Biblioteca Digital | FCEN-UBA

Biblioteca Digital ¿Por qué?
Objetivos
Impactos
Estadísticas
Documentos
Presentaciones
Notas
Autores y derechos
¿Por qué depositar?
¿Cómo depositar?
Autorización
Depositar y publicar
Editoriales
Publicar mi tesis Formulario Tesis Posgrado
Formulario Tesis Grado
Normativa
Res. CD 2053/05
Res. CD 2533/09
Res. CD 0272/13
Res. CD 2793/15

Colecciones Tesis Doctorales
Fotografías
Publicaciones
Archivo
Libros
Reportes Técnicos

Tesis > TEMA

Biología [ 2301 tesis ]

Micología [ 49 tesis ]

Pando, Pedro J.. "Esquisomicetas" (1882) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Registro Cita

Godeas, Alicia Margarita. "Estudio cuali y cuantitativo de los hongos del suelo del bosque de Nothofagus dombeyi" (1977) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Registro Cita

Waksman, Noemí Herminia. "Hidratos de carbono en Cyttaria harioti Fischer : Determinación de la estructura de un Pululano. Estudio de azúcares simples, aislamiento e identificación de ácido D-arabino hexulosónico y alfa, alfa-D-trehalosa" (1977) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El presente trabajo tuvo por objeto continuar con el estudio de la composición en Hidratos de Carbono de Cyttaria hariati Fischer. Se encuentra dividido en varias partes: 1) Una descripción de los hongos del género Cyttaria, así como un detalle de los trabajos químicos realizados sobre la única especie hasta el momento estudiada: Cyttaria harioti Fischer. 2) Se mencionan los distintos tipos de glucanos aislados de hongos y levaduras, clasificando los mismos de acuerdo al tipo y configuracidn de sus uniones glucosídicas. 3) Se resumen los principales métodos enzimáticos usados para el análisis de polisacaridos, haciendo especial mención de las enzimas amilolíticas. 4) Se menciona brevemente la química y bioquímica de la trehalosa así como sus fuentes de extracción. 5) Se describe la identificación y determinación cuantitativa de alfa,alfa-D-trehalosa y ácido D-arabino hexulosónico en un extracto acuoso del hongo. Se caracterizó la trehalosa por sus propiedades físicas (punto de fusión y poder rotatorio), por las propiedades físicas de su octaacetato y por el Tr en c.g.l. Por hidrólisis cuantitativa con trehalasa se calculó que su porcentaje en el hongo está entre 0.22 y 0.30%. El cetoácido se caracterizó a través de los productos resultantes de su reducción y posterior lactonización. Se determinó que su porcentaje en Cyttaria harioti Fischer es del 1%. Cabe aclarar que es esta la primera vez que se aisla ácido D-arabino hexulosónico libre de un producto natural. 6) Se detallan los métodos empleados en la elucidación de la estructura de un polisacárido aislados de Cyttaria harioti Fischer junto con una discusión de los resultados obtenidos. Dicho polisacárido se aisló por precipitación con etanol de un extracto acuoso de Cyttaria harioti Fischer, luego de eliminar el heteropolisacárido estudiado anteriormente. El producto obtenido entre 41 y 46% de etanol se purificó hasta constancia de poder rotatorio + 171 ( H2O). Se observaba un solo pico simétrico por ultracentrifugación y precipitaba de su solución acuosa en un estrecho rango de concentración etanólica, evidencias ambas de su homogeneidad. El grado de polimerización era 246 considerando que la unidad terminal está unida a través del 0 al C-4. Por hidrólisis ácida total se obtuvo solamente glucosa y con amiloglucosidasa la hidrólisis fue cuantitativa. La hidrólisis ácida parcial daba principalmente isomaltosa junto con maltosa, maltotriosa y oligosacáridos mayores. La acetólisis proporcionaba mayor proporción de maltosa y maltotriosa. Esto confirmaba la presencia de uniones alfa-D-( 1→4) y alfa-D-( 1→6) en el glucano. El polisacárido se hidrolizaba sólo un 8% con alfa amilasa, mientras que con pululanasa se obtenía un poder rotatorio correspondiente a 32- 33%. La cromatografía en papel del hidrolizado con pululanasa mostraba un único componente de Rg= maltotriosa. Esta fue posteriormente caracterizada por sus propiedades físicas (punto de fusión, poder rotatorio, espectro de resonancia magnética nuclear) y las de su acetato. Cuando la hidrólisis con pululanasa se detuvo en un paso intermedio, se aislaron oligosacáridos consistentes en residuos de maltotriosas unidas a través del 0-6. Por estos resultados se postuló que el glucano era estructuralmente similar al "pululano" aislado de varias cepas de Pullularia pullulans y de Tremella mesenterica y que contenía una cadena principal consistente en residuos de maltotriosas unidas por el 0 del C-6 (unión alfa). Los estudios de oxidación con IO4- permitieron confirmar estas suposiciones, si bien se encontró 3 - 7% de glucosa sin oxidar lo cual sugiere la posibilidad de que existan uniones 1→3 o ramificaciones. La metilación del glucano dio un producto con 43.8% de OCH3. La hidrólisis del producto metilado permitió identificar 2,3,4,6-tetra-O-Metil-glucosa; 2,3,4 y 2,3,6-tri-O-Metil-glucosa (Cromatografía en papel, c.g.l. y espectros de masas); 2,3-di-O-Metil-glucosa. La determinación cuantitativa de los productos metilados demostró que hay dos puntos de ramificación cada 100 unidades de glucosa y que el exceso de glucosa dimetiladas respecto de la tetrametilglucosa (7%) se puede deber a una submetilación. No se encontró 2,4,6-tri-O-Metil-glucosa que permitiría confirmar la presencia de uniones 1→3. También en el pululano aislado de Pullularia pullulans se encontraron uniones 1→3, así como 2,3-dimetil glucosa entre los productos de metilación e hidrólisis. Es esta la primera vez que se encuentra un pululano intracelular. En la Tabla siguiente se resumen las propiedades de los "pululanos" aislados de Pullularia pullulans, Tremella mesenterica y Cyttaria harioti Fischer.

Vaamonde, Graciela. "Estudio del comportamiento de diferentes variedades de maní en relación a la producción de aflatoxinas por Aspergillus Parasiticus" (1978) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Registro Cita

Galvagno, Miguel Angel. "Caracterización de la fosfodiesterasa de AMP cíclico del hongo dimórfico Mucor rouxii : Regulación de la actividad enzimática por fosforilación-desfosforilación" (1981) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Registro Cita

Lopez, Silvia Edith. "Estudio florístico y ecológico de basidiomycetes xilófilos en plantaciones de Eucalyptus viminalis" (1984) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Registro Cita

Lederkremer, Gerardo Zelmar. "Biosíntesis de glicoproteínas en Mucor Rouxii : Metilación in vivo de residuos de manosa en oligosacáridos con unión N-glicosídica a asparagina" (1985) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Registro Cita

Kerner, Néstor Alberto. "Mecanismo de regulación de la fosfodiesterasa de AMP cíclico del hongo dimórfico Mucor rouxii por fosforilación y proteólisis : Variaciones de las formas enzimáticas durante el crecimiento filamentoso" (1985) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Registro Cita

Adler, Mónica Teresa. "La familia Parmeliaceae, (liquines, ascomycotina), en la Provincia de Buenos Aires : estudio taxonómico-florístico" (1988) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Registro Cita

Venedikian, Nadia. "Análisis de las poblaciones y comunidades fúngicas en hoja de Pinus taeda L." (1995) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Registro Cita

Rossi, Silvia Graciela. "Quinasa de proteínas dependiente de cAMP durante la germinación del hongo dimórfico Mucor rouxii" (1995) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Registro Cita

Menéndez, Ana Bernardina. "Micoparasitismo de Trichoderma spp. sobre el patógeno vegetal de suelo Sclerotinia sclerotiorum : Pruebas preliminares sobre el biocontrol de esta enfermedad" (1996) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo se estudió la capacidad de algunas especies de Trichoderma, en particular T. harzianum, como antagonistas del patógeno vegetal Sclerotinia sclerotiorum. En las pruebas de antagonismo "in vierto" se comprobé dicha capacidad en términos de la disminución del crecimiento de la colonia del patógeno y la reducción tanto de la viabilidad de los esclerocios como del desarrollo de otros nuevos. También se describió el proceso del micoparasitismo por parte del antagonista Trichoderma spp. sobre dos fases somóticas del patógeno: sus esclerocios y el micelio. En el primer caso se observó, con microscopía óptica, la colonización de los tejidos de los esclerocios infectados por parte del antagonista, comprobándose la total destrucción de la médula de los mismos. En el segundo, se observaron las interacciones hifales entre el micoparásito (T. harzianum BAFC cult. N§ 742) y el hospedante, tanto en cultivo dual como en un suelo estéril, con microscopía óptica y de barrido. En los cultivos duales, las hifas de T. harzianum crecieron hacia las de S. sclerotiorum enrollándose alrededor de ellas. En los últimos estadíos del proceso micoparasítico, se observaron enrollamientos o "coilings" muy densos y una degradación parcial de las paredes celulares de las hifas del patógeno. En suelo estéril, los conidios de T. harzianum germinaron y el micelio en desarrollo alcanzó al de S. sclerotiorum. Trichoderma formó ramificaciones cortas y cuerpos similares a apresorios los cuales podrían contribuir con la penetración de la pared del hospedante. Por otro lado se comprobé la capacidad del aislamiento de T. harzianum BAFC cult. N§ 742 para producir enzimas extracelulares que degradan las paredes celulares de S. sclerotiorum. Paralelamente se verificó la presencia de lectinas en una medio de cultivo líquido de S. sclerotiorum. En este trabajo se estudió además, la supervivencia de esclerocios de S. sclerotiorum en un suelo inoculado con T. harzianum en función de la concentración de inóculo del antagonista, de la temperatura y del pH. Posteriormente se llevaron a cabo pruebas preliminares sobre control biológico. Primero se desarrolló un sistema "in vierto" para evaluar la habilidad de Trichoderma para controlar la marchitez producida por S. sclerotiorum en plantas de pepino y lechuga: el recubrimiento de semillas con conidios de T. harzianum result¢ en reducciones del efecto de S. sclerotiorum sobre la emergencia y post-emergencia de las plantas de ambos hospedantes. Luego se realizó una búsqueda o "screening" en invernadero, con lechuga, en el cual se ensayaron varios aislamientos de Trichoderma spp. algunos de los cuales aumentaron los porcentajes de semillas germinadas y la supervivencia de las plantas, aunque no significativamente desde el punto de vista estadístico. Uno de estos aislamientos, T. harzianum BAFC cult. N§ 742, indujo además un incremento significativo en el peso seco del vástago de las plantas. Se realizaron dos ensayos independientes con lechuga en los cuales se empleó el aislamiento mencionado anteriormente como antagonista, obteniéndose, en uno de los ensayos, una reducción no significativa en la incidencia de la enfermedad. Sin embargo, se observaron aumentos en la mayoría de los parámetros de crecimiento de la planta medidos, todos estadísticamente significativos. Se efectuaron otros dos ensayos empleando plantas de soja como hospedante, uno en invernadero y el otro a campo. En ambos se verificó un control significativo de la enfermedad en los tratamientos con la aplicación de T. harzianum BAFC cult. N§ 742. En cambio, no se registraron diferencias significativas en el desarrollo de las plantas en ninguno de los dos casos. Se realizaron dos ensayos de biocontrol más, empleando girasol como hospedante, de los cuales se extrajeron resultados significativos referentes al aumento en el desarrollo de las plantas y la reducción de la incidencia de la enfermedad producida por S. sclerotiorum. Los resultados se discuten en forma independiente por capítulos y finalmente en forma global.

Abstract:
In this work, the ability of some species of Trichodema, particularly T. harzianum, as antagonists of the soilborne plant pathogen Sclerotinia sclerotiorum, was studied. Such hability was demonstrated in "in vierto" assays, in terms of the reduction of the pathogen colony, the sclerotia viability, as well as the development of new ones. The process of mycoparasitism by the antagonist Trichoderma spp. is also described on two somatic phases: the sclerotia and the mycelium. In the first case, the colonization of infected tissues of the sclerotia by the antagonists was observed with light microscopy, and verified the total destruction of the sclerotia medulla. In the second, hiphal interactions between the mycoparasite (T. harzianum BAFC cult. N§ 742) and its host, were observed in dual cultures and also in sterilized soil, with both light and scanning microscopy. In dual cultures, hyphae grew towards and coiled around the S. sclerotiorum hyphae. Dense coils and partial degradation of the Sclerotinia cell wall were observed in later stages of the parasitism. In sterile soil, T. harzianum conidia germinated and the developing mycelium made contact with that of S. sclerotiorum. Trichoderma formed short branches and appressorium-like bodies which propably aid in holding and penetrating the host cell wall. On the other hand, the capacity of the isolate BAFC N§ 742 of T. harzianum to produce enzimes degrading cell wall of mycelium and sclerotia of S. sclerotiorum, was demonstrated. Parallely, the presence of lectins in a liquid culture medium of S. sclerotiorum was also shown. In this work, the survival of sclerotia of S. sclerotiorum in soil inoculated with T. harzianum was studied, versus the concentration of the antagonist inoculum, the temperature and the pH. Later, preliminary assays on biological control were carried out "in vierto", in greenhouse and in the field. An "in vierto" system was developed to test the Trichoderma ability to control Sclerotinia wilt in cucumber and lettuce: coating seeds with T. harzianum conidia resulted in a reduction in the pre- and post-emergence effect of S. sclerotiorum in both hosts. Several isolates of Trichodema spp. were assayed in a greenhouse screening of antagonists, using lettuce plants as the host. Some isolates increased seeds germination and plants survival, although the differences were not significant at statistical level. One of these isolates, T. harzianum BAFC cult. N§ 742, also induced a significant increase of the aerial dry weight of plants. Two independent assays with lettuce were performed in which the above mencioned isolate was employed as antagonist. A reduction of the diseases incidence was obtained in one of the experiments but it was not significant. However, most of the growth parameters measured in the plants increased significantly. Another two experiments were carried out with soybean as the host, one in greenhouse and the other in the field. A significant control of the disease was verified when T. harzianum BAFC cult. N§ 742 was applied, in both experiments. In contrast, there were not significant differences regarding growth parameters of the plants in any of the two experiments. Sunflower plants were employed as hosts in two biocontrol assays, from which significant results, related to increase of plants development and disease control were obtained. Results are discused separatly in each chapter and globaly at the end.

Zelada, Alicia M.. "Rol del AMPc en el dimorfismo del hongo C. Albicans : Efecto del glucagon: Caracterización de la quinasa de proteínas dependiente de AMPc y purificación de sus subunidades" (1997) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Gottlieb, Alexandra Marina. "Estudio sistemático de las especies sudamericanas del género Ganoderma (Aphyllophorales) : Un enfoque multidisciplinario" (1997) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En el presente trabajo se estudiaron 134 aislamientos dicarióticos mediante la electroforesis horizontal en geles de poliacrilamida, para ocho actividades enzimáticas: AAT, ACP, AKP, EST, MDH, MNR, PRX y SOD. Se analizaron 94 bandas totales, y con el fin de discernir micelios individuales, se implementaron tests de incompatibilidad somática. Por otra parte, se examinaron los caracteres macro- y micromorfológicos, tanto al MO como al MEB, de ca. 200 especímenes, incluyendo 28 holotipos de los Herbarios BPI, H, L, PC, NY, FH, K, PH, SP, BAFC y LPS. Analizando numéricamente los patrones de bandas isoenzimáticas y los caracteres morfológicos, se pudo establecer cierta correlación entre los datos moleculares y los morfológicos. Se observaron varios fenotipos alozímicos en cada sistema enzimático. No se encontraron bandas diagnósticas para especies determinadas morfológicamente. Sin embargo, se hallaron bandas diagnóstico en el ámbito de los dos subgéneros, Ganoderma y Elfvingia, corroborando los resultados proporcionados por los caracteres morfológicos. En total, se detectó en el área bajo estudio, la presencia de nueve especies del subgénero Ganoderma y ocho especies del subgénero Elfvingia.

Abstract:
In the present work 134 dikaryotic isolates of Ganoderma were examined by horizontal polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) for eight enzymatic activities: AAT, ACP, AKP, EST, MDH, MNR, PRX and SOD. A total of 94 bands were analysed. In order to discern fungal individuals somatic incompatibility tests were used. On the other hand, both macro- and microscopic structures of ca. 200 specimens were examined and in the latter case both with LM and SEM, which involved the study of 28 holotypes from the Herbaria BPI, H, L, PC, NY, FH, K, PH, SP, BAFC and LPS. By analysing numerically the isoenzymatic patterns and the morphological characters, a certain correlation between molecular and morphological data was established. The zymograms showed that within each enzyme system several allozyme phenotypes could be observed. The enzymatic systems analysed failed to yield diagnostic bands for each morphologically defined group. However, diagnostic bands for the two large subgenera, Ganoderma and Elfvingia, were encountered. Thus corroborating the results furnished by morphological characters. In total, the presence of 9 species of the subgenus Ganoderma and 8 species of the subgenus Elfvingia, was recognized for the area under study.

Levin, Laura Noemí. "Biodegradación de materiales lignocelulósicos por Trametes trogii (Aphyllophorales, Basidiomycetes)" (1998) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los materiales lignocelulósicos se explotan en industrias tales como la madera, el papel y la agroindustria, cuyos residuos podrían transformarse en productos utilizables por bioconversíón. Dentro de los hongos existen algunos con mayor capacidad degradativa de lignina, los que producen “pudrición blanca”. Uno de ellos es Trametes trogii. Experiencias previas en biopulpado con la cepa utilizada en este estudio, demostraron que reducía el consumo de energia y mejoraba la calidad del papel obtenido. Este trabajo se inició con el objetivo de comprobar si dicho hongo es capaz de producir enzimas lignocelulolíticas in vitro, las cuales podrían utilizarse en procesos de bioconversíón de materiales lignocelulósicos de desecho y otros procesos biotecnológicos. El mismo comprende la detección y el estudio de las enzimas involucradas en la conversión de materiales lignocelulolíticos por T. trogii (celulasas, xilanasas, pectínasas y enzimas que intervienen en la degradación de lignina), la investigación de las condiciones nutricionales y de cultivo que favorecen la producción de las distintas actividades enzimáticas, asi como una caracterización de dichas actividades enzimáticas en el extracto crudo. Previamente a la aplicación industrial de los hongos de pudrición blanca, es necesario investigar el proceso de degradación y como éste afecta a los diferentes tipos celulares, por ello paralelamente se realizaron ensayos de degradación sobre madera y analizaron los cambios estructurales y ultraestructurales producidos por la acción de T. trogii. Los resultados obtenidos permiten afirmar que T. trogii bajo condiciones adecuadas produce los sistemas enzimáticos extracelulares necesarios para degradar activamente los principales componentes de las paredes celulares de las plantas superiores. Teniendo en cuenta los altos títulos y la tolerancia a situaciones extremas registrados para algunas de dichas enzimas, se podría considerar que constituye una buena fuente para la obtención de los sistemas enzimáticos empleados en diferentes procesos de bioconversíón.

Abstract:
Lignocellulosic materials are exploited in wood, paper and agroindustries, whose residues might be transformed in utilizable products by bioconversion. White-tot Basidiomycetes are the only type of wood-rotting fungi that can attack efficiently all wood components, including lignin. One of them is Trametes trogii. Biopulping research with the strain used in this study, showed that it reduces energy input and significantly improves strength characteristics of finished paper. The aim of the present work was proving its ability to produce lignocellulolytic enzymes in vitro, which could be used in biotechnological processes. It comprises the detection and study of the enzymes involved in the conversion of lignocellulosic materials by T. trogii (cellulases, xylanases, pectinases and enzymes which participate in lignin degradation), the investigation of the nutritional and culture conditions that promote the production of such activities, as well as their characterization in a crude extract. Prior to application of whiterotters for industrial use, knowledge of how these fungi degrade different cells and the process responsible for the degradation is necessary, because of this, degradation assays on wood were done, and structural and ultrastructural changes caused by the action of T. trogii were analyzed. The results obtained showed that under appropriate conditions T. trogii is capable of producing the enzymatic systems required to degrade the main components of plant cell walls. Taking into account the high titers and tolerance to adverse situations displayed by some of these enzymes, T. trogii might be considered a good source for the obtention of enzymatic systems employed in bioconversion processes.

Comerio, Ricardo M.. "Influencia de la actividad acuosa sobre la producción de citrinina y deoxinivalenol en Trigo" (1998) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se estudió la influencia de la actividad de agua (aw) sobre la producción de dos micotoxinas importantes en relación a la contaminación potencial del trigo: el deoxinivalenol producido por Gibberella zeae (Schweinitz) Petch (anamorfo: Fusarium graminearum Schwabe), tipico hongo de campo, y la citrinina producida por el hongo xerófilo Penicillium citrinum Thom, mejor adaptado a las condiciones del almacenamiento. Ensayos preliminares realizados a fin de establecer el tratamiento más efectivo para reducir la micota de los cariopses de trigo con la menor alteración posible de sus caracteristicas naturales, determinaron que la desinfección del sustrato se realizara a una dosis de 6 kGy (600 krad). Este tratamiento arrojó el menor recuento fúngico manteniendo una elevada viabilidad de los granos. El trigo desinfectado y acondicionado a diferentes niveles de aw (0,985; 0,945; 0,925 y 0,900), se inoculó con una cepa de Gibberella zeae (Schweinitz) Petch BAFC 210 productora de deoxinivalenol e incubó a 30°C por períodos de aproximadamente dos meses. La influencia de la aw se estudió a través de parámetros cinéticos obtenidos a partir de las curvas de acumulación de la toxina a los diferentes niveles de aw. La mayor acumulación de deoxinivalenol (1000 μg/kg) se detectó a aw 0,980. Respecto de las aw menores (0,945 y 0,925) el máximo nivel de deoxinivalenol detectado fue 80 μg/kg. No fue detectado deoxinivalenol a aw 0,900. Se estudió la influencia de la aw sobre el crecimiento de Penicillium citrinum Thom en trigo. El trigo acondicionado a distintos niveles de aw fue inoculado con la cepa de P. citrimlm Thom BAFC 729 productora de citrinina e incubado a 30°C. El desarrollo de P. citrinum Thom en trigo fue examinado durante 17 días en el caso de las actividades acuosas mayores (0,885; 0,825; 0,810 y 0,800), y durante diez meses en el caso de las actividades acuosas menores (0,775; 0,760). El crecimiento fungico fue medido semicuantitativamente a través de la observación microscópica de los granos. P. citrimlm Thom fue capaz de desarrollarse a aw 0,775 inclusive. La influencia de la awsobre la producción de citrinina en trigo se estudió en el rango de aw 0,800 - 0,885. El trigo acondicionado a distintos niveles de awe inoculado con la cepa BAFC 729 fue incubado a 30°C durante dos meses aproximadamente. A partir de las curvas de acumulación de citrinina se obtuvieron parámetros cinéticos. A medida que decreció la aw, la citrinina fue detectada más tardíamente y los máximos de acumulación decrecieron notablemente (20,2 mg/kg a aw 0,885; 606 μg/kg a aw 0,825 y 57 μg/kg a aw 0,810). No fue detectada citrinina en el sustrato de aw 0,800. Se presenta un método para la determinación de citrinina en trigo con adecuados atributos de desempeño analítico (recuperación 79%; RSDr variable entre 5,1% y 18,1%, según el nivel de contaminación en el rango 10 μg/kg - 200 μg/kg; límite de detección 10 μg/kg).

Abstract:
The objective of present work was to study the influence of water activity (aw) on kinetics of deoxynivalenol and citrinin production in wheat. The substrate was desinfected by gamma irradiation at 6 kGy (600 krad). Preliminary studies shown that this treatment yields grains with the lowest level of contaminant mycota and high viability. The influence of aw on deoxynivalenol accumulation was studied by inoculating wheat conditioned at different aw levels with a toxigenic Gibberella zeae (Schweinitz) Petch BAFC 210 strain, and incubating at 30°C for about two months. Deoxynivalenol accumulation curves were analyzed to obtain kinetic parameters. At aw 0.980 was detected the highest accumulation of deoxynivalenol (1000 μg/kg). At the lower levels of aw 0.945 and 0.925 the maximum quantity of toxin accumulated was 80 μg/kg. Deoxynivalenol was not detected in the sustrate at aw 0.900. The influence of aw on Penicillium citrinum Thom growth in wheat was studied. Wheat conditioned at different levels of aw was inoculated with a citrinin producer strain of P. citrinum Thom BAFC 729, and incubated at 30°C. The experiments were carried out for l7 days at higher aw levels (0.885, 0.825, 0.810 and 0.800) and for ten months at lower ones (0.775, 0.760). Fungal growth was assesed by microscopic examination. P. citrimlm Thom grew down to aw 0.775. The influence of aw on the citrinin accumulation in wheat was studied. Wheat conditioned at different levels of aw and inoculated with the strain of P. citrinum Thom mentioned above, was incubated at 30°C for about two months. Citrinin accumulation curves were analyzed to obtain kinetic parameters. As awdecresed the citrinin was detected later and the maximum accumulation decresed markedly (20.2 mg/kg at aw0.885, 606 pg/kg at aw 0.825 and 57 pg/kg at aw0.810). Citrinin was not detected in the substrate at aw 0.800. An improved method for the detection of citrinin in wheat was studied. Analytical features of the proposed method were suitable for detection of this toxin in wheat (recovery 79%; RSDr between 5,1% and 18,1%, in the range 10 μg/kg - 200 μg/kg; detection limit lO μg/kg).

Broggi, Leticia Elvira. "Estudio de la distribución de la micoflora contaminante de arroz recién cosechado : Riesgo potencial de aparición de micotoxinas en la Región Arrocera Argentina" (1998) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Registro Cita

Ramos, Araceli Marcela. "Estudios quimiotaxonómicos en especies del género Saccobolus. : (Ascobolaceae-Pezizales)" (1998) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los objetivos del presente trabajo fueron establecer, a partir del análisis de los patrones electroforéticos de isoenzimas intracelulares, de ciertos caracteres de cultivo, y de la producción y patrones electroforéticos de endo β-D-1,4 glucanasa, la delimitación de diez especies del género Saccobolus. Se utilizaron para el mismo 114 cepas monospóricas del género. Se analizaron seis sistemas isoenzimáticos intracelulares: AAT, ACP, G6PD, IDH, EST, SOD, y uno extracelular: endo β-D-1,4 glucanasa. El fenograma obtenido a partir del análisis de agrupamientos (UPGMA) muestra dos grupos principales de especies, correspondientes a cada una de las dos secciones en las que se divide el género. Se observó una alta homogeneidad intraespecífica ya que no se observaron diferencias en los estados de los caracteres entre las cepas monospóricas de cada aislamiento geográfico y aún entre distintos aislamientos geográficos. El análisis de los fenogramas muestra un alto grado de asociación entre las especies, lo cual concuerda con las observaciones morfológicas y el comportamiento fisiológico del grupo donde las especies aparecen como un continuo. Los resultados de este trabajo avalan el uso de los patrones isoenzimáticos de las enzimas testeadas, y las diferencias en los parámetros fisiológicos, para la delimitación de las especies del género. Los mismos indican que las diez especies estudiadas constituyen unidades taxonómicas independientes, avalando lo establecido, para alguna de ellas, a partir del análisis de los patrones morfológicos, y fisiológicos previamente estudiados. Esta metodologia constituye una herramienta adicional a la taxonomía tradicional del género, que utiliza sólo caracteres morfológicos.

Abstract:
The aim of this work was to establish the delimitation of ten species of the genus Saccobolus on the base of the analysis of electrophoretic patterns of intracellular enzymes, cultural characters and production and electrophoretic pattem of endo β-D-1,4 glucanase. A hundred and fourteen monosporic strains of the genus were used throughout, six intracellular and one extracellular isozyme systems were analyzed: AAT, ACP, G6PD, IDH, EST, SOD and endoglucanase. The phenogram obtained from the analysis of grouping (UPGMA) showed two groups of species, corresponding to the two sections of the genus. A high intraspecific homogeneity was observed, since there were not differences in the status of the characters among the monosporic strains of each geographical isolement, and not even among difierent geographical isolements. The analysis of phenograms showed a high degree of association among species, which correlates with morphological observations and physiological behavior of the taxa. The results of this research support the use of isozyme patterns of enzymes tested as well as the differences in physiological parameters for the delimitation of species in this genus. They show that the ten species studied are independent taxonomical entities, supporting the taxa established by the analysis of morphological and physiological patters previously studied. This methodology constitutes an additional tool to traditional taxonomy of the genus, that uses only morphological characters.

Sanchez, Virginia E.. "Producción de proteasas fúngicas por fermentación en estado sólido para su aplicación en la industria de alimentos" (1999) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se evaluó la utilización de la fermentación en estado sólido para producción de proteasas por Aspergillus. A través de una selección entre 210 cepas sobre placas de agar leche en condiciones relevantes para la FES, se seleccionó a Aspergillus niger 91 como la más adecuada para estudios futuros. Se ensayó el efecto de diferentes sustratos naturales. La mejor producción de proteasa se obtuvo por fermentación de una mezcla de soja : afrechillo de arroz (7:3), con una relación carbohidrato/proteína de 0,8 y una proporción reducida de partículas de soja superiores a 3,35 mm. La adición de carbohidratos y fuentes de nitrógeno y proteína no tuvo efecto significativo. Se realizó un estudio cinético de la FES evaluando el efecto de parámetros ambientales (contenido de agua inicial - actividad de agua, pH y temperatura). La proteasa producida mostró un modelo mixto, de asociación parcial al crecimiento; se describió la cinética de producción de biomasa, consumo de sustrato, proteasa y conidios con una ecuación logística. En las condiciones óptimas (40% Ho, Aw 0,969, pH0 6, 37°C), Aspergillus niger 91 produjo 10000 UP/g SS0(15800 UP/g msk), siendo esto varias veces superior a otros sistemas de fermentación. La relación lineal encontrada entre la pérdida de peso seco y tanto la biomasa como la proteasa facilita la estimación de éstas a través de un parámetro facilmente medible. Se encontró una correlación entre la producción de proteasa y conidios y su asociación con un patrón común en la evolución del pH. Debido a la secreción diferencial de dos proteasas al medio se observaron variaciones en la actividad proteolítica y la estabilidad térmica de los extractos enzimáticos de acuerdo al tiempo de fermentación.

Abstract:
The feasibility of using solid state ferrnentation for the production of protease by Aspergillus fungi was evaluated. Aspergillus niger 91 was selected as being the most suitable for future studies, by screening among 210 strains on milk agar plates under relevant conditions for solid state fermentation. The effect of different natural substrates was tested. The best was obtained by fermenting a soybean : rice bran mixture (7:3), with a carbohidrate/protein around 0,8 and a reduced proportion of soybean particle size bigger than 3,35 mm. The addition of carbohidratos, nitrogen and protein sources had no significant influence on the protease yield. A kinetic study of solid state fermentation was conducted evaluating the effect of environmental parameters (initial water content - water activity, pH and temperature). The protease formed exhibited a mixed - growth associated pattern, and biomass, substrate consumption, protease and conidial kinetics were described with a logistic equation. At optima] conditions (40% Ho,Aw 0,969, pH0 6, 37°C), Aspergillus niger 9l produced 10000 PU/g SS0 (15800 PU/g dwk), several times higher than other fermentation systems. A linear relationship was found between the dry matter weight loss and both biomass and protease production allowing their estimation through an easily measurable parameter. A correlation between protease and conidial production and its connection with a pH evolution common pattern was described. Due to differencial secretion of two proteases, variations in the proteolitic activity pattern and different thermal properties of fermentation extracts were found during fungal growth.

Chiocchio, Viviana Mónica. "Influencia de las raíces sobre las poblaciones fúngidas del suelo : efecto rizoplano-rizósfera" (2000) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

López-Malo Vigil, Aurelio. "La preservación multiobjetivo de alimentos: Efecto de factores tradicionales y emergentes en la respuesta de Aspergillus flavus" (2000) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo de esta tesis fue evaluar el efecto de la interacción de distintos factores de estrés (aw, pH, antimicrobianos sintetizados químicamente o antimicrobianos naturales y sus mezclas binarias) en la respuesta de crecimiento de Aspergillus flavus y determinar las condiciones de combinación inhibitorias sinérgicas o de cooperación de dichos factores, con miras a generar modelos predictivos para la conservación multiobjetivo de alimentos. Se determinó el efecto de distintas combinaciones de factores de estrés, tales como actividad de agua (0,99 o 0,95), pH (4,5 o 3,5) y presencia de antimicrobianos sintetizados artificialmente (benzoato de sodio, bisulfito de sodio o sorbato de potasio) y/o antimicrobianos naturales (vainillina, eugenol, carvacrol, timol o citral) sobre la respuesta de crecimiento de Aspergillus flavus. Se formularon sistemas modelo tomando como medio base al agar papa-dextrosa adicionando las cantidades necesarias de sacarosa y ácido clorhídrico para ajustar la actividad de agua y el pH según el caso y adicionando desde 100 hasta 1,800 ppm de los antimicrobianos en forma individual o en combinaciones binarias de los antimicrobianos. En cada caso los medios sólidos fueron inoculados con 2 μL de una suspensión de esporas del moho y se registró el tiempo para detectar el inicio del crecimiento de la colonia y/o su cambio en diámetro en función del tiempo de incubación. En los sistemas formulados con algún agente antimicrobiano y donde el moho se desarrolló, la velocidad de crecimiento radial varió de 0,037 (a.w 0,95; pH 3,5; 500 ppm eugenol) a 0,609 mm/h (aw 0,99; pH 4,5; 100 ppm benzoato de sodio). El tiempo lag se incrementó conforme aumentó la concentración del agente antimicrobiano, por ejemplo, el tiempo lag se alargó aproximadamente 330 horas (cerca de 14 días) en medios formulados con 200 ppm de timol, aw 0,99 y pH 3,5 y con 300 ppm de este agente el tiempo para detectar la presencia del moho se retraso 1400 horas (más de 55 días). Se determinaron las concentraciones mínimas inhibitorias de antimicrobianos comunes y naturales para Aspergillus flavus, mostrándose cuando se utilizó benzoato de sodio, bilsulfito de sodio o sorbato de potasio, una dependencia en el valor de pH, y esta dependencia fue más notoria a valores de aw altos (0,99). A valores de aw bajos (0,95), se observó la interacción de la presencia de 300 ppm sorbato de potasio y un pH de 4,5 en la inhibición del moho. El sorbato de potasio junto con carvacrol y timol fueron los antimicrobianos más efectivos para esta combinación aw- pH. Se modeló utilizando el modelo de Fermi la respuesta a la dosis (cantidad de agente antimicrobiano) para todas las combinaciones antimicrobiano - pH - aw evaluadas. La respuesta del moho se expresó como el cociente entre el tiempo lag con respecto al tiempo lag del sistema control mostrando la típica forma sigmoide de las curvas de respuesta a la dosis. Se observaron diferencias importantes en los valores de los coeficientes de la fución de Fermi (Pc y k) para los diferentes agentes antimicrobianos, así como para los distintos valores de aw y pH evaluados. Los resultados mostraron que las concentraciones de los agentes antimicrobianos naturales necesarias para duplicar el tiempo lag que se obtiene en el sistema control no dependen tanto del pH del sistema, como en el caso de los agentes antimicrobianos sintéticos. Se determinó la interacción entre los distintos factores cuando se aplicaron en distintos niveles sobre la interferencia de la homeostasis de Aspergillus flavus y se determinaron condiciones sinérgicas o de cooperación para la inhibición y retraso en el crecimiento del moho, evaluando la respuesta de Aspergillus flavus a diferentes mezclas binarias de antimicrobianos comunes y naturales. No se observó crecimiento del moho a tiempos de incubación largos conforme se aumentó la concentración de los agentes antimicrobianos en la mezcla. Se observaron también importantes diferencias en el comportamiento del moho en los medios formulados con distinto valor de pH, así como entre las diferentes mezclas de agentes antimicrobianos. Las mezclas de los distintos agentes retrasaron el crecimiento al menos 5 días en muchos de los casos, resaltando el comportamiento de las mezclas con citral en donde se observó que en el 58% de los casos (274 de un total de 474) a pH 3,5 y en el 53% (253 de 474) a pH 4,5 las observaciones fueron de no crecimiento después de 5 días y de crecimiento a los 30 días de incubación. Cada uno de los resultados de las observaciones del crecimiento o no crecimiento de Aspergillus flavus se representaron mediante un isobolograma, utilizando para las diferentes condiciones de pH (4,5 o 3,5) y períodos de incubación(5, 10, 15 o 30 días), las concentraciones fraccionales inhibitorias (CFI) de cada agente en la mezcla. Los CFI índices (calculados como la suma de los CFI de cada agente en la mezcla) para las combinaciones de agentes antimicrobianos evaluados después de 30 días de incubación, variaron de 0,125 (pH 4,5; 50 ppm timol y 800 ppm vainillina) a 1,764 (pH 3,5; 1600 ppm citral y 50 ppm timol). Los CFI índices mostraron comportamientos de sinergismo, aditividad o antagonismo dependiendo de los agentes y sus niveles en las diferentes mezclas, y también del tiempo de incubación. Se realizaron experimentos que permitieron el modelado matemático (probabilístico) de la interfase entre crecimiento y no-crecimiento de Aspergillus flavus bajo diferentes condiciones de actividad de agua (0,98; 0,96 o 0,94), pH (5,0; 4,0 o 3,0), temperatura de incubación (15 o 25°C) y concentración (0, 200, 400, 600, 800 o 1000 ppm) de benzoato de sodio o vainillina. Los resultados se interpretaron utilizando modelos predictivos con miras a ser utilizados en la conservación multiobjetivo de alimentos, evaluando la supervivencia del moho a los diferentes factores y prediciendo las condiciones letales y/o inhibitorias. Se observó un efecto importante del tiempo de incubación, ya que combinaciones inhibitorias del crecimiento del moho a tiempos cortos resultaron positivas (crecimiento) con tiempos de incubación más prolongados, demostrando el efecto sobre el tiempo lag de A. flavus de los factores empleados en las distintas combinaciones estudiadas. Utilizando regresión logística se obtuvo un modelo polinomial con alto porcentaje de concordancia entre los datos (>93%) además las pruebas de Hosmer y Lemeshow y de Chi-cuadrado dieron resultados significativos, lo que demuestra la bondad en el ajuste del modelo propuesto para predecir la respuesta (probabilidad de crecimiento) de Aspergillus flavus. El modelo permitió calcular la probabilidad de crecimiento del moho cuando fue inoculado en medios formulados con distintos valores de aw, pH, concentraciones de benzoato de sodio o vainillina e incubado por diferentes tiempos a distintas temperaturas. Se observó que la probabilidad de crecimiento del moho disminuyó conforme disminuyó la temperatura de incubación, el pH y la aw y conforme aumentó la concentración de los agentes antimicrobianos. La probabilidad de que el moho se desarrollara fue menor en los casos en los que el medio contenía benzoato de sodio. El modelo logístico permitió predecir la respuesta del moho bajo diferentes combinaciones de las variables si se establecía un nivel de probabilidad para que el evento (crecimiento) ocurriera. Al disminuir el valor de probabilidad los niveles de las variables empleadas en la combinación deberían ser más severos; menor temperatura de incubación, menor pH, menor aw, mayor concentración de agente antimicrobiano o menor tiempo de incubación o el uso de vainillina como antimicrobiano, para asegurar con esa probabilidad que el evento ocurriera (o con el complemento de la probabilidad que el evento no ocurriera).

Abstract:
The objective of this research was to evaluate the effects of several microbial stress factors interactions (aw, pH, chemical synthesized antimicrobials or natural antimicrobials and their mixtures) in the growth response of Aspergillus flavus and to determine those combinations and conditions that cause a synergic inhibition and permit modeling and predicting of mold response within a multitarget preservation of foods approach. The effects of several combinations of microbial stress factors such as water activity (0,99 or 0,95), pH (4,5 or 3,5) and the presence of synthetic antimicrobials (sodium benzoate, sodium bisulfite or potassium sorbate) or naturally occurring antimicrobials (vanillin, eugenol, thymol, carvacrol or citral) on Aspergillus flavus growth response were evaluated. Potato dextrose agar was adjusted with the necessary quantities of sucrose and chlorhydric acid to attain aw and pH. l00, 200, 300 up to 1,800 ppm of individual or combinations of each antimicrobial agent were incorporated to the agar. Each formulated and solidified media was inoculated with 2 μL of A. flavus spore suspension and time to growth and/or colony diameter was recorded as a function of incubation time. In those systems formulated with antimicrobial agents and where mold growth was observed, radial growth rate ranged from 0,037 (aw 0,95; pH 3,5; 500 ppm eugenol) to 0,609 mm/h (aw 0,99; pH 4,5; 100 ppm sodium benzoate). Lag time increased as antimicrobial agent concentration in the agar increased, in media containing 200 ppm thymol, aw 0.99 and pH 3.5 lag time was around 330 h (l4 days), with 300 ppm of the same phenolic compound the time to detect a visible colony was delayed around l400 h (55 days). Synthetic and natural antimicrobial minimal inhibitory concentrations to Aspergillus flavus, indicated that the use of sodium benzoate, sodium bisulfite or potassium sorbate were pH dependent, being more noticeable at aw 0,99. At aw 0,95, an interaction between 300 ppm potassium sorbate and pH 4,5 to inhibit mold growth was observed. Potassium sorbate, carvacrol and thymol were the most effective antimicrobials tested in this aw—pH combination. Using Fermi function, dose response models for each antimicrobial were obtained in each pH-aw combination. Mold growth response was expressed as the ration between the lag time with respect the lag time obtained in the control media without antimicrobial, showing typical sigmoid form of dose response curves. Important differences in Fermi function parameters (Pc y k) were observed depending the type of antimicrobial, aw and pH. The model demonstrated that natural antimicrobial concentration needed to duplicate lag time as compared with A. flavus lag time in the control a lesser pH dependence than the observed with synthetic antimicrobials. An interaction between pH, aw and antimicrobial agent concentration on mold growth response. Homeostatic Aspergillus flavus interference due to interactions of stress factors and selected levels were evaluated in order to determine synergic situations that inhibit mold growth. Several binary combinations of natural and synthetic antimicrobials were tested against mold spore in model systems. At short incubation times A. flavus was unable to grow but with longer incubation times higher antimicrobial concentration were needed to inhibit growth. Mold respond in a different way depending on pH and antimicrobial type and concentration. In many of the tested combinations no growth was observed after 5 days of incubation. Mold inoculated in media formulated with antimicrobial mixtures containing citral show a special behavior. 58% of the evaluated cases (274 of a total of 474) at pH 3,5 and in 53% (253 of 474) at pH 4,5; no growth was observed after 5 days and growth was observed after 30 days of incubation. Each growth or no growth result obtained at pH 3,5 or 4, 5 and after 5, 10, 15 or 30 days of incubation, was transformed into fractional inhibitory concentrations (FIC) and an isobologram plot was constructed for each evaluated antimicrobial mixture. FIC was calculated as the inhibitory concentration of each antimicrobial in the presence of the other divided by the individual inhibitory concentration. Isoblograms as well as FIC index show that values near to 1 represent additivity, values lower than 1 represent synergy and values higher than 1 represent antagonism. Calculated FIC index for 30 days of incubation ranged from 0,125 (pH 4,5; 50 ppm thymol and 800 ppm vanillin) to 1,764 (pH 3,5; 1600 ppm citral and 50 ppm thymol). FIC index presented synergy, additivity or antagonism depending of the antimicrobials mixed and their level in the mixture. Several experiments were carried out to mathematically model (probabilistic) Aspergillus flavus growth —no growth interface when inoculated in media formulated with selected water activity (0,98; 0,96 or 0,94), pH (5,0; 4,0 or 3,0), incubation temperature (15 or 25°C) and antimicrobial agent concentrations (0, 200, 400, 600, 800 o 1000 ppm) of sodium benzoate or vanillin. The results were interpreted using predictive equations that permit to describe and predict multi-target preservation of foods by using mold survival as a model. Incubation time has an important effect on mold inhibition, several inhibitory factor combinations inhibit mold growth for 100—200 h of incubation but with longer incubation times mold grew, demonstrating the effect of the evaluated factors on mold lag time. Using logistic regression a polynomial equation was obtained with a higher than 93% of concordance between observed and predicted data. Hosmer and Lemeshow and Chi-square tests were significant indicating the goodness of fit of the model and its adequacy to predict the probability of growth. The model permitted to calculate mold probability of growth when inoculated in media formulated with selected aw and pH values selected concentrations of sodium benzoate or vanillin and incubated at different temperatures for different times. The probability of growth diminished as incubation temperature, pH and aw decreased and as antimicrobial concentration increased. Lower probability of growth was obtained in those factor combinations that included sodium benzoate as antimicrobial than in those containing vanillin. The logistic model permitted to predict the probability of growth under several combinations and also permitted to calculate the levels of the variables in the combination if a tolerable probability level is pre-established. As the probability diminished, the levels of the variables in the combination were more severe, lower incubation temperature, lower pH, lower aw, greater antimicrobial concentration or shorter incubation time.

Fracchia, Sebastian. "Hongos saprotrofos del suelo como microorganismos auxiliares de micorrización" (2002) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La formación de micorrizas arbusculares se puede ver afectada por distintos factores bióticos y abióticos. Entre los primeros se encuentran los diferentes microorganismos del suelo que pueden tener efectos inhibitorios, neutros o positivos sobre el establecimiento y posterior desarrollo de la simbiosis. Los hongos saprótrofos del suelo que habitan en la rizósfera de plantas susceptibles, interaccionan con los hongos formadores de micorrizas arbusculares (hongos MA) en forma diversa. Existe un gran potencial en aquellas cepas de hongos saprótrofos que interactúan en forma sinérgica con la formación y desarrollo de esta simbiosis. Coínoculando cepas seleccionadas junto a los hongos MA en plantas hospedantes de interés agronómico favorecería una más rápida colonización de las raíces y una mejora en la bioprotección y nutrición del vegetal. Por otro lado la detección de cepas con efectos inhibitorios sobre la formación de la simbiosis permitiría tener un mayor control sobre la calidad del inóculo de los hongos MA. En el presente trabajo se aislaron 39 cepas de hongos saprótrofos del suelo y se enfrentaron a esporas de Gigaspora rosca. Se seleccionaron dos cepas de hongos saprótrofos, Aspergillus niger y la levadura Rhodotorula mucilaginosa, como los aislamientos más efectivos en la estimulación del desarrollo del micelio a partir de las esporas de Gi. rosea. Se obtuvieron los exudados de ambos hongos saprótrofos y se ensayó su efecto sobre distintas especies de hongos MA, distintas cepas de Gi. rosea y una mezcla de esporas de un suelo cultivado. Con el fin de estudiar la naturaleza del principio activo de ambos exudados, se ensayó la termoestabilidad de los mismos y la diálisis en membranas de distinto tamaño de poro. De acuerdo a los resultados observados, el principio activo no sería el mismo para cada hongo. Se realizó el estudio de la interacción a lo largo de todo el ciclo de vida de Gi. rosea en un sistema especial de crecimiento. El agregado de los exudados de A. niger y R. mucilaginosa produjeron una mayor cantidad de micelio desarrollado a partir de las esporas de Gi. rosea, más del doble número de ápices hifales, mayor número de apresorios sobre las raices de T. repens, mayor porcentaje de micorrización, mayor desarrollo del micelio extrarradical y finalmente una estimulación en la esporulación del hongo MA. La inoculación líquida de los hongos saprótrofos junto al inóculo de Gi. rosea, lO días previos al trasplante de las plantas de T. repens a macetas, resultó la forma más efectiva en la estimulación de la micorrización de las raíces por parte del hongo MA. Esta forma de inoculación resultó ser efectiva para distintas especies de hongos MAy distintos hospedantes de interés agronómico. La inoculación de los hongos saprótrofos en plantas previamente micorrizadas con Gi. rosca no tuvo efectos sobre los valores de micorrización observados al cabo de 9 semanas de crecimiento. El riego con los exudados de A. niger y R. mucilaginosa produjo un aumento en los niveles de micorrización de las raíces de T. repens. En la realización del ensayo del número más probable para hongos MA, se observó un aumento en el número de propágulos de Gi. rosca al inocular los hongos saprótrofos a un inóculo general de dicha cepa. Los dos hongos saprótrofos seleccionados A. niger y R. mucilaginosa pueden considerarse como microorganismos auxiliares de la formación de micorrizas arbusculares.

Abstract:
Arbuscular mycorrhizae formation can be affected by different biotic and abiotic factors. Among the bíotic factors are soil microorganisms, which can inhibit, enhance or have no effect on the stablishment and development of the symbiosis. There are many strains of saprotrophic soil fungi interacting sinergically with the symbiosis that have greate agronomical potential. Dual inoculation of this selected strains and AM fungi of economically important hosts, would favour a faster mycorrhizal formation and a better plant nutrition and bioprotection. On the other hand, the detection of strains with inhibitory effects on the formation of the AM symbiosis would allow a better control on the quality of AM inocula. In this work, 39 strains of saprotrophic soil fungi were isolated and tested against the AM fungi Gigaspora rosca. One strain of Aspergillus niger and one of the yeast Rhodotorula musilaginosa were the most effective stimulating the development of mycelium of Gi. rosea in an in vitro assay. The exhudates of these two fungi were tested in different species of AM fungi and different strains of Gi. rosca. The optimal concentration was 0,25% (VN) for both selected fungi. Dialysis of these exhudates showed that the active compound would be different for each fungus. The interaction study was performed along the whole life cycle of Gi. rosea in a specially design growth system. The addition of exhudates from A. niger and R. musilaginosa induced a higher presymbiotic mycelial growth, number of hyphal tips, entry points on T. repens roots, mycorrhizal colonization, extraradical mycelium development and a final higher sporulation of the MA fungus. Liquid inoculation of saprotrophic fungi with Gi. rosea, lO days before transplanting T. repens seedlings to pots, was the most effective inocultation way for stimulating root colonization in most of AM fungi and host combinations. Inoculation of already mycorrhized plants with saprotrophic fungi, had no effects on the mycorrhizal level observed after 9 weeks of growth. The direct application of exhudates from A. niger and R. mucilaginosa to T. repens inoculated with Gi.rosea, enhanced root colonization of this host. The most probable number assay for AM fungi, showed an increase of the number of Gi. rosea propagules when saprotrophic fungi were added to the general inoculum of the AM fiJngus. Both saprotrophic fungi can be considered as auxiliary microorganisms in the arbuscular mycorrhizal formation.

Loray, María Alicia. "Estudio y mejoramiento genético de levaduras osmotolerantes" (2002) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Entre las levaduras existen especies osmotolerantes como D. hansenii, T. delbrueckii, S. octosporus, y especies consideradas no osmotolerantes como, por ejemplo, S. cerevisiae. Algtmas levaduras osmotolerantes son utilizadas en la producción de determinados productos alimenticios mientras otras se encuentran como organismos contaminantes en varios alimentos. Sin embargo, Saccharomyces cerevisiae es la levadura empleada tradicionalmente en la industria para la producción de diversos productos. Algunos de estos bioprocesos se desarrollan en medios con alta presión osmótica y esto limita su rendimiento en los procesos mencionados. Se realizaron diversas fusiones de protoplastos entre levaduras osmotolerantes y diferentes cepas industriales de S. cerevisiae con el objeto de obtener híbridos que reúnan características de interés industrial de ambos parentales, para luego caracterizarlos principalmente en cuanto a su comportamiento en medios hiperosmóticos. Las fusiones de protoplastos realizadas entre las levaduras S. cerevisiae P-158 y Torulaspora delbrueckii CBS-813 y entre S. cerevisiae UCD-522 y Debaryomyces hansenii NRRL Y-7393, dieron como resultado productos de fusión estables que adquirieron el carácter osmotolerante. Estos productos de fusión y las cepas parentales fueron estudiados con respecto a su tolerancia osmótica y a otros aspectos fisiológicos como: morfología, asimilación y fermentación de azúcares, patrones electroforéticos de cromosomas y proteínas, cinética de crecimiento en medios de diferente osmolaridad, producción de polihidroxialcoholes y mecanismos de transporte de monosacáridos a través de la membrana plasmática. Al estudiar el efecto que tienen elevadas concentraciones de NaCl sobre el funcionamiento celular y el desarrollo del cultivo se observó: disminución de la μmax de crecimiento; disminución del rendimiento en la producción de biomasa; aumento de la síntesis y de la retención intracelular de polioles; alteración del potencial de membrana (Δψ)de las células; alteración del transporte de monosacáridos; disminución de la velocidad de consumo específico de oxígeno en presencia de glucosa; alteración de los patrones electroforéticos de proteínas totales y de membrana plasmática.

Abstract:
The most useful yeast for the industry is still being Saccharomyces cerevisiae, however this specie is not osmotolerant, and because some particular industrial processes are carried out on high osmotic environment, the yields of those processes are not as high as desired. There are some osmotolerant yeast species like Debaryomyces hansenii, Torulaspora delbrueckii, Schizosaccharomyces octosporus. Some of them are used on food manufacturing industry, but also are found as contaminant on other processes. The aim of this work was to develop yeast strains capable to being used as S. cerevisiae but also with the osmotolerant characteristic. We have carried out protoplast fusion between different industrial strains of S. cerevisiae and osmotolerant yeasts and we studied and characterized the obtained hybrids. The fusion between S. cerevisiae P-158 and T. delbruecki CBS-813, and between S. cerevisiae UCD-522 and D. hansenii NRRL Y-7393, yielded stabled hybrids which showed the desired characteristics of the parental strains. The fusion products as wells as their parental strains were studied in order to characterize their physiological behavior in high osmotic environments and also in general aspects as morphology, sugar assimilation and fermentation, proteins and chromosomal electrophoretical profiles, growth kinetics, polyhidroxyalcohols production and monosaccharides membrane transport mechanism. Studying the impact of high NaCl concentrations to the cell physiology, we observed that the maximum specific growth rate and the biomass yields decreased; the synthesis and accumulation of intracellular poliols increased; a membrane potential were modified; the monossaccharides transport were altered; the specific comsuption oxygen rate in media contained glucose decreased and that the electrophoretical profiles of total and plasmatic membranes proteins were modified.

Pieckenstain, Fernando Luis. "Control biológico de enfermedades causadas por Sclerotinia Sclerotiorum en el girasol y estudio del rol de las poliaminas en las distintas etapas del ciclo de vida de este patógeno" (2002) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Registro Cita

Castillo, Marcelo Daniel. "Prevención de la contaminación por hongos toxigénicos y sus micotoxinas en una leguminosa, Poroto (Phaseolus vulgaris L.): parámetros de almacenamiento, flora fúngica contaminante, probables micotoxinas" (2002) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Registro Cita

Lechner, Bernardo E.. "Estudio de la biodiversidad, fisiología y cultivo de las especies silvestres del género Pleurotus (Basidiomycetes, Agaricales) en la República Argentina" (2002) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En el presente trabajo se estudió el género Pleurotus (Fr.) P. Kumm. en la República Argentina. Para conocer su biodiversidad, se analizaron los caracteres macro- y micromorfológicos de colecciones obtenidas a campo y de distintos herbarios nacionales (BAFC, LPS, LIL). Se utilizaron los cruzamientos intra- e interespecíficos entre cultivos monospóricos, obtenidos a partir de las fructificaciones de los aislamientos depositados en el cepario BAFC y de basidiocarpos coleccionados, como herramienta para la correcta delimitación de especies. Se concluyó que en la Argentina hay, hasta el momento, 6 especies, una de ellas representada por tres variedades: P. albidus, P. cystidiosus, P. djamor var. djamor, P. djamor var. cyathiformis, P. djamor var. roseus, P. ostreatus, P. pulmonarius y P. rickii. Se estudió la temperatura y el medio de cultivo óptimo de 28 cepas del género. Se caracterizaron los cultivos en medio sólido mediante la reacción enzimática con ácido gálico, ác. tánico, tirosina, p-cresol y guayacol, así como la degradación de Poly R-478 y Azure B. Se hizo el estudio de cultivo con base en la metodología propuesta por Nobles y en otros medios como agar papa glucosado, agar grano y medio sintético completo. Se utilizaron las técnicas de cultivo para la obtención de basidiocarpos con tres aplicaciones: 1) permitir que las fructificaciones pudieran ser estudiadas macro y micromorfológicamente en estado fresco; 2) obtener de ellas la esporada necesaria para lograr cultivos monospóricos y 3) analizar la capacidad productiva. Se ensayaron especies nativas en distintos sustratos artificiales con el fin de verificar su potencial productivo, encontrando diferencias entre las distintas cepas y sustratos ensayados.

Abstract:
To learn about the biodiversity of the genus Pleurotus (Fr.) P. Kumm. in Argentina, macro- and micromorfological characters of collections obtained in the field and from different national herbaria (BAFC, LPS, LIL)were analysed. Intra- and interspecific pairings between monosporic cultures, obtained from the fruit bodies of strains deposited in the BAFC culture collection and of collected fruit bodies were used as tool for the correct delimitation of species. We concluded that in Argentina there are, so far, 6 species. one of them represented by three varieties: P. albidus, P. cystidiosus, P. djamor var. djamor, P. djamor var. cyathifonnis, P. djamor var. roseus, P. ostreatus, P. pulmonarius and P. rickii. Optimum temperature and culture media of 28 strains of the genus were studied. Solid cultures were characterized by the enzymatic reaction with gallic and tannic acid. tyrosine, p-cresol and guaiacol, as well as the degradation of Poly R-478 and Azure B.Cultural study was based on Nobles’ protocol as well as on media such as potato glucose agar, grain agar and synthetic complete agar. Cultivation techniques used for obtaining basidiomata had three applications: 1) allowing macro- and micromorphological study of fresh developing fruitbodies, 2) to obtain spore prints and 3) to learn about their productive capacity. Native species were tested on different artificial substrates with the purpose of verifying their productive potential, and differences between the different strains and substrates were found.

Durman, Sandra Beatriz. "Grupos de compatibilidad miceliana (MCGs) en poblaciones Bonaerenses de Sclerotinia Sclerotiorum" (2003) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este estudio se obtuvieron 142 aislamientos de Sclerotinia sclerotíorum (Lib.) DeBary en un área de 25000 km² dentro de la provincia de Buenos Aires,provenientes de cultivos de soja, lechuga y girasol. Se distinguieron 49 grupos de compatibilidad miceliana (MCGs),de los cuales 28 estaban constituidos por dos o mas aislamientos. Las diferentes poblaciones de S. sclerotíorum estaban compuestas por numerosos MCGsy compartieron un perfil de frecuencias de MCGs similar, independientemente del hospedante o del sitio. La aparición de los MCGs difirió entre los diferentes cultivos, solo se encontraron dos MCGs en común entre los tres hospedantes, y aproximadamente el 60% de los MCGs fueron exclusivos para cada uno de ellos. El índice de diversidad de Shannon para los MCGs fue de 0.314 y el 98.4% de la diversidad total correspondió a variaciones dentro de las poblaciones. Las características morfológicas no fueron significativamente diferentes entre MCGs, excepto por el crecimiento miceliano en medio sólido y en medio liquido, y por la cantidad de esclerocios producidos por caja de Petri. Sin embargo, varios de los caracteres morfológicos pudieron relacionarse con el sitio o el hospedante al cual pertenecían los aislamientos. La fecundidad no fue diferente entre los MCGs, si bien pudieron detectarse aislamientos individuales especialmente fecundos. Sobre la base del ensayo in vitro sobre peciolos de apio, no pudieron detectarse diferencias en la agresividad entre los MCGs, siendo mas agresivos los aislamientos provenientes tanto de cultivos de girasol como los recolectados en 9 de Julio y Otamendi. El viraje del colorante azul de bromofenol (BPB),provocado especialmente por la liberación de ácido oxálico, pudo correlacionarse con la cuantificación de dicho ácido por espectrofotometría. Sin embargo, con las condiciones utilizadas en este trabajo no fue posible asociar la liberación de ácido oxálico con la agresividad. Las diferencias en la capacidad para liberarlo variaron entre los MCGs, y entre los aislamientos según su sitio u hospedante de origen, independientemente del método utilizado. El estudio de diferentes medidas fitosanitarios para el control de este patógeno demostró que aunque el uso de fungicidas de la familia de los bencimidazoles puede resultar muy efectivo, existen MCGs que se ven significativamente menos afectados que otros. Otras medidas menos convencionales, tales como la solarización, el anegamiento o el control biológico, no pudieron establecer efectos diferenciales sobre los MCGs, ni sobre los aislamientos según su origen. Un último análisis utilizando las herramientas de la taxonomía numérica indicó que las variables podian agruparse, en varios casos, coincidiendo con su naturaleza, morfológica o fisiológica. Por otro lado, ese mismo analisis evidenció una interesante asociación entre aquellos MCGs mas frecuentes, indicando que estarían compartiendo varias características en común que los harían altamente exitosos al momento de verse reflejados en mayor número en las muestras. A pesar de que los analisis estadísticos detectaron diferencias significativas entre los MCGs a partir de varios de los caracteres analizados, el gran solapamiento de estas diferencias significativas ha impedido establecer grupos discretos claramente definidos a partir de estos caracteres.

Abstract:
In this study 142 isolates of Sclerotinia sclerotiorum (Lib.)DeBary were obtained in a 25000-km² area of the Buenos Aires province, collected from soybean, Lettuce and sunflower fields. Forty-nine mycelial compatibility groups (MCGs) were distinguished overall, 28 of which consisted of two or more isolates. Each of the S. sclerotiorum populations were made up by numerous MCGsand shared a similar frequency profile regardless the host or the site. The occurrence of the MCGs differed among the crops, it was only found two MCGs shared by the three hosts and approximately 60% of the MCGs were unique for each one. The Shannon diversity index for the MCGs was 0.314 and 98.4% of total diversity corresponded to variations of diversity within populations. Morphological characteristics were not significantly different among MCGs, except for the mycelial growth in solid medium and in liquid medium, and for the number of sclerotia produced by Petri plate. Anyway, some of the morphological characters could be related to the site or the host to which the isolates belonged. Fecundity it was not different among MCGs, though some especially fecund isolates could be detected. On the basis of the detached celery petiole assay, it was detected no differences in aggressiveness among MCGs,being more aggressive isolates from sunflower crops and those collected at 9 de Julio and Otamendi. Turning of bromophenol blue dye (BPB),mainly caused by oxalic acid releasing, could be correlated to the spectrophotometric quantitation. But in the present conditions it was not possible to associate oxalic acid releasing with aggressiveness. Differences in ability to release varied among MCGs,and among isolates according their site or host source, irrespective of the used method. The study of different phytosanitary measures for the control of this pathogen showed that though the use of fungicides from benzimidazol family could be very effective, some MCGs were significantly less affected than the others. Others measures, less conventional, such as solarization, flooding or biologícal control, could set neither differential effects on MCGs,nor on isolates according to their source. A last analysis made with the tools of numeric taxonomy indicated that the variables could be grouped, in many cases, in agreement with their nature, morphological or physiological. In addition to that, the same analysis made evident an interesting association among those more frequent MCGs,painting out that such MCGs could be sharing some common characteristics, that made them more successful as to be the most sampled. In spite of the significant differences detected among MCGsby the statistical analysis in many of the analyzed characters, the high overlapping of these differences has made impossible to establish discrete groups clearly defined from those characters.

Papinutti, Víctor Leandro. "Enzimas ligninolíticas en Fomes sclerodermeus" (2003) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Registro Cita

Abstract:
White rot fungi are the only organisms capable to mineralize the lignin to CO2. These fungi posses at least three enzymes impicated in the process: lignin peroxidase, manganese dependent peroxidase and laccase. The screening of 13 strains of white-rot fungi showed that F. sclerodermeus was the more efficient ligninase producer fungus and the decolorization of the polymeric dye poly R was fast. Lip activity was not detected in any of the media tested. Optimal media conditions for laccase and MnP production in synthetic liquid media were found. The Doehlert uniform factorial experimental design was applied to study the effect of MnSO4, CuSO4 and asparagine. Among the aromatic compounds evaluated in GA medium, vanillin and fenilic acid were the more efficient laccase and MnP inducers. On the other hand, in semidefined medium (YPG) aromatic compounds had not effect on any activity. Under this conditions only copper and Mn increased laccase and MnP activities, respectively. Solid state fermentation on wheat or soy bran, high laccase and MnP were produced. Neither aromatic compounds, MnSO4 nor CuSO4 increased none of the activities. The effect on known ligninolytic inducers was studied on a crystalline cellulose (CC) based medium. Cellulolytic activities decreased 3-fold when CuSO4 or MnSO4 were added to the medium. MnP activity was only detected in the media containing MnSO4 as inducer, while the laccase activity was constitutiver expressed under all the conditions tested, and it was increased to a major extent when copper was added to the medium. Wood blocks of poplar incubated during six months with F. sclerodermeus registered dry weight losses of 51%. Differential hydrolysis of the wood blocks revealed that the remaining content of cellulose and lignin were 58 y 56%, respectively. On the other hand, the hydrosolubles increased 3-fold, due to the degradation products. Observation of the wood showed the degradation of parenchyma rays and thinning of the cell walls. Growing on sawdust medium, enzyme activities were produced only with poplar, whereas on cedar laccase and MnP were inhibited. Laccase and MnP produced in YPG medium by F. sclerodcrmeus were purified to electrophoretic homogeneity and characterized biochemically. Two isoenzymes of laccase (Lac I y Lac II) and two MnP (MnP I y MnP II) were found. Isoforms of both systems showed slight differences in their isoelectric points. Laccase activity produced on wheat bran based medium revealed three bands in PAGE with differential patterns of inactivation. Among the compounds tested, the CuSO4 1,25 mM was the best stabilizer. The combination of both CuSO4 and glycerol 0,2% further increased the stability of the enzyme. Laccase activity produced in the optimized conditions was used in assays of decoloration and detoxification of the fungicide malachite green. P. chrysosporium was used as biotest, this Fungus showed a high sensitivity to the fungicide, while degradation by F. sclerodermeus laccase rendered a not toxic compound. The presence of I-HBT accelerated the detoxification. The detoxification response of other white-rot fungi was similar to that observed for P. chrysosporium.

Carmarán, Cecilia C.. "Contribución al conocimiento de la familia Diatrypaceae, biodiversidad y Taxonomía" (2003) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La familia Diatrypaceae (actualmente, orden Xylariales) incluye a los géneros Eutypella, Eutypa, Diatrype, Cryptosphaeria, Echinomyces, Leploperidia, Dothideovalsa, con ascos octosporados y a los géneros Diatrypella y Cryptovalsa con ascos poliesporados. De los géneros considerados dentro de la familia, estudiaremos en este trabajo, especies pertenecientes a 5 de ellos, siendo estos los más representativos de los géneros octosporados en la familia: Diatrype con 56 especies, Eutypa con 26 , Eutypella con 76, Cryptosphaeria con 5 y Echinomyces con 2. Los objetivos de este estudio, son: -identificar caracteres fenotípicos diagnósticos para cada jerarquía taxonómica, contribuir al conocimiento de la biodiversidad de la familia Diatrypalceae en la República Argentina, -aplicar técnicas numéricas, para elaborar una clasificación genérica e infragenérica que permita el reconocimiento de las especies o grupos taxonómicos afines, -aplicar técnicas cladísticas para analizar las relaciones filogenéticas entre las especies y/o grupos taxonómicos definidos. Se realizaron colecciones en diferentes localidades de las provincias de Jujuy, Salta, Tucumán, Misiones, Mendoza, San Juan, Tierra del Fuego, Entre Ríos, Corrientes y Buenos Aires. Como consecuencia de este trabajo se reconocen 80 entidades taxonómicas (especies y/o complejos taxonómicos), distribuidos en tres géneros: Clavipella nom. nov., Diatrype y Peroneutypa; se proponen 4 especies nuevas y 4 nuevas variedades; l nombre nuevo, l7 nuevas combinaciones y 7 nuevas primeras citas para nuestro país.

Abstract:
The family Diatrypaceae (at present, in Xylariales) includes the genera: Eutypella, Eutypa, Diatrype, Cryptosphaeria, Echinomyces, Leptoperidia, Dothideovalsa (with octosporic asci) and the genera: Diatrypella and Cryptovalsa (with polysporic asci). Among these genera, Diatrype (56 species), Eutypa (26 species), Eutypella (76 species), Cryptosphaeria (5 species) and Echinomyces (2 species) were studied, being the most representative octosporic genera of the family. The objectives of this study are: -to identify diagnostic phenotypic characters for each taxonomic hierarchy, -to contribute to the knowledge of the biodiversity of the Diatrypaceae in the Argentina Republic, -to apply numerical techniques to elaborate generic and infrageneric classifications which allow to distinguish the different species and/or taxonomic groups, -to apply cladistic techniques to analyze the phylogenetic relations among the defined species and /or taxonomic groups. The samples were collected in different localities of the following provinces: Jujuy, Salta, Tucumán, Misiones, Mendoza, San Juan, Tierra del Fuego, Entre Ríos, Corrientes and Buenos Aires. As conclusion of this work: 80 taxonomic entities were recognized (species and/or taxonomic complexes), distributed in 3 genera: Clavipella nom. nov., Diatrype and Peroneutypa; 4 new species and 4 new varieties were proposed; l new name, l7 new combinations and 7 were recorded for first time for our country.

Gentile, Agustina. "Origen, divergencia y filogenia de endofitos Neotyphodium aislados de gramíneas nativas argentinas" (2004) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los endofitos fúngicos proveen a muchas especies de gramíneas de una protección biológica frente a factores bióticos y abióticos, que incrementa su productividad. Los endofitos del tipo Neotyphodium son asexuales, sistémicos y no patogénicos, mientras que sus parientes más cercanos son especies sexuales del género Epichloë (Familia Clavicipitaceae, Orden Hypocreales) que causan una enfermedad conocida como “Choke”. Se cree que los endofitos asexuales han evolucionado directamente a partir de especies sexuales de Epichloë o por medio de hibridizaciones inter-específicas entre distintas especies de Epichloë y/o Epichloë y Neotyphodium. En el presente trabajo, reportamos el origen evolutivo de endofitos Neotyphodium aislados de diversas poblaciones de 10 pastos nativos de Argentina, y los comparamos con especies tanto sexuales como algunas asexuales de hospedantes nativos de otros continentes. Las relaciones entre los endofitos aislados de gramíneas nativas y también con especies de Epichloë fue estimada por análisis filogenéticos basados en secuencias de la porción variable (principalmente intrones) de los genes de β-tubulina (tub2) y el factor de elongación de la traducción 1- α (tef1). Fueron analizados los caracteres morfológicos de los endofitos que mostraron afinidad filogenética. Los análisis filogenéticos revelaron que la mayoría de los endofitos son híbridos interespecíficos para ambos genes, derivados de dos especies de Epichloë E. festucae y E. typhina. Varios aislamientos de distintos hospedantes resultaron cercanamente relacionados con Neotyphodium tembladerae, previamente analizado filogenéticamente a partir de una gramínea nativa, Poa hueca. Es interesante destacar que un endofito de Phleum commutatum fue aparentemente derivado a partir de un evento de doble hibridización que involucra al menos tres genotipos distintos (E. baconli, E. amarillans y E. typhina). Este endofito particular podría ser considerado una nueva entidad taxonómica. Además de los organismos híbridos, se encontraron endofitos en algunas plantas de Bromus setifolius que resultaron ser, aparentemente, no híbridos; es decir, contaron solamente con una copia de cada gen. Nuestros resultados indican que la hibridación inter-específica podría ser un mecanismo importante y común en la generación de variabilidad genética en endofitos Neotyphodium de Argentina.

Abstract:
Seed-borne fungal symbionts (endophytes) provide many cool-season grass species with biological protection from biotic and abiotic stresses together with an increase in productivity. Neotyphodium endophytes are asexual, systemic and nonpathogenic, whereas closely related sexual species of genus Epichloë (family Clavicipitaceae, order Hypocreales) cause grass choke disease. It seems that asexual endophytes have evolved directly from sexual Epichloë species or by inter-specific hybridization between different species of Epichloë and/or Epichloë and Neotyphodium. In the present work, we report on the evolutionary origins of Neotyphodium endophytes from several populations of 10 different native hosts in Argentina, and compare them with the sexual and some asexual species from hosts native to other continents. Relationships among these fungi and with Epichloë species were estimated by phylogenetic analysis based on sequences from variable portions (mainly introns) of genes for β-tubulin (tub2) and translation elongation factor 1-α(tef1). Some morphological characters of the endophytes that showed phylogenetic affinities were analyzed. Phylogenetic analysis revealed that most of the endophytes were inter-specific hybrids from two different species of Epichlo: E. festucae and E. typhina. Several isolates from different hosts were closely related to Neotyphodium tembladerae, previously described from the Argentinian grass, Poa huecu. It worth noting that an endophyte of Phleum commutatum was apparently derived from two hybridization events involving three different genotypes. This particular endophyte could be considered a distinct taxonomic entity. In addition to the apparent hybrids, we found likely non-hybrid endophytes in some plants of the grass Bromus setifolius. Our results indicate that inter-specific hybridization may be a common and important mechanism for genetic variation in Neotyphodium endophytes from Argentina.

Patriarca, Andrea. "Factores que influyen en la coproducción de aflatoxinas y ácido ciclopiazónico en maní por aspergillus sección flavi" (2004) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se estudió la distribución de cepas de Aspergillus sección Flavi en 57 muestras de maní provenientes de la zona núcleo manisera de la provincia de Córdoba, Argentina. Se encontraron cepas de A. flavus y/o A. parasiticus en el 74% de las muestras analizadas. A. nomius, una especie relativamente poco frecuente en la naturaleza, no fue aislada de ninguna muestra. En base a estos resultados, se puede afirmar que las cepas de A.flavus y A. parasiticus están ampliamente distribuidas en la zona manisera de la provincia de Córdoba. Se evaluó la capacidad toxicogénica de las cepas aisladas de maní y se encontró que el 89% de las cepas de A. parasiticus eran aflatoxigénicas, y que el 76% de las cepas de A. flavus producían aflatoxinas y el 90% eran productoras de ácido ciclopiazónico (CPA), mientras que el 69% de las mismas eran productoras simultáneamente de ambas micotoxínas. Además se hallaron cinco cepas de A. flavus con características atípicas, productoras de aflatoxinas del grupo B y G en conjunción con CPA. Estudios a nivel molecular están siendo llevados a cabo por otros autores a fin de determinar si se trata de una nueva especie. Este trabajo es el primer informe de la presencia de estas cepas en cultivos de nuestro país. Se desarrolló un método analítico para la determinación de CPA en maní con adecuados atributos de desempeño analítico (recuperación 95%; RSDr variable entre 5,1% y 9,8% según el nivel de contaminación en el rango de 100 a 500 μg/kg; límite de detección 45 μg/kg). Se investigó la co-ocurrencia natural de aflatoxinas y CPA en maní en 50 muestras provenientes de la provincia de Córdoba. La co-ocurrencia de ambas micotoxinas fue hallada en 2 de las muestras. Si bien la proporción de muestras contaminadas fue relativamente baja, los niveles de contaminación fueron elevados (hasta 1250 μg/kg de aflatoxinas totales y 4300 μg/kg de CPA). Este es el primer informe de co-ocurrencia de aflatoxinas y ácido ciclopiazónico en maní cultivado en nuestro pais. Se estudió la influencia de la actividad de agua (aw), la temperatura y el tiempo sobre la co-producción de dos micotoxinas importantes en relación a la contaminación potencial del maní: las aflatoxinas y el ácido ciclopiazónico (CPA), ambas producidas por A.flavus. Se observó que la cantidad producida de ambas toxinas fue determinada por la compleja interacción de aw, temperatura y tiempo de incubación. El mayor nivel de CPA se produjo a aw0,94 y 25°C luego de 28 días de incubación, en tanto que aw0,86 puede ser considerada limitante para la producción de esta toxina en maní. La producción de ambas toxinas mostró una respuesta diferente a las condiciones estudiadas. Las condiciones de máxima acumulación de ambas micotoxinas es opuesta, es decir, en las condiciones óptimas para la producción de CPA, la acumulación de AFB1 es poco significativa y viceversa. La capacidad de responder de manera diferente a factores ambientales en relación a la biosíntesis de metabolitos secundarios tóxicos puede ayudar a la supervivencia del hongo en un nicho ecológico particular, permitiéndole colonizar el sustrato más eficientemente que otros competidores.

Abstract:
The distribution of Aspergillus section Flavi strains in 57 peanut samples from the peanut-growing area in the province of Córdoba, Argentina, was studied. Strains of A. flavus and/or A. parasiticus have been isolated in 74% of analyzed samples. A. nomius, a species relatively infrequent in nature, was not isolated. According to these results, it can be stated that A.flavus and A. parasiticus are widely distributed in the peanut-growing area of Córdoba. Mycotoxin potential of the strains was evaluated and it was found that 89% of A. parasiticus strains were aflatoxigenic, and that 76% of A. flavus strains produced aflatoxins and 90% were cyclopiazonic acid (CPA) producers, while 90% simultaneously produced both toxins. Additionally, five A.flavus strains with atypical characteristics, producing group B and G aflatoxins in conjunction with CPA, were found. Molecular studies are being carried out by other authors to establish if these strains belong to a new species. This is the first report of the presence of these strains in crops in our country. An analytical method was developed for determination of CPA in peanut, with adequate analytical performance (recovery 95%; RSDr variable from 5,1% and 9,8% according to contamination level in the range of 100-500 µg/kg; detection limit 45 µs/kg) The natural co-occurrence of aflatoxins and CPA in peanut was investigated in 50 samples from the province of Córdoba. The co-occurrence of both mycotoxins was found in 2 samples. Although the proportion of contaminated simples was relatively low, contamination levels were high (until 1250 µg/kg of total aflatoxins and 4300 µg/kg of CPA). This is the first report of co-occurrence of aflatoxins and cyclopiazonic acid in peanut cultivated in our country. The influence of water activity (aw),temperature and time on the co-production of two important mycotoxins related to potential peanut contamination was studied: aflatoxins and cyclopiazonic acid (CPA), both produced by A.flavus. It was observed that the quantity of both toxins produced was determined by the complex interaction between aw, temperature and incubation time. The highest level of CPA was produced at aw 0.94 and 25°C alter 28 days of incubation, while aw 0.86 can be considered limitant for the production of this toxin on peanut. The production of both toxins showed a different response to the studied conditions. Maximum accumulation conditions for both mycotoxins are opposite. At optimal conditions for CPA production, AFBl accumulation is less than significant and vice versa. The ability to respond in a different way to environmental factors in relation to the biosynthesis of toxic secondary metabolites may aid survival of the fungus in a particular ecologica] niche allowing it to colonize the substrate more efficiently than other competitors.

Rodríguez, María Alejandra. "Hongos del suelo antagonistas de Sclerotinia Sclerotiorum : selección y estudio de potenciales agentes de biocontrol" (2004) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los objetivos fundamentales de este trabajo fueron analizar las comunidades fúngicas de suelos supresivos y no supresivos frente a S. Sclerotiorum, seleccionar cepas antagonistas de dicho patógeno, estudiar y caracterizar los mecanismos involucrados y establecer el potencial de las dichas cepas como agentes de biocontrol. Se efectuó el estudio de la comunidad de hongos filamentosos provenientes de la rizósfera de soja y de lechuga. Se realizó el análisis de las comunidades fúngicas de suelos supresivos y no supresivos en función de las especies fúngicas presentes, determinóndose por un lado la composición fúngica de las mismas y por otro el comportamiento de las cepas integrantes de dicha comunidad,frente al patógeno, es decir caracterizando los suelos de acuerdo a la actividad y dominancia de las especies presentes. Se establecieron por un lado diferencias entre hospedantes dadas por el efecto rizosférico y por otro diferencias entre suelos supresivos y no supresivos. En particular, en suelos de soja, se determinó que la fungistasis del suelo respondió a una mayor proporción de antagonistas entre las especies dominantes por un lado y por otro los mecanismos involucrados en el antagonismo. Partiendo de las diferencias entre suelos supresivos y no supresivos de soja, se seleccionaron aquellas cepas dominantes y que fueron determinantes en la caracterización de la propiedad supresiva de los suelos. Estas cepas se emplearon en ensayos posteriores. Se estudió la relación del patógeno con hongos formadores de micorrizas arbusculares en estadios presimbióticos mediante ensayos in vitro, así como el efecto de la micorrización en la protección frente a S. sclerotiorum en plantas de soja en ensayos de invernáculo. Debido a la ausencia de biocontrol estas cepas no fueron consideradas en ensayos posteriores. Las cepas hongos saprótrofos seleccionadas fueron evaluadas mediante diversos ensayos in vitro y en invernáculo. Se determinó el potencial biocontrolador frente a S. sclerotiorum así como los principales mecanismos involucrados en el antagonismo. Se caracterizó e identificó los metabolitos responsables de la actividad antifúngica.

Abstract:
The fundamental objectives of this work were to analyze the fungal communities of suppressive and non-suppressive soils for S. sclerotiorum, to select antagonistic fungal strains of this pathogen, to study and characterizes the mechanisms involved and to establish the potential of these fungal strains as agents for biocontrol. Studies on the community of filamentous fungus coming from the rhizosfere of soybean and lettuce were carried out. Analysis of fungal communities from suppressive and non-suppressive soils of the fungal species present was also done, imiting on one hand their fungal composition and in the other hand the role of the integrating strains of this communities in the presence of the pathogen, thereby, characterizing soils taking into account the activity and dominance of the present species. Differences were established on one hand between hosts given by the effect of the rhizosfere and on the other between suppressive soil and non-suppressive soil. In particular in the soybean soil, it was established that the fungistasis of the soil responded to a mayor proportion of the antagonists because of the dominant species and the mechanisms involved in the antagonism. The dominant and responsible strains for the suppressive characteristics of soils were selected taking into account the differences between suppressive and non-suppressive soybean soils. These selected strains were used in later assays. The relationship between the fungal pathogen and the AM fungi was studied. In vitro assays were used to understand the effect of the pathogen on the different steps of the presimbiotic development. The effect of the micorrization in the protection against S. scsclerotiorum in soybean plants was developed in greenhouse. The selected saprophytic fungal strains were evaluated by different in vitro and greenhouse assays, determining the biocontrol potential against S. scclerotiorum and the principal mechanism involved in the antagonism. The metabolites responsible of the antifungal activity were characterized and identified.

Pildain, María Belén. "Caracterización fenotípica y molecular de Aspergillus sección Flavi. Estudio de la genética poblacional y capacidad toxigénica de Aspergillus flavus en maní" (2006) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Aspergillus flavus es uno de los principales productores de aflatoxinas, carcinógeno de grado 1. La Argentina es un país agrícola donde el cultivo de maní (Arachis hypogaea) es uno de los más rentables, pero también uno de los más susceptibles de ser atacados por Aspergillus. El origen del maní cultivado proviene de Argentina y Bolivia, donde se encuentran distribuidas las especies nativas del género y sobre las cuales no existen estudios sobre los hongos productores de micotoxinas asociados. Por primera vez se realizó un relevamiento de especies nativas de Arachis y se aislaron Aspergillus de la sección Flavi, comparando la diversidad fúngica de las especies nativas y cultivadas. Se estudió la estructura poblacional de A. flavus de semillas de maní en base a la técnica de compatibilidad vegetativa, potencial toxigénico y producción de esclerocios de tipo S o L. Se llevó a cabo una revisión de la sección Flavi utilizando características morfológicas, filogenia molecular y perfil de producción de extrolitos. Los resultaron mostraron que existen diferencias en la proporción y especies de la sección Flavi asociados a las especies de Arachis. Mas del 90% de A. flavus produjeron aflatoxinas y cerca del 100%, ácido ciclopiazónico. Las cepas S produjeron aflatoxinas tipo B y G. El porcentaje de las cepas L es mas alto que el de las cepas S. La presencia de un alto numero de VCGs con un solo aislamiento y el bajo número de grupos de compatibilidad vegetativa que incluyeron aislamientos de diferentes zonas agroecológicas demostraron la alta diversidad poblacional de A. flavus en nuestro país. Cepas tipo L y S de A. flavus actúan de diferente manera, presentan diferencias morfológicas, perfil de producción de extrolitos y quedan agrupadas en diferentes clados. Las especies nativas de Arachis podrían actuar como reservorios de Aspergillus sección Flavi. El alto potencial toxigénico de las especies de Aspergillus y la alta diversidad genética de A. flavus son factores importantes cuando se debe elegir y formular medidas de control a aplicar en el campo. La heterogeneidad en las poblaciones derivadas de las semillas de maní sugiere que las poblaciones de A. flavus se encuentran bajo continuos cambios temporales y espaciales. La sección Flavi se caracteriza por la superposición de caracteres entre los miembros del grupo por lo cual el estudio taxonómico requiere de la utilización de diferentes disciplinas. Del análisis filogenético se concluye que la habilidad de producir aflatoxinas fue perdida (o ganada) varias veces en la evolución de los integrantes de la sección. Se describen 2 nuevas especies.

Abstract:
Aspergillus flavus is one of the principal producers of aflatoxins, a class 1 carcinogen. Argentina is an agricultural country where peanut (Arachis hypogaea) is one of the best profitable but also one of the most susceptible to be attacked for Aspergillus. The origin of the cultivated peanut was in Argentina and Bolivia and until now does not exist studies of micotoxin producers fungi associated with the natural native species of Arachis. For the first time Aspergillus section Flavi strains were isolated from native species of Arachis and a comparison of the fungal diversity between native and cultivated peanut was made. The population structure of A. flavus from stored peanut seeds was studied by using vegetative compatibility toxigenic potential and L and S sclerotial production. A taxonomic revision of the section Flavi was made, by using morphologic characteristics, molecular phylogeny and extrolite production. The result shows differences in the proportion of section Flavi species associated with Arachis species. More than 90% of the A. flavus isolates were aflatoxin producers and almost 100% of them produce cyclopiazonic acid. The S strain produces aflatoxins type B and G. The percentage of the L strain is higher than S strain. Genetic diversity of A. flavus in Argentina is elevated and was indicated by the presence of many single-isolate vegetative compatibility groups as well as by the lower number of vegetative compatibility groups that have members of different agroecological zones. S and L strains acts different, they present different morphological characteristics, extrolite production and are in different clades. The native species of Arachis could act as reservoirs of Aspergillus section Flavi. The elevated toxigenic potential of the Aspergillus species strains isolated and the high diversity stabilized for A. flavus are important factors for the application and development of control measures in the field. The heterogeneity in the populations derived from peanut seeds at diverse locations in Argentina suggests that A. flavus populations have undergone spatial and temporal changes. The Section Flavi is characterized by the superposition of characteristics between their members, for this reason the taxonomic study requires the use of of different disciplines. The phylogenetic study shows that the ability of aflatoxin production was lost (or gained) several times during evolution. Two new species were described.

Barrera, Viviana Andrea. "El género Hypocrea Fr. (Hypocreales, Ascomycota) en la Argentina. Estudio de la variabilidad molecular de su estado anamórfico Trichoderma" (2012) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En la presente tesis se informan los resultados de un estudio polifásico integral del género Hypocrea/Trichoderma de Argentina. El estudio se encaró desde varios puntos de vista: biodiversidad, morfología, filogenia, incluyendo el análisis de la variabilidad de cepas biocontroladoras de T. harzianum. Para mostrar los resultados de forma ordenada se ha organizado el texto en dos capítulos. El Capítulo I trata sobre la identificación de ejemplares coleccionados y depositados en herbarios nacionales e internacionales. En el Capítulo II se analiza una colección de cepas bicontroladoras nativas de T. harzianum para reconocer caracteres útiles para su aplicación en el campo del control biológico. Como consecuencia de este estudio se identificaron 38 especies de las cuales se incorporan 4 especies nuevas para la ciencia, 2 especies que se citan por primera vez para Sudamérica, 17 especies que se citan por primera vez para la Argentina y por primera vez se cita la relación teleomorfo-anamorfo para T. longibrachiatum. Se caracterizaron 25 cepas nativas biocontroladoras de T. harzianum, se observaron diferencias en cuanto a sus requerimientos nutricionales y alta similitud entre sus caracteres genéticos. Se encontraron 291 marcadores moleculares polimórficos de RAPD de los cuales 15 fueron específicos para 5 cepas y 58 marcadores moleculares polimórficos de UP-PCR de los cuales 5 resultaron específicos para una cepa.

Abstract:
In this thesis we report the results of a comprehensive multi-phase study of the genus Hypocrea/Trichoderma in Argentina. The study was faced from several points of view: biodiversity, morphology and phylogeny, including analysis of the variability of biocontrol strains of T. harzianum. To display the results in an orderly way, the text is organized into two chapters. Chapter I deals with the identification of specimens collected and deposited in national and international herbaria. Chapter II discusses a collection of native biocontrol T. harzianum strains to recognize characters useful for application in the field of biological control. As a result of this study 38 species were identified of which are incorporated 4 new species to science. Two species are recorded for the first time for South America, 17 species recorded for the first time for Argentina and for the first time cited the teleomorph-anamorph relationship to T. longibrachiatum. Twenty five native biocontrol T. harzianum strains were characterized, showing differences in their nutritional requirements and high genetic similarity between their characters. We found 291 polymorphic RAPD molecular markers of which 15 were specific for 5 strains and 58 polymorphic molecular markers of UP-PCR of which 5 were specific for one strain.

Bertinetti, Brenda Verónica. "Búsqueda de agroquímicos naturales con potencial uso en agricultura sustentable a partir de cultivos de hongos" (2012-05-11) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En esta tesis se detalla el aislamiento y la elucidación estructural de productos naturales a partir de cultivos de hongos, realizado mediante una búsqueda bioguiada utilizando ensayos de actividad antifúngica y antibiótica. También se describe la preparación y el estudio de la actividad en invernadero frente a hongos patógenos de soja, de una familia de compuestos derivados de un producto natural proveniente de un cultivo fúngico. Además, se presenta el estudio del comportamiento de esa familia de compuestos por espectrometría de masa, y el análisis de la presencia de determinados metabolitos de extractos fúngicos por HPLC-EM. Se trabajó con las especies fúngicas Penicillium canescens, Gliocladium catenulatum y Fusarium oxysporum. La especie Penicillium canescens se aisló de polen de colmenas ubicadas en el apiario del INTA (Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria) de la ciudad de Balcarce, Buenos Aires, Argentina. Las especies Gliocladium catenulatum y Fusarium oxysporum se aislaron de suelo de plantaciones de lechuga en Las Heras (Provincia de Buenos Aires). A partir de P. canescens se aislaron decetopiperazinas, pseurotina A y un tetrapéptido que no había sido descripto con anterioridad. Algunas de las dicetopiperazinas fueron responsables de la actividad antibiótica y el péptido fue responsable de la actividad antifúngica frente a Fusarium virguliforme. De G. catenulatum se aisló un nuevo metabolito 1H, 1ˈH-biindol junto con dos epipolitiodioxopiperazinas que habían sido aisladas previamente de una cepa marina de Gliocladium. Además, el compuesto 1H, 1ˈH-biindol se preparó mediante un camino sintético y mostró una actividad notable como antiparasitario frente a T. cruzi. De los compuestos indólicos sintéticos ensayados en experimentos de actividad en invernadero se obtuvieron muy buenos resultados con dos análogos que disminuyen la incidencia y la severidad del síndrome de muerte súbita en soja, comparado con un control. En los extractos de F. oxysporum se determinó la presencia de diversas ciclosporinas, además de tres depsipéptidos cíclicos, dos conocidos y uno no informado con anterioridad.

Abstract:
This PhD thesis details the isolation and structural characterization of natural products from fungi. The isolation was performed looking for antifungal and antibiotic compounds by bioguided assays. The preparation of a group of compounds related to a natural one isolated from a fungal strain and their activity against soybean fungi pathogens in greenhouse experiments are also described. In addition many compounds from the mentioned family were studied by high resolution mass spectrometry, and chemical diversity from fungal extracts was analyzed by HPLC-MS. The strains studied are Penicillium canescens, Gliocladium catenulatum and Fusarium oxysporum. Penicillium canescens strain was isolated from beehives pollen from INTA apiary in Balcarce, Buenos Aires, Argentina. Gliocladium catenulatum and Fusarium oxysporum strains were acquired from lettuce fields soil in Las Heras, Buenos Aires. Diketopiperazines, pseurotin A and a tetrapeptide were isolated from P. canescens. The tetrapeptide was unknown until now. Some diketopiperazines found were responsible for the antibiotic activity showed by the extract and the tetrapeptide showed antifungal activity against Fusarium virguliforme. G. catenulatum culture yielded a new metabolite 1H, 1ˈH-biindole and two epipolitiodioxopiperazines that have been isolated before from a marine strain of Gliocladium. Compound 1H, 1ˈH-biindole was prepared synthetically and showed interesting activity as antiparasitic against T. cruzi. Good results were obtained from greenhouse experiments with two indolic synthetic analogues which diminish incidence and severity of sudden death syndrome in soybean compared to a control compound. Several cyclosporines were found in F. oxysporum extracts apart from three cyclic depsipeptides, two already known and a new one.

Capdet, Mariana. "Biodiversidad de Ascomycetes sexuales y asexuales xilófilos sobre palmeras nativas en la República Argentina" (2012-12-21) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se realizó un estudio sobre la diversidad de especies de ascomicetes sobre tres palmeras nativas: Butia yatay (Mart.) Becc., Euterpe edulis Mart. y Syagrus romanzoffiana (Cham.) Glassman en los Parques Nacionales Iguazú en la provincia de Misiones y el Parque Nacional El Palmar en la provincia de Entre Ríos. Este estudio se planteó por la necesidad de conocer la diversidad de ascomicetes frente a la pérdida de la biodiversidad aún en áreas protegidas. Por lo tanto los objetivos principales de este trabajo fueron: - identificar, describir e ilustrar las especies fúngicas (en estado teleomórfico o anamórfico) halladas sobre los sustratos elegidos; - estudiar la presencia de ascomicetes sobre las diferentes partes de la palmera en descomposición y sobre folíolos verdes sólo se estudió al género Coccostromopsis; - comparar cualitativamente la diversidad hallada en las dos regiones una con clima subtropical y la otra con clima templado; - comparar cualitativamente la composición de especies fúngicas con las comunidades encontradas sobre palmeras de otras partes del mundo. Durante el año y medio de muestreo se observaron 921 muestras de las cuales se identificaron 96 especies de ascomicetes, siendo 32 de ellos anamorfos, 55 teleomorfos y 6 holomorfos. Se proponen 5 especies nuevas y 57 nuevas citas para el país. El sitio y la palmera de mayor biodiversidad fue el Parque Nacional Iguazú y Euterpe edulis. Palabras claves: ascomicetes, taxonomía, biodiversidad, palmeras nativas, Misiones, Entre Ríos.

Abstract:
A study on the diversity of species of ascomycetes on three native palms: Butia yatay (Mart.) Becc., Euterpe edulis Mart. and Syagrus romanzoffiana (Cham.) Glassman in Iguazú National Parks in the province of Misiones and the National Park El Palmar in the province of Entre Ríos was carried out. This study was set by the need to understand the diversity of ascomycetes against the loss of biodiversity even in protected areas. Therefore the main objectives of this study were: - to identify, describe and illustrate the fungal species (in teleomorph or anamorphic) found on the selected substrates chosen, - to study the presence of ascomycetes on the different decaying parts of the palm tree and green leaves only genus Coccostromopsis was studied, - to compare qualitatively the diversity found in the two regions with each other subtropical and temperate climate, - to compare qualitatively the composition of fungal species found on the palms of communities elsewhere. During the samplings, 921 collections were observed. From them, 96 species of ascomycetes were identified, 32 of which are amorphous, 55 teleomorphs and 6 holomorphic. Five species are proposed and 57 species are first recorded from the country. Iguazú National Park and Euterpe edulis were the most biodiverse site and palm. Keywords: ascomycetes, taxonomy, biodiversity, native palms, Misiones, Entre Ríos.

Melito, Viviana Alicia. "Aminolevúlico dehidrasa del hongo dimórfico Mucor rouxii" (2013) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La 5-Aminolevúlico dehidrasa (ALA-D), segunda enzima de la biosíntesis del hemo, es una metaloenzima que cataliza la condensación de dos moléculas de ácido 5- aminolevúlico (ALA) para formar el único monopirrol natural, el Porfobilinógeno (PBG). El ALA-D en general no es la enzima limitante de la síntesis de hemo. En la mayoría de los organismos estudiados su actividad es muy superior a la necesaria para la formación de la cantidad requerida de hemo, con la excepción de Neurospora crassa y levadura, organismos en los cuales se le ha asignado un rol regulatorio. Es una enzima altamente conservada, aún entre organismos filogenéticamente muy distantes. Sin embargo, existen diferencias en cuanto al requerimiento por metales que cumplen un papel fundamental en la catálisis y estado de oligomerización de la proteína. La enzima de mamíferos y aves, levadura y algunas bacterias requieren Zn++. Por el contrario, la enzima de plantas y algunas bacterias requiere Mg++ en lugar de Zn++; mientras que en Rp. spheroides el requerimiento por el metal puede sustituirse por K+. Se ha propuesto que en E. coli, P. sativum y B. japonicum están presentes ambos cationes, en diferentes proporciones. Los hongos dimórficos son un grupo de organismos capaces de crecer como levadura o micelio en respuesta a las condiciones de crecimiento; según sean estas modificaciones pueden inducir, además, la transición morfológica de levadura a micelio o viceversa. Esta propiedad, los hace interesantes para investigar los mecanismos bioquímicos y moleculares que operan durante la diferenciación celular. En el hongo dimórfico Mucor rouxii existen evidencias de que el ALA -D también cumpliría un papel regulatorio en la biosíntesis del hemo y que esta enzima, a través de la mitocondriogénesis participaría en la transición morfogénica de levadura a micelio. En primer lugar se determinaron las condiciones óptimas para la extracción de la proteína y medición de la actividad enzimática de ambas formas, se encontró que ésta se duplica al pasar del estado fermentativo al del micelio aeróbico. Empleando diferentes técnicas para la purificación de proteínas, como diversas columnas de geles de afinidad, hidrofóbicos, iónicos y sulfosustituídos, se purificó la enzima de ambas formas obteniéndose preparaciones enriquecidas alrededor de 700 y 500 veces para micelio y levadura respectivamente. En ambos casos, el peso molecular fue de 280.000 Da, coincidiendo con el determinado para el ALA-D proveniente de otras fuentes. Tanto las propiedades de estabilidad térmica como cinéticas, también resultaron similares para ambas formas morfogénicas del hongo, comportándose en ambos casos como una enzima con cinética michaeliana y valores de Km comparables. Del estudio del efecto de cationes divalentes sobre la actividad enzimática se encontró que en la enzima de Mucor rouxii, el metal involucrado es el Zn++. Se postula la existencia de diferentes sitios de interacción del Zn++, un sitio A, en el cual el metal se encuentra fuertemente unido, un sitio B, en el que el catión se puede eliminar por diálisis y reemplazarlo parcialmente por otros cationes y sitios C, donde el Zn++ actuaría cuando la enzima se encuentre en un medio no reductor, en cuyo caso, los grupos sulfhidrilos oxidados provocarían la pérdida de la actividad catalítica, en tal situación, este catión sería capaz de restablecer las condiciones reductoras. Se estudió además la conocida inhibición de la actividad del ALA-D por el Pb++. Se demostró que este metal se puede unir a todos los sitios en los que se une el Zn++, produciendo una significativa inhibición. Se sabe que los átomos de Zn++ se unen a la proteína a través de una secuencia altamente conservada, rica en cisteínas e histidinas. Empleándose diversos agentes bloqueantes de grupos SH se comprobó la participación de residuos cisteína que son esenciales para la actividad enzimática y/o unión del metal; su titulación indicó la existencia de 5 grupos SH por subunidad, de los cuales 1 no se encuentra expuesto. La inhibición por DEP reveló la presencia de 2 grupos histidina por subunidad catalítica, uno de ellos es esencial para la catálisis. Cuando se modificaron algunos parámetros de las condiciones de crecimiento, se encontró que en ambas formas del Mucor rouxii el camino metabólico del hemo es funcional y se puede inducir por el agregado de concentraciones de ALA 10Exp-5–10Exp-3 M en el medio de cultivo. La captación de ALA, acumulación de precursores y porfirinas y la actividad de ALAD fue significativamente mayor para micelio que para levadura. El crecimiento en condiciones aeróbicas para el micelio requiere de un mayor contenido de hemoproteínas, fundamentalmente citocromos. Esta demanda se satisface por medio del funcionamiento más activo del camino biosintético de las porfirinas en micelio que en levadura. Así, los niveles de actividad del ALA-D en levadura fueron inferiores a los del micelio. Se demostró, además, su capacidad para regular la concentración de ALA acumulado intracelularmente. Durante la transformación dimórfica inducida mediante aireación del cultivo de levadura se observó la existencia de un camino biosintético del hemo eficientemente regulado. Por lo tanto si bien la inducción de la morfogénesis desde levadura a micelio estimuló la biosíntesis de porfirinas, lo que se puso en evidencia por el aumento de actividad del ALA-D durante la misma, no se encontró acumulación significativa ni de precursores ni de porfirinas. Los resultados obtenidos permiten asignar un rol regulatorio para el ALA-D en levadura del hongo dimórfico Mucor rouxii.

Abstract:
5-Aminolevulinic Acid Dehydratase (ALA-D) is a metal enzyme, the second in the haem biosynthetic pathway, which catalices the condensation of two molecules of 5- Aminolevulinic Acid (ALA) to yield the monopyrrol Porphobilinogen. In general, ALA-D is not the regulating enzyme in haem biosynthesis. In most organisms, its activity is high in accordance with the cells needs of haem, excepting in Neurospora crassa and yeasts, where a regulatory role has been assigned. It is an enzyme highly preserved. However there exist differences about its requirements for metals, which play a key role in both the catalysis and oligomeritation of ALA-D. In mammals, birds, fowls, yeasts and some bacteria, the enzyme requires Zn++. . Instead, the ALA-D from plants and some bacteria requires Mg++ and not Zn++., while in Rp. spheroides, the metal can be replaced for K+. It has been indicated that in E. coli, P. salivum and B. japonicum, can be present both cations, in different proportions. The dimorphic fungus are a group of organisms, which depending on the growing conditions, are able of developing both as yeasts and mycelium. Manipulation of such conditions can induce the morphological transition from yeasts to mycelium and vice versa. In the dimorphic fungus Mucor rouxii, there is evidence that the ALA-D would play a regulatory role in haem biosynthesis and that it also would participate in the morphogenic transition from yeasts to mycelium. The optimum conditions for extracting the protein and measuring enzymic activity, from both forms were determined, it was found that activity is doubled when passing from the fermentative state to the aerobical mycelium form. Using several affinity chromatography columns, hydrophobics, ionics and sulpho substituted, the enzyme from yeasts and mycelium was purified 500 and 700 times, respectively. The molecular weight was also 280,000 Da for both forms. Thermal stability and kinetics was again similar for yeasts and mycelium, showing a michaelianan kinetics and comparable Km values. The action of divalent cations on the enzymic activity showed that in Mucor rouxii, the metal involved is Zn++. The existence of different interaction sites for Zn++, has been proposed, an A site, where Zn++.is tightly attached, a B site where the metal can be removed by dialysis and be partially replaced for other cations and a C site, where Zn++ would function when the enzyme is found in a non reducing media, in this case, the oxidized sulphydril groups would diminish the catalytic activity, in such a situation, Zn++ could restore the reducing conditions. It is well known the strong inhibition of ALA-D by Pb++. It was demonstrated, that this metal can be attached to all Zn++ sites, significantly reducing the enzyme activity. The Zn++ atoms, bind to the protein trough a sequence highly preserved, rich in cysteins and histidines. Using several blockers of SH groups the participation of cystein residues essentials for activity and/or metal binding was shown, by tritation 5 SH residues per subunit were measured, one of them not exposed. Inhibition by DEP revealed the presence of 2 histidines per subunit, only one of them necessary for catalysis. Some parameters of growing conditions were modified, showing, that in both forms of Mucor rouxii, the haem pathway is functional and it can even be induced by adding ALA 10Exp-5 - 10Exp-3 M to the culture medium. Incorporation of ALA, accumulation of precursors and porphyrins and ALA-D activity was significantly higher in mycelium than in yeasts, in concordance with a haem synthesis necessarily greater in the former. The levels of ALA-D activity in yeasts were then lower than in mycelium. It was demonstrated the capacity of yeasts to regulate the concentration of ALA intracellularly accumulated. Along the dimorphic transition induced through aereation of yeasts cultures, it was observed that this process stimulates porphyrin biosynthesis, shown by an increase in the activity of mycelium ALA-D, although accumulation of neither precursors nor porphyrins was detected. These findings allow us to assign a regulatory role for the yeasts ALA-D of Mucor rouxii.

Kuhar, José Francisco. "Cultivo de Ganoderma lucidum (Curtis) P. Karst. y evaluación de su aplicación a la biorremediación" (2013-03-20) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Ganoderma lucidum (Curtis) P. Karst es un hongo causante de pudrición blanca y por consiguiente es capaz de degradar la lignina de la madera y otros sustratos sobre los que crece. Se evaluó su capacidad de producir las enzimas ligninolíticas Lacasa, Manganeso peroxidasa y lignin peroxidasa, encontrándose que sólo la lacasa se produce con una actividad apreciable. Se evaluó la inducción con metales pesados y compuestos fenólicos y se determinó que entre las sustancias ensayadas, el cobre y el ácido ferúlico son los mejores inductores de la lacasa. Se evaluaron fuentes de carbono y nitrógeno a fines de proponer un medio consistente en glucosa, peptona, extracto de levadura, cobre ya ácido ferúlico óptimo para la producción de esta enzima y a través de diseños factoriales se obtuvieron optimizaron las concentraciones de los mismos. Se encontró además que los dos tipos de inductores (fenólicos y metálicos) producen distintos patrones electroforéticos de actividad lacasa. Se optimizó la producción de cuerpos fructíferos en medios basados en aserrín de pino y álamo con y sin chips de esas maderas, concluyendo que la mayor bioconversión (peso seco de fructificaciones / peso seco de sustrato) se encuentra sobre aserrín de álamo con chips. Se evaluaron los componentes de los sustratos nuevos y gastados así como también los de la fructificación para caracterizar la bioconversión y se cuantificaron las actividades enzimáticas ligninolíticas e hidrolíticas. Se estudió la degradación de colorantes industriales por medios líquidos y sólidos y se evaluó el efecto de los mediadores de oxidorreducción HBT y ABTS. Se encontró que los compuestos fenólicos vainilloides producen un efecto protector sobre el micelio contra distintos xenobióticos por vías distintas de la inducción enzimática y se concluyó que el mecanismo consiste en la alteración de la matriz extracelular del micelio incrementando su capacidad para retener los tóxicos.

Abstract:
Ganoderma lucidum (Curtis) P. Karst is a white rot fungus and therefore is able to degrade the lignin of wood and other substrates on which it grows. The ability to produce the ligninolytic enzymes laccase, lignin peroxidase and manganese peroxidase were assessed. It was found that only laccase occurs with appreciable activity. Induction with heavy metals and phenolic compounds was evaluated and it was found that among the tested substances, copper and ferulic acid are the best inductors of laccase. Carbon and nitrogen sources were evaluated and an optimal medium consisting of glucose, peptone, yeast extract, ferulic acid and copper was proposed for production of this enzyme. Optimized concentrations were obtained through a factorial design. It was also found that the two types of inductors (phenolic and metallic) produce different electrophoretical patterns of laccase activity. Production of fruit bodies in media based on poplar pine sawdust with and without wood chips of those species were optimized. We concluded that the most efficient bioconversion (dry weight of fruit bodies / dry weight of substrate) is achieved on poplar sawdust with wood chips. Chemical composition of fresh and wasted substrates as well as of fruit bodies were analyzed to characterize the bioconversion. Hydrolytic and ligninolytic enzyme activities were quantified. Degradation of industrial dyes for liquid and solid media were studied and the effect of redox mediators HBT and ABTS was evaluated. It was found that the vanilloid phenolic compounds exert a protective effect on the mycelium against various xenobiotics by pathways which are different from that of enzyme induction and it was concluded that the mechanism involves the alteration of the extracellular matrix of mycelium by increasing its ability to retain toxic substances.

Scambato, Agustina Azul. "Influencia de la simbiosis con micorrizas arbusculares y rizobios sobre el crecimiento y la tolerancia a estrès salino en especies forestales de Prosopis" (2013-05-02) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Prosopis es un género de plantas pertenecientes a la familia Fabaceae, adaptada a ambientes de escasa fertilidad. Como otras especies de leguminosas, las especies de este género pueden establecer simbiosis con bacterias fijadoras de nitrógeno y hongos formadores de micorrizas arbusculares. En esta tesis se estudiaron las variaciones entre diversas especies de interés forestal del género Prosopis respecto de su respuesta a condiciones salinas extremas y de los mecanismos que intervienen en dicho proceso. Por otro lado se pone a prueba la hipótesis de que las plántulas de P. alba y P. hassleri mejoran su tolerancia a la salinidad cuando se encuentran asociadas simbióticamente a un hongo MA. Más aún, que dicha respuesta difiere dependiendo de la especie de MA a la que estén asociadas. También se aislaron bacterias capaces de formar nódulos en las seis especies de Prosopis, las cuales fueron caracterizadas genéticamente y evaluadas respecto de su tolerancia a concentraciones de 200 mM de NaCl. Como un objetivo secundario de este trabajo se describieron las variaciones morfológicas entre las diferentes especies de Prosopis estudiadas, respecto del nódulo que desarrollan. Finalmente, se evaluó si la asociación simbiótica con micorrizas arbusculares incrementa la fijación de nitrógeno en especies de Prosopis bajo condiciones control y de estrés salino. Palabras claves: Prosopis spp., estrés salino, hongos micorrícicos arbusculares, bacterias fijadoras de nitrógeno.

Abstract:
Prosopis is a genus of woody legume species (family Fabaceae) adapted to soils with low fertility. Like most legumes, these species establish symbiosis with nitrogen-fixing bacteria and arbuscular mycorrhizal fungi. In this thesis, variations between different tree species of the genus Prosopis were studied regarding their response to extreme saline conditions and mechanisms involved in this process. On the other hand, the hypothesis that seedlings of P. alba and P. hassleri improve their salt tolerance when they are symbiotically associated AM fungi has been tested. Furthermore, it has been shown that such a response differs depending on the inoculated AM fungal isolate. Also, bacteria capable of forming nodules in the six species of Prosopis, were genetically characterized and evaluated for their tolerance to concentrations of 200 mM NaCl. As a secondary objective of this paper, the morphological variations of nodules between different species of Prosopis was described. Finally, we assessed whether the symbiotic association with arbuscular mycorrhizae increases nitrogen fixation in Prosopis species under control and salt stress. Key words: Prosopis spp., salt stress, tolerance, arbuscular mycorrhizal fungi, nitrogen fixing bacteria.

Robles, Carolina Analía. "Biodeterioro fúngico de madera en el arbolado urbano : prospección, histopatología y control biológico en plátanos (Platanus acerifolia)" (2014-03-26) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Este trabajo tuvo como objetivo caracterizar el biodeterioro de madera de Platanus acerifolia de la Ciudad de Buenos Aires, en relación con los agentes etiológicos, los endófitos fúngicos y las variables ambientales. Se muestrearon árboles asintomáticos y sintomáticos en 4 sitios de muestreo. Se obtuvieron 27 especies de endofitos, 5 correspondientes a basidiomicetes. Tres especies de basidiomicetes fueron obtenidas de árboles sintomáticos. Las identificaciones fueron realizadas por métodos morfológicos y moleculares. Phanerochaete chrysosporium y Nodulisporium (Xylariales) presentaron los mayores valores de degradación in vitro y de producción de oxidasas. Los análisis multivariados sugieren que la biodiversidad de endofitos está altamente influenciada por el disturbio antrópico. Se encontró una asociación positiva entre la edad de los árboles y la riqueza de endofitos y entre la presencia de basidiomicetes endofíticos y patógenos en cada sitio. La confrontación en cultivos duales entre xilófagos y micromicetes, indican que Trichoderma harzianum y el endofito Granulobasidium vellereum presentan la mayor capacidad antagonista. Las observaciones en microscopia óptica y electrónica de los patrones de deterioro indican que Bjerkandera adusta e Inonotus rickii causan una pudrición blanca. B. adusta degrada más extensamente que I. rickii, con un patrón de degradación simultanea. I. rickii produjo un patrón de delignificación selectiva. Los resultados indican que existen hongos colonizando madera sana que poseen el potencial de degradarla, apoyando la hipótesis de la “infección latente”.

Abstract:
The aim of this study was to characterize the wood biodeterioration of Platanus acerifolia of Buenos Aires City, related to the causal agents, the fungal endophytes and the environmental variables. Asymptomatic and symptomatic trees were sampled in 4 sites of the city. A total of 27 endophytic taxa were obtained, 5 of them corresponding to Basidiomycetes. Three species of Basidiomycetes were obtained from symptomatic trees. Morphological and molecular identifications were performed. Phanerochaete chrysosporium and Nodulisporium (Xylariales) produced the highest degradation levels and oxidases production in vitro. Multivariate analyses suggest that the endophytes biodiversity is highly influenced by the level of anthropogenic disturbance. A positive relationship was found between tree age and endophyte richness and between the presence of endophytic and pathogenic Basidiomycetes in a same site. Confrontation assays in dual cultures between wood decay fungi and micromycetes, indicate that Trichoderma harzianum and the endophyte Granulobasidium vellereum showed the greatest antagonistic capacity. Analyses under optic and electronic microscopy indicate that Bjerkandera adusta and Inonotus rickii caused a white-rot pattern in London plane wood. B. adusta caused more biodeterioration than I. rickii and a simultaneous decay of wood. I. rickii, on the other hand, produced a selective delignification on wood. The results indicate that there are fungi colonizing healthy wood that have the capacity to cause wood rotting. This results support the “latent infection” hypothesis.

Fernández Di Pardo, Agustina. "Contaminación en suelos de la provincia de Buenos Aires con el herbicida organofosforado (glifosato) : impacto sobre la comunidad de hongos filamentosos" (2014-03-31) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El herbicida más utilizado en Argentina es el N-phosphonomethylglycine (nombre comercial: Glifosato). Éste puede ser rápida y completamente degradado por los microorganismos, por lo que el tiempo de vida en el suelo es bajo. Sin embargo, el comportamiento del glifosato puede variar en función de las características físicas y químicas del suelo sobre el que se aplique. Por lo tanto, el tiempo de permanencia en el suelo podría ser mayor. Es importante estudiar el comportamiento de este herbicida dada las potenciales alteraciones que puede provocar en las comunidades de microorganismos que viven en el suelo y en algunos de sus procesos. La contaminación de los suelos no sólo está afectando su biodiversidad microbiana sino también a su fertilidad, dado que los microorganismos son fundamentales para el proceso de reciclaje de nutrientes. En este trabajo, se compararon comunidades de hongos filamentosos provenientes de suelos con y sin historia de aplicación de glifosato y se evaluó la capacidad de los hongos filamentosos en la recuperación de suelos contaminados por el herbicida glifosato. Para ello, se aislaron y caracterizaron hongos filamentosos del suelo en dos sitios con distinta historia de aplicación de glifosato utilizando dos técnicas distintas (método tradicional de lavado de muestras múltiples y siembra de partículas de suelo y el método de pirosecuenciación). Se seleccionaron cepas tolerantes a glifosato, se estudiaron los efectos del glifosato sobre los hongos luego de una aplicación puntual y se evaluó la presencia de glifosato en el suelo. Se observó que las poblaciones fúngicas del suelo varían en su composición específica y en su biomasa en suelos expuestos a glifosato en comparación con suelos sin exposición. La mayor riqueza específica y los mayores valores de ergosterol, como medida indirecta de biomasa, se obtuvieron en suelos sin historia de prácticas agrícolas. Se lograron obtener cepas tolerantes al glifosato: T. harzianum; F. oxysporum; P. lilacinus; C. didymum. Finalmente, los valores de concentración de glifosato en suelos fueron bajos y prácticamente nulos luego de 3 meses de la aplicación en la mayoría de los casos.

Abstract:
The most widely used herbicide in Argentina in de N-phosphonomethylglycine (glyphosate). Because it can be rapidly and completely degraded by microorganisms, it disappears quickly from soil. However, the destiny of glyphosate in soil may vary depending on the physical and chemical soil characteristics. It is important to study the behavior of this herbicide given the potential changes that may produce in the communities of microorganisms and in the processes that involves them. The soil contamination with this herbicide no only affects the microbial biodiversity, but also its fertility, considering that microorganisms are a fundamental part of the nutrient recycling process in soil. In this study, changes in filamentous fungi communities’ from soils that were previously or not exposed to the herbicide and the capacity of some strains of remediating contaminated soils were evaluated. Soil fungi were isolated and communities were characterizes in two sites with different history of exposure to glyphosate, using two techniques: traditional isolation method (morphological) and pyrosequencing (molecular). Tolerant strains of fungi were selected; effects of recent glyphosate application on soils fungal communities was evaluated and remnant glyphosate in soil was quantified. In conclusion, soil fungal community changes and fungal biomass reduction were observed after glyphosate application. Six tolerant strains were obtained: T. harzianum; F. oxysporum; P. lilacinus; C. didymum. The concentration of glyphosate in soil was practically zero after 3 month from application.

Arrieta, Alejandro Matías. "Los endofitos fúngicos como inductores de cambios en la rizósfera de gramíneas nativas" (2014-06-23) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Las especies asexuales del género Epichloë Tul (Clavicipictaceae, Hypocreales, Ascomycota) establecen simbiosis mutualista con diferentes especies de gramíneas (C3) muchas de ellas de interés agronómico. El objetivo de esta tesis fue evaluar el efecto de las simbiosis entre gramíneas nativas y endofitos asexuales Epichloë sobre la diversidad fúngica de la rizósfera. Se postuló que la simbiosis Bromus auleticus – Epichloë pampeana modificaría la estructura de la comunidad del suelo debido a que los endofitos producen metabolitos en el interior de la planta los cuales son excretados por el sistema radical. Para poner a prueba la hipótesis, se realizó un ensayo en vivero con diversos tiempos de muestreo en el cual se evaluaron diferentes parámetros. Semillas de B. auleticus asociadas (E+) o no asociadas (E-) a E. pampeana fueron sembradas en macetas con dos tipos de suelo (Agronómico y No Agronómico). Se evaluó el efecto de la interacción gramínea-endofito y del uso agronómico del suelo mediante identificación por análisis macro y micromorfológico, metagenómico y cultivo en medios selectivos. La presencia de E. pampeana en las plantas de B. auleticus se asoció con un aumento de la diversidad de hongos saprobios de la rizósfera, un aumento del porcentaje de micorrización, y sumado a esto, un incremento de la diversidad de los hongos micorrícicos en suelos No Agronómico. También se evidenció un incremento de especies micorrícicas con mayor capacidad para movilizar fósforo (P), en asociación a plantas E+ en comparación a las E-, en muestras de suelo Agronómico. No se detectó un efecto significativo del estatus endofítico ni de los suelos sobre la cantidad de hongos solubilizadores de P, pero si se observó un efecto sobre su diversidad atribuible a la introducción de B. auleticus. En cuanto a su rol defensivo frente a especies parásitas y/o potenciales patógenos, no se observaron deferencias entre los diferentes tratamientos en cuanto al porcentaje de colonización de las raíces por Chytridiomycetes, pero si se detectó un aumento en el porcentaje de mortalidad de plantas E- de B. auleticus en comparación a las E+. Los resultados obtenidos en ésta tesis ponen en evidencia el efecto de los endofitos asexuales Epichloë en el entorno en el que se desarrolla su hospedante, lo cual señala la relevancia de este modelo para el estudio no sólo de la simbiosis planta-endofito sino también de múltiples interacciones, con el valor agregado de ser B. auleticus una gramínea nativa de interés agronómico.

Abstract:
Asexual species of the genus Epichloë Tul (Clavicipitaceae, Hypocreales, Ascomycota) establish mutualistic symbiosis with different species of C3 grasses, many of them of agronomic interest. The aim of this work was to evaluate the effect of the symbiosis established between native grasses and asexual Epichloë endophytes on the fungal diversity of the rhizosphere. It was postulated that the symbiosis Bromus auleticus – Epichloë pampeana could modify the structure of the soil community as endophytes produce metabolites within the plant which are excreted by the root system. To test this hypothesis, a greenhouse assay was conducted in with different sampling times, in which different parameters were evaluated. Seeds of B. auleticus associated (E+) or not (E-) with E. pampeana were sown in pots with two different soil types (Agricultural and Non- Agricultural). The effect of the interaction grass - endophyte and the agronomical management of soil was evaluated through identification by clasical taxonomic techniques, high-throughput analysis and cultivation on selective media. The presence of E. pampeana in plants of B. auleticus was associated with an increase in the diversity of saprobe fungi in the rhizosphere, in the percentage of mycorrhizal colonization, and also, in the diversity of mycorrhizal fungi in Non Agricultural soil. In addition, an increase was evidenced on mycorrhizal species with a greater capacity to mobilize phosphorus (P) in E+ plants in comparison to E-, in Agricultural soil samples. However, it was not detected a significant effect of the association nor the soils used over the P solubilizing fungi amount. But it did was observed an increase in its diversity, attributable to the introduction of B. auleticus. Regarding the defensive role against parasitic species and/or potential pathogens, although no significant differences on the percentage of root colonization by Chytridiomycetes were found between the different treatments, it was detected a significant increase in the mortality percentage of B. auleticus E- plants of compared to E +. The results obtained in this thesis highlight the effect of Epichloë asexual endophytes in the environment where the host develops , which indicates the relevance of this model for the study not only of the symbiosis established between plant-endophytes but also for multiple interactions, combined with the agronomic interest B. auleticus a native grass.

Carabajal, Maira Lía. "Degradación de compuestos fenólicos por el hongo causante de pudrición blanca Trametes versicolor" (2014-06-27) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los hongos causantes de pudrición blanca, producen enzimas lignolíticas, inespecíficas y altamente oxidativas, con capacidad para degradar distintos contaminantes. Los compuestos fenólicos son un grupo de moléculas orgánicas cuyo uso masivo industrial condujo a la contaminación de ecosistemas acuáticos y terrestres, resultando en su clasificación como contaminantes prioritarios. En el presente trabajo se realizó un relevamiento de cepas nativas de hongos de pudrición blanca en búsqueda de microorganismos capaces de ser empleados en la degradación y detoxificación de fenoles y derivados. Como resultado de dicho relevamiento se seleccionó a Trametes versicolor BAFC 2234 por su capacidad para degradar distintos compuestos fenólicos (fenol, ácido gálico, 2,6 dimetoxifenol y guayacol) y por su habilidad para utilizar el fenol como única fuente de carbono. Se analizó el secretoma de T. versicolor creciendo en medio de cultivo natural jugo de tomate suplementado con cobre y manganeso empleando el enfoque proteómico. Se identificó un número considerable de las proteínas relacionadas con la degradación de la biomasa lignocelulósica y entre éstas, hidrolasas, peroxidasas y oxidasas fueron las enzimas más abundantes. Se purificaron diversas enzimas lignolíticas: una polifenol oxidasa (lacasa), tres Mn-peroxidasas y una versatil peroxidasa. Esta última enzima no había sido purificada previamente en esta especie. Se detectó también por primera vez presencia de peroxidasa decolorante de tintes en T. versicolor. Cultivos de T. versicolor removieron eficientemente fenol y nitrofenol, pudieron también decolorar el tinte Azure B y el licor negro, residuo proveniente de la producción de papel. T. versicolor removió el 71, 62, 74 y 73% del fenol 15 mM adicionado en tres ciclos repetidos en un periodo de 23 días, inmovilizado en esponja vegetal (Luffa aegyptiaca). El hongo inmovilizado removió el 97% del 4- nitrofenol (1 mM) luego de 3 días. Esta cepa además disminuyó la fitotoxicidad de las respectivas muestras tratadas. Se investigó la transformación del fenol por acción de sus enzimas purificadas lacasa y Mn-peroxidasa; y la del 2-, 3- y 4-nitrofenol adicionalmente por la enzima versatil peroxidasa. El hongo produjo lacasa como principal enzima lignolítica, pero esta enzima purificada no fue capaz de degradar el nitrofenol. Mn-peroxidasa y versatil peroxidasa degradaron 2- y 4-nitrofenol in vitro en porcentajes cercanos al 50%. La lacasa de T. versicolor removió 84% del fenol en 4 hs, mientras que un 43% fue removido por la Mn-peroxidasa. Tanto el estudio del secretoma de esta cepa como los ensayos de degradación in vivo e in vitro llevados a cabo, aportan información valiosa sobre el potencial empleo de esta cepa de T. versicolor en la biorremediación de efluentes industriales.

Abstract:
White-rot fungi produce highly oxidative ligninolytic enzymes, nonspecific, with the ability to degrade different pollutants. Phenolic compounds are a group of organic molecules which led to massive industrial pollution of aquatic and terrestrial ecosystems, and as a consequence they are classified as priority pollutants. In this research a selection of Argentinean white-rot fungi was screened for their ability to tolerate and degrade phenolic compounds, searching for organisms capable of being employed in the degradation and detoxification of phenols and derivatives. As a result of this survey was selected Trametes versicolor BAFC 2234 because of its capacity to degrade different phenolic compounds (phenol, gallic acid, 2,6 dimethoxyphenol and guaiacol) and its ability to use phenol as sole carbon source. The secretome of T. versicolor growing in tomato juice, a natural culture medium, supplemented with copper and manganese was analyzed using the proteomic approach. A considerable number of the identified proteins were related to the degradation/modification of lignocelluloses. Hydrolases, peroxidases and phenoloxidases were the most abundant enzymes produced under the above-mentioned culture conditions. Various ligninmodifying oxidoreductases were successfully purified: one polyphenol oxidase (laccase), three manganese peroxidases (MnP) and one versatile peroxidase (VP), the latter for the first time from T. versicolor. The native VP protein has a molecular mass of 45 kDa and an isoelectric point of pH 3.7. Dye decolorizing peroxidases, a just recently discovered group of heme peroxidases, were also found to be secreted by T. versicolor for the first time. The study clearly showed that complex plant-based media being rich in phenolics, such as tomato juice, can stimulate the secretion of a broad set of extracellular lignocellulolytic enzymes. Using such natural products as fungal culture media may give the opportunity to investigate plant biomass decomposition as well as the biodegradation of organic pollutants in an environment close to nature. Cultures of T. versicolor efficiently removed phenol and nitrophenol, they could also discolor the dye Azure B and black liquor, a residue from paper production. T. versicolor immobilized on a natural sponge-like material from Luffa aegyptiaca, removed between 62% and 74% of phenol (15 mM) in three repeated cycles (fed-batch) over a period of 23 days. The immobilized fungus removed 97% of 4-nitrophenol (1 mM) after 3 days. This strain also reduced phytotoxicity of the respective treated samples. Phenol conversion by the action of the purified laccase and MnP was investigated, additionally 2- , 3- and 4-nitrophenol transformation was evaluated by the action of VP. Laccase was the main oxidative enzyme activity measured during the cultivation, and the isolated enzyme oxidized in vitro 84% of phenol (0.5 mM) within 4 h, while 43% was converted by a purified MnP of this strain. After fungal treatment, phenol phytotoxicity decreased noticeably. The purified laccase was not able to degrade nitrophenol, but MnP and VP degraded around 50% of 2- and 4-nitrophenol in vitro. The concentrations of phenol removed by T. versicolor are among the highest reported so far, thus, the investigated strain may have good prospects for application in industrial wastewater treatment. For the evaluation of the degradative potential of a fungus and its lignin-modifying system, the characterization of the secretome has proven to be a useful tool, additionally the in vivo and in vitro degradation studies performed during this research, provide valuable information about the potential use of T. versicolor in bioremediation of industrial effluents.

Español, Esteban. "Endofitos de Blepharocalyx salicifolius: diversidad y factores que modulan el ensamble de las comunidades fúngicas" (2014-10-17) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se conoce como endofítos fúngicos a los hongos que viven asociados a los distintos tejidos de las plantas. Estos organismos no ocasionan síntomas aparentes de infección y, en esta asociación, se reconoce o sospecha una relación mutualista entre sus integrantes. Un modelo interesante desde el punto de vista ecológico y aplicado son los endofítos No-Clavicipitaceos (tipo III). Estos son transmitidos horizontalmente y colonizan casi todos los linajes de plantas, comprendiendo una enorme riqueza específica. En este marco, este trabajo tuvo como objetivo el estudio de la diversidad de endófitos fúngicos tipo III en diferentes poblaciones de Blepharocalyx salicifolius (planta nativa) analizando la diversidad de la comunidad endofítica foliar y el posible impacto de diferentes factores sobre el ensamble. Por otro lado se llevaron a cabo diferentes análisis a fin de establecer si los endofítos fúngicos provienen de inóculos que circulan a través del corredor biológico, manteniendo el flujo genético entre las comunidades y, que la filiación de estas poblaciones puede ser detectada por el estudio poblacional mediante métodos moleculares. Se seleccionaron cuatro áreas, asociadas con el corredor biológico del Rio Paraná-Río de la Plata. Se estudiaron las comunidades fúngicas endofíticas foliares mediante: aislamiento de cepas y su posterior cultivo e identificación por métodos de análisis macro, micro morfológicos y a través de una aproximación multigénica. Se describen un total de 18 especies, solo 2 de ellas no habían sido previamente descriptas sobre este hospedante y una tercera constituye una nueva especie para la ciencia. El análisis de la composición de las distintas comunidades a través de sus índices de riqueza y diversidad, permitió reconocer que sitio con menor disturbio antropogénico presentaban mayor riqueza de organismos endófitos. Entre las cepas obtenidas, se seleccionó aquellas pertenecientes al género Colletotrichum como indicador, para el estudio de la influencia del corredor biológico sobre el ensamblaje de la comunidad fúngica, por ser el que presentó más cepas en común entre los sitios asociados al corredor. Los resultados indican la presencia de distintas especies de Colletotrichum asociadas a los diferentes sitios estudiados. Entre las conclusiones más relevantes de este trabajo se destaca que las comunidades fúngicas foliares de B. salicifolius poseen una importante riqueza de endófitos foliares que varía entre 5 y 13 especies, que los corredores biológicos no parecen tener una influencia clave en el ensamblaje de la comunidad y que el disturbio antropogénico podría ser un factor adicional a los ya considerados, modulando la comunidad endofítica foliar. Por lo expuesto, este estudio aporta datos que permiten entender alguno de los factores que determinan cómo se establecen las comunidades fúngicas en la naturaleza.

Abstract:
Fungal endophytes are associated with different living plant tissues. They do not present any external manifestation of their presence, and do not cause apparent symptoms of infection. This association is recognized as or suspected to be a mutualistic relationship between its members. From the ecological and applied point of view the Non-Clavicipitaceous (TypeIII) endophytes are an interesting model. They are transmitted horizontally and colonize almost all lineages of plants, comprising huge species richness. For these reasons, this study aimed to study the diversity of fungal endophytes type III on a native plant (Blepharocalyx salicifolius) analyzing the diversity of foliar endophytic community and the potential impact of different factors on the assembly. various analyzes was conducted to determine whether the fungal endophytes come from inoculums that flow through the biological corridor, maintaining a gene flow between populations, and that the relation of these populations can be detected by molecular methods. Four areas were selected related to the biological corridor of the Rio Paraná-Río de la Plata. Endophytic fungal foliar communities were studied by: isolation of strains and subsequent cultivation and identification methods of macro and micro analysis morphological and through a multigenic approximation. A total of 18 species are described, only 2 of them had been previously described on this host and one of them is a new species to science. The analysis of the composition of different communities allowed us to recognize, through richness and diversity indices, that sites with less anthropogenic disturbance had higher richness of endophytic organisms. Among the isolated organisms, the genus Colletotrichum was selected as a indicator, in order to study the influence of the biological corridor on fungal community assemblages, because this genus was one of the most common between the sites associated with the corridor. The results indicate that the presence of different species of Colletotrichum is associated with the different sites studied. The overall analysis of the results indicate that foliar endophytic fungal communities of B. salicifolius show significant richness of foliar endophytes that varies between 5 and 13 species, that biological corridors do not seem to have a key influence on the assemblage of the endophytic community and that anthropogenic disturbance could be an additional factor to those already considered, and that could modulates the foliar endophytic community. This study provides information that allows us to understand some of the factors that determine how fungal communities are established in nature.

Mc Cargo, Patricia Débora. "Evolución y diversidad de endofitos Epichloë de la forrajera nativa Bromus auleticus" (2015-03-30) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Bromus auleticus Trin. es una gramínea forrajera nativa que establece asociaciones simbióticas con al menos dos especies de hongos endofitos del género Epichloë Tul. & C. Tul (E. tembladerae y E. pampeana). Por ser especies asexuales, se considera que se transmiten exclusivamente en forma vertical a la siguiente generación del hospedante. Estos hongos pueden conferir ventajas adaptativas a sus hospedantes, como resistencia a stress y a herbivoría debido a la producción de alcaloides tóxicos para insectos, como las lolinas y peraminas, o para el ganado, como el indol-diterpeno lolitrem B y alcaloides del ergot. Esta tesis se centra en el estudio de 3 aspectos principales de esta asociación: i) la diversidad de endofitos abordada mediante análisis morfológicos y filogenéticos de secuencias de genes nucleares, complementados con la caracterización del perfil toxicogénico potencial mediante la detección por PCR de genes involucrados en la síntesis de alcaloides, ii) la distribución geográfica de los linajes identificados y iii) la posible existencia de eventos de transmisión horizontal a través de una aproximación filogenética así como mediante la implementación de técnicas de inoculación de endofitos en ejemplares libres de ellos. Se aislaron y caracterizaron los endofitos de B. auleticus y otros hospedantes simpátricos de más de 50 localidades, abarcando el área de distribución de B. auleticus. Los caracteres morfológicos y las reconstrucciones filogenéticas de los genes calM (calmodulina) e idtG (lolitrem B) permitieron identificar al menos 5 linajes de endofitos presentes en B. auleticus. La genotipificación del perfil potencial de alcaloides de los distintos endofitos apoyó la existencia de estos linajes. El análisis de la distribución de los linajes endofíticos, basado en su relación con variables bioclimáticas, permitió establecer las áreas geográficas donde cada uno es preponderante. Estas zonas resultaron mayormente disyuntas e influenciadas principalmente por variables relacionadas con las precipitaciones. Para poner a prueba la hipótesis de transmisión horizontal de endofitos entre diferentes plantas hospedantes de la misma y distintas especies, se evaluaron tres técnicas de inoculación de endofitos de B. auleticus y Poa lanigera (hospedantes simpátricos) en plantas de B. auleticus. Sólo se obtuvieron resultados positivos al inocular con E. tembladerae en meristema de plántulas. Además, los análisis de los endofitos aislados de hospedantes simpátricos apoyarían también la existencia de transmisión horizontal en Epichloë tembladerae ya que no pudieron diferenciarse mediante las filogenias ni otros marcadores utilizados. Sin embargo, aún deberían evaluarse mecanismos de dispersión alternativos en condiciones naturales. Los resultados obtenidos indican la existencia de una gran diversidad de endofitos con diferentes capacidades toxicogénicas potenciales, que deben ser considerados como una herramienta determinante en el mejoramiento agronómico de Bromus auleticus.

Abstract:
Bromus auleticus Trin. is a native forage grass that establishes symbiotic associations with at least two species of endophytic fungi of the genus Epichloë Tul. & C. Tul (E. tembladerae and E. pampeana). As asexual species, they are considered to be solely vertically transmitted to the next generation of the host plant. These fungi can confer adaptive advantages to their hosts, such as the production of alkaloids which can be toxic to insects, such as lolines and peramine , or toxic to livestock, such as indole diterpene (lolitrem B) and ergot alkaloids.. This thesis is focused on the study of 3 main aspects of this association: i) the diversity of endophytes addressed by morphological and phylogenetic analyses of nuclear gene sequences, complemented by the characterization of the potencial chemotypic profile by PCR detection of genes involved in the synthesis of alkaloids, ii) the geographical distribution of the identified lineages and iii) the possible existence of horizontal transmission events through a phylogenetic approach and through the implementation of techniques for the inoculation of endophytes to uninfected plants. The endophytes from B. auleticus and other sympatric hosts from more than 50 localities, in the distribution area of B. auleticus were isolated and characterized. The morphological characters and phylogenetic analyses of calM (calmodulin) and idtG (lolitrem B) genes allowed the identification of at least 5 endophyte lineages asocciated to B. auleticus. Genotyping of the different endophytes' potential alkaloid profiles supported the existence of these lineages. The distribution analysis of the endophytic lineages, based on their relationship with bioclimatic variables, let us identify the geographic areas where each is predominant. These areas were mostly disjunct and mainly influenced by variables related to precipitation. To test the hypothesis of horizontal transmission of endophytes between different host plants of the same and different species, three techniques of inoculation of endophytes from B. auleticus and Poa lanigera (sympatric hosts) in plants of B. auleticus were evaluated. Positive results were obtained only when plants were inoculated with E. tembladerae into seedling’s meristem. Furthermore, the analyses of endophytes isolated from sympatric hosts also supported the existence of horizontal transmission for Epichloë tembladerae as they could not be differentiated by filogenies nor by the other markers. However, alternative mechanisms of dispersion in natural conditions should still be evaluated. Results indicate the existence of a great diversity of endophytes with different potential toxigenic capabilities, which should be considered as a decisive tool in the agronomic improvement of Bromus auleticus.

Rothen, Carolina Paola. "Hongos endofitos septados en raíces de Glycine max: diversidad, caracterización y estudio de la interacción" (2015-08-14) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los hongos endofitos septados oscuros (DSE) han sido encontrados colonizando asintomáticamente las raíces de las plantas, entre las que se encuentra Glycine max, una oleaginosa de gran importancia económica. Aunque se caracterizan por su abundancia en diversos hábitats, poco se sabe sobre sus efectos en el hospedante. Dos aspectos sobre los que mostrarían mayor influencia son la nutrición vegetal y la respuesta de la planta frente a condiciones de estrés biótico y abiótico. Este trabajo se centra en cinco objetivos principales: i) Aislar cepas autóctonas de hongos DSE a partir de plantas de Glycine max, ii) Identificar dichas cepas utilizando caracteres morfológicos y moleculares, iii) Establecer la diversidad de las comunidades de estos endofitos asociadas a Glycine max en campos agrícolas con diferente historia de manejo, iv) Caracterizar los aislamientos en cuanto a la capacidad de solubilizar fósforo y producir enzimas hidrolíticas y promotores del crecimiento y, v) Evaluar los efectos en la planta hospedante, particularmente considerando el empleo y facilitación de diferentes fuentes nitrogenadas. Se obtuvieron 168 cultivos de hongos y 47 de ellos fueron clasificados como hongos dematiáceos. Fueron identificados 18 especies y 7 morfotipos, de los cuales, sólo 9 aislamientos fueron considerados dentro de la categoría de “endofitos estrictos” y pertenecieron a las especies: Alternaria alternata, Alternaría arborescens, Paraphoma radicina, Coniothyrium cerealis, Cladosporium sp., Humicola fuscoatra y a tres formas no identificadas, estériles. En cuanto a la diversidad de las comunidades, los dos suelos fueron igualmente diversos, sin embargo al comparar las distintas etapas fenológicas muestreadas, las comunidades pertenecientes al segundo muestreo, etapa R3, fueron menos diversas y equitativas, predominando Alternaria alternata y Paraphoma radicina, las únicas dos especies compartidas por las comunidades en estudio, lo que determinó una similitud baja entre ellas. Se encontró una relación entre las capacidades enzimáticas y el comportamiento en la planta hospedante, donde los endofitos estrictos fueron los que menos actividades enzimáticas presentaron. La producción de AIA fueron variables dentro de las categorías, y no fueron capaces de solubilizar fósforo inorgánico. En los ensayos de facilitación y translocación de N, uno de los endofitos, Cladosporium sphaerospermum, favoreció el crecimiento de plantas de Glycine max. Los mismos resultados fueron obtenidos en condiciones de invernadero, además cuando las plantas fueron co-inoculadas con bacterias fijadoras de nitrógeno, desarrollaron mayor cantidad de nódulos. Este hongo también promovió el crecimiento de Triticum aestivum. Estos resultados positivos se dieron particularmente en condiciones donde el nitrógeno no se encontraba asimilable Los resultados obtenidos indican que los hongos DSE comprenden un diverso grupo, entre los que se encuentran algunos endofitos capaces de favorecer el crecimiento de la planta hospedante, particularmente en ciertas condiciones y en especial, en relación con el uso del Nitrógeno PALABRAS CLAVES: endofitos septados oscuros, raíz, Glycine max , Triticum aestivum, Nitrógeno.

Abstract:
Dark septate endophytes (DSE) were are found asymptomatically colonizing the roots of plants, among which is Glycine max, an oil crop of great economic importance. Although they are characterized by its abundance in different habitats, little is known about its effects on the host. Two aspects that would show greater influence are plant nutrition and plant response against biotic and abiotic stresses. The objetives of this work were: i) to isolate native DSE fungal strains from Glycine max plants, ii) to identify these strains using morphological and molecular characters iii) to stablish the diversity of the communities of these endophytes associated with Glycine max in agricultural fields with different management history, iv) to characterize the isolates in terms of the ability to solubilize phosphorus and produce hydrolytic enzymes and growth promoters and v) to assess the effects on the host plant, particularly considering employment and facilitating different nitrogen sources. An total of 168 fungal isolates were obtained and 47 of them were classified as dematiaceous. 18 specied and 7 morphotypes were identified, of which only 9 isolates were considered within the category of "strictly endophytes" and belonged to the species: Alternaria alternata, Alternaria arborescens, Paraphoma radicina, Coniothyrium cerealis, Cladosporium sphaerospermum, Humicola fuscoatra and three unidentified forms, sterile. Regarding the diversity of the communities, the two soils studied were equally diverse, however when comparing the different phenological stages sampled, communities belonging to the second stage (R3) were less diverse and equitable. The only two species shared by both communities at stage R3 were Alternaria and Paraphoma radicine. A link between the enzymatic capabilities and behavior in the host plant, where strict endophytes were least had found enzymatic activities. AIA production were variable within categories, and were not able to solubilize inorganic phosphorus. In trials facilitation and translocation of N, one of the endophytes, Cladosporium sphaerospermum, favored the growth of Glycine max plants. The same results were obtained under greenhouse conditions, also when plants were co-inoculated with nitrogen-fixing bacteria, developed more nodules. This fungus also promoted the growth of Triticum aestivum. These results are particularly positive given in conditions where nitrogen was not assimilable. The results indicate that the DSE fungi comprise a diverse group, among which some endophytes are capable of favoring growth of the host plant, particularly under certain conditions and particularly in connection with the use of Nitrogen. KEYWORDS: dark septate endophytes, root, Glycine max, Triticum aestivum, Nitrogen.

Vignale, María Victoria. "Efecto de endofitos Epichloë sobre la micorrización y productividad de gramíneas hospedantes y no hospedantes" (2016-03-23) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Las plantas a menudo establecen múltiples asociaciones simbióticas simultáneas con diferentes microorganismos; sin embargo, la forma en que cada simbionte afecta a los otros simbiontes y los efectos de estas múltiples interacciones en la productividad de las plantas hospedantes no son bien entendidos. Esta tesis está centrada en contribuir al conocimiento de las interacciones multitróficas entre gramíneas nativas y endofitos Epichloë. Particularmente, está dirigida a la caracterización de la triple asociación mutualista entre gramíneas, endofitos y hongos formadores de micorrizas arbusculares (HMA) y a establecer los mecanismos que expliquen la correlación positiva observada entre la presencia de endofitos Epichloë y la colonización de gramíneas nativas por HMA. Se realizaron ensayos in vitro, donde se analizó el efecto de los exudados de endofitos y de plantas infectadas con endofitos (E+) y no infectadas (E-) sobre la fase extramatrical de los HMA. Se estudiaron, en invernadero, el efecto de exudados de endofitos sobre la micorrización y la productividad vegetal en plantas de Bromus auleticus libres de endofitos (E-) y en plantas vecinas agronómicamente seleccionada: Lolium multiflorum (E+ y E-). Se analizaron, a campo, el efecto simultáneo en simbiosis de los endofitos y los HMA sobre el desarrollo vegetativo y otros caracteres de interés agronómico de gramíneas nativas como Bromus auleticus, seleccionadas agronómicamente: Lolium multiflorum y Schedonorus arundinaceus y sobre una gramínea libre de endofitos en la naturaleza: Bromus catharticus. Este plan comprende estudios básicos para el futuro aprovechamiento y manejo tecnológico de la triple simbiosis mutualista que se relacionan con el mejoramiento de pastos para el forraje y productividad vegetal.

Abstract:
Plants often establish multiple simultaneous symbiotic associations with different microorganisms; however, the way in which each symbiont affects the other symbionts and the effects of these multiple interactions on plant performance are not well understood. This thesis is focused on contributing to the knowledge of multitrophic interactions between native grasses and Epichloë endophytes. Particularly, it is directed to the characterization of the triple mutualist interaction between grasses, endophytes and arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) and to establish mechanisms that explain the observed positive correlation between the presence of Epichloë endophytes and the colonization of native grasses by HMA. In vitro tests where the effect of endophytes exudates and from infected (E+) and endophyte free plants (E-) on the AMF extramatrical phase were performed. Greenhouse experiments were also performed to study the effect of endophyte exudates on the mycorrhization and plant productivity of uninfected (E-) Bromus auleticus and Lolium multiflorum (ryegrass) (E+ and E-) (agronomically selected). We performed field trials to study the simultaneous effect of symbiotic endophytes and AMF on the vegetative development and other traits of agronomic interest of native grasses as Bromus auleticus, agronomically selected as Lolium multiflorum and Schedonorus arundinaceus and endophytE-free grass in nature: Bromus catharticus. This plan includes basic studies for the future development and technological management of a triple mutualistic symbiosis that relate to the improvement of pastures for forage and plant productivity.

Da Re, Cristina Verónica. "Relevamiento de cepas argentinas de hongos ligninolíticos para su aplicación en procesos biotecnológicos ligados a la industria celulósico-papelera" (2016-04-15) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los materiales lignocelulósicos dan origen a múltiples industrias, siendo la fabricación de pulpa y papel una actividad económica de importancia global. Estudios previos demostraron que las enzimas de hongos ligninolíticos podrían resultar útiles en distintas etapas del procesamiento de la madera, así como en la biorremediación de los efluentes. El presente trabajo se centró en el relevamiento y la caracterización enzimática de 35 cepas de hongos causantes de pudrición blanca de la República Argentina y en su posible utilización en tres etapas específicas de la producción de pulpa y papel: biopulpado, bioblanqueo y degradación del licor negro. Los resultados de esta investigación permitieron identificar una cepa con potencial para el biopulpado de madera de Pinus taeda. Pycnoporus sanguineus no sólo fue capaz de reducir el contenido de lignina un 11% en 14 días de tratamiento, sino que también produjo cambios estructurales notables en la lignina y la hemicelulosa, incrementando la porosidad 15%. Además de la modificación química causada por delignificación selectiva, los cambios físicos producidos, como el aumento del tamaño de poro, afectan directamente la penetración de productos químicos de cocción, reduciendo el consumo de energía en el proceso. En referencia al bioblanqueo, se lograron resultados promisorios mediante una secuencia sencilla, totalmente libre de cloro, que involucró sobrenadantes de cultivo de Trametes trogii y Coriolus antarcticus, y posterior blanqueo con peróxido de hidrógeno. La misma funcionó aun en condiciones moderadas (28°C) lo que permite minimizar el consumo de energía y la pérdida de pulpa. La utilización de crudos enzimáticos evita el costo elevado de la purificación enzimática y el uso de mediadores adicionales. Entre las cepas investigadas para su posible uso en el tratamiento del licor negro, Lenzites elegans fue capaz de lograr buenos porcentajes de decoloración, y sólo requirió para ello de la disminución del pH del efluente con el agregado de ácido cítrico. Irpex lacteus también resultó capaz de decolorarlo, pero fue necesario un dializado previo. Como resultado de esta investigación, se identificaron nuevas cepas de hongos ligninolíticos con potencial en biopulpado, bioblanqueo y decoloración del licor negro y se analizaron condiciones a ser tenidas en cuenta a la hora de utilizar a estos organismos o sus enzimas en dichos procesos.

Abstract:
Lignocellulosic materials give rise to multiple industries, being the pulp and paper an economic activity of global importance. Previous studies demonstrated that fungal ligninolytic enzymes may be useful in various stages of wood processing and effluents bioremediation. This work focuses on the screening and enzymatic characterization of 35 strains of Argentinean white-rot fungi and their possible use in three specific stages of pulp and paper elaboration: biopulping, biobleaching and black liquor degradation. As a result of this research a strain with potential for biopulping Pinus taeda wood was identified. Pycnoporus sanguineus was not only able to reduce the lignin content 11% in 14 days of treatment, but also caused significant structural changes in lignin and hemicellulose, increasing the porosity of treated wood 15%. In addition to the chemical modification caused by selective delignification, the produced physical changes such as increased pore size, directly affect the penetration of cooking chemicals, reducing energy consumption in the process. Promising results were achieved through a totally chlorine free biobleaching sequence, involving culture supernatants of Trametes trogii and Coriolus antarcticus and a subsequent step of hydrogen peroxide bleaching. This sequence was functional even under mild conditions (28°C), thus minimizing power consumption and pulp loss. Using crude enzyme avoids the high cost of enzyme purification and the need of additional mediators. Among the strains investigated for their potential use in the treatment of black liquor, Lenzites elegans was able to attain good levels of decolorization, and only required lowering the pH of the effluent with citric acid addition. An important decolorization was also achieved by Irpex lacteus but only after the dialyzation of the effluent. As a result of this research, new strains of ligninolytic fungi with potential for biopulping, biobleaching and black liquor decolorization were identified, and several parameters that may affect the use of these organisms or their enzymes in the pulp and paper industry, were optimized.

de Errasti, Andrés. "Hongos manchadores de albura en especies forestales exóticas y nativas de los Andes Patagónicos: taxonomía, patogenicidad y manejo" (2016-06-27) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Esta tesis constituye el primer relevamiento sistemático de hongos manchadores de albura de la Patagonia argentina. La ‘mancha de albura’ es una modificación de las propiedades ópticas de la madera como consecuencia de la colonización fúngica. El cuerpo (hifas) pigmentado del hongo penetra el parénquima radial y los tejidos vasculares ocasionando una mancha profunda. La mayoría de especies manchadoras pertenecen a los hongos ‘ofiostomatoides’. Este grupo polifilético dentro de los Ascomycota se encuentra asociado íntimamente con artrópodos, en particular, a escarabajos de corteza y ambrosía (Coleoptera: Scolytinae/Platypodinae). Existen casos bien documentados de patógenos primarios dentro del grupo (por ejemplo Ceratocystis fagacearum, Ceratocystis fimbriata, Ophiostoma ulmi), sin embargo, la mayoría de las especies manchan la madera recién cosechada, como saprobios. La madera manchada tiene un precio de venta menor y su aceptación en el mercado disminuye. Ante la falta de información en el país sobre la diversidad y biología de este grupo, se planificó su recolección y estudio en la Patagonia durante el período 2009-2014. El relevamiento fue realizado durante 3 años. Se visitaron diferentes plantaciones y zonas de bosque nativo en las regiones cordilleranas de las provincias del Chubut, del Río Negro y del Neuquén. Los taxones fueron identificados mediante técnicas morfológicas y moleculares (regiones LSU, ITS, β-Tubulina y el factor TEF 1-α). Sus asociaciones con insectos también fueron informadas. En base a la diversidad encontrada sobre árboles enfermos (Nothofagus, Schinus) se diagramaron ensayos para estimar la patogenicidad de algunos aislamientos sobre árboles sanos. Paralelamente, se caracterizó el ciclo del manchado en pináceas utilizadas por la industria forestal, intentando cuantificar la colonización fúngica en función del tiempo, para árboles apeados en distintas épocas del año. Se coleccionaron 588 muestras de las que se obtuvieron 370 aislamientos. Estos fueron clasificados en 28 taxones: 18 taxones conocidos y 10 taxones nuevos para la ciencia. De los nuevos, 5 fueron descriptos formalmente: Huntiella decorticans, Leptographium gestamen, Ophiostoma patagonicum, Ophiostoma peregrinum y Sporothrix cabralii. El bosque andino-patagónico evidenció una importante diversidad con un 80% de taxones endémicos (12/15). Por el contrario, las plantaciones de pináceas estuvieron asociadas a especies que han sido introducidas junto con éstas, tal como se ha constatado en otras regiones del Hemisferio Sur. Los primeros datos moleculares de Ophiostoma nothofagi han permitido identificar un linaje independiente dentro de la familia Ophiostomataceae, cuyas características morfológicas y ecológicas particulares respaldan la posibilidad de erigir un género nuevo para ésta y otras especies relacionadas. En los ensayos de patogenicidad a campo, Huntiella decorticans colonizó satisfactoriamente árboles sanos, de acuerdo con los postulados de Koch. Su relación con escarabajos que se alimentan de savia fresca y la formación de una estructura tipo ‘pressure pad’ indican un comportamiento patogénico. Sin embargo, la formación de cancros fue consecuencia de lesiones localizadas y no de infecciones sistémicas típicas de un marchitamiento. Por el contrario L. gestamen y O. patagonicum no pudieron colonizar sus hospedantes (Nothofagus spp. y Schinus patagonicus, respectivamente), por lo que serían saprobios oportunistas dispersados por escarabajos de ambrosía hacia hospedantes bajo estrés severo. En las plantaciones de coníferas, Ophiostoma piliferum y O. peregrinum fueron las especies de mayor frecuencia, si bien la tasa de colonización de Diplodia pinea fue superior. Las dos primeras están asociadas a las especies de escarabajos Hylurgus ligniperda y Orthotomicus laricis. Las especies de Grosmannia fueron aisladas principalmente de Hylastes ater. Los ensayos a campo indican que los troncos estuvieron libres de mancha por 3 meses, independientemente de su época de apeo. A partir del tercer mes los árboles cosechados en primavera y, en menor medida en otoño, son altamente susceptibles al ataque de hongos ‘ofiostomatoides’, probablemente porque en esas épocas se producen los picos de vuelo de los escarabajos adultos. Las cosechas de verano son críticas si el rodal está afectado por Diplodia. La colonización de ésta especie, usualmente en estado latente dentro del tejido sano del hospedante, se ve favorecida por las altas temperaturas de la estación. El invierno es la época más favorable para la cosecha. Ophiostoma peregrinum, especie que inicialmente fue reportada en el hemisferio Norte sobre Betula sp., mostró en la Patagonia una amplia distribución y frecuencia en plantaciones (inclusive colonizando hospedantes nativos) remarcando los peligros del comercio entre regiones distantes.

Abstract:
This thesis comprehends the first survey of sap-stain fungi on exotic conifers and native broad-leaved species (Nothofagus) from Patagonia, Argentina. ‘Sap-stain’ is a dark discoloration of wood as a consequence of fungal colonization. Pigmented fungal hyphae penetrate the radial parenchyma and the vascular tissue, causing a deep stain. Most sapstain species belong to the so-named ‘ophiostomatoid fungi’ a polyphyletic group of ascomycetes with similar morphology and taxonomic history. These species are adapted to arthropod dispersal, especially bark and ambrosia beetles (Coleoptera: Scolytinae/Platypodinae). Pathogens are well documented among sap-stain species (e.g. Ceratocystis fagacearum, Ceratocystis fimbriata, Ophiostoma ulmi). Nevertheless, most species are saprobes, colonizing timber after harvest. Stained wood has a lower market value and a decreased acceptance, causing major losses to the forest industry worldwide. Addressing the need to characterize ophiostomatoid diversity and biology in Patagonia, a five-year project was undertaken (2009-2014). A three-year survey (2009-2012) in Neuquén, Río Negro and Chubut Provinces included milling companies, pine plantations and native forests. Species were collected and identified based on morphology and DNA sequence comparisons of multiple loci (LSU, ITS, β-Tubulin, TEF 1-α). Insect associates were also informed. Isolates obtained from diseased trees (Nothofagus, Schinus) were selected for pathogenicity trials. On pine plantations, colonization of logs was estimated at different intervals, for logs harvested in different seasons. A total of 588 samples were collected, and 370 isolates were obtained. These were classified under 28 taxa: 18 known species and 10 new taxa. In the present study, 5 out of these new 10 species were described: Huntiella decorticans, Leptographium gestamen, Ophiostoma patagonicum, Ophiostoma peregrinum and Sporothrix cabralii. Nothofagus forests include several, previously unknown, sap-stain taxa. The 80% of these (12/15) are considered to be endemic. On the other hand, species present on pine plantations have been most likely introduced, similarly to other Southern Hemisphere Countries. The first molecular data of Ophiostoma nothofagi strongly suggests the presence of an independent lineage within the Ophiostomataceae. Its morphological characteristics and ecological features also support the possibility to erect a new genus for this and other related taxa. Huntiella decorticans was able to colonize healthy trees in pathogenicity trials. Its relation to sap-feeding beetles (Coleoptera:Nitidulidae) as well as the formation of a ‘pressure-pad’ structure, points out a pathogenic capability. Nevertheless, the formation of cankers indicates a localized lesion and not a systemic colonization, typical of a wilted tree. On the contrary, Leptographium gestamen and Ophiostoma patagonicum could not colonize healthy trees and both species probably behave as opportunistic saprobes vectored by ambrosia beetles to severely stressed trees. On pine plantations, the most frequent species were Ophiostoma piliferum and O. peregrinum. However, Diplodia registered higher colonization rates. The former ophiostomatoid species are associated to Hylurgus ligniperda and Orthotomicus laricis galleries. Grosmannia species were found in association with Hylaster ater galleries. At every site logs were stain-free for 3 months, no matter which season they were harvested. After this period, harvest in spring (and sometimes autumn) is highly susceptible to ‘ophiostomatoid’ stain, probably because it is also beetle flying season. Summer harvest is critical if the stand is infected with Diplodia, because this endophytic fungus grows vigorously at high temperatures. Field trials indicate winter as the most favorable season to harvest. Ophiostoma peregrinum, initially reported from the Northern Hemisphere associated with Scolytus ratzeburgi on Betula, evidenced a wide geographical distribution and host range (even on native species) in Patagonia, showing the risks associated to commercial trade between distant regions.

http://digital.bl.fcen.uba.ar

Biblioteca Central Dr. Luis Federico Leloir - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales - Universidad de Buenos Aires
Intendente Güiraldes 2160 - Ciudad Universitaria - Pabellón II - C1428EGA - Tel. (54 11) 4789-9293 int 34