases estimated gene flow (Nm = 0.8 and 0.3) was lower than one individual per generation. In contrast, gene flow estimates among cospecific populations were higher than one. The highest proportion of variation occurred within population (54 —69 %), the among species variation was intermediate (23 —42 %) and the lower value was observed among conspecific populations (4 —16 %). Significant correlation between isoenzymatic allelic frequencies and geographical or climatic variables was observed. They suggest selective effects of these loci. By contrast, no significant associations were found by RAPD bands. Differences in results were also found when the correlation between geographic distances and genetic distances were evaluated for isozyme (significant correlation) and RAPD (no significant correlation) data. Genetic distance range among cospecific populations from isozyme data (0.04 - 0.121) were similar to that obtained from RAPD data (0.017 —0.10). Both isozyme and RAPDs showed high similarity among the studied species of Algarobia, since most alleles are shared by almost species. The diferentiation among species within this section measured through Nei distance was relative low with both techniques, with values ranging within the expected according to Ayala et al. (1974) for sub to semispecies. The phenogram obtained with both methodologies were consistent and showed clusters of cospecific populations. Hybrid populations were not intermediate between putative parents.

"Estudio de la variación alozímica en el género prosopis" (1985). Saidman, Beatriz Ofelia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de las bacterias fermentadoras del género Bacillus (Aerobacillus)" (1950). Giambiagi, Nélida. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de las características y composición de la oleogomoresina exudada del Mulinum Spinosum (Neneo) de la zona de Zapala en Neuquén" (1961). Chiesa, Rubén Alberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
*Antecedentes Lugar de origen: Zapala (Neuquen) Epoca de recolección: enero de 1960 Método de obtención: exudado provocado por cortes en el tronco. *Caracteres físicos *Caracteres organolépticos Aspecto: opaco y consistencia pastosa Color: ambar Olor: fuertemsnte aromático Partición de la oleogomoresina en: goma, resina y aceite esencial. Se partió de 108,15 grs de muestra, obteniéndose: Goma: 5 g - 4,62% Sol. éter de petróleo: 72,3 g (66,95%). Resina Sol. alcohol etílico: 15,8 g (14,62%). Aceite esencial: 16,5 cm3 (12,84%). GOMA: Se hicieron ensayos cualitativos de identificación con resultados negativo. Carece de adhesividad en suspención acuosa. Rf(glúcidos): 0,22. Posiblemente arabanos. RESINA: Determinaciones Solubilidad en distintos solventes: acetona, etanol, butanol, acetato de butilo, Toluol, glicerina, etc. Punto de ablandamiento: 45°C. Indice de ácido: 124,5 Indice de éster: 70,6 Indice de iodo: 97,78 Viscosidad: L-M Gardner-Holdt a 25°C equivale a 3,00-3,20 poises Indice de refracción: 1,5 Espectro infrarojo: revela presencia de ácidos, esteres, grupos carbanílicos. Presencia de compuestos carbonílicos: 2-4 dinitrofenilhidrazona P.F. 182°C. Ensayos de aplicación en barniz: La parte soluble en éter de petróleo mezclada con partes iguales de esencia de trementina se comporta como un barniz de secado lento que dá capa brillante que queda bien adherido a la madera. La oleogomoresina tal cual no dá resultado. Aceite esencial: Aspecto: producto oleoso, límpido. Color: amarillo muy pálido recién destilado. Olor: suigeneris. Determinaciones Peso específico: a 14,5°C = 0,8407 gr/cm3 Indice de refracción: Poder rotatorio: Cromatografía en columna, por desplazamiento, para separar los hidrocarburos terpénicos del aceite esencial liberado de carbonílicos. No dio resultado. Destilación analítica al vacio: se separaron 8 fracciones y 1 residuo, se constató por cromatografía gaseosa que estaban constituidas por mezclas. Cromatografía en placa de ácido silícico: se constató la presencia de carbonílicos. Espectrofotometría ultravioleta: ligera inflexión en 265mu. Cromatografía en fase gaseosa A) Columna R de 2 m (de polipropileno glicol.P.M.v550 sobre tierra de diatomeas; se le denomina UCON LB - 550 - X. Se cromatografiaron usando esta base fija y N2 como gas a 195°C y flujo 18,3 ml/min., las fracciones de la destilación analítica, obteniéndose hasta nueve componentes. B) Columna SAIB (diacetato exaisobutirato de sacarosa, 10% sobre tierra de diatomeas) de 2 m, se usó a 150°C con gas N2 y flujo 16,2 ml/min. Se hizo un cromatograma tal cual obteniéndose 4 picos y residuo destilación 5 componentes. Espectro infrarojo libre de oarbonílicos: predominio de hidrocarburos terpénicos. Componentes identificados: Hidrocarburos: & pineno pineno, limoneno, mirceno. Compuestos carbonílicos: existen los siguientes compuestos no identificados Cetona: 2-4 dinitrofenilhidrazona P.F. 128 - 130 semicarbazona P.F. 238°C Aldehido: 2-4 dinitrofenilhidrazona: a) derivado rojo P.F. 181°C. b) derivado amarillo pardo P.F. 194°c. semicarbazona P.F. 274°C con descomposición. Oxidación fracción 2 dest. analítica: P.F. 108- 110°C (1ra cristalización) P.F. 126°c (2da cristalización) PoFo 128°C (3ra cristalización) Fracción 8° destilación analítica: 2-4 dinitrofenilhidrazona P.F. 100°C. Residuo destilación en columna: a) 2-4 dinitrofenilhidrazona de la cetona P.F. 98°C b) Complejo Girard T I2Hg del aldehido P.F. 127°C (color parduzco).

"Estudio de las cepas de virus rábico utilizadas en la preparación de vacuna de cerebro de ratón lactante (tipo Fuenzalida - Palacios)" (1984). Dellepiane, Nora Ida. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo se comparó la capacidad inmunogénica de la vacuna antirrábica del cerebro de ratón lactante (CRL) trivalente con la de tres vacunas monovalentes elaboradas con cada una de las cepas virales que componen antigénicamente la vacuna clásica. Tanto la vacuna trivalente, como las monovalente CVS y 51, alcanzaron valores antigénicos elevados en pruebas de potencia NIH. No ocurrió lo mismo con la vacuna monovalente 91, que mostró ser un inmunógeno pobre. La vacuna trivalente fue superior a todas las monovalentes cuando se compararon la velocidad en inducir la respuesta de anticuerpos y los títulos alcanzados al administrarlas en diluciones crecientes. Los títulos de anticuerpos obtenidos con las vacunas trivalente y monovalentes CVS y51, así como su duración en el tiempo, fueron comparables; la vacuna 91 en cambio, indujo bajos títulos de anticuerpos neutralizantes. El estudio de la capacidad de neutralización cruzada de los anticuerpos inducidos, mostró que el virus 91 difiere antigénicamente de los virus CVS y 51. Al compararse la eficacia de cada vacuna en proteger a ratones inmunizados con ellas del desafío intracerebral con los virus fijos CVS, 51 y 91 y los virus calle 1026/80 y 1426/79, se comprobó que excepto la 91, todas protegían frente a todos estos virus con excepción del 91, frente al cual lo hacían sólo parcialmente. En contraposición, la vacuna 91 fue la única realmente eficaz para proteger a los ratones del posterior desafío con la cepa de virus homóloga, y fue ineficiente para protegerlos del desafío con los virus CVS, 51 y 1426/79. Los resultados de los tratamientos postexposición mostraron que tanto la vacuna trivalente como las monovalentes CVS y 51, a diferencia de la 91, protegen de la infección letal por vía parenteral con virus calle. No se pudo detectar interferón en el suero de los ratones inmunizados con ninguna de las vacunas. Por consiguiente no se pudo establecer que exista una relación directa entre producción de interferón y protección en tratamientos postexposición. Se demostró que la técnica de CIE utilizada para cuantificar anticuerpos en el suero de ratones inmunizados, daba títulos de anticuerpos correlacionados con los obtenidos con la prueba in vivo.

"Estudio de las etapas tempranas del ciclo de replicación del Virus Junín" (2010). Martínez, María Guadalupe. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El virus Junín (JUNV), agente etiológico de la fiebre hemorrágica argentina, es un miembro de la familia Arenaviridae. Es un virus envuelto de genoma ARN segmentado cuyo ciclo de replicación ha sido caracterizado en varios aspectos. La entrada a las células blanco se realiza vía endocitosis mediada por receptor y posterior fusión dependiente de pH. Una vez que la nucleocápside se encuentra dentro del citoplasma se expresan 5 proteínas estructurales, mediante una estrategia de codificación ambisentido. La proteína mayoritaria asociada a la nucleocápside es denominada NP. A partir de un único precursor glicoproteico (GPC), se obtienen dos glicoproteínas virales denominadas GP1 y GP2 y el péptido señal (SP). Estos conforman las estructuras claviformes encontradas en la envoltura viral. Se desconocen hasta el momento los mecanismos detallados y las estructuras celulares involucradas en los eventos tempranos del ciclo de replicación viral. En este trabajo se estudiaron aspectos de la interacción virus-célula huésped, caracterizando el rol de distintas proteínas celulares en los eventos tempranos del ciclo de multiplicación del JUNV. En primer lugar se analizó la vía de entrada utilizada por el JUNV para ser endocitado en las células, así como también se estudiaron las proteínas celulares esenciales para este proceso. Con este fin se utilizaron plásmidos que expresan proteínas dominantes negativas, encontrándose que es esencial la Eps-15 y dinamina en el proceso de endocitosis, mientras que las proteínas Rab5 y Rab7 juegan un rol esencial en el paso posterior a la internalización y previo a la fusión. Luego se estudio la interacción del virus con las principales redes del citoesqueleto: los microfilamentos y los microtúbulos. Se utilizaron compuestos capaces de despolimerizar o estabilizar específicamente cada una de estas redes. La internalización del virus disminuyó de manera dosisdependiente en presencia de compuestos que alteraban la integridad de los microfilamentos o estabilizaban los microtúbulos. El tropismo de los virus está regulado por la interacción entre factores celulares y virales durante la transmisión, diseminación y replicación en el huésped. La unión del virus a receptores de superficie específicos determina la susceptibilidad de las células a ser infectadas. La entrada y diseminación de diferentes familias virales puede ser mediada por lectinas de tipo C, como DC-sign o L-sign. Por este motivo se estudió si estas actúan en la infección con el JUNV. Para esto se utilizaron células relativamente no permisivas a la infección por JUNV como las células CHO, las cuales al expresar transientemente las lectinas DC-sign o L-sign fueron infectadas por el JUNV de forma altamente eficiente. Fue demostrado que las células 3T3, que en su forma salvaje no permiten la infección del JUNV, se vuelven permisivas al mismo al expresar de forma estable estas lectinas, y esta interacción es específica lo cual fue demostrado al bloquear la infección con anticuerpos específicos contra las lectinas o el compuesto mannan. Actualmente no hay tratamiento para las fiebres hemorrágicas, por lo que existe una necesidad crítica de desarrollar terapias efectivas para tratar los brotes anuales y contrarrestar su potencial uso como armas biológicas. Todos los virus causantes de fiebres hemorrágicas infectan preferencialmente monocitos, macrófagos y células dendríticas durante las etapas tempranas de la enfermedad. Es por este motivo que estas células representan un blanco potencial en el tratamiento de las fiebres hemorrágicas.

Abstract:
Junín virus (JUNV), the etiological agent of argentine hemorrhagic fever, is a member of the Arenaviridae family. The viral cycle multiplication of this RNA virus has been characterized in different aspects. The entrance in the target cells is performed by receptor-mediated endocytosis following pH dependant fusion step. Once the nucleocapsids are within the cytoplasm the ambisense strategy allows expression of five structural proteins. The major nucleocapsid associated protein is named NP. As a result of the glycoprotein precursor synthesis and after its maturation, two glycoproteins and a signal peptide are obtained. These components, named GP1, GP2 and SP, form the claviform structures found in the viral envelope. At this moment, the detailed mechanisms and cellular structures involved in the early steps of the virus replication cycle are not known although. In this work the interaction between virus and host cells was studied, characterizing the role of cellular proteins in early events of virus replication cycle. It was first evaluated the way of entry used by JUNV to entry host cells and the proteins involved in this process. With this end, plasmids that express dominant negative mutants were used, demonstrating that EPS-15 and dynamin were key proteins in this step, while Rab5 and Rab7 were essential in a step after entry prior to fusion. Then the interaction between JUNV and the main components of the cytoskeleton was evaluated. Compounds that specifically disrupt or stabilized microfilaments or microtubules were used. Virus entry was extremely reduced in a dose dependent way in the presence of compounds that depolimerized microfilaments or stabilized microtubules. Target cell tropism of enveloped viruses is regulated by interactions between viral and cellular factors during transmission, dissemination, and replication within the host. Binding of viral envelope glycoproteins to specific cellsurface receptors determines susceptibility to viral entry. The entry and dissemination of viruses in several families can be mediated by C-type lectins such as DC-sign and L-sign. Results from transduction with JUNV pseudovirus show that infection of relatively non-permissive CHO cells was markedly enhanced when we over expressed DC-sign or L-sign. Experiments using non-permissive mouse 3T3 cells showed that they become permissive to JUNV pseudovirus transduction when they stable express DC-sign, or its homologue L-sign, and that transduction of 3T3 stable expressing DC-sign or L-sign is blocked by anti–DC-sign and/or L-sign antibodies and mannan. Therefore hDC- and hL-sign can act as a novel attachment factors that mediate entry of JUNV. To the date there is no treatment for hemorrhagic fevers, so there is an important requirement to develop specific therapies against annual outbreaks and reduce its potential use as a bioterrorism agent. All hemorrhagic fever viruses infect preferentially monocytes, macrophages and dendritic cells during early stages of the disease. For this reason these cells represent a potential target in the treatment of hemorrhagic fevers.

"Estudio de las fagarinas" (1942). Berinzaghi, Blanca G.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de las fibras de "Caranday"" (1951). Kohan, Teresa. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de las fibras de ’Ihvira’ de Formosa" (1951). Junken, Elena Ruth. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de las fosfatasas de fosfoproteínas en el hongo dimórfico Mucor rouxii" (1985). Seigelchifer, Mauricio Angel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de las fuentes de variabilidad intraestacional en Sudamérica" (2016-03-14). Alvarez, Mariano Sebastián. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Este trabajo de tesis tiene como objetivo general estudiar el ciclo estacional que la variabilidad intraestacional (IS) exhibe en Sudamérica y explorar sus posibles fuentes, poniendo especial énfasis en analizar su relación con aquella variabilidad observada en la circulación del hemisferio sur y, en particular, con la Oscilación de Madden y Julian (MJO). La variabilidad IS (10-90 días) de la precipitación es representada a través de un análisis de funciones ortogonales empíricas de la radiación de onda larga saliente filtrada en la banda IS en el este de Sudamérica. Se estudiaron los patrones dominantes en toda la banda IS, así como en la escala IS corta (10-30 días) y larga (30-90 días), y su variación a lo largo del año. Las series temporales de las Componentes Principales fueron utilizadas para estudiar la dinámica de gran escala de la variabilidad IS asociada a la evolución de los patrones a través de un estudio de regresiones lineales desfasadas. Posteriormente, se analizó la variabilidad estacional de la influencia de la MJO en Sudamérica. Para esto se utilizó el Real-Time Multivariate MJO index (RMM) de Wheeler y Hendon y el OLR-based MJO index (OMI) propuesto por Kiladis y coautores. Se estudiaron las variaciones de la dinámica de la circulación del hemisferio sur en las 8 fases de los índices de la MJO, así como también de las anomalías de temperatura de superficie en Sudamérica. Además, se realizaron composiciones probabilísticas para mostrar la probabilidad de que en cada trimestre y durante cada fase de la MJO, la precipitación en Sudamérica supere el tercil superior de ese trimestre Finalmente, se utilizaron los pronósticos retrospectivos en escala intraestacional del modelo Climate Forecast System en su versión 2 (CFSv2) del NCEP para detectar si los patrones principales de variabilidad en Sudamérica son representados por el modelo. Además, se realizó un análisis sobre la representación de la MJO en estas salidas de 123 días del CFSv2. Palabras clave: variabilidad intraestacional, precipitación, Sudamérica, oscilación de Madden-Julian, ciclo estacional, ondas de Rossby

Abstract:
This thesis aims to study the seasonal cycle that intraseasonal (IS) variability presents in South America and to explore its sources, particularly analyzing its relation to the variability observed in the circulation in the Sotthern Hemisphere and especially with the Madden-Julian oscillation (MJO). The IS variability (10-90 days) of rainfall is represented by means of an empirical orthogonal function analysis of the outgoing long wave radiation filtered in the IS band in eastern South America. The leading patterns of the IS band, as well as of the short (10-30 days) and long (30-90 days) IS timescales were studied, and their variation throughout the year. The time series of the principal components were used to study the large scale dynamics of the IS variability associated to the evolution of the patterns through linear lagged regressions studies. The seasonal variability of the influence of the MJO in South America was afterwards studied. The Real-Time Multivariate MJO (RMM) index of Wheeler and Hendon and the OLR-based MJO index (OMI) proposed by Kiladis and coauthors were used to characterize the evolution of the MJO. The variations in the dynamics of the circulation of the Southern Hemisphere during the 8 phases of the MJO indexes and for each trimester of the year was studied, as well as those variations in the surface air temperature anomalies in South America. Furthermore, probabilistic composites were computed to show the probability that during each trimester and each MJO phase, the rainfall in South America exceed the upper tercile. Finally, the reforecasts provided by the Climate Forecast System in its version 2 (CFSv2) of the NCEP were used to detect if the leading patterns of variability in South America are represented by the model. Also, an analysis of the representation of the MJO in this 123-days-length runs of the CFSv2 was done. Keywords: intraseasonal variability, precipitation, South America, Madden-Julian oscillation, seasonal cycle, Rossby wave trains

"Estudio de las interacciones del virus del dengue con la célula hospedadora" (2011). Mondotte, Juan Alberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El virus del dengue produce en humanos la enfermedad viral más frecuentemente transmitida por artrópodos y no existe hasta el momento terapia antiviral ni vacuna alguna. En este trabajo se desarrollaron diferentes herramientas genéticas con el fin de estudiar las distintas etapas de la replicación viral y la interacción del virus con la célula huésped. Así, se obtuvo el primer clon infeccioso del virus del dengue de un aislamiento argentino y distintas generaciones de virus con proteínas reporteras. Empleando estos sistemas genéticos se pudieron disecar las distintas etapas de la replicación viral. La manipulación del genoma viral permitió caracterizar mutantes de N-glicosilación de las proteínas de envoltura y pre-membrana, y estudiar su importancia en las distintas etapas del ciclo viral. El ensayo del virus reportero, el cual permite evaluar la actividad de luciferasa como un marcador de replicación viral, fue miniaturizado para realizar una búsqueda de quinasas de la célula huésped involucradas en la replicación. Para esto se utilizó la tecnología del RNA de interferencia a gran escala. Mediante este ensayo se identificaron distintas quinasas claves en la replicación del virus y se estudió su importancia en la replicación viral. Por último, se aportó nueva infomación sobre el mecanismo celular por el cual la proteína de cápside se dirige a las organelas celulares lipid droplets, y su relación con la proteína celular ADRP. Este trabajo provee nuevas herramientas genéticas y nueva información sobre los requerimientos del virus del dengue para replicar en la célula infectada. Además, realiza un aporte que podría llevar al desarrollo de nuevas estrategias antivirales.

Abstract:
Dengue is the most prevalent viral disease transmitted by arthropods. At present, neither antiviral therapies or licensed vaccine exist. In this work, we developed new genetic tools to study different steps of viral replication and host-viral interactions. We obtained the first infectious clone from an Argentinean clinical isolate, and several dengue virus reporter systems. Using these tools, we dissected each step of the viral replication process through a luciferase activity assay. Genetically manipulating the viral genome, we characterized N-glycosylation mutants of envelope and pre-membrane proteins, and their role during the viral life cycle. The reporter virus assay was miniaturized to perform an RNA interference screen to search for host kinases involved in viral replication. We identified several kinases important for different steps of viral replication. Finally, we provided new information about the cellular mechanism by which the capsid protein is targeted to cellular organelles known as lipid droplets, and investigated the relationship of capsid with the cellular protein ADRP. This thesis provides new genetic tools and new information on the cellular requirements for dengue virus replication, which could lead to the development of new antiviral strategies.

"Estudio de las interacciones entre fosfolípidos y proteínas integrales de membrana. Efectos sobre la actividad enzimática de una ATPasa transportadora de Ca2+" (2014). Dodes Traian, Martín Miguel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las membranas celulares son estructuras dinámicas complejas de composición bioquímica muy diversa. Las interacciones específicas lípidolípido y lípido-proteína pueden generar dominios estables o transientes de composición y función biológica diferenciales. En este trabajo, abordamos el estudio de la regulación de la actividad de una proteína integral de membrana, la bomba de calcio de membrana plasmática (PMCA) por anfifilos que integran el sistema en el cual se la reconstituye. En micelas de lípidos y detergente, pudimos verificar que la actividad depende de la proporción relativa de estas especies y postulamos un modelo que explica esta dependencia en base al intercambio de anfifilos a nivel del dominio transmembrana. El análisis realizado con diversos métodos espectroscópicos mostró que los cambios estructurales asociados a la activación por lípidos serían sutiles pero suficientes para transducir una señal de activación al dominio citoplasmático de PMCA. Utilizando espectroscopía de correlación de fluorescencia y la sonda fluorescente Laurdan observamos que la actividad depende además de la fluidez del entorno y del tamaño de las micelas. Para extender este estudio al entorno natural de las proteínas -la membrana celular- evaluamos diversas sondas fluorescentes y pudimos determinar que la sonda C-Laurdan permite estudiar por microscopía confocal la organización de membranas biológicas.

Abstract:
Cellular membranes are dynamic complex structures with a highly diverse biochemical composition. Specific lipid-lipid and lipid-protein interactions can generate transient or stable domains of particular composition and biological function. In this work, we study the regulation of the activity of an integral membrane protein, the plasma membrane calcium pump (PMCA), by phospholipids that make up the reconstitution system. Working in a mixed micelles lipid/detergent system, we verify that the activity depends on the relative proportion of these species and we posited a model that explains this relationship by the exchange between amphiphiles at the protein transmembrane domain. The analysis performed by spectroscopic methods showed that the structural changes associated with the activation by lipids are subtle but enough to transduce an activation signal to the cytoplasmic domain of PMCA. Using fluorescence correlation spectroscopy and the fluorescent probe Laurdan, we observed that the activity is also related to micelle size and the fluidity of the protein lipidic microenvironment. To extend this study to the natural environment of the protein –the cellular membrane- we assayed the performance of several fluorescent probes and we could determine that the probe CLaurdan allows studying the organization of biological membranes by confocal microscopy.

"Estudio de las interacciones entre venados de las pampas (Ozotoceros bezoarticus) y ungulados introducidos (ganado vacuno y chanchos cimarrones) en el Refugio de Vida Silvestre Bahía Samborombón, Argentina: implicancias para su conservación" (2015-08-03). Perez Carusi, Lorena Cynthia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El venado de las pampas (Ozotoceros bezoarticus) es un cérvido nativo de Sudamérica que se encuentra seriamente amenazado en Argentina. En particular, en la provincia de Buenos Aires el último núcleo poblacional de la especie se encuentra en el Refugio de Vida Silvestre Bahía Samborombón (RVSBS). Dicha población se halla en retroceso desde hace al menos 30 años y, al respecto, se ha propuesto entre las principales causas de su declinación a las interacciones negativas entre el venado y especies introducidas como el ganado vacuno, los chanchos cimarrones y cérvidos exóticos. En ese contexto, el objetivo general de esta tesis ha sido estudiar la interacción del venado de las pampas con el ganado vacuno (Bos taurus) y los chanchos cimarrones (Sus scrofa) a dos escalas espaciales diferentes en el RVSBS, de sitio y de paisaje. En este último caso se incluyeron otras variables ambientales. A escala de sitio, se corrobora que vacunos y chanchos cimarrones ejercen un efecto negativo sobre el venado de las pampas. En particular, en el caso de los vacunos se registró una segregación espacial del venado respecto a los vacunos cuando el establecimiento era manejado con las cargas ganaderas habituales (0,6 - 1 E.V./ha.); en tanto que a cargas ganaderas más bajas, venados y vacunos coexisten manteniendo una distancia mínima promedio de 978 ± 68 m. La abundancia de venados estuvo inversamente correlacionada con la carga ganadera y no se registraron venados cuando la carga fue mayor a 0,6 E.V./ha. En cambio, la tolerancia de los venados a la presencia de chanchos fue mayor, pero ante la proximidad del chancho el venado manifestó alteraciones en su conducta e incrementó sus niveles de vigilancia. A escala de paisaje, los relevamientos aéreos permitieron detectar una segregación espacial y una distribución diferencial de vacunos, chanchos y venados a lo largo del RVSBS, con una mayor concentración de vacunos al norte, de chanchos en la zona central (y sobre todo en el estrato interno) en tanto que los venados aparecen más concentrados en el centro-sur de la bahía (y particularmente en el estrato costero). Al mismo tiempo, los resultados de los modelos lineales generalizados detectaron que la distancia a la ruta fue la variable ambiental que mayor influencia tuvo en la ocurrencia del venado (i.e., a mayor distancia, mayor ocurrencia de venados). Finalmente, las estimaciones del índice de abundancia poblacional de venados, realizadas en una serie temporal de 30 años, muestran una clara tendencia a la declinación de la población en el RVSBS. En función de todo lo anterior, se proponen una serie de recomendaciones para la conservación del venado de las pampas en el RVSBS que incluyen: 1) integrar al venado en sistemas ganaderos que permitan el descanso de algunos potreros y/o bajo esquemas de cargas ganaderas moderadas que permita a los venados mantener una distancia mínima que reduzca la interferencia entre ambas especies; 2) el control de la población de chanchos cimarrones, especialmente en la zona central de la bahía y, complementariamente, 3) la implementación de acciones de conservación exsitu con el propósito de reforzar la población silvestre de venado de las pampas de Bahía Samborombón y prevenir su extinción. Palabras claves: Ozotoceros bezoarticus; ungulados introducidos; especies exóticas; venado de las pampas; Pampa Deprimida; Bahía Samborombón; chanchos cimarrones; conservación; ganadería sustentable.

Abstract:
The pampas deer (Ozotoceros bezoarticus) is native to South America and is seriously endangered in Argentina. In particular, in Buenos Aires province, the last pampas deer population in the wild is located in the Bahía Samborombón Wildlife Refuge (BSWR). This population has been decreasing since at least 30 years and the negative interactions between the pampas deer and introduced species such as livestock, feral pig and exotic deer have been proposed among the main causes of its decline. In this context, the general objective of this thesis was to study the interactions among pampas deer, cattle (Bos taurus) and feral pigs (Sus scrofa) at two different spatial scales in the BSWR, at site and landscape scales. Additionally, other variables were included in the latter analysis. At the site scale, it is confirmed that cattle and feral pigs have a negative effect on the pampas deer. In particular, in the case of cattle, a spatial segregation of the deer was registered with regard to the cows when the establishment was handled with habitual stocking rates (0.6 – 1 LU/ha); while at lower stocking rates, the pampas deer and cattle coexist, separated by a minimum average distance of 978 ± 68 m. The pampas deer abundance was negatively correlated with stocking rate and no one deer was recorded when stocking rates was increased more than 0.6 LU/ha. Instead, the tolerance of the deer to the presence of feral pigs was higher, but the pampas deer switched its behavior and also increased levels of surveillance in response to feral pig proximity. At landscape scale, a spatial segregation and a differential distribution of cattle, pigs and deer were detected along the BSWR, with a higher concentration of cattle in the north of the bay, feral pigs in the central area (and especially in the internal zone) while the higher concentration of deer was in south-central bay (and particularly in the coastal zone). At the same time, the results of the generalized linear models detected that the distance to route was the main environmental factor influencing the pampas deer occurrence, both were positively related. Finally, pampas deer abundance index estimated in a temporary series of 30 years shows a clear trend to the decline of the population in the BSWR. On the basis of these results, it is proposed some management recommendations for the pampas deer conservation in the BSWR: 1) to integrate the pampas deer in grazing systems that allows some pasture to have a rest period and/or in systems with moderate stocking rates, allowing the pampas deer to maintain a distance with cattle to minimize interference with each other; 2) to implement feral pig control program mainly in the central zone of the bay and, additionally, 3) to reinforce the population of pampas deer located in BSWR to prevent its extinction in the wild. Key words: Ozotoceros bezoarticus; introduced ungulates; exotic species; pampas deer; Flooding Pampa; Bahía Samborombón; feral pigs; conservation; sustainable livestock production.

"Estudio de las interfaces - Obtención de un nuevo sensor de gases" (1999). Lamas, Diego Germán. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo de Tesis Doctoral se estudiaron nuevos métodos de obtención de materiales funcionales nanoestructurados para sensores de gases por gelificación-combustión, como así también sus propiedades estructurales y eléctricas. Los materiales analizados fueron: dióxido de circonio (o “circonia”, ZrO2) dopado con Y203, MgO, CaO o CeO2 (óxidos de conducción iónica) y dióxido de estaño (SnO2, semiconductor). Sobre la base del conocimiento de las propiedades de la interfaz se obtuvieron dos sensores originales de monóxido de carbono (CO), construidos con discos cerámicos de circonia tetragonal policristalina estabilizada con itria (Y-TZP) y con electrodos de Sn02 de dos tipos (peliculas gruesas depositadas por técnicas serigráficas con polvos nanocristalinos de SnO2 como agente activo y películas delgadas crecidas por “flash-pyrolysis”), depositados en forma simétrica sobre ambas caras del disco. Se empleó la técnica de espectroscopía de impedancia electroquímica para la caracterización eléctrica de las interfaces. Ambos sensores resultaron operables en el rango 400-550°C, mostrando alta sensibilidad y respuesta rápida (lO-20 seg.) frente a bajas concentraciones (10-350 ppm) de CO en aire sintético, señalando un nuevo procedimiento para sensar gases. Se destacan ventajas de estos sensores con respecto al único dispositivo similar registrado por la literatura, el cual debe operar a altas temperaturas ya que emplea como óxido conductor iónico la circonia estabilizada en su fase cúbica.

Abstract:
In this Doctoral Thesis, novel synthesis methods by gel-combustion and structural and electrical properties of several nanostructured functional materials for gas sensors have been studied. Zirconium dioxide (‘Zirconia’, ZrO2) doped with Y203, MgO, CaO or CeO2 (solid ionic conductors) and tin dioxide (Sn02, semiconductor) were analyzed. Knowing the properties of the interface, two original carbon monoxide (CO) sensors were obtained with ceramic disks of yttria-stabilized tetragonal zirconia polycrystals (Y-TZP) and with two types of SnO2 electrodes (thick films deposited by serigraphic techniques with nanocrystalline SnO2 powders as active agent and thin films grown by flash-pyrolysis), symmetrically deposited on both faces of the disk. The electrochemical impedance spectroscopy technique was used for the electrical characterization of interfaces. Both sensors could be operated in the range of 400-550°C, showing high sensitivity and fast response (lO-20 sec.) for small CO concentrations (lO-350 ppm) in synthetic air. The advantages of these sensors are pointed out in comparison with the only similar device reported by literature, made of cubic stabilized zirconia (as ionic conductor oxide) that requires high operation temperatures.

"Estudio de las interrelaciones entre nutrición y respuesta inmune en modelo experimental, en ratas en crecimiento" (1985). Slobodianik, Nora Haydée. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El tipo de respuesta y la vulnerabilidad de un tejido a los efectos del desequilibrio nutricional dependen de la velocidad de recambio celular. La cinética de proliferación celular en los órganos linfoides sugiere que estos tejidos deben ser particularmente susceptibles a los efectos de la desnutrición proteica. Teniendo en cuenta que la respuesta se inicia en dichos órganos, y debido a la multiplicidad de aspectos involucrados con el sistema inmune, en este trabajo se han estudiado los efectos de la deficiencia proteica severa y de la posterior realimentación sobre timo y ganglio mesentérico de ratas en crecimiento. Los resultados de este modelo experimental han permitido describir los efectos específicos de la malnutrición proteica severa al destete y analizar el impacto de la posterior recuperación con diferentes niveles de proteína sobre los órganos de importancia fundamental a nivel de inmunidad celular y secretoria. Para este estudio se utilizaron ratas de la cepa Wistar ( 6- 8 crias por madre) que se destetaron al llegar a un peso entre 35-40 grs., (21-23 dias de vida); a partir de ese momento se mantuvieron con dieta libre de proteínas hasta pérdida de 20% a 25% del peso inicial. Sobre estos animales se estudió: a) el efecto de la depleción proteica y b) el efecto de la realimentación. Sobre aquellos animales que perdieron no menos del 25% del peso al destete -lográndose así un modelo experimental para malnutrición de tercer grado (LP 25) (67, 68)- estudió el efecto de la recuperación nutricional durante períodos cortos (5 y 9 días) y prolongados (21 y 40 días). Sobre aquellos animales que durante el período de depleción proteica perdieron alrededor del 20 % del peso inicial- modelo de desnutrición de segundo grado (LP 20) (67, 68)- se estudió el efecto de la recuperación nutricional sólo durante períodos cortos. Como control de nutrición normal se utilizaron grupos de ratas que desde el destete recibieron dieta stock de vivero. Estos animales fueron sacrificados a los 12 días, al destete (21-23 días) y a los 39, 45, 60 y 80 días de vida. Al final del período experimental, y luego de 4 horas de ayuno, los animales fueron pesados y sacrificados previa anestesia con éter extrayéndoseles timo y ganglio mesentérico, los cuales fueron pesados. Se prepararon suspensiones celulares sobre las cuales se determinó el recuento celular y se caracterizaron los determinantes antigénicos en la superficie de la membrana celular de timocito y de las células T de ganglio mesentérico; en este órgano linfoide también se estudiaron las células B que expresan y/o contienen IgA. Para la caracterización de la población celular T se utilizó el anticuerpo monoclonal xenogeneico W3/13+ y para la determinación de los marcadores de la población celular B se utilizó el antisuero anti IgA específico para cadena alfa; todas estas determinaciones se realizaron por la técnica de inmunofluorescencia indirecta (25,74).

"Estudio de las levaduras de Mendoza" (1914). Lejeune, Luis Manuel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de las líneas de inestabilidad en la República Argentina" (2000). Gordillo, Susana Beatriz. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las lineas de inestabilidad en nuestro país traen aparejados con frecuencia fenómenos de tiempo severo , tormentas eléctricas con ráfagas intensas , fuertes precipitaciones con inundaciones repentinas , brusco descenso de temperatura , granizo y tornados con consecuencias importantes en lo socio-económico. El objetivo de la presente tesis es estudiar las características de las lineas de inestabilidad en la Argentina , las condiciones asociadas al desarrollo de las mismas y la factibilidad de obtener métodos objetivos para el pronóstico de las mismas. Para ello se analizaron tres líneas de inestabilidad en forma detallada a fin de encontrar los rasgos comunes de las mismas. La primera produjo una inundación repentina en Mina Clavero con importantes daños en esa ciudad provocada por una precipitación de 300 mm en cuatro horas en la Sierra de los Comechingones (Córdoba) , la segunda fue acompañada por una intensa depresión de estela que se produjo en la ciudad de Buenos Aires con intensidades de viento de 45 Kts mientras que la tercera fué captada por el radar meteorológico M33 en la estación meteorológica Ezeiza , lo que permitió el estudio de la disposición de las células convectivas en la misma . Las tres líneas de inestabilidad se desarrollaron dentro de una masa de aire caliente e inestable por delante de un sistemafrontal , en un campo de apreciable baroclinicidad . Una corriente en chorro en 850 hPa aportó calor y humedad y en la troposfera media una masa de aire seco penetró por detrás de las líneas de inestabilidad . Con el fin de determinar las condiciones sinópticas conducentes a la formación de las lineas de inestabilidad y las características de las masas de aire , se usaron los análisis diarios de 12 UTC del Centro Europeo a Mediano Plazo del Departamento de Ciencias de la Atmósfera de la Universidad de Buenos Aires y los análisis trihorarios del Servicio Meteorológico Nacional de los meses de Octubre a Marzo de los años 1982-1984. Se eligió un área de estudio delimitada por los paralelos 30°S y 40°S y los meridianos 5000 y 7000, se observaron 109 líneas de inestabilidad que afectaron el área indicada. Con respecto a la situación sinóptica asociada a la ocurrencia de las 109 líneas seleccionadas se observó queprevia a laformación de la línea de inestabilidad se produce una profundización de la Depresión del Noroeste Argentino con el consecuente aumento en la advección de calor y humedad lo que produce una anomalía positiva máxima de inestabilidad en el sur de Córdoba y noroeste de Buenos Aires. Asociado a una depresión en el sur de la Patagonia avanza un frente frío que el dia de la línea alcanza en promedio las provincias de Mendoza y La Pampa y el sudoeste de Buenos Aires , en tanto que una vaguada de onda corta en niveles medios se acerca desde el Océano Pacífico hacia la región central del pais. Estudiando la incidencia de distintos parámetros meteorológicos en la formación de líneas de inestabilidad se encontró que fueron preponderantes la influencia del viento de dirección norte hacia la región central del país , tanto en 1000 hPa como en 850 hPa ; la inestabilidad que adquiere la masa de aire alli presente y la entrada de aire frío desde el sudoeste del área de estudio. Con los resultados obtenidos previamente se seleccionaron dieciocho parámetros predictores a los que se aplicó el Análisis Discriminante con el propósito de encontrar un método objetivo de pronóstico. El procedimiento estadístico utilizado determinó que los parámetros de mayor significancia en el pronóstico de lineas de inestabilidad estaban relacionados con la inestabilidad de la masa de aire presente en la porción central del pais, la intensidad del flujo zonal en 500 hPa entre 30°S y 40°Sen 70°0 , la entrada de aire frío por Puerto Montt y la baroclinicidad entre Santa Rosa y Puerto Montt. La verificación en una serie independiente de 101 datos arrojó un 73% de acierto en el pronóstico de líneas de inestabilidad .

"Estudio de las moléculas de adhesión celular y quemoquinas involucradas en el tráfico leucocitario en un cuadro de orquitis autoinmune experimental" (2006). Guazzone, Vanesa Anabella. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los cuadros de inflamación e infección del aparato reproductor masculino constituyen una de las principales causas de infertilidad. La orquitis autoinmune experimental (OAE) fue inducida por inmunización activa, en la rata, con antígenos espermáticos y adyuvantes y constituye un modelo útil para estudiar inflamación testicular y autoinmunidad específica de órgano. La OAE se caracteriza por la presencia de un infiltrado linfomonocitario intersticial y lesión de los túbulos seminíferos con células germinales que sufren apoptosis y descamación. Nos propusimos estudiar, en la OAE, las principales quemoquinas y moléculas de adhesión involucradas en la migración y extravasación de linfomonocitos. Mediante técnicas de ELISA se detectó, en las ratas con orquitis, respecto de controles, un aumento en la concentración testicular de MIP-1? durante el período de inmunización mientras que MCP-1 aumentó durante el desarrollo completo del cuadro incluyendo el período de lesión severa. Se observó un aumento en el número de linfomonocitos testiculares que expresan los receptores específicos de dichas quemoquinas, CCR2 y CCR5. Por citometría de flujo, se detectó una disminución en el número linfomonocitos CD44+ en sangre periférica, simultánea a un aumento de dichas células en el intersticio testicular. A nivel del endotelio testicular, aumentó el número de células PECAM-1+ que expresan VCAM-1. Los resultados sugieren que las quemoquinas y moléculas de adhesión estudiadas constituyen un componente del circuito de amplificación de la respuesta inmune, esencial para el reclutamiento linfomonocitario y la inducción de una orquitis autoinmune severa, en el contexto de una inflamación crónica.

Abstract:
Inflammation and infection of the genital tract is one of the leading causes of male infertility. We have developed an experimental model of autoimmune orchitis (EAO) in rats by active immunization with spermatic antigens and adjuvants, a useful model to study organ specific autoimmunity and to analyze testis inflammation. This disease is characterized by interstitial lymphomononuclear cell infiltrates and severe damage of seminiferous tubules with apoptosis and sloughing of germ cells. The aim of this work was to detect the main chemokines and cell adhesion molecules involved in leukocyte extravasation in this model. By ELISA we detected in rats with EAO an increase in the testicular content of MIP-1? during the immunization period and of MCP- 1 during the development of the disease including the period of severe testicular damage. We also observed an increase in the number of testicular cells CCR2+ o CCR5+, specific chemokine receptors. By flow cytometry we detected a decrease in the number of CD44+ lymphomonocytes from peripheral blood concomitant with an increase of these cells in the testicular interstitium. Rats with EAO showed a significant increase in the number of PECAM-1+ testicular endothelial cells that express VCAM-1. Results suggest that the chemokines and cell adhesion molecules analyzed constitute part of an amplification circuit of the immune cell response essential, for leukocyte recruitment and induction of severe autoimmune orchitis, in the context of a chronic testicular inflammation.

"Estudio de las ondas atmosféricas en la región de la mesopausa a partir de las temperaturas rotacionales de OH(6-2) y de O2b(0-1)" (1994). Reisin, Esteban Rodolfo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se discute el comportamiento dinamico de la atmósfera neutra en la región entre 80 y 100km. Los datos utilizados provienen de mediciones cenitales de las emisiones del cielo nocturno de O2b(O-1) y OH(6-2), obteniéndose la temperatura alrededor de 95km y 86km de altura, respectivamente. Se analizaron los datos de 117 noches, medidos en una serie de campañas en El Leoncito (32°s, 69°W) y El Arenosillo (37°N, 7°W), entre 1986 y 1992. El parámetro ƞ de Krassovsky, con la ayuda del modelo de Hines, Tarasick y Shepherd, ha sido utilizado para caracterizar la propagación vertical de las ondas gravitatorias y de la componente semidiurna de la marea. Se hallaron, mediante un método de análisis espectral iterativo para datos no equidistantes, alrededor de mil eventos de ondas gravitatorias, para cada una de las emisiones, en el rango de periodos entre 2008 y más de 6h, y se hizo un análisis estadístico con respecto a la propagación vertical y a las distribuciones espectrales de la cantidad y potencia de ondas, y de ƞ. La mayoría de las ondas observadas tienen gran longitud de onda vertical, ó son evanescentes. De las ondas más cortas que 100km, un 30% se propaga hacia abajo. Se determinó una longitud de atenuación vertical de 22km, aproximadamente independiente del período, confirmando resultados de Collins et al, obtenidos con lidar. Con respecto a la forma de la densidad de potencia espectral del conjunto de ondas observadas, se concluye que la pendiente espectral es menos pronunciada que el valor -2 del modelo de Dewan. El modelo de Hines, Tarasick y Shepherd concuerda aceptablemente con los valores de ƞ encontrados, pero, con respecto al modelo de Walterscheid et al, hay grandes discrepancias en periodos menores a 1000s. Las fases de ƞ cubren el primer y el cuarto cuadrante, por lo cual no todos los valores están en 0°, y casi ninguno en 180°. Para la marea semidiurna, se observó propagación hacia arriba, con una longitud de onda vertical media de 29km y 43km a la altura de la capa de OH y del O2, respectivamente. En promedio, la marea en temperatura precede en fase a la intensidad por aproximadamente 70min para el O2 y l40min para el OH. El promedio de |ƞ| para la marea semidiurna es aproximadamente 5 para ambas capas. Estos valores no son compatibles con las predicciones del modelo de Walterscheid et al.

Abstract:
The dynamical behaviour of the neutral atmosphere in the region between 80 and 100km is discussed. Data from zenith measurements of the nightglow emission of O2b(0—1) and OH(6-2) have been used to obtain temperatures around 95 and 85km, respectively. Data from 117 nights, measured in a series of campaigns at El Leoncito (32°S, 69°W) and El Arenosillo (37°N, 7°W), from 1986 to 1992. Krassovsky's ƞ has been used, with the help of the model of Hines, Tarasick and Shepherd, to determine the vertical propagation of gravity waves and of the semidiurnal tide. Using an iterative method of spectral analysis for non-equidistant data, about one thousand gravity wave events, for each emission, has been found, in the period range between 2008 and more than 6h. A statistical analysis with respect the vertical propagation and the spectral distributions of the number of waves and power and ƞ has been done. Most of the observed waves have big vertical wavelength, or are evanescent. Thirty percent of the waves shorter than 1OOkm propagate downward. A vertical attenuation length of 22km has been determined, approximately independent of period, confirming the lidar results of Collins et al. With respect to the shape of the power spectral density of all the observed waves it is concluded that the spectral slope is less pronounced than the theoretical value of -2 according to Dewan's model. The model of Hines, Tarasick y Shepherd agrees reasonably with the ƞ values found, but with respect to the model of Walterscheid et al., there are big discrepancies in periods less than 1000s. The phases of ƞ cover the first and fourth quadrant, which means that not all values are zero, and there is nearly none at 180°. For the semidiurnal tide, upward propagation was observed, with a mean vertical wavelength of 29km and 43km at the height of the OH and the O2 layers, respectively. On the average, the temperature tide precedes intensity in phase, by approximately 70min for O2 and 140min for OH. The mean |ƞ| for semidiurnal tide is approximately 5 in both layers. These values are incompatible with the predictions of the model of Walterscheid et al.

"Estudio de las propiedades fotofísicas y de reacciones fotosensibilizadas de compuestos purínicos" (1997). Murgida, Daniel Horacio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudiaron distintos aspectos de la fotofísica de compuestos de la familia de las purinas entre los que se encuentran la purina y varios de sus derivados con distintos sustituyentes en la posición 6 (metilo, cloro, amino, hidroxi y metoxi), y dioxopurinas o xantinas (cafeína, teofilina y teobromina). Este estudio incluye la descripción de los espectros de absorción, el estudio de los efectos de matriz y de átomos pesados sobre la luminiscencia (fluorescencia y fosforescencia) a bajas temperaturas, y el estudio de las desactivaciones no radiativas mediante espectroscopía optoacústica inducida por láser. Por otra parte, se estudiaron las reacciones fotosensibilizadas de las xantinas utilizando benzofenona y Rosa de Bengala como sensibilizadores. En ambos casos se realizaron numerosas experiencias cinéticas empleando técnicas de estado estacionario y con resolución temporal, se identificaron los productos de las reacciones y se realizaron cálculos de modelado molecular entre otras cosas. Los resultados obtenidos permiten proponer que en el primer caso las xantinas desactivan al estado triplete de la benzofenona en forma fisica y por un proceso de abstracción de hidrógeno (fotooxidación de tipo I). En el segundo caso se determinó que las reacciones proceden mediante un mecanismo de tipo II, siendo el oxígeno singulete el agente oxidante. En este último estudio se incluyó además una trioxopurina (ácido trimetilúrico).

Abstract:
Different aspects of the photophysics of purinic compounds were studied. The compounds selected are purine and several purine derivatives with different substituents at position 6 (methyl, chloro, amino, hydroxy and methoxy), and dioxopunnes or xanthines (caffeine, theophylline and theobromine). This study includes the description of absorption spectra, the study of matrix effects and heavy atoms effects on luminescence (fluorescence and phosphorescence) at low temperatures, and the study of non radiative deactivations by laser induced optoacoustic spectroscopy. Besides, photosensitized reactions of xanthines were studied by using benzophenone and Rose Bengal as sensitizers. In both cases several kinetics experiments were run by using Steady state and time resolved methods. Also, reactions products were isolated and identified and molecular modeling calculations were done. The results obtained allow us to propose that in the first case xanthines quench benzophenone triplet state by a physical process and by hydrogen abstraction (type I photooxidation). In the second case, reactions occur trough a type II mechanism, being singlet oxygen the oxidizing agent. In this latter study a trioxopurine (trimethyluric acid) was also included.

"Estudio de las propiedades replicativas in vitro de la cepa A663 de Herpesvirus bovino tipo 5 (BoHV-5) y de la función de la proteína Us3" (2010). Ladelfa, María Fátima. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Este trabajo de tesis contribuyo a la caracterizacion de la cepa argentina A663 de Herpesvirus Bovino tipo 5 (BoHV-5) mediante el estudio de sus propiedades replicativas in vitro y del rol de la proteina Us3. En el primer caso se realizaron cineticas de crecimiento y se evaluaron los tamanos de las placas de lisis y de infeccion de las cepas A663 y N569 de BoHV-5. La produccion total de particulas virales infectivas en funcion del tiempo fue similar entre ambas cepas, sin embargo la cepa A663 resulto menos eficiente en la liberacion de particulas virales al medio extracelular y en la dispersion celula a celula, observandose para la cepa A663 una reduccion del 90% y del 80% en el tamano de la placa de lisis y de infeccion, respectivamente. Por otro lado, se secuencio la region codificante para la proteina Us3 de la cepa A663 de BoHV-5 y se observo un alto porcentaje de homologia con las secuencias correspondientes a otras cepas de BoHV-5. Mediante las tecnicas de Northern y Western blot se demostro que el gen us3 se expresa tempranamente (desde los 30 minutos post infeccion) y de manera prolongada (hasta las 48 horas post infeccion). Los ensayos in vitro se realizaron utilizando construcciones que expresaban la proteina Us3 wt o una version mutante de esta proteina que carece de actividad de proteina quinasa, fusionadas a la proteina fluorescente ECFP (US3-ECFP y Us3K261D-ECFP). Se observo que la proteina Us3 de BoHV-5 induce el redondeamiento celular y provoca el desensamblado de las fibras de estres, siendo estos efectos independientes de su funcion de quinasa. Ademas, la proteina mutante Us3K261D disminuyo la formacion de proyecciones de celulares y modifico la localizacion subcelular de la proteina Us3 de BoHV-5. En conjunto, los resultados obtenidos permitieron conocer las propiedades replicativas in vitro de la cepa A663 de BoHV-5 y constituyeron el primer reporte sobre el estudio de la funcion de la proteina Us3 de BoHV-5.

Abstract:
This thesis contributed to the characterization of the Argentinean bovine herpesvirus type 5 (BoHV-5) A663 strain by studying its in vitro growth properties and the function of the Us3 protein. Firstly, growth kinetics, lysis and infection plaque size assays were performed for BoHV-5 A663 and N569 strains. The total amount of infection virus produced was similar between both strains at each time assayed; however, A663 strain was less efficient than N569 strain in releasing infective viral particles to the extracellular media and in cell-to-cell spread, as shown by a reduction of 90% and 80% in its lysis and infection plaque size, respectively. On the other hand, the region encoding the Us3 protein of BoHV-5 A663 strain was sequenced and high homology was observed between it and other sequences of BoHV-5 strains. Then, early (from 30 minutes post infection) and prolong (up to 48 hours post infection) expression of us3 gene was demonstrated by Northern and Western blots assays. Finally, in vitro studies were performed with genetic constructions to express wt Us3 protein or a mutated version of this protein lacking its kinase activity, fused to the fluorescent protein ECFP (Us3-ECFP and Us3K261D-ECFP). In transient transfection assays it was observed that Us3 BoHV-5 protein induced cell rounding and stress fiber breakdown independently of its kinase activity. Besides, the point mutation in the Us3K261D protein reduced cell projections formation and modified the subcellular localization of BoHV-5 Us3 protein. Taken together, these results allowed the assessment of the in vitro growth properties of BoHV-5 A663 strain and constituted the first report of the function of the BoHV-5 Us3 protein.

"Estudio de las redes neuronales asociadas a procesos cerebrales espontáneos, atencionales y de planeamiento motor en sujetos sanos y en pacientes neurológicos mediante técnicas de RMN funcional" (2015-04-16). Expósito, Verónica. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La resonancia magnética funcional (RMf) es una técnica indirecta de medición de la actividad neuronal. La investigación por RMf de la función cerebral tanto de forma modular como integrada en redes tiene repercusión en el estudio de la actividad cognitiva normal así como de los desórdenes neurológicos. En el presente trabajo utilizamos la técnica de RMf para dilucidar aspectos de la función cognitiva en personas sanas y dos poblaciones de pacientes con síndromes de desconexión. En el primer estudio evaluamos la representación cerebral del planeamiento de gestos de uso de herramientas con distintos componentes motores: involucrando principalmente articulaciones del brazo y codo -gestos proximaleso de mano y dedos -gestos distales-. Hallamos una representación topográfica distinta para cada tipo de gesto, lo cual es importante para entender el patrón de errores en la pantomima e imitación de gestos que se observa en pacientes con apraxia. En el segundo estudio investigamos la actividad de las redes cerebrales involucradas en atención interna y externa y la conectividad dentro y entre esas redes, en pacientes con desórdenes de conciencia. Encontramos una estructura colectiva de regiones que aumenta su respuesta con el nivel de conciencia y una indiferenciación en la estructura de redes antagónicas como la red de modo por defecto y la red atencional, cuya especialización mejora en forma no lineal conforme el paciente progresa.

Abstract:
Functional magnetic resonance imaging (fMRI) is a technique that allows for indirect measurement of neuronal activity. The research of brain function with fMRI both as modular and as integrated into networks has impact in the study of normal cognitive activity as well as of neurological disorders. In the present work we used fMRI to elucidate aspects of cognitive function in healthy people and in two populations of patients with disconnection syndromes. In the first study we evaluated the brain representation of planning tool-use gestures with different motor components: involving mainly arm and elbow joints (proximal gestures) or hand and finger joints (distal gestures). We found a different topographic representation for each gesture, which is important to understand the error pattern in pantomime and imitation of gestures observed in patients with apraxia. In the second study we investigated the activity in the brain networks involved in internal and external attention, and the connectivity within and between that networks, in patients with disorders of consciousness. We found a collective structure of regions that increase their responsiveness with the level of consciousness and a de-differentiation in the structure of antagonic networks such as default-mode network and attentional network, whose specialization recovers non-linearly as the patients progresses.

"Estudio de las relaciones genómicas y de similitud genética relativa entre especies del germoplasma del cultivo andino "oca" (Oxalis tuberosa) mediante análisis de AFLP y secuencias de ADN ribosomal" (2002). Tosto, Daniela S.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Oxalis tuberosa, comúnmente conocida como oca, es una de las 8 especies andinas con raíces y tubérculos comestibles que juegan un rol importante en los sistemas agrícolas de las tierras altas de la región andina. Estos cultivos son de gran importancia económica y nutricional para la subsistencia de los agricultores de los Andes y un potencial alimento para el resto de la humanidad. La oca pertenece al género Oxalis, el cual está distribuido mundialmente e incluye alrededor de 800 especies. La mayor diversidad se encuentra en América del Sur y en Sud Africa; siendo las especies de América del Sur las que presentan el mayor rango de variación en cuanto a características morfológicas, ecológicas y citológicas. Los estudios citogenéticos revelaron una gran diversidad en el número básico de cromosomas variando desde X=5 a X=12, siendo X=7 el número más frecuente. Los niveles de poliplodía en el género también son variables (2n a 8n). De Azkue y Martínez (l990) encontraron que un grupo de once especies, que eran semejantes morfológicamente, compartían un número básico de cromosomas X=8. A este grupo pertenecen O. herrerae, O. medicaginea, O. mollissima, O. oblongiformis, O. peduncularis, O. subintegra, O. tabaconanensis. O.aff. víllosula (todas estas diploides), O. lotoides (2n=32), O. spiralis (2n=48) y la oca (O. tuberosa), un octoploide. A este grupo lo denominaron “la alianza de O. tuberosa”. Sin embargo este agrupamiento no coincide con la clasificación basada en criterios de taxonomía tradicional. El estudio de las especies silvestres relacionadas a los cultivos puede dar idea del proceso de domesticación y la evolución de los mismos, por otro lado pueden tener aplicaciones prácticas dado que las especies silvestres relacionadas a los cultivos son reservorios genéticos para el mejoramiento de los mismos. La caracterización de las distintas variedades y accesiones de O. tuberosa que existen es fundamental para saber con la diversidad que se cuenta y para el manejo de los bancos de germoplasma. Dentro de este marco los objetivos generales del presente estudio fueron por un lado poner a prueba, con herramientas de la taxonomía molecular, la hipótesis cromosómica que relaciona a O. tuberosa y con otras especies del género por compartir el mismo número básico de cromosomas X=8. Por otro lado evaluar distintas herramientas moleculares para cuantificar y comparar la diversidad genética de representantes del género y, más particularmente, de la especie cultivada, con el objeto de contribuir criterios objetivos para la conservación de estos recursos genéticos y su mejoramiento con fines agrícolas. Para lo cual se realizó el análisis de los genes ribosomales y se analizaron patrones de AFLP. El análisis de la región del espaciador interno de los genes ribosomales (ITS) corroboró la hipótesis cromosómica que relaciona a O. tuberosa y las especies que comparten el mismo número básico de cromosomas X=8. El análisis de AFLP también apoyó la hipótesis cromosómica ya que tanto en el análisis de agrupamientos como en el análisis mediante coordenadas principales las especies de la alianza se diferenciaron respecto de O. articulata generándose en el primer caso un dendrograma que sostenía este agrupamiento con un coeficiente de correlación cofenética de 0,99. El segundo análisis permitió identificar a las combinaciones de primers E41-M39 y E45- M43 como las que más aportaron a dicho agrupamiento. Los resultados no son del todo consistentes con los obtenidos a través de la taxonomía tradicional mediante descripciones puramente morfológicas, tanto en el caso de las clasificaciones que dividen a las distintas especies de la alianza en cuatro secciones (Knuth, 1939, 1936) como el caso en que las dividen en dos (Lourteig, 2000). De todos modos, la clasificación basada en datos moleculares de las especies de la alianza es más congruente con la propuesta taxonómica de Lourteig (2000) y puede ayudar a afinarla. El análisis de los genes ribosomales a nivel de la región codificante (la más conservada), muestra mayor similitud entre O. tuberosa y O. oblongiformis. Esta observación, sí sería congruente con la taxonomía tradicional, ya que ambas especies fueron las únicas de las especies estudiadas, agrupadas en la misma sección por Knuth (en Ortgiesae) y por Lourteig (en Lotoideae). Lo incongruente sería que, en su monografía, Lourteig (2000) sinonimizó a O. oblongiformis con O. tabaconasensis. El análisis del ADNr, pero a nivel de la región del IGS (la más variable) dio una idea de la compleja estructura de estas secuencias hipervariables en la alianza. Dado que es una región altamente variable no esclareció demasiado la relación de las especies diploides y poliploide cultivada, pero aportó información interesante de la relación entre las especies diploídes. Las tres especies diploides que comparten el mismo patrón de bandas fueron ubicadas por Knuth en tres secciones diferentes, mientras que por Lourteig en dos. Así mismo, esta parte del ADNr demostraría la inconsistencia de sinonimizar O. oblongiformis y O. tabaconasensis (Lourteig 2000). El análisis de los resultados obtenidos por los AFLP aparte de apoyar la hipótesis cromosómica de la alianza, permitieron visualizar el potencial de la técnica de AFLP para la caracterización de las distintas accesiones del cultivo y su utilización para el manejo de los bancos de germoplasma. Ya que se permitieron diferenciar accesiones que figuran con el mismo número, como así también identificar posibles duplicados, accesiones que figuran con distinto número, pero tienen perfiles de bandas idénticos. Siendo las combinaciones de primers E45-M43, E69-M69 y E41-M39 las que más incidieron para explicar la variación observada.

Abstract:
Oxalis tuberosa, commonly known as oca, is one of the 8 Andean species with edible underground roots and tubers that play a major role in the Andean highland farming systems. These crops are of great economic and nutritional importance to subsistence Andean farmers and a potential source of food for the whole mankind. Oca belongs to the genus Oxalis, that is worldwide distributed and represented by at least 800 species most of them in the southern hemisphere, mainly in America and South Africa, being South American species the most diverse in morphologigal, ecological and cytogenetic characteristics. Cytogenetic studies revealed a great deal of variability in the basic number of chromosomes (from X=5 to X=12), X=7 is the more frequent, as well as variation in the ploidy degree, that ranges from 2n to 8n (Marks, 1956; Cronquist, 1981; Naranjo et al., 1982; de Azkue, 1986; de Azkue & Martínez, 1983, 1984, 1989, 1990). Among them, a group of 12 species that share the same basic number of chromosomes (x=8) was defined by de Azkue & Martínez (1990). The group of species is named “the O. tuberosa alliance”. To this group belongs O. herrerae, O. medicaginea, O. mollissima, O. oblongiformis, O. peduncularis, O. subintegra, O. tabaconanensis, O. aff. villosula (all diploids species), O. Iotoides (2n=32), O. spiralis (2n=48) and the oca (O. tuberosa), an octoploid. However, this grouping is not consistent with the classification based on traditional taxonomy criteria. The study of the wild species related with the crop could help to clarify the processes of domestication and evolution of the oca. Furthermore, this study has practical applications since related wild species are natural genetic reservoirs for breeding. Characterization of different cultivars and accessions is very important in order to acknowledge the existing diversity and germplasm management. In this context, the general objectives of the present study were: first, to corroborate the chromosome hypothesis that relates O. tuberosa with the other species that share the same basic chromosome number, X=8. Second, to evaluate different molecular tools to quantitate and compare the genetic diversity of the different species of the genus, and particularly, within the crop species, so contributing objective criteria for genetic resources conservation and breeding. For these purposes, rDNA sequence analyses by RFLP complemented by nucleotide sequencing as well as AFLP were carried out. Comparative ribosomal intergenic transcribed sequences (ITS) analysis corroborated the hypothesis of relativeness of the species that share the same basic number of chromosome X=8. No differences were detected among the diploid species or within the O. tuberosa species. When diploid and polyploid species were compared, four differences were observed, two transitions in the ITS1 and two transversions in the ITS2. In contrast, when the species belonging to the alliance were compared to with an external reference species (O. articulata), several differences were found. The AFLP results also showed to be in good agreement with the cytogenetic hypothesis. Both cluster analysis and principal coordinates analysis discriminated the alliance species from O. articulata. In the first case, a dendrogram from UPGMA cluster analysis that show this grouping was obtained, and its very high cophenetic coefficient value (r = 0.99) indicates excellent fitness to the genetic similarity matrix. The co-ordinates analysis allowed to identify the primer combination E4l-M39 y E45-M43, as the most significant for this grouping. The results obtained from these analyses are not so consistent with those from the traditional taxonomy. Neither in the case of Knuth's classification (1930, 1936) by which the species of the alliance belong to four different sections, nor in the case of Lourteig (2000), which separates them in two different sections. In any case, the last classification is more congruent with the molecular data, which may help to refine it. O. tuberosa and O. oblongiformis showed identical restriction endonuclease patterns for the transcribed rDNA regions, which is consistent with conventional taxonomy, since both species were classified in the same section by Knuth (in Ortigiesae) and Lourteig (in Lotoideae). However, in the last case, the defined synonymy between O. oblongiformis and O. tabaconanensis is inconsistent with the molecular data shown here. Restriction endonuclease and sequence analyses of the IGS revealed a subrepeat organization which sequence and organization showed such degree of variation that did not allow relating polyploid to diploid species. However, the molecular organization of IGS rDNA contributed some important information on the relationship among diploids species. The three species that share the same pattern in this variable region, were classified by Knuth in three different sections, while they were classified in two by Lourteig. The IGS sequence also showed the inconsistency of the sinonimy between O. oblongiformis and O. tabaconanensis by Lourteig (2000). The AFLP analysis not only supported the chromosome hypothesis but also showed that AFLP is a powerful tool to characterize the different crop accessions and its usefulness for germplasm characterization and management (for example, for the identification of duplicate accessions), being the E45-M43, E69-M69 and E41-M39 primer combinations the most significant to explain the observed variability.

"Estudio de las resistencias a roya común del maíz y a roya de la hoja del trigo" (2015-03-09). Darino, Martín Alejandro. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La roya común, causada por el hongo biótrofo Puccinia sorghi Schwein. es una importante enfermedad del maíz. En la Argentina poco se conoce acerca de fuentes de resistencia, no existen híbridos comerciales identificados como portadores de resistencia durable a la enfermedad y se desconoce acerca de la estructura poblacional de P. sorghi presente en la zona núcleo de cultivo. Los objetivos del presente trabajo consistieron en: la identificación de fuentes de resistencia a la enfermedad mediante la evaluación de un set de líneas de maíz con 66 aislamientos del patógeno y con infecciones naturales a campo; evaluación de la variabilidad patogénica y molecular de los 66 aislamientos; y profundizar en el conocimiento acerca de las bases genéticas que controlan la resistencia durable en cereales para poder implementarlas en programas de mejoramiento de maíz, mediante el estudio de una variedad de trigo llamada Buck Poncho que fue identificada como portadora de resistencia durable a roya de la hoja (Puccinia triticina Erikss.). Las líneas de maíz Rp3-A, Rp1-K, Rp-GI, Rp-G5, Rp-G5JD, PIO19802, PIO28760 y PIO17570 resultaron resistentes a más del 75% de los aislamientos y en más del 78% de las localidades evaluadas. En las líneas PIO68752, PIO28427 y PIO36420 se identificó un nuevo tipo de resistencia cuya expresión comenzó en el estadio V4. Las líneas PIO12345 y PIO74876 mostraron resistencia parcial en el estadio V2. Se identificaron en la población de P. sorghi por lo menos 3 grupos de virulencia y 26 fenotipos de virulencia o razas que podrían ser 40 razas si se consideran los genotipos de AFLP. En Buck Poncho se detectaron la existencia de por lo menos tres genes de resistencia LrBP1, LrBP2 y LBP3. La combinación de los genes de resistencia detectados en las distintas líneas de maíz podría generar variedades comerciales que posean resistencia más durable. Los grupos de virulencia identificados en la población de P. sorghi no mostraron diferencias en el nivel molecular indicando que aislamientos pertenecientes a un mismo grupo de virulencia pueden tener distintos orígenes dentro de la población. La resistencia durable observada en Buck Poncho se puede explicar en parte por los efectos combinados de los genes LrBP1, LrBP2 y LrBP3 aunque no puede descartarse la presencia de genes menores y/o QTLs menores cuyos efectos sean detectados con poblaciones segregantes de mayor tamaño a la utilizada en este estudio.

Abstract:
Common rust caused by the biotrofic fungus Puccinia sorghi Schwein. is an important disease of maize. In Argentina little is known about maize lines carrying resistance to the disease, the existence of corn hybrids with durable resistance and about the existence of distinct virulence groups in the P. sorghi population. The objectives of this work were: the evaluation of a set of maize lines with 66 isolates of the pathogen and with natural pathogen population present in field in order to identify resistance sources to the diseases; the study of the population structure of P. sorghi population; and in order to deepen the knowledge about the genetic basis that control durable resistance, genetic and molecular studies of a wheat variety called Buck Poncho that was identified as durable resistance to wheat leaf rust (Puccinia triticina Erikss.) were performed. Maize lines Rp3-A, Rp1-K, Rp-GI, Rp-G5, Rp-G5JD, PIO19802, PIO28760 and PIO17570 were resistant over the 75% of the isolates and over the 78% of the field locations where they were evaluated. A new class of resistance was identified in maize lines PIO68752, PIO28427 and PIO36420 whose expression of the resistance began at leaf stage V4. In inbred lines PIO12345 and PIO74876 showed partial resistance at leaf stage V2. At least, 3 virulence groups were identified, 26 virulent phenotypes or races were distinguished that could become 40 races if AFLPs genotypes are considered. Three leaf rust resistance genes, LrBP1, LrBP2 and LrBP3 were identified in Buck Poncho. Pyramiding the resistant genes detected in maize lines could be a useful strategy to increase durability of the resistance. The virulence groups identified in P. sorghi population did not differ at genetic level, indicating that isolates from each group could have different origins within the population. The durable resistance observed in Buck Poncho could be explained in part by the combination effects of LrBP1, LrBP2 and LrBP3 genes and the presence of minor genes or minor QTLs whose effects could perhaps be detected in segregant populations bigger than the one that was used in this study.

"Estudio de las singularidades climáticas en series de temperaturas del noroeste argentino" (1991). Minetti, Juan Leonidas. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de las vías de señalización de CD31 y PD-1 en la regulación de la respuesta inmune contra Mycobacterium tuberculosis" (2010). Jurado, Javier Oscar. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La respuesta de citoquinas Th1 es critica en la inmunidad contra Mycobacterium tuberculosis. Por ello, es crucial comprender el establecimiento y mantenimiento de las respuestas efectoras de los linfocitos T. En este trabajo de tesis, se investigo el rol de proteinas de senalización en la modulación de respuestas de citoquinas y citótoxicas de los linfocitos T durante la infección por M. tuberculosis. Los resultados obtenidos demostraron que la interacción entre las proteinas inhibitorias CD31 y SAP participa en la regulación de las vias que conducen a la producción de IFN-Y durante la tuberculosis pulmonar activa. Más aún, en individuos con una fuerte Inmunidad mediada por células contra el patogeno, la estimulación especifica con el antigeno induce en las células productoras de IFN-Y el fenotipo CD31-SLAM+. Asimismo, se demostró el rol inhibitorio de la via PD-1:PD-Ls sobre las funciónes efectoras de las células Th1 en la tuberculosis. Ademas, se comprobo que la via de PD-1:PD-Ls inhibe la expansion de las poblaciónes Th1 y Th17 durante la infección por M. tuberculosis. Por lo tanto, se concluye que PD-1 modularia la activación y la expansion de las células Th1 y Th17, impidiendo la exacerbación de cada una de estas respuestas. En conjunto, los resultados obtenidos en este trabajo demuestran que el uso de anticuerpos bloqueantes y agonistas podria tener importantes implicancias en potenciales terapias para combatir infecciónes bacterianas cronicas como la tuberculosis.

Abstract:
The cytokine Th1 response is crucial in the immunity against Mycobacterium tuberculosis. For that reason, its critical to understand the establishment and maintenance of T lymphocyte effector functions. In this work, the role of signaling proteins on the modulation of cytokine and cytotoxic responses of T lymphocytes during M. tuberculosis infection was investigated. The results demonstrated that the interaction of the inhibitory proteins CD31and y SAP participates in the regulation of the pathways that lead to IFN-Y production during active pulmonary tuberculosis. Moreover, in individuals with strong cell-mediated immunity against the pathogen, specific antigen stimulation induces the CD31-SLAM+ phenotype in IFN-Y producing cells. Furthermore, we demonstrated the inhibitory role of the PD-1:PD-Ls pathway on Th1 effector functions in pulmonary tuberculosis. Besides, we showed that the PD-1:PD-Ls pathway inhibits the expansion of the Th1 and Th17 subsets during M. tuberculosis infection. Thus, we conclude that PD-1 would modulate the activation and expansion of Th1 and Th17 cells, avoiding exacerbation of each of these responses. Together, the results of this work demonstrate that the use of blocking and agonistic antibodies might have significant implications in potential therapies to fight chronic bacterial infections like tuberculosis.

"Estudio de las vías de señalización e inflamatorias del canal P2X7 y su variante polimórfica Gln460Arg en células del sistema nervioso central" (2014-04-11). Aprile García, Fernando. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los receptores P2X7 son canales de calcio activados por ATP conformados por subunidades de dos pasos de membrana que se asocian como homotrímeros. Sus efectos son mediados por activación de la vía de las MAPK que incluye a BRaf y ERK 1/2. En el sistema nervioso central, regulan la liberación de neurotransmisores y citoquinas, y la activación glial frente a situaciones inflamatorias. Mediante distintos estudios genéticos se encontró que pacientes con trastornos depresivos poseen, con una incidencia significativa, una variante polimórfica del gen P2X7, que consiste en un cambio de un único nucleótido que produce la sustitución de Glutamina por Arginina en la posición 460 (Gln460Arg). El objetivo principal de esta tesis consiste en investigar la relación funcional entre esta variante polimórfica del receptor y la aparición de trastornos psiquiátricos. En particular, se estudiaron las cascadas de señalización activadas por el receptor P2X7, poniendo énfasis en el ingreso de calcio extracelular tras dicha activación, el rol de la cascada de las MAPK y los efectos funcionales y transcripcionales que derivan de dicha activación. Primeramente, se observó que en homocigosis la variante mutada de P2X7 tiene la misma funcionalidad que el receptor wild-type (WT). En cambio, cuando ambas subunidades fueron coexpresadas se produjo una marcada disminución en la entrada de calcio y en la activación de la MAPK ERK 1/2. Se demostró además que ambas subunidades interactúan físicamente en la membrana celular de células coexpresoras, asociándose para formar trímeros funcionales de P2X7 compuestos por subunidades WT y Gln460Arg. A su vez, nuestro grupo colaborador en el Max-Planck en Munich, Alemania, demostró que solamente los ratones knock-in que expresan ambas variantes del receptor P2X7 humano, y no aquellos que expresan una única variante, muestran alteraciones del comportamiento similares a aquellas que presentan pacientes con depresión. A continuación, se buscaron proteínas involucradas en la transducción de señales de P2X7 de interés en el marco de mecanismos inflamatorios o con un posible rol en depresión. Se detectó asociada a BRaf a la proteína Poli ADP-ribosa polimerasa 1 (PARP1), enzima clave en la respuesta celular a procesos inflamatorios. Se demostró que P2X7 activa a PARP1, aumentando los niveles totales de poli ADP-ribosilación. Estos resultados identifican a PARP1 como un modulador clave de la transducción de señales de P2X7, y describen por primera vez a P2X7 como activador de PARP1. Además se realizó un microarray de expresión génica con el fin de caracterizar las consecuencias de la coexpresión de ambas variantes a nivel transcripcional. Con estos datos se realizó un análisis bioinformático global de los perfiles de expresión génica, con el cual se hallaron alteradas distintas vías de señalización relacionadas con inflamación y depresión. También identificamos genes candidatos con expresión alterada que resultan de máximo interés en el mismo contexto: CHUK (o IKKα, quinasa del inhibidor de NFκB α) y RCAN1 (regulador de calcineurina 1). Esta expresión diferencial detectada en el microarray fue posteriormente confirmada en distintos modelos, validando y profundizando dichos hallazgos. En conclusión, mediante la caracterización de las vías de transducción de señales asociadas a la activación de las distintas variantes de P2X7, el análisis de su impacto transcripcional y su asociación con nuevas moléculas se describen por primera vez los mecanismos moleculares y celulares que podrían proveer una explicación a la asociación entre la presencia de la variante mutada de P2X7 y la aparición de trastornos psiquiátricos como la depresión.

Abstract:
P2X7 receptors are ATP-gated calcium channels conformed by subunits with two transmembrane domains that assemble as homotrimers. Its effects are mediated by activation of the MAPK pathway that involves BRaf and ERK 1/2. In the central nervous system, they regulate neurotransmitter and cytokine release, as well as glial activation after inflammatory injury. Different genetic approaches have demonstrated that a significant amount of psychiatric patients suffering from major depression possess a polymorphic variant of the P2X7 gene, consisting in a single nucleotide change leading to a Glutamine for Arginine subtitution at the position 460 (Gln460Arg). The main aim of this thesis is to investigate the functional interplay between this polymorphic variant and the onset of psychiatric symptoms. More specifically, signaling pathways elicited by P2X7 receptor were studied, with special emphasis in calcium uptake, MAPK role and the functional and transcriptional effects derived from their activation. First of all, we report that the P2X7 polymorphic variant show the same functionality than its wild-type (WT) counterpart when expressed in homocygosis. In contrast, calcium uptake and MAPK ERK 1/2 activation were severely diminished when both subunits were coexpressed. We also show that both subunits physically interact in coexpressing cells, therefore assembling P2X7 receptors that bear WT and Gln460Arg subunits. At the same time, our partner research group at the Max-Planck Institute in Munich, Germany, showed that only knock-in mice for both variants of the human P2X7 receptor show behavior alterations reminiscent of those observed in psychiatric patients, while homozygous knock-in mice do not. Afterwards, we looked for novel proteins involved in P2X7 signaling pathways that would be of interest in the context of inflammation and depression. We detected Poly ADPribose polymerase (PARP1), a key enzime for cellular response to inflammatory processes. P2X7 activates PARP1, enhancing cellular levels of ADP-ribose. These results identify PARP1 as a key modulator of P2X7 signaling mechanisms, and describe P2X7 as a novel activator of PARP1. Also, we performed an expression microarray with the aim of depicting the transcriptional consequences of coexpressing both variants. This data was used to carry out a global bioinformatic analysis of gene expression profile. We found that different signaling pathways related to inflammation and depression were altered. We also found candidate genes with altered gene expression that are of interest in this context: CHUK and RCAN1. Their differential expression detected on the microarray was confirmed employing different models, therefore validating and gaining insight into these findings. Summing up, by means of characterizing the signaling pathways associated to the activation of the different P2X7 variants, the analysis of their transcriptional impact and the association with novel molecules we describe for the first time the molecular and cellular mechanisms that could provide an explanation for the association between the P2X7 polymorphic variant and the appearance of psychiatric illnesses such as depression.

"Estudio de las vías visuales superiores en el glaucoma experimental" (2015-03-20). Bordone, Melina Paula. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El glaucoma, una de las principales causas de ceguera irreversible, se caracteriza por una pérdida progresiva de las funciones visuales, que se asocia a la muerte de células ganglionares retinianas (CGRs) y atrofia de la cabeza del nervio óptico (NO). El principal factor de riesgo es el aumento de la presión intraocular (PIO). Aunque el glaucoma fue concebido como una enfermedad limitada al ojo, los axones de las CGRs son extraoculares, con componentes intraorbitales e intracraneales. En este trabajo de Tesis se examinaron los efectos del glaucoma experimental agudo y crónico sobre el sistema visual consciente (SV-C) y el sistema visual no formador de imagen (SV-NFI). El SV-C en la rata, se compone de las CGRs clásicas y sus axones que proyectan al colículo superior (CS) y al núcleo geniculado lateral (NGL). El SV-NFI se compone por las CGRs intrínsecamente fotosensibles que expresan melanopsina (CGRsm) y proyectan a los núcleos supraquiasmáticos (NSQ), al núcleo pretectal olivar (NPO) y al intergeniculado (IG), que participan en la sincronización del reloj circadiano y el reflejo pupilar, entre otros. El modelo de glaucoma agudo consistió en un aumento de la PIO a 70 mm de Hg durante 90 min (hipertensión ocular aguda, HOA), en tanto que el glaucoma crónico se indujo a través de inyecciones intracamerales de condroitín sulfato (CSU), una vez por semana, durante 15 semanas. A los 7 días post-HOA se observó una alteración significativa de la función y estructura retinianas, con una pérdida significativa de CGRs, así como cambios astro- y microgliales en el CS y una disminución en el transporte anterógrado desde la retina al CS y NGL, pero no a los NSQ y al NPO. El número de CGRsm, los niveles de melanopsina y el reflejo pupilar consensual permanecieron inalterados aún a las 4 semanas post-HOA. La administración de CSU por 6 semanas indujo alteraciones en la función retiniana y en la vía visual, una disminución en el transporte anterógrado a todas las áreas de proyección y cambios gliales a nivel del NO, el CS y la retina. En el CS, estas alteraciones incluyeron una marcada respuesta micro- y oligodendroglial y una moderada respuesta astrocitaria, que se acompañaron de una disminución del contenido lipídico. A las 15 semanas de glaucoma crónico, estas alteraciones fueron más marcadas e incluyeron alteraciones en los axones, sin afectar el número de neuronas coliculares. La minociclina previno algunas de las alteraciones inducidas por la hipertensión ocular crónica, como el déficit en el transporte anterógrado desde la retina al CS. En cuanto al SV-NFI, el glaucoma crónico indujo una caída significativa en el número de CGRsm y los niveles de melanopsina, así como en el transporte desde la retina a los NSQ y el NPO, con una disminución en el reflejo pupilar consensual. En suma, los resultados obtenidos en esta Tesis aportan datos de relevancia respecto a la participación de las áreas visuales post-retinianas en el daño glaucomatoso. Palabras clave: células ganglionares, glaucoma, glía, hipertensión ocular, minociclina, sistema visual consciente, sistema visual no formador de imagen, transporte axonal.

Abstract:
Glaucoma, one of the main causes of irreversible blindness, is characterized by a progressive loss of visual functions, which is associated to retinal ganglion cell (RGCs) death and optic nerve (NO) atrophy. The increase in intraocular pressure (IOP) is one of the main risk factors. Classically, glaucoma has been conceived as a disease limited to the eye, but axons of RGCs have extraorbital and intracranial components. In this Thesis work, the effects of acute and chronic experimental glaucoma on the conscious visual system (C-VS) and the non-image forming visual system (NIF-VS) were examined. The C-VS in rats includes classical RGCs and their axons that project to the superior colliculus (SC) and the lateral geniculate nucleus (LGN). The NIF-VS is composed by intrinsically photosensitive RGCs expressing melanopsin (mRGCs) that project to the suprachiasmatic nuclei (SCN), pretectal olivary nucleus (OPN) and intergeniculate leaflet (IG), which drive circadian rhythms and pupillary light reflex (PLR), among others. The acute glaucoma model was induced by increasing IOP to 70 mm Hg for 90 min (acute ocular hypertension, AOH), whereas chronic glaucoma was induced by intracameral injections of chondroitin sulfate (CSU), once a week, for 15 weeks. At seven days post-AOH, a significant impairment of retinal function and structure, with a significant RGCs loss, and astro- and microglial changes were observed in the CS. At the same time, a marked reduction in anterograde transport to the SC and LGN, but not to the SCN and the OPN, was observed. At 4 weeks post-AOH, mRGCs cell number, melanopsin levels, and consensual PLR remained unchanged. CSU administration for 6 weeks induced alterations in retinal and visual pathway function, a decrease in anterograde transport to all of the RGCs projecting areas, and glial changes at the level of the retina, ON, and SC. In the SC, these alterations included a marked microand oligodendroglial response and a moderate astrocytic response, which were accompanied by a decrease in lipid content. At 15 weeks of chronic glaucoma, these changes were more intense and included axonal changes, without affecting collicular neuron number. Minocycline prevented some of the alterations induced by chronic ocular hypertension, and the anterograde transport deficit to the CS. As for the NIF-VS, chronic glaucoma induced a significant reduction of mRGCs number, melanopsin levels, and anterograde transport to the SCN and OPN, as well as a decrease in consensual PLR. In summary, the results obtained in this Thesis work provide relevant information regarding the participation of post-retinal visual areas in glaucomatous damage. Keywords: retinal ganglion cells, glaucoma, glia, ocular hypertension, minocycline, conscious visual system, non-image forming visual system, axonal transport.

"Estudio de los cambios transcriptómicos producidos por infecciones virales en plantas, rol de fitohormonas y su vinculación con la progresión de síntomas" (2013). Manacorda, Carlos Augusto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las pérdidas en cultivos ocasionadas por virus dependen mayormente de la severidad de los síntomas producidos. La comprensión de los mecanismos moleculares que subyacen a la producción de síntomas es de importancia para el desarrollo de estrategias que permitan reducir las pérdidas ocasionadas por fitovirus. Mediante el uso de cepas de virus de los géneros Tobamovirus y Potyvirus, el presente trabajo analizó la relación entre la severidad de sus síntomas en Nicotiana tabacum y Arabidopsis thaliana con su capacidad para alterar diferencialmente parámetros morfológicos, fisiológicos y transcriptómicos relevantes para los procesos de desarrollo y respuestas a estrés, hormonas y defensa. Los resultados indicaron que a tiempos tempranos de la infección en tejidos sistémicos, cuando aún no son visibles los síntomas característicos de la infección, se producen cambios moleculares importantes. Éstos incluyen alteraciones en la acumulación de metabolitos vinculados con procesos de señalización y defensa, así como cambios transcriptómicos en genes clave en redes de senescencia, defensa y respuesta a hormonas. La respuesta de microRNAs con importantes roles en el desarrollo ante tratamientos con hormonas y virus exhibió un componente transcripcional y muchos de estos genes reguladores evidenciaron un patrón bifásico de cambios, sugiriendo que los procesos que conducen a su alteración en etapas tempranas de la infección difieren de los que condicionan la misma a etapas avanzadas. En Arabidopsis, gran parte de las diferencias en alteraciones fisiológicas y de síntomas inducidas por distintas cepas de un Potyvirus se perdieron en plantas mutantes para la vía del ácido salicílico. A la luz de estos hallazgos, se propone un mecanismo por el cual la retroalimentación entre ácido salicílico y especies reactivas de oxígeno determina la activación de genes clave en los procesos de desarrollo y senescencia.

Abstract:
Losses on crops caused by virus mostly depend on symptoms severity. The understanding of the molecular mechanisms underlying the production of symptoms is important for the development of strategies that will reduce the losses caused by plant virus. By using viral strains of virus of the genus Tobamovirus and Potyvirus, this study analyzed the relationship between the severity of their symptoms in Nicotiana tabacum and Arabidopsis thaliana with their ability to differentially alter physiological, morphological and transcriptomic parameters relevant to the processes of development and responses to stress, hormones, and defense. The results indicated that at early times of infection in systemic tissues, when the characteristic symptoms of the infection are still not visible, important molecular changes occur. These include alterations in the accumulation of metabolites linked to processes of signaling and defense, as well as transcriptomic changes in key genes in senescence, defense and response to hormones networks. The response of microRNAs with important roles in development following treatment with hormones and viruses exhibited a transcriptional component and many of these regulatory genes showed a biphasic pattern of changes, suggesting that the processes that lead to their alteration at early stages of infection differ from which condition it to advanced stages. In Arabidopsis, much of the differences in physiological changes and symptoms induced by different strains of a Potyvirus were lost in mutant plants for salicylic acid pathway. In the light of these findings, a mechanism is proposed by which the feedback between salicylic acid and reactive oxygen species determines the activation of key gen es in the processes of development and senescence.

"Estudio de los caminos de señalización involucrados en la terminación de la señal de c-fos. Apagado de la activación a nivel del ARN mensajero" (2012). Degese, María Sol. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La llegada de distintos tipos de señales a la superficie de las células altera la expresión génica mediante la activación de distintos caminos de transducción de señales. En este trabajo, nos enfocamos en el estudio de estímulos proliferativos y en como estos alteran la expresión del gen de respuesta inmediata, c-fos, factor de transcripción considerado como un proto-oncogén. Si bien tanto mensajero como la proteína Fos están ausentes en la mayor parte del ciclo celular, ambos aparecen y desaparecen rápidamente luego del estímulo. Nos hemos propuesto investigar la regulación de la estabilidad del ARN mensajero de c-fos dada por MAPKs. Una de las proteínas reguladoras de la estabilidad de los ARNm en la que centramos nuestro estudio es HuR, la cual se une al mensajero de c-fos en su región ARE o rica en adeninas y uracilos presente en la parte 3´UTR. Encontramos que p38 SAPK regula la asociación de HuR promoviendo su liberación del ARNm y llevándolo a degradación. Además p38 SAPK inhibe la fosforilación de HuR, sugiriendo la posible acción de alguna fosfatasa p38 dependiente. Encontramos también que KSRP se uniría al ARE de c-fos en los mismos sitios que HuR y su asociación puede revertir la estabilización dada por HuR o por la inhibición de p38, sugiriendo un rol positivo en la degradación del ARNm de c-fos.

Abstract:
Signals arriving to the cell surface may alter gene expression through the activation of different signaling pathways. In this work we focus in the study of proliferative stimuli and how they alter the expression of the immediate-early responsive gene c-fos, a transcription factor considered, as well, a proto-oncogene. Both messenger RNA and Fos protein are absent in most of the cell cycle, but they appear and disappear very fast upon stimulation. We have proposed to investigate the MAPKs´-dependent mRNA stability regulation. One of the most important regulators of the mRNA stability in which we focus our study is HuR that binds to the c-fos mRNA´s ARE (Adenine and uracil rich region) present in its 3´UTR. We found that p38 SAPK regulates the binding of HuR, promoting its dissociation from the mRNA and leading it to degradation. Besides, p38 SAPK inhibits HuR phosphorylation, suggesting a possible action of a p38 dependent phosphatase. We also found that KSRP may be binding to the c-fos ARE in the same sites as HuR and its association to this region is sufficient to revert the stabilization due both to HuR binding and to p38 activity inhibition, suggesting a positive role in c-fos mRNA degradation process.

"Estudio de los carragenanos de plantas cistocárpicas del alga roja Gigartina skottsbergii" (1994). Ciancia, Marina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo de Tesis se realizó el estudio estructural de los carragenanos de gametofitos femeninos del alga roja Gigartina skottsbergii y se profundizaron los conocimientos de la estructura fina de este tipo de polisacáridos relacionándola con sus propiedades físicas. En este mismo sentido, se estudió la reaccción de ciclación de las unidades de α-galactosa 6-sulfato y 2,6-disulfato en medio alcalino que mejora el poder gelificante de dichos productos. En la Primera Parte se trataron los siguientes temas: 1.- Se cubrieron ciertos aspectos generales que incluyen: a) Presentación de los tipos de estructuras caracteristicas de los galactanos sulfatados de algas rojas; b) descripción del ciclo de vida de estas algas; c) historia reciente del estudio estructural de los carragenanos a partir del descubrimiento que los polisacáridos producidos por gametofitos y tetraesporofitos de las algas pertenecientes a la familia Gigartinaceae son diferentes; d) teorias acerca de la biosíntesis de los carragenanos; e) estudios previos realizados sobre los carragenanos de Gigartina skottsbergii y f) teorias sobre el modo en que actúan los polisacáridos polianiónicos como agentes antivirales. 2.- Una reseña de los estudios realizados sobre el comportamiento de estos polisacáridos en solución, en particular, sobre el proceso de gelificación. 3.- La espectroscopia de resonancia magnética nuclear es una herramienta fundamental en el estudio estructural de los polisacáridos de algas rojas. La resonancia magnética nuclear de ¹³C se utiliza desde hace muchos años, sin embargo, en los últimos tiempos se han aislado nuevas estructuras cuyos espectros han sido asignados. Sólo recientemente se comenzó a usar la espectroscopia de resonancia magnética nuclear protónica en el estudio estructural de galactanos sulfatados de algas rojas y todavia sus aplicaciones son limitadas; se describieron los avances logrados hasta el momento. 4.- Una de las formas de realizar el estudio de la estructura fina de los polisacáridos de algas rojas es degradarlos parcialmente y luego analizar los fragmentos obtenidos. Se realizó una revisión de las aplicaciones de la reacción de autohidrólisis al estudio estructural de polisacáridos, asi como de los conocimientos con que se contaba acerca de la selectividad de la misma, comparándola con las reacciones de hidrólisis ácida producida por un ácido externo. 5.- La reacción de ciclación de las unidades de α-galactosa 6-sulfato y 2,6-disulfato de los carragenanos para dar 3,6-anhidrogalactosa y 3,6-anhidrogalactosa 2-sulfato es de fundamental importancia para aumentar el poder gelificante de estos polisacáridos. Sin embargo, esta reacción no habia sido estudiada hasta el momento. Se describieron los conocimientos existentes acerca de este tipo de reacciones, fundamentalmentesobre derivados de glicósidos tosilados en distintas posiciones. En la Segunda Parte se realizó la descripción y discusión de los resultados que comprende los siguientes puntos: 1.- Aislamiento, purificación de los carragenanos y fraccionamiento con cloruro de potasio del producto obtenido en la primera extracción (rend. 49,1% del peso seco del alga). Se obtuvieron tres fracciones que se analizaron (1c1, rend. 42,6%, rango de precipitación 0,30-0,31 M KC1; 1C2, 3,5% 0,40-0,42 M KCl y 1C3 53,9%, soluble en KCl 2,00 M). El estudio estructural por metilación y espectroscopia de r.m.n.-¹³C y -¹H mostró que 1C1 y 1C2 son carragenanos kappa/iota, aunque ambos presentan pequeños porcentajes de unidades de α-galactosa 6-sulfato y 2,6-disulfato y cierto número de unidades inusuales; 1C3 es un carragenano mu/nu parcialmente ciclado. Los resultados obtenidos evidencian la relación biosintética entre los carragenanos gelificantes y solubles: Las unidades de 3,6-anhidrogalactosa 2-sulfato presentes en 1C1 y 1C2 se forman a partir de los residuos de α-galactosa 2,6-disulfato de 1c3. Por otra parte, las unidades de 3,6-anhidrogalactosa que se encuentran en 1C3 se formarían selectivamente a partir de un hipotético precusor común mu/nu. Además, la secuencia biosintética 1C3-->1C1 involucraría un paso de despolimerización. 2.- La reacción de ciclación de las unidades de α-D-galactosa 6-sulfato y 2,6-disulfato para dar 3,6-anhidro-α-D-galactosa y 3,6-anhidro-α-D-galactosa 2-sulfato, respectivamente es muy importante tanto desde el punto de vista académico como industrial. Se trata de una reacción de pseudo primer orden que depende de la concentración de álcali, la temperatura y la fuerza iónica del medio. A partir de la variación de esta constante de velocidad en función de la concentración de hidróxido de sodio a 60°C fue posible calcular la verdadera constante de segundo orden para la reacción (k2 = 5,2 x 10ˉ4 1 molˉ¹ sˉ¹). Por otra parte, la reacción es mucho más rápida para los carragenanos mu/nu que para los lambda. Este hecho tiene significado desde el punto de vista industrial, ya que son los primeros los que dan lugar a productos gelificantes por medio del tratamiento alcalino. Luego, en mezclas naturales obtenidas de arribazones bastaría con continuar la reacción sólo hasta obtener ciclación de las unidades de α-galactosa 6-sulfato y 2,6-disulfato de los carragenanos de la familia kappa, aún cuando estas unidades en los carragenanos de la familia lambda no se hayan ciclado. Mayor tiempo de reacción no mejora las propiedades de los carragenanos, sino que puede llevar a degradación del producto con la concomitante disminución del poder de gelificación. Algunos autores llevan a cabo la extracción de los carragenanos en medio alcalino; hay que tener en cuenta que los productos aislados en estas condiciones pueden ser diferentes de los que se encuentran originariamente en la planta, principalmente, si se busca extraer conclusiones acerca de la biosintesis de estos productos. Se realizó el tratamiento alcalino preparativo de los carragenanos 1C1, 1C2 y 1C3 y posterior subfraccionamiento con cloruro de potasio de los derivados mayoritarios (1C1T y 1C3T). Tanto los productos modificados como las fracciones obtenidas se analizaron. Un nuevo fraccionamiento de 1C3T mostró que este método no era tan reproducible como se pensaba anteriormente, a pesar de haber cuidado las condiciones en que se llevó a cabo. Sin embargo, el patrón general de precipitación se mantuvo: además de las fracciones que precipitaban a bajas concentraciones de cloruro de potasio, se obtuvieron pequeñas cantidades de polisacáridos que gelificaban a concentraciones intermedias, asi como una fracción que permanecía soluble. El estudio estructural de las fracciones insolubles indicó una estructura kappa/iota; el caracter iota aumentaba con el incremento de la solubilidad. Para las fracciones intermedias se encontró una estructura kappa/iota (1C3T5 0,80-0,90 M KCl) y iota "pura" (IF4, 1,10-1,20 M KCl) a pesar de su alta solubilidad en soluciones de cloruro de potasio. Se descartó que este comportamiento se deba a un peso molecular bajo, ya que por r.m.n.-¹³C no se detectaron las señales correspondientes a los extremos reductores. La fracción soluble en cloruro de potasio 2,00 M presenta una estructura diferente a la de las otras fracciones. Se trata de un galactano sulfatado que contiene D- y L-galactosa e importantes cantidades de cadenas laterales de unidades de galactosa y xilosa. 3.- Se realizó la autohidrólisis de 1C1. El estudio de la selectividad de dicha reacción indicó que, ademásde la ruptura de las uniones 3,6-anhidrogalactosidicas (que habia sido determinada anteriormente), también se producía la hidrólisis de las uniones α-galactosidicas cuando las mismas llevaban sulfato en las posiciones 2 y 6; en cambio ésto no sucedía cuando dicha unidad se hallaba sulfatada sólo en la posición 6. Por otra parte, el grupo sulfato en C-2 no era completamente estable en las condiciones en que se realizaba la reacción. Se efectuaron ensayos preliminares de separación de los oligosacáridos obtenidos. La degradación parcial por autohidrólisis resultó una herramienta alternativa para el estudio estructural de carragenanos, ya que los productos obtenidos dan soluciones acuosas concentradas de baja viscosidad, adecuadas para realizar espectros de r.m.n.-¹³C con equipos de baja resolución y a temperatura ambiente. Asi, a partir del conocimiento de la selectividad de la reacción, se puede deducir la estructura del polisacárido de partida. 4.- Se determinó la actividad antiviral de los carragenanos 1C1, 1C2 y 1C3, así como de sus derivados tratados con álcali. Todos resultaron activos hacia el virus Herpes simplex tipo 1. Sin embargo, los productos de menor peso molecular no fueron activos en las mismas condiciones. En la Tercera Parte se describieron los materiales y métodos utilizados.

"Estudio de los ciclones explosivos sobre la región sur de Sudamérica" (2004). Possia, Norma E.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En base a los análisis del European Centre for Medium Range Weather Forecast, en esta tesis se encara el estudio de la formación y desarrollo de los sistemas ciclónicos explosivos a través de dos situaciones particulares. Una de ellas es un ciclón marítimo, debido a que estos son los más frecuentes y la segunda situación es un ciclón terrestre ya que son los que provocan mayores perjuicios económicos. En la misma se analizan los procesos responsables de la génesis y la estructura de estos sistemas a través de la evaluación de las ecuaciones del sistema hidrodinámico que rige el movimiento atmosférico. En el caso continental se incluye además, un análisis de las componentes ageostróficas. Finalmente, como no hay una climatología de este fenómeno en la región, se identifican los casos ocurridos en el período 1979 - 1993 y se analiza su ubicación espacial y temporal. La definición elegida para este estudio es la propuesta por Sanders y Gyakum. En 1980 estos autores definieron los ciclones explosivos o bombas como aquellos sistemas donde la caída de presión a nivel del mar es de un bergeron (24 hPa en 24 horas). Como el descenso de presión no tiene el mismo impacto en cualquier latitud, estos autores modularon a este valor multiplicándolo por un factor que combina la latitud media donde se desarrolla explosivamente el ciclón y los 60º. Aunque los ciclones que sufren un período de rápido desarrollo parecen tener características comunes, no hay acuerdo si existe un único factor detonante de tal desarrollo y cual es ese factor. lncluso hay trabajos que señalan que en distintas regiones geográficas difieren las causa dinámicas que las producen. Por otro lado, el estudio de casos particulares muestra que hay distintos procesos que las pueden producir. A pesar de que este tipo de evento ha sido ampliamente estudiado en el hemisferio norte, en la región sudamericana la situación no es la misma. Debido a la escasez de trabajos que estudian las ciclogénesis explosivas en el hemisferio sur, surge el poco conocimiento que se tiene de los distintos mecanismos que puedan favorecer la generación y el desarrollo de este fenómeno en la región sur de Sudamérica. Como señalan Gan y Rao (1996), es necesario realizar investigaciones sobre casos particulares para delinear los procesos intervinientes. Las dos situaciones estudiadas tienen características comunes. Ambos sistemas comienzan como un ciclón baroclínico, con advección de vorticidad ciclónica y divergencia en altura actuando sobre una zona baroclínica en capas bajas. Los ciclones explosivos estudiados presentan fuerte divergencia en niveles altos combinada con una masa de aire cálido y húmedo capas bajas. Esta masa de aire asociada con las velocidades verticales ascendentes muy intensas producen gran liberación de calor por condensación. Esto trae como consecuencia que ambos ciclones tengan un centro caliente. En las situaciones estudiadas este calor liberado aparece como el principal responsable del desarrollo explosivo. Las componentes ageostróficas presentan valores del mismo orden de magnitud que el viento mismo. Esto indica que en estos casos actuaron procesos de escala subsinóptica. En el caso continental cuando se divide a las componentes ageostróficas según sus efectos físicos se encuentra que en la divergencia en niveles altos actúan todas las fuentes de ageostrofismo. En cambio, niveles bajos la convergencia se debe principalmente a las variaciones temporales del viento. La componente de advección vertical del viento interviene en la verticalización del sistema y colabora en su desplazamiento. En la serie de los 15 años de reanálisis de Centro Europeo se encontraron 200 ciclones explosivos al sudeste de Sudamérica, de los cuales solo el 3 % se desarrolló sobre el continente. Son más frecuentes en invierno y su posición migra con las estaciones durante el año.

Abstract:
Based on the analyses of the European Centre for Medium Range Weather Forecast, this thesis studies the formation and development of explosive cyclonic systems in two specific cases. One is a sea cyclone, being the most frequent type and the other is a land cyclone, since these cause the greatest economic losses. The processes responsible for the genesis and structure of these systems are studied analyzing the hydrodynamic system equations that govern atmospheric movement. The ageostrophic components of the land case are also analyzed. Finally, there being no climatology of this phenomenon in the region, the events occurred which occurred between 1979 and 1993 are identified and their temporal and spatial location is analyzed. The methodology selected in this study is the one proposed by Sanders and Gyakum, who in 1980 defined explosive cyclones or bombs as one bergeron (24 hPa/ 24 hours) sea level pressure drops. As the impact of pressure drops depends on latitude, these authors modulated this value by multiplying it by a factor that combines the mean latitude where the cyclone develops explosively and 60º. Although rapidly developing cyclones seem to have common characteristics, there is no agreement on whether there is only one triggering factor and what such factor is. Some studies state that the dynamic causes differ depending on the geographic regions. Studies on specific cases show that different processes can generate such cyclones. This kind of events has been widely studied in the Northern Hemisphere, not so in South America. Because explosive cyclogenesis studies in the southern hemisphere are scarce, the different mechanisms that can favor the formation and development of this phenomenon in southern South America are barely known. According to Gan and Rao (1996), specific case studies are necessary in order to determine the processes involved. The cases analyzed have common features. Both systems start with a baroclinic cyclone with cyclonic vorticity advection and divergence at upper levels, which act over a lower level baroclinic zone. The explosive cyclones studied present strong upper level divergence combined with a warm, moist air mass at low levels. This air mass associated to very rapid ascending vertical velocities produces great heat release due to condensation. Consequently, both cyclones have warm center. In the situations studied, released heat appears to be the major cause of explosive development. Values of ageostrophic components have the same order of magnitude as the wind. This indicates that subsynoptic-scale processes took part in these events. When breaking the land case into ageostrophic components according to their physical effects, all ageostrophy sources are found to be acting in the upper level divergence. At low levels, convergence is mainly due to temporal wind variations. The vertical advection component of wind takes part in the vertical positioning of the system and contributes to its displacement. In the 15-year reanalysis series of the European Center, 200 explosive cyclones were found, only 3 % of which took place over the continent. They are more frequent in winter and their location changes with the seasons along the year.

"Estudio de los contenidos de elementos inorgánicos de interés ambiental en suelos afectados por derrames de combustibles derivados del petróleo" (2015-04-23). Rinaldi, Diego Santiago. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Este trabajo presenta la determinación de los contenidos de 14 elementos (Ba, Be, Cd, Co, Cr, Cu, Fe, Mn, Mo, Ni, Pb, Sb, Ti y Tl) en suelos correspondientes a la ex-usina de la ciudad de Corrientes. Los objetivos propuestos para la realización de este trabajo fueron: 1) Conocer el grado real de aporte de elementos inorgánicos de interés ambiental producido por el uso histórico de estos terrenos. 2) Realizar un aporte a la mejora la legislación vigente en términos de establecer valores de referencia con respecto a un caso real de la región. 3) Brindar una nueva mirada en relación con los peligros que puede generar en el ecosistema, la aplicación de medidas ambientales limitadas tales como los tratamientos biológicos o rellenado de terrenos contaminados. La técnica analítica instrumental elegida ha sido la espectroscopía de emisión óptica por plasma acoplado inductivamente (ICP-OES) que mediante estudios de validación metodológica demostró ser adecuada para este tipo de tareas. Dentro de los alcances del presente trabajo se pudo demostrar: Los resultados obtenidos resultaron satisfactorios. Los mismos se compararon con análisis paralelos de muestras seleccionadas aleatoriamente por espectrometría de masas acoplada a plasma inductivo, que es considerada como técnica de referencia. Por comparación con los contenidos elementales de suelos testigos ubicados en predios vecinos, se determinó una elevada contribución de Fe, Mn, Cu y Ti en los suelos estudiados posiblemente causada por el uso histórico de los mismos. Adicionalmente, el proceso de biorremediación no permitió su corrección. Si bien estos elementos no poseen efectos tóxicos en la mayoría de los seres vivos, está demostrado que a elevadas concentraciones pueden causar alteraciones en la biota. Existe un aporte significativo a la concentración de elementos tóxicos en los suelos problema estudiados (Cd, Pb, Sb y Tl). Estos elementos resultan de gran preocupación dado que pueden causar efectos tóxicos aún a bajas concentraciones, además de que provocan alteraciones a largo plazo debido a sus propiedades acumulativas en la biota que tiene contacto con los mismos. La legislación provincial fija un tope máximo del contenido de hidrocarburos totales, siendo el único parámetro que se evalúa en suelos remediados. Sin embargo esta legislación no establece valores límites al aporte de elementos inorgánicos en suelo, situación que hasta el momento era totalmente ignorada y que puede generar conflictos a futuro como consecuencia de la contaminación progresiva del suelo y su limitación para posteriores usos. Finalmente, los resultados obtenidos en este trabajo fueron comparados con datos informados en la bibliografía actual de distintos lugares alrededor del mundo. No se pudieron encontrar datos referidos a las composiciones multielementales de suelos correspondientes a la zona de estudio. Por lo que este trabajo realiza un importante aporte al conocimiento de la composición mineral y sus alteraciones por usos relacionados al almacenamiento de combustibles derivados del petróleo.

Abstract:
This work presents the determination of 14 mineral contents (Ba, Be, Cd, Co, Cr, Cu, Fe, Mn, Mo, Ni, Pb, Sb, Ti and Tl) in soils corresponding to the ex-factory of the city of Corrientes. The aims of this study were: 1) Control the real degree of contribution of inorganic elements of environmental interest produced by the historical use of these lands 2) Contribute to improving the legislation for establishing reference values about a real case in the region. 3) Provide a new perspective regarding the dangers that can generate to the ecosystem, the application of limited environmental measures such as biological or contaminated land filling treatments. The instrumental analytical technique chosen was the inductively coupled plasma optic emission spectroscopy (ICP-OES) that proved to be suitable for this tasks by methodological validation study. The main goals of the work can be summarized as follows: The results obtained were validated by parallel analysis of randomly selected samples determined by using mass spectrometry with inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS) used as reference technique. The concentrations of Fe, Mn, Cu and Ti in the samples were higher than the elemental content in soils witnesses located on neighboring sites. This fact suggested the bioremediation process does not allow correction. While these elements do not have toxic effects in most living organism, high concentrations of these elements may cause changes in biota. There is a significant concentration of toxic elements in soils studied problem (Cd, Pb, Sb and Tl) contribution. These elements are of great concern because they can cause toxic effects even at low concentrations, besides causing long-term changes due to cumulative properties in biota having contact with them. Significant contributions of toxic elements (Cd, Pb, Sb and Tl) were determined. These elements are of great concern because they can cause toxic effects even at low concentrations, besides causing long-term changes due to cumulative properties in biota. Currently legislation sets a maximum limit of 2% for total hydrocarbons. This is the only feature that is evaluated in soil remediation. However this legislation, not establish guide values about the contribution of heavy metals in soil, a situation that was ignored and may cause conflicts in the future because of the progressive contamination of soil and its limitation for future use. Finally, the results obtained in this study were compared with data reported in the current literature of different locations worldwide. We were unable to find any studies concerning the multielement soil compositions of the study area. So, this work makes an important contribution to knowledge about mineral composition and disturbances related to storing petroleum fuels.

"Estudio de los derivados 2-halogenados del Fluorene y de la Fluorenona" (1928). Chanussot, Pablo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de los efectos antiinflamatorios de 15-deoxi-delta 12,14-prostaglandina J2 e IL-10 en miocardiocitos infectados con Trypanosoma cruzi. Mecanismos moleculares involucrados" (2012). Hovsepian, Eugenia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la fase aguda de la enfermedad de Chagas, la infección por T. cruzi produce una intensa respuesta inflamatoria en diversos tejidos del organismo incluso en el corazón, donde los miocardiocitos constituyen un importante blanco. Si bien la reacción inflamatoria es importante para el control inicial de la infección, un desequilibrio o una mala resolución de la misma puede generar daños y alteraciones en la funcionalidad cardíaca. Las células cardíacas responden a la infección mediante la expresión de enzimas inflamatorias como óxido nítrico sintasa 2 (NOS2) y metaloproteasas (MMPs) y citoquinas como TNF-α e IL-6. Esta respuesta está mediada por la activación de vías de señalización que incluyen al factor de transcripción nuclear-ĸB (NF-ĸB) y a las quinasas reguladas por señales extracelulares-proteínas quinasas activadas por mitógenos (ERK1/2-MAPK), cuya participación es fundamental en procesos inflamatorios. Los receptores activados por factores de proliferación peroxisomal γ (PPARγ) son factores de transcripción dependientes de ligando que han sido implicados en la regulación del metabolismo lipídico y de procesos inflamatorios. En este trabajo evaluamos el aporte de 15-deoxi-Δ12,14-prostaglandina J2 (15dPGJ2), ligando natural de PPARγ y de la citoquina antiinflamatoria IL-10 en la resolución de la respuesta inflamatoria en cultivos primarios de miocardiocitos neonatales de ratón infectados con la cepa letal pantrópica/reticulotrópica (RA) de T. cruzi. Los resultados de esta evaluación evidencian que 15dPGJ2 es capaz de inhibir la expresión y actividad de diferentes enzimas inflamatorias como NOS2, MMP-9 y MMP-2, así como la expresión de las citoquinas proinflamatorias TNF-α e IL-6 inducidas por la infección. Los efectos inhibitorios ejercidos por 15dPGJ2 involucran participación de mecanismos dependientes e independientes de PPARγ. La contribución de su receptor en los efectos ejercidos por 15dPGJ2 fue confirmada al silenciar la expresión mediante ARN de interferencia (siARN-PPARγ). Por otro lado, a partir de la utilización de inhibidores específicos de ERK1/2 y de NF-ĸB, demostramos que 15dPGJ2 también ejerce sus efectos de manera independiente a PPARγ, a través de estas vías. IL-10 es una de las principales citoquinas antiinflamatorias y fue identificada originalmente como un factor inhibidor de la síntesis de citoquinas proinflamatorias y modulador de ciertas funciones asociadas a la activación de macrófagos y/o monocitos. En este trabajo se describe que la adición de IL-10 exógena inhibe la activación de las vías de señalización de ERK1/2 y de NF-ĸB y reduce los niveles de expresión y actividad de NOS2, MMP-9 y MMP-2, así como la expresión de TNF-α e IL-6 inducidas por la infección. La señalización por IL-10 a través de su receptor promueve fosforilación de STAT3, el cual actúa como factor de transcripción induciendo la expresión de proteínas supresoras de la señalización por citoquinas-3 (SOCS-3). Tanto la infección con T. cruzi como IL-10 inducen fosforilación de STAT3 y la expresión del ARNm de SOCS-3. El silenciamiento de la expresión de esta proteína mediante ARN de interferencia (siARNSOCS- 3) pone en evidencia la participación de la vía STAT3/SOCS-3 en los efectos ejercidos por IL-10. El conocimiento más profundo sobre el papel de ligandos de PPARγ y de IL-10 podría ser de gran utilidad para formular estrategias alternativas o coadyuvantes de la terapéutica clásica en la infección por T. cruzi.

Abstract:
In the acute phase of Chagas disease, T. cruzi infection produces an intense inflammatory response in different tissues including the heart where cardiomyocytes are an important target. Although the inflammatory reaction is important for the initial control of the infection, an imbalance or poor resolution can generate damage and impaired cardiac function. Cardiac cells respond to infection by the expression of inflammatory enzymes like nitric oxide synthase 2 (NOS2) and metalloproteases (MMPs) and cytokines such as TNF- α and IL-6. This response is mediated by the activation of nuclear factor-кB (NF-кB) and extracellular signal-regulated kinases-mitogen-activated protein kinase (ERK1/2-MAPK) pathways, whose participation is essential in inflammatory processes. Peroxisome proliferator-activated receptors γ (PPARγ) are ligand-dependent transcription factors that have been implicated in the regulation of lipid metabolism and inflammatory processes. In this study we evaluated the contribution of 15-deoxy-Δ12,14-prostaglandin J2 (15dPGJ2), natural PPARγ ligand, and the antiinflamatory cytokine IL-10 in primary cultures of neonatal mouse cardiomyocytes infected with the lethal pantropic/reticulotropic T. cruzi strain (RA). The obtained results show that 15dPGJ2 is able to inhibit the expression and activity of different inflammatory enzymes such as NOS2, MMP-9 and MMP-2 as well as the proinflammatory cytokines TNF-α and IL-6 induced by T. cruzi infection. 15dPGJ2 antiinflammatory effects involve participation of PPARγ-dependent and - independent mechanisms. PPARγ contribution in 15dPGJ2 effects was confirmed by silencing PPARγ expression with small interfering RNA (PPARγ-siRNA). On the other hand, the use of specific ERK1/2 and NF-кB pharmacological inhibitors demonstrated that 15dPGJ2 can also exert its effects through these pathways. IL-10 is one of the most important antiinflammatory cytokines and has been originally identified as a cytokine synthesis inhibitor factor and modulator of certain functions associated with macrophages and/or monocytes activation. This work describes that exogenous addition of IL-10 inhibits ERK1/2 and NF-кB activation and reduces NOS2, MMP-9 and MMP-2 expression and activities as well as TNF-α and IL-6 expression after T. cruzi infection. IL-10 signaling through its receptor promotes STAT3 phosphorylation, which acts as a transcription factor inducing the expression of suppressor of cytokine signaling-3 (SOCS- 3). Both T. cruzi infection and IL-10 treatment promote STAT3 phosphorylation and SOCS- 3 mRNA expression. SOCS-3 silencing with small interfering RNA (SOCS-3-siRNA) reveals STAT3/SOCS-3 signaling participation in IL-10 effects. A better understanding of the role exerted by PPARγ ligands and IL-10 could be useful in finding new or alternative strategies which could replace the classic parasiticidal therapeutic in T. cruzi infection.

"Estudio de los efectos de diferentes fuentes de error sobre la calidad de los análisis generados por un sistema de asimilación por filtros de Kalman" (2016-03-04). Saucedo, Marcos Adolfo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El presente trabajo de tesis plantea la realización de experimentos idealizados de asimilación de datos basado en un Filtro de Kalman por ensambles (EnKF) sobre un dominio regional centrado en Sudamérica. En particular se emplea el algoritmo conocido como Local Ensemble Transform Kalman Filter (LETKF) acoplado al modelo numérico Weather Research and Forecasting (WRF). Los experimentos exploran la sensibilidad del sistema de asimilación frente a los errores de modelo y los errores presentes en las condiciones de borde lateral. Los resultados indican que las regiones tropicales son más sensibles a los errores de modelo, mientras que las latitudes medias están más directamente influenciadas por los errores en las condiciones de borde lateral. Para reducir los errores del análisis se evalúan diferentes metodologías que buscan representar de manera explícita los errores en el sistema de asimilación: la inflación multiplicativa adaptativa estimada, los ensambles físicos y la introducción de perturbaciones en las condiciones de borde lateral. El empleo de dichas técnicas permite reducir el del error del análisis y contribuye a mejorar la representación de su incertidumbre. Sin embargo, los mejores resultados se obtienen al combinar dichas técnicas de forma simultánea. Finalmente, se llevan adelante experimentos utilizando observaciones reales en los que se explora el impacto de la resolución del modelo en la calidad del análisis y de los pronósticos a corto plazo. En estos experimentos se encuentra que el aumento de la resolución del modelo numérico genera una mejora tanto de la calidad del análisis como del pronóstico resultante. Sin embargo, los resultados sugieren que un tratamiento adecuado de las diferentes fuentes de incertidumbre que afectan a un sistema de análisis - pronóstico regional, junto con la incorporación de una mayor cantidad de observaciones, podría producir un impacto mayor sobre la calidad del análisis.

Abstract:
The present work proposes the realization of idealized data assimilation experiments based on an Ensemble Kalman Filter (EnKF) in a regional domain centered in South America. In particular, the Local Ensemble Transform Kalman Filter (LETKF) coupled with the Weather Research and Forecasting (WRF) model is employed. These experiments explore the sensitivity of the assimilation system to the model and lateral boundary condition errors. Results indicate that tropical regions are more sensitive to model errors, whereas mid-latitudes are more affected by lateral boundary condition errors. In order to reduce analysis errors different methodologies that seek to represent explicitly errors present in the assimilation system are employed: the estimated adaptive multiplicative inflation, perturbed physic ensemble and perturbed lateral boundary conditions. The employment of these techniques provides a reduction of the analysis error and contributes to improve the representation of the uncertainty. Nevertheless, the best results are obtained when these techniques are employed simultaneously. Finally, data assimilation experiments using real observations exploring the impact of model’s horizontal resolution in both the analysis and short term forecast are carried on. In these experiments it is found that the increment in model resolution results in an improvement of both the analysis and the forecast. However, results suggest that an adequate treatment of the different error sources that affect a regional analysis - forecast system and the inclusion of a greater amount of observations in the assimilation process further enhance the improvement on the analysis quality.

"Estudio de los efectos de inflamación prenatal sobre la neurogénesis adulta, sus comportamientos asociados y sus mecanismos de acción" (2010). Graciarena, Mariana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La exposición prenatal a estímulos pro-inflamatorios influye sobre diversas funciones del cerebro adulto. Además, estímulos pro-inflamatorios han mostrado efectos adversos sobre la neurogénesis adulta. En base a estos antecedentes, nuestra hipótesis de trabajo fue que un estímulo pro-inflamatorio durante el período prenatal provoca una disminución permanente de la neurogénesis adulta. Para testar esta hipótesis, ratas Wistar preñadas recibieron inyecciones subcutáneas de un estímulo pro-inflamatorio, el lipopolisacárido bacteriano (LPS), en sus días 14, 16, 18 y 20 de gestación. Las crías adultas prenatalmente tratadas con LPS mostraron una reducción en la cantidad total de células en proliferación y en la diferenciación neuronal en el giro dentado, que resultan en una menor neurogénesis total. Sin embargo la proliferación de progenitores neurales y la supervivencia celular se mantuvieron constantes. Además, el tratamiento prenatal con LPS provocó alteraciones en el desempeño de los animales en el test comportamental de Reconocimiento del Objeto Nuevo, un test que evalúa la memoria a corto plazo, y que ha sido previamente relacionado con la neurogénesis adulta. Evaluando cambios a nivel sistémico que expliquen la disminución de la neurogénesis adulta por el LPS prenatal, observamos que la exposición prenatal a LPS no afectó el funcionamiento basal del eje neuroendócrino Hipotalámico-Hipofisario-Adrenal. Por otra parte, el LPS administrado a las hembras en su preñez sí afectó los niveles de cuidado materno de las crías. Sin embargo, experimentos de adopción cruzada demostraron que los efectos del LPS prenatal sobre la neurogénesis adulta fueron independientes del cuidado materno recibido por las crías. El tratamiento prenatal con LPS provocó alteraciones permanentes en la composición del entorno o nicho neurogénico del GD adulto: a nivel celular, se observó una activación morfológica permanente de la microglía a estadíos intermedios. A nivel molecular, se observaron alteraciones agudas en la expresión de citoquinas en el cerebro fetal y una expresión disminuida del Factor Transformante de Crecimiento beta 1 (TGF-β1) específicamente en el GD de animales adultos. La sobreexpresión crónica de TGF-β1 en el GD adulto restauró los niveles disminuidos de neurogénesis a los niveles originales, equivalentes al grupo control, mientras que no aumentaron los niveles de neurogenesis en el grupo control. Además, la sobreexpresión bilateral de TGF-β1 restauró el desempeño en el test de Reconocimiento del Objeto Nuevo a los niveles del grupo control. La exposición adulta a LPS, al contrario de la exposición prenatal, provocó efectos transientes en la disminución de neurogénesis y la activación de microglía. Por otra parte, TGF-β1 mostró efectos pro-neurogénicos in vitro a través de la activación de su principal vía de señalización, la vía Smad 2/3. Estos resultados validan la hipótesis de trabajo. Además, destacan el período prenatal con una etapa de susceptibilidad a estímulos inflamatorios que ejercerán efectos a largo plazo sobre la neurogénesis adulta y comportamientos relacionados a través de alteraciones permanentes en la composición del nicho neurogénico, como la activación microglíal y la expresión disminuida de TGF-β1 en el GD. Por su parte, TGF-β1 resulta un modulador central de la disminución de los niveles de neurogénesis adulta y de comportamientos asociados a memoria por el LPS prenatal

Abstract:
Prenatal exposure to inflammatory stimuli is known to influence adult brain function. In addition, adult hippocampal neurogenesis is impaired by a local pro-inflammatory microenvironment. On this basis, we hypothesized that a pro-inflammatory insult during gestation would have negative effects on adult neurogenesis in the offspring. Pregnant Wistar rats received subcutaneous injections of lipopolysaccharide or saline every other day from gestational day 14 to 20. The adult offspring prenatally treated with LPS showed a decrease in the proliferating cells and the newborn neurons of the dentate gyrus, but no changes in progenitor cell proliferation and newborn neuron survival. Furthermore, prenatal LPS treatment impaired performance in the neurogenesis- dependent Novel Object Recognition test. Basal Hipothalamic-Pituitary-Adrenal functions were not altered by prenatal LPS exposure. Maternal care was impaired by prenatal LPS administration, but the effects on adult neurogenesis of the litter depended only on the prenatal treatment and not the amount of maternal care received, showing that maternal care did not contribute to the effects of prenatal LPS on adult neurogenesis. Prenatal LPS exposure caused permanent alterations in the neurogenic niche composition: rersistent microglíal activation and downregulated expression of transforming growth factor beta-1 (TGF-β1) occurred specifically in the adult hippocampus of animals treated prenatally with LPS. Importantly, chronic hippocampal TGF-β1 overexpression restored neurogenesis as well as recognition memory performance to control levels. TGF-β1 has shown to exert its pro-neurogenic effects through the canonical signaling pathway, Smad2/3. These findings validate our working hypothesis. In addition, they highlight the prenatal period as a temporal window of susceptibility to inflammatory stimuli that would cause long term alterations on adult neurogenesis and related behaviors through permanent alterations in the neurogenic niche composition, such as microglíal activation and reduced TGF-β1 expression in the dentate gyrus. TGF-β1, in turn, emerges as a central modulator in maintaining basal neurogenesis as well as memory-related behavior performance

"Estudio de los efectos de la orografía sobre la circulación atmosférica sinóptico-planetaria, en casos marcadamente barotrópicos y baroclínicos" (1987). Berbery, Ernesto Hugo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis se estudian las características más sobresalientes de la circulación general de la atmósfera en el hemisferio sur en la que hace a la dinámica de los efectos orográficos, particularizando en los fenómenos de naturaleza marcadamente barotrópica por un lado y marcadamente baroclínica por el otro. Para ello se desarrolla un modelo barotrópico con el esquema de Arakawa y Lamb, el cual tiene la capacidad de conservar la energía total y la enstrofía potencial del sistema y es estable aún en presencia de pendientes abruptas del terreno . El objeto de desarrallar este madelo es estudiar el efecto dinámico de la Cordillera de los Andes en dos fenómenos de estructura marcadamente barotrópica: las ondas estacianarias y los anticiclones de bloqueo. Se modifica también un madelo baroclínico en ecuaciones primitivas y coordenadas esféricas con la coordenada σ en la vertical: se ha extendido el recinto de integración a un hemisferio, incluyéndosele un filtro de Fourier para las altas latitudes, se le han modificado las condiciones de borde y se le ha incorporado la difusión horizontal y vertical. En este modelo, de 5 niveles en la vertical, se ha incorporado a la topografía como regiones de aire estanco y es empleado para la simulación de desarrollos ciclogenéticos. Las experiencias realizadas con estos modelos muestran que para lograr una correcta representación de los fenómenos es necesario emplear una orografía realzada (conocida como "envelope orography"). Las simulaciones de las ondas estacionarias indican que la orografía produce campos semejantes a los observados al sur de 45º S para invierno y al sur de 35º S para verano. Esta comparación es desde el punto de vista espectral. Regionalmente, los campos simulados coinciden cualitativamente con los observados entre 110/120º O y 10º E y al norte de 70º S para ambas estaciones, aunque la coincidencia es más pronunciada para el verano. De todos los continentes, América del Sur (con la cordillera de los Andes) es el más importante para definir la configuración de los campos simulados. La Antártida, entre 50 y 70º S también hace un aporte a las ondas. Las simulacianes de bloqueos muastran que el mecanismo de Kalnay-Rivas y Merkine (1981) mantiene su validez al ser extendido a un hemisferio con geometría esférica y con una topografía realiata. Este mecanismo, más que la iniciación del bloqueo, explicaría su intensificación y mantenimiento. La ciclogénesis a sotavento de los Andes resulta más profunda y más al norte que en el caso de ausencia de orografía. La orografía tendría el efecto de aumentar principalmente la acción ciclogenética del término de la advección de espesores en la ecuación del desarrollo, debido al bloqueo del flujo en las capas bajas.

"Estudio de los estados de agregación de reactivos organolíticos y de sus mecanismos de reacción : Desarrollo de secuencias "TANDEM" en síntesis orgánica" (2002). García, Graciela Viviana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los compuestos organolíticos son seguramente los intermediarios organometálicos más utilizados en síntesis orgánica, y además presentan estructuras de agregación fascinantes tanto en estado sólido como en solución, que le otorgan un rol protagónico en las reacciones en las que intervienen. Se realizó un estudio detallado sobre la reacción de adición de reactivos organolíticos a compuestos carbonílicos α,β-insaturados. La misma resultó fuertemente dependiente de las condiciones de reacción, por un estudio cuidadoso de las distintas variables, descubrimos que pueden modificarse de manera tal de transformar a esta reacción en una original secuencia tandem de adición-β-litiación-sustitución electrofílica que constituye una excelente metodología one pot para la síntesis de dihidrochalconas β-sustituidas con muy altos rendimientos. Con el objetivo de esclarecer el/los mecanismos de esta nueva secuencia se realizaron estudios detallados de distintas condiciones de reacción, uso de diversos reactivos y compuestos organolíticos. Los pasos principales se verificaron por aislamiento y caracterización de los intermediarios de reacción, estudios de intercambio isotópico, uso de atrapadores radicalarios y espectroscopía de RMN de mezclas de reacción. Estas investigaciones fueron de gran significación para un mayor conocimiento de la naturaleza de intermediarios y mecanismos de reacción que involucran reactivos organolíticos y para su aplicación en síntesis orgánica. Por otro lado, se sintetizó un rápido radical clock para estudiar eI mecanismo para el intercambio litio-halógeno entre compuestos organolíticos y haluros orgánicos. Los resultados obtenidos permitieron plantear un mecanismo de reacción y explorar las utilidades sintéticas de la misma. La caracterización completa del intermediario permitió la propuesta de una útil ciclización aniónica. Así, se diseñó una estrategia que permite la síntesis de 2,3-dihidrobenzofuranos sustituidos basada en una secuencia tandem de ciclización-γ-alquilación a partir de 2-bromofenil (E)-3-fenil-2-propenil éter.

Abstract:
The organolithium compounds are the most used organometallic intermediates in Organic Synthesis. These reagents have fascinating aggregation structures in both, solid state and solution, that play a key role in their reactivity. A thorough study of the addition reaction of organolithium reagents to α,β-unsaturated carbonyl compounds was carried out. The reaction resulted strongly dependent on the reaction conditions, which can be modificated to transform it in one original tandem sequence of addition-β-lithiation-electrophilic substitution. This sequence constitutes an excellent “one-pot" methodology for the synthesis of β-substituted dihydrochalcones in very high yields. In order to elucidate the reaction mechanism, studies of the reaction under different conditions, use of diverse reactives and organolithium compounds were then carried out. Isolation and characterisation of reaction intermediates, isotopic exchange, use of radical traps and NMR spectroscopy confirmed the key steps. These investigations were of relevance to get more insight into the nature of the intermediates and the mechanisms of reactions where organolithium reagents are involved. In addition, fast radical clocks were synthesized to study the mechanism of the lithium-halogen exchange between organolithium compounds and organic halides. The results allowed to postulate a reaction mechanism and investigate the synthetic utility. The full characterization of the intermediate allowed the proposal of a useful anionic cyclization. Thus, a new strategy for the synthesis of substituted 2,3-dihydrobenzofurans was designed, which is based in a tandem sequence of cyclization-γ-alkilation from 2-bromophenyl (E)-3-phenyl-2-propenyl ether.

"Estudio de los flujos turbulentos de energía y masa a través del uso de la metodología de covarianzas turbulentas sobre un ecosistema de marisma" (2016-03-30). Tonti, Natalia Edith. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las regiones templadas son las áreas de mayor concentración de población del planeta, por lo que sus ecosistemas están sujetos a la influencia humana. Por ejemplo, grandes áreas de bosques y pastizales han sido convertidas a la agricultura. Estos cambios en el uso de la tierra tienen el potencial de producir efectos importantes en los ciclos biogeoquímicos que regulan el equilibrio y dinámica de los ambientes naturales a través de los intercambios (flujos) de energía y masa (vapor y dióxido de carbono -CO2) entre la atmósfera y el ecosistema. Las marismas saladas son pastizales naturales costeros, ubicados en áreas preferenciales para el asentamiento urbano y por ende son vulnerables. Se consideran altamente productivas en energía y biomasa y son de sumo interés debido a las funciones que cumplen. El método de las covarianzas turbulentas es la herramienta actual que permite determinar con mayor precisión, de forma continua e integrada los flujos de energía y masa sobre los distintos ecosistemas terrestres. Los objetivos de esta Tesis son estudiar y analizar mediante este método, las dinámicas de los flujos de energía, CO2 y vapor de agua de una marisma del sudeste de la Provincia de Buenos Aires y caracterizar su producción primaria neta. Para alcanzar estos objetivos se realizó una campaña experimental en la que se midieron los flujos, además de observaciones de contenido de agua en el suelo, meteorológicas convencionales, muestreos destructivos de biomasa aérea y censos de vegetación complementarios. Los resultados muestran que la marisma actúa como sumidero de CO2 durante todo el año, a diferencia de otros ambientes en los que durante el período invernal la superficie actúa como fuente. Estos resultados contribuyen al conocimiento general de las interacciones entre la atmósfera y los ecosistemas y en particular provee la línea de base para caracterizar estados de equilibrio futuros en el sistema atmósfera - biósfera.

Abstract:
Temperate regions are the areas of greatest population in the world, so their ecosystems are subject to human influence. For example, large areas of forests and grasslands have been converted to agriculture. These changes in land use have the potential to produce significant effects on biogeochemical cycles that regulate the balance and dynamics of natural environments through energy and mass exchanges (water vapour and carbon dioxide -CO2- fluxes) between the atmosphere and the ecosystem. Salt marshes are coastal grasslands located in preferential areas for urban settling which therefore are vulnerable. They produce great amounts of energy and biomass, and also are of great interest because of the ecosystem services they provide. Eddy covariance is the method that nowadays provides the most precise, continuous and integrated energy and mass fluxes of terrestrial ecosystems. This doctoral thesis aims to study and analyze by this method, the dynamics of energy, water vapour and CO2 fluxes of a salt marsh located in southeastern Buenos Aires Province as well as, characterize its net primary productivity. To achieve these goals a field campaign was designed to monitor atmospheric flows, along with soil water content, conventional weather observations, and complementary destructive biomass sampling and vegetation census. Unlike other environments where the surface acts as a source in winter, results show that the marsh is a sink for CO2 throughout the year. These findings contribute to the knowledge of the interactions between the atmosphere and ecosystems and particularly provide the baseline to characterize future states of equilibrium in the atmosphere - biosphere system.

"Estudio de los galactanos del alga roja pterocladiella Capillacea" (2001). Errea, María Inés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Existen dos familias de polisacáridos sintetizados por algas rojas, los carragenanos y el ágar, que, debido a sus propiedades reológicas, que les permiten estabilizar soluciones o emulsiones acuosas, son utilizados en la industria farmacéutica y alimentaria de todo el mundo. Este Trabajo de Tesis comprende los tópicos que se indican a continuación: a) Estudio de la estructura de los galactanos que componen el sistema de polisacáridos de la agarofita Plerocladíella capillacea (Gelidiales, Gelidiaceae). Hasta el momento, todos los estudios realizados indicaban que las algas pertenecientes al orden Gelidiales sintetizaban básicamente agarosa. La mayoría de dichos estudios se realizaron sobre el producto obtenido por tratamiento de las algas con agua a ebullición, y posterior purificación de la agarosa por congelamiento y descongelamiento; mediante esta técnica de purificación todos los polisacáridos que no gelificaban se despreciaban. En este Trabajo de Tesis se extrajo secuencialmente el alga con agua a distintas temperaturas (ambiente, 50°, 70° y 90°C) y se estudiaron los productos aislados a temperatura ambiente, 50° y 90°C. Los resultados obtenidos son sumamente interesantes dado que revelaron la presencia, en algunas de las fracciones estudiadas, de estructuras que, hasta el momento, no habían sido detectadas en algas pertenecientes al orden Gelidiales. b) Desarrollo de dos metodologías que representan un aporte original para el estudio estructural de los galactanos sintetizados por algas rojas. c) Investigación de la capacidad de gelificación del sistema de polisacáridos sintetizado por el alga Cryptopleura ramosa (Ceramiales, Delesseriaceae),que es epífita de P. capillacea. Es muy probable que, al recolectar el alga P. capillacea con fines industriales, resulte contaminada con C. ramosa y, si el sistema de polisacáridos sintetizado por C. ramosa gelificara en soluciones acuosas, podría contaminar la agarosa obtenida a partir de P. capíllacea afectando la calidad del gel. d) Evaluación de la actividad antiviral de algunos de los productos obtenidos a partir de P. capillacea y C. ramosa determinándose, en algunos casos, que los mismos poseen una elevada actividad antiviral.

Abstract:
Agars and carrageenans are synthesized by red seaweeds. These polysaccharides form gels or viscous solutions, which due to their reological properties are appropriate for pharmaceutical and food applications. This Thesis comprises the following topics: a) The structural study of the galactans from the agarophyte Pterocladiella capillacea (Gelidiales,Gelidiaceae). Previous studies carried out on algae belonging to Gelidiales indicated that these seaweeds produced mainly agarose. However, in these studies, the seaweeds were subjected to hot water extraction and the isolated products purified by freeze-thawing; thus, by this purification method the non-gelling polysaccharides were discarded. In the present work, P. capillacea was sequentially extracted with water at room temperature, 50°, 70° and 90°C and the products obtained at room temperature, 50° and 90°C were fractionated and subjected to structural analysis. The results were unexpected because they showed that, besides agarose, this seaweed synthesized polysaccharides with unsual structures for algae belonging to this order. b) Development of new methods for the analysis of these polysaccharides which involve determination of the absolute configuration of 3,6-anhydrogalactose and 2,6-di-0-alkylgalactose units. c) Investigation of the gelling capability of the polysaccharides from Cryptopleura ramosa (Ceramiales, Delesseriaceae), an epiphyte on P. capíllacea. In the collection of P. capillacea contamination with C. ramosa may occur. It must be considered that the eventual gelling properties of the polysaccharides from C. ramosa might affect those of the agarose from P. capíllacea. d) As several sulfated polysaccharides have proved to be useful antiviral agents, fractions from both seaweeds were tested against different herpesviruses.

"Estudio de los gomales argentinos" (1909). Letiche, Enrique A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de los mecanismos de respuesta a la infección causada por la bacteria fitopatógena Pseudomonas syringae en la leguminosa modelo Lotus japonicus" (2015-12-15). Bordenave, César Daniel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Lotus japonicus es una legumbre modelo ampliamente utilizada para el estudio de procesos importantes como la nodulación y la respuesta al estrés salino. Sin embargo, existen pocos estudios sobre la respuesta defensiva de esta especie contra microorganismos patógenos. Comprender como se protege esta especie modelo contra patógenos podría ayudar a desarrollar cultivares más tolerantes en especies de Lotus de relevancia agronómica, así como también en otros géneros de legumbres. Para poder dilucidar los mecanismos de defensa más importantes en esta leguminosa, en este trabajo se exploraron las principales respuestas de dos ecotipos fenotípicamente contrastantes, Miyakojima MG-20 y Gifu B-129, a la inoculación con la bacteria Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000. Las respuestas de defensa activadas en ambos ecotipos fueron considerablemente diferentes. Así, en Miyakojima MG-20 se observó una interacción compatible caracterizada por una rápida multiplicación de la bacteria, acompañada por un descenso en la eficiencia del fotosistema II, la aparición de clorosis, desecación y defoliación, así como un moderado pero sostenido aumento en los niveles de especies reactivas del oxígeno (EROs). Estos fenómenos sólo fueron observados en los folíolos inoculados y no afectaron el desarrollo normal de la planta. Por su parte, en Gifu B-129 la interacción fue incompatible, los síntomas fueron en general imperceptibles, la bacteria fue incapaz de multiplicarse en los tejidos de la planta y existió un aumento notable de las EROs durante las primeras horas luego de la inoculación con la bacteria. A partir de estudios transcripcionales utilizando microarreglos de ADN, pudieron identificarse alrededor de 3000 genes regulados diferencialmente frente a la inoculación con la bacteria en el ecotipo Miyakojima MG-20 y alrededor de 300 genes en el ecotipo Gifu B-129. Además, se comparó la expresión génica basal de estas líneas, observándose diferencias en genes relacionados con estrés biótico y abiótico, metabolismo hormonal, estado redox y procesos fotosintéticos. Por otro lado se realizó un estudio del metaboloma, en el cual también se observó un comportamiento contrastante entre ambos ecotipos, detectándose un conjunto diferente de metabolitos que se modifican frente a la inoculación con la bacteria. Integrando los resultados del transcriptoma y del metaboloma se pudieron identificar numerosas vías metabólicas afectadas de manera diferencial en respuesta al ataque bacteriano, lo que permite explicar las diferencias de comportamiento observadas entre ambos ecotipos. Entre estas vías se destacan el sistema de antioxidantes (ascorbato y glutatión), el metabolismo del ácido γ-aminobutírico, la síntesis y degradación de componentes de la pared celular, la síntesis y degradación lípidos y el metabolismo hormonal. Posteriormente, sobre la base del análisis transcriptómico se seleccionaron distintas líneas mutantes insercionales del ecotipo Gifu B-129 para un conjunto de genes que podrían jugar un rol importante en la defensa vegetal. La mayoría de tales líneas demostró una tolerancia equivalente a la observada en la línea salvaje, sugiriendo que los genes mutados no son esenciales en la respuesta de defensa en estos ecotipos. Sin embargo, una línea incapaz de expresar el gen de la enzima Poliamina Oxidasa I demostró una mayor tolerancia durante la patogénesis, lo que indicaría que la expresión de este gen afecta negativamente la respuesta defensiva de la planta. Este trabajo permitió describir de manera global las principales vías metabólicas reguladas en dos ecotipos de L. japonicus durante la respuesta a la bacteria P. syringae pv. tomato DC3000. Las diferencias entre las respuestas inducidas en el ecotipo Gifu B-129 (interacción incompatible) con las observadas en el ecotipo Miyakojima MG-20 (interacción compatible) permitieron discernir cuales son los mecanismos de defensa más efectivos entre los presentadaos por los ecotipos evaluados. Estos resultados podrían ser extrapolados a otras especies de leguminosas de interés agronómico.

Abstract:
Lotus japonicus is a model legume widely used for the study of important processes such as nodulation and response to salt stress. However, there are few works focusing on the defensive response of this species against pathogenic microorganisms. Understanding how this model species responds against plant pathogens could help to develope more tolerant cultivars in agronomically important Lotus species as well as in other legume genera. In order to elucidate the most important defensive mechanisms in this legume, in this work it was explored the main responses of two phenotypically contrasting L. japonicus ecotypes, Miyakojima MG-20 and Gifu B-129, to the inoculation with the bacterial species Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000. The defensive responses activated in both ecotypes were considerably different. Thus, in Miyakojima MG-20 was observed a compatible interaction, characterized by a rapid multiplication of the bacteria in infiltrated tissues, along with a decrease in the efficiency of the photosystem II, the appearance of chlorosis, desiccation and defoliation, as well as a moderate but steady increase in the levels of reactive oxygen species (ROS). All these symptoms were observed only in the inoculated leaflets, and never affected the normal development of the plant. In contrast, the interaction was incompatible in Gifu B-129 , where symptoms were rather imperceptible, the bacterium was unable to multiply in leaf tissues, and a critical increase in ROS accumulation was observed during the first few hours after bacterial infiltration. Based on DNA microarrays, were identified about 3,000 differentially regulated genes, upon infiltration with the bacteria in Miyakojima MG-20, and about 300 genes of this type in Gifu B-129. Moreover, it was posible to compare the basal gene expression between these lines, which showed differences in genes related to biotic and abiotic stresses, hormonal metabolism, redox state, and photosynthetic processes. A metabolomic study on these samples was also performed, revealing that a different set of metabolites in each ecotype was modified in response to the bacteria. By integrating the transcriptomic and metabolomic data, several metabolic pathways affected differentially in response to bacterial attack were identified , which helps to explain the observed differences in behavior between both ecotypes. Among these pathways stand out those of the antioxidants system (ascorbate and glutathione), the γ-aminobutyric acid metabolism, the synthesis and degradation of cell wall components, the synthesis and degradation of lipids, and hormone metabolism. Finally, several insertional mutants of the Gifu B-129 ecotype were selected for a set of genes that could play an important role in plant defense. Most of them showed a level of tolerance to the bacteria similar to that of the wild type, suggesting that this genes are not essentials in the defense response in these ecotypes. However, one line defective in the Polyamine Oxidase I gene showed higher tolerance, indicating that the expression of this gene during the plant response to the bacterial attack. negatively affects the defense of the plant. This work globally describes the main metabolic pathways regulated in response to P. syringae pv. tomato DC3000 in two ecotypes of L. japonicus. The differences between the responses triggered in the ecotype Gifu B-129 (incompatible interaction) and Miyakojima MG-20 (compatible interaction) let us to unravel the most effective defense mechanisms among those presented by the evaluated ecotypes. These results could be extrapolated to other agronomical important legumes.

"Estudio de los mecanismos moleculares de patogénesis del sarcoma de Kaposi mediados por el Herpesvirus Humano-8/KSHV y su oncogén, el receptor acoplado a proteína G (vGPCR), en modelos animales" (2004). D’Agostino, Agata Magdalena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
KSHV es un oncovirus implicado en Sarcoma de Kaposi (KS) y otros cánceres asociados a SIDA. KS es un neoplasma caracterizado por la proliferación de células ahusadas y la intensa angiogénesis. Los mecanismos a través de los cuales KSHV causa la respuesta angioproliferativa de KS se desconocen y la reproducción de todos los aspectos de KS mediante infección experimental por KSHV aún no ha podido ser demostrada. El receptor acoplado a proteína-G (vGPCR) de KSHV puede estimular cascadas de señalización que inducen angiogénesis y transformación celular. Identificar estas cascadas puede tener significancia terapéutica. Ciclooxigenasa-2 (COX-2) es un medidor involucrado en angiogénesis tumoral que puede ser regulada por antinflamatorios (AINEs). En la primera parte de este trabajo demostramos que vGPCR regula la actividad y la expresión de COX-2 vía ERK-1/2. Encontramos que la inhibición de COX-2 impide la angiogénesis inducida por vGPCR y que la administración del AINE Celecoxib retarda el crecimiento tumoral con disminución en la vascularata y producción de VEGF. Así, COX-2 sería uno de los componentes moleculares del cambio angiogénico de vGPCR y un posible blanco terapéutico. En la segunda parte mostramos que la transfección con KSHV clonado en un Cromosoma Artificial Bacteriano (KSHVBac36) en preparaciones de médula ósea murinas enriquecida en precursores de células endoteliales (mEC) es suficiente para inducir tumorigénesis y llevar al cambio fenotípico angiogénico. Las células mEC transfectadas con KSHVBac36 (mECK36) estaban infectadas con KSHV, secretaban VEGF, eran angiogénicas in vivo e indujeron en ratones inmunodeficientes la formación de sarcomas de células ahusadas vascularizados que expresaban LANA y marcadores característicos de KS. La inhibición de la expresión de vGPCR en las mECK36 utilizando siRNA condujo a la inhibición de su angiogenicidad y tumorigenicidad. Estos resultados definen un modelo animal para estudiar la patogénesis de KS mediada por KSHV y señalan a vGPCR como uno de sus principales oncogenes angiogénicos.

Abstract:
KSHV ia a human oncovirus associated with Kaposi´s sarcoma (KS) an AIDS associated cancer. KS is a neoplasm characterized by proliferation of spindle-shaped cells and intense angiogenesis. The mechanisms whereby KSHV causes KS angioproliferative response are not well defined and the reproduction of KS by experimental KSHV infection has not yet been shown. vGPCR is a G protein-coupled receptor encoded by KSHV that subverts host´s signaling pathways to induced cell transformation and angiogenesis. Cyclooxygenase-2 (COX-2) is a mediator involved in tumor angiogenesis that can be inhibited by NSAIDS. We demonstrated that vGPCR upregulates COX-2 activity and expression, and we found that inhibition of COX-2 by the NSAID Celecoxib impairs vGPCR-driven angiogenesis and tumorigenesis. Taken together these results show that COX-2 is a molecular mediator of vGPCR angiogenicity and potential target for KS therapy. On the second part we show that transfection of KSHV cloned in a Bacterial artificial chromosome (Bac36) into mouse Bone marrow preparations enriched in endothelial cells and its progenitors (mEC) is sufficient to induce tumorigenesis and angiogenesis. mEC transfected with KSHVBac36 (mECK36) were infected with KSHV, displayed high levels of VEGF secretion, were angiogenic in vivo and induced spindle-cell sarcomas expressing KSHV LANA and KS phenotypic markers. The inhibition of vGPCR expression mediated by siRNA led to inhibition of mECK36 angiogenesis and of tumor growth. These results define an animal model of KSHV-mediated KS pathogenesis in vivo and point to vGPCR as one of its major angiogenic oncogenes.

"Estudio de los mecanismos patogénicos relacionados con la trombopoyesis en la trombocitopenia autoinmune" (2017-03-23). Grodzielski, Matías. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La presente Tesis de Doctorado propuso investigar la existencia de alteraciones en el proceso de trombopoyesis en la trombocitopenia inmune (PTI). Para ello se utilizó un modelo in vitro de diferenciación de megacariocitos a partir de progenitores hematopoyéticos CD34+ normales. Al día 13 de cultivo, los megacariocitos maduros se incubaron con muestras de plasma de pacientes con PTI evaluando su efecto sobre la formación de proplaquetas, la capacidad de adhesión y spreading, la apoptosis celular y la activación de señales intracelulares al contacto con proteínas de matriz de médula ósea. Los plasmas de PTI produjeron una inhibición dosis-dependiente de la trombpoyesis, lo que se acompañó de alteraciones morfológicas en las proplaquetas. Además, estos plasmas no afectaron la madurez ni la sobrevida de los megacariocitos, lo que sugiere que las alteraciones en la producción plaquetaria son ocasionadas por un efecto directo sobre el proceso de trombopoyesis. La fracción de inmunoglobulinas G purificadas de los pacientes reprodujo la inhibición, mientras que la eliminación de los autoanticuerpos del plasma la revirtió, demostrando que son los autoanticuerpos los responsables, al menos en parte, de estas alteraciones. Además de la trombopoyesis, los plasmas con autoanticuerpos dirigidos contra las glicoproteínas IIb- IIIa y Ia-IIa afectaron la capacidad de adhesión y spreading de los megacariocitos a los ligandos medulares de estos receptores, fibrinógeno y colágeno I, respectivamente. En particular, la presencia de anticuerpos anti-GPIa-IIa de PTI provocó una pérdida de la capacidad fisiológica del colágeno I de inhibir la trombopoyesis, lo que sugiere que podría ocurrir liberación de plaquetas en forma prematura en el contexto del nicho osteoblástico medular. La existencia de alteraciones trombopoyéticas en presencia de plasmas de PTI sin autoanticuerpos detectados sugiere la existencia de autoanticuerpos dirigidos contra blancos alternativos. La presente Tesis de Doctorado expone resultados novedosos que demuestran que los autoanticuerpos de PTI tienen un efecto nocivo sobre la trombopoyesis y sobre otras funciones megacariocíticas, revelando nuevos mecanismos que contribuyen a la disminución del recuento de plaquetas en esta entidad.

Abstract:
This PhD thesis was aimed at investigate possible alterations in the thrombopoietic process in immune thrombocytopenia (ITP). To this end, an in vitro model of megakaryocyte differentiation from normal CD34+ hematopoietic progenitors was used. At day 13 of culture, mature megakaryocytes were incubated with plasma samples from patients with ITP and the effect on proplatelet formation was evaluated. Besides, we studied the ability of megakaryocytes to adhere and spread on different matrices, cellular apoptosis and the activation of intracellular signalling after contact with bone marrow matrix proteins. ITP plasmas induced a dose-dependent inhibition on thrombopoiesis, that was accompanied by morphological alterations in proplatelet architecture. In addition, these samples did not affect either maturity or survival of megakaryocytes, suggesting that alterations in platelet production are due to a direct effect on the thrombopoietic process. The purified fraction of immunoglobulins G from ITP patients reproduced the inhibition, while elimination of autoantibodies from plasma reverted it, demonstrating that autoantibodies are responsible, at least in part, for these alterations. In addition to thrombopoiesis, plasmas containing autoantibodies directed against glycoproteins IIb- IIIa and Ia-IIa affected megakaryocyte adhesion and spreading to the corresponding ligands, fibrinogen and collagen I, in bone marrow. In particular, the presence of anti- GPIa-IIa autoantibodies caused a loss of the physiological ability of collagen I to inhibit thrombopoiesis, suggesting that premature platelet release could occur in the context of the bone marrow osteoblastic niche. The finding of abnormalities on thrombopoiesis in the presence of ITP plasmas with no detectable autoantibodies suggests the presence of alternative targets of autoimmunity in these samples. This PhD thesis presents new results demonstrating that ITP autoantibodies have a deleterious effect on thrombopoiesis and other megakaryocytic functions, revealing new mechanisms that contribute to the decrease of the platelet count in this entity.

"Estudio de los mecanismos subyacentes a las alteraciones mediadas por cocaína y metilfenidato en el sistema tálamo-cortical de ratón. Rol de la serotonina en la modulación de la transmisión GABAérgica talámica" (2015-03-17). Goitia, Belén. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los efectos de la cocaína sobre la transmisión GABAérgica del sistema tálamocortical son similares a los previamente descritos para un conjunto de patologías psiquiátricas y neurológicas englobadas bajo el nombre de síndrome de disritmia tálamocortical, que presenta coherencia anormal entre bajas y altas frecuencias a nivel tálamocortical. Se cree que la presencia de bajas frecuencias en individuos despiertos puede subyacer un procesamiento sensorial anormal. La cocaína ejerce sus propiedades en parte por el aumento en los niveles sinápticos de dopamina (DA) en los circuitos tálamocorticales somatosensoriales, seguido por el aumento de norepinefrina (NE) y serotonina (5-HT), debido a la inhibición de los transportadores encargados de la recaptación de DA (DAT), NE (NET) y 5-HT (SERT). El metilfenidato (Ritalina ®, estimulante legal para tratar el Trastorno por Déficit de Atención con Hiperactividad) bloquea DAT y NET, pero no afecta el SERT. En este trabajo de tesis se plantea un estudio comparativo de ambos psicoestimulantes a fines de dilucidar los mecanismos responsables del fenómeno de disritmia tálamocortical asociado al consumo de cocaína. En primera instancia se vio que la administración de cocaína, ya sea aguda o sub-crónica, medió incrementos en la densidad de corriente a través de canales de calcio de tipo T en las neuronas del núcleo Ventrobasal del tálamo y aumentó la frecuencia de miniaturas de GABA desde las terminales del núcleo reticular talámico, lo que sugiere anormalidades en la transmisión GABAérgica talámica. En comparación, el metilfenidato mostró efectos mucho más sutiles, lo que lleva a asociar las diferencias con la modulación serotoninérgica de la sinapsis inhibitoria entre el núcleo reticular del tálamo y el núcleo Ventrobasal, mediada por cocaína pero no por metilfenidato. A continuación, para poner a prueba dicha hipótesis, se realizaron experimentos de electrofisiología con rodajas obtenidas de animales naïve y se intentó emular los resultados de cocaína mediante la aplicación de 5-HT. Si bien este objetivo se logró, se encontró que los efectos de esta monoamina sobre la sinapsis GABAérgica en estudio siguen un curso temporal que indica que los receptores de 5-HT pueden sufrir un proceso de internalización. En conjunto los resultados obtenidos podrían contribuir a explicar la dinámica aberrante en la actividad tálamocortical de ratones tratados con cocaína, similar al síndrome de disritmia tálamocortical descrito en humanos. Las diferencias entre la cocaína y el metilfenidato a nivel tálamocortical parecen sugerir la existencia de mecanismos de homeostasis sináptica por los cuales la neurotransmisión GABAérgica desde el núcleo reticular del tálamo y las conductancias de calcio de las neuronas postsinápticas del núcleo Ventrobasal responderían aumentando la liberación espontánea de GABA y la densidad de corriente de calcio tipo T postsináptica tras el aumento transitorio de la 5-HT mediado por cocaína.

Abstract:
The effects of cocaine on thalamic GABAergic transmission resemble those described in several psychiatric and neurological pathologies included in the thalamocortical dysrhythmia syndrome, characterized by an anomalous coherence between high and low EEG frequencies. The presence of low frequencies in awake individuals is thought to cause aberrant processing of sensitive inputs. The known effects of cocaine are mainly achieved through the increase in synaptic levels of dopamine (DA), norepinephrine (NE) and serotonin (5-HT), caused by the inhibition of the uptake by their respective transporters (DAT, NET and SERT). Methylphenidate (Ritalin ®, a drug widely prescribed for the treatment of Attention Deficit and Hyperactivity Disorder) blocks DAT and NET, but not SERT. These studies compare the two psychostimulants with a view to unraveling the mechanisms that underlie the thalamocortical dysrythmia syndrome associated with cocaine use. Firstly, we found that cocaine administration, either acute or sub-chronic, led to an increase in the calcium current through T-type calcium channels in thalamic Ventrobasal neurons and to an increase in the frequency of GABAergic miniature inhibitory postsynaptic currents (mIPSCs), revealing an alteration in thalamic GABAergic transmission. Comparatively, the effects of methylphenidate are subtle, suggesting the existence of a cocaine-mediated serotonergic modulation of the inhibitory synapse between the thalamic reticular nucleus and the Ventrobasal nucleus. To test this hypothesis we tried to reproduce the results obtained previously with cocaine-treated animals in brain slices from naïve mice through the incubation and puffaplication of 5-HT. Our results show that even though 5-HT can mimic the effects of cocaine in the thalamus, it follows a time course consistent with an internalization process of 5-HT receptors. Taken together, the results here presented might help explain the aberrant dynamics in the thalamocortical activity seen in mice treated with cocaine, similar to the thalamocortical dysrhythmia syndrome described in humans. The differences found between cocaine and methylphenidate suggest the existence of homeostatic mechanisms through which GABAergic transmission from the thalamic reticular nucleus and T-type calcium currents in postsynaptic Ventrobasal neurons are enhanced due to the transient increase in 5-HT levels induced by cocaine.

"Estudio de los niveles dolomíticos ubicados en las formaciones Agrio y Huitrín, Provincia del Neuquén" (1984). Gaillardou, Rubén Alberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo de esta tesis es el estudio de los niveles dolomíticos ubicados en las Formaciones Agrio y Hritrín, en la zona central de la provincia del Neuquen, República Argentina, con vistas a su aprovechamiento económico, principalmente en la industria siderúrgica, como fundentes o refractarios. La idea original del trabajo surge de antecedentes bibliográficos que mencionan bancos dolomíticos de potencial interés en la referida provincia, en base a los cuales se preseleccionó un área de aproximadamente 2.700 km2, que abarca parcialmente los departamentos de Loncopué, Picunches y Zapala. Allí se efectuó un reconocimiento geológico a escala 1:50.000, en el que se midieron 8 perfiles estratigráficos, con extracción de muestras de bancos supuestamente dolomíticos, a lo largo del contacto entre las Formaciones Agrio y Huitrín. Sobre las 46 muestras de roca obtenidos en esa oportunidad, se realizaron análisis químicos de 8 componentes por cada una, a saber: CaO, MgO, SiO2, Fe2O3, Al2O3, P, S y H2O. Del total referido, se seleccionaron 15 muestras, en base a su ubicación estratigráfica, sobre las que se efectuaron estudios petrográficas. Los rosultados de los análisis químicos se graficaron, para muestras supuestamente pertenecientes al mismo nivel estratigráfico, por cada componente, en función de su ubciación en el terreno y la distancia relativa entre muestra y muestra. De la observación de los gráficos, y la comparación de los datos de los análisis químicos con los estudios petrográficos y los perfiles estratigráficos surgieron las siguientes conclusiones: - Las muestras arrojaron mejores valores en cuanto al contenido de MgO están ubicadas en el mismo nivel estratigráfico y corresponden a dolomita de grano fino, de textura sacaroide, formadas por diagénesis a partir de calizas oosparíticas y biosparitas originales. - En la zona correspondiente al perfil Nº6 (Puesto Moscoso), ubicado en las cercanías de Covunco Abajo, se verificaron las mejores coincidencias en cuanto al contenido de MgO y grado de recristalización de las dolomitas, así como otros factores de importancia desde el punto de vista de su aprovechamiento económico, destacándose entre ellos el abastecimiento de agua potable, facilidad de acceso, disposición estructural y espesor de la cubierta estéril. En base a los resultados del reconocimiento geológico se decidió efectuar un estudio de detalle en el área del Puesto Moscoso. En una segunda campaña, entonces, se realizó un relevamiento geológico- topográfico a escala 1:2.000, abarcando una superficie de aproximadamente 1,5 km2. En ella se tomaron 12 muestras, sobre las que se efectuaron análisis químicos y estudios petrográficos de similares características a las de la primera campaña, e inclusive en algunos casos, estudios micropalentológicos. Como resultado de los análisis y estudios referidos, se llegó a la conclusión de que se estaba en presencia de un depósito dolomítico, con posibilidades de aprovechamiento económico. Se afirmó, además, la íntima relación que se hallara entre el contenido de MgO y el grado de diagénesis de las rocas originales, y su relación con un ambiente salino de origen.

"Estudio de los patrones de diversificación de la avifauna neotropical a través del análisis de especies de ambientes selváticos" (2016-03-04). Lavinia Oblanca, Pablo Damián. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El Neotrópico posee la avifauna más diversa del mundo con más de 3.000 especies que se reproducen en sus tierras. Gran parte de esta diversidad se encuentra concentrada en sus ambientes selváticos, entre los cuales se incluyen la Selva Atlántica y las Yungas y su transición con la selva Amazónica. En esta tesis se estudiaron los patrones y procesos responsables de la diversificación de las aves neotropicales a través del análisis de tres especies de Passeriformes de ambientes selváticos sudamericanos: Habia rubica (Cardinalidae), Ramphotrigon megacephalum (Tyrannidae) y Pipraeidea melanonota (Thraupidae). Las tres especies poseen distribuciones disyuntas que incluyen poblaciones alopátricas en la Selva Atlántica y el complejo Yungas-Amazonas, y a su vez representan algunas de las principales radiaciones de Passeriformes del Neotrópico. Se utilizó un enfoque integrador, combinando análisis genéticos (marcadores nucleares y mitocondriales) con el estudio de la variación fenotípica (coloración del plumaje) y comportamental (vocalizaciones). Los resultados sugieren que las historias evolutivas de estas especies han sido afectadas de distinta forma por un factor común: el establecimiento del corredor de vegetación abierta que aisla actualmente a la Selva Atlántica del complejo Yungas-Amazonas. No obstante, la diversificación de cada una de estas especies evidenció, al mismo tiempo, ciertos atributos idiosincráticos, sugiriendo que sus historias evolutivas han sido moldeadas por factores tanto compartidos como específicos de las mismas. Las diferencias en las historias evolutivas de estas tres especies podrían asociarse a sus ecologías contrastantes. En conclusión, esta tesis sustenta la idea de que la diversificación de la avifauna neotropical no puede ser restringida a una única ventana temporal ni explicada a través de uno o unos pocos mecanismos evolutivos. PALABRAS CLAVE: Amazonas, Ambientes selváticos, Aves, Canto, Citocromo b, COI, Coloración, Diversificación, Especiación, Filogenética, Filogeografía, Habia rubica, Neotrópico, Pipraeidea melanonota, Ramphotrigon megacephalum, Selva Atlántica, Yungas.

Abstract:
The Neotropics possess the highest avian diversity of the world with over 3,000 breeding species. Most of this richness is found within its rainforests, which include some of the most biodiverse regions in the planet like the Atlantic Forest and the Yungas Forest together with the Amazonia. Here I studied the factors and processes that have promoted avian diversification in the Neotropics through the analysis of three species of Passeriformes that inhabit South American forests: Habia rubica (Cardinalidae), Ramphotrigon megacephalum (Tyrannidae) and Pipraeidea melanonota (Thraupidae). All of these species have disjunct distributions that include allopatric populations in the Atlantic Forest and the Yungas-Amazonia complex, and at the same time represent some of the main passerine radiations in the Neotropics. I applied an integrative approach combining genotypic (mitochondrial and nuclear markers) and phenotypic (plumage coloration and vocalizations) evidence. The results suggest that the evolutionary histories of these species have been differentially affected by one common factor: the establishment of the open vegetation corridor that currently isolates the Atlantic Forest from the Yungas-Amazonia complex. However, the diversification processes of each of these species showed some idiosyncratic features, suggesting that their evolutionary histories have been shaped by both shared and unique factors. The differences found among these species could be associated with their contrasting ecologies. In conclusion, this thesis supports the idea that the diversification of the Neotropical avifauna cannot be restricted to a single temporal period or explained by a single or a few evolutionary drivers. KEY-WORDS: Amazonia, Atlantic Forest, Birds, COI, Cytochrome b, Diversification, Habia rubica, Neotropics, Pipraeidea melanonota, Phylogenetics, Phylogeography, Plumage coloration, Rainforests, Ramphotrigon megacephalum, Song, Speciation, Yungas Forest.

"Estudio de los polisacáridos del alga roja Polysiphonia nigrescens, cationización de agarosa, formación de complejos interpolielectrolito. Aplicaciones en floculación de coloides y liberación controlada de drogas" (2010). Prado, Héctor Juan. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este Trabajo de Tesis se estudiaron los polisacáridos del alga roja Polysiphonia nigrescens, recolectada en las costas de Cabo Corrientes (Mar del Plata). Este alga biosintetiza agaranos sulfatados parcialmente ciclados y altamente sustituidos en C-6, principalmente con sulfato, aunque también se han encontrado éteres metílicos y ramificaciones simples de β-D-xilosa. Las dos díadas presentes en los galactanos de esta especie son: G6S→L6S (precursora) y G6S→LA. También se aisló una fracción compuesta por agarosa sulfatada. Además se sintetizaron agarosas cationizadas de distinto grado de sustitución (0,04-0,77), empleando cloruro de 3-cloro-2-hidroxipropil trimetilamonio. Se evaluaron diferentes parámetros de la reacción sobre el grado de sustitución y el peso molecular: concentración de reactivos, temperatura, tiempo y el agregado de NaBH4. Los productos se caracterizaron mediante microscopía electrónica de barrido, FT-IR, viscosimetría y RMN. Productos de metanólisis se estudiaron por espectrometría de masa ESI. Algunas agarosas cationizadas, se desempeñaron en la floculación de coloides de manera comparable a poliacrilamidas comerciales. Finalmente, se prepararon los siguientes complejos interpolielectrolito (IPECs) estequimétricos: eudragit E - carragenano kappa, almidón cationizado - carragenano kappa, eudragit E - agaranos de P. nigrescens y agarosa cationizada - agaranos de P. nigrescens. Se estudiaron dichos IPECs: turbidimetría, análisis elemental, FT-IR, microscopía electrónica de barrido y óptica, área superficial, ángulo de reposo, perfil de compactabilidad e hinchamiento. Se prepararon comprimidos por compresión directa, constituidos por los IPECs e ibuprofeno como droga modelo. Los perfiles de liberación de la droga ajustaron adecuadamente a dos modelos matemáticos, presentando cinéticas cercanas a orden cero.

Abstract:
In this Thesis the red seaweed Polysiphonia nigrescens polysaccharides, collected in Cabo Corrientes shores (Mar del Plata) were studied. This seaweed biosynthesizes sulphated agarans partially ciclyzed and highly substituted on C-6, mainly with sulphate, however methyl ethers and β-D-xylose single stubs were found. The two diads present in the agarans of this species are: G6S→L6S (precursor) and G6S→LA. A fraction composed by sulphated agarose was also isolated. Besides, cationized agaroses with different degrees of substitution were synthesized (0.04-0.77), employing 3-chloro-2-hydroxypropyl trimethylammonium chloride. Different reaction parameters were evaluated on the substitution degree and molecular weight: reactives concentration, temperature, time and addition of NaBH4. The products were characterized by means of scanning electronic microscopy, FT-IR, viscosimetry and NMR. Products of methanolysis were studied by ESI mass spectrometry. Some cationized agaroses presented a similar performance to commercial polyacrylamides, in colloid flocculation. Finally, the following stoichiometric interpolyelectrolyte complexes (IPECs) were prepared: eudragit E - kappa carrageenan, cationized starch - kappa carrageenan, eudragit E - agarans from P. nigrescens and cationized agarose - agarans from P. nigrescens. Those IPECs were studied: turbidimetry, elemental analysis, FT-IR, scanning electronic and optical microscopy, surface area, angle of repose, compactibillity profile and swelling. Tablets composed by the IPECs and ibuprofen as model drug, were prepared by direct compression. The release profiles were adequately fitted to two mathematical models, and presented near zero order kinetics.

"Estudio de los productos de fermentación de algunos fermentos butírico-butílicos" (1950). Hahn, Vera. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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La investigación, que fué realizada con finalidad taxonómica a la par que con el propósito de poner a punto y dominar las técnicas analíticas necesarias para el estudio de los balances de fermentación, no alcanzó integramente el propósito inicial. Sin embargo, la experiencia alcanzada nos coloca en una posición tal, que nos será mucho más fácil obtener resultados que signifiquen alguna contribución al conocimiento del tema. Los métodos analíticos para determinar azúcares reductores, butanol, etanol, acetona, alcohol isopropílico, ácidos butírico y acético fueron examinados por pruebas testigos hasta conocer sus limitaciones y errores y luego aplicados a los líquidos fermentados. Los métodos utilizados son del tipo seni-microquímico y han dado resultados compatibles con la exactitud requerida para los balances de fermentación. Prácticamente se han introducido pocas variantes sobre las técnicas descritas originalmente. Las cepas que hemos estudiado son muy pocas (9) para poder intentar un examen sistemático crítico útil y además su origen y autenticidad no nos han sido garantizados, de modo que los nombres de cuatro de ellas (87: Clostridium granulobacter pectinovorum, 181: Clostridium beijerinckii, 179: Clostridium butylicum y 180: Clostridium acetobutylicum) pueden no corresponder a las especies de esa designación. Tres cepas de Clostridium felsineum dadas por el Ing.Agr. Santos Soriano corresponden sin duda a la especie. Dos de Clostridium acetobutylicum son casi con certeza también auténticas y así lo consideraremos. La fermentación fué estudiada en un medio de levadura (autolizado de levadura) con glucosa y en mosto de maíz completo. Los resultados difieren de manera tan marcada, que el hecho merece la mayor atención y deberá ser estudiado, pues ofrece perspectivas interesantes. En efecto, en el medio de levadura la cantidad de solventes neutros formados contradice la idea corriente de que los "butíricos" apenas los producen, en comparación con los verdaderos formadores de solventes. En cambio dicha idea es correcta para el caso del medio de maíz, cuando la fuente hidrocarbonada está constituida casi exclusivamente por el almidón. De igual manera a proporción relativa de los distintos solventes no es la misma en el medio de levadura que en el medio de maíz. Hemos confirmado el significado práctico y quizás de valor taxonómico de a licuación de la gelatina, del enriado del lino, de la formación de isopropanol, de la del acetilmetilcarbinol. La proporción de ácidos acético y butírico en el medio de levadura se ha mostrado como una propiedad relativamente constante y distintiva de por lo menos dos de los cuatro grupos de bacterias que hemos creado por razones prácticas y no taxonómicas. Dicha propiedad está asociada con otras, como la de forrar isopropanol. De su valor práctico nada puede adelantarse y menos aún de su significado taxonómico. En el cuadro 20 de la página siguiente (p. 68) figuran en resumen las propiedades que mayor significado tienen para intentar una diferenciación de las bacterias estudiadas.

"Estudio de los residuos fosforilados del receptor quinasa LePRK2 en polen de Solanum lycopersicum VF36 (tomate cultivado) y su función en las interacciones polen-pistilo" (2009). Salem, Tamara Marcela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El crecimiento apical del tubo polínico es un modelo muy utilizado para el estudio de células polarizadas en plantas. Previamente caracterizamos a LePRK2, un receptor quinasa específico de polen de tomate (Solanum lycopersicum). Cuando se expresa de manera transitoria LePRK2-eGFP en polen de tabaco, se observa una disminución significativa del largo del tubo polínico y un aumento del ancho del ápice del tubo, comparado con tubos eGFP. Tubos que expresan la mutación en una lisina esencial para la actividad quinasa de LePRK2, muestran la misma longitud del tubo polínico y del ancho del ápice que los tubos eGFP control. Hemos demostrado que LePRK2 estaría presente como múltiples isoformas fosforiladas tanto en membranas de polen maduro como germinado. Utilizando un análisis comparativo de secuencias y la predicción de sitios de fosforilación, identificamos dos motivos posibles de fosforilación en el dominio citoplasmático yuxtamembrana. Mutagénesis dirigida sobre estos motivos y su sobreexpresión en polen de tabaco, muestra que ambos motivos tienen efectos opuestos en la regulación del crecimiento del tubo polínico. Sustituciones a alanina en residuos del motivo I de LePRK2, S277/S279/S282, resultó en tubos polínicos más largos, mientras que la sustitución a alanina de residuos del motivo II, S304/S307/T308, resultó en tubos más cortos. En contraste, sustituciones fosfomiméticas con ácido aspártico en estos residuos, mostró resultados recíprocos: tubos más cortos con mutaciones en el motivo I y tubos más largos con mutaciones en el motivo II. Concluimos que la longitud del tubo polínico puede estar controlada a través de una regulación negativa y positiva debida a la fosforilación de los residuos del motivo I y II respectivamente. Estos resultados sugieren que LePRK2 podría tener un papel central en el crecimiento del tubo polínico a través de la regulación de su propio estado de fosforilación. Hemos realizado distintos abordajes con polen maduro de tomate con el fin de determinar por espectrometría de masa los sitios de fosforilación de LePRK2, pero hasta el momento no hemos logrado identificarlos. Por otro lado, STIL, un ligando de LePRK2 proveniente del pistilo, desfosforila LePRK2 en membranas de polen maduro en 32 PγATP. Nuestra hipótesis plantea que LePRK2 está involucrada en el control del crecimiento del tubo polínico de tomate y el mismo es regulado in vivo por el equilibrio de distintos residuos de fosforilación, a veces organizados en motivos en su dominio yuxtamembrana. Por otro lado, alguno de los residuos de LePRK2 son desfosforilados por STIL.

Abstract:
The tip-growing pollen tube is a useful model for studying polarized cell growth in plants. We previously characterized LePRK2, a pollen-specific receptor-like kinase from tomato (Solanum lycopersicum). When transiently overexpressed in tobacco pollen tubes, LePRK2-eGFP significantly decreased pollen tube length and increased pollen tube tip width, relative to eGFP tubes. Tubes that expressed a mutation in a lysine essential for kinase activity showed the same length and width as the eGFP control. LePRK2 might be present as multiple phosphorylated isoforms in mature and germinated pollen membranes. Using comparative sequence analysis and phosphorylation site prediction programs we identified two putative phosphorylation motifs in the cytoplasmic juxtamembrane domain. Site-directed mutagenesis in these motifs, and overexpression in tobacco pollen, showed that both motifs have opposite effects in regulating pollen tube length. Relative to LePRK2-eGFP pollen tubes, alanine substitutions in residues of motif I, S277/S279/S282, resulted in longer pollen tubes, but alanine substitutions in motif II, S304/S307/T308, resulted in shorter tubes. In contrast, phosphomimicking aspartic substitutions at these residues gave reciprocal results: shorter tubes with mutations in motif I and longer tubes with mutations in motif II. We conclude that length of pollen tubes can be negatively and positively regulated by phosphorylation of residues in motif I and II respectively. These results suggest that LePRK2 may have a central role in pollen tube growth through regulation of its own phosphorylation status. In order to discover LePRK2 phosphorylation sites in vivo, some approaches were tested with tomato mature pollen. Morover, STIL, a ligand of LePRK2 from pisitil, dephosphorylates LePRK2 in mature pollen membranes in the 32PγATP. We hypothesize that LePRK2 is involved in the control of tomato presence pollen tube growth, and this is regulated in vivo by the equilibrium of different phosphorylated residues, sometimes organized in motifs in the juxtamembrane domain. On the other hand, some residues of LePRK2 are dephosphorylated by STIL.

"Estudio de los ácidos clorogénicos y sustancias relacionadas de la yerba mate" (1961). Badin, Pedro Antonio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se trató de aclarar la estructura de una sustancia cristalina que fué aislada por primera vez de la yerba mate por Hauschild (1935) Y posteriormente por Deulofeu, Fondovilla, Díaz, Mendive (1943). El trabajo se encaminó primero hacia la identificación de la Sustancia Tánica de Hauschild por cromatografía en papel. Se encontró de esta manera que sus Rf no coincidían con los ácidos clorogénico, isoclorogénico, neoclorogénico y cafeico. Por hidrólisis enérgica en medio ácido la Sustancia Tánica de Hauschild produce los ácidos cafeico y quínico, los cuales se reconocieron por cromatografía en papel. Se efectuó la determinación del equivalente de neutralización de la Sustancia Tánica de Hauschild y la curva obtenida demostró que no era un ácido carboxílico. Después de la hidrólisis alcalina suave, en cambio se pudo determinar un equivalente de neutralización 347, que coincide con el de una lactona del grupo de los ácidos clorogénicos. La Sustancia Tánica de Hauschild es por lo tanto una lactona que no es idéntica a la lactona del ácido isoclorogénico, descrita en la literatura. Para poder estudiar los productos de hidrólisis con álcalis diluídos ae hicieron experiencias de distribución en contracorriente con los ácidos clorogénico, isoclorogénico, neoclorogénico y cafeico que permitieron conocer sus máximos de distribución en condiciones experimentales bien normalizadas. Aplicando la partición en contracorriente se pudo comprobar que por tratamiento alcalino suave de la Sustancia Tánica de Hauschild aparecen dos sustancias distintas. La primera de ellas resultó ser ácido neoclorogénico. La segunda no pudo obtenerse en cantidades suficientes como para estudiarla a fondo, pero pudo demostrarse que contenía ácido cafeico en su molécula Provisoriamente se llamó a esta sustancia "sustancia tubos 19-20". Se encontró que la "sustancia T 19-20" es un producto vinculado con el ácido neoclorogénico porque también se lo obtiene al someter a este ácido al mismo tratamiento alcalino. Para su identificación, además de la distribución en contracorriente, se determinaron sus Rf por cromatografía en papel. Por otra parte se realizaron experiencias para comprobar si la "sustancia T 19-20" ya existía como tal en las hojas de yerba mate. El estudio por cromatografía en papel de diferentes extractos reveló que contenían ácido clorogénico, ácido isoclorogénico, ácido neoclorogénico y la "sustancia T 19-20". En ningún caso se pudo encontrar la Sustancia Tánica de Hauschild en cantidades apreciables en alguno de los extractos estudiados. Aplicando la técnica de Sondheimer (1958), con columna de Sílicagel embebida en ácido sulfúrico 0,5 normal, se pudieron separar los ácidos clorogénico, isoclorogénico, neoclorogénico y la "Sustancia T 19-20" de extracto de yerba mate. Las identificaciones se hicieron por cromatografía en papel de cada una de las fracciones recogidos.

"Estudio de mecanismos de promoción e interferencia de la memoria de reconocimiento de objetos" (2016-10-04). Villar, María Eugenia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La memoria de reconocimiento hace referencia a la habilidad de identificar si un objeto o una situación fueron experimentados previamente. Esta memoria se evidencia en roedores por la tendencia natural a explorar por más tiempo aquellos estímulos novedosos respecto a los familiares. En el presente trabajo nos enfocamos en estudiar el fenómeno de interferencia retroactiva (IR) y de promoción de memorias de reconocimiento, utilizando diferentes versiones de la tarea: Reconocimiento de Objeto en contexto (ROC), Reconocimiento de Objeto Novedoso (RON) y Reconocimiento Espacial de Objetos (REO). Tanto para el fenómeno de IR estudiado en la tarea de ROC (Capítulo 1), y en la tarea de RON (Capítulo 2), como para el fenómeno de promoción estudiado en la tarea de REO (Capítulo 3), se caracterizaron las condiciones requeridas para que estos fenómenos ocurran (influencia del contexto y de los objetos), así como los requisitos temporales y los procesos mnemónicos afectados. Por último, inactivamos o bloqueamos la traducción proteica en el Hipocampo dorsal o en la Corteza medial prefrontal, con el fin de dilucidar si la colaboración o la competencia en el uso de la actividad cerebral o de recursos proteicos pueden explicar los fenómenos de promoción e interferencia de la memoria.

Abstract:
Recognition memory refers to the ability to identify an object or a situation and judge if it was previously experienced or not (Warburton y Brown, 2010).This memory is evidenced by the natural tendency of rodents to explore more novel over familiar stimuli. In the present work, we focused on retroactive interference (RI) and promotion phenomena in the formation of recognition memories. We used three different versions of it: the Object-in-Context (OIC) task, the Spontaneous Novel Object Recognition (SNOR) and the Object Location (OL) task. For both, the phenomenon of IR discussed in Chapter 1 using the task of ROC and in the Chapter 2 with the task of RON, and the phenomenon of promotion addressed in Chapter 3 using the task of REO, we characterized the temporary effectiveness and the types of inputs required for these phenomena to occur (by accessing the influence of context and objects). Finally, by inactivation or inhibition of protein translation in the dorsal hippocampus or medial prefrontal cortex, we determine whether the collaboration or the competition of brain activity or protein resources can explain the promotion or interference memory phenomena.

"Estudio de moduladores endógenos de la Na+, K+ -ATPasa cerebral durante el desarrollo postnatal en ratas" (2001). Calviño, María Ana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Na+, K+-ATPasa es una enzima especialmente abundante en las membranas neuronales de la región sináptica, que parecería ser crucial en el ciclo celular normal y durante la diferenciación del Sistema Nervioso. Los resultados aquí presentados demuestran la presencia de dos fracciones solubles de corteza cerebral de rata, picos I y II, con distinta capacidad modulatoria sobre la Na+, K+-ATPasa de membranas sinaptosomales en un estadio temprano del desarrollo postnatal de la rata (4 días de edad). Además, una subfracción más pura del pico II se aisló de la corteza cerebral de ratas neonatas semejante a la de ratas adultas (denominada endobaína E por las propiedades símil-ouabaína), pero con mayor actividad sobre la enzima. Sin embargo, debido al comportamiento del modulador sobre la actividad de la Na+, K+-ATPasa de membranas sinaptosomales de corteza cerebral de ratas neonatas se sugirió que dicha sustancia podría fijarse además a sitios no relacionados con la inhibición de la enzima. Trabajando con prismas de corteza cerebral de rata, se comprobó que la endobaína E estimula la hidrólisis de fosfoinosítidos en forma transitoria a lo largo del desarrollo postnatal, un mecanismo de señalización intracelular implicado en la regulación de la plasticidad sináptica de los períodos críticos en el desarrollo del Sistema Nervioso. Se demostró que el mecanismo de acción de esta sustancia endógena sería diferente del de la ouabaína, aún cuando el efecto de ambas involucra la activación del subtipo 5 del receptor metabotrópico del glutamato y la liberación de glutamato por reversión del transportador de dicho neurotransmisor. Los datos sugieren que la liberación del neurotransmisor no sería suficiente para explicar el efecto de dichas sustancias y en el caso de la ouabaína los resultados estarían de acuerdo con la existencia de un sitio de unión en el receptor glutamatérgico.

Abstract:
Na+, K+-ATPasa is a synaptic membrane enzyme which seems to be crucial in the normal cell cycle and differentiation of the Nervous System. The presence of two brain soluble fractions -peaks I and II- which differently modulate Na+, K+-ATPase activity is described at an early postnatal stage of rat development (4-day-old rats). A more purified II-E fraction, termed endobain E (endogenous ouabain-like factor), was isolated from neonatal rat brain cortex which exerted a higher inhibitory activity than the homologous fraction prepared from adult brain. Such endogenous Na+, K+-ATPase modulator behavior on neonatal versus adult synaptosomal membrane suggested its binding to membrane sites unrelated of enzyme inhibition. Employing rat brain prisms, we found that, similar to ouabain, endobain E transiently stimulates phosphoinositide hydrolysis during postnatal brain development, a mechanism most likely responsible for neuronal neocortical plasticity during critical periods. Although the effect of both endobain E and ouabain involve subtype 5 metabotropic glutamate receptor activation and glutamate release through reversal of the plasma membrane glutamate transporter, a dissimilar mechanism was proved. Data suggested that glutamate release is not enough to explain the effect of both substances and are in favour of the existence of a glutamate receptor binding site for ouabain.

"Estudio de mutaciones noveles como causa de la deficiencia de 21-hidroxilasa" (2014-09-16). Taboas, Melisa. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Con el nombre de Hiperplasia Suprarrenal Congénita (HSC) se conoce a un conjunto de enfermedades autosómicas recesivas en las que se encuentra afectada la esteroidogénesis adrenal. En el 95% de los casos, la HSC se produce por deficiencia de la enzima 21- hidroxilasa. Esta deficiencia puede manifestarse en forma severa o clásica (FC), o leve o no clásica (FNC). La enzima está codificada por el gen CYP21A2, que se encuentra duplicado y repetido en tándem junto a un pseudogen CYP21A1P con el que comparte 98% de identidad de secuencia. La elevada identidad de secuencia produce que la región sea propensa al alineamiento incorrecto y a la recombinación desigual, como así también a la transferencia de secuencias del pseudogen al gen mediante el mecanismo de conversión génica. La mayor parte de los afectados son compuesto heterocigotas ya que poseen diferentes mutaciones en cada uno de sus alelos. En estos casos, la manifestación clínica de la enfermedad será aquella que se relaciona con el alelo con mayor actividad enzimática. Si bien la mayor parte de los pacientes presentan mutaciones derivadas del pseudogen, hasta la fecha se identificaron más de 240 mutaciones diferentes como causales de la patología. En un trabajo previo de nuestro laboratorio se analizó la presencia de las 10 mutaciones más frecuentes derivadas del pseudogén en pacientes con deficiencia de 21-hidoxilasa de nuestra población. En esta tesis se estudió por secuenciación todo el gen CYP21A2 y su región promotora en muestras de ADN de 87 pacientes (15 FC y 72 FNC) en los cuales restaba determinar el defecto causante de la patología en uno o en ambos alelos del gen. Nuestro análisis reveló la presencia de 12 mutaciones poco frecuentes ya descriptas previamente y 7 mutaciones noveles, 6 en la región codificante y 1 en un sitio aceptor de splicing en el intrón 5. Para todas las mutaciones noveles halladas se analizaron 50 individuos de la población general mediante amplificación de la región de interés y cortes con enzimas de restricción y en ningún caso se halló la presencia de las mismas. Se hallaron asimismo, variantes de secuencias no descriptas previamente en regiones promotoras e intrónicas que se clasificaron como polimorfismos ya sea porque las mismas se observaron también en individuos de la población general, o bien porque no se encuentran en sitios que a priori pudieran afectar el splicing, respectivamente.A los efectos de analizar la implicancia biológica de las mutaciones noveles halladas, se realizaron aproximaciones bioinformáticas y ensayos funcionales. Dado que la proteína CYP21A2 humana no está cristalizada, la misma se modeló mediante herramientas in silico a partir de 18 cristalografías de otras proteínas de la familia CYP. Una vez obtenido el modelo, se analizó la estabilidad de las mutantes aminoacídicas halladas que no generaban corrimiento del marco de lectura. Las predicciones indicaron cambios en la estabilidad y/o carga de la superficie de la proteína que sugerirían un posible efecto deletéreo de las mismas. Para los ensayos funcionales, se realizaron mutagénesis dirigidas sobre un vector que contiene al ADNc de CYP21A2, transfección en células COS-7 y estimación de la expresión de la proteína y de su actividad mediante Western Blot y cromatografía en placa delgada (TLC), respectivamente. En todos los casos, las mutantes presentaron una actividad enzimática residual (AER) entre el 15 y el 50%, que se corresponderían con alelos relacionados a la FNC de la patología. En uno de los pacientes, una de las mutaciones noveles se encontraba en el mismo alelo con otra descripta previamente. Los ensayos funcionales demostraron que si bien las mismas en forma aislada son leves, la presencia de ambas en cis predice un alelo severo con una AER cercana al 2%. Para algunas de las mutaciones puntuales y para la doble mutante se observó una disminución en la cantidad de proteína resultante. Para la mutación en el sitio aceptor de splicing en el intrón 5, los análisis bioinformáticos predijeron la anulación del sitio canónico y la presencia de 2 sitios crípticos de splicing, uno en la mitad del intrón 5 y otro en el exón 6. Para evaluar la eficiencia de splicing in vitro, los estudios funcionales consistieron en la construcción de un minigén mediante amplificación de un fragmento entre el exón 4 y el exón 7 del gen, posterior clonado en un vector de expresión, transfección en células HeLa, HEK-293 e Y-1 y valoración del ARNm obtenido por RTPCR. Los ensayos revelaron que la mutante presentaba un ARNm más corto que la salvaje producto de una deleción de 16 nucleótidos debido a la utilización del sitio críptico de splicing dentro del exón 6. Esta deleción generaría un codón de terminación prematuro que predice un alelo severo relacionado con la FC de la patología. Mediante este estudio, el genotipo se completó en 27 de los 87 pacientes (100% de los pacientes FC y 16,6% FNC). Estos resultados señalarían que es probable que el valor de 17- hidroxiprogesterona (17-OHP) post estímulo con ACTH (test que se realiza para incluir a los pacientes de la FNC), esté sobreestimando la prevalencia de la patología. A los efectos de disciminar si los valores hormonales difieren entre los pacientes FNC totalmente genotipificados y aquellos que no, se compararon los valores hormonales de 17-OHP basal y post estimulación con ACTH, así como los de Dehidroepiandrosterona-sulfato (DHEA-S), Testosterona (T) y Androstenediona (A) de 271 pacientes diagnosticados como FNC. Los mismos fueron agrupados de acuerdo a si poseen los 2 alelos mutados, uno o ninguno. Los resultados obtenidos indican que no hay diferencias significativas entre los grupos estudiados cuando se analizaron los valores de A, T y DHEA-S. Sin embargo, en el caso de 17-OHP basal y post ACTH, se observan diferencias significativas entre aquellos que poseen ambos alelos con mutación y los demás grupos de estudio. Asimismo, se observó que si los pacientes presentaban valores de 17-OHP post ACTH entre 10 (valor hormonal de corte para la inclusión de pacientes) y 20 ng/ml, sólo en el 23% se hallaban los 2 alelos mutados Si el valor hormonal era mayor a 20 ng/ml, el 85% posee ambos alelos con mutación. Por último, analizando los genotipos encontrados en todos los pacientes de nuestra cohorte, ya sea mediante secuenciación o mediante el estudio de las 10 mutaciónes más frecuentes, observamos que en un 97,7% de los pacientes el fenotipo se correspondía con el genotipo hallado. Las principales discordancias se hallaron en pacientes con la mutación p.I172N, ya que la misma se asoció tanto a la forma virilizante simple (VS) como a la forma perdedora de sal. Por otro lado, si bien la mutación p.R356W está altamente relacionada a la forma PS de la enfermedad, un paciente VS presentaba esta mutación en heterocigosis compuesta con otra mutación que predice una enzima sin actividad en el alelo homólogo. Asimismo, en la literatura se describe a la mutación poco frecuente p.H62L como una mutación leve y asociada a la FNC de la patología. En esta tesis, sin embargo, se refiere que la misma se relacionaría también con la forma VS de la enfermedad. Por último, la mutación poco frecuente p.R341P se asocia a la forma VS, si bien en este trabajo se describe un paciente PS que poseía esta mutación en heterocigosis compuesta con la mutación c.283-13A/C>G en el otro alelo.

Abstract:
Congenital Adrenal Hyperplasia (CAH) is an autosomal recessive disease caused, in 95 % of cases, by the deficiency of the 21–hydroxylase enzyme. This disorder, which is the most frequent inborn error of metabolism, has a broad spectrum of clinical forms, ranging from severe or classical, which includes the salt-wasting (SW) and simple virilising (SV) forms, to the mild late onset or non-classical form of CAH (NCCAH). The enzyme is encoded by the CYP21A2 gene, which is duplicated and repeated in tandem along with the CYP21A1P pseudogene with which it shares 98 % of sequence identity. The high degree of sequence identity makes this region prone to misalignment and unequal recombination, as well as the transference of sequences from the pseudogene to the gene by gene conversion. Although most of the patients presented pseudogene derived mutations, approximately 240 mutations haven been described up to date. In this work, DNA from 87 patients (15 CCAH and 72 NCCAH) was analyzed by complete gene sequencing. In these patients the determination of the defect causing the disease remained inconclusive after the study of the 10 most frequent pseudogen-derived mutations. We found 12 less frequent mutations previously described, and 7 novel ones, 6 of them in the coding region and one in an acceptor splice site in intron 5. For all the novel mutations, DNA from 50 randomly selected individuals from the general population were analyzed by PCR amplification followed by restriction enzyme assays, but none of these mutations were found. We also found novel sequence variants in in the promoter region of the gene and in introns that were classified as polymorphisms, either because they were found in individuals from the general population, or because they are placed in regions that might not affect splicing outcome, respectively. In order to study the biological consequences of the novel mutations, bioinformatic approaches and functional assays were performed. Since human CYP21A2 was not crystallized yet, the protein was modeled by means of in silico tools using 18 other CYP proteins as templates followed by the estimation of the mutant protein stability. Molecular modeling studies revealed changes in the stability and/or surface charge of the protein that could be related to the clinical manifestations found in the patients. For functional assays, site-directed mutagenesis of a vector containing the CYP21A2 cDNA were performed, followed by transfection into COS-7 cells and estimation of the protein expression by Western blotting (WB) and its activity by TLC. In all cases, the mutants showed a residual enzymatic activity (REA) lesser than 50% of the wild type protein. Accordingly, all the variants predict alleles compatible to the mild NCCAH form of the disease. In one patient, one of the novel mutations was found in the same allele with another previously described. Functional assays showed that while the mutations in isolation are mild, the presence of both mutations in cis predict a severe allele with a REA close to 2%. In the WB assays, some of the isolated mutants and the double one showed less amount of the protein in comparison with the wild type. For the novel mutation in the acceptor splcing site of intron 5, in silico analyses predicted the disruption of the canonical site. Besides, two strong putative cryptic splicing sites, one located in the intron 5 and one in exon 6 were predicted. For functional assays, splicing reporter minigenes were constructed comprising the genomic region from exon 4 to exon 7 of the CYP21A2 gene. The vector was transiently transfected into HEK-293, HeLa, Y-1 cells and splicing was assessed by RT-PCR. We demonstrate that the allele with the intron 5 mutation completely abolishes the use of the canonical splicing site. Instead, the use of the cryptic splicing acceptor site within exon 6 created an mRNA with a 16 nt deletion leading to the appearance of a premature stop codon. A severe allele related to the classical form of the disease is strongly suggested by this mutation. After our work, the genotype was completed in 27 out of 87 patients (100 % of the CCAH and 16,6% of the NCCAH). This results may indicate that the currently cut-off hormonal levels used for the diagnosis of NCCAH is overestimating the prevalence of the disease. To evaluate if hormone values differ between the NCCAH patients fully genotyped and those with at least one non-determined allele, basal and post ACTH stimulation 17-hydroxyprogesterone (17-OHP), dehydroepiandrosterone-sulfate (DHEA-S), testosterone (T) and androstenedione (A) values were compared in 271 patients diagnosed as NCCAH. Patients were grouped according to whether they had 2 mutated alleles, one or no one. Our analysis revealed no significant differences between groups when the values of A, T and DHEA-S were compared. However, basal and post ACTH 17-OHP levels were statistically different between those patients having both mutated alleles and those with one or no one. Among patients with 17-OHP post ACTH values between 10 (currently cut-off value) and 20 ng/ml, only a 23 % had 2 mutated alleles, whereas if the values were greater than 20 ng/ml, 85 % of patients had mutations in both alleles. Finally, analyzing the genotypes found in all our patients, either after sequencing or by studying the 10 most frequent mutations, we observed a 97,7% phenotype-genotype correlation, while discrepancies were found mostly associated to the p.I172N mutation. Patients having this mutation presented either with the SV form or with the SW one. In addition, while p.R356W mutation is strongly associated with the SW form of the disease, we found the mutation in one patient SV with another severe mutation in the homologous allele. On the other hand, the less frequent p.H62L is described in literature related to the mild NCCAH form. In this work, however, it is reported associated to the SV form of the disease. Finally, the less frequent SV p.R341P mutation, is herein described in a SW patient having the c.283-13A / C> G mutation in the homologous allele.

"Estudio de nuevas terapias naturales y antiangiogénicas para el tratamiento de la endometriosis" (2012-03-26). Ricci, Analía Gabriela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La endometriosis se define como la presencia de tejido endometrial fuera de la cavidad uterina y sus principales síntomas asociados son el dolor y la infertilidad. Las terapias médicas disponibles actualmente resultan insuficientes debido a las altas recidivas de la enfermedad y los efectos adversos que generan. Asimismo, en los últimos años, se ha propuesto a los inhibidores de la angiogénesis como posible alternativa terapéutica, así como también el uso de compuestos naturales presentes en alimentos que formen parte de nuestra dieta. El objetivo general de esta tesis consistió en evaluar el efecto de un agente antiangiogénico, el bevacizumab, y de dos polifenoles naturales, el resveratrol y el galato de epigalocatequina (EGCG); sobre el crecimiento de lesiones endometriósicas en un modelo murino de endometriosis. Asimismo, se estudió el efecto in vitro de los polifenoles sobre la supervivencia de células epiteliales de endometrio eutópico provenientes de pacientes con endometriosis y mujeres controles. Nuestros resultados sugieren que el resveratrol y el EGCG tendrían un efecto inhibidor del crecimiento del endometrio ectópico, regulando los niveles de apoptosis y proliferación celular, así como la vascularización de la lesión endometriósica. El bevacizumab también mostró ser efectivo en la inhibición de la endometriosis en el modelo murino. No obstante, es importante considerar sus posibles efectos secundarios y su costo como tratamiento. Siendo así, sugerimos que el resveratrol y el EGCG serían una opción terapéutica promisoria. Los resultados obtenidos en esta tesis avalan continuar investigando estos compuestos naturales para poder definir los mecanismos de acción que participan en el efecto inhibitorio observado, y determinar también las concentraciones plasmáticas efectivas en pacientes para poder esclarecer su potencial utilidad como agentes preventivos en el tratamiento de la endometriosis.

Abstract:
Endometriosis is defined as the presence of endometrial tissue outside the uterine cavity being its main associated symptoms, pain and infertility. Medical therapies available up to date are unsatisfactory due to their adverse effects and the frequent pathology recurrences. In the last few years, antiangiogenic agents and several natural compounds present in different dietary sources have been proposed as a potent alternative therapy. Given this scenario, the general objective of the present thesis was to evaluate the effect of bevacizumab, known for its antiangiogenic properties, as well as the effect of two natural polyphenols, resveratrol and epigallocatechin-3-gallate (EGCG), on the growth of endometriotic lesions in a mouse model of endometriosis surgically induced. Moreover, the effect of both polyphenols on the survival of epithelial endometrial cells from endometriosis patients and control subjects was evaluated in vitro. Our results suggest that resveratrol and EGCG would have a repressive effect on endometriotic growth, by increasing apoptosis and reducing cell proliferation and vascularization within the epithelial fraction of the endometriotic lesion. Bevacizumab was also effective in the inhibition of endometriosis development in the mouse model. Nevertheless, it is important to take into account its adverse effects as well as its cost. Based on these data, we propose that resveratrol and EGCG become a promising therapeutic option. Our results support to keep ongoing with the research in order to elucidate the mechanisms of action involved in the observed inhibitory effects, and determine the effective doses for patients to clarify the usefulness of these agents in endometriosis treatment.

"Estudio de ondas de gravedad atmosféricas a partir de datos de radio ocultamiento GPS y de simulaciones numéricas, a escala regional en la zona de Cuyo y global" (2009). Llamedo Soria, Pablo Martín. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo, se analizan las ventajas y limitaciones de la técnica de radio ocultamiento entre satélites GPS y de órbita baja, aplicada al estudio de las ondas de gravedad en las atmósferas baja y media. En particular, las limitaciones de la técnica mencionada son puestas en evidencia, a fin de cuantificar de la manera más realista posible, la densidad de energía asociada a las ondas atmosféricas, en función de su variabilidad estacional, latitudinal, longitudinal y en altura. Se pone en evidencia la ventaja del método en términos estadísticos, cuando se aplica a un número suficiente de perfiles de temperatura. Se discute en detalle la configuración geométrica relativa entre la trayectoria de los rayos descriptos por la señal de radio y los frentes de onda durante cada ocultamiento, así como las diferentes técnicas usuales de procesamiento de datos para separar la componente oscilatoria de los perfiles de temperatura. En el presente trabajo se aplica y discute una de ellas, consistente en la aplicación de un filtro pasa banda a cada perfil individual, antes de realizar el proceso de promediado. Los resultados obtenidos son aplicados para obtener una climatología de ondas de gravedad a escala global y regional. Se han observado algunas características previamente conocidas de la distribución espaciotemporal de la actividad ondulatoria en la estratósfera. A escala global, la actividad ondulatoria fue derivada de datos de radio ocultamiento GPS, obtenidos por las misiones CHAMP, GRACE y SAC-C entre los años 2001 y 2009. A escala regional, se utilizaron datos obtenidos por la misión COSMIC entre los años 2006 y 2009. El estudio de eventos de radio ocultamiento individuales de aparente gran energía potencial, ha sido complementado con simulaciones numéricas a partir de modelos de mesoescala y de la aplicación de la técnica de wavelets. En paricular, la región de Cuyo constituye un laboratorio natural para el estudio de ondas de gravedad,originables por los tres principales mecanismos usualmente reconocidos: convección profunda, forzado orográfico y ajuste al equilibrio geostrófico.

Abstract:
In the present work, the advantages and limitation of the radio occultation techniques between GPS and low earth orbit (LEO) satellites are analyzed. In order to give a realistic measure of the energy associated to atmospherics waves, the limitation are highlighted. From a statistical point of view, whenever the method is applied to a suficient number of temperature profiles, advantages are put in evidence. The relative geometric configuration between the ray trajectory of GPS signal and wave fronts during each occultation is discussed, as well as the different data processing techniques to separate the perturbation component from the temperature profiles. One of these data processing techniques is applied and discussed. Essentially, it consists in apply a band pass filter to each individual temperature profile before the average process. The obtained results were implemented to give a global and regional scale gravity waves climatology. Some previously known characteristics of the spatial-temporal distribution of wave activity in the stratosphere were observed. At global scale, gravity waves climatology were derived from GPS radio occultation data, obtained by CHAMP, GRACE and SAC-C missions between 2001 and 2009 years. At regional scale, data from the COSMIC mission were used, obtained between 2006 and 2009 years. The study of individual events with an apparent high wave activity, were complemented with numerical simulation from mesoescale models and the applications of wavelets techniques. In particular, the Cuyo region constitutes a natural laboratory where the main sources of gravity waves coexist: deep convection, topographic forcing and geostrophic adjustment.

"Estudio de ondas de gravedad mediante radio ocultamientos GPS: Limitaciones e incertidumbres" (2014). Luna, Diego Alejandro. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El radio ocultamiento GPS (RO GPS) es una técnica de sensado remoto para la medición de propiedades físicas de la atmósfera. En este trabajo se estudiaron las limitaciones de las mediciones de RO para evaluar la actividad de las ondas de gravedad atmosféricas (OG). También se presenta un estudio del rango de variabilidad de actividad ondulatoria aplicado específicamente en la zona de la Patagonia y Península Antártica, por ser una región que exhibe una gran intensidad. Esto permite por lo tanto comparar la importancia de las incertidumbres de medición frente a los rangos típicos de variación de la actividad ondulatoria. La medición por RO GPS no es una medición puntual sino un promedio sobre una gran distancia horizontal y en una dada dirección. Para analizar las consecuencias de este promediado espacial en el estudio de OG se hizo uso de la alta densidad de eventos de RO en el lado Este de la cordillera de los Andes durante los meses iniciales de la misión COSMIC (Constellation Observing System for Meteorology, Ionosphere and Climate). Esta zona es conocida por su alta actividad ondulatoria. Se eligieron dos pares de perfiles de temperatura, ambos conteniendo dos radio ocultamientos cercanos en tiempo y espacio. Un par mostró diferencias significativas entre perfiles de temperatura. Se efectuaron simulaciones de mesoescala para entender esta discrepancia. La misma fue atribuida a la presencia de estructuras inhomogéneas en la atmósfera, causadas por OG. La actividad ondulatoria suele cuantificarse mediante el cálculo de la energía potencial (Ep) a través de la integración del cociente entre temperatura de fondo y perturbación (ondas), entre dos altitudes. En este estudio se analizan y cuantifican las contribuciones de diferentes parámetros y variables en la incertidumbres del cálculo de la Ep en la baja estratósfera en perfiles de medición de RO GPS. En particular, se utilizó el método de Monte Carlo para estudiar la incertidumbre en la Ep debida a diferentes distribuciones de errores en la temperatura. Se estudió la dependencia temporal y espacial de la actividad ondulatoria en la baja estratósfera sobre el extremo sur de la Cordillera de los Andes y la Península Antártica. El análisis cubrió los años 2006 a 2011. Se encontraron diferencias significativas entre las actividades mensuales, en concordancia con estudios previos realizados con otros instrumentos y en otros períodos. Las distribuciones de probabilidad de Ep se analizaron mediante tests de Kolmogorov-Smirnov. Dado que las distribuciones de Ep varían según la época del año y no poseen simetría respecto de la media, se propone el uso de la mediana de los valores de Ep como cuantificador de la actividad ondulatoria.

Abstract:
GPS Radio occultation (GPS RO) is a remote sensing technique used for measuring the physical properties of the atmosphere. In the present work, the limitations of RO measurements to evaluate atmospheric gravity wave (GW) activity have been studied. Also, an analysis of the variability range of GW activity applied over the Patagonia and Antarctic Peninsula, is presented. This region has been chosen due to its high activity. This fact allows a comparison between measurement uncertainties and typical ranges of variability of GW activity. A GPS RO measurement is the result of an average over a great horizontal distance in a given direction. In order to analize the impact of this average on the GW studies, it has been taken advantage of the anomalous high density of RO events at the eastern side of the highest Andes Mountains during the initial months of the mission COSMIC (Constellation Observing System for Meteorology, Ionosphere and Climate). This zone is known for its high GW activity. Two pairs of RO, both containing two occultations that occurred close in space and time, were chosen. One pair showed significant differences between both temperature profiles. Numerical simulations with a mesoscale model were performed, in order to understand this discrepancy. It has been attributed to the presence of a horizontal inhomogeneous structure caused by GW. GW activity is usually quantified by calculating the potential energy (Ep) through the integration of the ratio of perturbation (waves) and background temperatures between two given altitudes. In this study, the contributions of different parameters and variables to the uncertainty in the calculation of Ep in the lower stratosphere via GPS RO measurements were investigated and quantified. In particular, a Monte Carlo method was used to evaluate the uncertainty that results from different GPS RO temperature error distributions. The seasonal and geographical behaviour of GW activity in the lower stratosphere over the southernmost Andes mountains and their prolongation in the Antarctic Peninsula was studied. The study covered the years 2006 to 2011. Significant variation of monthly activity was found, in agreement with results from other instruments and other periods. Probability distributions of Ep were studied using Kolmogorv-Smirnov tests. As the distributions present monthly variations and are not symmetrical around the mean, the median of the Ep values was proposed as an activity quantifier.

"Estudio de películas de óxidos de hierro crecidas y depositadas en diversos ambientes" (1990). Olmedo, Ana María T.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de posibles estrategias terapéuticas para neuroteratología funcional" (1999). Wolansky, Marcelo Javier. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
A partir de los años 60s se creó una subdisciplina dentro de la Teratología llamada Neuroteratología Funcional o de la Conducta. Ésta estudia especificamente las anomalías comportamentales que persisten a través de la vida del individuo que fue expuesto a agentes químicos neurotóxicos durante el neurodesarrollo. Pese a que en los últimos 30 años se han acumulado numerosas pruebas en modelos animales experimentales y estudios longitudinales y relevamientos epidemiólogicos en humanos acerca del potencial neuroteratogénico funcional de muchos agentes químicos de consumo humano rutinario, son sumamente escasos los grupos de investigación que trabajan en el diseño de estrategias terapéuticas para revertir este tipo neurotoxicidad. En esta tesis se reportan los resultados dela aplicación de 3 aproximaciones experimentales distintas probadas en el modelo animal rata. En todas las estrategias terapéuticas ensayadas la evaluación de los cambios comportamentales inducidos se realizó a posteriori de los tratamientos farmacológicos o ambientales con el Test de Entrenamiento Circular (TEC), el cual fue desarrollado previamente en nuestro laboratorio y validado para el estudio durante el desarrollo postnatal de alteraciones de conducta inducidas a nivel perinatal. Primero, modificamos las condiciones ambientales de cría durante la pubertad para revertir las alteraciones persistentes -motoras y asociativo-espaciales- inducidas por exposición al psicofármaco Haloperidol (HAL) durante la lactancia. En segunda instancia, aprovechando los efectos dependientes de período de desarrollo que tiene el mismo HAL, administramos esta droga durante la lactancia para corregir la neuroteratología motora inducida con la exposición al mismo agente durante la gestación. El mismo abordaje fue realizado en otra serie de experimentos con la droga anticonvulsivante Difenilhidantoina (DFH). Aunque las alteraciones motoras que esta droga induce luego de la exposición prenatal no pudieron ser atenuadas con la administración postnatal, sí pudo observarse una corrección de la neuroteratología del comportamiento espacial. Por último, se trabajó con el Factor de Crecimiento Nervioso. Con este agente pudimos modificar un período crítico de plasticidad sináptica dependiente de actividad fisiológica que aparece en el núcleo estriado sólo durante la quinta semana de vida. La posibilidad de modular la calidad y la duración de ciertas propiedades plásticas del cerebro durante el desarrollo es un punto de partida para diseñar nuevas estrategias terapéuticas con fármacos, como ha sido ya demostrado en el caso de la maduración de la vía visual. En forma integral, los experimentos presentados confirman la utilidad del test TEC para evaluar con sensibilidad las alteraciones funcionales inducidas en modelos experimentales de Neuroteratología de Conducta. El TEC aparece también útil para determinar el éxito o el fracaso en la examinación de diferentes estrategias terapéuticas para este tipo de disfunciones.

Abstract:
In the sixty's was developed a new field born from Teratology which was named Behavioral or Functional Neuroteratology. That is devoted to the study of enduring behavioral anomalies present through the life of an individual after be exposed to neurotoxic chemical agents during neurodevelopment. In the last 30 years it was growing a great body of evidence in experimental animals models, longitudinal follow-ups and epidemiological surveys in humans about the potential risk on human consumption of functional neuroteratogens for brain maturation. Yet, there is an scarcity of research groups working in animal models related to the design of therapeutical strategies to revert this type of developmental neurotoxicity. In this doctoral thesis are reported the results of the application of three experimental approachs working with the rat. For all strategies, the evaluation of behavioral changes induced during the experiments was performed at different times after treatments submitting the animals to the Circling Training Test (CT) which was developed in our laboratory and validated to study alterations of the natural pattern of brain maturation. First of all, we modify the rearing-housing environmental conditions during infancy to revert the motor and spatial-associative alterations previously induced by exposure to the psychoactive drug Haloperidol (HAL) during lactation. Second, we take advantage of those HAL effects dependent on period of exposure during development. So, we administered this drug during lactation to recover the motor deficits induced with the same agent by exposing rats during gestation. The same approach was applied in other series of experiments working with the anticonvulsant drug Diphenylhydantoin (DPH). We had a partial success in this case. At last, we use the Nerve Growth Factor, a prototypic neurotrophin. With this agent we could modulate a critical period of activity-dependent synaptic plasticity in rat striatum that normally appears exclusively around the fifth week of life. The modification during development of the quality and extent of the brain plastic properties opens the way to design new pharmacological treatments for developmental alterations. Certainly, it is that happened for the visual model of plasticity, and we detect some analogies in the reported plastic responses to NGF in this cortical system and our striatal model. Altoghether, the present experiments confirm the value of the TEC to evaluate with sensitivity induced functional alterations in animal models of Behavioral Neuroteratology. Besides, the TEC appears also a good option to determine the success or failure in examining several therapeutical strategies for this type of dissability.

"Estudio de propiedades de materiales mediante la generación de ultrasonido con luz láser" (2016-06-30). Alvarez, Natalia Clara. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los ensayos no destructivos involucran técnicas de análisis que permiten el estudio de materiales sin modificar sus propiedades y manteniendo sus características funcionales luego del ensayo. Estas técnicas se emplean tanto en el ámbito industrial como en el ámbito de la investigación. Existe gran interés en el desarrollo de este tipo de herramientas, ya que permiten el ahorro de costos y tiempos en la producción y evaluación de materiales y productos. En el método de ultrasonido láser un pulso de luz incide sobre la superficie del material bajo estudio y éste es parcialmente absorbido. A partir de este fenómeno se pueden producir diversos procesos (expansión térmica, evaporación y eyección de material, etc.) que generan una perturbación que se propaga en el medio, denominada ultrasonido. Para generar ondas de ultrasonido con un gran ancho de banda se utilizan pulsos cortos de láser de alta potencia. Las características del ultrasonido generado dependen de la forma y duración del pulso, de la extensión del área iluminada y de la potencia incidente. Si la potencia incidente es demasiado alta, puede producirse la ablación de la superficie. La ablación es en la mayoría de los casos algo que se desea evitar, ya que deteriora el material que se está estudiando. En los ensayos no destructivos se emplean potencias en el régimen denominado termoelástico, donde el material sólo se ve afectado por la expansión térmica y, por consiguiente, su estructura no resulta afectada. En la técnica de ultrasonido láser, las ondas de ultrasonido generadas en el material son detectadas sobre su superficie mediante métodos ópticos de interferometría. Esta técnica es de no contacto y por lo tanto es ideal para ensayar materiales en situaciones donde el acoplamiento de un sensor con la muestra puede ser riesgoso o puede degradar la exactitud de la medición. Una de las principales ventajas de la detección interferométrica es su gran ancho de banda, a diferencia del caso de sensores de contacto, como por ejemplo, los transductores piezoeléctricos. No obstante, la limitación más importante de este método de detección es su gran sensibilidad a las diferencias de camino óptico introducidas por el ambiente, ya sea por vibraciones, fluctuaciones térmicas, etc. En esta Tesis se desarrolla, en el marco de los ensayos no destructivos, una técnica de ultrasonido láser de características robustas. Esta técnica puede ser aplicable aún en entornos industriales, donde las técnicas interferométricas tradicionales suelen presentar serios problemas debido a la presencia de fuertes vibraciones. Por un lado, en este trabajo se exploran técnicas interferométricas de detección de ondas superficiales de ultrasonido en régimen termoelástico. Se proponen métodos de recuperación de fase que permiten obtener el desplazamiento medio de la superficie bajo análisis, aún en presencia de fluctuaciones en la longitud de camino óptico de varios órdenes de magnitud mayores a las generadas por el ultrasonido. Por otro lado, se estudia la capacidad de la técnica de ultrasonido láser propuesta para caracterizar diversos aspectos de la muestra bajo análisis, como son sus constantes elásticas y su espesor. También se generan defectos controlados en las muestras y se realiza la caracterización de su profundidad y localización a través del análisis, en tiempo y frecuencia, de las señales de ultrasonido. Para validar los resultados obtenidos experimentalmente se desarrolla un esquema numérico que simula el fenómeno termoelástico de generación de ultrasonido en materiales elásticos lineales, a partir de la incidencia de ondas electromagnéticas. Este método numérico permite modelar, también, la propagación de las ondas de ultrasonido en presencia de defectos en el material.

Abstract:
Nondestructive testing involves analysis techniques that allow the study of materials without altering their properties and maintaining their functional characteristics after testing. This methods are employed both in industrial applications and science research. There is great interest in the development of these kind of tools, since they allow to save costs and time in the production and evaluation of materials and products. In the laser ultrasonics method, a light pulse impinges on the surface of the material under test and it is partially absorbed, after which, diverse mechanisms may occur (such as thermal expansion, vaporization and material ejection) generating a perturbation that propagates in the medium, called ultrasound. In order to produce high bandwidth ultrasound waves, a short high power laser pulse is employed. The ultrasound wavefront properties depend on the shape and temporal length of the pulse, as well as, on the extension of the illuminated area and the laser power. If the laser power is too high, ablation can occur. Ablation is usually undesirable since it deteriorates the material under study. Hence, in nondestructive testing, the laser power is kept within the thermoelastic regime where the material undergoes thermal expansion only. Thus, maintaining its structural health. In the laser ultrasonics technique, ultrasound detection is achieved on the sample surface by means of optical interferometric methods. Since this technique does not involve physical contact with the sample, it is ideal for performing material testing in situations where the coupling of the sensor and the sample is risky or may jeopardize the validity of the test. One of the main advantages of interferometric detection, in contrast to contact sensors such as piezoelectric transducers, is its high bandwidth. However, the major limitation of this method comes from its high sensitivity to optical path modifications introduced by vibrations, thermal fluctuations and other undesired environmental variations. In this Thesis we develop a nondestructive technique based in laser ultrasonics which presents robust properties. This technique can be satisfactorily employed in industrial environments, where traditional optical interferometric detection fails due to the presence of strong vibrations. On the one hand, we explore interferometric techniques to achieve detection of surface ultrasonic waves in thermoelastic regime. We propose phase retrieval methods which allow to recover the surface mean displacement successfully, even under situations in which the undesired fluctuations in the optical path length are several orders of magnitude higher than the optical path differences introduced by the ultrasound. On the other hand, we study the ability of the proposed laser ultrasonic technique to successfully characterize several properties of the sample under test, such as, elastic parameters and thickness. We also create controlled defects in aluminium samples and estimate experimentally its depth and position by means of time-frequency signal analysis techniques. In order to validate the experimental results, we also develop a numerical method that allows to simulate the thermoelastic ultrasound generation, in linear elastic materials, from incident electromagnetic waves. This method is also capable of modeling the ultrasound propagation under the presence of defects in the simulated sample.

"Estudio de proteínas de unión a ácidos nucleicos en el parásito Trypanosoma cruzi : identificación y caracterización de una proteína con múltiples dominios dedos de zinc" (1999). Espinosa, Joaquín Maximiliano. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio de rayos cósmicos de muy alta energía con AMIGA, una extensión del Observatorio Pierre Auger: detectores de superficie y contadores de muones para estudiar la composición, dirección de arribo y espectro de los rayos cósmicos" (2012). Sidelnik, Iván Pedro. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los rayos cósmicos son partículas que llegan a nuestro planeta desde el espacio exterior, con energías comprendidas entre 109 eV y 1020 eV, siendo los más energéticos un gran enigma, ya que no conocemos cuales son sus fuentes, su composición química ni cómo son acelerados. El Observatorio Pierre Auger (PAO) fue dise~nado y construido para estudiar los rayos cósmicos a energías mayores de 1018 eV. El mismo se encuentra en la zona de Pampa Amarilla, próximo a la ciudad de Malargüe, en la provincia de Mendoza. Su tamaño gigante de aproximadamente 3000 km2 y el concepto híbrido de detección, proporcionado por detectores de superficie y de fluorescencia atmosférica, confieren al PAO capacidad suficiente para evaluar el espectro de energía, direcciones de arribo y composición química de los rayos cósmicos. Estos observables son los más importantes y el PAO los mide con altísima resolución y una estadística sin precedentes, utilizando las lluvias atmosféricas extensas que estos generan cuando ingresan a la atmósfera. Para bajar la energía umbral de detección del PAO a valores de 1017 eV, distintas extensiones fueron elaboradas en los últimos años. Uno de estos proyectos es Auger Muons and Infill for the Ground Array (AMIGA), que reduce la energía de detección en una década respecto a la energía original del PAO, posibilitando estudios en la región del espectro donde se cree encontrar una transición en el origen de los rayos cósmicos desde fuentes galácticas a extra galácticas. AMIGA posee dos tipos de detectores: por un lado detectores de superficie con separación de 750 m, menor que la del PAO de 1500 m, generando una región más densa de detectores denominada infill. Por otro lado contadores de muones que funcionan con la técnica de centelleo, que comenzaron a instalarse junto al arreglo denso de detectores, con el objetivo de determinar la composición química de los rayos cósmicos a partir del contenido muónico de las lluvias. Esta tesis esta abocada al estudio de los detectores y la física que posibilita AMIGA. La primer parte de la tesis esta dedicada al estudio de los contadores de muones de AMIGA. Se presenta la caracterización del primer prototipo del contador, a partir de la cual se entendió el funcionamiento del contador en condiciones de laboratorio y en el campo. Estos resultados fueron de suma importancia para establecer los parámetros finales de diseño del contador. También se detallan las tareas realizadas en la etapa de construcción e instalación de los primeros contadores de muones, indicando los primeros resultados que fueron obtenidos por estos detectores. Posteriormente se estudió la respuesta de los detectores de superficie utilizando la configuración infill y la original del PAO. Esta tarea fue realizada utilizando los primeros datos registrados por el infill, junto a la previa modificación de la reconstrucción estándar de eventos de superficie para considerar el caso en que los detectores se encuentran ubicados a menor distancia. Se caracterizó el infill para comprender su funcionamiento dentro de la estructura del detector de superficie del PAO, estudiando sus incertezas y comparándolas con las del arreglo principal. Luego se modificó la cadena de reconstrucción de eventos para el detector de superficie del PAO de forma tal de reconstruir los eventos del infill con el programa oficial Auger Offline Software. Para esto se determinó la distancia óptima que minimiza las incertezas de la reconstrucción y se optimizó la función de distribución lateral que mejor ajusta las se~nales de las estaciones que participan en cada evento. Se determinó el ángulo de referencia y la curva de atenuación con el método del Constant Intensity Cut, a fin de establecer el mejor estimador para la energía de los eventos del infill. Luego se realizó la calibración en energía del infill utilizando los eventos híbridos que fueron registrados por el detector de fluorescencia. Finalmente utilizando esta reconstrucción se determinó el espectro de energía de los rayos cósmicos en la zona donde el arreglo tiene máxima eficiencia de detección (2 x 1017 eV) y se obtuvo un índice espectral, cuyo resultado es compatible con el proporcionado por el PAO y otros experimentos que exploran las mismas regiones de energía. Por otro lado no se observó la presencia de una segunda rodilla en la zona del espectro explorada. En la última parte de esta tesis se presenta un estudio detallado de las anisotropías a gran escala con el método East-West utilizando eventos del infill. En el rango de energías explorado, entre 1016 eV y 1019 eV, no se observó una señal significativa que indique anisotropías, sin embargo se encontró una constancia en la fase del primer armónico en ascensión recta que sugiere fuertemente una orientación del dipolo en la dirección del Centro Galáctico.

Abstract:
Cosmic rays are particles that arrive at Earth from outer space with energies that span from 109 eV to 1020 eV, being the most energetic an enigma because of the lack of knowledge of their sources, chemical composition, or the acceleration mechanism. The Pierre Auger Observatory (PAO) was designed and built to study cosmic rays with energy larger than 1018 eV. It is located in the region of Pampa Amarilla, next to Malargue, Mendoza. Its giant size of 3000 km2 and the hybrid concept given by the surface and uorescence detectors, gives to the PAO the capacity to evaluate the energy spectrum, arrival direction and chemical composition of cosmic rays. These observables are the most important to characterize cosmic rays and the PAO measures them with high resolution and a very large statistics using the extended air showers that are generated when they enter in to the atmosphere. To lower the energy threshold of detection to values of 1017 eV different enhancements started in the latests years. One of those is Auger Muons and Infill for the Ground Array (AMIGA), that reduce the detection energy in one decade giving the chance to study the region in the energy spectrum where it can occur the transition from galactic to extra galactic cosmic ray sources. AMIGA is composed by two kind of detectors: on one hand surface detectors with a separation of 750 m, less than the PAO of 1500 m, generating a small and denser region called infill. On the other hand muon counters that work with the scintillator technique, that are being installed next to the denser surface array with the purpose of determine the chemical composition of cosmic rays trough the detection of the muonic content of the shower. This thesis is dedicated to the study of the detectors and the physics attained by AMIGA. The first part of this thesis shows a study of the AMIGA muon counter prototypes. A characterization of the first counter prototype is presented from which the performance of the detector in laboratory conditions and in the field was understood. This results were of paramount importance to establish the final design of the muon counter detector. Also the task involving the construction and deployment phase of the first muon counters are detailed, indicating the firsts results. Then the study of the surface detector performance of the PAO using infill and original configuration is shown. This task was done using the first infill data available, with the modification of the standard event reconstruction to consider the denser array case. The infill was characterized to understand its behaviour inside the structure of the PAO surface array detector, studying its uncertainties and making a comparison with the main array. Then the reconstruction chain was modified for the PAO surface detector, in a way that allows the reconstruction of infill data with the official program Auger Offline Software. In order to do this, the optimal distance that minimize the uncertainties of the reconstruction was calculated, and then the lateral distribution function that fit better the signal of the stations that participate in the event was optimized. The reference angle and the curve with the Constant Intensity Cut method were determined, to establish the best energy estimator for infill events. The energy calibration was performed using hybrids events that were also registered by the fluorescence detector. Finally, using this reconstruction the energy spectrum of cosmic rays was determined in the region were the array has full detection efficiency (2x 10 *27 eV) and an spectral index was calculated, which result turns out to be compatible with the given by the PAO and other experiments that explore the same energy regions that the infill. On the other hand no presence of the second knee was observed in the explored energy region. The last part of this thesis shows a detailed study of large scale anisotropy using the East-West method with infill events. In the explored energy range between 1016 eV and 1019 eV, no significant signal that indicates anisotropy was found, however a constant first harmonic phase in right ascension was measured that suggest a dipole orientation towards the Galactic Center direction.

"Estudio de reacciones nucleares inducidas por neutrones sobre germanio. Determinación, trazabilidad y aplicaciones de los datos nucleares" (2012). Furnari, Juan Carlos. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la presente Tesis se estudió al germanio desde aspectos poco explorados. Se determinaron y publicaron varias constantes nucleares de isótopos del elemento y se encontraron dos aplicaciones originales en el campo de los reactores nucleares y del análisis por activación. Para mejorar los escasos y discrepantes (o inexistentes) datos bibliográficos referidos a las constantes nucleares del germanio, se determinaron las secciones eficaces de las reacciones umbral 70Ge(n,p)70Ga, 72Ge(n,p)72Ga y 74Ge(n,p)74Ga. Asimismo se midieron los factores k0 correspondientes a 74Ge y 76Ge con exactitud y precisión comparables a otros datos publicados. Se desarrolló también un método radioquímico de separación de galio y germanio. Adicionalmente, se descubrieron nuevas transiciones gamma del 77mGe. Se planteó así la primera derivación de esta Tesis, referida a la viabilidad de utilizar germanio como monitor integral de flujo neutrónico en reactores de investigación. A ese respecto, se demostró su potencialidad en el análisis por activación paramétrico de muestras biológicas; se desarrolló en tales matrices una aplicación novedosa, la determinación simultánea de fósforo y aluminio empleando germanio como monitor de flujo integral y comparador. Consecuentemente, se determinó la sección eficaz de la reacción 31P(n,α)28Al, mejorando sustancialmente los valores previos de dicha constante. También se desarrolló, como herramienta, un novedoso método para determinar simultáneamente los factores f y α en reactores de investigación. Por último, se elaboraron varios trabajos concernientes al estudio, la determinación, la evaluación y la compilación de datos nucleares, que se incluyen en una de las secciones más relevantes de esta Tesis. De resultas de todos los temas tratados, se han realizado ocho publicaciones en revistas internacionales con referato y catorce presentaciones en congresos nacionales e internacionales.

Abstract:
In the present thesis, germanium was studied in aspects seldom explored. Several nuclear constants of isotopes of the element were determined and published. Two original applications, in the field of nuclear reactors and activation analysis, were found. In order to improve the scarce and discrepant (or inexistent) bibliographical data, referred to the nuclear constants of germanium, the cross-sections of the threshold reactions: 70Ge(n,p)70Ga, 72Ge(n,p)72Ga and 74Ge(n,p)74Ga were determined; the k0 factors corresponding to 74Ge and 76Ge were measured, as well, with accuracy and precision comparable to other published data. A radiochemical method for separation of germanium and gallium was also developed. In addition, new gamma transitions of 77mGe were discovered. Thus, the first derivation of this thesis was outlined; it was referred to the viability of using germanium as integral neutron flux monitor in research reactors. In this respect, its potentiality in parametric activation analysis of biological samples was demonstrated; in such matrixes, an innovative application, the simultaneous determination of aluminium and phosphorus employing germanium as integral flux monitor and comparator, was developed. Consequently, the cross-section of the 31P(n,α)28Al reaction was determined, substantially improving the previous values for this constant. As a tool, a new method for simultaneous determination of f and α research reactor parameters, was also developed. Finally, several works, connected with study, determination, evaluation and compilation of nuclear constants were elaborated and published; they are including in one of the most relevant sections of this thesis. As a result of all these subjects, eight publications in international journals and fourteen presentations in national and international conferences have been carried out.

"Estudio de reactores Trickle-Bed : Aplicación al tratamiento de aguas contaminadas" (1999). Horowitz, Gabriel I.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El presente trabajo enfoca el estudio de Reactores Trickle-Bed (RTBs), tendiente a su aplicación al tratamiento de aguas contaminadas. Se examina el efecto de la mojabilidad del relleno y de las características espumantes del líquido sobre las transiciones de régimen de flujo pulsante-reptante en RTBs, analizando simultáneamente la capacidad de herramientas no convencionales para diagnosticar dichas transiciones. Estas se determinan por inspección visual y a partir del análisis de series temporales de fluctuaciones de presión, STFP, en el marco de las teorías estadística convencional, de fractales temporales y de caos. Las STFP se miden en la pared de la columna, empleando aire y soluciones acuosas de un surfactante, como fluidos modelo, y lechos conformados por mezclas de partículas hidrofóbicas e hidrofllicas en diferentes proporciones. Se encuentra que tanto la mojabilidad de las partículas como las características espumantes del líquido influyen sobre las transiciones de flujo en RTBs. Por otra parte, se analizan los efectos de emplear un catalizador hidrofóbico sobre la performance de RTBs, utilizando la oxidación catalítica de etanol como reacción modelo, a partir de ensayos en un equipo escala banco. Se determina la conversión de etanol en el RTB relleno con catalizador hidrofóbico, hidrofílico y mezclas de diferentes proporciones de catalizador hidrofóbico y soporte hidrofllíco inerte. Los resultados se interpretan teniendo en cuenta factores hidrodinámicos y de transporte, mediante el planteo y la resolución de un modelo matemático generalmente aceptado para describir el comportamiento de RTBs. Se encuentra que el empleo de catalizador hidrofóbico, diluido o sin diluir, favorece significativamente la performance de RTBs para oxidaciones catalíticas.

Abstract:
Present work is concerned with the study of Trickle-Bed Reactors (TBRs) and their application to wastewater treatment. The influence of packing’s wettabillity and the liquid foaming characteristics on the pulse-trickle flow regime transitions in a TBR is examined, testing simultaneously the suitability of non-conventional tools to diagnose these transitions. They are determined by visual inspection and from the analysis of pressure fluctuation time series, PFTS, according to the conventional statistical theory, a fractal approach and the theory of chaos. PFTS are measured on the column wall using air and aqueous solutions of a surfactant, as model fluids, and beds constituted by mixtures of hydrophobic and hydrophilic particles, in various proportions. Both, the particles wettability and the liquid foaming character, affect flow regime transitions in TBRs. On the other hand, the effect of employing hydrophobic catalysts on TBRs’ performance, taking ethanol catalytic oxidation as a model reaction, is analyzed by carrying out experiments in a bench scale installation. Ethanol conversion is determined in the TBR packed with the hydrophobic or hydrophilic catalyst and mixtures of different proportions of hydrophobic catalyst diluted with the inert hydrophilic support. The results are interpreted taking into account hydrodynamics and mass transfer resistances through a widely accepted mathematical model to describe TBRs’ behavior, which is formulated and solved. The use of hydrophobic catalyst, either diluted with the hydrophilic support or not, deeply improves TBRs’ performance for catalytic oxidations.

"Estudio de reordenamientos polimórficos e inducidos en los cromosomas politénicos de la mosca del Mediterráneo: Ceratitis capitata" (1999). Delprat, María Alejandra. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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La mosca del Mediterráneo, Ceratitis capitata, es una de las plagas más perjudiciales, pero como modelo experimental es aún poco conocido. Para erradicarla se aplica la Técnica del Insecto Estéril empleando líneas de sexado genético. Uno de los problemas de estas líneas es la pérdida del ligamiento entre el gen separador y el cromosoma Y, debido a eventos de recombinacíón. El siguiente trabajo se propuso aportar información a través de los cromosomas politénicos para implementar mejoras en la estabilidad de las líneas autosexantes Muestras de distintas poblaciones naturales de Argentina fueron estudiadas en busca de reordenamientos espontáneos que pudieran introducirse en las líneas autosexantes como supresores de la recombinacíón. Se localizó la posición del locus sw empleado como gen separador en las líneas obtenidas en nuestro laboratorio y se estudiaron además 17 nuevas líneas de sexado genético para caracterizar el tipo de reordenamiento producido por la radiación y seleccionar así aquellas con menores probabilidades de recombinacíón. Por último, se realizaron ensayos de Hibridación in situ, ajustando una técnica directa de sondas fluorescentes, tanto para cromosomas politénicos de glándulas salivares como para cromosomas mitóticos. Este trabajo en conjunto, aporta información novedosa que permitirá implementar mejoras en las líneas de sexado genético.

Abstract:
Although the Mediterranean fruit fly (Ceratitis capitata) is an important pest of many crops around the world, some aspects of its biology are still unknown. Currently, the Sterile Insect Technique is used to control or eradicate this pest. Genetic Sexing strains are being reared to release only males. One of the problems of such strains are recombination that end in the separation of the male—determining Y chromosome and the sexing gene. The aim of this study was to analyse aspects of the cytology of this species to implement improvements in the stability of these sexing strains. Samples from different localities of Argentina were analysed in order to detect spontaneous rearrangements that could suppress recombination. The sexing gene sw, isolated in this laboratory, was localised by means of polytenic chromosomes analyses. Moreover, 17 new strains were analysed to select those with lower recombination probabilities. Finally the In Situ Hybridisation direct technique was used to analyse both polytenic and mitotic chromosomes. To sum up this work provides novel information that will improve the genetic sexing strains and hence the eradication of such important pest.

"Estudio de semejanza de operaciones de transferencia de calor y cantidad de movimiento" (1963). García Bourg, José María. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Con el objeto de contar con elementos de juicio concretos, respecto a las posibilidades de aplicacion de las distintas corralaciones propuestas, sobre la similitud entre las operaciones de transferencia de calor y cantidad de movimiento, se encaró el presente estudio, con espocial referencia a las condiciones reales e que deben desarrollarse dichas operacioes en nuestro medio. Para la realización de la parte experimental se construyó un intercambiador de calor de tubos concéntricos, con posibilidad de medir las temperaturas de pared del tubo en ensayo y la pérdida de carga producida por el flujo a lo largo de la sección en estudio. En el transcurso de las doscientas siete determinaciones efectuadas, se realizó el "Estudio de semejanza entre Operaciones de Transferencia de Calor y Cantidad de Movimiento", como se describirá de inmediato, en forma muy sucinta. Se estudio la posible influencia de los "efectos de entrada", en las condiciones previstas para el equipo empleado, con lo que se logró determinar que la acción producida por estos efectos, era perfectamente despreciable. Las condiciones en que se realizó el trabajo, fueron las siguientes: a) Equipo: Intercambiador de calor de tubos concéntricos b) Material del tubo: "Hierro negro", tipo comercial c) Diámetro del tubo: 3/4 pulgada "paso gas" (0,021 m) d) Longitud ensayada: 3,98 metros e) Fluido ensayado: Agua f) Fango de mímero de Reynolds: 5,10³ a 5,10 4 g) Rango de mímero de Prandtl: 3,3 a 5,3 h) Rango de coeficientes de fricción: 0,006 a 0,010 A los efectos de determinar la rugosidad absoluta del tubo ensayado, se efectuaron los correspondientes análisis metalográficos, previa "inclusión" de las probetas en soportes de metal y material plástico. A partir de estas condiciones se iniciaron los primeros ensayos con la intenión de observar el comportamiento y posible aplicación de la Analogía de Colburn (factores "J"). El resultado de este intento, fue la demostración cabal del incumplimiento de esta analogía en tubos rugosos. Luego se encaró la posibilidad de predicción de resultados por aplicación de la Analogía de Martinelli para lo cual se hicieron los ensayos correspondientes observando las indicaciones impuestas por el autor de la citada correlación. Es así que se llegó a los resultados finales, de donde se desprende la posibilidad de predicción de datos por aplicación de esta analogía. Como se menciona en las conclusiones, el hecho de haberse producido (por oxidación) variaciones de hasta el 60% en los valores del coeficiente de fricción, permite ver la independencia de estaanalogía respecto a la rugosidad del tubo en un rango apreciable. Por otro lado, tanto el material del tubo como el fluido estudiado permiten establecer la validez de esta correlación para condiciones reales y de múltiples aplicaciones en el campo de esta disciplina. Al final de las conclusiones de este trabajo, se hace una breve comparación entre las condiciones de operaciones empleadas en esta presentación y las utilizadas por Smith y Epstein (1) en su publicación: "Efecto de la rugosidad de pared sobre la transferencia de calor por cenvección en tubos comerciales" (Effect of Wall Roughness on Convective Heat Transfer in Commercial Pipes", A.I.Ch.E. Journal (Junio de 1957)), por lo que se verá la complementación mútua de estos estudios, dando de esta manera una mayor amplitud en su validez, a la correlación general que estableciese Martinelli.

"Estudio de soluciones acuosas de electrolitos en condiciones de alta temperatura por espectrofotometría UV-visible" (2003). Méndez De Leo, Lucila Paula. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo de este trabajo es el estudio del comportamiento de electrolitos en solución acuosa en condiciones de alta temperatura y presión. Existe muy poca información sobre el comportamiento de este tipo de sistemas en condiciones extremas. Para realizar el estudio se armó, a partir de partes modulares, un espectrofotómetro de doble haz al que se acopló una celda espectrofotométrica de flujo capaz de operar a alta temperatura y presión, diseñada y construida durante este proyecto. Este arreglo experimental se utilizó para estudiar dos equilibrios en soluciones de electrolitos de características muy diferentes. Por un lado se estudió el equilibrio ácido-base del 4-metilfenol hasta 175°C. El 4-metilfenol es un compuesto que puede ser útil como indicador de pH en sistemas acuosos a altas temperaturas. Por otro lado se estudió la asociación iónica de cobre (II) y sulfato hasta 200 °C. Este sistema resulta de gran interés para la comprensión de las interacciones entre los iones en soluciones acuosas y de los iones con el solvente, en un amplio intervalo de temperatura. Se obtuvo información sobre las propiedades termodinámicas de estos dos sistemas, a partir de la cual fue posible inferir la diferente solvatación de reactivos y productos, así como, en el caso de las asociación de cobre (II) y sulfato, fue posible obtener información sobre la estructura de los pares iónicos que se forman.

Abstract:
The purpose of this work is to study the behaviour of electrolytes in aqueous solutions at high temperature and pressure. There is a general lack of information about their properties in extreme conditions. A double beam spectrophotometer provided with a high temperature and pressure flow cell, designed and built during this project, was mounted using modular components. This setup was used to study two equilibria in aqueous solutions of electrolytes with very different characteristics. One equilibrium was the acid-base equilibrium of 4-methylphenol up to 175 °C. The 4-metylphenol is a compound that may be useful as a pH indicator in aqueous solutions at high temperature. The other equilibrium studied was the ionic association of copper (II) and sulphate up to 200 °C. The characteristics of this equilibrium are very interesting in order to understand the interaction between ions and between ions and solvent molecules in aqueous solutions over a wide range of temperature. Information about the thermodynamic properties of these two equilibria was obtained and used to infer the difference in solvation of reagents and products. For ionic association of copper (II) and sulphate it was also possible to obtain information about the structure of the ionic pairs formed.

"Estudio del AMP cíclico en sistemas fotosintéticos" (1988). Bianchini, Graciela Mabel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio del alquitrán de madera de Eucaliptus (Globulus)" (1935). Yantorno, Juan Horacio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio del aprendizaje asociativo en el anfibio anuro Bufo arenarum : aspectos comparados" (1995). Muzio, Ruben Nestor. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Estudios comparativos del comportamiento instrumental de algunas especies de vertebrados sugieren la posibilidad de diferencias en los procesos de aprendizaje asociativo. Dicha hipótesis está basada en el estudio de los efectos paradójicos del reforzamiento, un grupo de fenómenos de aprendizaje basados en el ajuste comportamental ante cambios en las condiciones de reforzamiento y que no responden a las predicciones de las teorias clásicas del aprendizaje. Dentro de estos fenómenos, los más estudiados son: el efecto del reforzamiento parcial sobre la extinción (ERPE), el efecto de la magnitud de reforzamiento sobre la extinción (EMRE) y el efecto de contraste negativo sucesivo (ECNS). Estos efectos han sido encontrados en estudios con especies de aves y mamíferos, pero no aparecieron en experimentos análogos con peces y reptiles. Tomando como referencia una serie de estudios previos realizados en nuestro laboratorio sobre las bases fisiológicas del control del balance acuoso en el sapo Bufo arenarum, y además un experimento preliminar que indicaba la ausencia de contraste negativo en esta especie, se inició el estudio sistemático de estos fenómenos. Además, se estudiaron los efectos sobre el aprendizaje de la lesión del pallium medial (una estructura cerebral de los anfibios que se cree homóloga a la formación hipocampal de los mamíferos, en base a estudios anatómicos e histoquímicos). Así, en este trabajo de tesis se presentan experimentos que estudian los efectos de cambios en la frecuencia o la magnitud del reforzamiento sobre el aprendizaje en Bufo arenarum, usando el acceso a agua como refuerzo en animales deshidratados. Se observaron diversos fenómenos de aprendizaje comunes a una amplia variedad de vertebrados, tales como la adquisición bajo condiciones de entrenamiento masivo y espaciado, la extinción, la recuperación espontánea, el efecto subsiguiente al refuerzo, y el efecto de la magnitud del reforzamiento sobre la adquisición. En general, en todas las situaciones la lesión del pallium medial no tuvo efectos sobre el desempeño ni sobre la tasa de captación de agua durante la adquisición, pero retardó significativamente la extinción de la respuesta instrumental respecto de controles con operación simulada o intactos. Estos resultados sugieren que el pallium medial de los sapos juega un papel en la inhibición de respuestas previamente aprendidas. El reforzamiento parcial empeoró la adquisición y determinó una respuesta menor durante la extinción comparado con el reforzamiento continuo, sin evidencia del efecto del reforzamiento parcial sobre la extinción. La lesión del pallium medial no tuvo efectos sobre la adquisición, pero aumentó la resistencia a la extinción tanto después de un entrenamiento con refuerzo continuo como después de uno con refuerzo parcial. El cambio de una magnitud de refuerzo grande o pequeña a extinción produjo tasas de extinción similares, sin aportar indicios del efecto de la magnitud del reforzamiento sobre la extinción. Por otra parte, el cambio de una magnitud de refuerzo grande a una pequeña fue seguido por un cambio gradual en el desempeño sin evidencia de contraste negativo. La ablación del pallium medial no produjo efectos sobre la adquisición del aprendizaje, ya sea con magnitudes de reforzamiento grandes o pequeñas, pero la lesión eliminó completamente el ajuste del desempeño luego del cambio de una magnitud de reforzamiento grande a una pequeña. El conjunto de resultados obtenidos apoya la hipótesis de que el pallium medial de los anfibios es homólogo a la formación hipocampal de los mamíferos y también indica que las diferencias entre especies en estos fenómenos de aprendizaje pueden estar relacionados con los diferentes grados de desarrollo del sistema septo-hipocampal.

"Estudio del barrenador de tallos Apagomerella versicolor (Boh.) (Coleoptera: Cerambycidae) como candidato para el control biológico del abrojo grande, Xanthium strumarium L. en los EE.UU." (2007). Logarzo, Guillermo A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Con el objetivo de evaluar las potencialidades de Apagomerella versicolor (Boheman) (Coleoptera: Cerambicidae) como agente de control biológico de Xanthium strumarium L. (Asteraceae) en los Estados Unidos, se realizaron estudios de laboratorio y de campo sobre el ciclo de vida, la fenología, las plantas hospedadoras, la especificidad, y el daño producido a Xanthium cavanillesii. Además, se realizaron estudios de laboratorio sobre preferencia de oviposición, ADN mitocondrial y pruebas de éxito reproductivo para estudiar las variabilidad intraespecífica en la utilización de las plantas hospedadoras. El ataque de A. versicolor redujo la producción de frutos en X. cavanillesii, el componente sudamericano del complejo Xanthium, en un 66%, y mató a las plantas jóvenes. En Buenos Aires A. versicolor es univoltino y los adultos aparecen en el campo a principios de la primavera. En el laboratorio los adultos vivieron en promedio 18.5 días. Cada hembra puso un promedio de 38 huevos, un huevo en cada oviposición; la larva se alimentó barrenando el tallo en dirección a la raíz. A principios del otoño, la larva realizó un corte circular interno en el tallo a la altura de la corona cuando las plantas ya estaban maduras causando la caída de su parte aérea. El último estadio larval entra en una diapausa obligada y empupa en la raíz de las plantas muertas y ya secas en la primavera. En el laboratorio, las larvas invernantes sobrevivieron a exposiciones continuas de temperaturas de -8oC por 3 días y a la inmersión en agua por un período de 20 días. El cerambícido uso en el campo siete plantas hospedadoras pertenecientes a tres géneros de la familia Asteraceae: Xanthium, Ambrosia, y Pluchea. La variación geográfica en el uso de las plantas hospedadoras estuvo determinada genéticamente y estuvo asociada a por lo menos tres razas geográficas, indicando que A. versicolor puede estar en un proceso de expansión de plantas hospedadoras. El cerambícido evolucionó de ser bivoltino y monófago sobre Pluchea sagittalis en el norte, a ser oligófago y univoltino en poblaciones derivadas en el centro y sur de Argentina. Los cambios parecen haber sido desencadenados por presión selectiva de ciertos rasgos de las plantas hospedadoras como la fenología. Por último, a partir de características de A. versicolor, como los parámetros del ciclo de vida, la amplia distribución y tolerancia ecológica y de hábitat, sumado al daño que provoca a la planta objeto de control biológico, se estima que A. versicolor podría controlar a Xanthium strumarium. Sin embargo, dado que A. versicolor no es específico sobre el género Xanthium ni sobre la subtribu Ambrosinae, que lo contiene, y además es posible que esté en un proceso de formación de razas por plantas hospedadoras su uso como agente de control biológico es riesgoso ya que no están garantizados los requisitos mínimos de especificidad. Por lo tanto, no se recomienda su utilización como agente de control. Sin embargo, A. versicolor y su variación intraespecífica en la utilización de plantas hospedadoras constituye un interesante modelo de estudio de procesos evolutivos recientes.

Abstract:
Laboratory and field studies on Apagomerella versicolor (Boheman), life cycle, phenology, host use, host specificity and amount of damage on Xanthium spp. were carried out in Argentina to evaluate its potential as a biocontrol agent of Xanthium strumarium L. in the United States. Also, laboratory studies on oviposition preference, mDNA and mating choice were performed to study intraspecific variation in host use. Attack by A.versicolor reduced fruit production in X. cavanillesii, the South American component of Xanthium complex, by 66%, and killed young plants. In Buenos Aires, A. versicolor is univoltine and adults appear in the field in early spring. In the laboratory, the adults lived an average of 18.5 days. Each female laid an average of 38 eggs, one egg per oviposition; larvae fed boring their way toward the root. At the beginning of the fall, larvae girdled the stem of the mature plant near the crown, causing the dry aerial part of the plant to fall over. The last instar entered diapause and pupated within the roots in dead and dry plants until spring. All overwintering larvae survived continuous exposure to -8oC for 3 days, and immersion of larvae in tap water for 20 days did not affect their survival. The insect used in the field seven hosts in three genera, Xanthium, Ambrosia, and Pluchea belonging to the Asteraceae family. Host use had geneticallydetermined geographical variation resulting in at least three geographic races indicating that the insect may be in the process of host expansion. Apagomerella versicolor has evolved from being bivoltine and monophagous on Pluchea saggitalis in the north to being oligophagous and univoltine in derived populations in central and southern Argentina; and changes seem to have been triggered by selective pressure of host plants traits, i.e. phenology. Finally, characteristics of A. versicolor, like the life cycle parameters, the broad ecological tolerance and habitat distribution, and the damage provoked to attacked plants may result in an effective control of the target plant Xanthium strumarium in the field. However, the fact that A. versicolor is not specific on Xanthium spp. or the subtribe Ambrosinae and that may be in the process of host race formation indicates its use as a biocontrol agent may not be safe since host specificity is not guaranteed. Therefore its utilization in alien areas for biocontrol purposes is not recommended. Nevertheless, A. versicolor and its pattern of host utilization constitute an interesting case-study of a recent or on-going evolution process.

"Estudio del comportamiento de diferentes variedades de maní en relación a la producción de aflatoxinas por Aspergillus Parasiticus" (1978). Vaamonde, Graciela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio del comportamiento de los nitrofenoles frente al nitrato mercurioso" (1941). Klappenbach, Marta. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio del comportamiento de los sistemas sinópticos migratorios en la Argentina" (1993). Seluchi, Marcelo Enrique. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio del comportamiento del viento en las capas de la atmósfera cercanas al suelo en condiciones de erosión eólica" (1996). Goldberg, Angélica Susana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Teniendo en cuenta el marcado impacto que representa la degradación del suelo para las actividades del hombre, es importante comprender los factores que la determinan a fin de que se puedan tomar medidas efectivas para su predicción y control. Los procesos físicos involucrados en la erosión eólica son consecuencia, además del tipo y del estado del suelo , de las características del flujo de aire en la capa de superficie de la atmósfera. El análisis de la información obtenida en una experiencia micrometeorológica llevada a cabo en farma conjunta por el Centro Nacional Patagónico (CONICET) y el Departamento de Meteorología (hoy Departamento de Ciencias de la Atmósfera) de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA) entre los días 13 y 15 de diciembre de 1982, en Pampa del Castillo ( Provincia del Chubut), permitió encontrar que los perfiles verticales de velocidad del viento válidos para la capa de superficie a tmosférica en condiciones de homogeneidad y estacionariedad , no son aplicables a la descripción de la variación vertical de la velocidad del viento cuando se presenta el procesa erosivo. En el presente trabajo se propone un modelo que describe la variación vertical de la velocidad del viento en la capa de superficie atmosférica alterada por la presencia de partículas de suelo transportadas por el viento. El mismo se basa en la hipótesis que postula que, en estas condiciones, se desarrolla sobre la superficie una capa de aire con partículas de suelo en saltación que actúan como sumidero de cantidad de movimiento de la atmósfera. Para ello se establece una analogía entre los efectos sobre el flujo del aire causados por las partículas y el que producen las componentes de una cobertura vegetal con una distribución de área foliar dada. En estas condiciones se considera que las variaciones verticales de la cantidad de movimiento son proporcionales al cuadrado de la velocidad del viento y al arrastre causado por los elementos sólidos. La ecuación básica resultante se resuelve numericamente utilizando el método de Runge-Kutta. Para su integración se requiere del conocimiento de las formas de las funciones que describen la variación vertical del área de arrastre, del coeficiente de arrastre y del coeficiente de intercambio turbulento para la cantidad de movimiento. Estas fueron encontradas partir de la información obtenida en experiencias realizadas en túnel de viento en condiciones de erosión eólica para distintos tipos de suelo y de rugosidad superficial. El modelo utiliza como variables de entrada, la altura de la capa de saltación, la velocidad del viento y su derivada vertical en el tope de la misma. Los valores de velocidad del viento obtenidos mediante el modelo propuesto fueron comparados con los datos observados en la experiencia realizada en Pampa del Castillo y en túneles de viento en condiciones de erosión. De la comparación se concluye que el modelo propuesto resulta adecuado para describir satisfactoriamente los perfiles verticales de velocidad del viento en condiciones de erosión, que los errores de estimación aumentan cuando disminuye la altura y cuando aumenta la velocidad de fricción, restringiendo su validez, a alturas mayores que un nivel dado, el que puede llegar a ser del 20% de la altura de la capa en condiciones de muy alta velocidad del viento. El modelo posee baja sensibilidad a los coeficientes involucrados en las funciones que describen la variación vertical del área de arrastre y del coeficiente de arrastre utilizados, que dependen del tipo de suelo y rugosidad superficial. Por otro lado, es considerable el efecto que produce las variaciones en la estimación de la altura de la capa de saltación, y el modelo es muy sensible a la forma del coeficiente de intercambio turbulento de cantidad de movimiento y al valor de la derivada de la velocidad del viento en el tope de la capa.

Abstract:
Considering that degradation of soil produces a great impact in human activities, understanding the factors that determine it is important topredict and control it. The physical processes involved in wind erosion are the result ofthe type and state of the soil, and the characteristics of the airflow in the atmospheric surface layer. A micrometeorological experiment was carried out jointly by Centro Nacional Patagonico CONICET) and the Meteorology Department (today called Departamento de Ciencias de la Atmosfera), Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires during december 13, 14 and 15 1982 in Pampa del Castillo, Provincia del Chubut in Argentina. The analysis of the information showed that the wind profiles valid for the atmospheric surface layer under steady state and horizontally homogeneous atmospheric conditions are not aplicable to the description of the vertical gradient the mean wind speed when the process of erosion is present. The model proposed in this thesis describes the wind profiles in the atmospheric surface layer altered by the presence of soil particles transported by the wind. It is based on the hypothesis which states that under this special conditions , an air layer with soil particles in saltation acts as momentum sink in the atmosphere .Ananalogy is established between the effects on the air flow caused by the particles and the one produced by the components of a vegetation canopy with a given leaf area distribution. Under these conditions the vertical gradient of momentum is proportional to the square of the wind speed and the drag caused by the particles. The resulting basic equation is solved numerically using the Runge-Kutta method.To integrate it, the functions that describe the vertical variation of the drag area ,the drag coefficient and the eddy diffusivity of momentum must be kown.These functions were obtained from wind tunnel measurements under wind erosion conditions for different soils and surface roughness. The input variables of the model are the height of the saltation layer , the wind speed and its vertical gradient at the top of the layer. The wind speed values obtained through the proposed model were compared with the data measured in Pampa del Castillo and the wind tunnel. The comparison shows that : 1) the proposed model describes satisfactorily the wind profile under erosion conditions; 2) the estimatiion errors increase when the height decreases and when the friction velocity increases. The model is valid for heights greater than a given value which may be up to 20% of the layer's height. The model shows low sensitivity regarding the coefficients involved in the functions which describe the vertical variation of the drag area and the drag coefficient, which in turn depend on the type of soil and surface roughness. On the other hand, a change in the estimation of the saltation layer's height produces a considerable effect on wind speed estimations. The model is quite sensitive to the mathematical expression of the eddy diffusivity of momentum and also to the value of the wind vertical gradient at the top of the layer.

"Estudio del comportamiento termohidrodinámico de la capa límite atmosférica sobre el Río de la Plata y sus inmediaciones, mediante un modelo de simulación numérica" (1987). Berri, Guillermo Jorge. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se presenta un modelo de simulación numérica, en tres dimensiones y no estacionario en mesoescala, de la capa límite atmosférica. Se aplica el modelo al estudio de la circulación de brisa sobre el Río de la Plata y su zona de influencia. Se trata de un modelo en ecuaciones primitivas y no lineal que consta de ambas ecuaciones horizontales de movimiento, la ecuación hidrostática, la ecuación de continuidad para un fluído incompresible, la ecuacidn termodinámica y la ecuación de estado de los gases ideales. El dominio horizontal del modelo es aproximadamente de 200 x 200 km y el vertical de 2 km. Con el objeto de tomar en cuenta especialmente la influencia que la irregularidad de la costa ejerce sobre la capa límite, se propuso la aplicación de un método de transforrnación de las coordenadas horizontales como solución al difícil problema que plantea en el modelado numérico tal condición de frontera superior. La transforrnación introduce una de las coordenadas horizontales paralela a las costas uruguaya y argentina mientras que la otra coordenada horizorital es localmente casi perpendicular a la anterior y la coordenada vertical ,sigue un espaciamiento de tipo logarítmico-lineal. Esta transformación permite obtener mayor resolución sobre las costas donde la separación entre puntos es aproximadamente 5 a 10 km, mientras que en las zonas más alejadas, donde se precisa menor resolución, la separación entre puntos es aproximadamente de 20 a 30 km. Similar ventaja se obtiene en la vertical. El sistema de ecuaciones ahora transformado se resuelve por diferencias finitas en el nuevo recinto regular. Para la integración del modelo se utiliza un método explícito y condicionalmente estable, de tipo adelantado en el tiempo, corriente arriba en el espacio para los términos advectivos y centrado en el espacio para los difusivos. Para verificar las soluciones que brinda el modelo se realizan experiencias de comparación con los modelos de McPherson y Pielke quienes simulan la brisa sobre costas que presentan cierta similitud con la del Rio de La Plata. Los resultados de ambas comparaciones son muy buenos y en particular aquella realizada con el modelo de Pielke arroja ademas coincidencias numéricas en los valores de la velocidad vertical. La falta de datos apropiados para una comprobación de los resultados del estudio de brisa sobre el Río de la Plata obliga a la adopción de la simulación numérica como alternativa para verificar la bondad del método utilizado. Para realizar tal simulación se introduce como forzante en superficie una perturbación en la temperatura que es función del tiempo y del espacio. Con el objeto de tomar en cuenta la parte mas definida de un ciclo de brisa, se extendió la simulación durante 14 horas a partir de un instante definido como 2 horas despues de la salida del sol. Tal instante representa, aproximadamente, el momento de mayor homogeneidad horizontal, en todo el dominio de la temperatura en superficie . El método de la transformación de coordenadas además de mostrar condiciones de estabilidad, reproduce las caracteristicas más notables de la brisa como cabría esperar en el Río de la Plata . Entre los resultados obtenidos con el modelo cabe destacar una respuesta correcta del rnismo al forzante introducido en la ternperatura de superficie; la rotacion del viento inducida por la perturbación de la presión es correcta; los campos de convergencia y divergencia horizontal y su movimiento vertical asociado son consistentes con los resultados anteriores; el efecto de la advección horizontal y vertical sobre los ejes verticales de máxima convergencia y divergencia y el movirniento vertical asociado coincide con lo hallado por otros autores; se establece una zona preferencial de convergencia horizontal y movimientos de ascenso sobre la parte oeste de la costa uruguaya y su inmediata adyacencia continental; sobre el resto del dominio predomina la divergencia y los movimientos de descenso; sobre toda la costa uruguaya el viento rota rapidarnente hacia el este y este- sudeste y permanece así durante el resto del día y , por último, sobre la costa de la provincia de Buenos Aires el viento es, sin mayores cambios, del sector noreste y este-noreste durante todo el día.

"Estudio del distrito pegmatítico en el extremo norte de la Sierra de San Luis, zona de Loma del Cercado y Los Chañares, en la Provincia de San Luis" (1984). Maisterrena, Enrique. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio del efecto del factor de Necrosis tumoral -alfa sobre las neuronas dopaminérgicas de la substantia nigra en relación a la enfermedad de Parkinson" (2002). Di Paolo, Nelson César. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La enfermedad de Parkinson (PD, “Parkinson Disease”) es una enfermedad neurodegenerativa crónica, de desarrollo muy lento. Su característica neuropatológica sobresaliente es la pérdida de las neuronas dopaminérgicas de la substantía nigra (s.n.) del cerebro. No se conoce la causa cierta, ni existe una cura para esta enfermedad. Las citoquinas inflamatorias han sido halladas en el cerebro de pacientes con diversas enfermedades neurodegenerativas, inclusive con PD. El Factor de Necrosis Tumoral-alfa (TNF) es una citoquina de particular interés, porque puede inducir tanto la sobrevida como la muerte de neuronas. El TNF y sus receptores han sido detectados en la s.n. de pacientes con PD, pero no de personas sanas. Sin embargo, no se tiene ninguna evidencia de cual podría ser la función del mismo en dicha patología. Utilizando ratones knock-in “hipomórficos” y un promotor específico de la s.n. (engrailed), se logró la expresión constitutiva de TNF en la s.n. de ratones. Combinando lo previo con dos elementos más (vectores adenovirales y el sistema Cre-LoxP), se desarrolló un modelo para lograr la expresión crónica de diferentes niveles de TNF en el cerebro de ratones in vivo. El mismo fue utilizado para analizar el papel de esa citoquina en la sobrevida o muerte de las neuronas dopaminérgicas. Realizando una única inyección estereotáxica de vectores adenovirales (Ad), se logró transducir las neuronas dopaminérgicas de la s.n. del ratón casi en un 100%. Así, cuando animales knock-in fueron inoculados en la s.n. con un adenovector codificante para la recombinasa Cre (AdCre), se observó la recombinación y escisión de un cassette que interfería con la expresión del transgén (cassette “PGK-neo”). El mismo estaba flanqueado por sitios llamados Lox-P (“floxeado”), los cuales son reconocidos por la recombinasa Cre. Seguidamente se demostró un aumento específico en la expresión del TNF respecto del basal en la s.n. de los animales knock-in inyectados con el AdCre, pero no cuando fueron inyectados con un Angal, o en animales silvestres (wt) inyectados con cualquiera de los dos adenovectores. Esos resultados demostraron que el mencionado cassette PGK-neo ejerce un efecto de “interferencia transcripcional” sobre el transgen de interés. Así, la combinación de las estrategias mencionadas ha permitido lograr la expresión constitutiva, e inducida, de una proteína de interés (TNF) en la s.n. del ratón. El análisis funcional de estos animales reveló que el TNF crónico inducido en algún momento de la vida adulta del animal provoca la lenta y progresiva desaparición de las neuronas dopaminérgicas de la s.n., representando un nuevo modelo de PD. Por otro lado, fue muy interesante observar que la expresión constitutiva de TNF logró aumentar 3 veces más el número de neuronas sobrevivientes que en los grupos controles ante el tratamiento de los animales con 6-hidroxidopamina (6-OHDa), una droga utilizada para modelar la PD. Estos resultados son un indicio para comenzar a comprender datos previos contradictorios de la literatura, referidos a la muerte o protección de neuronas mediado por TNF (el efecto final en cada caso podría depender de la concentración). La información aquí presentada será útil al considerar la posibilidad de una terapia que de alguna manera u otra afecte al TNF, o a cualquier otra citoquina (anti-inflamatorios, por ejemplo), como se ha realizado recientemente para esclerosis múltiple. Finalmente, la estrategia utilizada permitirá el estudio de las funciones de proteínas expresadas en la s.n. en forma controlada, y abre la posibilidad de establecer nuevos modelos animales de PD. Aún más, utilizando otros promotores endógenos, podrá permitir el estudio de otras patologías crónicas en el cerebro.

Abstract:
Parkinson Disease (PD) is a debilitating, long-term neurodegenerative disease, which most important neuropathological feature is the loss of dopaminergic neurons in the substantia nigra (s.n.) of the brain. It is not known its cause, nor exists a cure for this disease. Immune cytokines have been found in the brain of patients with many neurodegenerative diseases, including PD. Tumor Necrosis Factor-alpha (TNF) is a cytokine of particular interest, because it can induce both the survival or death of neurons. Importantly, it has been found in the s.n. of PD patients, but not in control subjects. Nevertheless, it is not known which function could have TNF in this disease. Combining “hypomorphic” knock-in mice and a promoter specific for the s.n. (engrailed), we obtained constitutive expression of TNF in the s.n. of mice. Combining two more elements (adenoviral vectors and the Cre-LoxP system), we had developed a model to obtain chronic expression of different levels of TNF in vivo in the s.n. of mice. This system was used to study the role of this cytokine in the survival or death of dopaminergic neurons. We found that we could transduce dopaminergic neurons of the s.n. of adult mice with almost 100% efficiency with a single stereotaxic injection of adenoviral vectors. When knock-in mice were inoculated in this brain region with an adenoviral vector coding for Cre recombinase, a “floxed” PGK-neo cassette was recombined. In addition, s.n.-specific TNF expression was up-regulated in the AdCRE-injected knock-in mice but not in knock-in mice injected with Adbetagal or in AdCRE-injected control animals. These results showed that the PGK-neo cassette had a “transcriptional interference” effect on TNF expression. Moreover, the combination of the mentioned strategies allowed for the basal expression, and the temporal onset of an up-regulation, of a protein of interest in the s.n. of mice. When we analyzed the functional effects of TNF on neuronal viability, we found that longterm TNF up-regulation was deleterious, inducing the progressive death of dopaminergic neurons. This has provided us with a new animal model of PD. On the other hand, it was very interesting to observe that the constitutive expression of TNF could protect 3 times more neurons than wt mice in an accepted PD model injecting 6-OHDa, a neurotoxin used as an accepted PD model, into the striatum. These results should help to understand previous contradictory data in the literature related to the neuroprotective or neurodegenerative effects of TNF (the final effect could depend on subtle differences on the TNF concentration). Even more, the information presented here should be considered when designing a possible therapy for PD that could affect cytokines expression (and TNF in particular) in the s.n., as has recently been tested for multiple sclerosis. Finally, the strategy used in this work provides the means to analyze the function of proteins expressed in the s.n. in a temporal and regional controlled manner, and opens up the possibility to establish other new animal models of PD. Even more, using other endogenous promoters, it should facilitate the study of other chronic pathologies in the adult mouse brain.

"Estudio del efecto genotóxico de alcoholes alifáticos de amplio uso aplicando el modelo de Drosophila melanogaster" (2004). Palermo, Ana María. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El estudio del efecto genotóxico de agentes xenobióticos se ha centrado tradicionalmente en la detección de daños que involucran al DNA y a los cromosomas entre los posibles blancos de ataque. En la actualidad la evaluación de un compuesto en cuanto a su acción deletérea sobre el genoma, debería incluir un análisis del efecto sobre la segregación cromosómica, ya que los blancos de acción pueden ser diferentes del ADN. El interes se debe al gran impacto de las aneuploidías en patología humana y a la creciente exposición a compuestos con capacidad potencial para actuar como aneugenos. La exposición a un agente que no afecta al ADN, no puede considerarse segura desde el punto de vista genético hasta tanto no sea evaluado su efecto aneugénico. En humanos, las aneuploidías en la línea germinal son frecuentes y tienen graves consecuencias, se considera que son causa del 5 al 7% de las muertes en niños y del 35% de los abortos espontáneos. Los individuos que sobreviven con números cromosómicos normales presentan severas discapacidades físicas y/o mentales. En las células somáticas las aneuploidías también juegan un papel importante, ya que existem evidencias crrecientes de que pueden ser determinantes en las etapas tempranas y/o tardías de los procesos de transformación celular y carcinogénesis, debido a la pérdida de heterocigosis. En esta misma línea están las pruebas de mutación y recombinación somatica (SMART, Somatic Mutation and Recombination Tests), un conjunto de ensayos capaces de identificar agentes mutagénicos o recombinagénicos potencialmente inductores de pérdida de heterocigosis. En este trabajo de Tesis se caracterisó el posible efecto mutagénico, recombinagénico y aneugénico en línea somática y germinal de Drosophila melanogaster producido por exposición a alcoholes alifáticos de cadena corta: etanol (EtOH), isopropanol (IPA) y metanol(MetOH). El conocimiento de los efectos genéticos de estos alcoholes es escaso o contradictorio y su metabolismo es muy semejante en humanos y en drosophila, siendo este organismo una excelente modelo de estudio para la evaluación de la toxicidad, genotoxicidad y teratogénicidad in vivo de alcoholes alifáticos de amplio uso. Con este objetivo se realizaron tratamientos agudos por vía inhalatoria, con los alcoholes (EtOH, IPA, MetOH) y sus primarios (acetaldehido=AAld, acetona=AcetO, formaldehído=FAld). Cuando se quiso evaluar el efecto de tratamientos crónicos las larvas fueron criadas en medio con el compuesto. Los resultados obtenidos indican que los tres alcoholes, EtOH, IPA y MetOH exhiben toxicidad y genotoxicidad diferencial en drosophila en las condiciones experimentales aplicadas. El grado de toxicidad demostrado en orden decreciente es: MetOH, EtOH e IPA. Los tres alcoholes presentan toxicidad reproductiva, disminuyendo la fertilidad de las hembras tratadas. El EtOH demostró afectar el desarrollo de larvas de Drosophila e inducir malformaciones congénitas. La genotoxicidad de los alcoholes alifáticos de cadena corta se manifiesta por su capacidad de inducción de no disyunción (ND) cromosómica. El grado de inducción de ND en orden decreciente es: IPA,EtOH y MetOH, guardando una relación inversa con la toxicidad. El MetOH actuaría como aneugeno indirecto, ya que su metabolismo, el FAld, es más genotóxico que el alcohol mismo. El EtOH y el IPA son aneugenos directos y sus respectivos metabolitos, el AAld y la AcetO, no afectan de manera significativa la disyunción cromosómica o muestran un efecto comparativamente menor que el de sus alcoholes de origen. En la línea germinal, los oocitos que están en las etapas más tardías de la diferenciación son los más afectados por los tratamientos con estos alcoholes. En la línea somática el efecto no es concluyente. Drosophila melanogaster es el modelo biológico de la elección para monitorear el daño inducido por alcoholes, permitiendo la extrapolación a otros organismos superiores en general y al hombre en particular.

Abstract:
The study of genotoxic effects of xenobiotics has been traditionally focused on DNA and chromosome damage. Nowadays, any evaluation of deleterious consequences exerted by any agent on the genome should necessary include the analysis of chromosome segregation, since the target of xenobiotics may be different from DNA itself. The study of aneuploidy is of interest due to its great impact on human health and the abundance of environmental agents with the capacity of acting as potential aneugenes. Exposition to a certain compound that has proved harmless regarding segregation has been discarded. In humans aneuploidy is quite common and has serious consequences. It may be the cause of around 5-7% infant deaths and it has been detected in 35% of all spontaneous abortions. Moreover, surviving individuals with abnormal chromosome sets are physically and/or mentally hadicape. The occurrence of aneuploidy in somatic cells is also of great interest since it may play a critical role in cell transformation and carcinogenesis, due to the loss of heterocigosity that may be induced. Somatic Mutation and Recombination Test (SMART) are also very useful to identify mutagenic and/or recombinagenic agents that result in the expression of recessive genes, wich may be involved in early and/or late steps in cancer development. The aim of the present Thesis was to characterize the potential mutagenic, recombinagenic and/or aneugenic effect of three short chain aliphatic alcohols, ethanol (EtOH), isopropanol (IPA) and methanol (MetOH), on somatic and germinal cells line in Drosophila melanogaster. The Knowledge about genetic consequences of the exposition to these alcohols in scarce or contradictory. Alcohol metabolism is similar in humans and Drosophila, thus this eukaryote has become a useful model in the in vivo evaluation of toxicicity, genotoxicicity and teratogenicity of the above mentioned aliphatic alcohols. Acute inhalation treatments with EtOH, IPA and MetOH, and with the corresponding primary metabolites, acetaldehyde (AAld), acetone (AcetO) and formaldehyde (FAld) were performed. To evaluate the consequence of chronic treatments, the compounds were added to the larva growth media. The results obtained show that all three alcohols, EtOH, IPA and MetOH exhibit differential toxicicity and genotoxicicity in Drosophila. The toxicicity of the alcohols in decrescent order is: MetOH, EtOH e IPA. All three alcohols show reproductive toxicicity, because fertitlity in treated females is lower than controls. Besides, EtOH exhibited developmental toxicicity in Drosophila larvae and induction of congenital malformations. Short chain aliphatic alcohols genotoxicity is expressed as a significant increase in chromosomal non-disjunction (ND) rates. The degree of induction of ND is inverse relative to the toxicity, thus IPA treated series show the highest level of ND in the progeny, being EtOH and MetOH less aneugemic. The MetOH is probably an indirect aneugenic agent, since the FAld is more active as genotoxic than the alcohol itself. The other two alcohols, EtOH and IPA act as direct mutagens in the induction of aneuploidy, and their metabolites, AAld and AcetO, do not effect chromosomal disjunction or show a comparatively lower effect than the alcohol from which they derive. In germ cells, mature oocytes are sensible to the drug treatments while less mature stages are not. The effects exerted by alcohols in somatic cells are inconclusive. Drosophila melanogaster has proven to be a useful biological model to monitor genetic damage induced by short chain aliphatic alcohols, because the results can be extrapolated to other organism including man.

"Estudio del fotocontrol de la germinación de semillas de Datura Ferox : Aspectos fisiológicos y moleculares" (2002). Burgin, María José. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Dependiendo del nivel de dormición la germinación de semillas de Datura ferox puede ser estimulada por la luz mediante una LFR o una VLFR. En ambos casos, esta promoción involucra el aumento de la fuerza expansiva del eje embrionario y el ablandamiento del endospenna micropilar, este último, asociado al aumento de las actividades endo-β-mananasa y β-manosidasa en ese tejido. El análisis del nivel de transcriptos relacionados con la germinación, revela la existencia de puntos en común y diferencias importantes entre la LFR y la VLFR. La LFR produce en embriones un incremento en el nivel de transcriptos para GA 3β-hidroxilasa, DfGA3β-hy, y una reducción en aquellos que codifican para GA 20 oxidasa, DfGA20-ox, indicando un probable aumento en el contenido de giberelinas. En respuesta a la LFR, y posiblemente a la acción de las giberelinas, se observa en el endosperma micropilar un aumento en el nivel de mensajeros para endo-β-mananasa y expansinas, y en embriones un aumento de la acumulación de transcriptos para expansinas. En semillas sensibles a la VLFR, el requerimiento de luz solo se mantiene para el aumento del nivel de transcriptos de DfGA3β-hy, mientras que la acumulación de los otros mensajeros analizados se produce independientemente de la luz. La germinación de D.ferox inducida por una VLFR, o una LFR, puede ser inhibida por una HIR. En ninguno de estos casos la HIR afecta el potencial de crecimiento del eje embrionario, siendo el blanco de la inhibición el ablandamiento del endosprmna micropilar. El antagonismo LFR-HIR involucra una disminución de la actividad de endo-β-mananasa, mientras que en la inhibición de la VLFR por una HIR, la promoción de las actividades endo-β-mananasa y β-manosidasa se encuentra bloqueada. A nivel de los distintos transcriptos analizados, tanto en el antagonismo LPR-HIR como en el VLFR-HIR, se observa una fuerte relación entre nivel de mensajeros de DfGA3β-hy y los valores de germinación. En el caso de inhibición de la VLFR por la HIR, la inhibición de la actividad endo-β-mananasa se encuentra asociada a una disminución en el nivel de los mensajeros para esta enzima. Los resultados obtenidos indican que los efectos de la HIR sobre la actividad de endo-β-mananasa pueden deberse, tanto a una reducción en el nivel de mensajeros para esta enzima (VLFR), como a algún proceso posterior al establecimiento de dichos niveles, que determina una disminución de esta actividad enzimática (LFR).

Abstract:
Datura ferox seed germination can be promoted by a LFR or a VLFR, according to dormancy levels. In both cases, this promotion involves an increase in embryo growth potential and endosperm softening. Endosperm weakening is related to an increase in endo-β- mannanase y β-mannosidase activities. The analysis of transcript levels related to germination, reveal some common points but also differences between germination induced by a LFR, or by a VLFR. In response to the LFR, transcript accumulation for GA 3 β-hydroxylase, DfGA3β-hy, is promoted in embryos, while a reduction in those for GA 20 oxidase, DfGA20-ox, is observed, suggesting an increase in gibberellin content. An increase in transcript levels for endo-β-mannanase and expansins, in endosperm caps, and for expansins in embryos, is promoted by the LFR and gibberellins. In seeds sensible to the VLFR, the light requirement is only maintained for the rise in DfGA3β-hy transcripts level, while the other analyzed transcripts accumulated independently of the light. Germination of D.ferox induced by a LFR, or a VLFR, can be inhibited by a HIR. It could not be detected any affect of HIR on embryo growth potential. Endosperm softening is the target of the inhibition by the HIR. Endo-β-mannanase activity promoted by LFR is deeply diminished by HIR. In the VLFR, the promotion of endo-β-mannanase y β-mannosidase activities is cancelled by the HIR. HIR inhibition of germination, promoted by VLFR or LFR, is linked to the pattern of GA 3 β-hydroxylase transcript accumulation. In the VLFR-HIR antagonism, endo-β-mannanase activity inhibition is related to a decrease in the transcripts level for this enzyme. These results indicated that endo-β-mannanase activity could be affected by HIR by a lowering on its transcripts level (VLFR), or by some other process given after the establishment of this transcripts level, determining a drop in enzyme activity.

"Estudio del impacto del balance Th17/Treg en periferia y en mucosas sobre la funcionalidad de la respuesta celular antiviral y la inmunopatogénesis de la infección HIV/SIDA" (2016-03-08). Falivene, Juliana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las subpoblaciones de linfocitos Th17 y T regulatorios (Treg) han sido relacionados con la progresión a enfermedad en el contexto de la infección por HIV-1. Sin embargo, su relación con la respuesta adaptativa T CD8+ antiviral durante la infección aguda/temprana por HIV (PHI, primary HIV infection) no ha sido aún estudiada. En este contexto, el primer objetivo general de este trabajo de tesis consistió en analizar las subpoblaciones Th17 y Treg y su relación con la respuesta celular T CD8+ específica frente a HIV y parámetros de seguimiento de la infección durante la infección aguda/temprana y hasta un año postinfección (p.i). Para ello se utilizaron muestras de sangre de 14 dadores sanos (DSs), 40 PHI, 17 Crónicos y 13 controladores elite (ECs, Elite Controllers). Los porcentajes de células Th17 y Treg se encontraban severamente alterados en individuos Crónicos, mientras que todos los pacientes infectados con HIV evidenciaron un desbalance Th17/Treg comparados con DSs (incluso ECs), en concordancia con sus mayores proporciones de células T CD8+ activadas (HLA-DR+/CD38+). Un mejor estatus clínico (evidenciado por mayores recuentos de células T CD4+ y menores cargas virales y activación inmune) se asoció con mayores niveles de Th17 y menores niveles de Treg. Notablemente, se encontraron correlaciones positivas entre los niveles basales de Th17 y la funcionalidad de la respuesta T CD8+ específica frente a HIV: la capacidad de suprimir la replicación viral (VIA, viral inhibitory activity) y la proporción de células polifuncionales (IFN-γ+/CD107A/B +) tanto a tiempos tempranos como tardíos p.i, resaltando el valor pronóstico de la subpoblación Th17 en la preservación de una inmunidad celular antiviral más eficiente. La relación Th17/Treg y la intensidad media de fluorescencia relativa (IMFr) de IL-17 también se correlacionaron positivamente con VIA. Debido a la importancia del tratamiento antirretroviral (TARV) en la reconstitución inmune de individuos infectados, a continuación se decidió caracterizar las subpoblaciones Th17, Treg y su balance en sangre periférica y mucosa cervical y su implicancia en la inmunopatogénesis de HIV-1 en ausencia o presencia de TARV. Para ello se utilizaron muestras de 19 individuos TARV+ (más de 2 años con supresión efectiva de la CV), 22 pacientes crónicamente infectados naïve de tratamiento (TARV-) y 20 DSs. Tras el tratamiento, tanto la frecuencia de Th17 como la relación Th17/Treg en periferia alcanzaron valores similares a los observados en DSs, en contraste a lo observado en células Treg cuyos niveles se mantuvieron altos. Asimismo, en individuos TARV+ se observó una disminución de los niveles de activación inmune a pesar de lo cual no se alcanzaron valores normales, hallándose correlaciones negativas entre los niveles de activación celular y el balance Th17/Treg. Por otro lado, mayores niveles de la citoquina proinflamatoria IL-1β en exocervix se correlacionaron positivamente con los niveles de activación celular periféricos, sugiriendo que existiría una relación entre los niveles de inflamación sistémicos y lo observado en sitios de mucosas. Es importante destacar que el tratamiento no indujo un incremento de los recuentos de células T CD4+ CD161+ (subpoblación de células precursoras de Th17 que migran a intestino) los cuales resultaron significativamente menores a los observados en DSs. Asimismo, al estudiar el patrón de secreción de citoquinas por parte de células mononucleares de cérvix (CMCs) estimuladas, se observó que las CMCs provenientes de individuos TARV+ secretan menores niveles de IL-17A e IL-10 en relación a las de DSs. En conjunto, los resultados de la presente tesis sugieren, por un lado, la existencia de una potencial relación entre la subpoblación Th17 y el balance Th17/Treg con respuestas T CD8+ HIV-específicas que juegan un rol clave en la contención de la infección. Por otro lado, aunque el tratamiento antirretroviral parece tener un impacto positivo sobre la restauración de las funciones inmunes a nivel sistémico, tanto los niveles de precursores de células Th17 que migran a intestino como la secreción de IL-17A e IL-10 por CMCs no alcanzaron valores normales, sugiriendo que en sitios de mucosas la restauración inmune es incompleta.

Abstract:
Th17 and Treg subsets have been related to disease progression during HIV-1 infection. However, the potential relation of these T cell subsets with antiviral T-cell responses during primary HIV infection (PHI) has not been studied yet. In this context, the first aim of this study was to analyze Th17 and Treg subsets and their relation with anti-HIV T-cell responses and clinical parameters during PHI and up to one year post-infection (p.i). Samples from 14 healthy donors (HDs), 40 PHI patients, 17 Chronics, and 13 Elite controllers (ECs) were studied. The percentages of Th17 and Treg subsets were severely altered in Chronics, whereas all HIV-infected individuals (including ECs) showed Th17/Treg imbalance compared to HDs, in concordance with higher frequencies of activated CD8+ Tcells (HLA-DR+/CD38+). Better clinical status (higher CD4+ T-cell counts, lower viral loads and immune activation) was associated with higher Th17 and lower Treg levels. Positive correlations were found between Th17 at baseline and anti-HIV CD8+ T-cell functionality: viral inhibitory activity (VIA) and key polyfunctions (IFN-γ+/CD107A/B +) at both early and later times p.i, highlighting the prognostic value of Th17 cells to preserve an effective antiviral T-cell immunity. Th17/Treg ratio and the IL-17 relative mean fluorescence intensity were also positively correlated with VIA. Due to the importance that antiretroviral treatment (ART) has in the immune reconstitution of HIV+ patients, the second aim of this study was to characterize Th17 and Treg subsets and their balance in peripheral blood and female genital tract and their implications in the immunopathogenesis of HIV-1 infection comparing ART+ with ARTpatients. Samples from 19 HIV+ ART+ patients (more than 2 years under treatment), 22 HIV+ ART naïve patients (ART-) and 20 HDs were used. After treatment, both the frequency of Th17 cells as well as Th17/Treg ratio in peripheral blood reached similar levels compared to HDs, in contrast to that observed for Treg cells that remained at high levels despite ART. Also, ART was accompanied by a reduction in the immune activation levels, yet not to normal values, finding negative correlations between cellular immune activation and Th17/Treg ratio. On the other hand, high levels of the proinflammatory cytokine IL-1β in exocervix samples were positively correlated with higher levels of cellular immune activation in the blood, suggesting a relationship exists between systemic and mucosal activation/inflammation. Importantly, ART did not induce a proper restoration of CD4+ CD161+ T-cell counts (a subset of Th17 precursor cells with GALT homing properties) which were significantly lower compared to HDs. Interestingly, it was observed that cervix mononuclear cells (CMCs) from ART+ subjects secreted lower amounts of IL-17A and IL-10 upon stimulation than those obtained from HDs. Taken together, these results suggested, first, a potential link between Th17 and Th17/Treg ratio with key HIV-specific CD8+ T-cell responses against the infection. On the other hand, although ART has a positive impact on immune restoration in blood, both the levels of Th17 precursor subset with GALT homing properties and the ability of CMCs to secrete IL-17A and IL-10 did not reach normal values, suggesting that immune restoration at mucosal sites is impaired or incomplete.

"Estudio del intercambio tiol/disulfuro en las proteínas: Caracterización y análisis de la Protein Disulfuro Isomerasa de colza (Brassica napus)" (1997). Heuck, Alejandro Pablo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La modificación de los enlaces disulfuro en las proteínas (escisión, formación e isomerización) es asistida por una creciente familia de proteínas denominadas protein disulfuro oxidoreductasas (PDOR). El mecanismo de acción de estas enzimas se basa en la rápida velocidad con la cual los residuos cisteína de su sitio activo (-Cys-X-Y-Cys-) llevan a cabo los intercambios tiol-disulfuro con los grupos sulfhidrilo o enlaces disulfuro de las proteínas sustrato. En el presente trabajo se desarrolló un novedoso procedimiento para determinar la actividad de las PDORs (Capítulo 1) y se purificó a homogeneidad y se caracterizó tanto estructural, como cinéticamente, la Protein Disulfuro Isomerasa (PDI) de colza (Brassica napus) (Capítulo 2). El método desarrollado para la medición continua de la actividad de las PDORs se basa en la escisión de los enlaces disulfuro de la insulina derivatizada en sus extremos amino terminales con una sonda fluorescente (fluoresceína). La velocidad del incremento en la fluorescencia de la "di Insulina-fluoresceintiocarbamilada" (di Ins-FTC) es lo suficientemente sensible para estimar concentraciones de Tiorredoxina (Trx) de E. coli desde 5 nM hasta 500 nM. Además, el ensayo permite estudiar, empleando reductores no-fisiolólogicos (DTT), el efecto del pH sobre la actividad de estas enzimas sin la interferencia de enzimas accesorias (e.g. NADP-Trx-reductasa). Utilizando este ensayo, se purificó por primera vez, una PDI de semillas de una planta dicotiledónea. Los estudios estructurales revelaron que la PDI de colza es una glicoproteína homodimérica (57 kDa la subunidad) sustituida con un solo oligosacárido del tipo alta manosa. La PDI es estable a la desnaturalización térmica, y la presencia del oligosacárido no alteraría su estabilidad. Sin embargo, la remoción del oligosacárido disminuyó un 60% la actividad reductasa de la PDI. La PDI cataliza tanto la formación, la escisión como la isomerización de los enlaces disulfuro en varias proteínas sustrato. Dos factores son fundamentales en estas reacciones de intercambio tiol-disulfuro: a) el pH y b) el potencial redox del medio. El empleo de la di Ins-FTC como sustrato para medir la actividad reductasa de la PDI y de la Trx, permitió determinar que a pesar de compartir un sitio activo característico y una similitud estructural, ambas enzimas poseen pH óptimos distintos. La Trx cataliza esta reacción a pH neutro o ligeramente alcalino, mientras que la PDI lo hace más eficientemente a pH levemente ácido. Sin embargo, cuando se analizó la efectividad de la PDI en la catálisis de la formación y de la isomerización de las cistinas, la mayor eficiencia se obtuvo a pH levemente alcalinos. Por otra parte, a potenciales redox equivalentes a los que existirían dentro del retículo endoplásmico, la PDI acelera tanto la formación como la isomerización de los enlaces disulfuro. Pero a potenciales más reductores, estas actividades disminuyen y aumenta la capacidad para escindir estos enlaces. Estos estudios sugieren que tanto el pH intracelular, como los niveles de GSH reducido y oxidado (potencial redox) pueden modular la tendencia a la formación o a la escisión de los enlaces disulfuros cuando la PDI es el catalizador. Finalmente, la PDI de colza fue efectiva en la reducción de los enlaces disulfuro de una proteína de reserva presente en la semilla de colza: la napina. Estos resultados en conjunto, sugieren que la PDI podría proveer una vía alternativa para la reducción de varias proteínas presentes en la semilla, además de la ya propuesta para la Trx-h, en los eventos tempranos de la germinación.

Abstract:
The modification of disulfide bonds in proteins (cleavage, formation, and isomerization) is assisted by a growing protein family named protein disulfide oxidoreductases (PDOR). The action mechanism relies on the fast rate of the thiol-disulfide exchange reaction between cysteines of the active site (-Cys-X-Y-Cys-) and the thiol groups or disulfide bonds of the protein target. The present work reports a novel assay for the measurement of the PDOR activity (Chapter 1) and the purification of Protein Disulfide Isomerase (PDI) to near homogeneity, as well as the characterization of kinetic and structural properties (Chapter 2). The method for the continuous assay of the PDOR activity is based on the cleavage of the disulfide bonds of insulin molecule, in which both N-terminal amino groups are chemically modified with a fluorescent probe (fluorescein). The rate of fluorescence increment of di-fluoresceinthiocarbamyl-insulin (di FTC-Ins) is sensitive enough for the estimation of E. coli thioredoxin (Trx) concentrations from 5 nM to 500 nM. Moreover, this assay allows the analysis of the pH effect on the activity of PDORs without the interference of accessory enzymes (e.g. NADP-Trx-reductase). Using this assay, a PDI was purified from Brassica napus germinating seeds. The structural studies showed that this PDI was an homodimeric glycoprotein (subunit of 57 kDa), containing only one high mannose type oligosaccharide. Although the oligosaccharide was not responsible for the unusual resistance of PDI to thermal denaturation, cleavage of the carbohydrate moiety reduced 60% the activity of the enzyme. PDI catalyzed the formation, the cleavage, and the isomerization of disulfide bonds in a variety of target proteins. Two factors were crucial in this thiol-disulfide exchange reactions: a) the pH and b) the redox potential of the milieu. The use of di FTC-Ins as substrate for the reductase activity of PDI and Trx, unveiled that these enzymes have different pH optimum. Whereas Trx catalyzed this reaction at neutral or slightly alkaline pH, PDI was more effective at a slightly acidic pH. However, when the effectiveness of PDI in the catalysis of the formation or isomerization of cystines was assayed, the greatest efficiency was obtained at slightly alkaline pH. At redox potentials similar to that prevailing in the endoplasmic reticulum, PDI catalyzed the formation as well as the isomerization of disulfide bonds. But at more reducing conditions, these activities decreased and the capacity to cleave disulfide bonds increased. These studies suggested that the intracellular pH, as well as the levels of reduced GSH and GSSG (redox potential) can modulate the formation or the cleavage tendency of the disulfide bonds when PDI was the catalyst. Finally, PDI was also effective in the cleavage of the disulfide bonds of a B. napus storage protein: napin. Taking together, these results suggested that, like Trx-h on the early events in the seed germination, PDI could provide an alternative mechanism for the reduction of important seed proteins.

"Estudio del mecanismo de activación de la quinasa de proteínas dependiente de cAMP" (1999). Zaremberg, Vanina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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El objetivo general de esta tesis es contribuir al estudio del mecanismo de activación de las proteinas quinasas dependientes de cAMP (PK A). Algunos de los grandes problemas a dilucidar en este tema son: si la enzima necesita disociarse en sus subunidades catalltica y regulatoria para activarse por cAMP , si el cAMP es el único agente necesario para la activación de la enzima y cómo se adquiere la selectividad de sustratos. Para este trabajo se han utilizado como modelos dos eucariontes inferiores. 1) PKA parcialmente purificada del hongo dimórflco Mucor rouxii, y ensayos in vitro. 2) Mutantes de subunidad regulatoria (bcy1) de la PKA de la levadura Saccharomyces cerevisiae con un abordaje genético-bioquímico-molecular. Utilizando el primer modelo y trabajando a concentraciones de holoenzima del orden de nM hemos llegado a las siguientes conclusiones (Mechanism of activation of cAMP-dependent protein kinase. In Mucor rouxii the apparont specific activity of the CAMP activated holoenzyme is different to that of its free catalytic subunit”. V.Zaremberg, A.Donnella-Deana and S.Moreno. Enviado a Archives in Biochemistry and Biophysics). - en este rango de concentración la actividad enzimática utilizando péptidos sintéticos como sustratos no es lineal con la concentración de enzima. Con la proteina protamina, utilizada como referencia, la actividad es casi lineal en el mismo rango de concentración. - la dependencia de la actividad fosforilante de cada péptido, con el cAMP, el grado de inhibición por un péptido inhibidor especifico y la modulación por policationes dependen del péptido utilizado. - en todos los ensayos arriba mencionados la relación de las actividades fosforilantes de la enzima con los distintos péptidos, comparados entre si o con la protamina, es diferente a la misma relación estimada a partir de las actividades medidas con la subunidad catalitica libre. Estos resultados se explican con dos modelos posibles: a) la subunidad catalitica libre es la entidad que fosforila los sustratos y el nivel de producción de subunidad C depende del cAMP y del sustrato; b) a altas concentraciones de holoenzima, existe holoenzima sin disociar con cAMP unido; esta especie es cataliticamente activa y la selectividad de esta especie por los sustratos es diferente a la de la subunidad catalitica libre. En el segundo modelo se han utilizado mutantes espontáneas, cedidas por el Dr. Kelly Tatchell, en el gen que codifica para la subunidad regulatoria (bcy1) de la PKA. En un primer trabajo (Analysis of the mechanism of activation of cAMPdependent protein kinase through the study of mutants of the yeast regulatory subunit. ” V.Zaremberg and S.Moreno, Eur.J.Biochem. 237: 136-142, 1996) trabajando con las cepas mutantes se obtuvieron los siguientes resultados: - los niveles de las subunidades regulatoria ( R) y catalltica (C ) en las cepas mutadas son similares a los de la cepa salvaje. - Una medida aproximada de la afinidad de las subunidades R mutadas por el CAMP, indicó que se encuentra disminuida. - Midiendoactividad de PKA en células penneadas en ausencia y presencia de cAMP, se encontró que las mutantes demuestran actividad dependiente de cAMP,aunque tienen una actividad basal elevada. - Los fenotipos se hicieron más severos si el fondo genético de las levaduras era RAS2; y permanecieron iguales por sobreexpresión del gen para PDE2. En la tercera parte de la tesis, y utilizando el mismo modelo de S.cerevisiae se encaró la sobreexpresión de algunas de las mutantes bcy1: construcción de los vectores correspondientes, estudio de la sobreexpresión y análisis de los fenotipos resultantes. El conjunto de estos resultados (manuscrito en preparación) confirma la conclusión que obtuviéramos en la primera parte: las holoenzimas mutadas tienen actividad enzimática. Del conjunto de los resultados genético-bioquímicos obtenidos hasta ahora en el sistema de las mutantes de levadura hemos concluido, que las holoenzimas mutadas tienen actividad fosforilante de proteinas sin necesidad de disociarse en sus subunidades, que la capacidad fosforilante de proteinas es diferente para cada mutante (diferentes fenotipos) y proponemos que los cambios conformacionales producidos por las mutaciones pueden ser similares a los introducidos por el cAMP al interactuar con la holoenzima.

Abstract:
The general aim of this thesis is to contribute to the study of the mechanism of activation of CAMP-dependent protein kinases (PKA). Some of the questions to solve on this field are the following: is it necessary for the holoenzyme to dissociate to be activated by CAMP? ls cAMP the only agent that promotes activation? How do the holoenzymes select the substrate to phosphorylate? In this work we have used two lower eukaryotic models. 1) Partially purified PKA from the dimorphic fungus Mucor rouxii and in vitro assays. 2) Mutants of the regulatory subunit (bcy1) of protein kinase A from the yeast Saccharomyces cerevisiae , using a molecular-genetic-biochemical approach. Using the first model and working at holoenzyme concentrations in the range of nM we have arrived to the following conclusions (Mechanism of activation of cAMP dependent protein kinase. In Mucor muxii the apparent specific activity of the cAMP activated holoenzyme is different to that of its free catalytic subunit, V.Zaremberg, A.Donnella-Deana and S.Moreno; submitted to Archives in Biochemistry and Biophysics) - under this range of enzyme concentration, the enzymatic activity using peptide as substrates is non linear; while it is almost linear when using protamine as substrate. - the dependency of each peptide phosphorylating activity with cAMP, the degree of inhibition by a specific peptide inhibitor, and the activation by polycations depends on the peptide used as substrate. - in all the above mentioned assays. the relationship of the apparent specific activity of the holoenzyme with each peptide , is different from the one displayed by the isolated free catalytic subunit. These results can be explained by two posible models: a) the free catalytic subunit is the enzymatic species that phosphorylates the substrates and the level of production of free C depends on cAMP and on the protein or peptide substrate; b) at high holoenzyme concentration, the existance of the species cAMP-bound holoenzyme is posible; this species is catalytically active and the selectivity for the substrates of this species is different from the one of the free catalytic subunit. In the second model we have used spontaneous mutants on the bcy1 gene, isolated and generously provided by Dr. Kelly Tatchell. In first stage of this approach we have obtained the following results: (Analysis of the mechanism of activation of CAMP-dependent protein kinase through the study of mutants of the yeast regulatory subunit, V.Zaremberg and S. Morenoi, Eur.J.Biochem. 237: 136-142, 1996.) - the levels of the regulatory (R) and catalytic (C) subunits of PKA in the mutated strains is similar to the levels of the wild type strain. an approximate measurement of the affinity of the mutated R subunits for cAMP indicates that the affinity is decreased. measurement of PKA activity in the abscence and presence of CAMP in permeabilized mutated and wild type cells indicates that the holoenzymes are dependent on CAMP and that basal activity is high. - the phenotypes were more severe when working on a wild type RAS2 background; and were maintained alike when over expression the gene for PDE2 (CAMP phosphodiesterase). In the third part of this thesis, and using the same model of S.cerevisiae mutant strains, we began the over expression of some of the bcy1 mutants: vector construction, analysis of the over expression and analysis of the derived phenotypes. These results suggest that the mutated holoenzymes are active. From the results obtained from the molecular genetic approaches, taken as a whole, we conclude that the mutated holoenzymes have catalytic phosphorylating activity without dissociating into its subunits; that the selectivity of substrate phosphorylation for each mutated holoenzyme ¡s different (different phenotypes) and we propose that the conformational structural changes produced by the mutatioon can be similar to the changes promoted by cAMP upon interaction with the holoenzyme.

"Estudio del método del persulfato-nitrato de plata, para determinar manganeso en aceros : Rol catalítico del ión plata. Compuestos de plata de valencia superior a uno" (1950). Ramos, Eugenia H.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio del papel de las palmitoil-proteínas en la regeneración del sistema nervioso, la importancia de la palmitoilación y la ubicación en dominios lipídicos de la membrana en su función" (2011). González Polo, Virginia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La S-palmitoilación ha sido propuesta de tener un papel fundamental en la asociación de proteínas citoplasmáticas con la membrana. Nuestro objetivo fue evaluar el papel de la S-palmitoilación en la transducción de señales en neuronas, en tres modelos de investigación: (i) el aislamiento de dominios membranales resistentes a la solubilización con detergentes (DRMs) de sinaptosomas de cerebro de la rata adulta, (ii) la asociación a membranas artificiales de una proteína neuronal palmitoilada y (iii) una visión funcional de la expresión de proteínas palmitoiladas ante un estímulo fisiológico. En el primer modelo de DRMs pudimos ver con el tratamiento con la proteasa trombina y dibutiril AMPc la translocación de ciertas palmitoil-proteínas a DRMs. Complementariamente en el modelo de liposomas estudiamos la asociación de la proteína neuronal GAP-43 palmitoilada ó no a las membranas artificiales de distinta composición. Nuestros resultados nos llevaron a proponer que en la interacción de la proteína GAP-43 con la membrana es influenciada por efectos electrostáticos. Para analizar la influencia del extremo amino terminal en la asociación de GAP-43 sin palmitoilar a la membrana abordamos la técnica de resonancia paramagnética electrónica (EPR). No pudimos observar diferencias estructurales en la proteína asociada a los liposomas en comparación con la proteína libre mediante esta técnica. Finalmente para poner la Spalmitoilación en un contexto funcional, analizamos la expresión y compartimentalización subcelular de varias palmitoil-proteínas durante la injuria y regeneración neuronal, trabajando con un modelo de axotomía unilateral del nervio ciático en ratas adultas. Entre las proteínas analizadas la expresión de la proteína quinasa lyn mostró un aumento significativo en la rama periférica pero no central ante el estímulo de la lesión del nervio ciático. Como conclusión general de nuestros resultados podemos decir que las proteínas palmitoiladas están involucradas activamente en procesos tan importantes como la regeneración neuronal y plasticidad sináptica. En un futuro trabajo y gracias a los avances logrados en la técnica de detección de proteínas palmitoiladas estaremos en condiciones de analizar el estado de palmitoilación de las proteínas involucradas en la regeneración neuronal y durante la remodelación sináptica fisiológica y patológica.

Abstract:
S-palmytolation has been proposed to have a major role in protein-membrane association. Our major objective was to evaluate the role of the S-palmytoilation in the neural intracellular signal transduction. We used three biological systems, (i) the isolation and evaluation of detergent resistant membrane (DRM) domains from adult rat brain synaptosomes, (ii) the association with artificial membranes of a palmytoil protein (iii) and a functional vision of the palmytoil protein because of physiological stimuli. The first approach consisted in the isolation and evaluation of detergent resistant membrane domains from adult rat brain synaptosomes. We saw that the treatment with thrombin and dibutiril cAMP translocated some palmytoil-proteins to DRMs. Complementary we measured the association of the neural GAP-43 S-palmytoilated protein to artificial membranes and to different lipid compositions in vitro. Our results led us to propose that the interaction of the protein GAP-43 with the lipid membrane is influenced by electrostatics forces. We wanted to analyze the influence of the amino terminal end in the association of GAP-43 with the membrane .We used the novel technique Electron Paramagnetic Resonance (EPR). No structural difference was observed when the protein was associated with membrane lipids or free. Additionally, using a unilateral sciatic nerve injury rat model, we analyzed the S-palmytolation of proteins ex vivo during axonal injury and regeneration. The protein lyn showed an increment in the peripherals stream but not in the central by the injury stimuli. Our general conclusion was that the palmytoilated proteins was involved actively in as important processes as neuronal regeneration and synaptic plasticity. In the future work and thanks to the advances obtained in the technique of palmytoil-protein detection we will be able to analyze the state of palmytoilation of the proteins involved in neuronal regeneration and during the physiological and pathological synaptic remodeling.

"Estudio del plegado proteico: la ß-lactamasa" (2004). Santos, Javier. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las propiedades biológicas de las proteínas dependen de su estructura tridimensonal (3D). Hoy sabemos que el plegado proteico permite la conversión de la información existente en la secuencia de aminoácidos en información 3D, pero no sabemos cómo se lleva adelante este proceso. Tampoco se conoce la lógica con que se distribuye la información 3D en la secuencia y no existe una opinion unificada sobre el grado de estructura presente en los estados parcialmente plegados ni sobre el papel de estos últimos en el plegado proteico. Sí existen algunas pruebas de que la información conformacional no estaria distribuida homogéneamente en la secuencia proteica. En una misma cadena polipeptídica existen fragmentos o bloques que pueden ser eliminados sin producir alteraciones en el plegado final, por lo que no formarían parte del conjunto de residuos determinantes de la estructura 3D nativa. Por el contrario, otros fragmentos aparentemente no pueden ser removidos sin abortar el proceso de plegado. En este trabajo de tesis se utilizó a la β-lactamasa de Bacillus Licheniformis. ES-βL como modelo experimental para estudiar el proceso de conversión de información 1D → 3D e investigar la existencia de módulos de información para el plegado. Se eligió a ES-βL como modelo principalmente porque a) la existencia de proteína correctamente plegada (nativa) es fácilmente detectable por actividad enzimática. aún en trazas; b) se conoce su estructura cristalográfica con gran resolución; c) no posee puentes disulfuro que compliquen adicionalmente el plegado; y d) ES-βL no es un modelo excesivamente reduccionista: posee dos dominios y una topología medianamente intrincada. Para caracterizar el modelo experimental se estudiaron aspectos generales de la estructura, el plegado, y estados intermediarios de ES-βL, tanto desde un punto de vista cinético como en el equilibrio. La estructura de formas parcialmente plegadas también se estudió a partir de experimentos de modificación química de cisteínas introducidas a tal fin en la cadena polipeptídica como sondas conformacionales. El desplegado de ES-βL inducido por urea presentó más complejidad que el desplegado por GdmCl. En el primer caso, se detectaron por lo menos cuatro estados parcialmente plegados. Inesperadamente, el reemplazo de Ser265 → Cys265 tuvo consecuencias importantes para el plegado. El efecto desestabilizador de la mutación sobre los estados parcialmente plegados indicó que el residuo formaría parte de un módulo estructurado en dichos estados. La observación de estados parcialmente plegados, curvas de desnaturalización no coincidentes, transiciones multifásicas, cores resistentes e intermediarios cinéticos es compatible con un mecanismo de ensamblado modular o plegado por partes de la β-lactamasa. Por otra parte, en este trabajo se manipuló la secuencia de la proteína para estudiar la interdependencia de los niveles jerárquicos de estructura en el proceso de plegado. Se evaluó el contenido de información para el plegado de ES-βL codificado por la hélice α C-terminal. Para estudiar el papel de esta hélice se prepararon y caracterizaron tres variantes de ES-βL acertadas, en nueve, catorce y diecinueve residuos desde el C-terminal. ES-βLͨΔ9, ES-βLͨΔ14 y ES-βLͨΔ19, respectivamente. Los lisados de bacterias expresando ES-βLͨΔ19 no presentaron actividad β-lactamasa. Por el contrario, dicha actividad sí fue detectada en lisados conteniendo tanto ES-βLͨΔ9 como ES-βLͨΔ14, demostrando de manera preliminar que una fracción de estas moléculas, puede adquirir estructura nativa. La caracterización rigurosa de ES-βLͨΔ9 permitió demostrar que la secuencia de residuos eliminada tiene un rol en el mecanismo de plegado pero que su ausencia no impide la formación de estructura 3D nativa. También se caracterizó en detalle Ip ES-βLͨΔ9, un estado parcialmente plegado, que está conectado con la forma nativa de ES-βLͨΔ9. Ip ES-βLͨΔ9 sólo posee estructura secundaria residual, pero es muy compacto. Posee las características de un glóbulo fundido y puede esmbilizarse formando un dímero. La eliminación de los residuos 287-295 afecta dramáticamente la velocidad de replegado de la β-lactamasa: ES-βLͨΔ9 se pliega 10 4 veces más lentamente que ES-βL. A partir del estudio tennodinámico y cinético de ES-βLͨΔ9 se concluyó que los residuos eliminados proveen información para formar estructura secundaria, evitar trampas cinéticas y asociación errónea de unidades de plegado, acelerar el pasaje a través del estado de transición y estabilizar al estado nativo. Los resultados obtenidos con la β-lactamasa se compararon con otros datos de literatura referidos a proteínas que a pesar de carecer de partes de su secuencia alcanzan un plegado nativo. El conjunto de las evidencias experimentales parece sugerir que la cadena polipeptídica tiende a plegarse guiada principalmente por información local en la secuencia. Las interacciones entre residuos alejados secuencialmente jugarían un papel secundario en el proceso de plegado y aparecerían posteriormente, luego de que la cadena polipeptídica adopte el recorrido espacial apropiado.

Abstract:
The biological properties of proteins rest upon their specific native three-dimensional structure. and it is known that protein native structure is the result of a folding process by which sequential information is spontaneously converted into three-dimensional information. However, it is unknown how the three-dimensional information is encoded by the sequence. Moreover, although the native, biologically active, conformation can be characterized in atomic detail, a clear understanding of the structure of unfolded and partially folded states is also lacking. There are evidences suggesting that the information content is not homogenously distributed in the protein sequence: there exist particular fragments or blocks of sequence that can be eliminated without producing major alterations in the native structure, whereas other fragments, or even single residues, cannot be removed without impeding the folding process. In this work, β-lactamase of Bacillus licheniformis (ES-βL) was used as an experimental model to study the conversion of sequential information into three-dimensional information, and to investigate the existence of information modules embedded in the polypeptide chain. ES-βL was chosen as a protein folding model because: a) even traces of its native state can be detected by measuring enzymatic activity; b) its crystal structure is known with high resolution; c) it does not have disulfide bridges that would additionally complicate the folding reaction; d) it is representative of medium-size proteins with two domains and a moderately intricate topology. In the first part of the work, to characterize the experimental model, native and intermediary states of ES-βL, were studied by kinetics, equilibrium unfolding experiments, and chemical modification of Ser → Cys mutants. At least four partially folded states with different spectroscopic properties or thiol accessibility were detected in ES-βL equilibrium unfolding. Unexpectedly, it was found that a Ser265 → Cys265 replacement destabilized selectively ES-βL partially folded intermediates indicating Ser265 is establishing fixed interactions in these states. In addition the results showed the presence of partially folded states, no coincident curves when unfolding was monitored by different probes, multiphase transitions, protease resistant cores, and kinetic intermediaries. All these features suggest a modular assembling mechanism for β-lactamase. In the second part of the work, the sequence of β-lactamase was manipulated to study the interdependence of the hierarchic levels of structure (modules, independent units, topomer, native structure, etc.) in the folding process. Sequential information was eliminated with the expectation of stopping folding at different levels of structural complexity. In particular, the information content encoded by the C-terminal helix of ES-βL was evaluated. Three variants shortened by nine, fourteen and nineteen residues from the C-terminal were prepared and characterized (ES-βLͨΔ9, ES-βLͨΔ14 and ES-βLͨΔ19, respectively). For ES-βLͨΔ9, ES-βLͨΔ14, most of the protein was was found forming inclusion bodies (insoluble aggregates) in transformed E. coli cells. Neither lysates of untransformed E. coli cells nor cells expressing ES-βLͨΔ19 had detectable lactamase activity. Contrastingly, lysates containing ES-βLͨΔ9 or ES-βLͨΔ14 exhibited enxymatic activity, which demonstrated that a fraction of these proteins acquired a properly folded structure in vivo. A thorough characterization of ES-βLCͨΔ19(hydrodynamics, spectroscopic and thermodynamic properties, enzymatic activity and resistance to proteolysis) allowed demonstrating that the eliminated sequence does have a role in the folding mechanism, but its absence does not prevent the acquisition of native structure. Also Ip ES-βLͨΔ9, a partially folded state, was discovered and characterized. Ip ES-βLͨΔ9 lacks tertiary structure, but it is compact and possesses residual secondary structure. These features are typical of molten globules, but this one is unusual because it forms a dímer in a concentration dependent process. ES-βLͨΔ9 folds 10 4 times more slowly than ES-βL. From a thorough thermodynamic and kinetic study of ES-βLͨΔ9, it is concluded that the eliminated residues (287-295) participate in folding at different levels: (a) encoding secondary structure; (b) encoding tertiary structure indirectly, avoiding kinetic traps and erroneous association of folding units; (c) participating in the folding transition state; (d) stabilizing the native state. Finally, in this thesis work it is discussed available experimental information on native proteins lacking parts of their sequences, and the relevance of these results to protein folding.

"Estudio del rol de la AQP2 en la regulación del volumen celular" (2010). Galizia, Luciano. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La capacidad de las células para regular su volumen es esencial para el mantenimiento de la homeostasis celular en condiciones de anisotonia. Nosotros previamente informamos, en una línea celular que deriva de túbulo colector cortical de rata (RCCD_1), que la presencia de la acuaporina 2 (AQP2) en la membrana celular es crítica para la activación rápida de mecanismos de regulación de volumen luego de un shock hipotónico (RVD). El objetivo de este trabajo de tesis fue investigar la vía de señalización que relaciona la AQP2 con esta activación rápida de RVD. Probamos la hipótesis de que AQP2 podría tener un papel en la activación de la entrada de calcio por hipotonía e investigamos su importancia en la regulación del volumen celular. Para ello estudiamos la i y el volumen celular en respuesta a un shock hipotónico en células WT- RCCD1 (no expresan acuaporinas) y en células AQP2-RCCD_1 (transfectadas con AQP2). Encontramos, que luego de la exposición a un gradiente hipotónico, sólo en las células que expresan AQP2 se observa un sustancial aumento i. Este aumento de la i es fuertemente dependiente del calcio extracelular y de depósitos intracelulares. La exposición de las células AQP2-RCCD_11 a HgCl_2 (inhibidor de las acuaporinas), gadolinio y rojo de rutenio (inhibidores del TRPV4) redujeron el aumento i . Además, la exposición de las células a estos inhibidores disminuyó el rápido RVD. Estudios de inmunofluorescencia mostraron que, en condiciones de isotonía el TRPV4 se distribuye principalmente en el compartimento intracelular en ambas líneas celulares. Sin embargo en condiciones de hipotonía el TRPV4 es translocado a la membrana celular sólo en las células que expresan AQP2. En esta tesis proponemos la existencia de una asociación funcional entre la AQP2 y el TRPV4, esencial para la generación de señales de calcio inducidas por swelling y necesarias para la activación rápida de los mecanismos de regulación de volumen celular.

Abstract:
The ability of cells to regulate their volume is essential for maintenance of cellular homeostasis under anisotonic environmental conditions. We previously reported in a rat cortical collecting duct cell line (RCCD_1) that the presence of aquaporin 2 (AQP2) in the cell membrane is critical for the rapid activation of regulatory volume decrease mechanisms (RVD). The aim of our present work was to investigate the signalling pathway that links AQP2 to this rapid RVD activation. We tested the hypothesis that AQP2 could have a role in activation of calcium entry by hypotonicity and its implication in cell volume regulation. We studied i and cell volume changes in response to a hypotonic shock in WT-RCCD1 (not expressing aquaporins) and in AQP2-RCCD_1 (transfected with AQP2) cells. We found that after a hypotonic shock only AQP2-RCCD_1 cells exhibit a substantial increase in i. This i increase is strongly dependent on extracellular Ca^2+ and on intracellular stores. Exposure of AQP2- RCCD1 cells to HgCl_2 (aquaporin inhibitor), gadolinium and ruthenium red (TRPV4 inhibitors) reduced the increase in i. Furthermore, exposure of cells to all of the above described conditions impaired rapid RVD. Immunofluorescence studies show that under isotonic conditions TRPV4 is distributed mainly in intracellular compartment in both cell lines. However under hypotonic conditions TRPV4 is translocated to the cell membrane only in AQP2-RCCD1 cells. In this thesis we suggest the existence of a functional interaction between AQP2 and TRPV4, which is essential for the calcium signal generation induced by swelling and necessary for a rapid activation of the mechanisms of cell volume regulation.

"Estudio del rol de la proteína VMP1 en los procesos de autofagia, muerte y sobrevida celular en la fisiopatología pancreática" (2010). Pardo, Romina Paola. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La autofagia es un proceso de degradación de componentes citoplasmáticos que en algunos casos puede jugar un rol citoprotectivo, mientras que en otros puede llevar a la muerte celular. En trabajos previos hemos descripto a la proteína transmembrana VMP1, la cual se encuentra inducida en la pancreatitis experimental. Con el objetivo de determinar su función, se estudió su participación en el proceso de autofagia. Los resultados obtenidos en esta tesis demostraron que la sobreexpresión de VMP1 induce autofagia en células cultivadas en un medio rico en nutrientes. Además, VMP1 está involucrada en la autofagia inducida por ayuno y rapamicina. Más aún, el silenciamiento de VMP1 inhibe la formación de autofagosomas por el tratamiento con ayuno o rapamicina sugiriendo que VMP1 es necesaria para la autofagia. Aún no ha sido esclarecido el rol de la autofagia en el cáncer de páncreas. Los estudios desarrollados en este trabajo sobre la autofagia y VMP1 en el cáncer de páncreas, indican que el tratamiento con gemcitabina induce autofagia en las líneas celulares de cáncer de páncreas PANC-1 y MIAPaCa-2, y que este proceso promueve la muerte celular por apoptosis. La inhibición de la autofagia con 3-metiladenina redujo significativamente el porcentaje de células apoptóticas en respuesta a la gemcitabina. También se observó que la gemcitabina induce la expresión temprana de VMP1, que el silenciamiento de VMP1 disminuye la apoptosis inducida por este agente quimioterapéutico y que la sobreexpresión de VMP1 aumenta significativamente el porcentaje de células apoptóticas. Estos resultados demuestran que la vía de autofagia mediada por VMP1 participa en la muerte celular por apoptosis inducida por gemcitabina. Con el objetivo de profundizar el estudio de los mecanismos moleculares mediante los cuales VMP1 interviene en la sobrevida o muerte celular, se buscaron interactores de esta proteína utilizando la estrategia de doble híbrido. Se demostró que VMP1 interacciona con S100A10, un miembro de la familia de proteinas S100 que se encontró sobreexpresado en adenocarcinomas pancreáticos. También se observó que la expresión basal del mRNA de S100A10 en las células MIAPaCa-2 es mayor que en las células HeLa. S100A10 se induce bajo estímulos autofágicos, como el tratamiento de ayuno y la gemcitabina, en células HeLa, pero no en las células tumorales MIAPaCa-2, sugiriendo que en estas su expresión se encuentra desregulada. El análisis del rol de la interacción VMP1-S100A10 en las células tumorales mostró que la sobreexpresión de VMP1 induce la expresión del mRNA de S100A10, sugiriendo que S100A10 forma parte de la respuesta celular mediada por VMP1. Cuando la proteína sobreexpresada es S100A10, se modifica la distribución intracelular de VMP1, disminuyendo su patrón punteado característico y aumentando la distribución en una estructura reticulada semejante al retículo endoplásmico. Finalmente se investigó la participación de S100A10 en el proceso de autofagia mediado por VMP1. Se observó que la sobreexpresión de S100A10 disminuye la formación de autofagosomas tanto en respuesta al tratamiento con gemcitabina como ante la inducción directa por la sobreexpresión de VMP1. Se determinó también que S100A10 reduce la apoptosis inducida por gemcitabina, ya que su silenciamiento aumentó la apoptosis causada por este agente quimioterapéutico. Por lo tanto, la expresión de S100A10 disminuye la autofagia y la apoptosis mediadas por VMP1, favoreciendo la resistencia a la muerte de las células de cáncer de páncreas. Los resultados de este trabajo contribuyen a elucidar el rol de la autofagia en el cáncer de páncreas, señalando a la autofagia mediada por VMP1 como un mecanismo molecular que conduce a la muerte por apoptosis de las células neoplásicas de origen pancreático, y a la proteína S100A10 como un mecanismo posible de supervivencia de las células de cáncer de páncreas, que actúa disminuyendo la capacidad de desarrollar autofagia y apoptosis. En base a los resultados obtenidos, proponemos a la vía de autofagia mediada por VMP1 como posible blanco para el estudio de nuevas estrategias terapéuticas para el cáncer de páncreas.

Abstract:
Autophagy is a process of degradation of cytoplasmic components, in some cases can play a cytoprotective role, while in other cases can lead to cell death. In previous works we have described the transmembrane protein VMP1, which is induced in experimental pancreatitis. In order to determine its function, its participation in the process of autophagy was studied. The results obtained in this thesis showed that overexpression of VMP1 triggers autophagy in cells grown in a culture media rich in nutrients. VMP1 is also involved in starvation or rapamycin-induced autophagy. Moreover, the silencing of VMP1 gene inhibits the formation of autophagosomes by starvation or rapamycin treatments, suggesting that VMP1 is necessary for autophagy. The role of autophagy in pancreatic cancer has not been clarified yet. Studies developed in this work on autophagy and VMP1 in pancreatic cancer indicate that treatment with gemcitabine induces autophagy in PANC-1 and MIAPaCa-2 pancreatic cancer cell lines, and this process promotes cell death by apoptosis. Inhibition of autophagy with 3-methyladenine significantly reduced the percentage of apoptotic cells in response to gemcitabine. It was also observed that gemcitabine induces early expression of VMP1. Furthermore, the silencing of VMP1 reduces this chemotherapeutic agent-induced apoptosis and VMP1 overexpression significantly increases the percentage of apoptotic cells. These results demonstrate that the pathway of VMP1-mediated autophagy participates in apoptotic cell death induced by gemcitabine. With the aim of study the molecular mechanisms by which VMP1 participates in cell death or survival, interactors of this protein were searched using the two-hybrid strategy. It was shown that VMP1 interacts with S100A10, a member of the family of proteins S100 found to be overeexpressed in pancreatic adenocarcinoma. It was also noted that the basal expression of the S100A10 mRNA in MIAPaCa-2 cells is higher than in HeLa cells. S100A10 is induced under autophagic stimuli such as starvation or treatment with gemcitabine in HeLa cells, but not in MIAPaCa-2 tumor cells, suggesting that in these cells its expression is unregulated. The analysis of the role of VMP1-S100A10 interaction in tumor cells showed that the overexpression of VMP1 induces S100A10 mRNA expression, suggesting that S100A10 is part of the VMP1-mediated cell response. When S100A10 protein is overexpressed, VMP1 intracellular distribution is modified, lowering its characteristic dotted pattern and increasing distribution in a reticulated structure similar to the endoplasmic reticulum. Finally the involvement of S100A10 in the process of autophagy mediated by VMP1 was investigated. It was found that S100A10 overexpression reduces the formation of autophagosomes induced by gemcitabine treatment or by VMP1 overexpression. It was also determined that S100A10 reduces gemcitabine –induced apoptosis, since its silencing increased apoptosis caused by this chemotherapeutic agent. Therefore, the expression of S100A10 reduces the autophagy and apoptosis mediated by VMP1, increasing death resistance of pancreatic cancer cells. The results of this work contribute to elucidate the role of autophagy in pancreatic cancer, pointing out VMP1- mediated autophagy as a molecular mechanism leading to death by apoptosis of neoplastic pancreatic cells, and protein S100A10 as a possible survival mechanism of pancreatic cancer cells, which acts decreasing the ability to develop autophagy and apoptosis. Based on these results, we postulate the pathway of VMP1-mediated autophagy as a possible target for the study of new therapeutic strategies for pancreatic cancer.

"Estudio del rol de la proteína de cápside del virus TMV-Cg en la modulación de la expresión génica y en la alteración de factores endógenos del hospedante Arabidopsis thaliana" (2015-12-03). Rodríguez, María Cecilia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Las enfermedades producidas por patógenos virales generan cuantiosas pérdidas en la producción de cultivos de importancia agropecuaria. El impacto de los virus en la alteración de la expresión génica explica, en parte, las reducciones en el rendimiento de estos cultivos. Por este motivo, entender los mecanismos por los cuales los virus modulan la expresión de genes del hospedante es de vital importancia para proponer estrategias antivirales efectivas o perfeccionar las que se están utilizando en la actualidad. En este estudio, se empleó una línea transgénica de Arabidopsis thaliana que expresa la proteína de cápside del virus TMV-Cg (CgCP) con el objetivo de estudiar el efecto de esta proteína en las alteraciones de la expresión génica y su concomitante impacto sobre los mecanismos de defensa. Inicialmente, se analizó el efecto de la CgCP sobre la expresión de genes implicados en vías de defensa, observándose que la CgCP modula negativamente la expresión de genes que participan de la vía de defensa mediada por ácido salicílico (SA, por sus siglás en inglés) y que, además, tienen un rol reportado frente a defensa antiviral. A continuación, se procedió a analizar el impacto global de la CgCp sobre el transcriptoma de A. thaliana por medio de un microarreglo realizado en plantas que expresan la CgCP. Los resultados indicaron que la CPCg altera la expresión de genes que están implicados en una amplia variedad de procesos. El uso de herramientas bio-informáticas permitió determinar que la CgCP regula negativamente la expresión de una red de genes que presentan en sus regiones promotoras motivos de respuesta a los factores de transcripción W-BOX y al factor Non-Expressor of PR 1(NPR1), un factor central en la vía del SA. Paralelamente, se observó que durante la infección con el virus TMV-Cg los genes dependientes de la vía de SA son incrementados a tiempos tempranos de infección, mientras que su expresión disminuye a tiempos tardíos. Por otra parte, se observó que la expresión de la CgCP en plantas de A. thaliana produce un retraso en el crecimiento. En base a estas observaciones, se procedió a estudiar la capacidad de la CgCP de alterar la estabilidad de las proteínas DELLA, las cuales están implicadas en la regulación de vías de desarrollo, como también en la supresión de la vía de defensa mediada por SA. Se observó que la proteína CgCP altera la estabilidad de la proteína RGA, una de las cinco proteínas DELLAs codificadas por el genoma de A. thaliana. Por otra parte, ensayos realizados con el virus TMV-Cg mostraron que el virus altera la estabilidad de otra proteína DELLA, la proteína GAI. Además, plantas mutantes para cuatro de los cinco genes que codifican proteínas DELLAs acumularon menores niveles del virus TMV-Cg que las plantas salvajes. En conclusión, los resultados de esta tesis muestran que la CgCP altera la expresión de un amplio conjunto de genes de A. thaliana. En particular, esta proteína modula negativamente un grupo de genes de defensa, dependientes de la vía de SA, a través de la estabilización de las proteínas DELLA. Estos resultados sugieren que la CgCP alteraría la estabilidad de las proteínas DELLAs como un mecanismo para modular negativamente las respuestas de defensa antivirales.

Abstract:
Phytopathogenic viruses produce significant losses on economically important crops species. Those losses are mostly dependent on the alterations of gene expression during viral infections. Consequently, the study of the virus-induced alterations in the gene expression profile is important for the development of strategies to reduce the losses caused by plant virus. In this study we used transgenic Arabidopsis plants that express the capsid protein of TMV-Cg (CgCP) with the aim of studying alterations in gene expression and defense mechanisms. First, we studied a subset of genes involved in antiviral defense pathways that are regulated by salicylic acid (SA), and found that CgCP negatively modulates the SA mediated defense pathways. Then, we studied the global impact of CgCP expression in the A. thaliana’s transcriptome. The results indicate that the CgCP alters the expression of genes that are involved in a wide range of processes. By means of the use of bioinformatic tools, we found CgCP negatively regulates a gene network dependent on Non-Expressor of PR 1(NPR1), which is a central player in the SA mediated response. In parallel, we observed that the expression of this set of genes is also altered during TMV-Cg virus infection. The expression is up-regulated at early time post infection and downregulated at late time of TMV-Cg infection. Also, we observed that the CgCP expression reduces plant growth of A. thaliana. Based on these data, we proceeded to study the alterations of DELLA proteins by CgCP, which are involved in the regulation of development and defense pathways. We found that the CgCP alters the stability of RGA, which is one of the five DELLA proteins codified by A. thaliana. Furthermore, the stability of DELLAs proteins was altered during the TMV-Cg infection. Moreover, it was observed that DELLA proteins negatively modulated the defense transcript profiles during TMV-Cg infection. As a result, TMV-Cg accumulation was significantly lower in the quadruple-DELLA mutant Arabidopsis plants than in wild type plants. Taken together, in this study we demonstrated that CgCP alters the expression of genes involved in a wide range of processes, particularly, negatively regulates the salicylic acid-mediated defense pathway by stabilizing the DELLA proteins. These results suggest that CgCP alters the stability of DELLAs as a mechanism of negative modulation of antiviral defense responses.

"Estudio del rol de la proteína en el desarrollo y progresión del melanoma humano" (1999). Ledda, María Fernanda. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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SPARC (Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteine) es una proteína extracelular asociada a tejidos que presentan altas tasas de proliferación celular y remodelación de la matriz. En este trabajo se muestra que las lineas celulares de melanoma humano IIB-MEL-LES, IIB-MEL-IAN e IIB-MEL-J así como varios melanomas humanos metastásicos expresan altos niveles de la proteína y del ARNm de SPARC. Mediante análisis por Western Blot, detectamos una única banda de 42 kDa secretada in vitro por fibroblastos diploides humanos y un doblete de 40 a 45 kDa secretado por las tres líneas celulares de melanoma y en todos los melanomas metastásicos testeados. Algunas de las muestras de melanomas y de las líneas celulares mostraron un doblete adicional de 34-36 kDa. El ARNm de SPARC fue detectado por ensayos de northern blot en las tres líneas de melanoma estudiadas, en las l4 muestras de melanomas metastásicos y en los tumores inducidos en ratones atímicos. El patrón heterogéneo de SPARC secretado por las células de melanoma humano es resultado de la glicosilación post-traduccional y de un clivaje extracelular específico. A diferencia de lo que sucede con los fibroblastos humanos, las células de melanoma no sobreexpresaron SPARC luego del agregado de TGF-β. El análisis inmunohistoquímico demostró que SPARC se expresó fuertemente en el 100% de los melanomas primarios (7/7) y metastásicos (29/29), con moderación en la mayoría de los nevos displásicos positivos (13/14) y débilmente en los nevos benignos (4/25). No se detectó expresión de SPARC en melanocitos normales. Los datos sugieren que la expresión de de esta proteína está asociada a la progresión neoplásica del melanoma humano. En el presente trabajo también se describe la supresión parcial de la expresion de SPARC en 2 líneas de melanoma humano utilizando un vector de expresión con la secuencia antisentido para SPARC. La reducción de los niveles de expresión de esta proteína dio como resultado una reducción en la capacidad adhesiva e invasiva in vitro de las células tumorales sobre membranas basales reconstituídas, eliminando completamente su capacidad tumorigénica in vivo. Esta es la primera evidencia de que SPARC desempeña un papel clave la progresión del melanoma humano.

Abstract:
SPARC (Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteine) is an extracellular protein associated with tissues exhibiting high rates of cell proliferation and matrix remodelling. The present work shows that the human melanoma cell lines IIB-MEL-LES, IIB-MEL-IAN and IIB-MEL-J and different human metastatic melanomas expressed high levels of SPARC mRNA and protein. By western blot analysis we detected a unique secreted 42 kDa band in human diploid fibroblast-conditioned medium and a 40 to 45 kDa doublet in the three melanoma cell lines and all the metastatic melanomas tested. Part of the melanoma samples and cell lines showed an additional doublet of 34-36 kDa. SPARC mRNA was expressed by the three established cell lines, 14 metastatic melanoma samples, and tumors raised in nude mice, and no spliced variants were found. The heterogeneous pattern of SPARC secreted by human melanoma cells is the result of post-translational glycosilation and specific extracellular cleavage. Unlike human fibroblasts, melanoma cells did not over express SPARC upon addition of TGF-β. Immunohistochemical analysis showed that SPARC was strongly expressed in 100 % of primary melanomas (7 of 7) and metastatic melanomas (29 of 29), moderately expressed in most of the positive dysplastic nevi (13 of 14), and only weakly expressed in nevocellular nevi (4 of 25). Normal melanocytes did not express SPARC. The data suggest that the expression of SPARC is associated with the neoplastic progression of human melanoma. The present study also reports that the suppression of SPARC expression by 2 human melanoma cell lines using a SPARC antisense expression vector, results in significant decrease in the in vitro adhesive and invasive capacity of tumor cells, completely abolishing their in vivo tumorigenicity. This is the first evidence that SPARC plays a key role in human melanoma development and progression.

"Estudio del rol de la vía de PD-1 sobre la respuesta inmune de células Nk y de los mecanismos inmunológicos inducidos por las células Th9 frente a la infección por M. tuberculosis" (2012). Alvarez, Ivana Belén. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Estudio del rol de la vía de PD-1 sobre la respuesta inmune de células NK y de los mecanismos inmunológicos inducidos por las células Th9 frente a la infección por M. tuberculosis La tuberculosis continúa siendo un grave problema de salud a nivel mundial a pesar de los tratamientos disponibles. Se estima que un tercio de la población mundial se encuentra infectada de manera asintomática con Mycobacterium tuberculosis, constituyendo un enorme reservorio de la bacteria. Ante eventos de inmuno-supresión, esos individuos pueden desarrollar enfermedad activa y transmitirla. La respuesta inmune frente a M. tuberculosis, requiere la inducción de un perfil de citoquinas de tipo Th1, donde el IFN-γ posee un rol fundamental. Sin embargo, actualmente se sabe que el IFN-γ no sería suficiente para controlar y erradicar completamente al patógeno del organismo hospedero. Por ello, resulta de crucial importancia para el desarrollo de nuevos tratamientos, vacunas y métodos de diagnóstico, conocer las bases moleculares y celulares que conllevan a la generación del correcto balance de poblaciones celulares efectoras durante la respuesta inmune contra el microorganismo. Así como dilucidar la interacción de proteínas específicas de la bacteria con las células del hospedero y, más aún, los mecanismos moleculares que involucran estas interacciones. Por lo mencionado, en este trabajo se investigó el rol de ciertas citoquinas, moléculas coestimulatorias e inmunomoduladores sobre las funciones efectoras de células NK y de linfocitos T durante la tuberculosis activa. Resultados previos de nuestro laboratorio demostraron que la molécula coestimulatoria PD-1 inhibe la respuesta de citoquinas Th1 frente a M. tuberculosis. Sin embargo, el rol de este receptor en la respuesta inmune innata durante la tuberculosis se desconocía. Por ello, en este trabajo se evaluó la expresión y función de los miembros de la vía de PD-1 en las células NK de pacientes con tuberculosis activa. Los resultados obtenidos en este trabajo demostraron por primera vez que las células NK humanas expresan constitutivamente los tres miembros de esta vía de señalización: el receptor PD-1 y sus dos ligandos, PD-L1 y PD-L2. Más aún, demostramos que la estimulación con antígeno de M. tuberculosis incrementa la expresión de estas tres moléculas en células NK y que la señalización a través de las mismas inhibe la producción de IFN-γ y la citotoxicidad de estas células. A su vez, los datos obtenidos en este trabajo demostraron que M. tuberculosis induce la expansión de células T productoras de IL-9 con fenotipo característico de la subpoblación linfocitaria Th9. De acuerdo a nuestros resultados, la IL-9 producida colaboraría en la generación de un perfil Th1 durante la enfermedad activa, promoviendo así la producción de IFN-γ frente a M. tuberculosis. Finalmente, estudiamos la interacción de la proteína específica de M. tuberculosis, ESAT-6, con células T humanas y el efecto de ESAT-6 sobre la producción de IL-9 durante la tuberculosis humana. Caracterizamos la cinética de esta interacción y además identificamos tres proteínas linfocitarias que interactúan con ESAT-6. En conjunto, los resultados obtenidos en este trabajo demuestran que el uso de anticuerpos bloqueantes y agonistas podría tener importantes implicancias en potenciales terapias para combatir infecciones bacterianas crónicas como la tuberculosis. Por otro lado, demostramos que ESAT-6 se une a linfocitos T humanos, ingresa a las células e interacciona con proteínas involucradas en el procesamiento y en la estabilidad de ARNm específicos. Este podría entonces tratarse de un mecanismo por el cual ESAT-6 modularía las funciones efectoras de linfocitos T, como lo es la producción de citoquinas, como factor de virulencia o mecanismo de evasión de la respuesta inmune por parte del patógeno.

Abstract:
Study of the role of the PD-1 pathway on the NK cell immune response and of the immunological mechanisms induced by Th9 cells against M. tuberculosis infection. Tuberculosis remains to be a serious health problem worldwide despite available treatments. One third of the world population is estimated to be infected with Mycobacterium tuberculosis in a latent but asymptomatic way; constituting a huge reservoir for the bacteria. In the event of immuno-suppression, those individuals can develop active disease and transmit it. The immune response against M. tuberculosis requires the induction of a Th1 cytokine profile, where IFN-γ plays a fundamental role. However, it is now known that IFN-γ is not sufficient to control and to completely eradicate the pathogen the host. Because of this it is of crucial importance for the development of new treatments, vaccines and diagnostic methods, knowing the molecular and cellular basis that leads to the generation of a correct balance among effector cell populations during the immune response against the microorganism, as well as elucidating the interaction of specific proteins from the bacteria with the host cells and even more, the mechanisms that this interactions involve. Based in the mentioned before, in this work we investigated the role of cytokines, costimulatory molecules and immunemodulators on the efector functions of NK cells and T lymphocytes during the human tuberculosis. Previous results from our laboratory showed that the co-stimulatory molecule PD-1 inhibits the Th1 response against M. tuberculosis. But the role of this receptor in the innate immune response against tuberculosis was so far unknown. Therefore, this study evaluated the expression and function of members of the PD-1 pathway on NK cells against M. tuberculosis. We show here for the first time, that human NK cells constitutively PD-1 receptor and its two ligands, PD-L1 and PD-L2. Moreover, we demonstrated that M.tuberculosis induces an increase in the expression of these molecules by NK cells and that signaling through this receptor inhibits the two main effector functions of NK cells, production of IFN-γ and cytotoxicity. In addition, the expression of PD-1 correlates directly with the production of IFN-γ. In this work, we also reported that M. tuberculosis significantly induces IL-9-producing cells which have all the characteristics of the Th9 cell subset. According to our results, IL-9 would collaborate in the generation of a Th1 profile during active disease, promoting the production of IFN-γ against M. tuberculosis. Finally, we studied the interaction of the M. tuberculosis specific protein, ESAT-6, with human T cells and ESAT-6 modulation of IL-9 production during human tuberculosis. We characterized the kinetics of the interaction and we were able of identify three lymphocytic proteins that interact with ESAT-6. Overall, the results of this study demonstrate that the use of blocking antibodies and agonists may have important implications for potential therapies for chronic bacterial infections such as tuberculosis. We also demonstrated that ESAT-6 binds to human T cells, enters the cells and interacts with proteins that are involved in the processing and stabilization of specific mRNA. This could comprise a mechanism by which ESAT-6 could modulate T cell effector functions, as cytokine production, acting as a virulence factor or as an immune evasion mechanism of the bacteria.

"Estudio del rol del transporte axonal en la via nigroestriatal en ratones knockout condicionales del motor molecular kif5b" (2017-04-04). Cromberg, Lucas Eneas. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los ganglios basales son una cadena de núcleos subcorticales que facilitan la coordinación motora. Las neuronas dopaminérgicas de la sustancia nigra pars compacta modulan la actividad de de las neuronas GABAérgicas del estriado que son inervadas por la corteza motora. En el estriado conviven dos tipos de neuronas GABAérgicas. Las de la vía directa, que expresan los receptores dopaminérgicos D1 estimulando los movimientos y las de la vía indirecta, que expresan los receptores dopaminérgicos del tipo D2, cuya función es inhibir los movimientos. Para la iniciación de los movimientos se requiere la activación conjunta de ambas vías. La enfermedad de Parkinson es la segunda enfermedad neurodegenerativa más común. Se caracteriza por la muerte progresiva de las neuronas dopaminérgicas, la cual genera fallas en la coordinación motora, defectos en la postura y problemas para el inicio de los movimientos. La enfermedad de parkinson está caracterizada patológicamente por el agregado intracelular de los cuerpos de Lewy (formados por α-synucleína) y los ovillos neurofibrilares (formados por la proteína tau en estado hiperfosforilado). Estas marcas de patología sugieren que defectos en el sistema de transporte axonal podrían estar involucrados en la enfermedad. Las neuronas dopaminérgicas son células con una alta polarización que les permite conectar con neuronas localizadas a grandes distancias. Esta polarización las hace depender de un complejo sistema de transporte compuesto por microtúbulos, motores moleculares y cargas. Kinesina-1 es un motor molecular anterógrado que lleva las cargas hacia el cono axonal. Es un heterotetrámero de dos subunidades pesadas (KHC) que interactúan con los microtúbulos y dos subunidades livianas (KLC) que interactúan con las cargas directamente o a través de proteínas adaptadoras. Existen tres genes que codifican para KHC, kif5a y kif5c que se expresan en el sistema nervioso y kif5b de expresión ubicua. Trabajos previos demostraron que ratones con defectos en la expresión del motor molecular KLC1 desarrollan patologías axonales con agregados de proteínas. Por otro lado, la deleción de kif5b resulta letal y los ratones knockout mueren en el día embrionario 11.5 sin embargo su rol específico en el sistema nervioso no está esclarecido. El objetivo de este trabajo es estudiar el rol específico de la subunidad Kif5b del motor molecular Kinesina-1 en la vía nigroestriatal. Se generaron ratones con deleción de la expresión del motor molecular kif5b de forma condicional en neuronas del sistema nervioso central, usando el sistema cre-loxp dirigido mediante el promotor de nestina (5b fl/fl nes cre/+) para cumplir este objetivo. Experimentos de análisis del movimiento en el campo abierto y en el rotarod determinaron que los ratones 5b fl/fl nes cre/+ presentan fallas en su actividad exploratoria y defectos en la coordinación motora. Por su parte, los niveles de dopamina no se habían visto afectados, sin embargo hubo una disminución en los niveles de degradación de dopamina, evidenciándose en una menor concentración del producto de degradación dopac. Estos resultados sugirieron un rol importante del motor kif5b en la vía nigroestriatal y en el metabolismo de dopamina. Para testear si los defectos en el metabolismo de dopamina eran la causa de los defectos en la locomoción se realizó una deleción condicional de kif5b específicamente en neuronas dopaminérgicas. Sorprendentemente, la deleción de Kif5b específica no indujo alteraciones en la respuesta locomotora sugiriendo que los defectos presinápticos no son suficientes para evidenciar defectos de coordinación o hipolocomoción. Para comprender si fallas en la locomoción se debían a problemas en la liberación de dopamina, esta se estimuló mediante la inyección de los ratones 5b fl/fl nes cre/+ con anfetamina. La estimulación con anfetamina, indujo un incremento en la distancia recorrida en ambos genotipos, permitiendo a los ratones 5b fl/fl nes cre/+ alcanzarla distancia obtenida por los ratones control estimulados. Para determinar si la actividad de las vías directa e indirectas del estriado se encontraban afectadas por la deleción de kif5b se analizó la motricidad de los ratones en el campo abierto, utilizando agonistas y antagonistas de los receptores D1 y D2. El antagonista de los receptores D1 (SCH 23390) y el agonista de los receptores D2 (quinpirole) disminuyeron la distancia recorrida en los ratones 5b fl/fl nes cre/+ y control. Sin embargo, bajo la estimulación con anfetamina, los ratones 5b fl/fl nes cre/+ resultaron insensibles al tratamiento con quinpirole o con un antagonista de los receptores D2 (risperidona), mientras que si se observó una respuesta en los animales control. Los resultados obtenidos en este trabajo sugieren que la expresión de kif5b es necesaria para el correcto recambio de dopamina y para la presentación de los receptores D2 en la membrana plasmática de las neuronas estriatales permitiendo el correcto desarrollo de la capacidad motora. A partir de los resultados obtenidos en este trabajo, sugerimos que kif5b tiene un rol específico en el metabolismo de dopamina a la vez que su expresión es necesaria para la actividad de los receptores dopaminérgicos del tipo D2. Kif5b es imprescindible para el correcto funcionamiento de la vía nigroestriatal y la locomoción.

Abstract:
The basal ganglia are a group of subcortical nuclei responsible of the motor coordination. Dopaminergic neurons from the sustancia nigra pars compacta modulate the activity of the GABAergic neurons from the striatum which are innervated by cortical neurons. In the striatum coexist two types of GABAergic neurons. Neurons from the direct pathway express dopamine receptors D1 like and stimulate movement, while GABAergic neurons from the indirect pathway express dopamine receptors D2 like and inhibit movement. Activation of both pathways is required for movement initiation. Parkinson’s disease is the second most common neurodegenerative disorder. It is characterized by the dopaminergic cell neurodegeneration which induce motor coordination failures, postural instability, and impairments in the initiation of movements. Parkinson’s disease pathological hallmarks include intracellular accumulation of Lewy Bodies (composed of α-synuclein) and neurofibrillary tangles (composed of hyperphosphorilated tau). These hallmarks suggest that impairments in the axonal transport system could be related to the disease. Dopaminergic neurons are highly polarized cells. Such polarization allows them to connect with other cells localized far away from the soma. However this morphology depends on a complex transport system composed by microtubule tracks, molecular motors and cargoes. Kinesin-1 is a molecular motor which carries cargoes toward the axonal growth cone. Kinesin-1 is an heterotretamere composed by two heavy subunits (KHC) which interact with the microtubules and two light subunits (KLC) which interact with the cargoes directly or through adaptor proteins. There are three genes coding for KHC, kif5a and kif5c expressed in the nervous system and the ubiquitously expressed kif5b. Previous publications have demonstrated that deletion of the KLC1 molecular motor in mice help the development of axonal pathologies with protein accumulation. Kif5b deletion is lethal and knockout mice die in the embrionary day 11.5. However the specific role of kif5b in the nervous system remains unknown. The objective of this work is to study the role of the kif5b subunit of the molecular motor Kinesin-1 in the central nervous system. Conditional transgenic mice with deficits in kif5b expression in neurons were generated with the cre-loxp system directed under the nestin promoter (5b fl/fl nes cre/+) to fulfill this objective. Movement analysis in the open field and rotarod assays determined that 5b fl/fl nes cre/+ have defects in the spontaneous exploratory activity and in motor coordination. Dopamine levels did not change, however a decrease in the concentration of the dopamine degradation product, dopac was observed, indicating a lower degradation rate of the internalized dopamine. These results suggested an important role of the molecular motor kif5b in the nigrostriatal pathway activity and dopamine metabolism. To analyze if dopamine metabolism impairments were the cause of the locomotion defects, we deleted kif5b from presynaptic dopaminergic neurons. Surprisingly, the specific deletion of kif5b did not induced alterations in the motor response suggesting that presynaptic defects are not sufficient to evidenciate coordination impairment or hipolocomotion. In order to understand if dopamine releasing was impaired, mice were injected with amphetamine to stimulate it. Amphetamine stimulation increased run length by both mice and remarkably 5b fl/fl nes cre/+ mice achieved the same distance run by stimulated control. To determine if the activity of the direct and indirect pathway were impaired, 5b fl/fl nes cre/+ mice were the antagonist of the dopamine receptor D1 (SCH 23390) and the agonist of the dopamine receptor D2 (quinpirole) decreased run length in both genotypes. However under amphetamine stimulation 5 fl/fl nes cre/+ mice were not sensitive to quinpirole or to the D2 antagonist (risperidone) treatment, while control mice responded to both drugs. All together the results obtained in this work, we suggest that kif5b has a specific role in the dopamine metabolism and its expression is necessary for the D2 receptors activity. Kif5b is fundamental for the proper function of the nigrostriatal pathway and locomotion.

"Estudio del sistema de polisacáridos del alga roja calcárea Corallina Officinalis" (1995). Cases, Marcelo Roberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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En este trabajo de Tesis se determinó la estructura del sistema de polisacáridos del alga roja calcárea Corallina officinalis. Se desarrollaron además dos técnicas de análisis de azúcares: el método de etilación para el estudio de azúcares naturalmente metilados, y la determinación de azúcares enantioméricos derivatizados como sus 1-amino- 1-desoxialditoles diastereoméricos, mediante una reacción de aminación reductiva con (S)-1-amino-2-propanol y (S)-α-metilbencilamina como aminas quirales. En la Primera Sección de esta Tesis se resumen los estudios realizados hasta el momento sobre polisacáridos de algas rojas, describiéndose las características estructurales de las familias del ágar, de los carragenanos, y de distintos polisacáridos cuyas estructuras se desvían respecto de dichas familias. La Segunda Sección contiene los resultados obtenidos y la discusión de los mismos. Puede dividirse en nueve partes: 1) Se efectuó la extracción, aislamiento y purificación de los polisacáridos provenientes de algas recolectadas en las Provincias de Chubut y Buenos Aires. Previamente fue necesario destruir la cubierta de carbonato de calcio por tratamiento cuidadoso con ácido clorhídrico diluido cuidando que el pH no disminuya de 6. Los productos obtenidos se caracterizaron cuantificando el contenido de hidratos de carbono, sulfato, proteínas, etc., determinando los pesos moleculares promedio y los poderes rotatorios, e identificando y cuantificando los azúcares componentes. Para ello fue necesario considerar ciertos aspectos de la metodología empleada para adecuarla a las características particulares de estos productos. Los análisis indicaron que los polisacáridos pertenecen a la familia del ágar debido a la presencia de galactosas de las series Dy L en proporciones aproximadamente equivalentes. Como caracteristicas distintivas mostraron una alta cantidad de xilosa (la mayor encontrada en los polisacárídos de algas rojas), y una elevada proporción de galactosas mono-O-metiladas en las cuatro posiciones posibles. El grado de sulfatación de estos productos es moderado en comparación con otros galactanos de algas rojas y los pesos moleculares son relativamente bajos. 2)Los polisacárídos se fraccionaron por cromatografia de intercambio iónico sobre DEAE-Sephadex A-SO eluyendo con soluciones de cloruro de sodio de concentración creciente, y se obuvieron once fracciones que fueron caracterizadas del mismo modo que los productos nativos. Se observó que el orden de elución está determinado por la cantidad de sulfato, como cabía esperar. El análisis de los poderes rotatorios confirmó que existe alrededor del 50% de galactosas de las series D y L, y que esta familia de polisacárídos estaría formada por el esqueleto típico de los galactanos de algas rojas: galactosas unidas α-(l→3) y β-(l→4), perteneciendo las unidades a a la serie L. 3) Las fracciones obtenidas fueron estudiadas por metilación, utilizándose una modificación del método de Hakomori que permite la solubilización de los polisacárídos sulfatados en dimetilsulfóxido. Los resultados confirmaron que los coralinanos están constituidos por la estructura básica de galactosas unidas por C-3 y C-4. En las fracciones principales, la unidad A (D-Gal unida por C-3) está casi en su totalidad sustituida en C-6, mientras que los oxhídrilos de las posiciones 2 y 4 están libres. La unidad B (L-Gal unida por C-4) se encuentra sin sustituir en un porcentaje levemente mayor al 50%, y está sustituida en igual proporción en los C-2 y C-3. Los sustituyentes en las tres posiciones mencionadas son: sulfato, xilosa y 4-O-metilgalactosa. 4) Se efectuó un estudio por etilación de los polisacáridos para determinar la ubicación de los grupos metoxilo sustituyentes. Se determinó que la 2-O-metil- y 3-O- metilgalactosa están presentes en su mayor parte en la unidad B, por lo que en compuestos de la familia del agar deben pertenecer a la serie L, mientras que la 6-O- metilgalactosa sólo se encuentra en la unidad A debiendo tener entonces configuración D. Por su parte, la 4-O-metilgalactosa aparece sólo como cadena lateral. Es de notar que las galactosas monometiladas se encuentran no sustituidas. Este hecho muestra un importante grado de regularidad en la estructura aparentemente diversa de estos polisacáridos. 5)Los polisacáridos fueron desulfatados y los productos obtenidos estudiados por metilación. Dados los problemas que se presentan en las desulfataciones ácidas (degradaciones), se probaron distintos métodos de desulfatación solvolítica pero el grado de desulfatación obtenido no permite determinar en fonna precisa las proporciones dc sulfato en cada posición. Por lo tanto, se decidió llevar a cabo la reacción con HCI / metanol y, si bien se produjo cierta degradación de los polímeros, los resultados permitieron establecer claramente que el sulfato está ubicado en el C-6 de las unidades A y en las posiciones 2 y 3 de las unidades B. Luego de la desulfatación, la presencia de sulfato en estas dos últimas posiciones disminuye hasta casi desaparecer, mientras que el C-6 de la unidad A permanece sustituido en una proporción importante indicando que la xilosa se encuentra unida mayoritariamente en esa posición. Sin embargo, los datos para las fracciones menores no permiten afirmar la ausencia de xilosa en el C-3 de la unidad B (ligada por C-4), ya que la metilación de los productos desulfatados muestra la existencia de cierta cantidad de galactosas disustituidas en las posiciones 3 y 4. 6)Se efectuó el estudio de los polisacáridos por derivatización como sus 1-aminoalditoles diastereométricos, obtenidos por aminación reductiva con (S)-1-amino-2-propanol para asignar la configuración de los monosacáridos componentes. La 2-O-metil- y 3-O-metilgalactosa pertenecen en su mayor parte a la serie L lo que coincide con lo predicho por etilación, mientras que la 6-O-metilgalactosa pertenece en su totalidad a la serie D. En los polisacáridos de algas rojas, la 4-O-metilgalactosa siempre fue encontrada como cadena lateral y con configuración L. Sin embargo, los resultados de aminación reductíva determinan que dicho azúcar, al menos mayoritariamente, pertenece a la serie D en los polisacáridos de Corallina officinalis. 7)El conjunto de datos obtenidos permitió establecer que los polisacáridos de Corallina officinalis están constituidos por la estructura altemante →3)-β-D-Galp( l→4)-α-L-Galp-(1→. Esta estructura está enmascarada por sustitución en la posición 6 de la unidad A por sulfato y ramificaciones de β-D-xilosa, junto con cantidades menores de metoxilo y cadenas laterales de 4-O-metil-D-galactosa. En la unidad B los sustituyentes son rnetoxilo y sulfato en los C-2 y C-3. Sin embargo, los coralinanos forman una familia de compuestos con caracteristicas variantes que puede dividirse en cuatro grupos: los Grupos Principal, Variante 1A, Variante 1B y Variante 11. La estructura promedio del Grupo Principal se presenta en la Figura, y los sustituyentes se describen en la Tabla de la página siguiente. Es característico de estos compuestos la ausencia de 3,6-anhidrogalactosa y de galactosa 6-sulfato enlazada por C-4, la importante proporción de ramificaciones de xilosa, y la variedad y cantidad de galactosas metiladas. El Grupo Variante 1A es semejante al Principal, pero contiene una menor proporción de xilosa y un aumento de sulfato y metoxilo; esta tendencia se acentúa en el Grupo Variante 1B donde la proporción de xilosa es mínima, es alto el porcentaje de sulfato en la posición 6 de la unidad A, y también aumenta la cantidad de 2-O-metil-L-galactosa. La estructura del Grupo Variante 11 es más compleja. La diferencia principal respecto de los demás compuestos es un aumento de las unidades de galactosa sin sustituir, y por consiguiente una menor proporción de sulfato y xilosa, pero es característica de estos productos la alta proporción de 4-O-metil-D-galactosa presente como cadena lateral. 8)Se estudió la separación e identificación de los O-acetil-O-etil-galactononitrilos y galactitoles, así como de ciertos derivados mono-O-metilados etilados, para su utilización en el análisis de polisacáridos metilados naturalmente. Se informaron los tiempos de retención y los picos principales en los espectros de masa para los distintos azúcares. Por analogía con el comportamiento de los derivados metilados, se propusieron los caminos de fragmentación de los aldononitrilos parcialmente etilados y se ilustró el empleo de dichos mecanismos para determinar la posición de los grupos metoxilo. 9)Se desarrolló un nuevo método para asignar la configuración de azúcares enantioméricos, por reacción con (S)-1—amino-2-propanol para obtener los correspondientes 1-amino-1-desoxialditoles diastereoméricos. Se presentaron los tiempos de retención de los derivados de distintos monosacáridos pertenecientes a las series D y L. La técnica es muy sencilla y permite asignar en forma precisa la configuración de diversos azúcares obteniéndose un sólo pico cromatográfico para cada uno, y simplificándose en gran medida los cromatogramas en comparación con otras técnicas de derivatización, lo cual es especialmente valioso en heteropolisacáridos. Esta técnica puede emplearse simultáneamente para el análisis de azúcares componentes, a modo de complemento de los métodos de derivatización como alditoles o aldononirrilos acetilados. En la Tercera Sección se presenta una descripción de los materiales y métodos experimentales utilizados.

"Estudio del sistema ocelar de la Vinchuca Triatoma infestans (Klug, 1834) (Heteroptera: Reduviidae)" (1997). Insausti, Teresita Concepción. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Mediante técnicas de microscopía óptica, electrónica de transmisión y electrónica de barrido y de inyección intraneural de colorantes, se estudió la morfología, ultraestructura, desarrollo postembrionario y conexiones nerviosas de los ocelos de T. infestans, así como su adaptación a la luz-oscuridad. pudo constatarse que estos órganos exhiben un nivel de complejidad no descripto para otros insectos. El rabdoma retinular involucra todas las caras laterales de las células fotorreceptoras. Se observaron gránulas de pigmento en el interior de las células fotosensibles, en células de la glía y en células pigmentarias. Los primeros se desplazan alrededor del rabdoma durante la adaptación a la luz y se retiran a la porción proximal de la célula en el acelo adaptado a la oscuridad. Se describen diversas estructuras membranosas subcelulares y organelas citoplasmáticas. El plexo acelar exhibe todas las formas de uniones sinápticas (i.e. axo-dendríticas, axo-axónicas, dendro-axónicas y dendro-dendríticas). El estudio de las vías acelares reveló conexiones directas, vía interneuronas de primer orden con centros nerviosos localizados en el cerebro, y diversos neurómeros de la cadena ganglionar ventral. También se describen las proyecciones centrales y se discute la función de sensilias mecanorreceptoras localizadas en la región acelar.

Abstract:
By means of techniques of light microscopy, transmission and scanning electron microscopy and neuronal filling, the morphology, ultrastructure, postembryonic development, central connections, and light-dark adaption, were analysed in the acelli of T. infestans. It could be established that these organs exhibit an unusual degree of complexity, as compared with other insects. The rhabdom has the structure of a meshwork that involves all the lateral walls of the photoreceptive cells. Pigment granules could be observed inside photosensitive cells, inside glial cells and inside pigmentary cells. The formers move around the rhabdom during light adaption and migrate down, towards the proximal region of the cell in the dark-adapted acellus. Several subcellular membranous bodies are described. The acellar plexus exhibits a high diversity of synaptic unions (i.e., axo-dentric, axo-axonic, dendro-axonic, and dendro-dendritic). The analysis of the acellar pathways, revealed direct connections by first-order interneurons with nervous centres located in the brain and several neuromeres along the ventral nerve cord. Central pathways of mechanorreceptors associated to the acellar region are described whose functionality is also discussed.

"Estudio e identificación de enzimas extracelulares en Ascobolus gamundii" (1999). Sivori, Andrea Silvia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudió la capacidad de Ascobolus gamundii (Pezizales, Ascomicetes) para producir enzimas degradativas extracelulares in "vitro". Luego de analizar el patrón enzimático producido en medios sintéticos líquidos, se concluyó que A. gamundii es un hongo coprófilo productor de enzimas celulolíticas, xilanolíticas y amilolíticas. Los tres complejos enzimáticos estudiados son inducibles por sustrato, y parcialmente inhibidos en presencia de glucosa en el medio de cultivo. Todos presentaron también una inducción específica, así como una inducción generalizada de menor intensidad con otros sustratos complejos no específicos. Los tres sistemas presentan además múltiples formas enzimáticas, isoenzimas. característica de este tipo de enzimas. Todas las enzimas son extracelulares, liberadas al medio después de sintetizarse durante el crecimiento activo y no se quedan adsorbidas a las paredes micelianas. Se determinaron además características bioquímicas de todas las enzimas estudiadas, así como el requerimiento de cationes en el medio de cultivo. El sistema celulolítico está compuesto por las tres enzimas componentes características de este complejo enzimático: actividad endoglucanasa, exoglucanasa y β-glucosidasa. Estos resultados confirman que este hongo es un verdadero agente celulolítico, adaptado al medio en el que vive naturalmente. El sistema celulolítico se induce preferencialmente en presencia de celulosa cristalina como sustrato. Se logró aún mejor inducción al utilizar un medio mixto de celulosa cristalina y xilano, que estaría reflejando en mejor medida las condiciones naturales en que crece A. gamundii. Con lactosa, se indujo el sistema celulolítico pero ésta fuente de carbono no logró promover el crecimiento del hongo. Lacelobiosa no resultó un buen inductor del sistema celulolítico. El sistema xilanolítico está representado mayoritariamente por la actividad endoxilanasa, ya que la actividad β-xilosidasa resultó muy baja, casi nula. Este sistema se indujo preferencialmente con xilano; pero al igual que en el caso del sistema celulolítico, el medio mixto resultó superior. La lactosa tuvo un comportamiento similar al obtenido con el sistema celulolítico. El sistema amilolítico está representado por la actividad α-amilasa y la actividad glucoamilasa. La inducción con almidón obviamente resultó la más favorable para este complejo enzimático, así como el uso de maltosa.

Abstract:
The ability of Ascobolus gamundii (Pezizales, Ascomycetes) to produce extracellular degrading enzymes "in vitro" was studied. After analysing the enzymes produced in artificial liquid media. A. gamundii appears to be a true cellulolytic fungus also showing xylanolytic and amylolytic activity. The three enzyme systems studied are truly extracellular. The enzymes in all cases are synthesised during active growth and diffuse out of the mycelium into the liquid media away from the hyphai walls. These enzyme systems can be induced not only by specific substrates, but also in a lower degree by other complex polymers as well. The three are partially inhibited in the presence of glucose (in no case total inhibition is achieved). For each enzymatic activity A. gamundii produces several isozymes, characteristic of these types of enzymes. Biochemical characterisation,of each enzyme as well as the need of several cations in the growth media was also determined. The cellulolytic system of A. gamundii produces its three characteristic enzymes: endoglucanases, exoglucanases and β-glucosidases, confirming its role as a decomposer and its adaptation to its natural habitat: dung. This enzyme system is induced specifically by crystalline cellulose. An even better induction was achieved when using a combined medium of crystalline cellulose and xylan which mirrors better this fungus' natural environment. When lactose was used as an inducer. high specific activity was obtained because growth was not promoted. Cellobiose proved to be a poor inducer for this enzyme system. The xylanolytic system is nearly entirely represented by the endoxylanase activity. β-xylosidase activity was found to be very low in all fractions studied, rendering a limitation for its survival in nature. Good induction was obtained with xylan, but as it happened with the cellulolytic system, the combined medium of crystalline cellulose and xylan proved better induction. With lactose, the results obtained were similar to those for the cellulolytic system. The amylolytic system is represented by the α-amylase and the glucoamylase activity. Induction with starch was the best for this enzyme system, as well as the use of maltose for this purpose.

"Estudio ecológico (distribución, relaciones tróficas y desarrollo gonadal) de Appendicularia (chordata, tunicata) en aguas costeras de Uruguay y Argentina hasta los 47º S." (1995). Capitanio, Fabiana Lía. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las apendicularias son organismos pelágicos pertenecientes por su tamaño al meso y macrozooplancton marino. Son particularmente interesantes debido a la capacidad de secretar un elaborado aparato de filtración, llamado comunmente "casa" mediante el cual el animal colecta y concentra desde carbono orgánico disuelto hasta microplancton. Las casas son renovadas periódicamente dependiendo la frecuencia de recambio de la temperatura y concentración de alimento. Tanto las ocupadas como las descartadas por el animal representan un recurso de alto valor energético en áreas epipelágicas ya que son agregados de carbono y nutrientes que sirven de sustrato y fuente de alimento concentrado a muchos organismos. En el presente trabajo se discuten diversos aspectos ecológicos que abarcan la distribución en aguas costeras de plataforma desde el Río de La Plata hasta el Golfo San Jorge, con especial énfasis en áreas delimitadas tales como el frente de Península Valdés y el estuario del Río de La Plata. Se realiza una caracterización morfométrica de los estadios de madurez de las dos especies más abundantes y se efectúa una evaluación preliminar de la importancia de estos organismos en la alimentación de la anchoita. Se encontraron 3 especies: Fritillaria borealis (fam. Fritillaridae), Oikopleura dioica y O. fitsiformis (fam. Oikopleuridae), lo cual concuerda con investigaciones previas realizadas en esta área. O. dioica, única representante de la clase Appendicularia con sexos separados, es característica de ambientes neríticos y estuariales. La mayor densidad de ejemplares se encontró en las estaciones más costeras, especialmente en las ubicadas al sur de Bahía Samborombón, con aguas salobres, y en aguas externas a Península Valdés donde se la halló estrechamente asociada a un sistema frontal costero. En este último caso se analizó la distribución de la especie y de sus estadios de madurez, en función de la profundidad, temperatura y concentración de clorofila a en las tres áreas que conforman dicho sistema. En el área de transición, también llamada "frente" se encontró el mayor número de individuos y la densidad fue algo menor en las áreas de mezcla y estratificada. Se observó una distribución diferencial respecto a la profundidad ya que en las áreas de transición y mezcla del frente la densidad fue máxima superficialmente, lo que coincidió con los picos más elevados de clorofila a; mientras que en el área estratificada fue superior en los niveles más profundos, donde se ubicó la termoclina. El desplazamiento de las apendicularias se lleva a cabo por los movimientos de retroprOpulsión provocados por la salida de agua movilizada por el batido de la cola dentro de la casa. Dado que existe una correlación directa entre las dimensiones de la casa y el tamaño del animal, los individuos pertenecientes a los estadios inmaduros e intermedios presentan un diámetro de casa menor respecto a la de los maduros. Por consiguiente estarán más limitados en cuanto a su desplazamiento, estando su presencia más asociada a los patrones fisicos de las corrientes y/o al estrato donde ocurre la liberación de las gametas de los individuos maduros, capaces de realizar migraciones a microescala. Así en la zona de mezcla y transición los individuos maduros se ubicaron más superficialmente, en correlación con los valores más altos de clorofila a, mientras que en la zona estratificada se ubicaron a la profundidad de la termoclina. La distribución vertical de los inmaduros e intermedios en la zona de mezcla, con suficiente turbulencia, fue homogénea en todos los niveles de profundidad, no mostrando ningún patrón diferencial de distribución; en el área estratificada estuvo directamente asociada a la presencia de los individuos maduros. F. borealis, especie cosmopolita, apareció poco representada en la mayoría de las estaciones. Esto probablemente se deba a un efecto selectivo de las redes de plancton utilizadas ya que esta especie es más pequeña aún que O. dioica que es una de las especies más pequeñas del género Oikopleura. O. fusiformis mostró una marcada preferencia por aguas externas de plataforma, encontrándose en gran abundancia en el área uruguaya donde fue dominante. En las estaciones costeras apareció, pero en densidades más bajas. En la región externa del Río de La Plata no se encontraron apendicularias. Dado que las especies estudiadas son consideradas eurihalinas y euritérmicas, especialmente O. dioica, es poco probable que su ausencia se deba a la baja salinidad. Los límites de distribución podrían estar dados por la alta concentración de sedimentos en suspensión respecto a las aguas marinas, forzando así a los animales a cambiar repetidas veces de casa debido al taponamienmto de sus filtros. El gasto energético que esto implica tomaría esta área menos favorable para las poblaciones de apendicularias. Se realizó, además, la caracterización morfométrica de los estadios de madurez de O. dioica y O. fusiformis discrirninando cuales son las variables que intervienen en su diferenciación. La altura de la cavidad genital y la longitud del estómago son las mediciones más importantes para diferenciar los estadios de O. fusiformis y, en menor grado, la longitud del tronco y el ancho de la notocorda. En cuanto a O. dioica las variables principales fueron la altura de la cavidad genital y la altura del tronco en la parte media y, con menor importancia, la longitud y el ancho de la musculatura de la cola y la longitud del tronco. En esta especie, el crecimiento de la gónada se realiza en todas las direcciones y afecta a la altura del tronco en la parte media, mientras que en O. fusiformis las gónadas crecen lateralmente hasta recubrir el estómago. En consecuencia, si bien los individuos crecen en altura, es más importante el crecimiento lateral. Por este motivo la altura del tronco en la parte media no sería un buen criterio para diferenciar sus estadios de madurez. Se encontró una marcada diferencia de tallas entre ejemplares de O. dioica y O. fusiformis provenientes de la desembocadura del Río de La Plata y adyacencias. La longitud del tronco (talla) de los ejemplares de O. dioica del sur de Bahía Samborombón, lindera a la zona externa del estuario con aguas salobres, fue bastante menor que en los ejemplares provenientes de la costa uruguaya. El mismo resultado se observó en O. fusiformis. Se constató, mediante cortes histológicos de ovario, que los ejemplares presentaban el mismo grado de maduración. Obviamente deben existir muchos factores que regulan la estructura de las tallas de las poblaciones. La temperatura desempeña un papel fundamental ya que su aumento acelera la maduración gonadal, lo que detiene en forma relativa el crecimiento del cuerpo. En consecuencia, a mayores temperaturas se obtienen individuos maduros en menor tiempo y con tallas menores. Las poblaciones del sur de Bahía Samborombón se desarrollaron a temperaturas mayores (entre 3 y 4 °C) lo que habría acelerado la madurez de estos individuos. Con respecto a la importancia de las apendicularias en la alimentación de Engraulis anchoita, se estudió el contenido estomacal de ejemplares adultos provenientes de lances de pesca realizados en la desembocadura del Río de La Plata y sur de la provincia de Buenos Aires, en correlación con muestras de plancton tomadas simultáneamente. La única apendicularia presente, tanto en los estómagos como en el plancton, fue O. dioica. Se encontró en el 45% de los estómagos, tratándose en todos los casos de ejemplares maduros. En las muestras de plancton, en cambio, se halló sólo un 50% de maduros, 20% eran inmaduros (proporción seguramente subestimada debido al tamaño de poro de la red) y el resto con un estado de maduración intermedio. Esto sugiere una selectividad en la predación sobre los ejemplares maduros que son obviamente los de mayor tamaño, siendo el diámetro de sus casas de 6,2mm en promedio, por lo que se encuentran dentro del rango de partículas que la anchoita ingiere por aprenhensión selectiva. Llama la atención que, hasta el momento, las apendicularias no hubieran sido citadas como parte importante de la dieta de este recurso pesquero. Probablemente sea necesario el estudio de material fresco, fijado a bordo como se hizo en este caso, para detectarlas en los contenidos estomacales. Es necesario repetir estos estudios para evaluar el impacto de predación de la anchoita sobre estos organismos y sería interesante extender estas investigaciones a otras especies de nuestra fauna íctica.

"Estudio ecológico de los hongos del suelo de un bosque de Pinus Taeda" (1999). Martinez, Alicia Elba. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio electrofisiológico y farmacológico de la transmisión sináptica en la unión neuromuscular de rata durante el desarrollo" (2000). Rosato Siri, Marcelo Damián. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
l. Se estudió el efecto de diferentes bloqueantes de canales de calcio (ω-Aga IVA, ω-CgTx GVIA, y dihidropiridinas) sobre la liberación evocada del neurotransmisor en las uniones neuromusculares (UNs) de embriones y de ratas recién nacidas. 2. El contenido cuántico (m) de la liberación evocada por estimulación nerviosa fue reducido casi completamente por el bloqueante de los canales de calcio dependientes de voltaje (CCDV) de tipo P/Q, la (ω-Aga IVA (100 nM) en las placas neuromusculares recientemente formadas de embriones y de ratas de 0-11 días de edad, en concordancia con el efecto de este bloqueante sobre la liberación del neurotransmisor en músculos adultos y reinervados. 3. La ω-CgTx GVIA (1-5 μM), el bloqueante de los CCDV de tipo N, también causó una reducción significativa en los valores de m, en una etapa temprana del desarrollo (embriones y animales de 0-4 días de edad) mientras que no fue efectiva en animales más adultos (ratas de 5-11 días de edad). 4. Los bloqueantes del canal de tipo L, nitrendipina (1 μM) y nifedipina (1 μM), no afectaron en forma significativa la liberación evocada neuralmente en las UNs en desarrollo. Sin embargo, la nifedipina (10 μM) incrementó significativamente los valores de m en las UNs de ratas de 0-4 días de edad. 5. En animales de 0-11 días de edad, la liberación evocada por alto K+ extracelular fue dependiente de la entrada de calcio a través de los CCDV de tipo P/Q (100 nM de la ω-Aga IVA redujo ~70% de la frecuencia de los potenciales de placa miniaturas evocados por alto K+). Los bloqueantes de los CCDV de tipo N y de tipo L no afectaron este tipo de liberación. 6. Los CCDV de tipo P/Q se encuentran más eficientemente acoplados a la liberación (pendiente promedio = 3.6 ± 0.09) que los canales de tipo N (pendiente promedio = 2.6 ± 0.03). 7. La incubación de los músculos con 10 μM de BAPTA-AM (un quelante de calcio rápido) desacopló a los canales de calcio de tipo N del proceso de liberación sin afectar a los canales de tipo P/Q. Esta diferencia podría ser explicada por una localización diferencial de estos canales dentro del mismo sitio de liberación en las UNs de ratas de 0-4 días de edad. 8 . En este estadio del desarrollo (i.e. 0-4 días de edad), la ω-CgTx GVIA (1 μM), la ω-Aga IVA (100 nM) y el BAPTA-AM (10 μM) redujeron significativamente la facilitación de la liberación generada por doble pulso en estos terminales motores. 9. Ninguna de las neurotrofinas estudiadas (NGF, GDNF, BDNF y NT-3) modificó la liberación espontánea ni la evocada por estimulación nerviosa cuando se estudió el efecto agudo de estos compuestos sobre la transmisión sináptica en esta preparación. 10. Se estudió también la modulación de la liberación del neurotransmisor por el agregado de diferentes bloqueantes de proteínas kinasas y de proteínas fosfatasas. 1 μM del ácido okadaico (OA) incrementó la liberación solo cuando el canal de tipo P/Q mediaba la transmisión sináptica. Por otro lado, el efecto de un activador de la PKC (i.e. TPA 2 μM) involucró tanto a los CCDV de tipo P/Q como a los de tipo N. 11 . Podemos concluir que en las uniones neuromusculares de ratas en desarrollo, los canales de calcio involucrados en la liberación: - son de tipo P/Q y de tipo N, - sufren cambios asociados al desarrollo en una etapa postnatal temprana, - muestran una eficiencia de liberación diferente posiblemente debido a una localización diferencial dentro del mismo sitio de liberación, - cumplen un papel importante en la generación de un fenómeno de plasticidad presináptica de corta duración, - y podrían estar modulados diferencialmente por vías intracelulares que involucren distintos tipos de segundos mensajeros.

Abstract:
1. The effects of different calcium channel blockers (ω-Aga IVA, ω-CgTx GVIA, and dihydropyridines) were tested on evoked transmitter release at embryonic and new-born rat neuromuscular junctions (NMJs). 2. The nerve-evoked transmitter release quantal content (m) was strongly reduced by the P/Q-type voltage-dependent calcium channel (VDCC) blocker ω-Aga IVA (100 nM) at newly formed endplates of embryos and 0-11 day-old rats, in agreement with the effect of this blocker on transmitter release at mature and reinnervating muscles. 2. ω-CgTx GVIA (1-5 μM), an N-type VDCC blocker, also caused a significant reduction on m at newly formed NMJs early in development (embryos and 0-4 day-old rats), while it was ineffective in maturer animals (5-11 day-old rats). 4. L-type channel blockers, nitrendipine (1 μM) and nifedipine (1 μM), did not significantly affect neurally evoked release at developing NMJs. However, nifedipine (10 μM) was able to increase m significantly at 0-4 day-old rat NMJs. 5. At developing NMJs (O-11 day-old rats), K+-evoked transmitter release was dependent on Ca2+ entry through VDCCs of the P/Q-type family (100 nM ω-Aga IVA reduced ~70% of the K+-evoked miniature endplate potential frequency). N- and L-type VDCC blockers did not affect this type of release. 6. The P/Q-type VDCCs are more efficiently coupled to neurotransmitter release (average slope = 3.6 ± 0.09) than N-type VDCCs (average slope = 2.6 ± 0.03). 7. The muscle incubation with BAPTA-AM 10 μM differentially affected the coupling of the N-type VDCCs to neurotransmitter release, without affecting the P/Q-type VDCCs. This difference could be accounted for by a differential location of these channels at the release sites of 0-4 day-old rat NMJs. 8. At this stage of development (i.e. 0-4 day-old), ω-CgTx GVIA 1 μM, ω-Aga IVA 100 nM and BAPTA-AM 10 μM significantly reduced the double-pulse facilitation of transmitter release in these motor nerve terminals. 9. NGF, GDNF, BDNF and NT-3 were not able to modify either spontaneous or nerve-evoked transmitter release, when we studied their acute effect on synaptic transmission in this preparation. 10. We also studied the modulation of neurotransmitter release by different protein-kinase and protein-phosphatase blockers. 1 μM okadaic acid (OA) was able to increase neurotransmitter release only if P/Q-type VDCCs mediated synaptic transmission, while the effect of a PKC activator (i.e. TPA 2 μM) involved both P/Q- and N-type of VDCCs. 11.We conclude that at neonatal rat neuromuscular junctions the presynaptic calcium channel types involved in transmitter release: - are P/Q- and N-type, - undergo developmental changes during the early postnatal period, - show a different efficacy in triggering transmitter release because they are differentially located at the same release site, - have an important role on a short-term form of presynaptic plasticity - and could be differentially modulated by different intracellular enzymatic pathways.

"Estudio espectro-electroquímico de flavinas en diferentes matrices poliméricas" (1998). Bonazzola, Cecilia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudió comparativamente el comportamiento electroquímico de flavinas en solución acuosa, en hidrogeles redox de poli-alilamina altamente hidratados, y como anión dopante de polipirrol. Se utilizaron técnicas electroquímicas y espectroscópicas uv-visible de absorción y emision simultánea a la oxidación-reducción de las flavinas. En solución acuosa se encontró que la disproporcionación de la semiquinona de la flavina conduce a una complicación cinética respecto de un mecanismo simple de transferencia de dos electrones y dos protones. En los electrodos modificados se observó que los hidrogeles de poli-alilamina brindan un ambiente altamente hidratado y la electroquímica y la espectroscopía son similares a las soluciones acuosas. Sin embargo, la protonación de aminos primarios fijos en la caden polimérica afecta la energía libre del proceso redox a través de un potencial de membrana. Los electrodos modificados por polipirrol con flavina atrapada son los que se presentan como más complejos. La matriz rígida del polímero, que en este caso puede oxidarse y reducirse en la misma ventana de potencial que la flavina lleva a un comportamiento electroquímico y espectrocópico bien diferenciado. Se encuentran cambios espectrocópicos de la flavina y del polipirrol al cambiar el estado de oxidación. Además, las especies redox de ambos sistemas pueden interactuar por reacciones químicas acopladas.

Abstract:
The electrochemical behaviour of flavins has been studied comparatively in aqueous solutions, in highly hydrated redox hydrogels of poly-(allylamine), and as a dopant anion of polypyrrole. In aqueous solutions, it was found that the disproportionation of flavin simiquinone leads to a kinetic complication with respect to a simple two electron two proton electron transfer mechanism. In modified electrodes it was found that poly-(allylamine) hydrogels yield a highly hydrated environment and the electrochemistry and spectroscopy are similar than in aqueosus solutions. However, protonation of primary amine groups fixed to the polymer backbone affects the redox process free energy through a membrane potential. Modified electrodes with polypyrrole and trapped flavin are the more complex ones. The rigid polymer matrix, which in this case can be oxidised and reduced in the same potential window that flavin gives a distinct electrochemical and spectrocopic behaviour. Spectroscopic changes due to flavin and polypyrrole are observed when the oxidation state changes. Besides, both systems' redox species can interact through coupled chemical reactions.

"Estudio estructural de componentes de membrana de formas infectantes de Trypanosoma cruzi liberados al medio de cultivo" (1999). Agustí, Rosalía. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo de tesis se realizó la determinación estructural de compuestos liberados al medio de cultivo por formas infectantes de T. cruzi. El estudio comprendió tres aspectos: Estudio químico de los compuestos lipídicos liberados: Sólo ciertos componentes de la membrana son liberados (PC, LPC, sulfátido, IPL, ácidos grasos). Es significativa la ausencia de PE ya que es un componente importante de la membrana. Por otra parte, algunos de los compuestos liberados presentan diferencias estructurales con los análogos del parásito, principalmente en los ácidos grasos componentes. La segunda parte abarcó el estudio estructural del ancla glicolipídica de la trans-sialidasa: se caracterizó una estructura de glicoinositolfosfolípido, formada mayoritariamente por ceramida en las formas trypomastigote metacíclicas y ceramida y alquilglicerol en relación 3:1 en las formas trypomastigote. La fracción oligosacarídica contiene una unidad de α-galactosa caracterizada por primera vez como componente de anclas en Trypanosoma cruzi. El tercer aspecto consistió en un estudio estructural de la cadena N-glicosidica de Tc-85 liberada al medio: el análisis por HPAE-PAD permitió determinar tres cadenas de menor longitud que las presentes en el oligosacárido de la proteína aislada de parásitos. Las cadenas difieren en el monosacárido presente en el extremo no reductor.

Abstract:
In this Thesis a structural determination of compounds shed to the culture medium by infective forms of Trypanosoma cruzi was performed. The study covered three topics: Chemical study of the lipidic compounds: only some membrane components were shed (PC, LPC, sulfatide, IPL, fatty acids). It was striking the absence of PE, considering that it is an important component of the membrane. Besides, some of the shed compounds evidenced structural differences with the analogues isolated from the parasite, mostly in their fatty acid composition. The second part comprised the structural study of the glycolipidic anchor of the trans-sialidase. It was characterized a glycoinositolphospholipid structure, containing a ceramide in the metacyclic trypomastigote forms and, ceramide and alkylglycerol in a 3:1 ratio in the trypomastigote forms. The oligosaccharide fraction contained an α-galactose unit, characterized for the first time as a component of an anchor in T. cruzi. The third topic was the study of the N-linked oligosaccharides of the glycoprotein Tc-85 shed to the culture medium. An analysis by HPAE-PAD allowed the determination of three chains shorter than the oligosaccharide present in the protein isolated from trypomatigote forms. The three chains differed in the monosaccharide unit at the non-reducing terminus.

"Estudio estructural y de reactividad de compuestos organolíticos con uniones con uniones N-Li Y C-Li : estudios mecanísticos - aplicaciones sintéticas" (1999). García Liñares, Guadalupe E.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se llevó a cabo un estudio estructural y de reactividad de compuestos organolíticos. Resultados basados en espectroscopía RMN-13C, intercambio isotópico y reacciones de carbonilación permitieron determinar que amiduros de litio cíclicos, como morfolil-litio y piperidil-litio, forman, en solución, agregados mixtos con moléculas de amina. Además, por difracción de rayos X se pudo confirmar, en el caso del piperidil-litio, la presencia de piperidina en la estructura cristalina: este amiduro de litio forma un agregado mixto , siendo el primero de este tipo descripto en la literatura. El análisis de los resultados obtenidos en la carbonilación en diferentes condiciones experimentales, permitió el desarrollo de una metodología con amplios alcances sintéticos y la postulación de los mecanismos de reacción de amiduros de litio con monóxido de carbono. El primer intermediario postulado, carbamoilo, es un anión acilo altamente reactivo que, usualmente, lleva a sistemas complejos. Se estudió entonces la reacción entre amiduros de litio y formamidas sustituidas mediante cromatografia gaseosa y Resonancia Magnética Nuclear. El equilibrio establecido ayudó a explicar la dependencia con las condiciones de reacción, por ejemplo, la naturaleza del amiduro. En el caso del morfolil-litio se logró identificar un intermediario monolitiado, el dimorfolinmetóxido de litio. Un aducto como éste, que puede considerarse como un aducto entre una molécula de amida y un amiduro de litio, no se habia encontrado anteriormente. Por otro lado, la reacción entre diciclohexilamiduro de litio y alquilformamidas produce principalmente un intermediario dilitiado en el que un carbono está unido a N, O, Li y un carbono carbonílico, siendo también la primera vez que se describe una entidad de este tipo. Estas investigaciones fueron de gran significancia para mayor conocimiento de la naturaleza de intermediarios y mecanismos de reacción que involucran reactivos organolíticos y para su aplicación en síntesis orgánica. Por otro lado, se investigó la reactividad de derivados litiados de heterociclos aromáticos frente a distintos electrófilos. Por reacción de 2-furil-litio, 5-metil-2-furil-litio y 2-litio-tiofeno con halogenuros orgánicos se logró sintetizar, en forma rápida y sencilla, furanos y tiofenos α sustituidos. La carbonilación de estos reactivos resultó de gran interés, ya que dio lugar a la formación de compuestos carbonílicos complejos. Además, la reacción se llevó a cabo en diversas condiciones estudiándose el mecanismo de la misma.

Abstract:
Structural and reactivity studies of organolithium compounds were carried out. Investigations based on 13C-NMR spectroscopy, isotopic exchange and carbonylation reactions allowed to determine that cyclic lithium amides, such as lithium morpholide and lithium piperidide, form, in solution, mixed aggregates with molecules of amine. Besides, the crystal structure of lithium piperidide was determined, which crystallizes with piperidine to form a mixed aggregate . This is a first aggregate of this type described in the literature. Analysis based on results of carbonylation carried out in different experimental conditions, to led to postulate the mechanism for reaction of lithium amides with carbon monoxide. The first intermediate postulated in the carbonylation, carbamoyl, is a very reactive acyl anion and usually lead to complex systems. Then, gas chromatography and Nuclear Magnetic Resonance analysis of reaction of lithium amides with substituted formamides were carried out. The equilibrium helpt to explain the striking dependence on the reactin conditions, for instance, the lithium amide nature. In the case of lithium morpholide an adduct of an amide with lithium amide, the lithium dimorpholinemethoxide, was identified. An adduct like had not been characterized before. The reaction between lithium dicyclohexylamide and formamides produces mainly a dilithiated intermediate in which a lithiated carbon atom is bonded to N, O, and a carbonyl functionality. Such an entity has not been described yet. These investigations were of relevance to get more insight into the nature of the intermediates and the mechanisms of reaction when organolithium reagents are involved. In addition, the reactivity of lithiated derivatives of aromatic heterocycles with different electrophiles was investigated. α-substituted furans and thiophens were synthesized by reaction of 2-furyl-lithium, 5-methyl-2-furyl-lithium and 2-lithium-tiophen with organic halides. The carbonylation of these reactives was the great interest because of the formation “one pot-one step” of complex carbonylic compounds. Besides, the reaction was carried out in different conditions and the mechanism was described.

"Estudio etnobotánico de la subsistencia de los "Criollos" del Chaco noroccidental Argentino" (2000). Scarpa, Gustavo Fabián. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio exomorfológico y anatómico de las inflorescencias de las especies Austroamericanas del género Nothofagus BL. (Fagaceae)" (1998). Picca, Pablo Ignacio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio experimental en el campo de las hidrácidas difénicas y nitrodifénicas" (1941). Felitte, Alfredo A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio experimental sobre dos peculiares estructuras del Armadillo Chaetophractus villosus : El núcleo de Onuf y la glándula de Harder" (1996). Aldana Marcos, Hernán Javier. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Esta Tesis se divide en: 1-El modelo experimental y la importancia del armadillo Chaetophractus villosus en la investigación biométrica; 2-Estudio del Núcleo de Onuf del Chaetophractus villosus; 3-Estudio de la glándula de Harder (GH) del Chaetophractus villosus. En la primera, se realizó, un resumen de la Sistemática y Taxonomía del Chaetophractus villosus y se mencionaron algunas líneas de investigación biomédica que han utilizado con éxito este modelo experimental. En la segunda se exponen los resultados obtenidos en la investigación del Núcleo de Onuf (NO). El trabajo fue dividido en: I-Revisión de los conocimientos actuales sobre el NO y la musculatura perineal dimórfica; II- Estudio del pene y de los músculos isquiocavernosos (IC), bulbocavernosos PC) y levator penis (LP), estudio de la inervación de dichas estructuras; III- Estudio de la columna vertebral y de la médula espinal, IV-Estudio del NO mediante ME y MO, marcación retrógrada de los IC, BC y LP con HRP y con colorantes fluorescentes-relación con el NO-. La tercera parte está abocada al estudio de las glándulas perioculares-fundamentalemente la GH- del Chaetophractus villosus. El trabajo se dividió en: I-Revisión de los conocimientos actuales de las glándulas perioculares. II-Estudio topográfico y macroscópico de la GH, lacrimal y nictitante. III- Estudio de las glándulas mediante MO y MET. Incluyendo un análisis histoquímico. IV-Se estudió la presencia de Melatonina en las glándulas perioculares mediante la puesta a punto de un método altamente sensible para la determinación de melatonina con HPLC en fase normal con detección fluorométrica.

Abstract:
This Thesis was divided in: 1- The amadillo Chaetophractus villosus (CV) as experimental model in biomedical research; 2-Onuf's nucleus (ON) in CV; Harderian gland (HG) in CV. In the fist part an abstract of the systematic, taxonomy and the most important features of biomedical research about CV was mentioned. The second part included Onuf's nucleus study in the CV; this part was divided in: a) literature review about ON and perineal dimorphic musculature, b) study of the penis, isquiocavernosus (IC), bulbocavernosus PC) and lewtor penis (LP) musculature and their innervation, c) study of the a vertebral and spinal cord, d) ON study by optic and transmission electron microscopy, retrograde labelling of IC, BC and LP with HRP and fluorecent tracers -relation to ON-. The third part include the periocular glands study, in particular HG. This study was divided in: a) literature review about periocular glands, b) topographic and macroscopic study of HG, lacrimal and nictitating glands, c) study of the periocular glands by optic and transmission electron microscopy -including histochemical analysis-, d) melatonin detection in the periocular glands using a new HPLC technique with fluorometric detection.

"Estudio fisicoquímico de la síntesis por precipitación homogénea de precursores de óxidos metálicos pulvurulentos" (1995). Candal, Roberto Jorge. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio fisicoquímico y bioinformático de la familia de hemoglobinas truncadas" (2015-11-13). Bustamante, Juan Pablo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las hemoproteínas son proteínas que poseen un grupo hemo unido generalmente de forma covalente. Participan en transporte de gases, en reacciones de transferencia de electrones y catálisis de reacciones redox. Un grupo muy particular dentro de estas proteínas son las hemoglobinas truncadas (trHbs), que constituyen una familia interesante de referencia para estudios de estructura y función de proteínas, debido a su plegado conservado y pequeño tamaño. Las trHbs están presentes en los tres super reinos de la vida, bacteria, arquea y varios organismos eucariotas. Han sido clasificadas en tres grupos, conocidos como N, O y P. Si bien la mayoría de trHbs no poseen una función asignada, se conoce que ésta generalmente depende de su afinidad por ligandos pequeños, es decir, de la relación entre la velocidad a la cual captan y liberan ligandos, caracterizadas por constantes de velocidad kon y koff, respectivamente. De allí la relevancia de abocarse al estudio de los determinantes moleculares de tal afinidad. Los procesos de captación y liberación de ligandos han sido extensamente estudiados durante los últimos años por diferentes grupos de investigación, incluido el grupo donde se desarrolló la presente tesis, utilizando enfoques teóricos y experimentales. Sin embargo, solo se estudiaron algunos de los procesos involucrados, tales como el rol de túneles e interacciones de puentes de hidrógeno, encontrándose únicamente tendencias cualitativas respecto a constantes kon y koff. En la presente tesis, a través de la aplicación de diversas técnicas computacionales, se profundizó en la descripción anterior mediante la inclusión de dos determinantes moleculares cruciales en el proceso de captación de ligandos: las cavidades internas de las proteínas y el rol de las moléculas de agua presentes en el sitio activo. Adicionalmente, se construyó un modelo matemático, validado a través de un riguroso análisis estadístico, que permite predecir de manera cuantitativa las constantes kon y koff de O2. Dado que la mayoría de trHbs no poseen una función asignada, se extendió el alcance del modelo propuesto a toda la familia de trHbs, prediciendo valores para una gran cantidad de trHbs (sobre un total de ~1100 secuencias proteicas). Se asignaron posibles funciones moleculares y se analizó a esta familia de proteínas en un contexto evolutivo-funcional, caracterizando a cada grupo filogenético. De manera adicional, el estudio evolutivo reveló que hay un grupo de trHbs que comparte características comunes que lo diferencian significativamente del resto de los grupos conocidos (N, O y P), por lo que se lo clasificó como un cuarto grupo, denominado Q. Finalmente, puesto que una de las proteínas más estudiadas durante el desarrollo de la presente tesis (la trHb O de Thermobifida fusca, Tf-trHbO) es una proteína termoestable perteneciente a una actinobacteria termófila, se estudiaron las bases moleculares de su termoestabilidad comparándola con una trHb mesoestable: la trHb O de Mycobacterium tuberculosis. Se encontró que la alta estabilidad térmica de la Tf-trHbO se explica, en gran parte, por el cambio de un único aminoácido que altera la estructura de un loop, haciéndolo más flexible y promoviendo la formación de puentes salinos. En su conjunto, esta tesis presenta una profunda caracterización de dos factores cruciales en el proceso de captación de ligandos en hemoglobinas truncadas, que, incluidos en un modelo matemático junto a una descripción del proceso de liberación de ligandos como ha sido previamente descripta, permiten explicar valores experimentales de kon y koff de O2 con una precisión muy alta. La extensión del modelo a toda la familia de trHbs ha permitido asignar posibles funciones moleculares a una gran cantidad de miembros de estas globinas. Complementado con un análisis evolutivo y bioinformático, se ha logrado además obtener una detallada caracterización de cada grupo de trHbs, descubriendo incluso un grupo nuevo. Por último, el estudio teórico sobre la termoestabilidad de la Tf-trHbO abre las puertas a posteriores estudios que analicen las bases moleculares de la adaptación a condiciones extremas. Palabras clave: hemoglobinas truncadas, cavidades internas, sitios de hidratación, dinámica molecular, QM/MM, predicción de constantes cinéticas, predicción secuencia-estructura-función, filogenia, evolución molecular, bioinformática, termoestabilidad.

Abstract:
Hemeproteins are proteins that possess a heme group generally covalently bound. They participate in gas transport, electron transfer reactions and catalysis of redox reactions. A particular group within these proteins is the truncated hemoglobins (trHbs), which constitute an interesting benchmark group for structure-to-function studies, due to its conserved fold and small size. The trHbs are present in all three superkingdoms of life, bacteria, archeas and several eukaryotes. They have been classified into three groups, labeled as N, O and P. While most trHbs do not have an assigned function, it is well known that generally their function depends on their affinity for small ligands, i.e. the balance between capture and release ligand rates, characterized by the kon and koff rate constants, respectively. Hence, the importance of focusing on the study of the molecular determinants of this affinity. The ligand capture and release processes have been extensively studied throughout in the last several years, by different research groups, including the group in which this thesis has been developed, with theoretical and experimental approaches. However only some involved processes, such as the role of tunnels and hydrogen bond interactions, were studied finding merely qualitative trends in kon y koff rate constants. In the present thesis, through the application of a variety of computational techniques, we incorporated to the previous description two key determinant factors of the ligand capture process: protein internal cavities and the role of water molecules in the active site. Additionally, validated through a rigorous statistical analysis, a mathematical model for the quantitative prediction of O2 kon y koff rate constants was built. Due to the fact that most trHbs do not have an assigned function, we extended our proposed model to the whole family, predicting values for a large amount of trHbs (over ~1100 protein sequences). In this context, possible molecular functions were assigned, as well as a protein family analysis in an evolutionary-functional scenario, characterizing each phylogenetic group. Furthermore, the evolutionary study revealed a novel trHb group that shares common features that differentiate it from the rest known groups (N, O and P), so it was classified in a fourth group, labeled as Q. Finally, given that one of the most studied proteins along this thesis (the trHb O from Thermobifida fusca, Tf-trHbO) is a thermostable protein from a thermophilic actinobacteria, the molecular basis of its thermostability was studied, comparing it with a mesostable trHb: the trHb O from Mycobacterium tuberculosis. It has been found that the high thermal stability of TftrHbO, is mainly explained by a single amino acid change that alters a loop structure making it more flexible, which also promotes the formation of salt bridges. Overall, in this thesis we present for the truncated hemoglobin family a deep characterization of two key determinant factors of the ligand capture process that, included in a mathematical model together with a description of the ligand release process that has been previously made, allows us to explain experimental O2 kon y koff values with high precision. The extension of the model to the whole trHb family enabled putative molecular function assignments. Complemented by an evolutionary and bioinformatics analysis, a detailed characterization of each trHb group was also achieved, describing a novel group. Last but not least, the theoretical study of the Tf-trHbO thermostability is a first step towards further indepth studies of the molecular basis of adaptation to extreme conditions. Keywords: truncated hemoglobins, internal cavities, hydration sites, molecular dynamics, QM/MM, kinetic constants prediction, sequence-structure-function prediction, phylogeny, molecular evolution, bioinformatics, thermostability.

"Estudio fisiológico sobre la producción del sistema celulolítico de Nectria catalinensis in vitro" (1995). Pardo, Alejandro Guillermo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio florístico y ecológico de basidiomycetes xilófilos en plantaciones de Eucalyptus viminalis" (1984). Lopez, Silvia Edith. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio fluidodinámico de reactores multifásicos mediante técnicas de análisis no-invasivas" (2010). Fraguío, María Sol. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Este trabajo presenta un estudio sobre algunos aspectos de la fluidodinámica de sistemas multifásicos utilizando técnicas que no perturban el movimiento de los fluidos y/o el sólido presentes. El objetivo es caracterizar y/o monitorear la fluidodinámica en sistemas de interés industrial, particularmente, columnas de burbujeo bifásicas y lechos fluidizados trifásicos. Para el estudio de los sistemas multifásicos involucrados en este trabajo se midieron y analizaron series temporales provenientes de experimentos de densitometría, de tomografía de emisión de partículas únicas, generalmente llamada ”Radioactive Particle Tracking” (RPT), y de fluctuaciones de presión. Se utilizaron técnicas estadísticas básicas y un test estadístico que permite tener en cuenta las características caóticas de los sistemas para determinar transiciones de régimen de flujo y/o monitorear un cambio brusco en la fluidodinámica del sistema. El análisis de las diversas series temporales registradas permitió proponer procedimientos de identificación de transiciones del régimen de flujo subyacente, habiéndose obtenido concordancia entre las predicciones que surgen del análisis de series temporales de distintas variables características. Asimismo, el análisis de series temporales durante una perturbación indica que es posible diagnosticar el inicio de la misma con un procedimiento similar al empleado para identificar transiciones de flujo. Por otra parte, además de haber implementado por primera vez la técnica de RPT en Argentina, se estudiaron exhaustivamente distintos aspectos de la misma y se exploró la posibilidad de utilizarla para obtener información en sistemas donde estén ocurriendo cambios en la fluidodinámica debido a una perturbación. Se cuantificaron por primera vez los errores en las determinaciones de posiciones y velocidades ”instantáneas” y se encontró que, para una columna de burbujeo con el sistema agua – aire, es posible utilizar una calibración realizada con la columna llena de líquido y sin circulación de gas para reconstruir las posiciones del trazador cuando la columna opera tanto en régimen homogéneo como heterogéneo.

Abstract:
This work presents a study of some fluid dynamic features in multiphase systems using techniques that do not disturb the behavior of the fluids or solids, in order to characterize or monitor the fluid dynamic in usual industrial systems, such as bubble columns and three phase fluidized beds. For the study of the multiphase systems involved in this work, time series from experiments of densitometry, single particle emission tomography, commonly known as Radioactive Particle Tracking (RPT), and pressure fluctuations were measured and analized. Diferent basic statistic techniques and a statistical test that allows taking into account the chaotic behavior of the multiphase systems were used to classify flow regime transitions and monitor a change in the system fluid dynamics. Analysis of different characteristic variables time series allowed suggesting procedures for flow regime transition identification. Good agreement was found between the predictions arising from the application of the statistic test to the different time series. Likewise, a perturbation could be sucessfully diagnosed from a similar time series analysis. Besides implementing the RPT technique for the first time in Argentina, different aspects of the technique were further investigated. Moreover, application of the technique to obtain information from systems where hydrodynamic changes due to a perturbation are taking place was explored. Errors in the positions and instantaneous velocities determinations were quantified for the first time. For an air-water bubble column, it was found that the use of a calibration carried out in a different hydrodynamic condition does not increase the inherent error of the technique. Hence, doing the calibration in the column with liquid and no gas circulation allows reconstructing the tracer positions measured when the column is operated in the homogeneous and heterogeneous flow regimes.

"Estudio funcional de la familia de enzimas Aurora quinasa en Trypanosoma cruzi" (2013-05-07). Fassolari, Matías. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio funcional de las proteínas codificadas por el virus del Mal de Río Cuarto en hospedantes vegetales" (2010). Mongelli, Vanesa Claudia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El virus del Mal de Río Cuarto (MRCV, Fijivirus, Reoviridae) causa la principal enfermedad del maíz en la Argentina. Este virus es capaz de replicar de manera persistente y no citopática en delfácidos (chicharritas) y en el floema de varias especies de gramíneas donde provoca síntomas severos y económicamente importantes. Nuestro trabajo anterior demostró que el MRCV es una especie viral independiente de las conocidas hasta el momento cuyo genoma está formado por 10 segmentos de RNA de doble cadena que codifican para 13 proteínas (PMRCVs) e identificó aquellas proteínas estructurales. Sin embargo, aún se desconoce la función de la mayoría de las proteínas virales (en particular de aquellas no estructurales) y los mecanismos moleculares que determinan el establecimiento y desarrollo de la infección. El objetivo general de esta Tesis fue estudiar, definir y caracterizar la función de distintas proteínas codificadas por el MRCV a nivel molecular en hospedantes vegetales. En particular se propuso identificar las proteínas virales implicadas en el movimiento intercelular del virus dentro de la planta, en la producción de los síntomas del MRCV en plantas (determinantes de patogenicidad) y la(s) posible(s) proteina(s) con actividad supresora del silenciamiento de RNA. Este trabajo de Tesis representa el primer avance en la caracterización a nivel molecular de la función de 10 las 13 PMRCVs (P4, P5-1, P5-2, P6, P7-1, P7-2, P8, P9-1, P9-2 y P10) en sistemas vegetales. Para identificar proteínas del MRCV responsables del movimiento viral en plantas, se ensayó la capacidad de las distintas proteínas en estudio de complementar el movimiento de un Potato virus X (PVX) mutante, defectivo en esta función en Nicotiana benthamiana (Nb). Mediante este sistema, no fue posible identificar proteínas de movimiento entre las codificadas por el MRCV. A continuación se analizaron las características de la infección de plantas de Nb con recombinantes de PVX portando distintas secuencias codificantes para las PMRCVs. Se encontró que la expresión temprana de la proteína no estructural P7-2 produce un drástico aumento en la severidad sintomática que no es acompañado por un aumento en la acumulación viral, mientras que la expresión de P7-1 a partir del mismo vector retrasa la infección viral y reduce la severidad sintomática. Por otra parte, la presencia de los secuencias codificantes para las proteínas P9-1 (mayoritaria del viroplasma) y P10 (mayoritaria de cápside externa) en el mismo vector viral impidió el establecimiento de la infección, sugieriendo que estas proteínas podrían desencadenar una respuesta de resistencia a la infección viral en Nb. Con el objetivo de identificar proteínas del MRCV con actividad supresora del silenciamiento del RNA se utilizó un sistema modelo que se basa en la inducción del silenciamiento en plantas transgénicas que expresan GFP mediante la agroinfiltración con una cepa capaz de expresar un inductor de silenciamiento (GFP o dsGFP). Ninguna de las proteínas del MRCV evaluadas logró interferir con el silenciamiento tanto local como sistémico en este sistema. Sin embargo, mediante el uso de este sistema modelo se logró demostrar que la expresión de las proteínas no estructurales P7-1 y P7-2 codificadas por el segmento 7 del MRCV da lugar a reducciones en la acumulación del mRNA de transgenes expresados de manera transitoria o estable en un proceso que probablemente sea de origen postranscripcional. Esta actividad no había sido descripta hasta el momento para otras proteínas virales y es muy novedosa e interesante, en particular cuando se considera que la proteína P7-2 no está presente en el virus Nilaparvata lugens reovirus (NLRV) que pertenece al mismo género que el MRCV pero que es incapaz de infectar plantas. En conjunto los resultados sugieren que las proteínas P7-1 y P7-2 podrían estar implicadas en la regulación de la expresión tanto de genes virales como del hospedante durante el desarrollo de la infección del MRCV. Finalmente, al estudiar la expresión transitoria de las PMRCVs en Nb se encontró que sus niveles de expresión son bajos y que la utilización de dicotiledóneas como sistemas modelo para el estudio funcional de estas proteínas podría no ser conveniente en ciertos casos. Al analizar comparativamente el uso de codones de las PMRCVs en Nb, maíz y Nilaparvata lugens (delfácido en el que replica el NLRV), no se encontraron diferecias en el uso de codones que pudieran explicar los bajos niveles de expresión en Nb. La información y herramientas biológicas aquí generadas constituyen un gran progreso en el estudio de la actividad de las proteínas coficadas por el MRCV lo cual contribuirá al diseño de futuras estrategias efectivas de control de esta enfermedad en plantas.

Abstract:
Mal de Río Cuarto virus (MRCV, Fijivirus, Reoviridae) causes the most important maize disease in Argentina. This virus is able to replicate both in delphacid vectors (planthoppers) where it replicates in a persistent and non-cytopathic manner and in the phloem tissue of several grass species where it produces severe and economically important symptoms. Our previous work showed that MRCV is a new viral species and that its genome consists of 10 segments of double-stranded RNA that encode for 13 proteins (PMRCVs). The identity of the viral structural proteins was also defined. However, the biological function of the different PMRCVs (particularly in the case of non-structural proteins) and the mechanisms that determine the establishment and development of MRCV infection in both hosts are still unknown. The aim of this Thesis was to study, define and characterize the role of different MRCV-encoded proteins in plant hosts at a molecular level. Our particular goals were to identify those viral proteins involved in the virus spread within the plant, those involved in the development of MRCV symptoms in plants (pathogenicity determinants) and the possible viral RNA silencing suppressors. This Thesis represents the first general survey of the biological function at a molecular level of 10 of the 13 PMRCVs (P4, P5-1, P5-2, P6, P7-1, P7-2, P8, P9-1, P9-2 y P10) using plant model system. In order to identify those PMRCVs involved in plant intercellular movement, the capacity of different viral-encoded proteins to complement movement of a mutant Potato Virus X (PVX) in Nicotiana benthamiana (Nb) was assessed. Using this model system no movement protein was found amongst PMRCVs. Next, general features of infections caused by recombinant PVX viruses carrying PMRCVs-coding sequences in Nb were analyzed. It was found that the early expression of P7-2 causes a drastic increase in symptom severity without producing a concomitant increase in recombinant PVX accumulation. Expression of P7-1 from the same PVX vector, on the other hand, lead to a delay in the progress of viral infection and reduced symptom severity. Inoculation of Nb with PVX recombinant vectors harboring P9-1 (major viroplasm protein) or P10 (major outher capsid protein) coding sequences produced no infection, suggesting that these proteins might trigger a resistance response. With the aim of identifying viral suppressors of RNA silencing among PMRCVs, a model system based on the induction of RNA silencing in transgenic plants expressing GFP by agroinfiltration with a strain capable of expressing an inducer of silencing (GFP or dsGFP) was used. None of the analyzed PMRCVs interfered with local or systemic RNA silencing. However using this same model system it was found that the expression of non-structural proteins P7-1 and P7-1, both encoded by MRCV genomic segment 7, caused reductions in the accumulation of mRNA from trangenes either transiently or stably expressed in a process that most probably is of postrancriptional origin. This activity has not been described so far for other viral protein and is very novel and interesting, especially considering that P7-2 is not present in Nilaparvata lugens reovirus (NLRV), a Fijivirus that is unable to infect plants. Overall, the results suggest that P7-1 and P7-2 may be involved in regulating the expression of both viral and host genes during MRCV infection. Finally, upon studying the transient expression of PMRCVs in Nb it was shown that their expression levels are low and that the use of dicots species as model systems for the functional study of these proteins may not be appropriate in certain cases. Comparative analysis of the codon usage of PMRCVs in Nb, maize and Nilaparvata lugens (delphacid in which NLRV replicates), showed that the low levels of expression of PMRCVs in Nb cannot be explained by differences in codon usage between these species. The information and tools generated here represent an important advancement in the study of MRCV-coded activities that will in turn contribute to the development of effective long-term strategies for disease control in plants.

"Estudio funcional del receptor dopaminérgico D2 en el sistema nervioso central mediante el uso de ratones mutantes inducibles" (2012). Bello Gay, Estefanía Pilar. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Liberaciones subóptimas o excesivas de dopamina son rasgos característicos de varias patologías muy frecuentes que incluyen a la enfermedad de Parkinson, esquizofrenia, desorden de déficit atencional e hiperactividad (ADHD) y autoadministración compulsiva de drogas de abuso. En este trabajo se estudió el rol del D2R mediante la generación de ratones mutantes condicionales. En primer lugar, generamos ratones deficientes de D2R en las neuronas dopaminérgicas (autorreceptores). Estos ratones tienen la síntesis y liberación de dopamina aumentada, son hiperactivos e hipersensibles a los efectos psicomotores de la cocaína, y tienen mayor motivación para trabajar por la comida. En segundo lugar, estudiamos los efectos de la pérdida de D2Rs en animales adultos que se habían desarrollado normalmente en comparación con ratones deficientes en D2Rs constitutivos que desarrollan programas compensatorios tempranos. La abrupta remoción de los D2R en la adultez provocó una marcada disminución de la locomoción, problemas severos en el aprendizaje y la coordinación de rutinas motoras. En algunos casos, se observó rigidez y temblor en los animales en reposo con características de parkinsonismo. Los resultados obtenidos, demostraron la importancia de la estricta regulación mediada por los D2R (pre y postsinápticos) en el control de la actividad locomotora, la sensibilidad a drogas de abuso y el estado motivacional de los animales.

Abstract:
Suboptimal or excessive dopamine (DA) release are characteristic of a number of very common diseases, including Parkinson's disease, schizophrenia, attention deficit disorder with hyperactivity (ADHD) and compulsive self-administration of drugs of abuse. In this paper, we study the role of D2R by generating mutant mice. First, we generated mice lacking D2R in dopaminergic neurons (autoreceptors). These mice have increased dopamine synthesis and release, are hyperactive and hypersensitive to the psychomotor effects of cocaine, and show enhanced motivation to work for food. Second, we generated a model that allows us to eliminate D2R of adult animals normally developed. The abrupt removal of the D2R in adulthood causes a marked decrease in locomotion, severe learning problems and motor coordination routines. In some cases, it can induce rigidity and tremor at rest. These results demonstrate the importance of the strict regulation mediated by the D2R (pre and postsynaptic) in the control of locomotor activity, sensitivity to drugs of abuse and particularly in the motivational state of animals.

"Estudio funcional y estructural de las quimerinas, una familia de receptores de DAG y esteres de Forbol con actividad de Rac-GAP" (2005). Coluccio Leskow, Federico. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las quimerinas son una familia de GAPs (GTPase Activating Proteins) especificas para la familia de proteínas de Rac, reguladas por el segundo mensajero diacilglicerol (DAG) y los esteres de forbol. En mamíferos los genes CHN1 (o α) y CHN2 (o β) codifican para las cuatro isoformas conocidas, α1 y β1 presentan un dominio C1 y un dominio de GAP, mientras que α2 y β2 poseen un dominio adicional SH2. En el primer capitulo de este trabajo se muestra que el gen beta codifica para al menos 3 nuevas isoformas. La resolución de la estructura cristalográfica de β2-chimaerin. Se demuestra que es necesaria la unión del ligando al dominio C1 y la interacción con fosfolípidos de membrana para la activación del GAP. En el tercer capitulo se muestra que el dominio SH2 de β2-chimaerin es capaz de unir proteínas fosforiladas en tirosina y se identifican tres de estas proteínas. En el capitulo cuarto se reporta el clonado y caracterización de z-chimaerin, el producto del único gen de quimerinas presente en el pez cebra. Esta proteína posee características similares a las de mamíferos y se expresa de forma materna y zigotica a lo largo del desarrollo embrionario. En el ultimo capitulo se estudia la función de z-chimaerin en el desarrollo embrionario. Se determino que su actividad de GAP es necesaria en la capa sincitial del saco vitelino para regular el movimiento de epíboli.

Abstract:
Chimaerins are a family of GAPs (GTPase Activating Proteins) specific for the Rac small GTPases regulated by the second messenger diacylglycerol (DAG) and the phorbol esters. In mammalians the genes CHN1 (or α) and CHN2 (or β) encode the four known isoforms, α1 and β1 that posses a C1 and a GAP domain, and α2 and β2 that have an additional SH2 domain. The first chapter describes the existence of at least three novel β isoforms. The 3-D structure of β2-chimaerin reveals that it is autoinhibited with the C1 and GAP domains sterically blocked. In the second chapter a mechanism for lipid activation of β2-chimaerin is proposed. In the third part of this thesis it is shown that the SH2 domain of β2-chimaerin binds phosphotyrosine proteins. Three proteins that interact with β2-chimaerin were isolated. The fourth chapter reports the cloning and characterization of z-chimaerin, the product of the only chimaerin gene in the zebrafish. This protein is similar to the mammalian isoforms and it is maternally and zygotically expressed during embryogenesis. In the last chapter we analyzed the function of z-chimaerin during early development and found that its GAP activity is necessary in the yolk syncytial layer for the regulation of epiboly

"Estudio geológico del distrito wolframífero Ambul, Provincia de Córdoba" (2002). Herrmann, Carlos Jorge. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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El distrito wolframífero Ambul se emplaza en la unidad morfoestructural Sierras Pampeanas Orientales, en las estribaciones occidentales de la Sierra Grande de Córdoba. El basamento está integrado principalmente por gneises, anfibolitas, mármoles, rocas calcosilicáticas y metacuarcitas de edad proterozoica superior a cámbrica, e intrusiones de granitoides paleozoicos. Se trata de un antiguo distrito minero con dos tipologías de mineralización de wolframio, una de scheelita alojada en rocas calcosilicáticas (región Santa Rosa) y otra de scheelita y wolframita en mantos y vetas de cuarzo-turmalina (región de Jaime). Sus yacimientos fueeron explotados intensamente en tres períodos discontinuos entre los años 1914 y 1960, en etapas parcial o totalmente simultáneas con períodos bélicos (Primera y Segunda Guerra Mundial) y de rearme mundiales. La génesis de la mineralización scheelítica en rocas carbonáticas se asignaba antiguamente a un proceso de reemplazo metasomático, en tanto que la mineralización en “vetas” se vinculaba con hidrotermalismo relacionado con el granito de Achala. El estudio encarado, con el objeto de estudiar la mineralización de wolframio en el distrito Ambul bajo la óptica de nuevos modelos yacimientológicos, se fundamenta en la geología, estructura, mineralogía, petrología y geoquímica de los depósitos y la litología asociada; tiene como antecedentes la propuesta de Brodtkorb y Pezzutti (1991) y la amplia bibliografia de orden internacional —en mucho mayor medida que nacional- sobre mineralización de wolframio, sus ambientes, modelos de formación y litologias asociadas. El desarrollo de la investigación identificó como relevantes para la mineralización wolframifera del distrito el estudio de los siguientes elementos de la geología del área, sobre los cuales se trabajó con las mejores técnicas y elementos disponibles: a) la mineralización de wolframio alojada en rocas calcosilicáticas y en vetas de cuarzo, b) la presencia de anfibolitas de carácter ortoderivado, c) la presencia de exhalitas (turmalinitas), d) elementos comunes (B y W) en ambas tipologías de mineralización (diseminada y vetiforme), e) la importancia del metamorfismo regional, t) el posible vinculo con el plutonismo paleozoico y g) la relación con la faja de cizalla regional Ambul-Mussi. En el desarrollo de la investigación, sobre especímenes elegidos entre las 200 muestras recolectadas junto con datos y observaciones en cuatro campañas, se realizaron: estudio de cortes microscópicos petrográficos y calcográficos; examen de inclusiones fluidas en el mineral de ganga; análisis geoquímicos sobre elementos mayoritarios, minoritarios y trazas; reconocimiento de minerales mediante difracción de rayos X; estudio de minerales mediante microsonda electrónica y determinación de composición isotópica. En la región Santa Rosa (sur del distrito) la mineralización de los depósitos wolframíferos es de scheelita, incluida en bancos definidos y delimitados de rocas calcosilicáticas que yacen íntimamente relacionadas con mármoles y anfibolitas, presentando geometrías lentiformes y concordantes con la esquistosidad y foliación de los gneises regionales. Las dimensiones de estos bancos son casi exiguas para la observación a gran escala, al extremo que en la región casi nunca fueron mapeados y pocas veces mencionados. Presenta muy pequeña representatividad volumétrica pero gran continuidad y dispersión; su presencia se repite con semejantes características en áreas que distan cientos de kilómetros entre si, como los distritos Altautina (35 km al SO de Ambul), Agua de Ramón (70 km al NE de Ambul) y Sierra del Morro Oeste (180 km al SSO de Ambul), entre otros, siempre en ambiente de Sierras Pampeanas Orientales. Las anfibolitas, de acuerdo con su geoquimica, son exponentes de una filiación básica y su mineralogía indica que son producto de metamorfismo regional de presión y temperatura medias, que alcanzara una facies anfibolita baja. Su posición geotectónica se interpreta como perteneciente a un arco de islas y a estas rocas derivadas del volcanismo básico submarino de dicho ambiente. Son de características subalcalinas, tholeiíticas, con alto magnesio. Los gneises destacan su procedencia como sedimentaria, con un protolito de grauvacas-subgrauvacas. Las rocas calcosilicáticas derivaron de sedimentos carbonáticos cálcicos y magnesianos más o menos impuros debido a los aportes silicoclásticos, en algunos casos también muy aluminosos. La mineralización de wolframio está controlada estratigráficamente, encajada en sedimentos neoproterozoicos-cámbricos depositados en épocas de sedimentación carbonática creciente. No se halló ninguna evidencia que permita relacionar la mineralización scheelítica con intrusivos ácidos; tampoco la hay de metasomatismo con aporte wolframífero ni de “caminos” de fluidos mineralizantes considerados necesarios en una eventual hipótesis epigenética. Las turmalinitas relacionadas con la mineralización scheelítica de esta región, considerando los antecedentes que las relacionan con procesos exhalativos en ambiente volcano-sedimentario, fueron estudiadas en detalle mediante geoquimica, microsonda e isotopia de boro para reconocer sus características, deduciendo que la mineralización de scheelita y las turmalinitas en este sector de la Sierra Grande de Córdoba pueden estar vinculadas con fluidos hidrotermales exhalativos submarinos en circulación convectiva a través de metasedimentos. La scheelita alojada en las rocas calcosilicáticas se presenta generalmente como cristales xenomorfos o agregados, diseminados o bien alineados en una o varias capas de algunos milímetros de espesor; aunque en general son milimétricos, pueden alcanzar 2 cm de lado. También se aloja en charnelas de pliegues y en diaclasas, por removilización metamórfica. En forma saltuaria es acompañada por fluorita, pirita y titanita. Las estructuras de mayor importancia pertenecen al campo dúctil, donde más de una fase deformacional afectaron los gneises y la asociación de rocas calcosilicáticas mineralizadas mármol- anfibolitas. Sufrieron plegamiento según dos direcciones principales de esfuerzo (ciclos Pampeano y Famatiniano?), con efectos sobrepuestos de ambas fases de deformación, y un gran evento deformacional en forma de “faja” de orden regional (Faja Ambul-Mussi). La temporalidad de esta mineralización pudo acotarse en la finalización del Precámbrico o en el Cámbrico medio, con referencia a la edad probable de los eventos deformantes de las rocas que alojan la mineralización scheelítica de acuerdo con investigaciones de otros autores. Existe concordancia con algunas de las escasas dataciones de anfibolitas en la Sierra Grande, aunque con reservas ante la ausencia de datación en el área de estudio y la escasa certeza que se le asigna a algunas dataciones por el método Rb/Sr. En la región de Jaime (norte del distrito) hay ausencia de rocas calcosilicáticas y quienes portan mineralización de scheelita y wolframita son mantos y vetas de cuarzo y turmalina, de estructura masiva, con corridas de hasta l km y potencias máximas de 25 cm. Se emplazan concordante a subconcordantemente en gneises protomiloníticos y miloníticos, con rumbo general este-oeste e inclinaciones de 15 a 45° al N y NE en algunos yacimientos y desde 55° S hasta la vertical en otros. Se componen de abundante cuarzo y turmalina y, en forma muy subordinada, moscovita; los minerales primarios que integran la mena son escasos y corresponden a scheelita y wolframita, acompañados por pirita, calcopirita, molibdenita, bornita, enargita (?) y esfalerita. Las especies secundarias son óxidos de cobre y de hierro. Inclusiones fluidas en cuarzo indicaron condiciones termométricas de rangos medios (260 a 300° C) y salinidades relativamente bajas. Estudios de detalle (microsonda, composición isotópica, difracción de rayos X) caracterizaron la wolframita con leve tendencia a ferberita. En el estudio comparativo se evidencia un grado de semejanza entre la turmalina de vetas y mantos y las de turmalinitas asociadas con la mineralización scheelítica estratoligada de la región de Santa Rosa. Valores similares en la isotopía de boro pueden sugerir un origen común para el boro y soportan la idea que W y B sean productos removilizados debido a efectos del metamorfismo regional o tectónicos (cizallamiento regional). Se analizó también la participación de varios elementos de la historia geológica paleozoica inferior-media de la región (intrusiones graníticas del Cámbrico y Ordovícico; granito achaliano; faja de deformación Ambul-Mussi) en la génesis de los depósitos wolframíferos vetiformes y en eventos de removilización. En el estudio se correlacionaron datos con otros distritos wolframíferos de Sierras Pampeanas Orientales (Sierra del Morro en la provincia de San Luis, y Altautina y Agua de Ramón en la provincia de Córdoba) y con varios ejemplos mundiales de mineralización scheelítica estratoligada en rocas metamórficas y wolframífera en vetas y mantos. Para la mineralización scheelítica del distrito se encontró favorecido un modelo yacimientológico-genético de tipo estratoligado, volcanogénico-exhalativo de carácter básico derivado de un volcanismo de arco de probable edad proterozoica superior a cámbrica inferior, alojado singenéticamente en sedimentos carbonáticos impuros, transformados en rocas calcosilicáticas como producto del metamorfismo regional. Para la mineralización vetiforme se hallaron elementos geológicos que apoyan una posible removilización por efectos del metamorfismo regional y/o tectónicos (faja de deformación regional) que afectaron el área, con la intervención de fluidos derivados del plutonismo paleozoico o metamórficos, con enriquecimiento a partir de la mineralización estratoligada.

Abstract:
In the basement of Sierras Pampeanas Orientales, in the central part of Argentina, there are several scheelitic districts in a 300 km-length area that belong to various styles of tungsten mineralization. One of them is the Ambul wolfram district, located in the Córdoba province, which was mined until early 1960 decade. The lithology in the Ambul area consists mainly of gneisses (biotite and migmatitic gneisses in the south and mylonitic and protomylonitic gneisses in the north) with minor amphibolites, calcsilicate rocks and marbles. Gneisses are derived from rocks in the range of sub-graywackes and are mostly composed of quartz, plagioclase and biotite. The amphibolites are derived from tholeiitic basalts; they are composed of Mg-hornblende and plagioclase that ranges from andesine to labradorite. Marbles and calcsilicate rocks are in close association with the orthoamphibolite. Calcsilicate rocks (composed of tremolite-actinolite, epidote, carbonates, quartz, and ocassionally flogopite and gamet) and marbles, are derived from impure and pure carbonates; their protoliths were transformed by the action of regional metamorphism. These rocks occur in lenses concordant with gneisses of regional distribution. A particular type of rock -a tounnalinite- was identified in close relationship with scheelite deposits. The amphibolite facies of regional metamorphism has been reached in the area. The other rocks in the district are pegmatites, aplites, granitoids and lamprophyres (spessartites). Two major deformation events characterize the Sierras Pampeanas orogeny. They are known as the Pampean (Cambrian) and Famatinian (Ordovician) cycles. A regional shear zone probably related to the Famatinian cycle occurs in the Ambul district (called Ambul-Mussi deformation zone). The Ambul district is divided into two areas named Santa Rosa and Jaime, where two types of wolfram mineralization have been recognized. In the Santa Rosa area the tungsten deposits are stratabound scheelite mineralization in calcsilicate rocks associated with marbles and amphibolites, with a defined stratigraphic control. Scheelite is ocassionally accompanied by fluorite, pyrite and titanite. In the Jaime area the tungsten deposits are wolframite and scheelite bearing quartz-tourmaline mantos and veins. The wolfram minerals are accompanied by smaller quantities of pyrite, chalcopyrite, molibdenite, bomite, sphalerite, enargite(?) and copper and iron oxides. Conditions of mineralization are characterized by a temperature interval between 260 and 300° C and relatively low salinities (4,5 - 7,5 % NaCl eq.) Detailed petrographic and chalcographic studies, geochemical analyses including trace element geochemistry, and electro microprobe analyses have been made on main rocks and minerals to support this research. In adition, compositional characteristics of wolframite and fluid inclusions in quartz of wolframite-bearing quartz veins have been studied, and boron isotope compositions have been measured on tourmalinite-hosted and vein-hosted tourmalines. The tungsten deposits in the Ambul district are stratabound scheelite mineralization associated with calcsilicate rocks and orthoamphibolites. Wolfram may be derived from submarine hydrothermal fluids of volcanogenic origin circulating within the former sedimentary sequence. This process may be an integral part of the genesis of the tourmalinite-stratabound scheelite-orthoamphibolite association. Wolframite and scheelite veins are located at the northern boundary of the regional shear zone, while the calcsilicate rocks, marbles and amphibolites bearing scheelite crop out near its southern boundary. It is possible that fluids circulating through the shear zone formed the veins and were responsible for remobilization during a deformation episode of the Famatinian cycle. The fluids could be derived from Cambrian granites or small Ordovician intrusions, possibly in connection with metamorphic processes; however, in the absence of clear age constraints of the deformation episodes, it can not be ruled out the derivation from the granitic batholith of Devonian-Carboniferous age (Achala complex).

"Estudio geológico y petrográfico de la Sierra del Morro, San Luis" (1914). Pastore, Franco. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio geológico-económico del distrito minero Campana Mahuida (Zona Sur)" (1957). García Campra, Horacio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio geoquímico de los fluídos volcánicos e hidrotermales del Complejo Volcánico Copahue-Caviahue y su aplicación para tareas de seguimiento" (2011). Agusto, Mariano Roberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Geoquímica de Fluidos (gases y aguas) es una disciplina de gran relevancia en el estudio de volcanes, debido a que permite determinar las características de los cuerpos magmáticos someros, su relación con el ambiente de generación profundo, e identificar variaciones en el grado de actividad del sistema en general. Cuando un volcán está en reposo, los gases continúan circulando a través del sistema de fracturas, mezclándose con aguas subterráneas y originando acuíferos hidrotermales, fumarolas, etcétera. Las perturbaciones del sistema se manifiestan mediante una serie de eventos y señales que involucran variaciones en la composición química de los fluidos que arriban a superficie (gases y aguas). El volcán Copahue es el foco activo del Complejo Volcánico Copahue-Caviahue (CVCC), cuya dinámica y manifestaciones están controladas por un importante sistema volcánico-magmáticohidrotermal. Dentro de este complejo volcánico se producen también numerosas áreas geotermales con emisiones gaseosas y de aguas termales. El estudio de los fluidos desempeña un papel fundamental para la caracterización y entendimiento de la dinámica del sistema general. El presente trabajo de Tesis Doctoral tiene como objetivo general caracterizar las emisiones fluidas volcánicas e hidrotermales del CVCC, evaluando su aplicación para trabajos de seguimiento. Particularmente se busca determinar el origen y naturaleza de los constituyentes del fluido de las manifestaciones, y los procesos actuantes que controlan su composición, así como identificar los distintos subsistemas que conforman el sistema volcánico-magmático-hidrotermal general, y el tipo de interacción existente entre ellos. Finalmente se busca determinar un patrón de comportamiento del sistema a partir del cual se puedan identificar anomalías asociadas a perturbaciones del mismo, correlacionando señales identificadas mediante otras disciplinas, y de esta forma establecer una línea de base que pueda ser utilizada en futuros trabajos de monitoreo. El trabajo se llevó adelante mediante el muestreo directo de gases y aguas, y la determinación de la composición química (inorgánica y orgánica) e isotópica de los mismos. La evaluación de las composiciones gaseosas indica una importante componente magmática que alimenta las manifestaciones, aunque estas se encuentran controladas por condiciones reductoras de un potente acuífero hidrotermal. Así las especies ácidas más importantes son el CO2 y H2S, donde la relación C/S permitió identificar áreas cercanas al edificio volcánico con mayor acidez. Las emisiones en general se caracterizan por altos valores relativos de CH4, H2 e hidrocarburos alcanos y aromáticos, consistente con el dominio hidrotermal. Se identificó un descenso de la relación N2/He con posterioridad al evento eruptivo del 2000, y junto con las altas relaciones isotópicas 3He/4He (las más altas registradas en los Andes hasta el momento) y los valores de δ13C-CO2, indican una activa conexión entre las cámaras magmáticas andesíticas someras y el ambiente magmático profundo de características mantélicas. Una inyección de fluidos profundos no evolucionados habrían actuado como disparadores del evento eruptivo del año 2000. Con respecto a las manifestaciones en fase líquida, se definieron subsistemas según aguas del Sistema Volcánico-Hidrológico (SVH) con alta acidez y bajos valores en la relación SO4/Cl, Aguas Calentadas por Vapor (ACV) con alta acidez y altos valores SO4/Cl y Aguas de Deshielo (AD) neutras. Las aguas SVH presentan además altos valores relativos de F, señalando que actúan como condensadores directos de gases volcánicos. Los isótopos estables (δ18O y δ2H) indican participación de aguas magmáticas en las SVH. Las ACV se encuentran y enriquecidas en NH4, señalando el fuerte control en la composición por parte del sistema hidrotermal subsuperficial. A partir del seguimiento geoquímico realizado en el SVH se identificó un patrón de comportamiento estacional, sensiblemente afectado durante el periodo de anomalía térmica (AT) registrado con un marcado descenso de la temperatura en el cráter a mediados del año 2004. Este evento fue atribuido a una obturación del sistema de fracturas que alimenta la laguna cratérica por sobresaturación como consecuencia del arribo de fluidos profundos hiperconcentrados. Este evento estuvo asociado a una particular actividad sísmica y procesos de deflación. Se considera que este mecanismo sería el responsable de los eventos freáticos del volcán durante la década del 90. A partir de la información obtenida se desarrolló un modelo geoquímico conceptual del sistema volcánicomagmático- hidrotermal general. Este trabajo sienta las bases para futuros trabajos de monitoreo geoquímico de este sistema, y para la extensión a otros sistemas volcánicos activos cordilleranos.

Abstract:
Geochemistry of fluids (gases and water) is a discipline of great importance in the study of active volcanoes, allowing to determine the characteristics of shallow magmatic bodies, their relationship with the deep environment of magma generation, and to identify changes on the system behavior. In a quiescent volcano, fluid circulation continues through the fracture system, interacting with meteoric waters and generating hydrothermal ground waters, fumaroles, etc. System disturbances are expressed by different kind of signals that involve changes on chemical composition of the fluids reaching at surface. Copahue volcano is the main active center of the Copahue-Caviahue Volcanic Complex (CVCC), whose dynamic and emissions are controlled by the development of an important volcanicmagmatic- hydrothermal system. Within this complex several geothermal areas are recognized, characterized by gas emissions and thermal waters. Fluid researches play a crucial role in characterizing and understanding the dynamic of these systems. This PhD thesis aims to characterize volcanic and hydrothermal fluid emissions of CVCC, and to evaluate the applicability of the acquire data for monitoring purposes. In particular this work tries to determine the origin and nature of fluid components from the discharges, the processes that control their composition, also to recognize the different subsystems in the volcanic-magmatic-hydrothermal general system and to identify the interaction between them. Finally, this work seeks to determine a pattern of behavior of the system in order to detect anomalies associated with system disturbances, validate it by crosschecking with identified signals from other disciplines, and establish a background for future monitoring works. This research was carried out by direct sampling of fluids (gases and waters), and determining the chemical (organic and inorganic) and isotopic composition. The evaluation of gas composition shows a significant magmatic component feeding the emissions, although these conditions are controlled by reduced conditions determined by a thick hydrothermal aquifer. The most important acidic species are CO2 and H2S, the C/S ratio allow us to determine higher acidic areas near the volcano edifice. Generally, the emissions are characterized by high relative values of CH4, H2, alkanes and aromatic hydrocarbons, which is consistent with the hydrothermal domain. A strong decrease in N2/He was detected after the 2000 eruption. This variation together with the high 3He/4He ratio registered at this area (the highest registered on the Andes until present) and δ13C-CO2 values, suggest an active connection between the shallow andesitic magma chamber and the deep magmatic-mantle system. An injection of deep non-evolved magmatic fluids could have triggered the eruptive activity on 2000. According to liquid phase emissions, different subsystems were defined: waters from volcanic-hydrologic system (SVH) characterized by high acidity and low SO4/Cl values; steam heated waters (ACV) with high acidity and high SO4/Cl values; and snow melted waters (AD) with neutral characteristics. SVH waters have high relative values of F, showing that they act as condensers for volcanic gases. Stable isotopes (δ18O and δ2H) point out magmatic waters contribution on SVH. ACD waters are enriched in NH4, indicating a strong control on composition from the subsurface hydrothermal system. The study performed on the SVH system allow us to identified a seasonal behavior significantly affected during the thermal anomalous period (AT), registered by a strong decrease in temperature from the crater lake in the middle of 2004. This event was interpreted to be caused by sealing of the fracture system that feeds the Crater Lake, due to oversaturation as a consequence of the uprising of highly-concentrated (brines) deep fluids. This anomaly was also registered by a particular seismic activity and a deflation period. This mechanism is considered to be responsible for the phreatic events that took place on CVCC during 90’s. A conceptual geochemical model for the general volcanic-magmatic-hydrothermal system was constructed from the information obtained by this research. This work establishes the principles for future geochemical monitoring at Copahue and other active volcanic systems from the Andes.

"Estudio inmunohistológico y electrofisiológico de la motoneurona en un modelo de transmisión pasiva de Esclerosis Lateral Amiotrófica" (1999). Fratantoni, Silvina Andrea. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Esclerosis Lateral Amiotrófica (ELA) es la enfermedad neuromotora humana más común. Los individuos que la padecen muestran disfunción y degeneración progresiva de motoneuronas cerebrales, de la protuberancia y de la médula espinal lo cual se manifiesta clínicamente como una debilidad muscular progresiva, parálisis y muerte dentro de los 3 a 5 años del diagnóstico. No existe una cura para esta enfermedad y su patofisiología permanece sin aclarar. Evidencias clínicas y experimentales apoyan la posibilidad de que un mecanismo autoinmune esté involucrado en la patogénesis de ELA. En trabajos anteriores de nuestro laboratorio se ha demostrado que la aplicación de inmunoglobulina G (IgG) de pacientes con ELA sobre terminales motores inducen una disfunción de la transmisión neuromuscular. Estudios animales han establecido que fisiológicamente la IgG y otras proteínas séricas endógenas son endocitadas por los terminales nerviosos de la placa neuromuscular. Estas proteínas pueden ser localizadas por técnicas inmunocitoquímicas en los somas donde se acumulan luego de ser transportadas por transporte axonal retrógrado. El objetivo de la primera parte de la tesis fue analizar si la captación de IgG es cuantitativamente diferente en el caso que la misma provenga de pacientes con ELA o de IgG controles (pacientes con otras enfermedades neurológicas o personas sanas). Para ello, hemos investigado la presencia de IgG humana de pacientes con ELA e IgG control en los somas de las motoneuronas de ratón. La IgG fue aplicada sobre los terminales motores del músculo elevador de la oreja del ratón, Levator auris longus, el cual está inervado por una rama del nervio facial. La fracción sérica de 7 pacientes con ELA, 6 sujetos controles y 3 pacientes con otras enfermedades neurológicas fue inyectada subcutáneamente dos veces por día durante 5 dias (50 μl cada vez de una solución de IgG 20 mg/ml). Secciones del tallo cerebral conteniendo el núcleo del facial fueron procesadas por inmunocitoquímica para detectar IgG humana y la inmunotinción fue cuantificada con un analizador de imágenes. Para todas las IgG consideradas, la tinción en las motoneuronas del núcleo del facial del lado ipsilateral al sitio de la inyección fue significativamente más intensa. En los animales tratados con IgG de ELA, la marca ipsilateral fue significativamente más alta que la encontrada en el lado ipsilateral de los animales inyectados con IgG control. Nuestros resultados son compatibles con el concepto de que las motoneuronas preferencialmente captan, transportan y/o acumulan IgG de ELA. La captación de anticuerpos patogénicos por terminales motores podrían tener un rol en la patogénesis de la enfermedad de la motoneurona. Para definir el posible rol de las IgG de ELA en la inducción de la disfunción de la transmisión neuromuscular, fue nuestro interés estudiar si la participación de canales de calcio voltaje dependientes (CCVD) puede ser alterada por la transmisión pasiva dichos anticuerpos. En la placa neuromuscular de humanos adultos y también en la placa de ratón, la transmisión sináptica está mediada por la entrada de calcio a través de CCVD del tipo P/Q. Otros canales de calcio, como los de tipo L y N, no están involucrados en la liberación de neurotransmisor. Sin embargo, en nervios en regeneración, la conducción de señales y la transmisión sináptica se hacen altamente sensibles a la nitrendipina, una dihidropiridina bloqueante de los canales de calcio de tipo L, sugiriendo que este canal estaría involucrado en la liberación de neurotransmisor. A fin de estudiar si la aplicación de IgG humana sobre los terminales motores induce cambios en la transmisión neuromuscular, IgG de pacientes con ELA y de sujetos controles fue inyectada subcutáneamente sobre el músculo Levator auris del ratón. La fracción sérica de 8 pacientes con ELA y 6 sujetos controles (3 sujetos sanos y 3 pacientes con otras enfermedades neurológicas) fue inyectada subcutáneamente dos veces por día durante 5 días (50 μl cada vez de una solución de IgG 20 mg/ml). Una semana o un mes después de la ultima inyección, los ratones fueron anestesiados y los músculos removidos en solución Ringer normal. El músculo fue montado en una cámara de registro y el nervio fue estimulado por medio de un electrodo de succión. Los potenciales de placa fueron registrados en por lo menos l5 fibras musculares distintas antes y después de la incubación con Nitrendipina l μM o toxinas polipeptídicas. El contenido cuántico de la respuesta evocada fue evaluado por el método de la varianza. No se observaron cambios en el contenido cuántico de la liberación de neurotransmisor. En los músculos tratados con IgG de ELA o IgG control, la liberación del neurotransmisor permaneció sensible a los bloqueantes de CCVD de tipo P/Q e insensibles al bloqueante de tipo N, como ocurre en los músculos sin tratar. En contraste, las IgG de 5 pacientes distintos de ELA indujeron una reducción significativa en el contenido cuántico de la respuesta evocada luego de la aplicación de Nitrendipina. Esto indicaría que una sensibilidad nueva a este bloqueante de CCVD aparece en los terminales tratados con IgG de pacientes con ELA. Estos resultados sugieren la participación del canal de calcio voltaje dependiente de tipo L en el proceso que llevaría a la muerte neuronal inducida por las inmunoglobulinas de ELA.

Abstract:
Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is the most common human motor neuron disease. Affected individuals show progressive dysfunction and degeneration of brain, brainstem and spinal cord motor neurons, clinically manifested as progressive muscular weakness, paralysis and death within a mean of 3 years. There is no cure available for this disease and its pathophysiology remains unclear. Clinical and experimental evidence support an autoimmune etiopathogenesis for ALS. Previous studies in our laboratory have shown that local application of immunoglobulin G (IgG) of ALS patients onto nerve terminals induces dysfunction in neuromuscular transmission. In animal studies, it has been established that endogenous IgG and other circulating serum proteins can be taken up by motor nerve terminals. They can be detected by immunocitochemistry in the motoneurons somas where they accumulate following retrograde axonal transport. We investigated the presence of human ALS and control IgG in the soma of mice motoneurons. IgG was applied onto motor nerve terminals by injections on the levator auris longus muscle which is innervated by a branch of the facial nerve. The seric IgG fraction of 7 ALS patients, 6 control subjects and 3 patients with other neurological diseases was injected subcutaenously, twice a day for 5 days, on the surface of the left Levator auris longus muscle of adult mice (50 μl of 20 mg/ml IgG in PBS per application). Sections of the brainstem containing the facial nuclei were immunoprocessed to detect human IgG. For all lgG tested, motoneuron labeling was significantly more intense in the facial nucleus ipsilateral to the site of injection. In ALS-IgG-treated animals, ipsilateral labeling was significantly stronger than that found on the ipsilateral side of control IgG-treated animals. Our results are compatible with the concept that motoneurons preferentially take up, transport and/or accumulate ALS-IgG. Uptake of pathogenic antibodies by motoneuron terminals may play a role in the pathogenesis of motoneuron disease. At both the mature mouse and human neuromuscular junction, synaptic transmission is mediated by Ca² entry through voltage-sensitive calcium channels (VSCCs) of the P/Q-type family. Other calcium channels, like the L- and N-type, are not involved in neurotransmitter release. However. in regenerating nerves, signal conduction and synaptic transmission become highly sensitive to Nitrendipine, a dihydropyridine antagonist of L-type calcium channel, suggesting that this type of calcium channel mediate transmitter release. Therefore, to further define the possible role of ALS IgG in the induction of NMJ dysfunction, it was our interest to study if the participation of other types of VSCCs in transmitter release can be induced by passively transferring these antibodies, as it was found in regenerating NMJ. In order to search for early changes induced by the application of human IgG onto the motor nerve terminals, IgG from ALS patients and control subjects was injected on the mice Levator auris muscle. The seric IgG fraction of 8 ALS patients and 6 control subjects (3 healthy subjects and 3 with other neurological diseases) was injected subcutaenously, twice a day for 5 days, on the surface of the left Levator auris longus muscle of adult mice (50 μl of 20 mg/ml IgG in PBS per application). A week or a month after the last injection, mice were anesthetized and the muscle removed in Normal Ringer solution. The muscle was mounted in a recording chamber and the nerve was stimulated by a suction electrode. The end plate potentials were recorded from at least 15 different muscle fibers before and after the incubation with l μM Nitrendipine or polipeptidic toxins. The mean quantal content of the evoked response was evaluated by the coefficient of variation method. No changes in quantal content of transmitter release were observed. In control and ALS IgG treated muscles, neurotransmitter release remained sensitive to P/Q-type and insensitive to N-type VSCC blockers as in untreated muscles. In contrast, IgG from 5 of 8 different ALS patients induced a significant reduction in the quantal content of the evoked response afler the incubation with Nitrendipine, indicating that a novel sensitivity to this calcium channel blocker appears in these motor nerve terminals. These results suggest the involvement of L-type VSCC in the process leading to neuronal death induced by ALS IgG.

"Estudio integrado de la contaminación acuática mediante bioensayos y parámetros fisiológicos y bioquímicos indicadores de estrés ambiental" (2001). de la Torre, Fernando Román. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Este trabajo estuvo orientado al estudio experimental de algunos de los aspectos de la Ecotoxicologia regional relacionados con un cuerpo de agua periurbano (río Reconquista). Con el propósito de evaluar la calidad toxicológica del mismo se diseñaron y aplicaron técnicas de bioensayos agudos y prolongados, de laboratorio y de campo, mediante métodos originales con organismos test nativos (alevinos, juveniles y adultos de Cnesterodon decemmacularus y larvas premetamórficas de Bufo arenarum), y con un teleósteo exótico (juveníles de Cyprinus carpio). Se demostró que las especies nativas son aptas para su utilización en diversos bioensayos de toxicidad brindando resultados confiables; por ello, podrían ser incorporados a la batería de tests de evaluación de calidad ecotoxicológica de cuerpos de agua continentales. En los organismos centinela se evaluaron los efectos tóxicos (letalidad y modificación en los parámetros biomarcadores bioquímicos y fisiológicos e indices somáticos) luego de su exposición a distintos medios (agua del río, agua potable de diferente dureza y soluciones conteniendo cadmio como tóxico de referencia); las respuestas se correlacionaron con los parámetros fisicos y químicos determinados en forma contemporánea. Además se estudió el grado de reversibilidad de los cambios producidos en los biomarcadores; esta información resultó valiosa como complemento para conocer la intensidad del daño sufrido por los peces. Los resultados obtenidos permitieron establecer diferencias de sensibilidad entre las especies y entre los distintos estadios de las especies nativas. Los parámetros bioquímicos y fisiológicos fueron seleccionados como biomarcadores del funcionalismo de los sistemas de osmoregulación, metabolismo energético y nervioso evaluados en preparaciones de branquias, hígado y cerebro; así mismo se estudió el impacto sobre índices somáticos y contenidos tisulares de proteinas. Un considerable número de las técnicas bioquímicas y estadisticas utilizadas fueron desarrolladas especialmente para su aplicación en este estudio. En su conjunto, los resultados obtenidos brindaron elementos objetivos para caracterizar y diferenciar los sitios muestreados del río sobre la base de la calidad ecotoxicológica del agua. Se detemiinó una línea de base para los parámetros estudiados teniendo en cuenta su variabilidad temporal. También se aplicaron técnicas que permitieron abordar el análisis integrado de los resultados con un nivel de mayor complejidad, evaluando con de forma mas precisa las diferencias en la sensibilidad de los teleósteos utilizados; todo lo anterior se pudo expresar mediante un Indice integrado descriptivo de su estado de salud general. Por último cabe señalar que fue la primera vez que se estudió la calidad toxicológica del agua del rio Reconquista en toda su extensión mediante un programa de biomonitoreo prolongado con el enfoque integrador de los parámetros fisicoquimicos con las respuestas biológicas asociadas de los organismos test mediante índices de calidad de agua e índices biológicos.

Abstract:
This research work involved the experimental study of some features of the regional Ecotoxicology related to a periurban water body (Reconquista River). In order to evaluate its toxicological quality we developed and applied techniques for acute and prolonged bioassays at laboratory and in situ, which involved original procedures with native test organisms (larvae, juveniles and adults of Cnesterodon decemmaculatus and premetamorphic larvae of Bufo arenarum) and an exotic teleost (juveniles of Cyprinus carpio). These experiments demonstrated that native species are adequate to be used in several toxicity bioassays because they provided reliable results, in this way, they could be integrated to the battery of tests for assessing the ecotoxicological quality of continental water bodies. We evaluated the toxic effects (such as lethality, modificatim of the physiological and biochemical biomarkers parameters and somatic index) in the sentinel organisms after their exposition to different media (river water, tap water with different hardness and solutions containing cadmiun as a reference toxicant); these responses were correlated with the chemical and physical parameters measured contemporaneously. Besides, we studied the reversibility of the biomarker changes and these results were very important to recognize the degree of damage the fishes supported. With the results obtained here we were able to establish different levels of sensitivity levels between species and between stages of the native species. The biochemical and physiological parameters measured in liver, gills and brain homogenates were selected as biomarkers of the functionalism of the osmoregulatory, energetic and nervous systems; besides, the impact on somatic index and protein content were studied. Most of the used biochemical and statistical techniques were particularly developed for this work. The results obtained here provided unbiased elements to characterise and discriminate the sampling sites based on in the toxicological river water quality. A baseline for the studied parameters was determined considering its temporary variability. The used techniques also allowed us to carry out the integrated analysis of the results with a higher level of complexity, assessing with more precision the teleost species sensitivity differences; the aforementioned was expressed by an integrated index descriptive of their general status of health. Finally, this is the first time that the toxicological quality of Reconquista River water was studied in all its length following a prolonged biomonitoring program with an integrated view of the physicochemical parameters and the associated biological responses of the test organisms by both water quality and biological indexes.

"Estudio integrativo de vías de señalización de MAP quinasas de Saccharomyces cerevisiae" (2012-07-27). Baltanás, Rodrigo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo principal de esta tesis fue estudiar la interacción entre las vías de MAP quinasas de Saccharomyces cerevisiae. Estas vías están representadas en humanos, donde su mal funcionamiento puede conducir a patologías tales como cáncer o problemas en el desarrollo. La complejidad de los circuitos de señalización de MAP quinasas en células de mamíferos dificulta la comprensión de como estas integran las señales que los activan. Para resolver este problema, una estrategia es analizar sistemas biológicos más simples que comparten propiedades con los más complejos. En este sentido, nos propusimos caracterizar exhaustivamente sistemas de señalización de MAP quinasas en un sistema biológico simple, la levadura S. cerevisiae. En esta tesis decidimos determinar los puntos de flujo de información entre las vías de "Respuesta a Shock Hiperosmótico" (HOG) y de "Respuesta a Feromona" (PR) de levaduras, ya que estas vías comparten componentes en sus vías de señalización y existe controversia sobre sus interacciones. A su vez, estudiamos estas vías en células individuales, estimulando las mismas controlando la dosis de los estímulos utilizados y en una variada serie de condiciones experimentales. Finalmente, medimos las respuestas de estas vías de un modo cuantitativo, estudiando su dinámica temporal y analizando el mayor número de respuestas posible en cada célula. Resumiendo los resultados obtenidos, podemos decir, que la vía de HOG no presenta osmoadaptación perfecta como se había afirmado previamente y permanece activa en estado estacionario. Su activación es mayor cuanto mayor es la osmolaridad externa, y también depende del gradiente químico de glicerol. Además, vemos una alta variabilidad de la respuesta de HOG en células individuales. A nivel de las interacciones entre las vías de MAP quinasas, determinamos que la vía PR es capaz de activar a la vía HOG en células adaptadas a alta osmolaridad. Esta compleja activación requiere de la MAPK de la vía de integridad de la pared celular (CWI) Slt2/Mpk1 y del polarisoma. La activación de HOG es pulsátil y presenta una alta variabilidad en células individuales. Los picos de actividad de HOG coinciden con eventos morfogenéticos inducidos por PR en los cuales se activa Slt2/Mpk1. La vía PR induce una salida de glicerol, que estaría mediada por Slt2/Mpk1, y este sería el mecanismo que llevaría a la activación de la vía HOG. La inducción de HOG también puede lograrse a través de la activación de Slt2/Mpk1 mediante shock térmico. Ambos tipos de activaciones (por feromona o alta temperatura) son proporcionales a la osmolaridad externa y dependen del gradiente químico de glicerol. Una consecuencia fisiológica de esta activación de HOG promovida por la vía PR es que las células en estas condiciones presentan una mejor capacidad de osmoadaptación. Finalmente, podemos agregar que los shocks hiperosmóticos inhiben a la vía PR durante la etapa de respuesta aguda, pero no hemos establecido aún los actores moleculares que median esta inhibición. Sin embargo, podemos descartar algunos componentes de la vía de HOG como Sho1, Ssk1 y Hog1. Para terminar, la alta osmolaridad, a largo plazo, en células ya adaptadas, cambia la dinámica de la respuesta de la vía PR reduciendo su sensibilidad a α factor. Esta reducción es proporcional a la osmolaridad externa. Esperamos que los resultados encontrados en este sistema biológico sean de utilidad, para pensar de una manera más integrativa, como se comporta la dinámica de la respuesta en un dado sistema frente a múltiples señales externas, de acuerdo a como el mismo las integra globalmente.

Abstract:
The main objective of this thesis was to study the interaction between MAPK signaling pathways in Saccharomyces cerevisiae. These pathways are represented in humans, were the malfunction of them can lead to pathologies such as cancer or developmental problems. The complexity of MAPK signaling circuits in mammalian cells difficult the understanding of how they integrate the signals activating them. As a means to solve this problem, one strategy is to analyze simpler biological systems that share properties with the more complex ones. In these sense, we ought to characterize thoroughly MAPK signaling pathways in a simple biological system, the yeast S. cerevisiae. In this thesis we decided to determine the points of information flow between the yeast "High Osmolarity" (HOG) and the "Pheromone Response" (PR) pathways, because they share components in their signaling cascades and there is controversy in how they interact. In addition to these, we studied these pathways in individual cells, stimulating them by controlling the stimulus doses and under a several experimental conditions. Finally, we measured the output of these pathways in a quantitative way, studying their temporal dynamics and analyzing the most number of possible readouts. Summing up the results obtained, we can say that, the HOG pathway does not present perfect adaptation as it was previously stated and it remains active in steady state. Its activation is higher the higher the external osmolarity and it also depends on the chemical gradient of glycerol. Besides, we see high variability in the HOG output of individual cells. At the level of interactions between the MAPK pathways, we determined that the PR pathway can activate the HOG pathway in cells adapted to high osmolarity. This complex activation requires the Cell Wall Integrity (CWI) MAPK Slt2/Mpk1 and the polarisome. This HOG activation occurs in pulses and presents high variability in single cells. The peaks of HOG activity coincide with PR induced morphogenetical events where Slt2/Mpk1 is activated. The PR pathway induces a glycerol efflux, which would be controlled by Slt2/Mpk1, and that would be the mechanism leading to HOG pathway activation. HOG induction can also be achieved through Slt2/Mpk1 heat shock activation. Both kinds of activations (by pheromone or high temperature) are proportional to the external osmolarity and depend on the glycerol chemical gradient. One physiological consequence of these PR promoted HOG activation is that the cells present a better osmoadaptation capacity in these conditions. Finally, we can add that hyperosmotic shocks inhibit PR pathway during the acute hyperosmotic phase, but we have not established yet the molecular actors that mediate this inhibition. However, we can rule out some of HOG pathway components like, Sho1, Ssk1 and Hog1. To finish, high osmolarity, at longer times in cells already adapted, changes the dynamics of PR response reducing its sensitivity to α factor. This reduction is proportional to the external osmolarity. We hope the results found in this biological system are helpful, to think in a more integrative way, how the output dynamics of a system behaves, facing multiple external signals, depending on how it integrates them globally.

"Estudio melitopalinológico de los recursos alimentarios y de la producción de un colmenar en la región del Delta del Paraná (Argentina)" (1998). Basilio, Alicia Mabel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Este trabajo estudia el contenido polínico de los recursos de la colmena (cargas corbiculares y miel inmadura) de un colmenar y de la producción de miel del mismo colmenar en la región del Delta del Río Paraná. El colmenar produce dos cosechas de miel anuales. La variabilidad intra-anual esta relacionada con la sucesión fenológica de las floraciones, y la inter-anual con el clima. El contenido de la miel inmadura refleja la floración de la vegetación que rodea las colmenas. La miel madura muestra un enriquecimiento en el polen de las floraciones tardías. El origen floral de las cargas corbiculares varió a Io largo de la temporada, en cantidad, diversidad y calidad de la cosecha. Un incremento de la densidad de 0,5 a 12,5 colmenas por hectarea no produjo diferencias ni en el contenido polínico de las cargas ni en el de la miel con respecto al histórico del colmenar. El trabajo permitió establecer el momento de la temporada en que los apicultores podrian trabajar en la producción de mieles monoflorales. La variabilidad de las floraciones de una temporada a otra hace difícilpredecir la magnitud de estas cosechas.

Abstract:
This work studied pollen content in the food (pollen loads and immature honey -or nectar inside hive-) of an apiary and the honey production from the same apiary, in the Delta region of the Parana River, along six seasons. The apiary produced two honey harvest a year. Intra-anual variability was found to be related to seasonal blossoms replacement and inter-anual variability to climatic effects. The origin of corbicular pollen loads varied throughout season in volume, diversity and quality. Pollen content of immature honey followed the floral phenology of the vegetation surrounding hive, while mature honey showed an increase in pollen from late florations. When compared with the apiary record of pollen contents, an increase in hive density from 0,5 to 12,5 hives /hectarea did not bring about significant differences in the pollen content of loads or in honey. As a practical application of this research, we established the time at season when beekeepers could work on monofloral honeys production. Inter-anual variability in blossoms makes it difficult to predict the magnitude of the annual harvest for every kind of monofloral honey type.

"Estudio microtermométrico de inclusiones fluídas en manifestaciones nucleares del Batolito de Achala, Pcia. de Córdoba : Caracterización fisicoquímica de los fluídos responsables de la episienitización" (1993). Montenegro, Teresita Francisca. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio molecular de la distribución de alelos HLA-DR-DQ en poblaciones normales argentinas y en pacientes con hepatitis crónica autoinmune" (1998). Pando, Marcelo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio molecular y funcional de la patología cardíaca inducida por inmunización con proteínas ribosomales P de Trypanosoma cruzi" (2000). López Bergami, Pablo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El estudio de la respuesta inmune contra las proteínas ribosomales P de Trypanosoma cruzi en el suero de pacientes chagásioos crónicos sugirió que esta respuesta inmune podria jugar un importante rolen el desarrollo de la cardiomiopatía chagásica. En función de esos resultados se encaró una tarea de clonado de las proteinas ribosomales P213 y P0 de T. cruzi en vectores procariontes con el objeto de expresar y purificar abundantes cantidades de proteínas recombinantes. Estas proteínas se utilizaron para desarrollar modelos de inmunización en ratones. En primer término se determinó la especificidad de la respuesta inducida mediante estos modelos. Luego se estudió la respuesta contra los principales epítopes de éstas proteínas localizados en el extremo C-terminal (péptido R13 en TcP2β y P015 en TcP0). Se determinó que la respuesta contra estos epitopes fue similar a la observada en sueros humanos. Paralelamente, se realizaron estudios tendientes a determinar alteraciones en la función cardíaca de los animales inmunizados. De esta forma, mediante la realización de electrocardiogramas, se estableció el desarrollo de alteraciones en la generación del impulso nervioso (arritmias), alteraciones en la conducción intraventricular y en la repolarización. La participación de los anticuerpos anti-P en la generación de alteraciones cardíacas también fue confirmada en ensayos realizados sobre corazones aislados de conejo.

Abstract:
The study of the immune response against ribosomal P proteins of Trypanosoma cruzi in chronic Chagas disease patient's sera suggested that this immune response might play an important role in the development of Chagasic Cardiomiopathy. The molecular cloning of the ribosomal P26 and P0 proteins allowed us to express and purify high amounts of recombinant proteins. These proteins were used to develop animal models of immunization. First, we assessed the specificity of the induced response and determining the induction of high levels of anti-P antibodies. Then, we determined that the response against the C-terminal epitopes of these proteins (peptide R13 in Tc2β Band peptide P015 in TcP0) was similar to those observed in human sera. Immunized animals showed a modified electrocardiographic pattern compared to that in control mice. The participation of anti-P antibodies in the induction of cardiac disturbances was also assessed in a whole rabbit heart isolated system.

"Estudio morfológico y sistemático de los Peneidos argentinos, precedido de algunas consideraciones conexas acerca de los Crustáceos y su clasificación" (1939). Fesquet, Alberto E. J.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio morfológico y taxonómico del género Cassia (Leguminosae) en la Argentina : Sección Chamaesenna, serie Aphyllae y serie Pachycarpae" (1977). Bravo, Lilia Dora. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El género Cassia L. posee representantes en casi todos los continentes con clima tropical, subtropical y templado. El número de especies destriptas y consideradas válidas hasta el presente es de aproximadamente 600, es el más grande género de las Leguminosas Caesalpinóideas y se encuentra entre los 25 géneros con mayor número de especies de las Dicotilédoneas. En nuestro país está representado por alrededor de 35 especies y numerosas variedades distribuídas en todas las regiones subtropicales y templadas desde los confines del norte hasta la patagonia septentrional. En este trabajo se han estudiado en detalle las especies argentinas de la Serie Aphyllae y de la Serie Pachycarpae de la Sección Chamaesenna, del subgénero Senna. El motivo por el cual se seleccionaron estos grupos, es el hecho de que las dos Series y en especial la Serie Aphyllae poseen especies con una amplia distribución pero en muchos casos restringida a la república Argentina. Sobre la Serie Aphyllae existe un trabajo preliminar del Ing. Agr. Arturo Burkart (1946), que contiene fundamentalmente una clave para diferenciar las especies y variedades. Luego en 1952 en la segunda edición de Las Leguminosas Argentinas, silvestres y cultivadas, este mismo autor publica una clave para diferenciar todas las especies del género presentes en nuestro país. El grupo de las especies áfilas con tan amplia distribución en todas las regiones áridas y semiáridas se encontraba aún en estado muy confuso y dado la escasez de caracteres morfológicos diagnósticos requería un exhaustivo estudio de todo el material coleccionado y en especial estudios en los ambientes naturales para poder dilucidar problemas indisolubles con estudios de laboratorio. Fueron estos los motivos que impulsaron al Ing. Agr. Arturo Burkart a sugerirme el estudio de estos grupos como tema de Tesis para la Carrera de Doctorado en Ciencias Biológicas. Este trabajo se realizó durante los años 1972-1977, período durante el cual se hicieron numerosos viajes por las regiones donde existían problemas de índole taxonómica difíciles de resolver; se realizaron colecciones que permitieron tras el estudio de campo continuar con el análisis de los materiales en el laboratorio y así resolver los problemas existentes.

"Estudio neurofarmacológico acerca de la función del ácido gamma-aminobutírico en el ganglio simpático cervical superior" (1995). González Burgos, Guillermo Ricardo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio palinológico de la Formación Cullen (Terciario superior), Tierra del Fuego, Argentina" (1999). Zamaloa, María del Carmen. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo de este trabajo es analizar el contenido palinológico de muestras pertenecientes a la Formación Cullen, aflorante en la costa noreste de la Isla Grande de Tierra del Fuego, caracterizar la paleovegetación y establecer correlaciones con asociaciones palinológicas de otras cuencas australes, en un contexto espacio-temporal y ajustado a un estrecho control estratigráfico. Se levantaron tres perfiles, se procesaron 126 muestras de las cuales 61 resultaron palinológicamente fértiles. Se describieron 64 especies, de las cuales 21 corresponden a esporas de algas, briofitas y pteridófitas; 8 a polen de coníferas y 35 a polen de angiospermas. De ellas, 3 son nuevos géneros y 6, nuevas especies. El tratamiento estadístico permitió realizar diagramas polinicos y análisis de agrupamiento. Su elaboración conjunta con datos sedimentológicos y tafonómicos, permitió reconstruir la historia de la vegetación y el paleoambiente en el lapso de depositación y proponer una zonación palinológica. Los resultados obtenidos indican la presencia de una flora diversa que combina elementos longevos gondwánicos con otros nuevos (algunos hoy ausentes en Patagonia). La vegetación circundante a la cuenca sedimentaria consistía en un bosque multiestratificado de Nothofagus y coníferas, un sotobosque bien desarrollado y comunidades locales especializadas de ambientes palustres y acuáticos, desarrollándose próximas a un curso fluvial meandriforme en un clima templado cálido y húmedo. Los términos inferiores del afloramiento muestran influencia marina. Las evidencias bio y cronoestratigráficas sugieren una edad entre el Oligoceno tardío y Mioceno medio para la Formación Cullen.

Abstract:
The purpose of this dissertation is to study the palynological content, paleoenvironment and correlations of the Cullen Formation. The latter is exposed in the northeast cliffs of Isla Grande de Tierra del Fuego (southernmost Patagonia). Three sections were studied, and 126 samples processed. Among them, 61 had palynomorphs, 64 species were described: 21 represent algae, bryophyte and pteridophyte spores; 8 gymnosperm pollen grains, and 35 angiosperm pollen grains. Three of them, are new genera and 6 are new species. Numerical methods with the Tilia Program were applied resulting in pollen diagrams and cluster analysis. The overall interpretation with sedimentary and taphonomic data allowed the reconstruction of past vegetational history and paleoenvironment at the time of deposition. A spore-pollen zonation was proposed. The diverse paleoflora included ancient gondwanic elements and new ones (some of which are not actually present in the region). The spore-pollen assemblages indicate a regional multistratified forest dominated by Nothofagus species and gymnosperms of podocarpaceous affinities, a well-developed herbaceous understorey and local occurrence of specialised freshwater, semi-aquatic and lake coast communities, growing under moist and warm temperate conditions. Sediments of the Cullen Formation accumulated in a predominantly terrestrial environment during phases of fluvial and lacustrine deposition. The marine influence is present in the lower levels only. Bio and chronostratigraphic evidences support a Late Oligocene to Middle Miocene age for the Cullen Formation.

"Estudio petrográfico geológico de la región de Alta Gracia (Córdoba)" (1942). Kull, Verena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio petrográfico y bosquejo geológico de la región de Chaján, Sierra de Córdoba" (1938). Lazzari de Pandolfi, Carolina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio poliedral y algoritmo branch-and-cut para el problema de coloreo equitativo en grafos" (2012). Severin, Daniel E.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los problemas de coloreo de grafos constituyen una familia de problemas de una gran relevancia tanto teórica como práctica. Todos ellos son variaciones del problema del coloreo clásico, cuyo estudio se inició en el Siglo XIX. El origen de estas variaciones radica en las restricciones adicionales que imponen las aplicaciones a problemas de la vida real. En esta tesis abordamos en particular el Problema de Coloreo Equitativo en Grafos. Como muchos problemas de Optimización Combinatoria, el Problema de Coloreo Equitativo es un problema NP-difícil. Los algoritmos Branch-and-Cut basados en el estudio poliedral de una formulación del problema como programa lineal entero, son la herramienta más efectiva que se conoce para la resolución exacta de problemas NP-difíciles. En esta tesis se propone un modelo de programación lineal entera para el Problema del Coloreo Equitativo y se estudia el poliedro asociado. Se derivan varias familias de desigualdades validas y se prueba que siempre definen caras de alta dimensión, lo cual es un buen indicador para la utilización de las mismas como planos de corte. Finalmente, se desarrolla e implementa un algoritmo Branch-and-Cut para el Problema de Coloreo Equitativo que resulta altamente competitivo con los algoritmos exactos conocidos.

Abstract:
The graph coloring problems constitute a family of problems of great theoretical and practical relevance. All of them are variations of the classical coloring problem, whose study began in the nineteenth century. The origin of these variations arises from the additional restrictions imposed by applications to real life problems. In particular, this thesis deals with the Equitable Graph Coloring Problem. Like many combinatorial optimization problems, the Equitable Coloring Problem is NP-hard. It is known that Branch-and-Cut algorithms based on the polyhedral study of a formulation of the problem as an integer linear program, are the most effective tool for solving NP-hard problems. This thesis proposes a linear integer programming model for the Equitable Coloring Problem and studies the polytope associated to that model. Several families of valid inequalities that define faces of high dimension are derived in order to use them later as cutting planes. Finally, a Branch-and-Cut algorithm for the Equitable Coloring Problem that is highly competitive against known exact algorithms is developed.

"Estudio por cromatografía gaseosa de los aceites esenciales de las diversas especies y variedades de mentas nativas y cultivadas en la República Argentina" (1961). Manfredini, Teodoro Antonio A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo se estudió por la técnica de Cromatografía en Fase Gaseosa la composición de los aceites esenciales de varias especies y variedades del género Mentha nativas y cultivadas en la República Argentina. Se obtuvo un resultado que revela la composicián típica de la Menta Piperita (de Mendoza y San Luis), Menta Arvensis (Mendoza y Misiones), Menta Viridis (Mendoza), Menta Pulegium y Peperina. La misma técnica se empleó para el reconocimiento de mezclas y adulteraciones de dichas mentas eligiendo la proporción de 80% de M.Piperita (o Arvensis) y 20% de las restantes especies, de menor valor comercial. De esta forna fue posible conocer la adulteración sobre la esencia pura y tener una idea exacta del tipo de aceite usado en 1a adulteración. Se aplicó también la Cromatografía en Fase Gaseosa al estudio del aceite esencial de Menta Arvensis desmentolizado industrialmente pudiendose determinar la variación en el contenido de mentol. Otra operación común en este tipo de esencias, la Rectificación, se pone en evidencia al comparar los cromatogramas respectivos del aceite bruto y del rectificado. Se confirmó además la utilidad de la investigación por espectrofotometría en el ultravioleta en lo referente a su aplicación para determinar con claridad las mezclas de mantas debido a la absorción característica de algunos componentes particulares de cada especie o variedad (Carvona, Pulegona, etc.) Los cromatogramas se registraron con un aparato Perkin Elmer modelo 154 C para el cual se seleccionaron condiciones de trabajo adecuadas al tipo de problema a resolver. Se ensayaron especialmente dos columnas: "R" de polipropilen glicol UCON 550 y "SÁIB", diacetato exaisobutirato de sacarosa, ambasde 2 mts. para las cuales se eligieron: temperatura de trabajo, sensibilidad, flujo de gas, etc. Con dichos materiales se obtuvieron gráficos demostrativos, especialmente con la columna SAIB. Las experiencias se realizaron sobre muestras representativas de nuestra produccidn nacional obtenidas la mayoria de ellas directamente por el autor en las zonas de cultivo y destilación y proporcionadas las restantes por productores de distintas zonas del paíse El orden que se ha seguido para realizar las experiencias es el siguiente: a) determinación de las características fisicas y químicas de las muestras por el análisis corriente. b) Ajuste del Cromatógrafo, ensayo y selección de rellenos y soportes y condiciones de temperatura, flujo, etc. c) Cromatografía en Fase Gaseosa de las muestras obtenidas utilizando para cada muestra las dos columnas: l) Menta Piperita de Mendoza (Rectificada y Sin Rect.) 2) " " " San Luis 3) " Arvensis de Mendoza 4) " " " Misiones 5) " Viridis de Mendoza 6) " Pulegium 7) Peperina (Byetrepogon mollis) d) Aplicacion de la espectrofometría en el ultavioleta para la investigación de mezclas de dichas esencias, especialmente M.Piperita y M.Arvensis con las restantes. e) Cromatografía en Fase Gaseosa aplicada a la resolución de mezclas de aceites esenciales de menta. Se ensayaron las siguientes mezclas: l) Menta Piperita con M.Viridis 2) " " " L.Pulegium 3) " " " Peperina 4) " Arwensis " Peperina f) Estudio del aceite esencial de Menta Arvensis desmentolizado industrialmente. Como resultado de todos estos ensayos se observa la utilidad notable de la técnica de Cromatografía en Fase Gaseosa y de la Espectrofotometría en el Ultravioleta como técnicas modernas para estudiar la composición de los Aceites Esenciales y sus mezclas o adulteraciones. Los resultados que se obtuvieron en forma de cromatogramas para las esencias puras pueden ser usados como verdaderas "tarjetas de identificación" de dichas esencias, que a su vez representan casi totalmente la produccion nacional de menta.

"Estudio por dinámica molecular de la difusión de Si y depósito de C sobre la superficie (001) de Si" (2001). Fu, Chu Chun. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La superlicie (001) de silicio ha sido objeto de numerosos estudios debido a sus interesantes propiedades, que aportan al avance de la física de semiconductores y a sus aplicaciones en dispositivos microelectrónicos. Si(001) es además un buen candidato para usar como sustrato del crecimiento de capas delgadas de carbono amorfo, material que tiene una dureza comparable a la del diamante. En esta tesis se estudiaron tres problemas vinculados con esta superficie: 1. El movimiento de balanceo (flipping) de los dímeros de Si(001) y su correlación dinámica tanto en la superficie perfecta como en la presencia de defectos. El período característico del balanceo y la correlación del movimiento de dímeros vecinos fueron investigados usando el método de simulación por dinámica molecular tight-binding. Los resultados fueron corroborados en parte por cálculos de primeros principios y también comparados con los obtenidos por un modelo de Ising bidimensional. Son importantes para la interpretación de imágenes obtenidas por STM a diferentes temperaturas. 2. La estabilidad y difusión de dímeros de Si adsorbidos sobre la superficie Si(001) a temperatura alta. Se observaron diferentes caminos y mecanismos de difusión en la simulación por dinámica molecular. Los resultados se compararon con los de cálculos a 0K y con los datos experimentales obtenidos por STM disponibles en la literatura. También se estimaron las energías de activación de algunos de estos procesos. 3. El depósito de carbono sobre Si(00l), tratando de simular el experirmmto realizado en Tandar. Con este propósito se propuso un modelo tight-binding para sistemas mixtos de C y Si, a partir de los modelos conocidos para los materiales puros. Se observó la formación de una capa de SiC amorfo que sirve como interfaz para crecer sobre ella el carbono amorfo duro, y se estudiaron sus propiedades estructurales y electrónicas. En particular, se lo caracterizó por su densidad, sus funciones de distribución radiales y angulares, su orden químico y su densidad de estados electrónicos.

Abstract:
The surface Si(001) has been studied in a large number of previous papers, due to its interesting physical properties. These studies have improved the knowledge of semiconductor physics and led to its application in micro-electronic devices. Si(001) is also an excellent substrate for the growth of amorphous carbon thin films, which have a hardness similar to that of diamond. In this thesis three problems related to Si(001) have been studied: I. The flipping of the surface dimers on Si(001) and its dynamical correlation, in the case of perfect and defective surfaces. The characteristic time between flips and the probability of correlated flips, when two nearest neighbouring dimers exchange their buckling positions, hare been studied using tight binding molecular dynamics simulations. The results have been compared with first principles calculations and with Monte Carlo simulations using a two-dimensional Ising model. Thev are important in order to understand STM images and their temperature dependence. 2. The stabilitv and diffusion of Si adsorbed dimers on Si(001) at high temperature. Several mechanisms and diffusion pathways have been observed by means of molecular dynamics simulations. The results have been compared with those from first principles calculations, at 0K, and also with available STM experimental ones. The dynamical activation energies along some pathways have also been estimated. 3. The deposit of energetic C atoms over Si(001), attempting to simulate the experimental procedure used in Tandar Laboratory. For this purpose we have proposed a tight binding model for systems containing both Si and C atoms starting from the available models for the pure materials. The formation of an amorphous SiC (a-SiC) thin film has been observed. It may be the interface over which the amorphous carbon thin film would grow. Structural and electronic properties of the a-SiC film so obtained have been investigated, in particular the density, the radial and angular distribution functions, the chemical order and the local density of electronic states.

"Estudio práctico de los métodos usuales para el dosaje cuantitativo del anhídrido túngstico en los minerales de yacimientos argentinos" (1942). Schürmann de Müller, Edith M.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio químico de algunas muestras de minerales argentinos de wolframio" (1943). Llambías, Horacio . Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio químico de venenos de sapos sudamericanos" (1941). Duprat, Enrique. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio químico y funcional de pectinas y glicanos entrecruzantes de paredes celulares de prunoideas" (2013). Basanta, María Florencia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se han realizado estudios tanto de naturaleza química como funcional de pectinas y glicanos entrecruzantes de las paredes celulares de prunoideas, apuntando fundamentalmente a estudiar como ellos cambian según la variedad y grado de madurez. En primer término se estudió el método extractivo de las pectinas débilmente unidas de ciruelas japonesas (Prunus salicina variedad ‘Roysum’), analizando las variables tiempotemperatura. Se pudo determinar que el procedimiento extractivo habitual que demora 24 h a temperatura ambiente puede acortarse a 2 h sin afectar los rendimientos ni las características del producto. Posteriormente se realizó el fraccionamiento completo de la pared celular de cinco variedades de cerezas (Prunus avium L.) en el primer y último estadío de madurez. Se pudieron correlacionar la composición y características macromoleculares de las pectinas y glicanos entrecruzantes con el grado de madurez del fruto y con la diferencia de firmeza entre las variedades. No se encontró un patrón relacionado con la susceptibilidad al cracking. A partir de dos variedades de cereza de firmeza contrastante, se evaluó el desempeño reológico de las fracciones de polisacáridos solubles en H2O, CDTA y Na2CO3 así como las propiedades de hidratación de los residuos insolubles parciales y final, identificándose patrones de composición y características macromoleculares relacionadas con la firmeza, maduración y funcionalidad biológica. Como se determinó que las paredes celulares de prunoideas son fuente de biopolímeros útiles y que el aprovechamiento de los subproductos agrícolas permite agregar valor a las materias primas es que, finalmente, se aislaron fibras a partir de residuos de la cosecha de tres variedades de cerezas dulces, determinándose su potencial utilidad como ingrediente funcional para la formulación de alimentos.

Abstract:
Cell wall pectins and crosslinking glycans of the Prunoideae were analyzed both from their chemical and functional points of view aiming mainly at understanding how they are modified according to ripeness and variety. First, the time and temperature variables on the extractive method of the weakly bonded pectins was studied using Japanese plums (Prunus salicina). It has been determined that the usual 24 h procedure at room temperature can be reduced to 2 h with no major effect on the yield or product characteristics. The next analysis was a complete fractionation of the cell wall of five different varieties of cherries (Prunus avium L.) at two different developmental stages, i.e. unripe and ripe. A correlation of the composition and the macromolecular characteristics of the pectins and matrix glycans with the stage of ripeness and the difference in firmness between varieties was encountered. However, no pattern was found regarding the cracking susceptibility. Starting from two f varieties with contrasting firmness, the rheological performance of the polysaccharides extracted by H2O, CDTA and Na2CO3 was evaluated as well as the hydration properties of the insoluble residues isolated at some steps of the sequential extraction, thus allowing to identify patterns relating the composition and the macromolecular characteristics with the firmness, ontogeny and biological functionality. As the cell walls of the Prunoideae are a useful source of biopolymers, and the use of agricultural subproducts may add value to the raw material, fibers of the residue of three sweet cherries varieties were isolated, showing their potential usefulness as functional ingredients for food formulations.

"Estudio sistemático de algunas bacterias del azufre" (1942). Spaini, Lydia Silvia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El presente trabajo tuvo como finalidad la de describir y, en lo posible, clasificar, las diferentes bacterias del azufre que se hallaran en muestras de aguas estancadas y tierras de jardín de los alrededores de Buenos Aires. Las bacterias del azufre son organismos autótrofos, capaces de utilizar el anhídrido carbónico como fuente de carbono para elaborar la sustancia orgánica de su protoplasma. Entre ellas existen formas incoloras, las que, mediante la oxidación del azufre o sus compuestos obtienen la energía necesaria para llevar a cabo la síntesis de la sustancia orgánica: efectúan quimiosíntesis. Otras, poseedores de pigmentos, son además fotosintéticas, es decir que la energía radiante es un factor esencial para su metabolismo. Estos organismos despertaron siempre gran interés, existiendo a su respecto diversos trabajos, entre los cuales, los que aclaran mejor su comportamiento fisiológico son los de Winogradsky en lo que se refiere a las bacterias incoloras con azufre en su interior, los de Van Niel, sobre las bacterias rojas y verdes y los de Waksman y Starkey sobre las bacterias incoloras que oxidan azufre y tiosulfato depositando azufre en el exterior. En este trabajo se aislaron, de aguas, 6 cepas de Th. thioparus y 1 de Th. thiooxidans. Las bacterias de este grupo fueron enriquecidas en medios con tiosulfato o con azufre y aisladas en medios sólidos con tiosulfato. Se obtuvieron buenos cultivos de enriquecimiento de las bacterias filamentosas Beggiatoa y Thiothrix, utilizando el método de Winogradsky, basado en el uso de heno y sulfato de calcio. Se aislo una cepa de Beggiatoa alba, mediante el método e Cataldi, fundado en la propiedad característica de dicho germen de poseer un moviniento deslizante y en su capacidad de desarrollar en medios con sustancias orgánicas. Se obtuvieron cultivos de enriquecimiento de Thiothrix, probablemente Ihiothrix tenuis, pero no fue posible conseguir su aislamiento. No fue tampoco posible enriquecer en forma apreciable las bacterias pertenecientes a la familia Achromatiaceae. Mediante las excelentes directivas encontradas en el trabajo de Van Niel, fue posible realizar el estudio de algunos representantes de las bacterias rojas y verdes. Los cultivos de enriquecimiento de las mismas se obtuvieron con el método de Winogradsky, lográndose la anaerobiosis por el método de Beijerinck. También se usaron para el enriquecimiento el medio de Van Niel y el de Lehner. El aislamiento se efectuó a partir de las colonias obtenidas en tubos de agar, en el medio de Van Niel. La fisiología de estos gérmenes permitió comprobar que, además de desarrollar en medios inorgánicos con sulfuro de sodio, son capaces de utilizar compuestos orgánicos para su crecimiento. Pero si la quimiosíntesis parece no tener una gran importancia, la fotosíntesis tiene a su cargo el papel principal en el metabolismo de estas bacterias, puesto que ellas no han podido desarrollar en la oscuridad en ninguno de los medios utilizados. Las tres cepas verdes se identificaron como Chlorobium limicola Nadson. En cuanto a la identificación de las cepas rojas, resultó muy difícil, aunque las mismas pueden estar comprendidas en los tres tipos morfológicos de Van Niel: Chromatium, Ihiocystis y Pseudomonas. Se aisló además una bacteria roja en forma de espirilo. En cuanto a la clasificación de las formas con pigmento sintético no ha podido resolverse exactamente debido a que los sistemas existentes han sido hechos, en su casi totalidad, basados en observaciones efectuadas con cultivos impuros. En posesión ahora del método simple de Van Niel para los aislamientos y aumentando suficientemente el númer ode cepas en cultivo puro, podrá procederse a su ordenación de acuerdo con una nueva sistemática más racional.

"Estudio sistemático de algunas bacterias esporuladas aerobias" (1934). De Soriano, Angela Misa. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio sistemático de las especies sudamericanas del género Ganoderma (Aphyllophorales) : Un enfoque multidisciplinario" (1997). Gottlieb, Alexandra Marina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo se estudiaron 134 aislamientos dicarióticos mediante la electroforesis horizontal en geles de poliacrilamida, para ocho actividades enzimáticas: AAT, ACP, AKP, EST, MDH, MNR, PRX y SOD. Se analizaron 94 bandas totales, y con el fin de discernir micelios individuales, se implementaron tests de incompatibilidad somática. Por otra parte, se examinaron los caracteres macro- y micromorfológicos, tanto al MO como al MEB, de ca. 200 especímenes, incluyendo 28 holotipos de los Herbarios BPI, H, L, PC, NY, FH, K, PH, SP, BAFC y LPS. Analizando numéricamente los patrones de bandas isoenzimáticas y los caracteres morfológicos, se pudo establecer cierta correlación entre los datos moleculares y los morfológicos. Se observaron varios fenotipos alozímicos en cada sistema enzimático. No se encontraron bandas diagnósticas para especies determinadas morfológicamente. Sin embargo, se hallaron bandas diagnóstico en el ámbito de los dos subgéneros, Ganoderma y Elfvingia, corroborando los resultados proporcionados por los caracteres morfológicos. En total, se detectó en el área bajo estudio, la presencia de nueve especies del subgénero Ganoderma y ocho especies del subgénero Elfvingia.

Abstract:
In the present work 134 dikaryotic isolates of Ganoderma were examined by horizontal polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) for eight enzymatic activities: AAT, ACP, AKP, EST, MDH, MNR, PRX and SOD. A total of 94 bands were analysed. In order to discern fungal individuals somatic incompatibility tests were used. On the other hand, both macro- and microscopic structures of ca. 200 specimens were examined and in the latter case both with LM and SEM, which involved the study of 28 holotypes from the Herbaria BPI, H, L, PC, NY, FH, K, PH, SP, BAFC and LPS. By analysing numerically the isoenzymatic patterns and the morphological characters, a certain correlation between molecular and morphological data was established. The zymograms showed that within each enzyme system several allozyme phenotypes could be observed. The enzymatic systems analysed failed to yield diagnostic bands for each morphologically defined group. However, diagnostic bands for the two large subgenera, Ganoderma and Elfvingia, were encountered. Thus corroborating the results furnished by morphological characters. In total, the presence of 9 species of the subgenus Ganoderma and 8 species of the subgenus Elfvingia, was recognized for the area under study.

"Estudio sobre algunos Colémbolos de la Ciudad de Buenos Aires y sus alrededores : Faz organográfica e histológica; familias y géneros: Entomobrydae: Tomocerus" (1938). González, Elsa Rosario. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio sobre algunos nitrilos benzoilados de ácidos aldónicos" (1956). Recondo, Eduardo Francisco. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio sobre aproximaciones racionales al problema de la función de Green en sistemas de muchas partículas" (1999). Cavasotto, Claudio Norberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las correcciones de primer, segundo y tercer orden a la autoenergía del propagador partícula-agujero se calcularon, tanto a partir de la ecuación de Dyson utilizando el formalismo del superoperador, como en el marco de una formulación Liouvilliana. El cálculo a primer orden con el primer método se hizo para un sistema descrito por un operador grand canónico de Hartree Fock, permitiendo de esta manera su aplicación a sistemas a T ≠ 0. En los otros cálculos se utilizó un estado de referencia puro de Hartree-Fock. En estas formulaciones el orden perturbativo se identifica fácilmente como potencias del potencial residual. En todos los casos se compararon los resultados con los obtenidos por el método perturbativo y diagramático y se discutió la forma de incorporar correcciones que den cuenta de efectos colectivos. Se presenta también un nuevo método para el desarrollo de la matriz inversa como suma finita de términos, derivandose las ecuaciones generales correspondientes. Este desarrollo aplicado a la función de Green permitió interpretar cada término de la expansión comouna contribución a la propagación de la interacción por diferentes caminos de transmisión y da cuenta en forma directa, de efectos colectivos, representando por tanto un aproximante racional a la autoenergía del propagador de polarización. Con este método de la expansión finita se efectuó también un análisis cuantitativo del propagador de polarización en la molécula de agua.

Abstract:
First, second and third order corrections to the particle-hole polarization propagator self-energies are derived both from the Dyson equation in the scenario of the superoperator algebra and from Liouville-spacebased methods. First order analysis with former method was performed using a grand canonical Hartree-Fock ensemble, allowing its application to systems at T ≠ 0,and in the other cases, a Hartree-Fock reference state was used. The perturbative order is easily identified as powers of the residual potential. These results were compared to those obtained with the perturbative and diagrammatic methods and alternative formulations to include colective motion effects were considered. A new method to expand the inverse matrix as a sum of finite terms is also introduced, obtaining the corresponding general equations. This method applied to the Green function analysis allowed to consider each term of the expansion as a contribution to the propagation of interaction through different transmission paths, taking into account in a direct way collective motion effects, and thus representing a rational approximation to the polarization propagator self-energy. This finite expansion method was applied also to perform a cuantitative analysis of the polarization propagator in the water molecule.

"Estudio sobre diferencias genómicas en neoplasias humanas" (1985). Rosemblit, Nora. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio sobre el aislamiento del bióxido de titanio contenido en arenas titaníferas" (1944). Mochulsky, Marcos. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio sobre el catabolismo de gramina en la planta Hordeum vulgare" (1987). Ghini, Alberto Antonio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo del presente trabajo fue estudiar el catabolismo del alcaloide gramina en plantas de Hordeum vulgare (cebada). Dicho estudio implicó la síntesis de gramina marcada en distintas posiciones con isótopos de carbono e hidrógeno, y de otros compuestos indólicos relacionados, los cuales fueron utilizados en experiencias "in vivo" con plantas de cebada en desarrollo. Los productos sintetizados permitieron realizar un estudio detallado de los espectros de RMN-¹H y particularmente RMN-¹³C de indoles sustituidos. En esta tesis se desarrollaron los siguientes temas: 1. Introducción: donde se resumen las características que le confieren a ciertas moléculas el carácter de alcaloide; se describen las características de las plantas de cebada utilizadas, los alcaloides presentes en las mismas y en particular, la presencia de gramina y los estudios realizados por otros autores sobre su biosíntesis y catabolismo. Se mencionan además las propiedades biológicas de la gramina y se hace referencia a su posible función en el vegetal. 2. Síntesis de indoles isotópicamente marcados: Se describe la síntesis de los distintos trazadores, radiactivos o no, y de otros compuestos indólicos empleados en la elucidación del camino catabólico de gramins y en estudios espectroscópicos . Ellos fueron: gramina-α-14C , gramina-α-¹³C, gramina-2-14C, gramina-2-¹³C, gramina-6-²H, gramina-6-³H, indol-2-¹³C, indol-6-²H, indol-3-carboxaldehido-2-14C, indol-3-carboxaldehido-2-¹³C, indol-3-carboxaldehido-6-²H, ácido indol-3-carboxílico-2-14C, 3-(hidroximetil)-indol, 3-(aminometil)-indol, 3-(metilaminometil)-indol, 6-bromoindol, 6-bromogramina y 1-trimetilsililindol . En especial, se desarrolló una síntesis novedosa para la obtención de indoles marcados con deuterio o tritio en el anillo bencénico, la cual resultó superior en especificidad y rendimiento químico e isotópico, a las anteriormente conocidas. Se aclararon además algunas contradicciones halladas en la literatura sobre la aplicabilidad de modificaciones de la reacción de Madelung para la síntesis de indol isotópicamente marcado. 3. Experiencias con plantas de cebada:En este Capítulo se describen: a) Las condiciones utilizadas para el desarrollo de las plantas y el método de inoculación de trazadores en plantas de cebada intactas en desarrollo. b) Experiencias de degradación de gramina-α-14C donde se determinó la degradación del C-α a C02. c) Experiencias de degradación de gramina-2-14C, donde se determinó la degradación del C-2 a C02. d) Experiencias de degradación de gramina-α-¹³C y su seguimiento por RMN-¹³C e) Experiencias de competencia y captura utilizando gramina-α-14C y gramina-2-14C en conjunto con posibles catabolitos como indol-3-carboxaldehido, ácido indol-3-carboxílico o 3-(hidroximetil)-indol y triptofano, ácido N- formilantranílico o formiato, respectivamente. f) Experiencias de degradación de indol-3-carboxaldehido-2-14C y ácido indol-3-carboxílico-2-14C donde se determinó la reversibilidad de la conversión gramina indol- 3-carboxaldehido. g) Experiencias realizadas con tallos aislados de cebada. h) Experiencias de degradación de gramina-6-³H y de gramina-(6-³H, 2-14C), donde se determinó la degradación total del sistema aromático. En base a estos estudios se concluyó que el C-α de la cadena lateral de la gramina es degradado cuantitativamente a C02, mientras que el C-2 sería eliminado como formiato que en gran parte se oxidaría a C02 mientras el resto pasaría al reservorio de C-1 del organismo donde sería posteriormente metabolizado a una variedad de compuestos. Los pasos en esta degradación serían la desmetilación secuencial del grupo dimetilamino y transformación a indol-3-carboxaldehido a través de una transaminasa, siendo esta parte de la secuencia reversible y probablemente común con el proceso biosintético de la gramina. Posteriormente se produciría la oxidación irreversible a ácido indol-3-carboxílico, descarboxilación con pérdida de la cadena lateral y ruptura oxidativa del anillo pirrólico para dar ácido N-formilantranílico y finalmente ácido antranílico y formiato. Las experiencias com gramina-6-³H permitieron además determinar que el ácido antranílico intermediario era también rápidamente degradado oxidativamente, con eliminación del ³H de la posición 6 de la gramina como ³H2O. La reversibilidad de la conversión gramina indol-3-carboxaldehido es analizada desde el punto de vista de su implicancia en la biosíntesis de gramina, la cual no se encontraba completamente elucidada. 4. Andlisis espectroscópico: Los distintos compuestos indólicos sintetizados, y en particular la marcación con ²H y ¹³C, permitió estudiar exhaustivamente los espectros de RMN-¹H y RMN-¹³C de estos compuestos. En especial se reasignaron las resonancias de los carbonos 5 y 6 de indol y gramina y 4 y 6 de indol-3-carboxaldehido en sus espectros de RMN-¹³C, los cuales estaban mal asignados en literatura. Además, se determinaron los espectros de RMN-²H de los compuestos deuterados, los cuales permitieron también asignar inequívocamente las resonancias del H-6 en los espectros de RMN-¹H de los compuestos sintetizados. Se asignaron completamente los espectros de RMN-¹H de indol, indol-6-²H, 6-bromoindol , gramina-6-²H, 6-bromogramina e indol-3-carboxaldeido-6-²H. 5. Parte experimental: Se describe la parte experimental de la labor realizada, donde se detallan las síntesis realizadas, las técnicas extractivas, cromatográficas y espectroscópicas empleadas, las condiciones de crecimiento de las plantas y de adrninistración de trazadores .

"Estudio sobre funciones específicas de proteínas MAGE-I y su relevancia en oncología" (2015-06-11). Toledo, María Fernanda. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las proteínas MAGE-I (Melanoma Antigen Gene) constituyen una de las familias multigénicas más grandes con expresión tumoral, la cual agrupa a los Mage-A, Mage-B, Mage-C. Estos genes se caracterizan por su expresión específica en tumores, por su alta conservación de secuencia (todos contienen un dominio común llamado MHD, Mage Homology Domain) y por su localización en el cromosoma X. Las primeras observaciones funcionales mostraron una correlación entre los altos niveles de expresión algunos Mage-A y la resistencia a drogas antitumorales. Así es que en los últimos años se ha investigado la potencial función de estos genes en distintos modelos. Nuestro grupo de trabajo ha aportado al estudio de los genes mage-I el mecanismo por el cual MageA2 causa la resistencia a ciertos agentes quimioterapéuticos e impide el gatillado de la senescencia inducida por PML mediante la activación de oncogenes como Ha-Ras. Estos mecanismos involucran, por un lado, la interacción de MageA2 con el oncosupresor p53 y la inhibición de su actividad transcripcional por la unión MageA2/HDAC3 (deacetilasa de histonas 3) formando el complejo inhibitorio p53/MageA2/HDAC3; y, por otro lado, une en forma directa a PML-IV (proteína de la leucemia promielocítica–3) interfiriendo en el eje PML-IV/p53. Las observaciones sobre la función y/o localización de otros MAGE-I nos llevaron a elaborar nuestra primera hipótesis: la conservación de secuencia dentro de esta familia de proteínas no implicaría necesariamente una redundancia funcional. Por otro lado, dada la relevancia de la función de p53, nos llevó a formular nuestra segunda hipótesis de trabajo: podrían existir vías intracelulares capaces de proteger a p53 de la actividad de MageA2. En la primera parte de este trabajo de Tesis caracterizamos otro miembro de la familia MAGE-I, del subgrupo B: la proteína MageB2 logrando evidenciar que la expresión de MageB2 induce proliferación en distintas líneas celulares en forma independiente de la inhibición de p53. Vinculamos la actividad de MageB2 a la regulación de factores de transcripción pro-oncogénicos como de la familia E2Fs y c-Myc. Además MageB2 se acumula en el nucléolo, aunque su distribución comprende tanto en citoplasma como en el núcleo también, dato que nos llevó a evaluar y evidenciar su asociación a los ribosomas. En la segunda parte de este trabajo de Tesis determinamos que la expresión de p14ARF (p14, Alternative Reading Frame) revierte la inhibición que MageA2 ejerce sobre p53 causando la relocalización de MageA2 del núcleo a los nucléolos en forma similar a lo que hace con Mdm2, un inhibidor de la función de p53. En conjunto, estos resultados demuestran que las proteínas MAGE-I podrían participar en el balance que existe en las células tumorales entre factores prooncogénicos y proteínas supresoras de tumor. Ciertas proteínas MAGE-I como MageA2 puede bloquear la actividad de p53, pero a su vez ser regulada por p14- ARF (en el caso que la célula tumoral la expresara). Por otro lado MageB2 colabora con el fenotipo proliferativo mediante la regulación de factores de transcripción oncogénicos como E2Fs y c-Myc.

Abstract:
MAGE-I (Melanoma Antigen Gene) proteins are one of the larger tumor expression multigenic families, which bring together the Mage-A, Mage-B, Mage-C. These genes are characterized by its specific expression in tumors, by its high sequence conservation (all contain a common domain called MHD, Mage Homology Domain) and because of its location on the X chromosome. The first functional observations showed a correlation between the Mage-A high expression levels and its resistance to antitumor doxorubicin and paclitaxel drug. So, among this past few years it have been published works about the potential function of these genes. Our working group had contributed to the mage-I genes study describing the mechanism by which MageA2 causes the resistance to certain chemotherapeutic agents in human melanoma cells and reduces the senescence induced by oncogenes such as ha-Ras in normal cells. This mechanism involves inhibition of the transcriptional activity of the p53 oncosupresor by the action of histone deacetylases, HDACs. More recently, we have shown that MageA2 is capable to bound directly to PML-IV (promyelocytic leukemia protein-IV) interfering with the senescence induced by the PML-IV/p53 axis. Our observations on the function and/or localization of others MAGE-I proteins led us to develop our a first hypothesis: the conservation of sequence within the MAGE-I family not necessarily implies functional redundancy. On the other hand, given the importance of p53 function, our second hypothesis is that: there might be some intracellular pathway able to protect p53 activity from MageA2. In the first part of this Thesis work we have characterized another MAGE-I family member from B group: the MageB2 protein, showing that its expression induces induces proliferation in different cell lines independently of p53. MageB2 links this activity to the regulation of pro-oncogenic transcription factors, as c-Myc and E2Fs family. Also, MageB2 accumulates in the nucleolus, although distribution comprises both in cytoplasm and nucleus too. These data prompted us to verify and evidence that MageB2 could be linked to ribosome function. In the second part of this thesis we determined that p14ARF (p14, Alternative Reading Frame) expression reverses the MageA2 inhibition exerted on p53. We observed that p14ARF expression causes MageA2 relocalization from the nucleoplasm to the nucleoli in a similarly way that relocates Mdm2, an inhibitor of p53 function. Taken together, these results demonstrate that MAGE-I proteins may participate in the balance that exists in tumor cells between pro-oncogenic factors and tumor suppressor proteins. Certain MAGE-I proteins such as MageA2 can block the p53 activity, but in turn can be regulated by p14ARF (in the case that the tumor cell express it). On the other hand, MageB2 collaborates with the proliferative phenotype through regulation of oncogenic transcription factors such as E2Fs and c-Myc.

"Estudio sobre la activación de linfocitos para inducir angiogénesis durante la portación tumoral" (1996). Monte, Martín. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La angiognésis tumoral es el proceso que involucra la proliferación de vasos sanguíneos hacia el tumor en desarrollo. Los capilares que llegan al tumor aportan nutrientes y oxígeno y la vía de acceso de las células tumorales a circulación. Por lo tanto, este proceso es indispensable para el crecimiento tumoral y la diseminación metastásica. Además de existir factores angiogénicos liberados por la células tumorales, se ha descripto que células del huésped pueden colaborar en este proceso. En este laboratorio se demostró que los linfocitos T provenientes de ratones portadores de tumor, tienen actividad angiogénica. El objetivo de este trabajo fue identificar factores que estuvieran alterados durante el crecimiento tumoral y que fueran capaces de estimular los linfocitos para desencadenar la respuesta angiogénica (SLIA). Particularmente se estudió la importancia de la síntesis de poliaminas (PA) y de la producción de radicales libres de oxígeno (ROS) en este proceso. Se encontró que si bien la síntesis activa de PA es indispensable para la actividad angiogénica de los linfocitos, estos metabolitos no son inductores de SLIA. Cuando se investigó la importancia de la producción de ROS en la SLIA, se observó: a) el bloqueo de la SLIA por la administración de secuestradores de ROS a ratones portadores de tumor; b) aumento de peroxidación lipídica en el bazo de ratones portadores de tumor; c) aumento en el cociente entre la actividad de las enzimas antioxidantes SOD y CAT en el bazo normal, que continuaba incrementándose durante el crecimiento tumoral. Luego se determinó in vitro que el peróxido de hidrógeno era el único ROS capaz de inducir esta respuesta angiogénica, coherentemente con los hallazgos realizados in vivo sobre la peroxidación lipídica y el desbalance SOD/CAT. Finalmente se observó que la administración in vivo de esta molécula estimula la respuesta SLIA en forma análoga a la inducida por las células tumorales.

Abstract:
Solid tumors induce an angiogenic response by the host blood vessels to form a new vascular network for the supply of fresh nutrients and oxygen. This neovascular response is responsible for tumor growth and metastatic spread. We have previously observed that, in addition to tumor cells, T-lymphocytes from tumor-bearing mice induced angiogenesis in syngeneic combination. This response was called SLIA (syngeneic lymphocyte-induced angiogenesis). The aim of this work was to identify factors related to tumor development capable to stimulate lymphocytes to induce angiogenesis. Since polyamine biosynthesis and reactive oxygen specis (ROS) production were increased during tumor growth, we focused the study on these processes. Using the irreversible inhibitor of the Ornithine Decarboxilase, a-DFMO we observed the in vivo and in vitro inhibition of the SLIA, but the treatment of lymphocytes with the polyamine putrescine failed to stimulate these cells induce angiogenesis. These results suggest that lymphocytes would require an active polyamine biosynthesis to induce angiogenesis but polyamines are not molecules capable to trigger this process. On the other hand, we blocked the SLIA by the administration of an antioxidant to tumor-bearing mice. Moreover, we stimulate normal lymphocytes to induce angiogenesis by the incubation of the cells in a ROS generator medium. Studies on lymphocytes stimulated in vitro by ROS to induce angiogenesis, showed that only the enzyme catalase could block the activation. The incubation of normal lymphocytes with H2O2 stimulated these cells to induce angiogenesis. The administration of hydrogen peroxide or an oxidative stress-producing drug (doxorubicin) to normal mice activated in vivo the SLIA response. On the other hand, we observed evidences of oxidative stress measuring high contents of lipid peroxidation products in the spleen. Moreover, when the ROS scavenger enzymes (superoxide dismutase-SOD and catalase-CAT) were determined, we observed low CAT activity in normal spleens, reflected on a high SOD/CAT ratio, when compared to liver or kidney values. We also showed an increasing value of the SOD/CAT ratio along with tumor growth. These results strongly suggest that hydrogen peroxide could be involved on the mechanisms of lymphocyte activation to induce angiogenesis during tumor growth.

"Estudio sobre la biosíntesis de Skimmianina en Fagara Coco (Gill.) Engl." (1970). Colonna, Agustín Ovidio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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l) Se describen individualmente los alcaloides aislados hasta el presente de la planta Pagara coco, indicándose brevemente en cada caso el método seguido para efectuar las determinaciones de estructura. 2) Se enumeran las hipótesis existentes y los trabajos realizados acerca de la biosíntesis de los alcaloides furoquinolínicos. 3) Se describen las experiencias realizadas en este trabajo de investigación, las cuales consistieron en lo siguiente: I) Aplicación de métodos ya descriptos para el aislamiento de skimmianina y β-sitosterol en cada uno de las experiencias. II) Ensayo con material inactivo de las degradaciones que se utilizaron luego con los alcaloides radiactivos. Dichas degradaciones fueron: a) Oxidación de skimmianina a ácido skimmiánico y posterior descarboxilación del mismo, captándose el dióxido de carbono formado, cuya actividad representaba la del C-3 del alcaloide, y aislándose el producto descarboxilado. b) Aislamiento de los carbonos correspondientes a los grupos metilos de los metoxilos. c) Reducción de skimmianina a su tetrahidro derivado, y posterior oxidación de éste, aislándose ácido propiónico, que representaba la actividad de los C-ll, C-3 y C-2, y ácido acético, cuya actividad representaba la de los C-3 y C-2. III) Síntesis del alcohol 3,3-dimetilalílico-l-14C y del ácido 3,3-dimetilacrílico-1-14-C partiendo de acetato de sodio-1-14C. IV)Se describen las experiencias de inoculación a ejemplares de Fagara coco, en ensayos separados con acetato de sodio-l-14C, formiato de sodio-l4C, ácido mevalónico-4-l4c, ácido mevalónico- 5-14C, alcohol 3,3-dimetilalílico-l-14 C, y ácido 3,3-dimetilacrílico- l-l4c. 4) En base a los resultados obtenidos con las experiencias mencionadas, se propone una teoría sobre la biosíntesis de skimmianina, según la cual dicho alcaloide se formaría por condensación del pirofosfato de dimetilalilo con un compuesto del tipo de la 2,4-dihidroxiquinolina, con posterior ciclación y pérdida da acetona del compuesto resultante. Se propone un mecanismo para este último paso.

"Estudio sobre la constitución de los peróxidos de zinc" (1946). Binaghi, Ruben A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio sobre la destilación pirogenada de las maderas argentinas" (1904). Magnin, Jorge. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio sobre la determinación de lignina en papeles, cartones y cartulinas por los métodos de Halse y la modificación oficial : aplicación a productos argentinos" (1942). Longo, Rafael E.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio sobre la formación de algunos nucleos heterocíclicos y sus reacciones" (1940). Basavilbaso, Felipe Carlos. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio sobre la posibilidad de determinación del vanadio por manganatrimetría" (1963). Zúdor, Andrés Ladislao. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio sobre la variabilidad genética del virus de la inmunodeficiencia humana" (1999). Marquina, Silvia Andrea. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El estudio de la variabilidad viral es importante para entender la patogenia, la evolución y la epidemiología del HIV. Esta tesis aborda la variabilidad del HIV desde diversos ángulos. Uno de ellos fue la caracterización molecular del HIV-1 en ciudades con corrientes migratorias importantes como Buenos Aires. San Petersburgo y Estocolmo. Se demostró que estas corrientes introdujeron subtipos del HIV-1 que no circulaban previamente y la existencia de un nuevo subtipo del HIV-1, conocido actualmente como subtipo J. Se caracterizaron cadenas epidemiológicas de transmisión de la infección determinando que las recombinantes virales son frecuentes y transmisibles por vía horizontal y vertical, lo que constituye un hecho de importancia epidemiológica. La presencia de recombinantes virales motivó el desarrollo de un método para buscar posibles sitios de recombinación genómica y otro filogenético que toma en cuenta el evento de recombinación, importante en la evolución de HIV.Además se demostró que la hipermutación G—>A está restringida por la estabilidad del ARN viral. Además del HIV-1 se estudió el HIV-2 y se confirmó el predominio del subtipo A en Guinea Bissau. La carga proviral y el recuento de linfocitos T CD4+ resultaron marcadores del estadio de la infección con HIV-2 similar a lo que ocurre con HIV-1. Existe relación entre el genotipo y el fenotipo viral ya que aislamientos "rapid/high" presentaron aminoácidos positivos con patrones similares al HIV-1. Por otra parte se estudió la contribución del ADN viral extracromosómica a la variabilidad genética in vitro e in vivo resultando que una linea celular persistentemente infectada con HIV-1 puede ser sobre infectada por otra variante cuyo ADN se localiza en la fracción extracromosómica y se dispersa sólo por contacto célula a célula. In vivo el ADN viral extracromosómico contribuye a la variabilidad genética en la población viral de individuos infectados con el HIV-1. En conclusión, aquí se discuten algunos aspectos acerca de la variabilidad genética del HIV desde los puntos de vista molecular, evolutivo y epidemiológico. Además la tesis sugiere posteriores estudios particularmente en los temas de recombinación y sobreinfección para enriquecer el conocimiento sobre la variabilidad del HIV.

Abstract:
Research on viral variability is a crucial issue to understand the pathogenesis, evolution and epidemiology of HIV. This work focuses on the variability issue from different angies. One of this is the HIV-1 molecular characterization in cities with great migratory influx such as Buenos Aires, St. Petersburg and Stockholm. These migrations resulted in the introduction of HIV-1 subtypes that were not previously circulating. The existence of a new HIV-1 subtype, currently known as subtype J was demonstrated. Epidemiological transmission chains were characterized demonstrating that viral recombinants are frequently found and that they are transmissible horizontally and vertically, fact that is epidemiological important. The evidence of viral recombinants lead to the development of a method for searching possible recombination sites and of a phylogenetic method which takes into account the recombination event, relevant during HIV evolution. Besides, G—>A hypermutation is restricted by RNA stability. Besides HIV-1, HIV-2 was studied and the predominance of subtype A was confirmed in Guinea Bissau. Proviral load and T CD4+ cell count demonstrated to be markers of stage of HIV-2 infection similar to HIV-1. There is a correlation between the genotype and the phenotype because "rapid/high" isolates presented positively charged amino acids in env region, similarly to HIV-1. On the other hand, extrachromosomic contribution to variability in vitro and in vivo was studied. A persistently infected cell line can be super infected with other variant whose DNAis in the extra chromosomic fraction and it spreads only by cell to cell contact. Extrachromosomic viral DNA contributes to in vivo genetic variability in HIV-1 infected individuals. Finally, several aspects of HIV genetic variability are discussed from different points of view such as molecular, evolutionary and epidemiological aspects. Besides, this work suggests further studies particularly in recombination and superinfection issues in order to enrich the knowledge about HIV variability.

"Estudio sobre la variabilidad temporal y espacial de la humedad del suelo sobre Sudamérica, y su rol en modular la evapotranspiración y la precipitación en distintas escalas temporales" (2015-03-18). Spennemann, Pablo Cristian. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Es aceptado que la humedad del suelo puede alterar las condiciones de la atmósfera a partir del control del balance energético e hidrológico. Es por esto que el objetivo general de esta Tesis, se basa en mejorar la comprensión del efecto que tienen las interacciones superficie terrestre-atmósfera sobre Sudamérica en distintas escalas temporales a partir de un conocimiento más profundo de la humedad del suelo y su variabilidad, así como también de la evapotranspiración, y los posibles mecanismos de control de estas variables sobre los procesos que favorecerían la ocurrencia de lluvia en forma local. Debido a la escasez de observaciones de las variables del suelo, es que se utilizaron las simulaciones de humedad del suelo del Global Land Data Assimilation System (GLDAS). Las mismas fueron evaluadas respecto a diversas estimaciones, proxies, y mediciones in-situ de las condiciones hídricas del suelo sobre Sudamérica. El buen acuerdo mostrado por GLDAS, permitió realizar una climatología enfocada principalmente en las simulaciones de humedad del suelo. En primer lugar, se documentaron las características medias y las distintas escalas temporales y espaciales de variabilidad de la humedad del suelo. De particular importancia resulto ser la variabilidad de baja frecuencia sobre grandes regiones del dominio, acentuada en los espesores más profundos del suelo. En algunas de las regiones analizadas se observaron picos de energía con ciclos significativos de 17, 8, 3 años, ciclos menores a los 12 meses, así como también en escalas intraestacionales. Además, se observó que el patrón espacial dominante respecto a la variabilidad temporal de la humedad del suelo fuera de las áreas tropicales es, a grandes rasgos, dipolar. Por otro lado, se estudió el grado de interacción entre la humedad del suelo, la evapotranspiración y la precipitación. En el sudeste de Sudamérica y en otras regiones aisladas se observó que las anomalías de humedad del suelo ejercen cierto grado de control sobre la precipitación, y en mayor grado sobre la evapotranspiración. En otras regiones, el comportamiento fue opuesto, donde la atmósfera estaría controlando las condiciones del suelo. En base a estos resultados, se analizó la variabilidad y el acople sueloatmósfera de un sistema de pronostico estacional, para evaluar la utilización de los resultados hallados en GLDAS, en la predicción estacional. Este sistema de pronóstico, si bien puede reproducir algunas de las características de la humedad del suelo observadas en GLDAS, tiene errores sistemáticos. Asimismo, ciertos procesos fundamentales de las interacciones entre el suelo y la atmósfera, no estarían adecuadamente representados, lo cual podría limitar la capacidad predictiva en baja frecuencia asociada a los modos acoplados suelo-atmósfera.

Abstract:
It is widely accepted that soil moisture conditions can influence the atmosphere by altering the control of the energy and hydrological balance. In this sense, the overall objective of this Thesis is to improve the understanding of the effect of land-atmosphere interactions over South America at different time scales. This is carried out, by studying soil moisture and evapotranspiration variability, and their possible control mechanisms on the processes that favor the occurrence of local precipitation. The Global Land Data Assimilation System (GLDAS) soil moisture simulations were used, due to the scarcity of observations characterizing the soil states state of the soil variables. The GLDAS soil moisture was assessed against estimations, proxies, and in-situ measurements of soil water conditions over South America. Based on the good agreement shown by GLDAS, a climatology based on these soil moisture simulations was performed. The mean characteristics of soil moisture and its different temporal and spatial variability scales were documented. The low-frequency variability is important over large regions of the domain, accentuated in deeper soil layers. In some regions, the variability showed significant cycles of 17, 8 and 3 years, also cycles shorter than 12 months, as well as significant cycles in the intraseasonal range. Moreover, it was found that the dominant spatial pattern of soil moisture temporal variability, outside tropical areas is mostly dipolar. On the other hand, the degree of interaction between soil moisture, evapotranspiration and precipitation was analyzed. In southeastern South America, as well as in other isolated regions, soil moisture anomalies exert some degree of control on precipitation and a higher control on evapotranspiration. In other regions, an opposite behavior was observed, where the atmosphere seems to control soil conditions. Based on these results, the variability and land-atmosphere coupling strength of a seasonal forecast system was analyzed. The potential prediction skill was evaluated against GLDAS. The forecast system is able to reproduce some characteristics of soil moisture behavior observed in GLDAS. However, it has systematic errors and some fundamental processes of the land-atmosphere interactions are possible not adequately represented, which could limit the predictive ability in low frequency associated with soil-atmosphere coupled modes.

"Estudio sobre rutas biosintéticas alternativas del anillo butenólido de cardenólidos en Digitalis purpurea" (1985). Maier, Marta Silvia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La digitoxina es el principal glicósido cardenólido en plantas del género Digitalis, encontrándose en menor proporción los glicósidos gitoxina y digoxina. El presente trabajo tuvo por objeto el estudio de los últimos pasos de la biosíntesis de estos glicósidos en la planta Digitalis purpurea, en particular la formación y cierre del anillo lactónico que poseen. En el mismo se describen los siguientes temas: 1. Los antecedentes que dieron origen a este trabajo de investigación; entre ellos los glicósidos cardenólidos presentes en la planta Digitalis purpurea, su concentración, su acción farmacológica y los estudios sobre su biosíntesis. 2. Las síntesis de los distintos precursores, radiactivos o no, empleados en el estudio de los últimos pasos del camino biosintético, es decir: a) la serie de compuestos con cadena lateral tipo β-hidroxiácido: ácido 2O(R,S)-hidroxi-23-norcolanoicos-24-14C. b) la serie de compuestos con cadena lateral de ácido α,β no saturado: ácidos 23-norcol-20(22)(E)-énicos-24-14C. 3. La búsqueda de un buen método de inoculación de los compuestos radiactivos sintetizados, así como, las mejores condiciones para el aislamiento de los glicósidos cardenólidos y su posterior purificación. 4. Los estudios realizados por espectroscopía de RMN-13C de los efectos derivados por la quiralidad de C-20 en los ácidos 20(R,S)-hidroxi-23-norcolanoicos y en sus ésteres etílicos. Para poder efectuar una correlación efectiva con compuestos análogos a los mismos, se sintetizaron como compuestos modelos 3β, 20-hidroxi-20-metil-pregn-5-eno y su 3β-acetoxi derivado, los cuales fueron analizados por espectroscopía de RMN-13C. 5. Las inoculaciones de los ácidos 20 (R,S)-hidroxi-23-norcolanoicos-24-14C y 23-norcol-20(22)(E)-énicos-24-14C, en plantas enteras de Digitalis purpurea, del mismo grado de desarrollo y en condiciones controladas y reproducibles y el análisis de las incorporaciones absolutas logradas. 6. La degradacidn de la digitoxina radiactiva proveniente de uno de los ensayos de inoculación de un precursor radiactivo, con el objeto de comprobar que la radiactividad se hallaba localizada en el anillo lactónico de los glicósidos cardenólidos. Con los resultados de las distintas experiencias se propuso y discutió la existencia de una ruta alternativa para la formación del anillo, butenólido en la biosíntesis de los cardenólidos.

"Estudio sobre síntesis de algunos de los productos de hidrólisis del antibiótico curamicina" (1972). Gruñeiro, Elena Manuela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El presente trabajo tuvo como objeto la realización de síntesis de algunos de los productos obtenidos de la hidrólisis ácida del antibiótico Curamicina. En el se presentan: 1) una somerareferencia a los antibióticos estructuralmente vinculados con 1a Curamicina por la presencia en sus respectivas moléculas del ácido dicloro-isoevernínico u otros ácidos aromáticos halogenados análogos, o por poseer a 1a 2,6-didesoxi-D-arabino-hexosa como constituyente común; 2) una enumeración detallada de los estudios realizados hasta el presente tendientes a lograr la determinación de la estructura del antibiótico Curamicina y de otros antibióticos relacionados; 3) una descripción detallada de las sintesis que se llevaron a cabo en este trabajo de investigación, las que consistieron en: a) transformación de curacina, 4-0-(dicloro-isoeverninil 2,6-didesoxi-D-arabino-hexopiranosa, en el metil 4-0- (dicloro-dimetoxi-o-orselinil)-2,6-didesoxi-α—D-arabino-hexopiranósido (metil glicósido de la curacina metilada) mediante dos procedimientos convergentes; b) sintesis del metil 4-O-(dicloro-dimetoxi-o-orse1inil)-2,6-didesoxi- α-D-arabino-hexopiranósido, el cual supuso: b1) sintesis del sintón aromático: cloruro de dicloro-dimetoxi- o-orselinilo; b2) sintesis del sintón hidrato de carbono: metil 3-0-(tetrahidropiran- 2-il)-2,6-didesoxi-α-D-arabino-hexopiranósido a partir de 1a 2-desoxi-D-arabino-hexosa; b3) reacción de esterificación entre ambos sintones; c) síntesis de la 6-0-metil-D-manosa a partir del metil α-D-manopiranósido mediante un nuevo procedimiento; d) sintesis de la 4,6-di-0-metil-D-manosa mediante un nuevo método a partir de D-manopiranosa. Esta sustancia se obtuvo en el intento de preparar la 2,6-di-O-metil-D-manosa (D-curamicosa); e) sintesis de nuevos derivados del ácido o-orselínico obtenidos en intentos de obtener el sintón aromático del punto 3,b1 a partir de orcina. Mediante la síntesis del mencionado glicósido de la metil curacina quedó confirmada la estructura que fuera propuesta para la curacina por interpretación de datos químicos y espectroscópicos.

"Estudio sobre síntesis y bioactividad de análogos de Brassinosteroides" (2003). Ramirez, Javier Alberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los brassinosteroides (BRs)son hormonas vegetales esteroidales de reciente descubrimiento, amplia distribución en la naturaleza, y esenciales para el normal desarrollo de las plantas. En los últimos años se han multiplicado los estudios sobre sus propiedades biológicas y posibles aplicaciones agronómicas. Debido a su baja concentración en las fuentes naturales, los compuestos utilizados en estos estudios deben obtenerse mediante síntesis química a partir de precursores accesibles. El trabajo desarrollado en esta Tesis se ha centrado en la síntesis de 28-homobrassinosteroides, a partir de estigmasterol. Se han sintetizado quince BRs, cuatro de ellos habían sido detectados como compuestos naturales, y once son análogos nuevos con modificaciones en C-3, C-S y C-6. En particular, resultó de interés la síntesisde análogos fluorados, debido a las importantes propiedades biológicas conocidas para los compuestos organofluorados. Se evaluó la actividad biológica de cada uno de los compuestos sintetizados. Los bioensayos utilizados fueron inclinación de la lámina de arroz, elongación del epicotilo de soja y crecimiento de plántulas normales y mutantes de Arabidopsis thaliana.

Abstract:
Brassinosteroids (BRs) are a new group of recently discovered plant hormones, widely distributed in the plant kingdom. BRs are essential for the normal development of plants. During the last past years studies concerning their biological properties and possible use as agrochemicals have increased. Chemical syntheses of BRs are required since they cannot be obtained from natural sources, due to their extremely low concentrations. This work has been devoted to the synthesis of 28-homobrassinosteroids, using stigmasterol as starting material. Four out of the fifteen obtained compounds had already been identified as natural products. The other eleven synthetic BRs were new analogues, with modifications involving the C-3, C-5 and C6. The synthesis of fluorinated analogues was of particular interest, due to the important previously reported bioactivities of organofluorinated compounds. Biological activity for each synthetic compounds has been evaluated using the following bioassays: the rice lamina inclination test, the soybean epicotyl elongation and the growth of wild type and mutant seedlings of Arabi dopsis thaliana.

"Estudio taxonómico de los percíctidos (Osteichthyes : Perciformes) actuales de Argentina" (1999). López Arbarello, Adriana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio taxonómico y florístico sobre las Parmeliaceae Sensu Stricto (Ascomycota Liquenizados) del segundo planalto del estado de Paraná, Brasil" (2001). Sionara, Eliasaro. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El presente trabajo es la primera revisión de las especies de Parmeliaceae s. str. del Segundo Altiplano (24°30’-26°06' S y 49°49’-50° 25' W) del Estado de Paraná, Brasil. La vegetación predominante del área de estudio varía desde campos abiertos sin árboles, hasta campos con arbustos y formación forestal denominada Cerrado. En las partes abiertas, las rocas de arenisca son el sustrato principal para los líquenes. Se describen e ilustran los ambientes donde se coleccionó el material. El clima es subtropical templado, con algunas heladas nocturnas en el invierno. Se resume la historia de la delimitación de la familia Parmeliaceae Zenker y se analiza el uso de los diferentes caracteres de importancia taxonómica al nivel de género y de especie. Se ha aceptado la delimitación de la familia Parmeliaceae propuesta por Rogers & Hafellner de 1992, que se basa en gran parte en caracteres anatómicos y morfológicos del talo, apoyados por algunos caracteres químicos como la sustancia predominante en la corteza superior y el tipo de polisacóridos de paredes hifales. Los especímenes estudiados fueron coleccionados principalmente por la autora e incorporados en el herbario UPCB de la Universidade Federal do Paraná (Curitiba, Paraná); además se depositaron algunos duplicados en BAFC, herbario de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales-UBA (Buenos Aires). Se estudiaron especímenes de referencia de distintos herbarios, incluyendo ejemplares tipo. La identificación de las sustancias de importancia taxonómica se ha realizado en su mayor parte por cromatografía en capa delgada. Los polisacáridos de paredes hifales se identificaron mediante la técnica histoquímica de Common. Se identificaron noventa y tres especies correspondientes a los siguientes catorce géneros, indicándose entre paréntesis el número de especies: Bulbothrix (6): Canomaculina (5); Canoparmelia (5); Flavoparmelia (3); Hypotrachyna (20); Myelochroa (1); Paraparmelia (1): Parmelinella (2); Parmelinopsis (5); Parmotrema (22); Punctelia (8); Relicina (1); Rimelia (8) y Xanfhoparmelia (6). Se propone una clave para diferenciar estos géneros. También se elaboraron claves para la identificación de las especies de cada género. Cada especie se describe e ilustra. También se da la distribución mundialde cada una de ellas y una distribución detallada dentro de Brasil, agregandose observaciones ecológicas y comentarios taxonómicos. Los principales hallazgos de este trabajo se resumen a continuación: descripción de dos especies nuevas para la ciencia, Rimelia succinreticulata Eliasaro & Adler y R. pontagrossensis Eliasaro & Adler primera mención de tres especies para el continente Americano: Flavoparmelia subamplexa (Hale) Hale, Parmelinella wallichiana (Taylor) Elix & Hale y Xantoparmelia mougeotina (Nyl.) D. Galloway; primera mención de tres especies para Brasil: Hypotrachyna neodissecta (Hale) Hale, H. pustulifera (Hale) Skorepa, y H. primitiva Hale & López; primera mención de cincuenta y una especies para el Estado de Paraná.

Abstract:
The present work is the first revision in the Parmeliaceae s. str. species from the Segundo Planalto (24°30'-26°06' S and 49°49'-50 ° 25' W), in the State of Paraná, Brasil. The predominant vegetation in the study area varies from open fields without trees, to fields with shrubs and the forest formation named Cerrado: in open places, sandstone rocks are the main substrate for lichens. Collection environments are described and illustrated. The climate is subtropical temperate, with some nocturnal frosts in winter. The history of the delimitation of family Parmeliaceae Zenker is summarized and the use of different characters of taxonomic significance at genus and species level is analysed. Delimitation of Parmeliaceae s. str. proposed by Rogers & Hafellner in 1992, is followed; it is mainly based on anatomical and morphological characters, but additionally supported by some chemical characters as the predominant substance in the upper cortex and the typeof polysaccharide of hyphal walls. Specimens were collected mostly by the author and housed at herbarium UPCB (Curitiba, Paraná); some duplicates were also deposited at BAFC, the herbarium of the Facultad de Ciencias Exactas y Naturales-UBA (Buenos Aires). Reference specimens from different herbaria were also examined, including types. Identification of taxonomically important lichen substances was mainly achieved by thin layer chromatography. Polysaccharides of hyphal walls were identified by means of Common's histochemical technique. Ninety three species were identified in the following fourteen genera, with species number in brackets: Bulbothrix (6): Canomaculina (5); Canoparmelia (5); Flavoparmelia (3); Hypotrachyna (20); Myelochroa (1); Paraparmelia (1): Parmelinella (2); Parmelinopsis (5); Parmotrema (22); Punctelia (8); Relicina (1); Rimelia (8) y Xanfhoparmelia (6). A key to differentiate these genera is proposed. Keys to identify the species in each genus are also given. Each species is described and illustrated. the world distribution of each species and the detailed distribution inside Brazil are also given, as well as ecological observations and taxonomic comments. the foremost findings of this works are summarised as follows: description of two species new to science: Rimelia succinreticulata Eliasaro & Adler y R. pontagrossensis Eliasaro & Adler; first report of three species for the American continent: Flavoparmelia subamplexa (Hale) Hale, Parmelinella wallichiana (Taylor) Elix & Hale y Xantoparmelia mougeotina (Nyl.) D. Galloway; primera mención de tres especies para Brasil: Hypotrachyna neodissecta (Hale) Hale, H. pustulifera (Hale) Skorepa, y H. primitiva Hale & López;: first report of fifty one species for the State of Paraná.

"Estudio taxonómico, de cultivo axenico y posibilidad de adaptación al cultivo industrial, de las especies silvestres del género Agaricus (basidiomycetes, agaricales)" (1995). Albertó, Edgardo Omar. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio teórico - experimental del mecanismo de reacción de sustratos aromáticos fluorados con nucleófilos nitrogenados" (1985). Mac Cormack, Patricio Guillermo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio teórico de propiedades anarmónicas de sólidos" (1995). Fracchia, Ricardo Mario. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio teórico del tensor de apantallamiento magnético y su relación con la estructura molecular" (1985). Ferraro, Marta Beatriz. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio teórico experimental sobre corrosión del hierro" (1922). Hickethier, Carlos Federico. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio teórico y experimental de la inestabilidad de gradiente en la Ionósfera" (1997). Hurtado de Mendoza, Diego. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio teórico y experimental de reacciones con reactivos organometálicos involucrando enlaces C-Li y C-Cr" (1999). Schulz, Hernán Gustavo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se investigó la influencia del estado de agregación de varios compuestos organolíticos en su estructura y en su reactividad frente a reacciones de índole muy diversa. El estudio de la carbonilación de aril-litios monoméricos permitió controlar la relación entre los isómeros geométricos del 1,2-diacetoxi-1,2-bismesitileteno y condujo a1 desarrollo de un método de sintesis de diarildicetonas impedidas. La relación enérgetica entre los isómeros calculada por MNDO justifica la tendencia observada con dichos compuestos. Las características diméricas del fenil-litio en THF determinaron que al ser utilizado en exceso en la reacción con E-cinamaldehído se logre obtener especificamente dihidrochalcona, producto de un reordenamiento en el cual se evidencia la participación del dímero del organolítico, en lugar del producto de adición 1,2. Se propuso un mecanismo para esta nueva reacción que se verificó por medio de estudios experimentales, espectroscópicos y teóricos. La formación de posibles agregados mixtos amiduro de litio-amina se estudió por métodos semiempíricos, ab initio y DFT para el sistema morfolil-litio- morfolina. En dicha evaluación se tuvieron en cuenta los resultados obtenidos con el piperidil-litio y se determinó el probable sitio de unión entre la amina y el amiduro. Se sintetizaron y caracterizaron nuevos complejos organometálicos de cromo (III), que tienen la particularidad de ser altamente selectivos en sus reacciones de adición. Su reactividad se investigó por medio de adiciones a compuestos carbonílicos en diversas condiciones de reacción, incluyendo variaciones del solvente, de la relación reactivo:sustrato y de la naturaleza del compuesto carbonílico. Se sintetizó una variedad de aminoalcoholes quirales y se verificó su actividad como catalizadores quirales. Como modelo, se realizó un estudio preliminar sobre la enantioselectividad de los complejos de cromo del tipo RCrCl2(THF)3 en la adición a aldehídos en presencia de ligandos quirales.

"Estudio teórico y numérico de inestabilidades Hall-MHD en flujos tipo shear" (2012). Bejarano, Cecilia Soledad. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La presente Tesis se propone, como objetivo general, contribuir al estudio de los plasmas astrofísicos que conforman diversas configuraciones en el Universo; mientras que, como objetivo específico, se plantea investigar el desarrollo de inestabilidades en la microescala de plasmas completamente ionizados. En concreto, se analiza el rol del efecto Hall en la dinámica microscópica asociada a pequeñas parcelas de fluido inmersas en un flujo macroscópico tipo shear. A tal fin, se utiliza como marco teórico las ecuaciones de la teor´ıa magnetohidrodinámica, en la aproximación shearing-box, teniendo en cuenta los términos adicionales correspondientes a las corrientes de Hall. Puntualmente, se estudia la evolución de una nueva inestabilidad a la cual se nombra Hall-MSI (Hall Magneto-Shear Instability). Con este propósito, se desarrolla un modelo analítico que proporciona una descripción del comportamiento de esta inestabilidad en el régimen lineal. Los resultados teóricos obtenidos se corroboran a su vez mediante cálculos numéricos. Asimismo, las simulaciones numéricas son fundamentales para abordar el estudio de la evolución no lineal del sistema. La comprensión de los procesos físicos involucrados en la microescala, responsables de los mecanismos de transporte, presumiblemente permitirá desarrollar modelos macroscópicos que profundicen los conocimientos de distintos fenómenos astrofísicos. En este contexto, el trabajo efectuado en esta Tesis resulta especialmente importante en el análisis de los procesos de acreción y de los mecanismos de eyección, sustentación y colimación de los denominados jets. Por un lado, el efecto Hall ciertamente modifica la inestabilidad magneto-rotacional, principal candidato para explicar el origen de la microturbulencia en discos de acreción. Por el otro, el desarrollo de la inestabilidad Hall magneto-shear podría afectar la evolución de la inestabilidad de Kelvin-Helmholtz, particularmente relevante en la interfaz entre jet y medio circundante.

Abstract:
The present Thesis aims to contribute to the study of astrophysical plasmas which are ubiquitous in the Universe in several configurations, dealing with the development of micro instabilities in fully ionized plasmas. It specifically adresses the role of the Hall effect in the dynamics of the micro-scale associated to small parcels of fluids embedded in a macroscopic shear flow. For this purpose, the framework of magnetohydrodynamics in the shearing-box approximation is adopted, with additional terms related to the Hall currents. Moreover, it studies the evolution of a new instability called Hall-MSI (Hall Magneto-Shear Instability). To this end, an analitical model is developed in order to describe the linear behavior of this instability. Furthermore, the theoretical results are corroborated by numerical simulations. In addition, the numerical approach allows to extend the evolution into the non-linear regime. The comprehension of the physical processes involved in the microscopic scales, which are responsible for the transport mechanisms, will hopefully contribute to develop macroscopic models to improve the knowledge of many astrophysical phenomena. In this context, the results reported in this Thesis may be important to enhance the understanding of the physics regarding accretion processes and launching, collimation and sustain mechanisms of astrophysical jets. On the one hand, the Hall effect certainly modifies the magneto-rotational instability, which is the main candidate to explain the origin of the microscopic turbulence in accretion disks. On the other hand, the Hall magneto-shear instability might affect the development of the Kelvin- Helmholtz instability, which is relevant at the interface between the jet and the surrounding environment.

"Estudio teórico y práctico de métodos de evaluación de acetona con vistas a su aplicación a los alcoholes industriales" (1941). Pompei, Roberto Mario. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio térmico y del flujo del aire en septiembre y octubre en los Valles de los Ríos Limay, Neuquén y Negro" (2001). Cogliati, Marisa Gloria. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las condiciones de suelo fértil, con abundante agua disponible hacen que los valles sean lugares preferenciales para asentamientos poblacionales y emprendimientos productivos. El estudio del flujo del aire y los intercambios de calor entre meseta y valle son considerados relevantes por sus múltiples aplicaciones de índole práctica. Los valles de los ríos Neuquén, Limay y Negro ubicados en la Patagonia Norte argentina constituyen una región con las características señaladas anteriormente y una importante producción fruti-hortícola. Por ejemplo, los cultivos agrícolas ocupan en el valle del Río Negro, el 60% de la superficie total del mismo. El comportamiento de los factores meteorológicos, muchas veces actúa de manera decisiva sobre la producción frutícola. En el Alto Valle, su influencia promedio se encuentra entre el 5 y el 6%. Si bien, durante la época de descanso vegetativo, los frutales necesitan de la ocurrencia de temperaturas bajas, en el período crítico de floración, dichas temperaturas pueden ocasionar daños severos a la producción. Las heladas tardías que afectan la producción frutícola ocurren en los meses de setiembre y octubre, y representan para la región de los valles de los ríos Limay, Neuquén y Negro, uno de los mayores riesgos para la actividad productiva, llegando a ocasionar grandes pérdidas económicas. El número medio de días con heladas en los meses de setiembre y octubre es 10 días en Villa Regina, 8.7 días en Alto Valle, 8.3 días en Cinco Saltos, 5.4 días en Neuquén y 3.5 días en Cipolletti. Esto pone en evidencia la variabilidad espacial de este fenómeno. En este trabajo se analizan las características espaciales y temporales de la temperatura del aire y el viento en los valles de los ríos Neuquén, Limay y Negro durante los meses de setiembre y octubre en los que ocurren heladas tardías. La diversidad de escalas involucradas en el fenómeno de las heladas hizo necesaria la inclusión en este trabajo de información con diferentes características dentro de los valles. Se utilizaron datos de temperatura del aire y del viento de varios puntos ubicados sobre la meseta y en el interior del valle, obtenidos con intervalos de tiempo de 1 minuto, 15 minutos, 30 minutos y 1 hora. Los datos con intervalo de observación menor, fueron adquiridos durante el experimento de campo MECIN realizado en la zona entre 1992 y 1998. Este trabajo, encara el análisis de distintas escalas involucradas en la determinación de las características de las fluctuaciones de temperatura del aire y viento a partir de distintos enfoques metodológicos. En un primer enfoque, se analizan las características climáticas de la zona comprendida por los valles de los ríos Neuquén, Limay y Negro mediante el estudio de datos de temperatura del aire e intensidad y dirección del viento incluidos en las estadísticas climatológicas (período: 30 años) del Servicio Meteorológico Nacional en las estaciones Neuquén Aero, Cipolletti, Alto Valle y Villa Regina. En este análisis de mayor escala, se incluyó también una climatología sinóptica realizada mediante los datos del reanálisis elaborado por el NCAR/NCEP correspondientes al período 1982-1994. Estos análisis proveyeron un marco de las características de escala sinóptica de la meteorología de la región durante los meses de setiembre y octubre. El análisis de escalas menores, se efectuó desde dos enfoques diferentes: - A partir de las series horarias, cada 15 min y cada 1 minuto de temperatura del aire y viento, se obtuvieron los espectros de dichas variables mediante la técnica de la Transformada Rápida de Fourier (Cooley y Tukey, 1965) en estaciones meteorológicas instaladas sobre la meseta y en el interior de los valles y se identificaron algunos procesos físicos a partir de los máximos de densidad espectral en escala sinóptica, meso y micro-escala. Se calcularon los espectros cruzados (coespectro, espectro de cuadratura) entre la temperatura del aire en distintos lugares de medición con la finalidad de obtener los períodos en que se presentan las mayores covarianzas. A partir de los espectros cruzados entre la temperatura del aire y las componentes u y v de la intensidad del viento se obtuvieron los estimadores de los transportes horizontales de temperatura. Las covarianzas estre la temperatura del aire y las componentes u y v del viento, se asocian con las características del intercambio horizontal de calor en las escalas sinóptica, meso y micro-escala. Realizando un análisis similar entre la componente u y la componente v de la intensidad del viento se calculó el intercambio horizontal de cantidad de movimiento. - Las interacciones del viento en los valles con el flujo de escala sinóptica, generan procesos característicos de escalas menores. En diversas partes del mundo se han realizado trabajos al respecto. Para el estudio de las relaciones entre el viento de escala sinóptico y el viento en el interior de los valles, se utilizó el modelo conceptual propuesto por Whiteman y Doran (1993) en el que se identifican cuatro mecanismos. El tipo de forzante se determina a partir de la distribución conjunta de los vientos de valle y los vientos en escala sinóptica. A partir de este análisis y de la descripción de las varianzas de la temperatura del aire y la dirección e intensidad del viento, se infirieron procesos físicos que regulan la conducción del aire en los valles de los ríos Neuquén, Limay y Negro en condiciones diurnas y nocturnas. El estudio en la microescala se completó con el análisis de los perfiles verticales de temperatura y viento en la capa cercana al suelo en el valle del río Neuquén. Las fluctuaciones en la dirección del viento en los valles de los ríos Neuquén y Negro ponen de manifiesto la existencia de un ciclo diurno que podría indicar un efecto térmico. En el valle del río Limay este efecto no fue observado. La distribución de frecuencias de direcciones de viento presenta una alineación del viento en superficie a lo largo de las direcciones de los ejes de los valles. El valle del Río Negro en Allen, no presenta un sólo proceso sino que se observa canalización forzada y transporte de cantidad de movimiento desde el viento en escala sinóptica. En el valle del río Limay se presentan dos giros en la dirección del viento, el primero se ajustaría a procesos producidos por el gradiente de presión y el segundo se asociaría a la canalización forzada. De manera similar a lo obtenido en el análisis de la temperatura, los valores de energía cinética varían entre la meseta y el interior de los valles, observándose mayores valores sobre la barda y valores en disminución hacia el interior de los valles. Los transportes horizontales de temperatura en Neuquén Aero, Allen y colonia Valentina Sur son mayores en la dirección N-S, mientras que en Centenario barda y Centenario valle los transportes son mayores en la dirección W-E. Esto significa que en todos los casos los transportes son mayores en la dirección transversal a los valles. El perfil del viento dentro del valle presentó una capa de calma y a mayor altura un aumento abrupto de la velocidad del aire. Esta configuración y la estratificación que se da en la capa de inversión nocturna, bajo condiciones propicias podrían provocar ondas de Kelvin- Helmholtz.

Abstract:
The fertile soil and available quantity of water made valleys wanted for population settlement and productive enterprices. The study of air flow and transport of heat between the plain and the valley are decisive results for practical aplications. The Neuquén, Limay and Negro river valleys located in Northern Patagonia are one of the most important fruit production region. The fruit crops ocupies the 60% of total Río Negro river valley surface (41671 has). The behaviour of meteorological factors acts in a decisive way over fruit production. In Alto Valle the mean influence is between 5 and 6%. During winter fruit trees need low temperatures, but in spring time low temperatures might cause extreme damage to crops. Late freeze affects fruit production during September and October and are one of the dangerous risks for production that could generate important economical losts. The mean number of freeze days in September and October is 10 days in Villa Regina, 8.7 days in Alto Valle, 8.3 days in Cinco Saltos, 5.4 days in Neuquén and 3.5 days in Cipolletti, showing the spatial variability of freeze occurrence. In this job the spatial and temporal characteristics of air temperature and wind in Neuquén, Limay and Negro rivers valleys in September and October are analyzed. A great density of data was included in this work because of the variety of scales involved in late freeze fenomena. Air temperature and wind in some points in the valley and the plain obtained by 1 min, 15 min or an hour were considered. Some data was obtained during MECIN field experiment (Nocturnal Inversion Layer Measurements) from 1992 to 1998. The variety of scales involved in temperature and wind fluctuations determined the use of different methodologies in the analysis. The first point of view is the analysis of climatic characteristics of Neuquén, Limay and Negro river valleys zone by studying 30 years climatic statistics in Neuquén Aero, Cipolletti, Alto Valle y Villa Regina and a synoptic climatology from NCEP/NCAR reanalysis from 1982-1994 for September and October. The spectrum of hourly, 15 minutes and 1 minute series of air temperature and wind were obtained using Fast Fourier Transform technique (Cooley and Tukey, 1965) in meteorological stations over the plain and in the valley, to identify physical processes connected with spectrum maxima in synoptic, meso and micro scale. Air temperature cross spectrum (coespectrum and quadrature spectrum) in different locations were calculated. Temperature and momentum estimations of the fluxes were obtained from air temperature and wind components cross spectrum. The interaction of winds in a valley with winds above the valley produces micro scale processes. Several authors made papers concerning this topic in different countries. Whiteman y Doran (1993) present a conceptual model of four different forcing mechanisms of valley winds. They determined the type of forcing that occurs at a site from a scatterplot of the synoptic winds versus the ambient winds. This analysis and standard deviation of temperature and wind inferred the channelling forcing within valleys. The wind direction fluctuations in Neuquén, and Negro river valley shows a diurnal cycle from thermal forcing. Limay river valley does not show evidences of diurnal cycle. The micrometeorology study was completed with vertical air temperature and wind soundings in Neuquén river valley. The surface wind direction distribution evidence directions aligned with valley axis. Neuquén river valley present forced channelling (Whiteman and Doran 1993), Río Negro valley present forced channelling and downward momentum transport influences and Limay valley present two shifts in wind direction: the first process was pressure driven channelling and the second forced channelling. Horizontal temperature transport in Neuquén Aero, Allen and Colonia Valentina Sur are important in N-S direction and in Centenario in W-E both in the cross valley direction. Wind profile in the valley shows a calm layer and an abrupt increase above. This pattern and nocturnal inversion layer temperature stratification could produce Kelvin Helmholtz waves.

"Estudio y aplicaciones de los minerales de Wolfram y en especial de los de la Sierra de San Luis, Criadero ("Los Condores")" (1909). Mazza, Aurelio F.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio y aplicaciones de un filtro magnético recto en una descarga arco de baja presión" (2009). Giuliani, Leandro Estanislao. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los equipos de descargas arco en vacío son una fuente de plasma atractiva para la producción de películas delgadas. En estos equipos se produce un intenso jet de plasma metálico formado por iones de relativamente alta energía que son producidos con mucha eficiencia en la superficie del cátodo. Sin embargo, estos arcos también producen macropartículas de material catódico derretido que son depositadas en los sustratos. La presencia de estas macropartículas aumenta la porosidad y rugosidad de los recubrimientos afectando las propiedades de los films. Se han desarrollado varios sistemas de filtrado para separar las macropartículas del plasma, pero el filtrado magnético es el más empleado en la actualidad. Este tipo de filtro consiste en un tubo con un campo magnético axial que transporta el plasma a lo largo del mismo. En este trabajo se presenta un estudio del plasma generado mediante una descarga arco pulsada en vacío en un filtro magnético recto y de los recubrimientos obtenidos con este equipo. El estudio del plasma involucró mediciones con sondas electrostáticas y analizadores por campo retardador. Los resultados obtenidos para la energía cinética de los iones son similares a los hallados por otros autores, pero también se encontró que la energía era independiente de la intensidad del campo magnético dentro del rango estudiado en este trabajo. La temperatura electrónica también resultó independiente del campo magnético y de la posición a lo largo del filtro, indicando la ausencia de colisiones. Se realizaron mediciones de corriente iónica de saturación y de potencial flotante en diferentes posiciones axiales y radiales dentro del filtro para distintas intensidades del campo magnético, y se desarrolló un modelo teórico para entender la dinámica de la entrada de plasma y su transporte a lo largo del filtro. Un análisis de los resultados experimentales realizado con el modelo teórico mostró que, en este dispositivo, a medida que la intensidad del campo magnético aumenta a lo largo del filtro, el movimiento del plasma evoluciona de una compresión radial con baja velocidad de rotación a un jet rotante guiado a lo largo del tubo. El estudio de los recubrimientos se realizó con cátodos de Cu, Ni, Ti, Zr y Mo, e involucró técnicas de microscopía así como difracción y reflectometría de rayos x. se encontró que los films crecen nanoestructurados, con granos columnares y espesores de alrededor de 10 nm por descarga. La presencia de macropartículas en los recubrimientos también fue estudiada y se encontró que el número y tamaño de las mismas variaba con el punto de fusión del material del film. A la entrada del filtro, el campo magnético axial produce una reducción considerable del número de partículas normalizado con la corriente iónica colectada. Sin embargo, no se observó más reducción en los films obtenidos a la salida del filtro, indicando que el flujo de macropartículas no es apreciablemente reducido a lo largo del tubo.

Abstract:
Vacuum Arc plasma sources are attractive for the deposition of thin films, since an intense jet of metallic plasma including relatively high-energy ions is produced with a high efficiency at the cathode surface. However, cathodic arcs also produce macroparticles from the melted cathode material that are deposited on the substrate. The presence of macroparticles increases the porosity and roughness of the coating, affecting the films properties. Several filtering systems to separate the arc plasma and the macroparticles have been developed. Presently, magnetic filtering is a widely used method for removing the macroparticles. This kind of filter consists in a tube with an axial magnetic field that guides the plasma along the duct. In this work, a study of the plasma jet generated in a pulsed vacuum arc along a straight magnetized filter and of the films obtained with this equipment is presented. The plasma study involved measurements with electrostatic Langmuir probes and a retarding field analyzer. The obtained results for the ion kinetic energy are similar to those reported by other authors, but they were also found to be independent of the magnetic field strength. The electron temperature was also found to be independent of the magnetic field strength and of the axial position along the filter, indicating the absence of collisions. The ion saturation current and the plasma potential at different radial and axial positions and magnetic field intensities were measured and a theoretical model was developed to understand the dynamics of the plasma entry and guiding in the filter. This model takes into account magnetic field variations and Gaussian ion radial profiles. An analysis of the experimental results with the theoretical model shows that, in our device, as the magnetic field intensity increases along the filter, the plasma motion evolves from a radial compression with a low rotational velocity at the filter entrance to a rotating jet guided along the duct. The coatings study was performed with cathodes of Cu, Ni, Ti, Zr and Mo. It involved microscopy techniques a well as x-ray diffraction and reflectometry. The films were found to be grown nano-structured with columnar grains, and thicknesses of about 10 nm per discharge. The presence of macroparticles in the films has been also studied. It was found that number and size of the macroparticles varied with the melting point of the film material. At the filter entrance, the axial magnetic field led to a considerable reduction of the number of macroparticles normalized to the collected ion current.However, no further reduction was observed in films obtained at the end of the magnetic filter, thus implying that the macroparticle flux is not appreciably reduced along the tube.

"Estudio y caracterización de los alcaloides libres presentes en la semilla de Erythrina Crista-Galli" (1944). Kaufmann, Alicia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudio y mejoramiento genético de levaduras osmotolerantes" (2002). Loray, María Alicia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Entre las levaduras existen especies osmotolerantes como D. hansenii, T. delbrueckii, S. octosporus, y especies consideradas no osmotolerantes como, por ejemplo, S. cerevisiae. Algtmas levaduras osmotolerantes son utilizadas en la producción de determinados productos alimenticios mientras otras se encuentran como organismos contaminantes en varios alimentos. Sin embargo, Saccharomyces cerevisiae es la levadura empleada tradicionalmente en la industria para la producción de diversos productos. Algunos de estos bioprocesos se desarrollan en medios con alta presión osmótica y esto limita su rendimiento en los procesos mencionados. Se realizaron diversas fusiones de protoplastos entre levaduras osmotolerantes y diferentes cepas industriales de S. cerevisiae con el objeto de obtener híbridos que reúnan características de interés industrial de ambos parentales, para luego caracterizarlos principalmente en cuanto a su comportamiento en medios hiperosmóticos. Las fusiones de protoplastos realizadas entre las levaduras S. cerevisiae P-158 y Torulaspora delbrueckii CBS-813 y entre S. cerevisiae UCD-522 y Debaryomyces hansenii NRRL Y-7393, dieron como resultado productos de fusión estables que adquirieron el carácter osmotolerante. Estos productos de fusión y las cepas parentales fueron estudiados con respecto a su tolerancia osmótica y a otros aspectos fisiológicos como: morfología, asimilación y fermentación de azúcares, patrones electroforéticos de cromosomas y proteínas, cinética de crecimiento en medios de diferente osmolaridad, producción de polihidroxialcoholes y mecanismos de transporte de monosacáridos a través de la membrana plasmática. Al estudiar el efecto que tienen elevadas concentraciones de NaCl sobre el funcionamiento celular y el desarrollo del cultivo se observó: disminución de la μmax de crecimiento; disminución del rendimiento en la producción de biomasa; aumento de la síntesis y de la retención intracelular de polioles; alteración del potencial de membrana (Δψ)de las células; alteración del transporte de monosacáridos; disminución de la velocidad de consumo específico de oxígeno en presencia de glucosa; alteración de los patrones electroforéticos de proteínas totales y de membrana plasmática.

Abstract:
The most useful yeast for the industry is still being Saccharomyces cerevisiae, however this specie is not osmotolerant, and because some particular industrial processes are carried out on high osmotic environment, the yields of those processes are not as high as desired. There are some osmotolerant yeast species like Debaryomyces hansenii, Torulaspora delbrueckii, Schizosaccharomyces octosporus. Some of them are used on food manufacturing industry, but also are found as contaminant on other processes. The aim of this work was to develop yeast strains capable to being used as S. cerevisiae but also with the osmotolerant characteristic. We have carried out protoplast fusion between different industrial strains of S. cerevisiae and osmotolerant yeasts and we studied and characterized the obtained hybrids. The fusion between S. cerevisiae P-158 and T. delbruecki CBS-813, and between S. cerevisiae UCD-522 and D. hansenii NRRL Y-7393, yielded stabled hybrids which showed the desired characteristics of the parental strains. The fusion products as wells as their parental strains were studied in order to characterize their physiological behavior in high osmotic environments and also in general aspects as morphology, sugar assimilation and fermentation, proteins and chromosomal electrophoretical profiles, growth kinetics, polyhidroxyalcohols production and monosaccharides membrane transport mechanism. Studying the impact of high NaCl concentrations to the cell physiology, we observed that the maximum specific growth rate and the biomass yields decreased; the synthesis and accumulation of intracellular poliols increased; a membrane potential were modified; the monossaccharides transport were altered; the specific comsuption oxygen rate in media contained glucose decreased and that the electrophoretical profiles of total and plasmatic membranes proteins were modified.

"Estudio y selección de levaduras aisladas de uvas y mostos de la Provincia de San Juan" (1940). Dubos, Roberto A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo se han estudiado las levaduras, aisladas por el método de Lindnar, de uvas, mostos y barras de moscatol, criolla y cereza del departamento 25 de mayo de la provincia de San Juan. Se da una breve reseña histórica de la fermentación alcohólica y se consignan los antecedentes sobre los trabajos realizados en el país mereciendo destacarse los de Lojoune L.M. (12), Pazo (18) y Dalvis P. (2). Se hizo el estudio empleando los medios de cultivo y los métodos de investigación clásicos para este tipo de trabajo; algunos de ellos se modificaron convenientemente. De acuerdo con los resultados obtenidos con las 217 cepas aisladas y clasificadas, se obtuvieron: 179 cepas del tipo s. caravisiae-ellipsoideus (81.6%) 12 cepas del tipo ??? (5,5%) 10 cepas del tipo apiculado (4,6%) 10 cepas del tipo Torulopsis (4,6%) 6 cepas del tipo Rhodotorula (2,8%) Pocas fueron las levaduras apiculadas aisladas en el transcurso de las experiencias, por lo cual no se cree que sean estas las que inician la fermentación alcohólica de los mostos en la República argentina. Por la resistencia al alcohol que presentan gran parte de las levaduras consideradas como nada fermentadoras (el 50% resisten superiores a 4°, no creo conveniente la aplicación de la fermentación llamada "supercuatro". Siendo el principal objeto de este trabajo la aplicación posterior a la industria de las buenas levaduras indígenas de fomentación, se hicieron varios ensayos para eterminar el rendimiento alcohólico, la resistencia al alcohol y la resistencia a SO2. Por su alto poder fermentativo y su rápida fermentación, se distinguen las levaduras correspondientesal tipo I de las curvas de fomentación. Todos estos hechos se resumen en Conclusiones, en el capítulo correspondiente. En la parte final del trabajo se dan 24 fichas bibliográficas, además fotografías de los distintos tipos de desarrollo en estría en agar de mosto de malta, dibujos a la pluma de los diferentes tipos de levaduras, y una fotografía del aparato empleado para determinar el rendimiento alcohólico. Por último figuran también 10 gráficos de los correspondientes tipos de curvas de fermentación, los 7 primeros corresponden a levaduras del tipo S. ??? y los tres úñtimos a las restantes.

"Estudios anatómicos en paleofloras del aptiano de Antártida y Patagonia y su comparación" (2010). Vera, Ezequiel Ignacio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo principal de la presente Tesis Doctoral ha sido el estudio de plantas fósiles de edad aptiana procedentes de Antártida y Patagonia, con énfasis en especímenes con anatomía preservada. Las muestras estudiadas proceden de la Formación Cerro Negro, aflorante en Isla Livingston (Antártida), y del Grupo Baqueró (Formaciones Anfiteatro de Ticó, Bajo Tigre y Punta del Barco), localizado en Patagonia. Los ejemplares permineralizados procedentes de la Formación Cerro Negro han permitido identificar nuevos taxones para la ciencia. En particular, se destacan cuatro nuevos géneros y especies del Orden Cyatheales, dos nuevas especies del género Millerocaulis (Familia Osmundaceae), y un nuevo género y especie de briofita. Además, se estudiaron los primeros restos permineralizados de Marattiaceae y Cycadales. Esta Tesis incluye también el primer análisis exhaustivo de restos permineralizados de criptógamas para la unidad. Como complemento, se estudiaron ejemplares preservados como impresiones y palinomorfos dispersos procedentes de la misma unidad, entre los cuales se identificaron representantes de las Osmundaceae, Dicksoniaceae, Cyatheaceae, pteridospermas, cycadofitas, Araucariaceae, Podocarpaceae, Pentoxylales y esfenopterídeas. Entre los ejemplares procedentes del Grupo Baqueró, se identificaron y estudiaron por primera vez maderas gimnospérmicas, las que permitieron identificar una nueva especie del morfogénero Agathoxylon y una nueva especie de Brachyoxylon. Además, se estudiaron pecíolos y rizomas anatómicamente preservados de gleicheniáceas, los que permitieron definir un nuevo género y especie de esta familia de helechos tan abundante en la unidad. Los restos fósiles preservados como improntas permitieron identificar taxones previamente reportados para la unidad (Gleichenites san‐martinii,Hausmannia papilio, Araucaria grandifolia). En particular, se describen por primera vez las esporas de Gleichenites san‐martinii Halle emend. Herbst. Si bien estudios previos han sugerido que el estrato arborescente de la comunidad registrada en la unidad antártica habría estado compuesto exclusivamente por gimnospermas, las estimaciones de alturas realizadas en esta investigación sugieren que algunos helechos arborescentes habrían rivalizado en altura con las gimnospermas más altas de la región. La existencia de algunos grupos de helechos en la Formación Cerro Negro (ej. Marattiaceae, Dicksoniaceae, Cyatheaceae), muchos de ellos presentando una importante abundancia y diversidad, sugerirían condiciones climáticas cálidas y húmedas durante el Aptiano en la Antártida. La comparación realizada entre ambas paleofloras estudiadas muestra que la proporción de representación de los grandes grupos de plantas (plantas terrestres no vasculares, licofitas, equisetáceas, pteridofitas, gimnospermas y angiospermas) es comparable en ambas unidades. Ambas asociaciones muestran a los helechos y a las gimnospermas como grupos dominantes (aproximadamente 80 % de la diversidad total). Entre las pteridofitas, se ha observado que el Orden Cyatheales es el grupo más diverso en la Formación Cerro Negro, mientras que en el Grupo Baqueró la mayor diversidad la presentan las Gleicheniaceae. Las gimnospermas presentan en ambas unidades una gran proporción de especies de Bennettitales, mientras que las Gnetales, Cupressaceae, Ginkgoales y Angiospermas se registran únicamente en las unidades patagónicas.

Abstract:
The aim of this Doctoral Thesis was the study of Aptian fossil plants from Antarctica and Patagonia, with focus on specimens with preserved anatomy. The studied samples were collected in the Cerro Negro Formation, which crops out in Livingston Island (Antarctica), and the Baqueró Group (Anfiteatro de Ticó, Bajo Tigre and Punta del Barco formations), located in Patagonia. The permineralized specimens recovered from the Cerro Negro Formation allowed the identification of new taxa, such as four new genera and species of the Order Cyatheales, two new species of the genus Millerocaulis (Family Osmundaceae), and a new genus and species of moss. Furthermore, the first permineralized remains of Marattiaceae and Cycadales were studied. This Thesis also includes the first exhaustive analysis of cryptogamic permineralized remains for the unit. As a complement, specimens preserved as impressions and disperse palynomorphs, contained in the same stratigraphic unit, were studied. Among them, several groups of plants were identifided, such as representatives of the Osmundaceae, Dicksoniaceae, Cyatheaceae, pteridosperms, cycadophytes, Araucariaceae, Podocarpaceae, Pentoxylales, and sphenopteridean foliage. Among the specimens from the Baqueró Group, gymnospermous wood was identified and studied for the first time, allowing the recognition of a new species of Agathoxylon, and a new species of Brachyoxylon. Furthermore, anatomically preserved petioles and rhizomes of gleicheniaceous ferns were studied, allowing the definition of a new genus and species of this fern Family, highly abundant in the unit. Fossil remains preserved as impressions consist in previously reported taxa (Gleichenites san‐martinii, Hausmannia papilio, Araucaria grandifolia). In particular, the spores of Gleichenites san‐martinii Halle emend. Herbst are described for the first time. Although previous studies have suggested that the arborescent stratum of the palaeocomunity recorded in the Antarctic unit would have been exclusively composed by gymnosperms, the height estimations made in this research suggest that some of the tree ferns would have rivalize in height with the tallest gymnosperms of the region. The existence of some groups of ferns in the Cerro Negro Formation (e.g. Marattiaceae, Dicksoniaceae, Cyatheaceae), many of them presenting an important abundance and diversity, would suggest warm and humid climatic conditions during the Aptian in Antarctica. The comparison made between both studied palaeofloras shows that the percent of representation of major groups of plants (non‐vascular terrestrial plants, licopsids, equisetaleans, ferns, gymnosperms and angiosperms) is comparable between the units. In both associations, ferns and gimnosperms are the dominant groups (approximately 80 % of the total diversity). Among the pteridophytes, the Order Cyatheles is the most diverse in the Cerro Negro Formation, whereas in the Baquero Group the greatest diversity is attained by the Gleicheniaceae. Bennettitales are, among the gymnosperms, the most diverse group in both units, while the Gnetales, Cupressaceae, Ginkgoales and angiosperms are exclusively recorded in the Baqueró Group.

"Estudios bioestratigráficos y paleoambientales de la formación Santa Máxima, paleozoico superior, Provincia de Mendoza, República Argentina" (1987). Ottone, Eduardo Guillermo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Formación Santa Máxima aflora en una amplia faja de rumbo aproximado NE-SO, en las quebradas de los Cerros Bayos y los Manantiales, departamento de Las Heras, Provincia de Mendoza. Infrayecen a esta unidad sedimentitas de la Caliza La Cruz (Cámbrico) y del Grupo Villavicencio (Devónico), y la suprayacen rocas del Grupo Choiyoi(Permo-Triásico) y sedimentos de coluvio/aluvio cuartáricos. A partir del reconocimiento detallado de 12 secciones geológicas se pudieron caracterizar cuatro facies sedimentarias. Facies Sedimentaria A inferior y superior (facies fluviales), Facies Sedimentaria B (facies de planicie de mareas), Facies Sedimentaria C (facies transicionales de fan delta), y Facies Sedimentaria D (facies marinas distales principalmente turbidíticas). Estas sedimentitas se habrían depositado en un ambiente litorial, con un nivel de mar inestable. La evolución paleoambiental de la cuenca de depositación puede esquematizarse a partir de la definición de tres momentos: t^0, t'y t". En t^0 (Carbonífero medio tardío-Carbonífero tardío), en el área de los Cerros Bayos, habría dominado un ambiente fluvial, (Facies Sedimentaria A inferior) y hacia el sur un medio marino neto (Facies Sedimentarias C y D). En t' (Carbonífero tardío-Pérmico inferior), se habría producido la trangresión efectiva de toda la comarca Manantiales-Cerros Bayos (Facies Sedimentaria B), y más tarde en t"(Pérmico inferior), luego de un lento proceso regresivo, se habrían hecho presentes nuevamente en la zona de los Manantiales depósitos continentales (Facies Sedimentaria A superior). t^0 el clima habría sido frío y húmedo registrándose en ocasiones el congelamiento parcial de los espejos de agua, mientras que en t'y fundamentalmente en t", el clima habría sido más templado y algo más árido. El estudio sistemático de la megaflora permitió determinar la presencia de 12 especies, restringidas en su mayoría a los niveles basales de la formación. El listado de las mismas es el siguiente: Fedekurtzia argentina (Kurtz)Archangelsky, Nothorhacopteris argentinica (Geinitz) Archangelsky, Botrychiopsis weissiana Kurtz, Bumbudendron pagancianum Archangelsky, Azcuy et Wagner, Bumbudendron nitidum Archangelsky, Azcuy et Wagner, Licópsida A, ?Calamites sp; Ginkgophyllum sp; Cordaites sp; Cordaicarpus chicheriensis Lele, Cordaicarpus cf. C. emarginatus Walcom y Forma A. El reconocimiento sistemático de los palinomorfos posibilitó determinar 127 especies, de las cuales 13 son especies nuevas y 10 se citan por primera vez en nuestro país. el listado de los mismos es el siguiente: Leiotriletes directus Balme et Hennelly, Leiotriletes sp., Calamospora hartungiana Schopf, Wilson et Bentall, Punctatisporites gretensis Balme et Hennelly, Punctatisporites gretensis forma minor Hart, Punctatisporites glaber (Naumova) Playford, Punctatisporites humilis Azcuy, Punctatisporites malangranensis sp. nov., Punctatisporites sp. A, Punctatisporites sp. B, Retusotriletes anfractus Menéndez et Azcuy, Granulatisporites varigranifer Menéndez et Azcuy, Granulatisporites austroamericanus Archangelsky et Gamerro, Cyclogranisporites microgranus Bharadwaj, Cyclogranisporites microgranulatus (Menéndez et Azcuy) Archangelsky et Gamerro, Cyclogranisporites sp., Osmundacidites senectus Balme, Apiculatisporis cornutus (Balme et Hennelly)Hoeg et Bose, Apiculatisporis sp., Apiculiretusispora variarnata (Menéndez et Azcuy) Menéndez et Azcuy, Apiculiretusispora tuberculata Azcuy, Apiculiretusispora alonsoi sp. nov., Apiculiretusispora manantielensis sp. nov., Apiculiretusispora sp,; Lophotriletes intermedius Azcuy, Lophotriletes cursus Upshaw et Creath, Lophotriletes rarus Bharadwaj et Salujha, Lophotriletes sp. A, Lophotriletes sp. B, Acanthotriletes sp. A, Acanthotriletes sp. B, Acanthotriletes sp. C, Apiculatasporites sp.; Verrucosisporites chiqueritensis sp. nov., Verrucosisporites sp. A, Verrucosisporites sp. B, Raistrickia densa Menéndez, Raistrickia rotunda Azcuy, Raistrickia sp. A, Raistrickia sp. B, Horriditriletes uruguaiensis (Marques-Toigo) Archangelsky et Gamerro, Horriditriletes gondwanensis (Tiwari et Moiz) Foster, Convolutispora muriornata Menéndez, Convolutispora ordoñezii Archangelsky et Gamerro, Convolutispora maximensis sp. nov., Foveosporites hortonensis (Playford) Azcuy, Microreticulatisporites sp., Dictyotriletes sp., Reticulatisporites sp. A, Reticulatisporites sp. B, Ahrensisporites cf. A. cristatus Playford et Powis, Limatulasporites sp., Lundbladispora braziliensis (Pant et Srivastava) Marques-Toigo et Pons, Lundbladispora riobonitensis Marques-Toigo et Picarelli, Ancistrospora verrucosa Menéndez et Azcuy, Cristatisporites inconstans Archangelsky et Gamerro, Cristatisporites crassilabratus Archangelsky et Gamerro, Cristatisporites longispinosus Menéndez, Cristatisporites rollerii sp. nov., Cristatisporites saltitensis sp. nov., Cristatisporites chacoparanaensis sp. nov., Cristatisporites sp. A, Cristatisporites sp. B, Cristatisporites sp. C, Cristatisporites sp. D, Kraeuselisporites volkheimerii Azcuy, Kraeuselisporites sp. A, Kraeuselisporites sp. B, Kraeuselisporites sp. C, Vallatisporites arcuatus (Marques-Toigo) Archangelsky et Gamerro, Vallatisporites sp. A, Vallatisporites sp. B, Spinozonotriletes sp., Spelaeotriletes ybertil (Marques-Toigo) Playford et Powis, Spelaeotriletes sp., Sublagenicula brasiliensis (Dijkstra) Dybová-Jachowicz, Jachowicz, Karczewska, Lachkar, Loboziak, Piérart, Turnau et Zoldani, Cannanoropollis densus (Lele) Bose et Maheshwari, Plicatipollenites malabarensis (Potonié et Sah) Foster, Plicatipollenites gondwanensis (Balme et Hennelly) Lele, Circunplicatipollis plicatus Ottone et Azcuy, Potonieisporites novicus Bharadwaj, Potonieisporites magnus Lele et Karim, Potonieisporites neglectus Potonié et Lele, Caheniasaccites densus Lele et Karim, Caheniasaccites ovatus Bose et Kar, Protodisaccites sp., Crucisaccites sp., Vestigisporites rudis Balme et Hennelly, Limitisporites hexagonalis Bose et Maheshwari, Limitisporites sp., Pityosporites sp. A, Pityosporites sp. B, Alisporites sp., Platysaccus trumpii sp. nov., Protohaploxypinus claroensis Menéndez, Protohaploxypinus sp. A, Protohaploxypinus sp. B, Lueckisporites stenotaeniatus Menéndez, Lueckisporites brasiliensis Cauduro, Lueckisporites sp., Staurosaccites cordubensis Archangelsky et Gamerro, Hamiapollenites insolitus (Bharadwaj et Salujha) Balme, Striatopodocarpites solitus (Bharadwaj et Salujha) Foster, Striatoabieites sp., ?Striomonosaccites sp. A, ?Striomonosaccites sp. B, Vittatina sp., Monosulcites sp., Pakhapites fusus (Bose et Kar) Menéndez, Portaliteslos gondwanensis Nahuys, Alpern et Ybert, Portalites baculus Gutierrez et Césari, Villosacapsula variornata sp. nov., Sylvanidium sp., Navifusa sp., Ungulites curvidentatus sp. nov., Nereigenys mendozaensis sp. nov., Nereigenys curvus sp. nov., Leodicites sp., Paleoenonites sp., Staurocephalites sp. A, Staurocephalites sp. B, Marlenites sp., Schistomeringos sp., Escolecodonte A, Escolecodonte B y Escolecodonte C. Las distintas asociaciones polinológicas se estudiaron además a partir de la confección de diagramas polínicos y mediante la utilización conjunta de los índices de correlación de Simpson y Jaccard. En los niveles basales de la formación (t^0), la vegetación dominante en ambiente continental fue de carácter hidro-higrófilo a higro-mesófilo con licofitas, articuladas y elementos de probable afinidad pteridospermatofita y progimnospermatofita. En los niveles marinos, el plancton dominante perteneció al Grupo Polygonomorphitae. En los niveles continentales del tope de la formación (t"), la vegetación dominante fue de carácter higro-mesófilo a meso-xerófilo con dominio de licofitas, articuladas, pteridospermatofitas, cycadofitas, ginkgofitas y coniferofitas."> En los niveles marinos de la parte media a superior (t'y t") dominan la asociación los Eunicidae y Leiofusidae. El estudio del querógeno por luz transmitida, luz reflejada y análisis químico elemental permitió definir tres facies orgánicas: Facies Orgánica A (correlacionable con la Facies Sedimentaria A inferior) de alto contenido vitrinítico y exinítico, Facies Orgánica B (correlacionable con las Facies Sedimentarias B y C) con porcentajes variables de inertinita, exinita y vitrinita, y Facies Orgánica C (correlacionable con la Facies Sedimentaria D) de bajo contenido orgánico, principalmente inertinítico. A partir del análisis de la mega y microflora contenida en distintos niveles de la formación se definieron tres asociaciones fosilíferas: Asociación inferior, Asociación media y Asociación superior. La megaflora de la Asociación inferior se refiere a la zona Nothorhucopteris argentínica-Botrychiopois weissiana-Ginkgophyllum diazii (Archangelsky et Azcuy, 1985: Archangelsky et al., 1986 a), mientras que la microflora incluye elementos comunes de la Zona Ancistrospora (Azcuy et Jelín, 1980: Azcuy, 1986) o Zona Ancistrospora-Potonieisporites (Azcuy et Gutierrez, 1984) o su equivalente Subzona Raistrickia-Plicatipollenites de la Zona Potonieisporites-Lundblandispora (Césari, 1985a y c y 1986b). La Asociación microflorística superior se correlaciona con la Zona Cristatisporites (Russo et al., 1980) y con la Palinozona III (Azcuy et Jelín, op. cit., Azcuy, op. cit.). En acuerdo con lo antedicho, la Asociación inferior tendría una antigüedad Carbonífero medio tardío-Carbonífero tardío y la Asociación superior Pérmico temprano. La Asociación media, principalmente por su ubicación entre ambas asociaciones estaría repesentando la transición Carbonífero tardío-Pérmico temprano. La edad de la Formación Santa Máxima sería entonces Carbonífero tardío a Pérmico temprano

"Estudios biológicos sobre Aleyrodidae (Insecta: Hemiptera) con especial énfasis en el complejo Bemisia tabaci (Gennadius) y su posible control biológico" (2000). Viscarret, Mariana Mabel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las "moscas blancas" (Homoptera: Aleyrodidae), se encuentran entre los insectos plaga de mayor importancia económica a nivel mundial. La presente tesis tuvo como objetivo conocer las especies de moscas blancas presentes en la Argentna su distribución, sus plantas hospederas y sus enemigos naturales parasitoides asociados; con particular énfasis en el complejo Bemisia tabaci y su posible control biológico. Como principales aportes de la investigación realizada pueden mencionarse: l-el mayor conocimiento de los aleiródidos de interés económico, sus plantas hospederas y sus enemigos naturales parasitoides. Estos resultados incluyen el registro de especies no citadas con anterioridad para la Argentina; 2-respecto al complejo B. tabaci, se ha registrado un aumento de su distribución geográfica original, las plantas hospederas que afecta y sus enemigos naturales parasitoides. Asimismo se ha determinado la presencia de diferentes biotipos para el mencionado complejo: el biotipo B y dos biotipos de carácter local; 3-la caracterización biológica y taxonómica de uno de los biotipos locales registrados para el complejo B. tabaci afectando cultivos de soja y algodón. Se ha propuesto denominar este biotipo como ARG1 (Argentina l); y 4-el análisis de los aspectos biológicos básicos de Encarsia porteri (Hymenoptera: Aphelinidae), el parasitoide más frecuentemente encontrado sobre el complejo B. tabaci biotipo ARGl.

Abstract:
Whiteflies (Homoptera: Aleyrodidae) are among the most relevant insect plagues with economical implicatiors worldiwide. The goal of this dissertation is to survey the whitefly species present in Argentina,establish their biopographical distribution, their host plants, and their associated parasitoids; special emphasis is placed on the Bembisia tabaci complex and its possible biological control. The following are among the main accomplishments of this dissertation: l-it improves the understanding of the economically relevant aleyrodids, their host plants, and their parasitoids. This survey has recorded species of previously unknown occurrence in Argentina; 2-it records an increase in the original biogeographical distribution of the B. tabaci complex, the number of host plants species it affects, and the number of its parasitoids species. In addition, it determines the presence of different biotypes for this complex: the B biotype and two local biotypes; 3-it characterizes one of the local biotypes for the B. tabaci complex biologically and taxonomically. This biotype affects soy and cotton crops. It is here named ARGl (Argentina l); and 4-it documents the basic biological characteristics of the parasitoid Encarsia porteri (Hymenoptera: Aphelinidae). This is the most frequent parasitoid for the biotype ARGl B. tabaci complex.

"Estudios biológicos sobre encarsia formosa Gahan y Eretmocerus corni Haldeman para su uso en el control biológico de Trialeurodes vaporariorum (Westwood) " (1998). López, Silvia Noemí. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La mosca blanca de los invernáculos Trialeurodes vaporariorum (Hemiptera: Aleyrodidae) es una especie fitófaga que afecta numerosos cultivos hortícolas. El objetivo de esta tesis fue estudiar los principales atributos biológicos de los parasitoides Encarsia formosa y Eretmocerus corni (Hymenoptera: Aphelinidae), y evaluar su potencial como agentes de biocontrol del insecto plaga. Con el objetivo de realizar los estudios biológicos y la cría de los parasitoides, se determinó la preferencia de T. vaporariorum por cuatro hospederas de importancia económica. Además se estimó el tiempo de desarrollo y la supervivencia de sus estados inmaduros sobre zapallito y tomate. Los atributos biológicos de los parasitoides se evaluaron en laboratorio utilizando al tomate como planta hospedera. Se determinó el tiempo de desarrollo de ambos parasitoides a 26 °C y 30°C. E. corní tuvo un tiempo de desarrollo mayor que E. formosa a ambas temperaturas. y las dos especies alcanzaron el estado adulto más lentamente a 26°C que a 30° C (P<0,05). Para cada parasitoide se determinó la longevidad y los principales parámetros poblacionales mediante la construcción de una tabla de vida y de fertilidad. Los resultados para El formosa fueron: longevidad media del adulto: 10,4 días; fertilidad especifica por edades media (mx): 15,2 hembras/hembra/dia; tasa neta de reproducción (Ro): 150,5 hembras/hembra; tiempo generacional (T)= 18 días; tasa intrínseca de crecimiento poblacional (rm)=0,28 hembras/hembra/día. Los resultados para E. corni fueron: longevidad media del adulto: 12,8 días (hembras) y 7,0 días (machos); proporción de sexos: 0,57 hembras-0,43 machos; fertilidad específica por edades media (mx)= 5,9 hembras/hembra/día; tasa neta de reproducción (Ro): 100,8 hembras/hembra; tiempo generacional (T)= 23,7 días; tasa intrínseca de crecimiento poblacional (rm): 0,20 hembras/hembra/día. Se evaluó el parasitismo y la eficiencia de búsqueda de E. formosa en relación con la disponibilidad de huésped. El parasitoide exhibió una respuesta funcional de tipo ll de Holling con un parasitismo máximo de 13,8 ninfas/día a una densidad de 40 ninfas/día. La interacción entre ambos parasitoides se evaluó mediante dos estudios bajo condiciones experimentales diferentes: a) controladas en laboratorio: se analizó el efecto de |a interacción sobre el parasitismo de cada especie. E. formosa se vio afectada por la presencia de E. comi con recurso limitado y no limitado (P<0,05); b) semicontroladas en invernáculo: se analizó el efecto de la liberación múltiple de los parasitoides sobre la mortalidad de Ia plaga. La liberación múltiple provocó el mismo parasitismo total que cualquiera de los parasitoides por separado (P>0,05). Puede concluirse que ambos parasitoides son potencialmente eficientes para controlar a la plaga. E. formosa presentaría ventajas respecto de E. comi por poseer una mayor tasa intrínseca de crecimiento poblacional (rm) producto de su reproducción por partenogénesis deuterotoca, su mayor fertilidady su menor tiempo de desarrollo.

Abstract:
The greenhouse whitefly Trialeurodes vaporariorum (Hemiptera: Aleyrodidae) is a herbivore species that affects numerous crops of high economical value. The goal of this thesis was to study the main biological characteristics of the parasitoids Encarsía formosa and Eretmocerus corni (Hymenoptera: Aphelinidae), and to evaluate their potencial use as biological agents to control this pest. In order to carry out the biological studies and the rearing of the parasitoids, the preference of T. vaporariorum for four host plants was determined. Moreover developmental time and suvirval rate of its inmature stages were estimated on squash and tomato. The biological attributes of the parasitoids were determined in controlled conditions using the tomato as host plant. Preimaginal developmental time for both parasitoids was measured at 26°C and 30°C. E. corni had a longer developmental time than E. formosa at both temperatures, and both species reached their adult stage later at 26°C than at 30° (P<0,05). The Longevity and the main population parameters of each parasitoids were also analysed. In order to do so, a life table was constructed. The results for E. formosa were: mean Longevity of adults = 10,4 days; mean age-specific fertility (mx)= 15,2 females/female/day; net reproductive rate (Ro)= 150,5 females/female; generational time (T)= 18 days; intrinsic rate of natural increase (rm)= 0,28 females/female/day. Results for E. corni were as follows: mean longevity of adults= 12,8 days (females) and 7,0 days (males); mean sex rate= 0,57 females-O.43 males; mean age-specific fertility (mx)= 5,9 females/female/day; net reproductive rate (Ro)= 100.8 females/female; generational time (T)= 23,7 days; intrinsic rate of natural increase (rm)=0,20 females/female/day. Parasitism pattern and functional response of E. formosa were evaluated in relation to density of its host. It showed a Holling type II functional response with a maximum parasitism of 13,8 nynphs/day at 40 nynphs/day density. The interspecific interaction between parasitoids was analysed in two studies under different experimental conditions: a) laboratory controlled conditions: the goal was to analyse the effect of the interaction on the parasitism of each species. E. formosa was affected by the presence of E. corni with and without limited resourse (P<0,05); b) greenhouse semicontrolled conditions: the objetive was to study the effect of multiple release of the parasitoids on the whitefly's mortality. It was observed that the multiple release produced the same total parasitism as each parasitoid by itself (P>0,05). It can be concluded that both parasitoids are potentially efficient to control the pest. E. formosa could be more advantageous with respect to E. comi because of its bigger intrinsic rate of natural increase (rm)as a result of its deuterotokous reproductive tactics, its bigger fertilityand its shorter developmental time.

"Estudios biológicos sobre los parasitoides, Mastrus ridens Horstman y Ascogaster quadridentata Wesmael, para evaluar su potencial como agentes de control biológico de Cydia pomonella (L.) plaga clave del manzano" (2015-05-29). Hernández, Carmen Marcela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La carpocapsa (Cydia pomonella) es una de las plagas clave del cultivo de pomáceas en todo el mundo. En la Argentina, si bien actualmente se están implementando medidas de control de bajo impacto ambiental, como la técnica de confusión sexual, la principal forma de control continúa siendo el empleo de productos químicos. El objetivo general de esta tesis fue estudiar aspectos básicos de la biología de Mastrus ridens y Ascogaster quadridentata a los efectos de evaluar su potencial como agentes de control de Cydia pomonella en nuestro país. Los principales aportes de este trabajo son: -Disponibilidad de un sistema de cría a nivel experimental para M. ridens y A. quadridentata en condiciones de laboratorio. -Conocimiento de los principales atributos biológicos y poblacionales de A. quadridentata sobre C. pomonella. -Estudio de la fecundidad y preferencia de M. ridens sobre dos especies de lepidópteros plaga presentes en nuestro país (C. pomonella- Grapholita molesta). -Determinación de la selectividad de los principales insecticidas utilizados en la producción de pomáceas para M. ridens. -Colonización y evaluación del establecimiento de M. ridens y A. quadridentata en el Alto Valle de Rio Negro. Los estudios realizados proporcionaron información y herramientas para impulsar el empleo de estos parasitoides a través del desarrollo de una estrategia de control biológico clásico de C. pomonella.

Abstract:
The codling moth is a key pest of apple crops. In Argentina, pest management strategies mainly relay on chemical control, although recently the technique of sexual confusion has been implemented with success. The aim of this thesis was to study the potential of the parasitoids, Mastrus ridens and Ascogaster quadridentata as biological control agents of Cydia pomonella in our country. The most important contributions from this thesis are: -Better understanding of rearing methodologies for M. ridens y A. quadridentata in the laboratory. -Knowledge of the reproductive biology and population parameters of A. quadridentata in C. pomonella. -Knowledge of the biology and host preference by M. ridens for C. pomonella and G. molesta. -Determination of the side effect of some pesticides use in apple crops on M. ridens. -Colonization and evaluation of establishment of M. ridens y A. quadridentata in the field. These results provided useful information to enhance the use of the parasitoids in classical biological control strategies against C. pomonella in Argentina.

"Estudios biológicos y enzimáticos en Chlorella kessleri (trebouxiophyceae, chlorophyta)" (2003). Juárez, Angela Beatriz. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo de tesis, se abordaron estudios sobre distintos aspectos de la biología de una cepa de Chlorella kessleri, aislada de la Laguna verde (Complejo Termal Copahue, Neuquén, Argentina), que no había sido estudiada previamente. Se realizó la caracterización morfológica, ultraestructural, bioquímica y fisiológica de esta cepa autóctona y se asignó su correcta identidad taxonómica. La identificación de esta especie constituyó una cita nueva para la Argentina, el segundo registro mundial de la especie en un ambiente natural, y una nueva cita de una especie del género Chlorella en un ambiente de origen volcánico. Además, se realizaron estudios enzimáticos, relacionados con los pasos regulatorios claves del camino biosintético de las clorofilas. Se determinaron, por primera vez en Chlorella kessleri, las actividades de dos enzimas involucradas en el primer paso regulatorio de este camino (síntesis del primer metabolito, ácido d -aminolevulínico), detectándose la presencia de actividad de las enzimas d -aminolevulínico sintetasa y g ,d -dioxovalerato transaminasa. Se estudió y caracterizó por primera vez en una Chlorophyta y por segunda vez en algas en general, la enzima del segundo paso regulatorio clave del camino (uroporfirinógeno decarboxilasa, UroD). Los estudios realizados sobre la actividad de esta última enzima en función de distintas condiciones (fase de crecimiento del cultivo, pH, temperatura, tiempo de incubación, tiempo de almacenamiento, concentración de proteínas, concentración de sustrato) permitieron caracterizar la UroD de C. kessleri y sentar las bases para la determinación de su actividad en las microalgas. Adicionalmente, se llevó a cabo la purificación parcial de esta enzima y se estableció que su estructura correspondería a un heterodímero de ca. 116 ± 7 kDa constituido por dos monómeros de ca. 72 ± 7 kDa y 66 ± 5 kDa de masa molecular. Al mismo tiempo, se estudiaron dos aspectos importantes relacionados con la biología aplicada de las microalgas: La potencial aplicación de esta cepa y alguna de sus propiedades como índice de contaminación ambiental con metales y xenobióticos, analizando el efecto de un metal pesado (cobre) y un hidrocarburo aromático polihalogenado (hexaclorobenceno) sobre la actividad de la enzima UroD. Se observó que, en las condiciones ensayadas, C. kessleri tolera concentraciones de cobre más elevadas que las informadas para otras especies del género (no se registró inhibición de la tasa de crecimiento) y que este metal afecta principalmente el contenido de clorofila y la actividad de la enzima UroD. Mientras que el hexaclorobenceno afecta principalmente el crecimiento de la especie y su actividad UroD a tiempos cortos de exposición, existiendo una recuperación a tiempos más largos. Los resultados obtenidos muestran que la determinación de la actividad UroD puede constituir un biomarcador de la contaminación reciente con hidrocarburos aromáticos polihalogenados y de la toxicidad de niveles de cobre que no alcanzan a producir efectos ponderables sobre el crecimiento algal. La potencialidad de esta cepa como fuente de compuestos biológicamente activos, evaluando la actividad antimicrobiana de extractos extracelulares de cultivos axénicos de C. kessleri frente a 11 cepas de microorganismos patógenos. Estos extractos mostraron actividad inhibitoria frente a todas las cepas ensayadas, tres de las cuales corresponden a bacterias altamente patógenas y resistentes a las drogas antibacilares de uso clínico actual. Los resultados obtenidos muestran la potencialidad de los cultivos de C. kessleri para la extracción, aislamiento e identificación de metabolitos farmacológicamente activos que puedan ser producidos y utilizados en la industria farmacéutica.

Abstract:
This disertation deals with the study of different biological aspects of a Chlorella kessleri strain isolated from Laguna Verde (Complejo Termal Copahue, Neuquén, Argentina). It was carried out the morphological, ultrastructural, biochemical and physiological characterization and the correct taxonomical determination of this autochtonous strain. This species is a new record for Argentina, the second record in the world and a new specific recording of the genera for volcanic environments. In addition enzymatic studies related with the regulatory steps of the chlorophyll biosynthetic pathway were made. For the first time in C. kessleri the activity of two enzymes related with the first regulatory step of this pahtway were studied. Evidences of the activity of the enzymes d -aminolevulinic synthase and g ,d -dioxovalerate transaminase were detected. For the first time in a green algae (Chlorophyta) and for second time in an algae, it was studied and characterized the enzime uroporphyrinogen decarboxylase (UroD). The studies in the activity of the UroD in different conditions (growing culture phase, pH, temperature, incubation time, storage time, protein concentration and substrate concentration), allow to characterize the enzyme. In addition partial purificated enzyme was obtained and it was established that UroD is an heterodimer of ca. 116 ± 7 kDa formed by two monomers of ca. 72 ± 7 kDa and 66 ± 5 kDa. At the same time two important aspects related with the applied biology of the microalgae were studied: 1) The potential application of this strain as an index of heavy metal and xenobiotic environmental contamination. 2) The potential usage of this strain as an source of products with biological activity. Analizing the effect of the copper and hexachlorobenzene on the C. kessleri strain it was observed that this species has a higher rank of tolerance for this heavy metal than other species of the same genera. This metal affect the chlorophyll content and the activity of the UroD. On the other hand, the hexachlorobenzene affect the growing of the species and the UroD activity in short exposure times. The results show that the activity of the UroD it would be an excellent tool to establish the levels of contamination due to HCB or copper contamination. In the other aspect C. kessleri extracellular extracts were tested against 11 pathogenic strains, testing its inhibitory properties, the results were positive in all cases. The results show C. kessleri cultures potential as a source of pharmacological substance.

"Estudios biológicos, bioquímicos y genéticos de la línea IIB-MEL-J como modelo para el melanoma humano" (1991). Guerra, Liliana Noemí. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudios bioquímicos y moleculares del metabolismo de fructanos en respuesta a estreses ambientales en Gramíneas nativas" (1999). Puebla, Andrea Fabiana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se ha estudiado la respuesta a estrés por bajas temperaturas y déficit hídrico en Gramíneas nativas de regiones con climas contrastantes de la Argentina. El modelo de trabajo se basó en el análisis comparativo del metabolismo de fructanos y sacarosa en relación con estreses abióticos en especies nativas de Patagonia y otras del mismo género adaptadas a regiones con climas más benignos. Bromus pictus y Bromus auleticus, se compararon como especies patagónicas y del centro y norte de Argentina, respectivamente. Se analizaron los azúcares que contienen fructosa en plantas control y tratadas. Se estudiaron los patrones de fructanos y se determinó la composición de oligosacáridos de ambas especies. Se estudiaron las enzimas del metabolismo de sacarosa y fructanos. Se midieron la actividad de las enzimas SPS, SS, INV y SST. La actividad SST mostró aumentos constantes frente al estrés por frío en la especie patagónica. Se desarrollo un nuevo método enzimático-colorimétrico para medir la actividad SST. Se estudiaron algunas propiedades bioquímicas de esta actividad parcialmente purificada de vástagos de B. pictus tratados a 4 °C. La actividad SST de Bromus pictus mostró un pH óptimo entre 5,5 y 6, no se saturó a altas concentraciones de sacarosa y mantuvo el 55% de la actividad a 30°C en incubaciones realizadas a 0°C. Se realizaron estudios de homología y expresión a partir de ácidos nucleicos de plantas de B. pictus tratadas con bajas temperaturas utilizando sondas heterólogas de la 6-SFT de cebada. Se demostró que en la especie patagónica hay secuencias homólogas de ADN y ARN a las existentes en cebada. Por la técnica de RT-PCR se clonó un fragmento de 760 pb del ADNc de Bromus pictus usando oligonucleótidos específicos en zonas altamente conservadas en otros genes de fructosil transferasas. La comparación de secuencias mostró una alta homología con la 6-SFT de cebada, con otras enzimas del metabolismo de fructanos de mono y dicotiledóneas y con INV ácidas de plantas.

Abstract:
Low temperature and water stress treatments were assayed in plants of various species of Gramineae, belonging to different regions of Argentina. The experimental model was based in comparative studies of fructan and sucrose metabolism in relation with the abiotic stresses in native plants from Patagonia and other species of the same generous adapted to northern regions of Argentina with mild climatic conditions. Bromus pictus and Bromus auleticus were compared as patagonic and northern species respectively. Fructose-containing sugars were analysed. The fructan pool was studied and oligosaccharide composition was determined. Sucrose and fructan enzymes were studied. SPS, SS, INV and SST were assayed in control and treated plants in both Bromus species. Increasing levels of SST activity were observed in patagonic plants exposed to low temperature. A novel enzymatic-colorimetric method to assay SST activity was developed. Some biochemical properties of SST activity partially purified from shoots of Bromus pictus treated with low temperatures, were studied. SST activity of Bromus pictus has pH optimum between 5,5-6, was non-saturated at high concentrations of sucrose and maintained high activity at 0°C. Southern and northern analysis were made with tissues of low temperature treated plants of Bromus pictus, using the ADNc of barley 6-SFT as a probe. Bromus sequences of DNA and RNA hybridised with the ADNc of barley. A ADNc fragment of Bromus pictus was cloned by RT-PCR using specific primers with high homology with plant fructosyltransferases. Sequence comparison has shown a high homology of the ADNc fragment with the ADNc of barley 6-SFT, other mono and dicotyledon fructan genes and acid invertases of plants.

"Estudios básicos sobre el predador Podisus connexivus Bergroth (insecta-heteróptera-pentatomidae) para su utilización en control biológico de lepidópteros plagas del cultivo de soja" (1995). Saini, Esteban Daniel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las poblaciones de insectos perjudiciales a los cultivos fluctúan en su densidad comoresultado de una serie de factores, entre los que se encuentra la actividad reguladora de otras especies conocidas como enemigos naturales (predadores, parasitoides y entomopatógenos). El hombre aprovechó y manejó el control que ejercen estos agentes sobre las plagas, transformándolo en un método de control biológico. Entre los enemigos naturales, en este caso predadores, los pentatómidos asopinos son algunos de los agentes que más contribuyen a1 control biológico de larvas de lepidópteros plagas del cultivo de la soja. La correcta identificación de estos organismos predadores y la evaluación de su potencialidad comoagentes de biocontrol, permitirán incrementar la utilización de estas especies en futuras tácticas de control biológico. Conel objeto de realizar un análisis dirigido a establecer en laboratorio el potencial como agente de biocontrol de un pentatómido predador, se llevaron a cabo estudios biológicos tales como tiempo de desarrollo, fecundidad, preferencia alimentaria, capacidad de consumo, respuesta funcional e interacción con virus entomopatógenos. En una primera aproximación se eligió a Podisus connexivus, la especie más abundante y frecuente en el cultivo de la soja, para concretar dichos estudios, los que constituyen la base para otras investigaciones aplicadas, fundamentalmente de experimentación en el campo. Al mismo tiempo y con el fin de conocer más profundamente este importante grupo de enemigos naturales, se llevaron a cabo estudios morfológicos de las distintas especies de pentatómidos encontradas en cultivos de soja, que culminaron con la elaboración de claves para su identificación. Este trabajo permite distinguir claramente las especies fitófagas de las predadoras, lo cual es básico para poder controlar a las primeras y proteger a las segundas. Encuanto a P. connexivus, se describieron aspectos biológicos básicos; se determinaron las especies de lepidópteros plagas de la soja preferidas por este predador y los tamaños de larvas (niveles de dieta) másadecuados para su cria masiva; se estudió la respuesta funcional del agente a la densidad de una de sus presas habituales y se analizó la interacción del predador con el virus de la poliedrosis nuclear en otra especie. Los resultados obtenidos permiten decir que P. connexivus es un promisorio agente de biocontrol de larvas de lepidópteros plagas de 1a soja, y que luego de una etapa de experimentación en el campo, será posible desarrollar un paquete de Manejo Integrado de Plagas, que incluya la utilización de este predador como agente de regulación poblacional.

"Estudios cariológicos y de sistemática de las especies argentinas de Alstroemeriaceae" (1996). Sanso, Andrea Mariel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se presentan los resultados de estudios interdisciplinarios tendientes a aclarar las relaciones entre los géneros Bomarea y Alstroemeria. Se realiza el tratamiento taxonómico de las especies argentinas de la familia Alstroemeriaceae. Se presenta una breve historia nomenclatura de los géneros Alstroemeria y Bomarea y de las relaciones supragenéricas e infragenéricas. El tratamiento taxonómico incluye la posición sistemática de la familia, descripción de los géneros y clave para diferenciarlos, descripción y clave para reconocer las especies argentinas, sinonimias, ilustraciones, mapas de distribución y observaciones ecológicas de cada taxón. Para delimitar la posición sistemática de Bomarea y Alstroemeria, se realizaron observaciones morfológicas sobre: órganos subterráneos, fruto, semilla, polen, hoja, tallo, inflorescencia y morfología floral. Los estudios cariológicos incluyeron el análisis cariotípico de dos especies de Alstroemeria: A. psittacina y A. isabellana y dos especies de Bomarea: B. edulis y B. boliviensis. Se estudió el comportamiento meiótico de representantes de ambos géneros. Además, se dan a conocer por primera vez, valores de contenido de ADN de especies de Bomarea: B. boliviensis y B. macrocephala y de Alstroemeria: A. psittacina y A. isabellana, obtenidos mediante microdensitometría de Feulgen. Se evaluaron las semejanzas morfológicas entre las especies y entre 123 individuos de esos taxones. Para establecer esas relaciones fenéticas, se aplicaron técnicas numéricas: análisis de agrupamiento (fenogramas) y análisis de ordenación (componentes principales).

Abstract:
This work presents a delimitation between Alstroemeria and Bomarea on the basis of morphological, anatomical, karyological, ecological and distribution data. The Argentine species of Alstroemeriaceae are studied after a brief nomenclatural history of the genera and the supragenerical and infragenerical relationships. The taxonomic treatment includes keys to genera and species, descriptions, synonyms, illustrations, ecological observations and distribution maps. The following species are treated: Alstroemeria andina Phil. ssp venustula Ehr. Bayer, A. pseudospathulata Ehr. Bayer, A. pygmaea Herb., A.patagonica Phil., A. bakeri Pax, A. apertiflora Baker, A. isabellana Herb., A. aurea Graham, A. psittacina Lehm., A. presliana Herb., Bomarea edulis (Tuss.) Herb., B. macrocephala Pax, B. boliviensis Baker and B. stans Kranzl. With the aim of clarifying the systematic position of Bomarea and Alstroemeria, detailed morphological observations were made. The karyological studies include karyotype analysis of two Alstroemeria species: A. psittacina and A. isabellana and two Bomarea species: B. edulis and B. boliviensis. The meiotic behaviour of representives of both genera have been studied also. Nuclear DNA content of species of Bomarea y Alstroemeria have been estimated by Feulgen microdensitometry, and the differences between both genera were found to be significant. The phenetic relationships have been stablished using cluster and principal components analyses.

"Estudios cinéticos y mecanísticos de procesos fotoquímicos para el tratamiento de contaminantes en solución acuosa y fase gaseosa" (2015-03-18). Montesinos, Víctor Nahuel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta Tesis se estudió la remoción de contaminantes modelo de origen principalmente antrópico mediante el uso de Procesos Avanzados Oxidativos (PAOs) y Reductivos (PARs) térmicos y fotoasistidos. Como contaminantes de estudio se eligieron Cr(VI), nitrato, compuestos orgánicos volátiles (COVs), aldehídos volátiles (AVs) y óxidos de nitrógeno (NOx). La remoción de Cr(VI) en fase acuosa fue realizada por medio de dos procesos avanzados: 1) nanopartículas de hierro cerovalente (nZVI), tanto en la oscuridad como bajo irradiación UV-vis y 2) fotocatálisis heterogénea (FH) con TiO2 en presencia de ácido cítrico. Se analizó la influencia de pH, cantidad de catalizador, rango activo de los catalizadores en el espectro UVvis y presencia de O2, entre otros en la eficiencia y cinética de remoción. También se analizó la generación de intermediarios de reacción y el rango activo de los catalizadores en el espectro UV-Vis. Adicionalmente, se realizó la caracterización de los sólidos empleando técnicas fisicoquímicas como MEB/EDS, DRX, espectroscopía Raman, XPS, TXRF y TRMC. La remoción de nitrato se estudió en esta Tesis mediante FH bajo irradiación UV-A, empleando ácido fórmico como agente de sacrificio. Se observó la formación de amonio y nitrito en fase acuosa, y NOx en fase gaseosa. Con el objetivo de integrar procesos avanzados en fase acuosa y gaseosa, se hicieron ensayos preliminares de acoplamiento del reactor empleado en la fase acuosa para nitrato con sistemas de tratamiento gaseoso de NOx con radiación UV-C y generación de O3 y su combinación con TiO2. Por otra parte, se diseñó y construyó un reactor gaseoso relleno con TiO2 soportado en fibra de cuarzo que emplea radiación UV-A. Utilizando este último sistema acoplado al fotorreactor acuoso, se evaluó la eficiencia global del sistema en la remoción de nitrato para 0,08 mM ≤ o ≤ 8 mM, incluyendo la remoción oxidativa de los NOx en el reactor gaseoso. Por otra parte, se estudiaron los productos nitrogenados formados en superficie y fase gaseosa a partir del tratamiento de NOx por FH, usando espectroscopía XPS a presión ambiente. En este caso, se evaluó la influencia de la presencia de H2O en la fase gaseosa y de heteroátomos como K en la matriz del semiconductor. Finalmente, se desarrolló un método para evaluar el rendimiento de purificadores de aire comerciales de uso doméstico basados en PAOs/PARs. Los experimentos fueron llevados a cabo en una cámara ambiental de 20 m3 en la que se introdujo una mezcla sintética de COVs en bajas concentraciones como las que se encuentran en el aire de los ambientes interiores (1 - 40 ppb). Dicha mezcla fue tratada por medio de diferentes purificadores de aire comerciales y se monitoreó la emisión de contaminantes secundarios, O3, partículas ultrafinas, temperatura, humedad relativa y la variación de la concentración de las sustancias introducidas, a lo largo de 24 h de operación. Se desarrolló además un método analítico para la determinación de especies reactivas de oxígeno (ROS) en fase gaseosa por medio de compuestos orgánicos que, por reacción con los ROS, se transforman en especies fluorescentes. Se determinaron figuras de mérito como límite de detección, cuantificación y sensibilidad, se estudió la eficiencia de captura y la interferencia del O3 y, finalmente, se determinó la emisión de ROS en 2 purificadores de aire comerciales basados en PAOs. Palabras clave: Cr(VI), ácido cítrico, nitrato, óxidos de nitrógeno (NOx), compuestos orgánicos volátiles (COVs) , procesos fotoquímicos, fotocatálisis heterogénea, TiO2, nanopartículas de Fe cerovalente (nZVI), acoplamiento de reactores en fase líquida y gaseosa, XPS a presión ambiente (APXPS),conductividad de microondas resuelta en el tiempo (TRMC).

Abstract:
In this Thesis, the removal of anthropogenic model pollutants using thermal and photoassisted Advanced Oxidative and Reductive Processes (AOPs and ARPs) was studied. Cr(VI), nitrate, volatile organic compounds (VOCs), volatile aldehydes (VAs) and nitrogen oxides (NOx) were chosen as pollutants for study. The study of aqueous Cr(VI) removal was performed using two advanced processes: 1) zerovalent iron nanoparticles (nZVI), both in the dark and under UV-vis irradiation and 2) heterogeneous photocatalysis (HP) with TiO2 in the presence of citric acid. The studies were focused on the effect of several variables on the Cr(VI) removal efficiency and kinetics such as pH, amount of catalyst and the presence of O2, among others. The generation of reaction byproducts and the active range of the catalysts in the UV-Vis spectrum were also analyzed. Additionally, the solids were characterized before and after the experiments by physicochemical techniques such as SEM/EDS, XRD, Raman Spectroscopy, XPS, TXRF and TMRC. Nitrate removal was studied in this thesis by HP under UV-A irradiation, using formic acid as sacrificial agent. Ammonium and nitrate formation was observed in aqueous phase, whereas NOx were detected in gas phase. In order to integrate advanced processes in aqueous and gaseous phases, preliminary tests were made coupling the reactor used for nitrate removal in aqueous solutions with gas phase NOx treatment systems based on UV-C radiation and O3 generation and its combination with TiO2. Moreover, we designed and built a gas reactor filled with TiO2 supported on quartz fibers which used UV-A radiation. Using this last photoreactor coupled to the aqueous system, the overall efficiency of the system was evaluated for the removal of nitrate 0,08 mM ≤ o ≤ 8 mM, including the oxidative removal of NOx in the gas phase reactor. Furthermore, ambient pressure XPS was used to study the generation of nitrogen species on the surface of TiO2 and in the gas phase during the HP of NOx. In this case, the influence of H2O in the gas phase and K heteroatom in the semiconductor matrix was evaluated. Finally, a method to evaluate the performance of commercial household air purifiers based on AOPs/ARPs was developed. The experiments were conducted in a 20 m3 environmental chamber in which a synthetic mixture of VOCs at usual indoor air concentrations (1-40 ppb) was introduced. This mixture was treated by different commercial air purifiers and the emission of secondary pollutants, O3, ultrafine particles, temperature, relative humidity and the change of VOCs concentration were monitored during 24 h of operation. An analytical method for the determination of reactive oxygen species (ROS) in gas phase was also developed using organic compounds which react with ROS becoming fluorescent compounds. Figures of merit such as detection and quantification limits and sensitivity were determined. Capture efficiency and interference from O3 were studied and, finally, the ROS emissions from two commercial air purifiers based on PAOs were determined. Key words: Cr(VI), citric acid, nitrate, nitrogen oxides (NOx), volatile organic compounds (VOCs), photochemical processes, heterogeneous photocatalysis, TiO2, zerovalent iron nanoparticles (nZVI,) liquid and gas phase reactors coupling, ambient pressure XPS (APXPS), time resolved microwave conductivity (TRMC).

"Estudios citogenéticos y de electroforesis de proteínas seminales en el género Amaranthus (Amaranthaceae)" (1995). Greizerstein, Eduardo José. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
A. La utilización de técnicas adecuadas ha permitido establecer con certeza, en varias especies del género Amaranthus, el número cromosómico, la descripción de las fórmulas cariotípicas y sus indices de asimetría. Además, se ha evaluado el contenido de DNA total y de heterocromatina en la mayoría de las especies analizadas. Las conclusiones más relevantes son: 1) En Amaranthus se han descripto. en general, dos números cromosómicos somáticos: 2n=32 y 2n=34. Ambos números han sido citados para algunas de las especies estudiadas. En este trabajo se determinó el número cromosómico en especies graniferas, en distintos cultivares de las mismas y en especies silvestres relacionadas. Estos estudios serán útiles para predecir resultados al elaborar planes de mejoramiento. 2) Las fórmulas cariotípicas y parámetros relacionados, tales como los indices de asimetría A1 y A2 permiten distinguir a las especies estudiadas hasta el momento (Tabla 3). 3) El contenido de DNA es un dato que complementa los restantes estudios cromosómicos realizados. Aquellas especies con mayor contenido de DNA poseen mayor contenido de heterocromatina y mayor período vegetativo (Tabla 4). 4)En algunos casos estos estudios permitieron aportar datos para clarificar situaciones conflictivas desde el punto de vista taxonómico. Así, por ejemplo, se apoyó la hipótesis de que A. powelii y A. bouchonii deberían ser consideradas dos buenas especies biológicas por diferir en número cromosómico, fórmula cariotípica, contenido de DNA total y heterocromatina. B. Pese a la importancia del amaranto como potencial cultivo alternativo, hay muy pocos estudios de híbridos interespecíficos tanto en especies cultivadas como en silvestres. Estos estudios son importantes desde el punto de vista agronómico y evolutivo. El análisis del comportamiento meiótico de 13 híbridos interespecificos espontáneos y el de sus especies progenitoras permitió estimar la afinidad genómica entre las especies, analizar el tipo de aislamiento postcigótico existente entre las mismas y predecir el éxito de ciertas combinaciones hibridas en planes de mejoramiento. Además, este estudio aportó datos que permiten resolver situaciones taxonómicas conflictivas en Ia delimitación específica de algunos taxa. 1) En las especies con 2n=32 y 2n=34 se observó una meiosis regular con formación de 16 ó 17 bivalentes respectivamente. A. dubius que posee 2n=64 cromosomas, presentó meiosis regular con formación de 32||. También fué elevado en las mismas, el porcentaje de polen teñido mediante el colorante de Alexander (90-98%). 2) Los híbridos entre especies con 2n=32 cromosomas mostraron siempre meiosis aparentemente regular, con formación de 16||. En algunos casos se observaron bivalentes heteromorfos. Estos serían consecuencia del apareamiento de cromosomas entre especies que difieren en su contenido de DNA total, siendo esta diferencia más notable en algunos pares de cromosomas. La tinción de polen de los híbridos, como una evaluación indirecta de su fertilidad, varió considerablemente (0-60%). La baja viabilidad del polen asociada con meiosis regular sugiere que en los híbridos existiría hibridez estructural críptica. Las especies diferirían en rearreglos estructurales pequeños que, pese a la formación de bivalentes, disminuyen Ia fertilidad de los individuos híbridos. No puede descartarse la existencia de diferentes combinaciones génicas responsables de éste fenómeno. Es interesante destacar que al analizar el híbrido A. hybridus x A. quitensis se encontró que la viabilidad de polen estimada es del 60%, indicando que ambas especies estarían relacionadas, pero no pertenecerían al mismo taxon específico como fue sugerido por otros autores sobre la base de estudios morfológicos. Las mayores diferencias con los resultados informados por otros autores se encuentran en híbridos donde A. hybridus esta involucrado como progenitor. Siendo esta una especie polimórfica, el apareamíento cromosómico en híbridos puede verse influenciado por el genotipo paterno. La gran variabilidad en A. hybridus sería la causa de Ia discrepancia encontrada entre los resultados de distintos autores (Figura 24). 3) Los híbridos entre especies con 2n=32 y 2n=34 cromosomas tales como A. cruentus x A. quítensis y A. caudatus x A. cruentus formaron 15||+1|| en todas las células presentando una baja viabilidad del polen (5-7%). El híbrido A. hybridus (2n=32) x A. spinosus (2n=34) mostró 8||+17| en la mayoría de las células sugiriendo que ambas especies poseerían sólo 8 cromosomas homólogos. Esto sugiere que los números básicos del género serian x=8 y x=9, siendo x=16 y x=17 números derivados. Otra observación que apoyaría esta hipótesis es la frecuente presencia de asociación secundaria de bivalentes en especies e híbridos. Sobre esta base, las especies actuales de Amaranthus serían tetraploides (alotetraploides). 4) El hibrido A. spinosus x A. dubíus presentó 17||+15| en la mayoría de las células estudiadas. Este hecho apoyaría la hipótesis que sugiere que los bivalentes formados se deberían al apareamiento alosindético entre 17 cromosomas de A. spinosus y 17 de los 32 cromosomas de A. dubíus, los 15 cromosomas restantes de A. dubíus se mantendrían como univalentes. Este resultado sugiere que que A. spinosus sería uno de los progenitores de A. dubíus. 5) Las observaciones meióticas de los híbridos, analizados en su conjunto, permitió postular una fórmula genómica para cada una de las especies analizadas (Tabla 9) C. La utilización de los perfiles de proteínas seminales, obtenido por electroforesis, se ha revelado como una técnica útil para la caracterización de especies y cultivares. El fenograma de Ia figura.33.muestra que se forman dos grupos a un nivel de similitudde 0,47. Estos grupos están formados por las especies graníferas y por A. spinosus. Dentro de A. spinosus se distinguen los distintos orígenes estudiados. Dentro de las especies graníferas se forman dos grupos a un nivel de similitud de 0,5. Uno de ellos está formado por A. hypochondriacus y A. cruentus y el otro por A. mantegazzianus y A. caudatus. A. hypochondriacus se diferencia de A. cruentus a un nivel de similitud de 0,65, mientras que, A. mantegazzianus se diferencia de A. caudatus a un nivel de similitud de 0,69. Dentro de A. hypochondriacus y A. caudatus se pueden discriminar los cultivares analizados, mientras que los pertenecientes a A. cruentus y A. mantegazzianus son indistinguibles electroforeticamente.

"Estudios citogenéticos y evolutivos en compuestas sudamericanas" (1994). Wulff, Arturo Federico. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudios de asociaciones micro y megaflorísticas del devónico en la porción sur de la Cuenca Tarija, noroeste argentino y sur de Bolivia: edad, correlación y ambiente de sedimentación" (2010). Noetinger, María Sol. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Este trabajo comprende el estudio de asociaciones fósiles, tanto de palino como megaflora, obtenidas de 6 localidades del noroeste argentino y sur de Bolivia, emplazadas en tres Provincias Geológicas: Cordillera Oriental, Sierras Subandinas y Llanura Chacosalteña. Se realizó el análisis morfotaxonómico de las especies presentes en 130 niveles palinológicos fértiles provenientes tanto de secciones aflorantes como de subsuelo, como también su caracterización palinofacial. Se reconocieron 231 especies de las cuales 116 comprenden especies de esporas y criptosporas, 31 quitinozoos y 84 taxones del microplancton incluyendo acritarcas, prasinofitas, clorofitas e incertae sedis. Se reconocieron 4 especies nuevas, una criptospora, Cymbohilates rubinsteinae, y tres esporas trilete, Acinosporites macgregorii di Pasquo y Noetinger 2008a, Retusotriletes albarinii di Pasquo y Noetinger 2008a y Retusotriletes ottonei Noetinger y di Pasquo 2011. A su vez, se estudiaron dos niveles con ejemplares fértiles y estériles de plantas fósiles del sur de Bolivia que permanecen en asignación específica abierta al igual que varias especies de palinomorfos. El análisis cuali-cuantitativo y la distribución vertical de las especies reconocidas en las localidades estudiadas permitió la definición de 14 asociaciones que abarcan un lapso desde el Devónico Temprano al Devónico Tardío (Lochkoviano s.l. al Frasniano temprano). Debido a la baja frecuencia o ausencia de especies clave, en las asociaciones estudiadas, ha sido dificultoso establecer una confiable correlación de muchas de las asociaciones con las biozonas conocidas para este período. A su vez, la comparación detallada a nivel taxonómico y palinofacial de las distintas asociaciones permitió establecer correlaciones entre las localidades estudiadas. Esto indica que hubo un importante endemismo en las floras de esta región principalmente durante el Devónico Temprano, extendiéndose hacia el Devónico Medio. La baja proporción de asociaciones coetáneas recuperadas, sumado a la pobre preservación de los palinomorfos, la ausencia de “especies guía” representadas en más de una asociación y el carácter longevo de un gran número de especies que aparecen en más de una localidad no ha permitido sustentar la propuesta de una biozonación local. La recuperación de sedimentitas que abarcan casi la totalidad de la columna devónica permitió el estudio de la evolución paleoambiental de puntos específicos de la cuenca y contribuir al mejoramiento de la configuración paleogeográfica regional más aceptada. Los resultados alcanzados aquí demuestran que las floras del sudoeste de Gondwana habrían estado representadas por especies endémicas tanto de plantas como especies de palinomorfos, las cuales sustentan la creación del Subreino Afro- Sudamericano (ASA), para el lapso Devónico Medio – Tardío temprano. La aparición de especies euramericanas en este Subreino, apoya una configuración paleogeográfica con un Océano Rheico casi cerrado o al menos no muy extenso, que permitió la conexión de ambos supercontinentes.

Abstract:
This work includes the study of fossil assemblages of both palyno and megaflora obtained from 6 localities in three different geographical provinces of northwestern Argentina and southern Bolivia: Cordillera Oriental, Sierras Subandinas and the Chacosalteña Plain. A morphotaxonomical analysis was performed on the species present in 130 fertile levels from both outcrop and subsurface sections, as well as their palynofacial characterization. 231 species were recognized, of which 116 species were spores and cryptospores, 31 chitinozoans, and 84 microplankton taxa, including acritarchs, prasinophytes chlorophytes and incertae sedis. Four new species were recognized: a cryptospore, Cymbohilates rubinsteinae, and three trilete spores: Acinosporites macgregorii di Pasquo and Noetinger 2008a, Retusotriletes albarinii di Pasquo and Noetinger 2008a, and Retusotriletes ottonei Noetinger and di Pasquo 2011. From southern Bolivia, two levels with fertile and sterile specimens of fossil plants that remain in open nomenclature were analyzed, as well as several species of palynomorphs. The qualitative and quantitative analysis and vertical distribution of the species recognized in this study allowed the definition of 14 associations covering a period from the Early Devonian to Late Devonian (Lochkovian s.l. to early Frasnian). It was difficult to establish a reliable correlation of many of the associations with known biozones for this period due to the low frequency or absence of key species in the associations. Nevertheless, the detailed comparison of palynofacial and taxonomical features in the recognized associations allowed for the establishment of correlations between the studied sites. This indicated a significant endemism in the flora of this region, mainly during the Early Devonian extending to the Middle Devonian. The low proportion of recovered contemporary associations, combined with poor preservation, lack of key species represented in more than one association, and the long-range nature of a number of species that appear in more than one location does not support the proposal of a local biozonation. The recovery of sediments that cover almost the entire Devonian column allowed the study of the paleoenvironmental evolution of specific points of the basin and contributed to the improvement of the more acceptable regional palaeogeographical settings. The results obtained here demonstrate that the floras of southwestern Gondwana would have been represented by endemic species of both plants and palynomorphs, which support the creation of the Afro- Southamerican Subrealm (ASA) for the Middle to early Late Devonian. The appearance of euramerican species in this Subrealm supports a palaeogeographical setting with a Rheic Ocean, nearly closed or at least not very extensive, allowing the connection of two supercontinents.

"Estudios de complejos halogenados de manganeso con piridina" (1964). Marin Miñones, Máximo Alejandro. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El manganeso, en su estado de oxidación + 2 , presenta una configuración electrónica en d5, lo que provoca un comportamiento singular como centro de coordinación de iones o moléculas complejas. Cualquiera sea la forma estereoquímica adoptada, en su estado de alto spin, con los cinco electrones del metal no apareados, el complejo resultante carece de energia de estabilización por campo cristalino. Como esa configuración del spin libre es la más común para el ión manganeso bivalente, la forma espacial del complejo dependerá fundamentalmente, del grado de polarizabilidad del ligando asi como de la concentración de carga sobre el ión central. Resultó de interés, investigar la estructura de complejos de manganeso bivalente en los cuales, el agua, el ión halogenuro y la piridina, pueden actuar como ligantes competitivos, definiendo así , según su caracter, distintas estereoformas para el producto final. La información bibliográfica además, mostraba confusión en la asignación de fórmula y estructura para los complejos de este tipo conocidos. Nosotros hemos recorrido para su estudio a métodos potenciométricos, polarográficos, conductimétricos y de espectrofotometría en infrarrojo como formas de diagnóstico estructural. En compuestos conteniendo el ión manganoso, la piridina puede existir comoligante efectivo o comoión piridinio. Resultan así formas octaédricas poliméricas del tipo mnpy2X2 o tetraédricas del tipo (pyH)2(MnX4) respectivamente. Estos complejos son lábiles según la clasificación de Pauling y en solución, sufren disociación hidrolítica total con formación de Mn(H20)6++, Xˉ y piridina libre en un caso y de Mn(H20)6++, Xˉ y piridinio en el otro. En la disolución de complejos con piridina ligada, la hidrólisis libera la base con el consiguiente aumento de pH y descomposición de la solución. Además, la existencia de las reacciones tales como Mnpy2Cl2(s) + HCl (g) ― (pyH)2 MnCl4(s) que hemos confirmado y que se invierten al disolver la sal de piridinio en piridina pura, nos pareció de interés para dilucidar el equilibrio estereoquímico de estas sustancias. Las evidencias experimentales reunidas indican que: las sustancias formuladas en la literatura como ácidos del tipo H2(Mnpy2X4) y H2(MnpyX3,(0H)) no son tales. Se probó que el catión presente es piridinio y no hidrógeno, y que el agregado de solución concentrada de hidróxido de potasio a sus disoluciones no provoca la precipitación de la sal de potasio correspondiente, sino que entre pH 2,5 y 3,5 se forma el complejo Mnpy2X2. Se demostró la inexistencia del ión Mnpy2++ en solución por medidas conductimétricas, así como la presencia de tres iones en solución acetónica para las sales de piridinio del tipo (pyH)2(MnX4), lo que confirma su estructura. La reacción del cloruro de hidrógeno sobre el complejo de piridina Mnpy2Cl2 se interpretó como una sustitución y no como una adición de ligandos. En efecto, creemos que el mecanismo implica un ataque del cloruro de hidrógeno sobre la piridina altamente polarizada produciendo su reemplazo por un ión cloruro y la consecuente modificación de la estructura espacial que se hace tetraódrica. La alta polarizabilidad del ión cloruro satisface el principio de la electroneutralidad con solo cuatro ligandos. La elección de los solventes, para las reacciones en solución resultó primordial, pués de su polaridad depende en buena medida la configuración final del halocomplejo. En nitrometano, por ejemplo, el ión manganoso conserva su configuración tetraédrioa al disolver la sal de piridinio((MnX4)ˉ), mientras que en agua adapta la forma octaédrica (Mn(H20)6)++. Se observó colateralmente la insolubilidad de los complejos de piridina en medio acetónico, lo que confirma el mecanismo de disolución que proponemos, con ruptura previa del polímero. Se preparó la sustancia Mnpy2Cl2• 2H2O, monómero octaédrico metaestable, como paso intermedio en la formación del polímero. El hecho de que el cloruro de hidrógeno no reacciona sobre este sólido, implica que el mecanismo de eliminación del agua es el que impide la reacción. Se obtuvo también la sal pyH(MnCl3, H2O) con anión polímero que en solución acuosa muestra un comportamiento en todo semejante al del (pyH)2MnCl4, Hecho seguido a travós de las curvas de titulación para ambas sustancias. El ataque del bióxido de manganeso con ácido clorhídrico en medio acético y en presencia de piridina, condujo a la obtención de un complejo verde oscuro cuyo estudio nos lleva a formularlo como (pyH)2(MnCl5, H2O) con manganeso trivalente. Por descomposición espontánea de este producto con pérdida de cloro y cloruro de piridinio, se obtiene la sal pyH(MnCl3, H2O). El ataque del bióxido de manganeso con ácido bromhidrico concentrado , condujo, por agregado de piridina, a la formación de un complejo rojo pardo al que hemos formulado como pyH(MnBr3, H2O) en base a nuestros resultados. Su comportamiento es semejante al de las otras sales de la misma familia. A lo largo del presente trabajo, se sugiere modificaciones a las técnicas de la obtención de complejos, en base al uso de propanona como solvente, especialmente en la obtención del (pyH)2(MnBr4) y del Mnpy2Br2. Finalmente, las configuraciones espaciales que pueden adoptar los ligandos en complejos de manganeso bivalente con piridina, son función de la densidad de carga del ión central parcialmente ligado. Como esta es necesariamente baja, la posible deformabilidad de la piridina está muy disminuida y por tanto es fácilmente reemplazable por el agua.

"Estudios de conductividad eléctrica y difusión en trifluorometano supercrítico" (1999). Goldfarb, Darío Leonardo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se utilizó trifluorometano (CHF3) en condiciones supercriticas (sc) como solvente modelo para describir las propiedades de transporte de un soluto iónico en un medio de densidad variable. Se obtuvieron las conductividades molares a dilución infinita (A°) y constantes de asociación para la formación de pares iónicos (KA) de las sales hexafluorofosfato de tetrabutílamonio (TBAPF6) y hexafluorofosfato de decametílferrocinio (Fe(Cp*)2PF6;Cp* = nS-C5Me5) en CHF3 a 323.15 K utilizando una celda de conductividad de alta presión. Se diseñó y construyó una celda electroquímica de alta presión con microelectrodo, con la que se realizaron voltametrías de estado estacionario en CHF3 sc con TBAPF6 como electrolito soporte. Se utilizó una teoria que describe el efecto de la asociación iónica sobre las corrientes límites para calcular los coeficientes de difusión de las especies electroactívas presentes: Fe(Cp*)2+(ion libre), Fe(Cp*)2+,PF6- (par iónico) y Fe(Cp*)2 (especie neutra), en presencia de cantidades variables del electrolito soporte. La misma información se obtuvo para estos solutos en algunos solventes orgánicos subcriticos de baja constante dieléctrica para comparar con los resultados de especiación y transporte en CHF3 sc y analizar la validez de modelos de conünuo que sólo toman en cuenta la fricción viscosa (Stokes-Einstein, regla de Walden) Los resultados en CHF3 sc fueron analizados en términos de un modelo simple de solvatación supercrítico, que permite explicar las desviaciones de los coeficientes de difusión y conductividad en la región de alta compresibilidad.

Abstract:
Trifluoromcthane (CHF3) under supercritical (sc) conditions was used as a model solvent to describe the transport properties of an ionic solute in a variable density medium. Molar conductivities at infinite dilution (A°) and association constants for ion pair formation (KA) were obtained for tetrabutyl ammonium hexafluorophosphate (TBAPF6) and decamethylferrocinium hexafluorophosphate (FC(CP*)2PF6, Cp*=n5-C5Me5)in CHF3 at 323.15 K using a high pressure conductivity cell. It was designed and constructed a high pressure electrochemical cell with a microelectrode, to perform steady state voltammetry in CHF3 with TBAPF6 as supporting electrolyte. A theory describing the effect of ionic association on limiting currents was used to calculate the diffusion coefficients of existing electroactive species: Fe(Cp*)2+(free ion), Fe(Cp*)2+,PF6-(ion pair) and Fe(Cp*)2 (neutral species) in the presence of variable quantities of supporting electrolyte. Equivalent information was obtained for these solutes in low-dielectric-constant organic solvents under subcritical conditions. It was compared with speciation and transport results in CHF3 and contrasted against continuum models that take only viscous friction into account (Stokes-Einstein relation, Walden’s rule). The results in CHF3 were analized in terms of a simple supercritical solvation model that explains deviations of the diffusion coefficients and conductivity in the high compressibility region.

"Estudios de corrosión microbiológica en una instalación nuclear" (2012). Forte Giacobone, Ana Florencia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo de este trabajo ha sido analizar las poblaciones bacterianas y los mecanismos de corrosión microbiológica en un depósito de almacenamiento interino en húmedo de elementos combustibles gastados provenientes del reactor de investigación y producción de radioisótopos, también llamado repositorio. Se realizaron análisis de la población bacteriana cultivable presente en el repositorio, identificándose 18 microorganismos diferentes, con presencia mayoritaria de Bacillus cereus, seguido del género Pseudomonas. Se investigó el efecto de una de las cepas aisladas de B. cereus, B. cereus RE10 tanto en la aleación de aluminio 6061 empleada en la fabricación de elementos combustibles como en aluminio de alta pureza (Al 99,999%). Los experimentos fueron llevados a cabo en un medio altamente diluido, con la finalidad de reproducir las condiciones ambientales presentes en el repositorio. Se observó la presencia de picaduras no cristalográficas en forma de túnel en las muestras de AA6061 expuestas a B. cereus RE10 pero no así en Al 99,999%. Dichas picaduras se encontraron cubiertas de depósitos blancos, de tipo globular, compuestos por una mezcla de biofilm y óxido de aluminio. Se determinó la existencia de una correlación entre las zonas atacadas y la presencia de inclusiones de tipo Al-Fe-Si. Se postuló que dicha correlación podría estar relacionada con el pH generado en torno a las inclusiones, el cual favorecería el desarrollo del biofilm, contribuyendo a generar un fenómeno de corrosión bajo depósito. Uno de los mayores problemas en el estudio de los biofilms, en particular en presencia de óxidos, es la dificultad de seguir su desarrollo por técnicas no invasivas, ya que habitualmente se emplean métodos basados en tratamientos tales como desecación, tinción con colorantes, etc. El uso de microorganismos genéticamente modificados capaces de producir la proteína verde fluorescente (GFP) propuesto en este trabajo, ha permitido superar este obstáculo ya que hace posible el seguimiento de los biofilms sin ningún tipo de tratamiento, mediante microscopía de epifluorescencia. Por este motivo se decidió evaluar en forma comparativa la capacidad de formación de biofilms en diferentes condiciones y el efecto sobre AA6061 en medio diluido de la cepa Pseudomonas aeruginosa PAO1, de su derivada PAO1-GFP y de dos cepas de Pseudomonas aisladas del repositorio. El empleo de la cepa PAO1-GFP como modelo en estudios de corrosión microbiológica permitiría el estudio del fenómeno en forma rápida, fácil y de bajo costo. Los resultados muestran que, en todos los casos se observó formación de depósitos y ataque debajo de los mismos, con una morfología similar a la encontrada para el caso de B. cereus RE10. No se encontraron diferencias significativas entre las cepas analizadas, lo que permitiría el uso de PAO1-GFP en futuros estudios de biocorrosion. Este trabajo muestra una primera aproximación al estudio de la corrosión inducida microbiológicamente en repositorios nucleares en Argentina. Los resultados obtenidos permiten destacar la importancia de dicho fenómeno, aún en medios con una baja concentración de nutrientes, así como también enfatizar las ventajas del empleo de microorganismos portadores de genes reporteros en estudios de corrosión microbiológica. Como conclusión general puede decirse que la profundización de estudios de los mecanismos de corrosión inducida microbiológicamente podría contribuir a la prevención y control del proceso de corrosión ya que es o puede llegar a ser un fenómeno de importancia en lo referente a la vida útil, costo operativo y seguridad de este tipo de instalaciones nucleares.

Abstract:
The aim of this Thesis was to analyze the bacterial population and the mechanisms of microbial corrosion in a spent nuclear fuel pool storage system from a research reactor. Analyses of the cultivable bacterial population present in the pool were performed and 18 different microorganisms were identified, with a preponderance of Bacillus cereus, followed by the genus Pseudomonas. The effect of one of the isolates of B. cereus, B. cereus RE10 was investigated both in the aluminum alloy 6061 (used for the manufacture of fuel elements) and in high purity aluminum (Al 99.999%). To simulate the environmental conditions, the experiments were performed using a highly diluted medium. After the exposure to B. cereus RE10 non crystallographic, tunnel-like pitting was found on AA6061 samples but not on Al 99.999%. These pits were covered with white, lumpy, globular deposits, comprised of a mixture of biofilm and aluminum oxide. We found a correlation between the areas under attack and the presence of inclusions such as Al-Fe-Si. It was postulated that this correlation could be the result of the pH generated around these kinds of inclusions, which could favor the development and survival of the biofilm, contributing to underdeposit corrosion. One of the main problems in the study of biofilms, particularly in the presence of oxides, is the difficulty of following their development by noninvasive techniques, since most commonly used methods are based on treatments such as drying, staining with dyes, etc. The use of genetically modified microorganisms capable of producing green fluorescent protein (GFP) proposed in this Thesis, has overcome this obstacle as it allows for monitoring of biofilms without any treatment by epifluorescence microscopy. For this reason we decided to evaluate and compare the ability to form biofilms under different conditions and the effect on AA6061 in a diluted medium of the strain Pseudomonas aeruginosa PAO1, its derivative PAO1-GFP and two strains of Pseudomonas isolated from the storage system. The use of the strain PAO1-GFP as a model for microbiologically induced corrosion experiments allows the study of the phenomenon in a fast, easy and low cost way. The results show that all tested Pseudomonas strains developed biofilms and initiated under deposit corrosion on AA6061 in a diluted medium, independently of the origin of the strain. The morphology of the attack was similar between the samples exposed to the different Pseudomonas strains and the samples exposed to B. cereus RE10. This work shows a first approach to the study of microbiologically induced corrosion in nuclear storage facilities in Argentina. The results obtained allow us to highlight the importance of this phenomenon, even in media with a low concentration of nutrients, as well as emphasize the advantages of using microorganisms carrying reporter genes in studies of microbiologically induced corrosion. As a general conclusion, it is possible to say that the studying of microbiologically induced corrosion mechanisms could contribute to the prevention and control of a process that is or may become a phenomenon of importance in relation to the life, operating cost and safety of nuclear installations.

"Estudios de difusión rotacional en moléculas fluorescentes a través de una doble excitación con pulsos láser ultracortos" (1999). Torga, Jorge Román. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudios de estructuras de ARN que regulan la replicación del virus del dengue en humanos y mosquitos" (2016-04-11). Villordo, Sergio Manuel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El virus de dengue es el principal patógeno humano transmitido por mosquitos para el cual aún no existen tratamientos antivirales efectivos. El genoma viral es una molécula de ARN compuesta por un único marco de lectura abierto flanqueado por las regiones 5' y 3' no codificantes. Mediante la manipulación genética de clones infecciosos y ensayos funcionales hemos, demostrado que la estructura del ARN en los extremos del genoma es dinámica y que la formación regulada de conformaciones alternativas es necesaria para la síntesis del ARN viral en células de mamíferos. Experimentos complementarios en células de mosquito confirmaron además la importancia de este fenómeno en ambos hospedadores y permitieron detectar una secuencia en el extremo 3' del genoma que funciona como un determinante específico para la replicación del virus en insectos. Por otro lado, la combinación de estudios de mapeo químico y análisis de conservación de la región 3' no codificante han revelado la existencia de estructuras de ARN que se mantienen conservadas entre distintos flavivirus transmitidos por insectos. El análisis de esta región mediante experimentos de adaptación en células y técnicas de secuenciación masiva ha permitido caracterizar una estructura de ARN que se adapta de manera diferencial durante la infección en mosquitos y mamíferos. Además a través de ensayos de mutagénesis dirigida y el estudio del fitness viral en células y mosquitos adultos se demostró que la duplicación de dicha estructura facilita la alternancia de hospedadores con requerimientos diferentes. En conjunto los resultados de esta tesis proveen nuevos conocimientos sobre la biología del dengue de posible utilidad para el desarrollo racional de estrategias antivirales. Asimismo, la información aquí presentada permitirá entender aspectos epidemiológicos y evolutivos de virus de ARN transmitidos por insectos con relevancia en salud pública.

Abstract:
Dengue virus is the most important mosquito-borne human pathogen for which there are no vaccines and no effective antiviral treatments available. The viral genome is an RNA molecule coding for a single open reading frame flanked by highly structured 5' and 3' non coding regions. Using infectious clones and evaluating replication of recombinant viruses, we have demonstrated that the ends of the viral genome are dynamic and that the regulation of alternative conformations of the viral RNA is crucial for infectivity. Additional experiments using mosquito cells confirmed the relevance of our findings for mosquito and human hosts, and allowed the identification of specific sequence requirements for viral replication in insects. Furthermore, by combining chemical probing and sequence conservation analysis of viral 3' non coding regions, the existence of RNA structure motifs that are conserved in mosquitoborne flaviviruses was demonstrated. In this regard, new models and patterns of 3’UTR conservation among all known flaviviruses were constructed. Employing host adaptation assays and deep sequencing analysis, different viral populations were characterized from distinct hosts. Interestingly, the sequence variations detected modified the secondary structure of a single RNA structure. Mutational analysis and virus fitness measurements in mosquito cells and infected mosquitoes showed the requirement of RNA structure duplication as a mechanism to maintain high viral fitness during host mosquito-human switch. Together, these results provide new knowledge about dengue virus biology useful for rational development of antiviral strategies. Importantly, in these studies we present new mechanisms of virus-host adaptation that will help the understanding of epidemiological and evolutionary aspects of viral pathogens transmitted by insects.

"Estudios de glicosidación 1, 2-cis con donores conformacionalmente restringidos 3,5-O-di-ter-butilsililén-D-galactofuranósidos" (2012-12-20). Tilve, Mariano Javier. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La presencia de unidades galactofuranosa en configuración α 1,2-cis en ciertos microorganismos patógenos ha motivado la búsqueda de métodos de construcción de estos enlaces glicosídicos. La síntesis de oligosacáridos naturales que contengan este tipo de unión contribuiría con los estudios de biosíntesis. Dado que la Galf no se encuentra en mamíferos, su metabolismo es considerado blanco de quimioterapia. Sin embargo, la flexibilidad del anillo furanósico y el menor efecto anomérico presente en comparación con la forma piranosa confieren una mayor dificultad para la construcción de estos enlaces. Uno de los mayores problemas dentro de la síntesis aplicada a hidratos de carbono, es la generación diastereoselectiva de enlaces glicosídicos 1,2-cis. Este trabajo de tesis se ha enfocado en la síntesis de α-D-galactofuranósidos, dirigiendo la formación del enlace anomérico a través del control de la conformación del donor mediante un grupo 3,5-O-di-ter-butilsililén. Se sintetizó el donor conformacionalmente restringido tricloroacetimidato de O-(6-O-acetil-2-O-bencil-3,5-O-(di-ter-butilsilandiil)-α,β-D-galactofuranosilo) y se realizó un estudio de glicosidación utilizando aceptores precursores de unidades presentes en microorganismos patógenos. La mejores diastereoselectividades α se obtuvieron a -78 ºC utilizando éter etílico como solvente. Con el fin de aumentar las diastereoselectividades obtenidas, se evaluó el método del tioglicósido por síntesis de p-tolil 6-O-acetil-2-O-bencil-3,5-O-(di-ter-butilsilandiil)-1-tio-β-D-galactofuranósido. Se obtuvieron selectividades mayores que por el método de tricloroacetimidato, permitiendo, por ejemplo, la síntesis completamente estereoselectiva del precursor α-D-Galf-(1→6)-D-Manp presente en Paracoccidioides brasiliensis. Los donores de tioglicósido son ampliamente utilizados en la síntesis de oligosacáridos, aunque existen pocos ejemplos de su aplicación a la síntesis de galactofuranósidos. Esto puede deberse al desafío que presenta la funcionalización de este tipo de derivados. Se desarrolló una metodología para apertura regioseleselectiva del grupo protector bidentado 3,5-O-di-ter-butilsililén; permitiendo así diferenciar las posiciones O-3 y O-5 de la unidad de tiogalactofuranósido. Esta metodología, en conjunto con la preactivación del tioglicósido, permitió el desarrollo de una nueva estrategia iterativa que fue aplicada a la síntesis de di- y trisacáridos precursores del galactofuranano constituyente de Aspergillus fumigatus. Palabras claves: D-galactofuranosa; glicosidación; 1,2-cis; tioglicósido; tricloroacetimidato, oligosacáridos, grupos protectores, efectos de solvente.

Abstract:
The presence of Galf units in 1,2-cis α-configuration in some pathogenic microorganisms has encouraged the development of methods for the construction of this glycosidic linkage. The synthesis of natural oligosaccharides containing α-Galf units would contribute to the research on its biosynthesis. Galf is absent in mammals, thus its metabolism is considered as a chemotherapeutic target. However, the flexibility of the furanosic ring and the low anomeric effect compared to pyranoses increases the difficulty for the construction of this linkage. One of the most challenging problems in oligosaccharide synthesis is the stereoselective formation of 1,2-cis linkages. In this thesis, we have focused on the synthesis of α-D-galactofuranosides directed by conformational control of the glycosyl donor exerted by a 3,5-O-di-tert-butylsilylene protecting group. The conformationally restricted donor O-(6-O-acetyl-2-O-benzyl-3,5-O-(di-tert-butylsilanediil)-α,β-D-galactofuranosyl) trichloroacetimidate was synthesized and glycosylation reactions were performed with several acceptors, most of them precursors of units present in pathogenic microorganisms. The highest α-selectivities were obtained when reactions were performed at -78 °C in diethyleter as solvent. With the aim of improving the α-selectivities obtained, the thioglycoside method was evaluated. p-Tolyl 6-O-acetyl-2-O-benzyl-3,5-O-(di-tert-butylsilanediil)-1-thio-β-D-galactofuranoside was synthesized. Higher selectivities was obtained with this method in comparison with trichloroacetimidate allowing, for example, the completely stereoselective synthesis of the precursor of α-D-Galf-(1→6)-D-Manp present in Paracoccidioides brasiliensis. Tha thioglycoside donors are widely used in oligosaccaride synthesis, however only few examples are described for Galf-containing oligosaccarides. This fact could be due to the challenge of protecting the thiofuranoside ring properly. In this thesis, a protocol for regioselective opening of the 3,5-O-di-tert-butylsilylene group has been developed, allowing the distinction between the O-5 and O-3 positions of a thiogalactofuranoside. This protocol, together with the preactivation of the thioglycosides, allowed the development of a new iterative strategy used to obtain di- and trisaccharides precursors of the Aspergillus fumigatus β(1→5)galactofuranan. KEYWORDS: D-galactofuranose; glycosylation; 1,2-cis; thioglycoside; trichloroacetimidate; oligosaccaride; protecting groups; solvent effects.

"Estudios de glicosidación para la obtención estereoselectiva de alfa-D-galactofuranósidos 1,2-cis. Aplicación a la síntesis del trisacárido constituyente del polisacárido capsular de Streptococcus pneumoniae 22 F}" (2013-12-17). Gola, Gabriel Francisco. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El mayor obstáculo en glicobiología lo constituye la falta de oligosacáridos y glicoconjugados puros y bien definidos, difíciles de obtener a partir de fuentes naturales. La síntesis de oligosacáridos toma relevancia siendo fundamental la reacción de glicosidación. En los últimos años se han realizado esfuerzos sintéticos principalmente enfocados en la preparación estereoselectiva de derivados piranósicos, mientras que los estudios sobre furanosilación estereoselectiva son más limitados. En particular, los oligosacáridos que contienen galactofuranosa han despertado gran atención ya que dicha unidad, ausente en mamíferos, se encuentra presente en muchos microorganismos patógenos, siendo el metabolismo de la Galf un potencial blanco terapéutico. Los enlaces β-D-galactofuranósicos se obtienen fácilmente por participación anquimérica mientras que la síntesis diastereoselectiva de α-D-galactofuranósidos 1,2-cis es más difícil de alcanzar, y no se dispone, hasta el momento, de ningún método general. Este trabajo de tesis se enfocó en desarrollar metodologías sintéticas para la obtención estereoselectiva de enlaces α-D-galactofuranósidos 1,2-cis y su aplicación a la síntesis de oligosacáridos. Con ese fin, se evaluó la asistencia anquimérica provista por el novedoso auxiliar quiral ((S)-1-fenil-2-(fenilsulfanil)etil) en O-2 de donores de galactofuranosilo armado o desarmado sobre aceptores precursores de microorganismos patógenos. Se realizó, además, un estudio de la influencia del solvente en la reacción de glicosidación de tricloroacetimidato de O- sobre los aceptores antes utilizados. Finalmente, a partir de la evaluación de la influencia de los grupos protectores de O-3 de donores de α-D-Galf, se sintetizó el trisacárido α-D-Glcp-(1→3)-α-D-Galf-(1→2)-α- L-Rhap, constituyente del polisacárido capsular de S. pneumoniae 22F con muy buen rendimiento y diastereoselectividad completa. Este el primer ejemplo de síntesis de un oligosacárido patogénico que contiene una unidad de α-D-Galf interna. Palabras claves: D-galactofuranosa; glicosidación; 1,2-cis; tricloroacetimidato; auxiliar quiral; efectos de solvente; grupos protectores; oligosacáridos; Streptococcus pneumoniae 22F.

Abstract:
The lack of pure and well defined oligosaccharides and glycoconjugates which are difficult to obtain from natural sources, is a major obstacle in glycobiology. The synthesis of oligosaccharides become relevant and the glycosylation reaction is crucial. Synthetic efforts in the field have been pursued mainly focused on the stereoselective preparation of pyranose derivatives while studies on stereoselective furanosylation are more limited. In particular, oligosaccharides containing galactofuranose have attracted much attention since this unit is absent in mammals and it has been found in many pathogenic microorganisms, turning the D-Galf metabolism into a potential therapeutic target. The β-D-galactofuranoside linkages are easily obtained by anchimeric participation, whereas the diastereoselective synthesis of 1,2-cis α-Dgalactofuranosides is more difficult to achieve. No general method is available so far. This thesis focuses on developing synthetic methodologies for stereoselective construction of 1,2-cis α-D-galactofuranosides linkages and the application to oligosaccharides synthesis. For that purpose, anchimeric assistance provided by a chiral auxiliary ((S)-1-phenyl-2-(phenylsulfanyl)ethyl) at O-2 of armed or disarmed galactofuranosyl donors was evaluated on acceptors which are precursors of pathogenic microorganisms. Studies on the influence of the solvent in the glycosylation reaction of O- trichloroacetimidate with the acceptors previously employed were performed. Finally, the influence of the protecting group substitution on O-3 of α-D-Galf donors was evaluated. The trisaccharide α-D-Glcp-(1→3)-α-D-Galf-(1→2)-α-L-Rhap, constituent of S. pneumoniae 22F capsular polysaccharide, was synthesized in high yield and in a complete diastereoselective manner. This is the first example of synthesis of a pathogenic oligosaccharide containing an internal α-D-Galf unit. Keywords: D-galactofuranose; glycosylation; 1,2-cis; trichloroacetimidate; chiral auxiliaries; solvent effects; protecting groups; oligosaccaride; Streptococcus pneumoniae 22F

"Estudios de la circulación forzada por el viento en el estuario del Río de la Plata y sus implicancias en la estratificación: resultados del análisis de datos y simulaciones numéricas" (2008). Meccia, Virna Loana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta Tesis, por primera vez, se combina el análisis de los datos históricos de salinidad disponibles con series de tiempo de corriente y simulaciones numéricas de alta resolución, en un esfuerzo por comprender los procesos que ocurren en el activo e importante sistema estuarino del Río de la Plata. Con ese fin, se analizan las primeras series relativamente largas de corrientes ADCP colectadas en dos puntos del estuario. Se encuentra que la marea sólo explica alrededor de un 25% de la varianza. Aproximadamente otro 25% está asociado con actividad de ondas internas en los puntos de adquisición de datos, que corresponden a zonas de fuerte estratificación. Estas ondas son forzadas por la brisa tierra-mar y por la marea y son muy frecuentes durante la primavera y el verano. El 50% restante de energía está forzado por el viento en las escalas de tiempo sinóptica a intra-estacional. El estuario responde en una escala de tiempo de alrededor de 6 horas a la variabilidad del viento, con una estructura esencialmente barotrópica frente a vientos con una componente dominante perpendicular al eje del estuario y con una fuerte estructura baroclínica, con inversión en la dirección de las corrientes entre capas superiores e inferiores, para vientos con una componente paralela al eje del estuario. Aunque este tipo de respuesta es característica de cuencas semi-cerradas, no es típica de estuarios y es observada en el Río de la Plata como consecuencia de su gran ancho. Se utilizó el modelo hidrodinámico Estuary Coastal and Ocean Model (ECOM) juntos con datos CTD de campañas sinópticas históricas para evaluar las implicancias de la circulación forzada por el viento en la estratificación. Se encuentra que, aunque la estructura de cuña salina es una consecuencia de la intensa descarga continental en la región, los vientos predominantes favorecen su mantenimiento. Solamente bajo vientos intensos o persistentes del sudeste la estratificación puede quebrarse completamente. Sin embargo, la estructura vuelve a establecerse en un período de tiempo relativamente corto después de que los vientos se relajan. Los eventos con estas características son poco frecuentes en la región. Esto tiene un fuerte impacto sobre la biología ya que las especies que alberga el estuario requieren de ciertas condiciones de salinidad para su reproducción exitosa. Además, se caracterizó la respuesta de los campos de salinidad al forzante del viento y se encontraron indicios de eventos de surgencia a lo largo de la costa uruguaya frente a vientos del noreste, característicos de la estación cálida. Los resultados modifican el esquema conceptual vigente respecto de la señal estacional como principal característica del campo de salinidad en el Río de la Plata. Esta señal es el resultado de la mayor frecuencia de ocurrencia de vientos provenientes de direcciones determinadas a lo largo de las diversas estaciones. Situaciones caracterizadas como típicas de “invierno” o “verano” pueden ocurrir a lo largo de todo el año con gran variabilidad. La pluma de agua de baja salinidad impactaría en la plataforma continental en forma de pulsos alternativos hacia el noreste o el sudoeste en una escala del orden de los tres a cuatro días. Se identificaron los principales forzantes de variabilidad en las diferentes escalas de tiempo mediante una simulación de largo período realizada con el modelo Hamburg Shelf Ocean Model (HamSOM). Se encuentra que el primer modo de variabilidad en la escala interanual de la elevación de la superficie libre está forzado simultáneamente por la descarga continental y por el viento y ambos están asociados a los ciclos del ENSO. La variabilidad en la escala estacional explica un muy bajo porcentaje de varianza y está compuesta por una onda anual y una semianual, forzada por viento y descarga, respectivamente. La variabilidad en la escala subanual explica alrededor del 90% de la varianza y está forzada por el viento. Se encontró que los eventos extremos de crecidas en el estuario presentan a lo largo del tiempo una mayor frecuencia de ocurrencia y una mayor intensidad de respuesta. Por último, la arquitectura de modelado aplicada a la circulación barotrópica resultó exitosa mostrando ser una herramienta robusta para pronóstico y para el estudio de la variabilidad climática futura en respuesta al cambio climático.

Abstract:
In this Thesis, for the first time, the analysis of historical salinity data and new current series is combined with high resolution numerical simulations, with the aim of understanding the processes that occur in the active and important Río de la Plata estuary. With that objective, the first relatively long ADCP current series collected in two points of the estuary are analyzed. Only 25% of the currents’ variance is accounted by the tide. Approximately another 25% is associated with internal wave activity at the sampling locations, where a strong stratification exists. These waves are forced by land-sea breeze and tide and are very frequent during spring and summer. The remaining 50% of the energy is wind driven and occurs in synoptic to intra-seasonal time scales. The estuary responds to wind variability in a time scale of approximately 6 hours. Response displays an essentially barotropic structure to winds with a dominant component perpendicular to the estuary axis and with a strong baroclinic structure, with inversion in current direction between upper and lower layers, to winds with a dominant component along the estuary axis. Although this kind of response is characteristic of semi-enclose basins, it is not a typical response in estuaries, and it is observed in the Río de la Plata due to its huge width. To evaluate the implications of the wind forced circulation on stratification, Estuary, Coastal and Ocean Model (ECOM) together with CTD data from synoptic campaigns were used. It is observed that, even though the salt wedge structure is a consequence of the intense discharge, its existence is favoured by winds that prevail in the region. The stratification can only be completely destroyed by strong or persistent south-easterly winds. Nevertheless, the structure is reconstructed in a relatively short period of time after wind relaxation, and that kind of events are not frequent in the region. This has a strong impact on biology because the species housed by the estuary require specific salinity conditions for their successful reproduction. Additionally, the response of the salinity field to wind forcing was characterized. High surface salinity, consistent with upwelling along the Uruguayan coast is observed for north-easterly winds, which are typical of the warm season. The present conceptual scheme involving the seasonal signal as the main feature of the salinity filed variability is modified by the results of this Thesis. This signal result of a larger frequency of occurrence of some wind direction along the different seasons, and conditions classically though as characteristic of “winter” or “summer” can take place during any season with high variability. The fresh water plume would impact the continental shelf in the form of alternating pulses toward the northeast or to the southwest in a time scale around three to four days. The main forcings of estuarine variability in different time scales were identified by means of a long term numerical simulation using Hamburg, Shelf Ocean Model (HamSOM). The first mode of the sea surface height variability on inter-annual time scale is forced simultaneously by runoff and wind. Results show clear evidence that both forcings are associated to ENSO cycles. The seasonal scale variability accounts by a very low percentage of variance and it is a combination of an annual and a semi-annual signal forced by wind and runoff, respectively. Approximately 90% of the variance is accounted by sub-annual scale variability, essentially wind driven. Extreme flood events in the estuary increase their frequency of occurrence and intensity over the time. Finally, the model hierarchy applied for barotropic circulation shows to be a robust tool for forecasting and for the study of estuarine climate variability in response to climate change.

"Estudios de la distribución de la variabilidad genética y análisis del sistema de apareamiento en poblaciones naturales de Caiman latirostris (Yacaré overo) (Reptilia, Alligatoridae)" (2009). Amavet, Patricia Susana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Caiman latirostris (yacaré overo) es una de las dos especies de cocodrilianos citadas para nuestro país. Sus poblaciones silvestres son objeto de manejo en Argentina, mediante programas que utilizan el sistema de ranching (cosecha de huevos silvestres para cría en granjas), para su uso sustentable y la conservación de su hábitat. C. latirostris, en nuestro país, se encuentra en el Apéndice II de CITES, el cual permite el comercio regulado de su cuero y carne, y se ha convertido en una especie de gran importancia comercial, a nivel nacional e internacional. Esta tesis incluye estudios genético-poblacionales del yacaré overo en la provincia de Santa Fe, Argentina. Se realizaron análisis de variabilidad, diferenciación y estructura genética empleando isoenzimas, marcadores RAPD y caracteres morfométricos, y un estudio de paternidad utilizando marcadores microsatélites. Los resultados obtenidos indican que las poblaciones analizadas de yacaré overo poseen valores de variabilidad genética de bajos a intermedios, diferenciación poblacional significativa y variabilidad fenotípica alta para algunos de los rasgos morfométricos estudiados. Además, se hallaron indicios de que el sistema de apareamiento de C. latirostris podría incluir el comportamiento de múltiple paternidad, al detectar más de un progenitor paterno en al menos una de las familias analizadas.

Abstract:
Caiman latirostris (broad-snouted caiman) is one of the two crocodilian species cited for Argentina. Their wild populations are subject to management in our country, by means of programs that use ranching system (harvest of wild eggs, captive rearing and reintroduction to wild) for their sustainable use and habitat conservation. In Argentina, C. latirostris is included in the Appendix II of CITES, therefore, the regulated trade of meat and leather is allowed, and this species has turned into an important resource at both national and international levels. This thesis includes genetic population studies about broad-snouted caiman in Santa Fe province, Argentina. Analyses related to variability, differentiation and genetic structure were carried out through isozyme electrophoresis, RAPD markers, and quantitative traits. On the other hand, paternity studies were conducted using microsatellite markers. The obtained results indicate that analyzed broad-snouted caiman populations have low to intermediate genetic variability values, significant population differentiation, and high phenotypic variability for some of the studied morphometric traits. In addition, we found indications that C. latirostris mating system could include multiple paternity behavior, since we found more than one paternal progenitor in at least one of the analyzed families.

"Estudios de la función biológica de la proteína Epidimaria "DE" en los distintos procesos involucrados en la interacción espermatozoide-ovocito" (1997). Cohen, Débora Juana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo se han estudiado distintos aspectos relacionados con la participación de la proteína epididimaria DE en el proceso de interacción de gametas. En primer lugar, se estudió el tipo de asociación de DE a la membrana del espermatozoide. Los resultados mostraron que esta proteína se une con dos afinidades distintas existiendo una población "débilmente unida" que se libera del espermatozoide durante la capacitación y otra "fuertemente unida" que permanece asociada y participa en la interacción con la zona pellucida y en el proceso de fusión de gametas. La secuenciación de un péptido interno de DE indicó la existencia de una proteína homóloga en ratón, la cual participa en el proceso de fusión espermatozoide-ovocito tanto en esta especie como en el sistema heterólogo ratón-rata. La participación de DE en el proceso de fusión de membranas a través de un mecanismo alternativo al previamente propuesto, indica la coexistencia de más de un mecanismo molecular en el proceso de fusión y brinda las primeras evidencias sobre los mecanismos involucrados en el proceso de fusión cruzada entre especies. Por último, los resultados indicando que la aparición de sitios complementarios para DE en el oolema otorga fusogenicidad al ovocito durante la ovogénesis, estarían brindando importante información sobre los mecanismos por los cuales el ovocito adquiere su capacidad de fusionarse con el espermatozoide.

Abstract:
In the present work we studied different aspects related to the participation of the epididymal protein DE during sperm-egg interaction. First, we studied the association of DE to the sperm plasma membrane. Results indicated the existence of two populations of DE: one “loosely” bound and released during sperm capacitation, and another one “tightly" bound, which remains on the sperm and participates in sperm-zona interaction and sperm-egg fusion. The sequentiation of a tryptic peptide of DE indicated the existence of a mouse homologue protein, that participates in both mouse-mouse and mouse-rat sperm-egg fusion. The participation of DE in the membrane fusion process through a mechanism alternative to the previously described, indicates the co-existence of different molecular mechanisms in gamete fusion and provides the first evidence on the mechanism involved in fusion between two different species. Finally, results indicate that the appearence of DE binding sites on the oocyte surface mediates the development of fusogenicity during oogenesis, providing important information on the molecular mechanisms by which the oocyte acquires its ability to fuse with a spermatozoa.

"Estudios de la sensibilidad de la circulación en el Atlántico Sur y la variabilidad de sus sistemas de corrientes de contorno a los forzantes atmosféricos de acuerdo al modelo Bryan-Cox/CIMA" (2002). Simionato, Claudia G.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudios de las relaciones interespecíficas en el género Nierembergia, como herramienta del mejoramiento" (2007). Soto, María Silvina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Antecedentes y objetivos: Esta tesis forma parte del programa de mejoramiento genético en el género Nierembergia, que iniciara en 2002 en el Instituto de Floricultura de INTA. Los objetivos generales que propuse al iniciarla, fueron: (i) conocer la compatibilidad interespecífica entre las especies nativas de valor ornamental y (ii) obtener híbridos interespecíficos como fuente de variación en el mejoramiento. Material y Métodos: En primer lugar se buscó establecer el grado de cercanía entre ocho especies del género Nierembergia: N. aristata, N. browalloides, N. calycina, N. ericoides, N. micrantha, N. linariaefolia var. linariaefolia, N. scoparia, N. veitichii en un análisis filogenético con los datos obtenidos usando el gen rpl14 y los espacios intergénico (IGS) trnK y trnL, como marcadores moleculares. En estas mismas especies se realizaron cruzamientos dirigidos aplicando polinización artificial seguida del estudio de la germinación de los granos de polen sobre el estigma y el crecimiento de los tubos polínicos a lo largo de los pistilos. Esto último permitió establecer la relación Estigma-Polen/Estilo- Tubo polínico (EPET) entre todas las especies consideradas. Con el fin de estudiar las barreras post fertilización tanto en los cruzamientos compatibles como en los incompatibles, se estudió del desarrollo del endosperma y del embrión. Finalmente se caracterizaron los híbridos interespecíficos. Resultados claves y Conclusiones: El análisis filogenético reveló la formación de tres subclados N. veitichii-N. aristata, N. linariaefolia-N. micrantha y N. scoparia-N. ericoides La distancia filogenética entre las especies que integran cada uno de ellos, fue corroborada por el análisis de compatibilidad interespecífica, y por los resultados de los estudios de endospermogénesis y embriogénesis. La combinación entre N. ericoides y N. scoparia resultó compatible, presentándose como óptima para la obtención de híbridos interespecíficos. En este género, el análisis filogenético utilizando los genes el gen rpl14 y los espacios intergénico (IGS) trnK y trnL constituye una herramienta del mejoramiento que permite predecir la compatibilidad interespecífica y consecuentemente obtener híbridos estables.

Abstract:
Backgrounds and aims: This study is part of the Genetic Improvement Program for the genus Nierembergia that commenced in 2002 in the Instituto de Floricultura of INTA. The general objectives that I proposed upon initiating it were: (i) determine interspecific compatibility between native species with ornamental value; and (ii) obtain interspecific hybrids as a source of variation in the improvement. Material and Methods: The first step was to establish the degree of proximity among eight species from the genus Nierembergi: N. aristata, N. browalloides, N. calycina, N. ericoides, N. micrantha, N. linariaefolia var. linariaefolia, N. scoparia, N. veitichii in a phylogenetic analysis with data obtained using the gen rpl14 and the intergenetic spacers (IGS) trnK and trnL, as molecular markers. In these species, directed crossings were carried out for both pollen germination (on the stigma) and pollen tube growth (along the pistils). The latter allowed for establishment of the relationship Stigma-Pollen/Style-Pollen tube (SPST) in all of the crossings. Endosperm and embryo development were analyzed in order to study the post-fertilization barriers in both the compatible and incompatible crossings. Finally, the characteristics of the interspecific hybrids obtained were described. Key Results and Conclusion: Phylogenetic analysis revealed the formation of three subclads: N. veitichii-N. aristata, N. linariaefolia-N. micrantha and N. scoparia-N. ericoides. The conclusions reached concerning the phylogenetic distance between the species that integrate each one of these was coincided with that from both compatibility and embryological studies. The combination between N. ericoides and N. scoparia was compatible, allowing production of interspecific hybrids. In this genus, phylogenetic analysis using the gene rpl14 and the intergenetic spacers (IGS) trnK y trnL constitutes a tool for genetic improvement that permits the prediction of interspecific compatibility and, consequently, obtainment of stable hybrids.

"Estudios de procesos de fotodegradación y adsorción de plaguicidas organofosforados para el desarrollo de tecnologías de depuración" (2011-07-08). Trinelli, María Alcira. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Debido al uso intensivo de agroquímicos, estos compuestos han alcanzado diversos ambientes acuáticos naturales, contaminándolos. En particular la utilización de plaguicidas organofosforados se ha incrementado notablemente en las últimas décadas, sin conocerse completamente el comportamiento y destino de los mismos. Las tecnologías para la depuración de efluentes de lavado de los envases y de los equipos aplicadores de plaguicidas no siempre son efectivas, de bajo costo, por lo que es necesario desarrollar técnicas eficientes, de fácil aplicación, económicas y por sobre todo sostenibles con el ambiente. Es por todo lo anterior que ha resultado de interés el estudio de la fotodegradación en solución de glifosato y de clorpirifós por acción de la luz UV, así como los procesos de adsorción de glifosato sobre materiales de diferentes orígenes como las zeolitas naturales o modificadas, y el alga Ulva lactuca procesada previamente. El presente trabajo de tesis mostró resultados favorables para que ambos procesos, la fotodegradación y la adsorción sobre materiales adecuados, solos o combinados puedan aplicarse en la depuración de plaguicidas organofosforados presentes en aguas de desecho.

Abstract:
Due to the intensive use of agrochemicals, these compounds have reached several natural aquatic environments, leaving to the pollution of them. In particular the use of organophosphorus pesticides has increased markedly during recent decades, without knowing well its behavior and their destination. Remediation technologies for containers washing effluents and pesticide application equipment are not always effective, low cost, making it necessary to develop efficient techniques, easy to implement, economic and mostly sustainable with the environment. For all this reasons it has been of interest to study the photodegradation of glyphosate and chlorpyrifos in aqueous solution by the action of UV light and adsorption processes of glyphosate on adsorbents materials such as natural or modified zeolites and pretreated algae Ulva lactuca. This thesis showed favorable results for both photodegradation and adsorption processes on suitable materials. Such processes can be applied individually or combined for remediation of wastewater containing organophosporous pesticides.

"Estudios de producción de proteasas en especies del género Bacillus" (1995). Ferrero, Marcela Alejandra. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudios de senescencia funcional en la mosca plaga Ceratitis capitata" (2013-03-26). Pujol Lereis, Luciana Mercedes. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La mosca del Mediterráneo, Ceratitis capitata, es una plaga agrícola a nivel mundial, y sus poblaciones han sido ampliamente estudiadas desde un punto de vista demográfico. En nuestro laboratorio, C. capitata ha sido utilizada durante muchos años como modelo de estudio del desarrollo de insectos. Aprovechando estos antecedentes, decidimos utilizar a C. capitata como modelo de estudio de la senescencia funcional, ampliando la comprensión de procesos relacionados con el envejecimiento de los individuos, y de las poblaciones. El objetivo principal fue la búsqueda de marcadores que reflejaran el estado funcional de los individuos, independientemente de la edad cronológica. Se encontró que los patrones de lípidos de las moscas pueden ser utilizados para construir índices que sirven como indicadores del estado funcional de los individuos, pudiendo discriminar entre poblaciones mantenidas bajo diferentes condiciones ambientales. A su vez, se estudiaron subpoblaciones de moscas con diferentes niveles de respuesta a un estrés térmico por enfriamiento, con el objetivo de comprender las diferencias en el estado de senescencia funcional entre las mismas. Se pudo demostrar que subpoblaciones con diferentes parámetros de senescencia demográfica presentan diferencias claves en sus patrones de lípidos, en su comportamiento, y en la expresión de genes relacionados a respuesta a estrés.

Abstract:
The Mediterranean fruit fly, Ceratitis capitata, is a worldwide pest, and their populations have been extensively studied from a demographic standpoint. In our laboratory, C. capitata has been used for many years as a model to study the development of insects. Building on this background, we decided for this Thesis to use the Mediterranean fruit fly as a model to study functional senescence, broadening the understanding of processes related to aging of individuals and populations. The main objective was to look for parameters that could reflect the functional status of individuals, regardless of their chronological age. We found that lipid patterns of flies can be used to build indexes that serve as indicators of the functional status of individuals, and are able to separate populations kept under different environmental conditions. In turn, we studied subpopulations of flies separated according to their level of response to a chilling stress, in order to understand differences in their functional state. It could be shown that subpopulations with different demographic parameters have key differences in their lipid patterns, in their behavior, and in the expression of genes related to stress response.

"Estudios de sensibilidad climática en el hemisferio sur de acuerdo al modelo de circulación general LMDZ/CIMA" (1998). Carril, Andrea F.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Este trabajo consiste, fundamentalmente, en la adaptación de un modelo de circulación general (el LMDZ/CIMA versión CIMA), para el estudio de la climatología del Hemisferio Sur. A fin de optimizar los campos medios simulados por el modelo sobre el Hemisferio Sur, se integraron tres experimentos. La experiencia "suave" difiere del "control" en el valor impuesto sobre el coeficiente de intercambio turbulento (Cd); mientras que la experiencia "zoom" es una sensibilidad a la distribución de los puntos del reticulado en la dirección meridional. De hecho, la experiencia de control indicó que la simulación de los campos medios básicos del Hemisferio Sur con el modelo en su versión original, no es del todo apropiada. Sin embargo, el ajuste del coeficiente Cd efectuado en el experimento "suave" mejoró la representación de la vaguada circumpolar, incrementando significativamente la intensidad de los ciclones marinos de latitudes medias, aunque poco modificó la estructura del jet invernal. La definición de una malla con zoom meridional, mejoró significativamente la representación de la presión a nivel del mar y del jet austral, dada la particular sensibilidad de las variables dinámicas a la resolución horizontal. Sin embargo, las falencias en la representación de las variables físicas (como la precipitación) parecen más dependientes de las parametrizaciones físicas, que de la resolución en sí misma. En un posterior esfuerzo por profundizar la validación del modelo en su versión con zoom, se observó que la energía cinética total es subestimada, principalmente debido a la inadecuada representación las perturbaciones transientes. La baja resolución del modelo es un factor determinante para la simulación de este campo. No obstante, el modelo reprodujo aceptablemente el flujo medio zonal de calor y de cantidad de movimiento por las perturbaciones transientes. En líneas generales se observó que la simulación de la baroclinicidad del flujo medio aproxima adecuadamente a la baroclinicidad del campo observado. No obstante, la energía cinética de las perturbaciones transientes es pobre, debido a la inadecuada representación del término de conversión baroclínica. Sin embargo, el modelo es capaz de reproducir el efecto de las perturbaciones sobre el flujo medio: las perturbaciones tienden a acelerar al flujo medio zonal al sur de 30º S. Asimismo, se validó la representación de la componente asimétrica del flujo medio, la cual presenta la estructura fuertemente barotrópica de las ondas observadas, aunque falla en modelar la propagación vertical de las mismas, debido a la baja resolución vertical del modelo (solo posee dos niveles estratosféricos). Con el fin de estudiar el alcance de los resultados obtenidos a través de la técnica de la inclusión del zoom meridional, se realizaron una serie de experimentos de sensibilidad a la resolución horizontal (baja, media y alta resolución). Los mismos fueron llevados a cabo con el modelo en su versión con zoom y sin zoom. De esta intercomparación surgió que: i) la introducción de un zoom en la región de los máximos gradientes de circulación no genera perturbaciones numéricas espúreas, sino que ii) favorece la representación de los campos simulados a punto tal que, un experimento con zoom en una resolución horizontal dada, produce campos comparables a los provenientes de una experiencia con malla regular pero con una resolución horizontal 50% mayor (sin incrementar los costos computacionales del experimento). Posteriormente, con el objeto de profundizar la validación del MCG LMDZ/CIMA, en cuanto a la representación de posibles estados climáticos futuros, se trabajó en la intercomparación de sus campos, con algunos campos medios provenientes de la integración de otros modelos. Se concluyó que el modelo LMDZ/CIMA es capaz de simular los procesos de interacción relevantes al estudio del cambio climático. Finalmente, se diseñó un experimento de sensibilidad forzado por un gradiente meridional anómalo en las temperaturas de la superficie del mar extratropical. Se observó que la circulación atmosférica responde al forzante anómalo impuesto en latitudes extratropicales, con el desplazamiento del jet polar hacia el norte. Particularmente se advierte que, el debilitamiento del transporte de cantidad de movimiento en latitudes extratropicales, sería el responsable del debilitamiento de la rama subpolar del jet y del fortalecimiento la rama subtropical. Cabe señalar que los resultados de este experimento de sensibilidad climática son coincidentes con estudios previos de remoción del hielo marino en los alrededores del continente antártico; aunque distintos a los resultados de otros autores que realizaron experimentos de calentamiento global. Estos resultados indicarían que los efectos derivados del incremento del vapor de agua en la atmósfera y de la intensificación del gradiente meridional de temperatura en altura, podrían ser de mayor relevancia al cambio climático, que la modificación del gradiente meridional de temperatura de superficie.

Abstract:
This thesis is mainly concerned with the adaptation of the LMDZ/CIMA General Circulation Model, in order to be able to study the Southern Hemisphere climatology. The first step of this work was to make the necessary adjustments to improve the representation of the mean fields. Three experiments were designed. The "smooth" experiment differs from the "control" one in the value imposed to the drag coefficient Cd; and the "zoom" experiment is an experiment with stretched grid scheme. In fact, the control experiment shows that the Southern Hemisphere simulation is not appropriate. Nevertheless, the tuning into the drag coefficient improved the subpolar throught representation. The "zoom" experiment improved the representation of the sea level pressure and the polar jet. Nevertheless, the physical variable misrepresentations appeares to be more related to the physical parameterizations than the resolution itself. The "zoom" experiment underestimates the representation of the transients disturbances, maybe because of the model coarse resolution. However, it reproduces acceptably the heat and angular momentum transients fluxes. In general, it is observed that the mean flow baroclinicity is well represented. However, the kinetic energy of the transient disturbances is underestimated, due to the inadequate representation of the baroclinic conversion term. Nevertheless, the model reproduces the effects of the eddies on the mean flow: the disturbances tend to accelerate the westerlies south of 30ºS. The zoom version model also represents the barotropic structure of the southern stationary waves, but not the vertical propagation of the waves due to its coarse vertical resolution. In order to determine the benefits of having applied the stretched grid scheme technique, horizontal resolution experiments were done (low, medium and high-resolution). These experiments were carried out with zoom and with regular grid. The results of this intercomparison showed that: i) the zoom introduction does not generate numerical disturbances, and ii) it is observed that the zoom experiments with a specified horizontal resolution compare well with those of regular grid and 50% greater resolution, without increasing the computational costs. In order to test the ability of LMDZ/CIMA GCM to reproduce different climate scenarios, an intercomparison with other model simulations were performed. It was found that the LMDZ/CIMA model is able to represent the interaction processes involved on the climate change. Finally, a sensitivity experiment forced by anomalous extratropical meridional gradient of sea surface temperature was designed. It was observed that the atmospheric circulation responds to the imposed anomalous temperatures, with a northern displacement of the polar jet. Particularly, it was conclude that the weakening of the transient momentum transport would induce the weakening of the subpolar jet and the intensification of the subtropical jet. It was found that the sensitivity experiment resembles to previous studies of Antarctic marine ice removal, whereas it differs than other experiments of global warming. This result could be explain by the fact that the increase of water-vapor and to the intensification of the temperature gradient at height levels, could be more relevant to the atmospheric circulation than the change in the meridional gradient of sea surface temperatures.

"Estudios de suplementación de aislados proteicos vegetales por coprecipitación con proteínas de alta calidad procedentes de subproductos animales : Coprecipitación de proteína de lino con caseína comercial" (1976). Revuelto, Sara Concepción. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudios de terapia por captura neutrónica en boro (BNCT) en un modelo experimental de cáncer oral" (2002). Kreimann, Erica Lorena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Terapia por Captura Neutrónica en Boro (BNCT) es una modalidad terapéutica binaria que involucra la acumulación selectiva de portadores de ¹°Ben el tumor y la subsiguiente irradiación con un haz de neutrones. Las particulas de alta transferencia lineal de energia que se producen durante la reacción de captura de un neutrón térmico por el núcleo de boro tienen un rango de aproximadamente 5-9 μm y una alta eficacia biológica relativa. Así, el BNCT dañaría selectivamente las células tumorales. Esta terapia se encuentra en etapa de ensayo clínico en el mundo para tumores de cerebro y melanoma. Dentro del marco de la búsqueda de nuevas aplicaciones para BNCT, el estudio de la biologia y radiobiología del BNCT, la búsqueda de nuevos compuestos borados y la evaluación de la respuesta del tejido tumoral, precanceroso y normal hemos propuesto el modelo de cáncer oral en la bolsa de la mejilla del hamster para estudios de BNCT. Los estudios de biodistribución y farmacocinética en este modelo de un compuesto borado tradicional y uno de última generación demostraron la incorporación selectiva de boro al tumor en cantidades potencialmente terapéuticas. Un estudio de BNCT in vivo demostró por primera vez el éxito de esta terapia en el tratamiento del cáncer oral sin daño al tejido normal.

Abstract:
Boron Neutron Capture Therapy (BNCT) is a binary treatment modality that involves the selective accumulation of ¹°B carriers followed by irradiation with a neutron beam. The high linear energy transfer particles emitted during the capture of a thermal neutron by a ¹°B nucleus have a range of approximately 5-9 μm in tissue and are known to have a high relative biological effectiveness. Thus, BNCT would potentially target neoplastic tissue selectively. Clinical trials of BNCT for the treatment of brain tumors and melanoma are underway in the world. Within the context of the search for new applications of BNCT, the study of the biology and radiobiology of BNCT, the assessment of new boron compounds and the evaluation of the response of tumor, precancerous and dose-limiting normal tissues we have proposed the hamster cheek pouch oral cancer model for BNCT studies. The biodistribution and pharmacokinetic studies of a traditional and a new boron compound in this model evidenced potentially therapeutic, selective, incorporation of boron to tumor tissue. An in vivo study demonstrated, for the first time, the success of BNCT in the treatment of oral cancer with virtually no damage to normal tissue.

"Estudios de ultraestructura, filogenia molecular y ecofisiología en euglenoideos" (2002). Nudelman, María Alejandra. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los euglenoideos son un grupo muy antiguo y diverso de eucariotas flagelados relacionados con los kinetoplástidos que incluye taxones verdes e incoloros. Las relaciones fllogenéticas dentro del grupo, así como con otras protistas, son aún desconocidas. A pesar de su gran distribución y frecuencia en todos los ambientes, el conocimiento de este grupo es escaso. El esquema taxonómico actualmente en uso es mayormente intuitivo, basado sobre características morfológicas. Tal clasificación puede estar reflejando sólo eventos de convergencia más que relaciones filogenéticas y se requiere una revisión sustancial. Además, algunas de estas características, consideradas diagnósticas en taxonomía son en gran parte variables, influenciadas por las condiciones ambientales. El objetivo de esta tesis fue combinar datos morfológicos y moleculares y así proponer un esquema fllogenético y una clasificación taxonómica consistente de euglenoideos, basada en grupos naturales. Realizamos estudios de los organismos en cultivo a fin de evaluar el rango de plasticidad fenotípica de algunas características diagnósticas. Para investigar Ia validez de los caracteres usados en taxonomía, analizamos la secuencia gen ribosomal 185 de algunos euglenoideos representativos. El análisis filogenético se realizó usando metodologías de máxima parsimonia, máxima verosimilitud, distancia y bayesiano. Los resultados obtenidos fueron consistentes bajo todos los criterios. Los euglenoideos conforman un grupo monofilético. Entre los incoloros, el fagotrofo Peranema sp. diverge en la base de los árboles. Los taxones osmotrofos incluids en este trabajo (Astasia, Khawkinea,Hyalophacus) se habrían originado por una pérdida secundaria de cloroplastos. Los géneros fotosíntétícos Euglena, Phacus y Lepocinclis son poliflléticos. Los géneros Ioricados Trachelomonas y Strombomonas están asociados fuertemente. La clasificación tradicional de estos géneros como entidades genéricas diferentes, usualmente controversial, no es contradecida por los datos moleculares. Las especies de Eug/ena rígidas se agrupan con las especies de Lepocinclis y algunos Phacus, con los cuales comparten la estructura pelicular básica y el tipo de los cloroplastos. Después de la adquisición de los cloroplastos por una forma fagotrófica y metabólica, que sería el ancestro de los euglenoides verdes, la rigidez de la célula habría evolucionado como eventos independientes en los distintos linajes, como así también Ia pérdida de cloroplastos. Los resultados derivados del estudio ultrastructural, en particular, del complejo pelicular, cloroplastos y Ióricas es consistente con el esquema filogenético propuesto. El análisis de algunos caracteres morfológicos permitió confirmar su valor como criterio taxonómico.

Abstract:
The euglenoids are an ancient and diverse group of eukaryotic flagellates related to kinetoplastids that comprises green and colorless taxa. The relationships within the group as with other protists remain unclear. Despite their wide distribution and frequency in all environments the knowledge of this group remain scarce. The taxonomic scheme currently in use is mainly intuitive, based on morphological features. Such classification may reflect just convergence rather than phylogenetíc affiliations and a substantial revision is required. Moreover, some of these features considered diagnostic have been proved to be variable, influenced by environmental conditions. The objective of the present study was to combine morphological and molecular data to propose a phylogenetíc framework as well as a natural and consistent taxonomic system of euglenoids. We conducted studies of the organisms in culture to assess the range of plasticity of diagnostic features. To ínvestigate the valídity of the characters used in taxonomy we analyzed the SSUrDNAsequence of some representative euglenoids. Phylogenetíc analyses was performed using maximum parsimony, maximum Iikelihood and distance methodologies. Results were consistent using all the criteria. The euglenoids conform a monophyletic group, the phagotrophs (Peranema sp.) arising at the base of the trees and osmotrophs (taxa Astasra, Khawkihea, Hyalophacus) derived from secondary loss of chloroplasts. They are positioned in a clade intermixed among metabolic Euglena spp. The photosynthetic genera Euglena, Phacus and Lepocinclis are polyphyletic. The Ioricate genera Trachelomonas and Strombomonas are stroneg associated but their status as different generic entities, usually controversial, is not contradicted by the molecular data. Rigid Euglena spp. are associated with Lepocínclis and some Phacus, with which they share basic pellicle structure and chloroplasts. After the acquisition of chloroplasts by a metabolic phagotrophíc form, ancestor of the Euglenales, the cell rigidity seems to be acquired many times, as independent events during the evolution of green euglenoids, as well as seems to be the loss of plastids. Ultrastructure flndings, mainly particularities of the pellicular complex, chloroplasts and envelopes confirmed the phylogenetíc scheme derived from molecular evidence. Examination of such morphological details has shown they may be taxonomically diagnostic.

"Estudios del mecanismo molecular de acción del hexaclorobenceno sobre la expresión del gen de la enzima málica citosólica hepatica" (1998). Loaiza Pérez, Andrea Irene. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El hexaclorobenceno (HCB) es un tóxico ambiental ampliamente distribuido en la biosfera. la exposición crónica de animales de laboratorio al HCB produce importantes efectos biológicos tales como desencadenamiento de porfiria, inducción de enzimas microsomales hepáticas, disfunciones tiroideas, inmunosupresión y carcinogénesis. Trabajos realizados en nuestro laboratorio habían demostrado que el HCB incrementa la actividad de enzimas lipogénicas hepáticas reguladas por hormonas tiroideas (HT) tales como la enzima málica (EM). En este trabajo hemos demostrado que el HCB provoca un incremento en los niveles de RNAm de EM hepática, siendo este efecto a nivel transcripcional. Estudios de los elementos en cis y en trans que median la respuesta descripta revelaron que el pesticida provoca la inducción de un complejo proteico sobre el elemento de respuesta a HT (TRE) presente en el promotor de EM, el cual presenta un 64% de homología con el elemento de respuesta a xenobióticos (XRE). RT3 no está involucrado en forma directa en dicha inducción aunque su presencia seria necesaria para dicha estimulación. Otros factores de trancripción tales como Ahr o factores de la familia "fork head" formarían parte del complejo inducido.

Abstract:
Hexachlorobenzene (HCB) is a widespread environmental pollutant. Chronical exposure of laboratory animals to HCB causcs a number of biological effects such as triggering porphyria, microsomal enzyme induction, thyroid dysfunction, inmunosupression and carcinogenesis. Previous data of our laboratory have demonstrated that HCB increases the activity of thyroid-responsive lipogenic enzymes such as malic enzyme(ME).In this work we have demonstrated that HCB increases ME mRNA levels as a consequence of stimulation of the transcription process. We have studied cis and trans elements that mediate that phenomena. Our data reveal that HCB induces protein/DNA complexes formed on TRE of ME promoter, that has a 64% of homology with consensus xenobiotic response element (XRE). RT3 would not be involved directly in that regulation but its presence would be necessary. Other transcription factors such as Ahr or fork head family members could participate in the HCB-induced complex formed on TRE.

"Estudios ecofisiológicos en microalgas del sistema ácido Río Agrio-Lago Caviahue (provincia del Neuquén, Argentina)" (2016-03-30). Schultz, Sabina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se realizaron aislamientos de 11 especies algales cocoides y filamentosas del Río Agrio-Lago Caviahue y del complejo termal Copahue (considerados ambientes extremos por su bajo pH y alta temperatura, respectivamente). Las especies se determinaron taxonómicamente al microscopio óptico y mediante microscopía electrónica de barrido y transmisión. Las especies seleccionadas para los bioensayos (Keratococcus rhaphidioides, Pseudococcomyxa simplex y Watanabea caviahuensis) se llevaron a axenicidad. A cada una de ellas se les midió la tasa de fotosíntesis y se les determinó el óptimo de crecimiento en bioensayos con pH entre 2 y 7. El efecto de los nutrientes sobre el crecimiento algal se evaluó con dos fuentes de fósforo (fosfato y glicerofosfato), con distintas fuentes de nitrógeno (nitrato, nitrito, amonio, urea, leucina y ácido aspártico) y con distintas fuentes de carbono en luz y oscuridad (CO2, glucosa, acetato de etilo y urea). Las curvas de fotosíntesis revelaron que la irradiancia de saturación fue relativamente baja (100-200 μmol fotón m^-2 s^-1) así como el punto de compensación lumínica, mientras que el pH de crecimiento óptimo estuvo alrededor de 4. Con respecto a los nutrientes, el P no mostró mayores diferencias de crecimiento entre la fuente inorgánica y la orgánica, sin embargo con N las mayores densidades se obtuvieron con nitrato, urea y leucina. En cuanto al carbono, K. rhaphidioides lo incorporó principalmente de manera inorgánica (CO2) aunque fue capaz de crecer con fuentes orgánicas en presencia de luz. Fue notable que en oscuridad las células permanecieran en estado estacionario manteniendo constante la densidad a lo largo del experimento. K. rhaphidioides, la especie mayoritaria en biomasa y densidad del fitoplancton del lago Caviahue, mostró que no posee mecanismos de concentración de carbono, con lo que su tasa de fotosíntesis depende principalmente de la disponibilidad de CO2 externo. Los hallazgos de laboratorio permitieron relacionar la distribución espacial y temporal de las especies estudiadas con las características ambientales observadas en el sistema ácido natural Río Agrio-Lago Caviahue.

Abstract:
Eleven algal strains of cocoidal and filamentous habits, were isolated from the Rio Agrio-Lago Caviahue system. These environments are considered extreme due to its low pH and high temperature, respectively. The species were determined and characterized under light and electronic microscopy (SEM and TEM). Three strains were selected for the bioassays (Keratococcus rhaphidioides, Pseudococcomyxa simplex and Watanabea caviahuensis) and axenic cultures of these were obtained. The photosynthesis rate and optimal growth conditions were determined in bioassays with pH between 2 and 7. The effect of different nutrients was also addressed. Among them, two phosphorus sources (phosphate and glicerophosphate), six sources of nitrogen (nitrate, nitrite, ammonium, urea, leucine and aspartic acid) and four sources of carbon (CO2, glucose, etil-acetate and urea) were studied. The photosynthesis studies reveled that the light compensation point and irradiance saturation were low (100-200 μmol photon m^-2 s^-1) while optimum pH was 4. Moreover, no significant differences were found for the growth with the different P sources, but for N, nitrate, urea and leucine yielded higher growth rates and cell densities. With regard to the carbon sources, K. rhaphidioides incorporated all the carbon sources under constant illumination, although the better growth parameters were obtained with CO2. Regardless of the source, no growth was registered in darkness, the algae were arrested for the whole experiment. K. rhaphidioides is the most abundant algal species of Lake Caviahue phytoplankton, in biomass and cell number. It was shown that this algae has no carbon concentrating mechanisms (CCM), reason why the photosynthesis rate depends only on the external CO2 concentration. The laboratory findings of this thesys allowed to connect the seasonal and spatial distribution of the studied species with the environmental features of the Rio Agrio-Lake Caviahue system.

"Estudios ecológicos en el Golfo San Jorge y adyacencias (Atlántico Sudoccidental) : Distribución, abundancia y variación estacional del fitoplancton en relación a factores Físico-químicos y la dinámica hidrológica" (1996). Akselman, Rut. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El estudio, basado en cuatro campañas estacionales durante 1984 y 1985, indicó la presencia -por advección de la masa de Agua Costera- de un frente termohalíno que presenta una rama hacia plataforma y otra costera. Entre primavera avanzada y otoño se desarrolla una termoclina, con reducidas concentraciones de nutrientes inorgánicos en la capa superior. Durante el invierno -con condiciones de homogeneidad vertical- existe elevada concentración de nutrientes. El desarrollo fitoplanctónico presenta una secuencia estacional típica de regiones templadas. En invierno las poblaciones fueron reducidas, con preponderancia de diatomeas. Durante el florecimiento primaveral se observaron los valores más elevados del ciclo asociados a Thalassiosira anguste-lineata, Alexandrium tamarense, Heterocapsa triquetra y Prorocentrum micans. En verano decreció abruptamente -predominando los dinoflagelados-, con un incremento menor en otoño debido a las diatomeas. En general, el desarrollo de diatomeas se vinculó al sistema frontal. La composición florística cuali-cuantitativa señala al golfo como área austral de transición con preponderancia de comunidades templado-frías. En primavera se presentó una rica flora de quistes de dinoflagelados, observándose enquistamiento. Se identificaron relaciones tróficas en el microplancton, observándose un acoplamiento espacial entre dinoflagelados predadores y dinoflagelados-presa fotosíntéticos. Se estímaron consumo e índices de pastoreo y selectividad de presas.

Abstract:
This study was based on four seasonal cruises during 1984 and l985. It revealed a thermo-haline frontal system formed by the advection of the Coastal Water mass flowing in two branches, one ninning towards the coast and the other mid-shelf directed. The thermocline developed between late spring and autumn results in a low inorgarric nutrient concentration in the upper layer. Nonetheless in winter, a vertical homogeneity and high nutrient concentration were observed Phytoplankton development presented a typical temperate-seas armual cycle. ln winter, reduced populations were dominated by diatoms. The highest biomass concentration in the cycle coincided with the spring blooming, to which Thalassiosira anguste-lineata, Alexandrium tamarense, Heterocapsa triquetra and Prorocemrum micans were associated. Summer concentration decreased sharply with dinoflagellates being dominant, and a minor increase followed in auturnn owing to diatom populations. Usually, diatom growth was linked to the frontal region. The quali-quantitative flora composition denote this gulf as a southern transitional area with a dominance of temperate-cold communities. A high dinoflagellate cysts richeness and encystment were detected in spring. Trophic relations in the microplankton community were identified, and a spatial coupling of predator-dinoflagellates and photosynthetic prey-dinoflagellates was noted. Consumption and grazing and prey selectivity indexes were also estimated.

"Estudios ecológicos y genéticos de la hormiga invasora Wasmannia auropunctata en Argentina, el límite sur de su distribución nativa" (2016-03-11). Chifflet, Lucila. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La historia evolutiva de especies invasoras en su área nativa puede involucrar procesos clave en su éxito fuera de ésta. Wasmannia auropunctata es una hormiga neotropical, que ha invadido diversos sitos tropicales del mundo, aunque recientemente también se estableció en la región Mediterránea. La posible población fuente de esta última invasión se localizó en Argentina, el límite sur de su distribución nativa. Resulta entonces interesante estudiar las poblaciones de W. auropunctata en esta región para entender su éxito fuera de la zona intertropical. En este trabajo se estudiaron distintos aspectos -ecológicos, genéticos y comportamentales- de W. auropunctata en el límite sur de su distribución nativa, con el fin de entender qué factores son responsables de su éxito y analizar si su historia evolutiva se corresponde con la reciente introducción en el Mediterráneo. Se analizó si las poblaciones en esta región presentan características invasoras, estudiando la asociación entre su dominancia y la perturbación del ambiente, su sistema de reproducción, por medio de microsatélites, y su sistema de organización social, por medio de ensayos de agresión. Se realizó un estudio filogeográfico, utilizando ADN mitocondrial y nuclear, para analizar su historia de dispersión y diversificación. Por medio de un modelado de nicho ecológico se determinaron áreas centrales y marginales de distribución y se analizó cómo cambiaron a lo largo del Cuaternario. Finalmente, se analizó su habilidad competitiva en un ensamble local, utilizando cebos y trampas de caída. Wasmannia auropunctata resultó estar ampliamente distribuida en esta región, siendo abundante y dominante en sitios perturbados, principalmente antrópicos. La organización social fue mayormente supercolonial independientemente del nivel de perturbación del ambiente. El sistema de reproducción fue principalmente clonal en sitios antrópicos; mixto en sitios con perturbación antrópica media y en las planicies de inundación; y sexual en sitios naturales. Los marcadores mitocondriales y nucleares corroboraron la existencia de dos clados principales (A y B), como había sido propuesto en otros trabajos. Un análisis filogeográfico bayesiano sugirió que el ancestro común de ambos clados habría existido en el centro de Brasil hace 3,9 millones de años aproximadamente, desde done el clado A se expandió hacia el norte y el B (el mismo que invadió el Mediterráneo) hacia el sur. El modelado de nicho ecológico sugirió que su diferenciación genética podría estar acompañada de una diferenciación de nicho ecológico, siendo el clado A un linaje tropical y el B un linaje subtropical y templado. Sólo el clado B alcanzó altas latitudes en el sur de Sudamérica, hasta Argentina, caracterizado por un clima más frío que el norte de este continente. Esto es compatible con su posterior establecimiento en la región Mediterránea. Wasmannia auropunctata presentó una baja habilidad competitiva, indicando que ésta no es un factor asociado a su éxito. En conjunto, nuestros resultados sugieren que los ambientes naturalmente perturbados (como las planicies de inundación) habrían jugado un papel importante en la aparición de características, como la clonalidad y la supercolonialidad, que posteriormente favorecerían a W. auropunctata en ambientes antrópicos, clave para su introducción fuera de su rango nativo. Por otro lado, su expansión natural a altas latitudes hacia el sur de Sudamérica, le habría permitido una adaptación a climas más fríos y con marcada estacionalidad, clave para su establecimiento en la región Mediterránea. El presente estudio refleja la utilidad de la exploración de la historia de vida de una especie invasora dentro de su rango nativo para lograr una mejor comprensión de su escenario de invasión.

Abstract:
The evolutionary history of exotic species within their native range may involve key processes for colonizing new habitats. Native from the Neotropics, the little fire ant Wasmannia auropunctata has invaded many tropical sites around the world, and it has recently been introduced in the Mediterranean region. The putative source population of this last invasion was located in Argentina, its native southernmost distribution limit. Therefore, it is interesting to study the populations of W. auropunctata in this region to understand its success outside the tropics. We studied different -biological, genetic and behavioural- aspects of W. auropunctata within its native southernmost distribution limit, in order to understand which factors are responsible for its success and analyze whether its evolutionary history agrees with the recent introduction into the Mediterranean. We examined whether the populations in this region have invasive characteristics, studying the association between their dominance and the habitat disturbance, the reproductive system, using microsatellite markers, and the social organization, through aggression tests. We analyzed mitochondrial and nuclear DNA markers, to perform a phylogeographic analysis in order to infer its dispersion and genetic differentiation history. Through an ecological niche modelling, we identified central and marginal distribution areas and analyzed how they changed over the Quaternary. Finally, we analyzed its competitive ability in a local assembly, using baits and pitfall traps. Wasmannia auropunctata was widespread at the southernmost limit of its native distribution range, with higher abundances being mainly recorded in anthropic habitats. The social organization was mainly supercolonial in all habitat types. The reproductive system was mainly clonal in anthropic habitats, mixed in partially disturbed sites and floodplains, and sexual in natural sites. The genetic analysis corroborated the existence of two main clades (A and B), as had been proposed in other works. Phylogeographical Bayesian analysis suggested that the common ancestor of both clades would have existed in central Brazil about 3.9 million years ago, from where clade A would have expanded and differentiated northward and clade B (the same that invaded the Mediterranean) southward. The ecological niche modelling suggested that genetic differentiation could be accompanied by a differentiation in the ecological niche requirements, clade A being a tropical lineage and clade B a subtropical and temperate lineage. Clade B was the only one which reached high latitudes in southern South America, which is characterized by colder temperatures than the north of the continent. This agrees with the subsequent establishment in the Mediterranean region. Wasmannia auropunctata had a low competitive ability, indicating that interspecific competition is not a factor associated with its success. Taken together, our results suggest that naturally disturbed environments (such as floodplains) may have played an important role in the appearance of features such as clonality and supercoloniality, which would have later favor W. auropunctata in anthropic habitats, key to its dispersal outside its native range. Aditionally, the natural expansion at high latitudes to the south of South America, would have allowed it to adapt to colder climates and seasonality, key to its later establishment in the Mediterranean region. This study highlights the usefulness and value of exploring the life history and biology of invasive species within their native range to better understand invasion scenario.

"Estudios electrofisiológicos de estructura-actividad de la célula antenal receptora del ácido benzoico de la hembra de Bombyx mori L" (2000). de Brito Sanchez, María Gabriela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo de este trabajo fue caracterizar las respuestas electrofisiológicas de la célula receptora olfativa al ácido benzoico, presentes en las hembras de la mariposa del gusano de la seda Bombyx mori. Nuestros estudios permiten concluir que la célula receptora al ácido benzoico es un receptor especialista ya que responde máximamente a su compuesto llave y tiene un espectro idéntico para compuestos menos efectivos. Mediante estudios de estructura-actividad con substituyentes halogenados del ácido benzoico, se determinó que un factor crítico para el reconocimiento del sitio receptor es la generación de un efecto inductivo por el halógeno substituyente. Este efecto es mayor para halógenos más electronegativos (flúor) y para la posición meta. Cuando fue estimulada con iodo benzeno, la célula receptora al ácido benzoico respondió con una inhibición durante el estímulo y con una excitación post-estímulo. En base a diversos experimentos propusimos un modelo para la acción de sustancias excitatorias e inhibitorias a nivel receptor olfativo. En dicho modelo, sustancias como el iodo benceno actuarían directamente sobre los canales iónicos (proceso inhibitorio rápido y transitorio, no dependiente de segundos mensajeros), o sobre el sitio receptor del ácido benzoico (proceso excitatorio posterior y dependiente de segundos mensajeros). La célula receptora al ácido benzoico mostró un aumento de su actividad basal en el aire del laboratorio sin filtrar. Por medio de experimentos combinados de cromatografía gaseosa- electroantenograma y registro de células únicas encontramos que dicho aire contenía ácido benzoico y benzaldehido (estimulantes de la célula receptora al ácido benzoico en la sensilia tricodea) y nonanal (estimulante de la sensilia coelocónica). El umbral de la célula receptora al ácido benzoico se halla por debajo de una carga de estímqu de 0.01 μg de ácido benzoico por papel de filtro. Se analizó la composición química del meconio, producto de excreción de la pupa y único estímulo natural capaz de activar a la célula receptora del ácido benzoico. El meconio está compuesto por una gran cantidad de ácido succínico y ácido benzoico y cantidades menores de otros ácidos. La cantidad estimada de ácido benzoico presente en el meconio de machos y hembras fue 8.4 μg y 4.2 μg por 100 μl de meconio, respectivamente. De los componentes hallados, el único componente activador de la célula receptora al ácido benzoico fue el ácido benzoico. Sin embargo cuando éste fue adicionado al meconio, la respuesta disminuyó significativamente. Concluimos que el meconio obstruye estructuralmente el papel activador del ácido benzoico. Así, el ácido benzoico relevante para la hembra de B. mori no es aquel que está presente en el meconio. Fuentes alternativas de ácido benzoico en la planta de mora serían los frutos mismos de la mora y/o la reacción de defensa de la hoja que resulta en la producción de ácido benzoico como fitolexina. En ambos casos el ácido benzoico sería señal de buena “calidad”de planta y por ende de sustrato adecuado para la oviposición. Estas respuestas pueden sin embargo haber sido modificadas por innumerables generaciones de selección y cultivo de B. mori en sericultura.

Abstract:
The aim of this work was to characterize the electrophysiological responses of the olfactory benzoic-acid receptor cell, present in the females of the silk moth Bombyx mori. Our studies allow to characterize the benzoic-acid cell as a specialist as it responds maximally to its cue compound and has a similar response spectrum for less effective compounds. By means of studies of structure-activity relationships performed with halogenated substitutes of benzoic acid, we determined that the generation of an inductive effect by the halogen is a critical factor for the recognition of the odor molecule by the receptor site. Such an effect increased for the more electronegative halogens (fluoride) and for the meta position. When the benzoic-acid receptor cell was stimulated with iodine benzene, it was first showed inhibition during the stimulation and then an excitation post-stimulation. On the basis of various experiments we sμggested a model for the action of excitatory and inhibitory substances at the olfactory receptor level. In such a model, substances like the iodine benzene would act directly on the ion channels (inhibitory,fast, transient process that would not depend on second messengers), or on the benzoic-acid receptor site (excitatory, post-stimulation process that would depend on second messengers). The benzoic-acid receptor cell showed an increase of its basal activity when exposed to the unfiltered air of the laboratory. By means of experiments combining gas chromatography, electroantenograms and single-cell recordings we determined that the air of the laboratory contained benzoic acid and benzaldehyde (stimulants of the benzoic-acid cell in the sensilla trichoidea), and nonanal (stimulant of the sensilla coeloconica). The response threshold of the benzoic-acid receptor cell for was estimated to be below 0.01 μg of benzoic acid per filter paper. We analyzed the chemical composition of the meconium, an excretion product of the pupae and the only stimulus known capable of activating the benzoic-acid cell. It is constituted by large amounts of succinic and benzoic acid and by minor quantities of other acids. The amount of benzoic acid estimated per 100 μl meconium was 8.4 μg and 4.2 μg for the males and for the females, respectively. From the substances found, the only one capable of activating maximally the benzoic acid cell was benzoic acid. However, when it was added to or mixed with meconium, the response of the benzoic-acid cell significantly decreased. We concluded that the meconium structurally obstructs the excitatory role of benzoic acid. Thus, the benzoic acid that is relevant for the female of B. mori is not that naturally occurring in the meconium. Alternative sources of benzoic acid in the mulberry are the fruits themselves and/or the defense reaction to fungal infection of the leaves, which result in the release of benzoic acid as a phytolexin. In both cases the benzoic acid would signalize a plant of “good quality” and therefore an appropriated oviposition substrate. However, these responses may have been lost due to the innumerous generations of selection and domestication related to the exploitation of B. mori in sericulture.

"Estudios electroquímicos de sistemas hidrotérmicos con electrodo de Pared-Tubo" (1997). Trevani, Liliana Noemí. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudios embriológicos sobre algunas gramíneas nativas útiles (Poaceae) presentes en la Depresión del Salado, provincia de Buenos Aires, Argentina" (2011). Lovisolo, Marcelo R.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo general de este trabajo fue estudiar el desarrollo del grano de polen, del megagametófito, el endosperma y el embrión, como así también la anatomía de las estructuras esporofíticas relacionadas con estos procesos, en diez taxones de Poaceae, correspondientes a las tres subfamilias (Pooideae, Chloridoideae y Panicoideae) más ricamente representadas en la región de la depresión del Salado, Provincia de Buenos Aires. Los objetivos particulares fueron: ● Describir la Microsporogénesis y la Microgametogénesis. ● Realizar el estudio ontogenético ultraestructural de los cuerpos de Ubisch con el fin de aportar datos que ayuden a dilucidar su posible función y participación en la formación de la pared del grano de polen. ● Describir la Megasporogénesis y Megagametogénesis. ● Realizar el estudio ultraestructural del saco embrionario pre- y post-fertilización, a fin de aportar datos sobre el rol que cumplen las antípodas. ● Describir la Endospermogénesis, la Embriogénesis, el desarrollo total de los tegumentos seminales y las capas del pericarpio del fruto. ● Realizar el estudio anatómico del óvulo y del microsporangio. ● Relacionar las características embriológicas particulares de los taxones con las subfamilias a las cuales pertenecen. Todas las especies estudiadas, a excepción de Paspalidium geminatum, presentan un desarrollo normal del grano de polen, el cual se libera en estadio tricelular. La ontogenia del megagametófito corresponde al tipo Polygonum, con antípodas haustoriales bien desarrolladas y en número variable de acuerdo a las especies. En Paspalidium geminatum se observó la formación de varios gametófitos femeninos en distintos estadios de desarrollo en un mismo óvulo. En Stenotaphrum secundatum y Melica brasiliana son pocos los óvulos que forman megagametófitos viables, y una gran cantidad de óvulos abortivos fue observada. Por lo tanto, estas tres especies podrían tener una tendencia a un desarrollo de tipo apomíctico. El presente trabajo constituye un aporte original debido a que nada se conocía previamente sobre la embriología de estas especies nativas de Argentina. También representa una contribución a favor del desarrollo socio-económico del país, pues aporta información sobre la reproducción de algunas gramíneas útiles, nativas de una zona relevante desde el punto de vista de la producción agropecuaria en la Provincia de Buenos Aires. Dichos datos podrán ser de aplicación para proyectos donde genetistas y otros investigadores se dediquen al mejoramiento de pastizales.

Abstract:
The general goal of this work was to study the development of the pollen grain, the megagametophyte, the endosperm and the embryo as well as the anatomy of the sporophytic structures involved in these processes in ten taxa of the three subfamilies of Poaceae (Pooideae, Chloridoideae and Panicoideae) most richly represented in the region of the depression of the Salado river, Province of Buenos Aires. The particular objectives were to: ● Describe both Microsporogénesis and Microgametogenesis. ● Fulfil the anatomical study of the ovule as of the microsporangium. ● Study the ultra-structural ontogeny of the Ubisch bodies in order to contribute data that would help to dilucidate their feasible function and participation in the development of the pollen grain wall. ● Describe both Megasporogenesis and Megagametogenesis. ● Carry out the ultra-structural study of the embryo-sac right before and after fertilization with the purpose of contributing to the general knowledge of the performance played by the antipodal cells. ● Describe the Endospermogenesis, Embryogenesis as well as the whole development of the seminal teguments and layers of the fruit pericarp. ● Relate embryological characteristics of the taxa with the subfamilies to which they belong to. All the species studied, except Paspalidium geminatum, show a normal development of the pollen grain, which is released in a tri-cellular-stage. The ontogeny of the megagametophyte is of the Polygonum type, with well-developed haustorial antipodal cells and in changeable number according to the species. In Paspalidium geminatum the formation of several female gametophytes in different stages of development within a same ovule were observed. Otherwise, in Stenotaphrum secundatum and Melica brasiliana only a few ovules give rise to viable megagametophytes but instead a great amount of abortive ovules was noted. Therefore, these three species could tend towards an apomictic type of development. The present work constitutes an original contribution since nothing was previously known about the embryology of these native species from Argentina. Moreover, it represents a contribution to the social and economic development of the country due to the information given on the reproduction of some useful grasses, natural from an outstanding region in terms of the farming (and stockbreeding) production of the Province of Buenos Aires. Such data could be used by geneticists and other investigators conducting grass breeding projects.

"Estudios estructurales de glicoconjugados de Crithidia oncopelti" (1985). Wolfenson Band, Claudio Fernando. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudios estructurales y cinéticos de variantes de la fructosa-1,6- bisfosfatasa de los cloroplastos de trigo generadas en Escherichia coli" (1996). Hagelin, Karin. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Fructosa-1,6-bisfosfatasa de los cloroplastos (CFBPasa) de las plantas superiores es un homotetrámero de peso molecular c.a 160000 que cataliza la siguiente reacción: fructosa 1,6-bisfosfato + H2O----> fructosa 6-fosfato + Pi Mg2+ (o Mn2+) La actividad CFBPasa es modulada por la luz, tal como ocurre con otras enzimas regulatorias del cloroplasto. La actividad de la enzima aumenta luego de la transición oscuridad-luz debido a que ocurre (a) un aumento del pH y de la concentración de Mg2+ en el estroma del cloroplasto, (b) la modificación de otros metabolitos y iones del cloroplasto y (c) la reducción de grupos -S-S- de la enzima. La influencia de la luz se debe al efecto del Sistema de Transporte de Electrones mediado por el Sistema Ferredoxina-Tiorredoxina. In vitro, la actividad de la CFBPasa es modulada por componentes tanto fisiológicos (tiorredoxina) como no fisiológicos (cosolventes, aniones caotrópicos, alta presión). Los cambios conformacionales inducidos por estos moduladores son los responsables del aumento de su actividad específica. A fin de analizar las características cinéticas y estructurales de la enzima, el gen de la CFBPasa de los cloroplastos de trigo fue subclonado en el plásmido pGEX-1. La expresión del gen de la proteína de fusión conteniendo a la Glutation-S-transferasa en su extremo N-terminal y a la CFBPasa de trigo en el C-terminal produjo los cuerpos de inclusión. En consecuencia, la CFBPasa particionó en la fracción insoluble del lisado bacteriano. Con esta suspensión fue analizado el proceso de recuperación de las propiedades funcionales de la CFBPasa mediante técnicas de desnaturalización y resolubilización de proteínas. Además se estudió el efecto de moduladores -fisiológicos y no fisiológicos- y de anticuerpos sobre la reconstitución de las actividades CFBPasa como Glutation-S-transferasa en la proteína quimérica. En contraste con las CFBPasas homotetraméricas obtenidas de otras fuentes, la capacidad catalítica residía en un dímero. A fin de caracterizar a la enzima de cloroplastos y comparar su comportamiento con el de la CFBPasa contenida en la proteína de fusión, la secuencia nucleotídica que codifica para la CFBPasa de trigo fue clonada y expresada en otro vector: el plásmido pET-22. Este plásmido condujo a la obtención de la enzima libre del fragmento GST, en la fracción soluble del lidado bacteriano. A partir del mismo, la CFBPasa fue purificada a homogeneidad y caracterizada estructural y cinéticamente. Al igual que las contraparte de otros orígenes, la CFBPasa de trigo era un homotetrámero activable por reductores (ditiotreitol) y moduladores fisiológicos (tiorredoxina) y no-fisiológicos (perturbantes proteicos). De particular interés en estos estudios fue que la ausencia de 20 aminoácidos de la región N-terminal de la CFBPasa no afectara la capacidad catalítica de la enzima. De manera que una región altamente variable en las FBPasas, cloroplásticas y no cloroplásticas, no tendría participación en el mecanismo catalítico.

Abstract:
In higher plants chloroplasts, a homotetrameric enzyme (MW 160000), fructose-1,6-bisphosphatase (CFBPase) catalyzes the cleavage of fructose 1,6-bisphosphate to fructose 6-phosphate and inorganic phosphate. Like other regulatory steps in this organelle, the striking feature of CFBPase is the modulation of activity by the concerted action of stromal metabolites and the light-stimulated Ferredoxin-Tiorredoxin System. In vitro, the enzyme activity is activated by physiological (thioredoxin) and non-physiological (cosolvents, caotropic anions and high preassure) modulators. Hence the modification of intramolecular non-covalent interaction contribute to enhance the reductive activation of CFBPase. In order to determine the kinetic and structural characteristics of the enzyme, the cDNA encoding wheat CFBPase was cloned in the plasmid pGEX-1. The expressed polipeptide comprised the chloroplast enzyme bound to the C-terminus of the Glutation-S-transferase was purified by affinity chromatography. Given that most of this novel protein accumulated in the particulate fraction of the lysate in the form of Inclusion Bodies, the recovery of functionality was essayed. After the insoluble material was resuspended under different conditions, the effect of physiological and non-physiological compounds as well as antibodies were analized on the recovery of CFBPase and Glutation-S-transferase catalytic activity. At variance with homotetrameric CFBPases from other sources, the catalytic capacity of the chimeric enzyme resided in a dimer. In order to evaluate the alterations that the Glutation-S-transferase moiety introduced on the enzyme activity and the formation of Inclusion Bodies, the cDNA that encodes the CFBPase was inserted in the plasmid pET-22. The homotetrameric, soluble and active enzyme was subsequently characterized. Like counterparts from other sources, wheat CFBPase is activable by reductants (dithiothreitol) and physiological (thioredoxin) and non-physiological (protein perturbants) modulators. Interestingly, the absence of 20 aminoacid residues in the N-terminal region does not influence the catalytic activity.

"Estudios experimentales y teóricos del transporte iónico en electrodeposición en celdas delgadas" (2004). Dengra, Silvina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudió el transporte iónico y la morfología de crecimiento en depósitos ramificados en celdas delgadas a través de mediciones experimentales y teóricas, y el modelado computacional. Se usaron en forma simultánea las técnicas de Schlieren y partículas trazadoras para seguir la evolución de los frentes de concentración y los rollos convectivos en regímenes gravitoconvectivos y electroconvectivos dominantes. El modelo teórico macroscópico se basa en primeros principios, la ecuación de Nernst- Planck para el transporte de iones, la ecuación de Poisson para el potencial electrostático y la ecuación de Navier-Stokes para el flujo de fluido. Se presentan simulaciones numéricas para configuraciones de celdas reales usando computación en serie y paralela. En las simulaciones numéricas en paralelo, se hizo uso de técnicas de descomposición por dominios y métodos fuertemente implícitos para su implementación en un cluster tipo Beowulf con MPI bajo Linux. Esto permitió la utilización de mallas muy finas en dorninios distorsionados que se acercan más a la realidad de los experimentos físicos realizados, con el beneficio de un speed up casi lineal para algunos casos. La teoría y las simulaciones numéricas predicen la completa interacción de los frentes, la generación de vértices y una correcta evolución espacio-temporal, en concordancia con los resultados experimentales observados.

Abstract:
Ion transport and growth morphology in ramified deposits in thin-layer cells are studied through experimental measurements and theoretical and computational modeling. Simultaneous Schlieren and particle image velocimetry techniques are used to follow front development of concentration fields and convection rolls in gravitoconvection and electroconvection prevailing flows. The theoretical macroscopic model is based on first principles, using the Nernst-Planck equations for ion transport, the Poisson equation for the electrostatic potencial and the Navier-Stokes equations for the fluid flow. Numerical simulations in realistic cell configurations using serial and parallel computing are presented. In the parallel simulations, use is of domain decomposition techniques with a strongly implicit iterative method and its implementation in a Beowulf cluster under MPI and Linux. This allows the utilization of very fine grids in highly distorted domains with a more realistic physical parametrization and results in a robust algorithm attaining almost linear speed up. Theory and simulations predict full front interaction, vortex generation and merging, and a space-time fronts evolution, in close agreement with the results observed in the experiments.

"Estudios fitolíticos de las comunidades vegetales del ecotono fueguino como una herramienta para reconocer sus variaciones de composición en el pasado reciente" (2013). Fernández Pepi, María Gabriela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los primeros estudios de la biodiversidad en el Ecotono fueguino (Tierra del Fuego, Argentina), permitieron conocer la composición de las comunidades vegetales y sus variantes en el paisaje. Éstos sugieren cambios en los pastizales naturales como consecuencia del sobrepastoreo. El objetivo de este trabajo fue comparar las asociaciones fitolíticas de las tres principales comunidades de esta región con distinto grado de pastoreo: la Estepa de Festuca gracillima, Pastizal de Poa pratensis y Humedal de Caltha sagittata. La caracterización de las asociaciones fitolíticas de las comunidades actuales permitieron reconocerlas en forma diferencial y esto fue aplicado al análisis de las asociaciones fitolíticas halladas en las sucesiones pedosedimentarias. Las comunidades actuales presentaron mayor afinidad con las asociaciones fitolíticas de los primeros 10-20 cm de cada perfil. Se pudo establecer que el Humedal y el Pastizal presentan mayores diferencias entre las asociaciones fitolíticas actuales con las del pasado. Además los niveles basales de estas comunidades se relacionan con la vegetación actual de la Estepa y su vega de inundación. Esto puede deberse a que tanto el Humedal como el Pastizal están sometidas al pastoreo de animales domésticos como de nativos. En cambio, la Estepa está sujeta sólo al pastoreo ocasional de guanacos.

Abstract:
Early studies of biodiversity in the central part of Fuegian Ecotone (Tierra del Fuego) allowed to know the composition of plant communities inhabiting the area and its variants in the landscape. The results of the present research suggest changes in the surrounding natural grasslands as a result of overgrazing by domestic livestock. The aim of this study was to compare the phytolith assemblages of three Fuegian Ecotone communities with different degrees of grazing: Festuca gracillima steppe, Poa pratensis grassland and Caltha sagittata wetland. The characterization of the phytolith assemblages of the each community allowed to differentiate and was applied to the analysis of phytolith assemblages found in soil succesisions. The actual communities had, in general, higher affinities with the first 10-20 cm phytolith assemblages of each profile. These results allow us to establish that communities of wetland and grassland are those with the greatest differences between actual and past phytolith assemblages. Besides the basal levels of these communities related to the current vegetation of the steppe and its flood plain. This may be due to the grazing level supported: the grasslands and wetlands are subject to livestock grazing as well as native herbivory, while, the steppe has only occasional guanacos grazing.

"Estudios florísticos y ecológicos sobre las algas de agua dulce de turberas de Tierra del Fuego" (1994). Mataloni, María Gabriela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta Tesis Doctoral se realizan diversas investigaciones florísticas y ecológicas sobre las algas de turberas de Sphagnum de la provincia de Tierra Fuego. Para ello se condijeron básicamente dos trabajos. en la primera parte se estudiaron ocho ojos de agua pertenecientes a siete turberas ubicadas en el sur de Tierra del Fuego. En cada una de ellas se muestrearon tanto el fitoplancton del agua libre como las algas que viven asociadas a Sphagnum a lo largo de un gradiente ambiental caracterizado por una disminución de la humedad del medio, acompañada por un incremento de la conductividad y una disminución del pH. Estas condiciones reflejan, a su vez, el grado de maduración del sistema. En esta primera parte se registraron 299 taxones específicos e intraespecíficos, para cada uno de los cuales se señalan las medidas y la distribución geográfica, y cuyas ilustraciones se reúnen en el Apéndice. Un 26.6 % de las mismas se citan por primera vez para nuestro país. Cabe destacar, así mismo, el importante número de especies en común con trabajos previos realizados en turberas del Hemisferio Norte. Las ficofloras asociadas a distintas turberas resultaron ser muy diferentes entre sí, en relación a las caracetrísticas físico-químicas de los diversos ojos de agua. Para cada ojo de agua se verifica, a su vez, una variación gradual y contínua de la composición florística en respuesta al proceso de consolidación, dada principalmente por la disminución de los números de géneros y especies y la consecuente dominancia del sistema por unas pocas especies resistentes a las condiciones "terrestres" más rigurosas. En la segunda parte de la Tesis se estudia en detalle la composición cualitativa y cuantitativa de las comunidades fitoplanctónicas de distintos cuerpos de agua de la turbera de Rancho Hambre y su relación con diferentes parámetros abióticos. Con este objeto se muestrearon el río Larsiparsahk, así como cinco ojos de agua relacionados con él. El fitoplancton de río se diferencia profundamente del de los ojos de agua debido a su condición lótica, tanto en su composición florística como por su mayor número de especies. Las diferencias entre las comunidades fitoplanctónicas de los ojos de agua, a su vez, se deben principalmente a la influencia de algunos parámetros morfométricos y la conductividad. Las formas algales que dominan en los ojos de agua pertenecen a los tipos cocoide y musilaginoso. sin embargo, el río se halla dominado por especies flageladas. Esto puede deberse a que la mayor aislación del medio que presentan los primeros les pérmite sobrevivir mejor en las condiciones más rigurosas de estos ambientes lénticos. Los resultados de ambas partes de la Tesis coinciden en cuanto a la preferencia de las Cianophyceae por los ambientes más ácidos, evidente tanto por una mayor riqueza específica como por sus altos valores de abundancia en un tipo de ambientes donde, según se creía, estos organismos no prosperan.

"Estudios fotocatalíticos de reducción y oxidación con TiO2, Fe/TiO2 y Pt/TiO2" (2012). Testa Fernández, Juan José. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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El objetivo de este trabajo de tesis es el estudio de la reacción fotocatalítica de remoción de Cr(VI) de suspensiones acuosas con TiO2 y nuevos fotocatalizadores, en presencia y ausencia de compuestos orgánicos oxidables, y la elucidación de los mecanismos involucrados en la misma. En el capítulo 1 se desarrolla la introducción al tema, en la cual se presentan las tecnologías avanzadas de oxidación (TAOs), se explican los fundamentos del modelo de bandas sobre semiconductores, se hace el análisis de las interfaces semiconductor-metal y semiconductorsolución, se presenta la Fotocatálisis Heterogénea sobre TiO2, detallando las distintas variables que influyen sobre ella y su mecanismo general. Finalmente, se exponen las distintas formas del cromo y su importancia como contaminantes, y se presentan los antecedentes sobre su reducción fotocatalítica. El capítulo 2 está dedicado a la presentación y análisis de los datos obtenidos en los ensayos realizados con el fin de determinar el mecanismo de reducción fotocatalítica de Cr(VI) con TiO2 Evonik P25, el fotocatalizador patrón. La irradiación se llevó a cabo con longitudes de onda en el intervalo de 300 a 400 nm. Se realizó la evaluación cinética de los perfiles de decaimiento de Cr(VI) durante la reacción, a pH 2 y 3, en ausencia de donores orgánicos y en presencia de ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) y ácido oxálico. También se estudió el efecto de la presencia de oxígeno sobre la reducción de Cr(VI). Todos los experimentos se desarrollaron a dos o más pH y en sistemas abiertos al aire y con atmósfera de nitrógeno. Fueron fundamentales para la elucidación del mecanismo los resultados de fotocatálisis realizados en la cavidad de un espectróscopo de resonancia paramagnética electrónica (RPE) en el que se pudo identificar especies paramagnéticas de Cr(V). El análisis de los resultados experimentales mostró que los mismos son consistentes con un mecanismo de reducción de Cr(VI) a Cr(III) en tres etapas monoelectrónicas. Los capítulos 3 y 4 están dedicados a la evaluación de nuevos fotocatalizadores de TiO2 modificados para la reducción de Cr(VI). El primero de ellos está centrado en muestras de TiO2 modificadas con Fe, sintetizadas por dos técnicas diferentes, impregnación y sol-gel, usando dos precursores (nitrato férrico y acetilacetonato férrico) para introducir el Fe y con dos cargas distintas del mismo. El capítulo 4 evalúa muestras de TiO2 modificadas con platino, preparadas por fotodeposición y conteniendo distintas cargas de Pt sobre dos muestras comerciales. Incluye la síntesis y caracterización de las muestras de Pt-TiO2 mediante técnicas tales como la determinación del área específica (BET), difracción de rayos x, microscopías electrónicas de barrido y de transmisión, y espectroscopía de reflectancia difusa. Los estudios fotocatalíticos de ambos capítulos se realizaron en ausencia y presencia de EDTA como donor de electrones, y en sistemas abiertos al aire y en atmósfera de nitrógeno. En el capítulo 3, además, se trabajó a dos pH (6,6 y 2). En todos los casos se analizaron los perfiles cinéticos mediante los ajustes correspondientes y se evaluó la eficacia de los fotocatalizadores en base a los niveles de reducción de cromo a diferentes tiempos de irradiación. El análisis de los datos de ambos capítulos permitió establecer claramente cuáles de las muestras estudiadas tienen mayor eficiencia y en qué condiciones se maximiza la misma, así como decidir en qué casos sería conveniente reemplazar las muestras comerciales tradicionalmente empleadas en Fotocatálisis Heterogénea por las estudiadas.

Abstract:
The aim of this thesis (research) is the study of the reaction involved in the photocatalytic removal of Cr (VI) from aqueous suspensions by means of TiO2 and other new photocatalysts, both in the presence and in the absence of oxidizable organic compounds, and elucidation of the mechanisms involved in it. Chapter 1 is an introduction to the subject, in which advanced oxidation technologies (AOTs) are described, the fundamentals of the semiconductor band model are presented, and an analysis of semiconductor-metal and of semiconductor-solution interfaces is presented. The Heterogeneous Photocatalysis on TiO2 is also described, detailing the different variables influencing it and its general mechanism. Finally, Chapter 1 presents the different forms of chromium and their importance as pollutants, and provides background on their photocatalytic reduction. Chapter 2 is devoted to the presentation and analysis of data obtained in experiments performed to determine the mechanism of the photocatalytic reduction of Cr (VI) with TiO2 Evonik P25, the photocatalyst standard. The irradiation was carried out with wavelengths in the range 300 to 400 nm. An evaluation was performed of the kinetic decay of Cr (VI) during the reaction, at pH 2 and 3, in the absence of organic donors and in the presence of EDTA and oxalic acid. The effect of the presence of oxygen on the reduction of Cr (VI) was also studied. All experiments were conducted at two or more pH levels in open systems with air and under nitrogen. The results achieved in the experiments developed in the cavity of an electron paramagnetic resonance spectroscope (EPR), in which paramagnetic species from Cr(V) could be identified, were fundamental in the elucidation of the photocatalysis mechanism. The analysis of the experimental results showed that they are consistent with a reduction mechanism of Cr (VI) to Cr (III) in three stages of one electron. Chapters 3 and 4 are devoted to the evaluation of new TiO2 photocatalysts modified to reduce Cr (VI). Chapter 3 is centered on samples of TiO2 modified with Fe, synthesized by two different techniques, impregnation and sol-gel, using two precursors (ferric nitrate and ferric acetylacetonate), and whit two charges of it. Chapter 4 evaluates samples of TiO2 modified with platinum, prepared by photodeposition and containing different Pt loadings on two commercial samples. It includes the description of the synthesis and characterization of Pt-TiO2 samples by techniques such as determining the specific area (BET), x-ray diffraction, scanning electron microscopy, transmission electron microscopy and diffuse reflectance spectroscopy. The photocatalytic studies assays explained in both chapters were performed both in the absence and in the presence of EDTA as electron donor, and in open air systems and in nitrogen. In Chapter 3, in addition, assays were performed with two different pH levels (6.6 and 2). In all cases kinetic profiles were analyzed using the appropriate adjustments and the efficacy of the photocatalysts was evaluated based on chromium reduction levels at different irradiation times. The analysis of data from both chapters allowed establishing which of the samples studied have greater efficiency and under what conditions it is maximized; this was useful to determine in which cases it would be convenient to replace the commercial samples usually employed in heterogeneous photocatalysis with the samples proposed in this thesis.

"Estudios genéticos de la biosíntesis de Poli(3-Hidroxibutirato)PHB, en Bacillus megaterium. Obtención y caracterización de mutantes y expresión heteróloga de genes phb" (1996). Floccari, Mirtha Elena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los polihidroxialcanoatos (PHAs) constituyen una familia compleja de polímeros, que se acumulan en el citoplasma celular de una amplia variedad de microorganismos en forma de gránulos, como material de reserva. Estos polímeros pueden ser utilizados en la fabricación de plásticos que, a diferencia de los producidos por síntesis química son termoplásticos, biodegradables y pueden biosintetizarse a partir de recursos renovables. Bacillus megateríum acumula principalmente poli(3-hidroxibutirato), PHB, un homopolímero lineal de D(-)-3-hidroxibutirato. La estructura del gránulo, así como los mecanismos involucrados en su formación son poco conocidos. En este trabajo se obtuvo una colección de mutantes de Bacillus megaterium deficientes en la biosíntesis de PHA, con inactividad de la enzima PHA sintasa. A continuación, se estableció, un sistema de estudio de genes pha heterólogos en una bacteria que acumula el polímero en forma natural. Para ello se introdujo el gen que codifica para la enzima PHA sintasa de Alcaligenes eutrophus en las mutantes PHA negativas obtenidas, utilizando como vector de subclonado el plásmido “shuttle” pATl9. Por último y para contribuir al conocimiento sobre los roles de las proteínas asociadas al gránulo y sus interacciones en la formación del mismo, se aplicó este sistema de estudio al análisis de la interacción de la proteína de Mr 22 de B. megateríum, propuesta como un factor estructural de importancia en la formación de estas inclusiones, en B. megaterium, con gránulos sintetizados por la PHA sintasa de A. eutrophus. Los resultados obtenidos revelaron que esta proteína puede asociarse a los gránulos formados por la sintasa heteróloga.

Abstract:
The polyhydroxyalkanoates (PHAs) are a group of polymers that accumulate in the bacterial cytoplasm forming inclusions called granules. These polymers, biosynthesized from removable resources, can be used as biodegradable plastics. Bacillus megaterium accumulates poly(3-hydroxybutyrate) PHB, a linear homopolymer of D(-)-3-hydroxybutyrate. The granule structure and the biochemical mechanisms involved in their synthesis are not completely understood. In this work a collection of B. megaterium mutants deficient in PHB synthesis was obtained. None of them showed PHA synthase activity. A system was developed for the study of heterologous genes, using these mutants and the Gram positive and negative bacterial shuttle plasmid pAT19, as cloning vector. In an attempt to understand the role of granule associated proteins and their interactions, this system was used to analyze if the 22 Mr protein of B. megaterium, that is supposed to perform the role of a structural protein, could be associated with PHA granules synthesized by the Alcaligenes eutrophus synthase. The results showed an association to the granules, whose synthesis was directed by an heterologous synthase.

"Estudios genéticos y citogenéticos en Aplasia Medular" (2015-03-26). Bestach, Yesica Soledad. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Aplasia Medular o Anemia Aplásica adquirida (AA) es una insuficiencia medular global cuantitativa, caracterizada por una médula ósea hipo-celular, pancitopenia y riesgo de progresión a Síndromes Mielodisplásicos (SMD). El 80% de los casos de AA son de etiología idiopática, vinculados a un desorden autoinmune subyacente. Los principales mecanismos relacionados a la supresión hematopoyética en AA involucran un incremento de las citoquinas TNF-α e IFN-γ producidas por linfocitos T citotóxicos y T helper (Th) 1, y el consecuente aumento de la apoptosis. También se observa un desbalance entre los diferentes subsets de linfocitos T y la desregulación de otras citoquinas como IL-6 y TGF-β1. El objetivo fue estudiar polimorfismos asociados con la expresión diferencial de los genes TNF, IFNG, IL6 y TGFB1, y establecer su relación con susceptibilidad y/o características clínico-patológicas en pacientes con AA y SMD. Además, determinar los niveles de expresión de estas citoquinas y de los factores de transcripción Foxp3, T-bet, GATA-3 y RORγt en AA, a fin de caracterizar el desbalance entre los linfocitos T regulatorios (Treg), Th1, Th2 y Th17, respectivamente. Los resultados sugieren que los polimorfismos estudiados no estarían asociados con susceptibilidad a AA; mientras que, existiría una relación entre los polimorfismos de los genes TNF e IL6 y riesgo a SMD, en nuestra población. Las variantes polimórficas estudiadas estarían relacionadas con la severidad de las citopenias tanto en AA como en SMD, pudiendo actuar como modificadores genéticos de la enfermedad. Los hallazgos del análisis de expresión en AA muestran un incremento de TNF e IL6, y una disminución de TGBF1. La relación entre los factores de transcripción reflejaría una disminución en la diferenciación y/o función de células Treg favoreciendo un estado pro-inflamatorio, principalmente Th1 y Th2, lo cual podría contribuir con los mecanismos patogénicos relacionados a la falla medular en los pacientes con AA.

Abstract:
Acquired aplastic anemia (AA) is a marrow failure characterized by a hypocellular bone marrow, pancytopenia and risk of progression to Myelodysplastic Syndromes (MDS). Around 80% of AA cases are idiopathic, linked to an underlying autoimmune disorder. The main mechanisms related to the hematopoietic suppression in AA involve an increase of the cytokines TNF-α and IFN-γ produced by cytotoxic T and T helper (Th) 1 cells and, therefore, an apoptosis rise. Furthermore, perturbations of the T cell balance and abnormal regulation of other cytokines such as IL-6 and TGF-β1 play important roles to the development of immune disorders in AA. The aim of this work was to study the polymorphisms associated with differential expression of TNF, IFNG, IL6 and TGFB1 genes and to establish its relationship with susceptibility and/or clinic-pathologic features in patients with AA and MDS. In addition, to determine the expression levels of these cytokines and of the transcription factors Foxp3, T-bet, GATA-3 and RORγt in AA, in order to characterize the imbalance among regulatory T cells (Treg), Th1, Th2 and Th17, respectively. The obtained results suggest that, in our population, the studied polymorphisms would not be associated with susceptibility to AA; while polymorphisms in TNF and IL6 genes may increase propensity to MDS. Furthermore, these polymorphic variants could be related to severity of the cytopenias in AA and MDS, and may act as genetic modifiers of the diseases. Moreover, the analysis of cytokine expression in AA shows an increase of TNF and IL6, and a decreased of TGBF1. Finally, the ratio among transcription factors might reflect a Treg deficiency impairment, supporting a proinflammatory state, mainly Th1 and Th2, which may contribute to the pathogenic mechanisms related to the bone marrow failure observed in patients with AA.

"Estudios genéticos y fisiológicos de Phaffia rhodozyma : control computarizado de la producción de astaxantina" (1995). Ducrey Santopietro, Luis Marcelo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudios genéticos y moleculares sobre la biosíntesis de los glucanos Beta (1,2) cíclicos en Rhizobiaceae" (1994). Castro, Olga Alejandra. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudios genómicos y funcionales en Anaplasma marginale y en bacterias intracelulares de la clase alfa-proteobacteria y su relación con la reducción del genoma" (2012). Nuñez, Pablo Alfredo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La subdivisión α- de la clase proteobacteria representa un grupo sumamente diverso y heterogéneo de bacterias con una gran variabilidad en sus características genómicas, biológicas y ecológicas. Dentro de esta subdivisión se encuentra el orden Rickettsiales que ha cobrado gran importancia durante los últimos años por agrupar a diversos patógenos emergentes que resultan relevantes para la salud pública y salud animal. Entre ellos, se destaca Anaplasma marginale, causante de la Anaplasmosis bovina enfermedad transmitida por garrapatas que tiene gran impacto sobre la actividad ganadera en nuestro país. Es importante concentrar esfuerzos en comprender mejor las preguntas: ¿Qué tienen en común y en qué difieren estos organismos en términos de información en el genoma y en su biología? ¿Podemos identificar y explicar las diferencias en sus capacidades de adaptación en términos del contenido génico y la conservación de la estructura y función de determinados mecanismos moleculares? Este trabajo se centra en aspectos inmunológicos, funcionales y evolutivos tomando como modelo a A. marginale y analizando comparativamente organismos relacionados del orden Rickettsiales en el contexto de la clase α-proteobacteria. La caracterización del conjunto de proteínas de membrana externa y de los sistemas de secreción representa un desafío importante por ser los principales blancos de interacción de las bacterias con las células hospedadoras y con las células del sistema inmune. Este estudio permitió la identificación de dos proteínas en A. marginale con capacidad antigénica que fueron capaces de estimular una respuesta inmune específica. Estudios futuros permitirán verificar experimentalmente la localización superficial, como también corroborar su potencialidad como antígenos protectivos en nuevas formulaciones de vacunas racionales. La caracterización del sistema de secreción de proteínas “Twin Arginine translocación pathway (Tat)” aporta nueva información acerca de la funcionalidad del sistema en dos patógenos de gran relevancia: A. marginale y B. abortus. A pesar de que sistema Tat en A. marginale presentan una organización genómica fragmentada, se pudo demostrar la conservación de su funcionalidad en este organismo. Esta organización se opone a la estructura clásica en operon bajo una única secuencia regulatoria característica de la mayoría de los sistemas proteicos multi-componentes. Asimismo, en A. marginale la diferencia de los niveles de abundancia de ARNm de cada uno de los genes correlaciona con los niveles de proteínas descriptos para complejos funcionales, sugiriendo la existencia de una adaptación a mecanismos de regulación alternativos gen-específicos. Las bacterias intracelulares estrictas tendrían un uso limitado del sistema Tat, mientras que organismos de vida libre y bacterias del suelo presentarían un uso moderado a alto. Sin embargo, tanto en A. marginale como en B. abortus el sistema Tat podría estar involucrado en procesos relevantes de adaptación y patogénesis. Los procariotas coordinan la transcripción de genes involucrados en complejos metabólicos o de proteínas mediante la organización de operones. En la actualidad,existen diferentes hipótesis acerca de las fuerzas que rigen estos procesos de organización, tanto para determinar su origen como los mecanismos de mantenimiento de este tipo de estructura. A partir de la fragmentación del operon tat y la adaptación a mecanismos de regulación gen-específicos, como así también de otros casos descriptos recientemente en la literatura, surgió la hipótesis de la existencia de un proceso generalizado de fragmentación de operones en organismos asociados a ambientes intracelulares con genomas reducidos en tamaño. En tal sentido, fue posible comprobar que en las α-proteobacterias de genomas pequeños tanto el número como el largo de los operones era menor en comparación con bacterias de genomas también pequeños pero pertenecientes a otros grupos. Este comportamiento observado en las α-proteobacterias sería compatible con un proceso generalizado de fragmentación. Estos resultados se explicarían teniendo en cuenta que los procesos de reducción genómica se describieron como procesos evolutivos independientes en los diferentes linajes. Del análisis de las diferentes propiedades de los genes presentes en operones en diversos grupos filogenéticos se pudo detectar tanto resultados que reflejan diversidad como patrones consistentes y conservados. La mayor frecuencia de fragmentación supone el incremento de regiones de regulación gen-específicas en genomas de tamaño reducido, y/o en genes bajo escasa presión de selección, como se observa para los genes menos persistentes, de baja expresión y no-esenciales. La aparición de mecanismos de control gen-específico versus un control concertado en operón estaría fuertemente influenciado por los procesos de mutación, selección y deriva. Dada la diversidad de la clase y la complejidad de procesos que afectan y determinan la organización de los cromosomas, el conocimiento acerca de los mismos ayudará a conocer los procesos celulares, moleculares que subyacen a la diversidad. Aspiramos a que los estudios realizados en la tesis aporten al conocimiento general de los organismos del orden Rickettsiales para avanzar en la caracterización de un grupo de bacterias que requiere más atención y estudio como patógenos emergentes de amplia distribución.

Abstract:
The α-proteobacteria class represents an extremely diverse and heterogeneous group of bacteria with a high variability in their genomic, biological and ecological features. The order Rickettsiales has become more important over the last years, since it groups together emerging pathogens that are relevant to human and animal health. Among them, Anaplasma marginale is the etiological agent of bovine Anaplasmosis, an infectious tick-borne disease that highly impacts on livestock farming activity in our country. It is important to focus efforts to better understand the following questions: what do these organisms have in common and in what do they differ, taking into account their genome and biology? Can we identify and explain the differences in their adaptive capacities in terms of genetic content, structure and functionality conservation of molecular mechanisms? This work focus on immunological, functional and evolutionary topics based on A. marginale in comparison with related organisms from the order Rickettsiales in the context of the α-proteobacteria class. The characterization of the set of outer membrane proteins and secretion systems represents a significant challenge, since they are the main targets of interaction of bacteria with host cells and the immune system, and also can be responsible of the export of virulence factors. This study allowed the identification of two novel proteins with antigenic capacities in A. marginale which were able to stimulate a specific immune response. Future studies will allow to verify their surface location, as well as their potential as protective antigens in new vaccine formulations. The characterization of protein secretion system "Twin Arginine translocation pathway (Tat)" provides new information on the functionality of the system in two relevant pathogens: A. marginale and B. abortus. The functionality of the Tat system was demonstrated in A. marginale, irrespective of the genomic and regulatory divergence relative to the classical operon organization under unique regulatory sequence. Difference in the abundance of mRNA levels which correlated with the protein levels described for functional complexes suggests the existence of alternative adaptive mechanisms by gene-specific regulation. Pathogenic intracellular bacteria would have a limited usage of the Tat system, while free-living organisms and soil bacteria could have a moderate to high usage. However, in both pathogens analyzed in this study, the Tat system could be involved in several adaptive or pathogenic mechanisms. Prokaryotes usually coordinate transcription of genes involved in metabolism or protein complexes through the organization of operons. Nowadays, different hypotheses are under discussion about the forces that govern these organizations, both regarding the origin and maintenance of this type of structure. Considering the tat operon fragmentation as well as other cases recently described in the literature, we hypothesized the existence of a more generalized operon fragmentation event in small genome organisms associated with intracellular lifestyles. In this regard, the α- proteobacteria showed less usage and length of operons supporting a generalized fragmentation process, while the opposite pattern was observed in small genomes from other groups. These results could be explained considering that genome reduction events were described as independent evolutionary processes in different lineages.The analysis of the different genes features and phylogenetic groups let us detect abundant diversity as well as consistent and conserved patterns among groups. The highest operon fragmentation frequency involves the increase of gene-regulatory regions in small genomes and/or in operons of genes with lower adaptive value as it is observed for non-persistent, lowly-expressed and non-essential genes. This suggests that gene-specific mechanisms versus operon organization are strongly shaped by mutation, selection and genetic drift. Considering the diversity and complexity of the events that affect the organization of bacterial chromosomes, a better understanding of chromosome organization will help to understand the cellular and molecular mechanisms underlying diversity. We believe this thesis contribute to the overall knowledge of organisms of the Rickettsiales order, making it possible to improve the characterization of a bacterial group that requires more attention and study as emerging pathogens widely distributed.

"Estudios genómicos y transcriptómicos de la adaptación al ambiente de cría en un modelo de especiación por especialización ecológica en Drosophila" (2017-03-27). De Panis, Diego Nicolás. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los estudios de secuenciación de alto rendimiento están abriendo nuevos caminos para investigar las respuestas adaptativas que los organismos despliegan en entornos alternativos. Sin embargo, mucho queda por entender sobre las bases genéticas de la adaptación a las plantas hospedadoras. La especies cactófilas de Drosophila que se encuentran en América del Sur tienen distinto grado de divergencia y especialización en la explotación de los cactus que habitan. La utilización de tejidos necróticos como hospedadores ha ligado su historia evolutiva a la expansión, retracción y diversificación de las cactáceas durante los cambios climáticos promovidos por los periodos glaciales del cuaternario. Las especies hermanas D. buzzatii y D. koepferae divergieron hace unos cinco millones de años y actualmente muestran una marcada diferenciación en caracteres de historia de vida, morfología y hábito, que aparentemente habrían evolucionado como adaptaciones a las distintas plantas hospedadoras. En su región simpátrica, ubicada en el noroeste Argentino, utilizan alternativamente cardones (Trichocereus terscheckii) y tunas (Opuntia sulphurea) como recursos de cría, donde el hospedador primario de una resulta en el secundario de la otra. Sin embargo, el cambio de hospedador afecta seriamente los componentes del fitness cuando ambas especies son criadas en el recurso secundario, lo que sugiere un importante papel de los metabolitos secundarios en el proceso de especialización ecológica. En la presente tesis, se estudiaron las particularidades genómicas de estas especies hermanas, así como la expresión génica en diferentes aproximaciones a las condiciones naturales de cría. A partir de los resultados, se desprenden diferencias entre ambas especies, tanto en su arquitectura genética como en su modulación transcripcional. Precisamente la mayor diferencia se encontró en la modulación transcripcional que llevan a cabo en los diferentes recursos de cría, aunque en ambos casos los genes diferencialmente expresados estuvieron principalmente relacionados con detoxificación, óxido-reducción y respuesta a estrés, pero también con desarrollo y procesos neurobiológicos. Esta trabajo aporta nuevos datos sobre el rol de la plasticidad transcripcional y las bases genómicas de estrategias adaptativas a ambientes de cría alternativos.

Abstract:
High-throughput sequencing studies are breaking new ground to investigate the adaptative responses that organisms deploy in alternative environments. Nevertheless much remains to be understood about the genetic basis of host plant adaptation. The cactophilic species of Drosophila that are found in South America have different degrees of divergence and specialization in the exploitation of the cactus they inhabit. The use of necrotic tissue as hosts has linked its evolutionary history to the expansion, contraction and diversification of cacti during climate changes promoted by Quaternary glacial periods. The sister species D. buzzatii and D. koepferae diverged about five million years ago and currently show a marked difference in life history traits, morphology and habit, which apparently have evolved as adaptations to different host plants. In its sympatric region located in northwestern Argentina, they alternatively use cardones (Trichocereus terscheckii) and prickly pears (Opuntia sulphurea) as breeding resources, where the primary host for one results in the secondary of the other. However, the host change seriously affects fitness components when both species are raised in the secondary resource, suggesting an important role of secondary metabolites in the process of ecological specialization. In this thesis, the genomics particularities of these sister species were studied, along with the genetic expression in different approaches to natural breeding conditions. From the results, differences arose between species, both in the genetic architecture as in the transcriptional modulation. Precisely, the biggest difference was found in transcriptional modulation carried out in the different breeding resources, although in both cases the differentially expressed genes were mainly related to detoxification, oxidation-reduction and response to stress, but also with development and neurobiological processes. This work contributes new data onto the role of transcriptional plasticity and the genomic bases of adaptive strategies to alternative rearing environments.

"Estudios geofísicos aplicados a la neotectónica de la falla El Tigre, precordillera de San Juan" (2011). Fazzito, Sabrina Yesica. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El presente estudio tiene como objetivo principal caracterizar la cinemática, la estructura y la deformación de uno de los rasgos estructurales más destacados en la Precordillera Centro- Occidental de San Juan con actividad neotectónica, la falla con deslizamiento oblicuo El Tigre. Para esto, se mostrará que la aplicación y el desarrollo de diferentes métodos geofísicos, en conjunto con los métodos geológicos tradicionales como el análisis estructural, geomórfico y estratigráfico, permiten ampliar significativamente el conocimiento de una zona afectada por actividad neotectónica. En este trabajo se aplicaron, con resultados positivos, diversos métodos de estudio geofísico en zonas afectadas por la falla: Tomografía Eléctrica Resistiva somera en 2D, Paleomagnetismo y Anisotropía de Susceptibilidad Magnética. Entre los principales aportes de la investigación se encuentran: la identificación de discontinuidades en la traza y geoformas asociadas a fallamiento de desplazamiento de rumbo, el reconocimiento de estructuras oblicuas a la falla, determinación de curvaturas menores y mayores de la traza y la evaluación de la actividad de la falla en el tiempo. En particular en el Segmento Central de la falla El Tigre, la Tomografía Eléctrica Resistiva en 2D reveló características de los sedimentos, la ubicación y orientación de la falla principal, la estructura de dorsos de presión y de bajos de hundimiento y permitió asociar la distribución de esas geoformas a los cambios mayores en la orientación de la traza de la falla. Además, esta metodología permitió sugerir la existencia de fallas ciegas y grábenes, la ubicación de la napa freática y reconocer la función de la falla El Tigre como barrera hidrogeológica. A través del Paleomagnetismo se logró detectar la presencia de zonas con importantes rotaciones tectónicas según ejes verticales asociadas al movimiento de la falla, diferencias en la actividad de la falla en distintos períodos geológicos y, teniendo en cuenta las estructuras oblicuas reveladas en el estudio cartográfico, ayudar a proponer un esquema cinemático preliminar de deformación en bloques. El método de Anisotropía de Susceptibilidad Magnética reveló las direcciones de máximo y mínimo acortamiento de la deformación y una posible variación de orientación de las mismas en el tiempo.

Abstract:
The present study has the characterization of the kinematics, structure and deformation of one of the most outstanding structural features in the Central-Western Precordillera of the San Juan province, the oblique-slip ‘El Tigre’ fault as it main objective. It is shown that the application and development of different geophysical methods, together with the usual geological studies as structural, geomorphological and stratigraphic analysis, allow to significantly extend the understanding of a zone affected by neotectonic activity. Different methods of geophysical study were applied with positive results in zones affected by the fault: shallow 2D Electrical Resistivity Tomography, Paleomagnetism and Anisotropy of Magnetic Susceptibility. Among the main achievements of the investigation we enumerate: the identification of discontinuities in the trace and landforms associated to strike-slip faulting, the recognition of structures oblique to the fault, the determination of smaller and larger trace curvatures, and the evaluation of the fault activity along time. In particular, in the Central Segment of the ‘El Tigre’ fault the 2D Electrical Resistivity Tomography revealed the underground features of sediments, the location and orientation of the main fault, the structure of pressure-ridges and sag-ponds, and allowed to relate the landforms distribution to the largest changes in the fault trace orientation. Besides, this methodology allowed to suggest the existence of blind faults and grabens, the location of the water table and the recognition of the ‘El Tigre’ fault as a hydrogeological barrier. Paleomagnetic studies were essential for: detection of the presence of zones with important tectonic rotations around vertical axes associated to the fault motion, differences in the fault activity in different geological periods and, considering the oblique structures revealed in the cartographic study, helped to propose a preliminary kinematic scheme of rigid-block deformation. The method of Anisotropy of Magnetic Susceptibility showed the maximum and minimum shortening directions of the deformation, and a possible variation of them with time.

"Estudios geológicos en la región del Río Chubut Medio" (1942). Petersen, Cristian Serafín. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La presente contribución tiene por objeto optar al titulo de Doctor en Ciencias Naturales. La región abarcada por las observaciones que en ella se consignan se halla comprendida, aproximadamente, entre los 42°20' - 43° L.S. y los 69°30' - 7O°20' Long.W.; ella se ilustra, a grandes rasgos, en el plano de orientación adjunto (fig. 1) confeccionado, con algunas modificaciones, sobre la base de las planchetas del Instituto Geográfico Militar en escala l:500.000, N°s 77 (Esquel) y 78 (Rio Chubut), edición de 1929. Los límites entre las unidades geológicas en él representadas tienen sólo carácter provisorio, dada la poca exactitud del mapa básico en lo referente a distancias relativas, trazados de caminos, cañadones, etc. Una distinción más precisa será factible cuando se disponga de mapas topográficos a mayor escala. Con el fin de establecer más exactamente las relaciones que existen entre los distintos grupos, efectué dos levantamientos topográficos y geológicos expeditivos en escala 1:50.000. Uno de ellos comprende la zona entre Piedra Parada y la casa de R.San Martin, localidades situadas sobre el valle del rio Chubut, y extendido a ambos lados de éste sobre una superficie total aproximada de 430 km²; el otro cubre una franja de unos 340 km² y comprende la región del Cerro Mirador y su continuación al sur hasta el rio Chubut, superponiéndose en parte al primero en las inmediaciones de Piedra Parada, a fin de ensamblar los perfiles y localidades que fueron objeto de estudio detallado. En ambos casos el mapa topográfico fué ejecutado a brújula, nivel inglés y pasos, con lineas de base auxiliares medidas a cinta métrica. Las alturas de estas lineas de base sobre el nivel del mar fueron determinadas hipsométricamente. Los trabajos de campaña se iniciaron con una recorrida preliminar de la zona durante la segunda mitad del mes de abril y primera del mes de mayo de 1940; los relevamientos propiamente dichos tuvieron lugar durante los meses de noviembre y diciembre del mismo año, extendiéndose, con algunas interrupciones, de marzo, abril, noviembre y diciembre de 1941 y marzo-abril de 1942. La finalidad principal de estas tareas consistió en dar cumplimientoa la confección de la hoja 43 e, Piedra Parada, del Mapa Geológico de la República en escala l:200.000, trabajos que se realizan por cuenta de la Dirección de Minas y Geologia del Ministerio de Agricultura de la Nación. Al señor Director de esta Repartición, Ing° D.Tomás M.Ezcurra, debo agradecer sinceramente por habeme autorizado a hacer de las observaciones y colecciones efectuadas en campaña, asi como del material de estudios de gabinete, a fin de llevar a cabo este trabajo de tesis. Séame pemitido asimismo expresar mi profunda gratitud a mi padrino de tesis, el Dr.Pablo Groeber, sin cuya constante guia hubiera sido imposible la ejecución de este trabajo. En dos oportunidades, esto es durante los primeros dias de diciembre de 1940 y el mimo mes de 1941, pude contar con su valiosa supervisión en campaña, habiendo efectuado en su compañía algunas recorridas por la zona de estudios y regiones adyacentes. A mi profesor de Paleontología, prof. D.Martin Doello-Jurado, agradezco particulamente por habeme conducido en la determinación de los fósiles marinos, así como al prof. D. AleJendro F. Bordas, del Museo Argentino de Ciencias Naturales, por el amable interés con que estudió los restos fósiles de Mamíferos de mis colecciones. Finalmente, agregaré que las dificultades que se presentaron en la ejecución de mis tareas censistieron, principalmente, en la necesidad de formar tropas de animales, de por sí muy escasos en la zona, para el traslado de los campamentos,y en la falta sensible de personal. Fuera del valle del río Chubut, el impedimento de mayor consideración estribó en la carencia de esta y pastaje, lo que obligó a dar cierta celeridad al trabajo, quizá en detrimento de la precisión del mismo.

"Estudios limnológicos en el Río Reconquista, Pcia. de Buenos Aires : relación entre parámetros biológicos y químicos, especialmente el impacto del zinc sobre la estructura del fitoplancton" (1995). Loez, Carolina Rosa. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Durante el periodo Noviembre 85-Febrero 87, se investigó la evolución de algunos parámetros bióticos y abióticos del rio Reconquista (Prov. de Buenos Aires), que atraviesa un área urbana muy contaminada. Los muestreos se llevaron a cabo mensualmente en cuatro sitios. Se relacionó la densidad del fitoplancton superficial con algunas propiedades fisicas y químicas del agua (temperatura, pH, conductividad, oxigeno disuelto y sólidos totales y disueltos); el factor más relevante fue el oxigeno disuelto (OD). Durante el periodo estudiado se registraron importantes fluctuaciones de los parámetros bióticos y abióticos, siendo, cerca de la desembocadura, muy característicos la disminución del OD hasta valores próximos a 0 y la elevada concentración de Zn (1-4 mg.1ˉ¹). El pH varió entre 6,4 y 10; la temperatura del agua siguió un patrón regular acompañandoel ciclo climático, mientras que la conductividad siguió un perfil similar al observado en los sólidos disueltos. Las concentraciones medias de clorofila a fueron relativamente bajas (4 μg. 1ˉ¹); valores más altos (35 μg. 1ˉ¹) se encontraron solamente durante floraciones algales. El análisis del fitoplancton mostró la presencia de 160 taxa. La biomasa fue dominada por las Bacillariophyceae, seguida en importancia por las Chlorophyceae. Hacia la desembocadura, en la zona más contaminada, se observaron importantes aumentos de las Cyanophyceae y de las Euglenophyceae. En una segunda etapa, se diseñaron cuatro bioensayos multiespecíficos estáticos de laboratorio a fin de evaluar la respuesta de las comunidades fitoplanctónicas nativas de otoño, invierno, primavera y verano, a diferentes concentraciones de zinc (2,5; 10; 20-25 y 40-50 mg. 1ˉ¹), en condiciones controladas. Los mismos se llevaron a cabo durante un mes, muestreándose cada 2-3 dias. La respuesta algal resultó concentración de zinc-dependiente: 2,5 y 10 mg. 1ˉ¹ de Zn en el medio provocaron un manifiesto efecto estimulatorio del crecimiento de ciertas diatomeas; con 20-25 se disparó el crecimiento de Chlorella vulgaris Biej. (Chlorophyceae), y en general, con 40-50 mg. 1ˉ¹ de Zn hubo signos de letalidad generalizada excepto para algunas especies de diatomeas que resultaron tolerantes al zinc en las condiciones de los bioensayos: Cyclotella meneghiniana Kütz., Gomphonemaparvulum (Kütz.) Kütz., Navicula sp., Nitzschia palea (Kütz.) Smith, Nitzschia sp., Pinnularia biceps Greg., Synedra acus Kütz. y Synedra ulna var. amphirrhynchus (Ehr.) Grun., Chlorella vulgaris Biej. desarrolló, en general, sin inconvenientes en todas las condiciones. Cyanophyceae, Euglenophyceae, Tribophyceae, Chrysophyceae y Dinophyceae mostraron ser particularmente sensibles. En general, a medida que la concentración de Zn ²+ se incrementó, Chlorella vulgaris Biej. gradualmente se volvió el taxón dominante, reflejándose ésto en una disminución de la diversidad del sistema algal ensayado. Se desarrollaron entonces, comunidades más simples, integradas casi exclusivamente por especies tolerantes al Zn.

Abstract:
The evotution of several biotic and abiotic parameters of the urban highly polluted Reconquista River was studied from November 1985 to February 1987. A monthly sampling was carried out at four river Multiple regressions between the density of surface phytoplankton and several physical and chemical water properties (temperature, pH, conductivity, dissolved oxygen and dissolved solids) were made; dissolved oxygen (DO) showed up as the most significant parameter. During the study period important fluctuations of both biotic and abiotic measured parameters were recorded. The main features were the decrease of DO down to values close to zero and the considerably high concentrations of Zn (1000-4000 ug.1ˉ¹) in the water of the sites located downstream. The pH varied between 6.4 and 10.0; water temperature followed the pattern of a regular climatic cycle without important modifications. The mean chlorophyll a concentrations were relatively low (4 ug.1ˉ¹); much higher values (35 ug.1ˉ¹) were found only when water blooms occurred. The phytoplankton analysis showed the presence of 160 taxa. The biomass of the Bacillariophyceae was always dominant followed by that of the Chlorophyceae. An important Cyanophyceae and Euglenophyceae increase was observed in the more polluted points. After the river monitoring, four static multispecific laboratory bioassays to study, under controlled conditions, the phytoplanktonic reponse of native communities (autumn, winter, spring and summer) to different Zn concentration (2.5, 10, 20-25 and 40-50 mg.1ˉ¹) were designed. The bioassays were conducted during a month and samplings were made each 2-3 days. The effect of the metal was concentration dependent: 2.5 and 10 mg.1ˉ¹ in the test medium caused a clear cut stimulatory effect on the growth rate (change in cell numbers over time) of certain diatoms; with 20-25 mg.1ˉ¹ a increase of Chlorella vulgaris Biej. (Chlorophyceae) appeared, and, in genera], with 40-50 mg.1ˉ¹ of Zn there were signs of generalized lethality except for some tolerant diatom species: Cyclotella meneghiniana Kütz., Gomphonemaparvulum (Kütz.) Kütz., Navicula sp., Nitzschia palea (Kütz.) Smith, Nitzschia sp., Pinnularia biceps Greg., Synedra acus Kütz. and Synedra ulna var. amphirrhynchus (Ehr.) Grun. Chlorella vulgaris Biej. grew remarkably well under all conditions. Cyanophyceae, Euglenophyceae, Tribophyceae, Chrysophyceae and Dinophyceae showed to be particularly sensitive to Zinc. In general, as Zn increased, Chlorella vulgaris Biej. gradually turned out to be the dominant taxon and thus, a decrease in the specific diversity of the algal system assayed was observed. In this way, simpler communities developed, integrated by Zn tolerant species.

"Estudios mecanísticos y cinéticos en el tratamiento de arsénico en solución acuosa por procesos fotoquímicos" (2013-02-14). Levy, Ivana Karina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo de esta Tesis fue evaluar la efectividad de procesos avanzados, con énfasis en los fotoquímicos, para la remoción de arsénico (As). El As es un contaminante de origen principalmente natural, extremadamente tóxico, y se encuentra disuelto en aguas en forma de As(III) y As(V), afectando grandes áreas de nuestro país y del mundo. Se investigaron dos procesos avanzados en fase acuosa. Por un lado, se estudió la fotocatálisis heterogénea reductiva con TiO2 bajo luz UV (FHR) para la transformación de As en la especie no tóxica As(0) y, por otra parte, la remoción de As con nanopartículas de Fe(0) y de magnetita, principalmente en condiciones oxidativas, en oscuridad y bajo irradiación UV-vis. Se investigó la FHR en condiciones anóxicas para la reducción de As(III) y As(V) a distintas concentraciones. Partiendo de una concentración 0,525 mM a pH 3, con el agregado de metanol (MeOH) como agente donor de electrones, se evaluó el efecto de la concentración de MeOH en la velocidad, encontrándose que su adición facilita la FHR y que, en el caso del As(V), es indispensable para que ocurra la transformación, pero no lo es en el caso de As(III). En todos los casos, los productos de la FHR fueron As(0) y AsH3(g) (As(-III)). Se estudió también el efecto del pH en el caso particular de As(III) ya que era necesario conocer si el agregado del ácido era indispensable. Se observó que, a pH alcalino (sin agregado de ácido), la reducción era más eficiente, produciéndose mayor cantidad de As(0) y de AsH3(g). La presencia de As(0) sobre la superficie del TiO2 fue verificada por las técnicas XPS y XANES. El proceso reductivo resultó muy eficiente a pH 3 para As (V ó III) a concentraciones más bajas (por ejemplo, 1 mg L−1, un valor comúnmente hallado en aguas contaminadas naturales), lográndose niveles de As más bajos que los establecidos por la regulación para aguas de bebida (< 10 g L−1), en menos de 30 min. La formación de As(0) resulta una forma excelente para la inmovilización de As(V) y As(III) presentes en medio acuoso. Sin embargo, la generación de AsH3 requiere medidas como la adsorción sobre catalizadores, un segundo paso de FH oxidativa o la utilización de condiciones menos reductoras; esta alternativa fue estudiada de manera preliminar indicando que, en ciertas condiciones experimentales, podría evitarse su formación. Por otra parte, se estudió la remoción de As(III) de soluciones acuosas empleando nanopartículas de Fe(0) (nZVI). Se ensayaron diferentes relaciones de concentración másica de As a Fe total (RC 1:3, 1:10 y 1:100), bajo atmósfera de O2. Se estudió también el efecto de la luz UV-vis. La RC más efectiva, a los 60 min de tratamiento, fue 1:100, con resultados de remoción de 70% en oscuridad, que mejoró a 90% bajo UVvis. Esta RC fue investigada también para la remoción bajo corriente de N2. Los productos sólidos fueron analizados por espectroscopías Mössbauer, XANES y EXAFS con luz sincrotrón, lo que permitió dilucidar las fases de Fe y la especiación de As. Se confirmó mediante XANES que el tratamiento implica la oxidación de As(III) a As(V). En particular, en la condición más efectiva, es decir, RC 1:100 (O2 y luz), se halló mayor porcentaje de As(V) en el sólido y de óxidos de Fe, indicando que la oxidación de As y la formación de óxidos frescos favorecen la remoción. Mediante los espectros Mössbauer, se pudo observar que el As se encuentra incluido en la estructura de los óxidos de Fe. Se estudió además la remoción de As(V) con distintas RC (1:50,1:100,1:10000) en la oscuridad y, con la RC más eficiente (1:100), se estudió el efecto de la luz UV-vis. Se obtuvo remoción total a los 60 min, sin que se registrara, en este caso, efecto de la irradiación. Para confirmar la importancia de las fases oxidadas se estudió la remoción de As(III) y As(V) con nanomagnetita (NM), RC 1:10 y 1:50, en la oscuridad y bajo irradiación UV-vis en atmósfera de O2. A los 60 min, para As(III) con RC 1:50, se alcanzó 73% de remoción en la oscuridad y 90% bajo irradiación, mientras que con As(V) la remoción fue total en ambas condiciones. Se propuso que la alta eficiencia de remoción con nZVI y NM está relacionada con la generación de óxidos in situ. En el caso de As(III), el aumento de la eficiencia bajo irradiación puede explicarse por un incremento en la oxidación de As(III) a As(V) y en los procesos autocatalíticos Fe(II)/Fe(III) que forman óxidos frescos de alta superficie específica. La utilización de nZVI y NM representa una excelente opción para el tratamiento de As frente a los tratamientos convencionales, dado que su aplicación es simple, de bajo costo y de muy baja generación de residuos sólidos.

Abstract:
The aim of this Thesis was to evaluate the effectiveness of advanced processes, with emphasis on photochemical processes, for removal of arsenic (As). Arsenic contamination is mainly natural, its toxicity is very high and it is found in water as As(III) and As(V) affecting large areas of our country and the world. Two advanced processes in aqueous phase were investigated. First, reductive heterogeneous photocatalysis with TiO2 (RHP) under UV light was studied for the transformation of As into the non toxic species As(0) and, on the other hand, removal of As with zerovalent iron nanoparticles and nanomagnetite, mainly under oxidative conditions, in the dark and under UV-vis irradiation. RHP for As(V) and As(III) reduction was studied at different concentrations under anoxic conditions. Experiments starting with a As(III) or As(V) concentration of 0.525 mM, at pH 3 with addition of methanol (MeOH) as electron donor , were performed to evaluate the effect of the MeOH concentration on the As reduction rate; it was found that the MeOH addition enhances the RHP being essential only in the case of As(V) reduction. In all cases, As(0) and AsH3 (As(-III)) were the RHP final products. Particulary, in the case of As(III), the effect of pH was studied. It was found that at alkaline pH, reduction of As(III) was more efficient than at pH 3, and higher amounts of As(0) and AsH3(g) were produced. The presence of As(0) on the surface of TiO2 was verified by XPS and XANES techniques. The reductive HP process was very efficient at pH 3 and at the lowest As (III or V) concentrations used (e.g., 1 mg L-1), a common value found in natural contaminated groundwater), reaching As final levels in solution in agreement with drinking water regulations (< 10 g L−1) in less than 30 min. As(0) formation appears as an excellent way to immobilize arsenic coming from As(V) and As(III) species present in aqueous media. However, AsH3 generation requires further treatment such as adsorption on suitable catalysts, a second TiO2 photocatalytic oxidative step or the use of less reducing conditions in the system; this last alternative was studied in preliminary experiments indicating that, under certain experimental conditions, the formation of AsH3 could be avoided. Furthermore, removal of As(III) from aqueous solutions using zerovalent iron nanoparticles (nZVI) was studied. Different initial As/Fe ratio (CR (mg L-1), 1:3, 1:10 and 1:100), under oxic conditions were evaluated. The effect of UV-vis irradiation was also analyzed. The best results, at 60 min, were obtained using CR 1:100, reaching 70% As(III) removal in the dark and 90% under UV-vis irradiation. This CR was further studied under N2 bubbling. Solid products were analyzed by Mössbauer spectroscopy and XANES and EXAFS with synchrotron light; these techniques allowed the elucidation of the iron phases and arsenic speciation. The oxidation from As(III) to As(V) was confirmed by XANES. Particularly, the amount of As(III) transformed into As(V) and iron oxides proportion found in the solids was the highest for the best condition of As removal (CR 1:100, under oxic conditions and UV light), indicating that removal is improved with arsenic oxidation and fresh oxides formation. Mössbauer spectra showed that arsenic was included into the iron oxides structure. In addition, As(V) removal was studied with different CR (1:50, 1:100, 1:10000) in the dark and also the effect of UV-vis irradiation was evaluated at the best CR (1:100). In this case, total removal was reached at 60 min and no irradiation effect was found. In order to confirm the relevance of the oxidized phases, As(III) and As(V) removal with nanomagnetite (NM), CR 1:10 and 1:50, in the dark and under UV-vis irradiation in oxic conditions was investigated. At 60 min, in the case of As(III) and CR 1:50, 73% of removal was achieved in dark increasing at 90% under irradiation, whereas, in the case of As(V), total removal was obtained in dark and under irradiation. It was proposed that high removal efficiency with nZVI and NM is related with in situ formation of iron oxides. In the case of As(III), the higher efficiency under UV-vis irradiation can be explained by an increase in As(III) oxidation and Fe(II)/Fe(III) autocatalytic processes that led to high specific area oxides formation. Both technologies, nZVI and NM, represent an excellent option for As removal in comparison with conventional treatments, due to the fact that they are simple, low cost technologies with very low solid waste generation.

"Estudios mecanísticos y cinéticos en el tratamiento de uranio (VI) en solución acuosa por procesos fotoquímicos" (2014). Salomone, Vanesa Natalia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudió la eliminación del U(VI) mediante dos procesos fotoquímicos. Se analizó la transformación fotoquímica del U(VI) bajo irradiación UV-vis sin catalizador (TF) (Cap. 2) y con TiO2 (FHR) en distintas condiciones experimentales (Cap. 3 y 4). El objetivo de la tesis fue analizar el rol de distintas variables relevantes en procesos fotoquímicos, dilucidar mecanismos de reacción y determinar parámetros cinéticos involucrados en la remoción de U(VI) de solución acuosa, para generar herramientas que permitan controlar los procesos involucrados en aplicaciones como tratamiento de aguas naturales o de desecho. En el Cap. 2 se evaluó la eficiencia de la TF en la remoción de U(VI) (0,25 mM), pH 3, bajo atmósfera de N2 y en presencia de 2-propanol (2-PrOH) y ácido fórmico (AF) como agentes reductores. Se estudiaron los efectos del contraión de la sal de uranio utilizada (nitrato, acetato, y perclorato), y del rango de longitud de onda empleada (lámpara de inmersión de Hg de media presión con reactor de cuarzo (230 < λ/nm < 450) o de vidrio (λ > 300 nm). En ausencia de donores, no hubo variación en la concentración de U(VI), excepto en los experimentos con acetato de uranilo, donde la remoción llegó al 16%; el espectro de la solución al final de la reacción mostró la presencia de U(V). Se obtuvieron altos valores de transformación con 2-PrOH y AF. La remoción de U(VI) y la velocidad inicial de reacción fueron mayores con el reactor de cuarzo, atribuible a la mayor intensidad de luz incidente en la solución. El menor rendimiento se obtuvo con acetato, debido a la formación de un complejo de U(IV)- acetato hidrolizable y fácilmente reoxidable en contacto con O2. La mayor eficiencia se obtuvo con nitrato de uranilo, 2-PrOH 1 M y reactor de cuarzo, obteniéndose una disminución en la concentración de U(VI) superior al 95% en 15 min de reacción. En este caso, se generó un depósito gris oscuro muy estable, cuyo análisis por DRX indicó que se trataba de un óxido mixto de U(VI)-U(IV), hecho que confirma la reducción del U(VI). En presencia de AF 1 M, si bien se produce la reducción de U(VI), la especie resultante es un complejo de U(IV)-formiato, soluble en agua, que fue detectado espectrofotométricamente. El sistema fotoquímico más eficiente es el que usa 2-PrOH. En el Cap. 3, se evaluó la eficiencia de la FHR en la remoción de U(VI) (0,25 y 1,25 mM) a pH 3 en presencia de 2-PrOH a distintas concentraciones empleando dos sistemas de irradiación (S), uno de ellos denominado SI (lámpara de alta presión de Xe provista de un filtro BG12 300 < λ < 500, λmáx. = 400 nm) y el otro el mismo usado en la TF (SII). Los mejores resultados se obtuvieron con el SII y reactor de cuarzo, lo cual indicó que los procesos son favorecidos por un mayor número de fotones. La eficiencia de remoción con U(VI) 0,25 mM sin donor fue baja, alcanzándose el 20% en 30 min. La presencia de 2-PrOH es necesaria para que ocurra una mayor remoción de U(VI). La máxima eliminación (80%) se obtuvo con la mayor concentración de 2-PrOH (10 M), en 10 min de reacción. El mayor rendimiento fotocatalítico se obtuvo con nitrato o perclorato de uranilo, tanto en ausencia como en presencia de 2-PrOH (1 ó 10 M). Se comprobó, al igual que en ausencia de TiO2 (Cap. 2), que el acetato afecta negativamente la eliminación de U(VI), ya que el U reducido queda en solución y no puede ser recuperado. El análisis por DRX confirma la deposición de óxidos de U(IV) de estequiometria variable según las condiciones, demostrando que el proceso fotocatalítico ocurre por reducción del U(VI) y precipitación. El análisis por XPS de los sólidos también confirmó la presencia de U(IV) sobre el TiO2. Por otra parte, la transformación fue más eficiente partiendo de U(VI) 1,25 mM, llegando a valores cercanos al 100%. Sin embargo, en estas condiciones, la contribución de la TF de U(VI) fue muy significativa. Por último, en el Cap. 4, se evaluó la eficiencia de la FHR de 0,25 mM U(VI), pH 3 y AF empleando los sistemas de irradiación antes mencionados. Se obtuvieron altos valores de remoción para todas las concentraciones de AF ensayadas, obteniéndose 80% con AF 0,01 M en 10 min de reacción. Se comprobó que altas concentraciones de AF resultan contraproducentes debido a que favorecen la reoxidación del uranio reducido (Cap. 2). Se concluye que es más apropiado el uso de la FH frente a la transformación fotoquímica homogénea como método de remoción de uranio de aguas, debido a que, en presencia del catalizador, se facilita la recuperación del uranio reducido por su deposición sobre el TiO2, lo que hace más estable los depósitos generados y menos dificultosa su separación de la fase líquida.

Abstract:
The removal of U(VI) was study by two photochemical processes. We analyzed the photochemical transformation of U(VI) under UV-vis irradiation without catalyst (PT) (Chapter 2) and with TiO2 (RHP) in different experimental conditions (Chapter 3 and 4). The aim of the thesis was to analyze the role of relevant variables photochemical processes, elucidate reaction mechanisms and determine kinetic parameters involved in the removal of U(VI) from aqueous solution to generate tools to control the processes involved in applications such as natural water treatment or waste. In the Chapter 2 was evaluated PT efficiency in removal of U(VI) (0.25 mM), pH 3, under N2 atmosphere and in the presence of 2-propanol (2-PrOH) and formic acid (FA) as reducing agent. The effects of salt counterion used uranium (nitrate, acetate and perchlorate), and the wavelength range used (Hg immersion lamp medium pressure quartz reactor (230 <λ / nm <450 ) or glass (> λ 300 nm.). In the absence of donor, there was no variation in the concentration of U(VI) except in experiments with uranyl acetate, where removal reached 16%, the spectrum of the solution the end of the reaction showed the presence of U(V). High values were obtained from transformation with 2-PrOH and FA. Removal of U(VI) and the initial reaction rate was higher with the quartz reactor attributable to the greater intensity of light incident on the solution. The lower yields were obtained with acetate due to complex formation of U(IV)-acetate easily hydrolyzable and reoxidizable in contact with O2. The highest efficiency was obtained with uranyl nitrate, 2-PrOH 1 M and quartz reactor, resulting in a decrease in the concentration of U(VI) greater than 95% at 15 min reaction. In this case, we generated a very stable dark gray deposit whose XRD analysis indicated that it was a mixed oxide of U(VI)-U(IV), which confirms the reduction of U(VI). In the presence of FA 1 M, although the U(VI) reduction occurs, the resulting species is a complex of U(IV)-formate, soluble in water, which was detected spectrophotometrically. Photochemical system with 2-PrOH was more efficient. In the Chapter 3, we assessed the efficiency of the RHP in the removal of U(VI) (0.25 and 1.25 mM) at pH 3 in the presence of 2-PrOH in different concentrations using two irradiation systems (S), one of they called SI (high pressure lamp equipped with a filter Xe BG12 300 <λ <500, λ max. = 400 nm) and the other the same used in the PT (SII). The best results were obtained with SII and quartz reactor, which indicated that the processes are favored by a large number of photons. The removal efficiency with U(VI) 0.25 mM without donor was low, reaching 20% in 30 min. The presence of 2- PrOH is necessary for the occurrence of a important removal of U(VI). Maximum removal (80 %) was obtained with the highest concentration of 2-PrOH (10 M) , in 10 min of reaction. The highest yield was obtained with photocatalytic perchlorate or uranyl nitrate, both in the absence and presence of 2-PrOH (1 or 10 M). It was found, as in the absence of TiO2 (Chapter 2), acetate presence adversely affects the removal of U(VI), due the reduced U remains in solution and can not be recovered. XRD analysis confirmed the deposition of oxides of U(IV) of variable stoichiometry depending on conditions, demonstrating that the photocatalytic process occurs by reduction of U(VI) and precipitation. The XPS analysis of the solids also confirmed the presence of U(IV) on the TiO2 . Moreover, the conversion was more efficient starting of U(VI) 1.25 mM, reaching values close to 100 %. However, in these conditions, the contribution of the PT of U(VI) was very significant. Finally, in Chapter 4, we assessed the efficiency of RHP with U(VI) 0.25 mM, pH 3 and FA using the irradiation systems aforementioned. High values were obtained for all removal FA concentrations tested, yielding 80% with AF 0.01 M in 10 min of reaction. It was found that high concentrations of FA are counterproductive because they favor the reduced uranium reoxidation (Chapter 2). We conclude that it is more appropriate to use the HP versus homogeneous photochemical transformation as a method of removing uranium from water, because, in the presence of the catalyst, it facilitates the recovery of depleted uranium for its deposition on the TiO2, it becomes more stable generated deposits and less difficult separation from the liquid phase.

"Estudios microbiológicos relacionados con el mejoramiento de cultivos vegetales en zonas desfavorables" (2017-03-22). Ibarra, Jose Gervasio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El desarrollo de estrategias para incrementar la producción agrícola es de relevancia debido a la importancia de los vegetales en la alimentación humana. Entre estas estrategias se incluyen la expansión de la frontera agrícola a zonas menos aptas, como los ambientes fríos o áridos, pero es necesario que las plantas puedan resistir y prosperar en esas condiciones. El uso de cultivos transgénicos resistentes a la sequía constituye una buena alternativa que puede ser mejorada con el uso de bacterias promotoras del crecimiento vegetal (PGPB), que puedan desarrollarse en condiciones de estrés, manteniendo sus actividades. El objetivo de este trabajo consistió en el análisis de cepas bacterianas aisladas de suelos, con diferentes regímenes hídricos, y de Pseudomonas extremaustralis, procedente de un ambiente extremo, en cuanto a su potencialidad para ser utilizadas como promotoras de crecimiento vegetal. Además se analizó la influencia de cultivos de maíz genéticamente modificados (GM) resistentes a la sequía sobre la composición de las comunidades bacterianas del suelo por técnicas secuenciación masiva. Las características de PGP en P. extremaustralis se analizaron en comparación con P. protegens Pf-5, una conocida PGPB. P. extremaustralis presentó una buena capacidad de solubilización y mineralización de fósforo, tanto a 28°C como en frio. El perfil de ácidos orgánicos, responsables de la solubilización de fosfato inorgánico, fue diferente al de P. protegens Pf-5. Estas diferencias se correlacionaron con la ausencia del gen gad responsable de la producción de 2-ceto-gluconato, en el genoma de P. extremaustralis. Esta bacteria también fue capaz de producir ácido indol acético (AIA) y posee genes relacionados a la resistencia a ácido fusárico y otros que la capacitan para resistir la desecación. Posee también la ruta metabólica completa para la síntesis y liberación de pioverdinas y se observó un efecto del regulador global anaeróbico Anr sobre la producción de estos compuestos. Ensayos de quimiotaxis mostraron que P. extremaustralis es atraída por exudados radiculares de plantas de trigo y es capaz de colonizar raíces de trigo y maíz de forma estable e incrementar el peso seco de vástago de plantas de trigo, mostrando que además de sus características como PGPB es capaz de interactuar con vegetales. También se analizaron características de PGP en aislamientos bacterianos obtenidos a partir de suelos de la provincia de Buenos Aires con distinto régimen de lluvias. Se obtuvieron 19 cepas bacterianas capaces de solubilizar fósforo, 3 de las cuales mostraron una alta capacidad de solubilización. Se encontraron 22 aislamientos positivos para la producción de AIA. Se observó un efecto positivo sobre el crecimiento de plantas de maíz en un sistema axénico autotrófico de 2 de las cepas, IIM-Man4 e IIA-Man30, indicando que pueden ser buenas candidatas como PGPB. Para analizar si existe un impacto de plantas GM resistentes a la sequía sobre la comunidad bacteriana del suelo se realizaron experimentos en macetas con suelo de dos localidades Río Cuarto(RC) e Inés Indart (II) en cámaras de cultivo con condiciones controladas, utilizando cultivares de maíz portadores del gen Hahb4 que confiere resistencia a sequía y salinidad. Las plantas fueron sometidas a dos tratamientos hídricos: alta y baja irrigación. Se analizó la diversidad bacteriana de las muestras de suelo mediante la secuenciación de amplicones del gen que codifica el 16S rRNA. Los suelos analizados fueron diferentes en cuanto a la α diversidad. En II no hubo diferencias en β diversidad, mientras que en RC se encontraron diferencias al utilizar los índices cuantitativos (Bray Curtis y Weighted UniFrac) al comparar el tipo de planta. La composición de los grupos mayoritarios fue similar, siendo las Proteobacterias el más representado en ambos suelos con alrededor del 30%, seguido por Acidobacterias con alrededor del 17% y Planctomycetes y Verrucomicrobia representando aproximadamente un 10% del total cada uno. En todas las muestras el género predominante fue Acidobacterium con 14 a 20 % de los registros (lecturas). La mayoría de los géneros presentó una abundancia relativa de 0,01-0,1 %. Se realizó un análisis para determinar que géneros bacterianos son afectados por cada condición de riego. Se detectaron 10 géneros en II y 16 géneros en RC que estuvieron significativamente (p<0,05) más representados en la condición de sequía con respecto a buena irrigación; siendo Chromatium, perteneciente a las Gamma Proteobacterias, el que mayor proporción de cambio mostró en II y Amycolatopsis, perteneciente al grupo de las Actinobacterias, y Nevskia, dentro de las Gamma Proteobacterias, en RC. También se observaron 29 géneros que mostraron diferencias significativas en relación al tipo de planta en II y 61 géneros en suelo de RC. Los tratamientos tuvieron menos efecto en II en comparación con RC. En II no se observaron diferencias significativas ni con el régimen de irrigación ni con el tipo de planta y hubo un menor número de géneros afectados. EN RC se observó un efecto significativo del tipo de planta pero no de la irrigación.

Abstract:
Due to the continuous human population growth, food production may be insufficient in the coming years, so it is necessary to implement strategies to increase crop production. These strategies include expanding the agricultural frontier to less suitable areas, such as cold or arid environments. To reach this goal it is necessary that plants can withstand and thrive in these conditions. The use of genetically modified (GM) crops resistant to drought can be a good option, as well as the use of plant growth promoting bacteria (PGPB) that can grow under stress conditions, maintaining their plant-beneficial traits. The objective of this study was to analyze bacterial strains isolated from environments under different rainfall regimes and cold, in relation to their potential as PGPB under unfavorable conditions. We also assessed the influence of drought-tolerant GM maize on the composition of the soil bacterial communities, using high throughput sequencing techniques. Pseudomonas extremaustralis isolated from an extreme environment (Antarctica) was analyzed for PGP traits in comparison with P. protegens Pf-5, a well known PGPB. P. extremaustralis presented a good solubilization and mineralization capacity of phosphate in comparison to P. protegens Pf-5, both at 28°C and under cold conditions. The profile of organic acids, responsible for the inorganic phosphate solubilization, was different from that of P. protegens Pf-5. These differences were correlated with genetic differences between both genomes, including lack of the gad gene in P. extremaustralis genome, related to 2-ketogluconate production. P. extremaustralis was also able to produce indole acetic acid (IAA); possesses genes encoding fusaric acid resistance and genes that enable it to withstand desiccation. It is, also a good siderophore producer, posses a complete genetic pathway to produce and release pyoverdine. We observed that pyoverdine production was influenced by the global anaerobic regulator Anr. Chemotaxis and colonization assays showed that P. extremaustralis was attracted to wheat root exudates and was able to colonize wheat and maize roots forming stable colonies in root surface, improving the dry weight of the stem in wheat plants. In addition, different characteristics related to the ability to promote plant growth in bacterial isolates obtained from soils with different rainfall regimes were analyzed. We found 19 isolates able to solubilizing inorganic phosphate, three of which showed a high solubilizing capacity and 22 isolates that were positive for IAA production, some of which reached high production (up to 60 μg / ml). Two strains, IIM-Man4 and IIA-Man30, showed a positive effect on the growth of maize plants in an autotrophic axenic system. The results indicate that P. extremaustralis, as some of the isolated bacterial strains, could be good candidates for their analysis in experimental plots subjected to stress conditions. Another expanding strategy to improve crop yield involves the use of GM plants. However, the evaluation of the impact of these organisms on the soil communities has not been deeply analyzed yet. We evaluated the effect of drought tolerant GM corn plants carrying the Hahb4 gene, on soil microbial community. Experiments were carried out in pots with soil from two locations Río Cuarto (RC) and Inés Indart (II) in culture chambers under controlled conditions. The plants were subjected to two soil irrigation regimes. Bacterial diversity of the soil community was analyzed using global amplicon sequencing techniques of the gene encoding the 16S rRNA. Soils were different in terms of α diversity. In II there were not differences in β diversity, while in RC differences were found when comparing the type of plant using the quantitative index (Bray Curtis and Weighted UniFrac). The composition of the major groups was similar, with Proteobacterias being more represented in both soils with about 30%, followed by Acidobacterias with around 17% and Planctomycetes and Verrucomicrobia representing approximately 10% of the total. In all the samples the genus Acidobacterium was predominant with 14 to 19% of the records (readings). Most genera had a relative abundance of 0.01-0.1%. Analysis of bacterial genera affected by irrigation conditions was performed. Ten genera in II and 16 genera in RC were detected that were significantly (p <0.05) more represented in drought conditions in comparison with good irrigation; being Chromatium belonging to GammaProteobacteria that showed the highest proportion of change in II soil, and Amycolatopsis belonging to Actinobacterias and Nevskia within the GammaProteobacteria in RC. We also observed 29 genera that showed significant differences in relation to the type of plant in II and 61 genera in RC soil. Treatments had less effect on II as compared to RC. In II, no significant differences were observed either with the irrigation regime or the type of plant and there were fewer affected genera. The analysis of bacterial community of RC soils showed a significant effect of the type of plant but not of irrigation regimes.

"Estudios moleculares de citoquinas relacionadas con fibrosis medular en la trombocitemia esencial" (2003). Lev, Paola Roxana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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La trombocitemia esencial (TE) y la mielofibrosis con metaplasia mieloide son enfermedades mieloproliferativas crónicas que se caracterizan por aumento de megacariocitos en médula ósea. Los pacientes con TE presentan además, aumento del recuento plaquetario en sangre periférica. Se estudió un grupo de pacientes con TE sin tratamiento y durante la normalización del recuento plaquetario por el tratamiento con anagrelide. En ellos se evaluó el nivel proteico en el plasma y en las plaquetas y el nivel de ARN mensajero intraplaquetario de tres citoquinas relacionadas con el desarrollo de fibrosis medular, el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), el factor de crecimiento transformante β (TGFβ) y el factor de crecimiento fibroblástico básico (bFGF). Se observó un incremento significativo en el nivel plasmático del PDGF que se normalizó con la reducción del recuento plaquetario por el tratamiento. Los pacientes que tenían fibrosis reticulínica leve en la biopsia de médula ósea mostraron mayores niveles de PDGF plasmático con respecto a los pacientes que no tenían fibrosis. Esta citoquina se encontró disminuida en las plaquetas y nuevamente los valores se normalizaron con el tratamiento. A diferencia de los niveles plasmáticos, los intraplaquetarios no se relacionaron con la presencia o ausencia de fibrosis en la médula ósea. El ARN mensajero se encontró disminuido antes y durante el tratamiento. La normalización del nivel plasmático de PDGF durante el tratamiento puede indicar que su incremento en el plasma se debe a liberación plaquetaria. La disminución del contenido intraplaquetario también podría atribuirse a una disminución de su síntesis en el megacariocito dado que se encontró disminuido el ARN mensajero. Los niveles plasmáticos del TGFβ se encontraron aumentados y los intraplaquetarios normales antes y durante el tratamiento y no se encontró relación con la presencia o ausencia de fibrosis reticulínica leve. El ARN mensajero intraplaquetario se encontró aumentado y se normalizó durante el tratamiento. Dado que el nivel plasmático de esta citoquina permaneció elevado aún con recuento plaquetario normal, se buscó la participación de otra fuente celular en este incremento. Se vió por inmunofluorescencia, la presencia de la citoquina en linfocitos y megacariocitos, la intensidad de marcación fue similar a la de los controles normales. Por lo tanto, los megacariocitos y no los linfocitos podrían ser una posible fuente celular causante del incremento plasmático, dado que su número se encuentra elevado en los pacientes con esta enfermedad. Los niveles plasmáticos e intraplaquetarios del bFGF se encontraron aumentados en los pacientes sin tratamiento y si bien disminuyeron significativamente con la normalización del recuento plaquetario, permanecieron aumentados con respecto al control. No se encontró relación con la presencia o ausencia de fibrosis reticulínica leve en la médula ósea. El ARN mensajero de la citoquina se encontró normal. Dado que el nivel plasmático se reduce cuando se normaliza el recuento plaquetario la liberación de esta citoquina podría ser atribuida en parte a las plaquetas. Pero por otro lado, se buscó la participación de otra fuente celular. Se vió por inmunofluorescencia, la presencia de la citoquina en linfocitos y megacariocitos con intensidad de marcación similar a la de los controles normales. Por lo tanto, también en este caso, los megacariocitos y no los linfocitos podrían ser una posible fuente celular causante del incremento plasmático. El aumento de estas citoquinas en el plasma de los pacientes con TE puede sugerir que éstas juegan un rol en la patogenia de la enfermedad. Los niveles del TGFβ intraplaquetarios normales con el aumento de su ARN mensajero y el aumento intraplaquetario del bFGF con el nivel de su ARN mensajero normal puede indicar una desregulación en su síntesis. Por otro lado se estudió el efecto del TGFβ sobre plaquetas normales. Se encontró la presencia de un número bajo de receptores en la membrana plaquetaria y se estudió el efecto de la citoquina sobre la agregación plaquetaria. El efecto del TGFβ sobre la función plaquetaria fue variable dependiendo tanto del tiempo de incubación como de la concentración de ADP utilizada como agonista. Se observó que el TGFβ potencia la agregación plaquetaria tanto en incubaciones de las plaquetas con la citoquina por períodos cortos como por períodos largos utilizando ADP en bajas concentraciones y tiene el mismo efecto cuando se incuban las plaquetas por periodos largos pero se utilizan concentraciones altas de ADP para inducir la agregación. En cambio, produce un efecto inhibitorio cuando las plaquetas se incuban con la citoquina por períodos cortos y se las estimula con concentraciones de ADP altas. En todos los casos el efecto fue leve y se corresponde con el bajo número de receptores encontrado por plaqueta. Las incubaciones de plaquetas con TGFβ in vitro durante tiempos largos podrían semejar situaciones patológicas en donde hay niveles altos de la citoquina durante tiempos prolongados. De esta manera, las plaquetas circulantes están continuamente expuestas a esta citoquina y ante un estímulo plaquetario las mismas responderían en forma incrementada Este sería el caso de la TE. La respuesta inhibitoria observada en tiempos cortos podría indicar un posible mecanismo de regulación negativa de la activación plaquetaria ante un estímulo intenso, en el sitio de injuria. Al estudiar el mecanismo por el cual la citoquina modula la función plaquetaria, se vió que cuando la activación plaquetaria está inhibida, la presencia de la citoquina no induce en forma directa la fosforilación de proteínas en residuos tirosinas. Al evaluar la fosforilación de proteínas durante la agregación plaquetaria inducida por ADP, en presencia de la citoquina, se vió una disminución en la intensidad de dos bandas correspondientes a 100 y 105 kd que estan relacionadas con la agregación. Este efecto se observó sólo al incubar las plaquetas durante 5 minutos en precencia de la citoquina y concuerda con el efecto inhibitorio causado por el TGFβ en la agregación plaquetaria.

"Estudios moleculares de sialidasas de Trypanosomátidos : relación estructura/función" (1999). Buschiazzo, Alejandro. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La trans-sialidasa de Trypanosoma cruzi es una enzima cuya existencia fue postulada en 1985 cuando se probó que este parásito intracelular de células de mamífero, posee ácido siálico conjugado a sus propias moléculas de superficie. La trans-sialidasa fue posteriormente purificada, caracterizada enzimáticamente y su gen clonado. Así se demostró en primer lugar, que era una actividad novedosa como transglicosidasa, ya que no utiliza como sustrato un dador nucleótido-azúcar, que en todas las otras sialiltransferasas cucarióticas conocidas, es el CMP-siálico. En segundo lugar, el análisis de secuencia reveló una lejana pero evidente homología con varias sialidasas bacterianas, y no con las sialiltransferasas eucariotas. En los últimos años han surgido distintos tipos de evidencias experimentales, que involucran a la trans-sialidasa en los mecanismos de adhesión/invasión de T. cruzi a las células del mamífero huésped, en el escape temprano de parásitos invasivos de la vacuola parasitófora de la célula hospedadora y en la evasión del camino alternativo de fijación del complemento. La actividad de trans-sialidasa, ha sido detectada hasta el momento sólo en T. cruzi y en dos parásitos tripanosomátidos emparentados, T. brucei y Endotrypanum sp. En algunos otros tripanosomátidos se han encontrado sialidasas, pero sin actividad de transferasa detectable, como en el caso de T. rangeli. Hasta ahora no se sabía si la sialidasa de este parásito no patogénico, estaba relacionada con la trans-sialidasa. Con el objetivo de comprender el(los) mecanismo(s) en el(los) que la trans-sialidasa está involucrada, en relación a la interacción huésped/parásito, en este trabajo de Tesis se ha avanzado en distintos aspectos del estudio molecular de la trans-sialidasa de T. cruzi y la sialidasa de T. rangeli: 1. Se optimizaron los sistemas de expresión y purificación de la trans-sialidasa recombinante con el fin de obtener grandes cantidades de proteína >95% pura. 2. Se utilizó trans-sialidasa recombinante pura como material inicial para cristalizar y comenzar estudios cristalográficos por difracción de rayos X, tendientes a resolver la estructura tridimensional de la misma. Además de las variaciones convencionales en los métodos y condiciones de cristalización, y mientras no se obtengan cristales adecuados, se procedió a buscar la separación de dominios parciales de la proteina para cristalizar de forma independiente. 3. En paralelo con los puntos anteriores, se demostró que la sialidasa de T rangelí es homóloga a la trans-sialidasa dc T. cruzi. Para ello se purificó la sialidasa nativa a partir de sobrenadantes de cultivo de T. rangeli, se microsecuenció y se logró clonar trece genes homólogos, miembros de lo que hemos denominado la familia multigénica de la sialidasa de T. rangeli. 4. Tres de los genes clonados codifican proteínas recombinantes con actividad de sialidasa comparable a la de la enzima nativa cuando se expresan en Escherichia coli. Uno de ellos fue secuenciado completamente, revelando una identidad en aminoácidos de 68.9% cuando se lo compara con la trans-sialidasa de T. cruzi, aumentando a una similitud dc 86.7% si se admiten sustituciones conservativas. 5. Se cristalizó la enzima nativa de T.rangeli sola y ligada a un inhibidor competitivo. Se resolvió su estructura tridimensional a partir del patrón de difracción de rayos X, hasta una resolución de 2.2Å. En paralelo se resolvió la estructura tridimensional de la misma proteína acomplejada al inhibidor hasta 2.9Å. 6. Se modelizó la estructura tridimensional de la trans-sialidasa, tomando como referencia inicial las coordenadas atómicas de la sialidasa, dada la gran homología entre las dos proteínas. 7. Se construyeron y expresaron moléculas quiméricas entre ambas enzimas con el objetivo de avanzar en la definición de regiones y/o residuos claves en la transglicosilación.

Abstract:
The trans-sialidase from Trypanosoma cruzi is an enzyme, which was predicted to exist in 1985, in order to explain the presence of sialic acid bound to surface molecules of this intracellular parasite of mammalian cells. Trans-sialidase was later purified, enzymatically characterized and its gene cloned. In this way it was shown in the first place, that it is a novel type of transglycosidase, since it does not use a sugar-nucleotide as the donor substrate, which is CMP-sialic acid in all the other known cukaryotic sialyltransferases. In the second place, the sequence analysis revealed a low level of homology with several bacterial sialidases, and not with eukaryotic sialyltransferases. Over the last few years different types of experimental evidence have appeared. involving the trans-sialidase of T. cruzi in the adhesion/invasion mechanisms that the parasite uses in the interaction with mammalian host cells, in the early escape of invasive parasites from the parasitophorous vacuole in recently invaded host cells and in the parasite evasion from the alternative pathway of complement activation. Trans-sialidase activity has been detected only in T. cruzi and in two related Trypanosomatidae parasites. T. brucei and Endotrypunum sp. Sialidases have been identified in some other Trypanosomatidae, but lacking detectable transferase activity, as in the case of T. rangeli. Until now it was not known if the sialidase from this non-pathogenic parasite, was related with trans-sialidase. In order to understand the mechanism(s) in which trans-sialidase is involved, with respect to hostcell/ parasite interaction, this PhD Thesis has contributed to advance in different aspects of the molecular study of the trans-sialidase from T. cruzi and the sialidase from T. rangeli: 1. The systems ofexpression and purification of recombinant trans-sialidase were optimized with the purpose of obtaining great quantity of highly pure (>95%) protein. 2. Pure recombinant trans-sialidase was used as the starting material in crystallization screenings, looking for suitable crystals to perform crystallographic studies by X ray diffraction, that would render its three-dimensional structure. Added to the conventional matrix variations in the crystallogonesis screenings, and until suitable crystals appear, a simultaneous approach was performed, searching for the separation of partial domains of the protein that could be crystallized independently. 3. In parallel with these points, it was demonstrated that the sialidase from T rangei is homologous to the the trans-sialidase of T. cruzi. With this purpose, the native sialidase was purified from culture supernatants of T. rangeli, and microsequenced. Thereafter, thirteen homologous genes were cloned, and grouped in what we have denominated the multigenic sialidase family of T. rangeli. 4. Three of the cloned genes encode recombinant proteins with sialidase activity, similar to the native enzyme's, when they are expressed in Escherichia coli. One of them was completely sequenced, showing an overall identity of 68.9% at the amino acid level, compared to the trans-sialidase from T cruzi. The similarity increases to 86.7% if conservative substitutions are admitted. 5. The T. rangeli native enzyme was crystallized, alone and complexed with a competitive inhibitor. Its three-dimensional structure was solved by X ray diffraction pattern analysis, up to 2.2Å resolution. The three-dimensional structure of the complex with the inhibitor was solved simultaneously to 2.9Å. 6. The three-dimensional structure of the trans-sialidase from T. cruzi was modelled, taking the atomic coordinates of the sialidase, as initial reference, given the high homology level between both proteins. 7. Chimeric molecules between both proteins were constructed and expressed. with the purpose of advancing in the definition of key regions and/or residues responsible for the transglycosylation activity.

"Estudios moleculares del gen 11 de rotavirus" (2001). Giambiagi, Susana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los mecanismos de variación y evolución en los rotavirus comprenden no sólo las mutaciones puntuales introducidas por la RNA polimerasa durante la replicación y la reasociación de segmentos virales durante infecciones mixtas, sino también los reordenamientos que se producen dentro de cada segmento genómico. Estos reordenamientos no afectan la estructura conservada de los segmentos genómicos (extremos 5' y 3' conservados), y esta estructura se supone relacionada con la capacidad de replicación y empaquetamiento del genoma viral en nuevas partículas virales. Con el objetivo de estudiar los mecanismos de reordenamiento genómicos en rotavirus se analizó la estructura molecular del segmento genómico 11 reordenado de distintos rotavirus humanos de "electroferotipo corto", aislados de niños infectados. De acuerdo a los resultados obtenidos, el segmento 11 reordenado de los aislamientos virales analizados tiene una inserción de 148 nucleótidos en la región 3' no traducida del segmento viral. Las secuencias obtenidas de los segmentos 11 de los distintos aislamientos virales analizados fueron altamente homólogas entre sí y con las secuencias de los segmentos 11 de otras dos cepas de rotavirus humanos decriptas previamente: RVS y DS-1. La inserción no afecta la región codificante del gen 11, ni la secuencia y localización de la región 3' no codificante, común a todos los segmentos 11 de los rotavirus tipo A. La secuencia de la inserción, rica en A y T, no presenta homología con el segmento 11 normal ni con otros segmentos virales. Los resultados obtenidos permitieron identificar y estudiar un nuevo mecanismo de reordenamiento genómico en rotavirus, en el cual no hay una duplicación parcial del segmento genómico. Un segundo objetivo de la tesis consistió en el desarrollo de un sistema que permita obtener rotavirus recombinantes. Se estudiaron las secuencias requeridas para que un ARN sea reconocido por la maquinaria viral y sea replicado y empaquetado en nuevas partículas virales. Para estudiar las secuencias involucradas en el reconocimiento del ARN viral por la polimerasa viral hemos construído un plásmido recombinante que al ser transcripto produce un ARN que contiene las secuencias 5' y 3' no traducidas del segmento 11 viral, flaqueando la región codificante del gen CAT. Este ARN es amplificado cuando es transfectado en el citoplasma de células infectadas con rotavirus. De acuerdo a los resultados obtenidos, las señales involucradas en el reconocimiento del ARN por la polimerasa viral con actividad replicasa están localizadas en el extremo 3' no codificante. La polimerasa requiere para iniciar la síntesis de la cadena - del segmento 11, no sólo la secuencia consenso 3', común a todos los segmentos virales, sino también la formación de una estructura de horquilla dejando un extremo 3' libre de 18 nucleótidos que incluyen la secuencia consenso terminal. Aunque la metodología propuesta ha permitido desarrollar un método valioso para el análisis de las secuencias de RNA capaces de ser reconocidas por el complejo de replicación viral, la misma no resultó satisfactoria para la obtención de partículas virales recombinantes. Es posible que existan otras señales importantes para el empaquetamiento que probablemente se localicen en la región codificante del segmento 11, y por lo tanto que están ausentes en nuestra construcción.

Abstract:
The mechanisms of genome variation and evolution in rotavirus, involve not only the mutations introduced by RNA polymerase during replication and the reassociation of genomic segments during infection, but also the rearrangement of genomic segments. The rearrangements don't modify the conserved structure of the genomic segments (conserved 5' and 3' ends), and this structure is supposed to be related with the replication and packaging of the viral genome. The first objective of this thesis was to study the genomic rearrangement mechanism in rotavirus. We have studied the molecular structure of the rearranged genomic segment 11 of different virus isolated from infected children. According to the results, the rearranged segments 11 of the viral isolates have an insertion of 148 nt in the 3' untranslated region. The sequences in all 6 isolates were highly conserved among them, and with those of human strains DS-1 and RVS. The insertion does neither affect the gene 11 coding region nor the sequence and localization of the 3' non coding region, conserved in all the 11 segments of rotavirus group A. The sequence of the insertion, A + T rich, has no clear resemblance with the normal gene 11 sequence nor with other viral segments. The results obtained have allowed identifying and studying a new mechanism of genomic rearrangement in rotavirus, in which partial duplication of genomic segment is not involved. The second objective was to develop a system for obtaining recombinant rotaviruses. We have developed an assay to study the RNA cis-acting signals that promote the synthesis of dsRNA. We have constructed a recombinant plasmid that transcribed with T3 polymerase yields a positive sense RNA containing the rotavirus gene 11 5' and 3' untranslated regions, flanking the coding region of CAT reporter gene. This RNA is amplified when transfected into the cytoplasm of rotavirus infected cells. The results obtained in the study of 3' mutant RNAs have shown that the cis-acting signals to promote the synthesis of dsRNA involved, not only the 3' consensus sequence, but also a "stem-loop" structure and a single strand 3' end of 18 nt that include the 3' conserved termini. We couldn't obtain recombinant rotavirus using this methodology. It is possible that the packaging signals are not located in the 5' or 3' untranslated region of segment 11, but into the coding region, absent in the RNAs we have studied.

"Estudios moleculares sobre la UDP-GLC : Glicoproteína glucosiltransferasa : relación estructura-función" (2002). Guerin, Marcelo Eduardo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El retículo endoplasmático (RE)es el compartimiento subcelular involucrado en la síntesis, modificación post-traduccional y plegamiento de proteínas y glicoproteínas que serán destinadas a secreción, membrana plasmática o distintas organelas de los sistemas endocítico y exocítico. Una de las modificaciones post-traduccionales más frecuentes, la N-glicosilación, está relacionada con el plegamiento de las proteínas. Numerosas proteínas son incapaces de alcanzar su conformación nativa sin la adición de N-oligosacáridos. Los intermediarios de plegamiento, las proteínas no totalmente ensambladas, las proteínas mal plegadas y los agregados proteicos son selectivamente retenidos en el RE. El transporte hacia los complejos de Golgi se lleva a cabo exclusivamente cuando las proteínas se han plegado correctamente y se han ensamblado los multímeros. Este importante fenómeno, que asegura la integridad funcional de las proteínas que salen del RE,ha sido denominado "control de calidad". En el caso de las glicoproteínas, la estructura y el grado de procesamiento de sus N-oligosacáridos resulta ser una señal para la retención en el RE o el transporte hacia los complejos de Golgi. La N-glicosilación de proteínas comienza en la mayoría de las células eucariotas, con la transferencia de un oligosacárido de estructura Glc3Man9GlcNAc2 desde un intermediario lipídico (dolicol-P-P-oligosacárido), a cadenas polipeptídicas nacientes en el lumen del RE.Sin embargo la Glc no es un componente normal de las N-glicoproteínas maduras. Inmediatamente luego de la transferencia, los residuos de Glc son removidos por las glucosidasas I (GI) y II (GII). Los N-oligosacáridos libres de Glc son reglucosilados transitoriamente por la UDPG-Glc:glicoproteína glucosiltransferasa (GT)y deglucosilados posteriormente por la GII. De acuerdo al modelo actualmente aceptado, la calnexina (CNX), la calreticulina (CRT), la GII y la GT intervienen en el control de calidad de plegamiento de glicoproteínas en el RE. A medida que las glicoproteínas van adquiriendo sus conformaciones nativas, alternan entre formas no glucosiladas y monoglucosiladas por efecto de las actividades catalíticas opuestas de la GII y de la GT. Las dos chaperonas moleculares no convencionales con propiedades de lectinas, CNX y CRT, que reconocen exclusivamente N-oligosacáridos monoglucosilados, unirían glicoproteínas en proceso de plegamiento o incorrectamente plegadas, reteniéndolas en el RE. Los ciclos de deglucosilación y reglucosilación continuarían hasta que el plegado correcto de las glicoproteínas se haya completado. Cuando las mismas adoptan su conformación nativa, se convertirían en sustrato de la GII, pero no de la GT, y se liberarían de las lectinas. Las glicoproteínas bien plegadas continuarían su camino por la vía secretoria hacia su destino mientras que las que se encuentran en proceso de plegamiento, serían retenidas en el RE y eventualmente translocadas al citoplasma para ser degradadas en el proteasoma. ' En este ciclo la GT funcionaría como un sensor del estado conformacional de las glicoproteínas, marcándolas o no con el residuo de Glc que determinará su unión a CNX o CRT. La GT fue purificada a homogeneidad a partir de Drosophila melanogaster,Rattus norvegicus y Schizosaccharomyces pombe,y demostró ser una proteína soluble del RE que depende de Ca2+ para su actividad y que utiliza UDP-Glc como dador de Glc. En cuanto a la glicoproteína aceptora, en un ensayo libre de células, ésta debe estar desnaturalizada para funcionar eficientemente como aceptor. La enzima reconoce el residuo más interno de GlcNAc de los N-oligosacáridos, y amino ácidos hidrofóbicos expuestos en las conformaciones no nativas de las glicoproteínas sustrato. Experimentos presentados en este trabajo de tesis demuestran que: (a) la GT de S. pombe es una enzima conformada por dos dominios: el dominio C-terminal (400 amino ácidos, altamente conservados entre GTS, 20% de la molécula), responsable de la interacción con UDP-Glc; y el dominio N-terminal (1100 amino ácidos, pobremente conservados entre GTs, 80% de la molécula) posiblemente responsable de la interacción de la GT con amino ácidos hidrofóbicos, confiriéndole a la enzima especificidad por glicoproteínas no totalmente plegadas. La unión entre ambos dominios se puede clivar proteolíticamente, pero ellos interaccionan a través de uniones no covalentes y no pueden separarse sin pérdida de la actividad enzimática. Esto explicaría el porqué la GT solo glucosila N-oligosacáridos muy cercanos al sitio mal plegado de la parte proteica (ver Discusión). Esta estructura de dos dominios está conservada desde levaduras a eucariotes superiores. (b) Los dominios N-terminal y C-terminal correspondientes a la GT de S. pombe, expresados separadamente en una misma célula S. pombe GT pueden formar una enzima activa y ser capaces de transferir Glc a glicoproteínas mal plegadas. (c) Los dominios N-terminal y C-terminal correspondientes a GTS de distintas especies, resultan ser intercambiables. (d) El dominio C-terminal correspondiente a la GT de S. pombe requiere la presencia del dominio N-terminal para plegarse correctamente y formar un complejo biológicamente activo, y/o para ser estable en el lumen del RE.

Abstract:
The endoplasmic reticulum (ER)is the intracellular location responsible for post-translational modifications and proper folding of proteins bound for secretion, the plasma membrane or organelles of the endocytic system. N-glycosylation is one of the most frequent post-translational modifications and is related to protein folding, as many species are unable of properly fold without N-glycan addition. Folding intermediates, incompletely assembled oligomers, misfolded proteins and aggregates are selectively retained in the ER. Transport to Golgi compartments takes place only if proteins are in their native conformations and properly assembled. The mecanism that ensures the functionality of proteins that exit the ER, is the so called "quality control" (QC) of glycoprotein folding. For glycoproteins, the structure and processing degree of the N-oligosaccharides appeared to be a signal for the retention or transport to the Golgi complex. In most eukariotic cells, N-glycosylation is initiated upon oligosaccharide (Glc3Man9GlcNAc2)transfer from a lipid-carrier (dolichol diphosphate) to nascent proteins in the ER lumen. However, the Glc unit is not usually found in folded glycoproteins. The three Glc residues of the transferred oligosaccharide are immediately trimmed by two ER resident enzymes, glucosidases I and II (GII). The Glc-free N-linked oligosaccharides are then transiently reglucosylated by the UDP-Glc:glycoprotein glucosyltransferase (GT)and further deglucosylated by GII. According to a currently accepted model, calnexin (CNX), calreticulin (CRT), GII and GT are involved in the ER glycoprotein-specific folding and QC. As glycoproteins acquiere their native conformations, they switch between nonglucosylated and monoglucosylated forms by the opposing activities of GII and GT. CNX and CRT are lectins that specifically bind monoglucosylated high mannose-type oligosaccharides in newly synthesized glycoproteins. The lectin-monoglucosylated glycoprotein interaction retains not properly folded or assembled species in the ER. The deglucosylation and reglucosylation cycle continues until proper folding is achieved. Once glycoproteins have adopted their mature, fully folded conformations, they are no longer recognized by GT. Subsequent GII-mediated deglucosylation liberates them from their lectin anchors, thus allowing properly folded species to continue their maturation along the secretory pathway. In addition, the lectin-glycoprotein interaction enhances folding efficiency by preventing aggregation, premature' oligomerization and incorrect disulfide bond formation. GT is the key element of the QC mechanism as it is the only element discriminating between glycoprotein conformations. GT was purified to homogeneity from Drosophila melanogaster, Rattus norvegicus and Schizosaccharomyces pombe. The enzyme is a soluble ER protein that has an absolute requirement of millimolar Ca2+ concentrations for activity and uses UDPGlc as sugar donor. In cell-free assays GT glucosylates glycoproteins only if the Noligosaccharides are linked to a polypeptide backbone displaying a non-native conformation. It has been proposed that GT senses the exposure of hydrophobic regions normally buried in native conformations. GT sequence analysis suggests that it is composed of two domains, the N-terminal that comprises 80% of the molecule, has no homology to other known proteins and is presumably involved in recognition of non-native conformers and the C-terminal or catalytic domain that binds UDP-Glc homologs and displays a similar size and significant homology to members of glycosyltransferase family 8. Here we show that N- and C-terminal domains from either R. norvegicusor S. pombe GTS remained tightly but not covalently bound upon mild proteolytic treatment and could not be separated by a variety of different procedures without loss of enzymatic activity. Further, the notion of a two domain protein was reinforced by the synthesis of an active enzyme on transfection of S.pombe GT null mutants with two expression vectors, each of them encoding one of both domains. The tight association between N- and C-terminal domains may explain why N-glycans in the close proximity to protein structural perturbations are preferentially glucosylated by the enzyme. In spite of displaying practically no homology with S. pombe N-terminal domain (15.5-16.3%),the same portions from R. norvegicus and D. melanogaster enzymes linked to the C-terminal domain of yeast GT were functionally active when expressed in S. pombe thus indicating that all N-terminal domains share a common role. No functional enzyme was obtained on expression of the C-terminal domain, thus reinforcing the idea that the N-terminal domain is responsible for recognition of non-native conformers.

"Estudios multidisciplinarios en el complejo galactia-camptosema-collaea (leguminosae)" (2005). Sede, Silvana Mabel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El género pantropical y subpantropical Galactia, y los géneros neotropicales Camptosema y Collaea se agrupan en un complejo basado en sus afinidades exomorfológicas. Algunos caracteres macromorfológicos diagnósticos están algunas veces presentes sin correlación en las especies de distintos géneros en la región austral de América del Sur, y es por esta razón que se han adoptado distintos criterios para delimitarlos, generando gran confusión taxonómica. El objetivo de este trabajo fue clarificar las relaciones entre las especies del complejo Galactia- Camptosema- Collaea. Con este propósito se analizaron las características morfológicas y citológicas de distintas especies. Se realizó además un análisis filogenético combinando caracteres moleculares y morfológicos y un análisis del patrón de bandas generado por AFLP. La mayoría de los caracteres tradicionalmente usados como diagnósticos en la taxonomía del grupo no permiten una delimitación clara de los rangos genéricos e infragenéricos. Se evaluaron las características cromosómicas del grupo y se realizaron nuevos recuentos para las especies conflictivas. De los datos citológicos analizados, los caracteres fundamentales y de mayor relevancia para la resolución de la taxonomía conflictiva del grupo, resultaron ser el número cromosómico y la fórmula cariotípica. Las hipótesis filogenéticas propuestas en este trabajo apoyan la monofilia de Collaea, y no corroboran la monofilia de Galactia y Camptosema. El análisis de agrupamiento obtenido a partir de los patrones de bandas de AFLP no es consistente con la actual circunscripción de Galactia y Camptosema, corroborando los resultados obtenidos en el análisis morfológico y filogenético. Los resultados obtenidos inducen a rever la circunscripción actual del complejo genérico.

Abstract:
The pantropical and subpantropical genus Galactia, and the neotropical genera Camptosema and Collaea are grouped in a complex based on exomorphological affinities. Some diagnostic macromorphological features are sometimes present without correlation between the species of different genera in the austral region of South America, and this is the reason why different criteria have been adopted to delimit them, thus generating great taxonomic confusion. The aim of this work was to clarify the relationships of the species within the complex Galactia- Camptosema- Collaea. To accomplish this objective, morphological and cytological characteristics of different species were evaluated. A phylogenetic analysis combining morphological and molecular characters and the analysis of the AFLP band patterns of the species were also undertaken. Most of the characters traditionally used as diagnostic in the taxonomy of the group, do not permit a clear delimitation of the generic and infrageneric ranges. The chromosome characteristics of the group were also evaluated and new records for the conflictive species were reported. From the cytological data analyzed, the most relevant characters were the chromosome number and the karyotype formula. The phylogenetic hypotheses proposed in this work strongly support the monophyly of Collaea, but do not corroborate the monophyly of Galactia and Camptosema. The clustering obtained from the analysis of the AFLP band patterns is not congruent with the current circumscription of Galactia and Camptosema, corroborating the results obtained from the morphological and phylogenetic analyses. The results obtained induce to revise the present circunscription of the genera in the complex.

"Estudios multidisciplinarios en las especies Patagónicas Argentinas del género Berberis L. (Berberidaceae)" (2000). Bottini, María Cecilia J.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La familia Berberidaceae está integrada por 14 géneros que habitan Norteamérica. Sudamérica, Europa, Asia y Norte de Africa, de los cuales sólo Berberis extiende su distribución al Hemisferio Sur. El género Berberis esta representado en la Patagonia Argentina por 16 especies. Algunas de ellas presentan: delimitación morfológica inequívoca que pueden o no hibridar en zonas ecotonales y/o marginales sin perder su identidad; adaptación a ambientes muy contrastantes (rangos de precipitación, tipos de suelos. etc); distribución muy restringida a condiciones ambientales especificas; características de habitat similares a pesar de presentar un amplio rango de distribución. Se realizaron estudios multidisciplinarios con la finalidad de caracterizar y delimitar los taxa que componen al género y analizar los mecanismos de especiación del grupo con especial referencia a la "Especiación Hibrida Homoploide y Poliploide". A partir de diferentes metodologías (morfología, citogenetica, proteinas seminales, isoenzimas, AFLP e ITS) se analizaron numerosas poblaciones de las siguientes especies: B. bidentata, B. buxifolia, B. cabrerae, B. chillanensis, B. comberi, B. copahuensis, B. darwinii, B. empetrifolia, B. heterophylla, B. ilicifolia, B. linearifolia, B. michay, B. montana, B. parodii y B. serrato-dentata. Los principales resultados obtenidos a partir de las diferentes técnicas sugieren que: En Berberis se encontró que el contenido de ADN está fuertemente asociado con un conjunto de variables ambientales y ecológicas, apoyando la hipótesis del "nucleotipo". B. bidentata, B. darwinii y B. linearifolia conformarían un Complejo Hibrido Homogámico. B. buxifolia, B. heterophylla y B. parodii constituirian un Complejo Híbrido Poliploide. El proceso de especiación de B. montana, B. chillanensis y B. cabrerae no estaría completo y estas tres entidades podrian tratarse de semiespecies.

Abstract:
The Berberidaceae are a family of about 14 genera, widespread in Northern Hemisphere and with a single genus, Berberis, extending into South America. In the Argentinian Patagonian region there are 16 species of Berberis. Some of them present: sharp morphological discontinuities, although there are intermediate forms among some of the species indicating the probable ocurrence of hybridization; adaptation to very different habits (rainfall range. soil types, etc); restricted geographic range to specific environmental conditions; widespread distribution maintaing similar type of habit. Multidisciplinary studies were made wiht the aim to analyze the boundaries among the taxa of the genus. Moreover there studies could help to delimitate the mechanism of speciation of there taxa, with special enphasis in "Homoploid and Polyployd Hybrid Speciation". Morphological, cytogenetical, seed proteins and isozymes electrophoresis, AFLP and ITS studies were done to analize the relationships among several populations of: B. bidentata, B. buxifolia, B. cabrerae, B. chillanensis, B. comberi, B. copahuensis, B. darwinii, B. empetrifolia, B. heterophylla, B. ilicifolia, B. linearifolia, B. michay, B. montana, B. parodii and B. serratodentata. The principal conclusions suggest that: Berberis' DNA content is strongly associated with geographical and ecological variables, this data would support the nucleotype hypotesis. B. bidentata, B. darwinii and B. Linearifolia would constitute an Homogamic Hybrid Complex. B. buxifolia, B. heterophylla and B. parodii would conform a Polyployd Hybrid Complex. The speciation process of B. montana, B. chillanensis and B. cabrerae would not be complete being considered as semispecies.

"Estudios poliedrales de problemas de coloreo de grafos" (2016-10-11). Delle Donne, Diego Andrés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los problemas de coloreo de vértices surgen en una amplia gama de situaciones de la vida real. Ejemplos de ellos son los problemas de asignación de frecuencias en redes de telecomunicaciones, problemas de asignación de aulas a las materias de una universidad e incluso algunos problemas de planificación (scheduling). En general, cualquier problema de asignación de recursos a tareas que contemple incompatibilidades entre pares de tareas para usar el mismo recurso, puede ser visto como un problema de coloreo de los vértices de un grafo. Existen muchas variantes de problemas de coloreo de grafos motivadas generalmente por restricciones reales, tales como Precoloring extension, μ-coloring, (γ, μ)-coloring y List-coloring, entre otras. La programación lineal entera (PLE) ha demostrado ser una herramienta muy adecuada para resolver problemas de optimización combinatoria. En los últimos 15 a˜nos la PLE fue aplicada con éxito a problemas de coloreo de vértices recurriendo a distintas formulaciones para el problema clásico de coloreo tales como el modelo estándar, la formulación por representantes, el orientation model y la formulación por conjuntos independientes, entre otras. Si bien muchos problemas de coloreo de grafos pueden ser resueltos en tiempo polinomial en ciertas familias de grafos, la mayoría de estos problemas no está “bajo control” desde el punto de vista poliedral. Es decir, no se conocen formulaciones de programación lineal entera con descripciones completas de los poliedros asociados. En el contexto de la teoría poliedral, la equivalencia entre los problemas de optimización y separación sugiere que para estos problemas debería existir alguna formulación cuyo problema de separación asociado pueda ser resuelto en tiempo polinomial y, más aun, tal que el poliedro asociado admita una caracterización “elegante”, en términos de desigualdades lineales. La búsqueda de tales caracterizaciones es el objetivo principal del presente trabajo de tesis. El objetivo teórico es completar la contraparte poliedral de aquellos problemas de coloreo de grafos que se encuentren ya bien resueltos por medio de técnicas combinatorias. El estudio de estos poliedros puede llevarnos a un mejor entendimiento de sus estructuras permitiéndonos de esta forma encontrar nuevas familias de grafos para las cuales algunos problemas de coloreo tengan resoluci ón polinomial, aportando así nuevos resultados útiles en la práctica. De este estudio surgen también nuevas familias de desigualdades válidas que pueden incorporarse a algoritmos de planos de corte para contribuir así a mejorar su performance en la práctica. Con estos objetivos, en esta tesis estudiamos los poliedros asociados a cuatro formulaciones distintas para el problema clásico de coloreo: el modelo estándar, la formulación por representantes, el orientation model y la formulación por conjuntos independientes. Presentamos adaptaciones de algunas de estas formulaciones para distintas variantes de coloreo y en algunos casos mostramos que los problemas de optimización en los poliedros asociados son polinomialmente equivalentes al problema de optimización sobre el poliedro de coloreo clásico. Damos caracterizaciones completas de los poliedros de coloreo para grafos que surgen de ciertas operaciones. Para algunas de las formulaciones estudiadas, hallamos descripciones completas de los poliedros asociados a distintas familias de grafos, entre ellas los árboles, grafos block, split y co-interval, entre otras. Estudiamos también la relaci ón entre los poliedros de coloreo Pcol y el poliedro de conjuntos independientes STAB y mostramos que en algunos casos, el primero es una cara del segundo (o hasta coincide con éste) para un grafo asociado al grafo original. Estos resultados nos permiten obtener nuevas familias de desigualdades válidas para Pcol basadas en desigualdades válidas conocidas para STAB. Más aun, a raíz de estos resultados hallamos descripciones completas de Pcol para algunas familias de grafos en las que se conoce una descripción de STAB para el grafo asociado. Presentamos también un estudio poliedral clásico para el orientation model en el cual describimos algunas familias de desigualdades válidas que definen facetas del poliedro asociado. Basados en la estructura de estas familias, presentamos el procedimiento de path lifting, que combina dos desigualdades válidas genéricas y un camino entre dos vértices particulares y genera una familia infinita de desigualdades válidas. Mostramos que este procedimiento puede generar facetas del poliedro de coloreo asociado y damos condiciones suficientes para que esto ocurra.

Abstract:
Vertex coloring problems arise in a wide range of real-life situations. Some common examples are frequency assignment problems in telecomunication networks, classroom assignment problems at universities and even certain scheduling problems. In general, any problem consisting in the assignment of some resources to jobs with incompatibility conditions among these jobs to use the same resource can be seen as a vertex coloring problem on some graph. There exist many variants of the vertex coloring problem, usually motivated by real restrictions, such as Precoloring extension, µ-coloring, (ɣ, µ)-coloring and List-coloring, among others. Integer linear programming (ILP) has prooved to be a powerful tool to solve combinatorial optimization problems. In the last 15 years it has been successfully applied to vertex coloring problems by resorting to different formulations for the classical coloring problem such as the standard model, the representatives formulation, the orientation model and the independent set formulation, among others. Despite the fact that many vertex coloring problems are polynomially solvable on certain graph classes, most of these problems are not “under control” from a polyhedral point of view. This is, we don’t know integer programming formulations with complete descriptions for the associated polytopes. In the context of polyhedral theory, the equivalence between optimization and separation suggests for these problems the existence of integer programming formulations with polynomially-solvable separation problems and, moreover, whose associated polytopes admit elegant characterizations, in terms of linear inequalities. The search for such characterizations is the main goal of this thesis. The theoretical goal is to complete the polyhedral counterpart of those coloring problems which we know can be solved in polynomial time by means of combinatorial techniques. The study of these polytopes can lead us to a better understanding of their structures revealing some insight by which we can find new classes of graphs where vertex coloring problems are polynomial, thus contributing with new practical results. This study also yields new families of valid inequalities which may be used in cutting plane schemes, thus improving the performance on the resolution of vertex coloring problems. With these objectives, in this thesis we study four different known formulations for the classical graph coloring problem: the standard model, the representatives formulation, the orientation model and the independent set formulation. We present adaptations of some of these formulations for several variants of vertex coloring and, in some cases, we show that the optimization problems associated with the corresponding polytopes are polynomially equivalent to the optimization problem associated to the polytope for the classical vertex coloring problem. We give complete characterizations of coloring polytopes for graphs that are the product of some graph operators. For some of the studied formulations, we found complete descriptions for the associated polytopes to several classes of graphs such as trees, block, split and co-interval graphs, among others. We further study the relation between coloring polytopes Pcol and stable set polytopes STAB and we show that, in some cases, the coloring polytope for a graph G corresponds to a face of (or even coincides with) STAB( ˜G ) for a particular graph ˜G. These results allowed us to deduce new families of valid inequalities for Pcol based on valid inequalities known for STAB. Furthermore, from these results we found complete descriptions for Pcol for some classes of graphs for which STAB is known for the associated graph. We also present a classical polyhedral study of the orientation model, where we introduce new families of facet-inducing valid inequalities. Based on the structure of these families, we introduce the path lifting procedure, which combines two generic valid inequalities and a path between two particular vertices and generates an infinite family of valid inequalities for the associated polytope. We show that this procedure is able to generate facets of the polytope and we give sufficient conditions for this to occur.

"Estudios quimiotaxonómicos en especies del género Ascobolus (Ascobolaceae-Pezizales)" (1999). Dokmetzian, Diana Ana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo del presente trabajo fue la delimitación de doce especies del género Ascobolus a partir de los caracteres morfológicos y de cultivo, los cruzamientos interespecíficos, el crecimiento vegetativo en cultivo y los patrones electroforéticos de isoenzimas intracelulares. Para ello se utilizaron 47 cepas monospóricas y 22 siembras mixtas de cepas sexualmente compatibles. En los cruzamientos interespecíficos de A. immersus x A. bistisii, los oídios colocados sobre el micelio base no gerrninaron y tampoco indujeron la formación de ascogonios. Los cruzamientos entre las demás especies formaron primordios incipientes pero no fértiles. Los resultados sugieren la existencia de una sustancia hormonal responsable en la formación de los apotecios muy similar en estas especies y por tal razón A. fiufuraceus está más relacionada a A. gamundii que a las otras especies. Los resultados obtenidos al estudiar el crecimiento vegetativo en cultivo en medio líquido muestran variación entre las especies, que difieren entre sí en la extensión de las fases de la curva. Considerando la duración de la fase de crecimiento exponencial, se reconocen tres grupos. La fase estacionaria, de variada longitud, frecuentemente es muy corta, entrando rápidamente en la fase de muerte, acompañada por la autólisis del micelio. Se examinaron los caracteres micro y macromorfológicos y se aplicaron técnicas numéricas. En el análisis isoenzimático se utilizaron los patrones de bandas de seis sistemas isoenzimáticos: AAT, EST, ACP, GDH, IDH y SOD. Los fenogramas obtenidos a partir del análisis de agrupamientos (UPGMA) mostraron dos gmpos principales de especies correspondientes a dos secciones del género: secc. Ascobolus y secc. Dasyobolus, con algunas diferencias dentro de cada sección. Aunque existe homogeneidad intraespecífica ya que no se observaron grandes diferencias en los estados de los caracteres entre las cepas monospóricas y siembras mixtas, se encontró variación para EST en A. gamundii y para ACP en A. ferrugineus. Los resultados de este trabajo permitieron establecer que las doce especies estudiadas constituyen unidades taxonómicas independientes.

Abstract:
The aim of this work was the delimitation of twelve species of the genus Ascobolus on the base of the analysis of morphological and cultural characters, the vegetative growth in liquid culture media and electrophoretic patterns of intracellular enzymes. Forty seven monosporic strains and twenty two mixed cultures of compatible strains of the genus were used. In A. immersus x A. bístisii interfertility crossing, when oidia were placed on a block of agar lying on a base mycelium, germination failed and there was no induction of ascogonium formation. Crossing between other species, formed incipient primordia, but none of them were fertile. These results suggest that hormonal substances responsible for apothecial formation are very similar in some of these species being, A. furfuraceus more closely related to A. gamundii than to other species. Vegetative growth of the different species showed variation in the duration of the different phases of the growth cycle. Three groups can be recognised considering the extension of the exponential phase of growth. The stationary phase, which differs in its length, is frequently very short, entering quickly in the phase of death, accompanied by the autolysis of the mycelium. Morphological characters were examined and numerical techniques were used. Six intracellular isozyme systems were analyzed: AAT, EST, ACP, GDH, IDH and SOD. The phenograms obtained from the analysis of grouping (UPGMA) showed two groups of species, corresponding to the two sections of the genus: sec. Ascobolus and sec. Dasyobolus with some differences within of each section. Though a high intraespecific homogeneity was observed since there were not differences in the status of the characters among monosporic strains and mixed cultures some variation was observed in EST patterns of A. gamundii and ACP patterns of A.ferrugineus. The results of this research let establish that the twelve species studied are independent taxonomical entities.

"Estudios quimiotaxonómicos en especies del género Saccobolus. : (Ascobolaceae-Pezizales)" (1998). Ramos, Araceli Marcela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los objetivos del presente trabajo fueron establecer, a partir del análisis de los patrones electroforéticos de isoenzimas intracelulares, de ciertos caracteres de cultivo, y de la producción y patrones electroforéticos de endo β-D-1,4 glucanasa, la delimitación de diez especies del género Saccobolus. Se utilizaron para el mismo 114 cepas monospóricas del género. Se analizaron seis sistemas isoenzimáticos intracelulares: AAT, ACP, G6PD, IDH, EST, SOD, y uno extracelular: endo β-D-1,4 glucanasa. El fenograma obtenido a partir del análisis de agrupamientos (UPGMA) muestra dos grupos principales de especies, correspondientes a cada una de las dos secciones en las que se divide el género. Se observó una alta homogeneidad intraespecífica ya que no se observaron diferencias en los estados de los caracteres entre las cepas monospóricas de cada aislamiento geográfico y aún entre distintos aislamientos geográficos. El análisis de los fenogramas muestra un alto grado de asociación entre las especies, lo cual concuerda con las observaciones morfológicas y el comportamiento fisiológico del grupo donde las especies aparecen como un continuo. Los resultados de este trabajo avalan el uso de los patrones isoenzimáticos de las enzimas testeadas, y las diferencias en los parámetros fisiológicos, para la delimitación de las especies del género. Los mismos indican que las diez especies estudiadas constituyen unidades taxonómicas independientes, avalando lo establecido, para alguna de ellas, a partir del análisis de los patrones morfológicos, y fisiológicos previamente estudiados. Esta metodologia constituye una herramienta adicional a la taxonomía tradicional del género, que utiliza sólo caracteres morfológicos.

Abstract:
The aim of this work was to establish the delimitation of ten species of the genus Saccobolus on the base of the analysis of electrophoretic patterns of intracellular enzymes, cultural characters and production and electrophoretic pattem of endo β-D-1,4 glucanase. A hundred and fourteen monosporic strains of the genus were used throughout, six intracellular and one extracellular isozyme systems were analyzed: AAT, ACP, G6PD, IDH, EST, SOD and endoglucanase. The phenogram obtained from the analysis of grouping (UPGMA) showed two groups of species, corresponding to the two sections of the genus. A high intraspecific homogeneity was observed, since there were not differences in the status of the characters among the monosporic strains of each geographical isolement, and not even among difierent geographical isolements. The analysis of phenograms showed a high degree of association among species, which correlates with morphological observations and physiological behavior of the taxa. The results of this research support the use of isozyme patterns of enzymes tested as well as the differences in physiological parameters for the delimitation of species in this genus. They show that the ten species studied are independent taxonomical entities, supporting the taxa established by the analysis of morphological and physiological patters previously studied. This methodology constitutes an additional tool to traditional taxonomy of the genus, that uses only morphological characters.

"Estudios radiobiológicos de la Terapia por Captura Neutrónica en Boro (BNCT) para el tratamiento de cáncer bucal y metástasis hepáticas a nivel experimental" (2016-04-22). Pozzi, Emiliano César Cayetano. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Terapia por Captura Neutrónica en Boro (BNCT) es una aplicación de la tecnología nuclear al área biomédica, que se basa en la acumulación selectiva de compuestos borados dentro del tumor y la subsiguiente irradiación con neutrones, generando una reacción de captura neutrónica que libera radiación de partículas de alta transferencia lineal de energía (LET) y corto alcance que resultan letales para la célula. De esta manera BNCT dañaría preferencialmente el tumor sin causar daño significativo al tejido normal. Nuestro grupo demostró la eficacia terapéutica de la aplicación a nivel experimental de distintos protocolos de BNCT in vivo, utilizando las fuentes de neutrones disponibles inicialmente, es decir los reactores nucleares de experimentación RA-1 (San Martín, Buenos Aires) y RA-6 (Bariloche, Río Negro). Luego, en 2005, la Comisión Nacional de Energía Atómica (CNEA) construyó una fuente de neutrones térmicos para aplicaciones biomédicas de BNCT en el reactor nuclear RA-3 (Ezeiza, Buenos Aires). Entre los objetivos del presente trabajo se planteó realizar una adaptación y caracterización dosimétrica de la nueva fuente que permitiera realizar estudios radiobiológicos de BNCT en el modelo experimental de cáncer bucal de la bolsa de la mejilla del hámster. Se evaluaron las respuestas del tumor, tejido precanceroso y tejido normal en forma comparativa con las otras fuentes utilizadas anteriormente. Los conocimientos obtenidos en estos estudios se emplearon para llevar adelante líneas de investigación para optimizar los protocolos de BNCT, maximizando su eficacia terapéutica, minimizando su radiotoxicidad y evaluando su potencial aplicación a otras patologías. En este contexto y dado el interés de la comunidad internacional de explorar el potencial terapéutico de BNCT para el tratamiento de metástasis hepáticas, otro objetivo principal de esta tesis doctoral fue realizar una evaluación sistemática de la eficacia terapéutica del BNCT en un modelo experimental de metástasis hepática, y considerar la potencial radiotoxicidad del tratamiento sobre el hígado. Se realizó la puesta a punto de un modelo in vivo en ratas, se desarrolló y caracterizó dosimétricamente un sistema adecuado de blindaje para luego realizar los estudios de BNCT in vivo en la fuente del reactor RA-3. Se evaluó la respuesta del tumor y aspectos de la radiotoxicidad en hígado para contribuir al conocimiento de la radiobiología de BNCT en el tratamiento de esta enfermedad. Los conocimientos de la radiobiología de BNCT obtenidos en modelos experimentales permitirían optimizar BNCT para distintas patologías.

Abstract:
Boron Neutron Capture Therapy (BNCT) applies nuclear technology to biomedicine. BNCT is based on the selective accumulation of boron compounds in tumor cells, followed by irradiation with neutrons. The capture reaction between a thermal neutron and a 10B atom gives rise to short range particles with high linear energy transfer (LET) that are lethal for the cell. Thus BNCT would damage tumor without causing significant damage to normal tissue. Our group demonstrated the therapeutic efficacy of the application of different experimental BNCT protocols in vivo employing the neutron sources initially available, i.e. the experimental nuclear reactors RA-1 (San Martín, Buenos Aires) and RA-6 (Bariloche, Río Negro). After that, in 2005, the National Atomic Energy Commission of Argentina (CNEA) built a neutron source for BNCT biomedical applications at the nuclear reactor RA-3 (Ezeiza, Buenos Aires). The first aim of the present PhD thesis was to adapt and dosimetrically characterize the new source to be able to perform BNCT radiobiological studies in the hamster cheek pouch oral cancer model. We evaluated the response of tumor, precancerous tissue and normal tissue, as compared to studies performed previously at other neutron sources. The knowledge contributed by these studies made it possible to undertake research projects devoted to optimize BNCT protocols, maximizing their therapeutic efficacy and minimizing their toxicity, and examining their potential for the treatment of other pathologies. Within this context, and based on the interest of the international community to explore the therapeutic potential of BNCT for liver metastasis, the next major aim of this PhD thesis was to perform a systematic evaluation of the therapeutic efficacy of BNCT in an experimental model of liver metastasis, considering the potential toxicity in liver. The in vivo experimental model in rats was adapted and characterized. Subsequently, a shielding device to perform the in vivo BNCT studies at the RA-3 facility was designed, constructed and characterized dosimetrically. Tumor response and potential liver toxicity were evaluated to contribute to the knowledge of BNCT radiobiology for the treatment of this pathology. The knowledge of BNCT radiobiology derived from experimental models would allow for the optimization of BNCT for different pathologies.

"Estudios relacionados con la síntesis de Novo del glucoceno en mamíferos" (2000). Lerner, Lorena R.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El glucógeno es un polisacárído de α-D-glucosas altamente ramificado que se encuentra en distintos tipos celulares, desde bacterias a células humanas. El glucógeno tiene por función actuar como reservorio de glucosas. Sus uniones glucosídicas son α(l—)4) α(l—->6). Su estructura altamente ramificada le confiere alta solubilidad. Esta característica le posibilita almacenar grandes cantidades de glucosa, fácilmente movilizable en caso de ser requerida por el organismo y, a la vez ejercer una presión osmótica muy pequeña en comparación con la que ejercería la misma cantidad de moléculas de glucosa en estado libre. El músculo esquelético y el hígado son los tejidos donde se encuentra acumulado la mayor parte del glucógeno. En el músculo esquelético, el glucógeno es un substrato energético sumamente importante para la actividad muscular. Las características bioquímicas y las propiedades enzimáticas de las enzimas involucradas en la síntesis de novo del glucógeno fueron analizadas en los dos tipos de fibras de músculo esquelético (de contracción rápida y de contracción lenta). La concentración de glucógeno fue significativamente más elevada en el músculo de fibras rápidas (EDL) que en el músculo de fibras lentas (Soleus), pero el Soleus a diferencia del EDL, contenía una gran cantidad de moléculas intermedias, aceptores endógenos de tamaño molecular intermedios, capaces de actuar como sustrato de la Glucógeno Sintetasa. Cabe destacar que las actividades enzimáticas de las proteínas involucradas en la síntesis de novo del glucógeno en músculos EDL fueron muy fuertemente estimuladas en presencia de Glc-6-P, mientras que la presencia de este azúcar no fue capaz de modificar la actividad enzimática de las proteínas de músculo Soleus. El ejercicio en el músculo esquelético es uno de los estímulos fisiológicos más importantes para la síntesis de glucógeno. Resultó de interés examinar el efecto de la estimulación muscular crónica en músculos de fibras rápidas. Mediante este estudio fue posible hallar que la actividad contráctil no sólo afecta la concentración de glucógeno muscular, sino que también altera su estructura. Además, el ejercicio intenso y continuo fue capaz de alterar las actividades relacionadas con la biogénesis del glucógeno muscular. Adicionalmente, luego de un estímulo prolongado o luego de un estímulo seguido de reposo fue posible encontrar el fenómeno de supercompensacíón de glucógeno. Este fenómeno se caracteriza por un gran incremento de la concentración de glucógeno muscular, más allá de los valores hallados para músculos en buenas condiciones nutricionales y en reposo. Junto con este fenómeno, el metabolismo de los músculos EDL sometidos a este tipo de tratamiento, presentó una acumulación de propia de músculo Soleus. Como resultado de los datos presentados en este trabajo, se propuso un modelo que explica los pasos involucrados en la síntesis de novo del glucógeno de músculo esquelético de contracción rápida. En el hígado, donde el glucógeno se acumula como reserva de glucosa para tejidos extrahepáticos, las enzimas del metabolismo del glucógeno poseen propiedades que le permite al hígado actuar como sensor de los niveles de glucosa plasmática, y de esta manera, almacenar o movilizar dicho polisacárido de acuerdo con las necesidades periféricas. Por los tanto, el metabolismo del glucógeno hepático es muy importante en la homeostasis de la glucosa. A partir de hígado de rata, la Glucogenina, la proteína iniciadora del glucógeno fue parcialmente purificada y bioquímicamente caracterizada. En líneas de células de hepatoma (HUH-7; HepG2) se estudió la regulación de la síntesis del glucógeno y de las enzimas asociadas a su metabolismo. Las enzimas de estas células mostraron muchas de las características bioquímicas propias de las enzimas de hígado de rata. Por tal motivo, estas líneas de células de hepatoma humano representaron un modelo apropiado para el estudio de la síntesis de novo del glucógeno hepático. En experimentos orientados a develar las bases moleculares de la regulación de las enzimas involucradas en la síntesis de novo del glucógeno hepático, fue posible observar que tanto el suero como la insulina y la glucosa fueron capaces de incrementar la síntesis del glucógeno. Esta estimulación fue producida por un incremento en la actividad transcripcional y en la actividad enzimática de las proteínas involucradas en esta ruta metabólica (Glucogenina, Glucógeno Sintetasa). Por el contrario, el glucagon, el HGF y el TGF-β produjeron un descenso del contenido del glucógeno acumulado mediante principalmente la inhibición de las actividades enzimáticas involucradas en su síntesis o alterando la relación síntesis/ degradación del polisacárido. La Enzima Ramificante no mostró ningún tipo de alteración a nivel transcripcional ni en su actividad enzimática frente a la presencia de estos factores o nutrientes.

Abstract:
Glycogen is a mayor storage form of glucose in many cell types. It is highly branches structure composed of thousands of glucose molecules attached to each other in an α (1—>4) glucosidíc linkage with branching points covnsisting of a (l—>6) linkages. Skeletal muscle and liver are the major sites of glycogen accumulation. Skeletal-muscle glycogen is an extremely important energy substrate for muscular activity. The biochemical and enzymatic properties of the enzymes involved in the de novo glycogen synthesis were analyzed in the two different skeletal muscle type fiber (fast and low twitch). It was found that glycogen concentration was higher in fast twitch muscle (EDL) that in slow twitch fiber muscle (Soleus), but Soleus muscle contained much more intermediate- acceptor molecules that could act as Glycogen Synthase substrate, than EDL muscle. On the other hand, the enzymes involved in the de novo glycogen synthesis in EDL muscle were strongly stimulated by the presence of Glc-6P, but Soleus muscle’s ones were not. One of the most important physiological stimuli of glycogen synthesis in skeletal muscle is glycogen exercise. It was interesting examine the effect of chronic muscle stimulation and repose on the enzymes involved in the de novo glycogen synthesis on fast twitch skeletal muscle. It was found that contractile activity not only affect glycogen concentration in EDL muscles, but also its structure. Additionally, glycogen-depleting exercise altered the enzymatic activities here studied. Moreover, glycogen supercompensation phenomenon was found after prolonged stimulation or stimulation followed by repose in EDL muscle. This phenomenon was characterized by a large increase in glycogen concentration, far above the levels found in well-fed, sedentary state muscle. Besides, intermediate-acceptor molecules were accumulated, as it was found in slow twitch muscle. As a result of the data presented here, a model for the de novo glycogen synthesis in fast twitch skeletal muscle was proposed. In liver, where glycogen is stored as a reserve of glucose for extrahepatíc tissues, the glycogen-metabolizing enzymes have properties that enable the liver to act as a sensor of blood glucose, and store or mobilized glycogen according to the peripheral needs. Therefore, liver glycogen metabolism is very important for glucose homeostasis. Glycogenin, the initiator glycogen protein, was partial purified and biochemical characterized from rat liver tissue. The regulation of the glycogen synthesis and associated enzymes were studied in human hepatoma cells lines (HUH-7; HepG2). These cells showed many biochemical properties similar to the rat liver tissue. For that reason, human hepatoma cells lines represented an appropriate model system for the study for the de novo glycogen synthesis. It was found that serum, ínsulin and glucose stimulated glycogen de novo synthesis. This stimulation was accompanied by a transcripcional and enzymatic activity increased of the enzymes involved in this metabolic pathway (Glycogenin and Glycogen Synthase). On the other hand, glucagon, HGF and TGF-β reduced glycogen synthesis mostly by enzymatic activity inhibition or by changing the ratio between synthesis and degradation of this polysaccharide. Branching Enzyme did not show any kind of enzymatic or transcripcional alteration due to the presence of this factors or nutrients.

"Estudios sobre el espectro de los nucleones excitados usando la expansión en 1/Nc de la cromodinámica cuántica" (2017-03-14). Willemyns, Cintia Teresita. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo se investigan los estados excitados de bariones no extraños en el marco de la expansión en la inversa del número de colores (Nc) de la Cromodinámica Cuántica (QCD). En particular, se busca obtener una mejor comprensión teórica de la fenomenología de los bariones excitados de manera independiente de modelos particulares y también conectar el análisis que se obtiene en términos de operadores efectivos en la expansión 1/Nc con una imagen dinámica que explique los valores de los coeficientes de la expansión. También se trabaja en la dirección de extender el análisis que usa la expansión en 1/Nc al caso en el que tenemos mezcla de configuraciones de spin-sabor. Para alcanzar estos objetivos se estudia el espectro de masas de los bariones excitados de paridad negativa realizando la conexión (matching) entre una extensa clase de modelos de quarks no relativistas, con interacciones efectivas entre quarks tanto dependientes como independientes del sabor, y la base de operadores de spin-sabor que se utiliza habitualmente en la expansión 1/Nc. Los resultados obtenidos son expresiones analíticas para los coeficientes libres que acompañan a cada uno de los operadores que aparecen a un cierto orden en potencias de 1/Nc. Estos coeficientes se expresan en función de integrales radiales que dependen de la forma y la magnitud relativa de las interacciones tensorial, spin-spin y spin-órbita del modelo y que se dejan sin especificar para mantener la generalidad de las expresiones. A partir de este matching se obtienen relaciones nuevas entre las masas bariónicas y los ángulos de mezcla. Estas relaciones son independientes de los parámetros y permiten discriminar entre distintas estructuras de spin-sabor de las interacciones quark-quark. Se analiza cómo esta parametrización general de las matrices de masa depende de los ángulos de mezcla y qué restricciones se imponen al considerar las suposiciones recién mencionadas sobre la interacción efectiva entre quarks. Los resultados hallados indican que, dentro de las incertezas experimentales, los valores para los ángulos de mezcla determinados por un reciente ajuste global a las masas y a los decaimientos no excluyen ninguna de las dos posibilidades más extremas para la dependencia o independencia del sabor de la interacción entre quarks originada por el intercambio de un mesón o gluón respectivamente. Por otro lado, se realiza un análisis del espectro de masas de los bariones excitados de paridad positiva utilizando la base de operadores de spin-sabor de la expansión 1/Nc. Se analiza por primera vez el espectro incluyendo la mezcla de configuraciones. En el límite de Nc grande los bariones excitados sin extrañeza se agrupan en representaciones irreducibles de la simetría contraída SU(4)c. Por medio del cálculo explícito del espectro de masas encontramos que esta estructura se conserva. El estudio de los autoestados demuestra que las mezclas son más sencillas de lo que se esperaría en un modelo de quarks y está de acuerdo con la simetría que se espera el límite del número de colores grande.

Abstract:
In this thesis we study the non-strange excited baryons in the 1/Nc expansion of Quantum Chromodynamics, with Nc the number of colors. In particular, we seek to obtain a better theoretical understanding of baryon phenomenology, less dependent on the particular details of models, and to connect the analysis obtained in terms of effective operators in the 1/Nc expansion with a dynamical picture that can help to understand the numerical values of the coeficients in the 1/Nc expansion. We also aim to extend the 1/Nc analysis by considering configuration mixing in the spin- flavor space. For this purpose, we study the mass spectrum of excited baryons with negative parity by matching a large class of non-relativistic quark models, with both flavor dependent and flavor independent effective quark-quark interactions, to the usual spin-flavor operator basis of the 1/Nc expansion. We obtain analytic expressions for the coeficients of each operator that appears in the expansion at a given order in 1/Nc. The coeficients of the 1/Nc operators can be expressed in terms of radial integrals that depend on the shape and relative strength of the spin-spin, spin-orbit and tensor interactions of the model, which are left unspecified. From this matching, we obtain several new parameter-free relations between the masses and the mixing angles that can discriminate between different spin-flavor structures of the effective quark-quark interaction. We analyze how a general parametrization of the mass matrix depends on the mixing angles and is constrained by the assumptions on the effective quark-quark interaction mentioned above. We find that, within the present experimental uncertainties, consistency with the best values of the mixing angles as determined by a recent global fit to masses and decays does not exclude either of the two most extreme possibilities of flavor dependent (independent) quark-quark interactions, as generated by meson (gluon) exchange interactions. We also perform an analysis of the mass spectrum of excited baryons with positive parity using the spin-flavor operator basis of the 1/Nc expansion. We analize the spectrum considering configuration mixing for the first time. In the large Nc limit, non-strange excited baryons are members of irreducible representations of a contracted SU(4)c symmetry. By calculating the mass spectrum explicitly, we find that this structure is still conserved when configuration mixing is taken into account. The analysis of the eigenstates shows that the mixings are simpler than what is expected from quark models and they satisfy the structure predicted in the large Nc limit.

"Estudios sobre el proceso de regulación reductiva de la Fructosa-1,6-Bisfostasa cloroplastídica de colza (Brassica napus)" (1998). Rodriguez Suarez, Roberto J.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En las plantas, la Fructosa-1,6-Bisfosfatasa de cloroplastos (CFBPase) cataliza la defosforilación irreversible de la fructosa-1,6-fosfato en el ciclo de Benson-Calvin. La CFBPase es una enzima clave en la regulación de la asimilación del C02 y su actividad específica es fuertemente regulada por luz, a traves de una cascada reductiva via Tiorredoxina. Los principales objetivos fueron: i) obtener una CFBPase recombinante útil como modelo de la contraparte cloroplastídica, ii) empleando mutagénesis sitio-dirigida, caracterizar el rol de las cist(e)inas en su estabilidad estructural, modulación y actividad catalítica, iii) analizar la multiplicidad de loci para la CFBPase en el alotetraploide B.napus y en sus parentales diploides B.campestris y B.oleracea. Construímos una cDNA library de expresión de hojas de colza y obtuvimos varios clones codificando la CFBPase. Luego expresamos y purificamos de E.coli la proteína recombinante, que mostró alta actividad enzimática. Su caracterización estructural y funcional estableció que es virtualmente idéntica a la contraparte cloroplastídica. Preparamos varias mutantes sitio-dirigidas por reemplazo de cisteínas diferencialmente afectadas en sus propiedades regulatorias, algunas de las cuales resultaron parcial o constitutivamente activadas. Determinamos que la Cys157 es crítica y que las Cysl74 y 179 también son participantes de la modulación reductiva. Proponemos un mecanismo que involucra tres residuos Cys, y donde se requiere la formación de diferentes disulfuros en las distintas subunidades del homotetrámero. La actividad catalítica no disminuyó por el reemplazo de ninguna de las siete Cys de la enzima. También encontramos que existen al menos dos loci por complemento haploide para la CFBPase en B.napus y en sus parentales B.oleracea y B.campestris. Ambos loci se expresan en hojas verdes y las enzimas recombinantes poseen actividades muy similares. En conjunto, estos análisis podrían tener un elevado impacto en los estudios orientados a manipular la velocidad de asimilación de C02 y la partición "fuente/sumidero” del fotosintato en una especie económicamente importante como la colza.

Abstract:
In plants, CFBPase catalyses the irreversible dephosphorylation of fructose 1,6-bisphosphate in the Benson-Calvin Cycle. This enzyme is a key regulator of C02 assimilation rate and its specific activity is strongly modulated by light through a reductive cascade via Thioredoxin. The main goals were to, i) obtain a recombinant CFBPase suitable as a model of the plastidic counterpart, ii) using site-directed mutagenesis, characterise the role that cyst(e)ines play in its structural stability, activation and catalytic processes, iii) analyse the multiplicity of loci for the CFBPase in the allotetraploid B.napus and its parental diploids B.campestris and B.oleracea. We constructed a cDNA expression library from rapeseed leaves and obtained several clones coding for the CFBPase. We expressed and purified from E.coli the recombinant protein who evinced high enzymatic activity. Its kinetic and structural characterisation showed that it was almost identical to the plastidic counterpart. We prepared several site-directed cysteine replacement mutants differently affected in their regulatory properties, some of which were partially or constitutively activated. We determined that Cys157 is critical, and Cysl74 and Cysl79 are also participants in the reductive modulation. A novel mechanism involving three Cys residues, where the formation of mixed disulphides in distinct subunits of the enzyme tetramer are likely required, is suggested. None of the seven Cys residues were essential for the catalytic activity of CFBPase. We also found the occurrence of at least two loci per haploid genome coding for the CFBPase in B.napus, and its parental species B.oleracea and B.campestris. Both loci are expressed in green leaves and the recombinant enzymes behave very similarly. Taken together, these analysis would have a large impact in the manipulation of C02 fixation rate and source-sink photosynthate partition in economically important species such as rapeseed.

"Estudios sobre el sistema de polisacáridos de la semilla de la leguminosa gleditsia triacanthos" (1977). Mazzini, María Nélida. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudios sobre el superparasitismo de larvas de la mosca del Mediterráneo Ceratitis capitata (Diptera: Tephritidae) por el parasitoide Diachasmimorpha longicaudata (Hymenoptera: Braconidae)" (2015-03-26). Devescovi, Francisco. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El endoparasitoide solitario larval Diachasmimorpha longicaudata ha sido ampliamente utilizado como agente de control de moscas de la fruta que generan grandes pérdidas económicas. Con el objetivo general de conocer los procesos que influyen en su desarrollo y ciclo de vida utilizando Ceratitis capitata como especie hospedadora, en esta tesis se evaluaron los efectos del fenómeno conocido como superparasitismo (i.e. oviposición en un hospedador previamente parasitado por la misma u otra hembra de la misma especie) sobre parámetros relacionados al éxito reproductivo y aspectos del comportamiento, genética y electrofisiología. El superparasitimo resultó ser un fenómeno común en la cría experimental del IGEAF (INTA, Castelar). En aquellos niveles de superparasitismo en los que fue posible un completo desarrollo del adulto, no se registraron consecuencias asociados al éxito reproductivo. La eliminación de las larvas competidoras durante el primer estadio larval permitiría que la mayor parte del desarrollo se produzca sin competencia, explicando la falta de efecto sobre el adulto. Estudios comportamentales mostraron que algunas hembras evitan superparasitar mientras que otras oviponen al azar, sugiriendo en éstas últimas, una incapaciadad para discriminar larvas parasitadas y no parasitadas. Al evaluar un posible componente genético en hembras con y sin esa habilidad no se encontró una correlación con sus respectivas hijas (análisis de correlación e isolineas). Estimulaciones en el extremo del ovipositor mediante técnicas de electrofisiología no evidenciaron una habilidad de discriminación entre larvas parasitadas y no parasitadas por parte del adulto. En conjunto, los resultados de esta tesis aportan nueva información sobre la biología básica de D. longicaudata, y contribuyen a futuros estudios dirigidos a una mejora en el proceso de cría artificial de este agente de control biológico de moscas de los frutos.

Abstract:
The solitary larval endoparasitoid Diachasmimorpha longicaudata has been widely used as a biological control agent against fruit flies of economic importance. With the aim of assessing processes affecting its development and life cycle when artificially reared on Ceratitis capitata as host species, in the current thesis the effects of the phenomenon known as superparasitism (i.e. oviposition in a previously parasitized host) on fitness related parameters and several aspects regarding behavior, genetics and electrophysiology were studied. Superparasitism was a common phenomenon in the experimental rearing located at IGEAF (INTA, Castelar). For those levels in which a full development was possible, no negative consequences on the adult fitness were recorded. Elimination of supernumerary larvae during the first instar probably allowed to the surviving larva an almost normal development without the effects of a prolonged competition. Behavioral studies showed that some individually tested females avoid superarasitism, while other females laid their eggs randomly, suggesting a lack of host discrimination ability for the latter. When the possible genetic component of females´ oviposition behavior regarding host discrimination and superparasitism was studied, neither a correlation with their respective daughters nor differences between isofemales strains were observed. Stimulations on the ovipositor apex using electrophysiological techniques did not provide a sensory basis for discrimination among parasitized and unparasitized larvae. In all, the results of this thesis contribute with new information about the basic biology of D. longicaudata for future studies aimed to improve artificial rearing processes of this important biological control agent.

"Estudios sobre esterilidad en maíces regionales de la Argentina" (1938). Gini, Emma María. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudios sobre la fosforilación de la proteína de movimiento TGBp1 del Potato Virus X" (2011). Módena, Natalia A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El Potato virus X (PVX) es un virus de plantas, miembro tipo del género Potexvirus. Su genoma está compuesto por una única molécula de ARN que codifica una replicasa viral, tres proteínas de movimiento (MPs: TGBp1, TGBp2 y TGBp3) y la proteína de la cápside (CP). La proteína TGBp1 es una proteína multifuncional requerida para el movimiento viral de célula a célula en la planta hospedera. Diferentes líneas de investigación sugieren que la fosforilación de las proteínas virales puede regular la replicación y el movimiento viral. En este estudio, se demostró que la proteína TGBp1 es fosforilada por al menos una proteína quinasa, presente en extractos de plantas de Nicotiana tabacum infectadas con PVX y no infectadas, que posee características distintivas de la caseína quinasa 2 (CK2). El análisis en geles bidimensionales de extractos de plantas infectadas permitió determinar que la proteína TGBp1 producida durante la infección viral presenta múltiples isoformas de diferentes puntos isoeléctricos; el tratamiento con fosfatasas de los extractos de plantas infectadas indicó la presencia de isoformas fosforiladas. A través de la combinación de estudios de determinación de aminoácidos fosforilados por espectrometría de masa, comparación de secuencias aminoacídicas de TGBp1 de distintos virus y evaluación de la fosforilación in vitro de mutantes puntuales y de deleción de la proteína TGBp1, se identificaron tres probables sitios de fosforilación por la quinasa CK2 de N. tabacum: S-165, T-193, T-214. Se observó que la simulación de la fosforilación en los residuos T-193 y T-214 regula negativamente la dispersión viral y la capacidad de la proteína TGBp1 de hidrolizar ATP. Los resultados sugieren firmemente que una proteína quinasa de la familia de CK2 estaría involucrada en la fosforilación de TGBp1 durante el curso de la infección viral de N. tabacum. Además, se discute el modo en que la fosforilación podría regular las actividades de la proteína TGBp1 durante la infección viral.

Abstract:
Potato virus X (PVX) is the type member of the Potexvirus genus. Its genome is based on a single RNA molecule encoding one viral replicase protein, three movement proteins (MPs: TGBp1, TGBp2 and TGBp3) and the capside protein (CP). In particular, TGBp1 is a multifunctional protein required for virus cell-to-cell movement inside the host plant. Recent work on other plant viruses has indicated that viral proteins phosphorylation by host kinases can regulate processes such us viral replication and mobilization. The results obtained during this Thesis work show that TGBp1 is phosphorylated by at least one kinase protein with properties characteristic of Caseinkinase 2 (CK2). This kinase activity is present in crude extracts prepared from both non-infected and PVX infected Nicotiana tabacum plants. Bi-dimensional gel experiments with crude extracts from PVX infected plants showed that TGBp1 expressed during infection presented several isoforms with different Isoelectrical points. Some of these isoforms were sensitive to phosphatase treatment, suggesting that TGBp1 is phosphorylated in multiple residues. Several experimental approaches (mass spectrometer identification of phosphorylated aminoacids, sequence comparison among TGBp1 homologues from several viruses, and in vitro phosphorylation experiments with mutated versions of TGBp1), allowed the identification of three potential phosphorylation sites by recombinant alpha subunit N. tabacum CK2: S-165, T-193 and T-214. Mimicking phosphorylation on residues T-193 and T-214 had a negative impact on viral spreading and TGBp1 ATP hydrolysis activity. The results presented in this Thesis strongly suggest that a N. tabacum kinase protein belonging to CK2 family is involved in the phosphorylation of TGBp1 during PVX infection. How the phosphorylation regulates TGBp1 activities is discussed.

"Estudios sobre la porfobiblinógeno-deaminasa de hígado y riñón de rata" (1998). Noriega, Guillermo Osvaldo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La porfobilinógeno-deaminasa (PBG-D) cataliza la condensación de cuatro moléculas de porfobilinógeno (PBG) para formar el hidroximetilbilano, el cual en presencia de la enzima isomerasa, origina el uroporfirinógeno m, precursor fisiológico en la síntesis de hemos, clorofilas y corrinas. Dado que bajo ciertas condiciones, la PBG-D podría actuar como segundo sitio de regulación, se resolvió estudiar la PBG-D de hígado y de riñón de rata, con un enfoque cinético. Se purificaron ambas enzimas empleando las siguientes técnicas: fraccionamiento con sulfato de amonio, filtración molecular (Sephadex G-lOO), intercambio aniónico (Q-Sepharosa) y cromatografla de afinidad (Blue Sepharosa). La purificación a homogeneidad de la enzima renal se logró mediante una electroforesis preparativa, que mostró una sola banda proteica con actividad, confirmada a través de Western blots. La actividad máxima se detectó en incubaciones a 65°C, a pH’s 7,8 y 8,2 con una energía de activación calculada de 16,8 kcal/mol y 19,3 kcal/mol y se detemiinaron las masas moleculares relativas: 41,7 ± 4,2 kDa y 39,8 ± 4,0 kDa para las enzimas hepática y renal respectivamente. La PBG-D de hígado de rata presenta un comportamiento michaeliano, con valores aparentes de Km y Vm de 12 ± 1,4 μM y 17,0 ± l,4 pmoles/mg.min. respectivamente y un n de Hill de 1, determinados a pH 8,2 y a 37°C. Estudios cinéticos revelaron que los iones Mg2+ (0-80 mM) y fosfato (0-20 mM) actúan como inhibidores incompetitivos, mientras que el amonio (0-50 mM) y la sulfarnerazina (0-2,0 mM) son inhidores no competitivos. En cambio, el ácido fólico (0-2,0 mM) actúa como un activador no esencial de la reacción. Para la enzima renal, los estudios cinéticos mostraron un comportamiento complejo, con una primera zona de saturación comprendida entre 5,0 y 7,0 μM y una segunda a partir de 66-70 μM. Los gráficos de dobles recíprocas son no lineales y exhiben un carácter bimodal que se traduce en dos constantes aparentes de afinidad, Km1: 0,8 ± 0,1 μM y Km2: 3,5 ± 0,4 μM. Comparando estas constantes cinéticas con las correspondientes para médula (Km: 0,8 ± 0,1 μM y Km2: 3,3 ± 0,4 μM) y corteza renal (Km: 0,9 ± 0,1 μM y Km2: 5,1 ± 0,6 μM), se sugiere que no existirian dos poblaciones proteicas distintas confinadas en diferentes estructuras. Además, la banda única obtenida (pI: 4,9) mediante la técnica de isoelectroenfoque, permitió descartar la presencia de isofonnas en riñón. Estudios cinéticos revelaron que el ion sodio (0-2,0 M) produjo un desplazamiento del punto de inflexión hasta obtener gráficos de inversas con una sola pendiente. A altas concentraciones de sustrato (7-66 uM) los iones Mg2+ (0-50 mM), fosfato (0-40 mM) y amonio (0-300 mM) actúan como inhibidores no competitivos. A bajas concentraciones de sustrato (0,8-7,0 pM) el Mg2+ es un inhibidor incompetitivo, el fosfato presenta un efecto dual y el amonio desplaza el punto de inflexión conforme aumenta su concentración. Estudios de inhibición realizados con PCMB, NEMI y DTNB demostraron la presencia de aminoácidos cisteína en el sitio activo, lo cual fue confirmado a través de estudios de grupos ionizables en la enzima y en los complejos enzima-sustrato. Se propone para la enzima renal, la existencia de por lo menos dos estados confonnacionales diferentes inducidos en el mismo sitio catalítico, ya sea por la unión del sustrato PBG o la no liberación del producto amonio o de ambos. La presencia de tales cambios confonnacionales permitiría la continuidad en la unión de las otras moléculas de PBG al sitio S, en presencia de intermediarios ES1, ES2 o ES3 en el sitio C, lo que originaria una diferente afinidad y actividad catalítr'ca final. Estos reordenamientos podrian producir finalmente cambios en los pasos limitantes de la reacción, lo cual sucedería a diferentes concentraciones de sustrato y daría lugar entonces a distintas constantes cinéticas.

"Estudios sobre la presencia y expresión de cadherina epitelial en gametas humanas y murinas. Evidencias sobre su participación en el proceso de la fecundación" (2011). Veiga, María Florencia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La fecundación involucra eventos de adhesión celular ovocitoespermatozoide dependientes de Ca2+. Cadherina epitelial (cadE) es una glicoproteína de membrana de 120 KDa, con 5 dominios extracelulares, 1 transmembrana y 1 citoplasmático. CadE se asocia al citoesqueleto de actina a través de moléculas adaptadoras como β-catenina y está involucrada en la adhesión celular dependiente de Ca2+. CadE participa en el desarrollo embrionario, la organogénesis y mantenimiento de tejidos y la tumorigénesis. El objetivo de este proyecto fue evaluar la expresión de cadE en tejidos reproductivos, su presencia y localización en ovocitos y espermatozoides y su participación en la fecundación. Se emplearon 2 modelos: humano y murino. Los estudios describen 1) la expresión del ARNm de cadE en testículo y epidídimo y 2) la presencia de la proteína en extractos de epidídimo y su localización en las células epiteliales 3) la presencia de cadE en estructuras membranosas del plasma seminal humano y del fluido epididimario murino 4) la presencia, formas proteicas y localización de cadE, β-catenina y actina en espermatozoides murinos epididimarios y humanos eyaculados 5) la localización de cadE en espermatozoides capacitados y reaccionados 6) la localización de cadE en ovocitos y formas proteicas en ovocitos murinos 7) la capacidad de anticuerpos bloqueantes de la función adhesiva de cadE de inhibir la interacción espermatozoide-ovocito 8) la evaluación de la presencia de cadE en pacientes en tratamiento por infertilidad e identificación de alteraciones en algunos casos. Este es el primer estudio que aborda de manera exhaustiva la detección de cadE en las gametas humanas y murinas y muestra evidencias de su rol en la fecundación.

Abstract:
Fertilization involves Ca2+ dependent adhesion events between the oocyte and the spermatozoon. Epithelial cadherin (Ecad) is a 120 KDa glycoprotein organized in five extracellular domains, one transmembrane and one cytoplasmic domain. Ecad is linked to the actin cytoskeleton by adaptor molecules, such as β- catenin, and is involved in Ca2+-dependent cell-cell adhesion. Among several functions, Ecad has been shown to participate in embryonic development, organogenesis and maintenance of tissues as well as in tumor progression and metastasis. The aims of this project were to evaluate Ecad expression in reproductive tissues, its presence and localization in oocytes and spermatozoa and its participation in fertilization. Human and murine tissues and gametes were used throughout the study. The studies have shown: 1) expression of Ecad mRNA in the testis and the epididymis 2) presence of the 120 KDa Ecad form in the epididymis mainly localized in the epithelial cells borders 3) immunodetection of Ecad in membranous vesicles isolated from human seminal plasma and murine epididymal fluid 4) presence and localization of Ecad, β-catenin and actin in murine epididymal spermatozoa and in ejaculated human sperm cells 5) a distinctive localization of Ecad in capacitated and acrosome-reacted spermatozoa 6) immunoreactivity towards Ecad in human oocytes and its protein forms in murine oocytes 7) the ability of specific antibodies towards Ecad to inhibit spermoocyte interaction 8) the assessment of Ecad in patients under infertility treatment and the identification of changes in some of them. This is the first report that thoroughly characterizes the expression of Ecad in tissues of the male reproductive tract, as well as in gametes from mice and humans, and shows evidence of its participation in fertilization.

"Estudios sobre la terapia fotodinámica a partir de ALA en células leucémicas sensibles y resistentes a drogas de quimioterapia" (2012). Diez, Berenice Andrea. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Terapia Fotodinámica (TFD) es utilizada para el tratamiento del cáncer y otras patologías no malignas. Se basa en la administración un compuesto fotosensibilizante (FS) que se acumula selectivamente en el tejido maligno y al recibir fotones interactúa con el O2 produciendo especies reactivas del oxígeno (ROS), que son altamente tóxicas y desencadenan la muerte celular. La administración exógena del ácido 5-aminolevúlico (ALA), precursor biológico de la síntesis de los tetrapirroles, induce la acumulación de protoporfirina IX (PpIX), un FS muy eficiente. La quimioterapia administrada en altas dosis, seguida del transplante autólogo de médula ósea es una de las modalidades terapéuticas más utilizadas para el tratamiento de la leucemia. Sin embargo, una pequeña proporción de células leucémicas indiferenciadas que se encuentran en un estado quiescente, pueden resultar resistentes a la quimioterapia y ser reinsertadas en el paciente luego del transplante. Por este motivo actualmente se estudian métodos de purgado potencialmente efectivos para eliminar a las células malignas remanentes. Además, el uso de quimioterapia presenta otras limitaciones como el desarrollo de fenotipos celulares resistentes a drogas y efectos secundarios no deseados. En esta tesis hemos estudiado los efectos de la TFD basada en ALA (TFD-ALA) en tres líneas celulares leucémicas murinas, LBR-, sensible a drogas de quimioterapia, LBR-D160 y LBR-V160, resistentes a doxorubicina (DOX) y vincristina (DOX), respectivamente. Para ello evaluamos la síntesis y acumulación de PpIX sintetizada a partir de ALA, y observamos que en las tres líneas estudiadas esta síntesis aumentó en función de la concentración y del tiempo de incubación con ALA. Estudios de microscopía confocal indicaron que las mitocondrias son el principal sitio de localización de PpIX. Mediante estudios de viabilidad celular demostramos la eficacia de la TFD-ALA en las tres líneas celulares, indicando la falta de resistencia cruzada en el caso de las líneas resistentes a drogas de quimioterapia. Por otra parte estudiamos los mecanismos involucrados en la muerte celular producida por la TFD, donde observamos un aumento en los parámetros de estrés oxidativo como la despolarización de la membrana mitocondrial, la producción de oxígeno singulete y de anión superóxido, indicando la importancia de las mitocondrias en los efectos de la TFD. El análisis de parámetros tanto morfológicos como bioquímicos demostró la predominancia de apoptosis como principal mecanismo de muerte, en particular a través de la vía intrínseca, lo que concuerda con el rol activo de las mitocondrias previamente mencionado. Evaluamos además los efectos al combinar la TFD-ALA con los agentes antineoplásicos DOX y VCR, en un modelo in vitro in vivo, utilizando la línea LBR-. En ambos casos observamos un beneficio significativo al utilizar las terapias combinadas, evidenciando la ventaja de esta modalidad frente a las terapias utilizadas en forma independiente. Los resultados obtenidos en esta tesis demuestran el beneficio potencial de utilizar la TFD-ALA como método de purgado de la médula ósea de pacientes con leucemia, especialmente para eliminar fenotipos resistentes a drogas. Además, los estudios utilizando las terapias combinadas indican la posibilidad de disminuir las dosis de drogas de quimioterapia, minimizando así las limitaciones ocasionadas por este tratamiento.

Abstract:
Photodynamic therapy (PDT) is a cancer treatment modality which involves the administration of a given photosensitizing agent (PS), its preferential accumulation in malignant tissue and the subsequent activation by light of appropriate wavelength. Interaction between the excited PS and molecular oxygen produces singlet oxygen as well as other reactive oxygen species (ROS) selectively destroying the target cells. Exogenous administration of 5-aminolevulinic acid (ALA) induces the accumulation of protoporphyrin IX (PpIX), a highly photosensitive compound. Autologous bone marrow transplantation (ABMT) after high dose chemotherapy is a widely accepted therapeutic modality for the management of hematologic malignancies. The major disadvantage of this approach is the possible contamination of the autograft with remaining leukemic cells which leads to recurrence of the disease. Besides, the use of chemotherapy agents promotes the development of drug resistant phenotypes and produces serious side adverse effects in many patients. In this work we studied the effects of ALA-based PDT (ALA-PDT) in three leukemic murine cell lines: LBR-, drug sensitive, LBR-D160 resistant to doxorubicin (DOX) and LBR-V160, resistant to vincristine (VCR). The synthesis and accumulation of PpIX after ALA administration was evaluated, which increased with the concentration and incubation time with ALA. Confocal microscopy studies revealed that PpIX was mainly localized in mitochondria. Cell viability studies demonstrated that ALA-PDT was effective in the three cell lines, indicating the lack of cross-resistance in LBR-D160 and LBR-V160 cells. The mechanisms involved in the death caused by ALA-PDT were also studied. It was observed an increase in oxidative stress parameters, such as mitochondrial membrane depolarization, singlet oxygen and superoxide anion production. Morphological and biochemical studies showed that apoptosis, especially involving intrinsic pathway, was the main death mechanism induced by ALA-PDT. We also evaluated on the LBR- cell line the effects of ALA-PDT combined with DOX or VCR using an in vitro-in vivo model, and a significant benefit for combination therapies, with respect to each one independently, was found. The results obtained in this work show that ALA-PDT could be useful as a purging method during ABMT in leukemia patients, especially to eliminate drug resistant cells. Besides, the use of combined therapies allows the possibility of reducing the doses of chemotherapeutic agents, thus minimizing the limitations of this therapy.

"Estudios sobre la transición vítrea y la estabilidad de biomateriales de baja humedad" (2000). Schebor, Carolina C.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La transición vitrea que se manifiesta macroscópicamente por cambios fisicos(ablandamiento del material) ocurre a una temperatura (Tg) que representa un punto critico para la movilidad de los componentes amorfos a nivel molecular. El objetivo de este trabajo de Tesis fue estudiar el efecto de la transición vitrea sobre la estabilidad enzimática y quimica en alimentos y biomateriales a muybajas humedades. El análisis se llevó a cabo estudiando reacciones susceptibles de estar afectadas por efectos de movilidad/difusión de los reactivos: resistencia térmica enzimática (enzima invertasa (β-fructofuranosidasa)) y pardeamiento no enzimático. Las conclusiones fueron las siguientes: 1. La temperatura de transición vitrea no puede ser utilizada como un umbral absoluto para predecir la inactivación térmica de la enzima invertasa, ni para definir la estabilidad con respecto a las reacciones de pardeamiento no enzimático en sistemas modelo y alimentos deshidratados. 2. Las matriz de trehalosa es superior a las matrices poliméricas en la protección de la enzima invertasa. 3. A altas temperaturas, la temperatura de almacenamiento per se es un factor más importante que T-Tg con respecto a la estabilización de la enzima invertasa y al desarrollo de pardeamiento no enzimático. 4. La estabilidad química de los azúcares frente a la hidrólisis, aun en condiciones de baja humedad, es un factor importante a tener en cuenta en la selección de matrices protectoras de biomateriales. 5. En sistemas de baja humedad los resultados obtenidos sugieren que el azúcar rafinosa podria considerarse como una alternativa de la trehalosa como matriz protectora de biomateriales.

Abstract:
The glass transition, which is manifested macroscopically by physical changes (softening of the material), occurs at a critical temperature (Tg) which promotes an increase in the mobility of amorphous components at a molecular level. The objective of present work was to study the effect of glass transition on enzymatic and chemical stability in low moisture biomaterials and food systems. These aspects were analyzed by studying reactions susceptible to be affected by mobility/diffusion effects of the involved reactants: thermal resistance of enzymes (the enzyme employed was invertase (β-fructofuranosidase)) and non-enzymatic browning. The conclusions were: 1. Glass transition temperature cannot be used as a threshold parameter for predicting invertase inactivation or non-enzymatic browning reactions in food and model dehydrated systems. 2. Trehalose was better than polymeric matrices to protect invertase. 3. At high storage temperatures, it is the temperature per se, rather than the value of T-Tg that determines the possibility of a significant extent of invertase inactivation or browning development. 4. When selecting sugars to protect labile biomaterials, the possibility of hydrolysis, even at low moisture conditions, has to be taken into account. 5. The results obtained suggested that in low moisture systems, raffinose could be considered as an alternative to trehalose to protect biomaterials.

"Estudios sobre respuestas inmunológicas inducidas por antígenos de la fracción flagelar de Trypanosoma cruzi" (1995). Hansen, Diana Silvia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Estudios ultraestructurales en el género Oedogonium Link (Oedogoniales, Chlorophyta) y su posición filogenética dentro de las algas verdes." (2004). Alberghina, Josefina Silvia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las Oedogoniales constituyen un orden de algas verdes con citocinesis particular, zooides estefanocontos, y forma especializada de reproducción sexual. Los tres géneros incluídos en el orden se diferencian por el tipo de hábito, siendo Oedogonium filamentoso simple. Se seleccionaron 11 especies de Oedogonium provenientes de distintos cuerpos de agua dulce argentinos, se analizó a nivel ultraestructural la citología de los oogonios con distintos tipos de apertura y se secuenció el gen 18S rDNA. Dado que uno de los caracteres diacríticos más importantes para dicho género es el tipo de apertura de los oogonios, se relacionó su estudio ultraestructural con el filogenético molecular y morfológico. Los estudios moleculares, que incluyeron 37 especies de Chlorophyta permitieron demostrar la monofilia del Orden Oedogoniales y que ningún carácter usado tradicionalmente en la determinación específica del género puede ser conciderado como sinapomórfico. Estos análisis también indicaron que el aparato flagelar estefanoconto de los zooides podría haber derivado tanto de una configuración CCW como una DO. Sin embargo, estudios ultraestructurales de la gameogenesis y zoosporogénesis en Oedogonium parecerían indicar que el origen correspondería al tipo DO. Se porpone además elevar el orden Oedogoniales al nicel de Clase Oedogoniophyceae.

Abstract:
Oedogoniales make up a green algae Order with an unusual form of cytokinesis, a ring of flagella on zooids, and complex sexual reproduction. The three genera included in this Order differ from each other in the type of habit. Oedogonium sp. is unbranched filamentous. Eleven Oedogonium species collected from argentinian freshwater bodies were selected. The cytology of their oogonia with different types of aperture was analyzed with ultrastructural techniques, and their 18S rDNA genes were sequenced. As one of the diacritic characters for this Genus is the type og oogonial aperture, the aim of this research is to integrate the ultrastructural study with the molecular analysis. The phylogenetic study including 37 species of Chlorophyta demonstrated the monophyly of Oedogoniales, and that traditional morphological characters used in the specific determination of the Genus can not be considered as synapomorphic. It is proposed that the stephanokont motile cells in this order could be originated either from CCW configuration or DO, although previous ultrastructural studies of gametogenesis and zoosporogenesis in Oedogonium seem to indicate that the origin correspond to the DO type. It is also proposed that the Oedogoniales group raised to the status of Class Oedogoniophyceae.

"Evaluación biológica de antígenos definidos de Trypanosoma Cruzi" (1995). Leguizamón, María Susana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Evaluación de Pseudapanteles dignus (Hymenoptera-Braconidae) como posible agente de control biológico de Tuta Absoluta (Lepidoptera-Gelechidae), plaga clave del cultivo de tomate en los alrededores del Gran Buenos Aires" (2013). Folcia, Ana María. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La polilla del tomate (Tuta absoluta) es considerada plaga clave del cultivo de tomate producido bajo cubierta en los alrededores de Buenos Aires debido a los daños que causa, en hojas, brotes y frutos, y a requerir permanentes medidas de control. Tanto el corto ciclo de vida que ocurre en los cultivos protegidos como la elevada cantidad de medidas de control requeridas han generado problemas de resistencia a insecticidas. Una de las alternativas al control químico es el control biológico. Hacia 1995 fue detectada la presencia natural de un parasitoide de larvas de T. absoluta, Pseudapanteles dignus (Hymenoptera, Braconidae). El objetivo general de esta tesis fue determinar la eficacia de Ps. dignus como agente de control biológico aumentativo de Tuta absoluta y evaluar su compatibilidad con la estrategia de control químico de la plaga. Para ello se determinó su potencialidad mediante la evaluación de sus atributos biológicos en condiciones de laboratorio (supervivencia y fecundidad) y comparación con los de la plaga. Se estimó su tasa de ataque en relación con la densidad de la presa (respuesta funcional). Se evaluó su eficacia en el control por medio de liberaciones controladas en laboratorio e invernáculos experimentales. Además, se analizó la compatibilidad de su empleo con estrategias de control químico aceptadas en manejo convencional (insecticidas) y orgánico (extractos vegetales) de plagas. Estos estudios resultan fundamentales para la implementación de una estrategia de manejo integrado de T. absoluta en cultivos de tomate en ambientes protegidos, que incluyan el empleo de liberaciones inoculativas de Ps. dignus en un contexto productivo.

Abstract:
The tomato moth (Tuta absoluta) is considered a key pest of tomato crops produced under cover near Buenos Aires due to the damage it causes, in leaves, shoots and fruits, and require permanent control measures. Both the short life cycle that occurs in protected crops and the high number of required control measures have led to problems of insecticide resistance. One alternative to chemical control is biological control. By 1995 it was detected naturally occurring larval parasitoid T. absoluta, Pseudapanteles dignus (Hymenoptera, Braconidae). The aim of this thesis was to evaluate the effectiveness of Ps. dignus as augmentative biological control agent of Tuta absoluta and to assess their compatibility with the chemical control strategy of the pest. This was determined by evaluating potential biological attributes in laboratory conditions (survival and fecundity) and compared with those of the pest. Estimated its attack rate relative to the density of prey (functional response). Evaluated its efficacy in control through releases controlled in laboratory and experimental greenhouses. Further analyzed the compatibility of use with chemical control strategies accepted in conventional (insecticides) and organic (plant extracts) pest management. These studies are essential for the implementation of an integrated pest management strategy of T. absoluta in tomato crop under protected environment, with the use of Ps dignus inoculative releases in a productive context.

"Evaluación de agentes químicos con potencial genotóxico en células meristemáticas de Allium cepa" (2011). Andrioli, Nancy Beatriz. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La toxicidad y genotoxicidad del Metronidazol (MTZ) y Tiabendazol (TBZ) fueron estudiados en raíces de Allium cepa. Ambos compuestos, inhibieron el crecimiento de las raíces en el rango de concentraciones 10-500 μg/ml. La exposición a 250μg/ml MTZ, indujo peroxidación lipídica y aumento significativo en los niveles de glutatión reducido en la zona de elongación. En la zona meristemática no se observó peroxidación lipídica y la respuesta antioxidante enzimática como actividad catalasa y superóxido dismutasa y no enzimática como contenido de ascorbato y dehidroascorbato, se incrementaron significativamente. Las células expuestas a 10-250 μg/ml de MTZ no mostraron efectos genotóxicos sugiriendo que las defensas antioxidantes contrarrestaron los radicales libres generados por exposición a MTZ. El TBZ indujo efectos genotóxicos para rango de concentraciones 50-250 μg/ml como inhibición del índice mitótico, alteración de índices de fase e inducción de biomarcadores citogenéticos de genotoxicidad. La inmunodetección de moléculas de tubulina , demostró el TBZ induce daño en las estructuras microtubulares promoviendo anormalidades en la segregación cromosómica y en la citocinesis. Los resultados obtenidos indicaron que la acción del MTZ estaría vinculada con la generación de radicales libres, mientras que el TBZ actuaría interfiriendo con la dinámica de formación de las estructuras microtubulares.

Abstract:
The toxicity and genotoxicity of metronidazole (MTZ) and Thiabendazole (TBZ) were studied in of Allium cepa roots. Both compounds inhibited the growth of roots for the concentration range 10-500 mg / μl. 250μg/ml MTZ exposure, induced lipid peroxidation and significantly increased of reduced glutathione levels in the elongation zone. In the meristem zone was not observed lipid peroxidation and enzymatic antioxidant response as catalase and superoxide dismutase activity and not enzymatic response as content of ascorbate and dehydroascorbate, increased significantly. Cells exposed to 10-250 μg / ml of MTZ showed no genotoxic effects, suggesting that antioxidant defenses offset the free radicals generated by exposure to MTZ. The genotoxic effects induced TBZ concentration range 50-250 μg / ml and inhibition of mitotic index, phase index alteration and induction of cytogenetic biomarkers of genotoxicity. The Immunodetection of tubulin molecules, demonstrated the TBZ induces damage to the microtubule structures and promote abnormalities in chromosome segregation and cytokinesis. The results indicated that the action of MTZ would be linked to the generation of free radicals, while TBZ act by interfering with the dynamics of formation of microtubule structures.

"Evaluación de alternativas para el tratamiento de lixiviados en el relleno sanitario Antanas del Municipio de San Juan de Pasto en Colombia" (2013). Arango Romero, Paola Andrea. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El agua es uno de los recursos naturales más íntimamente unido a la vida, se encuentra de forma abundante en la Tierra, por ello este recurso se ha convertido en tema de discusión a nivel mundial, por la importancia y la necesidad de abogar la gestión sostenible sobre todo de los recursos de agua dulce. En los países en desarrollo, el consumo de agua y la generación de residuos sólidos está en aumento; el tema de la gestión de residuos resulta un problema complejo en el cual se integran conceptos ambientales, económicos, institucionales y sociales. Por todo esto la legislación ambiental en Colombia ha cambiado su normativa para regular el vertimiento a los cuerpos de aguas continentales superficiales, buscando disminuir la contaminación. Las empresas encargadas de el manejo y disposición final de los residuos sólidos urbanos cada día deben implementar metodologías más eficientes para la remoción de los parámetros presentes en los lixiviados. Por tal motivo, la presente investigación tiene como objetivo principal evaluar el actual proceso de tratamiento de lixiviados del relleno sanitario Antanas, con respecto al cumplimiento de la normativa ambiental decreto aplicado hasta el momento y la nueva reglamentación; 1594/84 y el 3930/10 respectivamente, determinar el grado de eficiencia de los procesos de remoción, evaluar tecnologías complementarias alternativas para asegurar el cumplimiento de la nueva normativa ambiental y, desarrollar una evaluación multicriterial que posibilita la participación de distintos actores involucrados en el tema de los residuos sólidos, a través de la elección de criterios que compone las dimensiones técnico-económica, social, ambiental y político institucional, en un marco de calificación directa de las distintas alternativas de tratamiento. Este trabajo se realizó en base a los datos suministrados por la empresa Metropolitana de Aseo de Pasto EMAS S.A. E.S.P para analizar el funcionamiento y eficiencia de la planta de tratamiento de lixiviados, la revisión de material bibliográfico, la comparación de los resultados obtenidos en las pruebas piloto utilizando las tecnologías alternativas de membranas y los humedales como tecnología complementaria al tren de tratamiento de lixiviados, y la aplicación de la metodología de análisis multicriterio. Al analizar los resultados obtenidos durante los monitoreos se logró establecer que el actual tratamiento de lixiviados resulta eficiente en el cumplimiento de la anterior normativa, decreto 1594 de 1984, con los parámetros DQO, DBO5 y sulfatos, donde se obtuvieron remociones al final del monitoreo (marzo del 2012) del 99 y 100% para DQO y DBO5 respectivamente. Los parámetros más críticos resultaron grasas y aceites y sólidos totales con remociones relativamente bajas que no alcanzan a cumplir con la normativa ambiental. Con respecto a DQO, nitrógeno y fósforo se requieren ajustes que permitan mejorar la eficiencia para alcanzar el límite máximo permitido. En el caso de los sólidos suspendidos totales el rendimiento del proceso actual no es eficiente, se esperaría que la mayor remoción de SST ocurra en el reactor de lodos activados y en la planta físico-química, por lo que se requiere implementar acciones de mejora en estos procesos. Un análisis más exhaustivo sobre estas dos etapas del TTL será necesario realizar con la finalidad de identificar el funcionamiento del reactor de lodos, la eficiencia de los coagulantes/floculantes utilizados, la capacidad del sistema en relación a los tiempos de retención y los caudales de efluente utilizados en estas etapas parciales del TTL. También habría que considerar el ingreso del lixiviado del Vaso I en la planta físico-química que podría estar alterando la capacidad de la planta. Del análisis comparativo de las eficiencias de los procesos evaluados para remover los principales componentes de los lixiviados en el marco de las normativas ambientales, tanto en el escenario anterior (decreto 1594 del 84) como con el actual (decreto 3930 de 2010), se observa que las tecnologías de membranas acopladas resultan eficientes y cumplen con la actual normativa (que es más rigurosa que la anterior) aunque no resuelven totalmente el tratamiento ya que generan concentrados con alta carga de materia orgánica que requiere un tratamiento posterior. La tecnología de membranas VSEP por sí misma no mejora significativamente la eficiencia de remoción que tiene el proceso convencional TTL. La tecnología complementaria (TTL+ Humedal) resulta beneficiosa para la remoción de los contaminantes aunque requiere algunos ajustes para alcanzar un mayor nivel de remoción de los SST. Como se observa del análisis de los resultados de la evaluación multicriterial, la tecnología mejor ponderada es el sistema de membranas que claramente en los resultados de las pruebas piloto mostró alta eficiencia en la remoción de los contaminantes, aunque no queda reflejado el aspecto relacionado a los altos costos económicos que su implementación y mantenimiento implica. De igual forma se observa una mayor aceptación a la implementación de sistemas de evaporación, aunque también aspectos vinculados a la calidad del aire y del agua han sido considerados como desfavorables por la mayoría de los actores. Si bien la tecnología complementaria de humedales no fue ponderada favorablemente desde las diferentes dimensiones se identificó como altamente probable de implementar dada su compatibilidad con las políticas, el marco legal y la normativa ambiental existente.

"Evaluación de características estructurales y procesos fisiológicos determinantes de las posibilidades de uso de dos especies arbustivas del género Prosopis L. en el ecotono Monte-Patagonia" (2009). Agüero, Paola Romina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo general de esta tesis fue evaluar algunos de los caracteres estructurales y procesos fisiológicos determinantes de las posibilidades de uso de Prosopis alpataco y Prosopis denudans (Fabaceae). Se evaluó la etapa juvenil (pre-reproductiva) en parcelas cultivadas y la etapa adulta en poblaciones naturales. Esta tesis describe por primera vez los cambios ontogénicos producidos en P. alpataco durante los primeros cinco años de la etapa juvenil, en la partición de biomasa y la acumulación de hidratos de carbono de reserva. Se evaluó la plasticidad fenotípica frente a distintos niveles de disponibilidad hídrica. Se determinó y comparó la dinámica de la producción y mortalidad de estructuras reproductivas, la influencia del rendimiento sobre el nivel de reservas carbonadas de la planta y la composición química de los frutos. Se describieron las relaciones entre el contenido de hidratos de carbono de reserva, los estadios fenológicos y los destinos prioritarios de la planta. Se realizó un experimento manipulativo de la relación fuente-destino, en el que se evaluaron las relaciones de compromiso (trade-offs) entre la acumulación de reservas carbonadas, la asignación de recursos hacia crecimiento, reproducción y defensas estructurales y químicas. Las conclusiones aplican los conocimientos generados sobre los procesos fisiológicos y las características estructurales de Prosopis alpataco Prosopis denudans, a las posibilidades de aprovechamiento de estas especies.

Abstract:
The objective of this Dissertation was to characterize structural characteristics and processes related to the potential used of Prosopis alpataco y Prosopis denudans (Fabaceae). The pre-reproductive (juvenile) stage was evaluated in plots, while the reproductive cycle was studied in native stands. Ontogenetic changes of juveniles, such as changes in biomass allocation and carbohydrate storage are described in Prosopis for the first time. Phenotypic plasticity for water availability was also assessed. For the reproductive stage, the dynamics of the production and mortality of all reproductive structures as well as the influence of reproduction on fruit composition and carbohydrate storage are described. After a sink-source experiment it was determined that reproduction is mostly supported by carbon reserves rather than current assimilation, so the next step was to evaluate with a new manipulative experiment the effect of carbon storage on flower and fruit production and trade-offs between growth, reproduction and structural and chemical defenses. The information obtained in this work is used to discuss the potential uses of both Prosopis species.

"Evaluación de defectos intrínsecos de linfocito B en imunodeficiencia común variable pediátrica (IDCV)" (2013). Almejún, María Belén. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La inmunodeficiencia común variable (IDCV) es un síndrome heterogéneo que se caracteriza por producción defectuosa de inmunoglobulinas. Un defecto molecular en los estadios de diferenciación tardía de los linfocitos B, hasta el momento poco explorados en pacientes con IDCV, podría ser causal del desarrollo de la enfermedad dado que estas células pueden producirse normalmente en estos pacientes. Además, al ser la inmunodeficiencia primaria más frecuente, resulta un buen modelo experimental para el estudio de la biología del desarrollo terminal del linfocito B humano. Los resultados obtenidos en los ensayos funcionales que permiten evaluar los procesos fundamentales en la diferenciación tardía del linfocito B, SHM y CSR, así como el estudio de subpoblaciones B en sangre periférica de pacientes argentinos con IDCV de presentación pediátrica, nos permitieron definir subgrupos acotando los probables defectos genéticos a determinadas etapas de la regulación terminal del linfocito B. Por otro lado, el análisis en nuestros pacientes de la secuencia de TNFRSF13B, el gen que codifica para TACI, permitió la identificación de dos nuevas mutaciones. Entre ellas, S231R, la primera mutación descripta en el dominio citoplasmático altamente conservado del receptor (THC) específicamente en el sitio de unión a MyD88. Los experimentos llevados a cabo para evaluar funcionalmente la variante TACI-S231R demostraron que las células portadoras no logran desencadenar los eventos moleculares del CSR cuando se las estimula vía TACI y/o TLR9, incluyendo la secreción de inmunoglobulinas. Además, se observó que la cooperación entre TACI y el receptor CD40 estimulado en condiciones subóptimas se encuentra deteriorada. Por último, tras la estimulación con su ligando, el receptor TACI-S231R no logra colocalizar con MyD88 ni con TRAF2, proteínas esenciales para activar la cascada del CSR. Colectivamente estos resultados ponen de relieve la necesidad de un sitio de unión a MyD88 intacto para desencadenar el CSR mediado por TACI. En suma, este trabajo realiza un aporte al conocimiento de los eventos moleculares que suceden en el desarrollo y activación de los linfocitos B humanos y abre las puertas para la búsqueda de nuevos blancos genéticos implicados en el desarrollo de la enfermedad.

Abstract:
Common variable immunodeficiency (CVID) is a heterogeneous syndrome characterized by an impaired immunoglobulin production with usually normal B cell numbers in peripheral blood. The latter suggests that the molecular defect may be found in the late stages of B cell differentiation (SHM, CSR), so far unexplored in patients with CVID. Moreover, being the most prevalent primary immunodeficiency, it could be a good experimental model to study the terminal steps of the human B cell development. Actually, the results obtained in functional assays of SHM and CSR, and the study of B cell subpopulations in peripheral blood of pediatric Argentinean patients with CVID, allowed to discriminate different subgroups and approached possible genetic defects in their B lymphocytes. Furthermore, the sequence analysis of TNFRSF13B, the gene encoding TACI, led the identification of two novel mutations. Among them, S231R, the first mutation described in the highly conserved cytoplasmic domain of the receptor (THC) at the MyD88-specific binding site. The results obtained in the evaluation of the functional relevance of TACI-S231R variant, showed that the B cells failed to trigger the CSR related events (including the immunoglobulin secretion) when stimulated via TACI and/or TLR9. It was also noted an impaired APRIL-mediated enhancement of CD40 activation in suboptimal conditions. Finally, after stimulation with its ligand, the receptor TACI-S231R failed to colocalize with MyD88 nor with TRAF2, essential proteins to activate the CSR cascade. Collectively, these results highlight the requirement of an intact MyD88-binding site in TACI to trigger CSR. In summary, this work makes a contribution to the knowledge of the molecular events that occur in the differentiation and activation of human B lymphocytes and it provides a glimpse of possible pathways that lead to the discovery of new genetic factors involved in the onset of the disease.

"Evaluación de dietas, horarios de alimentación, disponibilidad de alimento, atractantes y tiempo de ayuno en juveniles de la langosta de agua dulce Cherax quadricarinatus (Decapoda, Parastacidae). Aplicaciones a su cultivo" (2015-03-19). Sacristán, Hernán Javier. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La langosta de agua dulce, Cherax quadricarinatus, presenta numerosas características biológicas y comerciales que la convierten en una especie apropiada para la acuicultura. Sin embargo, el crecimiento productivo ha sido poco significativo en la Argentina debido a diferentes motivos tales como la ausencia de tecnologías de cultivo, elección inadecuada del sitio de cultivo y, principalmente, por la falta de ―semilla" en distintas fases para su comercialización. Dada la escasa información existente sobre el cultivo de esta especie, se plantearon los siguientes objetivos generales: evaluar y comparar los efectos de alimentos comerciales y formulados especialmente para esta especie sobre la fisiología digestiva; estudiar el ritmo diario de secreción de las enzimas digestivas y su posible modificación en función del momento de alimentación y el período de ayuno; evaluar la inclusión de la harina de calamar como atractante y analizar el efecto de la disponibilidad de alimento luego de un ayuno corto o moderado sobre la actividad de enzimas digestivas y estudiar el efecto del ayuno prolongado y posterior alimentación sobre las respuestas bioquímicas y fisiológicas de C. quadricarinatus. Los animales alimentados con el alimento especialmente formulado presentaron una buena condición fisiológica en función de la actividad enzimática digestiva y una estructura celular y tisular conservada de la glándula digestiva. Sin embargo, la dieta diseñada para esta especie presentó baja digestibilidad in vitro de proteínas. La secreción de las enzimas digestivas no mostró un patrón diario y el momento de alimentación (matutina o vespertina) afectó la actividad de las enzimas digestivas. El ayuno moderado provocó modificaciones en el patrón de ritmo diario de secreción de las enzimas digestivas. La harina de calamar no actuó como atractante para C. quadricarinatus, mientras que la disponibilidad de alimento luego de un período de ayuno corto no causó modificaciones en la actividad de las enzimas digestivas; por el contrario, dicha actividad se vio alterada por la disponibilidad de alimento cuando los animales fueron expuestos previamente a un ayuno prolongado. En función de los resultados obtenidos sobre la disponibilidad de alimento y a estudios previos de otros autores, se propone una posible vía de regulación de la actividad de la lipasa digestiva. Finalmente, el ayuno prolongado provocó la disminución de reservas energéticas (glucógeno y lípidos), niveles de glutatión reducido, actividad de lipasa y proteasa; y alteraciones en la estructura celular y tisular de la glándula digestiva, aunque no causó un incremento en el daño oxidativo. La posterior alimentación, luego del ayuno prolongado, provocó que se restablecieran todos los parámetros anteriormente descriptos. La presente tesis aporta información novedosa e importante sobre la respuesta fisiológica de la langosta de agua dulce C. quadricarinatus que podría ser de gran utilidad para el cultivo de la especie.

Abstract:
The freshwater crayfish, Cherax quadricarinatus, have many biological and commercial characteristics which turn it into a suitable species for aquaculture. Nevertheless, productive breeding has been hardly significant in Argentina due to different reasons, such as the absence of breeding technologies, the bad choice of the breeding sites, and mainly to the lack of the ―seed" in the different stages of the commercialization process. Due to the scarce available information on the breeding of this species, the following general objectives were considered: to evaluate and compare the effects of commercial feeds, as well as specifically formulated feeds for this species based on its digestive physiology; to study the daily secretion pattern of the digestive enzymes, and its possible modification based on the time of feeding and the fasting period; to evaluate the inclusion of squid meal as an attractant, and analyze the effect of food availability on the activity of digestive enzymes after a short or moderate starvation; and to study the effect of extended starvation and subsequent feeding on the biochemical and physiological parameters of C. quadricarinatus. The animals fed with the specifically formulated feed, showed a good physiological condition according to digestive enzymatic activity, and a conserved tissue structure of the digestive gland. Notwithstanding, the designed diet for this species presented low in vitro protein digestibility. The digestive enzymes secretion did not show a daily secretion pattern, and the moment of feeding (morning or evening) affected the activity of digestive enzymes. Moderate starvation caused modifications in the pattern of the daily secretion of digestive enzymes. The squid meal did not act as an attractant for C. quadricarinatus, whereas food availability after a short starvation period did not modify the activity of digestive enzymes. On the contrary, such activity was altered by food availability when animals were previously exposed to an extended starvation. In consideration of the observed results on food availability, and other author’s previous studies, it is proposed a possible way of regulation of the activity of digestive lipase. Finally, the extended fasting caused a reduction in the energetic reserves (glycogen and lipids), reduced levels of glutathione, activity of lipase and proteinase and alterations in the cellular and tissue structure of the digestive gland, even though it did not increase the oxidative damage. The subsequent feeding, after extended starvation, brought the restoration of all previously described parameters. The present thesis contributes with new and meaningful information on the physiological responses of freshwater crayfish, C. quadricarinatus, which could be very useful for the breeding of this species.

"Evaluación de factores físicos, hormonales y maternos para optimizar la producción de la langosta de pinzas rojas Cherax quadricarinatus (Decapoda, parastacidae)" (2011). Tropea, Carolina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Cherax quadricarinatus es una especie de importancia comercial, cuya introducción en Argentina resultó en una producción limitada, debido entre otros motivos a la falta de tecnologías de cultivo que permitan incrementar el rendimiento en carne y optimizar la producción de “semilla”. Por lo tanto, los objetivos generales de la presente tesis son inducir un mayor crecimiento somático de las hembras y machos, manipular la proporción sexual para incrementar la cantidad de machos (dado que los machos crecen más que las hembras), y evaluar la calidad de la progenie. En el marco de dichos objetivos se evaluó el efecto de: (1) un factor físico (exposición a temperatura alta (TA)) sobre el crecimiento; (2) un factor hormonal (administración de dopamina (DA)) sobre la maduración ovárica y el crecimiento de las hembras; (3) otro factor hormonal (ablación de la glándula androgénica (GA)), sobre la reversión sexual de los machos, para obtener “neo-hembras” como paso previo a la producción de cultivos monosexo sólo macho; y (4) dos factores maternos (tamaño de la hembra y número de puestas) sobre la calidad de las progenies. La TA provocó una disminución en el crecimiento somático de los machos y aceleró la espermatogénesis, mientras que no afectó el crecimiento de las hembras y aceleró la maduración ovárica. La DA tuvo cierto efecto sobre el crecimiento y maduración ováricos sólo cuando fue inyectada en hembras de 4- 14 g, sin que esto resulte en un mayor crecimiento somático. La ablación de la GA no provocó la reversión sexual de los machos, si bien se observaron alteraciones en el desarrollo de los caracteres sexuales primarios y secundarios. Finalmente, de los parámetros de calidad de progenie estudiados, sólo el número de juveniles independizados por hembra varió con el tamaño de la madre, mientras que la tasa de puestas tendió a disminuir con las puestas consecutivas. Se discuten las posibles implicancias que estos resultados tendrían para el cultivo de la especie.

Abstract:
Cherax quadricarinatus is cultured worldwide with commercial purposes, with its introduction in Argentina resulting in a low production, mainly due to the absence of technologies that would allow an increase in meet yields and “seed” production. Hence, the general objectives of the present thesis are to induce a higher somatic growth of females and males, to manipulate sexual proportion in order to increase the amount of males (since growth is higher in males than in females), and to evaluate the offspring quality. In the context of these objectives, it was evaluated the effect of: (1) a physical factor (exposure to high temperature (HT)) on somatic growth; (2) one hormonal factor (administration of dopamine (DA)) on ovarian maturation and somatic growth of females; (3) another hormonal factor (ablation of the androgenic gland (AG)) on sexual reversion of males, to obtain “neo-females”, as a previous step for the production of allmale monosex cultures; and (4) two maternal factors (female size and consecutive spawning) on offspring quality. HT decreased male somatic growth and accelerated spermatogenesis, while it had no effect on female growth and accelerated ovarian maturation. DA influenced ovarian growth and maturation when injected in females of 4-14 g, but no increase in somatic growth was observed. AG ablation resulted in no sexual reversion of males, although some alterations were observed in the development of primary and secondary sexual characters. Finally, of the offspring quality parameters studied, only the number of independent juveniles per female varied with mother size, while the spawning rate tended to decrease with consecutive spawning. The possible implications of these results for the species culture were discussed.

Título :	Evaluación de factores físicos, hormonales y maternos para optimizar la producción de la langosta de pinzas rojas Cherax quadricarinatus (Decapoda, parastacidae) = Evaluation of physical, hormonal and maternal factors to optimize production of the red claw crayfish Cherax quadricarinatus (Decapoda, Parastacidae)
Autor :	Tropea, Carolina
Director :	López Greco, Laura S.
Consejero de estudios :	López Greco, Laura S.
Jurados :	Esnal, Graciela ; Lovrich, Gustavo ; Somoza, Gustavo
Año :	2011
Editor :	Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación :	Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental
Grado obtenido :	Doctor de la Universidad de Buenos Aires en el área de Ciencias Biológicas
Ubicación :	Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_5026_Tropea
Idioma :	Español
Area Temática :	Biología / Ecología Biología / Fisiología Animal
Palabras claves :	CHERAX QUADRICARINATUS; CALIDAD DE LOS HUEVOS; CALIDAD DE LOS JUVENILES; CALIDAD DE PROGENIE; CARACTERES SEXUALES SECUNDARIOS; CRECIMIENTO SOMATICO; CULTIVO MONOSEXO; DOPAMINA; ESPERMATOGENESIS; GLANDULA ANDROGENICA; MADURACION OVARICA; NEO-HEMBRAS; NUMERO DE PUESTAS; PRODUCCIÓN DE CARNE; REVERSION SEXUAL; SISTEMA REPRODUCTOR; TAMAÑO DE LA HEMBRA; TEMPERATURA; VARIABLES DE PRODUCCION; ANDROGENIC GLAND; CHERAX QUADRICARINATUS; CONSECUTIVE SPAWNING; DOPAMINE; EGG QUALITY; FEMALE SIZE; JUVENILE QUALITY; MEET PRODUCTION; MONOSEX CULTURE; NEO-FEMALES; OFFSPRING QUALITY; OVARIAN MATURATION; PRODUCTION VARIABLES; REPRODUCTIVE SYSTEM; SECONDARY SEXUAL CHARACTERS; SEXUAL REVERSION; SOMATIC GROWTH; SPERMATOGENESIS; TEMPERATURE
URL al Documento :	http://digital.bl.fcen.uba.ar/Download/Tesis/Tesis_5026_Tropea.pdf
URL al Registro :	http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_5026_Tropea

"Evaluación de factores involucrados en la transmisión vertical del HIV-1" (2002). Ceballos, Ana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El 95% de los niños infectados con HIV-1 en el mundo contraen la infección por transmisión vertical. En la Argentina han sido informados hasta septiembre del 2001 1260 niños con SIDA, que corresponde al 7% del total de casos, el más alto de América Latina. Se han descripto muchos factores, virológicos e inmunológicos, que inciden sobre la tasa de transmisión. Actualmente existen protocolos eficaces de tratamiento antiviral y de procedimientos obstétricos para la prevención de la transmisión vertical. Sin embargo, el costo de los tratamientos resulta muy oneroso para los países en vías de desarrollo, por lo cual se está muy lejos de la resolución del problema. Por otro lado, el diagnóstico de la infección del niño nacido de madre infectada es más complejo que el del adulto, dada la persistencia de IgG maternas durante los primeros 12 meses de vida. Esta tesis aborda la transmisión vertical del HIV-1 desde distintos enfoques. Inicialmente se realizó un estudio de población en Buenos Aires y alrededores, para evaluar el éxito de las estrategias implementadas para prevenir la transmisión vertical desde 1993 hasta 2001, con el estudio de 874 familias. Se demostró un aumento gradual en el número de madres y niños que siguieron el protocolo ACTG 076 (AZT para la prevención de la transmisión vertical) que alcanzó un 80% en el período 1999-2000. Se registró un aumento en el número de niños nacidos por cesárea que alcanzó un 54.8% durante 1999-2000 contra un 19.4 en 1993-1995. La efectividad de estas medidas se vio reflejada en la disminución de la tasa de transmisión madre a hijo de 37,3% en el período 1993-1995 a 6.5% en el año 2001. Sin embargo, un porcentaje constante de mujeres (12%) continuaron amamantando en el período estudiado, desde 1993 hasta el 2000. El porcentaje de mujeres que se enteraron de su infección luego del nacimiento del niño también fue del 12%. Estos resultados muestran la necesidad de implementar estrategias adicionales que generalicen la educación, la consulta y el diagnóstico en las mujeres jóvenes y sus parejas. Se estudió la eficiencia de la detección de la IgA específica en l4l niños, 46 tratados bajo protocolo ACTG 076 y 95 no tratados, demostrando que no se encontraron diferencias significativas respecto a los niños no tratados, a pesar de que la sensibilidad es menor en los niños tratados. Al cuantificar los sueros de estos niños se observan títulos menores en los niños tratados. Sin embargo, esto no altera la detección e indica el valor de la prueba en niños tratados, que hoy en día son la mayoría. Se estudió la reactividad frente a péptidos del V3 loop del gen env de variantes locales recombinantes y de los subtipos B y F de 22 madres transmisoras y 22 no transmisoras de la infección. Se demostró una mayor reactividad en las muestras de plasma de las madres no transmisoras frente a las transmisoras con el péptido SF2 y B/F, y además una diferencia significativa en la reactividad general frente al péptido recombínante B/F local. Esto indicaría la importancia de la inmunidad humoral en la protección frente a la transmisión vertical del HIV-1. Estos resultados apoyarían el uso de inmunosueros para evitar la transmisión madre a hijo. No se encontraron diferencias significativas entre madres tratadas y no tratadas con antirretrovirales. La transmisión vertical del HIV-1 ocurre predominantemente en el parto, presumiblemente a través del contacto con líquidos y sangre materna. La oxitocina y las prostaglandinas (PGs) son hormonas que inducen el trabajo de parto fisiológicamente, y que son aplicadas en forma terapéutica para activar el proceso del nacimiento. Por otro lado, la oxitocina interviene en la lactancia materna. Se estudió la acción de dichas hormonas in vitro sobre la replicación del HIV-1. Se demostró que la PGF2α disminuye transitoriamente la producción del antígeno p24 en células persistentemente infectadas con HIV-1 y no en células con infección aguda, mientras que la oxitocina y la PGE2 no produjeron ninguna variación en la cantidad de virus. Esto demuestra que tanto la oxitocina como la prostaglandina se pueden utilizar terapéuticamente sin temor a que potencien la replicación viral en el momento del parto. Finalmente se analizó la variabilidad viral en casos de transmisión a niños utilizando métodos moleculares, filogenéticos y de evolución simulada. Se demostraron dos casos de transmisión horizontal de padre a hijo. Aunque estos casos deben ser considerados excepcionales en la clínica, sin embargo, el conocimiento de estas excepciones ayuda a limitar las oportunidades de la transmisión del HIV-1 en lugares poco comunes tales como en el seno familiar y, dado que, la extensión de la epidemia es considerable, podrían presentarse más casos de este tipo en el futuro. Por otro lado, por demanda legal, se demostró un evento de transmisión ocunido 7 años antes de la obtención de las muestras entre un donante, una madre receptora de la transfusión y su hijo. Estos métodos podrían utilizarse en casos semejantes en los cuales no se cuenta con datos epidemiológicos y clínicos suficientes y se debe corroborar un hecho de transmisión. Por otro lado, se analizó la variabilidad viral en cuatro casos de seroconversión materna durante el embarazo y/o la lactancia y se observó que las madres presentaban poblaciones virales con baja variabilidad. A pesar de la similitud entre las variantes maternas, no se observó un fenómeno de selección en la transmisión, las madres pudieron transmitir múltiples variantes virales a sus hijos. Esto puede deberse a la falta de madurez de la respuesta inmune materna, que parecería jugar un papel importante en el origen de la variabilidad viral del gen env y en los mecanismos de selección viral durante la trasnmisión vertical del HIV-1. Estos casos de seroconversión durante el embarazo y transmisión de la infección al niño muestran la necesidad de realizar diagnósticos durante y después del embarazo. Además, en poblaciones donde la incidencia de HIV entre las mujeres jóvenes es alta, se deberia repetir el diagnóstico en los últimos meses del embarazo o en el parto, las cuales permitirían implementar intervenciones para prevenir la transmisión vertical.

Abstract:
Vertical transmission is responsible for 95% of the children infected with HIV-1 in the wordl. In Argentina until September 2001, 1260 children with AIDS were reported, 7% of total AIDS cases in the country, the highest level of Latin America. Many different factors, whether virological or immunological, have been described to have an effect on the transmission rate. There are now efficacious treatment protocols as well as obstetric procedures to avoid vertical transmission. However, the cost of these treatments is too high for developing countries, therefore the problem is far from being solved. Further, the diagnosis of pediatric HIV infection is more complicated than that of the adult, due to the persistence of maternal IgG during the first 12 months of life. This tesis faces the problem of vertical transmission from different sides. Initially a study was performed to evaluate the success of a National Program for the prevention of mother to child transmission (MTCT) in 874 mother-infant pairs from Buenos Aires and its surroundings. This population was referred to the National Reference Center for AIDS for diagnosis of neonatal infection during 1993-2000. The data revealed a substantial increase in the percentage in the use of antiretroviral therapy during pregnancy from 3.2% in 1993-1994 to 73.1% in 1999-2000. An increase in the use of Caesarean section (reaching 54.8% in 1999-2000) was observed. However, the proportion of HIV-infected women who continued to breast feed their children remained steady (around 12%). The general improvement of the conditions to decrease MTCT resulted in a significant decrease of infected infants from 37.3% before 1995 to 10.7% in 1999-2000, and even 6.5% during 2001. Data on the time of diagnosis indicates that only 42.7% of the women knew about their HIV status before pregnancy, 44.8 during pregnancy and 12.3% after the birth of their child. The main risk factor for HIV infection of the mothers was heterosexual contact (73%) and for fathers was injection drug use (67 %). These results point out the urgent need to develop additional strategies to generalize education, counseling, and testing of young women. The efficiency of IgA detection was studied in children treated under protocol O76, showing no significant differences with the untreated children, in spite of a lower sensitivity in treated children. Samples of this groups of children were quantified and the titers for IgA were lower in treated childre. However, this fact doesnt alterate the detection possibilities. These results show the usefulness of this test in ACTG 076 treated children, which today are the majority. The reactivity to V3 loop peptides from env gen of local recombinant forms as well as B & F subtypes was analysed in plasma samples of 22 HIV-transmitting and 22 non transmitting mothers. A higher reactivity was shown in the samples of non transmitting mothers compared to the transmitting ones. Further, there was a general significant reactivity to the B/F recombinant local peptide. These results would point out the importance of humoral immunity in the protection for vertical transmission of HIV-1 and would support the use of hiperimmune sera to avoid mother to child transmission. No significant differences were found between treated and non treated mothers. Mother to child transmision of HIV occurs mainly during birth, probably through the contact with maternal blood and liquids. Oxytocin and prostaglandins (PGs) are hormones involved in labor and are used clinically for its induction. The effect of oxytocin, PGF2α, and PGE2 on HIV-l replication in vitro was analysed. No significant effect on p24 antigen production in acutely or persistently infected cells was found within the range of concentrations of oxytocin or PGs assayed, except for a transient decrease in persistently infected cells treated with 1μM PGF2α. These results showed that oxytocin and PGs could be used clinically for labor induction without any direct enhancement in viral production. Finally, viral variability in cases of transmission of HIV to children was analysed by means of mollecular, filogenetic and simulated evolution methods. Two cases of father to child horizontal transmission were proven with filogenetic methods. Even if these cases should be considered as exceptional in the clinical experience, nevertheless their knowledge helps to limitate the opportunities of HIV transmission in such uncommon places as the nuclear family. Further, since the epidemics is in expansion, new cases like those could appear in the future. By legal demand on our laboartory, an event of transmission which happenned 7 years before was shown with simulated evolution. This event included a male blood donor, a woman receptor of the transfussion during puerperium and her son. These methods could be used in similar situations in which the epidemiological and clinical data are insufficient and a transmission event has to be ascertained. Also, viral variability was analysed by means of mollecular cloning in four cases of maternal seroconversion during pregnancy and/or lactancy. Maternal viral populations presented low variability. In spite of the maternal variant likeness, no apparent selection was observed in mother to child transmission, and the children showed multiple variants shown in ther respective mothers. This could be due to the lack of maturity in the immune response of the mothers, which would apparently play an important rol in the origin of the variability of the env gen and in the mechanisms of viral selection during mother to child transmission of HIV. The mentioned cases of seroconversion show the need to strenghten the counseling ans testing of HIV during pregnancy. Further, in populations where HIV incidence is high, diagnosis should be repeated in the last trimester, to be able to take interventions to avoid mother to child transmission.

"Evaluación de identificaciones taxonómicas mediante código de barras del ADN en un grupo tropical megadiverso" (2012-04-11). Labarque, Facundo Martín. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo principal del proyecto fue evaluar las ventajas y limitaciones de los códigos de barras del ADN y de los métodos de la taxonomía clásica al estudiar la diversidad de arañas en los bosques montanos de Panamá. Se procesaron 29961 especímenes de arañas de 49 familias, de los cuales el 60% son juveniles, se secuenciaron 3553 fragmentos de cox1 y se generaron las bases de datos morfológica y molecular respectivas. Se identificaron los especímenes mediante tres estrategias concatenadas. Primero una identificación rápida utilizando caracteres somáticos externos, seguida por una identificación de grupos moleculares obtenidos con el modelo Generalizado Mixto de Yule y Coalescencia, finalizando con una identificación integrativa fruto de la comparación recíproca de las anteriores y del aporte de la disección de los órganos sexuales que son críticos a la hora de delimitar especies en artrópodos. Se identificaron 548 especies de manera integrativa, se estimó la diversidad alfa y beta según cada estrategia con los individuos adultos y, por primera vez, con los estadios inmaduros identificados molecularmente; se realizó una revisión taxonómica integrada de la familia Theridiosomatidae con el aporte de dos géneros nuevos y 27 especies nuevas y se asociaron los sacos de huevos con sus adultos mediante los códigos de barra, y se evaluaron las metodologías de colecta. Los códigos de barra sirvieron para estimar la diversidad, asociar diferentes estadios entre sí como machos y hembras y juveniles con sus adultos, revelar haplotipos endémicos, y sugirieron especies crípticas y nuevas especies putativas a partir de los estadios inmaduros no encontrados entre los adultos.

Abstract:
The main goal of the project was to evaluate the advantages and limitations of DNA barcoding and traditional taxonomy to study the spider diversity in the montane forests of Panama. We have sorted 29961 specimens of 49 families, 60% of which were immature, and we have sequenced 3553 cox1 fragments, to generate morphological and molecular data bases. Specimens were identified using three linked approaches. First, a fast identification approach using external somatic characters, followed by a General Mixed Yule‐Coalescent molecular cluster identification, ending with the reciprocal illumination of both previous approaches plus a close examination of sexual organs, known as critic characters to delimit arthropods species, called integrative identification. We have identified 548 integrative species, we have estimated alpha and beta diversity with adults using each identification approach and, for the first time, we also have used immature specimens. We have done a taxonomic integrative revision of the family Theridiosomatidae describing two new genera and 27 new species plus spider egg‐sacs association with their species using DNA barcodes, and we have evaluated collecting methods. DNA barcodes can be used to estimate diversity, to associate different life and gender stages such as immature to mature and male to female specimens, and to reveal endemic haplotypes. DNA barcodes also suggest cryptic species, and putative new species from immature specimens not found among adults.

"Evaluación de la alteración y restauración de los ciclos biogeoquímicos en bosques de Nothofagus pumilio de Tierra del Fuego afectados por prácticas de manejo forestal" (2013-03-27). Mansilla, Paula Romina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El bosque de Nothofagus pumilio (lenga) es el ecosistema boscoso dominante en Tierra del Fuego y constituye el único bosque de explotación maderera de la isla. El uso de estos bosques con fines forestales comenzó en el siglo XIX, y a lo largo de su historia ha sido manejado bajo distintos sistemas de aprovechamiento, siendo la corta de protección el más aplicado. El objetivo general de este trabajo fue evaluar los cambios en la dinámica de nutrientes en bosques de lenga de Tierra del Fuego aprovechados por corta de protección a través de su cronosecuencia, considerando además los sitios de acopio o canchones originados por este sistema, así como también bosques primarios sin intervención como controles. El estudio se realizó en el centro de la provincia de Tierra del Fuego, en la región conocida como ecotono. Las variables analizadas en esta tesis incluyen variables edáficas y microclimáticas, producción, descomposición y liberación de nutrientes de la hojarasca, y disponibilidad, mineralización e inmovilización del nitrógeno del suelo. Las variables físicas del suelo (densidad aparente, profundidad del piso forestal, capacidad de campo) resultaron ser las más afectadas en las áreas intervenidas con canchones. Por el contrario, los reservorios de nutrientes en el suelo no se vieron afectados. Las precipitaciones, la humedad y la temperatura del suelo fueron diferentes entre los sitios intervenidos y los bosques sin intervención. En general, los sitios de 50 años fueron los que presentaron menos diferencias entre tipos de intervención. Tanto la producción de hojarasca como el retorno de nutrientes resultaron menores en los sitios intervenidos más recientemente. La tasa de descomposición fue significativamente menor en los sitios de 1 y 5-10 años respecto a los sitios con más de 50 años desde la intervención, la liberación de los nutrientes desde la hojarasca se vio afectada principalmente por la edad desde la intervención. En general se observó mineralización del nitrógeno del suelo, tanto en ensayos de campo como en laboratorio, siendo afectada principalmente en los canchones. El efecto de la intervención en los ciclos biogeoquímicos varía en función de los procesos del ecosistema. La producción de hojarasca se recupera más rápido respecto de los procesos que involucran la dinámica de los nutrientes. Este estudio permite profundizar el conocimiento de la dinámica del bosque luego de su aprovechamiento con fines forestales, haciendo hincapié en aspectos poco estudiados hasta el momento.

Abstract:
Nothofagus pumilio (lenga) is the most important forest ecosystem on the Tierra del Fuego island, and as such it is the only forest used for timber exploitation. The use of the forest for timber exploitation purposes started in the XIX century and along its history it has been managed under different agroforestry systems, with shelter wood cut being the one most widely applied. The general objective of this research is to assess the changes in the dynamics of nutrients in the Nothofagus pumilio forests in Tierra del Fuego through its whole cycle of shelter wood cut management, taking into account stock-piled areas originated by this system, as well as primary undisturbed forests (control forests). The research was conducted in the centre of Tierra del Fuego, in the region known as the ecotone. This thesis analyses variables such as soil and microclimate, production, decomposition, litter nutrient release as well as availability, mineralization and immobilization of soil nitrogen. The soil physical variables (apparent density, soil depth, field capacity) were the most affected by stockpiling. On the contrary, nutrient reservoirs were not affected. Rainfall, humidity and soil temperature in managed sites were different from undisturbed areas. In general, 50 year-old sites presented less difference among the types of intervention. Both litter production and nutrient recovery were lower in sites harvested most recently. Decomposition rate was significantly lower in sites 1 and 5-10 years since harvesting, litter nutrient release was mainly affected by the passing of time since harvesting. In general, soil nitrogen mineralization was observed both in the field as well as in the laboratory with stockpiled areas being more affected. The effect of harvesting on biogeochemical cycles depends on the ecosystem processes. Litter production recovers faster than processes that involve nutrient dynamics. This research focuses on aspects little studied up to now and enables further knowledge into the dynamics of the forest after harvesting for timber exploitation purposes.

"Evaluación de la calidad botánica y química de polifenoles de los productos comercializados como ¨Yerba mate aromatizada¨ en la ciudad de Buenos Aires" (2016-08-11). Shigler Siles, Wendelin Karem. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El control de calidad de los productos alimenticios es fundamental para garantizar el bienestar y la salud de la población. Desde el cultivo hasta la distribución del producto terminado, se requiere de cuidados especiales para el éxito final. Cuando se producen negligencias, controles incompletos o inadecuados, la calidad del producto se ve seriamente afectada. Las mezclas de yerbas aromatizadas constituidas por Ilex paraguariensis y otras especies trozadas o trituradas, presentan iguales problemas que las mezclas de hierbas medicinales: genuinidad incierta de las especies presentes, errores en los nombres, porcentajes de los componentes sin especificar, presencia de materia extraña, adulteraciones y sustituciones. Los objetivos fueron realizar un muestreo de los productos comercializados, establecer caracteres relevantes para identificar los componentes y detectar materia extraña. Se analizaron aspectos macroscópicos y microscópicos de los productos mediante técnicas farmacobotánicas. Se completó el estudio con un análisis fitoquímico de polifenoles. Los resultados demostraron que los caracteres establecidos constituyen parámetros diagnósticos para el control botánico de las muestras con métodos sencillos, aplicables en laboratorios de baja complejidad. El estudio fitoquímico reveló que el aporte de polifenoles de los componentes adicionales a la yerba es mínimo. El producto yerba mate, de consumo masivo entre la población, está contemplado en el Código Alimentario Argentino. Dado que la yerba aromatizada contiene especies con propiedades farmacológicas, es importante considerar su correcto control de calidad en el área alimenticia.

Abstract:
Quality control of food products is essential to ensure the welfare and health of the population. From cultivation to distribution of the finished product, special cares are required for final success. When negligence, incomplete or inadequate control occurs, the product quality is seriously affected. Flavored “yerba” mixtures consisting of Ilex paraguariensis and other species cut in pieces or very crushed, present the same problems as mixtures of medicinal herbs: uncertain authenticity of the species present, errors in names, percentages of components unspecified, presence of foreign material, adulterations and substitutions. Objectives in this work were to perform a sampling of the products marketed, establish relevant characters to identify the components and detect foreign matter. Macroscopic and microscopic aspects of the products were analyzed, using pharmacobotanical techniques. The study was completed with a phytochemical analysis of polyphenols. Results showed that the characters established were diagnostic parameters for botanical control of the samples, with simple methods applicable in laboratories of low complexity. The phytochemical study revealed that the contribution of the additional components to polyphenols content is minimal. “Yerba mate” product, of mass consumption among the population, is included in the Argentine Food Code. Since flavored “yerba” contains species with pharmacological properties, it is important to consider a proper quality control in the food area.

"Evaluación de la calidad de las aguas del río Matanza-Riachuelo (Buenos Aires, Argentina), mediante estudios limnológicos y bioensayos algales." (2004). Magdaleno, Anahí. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Durante el período septiembre 1996 a noviembre 1997, se investigó la evolución de algunos parámetros bióticos y abióticos del río Matanza-Riachuelo (Pcia. de Buenos Aires). Este río atraviesa zonas con diversos usos del suelo, entre ellas, áreas urbanas muy contaminadas. Los muestreos se llevaron a cabo mensualmente en cinco estaciones diferentes. Se estudió la estructura y dinámica del fitoplancton además de las propiedades físicas y químicas del agua. El fitoplancton estuvo dominado por grupos Cyanophyceae, Chlorophyceae (en su mayoría Chlorococcales) y Bacillariophyceae (principalmente diatomeas céntricas), encontrándose las mayores densidades químicas más relevantes fueron los niveles extremadamente bajos de oxígeno disuelto y las elevadas cantidades de nutrientes, materia orgánica y cloruro presentes en el agua. Los metales pesados superaron los niveles guía para la protección de la vida acuática según estándares internacionales y la Ley Nacional de Residuos Peligrosos. Se realizaron bioensayos de inhibición del crecimiento algal con la especie estándar Selenastrum capricornutum Printz (Clase Chlorophyceae, Order Chlorococcales) con el fin de monitorear la calidad del agua y detectar toxicidad por metales pesados con el agregado de un quelante fuerte como el EDTA. En varias muestras, donde las concentraciones de metales fueron muy bajas, se obtuvo inhibición del crecimiento algal, mientras que en otras muestras donde las concentraciones de metales fueron muy altas, no se observó inhibición. Estos resultados indican la presencia de factores mitigantes en el agua tales como sustancias complejantes y la posibilidad de procesos de sinergismo y antagonismo entre los contaminantes presentes en las muesrtas. El único metal que mostró una correlación positiva con los porcentajes de inhibición obtenidos fue el níquel. En una segunda etapa se realizaron bioensayos con cuatro cepas de algas nativas aisladas de este río y pertenecientes a la Clase Chlorophyceae, Orden Chlorococcales. La finalidad de estos estudios fue establecer la resistencia a los metales cobre, cadmio y zinc. La especie más sensible fue Ankistrodesmus fusiformis, mientras que las más resistentes fueron Chlorella ellipsoidea, Scenedesmus acuminatus y Monoraphidium contortum.

Abstract:
The evolution of several biotic and abiotic parameters of the Matanza-Riachuelo River (Buenos Aires) were studied from September 1996 to November 1997. This river runs through areas with diverse land uses, some of them urban and very polluted. Sampling took place monthly in five diferent sites along the main course of the river. The structure and dynamics of the total phytoplankton population and the physical and chemical porperties of the water were determined. Rhe phytoplankton was dominated by Cyanophyceae, Chlorophyceae (more representated by Chlorococcales) and Bacillariophyceae (more representated by centric diatoms) being the two first the highest in the most pulled areas of the river basin. Low levels of dissolved oxygen, and high concentrations of nutrients, organic matter and chloride were the most outstanding physico-chemical characteristics in the water. Heavy metals concentration levels exceeded the concentration limits stablished by international parameters and the Argentine Hazardous Waste Law Safe to protect aquatic life. Growth inhibition test using the standard alga Selenastrum capricornatum Printz (Chlorophyceae, Chlorococcales) were made to monitor the water quality and to detect toxicity by heavy metals utilizing a strong chelant agent such as EDTA. Several samples with low heavy metals concentration showed algal inhibition growth, while other samples with higher levels of metals showed no inhibition. These results indicated the presence of mitigating factors like complex substance and the possibility of synergistic and antagonistics processes among the contaminants present in the water. The only metal the showed a positive correlation with the percentages of inhibition was nickel. In a second stages, bioassays with four strains of native algae isolated from this river and belonging to the Class Chlorophyceae, Order Chlorococcale were made made to establish resistance to cooper, cadmium and zinc. The most sensitive strain was Ankistrodesmus fusiformis, while the most resistance were Chlorella ellipsoidea, Scenedesmus ocuminatus y Monoraphidium cantortum.

"Evaluación de la calidad de los recursos hídricos superficiales en la Alta Cuenca del Juramento (Salta)" (2005). Salusso, María Mónica. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Alta Cuenca del Juramento es uno de los sistemas hídricos del noroeste argentino que integran la Cuenca del Río de la Plata. El presente trabajo constituye el primer estudio limnológico integral de los sistemas lóticos y lénticos de la cuenca y proporciona la categorización de las diferentes subcuencas según su grado de afectación ambiental en función de diversos índices ecológicos. La mayor parte de los ambientes acuáticos presentaron una baja relación N/P característica de los ambientes subtropicales de la región. Las condiciones hidrográficas de los ríos condicionaron la estructura y productividad del fitoplancton, por cuanto existió una relación directa entre los menores niveles de descarga e incrementos de biomasa en el estiaje, en tanto que las perturbaciones durante los períodos de crecidas indujeron una mayor diversidad y equitatividad específicas. La existencia de cursos fluviales con baja a moderada capacidad ambiental durante el estiaje, determinan que se vean afectados los procesos de autodepuración, siendo generalizada la condición de β a α-mesosaprobiedad. Existió una gran correspondencia en la composición florística y abundancia de algas de rios y embalses, y dada la condición regulada del sistema, el manejo del nivel hidrométrico de los reservorios compromete la integridad ecológica de ambos sistemas. Las actividades puntuales y difusas que se desarrollan en las subcuencas Arias- Arenales y Toro-Rosario contribuyen con mayor proporción de nutrientes y carga orgánica por unidad de superficie por año.

Abstract:
The High Basin of Juramento is one of the water systems of the North-West of Argentina that it is part of the Plata River Basin. This paper is the first integral limnological study of lentic and lotic systems in the basin. It proposes a categorization of the different sub-basins according with the degree of environmental affectation considering several ecological indexes. The majority of the aquatic environments showed a low N/P relationship, that it is characteristics of subtropical environment of the region. The hydrographic conditions of the rivers affected the phytoplankton structure and productivity. It was the result of a direct relation between the lower level of unloading and the increase of the biomass during the low level water, meanwhile the perturbations during the flooding periods induce to a high diversity and specific evenness. The auto-purification process were affected by the existence of fluvial courses with low to moderate environmental capacity during the low level water. The β to α- mesosaprophytic condition was generalizable. The floristic composition and the algae abundance of the rivers and dams showed a great correspondence. Considering that this system is regulated, the management of the hydrometric level of the reservoirs can to compromise the ecological integrity of both systems. The punctual and diffuse activities that are developed in the Arias-Arenales and Toro-Rosario sub-basins contribute with a great proportion of the organic load and nutrients by surface unit by year.

"Evaluación de la dinámica de salud en poblaciones de Hydrochoerus hydrochaeris L. 1766 (RODENTIA: Caviidae): intensidad del parasitismo gastrointestinal" (2014-06-30). Eberhardt, María Ayelén Teresita. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Con la premisa que los helmintos son causa y consecuencia de la condición de salud de sus hospedadores, este trabajo tuvo como objetivos: i. Evaluar el uso de la intensidad de los parásitos gastrointestinales específicos como herramienta para el estudio de la salud poblacional en carpinchos ii. Relacionar cargas parasitarias con factores ambientales, demográficos e interacciones interespecíficcas de parásitos co-infectantes, iii. Evaluar la relación de la intensidad del parasitismo de determinados helmintos y/o protozoarios específicos con el estrés y el estado inmuno-fisiológico del carpincho. Se recolectaron 1600 heces frescas en la ecoregión “LLagunas y Esteros del iberá”, Corrientes, desde septiembre 2010 hasta febrero de 2013. Se realizaron 72 necropsias de ejemplares de carpinchos silvestres, y se realizó un experimento con 30 carpinchos de cautiverio. A partir de los análisis coproparasitologico de las heces y los parásitos adultos, se identificaron y contabilizaron los nematodes: Vianella hydrochoeri, Hydrocherisnema anomalobursata, Trichostrongylus cf axei, Strongyloides cf. chapini, Echinocoleus hydrochoeri, Trichuris sp. y Protozoophaga obesa; cestodes del género Monoecocestus sp.; trematodes de las especies Taxorchis cabrali, T. schistocotyle e Hippocrepis hippocrepis y ooquistes de especies del genero Eimeria spp. Según los resultados obtenidos, los conteos de las formas evolutivas en materia fecal son indicativos en niveles aceptables de la carga parasitaria interna para la superfamilia Trichostrongyloidea, S. chapini y Trichuris sp. En general, no se evidenció estacionalidad marcada para ningún taxón de parásito encontrado en las heces debido a que existió una interacción entre las estaciones y el año de muestreo. Además la abundancia de las distintas especies parasitarias estuvo asociada (positiva o negativamente dependiendo del parásito) a factores ambientales (precipitaciones y temperaturas) y a las densidades del hospedador. La interacción entre nematodos (Viannaiidae) y Eimeria spp. dependió de factores ambientales y del hospedador. La relación fue positiva en algunas circunstancias (dependió de la temporada, año, sexo o tamaño de los animales), y antagónica bajo diferentes escenarios. Estas interacciones antagonistas no siguieron un patrón estacional en particular y se encontraron predominantemente en el sexo femenino (cuando dependieron del sexo) o en 2010 y 2011 (cuando dependieron del año de muestreo). Los carpinchos estresados del experimento, tuvieron significativamente mayores intensidades de infección de coccidios, pero los individuos de menor tamaño, consistentemente mostraron bajas cargas de helmintos comparado con los controles. El estrés tuvo un marcado impacto negativo sobre el crecimiento y la condición corporal, pero un efecto positivo significativo en algunos de los componentes del sistema inmune. Nuestros resultados sugieren que: i. durante los períodos prolongados de estrés los carpinchos preventivamente invierten energía en algunos componentes de su sistema inmunológico, lo que podría considerarse una profilaxis dependiente del estrés, ii. se encontró que el estrés provoca una mayor intensidad de infección de protozoos, pero cargas más bajas de nematodos, lo que indica que la relación entre el estrés, las regulaciones fisiológicas y la infección depende del tipo de parásito en cuestión. Se propone que la inversión inmune contexto-dependiente documentada en este experimento con carpinchos podría ser la causa de las diversas interacciones intra e interespecíficas documentadas para los parásitos de los carpinchos silvestres.

Abstract:
Helminths are cause and consequence of the health of their host condition, so the overall objetives of this study were: i. Evaluate the use of intensity of specific gastrointestinal parasites as a tool to asses the population health in capybaras; ii. Establish link between parasites loads and environmental factors, demography of the host and interspecific interactions of parasite co-infection; iii. Evaluate the impact of food restriction and physical restraint on the infection intensity of specific gastrointestinal nematodes and coccidia, and how these stressors affected the growth, body condition, and some immuno-physiological parameters. 1600 feces were collected from September 2010 to February 2013 from a population of capybaras from Esteros del Iberá, Corrientes, Argentina. 72 necropsy of wild capybaras were performed and a experiment with 30 female captive capybara was carried out. There were identified and counted nematodes: Vianella hydrochoeri, Hydrocherisnema anomalobursata, Trichostrongylus cf axei, Strongyloides cf. chapini, Echinocoleus hydrochoeri, Trichuris sp. and Protozoophaga obesa; cestodes of gen Monoecocestus sp.; trematodes: Taxorchis cabrali, T. schistocotyle and Hippocrepis hippocrepis and oocytes of species of Eimeria spp. According to results, counts of fecal evolutionary forms are indicative at acceptable levels of internal parasite burdens of Trichostrongyloidea, S. chapini and Trichuris sp. In general, no seasonality was evident for any taxon of parasite found in feces due to an interaction existed between seasons and years of sampling. Besides the abundance of different parasite species was associated (positively or negatively depending on the parasite) with environmental factors (rainfall and temperature) and densities of the host. The interaction between nematodes (Viannaiidae) and Eimeria spp. depended on environmental and host factors. The relationship was positive in some circumstances (depending on season, year, sex, or animal size), but it appeared to become antagonistic under different scenarios. These antagonist interactions did not follow a particular seasonal pattern, but they were predominantly found in females (when they depended on sex) or in 2010 and 2011 (when they depended on the sampling year). These results suggest that the relationship between coccidia and nematodes in capybaras may be context dependent. Stressed capybaras had significantly higher coccidia infection intensities; but among individuals that were smaller, those stressed consistently showed lower helminth burdens than controls. Both stress treatments had a marked negative impact on growth and body condition, but they had a significant positive effect on some components of the immune system. Our results suggest, on the one hand, that during prolonged periods of stress capybaras preventatively invest in some components of their immunity, which could be considered a stress-dependent prophylaxis. On the other hand, stress was found to cause greater infection intensities of protozoans but lower burdens of nematodes, indicating that the relationship between stress, physiological trade-offs and infection depends on the type of parasite in question. We propose that the context-dependent immune investment documented in capybaras may be the cause of these varying interactions.

"Evaluación de la eficiencia de tratamiento de aguas residuales domésticas, implementando un sistema de humedales artificiales de flujo subsuperficial horizontal (HAFSSH) en el colegio comfamiliar siglo XXI, sede campestre corregimiento de San Fernando, Municipio de Pasto, Colombia" (2014-12-16). Mena Cabrera, Paolo Alexander. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los humedales artificiales son un reservorio construido en un terreno con paredes y pisos impermeabilizados que contienen un sustrato (grava o arena) y una vegetación acuática adecuada para tratar efluentes residuales; esta tecnología que busca una recuperación del recurso hídrico ha sido aplicada en países desarrollados y actualmente se está siendo implementada en países como Colombia por su bajos costos constructivos comparado con la tecnología convencional. El objetivo del presente estudio fue evaluar la eficiencia de tratamiento de aguas residuales domésticas, implementando un sistema de humedales Artificiales de flujo subsuperficial horizontal (HAFSSH) en el Colegio Comfamiliar Siglo XXI, sede Campestre Corregimiento de San Fernando, Municipio de Pasto, Colombia. Para el desarrollo del estudio se diseñó e implemento una trampa de grasas, un tanque séptico, un filtro anaerobio de flujo ascendente (FAFA), seguido del humedal artificial (HAFSSH), donde se llevó a cabo la evaluación del sistema mediante la medición y análisis de algunos determinantes de calidad del agua como DBO5, DQO, Sólidos suspendidos TOTALES SST, nitrógeno total N, fósforo total P, grasas y aceites, Coliformes Totales y Escherichia Coli. Se realizó un monitoreo de calidad de agua a la entrada y salida de cada componente, que permitió determinar la eficiencia de remoción del sistema en los parámetros establecidos, posteriormente se hizo una comparación de las eficiencias obtenidas del humedal artificial respecto al tanque séptico y el FAFA y las eficiencias calculadas con los modelos matemáticos aplicados para el diseño. Los resultados de la evaluación de la eficiencia del Humedal artificial de Flujo Subsuperficial Horizontal (HAFSSH) fueron los siguientes; Remoción de la DBO5 del 93.89% y de la DQO del 84.98%; la eficiencia de remoción de los SST fue del 40%. El N y las grasas y aceites no presentaron eficiencias de remoción, debido a que al igual que los SST, el agua que ingreso al humedal, ya presentaba excelentes condiciones en estos tres parámetros, por motivo de la eliminación en los componentes previos al humedal tal como tanque séptico y el FAFA. Para los parámetros microbiológicos como Coliformes Totales y E Coli, del humedal artificial se obtuvo eficiencias del 99,99 y 99,97% respectivamente. La remoción de los contaminantes a través del sistema implementado en este estudio, garantiza un aprovechamiento óptimo y eficaz del recurso hídrico. Sin embargo, se debe resaltar que la finalidad y uso de este recurso es para riego de los cultivos y jardines presentes en el Colegio.

"Evaluación de la respuesta inmune frente a cepas locales de Mycobacterium tuberculosis multirresistentes a drogas" (2010). Yokobori, Noemí. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La tuberculosis multirresistente a drogas (MDR-TB) representa un gran desafío sanitario. En el presente trabajo evaluamos en monocitos (Mo) y macrófagos (MΦ), las estrategias de evasión de la respuesta inmune de dos aislados clínicos MDR de Mycobacterium tuberculosis (Mtb) relacionados genéticamente: la cepa M causante de un extenso brote y la cepa 410 de baja virulencia. Nuestros resultados muestran que: 1) la inducción de citoquinas (CK) y respuesta linfoproliferativa Mtb-específica dependen tanto del status inmunológico del huésped como del genotipo de Mtb, 2) estas diferencias podrían deberse en parte al aumento en el subset de Mo-CD16+ en sangre periférica, 3) la cepa M es pobre inductora de TNF-α tanto en Mo como en MΦ, 4) ambas cepas MDR indujeron una cinética retardada de expresión de IL-1β en Mo, 5) algunos mecanismos de evasión, como la down-regulación del receptor de IFN-γ serían comunes a las cepas estudiadas, 6) la replicación intracelular de la cepa M fue lenta, mientras que 410 se multiplicó rápidamente dentro del MΦ, 7) la infección del MΦ con la cepa 410 induce tempranamente una fuerte secreción de TNF-α e IL-10, 8) la cepa M es capaz de interferir con señales proapoptóticas de la vía intrínseca y probablemente de la vía extrínseca, 9) la cepa 410 indujo predominantemente muerte por necrosis. En base a estos resultados, y a diferencia de lo reportado para otros genotipos virulentos de Mtb, proponemos que el éxito de M se debería a su capacidad de mantenerse en un estado de quiescencia, preservando su nicho y minimizando la respuesta inflamatoria en las etapas tempranas de la infección.

Abstract:
Multidrug-resistant tuberculosis (MDR-TB) is a major challenge to public health. We tested in monocytes (Mo) and macrophages (MΦ), the immune evasion strategies of two MDR clinical isolates of Mycobacterium tuberculosis (Mtb) genetically related: strain M, responsible for a large outbreak and the low virulence strain 410. Our results show that: 1) induction of cytokines (CK) and Mtb-specific T-cell proliferation are dependent on both the host's immune status and the genotype of Mtb, 2) these differences could be, in part, due to the increase in CD16+Mo-subset in peripheral blood, 3) strain M is poor inducer of TNF-α in both Mo and MΦ, 4) both MDR strains induced a delayed kinetics of IL-1β expression in Mo, 5) some immune evasion mechanisms such as the down-regulation IFN-γ receptor would be common to the strains tested, 6) intracellular replication of strain M was slow, while 410 multiplied rapidly within the MΦ, 7) infection of MΦ with strain 410 induces an early and strong secretion of TNF-α and IL-10, 8) strain M is capable of interfering with proapoptotic signaling of the intrinsic and, probably, also the extrinsic pathways, 9) 410-induced cell death was predominantly by necrosis. Our results suggest that, in contrast with previous reports with other virulent genotypes Mtb, the success of M is due to its ability to stay in a state of quiescence, preserving its niche and minimizing the inflammatory response in the early stages of infection.

"Evaluación de la respuesta inmune humoral contra el virus de la fiebre aftosa inducida por inmunógenos tradicionales y recombinantes : Desarrollo de métodos de vacunación alternativa utilizando proteínas quiméricas y ADN como inmunógenos" (2002). Capozzo, Alejandra Victoria. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La fiebre aftosa (FA) es una enfermedad viral altamente contagiosa que afecta a animales de pezuña hendida, como vacunos y porcinos; es causante de epidemias repentinas que acarrrean grandes pérdidas económicas. El control de esta enfermedad se realiza mediante la aplicación regular de vacunas a virus inactivado que son efectivas, pero que poseen el riesgo de re-introducción de la enfermedad debido al manipuleo de grandes cantidades de vian infeccioso o por la inactivación incompleta del antígeno. Este trabajo tiene por objetivos establecer parámetros serológicos que puedan ser útiles para la evaluación del nivel de protección de los animales, y el desarrollo de una estrategia de vacunación alternativa que conjugue seguridad y bajos costos. En primer lugar se evaluó la respuesta imnune humoral y su eventual correlación con el grado de protección contra la fiebre aftosa. Se estableció una correlación entre los niveles de isotipo IgG1 especificos contra VFA y protección. En una segunda parte, se construyeron genes quiméricos codificantes del gen para la proteína G del virus de la estomatitis vesicular (VSV-G),una glicoproteína altamente inmunogénica que posee epitopes T funcionales, como carrier del principal sitio antigénico presente en la proteína capsidal VP1 de VFA (ASA), blanco de la respuesta neutralizante. Estos genes quiméricos, uno con la secuencia entera de la G y otro con una deleción de la zona central y 3’, fueron expresados y caracterizados antigénicamente en sistemas libre de células y por transfección de células de mamíferos. Las proteínas quiméricas lograron exponer el epitope elegido en la conformación adecuada, similar sino idéntica a la presente en los viriones. Las construcciones expresadas en el sistema Baculovirus recombinante-céluias de insecto fueron inoculadas i.m. en bovinos en dos dosis de 30 ó 100 μg. La versión delecionada indujo una respuesta humoral con altos niveles de IgG1 y buena actividad neutralizante a los 90 días post vacunación (d.p.v). Se evaluaron las mismas construcciones como vacunas genéticas. Ratones vacunados con ADN codificante para estas quimeras respondieron con un perfil de respuesta Th1, presentando altos niveles de IgG2a. Bovinos vacunados con ADN codificante de la versión delecionada de la quimera, desarrollaron títulos de IgG1 anti VFA específicos tras una sola dosis (15 d.p.v) de 150 μg, pero los niveles de IgG2 prevalecieron a partir de los 45 d.p.v. En este trabajo se propone una estrategia de control de la FA mediante vacunación, combinando la utilización de proteinas recombinantes y ADN a fin de lograr una respuesta protectiva a largo plazo, sin los riesgos asociados a las vacunas a virus inactivado.

Abstract:
Foot and mouth disease (FMD) is a highly contagious viral disease of cloven-hoofed animals. It has the potential to cause explosive epidemics and huge economic losses to the agricultural industry worldwide. FMD control relies on regular vaccination with inactivated virus, which have been proven to be effective. However, current vaccines posses the risk of re-introduction of the disease due to handling of large amounts of infectious virus and by incomplete inactivation of the antigen. The main objectives of this work are, searching for serological parameters that could be useful in the evaluation of the potency of anti FMDV vaccines and subsequently, to develop efficient recombinant immunogens with potential as a safe and low cost non infectious candidates for massive vaccination of farm animals against FMDV. Qualitative aspects of bovine humoral response to commercial vaccines were first evaluated through the analysis of more than 200 samples. It was found that high levels of IgG1 isotype are directly correlated with protection and recovery from the disease. In a second part, hybrid genes coding for a carrier protein and a major antigenic site of FMDV VP1 were developed. Vesicular stomatitis virus (VSV) glycoprotein (G), which is highly immunogenic and has T-cell epitopes along its sequence, was chosen as a carrier for the 140-160 FMD virus major B- epitope of the capsidal protein VP1. One chimeric gene having the whole sequence of VSV-G and a second one, containing only the 3' third of the G gene, displayed FMD virus B-cell epitope activity, conformational dependent and somehow emulating the exposure encountered in the whole virus. Cattle vaccinated twice with 30 or 100 μg of the deleted baculovirus-expressed version of the chimera elicited a humoral immune response with high specific IgG1 levels and efficient neutralizing activity at 90 days post vaccination. DNA vaccines, that elicit both humoral and cellular immune response and are stable at room temperature, were also evaluated. Mice vaccinated with DNA encoding the G-VFA chimeras elicited a Th1 biased response, with high IgG2a levels. Cattle vaccinated with equivalent chimeric genes developed high IgG1 titers after 1 dose (150 μg) at 15 days post vaccination, but higher IgG2 levels were induced at longer periods. A strategy based in combining protein and DNA vaccination is proposed so as to immunize young animals and achieve a long lasting response, avoiding the risks associated with whole-virus inactivated vaccines.

"Evaluación de la respuesta inmune inducida por distintos inmunógenos recombinantes dirigidos contra el Virus de la Fiebre Aftosa" (2012). Romanutti, Carina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo del presente trabajo de tesis fue, emplear distintos sistemas de expresión para el desarrollo de vacunas recombinantes y de estrategias de vacunación contra el virus de la fiebre aftosa (VFA). Se trabajó con vacunas derivadas de vectores virales no replicativos (Adenovirus y Herpesvirus) y vacunas génicas (pCI). El antígeno utilizado fue la poliproteína P1, cuyos subproductos son las proteínas capsidales virales, junto con la proteína 2A y la proteasa 3C, del serotipo O1/Campos del VFA. Con las vacunas recombinantes disponibles (HSV-P12A3C, Ad-P12A3C y pCI-P12A3C) y una vacuna convencional a virus inactivado (VFAi) en formulación oleosa, se procedió a estudiar la respuesta inmune generada, utilizando estrategias de tipo prime-and-boost homólogo y heterólogo en un modelo murino. En general, la vacunación heteróloga con vectores virales fue más efectiva que la homóloga, en inducir una respuesta inmune α-VFA, tanto humoral como celular. Los títulos más altos de anticuerpos (Acs) específicos correspondieron a los animales vacunados con 2 dosis de VFAi, pero los ratones primados con Ad-P12A3C que recibieron una dosis de refuerzo con HSV-P12A3C o VFAi, también indujeron títulos significativamente más altos que los otros grupos analizados. Los regímenes de inmunización con vectores virales generaron respuestas con predominio de Acs de isotipo IgG2a, sugiriendo un sesgo hacia una respuesta de tipo Th1, mientras que en la inoculación con 2 dosis de VFAi se generaron altos niveles de Acs con predominio de isotipo IgG1. Estos resultados fueron confirmados por la evaluación de las citoquinas inducidas (IL-2, IFNγ e IL-4). En los ensayos de desafío no se encontraron diferencias significativas en el porcentaje de protección, entre el esquema de dos dosis de vacuna convencional frente a una dosis de vacuna vectorial con un refuerzo de HSV-P12A3C o VFAi. Por otra parte, la re- exposición de los distintos grupos inmunizados al virus inactivado a los 5 meses, generó un rápido aumento de los anticuerpos específicos α-VFA en todos los grupos, demostrando la presencia de células B de memoria, funcionales in vivo. En este mismo tiempo post vacunación, los ratones inmunizados con la combinación Ad-P12A3C/HSV-P12A3C fueron capaces de reducir la viremia post desafío en un 100%. Es decir que esta combinación de inmunógenos resultó efectiva para desencadenar una respuesta inmune protectiva a mediano plazo contra el VFA en ratones adultos.

Abstract:
In the present work, different recombinant vaccine candidates and vaccination regimes against foot-and-mouth disease virus (FMDV) were tried. The antigen used was the P1 polyprotein, which includes the viral capsid proteins. Defective vectors derived from heterologous virus (adenovirus and herpesvirus) and a classic genetic DNA vector (pCI) carrying these sequences were constructed. To characterize the immune responses, a well known murine model was used. BALB/c mice were immunized following a prime-and-boost delivery system combining the different vaccine candidates (HSV-P12A3C, Ad-P12A3C, and pCI-P12A3C) and the inactivated adjuvanted virus (FMDVi), mimicking the conventional vaccine. The heterologous prime-and-boost regimes resulted in more effective humoral and cellular immune responses than the homologous viral vector boosting. The highest antibody titers corresponded to the groups vaccinated with 2 doses of inactivated virus, but significant high titers were also obtained when mice primed with Ad-P12A3C were boosted either with HSV-P12A3C or FMDVi. The predominat presence of antibodies of the IgG2a isotype and increased levels of mRNA of IL-2 e INFγ was detected in the groups immunized with the viral vectors, suggesting a Th1 response, while inoculation with conventional vaccine generated high antibodies titers of the IgG1 isotype. No difference was found in protection from challenge with live O1/Campos virus, between animals vaccinated with inactivated virus or primed Ad-P12A3C and boosted either with HSV-P12A3C or FMDVi. The rapid induction of specific antibodies and antibody secreting cells in animals re-exposed to FMDV 5 months later, suggest that B memory and plasmatic cells were functional in vivo. At the same time point after vaccination, mice vaccinated with the combination Ad-P12A3C/HSV-P12A3C were 100% protected from viral challenge, suggesting that this combination was effective to elicit a protective immune response in the medium term against FMDV in adult mice.

"Evaluación de la sensibilidad en detectores de trazas nucleares" (1999). Saint Martín, María Laura Gisela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Evaluación de la toxicidad de los contaminantes Cobre, Nonilfenol y Diazinón sobre embriones y larvas de Rhinella (Bufo) arenarum" (2013-03-18). Aronzon, Carolina Mariel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La exposición de Rhinella arenarum a Cobre, Nonilfenol y Diazinón causó importantes efectos tóxicos letales y subletales sobre las etapas tempranas de su ciclo de vida. El Cobre resultó el más tóxico: la CL50-168h para los embriones y larvas fue de 19,5 μg Cu2+/L y 51 μg Cu2+/L, respectivamente, y el Potencial Teratogénico fue de 2. En la evaluación de la susceptibilidad estadio-dependiente al Cobre los embriones en los estadios de blástula y gástrula mostraron la más alta resistencia al Cobre, mientras que los estadios organogénicos fueron los más susceptibles. La toxicidad del Cobre por exposición continua de larvas tempranas alcanzó su valor máximo durante las primeras 24 h. Se confirmó el carácter pro-oxidante del metal. En larvas tempranas la primera vía de defensa antioxidante es la Superóxido Dismutasa. Se encontraron diferencias en la susceptibilidad al Cobre en camadas provenientes de sitios con diverso grado de contaminación, lo que fue relacionado con los mecanismos de defensa antioxidantes. El Nonilfenol resultó la segunda sustancia más tóxica. La susceptibilidad de los organismos expuestos al Nonilfenol a partir del inicio del desarrollo embrionario y larval fue tiempo-dependiente, aunque el período larval resultó significativamente más sensible, así la CL50-168h para embriones y larvas fue de 0,96 mg Nonilfenol/L y 0,37 mg Nonilfenol/L, respectivamente. El Diazinón resultó el menos tóxico, sin embargo, el Potencial Teratogénico fue mayor a 2 y el plaguicida causó severos efectos neurotóxicos. La susceptibilidad de los organismos expuestos al Diazinón a partir del inicio del desarrollo embrionario y larval fue tiempo-dependiente, aunque el período larval resultó significativamente más sensible, así la CL50-168h para embriones y larvas fue de 20 mg Diazinón/L y 6,7 mg Diazinón/L, respectivamente. La incorporación del Diazinón resultó concentración-dependiente, disminuyendo con el tiempo de exposición, y estadiodependiente, con un Factor de Bioconcentración de 107 en los estadios embrionarios. La toxicidad conjunta de las diferentes mezclas Cobre-Diazinón y Cobre-Nonilfenol tanto para los embriones como para las larvas resultaron en un patrón general de antagonismo. Las diferentes mezclas de Diazinón y Nonilfenol presentaron un comportamiento entre aditivo y sinérgico principalmente durante el período agudo.

Abstract:
The exposure to Copper, Nonylphenol and Diazinon on Rhinella arenarum caused important lethal and sublethal toxic effects on early life stages of the development. Copper was the most toxic, with a LC50-168h for embryos and larvae of 19.5 μgCu2+/L and 51 μgCu2+/L, respectively and the Teratogenic Potential was 2. In the stagedependent evaluation to copper, embryos at blastula and gastrula stages were the most resistant to copper, whereas the organogenic period were the most susceptible. Toxicity of continuous exposure from larvae reached the maximal value at the first 24h. It was confirmed the pro-oxidant character of the metal. The fisrt antioxidant defense pathway in larvae was the Superoxide Dismutase. There were differences in the susceptibility to Copper in litters captured in sites with different degrees of pollution, this were related with antioxidant defenses. Nonylphenol was the second most toxic compound evaluated. The susceptibility of organisms exposed to Nonylphenol from the beginning of the embryonic development was time-dependent, although the larval period was significantly more sensitive, so the LC50-168h for embryos and larvae was 0.96 mg Nonilfenol/L and 0.37 mg Nonilfenol/L, respectively. Diazinon was the less toxic compound. However, the teratogenic potential was more than 2 and the pesticide caused severe neurotoxic effects. The susceptibility of organisms exposed to Diazinón from the beginning of the embryonic development was time-dependent, although the larval period was significantly more sensitive, so the LC50-168h for embryos and larvae of 20 mg Diazinón/L and 6.7 mg Diazinón/L, respectively. Diazinón uptake was concentration-dependent, decreasing with time of exposure, and stage-dependent, with a Bioconcentration Factor of 107 in embryonic stages. The joint toxicity of copperdiazinon and copper-nonylphenol both for embryos and larvae was a general pattern of antagonist. In the case of diazinon - nonylphenol mixture the behavior was between additive and synergistic, especially in the acute period.

"Evaluación de la toxicidad del endosulfán, la cipermetrina y un fungicida de uso comercial, solos y en mezclas sobre el desarrollo temprano de Rhinella arenarum (Amphibia: Anura: Bufonidae)" (2014-06-26). Svartz, Gabriela Verónica. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se evaluó la toxicidad aguda y crónica de dos insecticidas, endosulfán (ES) y cipermetrina (CY), y del fungicida Maxim® XL (2,5% fludioxonil, 1,0% metalaxil- M), sobre el desarrollo embrio-larval de Rhinella arenarum, un anfibio autóctono de Argentina. Los resultados mostraron que los insecticidas fueron más tóxicos (el ES en el período agudo y la CY en el periodo crónico) en relación al fungicida. La susceptibilidad a estos agroquímicos fue estadio-dependiente encontrándose un patrón diferente para las tres sustancias de acuerdo al modo de acción de cada una de ellas. La toxicidad de los insecticidas aumentó significativamente en los estadios tardíos, siendo el periodo larval el más sensible y causando severas alteraciones en el comportamiento en concordancia con su acción neurotóxica. Por el contrario, la mayor toxicidad del Maxim® XL fue observada en los estadios embrionarios tempranos (blástula el más sensible), con severos efectos teratogénicos. La interacción de ES y CY en mezclas, mostraron tanto un efecto antagónico como aditivo durante los periodos agudo y crónico corto, así como sinergismo durante el periodo crónico. La toxicidad de un formulado comercial con CY resultó hasta 7 veces mayor que la del ingrediente activo, hecho muy relevante considerando que es el producto comercial el que efectivamente se aplica en los cultivos. Teniendo en cuenta los resultados de toxicidad y el análisis de peligrosidad, estos tres agroquímicos utilizados a nivel mundial, y en particular en nuestro país, podrían poner en riesgo la continuidad de las poblaciones de esta especie representativa de la herpetofauna regional asociada a los agroecosistemas de nuestro país.

Abstract:
The acute and chronic toxicity of two insecticides, endosulfan (ES) and cypermethrin (CY), and of the Maxim® XL fungicide (2.5% fludioxonil, 1.0% metalaxyl- M) was assessed on the embryo-larval development of Rhinella arenarum, a native amphibian of Argentina. The results showed that the insecticides were more toxic (ES during the acute exposure period and CY during the chronic exposure period) than the fungicide. The sensitivity to these agrochemicals was stage-dependent establishing a different pattern for the three substances according to their mode of action. The toxicity of the insecticides was significantly increased in later stages, the larval period being the most sensitive, and causing severe alterations in behaviour consistent with its neurotoxic action. In contrast, the greater toxicity of Maxim® XL was observed at early embryonic stages (blastula stage being the most sensitive), with severe teratogenic effects. The interaction of ES and CY in mixtures showed antagonistic and additive effects during the acute and short term chronic periods, and synergism during the chronic period. The toxicity of a CY commercial formulation was 7 times greater than the active ingredient, a very relevant fact considering that the commercial product is actually applied on crops. Taking into account the results of toxicity and hazard assessment, these three agrochemicals worldwide used, and particularly in our country, could threaten the continuity of populations of this species, representative of the regional herpetofauna associated to agroecosystems of our country.

"Evaluación de métodos inmunológicos de importancia comercial en la Argentina para el análisis de maíz, "gluten meal" y "gluten feed"" (1998). Galicio, Mariana. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Evaluación de triticale, trigo y centeno como sustratos para la producción de aflatoxinas" (1999). Bilotti, Luis Gustavo. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El triticale, cereal sintético derivado del cruzamiento del trigo con centeno, es un cultivo con promisorias perspectivas en cuanto a satisfacer las necesidades del hombre de más y mejores alimentos. Además de su buen rendimiento, ya sea como forrajera o para la producción de grano, el triticale parece combinar algunas de las mejores cualidades de sus antecesores. Junto con las aptitudes del trigo para la elaboración de diferentes tipos de alimentos, posee la capacidad que tiene el centeno de adaptarse a ambientes adversos, así como la resistencia a diversas plagas y enfermedades. La información existente sobre la contaminación de este cereal con micotoxinas es muy escasa. El principal objetivo de este trabajo de Tesis fue evaluar el comportamiento del triticale como sustrato para la biosíntesis de aflatoxinas, en comparación con los cultivos parentales. Para ello se obtuvieron las curvas de acumulación de aflatoxinas B1, B2, GI y G; en función del tiempo para los tres sustratos inoculados con una cepa toxicogénica (Aspergillus parasiticus NRRL 2999) e incubados en condiciones ambientales controladas (25°C y actividad acuosa 0,925) durante 10 semanas. Los parámetros cinéticos obtenidos de estas curvas ( Pi: período de iniciación de la producción de aflatoxinas; Am: máxima concentración acumulada; Tm: tiempo necesario para alcanzar la acumulación máxima) permitieron comprobar que los dos cereales progenitores se comportan de manera diferente. Las concentraciones máximas de aflatoxinas fueron mayores en el centeno que en el trigo (de 5 a 10 veces para las diferentes toxinas), observándose también en el centeno una rápida coloniución por parte del hongo toxicogénico. El triticale mostró un comportamiento similar al del trigo y ambos, también en comparación con otros granos como maíz y girasol, parecen ser sustratos poco propensos a la contaminación con aflatoxinasla diferencia de comportamiento no parece estar relacionada con el tamaño de los granos, como se ha sugerido, sino con algunos de los constituyentes de la composición química que podrían tener influencia en la biosíntesis de las aflatoxinas. Otro aporte del presente trabajo es la puesta a punto de un método modificado de análisis de aflatoxinas que demostró poseer adecuadas caracteristicas de ejecución en los tres sustratos estudiados.

Abstract:
Triticale is a hybrid resulting from crossing wheat and rye. It combines many of the best qualities of both its prodigious parents. It can have most of wheat’s qualities for making various types of noodles, pastries and some breads; and it can have most of rye’s disease resistance, drought tolerance and adaptability to harsh environments. Little is known about mycotoxins contamination in this promising crop. The main purpose of this Thesis was to evaluate the triticale as substrate for aflatoxin accumulation in comparison with its parents. Aflatoxins (B1, B2, G, and G2 ) accumulation curves were obtained for the three substrates inoculated with Aspergillus parasiticus NRRL 2999 and incubated at 25°C and water activity 0,925 for 10 weeks. Kinetic parameters from the accumulation curves (Pi: initiation period; Am: maximum accumulation ; Tm: time for maximum accumulation) were analyzed. Rye was more prone than wheat to a fast colonization by A. parasiticus and accumulated larger aflatoxins quantities over the whole incubation period. Maximum aflatoxins concentrations on rye were larger (5 to 10 times for each toxin) than those obtained on wheat. Triticale behaved similarly to wheat: both of them were poor substrates for aflatoxins production, also in comparison with other grains such as corn and sunflower. It is well known that, in general, natural incidence of aflatoxins is low in small grains, but this behaviour seems to bc more related with chemical composition than with the size of the seeds. In this work a modified method was proposed for the aflatoxin analysis. According to its analytical attributes, this method is suitable for aflatoxins analysis on wheat, rye and triticale.

"Evaluación de vacunas peptídicas contra el virus de la fiebre aftosa en bovinos : Aislamiento y caracterización de mutantes de escape" (1999). Tami, María Cecilia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
EI virus de la fiebre aftosa (VFA) pertenece a la familia Picomaviridae y es el agente causal de la fiebre aftosa (FA). Esta enfermedad causa grandes pérdidas económicas en el mundo y se controla mediante vacunación regular con una vacuna a virus inactivado. Esta vacuna presenta desventajas relacionadas principalmente con la manipulación de grandes cantidades de virus vivo y la inactivación incompleta de las preparaciones virales. En este trabajo se evaluó el potencial de vacunas peptídicas representando los sitios antigénicos A y C derivados del VFA serotipo C3 unidos a un epitope para células T derivado del VFA de seotipo O, como alternativa a las vacunas convencionales. Con este fin, se realizaron 5 experimentos de vacunación que involucraron 120 bovinos en total y se estudiaron los efectos de diferentes esquemas de vacunación y distintas dosis de inmunógeno. En cada experimento se evaluó la inducción de anticuerpos neutralizantes, la linfoproliferaciónen respuesta a antígenos virales y la protección frente al desafío con virus homólogo. Los mayores niveles de protección alcanzados fueron del 40% y no fue posible establecer una correlación entre protección y título de anticuerpos neutralizantes o respuesta linfoproliferativa frente a virus entero. En 12 de 29 lesiones rescatadas de los bovinos vacunados con péptidos sintéticos que no resultaron protegidos frente al desafío viral, se aislaron virus mutantes con sustituciones aminoacídicas únicas en la región del sitio A, en posiciones críticas para la antigenicidad del VFA. Las posiciones que se vieron alteradas fueron R (141) —>G incluida en el triplete RGD altamente conservado en los diferentes serotipos de VFA, L (144) —>P y L (147) —>P. Las variantes virales se caracterizaron fenotipicamente en cuanto al tamaño de placa y a su velocidad de crecimiento y antigénicamente mediante ensayos de ELISA y neutralización con un panel de anticuerpos monoclonales secuenciales y conformacionales. Los resultados mostraron que las sustituciones L(144)—P y L(147)-P tienen un efecto muy importante en la antigenicidad del VFA y afectaron múltiples epitopes dentro del sitio antigénico A. La mutación R(141)-G, en cambio, tuvo un efecto menor afectando sólo la reactividad con un AcM. Se discuten las posibles modificaciones en la formulación de las vacunas peptidicas para aumentar su capacidad protectiva y las implicancias de las sustituciones aminoacídicas encontradas en las variantes virales.

Abstract:
Foot-and-mouth disease virus (FMDV) belongs to the Picomaviridae family and is the causative agent of foot-and-mouth disease (FMD). FMD is the economically most important disease of cattle and other farm animals and its control is based on regular vaccination with an inactivated whole-virus vaccine. However, there are several disadvantages in the use of such vaccines related to the risk of reintroduction of the disease by the handling of large ammounts of infectious virus or by incomplete inactivation of the antigen. In this work, the potential of peptide vaccines bearing antigenic site A and C regions and a T-cell epitope of FMDV serotype C3. was evaluated as an alternative to conventional vaccines. For this purpose, 5 different vaccination experiments, involving a total of 120 bovines, were carried out and the efects of modifications in the timing of the immunizations and of different doses of peptides were studied. Induction of neutralizing antibodies, lymphoproliferation in response to viral antigens and protection against challenge with homologous infectious virus were examined. The highest level of protection achieved was of 40% and protection showed a limited correlation with serum neutralization activity and lymphoproliferation in response to whole virus. In 12 out of 29 lesions from peptide vaccinated cattle that were not protected after challenge, FMDV mutants with a unique amino acid substitutions at antigenic site A, were identified. The replacements found were R(141)-G, at the highly conserved RGD motif, L(144)-P and L(147)-P. The results showed that substitutions L(144)-P and L(147)-P were critically involved in FMDV antigenicity afecting multiple epitopes within antigenic site A. However, substitution R(141)—G had a minor effect, affecting the reactivity of just one Mab. Variant viruses were also phenotipically and antigenically characterized. Possible modifications of the vaccine formulation to increase protective activity as well as implications of the substitutions identified in the viral mutants are discussed.

"Evaluación del estado de conservación de dunas costeras: dos escalas de análisis de la costa pampeana" (2010). Monserrat, Ana Laura. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo se propone un modelo regional de las comunidades vegetales de la costa de dunas pampeanas, y se aplica para evaluar el estatus de conservación de sus diferentes paisajes. Para ello se desarrolla una regionalización de la costa bonaerense en función del patrón geomorfológico, que luego se confirma mediante el análisis de imágenes satelitales y relevamiento en campo de las comunidades vegetales. Se relevaron 256 parcelas en 6 sitios de la costa. Se determinaron 130 especies vegetales en total. La distribución de la vegetación se analizó con métodos multivariados permitiendo definir un patrón asociado a la geomorfología en escala regional y local. Se definieron 2 regiones dentro de las costas de dunas pampeanas, las cuales se corresponden con las Barreras Medanosas Oriental y Austral. La mayor riqueza y diversidad se encontró en el centro de la región austral. Se elaboró un modelo de sucesión espacial de comunidades vegetales en el gradiente mar-tierra en función de los aspectos estructurales y florísticos con diez ambientes que se distinguen tanto por las comunidades que contienen como por su geomorfología típica. Los valores de riqueza de bordes y de índice de conectividad indican un estado de conservación variable a lo largo de la costa, pero también que el gradiente de ambientes, propuesto como modelo, se mantendría en buen estado en la costa pampeana, en los seis sitios estudiados.

Abstract:
In this work a regional model of the vegetal communities from the Pampas dune coast is developed, and it is applied to assess the conservation state of its different landscapes. In order to achieve it, a regionalization of the coast based on the geomorphologic pattern is carried out, by the use of remote sensing tools and field survey on the vegetal communities. 256 plots in 6 different sites of the coast were sampled. 130 vegetal species were determined all through the study area. The vegetation distribution was analyzed by means of multivariate methods, which allowed defining a pattern associated to the geomorphology in the regional as much as in the local scale. 2 regions were defined within the Pampas dune coasts, which correspond with Eastern and Austral Sandy Barriers. The greater wealth and diversity were in the central section of the austral region. A spatial succession model of vegetal communities in the land-to-shore gradient was elaborated; the model were based on the structural and floristic aspects, and it resulted in ten zones distinguished by the communities that contain and the landform where are settled down. The number of edges and the connectivity index indicate a state of variable conservation throughout the coast, but also that the zonal gradient proposed as model would be on in good state in the Pampas coast, in the six studied sites.

"Evaluación del riesgo de introducción de especies invasoras en agua de lastre en buques que operan en el puerto de Buenos Aires" (2016-11-11). Avila Velandia, María Fernanda. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La creciente movilidad de personas y mercaderías entre los países del mundo generó un aumento de los impactos ecológicos en general, y de los relacionados con la introducción de especies exóticas en particular. Estas introducciones han causado dramáticos efectos en ambientes terrestres, marinos y de agua dulce, frecuentemente con severas consecuencias económicas y ambientales. Para los organismos acuáticos, la fuente de introducción de especies más importante es el agua de lastre de los buques comerciales. Se estima que en el mundo se movilizan entre 3000 y 5000 millones de toneladas de agua de lastre por año, transportando unas 7000 especies de animales y plantas. Si bien existe reglamentación tanto nacional como internacional orientada a mitigar estos problemas, el grado de cumplimiento de estas normas es cuestionable. Con el fin de verificar el cumplimiento de las reglas en vigencia, llevamos a cabo un relevamiento de las declaraciones de entrada y de manejo de agua de lastre presentadas por todos los buques que ingresaron al Puerto de Buenos Aires entre junio de 2010 y junio de 2011. Los resultados indican que en más del 70% de las entradas a puerto (del mismo o diferentes buques) la información referente al agua de lastre es inexistente o seriamente deficiente, imposibilitando una evaluación objetiva del grado de riesgo involucrado en el vertido de aguas de lastre en el puerto y sus inmediaciones. Para llevar a cabo una verificación independiente de las declaraciones de manejo de agua de lastre suministradas por los buques, contrastamos los volúmenes de agua descargada declarados con estimaciones de los volúmenes que potencialmente podrían haber sido eliminados en este puerto mediante la información del aumento en carga de los buques al zarpar con respecto a la carga al entrar a puerto (esta diferencia normalmente se compensa eliminando agua de lastre en el puerto correspondiente). Esta estimación sugiere que, si bien solamente menos de una decena de entradas a puerto informaron la intención de deslastrar en el mismo, en al menos 220 casos debe haber habido descarga de agua de lastre en las inmediaciones del puerto de Buenos Aires. El grado de riesgo de estas descargas en función de su probabilidad de introducir especies exóticas en el estuario del Río de la Plata se estimó comparando la similitud ambiental (salinidad y temperatura) entre los sitios declarados de origen del agua de lastre y el estuario, así como la proximidad geográfica y el grado de conexión natural entre ambas zonas. Este análisis indica que, para las zonas de agua dulce y mixohalina del estuario, el tráfico del período estudiado representa un riesgo nulo o muy bajo. Por el contrario, el riesgo para la zona marina de las costas de Buenos Aires fue alto según nuestras estimaciones. Se esbozan lineamientos generales orientados a mitigar los problemas detectados y fortalecer las capacidades locales para fiscalizar más eficientemente el cumplimiento de las normas vigentes en la materia.

Abstract:
The growing international mobility of people and goods around the world has had growing environmental impacts, in particular those associated with the introduction of alien species. Some of these introductions have had dramatic impacts on terrestrial, marine and freshwater habitats, often with severe economic and environmental consequences. For aquatic plants and animals, the most important source of biological introductions is the ballast water of commercial vessels. Around 3000-5000 millions metric tons of ballast water are carried around the world each year, transporting ~7000 species. Although transport and discharge of ballast water are regulated both on the international and on national levels, compliance with these regulations is questionable. In order to assess the degree of compliance with current regulations, we surveyed the ballast water reporting forms submitted by all incoming vessels in the port of Buenos Aires between June 2010 and June 2011. Our analyses show that for over 70% of the port calls (by the same or different vessels), ballast water-related information is severely flawed or missing altogether, precluding an objective assessment of the risk associated with the introduction of species in this area. In order to perform an independent assessment, we contrasted the information contained in the ballast water reporting forms with that on the weight of the cargo of each vessel on arrival and on departure, assuming that for ships that left with more cargo than they had upon arrival differences in weight have most probably been compensated with ballast water discharges in or close to Buenos Aires. This analysis suggests that, while only about 10 ships reported having deballasted in Buenos Aires, at least 220 port calls are very likely to have been associated with ballast water discharges. The risk of introduction of alien species associated with these discharges was analyzed assessing the environmental similarity (temperature and salinity) between the Río de la Plata estuary and the donor areas (according to the ballast water reporting forms), as well as the natural geographic connectedness between the two. Our results indicate that for the freshwater and the brackish sections of the estuary the risk was none or very low. On the other hand, for the offshore, marine section, the risk was much higher. We offer some guidelines aimed at mitigating the problems detected and discuss capacity-building measures for more efficiently dealing with the problem of enforcing compliance with current and future ballast water management regulations locally.

"Evaluación del sistema planta hospedera-huésped alternativo como estrategia para el control biológico de pulgones (Hemiptera: Aphididae) en sistemas de producción hortícola en cultivos protegidos" (2012). Andorno, Andrea Verónica. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los áfidos constituyen una de las plagas de mayor importancia económica sobre una gran variedad de cultivos. El control biológico por conservación utilizando plantas hospederas y fitófagos huéspedes alternativos ha sido exitosamente utilizado en el manejo de áfidos plaga. Esta modalidad consiste en el empleo de especies vegetales hospederas de herbívoros inócuos para el cultivo de interés pero que son utilizados por los enemigos naturales de la plaga como huéspedes alternativos. El objetivo de esta tesis fue evaluar el empleo de este sistema como estrategia para el control del áfido plaga, Myzus persicae por el parasitoide Aphidius colemani en cultivos hortícolas (rúcula y pimiento). Los principales aportes de esta tesis han sido: Conocimiento de las asociaciones áfidos - enemigos naturales parasitoides en cultivos hortícolas y plantas hospederas no cultivadas. Conocimiento de la biología y parámetros poblacionales de M. persicae sobre el cultivo de rúcula. Conocimiento de los atributos biológicos y de la preferencia del parasitoide A. colemani sobre las asociaciones cultivo- huésped plaga y planta hospedera alternativa- áfido alternativo, R. padi. Conocimientos sobre la compatibilidad de empleo de insecticidas y el parasitoide A. colemani. Evaluación del sistema planta hospedera – huésped alternativo para el control biológico de M. persicae por el parasitoide A. colemani.

Abstract:
Aphids are a common problem on a wide variety of crops. Alternative host plant - phytophagous systems has been successfully applied in conservation biological control for aphid pests. The use of alternative host plant – phytophagous provides an alternative suitable food resource for those natural enemies controlling the target pest with no threat for the crop of interest. The aim of this thesis was to evaluate the use of the alternative host plant - aphid - parasitoid system (oat - Rhopalosiphum padi - Aphidius colemani) as a strategy for aphid pest control in vegetable crop systems (arugula and pepper). The most important contributions from this thesis are: Knowledge of the relationships between aphids - natural enemies parasitoids associated to vegetable crops and uncultivated host plants. Knowledge of the biology of the aphid pest M. persicae in arugula. Knowledge on the biology and host preference of the aphid parasitoid A. colemani. Knowledge on the side effect of pesticides on A. colemani. Evaluation of the “alternative host plant- phytophagous system” as a biological control strategy of M. persicae by the aphid parasitoid A. colemani

"Evaluating classification algorithms applied to data streams" (2009-12-21). Donato, Esteban D.. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Eventos celulares durante la fecundación en humanos" (2000). Rawe, Vanesa Y.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Para dilucidar distintos aspectos del proceso de fecundación y desarrollo temprano, en la presente tesis se analizaron oocitos humanos ‘no fecundados' y ‘fecundados anormalmente' luego de Fecundación In Vitro (FIV) e Inyección Intracitoplásmica de Espermatozoides (ICSI), haciendo hincapié en la arquitectura del citoesqueleto, estado de la cromatina, organización del áster y presencia de activaciones abortivas. Se estudiaron un total de 815 oocitos clasificados como ‘no fecundados’ y 153 oocitos clasificados como ‘fecundados anormalmente' luego FIV e ICSI. El material se procesó para inmunofluorescencia mediante la utilización de anticuerpos monoclonales para la detección de B tubulinas y a tubulinas acetiladas. El material genético se estudió con Hoechst 33258 y se analizó por microscopía óptica (UV). El análisis citogenético se realizó en 189 oocitos activados luego de FIV e ICSI según la técnica de Tarkowski (1966). Durante las fallas de fecundación, la principal causa luego de FIV, fue la ausencia de penetración espermática (59,2%), el 10,5% mostró una falla de activación oocitaria y el 15,2% presentó alteraciones en la nucleación o migración de pronúcleos. Luego de ICSI, la principal causa de falla de fecundación fue la alteración de la activación oocitaria (36,5%). Un 18,5% de los oocitos detuvieron su desarrollo en la primera placa metafásica. El estudio cromosómico, permitió identificar la presencia de activaciones abortivas; metafases III (MIII), núcleos reticulares (NR) y núcleos telofásicos (NT). En la fecundación anormal, el patrón más frecuentemente detectado luego de FIV fue la presencia de 3 ó 4 pronúcleos (PNs), (77,4%). Por el contrario, luego de ICSI resultó ser la presencia de 1PN (65,2%). Se observaron leves diferencias en el desarrollo de subnúcleos entre ambos grupos.

Abstract:
In order to dilucidate different aspects during fertilzation and early development, we analyzed “non-fertilized" and “abnormally fertilized" human oocytes after In Vitro Fertilization (IVF) and Intracytoplasmic Sperm Injection (ICSI). We focused on the cytoskeletal architecture, chromatin configuration, aster organization and the presence of abortive activations. We analyzed 815 “non-fertilized"and 153 “abnormally fertilized" oocytes after IVF and ICSI. The material was processed for immunofluorescence to detect B tubulins and a acetylated tubulins. DNA was studied using Hoescht. Chromosomal spreads were performed by Tarkowski's air-drying method in 189 IVFand ICSI oocytes. During fertilization failure, the main reason after IVF was no sperm penetration (59.2%). The remaining oocytes showed different abnormal patterns: oocyte activation failure (10.5%) and defects in pronuclei apposition (15.2%). On the other hand, fertilization failure after ICSI was mainly associated to incomplete oocyte activation (36.5%). An 18.5% of the studied oocytes stopped their development at the metaphase of the first mitosis of the pre-embryo. The Chromosomal spreads allowed identifying abortive activations, including metaphase III and others. Immunofluorescence analysis of abnormal fertilization showed that the most frequent abnormal fertilization pattern found after IVF was the presence of 3 or 4 PNs (77.4%). On the other hand, the presence of 1 PN (65.2%) was the main pattern found after ICSI. No differences between both groups were seen in terms of subnuclei development.

"Eventos de señalización intracelular en células tumorales y su relación con la invasión y metástasis" (1997). Aguirre Ghiso, Julio A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El proceso de invasión y metástasis involucra múltiples factores tanto del huésped como del la célula tumoral. El proceso de invasión se asocia con una alta capacidad migratoria de las células neoplásicas así como con una sobreexpresión de proteasas. En numerosos modelos tumorales y estudios clínicos se ha demostrado la importancia, de las proteasas como el activador del plasminógeno tipo uroquinasa (uPA) y las metaloproteasas (MMP) en el proceso de invasión y metástasis. Sin embargo existe poca información acerca de los procesos que regulan la expresión de estas proteasas en células tumorales. También es claro que la capacidad migratoria que las células tumorales muestran depende de alteraciones en la capacidad de las mismas de adherirse a determinados substratos de la matriz extracelular así como de organizar correctamente su citoesqueleto. Relativo a este último punto, no se conocen en su totalidad las vias de señalización que controlan estos procesos en células tumorales. Se ha demostrado que la transformación con oncogenes que codifican proteínas señalizantes activadas constitutivamente como el v-Ras o v-Src llevan a la sobreproducción de las proteasas antes mencionadas. Asimismo la sobreexpresión de otras enzimas señalizantes como la proteína quinasa C (PKC) también pueden llevar a sobreexpresión de algunas de estas proteasas. Se ha demostrado también como estos mismos oncogenes pueden inducir una mayor capacidad migratoria y una independencia del anclaje para el crecimiento de las células transformadas. Por lo tanto es posible que las señales intracelulares que activan estos y muchos otros oncogenes lleven en forma conjunta, a través de la progresión tumoral, a un aumento de la proliferación, de la migración y de la producción de proteasas. Estos oncogenes y la PKC también activan una vía de señalización conocida como la vía mitogénica clásica que involucra entre otros componentes a la fosfolipasa D (PLD), Raf-1, MEK-1 y ERK1(MAPK o quinasa activadas por mitógenos). En el presente trabajo de tesis se han analizado en una primer etapa, los efectos del alcohol n-butanol, el cual puede funcionar como un inhibidor de la PLD y de la PKC, sobre la organización del tumor primario y sobre la actividad proteolítica asociada a células de un adenocarcinoma de mama murino (LM3). En una segunda etapa se intento establecer puntualmente si la vía de la PLD y/o de la PKC junto con otras vías de señalización, participan en la señal regulatoria que controla la sobreproducción de uPA en las células LM3. Finalmente se analizó si esta misma vía de señalización esta involucrada en la organización del citoesqueleto de actina y de la agrupación de integrinas en puntos de adhesión focal, durante la extensión (spreading) sobre distintos substratos de las células LM3. En la presente tesis hemos demostrado que: A) la capacidad extractiva y, posiblemente la función inhibitoria del n-butanol sobre las enzimas señalizantes antes mencionadas, generó una disminución en la capacidad tumorigénica de las células LM3 así como una disminución en la capacidad no solo de unir específicamente uPA a sus membranas sino también de secretar tanto uPA como MMP-9. B) Por primera vez demostramos que efectivamente la inhibición de la vía de la PLD y de la PKC es capaz de reducir la sobreproducción tanto endógena de uPA como la inducida por agonistas o factores de crecimiento en las células LM3. En esta misma etapa demostramos que existen, operando en forma paralela a la vía antes descripta, otras señales dependientes de tirosina-quinasas y de la PLD, pero independientes de la PKC, en el control de la sobreproducción de uPA. C) Demostramos que el spreading de las células LM3 sobre diferentes substratos y la organización del citoesqueleto de actína y de las integrinas β1 es regulada también por una vía dependiente de PLD/PKC y de tirosina-quinasas. D) Finalmente demostramos que la inhibición de la vía de la PLD/PKC reduce dramáticamente la capacidad metastásica experimental de las células LM3 en ratones BALB/c, correlacionando con la inhibición de los procesos celulares antes mencionados. Los resultados presentados en este trabajo de tesis demuestran por primera vez, con un enfoque experimental farmacológico, la participación de una vía dependiente de la PLD y de la PKC en el control de eventos críticos asociados con el fenotipo invasivo y metastásico, como la producción de uPA, de MMPs y de la organización del citoesqueleto y estructuras de adhesión durante eventos mótiles in vitro y con la capacidad metastásica in vivo. Finalmente nuestros resultados cuadran con la creciente bibliografía indicando que la activación de la vía mitogénica clásica no solo controla la proliferación sino que transduce lo que podría denominarse como la "señal invasiva".

Abstract:
The production of urokinase (uPA) and the migratory capacity of tumor cells are critical processes during invasion and metastasis. We have studied if the signaling pathways dependent on phospholipase D (PLD), protein kinase C (PKC) and tyrosine-kinases are involved in the control of urokinase overproduction in mammary tumor cells (LM3) as well as in the regulation of tumor cell spreading. Results: A) The extractive capacity of n-butanol and, possibly its inhibitory effect onsignal transduction, reduced the tumorigenicity of tumor cells and their capacity to bind and secrete uPA as well as to secrete metalloproteinase-9. B) We describe for the first time that the inhibition of the PLD/PKC pathway renders an inhibition of the endogenous, agonist and growth factor-stimulated overproduction of uPA in LM3 cells. In addition we found that a tyrosine-kinase-dependent pathway controls, coincidentally with the previous pathway uPA overproduction, but in a PLD-dependent and PKC-independent manner. C) We have found that the PLD/PKC pathway controls the spreading of LM3 cells on fibronectin and collagen IV dependent on f-actin cytoskeleton and β1-integrin point contact adhesion structures organization. D) Finally we have found that the inhibition of the PLD/PKC pathway renders a dramatic decrease of the metastatic ability of LM3 cells in BALB/c mice demonstrating the in vivo relevance on the modulation of this pathway.

"Eventos moleculares en el cáncer de próstata" (2007). Sacca, Paula Alejandra. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La HO-1 es una enzima que ejerce funciones citoprotectoras previniendo el daño oxidativo. Dado que existen reportes controvertidos sobre su función en cáncer, en esta tesis se estudió el rol de HO-1 en cáncer de próstata (PCa), planteándonos la hipótesis de que su inducción en células neoplásicas podría contrarrestar el daño peroxidativo. Evaluamos la expresión y localización celular de HO-1 en tumores primarios y en líneas celulares de PCa (sensibles e insensibles a andrógenos) luego de inducir daño oxidativo y/o exposición a un inductor de esta proteína. Estudiamos proteínas regulatorias del ciclo celular y de la apoptosis. Nuestros resultados muestran que en PCa la marcación nuclear de HO-1 está asociada a la carcinogénesis y a la progresión tumoral. Las líneas celulares mostraron diferente expresión basal de HO-1, probablemente relacionado con el nivel de estrés oxidativo endógeno. La exposición a hemina indujo sobre-expresión y translocación de HO-1 al núcleo en ambas líneas celulares. El estrés oxidativo inducido y/o el tratamiento con hemina moduló diferencialmente el control del ciclo celular, la apoptosis y la distribución en las distintas fases en ambos casos. Demostramos por primera vez que la expresión y localización nuclear de HO-1 puede definir un nuevo subgrupo de pacientes con PCa y que la modulación de estos parámetros puede representar una nueva estrategia terapéutica.

Abstract:
Heme oxygenase-1 (HO-1) is a cytoprotective enzyme that prevents oxidative damage. This protein has been detected in several cancer cell lines and tumors, but its role is still controversial and yet to be defined. This dissertation aimed to study its role in prostate cancer (PCa) hypothesizing that its induction in neoplastic cells could counteract the oxidative damage. We assessed the expression and cellular localization of HO-1 in primary tumors of PCa and in androgen-sensitive and androgen-independent cell lines after oxidative stress and/or exposure to a specific HO-1 inductor. Moreover, we studied cell cycle and apoptosis related proteins. Our results showed that nuclear HO-1 staining is associated with carcinogenesis and tumor progression in PCa. Cell lines had different basal levels of HO-1, probably related to the endogenous oxidative stress level. Hemin, a potent inducer of HO-1, up-regulated and translocated it into the nucleus in both cells lines. Oxidative stress and/or hemin exposure differentially modulated the cell cycle, apoptosis and the distribution in the different phases for both cell lines. Furthermore, we have demonstrated for the first time that HO-1 expression and nuclear localization can define a new subgroup of PCa primary tumors and that the modulation of HO-1 expression and its nuclear translocation can represent a new therapeutic avenue.

"Eventos paleoambientales en la cuenca del Lago Nahuel Huapi registrados en testigos sedimentarios lacustres durante los últimos 19.000 años" (2011-12-02). Lirio, Juan Manuel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se presentan los resultados del estudio del registro sedimentario de tres cuencas lacustres (El Trébol, Escondido y Moreno) ubicadas en la zona del Llao Llao, dentro de la cuenca del lago Nahuel Huapi, que por su fuerte gradiente de precipitaciones constituye un ecotono de gran valor para investigaciones paleoclimáticas y paleoambientales. En dos campañas se extrajeron, aproximadamente 100 m de testigos sedimentarios, que documentan la sedimentación desde el Último Máximo Glaciario. De cada cuenca se obtuvieron cuatro columnas sedimentarias, las que permitieron confeccionar un perfil integrado de cada lago; se describieron las facies y las estructuras sedimentarias. El estudio de las tefras permitió reconocer 38 niveles guía para la zona del Llao Llao. Estos niveles, se reconocen con facilidad, permitieron hacer correlaciones entre cuencas separadas entre si unos 6 kilómetros, se presume que cubrieron grandes áreas y podrían ser identificados en otros sectores de la cuenca del lago Nahuel Huapi. Se confeccionó un modelo tefrocronológico para la zona del Llao Llao, con la ayuda de 26 dataciones 14C – AMS, a cada nivel guía se les calculó su edad y error mediante estadísticas bayesianas; se reforzó el modelo con nueve niveles guías basados en la inclinación del campo magnético terrestre impresa en los sedimentos y con correlaciones basadas en las propiedades magnéticas y químicas de los niveles de tefra. El modelo tefrocronológico obtenido permitió realizar correlaciones muy precisas de los distintos eventos observados en la zona del Llao Llao para los últimos 19.000 años. Los modelos de tasa de sedimentación confeccionados confirman un gran aporte clástico a la cuenca entre los 19,1 y18,0 ka cal AP, una tasa mayor durante los períodos húmedos y que algunos incrementos puntuales de la tasa que marcan descensos en los niveles lacustres, o mayor erosión por la caída de tefra. Se realizaron numerosos análisis, tales como la determinación del tamaño de grano, humedad, carbono orgánico, carbono inorgánico, carbono total, pigmentos fósiles (clorofila y carotenoides), análisis geoquímicos de sedimentos (Mg, K, Na, Pb, Ba, Zn, Sr, Li, Mn, Co, Cu, Cr, Cd, Fe, Al y Ca), determinación de minerales de arcilla mediante rayos X y se utilizaron datos de distintas propiedades magnéticas. Se estudió la evolución de las propiedades analizadas y se la integró con información disponible para mejorar el conocimiento de los cambios paleoambientales y paleoclimáticos ocurridos en la cuenca del lago Nahuel Huapi. La determinación de la distribución temporal de las tefras depositadas en la zona del Llao Llao durante los últimos 19,0 ka cal AP; permitió reconocer picos de actividad volcánica entre 16,0- 14,5; 7-6 y 1,5-1 ka cal AP. Se comparó la distribución temporal de las erupciones volcánica con registros lacustres en Chile a latitud similar. Se dataron y caracterizaron químicamente (óxidos principales y elementos traza) los principales niveles de tefra. Como método de correlación para los niveles de tefra en la zona del Llao Llao, se destaca el poder de discriminación de los óxidos principales cuando se utiliza análisis de agrupamiento. Los resultados y la información recopilada, confirman que los sucesivos avances glaciarios, excavaron profundos y extensos valles y depositaron la morena San Carlos de Bariloche, al este del lago Nahuel Huapi, la cual sirvió como dique natural a un gran paleolago proglaciar, que se formó al retroceder los glaciares hace unos 19.000 años. Este paleolago denominado “Elpalafquen” incluyó a los lagos Nahuel Huapi, Guillelmo, Mascardi, Gutiérrez, Correntoso y Espejo y otros más pequeños (e. g. Moreno, El Trébol y Escondido). La presencia de varves, cadilitos, escasa cantidad de materia orgánica y pigmentos fósiles sugieren que el paleolago persistió durante casi 4.300 años; distintos eventos sismovolcánicos provocaron descensos de su nivel y a los 14,680 ± 0,261 ka cal AP un nuevo descenso dió lugar al lago Nahuel Huapi. Se destaca el reconocimiento de los procesos sedimentarios (hiatos, repeticiones estratigráficas y corrientes de turbidez) que actuaron en las cuencas estudiadas, para mejorar la interpretación paleoambiental registrada en los testigos y reconocer cuando la información es regional propia de grandes lagos, o local propia de lagos pequeños y someros. En la secuencia sedimentaria se reconocieron al menos 8 eventos sismovolcánicos que afectaron la cuenca del lago Nahuel Huapi; dichos eventos fueron datados y asociados a horizontes tangibles en la secuencia, como son los niveles de tefra. Se destaca la importancia de la actividad sismovolcánica en la evolución hidrológica de la cuenca del lago Nahuel Huapi. Con la integración de la información obtenida, se generó un esquema sobre la evolución de los lagos El Trébol, Escondido y Moreno, el cual propone que: a) el paleolago Elpalafquen se formó aproximadamente a los 19,081 ± 0,274 ka cal AP y comenzó a desintegrarse a los 16,840 ± 0,250 ka cal AP, b) el lago El Trébol quedó aislado como cuenca independiente a los 15,537 ± 0,249 ka AP y c) el lago Escondido se formó como cuenca independiente a los 1,785 ± 0,80 ka cal AP cuando el último descenso provocó que los lagos Nahuel Huapi y Moreno alcanzaran su nivel actual.

Abstract:
This thesis studies the sedimentary record of three lacustrine basins (El Trébol, Escondido and Moreno Lakes) located Llao Llao Area, Nahuel Huapi Lake Basin, which have a strong precipitation gradient that turns it into an ecotone of great value to perform palaeoclimatic and palaeoenvironmental studies. Four sedimentary columns of each lacustrine basin that represent approximately 100 m of cores, recorded a sedimentation since the Last Glacial Maximum were collected and studied. For each lake, an integrated sedimentary column was performed; their facies and sedimentary structures were described. The study of tephra levels, allows the recognition of 38 guide horizons on the Llao Llao Area. Those levels are visually easy to recognize, they allow making accurate correlations among lacustrine basins located more than 6 km away, it is assumed that they cover large areas and they could be found and recognized in other sectors of Nahuel Huapi Lake Basin. A tephrochronologic model for the Llao Llao Area was performed with the aid of 26 14C–AMS datations. For each tephra guide level, the age and its estimated error were calculated by Bayesian statistics. The model was reinforced with 9 isochrone levels based on the inclination of the terrestrial magnetic field records on the sediments and with correlation based on magnetic properties and chemical composition of the tephra levels. The tephrochronologic model allowed very accurate correlations of the observed event on the Llao Llao Region for the last 19,000 years cal BP. The sedimentation rates models performed confirmed a large clastic input into the basin between 18.0 and 19.1 ky cal BP, a high sedimentation rate during the wet periods and some peaks in the sedimentation rate that suggesting a decrease of the lacustrine level and/or increasing erosion caused by volcanic ash fall. This multiproxy study includes, grain size analyzes, humidity, organic carbon, inorganic carbon, total carbon, fossils pigment (chlorophyll-a, chlorophyll-b and carotenoids), geochemical analyses of sediments for 16 elements (Mg, K, Na, Pb, Ba, Zn, Sr, Li, Mn, Co, Cu, Cr, Cd, Fe, Al y Ca) as well as determinations of clay minerals using X-ray, measurements of several magnetic properties were used. In order to improve the palaeoenvironmental model of the region, the temporal evolution of the above mentioned properties were studied The occurrence of tephra level in the Llao Llao Region during the last 19.0 ky allowed the identification of peaks of volcanic activities at 16.0-14.5; 7.0-6.0 y 1.5-1.0 ky cal BP. These volcanic eruptions were compared with chilenian lacustrine records at similar latitude. The more representative tephra levels were dated and chemically characterized (main oxides and trace elements). The discrimination power of the main oxides together with clusters analysis as a correlation method for the tephra levels of the Llao Llao Area is recognized. The own results and the published information confirm that the successive glacial advances excavated deep and long valleys and leave a morenic deposits named Morena San Carlos de Bariloche, as a natural dam of a big proglacial lake formed at 19.081 ± 0.274 ky cal BP. The paleolake named Elpalafquen included several big lakes (Nahuel Huapi, Guillelmo, Mascardi, Gutiérrez, Correntoso and Espejo Lake) and smaller ones (Moreno, El Trébol and Escondido Lake) among others. The presence of varves, dropstones and the scarce amount of organic matter and fossil pigments, suggest that Elpalafquen Palaeolake was a proglacial lake over 4.300 years; its level decreased in step due to seismovolcanic events and after a new fall of the level at 14.680 ± 0.261 ky cal BP it became the Nahuel Huapi Lake. The importance of recognising of the sedimentary processes that have taken place on the basin (hiatus, stratigraphic repetitions and turbiditic deposits) recorded in the sedimentary cores is empathized to improve the palaeoenvironmental interpretation. The knowledge of the lake evolution in the region allows us a better evaluation of the kind of information recorded in the lacustrine sediments, as a regional feature recorded in big lakes or as a local feature recorded in small lakes. Sedimentary perturbations along the cores suggests, at least eight seismovolcanic events, which were dated and associated with tangible tephra levels used here as guide levels. The importance of the seismovolcanic activity in the hydrological evolution of the Nahuel Huapi Region is emphasized. The integration of the obtained information allows to propose a model of evolution of the three studied lacustrine basins, and suggest that: a) Elpalafquen Palaeolake was formed at 19.081 ± 0.274 ky cal BP and start to disintegrate about 16.840 ± 0.250 ky cal BP, b) El Trébol Lake was formed as an independent basin at 15.537 ± 0.249 ky cal AP and c) Escondido Lake was formed as an independent basin at 1.785 ± 0.80 ky cal AP, when the last recorded level fall caused that Nahuel Huapi and Moreno Lakes reached their present level.

"Eventos tempranos del ciclo de replicación del virus Junín: interacción del virus con lectinas del tipo C" (2016-03-15). Forlenza, María Belén. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El virus Junín (JUNV) es el agente etiológico de la fiebre hemorrágica argentina (FHA), una enfermedad zoonótica que afecta el área central de la Pampa húmeda de la República Argentina. Distintos mecanismos de endocitosis son utilizados en las infecciones virales. En la línea celular Vero, el complejo glicoproteico presente en los viriones es el responsable de las interacciones iniciales con el receptor celular de transferrina 1 (TfR1) y la entrada a la célula es por endocitosis mediada por vesículas recubiertas de clatrina. En varias familias de virus envueltos, su entrada y diseminación pueden estar mediadas por lectinas de tipo C. Las mismas son proteínas transmembrana tipo 2, constituyen una amplia familia de receptores que reconocen estructuras específicas de carbohidratos presentes en patógenos y se encuentra presente principalmente en células dendríticas inmaduras, macrófagos y células endoteliales. Una de ellas, DC-SIGN posee un rol importante en los estadios iniciales de la respuesta inmune, reconoce estructuras internas ramificadas de manosas y posee funciones de receptor para varios virus. DC-SIGN se compone por un dominio extracelular de reconocimiento a carbohidratos (DRC) que une residuos con carbohidratos de alta manosa y una cola citoplasmática con motivos conservados de dileucinas (LL) y un cluster triacídico (EEE). Debido a que JUNV presenta proteínas altamente glicosiladas, y que en los estadíos de la infección temprana interactuaría con células dendríticas y otras del sistema inmune, en este trabajo se estudió la interacción de JUNV con DC-SIGN y el mecanismo endocítico asociado a la misma. Los resultados demuestran que DC-SIGN actúa como un auténtico receptor para JUNV en las células que la expresan y que la entrada a las mismas es a través de endocitosis utilizando vesículas recubiertas de clatrina con dependencia de colesterol y filamentos de actina corticales intactos.

Abstract:
Junin Virus (JUNV) is a member of the Arenaviridae family and the etiologic agent of Argentine Hemorrhagic fever (AHF), a zoonotic illness affecting the farming land of Argentina. Several endocytic pathways are used during viral infections. In Vero cell line, the glycoprotein complex present in virions is responsible of interaction with Transferrin receptor type I (TfR1) and internalization is clathrin mediated. Entry and dissemination of several envelope viruses are mediated by C-type lectins. These are transmembrane proteins that are expressed in immature dendritic, macrophages and endothelial cells, integrating a family of receptors which recognize specific carbohydrates present in pathogens. One of them, Dendritic Cell-Specific ICAM-3 Grabbing Nonintegrin (DC-SIGN) has an important role during the initial stages of the immune response, recognizes high mannose residues and is considered as a receptor for several viruses. DC-SIGN is composed by an extracellular carbohydrate recognition domain (CRD) and a cytoplasmic tail containing conserved motives as dileucine (LL) and triacidic cluster (EEE). As JUNV presents highly glycosylated proteins and that during initial steps of the infection, JUNV would interact with dendritic cells and others belonging to the immune system, in this work we studied the interaction between JUNV and DC-SIGN and the entry pathway associated with this. Taken together our results demonstrate that DC-SIGN is a real receptor for JUNV and that the main entry pathway involved is clathrin mediated endocytosis and it depends on cholesterol and intact cortical actin filaments.

"Eventos tempranos en la interfase tumor linfocito T y consecuencias sobre la actividad de las células NK" (2009). Domaica, Carolina Inés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las células NK secretan IFN-g y ejercen citotoxicidad contra tumores que expresan ligandos del receptor NKG2D (NKG2DLs, tales como MICA, MICB y las moléculas ancladas a residuos GPI ULBP-1 a -3) y de los receptores de citotoxicidad natural tales como NKp46 (NKp46Ls, de identidad desconocida). No obstante, desconocemos si las células T son capaces de regular la respuesta anti-tumoral mediada por células NK. En este trabajo, investigamos los eventos tempranos que ocurren la interfase tumor-linfocito T, y su impacto sobre la funcionalidad de células NK. En esta Tesis demostramos que luego del co-cultivo con una línea de melanoma que expresa MICA en superficie, linfocitos T CD4+ o CD8+ activados o en reposo capturaron este NKG2DL de las células tumorales mediante un fenómeno que se denomina trogocitosis. Esta transferencia de membrana entre células fue confirmada mediante la utilización de células marcadas con los fluorocromos CFSE, DiOC18 y PKH26 y fue dependiente del contacto celular. Sin embargo, no fuimos capaces de detectar la transferencia de proteínas ancladas a residuos GPI. Los linfocitos T que estuvieron en contacto con las células tumorales fueron resistentes a la lisis mediada por células NK, pero fueron capaces de promover su degranulación y la secreción de IFN-g en forma dependiente de NKG2D y NKp46, lo que sugiere que además de MICA, otros NKG2DLs y NKp46Ls son capturados por los linfocitos T activados desde la superficie de las células tumorales. Por lo tanto, células de la inmunidad adaptativa (linfocitos T) son capaces de estimular funciones efectoras en células de la inmunidad innata (células NK) a través de la captura de ligandos específicos y en forma independiente del TCR.

Abstract:
NK cells trigger IFN-g secretion and cytotoxicity upon engagement of NKG2D or members of the NCR family such as NKp46 by ligands expressed on tumor cells (such as MICA, MICB, and the GPI-anchored molecules ULBP-1 to -3 for NKG2D, or ligands of unknown identity for NKp46). However, it remains uncertain whether T cells can regulate NK cell-mediated anti-tumor responses. Here, we investigated early events occurring during T lymphocyte-tumor cell interactions, and the impact on NK cell functions. Upon co-culture with MICA+ melanomas, activated CD4+, CD8+, or resting T cells displayed substantial amounts of cell surface MICA due to direct capture (trogocytosis) from the tumor cells. Such transfer was confirmed using CFSE-, PKH26- or DiOC18-labeled cells and required cell-to-cell contact. However, GPI-anchored NKG2DLs were not transferred. Tumor-experienced T lymphocytes remained resistant to NK cell-mediated cytotoxicity, but promoted degranulation and IFN-g secretion by NK cells in a NKG2D- and NKp46-dependent manner, suggesting that additional NKG2DLs and NKp46 ligands were captured by activated T lymphocytes from tumor cells. We conclude that cells from the adaptive immune response (T lymphocytes) support effector functions of innate immune cells (NK cells) through capture of specific ligands in a TCR-independent manner.

"Evidencias sobre la existencia de la enzima óxido nítrico sintasa en el espermatozoide murino y su participación en el proceso de fertilización" (1996). Herrero, María Belén. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Virtualmente todas las células de mamíferos están bajo la influencia del radical libre denominado óxido nítrico (NO). Las enzimas responsables de la síntesis del NO se conocen como óxido nítrico sintasas (NOS 6 NO-sintasas). En mamíferos, se han clonado tres isoenzimas de la NO-sintasa. Las isoformas neuronal y endotelial son dependientes de Ca++ y se expresan constitutivamente, mientras que la isoforma inducible es Ca++ independiente y se induce en presencia de lipopolisacáridos y citocinas. Todas las isoformas pertenecen a la farnilia de los citocromos P-450, utilizan L-arginina como sustrato, con oxígeno molecular y nicotinamida adenina dinucleótido fosfato forma reducida (NADPH) como co-sustratos. Las funciones del NO fueron descriptas primeramente en tres sistemas fisiológicos (vascular, nervioso e inmune) y a partir de dicho estudio se fueron descubriendo funciones del NO en otros sistemas como el reproductor, respiratorio y excretor. En reproducción, se vio que el NO induce la erección peniana, estimula al factor liberador de la hormona luteinizante (LH-RH) y modula la síntesis de prostaglandinas uterinas y ováricas durante la luteólisis en la rata. Sin embargo, hasta el momento no se había descripto la participación del NO en el proceso de fertilización. En el presente trabajo se presentan evidencias de la existencia de la enzima NO-sintasa en la gameta masculina murina y su participación en la fertilización in vitro. Mediante ensayos farmacológicos determinamos que la adición de inhibidores específicos de la NO-sintasa (NG-nitro-L-arginina (NO2-arg) ó NG-nitro-L-arginina metil éster (L-NAME)) durante el proceso de capacitación in vitro disminuye el porcentaje de ovocitos fertilizados. Esta inhibición es estereoespecífica y depende de la concentración. Dado que el proceso de fertilización se encuentra afectado en presencia de L-NAME y NO2-arg, medimos la motilidad espermática y el patrón de hiperactivación. A los 120 min de incubación, el L-NAME disminuye el porcentaje de espermatozoides mótiles e hiperactivados, mientras que un generador de NO como el nitroprusiato de sodio (NP) acelera estos parámetros de manera concentración dependiente. Considerando que el NO también podía participar en la reacción acrosomal, medimos el efecto del L-NAME sobre espermatozoides reaccionados espontáneamente ó en presencia de un inductor fisiológico como la progesterona. En estos casos, la exocitosis acrosomal también se halla inhibida; la inhibición es estereoespecífica y depende de la concentración. Contrariamente, 0.1 mM de spermine-NONOate (generador de NO) estimula la reacción acrosomal en espermatozoides previamente capacitados a niveles semejantes a los obtenidos con 15 microM de progesterona. Luego de los ensayos farmacológicos, evidenciamos la presencia de la NO-sintasa espermática mediante ensayos inmunológicos. Por inmunofluorescencia indirecta localizamos la NO-sintasa en el acrosoma y en la cola de espermatozoides no capacitados. Durante la capacitación, la fluorescencia desaparece del acrosoma y se mantiene en el flagelo, otorgando a esta enzima un potencial significado fisiológico en el proceso de capacitación y/o de reacción acrosomal. Seguidamente, realizamos ensayos de Western Blot, los cuales nos permitieron demostrar que anticuerpos anti-NOS neuronal, endotelial e inducible reconocen una única fracción proteica de 140 kD bajo condiciones desnaturalizantes y no reductoras en espermatozoides frescos de ratón. Cuando realizamos los experimentos cinéticos, detectamos la presencia de formación de NO, medida como conversión de L-arginina a L-citrulina en espermatozoides intactos y vivos (condiciones in vivo). Los espermatozoides sintetizan NO durante el proceso de capacitación alcanzando un plateau a los 120- 180 min de incubación. Además, la producción de NO depende de la concentración de L-arginina presente en el medio de incubación y es inhibida por L-NAME pero no por aminoguanidina (inhibidor específico para la NO-sintasa de caracter inducible), sugiriendo la existencia de una NO-sintasa espermática de caracter constitutivo. Considerando que en los ensayos farmacológicos evidenciamos la participación de la NO-sintasa del espermatozoide en la exocitosis acrosomal inducida por progesterona, se estudió también la modulación de este esteroide sobre la formación de NO en espermatozoides capacitados. Así, observamos que 15 microM de progesterona estimula directamente la síntesis de NO durante el período ensayado (90-120 min). Basándonos en trabajos realizados en nuestro laboratorio intentamos relacionar al NO con la síntesis de prostaglandinas e hidroxiácidos. Para ello, en primer término, demostramos que los espermatozoides de ratón son capaces de sintetizar PGE2 e hidroxiácido 5-HETE y luego observamos que el NP estimula la síntesis de estos metabolitos en la gameta masculina. Sin embargo, la síntesis basal de prostaglandinas no se ve modificada en presencia de L-NAME. Los resultados de este trabajo evidencian por primera vez la presencia de la NO-sintasa en el espermatozoide de ratón y demuestran su participación en el proceso de fertilización, modulando la motilidad espermática y la exocitosis acrosomal. Podemos afirmar entonces, que el NO sintetizado por la NO-sintasa espermática, es necesario para que el espermatozoide pueda expresar su plena capacidad fertilizante in vitro.

Abstract:
Mammalian cells are all virtually exposed to the action of nitric oxide (NO). Nitric oxide synthases (NOS or NO-synthases) are the enzymes that catalyze the production of NO. Three distinct isoforms of NO-synthase have been cloned in mammals. The neuronal and the endothelial isoforms are Ca++-dependenat nd are constitutively expressed while the inducible isoform does not depend on Ca"' and is induced with bacterial products and cytokines. NO actions have been previously described in the vascular, the nervous and the immune systems. However, many other fbnctions are being shown in the reproductive, the respiratory and the urinary systems. In the reproductive field, it was found that NO induces penis erection, stimulates LH-RH factor and modulates prostaglandins synthesis in the rat uterus. Nevertheless, till now it was not described the role of NO in the fertilization process. Our results show that NO-synthase inhibitors (NO-nitro-L-arginina (NO,-arg) 6 No-nitro- L--arginina meti1 kster (L-NAME)) added at the onset of capacitation reduce the percentage of f e e d oocytes. This inhibition is stereospecific and depends on the concentration. Moreover, we demonstrate that L-NAME reduces the percentage of motile and hyperactivated spermatozoa at 120 min of incubation, while a nitric oxide donor named sodium nitroprusside (NP) accelerates hyperactivation in a concentration manner. We were then interested in searching the effect of NO-syntahse inhibitors on the spontaneous and progesterone-induced acrosome reaction. In these cases, the acrosomal exocytosis is inhibited, the inhibition is stereospecific and depends on the concentration. In contrast, 0.1 mM spermine-NONOate (NO donor) stimulates the progesterone-induced acrosome reaction. Then, we evidence the presence of sperm NO-synthase by immunological assays. Thus, we localized NO-synthase in the acrosome and tail of non capacitated mouse spermatozoa by the immunofluorescence technique. During capacitation the fluorescence disappears in the acrosome and it persists in the tail. Besides, under denaturing and non reducing conditions, Western Blot analysis of solubilized sperm proteins reveal a unique band of Mr=140 kD with the three NO-synthase antisera tested (neuronal, endothelial and inducible isoforms). By means of kinetics assays, we detect the production of NO by intact spermatozoa (in vivo conditions). During the capacitation period (120 min), lo7 spermatozoa are capable to synthesize 7*2 picomoles of NO. Besides, NO formation depends on the incubation periodand on the concentration of L-arginine present in the incubation medium. Different concentrations of L-NAME but not aminoguanidine, inhibit L-citrulline formation, suggesting that sperm NO-synthase is a constitutive isoform. In the pharmacological assays, we demonstrated that NO-synthase may be involved in the progesterone-induced acrosome reaction; so we studied the effect of this steroid on the production of NO by capacitated sperm. In this set of experiments we show that 15 pM progesterone stimulates NO formation in spermatozoa. Based on studies done in our laboratory, we finally intend to relate NO to prostaglandins and hydroxyacids synthesis. We first demonstrate that mouse spermatozoa synthesize PGE, and 5-HETE and that these synthesis are stimulated by NP. However, L-NAME does not inhibit these basal synthesis. The results presented here evidence for the first time the presence of NO-synthase in the murine male gamete and the role of this enzyme in the fertilization process: sperm NO-synthase modulates sperm motility and the acrosomal exocytosis. So, we can say that NO, synthesized by sperm NO-synthase is necessary for spermatozoa to express its full fertilizing ability.

"Evolución cromosómica y divergencia de especies en Cebus y Ateles (Primates: Platyrrhini) desde un enfoque citogenético molecular" (2015-12-04). Fantini, Lucía. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La diversidad de los primates neotropicales (Platyrrhini), analizada en el GIBE a partir de la diversidad cariotípica, ha permitido plantear, al menos, dos posibles “estrategias especiogénicas” generales. Según una de ellas, las inversiones y la variación en heterocromatina constituirían los reordenamientos y cambios distintivos entre especies. La especiación en Platyrrhini, además, ocurriría acompañada de cambios cuantitativos en el genoma. Como ejemplo, Cebus y Ateles, los géneros con mayor proporción de heterocromatina, comparten además un patrón específico de distribución geográfica coincidente con la proporción y presencia de heterocromatina en sus genomas. En este trabajo se analizó la diversidad de especies en Cebus y Ateles tomando como eje la variabilidad en el tamaño del genoma y su influencia en parámetros fenotípicos como la diversidad cariotipíca y la distribución y proporción de heterocromatina. Fueron estimados los tamaños de genoma (Valor C) de 13 especies, entre ellas 3 pertenecientes al género Ateles y 6 del género Cebus. Por medio de Hibridación Genómica Comparativa se identificaron las regiones cromosómicas correspondientes a las diferencias cuantitativas entre los genomas, dentro de cada género. En Ateles, éstas se ubican principalmente en regiones heterocromáticas, aunque también en regiones eucromáticas. Los genomas de menor valor C de Ateles estarían completamente incluidos en los genomas de mayor tamaño, mientras que las regiones de ganancia de ADN detectadas en las especies de mayor valor C sólo corresponderían a amplificaciones o repeticiones del mismo tipo de secuencias, y no a secuencias especie-específicas. Las únicas diferencias cuantitativas entre las especies de Cebus analizadas se hallaron en el cromosoma Y. Como parte del estudio de la evolución del cariotipo primate se estableció el mapa de homologías cromosómicas de A. chamek y Cebus sp. respecto del cariotipo humano, así como también se obtuvo el primer registro de homología entre el cromosoma Y humano y un primate neotropical, mediante FISH con el gen ZFY en Ateles paniscus. Finalmente, se discuten los resultados obtenidos y la divergencia de especies en cada género en el contexto de la citogenética molecular, respecto de la presencia y proporción de heterocromatina y tamaño del genoma. Los hallazgos citogeneticos y los datos genómicos aquí presentados podrían estar indicando que durante los procesos especiogénicos en Cebus y Ateles el genoma se modula complementariamente entre regiones de eucromatina y heterocromatina, pero compensado de distinta manera según el género considerado. Palabras clave: Cebus, Ateles, Valor C, Genoma, CGH, Evolución del cariotipo

Abstract:
The karyotype diversity of Neotropical primates (Platyrrhini) has enabled us to propose at least two possible general "speciation strategies." According to one, chromosomal inversions and variation in heterochromatin are the distinctive chromosomal rearrangements and changes between karyotypes. Also, speciation in Platyrrhini appears to be accompanied by quantitative changes in the genome at inter- e intrageneric level. As an example, Cebus and Ateles, both genus with the highest proportion of heterochromatin, share a specific pattern of geographic distribution corresponding to the presence and proportion of heterochromatin in the genome. In this work, species diversity in Cebus and Ateles was analyzed taking variability in genome size and its influence on phenotypic parameters such as karyotypic diversity and distribution and proportion of heterochromatin as main axis. Genome size (C value) of 13 species were estimated, including 3 belonging to the genus Ateles and 6 of the genus Cebus. Using Comparative Genomic Hybridization (CGH) chromosomal regions associated with quantitative differences among species genomes were identified. In Ateles, these regions are mainly heterochromatic but also euchromatic.. The genomes of Ateles species with small C value are completely included in the genomes of the species with bigger C value. Regions of gained DNA in the bigger genomes represent amplifications or repetitions of sequences of the same type, not speciesspecific sequences. The only quantitative differences between Cebus genomes were located in chromosome Y. Regarding chromosomal evolution in Primates, an homeology map between karyotypes of A. chamek, Cebus sp. and the human is presented. Also the first record of homeology between human chromosome Y and that of a neotropical primate was observed with hybridization of human gene ZFY in A. paniscus. Finally, results and species divergence are discussed in a molecular cytogenetic context, relative to presence and proportion of heterochromatin and genome size. All in all, the cytogenetic and genomic findings and species characterizations here presented seems to point out that genomes, during a speciation process in Cebus and Ateles, are modulated in a complementary fashion between euchromatic and heterochromatic regions, but distinctively balanced in the genus considered. Key words: Ateles, Cebus, C value, genome, CGH, karyotype evolution

"Evolución de estructuras MHD helicoidales en la heliósfera" (2011). Gulisano, Adriana María. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta Tesis doctoral se estudia una clase de fenómenos transitorios en el viento solar, denominados nubes magnéticas (NMs). Estos eventos son expulsados por el Sol y se componen de masa más fría que el plasma del viento solar estacionario. Son objetos que contienen campo magnético con gran intensidad y con una estructura que conforma tubos de flujo magnético enroscados alrededor de un eje principal; contienen así cantidades importantes de Flujo (F ) y Helicidad magnética (H), que son transportadas desde su fuente solar durante su viaje en la heliósfera. Se realiza un modelado teórico de NMs en el marco de la magnetohidrodinámica. Se revisan y desarrollan diversas técnicas y metodologías para su estudio, que permiten determinar sus propiedades a partir del análisis de las observaciones magnéticas y del plasma realizadas in situ por sondas espaciales. Se estudian tres muestras de eventos: (a) en la heliosfera interna (desde 0.3 hasta 1 unidades astron ́ micas), (b) a 1 unidad astronómica del Sol y (c) en la heliosfera externa (desde 1.5 hasta 5 unidades astron ́ micas). Se caracterizan propiedades de la estructura magnética y de su evolución. Los resultados del modelado son usados para cuantificar F y H en nubes, y encontramos valores típicos de F ∼ 1020 − 1021 Mx y H ∼ 1041 − 1042 Mx2 . Encontramos que el par ́ metro de impacto (mínima distancia de aproximación entre la sonda y el eje de la nube) es uno de los parámetros mas cr ́ticos para modelar correctamente las NMs y hallamos un método para mejorar significativamente su estimación. Se introduce y se estudia un coeficiente de expansión adimensional, que permite cuantificar la evolución del tamaño de las NMs en función de la distancia al Sol y puede medirse a partir del perfil de velocidad observado in situ para una nube dada. Encontramos que las NMs pueden clasificarse en dos subclases, aquellas que son perturbadas significativamente por el viento solar de su entorno, y aquellas que siguen una evolución natural, dada por el decaimiento de la presión del viento solar ambiente.

Abstract:
In this PHD Thesis we study a class of transient phenomena in the solar wind, the so called magnetic clouds (MCs). These events are ejected from the Sun and are composed by plasma, which is cooler than the one in the stationary solar wind. They contain intense magnetic field which is formed by magnetic flux tubes twisted around a main axis; in this way they contain an important amount of magnetic Flux (F ) and magnetic Helicity (H) that are transported from their solar sources through their journey along the heliosphere. We develope a theoretical description of MCs in the frame of magnetohydrodynamic. We revise and develop several methods and techniques for the study of MCs, which allow us to determine MCs properties from the analysis of magnetic and plasma ’in situ’ observations made by spacecraft. We study three samples of events: (a) in the inner heliosphere (from 0.3 to 1 astronomical units), (b) at one astronomical unit, and (c) in the outer heliosphere (from 1.5 to 5 astronomical units). We characterize properties of their magnetic structure and of their dynamical evolution. Results from models are used to quantify F and H in MCs, and we find typical values: F ∼ 1020 − 1021 Mx and H ∼ 1041 − 1042 Mx2 . We find that the impact parameter (minimum distance approach between the cloud axis and the spacecraft) is one of the more critical parameters for making correct modelization of MCs, and we find a method to significantly improve its estimation. We introduce and study a dimensionless expansion coefficient, that allow us to quantify the evolution of the size of MCs in function of the distance to the Sun, and then can be obtained from the in situ observed velocity profile for a given event. We find that MCs can be classified in two sub-classes, those which are significantly perturbed by the solar wind environment, and those which follow a natural evolution, given by the decay of the ambien solar wind pressure.

"Evolución de la arquitectura genética del comportamiento olfativo en Drosophila" (2011). Lavagnino, Nicolás José. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Comprender la arquitectura genética de caracteres ecológicamente relevantes requiere de la contribución de diversas disciplinas dentro de la biología, ya que es necesario conocer numerosos factores involucrados en la expresión de la misma. Por otro lado, es también una oportunidad de poner a prueba hipótesis sobre la evolución de los organismos. Por la tanto, este tipo de análisis debe realizarse en un marco multidisciplinario y el organismo modelo Drosophila melanogaster es ideal para tal propósito. En el presente trabajo se han estudiado diferentes aspectos de la arquitectura genética del comportamiento olfativo en D. melanogaster. En particular, a) se identificaron genes candidatos a participar en el comportamiento olfativo larval, de los cuales algunos son exclusivos de larva y otros también participan en la arquitectura genética del olfato adulto; b) se describieron las propiedades de variación de la arquitectura genética del carácter en larvas y moscas adultas derivadas de poblaciones naturales de Argentina; c) basándose en resultados obtenidos en diferentes niveles de análisis se demostró que la interacción genotipo por ambiente es una parte importante de la arquitectura genética del comportamiento olfativo larval y adulto; d) se encontró que las diferencias en la arquitectura genética del olfato entre estadios del ciclo de vida repercute en que en que la canalización y la presencia de variabilidad genética críptica son más importantes en adulto que en larva y e) se analizaron las fuerzas evolutivas que actúan sobre los genes olfativos en 6 especies pertenecientes al grupo de especie D. melanogaster, lo que permitió determinar que la selección purificadora es el proceso que afecta a las tasas de sustituciones nucleotídicas en la mayoría de los genes olfativos y por el contrario la selección positiva tiene poca incidencia, también que las tasas de evolución de los genes olfativos dependen de la posición que ocupan en el sistema olfativo en la mayoría de las especies analizadas.

Abstract:
Understanding the genetic architecture of ecologically relevant phenotypic traits requires the contribution of several disciplines within biology, because numerous factors involved in its expression must be analysed. In addition, it is also an opportunity to test hypotheses regarding organisms’ evolution. Therefore, this kind of analysis must be done in a multidisciplinary fashion and using a model organism as Drosophila melanogaster is pertinent for this purpose. In the present thesis, we analyzed different aspects of the genetic architecture of olfactory behavior in D. melanogaster. Particularly, a) we identified candidates genes to participate in D. melanogaster larval olfactory behavior, some of which are larva exclusive and others participate also in adult olfaction; b) variational properties of olfactory behavior genetic architecture were described, both for larva and adult wild-derived flies from natural populations of Argentina; c) based on results from different levels of analysis it was demonstrated that genotype by environment interaction its an important aspect of olfactory behavior genetic architecture in larva and adult; d) it was found that differences in olfactory behavior genetic architecture between life cycle stages has an impact on canalization and cryptic genetic variability being more important in adult than in larva; and e) evolutionary forces acting on olfactory genes were analysed for 6 species belonging to the D. melanogaster species group, which allowed to determine that purifying selection is the process affecting most genes and instead positive selection has a limited incidence; also in most species analyzed a relationship between evolutionary rates and the position that the gene products occupy in the olfactory system was found. In conclusion, our results point out that the genetic architecture of olfactory behavior is complex, changes along ontogenetic stages and it’s influenced by the environment.

"Evolución de los depósitos litorales en Bahía Anegada, Provincia de Buenos Aires, durante el cuaternario tardío" (2000). Weiler, Nilda Ester. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se analizan desde el punto de vista geomorfológico, estratigráfico y geocronológioo, los depósitos litorales del Cuaternario (Pleistoceno tardío y Holoceno) en bahía Anegada. Esa área se extiende desde la desembocadura del río Colorado Viejo, por el norte, hasta Punta Rubia Falsa, por el sur (39° a 40° 43' S y 62°00' a .62°30' O). La misma tiene unos 100 Km de largo por 12 Km, de ancho. Desde el punto de vista geomorfológico se reconocieron, de norte a sur, cuatro zonas (A, B, C, y D) Cada una de ellas tiene sus propias características, las que dependieron de la morfología preexistente y de la dinámica litoral de cada sector en particular. Así, se reconocieron espigas en forma de gancho, espigas cuspidadas, islas de barrera, albuferas, barras y formas eólicas transversales y paralelas a la línea de costa. Al mismo tiempo, en cada zona existen tres niveles aterrazados (1, 2 y 3) ubicados a diferente altura respecto al nivel marino actual. El nivel de terraza más alto (Nivel 3) está comprendido entre las cotas de 10 y 5 m, el de altura intermedia entre los 5 y 1,50 m s.n.m. y el más bajo entre los 1,50 m y el nivel de baja marea. Mediante análisis estratigráficos y geocronológicos se determinó la existencia de depósitos litorales pertenecientes al Pleistoceno tardío y al Holoceno, formados durante tres episodios de nivel marino relativamente elevado denominados Transgresión Interglacial, Transgresión Interestadial y Transgresión Postglacial. Los depósitos correspondientes al Pleistoceno tardío (Transgresión Interglacial e Interestadial) se hallan entre las cotas de 10 y 5 m (Nivel 3), mientras que los correspondientes al Holoceno (Transgresión Postglacial) se los encuentra entre los 5 y 1,50 m s.n.m (Nivel 2). Los depósitos correspondientes a la Transgresión Interglacial están dentro del orden de más de 43.000 años AP. Las mismas son edades imprecisas dado que están más allá del límite técnico del método de datación. Por ello, se oonsidenó en forma tentativa que los mismos pertenecen a la transgresión ocurrida durante el Interglacial Sangamon (Interglacial Riss-Würm). Sobre esos depósitos y apoyados en forma discordante se encuentran sedimentos litorales con edades entre 38.500 y 25.000 años AP. Por la posición estratigráfica y los fechados obtenidos permitió correlacionar a esos depósitos con un nivel marino relativamente elevado que se produjo luego de la Transgresión Interglacial. El mismo se interpreta que ocurrió a consecuencia de un último gran interestadial dentro de la Glaciación Wisconsin. De allí su nombre de Transgresión Interestadial. Al producirse la regresión marina que acompañó a la última glaciación se produjo un episodio de gran aridez durante el cual se formaron dunas elongadas con rumbo O-E. El rumbo de las mismas estaría indicando la persistencia de los vientos del cuadrante oeste. Para el Holoceno se determinaron por lo menos 6 episodios de ascenso relativo del nivel marino, los mismos fueron denominados Estadios Transgresivos (ET 0 a V), durante los cuales se originaron crestas de playa. Las edades 14C de los respectivos ET son: ET-0= 6560±130; ET-|=: 6190±130; ET-II= 5570±120; ET-III=5200±100; ET-IV=4470±80; ET-V=3580±90 años AP. El ET-I representa al máximo alcance de la transgresión del Holoceno y el ET-O a un evento transgresivo anterior. Ambos estarían vinculados con picos de máxima actividad solar (transgresión termoeustática) Los ET más jóvenes (ET- II a V) indican episodios transgresivos menores asociadas a mareas excepcionalmente altas (coincidentes con el Ciclo de Progresión del perigeo Lunar) y a fuerte oleaje relacionado con fuertes tormentas excepcionales. Esos episodios de tormenta podrian estar condicionados por eventos episódicos de gran magnitud de EL Niño (eventos pasados del ENSO-EI Niño Oscilación Sur). Durante tales tormentas se habrían producido importantes acumulaciones de sedimentos en las playas y además cambios en la dirección de la corriente de deriva litoral. Las edades 14C obtenidas a partir de material biogénico (valvas de moluscos) removilizado se tomaron con carácter de Edad Geológica Probable. La misma tiene carácter de Edad Mínima ya que corresponde a la menor edad obtenida para un mismo depósito. En cambio, se consideró que las edades obtenidas a partir de valvas articuladas o en posición de vida tienen carácter de Edad Aproximada (EA). Dicha edad indica la posición del nivel del mar de ese momento pero no la antigüedad del depósito.

Abstract:
Coastal deposits from the Quatemary (late Pleistocene and Holocene) in bahía Anegada are analyzed from the geomorphologic, stratigraphic and geochronologic point of view. This area extends from the Colorado Viejo river outlet on the north side to Punta Rubia Falsa on the south (39° a 40° 43's y 62° 00’ a 62° 00' a 62° 30’) its measurements being about 100 km long by 12 km wide. From the geomorphplogical point of view, four zones were recognized going from north to south A, B, C y D. Each zone having its own characteristics depending on the preexisting morphology and the coastal dynamics from each particular area. That's how hook spits, cuspate spits, barrier islands, lagoons, bars, transversal and parallel eolic forms were recognized. At the time, there are three different altimetric levels in each area (1, 2 y 3) placed at different levels with respect to the actual marine level. The level of the highest terrace (level 3) is found between 10 and 5 m, the interrnediate high is between 5 and 1,50 m above sea level and the lowest is between 1,50 and low tide level. By means of stratigraphic and geochronological analysis the existence of coastal deposits to the late Pleistocene and Holocene were determined. These deposits were formed during three episodes of relatively high sea level called Interglacial Transgression., lnterestadial Transgression and Postglacial Transgression. The deposits corresponding to the late Pleistocene (Interglacial and Interestadial Transgression) are found between 10 and 5 m (Level 3), while those corresponding to the Holocene Postglacial Transgression are found between 5 and 1,50 m above sea level (Level 2). The deposits corresponding to the Interglacial Transgression are within the order of more than 43.000 years BP. The dates themselves are inaccurate because they go for beyond the technical limits of the datation methods. That's the reason why there where considered in a tentative approach that they belong to the transgression which occurred during the Sangamon Interglacial. Over these deposits and resting in a discordant way there has been found littoral sediments with the ages 38.000 and 25.000 years BP. The stratigraphic position and the dates obtained permitted a correlation of these deposits with a relatively high sea level, which was brought about after the Interglacial Transgression. This High sea level was interpreted to have taken place as a consequence of a last great interestadial within the Wisconsin glaciation. From these comes its name of Interestadial Transgression. The marine regression, which accompanied the last glaciation, was followed by a moment of great aridity in which elongated dunes with bearing West-East were formed. These bearing would be indicating the persistence of winds from the west. At least six major episodes of high wave-energy were found, which built the Holocene clastic ridges, and were identified as Transgressive Stages (TS-0 to V). Their Probable Geological Ages (PGA = the minimum 14C age) and Approximate Ages (AA+ with 14C ages obtained of mollusks in life position). are: TS-0 = 6560±130; TS-I = 6190±130; TS-II= 5570±120; TS-III= 5200±100; TS-IV = 4470±80; TS-V = 3580 ± 90 years BP. The TS-I represents the maximum Holocene Transgression and TS-) corresponds to a previous event. Both could be related to maximum solar activity peaks (thermoeustatic transgression). The younger TS (TS-II to V) show minor transgressive episodes could be related to exceptionally high tides (coincident with the Progression Cycle of the Lunar Perigees) and to high wave-energy episodes (exceptional storms). The storm episodes could be related to episodic events of great magnitudes such as the ENSO (past ENSO-like = El Niño Southern Oscillations events). These kind of events might have caused massive sediment pulses and changes in the direction of the of the littoral drift. The ages obtained by 14C from removed biogenic material (mollusk valves) were taken with the character of Probable Geologic Age. Minimum age oorresponds to the minor age obtained for a certain deposit. The ages obtains from articulate shells or in life position belong to Approximate Age (AA). This age indicates the position of sea level of that moment but not the antiquity of the deposit.

"Evolución de pavimentos de desierto y costras superficiales en un sector del Noreste del Chubut : Su relación con las propiedades físico-químicas y micromorfológicas del suelo superficial" (1995). Bouza, Pablo José. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la Patagonia árida del Chubut existen amplios sectores de suelo desnudo cubiertos por pavimentos de desierto y costras superficiales asociadas. El estudio de estos signos de degradación edáfica superficial constituye un tema de interés para el manejo y la recuperación de los pastizales naturales. Los objetivos de este trabajo son: 1) establecer, en base a atributos superficiales fácilmente reconocibles en el campo, una clasificación de condiciones superficiales y con ello el grado de desarrollo de pavimentos y costras. 2) para cada clase de condicidn superficial, determinar aquellas variables físicas y químicas que controlen o no la degradación del suelo superficial. 3) determinar el posible mecanismo de formación para cada categoria de costra 4) establecer una clasificación morfogenética de costras y capas superficiales y subsuperficiales basada principalmente en estudios micromorfológicos y en su posición microtopográfica. 5) determinar, en base a los estudios de suelos y a los rasgos morfológicos superficiales, una clasificación genética de los pavimentos de desierto. El Brea de estudio, denominada Bajo de la Suerte, se encuentra ubicada a 90Km al oeste de la ciudad de Puerto Madryn. El microrelieve está dado por montículos de suelo asociados a la vegetación arbustiva que alternan con Breas de suelo desnudo, estas últimas con desarrollo de pavimentos de desierto y costras superficiales. Los suelos del área de estudio fueron clasificados como un complejo de Natrargides tipicos y Haplargides tipicos y arénicos. Se identificaron al menos cuatro clases de condiciones superficiales, desde suelo intacto o de clase 1 hasta suelo con extrema degradación o de clase 4, pasando por estados intermedios. Además se observaron dos clases más, ambas relacionadas a pequeños cursos efímeros: la clase 5 definida por las formas de acumulación arenosa y la clase 6 por formas de erosión encauzada. Las clases de condiciones superficiales constituyen una secuencia espacial de deterioro de la superficie del suelo. La desagregación del suelo superficial es causada principalmente por: 1) dispersión quimica de las arcillas debido a1 elevado valor de PSI; 2) dispersión mecánica por impacto de las precipitaciones y por incremento de la presión de los poros del suelo cuando el mismo es saturado y 3) sucesivos ciclos de congelamiento-descongelamiento y/o desecación. La dispersión química de las arcillas puede tomar valores críticos de PSI al menos del orden del 10%. Las clases de condiciones superficiales fueron descriptas micromorfológicamente, definiendo las siguientes capas y costras: capas masivas de grano suelto, costras sedimentarias y costras estructurales vesiculares. Las capas masivas de grano suelto corresponden a los montículos de origen eólico de la clase 1. Las costras sedimentarias se presentan en la clase 2 e indican un microambiente de sedimentación por escurrimiento superficial. Las costras estructurales vesiculares se desarrollan en las clases 3 y 4. Las costras estructurales de la clase 3 son interpretadas como un estado inicial de formación del horizonte Av. Las cavidades y las vesiculas que presentan estas costras se forman por colapso de la estructura debido a los procesos de desagregación. El horizonte argilico en los suelos del Brea de estudio indica un periodo de mayor humedad y estabilidad que el actual ocurrido durante el Holoceno medio. Los signos de aridización creciente que presenta este horizonte son: 1) revestimientos arcillosos fragmentados por sucesivos ciclos de expansión-contracción; 2) destrucción y obliteración de revestimientos arcillosos por el crecimiento autigénico de carbonato 3) presencia de costras estructurales sobreyacentes 4) asentamiento de la estructura original; 5) relleno de grietas de desecación con material proveniente de las capas superiores. Los pavimentos de desierto del Bajo de la Suerte son clasificados como de tipo mixto, debido a que presentan caracteristicas autóctonas y alóctonas. Los procesos de concentración de partículas gruesas que generan los pavimentos de tipo autóctonos son: 1) eliminación de particulas finas por la acción hídrica y por sucesivos ciclos de congelamiento-descongelamiento; 2) migración de gravas hacia la superficie por sucesivos ciclos de congelamiento-descongelamiento y humedecimiento-desecación y por acreción vertical dada por el aporte de material eólico e hidrico. La concentración y redistribución de los fragmentos gruesos por flujo laminar generan pavimentos de tipo alóctono.

"Evolución de un complejo de especies de Ctenomys (Octodontidae, Rodentia) del noreste argentino: filogenia, variabilidad cromosómica y dinámica del ADN satélite" (2013). Caraballo, Diego Alfredo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los tuco-tucos, roedores subterráneos del género Ctenomys, de la provincia de Corrientes habitan en gran parte de su área de distribución en ambientes inestables tanto desde el punto de vista espacial como temporal. Constituyen un excelente modelo para estudiar la especiación y la hibridación, y el rol de la evolución cromosómica en estos procesos, un rasgo conspicuo en este grupo. Unas 39 poblaciones fueron descriptas en este grupo, la mayoría de status taxonómico indefinido. La variabilidad en el número diploide (2n) y número fundamental (NF) es inusualmente elevada en este grupo (2n=41-70, NF=76-84). En este trabajo se obtuvo una filogenia molecular que incluye representantes de 23 poblaciones correntinas, utilizando los marcadores mitocondriales citocromo b, citocromo oxidasa I y región control (D-loop). El grupo Corrientes resultó monofilético. Las especies previamente descriptas C. perrensi y C. dorbignyi no resultaron monofiléticas. Se propone el subgrupo iberá como linaje evolutivo diferenciado e independiente. Por otro lado, se obtuvieron cariomorfos de 33 individuos. El cariomorfo 2n=70 NF=84 ocurre en dos linajes basales en el grupo Corrientes, y en la especie hermana C. pearsoni, sería ancestral y habría sufrido reducciones en 2n y NF vía fusiones céntricas y en tándem, principalmente. Se exploró la relación entre la dinámica del principal ADN satélite de los tucos (SRPC) y la variabilidad cromosómica en Corrientes. Se analizó también la variación intra/inter poblacional del número de copias y de la secuencia del satélite SRPC. El satélite SRPC siguió un patrón conservativo en algunos linajes pero altamente dinámico en otros. La evolución de la secuencia y el número de copias de SRPC es compatible con la hipótesis de una biblioteca ancestral, cuyas variantes están presentes en todos los linajes, aunque en proporciones diferentes.

Abstract:
Tuco-tucos, subterranean rodents of the genus Ctenomys, from Corrientes province inhabit unstable environments both from a spatial and a temporal point of view, in most of its distribution. Tucotucos represent an excellent model for studying speciation and hybridization, and the role of chromosomal evolution in these processes, being a conspicuous attribute of this group. Most of the 39 populations described in this group have an undefined taxonomic status, and show an extraordinarily high diploid (2n) and fundamental number (FN) variability, in the ranges 2n=41-70 FN=76-84. In this work a molecular phylogeny was obtained, including representatives from 23 Correntinean populations, based on mitochondrial markers: cytochrome b, cytochrome oxidase I and the control region (D-loop). The Corrientes group resulted monophyletic. However, previously described species C. perrensi and C. dorbignyi did not result monophyletic. The iberá subgroup is proposed as an independent and differentiated evolutionary lineage. Besides, 33 individual karyomorphs were obtained with uniform staining. Karyomorph 2n=70 FN=84 occurs in two basal lineages in the Corrientes group, as well as in its sister species C. pearsoni, would be ancestral and may have suffered reductions in both 2n and FN mainly via centric and tandem fusions. The relationship between the major satellite DNA of tuco-tucos (RPCS) and chromosomal variability in Corrientes was studied. Intra and interpopulation variability in copy number and at RPCS’ nucleotide profile were also analyzed. The satellite RPCS followed a conservative pattern in some lineages but it has been highly dynamic in others. Nucleotide sequence and copy number evolution in RPCS are compatible with the hypothesis of an ancestral library, in which variants are present in all lineages, but in different proportions.

"Evolución del campo volcánico Pino Hachado, Andes del Sur (38°30´S y 71°O)" (2013-04-08). Tunstall, Cynthia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Pino Hachado es una zona volcánica desarrollada durante el Pleistoceno, ubicada en los Andes del sur de Chile y Argentina, a 40 km al NE de Las Lajas, provincia de Neuquén y a 700 km al sureste de Santiago de Chile, dentro de la principal cadena volcánica activa de los Andes. Esta región también se encuentra dentro del área de influencia de un rasgo tectónico importante: el sistema de Falla Liquiñe-Ofqui. La geología del área está formada principalmente por lavas basálticas, basandesíticas, riodacíticas y por depósitos piroclásticos que fueron emplazados en diferentes episodios, variadas condiciones paleoclimáticas y geomorfológicas, a través de diversos conductos asociados a este ambiente geodinámico. Los estudios realizados en los últimos años han puesto de manifiesto que la historia volcánica de la zona es mucho más compleja de lo que se creía, e incluye dentro de la depresión una serie de erupciones que dieron lugar al desarrollo de productos subglaciales, así como domos dacíticos ricos en cristales de anfíboles, minerales poco comunes en esta Zona Volcánica. Si bien en trabajos previos se ha definido a esta estructura como una caldera de colapso no se ha contrastado hasta el momento dicha hipótesis con evidencias de campo y de laboratorio. En el presente trabajo se sustenta la mencionada hipótesis, definiendo facies de pre-sin y post-colapso, así como facies explosivas de intra y extra-caldera, infiriendo que la caldera original presentaba un tamaño menor que la actual y que a su vez estuvo controlada por el estrés regional al momento de ocurrir el evento. La caldera se clasifica como de underpressure y presenta las siguientes características: los depósitos de intracaldera son escasos, no se reconocen eventos de resurgencia, la morfología es elongada en sentido E-O y presenta un diámetro de 6 x 7,5 km. Las unidades propuestas presentan características físicas particulares, como disyunción columnar con patrones radiales y curvos, brechas hialoclásticas, contactos brechosos con unidades sedimentarias basales, que permiten inferir un emplazamiento en un ambiente subglacial de estos productos volcánicos. La distribución de dichas unidades rellenando parcialmente la depresión de Pino Hachado, sugiere que la misma estaba rellena con importantes masas de hielo/lago en el Pleistoceno Inferior a Medio, De modo que, la depresión de Pino Hachado ha modificado su morfología a partir de la erosión retrocederte en sus paredes, ocurridos en distintos períodos glaciales dentro del pleistoceno. La compleja historia evolutiva de las rocas del Campo Volcánico Pino Hachado donde la mezcla de magmas, automezcla por convección, asimilación cortical y diferenciación por cristalización fraccionada actuaron conjuntamente a lo largo de la evolución petrogenética, desde la generación y ascenso de magmas básicos, hasta la mezcla de estos con un magma cristalino dacítico en niveles superficiales de la corteza, justifican la realización del presente estudio, cuyo propósito es el de generar un modelo volcanológico a partir del estudio de detalle de productos volcánicos y piroclásticos, sus relaciones estratigráficas, las características de sus litofacies, petrografía y petrología, geoquímica, edad y su relación con las estructuras presentes en la región. Palabras claves: Caldera, Zona Volcánica Sur, volcanismo Cuaternario, erupciones subglaciales, disyunción columnar, Pino Hachado.

Abstract:
Pino Hachado is a Pleistocene caldera structure developed during the Pleistocene, located in the southern Andes of Chile and Argentina at ca. 40 km NE of Las Lajas in the Neuquén province and 700 km SE of Santiago de Chile, within the main active volcanic chain of the Andes. The geology of the area is mainly formed by basaltic to andesitic lavas that form the caldera walls and scarce pyroclastic deposits in the surroundings of the structure. The caldera is also located within the influence area of a major tectonic feature, the Liquiñe-Ofqui Fault System. New studies carried out in recent years have revealed that the volcanic history in the area is much more complex, and includes within the caldera depression a series of subglacial eruptive products, as well as amphibole-rich dacitic domes, uncommon in the Southern Volcanic Zone. The subglacial products include hackle-jointed basaltic lavas, mixed pyroclastic and fluvioglacial deposits, and a major volcanic center formed by hialoclastite pyroclastic deposits, which shows on its base a transitional contact from glacial deposits. Although previous studies have defined this structure as a collapso caldera, until now this hypothesis has not been contrasted by field and laboratory evidence. In this work, such hypothesis is supported, defining pre- sin and post- collapse facies, as well as intra and extra- caldera explosive facies, inferring that the original caldera was smaller than the modern one and that, in turn, was controlled by the regional stress when the event occurred. The caldera is defined as an underpressure type due to the following characteristics: the intracaldera deposits are scarce, no resurgence events are known, the morphology is elongated in an E-W direction and presents a diameter of 6 x 7.5 km. The proposed units present particular physical characteristics, as columnar with radial and curved patterns, hialoclastic brechia, brechia contacts with basal sedimentary units, which allow inferring a settlement in a subglacial environment of these volcanic products. The distribution and type of products indicates a complex history in the area, suggesting that the initial caldera depression was filled by ice/lake during the Lower to Middle Pleistocene while bimodal magmas (basaltic andesite and dacite) were erupting and interacting with the ice and lake within the caldera. The complex evolutionary history of the rocks of the Volcanic Camp Pino Hachado where the magma mixture, convextion automixture, cortical assimilation and differentiation by fractionated crystallization acted together along the petrogenetic evolution, from the generation and ascension of basic magmas to the mixture of those with a crystalline dacitic magma in cortical surface levels, all which justify the realization of the present study, which aims to generate a vulcanologic model from the study of the detail of the volcanic and pyroclastic products, its stratrigraphic relationships, the lithofacies characteristics, petrography and petrology, geochemistry, age and its relationships with the structures of the region. Keywords: caldera, columnar jointing, subglacial eruptive, Southern Volcanic Zone, Quaternary volcanism, Pino Hachado

"Evolución del plumaje y el canto en las palomas americanas (Aves: Columbiformes)" (2003). Mahler, Bettina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo se estudió el patrón evolutivo de la coloración del plumaje y de la estructura del canto en las palomas americanas, el grado de correlación filogenética que presentan estos caracteres y las fuerzas selectivas que los han modificado. Los resultados obtenidos mostraron que en este grupo el grado de correlación filogenética difiere para los caracteres de plumaje y de canto, mostrando los primeros una mayor congruencia con la filogenia que los segundos. Esto sería consecuencia de los diferentes factores de selección actuando en cada caso. La coloración del plumaje se ve afectada por factores tanto de selección sexual como de selección natural. En primer lugar, se encontró que en al menos una especie, la torcacita Columbina picui, existen diferencias sexuales en la coloración del plumaje que no son percibidas por los humanos, ya que incluyen diferencias en el rango ultravioleta de la luz, un espectro que no es captado por los receptores del ojo humano. Además de que los machos presentaron un plumaje más brillante que las hembras, mostraron un mayor componente de luz ultravioleta en la coloración de varias regiones del plumaje que son exhibidas en contextos reproductivos. El hecho de que el plumaje pueda estar siendo modificado por un proceso de selección sexual fue confirmado por un análisis comparativo, que mostró que especies más dicromáticas presentan un brillo mayor en el plumaje que posee coloración melánica y estructural, indicando que un mecanismo de selección sexual esta originando un aumento en el brillo del plumaje. También se encontraron evidencias que sugieren que el color de las plumas está siendo seleccionado para maximizar el contraste con el ambiente, lo cual lo haría más eficaz como señal de comunicación. Las especies que habitan ambientes más cerrados mostraron tener plumajes con un importante componente de reflexión en longitudes de onda más largas, que presentan el mayor contraste con la vegetación circundante, mientras que especies que habitan en ambientes abiertos mostraron tener plumajes negros o blancos, que son los más conspicuos en estos ambientes. Asimismo, se estudió si las modificaciones presentes en las plumas primarias están ligadas a la emisión de sonidos mecánicos, como zumbidos o silbidos, que se han descripto para algunas especies de palomas. Se encontró que la emisión de sonidos mecánicos es independiente de la presencia de la modificación en las plumas primarias y que esta modificación probablemente se haya originado por algún otro proceso de selección. Por otro lado, se encontró que los cantos son diferencialmente variables en sus parámetros, siendo los parámetros de frecuencia menos variables que los parámetros temporales y estructurales. Esto probablemente sea una consecuencia del grado de dependencia con la morfología, ya que las frecuencias acústicas que pueden ser emitidas dependen fuertemente de la estructura del órgano fonador, mientras que los parámetros temporales y estructurales tienen una plasticidad mayor, dado que su variación depende de factores fisiológicos y comportamentales. También se encontró que los parámetros vocales que varían entre las especies son diferentes para los distintos grupos de palomas americanas y que no todos muestran las mismas respuestas a los factores de selección natural y selección sexual. Para uno de los grupos estudiados se encontraron evidencias que sugieren un efecto del ambiente sobre la duración de los cantos y de algún mecanismo de selección sexual sobre la complejidad de los mismos.

Abstract:
The aim of this study was to analyze the evolutionary patterns of plumage coloration and song structure in American pigeons and doves, the phylogenetic correlation of these characters and the selective forces that have modified them along evolution. The results showed that phylogenetic correlation differs for plumage and song characters in this group, being the former more congruent with phylogeny than the letter. This could be a consequence of the different selective pressures acting in each case. Plumage coloration showed to be influenced by sexual selection, as well as by natural selection. In the Picui Dove Columbina picui, differences in plumage coloration including the ultraviolet range of the light spectrum were present between the sexes. This part of the spectrum cannot be perceived by the human eye, but seems to be important in this species, as males showed a greater component of these wavelengths than females in the plumage regions exhibited during courtship displays. Males were also overall brighter than females. The indication that a sexual selection process may influence plumage color was confirmed in a comparative study that showed that more sexually dichromatic species had brighter melanic and structural plumage, suggesting that sexual selection is leading to increased plumage brightness. Evidences of natural selection acting on plumage color were also found. Colors that maximize contrast with the surrounding background are selected in this group. This increases the efficiency of plumage color as a communication signal, as it is easier to be detected by the receiver. Species inhabiting closed habitats showed plumage colors with a strong component in the long wavelengths, which are the most contrsting with dense vegetation. Species inhabiting open habitats, on the contrary, showed black and white plumage colors, which are the most conspicuous in these habitats. On the other hand, the association of feather modifications with mechanical sounds was analyzed. No association was found between both characters, suggesting that a different factor is selecting for feather modifications. Song structure was differentially variable depending on the vocal parameters studied, being the frecuency parameters less variable than temporal or structural ones. This is probably a consequence of the dependence of acoustic frequencies on syringeal morphology, in contrast to temporal or structural characters of the song that are more plastic and change with physiology or behaviour. Song characters showed to vary in a different way in the three groups of American doves and showed to respond differently to natural and sexual selection pressures. A relation of habitat with song duration and of sexual selection with song complexity was found in one of the groups.

"Evolución del volcanismo terciario en el Valle del Cura sobre el segmento de subducción horizontal pampeano, Provincia de San Juan" (2004). Litvak, Vanesa D.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La integración de los rasgos geológicos, petrológicos y geoquímicos, sumada al análisis de la información aeromagnética, permitió delinear la génesis y evolución del volcanismo terciario del Valle del Cura. Su historia magmática está representada por seis eventos eruptivos acontecidos desde el Paleoceno al Mioceno superior. Durante el Paleoceno, el volcanismo está representado por los Basaltos Río Frío; son manifestaciones volcánicas afíricas y alcalinas, con signaturas de intraplaca en un ámbito extensional y sin influencia del arco volcánico, que se encontraba a unos 200 km al oeste. Estas lavas son resultado del rápido ascenso, a través de una corteza adelgazada, de fundidos primarios generados a profundidad como consecuencia de bajos porcentajes de fusión de porciones enriquecidas del manto litosférico. Para el Eoceno, se generó en la región una cuenca de retroarco dentro de un régimen extensional, donde se depositó una secuencia volcanosedimentaria sin-orogénica. Bajo estas condiciones de corteza atenuada y anomalías térmicas, subplacados basálticos favorecieron la fusión de material cortical y en consecuencia la génesis de un volcanismo de composición dacítico a riolítico: la Formación Valle del Cura. Estas rocas presentan signaturas químicas de retroarco, alto contenido en elementos litófllos y un marcado enriquecimiento isotópico, en relación con el resto de la secuencia volcánica terciaria. Este magmatismo ácido presenta dos tipos litológicos: los primeros fundidos generados son de alta temperatura y alta viscosidad, que resultó en una eruptividad flsural y formación de ignimbritas de alto grado; los segundos son fundidos de mayor permanencia en la corteza y resultaron en un volcanismo explosivo, con depósitos de flujo piroclástico y la formación de una caldera en la cordillera de la Brea. El Oligoceno superior marcó el inicio de un magmatismo de arco en el Valle del Cura, representado por el Grupo Doña Ana: comenzó con facies ignimbríticas ácidas y lavas mesosilíceas — Formación Tillito- que luego evolucionaron a un volcanismo basandesítico a andesítico —Formación Escabroso—.Ambos grupos de rocas se caracterizan por sus rasgos químicos y petrográflcos típicos de volcanitas calcoalcalinas, derivadas de fundidos originados por fusión en la cuña astenosférica en el marco de una corteza de espesor normal (30-35 km); con un centro eruptivo reconocido en la cordillera del Zancarrón. La cuenca de depositación oligocena evolucionó dentro de un contexto extensional que favoreció la generación de un volcanismo máfico de retroarco representado por los Basaltos Las Máquinas. Sus rasgos geoquímicos muestran una afinidad alcalina y de intraplaca, pero con una importante influencia del coetáneo arco volcánico. Como respuesta a la subhorizontalización de la placa de Nazca, se produce la migración del arco volcánico y para el Mioceno medio a superior se ubicó en la actual posición del Valle del Cura. La Formación Cerro de las Tórtolas representa el pico de magmatismo andesítico y dacítico que caracterizó, local y regionalmente, a este sector de los Andes. Esta eruptividad resultó en la formación de domos y estratovolcanes como los volcanes Cerro de las Tórtolas, Vacas Heladas y el nuevo centro de emisión identificado en la cordillera del Zancarrón. En esta unidad se reconocen dos etapas: la sección inferior (16-14 Ma) representa fundidos que se equilibraron a una profundidad con fases residuales indicativas de una corteza de espersor normal (30-35 km) y la sección superior (13-10 Ma) cuyas relaciones de tierras raras indican una fase residual granatífera, lo que evidencia una mayor profundidad de generación, en una corteza engrosada de 50 km. El enriquecimiento isotópico de las lavas, desde la sección inferior hacia la superior, también registra el incremento de los aportes corticales en la génesis de los fundidos. Estas volcanitas permanecieron en cámaras magmáticas intermedias de similar profundidad, estimada en 14 a 15 km para la sección inferior, y en 15 a 17 km para la superior. En estas condiciones, los minerales se equilibraron en un rango de temperatura y presión entre 720° y 820°C, y 4,5 y 5,5 kb, respectivamente. Como parte del volcanismo mioceno medio, se incluyen a las ignimbritas dacíticas de la Formación Tambo, ya que conjuntamente con las lavas de la sección superior de la Formación Cerro de las Tórtolas, marcan el quiebre en el comportamiento químico e isotópico del volcanismo terciario del Valle del Cura. En conjunto representan el volcanismo desarrollado bajo las condiciones de máxima compresión. Las últimas manifestaciones volcánicas corresponden a las Ignimbritas Vacas Heladas, de composición dacítica; poseen signatura de arco, pero fundamentalmente evidencian una importante participación de material cortical: presentan el mayor enriquecimiento isotópico de toda la secuencia volcánica del arco terciario. Luego de estas manifestaciones volcánicas y como respuesta a la subhorizontalización de la losa subducida, cesó la actividad volcánica en el Valle del Cura.

Abstract:
Evolution of tertiary volcanism in the Valle del Cura over the Pampean flat-slab, San Juan Province. The genesis and evolution of tertiary volcanism in the Valle del Cura was established by the integration of its geological, geochemical and petrological features, plus the aeromagnetic data analysis. The magmatic history is represented by six eruptive events that occurred from the Paleocene to the upper Miocene. The Basaltos Río Frío represents the volcanic activity during the Paleocene; they are alkaline and aphiric volcanites with extensional and intraplate chemical signatures, without influence of the volcanic arc located 200 km to the west. These lavas resulted from primary deep magmas that were fastly erupted through a thin crust and generated by low melting degrees of enriched portions of lithospheric mantle. During the Eocene an extensional retroarc basin was developed and filled with a synorogenic volcanosedimentary sequence. Therefore, the thin crust and thennal anomalies environment was favorable for basaltic underplating and melting of the crust; hence the genesis of a dacitic and ryholitic volcanism: the Valle del Cura Formation. These rocks present retroarc chemical signatures, high contents of lithophiles elements, and an isotopic enrichment in comparison with the remaining tertiary volcanic sequence. This acid magmatism has two different líthologies: the first melts had high temperature and viscosity and derived in high grade ignimbrites associated to fisural eruptivity; the second melts resulted in explosive volcanism, piroclastic flows and the caldera structure in the cordillera dela Brea. An arc magmatism started at the Oligocene, which is represented by the Doña Ana Group. It began with acid ignimbrites facies and mesosiliceous lavas —theTillito Formation- that evolved to a basandesitic and andesitic volcanism —the Escabroso Forrnatíon—. Both units have petrographical and geochemical calcoalkaline features, and are the result of melting in the asthenospheric wegde beneath the main arc in a thin crust (35 km); they are related to a eruptive center recognized in the cordillera del Zancarrón. This extensional oligocene basin was favorable for retroarc mafic volcanism represented by the Basaltos Las Máquinas. Its geochemistry signature shows an alkaline and intraplate afinity, but with a strong influence of the contemporary volcanic arc. As a result of the shallowing of the downgoing slab of the Nazca plate, the volcanic front migrated, and by the middle Miocene it was located over the Valle del Cura area. The Cerro de las Tórtolas Formation represents the main event of andesitic and dacitic volcanism that characterized, locally and regionally, this area of the Andes. This volcanic activity was responsable for the formation of domes and stratovolcanoes, as the Cerro de las Tórtolas and Vacas Heladas, and the new eruptive center identified in the cordillera del Zancarrón. Two stages are recognized in this unit: the lower section (1614 Ma) represents melts that were equilibrated at depth with residual phases associated with a crust of normal thickness (30-35 km); while the upper section (13-10 Ma) has rare earths relationships indicating a granatiferous residual phase, and therefore a deeper site of magma generation in a thick crust of 50 km. The increase in the isotopic enrichment of the lavas, from the lower section to the upper section, also shows the increase of crustal contributions during the genesis of the magmas. These volcanítes were storaged in intennediate magmatic chambers of similar depth, estimated in 14 to 15 km for the lower section, and 15 to 17 km for the upper one. Under these conditions, the mineral assambleges were equilibrated in a temperature and pressure range of 720°—820°C and 4,5-5,5 kb, respectively. The dacitic ignimbrites of the Tambo Formation are also included in the middle Miocene volcanism because together with the upper section of the Cerro de las Tórtolas Formation indicate the break in the chemical and isotopic behaviour of tertiary volcanism in the Valle del Cura. Both units represent the volcanism developed under the highest compressional conditions. The Ignimbritas Vacas Heladas represent the last volcanic activity. These dacitic ignimbrites have arc-like signatures, but mainly show high crustal contributions: they are the most isotopicaly enriched lavas of all the tertiary volcanic-arc sequence. After these dacitic and ryholitic volcanism, and as a response of the flattening of the subducting slab, the volcanic activity ended in the Valle del Cura.

"Evolución dinámica de la turbulencia en el viento solar" (2014-03-26). Ruiz, María Emilia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La turbulencia es ubicua en el universo. Tanto observaciones remotas en el medio interestelar local como observaciones in situ en el viento solar (VS) han mostrado evidencia sobre la presencia de dinámica turbulenta en estos escenarios. El VS provee el túnel de viento con mayor número de Reynolds que permite estudiar turbulencia magnetohidrodinámica (MHD) con métodos de observación in situ. En este trabajo se estudia la evolución de la turbulencia MHD en el VS, caracterizando el proceso de envejecimiento y rejuvenecimiento de los estados turbulentos inicialmente desarrollados cerca del Sol. Como herramienta de diagnóstico de la turbulencia empleamos la función de correlación espacial R y la longitud de correlación asociada λ, calculadas ambas a partir de observaciones realizadas in situ en el VS por las sondas Helios 1, Helios 2, ACE y Ulysses. En esta tesis se muestra que en turbulencia MHD existe para R una escala de autosimilaridad dada por λ, y por primera vez se calcula el exponente espectral de las fluctuaciones magnéticas con una base estadística de 10 años. Realizamos un estudio evolutivo de la escala de similaridad en término de la edad de las parcelas de plasma. Además, caracterizamos la función de distribución de probabilidad (FDP) de λ a diferentes distancias heliocéntricas para dos regímenes de viento caracterizados por valores diferentes del beta de protones. Encontramos que la FDP de λ es lognormal y bi-modal, presentando diferentes parámetros en cada régimen, consistente con la variedad de procesos multiplicativos y no lineales que tienen lugar en el VS. Investigamos las propiedades anisótropas de las fluctuaciones a diferentes heliodistancias respecto del campo medio Bₒ. Mostramos que el VS rápido y el VS lento no son intrínsecamente diferentes, sino que la diferente manifestaci ón de la anisotropía en estos regímenes es consecuencia de la evolución dinámica de las fluctuaciones, independiente de la velocidad del viento e incluso de la etapa del ciclo de actividad solar. La cascada direccional de energía da lugar a una migración de la energía desde vectores de onda paralelos a Bₒ hacia vectores de onda perpendiculares a Bₒ a medida que el viento envejece.

Abstract:
Turbulence is ubiquitous in the Universe. Both, remote observations in the local interstellar medium and in situ observations in the Solar Wind (SW) have shown evidence for the presence of turbulent dynamics in these scenarios. The SW provides the wind tunnel with highest Reynolds number where to study magnetohydrodynamics (MHD) turbulence by means of observational in situ techniques. In this work we study the evolution of MHD turbulence in the SW, characterizing the process of aging and rejuvenation of the turbulent states initially developed near the Sun. As a diagnostic tool of the turbulence we employ the spatial correlation function R and the associated correlation length λ, both estimated from in situ SW observations performed by the spacecrafts Helios 1, Helios 2, ACE y Ulysses. In this Thesis we show that in MHD turbulence exists a scale of self-similarity for R given by λ, and for the first time we estimate the spectral exponent of the magnetic fluctuations with an extense statistical data base of ten years. We perform an evolutive study of the self-similarity scale in terms of the age of the plasma parcels. Besides, we characterize the probability distribution function (PDF) of λ at different heliocentric distances for two SW regimes distinguished by different values of proton beta. We find that the PDF of λ is lognormal and bi-modal, displaying distinct parameters in each regime, consistent with the variety of non-linear multiplicative processes taking place in the SW. We investigate the different anisotropic properties of the fluctuations at different heliodistances with respect to the mean field Bₒ. We show that the fast and slow SW are not intrinsically different, but the different manifestation of anisotropy in these regimes is a consequence of the dynamic evolution of the fluctuations, independent of wind speed and even of the activity solar cycle. Energy directional cascade leads to a migration of energy from wave vectors parallel to Bₒ to wave vectors perpendicular to Bₒ as the wind age.

"Evolución estratigráfica y tectónica del Jurásico de la Alta Cordillera de San Juan" (1997). Alvarez, P. Pamela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Evolución estructural de la cordillera principal entre Las Choicas y Santa Elena (35°S), provincia de Mendoza, Argentina" (2011). Mescua, José Francisco. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se presenta en esta tesis un estudio detallado de la estructura del sector interno de la faja plegada y corrida de Malargüe a la latitud de 35oS. A partir del relevamiento geológico realizado se determinó la estratigrafía local, que abarca desde el Paleozoico tardío hasta el Cenozoico. Se compone de un basamento integrado por metamorfitas paleozoicas y rocas ígneas del Permotriásico, la cobertura sedimentaria mesozoica de la cuenca Neuquina, rocas ígneas cenozoicas y depósitos cuaternarios. El relevamiento estructural de superficie permitió definir diferentes dominios estructurales dentro de un estilo general de piel gruesa: (1) un dominio noroccidental de inversión del depocentro Río del Cobre de la cuenca Neuquina; (2) un dominio sudoccidental de pliegues por despegue, favorecido por unidades jurásicas de comportamiento dúctil; (3) un dominio hacia el este correspondiente al bloque de basamento de Las Leñas; y (4) un dominio oriental de pliegues cuya dirección estuvo controlada por un graben mesozoico. A partir de su descripción se destaca la importancia de la historia geológica pre-ándica en la estructura ándica. Se reconoció por primera vez en la zona de estudio un episodio de deformación cretácico tardío. Por otro lado, sobre la base de las edades de deformación en secuencia y fuera de secuencia determinadas en la zona durante el Cenozoico, se propone una historia de la faja plegada y corrida a partir de la teoría de cuña crítica de Coulomb. La integración de los datos relevados con otros publicados del sector externo de la faja plegada y corrida permitió construir una sección balanceada de toda la faja plegada y corrida de Malargüe, obteniéndose un acortamiento de 26,18 km, equivalente al 22%. Se realizó ademas un estudio de la petrografía y geoquímica de rocas ígneas meso- y cenozoicas del área de estudio, que permitió interpretar un ambiente tectónico de retroarco extensional para la zona durante el Jurásico tardío, y una evolución cenozoica caracterizada por (1) una expansión del arco hacia el este durante el Mioceno temprano; (2) una leve tendencia al engrosamiento cortical durante el Mioceno tardío; y (3) una contracción del arco en el Plioceno. Por último, se discuten los controles tectónicos en la evolución estructural y magmática de la zona de estudio.

Abstract:
In this thesis, a detailed study of the inner Malargüe fold-and-thrust belt at 35oS is presented. A geologic survey was carried out in order to determine the local stratigraphic succession, which consists in a pre-Jurassic igneous and metamorphic basement, Mesozoic sedimentary rocks of the Neuquén basin, Cenozoic igneous rocks, and Quaternary deposits. Four structural domains were defined on the basis of surface information: (1) a northwestern domain in which the inversion of the Río del Cobre depocenter of the Neuquén basin took place; (2) a southwestern domain of detachment folds developed in a Jurassic sedimentary succession with ductile intervals; (3) the Las Leñas basement block to the east; and (4) an easternmost domain with folds controlled in their strike by a Mesozoic graben. The description of the different domains allowed the recognition of the importance of the pre-Andean geologic history in the Andean orogeny. An episode of late Cretaceous deformation was recognized for the first time in the study area. Based on the ages of in-sequence and out-of-sequence deformation in the area, an evolution of the fold-and-thrust belt controlled by the Coulomb wedge theory is proposed. The integration of the data presented here with previous publications of data from the eastern sector of the fold-and-thrust belt was carried out to build a balanced cross-section of the whole Malargüe fold-and-thrust belt at the studied latitudes. The minimum shortening obtained is 26.18 km, which corresponds to 22%. In addition to this, the petrography and geochemistry of Meso- and Cenozoic igneous rocks from the study area were studied. This study supports the proposal of an extensional retroarc environment for the area during the late Jurassic, and a Cenozoic evolution characterized by: (1) an arc expansion to the east during the early Miocene; (2) a tendence to crustal thickening in the late Miocene; and (3) a Pliocene contraction of arc magmatism. Finally, the tectonic controls on the structural and magmatic evolution of the Andes at 35oS are discussed.

"Evolución geodinámica de la Puna sobre la base de estudios paleomagnéticos" (1999). Prezzi, Claudia Beatriz. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los Andes Centrales presentan un combamiento pronunciado a los 18ºS. Este combamiento es denominado codo de Arica. Se determinó la existencia de rotaciones según ejes verticales en sentido antihorario al norte de Arica y en sentido horario al sur de Arica a partir de datos paleomagnéticos. Estos datos provienen de rocas mesozoicas y cenozoicas aflorantes en el antearco y el retroarco andinos. Varios autores han propuesto distintos modelos para tratar de explicar la evolución geodinámica de los Andes Centrales, pero el origen de las rotaciones continúa siendo discutido. Los modelos regionales propuestos involucran combamiento oroclinal y/o rotación local de bloques. Esta falta de consenso en parte se debe a la escasez de datos paleomagnéticos y a la incertidumbre en la edad de la mayoría de las rotaciones. Los objetivos de esta tesis doctoral son la obtención de nuevos datos paleomagnéticos a partir de rocas aflorantes en la Puna Argentina y tratar de definir los procesos generadores del patrón de rotaciones observado. En el campo se obtuvieron 831 muestras orientadas en distintas zonas: Siete Curvas, Juncal Grande, Tebenquicho, Chorrillos, Tiomayo, Morro Blanco, Rinconada, Mina Loma Blanca y Coranzulí. A los distintos especímenes se les aplicaron diferentes técnicas de desmagnetización. Algunos especímenes sufrieron cambios mineralógicos durante la desmagnetización térmica. Se determinó que durante el calentamiento se generaba maghemita como consecuencia de la descomposición y la oxidación de siderita y de la deshidratación de lepidocrocita. También se observó, la formación de hematita a partir de la deshidratación de goethita. Se aislaron magnetizaciones remanentes que indican la existencia de sitios no rotados, sitos rotados en sentido horario y sitios rotados en sentido antihorario. Se propone un modelo flexural muy simplificado para tratar de explicar el diacronismo observado en la deformación mio-pliocena a lo largo de la Puna Argentina. Dicha deformación finalizó en la Puna Septentrional y migró hacia el este a las Sierras Subandinas aproximadamente hace 10 Ma, pero continuó en la Puna Austral hasta los 4 Ma antes de que se produjera una migración similar. Se consideró una reología elástica. Se modelaron dos perfiles E-0 a los 22 y los 24ºS con espesores elásticos de 25 y 15 km respectivamente aplicando la carga de la topografía estimada para los Andes Centrales a los 10 Ma. Mientras la placa debajo de las Sierras Subandinas a los 22ºS sufría elevación, a los 24ºS debajo del Sistema de Santa Bárbara sufría subsidencia, explicando el diacronismo anteriormente mencionado. La base de datos paleomagnéticos de los Andes Centrales fue analizada y se determinaron algunas características del patrón de rotaciones. Estas características son explicadas considerando un modelo de rotación local de bloques en respuesta a cizalla distribuida en el antearco y en respuesta a cizalla penetrativa en niveles subcorticales en el retroarco.

Abstract:
The Central Andes show a pronounced bend at 18ºS. This bend is called the Arica elbow. The existence of counterclockwise vertical axis rotations north of Arica and clockwise ones to the south has been determined fiom paleomagnetic data. These data have been obtained from Mesozoic and Cenozoic rocks cropping out in the Andean forearc and backarc. Various authors have proposed different models to explain the geodynamic evolution of the Central Andes, but the origin of these rotations remains controversial. Proposed regional models involve oroclinal bending andlor local block rotations. This lack of agreement is partly due to the scarce paleomagnetic data base and the uncertain age of most of the rotations. The aims of this PhD Thesis are to obtain new paleomagnetic data fiom rocks cropping out in the Argentine Puna and to try to define the processes leading to the observed rotation pattern. 83 1 oriented samples were obtained in the zones of Siete Curvas, Juncal Grande, Tebenquicho, Chorrillos, Tiomayo, Morro Blanco, Rinconada, Mina Loma Blanca y Coranzuli. Different demagnetization techniques were applied to the specimens. Some specimens suffered mineralogcal changes when submitted to thermal demagnetization. It was determined that during heating, maghemite is produced by the decomposition and oxidation of siderite and by the dehydration of lepidocrocite. Also it was observed that hematite is produced by the dehydration of goethite. Remanent magnetizations were isolated which indicate the existence of non-rotated, clochse rotated and anticlochse rotated sites. A very simplified flexural model is proposed trying to explain the observed diachronism of Mio-Pliocene deformation along the Argentine Puna. It ceased in the Northern Puna and moved eastward to the Andean foreland belts at about 10 My, but it. continued to 4 My in the Southern Puna, before a similar shift. An elastic rheology was considered. Two E-W profiles at 22 and 24ºS were modelled with elastic thicknesses of 25 and 15 km respectively and applying the load of the estimated topography of the Central Andes at about 10 My. While under the model constrains the plate under de Andean foreland belts at 22ºS underwent elevation , at 24ºS it underwent subsidence, explaining the above mentioned diachronism. The Central Andes data base was analysed and some features of the rotation pattern were determined. These features are explained considering a model of local block rotations in response to distributed shear in the antearc and to shear-driven subcrustal ductile flow in the backarc.

"Evolución magmatotectónica cenozoica del noroeste de Neuquén (37° 00´- 38° 00´S., Argentina)" (2008). Rovere, Elizabeth Ivonne. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Este trabajo constituye un completo aporte al conocimiento geológico del volcanismo cenozoico en el noroeste de Neuquén. Presenta novedosos datos de índole científica, tales como datos geocronológicos y geoquímicos de rocas volcánicas y plutónicas. Estas rocas pertenecen a una región denominada "área clave", ubicada en un sector ubicado entre los 37° y 38° S al oeste de la cordillera del Viento. En este trabajo se presentan por primera vez estudios geoquímicos y geocronológicos con el propósito de analizar la evolución magmato-tectónica en el "área clave". Esto permitió realizar una comparación en el contexto volcánico de los Andes norpatagónicos entre el "Complejo Volcánico Los Miches" (ubicado en el "área clave") y el "Complejo Volcánico Caviahue" (ubicado al sur). El mismo da cumplimiento a los requisitos de la Universidad de Buenos Aires para optar al Doctorado en Ciencias Geológicas. Se resume la estratigrafía paleozoica y mesozoica de la región comprendida entre 37° y 38° S, desde el sector sudoccidental de la cordillera del Viento y el margen occidental de la cuenca neuquina hasta el límite fronterizo argentino-chileno. Estas unidades no se describen en detalle debido a que no corresponden al objetivo de este trabajo. No obstante, a modo de excepción, dos unidades mesozoicas, las Formaciones Nahueve y Epu Lauquen, son detalladas debido a que se obtuvieron nuevas dataciones durante la realización de este trabajo y pertenecen al "área clave". Se propone un esquema estratigráfico para el magmatismo cenozoico formado por las siguientes unidades agrupadas en dos Asociaciones y dos Complejos. El Complejo Volcánico Caviahue: Fm. Las Termas (Pleistoceno superior-Reciente), Fm. Pino Andino (Pleistoceno medio a superior), Fm. Cerro Trolón (Pleistoceno), Fm. Copahue (Pleistoceno), Fm. Riscos Bayos (Plioceno superior), Fm. Las Mellizas (Plioceno) y Fm. Hualcupén (Plioceno a Pleistoceno inferior); Complejo Volcánico Los Miches: Fm. Guañaco (Pleistoceno inferior a medio), Fm. Bella Vista (Plioceno superior), Fm. Cerro Centinela (Plioceno), Fm. Reñileuvú (Plioceno medio a superior). La Asociación Plutónico Volcánica Miocena compuesta por: Fm. Mitrauquén (Mioceno Medio a Plioceno inferior), Fm. Mandolegüe (Mioceno), Fm. Trapa-Trapa (Mioceno Medio a Superior), Fm. Invernada Vieja (Mioceno Medio a Superior), Andesita Cerro Moncol (Mioceno Medio a Superior), Granodiorita Cerro Columpio (paleozoicas y/o mesozoicas) durante el Mioceno y determinaron nuevas zonas de fractura que migraron en dirección noreste a partir del Neógeno. Se reconocieron tres fallas circunferenciales localizadas hacia el noroeste de Copahue: a) 37° 35’ S- 70° 45’ O, b) 37° 40’ S – 70° 40’ O, y c) 37°50’S – 71°00’ O. Además, se identificaron estructuras magmato-neotectónicas vinculadas a procesos de subsidencia térmica en la región de Copahue que exponen una distribución alineada hacia el Noreste desde el volcán Copahue hasta la cordillera del Viento a lo largo de la cordillera de Mandolegüe. Las cámaras magmáticas determinantes del arco volcánico Neógeno no presentan evidencias de migración en este segmento de la cordillera. Se describe la evolución de los Complejos Volcánicos Caviahue (CVC) y Los Miches, centrados en los volcanes Cerro Centinela (oeste de la cordillera del Viento - C.V.-) y Copahue (en la actual caldera del Agrio) asociada con la existencia del bloque competente de la C.V. (al norte de los 37° 30’ S) que condiciona una tectónica constrictiva. La interpretación tectono-magmática indica que: en la región sur, como dicha limitación mecánica -C.V.- no existe, la deformación pudo propagarse más fácilmente hacia el este y generó fallas normales de alivio y el consecuente colapso de una caldera. Las fallas circunferenciales se distribuyen a lo largo de un plano intermedio entre las dos regiones. Se provee un contexto magmato-tectónico regional enriquecido con un más ajustado control cronoestratigráfico, que genera un aporte a las actividades exploratorias y al manejo sustentable de los recursos naturales.

Abstract:
The present contribution has the objective to fulfil the requirements of the Buenos Aires University for a phD Thesis in Geology. This work represents a contribution to the geological and magmato-tectonic knowledge of the Northwest of Neuquén province (Argentina) between 37° S and 38° S. In particular, the geological field work in the región of Cerro Centinela and the Copahue volcano could complete the stratigraphical scheme, from the magmatic and sedimentary units mapping and isotopic dating. In this way, a stratigraphical column is proposed for the Cenozoic magmatism formed by the following units, from recent to older, grouped in two Associations and two Complexes. Caviahue Volcanic Complex: Las Termas Fm. (Upper Pleistoce to Recent), Pino Andino Fm. (Middle to Upper Pleistocene), Cerro Trolón Fm. (Pleistocene), Copahue Fm. (Pleistocene), Riscos Bayos Fm. (Upper Pliocene), Las Mellizas Fm. (Pliocene), Hualcupén Formation (Pliocene to Lower Pleistocene). Los Miches Volcanic Complex: Guañaco Fm. (Lower to Middle Pleistocene), Bella Vista Fm. (Upper Pliocene), Cerro Centinela (Upper Pliocene), Reñileuvú Fm. (Middle to Upper Pliocene). The Plutonic Volcanic Miocene Association: Mitrauquén Fm. (Middle Miocene to Lower Pliocene), Mandolegüe Fm. (Miocene), Trapa-Trapa Fm. (Middle to Upper Miocene), Invernada Vieja Fm. (Middle to Upper Mioceno), Cerro Moncol Andesite (Middle to Upper Miocene), Cerro Columpio Granodiorite (Miocene) and Arroyo Palao Fm (Lower to Middle Miocene). The Paleogene Volcano Sedimentary Association: Molle Group (Paleocene to Oligocene) and Lileo Formation (Oligocene to Lower Miocene). Furthermore, Epu Lauquen Formation (Cretaceous) and Nahueve Formation (Jurassic) were redefined. The discovery of Middle Jurassic volcanic centers (Nahueve Formation, 167 ± 6 Ma) and Cretaceous (Epu Lauquen Formation, 94 ± 4 Ma) extends the geographical boundaries known of the volcanic arc and the Mesozoic active margin. The first field observations of Miocene Mitrauquen ignimbrites were recognized in the Reñileuvú river in Argentina, this high volcanic explosivity event deposit was formerly mentioned in Chile. During Late Miocene, slow and oblique convergence occurred in this región of the Cordillera. In the same way, new data in geochronological ages from the Molle Group, Nahueve, Epu Lauquen, Mandolegüe, Lileo - Arroyo Palao (Cura Mallín), Cerro Columpio, Cerro Centinela, Bella Vista and Guañaco Formations could determine at these latitudes the distribution of its outcrops in Argentina territory and delineate the structures that put in contact different volcanic units. In the "key area", a central Pliocene volcanism attributed to Cerro Centinela Formation is described. Small basaltic Pleistocene volcanoes of Guañaco Formation lavas have subalkaline and undifferentiated mantle magma trends. Magmatic temporal and spatial evolution is in relation to Neogene deformation north from the cordillera de Mandolegüe, angularity, convergencial velocity and slab depth. During Middle Miocene (12,6 to 10 Ma) the emplacement of Cerro Columpio granodioritic pluton occurred; in correlation to a thermal uplift of Mandolegüe cordillera through a process of magmato-tectonic doming that produced tens of small monogenic cones. Since Pliocene, the subduction angle returns to a normal angle (about 30°) that expose an hydrated mantle through an astenospheric wedge thicker that produced a more dispersed melt. Changes in acting stress fields produced compressive and transtensive forces that generated preexistent fault reactivation (Paleozoic and/or Mesozoic) during Miocene and determined new fracture zones that migrated northeastward since Neogene. These morphotectonic changes controlled the distribution of contemporaneous depocenters of lacustrine margins related with a decreasing of the sea level to the south and west. Three circumferential faults were recognized they’re located next to: a) 37° 35’ S- 70° 45’ W, b) 37° 40’ S – 70° 40’ W, and c) 37° 50’S – 71° 00’ W. Furthermore, in the región of Copahue magmato-tectonic structures related to thermal subsidence show aligned northeastward trends oriented to "cordillera del Viento", through the Mandolegüe cordillera. Magma chambers didn’t evidence migration processes in this sector of the Andes. The evolution of Plio-Pleistocene volcanic centers of Los Miches Volcanic Complex (centered in Centinela-Huaraco volcano) west of cordillera del Viento and Caviahue Volcanic Complex (centered in Copahue volcano and Caviahue (Del Agrio) caldera) in relation to the cordillera del Viento block (north from 37° 30’ S) evolved into a contemporaneous tectonic uplift. Oppositely, in the southern región, this mechanical boundary do not exist, in that way the deformation could propagate smoothly eastward and facilitate the presence of normal distressed faults and a caldera collapse. Circumferential faults distributed along an intermediate plane between both regions. Informative schemes based on volcanic aspects were described. This section (Anexo 4) is focused on the mitigation of volcanic hazard of Copahue volcano in Caviahue village, severely damaged after July 2000 eruption. Here is exposed an enriched regional magmato-tectonic context with a detailed chronoestratigraphical control that contributes to natural resources exploratory and sustainable activities.

"Evolución mecánico-energética del músculo cardíaco durante la isquemia y la reperfusión" (1997). Mazzadi, Alejandro Noel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudió la producción de calor (Ht) y evolución mecánica en ventrículos de rata estimulados eléctricamente a 1.5 Hz, perfundidos según la Técnica de Langendorff y sometidos a 45 min de isquemia (Isq) y 45 min de reperfusión (Rep). La influencia de la temperatura se evaluó a 25, 30 y 35 ºC. Los 4 componentes diferenciables del calor activo (H1, H2, H3 y H4)(Ponce-Hornos y col, Pflugers Arch-Eur J Physiol 429; 1995) se analizaron en contracciones aisladas en los 10 primeros min de Isch. Los músculos se montaron en un calorímetro (Ponce-Hornos y col, Am. J. of Physiol. 243; 1982) que permitió medir Ht y simultáneamente la presión desarrollada en condiciones isovolúmicas (P) y la presión de reposo (PR). A partir de los estudios realizados fue posible descartar procesos que fueron postulados como responsables de la falla cardíaca isquémica e involucrar en medida apropiada a otros. Entre los primeros, fue posible descartar la caída del pH y los cambios en la energía libre del ATP como responsables en etapas muy tempranas. También pudo disociarse la caída de la P respecto de la desaparición de un componente mitocondrial Ca++ dependiente (H4). Entre los segundos, se identificó un evento energético durante la Isch de alto valor predictivo de la disfunción mecánica y/o daño durante la Rep. También, los experimentos dan apoyo a los cambios en la PR como responsables de la abrupta caída en la P al inicio de la Isch. Además, fue posible vincular a la interacción actomiosínica con la mayor fracción de liberación de energía en el período inicial de la Rep. También se asoció la baja recuperación mecánica durante la Rep con altos valores relativos de calor independiente de tensión.

Abstract:
Total heat production and mechanical evolution were studied in electrically stimulated (1.5 Hz) rat’s ventricles perfused by Langendorff technique and subjected to ischemia (isch) and reperfusion (Rep) (45 min both). Temperature effect was evaluated at 25, 30 and 35 °C. For identified active heat components from a single contraction (H1 to H4)(Ponce-Hornos et al, Pflugers Arch-Eur J Physiol 429; 1995) were analyzed during the first 10 min of ischemia. Resting (RP) and developed pressure (P) and total heat production (Ht) were simultaneously measure on isovolumetric hearts placed in a calorimeter (Ponce-Hornos et al, Am J of Physiol 243; 1982). From these results a fall in pH, as well a changes in ATP free energy, were discarded as possible causes of cardiac failure after early ischemia. Also, the fall in developed tension was dissociated from the Ca-dependent mitochondrial component (H4). An energetic event was identified during the ischemic phase which was highly related with the mechanical failure during reperfusion. And the other hand, these experiments suggest that changes in resting tension are responsible for the brisky fall in the developed pressure at the begining of the ischemia. Even more, the main fraction of released energy during the begining of reperfusion was associated to acto-myosin interaction. Finally, the small mechanical recovery during reperfusion was related with high relative values of tension independent heat.

"Evolución morfológica asociada al proceso de divergencia entre especies: el cluster Drosophila buzzatii (Diptera, Drosophilidae)" (2008). Soto, Ignacio M.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
¿Porqué hay especies morfológicamente crípticas sólo diferenciables por su genitalia? ¿Qué procesos están involucrados en la diferenciación morfológica de las especies y cuál es la importancia relativa de cada uno de ellos? ¿Qué patrones determinan estos procesos cuando se analizan en escalas micro y macroevolutivas? Muchos de los mecanismos por los que se producen los cambios morfo-fisiológicos que acompañan a la especiación permanecen largamente desconocidos por la biología. Más aún, las bases genéticas de la divergencia morfológica que acompaña a la cladogénesis sigue siendo una cuestión controvertida, tanto en lo que concierne al número de genes implicados como a la magnitud de sus efectos. En los últimos años se ha profundizado en el conocimiento de la genética, la biogeografía, la sistemática y la ecología del cluster buzzatii. El simple hecho de que este cluster incluya especies en diferentes etapas de la divergencia interespecífica ofrece la oportunidad de investigar las bases genéticas de la evolución de la morfología en un grupo en activa cladogénesis. Esto se suma a la posibilidad de generar híbridos interespecíficos en el laboratorio y al conocimiento acumulado sobre su ecología, lo que convierte al cluster en un excelente modelo biológico-evolutivo. Además, la fertilidad de las hembras híbridas posibilita experimentos de introgresión de material genético de una especie en el genoma de otra y la oportunidad de buscar loci que afectan caracteres cuantitativos como la forma y el tamaño de las alas y los órganos sexuales. El objetivo primario de esta tesis es comprender los factores causales, tanto genéticos como ecológicos, de las diferencias fenotípicas entre las especies cactófilas del cluster Drosophila buzzatii mediante el análisis de la variabilidad genética y la plasticidad fenotípica de caracteres de distinta naturaleza. Por un lado analizamos la morfología del ala, el tiempo de desarrollo y la viabilidad, que son caracteres íntimamente relacionados con la eficacia biológica. Por otro lado estudiamos la morfología del órgano copulador masculino (aedeagus), un carácter diagnóstico posiblemente blanco de la selección sexual. Asimismo, nos interesa conocer las relaciones entre la morfología, caracteres de historia de vida y el aprovechamiento de la planta hospedadora para determinar si existen correlaciones que puedan limitar o dirigir los cambios en forma y tamaño de los distintos órganos. Finalmente, estimando el grado de divergencia entre especies buscamos estudiar el patrón de evolución morfológica y poder determinar qué aspectos pueden ser atribuidos a la inercia filogenética y cuáles a procesos selectivos actuando en taxa específicos. Los resultados principales fueron: -La base genética de las diferencias morfológicas interespecíficas del ala y la genitalia masculina no sigue un modelo aditivo según el aporte de ensayos de hibridación. Existen elementos segregantes con fuertes efectos epistáticos y de dominancia. -Los sustratos de cría, distintas especies de cactus hospedadores, afectaron dramáticamente todos los caracteres estudiados. Quedan consolidados como un factor biótico central a considerar en cualquier estudio evolutivo en este modelo. - Se detectó plasticidad fenotípica en la genitalia masculina en respuesta a la planta hospedadora por primera vez en el género Drosophila. - Se obtuvo evidencia de que las plantas hospedadoras pueden perturbar diferencialmente el normal desarrollo larvario y constituir un factor de stress, posiblemente relacionado con la química de los cactus. -Las especies difirieron en los patrones de variación, plasticidad fenotípica y en el porcentaje de las diferencias de conformación debidas a la alometría para los caracteres medidos en ambos órganos. -En D. buzzatii y D. serido las diferencias genitales entre poblaciones siguen un modelo de aislamiento por distancia y un patrón de evolución morfológica congruente con un modelo neutro. -La evolución morfológica del cluster buzzatii presenta evidencia de divergencia por procesos selectivos. Esto se aplica tanto al ala como a la genitalia masculina aunque en este último carácter sólo valdría cuando está incluida D. buzzatii ya que las especies del “set” D. serido se ajustaron a un patrón de evolución neutra.

Abstract:
Why we do we have morphologically cryptic species that exclusively differ in the morphology of their genitalia? Which are the processes involved in morphological divergence between species? and which is the relevance of adaptive vs stochastic differentiation? What are the patterns established by these processes in both a micro and macroevolutionary scales? The mechanisms that drive morpho-physiological changes accompanying speciation remain largely unknown by biologists. Besides, there is still a controversy regarding the genetic basis of morphological divergence during cladogenesis and the number of genes involved and the magnitude of their effects In recent years it has been an increment in the knowledge about the genetics, biogeography, systematics and ecology of species that belong to the buzzatii cluster. The mere fact that this cluster comprises species in different stages of interspecific divergence offers the chance to study genetic basis of morphological evolution in a group in active cladogénesis. Additionally, the possibility of producing interspecific hybrids in the laboratory sets the cluster as an excellent biological model for the study the genetic basis of interspecific divergence during different stages of cladogenesis. Moreover, hybrid females are fertile allowing experiments of introgression of genetic material from one species to another and the chance to search for quantitative trait loci affecting wing and genital size and shape. The primary objective of this thesis is to comprehend the causal factors, both genetic and ecological, of phenotypic differences among cactophilic species of the Drosophila buzzatii cluster by means of the estimation of the relative contribution of genetic variation and phenotypic plasticity to phenotypic variation in morphological and life history traits. On one hand, we analyzed wing morphology, developmental time and viability, as representatives of fitness related traits, and, on the other hand, we studied the morphology of male copulatory organ (aedeagus), a diagnostic trait a possible target of sexual selection. As well, we are interested in knowing the relationship between morphological and life-history traits and the influence of host plant use to determine if correlations exists that might limit or drive the shape and size changes in different organs. Alternatively, we seek to understand morphological evolution and to establish which aspects of the evolution of the organ might be attributed to phylogenetic inertia and which to adaptive processes acting in specific taxa. Main results: - According to hybridization essays, the genetic basis of interspecific morphological differences in wing and genitalia did not respond to an additive model. Our results suggest the existence of segregating factors with dominant and epistatic effects. - The breeding substrates, different host cacti, affected dramatically all studied traits. Thus, our study emphasizes the position of host cacti as a central biotic factor to be taken into account in any evolutionary study with this model. - We report phenotypic plasticity in male genitalia associated to host plants for the first time in the genus Drosophila. - We obtained evidence that host plants may differentially affect normal development and represent a factor of stress which might be related to cactus chemistry. - Species differed in patterns of trait variation, phenotypic plasticity and the percentage of shape differences due to allometry for morphological traits in both organs. - Interpopulational genital differences in D. buzzatii and D. serido follow an “isolation by distance” model and a pattern of morphological evolution that is congruent with neutrality. - Morphological divergence in the buzzatii cluster appears to be largely due to adaptive processes for both wing and genitalia. This is true for the D. buzzatii cluster as a whole, while divergence of male genitalia in the D. serido sibling set appears to have evolved under random drift.

"Evolución tectónica de la cuenca de Cañadón Asfalto (zona del Valle Medio del Río Chubut)" (2005). Figari, Eduardo G.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Formacion Canadon Asfalto es un conjunto de depositos volcanicos, bioquimicos, piroclasticos y epiclasticos que aflora en la zona central y norte de la Provincia de Chubut, pero que fueron descritos inicialmente en la region del Valle Medio del rio Chubut. Las principales incognitas sobre esta unidad se planteaban sobre la geometria, extension y genesis de la cuenca que la albergo, asi como sobre los esfuerzos posteriores que la habrian deformado. El estudio de campo en detalle de la estratigrafia, distribucion, geometria, discontinuidades, y elementos tectonicos que controlaron la depositacion de la Formacion Canadon Asfalto (sensu lato) demostro que bajo este nombre se han considerado distintas unidades litoestratigraficas que deberian en realidad formar parte de formaciones distintas (Formaciones Canadon Calcareo, Estratos de Almada, etc.). Sin embargo por motivos conceptuales y de simplicidad, se decidio mantener el nombre generico de Formacion Canadon Asfalto y adoptar una nomenclatura descriptiva, evitando crear nombres formales nuevos. Los estudios estructurales y tectosedimentarios presentados en esta tesis doctoral permitieron reconocer que la clasica Formacion Asfalto representaba, ademas, el registro de etapas diferentes dentro de la evolucion de cuencas de hemigraben. Estas cuencas se desarrollaron como depocentros aislados sobre un area mas extensa que la conocida hasta el momento, habiendose encontrado numerosos afloramientos previamente mal asignados desde el punto de vista temporal, pero que en realidad pertenecen al mismo gran evento. Se definio entonces la existencia de un sistema de rift elongado en direccion noroeste que se desarrollo desde el Jurasico Medio hasta el Cretacico Temprano, constituido por un conjunto de hemigrabenes vinculados entre si por zonas de acomodacion, que recibe el nombre de Cuenca de Canadon Asfalto. Estos resultados se integraron a la evolucion tectonica de la parte sur del continente americano teniendo en cuenta su relacion temporal y espacial, en especial con la orientacion de los esfuerzos, de la apertura del Mar de Weddell. Esfuerzos compresivos durante el Neogeno de orientacion principal oeste-este provocaron la inversion tectonica parcial de la cuenca, principalmente en su borde occidental. La actitud diferencial que ha tenido la fracturacion preexistente frente a esta compresion regional, se justifica a partir de la orientacion de esas fallas ante al esfuerzo maximo compresivo (sigma 1). De esa manera, se produjo la reactivacion de esos planos de falla previos con desplazamiento inverso u oblicuo o su no reactivacion.

Abstract:
The Canadon Asfalto Formation is a succession of volcanic, biochemical, pyroclastic and epiclastic deposits which are exposed in the central and northern regions of the province of Chubut. These sequences were only originally described in the region of the Middle Valley of the Chubut River. The main uncertainties over this unit, before the present studies, were its geometry, distribution, and genesis of the basin, which controlled its deposition, as well as the stress field that later deformed its sediments. The detail field studies on the stratigraphy, distribution, geometry, discontinuities, and tectonic elements that constrain the deposition of the Canadon Asfalto Formation (sensu lato) showed that under this denomination have been grouped different litostratigraphic units, which could be considered as independent formations such as Canadon Calcareo Formation, the Almada beds, and so on. However, based on conceptual and simplicity reasons it was decided to keep Canadon Asfalto Formation as a generic name and to adopt a descriptive nomenclature avoiding creating new formal names. The structural and tectosedimentary studies in this doctoral thesis allowed recognizing that the classic Canadon Asfalto Formation represented a record of different stages in the evolution of a rift system that was controlled by halfgraben basins. These basins were developed as isolated depocentres over a more extensive area that was previously known. Several outcrops have been identified, whose ages were wrongly interpreted, and were part of a single great event. This reconsideration allowed defining a rift system a with a north-western trend that occurred between the Middle Jurassic up to the Early Cretaceous, formed by a series of halfgrabens linked among them by accommodation zones, which have received the name of Canadon Asfalto Basin. These results have been integrated to the tectonic evolution of the southern part of South American continent, and based on the temporal and space distribution, it was related to the main orientation of the stress field during the opening of the Weddell sea in Middle Jurassic times. Compressive stresses during the Neogene with a main east-west trend were responsible of the partial tectonic inversion of the basin, mainly along its western margin. The differential response that have been observed in the pre-existing fractures, it is explained by the orientation of these faults in relation to the maximum compressive stress (sigma 1). This fact, explains why this reactivation occurred by reverse or oblique displacements or in some cases by no reactivation of the previous faults.

"Evolución tectónica de los Andes Centrales Australes (36-39°S): el caso de un orógeno reactivado extensionalmente, la Fosa de Loncopué" (2011). Rojas Vera, Emilio A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
A partir de datos superficiales y geofísicos se estudiaron las distintas unidades aflorantes y no aflorantes acumuladas en la fosa de Loncopué. Esta cuenca ha tenido una fase reciente extensional evidenciada por fallamiento normal que afecta materiales cuaternarios postglaciarios y controla la efusión de campos volcánicos fisurales. Un sistema de fallas occidental asociado al emplazamiento de grandes estratovolcanes y complejos caldéricos sobre la cordillera principal, un sistema de fallas axial dominado por la presencia de pequeñas cuencas transtensionales y un sistema de fallas oriental que afecta el sector interno de la faja plegada y corrida del Agrio, controlan la subsidencia en esta depresión alojada en el frente andino. Además de actividad neotectónica, estos sistemas muestran localmente actividad paleosísmica que indica sismos de magnitudes superiores al registro instrumental disponible. El origen de estos sismos parece concentrarse básicamente en el sector oriental, donde la subsidencia es máxima. La fosa de Loncopué está formada en profundidad por una serie de depocentros aislados, que coinciden espacialmente con los principales sistemas de fallas reconocidos en superficie. Estos depocentros alcanzan localmente los 8 km de profundidad, albergando secuencias relativas a los primeros estadios de apertura de la cuenca Neuquina, secuencias oligo-miocenas ligadas a la cuenca de Cura Mallín, cuyos productos de hallan fuertemente invertidos y expuestos en el ámbito andino hacia el norte y secuencias relativas al arco plioceno que se estableció en la región antes de retraerse hacia el sector chileno en el Cuaternario. Transectas estructurales balanceadas a las diferentes etapas de evolución tectónica del piedemonte neuquino, muestran que el colapso de la estructura compresiva cretácica-eocena ha sido el principal factor asociado a la formación de este rasgo. Dos etapas extensionales (Oligo-Mioceno y Plioceno a la actualidad) han actuado en esta región, separadas por un evento de inversión tectónica. Finalmente, tres transectas estructurales realizadas entre los 36º y los 39º de más de 300 km de longitud cada una, que cruzan el orógeno andino, arrojan valores de acortamiento variable que muestran que los máximos acortamientos se alcanzan en el frente emergente de la cordillera principal, en los sitios en los cuales no se desarrolla la última fase extensional de la fosa de Loncopué.

Abstract:
The outcropping and subsurface units accumulated in the Loncopué trough were studied from field and geophysical data. This basin has had a recent extensional reactivation evidenced by normal faulting affecting Quaternary postglacial materials and controlling fissural volcanism. A western fault system associated with polygenetic stratovolcanoes and caldera complexes hosted in the main Cordillera, an axial fault system dominated by transtensional basins and an eastern fault system affecting the western Agrio fold and thrust belt are controlling subsidence next to the Andean front. Besides this neotectonic activity, paleoseismic indicators through these fault systems indicate paleoearthquakes of magnitudes higher than the instrumental record. Earthquakes seem to be produced in the eastern fault system where subsidence becomes higher. The Loncopué trough is formed at depth by a series of isolated depocenters that are coincident with main recognized faults at surface. These reach up to 8 km deep hosting synrift units of the Neuquén basin and Oligocene to Miocene sequences of the Cura Mallín Basin, whose products were strongly inverted to the north, and finally Pliocene volcanic rocks. These lasts belonged to a magmatic arc that lately retracted westwards in the Quaternary. A series of structural cross sections located across the Andean front show that the development of the Loncopué trough would have been associated with the collapse of a Late Cretaceous to Eocene fold and thrust belt. Two extensional stages have acted in the region separated by a tectonic inversion episode, in Late Oligocene times and Pliocene times respectively. Finally, three regional cross sections more than 300 km long each across the Andes between 36º and 39ºS yielded variable shortening values. These indicate that maximum shortening was achieved at the emergent main Andean front, particularly at the sites where the Loncopué trough has not been developed.

"Evolución tectónica de los Bernárdides entre los 44°30´S y los 46°s" (2016-05-16). Gianni, Guido M.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta Tesis se presenta una descripción de la evolución tectónica Mesozoica a Cenozoica del sistema de los Bernárdides o como se lo conoce más recientemente, faja plegada y corrida de San Bernardo entre los 44°30‘S y los 46°S. Esta área constituye el sector central de una zona de deformación de intraplaca recientemente definida como antepaís fragmentado Patagónico. En esta disertación se presentan datos estructurales de campo, sísmicos, geocronológicos y resultados de modelamiento análogo que en conjunto permiten caracterizar las fases de alzamiento y los mecanismos de deformación que afectaron el interior Patagónico. Un análisis integrado de datos estructurales y sísmicos (2-D y 3-D) en la faja plegada y corrida de San Bernardo y la Sub-cuenca de Río Mayo con foco en los depósitos continentales del Grupo Chubut (Cretácico Inferior tardío-Cretácico Superior) permitió inferir un carácter sinorogénico para las diferentes unidades que lo componen. Esto sugeriría el desarrollo temprano de un sistema de antepaís fragmentado asociado al crecimiento de la faja plegada y corrida de San Bernardo, sugiriendo un levantamiento inicial del mismo durante el Cretácico Inferior tardío a Cretácico Superior. Estos resultados implican la coexistencia de campos de esfuerzos contrastantes donde la compresión andina E-O actuó coetáneamente con una reactivación extensional transversal en sentido aproximado N-S en el sector oriental de la cuenca del Golfo de San Jorge. Aquí se propone una relación causal entre ambos fenómenos donde la compresión gatilló una reactivación de rifting sinorogénico en estructuras extensionales previas. El origen de los esfuerzos compresivos se discuten en relación a múltiples procesos que abarcan desde estadios de alta convergencia de placas y alta velocidad de la placa Sudamericana, colisión de dorsales oceánicas hasta cambios en el ángulo de subducción, como lo evidencia la migración hacia el este del frente volcánico durante el Cretácico Inferior tardío y el posterior cese del volcanismo de arco durante el Paleoceno. El estudio del registro sedimentario Terciario en la faja plegada y corrida de San Bernardo, la Sub-cuenca de Río Mayo y La Meseta de Chalía en el pié de monte andino, permitió desentrañar una serie de eventos de deformación contraccional en el Paleoceno a Eoceno que afectaron el sector de intraplaca patagónico en el Cenozoico temprano. Luego, en el Eoceno terminal el frente de deformación se habría retraído desde el antepaís fragmentado hacia los Andes Nordpatagónicos como lo indican, el cese de la compresión en el sector de la faja plegada y corrida de San Bernardo y la detección de estratos de crecimiento datados en ~40 Ma en la Meseta de Chalía. En el Oligoceno superior a Mioceno inferior, el sector del antepaís fragmentado fue afectado por un episodio extensional como lo revelan la depositación sinextensional de rocas volcánicas máficas. Este escenario cambió a un régimen compresivo en el Mioceno medio basado en la presencia de plateaus volcánicos cenozoicos plegados y la datación de secuencias sinorogénicas marinas. Finalmente, la actividad tectónica se habría reinstaurado recientemente en el área precordillerana como lo indica la presencia de depósitos cuaternarios fallados y plegados en el área de estudio. Un análisis integrando la historia de deformación cretácica y cenozoica revela que la deformación se propagó de manera rápida (~2 Ma) desde los Andes hacia el sector de intraplaca en el antepaís fragmentado (~200 km) en dos oportunidades, a los ~120 Ma y ~17-16 Ma. En este sentido, los resultados del modelamiento análogo, indican que la rápida propagación de la deformación hacia el interior patagónico pudo haber estado favorecida por una variación lateral en la resistencia cortical, donde zonas de debilidad vinculadas a la presencia de cuencas de rift mesozoicas en la Patagonia, actuaron como focalizadores efectivos de la deformación durante la orogenia Andina. Otro aspecto a destacar en la evolución general del área de estudio es la falta de correlación entre el ángulo de subducción y el estado de esfuerzos de la placa superior. Se considera en esta Tesis que el amplio registro de procesos de intraplaca en el área de estudio podría contribuir al entendimiento, aún escaso, de la orogénesis de intraplaca en márgenes de subducción tipo-Andino. Finalmente, una revisión de la evolución tectónica de las cuencas del Golfo de San Jorge, Grupo Salta y Taubaté en el sureste de Brasil; y la comparación con la historia de alzamiento de los Andes Nordpatagónicos y Centrales, permiten plantear la posibilidad de procesos de rifting y/o transtensionales en el antepaís de sistemas orogénicos directamente inducidos por compresión regional en un margen tipo-Andino.

Abstract:
This dissertation describes the Meso-Cenozoic tectonic evolution between 44°30‘S and 46°S of the Bernárdides system, also known as the San Bernardo fold and thrust belt. This area is located in the central zone of the Patagonian broken foreland, a broad morphostructural unit characterized by intense intraplate deformation. This Thesis presents field structural, seismic, geochronological data, as well as results of analog modeling that allowed the characterization of uplift phases and deformational mechanics in the Patagonian interior. An integrated analysis of structural and seismic (2-D and 3-D) data in the San Bernardo fold and thrust belt and the Río Mayo Sub-basin, focused in the continental beds of the Chubut Group (late Early to Late Cretaceous), allowed the recognition of a synorogenic character in all units belonging to this group, suggesting the early development of a broken foreland system related to the initial uplift of the San Bernardo fold and thrust belt since late Early Cretaceous times. These results imply the coexistence between contrasting stress-fields, where E-O-directed compression took place in concert with transversal N-S- directed extension further east in the San Jorge Gulf Basin. A causal relation between both processes is here proposed, where regional compression may have triggered a synorogenic foreland rift reactivation of an earlier extensional fabric. The origin of the compressional stress-field is then discussed in relation to multiple factors that go from changes in plate dynamics to subduction of mid-ocean ridges that converged to induce a shallow angle to the subducting slab, as evidenced by an eastward migration of the arc front in late Early Cretaceous and a volcanic arc gap until Paleocene times. The study of the Cenozoic sedimentary record in the San Bernardo fold and thrust belt, Río Mayo Sub-basin and the Meseta de Chalía in the Andean foothills, unraveled a series of intraplate deformational events spanning the Paleocene to Eocene periods. In the latest Eocene the orogenic front retracted westwards to the North Patagonian Andes as indicated by the cessation of intraplate deformation in the San Bernardo fold and thrust belt and the local U-Pb zircon dating of synorogenic deposits in the Meseta de Chalía over the eastern Andean front. In the Oligocene to early Miocene, the broken foreland sector was subjected to intraplate extension as revealed by the eruption of widespread within-plate magmatism over the entire area and field description of sinextensional deposits. This scenario changed to generalized compression in middle Miocene as suggested by the presence of folded and thrust volcanic rocks and U-Pb zircon dating of marine synorogenic deposits. Then, tectonic activity in the San Bernardo fold and thrust belt resumed as evidenced by faulting of Quaternary fluvial deposits in the study area. An integrated analysis of the Mesozoic to Cenozoic deformational record reveals a rapid propagation of the deformational front (~2 Ma) from the Andes to the broken foreland sector (~200 km) in two opportunities, at ~120 Ma and ~17-16 Ma. In this sense, analog modeling results indicate that fast migration of the orogenic front could be facilitated by the presence of weak zones located in the intraplate sector related to Early Mesozoic rift basins, acting as stress focalizers during Andean orogeny. Another aspect to highlight from the presented Meso-Cenozoic evolution is that there seems to be no clear correlation between slab angle and the stress state in the upper plate. As a whole, the complete record of intraplate tectonic processes unraveled in the study area may contribute to the understanding of intraplate orogenesis in Andean-type tectonic settings. Finally, a revision of the tectonic evolution of the San Jorge Gulf Basin, Grupo Salta and Taubaté Basin in southeast Brazil and its comparison with the main uplift phases of the Central and North Patagonian Andes, allow considering the possibility of a rifting event or a transtensional reactivation of the foreland sectors in orogenic systems directly related to regional compression related to Andean-type margins.

"Evolución tectónica del cinturón DOM feliciano en la región minas - Piriápolis, República Oriental del Uruguay" (1998). Sánchez Bettucci, Leda. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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La región bajo estudio está representada por diversas unidades litológicas que fueron definidas y ubicadas estratigráficamente de diferente forma a través del tiempo. Entre ella se destaca el Grupo Lavalleja que conforma dentro de esta región una unidad litoestratigráfica y estructural que ha sido nominada, estudiada y caracterizada a través de distintas propuestas desde principios de siglo. Esta secuencia volcanosedimentaria, que ocupa la mayor parte de la zona estudiada, fue plegada y afectada por eventos metamórficos durante el ciclo brasiliano, en el Proterozoico superior, e intruida por numerosos cuerpos graníticos. Hacia el este afloran granitos, granitos protomiloníticos, mármoles esquistos biotíticos, anfibolitas, etc., correspondientes al Grupo Carapé el cual es tradicionalmente considerado como una unidad afectada por un metamorfismo en grado mas alto que aquel que afectó al Grupo Lavalleja. Uno de los exponentes mas característicos de la región lo conforma el Complejo Sierra de las Animas. Este se encuentra representado por unidades volcánicas, volcano sedimentarias y plutónicas neoproterozoicas a eopaleozoicas, en discordancia sobre las anteriores, que afloran desde la costa del Río la Plata en el balneario Piriapolis, hasta a unos 50 kilómetros tierra adentro en dirección norte-sur. Los depósitos postorogénicos estan representados por las Formaciones Las Ventanas, Playa Hermosa y San Carlos de edad cambro - ordovicica. Las rocas volcánicas y conglomerados asignados temporalmente al Mesozoico afloran en el norte del área estudiada. En dicha región el cerro Arequita, de composición riolítica, constituye el representante más conspicuo. Los esquemas y modelos interpretativos previos son escasos y han sido realizados fundamentalmente usando datos de índole general, faltando una base de datos mínima para realizar una interpretación sustentada a partir de información geológica, petrográfica, geoquímica, geocronológica y paleomagnética. El objetivo del presente trabajo es analizar la geología de la región Minas Piriápolis tanto desde el punto de vista petrográfico, estructural, geoquímico y geocronológico. Esto implica tratar de resolver la estratigrafia del Proterozoico superior y el Paleozoico inferior para esta región y reconstruir a través de la elaboración de un mapa geológico regional a escala 1:50.000 las relaciones espaciales de las diferentes unidades. Sobre la base de datos obtenidos se definen los ambientes de sedimentación de las secuencias postorogénicas y su relación con el Grupo Lavalleja, el Complejo Sierra de las Animas y granitoides asociados al Complejo Carapé.

"Evolución tectónica del orógeno Andino comprendido entre los 36° y 37° de latitud sur: estudio integrado desde el arco volcánico hasta la región del antepaís" (2015-03-18). Sagripanti, Lucía. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Esta tesis doctoral analiza los pulsos y eventualmente mecanismos de deformación ocurridos en los Andes Centrales del Sur a lo largo de una transecta ubicada a los 37ºS. Para ello se seleccionaron cuatro zonas, que de oeste a este son la Cordillera del Viento, el plateau volcánico del Tromen, la sierra de Reyes y el complejo volcánico Chachahuén. Cada una de estas zonas presenta evidencias de uno o más pulsos de deformación que afectaron al margen andino desde el Cretácico superior en adelante. Debido a los contrastantes tiempos de estructuración y columna geológica aflorante se aplicaron diferentes metodologías entre las que se destacan: i) utilización de cortes estructurales balanceados para representar un modelo de la estructura, ii) utilización de métodos potenciales para tener un mejor conocimiento del subsuelo, iii) análisis geocronológicos de U/Pb en circones detríticos para dilucidar la edad y las áreas de proveniencia, iv) análisis morfométricos de la red de drenaje y topográficos para evidenciar actividad neotectónica y, v) realización de perfiles sedimentarios de detalle con reconocimiento de fósiles que permiten acotar la edad y el ambiente de depositación de la zona. Como resultado del análisis de estas zonas se esboza un cuadro evolutivo para los Andes Centrales del Sur en el cual se reconocen cuatro pulsos de deformación que coinciden, con las propuestas iniciales. Sin embargo su distribución muestra un patrón más complejo que lo esperado previamente. El sector de la Cordillera del Viento presenta un pulso de deformación durante el Cretácico Tardío seguido de una reactivación en el Mioceno tardío. Los mecanismos asociados a este alzamiento corresponden a la reactivación diferencial de hemigrábenes y creación de nuevos corrimientos que cortan estas estructuras previas. Hacia el este, en el plateau volcánico del Tromen, se reconoce una fase pre-miocena que sufre una reactivación neotectónica produciendo alteraciones superficiales que modifican la red de drenaje. Presumiblemente esta reactivación esté asociada con el ascenso de material astenosférico en la región tal como revelan estudios magnetotelúricos. En el frente orogénico, la sierra de Reyes se ha exhumado inicialmente durante el Eoceno y luego ha sufrido una fuerte reactivación neógena que registra una secuencia de destechado en su cuenca de antepaís asociada. Finalmente, este último pulso ha avanzado anómalamente hacia la región del antepaís donde se reconocen secuencias cretácicas inferiores de borde de cuenca emplazadas sincronicamente con un sistema de filones que datan esta deformación en 7 Ma. De esta forma se demuestra que la faja plegada y corrida de Chos Malal ha crecido en secuencia entre el Cretácico Superior y el Eoceno, para luego sufrir una reactivación de los sectores internos a partir de corrimientos fuera de secuencia entre el Mioceno y el Cuaternario, ubicándose actualmente el frente orogénico en el centro de la faja. Palabras clave: Andres centrales del Sur, fases de deformación, evolución tectónica.

Abstract:
The following doctoral thesis analyzes the deformational pulses and mechanisms that occurred in the Southern Central Andes at 37ºS. Four zones were selected for that purpose, being from west to east the Cordillera del Viento, the Tromen volcanic plateau, the Sierra de Reyes and the Chachahuén volcanic complex. Each of these zones shows evidence of one or more deformational stages that affected the Andean margin since the Late Cretaceous onwards. Due to the contrasting structural settings and geology of each zone, different methodologies were applied, from i) balanced structural cross sections to represent structure at depth, ii) use of potential methods for a subsurface constraint, iii) geochronological analyses using U/Pb dating in detrital zircons to determine maximum ages and source areas, iv) morphometric analyses done in the drainage network in order to analyze the activity of neotectonic structures during landscape evolution, and v) sedimentary profiles with recognition of fossils which allow constraining the age and depositional environment of the area. As a result of this study an evolutionary model is presented for the Southern Central Andes in which four pulses of deformation were recognized in agreement with previous proposals, although with a variable distribution that reflect a more complex pattern than previously expected. In particular, the Cordillera del Viento area registers an uplift stage that occurred during the Late Cretaceous followed by a Late Miocene reactivation. The mechanisms associated with this uplift are related to the selective reactivation of half-grabens and generation of new thrusts cutting through the extensional architecture without a direct control. To the east, the Tromen volcanic plateau registers a pre- Miocene stage of uplift that was affected by a neotectonic reactivation that modifies the pattern of the modern fluvial network. This reactivation may be locally related to the rise of asthenospheric material under the region as revealed by magnetotelluric studies. In the orogenic front, the Sierra de Reyes was initially uplifted during Eocene times to subsequently suffer a strong reactivation during the Neogene. This last stage produced an unroofing sequence registered in the Sierra de Reyes foredeep. Finally, the Neogene deformational stage has produced an anomalous development towards the foreland region where Lower Cretaceous sequences were deformed during the intrusion of a sill swarm at 7 Ma that was coeval with this deformation. Thus, the Chos Malal fold and thrust belt shows an in sequence development between the Upper Cretaceous and Eocene, that was followed by a reactivation in the internal sectors through a series of out-of-sequence thrusts since the Miocene to the Quaternary, defining an active orogenic front at the mid section of the fold and thrust belt. Keywords: Southern Central Andes, deformational stages, tectonic evolution.

"Evolución temporal de la dinámica asociada a series electroencefalográficas" (2001). Mairal, María Liliana. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La interpretación clínica de los registros EEG intenta establecer una relación entre los rasgos patológicos (sintomatología clínica) con el reconocimiento de patrones (“patterns”) determinados, a través de la inspección visual. Si bien este análisis tradicional es muy útil, la inspección visual de un registro EEG es una práctica subjetiva y de difícil sistematización. Con el objetivo de superar estos inconvenientes, el análisis cuantitativo EEG (qEEG) introduce medidas que reflejan las características de la actividad eléctrica cerebral, como así también las de su dinámica asociada. Recientemente algunos grupos de investigadores han reportado resultados, acerca de la caracterización de la evolución temporal de la dinámica asociada a registros EEG de pacientes epilépticos, utilizando cuantificadores basados en técnicas métricas de la dinámica no-lineal. Ellos analizaron el registro EEG durante el inicio de la crisis epiléptica y también la actividad de base (pre y post-ictal), siguiendo la evolución temporal de la complejidad de la señal, asociada con la dimensión de correlación, D2, y el grado de caoticidad dado por el mayor exponente de Lyapunov, Λmax. Uno de los principales hallazgos reportados fue la disminución observada en estos dos cuantificadores durante el estadio ictal. Esto sugiere la existencia, al inicio de la crisis, de una transición en el comportamiento dinámico de la red neuronal desde un sistema complejo a uno más simple. Más aún, algunos investigadores reportan un decrecimiento significativo de los cuantificadores mencionados minutos antes del inicio mismo del ataque, generando la hipótesis de que el mismo podría ser predicho. La aplicación de las técnicas métricas de la dinámica no-lineal a un conjunto de datos experimentales exige como requisito básico la estacionariedad de la serie de tiempo que representa. La serie temporal, a su vez, debe ser representativa de un atractor único y estable. Asimismo, la evaluación de la D2 y el Λmax requieren registros con un elevado número de datos significativos, puesto que se definen como propiedades asintóticas de dicho atractor. Se pueden caracterizar diferentes estados a través de las medidas estáticas de D2 y Λmax en porciones seleccionadas de la actividad cerebral (series de tiempo EEG) que satisfagan las hipótesis matemáticas requeridas. Sin embargo, estos invariantes métricos requieren la computación previa de ciertos parámetros y además se degradan rápidamente con el ruido aditivo, dando muchas veces vagos resultados. Desafortunadamente, no se puede asumir la existencia de un atractor estable cuando tratamos con registros de larga duración de la actividad de la masa neuronal, por consiguiente, no se pueden inferir en forma directa conclusiones acerca de las características de su dinámica. A fin de caracterizar la dinámica, es posible relajar el requisito de estacionariedad de la serie temporal e introducir dos cuantificadores: la dimensionalidad y la caoticidad. De este modo, computando sus valores en ventanas temporales deslizantes se podría acceder a la dinámica asociada a la señal EEG. Estos nuevos cuantificadores esencialmente están definidos del mismo modo que la Dz y el Λmax, pero no son equivalentes, ya que violan el requisito matemático básico de estacionariedad de la serie temporal dada. Otra posibilidad para abordar el estudio cuantitativo de una señal EEG es por medio del análisis tiempo-frecuencia, basado en la Transformada Wavelet Discreta Ortogonal (ODWT). En este método no es necesario el cumplimiento del requisito de estacionariedad de la señal y solo se trabaja con la respuesta mensurable del sistema, es decir, la serie temporal misma. Tomando entonces como herramienta básica la Transformada Wavelet de la señal EEG, definimos dos cuantificadores: la Energía Wavelet Relativa (RWE) y la Entropia Wavelet Total (SWT). La RWE brinda información acerca de la energía relativa asociada con las diferentes bandas de frecuencias presentes en el EEG y su correspondiente grado de importancia. La SWT da una medida del grado de orden/desorden presente en una serie de tiempo, y en consecuencia, si se la evalúa a lo largo de todo el intervalo temporal del registro EEG, proveerá información importante que se puede relacionar con cambios en la dinámica subyacente. Los resultados provistos por la SWT son independientes de la energía de la señal y por otra parte, de su definición se desprende que, es una magnitud libre de parámetros y del requisito de estacionariedad de la serie temporal. En este trabajo de tesis se comparan los resultados obtenidos a partir de cuantificadores basados en las técnicas métricas de la dinámica no-lineal y en el análsis wavelet (en particular a través de la Caoticidad y la Entropía Wavelet Total) para señales EEG de pacientes epilépticos, provistas por electrodos profundos y de superficie. El objetivo de esta comparación es elegir la técnica más adecuada para una posible aplicación de la misma en la detección automática de cambios en la dinámica de la señal. En este sentido, se intenta determinar de las dos técnicas analizadas la que presenta mayores ventajas, tanto en su implementación como en su interpretación.

Abstract:
The clinical interpretation of EEG attempts to link pathological features (clinical symptomatology) with the visual inspection and pattern recognition of the EEG. Although this traditional analysis is quite useful, the visual inspection of the EEG is subjective and hardly allows any systematization. In order to overcome this, quantitative EEG (qEEG) analysis introduces objective measures reflecting the characteristics of the brain activity as well as the associated dynamics. Recently, several results have been reported about the characterization of the temporal evolution of the EEG associated dynamics by some research groups. They used quantifiers based on metric techniques of nonlinear dynamics applied to EEG epileptic records. Following the temporal evolution of the signal complexity, associated with the measurement of the correlation dimension D2, and the chaoticness degree, throughout the largest Lyapunov exponent, Λmax); they not only analyzed the EEG during the seizure onset but also the background neuronal activity (pre- and post-ictal). The main findings from these reports were a reduction of these two quantifiers during the ictal stage, suggesting that a transition takes place at the seizure onset in the dynamical behavior of the neural network from a complex behavior to a simpler one. Furthermore, some researchers reported a significant decrease of these quantifiers a few minutes before the seizure-onset raising the hypothesis that epileptic seizure could be predicted. The basic requirement for applying the nonlinear dynamics metric tools to experimental data is the stationarity of the time series. This means that the time series is representative of a unique and stable attractor. The evaluation of D2 and Λmax requires long time recordings, because they are defined as asymptotic properties of the attractor. Applying static measurements of D2 and Λmax to selected portions of brain electrical activity (EEG time series), which satisfy all the mathematical hypothesis, different states could be characterized. These metric invariants require the computation of some previous parameters and also degrade rapidly with additive noise, giving many times vague results. Unfortunately, for long recordings of neural mass activity we can not assume a stable attractor and, therefore we can not come straightforward conclusions concerning dynamic characterization. Moreover when one is interested in state transitions that are not strictly defined, it is possible to relax the stationarity requirement. In these cases we can introduce two quantifiers: the dimensionality and the chaoticity. Computing their values in slide time windows the EEG associated dynamics could be accessed. They are formally defined as D2 and Λmax, but they are not equivalent, because they violate the basic mathematical hypothesis of stationarity. Another kind of qEEG methods is based on time-frequency analysis, like the Wavelet Transform for example. This method only uses the data set, that means the time series. It is not necessary to assume any mathematical hypothesis. Then, taking as a basic element the Orthogonal Discrete Wavelet Transform (ODWT). of the EEG signal, we define two quantifiers: the Relative Wavelet Energy (RWE) and the Total Wavelet Entropy (TWS). The RWE give information about the relative energy associated with the different frequency bands present in the EEG and their corresponding degree of importance. The TWS is a measure of the order/disorder degree in the EEG signal. Furthermore, it gives information in relation with the changes in its underlying dynamical process. The TWS is independent of the signal energy and parameter free. Furthermore, it is not necessary the stationarity requirement for computing the TWS of the EEG time series. In this work we compare the results based on the two different methods mentioned above. Firstly, we apply metric techniques of no lineal dynamic defining the Chaoticity and then the wavelet analysis through the Total Wavelet Entropy. These two quantifiers were computing in EEG signals of epileptic patient providing by depth and scalp electrodes. This study tries to determine the better method in order to detect changes in the EEG signals, from the point of view of its interpretation and implementation. Finally, the main goal of this comparison is to select a suitable technique to a possible application in automatic detection of changes in the underlying dynamic of the EEG time series.

"Evolución y diversidad de endofitos Epichloë de la forrajera nativa Bromus auleticus" (2015-03-30). Mc Cargo, Patricia Débora. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Bromus auleticus Trin. es una gramínea forrajera nativa que establece asociaciones simbióticas con al menos dos especies de hongos endofitos del género Epichloë Tul. & C. Tul (E. tembladerae y E. pampeana). Por ser especies asexuales, se considera que se transmiten exclusivamente en forma vertical a la siguiente generación del hospedante. Estos hongos pueden conferir ventajas adaptativas a sus hospedantes, como resistencia a stress y a herbivoría debido a la producción de alcaloides tóxicos para insectos, como las lolinas y peraminas, o para el ganado, como el indol-diterpeno lolitrem B y alcaloides del ergot. Esta tesis se centra en el estudio de 3 aspectos principales de esta asociación: i) la diversidad de endofitos abordada mediante análisis morfológicos y filogenéticos de secuencias de genes nucleares, complementados con la caracterización del perfil toxicogénico potencial mediante la detección por PCR de genes involucrados en la síntesis de alcaloides, ii) la distribución geográfica de los linajes identificados y iii) la posible existencia de eventos de transmisión horizontal a través de una aproximación filogenética así como mediante la implementación de técnicas de inoculación de endofitos en ejemplares libres de ellos. Se aislaron y caracterizaron los endofitos de B. auleticus y otros hospedantes simpátricos de más de 50 localidades, abarcando el área de distribución de B. auleticus. Los caracteres morfológicos y las reconstrucciones filogenéticas de los genes calM (calmodulina) e idtG (lolitrem B) permitieron identificar al menos 5 linajes de endofitos presentes en B. auleticus. La genotipificación del perfil potencial de alcaloides de los distintos endofitos apoyó la existencia de estos linajes. El análisis de la distribución de los linajes endofíticos, basado en su relación con variables bioclimáticas, permitió establecer las áreas geográficas donde cada uno es preponderante. Estas zonas resultaron mayormente disyuntas e influenciadas principalmente por variables relacionadas con las precipitaciones. Para poner a prueba la hipótesis de transmisión horizontal de endofitos entre diferentes plantas hospedantes de la misma y distintas especies, se evaluaron tres técnicas de inoculación de endofitos de B. auleticus y Poa lanigera (hospedantes simpátricos) en plantas de B. auleticus. Sólo se obtuvieron resultados positivos al inocular con E. tembladerae en meristema de plántulas. Además, los análisis de los endofitos aislados de hospedantes simpátricos apoyarían también la existencia de transmisión horizontal en Epichloë tembladerae ya que no pudieron diferenciarse mediante las filogenias ni otros marcadores utilizados. Sin embargo, aún deberían evaluarse mecanismos de dispersión alternativos en condiciones naturales. Los resultados obtenidos indican la existencia de una gran diversidad de endofitos con diferentes capacidades toxicogénicas potenciales, que deben ser considerados como una herramienta determinante en el mejoramiento agronómico de Bromus auleticus.

Abstract:
Bromus auleticus Trin. is a native forage grass that establishes symbiotic associations with at least two species of endophytic fungi of the genus Epichloë Tul. & C. Tul (E. tembladerae and E. pampeana). As asexual species, they are considered to be solely vertically transmitted to the next generation of the host plant. These fungi can confer adaptive advantages to their hosts, such as the production of alkaloids which can be toxic to insects, such as lolines and peramine , or toxic to livestock, such as indole diterpene (lolitrem B) and ergot alkaloids.. This thesis is focused on the study of 3 main aspects of this association: i) the diversity of endophytes addressed by morphological and phylogenetic analyses of nuclear gene sequences, complemented by the characterization of the potencial chemotypic profile by PCR detection of genes involved in the synthesis of alkaloids, ii) the geographical distribution of the identified lineages and iii) the possible existence of horizontal transmission events through a phylogenetic approach and through the implementation of techniques for the inoculation of endophytes to uninfected plants. The endophytes from B. auleticus and other sympatric hosts from more than 50 localities, in the distribution area of B. auleticus were isolated and characterized. The morphological characters and phylogenetic analyses of calM (calmodulin) and idtG (lolitrem B) genes allowed the identification of at least 5 endophyte lineages asocciated to B. auleticus. Genotyping of the different endophytes' potential alkaloid profiles supported the existence of these lineages. The distribution analysis of the endophytic lineages, based on their relationship with bioclimatic variables, let us identify the geographic areas where each is predominant. These areas were mostly disjunct and mainly influenced by variables related to precipitation. To test the hypothesis of horizontal transmission of endophytes between different host plants of the same and different species, three techniques of inoculation of endophytes from B. auleticus and Poa lanigera (sympatric hosts) in plants of B. auleticus were evaluated. Positive results were obtained only when plants were inoculated with E. tembladerae into seedling’s meristem. Furthermore, the analyses of endophytes isolated from sympatric hosts also supported the existence of horizontal transmission for Epichloë tembladerae as they could not be differentiated by filogenies nor by the other markers. However, alternative mechanisms of dispersion in natural conditions should still be evaluated. Results indicate the existence of a great diversity of endophytes with different potential toxigenic capabilities, which should be considered as a decisive tool in the agronomic improvement of Bromus auleticus.

"Excitación de ondas electromagnéticas superficiales : estudio mediante intensidad, polarización y fase" (1996). Presa, Verónica Ana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Existencia y unicidad de soluciones para ecuaciones del tipo curvatura media prescripta" (1998). Amster, Pablo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Experimentos fotónicos de tomografía selectiva y eficiente de procesos cuánticos" (2011). Schmiegelow, Christian Tomás. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Esta tesis presenta la primer demostración experimental de un nuevo método para caracterizar la evolución de sistemas cuanticos de un modo eficiente y selectivo. Es el resultado de una colaboración entre teóricos y experimentales en la busqueda de métodos que permitan caracterizar, controlar y entender el comportamiento de sistemas cuanticos con el objetivo de poder realizar tareas de información cuantica. Esta dividida en dos partes. En la primer parte se desarrollan las bases experimentales y describe el armado del laboratorio. Las técnicas experimentales utilizadas y las ideas fundamentales relacionadas con el uso de fotones como objetos capaces de procesar información cuantica son descriptas. La segunda parte primero revee distintos métodos de tomografía de procesos cuanticos con especial enfasis en el método que implementamos experimentalmente por primera vez: tomografía de procesos cuanticos selectiva y eficiente. Finalmente, se describe la impementación experimental de este nuevo método en sistemas de uno y dos qubits. Las diferentes evoluciones estudiadas presentan clara evidencia de su perfomance robusta en la determinación de propiedades de un sistema de un modo eficiente y selectivo.

Abstract:
This thesis presents the first experimental demonstration of a new method to characterize the evolution of quantum systems in an efficient and selective manner. It is the result of the joint collaboration between theoreticians and experimentalists in a quest to characterize, control and understand the behaviour of quantum systems in order to perform quantum information tasks. It is divided into two parts. The first part covers the experimental foundations and set up of the labo ratory. Experimental techniques used and the basic ideas regarding using single photons as quantum information processing devices are detailed. The second part first reviews different methods for quantum process tomography with special emphasis in the method we experimentally implement for the first time: selective efficient quantum process tomography. Finally, the experimental implementation of this new method on one and two qubit systems is presented. Different evolutions are studied presenting clear evidence of its robust performance in determining in their properties in an efficient and selective manner.

"Exploración de la arquitectura genética para la respuesta al frío y al etanol en el modelo Drosophila: líneas de selección y mapeo de QTL" (2011). Bertoli, Carlos Ignacio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las respuestas de los organismos a los distintos factores de estrés han sido objeto de estudio desde hace varias décadas. El interés que despertó esta área de conocimiento ha llevado a tomar diferentes enfoques para abordar un tema sumamente complejo como es la respuesta de un organismo a un factor de estrés. Tanto aspectos fisiológicos, como moleculares y genéticos entre otros aspectos, han sido considerados en estudios recientes para develar como es que los organismos responden a la presencia de un estresor. En esta tesis colaboramos, desde la genética cuantitativa, en la búsqueda de la base genética que permita entender más acabadamente que factores intervienen en la recuperación de un individuo cuando se lo expone al frío, así como cuales son los factores que permiten la recuperación y la tolerancia cuando son expuestos a altas concentraciones de etanol. También se buscan posibles correlaciones genéticas entre la recuperación al frío y otros caracteres de historia de vida así como de resistencia a distintas formas de estrés. Hemos hecho uso de un organismo experimental ampliamente utilizado en el área de la genética, Drosophila melanogaster. Asimismo, algunos experimentos también fueron desarrollados en otra especie del mismo género Drosophila, Drosophila buzzatii, que es una especie cactófila. En primer lugar, desarrollamos, mediante selección artificial, líneas para alta y baja velocidad de recuperación al coma por enfriamiento, ambas en Drosophila buzzatii. Una vez constatada la heredabilidad del caracter y la diferenciación significativa entre los fenotipos de ambas líneas evaluamos la posible correlación de este régimen selectivo con distintos caracteres adaptativos, como ser el tiempo de desarrollo, resistencia al golpe de calor, tamaño corporal, resistencia a la inanición, resistencia a los vapores de etanol. También desarrollamos un programa que permite mejorar la eficiencia y precisión de la medición. En segundo lugar, realizamos, mediante la utilización de líneas RIL (líneas recombinantes endocriadas) de Drosophila melanogaster pertenecientes al laboratorio GERES, un mapeo genético para localizar la posible existencia de QTL (loci de caracter cuantitativo) vinculados con las diferencias fenotípicas para la recuperación al frío presentes en las líneas RIL antes mencionadas. En tercer lugar, utilizando estas mismas líneas de Drosophila melanogaster se 4 mapearon tres caracteres vinculados a la respuesta a la exposición al etanol (recuperación y tolerancia en adultos y supervivencia en larvas). Por último, se comparan los resultados obtenidos en los mapeos para la recuperación al frío con los obtenidos en la respuesta al etanol. Si bien se pudo constatar que en Drosophila buzzatii la heredabilidad de la recuperación al coma por enfriamiento es significativa en un régimen selectivo de múltiples generaciones, no se pudo establecer correlaciones genéticas entre este régimen y otros caracteres medidos (tamaño corporal, tiempo de desarrollo, resistencia al calor o resistencia a la inanición). El único caracter que mostró una correlación con el régimen selectivo fue la tolerancia a la exposición al etanol. El mapeo de QTL para la recuperación al frío permitió identificar 3 QTL para los cuales fue posible detectar algunos genes candidatos. Algunos de estos QTL solapan con QTL identificados por otros autores para el mismo caracter de resistencia al frío así como también para otros caracteres de resistencia al calor. Para el caso del mapeo de QTL para la exposición al etanol se encontraron 13 QTL, muchos de estos específicos según el caracter analizado. La superposición de los QTL correspondientes a la respuesta al etanol con los QTL encontrados para la recuperación al frío fue casi nula, así como la superposición entre los mismos caracteres vinculados a la respuesta al etanol. En conjunto, los resultados indican que la arquitectura genética es diferente entre la resistencia al frío y los caracteres mapeados de tolerancia al etanol en el modelo Drosophila. Debido a esto es que podemos decir que la correlación detectada en Drosophila buzzatii parece ser dependiente de la población, lo que nos lleva a plantear que los vínculos entre la respuesta al frío y la respuesta al etanol son débiles y dependientes de la población en estudio.

Abstract:
The responses of organisms to diferent stress factors have been studied for several decades. The interest in this topic has been illustrated from different approaches to address a very complex issue, which is the response of an organism to a stressor. Both physiological and molecular mechanisms, as well as the genetic variation among other issues, have been considered in recent studies to reveal how the organisms respond to the presence of a stressor. In this thesis a quantitative genetic approach is followed to search for the genetic basis of stress resistance to test for factors that are potentially involved in the recovery of an individual when it is exposed to cold stress, and what is the genetic basis for recovery and stress tolerance when exposed to high concentrations of ethanol. This work also test for possible correlations between chill- coma recovery and other adaptive characters, including some life history traits as well as other traits of stress resistance. We made use of an experimental organism widely used in the area of genetics, Drosophila melanogaster. Likewise, another species of the same genus Drosophila is used in other experiments, the cactophilic species Drosophila buzzatii. Firstly, artificial selection was applied to select for both increased and reduced times of chill-coma recovery in Drosophila buzzatii. After constructing divergent lines for chill-coma recovery by artificial selection in D. buzzatii, the possible genetic correlations were tested between this trait and other adaptive traits such as development time, resistance to heat stroke, body size, starvation resistance, resistance to ethanol vapors. I also developed a program that improves the efficiency and precision of measurement. Second, recombinant inbred lines (RIL) of Drosophila melanogaster were used to identify QTL (quantitative trait loci) for chill-coma recovery. Third, the same RIL were used to also map traits of tolerance to ethanol in adults and larvae. Finally, the results are compared between traits of cold and ethanol tolerance. After applying artificial selection for chill-coma recovery in Drosophila buzzatii, replicated lines obtained were divergent for this trait indicating the the trait is heritable. These divergent lines were used to test for any possible genetic correlations between chill-coma recovery and other adaptive traits such as body size, development 6 time, heat-stress resistance and starvation resistance. In these experiments with D. buzzatii, the only character that showed a correlation with selective regime for chill- coma recovery was tolerance to ethanol. QTL mapping for the chill-coma recovery allowed to reveal the presence of 3 QTL where some candidate genes are allocated. Some QTL for chill-coma recover overlapped with QTL with QTL regions detected in previous studies with other mapping populations for both chill-coma recovery and heat-stress resistance. In the case of the QTL mapping for ethanol resistance traits, a total of 13 QTL were identified. There was no consistent overlapping between QTL for chill-coma recovery and QTL for ethanol tolerace. Overall, the results indicate that the genetic architecture of the mapped traits is different between chill-coma recovery and ethanol resistance in the Drosophila model. Because of this we can say is that the correlation detected in Drosophila buzzatii seems to be dependent on the population, which leads us to propose that the ties between the response to cold and response to ethanol are weak and dependent on the study population.

"Explotación diferencial de los recursos en especies cactófilas de Drosophila" (1995). Fanara, Juan José. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las especies cactófilas Drosophila buzzatii y D. koepferae son sinmórficas y utilizan como recursos para oviponer y alimentarse los tejidos en descomposición de los cactus tanto en el desarrollo larvario como en la fase adulta. Dado que hay heterogeneidad ambiental en los recursos, fundamentalmente por las diferencias existentes entre los tipos de cactus columnares y las opuntias así como las diferencias entre las especies en ambos casos, el objetivo de la presente tesis es estudiar la adaptación de las dos especies de Drosophila a los diferentes escenarios ecológicos y, a partir de este conocimiento determinar las posibles causas de la biodistribución de D. buzzatii y D. koepferae. Para alcanzar este objetivo, el trabajo experimental se dividió en 3 partes: a) determinación del efecto de la heterogeneidad ambiental sobre un parámetro de vida de gran importancia adaptativa: el tamaño del tórax, y la correlación de este parámetro con el polimorfismo cromosómico en D. buzzatii; b) estudio del efecto de la heterogeneidad ambiental en el mantenimiento del polimorfismo cromosómico de D. buzzatii en una población natural donde los potenciales hospedadores son Opuntia quimilo y O. ficus-indica y c) análisis de la selección de habitat entre las especies D. buzzatii y D. koepferae en la población de Ruinas de Quilmes en la que se encuentra O. sulphurea y T. terschekii(columnar). De acuerdo a los resultados obtenidos, el tamaño del tórax de D. buzzatii mostró una relación significativa entre este carácter morfométrico con las inversiones cromosómicas y con componentes del fitness (longevidad) que sumado a la facilidad de la medición, hacen de este caracter una herramienta importante en los estudios ecogenéticos. En cuanto a los efectos de la heterogeneidad ambiental en el mantenimiento de la variabilidad, se demostró en D. buzzatii que los cariotipos no utilizan diferencialmente los recursos presentes en la población de Termas de Río Hondo: O. quimilo y O. ficus—indica. En cuanto a la capacidad de D. buzzatii y D. koepferae de colonizar opuntias y cactus columnares se observó que la misma es factible aunque se demostró que D. buzzatii preferiría las opuntias mientras que D. koepferae los columnares siendo estas diferencias explicadas por efectos de oviposición y viabilidad.

"Expresión de CD44 en tumores murinos y humanos y su relación con el proceso metastásico" (1998). Ladeda, Virginia Edith. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
CD44, receptor del acido hialurónico, es una glicoproteína de membrana con un dominio extracelular altamente glicosilado, una porción transmembrana y una cola citoplasmática que interactúa con el citoesqueleto. Originalmente fue descripta como receptor “homing” en células linfocitarias, pero luego se vio que también se expresa en otros tipos celulares. Existen múltiples formas de esta molécula, llamadas variantes, que se generan por splicing alternativo de 10 exones. La forma mas abundante es la llamada estándar ó hemopoyética (CD44s/ H), que carece de los diez exones alternativos y se expresa predominantemente en células hemopoyéticas y mesenquimaticas. Su peso molecular es de 80-90 kDa. Sus principales funciones son participar en la activación de linfocitos y en la adhesión y migración celular. Las formas variantes tienen un peso molecular de 120-150 kDa y se expresan con predominio en tejidos epiteliales. Las funciones precisas de estas isoformas aún no estan claras. En 1991, Gunthert y col., demostraron que la ísoforma v6 confería capacidad metastasica al ser transfectada en células tumorales no metastásicas de rata. Como consecuencia de este hallazgo ha surgido un gran interés por el estudio de CD44 en otros modelos tumorales. En el desarrollo de este plan de Tesis, hemos estudiado la función, expresión y distribución de CD44 en una línea celular tumoral mamaria murina, F3II, altamente invasiva y metastasica. El estudio de la expresión de CD44 en cortes histológicos de tumores F3II, mostró una alta expresión de esta molécula asociada al crecimiento subcutaneo de los mismos, mientras que dicha expresión fue prácticamente nula en tumores F3II crecidos en forma peritoneal. El analisis de la expresión de CD44, por Western blot e inmunohistoquímica, en cultivos de células tumorales FSII y normales NMuMG, mostró que las monocapas de células FSII expresan mayores niveles que las células normales. En ambas líneas se pudo detectar, por Western blot, una banda principal de 80 kDa, correspondiente a CD44s. También se observó la presencia de bandas de mayor peso molecular, que podrian corresponder a la expresión de variantes de CD44, aunque dicha expresión fue menos evidente en las células NMuMG. Mediante el uso de un anticuerpo monoclonal específico antíCD44 (KM201), hemos demostrado que los procesos de adhesión y spreadíng dc células FSII pueden ser inhibidos en forma significativa. El análisis de la expresión de CD44, por inmunocitoquímica durante el spreading, mostró que esta molécula se distribuye en forma contínua (no punctata) sobre la membrana plasmática, particularmente en los bordes anteriores o de avance y en la zona perinuclear de la membrana plasmática. CD44 no fue detectado en estructuras como filopodios o lamelipodios, pero sí entre dichas estructuras. Las células totalmente extendidas sobre el sustrato, presentaron una significativa disminución de la tinción de CD44 sobre la membrana plasmática, comparado con los estadios iniciales del spreading. Este descenso en la expresión a lo largo del spreading fue confirmado por Western Blot. En ensayos de migración e invasión de células F3II en cámaras Transwell, demostramos que el anticuerpo anti-CD44, fue también capaz de inhibir en forma significativa ambos procesos. Además, el tratamiento de células FSII con anti-CD44 conjuntamente con anti-uPA, la inhibición de la migración se incrementó en un 90%, sugiriendo una acción sinergíca entre CD44 y uPA en favor de la migración de estas células tumorales. Además de la asociación funcional entre CD44 y el uPA en el en el proceso de migración, los resultados de ensayos de inmunoprecipitación con anticuerpos específicos, indicaron que el receptor CD44 estaría físicamente asociado con el uPA, sugiriendo la participación conjunta de ambas moléculas en algunas etapas de la cascada metastasica de células tumorales mamarias murinas. En conjunto estos resultados demuestran que, en la línea celular tumoral F3II, CD44 cumple un rol activo en eventos críticos que tienen lugar durante la cascada metastásica, como la adhesión, spreading, migración e invasión celular. Mediante un enfoque farmacológico, se estudiaron las vías de señalización que participarían en la regulación de la expresión de CD44 en células FSII. El tratamiento de células F3II con PMA, activador de PKC, o ácido fosfatídico, producto de la degradación de fosfatídilcolina dependiente de PLD, aumentaron en forma significativa la expresión de CD44. Cuando los cultivos fueron tratados con H7, inhibidor específico de PKC,o con propranolol, inhibidor de la conversión de acido fosfatídico a DAG,se observó una sensible disminución de la expresión de CD44. Los resultados de estos experimentos sugieren la participación de PKC y PLD en las vias de señales que regulan la expresión de este receptor. Los tumores cerebrales raramente metastatizan pero son muy invasivos a nivel local. Dado que el AH es un componente abundante de la matriz extracelular del sistema nervioso central y que CD44 participa en su degradación, la sobreexpresión de este receptor podría facilitar el proceso invasivo de estos tumores. En un trabajo colaborativo con los Servicios de Oncología y Patología del Hospital Italiano, hemos analizado la expresión de CD44 en 57 tumores de cerebro (14 astrocitomas de bajo grado, 13 astrocitomas anaplásicos, 22 glioblastomas multiformes, 5 ependimomas y 3 meduloblastomas). Cuando se analizaron los glioblastomas de distintos estadios, se observó que la sobreexpresión de CD44s se correlaciona en forma lineal con el grado de agresividad de estos tumores (Clasificación de Burger). En cambio, el mismo analisis en ependimomas, tumores poco agresivos, mostró una alta expresión de CD44s, mientras que, en meduloblastomas, tumores altamente agresivos, la expresión de esta molécula, fue casi nula. No se detectó expresión de variantes de CD44 en ninguno de los tumores estudiados. Nuestros resultados sugieren que la sobreexpresión de CD44s podria ser de importancia durante el desarrollo de tumores humanos de origen neuroglial.

Abstract:
CD44, the receptor of hyaluronan acid, is a transmembrane glycoprotein, which has an extracellular domain, a transmembrane portion, and a cytoplasmic tail which is connected to the cytoskeleton. CD44 was originally described as the lymphocyte “homing receptor” to lymph nodes endothelium. A large number of isoforms are generated by alternative splicing of up to IO variant exons. Further diversity is created by variable side chain glycosilation. The most abundant form is the so called standard or hematopoetic form, CD44s/H, expressed predominantly in hematopoetic and mesenchymal cells. CD44s lacks the variant exons and has a molecular weight of 80-90 kD. Its multiple functions include lymphocyte activation, cell adhesion and migration. The variant forms range from 120 to 250 kD and are expressed predominantly in epithelial tissues. The precise functions of these isoforms are not clear at present. A considerable amount of interest in this molecule was generated by the finding reported by Gunthert et al (1991), that a particular isoform (v6), when transfected into non metastatic rat pancreatic carcinoma cells, conferred metastatic capability. This was followed by a series of papers indicating increased expression of CD44s and variants in other tumor models. In this Thesis project, we have studied the function, expression and distribution of CD44 in the highly invasive and metastatic murine mammary tumor cell line, F3II. We detected a high CD44 expression on F311subcutaneous tumors, while the expression was almost nule when the tumor grew intraperitoneally. Confluent monolayers of normal murine mammary cells (NMuMG) and F311tumor cells were assayed for their capacity to express CD44 by Western blot and immunohystochemistry. F3II cells were found to express significantly higher levels of CD44 than NMuMG. The Western blot analysis showed a main specific band of 80 kDa on both cell lines, corresponding to CD44s, and minor bands of higher molecular weight suggesting the expression of CD44 variants. A mAb anti-CD44 (KM201) dramatically blocked F3II cell adhesion and spreading. Immunocytochemistry of spreading cells revealed that CD44 distributed in bands on the cell surface, particularly in the tip of leading edges and in the perinuclear zones of the cell membrane. CD44 antigen was never detected in filopodia or lamellipodia but was detected as strong interlamellar bands. CD44 staining never showed a distribution compatible with association to focal adhesion-like structures. Fully spread cells showed remarkably less CD44 staining compared to cells in early stages of spreading. This decrease observed by ICCstudies, correlated with a reduced expression of CD44, as detected by Western blot. KM201 mAb significantly inhibited F3II cell migration and invasion in Transwell Chambers. When F3II cells migration was assayed in the presence of both anti-CD44 and anti-uPA antibodies, the inhibition on migration was dramatically enhanced (90% inhibition). This result suggest a sinergistic cooperation between CD44 and uPA during migration of F3II cells. In addition to the functional cooperation between CD44 and uPA during cell migration, we demonstrated by immunoprecipitation with specific antibodies, a physical link between both molecules on F3II cells. These results may indicate that the close proximity of CD44 and uPA may be important for the functional synergy during the migration process of murine mammary tumor cells. Taken together, these results demonstrate that CD44 plays an important role during F3II cells adhesion, spreading, migration and invasion, all of them critical events during tumor metastasis. We used a pharmacologycal approach to study the signal pathways regulating CD44 expression in F3II cells. Treatment of F3II cells with PMA, a PKC activator, or phosphatidic acid, the product of PLD dependent phosphatidilcholine degradation, significantly enhanced CD44 expression. When F3II cells monolayers were treated with H7, a specific PKC inhibitor, or propranolol, which inhibits phosphatidic acid convertion to DAG, it was observed a dramatic decrease of CD44 antigen levels. These results suggest the involvement of PKC and PLD pathways in the regulation of CD44 expression. Primary brain tumors are characterized by their highly invasive behaviour, although they seldom metastasize to distant organs. HA, a main component of the extracellular matrix in the central nervous system, may be substrate for tumor cell invasion through CD44. In a collaborative study with the “Hospital Italiano”, we have analyzed CD44 expression on 57 human brain tumor biopsies (14 low grade astrocytomas, 13 anaplastic astrocytomas, 22 glioblastomas multiforme, 5 ependymomas and 3 medulloblastomas). In the astrocytomas group we found that overexpression of CD44s correlates with tumor aggresiveness (upon Burger grade). In contrast, in ependymomas, less aggressive tumors, CD44s expression was high, while CD44s expression was almost negative in medulloblastomas, highly aggressive tumors. No CD44 variants expression was detected in any of the samples analyzed. Our results suggest that overexpression of CD44s could be important during the development of human astrocytomas.

"Expresión de antígenos del virus de la fiebre aftosa en plantas de alfalfa transgénicas: su utilización como inmunógenos experimentales" (2001). Dus Santos, María José. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El uso de plantas transgénicas como sistema de expresión de antígenos relevantes ha sido ampliamente evaluado dada la posibilidad de utilizar plantas modificadas genéticamente para la producción de vacunas. Las vacunas a base de plantas serían más baratas y más fáciles de elaborar en grandes cantidades. Estas vacunas se podrían producir en países en desarrollo sin necesidad de instalaciones sofisticadas y costosas como las que se necesitan en la actualidad. Por otra parte, estas vacunas eliminarlanel riesgo de virus contaminantes que existe en las vacunas producidas en líneas celulares de mamíferos ya que los posibles vian de plantas contaminantes no constituyen un peligro potencial ni para el hombre ni para los animales. Adicionalmente, las plantas transgénicas que expresen antígenos en sus tejidos comestibles podrían ser usadas como sistemas de producciónde vacunas de administración oral. Hasta el momento, la mayoría de los antígenos expresados consisten en péptidos, proteínas únicas ó estructuras muy simples. Sin embargo, la producción de antígenos vacunales en sistemas heterólogos requiere, en muchos casos. ía expresión de estructuras antigénicas complejas. EIVirus de la Fiebre Aftosa (VFA)produce una de las enfermedades más temidas del ganado debido a su amplia distribucióngeográfica y por ser altamente contagiosa. La vacuna utilizada actualmente es polivalente y a virus inactivado. El progreso en la producción de vacunas antiaftosas está dirigido hacia el logro de vacunas de elaboración más fácily económica y que eviten la manipulación de grandes cantidades de virus. Una alternativa a las vacunas convencionales es la preparación de cápsides vacías expresando y procesando la poliproteína precursora en un sistema de expresión heterólogo. Se han obtenido cápsides vacías confonnacionalmente correctas de los serotipos A, 0 y C del VFA utilizando sistemas de expresion en E. CoIi, baculovirus o virus vaccinia. Los resultados obtenidos hasta ahora al expresar cápsides vacías del VFA en sistemas heterólogos, con relación a Ia conservación de epitopes protectivos, las convierten en antígenos candidatos para la formulaciónde vacunas. Sin embargo, aún no se ha logrado un método de expresión masiva de un inmunógeno eficaz como para ser utilizado a campo, ya que los sistemas desarrollados hasta ahora resultan costosos y poco aplicables a nivel industrial. Como primer objetivo de este trabajo de tesis se propuso producir plantas de alfalfa transgénicas conteniendo el gen que codifica para la poliproteína P1 precursora de las proteínas estructurales del VFA. Las construcciones utilizadas involucran únicamente a P1 ó a P1 junto con la proteasa SC. La presencia del gen foráneo se detectó, en las plantas transgénicas, por PCR y su actividad transcripcional específica por RT-PCR y Northern blot. Fue posible visualizar por microscopía electrónica estructuras que por su tamaño y morfología podrían corresponder a cápsides vacías del VFA. La inmunogenicidad de los productos expresados fue evaluada en el modelo murino. Ratones adultos inmunizados intraperitonealmente desarrollaron una respuesta de anticuerpos detectada por su reactividad. en ELISA, frente a un péptido sintetico que representa la zona más inmunogénica de VP1 y partículas virales completas; y, en Western blot, frente a las proteínas estructurales del virus nativo. Además, estos animales desarrollaron anticuerpos neutralizantes y resultaron completamente protegidos frente al desafío con virus infeccioso. Estos resultados demuestran la factibilidad de expresar antígenos altamente complejos en plantas transgénicas y su utilizacióncomo efectivos inmunógenos experimentales. Los resultados obtenidos por nuestro y otros grupos de investigación demuestran la factibilidad de la utilización de plantas transgénicas como fuente de producción de antígenos vacunales. Sin embargo, uno de los principales problemas que posee este sistema de expresión es que los niveles de proteína expresada en las plantas transgénicas son relativamente escasos como para extrapolar su uso a una vacuna de aplicabilidad real. De modo que, el desarrollo de estrategias que generen una mayor concentración de la proteína recombinante es sumamente importante, especialmente cuando se desea utilizar los extractos de planta sin ningún proceso de enriquecimiento y/o purificación posterior. Dado que la inserción del transgen en el genoma vegetal es al azar, es altamente probable que los niveles de su expresión varíen entre los individuos producidos. Una alternativa posible, entonces, consiste en poder identificar aquellos individuos que presentan niveles excepcionalmente altos de la proteina foránea. Sin embargo, la identificación de aquellas plantas que expresen cantidades significativas de antígeno por métodos inmunológicos es un proceso lento y labioroso. Teniendo en cuenta lo mencionado anteriormente, y como segunda parte de este trabajo de tesis, hemos desarrollado una metodologia que nos permite evaluar un gran número de individuos y seleccionar de un modo fácil y rápido aquéllos que presentan mayores niveles de expresión de la proteina recombinante. Esta metodologia se basa en la expresión de un gen de interés fusionado a un gen reportero, codificante para la enzima B-Glucuronidasa (B-GUS), cuya presencia puede ser detectada cuantitativamente por colorimetrla. A fin de evaluar el sistema de selección propuesto, utilizamos como antígeno un péptido que comprende los residuos 135 a 160 de la proteina VP1 del VFA para generar la proteina de fusión con la enzima B-GUS.Las plantas transgénicas obtenidas fueron primeramente evaluadas por su actividad enzimática de B-GUS. Fue posible detectar por Western blot la proteina de fusión en aquellas plantas que presentaron mayores niveles de B-GUS. Las plantas seleccionadas expresaron 0.5-1 pglmg de proteina soluble total. El péptido p135-160 expresado como proteina de fusión conservó sus caracteristicas inmunogénicas ya que ratones inmunizados parenteralmente con una vacuna elaborada con extracto foliar desarrollaron una respuesta de anticuerpos especificos detectada por su reactividad en ELISAfrente a p135-160, particulas virales completas y en Western blot frente a VP1. Además, se detectaron anticuerpos neutralizantes que resultaron protectores frente al desafio con virus infeccioso. Estos resultados demuestran la posibilidad de utilizaruna metodologia simple para detectar las plantas que expresan altos niveles del péptido recombinante, el cual conserva sus propiedades antigénicas e inmunogénicas al ser expresado como proteina de fusión.

Abstract:
The use of transgenic plants as a system for expressing recombinant antigens has already been widely evaluated and constitutes a feasible methodology for vaccine production. Plant based vaccines would be less expensive and easier to be produced in large scale. These vaccines could be produced in undeveloped countries without requiring sophisticated facilities, as they are currently needed. On the other hand, the use of these vaccines would eliminate the risk of contaminating viruses present in mammalian cellular lines since the plant contaminating viruses do not constitute an actual risk for animals or humans. Additionally,edible transgenic plants expressing antigens in their tissues could be used as oral vaccines. Up to now, most antigens expressed in plants are peptides, unique proteins or very simple structures. Nevertheless, production of vaccine antigens in heterologous systems often require the expression of complex antigenic structures. Foot and mouth disease virus is the causal agent of a worldwide distributed highly contagious disease of cattle. The currently used vaccine is based in the utilization of polyvalent inactivated virus. In general, progress in the process of FMDV vaccine production are pointed toward the development of simpler and cheaper protocols involving the use of lower amount of virulent viruses. An alternative to the conventional FMDV vaccines are those containing recombinant virus empty capsids after the expression of the precursor polyprotein.In the past, it has been possible to obtain empty capsids of serotypes 0, A and C using as expression systems E. coli, baculovirus and vaccinia virus. Although the products resulted immunogenically efficient, the methodologies for producing them are not suitable to be used at the industrial level. The first objective of this thesis was the production of transgenic plants of alfalfa containing the gene encoding for the polyprotein P1, which is the precursor of all structural FMDV proteins. The transgenic constructs used contained either just P1 nor P1 along with the 3C gene. The presence of the foreign gene in the recombinant plants was detected by PCR and their transcriptional activity analyzed by RT-PCR and Northen blot. Additionally. it was possible to demonstrate, by electron microscopy, the presence of structures with a size and shape resembling those of the FMDV empty capsides. The immunogenicity of the obtained products was evaluated in mice. Intraperitoneally immunized adult mice presented a FMDVantibody response detected by its activity,in ELlSA, against a synthetic peptide representing the major immunogenic area of VP1, and against complete virus particles, and in Western blot, against all the FMDV structural proteins. Additionally, these animals developed a significant neutralizing antibody response and protection when experimentally challenged with the virulent virus. These results demonstrated the feasibility of expressing highly complex structures in transgenic plants and its use as effective experimental immunogens. As stated earlier, results obtained by us and other research groups demonstrated the potential feasibility of using transgenic plants as a source of antigen for vaccine production. Nevertheless, the main problem presented by this approach resides in the relatively low concentration of the recombinant protein in the plant tissues, which hampers its possible utilization at the industrial scale. Thus, the development of strategies which allow the production of transgenic plants expressing high levels of recombinant protein would substantially modify the expectations on the utilization of this system in the future, specially in those cases where no further steps toward the enrichment or purification of the recombinant product will be needed. Due to the fact that the insertion of the transgene in the plant genome is a random process, it is expected the development of individuals presenting very different expression levels of the recombinant protein. An interesting approach could be the identification of those individuals presenting exceptionally high levels of the foreign protein. Nevertheless, the identification of those individuals,using immunological approaches, is usually a laborious and slow process. Focusing in this particular problem, the second part of this thesis deals with the development of a methodology that allows us to evaluate a significant number of individuals and select, in an easy and quick way, those presenting the highest levels of expression of the foreign protein. The methodology is based in the expression of the gene of interest as a fusion protein along with a reporter gene which encodes for the enzyme ß-Glucuronidase (ß-Gus), which could be quantitatively detect by a oolorimetric test. In order to evaluate this methodology, we selected as antigen a peptide which represent the amino acid residues at position 135 to 160 of the structural FMDV protein VP1. This peptide was expressed as a fusion protein along with ß-Gus. The obtained transgenic plants were first evaluated based in their ß-Gus activity. Among those presenting the highest enzymatic activity it was possible to detect, by Western blot, the presence of the FMDV epitope. The selected plants expressed a concentration of the recombinant protein between 0.5 to 1 mg/g of the total soluble protein extracted for the plant tissue. The peptide 135-160 appears as conserving its native immunogenic characteristic since adult mice parenterally immunized with a vaccine prepared with the foliar extracts developed a specific FMDV antibody response detected in ELISA, against the p135-160 synthetic peptide. and complete virus particles, and against native VP1 in Western blot. Additionally,the sera of these animals showed significant neutralizing antibodies titers and the mice resulted protected against the experimental challenge with infectious virus. These results demonstrate the feasibility of using this simple methodology to detect transgenic plants expressing high levels of recombinant peptide, which completely conserves its antigenic and immunogenic properties when expressed as a fusion protein.

"Expresión de antígenos derivados del virus de la fiebre aftosa en diferentes sistemas eucarióticos" (2000). Taboga, Oscar A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La fiebre aftosa es una enfermedad de gran importancia económica que afecta principalmente al ganado bovino. Esta enfermedad está causada por un picornavirus, el virus de la fiebre aftosa (VFA). El control de la enfermedad se lleva a cabo mediante eliminación de los animales infectados y vacunación con vacunas basadas en virus inactivado. Existen varias desventajas relacionadas con la producción y el uso de tales vacunas, entre las que están la reintroducción de la enfermedad debida a la manipulación de grandes masas virales o a la incorrecta inactivación del virus, por lo que el desarrollo de vacunas recombinantes más seguras aparece como una alternativa de gran interés. En el presente trabajo se estudió la posibilidad de expresar sitios antigénicos simples y complejos derivados del VFA en diferentes sistemas de expresión. La poliproteína P1, precursora de las proteínas estructurales del virus, pudo expresarse con éxito en un sistema bacteriano y en el sistema “baculovirus-células de insecto”. Sin embargo, las diferentes versiones de esta proteína no fueron capaces de montar una respuesta efectiva contra el VFA,probablemente debido a un incorrecto plegamiento espacial. Por otro lado, el sitio antigénico inmunodominante (sitio A) presente en el loop V-H de la proteína VP1 se expresó con éxito como fusión a la proteína transportadora core del virus de la hepatitis B (VHB) en células de insecto infectadas con baculovirus recombinantes. Esta proteína quimérica no adoptó Ia estructura multimérica esperada, la que se consiguió mediante coinfecciones con un baculovirus que expresaba la proteína core. De todos modos, las partículas obtenidas resultaron pobres inmunógenos cuando se inyectaron en animales experimentales, hecho debido probablemente a la baja densidad de epitopes derivados del VFA en las preparaciones vacunales. Finalmente, tanto el sitio A como la poliproteína P1 pudieron expresarse como fusión a la glicoproteína gp64 del baculovirus AcNPV. Estas proteínas quiméricas se localizaron tanto en la membrana de células infectadas como en la superficie de los baculovirus recombinantes. Esta localización asegura una conformación particulada sobre un soporte fosfolipídico (características relacionadas con el aumento de inmunogenicidad de sitios antigénicos) y facilita la purificación de los inmunógenos. Cuando se vacunaron ratones con estas construcciones, los baculovirus llevando el sitio A y las células infectadas con éstos despertaron una respuesta inmune humoral neutralizante contra el VFA, aún en ausencia de adyuvantes. De nuevo, las construcciones llevando P1 fallaron para montar una respuesta inmune humoral neutralizante, probablemente debido a un incorrecto plegamiento espacial. La posibilidad de producir baculovirus recombinantes y células infectadas que lleven en sus superficies sitios antigénicos derivados de patógenos de interés veterinario mediante infección de larvas puede convertirse en una manera sencilla y económica de producción de vacunas de nueva generación.

Abstract:
Foot-and-mouth disease (FMD)is an economically very important disease of cattle and other farm animals. It is caused by a picornavirus, foot-and-mouth disease virus (FMDV).The control is achieved by slaughter of infected and contact animals and systematic vaccination with inactivated virus-based vaccines. Although these vaccines have been effective in controlling the disease, there are a number of concerns about their production and use, such as the risk of reintroduction of the disease by handling of infectious virus or incomplete inactivation of the antigen. These disadvantages have led to efforts to develop safer recombinant vaccines using genetic engineering. In the present work, the possibility of expressing simple and complex antigenic sites from FMDV in different expression systems has been assessed. P1 polyprotein, the precursor of the four capsid proteins, has been successfully expressed in bacteria and insect cells. However, different versions of this protein failed to elicit a protective immune response to FMDV,probably due to an incorrect folding of the protein. On the other hand, immunodominant site A, located at the G-H loop of VP1, was successfully expressed as a fusion protein with the core protein of hepatitis B virus (HBV)in the baculovirus system. However, this chimaeric protein failed to adopt the expected multimerio conformation. Interestingly, multimerio particles were obtained by coinfections with a recombinant baculovirus expressing the wild type core protein, but the hybrid core particles obtained resulted poor immunogens in mice, probably due to low FMDV epitope density present in the particles. Finally, both site A and P1 polyprotein could be expressed as fusion proteins with baculoviral glycoprotein gp64 of baculovirus AcNPV. These chimaeric proteins localized in the membrane of the infected insect cells as well as onto the surface of recombinant baculoviruses. This localization ensures a particulate conformation on a phospholipidic layer (both characteristics related to an increase of immunogenicity of simple antigenic sites) and facilitates the purification of immunogens. Experimental mice inoculated with gp-site A fusion protein expressed both in the surface of recombinant baculoviruses or in the membrane of infected cells elicited a specific humoral immune response with neutralizing activity against FMDV,even in the absence of adjuvants. Similar constructions bearing gp-P1 fusions failed to elicit a humoral immune response with neutralizing activity when inoculated in mice. The expression of antigens from veterinary pathogens with economic importance on the surface of baculovirus and infected cells by infecting insect larvae could be an alternative, safe method to reduce the costs of this kind of vaccines.

"Expresión de genes asociados a fibrosis quística" (2001). González Guerrico, Anatilde María. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Fibrosis Quística es la más frecuente de las enfermedades humanas severas, de origen genético, en la población caucásica (Welsh MJ, 1995). Se produce por mutaciones en un único gen, que codifica para el canal de Cl- CFTR (cystic fibrosis transmembrane conductance regulator)(Kerem et al., 1989; Riordan et al., 1989; Rommens et al., 1989). Aún no ha sido establecida una relación clara entre el defecto genético y los mecanismos que gobiernan esta enfermedad. Todas las citoquinas proinflamatorias que han sido estudiadas en el ambiente inflamatorio de los pulmones FQ están elevadas y la concentración de la citoquina antinflamatoria interleuquina-10 (IL-10) está considerablemente reducida (Khan et al., 1995). A su vez, la IL-1β regula la expresión del CFTR (Cafferata E G A, 2001; Cafferata et al., 2000). Por otro lado, las proteínas proinflamatorias TNF-α, IL-1β y IL-6 regulan positivamente los genes de las mucinas muc2 y muc5 (Dohrman et al., 1998) e incrementan la quimioatracción de neutrófilos (Ohishi, 2000) que liberan gran cantidad de proteínas, especies reactivas de oxígeno y NO, que pueden causar daño celular. Entonces, es posible que genes diferencialmente regulados por IL-1β tengan una participación en los mecanismos que llevan a la muerte celular, la exacerbación de los procesos inflamatorios o la acumulación de mucinas en el tracto respiratorio FQ. Con el fin de identificar nuevos intermediarios en la vía de señalización de IL-1β, o de identificar genes que tuviesen una regulación similar al CFTR, se realizó un "Differential Display" sobre las células T84 tratadas con distintas concentraciones de IL-1β. Se aisló un gen regulado por dicha citoquina, que poseía el mismo patrón de modulación que el CFTR. La banda aislada fue clonada y secuenciada. La misma mostró una homología del 99% con otras del banco de datos que codificaban para proteínas cuya actividad es desconocida. A este gen diferencial se lo denominó hsccl (Homo sapiens T84 colon carcinoma cell line IL-1beta regulated mRNA 1). Por el análisis de la secuencia completa del ARNm se determinó que hscc1 contiene dominios que se hallan conservados en la familia de las proteínas transportadoras. Mediante "Northern blots" se observó una doble banda correspondiente a 3,5 kb, que mostraba un máximo de activación cuando las células fueron tratadas con 0,5 ng/ ml de IL-1β. Por otro lado, la expresión de hscc1 se inhibió a concentraciones de IL-1β mayores a 1 ng/ml. La IL-1β induce al factor de transcripción NF-κB cuando se encuentra presente en el medio de cultivo a una concentración de 0,5 ng/ml (Cafferata E G A, 2001), mientras que con 2,5 ng/ml de IL-1β se inducen los factores c-jun y c-fos, pero no NF-κB. Usando un virus que sobre-expresa a un dominante negativo de NF-κB, se determinó que la inducción de este factor es necesaria para que se produzca el aumento en la expresión de hscc1 por IL-1β, en forma similar a lo que ocurre con CFTR. Por otro lado, el inhibidor de proteína quinasa C, GF109203X (Battle et al., 1998) y los inhibidores de proteína quinasas de tirosina Genisteína (Rao et al., 1997) y Herbimicina A (Taylor et al., 1997), bloquearon la inducción mediada por IL-1β, sugiriendo que estas proteína quinasas estan también involucradas en el camino de transducción de la señal de IL-1β. Otro objetivo de este trabajo fue identificar genes cuya expresión fuese dependiente de la actividad del CFTR, con el fin de determinar cuales eran las funciones celulares dependientes del canal CFTR y de identificar factores que contribuyesen a la deficiencia pulmonar en fibrosis quística. Realizamos un "Differencial Display" usando células de epitelio de traquea fibroquística (CFDE) y las mismas células transfectadas con el CFTR normal (CFDE/6RepCFTR). Aislamos e identificamos un ARNm de expresión diferencial que codifica para la quinasa de tirosina c-Src. Este mensajero se encontró sobre-expresado en las células CFDE. Cuando las células CFDE/6RepCFTR fueron tratadas con el inhibidor del canal CFTR NPPB, los niveles del ARNm c-Src se elevaron. Es decir, la actividad del canal CFTR sería necesaria para la regulación de c-src. Asimismo, los análisis de la proteína c-Src por inmunohistoquímica mostraron que ésta se encuentra elevada en los pulmones FQ. La fibrosis quística se caracteriza por la acumulación de mucus que obstruye los conductos de distintos órganos (Hutchison and Govan, 1999). A su vez, este aumento en la producción de mucinas puede hacer a los enfermos más susceptibles de sufrir infecciones pulmonares por Pseudomonas aeruginosa (Parmley and Gendler, 1998). Se sabe que MUC1 se encuentra elevada en el colon de los ratones FQ, pero los ratones FQ que no producen MUC1 (ratones "knock out" para MUC1) tienen una obstrucción intestinal mucho menor. Además, a c-Src se la ha involucrado en la producción de mucinas en respuesta a diversas injurias (Bausbaum et al., 1999). Era posible entonces que el aumento de c-Src inducido por la falla en CFTR fuese responsable de la acumulación de mucus. Para corroborar esta hipótesis, se midió la expresión de la MUC1. Esta fue encontrada elevada en células CFDE respecto de las células CFDE/6RepCFTR. Además, cuando las células CFDE fueron tratadas con un dominante negativo o con un inhibidor de c-Src (PP2) los niveles de MUC1 disminuyeron. Estos resultados indican que c-Src estaría involucrada en el camino de señalización que lleva el aumento de MUC1. Estos datos sugieren, además, que la falla en el CFTR produciría un incremento en la expresión de MUC1 en el sistema respiratorio y que esto ocurre previamente a la infección pulmonar. En consecuencia, la quinasa c-Src podría ser el nexo entre la falla del CFTR y la acumulación de mucinas en fibrosis quística.

Abstract:
Cystic Fibrosis (CF) is the most important severe genetic in Caucasian population (Welsh MJ, 1995). It is caused by mutations in a single gene that codifies for the chloride channel named cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR)(Kerem et al., 1989; Riordan et al., 1989; Rommens et al., 1989). A clear relationship between the genetic defect and the mechanisms governing the disease has not been fully established. In the inflammatory medium of CF lung every pro-inflammatory cytokines tested were elevated and the concentration of anti-inflammatory cytokine interleukin-10 (IL-10) was considerably decreased. In addition, IL-1β regulates CFTR expression. In this work, a differential display from T84 cells treated with different concentrations of IL-1β was performed, in order to identify new second messengers of IL-1β signaling pathway or other genes that have a regulation similar to cftr. The proinflammatory cytokines TNF-α, IL-1β and IL-6 up-regulate muc2 and muc5 gene expression (Dohrman et al., 1998) and increase neutrophils chemioattraction (Ohishi, 2000), which produce proteins, NO, and oxygen reactive molecules that can cause cellular injure; then, IL-1β differential expressed genes may be involved in processes that produce cell died, inflammation exacerbation or mucus accumulation in the CF airway. One of the differential display isolated fragments was cloned and sequenced. The sequence showed 99% homology with other sequences present in the data bank. They codify for proteins with unknown activity. This differential expressed gene was called hscc1 (Homo sapiens T84 colon carcinoma cell line IL-1beta regulated mRNA 1). The complete hscc1 mRNA sequence analysis predicted that HSCC1 sheared some conserved domains with transport proteins. Northern blots assays, using 32P labeled hscc1 as a probe, a double band of 3,7 kbp was observed. Maximum mRNA levels were obtained after treating the cells with 0.5 ng/ml of IL-1β. Hscc1 expression was inhibited with 1 ng/ml or higher concentrations of IL-1β. On the other hand, IL-1β at 0.5 ng/ml induced the transcription factor NF-ĸB (Cafferata E G A, 2001) but 2.5 ng/ml of this cytokine induced c-jun and c-fos but not NF-ĸB. In this work it was determinated that NF-ĸB is essential for the IL-1β induction of hscc1 by using a NF-ĸB dominant negative expressing virus. The pre-treatment with PKC inhibitor GF109203X (Batlle et al., 1997) blocked the IL-1β induction of hscc1, suggesting that these protein-kinases are involved in the IL-1 signal transduction pathway. In order to better understand which cellular functions depend on CFTR channel activity and which factors contribute to the pulmonary defects in cystic fibrosis, we search for possible genes having a CFTR-dependent expression. We performed a differential display assay using human CF tracheal epithelial cells (CFDE) and the same cells transfected with normal CFTR (CFDE/6RepCFTR). We have isolated and identified the tyrosine kinase c-Src as a differential gene, which was up-regulated in CFDE cells. When CFDE/6RepCFTR cells were treated with the CFTR channel inhibitor, NPPB, the levels of the c-Src mRNA raised, suggesting that the chloride channel activity should be involved in CFTR-dependent regulation of c-Src expression. In addition, immuno-histochemical analysis showed and increased c-Src in the CF lung. The most important problem in cystic fibrosis results from obstruction of ducts in several organs due to excessive mucus secretion (Hutchison and Govan, 1999). The overexpression of mucins in turn might lead to susceptibility to Pseudomonas aeruginosa infection in cases of CF (Basbaum et al., 1999). The expression of the mucin MUC1 is elevated in the colon of CF mouse, and CF mouse lacking MUC1 exhibits greatly diminished intestinal mucus obstruction (Parmley and Gendler, 1998). In addition, c-Src has been involved in mucin production in response to diverse insults (Basbaum et al., 1999). Therefore, we studied the possible role of c-Src in mucus accumulation due to the CFTR failure. We found taht MUC1 was elevated in the tracheal CFDE cells compared with CFDE/6RepCFTR cells. When CFDE cells were treated with a c-Src dominant negative plasmid or the c-Src inhibitor PP2, the MUC1 levels diminished, suggesting that c-Src might be involved in the signalling pathway that drives the elevation of MUC1 in CF. These data suggest that the CFTR failure produce an elevated MUC1 expression in the airway and this occurs previously to lung infection. Therefore, the tyrosine kinase c-Src seems to constitute a bridge between MUC1 over-expression and the CFTR channel failure.

"Expresión y funcionalidad del receptor de progesterona (RP) en la modulación del crecimiento hormono-dependiente y en la adquisición de resistencia al tratamiento hormonal de un modelo murino de carcinogénesis mamaria" (2002). Helguero, Luisa Alejandra. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El cáncer de mama es la segunda causa de muerte en las mujeres, luego del cáncer de pulmón. En el desarrollo de esta enfermedad se postulan distintas etapas biológicas que van progresando desde un crecimiento hormono-dependiente a uno hormono-independiente, lo que está asociado a un aumento de la agresividad. En la clínica, si el tumor expresa receptores de estrógenos (RE) y progesterona (RP), una parte importante de los enfoques terapéuticos de elección, es la hormonoterapia con el antiestrógeno tamoxifeno. Sin bien en un principio la gran mayoría de los pacientes responden, con frecuencia el tumor evoluciona hacia la resistencia al tratamiento hormonal, lo que se asocia a diseminación generalizada. Esta resistencia, cuyos mecanismos aun se desconocen, no implica en general una pérdida de expresión de receptores hormonales y todo parece indicar que, o bien existe un cambio intrínseco en éstos, o en los mecanismos que regulan su expresión y activación. En nuestro laboratorio desarrollamos un modelo de adenocarcinomas mamarios murinos por la administración prolongada de MPA en ratones hembras vírgenes de la cepa BALB/c. Estos tumores son en su mayoría de origen ductal con capacidad invasora. En un principio poseen un comportamiento progestágeno-dependiente (PD), requiriendo de la hormona trófica para su crecimiento y expresan RE y RP, pero con el tiempo pueden adquirir un fenotipo progestágeno-independiente, en el cual se conserva aún la expresión de receptores. Previamente hemos demostrado que el RP estaria involucrado en la adquisición de hormonodependencia. El objetivo de este trabajo fue estudiar el papel del RP en la transición de hormono-dependencia a independencia y en la adquisición de resistencia hormonal. Para este estudio utilizamos seis tumores PD y nueve progestágeno-independientes. Caracterizamos la respuesta in vivo de los tumores independientes al tratamiento con los antiprogestágenos onapristona y mifepristona y al 17-β-estradiol. Seis tumores respondieron regresionando, y los llamarnos progestágeno-independientes respondedores (PI-NR) y tres no respondieron; a éstos los denominamos progestágeno-independientes no respondedores (PI-NR). En nuestro laboratorio ya se había evaluado la respuesta in vivo de los tumores PD, y respondieron a estrógenos y antiprogestágenos con regresión. Cuando, en cultivos primarios de un tumor PD, estudiamos la respuesta proliferativa a MPA in vitro observamos que la misma fue bifásica, con dos pendientes estimulatorias, una a concentraciones muy bajas (EC50 = 1.5 ± 0.7 fM) y la otra a concentraciones más altas (EC50 = 0.33 ± 0.3 nM). Con estos resultados, evaluamos por unión del ligando la expresión de receptores en todos los tumores y en tejidos normales. En útero normal, y en tumores PD y PI-R, descubrimos dos sitios receptores de progesterona, uno de alta afinidad no descrito previamente en el RP (Kd = 43 ± 9 pM, Q = 9 ± 2 fmoles/mg de proteína) y el otro sitio clásico que habíamos hallado previamente (Kd= 9.2 ± 4 nM). En los tumores PI-NR no se pudieron determinar estos parámetros. El estudio de la distribución subcelular de RP mostró que en los tumores PD y PI-R se localizan principalmente en el citosol, y son regulados por MPA, mientras que en los tumores PI-NR están principalmente en el núcleo y no son regulados. Sin embargo, durante el ciclo estral, los sitios receptores son regulados en todos los tipos de tumor estudiados. Para caracterizar la expresión de las isoformas del RP utilizamos Western blot. En los tumores PD y PI-R se encontraron ambas isoformas, RPa y RPb, con patrón de expresión similar al de los controles normales, útero y mama de ratón. Encontramos además, una proteína de 78 kDa que se expresa exclusivamente en los tumores, pero no en los tejidos normales. Desconocemos su naturaleza, pero se ha descrito una proteína similar en un 25 % de tumores humanos. Su ausencia de tejidos normales sugiere una posible aplicación como marcador tumoral. Con MPA, ambas isoformas RPA y RPB se regulan negativamente en forma similar. En los tumores PI-R se regula preferencialmente RPb, esto sugeriría un papel del RP en este tipo de crecimiento en particular por RPb. En los tumores PI-NR se detectaron menores niveles de RP, principalmente de RPb. Por estudios de Western Blot se podría predecir la capacidad de los tumores de responder al tratamiento hormonal. Por inmunohistoquímica, no se observaron diferencias en el patrón de marcación entre los tres tipos de tumores. Todos fueron positivos, con un porcentaje de células marcadas del 50 % o más. Los resultados de SSCP indican que la reactividad diferencial de los anticuerpos con Western blot e inmunohistoquímica no se debe a mutaciones en el gen de RP. Hemos teorizado la posibilidad de cambios de expresión de epitopes secundarios al distinto procesado de los tejidos en las técnicas. La caracterización de ARN por protección a RNasa indica que los niveles de RP en tumores PI-R y PI-NR son similares. Es probable que, en los tumores PI-NR, las diferencias de expresión observadas con Western blot se deban a cambios post-traduccionales. Con oligonucleótídos antisentido del RP (asRP) en cultivos primarios de tumores PI-NR demostramos que los RP están involucrados en la proliferación celular aún cuando han perdido la capacidad de unir al antiprogestágeno. Estos resultados, de ser extrapolables al humano indicarían que, en el tratamiento del cáncer de mama resistente a la terapia hormonal aún se podrían utilizar estrategias diseñadas a bloquear la funcionalidad de los receptores hormonales.

Abstract:
Breast cancer is, after lung cancer, the second cause of death in women. The development of this disease occurs through different stages from a hormone-dependent to a hormone-independent growth, which is associated to increased aggressiveness. One of the treatments of choice for ER and PR positive breast cancer is hormone therapy with the antiestrogen tamoxifen. Most of the patients respond, although eventually the tumor becomes refractory and the disease progresses. The mechanisms of resistance remain unknown, but most tumors still express hormone receptors, indicating that there is either an intrinsic modification on these molecules, or in the regulation of their expression and activation. In our laboratory, we have developed a murine mammary adenocarcinoma model by prolonged administration of MPA on female virgin BALB/c mice. Most of these tumors are invasive ductal carcinomas, disclosing a progestin-dependent pattern of growth (PD) and they express ER and PR. Either spontaneously or by successive transplantations in animals not treated with hormones, progestin-independent tumors may arise that maintain the expression of hormone receptors. Our goal was to study the role of PR in the transition from hormone-dependence to independence and in the acquisition of resistance to hormonal therapy. We characterized the in vivo response of progestin-independent tumors to the antiprogestins onapristone and mifepristone and to 17-β-estradiol. Six tumors regressed, and we named them responsive progestin-independent (R-PI); three did not respond and were named unresponsive progestin-independent tumors (UR-PI). We studied the proliferative response to MPA in vitro on primary cultures of a PD tumor, and observed that it was biphasic, with two stimulatory slopes, one at very low concentrations (EC50 = 1.5 ± 0.7 fM), and the other at higher concentrations (EC50 = 0.33 ± 0.3 nM). Based on these results we evaluated the receptor expression by radioligand binding in all the tumors and normal tissues. In uterus, PD and R-PI tumors, we discovered two sites for the progesterone receptor, one of high affinity not previously reported (Kd = 43 ± 9 pM, Q = 9 ± 2 fmoles/mg de protein) and the other site which corresponds to the classical PR described by others (Kd = 9.2 ± 4 nM, Q = 376 ± 74 fmoles/mg de protein). PR, in PD and R-PI tumors, are mainly localized in the cytosol, and are regulated by MPA, while in UR-PI tumors they are mainly in the nucleus and are not regulated by this hormone. Nevertheless, the receptor sites were regulated through the estral cycle in all the tumor types studied. To characterize PR isoform expression we used Western blot. We found both PRa and PRb isoforms in PD and R-PI tumors, with a similar expression pattern compared to the control tissue uterus and normal mammary gland. We also found a 78 kDa protein which is exclusively expressed in tumors but not in normal tissue. Its nature remains unknown but a similar protein has been described in 25 % of human cancers. Its absence in normal tissues suggests a possible use as a tumor marker. With MPA treatment, both PRa and PRb are down regulated. PRb is preferentially down regulated in R-PI tumors and this may be indicating its role in this type of growth. Lower levels of PR were detected in UR-PI tumors, particularly PRb. Based on the Western blot studies the ability of the tumors to respond to hormonal treatment could be predicted. PR expression was also studied by immunohistochemistry. No differences were observed between the staining patterns of the three tumor types. The signal was positive in 50% or more nuclei. We conclude based on the SSCP studies that the differential reactivity between the antibodies used in Western blot and immunohistochemistry is not due to mutations in the PR gene. We theorize the possibility that these changes are product of modifications in the epitope expression due to the processing of the sample for each technique, or to post-translational changes. The studies at RNA level by RNase protection assay indicate that PR expression levels in R-PI and UR-PI tumors are similar. Probably, in UR-PI tumors the lower expression levels observed with Western blot are due to post-translational modifications. In primary cultures of UR-PI tumors, using antisense oligonucleotides to PR (asPR) we demonstrated that PR are involved in cell proliferation even when they have lost their ability to bind to the antiprogestagens. The importance of these observations relies in that, if these results to humans are possible to extrapolate to human, in the treatment of hormone resistant breast cancer strategies designed to block the functionality of these receptors could still be used.

"Expresión y función de las MAP quinasas fosfatasas 1 y 3 (MKP-1 y MKP-3) en células de Leydig" (2014). Mori Sequeiros Garcia, María de las Mercedes. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
MKP-3 es una enzima inducible sólo por estímulos proliferativos que desfosforila específicamente a ERK1/2. En cambio MKP-1 desfosforila diferentes MAPKs y se induce por diversos tipos de estímulos. En este trabajo se analizaron aspectos regulatorios y funcionales de ambas enzimas en células de Leydig MA-10 bajo la estimulación del receptor de LH (RLH) con hCG o en presencia del derivado del segundo mensajero correspondiente, 8Br-AMPc. Este estudio pone en evidencia, por primera vez, que la activación del RLH regula la expresión de MKP-3. hCG y 8Br-AMPc aumentan los niveles de MKP-3 activando la expresión génica por eventos dependientes e independientes de ERK1/2 y promoviendo modificaciones post-traduccionales que estabilizan la proteína. Se demostró que la activación del RLH conduce a la inducción p21, un inhibidor de la proliferación, y que este efecto es dependiente de MKP-3. Respecto de la enzima nuclear MKP-1, se determinó que el AMPc regula su estabilidad por múltiples fosforilaciones, involucrando la fosforilación por ERK1/2 en sitios consenso relacionados con la estabilidad (S359 y S364) y con la inestabilidad (S296 y S323) de la proteína. Se demostró que la inducción del factor de transcripción NUR77 por 8Br-AMPc, factor que participa en expresión de genes cruciales para la esteroidogénesis, es dependiente de ERK1/2 y se determinó que MKP-1 y sus modificaciones post-traduccionales impactan en la inducción de NUR77 por 8Br-AMPc. Se concluye que la inducción de MKP-1 y MKP-3 por estimulación del RLH modula las acciones de LH sobre la esteroidogénesis y la proliferación de las células de Leydig.

Abstract:
MKP-3 is an enzyme inducible only by proliferative stimuli and involved specifically in ERK1/2 dephosphorylation. In contrast, MKP-1 is an enzyme inducible by different stimuli and able to dephosphorylate different MAPKs. This work analyzes regulatory and functional aspects of both phosphatases in MA-10 Leydig cells under the stimulation of the luteinizing hormone receptor (LHR) with human chorionic gonadotropin hormone (hCG) or a permeable derivative of the corresponding second messenger (8Br-cAMP). The present study demonstrates, for the first time, the expression of MKP-3 by the activation of LHR. hCG and cAMP increase MKP-3 levels by activating gene expression –through ERK1/2-dependent and independent events- and promoting posttranslational modifications that increase protein stabilization. This work also demonstrates that the activation of LHR leads to the induction of p21, an inhibitor of cell proliferation, by a mechanism involving MKP-3 expression. Regarding the nuclear enzyme MKP-1, this work shows that cAMP regulates MKP-1 half life by ERK1/2-mediated phosphorylation in sites involved in protein stabilization (S359 and S364) and destabilization (S259 and S263). It is also established that transcription factor NUR77, whose action is essential for the expression of crucial steroidogenic genes, is cAMP-induced by an ERK-dependent mechanism. In line with this finding, this study also demonstrates that MKP-1 and its post-translational modifications impact on MKP-3 expression. It is concluded that the induction of MKP-1 and MKP-3 by LHR activation modulates LH actions on steroidogenesis and proliferation of Leydig cells.

"Extensión de los conceptos de Visibilidad Afín" (1997). Rodríguez, Mabel Alicia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Este trabajo se inserta dentro de la Geometría Convexa, más precisamente en el área de Visibilidad Afín. Consta de una primera parte esencialmente técnica en la que se describe, en el espacio euclídeo n-dimensional, el mirador de un dominio regular como la intersección de los inner stems de sus puntos de no convexidad local. Para esta descripción se obtiene un Lema tipo-K, es decir, una nueva caracterización del mirador como intersección de las cápsulas convexas cerradas de los inner stems de sus puntos de no convexidad local permitiendo asi obtener teoremas tipo Krasnoselsky. La segunda parte trata de problemas de visibilidad externa, o sea problemas referentes a la visibilidad en la clausura del complemento del conjunto. Se conecta la propiedad de la semirrecta con la emisión de rayos salientes así como con la propiedad de la frontera radiante aquí definida. Por último, se estudia la estructura de los conjuntos finitamente estrellados no estrellados cerrados. Se prueba que un tal conjunto admite cono de recesión no trivial y se obtienen propiedades referentes a elementos de visibilidad tales como estrellas, novas, etc. Por último se conecta este tema con la visibilidad externa, con el espacio afin ampliado y también se exhibe una caracterización plana de ellos por medio de componentes convexas.

Abstract:
This work is about Convex Geometry and in particular Affine Visibility. It contains a first part composed mainly by technical results in which the kernel of a regular domain is described as the intersection of the inner stems of its points of local nonconvexity. It also contains a K-lemma, i.e. a new characterization of the kernel of the set as the intersection of the closed convex hulls of the inner stems of its points of local nonconvexity. By means of it, Krasnoselsky-type theorems are obtained. In the second part external visibility problems are studied, where external visibility means visibility referred to the closed complement of the set. The emission of outward rays is connected with the half-line property and with the shining boundary property defined here. The last part is devoted to analyze the structure of closed finitely starshaped sets that are not starshaped. It is proved that the recession cone of such a set is non trivial. Properties concerning visibility elements (stars, novae, etc.) are studied, and a planar characterization by means of convex components is exhibited. Finally, the finitely starshaped sets are connected with the external visibility and with the enlarged affine space.

"Extensión de polinomios en espacios de Banach" (1998). Carando, Daniel Germán. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Extremos de temperaturas en Argentina: cambios observados en la variabilidad espacio-temporal y su relación con otras características del sistema climático" (2008). Barrucand, Mariana Graciela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El presente trabajo de tesis estudia la variabilidad en la frecuencia de temperaturas extremas en la Argentina durante el período 1959-2003 Se analizan tres aspectos específicos: la homogeneidad espacial que tienen los extremos de temperatura en Argentina, la variabilidad temporal de los mismos y la relación con otras características del sistema climático. El análisis de homogeneidad espacial mostró algunas diferencias respecto al tipo de extremo analizado y permitió la selección de estaciones de referencia para estudios ulteriores. El análisis de variabilidad temporal mostró tendencias significativas negativas (positivas) en la frecuencia de noches frías (cálidas) entre los meses de octubre y marzo, siendo estos últimos los de mayores cambios. Esto indica una extensión de las condiciones cálidas desde los comienzos de la primavera hasta el comienzo del otoño. En los meses de época fría (abril a septiembre) se destaca un aumento en la frecuencia de noches cálidas, excepto en julio que presenta una tendencia negativa en el centro-este del país. En términos generales, se observa una disminución en la frecuencia de días cálidos en gran parte del año. Las excepciones están dadas para los meses de agosto y octubre. Los resultados encontrados son congruentes con una disminución en la amplitud térmica observada en todo el país durante todo el año, a excepción del mes de julio y en algunas estaciones del sur del país. Se encontró un aumento en el porcentaje de días con cielo cubierto, y mayor disponibilidad de humedad en el aire. El principal modo de variabilidad encontrado corresponde a una onda de 8 años en los índices de extremos de temperatura (especialmente en la frecuencia de noches frías), en la temperatura superficial del mar (TSM) y en el Modo Anular del Sur (SAM), que actuaría como modulador de la variabilidad de los extremos de temperatura y las TSM en dicha escala temporal. Este modo de variabilidad común aparece más fuertemente en primavera en las estaciones situadas al norte de los 40 ºS. La señal se debilita a principios de los 90, momento a partir de cual empieza a reflejarse más al sur. Esto plantea la hipótesis sobre un posible cambio en las relaciones del sistema climático en la década del 90.

Abstract:
This thesis is about the variability of temperature extreme frequencies in Argentina during 1959-2003. Three specific aspects are analysed: the spatial homogeneity of temperature extremes in Argentina, its temporal variability, and the relationship with other characteristics of the climatic system. The spatial homogeneity analysis showed some differences depending on the extreme variable analysed and it permitted to select some reference stations for other studies. The temporal variability analysis showed significant negative (positive) trends in the cold (warm) night series between October and March. These months were the most affected by these changes. These features indicate an extension of the warm conditions towards the early spring and the beginning of autumn. An increase of warm nights is noticeable during the cold season (April to September), except for July, which showed a negative trend in the centre-east of the country. In general terms, a decrease of warm days is observed all year round, except for August and October. The results are consistent with a decrease in the diurnal temperature range in the country all year round, except for July and some stations in the south of Argentina. An increase of the percentage of days with covered sky and humid conditions were also found. The principal variability mode found in this analysis was an 8 year signal in the temperature indices (specially in the cold night frequencies), the sea surface temperature (SST) and the Southern Annular Mode (SAM).This mode would act as a modulator of the temperature extreme frequencies and the TSM at that temporal scale. This common variability mode appears strongly during spring at those stations northward of 40ºS. The signal vanishes at the earlier 90’s, when it begins to be reflected to the south. It raises the hypothesis about a possible change in the climatic system relationships during the 90’s.

"Extremos diarios de precipitación en la Argentina: cambios observados en la segunda mitad del siglo XX y asociación con la temperatura superficial del océano tropical" (2012-03-09). Robledo, Federico Ariel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Esta tesis presenta un estudio de la variabilidad espacio-temporal de la intensidad diaria de precipitación que excede el percentil 75 (DIER75). Este índice permitió evaluar la frecuencia y la intensidad de los extremos diarios de precipitación, explicando el 70% de los acumulados mensuales de lluvia. En el periodo 1962-2005, la región subtropical de Argentina muestra una disminución en el DIER75, en cambio en el centro del país, se registran incrementos en los primeros meses del año. Junio, es el único mes que presenta una señal significativa (disminución) con coherencia espacial, en el centro de Argentina. Asimismo, la región subtropical presenta variabilidades de mayor frecuencia (2 años) que las zonas del centro-este de Argentina (de 3 a 8 años), y hacia el oeste, se evidencian ciclos de variabilidad de entre 10 y 14 años. La tesis avanza en el conocimiento sobre la relación entre la anomalía de temperatura superficial del mar (TSM) de los océanos tropicales y subtropicales y la intensidad de precipitación diaria extrema en la Argentina, con el fin de encontrar las regiones fuentes en los océanos y describir los mecanismos dinámicos asociados a escala planetaria y regional. Se realizó un análisis de descomposición en valores singulares y se identificó que la influencia del Pacífico, ligada al ENOS y Niño Modoki, aquella del Índico, relacionado al IOD, y aquella del Atlántico, asociada al AMO y el TSA, se combinan en los tres primeros modos que resultan del análisis de SVD. Aunque la relación de cada una de las regiones oceánicas identificadas con el DIER75 no es la misma. En especial se encontró que la influencia de las regiones oceánicas tropicales sobre los extremos de precipitación diaria en Argentina, se asocia con diferentes trenes de ondas de Rossby que emanan del Pacífico central y oeste e Índico este en dirección a Sudamérica, que promueven la convergencia o divergencia de humedad en el Sudeste de Sudamérica. Se realizó un trabajo exploratorio con el fin de evaluar cómo la señal global de calentamiento de las TSM repercute en la covariabilidad observada entre las anomalías de TSM y del DIER75 en Argentina. Se encontró que este calentamiento debilita la influencia de la TSM en el Pacífico central asociadas al ENOS, mientras que la asociación se intensifica con los océanos el Indico y el Atlántico tropical.

Abstract:
This thesis presents a study of the spatiotemporal variability of extreme daily rainfall in Argentina using a monthly index of daily precipitation intensity based on the 75th percentile (DIER75). The index allowed the evaluation of frequency and intensity of extreme daily rainfall, which accounts for 70% of the monthly accumulated rainfall. In the period 1962-2005, the subtropical region of Argentina shows a decrease in DIER75, while there are increases in the Midwest during the summer months. On the other hand, June is the only month that shows a significant decrease with large spatial coherence in central Argentina. Also, the subtropical region exhibits higher frequency variability (2 years) than those observed over central-eastern Argentina (3 to 8 years), while to the west, cycles of variability are detected between 10 and 14 years. This thesis studied the relationship between the anomaly of sea surface temperature (SST) at the tropical and subtropical oceans and extreme daily rainfall in Argentina. We also explore the dynamical mechanisms associated with regional and global scale. An analysis of singular value decomposition (SVD) was made that shows that a combined influence of the Pacific (linked to ENSO, Niño Modoki) the Indian Ocean (related to the IOD), and the Atlantic (associated with the AMO and the TSA), influence the variability the three leading modes resulting from the SVD analysis. Although, the influence of each identified ocean region over the DIER75 activity is not the same. Moreover, it was found that the influence of tropical ocean regions on the extremes of daily precipitation in Argentina is associated with Rossby wave trains emanating from the central and western Pacific and Indian Oceans extending towards South America, promoting the convergence or divergence of moisture in southeastern South America. Exploratory work was carried out on how global warming signal as described by global SSTs affects the observed covariability between SST anomalies and DIER75 in Argentina. We found that global warming weakens the influence of SSTs in the central Pacific associated with ENSO. Conversely, the magnitude of the correlations with the tropical Indian and Atlantic intensify.

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