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Tesis > TEMA

Biología [ 2301 tesis ]

Fitopatología [ 19 tesis ]

Castillo, Marcelo Daniel. "Prevención de la contaminación por hongos toxigénicos y sus micotoxinas en una leguminosa, Poroto (Phaseolus vulgaris L.): parámetros de almacenamiento, flora fúngica contaminante, probables micotoxinas" (2002) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Pieckenstain, Fernando Luis. "Control biológico de enfermedades causadas por Sclerotinia Sclerotiorum en el girasol y estudio del rol de las poliaminas en las distintas etapas del ciclo de vida de este patógeno" (2002) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Kobayashi, Ken. "Análisis de la interacción planta-virus mediante la caracterización molecular de plantas transgénicas que expresan proteínas de movilización de PVX" (2002) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Durante la primera etapa del presente trabajo, se transformaron Nicotiana tabacum con el gen ORF3 que codifica la proteina p12 de PVX,con el fin de estudiar los efectos que provoca la expresión de esta proteina viral en la interacción planta-virus. A pesar de que las plantas transgénicas mostraron un aspecto normal, observaciones hechas con el microscopio revelaron la presencia de alteraciones en sus hojas. Al infectar estas plantas con PVX,se observó en sus hojas la aparición de sintomas atípicos y el desarrollo de resistencia al virus. Los sintomas consistlan en la formación de anillos amarillos concéntricos rodeados de tejido necrosado. Además, los mismos eran acompañados de cambios bioquímicos asociados a la respuesta hipersensible (HR), y no se formaban en plantas transgénicas sanas ni en plantas no transgénicas infectadas con PVX.No se observó una resistencia similar cuando las plantas p12 se inocularon con TMV o PVY. lo que sugirió la existencia de un mecanismo de resistencia específica contra PVX.A pesar de la aparición de sintomas de tipo HR, no se observó la inducción de una respuesta SAR en plantas p12 infectadas con PVX. Tampoco, se encontraron evidencias que indiquen la presencia de resistencia mediada por RNA. Durante la segunda etapa del trabajo, se analizaron plantas transgénicas previamente transformadas con el gen ORF2 que codifica la protelna p24 de PVX. con el fin de estudiar las alteraciones fisiológicas provocadas por la expresión de la misma. Estas plantas mostraron una apariencia clorótica y un marcado enanismo. A pesar de poseer hojas más pequeñas. distancias intemodales más cortas y reducción del tamaño en todos sus órganos, las plantas p24 poseían una relación de los tamaños tallo/raíz normal. Además, el tamaño de meristema radicular resultó más pequeño que el de las plantas control. Otros análisis revelaron que la tasa fotosíntética estaba disminuida en las plantas p24 y que los niveles de almidón, tanto en las hojas como en las raices, se encontraban reducidos. Además, las hojas mostraron un alto contenido de nitrato y una considerable acumulación de transcriptos de proteinas PR. Varias lineas de evidencia sugieren que el fenotipo enano de las plantas p24 serla una consecuencia directa de la actividad de la proteina p24, y no un efecto indirecto de la disminución de la fotosíntesis o de los cambios metabólicos.

Abstract:
In the first part of the present work, Nicotiana tabacum were transformed with the PVX ORF3 gene coding for the p12 protein, with the aim of studying the effects provoked by its overexpression. Although the transgenic plants exhibited a normal morphological aspect, microscopic examination revealed extensive alterations in leaf tissue structure. After challenging with PVX, the transgenic plants showed resistance to PVX infection and formation of leaf symptoms consisting of concentric rings encircled by necrotic borders. These novel symptoms were accompanied by biochemical changes normally associated with the Hypersensitive Response (HR) and were absent in non-infected transgenic plants or in PVX-infected non-transgenic plants. No equivalent virus resistance was observed after inoculation with TMV or PVY, suggesting the presence of a specific resistance mechanism in p12 plants. Despite the development of HR-like symptoms, SAR was not induced in PVX-infected p12 transgenic plants. No evidence of an RNA-mediated resistance mechanism was found. During the second part of this work, transgenic N. tabacum plants previously transformed with the PVX ORF2 gene coding the p24 movement protein were further analyzed with the aim of studying the physiological alterations provoked by viral MP. These plants exhibit a slightly chlorotic appearance and a pronounced stunted phenotype. Although p24 plants have smaller leaves, shorter internodes and reduced organs, their shoot to root ratio remained similar to that of control plants. Moreover, root meristems were smaller in p24 plants than in control plants. Further analyses of transgenic plants showed considerable reductions in photosynthetic rates and lower starch levels in both leaves and roots. In addition, p24 leaves showed higher nitrate levels and a significant accumulation of PRs transcripts. Different lines of evidence suggest that the stunted phenotype observed in p24 plants is a direct consequence of p24 activity and not an indirect effect derived from diminished photosynthesis or other metabolic changes.

Broggi, Leticia Elvira. "Productos agrícolas de la provincia de Entre Ríos: contaminación potencial por mohos y micotoxinas e influencia de los procesos de molienda regional" (2003) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La producción agrícola en Entre Ríos alcanza el 40 % del total de los ingresos, resultando relevantes las cosechas de soja, maíz, trigo, arroz y sorgo. Solamente existen estudios previos de contaminación por micotoxinas y flora fúngica en arroz. Se evaluaron las micotoxinas de aparición probable en dichos sustratos en esta provincia y se estimó el efecto de los procesos de la molienda regional en maíz y arroz. Entre los hongos potencialmente toxicogénicos prevalece Fusarium verticillioides en maíz; en trigo, sorgo, arroz y soja, se observa una predominancia de Alternaria alternate, situación no observada anteriormente en otras regiones del país. Debido a la alta prevalencia de A. alternate, se estudió su capacidad toxicogénica. Cepas de esta especie fueron productoras de alternariol monometileter, alternariol, altertoxina-l y ácido tenuazónico. En maíz, tanto en la cosecha como elaborado, no se observó co-ocurrencia de ocratoxina A, zearalenona ni deoxinivalenol y una sola muestra del año 1.999 fue positiva de aflatoxina B1. Se comprobó la presencia de fumonisinas B1, B2 y B3. tanto en el maíz recientemente cosechado, almacenado y en todas las fracciones de la molienda. En arroz con cáscara y en los subproductos de elaboración, no se detectó la contaminación por estas toxinas En los dos procesos industriales de molienda y para las micotoxinas estudiadas (fumonisinas en maíz y toxinas de Alternaria en arroz), se estimó la reducción en las fracciones destinadas a consumo humano (harina de maiz y arroz pulido) y el incremento en las correspondientes a consumo animal.

Abstract:
Agricultural production in Entre Ríos represents about 40 % of the total income in the province. The most relevant crop species are soybean, corn, wheat, rice and sorghum. Previous studies dealing with mycotoxin production and fungal contamination have only been carried out in rice. For that reason, the present work has evaluated those mycotoxins of liker occurrence in such grains. Additionally, the effects of the regional milling processes in corn and rice on mycotoxin contamination were also analyzed. Among potentially toxigenic fungi, Fusarium verticillioides was prevalent in corn, and Alternaria alternata was predominant in wheat, sorghum, rice and soybean. This situation has not been previously reported for other Argentinean regions. Due to the prevalence of A. alternata, its toxigenic ability was studied: the strains collected were found to be able to produce alternariol monomethyleter, alternariol, altertoxin-l and tenuazonic acid. In corn, both at harvest and in different milling fractions, no co-occurrence of ochratoxin A, zearalenone or deoxynivalenol was observed. Just one sample (year 1999) resulted positive for aflatoxin B1. The presence of fumonisins B1, B2 and B3 was determined in all freshly harvested, stored and corn milling fractions. No mycotoxin contamination was detected on hulled rice or its milling fractions. Finally, reduction in mycotoxin contamination (fumonisins in corn and Alternaria toxins in rice) for those milling fractions aimed at human consumption was studied, as well as the increment in those fractions destined to animal feed.

Durman, Sandra Beatriz. "Grupos de compatibilidad miceliana (MCGs) en poblaciones Bonaerenses de Sclerotinia Sclerotiorum" (2003) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este estudio se obtuvieron 142 aislamientos de Sclerotinia sclerotíorum (Lib.) DeBary en un área de 25000 km² dentro de la provincia de Buenos Aires,provenientes de cultivos de soja, lechuga y girasol. Se distinguieron 49 grupos de compatibilidad miceliana (MCGs),de los cuales 28 estaban constituidos por dos o mas aislamientos. Las diferentes poblaciones de S. sclerotíorum estaban compuestas por numerosos MCGsy compartieron un perfil de frecuencias de MCGs similar, independientemente del hospedante o del sitio. La aparición de los MCGs difirió entre los diferentes cultivos, solo se encontraron dos MCGs en común entre los tres hospedantes, y aproximadamente el 60% de los MCGs fueron exclusivos para cada uno de ellos. El índice de diversidad de Shannon para los MCGs fue de 0.314 y el 98.4% de la diversidad total correspondió a variaciones dentro de las poblaciones. Las características morfológicas no fueron significativamente diferentes entre MCGs, excepto por el crecimiento miceliano en medio sólido y en medio liquido, y por la cantidad de esclerocios producidos por caja de Petri. Sin embargo, varios de los caracteres morfológicos pudieron relacionarse con el sitio o el hospedante al cual pertenecían los aislamientos. La fecundidad no fue diferente entre los MCGs, si bien pudieron detectarse aislamientos individuales especialmente fecundos. Sobre la base del ensayo in vitro sobre peciolos de apio, no pudieron detectarse diferencias en la agresividad entre los MCGs, siendo mas agresivos los aislamientos provenientes tanto de cultivos de girasol como los recolectados en 9 de Julio y Otamendi. El viraje del colorante azul de bromofenol (BPB),provocado especialmente por la liberación de ácido oxálico, pudo correlacionarse con la cuantificación de dicho ácido por espectrofotometría. Sin embargo, con las condiciones utilizadas en este trabajo no fue posible asociar la liberación de ácido oxálico con la agresividad. Las diferencias en la capacidad para liberarlo variaron entre los MCGs, y entre los aislamientos según su sitio u hospedante de origen, independientemente del método utilizado. El estudio de diferentes medidas fitosanitarios para el control de este patógeno demostró que aunque el uso de fungicidas de la familia de los bencimidazoles puede resultar muy efectivo, existen MCGs que se ven significativamente menos afectados que otros. Otras medidas menos convencionales, tales como la solarización, el anegamiento o el control biológico, no pudieron establecer efectos diferenciales sobre los MCGs, ni sobre los aislamientos según su origen. Un último análisis utilizando las herramientas de la taxonomía numérica indicó que las variables podian agruparse, en varios casos, coincidiendo con su naturaleza, morfológica o fisiológica. Por otro lado, ese mismo analisis evidenció una interesante asociación entre aquellos MCGs mas frecuentes, indicando que estarían compartiendo varias características en común que los harían altamente exitosos al momento de verse reflejados en mayor número en las muestras. A pesar de que los analisis estadísticos detectaron diferencias significativas entre los MCGs a partir de varios de los caracteres analizados, el gran solapamiento de estas diferencias significativas ha impedido establecer grupos discretos claramente definidos a partir de estos caracteres.

Abstract:
In this study 142 isolates of Sclerotinia sclerotiorum (Lib.)DeBary were obtained in a 25000-km² area of the Buenos Aires province, collected from soybean, Lettuce and sunflower fields. Forty-nine mycelial compatibility groups (MCGs) were distinguished overall, 28 of which consisted of two or more isolates. Each of the S. sclerotiorum populations were made up by numerous MCGsand shared a similar frequency profile regardless the host or the site. The occurrence of the MCGs differed among the crops, it was only found two MCGs shared by the three hosts and approximately 60% of the MCGs were unique for each one. The Shannon diversity index for the MCGs was 0.314 and 98.4% of total diversity corresponded to variations of diversity within populations. Morphological characteristics were not significantly different among MCGs, except for the mycelial growth in solid medium and in liquid medium, and for the number of sclerotia produced by Petri plate. Anyway, some of the morphological characters could be related to the site or the host to which the isolates belonged. Fecundity it was not different among MCGs, though some especially fecund isolates could be detected. On the basis of the detached celery petiole assay, it was detected no differences in aggressiveness among MCGs,being more aggressive isolates from sunflower crops and those collected at 9 de Julio and Otamendi. Turning of bromophenol blue dye (BPB),mainly caused by oxalic acid releasing, could be correlated to the spectrophotometric quantitation. But in the present conditions it was not possible to associate oxalic acid releasing with aggressiveness. Differences in ability to release varied among MCGs,and among isolates according their site or host source, irrespective of the used method. The study of different phytosanitary measures for the control of this pathogen showed that though the use of fungicides from benzimidazol family could be very effective, some MCGs were significantly less affected than the others. Others measures, less conventional, such as solarization, flooding or biologícal control, could set neither differential effects on MCGs,nor on isolates according to their source. A last analysis made with the tools of numeric taxonomy indicated that the variables could be grouped, in many cases, in agreement with their nature, morphological or physiological. In addition to that, the same analysis made evident an interesting association among those more frequent MCGs,painting out that such MCGs could be sharing some common characteristics, that made them more successful as to be the most sampled. In spite of the significant differences detected among MCGsby the statistical analysis in many of the analyzed characters, the high overlapping of these differences has made impossible to establish discrete groups clearly defined from those characters.

Haurigot, Lorena Cristina. "Identificación y caracterización de un sistema de secreción de proteínas tipo I en Agrobacterium tumefaciens" (2010-12-22) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los Sistemas de Secreción de Proteínas tipo I (T1SS) permiten a una amplia variedad de bacterias Gram-negativas secretar proteínas al medio extracelular; estos sistemas participan en varias respuestas fisiológicas como la adaptación al medio ambiente y contribuyen a la virulencia en diversos patógenos. Los T1SS están formados por un componente de membrana interna (ABC) un componente de fusión de membrana (MFP) y un componente de membrana externa (OMF). Los genes de los dos primeros (e inclusive el OMP) suelen estar formando un operón y pueden estar adyacentes a los genes que codifican sus proteínas sustrato. En la bacteria simbionte Rhizobium leguminosarum, el T1SS, PrsDE, es responsable de la secreción de diversas proteínas que participan en la supervivencia del rizobio en el suelo, favoreciendo la formación de estructuras comunitarias denominadas biofilms. A. tumefaciens es un fitopatógeno de alto interés agronómico y biotecnológico. A pesar de la relevancia que los TISS muestran tener en diversas bacterias Gram negativas, hasta la fecha no se ha avanzado en el estudio y la relevancia fisiológica de estos sistemas de secreción en este fitopatógeno. En este trabajo, se aisló a partir de una biblioteca genómica proveniente de A. tumefaciens el cósmido pIJ7760 que fue capaz complementar el fenotipo de secreción de cepas mutantes en el sistema PrsDE de R. leguminosarum. Se determinó que dicho cósmido alberga los genes de un sistema homólogo al que se denominó AspD-AspE, Agrobacterium secretion protein D and E) formado por un componente ABC (dominio de unión a ATP) y otro MFP (proteína de fusión de membranas), respectivamente. Este sistema fue responsable de la secreción de una proteína, a la que se denominó Hla, de función desconocida codificada rio arriba de aspDE. El análisis de las secuencias del cósmido permitió identificar, río arriba de hla, genes cuyo productos presentan alta similitud de secuencia aminoacídica con receptores de hemo (denominado hlaR) y a factores sigma y anti sigma (denominados hlaS y hlaI). Las zonas promotoras de ambos loci presentaron secuencias consenso de reconocimiento del regulador RirA que responde a la concentración de hierro extracelular. Rio arriba de estos genes se identificó un probable sistema ABC de captación de hemo (denominado ahuUVTB) que presenta en su región promotora secuencias de reconocimiento de RirA y del regulador del metabolismo del hemo IrrA. El análisis de las proteínas presentes en el medio extracelular en diversas condiciones de cultivo y nutricionales permitió reflejar un complejo control y una regulación diferencial de la secreción de la proteína Hla en el hospedador sustituto R. leguminosarum A34 y A. tumefaciens C58. Se observó una muy elevada secreción de Hla en el hospedador sustituto R. leguminosarum A34 en medios ricos de cultivo. Se determinó que esta desregulación se debe a que la cepa de A34 contiene una mutación ancestral en algún regulador desconocido hasta la fecha que provoca un fenotipo pleiotrópico. Este regulador es codificado en el plásmido simbiótico pRL1JI y regula, la secreción de Hla. El estudio de la regulación en el pariente heterólogo R. leguminosarum mostró que la secreción de Hla también se ve reprimida por los reguladores globales de respuesta a hierro descriptos en Rhizobiaceae, RirA e IrrA. Por otro lado, el agregado de hemoglobina como fuente de hemo extracelular, indujo la secreción de Hla como proteína mayoritaria en el contexto heterólogo de Rhizobium. El análisis del contexto genético de hla mostró que este gen está incluido en un locus sinténico a otros clusters de genes involucrados en la captación de hemo a través de hemóforos, aunque Hla no presenta similitud de secuencia aminoacídica con hemóforos caracterizados. Sin embargo, la purificación por columna de afinidad de hemina mostró que Hla presenta capacidad de unir hemina y sería el primer hemóforo descripto en la familia Rhizobiaceae. Mediante mutagénesis dirigida se generó una mutante de secreción en aspD de A. tumefaciens C58. Los fenotipos asociados a esta mutante mostraron un carácter pleiotrópico, tanto la autoagregación bacteriana, la adhesión a soporte abiótico y la motilidad en agar se vieron afectadas. En A. tumefaciens la secreción de Hla respondió principalmente a condiciones microóxicas/anóxicas, además de a la ausencia de hierro y presencia de hemo. Interesantemente, la mutante deficiente en la secreción de Hla fue incapaz de inducir la formación de tumores en Kalanchoe sp. En conjunto, los resultados presentados en este trabajo sugieren que el T1SS AspDE, participaría en la captación de hemo extracelular a través de la secreción de un nuevo hemóforo (Hla) probablemente en condiciones microaerófilas y de bajo hierro presentes en el contexto del tumor.

Abstract:
Type I secretion systems (TISSs) enable a wide spectrum of Gram-negative bacteria to deliver proteins to the extracellular medium. This secretion machinery has been shown to be involved in several physiological responses such as adaptation to the environment and virulence. T1SS are composed by an inner membrane component (ABC), a membrane fusion component (MFP) and an outer membrane component (OMP). ABC and MFP are ussually encoded as an operon and they can even be located in adjacency to some of their substrate proteins. The PrsDE System of the related symbiont R. leguminosarum is responsible for the secretion of several proteins that participate in the survival behaviour of rhizobia in the soil by the establishment of structured communities known as biofilms. A. tumefaciens is an important agroeconomical and biotechnological phytopathogen. Despite the physiological relevance of the subject, previous observations suggested the presence of T1SS in A.tumefaciens since C58 strain genome sequences are available (2001), however there have been no advances in the characterization or functional studies of the secretion system in this phytopathogen. In this work, heterologous functional complementation assay has been carried out using an A. tumefaciens genomic library to revert PrsDE mutant strains of R. leguminosarum A34. This strategy allowed us to isolate an A. tumefaciens cosmid, pIJ7760 encoding a T1SS, namely AspDE (Agrobacterium secretion protein D and E). aspD and aspE genes encoded the ABC (ATP binding domain) and MFP (membrane fusion protein) components of the secretion system respectively. Hla, a conserved unknown protein located upstream in the cosmid, was identified as a substrate of AspDE system. The genetic analysis of the surrounding region revealed a putative heme receptor (HlaR) and an ECF sigma and antisigma factor (HlaSI) encoded upstream of Hla. These genes have a RirA (global iron regulation) consensus sequence in their promoter region. Another putative ABC uptake system (AhuUVTB) was identified in pIJ7760 with recognition sequence for RirA and IrrA (heme response regulator). Extracellular protein analysis from different cultured conditions shown that complex and differential control of the secretion of Hla occurs between R. leguminosarum A34 and A. tumefaciens C58 strains. An elevated Hla secretion was observed in rich medium in the R. leguminosarum A34 heterologous host. This miss regulation was found to be in response to a so far unknown mutation which triggers pleiotropic phenotypes. This regulator is encoded in the pRL1JI symbiotic plasmid and appears to regulate Hla secretion. The modulation of Hla secretion was studied using the related strain R. leguminosarum, and revealed that the secretion of the protein is also controlled by the two global regulators previously described in Rhizobiaceae, RirA and IrrA. Additionally, adding hemoglobin as an extracellular heme source induces the secretion of Hla as the major protein in the R. leguminosarum heterologous context. Despite the fact that Hla shows no homology with previously characterized hemophores, the gene is included in a region with remarkable homology to a locus involved in heme uptake through hemophores. Hla was purified from extracellular medium cultures using hemin affinity column suggesting novel hemophore in Rhizobiaceae family. Using directed mutagenesis, an aspD secretion mutant was generated in A. tumefaciens C58 strain. Phenotypic characterization revealed that the mutation has a pleiotropic phenotype affecting the bacterial aggregation, adhesion to an abiotic surface and agar-motility. Studies on A. tumefaciens showed that apart from responding to iron starvation and addition of heme to the medium, Hla secretion mainly responds to microoxic/anoxic conditions. Interestingly, aspD mutant, unable of Hla secretion was avirulet, as shown by incapability of tumor induction in Kalanchoe sp. plants. Taking together, these results suggest that the AspDE Type I Secretion System characterized in this work could be involved in heme uptake through the secretion of a novel hemophore (Hla) probably in the low iron and microaerobiosis present in the tumor.

Folcia, Ana María. "Evaluación de Pseudapanteles dignus (Hymenoptera-Braconidae) como posible agente de control biológico de Tuta Absoluta (Lepidoptera-Gelechidae), plaga clave del cultivo de tomate en los alrededores del Gran Buenos Aires" (2013) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La polilla del tomate (Tuta absoluta) es considerada plaga clave del cultivo de tomate producido bajo cubierta en los alrededores de Buenos Aires debido a los daños que causa, en hojas, brotes y frutos, y a requerir permanentes medidas de control. Tanto el corto ciclo de vida que ocurre en los cultivos protegidos como la elevada cantidad de medidas de control requeridas han generado problemas de resistencia a insecticidas. Una de las alternativas al control químico es el control biológico. Hacia 1995 fue detectada la presencia natural de un parasitoide de larvas de T. absoluta, Pseudapanteles dignus (Hymenoptera, Braconidae). El objetivo general de esta tesis fue determinar la eficacia de Ps. dignus como agente de control biológico aumentativo de Tuta absoluta y evaluar su compatibilidad con la estrategia de control químico de la plaga. Para ello se determinó su potencialidad mediante la evaluación de sus atributos biológicos en condiciones de laboratorio (supervivencia y fecundidad) y comparación con los de la plaga. Se estimó su tasa de ataque en relación con la densidad de la presa (respuesta funcional). Se evaluó su eficacia en el control por medio de liberaciones controladas en laboratorio e invernáculos experimentales. Además, se analizó la compatibilidad de su empleo con estrategias de control químico aceptadas en manejo convencional (insecticidas) y orgánico (extractos vegetales) de plagas. Estos estudios resultan fundamentales para la implementación de una estrategia de manejo integrado de T. absoluta en cultivos de tomate en ambientes protegidos, que incluyan el empleo de liberaciones inoculativas de Ps. dignus en un contexto productivo.

Abstract:
The tomato moth (Tuta absoluta) is considered a key pest of tomato crops produced under cover near Buenos Aires due to the damage it causes, in leaves, shoots and fruits, and require permanent control measures. Both the short life cycle that occurs in protected crops and the high number of required control measures have led to problems of insecticide resistance. One alternative to chemical control is biological control. By 1995 it was detected naturally occurring larval parasitoid T. absoluta, Pseudapanteles dignus (Hymenoptera, Braconidae). The aim of this thesis was to evaluate the effectiveness of Ps. dignus as augmentative biological control agent of Tuta absoluta and to assess their compatibility with the chemical control strategy of the pest. This was determined by evaluating potential biological attributes in laboratory conditions (survival and fecundity) and compared with those of the pest. Estimated its attack rate relative to the density of prey (functional response). Evaluated its efficacy in control through releases controlled in laboratory and experimental greenhouses. Further analyzed the compatibility of use with chemical control strategies accepted in conventional (insecticides) and organic (plant extracts) pest management. These studies are essential for the implementation of an integrated pest management strategy of T. absoluta in tomato crop under protected environment, with the use of Ps dignus inoculative releases in a productive context.

Manacorda, Carlos Augusto. "Estudio de los cambios transcriptómicos producidos por infecciones virales en plantas, rol de fitohormonas y su vinculación con la progresión de síntomas" (2013) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las pérdidas en cultivos ocasionadas por virus dependen mayormente de la severidad de los síntomas producidos. La comprensión de los mecanismos moleculares que subyacen a la producción de síntomas es de importancia para el desarrollo de estrategias que permitan reducir las pérdidas ocasionadas por fitovirus. Mediante el uso de cepas de virus de los géneros Tobamovirus y Potyvirus, el presente trabajo analizó la relación entre la severidad de sus síntomas en Nicotiana tabacum y Arabidopsis thaliana con su capacidad para alterar diferencialmente parámetros morfológicos, fisiológicos y transcriptómicos relevantes para los procesos de desarrollo y respuestas a estrés, hormonas y defensa. Los resultados indicaron que a tiempos tempranos de la infección en tejidos sistémicos, cuando aún no son visibles los síntomas característicos de la infección, se producen cambios moleculares importantes. Éstos incluyen alteraciones en la acumulación de metabolitos vinculados con procesos de señalización y defensa, así como cambios transcriptómicos en genes clave en redes de senescencia, defensa y respuesta a hormonas. La respuesta de microRNAs con importantes roles en el desarrollo ante tratamientos con hormonas y virus exhibió un componente transcripcional y muchos de estos genes reguladores evidenciaron un patrón bifásico de cambios, sugiriendo que los procesos que conducen a su alteración en etapas tempranas de la infección difieren de los que condicionan la misma a etapas avanzadas. En Arabidopsis, gran parte de las diferencias en alteraciones fisiológicas y de síntomas inducidas por distintas cepas de un Potyvirus se perdieron en plantas mutantes para la vía del ácido salicílico. A la luz de estos hallazgos, se propone un mecanismo por el cual la retroalimentación entre ácido salicílico y especies reactivas de oxígeno determina la activación de genes clave en los procesos de desarrollo y senescencia.

Abstract:
Losses on crops caused by virus mostly depend on symptoms severity. The understanding of the molecular mechanisms underlying the production of symptoms is important for the development of strategies that will reduce the losses caused by plant virus. By using viral strains of virus of the genus Tobamovirus and Potyvirus, this study analyzed the relationship between the severity of their symptoms in Nicotiana tabacum and Arabidopsis thaliana with their ability to differentially alter physiological, morphological and transcriptomic parameters relevant to the processes of development and responses to stress, hormones, and defense. The results indicated that at early times of infection in systemic tissues, when the characteristic symptoms of the infection are still not visible, important molecular changes occur. These include alterations in the accumulation of metabolites linked to processes of signaling and defense, as well as transcriptomic changes in key genes in senescence, defense and response to hormones networks. The response of microRNAs with important roles in development following treatment with hormones and viruses exhibited a transcriptional component and many of these regulatory genes showed a biphasic pattern of changes, suggesting that the processes that lead to their alteration at early stages of infection differ from which condition it to advanced stages. In Arabidopsis, much of the differences in physiological changes and symptoms induced by different strains of a Potyvirus were lost in mutant plants for salicylic acid pathway. In the light of these findings, a mechanism is proposed by which the feedback between salicylic acid and reactive oxygen species determines the activation of key gen es in the processes of development and senescence.

Munitz, Martín Sebastián. "Arándanos: micoflora contaminante, micotoxinas, residuos de fungicidas y cinéticas de degradación" (2013-02-15) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los arándanos son susceptibles a enfermedades fúngicas y a contaminación por micotoxinas, y esta es la razón de las aplicaciones de fungicidas. Estas contaminaciones pueden tener repercusiones en los rendimientos productivos y crear dificultades a la exportación. Los objetivos fueron identificar los hongos causantes de las enfermedades de arándanos en la Región de Salto Grande, Entre Ríos, una de las principales áreas de producción y exportación de arándanos en Argentina, y su capacidad para generar toxinas, y la cinética de degradación de azoxystrobin, boscalid, cyprodinil, fludioxonil y pyraclostrobin, así como su ocurrencia en productos de arándanos. Varias especies fúngicas, algunas con la capacidad de producción de micotoxinas, se han identificado por primera vez en los arándanos. Las metodologías desarrolladas para la cuantificación de los fungicidas fueron precisas y exactas. La degradación siguió una cinética de primer orden, ajustando mediante un modelo exponencial, con valores de R2 mayores a 0,96. La distribución de los pesticidas durante la elaboración de jugo de arándano reduciría más del 25% de fungicidas si se eliminan el agua de lavado y escaldado. Los productos de arándano han tenido elevada ocurrencia de los pesticidas, probablemente por el uso de la fruta de descarte para su elaboración.

Abstract:
Blueberries are susceptible to fungal diseases and mycotoxin contaminations, and this is the reason of fungicide applications. These contaminations may impact on productive yields and make export difficulties. The objectives were to identify fungi that cause blueberry diseases in the Salto Grande Region, Entre Ríos, one of the main production areas and exportation of blueberries in Argentina, and its ability to generate toxins, and the kinetics of degradation of azoxystrobin, boscalid, cyprodinil, fludioxonil and pyraclostrobin, as well as their occurrence in blueberry products. Several fungal species, some of them with mycotoxins production capacity, have been identified for the first time in blueberries. The developed methodologies for the quantification of the fungicides were precise and accurate. Degradation followed a first order kinetics, fitting using an exponential model, with R2 values higher than 0,96. The distribution of pesticides during the elaboration of blueberry juice would reduce more than 25% of fungicides if are eliminated the washing and blanching water. Blueberry products have had high occurrence of pesticides, probably for the use of scrap fruit for their elaboration.

Pozzo Ardizzi, María Cristina. "Cancrosis del álamo en plantaciones comerciales de la región del Comahue. Estado actual y perspectivas" (2014-03-26) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El agente causal de la Cancrosis del Álamo es Septoria musiva y entre las especies e híbridos del género Populus hay genotipos que van desde tolerantes a muy susceptibles. La hipótesis de esta tesis estableció que esos diferentes comportamientos se debían a diferencias anatómicas y fisiológicas en los órganos susceptibles que constituían mecanismos de defensa pasiva que podían regular la intensidad de los síntomas. Utilizando métodos histológicos se describieron y compararon diversas características foliares y caulinares en clones susceptibles (´I 214`e ´I 488`) y tolerantes (´Conti 12` y ´Ballestra`). Mediante análisis de Componentes Principales se determinó que los clones tolerantes poseían hojas más gruesas, con células epidérmicas y cutículas de mayor espesor generando una superficie foliar lisa, con un menores densidades estomáticas y tallos con peridermis más gruesas, con una menor superficie lenticelar, y con cortezas que forman las peridermis necrofilacticas más próximas a las lesiones, que los clones susceptibles. Debido a que los clones más difundidos presentaban diferentes niveles de incidencia en los diferentes valles irrigados de la región del Comahue, se realizaron muestreos en diferentes localidades y el patógeno sólo fue encontrado en los valles de Viedma, General Conesa y Río Colorado.

Abstract:
The causal agent of the Septoria Leaf Spot and Stem Canker is Mycosphaerella populorum and there are genotypes that ranging from tolerant to very susceptible among Populus species and hybrids. The hypothesis of this thesis established that those different behaviors were due to anatomical and physiological differences in the susceptible organs constituting passive defense mechanisms that could regulate the symptoms intensity. Different characteristics of the stem and foliage were described and compared in susceptible (´I 214 'e ´I 488') and tolerant (´Conti 12' and ´Ballestra') clones using histological methods. Through Principles Components Analysis was determined that the tolerant clones had thicker leaves, with thicker epidermis and cuticles, with a lower stomata densities and thicker peridermis stems, with a lower lenticelar surfaces, and with cortex that form the necrophilactic periderm closer to injuries, than the susceptible clones. Since the most widespread clones had different levels of incidence in the different irrigated valleys of the region of Comahue, samplings were carried out in different locations and the pathogen was only found in the Viedma, General Conesa and Colorado River valleys.

Ramírez Albuquerque, L. Diana. "Estudio comparativo de las condiciones ambientales que influencian la producción de tricotecenos en cepas de Fusarium graminearum aislados de trigo cultivado en Argentina" (2014-04-29) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El trigo es uno de los cultivos de mayor importancia en Argentina ya sea para consumo local o como producto de exportación. Una de las principales enfermedades que afectan el cultivo es la “Fusariosis de la Espiga de Trigo” (FET). Es una enfermedad endémica en nuestro país causada por Fusarium graminearum, el agente más común de la Fusariosis de la espiga (FET) en muchas partes el mundo. La infección está fuertemente influenciada por parámetros ambientales y ocurre principalmente cuando se dan las condiciones favorables de humedad y temperatura durante la antesis o floración del trigo. Esta destructiva enfermedad afecta al trigo, cebada y otros granos pequeños y tiene la capacidad de destruir cultivos, causando grandes pérdidas económicas debido a la reducción de la calidad de los granos pudiéndose además acumular niveles significativos de micotoxinas, como los tricotecenos. La presente Tesis abarcó el estudio de la influencia de la temperatura y la aw sobre el crecimiento y la biosíntesis de micotoxinas utilizando una cepa de Fusarium graminearum productora de deoxinivalenol (DON), 3- y 15-acetildeoxinivalenol (3- y 15-ADON). El análisis en este estudio mostró que los factores ambientales tuvieron gran influencia en la síntesis relativa de los derivados acetilados, siendo esta influencia más marcada en el caso de la temperatura. Las interacciones entre estos factores: aw, temperatura y el tiempo de incubación, resultaron significativos sobre la producción de DON y 3-ADON. En cambio, la aw no produjo un efecto significativo sobre la producción de 15-ADON, aunque sí lo hicieron la temperatura, y el tiempo de incubación, así como sus interacciones. Las diferentes condiciones estudiadas mostraron que, para DON, no existen diferencias significativas entre las cantidades producidas en las condiciones óptimas (0.99 aw, 30 ºC, 14 días) y las observadas a la misma aw a 25 y 20 ºC, luego de 14 días de incubación, o la producción a 0,95 aw, 25 ºC y 21 días de incubación. El resto de las condiciones resultaron en una acumulación significativamente menor de DON. En cambio, para 3-ADON, las condiciones de máxima producción (0,99 aw, 30 ºC y 21 días) resultaron en una cantidad de toxina significativamente mayor que para el resto de las condiciones estudiadas. Lo mismo se observó para 15-ADON, para el cual las condiciones óptimas de producción fueron de 0,99 aw, 10 ºC y 7 días de incubación y la cantidad de toxina acumulada difirió significativamente con la que se detectó en el resto de las condiciones de estudio. De acuerdo a estudios realizados los últimos años, se demostró que el quimiotipo 3- ADON está desplazando rápidamente al quimiotipo 15-ADON en poblaciones de F. graminearum del oeste de Canadá. Estudios efectuados en invernadero demostraron que aislamientos pertenecientes al quimiotipo 3-ADON producían concentraciones de DON superiores a los aislamientos pertenecientes al quimiotipo 15-ADON, lo cual es motivo de preocupación para los productores de granos y las industrias relacionadas. Tanto la distribución geográfica de las especies como de los quimiotipos está influenciada fuertemente por los factores climáticos, el calentamiento global tendrá entonces un gran impacto en esta distribución. Por este motivo, el estudio del efecto de los factores climáticos (temperatura y actividad acuosa) sobre la producción relativa de tricotecenos por Fusarium graminearum permitirá predecir el riesgo al que están expuestos los cultivos susceptibles en este nuevo escenario.

Abstract:
Wheat is one of the most important crops in Argentina, either for local consumption or export. One of the major diseases affecting the crop is the Fusarium Head Blight (FHB). It is an endemic disease in our country caused by Fusarium graminearum, the most common agent of Fusarium head blight (FHB) around the world. The infection is strongly influenced by environmental parameters and occurs mostly when there are favorable conditions of moisture and temperature during wheat anthesis or flowering. This destructive disease affects wheat, barley and other small grains and has the capability of destroying crops, causing great economic losses due to reduced grain quality, and accumulating significant levels of mycotoxins such as trichothecenes. This thesis involved the study of the influence of temperature and aw on growth and mycotoxins biosynthesis, using a strain of Fusarium graminearum producing deoxynivalenol (DON), 3- and 15 acetyldeoxynivalenol (3- and 15-ADON). The analyses showed that environmental factors greatly influenced the relative synthesis of the acetylated derivatives, this influence being more pronounced in the case of temperature. The interactions between these factors: aw, temperature and incubation time were significant on DON production and 3-ADON. However, aw showed no significant effect on the production of 15-ADON, although temperature and incubation time incubation were significant, as well as their interactions. The different conditions studied showed that there are no significant differences between the amount of DON produced under optimal conditions (0.99 aw, 30 °C, 14 days) and those at the same aw, 25 and 20 °C, after 14 days of incubation, or 0.95 aw, 25 °C and 21 days of incubation. The rest of the conditions resulted in significantly lower accumulation of DON. In contrast, for 3-ADON, the maximum production conditions (0.99 aw, 30 and 21 days) resulted in a significantly greater amount of toxin than for the rest of the conditions studied. The same effect was observed for 15-ADON, for which the optimal production conditions were 0.99 aw, 10 °C and 7 days of incubation, and the amount of accumulated toxin differed significantly with those detected in the rest of the studied environmental conditions. According to studies conducted in recent years, it was demonstrated that the 3-ADON chemotype is rapidly displacing the 15-ADON chemotype of F. graminearum populations from western Canada. Greenhouse studies showed that isolates belonging to 3-ADON chemotype produced higher concentrations of DON than isolates belonging to the 15-ADON chemotype, which is of concern to grain producers and related industries. Both the geographical distribution of species and chemotypes is strongly influenced by climatic factors, and thus global warming will have a major impact on this distribution. For this reason, the study of the effect of climatic factors (temperature and water activity) on the relative production of trichothecenes by Fusarium graminearum will allow to predict the risk to which susceptible crops are exposed in this new scenario.

Sepúlveda Díaz, Mónica Leonor. "Estudio comparativo de la variabilidad del potencial toxicogénico de cepas de Fusarium graminearum aislados de trigo, cebada y maíz cultivados en Argentina" (2014-09-24) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El complejo de la especie Fusarium graminearum (FGSC) infecta el trigo, cebada, maíz y otros cultivos de cereales en todo el mundo, causando enfermedades como la Fusariosis de la espiga (FHB) y Pudrición de la mazorca (GER). Estas enfermedades reducen significativamente el rendimiento de grano y su calidad. Además, ocasionan problemas de seguridad alimentaria porque el grano infectado suele estar contaminado con micotoxinas que inhiben la síntesis de proteínas y producir complicaciones de salud en los seres humanos y animales. Se obtuvieron aislamientos de F. graminearum sembrando granos de trigo, cebada y maíz desinfectados superficialmente en medio Dicloran Cloranfenicol Malta Agar (DCMA), incubado a 25°C de 3 a 5 días. Para su identificación los aislamientos fueron sembrados en medio Spezieller Nährstoffarmer Agar (SNA), incubado a 25°C de 5 a 6 días. Las toxinas se extrajeron con una mezcla de acetonitrilo:acetato de etilo:agua (50:41:9, v/v) realizándose el clean-up en una columna con carbón activado:alúmina neutra:celite. La detección de tricotecenos se realizó por CG con detector de captura de electrones (ECD), previa derivatización con anhídrido trifluoroacético. Además los tricotecenos fueron confirmados por CG-MS. Todos los aislamientos estudiados produjeron al menos una sola toxina y la mayoría de ellos produjeron dos o más. NIV fue la toxina producida en menor cantidad y por un menor número de aislamientos. Casi la totalidad de los aislamientos produjeron 15-ADON en mayor cantidad que NIV, pero en menor proporción que 3-ADON y DON. Una gran proporción de aislamientos fue capaz de sintetizar 3-ADON en cantidades mucho mayores que las de las otras toxinas. Los aislamientos de maíz fueron los que produjeron los máximos valores de DON (290 μg/g) y 3-ADON (9218 μg/g). Los perfiles de producción de toxinas variaron según el sustrato de aislamiento. En trigo fue ampliamente dominante el perfil DON 3- y 15-ADON (89%) seguido por DON 3-ADON (8%) y DON 15-ADON (1,33%). En cebada los perfiles dominantes fueron los mismos que para trigo, pero con diferencias en las proporciones de incidencia DON 3- y 15-ADON (47%) y DON 3-ADON (33%). No se encontró el perfil DON 15-ADON en cebada. En maíz el perfil de mayor incidencia fue DON 3-ADON (36%) seguido por DON 3- y 15-ADON (30%). El perfil DON 15-ADON estuvo presente en maíz en un número mayor de aislamientos (10%) que en trigo y en cebada. Los perfiles que incluyen NIV se encontraron en cebada (NIV DON 3- y 15-ADON) y en maíz (NIV DON 15-ADON). Los perfiles NIV DON 3-ADON, NIV 3- y 15-ADON, NIV 15-ADON, 3- y 15-ADON, 3- ADON, DON presentaron una incidencia baja (menor al 6%). En todas las muestras se encontró 3-ADON en altas cantidades, seguido por DON. La mayor acumulación de toxina se produjo en las muestras de trigo. NIV y 15-ADON estaban presentes en menor cantidad. En todos los casos 15-ADON fue encontrado en valores mucho más bajos que 3-ADON. El monitoreo de las cosechas y el estudio de la influencia de los factores climáticos permitirá predecir el riesgo micotoxicológico al que están expuestos los cultivos.

Abstract:
The Fusarium graminearum species complex (FGSC) infects wheat, barley, maize and other cereal crops worldwide, causing diseases such as Fusarium head blight (FHB) and ear rot (GER). These diseases significantly reduce grain yield and quality. Moreover, they cause food safety problems because the infected grains are often contaminated with mycotoxins that inhibit protein synthesis and cause in human and animal diseases complications. F. graminearum isolates were obtained from wheat, barley and maize grains superficially disinfected, directly planted on Dicloran Chloramphenicol Malt Agar (DCMA), and incubated at 25°C for 3 to 5 days. For identification, the isolates were grown in medium Spezieller Nährstoffarmer Agar (SNA) and incubated at 25°C for 5-6 days. Toxins were extracted with acetonitrile:ethyl acetate:water (50:41:9, v/v) performing the clean-up in a column with activated charcoal:neutral alumina:celite. Detection of trichothecenes was performed by GC with electron capture detector (ECD) after derivatization with trifluoroacetic anhydride. Furthermore trichothecenes were confirmed by GC-MS. All isolates were able to synthesize at least one toxin and most of them two or more. NIV was the toxin produced in a lower proportion and by few isolates. Almost all of the isolates produced 15-ADON in greater proportion than NIV, but to a lesser extent than 3-ADON and DON. A high proportion of isolates were able to synthesize 3- ADON in much larger amounts than of the other toxins. Corn isolates were which accumulated the maximum values of DON (290 μg/g) and 3-ADON (9218 μg/g). The toxin production profiles varied with the isolation substrate. In wheat the DON 3- and 15-ADON (89%) was prevalent, followed by the DON 3-ADON (8%) and DON 15-ADON (1,33%) profiles. In barley the dominant profiles were the same as for wheat, but with differences in the incidence rates, DON 3- and 15-ADON (47%) and DON 3-ADON (33%). No profile DON 15-ADON was found in barley. In maize the profile of highest incidence was DON 3-ADON (36%) followed by DON 3- and 15- ADON (30%). The profile DON 15-ADON was present in corn (10%) in a greater proportion than in wheat and barley isolates. Profiles including NIV were found in barley (NIV DON 3- and 15-ADON) and maize (NIV DON 15-ADON). Profiles NIV DON 3-ADON, NIV 3- and 15-ADON, NIV 15-ADON, 3- and 15-ADON, 3-ADON, DON showed a low incidence (less than 6%). In all samples 3-ADON was found in high amounts, followed by DON. The greatest accumulation of toxin occurred in wheat samples. NIV and 15-ADON were present in smaller amounts. In all cases, 15-ADON was found at much lower values than 3- ADON. Crop monitoring and studies of the influence of climatic factors will predict the mycotoxicological risk at what crops are exposed.

Cagnotti, Cynthia Lorena. "Desarrollo de la técnica del insecto estéril y su integración con el control biológico mediante entomófagos parasitoides para el control de la pollila del tomate Tuta absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae)" (2014-12-17) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La polilla del tomate, Tuta absoluta, es una de las plagas más devastadoras del cultivo de tomate en Sudamérica, donde es originaria, y en Europa y África, donde ha ingresado recientemente. El control de T. absoluta se basa principalmente en el empleo de plaguicidas. El objetivo de esta tesis fue establecer las bases para el desarrollo de la Técnica del Insecto Estéril, mediante el empleo de la Esterilidad Heredada (EH) en T. absoluta, y evaluar su integración con el Control Biológico (CB) con entomófagos. Los principales aportes de esta tesis son: - Conocimiento del efecto de los rayos X sobre la biología de T. absoluta. - Determinación de la dosis óptima de radiación X para aplicar la EH en el control de T. absoluta. - Estudio del efecto de la radiación sobre la dispersión de machos irradiados. - Evaluación de la supresión de poblaciones silvestres de T. absoluta mediante la liberación de individuos irradiados en invernáculo. - Determinación del número mínimo de individuos irradiados a liberar para reducir poblaciones de T. absoluta. - Evaluación de la integración de la EH y el CB mediante el empleo de los entomófagos Trichogramma spp. y Tupiocoris cucurbitaceus.

Abstract:
The tomato leafminer, Tuta absoluta, is one of the most devastating pests of tomato crops. This species is native to South America, but it has been invading Europe, Africa and Asia recently. The main method of control of T. absoluta relies on the application of chemical insecticides. The objective of the thesis was to establish the basis for the development of the Sterile Insect Technique in this species through the Inherited Sterility (IS), and to evaluate its integration with Biological Control (BC) by entomophagous. The main contributions of this thesis are: - Knowledge of the effect of X rays on the T. absoluta biology. - Determination of the optimal dose of X radiation to be used in the IS against T. absoluta - Study of the effect of the radiation on the dispersion of irradiated males - Assessment of the suppression of wild populations of T. absoluta through the release of irradiated individuals under greenhouse conditions. - Determination of the minimum number of irradiated individuals that should be released to reduce wild T. absoluta populations - Evaluation of the integration of both IS and BC techniques using the entomophagous Trichogramma spp. and Tupiocoris cucurbitaceus

Darino, Martín Alejandro. "Estudio de las resistencias a roya común del maíz y a roya de la hoja del trigo" (2015-03-09) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La roya común, causada por el hongo biótrofo Puccinia sorghi Schwein. es una importante enfermedad del maíz. En la Argentina poco se conoce acerca de fuentes de resistencia, no existen híbridos comerciales identificados como portadores de resistencia durable a la enfermedad y se desconoce acerca de la estructura poblacional de P. sorghi presente en la zona núcleo de cultivo. Los objetivos del presente trabajo consistieron en: la identificación de fuentes de resistencia a la enfermedad mediante la evaluación de un set de líneas de maíz con 66 aislamientos del patógeno y con infecciones naturales a campo; evaluación de la variabilidad patogénica y molecular de los 66 aislamientos; y profundizar en el conocimiento acerca de las bases genéticas que controlan la resistencia durable en cereales para poder implementarlas en programas de mejoramiento de maíz, mediante el estudio de una variedad de trigo llamada Buck Poncho que fue identificada como portadora de resistencia durable a roya de la hoja (Puccinia triticina Erikss.). Las líneas de maíz Rp3-A, Rp1-K, Rp-GI, Rp-G5, Rp-G5JD, PIO19802, PIO28760 y PIO17570 resultaron resistentes a más del 75% de los aislamientos y en más del 78% de las localidades evaluadas. En las líneas PIO68752, PIO28427 y PIO36420 se identificó un nuevo tipo de resistencia cuya expresión comenzó en el estadio V4. Las líneas PIO12345 y PIO74876 mostraron resistencia parcial en el estadio V2. Se identificaron en la población de P. sorghi por lo menos 3 grupos de virulencia y 26 fenotipos de virulencia o razas que podrían ser 40 razas si se consideran los genotipos de AFLP. En Buck Poncho se detectaron la existencia de por lo menos tres genes de resistencia LrBP1, LrBP2 y LBP3. La combinación de los genes de resistencia detectados en las distintas líneas de maíz podría generar variedades comerciales que posean resistencia más durable. Los grupos de virulencia identificados en la población de P. sorghi no mostraron diferencias en el nivel molecular indicando que aislamientos pertenecientes a un mismo grupo de virulencia pueden tener distintos orígenes dentro de la población. La resistencia durable observada en Buck Poncho se puede explicar en parte por los efectos combinados de los genes LrBP1, LrBP2 y LrBP3 aunque no puede descartarse la presencia de genes menores y/o QTLs menores cuyos efectos sean detectados con poblaciones segregantes de mayor tamaño a la utilizada en este estudio.

Abstract:
Common rust caused by the biotrofic fungus Puccinia sorghi Schwein. is an important disease of maize. In Argentina little is known about maize lines carrying resistance to the disease, the existence of corn hybrids with durable resistance and about the existence of distinct virulence groups in the P. sorghi population. The objectives of this work were: the evaluation of a set of maize lines with 66 isolates of the pathogen and with natural pathogen population present in field in order to identify resistance sources to the diseases; the study of the population structure of P. sorghi population; and in order to deepen the knowledge about the genetic basis that control durable resistance, genetic and molecular studies of a wheat variety called Buck Poncho that was identified as durable resistance to wheat leaf rust (Puccinia triticina Erikss.) were performed. Maize lines Rp3-A, Rp1-K, Rp-GI, Rp-G5, Rp-G5JD, PIO19802, PIO28760 and PIO17570 were resistant over the 75% of the isolates and over the 78% of the field locations where they were evaluated. A new class of resistance was identified in maize lines PIO68752, PIO28427 and PIO36420 whose expression of the resistance began at leaf stage V4. In inbred lines PIO12345 and PIO74876 showed partial resistance at leaf stage V2. At least, 3 virulence groups were identified, 26 virulent phenotypes or races were distinguished that could become 40 races if AFLPs genotypes are considered. Three leaf rust resistance genes, LrBP1, LrBP2 and LrBP3 were identified in Buck Poncho. Pyramiding the resistant genes detected in maize lines could be a useful strategy to increase durability of the resistance. The virulence groups identified in P. sorghi population did not differ at genetic level, indicating that isolates from each group could have different origins within the population. The durable resistance observed in Buck Poncho could be explained in part by the combination effects of LrBP1, LrBP2 and LrBP3 genes and the presence of minor genes or minor QTLs whose effects could perhaps be detected in segregant populations bigger than the one that was used in this study.

Hernández, Carmen Marcela. "Estudios biológicos sobre los parasitoides, Mastrus ridens Horstman y Ascogaster quadridentata Wesmael, para evaluar su potencial como agentes de control biológico de Cydia pomonella (L.) plaga clave del manzano" (2015-05-29) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La carpocapsa (Cydia pomonella) es una de las plagas clave del cultivo de pomáceas en todo el mundo. En la Argentina, si bien actualmente se están implementando medidas de control de bajo impacto ambiental, como la técnica de confusión sexual, la principal forma de control continúa siendo el empleo de productos químicos. El objetivo general de esta tesis fue estudiar aspectos básicos de la biología de Mastrus ridens y Ascogaster quadridentata a los efectos de evaluar su potencial como agentes de control de Cydia pomonella en nuestro país. Los principales aportes de este trabajo son: -Disponibilidad de un sistema de cría a nivel experimental para M. ridens y A. quadridentata en condiciones de laboratorio. -Conocimiento de los principales atributos biológicos y poblacionales de A. quadridentata sobre C. pomonella. -Estudio de la fecundidad y preferencia de M. ridens sobre dos especies de lepidópteros plaga presentes en nuestro país (C. pomonella- Grapholita molesta). -Determinación de la selectividad de los principales insecticidas utilizados en la producción de pomáceas para M. ridens. -Colonización y evaluación del establecimiento de M. ridens y A. quadridentata en el Alto Valle de Rio Negro. Los estudios realizados proporcionaron información y herramientas para impulsar el empleo de estos parasitoides a través del desarrollo de una estrategia de control biológico clásico de C. pomonella.

Abstract:
The codling moth is a key pest of apple crops. In Argentina, pest management strategies mainly relay on chemical control, although recently the technique of sexual confusion has been implemented with success. The aim of this thesis was to study the potential of the parasitoids, Mastrus ridens and Ascogaster quadridentata as biological control agents of Cydia pomonella in our country. The most important contributions from this thesis are: -Better understanding of rearing methodologies for M. ridens y A. quadridentata in the laboratory. -Knowledge of the reproductive biology and population parameters of A. quadridentata in C. pomonella. -Knowledge of the biology and host preference by M. ridens for C. pomonella and G. molesta. -Determination of the side effect of some pesticides use in apple crops on M. ridens. -Colonization and evaluation of establishment of M. ridens y A. quadridentata in the field. These results provided useful information to enhance the use of the parasitoids in classical biological control strategies against C. pomonella in Argentina.

Rodríguez, María Cecilia. "Estudio del rol de la proteína de cápside del virus TMV-Cg en la modulación de la expresión génica y en la alteración de factores endógenos del hospedante Arabidopsis thaliana" (2015-12-03) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las enfermedades producidas por patógenos virales generan cuantiosas pérdidas en la producción de cultivos de importancia agropecuaria. El impacto de los virus en la alteración de la expresión génica explica, en parte, las reducciones en el rendimiento de estos cultivos. Por este motivo, entender los mecanismos por los cuales los virus modulan la expresión de genes del hospedante es de vital importancia para proponer estrategias antivirales efectivas o perfeccionar las que se están utilizando en la actualidad. En este estudio, se empleó una línea transgénica de Arabidopsis thaliana que expresa la proteína de cápside del virus TMV-Cg (CgCP) con el objetivo de estudiar el efecto de esta proteína en las alteraciones de la expresión génica y su concomitante impacto sobre los mecanismos de defensa. Inicialmente, se analizó el efecto de la CgCP sobre la expresión de genes implicados en vías de defensa, observándose que la CgCP modula negativamente la expresión de genes que participan de la vía de defensa mediada por ácido salicílico (SA, por sus siglás en inglés) y que, además, tienen un rol reportado frente a defensa antiviral. A continuación, se procedió a analizar el impacto global de la CgCp sobre el transcriptoma de A. thaliana por medio de un microarreglo realizado en plantas que expresan la CgCP. Los resultados indicaron que la CPCg altera la expresión de genes que están implicados en una amplia variedad de procesos. El uso de herramientas bio-informáticas permitió determinar que la CgCP regula negativamente la expresión de una red de genes que presentan en sus regiones promotoras motivos de respuesta a los factores de transcripción W-BOX y al factor Non-Expressor of PR 1(NPR1), un factor central en la vía del SA. Paralelamente, se observó que durante la infección con el virus TMV-Cg los genes dependientes de la vía de SA son incrementados a tiempos tempranos de infección, mientras que su expresión disminuye a tiempos tardíos. Por otra parte, se observó que la expresión de la CgCP en plantas de A. thaliana produce un retraso en el crecimiento. En base a estas observaciones, se procedió a estudiar la capacidad de la CgCP de alterar la estabilidad de las proteínas DELLA, las cuales están implicadas en la regulación de vías de desarrollo, como también en la supresión de la vía de defensa mediada por SA. Se observó que la proteína CgCP altera la estabilidad de la proteína RGA, una de las cinco proteínas DELLAs codificadas por el genoma de A. thaliana. Por otra parte, ensayos realizados con el virus TMV-Cg mostraron que el virus altera la estabilidad de otra proteína DELLA, la proteína GAI. Además, plantas mutantes para cuatro de los cinco genes que codifican proteínas DELLAs acumularon menores niveles del virus TMV-Cg que las plantas salvajes. En conclusión, los resultados de esta tesis muestran que la CgCP altera la expresión de un amplio conjunto de genes de A. thaliana. En particular, esta proteína modula negativamente un grupo de genes de defensa, dependientes de la vía de SA, a través de la estabilización de las proteínas DELLA. Estos resultados sugieren que la CgCP alteraría la estabilidad de las proteínas DELLAs como un mecanismo para modular negativamente las respuestas de defensa antivirales.

Abstract:
Phytopathogenic viruses produce significant losses on economically important crops species. Those losses are mostly dependent on the alterations of gene expression during viral infections. Consequently, the study of the virus-induced alterations in the gene expression profile is important for the development of strategies to reduce the losses caused by plant virus. In this study we used transgenic Arabidopsis plants that express the capsid protein of TMV-Cg (CgCP) with the aim of studying alterations in gene expression and defense mechanisms. First, we studied a subset of genes involved in antiviral defense pathways that are regulated by salicylic acid (SA), and found that CgCP negatively modulates the SA mediated defense pathways. Then, we studied the global impact of CgCP expression in the A. thaliana’s transcriptome. The results indicate that the CgCP alters the expression of genes that are involved in a wide range of processes. By means of the use of bioinformatic tools, we found CgCP negatively regulates a gene network dependent on Non-Expressor of PR 1(NPR1), which is a central player in the SA mediated response. In parallel, we observed that the expression of this set of genes is also altered during TMV-Cg virus infection. The expression is up-regulated at early time post infection and downregulated at late time of TMV-Cg infection. Also, we observed that the CgCP expression reduces plant growth of A. thaliana. Based on these data, we proceeded to study the alterations of DELLA proteins by CgCP, which are involved in the regulation of development and defense pathways. We found that the CgCP alters the stability of RGA, which is one of the five DELLA proteins codified by A. thaliana. Furthermore, the stability of DELLAs proteins was altered during the TMV-Cg infection. Moreover, it was observed that DELLA proteins negatively modulated the defense transcript profiles during TMV-Cg infection. As a result, TMV-Cg accumulation was significantly lower in the quadruple-DELLA mutant Arabidopsis plants than in wild type plants. Taken together, in this study we demonstrated that CgCP alters the expression of genes involved in a wide range of processes, particularly, negatively regulates the salicylic acid-mediated defense pathway by stabilizing the DELLA proteins. These results suggest that CgCP alters the stability of DELLAs as a mechanism of negative modulation of antiviral defense responses.

Bordenave, César Daniel. "Estudio de los mecanismos de respuesta a la infección causada por la bacteria fitopatógena Pseudomonas syringae en la leguminosa modelo Lotus japonicus" (2015-12-15) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Lotus japonicus es una legumbre modelo ampliamente utilizada para el estudio de procesos importantes como la nodulación y la respuesta al estrés salino. Sin embargo, existen pocos estudios sobre la respuesta defensiva de esta especie contra microorganismos patógenos. Comprender como se protege esta especie modelo contra patógenos podría ayudar a desarrollar cultivares más tolerantes en especies de Lotus de relevancia agronómica, así como también en otros géneros de legumbres. Para poder dilucidar los mecanismos de defensa más importantes en esta leguminosa, en este trabajo se exploraron las principales respuestas de dos ecotipos fenotípicamente contrastantes, Miyakojima MG-20 y Gifu B-129, a la inoculación con la bacteria Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000. Las respuestas de defensa activadas en ambos ecotipos fueron considerablemente diferentes. Así, en Miyakojima MG-20 se observó una interacción compatible caracterizada por una rápida multiplicación de la bacteria, acompañada por un descenso en la eficiencia del fotosistema II, la aparición de clorosis, desecación y defoliación, así como un moderado pero sostenido aumento en los niveles de especies reactivas del oxígeno (EROs). Estos fenómenos sólo fueron observados en los folíolos inoculados y no afectaron el desarrollo normal de la planta. Por su parte, en Gifu B-129 la interacción fue incompatible, los síntomas fueron en general imperceptibles, la bacteria fue incapaz de multiplicarse en los tejidos de la planta y existió un aumento notable de las EROs durante las primeras horas luego de la inoculación con la bacteria. A partir de estudios transcripcionales utilizando microarreglos de ADN, pudieron identificarse alrededor de 3000 genes regulados diferencialmente frente a la inoculación con la bacteria en el ecotipo Miyakojima MG-20 y alrededor de 300 genes en el ecotipo Gifu B-129. Además, se comparó la expresión génica basal de estas líneas, observándose diferencias en genes relacionados con estrés biótico y abiótico, metabolismo hormonal, estado redox y procesos fotosintéticos. Por otro lado se realizó un estudio del metaboloma, en el cual también se observó un comportamiento contrastante entre ambos ecotipos, detectándose un conjunto diferente de metabolitos que se modifican frente a la inoculación con la bacteria. Integrando los resultados del transcriptoma y del metaboloma se pudieron identificar numerosas vías metabólicas afectadas de manera diferencial en respuesta al ataque bacteriano, lo que permite explicar las diferencias de comportamiento observadas entre ambos ecotipos. Entre estas vías se destacan el sistema de antioxidantes (ascorbato y glutatión), el metabolismo del ácido γ-aminobutírico, la síntesis y degradación de componentes de la pared celular, la síntesis y degradación lípidos y el metabolismo hormonal. Posteriormente, sobre la base del análisis transcriptómico se seleccionaron distintas líneas mutantes insercionales del ecotipo Gifu B-129 para un conjunto de genes que podrían jugar un rol importante en la defensa vegetal. La mayoría de tales líneas demostró una tolerancia equivalente a la observada en la línea salvaje, sugiriendo que los genes mutados no son esenciales en la respuesta de defensa en estos ecotipos. Sin embargo, una línea incapaz de expresar el gen de la enzima Poliamina Oxidasa I demostró una mayor tolerancia durante la patogénesis, lo que indicaría que la expresión de este gen afecta negativamente la respuesta defensiva de la planta. Este trabajo permitió describir de manera global las principales vías metabólicas reguladas en dos ecotipos de L. japonicus durante la respuesta a la bacteria P. syringae pv. tomato DC3000. Las diferencias entre las respuestas inducidas en el ecotipo Gifu B-129 (interacción incompatible) con las observadas en el ecotipo Miyakojima MG-20 (interacción compatible) permitieron discernir cuales son los mecanismos de defensa más efectivos entre los presentadaos por los ecotipos evaluados. Estos resultados podrían ser extrapolados a otras especies de leguminosas de interés agronómico.

Abstract:
Lotus japonicus is a model legume widely used for the study of important processes such as nodulation and response to salt stress. However, there are few works focusing on the defensive response of this species against pathogenic microorganisms. Understanding how this model species responds against plant pathogens could help to develope more tolerant cultivars in agronomically important Lotus species as well as in other legume genera. In order to elucidate the most important defensive mechanisms in this legume, in this work it was explored the main responses of two phenotypically contrasting L. japonicus ecotypes, Miyakojima MG-20 and Gifu B-129, to the inoculation with the bacterial species Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000. The defensive responses activated in both ecotypes were considerably different. Thus, in Miyakojima MG-20 was observed a compatible interaction, characterized by a rapid multiplication of the bacteria in infiltrated tissues, along with a decrease in the efficiency of the photosystem II, the appearance of chlorosis, desiccation and defoliation, as well as a moderate but steady increase in the levels of reactive oxygen species (ROS). All these symptoms were observed only in the inoculated leaflets, and never affected the normal development of the plant. In contrast, the interaction was incompatible in Gifu B-129 , where symptoms were rather imperceptible, the bacterium was unable to multiply in leaf tissues, and a critical increase in ROS accumulation was observed during the first few hours after bacterial infiltration. Based on DNA microarrays, were identified about 3,000 differentially regulated genes, upon infiltration with the bacteria in Miyakojima MG-20, and about 300 genes of this type in Gifu B-129. Moreover, it was posible to compare the basal gene expression between these lines, which showed differences in genes related to biotic and abiotic stresses, hormonal metabolism, redox state, and photosynthetic processes. A metabolomic study on these samples was also performed, revealing that a different set of metabolites in each ecotype was modified in response to the bacteria. By integrating the transcriptomic and metabolomic data, several metabolic pathways affected differentially in response to bacterial attack were identified , which helps to explain the observed differences in behavior between both ecotypes. Among these pathways stand out those of the antioxidants system (ascorbate and glutathione), the γ-aminobutyric acid metabolism, the synthesis and degradation of cell wall components, the synthesis and degradation of lipids, and hormone metabolism. Finally, several insertional mutants of the Gifu B-129 ecotype were selected for a set of genes that could play an important role in plant defense. Most of them showed a level of tolerance to the bacteria similar to that of the wild type, suggesting that this genes are not essentials in the defense response in these ecotypes. However, one line defective in the Polyamine Oxidase I gene showed higher tolerance, indicating that the expression of this gene during the plant response to the bacterial attack. negatively affects the defense of the plant. This work globally describes the main metabolic pathways regulated in response to P. syringae pv. tomato DC3000 in two ecotypes of L. japonicus. The differences between the responses triggered in the ecotype Gifu B-129 (incompatible interaction) and Miyakojima MG-20 (compatible interaction) let us to unravel the most effective defense mechanisms among those presented by the evaluated ecotypes. These results could be extrapolated to other agronomical important legumes.

Toum Terrones, Laila. "Mecanismos de Xanthomonas campestris pv. campestris en la supresión de la respuesta inmune de Arabidopsis thaliana" (2015-12-21) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis, estudiamos algunos de los mecanismos a través de los cuales Xanthomonas campestris pv. campestris (Xcc) suprime la respuesta inmune de Arabidopsis thaliana. Los microbios gatillan el cierre estomático en la planta a través de patrones moleculares asociados a microbios (MAMPs), sin embargo Xcc es capaz de colonizar A. thaliana a través de estos poros mediante un factor de virulencia (Xcc FV) capaz de inhibir su cierre. En la primera parte de esta tesis estudiamos el mecanismo de acción del Xcc FV y de una toxina de efecto similar producida por la bacteria fitopatógena Pseudomonas syringae pv. tomato denominada coronatina. Encontramos que ambos compuestos inhiben el cierre estomático inducido por MAMPs y por la hormona ácido abscísico a través de la inhibición de la producción de especies reactivas de oxígeno (ERO) mediada por NADPH oxidasas y de manera dependiente de la señalización de jasmonatos. En la segunda parte de la tesis, estudiamos el rol del glucano cíclico β-(1,2) de Xcc en el proceso infectivo. Hallamos que este compuesto inhibe la producción de ERO, disminuye la expresión de genes de defensa y suprime la deposición de calosa inducidas por flagelina. Asimismo, observamos que el efecto del glucano cíclico β-(1,2) requiere de dos receptores quinasa con dominios ricos en lisina, LYK3 y LYK4, y que se une específicamente a preparaciones de membranas de A. thaliana, lo cual sugiere que actúa a través de la unión a un receptor de membrana. En la tercera parte de la tesis, estudiamos el mecanismo a través del cual el xantano, un exopolisacárido producido por Xcc, actúa como factor de virulencia. A través del uso mutantes de Xcc afectadas en enzimas biosintéticas encargadas de modificar químicamente el xantano, descubrimos que la piruvilación sobre la manosa externa de la unidad repetitiva de este polisacárido son esenciales para su actividad de supresión de la respuesta inmune de A. thaliana. Palabras clave: estomas, ABA, coronatina, NADPH oxidasas, especies reactivas de oxígeno, glucano cíclico β-(1,2), flg22, inmunidad vegetal, xantano, Xanthomonas, Arabidopsis thaliana.

Abstract:
In this thesis, we studied some of the mechanisms by which Xanthomonas campestris pv. campestris (Xcc) suppresses Arabidopsis thaliana immune response. Microbes trigger stomatal closure through microbe-associated molecular patterns (MAMPs). However, Xcc is able to colonize A. thaliana through stomatal pores by synthesizing a virulence factor (Xcc VF), which is capable of inhibiting stomatal closure induced by MAMPs. In the first part of this thesis we studied the mechanism of action of the Xcc VF and of coronatine, a similar toxin produced by the phytopathogen Pseudomonas syringae pv. tomato. We found that both compounds inhibit stomatal closure triggered by ABA and by MAMPs by preventing NADPH oxidasedependent reactive oxygen species (ROS) production and in a jasmonate signalling-dependent manner. In the second part of this thesis, we studied the role of a cyclic β-(1,2)-glucan produced by Xcc during the infective process. We found that this compound prevents flagellin-induced ROS production, inhibits induction of defense genes and suppresses callose deposition elicited by this MAMP. We also demonstrated that the cyclic β-(1,2)-glucan effect requires two lysin motif receptor kinases, LYK3 and LYK4. Additionally, we observed that cyclic β-(1,2)-glucan binds specifically to A. thaliana membranes, which suggests that this compound might exert its suppressive effect via membrane-bound receptors. In the third part of this thesis, we studied the mechanism by which xanthan, an exopolysaccharide produced by Xcc, acts as a virulence factor. By using mutants of Xcc affected in enzymes that modify xanthan chemically during its biosynthetic process, we found that pyruvilation and mannosylation of the polysaccharide are essential for its activity as a suppressor of A. thaliana immune response. Keywords: stomata, ABA, Xcc VF, coronatine, NADPH oxidases, ROS, cyclic β-(1,2)-glucan, flg22, plant immunity, xanthan structure, Xanthomonas, Arabidopsis thaliana.

de Errasti, Andrés. "Hongos manchadores de albura en especies forestales exóticas y nativas de los Andes Patagónicos: taxonomía, patogenicidad y manejo" (2016-06-27) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Esta tesis constituye el primer relevamiento sistemático de hongos manchadores de albura de la Patagonia argentina. La ‘mancha de albura’ es una modificación de las propiedades ópticas de la madera como consecuencia de la colonización fúngica. El cuerpo (hifas) pigmentado del hongo penetra el parénquima radial y los tejidos vasculares ocasionando una mancha profunda. La mayoría de especies manchadoras pertenecen a los hongos ‘ofiostomatoides’. Este grupo polifilético dentro de los Ascomycota se encuentra asociado íntimamente con artrópodos, en particular, a escarabajos de corteza y ambrosía (Coleoptera: Scolytinae/Platypodinae). Existen casos bien documentados de patógenos primarios dentro del grupo (por ejemplo Ceratocystis fagacearum, Ceratocystis fimbriata, Ophiostoma ulmi), sin embargo, la mayoría de las especies manchan la madera recién cosechada, como saprobios. La madera manchada tiene un precio de venta menor y su aceptación en el mercado disminuye. Ante la falta de información en el país sobre la diversidad y biología de este grupo, se planificó su recolección y estudio en la Patagonia durante el período 2009-2014. El relevamiento fue realizado durante 3 años. Se visitaron diferentes plantaciones y zonas de bosque nativo en las regiones cordilleranas de las provincias del Chubut, del Río Negro y del Neuquén. Los taxones fueron identificados mediante técnicas morfológicas y moleculares (regiones LSU, ITS, β-Tubulina y el factor TEF 1-α). Sus asociaciones con insectos también fueron informadas. En base a la diversidad encontrada sobre árboles enfermos (Nothofagus, Schinus) se diagramaron ensayos para estimar la patogenicidad de algunos aislamientos sobre árboles sanos. Paralelamente, se caracterizó el ciclo del manchado en pináceas utilizadas por la industria forestal, intentando cuantificar la colonización fúngica en función del tiempo, para árboles apeados en distintas épocas del año. Se coleccionaron 588 muestras de las que se obtuvieron 370 aislamientos. Estos fueron clasificados en 28 taxones: 18 taxones conocidos y 10 taxones nuevos para la ciencia. De los nuevos, 5 fueron descriptos formalmente: Huntiella decorticans, Leptographium gestamen, Ophiostoma patagonicum, Ophiostoma peregrinum y Sporothrix cabralii. El bosque andino-patagónico evidenció una importante diversidad con un 80% de taxones endémicos (12/15). Por el contrario, las plantaciones de pináceas estuvieron asociadas a especies que han sido introducidas junto con éstas, tal como se ha constatado en otras regiones del Hemisferio Sur. Los primeros datos moleculares de Ophiostoma nothofagi han permitido identificar un linaje independiente dentro de la familia Ophiostomataceae, cuyas características morfológicas y ecológicas particulares respaldan la posibilidad de erigir un género nuevo para ésta y otras especies relacionadas. En los ensayos de patogenicidad a campo, Huntiella decorticans colonizó satisfactoriamente árboles sanos, de acuerdo con los postulados de Koch. Su relación con escarabajos que se alimentan de savia fresca y la formación de una estructura tipo ‘pressure pad’ indican un comportamiento patogénico. Sin embargo, la formación de cancros fue consecuencia de lesiones localizadas y no de infecciones sistémicas típicas de un marchitamiento. Por el contrario L. gestamen y O. patagonicum no pudieron colonizar sus hospedantes (Nothofagus spp. y Schinus patagonicus, respectivamente), por lo que serían saprobios oportunistas dispersados por escarabajos de ambrosía hacia hospedantes bajo estrés severo. En las plantaciones de coníferas, Ophiostoma piliferum y O. peregrinum fueron las especies de mayor frecuencia, si bien la tasa de colonización de Diplodia pinea fue superior. Las dos primeras están asociadas a las especies de escarabajos Hylurgus ligniperda y Orthotomicus laricis. Las especies de Grosmannia fueron aisladas principalmente de Hylastes ater. Los ensayos a campo indican que los troncos estuvieron libres de mancha por 3 meses, independientemente de su época de apeo. A partir del tercer mes los árboles cosechados en primavera y, en menor medida en otoño, son altamente susceptibles al ataque de hongos ‘ofiostomatoides’, probablemente porque en esas épocas se producen los picos de vuelo de los escarabajos adultos. Las cosechas de verano son críticas si el rodal está afectado por Diplodia. La colonización de ésta especie, usualmente en estado latente dentro del tejido sano del hospedante, se ve favorecida por las altas temperaturas de la estación. El invierno es la época más favorable para la cosecha. Ophiostoma peregrinum, especie que inicialmente fue reportada en el hemisferio Norte sobre Betula sp., mostró en la Patagonia una amplia distribución y frecuencia en plantaciones (inclusive colonizando hospedantes nativos) remarcando los peligros del comercio entre regiones distantes.

Abstract:
This thesis comprehends the first survey of sap-stain fungi on exotic conifers and native broad-leaved species (Nothofagus) from Patagonia, Argentina. ‘Sap-stain’ is a dark discoloration of wood as a consequence of fungal colonization. Pigmented fungal hyphae penetrate the radial parenchyma and the vascular tissue, causing a deep stain. Most sapstain species belong to the so-named ‘ophiostomatoid fungi’ a polyphyletic group of ascomycetes with similar morphology and taxonomic history. These species are adapted to arthropod dispersal, especially bark and ambrosia beetles (Coleoptera: Scolytinae/Platypodinae). Pathogens are well documented among sap-stain species (e.g. Ceratocystis fagacearum, Ceratocystis fimbriata, Ophiostoma ulmi). Nevertheless, most species are saprobes, colonizing timber after harvest. Stained wood has a lower market value and a decreased acceptance, causing major losses to the forest industry worldwide. Addressing the need to characterize ophiostomatoid diversity and biology in Patagonia, a five-year project was undertaken (2009-2014). A three-year survey (2009-2012) in Neuquén, Río Negro and Chubut Provinces included milling companies, pine plantations and native forests. Species were collected and identified based on morphology and DNA sequence comparisons of multiple loci (LSU, ITS, β-Tubulin, TEF 1-α). Insect associates were also informed. Isolates obtained from diseased trees (Nothofagus, Schinus) were selected for pathogenicity trials. On pine plantations, colonization of logs was estimated at different intervals, for logs harvested in different seasons. A total of 588 samples were collected, and 370 isolates were obtained. These were classified under 28 taxa: 18 known species and 10 new taxa. In the present study, 5 out of these new 10 species were described: Huntiella decorticans, Leptographium gestamen, Ophiostoma patagonicum, Ophiostoma peregrinum and Sporothrix cabralii. Nothofagus forests include several, previously unknown, sap-stain taxa. The 80% of these (12/15) are considered to be endemic. On the other hand, species present on pine plantations have been most likely introduced, similarly to other Southern Hemisphere Countries. The first molecular data of Ophiostoma nothofagi strongly suggests the presence of an independent lineage within the Ophiostomataceae. Its morphological characteristics and ecological features also support the possibility to erect a new genus for this and other related taxa. Huntiella decorticans was able to colonize healthy trees in pathogenicity trials. Its relation to sap-feeding beetles (Coleoptera:Nitidulidae) as well as the formation of a ‘pressure-pad’ structure, points out a pathogenic capability. Nevertheless, the formation of cankers indicates a localized lesion and not a systemic colonization, typical of a wilted tree. On the contrary, Leptographium gestamen and Ophiostoma patagonicum could not colonize healthy trees and both species probably behave as opportunistic saprobes vectored by ambrosia beetles to severely stressed trees. On pine plantations, the most frequent species were Ophiostoma piliferum and O. peregrinum. However, Diplodia registered higher colonization rates. The former ophiostomatoid species are associated to Hylurgus ligniperda and Orthotomicus laricis galleries. Grosmannia species were found in association with Hylaster ater galleries. At every site logs were stain-free for 3 months, no matter which season they were harvested. After this period, harvest in spring (and sometimes autumn) is highly susceptible to ‘ophiostomatoid’ stain, probably because it is also beetle flying season. Summer harvest is critical if the stand is infected with Diplodia, because this endophytic fungus grows vigorously at high temperatures. Field trials indicate winter as the most favorable season to harvest. Ophiostoma peregrinum, initially reported from the Northern Hemisphere associated with Scolytus ratzeburgi on Betula, evidenced a wide geographical distribution and host range (even on native species) in Patagonia, showing the risks associated to commercial trade between distant regions.

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