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Zurita, María Pía. "Producción de hadrones en medios nucleares" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el presente trabajo estudiamos las modificaciones generadas por la presencia de medios nucleares en los estados inicial y final de procesos que involucran hadrones. Realizamos el análisis en el contexto de QCD a segundo orden en el desarrollo perturbativo. Para ello efectuamos una descripción exhaustiva de la cinemática de procesos de dispersión inelástica profunda y colisiones hadrónicas en el vacío. A partir de esto analizamos la incidencia de los medios nucleares sobre la distribución de partones en nucleones ligados. Dicho estudio incluye una actualización de los análisis realizados hasta el momento, a saber la inclusión de efectos de masa por la presencia de quarks pesados, el agregado de nuevos resultados experimentales y el impacto de las modificaciones en las funciones de fragmentación debidas a la presencia del medio nuclear. Por otro lado investigamos también las modificaciones de estado final observadas por los experimentos de DESY y RHIC, y presentamos funciones de fragmentación nucleares, extraidas en forma consistente con la determinación de distribuciones partónicas. Empleando estos resultados, brindamos predicciones para experimentos a realizarse en el LHC, y en los futuros LHeC y EIC.

Abstract:
In the present thesis we study the modification of initial and final hadronic states when the processes occur in nuclear media. We make this analysis in the context of QCD at next-to-leading order in the perturbation series. We present a thorough description of the kinematics of deep-inelastic scattering and hadronic collisions in vacuum. From this point we analyze the partonic distribution functions on bounded nuclei. There we consider all the characteristics of up-to-date analysis, such as heavy quarks mass effects and new experimental results. We also take into account the novel set of nuclear fragmentation functions in order to get a good description of single-inclusive hadron production in proton(deuteron)-nucleus collisions. On the other hand we also study the final state modification observed by the HERMES collaboration at DESY and by the four collaborations at RHIC, and present the first set of nuclear fragmentation functions, which we extract in a consistent way. Using these results, we present predictions for experiments at LHC and future colliders LHeC and EIC.

Zorrilla de San Martín, Javier. "Caracterización de la liberación del neurotransmisor en la sinapsis eferente olivococlear durante el desarrollo" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el órgano de Corti, el epitelio sensorial del sistema auditivo de los mamíferos, las células ciliadas internas (CCIs) transducen los estímulos sonoros a señales eléctricas que son enviadas al sistema nervioso central, mientras que las células ciliadas externas (CCEs) participan del proceso de amplificación y sintonización fina de estos estímulos. Durante el desarrollo, las CCIs presentan actividad espontánea, la cual promueve la liberación de glutamato en la sinapsis entre las CCIs y las dendritas de las neuronas aferentes que forman el nervio auditivo. La actividad espontánea en el sistema auditivo en desarrollo es fundamental tanto para la supervivencia neuronal como para el refinamiento y mantenimiento de los mapas tonotópicos en el cerebro. Desde el nacimiento hasta el comienzo de la audición (postnatal 12-13 en ratones), las CCIs reciben una inervación eferente axo-somática transitoria desde la oliva superior en el tallo cerebral, la cual se postula estaría modulando la actividad espontánea de las CCIs en este período del desarrollo. La sinapsis entre las fibras eferentes mediales olivococleares (MOC) y las células ciliadas es colinérgica, rápida e inhibitoria y está mediada por la activación conjunta del receptor colinérgico nicotínico (nAChR) α9α10 y el canal de potasio activado por calcio SK2. En trabajos previos, se han caracterizado extensamente los cambios que ocurren en la expresión y función del nAChR α9α10 y su acople con el canal SK2, en el corto período en el cual la sinapsis MOC-CCIs es funcional. Sin embargo, es poco lo que se conoce sobre las propiedades de liberación del neurotransmisor y los cambios que ocurren en la presinapsis durante este período. El principal objetivo de esta tesis fue caracterizar las propiedades biofísicas y funcionales de la sinapsis transitoria MOC-CCI durante el desarrollo postnatal previo al comienzo de la audición. Para esto se realizaron registros electrofisiológicos en el modo “whole-cell“ en las CCIs presentes en preparaciones del órgano de Corti del ratón, aisladas en forma aguda, en dos períodos postnatales, mientras se estimulaban eléctricamente los axones eferentes para provocar la liberación del neurotransmisor. Los resultados de este trabajo de investigación muestran que la eficacia sináptica aumenta significativamente entre los días postnatales (P) 5-7 y 9-11. Este fenómeno está acompañado por cambios en el tipo de plasticidad de corto término, en los tipos de canales de Ca²+que median y/o modulan la liberación del neurotransmisor y también por un cambio en la cantidad de vesículas sinápticas disponibles para ser liberadas, sin modificaciones en la probabilidad de liberación de cada sitio activo.

Abstract:
In the organ of Corti, the sensory epithelium of the mammalian auditory system, inner hair cells (IHCs) transduce sound stimuli into electrical signals which are conveyed to the central nervous system, while outer hair cells (OHCs) participate in the amplification and fine tuning of sounds. During development, the IHCs present spontaneous activity which promotes the release of glutamate at the synapse between the IHCs and the afferent dendrites of the neurones that make up the auditory nerve. Spontaneous activity in the auditory system is fundamental both for neuronal survival as well as for the refinement and maintenance of tonotopic maps in the brain. Since birth until the onset of hearing (postnatal day (P) 12-13 in mice), the IHCs receive a transient axo-somatic innervation from the superior olive in the brain stem, which is postulated to modulate IHC spontaneous activity during this developmental period. The synapse between the medial olivocochlear (MOC) fibers and the IHCs is cholinergic, fast and inhibitory and is mediated by the combined activation of the α9α10 cholinergic nicotinic receptor (nAChR) and the SK2 calcium-activated potassium channel. In previous work, the changes that occur in the expression and function of the α9α10 nAChR and its coupling to the SK2 channel have been extensively characterized during the short period at which this synapse is functional. However, little is known about the properties of transmitter release and the changes that take place at the presynaptic level during this period. The main goal of this Thesis work was to characterize the biophysical and functional properties of the transient MOC-IHC synapse during postnatal development prior to the onset of hearing. For this purpose, electrophysiological recordings in the whole-cell mode were performed in IHCs, present in acutely isolated organs of Corti from mice at two postnatal ages, while the MOC efferent axons were electrically stimulated to promote the release of transmitter. The results of this work show that the efficacy of the MOC-IHC synapse significantly increases from P5-7 to P9-11. This is accompanied by changes in the pattern of short term synaptic plasticity, in the types of calcium channels that support and/or mediate neurotransmitter release as well as in the number of synaptic vesicles ready to be released, without modifications in the release probability of each active site.

Zabala, María Soledad. "Ecología trófica, crecimiento y reproducción en el gasterópodo Adelomelon ancilla en el Golfo Nuevo" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El caracol Adelomelon ancilla (Neogastropoda: Volutidae) se distribuye en el Océano Sudoccidental Atlántico hasta la Bahía de Ushuaia inclusive y por el Pacífico hasta los 23° de latitud. Esta especie ha sido postulada como recurso alternativo para las pesquerías locales de gasterópodos en Chile y los golfos norpatagónicos de Argentina. En esta tesis, el uso de múltiples herramientas (métodos directos e indirectos) permitió abordar cada uno de los distintos objetivos desde una perspectiva integrativa, brindando un análisis más completo del estudio en cuestión. Se describió en detalle la dieta y asociación trófica con la anémona epibionte A. achates, a través de técnicas directas (observación de eventos de alimentación in situ y contenido estomacal) e indirectas (isótopos estables de C y N). La especie A. ancilla consume principalmente moluscos vivos, acorde con su condición de depredador tope en las comunidades bentónicas. No existe solapamiento entre las dietas de ambas especies. A. ancilla se alimenta de organismos infaunales (bivalvos y gasterópodos) mientras que la anémona epibionte se alimenta de organismos epifaunales. Se postula que la asociación trófica existente entre ambos es la “facilitación” por parte de los caracoles hacia las anémonas. Mediante el estudio de isótopos estables de O se estableció que las marcas de crecimiento observadas en el interior de la concha son semianuales, correspondientes a máximas y mínimas temperaturas del agua. La edad máxima registrada de un individuo es de 20 años y el modelo de crecimiento que mejor describe la población es el de Gompertz. La producción somática individual es de 7,4 g PPB año¯¹ a los 120 mm de largo total. La densidad promedio de la población de golfo Nuevo es de 0,022 ind/m² y la proporción de sexos hallada no difiere de 1:1. A. ancilla no presenta dimorfismo sexual respecto a la concha y la descripción de la macroanatomía es similar a otros neogasterópodos, en particular volútidos. Se corrobora la presencia del fenómeno de imposex, el cual estaría relacionado con la presencia de TBT en el ambiente, asociado al alto tráfico marítimo. La presencia de neoformaciones anatómicas como múltiples penes en ambos sexos, indicarían una alta susceptibilidad de la especie y la contaminación crónica del sitio. El estudio del ciclo reproductivo mostró que el periodo de evacuación de gametas para los machos se extiende a lo largo de todo el año. Por lo contrario, las hembras muestran una estacionalidad de liberación de junio a noviembre, en coincidencia con la época de oviposición en el campo. Este patrón en las hembras estaría relacionado a la combinación de los cambios del fotoperiodo y la temperatura. La talla de primera madurez sexual gonádica fue de 93,5 mm y de 73,5 mm de largo total de la concha correspondiente a 7 y 9 años para hembras y machos, respectivamente. El desarrollo embrionario de A. ancilla se estimó entre 5-6 meses y se caracteriza por ser continuo, a medida que se alimenta ocurren los cambios morfológicos de forma simultánea. El número de eclosionantes por ovicápsula varió de 1 a 4 individuos. Los parámetros estudiados sobre la población de A. ancilla tales como: longevidad, crecimiento lento, baja producción somática, baja densidad, alta posición trófica y madurez reproductiva tardía (7-9 años) con desarrollo directo y pocos embriones por ovicápsula, sugieren que esta especie no soportaría una explotación pesquera. Sin embargo, en caso de que se establezca la recolección de A. ancilla como recurso pesquero alternativo, se sugiere una talla mínina de captura de 100 mm para ambos sexos y que la recolección se realice de forma manual por buceo.

Abstract:
The snail Adelomelon ancilla (Neogastropoda: Volutidae) is distributed in the Southwestern Atlantic reaching the Bahia Ushuaia and Pacific oceans until 23° of latitude. This species has been suggested as a potential alternative resource for local gastropod fisheries in Chile and the Argentine North patagonic gulfs. In this study, the use of multiple complementary tools (direct and indirect methods) allowed dealing with each objective from a integrative perspective, obtaining a detailed and more complete analysis of the study. The diet and trophic interaction of A. ancilla with its epibiotic anemone A. achates is described through direct (in situ feeding events observation) and indirect (C and N stable isotopes) techniques. A. ancilla feeds mainly on living molluscs, enforcing its top predator condition in the benthic assemblages. Results did not show evidences of dietary overlap between anemones and snails. The snails feed on infaunal organisms (bivalves, gastropods), while the anemone feed on epifaunal organisms. It is proposed that the trophic interaction between both species is “facilitation”. The analysis of oxygen stable isotopes allowed establishing that the internal growth marks observed in the shell were deposited twice a year, corresponding to maximum and minimum water temperatures. The maximum age for the A. ancilla studied population was 20 years, and the growth is well explained by the Gompertz model. Individual somatic production was 7.38 g year¯¹ at 120 mm in total shell length. Mean density of golfo Nuevo population was 0,022 ind/m² and sex ratio was not significantly different from 1:1. A. ancilla evidence no sexual dimorphism of its shell, and the macroanatomy description is similar to that of other neogastropods, in particular volutids. The occurrence of the imposex phenomenon is corroborated in this study, which might be related to the presence of TBT in the environment, associated to high marine traffic. The occurrence of anatomical neoformation, as multiple penes, in both sexes indicates a high susceptibility of this species to TBT and chronic pollution of the affected localities. The study of the reproductive cycle showed that males evacuate gametes all year round, while females evacuation period was from June to November, coinciding with spawning in the field. This pattern is related with changes in photoperiod and temperature. Size at first maturity was determined by microscopy study of the gonads at 93.5 mm and 73.5 mm in total shell length corresponding 9 and 7 years for females and males, respectively. A. ancilla embryonic developmental time was estimated in 5-6 months and it was characterized by a continuous growth, where feeding and morphological changes occurred simultaneously. The number of hatching embryos per egg capsule ranged between 1-4. All features of the population dynamic of A. ancilla, as its longevity, slow growth, low somatic production, low density, high trophic position, and late reproductive maturity (7-9 years) including direct development with few embryos per egg capsules, situate this species as a not recommendable resource for commercial exploitation. However, in case that the consume of A. ancilla might established as fishery resource, it is suggested a minimum capture size of 100 mm for both sexes with manual recollection by scuba diving.

Yovanovich, Carola Anabel Mariana. "Potencial neurogénico del epitelio olfatorio en un modelo de degeneración neuronal masiva: Dinámica celular, factores tróficos y adquisición de funcionalidad" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La maduración del sistema nervioso es el resultado de un intrincado balance entre mecanismos de proliferación y diferenciación neuronal, apoptosis y refinamiento sináptico. Estos procesos no son exclusivos de la vida embrionaria, sino que algunas estructuras nerviosas se recambian continuamente aun durante la vida adulta. El caso mejor conocido es el de las neuronas receptoras olfatorias (ORNs), en las cuales este fenómeno se verifica durante toda la vida en todos los vertebrados analizados. El recambio cíclico de las ORNs ocurre también en respuesta a la muerte neuronal masiva provocada por la destrucción del epitelio olfatorio (EO), haciendo de este sistema un excelente modelo para el estudio de la neurogénesis y de la regeneración neuronal. El propósito de esta tesis es analizar algunos aspectos poco conocidos del proceso de neurogénesis usando un modelo de destrucción del EO en larvas de anuros por inmersión en sulfato de zinc (ZnSO4) desarrollado previamente en nuestro laboratorio. Para ello diseñamos una prueba comportamental con el fin de evaluar la capacidad de los animales de responder a estímulos olfatorios durante el proceso de regeneración. Esta herramienta nos permite analizar la funcionalidad del EO y luego procesar a los mismos animales para estudiar los fenómenos de proliferación celular, diferenciación neuronal y participación de factores tróficos en ese proceso mediante técnicas histológicas e inmunohistoquímicas. Observamos que los animales que responden al estímulo presentan niveles normales de proliferación celular y un grado avanzado de diferenciación de las ORNs a nivel histológico y de expresión de marcadores de maduración neuronal, aunque el tamaño de esta población celular es pequeño en relación a los animales intactos. A partir de esto concluimos que el grado de avance de la recuperación morfológica del EO requerido para la readquisición de la funcionalidad es relativamente escaso. Por otro lado, el análisis de la distribución del Factor Neurotrófico Derivado del Cerebro (BDNF) indica que aumenta su expresión en regiones específicas del sistema olfatorio luego del tratamiento con ZnSO4, lo que sugiere que desempeña un papel importante en la reconstitución del EO y su reconexión con el bulbo olfatorio.

Abstract:
The nervous system maturation is the outcome of an intricate balance among proliferation, neuronal differentiation, apoptosis and synaptic refinement mechanisms. These processes are not fully restricted to embryonic development, as some nervous structures undergo continuous lifelong turnover. The best documented case is that of olfactory receptor neurons (ORNs) in which this phenomenon occurs throughout life in all vertebrates analyzed. Cyclic ORNs turnover also occurs in response to massive neuronal death induced by injury to the olfactory epithelium (OE), rendering this system as an excellent model to study neurogenesis and neuronal regeneration. This thesis aims to analyze some poorly known aspects of the neurogenic process using an experimental model of OE disruption induced by immersion of anuran larvae in zinc sulfate (ZnSO4) that has been previously developed in our lab. For that purpose we designed a novel behavioral test aimed to evaluate the animals’ responsiveness to olfactory stimuli during the regeneration process. This tool allows us to analyze OE functionality and then processing the same individuals to study cell proliferation, neuronal differentiation and involvement of trophic factors in this process by means of histological and immunohistochemical procedures. We observed that the stimulus-responsive animals show normal levels of cell proliferation and an advanced degree of ORNs differentiation at histological and maturity markers expression levels, even if this cell population has a small size related to that of intact animals. Based on this evidence we conclude that the degree of morphological recuperation required for acquisition of functionality is relatively small. On the other hand, analysis of Brain-Derived Neurotrophic Factor (BDNF) distribution shows that its expression increases in specific regions of the olfactory system after ZnSO4 treatment, thus suggesting that it plays an important role in OE reconstitution and reconnection to the olfactory bulb.

Yang, Sung Min. "Propagación de señales en neuronas NS de la sanguijuela Hirudo sp." (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Un número creciente de estudios señalan la importancia de la distribución espacial de las conductancias iónicas activas en el procesamiento de las entradas sinápticas y en la señalización intracelular. Conocer la distribución de las conductancias sensibles a voltaje es importante porque éstas podrían servir como un mecanismo para el boosting y la propagación de las respuestas postsinápticas, reduciendo la atenuación espacial que resultaría de una transmisión pasiva. Las neuronas NS de la sanguijuela no desencadenan potenciales de acción dependientes de sodio y presentan una arborización neurítica muy extensa. Estas células están eléctricamente acopladas a prácticamente todas las motoneuronas excitatorias y, de esta forma, son capaces de modular el comportamiento motor. Dada esta amplia influencia sobre las neuronas efectoras, resulta de sumo interés analizar la integración de entradas sensoriales por las neuronas NS. Se realizaron registros electrofisiológicos intracelulares en el soma en simultáneo con la medición de señales de calcio en árbol neurítico empleando indicadores fluorescentes sensibles a calcio. De esta forma, se pudieron estudiar transitorios de calcio evocados por potenciales de acción dependientes de calcio de bajo umbral (Capítulo I), por pulsos despolarizantes (Capítulo II) y por estimulación sináptica activada por neuronas sensoriales (Capítulo III). Los resultados indican que la neurona dispone de conductancias de calcio de bajo umbral ampliamente distribuidas en el árbol neurítico de la neurona NS. Estas conductancias participan de la regeneración activa de las señales sinápticas, activándose en forma gradual dependiendo de la amplitud de la señal electrofisiológica y sirviendo como un mecanismo para el procesamiento e integración de señales dentro de la arborización neuronal.

Abstract:
An increasing number of studies point out the importance that the spatial distribution of active ionic conductances have in synaptic processing and intracellular signaling. Knowing the distribution of voltage-dependent conductances is relevant because of the role they can play in boosting and propagation of synaptic responses, reducing the spatial attenuation that would result from purely passive spread. The NS neurons of the leech are nonspiking neurons (they do not fire sodium dependent action potentials) and present a widespread neuritic arborization. These cells are electrically coupled to all the excitatory motoneurons and, in this way, they are able to modulate motor behaviors. Given the wide influence of NS neurons on effector neurons it is of great importance to analyze how they integrate sensory inputs. We have performed intracellular electrophysiological recordings in the NS soma, together with calcium imaging throughout its neuritic arborization by means of fluorescent calcium indicators. In this way we studied calcium transient evoked by low threshold spikes (Chapter I), by depolarizing pulses (Chapeter II) and by synaptic inputs from sensory neurons (Chapter III). The results indicate that NS neuron display calcium conductances that can be activated at a low threshold and are distributed throughout the entire neuritic arbor. These conductances participate in the active regeneration of synaptic inputs, giving rise to calcium transients whose amplitude is a function of the electrophysiological response magnitude, and thus they contribute to the processing and integration of signals throughout the neuronal arborization.

Wenker, Shirley Denise. "Investigación de la acción neuroprotectora de la eritropoyetina en modelos in vitro" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La supervivencia de las células neuronales depende de un estricto balance entre diversos factores pro y antiapoptóticos. La pérdida de este delicado equilibrio puede conducir a la muerte celular por apoptosis como se manifiesta en accidentes cerebro-vasculares y en enfermedades neurodegenerativas. La muerte neuronal puede ocurrir en forma directa, donde el daño per sé induce la disminución del número de células viables o bien indirectamente, involucrando la activación de células de la glía, las cuales liberan citoquinas proinflamatorias, nitritos y especies reactivas del oxigeno, agentes causantes de la degeneración neuronal. La deficiencia de oxígeno (hipoxia) en el sistema nervioso central es un factor de estrés que induce múltiples respuestas. A nivel celular, la exposición a hipoxia puede inducir una desregulación metabólica con pérdida de la homeostasis y muerte celular. Además, durante dicho proceso se desarrolla un microambiente proinflamatorio generado por la activación de la glía, lo cual afecta indirectamente a las células neuronales. Dado el impacto de las secuelas que pueden originarse, se desarrollaron diferentes líneas de investigación con el fin de prevenir el daño neuronal y sus consecuencias. La eritropoyetina (Epo) es una citoquina pleiotrópica, originalmente definida por su rol en la eritropoyesis. Sin embargo, el hallazgo de receptores específicos en tejidos no hematopoyéticos, expandió su acción biológica y farmacológica. La utilización potencial de los efectos no hematopoyéticos de la eritropoyetina recombinante es uno de los aspectos más promisorios en la investigación de la acción farmacológica de esta hormona. De hecho, la Epo ha sido asociada a la prevención de apoptosis de células neuronales sometidas a agresiones tales como privación de nutrientes o factores de crecimiento. Si bien se propone a la Epo como factor de protección celular frente a estímulos apoptóticos, poco se sabe acerca de la modulación de su acción en diferentes estadios de diferenciación neuronal. Por otro lado, resultados de investigaciones utilizando diversos modelos experimentales le han adjudicado a la Epo una acción antiinflamatoria, aunque aún se desconoce el rol que puede presentar este factor sobre la microglía ante un daño tisular. En este trabajo se planteó, como objetivo general, el estudio del efecto modulador y/o neuroprotector de la Epo frente a daños inducidos por hipoxia y por otros estímulos. Para el estudio de la acción antiapoptótica de Epo frente al daño por hipoxia se utilizó un modelo in vitro de cultivos de la línea de origen neuronal SH-SY5Y. Además de disminución de la viabilidad celular y aumento significativo de la apoptosis, la exposición a hipoxia indujo alteraciones morfológicas tales como disminución del área celular y pérdida de la adhesión celular en cultivos indiferenciados. Como resultado del pretratamiento de estos cultivos con Epo, fueron prevenidos los efectos de la posterior exposición a hipoxia. En esta acción antiapoptótica de la Epo se encontraron involucrados la vía mediada por PI3K y el incremento de los niveles de los factores antiapoptóticos Bcl- 2 y Bcl-xL. Actualmente, se reconoce que los mecanismos de muerte celular son marcadamente diferentes en el cerebro inmaduro y en desarrollo por lo que, en el siguiente paso de este trabajo se realizó una comparación de la acción de Epo entre estadios inmaduro y maduro de células de origen neuronal. Los resultados obtenidos sugieren que la diferenciación celular, mediada por el agente diferenciador ácido retinoico (atRA), aumenta el umbral de resistencia celular ante diferentes agentes proapoptóticos, como staurosporina (STP), TNF-α o hipoxia. Este hallazgo se encontró asociado a la activación de la vía de supervivencia celular PI3K y a una regulación positiva del factor antiapoptótico Bcl-2, lo que explicaría, al menos parcialmente, la disminución de la susceptibilidad celular. En los cultivos de células neuronales diferenciadas con atRA no se pudo detectar un efecto protector de la Epo frente a la exposición a STP. Esta observación coincidió, a su vez, con la ausencia de modulación de los factores Bcl-2 y Bcl-xL por Epo. Además, la acción de Epo fue afectada por la modulación negativa de la expresión de su receptor observada en los cultivos diferenciados por atRA. Como se mencionó anteriormente, la inflamación se encuentra involucrada de manera crónica en enfermedades neurodegenerativas como también en procesos de isquemia cerebral y es una de las principales causas de muerte neuronal. En base a trabajos previos en los que se reportó un efecto antiinflamatorio de la Epo en distintos tejidos, se investigó si la Epo podía presentar un efecto modulador en cultivos de células de microglía murina EOC-2 activados por hipoxia química y se estudió el comportamiento de la hormona frente a estímulos proinflamatorios. No se observó un efecto antiinflamatorio clásico de Epo frente al estímulo de hipoxia química. Sin embargo, los resultados mostraron una acción directa de la Epo sobre la microglía incrementando los niveles de iNOS, enzima responsable de la síntesis de óxido nítrico. Además, la Epo mostró acción antioxidante previniendo la formación de especies reactivas de oxígeno e impidió la proliferación de las células de microglía inducida por hipoxia química en ausencia de Epo. Estos hallazgos sugieren que si bien la Epo no impide la activación de la microglía, podría reducir el daño potencial implicado, contrarrestando la inflamación a largo plazo mediante una acción antioxidante y antiproliferativa. En base a los resultados obtenidos, resultó interesante investigar la acción de la Epo en modelos de interacción microglía-neurona. Se observó el efecto neuroprotector de Epo ante la exposición de cultivos de células neuronales SH-SY5Y a medios condicionados obtenidos en cultivos de microglia estimulados por hipoxia. Esta acción citoprotectora de Epo también fue observada en cultivos de las células neuronales expuestas a medios condicionados de cultivos de macrófagos (células RAW) estimulados con LPS-IFNγ. Los resultados obtenidos en este trabajo aportan nuevos conocimientos sobre la acción de la Epo sobre células neuronales y de microglia. Por un lado, la Epo presenta acción neuroprotectora ante el daño directo inducido en células indiferenciadas por diversos agentes proapoptóticos como también ante un ambiente proinflamatorio inducido por la activación, tanto de células de microglía como de macrófagos. Si bien la Epo no presentó una acción antiinflamatoria clásica sobre la microglia, sí mostró un efecto antioxidante y antiproliferativo. De esta manera, se podría sugerir que la acción de la Epo atenuaría la activación de la microglía y, de esta forma, contribuiría a prevenir el desarrollo de un cuadro proinflamatorio mayor, disminuyendo el riesgo de la aparición de efectos perjudiciales para el sistema nervioso. Dada la búsqueda constante de nuevos fármacos para el tratamiento de enfermedades neurodegerativas y la existencia de la eritropoyetina recombinante humana, el conocimiento de la acción antiapoptótica y moduladora de dicha hormona sobre células del sistema nervioso puede constituir un aporte importante a sus características terapéuticas ya conocidas.

Abstract:
Among the factors that support cell survival, erythropoietin (Epo) is well known as a growth factor that maintains the number of circulating erythrocytes primarily by preventing apoptosis of erythroid progenitors. However, its biological role has been expanded by the finding of specific receptors in non-hematopoietic tissues, such as endothelial and neuronal tissues. Evidence has shown that Epo exhibits neuroprotective effects in vitro against proapoptotic agents. In addition, in vivo studies in adult and neonatal animal models have revealed a neuroprotective action of exogenous Epo administration. In this work, we compared the protective action of Epo between immature and mature cultures of neuroblastoma cells. We found a neuroprotective action of Epo upon undifferentiated neuronal SH-SY5Y cells against cytotoxicity induced by staurosporine (STP), TNF-alpha or hypoxia. Our results suggest that Epo might repress neuronal apoptosis by activation of PI3K and JAK-2 signaling pathways upregulating the expression of the antiapoptotic factors Bcl-2 and Bcl-xL. On the other hand, SH-SY5Y cell differentiation by retinoic acid (atRA) caused cell resistance to the Epo action. Together, the results describing modulation of the signaling pathways activated by Epo and those observed in cultures with atRA suggest that differentiated cell resistance to Epo protection can be coupled to an altered response at the EpoR level. During cerebral ischemia, hypoxia may not only cause neuronal cell injury in a direct way, since neuron-microglia interactions are important for neuronal viability. In vitro and in vivo studies have shown that hypoxia can activate microglia cells, leading to proinflammatory reactions that contribute to create a stressing environment upon neighboring neurons. Because of the role of hypoxia in proinflammatory mechanisms in the nervous system, and the protective effect of Epo against a proinflammatory condition resembled by TNF-α, we investigated the role of the hormone in the dialogue between neuron and microglial cells. As the first line of defense, microglia play a critical role in the innate immune response of the central nervous system (CNS) but an excessive response to CNS injury induces microglial activation. Thus, it is likely that toxic inflammatory mediators produced by activated microglial cells under hypoxic conditions may exacerbate neuronal injury following cerebral ischemia. The next step in the current research was the characterization of microglia activation. The murine EOC-2 cell line activated by chemical hypoxia induced by CoCl2 showed increased proinflammatory mediators (nitrites and TNF-α), reactive oxygen species (ROS), iNOS and Cox-2 modulation while cell proliferation data and PCNA stain demonstrated the mitogenic effect of chemical hypoxia. Pretreatment with Epo prevented the CoCl2 effect on cell proliferation and oxidative stress without changing nitrite production, iNOS protein expression or TNF-α secretion. Finally and taking into consideration the results obtained, it was interesting to investigate the effect of hypoxia upon the dialogue microglia-neuron. Conditioned media from activated microglial cells induced apoptosis of SH-SY5Y neuronal cells, effect that was abolished by Epo. Neuroprotection by this cytokine was also demonstrated against the cytotoxic effect of conditioned media obtained from activated macrophages (RAW 264.7 cell line). These results show that even though Epo did not exert a direct antiinflammatory effect upon microglial activation it did increase the resistance of neurons to subsequent damage derived from a proinflammatory environment. In conclusion, our results suggest that Epo protects neuronal cells from direct injuries as well as from the indirect damage caused by cytotoxic agents produced from microglia activation. The demonstrated antioxidant and antiapoptotic ability of Epo could contribute to consider this agent as a neuroprotective factor.

Walsh, Miguel Nicolás. "Teoremas inversos discretos" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La presente tesis estudia dos instancias diferentes de teoremas inversos discretos, la primera relacionada con cuestiones de convergencia en la teoría ergódica y la segunda con problemas de distribución local en la teoría de números. El primer resultado nos permite caracterizar aquellas funciones que pueden formar promedios ergódicos no convencionales grandes en la norma L2. Discutimos luego descomposiciones abstractas de estructura y aleatoriedad y las extendemos al contexto de la teoría ergódica, habilitando la posibilidad de estudiar varios niveles de estructura en forma simultánea. Combinando estas herramientas con el teorema inverso previamente mencionado y un proceso inductivo adecuado, logramos demostrar que los promedios ergódicos polinomiales múltiples provenientes de la acción de un grupo nilpotente de transformaciones que preservan la medida en un espacio de probabilidad siempre convergen en norma. Esto responde una conjetura de Bergelson y Leibman. El segundo resultado concierne la distribución de conjuntos en clases residuales. Introducimos los conceptos de conjuntos característicos y genéricos, y los aplicamos en el marco de la criba de Gallagher para mostrar que si un conjunto grande de puntos enteros S ⊆ {1,...,N}d, d > 1, ocupa pocas clases residuales modulo p, para muchos primos p, entonces debe estar esencialmente contenido en el conjunto de soluciones de una ecuación polinomial de grado acotado. Esto resuelve una pregunta de Helfgott y Venkatesh.

Abstract:
The present thesis studies two diferent instances of discrete inverse theorems, the first one pertaining convergence issues in ergodic theory and the second one problems of local distribution in number theory. The first result allows us to characterize those functions that can form nonconventional ergodic averages with large L2 norm. We then discuss abstract structurerandomness decompositions and extend them to the context of ergodic theory, by allowing for diferent levels of structure to be handled simultaneously. Combining these tools with the aforementioned inverse theorem and an adequate induction procedure, we are able to show that multiple polynomial ergodic averages arising from nilpotent groups of measure preserving transformations of a probability space always converge in norm. This answers a conjecture of Bergelson and Leibman. The second result concerns the distribution of sets in residue classes. We introduce the concepts of characteristic and generic sets, and apply them in the framework of the larger sieve to show that if a big set of integer points S ⊆ {1,...,N}d, d > 1, occupies few residue classes mod p, for many primes p, then it must essentially lie in the solution set of some polynomial equation of low degree. This settles a question of Helfgott and Venkatesh.

Vozza, Nicolás Federico. "Factores de adhesión de Rhizobium leguminosarum y su rol en la formación de biofilms" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Rhizobium leguminosarum es una α-proteobacteria que puede establecer simbiosis con ciertas leguminosas. La formación de un biofilm puede favorecer la persistencia en suelos y en la rizosfera y también contribuir a la competitividad para la infección de la leguminosa. En esta tesis se estudiaron factores importantes para la adhesión a diversos sustratos y la formación de biofilms. Uno de los factores estudiados fue la proteína de adhesión RapA1, secretada a través del sistema PrsDE. Se sobreexpresó RapA1 y se observó que esto produjo diversos fenotipos de superficie, incluido el aumento de adhesión a sustratos abióticos y la formación aumentada de biofilms in vitro. Se estudió la relación entre RapA1 y el exopolisacárido acídico (EPS) y el requerimiento del EPS y PrsDE para formar biofilms en flujo continuo. Se analizó la localización de RapA1 y de otras proteínas relacionadas y se estudiaron posibles mecanismos involucrados en la localización. Algunos estudios complementarios sobre el efecto de RapA1 sobre la superficie, efecto de expresión de otras Raps y regulación de genes relacionados con la adhesión fueron encarados de manera inicial. La interacción entre Polisacáridos de superficie y adhesinas proteicas resulta clave para la adhesión y formación de biofilms, dos fenómenos importantes en la biología de Rhizobium y de relevancia para la humanidad.

Abstract:
Rhizobium leguminosarum is an α-proteobacteria that can establish symbiosis with certain legumes. Biofilm formation can improve persistence in soil and in the rhizosphere and can also contribute to competitivity for legume infection. Several factors, important for substrate adhesion and biofilm formation, were studied in this thesis. The PrsDE-secreted protein RapA1 was one of the adhesion factors studied in this work. RapA1 was overexpressed and we observed this produced a complex surface phenotype, enhancing adhesion to abiotic substrata and the formation of biofilms in vitro. The interaction between RapA1 and the acidic exopolysaccharide (EPS) was examined as well as the requirement for EPS and a functional PrsDE for biofilm formation in continuous-flow conditions. The subcellular localization of RapA1 and related proteins was also examined and putative mechanisms for localization were studied. Some additional studies on the effect of RapA1 overexpression on cell surface, the expression of other Rap family members and the analysis of the expression of adhesion-relevant genes were performed but only preliminary results were obtained. The intarections between surface polysaccharides and adhesion proteins is key for adhesion and biofilm formation; two important phenomena in the biology of Rhizobium and of great relevance to man.

Vota, Daiana Marina. "Eriptosis. Mecanismos involucrados y efecto protector de la eritropoyetina" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los procesos inflamatorios, frecuentemente asociados a anemia de enfermedades crónicas, podrían cumplir un rol en la inhibición de la eritropoyesis. La existencia de señales intracelulares comunes entre los procesos que regulan la eritropoyesis y la respuesta inflamatoria sugiere que la desregulación de un sistema podría explicar la disminución de la función del otro. Por otro lado, un daño directo sobre los eritrocitos maduros en circulación, causado por factores presentes en dichos procesos, podría contribuir también al desarrollo de anemia. Teniendo en cuenta que la identificación de factores que pueden afectar la sensibilidad de células eritroides a las diferentes señales recibidas permitiría conocer la interferencia de la inflamación en la eritropoyesis, se planteó como primer objetivo, dilucidar la interrelación entre diferenciación eritroide y apoptosis. Se observó una mayor sensibilidad de la línea eritroleucémica humana K562 a la acción proapoptótica de citoquinas proinflamatorias, como TNF-α e IL-1β, cuando las células se encontraban en etapa de diferenciación eritroide. El estudio de los mecanismos involucrados permitió sugerir, por primera vez, una posible explicación del efecto de TNF-α e IL-1β basada en la disminución de los niveles de la proteína antiapoptótica c-FLIP observada durante la diferenciación con hemina. Más aún, el tratamiento previo con el factor de crecimiento eritropoyetina (Epo) de las células inducidas a diferenciación eritroide las protegió de la acción proapoptótica a la vez que se detectó la modulación positiva de c-FLIP. La Epo contrarrestaría los cambios en las vías de señalización producidos durante el proceso de diferenciación eritroide permitiendo a las células mantener su resistencia a la apoptosis mediada por citoquinas proinflamatorias. Bajo ciertas circunstancias, eritrocitos maduros pueden sufrir autodestrucción prematura presentando alteraciones celulares similares a las de la apoptosis de una célula nucleada, razón por la que se denominó a este proceso eriptosis. Además de citoquinas, durante los procesos inflamatorios es frecuente encontrar incrementados los niveles de compuestos prooxidantes. Por ello, a continuación se enfocó el trabajo hacia la evaluación de un posible efecto directo de estos agentes sobre eritrocitos maduros. Se estudió el desarrollo de signos de eriptosis en los eritrocitos expuestos a citoquinas proinflamatorias (TNF-α, IL-1β e IFN-γ) y a agentes prooxidantes (NaNO2 y H2O2). Se encontró que éstos pero no las citoquinas indujeron traslocación de fosfatidilserina (PS) en la membrana del eritrocito. Para investigar los posibles mecanismos involucrados en la autodestrucción prematura de los eritrocitos, se analizaron cambios morfológicos y bioquímicos en el glóbulo rojo expuesto a dos condiciones: aumento masivo de calcio intracelular y exposición celular a NaNO2 y H2O2. Además de la externalización de PS, los eritrocitos bajo ambos tratamientos mostraron un incremento del nivel intracelular de calcio, ambas características típicas del desarrollo de eriptosis. Sólo en el modelo de estrés oxidativo se observó, además, el incremento de especies reactivas de oxígeno (ROS) y la disminución de glutation (GSH). La activación de la proteína PI3K parecería ser relevante en la eriptosis inducida por ambos modelos mientras que la activación de la fosfatasa PTP1B estaría favorecida en el modelo de sobrecarga de calcio. Las modificaciones de proteínas de membrana y los cambios en la morfología celular fueron también signos diferenciales entre ambos tratamientos. La Epo fue capaz de disminuir significativamente la inducción de la alteración en el estado redox celular por NaNO2 y H2O2. En cambio, no fue capaz de inhibir la traslocación de PS en el modelo de incremento de calcio. Las diferencias en los mecanismos involucrados en los dos modelos estudiados podrían explicar la acción diferencial de Epo sobre los eritrocitos inducidos a eriptosis por los diferentes agentes. En base a los resultados obtenidos y a otros trabajos realizados previamente en nuestro laboratorio, se decidió, en el siguiente paso, investigar si compuestos de aluminio pueden actuar como factores proeriptóticos. Experiencias in vivo e in vitro permitieron asociar la sobrecarga de aluminio con anemia. En este trabajo, se estudiaron mecanismos de acción del metal, utilizando un modelo de eritrocitos humanos sometidos a tratamiento prolongado in vitro con cloruro de aluminio. La aparición de eritrocitos con morfología anormal sugirió una interacción del metal con la superficie celular, sustentado por el hallazgo de elevada concentración de Al en la membrana celular. Se demostró que el Al induce signos de eriptosis, como externalización de PS, aumento de calcio intracelular y degradación de banda 3. El hallazgo de un incremento significativo de ROS en conjunto con una disminución de la concentración de GSH mostró un estado de estrés oxidativo. Un punto interesante es que la acción prooxidante del aluminio fue contrarrestada por la Epo. El hecho de que este resultado fuera similar a la prevención del desbalance óxido-reducción por la acción del antioxidante N-acetilcisteina (NAC), sugiere un rol antioxidante de la Epo. El efecto antieriptótico de la Epo podría contribuir a enriquecer el conocimiento acerca del rol fisiológico de esta hormona sobre células eritroides. Independientemente de cuál sea su mecanismo antioxidante, el efecto de Epo demostrado en este modelo de exposición a aluminio, así como en el modelo de estrés oxidativo, nos permite sugerir potenciales beneficios del tratamiento con la hormona en pacientes con anemia asociada a patologías con un ambiente redox alterado.

Abstract:
The first part of this study focused on the modulation of factors that would affect the sensitivity of erythroid differentiated cells to proinflammatory citokines, such as TNF-α and IL- 1β. The tumor necrosis factor alpha (TNF-α) affects a wide range of biological activities, such as cell proliferation and apoptosis. Cell life or death responses to this cytokine might depend on cell condition. Therefore, it was interesting to study whether erythroid differentiation may affect erythroid progenitors to apoptosis induced by proinflammatory cytokines. Hemin-differentiated K562 cells showed higher sensitivity to TNF-induced apoptosis than undifferentiated cells. At the same time, hemin-induced erythroid differentiation reduced c- FLIP expression. However, this negative effect was prevented by previous treatment with erythropoietin, which allowed the cell line to maintain c-FLIP levels. The results suggest that erythroid differentiation might deregulate the balance between growth promotion and death signals induced by TNF-α, depending on cell type and environmental conditions. The role of c-FLIP seemed to be critical in the protection of erythroid differentiated cells from apoptosis or in the determination of their sensitivity to TNF-mediated programmed cell death. Epo, which for the first time was found to be involved in the prevention of c-FLIP downregulation, proved to have an antiapoptotic effect against the proinflammatory factor. The identification of signals related to cell life/death switching would have significant implications in the control of proliferative diseases, and would contribute to the understanding of mechanisms underlying the anemia associated to inflammatory processes. Proinflammatory factors may not only affect the erythropoiesis process but also cause direct injury upon mature erythrocytes. Eryptosis is a process by which red blood cells can undergo self-destruction sharing several features with apoptosis. Since premature programmed erythrocyte death may be induced by different agents, in this work mechanisms involved in two eryptotic models (oxidative stress and cell calcium overload) were compared. Phosphatidylserine (PS) translocation and increased calcium content were common signs observed in erythrocytes exposed to sodium nitrite plus hydrogen peroxide or calcium ionophore A23187, while increased reactive oxygen species (ROS) and decreased reduced gluthation (GSH) levels were detected in the oxidative model. Protein kinase activation seemed to be an outstanding feature in eryptosis induced by oxidative stress whereas phosphatase activation was favored in the calcium overload model. Cell morphology and membrane protein alterations were also differential signs between both models. Erythropoietin was able to prevent cell oxidative unbalance, thus blunting PS translocation. However, the hormone favored intracellular calcium influx which could be the reason why it could not completely counteract the induction of eryptosis. Instead, erythropoietin was unable to inhibit PS externalization in the increased calcium model. The different mechanisms involved in the eryptotic models may explain the differential action of erythropoietin upon erythrocytes induced to eryptosis by different agents. Previous works developed in our laboratory suggested that aluminum compounds could be proeryptotic agents. The widespread use of aluminum provides easy exposure of humans to the metal and its accumulation remains a potential problem. In vivo and in vitro assays have associated Al overload with anemia and erythrocyte morphological and biochemical changes. To better understand the mechanisms by which aluminum affects human erythrocytes, these cells were exposed to long-term treatment with the metal using an in vitro model developed in our laboratory that mimic in vivo effects. The appearance of erythrocytes with abnormal shapes suggested metal interaction with cell surface, supported by the fact that high amounts of aluminum were found attached to cell membrane. Long-term incubation of human erythrocytes with Al induced signs of premature erythrocyte death (eryptosis), such as phosphatidylserine externalization, increased intracellular calcium, and band 3 degradation. Signs of oxidative stress, such as significant increase in ROS in parallel with decrease in the amount of GSH, were also observed. Interestingly, Epo protected erythrocytes from the prooxidative action of aluminum. Since this result was similar to that of the antioxidant N-acetylcysteine, it can be suggested an antioxidant ability of Epo. In conclusion, results provide evidence that chronic aluminum exposure may lead to biochemical and morphological alterations similar to those shown in eryptosis induced by oxidant compounds in human erythrocytes. The antieryptotic effect of Epo may contribute to enhance the knowledge of its physiological role on erythroid cells. Irrespective of the mechanism involved in its antioxidant action, this property of Epo shown in this model of aluminum exposure, let us suggest additional benefits of the Epo treatment in patients with anemia associated to altered redox environment.

Vivas, Quimey. "Algebras de Weyl generalizadas en el caso cuántico: isomorfismos y cohomología" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Vila, Gabriela Soledad. "Modelos radiativos para jets en binarias de rayos X" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Una propiedad notable de los sistemas astrofísicos acretantes a toda escala en el Universo es la producción de jets - flujos colimados, bipolares y extendidos de materia y campo electromagnético eyectados desde las cercanías de un objeto en rotación. Los microcuasares son binarias de rayos X con jets. Los jets en microcuasares emiten a lo largo de todo el espectro electromagnético. La radiación es no térmica, lo que indica que los jets aceleraran partículas hasta energías relativistas. Comprender el origen de la emisión electromagnética es, entonces, una de las maneras de explorar el interior de los jets. En esta tesis se desarrolla un modelo lepto-hadrónico para la radiación electromagnética de jets en microcuasares con estrellas compañeras de baja masa. Se considera la interacción entre las partículas relativistas con materia, radiación y campo magnético para obtener espectros de banda ancha. Se investiga cómo se modifica la forma de los espectros al variar los valores de los parámetros que modelan las condiciones físicas en los jets, dentro de las cotas impuestas por teoría y observaciones. Se presentan resultados generales y aplicaciones a sistemas específicos. En vista de la creciente calidad y cantidad de los datos que es actualmente posible obtener a altas y muy altas energías, se analizan en detalle las predicciones del modelo en la banda de rayos gamma. Los resultados podrán ser directamente contrastados en el futuro cercano con las observaciones de telescopios de rayos gamma espaciales y terrestres de presente y futura generación.

Abstract:
An outstanding feature of astrophysical accreting sources at all scales in the Universe is the production of jets - collimated, bipolar, extended flows of matter and electromagnetic field ejected from the surroundings of a rotating object. Microquasars are X-ray binaries that produce relativistic jets. Jets in microquasars emit along the whole electromagnetic spectrum. The radiation is non-thermal; this reveals that jets accelerate particles up to relativistic energies. Understanding the origin of the emission is, then, one way to probe the interior of jets. In this thesis we develop a lepto-hadronic model for the electromagnetic radiation from jets in microquasars with low-mass companion stars. We consider the interaction of relativistic particles with matter, radiation, and magnetic field, and obtain broadband spectral energy distributions. We investigate how the shape of the spectrum changes as the parameters that model the conditions in the jet are varied within the constraints imposed by theory and observations. We present general results, as well as applications to some specific systems. Motivated by the growing volume and quality of the data now becoming available at high and very high energies, we carefully analyse the predictions of the model in the gamma-ray band. The results will be directly tested in the near future with the present and forthcoming space-borne and terrestrial gamma-ray telescopes.

Travella, Ana Carolina. "Análisis de nuevos marcadores moleculares en Leucemia Linfocítica Crónica" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La leucemia linfocítica crónica (LLC) constituye la leucemia más frecuente en occidente, caracterizada por presentar un curso clínico variable, siendo de interés la búsqueda de nuevos marcadores. En este trabajo se estudiaron 223 pacientes con LLC mediante análisis citogenético, citomolecular y molecular. Los estudios citogenéticos y citomoleculares permitieron identificar 35 alteraciones estructurales no descriptas previamente en la literatura, siendo el cromosoma 8 el más frecuentemente implicado. El análisis del estado mutacional y los rearreglos del gen IGVH (immunoglobulin heavy chain variable gene), permitió caracterizar a nuestra población de pacientes con LLC, mostrando una distribución similar a la de los países Occidentales (IGVH3>IGVH1>IGVH4) con diferencias respecto de Asia y Brasil, sustentando variaciones en el background genético y/o en factores ambientales entre poblaciones. La evaluación de los niveles de expresión de los genes SEPT- 10, MCL-1, LPL, ADAM-29 y CLLU-1, mostró gran heterogeneidad que refleja la variabilidad característica de la LLC, y permitió establecer la asociación de la expresión LPL y ADAM-29 con las características citogenéticas de los pacientes, aspecto no explorado previamente. Estos estudios resaltan la importancia de profundizar la caracterización biológica y la comprensión de los mecanismos patogénicos de esta enfermedad tendiente a definir nuevos grupos de riesgo específicos.

Abstract:
Chronic lymphocytic leukemia (CLL) is the most frequent form of leukemia in Western world, characterized by a highly variable clinical course, being necessary the search for new prognostic markers. In this study, we described cytogenetic, citomolecular and molecular analysis of 223 CLL patients. Cytogenetic and citomolecular results showed 35 new structural abnormalities not previously described in the literature, being chromosome 8 the most frequently involved. The mutational status of the IGVH (immunoglobulin heavy chain variable genes) gene in our cohort showed a family distribution similar to that observed in Western countries (IGVH3>IGVH1>IGVH4) and different to CLL patients from Asia and Brazil, that may reflect variations in the genetic background and/or environmental factors of their populations. Expression profiles of SEPT-10, MCL- 1, LPL, ADAM-29 and CLLU-1 genes showed great heterogeneity that may reflect characteristic variability of CLL patients, and showed association between LPL and ADAM-29 with cytogenetic features in our cohort, data not previously described in the literature. This results remarks the importance of biological characterization and understanding of pathogenic mechanisms of this disease in order to define specific risk groups.

Testa Fernández, Juan José. "Estudios fotocatalíticos de reducción y oxidación con TiO2, Fe/TiO2 y Pt/TiO2" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo de este trabajo de tesis es el estudio de la reacción fotocatalítica de remoción de Cr(VI) de suspensiones acuosas con TiO2 y nuevos fotocatalizadores, en presencia y ausencia de compuestos orgánicos oxidables, y la elucidación de los mecanismos involucrados en la misma. En el capítulo 1 se desarrolla la introducción al tema, en la cual se presentan las tecnologías avanzadas de oxidación (TAOs), se explican los fundamentos del modelo de bandas sobre semiconductores, se hace el análisis de las interfaces semiconductor-metal y semiconductorsolución, se presenta la Fotocatálisis Heterogénea sobre TiO2, detallando las distintas variables que influyen sobre ella y su mecanismo general. Finalmente, se exponen las distintas formas del cromo y su importancia como contaminantes, y se presentan los antecedentes sobre su reducción fotocatalítica. El capítulo 2 está dedicado a la presentación y análisis de los datos obtenidos en los ensayos realizados con el fin de determinar el mecanismo de reducción fotocatalítica de Cr(VI) con TiO2 Evonik P25, el fotocatalizador patrón. La irradiación se llevó a cabo con longitudes de onda en el intervalo de 300 a 400 nm. Se realizó la evaluación cinética de los perfiles de decaimiento de Cr(VI) durante la reacción, a pH 2 y 3, en ausencia de donores orgánicos y en presencia de ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) y ácido oxálico. También se estudió el efecto de la presencia de oxígeno sobre la reducción de Cr(VI). Todos los experimentos se desarrollaron a dos o más pH y en sistemas abiertos al aire y con atmósfera de nitrógeno. Fueron fundamentales para la elucidación del mecanismo los resultados de fotocatálisis realizados en la cavidad de un espectróscopo de resonancia paramagnética electrónica (RPE) en el que se pudo identificar especies paramagnéticas de Cr(V). El análisis de los resultados experimentales mostró que los mismos son consistentes con un mecanismo de reducción de Cr(VI) a Cr(III) en tres etapas monoelectrónicas. Los capítulos 3 y 4 están dedicados a la evaluación de nuevos fotocatalizadores de TiO2 modificados para la reducción de Cr(VI). El primero de ellos está centrado en muestras de TiO2 modificadas con Fe, sintetizadas por dos técnicas diferentes, impregnación y sol-gel, usando dos precursores (nitrato férrico y acetilacetonato férrico) para introducir el Fe y con dos cargas distintas del mismo. El capítulo 4 evalúa muestras de TiO2 modificadas con platino, preparadas por fotodeposición y conteniendo distintas cargas de Pt sobre dos muestras comerciales. Incluye la síntesis y caracterización de las muestras de Pt-TiO2 mediante técnicas tales como la determinación del área específica (BET), difracción de rayos x, microscopías electrónicas de barrido y de transmisión, y espectroscopía de reflectancia difusa. Los estudios fotocatalíticos de ambos capítulos se realizaron en ausencia y presencia de EDTA como donor de electrones, y en sistemas abiertos al aire y en atmósfera de nitrógeno. En el capítulo 3, además, se trabajó a dos pH (6,6 y 2). En todos los casos se analizaron los perfiles cinéticos mediante los ajustes correspondientes y se evaluó la eficacia de los fotocatalizadores en base a los niveles de reducción de cromo a diferentes tiempos de irradiación. El análisis de los datos de ambos capítulos permitió establecer claramente cuáles de las muestras estudiadas tienen mayor eficiencia y en qué condiciones se maximiza la misma, así como decidir en qué casos sería conveniente reemplazar las muestras comerciales tradicionalmente empleadas en Fotocatálisis Heterogénea por las estudiadas.

Abstract:
The aim of this thesis (research) is the study of the reaction involved in the photocatalytic removal of Cr (VI) from aqueous suspensions by means of TiO2 and other new photocatalysts, both in the presence and in the absence of oxidizable organic compounds, and elucidation of the mechanisms involved in it. Chapter 1 is an introduction to the subject, in which advanced oxidation technologies (AOTs) are described, the fundamentals of the semiconductor band model are presented, and an analysis of semiconductor-metal and of semiconductor-solution interfaces is presented. The Heterogeneous Photocatalysis on TiO2 is also described, detailing the different variables influencing it and its general mechanism. Finally, Chapter 1 presents the different forms of chromium and their importance as pollutants, and provides background on their photocatalytic reduction. Chapter 2 is devoted to the presentation and analysis of data obtained in experiments performed to determine the mechanism of the photocatalytic reduction of Cr (VI) with TiO2 Evonik P25, the photocatalyst standard. The irradiation was carried out with wavelengths in the range 300 to 400 nm. An evaluation was performed of the kinetic decay of Cr (VI) during the reaction, at pH 2 and 3, in the absence of organic donors and in the presence of EDTA and oxalic acid. The effect of the presence of oxygen on the reduction of Cr (VI) was also studied. All experiments were conducted at two or more pH levels in open systems with air and under nitrogen. The results achieved in the experiments developed in the cavity of an electron paramagnetic resonance spectroscope (EPR), in which paramagnetic species from Cr(V) could be identified, were fundamental in the elucidation of the photocatalysis mechanism. The analysis of the experimental results showed that they are consistent with a reduction mechanism of Cr (VI) to Cr (III) in three stages of one electron. Chapters 3 and 4 are devoted to the evaluation of new TiO2 photocatalysts modified to reduce Cr (VI). Chapter 3 is centered on samples of TiO2 modified with Fe, synthesized by two different techniques, impregnation and sol-gel, using two precursors (ferric nitrate and ferric acetylacetonate), and whit two charges of it. Chapter 4 evaluates samples of TiO2 modified with platinum, prepared by photodeposition and containing different Pt loadings on two commercial samples. It includes the description of the synthesis and characterization of Pt-TiO2 samples by techniques such as determining the specific area (BET), x-ray diffraction, scanning electron microscopy, transmission electron microscopy and diffuse reflectance spectroscopy. The photocatalytic studies assays explained in both chapters were performed both in the absence and in the presence of EDTA as electron donor, and in open air systems and in nitrogen. In Chapter 3, in addition, assays were performed with two different pH levels (6.6 and 2). In all cases kinetic profiles were analyzed using the appropriate adjustments and the efficacy of the photocatalysts was evaluated based on chromium reduction levels at different irradiation times. The analysis of data from both chapters allowed establishing which of the samples studied have greater efficiency and under what conditions it is maximized; this was useful to determine in which cases it would be convenient to replace the commercial samples usually employed in heterogeneous photocatalysis with the samples proposed in this thesis.

Teitelbaum, Tomás. "El decaimiento libre de flujos turbulentos rotantes" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis se presenta un estudio detallado del decaimiento libre de flujos turbulentos rotantes tridimensionales (3D), y de flujos rotantes y estratificados en la aproximación cuasi-geostrófica de superficie, sometidos a distintas condiciones iniciales. En el caso de la turbulencia rotante 3D se usa la conocida cuasi- bidimensionalización para predecir los distintos decaimientos, proponiendo un método original que consiste en estudiar la energía presente en modos bidimensionales (2D) y 3D de manera independiente. Con el mismo fin, se introduce el uso de dos nuevas magnitudes conservadas anisótropas, relacionadas con el momento lineal y angular en la dirección paralela al eje de rotación. Los resultados indican que las leyes del decaimiento de la energía no son universales, dependiendo de la forma en que los flujos son excitados inicialmente. Las leyes de potencia observadas para el decaimiento son afectadas por las correlaciones en las escalas grandes, por la cantidad neta de helicidad presente inicialmente, por el grado inicial de anisotropía, y por la formación de estructuras coherentes. Para todos los casos estudiados se logra predecir las leyes de potencia observadas en las simulaciones mediante modelos fenomenológicos, conocidas las condiciones iniciales. Los flujos estratificados fuertemente rotantes se estudian utilizando la aproximación cuasi-geostrófica de superficie, derivada a partir de las ecuaciones de Navier-Stokes. Se presentan soluciones estadísticas de equilibrio para las ecuaciones ideales, verificando su validez en simulaciones numéricas. Las soluciones estadísticas del sistema ideal permiten predecir el sentido de la transferencia y cascadas de las dos magnitudes cuadráticas (la pseudoenergía y la pseudo-enstrofía) conservadas por el sistema. A partir de estos resultados se predice la tasa de decaimiento de la pseudo-enstrofía, teniendo en cuenta el efecto de las estructuras coherentes en el flujo. La predicción es verificada para número de Reynolds muy alto en simulaciones del sistema viscoso y en simulaciones ideales.

Abstract:
In this thesis we present a numerical study of freely decaying turbulent rotating three dimensional (3D) flows, and of rotating and stratified fluids under the surface quasi-geostrophic approximation. In both cases we explore a wide variety of initial conditions. In the case of 3D rotating turbulence we propose an original approach considering the energy contained in 2D and 3D modes separately, and take advantage of the well known bidimensionalizating process common in these systems. Also, we introduce two new anisotropic conserved quantities related to the angular and linear momentum parallel to the rotation axis. The results show that the energy decay rates are sensitive to the initial conditions and no single universal solution appears to exist. The different decay laws observed indicate that rotating turbulence is affected by initial large scale correlations in the flow, by the initial content of helicity, by the anisotropy in the initial conditions, and by the formation of coherent structures. For every initial condition studied, we use phenomenological models to predict the decay laws observed in the simulations. We then study stratified flows under strong rotation using the surface quasi-geostrophic (SQG) approximation derived from the Navier-Stokes equations. We derive statistical equilibrium solutions of the inviscid equations, and verify the validity of these solutions in numerical simulations. The statistical solutions of the inviscid equations allow us to predict the direction in which the two quadratic invariants of the system (the pseudo-energy and pseudo-enstrohpy) cascade in the viscous case. Using these results, we predict the decay rate of the pseudo-enstrophy considering also the effect of coherent structures in the flow evolution. These predictions were validated using numerical simulations of viscous and inviscid systems.

Teijo, María Julieta. "Mecanismos de muerte y supervivencia celular por terapia fotodinámica basada en ácido 5-aminolevúlico" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La Terapia Fotodinámica (TFD) es utilizada para el tratamiento del cáncer y otras patologías no malignas. Se basa en la administración un compuesto fotosensibilizante (FS) que se acumula selectivamente en el tejido maligno y al recibir luz de longitud de onda adecuada, éste interactúa con el O2 produciendo especies reactivas del oxígeno (ROS), que son altamente tóxicas y desencadenan la muerte celular. La administración exógena del ácido 5-aminolevúlico (ALA), precursor biológico de la síntesis de los tetrapirroles, induce la acumulación de protoporfirina IX (PpIX), el único FS endógeno. En la erradicación de tumores mediante TFD intervienen diferentes procesos de muerte celular, los que incluyen apoptosis, necrosis, y autofagia. En el presente trabajo se estudiaron los mecanismos que llevan a la muerte celular por TFD basada en ALA en células de adenocarcinoma de pulmón humanas (A549) cultivadas de modo convencional -en monocapa- o en esferoides multicelulares (EMCs, agregados celulares compactos que desarrollan gradientes de nutrientes y oxígeno), y en una variante resistente derivada mediante sucesivos ciclos de tratamiento fotodinámico y recuperación. La acumulación de PpIX a partir de ALA aumentó con el tiempo de incubación y la concentración de ALA hasta alcanzar un plateau con 1 mM tanto en monocapas como en EMCs. Estudios de microscopía confocal indicaron que las mitocondrias son el principal sitio de localización de PpIX endógena pero no de PpIX administrada exógenamente, la cual se localiza en la membrana plasmática. Los EMCs presentaron una capacidad de síntesis de PpIX similar a las células en monocapa, mientras que en células resistentes se observaron niveles menores de acumulación. La TFD-ALA reduce significativamente la supervivencia celular de manera dosis lumínica dependiente aunque en menor medida tanto en células resistentes como en EMCs. La TFD-ALA induce en las células la generación de ROS tales como ¹O2, O2ֿ y peróxidos, en células en monocapa pero no en EMCs; y esa producción puede ser modulada por agentes antioxidantes de alto grado de protección como el ascorbato y el trolox, con un consecuente aumento en la viabilidad celular. Se observaron eventos asociados a apoptosis 1 h luego de la TFD: reducción del tamaño celular, irregularidades en la membrana plasmática, condensación de la cromatina, despolarización de la membrana mitocondrial, liberación de citocromo c al citoplasma, externalización de fosfatidilserina y activación de caspasa-3. En cambio, tanto en EMCs como en células resistentes se observó una reducción notable en la producción de ROS y en los parámetros de apoptosis. Por otro lado, en todos los casos se hallaron indicios de un proceso autofágico, caracterizado por la formación de vacuolas de doble membrana y la detección de LC3-II, así como la expresión de la proteína antiapoptótica Bcl-2. La activación del factor nuclear NFκB únicamente se halló en células tratadas con dosis bajas de TFD, mientras que las células resistentes mostraron presencia de este factor en el núcleo en todos los tiempos de irradiación, de manera creciente. Los resultados obtenidos en este trabajo permiten determinar que los mecanismos de muerte celular post-TFD ocurren principalmente por la vía apoptótica intrínseca, pueden ser modulados por agentes antioxidantes, y coexisten con procesos autofágicos. Por otro lado, el modelo de EMCs es más adecuado para el estudio de los efectos de la TFD-ALA respecto de la monocapa, ya que simula la estructura de microtumores avasculares y refleja características histológicas como la secreción de mucopolisacáridos y la expresión del factor inducido por hipoxia (HIF1-α). La autofagia es el mecanismo principal de respuesta a TFD en células resistentes, las cuales a su vez incrementan mecanismos de sobrevida como la activación de NFκB. Estos son factores condicionantes de la eficacia del tratamiento a considerar al aplicar TFD repetidamente en el tratamiento de tumores y al emplear agentes antioxidantes para minimizar el fotodaño a tejidos no tumorales.

Abstract:
Photodynamic therapy (PDT) is a treatment for malignant and non malignant pathologies. It consists on the administration of a photosensitizing drug (PS) which selectively accumulates in tumor cells and upon irradiation with appropriate wavelength light reacts with O2 and produces reactive oxygen species (ROS) leading to cell death. Exogenous administration of 5-aminolevulinic acid (ALA) induces the accumulation of the endogenous PS, protoporphyrin IX (PpIX). Different cell death pathways develop after PDT, such as apoptosis, necrosis, and autophagy. Mechanisms of cell death after ALA-PDT were evaluated in a human adenocarcinoma cell line (A549) cultured in conventional monolayers, or as multicellular spheroids (MCSs, compact cell aggregates which generate nutrient and oxygen gradients) and in a derived PDT-resistant cell culture obtained after repetitive PDT-recovery cycles. PpIX accumulation from exogenous ALA increased with incubation time and ALA concentration reaching a plateau at 1 mM, both in monolayers and MCSs. Confocal microscopy images showed that endogenously generated PpIX localized in mitochondria, and exogenous PpIX in the plasma membrane. Similar PpIX accumulation rates were found in MCSs with respect to monolayers, whereas derived resistant cells showed lower levels. ALA-PDT significantly reduced cell survival in a light-dose dependent manner, but to a lesser extent in resistant cells and MCSs. Cells subjected to ALA-PDT in monolayers produce ROS like ¹O2, O2ֿ and peroxides, but not in MCSs. They can be modulated by high protection grade antioxidants such as ascorbate or trolox, with the consequent increase in cell viability. Several apoptosis related features were observed after PDT: cell shrinking, membrane blebbing, chromatin condensation, mitochondrial membrane despolarization, cytocrome c release to the cytoplasm, phosphatidylserine externalization and caspase-3 activation. MCSs and resistant cells showed a marked reduction in ROS production and apoptotic features; as well as autophagic signs including doble membrane vacuoles and LC3-II detection, in addition to antiapoptotic protein Bcl-2 expression. Nuclear factor NFκB was detected only after low dose PDT, but in resistant cells all irradiation times showed presence of NFκB in the nucleus, increasing with irradiation time. Results presented in this work indicate that cell death mechanisms induced by ALA-PDT occur mainly by the apoptotic intrinsic pathway, which can be modulated by antioxidant agents, and coexist with autophagic processes. In addition, MCSs are an appropriate model for the study of ALA-PDT because they mimic avascular microtumors and present hystological features like mucopolysacharides secretion and hipoxia-inducible factor expression (HIF1-α). Autophagy is the principal cell death pathway occurring in resistant cells in which increased survival mechanisms, like NFκB activation, were found. Factors conditioning PDT efficacy should be considered when applying repetitive PDT for tumor treatment together with the use of antioxidants to minimize photodamage to non malignant tissue.

Teich, Ingrid. "Análisis de la estructura genética espacial de especies arbóreas y su asociación con la variabilidad fenotípica y ambiental" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Este trabajo aborda el análisis de estructura genética espacial (EGE) en especies arbóreas nativas de importancia para Argentina, y su asociación a otras variables, desde un enfoque interdisciplinar que incluye perspectivas biológicas y metodológicas. Mediante la revisión y comparación del desempeño de métodos estadísticos para detectar y caracterizar EGE, según distintos escenarios biológicos, se recomiendan estrategias analíticas para el estudio espacial de la variabilidad genética y su asociación con variables ambientales y fenotípicas. Se analizó la EGE a escala fina en un enjambre híbrido de Prosopis spp., encontrando significativa asociación de ésta con la variabilidad morfológica; información relevante para el ordenamiento del recurso genético algarrobo. También se analizó la correspondencia entre la variación espacial de la diversidad genética de poblaciones de Polylepis australis, a lo largo de su rango de distribución, y la inestabilidad del ambiente usando nuevos índices de heterogeneidad temporal del paisaje derivados de imágenes satelitales. Se concluye, que sitios ambientalmente más estables albergan mayores niveles de diversidad genética para esta especie. El estudio de EGE en árboles, y su asociación con variabilidad fenotípica y ambiental, permite inferir procesos evolutivos-ecológicos, que aportan conocimiento para mejorar el manejo y conservación de los bosques.

Abstract:
In this work, the analysis of spatial genetic structure (SGS) of native tree species and its association with other variables is investigated with an interdisciplinary approach, including both the methodological and biological perspectives. Through the revision and comparison of the performance of statistical methods used to detect and characterize SGS, under different biological scenarios, we recommend and propose analytic strategies to spatially analyze genetic variability. We analyzed the SGS at fine scale of a Prosopis spp. hybrid swarm and found a significant correlation with its morphological variability, facilitating the differentiation of biological units that are object of management and improvement of the Algarrobo genetic resource. We also characterized the spatial pattern of Polylepis australis genetic diversity and differentiation along its entire distribution range and found that they differ from historical migration scenarios observed in the northern hemisphere. We found a significant correlation between genetic diversity and environmental instability indices derived from satellite imaginary, concluding that more environmentally stable sites show higher levels of P. australis genetic diversity. The study of SGS in tree species and its association with other variables allows the inference of ecological and evolutionary processes, providing relevant information for the management and conservation of native forests.

Sueiro, María Cruz. "Plantas vasculares como agentes modificadores de ecosistemas en la costa patagónica" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En las costas de Patagonia, aquellos ambientes costeros que poseen la fisonomía típica de un intermareal rocoso pero están dominados por el tipo de plantas vasculares que dominan y caracterizan las marismas de sustratos blandos se han designado recientemente como marismas rocosas. Spartina densiflora, la especie vegetal dominante en la mayoria de las marismas rocosas relevadas, es considerada un organismo bioingeniero gracias a su capacidad de modificar, mantener, y/o crear hábitats. En este trabajo se describen las variables físicas y biológicas en areas donde esta especie vegetal se halla presente y se estudian cuales son los efectos que ejerce sobre la estructuración de los ensambles de macroinvertebrados asociados. Se encontró que la presencia de esta halofita amortigua las condiciones físicas estresantes de los ambientes intermareales y que los ensambles de macorinveretabrados asociados a su presencia difieren en su distribución y abundancia con respecto a los sitios vecinos sin vegetación. La realización de experimentos manipulando la presencia de S. densiflora, mediante transplantes de plantas vivas así como de estructuras artificiales que imitan su arquitectura, permitió evidenciar el efecto positivo que ejercen esta halófita sobre la abundancia y riqueza de los macroinvertebrados presentes en las marismas rocosas estudiadas. Se encontró además que tal efecto es llevado a cabo principalmente por la estructura física que proveen las plantas, independientemente de sus propiedades biológicas y ecológicas. Los resultados que presento en esta Tesis muestran que este efecto actúa no solo sobre las especies nativas, sino que también favorece la presencia de una especie invasora de crustáceo. Estos resultados aportan información novedosa y destacan la importancia del rol que desempeña la bioingeniera Spartina densiflora en la estructuración de las comunidades de invertebrados en marismas rocosas de Patagonia. La Tesis expone y discute diversos mecanismos por medio de los cuales la estructura fisica y complejidad ambiental generada por organismos bioingenieros pueden condicionar la composición faunística en tiempo y espacio.

Abstract:
On Patagonian coasts, those environments which have the typical appearance of a rocky intertidal but are dominated by the type of vascular plants that dominate and characterize soft substratum salt marshes were recently designated as rocky salt marshes. Spartina densiflora, the dominant plant species in the rocky salt marshes surveyed, is considered a bioengineer due to its ability to modify, maintain, and / or create habitats. This study describes the physical and biological variables that are associated with the presence of this plant species and evaluates its effects on the structure of the associated macroinvertebrate assemblages. It was found that the presence of S. densiflora buffered of the stressful physical variables of intertidal environments and that their associated macroinvertebrate assamblages differ in their distribution and abundance from those found on unvegetated patches. Through manipulative experiments that included transplants of live plants and plastic structures simulating the architecture of S. densiflora, it was found that this halophyte has a positive effect on the abundance and richness of macroinvertebrate assemblages and that its physical structure was the major factor influencing the assemblages. This positive effect acted not only on local invertebrate species, but also favors the presence of a non native species of crustacean. These results provide novel information and highlight the central role played by the bioengineer Spartina densiflora in structuring invertebrate communities in Patagonian rocky salt marshes.

Stigliano, Ivan Daniel. "Rol de la subunidad beta de la glucosidasa II en el control de calidad del plegamiento de glicoproteínas en el retículo endoplásmico" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La Glucosidasa II (GII) cumple un rol fundamental en la biogénesis de glicoproteínas en el retículo endoplásmico (RE). Es responsable por la remoción secuencial de los dos residuos de glucosa (Glc) más internos del glicano (Glc3Man9GlcNAc2) transferido a los residuos de Asn en las glicoproteínas nacientes en la vía secretoria. GII participa en los ciclos de Calnexina (CNX)/Calreticulina (CRT) ya que remueve el residuo de Glc agregado a intermediarios de plegamiento por la UDP-Glc:glicoproteína glucosiltransferasa (UGGT). La GII un es un heterodímero soluble del RE cuya subunidad α (GIIα) posee el sitio catalítico mientras que el rol de la subunidad β (GIIβ) es controvertido, si bien ha sido involucrada en la retención en el RE de GII y en el plegamiento de GIIα. En esta tesis demostramos que en ausencia de GIIβ, la subunidad catalítica GIIα de la levadura de fisión Schizosaccharomyces pombe (un organismo que posee un mecanismo de control de calidad de plegamiento de proteínas similar al presente en células de mamíferos) adopta una conformación activa y es capaz de hidrolizar el análogo de sustrato p-nitrofenil-α-D-glucopiranósido. Sin embargo GIIβ es necesaria para la correcta localización de GII en el RE y para la deglucosilación eficiente de los sustratos fisiológicos Glc2Man9GlcNAc2 y Glc1Man9GlcNAc2. El dominio homólogo al dominio lectina del receptor de Manosa 6-fosfato presente en el C-terminal de GIIβ interacciona con manosas en las ramas B y/o C de los N-glicanos mediando la hidrólisis del sustrato por GIIα. Demostramos, también, que el dominio G2B del N-terminal de GIIβ es necesario para la interacción GIIα-GIIβ. Por último, demostramos que una reducción en el contenido de manosas de los N-glicanos disminuyó significativamente la deglucosilación in vivo mediada por GII pero no afectó la glucosilación in vivo mediada por UGGT, favoreciendo la formación de derivados monoglucosilados. Esto sugiere que GII funcionaría como un regulador de la permanencia en los ciclos de CNX/CRT de las glicoproteínas que se pliegan muy lentamente, y por lo tanto han sido demanosiladas, otorgando más oportunidades de plegamiento a las proteínas antes de enviarlas a degradación.

Abstract:
Glucosidase II (GII) plays a key role in glycoprotein biogenesis in the endoplasmic reticulum (ER). It is responsible for the sequential removal of the two innermost glucose residues from the glycan (Glc3Man9GlcNAc2) transferred to Asn residues in proteins. GII participates in the Calnexin (CNX)/Calreticulin (CRT) cycle as it also removes the single glucose unit added to folding intermediates and misfolded glycoproteins by the UDPGlc: glycoprotein glucosyltransferase (UGGT). GII is a heterodimer whose α subunit (GIIα) bears the glycosyl hydrolase active site, whereas its β subunit (GIIβ) role is controversial and has been reported to be involved in GIIα ER retention and folding. Here, we report that in the absence of GIIβ, the catalytic subunit GIIα of the fission yeast Schizosaccharomyces pombe (an organism displaying a glycoprotein folding quality control mechanism similar to that occurring in mammalian cells) folds to an active conformation able to hydrolyze p-nitrophenyl- α-D-glucopyranoside. However, GIIβ is required for correct GII ER retention and for efficient deglucosylation of the physiological substrates Glc2Man9GlcNAc2 and Glc1Man9GlcNAc2. The interaction of the mannose 6-phosphate receptor homologous domain present in the Cterminal of GIIβ and mannoses in the B and/or C arms of the glycans mediates N-glycan hydrolysis enhancement. We also found that the N-terminal GIIβ G2B domain is essential for GIIα-GIIβ interaction. Finally, we show that a decrease in the N-glycan mannose content significantly diminished in vivo GII-mediated deglucosylation but did not affect in vivo UGGT activity. This suggests that GII may be an in vivo regulator of misfolded and slow-folding glycoprotein permanence in the ER as these glycoproteins are characterized by a detectable ER mannosidase(s)-catalyzed N-glycan demannosylation and therefore, an increased possibility of displaying monoglucosylated structures able to interact with CNX or CRT for longer time periods is likely to occur.

Sotelano, María Paula. "Biología de los estadios juveniles tempranos de Lithodes santolla del Canal Beagle, Ushuaia, Tierra del Fuego" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La presente tesis profundiza en el conocimiento de la biología y comportamiento de los primeros estadios de juveniles de L. santolla, poniendo especial hincapié en el crecimiento y las relaciones intra-específicas (canibalismo) de los individuos de esta especie de alto valor comercial. Se observó que el canibalismo está presente en todos los estadios juveniles de la especie, incluso durante el período intermuda. El canibalismo puede alcanzar hasta el 75 o el 83% cuando coexisten estadios consecutivos o individuos de diferentes cohortes respectivamente. La condición de muda, densidad, disponibilidad de sustrato y/o refugio así como la dieta, influyen sobre el canibalismo y se propone su manipulación para la optimización de la supervivencia de juveniles de centolla en condiciones de cultivos masivos. La optimización de técnicas de cultivo de larvas y juveniles de centolla es altamente necesaria, ya sea para investigación, acuicultura o estrategias de repoblamiento. La información obtenida, conjuntamente con los conocimientos sobre el hábitat de reclutamiento, resultará útil para diagramar las condiciones de un futuro subsidio poblacional de L. santolla, cuya pesquería en el Canal Beagle se encuentra actualmente colapsada.

Abstract:
This thesis broadens the biological and behavioral knowledge of early juvenile stages of Lithodes santolla, emphasizing research on growth and intra-specific relationships (cannibalism) among individuals of this commercially valuable species. Cannibalism was present in all juvenile stages and even during the intermolt period. Cannibalism could cause up to 75 or 83% of animal damage, if consecutive stages or individuals of different cohorts coexisted, respectively. Molt condition, density, substrate and/or refuge availability and diet influenced cannibalism; therefore, its manipulation is proposed to optimize juvenile survival under massive culture conditions. Optimization of larval and juvenile culture techniques is extremely necessary for research, aquaculture or even wild stock enhancement strategies. The information acquired here, together with knowledge about habitats for recruitment, will be useful to design conditions for future L. santolla population stocking in the Beagle Channel, as this fishery is currently collapsed.

Sonzogni, Silvina Verónica. "Participación de p19INK4d en la inducción de senescencia genotóxica y replicativa" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
A lo largo de la evolución, los organismos con tejidos renovables han desarrollado mecanismos para prevenir la tumorigénesis. Entre ellos, podemos mencionar a la senescencia celular y a la apoptosis. La senescencia se caracteriza por el arresto permanente del ciclo celular en respuesta a insultos tanto endógenos como exógenos. En los últimos años se han estudiando las moléculas involucradas en la activación de este mecanismo, destacándose la participación de los inhibidores de quinasas dependientes de ciclinas (CKIs) p21Cip1, p16INK4a y p15INK4b. En nuestro laboratorio se ha demostrado que la proteína p19INK4d (p19), un miembro de la familia INK4 de CKIs, se induce significativamente en respuesta a diversos genotóxicos aumentando la eficiencia de la reparación del ADN. El daño al ADN es un agente causal común de la respuesta senescente, independientemente del estímulo que le da origen. Los efectos provocados por diferentes inductores, tales como las especies reactivas de oxigeno (considerablemente aumentadas a lo largo del envejecimiento), los agentes genotóxicos (frecuentemente empleados en quimioterapia) o la activación de oncogenes, culminan dañando al ADN y activando en consecuencia mecanismos de arresto del ciclo celular. El arresto es dependiente de factores que controlan la progresión del ciclo tales como p53 y pRb-p16. Si bien estos son lo principales efectores moleculares involucrados en la iniciación y mantenimiento del estado de senescencia, las proteínas que participan en los mecanismos que sostienen la irreversibilidad del arresto del ciclo no han sido aún identificadas. La proteína p19 desempeña un papel importante en la respuesta celular frente al daño al DNA, además de ser un inhibidor del ciclo celular en la fase G1. Estas propiedades la convierten en un factor con potencial para participar en la iniciación y/o mantenimiento del estado de senescencia. El objetivo general de este trabajo de investigación consiste en determinar la participación de p19 en la inducción y/o mantenimiento de la senescencia. En este trabajo demostramos por primera vez que p19 induce su expresión en respuesta a distintos tipos de senescencia. Dicha inducción va acompañada de un arresto irreversible del ciclo y se correlaciona con la aparición de distintos marcadores de senescencia. Entre ellos, el aumento en la expresión p16INK4a y p21. La inducción de estos dos genes se corresponde temporalmente con la de p19, lo que indica que p19 se induce tempranamente en respuesta a un estímulo que dispara la senescencia. Demostramos que hay una relación directa entre la inducción de p19 y el establecimiento de la senescencia, dado que modulando los niveles de p19 se observó una alteración en el arresto del ciclo y en la actividad β-galactosidasa asociada a senescencia. Se observó que la inducción de p19 esta regulada a nivel transcripcional. En senescencia genotóxica la inducción depende de E2F, sin embargo en senescencia fisiológica, pese a que hay un efecto inductor a nivel transcripcional, es independiente de este factor. La activación de p19 en senescencia está mediada por la vía de señalización relacionada a la respuesta general al daño, es decir la vía ATM/ATR--Chk1--p53. Por otro lado también se observó que p38 esta involucrada en la inducción de p19. En respuesta a un estímulo senescente, p19 se transloca al núcleo y se une fuertemente a la cromatina, particularmente a la fracción correspondiente a la heterocromatina. Cuando se analizaron los niveles de mRNA y proteína de p19 en diversos tejidos de ratones de distintas edades, se observó un aumento en los niveles de p19 directamente correlacionado a la edad de los ratones. Esto nos indica que la inducción de p19 no se limita solamente a los modelos de cultivos celulares utilizados, sino que también hay una correlación entre el aumento de expresión de p19 y el envejecimiento de un mamífero. Descifrar los mecanismos involucrados en senescencia así como identificar las proteínas que participan tanto en su inducción como en su mantenimiento en respuesta a diferentes insultos, resulta un gran desafío para el desarrollo de estrategias para combatir el cáncer y enfermedades asociadas al envejecimiento.

Abstract:
During evolution, organisms with renewable tissues have developed mechanisms to prevent tumorigenesis, including cellular senescence and apoptosis. Cellular senescence is characterized by a permanent cell cycle arrest triggered by endogenous as well as exogenous stress. Over the years, studies on the molecules involved in the activation of this mechanism have highlighted the role of the cyclin-dependent kinase inhibitors (CKIs) p21Cip1, p16INK4a and p15INK4b. In our laboratory, the p19INK4d protein, a member of the INK4 family of CKIs, has been shown to become significantly induced in response to various types of genotoxic stress and to stimulate DNA repair. DNA damage is a common trigger of cellular senescence, independently of the stimulus that originated it. As such, oxygen reactive species (significantly increased during aging), genotoxic drugs (frequently used in chemotherapy) or oncogene activation lead to DNA damage and consequently activate the cell cycle arrest machinery. The arrest requires factors that regulate cell cycle progression such as p53 and pRb-p16. Although these are the main molecular effectors involved in the initiation and maintenance of the senescent state, the proteins responsible for the irreversibility of the cell cycle arrest remain yet to be identified. The p19 protein plays an important role in the cellular DNA damage response, in addition to being a G1-phase cell cycle inhibitor. These attributes point to p19 as a potential factor involved in the initiation and/or maintenance of the senescent state. The aim of this thesis is therefore to examine the role of p19 in the induction and/or maintenance of cellular senescence. The data presented here shows for the first time that p19 expression is upregulated by different types of senescence. This induction is associated with an irreversible cell cycle arrest and correlates with the appearance of multiple markers of cellular senescence, including an increase in p16INK4a and p21 expression. The up regulation of these two genes temporarily correlates with that of p19, suggesting that p19 is early induced following stimuli that trigger the senescence program. Modulation of p19 levels affected cell cycle arrest and senescence-associated β-galactosidase activity, indicating a direct link between p19 induction and the establishment of cellular senescence. Although this induction occurs at the transcriptional level for both genotoxic-induced and physiological (replicative) senescence, it is mediated by distinct mechanisms, requiring the E2F transcription factors only in the first context. p19 activation during senescence is mediated by the canonical DNA damage signaling pathway ATM/ATR--Chk1--p53. Finally, p38 is also shown to be involved in p19 induction. Following a senescence-triggering stimulus, p19 translocates to the nucleus and tightly associates with chromatin, particularly the fraction corresponding to heterochromatin. Analysis of p19 mRNA and protein levels in several tissues from differently aged mice revealed an up regulation of p19 that correlates with age. This indicates that p19 induction is not limited to the cell culture models used and that there is a correlation between p19 expression and the aging of a mammal. To elucidate the mechanisms involved in senescence and to identify the proteins that mediate its induction as well as its maintenance constitute an important challenge for the development of therapeutic strategies aiming to overcome cancer and aging-associated diseases.

Sonego, Juan Manuel. "Síntesis de análogos de salpichrólidos con anillo D aromático y determinación de su actividad antiestrogénica y antifúngica" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los withanólidos son un grupo de esteroides naturales de 28 carbonos aislados de plantas pertenecientes al género Solanacea. En particular un pequeño grupo de withanólidos con un anillo D aromático de seis miembros se aisló de la planta Salpichroa origanifolia. Estos compuestos presentan actividad antialimentaria y antiproliferativa. Para determinar la relevancia del anillo D aromático en las propiedades biológicas de los salpichrólidos, en este trabajo de Tesis se sintetizaron ocho esteroides con anillo D aromático, análogos de los salpichrólidos con cadena lateral simplificada. Se describe una nueva metodología para la preparación de esteroides con anillo D aromático, la cual involucra la abstracción de HBr a partir de un homoesteroide dibromado por tratamiento con DABCO. Todos los nuevos compuestos fueron caracterizados usando técnicas de RMN 2D y espectrometría de masas. Se determinaron las actividades antiestrogénica y antifúngica de los análogos sintéticos y de tres salpichrólidos naturales.

Abstract:
Withanolides are a group of naturally occurring C-28 steroids isolated from several genera of Solanacea. In particular a small group of withanolides with a six membered aromatic D ring, the salpichrolides, were isolated from the plant Salpichroa organfiolia. These compounds exhibit antifeedant and antiproliferative activities. To determine the relevance of the aromatic D ring in the biological properties of salpichrolides, in this work eight steroids with an aromatic D ring (analogues of salpichrolides with a simplified side chain) were synthesized. A new methodology for the preparation of steroids with an aromatic D ring is described, which involved the abstraction of HBr in a vicinal dibromo homosteroid by treatment with DABCO. All new compounds were completely characterized by 2D NMR techniques and mass spectrometry. The antiestrogenic and antifugal activities of the synthetic analogues and of three natural salpichrolides were determined.

Sánchez, María Laura. "Estructura de la comunidad perifítica y sus interacciones con la comunidad fitoplanctónica en lagunas turbias y claras de la llanura Pampeana (Provincia de Buenos Aires, Argentina)" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En la llanura pampeana se han descripto tres tipos de lagunas, clasificadas según sus características ópticas: claras vegetadas, turbias orgánicas (con elevada biomasa fitoplanctónica) y turbias inorgánicas (alta concentración de abioseston). Las lagunas claras vegetadas y las turbias orgánicas representan estados opuestos de equilibrios alternativos en este tipo de sistemas. En esta tesis se estudió a través de variadas aproximaciones al perifiton desarrollado bajo estos distintos escenarios, analizándose su estructura y sus interacciones con el fitoplancton, evaluándose sus posibles implicancias en el pasaje de un estado de equilibrio al otro. Se describió la composición algal perifítica resultando dominantes las diatomeas, clorofitas y cianobacterias en los tres tipos de lagunas. Se analizó la composición pigmentaria por HPLC para ambas comunidades, registrándose una variación de los pigmentos acorde a la disponibilidad lumínica en las lagunas. Se estudió la composición bacteriana planctónica y perifítica mediante la técnica molecular CARD-FISH, siendo el grupo de las alfaproteobacterias dominante en ambas comunidades y en los tres tipos de lagunas. Se midió en forma comparativa la producción primaria fitoplanctónica y perifítica, resultando las lagunas turbias orgánicas las más productivas. Además, se estudiaron experimentalmente las interacciones entre las comunidades algales, encontrándose el perifiton mejor adaptado a condiciones limitantes de nutrientes y el fitoplancton a condiciones de limitación lumínica.

Abstract:
Three types of shallow lakes have been described in Pampean plain according to their optical characteristics: clear-vegetated, organic-turbid (with high phytoplanktonic biomass) and inorganicturbid (with high concentration of inorganic material). In these systems, clear-vegetated and organic-turbid shallow lakes represent alternative steady states. Different approximations about periphyton developed under these scenarios were carried out in this study, analyzing its structure and the interactions with phytoplankton community, taking into account its potential effects on the shift between the two alternative steady states. Algal periphytic composition was described in the three types of shallow lakes, being diatoms, clorophytes and cyanobacteria the dominant groups in all types of systems. Pigments were determined using HPLC technique for both communities, observing different pigment composition according to light availability in the lakes. Plankton and periphyton bacterial composition was studied with molecular CARD FISH technique, resulting alphaproteobacteria group dominant in both communities of the three types of lakes. Primary production was comparatively measured in phytoplankton and periphyton communities, being organic turbid shallow lakes the most productive systems. Moreover, interactions between algal communities were experimentally studied observing that the periphyton is better adapted to limiting nutrient conditions whereas phytoplankton is better adapted to light limitation.

Simoy, María Verónica. "Un modelo individual de balance energético para el ñandú común (Rhea americana) y su implicancia en el reclutamiento poblacional" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En este trabajo se plantearon modelos individuales del balance energético del ñandú (Rhea americana) para analizar su efecto en el reclutamiento poblacional. El modelo individual se basó en un sistema de ecuaciones que calcula diariamente el peso corporal del individuo en función de su tasa de ingesta y del costo energético de la actividad desarrollada. La tasa de ingesta se estimó a partir de resultados de ensayos en cautiverio. El costo energético diario se estimó a partir de patrones de comportamiento observados en animales silvestres, teniendo en cuenta género y factores que influyen en el comportamiento (e.g. fotoperíodo, período del año). Concatenando los resultados del modelo diario, se obtuvo la dinámica del peso a lo largo del período deseado. Una vez calibrado el modelo, se analizó la factibilidad de diferentes estrategias reproductivas para ambos sexos y se determinó la condición física (peso) que un individuo debe alcanzar para reproducirse exitosamente. Los resultados mostraron que existen pocas restricciones para que una hembra pueda reproducirse pero, en cambio, los machos dependen fuertemente de su estado nutricional para reproducirse exitosamente cada año. Los resultados obtenidos fueron contrastados con observaciones a campo que confirman el bajo éxito reproductivo en la población, a pesar de poseer esta especie un sistema de apareamiento altamente promiscuo. Adicionalmente, se estimó el impacto de poblaciones silvestres en las actividades agropecuarias de la región pampeana bonaerense.

Abstract:
We proposed an individual based model of energy budgets of ñandú (Rhea americana) for analyzing its effect on the population recruitment. The individual model was based on a system of equations calculating the weight of an individual as a function of its ingestion rate and energetic cost of its activity pattern with daily step. The ingestion rate was calculated from field experiments. Daily energetic cost was estimated from observed activity patterns at the field, taking into account gender and factors that influence behavior (e.g., photoperiod, season). Concatenating daily model output, the weight dynamics over any period can be obtained. Once the model is calibrated, different reproductive strategies for each gender were analyzed and the minimal body weight that an individual needs to achieve for ensuring reproductive success was determined. Females exhibit low nutritional requirements to produce eggs, but reproductive success of males depends strongly on the body weight. Results obtained were compared to observations made during population censuses Additionally, the impact of wild populations on agricultural activities is assessed using the model.

Silva, Analía Concepción. "Problemas elípticos con crecimiento no estándar y falta de compacidad" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Siless, Gastón Ezequiel. "Búsqueda de nuevas sustancias bioactivas a partir de productos naturales abundantes" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el presente trabajo se obtuvieron sustancias estructuralmente novedosas y biológicamente activas mediante modificaciones sintéticas de productos naturales abundantes. En particular, se trabajó con el pachydictyol A, un diterpeno con el core de perhidroazuleno, aislado a partir del alga parda Dictyota dichotoma, y con el ácido secochiliolídico, otro diterpeno pero con un core de espiro-furanolactona, aislado de la planta Nardophyllum bryoides. A partir del pachydictyol A se obtuvieron derivados modificados por oxidaciones selectivas; hidroxilación alílica, dihidroxilación de doble enlace y epoxidación. También se obtuvo un producto de iodociclación mediante tratamiento con el reactivo de Barluenga. Por último se obtuvieron productos híbridos de acoplamiento pachydictyol-p-benzoquinona mediante la cicloadición de Paterno-Buchi. Se ensayó la actividad antifouling de los dictyoles naturales y de algunos dictyoles modificados frente al molusco invasor Limnoperna fortunei. A partir del ácido secochiliolídico se sintetizaron; aza-derivados, híbridos secochiliolídico-quinona e hidroquinona, derivados de ácido, epóxidos y lactonas entre otros. Se ensayó la actividad tripanosomicida. Se sintetizaron híbridos terpeno-quinona y esteroide-quinona a partir de ácidos terpénicos naturales, ácidos biliares y p-benzoquinona, utilizándo la química que los ésteres tiohidroxámicos de Barton. Mediante una descarboxilación radicalaria fotoinducida y posterior adición a p-benzoquinona se logró sintetizar 12 quinonas e hidroquinonas esteroidales, una de ellas presentó una interesante actividad citotóxica frente a líneas celulares tumorales. Se estudió el alcance de la metodología para sustratos terpénicos mas complejos.

Abstract:
In the present work, novel bioactive compounds were obtained through synthetic modification of abundant natural products. Pachydictyol A, a perhydroazulenoid diterpene isolated from the brown alga Dictyota dichotoma was used as a starting material. The diterpene secochiliolidic acid, containing an interesting core of spiro-furanolactone, was isolated from the plant Nardophyllum bryoides and transformed into new componds. From pachydictyol A, several componds were synthetisized, for example: selectively oxydized derivatives; allylic hidroxylation products, dihydroxylation of a double bond and epoxidation products. An interesting iodocyclized diterpene was obtained using Barluenga´s reagent. Finally, hybrids of natural products were synthetisized by coupling pachydictyol A and p-benzoquinone using Paterno-Buchi cycloaddition. Natural and modified dictyols were tested for antifouling activity against the invassive molusk Limnoperna fortunei. By synthetic modification of secochiliolidic acid several derivatives were obtined: aza-diterpenes, hybrids of secochiliolidic-quinone and hydroquinone, acid derivatives, epoxides and lactones. The tripanosomycidal activity against Tripanosoma cruzii was tested. Many terpene-quinone hybrids were synthetisized by coupling terpene and bile acids with p-benzoquinone, using the Barton thiohydroxamic ester´s chemistry. Twelve steroidal hydroquinones and quinones were obtained by fotoinduced radical decarboxylation and addition to p-benzoquinone. One of these hybrids showed an interesting citotoxicity against tumor cell lines PANC1(human) and LM3(murine). The versatility of this methodology was studied for complex terpenic substrates.

Sigismondi, Mario Emilio. "Estudio de la deformación litosférica de la cuenca Neuquina: estructura termal, datos de gravedad y sísmica de reflexión" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En las últimas dos décadas especialmente, la atención de los científicos hacia trabajos de campo, geofísica y geoquímica, ha servido para el estudio de la estructura profunda de la corteza y del manto y su relación con la génesis y evolución de las cuencas sedimentarias. Es claro que estos resultados no son sólo de valor académico, sino que tienen importancia práctica ya que el mejor conocimiento de la geología y la geofísica profunda llevan a un entendimiento acabado de los fenómenos geológicos y las condiciones de formación y distribución de los espacios de acomodación para alojar depósitos minerales de interés económico. Consecuentemente, parece lógica la decisión de intentar reunir la mayor parte de los datos geofísicos disponibles tanto a escala de detalle como regional, y proveer una síntesis de la evolución de la cuenca Neuquina en su contexto geodinámico. La investigación presentada es un esfuerzo dirigido a hacia esos objetivos. Como un método geofísico en particular ilumina sólo una parte del problema, el empleo de técnicas combinadas ha permitido encontrar soluciones más cercanas a la realidad, teniendo en cuenta sus relaciones, semejanzas y diferencias. Debido a que los relevamientos geofísicos para estudios regionales y de detalle han sido ejecutados mayormente por organismos gubernamentales o privados y muchas veces no son accesibles para docentes e investigadores universitarios, una de las contribuciones de esta tesis es la cooperación entre la universidad y la industria, tomando las fortalezas de ambas vertientes. La premisa fundamental en esta tesis ha sido examinar la relación existente entre elementos que condicionan el régimen tectónico por medio de observaciones geofísicas. El ambiente tectónico de tipo andino de la cuenca Neuquina está controlado por tres factores fundamentales: estado térmico, volcanismo y apilamiento tectónico. El régimen térmico está regido por el flujo de calor, el cual muestra como cuadro de primer orden un sector norte alineado entre la localidad de Chos Malal y el volcán Auca Mahuida que exhibe un gradiente promedio mayor al resto de la cuenca Neuquina, especialmente respecto al sur de la dorsal de Huincul donde el flujo es el menor. Simultáneamente, el régimen térmico es el principal responsable de la existencia de tres escenarios nítidos de rigidez flexural, que han condicionado la deformación a escala cortical pero transmitiendo su impronta en la deformación del basamento: la dorsal de Huincul se comporta como un elemento de elevada resistencia mecánica relativa, que limita la propagación de la deformación hacia el sur de la comarca; la faja plegada del Agrio – Chos Malal y el volcán Auca Mahuida son las zonas más propensas a la deformación pues es la de menor rigidez relativa; y por último, el sector oriental o de plataforma, el cual presenta una rigidez flexural intermedia. Una observación muy importante es la anisotropía de la rigidez que se comporta en dirección oeste – este al norte de la dorsal de Huincul, para transformarse casi norte – sur desde la dorsal de Huincul hacia abajo. Como resultado de los cambios en la distribución de rigidez, la partición de la deformación asociada a un régimen de convergencia oblicuo que cambia su trayectoria en el tiempo, no ha permanecido invariable, sino que se ha resuelto de dos formas: al norte de la dorsal de Huincul la deformación se propaga casi sin partición, dando origen a la existencia de la faja plegada y corrida del Agrio y Chos Malal, a la deformación de arco y antearco, y a una zona sismogénica más amplia y trabada que ha ocasionado dos megasismos recientes en la región. Mientras, al sur de la dorsal de Huincul, el vector de convergencia andino se descompone en segmentos aproximadamente perpendiculares entre sí y sometidos a transpresión y transtensión, que dan origen a dos megaestructuras con mecanismo dominante de transcurrencia: la zona de falla de Liquiñe – Ofqui con dirección preferencial norte – sur y la dorsal de Huincul oeste – este. Acerca del volcanismo al cual hicimos referencia como un factor de control tectónico, en esta investigación se ha prestado especial atención al aparato volcánico del Auca Mahuida. Se postula aquí que por su edad pliocena – pleistocena, el control isostático que ejerce actualmente es casi exclusivamente local, pero aún así, sus consecuencias son fundamentales: debilita la corteza, eleva las transiciones frágil– dúctiles y permite la propagación de la deformación a sectores de borde de cuenca, relativamente retirados del frente orogénico. En cuanto al volcanismo de arco propiamente dicho, este coincide regionalmente con una zona de baja rigidez flexural para su emplazamiento, lo cual ha facilitado los mecanismos de acortamiento orogénico, el debilitamiento de la litosfera, y la migración del magmatismo por empinamiento y horizontalización de la placa subducida, procesos que se retroalimentan en sí. Con respecto al apilamiento tectónico, la faja plegada y corrida del Agrio – Chos Malal se halla emplazada sobre una zona de muy baja rigidez flexural y al menos su influencia como carga topográfica de superficie, habría facilitado la propagación de la deformación hacia el antepaís de la cuenca Neuquina por mecanismos básicamente flexurales, si bien se reconoce a partir del análisis de subsidencia en pozos, que la componente térmica es más importante que la tectónica, prevaleciente en la mayoría de las cuencas del Subandino. La cuenca Neuquina posee descompensación isostática residual positiva asociada a anomalías magnéticas corticales negativas localizadas en su depocentro sedimentario, que avalan la hipótesis de adelgazamiento cortical. El mecanismo de apertura de la cuenca Neuquina en su etapa de rifting localizado, se puede explicar satisfactoriamente y de forma coherente a las observaciones si se recurre a la hipótesis de cizalla simple, con una falla maestra de enraizamiento cortical que trae como consecuencia la distribución asimétrica de flujo de calor. Este modelo, que además predice atenuamiento cortical confirmando las anomalías observadas, no necesariamente coincide con la zona de levantamiento térmico, y por tanto, el área por debajo no acomoda toda la subsidencia térmica. La distribución de la deformación y la fábrica del basamento, que condiciona la existencia de espacios de acomodación sedimentarios, está íntimamente sujeta a los cambios del flujo de calor, la rigidez flexural y el estado isostático, como elementos de primer orden. La cuenca Neuquina conserva un gradiente geotérmico ligeramente mayor al promedio mundial de regiones continentales, cuyo origen se atribuye esencialmente a fenómenos de refracción térmica del basamento y volcanismo reciente, los cuales afectan las condiciones reológicas de la corteza, favoreciendo la deformación de intraplaca en el antepaís. Entre tanto, los cambios en la rigidez flexural, se interpretan fundamentalmente como cambios en la resistencia mecánica a la deformación. A pesar de la abundante información recopilada en esta tesis, la correlación de las anomalías geofísicas y de los datos provenientes de perforaciones y afloramientos está en una etapa inicial, por lo cual sigue existiendo ambigüedad en las interpretaciones, especialmente cuando se trabaja con métodos potenciales no ajustados con datos independientes. La fortaleza de esta tesis está basada en la interpretación geofísica interdisciplinaria sobre un marco de referencia generalizado, que se espera contribuya en la comprensión de la evolución geodinámica de la región, y más importante aún, estimule el desarrollo de nuevas investigaciones para mitigar las incertezas encontradas.

Abstract:
The attention of scientists working in the fields of geology, geophysics and geochemistry was very much attracted during the last two decades, to the study of the deep structure of the earth’s crust and mantle and their relationships to the genesis and evolution of sedimentary basins. Obviously, these results are not only of pure scientific value, but also have practical significance since the best knowledge of geology and geophysics lead to a better understanding of geological phenomena and the conditions of formation and distribution of mineral resources. Consequently, it seems logical the decision to try collecting most of the geophysical data available, for understanding the Neuquén Basin evolution in a geodynamics framework. This thesis is an effort towards these goals. Due to that if we use exclusively one geophysical method it illuminates only one part of the problem; the use of combined techniques has allowed us to find solutions closer to reality, taking into account their relationships, similarities and differences. Because geophysical surveys have been carried out mostly by government and private agencies, seldom these data are straightforward available to academic researchers. One character of this thesis is the link between universities and industry, trying to mitigate the weaknesses of both sides. A primary principle was to study the relationship between the factors that determine the tectonic regime throughout geophysical observations. Geophysical data indicate that the crust is not a homogeneous rigid layer over the Neuquén Basin. The crucial reason for crustal in homogeneity is that Neuquén Basin is in an Andean-type tectonic regime that is controlled by three factors: thermal state, volcanism, and tectonic load. It has been suggested that thermal state is governed by current heat-flow. In the study-case a first-order feature, a lineament between Chos Malal and Auca Mahuida volcano, has a higher average thermal-gradient at the northern zone, mainly when compare with the south Huincul system where the heat-flow is lower. Likewise, it has been argued from this thesis that thermal regime has conditioned the crustal and basement deformation, due to rigidity is strongly dependent on temperature and deformation rate. Consequently, lithosphere rigidity is expected to vary laterally as a function of geothermal gradient; a cold lithosphere is probable to be stronger and/or thicker and a hot lithosphere is expected to be weaker and/or thinner. This is the main reason for the existence of three scenarios of flexural rigidity: 1) the Huincul-system as a regional edge limiting the develop of basement ductile deformation to the south of the Neuquén Basin; 2) the Agrio - Chos Malal fold thrust belt and Auca Mahuida volcano with lower rigidity values, predisposed to thin–skinned deformation and structural control of volcanism respectively, and 3) the Eastern Platform with an intermediate flexural rigidity value. I propose two non-exclusive processes that take into account the play between crustal and basement deformation in Neuquén Basin: response to changes in distribution of flexural-rigidity, and divergence in plate convergence vector related to an oblique subduction against the plate boundary. As a result, there are two background-structural scenarios connected with the partition of the deformation: − A low partition-system north of the Huincul-axis, associated with the deformation in the arc, forearc, fold and thrust belt, and a wider locked seismogenic zone. − A high partition-system from the Huincul-trench to the south, a place where the vector of convergence splits in two perpendicular movements: the north - south Liquiñe - Ofqui fault zone, and the west - east Huincul high structural feature, both with dominant mechanisms of strike-slip displacement. Therefore, rigidity layering has the largest effect on horizontal deformation under the Andean type subduction system. A key observation in this context was the congruity with a next aspect; it is referred to the nature of the relationship between volcanism as a control factor in the tectonic regime and deformation. In this particular case, a key role plays the interaction between crustal structures of the basement and ongoing regional stress field on the Pliocene – Pleistocene Auca Mahuida volcanic complex. This effect is followed by crustal weakening, raise of the limits of brittleductile zones, and expansion of the deformation far away from the Andean orogenic front. On the other hand, a third aspect is connected with tectonic load. As we have affirmed, the influence of surface topography in the Agrio - Chos Malal fold and thrust belt have facilitated the foreland region deformation by flexural mechanisms, although it is recognized from borehole subsidence analysis time-depths cross plots that thermal component is besides tectonics, prevailing in most Sub-Andean basins. In this context, the development of geophysical methods to determine the lithospheric structure gave direct evidence from the pair associated positive residual isostatic anomaly - negative crustal magnetic anomaly, that Neuquén Basin has a thinned crustal structure in the deepest sedimentary alignment. During the rifting stage, the opening mechanism of Neuquén Basin can be adequately explained by the simple shear model, with a crustal master fault like Entre Lomas – Estancia Vieja and an asymmetric heat-flow array. The distribution of deformation patterns and basement fabrics play a key role in relation to changes in heat-flow and flexural rigidity. These changes in rigidity, can be attributed to variations in the geochemical properties of rocks, or differences in temperature and pressure conditions between the upper and lower crust, but here are interpreted as changes in the mechanical strength. The correlation of geophysical anomalies and outcrops or boreholes examples are at early stage, therefore there is still ambiguity in some of the interpretations, especially when working with potential methods.

Sidelnik, Iván Pedro. "Estudio de rayos cósmicos de muy alta energía con AMIGA, una extensión del Observatorio Pierre Auger: detectores de superficie y contadores de muones para estudiar la composición, dirección de arribo y espectro de los rayos cósmicos" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los rayos cósmicos son partículas que llegan a nuestro planeta desde el espacio exterior, con energías comprendidas entre 109 eV y 1020 eV, siendo los más energéticos un gran enigma, ya que no conocemos cuales son sus fuentes, su composición química ni cómo son acelerados. El Observatorio Pierre Auger (PAO) fue dise~nado y construido para estudiar los rayos cósmicos a energías mayores de 1018 eV. El mismo se encuentra en la zona de Pampa Amarilla, próximo a la ciudad de Malargüe, en la provincia de Mendoza. Su tamaño gigante de aproximadamente 3000 km2 y el concepto híbrido de detección, proporcionado por detectores de superficie y de fluorescencia atmosférica, confieren al PAO capacidad suficiente para evaluar el espectro de energía, direcciones de arribo y composición química de los rayos cósmicos. Estos observables son los más importantes y el PAO los mide con altísima resolución y una estadística sin precedentes, utilizando las lluvias atmosféricas extensas que estos generan cuando ingresan a la atmósfera. Para bajar la energía umbral de detección del PAO a valores de 1017 eV, distintas extensiones fueron elaboradas en los últimos años. Uno de estos proyectos es Auger Muons and Infill for the Ground Array (AMIGA), que reduce la energía de detección en una década respecto a la energía original del PAO, posibilitando estudios en la región del espectro donde se cree encontrar una transición en el origen de los rayos cósmicos desde fuentes galácticas a extra galácticas. AMIGA posee dos tipos de detectores: por un lado detectores de superficie con separación de 750 m, menor que la del PAO de 1500 m, generando una región más densa de detectores denominada infill. Por otro lado contadores de muones que funcionan con la técnica de centelleo, que comenzaron a instalarse junto al arreglo denso de detectores, con el objetivo de determinar la composición química de los rayos cósmicos a partir del contenido muónico de las lluvias. Esta tesis esta abocada al estudio de los detectores y la física que posibilita AMIGA. La primer parte de la tesis esta dedicada al estudio de los contadores de muones de AMIGA. Se presenta la caracterización del primer prototipo del contador, a partir de la cual se entendió el funcionamiento del contador en condiciones de laboratorio y en el campo. Estos resultados fueron de suma importancia para establecer los parámetros finales de diseño del contador. También se detallan las tareas realizadas en la etapa de construcción e instalación de los primeros contadores de muones, indicando los primeros resultados que fueron obtenidos por estos detectores. Posteriormente se estudió la respuesta de los detectores de superficie utilizando la configuración infill y la original del PAO. Esta tarea fue realizada utilizando los primeros datos registrados por el infill, junto a la previa modificación de la reconstrucción estándar de eventos de superficie para considerar el caso en que los detectores se encuentran ubicados a menor distancia. Se caracterizó el infill para comprender su funcionamiento dentro de la estructura del detector de superficie del PAO, estudiando sus incertezas y comparándolas con las del arreglo principal. Luego se modificó la cadena de reconstrucción de eventos para el detector de superficie del PAO de forma tal de reconstruir los eventos del infill con el programa oficial Auger Offline Software. Para esto se determinó la distancia óptima que minimiza las incertezas de la reconstrucción y se optimizó la función de distribución lateral que mejor ajusta las se~nales de las estaciones que participan en cada evento. Se determinó el ángulo de referencia y la curva de atenuación con el método del Constant Intensity Cut, a fin de establecer el mejor estimador para la energía de los eventos del infill. Luego se realizó la calibración en energía del infill utilizando los eventos híbridos que fueron registrados por el detector de fluorescencia. Finalmente utilizando esta reconstrucción se determinó el espectro de energía de los rayos cósmicos en la zona donde el arreglo tiene máxima eficiencia de detección (2 x 1017 eV) y se obtuvo un índice espectral, cuyo resultado es compatible con el proporcionado por el PAO y otros experimentos que exploran las mismas regiones de energía. Por otro lado no se observó la presencia de una segunda rodilla en la zona del espectro explorada. En la última parte de esta tesis se presenta un estudio detallado de las anisotropías a gran escala con el método East-West utilizando eventos del infill. En el rango de energías explorado, entre 1016 eV y 1019 eV, no se observó una señal significativa que indique anisotropías, sin embargo se encontró una constancia en la fase del primer armónico en ascensión recta que sugiere fuertemente una orientación del dipolo en la dirección del Centro Galáctico.

Abstract:
Cosmic rays are particles that arrive at Earth from outer space with energies that span from 109 eV to 1020 eV, being the most energetic an enigma because of the lack of knowledge of their sources, chemical composition, or the acceleration mechanism. The Pierre Auger Observatory (PAO) was designed and built to study cosmic rays with energy larger than 1018 eV. It is located in the region of Pampa Amarilla, next to Malargue, Mendoza. Its giant size of 3000 km2 and the hybrid concept given by the surface and uorescence detectors, gives to the PAO the capacity to evaluate the energy spectrum, arrival direction and chemical composition of cosmic rays. These observables are the most important to characterize cosmic rays and the PAO measures them with high resolution and a very large statistics using the extended air showers that are generated when they enter in to the atmosphere. To lower the energy threshold of detection to values of 1017 eV different enhancements started in the latests years. One of those is Auger Muons and Infill for the Ground Array (AMIGA), that reduce the detection energy in one decade giving the chance to study the region in the energy spectrum where it can occur the transition from galactic to extra galactic cosmic ray sources. AMIGA is composed by two kind of detectors: on one hand surface detectors with a separation of 750 m, less than the PAO of 1500 m, generating a small and denser region called infill. On the other hand muon counters that work with the scintillator technique, that are being installed next to the denser surface array with the purpose of determine the chemical composition of cosmic rays trough the detection of the muonic content of the shower. This thesis is dedicated to the study of the detectors and the physics attained by AMIGA. The first part of this thesis shows a study of the AMIGA muon counter prototypes. A characterization of the first counter prototype is presented from which the performance of the detector in laboratory conditions and in the field was understood. This results were of paramount importance to establish the final design of the muon counter detector. Also the task involving the construction and deployment phase of the first muon counters are detailed, indicating the firsts results. Then the study of the surface detector performance of the PAO using infill and original configuration is shown. This task was done using the first infill data available, with the modification of the standard event reconstruction to consider the denser array case. The infill was characterized to understand its behaviour inside the structure of the PAO surface array detector, studying its uncertainties and making a comparison with the main array. Then the reconstruction chain was modified for the PAO surface detector, in a way that allows the reconstruction of infill data with the official program Auger Offline Software. In order to do this, the optimal distance that minimize the uncertainties of the reconstruction was calculated, and then the lateral distribution function that fit better the signal of the stations that participate in the event was optimized. The reference angle and the curve with the Constant Intensity Cut method were determined, to establish the best energy estimator for infill events. The energy calibration was performed using hybrids events that were also registered by the fluorescence detector. Finally, using this reconstruction the energy spectrum of cosmic rays was determined in the region were the array has full detection efficiency (2x 10 *27 eV) and an spectral index was calculated, which result turns out to be compatible with the given by the PAO and other experiments that explore the same energy regions that the infill. On the other hand no presence of the second knee was observed in the explored energy region. The last part of this thesis shows a detailed study of large scale anisotropy using the East-West method with infill events. In the explored energy range between 1016 eV and 1019 eV, no significant signal that indicates anisotropy was found, however a constant first harmonic phase in right ascension was measured that suggest a dipole orientation towards the Galactic Center direction.

Severin, Daniel E.. "Estudio poliedral y algoritmo branch-and-cut para el problema de coloreo equitativo en grafos" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los problemas de coloreo de grafos constituyen una familia de problemas de una gran relevancia tanto teórica como práctica. Todos ellos son variaciones del problema del coloreo clásico, cuyo estudio se inició en el Siglo XIX. El origen de estas variaciones radica en las restricciones adicionales que imponen las aplicaciones a problemas de la vida real. En esta tesis abordamos en particular el Problema de Coloreo Equitativo en Grafos. Como muchos problemas de Optimización Combinatoria, el Problema de Coloreo Equitativo es un problema NP-difícil. Los algoritmos Branch-and-Cut basados en el estudio poliedral de una formulación del problema como programa lineal entero, son la herramienta más efectiva que se conoce para la resolución exacta de problemas NP-difíciles. En esta tesis se propone un modelo de programación lineal entera para el Problema del Coloreo Equitativo y se estudia el poliedro asociado. Se derivan varias familias de desigualdades validas y se prueba que siempre definen caras de alta dimensión, lo cual es un buen indicador para la utilización de las mismas como planos de corte. Finalmente, se desarrolla e implementa un algoritmo Branch-and-Cut para el Problema de Coloreo Equitativo que resulta altamente competitivo con los algoritmos exactos conocidos.

Abstract:
The graph coloring problems constitute a family of problems of great theoretical and practical relevance. All of them are variations of the classical coloring problem, whose study began in the nineteenth century. The origin of these variations arises from the additional restrictions imposed by applications to real life problems. In particular, this thesis deals with the Equitable Graph Coloring Problem. Like many combinatorial optimization problems, the Equitable Coloring Problem is NP-hard. It is known that Branch-and-Cut algorithms based on the polyhedral study of a formulation of the problem as an integer linear program, are the most effective tool for solving NP-hard problems. This thesis proposes a linear integer programming model for the Equitable Coloring Problem and studies the polytope associated to that model. Several families of valid inequalities that define faces of high dimension are derived in order to use them later as cutting planes. Finally, a Branch-and-Cut algorithm for the Equitable Coloring Problem that is highly competitive against known exact algorithms is developed.

Sepúlveda, Claudia Soledad. "Estrategias antivirales para la prevención y tratamiento de infecciones con arenavirus: actividad inhibitoria contra virus Junín de disulfuros y acridonas" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el presente trabajo se realizó la evaluación de la actividad biológica de diversos compuestos que incluyeron disulfuros aromáticos, disulfuros de tiuramo, tiosulfonas y acridonas, encontrándose compuestos con una muy selectiva actividad antiviral y potente efecto virucida contra varios miembros de la familia Arenaviridae. El disulfuro aromático NSC4492 mostró el efecto virucida más potente, y los más efectivos agentes antivirales resultaron el disulfuro de tiuramo NSC14560 y la acridona 3f, las tiosulfonas fueron totalmente inactivas. Los compuestos antivirales NSC14560 y 3f resultaron igualmente efectivos en distintos tipos celulares. Estudios mecanísticos de la actividad antiviral indicaron que la acción de estos compuestos parecería afectar pasos tempranos e intermedios de la infección viral, sin bloquear la entrada del virus a la célula. La síntesis del RNA viral se vio inhibida con ambos compuestos, y, para el caso de 3f, fue posible recuperar parcialmente la infectividad y los niveles de RNA por el agregado de guanosina exógena. Los compuestos inactivantes mostraron ser efectivos también contra varios arenavirus, con una cinética de inactivación rápida y dependiente de la temperatura. El tratamiento con NSC4492 no mostró efectos sobre el autoensamblaje y la brotación de partículas tipo virales (VLPs) pero sí una alteración en el patrón electroforético de la proteína Z y una fuerte inhibición en la síntesis del RNA viral. En conclusión, se han detectado nuevos compuestos con potente y selectiva acción antiviral contra los arenavirus que parecen interferir con procesos relacionados a la síntesis de RNA viral así como agentes con fuerte capacidad inactivante de los viriones que alteran irreversiblemente proteínas virales de JUN lo que conduciría a la pérdida de la infectividad viral.

Abstract:
In the present study we evaluated the biological activity of various compounds including aromatic disulfides, thiuram disulfide, thiosulfones and acridones finding compounds with highly selective antiviral activity and potent virucidal effect against several members of the family Arenaviridae. The aromatic disulfide NSC4492 showed the most potent virucidal effect, and the most effective antiviral agents were thiuram disulfide NSC14560 and acridone 3f, the thiosulfones were totally inactive. Antiviral compounds NSC14560 and 3f were equally effective in different cell types. Mechanistic studies of antiviral activity indicated that these compounds affect early and intermediate steps of viral infection, without blocking viral entry into cells. Viral RNA synthesis was inhibited with both compounds and, in the case of 3f, it was possible to partially restore the infectivity and RNA levels by adding of exogenous guanosine. Inactivating compounds shown to be effective also against several arenavirus, with fast inactivation kinetics and temperature dependent. NSC4492 treatment showed no effect on the self-assembly and budding of virus-like particles (VLPs) but an alteration in the electrophoretic pattern of protein Z and a strong inhibition of viral RNA synthesis were evidenced. In conclusion, we have identified new compounds with potent and selective antiviral action against arenavirus that seem to interfere with processes related to the synthesis of viral RNA as well as inactivating agents with strong capacity of virions that alter JUNV viral proteins and lead to the loss of viral infectivity.

Schiaffino, María Romina. "Análisis de la estructura del picoplancton y sus patrones biogeográficos en lagos comprendidos en una transecta Patagónico-Antártica" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis se estudiaron 45 cuerpos de agua (lagos, lagunas y lagunas temporarias) ubicados a lo largo de un gradiente latitudinal que se extiende desde Patagonia Austral Argentina (45º 22' S) hasta Antártida Marítima (63º 24' S), con el objetivo central de analizar la estructura (abundancia, composición y diversidad) del picoplancton autotrófico y heterotrófico. Los estudios involucraron un enfoque polifacético mediante la utilización de técnicas moleculares, microscopía de epifluorescencia y citometría de flujo. Otro de los objetivos principales fue analizar la existencia de patrones biogeográficos para estos microorganismos. Los resultados obtenidos constituyen un importante aporte al conocimiento de la estructura de los distintos componentes picoplanctónicos en estos ambientes únicos y permiten avanzar en el conocimiento de sus patrones biogeográficos a lo largo de escalas espaciales extensas (>2100 km). Las investigaciones realizadas mostraron que al aumentar la distancia geográfica disminuyó significativamente la similitud en la composición del picoplancton, y a pesar de que algunas secuencias y muchas unidades taxonómicas operativas (OTUs) fueron compartidas entre Patagonia y Antártida (60-70%), la composición de estas comunidades fue significativamente diferente. Por otro lado, se observaron diferencias en la composición del picoplancton entre los lagos relacionadas con su estado trófico. La influencia de los factores ambientales locales y geográficos en el modelado de las comunidades picoplanctónicas revela que ambos controlan la estructura del picoplancton, sugiriendo una distribución no aleatoria del picoplancton y aportando nuevas evidencias que apoyan la hipótesis de la existencia de patrones biogeográficos en la ecología microbiana.

Abstract:
In this Doctoral Thesis the structure (abundance, composition and diversity) of autotrophic and heterotrophic picoplankton of 45 freshwater environments (lakes, shallow lakes and ponds) located along a latitudinal gradient from Southern Argentinean Patagonia (45º 22' S) to Maritime Antarctica (63º 24' S) was analyzed. The studies involved a polyphasic approach combining molecular techniques, epifluorescence microscopy and flow cytometry. The existence of biogeographic patterns for these microorganisms was also analyzed. The results constitute an important contribution to the knowledge of the structure of the different picoplanktonic components in these unique environments and allow understanding patterns over large spatial scales (>2100 km). The results showed that with increasing geographic distance, the similarity in the composition of picoplankton significantly decreased, and even though some sequences and a high percentage of OTUs (operational taxonomic units) were shared between Patagonia and Antarctica (60%-70%), the composition of these communities was significantly different. On the other hand, differences in the picoplankton structure among the lakes were also related with their trophic state. The influence of local environmental factors and geographic factors on picoplankton communities reveals that both control and shape the structure of picoplankton, suggesting a nonrandom distribution of picoplankton and providing new evidence supporting the hypothesis of biogeographic patterns in microbial ecology.

Sartarelli, Salvador Andres. "Adsorción de fluidos sobre sustratos sólidos, estudiada en el marco de funcionales de la densidad" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La adsorción de gases nobles clásicos (Ne, Ar, y Xe) sobre sustratos sólidos de metales alcalinos (Cs, Rb, K, Na, y Li) y algunos otros compuestos es investigada en el marco de la Teoría del Funcional de la Densidad. Estudiamos tanto la adsorción sobre una sola pared plana como el llenado de ranuras planas simétricas. En primer lugar, proponemos una forma para la interacción de pares del fluido que pueda utilizarse en todo el rango de temperaturas, T, entre el punto triple y el crítico (Tt ≤ T ≤ Tc). Verificamos que la predicción para la tensión superficial de la interfase líquido-vapor del Ne, del Ar, y del Xe es correcta. Calculamos isotermas de adsorción y perfiles de la densidad. Analizamos líneas de pre-mojado y determinamos temperaturas de mojado, Tw, y críticas de pre-mojado, Tcpw. En el llenado de ranuras simétricas encontramos que bajo ciertas condiciones los estados fundamentales tienen perfiles de densidad que violan la simetría del potencial ejercido por las paredes. Hay una correlación entre la aparición de estos perfiles asimétricos y la existencia de líneas de pre-mojado. Resolvimos los sistemas aplicando las estadísticas correspondientes a los Ensambles Canónico (sistema cerrado) y Gran Canónico (sistema abierto). Mostramos que para sistemas abiertos también se obtiene soluciones asimétricas. Todos los temas están discutidos en detalle.

Abstract:
The adsorption of noble classical gases (Ne, Ar, y Xe) on solid substrates of alkali metals and other composites are analyzed in the frame of the Density Functional Theory. We investigated both the adsorption on a single wall and the filling of symmetric pore slits. In a first step, we propose an analytical form for pair interaction between fluid atoms can be used over the entire range of temperatures, T, between triple point and the critical one (Tt≤T≤Tc). We verified that predictions for the surface tension of the liquid-vapor interface of Ne, Ar, and Xe are correct. We calculated adsorption isotherms and density profiles. We analyzed the prewetting lines and determined wetting temperatures, Tw, and critical prewetting ones, Tcpw. We found that under certain conditions there are ground states with density profiles that break the symmetry of the potential exerted by the walls. There is a correlation between the ocurrence of asymmetric profiles and the existence of prewetting lines. For solving the equations we applied both the Canonical (closed system) and Grand Canonical (open system) Ensembles. We show that for open system one also gets asymmetric solutions.

Salort, Ariel Martín. "Homogenización de autovalores en operadores elípticos cuasilineales" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Distintos problemas clásicos de vibraciones mecánicas son modelados con ecuaciones diferenciales, y las frecuencias de vibración corresponden a los autovalores de éstas. Estructuras tales como columnas, placas, membranas o cuerdas, obedecen distintas clases de problemas elípticos (el sistema de ecuaciones de la elasticidad, el laplaciano, el bilaplaciano, ecuaciones de Sturm Liouville). Estos operadores han sido muy estudiados y se conocen numerosas propiedades de sus autovalores, ver por ejemplo los trabajos clásicos de Courant, Hormander, Timoshenko, Titchmarsh, Weinstein entre otros. Durante el siglo XX, la teoría no lineal generó nuevas herramientas y problemas, y los autovalores son interpretados en este contexto como un parámetro de bifurcación, correponden a valores críticos para los cuales una estructura puede deformarse, colapsar o salir de equilibrio (buckling, bending). Podemos citar como ejemplo los trabajos de Antman, Browder, Berger, y Amann . En los últimos años, los nuevos materiales han creado nuevos desafíos. En particular, cuando se consideran mezclas de dos o más materiales se van obteniendo mejores propiedades específicas, y gracias a estas mejores características los materiales heterogéneos reemplazan a los homogéneos. Particularmente, materiales compuestos como por ejemplo los polímeros reforzados con fibras de vidrio o fibras de carbono, presentan unas excelentes relaciones rigidez/peso y resistencia/peso que los hace idóneos para determinados sectores productivos, esto hace que vayan desplazando a materiales tradicionales como el acero, la madera o el aluminio. Desde el punto de vista matemático esto significa principalmente que las soluciones de un problema de valores de contorno, que dependen solo de un parámetro pequeño, convergen a la solución de un problema límite de contorno que puede ser explícitamente descripto . Un problema interesante, común a muchos problemas diferentes más, es obtener información sobre la existencia de transiciones de fases, situaciones en las cuales la variación del parámetro ε provoca diferentes comportamientos de las soluciones. En este trabajo nos centramos en el estudio de la homogeneización de problemas de autovalores en ecuaciones elípticas con condiciones de contorno del tipo Dirichlet y Neumann. Esta tesis se divide esencialmente en tres partes. Primero, recolectamos propiedades conocidas sobre el espectro del p−Laplaciano, y luego las generalizamos a una familia mas general de operadores. Hecho esto, definimos las nociones de H− y G−convergencia para operadores elípticos. Luego nos centramos en el estudio del comportamiento de integrales oscilantes, esto es, integrales que involucran coeficientes rápidamente oscilantes. En una última parte aplicamos estos resultados al estudio de la homogeneización de problemas de autovalores elípticos y la estimación las tasas de convergencia de los autovalores.

Abstract:
Different classical problems of mechanic vibration are modeled with differential equations, and the vibration frequencies correspond to the eigenvalues of these. Structures such as plates, membranes and strings, obey different class of elliptic problems (the laplacian, the bilaplacian, Sturm Liouville equations). Those operators have been extensively studied and are known many properties of their eigenvalues, see for instance the classical works of Hormander, Timoshenko, Titchmarsh, Weinstein . Along the XX century, the non-linear theory has generated new tools and problems, and in this context, eigenvalues are interpreted like a bifurcation parameter, corresponding to the critical values for which a structure can be deformed, collapse or lose the equilibrium (buckling, bending). We cite, for instance, works of Antman, Browder, Berger, y Amann . During the last years, new materials have created new challenges, Particularly, when are considered mixing of two or more materials, better specific properties are obtained. Due to this better characteristics, heterogeneous materials replace to homogeneous ones. Particularly, materials like polymers reinforced with glass fibers or carbon fibers, present excellent relations stiffness / weight and strength / weight. For these characteristics are ideal to certain sectors of production, and they are displacing to traditional materials like steel, wood or aluminum. From a mathematical point of view, this means mainly that solutions of a boundary value problem, which only depend of a small parameter, converge to the solution of a limit boundary problem which can be explicitly described . Homogenization describes the global behavior of the composite materials. They are heterogeneous but the heterogeneities are very small compared to its dimension. The aim of this theory is to give macroscopic properties of the composite by taking into account the properties of the microscopic structure. In this work we focus in the study of the homogenization of elliptic eigenvalue problems either with homogeneous Dirichlet or Neumann boundary conditions. This thesis is divided in three parts. First, we collect known properties about the spectrum of the p−Laplacian operator, and then, we extend them to a more general family of operators. Done this, we define the H− and G−convergence for elliptic operators. Then, we focus in the study of the behavior of rapidly oscillating integrals, i.e., integrals involving rapidly oscillating coefficients. In the last part we apply these results to the study of the homogenization of elliptic eigenvalue problems and estimate the eigenvalue convergence rates.

Saez, Trinidad María de los Milagros. "Efectos de la exposición prenatal al agonista cannabinoide WIN55,212-2 sobre la proliferación, la migración y el citoesqueleto neuronal de la rata" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El sistema endocannabinoide (eCB), compuesto por los receptores cannabinoides (rCB1 y rCB2), ligandos endógenos (endocannabinoides), y enzimas de síntesis y degradación, está presente en el cerebro desde etapas muy tempranas de su desarrollo. En este periodo, el sistema eCB está involucrado en la regulación de la proliferación de progenitores neuronales, en la especificación, la migración y la diferenciación de neuronas piramidales e interneuronas y también en la sinaptogénesis. El consumo de marihuana durante la gestación representa un gran riesgo para el desarrollo del sistema nervioso central de los fetos, dado que el Δ9‐ tetrahidrocannabinol, el principal compuesto activo del cannabis, atraviesa la placenta y la barrera hemato‐encefálica. Estudios realizados en niños y adolescentes cuyas madres consumieron marihuana durante el embarazo, documentaron anormalidades cognitivas y comportamentales. En este trabajo se demostró la expresión del rCB1 durante la corticogénesis en neuronas postmitóticas en migración, así como en diversas poblaciones neuronales. Además, el presente trabajo aporta evidencias sobre los efectos que produce la exposición materna a un agonista cannabinoide sobre las neuronas postmitóticas en migración y la diferenciación de neuronas del linaje glutamatérgico. Estos resultados contribuyen al conocimiento sobre los sustratos neurobiológicos que determinarían los cambios neuro‐comportamentales que persistentes en las funciones cerebrales durante la vida postnatal. Asimismo, se demostró que ratones CB1 knockout mostraron una disminución en el número de progenitores intermedios y un aumento en el número de neuronas postmitóticas glutamatérgicas. Durante la vida postnatal, la deleción del rCB1 indujo una distribución de interneuronas anormal. En suma, los resultados obtenidos en este trabajo constituyen avances originales sobre el papel del sistema endocannabinoide en el desarrollo de la corteza cerebral.

Abstract:
The endocannabinoid system (eCB), formed by the cannabinoid receptors (rCB1 and rCB2), endogenous ligands (endocannabinoids) and synthesis and degradation enzymes, is present since early stages of brain development. During this period, the eCB is involved in the regulation of proliferation of neural progenitors and in specification, migration and differentiation of pyramidal neurons and interneurons as well as in synaptogenesis. Marihuana consumption during pregnancy represents a serious risk for the proper development of the fetus´s brain since Δ9‐ tetrahidrocannabinol, main active compound of cannabis, can reach the fetus through placenta and hemato‐encephalic barrier. Cohort studies performed on children and adolescents of mothers who consumed marihuana during pregnancy, reported cognitive and comportamental abnormalities in these subjects. In the present study, we demonstrated the expression of the rCB1 during corticigenesis in migrating postmitotic neurons as well as in other neuronal populations. Moreover, this Thesis work provides evidence on the effects accounted by prenatal exposure to a cannabinois agonist on migrating post‐mitotic neurons and the differentiation of glutamatergic neurons. The present results contribute to the knowledge on neurobiologic substrates that determine neuro‐comportamental changes that will persist through post‐natal life. Finally, it was also proved that CB1 knockout mice showed a diminished number of intermediate progenitors and a higher number of glutamatergic post‐mitotic neurons. During post‐natal life, the deletion of rCB1 induced an abnormal distribution of interneurons. In summary, the results presented in this Thesis work represent an original advance in the understanding of the role played by the eCB system in the development of the cerebral cortex.

Rubio, Alejandra. "Respuesta de las comunidades de dípteros de recipientes artificiales a la urbanización" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La urbanización es considerada una de las principales actividades humanas que impacta negativamente sobre la biodiversidad. En esta tesis se investigan los patrones de respuesta de la comunidad de dípteros que utilizan el agua contenida en recipientes artificiales como hábitats larvales a lo largo de un gradiente de urbanización en la Provincia de Buenos Aires, Argentina. Se colectaron en total 297.172 dípteros entre los 10.161 recipientes inspeccionados. A escala de paisaje, la respuesta de la comunidad al nivel de urbanización dependió del atributo analizado (i.e. abundancia, riqueza, diversidad, similitud en la composición de especies) y del origen de dicha comunidad (i.e. floreros en cementerios o cubiertas de auto en desuso en áreas residenciales). En floreros, las variables relacionadas con la abundancia registraron valores máximos a niveles intermedios de urbanización, mientras que una elevada similitud en composición específica y riqueza fue observada a lo largo del gradiente. En contraste, todas las variables utilizadas para caracterizar la estructura de la comunidad en cubiertas revelaron una respuesta negativa a elevados niveles de urbanización. Por otro lado, no se hallaron evidencias de que la estructura de la comunidad difiera entre usos de la tierra o parches con distinto nivel de edificación y vegetación. Finalmente, la probabilidad de ocurrencia de dípteros fue mayor en recipientes de mayor tamaño y volumen de agua, conteniendo materia orgánica, dispuestos a la sombra y en el fondo de las propiedades bajo cobertura vegetal elevada, y ubicados en áreas de menor nivel de urbanización. El conjunto de resultados sugiere que la respuesta de la comunidad al nivel de urbanización depende tanto de la escala de estudio como del tipo de recipiente artificial estudiado. En ningún caso, un elevado nivel de urbanización tuvo efectos favorables sobre la comunidad.

Abstract:
Urbanization is considered one of the main human activities affecting negatively on biodiversity. The aim of this thesis was to investigate the response patterns of the fly community using water‐filled artificial containers as larval habitat along an urbanization gradient in Buenos Aires Province, Argentina. A total of 297.172 individuals were collected in 10.161 inspected containers. At the landscape scale, the community response to the urbanization level depended on the attribute analyzed (i.e. abundance, richness, diversity, similarity in species composition) and on the source of the community (i.e. flower vases from cemeteries or used car tires from residential areas). In flower vases, the variables related with the abundance recorded their highest values at intermediate levels of urbanization, whereas a high similarity in species composition and richness was observed along the gradient. In contrast, all the variables assessed to characterize the community structure in tires showed a negative response to increasing urbanization levels. On the other hand, there was no evidence supporting that the community structure differed between different land uses and contrasting patches regarding vegetation and edification levels. Finally, the probability of finding a positive container was greater at increasing size and water volume with organic matter content, located in shaded conditions under high vegetation cover in backyards, and in low urbanized areas. Altogether, these results suggest that the response of the community to the urbanization depends both on the spatial scale of the study and the type of container used as larval habitat. The increasing urbanization did not show favorable effects on the fly community in any case.

Rossi, Lucas Ezequiel. "Impacto de los inhibidores de Deacetilasas de Histonas (iHDAC) sobre la funcionalidad de células NK" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Desde el descubrimiento de que la expresión y funcionalidad de las deacetilasas de histonas (HDAC) se encuentra alterada en muchos tumores y que las mismas contribuyen a la carcinogénesis, se han desarrollado inhibidores de HDAC (iHDAC) para el tratamiento del cáncer. Los iHDAC inducen apoptosis, arresto del ciclo celular e inhibición de la angiogénesis en células tumorales. Sin embargo, no se ha estudiado adecuadamente el impacto de los iHDAC sobre células del sistema inmune involucradas en la respuesta anti‐tumoral. Por eso y debido a la relevancia de las células NK en la respuesta contra tumores, el objetivo de esta tesis fue estudiar el impacto de los iHDAC sobre estas células. Hemos demostrado que los iHDAC Tricostatina A (TSA), valproato de sodio (VPA) y butirato de sodio (NaB) inhibieron la producción de IFN-γ y la actividad citotóxica de células NK humanas. Aunque las drogas indujeron apoptosis en una fracción de las células NK, la marcada inhibición de sus funciones efectoras también se debió a la inhibición de la translocación nuclear de NF-κB y a una modulación negativa en la expresión de receptores activadores (NKG2D, NKp44 y NKp46), receptores de citoquinas (IL-12Rβ1, IL-15Rβ, IL-2Rγ e IL-18R) y de la subunidad α del receptor de IL-2 de alta afinidad (CD25). Además, demostramos que esta modulación negativa de NKG2D, NKp46 y CD25 fue funcionalmente relevante. Estos resultados fueron validados in vivo con células NK de ratones tratados con TSA, las que mostraron una menor expresión de los receptores NK1.1, NKG2D y NKp46, y una menor producción de IFN‐γ en respuesta a la estimulación ex vivo con citoquinas. Asimismo, comenzamos un estudio con muestras de sangre de pacientes epilépticos tratados con VPA ya que las células NK de estos pacientes se encuentran expuestas sólo a los efectos de la droga. Observamos un menor porcentaje de células NK en células mononucleares de los pacientes, las que exhibieron una menor expresión de receptores activadores, una menor producción de IFN-γ y una menor capacidad de degranulación. Estos resultados indican que estas drogas poseen efectos supresores sobre células NK (comprometidas en la inmunovigilancia contra tumores) y contribuyen al diseño de nuevos enfoques para el desarrollo de drogas terapéuticas que no comprometan la respuesta inmune anti-tumoral.

Abstract:
Since the discovery that many tumors exhibit altered expression and activity of different histone deacetylases (HDAC) and that they contribute to carcinogenesis, many HDAC inhibitors (HDACi) have been developed for the treatment of cancer. HDACi can induce apoptosis, cell cycle arrest and inhibit angiogenesis on tumor cells. However, their impact on cells of the immune system involved in immune surveillance against tumors has not been studied. Thus, the aim of this work was to investigate the effect HDACi on NK cells as they constitute critical actors of the anti‐tumor immune response. We have demonstrated that the HDACi Tricostatin A (TSA), sodium valproate (VPA) and sodium butyrate (NaB) inhibited in vitro IFN-γ production and cytolytic activity by human NK cells. Although the drugs induced apoptosis of a minor fraction of NK cells, the strong inhibition of their effector functions involves additional mechanisms such as inhibition NF-κB p50 nuclear translocation and down‐regulation of activating receptors (NKG2D, NKp44 and NKp46), cytokine receptors (IL-12Rβ1, IL-15Rβ, IL-2Rγ, IL-18R) and CD25 (the α chain of the high affinity IL-2R). Downregulation of NKG2D, NKp46 and CD25 were functionally relevant. Our results were validated in vivo, in HDACi treated mice, which exhibited NK cells with lower expression of the activating receptors NK1.1, NKp46 and NKG2D, and produced less IFN-γ upon ex vivo stimulation with cytokines. Preliminary data obtained with peripheral blood mononuclear cells from epileptic patients treated with VPA, showed that these patients exhibited lower percentages of NK cells than normal controls, and these NK cells presented lower expression of NKG2D and NKp46, lower IFN-γ production upon stimulation with citokynes and lower degranulation after stimulation with K562 cell line. Thus, our results suggest that HDACi have immunosuppressive effects on NK cells that may dampen their immune surveillance capacity. Our results may contribute to the development of drugs with a higher therapeutic eficacy which do not compromise immune response.

Romero, Alejandra Daniela. "Astrosismología de estrellas enanas blancas variables ZZ Ceti" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las estrellas enanas blancas constituyen la etapa final más común de la evolución estelar en la Vía Láctea. Por lo tanto, la población actual de estos objetos contiene valiosa información acerca de la historia de nuestra Galaxia. A lo largo de su evolución, las estrellas enanas blancas atraviesan varias etapas de inestabilidad pulsacional. Esto permite estudiarlas usando la Astrosismología, que estudia las propiedades evolutivas y estructurales de las estrellas pulsantes a partir del espectro de períodos observado. En particular, la astrosismología de enanas blancas es la única herramienta conocida para estimar la masa de las envolturas de hidrógeno y helio, y determinar la masa estelar con gran presición. en esta Tesis realizamos un estudio astrosismológico aplicado a estrellas enanas blancas variables de tipo DA conocidas como ZZ Ceti. Para ello, calculamos una grilla de modelos evolutivos representativos de estrellas enanas blancas DA, caracterizados por una estructura química interna detallada. También, realizamos un estudio de las propiedades evolutivas y estructurales de estos modelos, en particular la relación masa inicial-masa final. Luego, calulamos el espectro de períodos adiabáticos de pulsación de los modelos evolutivos, en un rango de temperatura efectiva suficiente para cubrir ampliamente la banda de inestabilidad observada (~ 12500 - 10500 K). Luego realizamos ajustes astrosismológicos período a período sobre una muestra de 45 estrellas ZZ Ceti. Comenzamos con un conjunto de 44 ZZ Ceti clásicas, que cuentan con determinaciones precisas de la temperatura y gravedad superficiales. En particular se realiza un análisis astrosismológico detallado del arquetipo de la clase, G117-B15A. También realizamos un estudio detallado de WD J1916+3938, la primera enana blanca DA variable descubierta en el campo de la misión Kepler. Finalmente, realizamos un análisis de las propiedades pulsacionales globales de la clase de ZZ Cetis. Estudiamos la distribución en masa, temperatura y masa de hidrógeno, para la muestra analizada. En particular, encontramos que el espesor de la envoltura de hidrógeno adopta diferentes valores con masas de hidrógeno en el rango 10ֿ4 - 10ֿ10 M*, con un valor medio más pequeño que aquel predicho por la teoría de evolución estándar. Este resultado implica la existencia de un escenario de formación que da lugar a envolturas de hidrógeno más delgadas. Aquí proponemos un posible escenario, relacionado con un episodio de un pulso térmico tardío (Althaus et al. 2005b).

Romeo, Gastón Leonardo. "Búsqueda de supersimetría en estados finales con energía faltante y al menos tres b-jets" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La teoría de Supersimetria (SUSY) es una candidata principal para describir la física mas allá del Modelo Estándar (ME) puesto que tiene el potencial para ofrecer una integración consistente y natural del ME dentro de una teoría más general cuya escala natural es la escala de Planck (MP). El Gran Colisionador de Hadrones (LHC) y el experimento ATLAS han sido diseñados para ser capaces de determinar si SUSY es una descripción correcta de la Naturaleza. Esta tesis presenta los resultados de la primera búsqueda de quarks escalares top y bottom a partir de la producción de pares de gluinos en eventos con energía faltante y al menos tres b-jets. El análisis es llevado a cabo con una luminosidad integrada total correspondiente a 4.7 fb¯¹ de colisiones protón-protón a una energía de centro de masa √s = 7 TeV. Una optimización exhaustiva ha sido efectuada con el objetivo de seleccionar topologías diferentes que involucran partículas supersimétricas, a partir de la cual cinco regiones enriquecidas de señal han sido elegidas para identificar candidatos posibles de eventos SUSY. Los resultados obtenidos en cada una de las cinco regiones se encuentran en buen acuerdo con las predicciones del ME. En consecuencia, se establecieron límites de exclusión con un intervalo de confianza del 95 % para una variedad de modelos con producción de pares de gluinos, excluyendo masas de gluinos de hasta 1.02 TeV. Estos límites son los más estrictos obtenidos hasta ahora por experimentos en colisionadores, e imponen severas restricciones fenomenológicas.

Abstract:
Supersymmetry (SUSY) is a leading candidate theory for describing physics beyond the Standard Model (SM) as it has the potential for providing a consistent and natural embedding of the SM in a more general theory whose natural scale is the Planck scale (MP ). The Large Hadron Collider (LHC) and the ATLAS experiment have been designed with the capability to determine whether SUSY is a correct description of Nature. This thesis presents the results of the first search for top and bottom squarks from gluino pair production in events with large missing transverse momentum and at least three jets identified as originating from a b-quark. The analysis is performed with a total integrated luminosity corresponding to 4.7 fb¯¹ of proton-proton collisions at center-of-mass energy √s = 7. An exhaustive optimization has been done targeting different topologies involving SUSY particles, from which five enriched signal regions (SR) have been chosen to identify possible SUSY-like event candidates with at least three b-jets and missing transverse energy. The results obtained in each of the five SR have been found to be in good agreement with the SM predictions. Therefore, exclusion limits at 95% confidence level are presented for a variety of gluino-mediated models with gluino masses up to 1.02 TeV excluded. These are the most stringent limits obtained up to now by collider experiments, and impose harsh constraints in several supersymmetric models.

Romanutti, Carina. "Evaluación de la respuesta inmune inducida por distintos inmunógenos recombinantes dirigidos contra el Virus de la Fiebre Aftosa" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo del presente trabajo de tesis fue, emplear distintos sistemas de expresión para el desarrollo de vacunas recombinantes y de estrategias de vacunación contra el virus de la fiebre aftosa (VFA). Se trabajó con vacunas derivadas de vectores virales no replicativos (Adenovirus y Herpesvirus) y vacunas génicas (pCI). El antígeno utilizado fue la poliproteína P1, cuyos subproductos son las proteínas capsidales virales, junto con la proteína 2A y la proteasa 3C, del serotipo O1/Campos del VFA. Con las vacunas recombinantes disponibles (HSV-P12A3C, Ad-P12A3C y pCI-P12A3C) y una vacuna convencional a virus inactivado (VFAi) en formulación oleosa, se procedió a estudiar la respuesta inmune generada, utilizando estrategias de tipo prime-and-boost homólogo y heterólogo en un modelo murino. En general, la vacunación heteróloga con vectores virales fue más efectiva que la homóloga, en inducir una respuesta inmune α-VFA, tanto humoral como celular. Los títulos más altos de anticuerpos (Acs) específicos correspondieron a los animales vacunados con 2 dosis de VFAi, pero los ratones primados con Ad-P12A3C que recibieron una dosis de refuerzo con HSV-P12A3C o VFAi, también indujeron títulos significativamente más altos que los otros grupos analizados. Los regímenes de inmunización con vectores virales generaron respuestas con predominio de Acs de isotipo IgG2a, sugiriendo un sesgo hacia una respuesta de tipo Th1, mientras que en la inoculación con 2 dosis de VFAi se generaron altos niveles de Acs con predominio de isotipo IgG1. Estos resultados fueron confirmados por la evaluación de las citoquinas inducidas (IL-2, IFNγ e IL-4). En los ensayos de desafío no se encontraron diferencias significativas en el porcentaje de protección, entre el esquema de dos dosis de vacuna convencional frente a una dosis de vacuna vectorial con un refuerzo de HSV-P12A3C o VFAi. Por otra parte, la re- exposición de los distintos grupos inmunizados al virus inactivado a los 5 meses, generó un rápido aumento de los anticuerpos específicos α-VFA en todos los grupos, demostrando la presencia de células B de memoria, funcionales in vivo. En este mismo tiempo post vacunación, los ratones inmunizados con la combinación Ad-P12A3C/HSV-P12A3C fueron capaces de reducir la viremia post desafío en un 100%. Es decir que esta combinación de inmunógenos resultó efectiva para desencadenar una respuesta inmune protectiva a mediano plazo contra el VFA en ratones adultos.

Abstract:
In the present work, different recombinant vaccine candidates and vaccination regimes against foot-and-mouth disease virus (FMDV) were tried. The antigen used was the P1 polyprotein, which includes the viral capsid proteins. Defective vectors derived from heterologous virus (adenovirus and herpesvirus) and a classic genetic DNA vector (pCI) carrying these sequences were constructed. To characterize the immune responses, a well known murine model was used. BALB/c mice were immunized following a prime-and-boost delivery system combining the different vaccine candidates (HSV-P12A3C, Ad-P12A3C, and pCI-P12A3C) and the inactivated adjuvanted virus (FMDVi), mimicking the conventional vaccine. The heterologous prime-and-boost regimes resulted in more effective humoral and cellular immune responses than the homologous viral vector boosting. The highest antibody titers corresponded to the groups vaccinated with 2 doses of inactivated virus, but significant high titers were also obtained when mice primed with Ad-P12A3C were boosted either with HSV-P12A3C or FMDVi. The predominat presence of antibodies of the IgG2a isotype and increased levels of mRNA of IL-2 e INFγ was detected in the groups immunized with the viral vectors, suggesting a Th1 response, while inoculation with conventional vaccine generated high antibodies titers of the IgG1 isotype. No difference was found in protection from challenge with live O1/Campos virus, between animals vaccinated with inactivated virus or primed Ad-P12A3C and boosted either with HSV-P12A3C or FMDVi. The rapid induction of specific antibodies and antibody secreting cells in animals re-exposed to FMDV 5 months later, suggest that B memory and plasmatic cells were functional in vivo. At the same time point after vaccination, mice vaccinated with the combination Ad-P12A3C/HSV-P12A3C were 100% protected from viral challenge, suggesting that this combination was effective to elicit a protective immune response in the medium term against FMDV in adult mice.

Robredo, Claudio Gabriel. "Caracterización de un segmento del cromosoma seis de una línea de maíz portadora de un Sistema de Letales Balanceados (BLS)" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La línea BLS1A posee un sistema de letales balanceados localizado en las cercanías del centrómero del cromosoma 6 de maíz formado por un gen letal clorofílico estrechamente ligado en fase de repulsión con un gen letal gamético. Los objetivos de esta tesis fueron los de caracterizar agronómica y molecularmente el segmento cromosómico balanceado de la línea de maíz BLS1A. Los resultados de ensayos a campo mostraron diferencias estadísticamente significativas entre BLS1A y algunos de sus recombinantes. La línea BLS1A mantuvo su vigor a pesar de los años de endocría. La caracterización genética a nivel molecular se realizó a través de la búsqueda de polimorfismos con marcadores moleculares de RAPD, RFLP, STS, AFLP y Microsatélites. Se analizaron más de 13200 loci génicos en todo el genoma de las líneas. Cinco microsatélites resultaron polimórficos para en el segmento y se lograron clonar y secuenciar siete bandas de RAPD y AFLP que mapearon en la región cromosómica en estudio. Las técnicas moleculares permitieron demostrar la alta homocigosis de la línea BLS1A, por fuera del segmento balanceado, luego de más de 25 años de endocría Del resultado de algunos de los ensayos de rendimiento de híbridos se observó que las líneas Rec 9 y Rec 10 que perdieron los letales, debido a la recombinación, parecerían corresponderse a los “homocigotas” de cada uno de los brazos del segmento balanceado original. La línea BLS1A como sus Recombinantes presentan buena aptitud combinatoria con las líneas públicas Mo17 y B73 representativas de los 2 grupos heteróticos más importantes en la producción de híbridos comerciales.

Abstract:
BLS1A maize line has a Balanced Lethal System located near the centromeric region of chromosome 6, formed by a chlorophyll lethal gene closely linked in repulsion phase with a gametic lethal gene. The objective of this tesis was to characterize agronomic and at the molecular level the Balanced Lethal System of BLS1A corn line. The results of field trials showed statistically significant differentces between BLS1A and some of their Recominant lines. BLS1A remained strong vigor despite the 25 years of inbreeding. Genetic caracterización was performed at the molecular level by searching for polymorphisms with RAPD, RFLP, STS,AFLP and microsatellites molecular markers. More than 13,200 gene loci were analized across the lines genome. Five microsatellites were polymorfic for the segment and seven RAPS and AFLP bands, that mapped in the chromosomal region under study. The molecular markers allow to demostrate the high hozygosity of the BLS1A, outside the balanced system, after more than 25 years of inbreeding. At the field yield trials of hybrids was observed that the lines Rec 9 and Rec 10, that lost the lethal ones due to the recombination, would seem to correspond to the "homozigous" of each arms of the original balanced lethal system. The BLS1A as its Recombinants present good (ac) with the public lines Mo17 and B73 representative of the 2 more important heterótic groups in the production of commercial hybrids

Ricardi, Martiniano María. "La proteína ASR1 de tomate. Aspectos estructurales y funcionales. Búsqueda de sus genes blanco" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las proteínas ASR, exclusivas del reino vegetal, se encuentran relacionadas con la respuesta al estrés por falta de agua y otros estreses. ASR1 tiene funciones de chaperona y factor de transcripción. Esta función dual de ASR1 se condice con su presencia en extractos citosólicos y nucleares. Hemos corroborado in planta esta localización dual y demostrando que la misma ocurre por difusión y no mediante transporte activo. Además demostramos que dicha proteína puede homodimerizar en el citosol y se encuentra como dímero en el núcleo. Por otra parte, hemos adaptado exitosamente una metodología de inmunoprecipitación de la cromatina (ChIP) para tomate. Este protocolo fue utilizado para realizar un ChIP “semi-nativo” y detectar marcas de histonas relacionadas a represión y activación de genes en todo el genoma de tomate a lo largo de diferentes estadíos de maduración del fruto. Además, experimentos de ChIP sobre hojas de plantas de tomate estresadas, usando un anticuerpo anti-ASR1, mostraron que la mayoría de las regiones genómicas se ubicaron cerca de genes. Los grupos de genes hallados, y por lo tanto posiblemente regulados por ASR1, están relacionados a la síntesis y remodelación de la pared celular, y al transporte de agua y solutos. Finalmente, encontramos una robusta secuencia de ADN consenso de "binding" para ASR1.

Abstract:
ASR proteins, exclusive to the plant kingdom, are related to water stress and other abiotic stresses. ASR1 has chaperone and transcription factor functions. This dual function is correlated with a dual nuclear/cytosolic subcellular localization, demonstrated to be due to diffusion rather than active transport. Additionally, we observed homodimerization in cytosol and homodimers in the nucleus. We have also successfully adapted a chromatin immunoprecipitation protocol (ChIP) for tomato. This protocol was used to perform semi-native ChIP for detection of repressive and activating histone modifications genome wide at different fruit maturation stages. In addition, ChIP assays on leaves from stressed tomato plants, performed with an anti-ASR1 antibody, showed that most of the enriched genomic regions were located near genes. The gene groups found, and hence probably regulated by ASR1, were related to cell wall synthesis and remodeling, and water and solute transport. Finally, we were able to find a robust consensus ASR1-binding DNA sequence.

Regueira, Eleonora. "Regulación de las variaciones estacionales en la sensibilidad testicular a la acción de los glucocorticoides en Rhinella arenarum (Amphibia, Anura). Interrelación testículo-interrenal" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los anfibios anuros tienen variaciones estacionales en los andrógenos y glucocorticoides (GCs) plasmáticos. En Rhinella arenarum la concentración plasmática de GCs aumenta durante el período reproductivo provocando una disminución en la síntesis de andrógenos vía un receptor citosólico (GR). El objetivo de esta tesis fue evaluar las variaciones estacionales en la sensibilidad testicular a la acción de los GCs. Para ello se estudiaron los cambios en la cantidad de GR así como el efecto de los andrógenos, los GCs y la melatonina en la regulación de dichos cambios. Los estudios de la interrelación entre la glándula interrenal y el testículo indicaron que la cantidad de proteína GR testicular varía estacionalmente y que los GCs regulan de manera positiva su propio receptor mientras que melatonina disminuye la unión del GC al GR y antagoniza el efecto de los GCs. En cambio, melatonina no disminuye la síntesis de andrógenos de manera directa. En la glándula interrenal, una concentración de andrógenos alta (período prerreproductivo) disminuye la síntesis de GCs. El estudio histológico de la glándula mostró que hay dos tipos de células esteroidogénicas que podrían producir distinta cantidad de GCs y que ambas presentan una regionalización antero-posterior. Se infiere que las variaciones estacionales de andrógenos y GCs están determinadas, en parte, por la regulación recíproca entre ambas hormonas y que la sensibilidad del testículo a la acción de los GCs, cuando se considera la cantidad de GR, varía de manera estacional y está regulada por los mismos GCs y la melatonina.

Abstract:
Anuran amphibians are characterized by having seasonal changes in plasma androgens and glucocorticoids (GCs). In Rhinella arenarum, plasma GCs concentration is highest during the reproductive season and GCs produce a decrease in androgen synthesis via a testicular cytosolic glucocorticoid receptor (GR). The aim of this thesis was to evaluate seasonal variations in testicular sensitivity to GCs’ action by studying changes in the amount of testicular GR as well as the effect of androgens, GCs, and melatonin on its regulation. In addition, it was analyzed the interrelation between the interrenal gland and the testis. Results indicated that the amount of GR protein varies seasonally and GCs positively regulate its own receptor whereas melatonin decreases the binding of GC to the GR antagonizing GCs’ effect. However, melatonin has no a direct effect on androgen synthesis. In the interrenal gland, high concentrations of androgens - corresponding to the pre-reproductive period - decrease the synthesis of GCs. Histological examination of the interrenal showed two anteroposterior regionalized steroidogenic cell types that could produce different amounts of GCs. Taking together, these results suggest that the seasonal variations of androgens and GCs are determined, at least in part, by the interregulation between these hormones. In addition, the GR-dependent sensitivity of the testis to the action of GCs varies seasonally and is regulated by GCs and melatonin.

Recouvreux, María Victoria. "Caracterización del sistema TGF-ß1 hipofisario: en búsqueda de un blanco terapéutico para prolactinomas resistentes a agonistas dopaminérgicos" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los prolactinomas son tumores benignos que en general responden bien al tratamiento con agentes dopaminérgicos. Sin embargo alrededor del 15% de estos tumores son resistentes y aún no existen terapias médicas alternativas. TGF-β1 es un inhibidor de las funciones del lactotropo, y un intermediario de la inhibición que ejerce la dopamina, por lo tanto, resulta un candidato atractivo como blanco terapéutico para prolactinomas resistentes. El objetivo de la presente tesis fue caracterizar el sistema TGF-β1 hipofisario y la regulación de sus componentes, incluyendo los niveles de citoquina total y activa, sus proteínas de latencia (LTBPs) y activadores locales, para evaluar su posible utilidad para el desarrollo de nuevas terapias. Utilizamos dos modelos experimentales de prolactinomas: 1) ratones hembra con mutación nula del receptor dopaminérgico D2 (Drd2-/-); y 2) ratas tratadas crónicamente con estrógenos. Nuestros resultados demuestran que el sistema TGF-β1 se encuentra inhibido en las hipófisis tumorales de ambos modelos. Describimos por primera vez en la literatura una regulación diferencial de los niveles de TGF-β1 activo hipofisario por dopamina y estrógenos que podría explicar en parte las diferencias sexuales en la formación de prolactinomas. Determinamos la expresión de las tres isoformas de LTBPs capaces de unir TGF-β1, y su regulación frente a estímulos con estrógenos y agentes dopaminérgicos. Por último, identificamos a trombospondina 1 (TSP1) y calicreína 1 (KLK1) como posibles activadores de TGF-β1 a nivel local. Asimismo, ensayamos la eficacia de un tratamiento con péptidos análogos de TSP1 (ABT-510 y ABT-898) en el modelo de ratas estrogenizadas. Este tratamiento logró disminuir los niveles de prolactina sérica y el tamaño hipofisario incrementados por los estrógenos. Nuestro estudio contribuye al conocimiento del sistema TGF-β1 hipofisario y su regulación local. Siendo TGF-β1 un inhibidor de la función del lactotropo, proponemos que la restauración de su actividad local podría ser efectiva para frenar el crecimiento de prolactinomas resistentes a los tratamientos clásicos.

Abstract:
Prolactinomas are common benign adenomas that are generally treated with dopaminergic agonists. However, around 15% of these tumors become resistant, and there are still not alternative therapeutical approaches. TGF-β1 is a potent cytokine that inhibits lactotrope function and, that mediates dopamine inhibitory action. Therefore, we postulate TGF-β1 as a candidate for developing new therapies against dopamine - resistant prolactinomas. The aim of this thesis was to characterize the pituitary TGF-β1 system (active and total cytokine levels, latent TGF-β1 binding proteins (LTBPs) and local activators) and its regulation, in order to identify potential therapeutical targets. We used two different experimental models of prolactinoma development: 1) the female dopamine D2 receptor knock-out mice (Drd2-/-) and 2) the estrogen-treated rat. We demonstrated that TGF-β1 system is down-regulated in both prolactinoma models. We described for the first time in the literature a differential regulation of pituitary active TGF-β1 levels by dopamine and estradiol in vivo. These differences may contribute to sexual dimorphism found in prolactinoma development. We found that LTBPs isoforms were differentially expressed in normal vs. tumoral pituitaries in both prolactinoma models, and each isoform was also differentially regulated by dopamine and estradiol. We identified thrombospondin 1 (TSP1) and kallikrein 1 as candidates to mediate pituitary TGF-β1 activation. Finally we explored the efficacy of an in vivo treatment with TSP1 mimetic peptides (ABT-510 and ABT-898) in the rat prolactinoma model. TSP1 analogs treatment caused a significant reduction in prolactin serum levels and pituitary weight induced by estrogen after 2-weeks treatment. Our findings provide novel evidence of TGF-β1 system function and regulation in pituitary tumorogenesis. Since TGF-β1 exerts a negative control on lactotrope cells, we postulate that recovering its local activity could be effective in inhibiting tumor growth of dopamine agonist resistant prolactinomas.

Quallbrunn, Federico. "Familias playas de foliaciones algebraicas" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En lo que sigue el autor desarrolla una teoría para determinar la compatibilidad de la noción de familias de foliaciones algebraicas singulares definidas a través de distribuciones involutivas de campos vectoriales, o a través de ideales diferenciales de formas. Se definen, usando construcciones algebrogeométricas, espacios de módulos para familias de ideales diferenciales y para familias de distribuciones involutivas, con tales construcciones se recuperan, en el caso algebraico, los espacios de módulos construídos por Gomez-Mont y Pourcin. Usando el enfoque algebro-geométrico, se puede mostrar que los espacios de distribuciones involutivas InvP (X) y de ideales diferenciales iPfQ(X) son, de hecho, birracionales, ampliando así resultados obtenidos por Pourcin al respecto. Tambi´en se expone una caracterización de abiertos de InvP (X) y iPfQ(X) donde el funtor Hom(−,OX) define un isomorfismo entre los dos espacios, estos abiertos se caracterizan por los tipos de singularidades de las foliaciones. Los resultados mostrados aquí generalizan los previamente obtenidos por Cukierman y Pereira en a foliaciones definidas sobre variedades proyectivas regulares cualesquiera.

Abstract:
The author develops a theory in order to establish compatibility between the related notions of families of singular algebraic foliations given by involutive distributions of vector fields, and that given by differential ideales of forms. Using algebro-geometric constructions, moduli spaces for families of differential ideals and families of involutive distributions are defined, with these constructions we recover, in the algebraic case, moduli spaces as defined by Gomez-Mont and Pourcin. With the algebro-geometric approach we can establish birationallity between the moduli spaces InvP (X) of involutive distribution and iPfQ(X) of differential ideals, thus generalizing Pourcin previous results. A characterization of open sub-spaces of InvP (X) and iPfQ(X) where an isomorphism is defined by the functor Hom(−,OX) presented, this characterization is in terms of the singularities of the foliations. The results of this work generalize previous ones by Cukierman and Pereira in to foliations over regular projective varieties.

Prymaczok, Natalia Cecilia. "Aclimatación térmica y salina en juveniles de la langosta de agua dulce Cherax quadricarinatus. Papel fisiológico de la hormona hiperglucemiante" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis estudiamos la respuesta fisiológica de individuos de C. quadricarinatus, una langosta de agua dulce originaria de los ríos del norte de Australia, expuestos a condiciones de estrés térmico, salino, o a la combinación de ambos factores. Demostramos que la combinación de ambos tratamientos produjo una inhibición en la ganancia de peso de los juveniles avanzados expuestos. El efecto de la temperatura sobre la fisiología del animal fue notable; la disminución de la temperatura impidió, en los juveniles expuestos, la eficiente regulación de los niveles de Na+ y K+ y generó incrementos superiores al 100 % en los niveles de glucosa, en hemolinfa. A su vez, la tasa metabólica varió levemente ante las diferentes condiciones ensayadas. Con el objetivo de estudiar la participación de la Hormona Hiperglucemiante de Crustáceos (CHH) en este tipo de estrés, medimos sus niveles de expresión por RT-PCR. Con ello demostramos que CHH se induce, bajo condiciones de estrés, en el tejido nervioso del pedúnculo ocular, sitio en el cual CHH es sintetizada, almacenada y secretada. Luego de producir CHH recombinante (rCqCHH) en bacterias, demostramos que la administración prolongada de esta hormona condujo a una disminución en los niveles de glucógeno en el hepatopáncreas y a un aumento de glucosa en la hemolinfa. Contrariamente, los niveles de glucógeno se mantuvieron estables en el músculo abdominal, luego de la administración de rCqCHH. Demostramos también que el aumento de los iones Na+ y K+ inducido por condiciones de alta salinidad, disminuyó por la administración de rCqCHH. Finalmente, las condiciones de estrés utilizadas en este trabajo condujeron a una desregulación en la expresión de PEPCK, enzima fundamental de la gluconeogénesis. En su conjunto, estos resultados sugieren una participación directa de la hormona CHH en el metabolismo energético asociado al mantenimiento de la homeostasis bajo condiciones de estrés térmico y salino. En línea con esta hipótesis, demostramos que bajo las condiciones de estrés mencionadas, los animales inyectados con rCqCHH poseen un significativo incremento en la ganancia de peso (200-300 %). El descubrimiento de la función de CHH como modulador del metabolismo energético en condiciones de estrés térmico y salino puede contribuir al desarrollo de nuevas tecnologías que puedan ser utilizadas para estimular el crecimiento de C. quadricarinatus en condiciones subóptimas, favoreciendo así la producción de la especie con fines comerciales.

Abstract:
In this thesis we studied the physiological response of individuals of C. quadricarinatus, an Australian freshwater crayfish, to salinity, cold shock, or the combinatory of both kind of stress. We demonstrated that both treatments lead to an inhibition of weight gain, respect the controls. The effect of temperature on the physiology of the animal was remarkable; the decrease in temperature prevented, at the exposure animals, the efficient regulation of Na+ and K+ levels and increased more than 100% the glucose levels, in the hemolymph. In turn, the metabolic rate varied slightly in different conditions tested. With the aim of studying the involvement of the Crustacean Hyperglycemic Hormone (CHH) hormone in this kind of stress, its expression levels were quantified by RT-PCR. We found that CHH is induced by stress conditions in eyestalk, the organ in which CHH is synthesized and secreted. We produced recombinant CHH (rCqCHH) in bacteria and administrated in to C. quadricarinatus individuals; the long-term administration of CHH decreased the glycogen levels in hepatopancreas, but increased the glucose levels in hemolymph. Oppositely, the glycogen levels remained unchanged in abdominal muscle upon CHH administration. Also, we demonstrated that the high-salinity induced increase of Na+ y K+ ions is inhibited after recombinant CHH administration. Finally, the stress conditions used in this work lead to a deregulation of PEPCK, the main enzyme of glyconeogenesis. Overall, these results suggest a direct involvement of CHH in the energetic metabolic rate associated to the homeostasis maintenance upon salinity and cold shock stress. In accordance with this hypothesis, we demonstrated that the animals injected with CHH showed a significant increase of weight gain (200-300 %). The discovery of CHH as a modulator of the energetic metabolic rate in salinity and cold shock stress will contribute to the development of novel technologies used to stimulate the growth of C. quadricarinatus in suboptimal conditions, and to the improvement of the knowledge related to its culture for commercial aims.

Pérez Recalde, María Mercedes. "Polisacáridos del alga roja Nemalion helminthoides: caracterización, modificación química y actividad biológica" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La presente Tesis comprende cuatro temas principales: Estudio del sistema de polisacáridos del alga roja Nemalion helminthoides, familia Liagoraceae, orden Nemaliales. Se determinó que la matriz de la pared celular estaba compuesta: (i) mayoritariamente por α-D-(1→3)-mananos con unidades monosulfatadas en C-4 ó C-6, con un promedio de un grupo sulfato cada cuatro residuos, y un grado de polimerización de ~200; (ii) en menor proporción por α-D-(1→3)-mananos con ramificaciones simples de β-D-xilosa en C-2, de similar grado de sulfatación también en C-4 ó C-6, y peso molecular promedio de ~10 kDa; (iii) por xilanos neutros β-D- (1→3;1→4), de ~6 kDa. Por último, de pared fibrilar se aislaron (1→4)-β-D-xilanos neutros. Modificaciones químicas de las fracciones de mananos y xilomananos de Nemalion helminthoides. (i) A partir de los mananos nativos se generaron polisacáridos modificados con 43-50% de sulfatación, constituidos mayormente por unidades disulfatadas en C-2 y C-6 y de unidades trisulfatadas. (ii) A partir de las fracciones de xilomananos se obtuvieron, por degradación de Smith, derivados sin ramificaciones de xilosa. Estudio de actividad antiviral de fracciones nativas y modificadas de Nemalion helminthoides. Los xilomananos inhibieron in vitro al virus herpes simplex (HSV-1 y HSV-2) y al virus dengue (DENV-2) agregados durante la adsorción viral. Los mananos sobresulfatados inhibieron DENV-2 agregados durante la adsorción viral, y HSV-1 y HSV-2 colocados durante y/o después de la adsorción viral in vitro. Utilizando un modelo de infección intranasal de ratones BALB/c con HSV-2, los mananos sobresulfatados protegieron de la enfermedad en un 100% con una única dosis, por la misma vía. Evaluación de acción inmunomoduladora de polisacáridos de Nemalion helminthoides. Fracciones de xilomananos indujeron proliferación de linfocitos T humanos (línea H9) y macrófagos murinos (línea RAW). En macrófagos, además, estimularon la secreción de citoquinas proinflamatorias IL-6 y TNF-α y de óxido nítrico. La respuesta de citoquinas también se detectó en plasma de ratones BALB/c inyectados por vía intravenosa. Los animales tratados con xilomananos no desarrollaron la enfermedad al ser infectados, una hora después, con HSV-2.

Abstract:
This Thesis comprises four main topics: Study of the polysaccharide system from the red seaweed Nemalion helminthoides family Liagoraceae, order Nemaliales. It was determined that the cell wall matrix was composed: (i) mainly by α-D-(1→3)-mannans with monosulfated units at C-4 or C-6, one sulfate group every four residues, on average, and a polymerization degree of ~200; (ii) in minor amount by α-D-(1→3)-mannans with β-D-xylose at C-2, with similar sulfation degree at C-4 or C-6, and average molecular weigth of ~10 kDa; (iii) by neutral β-D-(1→3;1→4) mixed linkage xylans, of ~6 kDa. Finally, from the fibrillar wall, neutral (1→4)-β-D-xylans were isolated. Chemical modifications of mannan and xylomannan fractions from Nemalion helminthoides. (i) From the native mannans, oversulfated polysaccharides with a 43- 50% sulfation were prepared. These mainly constituted by disulfated units at C-2 and C- 6, and trisulfated units. (ii) From the xylomannan fractions, derivatives without xylose branches were obtained, by Smith degradation. Study of antiviral activity of native and modified fractions of Nemalion helminthoides. Xylomannans were inhibitors of herpes simplex virus (HSV-1 and HSV- 2) and dengue virus (DENV-2) in vitro when were added during viral adsorption. Oversulfated mannans were inhibitors of DENV-2 when were incorporated during viral adsorption, and HSV-1 and HSV-2 during and/or after viral adsorption in vitro. Oversulfated mannans were evaluated in BALB/c mice with intranasal infection with HSV-2, 100% of the mice receiving one dose were protected. Evaluation of immunomodulatory effect by Nemalion helminthoides polysaccharides. Xylomannans fractions were inductors of human T lymphocites (H9 line) and murine macrophages (RAW line) proliferation. Besides, this compounds were able to stimulate secretion of nitric oxide and cytokines (IL-6 and TNF-α) in macrophages. Cytokine response was also observed in BALB/c mice inoculated by intravenous route. Remarkably no illness was developed in mice treated with xylomannans fractions one hour before HSV-2 infection.

Pérez Daroca, Diego Raúl. "Vórtices en monocristales de NbSe2: dinámica alterna en el régimen plástico" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis se investigó la dinámica alterna de vórtices superconductores en monocristales de NbSe2 , en condiciones compatibles con el régimen plástico.Mediante mediciones de susceptibilidad ac en el régimen lineal se exploraron configuraciones de vórtices en las inmediaciones de la transición orden - desorden, siguiendo diferentes historias térmicas, magnéticas y dinámicas. También, se estudió la respuesta del sistema después de agitar los vortices con campos magnéticos oscilatorios. Con estas mediciones, identificamos tres regiones. En la región T < T1 (H), agitar la red de vórtices lleva a configuraciones estables con máximo orden. Identificamos esta región con la fase de vidrio de Bragg. Para T > T2 (H) las configuraciones son desordenadas. En la región T1 < T < T2, al agitar la red de vórtices se producen deformaciones plásticas (irreversibles) que identificamos con la creación y aniquilación de disclinaciones alcanzándose configuraciones con propiedades peculiares. Profundizando el estudio en esta región, se hicieron experimentos cambiando la frecuencia y la forma de onda del agitado. Se observó que las frecuencias de agitados más altas llevan a configuraciones más ordenadas. Estas configuraciones no depende de la condición inicial, pero mantiene memoria de la frecuencia de agitado. Usando un modelo simple de la dinámica de vórtices y mediante simulaciones de dinámica molecular se analizó el desanclaje de la red de vótices bajo la acción de una fuerza externa ac. Se discutió la diferencia con el caso de una fuerza externa dc y se determinaron los observables más representativos para identificar el desanclaje ac. Para un conjunto compatible de parámetros de interacción que modelan cualitativamente las características principales de los protocolos experimentales de agitado, se realizaron simulaciones que revelan una posible naturaleza de las configuraciones de vórtices obtenidas mediante agitados en la región T1
Abstract:
In this thesis we studied the ac dynamics of superconducting vortices in NbSe2 single crystals in the plastic regime. By performing ac susceptibility measurements in the Campbell regime, we explored vortex configurations in the vicinity of the order - disorder transition following different thermal, magnetic and dynamical histories. Also, we studied the response of the system after shaking with oscillatory magnetic fields. With these measurements, we identified three regions. In the region T < T1 (H), shaking the vortex lattice leads to stable configurations with maximum order. We identify this region with the Bragg glass phase. For T > T2 (H) configurations are disordered. In the region T1 < T < T2 , shaking the vortex lattice produces plastic (irreversible) deformations that we associate with the creation and annihilation of disclinations leading to configurations with peculiar properties. Additional studies of this region were performed by changing the frequency and waveform of the shaking field. The highest shaking frequencies lead to the most ordered configurations. The system does not keep memory of the initial condition, but the final configuration depends on the shaking frequency. Using a simple model for the vortex dynamics and performing molecular dyna- mics simulations we analyzed the vortex lattice depinning by an ac external force. We discussed the difference with the case of a dc external force and considered the most representative observables to characterize the ac depinning. Additional simulation were performed that reveal a possible nature of vortex configurations obtained by shaking protocols in the region T1 < T < T2 ithin this picture the vortex configurations could be associated to stationary states in which both, lattice vortex disclinations and the average velocity fluctuate around a stable value. These states could be similar to the fluctuating states proposed in colloidal systems. In summary, a dynamic reorganization in the plastic regime that maintains memory of the shaking frequency, but it is independent of the initial configuration has been observed experimentally and numerically.

Pozo Devoto, Victorio Martín. "Estudio bioquímico y estructural de la muerte celular propia del desarrollo y la inducida por un evento hipóxico en el SNC durante el desarrollo" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los eventos de hipoxia tienen consecuencias nocivas que se manifiestan de múltiples formas en el SNC durante el desarrollo. El presente estudio analiza los daños generados en el tectum óptico por una hipoxia aguda normobárica sobre embriones de aves. Encontramos que tanto la vulnerabilidad diferencial como el retraso temporal de la muerte celular son dos fenómenos producto del evento hipóxico. Dicho daño se caracteriza por ser independiente de aferencias de la retina y por presentar una muerte celular mediada por la vía apoptótica intrínseca. Esto fue determinado ultraestructuralmente y bioquimicamente mediante la inmunomarcación de proteínas involucradas en la cascada apoptótica. Por otro lado, se determinó que la muerte celular propia del desarrollo presenta un perfil morfológico y bioquímico apoptótico similar al observado en condiciones de hipoxia. Frente a la evidente semejanza entre estos dos procesos de muerte postulamos que la hipoxia en nuestro modelo genera un desequilibrio transitorio en la homeostasis del tectum óptico, incrementando la muerte celular propia del desarrollo. Además, observamos una disminución transitoria en la actividad de la vía de supervivencia PI3K/Akt durante el evento hipóxico. Los resultados preliminares derivados de la administración de drogas que logran estimular esta vía de supervivencia en cultivos de embriones ex ovo, sugieren un rol ejecutor de esta vía en la muerte hipóxica. Por último, hemos determinado que la administración de estradiol posterior al evento hipóxico presenta efectos neuroprotectores a través de la unión a receptores y posiblemente mediante acciones no genómicas a través de PI3K/Akt.

Abstract:
Hypoxic insults during CNS development have multiple deleterious outcomes. In the present thesis, we analize the cell death evolution in the chick optic tectum layers after an acute normobaric hypoxia, showing two important features: differential vulnerability of optic tectum layers and delayed neuronal death. Our results show that hypoxic cell death is independent of retinal inputs and we found that this cell death is mediated by the apoptotic intrinsic pathway. This was determined by ultrastructural analysis and immunofluorescence against apoptotic pathway proteins. With minor differences, developmental cell death itself presents a morphological and biochemical apoptotic profile. The similarity between these two cell death processes lead us to postulate that hypoxia generates a temporary imbalance in the homeostasis of the optic tectum, increasing developmental cell death. In addition, we observed a transient decrease in the activity of the PI3K/Akt survival pathway during the hypoxic event, suggesting an important role as executor of hypoxic cell death. This is supported by the results obtained from the administration of drugs in a model of cultured ex ovo embryos, where the stimulation of pAkt levels reverts the hipoxic cell death. Finally, we have determined that administration of estradiol after the hypoxic event exerts neuroprotective effects through estrogen-estrogen receptor interaction and possibly through nongenomic actions via PI3K/Akt pathway.

Pontillo, Carolina Andrea. "Acción del hexaclorobenceno en la migración, invasión y metástasis en modelos experimentales de cáncer de mama" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El Hexaclorobenceno (HCB) es un pesticida organoclorado considerado como probable carcinógeno humano. A nivel regional, este contaminante fue encontrado en leche materna de puérperas y en muestras de leche vacuna para consumo humano. Es un tóxico tipo dioxina, y como tal se une al receptor de hidrocarburos aromáticos (RHA), un factor de transcripción que modula procesos tales como apoptosis, proliferación y migración celular. El RHA está presente en el citosol e interacciona con el complejo que contiene a la quinasa de tirosina c-Src. Cuando estos tóxicos se unen al RHA, se pueden desencadenar dos mecanismos: 1) que el complejo tóxico-RHA se transloque al núcleo y module la expresión de genes con elementos de respuesta a dioxinas (DREs) en sus promotores y 2) que se libere la c-Src del complejo citosólico y active receptores de factores de crecimiento, como el Receptor de Factor de Crecimiento Epidérmico (HER1). Resultados previos de nuestro laboratorio demostraron que el HCB aumenta el desarrollo y malignidad de tumores mamarios inducidos por N-Nitroso-N-metilurea en rata. En este mismo modelo se observó que el HCB activa la vía de señalización de c-Src/HER1 y disminuye la actividad del receptor de estrógenos (REα) en los tumores mamarios. Por otro lado, en estudios in vitro se demostró que el tóxico incrementa la proliferación y la actividad de c-Src en la línea celular de cáncer de mama MCF-7 (+REα). La tumorigénesis ocurre frecuentemente como resultado de la sobreexpresión de proteínas como el HER1 y la c-Src, que están involucradas en procesos celulares normales. Estas proteínas están usualmente sobreexpresadas en cáncer de mama en estadíos tardíos, y cooperan en la formación y progresión tumoral al favorecer procesos como la proliferación, migración e invasión celular, actividad de metaloproteasas y metástasis. Los objetivos de este trabajo fueron investigar en ensayos in vitro, utilizando una línea celular de cáncer de mama humano MDA-MB-231 (-REα) los efectos del tóxico en: a) la migración e invasión celular, b) la actividad y expresión de c-Src y HER1, c) la estimulación de las vías de señalización de ERK1/2, Akt2 y STAT5b, d) la actividad y expresión de metaloproteasas 2 y 9 (MMP2 y 9), y e) si los efectos observados dependen de las vías de señalización en estudio y de la unión del pesticida al RHA. Por otro lado, nos propusimos estudiar en ensayos in vivo, la acción del HCB sobre el crecimiento tumoral y la metástasis en modelos espontáneos y experimentales. Nuestros resultados muestran que el HCB estimula las vías de transducción de señales de c- Src/HER1/STAT5b y HER1/ERK1/2, la migración e invasión celular, la expresión de MMP2 y 9, así como la secreción y actividad de MMP9 en la línea celular MDA-MB-231, in vitro. Observamos que la migración e invasión celular inducida por el tóxico están mediadas por c-Src, HER1 y el RHA. A su vez, la secreción y actividad de la MMP9 estimulada por el HCB depende de HER1 y del RHA, mientras que el aumento en la expresión de MMP2 depende tanto de c-Src, HER1 como del RHA. Asimismo, en un modelo de xenotrasplante con la línea celular MDA-MB-231 en ratones atímicos, demostramos que el pesticida estimula el crecimiento tumoral (0.3 y 3 mg/kg p.c.), mientras que induce la activación de c-Src, HER1, ERK1/2 y STAT5b e incrementa los niveles proteicos de MMP2 y 9 en los tumores mamarios en todas las dosis ensayadas. Por otro lado, en estudios de metástasis espontánea con tumores C4-HI en ratones BALB-c, encontramos que el HCB (0.3 y 3 mg/kg p.c.) aumenta el crecimiento de los tumores mamarios y el número de micrometástasis en hígado y pulmón. En los estudios de metástasis experimental con la línea celular LM3 en ratones BALB-c, el pesticida (3 mg/kg p.c.) incrementa el tamaño de las metástasis en pulmón. En conclusión, en el presente trabajo demostramos por primera vez, que el HCB promueve la migración e invasión celular por las vías de c-Src/HER1/STAT5b y HER1/ERK1/2, así como la expresión de MMP2 y MMP9 de manera dependiente del RHA. A su vez, observamos que el tóxico estimula el crecimiento tumoral y metástasis en pulmón e hígado en modelos experimentales de cáncer de mama.

Abstract:
Hexachlorobenzene (HCB) is an organochlorine pesticide considered as a probable human carcinogen. This pollutant was found in puerperal mother milk and in samples of bovine milk for human consumption, at regional level. It is a dioxin-like compound and a weak ligand of the aryl hydrocarbon receptor (AhR) protein, which is a transcription factor that modulates processes as apoptosis, proliferation and cell migration. AhR interacts with cytosolic complex containing c-Src kinase. Upon dioxin binding, two mechanisms can be triggered: 1) the AhR-toxic complex translocates to the nucleus and modulates gene expression with dioxin-responsive elements (DREs) and 2) c-Src kinase frees from its complex and activates growth factors receptors like Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR/HER1). In previous studies of our laboratory, we found that HCB has a co-carcinogenic effect in N-Nitroso N-methyl urea–induced mammary tumors in rats, enhancing their development and malignancy. We have also demonstrated that HCB activates c-Src/HER1 signaling pathway and decreases estrogen receptor α (ERα) activity of mammary tumors, in the same model. In previous in vitro studies, we observed that HCB induces cell proliferation and c-Src activity in ERα (+) MCF-7 breast cancer cell line. Tumorigenesis frequently occurs as a result of the overexpression of proteins that are otherwise involved in normal cell processes, as HER1 family and c-Src tyrosine kinase. These proteins are overexpressed in a high percentage of certain late-stage human breast cancers, and they cooperate in tumor formation and progression, promoting processes like cell proliferation, migration and invasion, metalloprotease activities and metastasis. The aim of our study was to investigate the effects of HCB on: a) cell migration and invasion, b) c-Src and HER1 expression and activities, c) ERK1/2, Akt2 and STAT5b signaling pathways activation, d) MMP2 and MMP9 expression and activities, and e) AhR and c-Src/HER1 signaling pathways roles in ERα (-) MDA-MB-231 breast cancer cell line, in vitro. On the other hand, we studied the action of HCB on tumour growth and metastasis in spontaneous and experimental models, in vivo. Our results demonstrate that HCB stimulates c-Src/HER1/STAT5b and HER1/ERK1/2 signaling pathways, cell migration and invasion, MMP2 and 9 expression, as well as MMP9 secretion and activity in MDA-MB-231, in vitro. We observed that c-Src, HER1, and AhR are involved in cell migration and invasion increased by HCB. Moreover, HCB-induced MMP2 expression depends on c-Src, HER1 and AhR; whereas only HER1 and AhR are involved in HCB-induced MMP9 secretion and activity. When MDA-MB-231 were xenotrasplanted in athymic mice, we observed that HCB estimulates tumoral growth (0.3 and 3 mg/kg b.w.), whereas the pesticide also increases c-Src, HER1, ERK1/2 and STAT5b activities, as well as MMP2 and 9 protein levels in mammary tumors at all assayed doses. On the other hand, we found that HCB (0.3 and 3 mg/kg b.w.) enhaces mammary tumor growth, as well as lung and liver micrometastasis levels in spontaneous metastasis models with C4-HI tumors in BALB-c mice. Furthermore, we observed that the pesticide (3 mg/kg b.w.) enhances the lung metastasis size, in experimental metastasis assay with LM3 cell line in BALB-c mice. In conclusion, in the present study we demonstrate for the first time, that HCB promotes cell migration and invasion through c-Src/HER1/STAT5b and HER1/ERK1/2 signaling pathways activation, as well as MMP2 and MMP9 expression in an AhR dependent manner. Moreover, we observe that the pesticide estimulates tumor growth and lung and liver metastasis in breast cancer experimental models.

Poggio, María Georgina. "Aportes al conocimiento de los cromosomas holocíneticos de Hemiptera: estudios citogenéticos y evolutivos en especies de Cimicomorpha" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El presente trabajo de Tesis Doctoral se basa en el estudio citogenético clásico, molecular y evolutivo de especies de insectos hematófagos y predadores pertenecientes a las familias Cimicidae y Reduviidae del infraorden Cimicomorpha (Hemiptera: Heteroptera), que se caracterizan por presentar cromosomas holocinéticos. Se analizó el complemento cromosómico, el desarrollo meiótico masculino, el contenido, distribución y composición de la heterocromatina y el número y la localización de los genes de ADN ribosomal en las siguientes especies: Acanthocrios furnarii 2n=10A+XY/XX (macho/hembra) y Psitticimex uritui 2n=28A+X1X2Y (macho) (Cimicidae: Haematosiphoninae); Brontostoma colossus 2n=28A+XY (macho) y B. discus 2n=34A+X1X2Y (macho) (Reduviidae: Ectrichodiinae); Microtomus lunifer 2n=26A+2m+X1X2Y (macho) (Reduviidae: Hammacerinae); Apiomerus lanipes 2n=22A+XY (macho), Atrachelus (Atrachelus) cinereus 2n=26A+XY/XX (macho/hembra), Cosmoclopius annulosus 2n=24A+X1X2X3Y/X1X1X2X2X3X3 (macho/hembra), Graptocleptes bicolor 2n=22A+XY/XX (macho/hembra) y Zelus obscuridorsis 2n=16A+XY/XX (macho/hembra) (Reduviidae: Harpactorinae); Zelurus femoralis longispinis 2n=20A+XY/X1X2Y (macho) (Reduviidae: Reduviinae); Rhodnius prolixus 2n=20A+XY/XX (macho/hembra) y Triatoma infestans 2n=20A+XY (macho) (Reduviidae: Triatominae). El análisis citogenético clásico realizado en ejemplares de A. furnarii y P. uritui demuestra que la meiosis masculina en ambas especies es aquiasmática y de tipo collochores , la cual podría ser considerada como una característica citogenética que comparten los miembros de la familia Cimicidae. Sin embargo, A. furnarii y P. uritui poseen un patrón propio de meiosis aquiasmática, en el cual se pueden diferenciar tres regiones en los bivalentes autosómicos: i) regiones terminales que se encuentran en repulsión, ii) región media donde los cromosomas se ubican paralelos pero sin contacto y iii) pequeñas regiones dentro de la región media donde se localizan puntos de unión no quiasmáticos o collochores . La población de A. furnarii analizada previamente por otros autores (2n=32A+XY, macho) difiere de la aquí descripta (2n=10A+XY, macho). Esta notable diferencia en el número diploide de autosomas no puede ser explicada como politipismo; por consiguiente, se concluye que estos dos cariotipos pertenecerían a dos entidades taxonómicas diferentes. Sobre la base de los resultados descriptos en la presente Tesis Doctoral y los antecedentes citogenéticos disponibles se sugieren las siguientes tendencias evolutivas para la subfamilia Haematosiphoninae: i) fusiones autosómicas que provocaron una reducción en el número de autosomas; ii) fragmentación del cromosoma X ancestral originando sistemas sexuales múltiples y iii) fragmentaciones autosómicas que trajeron aparejado un incremento en el número de autosomas. Acanthocrios furnarii y P. uritui poseen un alto contenido de heterocromatina, ubicada en ambas regiones terminales de cada uno de los autosomas del complemento, por lo cual las regiones cromosómicas que se repelen son heterocromáticas. En A. furnarii, los clusters de ADNr se localizan en una de las regiones terminales de un par autosómico, mientras que en P. uritui se ubican en una de las regiones terminales de un par autosómico y de uno de los cromosomas sexuales. En ambas especies la composición nucleotídica de los genes ribosomales es rica en pares de bases GC. Además del amplio rango en el número cromosómico en la familia, la localización de los genes de ADNr es muy variable, lo que permite sugerir que el genoma de los cimícidos presenta una gran dinámica, que podría deberse a diferentes mecanismos tales como la recombinación ectópica y/o la presencia de elementos transponibles. Las especies de Reduviidae estudiadas comparten características que son típicas de la familia e incluso de Heteroptera: los bivalentes autosómicos son quiasmáticos y se dividen reduccionalmente en anafase I; los cromosomas sexuales son heteropicnóticos positivos durante la profase I temprana, asinápticos, aquiasmáticos y se dividen ecuacionalmente en anafase I. Sin embargo, también se han observado diferencias y/o particularidades citogenéticas: i) las especies analizadas presentan una disposición cromosómica desordenada en metafase I, independientemente del número cromosómico y del sistema de cromosomas sexuales que posean, aunque en metafase II la arquitectura de la placa es la típica para los heterópteros; ii) la presencia de por lo menos un bivalente mayor con dos quiasmas es una característica frecuente en Reduviidae; además, estos bivalentes se comportarían como telocinéticos al liberarse primero uno de los dos quiasmas; iii) de acuerdo al comportamiento y las características meióticas del par menor hallado en M. lunifer , se propone que sea considerado como un par de cromosomas m. Hasta el presente Microtomus es el único género de Reduviidae que presenta este tipo de cromosomas. En cuanto a la evolución del cariotipo, se sugieren las siguientes tendencias evolutivas: i) la presencia de cromosomas m en Hammacerinae podría ser considerado como un carácter plesiomórfico; ii) las fusiones son más frecuentes que las fragmentaciones autosómicas; iii) las fragmentaciones en el cromosoma X y aún la pérdida del cromosoma Y aparecen en distintos grupos y de forma independiente. El análisis del contenido, localización y composición de heterocromatina sugieren que esta familia se caracterizaría por presentar un bajo contenido de heterocromatina constitutiva, preferentemente localizada en regiones terminales de los autosomas. En aquellas especies con bloques heterocromáticos terminales en algún bivalente autosómico, los quiasmas se ubicaron en zonas adyacentes, por lo que si bien muy probablemente no habría recombinación a nivel de heterocromatina, el efecto supresor de la recombinación no se extendería más allá de la región heterocromática en sí misma. La localización de los clusters de ADNr en Reduviidae fue también muy variable: en autosomas, en cromosomas sexuales o en ambos a la vez. En el par mayor de M. lunifer , G. bicolor y Z. obscuridorsis, la localización de ADNr fue utilizada como marcador cromosómico para analizar los sitios de actividad cinética, permitiendo sugerir que en las tres especies la elección de los extremos cinéticamente activos es un proceso azaroso en ambas divisiones meióticas y que aquellas regiones que fueron activas en la primera división meiótica son inactivas en la segunda y viceversa. Con el fin de analizar el grado de diferenciación molecular de los cromosomas sexuales utilizando técnicas citogenético-moleculares, se utilizó como modelo de estudio a R. prolixus y se implementó por primera vez en Cimicomorpha las técnicas de pintado cromosómico (CP), hibridación in situ de genoma (GISH) e hibridación comparativa de genoma (CGH). La técnica de CP sugiere que la estructura del genoma de R. prolixus posee un alto contenido de secuencias repetidas dispersas en el genoma. Por su parte, las técnicas de GISH y CGH fueron informativas al revelar que el cromosoma Y posee secuencias específicas de macho y que el cromosoma X no estaría enriquecido preferentemente en ADN de uno u otro sexo. Además, se pudo detectar un alto grado de diferenciación molecular entre los cromosomas sexuales X e Y en el sistema simple de R. prolixus. En este trabajo se describe una población polimórfica de Zelurus femoralis longispinis para el número de cromosomas, observándose dos citotipos (2n=22/23). El comportamiento del cromosoma extra altamente regular y similar al de los cromosomas sexuales y el hecho de encontrar que el largo promedio de los cromosomas sexuales en los individuos no portadores del cromosoma extra es significativamente mayor respecto a los que sí lo poseen, permiten concluir que: i) esta variante cariotípica es neutral o, al menos, no perjudicial, ii) su surgimiento no habría acontecido tan recientemente y iii) el cromosoma extra se habría originado por fragmentación del cromosoma X original, dando como resultado un sistema múltiple X1X2Y. El análisis de esta población sustenta la hipótesis del origen de los sistemas múltiples en Heteroptera. Por otra parte, se describió la presencia de un individuo de Triatoma infestans mutante espontáneo heterocigota para una fusión entre cromosomas no homólogos (2n=19A+cromosoma extra+XY, macho). A partir del análisis del comportamiento meiótico del mutante y del patrón de bandas C se propone que: i) el trivalente autosómico se divide ecuacionalmente en la primera división meiótica; ii) dos de los tres pares de autosomas mayores habrían estado involucrados en el evento de fusión; iii) el cromosoma extra se habría originado como producto de la fusión autosómica. La presencia de un mutante espontáneo en una población natural y el comportamiento masculino meiótico altamente regular constituyen evidencias a favor de la hipótesis que propone a las fusiones como uno de los mecanismos de evolución del cariotipo en Heteroptera.

Abstract:
This PhD Thesis is based on the classical cytogenetic, molecular and evolutionary study of hematophagous and predatory insects of Cimicidae and Reduviidae families from Cimicomorpha (Hemiptera: Heteroptera), which are characterized by the presence of holokinetic chromosomes. Chromosome complement and meiotic development were analysed as well as the heterochromatin content, composition and distribution. Moreover, the number and location of ribosomal DNA genes were also analysed in the following species: Acanthocrios furnarii 2n=10A+XY/XX (male/female) and Psitticimex uritui 2n=28A+X1X2Y (male) (Cimicidae: Haematosiphoninae); Brontostoma colossus 2n=28A+XY (male) and B. discus 2n=34A+X1X2Y (male) (Reduviidae: Ectrichodiinae); Microtomus lunifer 2n=26A+2m+X1X2Y (male) (Reduviidae: Hammacerinae); Apiomerus lanipes 2n=22A+XY (male), Atrachelus (Atrachelus) cinereus 2n=26A+XY/XX (male/female), Cosmoclopius annulosus 2n=24A+X1X2X3Y/X1X1X2X2X3X3 (male/female), Graptocleptes bicolor 2n=22A+XY/XX (male/female) and Zelus obscuridorsis 2n=16A+XY/XX (male/female) (Reduviidae: Harpactorinae); Zelurus femoralis longispinis 2n=20A+XY/X1X2Y (male) (Reduviidae: Reduviinae); Rhodnius prolixus 2n=20A+XY/XX (male/female) and Triatoma infestans 2n=20A+XY (male) (Reduviidae: Triatominae). The classical cytogenetic analysis performed on A. furnarii and P. uritui shows that male meiosis in both species is achiasmatic and of collochores type, which could be considered a cytogenetic characteristic shared by members of Cimicidae family. However, A. furnarii and P. uritui have an own pattern of achiasmatic meiosis, in which three regions can be differentiated in autosomal bivalent: i) terminal regions found in repulsion, ii) half region where the chromosomes are located parallel but without contact and iii) small areas within the middle region where not chiasmatic attachment points or collochores are located. The analysed population of A. furnarii by other authors (2n=32A+XY, male) differs from the present description (2n=10A+XY, male). This remarkable difference in the diploid number of autosomes cannot be explained as polytypism, therefore we concluded that these two karyotypes belong to two different taxa. Based on the results described in this PhD Thesis and on the cytogenetic background available, it suggests the following evolutionary trends for the subfamily Haematosiphoninae: i) autosomal fusions that caused a reduction in the number of autosomes, ii) X ancestral chromosome fragmentation originating the derived system of multiple sex chromosomes and iii) autosomal fragmentations associated with an increase in the number of autosomes. Acanthocrios furnarii and P. uritui both possess high heterochromatin content, located in both end regions of each autosome wherefore chromosomal regions that repel are heterochromatic. In A. furnarii rDNA clusters are located on one of the terminal regions of an autosomal pair, whereas in P. uritui are located in one of the end regions of an autosomal pair and in one of the sex chromosomes. In both species, the nucleotide composition of the ribosomal genes is rich in GC base pairs. In addition to the wide range in the chromosome number in the family, the location of rDNA genes is very variable, which allows to suggest that the cimicid genome has a high dynamic. This could be due to diverse mechanisms such as ectopic recombination and/or to the presence of transposable elements. The Reduviidae species studied herein share characteristics that are typical of the family and also from Heteroptera: autosomal bivalents are chiasmatic and divide at anaphase I, the sex chromosomes are positively heteropycnotic during early prophase I, asynaptic, achiasmatic and divided equationally at anaphase I. However, it has also observed different cytogenetic features: i) the analysed species have a disordered arrangement in metaphase I, regardless of the chromosome number and the sex chromosome system they have, although in metaphase II the plate architecture is typical for the group of Heteroptera; ii) the presence of at least one large bivalent with two chiasmata is a frequent feature in Reduviidae. Furthermore, those bivalents should behave as telokinetic by releasing first one of the two chiasmata; iii) according to the behaviour and meiotic characteristics of the minute pair found in M. lunifer, it proposes that it should be considered as one pair of m chromosomes. Microtomus is at present the only reduvid genus which presents a pair of m chromosomes. Regarding karyotype evolution, it suggests the following evolutionary trends: i) the presence of m chromosomes in Hammacerinae could be considered as a plesiomorphic character, ii) fusions are more common than autosomal fragmentations, iii) fragmentations on the X chromosome and even the loss of the Y chromosome appear in different groups and in an independent way. Analyses of content, location and composition of heterochromatin suggest that this family is characterized by a low content of constitutive heterochromatin, mainly located in terminal regions of the autosomes. In those species with terminal heterochromatic blocks in any autosomal bivalent, chiasmata were located in adjacent areas. Therefore, although there would not probably be recombination at heterochromatin level, the suppressive effect of recombination would not extend beyond the heterochromatic region itself. The rDNA clusters location was also highly variable in Reduviidae: on autosomes, on sex chromosomes, or in both simultaneously. In the largest autosomal pair of M. lunifer , G. bicolor and Z. obscuridorsis, the location of rDNA was used as a chromosomal marker to analyse sites of kinetic activity, suggesting that, in the three analysed species, the kinetic activity of both ends is not a random process and there is an inversion of this activity. In order to analyse of molecular differentiation in sex chromosomes by molecular cytogenetic techniques, R. prolixus was used as a model of study. Chromosome painting (CP), genome in situ hybridization (GISH) and comparative genome hybridization (CGH) were used for the first time in Cimicomorpha. CP technique suggests that the genome structure of R. prolixus has a high content of dispersed repeated sequences. On the other hand, GISH and CGH techniques were informative and revealed that the Y chromosome has male-specific sequences, whereas the X chromosome would not be enriched preferably in either sex DNA. In addition, it could also detect a high degree of molecular differentiation between X and Y sex chromosomes in the simple system of R. prolixus . In the present PhD Thesis, a polymorphic population of Zelurus femoralis longispinis for the chromosomal number has been described, being observed two cytotypes (2n=22/23). The behaviour of the extra chromosome highly regular and similar to sex chromosomes and finally, the finding that the average length of the sex chromosomes in individuals not carrying the extra chromosome is significantly greater than in those who do have, allow to conclude: i) this new chromosome complement is neutral or at least not harmful, ii) its origin would not have occurred so recently and iii) the extra chromosome should be originated by fragmentation of the original X chromosome, resulting in a multiple system X1X2Y. The analysis of this population supports the hypothesis of the multiple sex systems origin in Heteroptera. Moreover, the presence of a spontaneous mutant heterozygous of Triatoma infestans carrying a fusion between non-homologous chromosomes has been described (2n=19A+extra chromosome+XY, male). Taking into account its meiotic behaviour together with the results of the C-banding pattern, allow to propose that: (i) the autosomal trivalent divides equationally during the first meiotic division, ii) two of the largest pairs of autosomes might have been involved in the fusion event and (iii) the extra chromosome was originated as a product of the autosomal fusion. The presence of a spontaneous mutant in a natural population and the highly regular meiotic male behaviour are evidences that favour the hypothesis that fusion as one of the mechanisms of karyotype evolution in Heteroptera.

Pisoni, Juan Pablo. "Los sistemas frontales y la circulación en las inmediaciones de los Golfos Norpatagónicos" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En la presente tesis se estudian los sistemas frontales y la circulación en la región de los denominados golfos norpatagónicos y la plataforma adyacente empleando imágenes satelitales de temperatura de alta resolución y datos oceanográficos in-situ. Las imágenes satelitales revelan claramente los frentes térmicos formados en la boca del golfo San Matías (Frente Meridional GSM), dentro del GSM (Frente Zonal GSM), dentro del golfo San José (FGSJ), al este de la península Valdés (FV) y dentro del golfo Nuevo (FGN). En los meses de máximo porcentaje de ocurrencia los frentes no presentan variaciones significativas en su posición media mensual. Sin embargo, en el FMGSM y en el FV se observan desplazamientos de frecuencia quincenal, no siendo el caso del FZGSM, del FGSJ y del FGN los cuales son debidos a procesos advectivos. Perfiles verticales de densidad y de porcentaje de saturación de oxígeno disuelto sugieren que la ventilación dentro del GSM se produce localmente mediante convección en invierno, sin evidencia de derrame de aguas densas, pero sugiriéndose ingreso de agua sub-superficial desde la plataforma continental adyacente. En contraste, las aguas profundas del GN son ventiladas por el derrame de aguas densas sobre el fondo desde la plataforma continental y además por convección local en invierno. Las dimensiones y orientación del margen occidental del GSM favorecen la ocurrencia de surgencia costera. El análisis combinado de imágenes satelitales de temperatura superficial y viento junto con la temperatura in-situ sugiere la formación de un frente de upwelling sobre la costa occidental del GSM, generado por eventos de viento norte con al menos uno o dos días de persistencia.

Abstract:
In this thesis I study the frontal systems and circulation in the northern patagonian gulfs and their adjacent continental shelf using high resolution satellite images of temperature and insitu oceanographic data. Satellite images clearly show thermal fronts in the San Matías gulf (Meridional Front of SMG and Zonal Front of SMG), in the San José gulf (SJGF), east of the Valdés Peninsula (VF) and in Nuevo gulf (NGF). During the months of maximum percentage of occurrence, fronts do not show significant variation in their monthly mean position. However, the Meridional Front of SMG and the Valdés Front show displacements with a fortnightly frequency. These displacements are not observed in the Zonal Front of SMG neither on the SJGF nor on the NGF which are due to advective processes. Vertical profiles of density and dissolved oxygen saturation suggest that ventilation in the SMG is locally generated through winter convection. There is no evidence of spreading of deep waters from the continental shelf. However, a sub-surface water flows from the adjacent continental shelf into the northern SMG gyre. In contrast, the deep waters of Nuevo Gulf are renewed through spreading of shelf bottom water and local winter convection. The dimension and orientation of the west margin of the SMG, favor the occurrence of upwelling in response to northerly winds. The combined analysis of surface temperature and satellite derived wind data, and in-situ temperature suggests the formation of an upwelling front along the west coast of SMG, generated by wind events persisting more than one or two days.

Pessacg, Natalia Liz. "Impacto de las condiciones de suelo en el clima del sur de América del Sur en diferentes escalas temporales" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis se evalúa la respuesta del clima regional del sur de Sudamérica a dos forzantes locales asociados a las condiciones de superficie, los cambios de uso/cobertura de suelo y los cambios en las condiciones de la humedad de suelo. Por otro lado, se analiza cómo la respuesta del clima regional a distintos forzantes remotos es modulada por los cambios de uso/cobertura de suelo. En primer lugar, se analiza la capacidad de una serie de modelos climáticos regionales para representar los balances de radiación y los flujos de calor en América del Sur, ya que los cambios en las condiciones de superficie afectan fuertemente estos balances. En particular, se evalúa la capacidad del modelo regional MM5, utilizado como herramienta para el abordaje de esta tesis. En segundo lugar, se estudia la respuesta del clima regional del sur de Sudamérica para diferentes escenarios idealizados de cambios de uso/cobertura de suelo, asociados a los procesos de desertificación, reforestación y remplazo de la cobertura actual por tierras para la agricultura, procesos que se han dado en nuestra región en las últimas décadas y que continúan teniendo una tendencia positiva. Se encontró que los cambios en la cobertura de suelo influyen fuertemente sobre la temperatura y la precipitación mediante cambios en los balances de energía y agua en el sur de Sudamérica. En tercer lugar, se evalúa cómo los cambios en la cobertura de suelo modulan la respuesta del clima regional a la señal asociada a distintos forzantes remotos, ENSO y el aumento en la concentración de los gases de efecto invernadero. Finalmente, se analiza el efecto de los cambios de humedad de suelo en la variabilidad climática estacional del sur de Sudamérica. En particular, considerando que la humedad de suelo es una de las variables con mayor memoria del Sistema Climático, se evalúa la influencia de este forzante local en la predictabilidad climática en escala estacional.

Abstract:
In this thesis the regional climate response to two local forcings related with the surface conditions, land use/land cover changes and soil moisture conditions changes over southern South America is studied. In addition, the modulation of the regional climate response due to the interaction between changes in land use/land cover changes and different remote forcings is analyzed. First, the capability of a group of regional climate models to represent the radiation budgets at surface and the heat fluxes over South America is analyzed, since the changes in the surface conditions strongly affect the radiation budget. In particular, the capability of the regional climate model MM5, which is the tool used for addressing this thesis, is evaluated. Secondly, the southern South American climate response is studied for different idealized scenarios of land use/land cover changes, related with desertification, reforestation and replacement of actual cover by agricultural land, processes that southern South America suffered during the last decades and continue with a positive tendency. The results indicated that the land use/cover changes strongly influence the temperature and precipitation by means of changes in the energy and water budgets. Thirdly, it is evaluated how the land use/cover changes modulate the regional climate response to the signal related with remote forcings such as ENSO and the increase of the concentration of greenhouse gases. Finally, the effect of soil moisture changes in the seasonal climate variability over southern South America is evaluated. In particular, assuming that soil moisture is one of the variables with longest memory in the Climate System, it is analyzed the influence of this local forcing in the climate predictability in seasonal time scale.

Peri, Verónica Gisel. "Caracterización morfotectónica de las Lomadas de Otumpa (Gran Chaco, Santiago del Estero y Chaco): Influencias en el control del drenaje" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se realizó una caracterización morfotectónica multiescalar de las Lomadas de Otumpa, ubicadas en el Gran Chaco Argentino, vinculada con un análisis dinámico del diseño y evolución de la red de drenaje. La caracterización morfotectónica profunda se llevó a cabo mediante un relevamiento magnetotelúrico en una transecta dispuesta sublatitudinalmente a los 27° Latitud Sur, que permitió detectar la estructura eléctrica a escala de corteza-manto y a escala somera, identificándose las cuencas sedimentarias. Asimismo, se realizó un análisis de la sismicidad profunda (500-600 kilómetros) de la región, para complementar los rasgos profundos. La caracterización morfotectónica intermedia se apoyó en sísmica de reflexión, anomalías gravimétricas residuales, registros litológicos de perforaciones petroleras y datos mundiales del campo de esfuerzos, con los que se esbozó un modelo estructural. La caracterización morfotectónica somera llevada a cabo a partir de dos perfiles de audiomagnetotelúrica (600 metros) y de un perfil geoeléctrico, permitió identificar horizontes eléctricos que fueron correlacionados a unidades litológicas reconocidas en perforaciones. La caracterización morfotectónica de superficie, basada en la identificación de unidades geomorfológicas y en el cálculo de parámetros geomorfométricos, evidencian anomalías del relieve y del drenaje, manifiestas principalmente sobre la planicie aluvial y paleocauces del río Saldo del Norte. Además, se estudiaron los afloramientos rocosos de la zona oriental de las Lomadas de Otumpa que, finalmente fueron correlacionados a los depósitos eólicos del Jurásico superior-Cretácico inferior o Formación Misiones. Sobre estas eolianitas se evidencian importantes y posteriores eventos de silicificación y meteorización. Las Lomadas de Otumpa constituyen una morfoestructura relíctica gondwánica con reactivaciones mesozoicas y cenozoicas influyentes en el desarrollo de los patrones de la paleored y actual red de drenaje. Es importante en la determinación del posible límite occidental del Sistema Acuífero Guaraní y en el aporte de materiales pétreos aplicados para la construcción.

Abstract:
A multi-scale morphotectonic characterization of Otumpa hills (Gran Chaco Argentino) was made linked to a dynamic analysis of the design and evolution of the drainage network. The morphotectonic deep characterization was carried out by a magnetotelluric survey in a sublatitudinal transect at 27 ° south latitude, that show the electrical structure at crust-mantle scale and led identified the sedimentary basins at shallow scale. Furthermore, an analysis of deep seismicity in the region was made (500-600 km), to complement the deep characteristics. The morphotectonic intermediate characterization was based on seismic reflection, residual gravity anomalies, lithology logs from oil drilling and global data field stress, which outlined a structural model. The morphotectonic shallow characterization was based on two audiomagnetotelluric and a geoelectrical profiles, which identified electrical horizons that were correlated to lithological units recognized in boreholes. Morphotectonic surface characterization based on the identification of geomorphological units and calculation of parameter geomorphometrics, show abnormalities of the relief and drainage manifest mainly on the floodplain and old channels of Salado North river. Also were explored the rocky outcrops of the eastern Otumpa hills which finally were correlated to the Upper Jurassic-Lower Cretaceous aeolian deposits or Misiones formation. Evident and important events of silicification and weathering were observed on it. The Otumpa hills are a relict gondwanan morphostructure with Mesozoic and Cenozoic reactivation influential in the development of patterns of old and current drainage network. It is important in the determination of possible western boundary of the Guarani Aquifer System and the contribution of applied stone materials for construction.

Pellegrino, Juan. "Complejos de metales de transición con el ligando rédox activo NO: estructura electrónica, interconversión y reactividad" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El óxido nítrico (NO) puede unirse a los metales como NO+ (nitrosonio), NO● o NO¯ /HNO (nitroxilo), resultando ambiguos los estados de oxidación del metal y el ligando en los fragmentos M-NO. Por eso, Enemark y Feltham propusieron designar estos fragmentos como NO}n con dos enfoques diferentes. El primero se enmarca en el área de química bioinorgánica y está relacionado con el estudio de complejos NO}n organometálicos y el objetivo específico es estudiar la estructura electrónica y reactividad de complejos eNO}n con un ligando derivado de ciclopentadienilo. En la primera parte, nos enfocamos particularmente en complejos eNO}7 Fe(TFPPBr8)NO (1●) (TFPPBr8 = meso--octabromoporfirina), cuyo voltagrama presenta dos ondas de reducción reversibles y una onda de oxidación. Se presentan resultados del estudio de los tres procesos de transferencia electrónica observados para 1● por métodos químicos, espectroelectroquímicos y cálculos DFT. El producto de reducción por un electrón, eNO}8 no hémicos, mejor descriptos principalmente como FeIINO¯. También se estudió la reactividad de 1¯ con ácidos; el complejo eNO}7: Este resultado motivó la realización de cálculos DFT para dilucidar los factores determinantes de la estabilidad de complejos eNO}8 en un modelo hémico permita futuros estudios de reactividad de esta especie biológicamente relevante. También se estudió la oxidación de 1● al complejo eNO}6 1+, se preparó el complejo NO}6 pero no para derivados de porfirinatos de hierro. En el marco del estudio de complejos hNO}8 con ligandos pinza tipo PCP y PNP previamente sintetizados y caracterizados en nuestro laboratorio y con un complejo eNO}6 presentó una reducción cuasirreversible de dos electrones, pero el complejo hNO}8 con ligando PCP presentaron reducciones monoelectrónicas para dar los complejos paramagnéticos hNO}9 presentaron una reactividad interesante, activando enlaces carbonohal ógeno, similar a la reportada para otros complejos paramagnéticos no nitrosilados de otros metales. La reactividad con halogenuros de alquilo y arilo fue estudiada para uno de los complejos

Abstract:
Nitric oxide (NO) can bind to metals as NO+ (nitrosonium), NO● or NO¯/HNO (nitroxyl). Consequently, the oxidation states of the metal and the ligand are found ambiguous in M-NO moieties. For this reason, Enemark and Feltham introduced the rationalized description of these fragments as NO}n complexes are studied from two different approaches. The first one is related to bioinorganic chemistry and presents the study of biorelevant NO}n organometallic complexes and the specific goal is to study the structure and reactivity of eNO}n complexes with a cyclopentadienyl derivative ligand. In the first part, eNO}7 Fe(TFPPBr8)NO (1●) (TFPPBr8 = meso--octabromoporphyrin), which voltamogramm exhibits two reversible reduction waves and one oxidation process. This work presents the results obtained for the three electron transfer processes observed for 1● by chemical methods, spectroelectrochemistry and DFT calculations. The one-electron reduced product, eNO}8 complexes, which are better described as FeIINO¯. Also, the reactivity of 1¯ with acids was studied; the protonated eNO}7 species. This result inspired us to do theoretical DFT calculations in order to study the relevant factors associated with the stabilization of protonated eNO}8 species as an hemic model could inspire other future reactivity studies. Also, the oxidation of 1● to the eNO}6 complex derived from a porphyrinate without withdrawing substituents was prepared, + (TPP = meso--porphyrin), which was surprisingly stable towards NO loss. Its reactivity with hydride was studied, reaction that was reported for many NO}n organometallic complexes, the precursors used were eNO}6 complex, 2. The electrochemistry of all the organometallic complexes was studied by cyclic voltammetry and the oxidized or reduced species were characterized by FTIR spectroelectrochemistry. Also, DFT calculations were performed to get more insight into the electronic structure of the different species. The eNO}8 complex was not stable, it decomposed to other diamagnetic complexes with and without NO ligand. In contrast, the PCP hNO}9 complexes, one of which was stable enough to be well characterized by IR and EPR, showing a predominant RhINO● structure. These hNO}9 complexes by 31P, 1H and 19F NMR spectroscopies and gas chromatography coupled to mass spectrometry, and a mechanism was proposed supported by DFT calculations.

Pagotto, Romina María del Luján. "Influencia de la histamina en la regulación del desarrollo y el mantenimiento de las funciones de los tejidos esteroidogénicos testicular y córticoadrenal" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La histamina (HA) es una amina biógena asociada a diversas funciones llevadas a cabo a través de cuatro subtipos de receptores pertenecientes a la familia de los GPCR. En este trabajo de Tesis se evaluó el efecto de HA sobre la esteroidogénesis y proliferación de tumores córticoadrenales utilizando dos líneas celulares, las Y1 murinas y las H295R humanas y se profundizaron estudios previos del laboratorio en células de Leydig (CL), analizando la participación de esta amina en su desarrollo. En las células córticoadrenales la esteroidogénisis no se vió modificada por HA, lo que supone que el efecto modulador reportado previamente en CL no sería extrapolable a todos los sistemas esteroidogénicos. En cambio, HA inhibió la proliferación de las células H295R a 24h, provocando un arresto de las células en la fase G2/M en un mecanismo mediado por el subtipo de receptor H1 e IP3 y DAG como segundos mensajeros. Estos resultados permitieron identificar un nuevo rol de HA sobre la proliferación de células córticoadrenales humanas que podría contribuir a una mejor comprensión de la patología tumoral y al desarrollo de nuevos agentes terapéuticos. En lo que respecta a las CL, HA fue capaz de inhibir la proliferación de CL inmaduras (CLI) en ensayos in vitro a través de la activación del subtipo de receptor H4, mientras que en estudios in vivo el tratamiento con esta amina produjo un incremento en el número de CL con morfología adulta. Estos datos sugieren que esta amina modularía la proliferación en un paso previo a la diferenciación y pone en evidencia la necesidad de continuar los estudios sobre su función en la transición de los distintos estadíos de desarrollo de CL así como en la génesis de patologías tumorales.

Abstract:
Histamine (HA) is a biogenic amine associated with heterogeneous functions carried out through the activation of four receptor subtypes, all of them members of the GPCR family. In this doctoral thesis the effects of HA on steroidogenesis and proliferation of adrenocortical tumors were evaluated using two experimental models, the murine Y1 and the human H295R cell lines. Also previous studies in Leydig cells (LC) were continued, evaluating the participation of the cited amine in their development. Steroidogenesis was not modified by HA in adrenocortical cells, which suggests that the modulatory effect previously reported in LC can not be extrapolated to all steroidogenic systems. Nevertheless, HA inhibited the proliferation of H295R cells after a 24 h-treatment through activation of the H1 receptor subtype and an increase in the production of IP3 and DAG second messengers, causing a cell cycle arrest in the G2/M phase. These results indicate a new role of HA on human adrenocortical cells proliferation that could contribute to a better understanding of tumor pathology, and to the development of new therapeutic agents. With respect to LC, HA was able to inhibit the proliferation of immature and progenitor LC in in vitro assays via the activation of the H4 receptor subtype, whereas in in vivo studies HA caused an increase in LC number. These data suggest that the amine would modulate the proliferation of LC before differentiation takes place and highlights the need for further studies on its role on the transition of different LC development stages as well as on its influence on tumor pathogenesis.

Osa Codesido, Nicolás. "Nuevos fragmentos para la coordinación y activación del grupo Nitrosilo" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El tema central del presente trabajo es la preparación de nuevos complejos nitrosilados, y su utilización como modelos de estudio de especies reducidas del grupo NO. Se presenta la síntesis y caracterización estructural, electrónica y electroquímica de compuestos pertenecientes a la serie aneN3)(L2)(L)]m+ (L2: bpy, bpy-MeO, phen; L: NO+, NO2-) (Me3aneN3: 1,4,7- trimetil-1,4,7-triazaciclononano, bpy: 2,2'-bipiridilo, bpy-MeO: 4-4’-Dimetoxi-2-2’-bipiridina, phen: 1,10-fenantrolina), mediante diversas técnicas que incluyen espectroscopías de RMN, DRX, IR, UV-Vis, estudios de voltametría cíclica y de reactividad frente a OHˉ. La incorporación de ligandos L2 con distintas cualidades “donoras”, apunta a modificar las características electrónicas del fragmento NO coordinado, y con esto sus principales propiedades y reactividad. El análisis de los resultados a lo largo de la Tesis se complementa con cálculos computacionales DFT. En el presente trabajo se abordó el estudio de las especies nitrosiladas NO}7 frente a O2, que resulta un proceso relevante desde el punto de vista biológico. Presentaremos resultados de estudios de cinética, variación de pH, y estudio comparativo de la reacción con H2O2, buscando aportar a la descripción generalizada de esta reacción. Se expone el estudio detallado de las especies HNO}8 en CH3CN y medio acuoso. Hemos explorado la obtención e interconversión de estas especies, mediante varias metodologías que permiten trabajar en condiciones anaeróbicas a distintos valores de pH. Como resultado más relevante presentamos la determinación del pKa de la especie

Abstract:
This work reports the preparation of novel nitrosyl compounds and their use as models to study the reactivity and redox chemistry of coordinated NO. For this purpose we prepared a series of Ruthenium nitrosyl complexes aneN3)(L2)(L)]m+ (L2: bpy, bpy-MeO, phen; L: NO+, NO2 -) (Me3aneN3: 1,4,7-trimethyl-1,4,7-triazonane, bpy: 2,2'-bipiridine, bpy-MeO: 4-4’- Dimethoxy-2-2’-bipyridine, phen: 1,10-phenanthroline). The compounds were characterized using various techniques including NMR spectroscopy, DRX, IR, UV-Vis, cyclic voltammetry (CV) measurements, and reaction with OHˉ. The incorporation of bidentate L2 ligands with different donor qualities, prevents the labilization of the coordination sphere and at the same time allows to tune the electronic properties of the coordinated NO moiety and therefore its properties and reactivity. The analysis of the results is complemented with density functional theory (DFT) computations. We explored the nitrosyl species in three different redox stages: NO}6 compounds was achieved both chemically (Eu2+) and electrochemically (controlled potential coulometry coupled with spectroscopic monitoring). We studied the reaction of the obtained NO}8 andHNO}8 species in several compounds. The analysis is centered on the impact exerted by structural changes introduced by modifying the L2 ligand in the electronic properties and reactivity of the

Olivares, Carla Noemí. "Regulación del crecimiento del tejido endometrial en respuesta a nuevas alternativas terapéuticas propuestas para tratar la endometriosis" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La endometriosis se caracteriza por la presencia de focos de tejido endometrial por fuera de la cavidad uterina confiriéndole, a las mujeres que la padecen, fuertes dolores pélvicos e infertilidad. Basándonos en trabajos previos realizados en cáncer, evaluamos la aplicación de los inhibidores de aromatasa, los inhibidores de ciclooxigenasa (COX)-2 y los agonistas de los receptores activados por proliferadores de peroxisomas (PPAR)γ como posibles alternativas terapéuticas para la endometriosis. Específicamente evaluamos los efectos del inhibidor de aromatasa, anastrozole, del inhibidor selectivo de COX-2, celecoxib y del ligando de PPARγ, rosiglitazona sobre el crecimiento de células endometriales in vitro y sobre la implantación y crecimiento de lesiones endometriósicas en un modelo murino de endometriosis. Los resultados obtenidos son promisorios ya que todos los tratamientos provocaron efectos inhibitorios del desarrollo de la endometriosis así como efectos antiproliferativos, proapoptóticos y antiangiogénicos tanto in vivo como in vitro. Por otro lado, luego de administrar anastrozole y celecoxib en forma conjunta, no pudimos demostrar una mejora del tratamiento combinado por sobre la aplicación de cada una de las terapéuticas de manera individual. Nuestros resultados avalan al inhibidor de COX-2 como una alternativa terapéutica concreta para la endometriosis y, sugieren que la combinación de celecoxib con una glitazona podría mejorar la involución de la endometriosis, aunque aún se requiere profundizar los estudios para confirmar estos últimos datos.

Abstract:
Endometriosis is characterized by the presence of endometrial tissue outside the uterine cavity. Women suffering from endometriosis experience pelvic pain and infertility. On the basis of previous cancer research, we evaluated aromatase inhibitors, cyclooxygenase (COX)- 2 inhibitors and peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR)γ agonists as possible alternatives for endometriosis treatment. Specifically, we evaluated the effects of anastrozole, an aromatase inhibitor, celecoxib, a selective COX-2 inhibitor, and rosiglitazone, a PPARγ agonist on endometrial cell growth in vitro and on the implantation and growth of endometriotic lesions in a murine model of endometriosis. The results obtained are promising given that all treatments inhibited endometriosis development and had antiproliferative, proapoptotic and antiangiogenic effects both in vitro and in vivo. On the other hand, after anastrozole and celecoxib combined administration we could not demonstrate an improvement over the drugs administered individually. Our results support the COX-2 inhibitor as a real option as an alternative for endometriosis treatment and suggest that celecoxib combined with a glitazone might improve endometriosis involution, although this must be further confirmed.

Ogara, María Florencia. "Mecanismo de activación de P191NK4d y su papel como factor neuroprotector frente a la injuria genotóxica" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La permanencia de la mayoría de las neuronas durante toda la vida del organismo necesaria para mantener sus funciones, y el hecho de que estas células no se dividan luego del desarrollo sugieren que, durante la evolución, se ha ejercido una fuerte presión sobre el sistema nervioso de modo de desarrollar diversos mecanismos que lo protejan contra la muerte celular. Las dramáticas consecuencias de la neurodegeneración enfatizan la importancia de estos mecanismos que promueven la supervivencia y plasticidad neuronal. Por lo tanto, la identificación de los factores implicados en la regulación de la homeostasis y supervivencia neuronal es imprescindible para comprender el desarrollo y establecimiento de las enfermedades neurodegenerativas y para el diseño de una terapia racional para su tratamiento. La expresión temprana y extensa de p19INK4d, un miembro de la familia INK4 de inhibidores del ciclo celular, en el cerebro y su participación en la reparación del DNA y en la apoptosis sostienen la hipótesis de que esta proteína participaría en mecanismos de protección de las neuronas frente a la muerte celular. El objetivo del presente trabajo consistió en evaluar el potencial rol de p19 en este sentido, así como también su mecanismo de activación. Se utilizaron células SH-SY5Y diferenciadas con ácido trans-retinoico como modelo neuronal y cultivos primarios de neuronas hipocampales de rata. Los tratamientos con genotóxicos como el péptido β-amiloide o neocarzinostatina indujeron la expresión y fosforilación de la proteína de p19. Ambos efectos fueron dependientes de la movilización de calcio intracelular, ya que la incubación con el ionóforo de calcio A23187 o con una concentración aumentada de potasio, recapitularon la acción de los genotóxicos sobre p19. La inhibición de la actividad de CDK5 o la incubación con calpeptina, un inhibidor de la calpaína, responsable de la proteólisis de p35, subunidad regulatoria de CDK5, a p25, su forma más activa, causaron la inhibición de la fosforilación de p19 en respuesta a genotóxicos, demostrando que la quinasa CDK5 es la enzima efectora de dicha fosforilación. Se establecería un balance entre la síntesis y degradación de la proteína p19, ya que la misma parecería ser un sustrato de la calpaína, proteasa que se activa en presencia de los genotóxicos mencionados. Por otro lado, el factor de transcripción E2F1 participaría en la inducción de la expresión de p19 frente al péptido β-amiloide. Las células neuronales con sobrexpresión inducida de p19 repararon más eficientemente el DNA dañado y mostraron niveles reducidos de muerte celular en respuesta al tratamiento con el péptido β-amiloide o neocarzinostatina. Resultados opuestos se obtuvieron en células deficientes en esta proteína. La presencia de los genotóxicos también produjo la inducción del gen de p19 en neuronas de hipocampo. Estas células con niveles disminuidos de p19 presentaron una menor eficiencia en la reparación del DNA y un mayor grado de apoptosis luego del tratamiento con los genotóxicos. La presencia de p19 influenció la sensibilidad neuronal a largo plazo y confirió resistencia al estrés neurotóxico. Ensayos in vivo llevados a cabo en el hipocampo del ratón mostraron que en ausencia de p19 existía un mayor porcentaje de células dañadas luego de la inyección de neocarzinostatina. De esta forma, los resultados obtenidos en esta tesis nos permiten hablar de p19 como un factor neuroprotector, implicado no sólo en los mecanismos de reparación del DNA en respuesta al estrés genotóxico exógeno, sino también en la resistencia y en la supervivencia de las neuronas en respuesta a procesos endógenos que conducen a la neurodegeneración.

Abstract:
The permanence of most neurons throughout the life span of an organism is required to maintain its functions. The fact that these cells do not undergo division after the developmental stage suggests that, during evolution, the nervous system was subjected to a strong selective pressure to develop appropriate mechanisms to prevent cell death. The dramatic consequences of neurodegeneration highlight the importance of these mechanisms that promote neuron survival and plasticity. Therefore, the identification of the factors involved in the regulation of neuron homeostasis and survival is critical to understanding the development and progress of neurodegenerative diseases, as well as for the design of rational therapies for their treatment. p19INK4d, a member of the INK4 family of cell cycle inhibitors, is expressed in an early and long-lasting manner in the brain and is involved in DNA repair and apoptosis. This supports the hypothesis that this protein might participate in the mechanisms that protect neurons from cell death. The aim of this thesis was to examine a potential role for p19 in this context, as well as its mechanism of activation. SH-SY5Y cells differentiated with all-trans-retinoic acid and primary cultures of rat hippocampal neurons were used as neuronal models. Genotoxic stimuli such as the β- amyloid peptide and neocarzinostatin induced the expression and phosphorylation of the p19 protein. Both effects appear to depend on intracellular calcium mobilization since they were recapitulated by treatment with the calcium ionophore A23187 or high extracellular potassium levels. Inhibition of CDK5 activity or treatment with the calpain inhibitor calpeptin prevented p19 modification in response to genotoxic stress. The protease calpain cleaves p35, CDK5 regulatory subunit, to its more active form p25. These results indicate that CDK5 is the kinase responsible for p19 phosphorylation. An equilibrium between p19 synthesis and degradation likely exists since p19 appears to be a substrate for calpain, which becomes activated following genotoxic stress. Finally, the E2F1 transcription factor is shown to be involved in p19 transcriptional regulation in response to β-amyloid peptide treatment. Neuronal cells overexpressing p19 promoted DNA repair more efficiently and exhibited reduced levels of cell death in response to β-amyloid peptide or neocarzinostatin treatment, compared to control cells. The opposite effect was observed in cells with reduced p19 expression. The same genotoxic stimuli also induced the p19 gene in hippocampal neurons and, in these cells, downregulation of p19 led to impaired DNA repair and enhanced apoptosis following genotoxic stress. The presence of p19 influenced long-term neuronal sensitivity and conferred resistance to neurotoxic stress. In vivo studies showed that ablation of p19 in mouse hippocampal neurons correlates with an increased percentage of cells displaying signs of DNA damage after neocarzinostatin injection. In summary, the data described in this thesis supports the hypothesis of p19 as a neuroprotective factor, implicated not only in the mechanisms of DNA repair in response to exogenous genotoxic stress, but also affecting neuronal cell resistance and survival in response to the endogenous processes leading to neurodegeneration.

Nuñez, Pablo Alfredo. "Estudios genómicos y funcionales en Anaplasma marginale y en bacterias intracelulares de la clase alfa-proteobacteria y su relación con la reducción del genoma" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La subdivisión α- de la clase proteobacteria representa un grupo sumamente diverso y heterogéneo de bacterias con una gran variabilidad en sus características genómicas, biológicas y ecológicas. Dentro de esta subdivisión se encuentra el orden Rickettsiales que ha cobrado gran importancia durante los últimos años por agrupar a diversos patógenos emergentes que resultan relevantes para la salud pública y salud animal. Entre ellos, se destaca Anaplasma marginale, causante de la Anaplasmosis bovina enfermedad transmitida por garrapatas que tiene gran impacto sobre la actividad ganadera en nuestro país. Es importante concentrar esfuerzos en comprender mejor las preguntas: ¿Qué tienen en común y en qué difieren estos organismos en términos de información en el genoma y en su biología? ¿Podemos identificar y explicar las diferencias en sus capacidades de adaptación en términos del contenido génico y la conservación de la estructura y función de determinados mecanismos moleculares? Este trabajo se centra en aspectos inmunológicos, funcionales y evolutivos tomando como modelo a A. marginale y analizando comparativamente organismos relacionados del orden Rickettsiales en el contexto de la clase α-proteobacteria. La caracterización del conjunto de proteínas de membrana externa y de los sistemas de secreción representa un desafío importante por ser los principales blancos de interacción de las bacterias con las células hospedadoras y con las células del sistema inmune. Este estudio permitió la identificación de dos proteínas en A. marginale con capacidad antigénica que fueron capaces de estimular una respuesta inmune específica. Estudios futuros permitirán verificar experimentalmente la localización superficial, como también corroborar su potencialidad como antígenos protectivos en nuevas formulaciones de vacunas racionales. La caracterización del sistema de secreción de proteínas “Twin Arginine translocación pathway (Tat)” aporta nueva información acerca de la funcionalidad del sistema en dos patógenos de gran relevancia: A. marginale y B. abortus. A pesar de que sistema Tat en A. marginale presentan una organización genómica fragmentada, se pudo demostrar la conservación de su funcionalidad en este organismo. Esta organización se opone a la estructura clásica en operon bajo una única secuencia regulatoria característica de la mayoría de los sistemas proteicos multi-componentes. Asimismo, en A. marginale la diferencia de los niveles de abundancia de ARNm de cada uno de los genes correlaciona con los niveles de proteínas descriptos para complejos funcionales, sugiriendo la existencia de una adaptación a mecanismos de regulación alternativos gen-específicos. Las bacterias intracelulares estrictas tendrían un uso limitado del sistema Tat, mientras que organismos de vida libre y bacterias del suelo presentarían un uso moderado a alto. Sin embargo, tanto en A. marginale como en B. abortus el sistema Tat podría estar involucrado en procesos relevantes de adaptación y patogénesis. Los procariotas coordinan la transcripción de genes involucrados en complejos metabólicos o de proteínas mediante la organización de operones. En la actualidad,existen diferentes hipótesis acerca de las fuerzas que rigen estos procesos de organización, tanto para determinar su origen como los mecanismos de mantenimiento de este tipo de estructura. A partir de la fragmentación del operon tat y la adaptación a mecanismos de regulación gen-específicos, como así también de otros casos descriptos recientemente en la literatura, surgió la hipótesis de la existencia de un proceso generalizado de fragmentación de operones en organismos asociados a ambientes intracelulares con genomas reducidos en tamaño. En tal sentido, fue posible comprobar que en las α-proteobacterias de genomas pequeños tanto el número como el largo de los operones era menor en comparación con bacterias de genomas también pequeños pero pertenecientes a otros grupos. Este comportamiento observado en las α-proteobacterias sería compatible con un proceso generalizado de fragmentación. Estos resultados se explicarían teniendo en cuenta que los procesos de reducción genómica se describieron como procesos evolutivos independientes en los diferentes linajes. Del análisis de las diferentes propiedades de los genes presentes en operones en diversos grupos filogenéticos se pudo detectar tanto resultados que reflejan diversidad como patrones consistentes y conservados. La mayor frecuencia de fragmentación supone el incremento de regiones de regulación gen-específicas en genomas de tamaño reducido, y/o en genes bajo escasa presión de selección, como se observa para los genes menos persistentes, de baja expresión y no-esenciales. La aparición de mecanismos de control gen-específico versus un control concertado en operón estaría fuertemente influenciado por los procesos de mutación, selección y deriva. Dada la diversidad de la clase y la complejidad de procesos que afectan y determinan la organización de los cromosomas, el conocimiento acerca de los mismos ayudará a conocer los procesos celulares, moleculares que subyacen a la diversidad. Aspiramos a que los estudios realizados en la tesis aporten al conocimiento general de los organismos del orden Rickettsiales para avanzar en la caracterización de un grupo de bacterias que requiere más atención y estudio como patógenos emergentes de amplia distribución.

Abstract:
The α-proteobacteria class represents an extremely diverse and heterogeneous group of bacteria with a high variability in their genomic, biological and ecological features. The order Rickettsiales has become more important over the last years, since it groups together emerging pathogens that are relevant to human and animal health. Among them, Anaplasma marginale is the etiological agent of bovine Anaplasmosis, an infectious tick-borne disease that highly impacts on livestock farming activity in our country. It is important to focus efforts to better understand the following questions: what do these organisms have in common and in what do they differ, taking into account their genome and biology? Can we identify and explain the differences in their adaptive capacities in terms of genetic content, structure and functionality conservation of molecular mechanisms? This work focus on immunological, functional and evolutionary topics based on A. marginale in comparison with related organisms from the order Rickettsiales in the context of the α-proteobacteria class. The characterization of the set of outer membrane proteins and secretion systems represents a significant challenge, since they are the main targets of interaction of bacteria with host cells and the immune system, and also can be responsible of the export of virulence factors. This study allowed the identification of two novel proteins with antigenic capacities in A. marginale which were able to stimulate a specific immune response. Future studies will allow to verify their surface location, as well as their potential as protective antigens in new vaccine formulations. The characterization of protein secretion system "Twin Arginine translocation pathway (Tat)" provides new information on the functionality of the system in two relevant pathogens: A. marginale and B. abortus. The functionality of the Tat system was demonstrated in A. marginale, irrespective of the genomic and regulatory divergence relative to the classical operon organization under unique regulatory sequence. Difference in the abundance of mRNA levels which correlated with the protein levels described for functional complexes suggests the existence of alternative adaptive mechanisms by gene-specific regulation. Pathogenic intracellular bacteria would have a limited usage of the Tat system, while free-living organisms and soil bacteria could have a moderate to high usage. However, in both pathogens analyzed in this study, the Tat system could be involved in several adaptive or pathogenic mechanisms. Prokaryotes usually coordinate transcription of genes involved in metabolism or protein complexes through the organization of operons. Nowadays, different hypotheses are under discussion about the forces that govern these organizations, both regarding the origin and maintenance of this type of structure. Considering the tat operon fragmentation as well as other cases recently described in the literature, we hypothesized the existence of a more generalized operon fragmentation event in small genome organisms associated with intracellular lifestyles. In this regard, the α- proteobacteria showed less usage and length of operons supporting a generalized fragmentation process, while the opposite pattern was observed in small genomes from other groups. These results could be explained considering that genome reduction events were described as independent evolutionary processes in different lineages.The analysis of the different genes features and phylogenetic groups let us detect abundant diversity as well as consistent and conserved patterns among groups. The highest operon fragmentation frequency involves the increase of gene-regulatory regions in small genomes and/or in operons of genes with lower adaptive value as it is observed for non-persistent, lowly-expressed and non-essential genes. This suggests that gene-specific mechanisms versus operon organization are strongly shaped by mutation, selection and genetic drift. Considering the diversity and complexity of the events that affect the organization of bacterial chromosomes, a better understanding of chromosome organization will help to understand the cellular and molecular mechanisms underlying diversity. We believe this thesis contribute to the overall knowledge of organisms of the Rickettsiales order, making it possible to improve the characterization of a bacterial group that requires more attention and study as emerging pathogens widely distributed.

Negri, Agustín E.. "Distribución latitudinal del radioisótopo 129I en la Argentina" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Este trabajo de tesis analiza la presencia del radioisótopo 129I en la Argentina con el objetivo de aportar nueva información para el desarrollo de aplicaciones medioambientales de este nucleido en nuestro continente. Con ese fin se midieron concentraciones de yodo y del radioisótopo 129I en tiroides animales provenientes de distintas regiones del país. Los resultados obtenidos sugieren una fuerte dependencia con la latitud e indican la existencia de una variación estacional de la concentración de 129I. Ambas características se pueden explicar teniendo en cuenta las fuentes de ambos isótopos, el transporte atmosférico y la deposición de los mismos. Se demuestra, además, la importancia de la quema de biomasa en el Amazonas como fuente de reciclado de 129I para Sudamérica. Las relaciones isotópicas 129I/127I medidas son menores a las halladas en muestras del hemisferio Norte, inclusive a las tomadas en regiones lejanas a las plantas de reprocesamiento de combustible nuclear ubicadas en Europa occidental, siendo estas actualmente la principal fuente de 129I. De hecho, dos sitios de muestreo presentan valores de la relación 129I/127I similares a resultados pre-antropogénicos. El perfil latitudinal y los niveles medidos de 129I permiten aseverar que no hay fuentes locales de producción de este radioisótopo.

Abstract:
This thesis work analyzes the presence of 129I in Argentina in order to develop environmental applications with this radioisotope in South-America. For this, 129I and 127I concentrations were measured in animal thyroids coming from several regions of Argentina. The results show a clear dependence with latitude and season, which can be understood considering tropospheric circulation patterns, possible 129I sources and regional precipitation rates. It was found that biomass burning in the Amazon plays a major role as source of recycled 129I for South America. The measured 129I/127I isotopic ratios are lower than those found in samples from the northern hemisphere, including those taken in regions far from nuclear fuel reprocessing plants located in Western Europe, nowadays the main source of 129I. In fact, two sampling sites yield 129I/127I values similar to pre-anthropogenic ones. Taken into account the latitudinal profile and 129I levels measured, local sources of 129I are ruled out.

Musikant, Alejandro Daniel. "La trans-sialidasa como factor de virulencia en la infección experimental con Trypanosoma cruzi" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el presente trabajo nos propusimos comprender los mecanismos asociados a la patología inducida por Trypanosoma cruzi en el modelo murino empleando cepas de baja y de alta virulencia. Estas últimas generan altos porcentajes de mortalidad en pocos días y expresan grandes cantidades de un factor de virulencia, la trans-sialidasa (TS) que induce, en la etapa temprana de la infección, apoptosis y desorganización de la histoarquitectura de órganos como el bazo, ganglio y timo. En esta Tesis Doctoral nos propusimos analizar las poblaciones celulares involucradas en las alteraciones producidas por la actividad de TS utilizando dos estrategias: - mediante la neutralización de la actividad circulante de TS durante la infección aguda observamos que el tratamiento no fue capaz de prevenir los desórdenes en las poblaciones linfocitarias maduras e inmaduras. El análisis de marcadores de migración linfocitaria permitió describir por primera vez que el parásito altera el tráfico de los linfocitos B en el bazo. - mediante un modelo de estimulación de la respuesta inmune con un antígeno definido observamos que el tratamiento con TS recombinante activa no fue suficiente para alterar el armado de los centros germinales. En la segunda etapa de este trabajo, analizamos la capacidad de T. cruzi de modular la expresión de las metaloproteasas (MMPs) del huésped. Observamos en la fase aguda de la infección, que las cepas/clones de alta virulencia inducen aumento de la actividad de MMP-2 y disminución de la actividad de MMP-9 plasmática, mientras que las de baja virulencia solo inducen disminución de MMP-9. El timo, ganglio e hígado de animales infectados con cepas/clones de alta virulencia poseen alterada la actividad de estas dos MMPs y observamos el mismo fenómeno en una línea celular de fibroblastos humanos. Utilizando ensayos in vivo e in vitro demostramos que la actividad de TS está relacionada con el aumento de la actividad de MMP-2. En este último sistema determinamos que el efecto es por hidrólisis de ácido siálico y pudimos reproducirlo utilizando neuraminidasas de origen bacteriano. Por último describimos vías de transducción de señal asociadas al aumento de la actividad de MMP-2 por la acción de TS y las neuraminidasas ensayadas. Nuestros hallazgos constituyen un aporte novedoso acerca del comportamiento de las MMPs en la infección murina por T. cruzi y su modulación diferencial dependiente de la virulencia. Es destacable que la modulación de MMP-2 está asociada a la actividad de TS que es altamente expresada en las mismas cepas que son inductoras de MMP-2 en la infección experimental.

Abstract:
In this work we have studied mechanisms associated with Trypanosoma cruzi pathology in a murine model employing different virulences strains. High-virulence parasites induce an increase mortality rate in a few days and also express high amount of trans-sialidasa (TS), a virulence factor that induces apoptosis and histological disorganization of organs such as spleen, thymus and lymph. In this thesis we analyze the cell populations involved in the alterations produced by the activity of TS using two strategies: - by neutralizing the activity of circulating TS during the acute phase of infection we observed that this treatment was not able to prevent disturbances in the mature and immature lymphocyte populations. The analysis of lymphocyte migration markers allow us to describe for the first time that the parasite alters B lymphocytes traffic in the spleen. - by using a immune response stimulation model with a specific antigen we showed that active recombinant TS treatment was not able to alter the assembly of the germinal centers. In the second stage of this work, we analyze if T.cruzi was able to modulate host matrix metalloproteinases (MMPs) expression. We showed that during the acute phase of infection high-virulence parasites (with detectable TS activity) induce an increase MMP-2 and diminished MMP-9 plasmatic activity and low-virulence parasites only induce reduction of MMP-9 plasmatic activity. Organs such as thymus, lymph and liver of infected animals with high-virulence parasites have an altered activity of both MMPs and the same results were observed in a human trofobroblast cell line. Using both in vivo and in vitro experiments we showed that TS activity is related with the increase of MMP-2 activity. We determined in vitro that the mechanism of the increase of MMP-2 is the hydrolysis of sialic acid and this was confirmed by using bacteria neuraminidases. Finally, we described signaling transduction pathways related to the increase of MMP-2 activity induced by TS and neuraminidases. Our findings constitute a novel contribution regarding MMPs behavior in murine infection by T. cruzi and differential modulation by different strains. Besides, modulation of MMP-2 activity is associated with TS, a virulence factor that is highly expressed in those strains that induce MMP-2 in the experimental infection.

Morgenfeld, Mauro Miguel. "Desarrollo de un sistema de expresión plastídico para producir el antígeno E7 del papilomavirus humano en tabaco" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Durante este trabajo se obtuvieron distintas líneas de plantas de tabaco transplantómicas para el antígeno viral E7 del virus del papiloma humano (VPH). La capacidad del sistema plastídico para producir el antígeno viral fue verificada. Asimismo se comprobó que la proteólisis del péptido es el factor determinante de la expresión y principal limitante de los niveles de acumulación de la proteína recombinante. La modificación de las características intrínsecas del polipéptido mediante la fusión traduccional a otras proteínas como la cápside viral de PVX o la enzima β-glucuronidasa mostró ser una estrategia válida para reducir la tasa de degradación de E7. De esta forma se alcanzó un incremento de la expresión entre 5 y 10 veces superior a lo observado con E7 por masa de tejido. Sin embargo los mejores resultados se obtuvieron al reorientar la acumulación del antígeno viral hacia un entorno con características bioquímicas diferentes como es el lumen tilacoide. Por primera vez se logró translocar una proteína codificada por el plastoma a través de la membrana tilacoide utilizando una secuencia específica de la misma especie, la señal bipartita amino-terminal del gen OEC23 de tabaco. Los niveles de acumulación del antígeno en el tilacoide resultaron ser dos órdenes de magnitud superiores a los observados en el estroma. Los resultados de este trabajo muestran distintos abordajes basados en la utilización de plantas de tabaco transplastómicas como biorreactores para la producción de proteínas de interés inestables como E7 del VPH.

Abstract:
In this work, different lines of transplantomic tobacco plants for the viral antigen E7 of human papillomavirus (HPV) virus were obtained. The plastid system capacity to produce the viral antigen was verified. Furthermore, we found that proteolysis of this peptide is the primary determinant of the expression and main limiting factor for recombinant protein accumulation. The modification of the intrinsic characteristics of the polypeptide by translational fusion with other proteins such as PVX coat protein or the enzyme β- glucuronidase proved to be a valid strategy to reduce the rate of E7 degradation. Using this strategy an increase in the expression from 5 to 10 times that of the observed value for E7 by tissue mass was achieved. However, the best results were obtained by redirecting the viral antigen into an environment with different biochemical characteristics such as the thylakoid lumen. For the first time, we achieved the translocation of a protein encoded by the plastoma across the thylakoid membrane by using a specific sequence from the same species, the bipartite signal amino-terminal of the OEC23 gene in Tobacco. Accumulation levels of the antigen in the thylakoid were two orders of magnitude higher than those observed in the stroma. The results of this work demonstrate different approaches based on the use of transplastomic tobacco plants as bioreactors for the production of unstable proteins of interest, such as E7 from HPV.

Morande, Pablo Elías. "Papel de la proteína eritrocitaria Banda 3 en la biología de las células de leucemia linfática crónica" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los pacientes con leucemia linfática crónica (LLC) suelen desarrollar anemia hemolítica autoinmune (AHA). Nuestro grupo demostró que la proteína Banda 3, la más abundante en la membrana del eritrocito y blanco frecuente de los autoanticuerpos en AHA, se une a la superficie de células LLC a través de su porción N-terminal. Esta tesis tuvo como objetivos centrales identificar el sitio de unión de Banda 3 y estudiar el impacto que dicha unión tiene para la célula leucémica. Los resultados demostraron que el principal sitio de unión de Banda 3 en la membrana de la célula leucémica es una proteína que se eluye a pH 2,5 y que se identificó como high mobility group N2 (HMGN2), proteína de nucleosomas que no había sido descripta en la membrana hasta el momento. La expresión de HMGN2 en la superficie de células LLC fue corroborada por citometría de flujo y microscopía de fluorescencia. El cultivo con IFN-α incrementó la expresión de HMGN2 y la capacidad de unir Banda 3 de las células LLC. Asimismo, la unión de Banda 3 tuvo como consecuencia el aumento en la expresión de marcadores de activación de las células leucémicas. Proponemos que Banda 3 a través de HMGN2 podría favorecer la iniciación de la AHA en LLC.

Abstract:
Chronic Lymphocytic Leukemia (CLL) patients often develop autoimmune hemolytic anemia (AHA). Our group previously showed that Band 3, the most abundant protein in the outer membrane of red blood cells and a frequent target of autoantibodies in AHA, specifically binds the surface of CLL cells through its N-terminal domain. The main objectives of the present thesis work were to identify the binding site of Band 3 and to study the impact of such interaction in the leukemic cells. The results demonstrate that the major binding site of Band 3 on leukemic B cell membrane is a protein eluted at pH=2,5 that was identified as high mobility group N2 (HMGN2), a nucleosome-interacting protein which has not been previously reported as a membrane protein. Expression of HMGN2 at the surface of CLL cells was corroborated by flow cytometry and fluorescence microscopy. Cell cultures in the presence of IFN-α increased the expression of HMGN2 and the binding capacity of Band 3 to CLL cells. Additionally, binding of Band 3 resulted in an increased expression of activation markers on the leukemic cells. We propose that Band 3, through HMGN2, might favor the ignition of AHA in CLL.

Monti Hughes, Andrea. "Eficacia terapéutica y toxicidad de la terapia por captura neutrónica en boro (BNCT) en tejido con cancerización de campo: Estudio radiobiológico en un modelo experimental de cáncer bucal" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
BNCT se basa en la reacción de captura entre el boro depositado preferencialmente en tumor y los neutrones térmicos, generando partículas letales de corto alcance que dañan al tumor, preservando el tejido normal. Previamente, demostramos el éxito terapéutico del BNCT en tumores de la bolsa de la mejilla del hámster. El desafío pendiente era inhibir el desarrollo de segundos tumores primarios (STP) a partir de tejido con cancerización de campo, minimizando la mucositis limitante de dosis. Los STP son frecuentemente la causa del fracaso terapéutico clínico en tumores de cabeza y cuello. El objetivo general de la presente tesis doctoral fue evaluar, por primera vez, la radiotoxicidad y potencial inhibitorio a largo plazo de BNCT sobre el desarrollo tumoral en un modelo de mucosa bucal con cancerización de campo desarrollado en la bolsa de la mejilla del hámster para seguimiento a largo plazo (8 meses). Estudiamos la radiotoxicidad y capacidad inhibitoria de diferentes protocolos de BNCT, variando las dosis y los protocolos de fraccionamiento. Por primera vez, evidenciamos el efecto inhibitorio de BNCT en un tejido con cancerización de campo a largo plazo. Para optimizar BNCT, determinamos la influencia de las condiciones de tratamiento sobre la ventaja terapéutica y radiotoxicidad.

Abstract:
BNCT combines selective accumulation of 10B carriers in tumor tissue with subsequent neutron irradiation, giving rise to lethal, short-range particles. Damage is limited largely to cells containing 10B. Previously, we demostrated the therapeutic efficacy of BNCT to treat tumors in the hamster cheek pouch. However, the inhibition of tumor development from field-cancerized tissue was still an unresolved challenge. In a clinical scenario, tumor development from field-cancerized tissue is frequently the cause of therapeutic faliure. The aim of the present PhD thesis was evaluate, for the first time, BNCT-induced potential radiotoxicity and long-term inhibition of tumor development in a model of oral field-cancerized tissue. We developed an oral precancer model in the hamster cheek pouch for long-term studies (8 months). We studied radiotoxicity and the potential inhibitory effect of different BNCT protocols, evaluating different dose levels, dose fractionation and interval between applications. For the first time, we evidenced the long-term inhibitory effect on tumor development of BNCT in field-cancerized tissue and showed that treatment conditions are pivotal to therapeutic advantage and radiotoxicity. The knowledge of BNCT radiobiology for experimental oral precancer contributes to the optimization of the technique.

Moiola, Cristian Pablo. "Nuevos blancos moleculares en el cáncer de próstata" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El cáncer de próstata (PCa) es el segundo tipo de cáncer más frecuente en el mundo. En la Argentina, es el de mayor incidencia y el segundo en mortalidad. La edad, el origen étnico, la historia familiar, el estilo de vida y la obesidad son importantes factores de riesgo asociados al desarrollo de esta patología. En este trabajo de tesis nos centralizamos en el rol de BRCA1 en diferentes vías que contribuyen al desarrollo del PCa. Estudiamos la regulación transcripcional mediada por BRCA1 del gen ATM, clave en el mantenimiento de la estabilidad genómica celular. Determinamos que el complejo formado por las proteínas BRCA1, E2F1 y CtIP, se asocian al promotor de ATM y activan su transcripción. Asimismo, cuando se induce estrés genotóxico, BRCA1 y CtIP se liberan reprimiendo su transcripción. Además, estudiamos la regulación transcripcional de BRCA1. Encontramos que los andrógenos, la principal hormona masculina, regula la expresión de BRCA1 en líneas celulares de PCa. Esta hormona reprime la transcripción de BRCA1 en las células LNCaP, sensibles a andrógenos. Mientras que en las células PC3, insensibles a andrógenos, la testosterona aumenta los niveles de expresión de BRCA1. Esta diferencia en la respuesta a la testosterona en las células tumorales de próstata parece responder a un efecto en la síntesis de estrógenos a partir de andrógenos. En este trabajo de tesis también determinamos que las proteínas CtBP1 y BRCA1 se encuentran asociadas a la región proximal del promotor de BRCA1 reprimiendo su transcripción. En la línea tumoral PC3, la testosterona provoca que estos factores se liberen del promotor de BRCA1 activando su transcripción. Utilizando líneas celulares que sobre-expresan o tienen disminuida en forma estable la expresión de CtBP1, encontramos que la sobreexpresión de CtBP1 aumenta la transformación y la viabilidad celular. En un modelo de xenotransplantes generado por inoculación de estas células estables en ratones nude, determinamos que la disminución de la expresión de CtBP1disminuyó drásticamente el crecimiento tumoral solo cuando los animales habían sido alimentados con una dieta hipercalórica. Asimismo, la incubación de las líneas estables de PC3 con el suero proveniente de animales alimentados con una dieta hipercalórica aumento la proliferación celular de las células que sobre-expresan CtBP1 al igual que se ven favorecidos la activación de procesos de EMT que podrían conducir al establecimiento de metástasis. En resumen, en este trabajo de tesis describimos por primera vez un mecanismo de regulación transcripcional de ATM por BRCA1 en respuesta al estrés genotóxico. Además determinamos que los andrógenos y la dieta hipercalórica pueden influenciar el desarrollo tumoral prostático alterando la vía de CtBP1/BRCA1. Por lo tanto, estos resultados aportan nuevas evidencias en cuanto a la regulación transcripcional de BRCA1 y su función co-reguladora de otros blancos moleculares fortaleciendo así su rol supresor tumoral en el PCa.

Abstract:
Prostate cancer (PCa) is the second most frequently diagnosed cancer in the world. In Argentina, has the highest incidence rate and is the second leading cause of deaths in males. Several factors, such as ethnicity, age, family history, lifestyle and obesity, have been associated with and increase risk of developing this pathology. In this thesis we focus on BRCA1’s role in different molecular pathways that contribute to the development of PCa. We studied ATM transcriptional regulation mediated by BRCA1 and its importance in the maintenance of cellular genomic stability. We determined that the molecular complex formed by BRCA1, CtIP and E2F1 proteins are associated with ATM promoter and activate its transcription. In addition, CtIP and BRCA1 are release and repressed ATM promoter under genotoxic stress conditions. On the other hand, we studied BRCA1 transcriptional regulation. We found that androgens regulate BRCA1 expression in PCa cell lines. Particularly, testosterone represses BRCA1 transcription in androgens sensitive LNCaP cells. However, testosterone increases BRCA1 expression levels in PC3 insensitive to androgens cell lines. This contradictory behavior in PCa cell lines may be due to an effect on the synthesis of estrogens from androgens. Moreover, we found that CtBP1 and BRCA1 proteins are associated to BRCA1 proximal promoter to repress its transcription. However, in PC3 cell lines, testosterone induces BRCA1 transcription causing the release of these factors. Furthermore, we generated PC3 cell lines with stable overexpression or knockdown CtBP1 expression. We found that CtBP1 overexpression enhanced cellular transformation and increased cell viability. We also determined, in a xenograft nude mice model generated by PC3 stable cell lines inoculation, that the decreased expression of CtBP1 drastically diminished the tumor growth only when the animals had been high-calorie diet fed. In addition, incubation of stable lines PC3 with serum from animals fed with a hypercaloric diet, increased cell proliferation of cells that overexpress CtBP1. Finally CtBP1 overexpressing cells have enhanced EMT activation toward CtBP1 silencing cell lines leading to the establishment of metastasis. In summary, we describe for the first time a transcriptional regulation mechanism of ATM by BRCA1 in response to genotoxic stress. We also determined that androgens and high caloric diet modulate CtBP1/BRCA1 pathway affecting prostate tumor development. Therefore, these results provide further evidence of BRCA1 transcriptional regulation and BRCA1 transcriptional co-regulatory function, strengthening its tumor suppressor role in PCa.

Miranda Bront, Juan José. "Enfoques de programación entera para el Problema del Viajante de Comercio con costos en función del tiempo" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El Problema del Viajante de Comercio Dependiente del Tiempo (PVCDT) es una generalización del clásico Problema del Viajante de Comercio (PVC) en el cual se busca un circuito de costo mínimo que recorra todos los clientes, donde los tiempos (o costos) de viaje entre ellos no son constantes y pueden variar dependiendo de diversos factores. Una de las motivaciones para considerar la dependencia del tiempo es que nos permite tener una mejor aproximación a muchas aplicaciones de la vida real, dentro de la industria y en el sector de servicios. En la literatura relacionada, existen distintas versiones del PVCDT que consideran que las variaciones se producen por diversos motivos y sobre distintos parámetros. Algunas de ellas estipulan que las variaciones se producen sobre los tiempos (y/o costos) de viaje mientras que otras asumen que las variaciones se producen sobre la velocidad de viaje. Más aún, para el primer caso, una variante asume que el tiempo de viaje depende de la posición del arco en el circuito mientras que otra asume que depende del instante en el que se comienza a atravesar el arco. Al igual que el PVC, el PVCDT pertence a la clase NP-Difícil y por lo tanto no se conoce un algoritmo que encuentre una solución en tiempo polinomial. En esta tesis abordamos dos de las variantes antes mencionadas mediante la formulación de modelos de Programación Lineal Entera. Para cada formulación, realizamos un estudio teórico enfocado en derivar familias de desigualdades válidas que exploten las características particulares del problema. En particular, para una de las variantes, demostramos que varias de ellas definen facetas del poliedro. Desde el punto de vista práctico, para las variantes consideradas desarrollamos algoritmos exactos de tipo Branch and Cut que incorporan estas familias de desigualdades válidas y los evaluamos considerando instancias propuestas en la literatura, obteniendo buenos resultados que muestran que ambos enfoques son factibles para ser utilizados en la práctica.

Abstract:
The Time Dependent Travelling Salesman Problem (TDTSP) is a generalization of the well known Travelling Salesman Problem (TSP) in which we look for a minimum cost tour that visits each client exactly once where the travel times (or costs) among them are not assumed to be constant and may vary depending on many different factors. The motivation to consider the time dependence factor is that it enables to have better approximations to many problems from practice, mainly from the industry and the service sector. In the related literature there are different versions of the TDTSP that consider that variations occur for different reasons and over distinct parameters. For example, some of them consider that variations affect travel times (and/or costs) while others assume that variations influence travel speeds. Moreover, in the first case, one version assumes that the travel time depends on the position of the arc in the tour while another one assumes that it depends on the particular starting instant for travelling the arc. As well as the TSP, the TDTSP belongs to the class NP-Hard and therefore it is not known an algorithm that solves it in polynomial time. In this thesis we approach two of the versions mentioned above by means of Integer Linear Programming formulations. For each formulation, we perform a theoretical study focused on deriving families of valid inequalities that exploit the particular characteristics of the problem. In particular, for one of the variants, we prove that some of them are facet defining. From a practical standpoint, for the versions considered we develop exact Branch and Cut algorithms that incorporate these families of valid inequalities and we evaluate them on instances from the related literature, obtaining good computational results that show that both approaches are feasible to be used in practice.

Miler, Eliana Andrea. "El cadmio como disruptor endocrino. Estudios de la exposición al cadmio sobre la adenohipófisis de rata" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Introducción: El cadmio (Cd2+) es un contaminante ambiental que produce numerosos efectos tóxicos en los organismos. Este metal puede actuar como un disruptor endocrino en diferentes tejidos. La adenohipófisis es la glándula directriz y presenta una alta sensibilidad al Cd2+. Objetivos: 1) Investigar posibles formas de tratamiento que reviertan los efectos inducidos por la exposición crónica al Cd2+ en la adenohipófisis de rata in vivo. 2) Investigar el papel xenoestrogénico del Cd2+ a nivel adenohipofisario. Resultados: 1) La exposición al Cd2+ in vivo induce estrés oxidativo y disminuye los niveles séricos de prolactina (PRL) y de hormona luteinizante (LH). La melatonina, administrada a posteriori de la exposición al Cd2+, revierte los efectos del metal sobre la expresión de la hemo-oxigenasa-1, mientras que tiene un efecto per se sobre la expresión de la metalotioneína-1 y de la óxido nítrico sintasa 1. El cese de la exposición al Cd2+, en cambio, revierte totalmente los efectos del metal sobre los marcadores de estrés oxidativo y sobre los niveles séricos de PRL y LH. 2) El Cd2+, en concentraciones nanomolares, es capaz de inducir la proliferación celular y la secreción de PRL en las células adenohipofisarias. Ambos efectos son mediados por el receptor de estrógenos alfa (REα). Este metal también regula la expresión proteica del REα y de sus variantes truncadas. El Cd2+ y el estradiol muestran un efecto cooperativo sobre la expresión del mensajero del REα y del de PRL. Conclusión: El Cd2+ es un disruptor endocrino que inhibe o estimula la secreción hormonal adenohipofisaria, efecto que depende del mecanismo involucrado: generación de estrés oxidativo o efecto xenoestrogénico.

Abstract:
Introduction: Cadmium (Cd2+) is an environmental contaminant that produces many toxic effects on organisms. This metal can act as an endocrine disruptor in different tissues. The anterior pituitary gland is the directive gland and presents high sensitivity to Cd2+. Objetives: 1) To investigate possible forms of treatments those reverse the effects induced by Cd2+ chronic exposure in the rat anterior pituitary gland in vivo. 2) To investigate Cd2+ xenoestrogenic role at anterior pituitary level. Results: 1) Cd2+ exposure in vivo induces oxidative stress and decreases prolactin (PRL) and luteinizing hormone (LH) serum levels. Melatonin, administered a posteriori of Cd2+ exposure, reverses metal effects on heme oxygenase-1 expression, while having a per se effect on metallothionein-1 and nitric oxide synthase 1 expression. Suspension of Cd2+ exposure, instead, completely reverses metal effects on oxidative stress markers and serum levels of PRL and LH. 2) Cd2+, in nanomolar concentrations, is able to induce cellular proliferation and PRL secretion in anterior pituitary gland cells. Both effects are mediated by the estrogen receptor alpha (ERα). The metal also regulates protein expression of ERα and its truncated variants. Cd2+ and estradiol show a cooperative effect on ERα and PRL mRNA expression. Conclusion: Cd2+ is an endocrine disruptor that inhibits or stimulates anterior pituitary gland hormonal secretion and its action depends on the involved mechanism: oxidative stress generation or xenoestrogenic effect.

Menoret, Adriana. "Relaciones tróficas y parasitismo en peces marinos: uso de cestodes Trypanorhyncha como marcadores biológicos" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los cestodes Trypanorhyncha son parásitos con ciclos de vida complejos en los que intervienen varios hospedadores. Las larvas infectan invertebrados y peces teleósteos (hospedadores intermediarios y/o paraténicos) y los adultos se desarrollan en elasmobranquios (hospedador definitivo). La transmisión de los tripanorrincos se produce entre los hospedadores, a través de la red trófica. Dado que estos cestodes presentan ciertas características morfológicas y ecológicas tienen el potencial de ser utilizados como marcadores biológicos de sus hospedadores. El objetivo principal fue realizar la revisión taxonómica de cestodes tripanorrincos en el Mar Argentino y evaluar su potencialidad como marcadores biológicos a partir de la (1) la estimación de la diversidad de tripanorrincos en el área de estudio mediante la descripción de nuevos taxa y la verificación de la identidad de las epecies de tripanorrincos previamente registradas en el área, (2) la caracterización de los ciclos de vida de los especímenes coleccionados y el rol que desempeñan los peces en su transmisión, (3) la evaluación del grado de especificidad de los estadios de cestodes, (4) la reconstrucción de las tramas tróficas de los peces involucrados en los ciclos de vida, y (5) la evaluación de los tripanorrincos como marcadores biológicos en el área de estudio. Se examinaron 1332 peces (897 teleósteos y 435 elasmobranquios) capturados a lo largo del Mar Argentino. Los tripanorrincos obtenidos fueron preparados adecuadamiente según distintas técnicas (histología, microscopía óptica y electrónica de barrido). Se identificaron 10 especies de tripanorrincos (4 familias), de las cuales 5 fueron registradas previamente en el área y 4 resultaron nuevas especies (Grillotia patagonica Heteronybelinia mattisi, Heteronybelinia n. sp. 1 y Parachristianella n. sp. 1). Además se registró por primera vez a Dollfusiella cf. aculeata en el Atlántico sudoccidental, se amplió el rango de hospedadores para G. (C.) carvajalregorum (16 nuevos registros) y para C. gracilis (1 hospedador nuevo). La mayoría de los teleósteos parasitados con tripanorrincos pertenecen a las familias Sciaenidae, Carangidae y Nototheniidae, mientras los hospedadores definitivos en su mayoria, parasitan rayas Arhynchobatidae. De las especies de tripanorrincos registradas previamente, 4 registros se consideran dudosos en el área, ya que no fueron obtenidos de peces indicados como sus hospedadores. En muchos casos se identificaron otras especies de tripanorrincos de características similares a aquellas, lo que estaría demostrando casos de identificaciones erróneas. Hepatoxylon trichiuri, Dasyrhynchus pacificus y Callitetrarhynchus gracilis se obtuvieron en estadio larval, mientras que D. cf. aculeata, Dollfusiella vooremi y Parachristianella n. sp. 1 como adultos. Grillotia (C.) carvajalregorum, G. patagonica, H. mattisi y Heteronybelinia n sp. 1 fueron identificadas como adultos y larvas, lo que permitió estimar sus ciclos de vida parciales. Tanto Heteronybelinia n. sp. 1 como D. pacificus podrían resultar buenos marcadores tróficos en el área debido a su estricta especificidad por sus respectivos hospedadores intermediarios. La presencia de G. (C.) carvajalregorum, G. patagonica y H. mattisi en algunos hospedadores, podría indicar relaciones tróficas que hasta el momento no han sido documentadas en base al contenido estomacal.

Abstract:
Trypanorhynch cestodes have complex life cycles that involve several hosts. Larvae parasite teleost fishes and invertebrates (intermediate and/or paratenic hosts), and adults develop in elasmobranchs (definitive hosts). Transmission through hosts depends on trophic relationships. These cestodes have morphological and ecological features that made them potentially useful as biological tags. The main goals of this work were the systematic revision of trypanorhynchs from the Argentine Sea and the evaluation of their putative use as biological tags. It was carried on by (1) the appraisal of the diversity of trypanorhynchs by describing new taxa and verifying the identity of trypanorhynch species previously reported in the area, (2) the description of their life cycles and the role each fish host plays in parasite transmission, (3) the evaluation of host specificity at different stages of development, (4) the reconstruction of food webs, and (5) the evaluation of trypanorhynchs as biological tags in the studied area. A total of 1332 fishes (897 teleosts and 435 elasmobranchs) were caught along the Argentine Sea. Cestodes were properly prepared for the study of their morphology using different techniques (whole mounts, temporarily mounts, serial histology, scanning electron microscopy). Ten species of trypanorhynchs (belonging to 4 families) were identified, 5 species were previously reported in the area, and 4 resulted in new species (Grillotia patagonica, Heteronybelinia mattisi, Heteronybelinia n. sp. 1 y Parachristianella n. sp. 1). Dollfusiella cf. aculeata was reported for the first time in the Southwest Atlantic. Additionally, the host range for G. carvajalregorum (16 new reports), and for C. gracilis (1 new host) was extended. Most of teleost parasitized by trypanorhynchs are represented by Sciaenidae, Carangidae and Nototheniidae, whereas mostly definitive hosts are batoids in Arhynchobatidae. Among trypanorhych previously reported, 4 records are considered dubious, as they were not collected from fishes reported as their former hosts. In many cases the cestodes obtained from the same hosts are similar in morphology, supporting cases of misidentifications. Hepatoxylon trichiuri, Dasyrhynchus pacificus, and Callitetrarhynchus gracilis were obtained as larvae, D. cf. aculeata, Dollfusiella vooremi y Parachristianella n. sp. 1 as adults. Grillotia (C.) carvajalregorum, G. patagonica, H. mattisi y Heteronybelinia n sp. 1 were obtained in both stages, allowing the proposal of their life cycles. Certain prey-predator relationships were estimated on the basis of the scheme of their parasite´s life cycles. Heteronybelinia n. sp.1 and D. pacificus are suggested as potentially useful as trophic tags in the studied area. Additionally, the presence of G. (C.) carvajalregorum G. patagonica y H. mattisi in several hosts could indicate new trophic relations that have not been documented based only on the study of stomach contents.

Menéndez, Guillermo Oscar. "Modulación de las propiedades ópticas de nanocristales semiconductores (Quantum Dots) por modificación superficial : Aplicaciones" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo de esta tesis es el desarrollo de nanoherramientas basadas en nanopartículas semiconductoras luminiscentes (Quantum Dots, QDs) mediante su modificación superficial. Esto incluye la creación de elementos de control de las propiedades ópticas de las nanopartículas así como también el diseño de métodos de unión específica a biomoléculas e internalización en células. Con este fin, se sintetizaron una serie de tricarbocianinas simétricas y asimétricas como sensores fluorescentes de Zn(II) y pH, ópticamente activos en la zona del infrarrojo cercano (Near Infrared Region, NIR) del espectro de radiación. Se trabajó en esta zona del espectro debido a las múltiples ventajas para su aplicación en biomedicina, microscopía de fluorescencia o química de materiales, ya que ofrece mínima interferencia de absorción y fluorescencia con muestras biológicas y una alta penetración en tejidos, entre otras. Asimismo, los fluoróforos obtenidos fueron conjugados con diferentes plataformas, entre las que se incluyen el uso de monocapas autoensambladas, dendrímeros y nanopartículas fluorescentes (Quantum Dots) y de oro. Se describe la síntesis, caracterización estructural, propiedades ópticas y funcionamiento de los sensores en solución y en dichos sistemas supramoleculares. Finalmente, se diseñaron y desarrollaron sensores de pH fluorescentes basados en Quantum Dots conjugados con fluoróforos, uno de los cuales fue utilizado en microscopía confocal y de tiempo de vida media de fluorescencia para la marcación específica en células con el fin de estudiar procesos celulares in‐vivo. Este sistema se presenta como un prototipo de sensado celular basado en determinaciones resueltas en el tiempo.

Abstract:
The aim of this thesis is the development of nanotools based on luminescent semiconductor nanoparticles (Quantum Dots, QDs) by means of its surface modification. This approach includes the development of control elements of the optical properties of the nanoparticles, besides the design of methods for specific recognition of biomolecules and cell internalization. Several symmetric and asymmetric tricarbocyanines dyes were synthesized as fluorescent sensors for Zn(II) and pH, which are active in the near infrared (NIR) region of the electromagnetic spectrum. Emissive dyes in this region of the radiation spectrum have multiple advantages regarding their application in biomedicine, fluorescence microscopy and chemistry of materials. In the NIR region, the radiation is relatively poorly absorbed by biomolecules and can penetrate deeply into tissues. Moreover, there is also less cellular autofluorescence in this region. In addition, the dyes synthesized were conjugated to different platforms, such as self‐assembled monolayers, dendrimers, Quantum Dots and gold nanoparticles. The synthesis, structural characterization, optical properties and performance of fluorescent sensors both in solution and in such supramolecular systems is described. A novel pH fluorescent sensor based on a pH‐sensitive dye conjugated to Quantum Dots was developed. The nanoprobe was used to study the cellular processes in vivo by means of confocal and fluorescence lifetime imaging microscopy. The fluorophore‐ QD conjugate nanosensor is a prototype of a series of lifetime‐based cellular sensors.

Maurette, Manuel. "Sistemas diferenciales singulares de segundo orden. Un enfoque topológico" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Marotte, Clarisa. "Interacción entre el metabolismo del calcio y el metabolismo energético en ratas normales y en animales espontáneamente obesos" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo fue comparar absorción y retención de Ca, y cambios en la composición corporal y en diferentes parámetros del metabolismo energético durante el crecimiento. Ratas espontáneamente obesas (IIMb/β) (O) y ratas Wistar (W), fueron apareadas; las madres se alimentaron con una dieta isocalórica con diferentes concentraciones de Ca: Alto (ACa: 0.9%), Normal (NCa: 0.5%) y Bajo (BCa: 0.2%). Las crías macho continuaron recibiendo la misma dieta materna hasta los 60 días de edad (ACa, NCa y BCa). En O, el PC fue inverso al contenido dietario de Ca sin diferencias en % de agua; OBCa presentó el menor % corporal de proteínas (p<0.01). El %ACa fue inverso al contenido de Ca de la dieta y el %A grasas no se modificó. OBCa presentó los mayores niveles de TGL, glucosa, insulina en ayunas, y HOMA-IR (p<0.01) y el menor valor de Ca y P corporal, CMO del esqueleto total y DMO de tibia y columna (p<0.01). OACa presento similar %Ca corporal pero CMO del esqueleto total y DMO de tibia proximal y columna fueron menores que ONCa (p<0.01). En W, AWCa presentó mayor % de grasa que los otros dos grupos (p<0.01). WBCa y WACa presentaron % de proteínas y cenizas menores a WNCa (p<0.01). WACa presentó los mayores niveles de TGL, glucosa, insulina y HOMA-IR (p<0.01) y WBCa mayores que WNCa (p<0.01). Al comparar O con W se observó en O mayor depósito graso y menor % de proteínas para una misma dieta experimental, menor niveles de marcadores bioquímicos y mayores niveles de glucosa, insulina, TGL y HOMA-IR. La BGP guardó una relación inversa con dichos parámetros y directa con CTX. Conclusiones: Durante el período de crecimiento, la baja ICa o relación Ca/P dietaria modularía el PC, induciendo cambios en la composición corporal. La masa grasa no sería beneficiosa para la salud ósea. La BGP se asocia negativamente a la glucosa en ayunas y resistencia a la insulina; la deficiente ingesta de Ca induce cambios más negativos.

Abstract:
The aim of the present study was to compare absorption and retention of Ca, changes in body composition and in different parameters of energetic metabolism during growth. Spontaneously obese (IIMb/β) (O) and Wistar (W) rats were mated; the dams fed an isocaloric diet with different Ca concentrations: High (ACa: 0.9%), Normal (NCa: 0.5%) and Low (BCa: 0.2%). Male pups continued receiving mother´s diet until 60 years of age (ACa, NCa and BCa). Body weight of O groups was inversely related to dietary Ca content, with no differences in water %; body protein % was lower in OBCa (p<0.01). The ACa% was inversely related to dietary Ca content, while fat % did not changed. OBCa presented the highest triglycerides and fasting glucose and insulin levels, and HOMA-IR (p<0.01), the lowest body Ca and P content, total body BMC and, tibial and spinal BMD (p<0.01). OACa showed similar body Ca% but lower total body BMC and, tibial and spinal BMD than ONCa (p<0.01). AWCa showed the highest fat% (p<0.01). WBCa and WACa presented lower protein and ashes % than WNCa (p<0.01). WACa showed the highest levels of triglycerides, glucose, insulin and HOMA-IR (p<0.01). Comparing O and W, the O groups showed a higher fat store and a lower protein %, a lower bone turnover and higher glucose, insulin and HOMA-IR levels for a same experimental diet. BGP levels presented an inverse relationship with these biochemical parameters, and a direct relationship with CTX. Conclusions: During the growth period, the low Ca intake or dietary Ca/P relationship could modulate the body weight, inducing changes in body composition. The fat mass would not be beneficial for bone health. BGP levels are negatively associated to glucose and insulin resistance levels and the low Ca intake increase this negative effect.

Marino, Gabriela Inés. "Transporte iónico en una línea celular derivada de trofoblasto humano (BeWo) y en placenta humana" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Estudiamos los canales aniónicos ORCC y CFTR y el canal de sodio ENaC en la línea BeWo derivada de trofoblasto humano. La actividad iónica fue estudiada con la técnica de patch clamp en las configuraciones de canal único (inside out y cellattached) y célula entera (whole cell). La expresión de las proteínas fue analizada con técnicas corrientes de biología molecular. Los tres objetivos fueron: 1) identificar y caracterizar la actividad de esos canales con la ayuda de agentes farmacológicos, 2) estudiar la expresión de las proteínas de los canales clonados; 3) analizar la participación de esos canales en la proliferación, y la migración celular por medio del modelo de cierre de la herida. Los principales resultados fueron: Las células BeWo tienen canales aniónicos y catiónicos funcionales que se expresan en la membrana. Las corrientes de Na+ por el canal ENaC sensible al amiloride y las corrientes transportadas por el ORCC y CFTR participan en la migración o proliferación celular. La aldosterona que estimula la metilación de ENaC juega un papel importante en el mecanismo por el cual el ENaC participa en la migración celular. En conclusión, fuimos capaces de aislar y caracterizar canales aniónicos y catiónicos en las células BeWo y establecer su papel en la migración y proliferación celular.

Abstract:
Anion channels such as ORCC and CFTR and the sodium channel ENaC were studied in the human trophoblastic cell line BeWo. Ion channel activity was recorded in the cell attached and inside out and in the whole cell configurations with patch-clamp technology and the expression of the proteins were studied with current techniques of molecular biology. Three main objectives were planned: 1) to identify and characterize the activity of these channels with pharmacological tools; 2) to study the expression of the cloned channels in the cell membranes; 3) to analyze the participation of these channels in the cellular processes and migration with the aid of a wound healing model. The main results were: BeWo cells have functional anionic and cationic channels and they are expressed in the membranes. Na+ currents mediated by the amiloride sensitive ENaC and currents transported by CFTR and ORCC are involved in either cell migration or cell proliferation. Aldosterone which stimulates protein methylation of ENaC seems to play an important role in the mechanism of action of ENaC in the migration process. In conclusion we were able to identify clearly anionic and cationic channels in BeWo cells and to establish their participation in the migration and proliferation processes.

Mansilla, Marcela Angela. "Influencia de la microestructura en las propiedades mecánicas y térmicas de mezclas de caucho natural y caucho estireno butadieno" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El trabajo de Tesis aquí expuesto representa la investigación de un tema de gran interés tanto científico como tecnológico como es el estudio de mezclas elastoméricas vulcanizadas compuestas por caucho natural NR y caucho estireno butadieno SBR. Se tratan de dos de los elastómeros más utilizados a escala global para distintas aplicaciones industriales, en particular como compuestos en diferentes tipos de neumáticos. Se ha desarrollado una técnica para preparar mezclas a escala de laboratorio utilizando la técnica de disolución en un solvente adecuado de ambos elastómeros, incorporación de curativos, mezclado y posterior evaporación. De esta forma se fabricaron 11 compuestos con diferentes proporciones de NR/SBR. También se utilizaron mezclas similares preparadas en un molino de laboratorio. Justamente la diferencia en el método de mezclado de estas muestras llevó a diferentes comportamientos mecánicos y térmicos, producto de las subestructuras obtenidas. Los compuestos fueron preparados con un sistema de cura basado en azufre y acelerante, y vulcanizados a 160 °C que es una temperatura de interés tecnológico. De esta forma, en función de las distintas composiciones estudiadas se lograron diferentes subestructuras, debido a la distribución de las fases obtenidas y a la diferencia en la densidad de entrecruzamiento (crosslinks). Se efectuaron ensayos de hinchamiento (swelling) a temperatura ambiente con la finalidad de cuantificar la densidad de puentes azufre (crosslinks) formados durante la reacción de vulcanización. Luego las muestras fueron caracterizadas por ensayos mecánico-dinámicos, calorimetría diferencial de barrido (DSC), dispersión de rayos X a bajos ángulos (SAXS), Espectroscopía de tiempo de aniquilación de positrones (PALS), Espectroscopía Infrarroja (FT-IR) y Microscopía electrónica de Barrido (SEM). Los resultados obtenidos mediante estas técnicas en las muestras vulcanizadas son analizados considerando la composición de la muestra y la influencia de los puentes formados. Muchos de los resultados obtenidos de las mezclas fabricadas a partir de soluciones de los cauchos fueron comparados con otras mezclas similares fabricadas mecánicamente en un molino de laboratorio. Las micrografías SEM revelaron importantes diferencias morfológicas que indican una mayor miscibilidad en las mezclas fabricadas por solución. Las mediciones reométricas y viscosimétricas revelaron resultados que evidencian una fuerte influencia de los nudos topológicos (entanglements) en las propiedades físicas y mecánicas de las muestras. Se observó que dicha influencia es reducida si las mezclas son fabricadas a partir de soluciones de los cauchos, y el efecto de reducción es más acentuado en mezclas compuestas mayormente por NR. Mediante los resultados de mediciones de DSC efectuados en las mezclas preparadas por solución se pudo evaluar las temperaturas de transición vítrea de cada fase en las mezclas. También fue posible evidenciar la presencia de una interfase cuando ésta técnica se aplico a un estudio en la mezcla de composición 50NR/50SBR. Las mediciones mecánica-dinámicas efectuadas en un péndulo de torsión de oscilaciones forzadas permitieron caracterizar la transición del estado vítreo al elástico de las mezclas vulcanizadas por ambos métodos de fabricación. Los resultados evidenciaron una mayor miscibilidad en las mezclas preparadas por solución. Los resultados obtenidos permitieron caracterizar la estructura de cada una de las mezclas vulcanizadas estudiadas y establecer un vínculo con las propiedades mecánicas y térmicas, en particular como varía con la composición del compuesto y la estructura de fases formada.

Abstract:
The thesis work here exposed represents the investigation on a subject of great interest both scientific as technologically, as is the study of vulcanized elastomer blends composed by natural rubber NR and styrene butadiene rubber SBR. They are about of the most used elastomer globally for various industrial applications, particularly as compounds in different types of tires. It has been developed a technique for preparing elastomer blends at laboratory scale by dissolving in a suitable solvent both elastomer, incorporation of curatives, mixing and subsequent evaporation. In this way 11 compounds were made with different proportions of NR/SBR. Also similar mixtures were used, prepared in a laboratory mill. Precisely the difference in the method of mixing of these samples led to different mechanical and thermal behavior, as a product of the obtained substructures. The compounds were prepared using a cure system based on sulphur and accelerator, and vulcanized at 160°C which is a temperature value of technological interest. Thus, according to the variation in the composition, different substructures were achieved, due to the phase distribution obtained with the crosslink density. Swelling tests were carried out at room temperature in order to quantify the sulphur crosslink density formed during the vulcanization reaction. Then the samples were characterized by dynamic mechanical analysis (DMA), differential scanning calorimetry (DSC), small angle X-ray scattering (SAXS), positron annihilation lifetime spectroscopy (PALS), infrared spectroscopy (FT-IR) and scanning electron microscopy (SEM). The obtained results using these techniques in the cure samples were analyzed by considering the composition of the sample and the influence of the crosslinks. Many of the results obtained from the blends made from rubbers solutions were compared with other similar compounds fabricated mechanically in a laboratory roll mill. SEM micrographs showed significant morphological differences that indicate a higher miscibility in the blends made by solution. Viscometric and rheometric measurements revealed results that evidence a strong influence of topological knots (entanglements) in the physical and mechanical properties of the samples. It was observed that such influence is reduced if the mixtures are made from solutions of the rubbers, and the effect is more pronounced in mixtures composed mostly of NR. Through the results of DSC measurements made in the blends prepared by solution it was possible to evaluate the glass transition temperatures of each phase in the blends. Also, it was possible to detect the presence of an interface when this technique is applied to a study on the compound of composition 50NR/50SBR. Dynamic mechanical measurements made in a torsion forced pendulum allowed to characterize the transition from the glassy to the rubbery state in the vulcanized blends prepared by both methods of manufacture. The results demonstrated a higher miscibility in the blends prepared by solution. The obtained results allowed to characterize the structure of each of the vulcanized blends studied and establish a link with the mechanical and thermal properties, in particular, how it varies with the composition of the compound and the formed phase structure.

Lorenzetti, Mario Alejandro. "Caracterización de variantes del virus de Epstein Barr en la infección aguda en pacientes pediátricos y su comparación con linfomas pediátricos EBV +" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El virus de Epstein Barr (EBV) posee dos ciclos de infección, lítica y latente, en linfocitos B, el segundo está asociado a procesos neoplásicos. Se han descripto polimorfismos en los genes BZLF1, BKRF1 (EBNA1) y BNLF1 (LMP1), algunos asociados a linfomas EBV+, a los compartimentos del hospedador o al origen geográfico del virus. Con el objetivo de identificar polimorfismos en estas regiones génicas y su dinámica de distribución en el tiempo y entre los compartimentos del hospedador, se estudió una serie de 35 pacientes pediátricos, 15 con mononucleosis infecciosa (MNI) y 20 con linfoma EBV+, todos de nuestra región geográfica. Mediante amplificación por PCR y posterior secuenciación, se caracterizaron las variantes virales de dichos genes en distintos compartimentos de pacientes i) con MNI al momento del diagnóstico (D0), al mes (D30) y a los tres meses (D90) durante la convalecencia y ii) en muestras de biopsias ganglionares de linfomas EBV+. Se identificaron variantes de BZLF1 estadísticamente asociadas a tumores EBV+, variantes de EBNA1 de circulación exclusiva en nuestra región geográfica y variantes de LMP1 preferentemente asociadas a patologías EBV+, tanto malignas como benignas.

Abstract:
Epstein Barr virus (EBV) displays two infective cycles, lytic cycle and latency within B cells, and it is the latter which is associated with neoplasic processes. Polymorphisms within BZLF1, BKRF1 (EBNA1) and BNLF1 (LMP1) genes were described, and some seemed to associate with malignancy, distribution between compartments or the geographical origin of the virus. With the aim to characterize polymorphisms within these genetic regions and their distribution over time and/or anatomical compartments, we studied a series of 35 pediatric patients from our geographic region: 15 with infectious mononucleosis (IM) and 20 with EBV-related lymphomas. Viral variants from these genes were characterized after direct sequencing of PCR products obtained from different anatomical compartments from patients with IM at diagnosis (D0), at a month time (D30) and after three months (D90), during the convalescence and also from EBV+ tumor biopsies. We identified BZLF1 variants statistically associated with EBV-related lymphomas, EBNA1 variants exclusively circulating in our region and LMP1 variants preferentially occurring in EBV-related pathologies, both malignant and benign.

Laserna, María Paula. "Variaciones fenotípicas y poblacionales entre híbridos convencionales y transgénicos de maíz (Zea mays L.) y sus posibles bases genéticas" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El uso de híbridos de maíz transgénicos (Bt, RR, Bt-RR) ha simplificado el manejo de los cultivos, debido a un control efectivo de plagas y malezas. Los efectos de la inserción de los transgenes sobre el comportamiento de los híbridos de maíz no están completamente documentados, especialmente sin la incidencia de adversidades bióticas. Los objetivos de esta tesis fueron (i) establecer las posibles diferencias en fenología, crecimiento y rendimiento entre un híbrido de maíz no transgénico y sus versiones transgénicas (híbridos Bt, híbridos RR e híbridos Bt-RR) y entre las versiones transgénicas de otro híbrido; (ii) analizar el impacto del aumento de la densidad poblacional sobre la variabilidad fenotípica de los diferentes rasgos en los distintos genotipos; (iii) establecer las diferencias genéticas existentes entre las distintas versiones dentro de cada grupo de híbridos; y (iv) relacionar la variabilidad genética entre las plantas de una misma versión con la variabilidad fenotípica observada en los distintos rasgos. Los experimentos se llevaron a cabo en el campo experimental de la FA-UBA, durante el período 2008-2009 (Exp 1), 2009-2010 (Exp 2) y 2010-2011 (Exp 3). Se cultivaron las distintas versiones de dos grupos de híbridos (DK747 y DK190) en dos densidades de siembra contrastantes (6 y 12 pl m-2 en Exp 1 y Exp 2) y con distinto espaciamiento entre las plantas de la hilera de siembra (Exp3). Todos los experimentos fueron regados y conducidos sin limitaciones de nutrientes, con controles químicos y mecánicos de malezas y de plagas. En las dos densidades de siembra, se registró variabilidad fenotípica de diferentes rasgos entre las versiones de un mismo grupo de híbridos (e.g. tasas de crecimiento, partición de biomasa a la espiga, TT a floración). También se describieron diferencias en la respuesta de la variabilidad fenotípica de algunos rasgos (e.g. rendimiento y tasa de crecimiento de la espiga) frente al aumento de presión de competencia, indicador de diferencias entre las versiones en la tolerancia a la alta densidad de siembra. Por último, se encontraron diferencias genéticas entre las versiones del híbrido DK747 y entre las plantas de una misma versión, siendo la versión convencional la más variable, y la versión Bt-RR la menos variable. La ubicación de los SNP variables en cada una de las versiones permitió inferir que la variabilidad podría deberse a heterocigosis residual en las líneas parentales. Algunos de los estimadores de la variabilidad fenotípica pudieron relacionarse con la variabilidad genética (e.g. el CV del NGP, la amplitud de la BT y el coeficiente de asimetría de la TCPPC), aunque resta establecer la bases ecofisiológicas determinantes de la variabilidad.

Abstract:
The use of transgenic maize hybrids (Bt, RR, Bt-RR) has simplified crop management because of an effective control of pests and weeds. The effects of the transgenes insertion on the performance of maize hybrids are not well documented, especially without the incidence of biotic adversities. The objectives of this thesis were (i) to establish the differences in phenology, growth and yield between non-transgenic maize hybrid versions and its transgenic versions (Bt hybrids, RR hybrids and Bt RR hybrid ) and among transgenic versions of another hybrid, (ii) to analyze the impact of increased population density on the phenotypic variability of several traits of the different genotypes, (iii) to establish the genetic differences among versions of each group of hybrids, and (iv) to relate the genetic variability among plants of a genotype with the phenotypic variability of several traits. The experiments were carried out in the experimental field of the FA-UBA, during 2008-2009 (Exp 1), 2009-2010 (Exp 2) and 2010-2011 (Exp 3). Different versions of two groups of hybrids (DK747 and DK190) were cultivated at two contrasting plant population densities (6 and 12 pl m-2 in Exp 1 and Exp 2) and with different spacing between plants along the rows (Exp3). All experiments were irrigated and conducted without nutrients limitations, with chemical and mechanical control of weeds and pests. At both plant densities, there were phenotypic variations of some traits among versions of the same group of hybrids (e.g. plant growth rate, biomass partitioning to the ear, time to flowering). Some versions also exhibited different phenotypic variability of some traits (e.g. grain yield and ear growth rate around female flowering) as competition was increased, i.e. an indicator of the tolerance to crowding degree of each genotype. Finally, genetic differences among versions of the DK747 and between plants of the same version were detected, resulting the non- transgenic DK747 the most variable, and the DK747MGRR, the less variable. The location of the variable SNP in each version let us infer that genetic variability is probably due to residual heterozygosity in the parental lines. Some of the estimators of the phenotypic variability could be related to genetic variability (e.g. the CV of the kernel number per plant, the amplitude of the total biomass and the skewness of plant growth rate around the critical period). Physiological bases of inter-plant variability were not determined.

Laplagne, Santiago Jorge. "Algoritmos de álgebra conmutativa en anillos de polinomios" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis nos enfocamos en los aspectos algorítmicos de algunos de los tópicos más importantes del álgebra conmutativa. Estudiamos el cálculo de radicales y primos y minimales, la normalización de anillos e ideales y otros problemas relacionados. En los últimos años, se desarrollaron varios programas de álgebra computacional con implementaciones muy eficientes de las herramientas básicas para trabajar con polinomios, ideales y anillos. Esto renovó el interés por algoritmos eficientes para resolver algunos problemas difíciles del área. Proponemos nuevos algoritmos para algunos de estos problemas, basándonos en ideas matemáticas y resultados nuevos. Hemos implementado todos los algoritmos en esta tesis en Singular (Decker et al., 2011), uno de los programas de álgebra computacional más comúnmente utilizados, y están actualmente disponibles para su uso por toda la comunidad matemática. Si bien para la mayoría de estos problemas ya existían algoritmos, los nuevos algoritmos propuestos los superan en la mayoría de los casos, siendo ahora los algoritmos por default en SINGULAR.

Abstract:
This thesis addresses the algorithmic aspects of some major topics of commutative algebra. We study the computation of radicals and minimal associated primes of ideals, the normalization of rings and ideals and other related problems. In recent years a number of computer algebra systems have been developed with very efficient implementations of some basic tools to work with polynomials, ideals and rings. This put on the spot the need for efficient algorithms to solve some difficult problems. We propose new algorithms for some of these problems, based on new mathematical ideas and results. All the algorithms in this thesis have been implemented in Singular (Decker et al., 2011), one of the most commonly used computer algebra systems, and are now available for use of the mathematical community. Although other algorithms already existed for most of these tasks, the new algorithms outperform them in most cases and are now the default algorithms in SINGULAR.

Lamanna, Melisa Elsa. "Estructuras poliméricas con anillos triazólicos. Síntesis, caracterización y aplicaciones" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo general de esta Tesis Doctoral es la síntesis de nuevos polímeros que contengan heterociclos en su cadena principal o como sustituyentes, y el estudio de sus posibles aplicaciones. En virtud de este objetivo se propuso la polimerización del 3-amino-1,2,4-triazol (3ATA), así como la modificación sintética de policloruro de vinilo (PVC) y alcohol polivinílico (PVA) con anillos heterocíclicos. Los materiales resultantes se caracterizaron mediante métodos físicos, térmicos, reológicos y espectroscópicos. En principio se estudió la polimerización de la anilina para extenderla al 3-amino-1,2,4-triazol. A partir de la polimerización de anilina en presencia de diferentes partículas como agentes nucleantes se lograron desarrollar nuevos materiales híbridos. Por otra parte, al polimerizar el 3ATA hemos logrado obtener un oligómero (OATA). Se confirmó que el OATA se trata de un tetrámero con carácter de semiconductor. Se estudió su capacidad para interactuar con metales. Asimismo, se verificó que la capacidad de interacción con cobre aumentaba considerablemente cuando era insertado dentro de la vermiculita. Debido a las singulares propiedades ácido base del OATA y luego de un estudio exhaustivo de las mismas, se concluyó que dicho material puede ser aplicado satisfactoriamente como indicador de punto final de una titulación ácido base y como sensor de amoníaco. En cuanto a la modificación química del PVC, se realizó eficientemente la transformación, tanto por métodos tradicionales, así como por empleo de energía de microondas. Esta última técnica permitió obtener los mayores porcentajes de conversión. De todos los heterociclos estudiados, el 1,2,4-triazol-3-tiol resultó el más eficiente en la reacción de sustitución. Se determinó la capacidad de interacción con cobre, se vio que existe una interacción positiva entre la muestra con mayor porcentaje de conversión y dicho metal. Se logró la síntesis de nuevos copolímeros, obtenidos por modificación química del PVA. Las estrategias de síntesis aplicadas permitieron la obtención de copolímeros con grupos heterocíclicos unidos directamente a la cadena polimérica, así como sustituyentes heterocíclicos unidos a la cadena mediante un heteroátomo. Se realizaron ensayos de interacción para aplicar los nuevos copolímeros en la remoción de metales en aguas contaminadas. La interacción se evaluó en función del pH, tiempo y concentración. Se obtuvieron resultados muy promisorios en particular para la remoción de Hg (II), pero también para iones Cd (II), Zn (II) y Cu (II). Se realizaron ensayos de selectividad competitiva y no competitiva, y se evaluó la posibilidad de reutilización de los nuevos materiales.

Abstract:
The main goal of this Thesis is the synthesis of new polymeric materials containing heterocyclic groups in their main chain or as substituent, and the study of their possible applications. For that purpose, the polymerization of 3-amino-1,2,4-triazole (3ATA) was proposed. Moreover, we studied the synthetic modification of polyvinyl chloride (PVC) and polyvinyl alcohol (PVA) with heterocyclic as pendant groups. The new materials were characterized by physical, thermal, rheological and spectroscopical techniques. The polymerization of aniline was studied in depth and then we extended the methodology to 3ATA. From the polymerization of aniline in the presence of different nucleating particles we developed new hybrid materials with a wide range of applications. Furthermore, when the polymerization of 3ATA was carried out an oligomer (OATA) was obtained. It was confirmed by different techniques that OATA is a semiconductor tetramer. We studied its ability to interact with heavy metals. It was observed that when OATA was inserted into vermiculita, its ability to interact with copper (II) was considerably increased. The unique acid base properties, and after a thorough study of them, we have applied OATA as indicator of endpoint acid base titration. The PVC modification was successfully performed by traditional techniques and microwave irradiation. The latter technique yields the highest conversion rates. From all the heterocyclic substituent studied, 1,2,4-triazol-3-thiol was the most efficient in the substitution reaction. We determined the capability of the new copolymers to interact with cooper (II); we found that there was an interaction between the sample with the highest conversion and this metal. The synthesis of novel copolymers was achieved by chemical modification of PVA. The synthetic pathways applied let us to obtain copolymers with heterocyclic groups attached directly to the polymer chain or attached by a heteroatom. We performed interactions studies with heavy metals in order to remove them from contaminated waters. The sorption of Hg (II), Cd (II), Zn (II), Cu (II) were evaluated as function of pH, time and concentration. Besides, competitive and non competitive conditions were analyzed. Promising results were obtained in particular for mercury removal but also for cadmium, zinc and cooper. Their capability to be reused was also studied.

Jungblut, Lucas David. "El sistema olfatorio y vomeronasal en larvas de anfibios anuros y su participación en la detección de estímulos químicos en el ambiente" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La mayoría de los tetrápodos poseen dos órganos quimiosensoriales nasales: el epitelio olfatorio (EO) y el órgano vomeronasal (OVN). Ambos sistemas sensoriales, olfatorio (SO) y vomeronasal (SVN), presentan diferencias morfológicas, bioquímicas y moleculares lo que indica que participan en procesos fisiológicos diferentes. Usualmente se asocia al SVN con la detección de feromonas, mientras que el SO participaría en la detección de “olores comunes” no vinculados a la comunicación intraespecífica. Sin embargo, varias evidencias contradicen esta hipótesis y actualmente no está claro cuáles serían las funciones diferenciales de ambos sistemas sensoriales, o qué tipo de estímulos son detectados en cada uno de ellos. Más aún, inclusive el propio origen de este sistema “dual” de quimiodetección, durante la evolución de los vertebrados, presenta algunas controversias. Generalmente se interpreta que el SVN apareció en tetrápodos como consecuencia de la adaptación al ambiente terrestre. Sin embargo, las evidencias moleculares y morfológicas actuales sugieren que tanto el SO como el SVN aparecieron tempranamente en la filogenia de los vertebrados, probablemente en un ancestro común acuático de los tetrápodos; aunque nada se sabe de la funcionalidad del SVN en este ambiente. En este contexto, los anfibios constituyen un grupo sumamente interesante para el estudio de los sistemas quimiosensoriales en tetrápodos ya que poseen una etapa larval acuática. Las pocas especies estudiadas hasta la actualidad sugieren que las larvas de anuros poseen tanto SO como SVN, pero nunca se ha realizado un análisis comparado abarcando un número considerable de especies. Por otra parte, los renacuajos presentan un repertorio muy variado de comportamientos mediados por detección de claves químicas, como: detección de comida, predadores, señales de alarma liberadas por coespecíficos, etc. Curiosamente, nada se sabe de la participación de los distintos sistemas quimiosensoriales en la detección de estos estímulos. En la presente tesis se analizaron larvas de catorce especies de anuros, en las cuales se demuestra que, tanto el SO como el SVN, se desarrollan tempranamente y están presentes durante toda la etapa larval. Las características morfológicas, histológicas y bioquímicas observadas en varias de estas especies, sugieren que un grado importante de maduración, se alcanza en ambos sistemas sensoriales durante la etapa larval. Las neuronas del EO y el OVN expresan marcadores específicos descriptos en neuronas quimiosensoriales de otros vertebrados. Además, sus axones proyectan a zonas específicas de telencéfalo: el bulbo olfatorio principal y accesorio, respectivamente, donde establecen conexiones sinápticas. Estas características nos hacen suponer que ambos sistemas sensoriales son funcionales en renacuajos. Finalmente, se ha caracterizado, en larvas del sapo común Rhinella arenarum, las respuestas comportamentales a dos tipos de estímulos diferentes mediados por detección de claves químicas. Por un lado, la detección de estímulos que indican la presencia de una fuente de alimento, y por otro, la detección de señales de alarma liberadas por otros renacuajos, un fenómeno de comunicación social conocido en larvas de otras especies de anuros. Ambos estímulos parecen estar mediados por el SO en R. arenarum, ya que las larvas con OVN ablacionado responden igual que los controles, mientras que si se ablaciona el EO las respuestas comportamentales a ambos estímulos desaparecen. Además, los análisis cuantitativos de activación neuronal mostraron que el número de neuronas sensoriales activadas aumenta en el EO luego de la exposición a ambos estímulos, mientras que en el OVN no varía respecto a los controles.

Abstract:
Most tetrapods have two nasal chemosensory organs: the olfactory epithelium (OE) and the vomeronasal organ (VNO). Both sensory systems, olfactory (OS) and vomeronasal (VNS), are morphologically, biochemically and molecularly different, indicating that they are involved in different physiological processes. The VNS is usually associated with pheromone detection, while the OS would detect “common odours”, which may not be involved in intraspecific communication. This hypothesis, however, has been contradicted by several data, and it is not clear, at this time, which would the relative functions of the OS and the VNS or what kinds of stimuli are detected by each sensory system. Moreover, even the evolutionary origin of this “dual” chemosensory system during vertebrates’ evolution is still controversial. It is generally believed that the VNS arose in tetrapods as an adaptation to terrestrial environment. However, the current molecular and morphological evidence, suggest that both OS and VNS appeared early in vertebrate evolution, probably in a common aquatic ancestor of tetrapods, but nothing is known about the functionality of VNS in aquatic environment. In this context, amphibians represent an extremely interesting group to study chemosensory systems among tetrapods, as they have an aquatic larval stage. The few species analysed to the present suggest that anuran larvae have both an OS and a VNS, but a comparative analysis involving a considerable number of species has never been carried out. By the other hand, tadpoles show a diverse repertoire of chemodetection mediated behaviors, such as food detection, predators’ recognition, alarm signals released by conspecifics, etc. Curiously, nothing is known about the involvement of the different chemosensory systems in detecting these stimuli. In this thesis, the analysis of 14 different anuran larvae species demonstrates that both, the OS and the SVN, are early developed in anurans, and both sensory system are present throughout the entire larval stage. The morphological, histological and biochemical characteristics founded in many of these species, suggest that a significant level of maturity is reached in both sensory systems during the larval stage of anurans. Chemosensory neurons of the EO and the VNO express specific markers described in chemosensory neurons of other vertebrates. Moreover, axons from olfactory and vomeronasal chemosensory neurons project to specific areas in the telencephalon: the main and accessory olfactory bulb, respectively, where they establish synaptic connections. These features led us to speculate that both sensory systems are functional in tadpoles. Finally, the behavioural responses to two different stimuli, mediated by chemical cues detection, has been characterized in larvae of the common toad Rhinella arenarum: First, the chemodetection of cues that indicate the presence of a food source. And second, the chemodetection of alarm signals released by other tadpoles, a social communication phenomenon widely known in other anuran larvae species. Both stimuli appear to be mediated by the OS in R. arenarum as larvae without VNO responded equally to the control animals, while if the EO is removed the behavioural responses to both stimuli was not observed. In addition, the quantitative analyses of activated neurons shows that the number of chemosensory neurons activated increases in the EO after exposure to both stimuli, while there is no detectable variation in the VNO compared to control animals.

Julianelli, Vanina Laura. "El Heparán Sulfato y la descondensación del núcleo espermático humano: estudio de su rol específico en dicho proceso y caracterización molecular de la interacción Heparán Sulfato-ADN-Protaminas" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
A diferencia de las células somáticas, el espermatozoide posee su cromatina empaquetada principalmente por protaminas en lugar de histonas. Las protaminas son proteínas pequeñas y básicas, debido a su alto contenido de residuos lisina, arginina y cisteína. Las cisteínas forman puentes disulfuro intra e intercatenarios, lo que le proporciona al núcleo espermático gran estabilidad y resistencia para poder atravesar el tracto masculino, el femenino y llegar con su ADN intacto hasta el sitio de fecundación. Una vez que el espermatozoide penetra en el ovocito, es imprescindible que se produzca la descondensación de su cromatina, es decir el desempaquetamiento del ADN para poder reemplazar las protaminas por histonas ovocitarias. La descondensación de la cromatina consiste en dos eventos, deben reducirse los puentes disulfuro (tiorreducción) y removerse las protaminas. Las moléculas involucradas en estos procesos son el glutatión reducido (GSH) y el heparán sulfato (HS) ovocitarios. Hasta el momento se consideraban eventos independientes y sucesivos: primero el GSH tiorreduce las protaminas, y luego el HS las remueve. Sin embargo, nuestros resultados indican que estos procesos podrían ser simultáneos y cooperativos. El objetivo de esta tesis fue avanzar en el estudio del mecanismo de la descondensación de la cromatina del espermatozoide humano in vitro en presencia de heparina (análogo estructural del HS) y GSH y su extrapolación al mecanismo in vivo durante la fertilización. Al coincubar espermatozoides humanos o núcleos espermáticos aislados con heparina y GSH, se produce un mayor porcentaje de descondensación de la cromatina, con respecto a la incubación en forma secuencial con los mismos agentes, independientemente del orden de los mismos. Utilizando naranja de acridina como técnica para evaluar en forma indirecta el estado de tiorreducción de los núcleos espermáticos, se observa que la heparina colabora con el GSH en la tiorreducción, durante la descondensación. Estos resultados fueron confirmados utilizando monobromobimane como método directo para evaluar tiorreducción. Los resultados aportados por esta tesis indican que la tiorreducción producida por el GSH, y la remoción de las protaminas producida por la heparina, durante la descondensación de la cromatina de espermatozoides humanos in vitro, ocurriría en forma simultánea, y no secuencial, ya que ambos factores cooperarían entre sí.

Abstract:
Unlike somatic cells, sperm have a highly packed chromatin due to the presence of protamines instead of histones. Protamines are small basic proteins, very rich in cysteine, lysine and arginine. Cysteine residues form disulfide bonds, both intra and interchain, rendering the sperm nucleus high stability and resistance during transit along the male and female reproductive tracts, thus enabling the spermatozoon to arrive at the fertilization site intact. Once the sperm penetrates the oocyte, chromatin decondensation must occur, implying the unpacking of DNA through the replacement of protamines by oocyte histones. Decondensation comprises two steps: disulfide bonds must be reduced (thioreduction) and protamines must be removed. The molecules involved in these steps are reduced glutathione (GSH) and heparan sulfate (HS) from the oocyte. Until now, these events were considered independent and consecutive: first GSH thioreduced protamines and, then HS removed them. Our results indicate otherwise, suggesting that both processes could be simultaneous and cooperative. The aim of this thesis was to advance in the study of the mechanism of nuclear decondensation of human sperm in vitro, using heparin (HS structural analog) and GSH and the extrapolation to the in vivo mechanism during fertilization. A higher degree of decondensation was observed upon coincubating of human sperm or isolated nuclei with heparin and GSH, compared to sequential incubation with the same agents, regardless of the order in which they were added. Use of an acridine orange staining technique as a means to indirectly evaluate the thioreduced status of sperm chromatin, revealed that heparin enhanced GSH thiol reducing activity, suggesting the existence of a cooperative effect between both reagents during decondensation. These results were confirmed by direct thiol reduced status evaluation uthrough labeling of free thiols in sperm chromatin with monobromobimane. The results presented herein indicate that protamine thiol reduction by GSH and removal of protamines by heparin during chromatin decondensation of human sperm in vitro, occur simultaneously rather than sequentially, since a cooperative effect could be observed between both decondensing agents.

Hovsepian, Eugenia. "Estudio de los efectos antiinflamatorios de 15-deoxi-delta 12,14-prostaglandina J2 e IL-10 en miocardiocitos infectados con Trypanosoma cruzi. Mecanismos moleculares involucrados" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En la fase aguda de la enfermedad de Chagas, la infección por T. cruzi produce una intensa respuesta inflamatoria en diversos tejidos del organismo incluso en el corazón, donde los miocardiocitos constituyen un importante blanco. Si bien la reacción inflamatoria es importante para el control inicial de la infección, un desequilibrio o una mala resolución de la misma puede generar daños y alteraciones en la funcionalidad cardíaca. Las células cardíacas responden a la infección mediante la expresión de enzimas inflamatorias como óxido nítrico sintasa 2 (NOS2) y metaloproteasas (MMPs) y citoquinas como TNF-α e IL-6. Esta respuesta está mediada por la activación de vías de señalización que incluyen al factor de transcripción nuclear-ĸB (NF-ĸB) y a las quinasas reguladas por señales extracelulares-proteínas quinasas activadas por mitógenos (ERK1/2-MAPK), cuya participación es fundamental en procesos inflamatorios. Los receptores activados por factores de proliferación peroxisomal γ (PPARγ) son factores de transcripción dependientes de ligando que han sido implicados en la regulación del metabolismo lipídico y de procesos inflamatorios. En este trabajo evaluamos el aporte de 15-deoxi-Δ12,14-prostaglandina J2 (15dPGJ2), ligando natural de PPARγ y de la citoquina antiinflamatoria IL-10 en la resolución de la respuesta inflamatoria en cultivos primarios de miocardiocitos neonatales de ratón infectados con la cepa letal pantrópica/reticulotrópica (RA) de T. cruzi. Los resultados de esta evaluación evidencian que 15dPGJ2 es capaz de inhibir la expresión y actividad de diferentes enzimas inflamatorias como NOS2, MMP-9 y MMP-2, así como la expresión de las citoquinas proinflamatorias TNF-α e IL-6 inducidas por la infección. Los efectos inhibitorios ejercidos por 15dPGJ2 involucran participación de mecanismos dependientes e independientes de PPARγ. La contribución de su receptor en los efectos ejercidos por 15dPGJ2 fue confirmada al silenciar la expresión mediante ARN de interferencia (siARN-PPARγ). Por otro lado, a partir de la utilización de inhibidores específicos de ERK1/2 y de NF-ĸB, demostramos que 15dPGJ2 también ejerce sus efectos de manera independiente a PPARγ, a través de estas vías. IL-10 es una de las principales citoquinas antiinflamatorias y fue identificada originalmente como un factor inhibidor de la síntesis de citoquinas proinflamatorias y modulador de ciertas funciones asociadas a la activación de macrófagos y/o monocitos. En este trabajo se describe que la adición de IL-10 exógena inhibe la activación de las vías de señalización de ERK1/2 y de NF-ĸB y reduce los niveles de expresión y actividad de NOS2, MMP-9 y MMP-2, así como la expresión de TNF-α e IL-6 inducidas por la infección. La señalización por IL-10 a través de su receptor promueve fosforilación de STAT3, el cual actúa como factor de transcripción induciendo la expresión de proteínas supresoras de la señalización por citoquinas-3 (SOCS-3). Tanto la infección con T. cruzi como IL-10 inducen fosforilación de STAT3 y la expresión del ARNm de SOCS-3. El silenciamiento de la expresión de esta proteína mediante ARN de interferencia (siARNSOCS- 3) pone en evidencia la participación de la vía STAT3/SOCS-3 en los efectos ejercidos por IL-10. El conocimiento más profundo sobre el papel de ligandos de PPARγ y de IL-10 podría ser de gran utilidad para formular estrategias alternativas o coadyuvantes de la terapéutica clásica en la infección por T. cruzi.

Abstract:
In the acute phase of Chagas disease, T. cruzi infection produces an intense inflammatory response in different tissues including the heart where cardiomyocytes are an important target. Although the inflammatory reaction is important for the initial control of the infection, an imbalance or poor resolution can generate damage and impaired cardiac function. Cardiac cells respond to infection by the expression of inflammatory enzymes like nitric oxide synthase 2 (NOS2) and metalloproteases (MMPs) and cytokines such as TNF- α and IL-6. This response is mediated by the activation of nuclear factor-кB (NF-кB) and extracellular signal-regulated kinases-mitogen-activated protein kinase (ERK1/2-MAPK) pathways, whose participation is essential in inflammatory processes. Peroxisome proliferator-activated receptors γ (PPARγ) are ligand-dependent transcription factors that have been implicated in the regulation of lipid metabolism and inflammatory processes. In this study we evaluated the contribution of 15-deoxy-Δ12,14-prostaglandin J2 (15dPGJ2), natural PPARγ ligand, and the antiinflamatory cytokine IL-10 in primary cultures of neonatal mouse cardiomyocytes infected with the lethal pantropic/reticulotropic T. cruzi strain (RA). The obtained results show that 15dPGJ2 is able to inhibit the expression and activity of different inflammatory enzymes such as NOS2, MMP-9 and MMP-2 as well as the proinflammatory cytokines TNF-α and IL-6 induced by T. cruzi infection. 15dPGJ2 antiinflammatory effects involve participation of PPARγ-dependent and - independent mechanisms. PPARγ contribution in 15dPGJ2 effects was confirmed by silencing PPARγ expression with small interfering RNA (PPARγ-siRNA). On the other hand, the use of specific ERK1/2 and NF-кB pharmacological inhibitors demonstrated that 15dPGJ2 can also exert its effects through these pathways. IL-10 is one of the most important antiinflammatory cytokines and has been originally identified as a cytokine synthesis inhibitor factor and modulator of certain functions associated with macrophages and/or monocytes activation. This work describes that exogenous addition of IL-10 inhibits ERK1/2 and NF-кB activation and reduces NOS2, MMP-9 and MMP-2 expression and activities as well as TNF-α and IL-6 expression after T. cruzi infection. IL-10 signaling through its receptor promotes STAT3 phosphorylation, which acts as a transcription factor inducing the expression of suppressor of cytokine signaling-3 (SOCS- 3). Both T. cruzi infection and IL-10 treatment promote STAT3 phosphorylation and SOCS- 3 mRNA expression. SOCS-3 silencing with small interfering RNA (SOCS-3-siRNA) reveals STAT3/SOCS-3 signaling participation in IL-10 effects. A better understanding of the role exerted by PPARγ ligands and IL-10 could be useful in finding new or alternative strategies which could replace the classic parasiticidal therapeutic in T. cruzi infection.

Hernández, Silvia Fátima. "Regulación de la luteólisis funcional y estructural. Rol de la esfingosina 1-fosfato (S1P) y del sistema Notch" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El primer capítulo de esta tesis se diseñó con el objetivo de estudiar si la administración local de S1P en el ovario de ratas preñadas bloquea efectivamente la luteólisis inducida por prostaglandina F2 alfa (PGF2α). Se utilizaron ratas preñadas en el día 19 de la gestación a las cuales se les administró en forma local S1P o su vehículo y dos horas después una dosis luteolítica de PGF2α. Los animales se sacrificaron a las 0, 4 y 36 hs de la PGF2α. Se midió la actividad de las caspasas que contribuyen a los eventos iniciales (caspasa -2, -8 y -9) y finales (caspasa-3) de la apoptosis en grupos de CLs de cada animal. Se evaluó también la expresión de las formas fosforiladas de AKT y ERK y los niveles del factor de necrosis tumoral alfa (TNF- α) mediante la técnica de ELISA. Además se estudió la muerte celular por la técnica de ME y TUNEL y la funcionalidad luteal midiendo como parámetro la progesterona (P4) luteal. La actividad de la caspasas -2, -3 y -8 aumentó significativamente a las 4 horas de la inyección de PGF2α, no así la actividad de caspasa -9. Además aumentó el número de células apoptóticas. De forma contraria la expresión de pAKT y TNF-α y el contenido de P4 luteal disminuyó considerablemente. El tratamiento con S1P pudo prevenir el incremento en la actividad de las caspasas -2, -8 y -3 inducido por PGF2α, redujo el número de células apoptóticas, restauró la funcionalidad luteal y aumentó la expresión de pAKT, pERK y TNF-α. El tratamiento con PGF2α incrementó el número de células luteales con signos avanzados de apoptosis, (por ejemplo: fragmentación nuclear, condensación de la cromatina y la presencia de cuerpos apoptóticos) a las 36 horas de la PGF2α. En cambio S1P pudo suprimir estos efectos y además aumentó la densidad vascular en los CL. Estos resultados demuestran, por primera vez, que la administración in vivo de S1P es capaz de bloquear la acción luteolítica de la PGF2α en ratas preñadas. El segundo capítulo de esta tesis se diseñó con el objetivo de estudiar la expresión y la localización celular de los receptores Notch1, Notch4 y el ligando Dll4 en CL de ratas durante la gestación y la luteólisis inducida por PGF2α. También estudiamos el contenido de P4 sérica y de proteínas luteales relacionadas a la apoptosis luego de la administración local de un inhibidor de esta vía llamado DAPT (N- -S-phenylglycine t-butyl ester). Se detectó marca específica de los receptores NOTCH1 y 4 principalmente en las células luteales grandes y pequeñas. Además la inmunomarcación fue evidente en los núcleos de las células luteales, de forma coincidente con el hecho de que el dominio intracelular de Notch (NICD) una vez activo se transloca al núcleo. Además, se detectó marca citoplasmática difusa para DLL4 en las células luteales grandes y pequeñas, coincidiendo con el hecho de que Dll4 se somete a la degradación proteolítica después de unión al receptor. La expresión del ARNm de Notch1, Notch4 y Dll4 en CL aislados en el día 19 de preñez se redujo significativamente después de la administración de PGF2α. En forma coincidente, la PGF2α disminuyó el fragmento activo de los receptores NOTCH1 y 4, por el contrario, no se detectaron cambios significativos en los niveles proteicos del ligando DLL4. La administración intraovárica de DAPT disminuyó los niveles séricos de P4, aumentó los niveles del fragmento activo de la caspasa-3 y la relación BAX: BCL2 24 horas después del tratamiento. También se demostró que la inhibición in vitro de la síntesis de P4 en CL de ratas preñadas con aminoglutetimida (inhibidor específico de la enzima P450scc) disminuyó el contenido proteico de NOTCH1, pAKT, y pERK. Sin embargo no se observaron diferencias significativas en los niveles proteicos de NOTCH4 y el factor de transcripción HES1. Estos resultados respaldan el rol luteotrópico de la vía de señalización de Notch para promover la viabilidad celular y la esteroidogénesis luteal, y sugieren que la hormona luteolítica PGF2α puede actuar, en parte, disminuyendo la expresión de algunos miembros del sistema Notch.

Abstract:
The first chapter of this thesis was designed to study if local administration of the antiapoptotic agent sphingosine 1-phosphate (S1P) to pregnant rats effectively blocks the luteolytic action of prostaglandin F-2alpha (PGF2α). On day 19 of pregnancy, 2 hr before systemic PGF2α administration, rats were injected intrabursa with either S1P or vehicle and euthanized at 0, 4 and 36 hr after PGF2α injection. The activity of four caspases, which contribute to the initial (caspase-2, -8, and - 9) and final (caspase-3) events in apoptosis was measured. The expression of the phosphorylated form of AKT (pAKT), ERK (pERK) and tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) was analyzed by ELISA. In addition, cell death was evaluated by TUNEL technique and electronic microscopy. We also examined luteal progesterone. The activity of caspase-2, -3, and -8 was significantly greater by 4 hr after PGF2α, but not the caspase-9 activity and the number of apoptotic cells in CL was higher. In contrast, expression of pAKT and TNF-α decreased significantly. Administration of S1P suppressed these effects, decreasing caspase activities and increasing pAKT, pERK and TNF-α expression. The administration of S1P also significantly decreased the percentage of luteal apoptotic cells induced by PGF2α. PGF2α treatment increased the prevalence of luteal cells with advanced signs of apoptosis (i.e., multiple nuclear fragments, chromatin condensation, or apoptotic bodies). S1P treatment suppressed these changes and increased the blood vessel density. These results suggest for the first time that S1P blocks the luteolytic effect of the PGF2α in pregnant rats. The second chapter of this thesis was designed to investigate the expression and cell localization of NOTCH1, NOTCH4, and the delta-like ligand DLL4 in corpus luteum (CL) from rats during pregnancy and PGF2α-induced luteolysis. We also examined serum progesterone (P4) and CL proteins related to apoptosis after local administration of the Notch inhibitor N--S-phenylglycine t-butyl ester (DAPT). Specific staining for NOTCH1 and NOTCH4 receptors was detected predominantly in large and small luteal cells. Furthermore, in line with the fact that the notch intracellular domain (NICD) is translocated to the nucleus, where it regulates gene expression, staining was evident in the nuclei of luteal cells. In addition, we detected diffuse cytoplasmic immunostaining for DLL4 in small and large luteal cells, in accordance with the fact that DLL4 undergoes proteolytic degradation after receptor binding. The mRNA expression of Notch1, Notch4, and Dll4 in CL isolated on Day 19 of pregnancy decreased significantly after administration of PGF2α. Consistent with the mRNA results, administration of PGF2α to pregnant rats on Day 19 of pregnancy decreased the protein fragment corresponding to the cleaved forms of NOTCH1/4 CL receptors. In contrast, no significant changes were detected in protein levels for the ligand DLL4. The local intrabursal administration of DAPT decreased serum P4 levels and increased luteal levels of active caspase 3 and the BAX:BCL2 ratio 24 hr after the treatment. In addition we demonstrated that in vitro treatment of pregnat rat CL with aminoglutethimide (blocker of cytochrome P450scc), decreased luteal levels of NOTCH1, pAKT and pERK. In contrast, no significant changes were detected in protein levels for the receptor NOTCH4 and the transcriptional factor HES1. These results support a luteotropic role for Notch signaling to promote luteal cell viability and steroidogenesis, and they suggest that the luteolytic hormone PGF2α may act in part by reducing the expression of some Notch system members.

Hepp, Yanil. "Caracterización del receptor de glutamato tipo NMDA en el cangrejo Neohelice granulata y estudio de su rol en procesos de aprendizaje y memoria" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis se estudió la localización y dinámica de receptores glutamatérgicos tipo NMDA (NMDARs), y su relación con la memoria, en el cangrejo Neohelice granulata. Se realizó un esquema neuroanatómico de su sistema nervioso central (SNC), y se diseñaron mapas detallados de neuropilos y clusters neuronales del cerebro. Se evaluó la presencia y localización de NMDARs, realizando técnicas inmunohistoquímicas y ensayos de Western blot. Se demostró que están ampliamente distribuidos, compuestos por subunidades tipo NR1 y NR2, y con distribución similar a proteínas de anclaje tipo PSD95. Se desarrolló un sistema estereotáxico, para realizar microinyecciones en áreas específicas del SNC, corroborándose con esta técnica el efecto del ácido iboténico sobre de los NMDARs. Luego se estudió la dinámica de NMDARs (tráfico) asociada a procesos mnésicos, demostrando cambios en la proporción entre receptores vesiculizados e insertos en membrana celular, después de un entrenamiento que genera una memoria de largo término. Al evocar esta memoria los cambios correlacionan con el grado de variación de respuesta de los animales durante el entrenamiento. Estos resultados sugieren la participación de NMDARs en procesos mnésicos en este modelo, permitiendo establecer comparaciones con otras especies, y posibilitando el posterior análisis del tráfico de estos receptores en otras fases de la memoria.

Abstract:
This thesis studied the localization and dynamic of NMDA-like glutamate receptors (NMDARs), and their role in long term memory in the crab Neohelice granulata. A detailed neuroanatomic description of the central nervous system (CNS) was performed, as well as maps of neuronal clusters and neuropils. The presence and localization of these NMDA-like receptors were evaluated in the CNS by inmunohistochemitry and Western blot techniques. We found a NMDARs broad distribution, constituted by NR1- and NR2-like subunits, with a pattern similar to the one found for PSD95 scaffold proteins. A stereotaxtic device was developed in order to make microinjections in specific areas of the CNS, confirming with this technique the ibotenic acid effect on the NMDARs. Afterwards, the receptor’s dynamic (traffic) was studied in relation to mnesic processes. Changes in the proportion between vesiculized and membrane receptors were seen after a training that induces long term memory. After retrieval this change correlates with the degree of variation in the animal response. These results suggest the NMDARs participation in mnesic processes in this model, allow comparisons between species, and encourage future analysis of receptor’s traffic in other memory phases.

Heer, Angeles. "Análisis estructural y conformacional de E6*I, un producto de procesamiento alternativo derivado de la oncoproteína E6 de HPV16" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las proteínas E6 de papilomavirus humano de alto riesgo participan en la progresión tumoral, mayoritariamente por su habilidad de promover la degradación de p53. Los transcriptos de HPV muestran un patrón de procesamiento complejo, donde E6*I es el transcripto más abundante en HPV de alto riesgo, correspondiendo en secuencia de aminoácidos a los primeros 50 aminoácidos de E6. Actualmente, no hay información estructural o bioquímica de este polipéptido que contiene la mitad del primer motivo de unión a Zn de E6, debido a la dificultad de obtener una estructura compacta y monomérica en tan pequeño polipéptido. En este trabajo se muestra que E6*I de HPV16 puede plegarse en oligómeros con alto contenido de hélice-α o láminas-β a pH 7.5 y 5.0 respectivamente, en ausencia de Zn. Los oligómeros-β son altamente estables y no se ven afectados por la presencia de Zn, mientras que los oligómeros-α tienden rápidamente a agregar, evitando esto la presencia de Zn. Dos moléculas de E6*I unen una molécula de Zn, sugiriendo una coordinación tetraédrica de alta afinidad (KD < 10⁻¹² M), que resulta en un dímero de E6*I mediado por Zn con significativa estructura secundaria. Previamente se encontraron en el citosol de líneas celulares transformadas por HPV oligómeros endógenos de E6, y nosotros proponemos que las características determinantes de esta agregación se encuentran dentro de E6*I. Los efectos reportados de E6*I están asociados a la regulación negativa de la proteína E6, y la relación entre ambas especies modula la degradación de p53 y otras cascadas de señalización de apoptosis. En este trabajo, demostramos la interacción directa y específica entre las proteínas E6 y E6*I de HPV16. La abundancia en la célula de E6*I con una naturaleza “camaleón” correlaciona con la plasticidad para unir blancos celulares, y su destino está asociado a un balance entre los niveles de proteína, la disponibilidad de Zn, el potencial redox y la oligomerización. Este pequeño pero complejo polipéptido está asociado a un efecto más que a una función de un producto viral que, cuando se encuentra en altas concentraciones, puede directa o indirectamente afectar varios procesos celulares.

Abstract:
High-risk human papillomavirus E6 participates in tumorigenic progression, mainly by its ability to promote p53 degradation. HPV transcripts show a complex splicing pattern, where E6*I is the most abundant transcript in high-risk HPV types, comprising the first 50 amino acids of E6. No structural or biochemical information of this polypeptide, which contains half of the first zinc binding motif of E6, is available, due to the difficulty to acquire a compact monomeric fold in such a small polypeptide. We show that HPV16-E6*I can fold into either a-helix or ß-sheet large oligomers at pH 7.5 and 5.0, respectively, in the absence of zinc. The ß-sheet oligomers are highly stable and unaffected by the presence of zinc, while the a-helix oligomers tend to rapidly form aggregates, prevented by the presence of the metal. Two E6*I molecules bind per atom of zinc, suggesting a tetrahedral, high affinity arrangement (KD< 10⁻¹² M), which results in a zinc mediated E6* dimer with significant secondary structure. Endogenous E6 oligomers were previously found in the cytosol of high-risk HPV transformed cell lines, and we propose that the oligomerization determinant resides within E6*I. E6*I effects were reported to counteract those of E6 in cells, and the ratio between these two species modulates p53 degradation and other apoptosis dependent signaling cascades. In the present work, we show a direct and specific interaction between HPV16 E6 and E6*I. A residue of an evolved splicing event related to regulation of oncogene expression in HPV or a splicing event resulting from the selection of a small deleterious viral polypeptide, the abundant existence of E6*I with a “chameleon” nature correlates with target plasticity, and its fate is linked to a balance between protein levels, zinc availability, redox potential, and oligomerization. In addition, the results presented here have strong implications for zinc binding sites in nascent polypeptides. This evolved promiscuous folder speaks of effect rather than function of a viral product that, when highly increased, can directly or indirectly affect various cellular processes leading to cell deregulation and tumorigenesis.

Haddad, Julián. "Topología y geometría aplicada al estudio de algunas ecuaciones diferenciales de segundo orden" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Guerrero, Leandro Demián. "Comunidades bacterianas en suelos bajo siembra directa en la región agropecuaria pampeana. Influencia del manejo y propuesta de nuevos indicadores biológicos" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los suelos son considerados uno de los ambientes más diversos y heterogéneos que se conocen. En ellos se producen innumerables procesos que permiten el reciclado y transformación de sustancias esenciales para la vida de plantas y animales. La mayoría de estos procesos son realizados por bacterias, y se ven afectados por distintos factores en el ambiente. Una de las principales causas que modifican estos ecosistemas es la producción agrícola. En los últimos tiempos el desarrollo de nuevas tecnologías, como la siembra directa podrían atenuar parcialmente el impacto de esta explotación. Sin embargo, el uso sustentable implica también la aplicación de prácticas de manejo, que incluyen rotaciones de cultivos, reposición de nutrientes y manejo integral de plagas. En este trabajo estudiamos la composición y dinámica de las comunidades de bacterias bajo prácticas contrastantes en siembra directa, con los objetivos de determinar de qué manera las prácticas agrícolas impactan sobre el suelo, y encontrar variaciones en las comunidades que puedan servir como indicadores de biológicos de calidad del suelo. Para el estudio se analizaron ambientes naturales y dos tratamientos de siembra directa que difieren principalmente en el régimen de rotación de cultivos, y otras características que los separan en Buenas y Malas prácticas agrícolas. Se tomaron datos de cuatro localidades diferentes de la región que abarca desde la provincia de Córdoba hasta Entre Ríos durante un periodo de dos años. Mediante la utilización de herramientas moleculares encontramos que las diferencias entre los distintos ambientes a nivel de las comunidades de bacterias y los taxones mayoritarios se ven influenciadas en primer lugar por las diferencias geográficas y en menor medida por los efectos del uso del suelo. A medida que aumentamos el nivel de resolución taxonómica encontramos que existen diferencias para determinados grupos que pueden separar las Buenas de las Malas prácticas. El número de bacterias pertenecientes al grupo de Acidobacteria Gp1 y al género Rubellimicrobium varían de forma dependiente de los tratamientos, por lo cual son potenciales candidatos como indicadores de calidad de suelos. Para esto proponemos la confección de un índice calculado como el cociente entre la proporción de bacterias de cada grupo encontradas en la muestra (Acidobacteria Gp1/Rubellimicrobium), respecto del número encontrado en un ambiente natural próximo.

Abstract:
The soil is considered one of the most diverse and heterogeneous environments. They produce many processes that enable the recycling and transformation of substances essential for plant life and animals. Most of these processes are performed by bacteria, and are affected by different factors in the environment. One of the main causes that modify these ecosystems is agricultural production. The recent development of new technologies, such as no-till crop could reduce the impact of this exploitation. However, the sustainable use also involves the implementation of management practices, including crop rotations, nutrient replenishment and integrated pest management. In this work we have studied the composition and dynamics of bacterial communities under contrasting no-till crop systems in order to determine how impacts on soil, and to find variations in the communities that can serve as biological indicators of soil quality. For the study, two tillage treatments that differ mainly in the rotation regime and other features that separate into good and poor agricultural practices were analyzed. Data were collected from four different locations in the region from the province of Cordoba to Entre Rios for a period of two years. Using molecular tools we found that the differences between the different environments at the level of bacterial communities and major taxa, are influenced primarily by geographic differences and in lesser extent by the effects of land use. As we increased the level of taxonomic resolution, we found that there were differences for certain groups that can separate good from poor practices. The number of bacteria belonging to the Acidobacteria Gp1 group and the genus Rubellimicrobium varied depending on the treatments, suggesting that they could be potential candidates indicators of soil quality. To this end we propose the confection of an index calculated as the ratio (Acidobacteria Gp1/Rubellimicrobium) between the proportion of each group of bacteria found in the sample and the number found in a nearby grassland soil.

Graziano, Martín. "Mecanismos cerebrales implicados en el flujo de información de breves estímulos sensoriales a la conciencia y memoria de trabajo" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El estudio de la conciencia y la arquitectura cognitiva subyacente a este fenómeno es motivo de amplia discusión y debate dentro de la neurociencia en las últimas décadas, gracias a los avances logrados sobre todo en el campo del procesamiento visual. El trabajo desarrollado en esta tesis se encuentra enmarcado dentro del estudio de los aspectos cognitivos y neurofisiológicos de procesos que involucran tareas de decisión perceptual, en particular, el acceso de la información sensorial a procesos cognitivos posteriores tales como la memoria de trabajo, la conciencia y el reporte subjetivo. Hemos desarrollado y profundizado el estudio de un paradigma de reporte parcial asociado a una respuesta subjetiva y analizado la relación existente entre la respuesta objetiva y la respuesta subjetiva. A partir de las propiedades temporales y espaciales encontradas y del análisis de los errores, observamos un efecto de aprendizaje perceptual en el acceso a la memoria icónica, una restricción atencional al acceso y mantenimiento de la información en memoria icónica, y un decaimiento de la información geométrica similar a la dinámica de la misma. Adicionalmente, encontramos una respuesta subjetiva robusta y bajo ciertas condiciones desacoplada de la respuesta objetiva. A su vez, gracias a la evidencia acumulada en los trabajos precedentes, evaluamos los correlatos neurofisiológicos del reporte subjetivo, independientemente de la respuesta objetiva, mediante la utilización de electroencefalografía de alta densidad (EEG), y alteraciones en el flujo de información en pacientes con lesiones frontales y pacientes con Trastorno Bipolar. Encontramos marcadas evidencias respecto a la participación de áreas pre-frontales, de la corteza cingulada y la corteza parietal en la generación del reporte subjetivo, en favor de un modelo global de acceso a conciencia que involucra la participación e integración de la información de áreas sensoriales por parte de regiones de la corteza pre-frontal y del cingulado anterior. Encontramos también evidencia de un proceso de acumulación involucrado en la generación de la confianza subjetiva. Desarrollamos en paralelo un paradigma de decisión perceptual con respuesta continua en donde logramos seguir en tiempo real el acceso de la información sensorial a la toma de decisiones, dividiendo este evento en secuencias discretas cuya duración y número covarían con la dificultad de la tarea. En este sentido, creemos que los resultados obtenidos en esta Tesis son un avance en el entendimiento de la dinámica de los procesos cognitivos, el acceso conciente y la generación de estados mentales subjetivos.

Abstract:
The study of consciousness and the underlying cognitive arquitecture is a matter of intense discussion within the field of neuroscience in the last decades due to advances especially in the field of visual processing. The work presented in this Doctoral Thesis is framed within the study of the cognitive and neurophisiological processes involved in perceptual decision tasks, in particular, the access of sensory information to subsequent cognitive processes such as working memory, consciousness and subjective report. We have developed and deepened in the study of a partial report paradigm associated with a subjective response and analyzed the relationship between the objective and subjective measures. From the temporal and spatial properties found in the paradigm and the analysis of the errors in the task, we observe a perceptual learning effect in the access to iconic memory storage, an atenttional constrain to the access and mainteinance in iconic memory, and a decay of the geometrical information with similar dynamics of the fading of this memory. Additionally, we found a strong subjective response and partially decoupled of the objective response. In turn, thanks to the evidence accumulated previously, we evaluate through high density electroencephalography (EEG) the neurophysiological correlates of subjective report (regardless of the objective response) and alterations in the flow of information in patients with frontal lesions and patients with bipolar disorder. We found marked evidence regarding the involvement of pre-frontal, parietal and anteior cingulate cortex in subjective report generation in favor of a model of global access to consciousness that involves the participation of higher areas and the integration of information from sensory areas in pre-frontal and anterior cingulate regions. Also, we found evidence for an accumulation process involved in the generation of subjective confidence. We developed in parallel a perceptual decision paradigm with a continuous space of response in which we were able to follow in real-time the access of sensory information to the decision-making system, parsing the trayectory of the decision into a discrete sequence of stops whose length and number covaried with the difficulty of the task. We think that the results obtained in this thesis are an advance in the understanding of the dynamics of cognitive processes, consciouss access and the generation of subjective mental states.

González Silva, María Laura. "Identificación de jets con hadrones b producidos por desdoblamiento de gluones con el detector ATLAS" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis se presenta un estudio de la subestructura de jets que contienen hadrones b con el propósito de distinguir entre jets-b genuinos, donde el quark b se origina a nivel de elemento de matriz (por ejemplo, en decaimientos de top, W, o Higgs) y jets-b producidos en la lluvia partónica de QCD, por el desdoblamiento de un gluón en un quark y un antiquark b cercanos entre sí. La posibilidad de rechazar jets-b producidos por gluones es importante para reducir el fondo de QCD en análisis de física dentro del Modelo Estándar, y en la búsqueda de canales de nueva física que involucran quarks b en el estado final. A tal efecto, se diseñó una técnica de separación que explota las diferencias cinemáticas y topológicas entre ambos tipos de jets-b. Esta se basa en observables sensibles a la estructura interna de los jets, construídos a partir de trazas asociadas a éstos y combinados en un análisis de multivariable. En eventos simulados, el algoritmo rechaza 95% (50%) de jets con dos hadrones b mientras que retiene el 50% (90%) de los jets-b genuinos, aunque los valores exactos dependen de pT , el momento transverso del jet. El método desarrollado se aplica para medir la fracción de jets con dos hadrones b en función del pT del jet, con 4,7 fb¹ de datos de colisiones pp a √s= 7 TeV, recogidos por el experimento ATLAS en el Gran Colisionador de Hadrones en 2011.

Abstract:
This thesis presents a study of the substructure of jets containing bhadrons with the purpose of distinguishing between “single” b-jets, where the b-quark originates at the matrix-element level of a physical process (e.g. top, W or Higgs decay) and “merged” b-jets, produced in the parton shower QCD splitting of a gluon into a collimated b quark-antiquark pair. The ability to reject b-jets from gluon splitting is important to reduce the QCD background in Standard Model analyses and in new physics searches that rely on b-quarks in the final state. A separation technique has been designed that exploits the kinematic and topological differences between both kinds of b-jets using track-based jet shape and jet substructure variables combined in a multivariate likelihood analysis. In simulated events, the algorithm rejects 95% (50%) of merged b-jets while retaining 50% (90%) of the single b-jets, although the exact values depend on pT , the jet transverse momentum. The method developed is applied to measure the fraction of double b-hadron jets as a function of jet pT , using 4.7 fb‾¹ of pp collision data at √s = 7 TeV collected by the ATLAS experiment at the Large Hadron Collider in 2011.

González, Rodrigo Matías. "Regulación epigenética de la familia de genes Asr en tomate (Solanum lycopersicum)" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el presente trabajo, se estudió la epigenética asociada al estrés por falta de agua en dos genes de tomate (Asr1 y Asr2), que pertenecen a una familia génica involucrada en la tolerancia a distintos estreses abióticos. Se analizó la región codificante del gen Asr1 en hojas y se detectó la presencia de metilación en todos los contextos: CG, CNG y CNN. Al someter las plantas a estrés hídrico, se observó un ligero aumento de la metilación en contexto CG y una marcada disminución en la metilación asimétrica (CNN). También se detectó, en histonas, una marca represiva de la expresión: H3K27me3, la cual disminuyó como consecuencia del estrés impuesto. Concomitantemente, se registró un marcado aumento en el nivel de transcripto de Asr1. También se analizaron las regiones regulatoria y codificante de Asr2 en raíces. En este sistema, se hallaron elevados niveles de metilación en citosinas en todos los contextos sobre la región regulatoria, registrándose una ligera disminución en la metilación asimétrica como consecuencia del estrés impuesto. En cambio, sobre la región codificante sólo se halló metilación CG, la cual no varió como consecuencia del estrés. Sólo se detectó la marca represiva H3K27me3 sobre una región ubicada 800 pb río arriba del gen, permaneciendo la misma invariable al aplicar el estrés. Estos hallazgos fueron concomitantes con una disminución generalizada de la transcripción, manteniéndose casi constantes los niveles de transcripto de Asr2.

Abstract:
In this work, we studied the epigenetics associated with water stress in two tomato genes (Asr1 and Asr2), belonging to a gene family involved in tolerance to various types of abiotic stress. The Asr1 gene coding region in leaves was analyzed. The presence of methylation in all contexts (CG, CNG and CNN) was detected. When subjecting plants to water stress, a slight increase in methylation in CG context and a marked decrease in asymmetric methylation (CNN) were observed. An expressionrepressive histone mark was also detected: H3K27me3, which decreased as a result of the stress imposed. Concomitantly, a marked increase in the level of Asr1 transcript was registered. The regulatory and coding regions of Asr2 in roots were analyzed as well. In this system, high levels of cytosine methylation in all contexts were found on the regulatory region and a slight decrease in asymmetric methylation due to the stress imposed was recorded. By contrast, on the coding region, only stress-independent CG methylation was found. Only the repressive H3K27me3 mark on a region located 800 bp upstream of the gene was registered, remaining unchanged when the same stress was applied. These findings were concomitant with a general decrease in transcription, remaining the Asr2 transcript levels almost constant.

Gómez, Maximiliano. "Desarrollo de caña de azúcar transgénica resistente al Sugarcane mosaic virus (SCMV) y al Sorghum mosaic virus (SrMV) por silenciamiento génico" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El desarrollo de plantas transgénicas que explotan el mecanismo de silenciamiento génico contra los virus causales del mosaico (SCMV y SrMV) representa una interesante estrategia alternativa a los métodos de mejoramiento genético clásico. Sin embargo hasta el momento dichas estrategias han sido implementadas en base al conocimiento de unas pocas secuencias virales, lo que incrementa la posibilidad de que la resistencia sea quebrada por variantes poco frecuentes del virus. Se desarrolló un protocolo simple, rápido y económico diseñado para obtener secuencias virales a partir de un gran número de hojas de caña sintomáticas. Utilizando dicho protocolo se analizó la estructura poblacional de los virus causales del mosaico de la caña de azúcar en la Argentina y las áreas cañeras limítrofes de Bolivia, Uruguay y Paraguay, incluyendo 103 sitios de muestreo. Se analizaron 567 muestras sintomáticas por RT-PCR (pertenecientes a 104 genotipos de caña de azúcar) amplificando un fragmento del gen de la proteína de cápside del SCMV y del SrMV con iniciadores reportados en la literatura. Los productos de amplificación fueron secuenciados directamente. El análisis de las secuencias virales determinó que el principal agente causal de mosaico en la región es el SCMV, presente en 94% de las muestras. El SrMV estaba presente en solo 2,8% de las muestras, con bajos porcentajes de coinfección de los dos virus (0,5%). Las secuencias fueron analizadas filogenéticamente y clasificadas en cuatro grupos virales utilizando un valor de corte de 0,91 de identidad de secuencia, con un nuevo grupo viral (W) propuesto dentro de la clasificación del SCMV reportada en la literatura. Se diseñó un transgén de resistencia para desencadenar el silenciamiento génico contra todas las variantes virales encontradas en el muestreo realizado. Se seleccionaron tres fragmentos del genoma viral evolutivamente conservados: parte del gen P3 (función probables de anclaje a membrana del complejo de replicación) y dos fragmentos no homólogos del gen de la proteína de cápside, para ser clonados en direcciones opuestas a ambos lados de un intrón (construcción tipo horquilla), bajo la dirección del promotor del gen de la ubiquitina de maíz. Se obtuvieron plantas transgénicas de cinco variedades de caña de azúcar de interés comercial y fueron desafiadas con el SCMV en un ensayo de inoculación artificial en invernáculo y en un ensayo a campo bajo condiciones naturales de infección en la Chacra Experimental (provincia de Salta). Resultados preliminares indican la ocurrencia de eventos resistentes a la infección con mosaico de cuatro variedades de caña. El análisis molecular de un grupo de eventos es consistente con una resistencia mediada por silenciamiento génico. Se planea la realización de ensayos a campo para confirmar el fenotipo de resistencia a mosaico e identificar eventos que conserven las características agronómicas del genotipo transformado.

Abstract:
Attractive alternatives to traditional resistance breeding in sugarcane against sugarcane and sorghum mosaic virus (SCMV and SrMV, respectively), both causal agents of mosaic disease, have derived from transgenic approaches exploiting gene silencing. Such approaches, however, have been implemented based upon relatively few available virus sequences, therefore it is possible that infrequent variants escape gene silencing and break resistance. We developed a simple, fast and economic protocol designed to obtain viral sequences from a large set of symptomatic sugarcane leaf samples. Using this protocol, we estimated the population structure of potyviruses causing sugarcane mosaic disease throughout the sugarcane growing area of Argentina and neighboring regions in Bolivia, Uruguay and Paraguay by analyzing sugarcane leaf samples showing mosaic symptoms from 103 locations, including commercial and experimental fields. A set of 567 samples from 104 sugarcane genotypes were extracted and analyzed for the presence of a genomic fragment including most of the SCMV and SrMV coat protein coding regions by RT-PCR using reported sets of primers. PCR products were directly sequenced using the same amplification primers. Sequence analysis demonstrated that SCMV is the predominant mosaic virus infecting sugarcane in the region, and is present in 94% of the samples. SrMV was present only in 2.8% of samples, with low (0.5%) coinfection rates. Sequences were subject to phylogenetic analysis and classified into four viral groups using a 0.91 nucleotide identity cutoff, and a new group (W) was proposed to be included in the SCMV classification previously reported. A resistance transgene was designed to trigger silencing mediated resistance against all virus variants found in the large scale survey. Three viral fragments: a P3 gene fragment and two nonoverlapping fragments from the coat protein gene, were cloned in opposite directions separated by an intron in a hairpin construct, and placed under the maize UBI promoter. Transgenic sugarcane plants belonging to 5 varieties were obtained and putative events were tested in the greenhouse with artificial inoculation and in a field trial at Chacra Experimental (Salta province) under natural infection conditions. Preliminary results indicate the occurrence of events from four sugarcane varieties that are resistant to mosaic infection. Preliminary molecular analysis are consistent with a resistance mechanism mediated by gene silencing. Further analysis are needed to identify resistant events that have a good agronomic performance as well.

Germano, Mónica Daniela. "Herencia y efectos demográficos de la resistencia a deltametrina en Triatoma infestans" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Triatoma infestans es un insecto de alta importancia sanitaria en Latinoamérica debido a su rol como vector de la enfermedad de Chagas. Este insecto es controlado mediante el rociado de las viviendas con insecticidas. A partir de las década de 1980, las medidas de control se focalizaron en el uso de la deltametrina, un insecticida de alta efectividad triatomicida y baja toxicidad en humanos. Sin embargo, a fines de la década de 1990 se detectaron fallas de control que fueron correlacionadas con una disminución de la efectividad del compuesto en las poblaciones de insectos. El desarrollo de resistencia a deltametrina fue detectado en diferentes localidades de Argentina y Bolivia, y durante los primeros años de la década 2000 ha sido causal de la disminución de la efectividad de los rociados con deltametrina. En este trabajo de tesis se determinó el alcance de la zona resistente en las provincias de Salta, Santiago del Estero y Chaco. Se evaluaron distintas localidades en cada provincia y se demostró que existen poblaciones de vinchucas con alto y mediano grado de resistencia, como así también prevalecen las áreas con T. infestans susceptibles a la deltametrina. Con el fin de determinar la posible reversión de la resistencia a deltametrina, resultó de interés determinar el modo de herencia de la resistencia a deltametrina en T. infestans. Se condujeron cruzamientos recíprocos de insectos susceptibles y resistentes, y se evaluó el grado de resistencia en la descendencia. Se demostró que la resistencia a este insecticida se hereda de manera autosómica y semidominante, y que se trata de un carácter determinado por al menos un gen mayoritario. Además, se evaluó la respuesta a la deltametrina en generaciones sucesivas de T. infestans resistentes, y se determinó la estabilidad de esta característica en poblaciones de campo y laboratorio. Mediante el uso de bioensayos se determinó la toxicidad de la deltametrina en los distintos estadios de desarrollo de T. infestans. Este ensayo demostró que la cantidad de insecticida necesario para eliminar al cincuenta por ciento de los insectos de una población susceptible aumenta con el estadio, y que la ninfa V es el estadio más tolerante al tratamiento químico. Por otra parte, se verificó que la resistencia a la deltametrina se expresa en todos los estadios de desarrollo. Además, se verificó que la ninfa V representa el estadio más resistente al insecticida en estudio, en comparación con la cepa susceptible. La confección de una tabla de vida permitió determinar las variaciones en el ciclo de vida del vector, en relación a la expresión de la resistencia. La evaluación de la duración de los estadios permitió demostrar que existen diferencias significativas entre la duración de los estadios II, III y V de las cepas susceptible y resistente. La mayor contribución a las diferencias estuvo dada por la duración de la ninfa V, la que presentó una duración significativamente mayor en la cepa resistente. Estos resultados sugirieron que la ninfa V ocupa un lugar clave en la estructura de las poblaciones resistentes a insecticidas mediante un mecanismo doble de resistencia: un alto grado de resistencia toxicológica, y un posible comportamiento de letargo de desarrollo asociado al refugio de la aplicación de insecticida. Además, la estructura poblacional fue evaluada mediante la confección de una matriz poblacional de estadios para las cepas susceptible, resistente, y sus cruzas recíprocas. La proyección de esta matriz demostró una menor tasa reproductiva en las cepas resistentes, en relación a la susceptible. El análisis prospectivo y retrospectivo de los parámetros poblacionales demostró que la causa fundamental de las diferencias en la tasa de crecimiento está asociada a una importante disminución de la fecundidad de las hembras resistentes. Además, se detectó una fuerte contribución de la duración de la ninfa V en este estadio, posiblemente debido a su asociación directa con la muda al estadio reproductivo. Los resultados de este trabajo de tesis indican que la resistencia a la deltametrina está presente en las provincias de Salta y Chaco. Además, se demuestra que es posible el cruzamiento entre insectos de zonas distantes geográficamente, y que el cruzamiento entre insectos susceptibles y resistentes genera una disminución amplia del grado de resistencia. Sin embargo, se observa que existen diferencias reproductivas entre las poblaciones susceptibles y las resistentes a deltametrina. Estas diferencias podrían estar asociadas a la resistencia a deltametrina y manifestarse no sólo con una menor fecundidad, sino como un cambio en la estructura poblacional y las tasas de muda al estadio adulto.

Abstract:
T. infestans is an insect of sanitary importance due to its role in Chagas disease transmission in Latin America. This insect is currently controlled by the use of chemical compounds for house impregnation. Since 1980s, deltamethrin has been the main compound used for its control because of its high triatomicidal action and its low human toxicity. However, campaigns have started to decrease in success since the end of the 1990s, when the development of resistance started to affect its effectiveness in Argentina and Bolivia. In this thesis the spread of deltamethrin resistance was evaluated. It was determined that its range includes Salta and Chaco provinces, where both high and moderated levels of resistance were determined. However, no resistance to this compound was found in Santiago del Estero populations. With the aim of determining a possible reversion of resistance, the way that this character is inherited was evaluated by conducting reciprocal crosses between susceptible and resistant insects. This assay demonstrated that resistance to the insecticide is produced by at least one main gene, and that it is inherited semi‐dominantly. Also, it demonstrated that there are no mother effects affecting resistance. The evaluation of deltamethrin toxicity in successive generations of resistant field and laboratory populations showed that the levels of resistance are not reversed after several years without chemical treatment. Through the use of bioassays the doses necessary to treat each of development stage were evaluated. Lethal doses for eliminating fifty percent of susceptible insects were determined to increase with the age of the insect. Moreover, resistance was expressed in all of the development stages. In fact, both the most tolerant, and the most resistant stage was the fifth nymph. A life table analysis was performed. The length of each stage was determined, and compared between the susceptible and the resistant colonies, including progeny of reciprocal crosses. The length of each development stage was compared, and the result indicated that there are significant differences between the susceptible and resistant colonies, when considering the second, third, and fifth nymph. In particular, the fifth nymph represented the major contribution to the differences between the colonies. The fact that this stage was the most tolerant to deltamethrin and that it represented the major difference between the colonies suggested that it plays a major role in the development of resistance, through two possible mechanisms: the toxicological change in response, and an ecological response related to avoidance of insecticide and possible developmental delays. In addition, life table information was analyzed using a stage structured population model. The population matrix was projected in time and it was determined that the resistant population shows a smaller intrinsic rate of increase. This difference was also detected for the reciprocal crosses progeny, which suggested that the decrease in reproductive success was associated to resistance, although not strictly to the degree of resistance. Prospective and retrospective analysis established that the main cause for this decline in the rate of increase was a lower fecundity of the resistant colony. In addition, the delay in moulting detected for the fifth nymph represented an important contribution to the differences between the colonies, possibly related to the delay in entering the reproductive state. The results presented in this thesis show that deltamethrin resistance is present in Salta and Chaco provinces. Moreover, they demonstrate that insects from distant geographical areas can reproduce effectively, although the crossing of susceptible and resistant insects importantly decreases the level of resistance. On the other hand, it was demonstrated that susceptible and resistant T. infestans present differences in their reproductive output. These differences could be related to deltamethrin resistance and be expressed not only as a fecundity decrease but also as a change in the population structure and rates of moulting to the adult stage.

Gargiulo, Carolina Natalia. "Distribución y situación actual del cóndor andino (Vultur gryphus) en las sierras centrales de Argentina" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Vultur gryphus posee una amplia distribución en Sudamérica y si bien es una especie que ha sido estudiada desde las primeras décadas del Siglo XX, los estudios son aislados y se desarrollaron principalmente en los Andes, por lo que las Sierras Centrales de Argentina cuentan con menor cantidad de información sobre la especie. Si bien la creación de tres Parques Nacionales en la región significó un paso importante para la conservación del cóndor, dichas áreas protegidas también requieren contar con información. Debido a ello, los objetivos de esta tesis fueron: 1) analizar posibles cambios entre la distribución histórica y actual del cóndor andino en las provincias de Córdoba, San Luis y La Rioja. Para ello se obtuvo información sobre la presencia/mención de la especie en la región, la cual fue clasificada en datos históricos (topónimos, manifestaciones artísticas indígenas alusivas al cóndor y avistajes anteriores al Siglo XX) y datos actuales (avistajes ocurridos a partir del Siglo XX hasta el presente, dormideros y nidos), y mediante su superposición en un mapa se evaluó si se produjeron cambios; 2) determinar la abundancia de cóndores, la estructura de edades, el patrón de actividad y caracterizar el comportamiento de vuelo de la especie en tres dormideros comunales de los Parques Nacionales de dichas provincias (Quebrada del Condorito, Sierra de las Quijadas y Talampaya), mediante censos estacionales basados en observaciones directas de los ejemplares presentes (Condorito: 10 campañas entre 2006, 2009-2010; 835 censos; 48 días; Quijadas: 8 campañas entre 2008-2010; 830 censos; 36 días; Talampaya: 7 campañas entre 2009-2010; 668 censos, 32 días). Las estimaciones de abundancias se basaron en la obtención del número máximo de adultos e inmaduros; y 3) contribuir con información sobre la biología reproductiva del cóndor en estado silvestre mediante el monitoreo estacional de un nido en la Reserva Cerro Blanco, Córdoba (120 días y 586 horas de observación en 2008- 2012). En las tres provincias se observó que la distribución histórica del cóndor no se modificó respecto a la actual. Las abundancias máximas de cóndores en los tres Parques Nacionales (Condorito: 113; Quijadas: 36 y Talampaya: 11) fueron estables durante el estudio sin mostrar un patrón estacional marcado. En los tres dormideros hubo mayor cantidad de cóndores adultos que inmaduros, aunque dichas diferencias resultaron significativas únicamente en algunas estaciones en Condorito y Quijadas, por lo que la segregación espacial por edades no fue marcada. Los cóndores llegaron y salieron solitariamente en horas determinadas y rumbos fijos. En Condorito y Quijadas existieron sectores usados para dormir, caracterizados por presentar orientaciones que brindaron mayor protección contra los vientos predominantes, recibieron sol desde el amanecer y tuvieron máximas abundancias medias de cóndores al amanecer y anochecer con mínimos registros al medio día; por lo que posiblemente los individuos logren beneficios termorregulatorios. Talampaya fue un posadero ocasional utilizado anualmente por escasos ejemplares. En Cerro Blanco una pareja nidificó 4 años consecutivos (75% de éxito). La frecuencia de puesta anual es la mayor registrada para la especie, mientras que el período de dependencia fue menor del año siendo más breve respecto a otros sitios. La pareja participó igualmente en la incubación, pero el macho destinó más tiempo al cuidado y alimentación del pichón. Este estudio contribuye con información de referencia para las Sierras Centrales de Argentina, la cual servirá como herramienta de manejo y conservación de la especie en los Parques Nacionales involucrados y orientará futuras líneas de investigación en la región.

Abstract:
Vultur gryphus has a wide distribution in South America. While the species has been studied since the earliest decades of the 20th century, the contributions are isolated and have been conducted mainly in the Andes. Hence, information about the species for the Central Mountains of Argentina is scarce. Although the creation of three National Parks in the region was an important step for the conservation of the Andean condor, there is a need for information for those protected areas. Therefore, the aims of this thesis work were: 1) to analyze possible changes between the historical and the current distribution of the Andean condor in the provinces of Córdoba, San Luis and La Rioja. For that purpose, information about the presence/mention of the species in the region, which was classified into historical data (toponyms, aboriginal artistic expressions of the Andean condor and observations prior to the 20th century) and current data (observations made from the 20th century to the present, roosting sites and nests); changes were evaluated by overlapping those records on a map; 2) to determine the Andean condor abundance, age structure, and activity pattern, and to characterize their flight behavior in three communal roosts of the National Parks of those provinces (Quebrada del Condorito, Sierra de las Quijadas and Talampaya), by conducting seasonal censuses based on direct observations of the individuals present (Condorito: 10 surveys between 2006, 2009-2010; 835 censuses; 48 days; Quijadas: 8 surveys between 2008-2010; 830 censuses; 36 days; Talampaya: 7 surveys between 2009-2010; 668 censuses, 32 days). Abundance seasons were determined on the basis of the maximum number of adults and immature individuals obtained; and 3) to contribute with information on the reproductive biology of wild Andean condors by seasonally monitoring a nest in Cerro Blanco Reserve, Córdoba (120 days and 586 hours of observation between 2008-2012). Historical distribution of the Andean condor did not vary with respect to the current distribution in any of the three provinces. Maximum abundances of the Andean condor in the three National Parks (Condorito: 113; Quijadas: 36 and Talampaya: 11) were stable throughout the study period, without showing a marked seasonal pattern. A higher number of adults than of mature individuals were recorded in the three roosting sites, although those differences were significant only in some seasons in Condorito and Quijadas; hence, spatial segregation by age was not marked. Andean condors arrived and left individually at certain hours and with fixed orientation. In Condorito and Quijadas some sectors were used for roosting; those sectors were characterized by orientations that provided greater protection against prevailing winds, receiving sunlight since sunrise, and had marked mean abundances of Andean condors at sunrise and sunset, with minimum records at midday. Hence, individuals may obtain thermoregulatory benefits. Talampaya was an occasional perching site used by scarce individuals annually. In Cerro Blanco, a pair nested for 4 consecutive years (75% success). Annual egg-laying rate is the highest ever recorded for the species, whereas the dependence period was the lowest of the year, being briefer than at the other sites. The pair participated in incubation equally, but the male devoted more time to chick caring and feeding. This study contributes with baseline information for the Central Mountains of Argentina, which will be useful as a management and conservation tool for the Andean condor in the National parks involved and will guide future research lines in the region.

Garbarz, Alan Nicolás. "Gravedad en tres dimensiones y la conjetura AdS/CFT" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis son estudiados desarrollos recientes en gravedad en tres dimensiones. Luego de una descripción concisa de los hechos fundamentales de gravedad AdS3, principalmente dentro del marco de AdS/CFT, se presentan los últimos intentos para calcular la función de partición de dicha teoría. En particular, presentamos en gran detalle una novedosa construcción de geometrías con singularidades cónicas, tanto estáticas como rotantes. Estas geometrías darían contribuciones adicionales a la función de partición de gravedad en tres dimensiones. Por otro lado, el rol de la factorización holomorfa es enfatizado con el propósito de motivar la búsqueda de un dual gravitacional a una CFT holomorfa. Explicamos en detalle un posible ejemplo de Li, Maloney, Song y Strominger llamado gravedad quiral, el cual está definido en un punto especial de la gravedad topológicamente masiva con condiciones de contorno de Brown- Henneaux. Comentamos los pros y contras de tal teoría como un dual a una CFT holomorfa y también consideramos la teoría que aparece cuando se imponen condiciones de contorno más relajadas, llamada gravedad logarítmica, que sera dual a una CFT logarítmica. En este contexto, una solución exacta que obedece estas nuevas condiciones de borde, la cual fue encontrada por el autor y colaboradores, es descrita. Finalmente, formulamos en detalle una propuesta original para una nueva gravedad quiral, la cual está dfinida en un punto especial de la teoría de Mielke-Baekler con condiciones de contorno de Brown-Henneaux. Aunque dicha dualidad pueda contenter soluciones con torsión, evita las complicaciones de tener un zoológico de soluciones como es el caso de gravedad quiral: cualquier solución en nuestra propuesta tiene curvatura y torsión constantes. La teoría de Mielke-Baekler genéricamente exhibe un álegbra asintótica dada por dos copias del álgebra de Virasoro. El análisis canónico en el punto quiral donde nuestra propuesta reside es presentado y se muestra como la mitad de los generadores de las simetrías asintóticas desaparecen y la carga central izquierda se anula. Por esto, la quiralidad es manifiesta. Esta tesis está parcialmente basada en resultados que el autor ha publicado en las referencias .

Abstract:
In this thesis, recent developments on three-dimensional gravity are studied. After a concise description of the fundamental facts on AdS3 gravity, mainly within the context of AdS/CFT, recent attempts to compute the partition function of such theory are presented. In particular, we present in great detail a novel construction of geometries with conical singularities, both static and rotating. These are believed to give further contributions to the partition function of three- dimensional gravity. On the other hand, the r^ole played by holomorphic factorization in the dual conformal theory is emphasized in order to motivate the search for a gravitational dual to a holomorphic CFT. We explain in detail one possible example given by Li, Maloney, Song and Strominger, called chiral gravity, which is defined at a special point of topologically massive gravity with Brown- Henneaux boundary conditions. We comment on the pros and cons of such theory as a dual to a holomorphic CFT. We also consider the theory that appears when more relaxed boundary conditions are imposed, dubbed log gravity, presumably being dual to a logarithmic CFT. In this context, an exact solution obeying these new boundary conditions, which was found by the author and collaborators, is described. Finally, we formulate in detail an original proposal for another chiral gravitational theory which is defined at a special point of Mielke-Baekler theory with Brown-Henneaux boundary conditions. Although it may contain solutions with torsion, it avoids the complications of having a wild zoo of solutions as chiral gravity does: Any solution in our proposal is of constant curvature and constant torsion. Mielke-Baekler theory generically exhibits an asymptotic symmetry algebra that can be cast in the form of two copies of the Virasoro algebra. The canonical analysis at the critical point where our proposal takes place is presented and it is shown how half of the generators of asymptotic symmetries disappear and the left central charge vanishes. Thus, chirality is manifest. This thesis is partially based on results that the author has published in references .

Galicer, Daniel E.. "Productos tensoriales simétricos: teoría métrica, isomorfa y aplicaciones" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Esta tesis tiene como objeto contribuir al desarrollo de la teoría métrica e isomorfa de productos tensoriales simétricos en espacios de Banach. Mostramos varios ejemplos donde la teoría de ideales de polinomios homogéneos resulta enriquecida con el uso de técnicas tensoriales. Probamos que la extensión de Aron-Berner preserva la norma para todo ideal maximal y minimal de polinomios homogéneos. Este resultado puede interpretarse como una versión polinomial de uno de los “Cinco Lemas Básicos” de la teoría de productos tensoriales. Más aún, enunciamos y probamos análogos simétricos de dichos lemas y damos, a lo largo del texto, varias aplicaciones. Estudiamos las cápsulas inyectivas y projectivas de una norma tensorial simétrica, analizando sus propiedades y relaciones. Describimos los ideales de polinomios maximales asociados a dichas normas en términos de ideales de composición e ideales cocientes. Examinamos las normas naturales de Grothendieck en el n-ésimo producto tensorial simétrico y mostramos que, para n ≥ 3, hay exactamente seis de ellas, a diferencia del caso n = 2 donde hay cuatro. Definimos la propiedad de Radón-Nikodym simétrica para normas s-tensoriales y mostramos, bajo ciertas hipótesis, que los ideales de polinomios maximales asociados a normas con dicha propiedad coinciden isométricamente con su núcleo minimal. Como consecuencia, probamos la existencia de ciertas estructuras en algunos ideales de polinomios clásicos (existencia de bases o la propiedad de Radon-Nikodym). Por otra parte, damos una demostración alternativa del hecho que el ideal de los polinomios integrales coincide isométricamente con el ideal de los polinomios nucleares en espacios Asplund. Analizamos la existencia de bases incondicionales en ideales de polinomios. Para esto, estudiamos incondicionalidad en productos tensoriales simétricos. Damos un criterio sencillo para determinar si un ideal de polinomios carece de base incondicional. Utilizando dicho criterio mostramos que muchos de los ideales usuales no poseen estructura incondicional. Entre ellos, los r-integrales, r-dominados, extendibles y r-factorizables. Para muchos de estos ejemplos obtenemos incluso que la sucesión básica monomial no es incondicional. Estudiamos la preservación de otro tipo de estructuras en el producto tensorial simétrico: la estructura de álgebra de Banach y la estructura de M-ideal. Mostramos cuáles de las normas s-tensoriales de Grothendieck preservan la estructura de álgebra. Por otra parte, probamos que la norma inyectiva simétrica destruye la estructura de M-ideal (opuesto a lo que pasa en el producto tensorial completo con la norma inyectiva). Si bien dicha estructura se pierde en el caso simétrico, mostramos que, si E es Asplund y M-ideal en F, entonces los polinomios integrales sobre E se extienden a F preservando la norma de manera única.

Abstract:
This thesis aims to contribute to the development of the metric and isomorphic theory of symmetric tensor products on Banach spaces. We show several examples where the theory of polynomial ideals is enriched with the use of tensor techniques. We prove that the Aron-Berner extension preserves the norm for every maximal and minimal ideal of homogeneous polynomials. This result can be interpretated as a polynomial version of one of the “Five basic Lemmas” of the theory of tensor products. Moreover, we state and prove symmetric analogues of these lemmas and give, throughout the text, several applications. We study the injective and projective associates of a symmetric tensor norm, analyzing their properties and relations. We describe the maximal polynomial ideals associated with these norms in terms of composition ideals and quotient ideals. We examine Grothendieck’s natural norms on the n-fold symmetric tensor product and show that there are exactly six natural symmetric tensor norms for n ≥ 3, unlike the 2-fold case in which there are four. We define the symmetric Rad´on-Nikod´ym property for s-tensor norms and show, under certain hypothesis, that maximal polynomial ideals associated with norms with this property coincide isometrically with their minimal kernel. As a consequence, we prove the existence of certain structures on some classical polynomial ideals (existence of basis or the Rad´on- Nikod´ym property). On the other hand, we give an alternative proof of the fact that the ideal of integral polynomials coincide isometrically with the ideal of nuclear polynomials on Asplund spaces. We analyze the existence of unconditional basis on polynomial ideals. For this, we study unconditionality on symmetric tensor products. We provide a simple criterium to check wether a polynomial ideal lacks of unconditional basis. Using this criterium, we show that many usual polynomial ideals do not have unconditional structure. Among them we have the r-integral, r-dominated, extendible and r-factorable polynomials. For many of these examples we also get that the monomial basic sequence is not unconditional. We study the preservation of other kind of structures on the symmetric tensor product: the Banach algebra structure and the M-ideal structure. We show which of the Grothendieck’s natural symmetric tensor norms preserve the algebra structure. On the other hand, we prove that the injective s-tensor norm destroys theM-ideal structure (opposite to what happens in the full tensor product with the injective norm). Even though this structure is lost in the symmetric case, we show that, if E is Asplund and M-ideal in F, every integral polynomial in E has a unique norm preserving extension to F.

Furnari, Juan Carlos. "Estudio de reacciones nucleares inducidas por neutrones sobre germanio. Determinación, trazabilidad y aplicaciones de los datos nucleares" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En la presente Tesis se estudió al germanio desde aspectos poco explorados. Se determinaron y publicaron varias constantes nucleares de isótopos del elemento y se encontraron dos aplicaciones originales en el campo de los reactores nucleares y del análisis por activación. Para mejorar los escasos y discrepantes (o inexistentes) datos bibliográficos referidos a las constantes nucleares del germanio, se determinaron las secciones eficaces de las reacciones umbral 70Ge(n,p)70Ga, 72Ge(n,p)72Ga y 74Ge(n,p)74Ga. Asimismo se midieron los factores k0 correspondientes a 74Ge y 76Ge con exactitud y precisión comparables a otros datos publicados. Se desarrolló también un método radioquímico de separación de galio y germanio. Adicionalmente, se descubrieron nuevas transiciones gamma del 77mGe. Se planteó así la primera derivación de esta Tesis, referida a la viabilidad de utilizar germanio como monitor integral de flujo neutrónico en reactores de investigación. A ese respecto, se demostró su potencialidad en el análisis por activación paramétrico de muestras biológicas; se desarrolló en tales matrices una aplicación novedosa, la determinación simultánea de fósforo y aluminio empleando germanio como monitor de flujo integral y comparador. Consecuentemente, se determinó la sección eficaz de la reacción 31P(n,α)28Al, mejorando sustancialmente los valores previos de dicha constante. También se desarrolló, como herramienta, un novedoso método para determinar simultáneamente los factores f y α en reactores de investigación. Por último, se elaboraron varios trabajos concernientes al estudio, la determinación, la evaluación y la compilación de datos nucleares, que se incluyen en una de las secciones más relevantes de esta Tesis. De resultas de todos los temas tratados, se han realizado ocho publicaciones en revistas internacionales con referato y catorce presentaciones en congresos nacionales e internacionales.

Abstract:
In the present thesis, germanium was studied in aspects seldom explored. Several nuclear constants of isotopes of the element were determined and published. Two original applications, in the field of nuclear reactors and activation analysis, were found. In order to improve the scarce and discrepant (or inexistent) bibliographical data, referred to the nuclear constants of germanium, the cross-sections of the threshold reactions: 70Ge(n,p)70Ga, 72Ge(n,p)72Ga and 74Ge(n,p)74Ga were determined; the k0 factors corresponding to 74Ge and 76Ge were measured, as well, with accuracy and precision comparable to other published data. A radiochemical method for separation of germanium and gallium was also developed. In addition, new gamma transitions of 77mGe were discovered. Thus, the first derivation of this thesis was outlined; it was referred to the viability of using germanium as integral neutron flux monitor in research reactors. In this respect, its potentiality in parametric activation analysis of biological samples was demonstrated; in such matrixes, an innovative application, the simultaneous determination of aluminium and phosphorus employing germanium as integral flux monitor and comparator, was developed. Consequently, the cross-section of the 31P(n,α)28Al reaction was determined, substantially improving the previous values for this constant. As a tool, a new method for simultaneous determination of f and α research reactor parameters, was also developed. Finally, several works, connected with study, determination, evaluation and compilation of nuclear constants were elaborated and published; they are including in one of the most relevant sections of this thesis. As a result of all these subjects, eight publications in international journals and fourteen presentations in national and international conferences have been carried out.

Franceschini, Esteban Andrés. "Fisicoquímica de materiales para celdas de combustible PEM alimentadas con metanol" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las celdas de combustible de membrana de intercambio protónico (PEM) alimentadas con metanol directo (DMPEM) utilizan en la actualidad como catalizadores catódico y anódico, platino y aleaciones platino/rutenio, respectivamente. Los catalizadores comerciales utilizados, están compuestos por nanopartículas de estos metales soportadas sobre partículas de carbón Vulcan XC72®. Estos catalizadores soportados presentan un bajo aprovechamiento del platino debido a que, para obtener una alta área electroquímicamente activa, se requiere la utilización de una gran cantidad de catalizador. La electrodeposición de platino y sus aleaciones con rutenio puede ser utilizada como método para obtener capas catalíticas de bajo espesor, mejorando el aprovechamiento del platino, mientras que la utilización de nanomoldes permite obtener una alta área electroquímicamente activa. En una primera etapa se consiguió sintetizar catalizadores mesoporosos utilizando como nanomolde un cristal líquido formado por un surfactante comercial, Brij 56® y un copolímero bloque comercial, Pluronic F127®. Estas síntesis mostraron ser reproducibles en diferentes soportes de electrodeposición. El diámetro de poro obtenido con la utilización del Brij 56® (entre 2,5 – 3 nm) podría dificultar el flujo del combustible y los productos de reacción dentro de los poros. Por esta razón, se sintetizaron luego catalizadores de Pt puro y cuatro aleaciones de Pt/Ru con concentración creciente de Ru utilizando como nanomolde el copolímero bloque comercial Pluronic F127® (tamaño de poro 8-10 nm). Los catalizadores obtenidos muestran una estructura estable y reproducible. Estos catalizadores mesoporosos de Pt exhiben un alto grado de conversión de oxígeno hacia la formación de H2O, es decir, una baja producción de H2O2, un producto secundario no deseado en el cátodo de pilas de combustible PEM. La caracterización electroquímica de las aleaciones de Pt/Ru demuestra que estos catalizadores tienen una alta actividad para la reacción de oxidación de metanol, que podría atribuirse a una distribución de tamaño de poro, la cual mejoraría el transporte de masa desde / hacia el área electroactiva. Una vez caracterizados, los catalizadores se ensayaron en lo que respecta a su integración en un prototipo de DMFC. Para ello primero se prepararon capas de catalizadores mesoporosos de Pt/Ru sobre carbón con estructura jerárquica de poros y tela de carbón comercial utilizando el copolímero de bloque, Pluronic F127®, como plantilla. La integración de materiales estructurados muestra un mejor rendimiento en experimentos de celdas de combustible de metanol/O2, alcanzando una potencia máxima de 8,9 mW·mg Pt- 1cm-2 a 25 ºC (~5 % mayor en comparación con materiales comerciales). En resumen, todos estos resultados indican claramente que el catalizador mesoporoso soportado sobre carbón con estructura jerárquica de poros es un sistema integrado capa difusora de gases / soporte de catalizador prometedor que podría contribuir a la miniaturización de celdas de combustibles para aplicaciones portátiles.

Abstract:
The proton exchange membrane (PEM) fuel cells fed with direct methanol (DMPEM) currently uses as cathode and anode catalysts, platinum and platinum / ruthenium alloys, respectively. The commercial catalysts used consist of metal nanoparticles supported on Vulcan XC72® carbon particles. These supported catalysts have low platinum utilization because, large amount of catalyst is required for obtaining high electrochemically active area. The electrodeposition of platinum and platinum / ruthenium alloys can be used as a method to obtain low thickness catalytic layers, improving the utilization of platinum, while the use of nano-templates allows high electrochemically active area. In a first stage, the synthesis of mesoporous catalysts using a liquid crystal consisting of a commercial surfactant, Brij 56® and a commercial block copolymer Pluronic F127® as nano-template was accomplished. These syntheses were shown to be reproducible in different electrodeposition supports. The pore diameter obtained with the use of Brij 56® (from 2.5 to 3 nm) could restrict the flow of fuel and reaction products within the pores. For this reason, pure Pt catalysts and four alloys of Pt / Ru with increasing Ru concentration nano-template using as the commercial block copolymer Pluronic F127® were synthesized (pore size 8-10 nm). The catalysts obtained show a reproducible and stable structure. These mesoporous Pt catalysts exhibit a high oxygen to H2O conversion degree, that is low H2O2 production, an undesired secondary product in the cathode of PEM fuel cells. The electrochemical characterization shows that these mesoporous catalysts have a high activity for methanol oxidation reaction, which could be attributed to a distribution of pore size which could improve the mass transport from/to the electroactive area. Once characterized, the catalysts were tested for integration into a DMFC prototype. Catalytic layers of mesoporous Pt/Ru were prepared on mesoporous carbon with hierarchical pore structure and commercial carbon cloth using the commercial block copolymer, Pluronic F127® as nanotemplate. The integration of structured materials results in a better performance in methanol/O2 fuel cells, reaching a maximum power of 8.9 mW·mg Pt-1cm-2 at 25 °C (~ 5% higher compared with commercial materials). In summary, these results clearly indicate that the mesoporous catalyst supported on carbon with hierarchical pore structure is a promising integrated gas diffusion layer/catalyst support which could contribute to miniaturization of fuel cells for portable applications.

Fox, Ana Romina. "Fototransducción de señales en Arabidopsis thaliana. Dos casos de estudio: participación de la subunidad alfa de la proteína G heterotrimérica; e identificación de proteínas diferencialmente expresadas en el cuádruple mutante phyA phyB cry1 cry2" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El desarrollo de las plantas es un proceso que ocurre bajo fluctuaciones del ambiente lumínico que son percibidas por fotorreceptores específicos, principalmente los fitocromos phyA y phyB, y los criptocromos cry1 y cry2. El estudio de las respuestas de mutantes simples y múltiples de fotorreceptores en diferentes condiciones lumínicas es una herramienta muy útil para analizar las vías de señalización. Este trabajo de tesis tuvo como objetivo principal estudiar los mecanismos moleculares y bioquímicos de la transducción de señales lumínicas mediadas por fitocromos y criptocromos durante el desarrollo de Arabidopsis thaliana. En el primer capítulo estudiamos la participación de la subunidad α de la proteína G heterotrimérica (GPA1) en los caminos de señalización de los fotorreceptores. Los mutantes cry1 fueron los únicos simples mutantes que mostraron una reducción en la unión de GTPγS35, a niveles similares a los observados en el mutante gpa1. Hallamos interacción génica entre cry1 y GPA1 en la apertura del gancho apical en oscuridad y en la acumulación de antocianas en luz azul. Estas respuestas fueron dependientes de la presencia de sacarosa en el medio. Análisis moleculares nos llevaron a proponer un modelo en el que la posible modificación posttraduccional de GPA1 mediada por cry1 alteraría su actividad. En el segundo capítulo realizamos un estudio comparativo de los perfiles proteicos entre plántulas cuádruples mutantes phyA phyB cry1 cry2 y plántulas salvajes utilizando la técnica de geles bidimensionales. La identificación de proteínas sub-expresadas en el cuádruple mutante phyA phyB cry1 cry2 fue consistente con la drástica reducción en la tasa fotosintética, el contenido de clorofila y el concomitante retraso en el desarrollo del mutante. Las proteínas sobreexpresadas en el cuádruple mutante phyA phyB cry1 cry2 estuvieron involucradas en respuesta a estrés por temperatura y por sequía. Sin embargo, sólo la expresión de éstas proteínas no permitió explicar el comportamiento del cuádruple mutante phyA phyB cry1 cry2 en condiciones de estrés. La reducción en la cantidad relativa de ácidos grasos insaturados de las membranas del cuádruple mutante phyA phyB cry1 cry2 fue consistente con una mayor sensibilidad a un shock de bajas temperaturas y una mayor tolerancia a un shock de altas temperaturas. Las posibles significancias fisiológicas y ecológicas de estos resultados son discutidas en esta tesis.

Abstract:
Plant development is a process that occurs under fluctuating light environment which is perceived by specific photoreceptors, mainly by phytochromes phyA and phyB, and cryptochromes cry1 and cry2. The study of the behaviour of simple and multiple photoreceptor mutants in different light conditions is a useful tool to analyze signalling pathways. The main objective of this thesis was to study the molecular and biochemical transduction of light signalling mediated by phytochromes and cryptochromes during Arabidopsis thaliana development. In the first chapter we studied the involvement of the α- subunit of the Heterotrimeric G protein (GPA1) in photoreceptors signalling pathways. cry1 mutants were the only single mutants that showed GTPγS35 binding reduction, at similar levels to that observed for the gpa1 mutant. We found genetic interaction between cry1 and GPA1 on apical hook opening in darkness and anthocyanin accumulation under blue light. These responses were dependent on the presence of sucrose. Molecular approaches conducted us to propose a model where a potential post-translational modification of GPA1 mediated by cry1 would alter its activity. In the second chapter we made a comparative study of the protein profiles between the phyA phyB cry1 cry2 quadruple mutant and wild type seedlings using the two-dimensional gel electrophoresis technology. Under-expressed proteins in the phyA phyB cry1 cry2 quadruple mutant were consistent with the drastic reduction in photosynthetic rates, reduced chlorophylls contents and retarded development in the mutants. Over-expressed proteins were involved in temperature and drought stresses. However, the expression of these proteins does not explain the phyA phyB cry1 cry2 quadruple mutant behaviours under stress conditions. The reduction in the relative contents of unsaturated fatty acid of the phyA phyB cry1 cry2 quadruple mutant membranes was consistent with its sensitivity to a low temperature shock and its tolerance to a high temperature shock. The physiological and ecological significance of these results are discussed in this thesis.

Forte Giacobone, Ana Florencia. "Estudios de corrosión microbiológica en una instalación nuclear" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo de este trabajo ha sido analizar las poblaciones bacterianas y los mecanismos de corrosión microbiológica en un depósito de almacenamiento interino en húmedo de elementos combustibles gastados provenientes del reactor de investigación y producción de radioisótopos, también llamado repositorio. Se realizaron análisis de la población bacteriana cultivable presente en el repositorio, identificándose 18 microorganismos diferentes, con presencia mayoritaria de Bacillus cereus, seguido del género Pseudomonas. Se investigó el efecto de una de las cepas aisladas de B. cereus, B. cereus RE10 tanto en la aleación de aluminio 6061 empleada en la fabricación de elementos combustibles como en aluminio de alta pureza (Al 99,999%). Los experimentos fueron llevados a cabo en un medio altamente diluido, con la finalidad de reproducir las condiciones ambientales presentes en el repositorio. Se observó la presencia de picaduras no cristalográficas en forma de túnel en las muestras de AA6061 expuestas a B. cereus RE10 pero no así en Al 99,999%. Dichas picaduras se encontraron cubiertas de depósitos blancos, de tipo globular, compuestos por una mezcla de biofilm y óxido de aluminio. Se determinó la existencia de una correlación entre las zonas atacadas y la presencia de inclusiones de tipo Al-Fe-Si. Se postuló que dicha correlación podría estar relacionada con el pH generado en torno a las inclusiones, el cual favorecería el desarrollo del biofilm, contribuyendo a generar un fenómeno de corrosión bajo depósito. Uno de los mayores problemas en el estudio de los biofilms, en particular en presencia de óxidos, es la dificultad de seguir su desarrollo por técnicas no invasivas, ya que habitualmente se emplean métodos basados en tratamientos tales como desecación, tinción con colorantes, etc. El uso de microorganismos genéticamente modificados capaces de producir la proteína verde fluorescente (GFP) propuesto en este trabajo, ha permitido superar este obstáculo ya que hace posible el seguimiento de los biofilms sin ningún tipo de tratamiento, mediante microscopía de epifluorescencia. Por este motivo se decidió evaluar en forma comparativa la capacidad de formación de biofilms en diferentes condiciones y el efecto sobre AA6061 en medio diluido de la cepa Pseudomonas aeruginosa PAO1, de su derivada PAO1-GFP y de dos cepas de Pseudomonas aisladas del repositorio. El empleo de la cepa PAO1-GFP como modelo en estudios de corrosión microbiológica permitiría el estudio del fenómeno en forma rápida, fácil y de bajo costo. Los resultados muestran que, en todos los casos se observó formación de depósitos y ataque debajo de los mismos, con una morfología similar a la encontrada para el caso de B. cereus RE10. No se encontraron diferencias significativas entre las cepas analizadas, lo que permitiría el uso de PAO1-GFP en futuros estudios de biocorrosion. Este trabajo muestra una primera aproximación al estudio de la corrosión inducida microbiológicamente en repositorios nucleares en Argentina. Los resultados obtenidos permiten destacar la importancia de dicho fenómeno, aún en medios con una baja concentración de nutrientes, así como también enfatizar las ventajas del empleo de microorganismos portadores de genes reporteros en estudios de corrosión microbiológica. Como conclusión general puede decirse que la profundización de estudios de los mecanismos de corrosión inducida microbiológicamente podría contribuir a la prevención y control del proceso de corrosión ya que es o puede llegar a ser un fenómeno de importancia en lo referente a la vida útil, costo operativo y seguridad de este tipo de instalaciones nucleares.

Abstract:
The aim of this Thesis was to analyze the bacterial population and the mechanisms of microbial corrosion in a spent nuclear fuel pool storage system from a research reactor. Analyses of the cultivable bacterial population present in the pool were performed and 18 different microorganisms were identified, with a preponderance of Bacillus cereus, followed by the genus Pseudomonas. The effect of one of the isolates of B. cereus, B. cereus RE10 was investigated both in the aluminum alloy 6061 (used for the manufacture of fuel elements) and in high purity aluminum (Al 99.999%). To simulate the environmental conditions, the experiments were performed using a highly diluted medium. After the exposure to B. cereus RE10 non crystallographic, tunnel-like pitting was found on AA6061 samples but not on Al 99.999%. These pits were covered with white, lumpy, globular deposits, comprised of a mixture of biofilm and aluminum oxide. We found a correlation between the areas under attack and the presence of inclusions such as Al-Fe-Si. It was postulated that this correlation could be the result of the pH generated around these kinds of inclusions, which could favor the development and survival of the biofilm, contributing to underdeposit corrosion. One of the main problems in the study of biofilms, particularly in the presence of oxides, is the difficulty of following their development by noninvasive techniques, since most commonly used methods are based on treatments such as drying, staining with dyes, etc. The use of genetically modified microorganisms capable of producing green fluorescent protein (GFP) proposed in this Thesis, has overcome this obstacle as it allows for monitoring of biofilms without any treatment by epifluorescence microscopy. For this reason we decided to evaluate and compare the ability to form biofilms under different conditions and the effect on AA6061 in a diluted medium of the strain Pseudomonas aeruginosa PAO1, its derivative PAO1-GFP and two strains of Pseudomonas isolated from the storage system. The use of the strain PAO1-GFP as a model for microbiologically induced corrosion experiments allows the study of the phenomenon in a fast, easy and low cost way. The results show that all tested Pseudomonas strains developed biofilms and initiated under deposit corrosion on AA6061 in a diluted medium, independently of the origin of the strain. The morphology of the attack was similar between the samples exposed to the different Pseudomonas strains and the samples exposed to B. cereus RE10. This work shows a first approach to the study of microbiologically induced corrosion in nuclear storage facilities in Argentina. The results obtained allow us to highlight the importance of this phenomenon, even in media with a low concentration of nutrients, as well as emphasize the advantages of using microorganisms carrying reporter genes in studies of microbiologically induced corrosion. As a general conclusion, it is possible to say that the studying of microbiologically induced corrosion mechanisms could contribute to the prevention and control of a process that is or may become a phenomenon of importance in relation to the life, operating cost and safety of nuclear installations.

Figueira, Juan Manuel. "Estudio de la tasa de reacción 30P(alfa, p)33S de interés astrofísico en erupciones de rayos X" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los procesos que ocurren en la superficie de una estrella de neutrones durante erupciones de rayos X incluyen cientos de reacciones (p, γ) y (α, p) diferentes, la mayoría de las cuales involucran núcleos radiactivos de corta vida media. Las estimaciones de la mayoría de las tasas de reacción están aún basadas en cálculos realizados utilizando el modelo estadístico de Hauser-Feshbach, ya que en el pasado no eran posibles las mediciones directas de estas reacciones. Sin embargo, la aplicabilidad de un tratamiento estadístico con núcleos de masa liviana y media es cuestionable. Unicamente en los ultimos años los haces de núcleos radioactivos se han vuelto accesibles experimentalmente y se han llevado a cabo las primeras mediciones directas de este tipo de reacciones. Debido a que las intensidades de los haces disponibles en las instalaciones actuales de haces radiactivos siguen siendo 3–5 órdenes de magnitud menores que las disponibles con haces estables, estas mediciones no pueden aún llevarse a cabo en el rango de energías astrofísicas. En consecuencia los experimentos son realizados a mayores energías y luego se extrapolan a la región de interés. Otras dificultades se originan debido la a presencia de impurezas en el haz, que a veces pueden incluso ser la parte dominante del mismo. Por estas razones es necesario que sean desarrolladas técnicas experimentales novedosas. En este trabajo se desarrolló una nueva técnica utilizando un espectrómetro magnético lleno de gas, la cual permite el estudio de reacciones (α, p) de interés astrofísico en cinemática inversa y por medio de las reacciones temporales inversas. Además se midieron las secciones eficaces de la reacción 30 P(α, p)33 S, de relevancia en modelos de nucleosíntesis en explosiones de rayos X, en el rango de energía Ec.m. = 2,83 a 4,38 MeV y se compararon con cálculos de Hauser-Feshbach. Las secciones eficaces experimentales resultaron ser un factor de alrededor de 7 a 8 menores que los resultados teóricos. A partir de estas secciones eficaces experimentales, se calculó la tasa de reacción estelar en función de la temperatura en el rango de aproximadamente 0,1–10 GK relevante para las erupciones de rayos X. Se discuten las posibles consecuencias para la nucleosíntesis en ese tipo de erupciones

Abstract:
The processes occurring on the surface of a neutron star during X-ray bursts usually include hundreds of different (p, γ) and (α, p) reactions, the majority involving short-lived radioactive nuclei. The estimates of most reaction rates are based on statistical Hauser-Feshbach calculations since direct measurements of these reactions were not possible in the past. The applicability of a statistical treatment for light and medium mass nuclei, however, is questionable. Only in recent years have beams of short-lived nuclei become experimentally accessible and the first direct measurements of these reactions been performed. Because the beam intensities available at existing radioactive beam facilities are still 3–5 orders of magnitude smaller than what is available with stable beams, these measurements can not yet be done at astrophysical energies. Consequently experiments are usually studied at higher energies, which are then extrapolated into the region of interest. Other difficulties originate from the presence of beam impurities which sometimes can be the dominant part of the incident beam. For these reasons novel experimental techniques need to be developed. In this work, a new technique has been developed using a gas-filled magnetic spectrograph which enables the study of (α, p) reactions of astrophysical interest in inverse kinematics and by means of the time-reverse reactions. Using this technique, cross sections of the 30 P(α, p)33 S reaction, relevant to X-ray burst nucleosynthesis models, were measured in the energy range Ec.m. = 2.83–4.38 MeV and compared with Hauser-Feshbach calculations. The experimental cross sections were found to be a factor of around 7–8 smaller than the theoretical results. From these experimental cross sections, the stellar reaction rate was calculated as a function of temperature in the range relevant to X-ray bursts of about 0.1–10 GK. Possible implications for nucleosynthesis in X-ray bursts are discussed

Ferré, Lilian Elizabeth. "Niveles de vitelogenina en la langosta de agua dulce Cherax quadricarinatus (Decápoda: Parastacidae): ensayos in vitro e in vivo" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se determinaron los niveles de vitelina (Vn) y vitelogenina (Vg) en hembras de la langosta dulceacuícola Cherax quadricarinatus durante todo su ciclo reproductivo y además en respuesta a tratamientos tanto in vitro como in vivo con las siguientes hormonas o neuroreguladores: metil farnesoato (MF), 17α-hidroxiprogesterona (17PG) y naloxona (Nx), ensayando adicionalmente 17β-estradiol (E2) in vitro. Los niveles de Vn y Vg se midieron en ovario (OV), hemolinfa (HL) y hepatopáncreas (HP) mediante la técnica inmunoenzimática ELISA puesta a punto especialmente para el desarrollo de esta Tesis. En el estudio del ciclo reproductivo, se determinó la variación anual de los niveles de Vn yVg en hemolinfa, ovario y hepatopáncreas de hembras adultas de C. quadricarinatus y se correlacionaron tales niveles con los índices gonadosomático (IGS) y hepatosomático (IHS). Se encontró una concentración máxima de vitelogenina circulante en el período reproductivo medio, en correlación con valores elevados de IHS y de contenido de Vg en hepatopáncreas. En el caso de los ensayos in vitro, los compuestos ensayados se agregaron al medio de incubación, mientras que en el ensayo in vivo se incorporaron al alimento. Los resultados obtenidos tanto in vitro como in vivo, indican que el MF estimula la síntesis endógena de vitelina en el ovario, durante la maduración temprana e intermedia del mismo, siendo incluso capaz de inducir la síntesis de Vn en un ovario en quiescencia reproductiva (periodo postreproductivo). El MF no mostró efectos sobre la producción de vitelogenina en sitios extraováricos. Las hormonas esteroideas estimularon la vitelogénesis endógena (en el ovario) durante el periodo pre-reproductivo ó reproductivo temprano. El antagonista encefalinérgico naloxona no tuvo efecto sobre la s vitelogénesis indicando que la hormona estimulante gonadal, cuya secreción es estimulada por naloxona, no estaría involucrada directamente en la síntesis de Vn, aunque sí tendría efecto sobe la síntesis de otras proteínas ováricas. El presente trabajo provee herramientas de potencial aplicación en acuicultura a fin de optimizar la producción de la especie en estudio.

Abstract:
Vitellin (Vn) and vitellogenin (Vg) levels were determined in females of the freshwater crayfish Cherax quadricarinatus during the entire reproductive cycle, and also in response to the following hormones and neuroregulators: methyl farnesoate (MF), 17α- hidroxyprogesterone (17PG) and naloxone (Nx); additionally, 17β-estradiol (E2) was assayed in vitro. Vn and Vg levels were measured in hemolymph (HL), ovary (OV) and hepatopancreas, by means of the immunoenzymatic technique ELISA, specially developed for this Thesis. In the study of the reproductive cycle, the annual variation of Vn and Vg levels in ovarty, hemolymph and hepatopancreas was determined and correlated to both the gonsadosomatic (GSI) and hepatosomatic (HSI) indexes. A maximum concentration of circulating Vg was found in the mid reproductive period, in correlation to high values of both HIS and Vg content in hepatopancreas.. For the in vitro assays, the assayed compounds were added to the incubation medium, while for the in vivo assay, the same compounds were incorporated to the provided food. The results obtained both in vitro and in vivo indicate that MF stimulates the endogenous Vn synthesis in the ovary, during both its early and intermediate maturation, even being able to induce the Vn synthesis in a quiescent ovary (i.e., during the post-reproductive period). On the other hand, MF did not show any stimulating effect on Vg synthesis in extra-ovarian sites. Steroid hormones stimulated endogenous vitellogenesis (in the ovary) during either the prereproductive or early reproductive period. The enkephalinergic antagonist naloxona showed no effect on vitellogenesis process, indicating that the gonad stimulating hormones, whose secretion is stimulated by naloxona, would not be directly involved in the Vn synthesiss; instead, it would be stimulating the synthesis of other ovarian proteins. The current study provides tools of potential application in aquaculture, to improve the production of the studied species.

Ferreiro, Nicolás Andrés. "Influencia de la heterogeneidad ambiental de los lechos de macrófitas en los organismos acompañantes en un arroyo pampeano" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En los arroyos pampeanos, las abundantes y diversas plantas acuáticas constituyen la principal fuente de heterogeneidad ambiental. La hipótesis de trabajo fue que la heterogeneidad de diferentes especies de macrófitas, cuantificada por la dimensión fractal (DF), tiene un efecto positivo sobre la abundancia y diversidad de macroinvertebrados que viven sobre ellas, debido a la influencia positiva de la complejidad sobre el espacio habitable por organismos pequeños y la heterogeneidad del hábitat. Se realizaron tres muestreos estacionales de seis parches mixtos con distintas macrófitas sumergidas (Ceratophyllum demersum, Egeria densa, Elodea ernstae, Stuckenia striata) en un tramo del arroyo Las Flores (NE de pcia. Buenos Aires). En cada ocasión, se estimaron las DF de las macrófitas, la biomasa de algas epífitas, así como la abundancia, biomasa, diversidad y tamaño de los invertebrados asociados. La DF de las macrófitas se encontró relacionada positivamente con la densidad de macroinvertebrados pero no con su biomasa, riqueza o diversidad. La relación entre la DF y la abundancia relativa de invertebrados por clase de tamaño, fue positiva para los organismos pequeños y negativa para los organismos grandes. Se realizaron varios experimentos de campo y laboratorio con E. densa, E. ernstae y análogos plásticos, encontrándose una correlación significativa y positiva entre la DF y la densidad de macroinvertebrados, independientemente del tamaño de los organismos. En los arroyos pampeanos, la complejidad de la arquitectura de las macrófitas afecta positivamente a la abundancia de invertebrados pero no a su biomasa ni diversidad.

Abstract:
Dense and diverse communities of macrophytes are the main source of environmental heterogeneity in Pampean streams. The hypothesis was that heterogeneity caused by different macrophyte species, measured as fractal dimension (FD), has a positive effect on associated macroinvertebrate density and diversity due to a positive effect of complexity on available space for small organisms and habitat heterogeneity. Field work consisted in three sampling dates when six macrophyte patches with several submerged species (Ceratophyllum demersum, Egeria densa, Elodea ernstae, Stuckenia striata) were sampled in a reach of Las Flores stream (NE of Buenos Aires province). Macrophyte FD, epiphytic algae biomass, and macroinvertebrate density, biomasss, richness, diversity and size were estimated each time. Macrophyte FD was positively associated to macroinvertebrate density but not to macroinvertebrate biomass, richness or diversity. FD and macroinvertebrate relative abundance were positively related for small organisms and negatively related for big invertebrates. Several field and laboratory experiments were conducted with E. densa, E. ernstae and plastic analogs. Macroinvertebrate density was positively affected by FD but no effect of invertebrate size on this relationship was detected. According to this, in Pampean streams macrophyte architecture complexity has a positive effect on associated macroinvertebrate abundance but not on its biomass or diversity.

Fernández, Vanesa Maribel. "Efectos inhibitorios sobre el aprendizaje olfativo en la abeja doméstica (Apis mellifera)" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Entre los múltiples estímulos percibidos del entorno, los animales deben ser capaces de seleccionar aquellos que les sean útiles para sobrevivir. A tal efecto, las experiencias previas permiten diferenciar los estímulos relevantes de aquellos que no lo son; en especial esta Tesis se focalizará en los relacionados con la búsqueda y obtención de alimento. Cuando se pretende asociar un estímulo, que ha sido preexpuesto en el ambiente, a una recompensa, puede resultar difícil establecer una contingencia entre ellos. Este fenómeno ha sido definido como inhibición latente (IL) y se lo ha explorado a lo largo de esta Tesis usando como modelo experimental a la abeja Apis mellifera. A partir de ensayos de condicionamiento olfativo se evaluaron los efectos de volátiles preexpuestos tanto en el contexto social de la colmena como bajo condiciones experimentales controladas. Los volátiles preexpuestos en una colmena reducen las preferencias de las abejas hacia una fuente de alimento aromatizada con ese olor. Además, durante un condicionamiento clásico evaluado bajo el protocolo de extensión de probóscide, la preexposición olfativa dificulta la adquisición de una relación predictiva entre el olor preexpuesto y una recompensa. Esta reducción en el aprendizaje varía con la identidad del olor, siendo olor-específica. Si bien este fenómeno fue evidenciado para todas las categorías de edades de la casta obrera, en ninguna de ellas este efecto duró más de 24 hs. Asimismo, la preexposición de volátiles no provocó ningún cambio en la sensibilidad gustativa al azúcar de individuos de edades pre-recolectoras. Sin embargo, sí se observó que exposiciones prolongadas o mayores concentraciones del volátil afectan la persistencia de la IL. Finalmente, se estudiaron las vías aminérgicas involucradas en la IL de la abeja melífera; para lo cual se realizaron tratamientos farmacológicos que involucraron el uso de antagonistas de algunas aminas biogénicas (octopamina, dopamina y serotonina). Los resultados sugieren que la vía serotoninérgica podría estar involucrada en la modulación de la IL en la abeja melífera. Los resultados de esta Tesis muestran, por un lado, que los olores preexpuestos pueden reducir el rendimiento del aprendizaje asociativo si el mismo es subsecuentemente pareado con el alimento. Esta situación puede tener implicancias a nivel social, pudiendo influir en la propagación de información floral olfativa dentro de la colmena. Por otro lado, el hecho de que por primera vez se haya mostrado una interrupción de la IL mediante tratamientos farmacológicos abre nuevas perspectivas con relación al estudio de las vías neurales involucradas en este fenómeno en insectos.

Abstract:
Among all the stimuli perceived by animals in the environment, they must be able to select those that are useful for survival. In this context, previous experiences with the stimuli allow animals to differentiate those stimuli that are relevant from those that are not. This Thesis will focus on the olfactory experiences related to seeking and obtaining food. The retardation of associative learning as a function of prior stimulus exposure has been named Latent inhibition (LI) phenomenon, and it has been explored throughout this thesis by using the honey bee, Apis mellifera, as experimental model. The effects of volatile pre-exposure have been studied by using an olfactory conditioning procedure, both in the social environment of the hive and under controlled laboratory conditions. The pre-exposition to a volatile compound in a hive reduces the preferences of the bees for a certain food source scented with this odour. Furthermore, during a classical conditioning protocol assessed under the proboscis extension, olfactory preexposure reduces the acquisition of a predictive relationship between the pre-exposed odour and the reward. The LI effect varies with the odour identity and it has been found for the whole range of ages of workers bees. However, its effect did not last more than 24 h., unless the odour concentration was increased or its exposure prolonged. Moreover, the pre-exposition odour did not cause any changes in the gustative responsiveness for pre-foraging age bees. Finally, putative aminergic pathways involved in the LI- phenomenon in honey bees have been studied. Previously pharmacological treated individuals with antagonists of biogenic amines were exposed to a volatile compound, after which, their learning performances were studied. The results suggest that serotonergic pathway may be involved in the modulation of this phenomenon in honey bees. On one hand, the results of this Thesis show that pre-exposed odors may reduce the performance of associative learning if it is subsequently paired with food. This may have implications for the social level, because it may influence the spread of floral scent information within the hive. On the other hand, the fact that for the first time it has been shown a disruption of the IL by drug treatments opens new perspectives on the study of neural pathways involved in this phenomenon in insects.

Fernández, Paula Virginia. "Polisacáridos del alga verde Codium vermilara: estructura fina, su ensamble en la pared celular. Actividad anticoagulante de un arabinano piranósico sulfatado" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El alga verde cenocítica Codium vermilara desarrolla paredes celulares complejas, con una fase fibrilar compuesta por β-(1→4)-D-mananos que se ubican en una capa exterior y una interior de similar espesor, y una matriz central de polisacáridos sulfatados, incluyendo un arabinano y un galactano como componentes principales, y en menor medida un β-(1→4)-D-manano sulfatado que podría actuar como interfase con la parte neutra de la pared). El galactano es similar a los sintetizados por otras especies del género. Tienen enlaces β-D-(1→3), grupos sulfato en C-4 y C-6 y acetales de ácido pirúvico en C-3 y C-4. El arabinano, altamente sulfatado y con uniones β-L-(1→3), constituye el primer reporte de un polisacárido compuesto por una cadena lineal de unidades de arabinopiranosa. Estos resultados permiten proponer un modelo completo de pared celular para esta macroalga verde. El arabinano sulfatado presentó una importante actividad anticoagulante a través de al menos cuatro mecanismos: potenciación de antitrombina y de cofactor II de la heparina e inhibición directa de Factor Xa y de trombina. La inhibición directa de trombina involucra un mecanismo novedoso, donde la unión del polisacárido al exositio 2 de la enzima provoca cambios en la geometría de su tríada catalítica.

Abstract:
Coencocytic green seaweed Codium vermilara develops complex cell walls, with a fibrillar phase composed by β-(1→4)-D-mannans that form an outer and an inner layer of similar thickness, and a central matrix of sulfated polysaccharides, including arabinans and galactans as major components, and in minor quantities, a sulfated β- (1→4)-D-mannan that could act as an interphase with the neutral part of the wall). Galactans are similar to those synthetized by other Codium species. They present β-D- (1→3) linkages, sulfate groups on C-4 and C-6 and pyruvic acetals on C-3 and C-4. The highly sulfated arabinan, with β-L-(1→3) linkages, constitutes the first report of a polysaccharide built up by a linear chain of arabinopyranose units. These results allow us to postulate a complete model of cell wall arrangement for this green macroalga. The sulfated arabinan showed important anticoagulant activity by at least four mechanisms of action: potentiation of antithrombin and heparin cofactor II and direct inhibition of Factor Xa and thrombin. Direct inhibition of thrombin takes place by an original mechanism involving binding of the polysaccharide to exosite 2 of the enzyme that promotes changes in the geometry of its catalytic triad.

Fernández, María Soledad. "Eco-epidemiología de vectores de Leishmania spp. en el noreste de la Argentina (Provincia de Misiones)" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La leishmaniasis es una enfermedad de transmisión vectorial producida por parásitos tripanosomatídeos del género Leishmania (Kinetoplastida: Trypanosomatidae), los vectores involucrados son flebótomos (Díptera: Psychodidae: Phlebotominae) y los reservorios son mamíferos. En nuestro país el ser humano es considerado un hospedador accidental. En Misiones (noreste de la Argentina), donde se realizó esta tesis, se registran casos de leishmaniasis tegumentaria (LT) y leishmaniasis visceral (LV). El trabajo se llevó a cabo en dos áreas: 1) un área endémica de LT, en una zona de chacras ubicada en un frente de deforestación al sur de la ciudad de Puerto Iguazú donde se registró un brote en los años 2004-2005, con Nyssomyia whitmani como vector de Leishmania braziliensis y con reservorio desconocido; y 2) en un foco de LV (ciudad de Posadas), donde se registró el primer caso humano en el país (2006), con Lutzomyia longipalpis como vector de L. infantum (syn chagasi) y el perro doméstico como reservorio. Para el área endémica de LT se realizaron estudios de la composición de la comunidad de vectores en el tiempo y entre ambientes dentro de las chacras, relacionando a los flebótomos con variables climáticas y ambientales. Además se estudió el papel de los micromamíferos como potenciales reservorios de Leishmania spp. Para la ciudad de Posadas, se describió la distribución de Lu. longipalpis y sus cambios en el tiempo y se relacionó la abundancia con variables ambientales. Para ambos escenarios se encontró que la abundancia de los vectores estaría explicada al menos en parte por variables ambientales (principalmente relacionadas con la cobertura vegetal y la abundancia de animales silvestres y/o domésticos) y en el caso del escenario de transmisión de LT se encontró asociación positiva con variables climáticas (temperatura, precipitación). La abundancia de vectores se asoció con la de micromamíferos, sin embargo no se encontró evidencia suficiente para incriminarlos como reservorios. La distribución espacial de vectores resultó heterogénea en ambos escenarios, en la ciudad de Posadas se encontró un patrón de islas de alta abundancia de vectores, incrementándose la abundancia del vector entre los años 2007 y 2009. Para ambos escenarios (LT y LV) se recomienda alejar sitios de cría y dormideros de animales domésticos de la vivienda y de la ceja de monte (LT) cuando corresponda y reforzar cuidados de protección personal y tenencia responsable de mascotas (LV) en situaciones de riesgo donde exista mayor probabilidad de contacto hombre-vector, siendo la primavera y el verano las estaciones de mayor abundancia de los vectores.

Abstract:
Leishmaniasis is a vector-borne disease caused by parasites of the genus Leishmania (Kinetoplastida: Trypanosomatidae), sandflies are the vectors involved (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae) and mammals are the reservoirs. In our country the man is considered an accidental host. In Misiones (northeastern Argentina), where this thesis were performed, tegumentary leishmaniasis (TL) and visceral leishmaniasis (VL) were recorded. This work was carried out in two areas: 1) an intense deforestated area endemic of LT, composed by farms, in the south of the city of Puerto Iguazú where an outbreak took place in 2004-2005, with Nyssomyia. whitmani as a vector of Leishmania braziliensis and unknown reservoir, and 2) in a focus of VL (Posadas), where the first case were recorded for the country (2006), with Lutzomyia longipalpis as vector and the domestic dog as reservoir. For the LT endemic area studies of the sandfly community were conducted along the time and between habitats within the farms, relating sandflies with climatic and environmental variables. In addition we studied the role of small mammals as potential reservoirs of Leishmania spp. In the city of Posadas, the distribution of Lu. longipalpis and its changes over time and abundance were related to environmental variables. For both scenarios it was found that the abundance of vectors would be explained at least partially by environmental variables (mainly related to vegetation cover and abundance of wildlife and /or domestic animals) and in the case of the LT scenario it was found a positive association between vectors and climatic variables (temperature, precipitation). The abundance of vectors was associated with small mammals, but it was not found enough evidence to incriminate them as reservoirs. The spatial distribution of vectors was heterogeneous in both scenarios and in the city of Posadas it was found vectors concentrated in limited „islands‟ of high abundance, and that the vector abundance increased between 2007 and 2009. For both scenarios (TL, VL, LV) is recommended to remove resting and breeding sites of domestic animals near the house and the forest edge (TL) where it is appropriate and enhance protective care and responsible pet ownership (VL) at risk situations where there is greater probability of man-vector contact, being the spring and summer the seasons of greatest abundance of vectors.

Fernandez, Diego Carlos. "Estudio de mecanismos de pre y post-condicionamiento como estrategia de inducción de tolerancia isquémica retiniana" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La isquemia es un componente central de diversas enfermedades retinianas que pueden provocar ceguera irreversible. Al presente, no existen tratamientos efectivos frente al daño isquémico retiniano. En este trabajo de Tesis se demostró por primera vez, que el post-condicionamiento isquémico (PostC) inducido por la aplicación de pulsos breves de isquemia en forma posterior a una isquemia prolongada, revierte significativamente las alteraciones funcionales e histológicas provocadas por una isquemia retiniana deletérea. En cuanto a los mecanismos involucrados en este fenómeno, los resultados obtenidos sugieren la participación de la síntesis de novo de proteínas y la actividad de la isoforma inducible de la óxido nítrico sintasa. Además, se demostró que el daño isquémico, al menos en parte, es causado por un aumento en las concentraciones sinápticas de glutamato y que el PostC podría proteger a la retina al disminuir este parámetro. A continuación, se realizó una caracterización del daño de la retina y la vía visual en un modelo de retinopatía diabética experimental inducido por la inyección de estreptozotocina (STZ). A nivel retiniano, se observaron alteraciones funcionales, vasculares y morfológicas significativas. En estadíos tempranos luego de la inyección de STZ se observaron alteraciones axo-gliales en la porción distal del nervio óptico, que podrían constituir el primer cambio estructural en la vía visual diabética. El condicionamiento isquémico (aplicación de pulsos semanales de isquemia) revirtió significativamente todas estas alteraciones, tanto a nivel de la retina como de la vía visual. Asimismo, los resultados obtenidos sugieren que la disminución en los niveles de VEGF y la restauración de la actividad de glutamina sintetasa podrían participar activamente en la protección inducida por el condicionamiento isquémico frente a las alteraciones provocadas por la retinopatía diabética. Finalmente, se demostró que las células ganglionares retinianas intrínsecamente fotosensibles en particular, y el sistema visual no formador de imagen en general, se preservan en etapas avanzadas de diabetes. En suma, los resultados obtenidos en este trabajo constituyen avances originales en la comprensión de los mecanismos involucrados en la lesión retiniana inducida por isquemia aguda y por diabetes, así como en la posibilidad de prevenir ambos procesos a través de la inducción de tolerancia isquémica. La demostración de que el sistema visual no formador de imagen es menos susceptible al daño diabético representa una valiosa pieza de información respecto a este sistema no canónico de transducción de la información luminosa.

Abstract:
Ischemia is a central component of several retinal diseases that can result in irreversible blindness. At present, there are no effective treatments to protect the retina from ischemic damage. For the first time, in this Thesis work, we have demonstrated that ischemic post-conditioning (PostC) induced by brief episodes of ischemia/reperfusion applied at the onset of reperfusion, significantly protected the retina against functional and histological alterations induced by ischemia. As for the involved mechanisms, the results suggest the participation of de novo synthesis of proteins and the inducible isoform of nitric oxide synthase activity in the protective mechanism triggered by PostC. We have also demonstrated that ischemic damage is, at least in part, caused by an increase in glutamate synaptic concentrations and that PostC protected the retina by decreasing this parameter. Moreover, we have analyzed the alterations at retinal and visual pathway level provoked by experimental diabetes induced by streptozotocin (STZ). Al retinal level, diabetes caused significant functional, vascular, and morphological alterations. In addition, significant axo-glial alterations were observed at the distal portion of the optic nerve at early stages of diabetes that could be the first structural change in the diabetic visual pathway. Ischemic conditioning (weekly application of brief pulses of ischemia) significantly reversed all these alterations. Furthermore, the results suggest that a decrease in VEGF levels and the restoration of glutamine synthetase activity could be key aspects in the protective mechanism triggered by ischemic conditioning against diabetic retinopathy. Finally, we showed that intrinsically photosensitive retinal ganglion cells and the non-forming image visual system are preserved at advanced stages of diabetes. In summary, the results presented in this Thesis provide original insights for unraveling the mechanisms involved in the retinal damage induced by acute ischemia and diabetes, as well as in the possibility of preventing these processes through the induction of ischemic tolerance. The demonstration that the non-forming image visual system is less susceptible to diabetic damage is a valuable piece of information about this non canonical system of light transduction.

Fermani, Paulina. "Patrones de abundancia de los componentes del bucle microbiano en las lagunas pampeanas" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo general de esta Tesis es estudiar los patrones de abundancia de los componentes del bucle microbiano en lagunas pampeanas, utilizando como marco de referencia la Teoría de Estados Estables Alternativos (Scheffer et. al.; 1993) y el modelo de Gasol (1994). En la laguna El Triunfo (aguas claras) la abundancia de bacterias heterótrofas (BH) y flagelados heterótrofos (FH) se encuentran sobre el extremo más productivo del modelo de Gasol (1994), y el grado de acople entre estos componentes es débil; concordando con las predicciones de Perntahler (2005) quienes utilizan el model de Gasol (1994) como marco de referencia. Desde el punto de vista de la teoría de estados alternativos, esta laguna constituye un caso en el que parecen cumplirse sus predicciones. No obstante, uno esperaría que en un cuerpo de agua dominado por macrófitas, el metazooplancton se caracterice por ser abundante y con una alta eficiencia de filtración, lo cual implicaría también un débil acoplamiento entre BH y FH; sin embargo, no se encontró evidencia de este tipo de zooplancton. En la laguna Chascomús (aguas turbias), las abundancias de BH exceden el límite máximo contemplado en el modelo de Gasol (1994), lo que constituye un aporte en sí mismo. El grado de acople observado entre FH y BH resultó levemente superior a las predicciones del modelo. Desde la perspectiva de la teoría de estados alternativos, se esperaría que el metazooplancton de una laguna turbia estuviese dominado por rotíferos y/o copépodos ciclopoideos. Durante el estudio se pudo distinguir dos períodos que difieren marcadamente en la composición del zooplancton: el año 2008 dominado por pequeños cladóceros y copépodos, y el año 2009 dominado por rotíferos y copépodos. Estas diferencias no modificaron el grado de trofismo general de la laguna, pero sí se tradujeron en un distinto grado de acople entre FH y BH: el dasacople (D) resultó significativamente menor durante el primer período que en la segunda mitad del estudio. Ni el modelo original de Gasol (1994) ni sus desarrollos posteriores proveen elementos para interpretar estos resultados. Los patrones de abundancia de BH y FH en 40 lagunas pampeanas confirman la existencia de una gran diversidad de ambientes. Este estudio permite completar el modelo de Gasol (1994), ya que muchas de estas lagunas proporcionan valores que exceden los límites de abundancia del modelo y resultan comparables, o superiores, a los valores más altos reportados en la literatura. Desde el punto de vista de la teoría de estados alternativos, no se encontró evidencia de que la población de lagunas pampeanas se segreguen en dos estados alternativos discretos, sino que se encontró un gradiente de condiciones, tanto de indicadores de estado trófico, como de transparencia. Por otra parte, el grado de acople entre FH y BH no mostró ninguna tendencia ni con los indicadores de estado trófico, ni con los de transparencia. Por lo tanto esta teoría no parece ser de utilidad para evaluar los patrones de abundancia de FH y BH en el conjunto de las lagunas pampeanas, dado que no se cumplen ni sus supuestos ni sus predicciones.

Abstract:
The aim of this thesis is to study the abundance patterns of microbial loop components in Pampean lakes, using as a framework the theory of alternative stable states (Scheffer et. al., 1993) and Gasol model (1994). In shallow lake El Triunfo (clear water) the heterotrophic bacteria (HB) and heterotrophic flagellates (HF) abundances are on the far more productive in the Gasol model (1994), and the degree of coupling between these components is weak, in accordance with the predictions of Perntahler (2005) who used the Gasol’s model (1994) as a reference. According with the theory of alternative states, one would expect in a shallow lake dominated by macrophytes that the metazooplankton will be characterized by abundant and high efficiency filtration, which would also imply a weak coupling between HB and HF, but there was no evidence this type of zooplankton. In shallow turbid lake (Chascomús), the HB abundance exceeds the ceiling set in the Gasol model (1994), which itself is a contribution. The degree of coupling observed between HF and HB was slightly higher than model predictions. From theory of alternative states perspective, one would expect that the metazooplankton was dominated by rotifers and/or cyclopoid copepods. During the study it was possible to distinguish two periods that differ markedly in the composition of zooplankton: 2008 dominated by small cladocerans and copepods, and 2009 dominated by rotifers and copepods. These differences did not change the overall trophic level of the lake, but led to a different degree of coupling between HF and HB: the decoupling (D) was significantly lower during the first period in the second half of the study. Neither the original model of Gasol (1994) and subsequent developments provide elements to interpret these results. HB and HF abundance patterns in 40 Pampas wetlands confirm the existence of a wide range of environments in terms of abundance of HF and HB. This study allows to complete the model of Gasol (1994), as many of these gaps provide values which exceed the limits of abundance of the model and are comparable or superior to the highest values reported in the literature. From the standpoint of the theory of alternative states, there was no evidence that the population of Pampean lakes are segregated into two discrete alternative states, but found a gradient of conditions, both trophic status indicators, such as transparency. Moreover, the degree of coupling between HF and HB showed no tendency with trophic status indicators or with transparency. Therefore this theory does not seem to be useful for assessing patterns of HF and HB abundance in the whole of the Pampas wetlands, as not met or their assumptions or their predictions.

Fazio, Ana. "Alimentación de gaviotas cocineras (Larus dominicanus) de piel y grasa de ballenas francas del sur (Eubalaena australis) en Península Valdés, Argentina" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La gaviota cocinera (Larus dominicanus) es una especie con hábitos de alimentación generalista y oportunista que en Península Valdés también se alimenta de trozos de piel y grasa de las ballenas francas del sur (Eubalaena australis). Este comportamiento se ha incrementado desde su primera observación en 1972 al igual que la población de gaviotas y de ballenas. Los objetivos de este trabajo fueron evaluar si este comportamiento parásito es una conducta generalizada en la población de gaviotas, describir la distribución espacio-temporal de los ataques, determinar las variables que más se relacionan con esta interacción y establecer las posibles consecuencias sanitarias para las ballenas. Durante las temporadas 2005 al 2008 se realizaron 1.559 embarques desde Puerto Pirámides con 5.703 avistajes. En los años 2009 y 2010 se realizaron 657 avistajes costeros en el área de El Doradillo. Las gaviotas atacaron a las ballenas en la mitad de las ocasiones en que co-ocurren en un avistaje al menos una gaviota y una ballena. Las mayores frecuencias y tasas de ataque se registraron sobre los pares madrecría, especialmente sobre las crías y cerca de la costa en agosto y septiembre, coincidentemente con el mayor número de ballenas y gaviotas en el área. El comportamiento de ataque fue más frecuente e intenso en la zona de El Doradillo. Una gran parte de las observaciones de ballenas adultas y casi todas las de crías de la población de Península Valdés presentaron heridas provocadas por gaviotas cocineras durante la temporada reproductiva y más de la mitad de las observaciones de ballenas adultas presentaron algún otro tipo de lesión de piel. El aumento de las tasas de ataque encontradas en la actualidad podría desencadenar un futuro problema de conservación para las ballenas.

Abstract:
Kelp gulls (Larus dominicanus) are generalist and opportunist seabirds that also feed on pieces of skin and blubber from Southern right whales (Eubalaena australis) at Península Valdés, Argentina. In addition to the kelp gull and whale population growth, interactions between gulls and whales have also increased since the first record in 1972. The main goal of this study was to evaluate if this parasitic behavior is a generalized conduct in the kelp gull population, describe the spatial and temporal distribution of the attacks, assess the most related variables to gull attacks and establish the possible sanitary consequences to whales. During the seasons 2005 to 2008, 1,559 boat trips and 5,703 whale-watching sightings were made from Puerto Pirámides. In the years 2009 and 2010, 657 coastal sightings were made from El Doradillo. Gulls attacked whales in half of the occasions at least one gull and one whale co-occurred in a sighting. The highest frequency of sightings with attacks as well as attack rates were registered on mother-calf pairs, especially on calves and near the coast in August and September, coincidentally with the major number of whales and gulls in the area. The attack behavior was more frequent and intense in El Doradillo. Many observations of adult whales and most the calves‟ of the Península Valdés population presented injuries provoked by gulls during the reproductive season, and more than half of observations of adult whales presented some other kind of skin lesion. The increasing attack rates encountered could cause a future conservation problem to whales.

Fasanella, Mariana. "Variabilidad genética espacial y ecología molecular en dos especies de roedores del Archipiélago de Tierra del Fuego: Ctenomys magellanicus, especie nativa y Castor canadensis, especie invasora" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis, se analizan a nivel molecular dos especies que habitan el Archipiélago de Tierra del Fuego (ATDF): una especie endémica (Ctenomys magellanicus) y una invasora (Castor canadensis). Ctenomys magellanicus se encuentra en estado Vulnerable según la UICN y es la única especie del género Ctenomys que se encuentra en Tierra del Fuego, mientras que el castor es la exótica más importante del ATDF y que genera mayores problemas a nivel ecológico y económico. Utilizando trampas de captura muerta, se capturaron 255 ejemplares de C. canadensis muestreados en todo el ATDF incluyendo Chile y Argentina, mientras que se capturaron 60 ejemplares de C. magellanicus de la zona norte de la Isla Grande de TDF (Argentina) utilizando trampas de captura viva. Utilizando marcadores moleculares (ADNmt y microsatélites), se estudió la variabilidad genética y la estructura genético poblacional de ambas especies. Para esto se subdividió a la población de castor en 5 subpoblaciones y a la de tucos en dos regiones (REGION NORTE y REGION SUR) según la forma cromosómica y dentro de cada una en 2 y 4 subpoblaciones respectivamente. Para C. magellanicus se detectaron 9 haplotipos de ADNmt, 3 exclusivos de la REGION NORTE y 6 exclusivos de la REGION SUR mientras que para castor se encontraron 7 haplotipos distribuidos en casi todas las subpoblaciones. Se encontró una significativa estructuración genética en la población de tucos (tanto con el marcador mitocondrial Φst=0,181 p=0,001 como con el nuclear Fst=0,108 p=0,001) a diferencia de la población de castores, que no presentó estructuración significativa en ambos marcadores moleculares (Φst=0,058 p=0,002; Fst=0,052 p < 0,001). Los resultados del ADNmt y los microsatélites mostraron una alta variabilidad para tucos mientras que para castor la variabilidad fue menor. Por último, en castor, se identificó a la Isla Dawson (subpob E) como una Unidad de Erradicación (UE) mientras que dentro de la Isla Grande, al haber muy baja estructuración poblacional no se pudieron identificar UE. Debido a que en la Isla Grande no existen barreras a la dispersión para los castores, se deberá realizar un control simultáneo en toda la isla para evitar posibles recolonizaciones. Si bien los datos para Ctenomys magellanicus aportan información parcial, se podrían sugerir 5 Unidades de Manejo (UM) basadas en la estructuración genética: 4 UM para la REGION SUR y 1 UM para la REGION NORTE.

Abstract:
In this thesis, we analyze at the molecular level two species that inhabit the Tierra del Fuego Archipelago (TDFA): an endemic (Ctenomys magellanicus) and an invasive species (Castor canadensis). Ctenomys magellanicus is in a Vulnerable state by the UICN and is the only species of the genus Ctenomys found in Tierra del Fuego, while the beaver is the most important exotic in the TDFA and generates the biggest problems at the ecological and economic levels. Using killing traps we capture 255 individuals of C. canadensis sampled throughout the TDFA including Chile and Argentina, while we capture 60 individuals of C. magellanicus from the north of the Isla Grande of TDF (Argentina) live trapping. Using molecular markers (mtDNA and microsatellites), we studied the genetic variability and population genetic structure of both species. For this, beaver population was further divided into 5 sub-populations and C. magellanicus was divided into two regions (NORTH REGION and SOUTH REGION) according to the chromosome form and within each into 2 and 4 sub- populations respectively. For C. magellanicus we detected 9 mitochondrial haplotypes, 3 exclusive from the NORTH REGION and 6 exclusive from SOUTH REGION while for beaver we found 7 haplotypes in almost all sub-populations. There was a significant population genetic structure in tucos (both with mitochondrial marker Φst=0,181 p=0,001 as with nuclear Fst=0,108 p=0,001) as opposed to the beaver population which did not present significant structure in both molecular markers (Φst=0,058 p=0,002; Fst=0,052 p < 0,001). Microsatellite and mtADN results showed a high variability in tucos while in beavers the variability was less. Finally, in beavers, we identified Isla Dawson (Subpop E) as an Eradication Unit (EU) while inside the Isla Grande, we could not identified EUs because of the very low population structure. Since on the Isla Grande there are no barriers to dispersal for beavers, it should be performed a simultaneously control on the island to avoid recolonization. While data on Ctenomys magellanicus provide partial information, we could suggest 5 Management Units (MU) based on the genetic structure: 4 MU for the SOUTH REGION and 1 MU for the NORTH REGION.

Farías, María Edith. "Autoensamblaje del caseinomacropéptido (CMP) y su impacto en la gelificación y espumado" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo de este trabajo fue estudiar mediante dispersión dinámica de luz (DLS) el autoensamblaje del caseinomacropéptido (CMP) en relación al pH, tipo de ácido y presencia de sales y su impacto en la gelificación y el espumado. A pH 7,0, las soluciones de CMP son estables con el tiempo y no gelifican aún bajo calentamiento. La forma predominante del CMP en estas condiciones es la monomérica. A pH < 4,5 ya sea a temperatura ambiente o por calentamiento, el CMP genera en el tiempo una estructura ordenada gelificada de características viscoelásticas, baja dureza y cohesividad. Dicha estructura es reversible a un cambio ulterior de pH pero no a la forma monomérica original. Se propuso un modelo de autoensamblaje y gelificación del CMP. El autoensamblaje del CMP y su gelificación están modulados por diferentes condiciones del medio: pH, temperatura, tipo de ácido y presencia de sales. El tipo de ácido y la presencia de sales impactan en la asociación del CMP por vía hidrofóbica, la cual constituye la primera etapa del autoensamblaje, conduciendo a dímeros (HCl), tetrámeros (ácido cítrico, ácido láctico, NaCl, CaCl2) o hexámeros (ácido acético). Estas formas asociadas del CMP son las que posteriormente interactúan a pH < 4,5 por via electrostática (segunda etapa del autoensamblaje) conduciendo en el tiempo a una estructura ordenada gelificada. Las propiedades de espumado del CMP también están relacionadas con su autoensamblaje y gelificación ya que la estabilidad de las espumas tanto al colapso como al drenado aumenta significativamente a pH < 4,5.

Abstract:
The aim of this work was to study by dynamic light scattering (DLS) the self-assembly of caseinomacropeptide (CMP) as affected by pH, type of acid and salts as well as its effect on gelling and foaming. At pH 7.0, CMP solutions are stable over time and do not gel even under heating. The dominant form of CMP in these conditions is the monomer. At pH < 4.5, at room temperature or upon heating, the CMP generates an ordered gelled structure with viscoelastic characteristics, low hardness and cohesiveness. This structure is reversible to a subsequent change of pH but not to the original monomeric form. CMP selfassembly and gelation are modulated by different environmental conditions: pH, temperature, type of acid and presence of salts. A model to explain CMP self-assembly and the formation of a gel is proposed. The type of acid and the presence of salts have an impact on the association of CMP via hydrophobic interactions, which constitutes the first stage of self-assembly, leading to dimers (HCl), tetramers (citric acid, lactic acid, NaCl, CaCl2) or hexamers (acetic acid). These associated forms interact subsequently at pH < 4.5 via electrostatic interactions (second stage of self-assembly) leading over time to a gelled structure. The foaming properties of CMP are also related to its self-assembly and gelation as the stability of foams both to drainaige or collapse were slightly increased at pH < 4.5.

Falibene, Agustina L.. "Modulación del comportamiento alimentario en hormigas: fisiología de la ingestión de néctar" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La alimentación es un comportamiento complejo cuya regulación involucra la integración de factores externos e internos. En insectos sociales este comportamiento no solo varía de acuerdo a las características del alimento y las condiciones ambientales sino que también de acuerdo a los requerimientos de la colonia. En este trabajo combinamos estudios de comportamiento, electrofisiológicos, farmacológicos e inmunocitoquímicos para estudiar cómo distintos factores afectan la ingestión de soluciones azucaradas en la hormiga Camponotus mus. Nuestros estudios mostraron que el ayuno de la colonia determina la motivación recolectora de la hormiga forrajera modificando la concentración umbral de aceptación y su comportamiento de ingestión no solo de soluciones azucaradas sino también de cebos tóxicos. Durante la ingestión, el accionar de la bomba de succión estuvo determinado por el ayuno de la colonia, la temperatura ambiental, la concentración de sacarosa y la presencia de tóxico en la solución. Cambios en estas variables dieron lugar a variaciones en la velocidad y el tiempo de ingestión a través de la modulación de la frecuencia de bombeo, el volumen de solución incorporado por cada bombeo o el número de bombeos totales. Indagamos sobre los mecanismos neuroendócrinos involucrados y encontramos un efecto depresivo de la serotonina sobre la ingestión. También observamos la presencia de neuronas serotoninérgicas en los centros nerviosos involucrados en el control de la alimentación e inervaciones serotoninérgicas a lo largo del tubo digestivo. En conjunto, estos resultados nos permiten una comprensión integral de cómo distintos factores modelan el comportamiento de ingestión en hormigas y cómo esto se integra con estratégias de recolección eficientes en condiciones siempre cambiantes.

Abstract:
Feeding is a very complex behaviour and its regulation requires the integration of both internal and external factors. Social insects present a special case: not only do the quality of food and the environmental conditions determine their feeding behaviour, but also the colony´s requirements. In the present work we combined behavioural, electrophysiological, pharmacological and immunocitochemical studies in order to investigate how different factors affect the nectar ingestion in the ant Camponotus mus. Our results showed that colony starvation determines forager motivation by modifying its acceptance threshold and its feeding behaviour not only of sucrose solutions but also of toxic baits. During ingestion, sucking pump activity was determined by colony starvation level, ambient temperature, sucrose concentration and presence or not of toxic in the ingested solution. Changes in these variables prompted variations in the intake rate and the feeding time by modulating the pumping frequency, the volume uptake per pump contraction or the total number of pump contractions. We explored the neuroendocrine mechanisms involved in this regulation and we found a depressant effect of serotonin on food intake. We also observed the presence of serotonin immunoreactive cell bodies on the main nervous centres involved in feeding control and serotonergic innervation along the digestive tube. Alltogether, these results allow for an integral understanding of how different factors model feeding behaviour in ants and how this articulates with efficient foraging strategies in ever-changing conditions.

Fachinetti, Carolina. "Coloración del plumaje, sistema de apareamiento y elección de pareja en el Capuchino Canela (Sporophila hypoxantha)" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El Capuchino Canela, Sporophila hypoxantha, es una especie sexualmente dicromática, siendo los machos adultos más coloridos y los machos juveniles indistinguibles a simple vista de las hembras. Poco se conoce sobre esta especie y los objetivos de este trabajo fueron estudiar algunos aspectos de su biología reproductiva y el posible rol de la coloración de los machos en la elección de pareja por parte de las hembras y/o en la competencia intraespecífica. Se estudió el sistema de apareamiento social y genético y la participación de machos y hembras en el cuidado parental de los huevos y/o pichones, utilizando filmaciones de nidos y herramientas moleculares. Por otro lado, se analizaron la microestructura de cortes de bárbulas de machos y hembras y la maduración de la coloración del plumaje de los machos, evaluando si existen diferencias cripticas con la coloración del plumaje de las hembras utilizando espectrofotometría de reflectancia y un modelo visual de discriminación del color. Finalmente, en experimentos con animales en cautiverio, se evaluó si la elección de pareja por parte de las hembras y la dominancia en contiendas por acceso a recursos estaban asociadas a la coloración y/o edad de los machos. El Capuchino Canela presenta monogamia social con cuidado biparental sesgado hacia las hembras. Sin embargo, se encontró que existe un mínimo del 13% de los pichones que son el resultado de fertilizaciones por fuera de la pareja social, lo que indica que el sistema de apareamiento social difiere del genético. La coloración del pecho es principalmente el resultado de la presencia de melanina y las diferencias observadas en la coloración de machos adultos y hembras se debe principalmente a la concentración de los gránulos de melaninas, mientras que las diferencias entre machos adultos y juveniles, a la distribución de los mismos en las bárbulas. La coloración de la corona es principalmente estructural, y las diferencias entre machos adultos y hembras se deben a diferencias en la organización de los gránulos de melanina en las bárbulas. Los machos presentan maduración tardía del plumaje adquiriendo el plumaje definitivo a los dos años de edad, y durante el primer año de vida, si bien parecen ser indistinguibles de las hembras, presentan diferencias en la coloración del pecho y de la corona que podrían ser percibidas por su sistema visual. En los experimentos de elección de pareja y dominancia se observó que las hembras no mostraron una clara preferencia por la coloración o edad de los machos, y que la coloración del pecho de los machos no parece ser un indicador de la dominancia social bajo estas condiciones de estudio.

Abstract:
The Tawny-bellied Seedeater, Sporophila hypoxantha, is a sexually dichromatic species, with adult males more colorful and juvenile males indistinguishable from females. Little is known about this species and the aims of this work were to study some aspect of the reproductive biology and evaluate if male coloration is a sexually selected trait or an indicator of male social dominance. I studied the social and genetic mating system and the extent of parental care provided by females and males using videotapes of nest activity and molecular tools. I also examined electronic micrographs of barbules from males and females and studied plumage maturation of males and determined if juvenile males and females differ in plumage coloration using reflectance spectrometry and an avian model visual system. Finally, I conducted mate choice and dominance experiments in captivity. I found that the Tawny-bellied Seedeater is a social monogamous species with biparental care biased towards the females. However, I found a minimum of 13% of young that were the result of extra pair fertilizations, which indicates that the social and genetic mating systems are different. Breast plumage coloration was melanin-based, the differences between adult males and females were the result to differences in melanin concentration, while differences between adult and juvenile males were the result of differences in the distribution of the pigment in the barbules. Crown coloration was mainly structurally-based, and the differences between adult males and females were the result to differences in the organization of the melanin granules in the barbules. Males showed delayed plumage maturation and acquired the definitive plumage before the second reproductive season. During the first year of life juvenile males were distinguishable from females in breast and crown coloration and these differences can be detected by the visual system of conspecifics. Finally, in mate choice and dominance experiments, females did not show a clear preference for males breast coloration or age, and breast coloration of males appears not to be an indicator of social dominance under my experimental conditions.

Estalles, María Lourdes. "Características de historia de vida y explotación comercial de la raya Sympterygia bonapartii en el Golfo San Matías" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Sympterygia bonapartii se distribuye desde Río de Janeiro (23º S), Brasil hasta Santa Cruz (51º S), Argentina. El objetivo de este estudio fue estimar los parámetros de historia de vida y caracterizar los desembarques comerciales de la especie en la pesquería de arrastre de fondo del Golfo San Matías (GSM). Los ejemplares se colectaron en el GSM durante los años 2004-2010. Los mismos provinieron de las campañas de evaluación de recursos demersales realizadas por el Instituto de Biología Marina y Pesquera ―Alte. Storni‖; del programa de observadores a bordo de las embarcaciones pesqueras de la Provincia de Río Negro y de los muestreos mensuales de desembarques de la flota de arrastre local. Las mayores concentraciones de individuos se registraron entre los 80 y 100 m de profundidad en el sector este del golfo. La talla de madurez sexual para los machos y las hembras se estimó en 545 y 594 mm, respectivamente. La especie presentó un ciclo reproductivo estacional. La época de apareamiento ocurriría de julio a diciembre y la de puesta de septiembre- octubre a febrero. De acuerdo al análisis de la dieta, la especie se consideró como consumidora secundaria, de hábitos bentónicos. La dieta se describió como carcinófaga y presentó variaciones de acuerdo al sexo, talla y período del año. En la pesquería de arrastre local, S. bonapartii fue la raya con mayor cantidad de individuos desembarcados y la segunda por su contribución en peso. Los desembarques de la especie se caracterizaron por un predominio de ejemplares maduros y de hembras. Esto sugiere la presencia de segregación sexual y de una selección de tallas a bordo de las embarcaciones por parte de la tripulación.

Abstract:
Sympterygia bonapartii is distributed from Rio de Janeiro (23º S) Brazil to Santa Cruz (51º S) Argentina. The objective of this study was to describe its life history traits and to characterize its commercial landings in the bottom trawl fishery of San Matías Gulf (SMG). Individuals of S. bonapartii were sampled in GSM during 2004-2010. They were collected during research surveys performed by the Institute of Marine Biology and Fisheries ―Alte. Storni‖ aiming at assessing demersal resources; the onboard observer program of Río Negro Province and monthly samples of port landings from the local fishery. Sympterygia bonapartii showed the highest concentrations of individuals between 80 and 100 m deep, in the eastern region of SMG. Size at maturity (TL50%) was estimated at 545 and 594 mm for males and females respectively. The skate exhibited a seasonal reproductive pattern. The mating season was estimated to take place from July to December and the egg-laying season from September-October to February. The skate was considered a secondary consumer with benthic habits. Its diet was mainly composed of crabs and showed significant differences depending on sex, size group and period of the year. Sympterygia bonapartii exhibited the highest number of individuals and it was the second one for its contribution in weight in commercial landings from the local fishery. The presence of the species was detected throughout the year, with predominance of females and of mature individuals. These suggest that the species may segregate by sex and that the crew may perform a selection of the individuals on board the vessels.

Echazú, Daniela María. "Biodiversidad de diatomeas en humedales del sur de la Provincia de Santa Cruz, Argentina" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las diatomeas constituyen un importante componente de las comunidades acuáticas ya que tienen una distribución cosmopolita, ocupan una amplia variedad de hábitats y su distribución está relacionada con la química del agua, el clima y la geología. Además de ser utilizadas como bioindicadores actuales constituyen una valiosa herramienta para realizar inferencias paleoclimáticas. A pesar de su importancia, en Santa Cruz hay pocos antecedentes referidos a los ensambles diatomológicos y su relación con las características ambientales. El objetivo general de esta tesis fue relevar la biodiversidad de las diatomeas en humedales (turbales, lagos y lagunas) en Santa Cruz entre los 49º y 52º S y relacionarla con variables ambientales a fin de recopilar datos ecológicos útiles para la interpretación de secuencias fósiles en lagos y lagunas. Se registraron diatomeas en 41 sitios de los 45 muestreados. Se identificaron 80 géneros y 313 taxones infragenéricos, de los cuales 40 son nuevas citas para la Argentina y 108 son mencionadas por primera vez para la provincia. Se propone una nueva especie (Encyonopsis patagonensis Echazú & Maidana), una nueva variedad (Biremis schwabei var. undulata Echazú & Maidana) y cuatro nuevas combinaciones (Achnanthidium abundans (Manguin) Echazú & Maidana, Achnanthidium didymun (Hustedt) Echazú & Maidana, Achnanthidium exiguum var. angustirostrata (Krasske) Echazú & Maidana y Achnanthidium marginulatum (Grunow) Echazú & Maidana). Se registraron 10 taxones (3,2 % del total) aparentemente endémicos del Hemisferio Sur y, de los restantes, la mayoría son cosmopolitas o con distribución nórdico alpina. El 12 % no pudo ser identificado a nivel de especie y se estima que alrededor del 4 % podrían ser nuevas especies. La composición y la estructura de los ensambles de diatomeas tanto en los turbales como en los lagos y lagunas fueron altamente heterogéneas y no mostraron un claro patrón relacionado con la ubicación geográfica. Los ensambles diatomológicos en los sedimentos superficiales de los lagos y lagunas se correlacionaron positiva y significativamente con la conductividad, el Nitrógeno total, los nitratos, el Fósforo total, los cloruros y los iones calcio y fluor. Con los datos obtenidos se confeccionó un set de calibración que permitirá, luego de ser ampliado, la aplicación de funciones de transferencia en testigos sedimentarios.

Abstract:
Diatoms are important components of aquatic communities as they have a cosmopolitan distribution, occupy a wide variety of habitats and their distribution is related to water chemistry, climate and geology. Besides being used as current bioindicators, they are valuable tools for paleoclimatic inferences. Despite its importance, in Santa Cruz there are few records of studies of diatom assemblages and its relation to environmental characteristics. The main objective of this Thesis was to survey the biodiversity of diatoms in wetlands (peatlands, lakes and ponds) in Santa Cruz between 49° and 52° S and relate with environmental variables in order to collect ecological data useful for the interpretation of fossil sequences in lakes. Diatoms were recorded in 41 of the 45 sites sampled. We identified 80 genera and 313 infrageneric taxa, of which 40 are new records for Argentina and 108 are mentioned for the first time for the province. We propose a new species (Encyonopsis patagonensis Echazu & Maidana), a new variety (Biremis schwabei var. undulata Echazú & Maidana), and four new combinations (Achnanthidium abundans (Manguin) Echazú & Maidana, Achnanthidium didymun (Hustedt) Echazú & Maidana, Achnanthidium exiguum var. angustirostrata (Krasske) Echazú & Maidana y Achnanthidium marginulatum (Grunow) Echazú & Maidana). There were 10 taxa (3,2 % of total) apparently endemic to the southern hemisphere and most of the remaining taxa are cosmopolitan or they have Nordic-alpine distribution. 12 % of the taxa could not be identified to species and it is estimated that about 4% could be new for science. The composition and structure of diatom assemblages in both peatlands and in lakes and ponds were highly heterogeneous and showed no clear pattern related to geographic location. Diatom assemblages in surface sediments of lakes and ponds were positively and significantly correlated with conductivity, total nitrogen, nitrates, total phosphorus, chloride and calcium and fluorine ions. A set training was developed with the obtained data. After being enlarged, it could be used in the application of transfer functions for quantitative paleoenvironmental reconstructions.

Diez, Berenice Andrea. "Estudios sobre la terapia fotodinámica a partir de ALA en células leucémicas sensibles y resistentes a drogas de quimioterapia" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La Terapia Fotodinámica (TFD) es utilizada para el tratamiento del cáncer y otras patologías no malignas. Se basa en la administración un compuesto fotosensibilizante (FS) que se acumula selectivamente en el tejido maligno y al recibir fotones interactúa con el O2 produciendo especies reactivas del oxígeno (ROS), que son altamente tóxicas y desencadenan la muerte celular. La administración exógena del ácido 5-aminolevúlico (ALA), precursor biológico de la síntesis de los tetrapirroles, induce la acumulación de protoporfirina IX (PpIX), un FS muy eficiente. La quimioterapia administrada en altas dosis, seguida del transplante autólogo de médula ósea es una de las modalidades terapéuticas más utilizadas para el tratamiento de la leucemia. Sin embargo, una pequeña proporción de células leucémicas indiferenciadas que se encuentran en un estado quiescente, pueden resultar resistentes a la quimioterapia y ser reinsertadas en el paciente luego del transplante. Por este motivo actualmente se estudian métodos de purgado potencialmente efectivos para eliminar a las células malignas remanentes. Además, el uso de quimioterapia presenta otras limitaciones como el desarrollo de fenotipos celulares resistentes a drogas y efectos secundarios no deseados. En esta tesis hemos estudiado los efectos de la TFD basada en ALA (TFD-ALA) en tres líneas celulares leucémicas murinas, LBR-, sensible a drogas de quimioterapia, LBR-D160 y LBR-V160, resistentes a doxorubicina (DOX) y vincristina (DOX), respectivamente. Para ello evaluamos la síntesis y acumulación de PpIX sintetizada a partir de ALA, y observamos que en las tres líneas estudiadas esta síntesis aumentó en función de la concentración y del tiempo de incubación con ALA. Estudios de microscopía confocal indicaron que las mitocondrias son el principal sitio de localización de PpIX. Mediante estudios de viabilidad celular demostramos la eficacia de la TFD-ALA en las tres líneas celulares, indicando la falta de resistencia cruzada en el caso de las líneas resistentes a drogas de quimioterapia. Por otra parte estudiamos los mecanismos involucrados en la muerte celular producida por la TFD, donde observamos un aumento en los parámetros de estrés oxidativo como la despolarización de la membrana mitocondrial, la producción de oxígeno singulete y de anión superóxido, indicando la importancia de las mitocondrias en los efectos de la TFD. El análisis de parámetros tanto morfológicos como bioquímicos demostró la predominancia de apoptosis como principal mecanismo de muerte, en particular a través de la vía intrínseca, lo que concuerda con el rol activo de las mitocondrias previamente mencionado. Evaluamos además los efectos al combinar la TFD-ALA con los agentes antineoplásicos DOX y VCR, en un modelo in vitro in vivo, utilizando la línea LBR-. En ambos casos observamos un beneficio significativo al utilizar las terapias combinadas, evidenciando la ventaja de esta modalidad frente a las terapias utilizadas en forma independiente. Los resultados obtenidos en esta tesis demuestran el beneficio potencial de utilizar la TFD-ALA como método de purgado de la médula ósea de pacientes con leucemia, especialmente para eliminar fenotipos resistentes a drogas. Además, los estudios utilizando las terapias combinadas indican la posibilidad de disminuir las dosis de drogas de quimioterapia, minimizando así las limitaciones ocasionadas por este tratamiento.

Abstract:
Photodynamic therapy (PDT) is a cancer treatment modality which involves the administration of a given photosensitizing agent (PS), its preferential accumulation in malignant tissue and the subsequent activation by light of appropriate wavelength. Interaction between the excited PS and molecular oxygen produces singlet oxygen as well as other reactive oxygen species (ROS) selectively destroying the target cells. Exogenous administration of 5-aminolevulinic acid (ALA) induces the accumulation of protoporphyrin IX (PpIX), a highly photosensitive compound. Autologous bone marrow transplantation (ABMT) after high dose chemotherapy is a widely accepted therapeutic modality for the management of hematologic malignancies. The major disadvantage of this approach is the possible contamination of the autograft with remaining leukemic cells which leads to recurrence of the disease. Besides, the use of chemotherapy agents promotes the development of drug resistant phenotypes and produces serious side adverse effects in many patients. In this work we studied the effects of ALA-based PDT (ALA-PDT) in three leukemic murine cell lines: LBR-, drug sensitive, LBR-D160 resistant to doxorubicin (DOX) and LBR-V160, resistant to vincristine (VCR). The synthesis and accumulation of PpIX after ALA administration was evaluated, which increased with the concentration and incubation time with ALA. Confocal microscopy studies revealed that PpIX was mainly localized in mitochondria. Cell viability studies demonstrated that ALA-PDT was effective in the three cell lines, indicating the lack of cross-resistance in LBR-D160 and LBR-V160 cells. The mechanisms involved in the death caused by ALA-PDT were also studied. It was observed an increase in oxidative stress parameters, such as mitochondrial membrane depolarization, singlet oxygen and superoxide anion production. Morphological and biochemical studies showed that apoptosis, especially involving intrinsic pathway, was the main death mechanism induced by ALA-PDT. We also evaluated on the LBR- cell line the effects of ALA-PDT combined with DOX or VCR using an in vitro-in vivo model, and a significant benefit for combination therapies, with respect to each one independently, was found. The results obtained in this work show that ALA-PDT could be useful as a purging method during ABMT in leukemia patients, especially to eliminate drug resistant cells. Besides, the use of combined therapies allows the possibility of reducing the doses of chemotherapeutic agents, thus minimizing the limitations of this therapy.

de la Llave, Ezequiel Pablo. "Modelado computacional del comportamiento molecular en interfases y entornos nanoestructurados" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Esta tesis considera la interacción de moléculas en interfases y entornos confinados, utilizando herramientas de simulación molecular en varias escalas. Se abordan dos temáticas de gran interés en el área de la fisico-química de materiales, tanto por su valor fundamental en el contexto de los fenómenos en la nanoescala, como por las implicancias tecnológicas que tienen asociadas. Primeramente se investiga la interacción de diversas moléculas sobre la superficie de Au(111). Este estudio abarca sistemas aromáticos y alifáticos capaces de formar monocapas auto-ensambladas (SAMs), y se extiende a porfirinas de cobalto, como prototipo de complejo molécula-superficie con propiedades promisorias como sensor de ligandos pequeños. En particular se analizan similitudes y diferencias en distintos adsorbatos en los cuales el enlace químico con la superficie se produce a través de átomos de C, S o Se. Se emplea la teoría del funcional de la densidad (DFT) para indagar acerca de la geometría y la estabilidad de la unión, las densidades de estados electrónicos (DOS) total y proyectada, el espín total, la polarización del enlace, y la transferencia de carga entre la molécula y la superficie. La segunda línea de trabajo explora el comportamiento del agua en entornos confinados, en particular en poros de diámetro nanométrico característicos de materiales meso y nanoestructurados. Frente al desafío de obtener una descripción cabal de estos sistemas, se utilizan herramientas computacionales que van desde la simulación desde primeros principios hasta la mecánica molecular clásica con campos de fuerza atomísticos y de grano grueso (coarse-grained). Así es posible describir, desde una perspectiva molecular, la estructura del agua, el proceso de llenado de los nanoporos y los fenómenos de histéresis y condensación capilar durante la adsorción. Se discute acerca de la incidencia del radio del poro y la filicidad de las paredes del mismo sobre estos fenómenos. También se brinda una descripción microscópica de la estructura del hielo y de los equilibrios sólido-líquido y líquido-gas en estos entornos altamente confinados.

Abstract:
This thesis considers the interaction of molecules with interfaces and confined environments, using molecular simulation tools at different scales. Two major topics are addressed, of great relevance in the area of physical-chemistry of materials, both because of their fundamental value in the context of nanoscale phenomena, as well as for the technological implications associated with them. Firstly, we investigate the interaction of various molecules on the Au(111) surface. This study encompasses aromatic and aliphatic molecules able to form self assembled monolayers (SAMs), and is extended to cobalt porphyrins, as a prototype of a molecule-surface complex with promising properties for small ligand sensing. In particular, we analyze similarities and differences in different adsorbates in which the chemical bond with the surface is established through C, S or Se atoms. Density functional theory (DFT) is employed to inquire about the geometry and the stability of the interactions, the total and projected densities of electronic states (DOS and PDOS), the total spin, the polarization of the bond, and the charge transfer between the molecule and the surface. The second line of this work explores the behavior of water in confined environments, in particular in pores of nanometric diameters characteristic of meso and nanostructured materials. To face the challenge involved in a full description of these systems, computational tools are used ranging from first principles simulations to classical molecular dynamics with atomistic and coarse-grained forces fields. Thus it is possible to describe, from a molecular perspective, the structure of confined water, the filling process of the nanopore and the phenomena of hysteresis and capillary condensation during adsorption. We discuss about the incidence of the radius of the pore and the philicity of the interfaces on these phenomena. We also provide a microscopic description of the structure of ice, and of the solid-liquid and liquid-vapor equilibria on these highly confined environments.

de la Fuente, Verónica. "Mecanismos celulares y moleculares involucrados en las distintas fases de la memoria de condicionamiento de miedo en ratones" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el aprendizaje asociativo, la reactivación de la memoria por la presentación de un recordatorio puede inducir dos procesos mnésicos aparentemente opuestos, la reconsolidación o la extinción. En esta Tesis describimos un switch molecular entre mecanismos de transcripción que se inducen diferencialmente en el hipocampo en la determinación de dichos procesos. Encontramos que NF-kB es necesario para la reconsolidación, mientras que para la extinción su activación se ve restringida por la fosfatasa calcineurina. El factor de transcripción NFAT es activado a su vez por calcineurina durante la extinción, y es necesario para que este proceso tenga lugar. Por el contrario, NFAT parecería no tener ningún rol en la reconsolidación. La actividad de calcineurina también es necesaria para que se lleve a cabo el proceso de extinción. Esta fosfatasa jugaría entonces un doble papel: 1) induciendo la activación y translocación de NFAT desde el citoplasma hacia el núcleo, 2) bloqueando a la vez la activación de NF- kB. Asimismo, nuestros resultados en el estudio de la consolidación sugieren fuertemente que calcineurina actúa como limitante negativo en la formación de memorias, y su mecanismo de acción involucra la regulación del estado de activación de NF-kB. Profundizamos entonces el modelo en el que quinasas y fosfatasas dependientes de calcio controlan activamente el procesamiento neuronal, mediante un equilibrio finamente regulado en el que se oponen entre sí. Por último, estudiamos el rol de NF-kB en plasticidad estructural relacionada a procesos de memoria, y resultados preliminares nos indican que el mismo tendría un rol clave en el aumento de densidad de espinas asociado al aprendizaje.

Abstract:
In associative learning, memory reactivation by the presentation of a reminder can induce two behaviorally opposing memory processes, reconsolidation or extinction. In this PhD Thesis, using the fear conditioning paradigm in mice, we describe a molecular switch between transcriptional mechanisms that are induced differentially in the hippocampus by these two processes. We found that NF-kB is necessary for reconsolidation, whereas in extinction, its activation is constrained by the phosphatase calcineurin. The transcription factor NFAT is, in turn, necessary for the extinction process to take place, and it seems to have no role in reconsolidation. Calcineurin activity is also necessary for extinction. This phosphatase plays then a dual role: inducing the activation and translocation of NFAT from the cytoplasm to the nucleus, while blocking activation of NF-kB. Furthermore, our results in the study of the consolidation phase strongly suggest that calcineurin acts as a negative constraint in memory formation, and its mechanism of action involves the regulation of NF-ĸB activation. Thus, we support the model in which kinases and phosphatases actively control calcium-dependent neuronal processing through a finely regulated balance in which they oppose each other. Finally, preliminary results from our study on the role of NF-ĸB in structural plasticity related to memory processes indicate that it has a key role in the increase in spine density associated with learning.

Degese, María Sol. "Estudio de los caminos de señalización involucrados en la terminación de la señal de c-fos. Apagado de la activación a nivel del ARN mensajero" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La llegada de distintos tipos de señales a la superficie de las células altera la expresión génica mediante la activación de distintos caminos de transducción de señales. En este trabajo, nos enfocamos en el estudio de estímulos proliferativos y en como estos alteran la expresión del gen de respuesta inmediata, c-fos, factor de transcripción considerado como un proto-oncogén. Si bien tanto mensajero como la proteína Fos están ausentes en la mayor parte del ciclo celular, ambos aparecen y desaparecen rápidamente luego del estímulo. Nos hemos propuesto investigar la regulación de la estabilidad del ARN mensajero de c-fos dada por MAPKs. Una de las proteínas reguladoras de la estabilidad de los ARNm en la que centramos nuestro estudio es HuR, la cual se une al mensajero de c-fos en su región ARE o rica en adeninas y uracilos presente en la parte 3´UTR. Encontramos que p38 SAPK regula la asociación de HuR promoviendo su liberación del ARNm y llevándolo a degradación. Además p38 SAPK inhibe la fosforilación de HuR, sugiriendo la posible acción de alguna fosfatasa p38 dependiente. Encontramos también que KSRP se uniría al ARE de c-fos en los mismos sitios que HuR y su asociación puede revertir la estabilización dada por HuR o por la inhibición de p38, sugiriendo un rol positivo en la degradación del ARNm de c-fos.

Abstract:
Signals arriving to the cell surface may alter gene expression through the activation of different signaling pathways. In this work we focus in the study of proliferative stimuli and how they alter the expression of the immediate-early responsive gene c-fos, a transcription factor considered, as well, a proto-oncogene. Both messenger RNA and Fos protein are absent in most of the cell cycle, but they appear and disappear very fast upon stimulation. We have proposed to investigate the MAPKs´-dependent mRNA stability regulation. One of the most important regulators of the mRNA stability in which we focus our study is HuR that binds to the c-fos mRNA´s ARE (Adenine and uracil rich region) present in its 3´UTR. We found that p38 SAPK regulates the binding of HuR, promoting its dissociation from the mRNA and leading it to degradation. Besides, p38 SAPK inhibits HuR phosphorylation, suggesting a possible action of a p38 dependent phosphatase. We also found that KSRP may be binding to the c-fos ARE in the same sites as HuR and its association to this region is sufficient to revert the stabilization due both to HuR binding and to p38 activity inhibition, suggesting a positive role in c-fos mRNA degradation process.

Dansey, María Virginia. "Síntesis y actividad biológica de análogos de esteroides neuroactivos y hormonas esteroidales" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis se detallan los resultados obtenidos en la síntesis, actividad biológica y la relación estructura-actividad de nuevos análogos de esteroides bioactivos. Por un lado, se sintetizó un análogo no hidrolizable del 21-hemisuccinoiloxi-6,19-epoxiprogesterona (21HS-6,19OP), para lo cual se desarrolló una metodología one-pot sencilla de alquilación para la posición C-21 de 20- ceto pregnanos que consiste en la formación del sililenoléter, seguido de la condensación de Mukaiyama con un aldehído. El análogo obtenido resultó ser biológicamente inactivo a diferencia de su líder. Por otro lado, se diseñaron y sintetizaron cuatro A-homoanálogos del neuroesteroide allopregnanolona. A partir de progesterona comercial, se preparó un ciclopropilcarbinol que fue sometido a un reordenamiento catiónico catalizado por ácidos y promovido por microondas para dar un A-homo-3,5-pregnadieno. Este se epoxidó regioselectivamente con dioxiranos generados in situ, con un derivado de fructosa como catalizador y oxone® como oxidante para dar los análogos. Uno de ellos resultó tener una actividad in vitro sobre el receptor GABAA similar a la pregnanolona; los otros tres resultaron levemente activos demostrando que la libertad conformacional del anillo A de 7 miembros les permitiría a los análogos alcanzar conformaciones activas. A dos de los A-homoesteroides intermediarios de la síntesis, que por poseer una funcionalidad ceto en el anillo A son análogos de progesterona, se les ensayó la actividad sobre el receptor progestágeno (PR) y mineralocorticoide (MR), encontrando que estos actúan selectivamente sobre el primero, probablemente debido a un aumento en la hidrofobicidad del anillo A.

Abstract:
This thesis describes the synthesis, biological activity and structure-activity relationships of seven novel bioactive steroid analogues. In the first part, a non hydrolyzable analogue of 21- hemisuccinoyloxy-6,19-epoxyprogesterone (21HS-6,19OP) was synthesized. To achieve this goal, a straightforward one-pot alkylation methodology at C-21 of 20-keto pregnanes was developed, consisting of silylenol ether formation followed by a Mukaiyama aldol reaction. In contrast with the lead compound, the resulting analogue was biologically inactive. In the second part, four Ahomo neurosteroids analogues where designed and synthesized. Starting from commercially available progesterone, a ciclopropylcarbinol derivative was prepared, which was subjected to an acid catalyzed-microwave promoted cationic rearrangement to give an A-homo-3,5-pregnadiene. This diene was regioselectively epoxydized with a bulky dioxirane generated in situ from a fructose derivative and Oxone®. One of the analogues exhibited an in vitro activity on the GABAA receptor similar to pregnanolone; the other three analogues where only slightly active, proving that the conformational freedom provided by the seven membered A ring would allow the compounds to explore active conformations. Two A-homo synthetic intermediates with a ketone functionality on the A ring proved to be selective progesterone receptor (PR) agonists, lacking mineralo/antimineralocorticoid activity. The selectivity achieved might be due to the enhanced hydrofobicity of the expanded A ring.

Crocco, Carlos Daniel. "Rol de las proteínas B-box en las respuestas de escape al sombreado en Arabidopsis thaliana" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Cuando las plantas crecen a altas densidades perciben la presencia temprana de plantas vecinas sensando los cambios en la calidad de luz que las rodea. Esta percepción es mediada principalmente por los fitocromos, una familia de fotorreceptores que detectan una reducción en la relación rojo:rojo lejano (R:RL) causada por la proximidad de plantas vecinas induciendo un conjunto de respuestas morfo-fisiológicos tales como la elongación de hipocotilo y tallo, dominancia apical, aceleración de la floración, entre otros. Este conjunto de respuestas plásticas constituye “el síndrome de escape al sombreado”, SAS (del inglés, Shade Avoidance Syndrome). Si bien en los últimos años se ha comenzado a comprender los mecanismos moleculares involucrados en la SAS, aún nuestro conocimiento es escaso. En esta tesis estudiamos la función de las proteínas B-Box (BBX) en la señalización de la SAS en plántulas de Arabidopsis thaliana, enfocando nuestra atención en un subgrupo de esta familia que se caracteriza por presentar un doble dominio B-box en su región amino terminal. La caracterización fisiológica de algunos mutantes simples nos permitió demostrar que BBX18 y BBX24 promueven, mientras que BBX19, BBX21, BBX22 inhiben la respuesta de elongación por sombra. En particular, estudiamos el mecanismo de acción de BBX21 y BBX24 en la señalización de las SAS mediante aproximaciones genéticas-moleculares y fisiológicas. La escasa similitud que detectamos entre los transcriptomas asociados a BBX21 y BBX24 en respuesta a las señales de sombra sugiere que ambas proteínas participarían por vías distintas de señalización. En sombra prolongada, la función de BBX21 es inhibir la expresión de genes que codifican para proteínas involucradas en el crecimiento y proliferación celular, mientras que BBX24 promueve la expresión de genes del metabolismo y señalización de hormonas vinculadas a la SAS. Por medio de aproximaciones genéticas demostramos que BBX21 modula esta respuesta interaccionando genéticamente con COP1 (CONSTITUTIVE PHOTOMORPHOGENIC1), un represor maestro de la fotomorfogénesis que promueve la SAS. También demostramos que BBX24 participa en la misma vía de señalización que PIF4 (PHYTOCHROME-INTERACTING FACTOR 4), un factor de transcripción que promueve la elongación, y que interviene en la síntesis de giberelinas para promover la SAS. En base a los resultados obtenidos, se propone un posible mecanismo de acción de estas proteínas BBX en la modulación de la respuesta de escape al sombreado.

Abstract:
Plants grown at high densities perceive the presence of neighboring plants by sensing changes in light quality that surrounds and adapt their growth and development (Ballaré et al., 1990). This perception is mediated primarily by phytochrome, a family of photoreceptors that detect a reduction in the red:far red (R:RL) ratio as reliable indicator of future competition. Low R:FR light is perceived by the phytochromes, triggering dramatic changes in gene expression which lead to changes at morpho-physiological levels of shaded plants, such as hypocotyl and stem elongation, apical dominance and acceleration of flowering, which are collectively known as the shade-avoidance syndrome (SAS). Using Arabidopsis thaliana as model system, we study the role of B-Box proteins (BBX) in the SAS signaling pathway. Our study focused on the characterization of a subset of these BBX proteins, which have a high homology between their sequences and two Bbox domains at the N-terminal region. The physiological characterization of some single mutants allowed us to demonstrate that while BBX18 and BBX24 promote elongation, BBX19, BBX21 and BBX22 inhibit elongation response under shade. We use physiological, genetic and molecular approach to understand the mechanism of action of BBX21 and BBX24 in the SAS signalling pathway. The low similarity between the transcriptomes of BBX24 and BBX21 suggested that both proteins participate by different signaling pathways to modulate SAS. In long term shade, BBX21 inhibits the expression levels of genes that promote cell growth and proliferation, while BBX24 is promoting genes involve in hormones biosynthesis and signaling pathway related to the shade. Applying genetic approaches, we demonstrated that BBX21 interacting genetically with COP1 (CONSTITUTIVE PHOTOMORPHOGENIC1), a master repressor of photomorphogenesis, in the regulation of SAS. We also demonstrated that BBX24 and PIF4 (PHYTOCHROMEINTERACTING FACTOR 4) are part of the same signaling pathway and that BBX24 promoted gibberellin biosynthesis during the SAS. Based on these results, we propose a possible mechanism of action of these BBX proteins in shade avoidance response.

Cámara, María de los Milagros. "Avances en el estudio de la Adenilato Quinasa Nuclear de Trypanosoma cruzi" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Trypanosoma cruzi, el agente etiológico del Mal de Chagas es un eucariota inferior en donde el control de la expresión génica recae mayormente en mecanismos postraduccionales. Durante todo su ciclo de vida se observan fluctuaciones en la expresión génica. En la presente tesis se realizó el estudio de una adenilato quinasa nuclear (TcADKn) que se encuentra involucrada en la biogénesis ribosomal. Las adenilato quinasas nucleares han sido descriptas en muy pocos organismos, se las ha asociado al metabolismo del ARN, pero su función en el núcleo todavía es incierta. Todas las isoformas descriptas son esenciales para la viabilidad celular. La función de TcADKn es llevar a cabo el procesamiento del 18S, en el sitio D en el citoplasma, vía interacción directa con la proteina ribosomal S14 (Rps14). Establecimos la presencia de una señal de localización nuclear atípica en su extremo amino terminal, que involucraría la región del sitio activo. Además identificamos una posible señal de exportación nuclear hacia el carboxilo terminal de la proteína. Por otra parte determinamos que su localización nuclear es dependiente de la transcripción activa del ARN ribosomal, el ensamblado correcto de los ribosomas, la integridad del ADN, los niveles de nutrientes en el medio y posiblemente involucre a la vía TOR (“Target of Rapamycin”). Además detectamos que los niveles de TcADKn disminuyen a lo largo de la curva de crecimiento de epimastigotes en cultivo, pudimos determinar que las secuencias responsables de dicha regulación se encontrarían en su 3’ UTR y probablemente exista un mecanismo de autorregulación de la expresión de TcADKn. Finalmente se comenzó con el estudio del locus ribosomal de T. cruzi tanto a nivel de su secuencia como así también en cuanto a la biogénesis ribosomal identificándose los sitios de procesamiento del ribosoma.

Abstract:
Trypanosoma cruzi, the etiological agent of Chagas’ disease, is an early divergent eukaryote in which the control of gene expression relies mainly in post-transcriptional mechanisms. Translation process is globally up and down regulated during the transition between proliferating and non-proliferating life-cycle stages. In this thesis we report the presence of a nuclear isoform of adenylate kinase (TcADKn) which is involved in ribosome biogenesis. Nuclear adenylate kinases have been recently described in a few organisms; however their role in nuclear and ribosomal processes is still unclear. Depending on ribosomal RNA transcription and assembly, TcADKn is located in the nucleolus or cytoplasm. Nuclear transport and the signals that determine this process were also identified for the first time. A non-canonical nuclear localization signal was mapped towards the N-terminal of the protein, being the phosphate-binding loop of the catalytic site essential for its localization. Nucleolar localization presented a nutrient availability, oxidative stress and probably by the equivalent in T. cruzi of the mammalian TOR pathway regulation. TcADKn is involved in ribosomal 18S RNA processing which involves its interaction with the ribosomal protein S14 (Rps14). Furthermore, TcADKn expression is regulated by its 3’ UTR. Finally we started with the study of T. cruzi ribosomal locus, at a sequence and biogenesis level.

Cieri, Leandro Javier. "Producción de partículas en colisionadores hadrónicos" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El presente trabajo versa sobre el cálculo de secciones eficaces para colisionadores hadrónicos. La motivación principal, que constituye el eje de esta tesis, es la de realizar tales cálculos con la mayor precisión posible. En particular incrementar para diversos procesos la precisión hasta ahora disponible de los mismos, cuando se le calculan las correcciones de QCD (Quantum ChromoDynamics) radiativas correspondientes. El método utilizado para tales propósitos, que permite lidiar con procesos cuyo estado final no posea color (producción de pares de leptones, bosones vectoriales, bosones de Higgs, etc), es una variante del método de sustracción y posibilita el cómputo de observables numéricamente de forma libre de divergencias infrarojas. Para cancelar tales divergencias nos valemos del comportamiento universal de las distribuciones asociadas en momento transverso (qT ) en la región de qT pequeño. Este método es ilustrado de forma general en el presente trabajo hasta el next-to-next-to-leading order (NNLO) en teoría de perturbaciones de QCD, y requiere, por lo tanto, del conocimiento de los coeficientes hard-collinear a NNLO (H2), de las contribuciones logarítmicas resumadas a todo orden a pequeño momento transverso qT . En esta tesis se calculan explicitamente los coeficientes H2 a NNLO, para el caso de producción de bosones vectoriales (Drell-Yan) y de producción de par de fotones (di-fotones), como así también la forma general de tal coeficiente que permite calcularlo para cualquier proceso cuyo estado final no posea color. De esta forma la variante del método de sustracción presentada queda completamente especificada a NNLO, siendo así utilizable por el resto de la comunidad, para cualquier observable que no posea color en su estado final. Se consideran dos aplicaciones explícitas del método de sustracción a NNLO: el proceso de Drell-Yan y la producción de di-fotones, principal señal de fondo en la producción del bosón de Higgs. Estas dos aplicaciones constituyen el aporte fundamental de esta tesis, siendo el caso de producción de di-fotones el primer cálculo para procesos en colisiones hadrónicas cuyo estado final está compuesto de dos partículas a un nivel de precisión NNLO. En el caso particular de producción de par de fotones, la precisión NNLO es esencial e inevitable para comprender la fenomenología de este proceso de forma satisfactoria. Tarea esencial en la actual búsqueda del bosón de Higgs y futuros estudios. Estos cálculos fueron implementados en sendos programas de tipo Monte Carlo. Estos programas permiten al usuario aplicar cortes cinemáticos arbitrarios sobre la física del estado final y calcular las correspondientes distribuciones en la forma de histogramas.

Abstract:
In this Thesis we show and explain cross sections calculations in hadron collisions. The main aim here is to perform these calculations in the best way possible, with the highest precision. In particular, our aim is to consider benchmark processes and apply our subtraction method to increment the precision available in the literature, calculating their QCD (Quantum ChromoDynamic) corrections. The method implemented in such calculations was the transverse momentum (qT ) subtraction method which allows to deal with final states which are colorless (lepton pair production, boson pair production, Higgs boson production, associated Higgs production, etc). The virtue of our method is its capability to offer counter-terms to cancel the singularities that appear in the reals emission contributions to the total cross section exploiting the universal behaviour of the matrix elements in the small-qT limit. This method is illustrated in the present Thesis up to the next-to-next-to-leading-order (NNLO) of accuracy in perturbative QCD. Therefore, due to the order of accuracy implemented we need the hard-collinear coeficients at the same order of precision (H2). In the present Thesis are calculated the hard-collinear coeficients up to NNLO in the case of the Drell-Yan process and the diphoton production in hadron collisions. To calculate the hard-collinear coeficient in the case of diphoton production was necessary the deduction of a new general and universal method to extract such coeficients. In this sense, the transverse momentum subtraction formalism acquires its final and complete form. And now is possible to use this new method to extract the H2 coeficient for any class of colorless process up to NNLO. We'll show two explicit implementations of the transverse momentum subtraction method up to NNLO: the Drell-Yan process and the diphoton production, which is the main background in recent Higgs boson searches. These are the main contributions of this Thesis, and the case of diphoton production is the first calculation with two particles in the final state at the NNLO accuracy. Even more, the NNLO accuracy for this process is essential and inevitable to understand the phenomenology related to this process. Crucial task in current Higgs boson searches and studies. Both calculations were implemented in parton level Monte Carlo codes. The programs allow the user to apply arbitrary kinematical cuts on the final-state photons and the associated jet activity, and to compute the corresponding distributions in the form of bin histograms.

Chiappini, Florencia Ana. "Efecto del hexaclorobenceno sobre la regulación del crecimiento de células foliculares tiroideas. Estudios in vivo e in vitro" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El hexaclorobenceno (HCB) es un contaminante ambiental altamente persistente y ubicuo, que produce efectos deletéreos para la salud humana. La exposición de animales de laboratorio al mismo, induce disfunciones endocrinas tiroideas (Kleiman de Pisarev et al., 1990, Alvarez et al., 2004), reproductivas (Foster et al., 1992; Alvarez et al., 2000) e inmunomodulación (Ezendam et al., 2004) entre otros efectos. El HCB se localiza en una variedad de tejidos y fluidos humanos con un amplio rango de concentraciones según el contenido lipídico y el grado de exposición al mismo. En trabajos previos demostramos que el tratamiento de ratas con HCB (1000 mg/kg p.c.) produce una disminución de los niveles circulantes de 3,3’,5,5’-tetraiodotironina (T4) total, y un aumento en la concentración sérica de la hormona estimulante de la tiroides (TSH), sin alterar el peso tiroideo (Kleiman de Pisarev et al., 1989). Estos datos sugerían la existencia de algún mecanismo inhibitorio del crecimiento tiroideo, o pro-apoptotico desencadenado por el HCB. En base a los antecedentes de la literatura y a nuestros resultados previos, nos propusimos como objetivo general, investigar las bases bioquímicas y moleculares del mecanismo de acción del HCB sobre la regulación del crecimiento celular tiroideo. Para ello estudiamos la apoptosis, la proliferación celular, el estado oxidativo y las cascadas de señalización de receptores de factores de crecimiento (RFC), realizando estudios in vivo en ratas hembras Wistar e in vitro en células foliculares tiroideas de rata Fisher (FRTL-5). Demostramos que el HCB administrado a ratas durante 30 días, en dosis que no modifican el status tiroideo (1-100 mg/kg p.c.), aumenta la expresión del factor de crecimiento transformante-β1 (TGF-β1) y la apoptosis a través de la vía mitocondrial, promoviendo la liberación del citocromo c, de la mitocondria hacia el citosol y la activación de la caspasa-9. Los estudios en células FRTL-5, demostraron que el HCB incrementa la expresión de TGF-β1, disminuye la expresión de tiroglobulina (TG) e induce la apoptosis a través de mecanismos dependientes e independientes de caspasas. El aumento en la producción de ROS y subsecuente activación de ERK1/2, están asimismo involucrados en el efecto apoptótico del HCB. Por otra parte, el plaguicida induce un desbalance en proteínas involucradas en el control de la progresión del ciclo celular llevando a un arresto en las fases G1 y G2/M, del mismo. En conclusión, nuestros resultados demuestran por primera vez, que el HCB induce un desbalance en la homeostasis del crecimiento celular y disfunción tiroidea.

Abstract:
Hexachlorobenzene (HCB) is a widespread and persistent environmental pollutant with deleterious effect on human health. Chronic administration of HCB to laboratory animals elicits a number of effects including, thyroid (Kleiman de Pisarev et al., 1990, Alvarez et al., 2004) and reproductive dysfunctions (Foster et al., 1992; Alvarez et al., 2000) and immunopathology (Ezendam et al., 2004). HCB is found in a variety of human tissues and fluids with a wide range of values depending on the dose and time of exposure, and on the tissue lipid content. We have demonstrated that HCB administration (1000 mg/kg b.w), reduced total serum 3,3’,5,5’-tetraiodothyronine (T4) levels, increased thyroid stimulating hormone (TSH) levels, but had no effect on thyroid weight in rats (Kleiman de Pisarev et al., 1989). As TSH stimulates thyroid follicular cell proliferation, our data suggested the existence of a thyroid growth inhibitory mechanism, or a pro-apoptotic effect, triggered by the HCB. The aim of the present study was to determine the biochemical and molecular mechanism of action of HCB, on the regulation of thyroid follicular cells growth. We examined parameters of apoptosis, cell proliferation, oxidative status and growth factor receptor (GFR) signaling pathways in vivo, in female Wistar rats, and in vitro, in Fischer rat thyroid cell line (FRTL-5). Our results showed that HCB administered to Wistar rats during 30 days, at doses that do not disrupt thyroid economy (1-100 mg/kg p.c.), induce transforming growth factor-β1 (TGF-β1) expression and apoptosis in the thyroid gland, involving the mitochondrial pathway. HCB promotes cytochrome c release from the mitochondria and caspase-9 activation. In FRTL-5 cell line, HCB increases TGF-β1 expression, decreases thyroglobulin (TG) protein levels, and induces apoptosis through a caspase dependent and independent mechanism, involving ROS production and ERK1/2 activation. In addition, HCB induces alterations in cell cycle regulatory proteins, and G1 and G2/M cell cycle arrest. In conclusion, our results show for the first time, that HCB induces an imbalance in the homeostasis of follicular thyroid cells growth and thyroid dysfunction.

Caso, Alvaro. "Relaciones de fluctuación-disipación y temperaturas efectivas en transporte cuántico dependiente del tiempo" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En este trabajo de Tesis se estudian los conceptos de temperatura local y tempe- ratura efectiva en sistemas mesoscópicos fuera del equilibrio. Para definir y estudiar estos conceptos se se eligió como ámbito el estudio del transporte cuántico en sistemas mesoscópicos llevados fuera del equilibrio mediante la aplicación de potenciales externos que presentan una dependencia armónica en el tiempo. En el Capítulo 1 se introducen los sistemas mesoscópicos. Se describe el área de la física denominada transporte cuántico y se mencionan las magnitudes físicas relevantes, las escalas de longitud y energía características y se describen algunos de los métodos de fabricación de este tipo de dispositivos. Además se presenta el dispositivo que se estudiará en este trabajo. En el Capítulo 2 se introduce el formalismo utilizado para el tratamiento de un problema general de transporte cuántico. El mismo se basa en el denominado formalismo de Keldysh de funciones de Green de no-equilibrio. Se hace una formulación Hamiltoniana del problema general de transporte cuántico y se encuentran expresiones para las corrientes de carga y de calor. En el Capítulo 3 se presenta la definición de temperatura local (TlP ) mediante la inclusión de una punta de prueba que actúa como termómetro. Se encuentran expresiones analíticas para esta temperatura en el régimen en el que la frecuencia 0 de los potenciales externos es mucho más pequeña que la temperatura T de los reservorios ( Ω0 ≪ T). También se muestran expresiones explícitas para el caso opuesto (Ω 0 ≫ T). Se estudia su comportamiento a lo largo del sistema y su relación con el flujo de calor. Además se estudia la validez de la ley de Wiedemann-Franz, que relaciona la conductancia eléctrica con la térmica, para este sistema fuera del equilibrio. En el Capítulo 4 se estudia la posibilidad de definir una temperatura efectiva (Teff ) a través de una relación de fluctuación-disipación (RFD) local para funciones de Green de una partícula. Se encuentra una expresión analítica en el límite de bajas frecuencias (Ω 0 ≪ T) que coincide exactamente con la obtenida para la temperatura local. En el Capítulo 5 se estudia la posibilidad de definir otra temperatura efectiva (Teff∗) a través de una RFD para funciones de correlación corriente-corriente. Para ello, en primer lugar se calculan dichas funciones de correlación dentro del formalismo de Keldysh. Las expresiones obtenidas son comparadas con las correspondientes al formalismo de matriz de dispersión y se muestra analíticamente que coinciden. Una vez calculadas las funciones de correlación se estudia el comportamiento de la temperatura efectiva y se la compara con la temperatura local TlP . Se muestra que coinciden en el régimen de bajas frecuencias (Ω 0 ≪ T), en el cual además TlP coincide con la temperatura efectiva Teff definida a partir de una RFD para funciones de Green de una partícula. Es decir que en este régimen todas las definiciones estudiadas de temperatura coinciden. El Capítulo 6 está destinado a los últimos comentarios, discusión de los resultados y conclusiones. En los Apéndices A y B se encuentran los detalles de algunos de los cálculos realizados a lo largo de este trabajo.

Abstract:
In this thesis we study the concepts of local temperature and effective temperature in mesoscopic systems out of equilibrium. We study these concepts within the framework of quantum transport in mesoscopic systems driven out of equilibrium by harmonically time-dependent external potentials. In Chapter 1 we present the definition of mesoscopic system and we describe the area of physics called quantum transport. We establish the relevant physical quantities, length and energy scales and describe some of the fabrication methods for these devices. In addition we present the device which will be studied in this work. In Chapter 2 we introduce the formalism employed to study the problem of quantum transport. It is based in the Keldysh non-equilibrium Green’s function formalism. We establish the Hamiltonian formulation of the general problem of quantum transport and we find expressions for charge and heat currents. In Chapter 3 we introduce the definition of local temperature (TlP ) via the inclusion of a probe that acts as a thermometer. We find analytical expressions for this temperature in the regime where the frequency 0 of the external potentials is much lower than the temperature T of the reservoirs (Ω 0 ≪ T). We also give explicit expressions for the opposite case (Ω 0 ≫ T). We study its behavior along the system and its relation to the heat current. In addition we study the validity of the Wiedemann-Franz law, which relates charge and heat conductances, for this system out of equilibrium. In Chapter 4 we study the possibility of defining an effective temperature (Teff ) through a local fluctuation-dissipation relation (FDR) for one-particle Green’s functions. We find an analytic expression in the low frequency limit (Ω 0 ≪ T) which is exactly the same found for the local temperature. In Chapter 5 we study the possibility of defining another effective temperature (Teff∗) by means of a FDR for current-current correlation functions. To do this, first we calculate those correlation functions within the Keldysh formalism. The expressions are compared with the ones obtained within the scattering matrix approach and we show analytically that both coincide. We study the behavior of this effective temperature and compare it to the local temperature TlP . We show that both coincide in the low frequency regime ( Ω0 ≪ T), in which in addition TlP coincides with the effective temperature Teff defined from a FDR for one-particle Green’s functions. This means that in this regime all the proposed definitions of temperature coincide. Chapter 6 is devoted to final remarks, discussion and conclutions. In the Appendices A and B we find details of some of the calculations done for this work.

Casares, María Victoria. "Biodisponibilidad y toxicidad de metales pesados en aguas naturales con características físico-químicas extremas. Bases para su monitoreo y remediación" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis doctoral se presentan los resultados obtenidos en el marco de la aplicación de dos herramientas importantes para ser tenidas en cuenta en el manejo, restauración y monitoreo de ecosistemas acuáticos contaminados por metales pesados: el Modelo del Ligando Biótico y la Fitorremediación, evaluadas en dos aguas naturales de nuestro país con características físico-químicas extremas, como lo constituyen las aguas del Río Pilcomayo, caracterizadas por los elevados valores de sus iones principales como por la gran carga de sólidos que transporta y las aguas del Arroyo Morales, afluente del Río Matanza-Riachuelo, caracterizadas por el elevado pH y elevada concentración de sodio y alcalinidad. El Río Pilcomayo presenta también una gran variación inter-estacional en su caudal que, de acuerdo al análisis realizado, afecta directamente la hidroquímica del río ya que los iones mayoritarios muestran una variación inter-estacional con valores superiores en la estación seca. Los sólidos totales en suspensión son mayores en la estación húmeda y constituyen los principales transportadores de los metales pesados que este río recibe provenientes de la actividad minera en su alta cuenca. El mecanismo determinante del contenido iónico en el agua del Río Pilcomayo en la cuenca baja es la evaporación-cristalización en ambas estaciones. Dado el efecto directo de la hidroquímica sobre la biodisponibilidad y toxicidad de los metales en los organismos acuáticos, se estudió la toxicidad aguda del cobre, cinc, cadmio y plata en la especie nativa Cnesterodon decemmaculatus, en agua del Río Pilcomayo y en agua del Arroyo Morales, que mostró el siguiente patrón: plata>cobre>cadmio>>cinc y en agua del Arroyo Morales; cobre>>cinc. La variable físico-química con mayor influencia sobre la toxicidad de los metales fue la dureza. Se aplicó el Modelo del Ligando Biótico a cada calidad de agua y cada metal para evaluar la validez de una extrapolación inter-específica de la predicción de toxicidad aguda del modelo para la especie P. promelas. La extrapolación mostró ser válida sólo para el cobre en agua del Río Pilcomayo, para el resto, el modelo tendió a sobrestimar la toxicidad. Esto podría deberse a las limitaciones del modelo en cuanto al rango de valores de los parámetros físico-químicos con los que ha sido calibrado, a que los individuos empleados en los ensayos constituían estadíos menos sensibles y/ó a la menor sensibilidad de C. decemmaculatus respecto a P. promelas a la presencia de los metales estudiados. La especie acuática flotante nativa Salvinia minima presentó una gran capacidad para remover nutrientes, cobre y cinc, tanto en medio de cultivo como en un agua natural como el agua del Río Pilcomayo, incrementándose el contenido del metal en la biomasa a mayor concentración del mismo en solución. La remoción de cobre fue fundamentalmente por biosorción. Esto permitiría una recuperación relativamente sencilla del metal removido. Asimismo, esta especie presentó una baja traslocación del metal a la biomasa aérea, evidenciando un efecto protector de la maquinaria fotosintética. Estas características hacen de esta especie una buena elección para el tratamiento de aguas y efluentes con elevados niveles de los nutrintes y metales estudiados. El trabajo realizado en esta tesis contribuye con la evaluación de herramientas que puedan ser aplicadas, en un futuro, en la generación de una normativa y en el manejo y monitoreo ambiental de las aguas basados en las características propias de nuestras especies y nuestros cuerpos de agua.

Abstract:
This PhD thesis presents the results obtained in the application framework of two important technics to be taken into account in the management, restoration and monitoring of aquatic ecosystems affected by heavy metals pollution. The Biotic Ligand Model and Phytoremediation, have been evaluated in two natural waters with extreme water quality characteristics, Pilcomayo river water, characterized by its high major ions concentration and high load of total suspended solids and Morales stream, an affluent of the Matanza-Riachuelo River, with high pH and elevated sodium and alkalinity concentration. Pilcomayo river water discharge also presents a marked inter-seasonal variation which, according to the analysis performed, shows a direct effect on the river water chemistry, given that major ions also showed an inter-seasonal variation with higher values during the dry season. Total suspended solids showed the highest values during the wet season. Likewise, solids transport heavy metals that the river receives from the mining activities which take place in the upper catchment. The main mechanism which determines Pilcomayo river water major ions composition in Misión La Paz is evaporation-crystallization during both seasons. Water chemistry has a direct effect on the bioavailability and toxicity of metals to aquatic organisms. Copper, zinc, cadmium and silver acute toxicity on the native species Cnesterodon decemmaculatus was studied in Pilcomayo River and Morales stream waters showing the following toxicity order: silver>copper>cadmium>>zinc and in Morales stream water: copper>>zinc. The water quality variable with highest influence on heavy metals toxicity was hardness. Biotic Ligand Model was run with Pilcomayo river and Morales stream water quality parameters and each metal in order to evaluate a possible inter-species extrapolation of the models acute toxicity prediction for the species Pimephales promelas. The extrapolation was valid only for copper in Pilcomayo river water. For the rest of the metals the model tended to overestimate heavy metals toxicity. This overestimation can be owed to the models limitation to the range of values of the water quality parameters with which the model has been calibrated, to the use of an elder life stage and/or to the fact that C. decemmaculatus is less sensitive to the metals to which it has been exposed. The aquatic free floating native species Salvinia minima showed a great ability to remove nutrients, copper and zinc in a nutritive solution as well as in Pilcomayo River water. Metal content in biomass increased with metal concentration in solution. Copper was removed mainly by biosorption this would allow the use of a more effective method to recover metals from the biomass. This species also showed a low traslocation rate which possibly indicates a protective mechanism of the photosyntetic systems. S. minima might be useful in phytoremediation of waters and wastewaters with high levels of nutrients and metals. The analysis performed in this thesis contributes to the evaluation of technics which can be applied to the development of regulations and environmental management and monitoring based on the properties of our species and water bodies.

Carro, Mariana E.. "Dispersión natal y reproductiva de la ratona común, Troglodytes musculus" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La dispersión es definida como el desplazamiento de los individuos de un lugar a otro. Este movimiento de los individuos hace que la dispersión sea una de las características de historia de vida más importantes, y a la vez menos comprendida, de la ecología y biología poblacional de una especie. La dispersión es responsable no sólo de la dinámica espacial de una población sino también constituye el proceso que causa, en último término, el flujo de genes entre poblaciones. En este trabajo se analizó el comportamiento de dispersión de la Ratona común, Troglodytes musculus. Esta es una pequeña ave paseriforme que habita gran parte de Sur y Centroamérica. Durante las temporadas reproductivas (octubre-enero) de 2006 a 2011 se estudió la dispersión natal y reproductiva de una población de ratonas de General Lavalle, provincia de Buenos Aires. La dispersión natal fue definida como el movimiento de los individuos, desde el lugar de nacimiento hasta el sitio del primer o potencial intento reproductivo. La dispersión reproductiva, por su parte, corresponde al desplazamiento de los individuos adultos entre un territorio reproductivo a otro, en la misma o en distinta estación reproductiva. Para estudiar la dispersión natal de la Ratona común se utilizaron tanto métodos directos como indirectos. Los métodos directos involucraron el marcado de los pichones en el nido con anillos metálicos numerados, y la posterior captura e identificación cuando adultos, si permanecían dentro del área de estudio. Para ello se realizaron durante toda la temporada reproductiva censos intensivos identificando los individuos reproductores que poseían territorios en la población. Los métodos indirectos involucraron el análisis genético de 5 poblaciones diferentes de Ratona común, distanciadas entre sí entre 0.7 y 16 km. Los resultados obtenidos a partir de métodos directos, mostraron la existencia de una alta filopatría natal, particularmente en los machos, sugiriendo que las hembras serían el sexo dispersor. Esta alta filopatría también se reveló en los análisis genéticos realizados, donde se encontró una clara estructuración y diferenciación genética entre las poblaciones que se encontraban a más de 5 km de distancia. El análisis de los costos de la dispersión mostró que las aves dispersoras tenían una menor probabilidad de supervivencia que aquellos que no dispersaban. Para estudiar la dispersión reproductiva de la población de ratonasse realizaron censos repetidos en cada temporada reproductiva, identificando los territorios y los individuos que los defendían, los cuales se hallaban marcados con anillos plásticos de colores. En este caso se estudió tanto la dispersión intra-anual (la que sucedía entre eventos reproductivos realizados en un mismo año) como la inter-anual (la que se daba entre eventos reproductivos de sucesivos años). Los resultados mostraron una alta filopatría al territorio, siendo nuevamente mayor en machos que en hembras. Los machos solteros tuvieron una mayor tendencia a cambiar de territorio que aquellos que poseían pareja, mientras que las hembras, mostraron una mayor tendencia a cambiar de territorio cuando la pareja no sobrevivía a la siguiente temporada. Además, mediante un experimento manipulativo se encontró que la probabilidad de dispersión estaba afectada por el éxito de nidificación. Estos resultados sugieren que los cambios en los territorios en esta especie responden principalmente a incrementar el éxito reproductivo. Los resultados obtenidos en este estudio demuestran que la Ratona común posee una alta filopatría, tanto natal como reproductiva, diferenciándose del patrón observado en la ratona norteamericana, T. aedon, una especie cercanamente emparentada que hasta hace poco tiempo incluía a T. musculus. Esto probablemente se debe no sólo a diferencias en las historias de vida de estas especies, sino que también muy probablemente a diferencias en los factores ambientales. Este trabajo constituye uno de los pocos estudios que existen analizando el comportamiento de dispersión de una especie de ave paseriforme del hemisferio sur, y plantea interesantes cuestiones acerca de la evolución del comportamiento de dispersión y del efecto que variables ambientales y demográficas tienen sobre éste.

Abstract:
Dispersal is defined as the displacement of individuals from one place to another, and is one of the most important life history characteristics, yet least understood, of the ecology and population biology of a species. Dispersal is responsible, not only for the spatial dynamics of a population, but is the process that causes, ultimately, the gene flow. In this paper we analyzed the dispersal behavior of the southern House wren, Troglodytes musculus. This is a small passerine bird that inhabits much of South and Central America. During the 2006-2011 breeding seasons (October-January) I studied the natal and reproductive dispersal of a House wren population at General Lavalle, Buenos Aires. Natal dispersal was defined as the movement of individuals from the place of birth to the site of their first reproductive attempt, whereas breeding dispersal corresponded to the displacement of an adult from one territory to another during the same or between successive breeding seasons. I use both, direct and indirect methods to study the natal dispersal of wrens. Direct methods involved the marking of nestlings at the nests with numbered aluminum rings, and the subsequent capture and identification as adults if they took territories within the study area. I performed intensive censuses during breeding seasons to identify breeding individual defending territories (almost the entire wren population was color-banded). Indirect methods involved the genetic analysis of 5 wren populations apart 0.7 - 16 km one each other. There was a high natal philopatry, particularly for the males; therefore, females would be the dispersal sex. This high philopatry also was detected in the genetic analysis, as I found a clear genetic differentiation among populations more than 5 km apart. Dispersal costs were associated mainly to a reduced individual survival. In addition to natal dispersal, I studied the breeding dispersal of wrens. I performed repeated censuses during each breeding season to recognize breeding territories and individuals. I studied both, intra- and inter-annual reproductive dispersal. Results showed that wrens have a high territorial philopatry, being higher for males than for females. Bachelor males were more likely to change of territory than always paired males, while females showed a higher tendency to territory change when its mate did not survive to the next season. Also, in an experiment where nesting success was reduced, I found that individuals increased the dispersal rate. These results demonstrate that changes in the breeding territories in this species respond primarily to reproductive success. The results obtained in this study show that wrens have a high natal and reproductive philopatry, differing from the dispersal pattern observed in the north american House wren, T. aedon, a closely related species that until recently included to T. musculus. These are not only due to differences in life histories between these species, but also to differences in environmental factors. This study is one of the few studies that analyzes the dispersal behavior of a passerine bird in the southern hemisphere, and raises interesting questions about the evolution of dispersal behavior and the effect that environmental and demographic variables have on it.

Cardona Giraldo, Carlos Andrés. "Funciones de correlación en la correspondencia Ads/CFT" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La dualidad entre teorías de gravedad y teorías de campos de gauge es una de las ideas que más ha influido en el desarrollo de la física teórica de altas energías en la última decada. Hoy en día, esta se ha convertido en una poderosa herramienta en el estudio de sistemas fuertemente interactuantes. Sin embargo, la correspondencia AdS/CFT no ha sido probada completamente y aún se encuentra al nivel de conjetura. En este trabajo pretendemos chequear la correspondencia en algunos casos simples. Concretamente, calculamos funciones de correlación de tres y cuatro puntos en teoría de supercuerdas sobre AdS3 X S3 X T4 a nivel árbol para operadores primarios quirales y mostramos que estas coinciden perfectamente con los correladores esperados en la teoría de campos dual. Además sugerimos una interesante conexión entre funciones de correlación de n puntos de operadores con número de torcimiento (twist) igual a dos y espín muy grande y valores de expectacion de loops de Wilson poligonales con lados nulos en teoría de Super-Yang-Mills con cuatro super-simetrías. Justificamos esta conexión a través de la comparación de las divergencias ultravioletas de ambos objetos en acoplamiento fuerte y presentamos algunas consideraciones perturbativas a este respecto en teoría de campos.

Abstract:
The duality between theories of gravity and gauge field theories has been one of the most influential ideas in theoretical high energy physics within the last decade. Nowadays, it has become a truly powerful tool to study strongly interacting systems. However, the AdS/CFT correspondence still has the status of a conjecture. In this work we would like to contribute to test the correspondence in some simple cases. Concretely, we compute correlation functions of three- and four-points in string theory on AdS3 X S3 X T4 at tree-level for chiral primary operators and we find perfect agreement with the corresponding correlators in dual the field theory in all the cases considered. We also suggest a possible connection between n-point functions of twist-two large spin operators in N = 4 super Yang-Mills and null-polygonal Wilson loops. We support that suggestion by a semi-classical computation in the string theory side and by some perturbative considerations in the dual field theory.

Cardo, María Victoria. "Estructura de las comunidades de mosquitos de cuerpos de agua en el suelo en el Bajo Delta del Río Paraná: un enfoque multiescalar considerando la heterogeneidad ambiental y las estrategias de oviposición" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los humedales son ecosistemas muy favorables para los insectos con estadios acuáticos, y dada su compleja dinámica del agua, son escenarios ideales para evaluar la influencia de las características ecofisiológicas de las especies en la estructuración de las comunidades en función del ambiente. En esta tesis, se investigó cómo se estructuran las comunidades de mosquitos (Diptera: Culicidae) que habitan en cuerpos de agua en el suelo (CAS) en función de la heterogeneidad ambiental a tres escalas espaciales de un humedal considerando sus efectos sobre distintas estrategias de oviposición. Entre los 1.689 CAS inspeccionados durante 2008- 2012 en el Bajo Delta del Río Paraná, se colectaron en total 10.626 inmaduros de mosquitos pertenecientes a 32 especies de siete géneros. Mediante el uso de modelos lineales generalizados y análisis de nicho se identificaron variaciones en la estructura de distintas comunidades en respuesta a la estacionalidad, a las características propias de los CAS, al uso de la tierra y al paisaje. Dichas respuestas dependieron de la estrategia de oviposición, siendo distintas las asociaciones entre la dinámica del agua (lluvia y mareas) y el uso de la tierra para mosquitos de inundación y de balsa. La composición del ensamble en CAS temporarios varió en función del paisaje, no así los otros atributos comunitarios; los patrones de recambio de especies estuvieron dominados por mosquitos de inundación. El conjunto de resultados sugiere que la heterogeneidad ambiental a distintas escalas espaciales afecta distintos atributos de las comunidades de mosquitos, y que las estrategias de oviposición tienen un rol central en dicha relación.

Abstract:
Wetlands are highly favorable ecosystems for insects with aquatic stages and, given their complex water dynamics, they are the ideal setting to assess the influence of ecophysiological characteristics of the species in the structuring of the communities as a function of the environment. In this thesis, the structuring of mosquito (Diptera: Culicidae) communities breeding in ground-water habitats (GWH) as a function of environmental heterogeneity in a wetland was evaluated, considering its effects at three spatial scales on different oviposition strategies. A total of 10,626 mosquito immatures of 32 species from seven genera were collected among 1,689 GWH inspected during 2008-2012 in the Paraná Lower Delta. Using generalized linear models and outlying mean index analysis, variations in the structure of different communities were identified in response to seasonality, the characteristics intrinsic to each GWH type, the landuse and the landscape. Such variations depended on the oviposition strategy, with floodwater and raft-laying mosquitoes showing distinct associations between water dynamics (precipitation and tidal regime) and landuse. In contrast to all other community attributes evaluated, the composition of the assemblage of temporary GWH varied as a function of the landscape, with floodwater mosquitoes dominating species replacement patterns. These results suggest that the environmental heterogeneity at different spatial scales affect different attributes of mosquito communities, and that oviposition strategies play a central role in this relation.

Campodónico, Paola Bernadette. "Regulación de la diseminación de los tumores sólidos murinos por el sistema del ácido retinoico y sus receptores" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El presente trabajo tuvo como objetivo estudiar el rol del sistema retinoide en la progresión del tumor mamario murino LM38-LP, haciendo énfasis en las interacciones celulares entre su componente luminal (LEP) y mioepitelial (MEP). Determinamos que la línea LM38-LP expresa receptores retinoides y que los mismos son funcionales. El tratamiento con retinoides induce en la línea un arresto del ciclo celular. El mismo tratamiento induce apoptosis sólo en el compartimiento LEP y senescencia en las células MEP, mientras que una pequeña población celular que mediaría la interacción entre ambos componentes continúa ciclando. Asimismo se ha podido determinar la existencia de una población con características de células stem/progenitoras parcialmente resistentes al tratamiento con retinoides. Hemos estudiado además mecanismos implicados en la diseminación metastásica de la línea LM38-LP. En este sentido hemos observado que los retinoides inhiben tanto la actividad de proteasas secretadas como la capacidad migratoria, mientras que aumentan la capacidad adhesiva a componentes de la matriz extracelular. Los retinoides inhiben la invasión sólo en la población MEP de la línea LM38-LP. Se analizó la transcripción de un panel de genes implicados en el proceso de transición epitelio-mesenquimática. Se pudo determinar que el ácido retinoico modula estos genes diferencialmente entre los compartimientos LEP y MEP conduciendo a la línea hacia un fenotipo menos agresivo. Se generaron sublíneas que presentan silenciados o sobreexpresados los distintos receptores retinoideos, lo que permitió evaluar la participación de cada uno de ellos en la progresión tumoral maligna de la línea en estudio. Este trabajo sugiere que los retinoides ejercen efectos pro-apoptóticos y citostáticos diferenciales en los diferentes compartimentos celulares de la línea LM38-LP. Asimismo los resultados sugieren la existencia de una tercera población con capacidad clonogénica y resistente a los retinoides.

Abstract:
The objective of the present work is to study the role of retinoid system in the murine mammary tumor LM38-LP progression, emphasizing luminal and myoepithelial cellular interactions. We determined that LM38-LP cell line expresses retinoic acid receptors and that these are functional. Retinoid treatment induces cell cycle arrest in the cell line. Same treatment induces apoptosis only in LEP compartment, senescence in MEP cells, while a small cellular population that mediates interaction between LEP and MEP compartment remains cycling. We determined the presence of a small cell population with characteristics of stem/progenitor cells, partially resistant to retinoid treatment. Besides, we studied some mechanism involved in metastatic dissemination in LM38-LP cell line. In this way, we observed that retinoids inhibit both secreted protease activity and migratory capacity, while increase adhesion capacity to some components of extracellular matrix. Retinoids inhibit invasion only in LM38-LP cell line MEP population. A set of genes implicated in epithelial-mesechymal transition were analyzed employing a qPCR array. We could determine that retinoic acid modulated these genes in a differential way in LEP and MEP compartments, leading to a less aggressive phenotype. By using sub lines generated either silencing or over expressing different retinoic acid receptors, we analyzed the role of the different receptors in the metastatic progression of LM38-LP cells. This work suggests that retinoids exert differential pro apoptotic and citostatic functions on the different cell components of the mammary tumor cell line LM38-LP. Likewise, these results suggest the existence of a third cell population with clonogenic capacity and resistant to retinoids.

Campagna, Leonardo. "Especiación en passeriformes neotropicales de ambientes abiertos" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El Neotrópico es la región con mayor diversidad de aves a nivel mundial. Este trabajo estudia el proceso de especiación, focalizándose en grupos de passeriformes de ambientes abiertos, con el objetivo de comprender los procesos que generaron esta gran diversidad de aves. Se utilizaron herramientas moleculares y una perspectiva filogenética/filogeográfica, en conjunto con el análisis de sonogramas derivados de vocalizaciones, para estudiar la radiación de los capuchinos del sur (Sporophila) en los pastizales de Sudamérica, la diversificación del género Phrygilus en los ambientes abiertos de la cordillera de los Andes y la existencia de linajes endémicos de passeriformes en las islas Malvinas. Se encontró una marcada variación fenotípica pero pocas diferencias genéticas neutras entre especies de capuchinos del sur, resultado consistente con una radiación reciente que comenzó en el Pleistoceno. Los resultados indican que Phrygilus es polifilético, comprendido por cuatro clados distantemente relacionados, que se diversificaron en la altura de los Andes pero también asociados a cambios en los rangos altitudinales, durante el Pleistoceno. Por último, los patrones genéticos sugieren que las islas Malvinas fueron colonizadas a diferentes tiempos por las especies de passerifomes que las habitan. Finalmente, se discuten estos resultados en el contexto de la literatura existente al respecto de la especiación en aves, particularmente con respecto al papel de la selección natural, la deriva genética, el flujo génico, la predominancia de la alopatría y la función de la especialización ecológica en el proceso de especiación.

Abstract:
The Neotropics hold the largest avian diversity in the world. This thesis studies the process of speciation, focusing on groups of open habitat passerines, with the objective of understanding what factors have contributed to generating the vast avian diversity of the region. A combination of molecular tools and a phylogenetic/phylogeographic approach, together with the analysis of sonograms derived from vocalizations, was used to study the radiation of the southern capuchinos (Sporophila) in the grasslands of South America, the diversification of the genus Phrygilus in open habitats of the Andes Mountains and the existence of endemic passerine lineages in the Malvinas islands. The southern capuchinos show marked phenotypic variation despite few neutral genetic differences, a result that is consistent with a recent radiation that started in the Pleistocene. The genus Phrygilus proved to be polyphyletic, composed of four distantly related clades that have diversified in the Andean highlands but also associated with changes in altitudinal ranges, during the Pleistocene. The observed genetic patterns suggest that the Malvinas islands were colonized at different periods in time by the passerine species that inhabit them. Finally, these findings are discussed within the context of the existing literature on speciation in birds, focusing on the relevance of these results with respect to the roles of selection, genetic drift, gene flow, the prevalence of allopatry and the function of ecological specialization in the process of speciation.

Buemi, María Elena. "Tratamiento de imágenes de radar de apertura sintética mediante filtros stack" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el tratamiento de imágenes que se apartan del modelo Gaussiano aditivo, en particular aquellas que además exhiben una baja relación se nalruido o presentan ruido impulsivo, la aplicación de filtros lineales generalmente no da buenos resultados, siendo los problemas típicos el borroneo de bordes o una pobre atenuación del ruido. Por otro lado, la aplicación de filtros no-lineales a este tipo de imágenes logra filtrar los valores de los pixels más afectados por el ruido y al mismo tiempo preservar los bordes. Las imágenes de Radar de Apertura Sintética (Synthetic Aperture Radar, SAR en inglés) poseen un tipo de ruido llamado speckle, el cual no es ni Gaussiano ni aditivo, y que posee una baja relación se~nal-ruido. Esto hace que la aplicación de filtros no-lineales resulte atractiva para este tipo de datos. Dentro de los filtros no lineales existe la clase de los filtros stack la cual es muy amplia y permite el diseño de filtros óptimos, desde el unto de vista del Error Absoluto Medio (Mean Absolute Error, MAE en inglés), y además permiten el procesamiento paralelo. Es por estas razones que esta tesis se dedica al estudio de la aplicación de esta clase de filtros a imágenes de Radar de Apertura Sintética. Para la evaluación de la efectividad de los filtros stack se utilizaron imágenes SAR simuladas bajo el modelo G0 e imágenes reales. Este modelo fue adoptado debido a su buen comportamiento para diversos tipos de target y su tractabilidad computacional. Se recurrió a evaluaciones de parámetros estadísticos, performance en la clasificación y calidad perceptual. También se estudió la utilización del modelo Gh en segmentación de imágenes SAR utilizando conjuntos de nivel y competencia de regiones.

Abstract:
In the treatment of images that do no follow the Gaussian additive model, particularly those that exhibit a low signal to noise ratio, or are affected by impulsive noise, the use of linear filters usually does not yield good results, being edge blurring or poor noise attenuetion the most common problems. On the other hand, the use of non-linear filters with this type of images, filters out the values of the most noisy pixels while, preserving the edges at the same time. Synthetic Aperture Radar (SAR) images possess a noise called speckle which is neither Gaussian nor additive, and which exhibits a low signal to noise ratio. This makes atractive the use of non-linear filters with this type of data. Within the class of non-linear filters, the stack filters represent a wide and flexible class that allows the design of optimal filters which minimize the Mean Absolute Error, and also allow to perform parallel processing. This is the reason why this thesis is devoted to the study of the application of stack filters to SAR images. To evaluate the effectivity of stack filtering, simulated SAR images under the G0 law and real SAR images, were used. This model has been adopted here due to its good behavior for different types of target and its computational tractability. Evaluation of statistical parameters, classification performance and perceptual quality assessment were performed. The suitability of the Gh modeling SAR images for segmentation, using level sets and region competition, has also been studied.

Borge, Mercedes. "Leucemia linfocítica crónica de células B: el papel de las señales del microambiente en la patogénesis de la enfermedad" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las células leucémicas de pacientes con Leucemia Linfocítica Crónica de células B (LLC) proliferan en los órganos linfoides, donde la quimiocina CXCL12 proveniente de células estromales y de células de tipo nodriza (NLC), y moléculas como CD40L e IFNγ producidas por linfocitos T CD4+ activados, favorecen su expansión y sobrevida. Existen numerosos estudios donde se evalúa el efecto del CXCL12 sobre el clon leucémico, pero no había sido estudiado hasta el momento el impacto de dicha quimiocina en la fisiología de los linfocitos T de pacientes con LLC. Los resultados presentados en este trabajo demuestran que el CXCL12 induce la migración de linfocitos T de pacientes LLC, aunque en menor medida que la de linfocitos T de dadores sanos, hecho que se correlaciona con una menor polimerización de actina en respuesta al CXCL12. Además, observamos que los linfocitos T de pacientes de buen pronóstico migran menos en respuesta al CXCL12 en comparación a linfocitos T de pacientes de mal pronóstico debido a señales provenientes del clon leucémico. También demostramos que el CXCL12 actúa como un factor coestimulante de linfocitos T CD4+ de pacientes LLC, incrementando su activación y proliferación, y que los linfocitos T activados en presencia de CXCL12 inducen una mayor proliferación del clon leucémico. Por último, demostramos que las NLC contactan con linfocitos T CD4+ y aumentan su activación y proliferación, en parte, a través del receptor para CXCL12, el CXCR4. Como conclusión, nuestros resultados demuestran que el CXCL12 tiene un rol dual sobre los linfocitos T de pacientes LLC, induciendo la migración y también aumentando su activación y proliferación, favoreciendo en última instancia la expansión del clon leucémico. Considerando que la presencia de los linfocitos T en los órganos linfoides favorece que las células leucémicas sobrevivan y proliferen, la menor migración al CXCL12 de los linfocitos T de pacientes de buen pronóstico podría estar involucrada en el curso clínico indolente característico de esos pacientes.

Abstract:
Leukemic cells from patients with B-cell chronic lymphocytic leukemia (CLL) proliferate in lymphoid organs in close contact with activated T cells and CXCL12`s producer stromal and nurse like cells (NLC). CD4+ T cells induce CLL cell proliferation and survival mainly trough CD40L and IFNγ production, and CXCL12 enhances CLL survival. While a number of reports have evaluated the impact of CXCL12 on the leukemic clone, there is no information about the role of this chemokine in T cell physiology. Our results here show CXCL12 induces the migration of T cells from CLL patients, although in a lesser extend than T cells from healthy donors. The low migratory response of T cells from CLL patients was correlated with an actin polymerization defect in response to CXCL12. Moreover, we found that T cells from CLL patients with good prognosis have a lower migratory response to CXCL12 than T cells from CLL patient with worst prognosis, due to signals delivered by leukemic cells. We also found that CXCL12 costimulates the activation and proliferation of activated CD4+ T cell from CLL patient, and that activated T cells in the presence of CXCL12 enhance the activation and proliferation of the leukemic clone. Finally we demonstrated that autologous NLC establish a close contact with CD4+ T cells and increase their activation and proliferation partially through a CXCR4-dependent mechanism. In conclusion, our results suggest that CXCL12 production by lymphoid tissue microenvironment in CLL patients might play a key dual role on T cell physiology, functioning not only as a chemoattractant but also as a costimulatory factor for activated T cells, which finally improves CLL cell proliferation. Since T cells in lymphoid organs may help CLL cells to survive and proliferate, the low migratory response to CXCL12 in T cells from CLL patients with good prognosis might favor the indolent clinical course of the disease in these patients.

Bolcic, Federico Martín. "Coinfección HIV-Hepatitis C: análisis molecular de factores genéticos del HCV que influyen sobre la respuesta al interferón" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El virus de la hepatitis C y el HIV comparten las mismas vías de transmisión, lo que conlleva a una elevada tasa de coinfección. En este escenario, la tasa de respuesta al peg-IFN+RBV es más baja que en pacientes monoinfectados con HCV. El objetivo central de este trabajo fue estudiar si diferentes proteínas del HCV, estructurales (E2) y no estructurales del HCV (NS5A), son capaces de interrumpir las acciones antivirales desencadenadas por el IFN, contribuyendo hacia una respuesta disminuida a la terapia. El genotipo de HCV implicado en la infección denotó una prevalencia elevada del 1a así como un crecimiento del 4. Ambos son conocidos por su baja tasa de respuesta al IFN. Se encontró una relación temporal en la introducción en Argentina del genotipo 1a del HCV y el subtipo BF de HIV. La glicoproteína E2 no dio evidencia de rol alguno en la respuesta al tratamiento. Dominios definidos de la proteína NS5A arrojaron resultados encontrados dependiendo de la población bajo estudio. La co-presencia de HIV no parece impactar en la génesis de variantes de escape de HCV, ni modificar la composición de cuasiespecies. No obstante el HCV tendría capacidad replicativa en sitios extrahepáticos aunque las variantes virales halladas en células mononucleares de sangre periférica no exhibieron diferencias con las presentes en plasma. La menor respuesta al tratamiento con peg-IFN+RBV en la coinfección guardaría relación con la mayor presencia de genotipos 1a y 4. La proteína NS5A podría contribuir en tal sentido. Es necesario analizar el rol que desempeñan factores inherentes al hospedador.

Abstract:
The HIV and HCV share the same transmission routs which lead to a high prevalence of coinfection. In this scenario, the rate of response to peg-IFN + RBV is lower than in HCV monoinfected patients. The aim of this work was to analyze whether different HCV proteins, structural (E2) and nonstructural HCV (NS5A), are able to disrupt viral actions triggered by IFN, contributing to a decreased response to therapy. The HCV genotype infection epidemiology denoted that the most prevalent was 1a and growth of 4. Both are known for their low response rate to IFN. We found a temporal relationship in the introduction in Argentina of HCV genotype 1a and BF subtype of HIV. The E2 glycoprotein gave no evidence of any role in the response to treatment. Defined domains of the NS5A protein yielded results depending on the population under study. The co-presence of HIV does not appear to impact the selection of HCV resistant variants, or modify the composition of quasispecies. However, the HCV may have replicative capacity in extrahepatic compartments but viral variants found in peripheral blood mononuclear cells did not differ with those present in plasma. The lower response to treatment with peg-IFN + RBV in HIV coinfected patients would be related to the increased presence of genotypes 1a and 4. NS5A protein could contribute to this effect. It is necessary to analyze the role that factors inherent to the host.

Blidner, Ada G.. "Efecto del antiinflamatorio no esteroideo indometacina sobre las células mieloides supresoras en microambientes inflamatorios normales y tumorales" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las células mieloides supresoras (CMS) constituyen una población de células con actividad regulatoria que controla las respuestas inflamatorias crónicas y promueve el escape tumoral. En este proyecto de tesis mostramos que el efecto del antiinflamatorio no esteroide indometacina (Indo) sobre las CMS es dependiente del contexto en el que se diferencie esta población celular. Ratones BALB/c inoculados con el adenocarcinoma de pulmón singeneico LP07 (3x105 células) se trataron in vivo con una dosis de 10 μM de Indo en el agua de beber. El tratamiento inhibió la acumulación de CMS en el tumor y en órganos linfáticos secundarios producida durante la progresión tumoral, inhibió la actividad supresora de las CMS esplénicas sobre la respuesta linfocitaria a un aloantígeno e inhibió el crecimiento tumoral en un ensayo de transferencia adoptiva, p<0.001. En línea con estos resultados, observamos la misma actividad en las CMS cuando se trataron in vitro con Indo (10 μM) en presencia de medio condicionado de células LP07, simulando el microambiente tumoral. Sin embargo, en ausencia del microambiente tumoral, la administración de Indo generó un aumento en la capacidad supresora (MLR; p< 0.05) y pro-tumoral (transferencia adoptiva, p<0.01) de las CMS. Además, las CMS de ratones normales tratadas con Indo en ausencia del microambiente tumoral suprimieron el desarrollo de la encefalomielitis aguda experimental (EAE), un modelo de esclerosis múltiple en ratones C57BL/6, mientras que las CMS tumorales tratadas con Indo aumentaron la severidad de los síntomas e impidieron su resolución (p<0.05). Analizando los mecanismos de inmunosupresión, Indo redujo la actividad arginasa (4,794 vs 2,077 μg urea/ mg total proteína, p<0.001) y la producción de óxido nítrico (9.2 vs 4.4 μM; P<0,05) y de especies reactivas de oxígeno (124 vs 87 MFI P<0.05) en CMS tumorales pero no en CMS normales. Este estudio revela el rol dual de un agente antiinflamatorio en el control de una población celular regulatoria con implicancias críticas en cáncer y en desórdenes autoinmunes.

Abstract:
Myeloid-derived suppressor cells (MDSCs) have emerged as a regulatory cell population that controls chronic inflammatory responses and promotes tumor-immune escape. To date no specific immunomodulatory drug has proven efficacy in targeting the expansion and/or function of these cells. Here we show a context-dependent effect of the non-steroidal antiinflammatory drug indomethacin (Indo) on MDSCs. BALB/c mice were injected with 3x105 LP07 lung adenocarcinoma cells and treated with a non-cytotoxic dose of Indo (10 μM; IC50 LP07: 60 μM). Indo treatment inhibited the suppressive activity of splenic MDSCs in mixed lymphocyte reactions (MLR) (p<0.05), and restrained tumor growth in adoptive transfer experiments (p<0.001). Accordingly, the same effect was observed when MDSCs were treated with Indo in vitro (10 μM; IC50 MDSCs: 125 μM) in the presence of conditioned media from LP07 cells. However, in the absence of a tumoral context, Indo administration increased the suppressive activity of these cells (MLR; p< 0.05) and their pro-tumoral effect (p<0.01). In keeping with these observations, Indo-treated normal MDSCs suppressed the development of Experimental Autoimmune Encephalomyelitis (EAE), a model of multiple sclerosis in C57BL/6 mice, while Indo-treated tumoral MDSCs enhanced the severity of EAE and delayed its resolution (p<0.05). Mechanistically, Indo reduced arginase activity (4,794 vs 2,077 μg urea/ mg total protein,p<0.001) and production of nitric oxide (9.2 vs 4.4 μM; p<0,05) and reactive oxygen species (ROS) (124 vs 87 MFI P<0.05) in tumoral MDSCs, but not in normal MDSCs. Our study unveils the dual role of a widely used anti-inflammatory agent in the control of regulatory cell compartments with critical therapeutic implications in cancer and autoimmune disorders.

Bello Gay, Estefanía Pilar. "Estudio funcional del receptor dopaminérgico D2 en el sistema nervioso central mediante el uso de ratones mutantes inducibles" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Liberaciones subóptimas o excesivas de dopamina son rasgos característicos de varias patologías muy frecuentes que incluyen a la enfermedad de Parkinson, esquizofrenia, desorden de déficit atencional e hiperactividad (ADHD) y autoadministración compulsiva de drogas de abuso. En este trabajo se estudió el rol del D2R mediante la generación de ratones mutantes condicionales. En primer lugar, generamos ratones deficientes de D2R en las neuronas dopaminérgicas (autorreceptores). Estos ratones tienen la síntesis y liberación de dopamina aumentada, son hiperactivos e hipersensibles a los efectos psicomotores de la cocaína, y tienen mayor motivación para trabajar por la comida. En segundo lugar, estudiamos los efectos de la pérdida de D2Rs en animales adultos que se habían desarrollado normalmente en comparación con ratones deficientes en D2Rs constitutivos que desarrollan programas compensatorios tempranos. La abrupta remoción de los D2R en la adultez provocó una marcada disminución de la locomoción, problemas severos en el aprendizaje y la coordinación de rutinas motoras. En algunos casos, se observó rigidez y temblor en los animales en reposo con características de parkinsonismo. Los resultados obtenidos, demostraron la importancia de la estricta regulación mediada por los D2R (pre y postsinápticos) en el control de la actividad locomotora, la sensibilidad a drogas de abuso y el estado motivacional de los animales.

Abstract:
Suboptimal or excessive dopamine (DA) release are characteristic of a number of very common diseases, including Parkinson's disease, schizophrenia, attention deficit disorder with hyperactivity (ADHD) and compulsive self-administration of drugs of abuse. In this paper, we study the role of D2R by generating mutant mice. First, we generated mice lacking D2R in dopaminergic neurons (autoreceptors). These mice have increased dopamine synthesis and release, are hyperactive and hypersensitive to the psychomotor effects of cocaine, and show enhanced motivation to work for food. Second, we generated a model that allows us to eliminate D2R of adult animals normally developed. The abrupt removal of the D2R in adulthood causes a marked decrease in locomotion, severe learning problems and motor coordination routines. In some cases, it can induce rigidity and tremor at rest. These results demonstrate the importance of the strict regulation mediated by the D2R (pre and postsynaptic) in the control of locomotor activity, sensitivity to drugs of abuse and particularly in the motivational state of animals.

Bejarano, Cecilia Soledad. "Estudio teórico y numérico de inestabilidades Hall-MHD en flujos tipo shear" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La presente Tesis se propone, como objetivo general, contribuir al estudio de los plasmas astrofísicos que conforman diversas configuraciones en el Universo; mientras que, como objetivo específico, se plantea investigar el desarrollo de inestabilidades en la microescala de plasmas completamente ionizados. En concreto, se analiza el rol del efecto Hall en la dinámica microscópica asociada a pequeñas parcelas de fluido inmersas en un flujo macroscópico tipo shear. A tal fin, se utiliza como marco teórico las ecuaciones de la teor´ıa magnetohidrodinámica, en la aproximación shearing-box, teniendo en cuenta los términos adicionales correspondientes a las corrientes de Hall. Puntualmente, se estudia la evolución de una nueva inestabilidad a la cual se nombra Hall-MSI (Hall Magneto-Shear Instability). Con este propósito, se desarrolla un modelo analítico que proporciona una descripción del comportamiento de esta inestabilidad en el régimen lineal. Los resultados teóricos obtenidos se corroboran a su vez mediante cálculos numéricos. Asimismo, las simulaciones numéricas son fundamentales para abordar el estudio de la evolución no lineal del sistema. La comprensión de los procesos físicos involucrados en la microescala, responsables de los mecanismos de transporte, presumiblemente permitirá desarrollar modelos macroscópicos que profundicen los conocimientos de distintos fenómenos astrofísicos. En este contexto, el trabajo efectuado en esta Tesis resulta especialmente importante en el análisis de los procesos de acreción y de los mecanismos de eyección, sustentación y colimación de los denominados jets. Por un lado, el efecto Hall ciertamente modifica la inestabilidad magneto-rotacional, principal candidato para explicar el origen de la microturbulencia en discos de acreción. Por el otro, el desarrollo de la inestabilidad Hall magneto-shear podría afectar la evolución de la inestabilidad de Kelvin-Helmholtz, particularmente relevante en la interfaz entre jet y medio circundante.

Abstract:
The present Thesis aims to contribute to the study of astrophysical plasmas which are ubiquitous in the Universe in several configurations, dealing with the development of micro instabilities in fully ionized plasmas. It specifically adresses the role of the Hall effect in the dynamics of the micro-scale associated to small parcels of fluids embedded in a macroscopic shear flow. For this purpose, the framework of magnetohydrodynamics in the shearing-box approximation is adopted, with additional terms related to the Hall currents. Moreover, it studies the evolution of a new instability called Hall-MSI (Hall Magneto-Shear Instability). To this end, an analitical model is developed in order to describe the linear behavior of this instability. Furthermore, the theoretical results are corroborated by numerical simulations. In addition, the numerical approach allows to extend the evolution into the non-linear regime. The comprehension of the physical processes involved in the microscopic scales, which are responsible for the transport mechanisms, will hopefully contribute to develop macroscopic models to improve the knowledge of many astrophysical phenomena. In this context, the results reported in this Thesis may be important to enhance the understanding of the physics regarding accretion processes and launching, collimation and sustain mechanisms of astrophysical jets. On the one hand, the Hall effect certainly modifies the magneto-rotational instability, which is the main candidate to explain the origin of the microscopic turbulence in accretion disks. On the other hand, the Hall magneto-shear instability might affect the development of the Kelvin- Helmholtz instability, which is relevant at the interface between the jet and the surrounding environment.

Beckwith, Esteban Javier. "La vía de BMP modula las propiedades básicas del reloj circadiano de Drosophila" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El reloj circadiano controla los ritmos comportamentales, fisiológicos y metabólicos en todos los organismos en los que se lo ha estudiado. Este oscilador, cuya periodicidad es cercana a las 24 hs, se mantiene sincronizado gracias a diversas claves ambientales. En Drosophila, como en otros organismos, se han identificado algunos de los componentes responsables de generar y mantener las oscilaciones moleculares. Asimismo se han caracterizado circuitos neuronales en los que componentes del reloj fluctúan con un período cercano a 24 hs. A lo largo de esta tesis se estudió el rol de la vía de bone morphogenetic protein (BMP) en Drosophila en el circuito neuronal que controla el comportamiento rítmico. Esta vía de señalización, además de estar involucrada en la organogénesis y el crecimiento, funciona como una señal sináptica retrógrada involucrada en la sinaptogénesis, la morfología sináptica y el control de la homeostasis en Drosophila y en otros organismos. La alteración de esta vía en el circuito PDF en estadios adultos conlleva un alargamiento del período endógeno de la actividad locomotora, que correlaciona con el ritmo de acumulación y localización subcelular de period, un componente central del reloj molecular. Los resultados obtenidos a lo largo de este trabajo permiten proponer que la vía de BMP es capaz de modular la trascripción de genes centrales del reloj molecular y que schnurri podría constituir un regulador negativo determinante del nivel de expresión de los genes reloj en Drosophila.

Abstract:
The circadian clock controls rhythms in behavior, physiology and metabolism in all living organisms. This internal timekeeping system is entrained by environmental cues such as light and temperature. In Drosophila and other species some of the molecular components as well as the neuronal network responsible to generate and sustain this process have been identified. The long term goal of this thesis has been to study the role of the the bone morphogenetic protein (BMP) in Drosophila in the neural circuit that controls circadian locomotor activity rhythms. This signal transduction pathway is a general regulator of organogenesis and growth in Drosophila and other species, but specifically in the nervous system it constitutes a retrograde signal crucial for processes like synaptogenesis, synaptic morphology and the homeostatic response. Adult-specific alteration of this pathway within the fly circadian network produces a long period phenotype in locomotor behavior, that correlates with an altered (i.e. delayed) accumulation and subcelular localization of PERIOD, a core component of the molecular clock. Our results lend support to the view that the BMP pathway modulates transcription of clock genes, and more specifically, that schnurri could be a negative regulator crucial to determine clock gene expression levels in Drosophila.

Bavera, Francisco Pedro. "Tipos para seguridad basada en flujo de información y computación auditada" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Garantizar la confidencialidad de la información restringiendo su acceso sólo a usuarios autorizados es uno de los pilares de la seguridad informática actual. Sin embargo, una vez otorgado dicho acceso no se conserva control alguno sobre cómo se utiliza. El Análisis del Flujo de Información (IFA) estudia cómo se transmite la información por diferentes mecanismos. Para ello se vale de políticas de flujo de información previamente establecidas. IFA vela por el cumplimiento de las mismas, a través de técnicas de análisis estático de programas o a través de monitores de ejecución. De esta manera se logra un control sobre el uso de los datos, que aplica más allá del momento en que se otorga el acceso a los mismos. Una alternativa a esta modalidad de control de uso de los datos es utilizar computación auditada. En este caso, las operaciones sobre los datos son permitidas pero también auditadas. Las contribuciones de esta tesis son dos. En primer lugar, presentamos un sistema de tipos para Bytecode JVM que garantiza que el flujo de la información sea seguro, incluso en el caso en que diferentes instancias de una clase puedan tener atributos cuyo nivel de seguridad varía de acuerdo al contexto en el cual han sido instanciados. La seguridad viene dada por la propiedad de no-interferencia: una formulación rigurosa de la ausencia de filtraciones de información sensible. Si bien esta propiedad es técnicamente viable, en la práctica hay muchos programas que permiten revelar intencionalmente cierta información sensible. Esto nos motiva a extender el Bytecode JVM con un mecanismo de "desclasificación" que permite liberar información sensible. El riesgo que introduce es que el mismo pueda ser abusado, permitiendo desclasificar más información sensible de la que originalmente se tenía prevista. Por tal motivo, extendemos el sistema de tipos para garantizar que estas situaciones no sucedan. Dicha extensión satisface "desclasificación robusta": un atacante no puede deducir ninguna información adicional a la permitida por la política de seguridad ni tampoco puede influir en los datos que serán desclasificados. En segundo lugar, presentamos un análisis teórico de un modelo computacional funcional que mantiene un registro de su historia de computación. A partir de un fragmento de la Lógica de Justificación (JL) de Artemov y el isomorfismo de Curry-de Bruijn-Howard obtenemos un cálculo lambda que modela unidades auditadas de computación. Reducción en estas unidades auditadas genera trazas que están confinadas a cada unidad auditada. Asimismo, estas unidades auditadas pueden consultar sus trazas para tomar decisiones en base a las mismas. Probamos seguridad de tipado y normalización fuerte para una restricción del mismo. Este cálculo lambda puede ser utilizado para definir programas que refuerzan una variedad de políticas de seguridad basadas en computación auditada.

Abstract:
One of the pillars of computer security is to ensure the confidentiality of information restricting its access to authorized users. Information Flow Analysis studies how information is transmitted by different mechanisms or channels. An attacker can obtain confidential information by observing the output (of any particular channel) of the system. However, while information flow policies are useful and important, there are other proposed mechanisms such as access control or stack inspection. We want a programming language that can enforce a wide range of policies while providing the assurance that programs enforce their policies correctly. An alternative is to use audited trails (logs). Informally, a program is auditable if, at any audit point, an impartial judge is satisfied with the evidence produced by the program. The contributions of this dissertation are twofold. Firstly, we present a type system for ensuring secure information flow in a JVM-like language that allows instances of a class to have fields with security levels depending on the context in which they are instantiated. We prove that the type system enforces noninterference. Although noninterference is an appealing formalisation for the absence of leaking of sensitive information, its applicability in practice is somewhat limited given that many systems require intensional release of secret information. This motivates our extension of a core JVM-like language with a mechanism for performing downgrading of confidential information. We discuss how the downgrading mechanism may be abused in our language and then extend our type system for ensuring it captures these situations. It is proved that the type system enforces robustness of the declassification mechanism: attackers may not affect what information is released or whether information is released at all. Secondly, we present a proof theoretical analysis of a functional computation model that keeps track of its computation history. A Curry-de Bruijn-Howard isomorphism of an affine fragment of Artemov's Justification Logic yields a lambda calculus λh which models audited units of computation. Reduction in these units generates audit trails that are confined within them. Moreover, these units may look-up these trails and make decisions based on them. We affirm that the computational interpretation of JL is a programming language that records its computation history. We prove type safety for λh and strong normalisation for a restriction of it. λh can be used for writing programs that enforce a variety of security policies based on audited trails.

Barrera, Viviana Andrea. "El género Hypocrea Fr. (Hypocreales, Ascomycota) en la Argentina. Estudio de la variabilidad molecular de su estado anamórfico Trichoderma" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En la presente tesis se informan los resultados de un estudio polifásico integral del género Hypocrea/Trichoderma de Argentina. El estudio se encaró desde varios puntos de vista: biodiversidad, morfología, filogenia, incluyendo el análisis de la variabilidad de cepas biocontroladoras de T. harzianum. Para mostrar los resultados de forma ordenada se ha organizado el texto en dos capítulos. El Capítulo I trata sobre la identificación de ejemplares coleccionados y depositados en herbarios nacionales e internacionales. En el Capítulo II se analiza una colección de cepas bicontroladoras nativas de T. harzianum para reconocer caracteres útiles para su aplicación en el campo del control biológico. Como consecuencia de este estudio se identificaron 38 especies de las cuales se incorporan 4 especies nuevas para la ciencia, 2 especies que se citan por primera vez para Sudamérica, 17 especies que se citan por primera vez para la Argentina y por primera vez se cita la relación teleomorfo-anamorfo para T. longibrachiatum. Se caracterizaron 25 cepas nativas biocontroladoras de T. harzianum, se observaron diferencias en cuanto a sus requerimientos nutricionales y alta similitud entre sus caracteres genéticos. Se encontraron 291 marcadores moleculares polimórficos de RAPD de los cuales 15 fueron específicos para 5 cepas y 58 marcadores moleculares polimórficos de UP-PCR de los cuales 5 resultaron específicos para una cepa.

Abstract:
In this thesis we report the results of a comprehensive multi-phase study of the genus Hypocrea/Trichoderma in Argentina. The study was faced from several points of view: biodiversity, morphology and phylogeny, including analysis of the variability of biocontrol strains of T. harzianum. To display the results in an orderly way, the text is organized into two chapters. Chapter I deals with the identification of specimens collected and deposited in national and international herbaria. Chapter II discusses a collection of native biocontrol T. harzianum strains to recognize characters useful for application in the field of biological control. As a result of this study 38 species were identified of which are incorporated 4 new species to science. Two species are recorded for the first time for South America, 17 species recorded for the first time for Argentina and for the first time cited the teleomorph-anamorph relationship to T. longibrachiatum. Twenty five native biocontrol T. harzianum strains were characterized, showing differences in their nutritional requirements and high genetic similarity between their characters. We found 291 polymorphic RAPD molecular markers of which 15 were specific for 5 strains and 58 polymorphic molecular markers of UP-PCR of which 5 were specific for one strain.

Barradas, José Sebastián. "Síntesis de azoles derivados de hidratos de carbono con potencial actividad biológica" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los “azoles” son compuestos que contienen un anillo heterocíclico de cinco o seis miembros con dos o más nitrógenos. Teniendo en cuenta su interés biológico, en este trabajo se planteó la síntesis y caracterización de una serie de azoles como agentes antivirales. Se sintetizaron compuestos pertenecientes a las siguientes familias heterocíclicas: 1,2,4-triazolil-3-tionas, 1,3,4-oxadiazoles y imidazotiazoles, así como los pirrolotiazoles análogos isostéricos de imidazotiazoles, todos ellos sustituidos con un residuo glicosídico y un anillo aromático halogenado. Primeramente, se llevó a cabo la síntesis de derivados fúranósicos protegidos, donde los heterocíclicos antes mencionados se formaban mediante la funcionalización del carbono exocíclico. Este objetivo también involucró la búsqueda y optimización de condiciones de halogenación y oxidación quimioselectivas. Además, se estudió la influencia de la estereoquímica del carbohidrato sobre los rendimientos de reacción para la síntesis de los precursores. Los compuestos fueron evaluados por colegas contra virus Junín y virus Dengue, siendo los imidazotiazoles los derivados más promisorios. Posteriormente y gracias a la versatilidad de la estrategia sintética utilizada, se extendió la síntesis de imidazotiazoles que presentan variaciones en la posición relativa de los sustituyentes sobre el heterociclo. Se compararon condiciones de calentamiento térmico y por microondas, logrando con esta última minimizar tiempos de reacción. Los estudios de actividad antiviral indicaron que los derivados bromados y clorados resultaron los más activos. Para evaluar la hidrofilia en la actividad, se sintetizaron derivados análogos donde el hidrato de carbono estuviese desprotegido. Para cumplir con este objetivo se evaluaron distintos grupos protectores siendo el p-metoxibencilo aquel que permitió obtener los compuestos deseados. La evaluación antiviral de los mismos indicó que la mayor hidrofília resultaba en desmedro de la actividad.

Abstract:
The "azoles" is a class of five or six-membered heterocyclic ring compounds containing two or more nitrogens. This work was focused in the synthesis and characterization of a series of azoles as antiviral agents. The following heterocyclic families were synthesized: 1,2,4-triazolyl-3-thiones, 1,3,4-oxadiazoles, imidazothiazole and pyrrolothiazoles, isosteric compounds of the imidazothiazoles, substituted with a glycosidic residue and a halogenated aromatic ring. Firstly, we performed the synthesis of furanosic-protected derivatives, the abovementioned heterocyclic rings where formed by functionalization of exocyclic carbon. To achieve this goal, the search and optimization of chemoselectivity halogenation and oxidation conditions was also involved. Furthermore, we assessed the influence over the reaction yields of carbohydrate stereochemistry involved in the precursors synthesis. The obtained compounds were evaluated by colleagues against Junín virus and Dengue virus being the imidazothiazoles the most promising derivatives. Subsequently, thanks to the versatility of the synthetic strategy used, we spread the imidazothiazole synthesis with variations in the relative position of heterocycle’s substituents. Classic and microwave heating conditions were compared, achieving with microwave heating an important reduction of reaction time. Finally, studies of antiviral activity showed that brominated and chlorinated derivatives were the most active. To evaluate the hydrophilicity in the antiviral activity, the synthesis of the analogous derivatives with unprotected carbohydrate residue was planned. To achieve this objective, different protecting groups were evaluated. The optimal reaction yields were obtained when p-methoxybenzyl was used as protective group. However antiviral evaluation of these new family members indicated that, an increase in compound´s hydrophilicity produce a decrease the antiviral activity.

Baron, Walter Helmut. "Cuerdas y D-branas en espacio-tiempos curvos" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis estudiamos el modelo AdS3 Wess-Zumino-Novikov-Witten. Calculamos la Expansión en Producto de Operadores de campos primarios y de sus imágenes bajo el automorfismo de flujo espectral en todos los sectores del modelo considerado como una rotación de Wick del modelo coset H3+ . Argumentamos que las simetrías afines del álgebra requieren un truncado que determina la clausura de las reglas de fusión del espacio de Hilbert. Estos resultados son luego utilizados para discutir la factorización de las funciones de cuatro puntos con la ayuda del formalismo conocido como bootstrap.También realizamos un estudio de las propiedades modulares del modelo. Los caracteres sobre el toro Euclídeo divergen de una manera poco controlable. La regularización propuesta en la literatura es poco satisfactoria pues elimina información del espectro y se pierde así la relación uno a uno entre caracteres y representaciones del ́álgebra de simetría que forman el espectro. Proponemos estudiar entonces los caracteres definidos sobre el toro Lorentziano los cuales están perfectamente definidos sobre el espacio de funcionales lineales, recuperando así la biyección entre caracteres y representaciones. Luego obtenemos las transformaciones modulares generalizadas y las utilizamos para estudiar la conexión con los correladores que determinan los acoplamientos a las branas simétricas en tal espacio de fondo, obteniendo que en los casos particulares de branas puntuales o dS2 branas se recuperan resultados típicos de Teoría de Campos Conformes Racionales como soluciones tipo Cardy o fórmulas tipo Verlinde.

Abstract:
In this thesis we study the AdS3 Wess-Zumino-Novikov-Witten model. We compute the Operator Product Expansion of primary fields as well as their images under the spectral flow automorphism in all sectors of the model by considering it as a Wick rotation of the H3+ coset model. We argue that the symmetries of the affine algebra require a truncation which establishes the closure of the fusion rules on the Hilbert space of the theory. These results are then used to discuss the factorization of four point functions by applying the bootstrap approach. We also study the modular properties of the model. Although the Euclidean partition function is modular invariant, the characters on the Euclidean torus diverge and the regularization proposed in the literature removes information on the spectrum, so that the usual one to one map between characters and representations of rational models is lost. Reconsidering the characters defined on the Lorentzian torus and focusing on their structure as distributions, we obtain expressions that recover those properties. We then study their generalized modular properties and use them to discuss the relation between modular data and one point functions associated to symmetric D-branes, generalizing some results from Rational Conformal Field Theories in the particular cases of point like and dS2 branes, such as Cardy type solutions or Verlinde like formulas

Bali, Juan Lucas. "Métodos robustos de estimación de componentes principales funcionales y el modelo de componentes principales comunes" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En muchas situaciones prácticas, los datos se registran sobre un período de tiempo o corresponden a imágenes. Por esta razón, conviene considerarlos como realizaciones de un proceso estocástico en lugar de discretizarlos y estudiarlos como realizaciones de datos multivariados. Un método ampliamente usado para describir los principales modos de variación de las observaciones es el de componentes principales funcionales. Sin embargo, los procedimientos clásicos basados en el desvío estándar o el operador de covarianza muestral son muy sensibles a datos atípicos. Para resolver este problema, en esta tesis, se introducen estimadores robustos para las componentes principales mediante un enfoque basado en el método de projection–pursuit. Estimadores de projection–pursuit, para el caso finito– dimensional, fueron inicialmente propuestos en Huber (1981) como una forma de obtener estimadores robustos de la matriz de covarianza. Posteriormente, fueron considerados por Li y Chen (1985) para el problema de componentes principales como una aproximación directa al problema sin necesidad de obtener estimadores robustos de la matriz de escala (ver, también Huber, 1985). En esta tesis, se extiende dicha propuesta al caso funcional. Por otra parte, se consideran diversas variaciones de la misma que permiten obtener estimadores suaves mediante una penalización en la escala o en la norma, o bien, mediante una aproximación finito–dimensional sobre una base con elementos suaves. Bajo condiciones débiles de regularidad, se obtiene la continuidad del funcional asociado, de lo que se deduce la consistencia de los estimadores sin suavizar. Por otra parte, se prueba la consistencia de los estimadores que penalizan la norma y/o la escala así como la de una propuesta basada en aproximaciones por subespacios crecientes, bajo condiciones débiles. Mediante un estudio de simulación, se compara la performance de las propuestas clásicas y robustas bajo diferentes tipos de contaminación. Se complementa el estudio de los estimadores de proyección de las direcciones principales, obteniendo una expresión para la función de influencia del funcional asociado a la dirección principal y su tamaño. Las propuestas anteriores de estimación se extendieron al caso de k poblaciones que cumplen un modelo de componentes principales comunes funcional. Bajo dicho modelo, las diversas poblaciones presentan una estructura común en cuanto a su operador de dispersión compartiendo sus autofunciones y el orden de las mismas. Para ser más precisos, se definen estimadores robustos de projection–pursuit de las direcciones principales bajo un modelo de componentes principales comunes. Para las distintas propuestas, algunas de las cuales incluyen como antes diversos tipos de penalización, se prueba su consistencia, bajo condiciones débiles. Por otra parte, mediante un estudio de Monte Carlo, se estudia el comportamiento de los estimadores introducidos para muestras finitas, bajo diferentes modelos y tipos de contaminación. Finalmente, se proponen algoritmos que permiten calcular aproximaciones de cada una de las propuestas dadas. Se prueba la consistencia del estimador obtenido a través de dicho algoritmo. Mediante un estudio Monte Carlo, se analiza la velocidad de convergencia de dicha propuesta en el caso de procesos con trayectorias suaves e irregulares. Para estas últimas, se propone un método alternativo de cálculo.

Abstract:
In many practical situations, data are recorded over a period of time or may correspond to images. In these situations, it is preferable to consider them as samples of an stochastic process instead of discretizing and studying them as multivariate data samples. A technique widely used to describe the observations principal modes of variations is the functional principal components analysis. The classical procedures based on the standard deviation or the sample covariance are very sensitive to atypical data. To overcome this problem, in this thesis, we introduce robust estimators for the principal components using a projection–pursuit approach. In the multivariate setting, projection–pursuit estimators were initially proposed in Huber(1981) as a way to obtain robust estimators of the covariance matrix. They were then considered by Li and Chen (1985) to perform a robust principal component analysis without passing by a robust estimate of the covariance matrix (see also, Huber, 1985). In this thesis, we extend that proposal to the functional case. On the other hand, we consider other alternatives which allow us to obtain smooth estimators of the principal directions using either a penalization on the scale or the norm or through a sieve approach which consists in considering an increasing sequence of finite–dimensional spaces spanned by a basis with smooth elements. Under mild regularity conditions, we derive the continuity of the associated functional which entails the consistency of the non–smoothed estimators. On the other hand, we show that the estimators defined penalizing the norm and/or the scale and those based on the sieve approach are consistent. Through a simulation study, we compare the performance of the classical and robust proposals under different contamination models. We complete the study of the projection–based estimators of principal directions, obtaining an expression for the influence function of the functional related to the principal direction and its size. The previous proposals are extended to k populations satisfying a functional common principal component model. Under this model, the populations have a common dispersion structure, since the dispersion operators share the same eigenfunctions and their order. More precisely, we introduce robust projection– pursuit estimators of the principal directions under functional common principal components model. We derive the consistency of the the different proposals, some of which include penalization terms. On the other hand, through a Monte Carlo study, we the performance of the robust estimators is compared to that of the classical one, under different models and contaminations. Finally, we propose algorithms that allow to compute approximations for each of the robust proposals given. The estimators obtained through that algorithm turn out to be consistent. Using a Monte Carlo study, we analyse the convergence rate of the proposals when the observations have smooth or rugged trajectories. For the latter, we propose an alternative method of computation.

Balbuena, María Sol. "El uso de información olfativa durante la recolección colectiva de recursos en la abeja Apis mellifera" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En insectos sociales como la abeja Apis mellifera, una eficiente recolección colectiva de recursos requiere de una precisa transferencia de información. La ubicación, productividad y tipo floral a explotar son esenciales para poder encontrar rápidamente el alimento descubierto. Las abejas combinan la transmisión de señales acústico-vibratorias y olfativas con la transferencia de información quimio-sensorial para alcanzar ese objetivo. En esta Tesis se evaluó la correlación entre las interacciones sociales que ocurren durante el reclutamiento hacia un nuevo tipo floral (nueva información olfativa) con las preferencias recolectoras de las abejas reclutadas. Se observó que el tipo de interacción más frecuente es el contacto corporal y que, incluso, no es necesario un contacto trofaláctico directo (transferencia de alimento boca a boca) con la reclutadora para que las abejas reclutadas arriben a la fuente de alimento señalada, como se sugería hasta el presente. Además, las abejas reclutadas mostraron una alta preferencia por aterrizar en los alimentadores que presentaron el mismo olor que el llevado por la danzarina. Por otro lado, con el fin de vincular semioquímicos cuticulares y actividad recolectora, se analizaron los perfiles de los compuestos cuticulares presentes en abejas recolectoras de néctar expuestas a fuentes de alimento de productividad variable. Estos perfiles variaron con la productividad de la fuente explotada, lo cual podría tener implicancias en el reclutamiento de nuevos individuos al sitio recolector. Además, se propuso desarrollar un bioensayo que permita cuantificar la sensibilidad quimiosensorial de abejas de colmena que pueden ser potencialmente activadas por abejas recolectoras a salir al exterior en busca de recursos. Estas abejas fueron capturadas en la colmena y tanto sus umbrales de respuestas al azúcar como sus respuestas espontáneas a olores cuantificadas. Finalmente, se estudió el rol de las experiencias olfativas, adquiridas a edades pre recolectoras dentro de la colmena, sobre el subsiguiente proceso de reclutamiento. Estos resultados indican que las memorias de abejas que aprendieron la asociación olor-recompensa dentro de la colmena, durante el desempeño de tareas de colmena, no relacionadas con la recolección, pueden ser evocadas incluso 8 días después de haber ocurrido el aprendizaje olfativo. En resumen, la transferencia y propagación de información referida al recurso afectaron a distintos grupos operativos de obreras, incluso a los que no estaban involucrados en la recolección. Esto permite suponer que la información floral puede persistir por periodos prolongados dentro de la colonia. A partir de estos resultados se concluye que la abeja Apis mellifera resulta un buen modelo para evaluar el establecimiento de información social a corto y largo término.

Abstract:
Social insects such as the honey bee Apis mellifera rely on accurate information transfer to collectively achieve an efficient gathering of resources. Location, productivity and floral type are essential for finding known food sources rapidly. Honey bees achieve this by combining the transmission of acoustic-vibratory and olfactory cues with the transfer of quimio-sensory information. In this thesis, the correlation between social interactions during recruitment involving new olfactory information and the gathering preferences of the recruited bees was studied. The most frequent type of interaction resulting of recruitment to a novel food source was found to be body contact with the recruiter. This is contrary to what had been previously suggested, direct trophallactic contact (mouth to mouth food transfer) is apparently not necessary. Recruited honey bees showed high preference for landing on feeders that presented the same odor as that borne by the dancer. I also analyzed the profiles of cuticular compounds present in bees from sources with different productivity, aiming to relate recruitment activity with cuticular semiochemicals. These cuticular profiles varied with the productivity of the exploited food source. This could have an effect on the recruitment of new individuals to the gathering site. Furthermore, I proposed the development of a bioassay to quantify the quimiosensory sensitivity of hive bees, taken as the likelihood to leave the hive in search of resources due to activation by foragers. Hive bees were captured and their sugar response thresholds and spontaneous response to odors quantified. Finally, I studied the role of olfactory experiences, acquired inside the hive at preforaging ages in the recruitment process. The results imply that odor-reward associative memories established inside the hive whilst carrying out hive tasks unrelated to gathering can be evoked even 8 days after the olfactory learning occurs. In summary, transfer and propagation of information related to the resource affected different operative groups of worker bees, even those that were not involved in food gathering. Thus, it can be assumed that floral information can persist for prolonged periods inside the colony. In conclusion, the honeybee Apis mellifera is an excellent model for the study of short and long term establishment of social information.

Balboa, Luciana. "Alteraciones de las células presentadoras de antígenos en pacientes con tuberculosis pulmonar" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La tuberculosis (TB) es considerada la segunda causa de muerte por infección, causando 1.7 millones de muertes al año. Se estima que un tercio de la población mundial está actualmente infectada con Mycobacterium tuberculosis (Mtb) y que sólo entre el 5‐10% de aquellos infectados desarrollarán la enfermedad, siendo desconocidos los mecanismos que conducen al establecimiento de la enfermedad tuberculosa latente o activa. El éxito de la infección depende principalmente de las estrategias de evasión de la respuesta inmune y de la capacidad de las células presentadoras de antígeno (CPA) de iniciar una eficiente respuesta. En este sentido, las células dendríticas (CD) son críticas para el desarrollo de la respuesta inmune antibacteriana y, por lo tanto, constituyen un blanco fundamental en la inmuno‐evasión inducida por Mtb. Nuestra hipótesis de trabajo es que durante la infección con Mtb se inducirían alteraciones en las CPA determinando la eficiencia de la respuesta inmune así como el curso de la infección; teniendo en cuenta esto, nuestro objetivo fue investigar las alteraciones en la generación de las CPA y su impacto en el desarrollo de la respuesta inmune en pacientes con TB. Para ello, caracterizamos el efecto de la bacteria sobre la diferenciación de monocitos (Mo) en controles sanos, observando que Mtb altera la diferenciación hacia CD a través de la secreción de IL‐10 y la activación de TLR‐2. Las células obtenidas presentaron baja expresión de receptores de entraba para la bacteria, baja capacidad de presentación de antígenos micobacterianos en el contexto de moléculas CD1 y mayor proliferación de clones T específicos de perfil TH2. Por otro lado, caracterizamos el fenotipo y la función de las CD obtenidas a partir de los Mo de pacientes con TB, las cuales presentaron alteraciones en la expresión de los marcadores típicos de CD así como una baja capacidad de presentación de antígenos micobacterianos. Finalmente, los Mo de los pacientes con TB mostraron un alto grado de activación y un enriquecimiento en la población de Mo CD16+, la cual fue previamente descripta como proinflamatoria. Esta población resultó ser menos eficiente para diferenciarse hacia CD y ha sido asociada a la severidad radiológica de la TB y a los niveles plasmáticos de TNF‐α, poniendo de manifiesto la relevancia clínica del hallazgo. En conclusión, en este trabajo de Tesis describimos un nuevo paso en la regulación de la respuesta inmune contra Mtb a través de la modulación de la capacidad de diferenciación de los Mo. Nuestros resultados amplian el conocimiento de los mecanismos involucrados en la evasión de la respuesta inmune ejercida por Mtb y, de ese modo, podrían contribuir al desarrollo de nuevos tratamientos y vacunas en esta enfermedad re‐emergente tanto a nivel local como mundial.

Abstract:
Tuberculosis (TB) is the second most common cause of death from infectious diseases in the world and it causes an estimated 1.7 million deaths worldwide. Overall, one‐third of the world's population is currently infected with the TB bacillus (Mycobacterium tuberculosis) and 5‐10% of those infected individuals may develop TB disease. The exact mechanism leading to latent or acute TB disease is unknown, but it mainly depends on immune evasion strategies displayed by M. tuberculosis and the efficiency of the immune response initiated by antigen presenting cells (APC). As dendritic cells (DC) are critical for initiating a M. tuberculosis‐specific T‐cell response, they may represent a crucial target of M. tuberculosis immune evasion. Our hypothesis is that M. tuberculosis infection could induce alterations in APC, determining the outcome of the infection. Therefore, our aim was to evaluate the impact of M. tuberculosis infection on the generation of APC and on the host immune response. Thus, we characterized the effect of M. tuberculosis in the differentiation of monocytes (Mo) from healthy donors into DC. We determined that M. tuberculosis alters Mo differentiation through IL‐10 release and TLR‐2 activation, promoting the generation of cells with a low expression of M. tuberculosis pattern recognition receptors, a reduced specific CD1‐restricted lymphocytes proliferation, and a preferential polarization towards a TH2 pattern. In this line, the phenotype and function of DC from Mo in TB patients also showed alterations in DC loyal markers and a reduced antigenpresenting capacity. Finally, we found that circulating Mo from TB patients presented an activated phenotype with an enrichment of the proimmflamatory CD16+ subset, being this subset less prone to differentiate into DC. Moreover, the percentages of CD16+ Mo correlated with disease severity and with TNF‐α plasma levels, highlighting the clinical relevance of this finding. In conclusion, we have described a new step in the regulation of the immune response to M. tuberculosis through modulation of Mo differentiation. Our results may contribute to a better understanding of the immune evasion strategies of M. tuberculosis, therefore facilitating the development of effective therapeutic and prophylactic approaches for controlling M. tuberculosis infection.

Badano, María Noel. "Regulación de la linfopoyesis B por la cisteín proteasa catepsina-L" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La catepsina-L (CTSL) es una proteasa lisosomal de expresión ubicua que presenta funciones diversas y específicas. Entre ellas, participa en la selección positiva de las células T CD4+ y en la homeostasis de las células T. Utilizando como modelo experimental ratones CTSLnkt/nkt, portadores de una deleción en el gen que codifica para la CTSL, estudiamos la influencia de la CTSL sobre la homeostasis de las células B. Observamos un incremento en el número de células B en los ganglios linfáticos (GL), el bazo y la sangre periférica (SP) de los ratones CTSLnkt/nkt. En el bazo, este incremento estuvo restringido a las células B transicionales T1 y T2 y a las células B de la zona marginal (ZM). No se detectaron alteraciones en los niveles de proliferación y apoptosis basales de las células B periféricas en los ratones CTSLnkt/nkt. La frecuencia y el número de células B en los distintos estadios de maduración de la médula ósea (MO) en los ratones CTSLnkt/nkt resultó normal. Sin embargo, experimentos in vitro e in vivo demostraron que la linfopoyesis B se encuentra incrementada en los ratones CTSLnkt/nkt. Tanto los precursores de las células B como el microambiente de la MO de los ratones CTSLnkt/nkt contribuyen a dicho incremento. Además la emigración de células B de la MO hacia el bazo se encuentra incrementada en los ratones CTSLnkt/nkt. El conjunto de estos resultados indica que la CTSL regula negativamente la producción y exportación de los linfocitos B por la MO y el número de células B periféricas.

Abstract:
Cathepsin-L (CTSL) is an ubiquitously expressed lysosomal cysteine protease with diverse and highly specific functions. The involvement of CTSL in thymic CD4+ T-cell positive selection and T-cell homeostasis has been previously documented. Using CTSLnkt/nkt mice that lack CTSL activity, we investigated the influence of CTSL activity on B-cell homeostasis. B-cell numbers were increased in lymph nodes (LN), spleen and blood from CTSLnkt/nkt mice. Increases in splenic B-cell numbers were restricted to transitional T1 and T2 cells and to the marginal zone (MZ) cell subpopulations. No alterations in the proliferative or apoptosis levels were detected in peripheral B-cell populations from CTSLnkt/nkt mice. In the bone marrow (BM), the percentage and the absolute number of B cells precursors and mature B cells were not altered. However, in vitro and in vivo experiments showed that BM B-lymphopoiesis was markedly increased in CTSLnkt/nkt mice. Both BM microenvironment and B-cells progenitors would contribute to the increased Blymphopoiesis in CTSLnkt/nkt mice. Besides, BM B-cell emigration to the spleen was increased in CTSLnkt/nkt mice. Overall, our data clearly demonstrate that CTSL negatively regulates BM B-cell production and output and the number of peripheral B cells.

Bachmann, Sandra D.. "Caracterización bioquímica y molecular de nucleósido difosfato quinasas de Solanum tuberosum (StNDPKs): análisis de su expresión en la planta de papa en respuesta a estreses" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La capacidad de respuesta de una planta ante los cambios ambientales circundantes asegura su supervivencia. Los mecanismos de respuesta a estres biótico y abiótico están regulados por vías que dependen de la activación de genes en la cual una red de transducción de señales abarca desde la percepción de las señales hasta la expresión de genes de respuesta permitiendo la adaptación de la planta a su entorno, debiendo para ello integrar las señales externas e internas. Las nucleosido di fosfato quinasas (NDPKs) son enzimas que transfieren el fosfato γ de nucleósidos tri fosfatos (NTPs) a nucleósidos di fosfatos (NDPs) a través de un intermediario fosforilado en una histidina conservada, participando de la red de comunicación energética intracelular y pudiendo alterar el pool de NTPs. En plantas se han visto recientemente involucradas en varias cascadas de señalización. El objetivo general del trabajo es caracterizar las isoformas de NDPK en plantas de papa (S. tuberosum, var. Spunta) y estudiar su participación en la percepción de señales ambientales, analizando su expresión en respuesta a señales de estrés biótico y abiótico. La hipótesis planteada es que, dado que en toda situación de estrés subyace un compromiso energético y considerando que las NDPKs poseen actividad de fosfo-transferasa, éstas podrían estar involucradas en las respuestas a estímulos ambientales. A partir de los EST correspondientes a isoformas de NDPKs (STMED71, STMHY37) detectados en los microarreglos TIGR 10K de ARNm de brotes de papa cultivados en luz/oscuridad, se clonó de la secuencia codificante completa de StNDPK1 (GB FJ743686) a partir de brotes de papa y se sub-clonó un fragmento de la secuencia codificante de StNDPK2 (GB JF832386) a partir de una biblioteca de estolones. Se comparó la expresión de ambas en los distintos tejidos vegetativos y reproductivos de la planta y en tres estadios de tuberización por RT-PCR semi cuantitativa. StNDPK1 se expresa con distintos niveles de ARNm tanto en los tejidos como en los estadios de tuberización, mientras que StNDPK2 se expresaría en algún estadio de estolón tuberizante que no se pudo determinar. El análisis in silico de la secuencia aminoacidica de StNDPK1 muestra que tiene 238 amino ácidos de longitud, un peso molecular aproximado de 26 kDa y un punto isoeléctrico de 9.24. Codificaría para una proteína mitocondrial, el péptido señal comprendería los primeros 56 aa y el PM de la proteína madura sería de aprox. 20 kDa. La proteína recombinante StNDPK1 marcada con seis histidinas (6xHis) en su N-terminal producida se analizó por Western blot. Un anticuerpo anti-His detectó una banda de 26 kDa, mientras que un anticuerpo anti-NDPK1 dirigido contra el extremo Cterminal de la proteína reveló la banda de 26 kDa y una banda de 18kDa que podría corresponder a la proteína madura. Se detectó actividad de NDPK en extractos crudos y fracciones mitocondriales de brotación tubérculos, pero no en fracciones de cloroplastos. Además, los ensayos de Western blot realizados con el anticuerpo específico antiNDPK1 detectó la enzima en la fracción mitocondrial. El análisis filogenético de la proteína muestra que StNDPK1 está directamente emparentada con NDPK de Spinacia olaracea (que localiza en cloroplastos) y que posee un ancestro común con las otras isoformas de NDPKs de localización mitocondrial (AtNDPK3, BrNDPKIII y PsNDPK3). Además se pudo clonar la secuencia genómica completa de Stndpk1 (GB GU144806) de 3358 nts, posee 7 exones y 6 intrones. El Southern Blot usando como sonda la secuencia codificante de StNDPK1 sugiere que este gen pertenece a una familia multigénica. Por otro lado, se obtuvo el promotor de éste gen de 2385 pb cuyo análisis in silico revela la presencia de elementos regulados por luz, frío, daño mecánico, respuesta a defensa y dos sitios reguladores de los niveles transcripcionales (CAATbox y 5UTR Py-rich stretch). Dado que se disponía de mayor información respecto de la estructura del gen y de los elementos regulatorios que contiene la isoforma 1 de StNDPK y considerando que ésta tenía un perfil de expresión menos complejo que la isoforma 2, se realizaron los estudios de expresión en condiciones de estrés abiótico y biótico sólo para la isoforma 1. Los resultados de las RT-PCR semi-cuantitativas muestran que el nivel de ARNm de StNDPK1 aumenta en la exposición de plantas a oscuridad por tiempos cortos, mientras que en la exposición a bajas temperaturas se produce una disminución inicial de la expresión para luego recuperar los niveles normales. Se observó que tanto en el tratamiento con daño mecánico como el agregado de AJ (10μM) producen un aumento del mensajero de StNDPK1. Por otro lado, se midió actividad de NDPK en extractos de proteínas nativas de fracciones mitocondriales y de cloroplastos; tanto el extracto crudo, como la fracción mitocondrial presentan actividad de NDPK, sin embargo en la fracción de cloroplastos no se detectó actividad alguna. El análisis bio-informático sugiere que las dos isoformas, son de localización sub-celular. Pero en particular, StNDPK1 fue detectada por Western blot en la fracción mitocondrial donde también se midió la actividad enzimática; por lo que StNDPK1 sería una isoforma que localiza en la mitocondria. Al menos dos isoformas de NDPK en plantas de papa muestran un patrón muy diferente de expresión, StNDPK1 tiene diferentes niveles de expresión en tejidos, pero su expresión es ubicua, mientras StNDPK2 muestra un patrón más restringido y sólo se expresa en ciertas etapas de estolones, lo que sugiere que posiblemente su expresión esté asociada a ciertas etapas del desarrollo del tubérculo. Nuestros resultados sugieren fuertemente que StNDPK1 está dirigida a la mitocondria. El análisis de los datos de Stndpk1 promotor es consistente con los resultados de la expresión, lo que sugiere que StNDPK1 podrían estar involucrados en las respuestas ambientales a la disponibilidad de luz, temperaturas bajas o ataque herbívoro.

Abstract:
The responsiveness of a plant to environmental changes ensures its survival. Response mechanisms to biotic and abiotic stresses are regulated by signal transduction networks that extend from signal perception to gene activation allowing the plant´s adaptation to the environment through a process that integrates external and internal signals. Nucleoside diphosphate kinases (NDPKs) participate in the intracellular energy communication network by altering the nucleoside triphosphates (NTPs) pool; they catalyze the transfer of γ phosphates from NTPs to nucleoside diphosphate (NDPs) through a phosphorylated protein intermediary at a conserved histidine. NDPKs have been involved in several signaling cascades in plants. The overall aim of this study is to characterize NDPK isoforms in potato (S. tuberosum, var. Spunta) plants and to study their involvement in the perception of environmental signals by analyzing their expression in response to biotic and abiotic stress signals. Our hypothesis is that, as in all stress situations there is an underlying commitment to energy; NDPKs could be involved in responses to environmental stimuli. ESTs from NDPKs isoforms (STMED71, STMHY37) were detected in a TIGR 10K microarray probed with total RNA from potato sprouts grown under different conditions (light/dark). StNDPK1 complete coding sequence (GB FJ743686) was cloned using total RNA from potato sprouts while a fragment of StNDPK2 coding sequence (GB JF832386) was amplified from a cDNA library from tuberizing stolons. Bioinformatic analysis suggested that both isoforms have a sub-cellular localization because they don´t have the characteristic YE motif present in cytosolic NDPKs. Phylogenetic analysis shows that StNDPK1 protein is directly akin of Spinacia olaracea NDPK (which is located in chloroplasts) and shares a common ancestor with other NDPK isoforms with mitochondrial localization (AtNDPK3, BrNDPKIII and PsNDPK3). In silico analysis of StNDPK1 sequence shows that it encodes a protein of 238 aminoacids (aa) with a molecular weight of 26 kDa and an isoelectric point of 9.24. A mitochondrial signal peptide of 56 aa was predicted, thus the mature protein would be of approx. 20 kDa. The recombinant StNDPK1protein tagged with six histidines (6xHis) in its N-terminus was produced and analyzed by Western blot. An anti-His antibody detected a 26 kDa band while an anti-NDPK1 antibody directed against the C-terminus of the protein revealed the 26 kDa band and an 18kDa band that could correspond to the mature protein. NDPK activity was detected in crude extracts and mitochondrial fractions from sprouting tubers, but not in chloroplast fractions. In addition, Western blot assays performed with the specific antiNDPK1 antibody detected the enzyme in the mitochondrial fraction. A Southern blot probed with StNDPK1 complete coding sequence suggests that this gene belongs to a multigene family. The complete genomic sequence of Stndpk1 (GB GU144806) and its promoter region (2385 bp) were cloned. Stndpk1 is 3358 bp long and has seven exons and six introns. In silico analysis of the promoter region reveals the presence of elements regulated by light, cold, wounding, defense and two regulatory sites of transcriptional levels (CAATbox and Py-rich 5UTR stretch). We compared the expression of both isoforms in various vegetative and reproductive tissues of the plant and in three stages of tuberization by semiquantitative RT-PCR. StNDPK1 is expressed in all tissues and tuberization stages being most abundant in shoot apex, flowers and leaves, while StNDPK2 expression was undetectable in the tissues analyzed. Expression studies under abiotic and biotic stress conditions were performed only for StNDPK1. Semiquantitative RT-PCR results show that StNDPK1 transcripts increased in plants exposed to short periods of darkness, while exposure to low temperatures produced an initial decrease in the expression recovering after 6hs. Both, mechanical wounding or the addition of 10μM jasmonic acid (JA) produced an increase in StNDPK1´s mRNA. According to our results we propose that at least two NDPK isoforms are present in potato plants that show different expression patterns, StNDPK1 is ubiquitous being most abundant in aerial tissues, while StNDPK2 is restricted to tuberizing stolons. Our results strongly suggest that StNDPK1 is targeted to mitochondria. The data analysis of Stndpk1 promoter is consistent with the expression results, suggesting that StNDPK1 could be involved in environmental responses to light availability, low temperatures or herbivore attack.

Babaro, Juan Pablo. "Teorías de campos conformes no racionales formuladas en variedades de topología no trivial" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis estudiamos una familia de teorías conformes no-racionales en dos dimensiones formuladas sobre supeficies de Riemann de topología no-trivial. Más precisamente, nos dedicamos en superficies con bordes a y superficies cerradas con número de género mayor que uno. Este conjunto de teorías corresponden a una generalización de otras teorías de campos conformes importantes, tales como la teoría de campos de Liouville y el modelo deWess-Zumino- Novikov-Witten, los cuales tienen importantes aplicaciones en materia condensada y teorías de cuerdas. Calculamos valores de expectación de campos primarios en el disco y funciones de correlación en el toro, relacionando estas cantidades con observables de la teoría de Liouville. El desarrollo de estos cálculos se realizó empleando tanto el formalismo de integral funcional como el formalismo del gas de Coulomb, siempre chequeando la consistencia de ambos métodos. También discutimos dos aplicaciones para nuestros resultados: su uso en el estudio de D-branas en teoría de cuerdas en dos y tres dimensiones, y su uso como herramienta para realizar cálculos en teorías superconformes en cuatro dimensiones con supersimetría N = 2. Los resultados de esta tesis están basados en trabajos del autor.

Abstract:
In this thesis we study a family of non-rational conformal field theories in two dimensions formulated on Riemann surfaces of non-trivial topology. More precisely, we study surfaces with boundaries and closed manifolds with genus number grater than zero. This set of theories generalizes important conformal theories, such as Liouville Field Theory and the Wess-Zumino- Novikov-Witten model, which have important applications in condensed matter and string theory. We compute expectation values for primary operators in the disk and correlation functions in the torus, relating these quantities with observables of the Liouville theory. The computations are done both in the path integral formalism and in the Coulomb Gas formalism, then checking their consistency. We also discuss two applications for ours results: their use in the study of D-branes in string theory in two and three dimensions, and their use as a tool to perform computations in four dimensional super-conformal field theories with N = 2 supersymmetry. The results of this thesis are based on works of the author.

Auzmendi, Jerónimo Andrés. "Desarrollo de tecnología para el estudio de la activación rápida de canales iónicos" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los canales iónicos son proteínas multiméricas que regulan el pasaje de iones a través de la membrana celular acoplando su funcionamiento a factores externos como el voltaje de membrana y/o presencia de ligandos específicos. Sus dinámicas de cambio de estado pueden ser descriptas cuantitativamente en términos de un proceso de Markov, aleatorio y sin memoria. Las constantes cinéticas de estos procesos pueden ser obtenidas, a partir de resultados experimentales, con la estimación de la máxima verosimilitud (EMV), empleando el algoritmo recursivo de cadenas ocultas de Markov. En el caso particular de los canales activados por ligando se han postulado estados parciales de energía intermedia (FLIP-STATE), para explicar retardos durante la activación del receptor. Para dilucidar si la existencia de estos estados es una propiedad del receptor o de cada una de las subunidades es necesario poder realizar aplicaciones de agonista aún más breves que las del estado de arte (0.2 ms). Por tal motivo en esta tesis se presenta la creación de un método que permite realizar aplicaciones discretas de agonista ultra-rápidas (20 μs), sobre una preparación de outside-out patch clamp, marcando una mejora sustancial de 10- 50 veces comparado con el estado del arte actual y a los dispositivos comerciales, respectivamente. Se analizó el rango de condiciones en el que esta técnica puede s er empleada y se realizaron modificaciones para generar aplicaciones arbitrarias del agonista maximizando la información cinética obtenida por experimento. Por último, se realizó un análisis teórico, bajo la óptica de la estadística Bayesiana, de la respuesta de canales a aplicaciones ultra-cortas de agonista. Empleando esta técnica y método de análisis puede discriminarse entre modelos que ajustan igualmente los datos experimentales.

Abstract:
Ion channels are multimeric proteins that regulate the passage of ions through cell membrane coupling their functioning to external factors like membrane voltage and/or the presence of specific ligands, etc. Their change of state dynamics can be quantitatively descripted in terms of a Markov’s process, random and without memory. The kinetic constants of these processes can be obtained, from experimental results, with the maximum likelihood estimation (MLE), using the recursive algorithm of hidden chains of Markov. In the particular case of ligandactivated channels there had been postulated states of intermediate energy (FLIPSTATE), to explain delays during the activation of the receptor. To elucidate whether the existence of these states is a property of the receptor or each one of the subunits it is necessary to make applications of agonist even shorter than art state (0.2 ms). Therefore in this thesis presents the creation of a method that allows discrete ultra-fast applications of agonist (20 μs), on an outside-out patch clamp preparation, marking a substantial 10-50 fold improvement compared with actual art state and commercial devices, respectively. We analyzed the range of conditions in which this technique can be used and we made modifications to generate random applications of agonist maximizing the kinetic information obtained by experiment. Finally, we made a theoretical analysis, under the viewpoint of Bayesian statistics, of the response of channels to ultra-fast applications of agonist. Using this technique and this method of analysis can discriminate between models that also fit the experimental data.

Astort, Francisco. "Mecanismos involucrados en la inducción del gen de HO-1 en células adrenales. Efecto de ACTH, NO y LPS" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La actividad de HO-1 ha sido asociada a una plétora de efectos biológicos. En particular estudios previos de nuestro grupo de trabajo han demostrado su rol como modulador autócrino/parácrino de la esteroidogénesis en la corteza adrenal de ratas estimuladas con ACTH y LPS , así como su acción citoprotectora como parte del sistema antioxidante adrenal. En el presente trabajo de tesis estudiamos mecanismos de inducción de HO-1 en células adrenales. Los resultados obtenidos confirman que el tratamiento de células Y1 con ACTH induce la transcripción de HO-1. Se localizó una zona del promotor murino de HO-1 de 400 pb aledaña al inicio de la transcripción, donde se encontraron secuencias consenso para la unión de los factores de transcripción CREB y AP-1. Se demostró también la participación de la vía de transducción de señales de AMPc/PKA/CREB y de Akt/PKB en el mecanismo de inducción de HO-1 por ACTH. El LPS incrementó la transcripción de HO-1 por un mecanismo que involucra una zona del promotor de aprox. 516 pb (entre -3216 y -2700). Tras el estímulo con LPS constatamos, además, la activación del factor de transcripción NFκB y la regulación de la expresión de HO-1 por la vía de la PKA. Finalmente, encontramos evidencias que nos permiten afirmar que el NO también induce a la HO-1 incrementando su transcripción, por un mecanismo que involucra la activación del factor de Nrf2, la actividad de PKC, la activación de la GCs y la generación de GMPc. En suma, demostramos que diferentes estímulos son capaces de activar la transcripción de HO-1, en células adrenales Y1, utilizando diferentes mediadores y factores de transcripción. Dado su rol modulatorio en la síntesis de glucocorticoides adrenales además de sus efectos citoprotectores, este conocimiento podría utilizarse para diseñar estrategias dirigidas a inducir HO-1 como un blanco novel alternativo en el tratamiento de patologías que cursan con disfunción adrenal.

Abstract:
HO-1 activity has been involved in a plethora of biological effects. In particular, previous studies from our group have demonstrated an autocrine/paracrine modulatory role in steroidogenesis in the adrenal cortex of the rat under the stimulation of ACTH or LPS . In addition, HO-1 induction was shown to exert a citoprotective effect in these cells . Present studies were designed to analyze different mechanisms of HO-1 induction in adrenal cells. Our results confirm that ACTH treatment of Y1 adrenal cells results in an increase in the transcription of the HO-1 gene. Results showed a 400 bp zone of the murine HO-1 promoter near the initiation of the transcription site housing consensus sequences for the binding of CREB and AP-1. The involvement of the cAMP/PKA/CREB and Akt/PKB transduction pathways in ACTH-induced regulation of the HO-1 gene was also demonstrated. HO-1 transcription was also increased by LPS, and this effect was dependent on the presence of a ~516 bp zone in the murine promoter (between -3216 y -2700 bp). LPS-dependent HO-1 gene induction was mediated by the activation of the NFκB transcription factor. The modulation of this pathway by PKA was also demonstrated. Finally, we also showed that NO also increased HO-1 mRNA expression levels through the activation of Nrf2, PKC, and sGC with the resulting production of cGMP. In summary we demonstrated that different stimuli are able to induce HO-1 in the murine adrenocortical cell line Y1, using several signaling pathways that ultimately activate this enzyme’s gene by means of different transcription factors. Considering its role as a modulator of adrenal glucocorticoid synthesis, in addition to its cytoprotective effects, this knowledge could be used to design strategies aimed at inducing HO-1 as a novel alternative target in the treatment of diseases that presents with adrenal dysfunctions.

Arneodo, Ezequiel Matías. "Modelos de baja dimensión para canto de aves y aplicación a interfaces cerebro-máquina" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El canto de aves oscinas es un comportamiento complejo aprendido que surge de la interacción entre un sistema nervioso central y una serie de dispositivos periféricos bio-mecánicos. Es una tarea intensa la de dilucidar cuánta de la complejidad es debida a la enorme dimensión de la dinámica del sistema nervioso, y cuánta a la de la respuesta mecánica de la periferia. Este último punto resulta de particular interés para la física, porque los sistemas bio-miméticos empleados por los seres vivos son abrumadoramente no lineales, y capaces de presentar comportamiento complejo aún ante instrucciones sencillas. Esta tesis se propone mostrar que modelos vocales sumamente sencillos son capaces de reproducir las sutilezas presentes en el canto de las aves oscinas, siendo la sencillez del modelo de tal magnitud que su solución es computable mediante un procesador de señales digitales (DSP). Esto permite diseñar una nueva estrategia para la bio-mimética prostética vocal: la integración en tiempo real de modelos sencillos, controlados por pocas señales fisiológicas. En esta tesis se muestra la plausibilidad de esta estrategia construyendo un prototipo de ese dispositivo.

Abstract:
The complex vocalizations composing birdsong emerge from the interaction between the nervous system and a nonlinear peripheral device, its vocal organ. It is an area of intensive work to elucidate how much of the complexity of it is due to the huge dimensionality of the dynamics of the nervous system, and how much due to the mechanical response of the periphery. This last point is of particular interest for applied physics, as bio-mechanic systems used by living things are overwhelmingly non-linear, and capable of presenting complex behaviors even as a response to simple instructions. We present a bio-prosthetic device based on a model for the zebra finch vocal organ, which is capable of producing the subtleties present in the actual song of the birds. This model is simple to the extent that its solution can be computed by digital signal processors (DSP), when fed with actual physiological motor instructions by a freely behaving subject. This allows for the design of a new strategy for biomimetic prosthesis: real-time integration of simple models, controlled by few physiological signals. In this thesis we show the plausibility of this strategy by building a prototype of such a device.

Argüello, Rafael José. "Mecanismos de regulación negativa de la respuesta inmune en pacientes con enfermedad de Chagas" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La enfermedad de Chagas es causada por el parásito protozoario intracelular Trypanosoma cruzi (T. cruzi) y afecta alrededor de 10 millones de personas. Aproximadamente un 20 a 30% de los sujetos crónicamente infectados muestran la progresión a miocardiopatía, después de padecer infección asintomática durante un período de años a décadas. La miocardiopatía de la enfermedad de Chagas es la causa más frecuente de miocardiopatía infecciosa en el mundo. Las respuestas inmunes mediadas por células CD8 y células T CD4 son cruciales para el control de esta infección crónica. En el pasado, debido a la escasez de los parásitos en el corazón, prevaleció la hipótesis de que la miocarditis chagásica crónica era atribuible exclusivamente a reacción cruzada autoanticuerpos al tejido cardiaco, y que la presencia del parásito era dispensable para la inflamación y fisiopatogénesis. Esta idea, en combinación con la elevada toxicidad y la falta de estudios controlados sobre la eficacia del tratamiento, exacerbó el escepticismo sobre la conveniencia de un tratamiento antiparasitario durante la infección crónica. Este escepticismo se mantuvo hasta finales de la década de los 90. Por otra parte, las pruebas serológicas convencionales pueden mantenerse positivas durante años o incluso décadas después de tratamiento antiparasitario exitoso y los resultados de un ensayo clínico doble ciego controlado con placebo para determinar la eficacia del tratamiento benznidazol no están disponibles actualmente. En el presente trabajo hemos estudiado los mecanismos inmunoregulatorios presentes en células T de sangre periférica, específicas o no contra T. cruzi y también en el corazón de pacientes humanos infectados con este parásito. Así mismo evaluamos el impacto del tratamiento tripanocida (benznidazol) sobre, la expresión de las moléculas de inmunoregulatorias y sobre los niveles de subpoblaciones de células T (ítems 1, 2 y 3). 1) Caracterización funcional de moléculas inmunoregulatorias y producción de citoquinas por parte de linfocitos T específicos contra T. cruzi. 2) Evaluación del impacto del tratamiento con benznidazol en subpoblaciones de linfocitos T en pacientes con infección crónica. 3) Composición celular, grado de diferenciación celular y perfil funcional de las células reclutadas hacia el corazón de pacientes con miocarditis crónica de Chagas. 1) Caracterización funcional de moléculas inmunoregulatorias y producción de citoquinas por parte de linfocitos T específicos contra T. cruzi. En los individuos infectados, más del 80% de los linfocitos T específicos contra el parásito productores de IFN-γ, presenta expresión del receptor inhibitorio CTLA-4, pero no de LIR-1. Por el contrario, en los mismos sujetos los linfocitos T específicos contra antígenos de la vacuna TetaDif productores de IFN-γ, no expresan ni CTLA-4 (3%), ni LIR-1 (5%). Además demostramos que la expresión de CTLA-4 en células T específicas contra T. cruzi tiene consecuencias funcionales, debido a la activación de CTLA-4 conduce a la disminución de la producción de IFN-γ en respuesta a antígenos de parásitos. Interesantemente, detectamos expresión de CTLA-4 en linfocitos T en el corazón de pacientes con miocarditis chagásica crónica. Luego de la activación policlonal, la expresión de CTLA-4 aumenta en mayor medida en pacientes sintomáticos en comparación con la inducción de la misma en sujetos asintomáticos y no infectados (P<0,001). La expresión de este receptor inhibitorio en células T específicas contra el parásito en repetidas ocasiones durante la exposición antigénica crónica, podría resultar en el agotamiento immunológico observado en el compartimento total de células T después de 10-20 años de la infección inicial. 2) Evaluación del impacto del benznidazol en subpoblaciones de linfocitos T que se encuentran aumentadas en pecientes crónicamente infectados. La administración del fármaco tripanocida en adultos con infección crónica por T. cruzi induce una disminución temprana, duradera y significativa (5 años de seguimiento) en los niveles de linfocitos T altamente diferenciados, los cuales vuelven a niveles normales. Este cambio se observa en la mitad (7 de 14) de los individuos infectados tratados, pero en ninguno de los individuos infectados no tratados seguidos en el tiempo (0 de 12). La serología convencional acompaña a la disminución de los CD4 + LIR-1 + obtenido en los primeros tiempos después del tratamiento y, por tanto constituiría un marcador precoz subrogante de la eficacia del tratamiento. 3) Composición celular, grado de diferenciación celular y perfil funcional de las células reclutadas hacia el corazón de pacientes con miocarditis crónica de Chagas. Con el fin de caracterizar los tipos celulares presentes y su posible rol durante la miocarditis de la enfermedad de Chagas, se analizaron la composición celular (i.e. CD3, CD4, CD8, CD20, CD21, CD68, CD57), la expresión de moléculas coestimuladoras (i.e. CD27), receptores inhibitorios (i.e. HLA-G, PD-1, CTLA-4), factores de transcripción de TH1 o células T reguladoras (i.e. Tbet, FOXP3), marcadores de senescencia (i.e. CD57, CD45RA) y un marcador de ciclo celular activo (i.e. Ki67). 3a. El porcentaje de células T (CD3 + , CD4 + y CD8 + células) se encuentra incrementado significativamente en las regiones con mayor grado de inflamación (hasta 70% del total infiltrado). Por el contrario, el porcentaje de macrófagos (% CD68 + ) fue similar en regiones de alto y bajo nivel de infiltración (20% del infiltrado). Por otro lado, las células B (i.e. células CD20 + ) se observaron sólo en algunas áreas con alto grado de inflamación y en bajo porcentaje (i.e. mediana, rango; 2%, 0-13%). 3b. La mayoría de los linfocitos infiltrantes mostraron expresión de CD45RO y CD27, marcadores de células con experiencia antigénica y bajo grado de diferenciación. Por el contrario, la expresión de PD-1, CD57 y CD45RA fue muy baja o ausente en el corazón de pacientes con enfermedad de Chagas independientemente del grado de miocarditis. 3c. La expresión del factor de transcripción maestro de TH1, Tbet, se observó en una importante proporción de células durante la miocarditis chagásica. En contraste, el nivel de células T reguladoras (i.e. FOXP3 + ) mostró ser escaso. Se observaron altos niveles del células expresando el marcador del ciclo celular activo, Ki67, las cuales a su vez resultaron coexpresar CD3, pero no CD8. 3d. Mediante un análisis de estadística de dos dimensiones pudimos demostrar la infección del miocardiocito humano durante el curso natural de la infección induce un reclutamiento eficiente de linfocitos T con experiencia antigénica y bajo grado de diferenciación (i.e. CD45RO + CD57 – ). En resumen, hemos encontrado que las células T reclutadas por el corazón infectado de pacientes con Chagas miocarditis poseen bajo grado de diferenciación y un fenotipo similar al de los linfocitos T específicos contra T. cruzi en presentes en sangre periférica. Además, se observó que las células T proliferarían in situ, y que los linfocitos T con experiencia antigénica y bajo grado de diferenciación son reclutadas por los miocitos infectados de manera eficiente.

Abstract:
Chagas disease, caused by the intracellular protozoan parasite Trypanosoma cruzi (T. cruzi), affects around 10 million people. An estimated 20 to 30% of the chronically infected subjects show progression to cardiomyopathy, after being asymptomatic for a period of years to decades. Chagas heart disease is the most frequent cause of infectious cardiomyopathy in the world. Immune responses mediated by CD8 and CD4 T cells are crucial for the control of this chronic infection. In the past, due to the scarcity of parasites in the heart, it was hypothesized that chronic chagasic myocarditis was exclusively attributable to cross-reacting autoantibodies to cardiac tissue and that the presence of the parasite was unnecessary for pathogenesis. This belief, in combination with the high toxicity of treatment and lack of treatment efficacy tests led to skepticism about the convenience of antiparasitic treatment for chronic T. cruzi infection, which persisted until late 1990s. Moreover, conventional serologic assays remain positive after years or even decades after successful treatment and results of a double-blind placebo controlled clinical trial to determine benznidazole treatment efficacy are not available. During my thesis I studied immunoregulatory mechanisms in total peripheral T cells, T. cruzi- specific T cells, and also in heart infiltrating cells from infected human patients. I was able to evaluate the impact of trypanocidal treatment (benznidazole) on the expression of immunoregulatory molecules and T cell subsets in the blood and heart of these patients (item 1, 2, and 3). In order to contribute to the progress towards drug discovery in this neglected and poverty related disease, I developed an automatized method for highthroughput screenings of drugs against trypanosome parasites. 1) Evaluation of the impact of benznidazole treatment in T cell subsets that are increased in chronically infected subjects. 2) Functional characterization of immunoregulatory molecules and cytokine production by T. cruzi-specific T cells from peripheral blood of infected subjects. 3) Cellular composition, grade of differentiation and functional profile of cells recruited by the heart of patients with chronic Chagas myocarditis. 1) Evaluation of the impact of benznidazole on T cell subsets that are increased in chronically infected subjects. Trypanocidal drug administration in chronically infected adults induces a significant, early and long lasting (5 years of follow-up) decrease on highly differentiated effector T cells that return to normal levels. This change is observed in half (7 out of 14) of the infected individuals but in none of their untreated counterparts (0 out of 12). Conventional serology accompanies the decrease in CD4 + LIR-1 + obtained at earlier times after treatment and thus would constitute an early surrogant marker of treatment efficacy. 2) Functional characterization of immunoregulatory molecules and cytokine production by T. cruzi-specific T cells from peripheral blood of infected subjects. More than 80% of the IFN-γ producing T. cruzi-specific T cells from chronically infected patients show high expression of the inhibitory receptor CTLA-4, but not LIR-1. In contrast, IFN-γ-producing vaccine antigen-specific T cells from the same infected subjects do not express neither CTLA-4 (3%), nor LIR-1 (5%). We demonstrated that CTLA-4 expression in T.cruzi-specific T cells has functional consequences, because activating CTLA-4 leads to decreased IFN-γ production in response to parasite antigens. Moreover, the expression of CTLA-4 was observed in T cells in the heart of patients with chronic Chagasic myocarditis. Interestingly, we found that after policlonal activation, CTLA-4 expression was more significantly increased (P<0.001) in symptomatic subjects in comparison with asymptomatic and uninfected subjects. The expression of this inhibitory receptor in parasite specific T cells in conjunction with the chronic antigenic exposure could result in the observed exhaustion of the total T cell compartment after 20-40 years of the initial infection. 3) Cellular composition, grade of differentiation and functional profile of the cells recruited by the heart of patients with chronic Chagas myocarditis. In order to determine their role in the pathogenesis of chronic Chagas heart disease, we analyzed the cellular composition (CD3, CD4, CD8, CD20, CD21, CD68, CD57), the expression of co-stimulatory molecules (CD27), inhibitory receptors (HLA-G, PD-1, CTLA-4), transcription factors of TH1 or regulatory T cells (Tbet, FOXP3), senescence (CD57, CD45RA) and active cell cycle markers (Ki67). 3a. The percentage of T cells (CD3 + , CD4 + and CD8 + cells) are highly increased in regions with the highest degree of inflammation (up to 70% of the total infiltrate). Conversely, the percentage of macrophages (%CD68 + cells) was similar in regions with high and low level of infiltration (20% of the infiltrate). On the other hand, B cells (CD20 + cells) were only observed in some areas bearing high degree of inflammation (Median, range; 2%, 0-13%). 3b. Most heart infiltrating T cells showed CD45RO and CD27 expression, markers of antigen experienced T cells with low grade of differentiation. In contrast, PD-1, CD57 and CD45RA expression were absent, being this in agreement with the absence of terminally differentiated effector T cells and NKs in the heart of Chagas disease patients. 3c. TH1 (Tbet) were highly abundant during Chagas myocarditis. In contrast, regulatory T cells were scarce (FOXP3 + ). Cells expressing high levels of the active cell cycle marker, Ki67, showed CD3 expression but lacked CD8. 3d. Using two dimensional statistics I demonstrated that in-vivo infected human cardiac myocytes efficiently recruit antigen experienced (CD45RO + CD57 – ) T cells with low grade of differentiation. In summary, we found that T cells recruited by the infected heart of patients with Chagas myocarditis bear low grade of differentiation and a strikingly similar phenotype to T. cruzi- specific T cells present in peripheral blood. Moreover, we determined that T cells proliferate in situ, and that antigen experienced T cells are more efficiently recruited than other mononuclear cells by the infected myocytes (2-Dimensional statistics and Monte-Carlo simulations).

Andorno, Andrea Verónica. "Evaluación del sistema planta hospedera-huésped alternativo como estrategia para el control biológico de pulgones (Hemiptera: Aphididae) en sistemas de producción hortícola en cultivos protegidos" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los áfidos constituyen una de las plagas de mayor importancia económica sobre una gran variedad de cultivos. El control biológico por conservación utilizando plantas hospederas y fitófagos huéspedes alternativos ha sido exitosamente utilizado en el manejo de áfidos plaga. Esta modalidad consiste en el empleo de especies vegetales hospederas de herbívoros inócuos para el cultivo de interés pero que son utilizados por los enemigos naturales de la plaga como huéspedes alternativos. El objetivo de esta tesis fue evaluar el empleo de este sistema como estrategia para el control del áfido plaga, Myzus persicae por el parasitoide Aphidius colemani en cultivos hortícolas (rúcula y pimiento). Los principales aportes de esta tesis han sido: Conocimiento de las asociaciones áfidos - enemigos naturales parasitoides en cultivos hortícolas y plantas hospederas no cultivadas. Conocimiento de la biología y parámetros poblacionales de M. persicae sobre el cultivo de rúcula. Conocimiento de los atributos biológicos y de la preferencia del parasitoide A. colemani sobre las asociaciones cultivo- huésped plaga y planta hospedera alternativa- áfido alternativo, R. padi. Conocimientos sobre la compatibilidad de empleo de insecticidas y el parasitoide A. colemani. Evaluación del sistema planta hospedera – huésped alternativo para el control biológico de M. persicae por el parasitoide A. colemani.

Abstract:
Aphids are a common problem on a wide variety of crops. Alternative host plant - phytophagous systems has been successfully applied in conservation biological control for aphid pests. The use of alternative host plant – phytophagous provides an alternative suitable food resource for those natural enemies controlling the target pest with no threat for the crop of interest. The aim of this thesis was to evaluate the use of the alternative host plant - aphid - parasitoid system (oat - Rhopalosiphum padi - Aphidius colemani) as a strategy for aphid pest control in vegetable crop systems (arugula and pepper). The most important contributions from this thesis are: Knowledge of the relationships between aphids - natural enemies parasitoids associated to vegetable crops and uncultivated host plants. Knowledge of the biology of the aphid pest M. persicae in arugula. Knowledge on the biology and host preference of the aphid parasitoid A. colemani. Knowledge on the side effect of pesticides on A. colemani. Evaluation of the “alternative host plant- phytophagous system” as a biological control strategy of M. persicae by the aphid parasitoid A. colemani

Alvarez, Ivana Belén. "Estudio del rol de la vía de PD-1 sobre la respuesta inmune de células Nk y de los mecanismos inmunológicos inducidos por las células Th9 frente a la infección por M. tuberculosis" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Estudio del rol de la vía de PD-1 sobre la respuesta inmune de células NK y de los mecanismos inmunológicos inducidos por las células Th9 frente a la infección por M. tuberculosis La tuberculosis continúa siendo un grave problema de salud a nivel mundial a pesar de los tratamientos disponibles. Se estima que un tercio de la población mundial se encuentra infectada de manera asintomática con Mycobacterium tuberculosis, constituyendo un enorme reservorio de la bacteria. Ante eventos de inmuno-supresión, esos individuos pueden desarrollar enfermedad activa y transmitirla. La respuesta inmune frente a M. tuberculosis, requiere la inducción de un perfil de citoquinas de tipo Th1, donde el IFN-γ posee un rol fundamental. Sin embargo, actualmente se sabe que el IFN-γ no sería suficiente para controlar y erradicar completamente al patógeno del organismo hospedero. Por ello, resulta de crucial importancia para el desarrollo de nuevos tratamientos, vacunas y métodos de diagnóstico, conocer las bases moleculares y celulares que conllevan a la generación del correcto balance de poblaciones celulares efectoras durante la respuesta inmune contra el microorganismo. Así como dilucidar la interacción de proteínas específicas de la bacteria con las células del hospedero y, más aún, los mecanismos moleculares que involucran estas interacciones. Por lo mencionado, en este trabajo se investigó el rol de ciertas citoquinas, moléculas coestimulatorias e inmunomoduladores sobre las funciones efectoras de células NK y de linfocitos T durante la tuberculosis activa. Resultados previos de nuestro laboratorio demostraron que la molécula coestimulatoria PD-1 inhibe la respuesta de citoquinas Th1 frente a M. tuberculosis. Sin embargo, el rol de este receptor en la respuesta inmune innata durante la tuberculosis se desconocía. Por ello, en este trabajo se evaluó la expresión y función de los miembros de la vía de PD-1 en las células NK de pacientes con tuberculosis activa. Los resultados obtenidos en este trabajo demostraron por primera vez que las células NK humanas expresan constitutivamente los tres miembros de esta vía de señalización: el receptor PD-1 y sus dos ligandos, PD-L1 y PD-L2. Más aún, demostramos que la estimulación con antígeno de M. tuberculosis incrementa la expresión de estas tres moléculas en células NK y que la señalización a través de las mismas inhibe la producción de IFN-γ y la citotoxicidad de estas células. A su vez, los datos obtenidos en este trabajo demostraron que M. tuberculosis induce la expansión de células T productoras de IL-9 con fenotipo característico de la subpoblación linfocitaria Th9. De acuerdo a nuestros resultados, la IL-9 producida colaboraría en la generación de un perfil Th1 durante la enfermedad activa, promoviendo así la producción de IFN-γ frente a M. tuberculosis. Finalmente, estudiamos la interacción de la proteína específica de M. tuberculosis, ESAT-6, con células T humanas y el efecto de ESAT-6 sobre la producción de IL-9 durante la tuberculosis humana. Caracterizamos la cinética de esta interacción y además identificamos tres proteínas linfocitarias que interactúan con ESAT-6. En conjunto, los resultados obtenidos en este trabajo demuestran que el uso de anticuerpos bloqueantes y agonistas podría tener importantes implicancias en potenciales terapias para combatir infecciones bacterianas crónicas como la tuberculosis. Por otro lado, demostramos que ESAT-6 se une a linfocitos T humanos, ingresa a las células e interacciona con proteínas involucradas en el procesamiento y en la estabilidad de ARNm específicos. Este podría entonces tratarse de un mecanismo por el cual ESAT-6 modularía las funciones efectoras de linfocitos T, como lo es la producción de citoquinas, como factor de virulencia o mecanismo de evasión de la respuesta inmune por parte del patógeno.

Abstract:
Study of the role of the PD-1 pathway on the NK cell immune response and of the immunological mechanisms induced by Th9 cells against M. tuberculosis infection. Tuberculosis remains to be a serious health problem worldwide despite available treatments. One third of the world population is estimated to be infected with Mycobacterium tuberculosis in a latent but asymptomatic way; constituting a huge reservoir for the bacteria. In the event of immuno-suppression, those individuals can develop active disease and transmit it. The immune response against M. tuberculosis requires the induction of a Th1 cytokine profile, where IFN-γ plays a fundamental role. However, it is now known that IFN-γ is not sufficient to control and to completely eradicate the pathogen the host. Because of this it is of crucial importance for the development of new treatments, vaccines and diagnostic methods, knowing the molecular and cellular basis that leads to the generation of a correct balance among effector cell populations during the immune response against the microorganism, as well as elucidating the interaction of specific proteins from the bacteria with the host cells and even more, the mechanisms that this interactions involve. Based in the mentioned before, in this work we investigated the role of cytokines, costimulatory molecules and immunemodulators on the efector functions of NK cells and T lymphocytes during the human tuberculosis. Previous results from our laboratory showed that the co-stimulatory molecule PD-1 inhibits the Th1 response against M. tuberculosis. But the role of this receptor in the innate immune response against tuberculosis was so far unknown. Therefore, this study evaluated the expression and function of members of the PD-1 pathway on NK cells against M. tuberculosis. We show here for the first time, that human NK cells constitutively PD-1 receptor and its two ligands, PD-L1 and PD-L2. Moreover, we demonstrated that M.tuberculosis induces an increase in the expression of these molecules by NK cells and that signaling through this receptor inhibits the two main effector functions of NK cells, production of IFN-γ and cytotoxicity. In addition, the expression of PD-1 correlates directly with the production of IFN-γ. In this work, we also reported that M. tuberculosis significantly induces IL-9-producing cells which have all the characteristics of the Th9 cell subset. According to our results, IL-9 would collaborate in the generation of a Th1 profile during active disease, promoting the production of IFN-γ against M. tuberculosis. Finally, we studied the interaction of the M. tuberculosis specific protein, ESAT-6, with human T cells and ESAT-6 modulation of IL-9 production during human tuberculosis. We characterized the kinetics of the interaction and we were able of identify three lymphocytic proteins that interact with ESAT-6. Overall, the results of this study demonstrate that the use of blocking antibodies and agonists may have important implications for potential therapies for chronic bacterial infections such as tuberculosis. We also demonstrated that ESAT-6 binds to human T cells, enters the cells and interacts with proteins that are involved in the processing and stabilization of specific mRNA. This could comprise a mechanism by which ESAT-6 could modulate T cell effector functions, as cytokine production, acting as a virulence factor or as an immune evasion mechanism of the bacteria.

Alonso, Leandro Martín. "Oscilaciones no lineales en canto de aves" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las instrucciones motoras en aves son el emergente de la actividad de miles de neuronas. En el cerebro del ave, estas neuronas se encuentran agrupadas en núcleos de miles de unidades, y estos núcleos estan a su vez conectados formando lo que se denominan arquitecturas neuronales. Existen numerosos experimentos que determinan, en alguna medida, las funcionalidades y conexiones de estas arquitecturas. Las aves emiten vocalizaciones complejas y existe evidencia a favor de que este comportamiento es aprendido. La posibilidad de entender como un cerebro se reconfigura para lograr un objetivo determinado, como es imitar el canto del tutor, puede tener relevancia en varias áreas de la ciencia. Para emitir las vocalizaciones, el ave debe controla un delicado aparato vocal, la sirínge. Las instrucciones motoras que controlan la sirínge son el objeto de este trabajo. Actualmente contamos con una teoría bien establecida para control motor en canto de aves. En este trabajo proponemos una teoría alternativa y se expone la manera en la que llegamos a ella por caminos independientes. La primera, se sustenta en observaciones de actividad neuronal al nivel de unidades individuales. Nuestra propuesta por otro lado, se construye a partir de observaciones de carácter macroscópico, como son los gestos motores en el canto de aves. En este trabajo mostramos que la dinámica de un conjunto grande de unidades excitables puede capturarse por ecuaciones dinámicas de baja dimensión. Estas ecuaciones a su vez, tienen algunas características comunes con modelos fenomenológicos propuestos para poblaciones de neuronas y establecen de alguna manera, una conexión entre estas dos escalas. Estas ecuaciones pueden explicar la diversidad, morfología y organización temporal de los gestos motores de canarios con un buen grado de presición. Las características matemáticas de estas ecuaciones están presentes en muchos modelos compatibles con los datos fisiológicos.

Abstract:
The physiological instructions responsible of motor control in song birds are due to the collective behaviour of thousands of neurons. This neurons are spatially clustered in the bird's brain forming neural nucleous. The nucleous are interconnected in complicated ways forming circuitries called neural architectures. There are numerous experiments that determine to some extent the different functionalities of each nucleous involved in the motor pathway. Song birds elicitate complex vocalizations and there is strong evidence supporting the view that this behaviour is learned. The possibility of understanding the mechanisms by which a brain reconfigures to attain a determined objective, like imitating the tutor's song, might have relevance in several fields of science. In order to vocalize, the bird has to control a delicate vocal organ, the syrinx. The neural instructions driving the syrinx are the main objet in this study. There is a well established theory for motor control in songbirds. In this work we put forward an alternative view and we discuss the way we arrived to it by independent means. The first one is supported by single unit observations. Our proposal is built from macroscopic observations, such as the respiratory gestures used during song production. In this work we show that the dynamics of a large set of excitable units can be described by a low dimensional non linear dynamical system. This equations have several mathematical features which are common to various phenomenological models that have been proposed for the description of large populations of neurons, stablishing in this way a connection between different scales of the description. This equations allow a simple explanation of the diversity, morphology and temporal organization of motor gestures in canaries (Serinus Canaria) with good quantitative agreement. The mathematical features of this equations are present in several models that are compatible with the available physiological data.

Allievi, Mariana Claudia. "S-layer de Bacillus sphaericus: caracterización, regulación, análisis funcional y aplicaciones" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las cepas de Bacillus sphaericus 2362 (cepa de referencia), C7 y C11 (nuevos aislamientos) todas pertenecientes al grupo IIA, son entomopatógenas contra larvas de mosquitos. Además de las envolturas habituales de bacterias Gram positivas, estas cepas están recubiertas de una capa externa de una estructura proteica cristalina: la capa S o Surface layer (S-layer) que estaría asociada un polímero secundario de pared (SWCP). En las 3 cepas se observa que la proteína S-layer tiene un PM de aproximadamente 125 kDa y que es reconocida por el mismo anticuerpo. Tratamientos con LiCl, que remueven la S-layer sin afectar la viabilidad, permitieron observar que en esa condición estas células (carentes de S-layer) crecen más lentamente que las células con S-layer y que en medios hipersalinos solo crecen al recuperar S-layer. El análisis por western blot con un anticuerpo anti S-layer de la cepa 2362, mostró que en las células tratadas la síntesis de S-layer se inició muy temprano durante el crecimiento bacteriano. Las modificaciones en tamaño, concentración, ubicación (fijadas a membrana, asociada a esporas, o libres en el sobrenadante) en función de las etapas de su crecimiento y de las condiciones de estrés hiperosmótico (altas concentraciones de NaCl), nos indican posibles modificaciones postraduccionales, siendo la glicosilación la más frecuentemente reportada. Los resultados de agregación de cultivos y tinción con azul de bromo-timol fueron contradictorios respecto a la presencia de glicosilación cuando se comprarn con los de tinción empleando un kit comercial que distingue proteínas glicosiladas. Se discuten distintas posibilidades: Oglicosilación no enzimática, desprendimiento de la S-layer con el SWCP. Por otro lado se exploraron dos funciones importantes que estas proteínas aportarían a la bacteria: bioabsorción de metales y actividad mosquitocida. Distintas especies de Bacillus han sido involucradas en la asociación con metales como bioadsorbentes, pero hasta el momento no hay un claro entendimiento de las propiedades quelantes. Con ese objetivo, se analizó la capacidad de bioadsorción de cobre en cultivos y esporas de bacterias Gram positivas de especies que producen o no S-layer. Sólo aquellas cepas provistas de S-layer, como Bacillus sphaericus y B. thuringiensis, mostraron una bioadsorción significativa tanto en cultivos como en esporas. Esta capacidad (cercana al 50%) se retuvo luego de un proceso de calentamiento suave de los cultivos, indicando que elementos estructurales de la envoltura son los responsables de esta propiedad. Las S-layer purificadas de dos cepas de Bacillus sphaericus mantuvieron la capacidad de bioadsorber cobre mostrando que la propiedad está directamente asociada a ellas. Se determinaron los parámetros de bioadsorción para la cepa B. sphaericus 2362 que responden al modelo de Langmuir. Tanto la afinidad como la capacidad de bioadsorción fueron comparables con otros bioadsorbentes de origen bacteriano. Se observó un efecto competitivo de Ca2+ y Zn2+, aunque no de Cd2+, lo que indicaría que esta proteína podría retener otros metales además de cobre lo que explicaría su persistencia en ambientes contaminados. La utilización del anticuerpo anti-S-layer permitió determinar que la S-layer permanece adherida a la espora y que sólo las esporas sin lavados intensivos (que eliminan la Slayer) captan eficientemente el cobre. Por primera vez se mostró una correlación directa entre el contenido de S-layer y la capacidad de bioadsorción. Esta capacidad está ligada a la retención de las S-layer adheridas a las células y esporas de Bacillus. Algunas cepas de Bacillus sphaericus son tóxicas para larvas de mosquitos, y sus propiedades insecticidas se deben principalmente a la inclusión cristal que se produce durante la esporulación. Se inspeccionó la actividad insecticida de las S-layer de las cepas 2362 y C7. Se encontró que las S-layer per se muestran actividad contra larvas de Culex. En experimentos con preparaciones de espora-cristal tóxicas en conjunto con la S-layer, se observó un efecto sinérgico aportado por esta proteína. La S-layer de la cepa C7 en particular aumenta el rango de huésped hacia mosquitos del género Aedes para los cuales B. sphaercius no es eficiente. Los análisis in silico de la estructura de la Slayer muestran un motivo con actividad hemolítica que fue confirmado por experimentos realizados in vitro. Esta actividad explicaría los resultados de toxicidad de las S-layer.

Abstract:
Bacillus sphaericus strains 2362 (reference strain), C7 and C11 (new isolated strains), all of them belonging to the homology group IIA, are entomopathogenic against mosquito larvae. In addition to the usual envelopes of Gram positive bacteria, this strains are covered by an external layer with a crystalline protein structure: the S-layer or surface layer. This layer could possibly be associated to a secondary wall polymer (SWCP). In the 3 strains the S-layer protein has a molecular weight of approximately 125 kDa recognized by the same antibody. Treatments with LiCl, that removed the S-layer without affecting their viability, allowed to observe that in this condition these cells (without S-layer) grow slower than those with S-layer. In hypersaline mediums they only grow when they restore the S-layer. The western blot analysis using the anti S-layer antibody against strain 2362, showed that treated cells recover S-layer synthesis early during the start of bacterial growth The modifications in size, concentration, location (fixed to membrane, associated with spores, or free in the supernatant) are related to the growing stages and stress conditions (high NaCl concentrations) indicating possible posttranslational modifications, being the glycosylation the most frequent. The cultures segregation and staining with bromothymol blue results are in contradiction with those obtained with commercial kit staining that distinguishes glycosylated proteins. Different possibilities are discussed as non enzymatic O-glycosylation and S-layer detachment with the SWCP. On the other hand, two important functions of this protein as metal biosorption and mosquitocidal activity have been explored. Various Bacillus species have been implicated as biosorbents of metals, but so far there is no clear understanding of the chelating properties. To that end, we examined the ability of copper biosorption in cultures and spores of Gram positive species with and without S-layer. Only those strains provided with S-layer as Bacillus sphaericus and B. thuringiensis, showed a significant biosorption both in cultures and spores. This capacity (about 50%) was retained after a mild heating of cultures, indicating that structural elements of the envelope are responsible for this property. The S-layer extracted from two strains of Bacillus sphaericus maintained the ability to bioadsorb copper showing that the property is directly associated with this protein. Biosorption parameters were determined for S-layer of strain B. sphaericus 2362 and showed to respond to the Langmuir model. Both the affinity and biosorption capacity were comparable with other bacterial biosorbents. A competitive effect of Ca2+ and Zn2+, but not of Cd2+, was also observed, indicating that other cations may be biosorbed by this protein, which would explain the persistence of this bacterium in polluted environments. The use of anti-S-layer antibody allowed to determine that the S-layer remains attached to spores and that only those not submitted to intensive washing (which eliminate the Slayer), efficiently capture copper. This was the first time that a direct correlation between the content of S-layer and the capacity of biosorption was shown. This capacity is linked to the retention of S-layer proteins attached to Bacillus spores and cells. Some Bacillus sphaericus strains are toxic to mosquito larvae, and their insecticidal properties are mainly due to crystal inclusions produced during sporulation. The insecticidal activity of the S-layer of strains 2362 and C7 was inspected. It was found that the S-layer per se showed activity against Culex larvae. In experiments with toxic spore-crystal preparations in conjunction with the S-layer, we observed a synergic effect provided by this protein. In particular, the S-layer of strain C7 increased the host range to Aedes mosquitoes for which B. sphaercius is not efficient. In silico analysis of the structure of the S-layer show a domain with possible hemolytic activity which was confirmed by in vitro experiments. This activity would explain the results of S-layer toxicity and increased host range.

Alaimo, Agustina. "Neurotoxicidad inducida por manganeso. Vías de muerte apoptóticas y rol de la dinámica mitocondrial" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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El Manganismo es un desorden neurológico originado por exposición crónica al manganeso (Mn) que presenta características clínicas y vías de señales similares a las de la enfermedad de Parkinson Idiopático (EPI). El Mn se acumula preferentemente en los ganglios basales y en particular, en las mitocondrias de los astrocitos. Estas organelas son dinámicas y de morfología variable como resultado del balance entre eventos de fusión y fisión mitocondrial, el cual está alterado en varias enfermedades neurodegenerativas. En el presente trabajo, se estudiaron las cascadas de señalización molecular implicadas en la muerte celular inducida por Mn, con particular énfasis en el rol de la dinámica mitocondrial. Los estudios in vitro realizados en la línea C6 de astrocitoma de rata indicaron que el Mn indujo muerte celular apoptótica dependiente de caspasas con participación de las Vías Extrínseca e Intrínseca, la cual estuvo mediada por la generación de especies reactivas de oxígeno. Aún más, el Mn promovió la fragmentación exacerbada de las redes mitocondriales y disturbios en los niveles de expresión de las proteínas de fusión y fisión Opa-1 y Drp-1, generando un desequilibrio hacia éste último evento, lo cual contribuyó a la muerte celular. Por otra parte, estudios in vivo realizados en ratas expuestas a Mn indicaron la presencia de lesiones en el tejido estriatal y de alteraciones en los niveles de expresión de las proteínas reguladoras de la dinámica mitocondrial. En conjunto, nuestros resultados contribuyen al esclarecimiento de los mecanismos moleculares participantes en la apoptosis inducida por Mn y demuestran por primera vez que las proteínas Opa-1 y Drp-1 juegan roles protagónicos en la ejecución de la vía apoptótica mitocondrial.

Abstract:
Manganism is a neurological disorder caused by chronic exposure to Mn, closely resembling Idiophatic Parkinson´s Disease (IPD) at both clinical characteristics and molecular signaling pathways. Mn accumulates predominantly in the basal ganglia, particularly in the mitochondria of astrocytes. These are dynamic organelles which morphology is variable as a result of a delicate equilibrium between mitochondrial fission and fusion events. This balance is known to be altered in neurodegenerative diseases. In this research, we studied the molecular signaling pathways involved in Mn-induced cell death, with special focus on the role of mitochondrial fusion and fission proteins. In vitro studies conducted in rat astrocytoma C6 cells demonstrated that Mn induced cell death by caspase-dependent apoptosis mediated by ROS. A detailed analysis of signaling pathways showed the involvement of the Extrinsic and Intrinsic pathways. Moreover, Mn induced exacerbated mitochondrial network fragmentation and disturbances in the expression levels of fusion and fission proteins, Opa-1 and Drp-1, shifting the balance towards to the fragmentation event and contributing to cell death. Furthermore, in vivo studies conducted in rats exposed to Mn showed that Mn produce lesions in the striatal tissue and alterations in mitochondrial dynamics regulatory proteins. Taking together, these findings contribute to a deeper elucidation of the molecular signaling mechanisms underlying Mn-induced apoptosis and demonstrate for the first time that Opa-1 and Drp-1 are central protagonists in the execution of mitocondrial apoptotic pathway.

Acuña, Leandro Marcelo. "Conductores mixtos nanoestructurados para electrodos de celdas de combustible de óxido sólido de temperatura intermedia" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el presente trabajo de tesis doctoral se estudiaron propiedades morfológicas, estructurales y eléctricas de óxidos nanoestructurados para ser empleados como electrodos en celdas de combustible de óxido sólido de temperatura intermedia (IT‐ SOFCs). En particular, se estudiaron soluciones solidas nanoestructuradas de ZrO2‐CeO2 aplicables como ánodo y nanopolvos de cobaltitas de La0,6Sr0,4CoO3‐δ y Sm0,5Sr0,5CoO3‐δ (LSC y SSC, respectivamente) aplicables como cátodo en este tipo de dispositivos. Se sintetizaron polvos nanoestructurados homogéneos en composición de ZrO2‐CeO2 en el rango de composiciones de 50 ‐ 90 % molar CeO2 empleando los métodos de gelificación‐ combustión, complejación de cationes y mojado de poros de membranas poliméricas para la síntesis de nanotubos. Para la síntesis de los polvos de LSC y SSC se emplearon los métodos de complejación de cationes, liofilización y gelificación‐combustión. La morfología de los productos sintetizados se estudió por medio de microscopía electrónica de barrido y de transmisión (SEM y TEM) y análisis de área superficial específica (BET). Los estudios sobre las propiedades estructurales se realizaron por medio de las técnicas de difracción de rayos‐X y espectroscopía de absorción de rayos‐X empleando radiación sincrotrón (DRX‐RS y XAS, respectivamente). El estudio del rendimiento electrocatalítico de cátodos de película gruesa preparados a partir de polvos nanoestructurados de LSC y SSC se realizó en celdas simétricas mediante la técnica de espectroscopía de impedancia electroquímica (EIS). En el caso del sistema ZrO2‐CeO2 los estudios realizados permitieron determinar la influencia del tamaño nanométrico de las cristalitas en las propiedades estructurales de los nanomateriales. En particular, a partir de los estudios por DRX‐RS se construyó un diagrama de fases metaestables para polvos nanoestructurados de ZrO2‐CeO2 homogéneos en composición. Por otro lado, mediante la técnica de XAS se pudieron hallar modelos de orden local para el Zr a partir de los cuales fue posible proponer mecanismos de retención de las fases de alta temperatura a temperatura ambiente en forma metaestable. Estudios de XAS in situ en atmósfera reductora permitieron establecer la relación entre morfología y estado de oxidación del Ce. Por otra parte, con el objeto de obtener morfologías controladas de alta área especifica, se reportó por primera vez la síntesis de nanotubos de ZrO2‐CeO2. Se demostró por primera vez la retención de la fase cúbica de alta temperatura de LSC a temperatura ambiente en polvos nanoestructurados. Los estudios electrocatalíticos indicaron que los cátodos nanoestructurados preparados con nanopolvos de LSC o SSC presentaron un rendimiento muy superior al de los cátodos microestructurados. Se determinó que el proceso limitante en los cátodos nanoestructurados es el de difusión de O2- en el material. Además, los cátodos nanoestructurados presentan mayor difusividad de aniones O2-. Los estudios realizados demostraron que los materiales nanoestructurados presentan características morfológicas, estructurales y eléctricas que los convierte en muy buenos candidatos para ser aplicados como electrodos en IT-SOFCs.

Giorgi, María Eugenia. "Síntesis y evaluación de sustratos e inhibidores de trans-sialidasa de Trypanosoma cruzi, agente del mal de Chagas" (2012-12-21). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La trans-sialidasa de Trypanosoma cruzi (TcTS) cataliza la transferencia de ácido siálico desde los glicoconjugados del hospedero a β-galactopiranósidos terminales en las mucinas del parásito. Esta enzima no tiene equivalentes en mamífero y durante la infección se secreta activamente induciendo alteraciones hematológicas. Se había demostrado que en cepas menos infectivas las cadenas Oglicosídicas de las mucinas contenían β-galactofuranosa además del aceptor β-galactopiranosa. El propósito de esta tesis es contribuir al conocimiento de la acción de la TcTS sobre sustratos aceptores o donores de ácido siálico y la síntesis y evaluación de inhibidores de la enzima. Se estudiaron las propiedades aceptoras de los oligosacáridos sintéticos que son componentes de las mucinas para correlacionar su estructura con la habilidad de actuar como sustratos. Se calcularon los valores de Km para los azúcares libres, los oligosacáridos alditoles y los bencil glicósidos. Todos los compuestos resultaron buenos aceptores de ácido siálico, o sea que la galactofuranosa no afectaría la sialilación de las unidades de Galp presentes en los mismos oligosacáridos. Se llevó a cabo la sialilación preparativa del bencil glicósido del hexasacárido β-D-Galp-(1→2)--β-D-Galp-(1→6)--D-GlcNAc utilizando una enzima recombinante y sialillactosa como donor. El aislamiento del producto sialilado permitió determinar por espectros RMN mono y bidimensionales que el ácido siálico se incorpora selectivamente a la Galp terminal unida (β1→3). Con respecto a sustratos donores en la reacción de TcTS se determinó su capacidad de transferir N-glicolilneuramínico (Neu5Gc) desde oligosacáridos sintéticos a lactosa y análogos con igual o mejor eficiencia que el ácido siálico común (Neu5Ac). Por otra parte, con el fin de aumentar la vida media en la circulación sanguínea de inhibidores de la reacción de trans-sialilación, se sintetizaron conjugados con polietilenglicol (PEG), en particular derivados con PEG de 8-brazos de análogos de lactosa. La multivalencia se confirmó por RMN y se evaluó la biodisponibilidad de los conjugados en plasma de ratones. Se encontró que la misma mejoró considerablemente con respecto a conjugados lineales que también fueron sintetizados en este trabajo de tesis. Palabras clave: Trypanosoma cruzi, trans-sialidasa, mucinas, inhibidores, PEGilación.

Abstract:
The trans-sialidase of Trypanosoma cruzi (TcTS) catalyzes the transfer of sialic acid from host glycoconjugates to terminal β-galactopyranosides in the mucins of the parasite. The enzyme has no equivalent in mammals and during infection is actively shed to the medium inducing hematological alterations. In less infective strains, the Olinked chains may contain β-galactofuranose in addition to the acceptor β-galactopyranose units. This Tesis is a contribution to the knowledge of the action of TcTS on acceptor and donor substrates. Also, inhibitors have been synthesized and evaluated. The acceptor properties of the chemically synthesized oligosaccharides, components of the mucins, were now studied in order to correlate their structure with the ability to act as substrates. The Km values were calculated for the free sugars, the sugar alditols and the benzyl glycosides. All the compounds showed to be good acceptors of sialic acid. Thus, the introduction of galactofuranose in the mucins would not affect sialylation of the Galp units in the same oligosaccharides. Preparative sialylation of the benzyl glycoside of the hexasaccharide β-D-Galp-(1→2)--β-D-Galp-(1→6)--D-GlcNAc, with a recombinant TcTS and sialyllactose as donor afforded the sialylated oligosaccharide. NMR spectroscopic analysis showed that selective monosialylation occurred at the terminal (β1→3) linked Galp. With respect to donors in the TcTS reaction it was shown that Nglycolylneuraminic acid (Neu5Gc) may be transferred even better than the common sialic acid (Neu5Ac) from synthetic oligosaccharides to lactose or analogs. Also, with the aim to improve the circulating half-lives in vivo of inhibitors of TcTS, we synthesized covalent conjugates of polyethyleneglycol (PEG), in particular eight arm-PEG of lactose analogs. Substitution of all arms was proven by 1H NMR spectroscopy. The bioavailability of the conjugates in mice plasma was considerably improved with respect to the linear PEG conjugates which were also synthesized in this Tesis. Keywords: Trypanosoma cruzi, Trans-sialidase, mucins, inhibitors, PEGylation.

Capdet, Mariana. "Biodiversidad de Ascomycetes sexuales y asexuales xilófilos sobre palmeras nativas en la República Argentina" (2012-12-21). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se realizó un estudio sobre la diversidad de especies de ascomicetes sobre tres palmeras nativas: Butia yatay (Mart.) Becc., Euterpe edulis Mart. y Syagrus romanzoffiana (Cham.) Glassman en los Parques Nacionales Iguazú en la provincia de Misiones y el Parque Nacional El Palmar en la provincia de Entre Ríos. Este estudio se planteó por la necesidad de conocer la diversidad de ascomicetes frente a la pérdida de la biodiversidad aún en áreas protegidas. Por lo tanto los objetivos principales de este trabajo fueron: - identificar, describir e ilustrar las especies fúngicas (en estado teleomórfico o anamórfico) halladas sobre los sustratos elegidos; - estudiar la presencia de ascomicetes sobre las diferentes partes de la palmera en descomposición y sobre folíolos verdes sólo se estudió al género Coccostromopsis; - comparar cualitativamente la diversidad hallada en las dos regiones una con clima subtropical y la otra con clima templado; - comparar cualitativamente la composición de especies fúngicas con las comunidades encontradas sobre palmeras de otras partes del mundo. Durante el año y medio de muestreo se observaron 921 muestras de las cuales se identificaron 96 especies de ascomicetes, siendo 32 de ellos anamorfos, 55 teleomorfos y 6 holomorfos. Se proponen 5 especies nuevas y 57 nuevas citas para el país. El sitio y la palmera de mayor biodiversidad fue el Parque Nacional Iguazú y Euterpe edulis. Palabras claves: ascomicetes, taxonomía, biodiversidad, palmeras nativas, Misiones, Entre Ríos.

Abstract:
A study on the diversity of species of ascomycetes on three native palms: Butia yatay (Mart.) Becc., Euterpe edulis Mart. and Syagrus romanzoffiana (Cham.) Glassman in Iguazú National Parks in the province of Misiones and the National Park El Palmar in the province of Entre Ríos was carried out. This study was set by the need to understand the diversity of ascomycetes against the loss of biodiversity even in protected areas. Therefore the main objectives of this study were: - to identify, describe and illustrate the fungal species (in teleomorph or anamorphic) found on the selected substrates chosen, - to study the presence of ascomycetes on the different decaying parts of the palm tree and green leaves only genus Coccostromopsis was studied, - to compare qualitatively the diversity found in the two regions with each other subtropical and temperate climate, - to compare qualitatively the composition of fungal species found on the palms of communities elsewhere. During the samplings, 921 collections were observed. From them, 96 species of ascomycetes were identified, 32 of which are amorphous, 55 teleomorphs and 6 holomorphic. Five species are proposed and 57 species are first recorded from the country. Iguazú National Park and Euterpe edulis were the most biodiverse site and palm. Keywords: ascomycetes, taxonomy, biodiversity, native palms, Misiones, Entre Ríos.

Tilve, Mariano Javier. "Estudios de glicosidación 1, 2-cis con donores conformacionalmente restringidos 3,5-O-di-ter-butilsililén-D-galactofuranósidos" (2012-12-20). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La presencia de unidades galactofuranosa en configuración α 1,2-cis en ciertos microorganismos patógenos ha motivado la búsqueda de métodos de construcción de estos enlaces glicosídicos. La síntesis de oligosacáridos naturales que contengan este tipo de unión contribuiría con los estudios de biosíntesis. Dado que la Galf no se encuentra en mamíferos, su metabolismo es considerado blanco de quimioterapia. Sin embargo, la flexibilidad del anillo furanósico y el menor efecto anomérico presente en comparación con la forma piranosa confieren una mayor dificultad para la construcción de estos enlaces. Uno de los mayores problemas dentro de la síntesis aplicada a hidratos de carbono, es la generación diastereoselectiva de enlaces glicosídicos 1,2-cis. Este trabajo de tesis se ha enfocado en la síntesis de α-D-galactofuranósidos, dirigiendo la formación del enlace anomérico a través del control de la conformación del donor mediante un grupo 3,5-O-di-ter-butilsililén. Se sintetizó el donor conformacionalmente restringido tricloroacetimidato de O-(6-O-acetil-2-O-bencil-3,5-O-(di-ter-butilsilandiil)-α,β-D-galactofuranosilo) y se realizó un estudio de glicosidación utilizando aceptores precursores de unidades presentes en microorganismos patógenos. La mejores diastereoselectividades α se obtuvieron a -78 ºC utilizando éter etílico como solvente. Con el fin de aumentar las diastereoselectividades obtenidas, se evaluó el método del tioglicósido por síntesis de p-tolil 6-O-acetil-2-O-bencil-3,5-O-(di-ter-butilsilandiil)-1-tio-β-D-galactofuranósido. Se obtuvieron selectividades mayores que por el método de tricloroacetimidato, permitiendo, por ejemplo, la síntesis completamente estereoselectiva del precursor α-D-Galf-(1→6)-D-Manp presente en Paracoccidioides brasiliensis. Los donores de tioglicósido son ampliamente utilizados en la síntesis de oligosacáridos, aunque existen pocos ejemplos de su aplicación a la síntesis de galactofuranósidos. Esto puede deberse al desafío que presenta la funcionalización de este tipo de derivados. Se desarrolló una metodología para apertura regioseleselectiva del grupo protector bidentado 3,5-O-di-ter-butilsililén; permitiendo así diferenciar las posiciones O-3 y O-5 de la unidad de tiogalactofuranósido. Esta metodología, en conjunto con la preactivación del tioglicósido, permitió el desarrollo de una nueva estrategia iterativa que fue aplicada a la síntesis de di- y trisacáridos precursores del galactofuranano constituyente de Aspergillus fumigatus. Palabras claves: D-galactofuranosa; glicosidación; 1,2-cis; tioglicósido; tricloroacetimidato, oligosacáridos, grupos protectores, efectos de solvente.

Abstract:
The presence of Galf units in 1,2-cis α-configuration in some pathogenic microorganisms has encouraged the development of methods for the construction of this glycosidic linkage. The synthesis of natural oligosaccharides containing α-Galf units would contribute to the research on its biosynthesis. Galf is absent in mammals, thus its metabolism is considered as a chemotherapeutic target. However, the flexibility of the furanosic ring and the low anomeric effect compared to pyranoses increases the difficulty for the construction of this linkage. One of the most challenging problems in oligosaccharide synthesis is the stereoselective formation of 1,2-cis linkages. In this thesis, we have focused on the synthesis of α-D-galactofuranosides directed by conformational control of the glycosyl donor exerted by a 3,5-O-di-tert-butylsilylene protecting group. The conformationally restricted donor O-(6-O-acetyl-2-O-benzyl-3,5-O-(di-tert-butylsilanediil)-α,β-D-galactofuranosyl) trichloroacetimidate was synthesized and glycosylation reactions were performed with several acceptors, most of them precursors of units present in pathogenic microorganisms. The highest α-selectivities were obtained when reactions were performed at -78 °C in diethyleter as solvent. With the aim of improving the α-selectivities obtained, the thioglycoside method was evaluated. p-Tolyl 6-O-acetyl-2-O-benzyl-3,5-O-(di-tert-butylsilanediil)-1-thio-β-D-galactofuranoside was synthesized. Higher selectivities was obtained with this method in comparison with trichloroacetimidate allowing, for example, the completely stereoselective synthesis of the precursor of α-D-Galf-(1→6)-D-Manp present in Paracoccidioides brasiliensis. Tha thioglycoside donors are widely used in oligosaccaride synthesis, however only few examples are described for Galf-containing oligosaccarides. This fact could be due to the challenge of protecting the thiofuranoside ring properly. In this thesis, a protocol for regioselective opening of the 3,5-O-di-tert-butylsilylene group has been developed, allowing the distinction between the O-5 and O-3 positions of a thiogalactofuranoside. This protocol, together with the preactivation of the thioglycosides, allowed the development of a new iterative strategy used to obtain di- and trisaccharides precursors of the Aspergillus fumigatus β(1→5)galactofuranan. KEYWORDS: D-galactofuranose; glycosylation; 1,2-cis; thioglycoside; trichloroacetimidate; oligosaccaride; protecting groups; solvent effects.

Loreti, Rosana Nazareth. "Implicancia del grado de sialilación y complejidad de los oligosacáridos de FSH en la regulación de la función ovárica: estudios clínicos y experimentales" (2012-12-20). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La FSH se sintetiza y secreta como una familia de variantes glicosiladas, las cuales difieren en el grado de sialilación y complejidad de sus oligosacáridos y en la inducción de respuestas biológicas en células blanco, in vivo e in vitro. El objetivo general de esta Tesis Doctoral fue establecer la relación existente entre las características de los carbohidratos presentes en la molécula de FSH y la inducción de respuestas biológicas en las células de la granulosa. La acción de variantes glicosiladas, aisladas de FSH recombinante humana (FSHrh), fue evaluada in vitro utilizando dos modelos experimentales. Se estudió la producción de inhibinas diméricas en células de la granulosa de rata; de esteroides e inhibinas en la línea celular de granulosa humana, KGN, como así también el patrón de expresión génica global y la expresión de enzimas esteroidogénicas y subunidades de inhibinas. Estudios in vitro demostraron que el grado de sialilación y la complejidad de los oligosacáridos presentes en la FSHrh reguló en forma diferencial la producción de esteroides y péptidos. Asimismo, el análisis de ontología génica reveló la capacidad que poseen las variantes glicosiladas de FSHrh de modular en forma diferencial la expresión de genes involucrados en funciones o procesos esenciales para el mantenimiento de la función celular. Las características de las variantes glicosiladas de la FSH circulante fueron determinadas en condiciones fisiológicas y en pacientes infértiles con ciclos regulares. Se observaron alteraciones en el grado de sialilación de la FSH circulante en las pacientes con trastornos reproductivos y en mujeres jóvenes ovodonantes. Los resultados obtenidos demuestran que los oligosacáridos de la molécula de FSH regulan distintas funciones de la célula de la granulosa. Alteraciones precoces en el grado de sialilación de la gonadotrofina podrían comprometer la capacidad reproductiva en la mujer.

Abstract:
FSH is produced and secreted as a family of glycosylation variants which differ from each other in the oligosaccharide sialylation and complexity and in the induction of different biological responses in vitro and in vivo. The aim of this Doctoral Thesis was to establish the relationship between the FSH carbohydrate characteristics and the induction of biological responses in granulosa cells. The effect of recombinant human FSH glycosylation variants were evaluated in two experimental models in vitro. Dimeric inhibin production was assessed in rat granulosa cells, steroids and inhibin production in human granulosa cell line KGN, as well as global gene expression profile and the expression of steroidogenic enzymes and inhibin subunits. In vitro studies demonstrated that sialylation and complexity of rhFSH oligosaccharides induced a differential regulation of steroid and inhibin production. Gene ontology analysis revealed the ability of rhFSH glycosylation variants to differentially modulate the expression of genes involved in essential cell biological processes and molecular functions. Circulating FSH oligosaccharides characteristics were determined under physiological conditions and in infertile patients. Alterations in FSH sialylation were observed in infertile patients and in ovodonors. The results obtained in this study show that FSH oligosaccharides regulate different functions in granulosa cells. Early alterations in FSH sialylation may jeopardize the reproductive capacity in women.

González Carman, Victoria. "La tortuga verde en el Atlántico Sudoccidental" (2012-12-19). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo general de esta tesis fue contribuir al conocimiento de la población de juveniles de tortuga verde (Chelonia mydas) que habita las aguas templadas del Atlántico Sudoccidental. La tortuga verde es una de las siete especies de tortugas marinas del mundo. Se encuentra en peligro de extinción debido a siglos de explotación de hembras adultas y huevos en las zonas de reproducción. Los esfuerzos de conservación llevados a cabo hasta la actualidad resultaron en el aumento de algunas colonias, aunque otras continuaron disminuyendo debido a las diferentes condiciones ambientales y amenazas que los juveniles experimentan en sus zonas de alimentación y a lo largo de sus rutas migratorias. La determinación del estado de conservación requiere de la investigación y manejo de la especie a lo largo de todo el ciclo de vida y la distribución de la especie. Una de las poblaciones que se encuentra en crecimiento es la colonia de Isla Ascensión. Los juveniles de esta población son afectados por la captura incidental y la degradación de sus hábitats que ocurre en la costa de Sudamérica. Por ello se estudió el comportamiento de los animales en relación al uso de hábitat, la ecología trófica y se analizó el marco legal en que ocurre la captura incidental. Los resultados de estos estudios demostraron que los juveniles de tortuga verde exhiben un comportamiento diferente al que se conoce para el resto de su distribución y que esto podría tener consecuencias para su conservación. Los animales utilizan áreas neríticas y oceánicas para alimentarse, e incluso en algunas áreas neríticas no exhiben una dieta estrictamente herbívora y una alimentación bentónica, sino que consumen plancton gelatinoso. El cambio ontogenético no sería necesariamente abrupto e irreversible. Los animales adaptarían su comportamiento a las condiciones ambientales locales. Además, los juveniles están expuestos a numerosas pesquerías costeras y pelágicas, y se alimentarían en una serie de ambientes degradados. Al menos en Argentina, existe un abundante marco legal e institucional que podría utilizarse para implementar medidas que apunten a reducir su captura incidental. Si bien la magnitud de la mortalidad de los juveniles en la región se desconoce, las amenazas ocurren en un área de grandes dimensiones y de difícil manejo que abarca las jurisdicciones y regímenes legales de tres países e implica el trabajo con pesquerías artesanales para las cuales hay un vacío de información. Esta tesis propone sumar el seguimiento y protección de los juveniles para asegurar que la colonia de Isla Ascensión alcance los niveles poblacionales previos a la explotación o al menos la capacidad de carga del ambiente. Esta tesis aporta información novedosa y de relevancia que puede ser utilizada para el manejo y protección de los juveniles en sus zonas de alimentación a lo largo de la costa de Sudamérica.

Abstract:
The main goal of this thesis is to contribute to the knowledge of the juvenile green turtle (Chelonia mydas) population in the temperate waters of the Southwest Atlantic. The green turtle is one of the seven sea turtle species of the world. The species is endangered due to the exploitation of eggs and adult females at their breeding grounds. Conservation efforts conducted to date resulted in the recovery of some colonies, although some other populations are continuing to decline owing to different environmental conditions and threats faced by juveniles in their foraging grounds and along their migratory routes. Research and management activities throughout the entire life cycle and distribution are required to improve the conservation status of a species. One of the colonies that is currently increasing is Ascension Island; however juveniles from this population are affected by habitat degradation and bycatch occurring on the coast of South America. For this reason, this thesis studies the habitat use, the trophic ecology and the legal framework in which bycatch of juveniles takes place. The results demonstrated that juvenile green turtles behave differently in this region than in the rest of its distribution with consequences to its conservation. The turtles used neritic and oceanic areas to forage, and even in some neritic areas they do not exhibit a strict herbivorous diet and benthic feeding, but rather they feed on gelatinous plankton. This shows that the ontogenetic shift is not necessarily abrupt and irreversible as been shown elsewhere. Instead, the turtles adapt their behavior to local environmental conditions. Besides, the juveniles are exposed to several coastal and high-seas fisheries and they forage along degraded habitats. At least in Argentina, a rich legal and institutional framework exists to reduce bycatch. Even though the mortality of juveniles in the region is unknown, attention should be focused on the threats that occurred within this large and difficult to manage area where three jurisdictions and legal regimes are involved, along with artisanal fisheries for which information is lacking. This thesis proposes the monitoring and protection of juveniles to ensure that the Ascension Island population will achieve pre-exploitation levels or at least the carrying capacity of the environment. It also provides novel and relevant information that can be used to the protection and management of juveniles in their foraging grounds along the coast of South America

Diz, Virginia Emilse. "Fotosensibilizadores nanoconfinados. Caracterización fotofísica y fisicoquímica" (2012-12-19). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Cadranel, Alejandro. "Antenas moleculares de polipiridinas de rutenio puenteadas por cianuro" (2012-12-18). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En este trabajo se desarrollan la síntesis y la caracterización de polipiridinas de rutenio puenteadas por cianuro, con el objeto de generar moléculas que funcionen como plataforma de estudio de los procesos fisicoquímicos que dan origen a los comportamientos como cables y antenas moleculares. Este tipo de compuestos pueden ser utilizados para la construcción de dispositivos que utilicen la luz como fuente de energía. Se realizó un estudio sistemático de las propiedades de sistemas de nuclearidad creciente, comenzando por monómeros + (X = CN- o NCS-) y utilizando luego compuestos bimetálicos n- (M = Fe(III), Fe(II), Cr(III), Ru(II), Os(III), Os(II)). En los mismos se logran variaciones drásticas de las propiedades fotofísicas según la identidad y el estado de oxidación del metal M, y se observan procesos de transferencia de carga y de energía. Posteriormente, a través del trímero , se pone a prueba la capacidad de las tetrapiridinas de rutenio de funcionar como cables moleculares y mediar la transferencia de energía entre una polipiridina de rutenio (fragmento donor) y el hexacianocromato (fragmento aceptor). Este análisis permite individualizar las contribuciones de cada fragmento utilizado a las características globales de cada molécula y formular estrategias para el dise~no de cables y antenas moleculares. Finalmente, algunos de los complejos preparados muestran inyección efectiva de cargas en superficies de TiO2 bajo iluminación, lo cual resulta prometedor en cuanto a su utilización como colorantes en celdas solares. Palabras Clave polipiridinas de rutenio - tetrapiridinas de rutenio - puente cianuro - antenas moleculares - cables moleculares - celdas solares - transferencia de energía - transferencia de carga - valencia mixta

Abstract:
This work consists in the synthesis and characterization of cyanide-bridged ruthenium polipyridines. Our aim is to develop a new set of molecules that may serve as a platform to study the physicochemical processes that take place in molecular wires and antennae. These type of compounds can be used to ensemble devices for which light is the energy source. A systematic study was carried on the properties of systems of growing nuclearity, starting with + (X = CN- or NCS-) monomers and using the bimetallic complexes n- (M = Fe(III), Fe(II), Cr(III), Ru(II), Os(III), Os(II)). Drastic variations of their photophysical properties are found depending on the identity and the oxidation state of the metal M, and energy and charge transfer processes are observed. Then, by meanings of the trimer , ruthenium tetrapyridines are probed to promote energy transfer between a ruthenium polipyridine (donor) and a hexacyanochromate moiety (acceptor), as molecular wires. This procedure allows us to recognize individual contributions of each fragment to the global characteristics of each molecule, and to rationally design molecular wires and antennae. Finally, some of the prepared complexes show effective charge injection into TiO2 surfaces under illumination. This results a promising feature as an approach to their use as dyes in solar cells. Key Words ruthenium polipyridines - ruthenium tetrapyridines - cyanide bridge - molecular antennae - molecular wires - solar cells - energy transfer - charge transfer - mixed valence

Peroni, Javier Ignacio. "Modelado geofísico-geológico de plutones en las Islas Grande de Tierra del Fuego (Argentina) y Navarino (Chile)" (2012-12-17). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En la Islas Grande de Tierra del Fuego y Navarino, afloran los plutones Kranck, Jeujepen, Moat, Ushuaia, Trapecio, Santa Rosa y Castores. Todos estos plutones, se encuentran emplazados en corteza superior, con indicadores composicionales característicos de zonas de subducción. Utilizando datos aeromagnéticos disponibles junto a datos adquiridos de magnetismo terrestre y marino, se ha obtenido un mapa completo de anomalías magnéticas para toda la zona de estudio. A partir de esta información se ha realizado el modelado magnético 3D de los intrusivos estudiados, tomando en consideración los datos de topografía, el valor de susceptibilidad magnética de cada intrusivo y la roca de caja, el campo magnético regional, el campo magnético remanente y las principales estructuras locales y regionales. Los resultados alcanzados son presentados en bloques diagramas que integran los modelos obtenidos junto a la información geológica de superficie. Con carácter complementario se han realizado muestreos piloto de anisotropía de susceptibilidad magnética, que indican la naturaleza dominantemente ferromagnética de los intrusivos estudiados, con magnetita como portador principal de la susceptibilidad. Para cada plutón se ha determinado la geometría, tamaño, volúmenes totales. Se observaron dos modas en relación al tamaño de los plutones, un tamaño pequeño del orden de 1-10 km3 y otros de mayor tamaño del orden de 100 km3. La forma de los plutones pequeños es más laminar que las de los de mayores volúmenes. Se adquirieron 4 nuevos polos paleomagnéticos en 3 de los plutones estudiados (plutones Kranck, Santa Rosa y Castores) que abonan la hipótesis de que los Andes Fueguinos constituyen un arco primario, curvado en el Cretácico Medio-Superior, durante el cierre de la Cuenca Marginal Rocas Verdes, a partir de un paleomargen curvo preexistente. Los valores del ángulo de inclinación (AI) de estos polos, permiten aportar información complementaria a la observada para las estructuras compresivas a nivel regional. En este sentido los AI de los plutones Jeujepen y Kranck del área norte estudiada, son mayores a los 30º, mientras que para los plutones del canal Beagle en el área sur, se encuentran entre los 5 y 10º. Los primeros se encuentran afectados por estructuras compresivas, mientras que los del área sur, no están afectados por este tipo de estructuras. Palabras claves: Tierra del Fuego, Plutones, Anomalías magnéticas, Modelado magnético, Paleomagnetismo.

Abstract:
In the islands of Tierra del Fuego and Navarino, outcrop the Kranck, JeuJepen, Moat, Ushuaia, Trapecio, Santa Rosa and Castores plutons. All these plutons are emplaced in the upper crust and have characteristic compositional indicators of subduction zones. Using aeromagnetic available data along with land and marine magnetic data acquired, a complete map of magnetic anomalies for the entire study area has been obtained. From this information a 3D magnetic modeling of the studied intrusive has been made, taking into consideration the topography data, the magnetic susceptibility values of each intrusive and country rock, the regional magnetic field, the remanent magnetic field and the major regional and local structures. The results obtained are presented in block diagrams that integrate the models obtained together with surface geological information. A complementary pilot sampling of anisotropy magnetic susceptibility has been done and indicate the ferromagnetic dominant nature of the intrusive with magnetite as the main carrier of susceptibility. For each pluton the geometry, size, a total volumes has been determined. Two modes were observed in relation to the plutons size, a small size of the range of 1-10 km3 and larger ones of about 100 km3. The shape of the smaller plutons is more laminar than the larger ones. Four new paleomagnetic poles acquired in three of the studied plutons (Kranck, Santa Rosa and Castore) support the hypothesis that he Fuegian Andes are a primary arc, bent in the Middle-Upper Cretaceous, during the closure of the marginal basin Rocas Verdes, from a preexisting curved paleomargin. The values of the inclination angle (AI) of these poles, provide additional information for the regional compressive structures. In this sense the AI of the plutons Kranck and Jeujepen of the northern area, are greater than 30 °, while for the plutons of the Beagle Channel on the south, are between 5 and 10 º. The former are affected by compressive structures, while the southern area are not affected by this type of structures. Keywords: Tierra del Fuego, Plutons, Magnetic Anomaly; Magnetic model, Paleomagnetism

Mom, María Pía. "Caracterización estructural y propiedades funcionales de las harinas de los frutos de Prosopis alba Griseb., P. chilensis (Molina) Stuntz emend. Burkart y P. flexuosa DC. Desarrollo de un proceso de secado, molienda y mezcla para optimizar la calidad del producto" (2012-12-17). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Prosopis alba, P. chilensis y P. flexuosa "algarrobos", características en las regiones fitogeográficas del Chaco y Monte, Argentina, constituyen un recurso natural con innumerables aplicaciones. Si bien el progresivo avance de la desertización ha puesto en riesgo a estas comunidades vegetales, es indudable que en la actualidad constituyen una fuente inagotable de productos y subproductos. A partir del estudio de los caracteres estructurales (micro, ultra, nano), propiedades funcionales y color de los frutos y harinas de P. alba, P. chilensis y P flexuosa, se desarrolló un proceso de secado, molienda y mezcla. Se analizaron y discutieron las observaciones con microscopio óptico (MO), microscopio electrónico de barrido ambiental (MEBA) y con campo de emisión (FESEM), microscopio electrónico de transmisión (MET) y microscopio de fuerza atómica (MFA). Se caracterizaron las harinas de las distintas especies en función de la granulometría, la capacidad de absorción de agua, la capacidad de absorción de aceite, la solubilidad y el color. La investigación permitió optimizar el proceso, elaborar harina enriquecida con proteínas a partir de P. chilensis y proponer una mezcla de fácil formulación. El estudio constituye un aval para lograr la incorporación de P. chilensis al Código Alimentario Argentino.

Abstract:
Prosopis alba, P. chilensis and P. flexuosa "algarrobos", are natives resources from the phytogeographic regions of Chaco and Monte, Argentina, with multiple applications. Although the progressive advance of desertification has affected these species, they still constitute a valious source to obtain products and subproducts. A drying and grinding process to optimize the production and quality of the flours was assayed. Light microscope (LM), environmental scanning electron microscope (ESEM) and field emission (FESEM), transmission electron microscope (TEM) and atomic force microscope (AFM) observations were analyzed and discussed. Structural features (micro, ultra, nano), functional properties (granulometry, water and oil absorption capacity, solubility) and color of raw fruits and flours were documented. The present research allowed to obtain protein-enriched flour from P. chilensis and also contributed to propose a simple formulation mixture with high nutritional value. The study would constitute a certification to attain the P. chilensis inclusion into the Código Alimentario Argentino.

Muschetto, Emiliano. "Efectos de la granívora/herbivoría sobre la invasión de especies leñosas en pastizales de la pampa interior" (2012-12-13). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las invasiones biológicas son uno de los procesos que más están contribuyendo a la pérdida de la diversidad en algunos sistemas, sin embargo la magnitud de su efecto depende en muchos casos de las características de las comunidades invadidas y de la presencia de enemigos naturales. En este marco, el objetivo general de esta tesis fue avanzar en el conocimiento del rol que tiene la comunidad de pequeños roedores en la resistencia a la invasión de especies de árboles en la región Pampeana, en particular de G. triacanthos y R. pseudoacacia. Un experimento de 4 años de duración de exclusión de roedores, que incluyó la generación de disturbios para simular etapas sucesionales tempranas, obtuvo resultados que demuestran que tanto el efecto de los roedores como el del disturbio varió según la especie de leñosa considerada. Los roedores solo ejercieron un efecto positivo en la germinación de G. triacanthos en las parcelas disturbadas y no tuvieron efecto sobre la mortalidad de las plántulas germinadas. El disturbio afectó únicamente a las plántulas de G. triacanthos, disminuyendo la mortalidad en el primer año de estudio para luego aumentarla en el último periodo cuando se produjo un cambio en las especies vegetales dominantes. El nivel de precipitaciones durante la época de crecimiento de las plántulas fue un factor determinante en las posibilidades de invasión de ambas especies de leñosas y afectó también a la población de roedores. Las semillas de G. triacanthos permanecieron viables en el banco por más tiempo que las de R. pseudoacacia. El estudio de remoción de semillas en distintas comunidades vegetales registró un mayor consumo en las estaciones del año donde los roedores registran mayor abundancia (otoño) y varió según los sitios estudiados. En pastizales, la disponibilidad de alimento alternativo sería el principal factor que explicaría las diferencias en la depredación de semillas, principalmente a través de interacciones indirectas como el mutualismo aparente. A su vez, los experimentos bajo condiciones controladas determinaron que los roedores disminuirían el consumo de G. triacanthos en presencia de alimento alternativo compuesto por semillas de herbáceas nativas y exóticas de pequeño tamaño. Los resultados de esta tesis sugieren que el éxito en la invasión estaría dado por la interacción entre los factores extrínsecos (fluctuaciones en las condiciones ambientales) e intrínsecos de las comunidades vegetales y de las poblaciones de roedores.

Abstract:
Biological invasions are one of the processes that are contributing to the loss of diversity in many systems; although the magnitude of the effect depends on the characteristics of the invaded communities and the presence of natural enemies. In this context, the general objective of this thesis was to advance in the knowledge of the role of small rodents in the resistance to tree species invasion, particularly G. triacanthos and R. pseudoacacia, in the Pampas region. A rodent exclusion experiment of 4-year duration, which included disturbances generation to simulate early successional stages, showed that both the effect of rodents and disturbances varied depending on the woody species considered. Rodents only had a positive effect on the germination of G. triacanthos in disturbed plots and had no effect on the mortality of seedlings. The disturbances affected only G. triacanthos seedlings, decreasing the mortality in the first year of study and then causing an increase in the last year, when there was a change in the dominant plant species of the community. Precipitations during the growing season of the seedlings affected the chances of invasion of both woody species and also affected the rodent population. G. triacanthos seeds remained viable in the seed bank during a longer period than those of R. pseudoacacia. The comparison of seed removal along seasons and in plant communities that differed in structure and alternative food availability showed higher consumption in the season where rodents recorded greater abundances (autumn) and varied according to study sites. Alternative food availability would be the main factor explaining differences in seed predation, mainly through indirect interactions like apparent mutualism. In turn, the experiments under controlled conditions determined that rodents would decrease the consumption of G. triacanthos seeds in the presence of alternative food composed by native and exotic herbaceous seeds of small size. The results of this thesis suggest that the invasion success of woody species would be given by the interaction between extrinsic factors (fluctuations in environmental conditions) and those intrinsic of plant communities and rodent populations.

Bracco, Mariana. "Caracterización genética del germoplasma de razas de maíz autóctonas provenientes del noreste argentino" (2012-11-13). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El maíz, Zea mays ssp. mays, se cultiva en todo el mundo y ocupa el tercer lugar entre los destinados al consumo alimentario. La Argentina es el segundo exportador mundial, precedida por los Estados Unidos. Esto coloca a la producción de maíz como una de las actividades económicas más rentables para nuestro país. En el norte de la Argentina habitan comunidades aborígenes que cultivan razas nativas de maíz. La caracterización genética del germoplasma autóctono de las razas de la región noreste de la Argentina (NEA) ha sido prácticamente nula hasta la concreción de esta Tesis. Con el fin de aportar al conocimiento de la diversidad genética y la estructura poblacional de las razas nativas del NEA, contribuir a su conservación y evaluar su potencial como reservorio de nuevos alelos, se evaluaron 15 loci microsatélites nucleares en 572 individuos. Los resultados del presente estudio permiten concluir que: 1) las razas de Misiones se encuentran constituidas por acervos génicos diferentes, que concuerdan con el tipo de grano que poseen (harinosos y córneo-harinosos vs. reventadores), éstos deberían ser considerados como unidades de conservación diferentes; 2) las razas nativas del NEA constituyen una reserva de diversidad significativa, con potencial para ampliar la base genética de los programas de fitomejoramiento; 3) las razas de Misiones no parecen haber sufrido un proceso de erosión genética severo en tiempos recientes, ya que los ejemplares actuales conservan gran parte de la diversidad detectada en las colecciones del NEA de los años 1977 y 1978; 4) la comparación entre las razas del NEA y del NOA apoyan la existencia de dos centros de diversidad diferentes en Sudamérica; la comparación con otras razas del Continente Americano avala la hipótesis de ocurrencia de una via de introducción del germoplasma nativo del NEA a través del este de Sudamérica; 5) la ausencia de cromosomas B en las razas del NEA coincide con la constitución cromosómica esperada para el grupo de las razas de regiones bajas.

Abstract:
Zea mays ssp. mays is cultivated worldwide and ranks third in importance among crops for human consumption. Argentina is the second largest exporter, preceded by the United States. Corn production is one of the most profitable economic activities in our country. Northern aboriginal communities from Argentina cultivate maize landraces for self-sufficiency. Genetic characterization of indigenous germplasm from the northeastern region of Argentina (NEA) was practically nil until the completion of this Thesis. To contribute to the knowledge and conservation of the genetic diversity of native maize landraces from NEA and to assess their potential as a reservoir of novel alleles, 572 individuals were evaluated using 15 nuclear microsatellite loci. The results of this study allow to conclude that: 1) landraces from Misiones can be divided into two different gene pools, which are consistent with the type of corn (flints and flours vs. popcorns), these should be regarded as different conservation units; 2) NEA landraces represent a significant reservoir of diversity, useful to broaden the genetic base of breeding programs; 3) landraces from Misiones do not seem to have undergone a severe genetic erosion in recent times, since much of the extant diversity is detected in NEA seed bank collections from 1977-1978; 4) the comparison between landraces from NEA and NOA support the existence of two different centers of diversity in South America; the comparison with other races of the Americas supports the hypothesis of the introduction of NEA germplasm through eastern South America; 5) the absence of B chromosomes in NEA landraces agrees with the expected chromosomal constitution of the landraces from lowland South America.

Ernesto, Juan Ignacio. "Caracterización de distintos miembros de la familia de proteínas CAP en tracto reproductor masculino y femenino y su participación en el proceso de fertilización" (2012-10). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
A pesar de la importancia del proceso de fertilización, es aún muy escasa la información disponible acerca de las moléculas involucradas. Las evidencias de nuestro laboratorio indican que las proteínas de la familia CRISP, miembro de la superfamilia CAP, serían claros mediadores del proceso de interacción de gametas. Teniendo en cuenta que las CRISP se expresan principalmente en el tracto reproductor masculino, el primer objetivo de esta Tesis ha sido investigar si las mismas también se expresan en el tracto reproductor femenino y cumplen un rol en el proceso de fertilización. Los resultados obtenidos utilizando los modelos de rata y ratón indicaron que mientras CRISP1 se encuentra presente en útero, oviducto, ovario, y células del cúmulus, CRISP2 se detecta sólo en ovario, y CRISP4 no se expresaría en el tracto de la hembra. Ensayos de fertilización in vitro utilizando espermatozoides y COC (complejos ovocito-cúmulus) provenientes de ratones knockout para CRISP1 indicaron que la proteína presente en el cúmulus cumpliría una función en el proceso de fertilización. Estudios posteriores revelaron que CRISP1 exhibe propiedades quimioatractantes hacia los espermatozoides, sugiriendo que éste podría ser el mecanismo por el cual CRISP1 del cúmulus participa en el proceso de fertilización. Dada la gran homología entre las CRISP y las GLIPR1, las cuales constituyen las dos familias mejor caracterizadas de la superfamila CAP, el segundo objetivo de este trabajo consistió en estudiar la presencia de proteínas GLIPR1 en el tracto reproductor masculino y su participación en la fertilización. Los resultados indicaron la expresión de GLIPR1L1 a nivel testicular y de GLIPR1L2 tanto en testículo como en epidídimo de ratón. La generación de ambas proteínas en forma recombinante y de sus correspondientes anticuerpos confirmó la presencia de las mismas en el espermatozoide y su participación específica en la primera etapa de unión a la zona pellucida. La información obtenida acerca del rol de las proteínas CRISP y GLIPR1 contribuirá a una mayor comprensión de los mecanismos moleculares involucrados en la interacción de gametas como así también al desarrollo de futuros métodos de regulación de la fertilidad tanto en animales como en el humano.

Abstract:
Despite the importance of the fertilization process, there is still little information about the molecules involved in it. Evidence from our laboratory indicates that proteins from de CRISP family, members of the CAP super family, would be clear mediators of the gamete interaction process. Considering that the CRISP are expressed primarily in the male reproductive tract, the first objective of this thesis was to investigate whether these proteins are expressed in the female reproductive tract and if they play a role in the fertilization process. The results indicated that while CRISP1 is present in uterus, oviduct, ovary and cumulus cells, CRISP2 is detected only in the ovary and CRISP4 is not expressed is the female reproductive tract. In vitro fertilization assays using both sperm and COC (oocyte-cummulus complex) from CRISP1 knockout mice indicated that the protein present in the cumulus fulfill a role in the fertilization process. Further studies revealed that CRISP1 exhibit sperm chemoattractant properties, suggesting that this might be the mechanism by which CRISP1 present in the cumulus participates in the fertilization process. Given the high homology between CRISP and GLIPR1, which are the two best characterized families from the CAP super family, the second objective of the present work was to study the presence of GLIPR1 proteins in the male reproductive tract and their participation in the fertilization process. Our results indicated that GLIPR1L1 is expressed in the testis while GLIPR1L2 is present in the testis and the epididymis. The generation of both recombinant proteins and their corresponding antibodies confirmed the presence of these proteins in the sperm (human and mouse) and their specific involvement in the first stage of binding to the zona pellucida. The information obtained about the role CRISP and GLIPR1 proteins will contribute to a greater understanding of the molecular mechanisms involved in gamete interaction as well as to the development of future methods to regulate fertility both in animals and humans.

Alvarez Paggi, Damián Jorge. "Bases moleculares de los mecanismos regulatorios de los procesos de transferencia electrónica proteica" (2012-10-02). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis doctoral se abordó el estudio de los parámetros que regulan las reacciones de transferencia electrónica (TE) en sistemas proteicos dentro del marco teórico desarrollado por Marcus. Para ello se emplearon métodos espectroscópicos, electroquímicos, espectroelectroquímicos y computacionales. En particular, se investigaron dos componentes de la cadena de transporte respiratorio: el citocromo c (Cyt), un transportador soluble de electrones y el centro de CuA, el aceptor primario de la citocromo c oxidasa. En primer lugar, se estudió el rol de la dinámica proteica del Cyt y su modulación por campos eléctricos de relevancia biológica. Se verificó que dicha dinámica es crucial en la regulación de las reacciones de TE que tienen lugar en la cadena de transporte de electrones a través de la modulación del acoplamiento electrónico entre donor y aceptor. Por otro lado, se encontró evidencia de que el campo eléctrico regularía la alternancia entre dos conformaciones del Cyt que difieren principalmente en la magnitud de la energía de reorganización. Finalmente, se constató el rol fundamental de las fluctuaciones térmicas y la dinámica proteica para las reacciones de TE en centros de CuA. Dichos centros podrían alternar entre dos estados electrónicos distintos, en los cuales el balance entre la energía de reorganización y el acoplamiento electrónico permitiría conferir direccionalidad a las reacción de TE a pesar de presentar un ΔG≈0. El conjunto de los resultados obtenidos sugiere que los procesos de TE en sistemas biológicos se encuentran finamente regulados, y en particular nos permiten postular un mecanismo de retroalimentación negativa cuyo actor principal es el campo eléctrico interfacial.

Abstract:
This Ph.D. thesis is dedicated to disentangling the parameters that regulate protein electron transfer (ET) reactions, within the theoretical framework developed by Marcus. To that end, spectroscopic, electrochemical, spectroelectrochemical and computational methods were employed. The proteins investigated are two components of the respiratory electron transport chain: cytochrome c (Cyt), a soluble electron shuttle, and the CuA center, the primary electron acceptor of cytochrome c oxidase. Part of the thesis deals with the role of protein dynamics and their modulation by biologically relevant electric fields for the specific case of Cyt. Such dynamics are proposed to be crucial in the regulation of the ET reactions that take place at the electron transport chain by modulating the electronic coupling between donor and acceptor. Moreover, we found evidence of the electric field acting as a switch between two different Cyt conformations that exhibit different reorganization energies. Finally, we verified that thermal fluctuations and protein dynamics play a fundamental role in the ET reaction of CuA centers. These centers could switch between two different electronic ground states in which the interplay between reorganization energy and electronic coupling may confer directionality to the ET reactions in spite of occurring with ΔG≈0. Altogether, these results suggest that ET process in biological systems are finely tuned, and allow us to postulate a mechanism of negative feedback whose main actor is the interfacial electric field.

Título :	Bases moleculares de los mecanismos regulatorios de los procesos de transferencia electrónica proteica = Molecular basis of the fine-tuning mechanisms of protein electron transfer
Autor :	Alvarez Paggi, Damián Jorge
Director :	Murgida, Daniel H.
Consejero de estudios :	Dicelio, Lelia
Jurados :	Olabe, José Antonio ; Vela, María Elena ; Brondino, Carlos Dante
Año :	2012-10-02
Editor :	Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación :	Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Departamento de Química Inorgánica, Analítica y Química Física. Instituto de Química Física de los Materiales, Medio Ambiente y Energía (INQUIMAE)
Grado obtenido :	Doctor de la Universidad de Buenos Aires en el área de Química Inorgánica, Analítica y Química Física
Ubicación :	Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_5212_AlvarezPaggi
Idioma :	Español
Area Temática :	Química / Química Biológica Química / Electroquímica Química / Química Inorgánica
Palabras claves :	CITOCROMO C; CITOCROMO C OXIDASA; CENTRO DE CUA; CADENA DE TRANSPORTE ELECTRONICO; CAMPO ELECTRICO; TRANSFERENCIA ELECTRONICA; MARCUS; ELECTROQUIMICA; BIOELECTROQUIMICA; RAMAN; RAMAN RESONANTE; SERS; SERRS; DINAMICA MOLECULAR; DFT; MONOCAPAS AUTOENSAMBLADAS; MODELO DE PATHWAYS; ENERGIA DE REORGANIZACION; ACOPLAMIENTO ELECTRONICO; MECANISMO DE GATING; DINAMICA PROTEICA; CYTOCHROME C; CYTOCHROME C OXIDASE; CUA CENTER; ELECTRON TRANSPORT CHAIN; ELECTRIC FIELD; ELECTRON TRANSFER; MARCUS; BIOELECTROCHEMISTRY; RAMAN; RESONANCE RAMAN; SERS; SERRS; MOLECULAR DYNAMICS; DFT; SELF-ASSEMBLED MONOLAYERS; PATHWAYS MODEL; REORGANIZATION ENERGY; ELECTRONIC COUPLING; GATING MECHANISM; PROTEIN DYNAMICS; ELECTROCHEMISTRY
URL al Documento :	http://digital.bl.fcen.uba.ar/Download/Tesis/Tesis_5212_AlvarezPaggi.pdf
URL al Registro :	http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_5212_AlvarezPaggi

Quintana, Paula Gabriela. "Lipasas y células enteras de microorganismos como biocatalizadores en síntesis de derivados de esteroides y ácido 2-oxoglutárico" (2012-09-28). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el presente trabajo se estudió la aplicación de enzimas aisladas y células enteras de microorganismos en la síntesis y transformación de compuestos orgánicos. Se estudió la actividad de lipasas comerciales y una proveniente de un agroresiduo, en la síntesis de ésteres de ácido 2-oxoglutárico. Los resultados obtenidos permitieron no sólo la preparación de seis productos novedosos sino también otorgarle un valor y utilidad a un agro-residuo ampliamente disponible. La aplicación de lipasas en la reacción de acilación de hidrocortisona y en la desacetilación de su derivado peracetilado, permitió la preparación de nueve derivados, ocho de los cuales resultaron novedosos. Además se estudió una lipasa heteróloga del hongo Rhizopus oryzae en la acetilación del esteroide cortexolona. Se evaluó el biocatalizador en su forma nativa e inmovilizado sobre diversos soportes. Se aplicó un modelo matemático con el objetivo de lograr una mejor optimización de los parámetros de reacción. Finalmente se describió la aplicación de células enteras de diferentes cepas fúngicas del Orden Mucorales en la biotransformación de la drospirenona, progestina de origen sintético usada en terapia hormonal combinada. A través de la biotransformación se obtuvieron cuatro productos, tres de ellos novedosos y uno mayoritario.

Abstract:
In this work, the application of lipases and microorganism whole cells in the synthesis and transformation of organic compounds is described. The activity of commercial lipases and a non-commercial one, obtained from agrowastes, in the synthesis of 2-oxoglutaric esters was studied. The obtained results allowed the preparation of six novel compounds and the possibility of increasing the value of a widely available agrowaste. The application of lipases in the acylation reaction of hydrocortisone and the desacetylation of its peracetylated derivative allowed us preparing nine derivatives, eight of them novel compounds. Moreover, the study of a heterologous lipase from the fungus Rhizopus oryzae in the acetylation of the steroid cortexolone was carried out. The biocatalyst was evaluated in the native form and immobilized on several supports. With the aim of achieving an optimization in the reaction parameters, a mathematical model was applied. Finally, the use of whole cells of various fungi strains belonging to the Order Mucorales in the biotransformation of drospirenone, a synthetic progestin used in combined hormone therapy, was studied. The biotransformation afforded four compounds, three of them not reported previously in literature and one as a major constituent.

Di Yorio, María Paula. "Regulación de la expresión de los receptores de leptina en el eje reproductivo de la rata" (2012-09-14). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Leptina, proteína de 16 kDa sintetizada y secretada principalmente por el tejido adiposo, parece ser un regulador de la función reproductiva. En este trabajo evaluamos la acción de distintos niveles de leptina sobre la expresión de las principales isoformas de su receptor en el eje hipotálamo-hipófisis- ovario, y el efecto de NPY y 17β-estradiol sobre estos receptores en el eje hipotálamo-adenohipófisis, ambos durante el proceso ovulatorio. Utilizamos como modelo biológico ratas inmaduras estimuladas con gonadotrofinas y evaluamos mediante estudios in vivo e in vitro la expresión del mensajero (RTPCR) y de la proteína (western blot) de los receptores de leptina. Encontramos que tanto leptina como las gonadotrofinas son capaces de regular diferencialmente la expresión del mensajero y de la proteína de ambos tipos de isoformas en el eje reproductivo, en forma dosis y tejido dependiente. Por otro lado, NPY y 17β-estradiol fueron capaces de inducir la expresión del mensajero y de la proteína de ambas isoformas en el eje hipotálamo-adenohipófisis a través del receptor de NPY tipo 1 y de los receptores estrogénicos α y/o β, respectivamente. Como el efecto estimulatorio o inhibitorio de leptina sobre la función ovárica podría depender de la activación diferencial de sus receptores, estudiamos las vías JAK2/STAT3 y ERK1/2, y la expresión de SOCS3 (western blot) en el eje reproductivo durante el proceso ovulatorio. Utilizamos ratas estimuladas con gonadotrofinas las que recibieron los siguientes tratamientos: i) tratamiento agudo, las que recibieron 5 dosis de leptina (5 μg c/u) o vehículo durante el proceso ovulatorio, o ii) tratamiento diario, las que recibieron 3 μg de leptina o vehículo por día durante 12 días a partir del destete. Observamos que el tratamiento agudo, que inhibe la función ovárica, i) disminuye la expresión de p-ERK1/2 en hipotálamo, adenohipófisis y ovario; ii) disminuye la expresión de p-STAT3 en adenohipófisis y ovario; y iii) aumenta la expresión de SOCS3 en adenohipófisis y ovario. En el tratamiento diario, que estimula la función ovárica, observamos que i) aumenta la expresión de p-STAT3 y p-ERK1/2 en hipotálamo y en ovario; ii) disminuye la expresión de SOCS3 en ovario; y iii) no hubo cambios en estas vías en adenohipófisis. Al evaluar in vitro la acción directa de leptina sobre estos caminos de señalización en ovario observamos que la presencia de leptina es capaz de aumentar la expresión de p-STAT3 a bajas y altas concentraciones, la expresión de p-ERK1/2 a bajas concentraciones y los niveles de SOCS3 a altas concentraciones. Con estos resultados podemos concluir que las gonadotrofinas, leptina, NPY y 17β-estradiol son capaces de regular la sensibilidad a leptina a lo largo del eje reproductivo por modular la expresión de sus receptores, y que los cambios observados en las distintas vías de señalización inducidos por diferentes niveles de leptina pueden ser, al menos en parte, responsables del efecto positivo o negativo que leptina ejerce sobre el proceso ovulatorio. Palabras claves: receptor de leptina, leptina, NPY, 17β-estradiol, hipotálamo, adenohipófisis, ovario, proceso ovulatorio, JAK2/STAT3, ERK1/2, SOCS3.

Abstract:
Leptin, a 16 kDa protein synthesized and secreted mainly by adipocytes, modulates the reproductive function. The aims of the present work were to investigate the expression of leptin receptors in the hypothalamic-pituitary-ovarian axis, and to assess whether different levels of leptin in this axis were able to modulate the expression of both the long and the shorts isoforms of its receptors. Moreover, we also evaluated the direct effects of some factors involved in the reproductive function, like NPY and 17β-oestradiol, on the expression of these receptors in the hypothalamic-pituitary axis. Immature rats primed with gonadotropins were used and either in vivo or in vitro assays were performed to evaluate the expression of both RNA messenger (RT-PCR) and proteins (western blot) of the leptin receptors. Gonadotropins and leptin were able to regulate the expression of RNA messenger and proteins of both isoforms in the reproductive axis in a differential way and in a dose and tissue dependent manner. Furthermore, NPY and 17β-oestradiol up-regulated the receptor expression in the hypothalamic-pituitary axis by the interaction with the receptor Y type 1 and the oestrogen receptors α and/or β, respectively. Leptin is able to both stimulate and inhibit the ovarian function and this effect could be induced by a differential activation of its receptors. Thus, we investigated whether changes in the signalling pathways, mediated by JAK2/STAT3 or ERK1/2 and the SOCS3 expression (western blot), were involved in this biphasic response in the hypothalamic-pituitary-ovarian axis during the ovulatory process. Immature rats primed with gonadotropins received one of the following treatment: i) acute treatment, in which the rats received five ip injection of leptin (5 μg each) or vehicle during the ovulatory process, and ii) daily treatment, at 22 days of age, in which the rats received an ip injection of leptin (3 μg) or vehicle per day for 12 days. We found that the acute treatment, which inhibits the ovulatory process, caused a reduction in the expression of p-ERK1/2 in hypothalamus, pituitary and ovary; p-STAT3 in pituitary and ovary; and an increase in SOCS3 expression in pituitary and ovary. The daily treatment, which induces the ovulatory process, increased the expression of both p-STAT3 and p-ERK1/2 in hypothalamus and ovary; caused a reduction of SOCS3 expression in the ovary; but no changes were found in pituitary. In vitro studies were performed to evaluate a direct effect of leptin on those signaling pathways in the ovarian tissue. Leptin was able to activate both STAT3 and ERK1/2 in the presence of physiological levels, but only STAT3 at high concentrations. In addition, the expression of SOCS3 protein increased at high levels of leptin. These results indicate that gonadotropins, leptin, NPY and 17β-oestradiol are able to modulate the responsiveness to leptin by regulating the expression of its receptors. Furthermore, changes in different signaling pathways throughout the reproductive axis, induced by different levels of leptin may be, at least in part, responsible for the positive or negative effects of leptin on the ovulatory process. Key words: Leptin receptor, leptin, NPY, 17β-oestradiol, hypothalamus, pituitary, ovary, ovulatory process, JAK2/STAT3, ERK1/2, SOCS3.

Binaghi, María. "Rol de la fosforilación en la regulación funcional de la proteína de movimiento TGBp1 del potato virus X" (2012-08-21). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El Potato virus X (PVX) es un virus de plantas perteneciente al género Potexvirus. Su genoma está compuesto por una única molécula de ARN que codifica una replicasa viral, tres proteínas de movimiento (MPs: TGBp1, TGBp2 y TGBp3) y la proteína de la cápside (CP). La proteína TGBp1 es una proteína multifuncional requerida para el movimiento viral célula a célula en la planta hospedera. Se ha demostrado que esta MP es fosforilada en los residuos T193 y T214 por una quinasa tipo CK2. Diferentes líneas de investigación sugieren que la fosforilación de las proteínas virales puede regular la replicación y el movimiento viral. El objetivo de este trabajo fue estudiar el rol de la fosforilación en la regulación funcional de la proteína de movimiento TGBp1 de PVX y en su interacción con la proteína de plantas remorina (REM). Para ello se construyeron por mutagénesis dirigida versiones de TGBp1 no fosforilables (T193A y T214A) y otras que simulan la fosforilación (T193D y T214D). En ensayos de transcomplementación de la movilización célula a célula de un virus defectivo para dicha función, se demostró que las modificaciones en ambas treoninas resultan perjudiciales en la complementación del movimiento viral. Se determinó que la fosforilación de TGBp1 en la T193 regula la estabilidad de esta proteína viral por medio de un mecanismo que involucra la presencia de una secuencia de degradación tipo PEST en el extremo C-terminal de dicha proteína. A través de la combinación de estudios que involucran el análisis comparativo in silico de varias TGBp1s de virus de los géneros Alpha y Betaflexiviridae y de estudios por mutagénesis dirigida, se determinó que la T193 y la secuencia PEST C-terminal se encuentran conservadas en todas las TGBp1s analizadas, sugiriendo que la fosforilación en la T193 de estas MPs sería un mecanismo regulatorio de la estabilidad de dichas proteínas. Por otra parte, el análisis funcional de las fosfomutantes T193 y T214 de TGBp1 determinó que la fosforilación en dichos residuos afecta negativamente la actividad supresora del PTGS de TGBp1. Los ensayos de interacción entre TGBp1 de PVX y la proteína REM determinaron que tanto el dominio N- como el C-terminal de TGBp1 son necesarios para la interacción y que la misma no es regulada por fosforilación en los residuos T193 y T214 de TGBp1. Por otro lado, este trabajo presenta las primeras evidencias que la interacción entre distintas proteínas TGBp1s y REM se encontraría conservada entre los virus que utilizan estrategias de movilización del tipo Triple Bloque de Genes (TGB). Los análisis realizados para determinar el efecto biológico de REM sobre la TGBp1 de PVX demostraron que la proteína REM no interfiere en la actividad del PTGS de esta proteína viral. Finalmente estudios de localización subcelular determinaron que la localización subcelular de TGBp1 es influenciada por la presencia de las otras proteínas virales y que a su vez varía según si la proteína se encuentra fusionada en su extremo N- o C- terminal a GFP.

Abstract:
Potato virus X (PVX) is the type member of the Potexvirus genus. Its genome is based on a single RNA molecule encoding one viral replicase protein, three movement proteins (MPs: TGBp1, TGBp2 and TGBp3) and the capsid protein (CP). In particular, TGBp1 is a multifunctional protein required for virus cell-to-cell movement inside the host plant. Previously it has been demonstrated that TGBp1 is phosphorylated by a CK2-like kinase in T193A and T214 residues. Recent works on other plant viruses have indicated that viral protein phosphorylation by host kinases can regulate processes such us viral replication and mobilization. The aim of this work is to evaluate the role of phosphorylation in regulating the functional activities of the movement protein TGBp1 of PVX and its interaction with the protein Remorin (REM). For this aim different TGBp1 mutants have been developed by direct mutagenesis where the identified threonines have been replaced by alanine (T193A and T214A) or aspartate (T193D and T214D) residues. The virus movement function of the phosphomutants was assessed by complementation of PVX cell-to-cell movement in trans. It was shown that all mutants were non-functional for virus movement, and that phosphorylation of T193 is essential for stability of the MP by a degradation mechanism that involves a PEST sequence at the C-terminus of TGBp1. Several experimental approaches involving sequence comparison among TGBp1 homologues from viruses belonging to the Alpha and Betaflexiviridae genera and direct mutagenesis show that the T193 residue and the PEST sequence are conserved among all TGBp1 analyzed, suggesting that phosphorylation of T193 in these MPs could be a mechanism by which protein stability is regulated in several viruses. The results obtained in this work also have shown that phosphorylation of T193 and T214 of TGBp1 negatively affects the PTGS suppression activity of this MP. Two-hybrid assays and pull down experiments demonstrated that the N- and C-term domain of TGBp1 are involved in the interaction between PVX TGBp1 and REM and that this interaction is not regulated by TGBp1 phosphorylation. In addition, this work presents the first evidence that the interaction between REM and other TGBp1s could be a conserved mechanism used by different TGB-containing viruses. The studies conducted to determine the biological effect of REM on TGBp1 from PVX showed that REM protein does not interfere with PTGS- suppressing activity of TGBp1. Finally, sub-cellular localization studies demonstrated that TGBp1 localization is influenced by the presence of other viral proteins and by the use of N- or C-terminal GFP fusion proteins.

Bertucci, Paola Yanina. "Efectos del receptor de progesterona sobre la elongación transcripcional del gen bcl-x humano" (2012-08-06). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los Receptores de Esteroides (SRs) regulan la expresión génica mediante su interacción con Elementos de Respueta a Hormona (HREs) ubicados en las regiones promotoras de sus genes blanco. Según el modelo clásico de activación transcripcional, los SRs reclutan complejos que relajan el estado de la cromatina favoreciendo, así, los pasos tempranos de la transcripción. Sin embargo, a partir del uso de la técnica de inmunoprecipitacion de cromatina seguida de secuenciación masiva (ChIP-seq), se encontró que una gran parte de los sitios de unión de los SRs al ADN se encuentra ubicada en regiones intragénicas. Adicionalmente, algunos de los complejos modificadores de la cromatina asociados a los efectos de los SRs en las regiones promotoras de sus genes blanco, también fueron encontraron favoreciendo la elongación transcripcional a lo largo de las regiones transcribibles. El objetivo de esta tesis es estudiar el posible efecto de los SRs unidos a las regiones intragénicas sobre la elongación de la Pol II en genes endógenos. Para ésto se utilizaron células humanas T47D tratadas con el progestágeno sintético R5020 y al gen bcl-x como modelo de estudio. Los resultados mostraron que el Receptor de Progesterona (PR) se recluta únicamente a sitios intragénicos, conjuntamente con las histonas acetiltransferasas CBP y GCN5 y el factor positivo de elongación P-TEFb. El reclutamiento de estos factores correlaciona con un aumento en la acetilación de las histonas, el desplazamiento parcial de los nucleosomas, un aumento en la abundancia de la Pol II principalmente en el extremo 3´del gen y una mayor procesividad de la Pol II a lo largo del mismo. En su conjunto los resultados presentados en este trabajo sugieren que la modulación de elongación de la Pol II en bcl-x humano supondría un nuevo mecanismo de regulación de la expresión génica mediada por el PR.

Abstract:
Steroid Receptors (SRs) regulate gene expression througth their interaction with the Hormone Response Elements (HREs) located in the promoter regions of their target genes. The classical mechanism of SR transcriptional activation explains that the SRs recruit modifying complexes to these regions, which in turn open the target chromatin thus, favoring the first steps of gene transcription. However, recently developed genome wide technologies, as ChIP-seq, revealed that a main part of SRs binding sites are located in intragenic regions. Additionaly, some chromatin modifying complexes classically found in the promoter regions of the SRs target genes were also found favoring the elongation process. In this sense, it was propossed that changes in the chromatin context in intragenic regions would affect Pol II elongation. The aim of this thesis is to analyze the putative effect of the SRs bound to their intragenic sites on Pol II elongation in hormone-regulated endogenous genes. To tackle this, we used T47D human breast cancer cell line treated with the synthetic progestin R5020 and bcl-x as a gene model. The results showed that, after the progestin addition, the Progesterone Receptor (PR) is recruited together with the acetyltransferases CBP and GCN5 and with the elongation factor PTEFb to different binding sites distributed along the intragenic region of bcl-x gene. The recruitment of these factors correlates with an increase of histone acetylation levels, the pantial decrease in nucleosome occupancy and the improvement of Pol II processivity along this gene. All together, these results suggest a new mechanism which involves the PR control of endogenous Pol II elongation.

Caro, Florence. "Estudio de la traducción a escala genómica y métodos de manipulación genética en el parásito de la Malaria, Plasmodium falciparum" (2012-08-01). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Plasmodium falciparum es el parásito que causa la malaria más severa en humanos, enfermedad que afecta mundialmente a 200–300 millones de individuos al año. La descripción del genoma, del transcriptoma y del proteoma son un recurso importante para poder entender la función y la regulación de la expresión génica. En el caso del parásito P. falciparum, el 60% de los genes anotados siguen siendo hipotéticos, debido a la gran distancia evolutiva del parásito respecto de organismos modelo. Por otro lado, la presencia y abundancia de un ARNm no necesariamente se correlaciona con la abundancia de la proteína correspondiente y la cuantificación de estos parámetros son por lo tanto representaciones imperfectas de la regulación génica y proteómica subyacente. En esta tesis se establece la conexión entre ARNm y proteína midiendo directamente la traducción a nivel genómico usando la técnica de perfilamiento ribosomal, revelando por primera vez la dinámica de este proceso durante los estadíos intraeritrocíticos del parásito. Los resultados obtenidos demuestran que los procesos de transcripción y traducción están estrechamente acoplados, que el 11% del transcriptoma está regulado traducciónalmente y que este tipo de regulación juega un rol importante en genes con funciones de egreso e invasión del merozoito. Además, se presenta un conjunto de métodos mejorados para la manipulación genética a escala genómica de P. falciparum. Este conjunto de protocolos puede ser aplicado para la investigación y descubrimiento de la función de los genes del parásito.

Abstract:
Plasmodium falciparum is the causative agent of the most burdensome form of human malaria, affecting 200–300 million individuals per year worldwide. For the study of P. falciparum, the description of the genome, the transcriptome and the proteome are a tremendous resource for understanding gene function and gene expression regulation. However, 60% of the annotated genes in the genome remain hypothetical due to the evolutionary distance of this parasite to model organisms, and mRNA and protein abundance measurements remain imperfect representations of the underlying genetic and proteomic regulation, since the presence and abundance of an mRNA species does not necessarily correlate with the abundance of the corresponding protein. The work presented in this thesis bridges this disconnect by measuring whole genome translation, using the ribosome profiling technique, revealing for the first time translation dynamics throughout the asexual intraerythrocytic developmental cycle. The findings show that transcription and translation are tightly coupled in this parasite, that 11% of the transcriptome is translationally regulated and that this type of regulation plays a major role on genes related to merozoite egress and invasion. Additionally, presented here is an improved set of methods for 96-well plate-based transfection and culture that facilitate genome-scale genetic manipulation of P. falciparum. This set of protocols can be applied to investigation and discovery gene functions in this parasite.

Baltanás, Rodrigo. "Estudio integrativo de vías de señalización de MAP quinasas de Saccharomyces cerevisiae" (2012-07-27). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo principal de esta tesis fue estudiar la interacción entre las vías de MAP quinasas de Saccharomyces cerevisiae. Estas vías están representadas en humanos, donde su mal funcionamiento puede conducir a patologías tales como cáncer o problemas en el desarrollo. La complejidad de los circuitos de señalización de MAP quinasas en células de mamíferos dificulta la comprensión de como estas integran las señales que los activan. Para resolver este problema, una estrategia es analizar sistemas biológicos más simples que comparten propiedades con los más complejos. En este sentido, nos propusimos caracterizar exhaustivamente sistemas de señalización de MAP quinasas en un sistema biológico simple, la levadura S. cerevisiae. En esta tesis decidimos determinar los puntos de flujo de información entre las vías de "Respuesta a Shock Hiperosmótico" (HOG) y de "Respuesta a Feromona" (PR) de levaduras, ya que estas vías comparten componentes en sus vías de señalización y existe controversia sobre sus interacciones. A su vez, estudiamos estas vías en células individuales, estimulando las mismas controlando la dosis de los estímulos utilizados y en una variada serie de condiciones experimentales. Finalmente, medimos las respuestas de estas vías de un modo cuantitativo, estudiando su dinámica temporal y analizando el mayor número de respuestas posible en cada célula. Resumiendo los resultados obtenidos, podemos decir, que la vía de HOG no presenta osmoadaptación perfecta como se había afirmado previamente y permanece activa en estado estacionario. Su activación es mayor cuanto mayor es la osmolaridad externa, y también depende del gradiente químico de glicerol. Además, vemos una alta variabilidad de la respuesta de HOG en células individuales. A nivel de las interacciones entre las vías de MAP quinasas, determinamos que la vía PR es capaz de activar a la vía HOG en células adaptadas a alta osmolaridad. Esta compleja activación requiere de la MAPK de la vía de integridad de la pared celular (CWI) Slt2/Mpk1 y del polarisoma. La activación de HOG es pulsátil y presenta una alta variabilidad en células individuales. Los picos de actividad de HOG coinciden con eventos morfogenéticos inducidos por PR en los cuales se activa Slt2/Mpk1. La vía PR induce una salida de glicerol, que estaría mediada por Slt2/Mpk1, y este sería el mecanismo que llevaría a la activación de la vía HOG. La inducción de HOG también puede lograrse a través de la activación de Slt2/Mpk1 mediante shock térmico. Ambos tipos de activaciones (por feromona o alta temperatura) son proporcionales a la osmolaridad externa y dependen del gradiente químico de glicerol. Una consecuencia fisiológica de esta activación de HOG promovida por la vía PR es que las células en estas condiciones presentan una mejor capacidad de osmoadaptación. Finalmente, podemos agregar que los shocks hiperosmóticos inhiben a la vía PR durante la etapa de respuesta aguda, pero no hemos establecido aún los actores moleculares que median esta inhibición. Sin embargo, podemos descartar algunos componentes de la vía de HOG como Sho1, Ssk1 y Hog1. Para terminar, la alta osmolaridad, a largo plazo, en células ya adaptadas, cambia la dinámica de la respuesta de la vía PR reduciendo su sensibilidad a α factor. Esta reducción es proporcional a la osmolaridad externa. Esperamos que los resultados encontrados en este sistema biológico sean de utilidad, para pensar de una manera más integrativa, como se comporta la dinámica de la respuesta en un dado sistema frente a múltiples señales externas, de acuerdo a como el mismo las integra globalmente.

Abstract:
The main objective of this thesis was to study the interaction between MAPK signaling pathways in Saccharomyces cerevisiae. These pathways are represented in humans, were the malfunction of them can lead to pathologies such as cancer or developmental problems. The complexity of MAPK signaling circuits in mammalian cells difficult the understanding of how they integrate the signals activating them. As a means to solve this problem, one strategy is to analyze simpler biological systems that share properties with the more complex ones. In these sense, we ought to characterize thoroughly MAPK signaling pathways in a simple biological system, the yeast S. cerevisiae. In this thesis we decided to determine the points of information flow between the yeast "High Osmolarity" (HOG) and the "Pheromone Response" (PR) pathways, because they share components in their signaling cascades and there is controversy in how they interact. In addition to these, we studied these pathways in individual cells, stimulating them by controlling the stimulus doses and under a several experimental conditions. Finally, we measured the output of these pathways in a quantitative way, studying their temporal dynamics and analyzing the most number of possible readouts. Summing up the results obtained, we can say that, the HOG pathway does not present perfect adaptation as it was previously stated and it remains active in steady state. Its activation is higher the higher the external osmolarity and it also depends on the chemical gradient of glycerol. Besides, we see high variability in the HOG output of individual cells. At the level of interactions between the MAPK pathways, we determined that the PR pathway can activate the HOG pathway in cells adapted to high osmolarity. This complex activation requires the Cell Wall Integrity (CWI) MAPK Slt2/Mpk1 and the polarisome. This HOG activation occurs in pulses and presents high variability in single cells. The peaks of HOG activity coincide with PR induced morphogenetical events where Slt2/Mpk1 is activated. The PR pathway induces a glycerol efflux, which would be controlled by Slt2/Mpk1, and that would be the mechanism leading to HOG pathway activation. HOG induction can also be achieved through Slt2/Mpk1 heat shock activation. Both kinds of activations (by pheromone or high temperature) are proportional to the external osmolarity and depend on the glycerol chemical gradient. One physiological consequence of these PR promoted HOG activation is that the cells present a better osmoadaptation capacity in these conditions. Finally, we can add that hyperosmotic shocks inhibit PR pathway during the acute hyperosmotic phase, but we have not established yet the molecular actors that mediate this inhibition. However, we can rule out some of HOG pathway components like, Sho1, Ssk1 and Hog1. To finish, high osmolarity, at longer times in cells already adapted, changes the dynamics of PR response reducing its sensitivity to α factor. This reduction is proportional to the external osmolarity. We hope the results found in this biological system are helpful, to think in a more integrative way, how the output dynamics of a system behaves, facing multiple external signals, depending on how it integrates them globally.

Palmerio, Andrés Gabriel. "Maduración tardía del plumaje y costo reproductivo en el Jilguero Dorado Sicalis flaveola" (2012-07-11). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El estudio de las “historias de vida” comprende el balance entre las demandas energéticas que requieren los organismos para nacer, crecer hasta la madurez, reproducirse y sobrevivir. La mayoría de los estudios sobre la historia de vida y biología reproductiva de las aves se han realizado en el Hemisferio Norte donde habitan menos del 25 % de las especies del planeta. El Jilguero Dorado es un Passeriforme relativamente abundante en Argentina y poco estudiado; son frecuentemente capturados como aves de jaula y los machos de esta especie presentan maduración tardía del plumaje (MTP). Los objetivos de esta Tesis fueron determinar si existen diferencias en los caracteres de historia de vida relativos a los nidos de machos blancos y amarillos y, además, determinar mediante una manipulación, si los adultos disminuyen el esfuerzo reproductivo presente resguardando su supervivencia, o si aumentan el esfuerzo parental a costa de su propia supervivencia en relación a la MTP. El estudio se llevó a cabo en un sistema de cajas nido ubicado en el IIBInTeCh, Chascomús, Pcia. de Buenos Aires, entre los años 2005 y 2010. Se encontró que las hembras apareadas con machos amarillos resultaron ser significativamente más pesadas que aquellas apareadas con machos blancos así como el peso de sus huevos; la vida media de los machos reproductivos amarillos de Jilguero Dorado fue de 3.2 años y la de los machos reproductivos blancos fue 5 meses menor; las hembras manipuladas apareadas con machos blancos disminuyeron su peso un 10% más que los controles así como fue menor la duración de sus visitas de alimentación a los pichones; los pichones pertenecientes a nidos de hembras manipuladas apareadas con machos blancos presentaron una menor tasa de crecimiento y peso asintótico al abandonar el nido. Estos resultados apoyan la existencia de un apareamiento selectivo y en este caso, las hembras de menor calidad estarían obligadas a reproducirse con los machos blancos. Las respuestas encontradas en las variables analizadas de los machos blancos son idénticas a las de los machos amarillos en todos los aspectos analizados en este trabajo.

Abstract:
The study of "life history traits" comprises the balance between the energy required by organisms to born, grow to maturity, reproduce and survive. Most studies of life history traits and reproductive biology of birds have been conducted in the Northern Hemisphere, where less than 25% of the planet's species live. The Saffron Finch Sicalis flaveola is a relatively abundant but understudied species in Argentina; they are often captured as birds of cage and males present delayed plumage maturation. The goals of this Thesis were to determine whether the birds associated to nests held by yellow and white males differ at any life history trait and if, when handicapping one of the members of the white or yellow male’s pair, the adults reduce the reproductive effort and prioritize their own survival, or increase the parental effort at the expense of their survival, keeping in mind the fact the species shows delayed plumage maturation. The study was conducted in a nest box system located at the IIB-INTECH, Chascomús, Buenos Aires, between 2005 and 2010. We found that females mated with yellow males were significantly heavier than those paired with white males, and so were their eggs; the average life expectancy of reproductive yellow Saffron Finch males was 3.2 years and that of white reproductive males was 5 months shorter; manipulated females paired with white males were significantly lighter than females in the control group, and lost 10 % of their weight; their visits to the nestlings were also significantly shorter, and the nestlings belonging to these females had lower growth rate and asymptotic weight at the time they fledged from the nest. These results point at the existence of assortative mating: low-quality females would be accepted by younger, white males. However, white and yellow males did not differ on their life history traits and responses to the manipulation and were identical in all the aspects analyzed in this Thesis.

Sosa, Natalia. "Efecto de la trehalosa sobre la encapsulación de aromas cítricos por secado spray" (2012-07-02). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo fue estudiar la aplicación del azúcar trehalosa en la encapsulación de aromas apuntando a mejorar la calidad sensorial y la estabilidad física de aromas encapsulados por secado spray. Se prepararon formulaciones conteniendo trehalosa, sacarosa, mezclas de los azúcares con maltodextrina y almidones. Los volátiles fueron: etanol, citral y aceite esencial de naranja. Para los volátiles hidrofóbicos se prepararon emulsiones y se analizaron propiedades reológicas y de estabilidad. Se evaluaron propiedades físicas de los polvos. Se cuantificó la retención de volátiles y se realizó la evaluación sensorial de los aromas cítricos. La retención de citral encapsulado fue la misma para todas las formulaciones. Por el contrario, el perfil de volátiles obtenido en el caso del aceite de naranja fue muy diferente para las formulaciones conteniendo sacarosa o trehalosa. Estos resultados indican la importancia del azúcar seleccionado para el desarrollo de aromas encapsulados y la posibilidad de diseñar aromas en polvo diferentes a partir de un mismo aroma. El uso de la trehalosa como matriz en la encapsulación generó ventajas respecto al uso de la sacarosa, tales como incremento de la Tg del producto, y la capacidad de conservar el aroma característico del aceite de naranja en el almacenamiento.

Abstract:
The objective of the present work was to study the application of the sugar trehalose on the encapsulation of aromas, aiming on improving the sensorial quality and the physical stability of the spray-dried aromas. The formulations contained trehalose, sucrose, mixtures of sugars with maltodextrin and modified starches. The volatiles were: ethanol, citral and orange essential oil. In the case of hydrophobic volatiles, emulsions were prepared. Rheological properties and stability were analyzed. Physical properties of the powders were evaluated. Volatiles were quantified and sensorial evaluation was done for citric aromas. The encapsulated volatiles were retained differentially in the different. Citral retention was the same in all the analyzed formulations. The volatiles profile obtained for orange oil was very different for trehalose and sucrose formulations. These results indicate the relevance of the sugar selection for the development of encapsulated aromas, and the possibility of designing different powdered aromas from a single aroma. Also, we found that the use of trehalose as part of the carrier matrix for encapsulation showed advantages as compared to sucrose, higher Tg values were obtained, and the characteristic aroma of orange essential oil was maintained during storage.

Rey Vázquez, Graciela. "Espermatogénesis, ciclo reproductivo anual y parámetros hematológicos de Cichlasoma dimerus (Teleostei, Perciformes). Efecto de la exposición a 4-tert-octilfenol" (2012-06-28). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el presente trabajo se analizó primeramente la espermatogénesis y el ciclo reproductivo anual del pez Cichlasoma dimerus, un perciforme representativo de la ictio-fauna de la Cuenca del Río de La Plata. Los estudios realizados con microscopía óptica y electrónica permitieron determinar que los testículos pertenecen al tipo lobular irrestricto. La espermatogénesis es de tipo cística y se estudiaron las características de los distintos estadios de las células germinales durante este proceso, desde espermatogonia hasta espermatozoide. Los espermatozoides en esta especie corresponden a la categoría acuasperma anacrosomal tipo I y se determinó que son biflagelados, carácter excepcional entre los cíclidos. Se estableció que la estación de alta actividad reproductiva se extiende a lo largo de siete meses (desde septiembre hasta marzo) durante los cuales las puestas tienen lugar cada 29,4 ± 16,2 días. Se describieron los cambios del epitelio germinal a lo largo de todo el año, estableciéndose cinco clases reproductivas: proliferación, maduración temprana, media y tardía (final) y regresión. Además, se caracterizaron a nivel óptico y electrónico los distintos tipos celulares de la sangre y se determinaron los valores de referencia de los índices hematológicos (RGR, RGB, HTC, Hb, VCM, HCM, CHCM) de esta especie bajo condiciones estandarizadas. En una segunda etapa, utilizando métodos semiestáticos se evaluó el efecto de la exposición de C. dimerus a concentraciones subletales de octilfenol (OF), uno de los surfactantes más comúnmente utilizado, que puede contaminar el ambiente acuático. Se determinó en primer lugar la toxicidad aguda del compuesto y posteriormente, se realizaron ensayos de exposición subcrónica. Se observó que el OF tiene acción estrogénica consistente en la inducción de la síntesis de Vtg y daño en la morfología testicular que determina la infertilidad de los machos de esta especie. Por otra parte, produce estrés hemodinámico que lleva a anemia normocrómica, normocítica, con un aumento significativo de eritroblastos y presencia de eritrocitos amitóticos como patología eritrocítica. Todos los efectos resultaron ser dependientes de la concentración y reversibles tras un proceso de depuración.

Abstract:
The first step in the present study was the analysis of spermatogenesis and annual reproductive cycle in Cichlasoma dimerus, a typical perciform of the Río de la Plata basin ichthyiofauna. The studies performed under light and electron transmission microscopy revealed that the testicular structure corresponds to an unrestricted lobular type. Spermatogenesis is of cystic type and the characteristics of the different stages of the germ cells during this process, from spermatogonia to spermatozoa, were studied. Sperm in this species correspond to the anacrosomal type I aquasperm and they are biflagellate, an exceptional character among cichlids. It was established that the season of highest reproductive activity extends over seven months, from September to March, during which spawning took place on average every 29.4 ± 16.2 days. The changes that occur in the germinal epithelium throughout the year were described, determining five reproductive classes: proliferative, early, mid-, and late maturation and regression. The different blood cell types were characterized under light and electron microscopy, and reference values of the hematological indexes (RBC, WBC, HCT, Hb, MCV, MCH, MCHC) were determined for this species under standardized conditions. In a second step, under semistatic conditions, the effects of exposure of C. dimerus to sublethal concentrations of octylphenol (OP), one of the surfactants most widely used that can pollute the aquatic environment, were evaluated. First, the acute toxicity of OP was assessed, and afterwards subchronic essays were performed. It was observed that OP acts as a xenoestrogen, since there was Vtg synthesis in males and testicular damage which determined infertility. Besides, it produces hemodynamic stress that leads to normochromic and normocytic anemia, a significant increase of erythroblasts and amitotic erythrocytes as erythrocytic pathology. All effects were concentrationdependent and reverted after a depuration process.

Bertinetti, Brenda Verónica. "Búsqueda de agroquímicos naturales con potencial uso en agricultura sustentable a partir de cultivos de hongos" (2012-05-11). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis se detalla el aislamiento y la elucidación estructural de productos naturales a partir de cultivos de hongos, realizado mediante una búsqueda bioguiada utilizando ensayos de actividad antifúngica y antibiótica. También se describe la preparación y el estudio de la actividad en invernadero frente a hongos patógenos de soja, de una familia de compuestos derivados de un producto natural proveniente de un cultivo fúngico. Además, se presenta el estudio del comportamiento de esa familia de compuestos por espectrometría de masa, y el análisis de la presencia de determinados metabolitos de extractos fúngicos por HPLC-EM. Se trabajó con las especies fúngicas Penicillium canescens, Gliocladium catenulatum y Fusarium oxysporum. La especie Penicillium canescens se aisló de polen de colmenas ubicadas en el apiario del INTA (Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria) de la ciudad de Balcarce, Buenos Aires, Argentina. Las especies Gliocladium catenulatum y Fusarium oxysporum se aislaron de suelo de plantaciones de lechuga en Las Heras (Provincia de Buenos Aires). A partir de P. canescens se aislaron decetopiperazinas, pseurotina A y un tetrapéptido que no había sido descripto con anterioridad. Algunas de las dicetopiperazinas fueron responsables de la actividad antibiótica y el péptido fue responsable de la actividad antifúngica frente a Fusarium virguliforme. De G. catenulatum se aisló un nuevo metabolito 1H, 1ˈH-biindol junto con dos epipolitiodioxopiperazinas que habían sido aisladas previamente de una cepa marina de Gliocladium. Además, el compuesto 1H, 1ˈH-biindol se preparó mediante un camino sintético y mostró una actividad notable como antiparasitario frente a T. cruzi. De los compuestos indólicos sintéticos ensayados en experimentos de actividad en invernadero se obtuvieron muy buenos resultados con dos análogos que disminuyen la incidencia y la severidad del síndrome de muerte súbita en soja, comparado con un control. En los extractos de F. oxysporum se determinó la presencia de diversas ciclosporinas, además de tres depsipéptidos cíclicos, dos conocidos y uno no informado con anterioridad.

Abstract:
This PhD thesis details the isolation and structural characterization of natural products from fungi. The isolation was performed looking for antifungal and antibiotic compounds by bioguided assays. The preparation of a group of compounds related to a natural one isolated from a fungal strain and their activity against soybean fungi pathogens in greenhouse experiments are also described. In addition many compounds from the mentioned family were studied by high resolution mass spectrometry, and chemical diversity from fungal extracts was analyzed by HPLC-MS. The strains studied are Penicillium canescens, Gliocladium catenulatum and Fusarium oxysporum. Penicillium canescens strain was isolated from beehives pollen from INTA apiary in Balcarce, Buenos Aires, Argentina. Gliocladium catenulatum and Fusarium oxysporum strains were acquired from lettuce fields soil in Las Heras, Buenos Aires. Diketopiperazines, pseurotin A and a tetrapeptide were isolated from P. canescens. The tetrapeptide was unknown until now. Some diketopiperazines found were responsible for the antibiotic activity showed by the extract and the tetrapeptide showed antifungal activity against Fusarium virguliforme. G. catenulatum culture yielded a new metabolite 1H, 1ˈH-biindole and two epipolitiodioxopiperazines that have been isolated before from a marine strain of Gliocladium. Compound 1H, 1ˈH-biindole was prepared synthetically and showed interesting activity as antiparasitic against T. cruzi. Good results were obtained from greenhouse experiments with two indolic synthetic analogues which diminish incidence and severity of sudden death syndrome in soybean compared to a control compound. Several cyclosporines were found in F. oxysporum extracts apart from three cyclic depsipeptides, two already known and a new one.

Fava, Joaquín. "Anatomía aplicada al diseño de tecnologías de procesamiento mínimo en frutos (bayas) de Vaccinium corymbosum L. (Ericaceae), Solanum lycopersicum L. var. cerasiforme (Solanaceae) y Vitis labrusca L. (Vitaceae)" (2012-05-04). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La alta calidad de los frutos es una de las metas principales de la investigación actual en tecnologías postcosecha y de preservación. El diseño del procesamiento mínimo de arándanos, tomates cereza y uvas requiere, entre otros, el conocimiento de las alteraciones estructurales y ultraestructurales de células y tejidos debido a su influencia en las propiedades físico-químicas del fruto. El presente estudio examinó los principales cambios (micro-, ultra- y nano-) estructurales de la pared tangencial externa de la epidermis de frutos de arándano (Vaccinium corymbosum L.), tomate cereza (Solanum lycopersicum L. var. cerasiforme) y uva (Vitis labrusca L.) producidos por el tratamiento con peróxido de hidrógeno, la radiación UV-C, la aplicación de ultrasonido, la congelación y descongelación y el escaldado en vapor y su efecto en las propiedades mecánicas y ópticas. Se analizaron y discutieron las observaciones con microscopio óptico (MO), microscopio electrónico de barrido ambiental (MEBA), microscopio electrónico de transmisión (MET) y microscopio de fuerza atómica (MFA). Se evaluaron las características reológicas mediante ensayos de punción con una máquina de ensayos universales Instron y el color mediante los parámetros L*, a* y b* y las funciones C* y h* con un colorímetro. Cada tratamiento produjo en el epicarpo efectos estructurales específicos, que además dependieron del tipo de fruto. Los cambios observados afectaron las propiedades mecánicas de punción y el color de los frutos en diferente grado.

Abstract:
High quality of fruits is one of the main targets of post harvest and preservation research. The design of minimal processes for blueberries, cherry tomatoes, and grapefruits preservation requires, among others, the knowledge of structural and ultrastructural tissue and cell changes due to influence of physico-chemical properties of fruits. The present study examined the main structural (micro-, ultra-, and nano-) alterations occurred in the outer tangential epidermal cell wall of blueberries (Vaccinium corymbosum L.), cherry tomatoes (Solanum lycopersicum L. var. cerasiforme), and grapefruits (Vitis labrusca L.) due to hydrogen peroxide, UV-C irradiation, vapor blanching, freezing-thawing and ultrasound treatments, and their effect on the optical and mechanical properties. Light microscope (LM), environmental scanning electron microscope (ESEM), transmission electron microscope (TEM) and atomic force microscope (AFM) observations were analyzed and discussed. Rheological properties were evaluated by puncture test with an universal testing machine, and color by L*, a* and b* parameters, and C* and h* functions with a colorimeter. Each treatment produced specific epicarp effects depending of fruit type. These changes affected the mechanical properties, shape, brigthness, colour and the integrity of the fruit in different degree.

Labarque, Facundo Martín. "Evaluación de identificaciones taxonómicas mediante código de barras del ADN en un grupo tropical megadiverso" (2012-04-11). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo principal del proyecto fue evaluar las ventajas y limitaciones de los códigos de barras del ADN y de los métodos de la taxonomía clásica al estudiar la diversidad de arañas en los bosques montanos de Panamá. Se procesaron 29961 especímenes de arañas de 49 familias, de los cuales el 60% son juveniles, se secuenciaron 3553 fragmentos de cox1 y se generaron las bases de datos morfológica y molecular respectivas. Se identificaron los especímenes mediante tres estrategias concatenadas. Primero una identificación rápida utilizando caracteres somáticos externos, seguida por una identificación de grupos moleculares obtenidos con el modelo Generalizado Mixto de Yule y Coalescencia, finalizando con una identificación integrativa fruto de la comparación recíproca de las anteriores y del aporte de la disección de los órganos sexuales que son críticos a la hora de delimitar especies en artrópodos. Se identificaron 548 especies de manera integrativa, se estimó la diversidad alfa y beta según cada estrategia con los individuos adultos y, por primera vez, con los estadios inmaduros identificados molecularmente; se realizó una revisión taxonómica integrada de la familia Theridiosomatidae con el aporte de dos géneros nuevos y 27 especies nuevas y se asociaron los sacos de huevos con sus adultos mediante los códigos de barra, y se evaluaron las metodologías de colecta. Los códigos de barra sirvieron para estimar la diversidad, asociar diferentes estadios entre sí como machos y hembras y juveniles con sus adultos, revelar haplotipos endémicos, y sugirieron especies crípticas y nuevas especies putativas a partir de los estadios inmaduros no encontrados entre los adultos.

Abstract:
The main goal of the project was to evaluate the advantages and limitations of DNA barcoding and traditional taxonomy to study the spider diversity in the montane forests of Panama. We have sorted 29961 specimens of 49 families, 60% of which were immature, and we have sequenced 3553 cox1 fragments, to generate morphological and molecular data bases. Specimens were identified using three linked approaches. First, a fast identification approach using external somatic characters, followed by a General Mixed Yule‐Coalescent molecular cluster identification, ending with the reciprocal illumination of both previous approaches plus a close examination of sexual organs, known as critic characters to delimit arthropods species, called integrative identification. We have identified 548 integrative species, we have estimated alpha and beta diversity with adults using each identification approach and, for the first time, we also have used immature specimens. We have done a taxonomic integrative revision of the family Theridiosomatidae describing two new genera and 27 new species plus spider egg‐sacs association with their species using DNA barcodes, and we have evaluated collecting methods. DNA barcodes can be used to estimate diversity, to associate different life and gender stages such as immature to mature and male to female specimens, and to reveal endemic haplotypes. DNA barcodes also suggest cryptic species, and putative new species from immature specimens not found among adults.

Petroni, Agustín. "Procesamiento cortical rápido de estímulos emocionales y toma de decisiones en humanos" (2012-03-30). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La percepción de rostros depende de mecanismos complejos que involucran procesamiento paralelo y masivo, a un costo computacional alto. Existe un área cerebral principalmente implicada en el procesamiento esctructural de rostros, el área fusiforme, localizada en la región ventral de los lóbulos occipitales. El área fusiforme está funcionalmente conectada con la amígdala, lo que sugiere la existencia de un circuito involucrado en la extracción rápida de rasgos emocionales. Bajo el postulado teórico de que este circuito estaría embebido en una red extensa, sustrato de cognición compleja necesaria para la interacción social, incluyendo teoría de la mente, testeamos la hipótesis que establece que potenciales corticales modulados por contenido emocional de caras predicen habilidades sociales de los individuos. Nuestros resultados sugieren una asociación directa entre potenciales cerebrales modulados por emociones faciales y cognición social, medida con tres tareas. Testeamos el mismo paradigma experimental en dos grupos de pacientes psiquiátricos que presentan déficits emocionales y ejecutivos: Trastorno por déficit de atención con hiperactividad – y síndrome bipolar. Ambos desórdenes mostraron una ausencia de modulación cortical emocional, y los pacientes bipolares mostraron que la variabilidad en la modulación de componentes en respuesta a emociones faciales es explicada por el estado emocional del paciente (para índices de manía y depresión). Finalmente, mostramos que estos pacientes presentan deficiencias en el procesamiento cortical de recompensas monetarias en una tarea de toma de decisión. La modulación de los componentes electroencefalográficos en respuesta a recompensas mostró una asociación con tareas de cognición compleja.

Abstract:
Face perception relies on a complex mechanism that involves massive parallel processing with high computational cost. The brain region implicated in the structural processing of faces in humans is the fusiform face area, located in the ventral part of the occipital lobes. The fusiform face area is functionally connected with the amygdala, which suggests a circuit involved in the rapid extraction of emotional features. Under the theoretical postulate that this circuit is embedded in a more extensive network that supports complex cognition necessary for social interaction including theory of mind, we tested the hypothesis that early cortical potentials modulated by emotional facial stimuli will predict individual social skills. Our results suggest a direct association between brain potentials modulated by facial emotions and social cognition, measured by three different tasks. We tested the same paradigm in two psychiatric disorders that present emotional and executive deficits: bipolar disorder and Attention-Deficit Hyperactivity Disorder (ADHD). Both disorders showed an absence of cortical emotional modulation, and bipolars showed that the variability in the emotional modulation is explained by the emotional state of the patient (for both maniac and depression scores). Finally, we showed that these patients have deficiencies in the processing of monetary reward under a decision making task. Importantly, the feedback modulation is associated to complex cognition.

Agudelo Laverde, Lina Marcela. "Interacciones agua-sólido en frutas liofilizadas y sus consecuencias sobre aspectos estructurales, atributos cromáticos y distribución espacial de la luz" (2012-03-30). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los aspectos físicos, químicos y microbiológicos que definen la calidad de los alimentos están relacionados con la cantidad, la ubicación y el estado del agua en los mismos. El objetivo de este trabajo fue estudiar el impacto de las interacciones agua-sólido sobre las propiedades estructurales, atributos cromáticos y la distribución espacial de la luz en frutas liofilizadas, y su relación con su estado físico y la ocurrencia de reacciones químicas. Se analizaron las características de sorción de agua, las temperaturas de transición vítrea y la movilidad molecular. Se estudió el efecto del secado, la humidificación y el tratamiento térmico sobre los cambios estructurales y de color por degradación de pigmentos naturales y/o la generación de productos pardos. La técnica de análisis de imágenes permitió el estudio de las características estructurales y ópticas de materiales con distribución homogénea o heterogénea de color de forma sencilla. El estudio integral de las propiedades de sorción de agua, temperaturas de transición vítrea en función de la fracción de agua y de la movilidad molecular permitió explicar el efecto del agua sobre el colapso estructural, la cinética de reacción de pardeamiento, la perdida de pigmento y el desarrollo de transparencia en frutas liofilizadas.

Abstract:
Physical, chemical and microbiological aspects that define food quality are related to the amount, location and state of water. The objective of the present work was to study the impact of the water-solids interactions on structural aspects, chromatic attributes and spatial distribution of light in freeze-dried fruits, and the relation with the physical state and the occurrence of chemical reactions. Water sorption properties, glass transition temperatures and molecular mobility were analyzed. The effect of drying, humidification and thermal treatment were studied in relation to structural changes and color changes due to natural pigments degradation and/or generation of brown products. The images analysis technique allowed analyzing structural and optical characteristics of materials bearing homogeneous or heterogeneous color distribution in a simple way. The integral study of water sorption properties, glass transition temperatures as a function of water fraction, and of the molecular mobility explained the effect of water on structural collapse, the kinetics of browning reactions, the loss of pigments and the development of transparency in dehydrated fruits.

Benites, María del Pilar. "Análisis de las diferencias de coloración y vocalizaciones en especies de aves cercanamente emparentadas y simpátricas, y su importancia como mecanismos de aislamiento reproductivo" (2012-03-29). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las diferencias interespecíficas en caracteres que evolucionaron a través de procesos de selección sexual pueden ser importantes barreras para mantener el aislamiento reproductivo entre especies cercanamente emparentadas viviendo en simpatría. Se estudiaron en este trabajo las diferencias existentes en el canto y la coloración de especies cercanamente emparentadas y simpátricas, evaluando la importancia que estas diferencias puedan tener en mantener a las especies aisladas. Estos se realizó sobre dos grupos de aves presentes en Argentina, donde coexisten en parte de su rango de distribución: los Pechos colorados (Sturnella superciliaris, S. defilippii y S. loyca) y los Capuchinos del sur (Sporophila hypoxantha, S. hypochroma, S. cinnamomea, S. ruficollis, S. palustris, S. zelichi y S. bouvreuil). La coloración del plumaje se medió a través de espectrofotometría de reflectancia y un modelo fisiológico de la visión de las aves, y las diferencias en el canto se analizaron midiendo variables directamente sobre los espectrogramas de sonido. Se encontraron diferencias consistentes en la coloración y en el canto entre las especies de estos dos grupos. Las diferencias en la coloración involucraron tanto la parte visible como la UV del espectro, y son potencialmente percibidas por las aves, ya que superan ampliamente el umbral de discriminabilidad de dos colores en el modelo perceptual. Las diferencias en el canto involucran parámetros estructurales, temporales y de frecuencia. Experimentos de playback a campo diseñados para analizar la respuesta al canto en machos de S. hypoxantha y S. palustris mostraron que estas especies responden diferencialmente frente al canto homoespecífico y al canto heteroespecífico, virtualmente ignorando a este último. Esto muestra que las diferencias interespecíficas en el canto encontradas son percibidas como tales por los receptores, y sugiere la posible función del canto en el reconocimiento de especies en este grupo. Se compararon poblaciones simpátricas y alopátricas de Pechos colorados y de Capuchinos del sur, en cuanto a variables del canto y la coloración, investigando la posibilidad que las diferencias en estos caracteres hayan evolucionado para mantener a las especies separadas. Se encontraron ciertos indicios de desplazamiento de caracteres de canto y coloración; aún así, los mismos fueron escasos y por momentos contradictorios. Finalmente, discutimos los resultados obtenidos, evaluando la importancia que las diferencias interespecíficas en la coloración y el canto puedan tener como mecanismos de aislamiento reproductivo en estas especies.

Abstract:
Interspecific differences in characters that have evolved through sexual selection processes may be important barrier that keep reproductive isolation among closely related species that occur in sympatry. In this study, existing differences in the song and color of closely related sympatric bird species was analyzed, evaluating the importance that these differences might have in maintaining species apart. This was done on two groups of passerines birds present in Argentina that are sympatric in part of their distribution range: the red breasted meadowlarks (Sturnella superciliaris, S. defilippii y S. loyca) and the southern Capuchinos (Sporophila hypoxantha, S. hypochroma, S. cinnamomea, S. ruficollis, S. palustris, S. zelichi y S. bouvreuil). In these groups we studied plumage coloration through spectrophotometry and the use of a physiological model of avian visual system, and we studied differences in song measuring variables directly on the sound spectrograms. Consistent differences in coloration and song were found in these two groups. Color differences involved not only the visual part of the wavelength spectrum but also the UV, and are potentially discernable by birds as values in avian visual space were considerably higher than the threshold for color discrimination. Differences in song involved structural, temporal and frequency parameters. Playback field experiments design to test the response to homospecific and to heterospecific song in males of S. hypoxantha y S. palustris show that these species respond differentially to homospecific and to heterospecific song, virtually ignoring the latter. This shows that the differences in song found are perceived as such by the receptors, and suggests that song might function in species recognition in this group. Sympatric and allopatric populations of red breasted meadowlarks and southern Capuchinos were compared in song and coloration, studying the possibility that these differences have evolved as mechanism that maintain species apart. Some evidence of character displacement in song and coloration was found; yet, this evidence were weak and in some cases, contradictory. Finally, we discuss the results obtained, evaluating the importance that the differences in color and song might have as reproductive isolation mechanism in these species.

Villagra, Mariana. "Plasticidad morfológica y fisológica de especies arbóreas del Bosque Atlántico en respuesta a cambios en la disponibilidad de luz y nutrientes" (2012-03-28). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el presente trabajo se evaluaron los efectos de la disponibilidad de luz y de nutrientes sobre el crecimiento y supervivencia de renovales arbóreos del Bosque Atlántico en Misiones, Argentina. Para ello se realizó un experimento de fertilización a largo plazo en el sotobosque (baja radiación solar) y en claros naturales (alta radiación solar). Luego de cuatro años se investigaron también los efectos de la adición de N+P sobre características fisiológicas involucradas en el transporte de agua. Los resultados indican que la disponibilidad de luz sería un factor más limitante de la supervivencia, el crecimiento y la capacidad fotosintética de las especies estudiadas que la disponibilidad de nutrientes, aunque dependiendo del grado de tolerancia a la sombra de las especies, los renovales pudieron responder a la adición de nutrientes aún bajo condiciones de baja radiación. La fertilización y el grado de tolerancia a la sombra de las especies determinaron cambios en la longevidad foliar, el área foliar específica, el daño foliar por herbivoría, la densidad de la madera y la vulnerabilidad a la cavitación de las ramas terminales. Las especies estudiadas fueron capaces de ajustar la arquitectura hidráulica a la adición de N+P a nivel de las ramas terminales, y no así a nivel de hojas, incrementando por ejemplo la resistencia a la cavitación del xilema. La vulnerabilidad a la disfunción hidráulica de hojas y de ramas terminales fue independiente. Además, no se encontró un compromiso entre la eficiencia en el transporte de agua y la vulnerabilidad a la cavitación. Finalmente, tanto el N como el P limitarían el crecimiento de estas especies en los bosques del norte de Misiones.

Abstract:
The effects of light and nutrient availability on growth and survival of tree seedlings were evaluated in the Atlantic Forest of Misiones, Argentina. A long-term fertilization experiment was carried out in the understory (low solar radiation) and in natural gaps (high solar radiation). After four years the effects of N+P addition on physiological traits involved in the water transport system were also investigated. The results indicate that light availability would be a major factor limiting the survival, growth and photosynthetic capacity of the species studied than nutrient availability, although depending on species shade tolerance, plants were able to respond to nutrient addition even under low light availability. Fertilization and species shade tolerance determined changes in leaf lifespan, specific leaf area, leaf herbivory damage, wood density and vulnerability to cavitation of terminal branches. The species studied were able to adjust the hydraulic architecture to N+P addition in terminal branches, but not in leaves, for example, increasing the resistance to xylem cavitation. Vulnerability to hydraulic dysfunction in leaves and terminal branches was independent. In addition, a trade-off between the efficiency of the water transport system and vulnerability to cavitation was not observed. Finally, both N and P limit the growth of these species in northern forests of Misiones.

Vicchi, Leonardo H.. "Sobre la valuación de derivados de varianza a través de métodos de Monte Carlo eficientes" (2012-03-27). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis, se estudian contratos financieros sobre varianza realizada. Un método eficiente de Monte Carlo es desarrollado bajo un modelo general en el que los retornos del activo considerado vienen dados por cambios aleatorios modulados por un proceso de volatilidad estocástica. La varianza realizada es la suma de los cuadrados de los retornos diarios, que dependen de la secuencia de la serie de cambios en el activo y del camino realizado por el proceso de volatilidad. El precio del derivado se ve representado como una integral en un elevado número de dimensiones sobre las fuentes fundamentales de incertidumbre. Identificamos una variedad de baja dimensión, definida por la suma de los cuadrados de los cambios en el activo y la volatilidad, que son los que conducen la estocasticidad en el proceso de varianza realizada. El precio del contrato es calculado por medio de una combinación de integración deteminística sobre esta variedad de baja dimensión (implmentado a travéss de una estratificación precisa o cuadratura), junto con un sampleo de Monte Carlo Condicional en las restantes dimensiones. Concentrar el esfuerzo computacional en la variedad de baja dimensión conduce a un estimador con menor varianza que en un Monte Carlo estándar. Bajo un supuesto de independencia, obtenemos resultados teóricos aproximados que cuantifican este efecto para una clase de funciones de pago no lineales. Verificamos numéricamente que para los modelos de Hull-White y Heston, el algoritmo funciona significativamente mejor que un Monte Carlo tradicional dado un costo computacional fijo.

Abstract:
In this thesis, financial contracts on realized variance are studied. Efficient Monte Carlo method for their valuation is developed under a general model in which asset returns are random shocks modulated by a stochastic volatility process. Realized variance is the sum of squared daily returns, depending on the sequence of squared shocks to the asset and the realized path of the volatility process. The derivative price is represented as a high dimensional integral over the fundamental sources of randomness. We identify a low dimensional manifold, defined by the sum of squared shocks to the asset and the path average of the modulating variance process, that drives the uncertainty in realized variance. We compute the contract price by combining precise integration over this low dimensional manifold, implemented as fine stratification or deterministic quadrature, with conditional Monte Carlo sampling on the remaining dimensions. Focusing computational effort on the low dimensional manifold leads to an estimator with lower variance than standard Monte Carlo. We derive, under an independence assumption, approximate theoretical results that quantify this effect for a class of nonlinear payoffs. We verify numerically that for the Hull-White and Heston models the algorithm performs significantly better than standard Monte Carlo for fixed computational budgets.

González, Laura Elisabeth. "Interacción de la inmunoglobulinas G de pacientes con Esclerosis Lateral Amiotrófica con la placa neuromuscular y su relación con los canales de calcio de tipo P/Q" (2012-03-27). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La Esclerosis Lateral Amiotrófica (ELA) es una enfermedad neurodegenerativa de motoneuronas. Se encuentra mayormente asociada a una forma esporádica de etiología desconocida. Numerosas evidencias favorecen a la auto-inmunidad como uno de los potenciales contribuyentes a esta patología. Para estudiar los posibles antígenos que interactúan con las IgGs de pacientes con ELA esporádica (IgGs-ELA), evaluamos su inmuno-reactividad hacia la placa neuromuscular (PNM), comparando animales normales con aquellos carentes de la subunidad formadora del poro del canal de calcio (Ca2+) de tipo P/Q (CaV2.1). Las IgGs-ELA mostraron una importante reactividad hacia la PNM de ratones CaV2.1+/+ e incrementaron la frecuencia de potenciales de placa miniatura (MEPPs). Ambos parámetros disminuyeron significativamente al evaluar tejido de animales CaV2.1-/-. Ensayos de inmuno-precipitación y western blot indican que el blanco de los anticuerpos no sería el canal mismo sino una proteína asociada. Estudios de proteómica sugieren a la proteína BASP-1 (proteína ácida soluble de cerebro-1) como un candidato a evaluar en forma más detallada en fututos ensayos. Nuestros resultados adicionan evidencias a favor de la auto-inmunidad como uno de los posibles mecanismos contribuyentes a la patología de ELA. También sugieren que los auto-anticuerpos en el suero de una serie de pacientes interactúan con proteínas cuya presencia en la PNM disminuye cuando los canales de Ca2+ de tipo P/Q se encuentran ausentes.

Abstract:
Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS) is a motoneuron neurodegenerative disease. It is primarily associated with a sporadic form of unknown etiology. Several pieces of evidence favor auto-immunity as a potential contributor to this pathology. To gain understanding concerning possible antigens interacting with IgGs from sporadic ALS patients (ALS-IgGs), we studied immuno-reactivity against the neuromuscular junction (NMJ) of mice with and without the pore-forming subunit of the P/Q-type calcium (Ca2+) channel (CaV2.1). ALS-IgGs showed a strong reactivity against NMJs of WT diaphragms and increased the miniature end-plate potential (MEPP) frequency. Both parameters were significantly diminished when evaluating tissue from CaV2.1-/- animals. Immuno-precipitation and western blot assays indicate that antibody target would not be the channel itself but an associated protein. Proteomic studies suggest BASP-1 (brain acid soluble protein-1) as a candidate to evaluate in more detail in future assays. Our findings add further evidence supporting auto-immunity as one of the possible mechanisms contributing to ALS pathology. They also suggest that serum auto-antibodies in a subset of ALS patients would interact with NMJ proteins downregulated when P/Q-type Ca2+ channels are absent.

Bonifazi, Evelyn Lucía. "Síntesis de naftoquinonas relacionadas a lapachol y ß-lapachona. Evaluación como agentes antitumorales" (2012-03-27). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Este trabajo de tesis describe la síntesis de naftoquinonas relacionadas a las quinonas naturales lapachol y β-lapachona, que presentan una amplia variedad de actividades biológicas entre las cuales se destaca su actividad antitumoral. El fin fue lograr compuestos con acción citotóxica mejorada y poder determinar los requerimientos estructurales de este tipo de quinonas, para facilitar así el racional desarrollo de nuevos compuestos específicos. Se llevó a cabo la síntesis de 1,2 y 1,4-naftoquinonas dihidropirano y dihidrofurano con modificaciones en el anillo aromático, principalmente con la introducción de un grupo hidroxilo. En primer lugar se obtuvieron derivados hidroxilados de lapachol y dunniol, para luego mediante reacciones de ciclación adecuadas obtener las naftoquinonas tricíclicas deseadas. Se exploraron distintas metodologías para lograr una síntesis más eficiente de los hidroxilapacholes de interés. Con el fin de sintetizar el derivado 10-hidroxi-β-lapachona mediante la ciclación de 5-hidroxilapachol en medio ácido, se realizó una amplia búsqueda de condiciones, que luego fue extendida hacia la síntesis eficiente de derivados de β- lapachona sustituidos en el anillo aromático. En dicho contexto se ensayó la reacción de ciclación en distintas condiciones ácidas de derivados de lapachol sustituidos en C-5 por diferentes grupos funcionales, con el fin de esclarecer la influencia de dichos sustituyentes y del ácido utilizado en los productos obtenidos. Los compuestos sintetizados en esta tesis fueron evaluados como agentes antiproliferativos contra un panel representativo de cuatro líneas celulares de tumores sólidos humanos. En función de la actividad biológica se establecieron relaciones de estructura-actividad para el diseño y síntesis de nuevos compuestos con actividad mejorada. El compuesto 7-hidroxi-β-lapachona resultó ser el más activo presentando mejor actividad que el compuesto líder β-lapachona.

Abstract:
This thesis describes the synthesis of naphthoquinones related to the natural quinones β-lapachone and lapachol, featuring a wide variety of biological activities among which highlights its antitumor activity. The aim was to obtain compounds with enhanced cytotoxic activity and to shed light on the structural requirements of these quinones, thereby facilitating the rational development of new specific compounds. The synthesis of 1,2-and 1,4-naphthoquinones fused to dihydropyran and dihydrofuran rings carrying modifications on the aromatic ring, mostly the introduction of a hydroxyl group, was performed. First hydroxylated derivatives of dunniol and lapachol were obtained and then, by appropriate cyclization reactions, the desired tricyclic naphthoquinones were synthesized. Different methodologies were explored to achieve a more efficient synthesis of hydroxylapachol analogues. In order to synthesize 10-hydroxy-β-lapachone by cyclization of 5- hydroxylapachol in acid media, an extensive search of reaction conditions was carried out, which was later extended for the efficient synthesis of β-lapachone derivatives substituted on the aromatic ring. In this context the cyclization reaction of lapachol derivatives substituted at C-5 by different moieties, was tested under different acidic conditions in order to elucidate the influence of these substituents and the acid employed. The compounds obtained in this thesis were evaluated as anti-proliferative agents against a representative panel of four cell lines of human solid tumors. According to the biological activity, structure-activity relationships were established aimed at the design and synthesis of new compounds with improved activity. The compound 7-hydroxy-β-lapachone was the most active showing better activity than the lead compound β-lapachone.

Ricci, Analía Gabriela. "Estudio de nuevas terapias naturales y antiangiogénicas para el tratamiento de la endometriosis" (2012-03-26). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La endometriosis se define como la presencia de tejido endometrial fuera de la cavidad uterina y sus principales síntomas asociados son el dolor y la infertilidad. Las terapias médicas disponibles actualmente resultan insuficientes debido a las altas recidivas de la enfermedad y los efectos adversos que generan. Asimismo, en los últimos años, se ha propuesto a los inhibidores de la angiogénesis como posible alternativa terapéutica, así como también el uso de compuestos naturales presentes en alimentos que formen parte de nuestra dieta. El objetivo general de esta tesis consistió en evaluar el efecto de un agente antiangiogénico, el bevacizumab, y de dos polifenoles naturales, el resveratrol y el galato de epigalocatequina (EGCG); sobre el crecimiento de lesiones endometriósicas en un modelo murino de endometriosis. Asimismo, se estudió el efecto in vitro de los polifenoles sobre la supervivencia de células epiteliales de endometrio eutópico provenientes de pacientes con endometriosis y mujeres controles. Nuestros resultados sugieren que el resveratrol y el EGCG tendrían un efecto inhibidor del crecimiento del endometrio ectópico, regulando los niveles de apoptosis y proliferación celular, así como la vascularización de la lesión endometriósica. El bevacizumab también mostró ser efectivo en la inhibición de la endometriosis en el modelo murino. No obstante, es importante considerar sus posibles efectos secundarios y su costo como tratamiento. Siendo así, sugerimos que el resveratrol y el EGCG serían una opción terapéutica promisoria. Los resultados obtenidos en esta tesis avalan continuar investigando estos compuestos naturales para poder definir los mecanismos de acción que participan en el efecto inhibitorio observado, y determinar también las concentraciones plasmáticas efectivas en pacientes para poder esclarecer su potencial utilidad como agentes preventivos en el tratamiento de la endometriosis.

Abstract:
Endometriosis is defined as the presence of endometrial tissue outside the uterine cavity being its main associated symptoms, pain and infertility. Medical therapies available up to date are unsatisfactory due to their adverse effects and the frequent pathology recurrences. In the last few years, antiangiogenic agents and several natural compounds present in different dietary sources have been proposed as a potent alternative therapy. Given this scenario, the general objective of the present thesis was to evaluate the effect of bevacizumab, known for its antiangiogenic properties, as well as the effect of two natural polyphenols, resveratrol and epigallocatechin-3-gallate (EGCG), on the growth of endometriotic lesions in a mouse model of endometriosis surgically induced. Moreover, the effect of both polyphenols on the survival of epithelial endometrial cells from endometriosis patients and control subjects was evaluated in vitro. Our results suggest that resveratrol and EGCG would have a repressive effect on endometriotic growth, by increasing apoptosis and reducing cell proliferation and vascularization within the epithelial fraction of the endometriotic lesion. Bevacizumab was also effective in the inhibition of endometriosis development in the mouse model. Nevertheless, it is important to take into account its adverse effects as well as its cost. Based on these data, we propose that resveratrol and EGCG become a promising therapeutic option. Our results support to keep ongoing with the research in order to elucidate the mechanisms of action involved in the observed inhibitory effects, and determine the effective doses for patients to clarify the usefulness of these agents in endometriosis treatment.

Baldoni, Luciana. "Herramientas sintéticas para la caracterización de galactofuranosiltransferasas y galactofuranosidasas. Glicosidaciones via ioduros de D-galactofuranosilo" (2012-03-23). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La síntesis de oligosacáridos y glicoconjugados con unidades de Dgalactofuranosa (D-Galf) es un área de investigación activa, ya que dicho azúcar se encuentra en glicoconjugados de bacterias, hongos y parásitos, muchos de ellos patógenos, y no se presenta en eucariotas superiores. Dado que en muchos casos se ha demostrado que las unidades de D-Galf son esenciales para la supervivencia o virulencia de los microorganismos mencionados, los glicoconjugados y oligosacáridos sintéticos que contienen D-Galf son herramientas valiosas para la elucidación de los mecanismos de acción de las enzimas relacionadas con la glicobiología de este azúcar, y para la identificación y el diseño de nuevos agentes terapéuticos. Sin embargo, a pesar de las diversas estrategias que se han desarrollado para la obtención de precursores de D-Galf y de los distintos métodos de glicosidación descriptos para la síntesis de oligogalactofuranósidos, aún es necesario el desarrollo de nuevos precursores de estas unidades, de donores de galactofuranosilo y de nuevas metodologías de glicosidación eficientes. En este trabajo de Tesis, se desarrolló la síntesis de per-O-tert-butildimetilsilil-β-Dgalactofuranosa como un nuevo precursor de unidades de D-galactofuranosilo, y se estudió la reacción de O-glicosidación de este derivado por activación in situ como ioduro de glicosilo, constituyéndose en la primera referencia en la literatura sobre el uso de ioduros de D-Galf. Se evaluó la eficiencia de este método de glicosidación para la obtención de diferentes precursores de disacáridos de relevancia biológica. Posteriormente, se extendió el estudio de la reacción de glicosidación de per-Otert- butildimetilsilil-β-D-galactofuranosa via ioduro de glicosilo a la síntesis de C- y Sglicósidos y de derivados nitrogenados, y se investigó la reacción de glicosidación via ioduros a partir de donores peracilados.

Abstract:
The synthesis of D-galactofuranose (D-Galf) containing oligosaccharides and glycoconjugates is an area of active investigation, since this sugar is present in glycoconjugates of bacteria, fungi and parasites, many of them pathogenic, but is absent in higher eukaryotes. Given the fact that in many cases the D-Galf units are essential for the survival or virulence of the mentioned microorganisms, synthetic D-Galf containing oligosaccharides and glycoconjugates are valuable tools for the elucidation of the action mechanisms of the enzymes related to the glycobiology of this sugar, and for the identification and design of new therapeutic agents. However, despite the varied strategies developed for obtaining D-Galf precursors and the several glycosylation methods described for oligogalactofuranosides synthesis, it is still necessary to develop new precursors of these units and of galactofuranosyl donors, as well as new efficient glycosylation methodologies. In this Thesis, the synthesis of per-O-tert-butyldimethylsilyl-β-D-galactofuranose as a new precursor of D-galactofuranosyl units has been developed, and the Oglycosylation reaction of this derivative activated in situ as glycosyl iodide has been studied. This is the first time that this rather unstable intermediate is employed in glycosylation reactions. The efficiency of the glycosylating method for obtaining different precursors of disaccharides of biological relevance has been evaluated. The study of the glycosylation reaction of per-O-tert-butyldimethylsilyl-β-Dgalactofuranose via galactofuranosyl iodide has been extended to C- and S-glycosides and nitrogenated derivatives synthesis, and the glycosylation reaction via iodides from peracylated donors has been investigated.

Alberico, Natalia Andrea. "Sistemática y biogeografía del orden Cumacea (Crustacea: Peracarida) del Mar Argentino" (2012-03-23). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El orden Cumacea (Peracarida) agrupa más de 1.600 especies. Sin embargo, el conocimiento de los cumáceos del Mar Argentino es incompleto. El objetivo principal de esta tesis doctoral es avanzar en el estudio de dicha fauna. Se analizaron 156 muestras bentónicas recolectadas desde Uruguay hasta Tierra del Fuego (entre 2 y 150 m). Se identificaron 36 entidades taxonómicas, 4 familias y 12 géneros; 11 especies resultaron nuevas para la ciencia. La familia Diastylidae fue la más diversa y la mejor representada con 19 entidades taxonómicas pertenecientes a los géneros Anchistylis, Diastylis, Ekleptostylis, Makrokylindrus y Vemakylindrus. Se cita por primera vez al género Vemakylindrus para el área, y se extiende el intervalo de distribución de numerosas especies. Se describen cinco nuevas especies, Diastylis fabrizioi n. sp., D. sexpectinata n. sp., Diastylis n. sp. B, D. andeepae n. sp. y D. catalinae n. sp., las dos últimas del Mar de Weddell. Además, se completan las descripciones de: Diastylis hammoniae, D. planifrons, D. sympterygiae y D. geocostae. Se propone la sinonimia de Leptostylis (?) mancoides con D. hammoniae, y Diastylis manca es tratada como species inquirenda. Se confeccionan claves dicotómicas para separar las familias, géneros y las especies del gro. Diastylis del Mar Argentino. Se describe al copépodo nicothoideo Homoeoscelis meridionalis n. sp., que infesta las cámaras branquiales de Diastylis fabrizioi y D. planifrons, siendo este el primer registro del gro. Homoeoscelis para el Hemisferio Sur. La nueva especie se compara con H. minuta y H. frigida, y se presentan datos biológicos sobre esta asociación parásito-hospedador. Por último se da a conocer un listado de todas las especies del orden reportadas para el Mar Argentino, y se estudian sus afinidades faunísticas a través de la aplicación del análisis cluster a datos de presencia/ausencia, utilizando el índice de Sørensen (programa PRIMER v.5). Estos análisis permitieron reconocer las dos provincias biogeográficas de la plataforma argentina: argentina y magallánica. Las islas Georgias del Sur mostraron una baja afinidad con las localidades de la provincia biogeográfica magallánica.

Abstract:
The order Cumacea (Peracarida) comprises over 1.600 species. However, our knowledge of the fauna from the Argentine Sea is still incomplete. Therefore, the aim of the present thesis is to improve the taxonomy and biogeography of the cumaceans from Argentina. Approximately 153 benthic samples collected from Uruguay to Tierra del Fuego (2-150 m) were analyzed. As many as 36 nominal species, 4 families and 12 genera were identified, 11 species were new to science. The family Diastylidae presented not only the highest diversity but also the largest abundance. A total of 19 species belonging to the genera Anchistylis, Diastylis, Ekleptostylis, Makrokylindrus and Vemakylindrus were identified. The genus Vemakylindrus is first recorded from Argentina. The range of distribution of several species is extended. Five new species were fully described: Diastylis fabrizioi n. sp., D. sexpectinata n. sp., Diastylis n. sp. B, D. andeepae n. sp. and D. catalinae n. sp., the last two from the Weddell Sea. The descriptions of other four diastylids are completed: Diastylis hammoniae, D. planifrons, D. sympterygiae and D. geocostae. Diastylis hammoniae is redescribed based on its type material, the synonymy of Leptostylis (?) mancoides with Diastylis hammoniae is proposed and D. manca is treated as species inquirenda. Identification keys to separate the families, genera and all the species of the genus Diastylis known from Argentina are presented. The nicothoid copepod Homoeoscelis meridionalis n. sp. is fully described. It was found infesting the branquial chambers of Diastylis fabrizioi and D. planifrons. This is the first record of de genus Homoeoscelis from the Southern Hemisphere. The new species is compared with Homoeoscelis minuta and H. frigida; and brief remarks on this parasite-host association are given. A list of all the species reported from the Argentine Sea is presented. The faunistic affinities were studied using the analyses of hierarchical clustering, the Sørensen index was calculated based on the presence/absence species data (PRIMER v.5 software). The results of these faunistic analyses fit with the two biogeographic provinces recognized for the Argentine continental shelf: Argentine and Magellan. In addition, South Georgia Island presented a low similarity with the localities of the Magellan Province.

Pichel, Ana Carolina. "Observaciones multifrecuencia de blazares TeV con datos del telecospio Whipple y VERITAS" (2012-03-19). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En este trabajo se presenta un estudio multi-frecuencia sobre los blazares Mrk 421 y Mrk 501, realizado a partir de tres campañas multi-frecuencia llevadas a cabo durante las temporadas de observación 2007-08 y 2008-09. Los datos analizados incluyen mediciones realizadas en el Observatorio Whipple para rayos gamma de muy alta energía (VHE), por Fermi-LAT para rayos gamma de alta energía, por Swift y RXTE para rayos X, y con varios telescopios en la banda óptica y de radio-frecuencias. El telescopio Whipple estuvo dedicado a monitorear las fuentes Mrk 421 y Mrk 501 durante meses, todas las noches en que fuera posible. Estas observaciones, sumadas a las realizadas con VERITAS, de mayor sensibilidad y menor umbral de energía de detección, permitieron lograr un excepcional muestreo para la banda VHE de rayos gamma. Los comportamientos observados para estas fuentes durante las campañas fueron muy diferentes entre sí, presentándose períodos de baja y alta actividad en casi todas las bandas del espectro, incluyendo episodios de alta actividad en la banda VHE. Se estudió la correlación en el flujo y la energía espectral entre la banda VHE y el resto de las bandas de energía. Tam- bién se analizó la variabilidad en tiempos largos y cortos. Se obtuvo la distribución espectral de energía para los distintos estados de actividad, para las dos fuentes, observándose un buen acuerdo entre los datos y los ajustes realizados empleando el modelo synchrotron-self-Compton. Estos resultados son compatibles con que los electrones acelerados son los responsables de la emisión gamma de muy altas energías en estos blazares.

Abstract:
In this work, a multi-wavelength study of the TeV blazars Mrk 421 and Mrk 501 is reported. The survey comprehends three multi-wavelength campaigns performed during two observing seasons: 2007-08 and 2008-09. Analyzed data include observations from the Whipple Observatory for very-high-energy (VHE) gamma-rays, Fermi-LAT for high-energy gamma-rays, Swift and RXTE for X-rays, and various instruments covering the optical and radio bands. The Whipple 10m telescope was dedicated to monitoring Mrk 421 and Mrk 501; conducting observations every night it was possible. By combining Whipple data with observations performed by VERITAS (with higher sensitivity and lower energy threshold for detection) an outstanding coverage for months in the VHE band was obtained. The behavior observed during the campaigns was substantially different for each source. Periods of low and high activity were observed for almost all the energy bands, even including VHE flares. Correlations between VHE gamma-rays and the other bands in flux and spectral energy were analyzed, and searches for short/long term variability were conducted. The spectral energy distribution for each campaign, and for different periods of activity in each source, was obtained, being well described by the one-zone synchrotron-self-Compton model. These results are compatible with the explanation that accelerated electrons are responsible for the VHE gamma-ray emission in these blazars.

Lescano, Marina Aurora. "Bioestratigrafía, paleoecología y paleobiogeografía de las asociaciones de nanofósiles calcáreos y nanocónidos del Jurásico tardío y Cretácico temprano de la cuenca neuquina" (2012-03-19). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se dan a conocer las asociaciones de nanofósiles calcáreos del Jurásico Tardío- Cretácico Temprano halladas en muestras provenientes de perfiles estratigráficos de la Cuenca Neuquina. Las secciones estudiadas son: Arroyo Durazno (35º 05' S- 69º 45' O), Don Alfaro (36º 18´ S- 70º 21´ O), Lonco Vaca (36º 22´ S- 70º 12´ O), Quebrada Maravilla (36º 28´ S- 70º 12´ O), Cerro La Parva (37º 16´ S- 70º 26´ O), Mina San Eduardo (37º 31´ S- 70º 00´ O), Agua de la Mula (38° 04' S- 70° 01' O) y Bajada del Agrio (38° 27' S- 70° 04' O). Se reconocen y describen 90 taxones de nanofósiles calcáreos. Se destacan 15 especies que sugieren características paleobiogeográficas novedosas para la Cuenca Neuquina y otras 21 especies que amplían sus rangos estratigráficos. Se han procesado las muestras bajo técnicas de rutina, confeccionado las cartas de distribución de las especies halladas y analizado sus características en cada una de las localidades estudiadas. El análisis bioestratigráfico detallado ha permitido definir 22 bioeventos, 10 de ellos considerados nuevos y valiosos a nivel regional. Además se han redefidinido 5 de los bioeventos reconocidos previamente. A partir de este análisis se asigna a las sedimentitas de las formaciones Vaca Muerta y Agrio una edad tithoniana- valanginiana inferior y valanginiana superior- hauteriviana superior, respectivamente. Los diferentes bioeventos hallados precisan aún más la datación relativa de estas unidades litoestratigráficas y facilitan la correlación de las secciones estudiadas con otras adyacentes. A partir del estudio semicuantitativo de las 374 muestras fértiles y a partir de las variaciones en la composición y abundancia de las asociaciones de nanofósiles calcáreos registradas, se infieren condiciones paleoecológicas que ayudan a precisar los ambientes sedimentarios de las dos unidades litoestratigráficas consideradas.

Abstract:
Late Jurassic- Early Cretaceous calcareous nannofossil associations coming from eight stratigraphic sections of the Neuquen Basin are here presented. The sections comprise: Arroyo Durazno (35º 05' S- 69º 45' O), Don Alfaro (36º 18´ S- 70º 21´ O), Lonco Vaca (36º 22´ S- 70º 12´ O), Quebrada Maravilla (36º 28´ S- 70º 12´ O), Cerro La Parva (37º 16´ S- 70º 26´ O), Mina San Eduardo (37º 31´ S- 70º 00´ O), Agua de la Mula (38° 04' S- 70° 01' O) and Bajada del Agrio (38° 27' S- 70° 04' O). Ninety calcareous nannofossil taxa are recognized and described. Fifteen species suggest new paleobiogeographical feactures for the Neuquén Basin and another twetyone species extend their stratigraphic ranges. Collected samples has been processed following the standard procedures, the range chart species have been prepared taking account the nannoflora features observed in all studied localities. A detailed biostratigraphic analysis has allowed us to define 22 bioevents, 10 of them are considered new and useful at regional level. Another 5 bioevents have been redefined in age. The Vaca Muerta and Agrio Formations sediments indicate Tithonian- Lower Valanginian and Upper Valanginian- Upper Hauterivian. The recognized bioevents have facilitated the correlation between the studied sections with other ones located in the adjacent areas, and the correlations of bioevents with the known ammonite biozones. Taking account the nannoflora composition and the abundance variations observed counting 374 samples, paleoecological conditions are inferred and they provide additional information about the sedimentary environments of the two lithostratigraphic units.

Cecchi, Florencia. "Trifenilenos mesogénicos funcionalizados: organizadores estructurales de materiales poliméricos" (2012-03-15). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los trifenilenos hexasustituidos (TF) tienen tendencia a auto-ensamblarse dando origen, en general, a mesofases columnares. A su vez, los polímeros basados en cristales líquidos han presentado gran interés dentro del área de los materiales ya que combinan la tendencia a auto-ensamblarse de los cristales líquidos, la facilidad de procesamiento y estabilidad térmica con las propiedades intrínsecas de los polímeros convencionales. Teniendo en cuenta estas propiedades, en el presente trabajo de tesis se desarrolló la síntesis, caracterización y estudio de las propiedades térmicas y estructurales de diversos sistemas poliméricos en los que se incorporó la unidad trifenileno como fragmento organizador. Para ello se sintetizaron los trifenilenos monoméricos que fueron introducidos tanto en polímeros de cadena lateral como principal, en sistemas híbridos como en puramente orgánicos, y en polímeros lineales como en sistemas entrecruzados. En primer lugar, se prepararon y estudiaron los trifenilenos monoméricos precursores. Para ello se sintetizaron trifenilenos mono, di y trifuncionalizados con grupos carboxílicos terminales para dos longitudes de espaciadores diferentes. Se evaluó la dependencia de las propiedades mesomorfas con la cantidad de grupos terminales presentes y con la distancia centro aromático-grupo terminal. También se sintetizó un trifenileno monofuncionalizado con un grupo amino y sus propiedades cristal líquido se compararon con las de los trifenilenos mono-ácidos. En segundo lugar, se incorporaron los trifenilenos mono-carboxílicos como unidades “colgantes” en polímeros de coordinación espinales basados en carboxilatos bimetálicos de rutenio. Los dos sistemas estudiados presentaron polimorfismo y se observó una importante dependencia de la estructura de la mesofase obtenida con la distancia del espaciador TF-esqueleto polimérico. En tercer lugar, el trifenileno con un grupo amino terminal también se incorporó como grupo “colgante” en silsesquioxanos puenteados. Las condiciones de síntesis de estos materiales entrecruzados se eligieron de forma tal de favorecer la organización del material por la presencia del grupo colgante, empleando en la puesta a punto dos aminas aromáticas comerciales. Se logró obtener una estructuración 2-D, aunque de mediano alcance, para el material con el grupo TF. Por último, se prepararon dos tipos de polímeros de cadena principal basados en trifenilenos: poliésteres y poliéteres. Se obtuvieron los polímeros lineales, a partir de los trifenilenos difuncionalizados, y los sistemas entrecruzados al introducir trifenilenos trifuncionalizados. Los poliéteres presentaron mejores grados de polimerización y sistemas con una mayor organización.

Abstract:
Hexasubsituted triphenylenes (TF) tend to self-assembly, usually giving rise to columnar mesophases. Also, liquid crystal (LC) polymers received considerable attention in the materials chemistry field since they combine the self-assembling properties of monomeric liquid crystals with the easy processing and thermal stability of classical polymers. Based on these qualities, in this work we studied the synthesis, characterization, thermal and structural properties of various polymeric systems containing a triphenylene group aimed to act as a structural organizer. We first synthesized monomeric TF that were then incorporated in main chain as well as side chain polymers, in hybrid as well as purely organic polymers, and in linear polymers as well as in networks. The monomeric TF used in this work were terminally functionalized hexaalkoxytriphenylenes. We synthesized mono-, bi- and tri-functionalized TF bearing carboxylic groups as terminal subsituents of the corresponding alkoxy chain, for two different spacers lengths. We studied the influence of the number of terminal groups in the mesomophic properties, as well as the influence of the core-terminal group distance. We also synthesized a mono-functionalized triphenylene bearing an amine group as a terminal substituent, and we compared its LC properties with those of the mono-acidic triphenylenes. Mono-carboxylic triphenylenes were employed as pendant units in diruthenium carboxylate-based spinal coordination polymers. Both systems showed polymorphism and a significant influence of the spacer length on the mesophase structure. A mono-amine triphenylene was introduced in bridged silsesquioxanes. Synthesis conditions were chosen to favor the influence of the pendant group in the network organization. Two commercial aromatic amines were employed for setting up the “ideal” synthesis conditions. A 2-D medium-range organization was observed for the material bearing the TF group. Two types of triphenylene-based main chain polymers, polyesters and polyethers, were obtained by polymerization of bi-functionalized triphenylenes. Crosslinking of these systems was achieved by introducing tri-functionalized triphenylenes during the synthesis of the polymer main-chain. Polyethers showed a higher degree of polymerization and more organized systems.

Robledo, Federico Ariel. "Extremos diarios de precipitación en la Argentina: cambios observados en la segunda mitad del siglo XX y asociación con la temperatura superficial del océano tropical" (2012-03-09). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Esta tesis presenta un estudio de la variabilidad espacio-temporal de la intensidad diaria de precipitación que excede el percentil 75 (DIER75). Este índice permitió evaluar la frecuencia y la intensidad de los extremos diarios de precipitación, explicando el 70% de los acumulados mensuales de lluvia. En el periodo 1962-2005, la región subtropical de Argentina muestra una disminución en el DIER75, en cambio en el centro del país, se registran incrementos en los primeros meses del año. Junio, es el único mes que presenta una señal significativa (disminución) con coherencia espacial, en el centro de Argentina. Asimismo, la región subtropical presenta variabilidades de mayor frecuencia (2 años) que las zonas del centro-este de Argentina (de 3 a 8 años), y hacia el oeste, se evidencian ciclos de variabilidad de entre 10 y 14 años. La tesis avanza en el conocimiento sobre la relación entre la anomalía de temperatura superficial del mar (TSM) de los océanos tropicales y subtropicales y la intensidad de precipitación diaria extrema en la Argentina, con el fin de encontrar las regiones fuentes en los océanos y describir los mecanismos dinámicos asociados a escala planetaria y regional. Se realizó un análisis de descomposición en valores singulares y se identificó que la influencia del Pacífico, ligada al ENOS y Niño Modoki, aquella del Índico, relacionado al IOD, y aquella del Atlántico, asociada al AMO y el TSA, se combinan en los tres primeros modos que resultan del análisis de SVD. Aunque la relación de cada una de las regiones oceánicas identificadas con el DIER75 no es la misma. En especial se encontró que la influencia de las regiones oceánicas tropicales sobre los extremos de precipitación diaria en Argentina, se asocia con diferentes trenes de ondas de Rossby que emanan del Pacífico central y oeste e Índico este en dirección a Sudamérica, que promueven la convergencia o divergencia de humedad en el Sudeste de Sudamérica. Se realizó un trabajo exploratorio con el fin de evaluar cómo la señal global de calentamiento de las TSM repercute en la covariabilidad observada entre las anomalías de TSM y del DIER75 en Argentina. Se encontró que este calentamiento debilita la influencia de la TSM en el Pacífico central asociadas al ENOS, mientras que la asociación se intensifica con los océanos el Indico y el Atlántico tropical.

Abstract:
This thesis presents a study of the spatiotemporal variability of extreme daily rainfall in Argentina using a monthly index of daily precipitation intensity based on the 75th percentile (DIER75). The index allowed the evaluation of frequency and intensity of extreme daily rainfall, which accounts for 70% of the monthly accumulated rainfall. In the period 1962-2005, the subtropical region of Argentina shows a decrease in DIER75, while there are increases in the Midwest during the summer months. On the other hand, June is the only month that shows a significant decrease with large spatial coherence in central Argentina. Also, the subtropical region exhibits higher frequency variability (2 years) than those observed over central-eastern Argentina (3 to 8 years), while to the west, cycles of variability are detected between 10 and 14 years. This thesis studied the relationship between the anomaly of sea surface temperature (SST) at the tropical and subtropical oceans and extreme daily rainfall in Argentina. We also explore the dynamical mechanisms associated with regional and global scale. An analysis of singular value decomposition (SVD) was made that shows that a combined influence of the Pacific (linked to ENSO, Niño Modoki) the Indian Ocean (related to the IOD), and the Atlantic (associated with the AMO and the TSA), influence the variability the three leading modes resulting from the SVD analysis. Although, the influence of each identified ocean region over the DIER75 activity is not the same. Moreover, it was found that the influence of tropical ocean regions on the extremes of daily precipitation in Argentina is associated with Rossby wave trains emanating from the central and western Pacific and Indian Oceans extending towards South America, promoting the convergence or divergence of moisture in southeastern South America. Exploratory work was carried out on how global warming signal as described by global SSTs affects the observed covariability between SST anomalies and DIER75 in Argentina. We found that global warming weakens the influence of SSTs in the central Pacific associated with ENSO. Conversely, the magnitude of the correlations with the tropical Indian and Atlantic intensify.

Gabelloni, María Laura. "Mecanismos moleculares involucrados en la secreción de IL-1ß por los neutrófilos humanos" (2012-03-09). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La interleuquina-1β (IL-1β) es una citoquina proinflamatoria central en procesos fisiopatológicos, sintetizada como un precursor (proIL-1β) que debe ser procesado proteolíticamente para la generación de su forma activa. En esta Tesis determinamos que los neutrófilos humanos altamente purificados liberan IL-1β en respuesta a estímulos infecciosos como el lipopolisacárido (LPS) y estériles, como los cristales de urato monosódico (MSU), así como también frente al primado con LPS y posterior estimulación con ATP. Los efectos de inhibidores específicos y la capacidad de los agonistas de inducir la activación de la caspasa-1 sugirieron que la secreción de IL-1β es dependiente de caspasa-1 y de las serinproteasas elastasa y/o proteinasa 3. Nuestros hallazgos realizados con neutrófilos de pacientes incapaces de activar a la enzima generadora de intermediarios reactivos del oxígeno (IRO) NADPH oxidasa, con una línea celular neutrofílica carente de actividad de esta enzima, y con un inhibidor específico de la misma, sugirieron que el evento de secreción de IL-1β madura de la célula requiere de la actividad de la NADPH oxidasa. Sin embargo, el procesamiento de la proIL-1β es regulado negativamente por los IRO, los cuales ejercen un efecto inhibitorio sobre la caspasa-1. Esta compleja regulación de la secreción de IL-1β que depende del estado rédox celular podría constituir un mecanismo fisiológico de control de procesos inflamatorios dependientes de IL-1β donde el neutrófilo cumple un papel destacado.

Abstract:
Interleukin-1β (IL-1β) is a major pro-inflammatory cytokine involved in pathophysiological processes. It is synthesized as a precursor (pro-IL-1β) which must be cleaved to become biologically active. In this work we determined that highly purified human neutrophils release IL-1β in response to infectious and sterile stimuli, like LPS or monosodium urate crystals, respectively, and also to LPS-priming plus ATP stimulation. By using specific inhibitors and monitoring caspase-1 activation induced by the above-mentioned agonists, we determined that IL-1β secretion is dependent on caspase-1 and the serine-proteases elastase and/or proteinase-3. Our findings with neutrophils from patients lacking NADPH oxidase activity, as well as with both, a NADPH oxidase-deficient neutrophilic cell line and a specific inhibitor of this enzyme, showed that the event of mature IL-1β release requires the activity of the NADPH oxidase. However, pro-IL-1β processing is negatively regulated by reactive oxygen species, which inhibit caspase-1 activity. These findings show a complex redox regulation of IL-1β secretion that could constitute a physiological mechanism to control IL-1β-dependent inflammatory processes where neutrophils play a pivotal role.

Di Guilmi, Mariano Nicolás. "Alteraciones en la transmisión sináptica en ratones transgénicos modelo de migraña (S218L) y su modulación por drogas antiepilépticas" (2012-03-02). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Ratones transgénicos (knock-in, KI) con mutaciones del canal de calcio P/Q fueron utilizados como modelos murinos de Migraña Hemipléjica Familiar tipo I. Se estudiaron mediante técnicas de patch-clamp (whole cell) las corrientes de calcio presinápticas (IpCa) en los terminales nerviosos gigantes del caliz de Held y las corrientes postsinápticas en las neuronas que este inerva. En los KI S218L se observo la activación de las IpCa hacia potenciales más hiperpolarizados y una reducción de la amplitud de la corriente de calcio siendo esto ultimo dependiente de la duración de la repolarizacion del potencial de acción. A pesar de la reducción de las IpCa las corrientes postsinápticas evocadas están incrementadas así como la frecuencia pero no la amplitud de las espontaneas indicando la existencia de un ingreso continuo de calcio al terminal presinápticos, posible generador de cambios en la maquinaria de liberación responsable de la ganancia de función observada. La droga antiepiléptica pregabalina estudiada sobre ratones normales mostró ser efectiva en disminuir la liberación evocada a través de la reducción de la amplitud de las IpCa y de la remoción de su inactivación. La mayor tasa de inactivación observada en el KI R192Q fue absolutamente removida por la pregabalina.

Abstract:
Transgenic mice models (knock-in, KI), with the human mutation on the P/Q calcium channels were used as model of Familial Hemiplegic Migraine type-1. Using patchclamp (whole-cell) recordings, it was studied presynaptic calcium currents (IpCa) at the calyx of Held and postsynaptic currents onto principal cells of the MNTB. It was observe a shift of the I-V curve to more negative potentials on KI mice and a reduction of calcium currents (IpCa) depending on the shape of action potentials. Despite the reduction of IpCa, both amplitude of excitatory postsynaptic currents and frequency of miniature events were enhanced (without changes on its amplitude). These data suggest a continuous calcium influx at resting membrane potential which might be responsible to enhance transmitter release and its possible gain of function. The anticonvulsant medication pregabalin was tested on WT mice showing a reduction of postsynaptic currents by reduction of IpCa and removing its inactivation. It was observed that inactivation rate of IpCa in KI R192Q was larger in KI than WT and it was completely recovered after PGB application.

Chiarella, Paula. "Estrategias de inmunoterapias contra tumores murinos durante el estado de inmunosupresión inducido por el tumor" (2012-02-16). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Aunque los animales pueden ser inmunizados contra el crecimiento de algunos tumores, la mayoría de los intentos por aplicar estas inmunoterapias para causar la regresión en tumores humanos y de animales una vez que estos se encuentran establecidos no has sido exitosos, aun cuando los tumores son fuertemente inmunogénicos. En esta tesis, nosotros demostramos que el inicio de la refractariedad a los tratamientos inmunológicos coincidió con el comienzo de un estado de inmunosupresión conocido como “eclipse inmunológico” caracterizado por una pérdida o bloqueo de la respuesta inmune antitumoral después que el tumor ha superado cierto volumen crítico (500 mm3). A su vez el inicio del eclipse se correspondió con el comienzo de un proceso de inflamación sistémica progresiva caracterizado por un aumento en el número de neutrófilos circulantes y en bazo, un alto número células mieloides inmaduras (GR1/CD11b) y una elevada concentración sérica de citoquínas proinflamatorias como TNF-α, IL-1β e IL-6, proteína C reactiva y proteína A Amieloide. En ratones portadores de tumor, la aplicación de una sola dosis (0.75 mg/Kg) de un corticoide sintético como la dexametasona (DX) redujo significativamente los parámetros de inflamación sistémica y revirtió simultáneamente el eclipse inmunológico, lo cual fue demostrado por la recuperación de ciertos indicadores de respuesta inmune antitumoral. Otros dos tratamientos anti-inflamatorios (inodmetacina o receptor para TNF-α) revirtieron parcialmente el eclipse inmunológico, aunque el efecto no fue tan efectivo que el observado con DX. La reversión del eclipse inmunológico no fue suficiente por si solo para inhibir el crecimiento de un tumor primario. Sin embargo, cuando usamos la estrategia de dos pasos inoculando DX para revertir el eclipse inmunológico y células dendríticas (CDs) estimuladas con antígeno tumoral, como un Booster de inmunización, se observó una inhibición significativa tanto en el crecimiento de tumores establecidos como en células remanentes luego de una operación de un tumor grande establecido, a pesar de que la vacunación con CDs solamente no tuvo efecto o incluso, a veces, produjo un aumento del crecimiento tumoral. Asimismo, cuando a la estrategia de dos pasos le adicionamos un tratamiento adicional (transferencia pasiva de linfocitos näive o administración de ATRA), si bien se observó una mayor inhibición del crecimiento de los tumores, la sobrevida de los animales no fue significativa. Por lo tanto, los datos presentes en esta tesis demuestran que es necesario eliminar o mejorar el eclipse inmunológico como condición previa para permitir que una terapia inmunológica anti-tumoral pueda ser efectiva.

Abstract:
Although animals can be immunized against the growth of some tumor implants, most of the attempts to use immunotherapy to cause the regression of animal and human tumors once they have become established have been disappointing even when strongly immunogenic tumors were used as target. In this paper, we demonstrate that the failure to achieve an efficient immunological treatment against an established strongly immunogenic murine fibrosarcoma was paralleled with the emergence of a state of immunological unresponsiveness (immunological eclipse) against tumor antigens observed when the tumor surpassed the critical size of 500 mm3. In turn, the onset of the immunological eclipse was coincidental with the onset of a systemic inflammatory condition characterized by a high number of circulating and splenic polymorphonucleated neutrophils displaying activation and myeloid suppressor cell (Gr1/CD11b) and an increasing serum concentration of the proinflammatory cytokines TNF-α, IL-1β and IL-6 cytokines and C-reactive protein and serum A amyloid phase acute proteins. Treatment of tumor-bearing mice with a single low dose (0.75 mg/kg) of the synthetic corticoid dexamethasone (DX) significantly reduced all the systemic inflammatory parameters and simultaneously reversed the immunological eclipse. Two other antiinflammatory treatments by using indomethacin or dimeric TNF-α receptor, also partially reversed the immunological eclipse although the effect was not as striking as that observed with DX. The reversion of the immunological eclipse was not enough on its own to inhibit the primary growing tumor. However, when we used the two-step strategy of inoculating DX to reverse the eclipse and then dendritic cells loaded with tumor antigens (CDs) as an immunization booster, a significant inhibition of the growth of both established tumors and remnant tumor cells after excision of large established tumors was observed, despite the fact that the vaccination alone (CDs) had no effect or even enhanced tumor growth in certain circumstances. Also, when we add an additional treatment (passive transfer of naive lymphocytes or administration of ATRA), although there was a greater inhibition of tumor growth, but survival was not significant. Therefore, these data that we present is based on the rationale that it is necessary to eliminate or ameliorate the immunological eclipse as a precondition to allow an otherwise ineffective anti-tumor immunological therapy to have a chance to be successful.

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