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Young, Juan I.. "Estudio de la regulación transcripcional y funcional del gen de proopiomelanocortina en el sistema nervioso central de ratones transgénicos" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Walz, Katherina. "Estudio bioquímico y estructural de la quinasa de proteínas CK2 del hongo Candida Albicans y su participación en la fosforilación del proteasoma 20S homólogo : Clonado de la subunidad regulatoria (beta) de la enzima" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Wainer, Gabriel A.. "Modelos celulares de eventos discretos con demoras explícitas" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En un plano conceptual, este trabajo se dedica a presentar diversas descripciones formales para modelar y simular espacios de celdas. Los paradigmas propuestos constituyen extensiones a los formalismos DEVS y Autómatas Celulares, agregando la posibilidad de tener demoras de transporte o inerciales. Los formalismos de especificación han sido definidos para espacios de celdas binarios o de tres estados, y se han extendido para otros dominios. Los conceptos de demoras pertenecen al dominio de los circuitos digitales, y han sido adaptados a los autómatas celulares, constituyendo una de las contribuciones principales del trabajo. Los formalismos permiten la definición automática de los espacios, y facilita la verificación de los modelos, permitiendo el desarrollo eficiente y efectivo de simuladores. Desde un punto de vista práctico, se construyó un entorno de modelización y simulación basado en los formalismos propuestos. Esta permitió verificar de forma empírica la eficiencia de las soluciones propuestas, con respecto a los tiempos de desarrollo y chequeo. Se propuso a su vez un mecanismo de simulación achatado de los espacios de celdas que permitió mejorar los tiempos de ejecución en hasta un orden de magnitud. Debe hacerse notar que puede realizarse la construcción automática de un modelo a partir de su especificación, lo que simplifica el problema de verificación del modelo y permite un desarrollo rápido de los simuladores, debido a las mejoras obtenidas en las fases de chequeo y mantenimiento.

Abstract:
This work is devoted to introduce several formal descriptions used to model and simulate cell-shaped spaces. The paradigms are based on the DEVS and Cellular Automata formalisms, combined with transport delays and inertial delays. The specification formalisms have been defined for binary or three-states cell spaces, and have been extended to other domains. The delay concepts belong to the digital circuits domain, and have been adapted to the Cellular Automata paradigm, being one of the main contributions of the present work. The formalims allow the automatic definition for the cell spaces, easing the model verification, allowing the cost-effective development of simulators. A tool was built with the goal to implement the formalism, allowing to verify empirically the performance of the proposed solutions. Development times were considered, with special attention to the testing and mantainance costs. An abstract simulation mechanism was also proposed, with the goal to improve the execution times of the cell spaces based on the flattening of the hierarahical models. This approach allowed to improve the execution times up to one order of magnitude. It must be noticed that a model can be built automatically using its specification, easing the verification problems and allowing rapid development of the simulators. The use of a formal mechanism allowe to reduce the development times, due to the improvements obtained in the testing and maintainance phases. The use of this formal mechanism also allows automatic verification of the model structure, permitting the programmer to focus only in the development of the models to be implemented.

Vigo, Claudio Lionel Martín. "El fenómeno de tiempo de espera en corrientes de gravedad en fluídos y difusión no lineal" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La presente investigación de Tesis trata sobre el fenómeno de tiempo de espera en corrientes de gravedad en fluidos y difusión no lineal. Muchos fenómenos se describen mediante la ecuación de difusión no lineal unidimensional (EDNL): h1 = δx(hᵐδxh) (1) en donde los subíndices t y x indican derivadas parciales respecto del tiempo y del espacio, respectivamente. Entre ellos se pueden citar: (a) flujos en acuíferos no confinados en la aproximación de Dupuit-Forchheimer (Polubarinova-Kochina 1962, Eagleson 1970, Peletier l981, m=l), (b) flujos de gases en medios porosos (Muskat 1937, Gilding y Peletier l977a, l977b, Vázquez 1983, m=γ), (c) conducción térmica en plasmas (Zel’dovich y Raizer 1966, m=5/2) (d) conducción del calor por radiación en gases multiplemente ionizados (Zel’dovich y Raizer 1966, Pert 1977, m=4,5-5,5). (e) conducción del calor por radiación en gases completamente ionizados (Marshak 1958, Zel’dovich y Raizer 1966, Larsen y Pomraning 1980, m=l3/2), (f) corrientes viscogravitatorias (CVG, m=3). Las CVG son un tipo particular de corrientes de gravedad en líquidos, e interesan en las ciencias naturales y por sus aplicaciones a la tecnología y al medio ambiente (Simpson, 1982, Huppeit, 1986). Son flujos que se derraman sobre una superficie plana horizontal y rígida en el régimen en que los esfuerzos viscosos balancean la gravedad (bajo número de Reynolds y efectos de capilaridad despreciables) descriptos por la aproximación de lubricación (Buckmaster 1977, Huppert 1982, Gratton y Minotti 1990). Por la facilidad con que se las puede estudiar en el laboratorio, son una herramienta muy útil para el estudio de la difusión no lineal. Una característica de la difusión no lineal es la presencia de frentes que separan dominios donde h>0 de otros en donde h=0 (recordar la velocidad finita de propagación de una onda térmica fuerte); otra característica es la existencia de soluciones con tiempo de espera (STE), cuyo frente queda inmóvil durante un lapso finito tw, mientras ocurren cambios detrás de él (Aronson 1970, Kamin 1980, Knerr 1977, Lacey et al. 1982, Kath y Cohen 1982, Lacey 1983, Aronson et al. 1983, 1985, Vázquez 1984, Thomas et al. 1991, Gratton et al. 1992, Marino et al. 1995). Las soluciones autosemejantes de la ecuación (1) fueron estudiadas extensamente en el caso unidimensional, en el que dependen de una única variable ξ=x/tδ, donde x representa a una coordenada cartesiana (simetría plana) o a una radial (simetría axial). Su interes radica en que se obtienen fácilmente y que representan el comportamiento asintótico intermedio de muchos problemas no autosemejantes (Barenblatt 1952, Barenblatt y Zel’dovich 1957, Pattle 1959, Pen 1977, Grundy 1979, etc.). También se conocen bien las CVG autosemejantes (Buckmaster, 1977, Huppen, 1982, Gratton y Minotti, 1990, Maxworhy 1982, 1983, Huppert 1982, etc.). Reseñas sobre las propiedades de la ecuación (1) y de las STE se encuentran en Gratton (1991a) y Gratton et al. (1992). Una reseña sobre la autosemejanza, sus aplicaciones y las corrientes de gravedad en fluidos, incluyendo las CVG, puede encontrarse en Gratton (1991b). En esta investigación de Tesis Doctoral se investigan STE para CVG planas con condiciones iniciales del tipo h c xp. El proceso comienza en t=—t(...); inicialmente el frente está en x=0 y hǂ0 para 02/m aparece un corner layer en la solución (un CL, es un pequeño intervalo Δx en el que hx varía fuertemente). Vázquez (1984) extendió este resultado para todo m>0. (b) La asintótica de las STE cerca del frente y para tiempos próximos al momento del arranque (ǀxǀ<l y son de tres clases: si l<δl3/l0 (clases E y N) no hay CL. La nomenclatura proviene del comportamiento de la singularidad en el plano de fase que les da origen (el ciclo límite L o el punto B, quien de acuerdo al valor de δ, es un punto Espiral o Nodo). Las soluciones A tienen δ≤1, y representan la evolución del corner layer fuerte que está llegando al frente; el caso δ=1 es la solución de onda viajera (0V, ver Gratton y Minotti 1990). Las soluciones numéricas muestran que si p<2/3 el frente arranca de inmediato y si p>2/3 se obtienen soluciones con tiempo de espera con un CL móvil, de acuerdo con la teoría. El CL se refuerza (Δx se reduce y aumenta la variación de hx) mientras avanza hacia el frente que espera, y cuando lo alcanza, éste se pone en movimiento. Se estudia en detalle el movimiento del CL y del frente y otras propiedades de las soluciones. Se determina tw(p) y se compara con las cotas teóricas, viendo que en muchos casos estas no son buenos estimadores de tw. La asintótica de las STE muestra un comportamiento sorprendente. En primer lugar sólo las soluciones clase L y la OV son relevantes. Tan sólo la parte de las soluciones L que está detrás del primer CL de la sucesión representa la asintótica de las soluciones numéricas, y lo hace en un dominio que está detrás del corner layer, y para un intervalo de tiempo que excluye el entorno del arranque (se observa un solo CL, porque cerca del frente la solución verdadera converge demasiado lentamente a la solución L). En cambio la asintótica en el entorno del CL y para tiempos próximos al arranque (e incluyéndolo) está descripta por la 0V (δ=1), de forma tal que el movimiento del CL empalma con continuidad con el del frente, luego del arranque. Los flujos viscogravitatorios son un privilegio para el investigador puesto que constituyen un caso modelo altamente viable para su implementación experimental a escala de laboratorio; en ese sentido la verificación experimental de la teoría fue realizada en colaboración con el grupo del Instituto de Física de Arroyo Seco (IFAS), de la Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires (UNCPBA), Tandil, dirigido por el Profesor R. Gratton, en donde se realizaron experimentos de derrames de aceites de siliconas con perfiles iniciales en forma de cuña (correspondientes a p=l), que presentan tiempo de espera (Marino et al. 1996). Se presenta una reseña de estos resultados experimentales y una comparación con algunos de los resultados obtenidos en esta Tesis.

Abstract:
The present Thesis Investigation address with the waiting-time viscous gravity currents phenomena and non linear diffusion. A wide range of phenomena are described by the one-dimensional non linear diffusion equation (NLDE): h1 = δx(hᵐδxh) (l) where the t and x subscripts indicate partial time and spatial derivatives, respectively. Among them, we can mention: (a) unconfined groundwater flows, in the Dupuit Forchheimer approximation (Polubarinova-Kochina 1962, Eagleson 1970, Peletier 1981, m=l), (b) gas flow through porous media (Muskat 1937 Gilding y Peletier l977a, l977b, Vázquez 1983, m=γ), (c) thermal conduction in plasmas (Zel’dovich y Raizer 1966, m=5/2) (d) thermal conduction by radiation in multiply ionized gas (Zel’dovich y Raizer 1966, Pert 1977, m=4,5-5,5), (e) thermal conduction by radiation in a fully ionized gas (Marshak 1958, Zel’dovich y Raizer 1966, Larsen y Pomraning 1980, m=l3/2), (f) viscous gravity currents (VGC, m=3). The VGC are a special case of viscous currents in liquids, and are of particular interest in technology applications and natural and environmental sciences, (Simpson, 1982, Huppen, 1986). VGC refers to flows over a horizontal rigid plane surface in the regime where viscous forces balance gravity (low Reynolds number and capillary effects are negligibles), and are described by the lubrication approximation. (Buckmaster 1977, Huppert 1982, Gratton y Minotti 1990). They are a useful tool for the study of non linear diffusion, because they are inexpensive and simple to set up in the laboratory. A characteristic of the non linear diffusion is the presence of fronts that divide domains where h>0 from others where h=0 (remember the finite propagation velocity of the strong thermal wave); another characteristic is the existence of waiting-time solutions (WTS), which have a front that remains motionless during a finite time tw, while some changes occur behind it. (Aronson 1970, Kamin 1980, Knerr 1977, Lacey et al. 1982, Kath y Cohen 1982, Lacey 1983, Aronson et al. 1983, 1985, Vázquez 1984, Thomas et al. 1991, Gratton et al. 1992, Marino er al. 1995). Self similar solutions of equation (l) were studied extensively in the one dimensional case in which they depend on a single variable ξ=x/tδ, where x is a Cartesian coordinate (plane symmetry) or a radial coordinate (axial symmetry). They are interesting because can be easily constructed and represent the intermediate asymptotic behavior of a wide range of non self similar problems. (Barenblatt l952, Barenblatt y Zel’dovich 1957, Pattle 1959, Pert 1977, Grundy 1979, etc.). The self-similar VGC are well known (Buckmaster, 1977, Huppert, 1982, Gratton y Minotti, 1990, Maxworthy 1982, 1983, Huppert 1982, etc.). Reviews about the properties of equation (1) and WTS can be found in Gratton (1991a) and Gratton et al, (1992). Other reviews about self-similarity, its aplications, and the gravity currents in fluids, including VGC, can be found in Gratton (l99lb). In this PHD Thesis Research, we investigate WTS for plane VGC with initial conditions of the type h c xp. The process begins at t=—tw, initially the front is at x=0 y hǂ0 for 02/m, a corner layer (CL) developed in the solution (a CL, is a small interval Δx where hx suffers strong variations). Vazquez (1984) extended this result for all m>0. (b) The asymptotic regime of WTS near the front and close to the startup time (ǀxǀ<l and are of three classes: when 1<δl3/10 (clases E y N) there is no CL at all. The nomenclature comes from the behavior of the singularity in the phase plane, a limit cycle L or a spiral or nodal (according to the value of δ ) point B. The A solutions have δ≤1, and represent the evolution of a strong corner layer that is arriving to the front; the δ=1 case corresponds to the travelling wave (TW, see Gratton y Minotti, 1990). The numerical solutions show that if p<2/3 the front starts to move inmediately and that if p>2/3, we obtain waiting-time solutions with a moving CL, according to the theory. The CL reinforces (Δx decrease and hx increase) while it moves toward the front, and when it reaches it, the front it begins to move. We study in detail the movement of the CL and of the front and another properties of the solutions. We determine tw(p) and compare it with the theoretical bounds, and observe that in many cases, these are not a good estimator of tw. The asymptotic regime of the WTS shows a surprising behavior. First, only the L and TW classes are relevant to the problem. Only the part of the L solutions that is behind the first CL of the series represents the asymptotic of the numerical solutions, and it does so in a domain that is behind the CL, for a time interval that excludes the startup, (only one CL can be observed because near the front, the real solution converges too slowly to the L solution). On the other hand, the asymptotic in a region around the CL for times close to the startup time (including it), is described by the TW (δ=1), in such a way that CL joins smoothly with the front after startup. The viscous gravity flows are a privilege for the researchers, because they constitute a model case of wide experimental implementation in the laboratory; in this sense, the experimental check of the theory was made in conjunction with the group of the Instituto de Física de Arroyo Seco (IFAS), from the Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires (UNCPBA), Tandil, directed by Professor R. Gratton. They make experiments on the spreading of silicone oils with initial wedge-like profiles (corresponding to p=l), that presents waiting-time behavior (Marino et al. 1996). We show a review of these experimental results and a comparation with some of the results obtained in this Thesis.

Vicent, Guillermo Pablo. "Acción y mecanismo de acción glucocorticoide de algunos derivados de progesterona" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Esta Tesis estudia: 1) la influencia de la 11βhidroxilación así como de la introducción de un doble enlace Δ1 en la molécula de la progesterona, en las respuestas glucocorticoides (GC); 2) la relación entre conformaciones moleculares de éstas y otras 20 moléculas derivadas, con estas respuestas. Con notorias excepciones (dexametasona (DEX), RU28362 y 5β-dihidroprogesterona), las afinidades de los 22 esteroides estudiados obedecen con una muy buena linealidad a la correlación afinidad por el receptor de glucocorticoides (GR) vs afinidad por transcortina (CBG). Existe una correlación inversa, simétrica con respecto a la observada para propiedades MC, del ángulo A/BCD de la mayoría de los esteroides estudiados con su afinidad por GR (y por consiguiente, por CBG). A estos efectos los esteroides se pueden dividir en cuatro grupos: I)de alta afinidad; II)grupo conformacionalmente plano, de baja afinidad; III) los Δ1 esteroides, correlacionados en una paralela a sus esteroides madres, que significa menor afinidad por GR o CBG de la que se esperaría de acuerdo con su ángulo de torsión; IV)grupo de esteroides muy torsionados (con baja unión). El conjunto de correlaciones sugiere una torsión óptima para unión a dichas proteínas (entre -20 y -28 para el grupo I. Entre -20 y -36 para el conjunto de los grupos I y III). Contrariamente a lo observado por Duax et al para efecto antiinflamatorio, no se observa correlación de ángulo de torsión vs inducción de TAT (ni utili7ando A/BCD ni C3/D). Las propiedades de 11βhidroxiprogesterona (HOP) y Δ1-11βhidroxiprogesterona (ΔHOP): este par de esteroides posee propiedades glucocorticoides apreciables, a veces muy intensas y carece de otras. Entre las primeras se cuentan la unión a GR y/o CBG, la disociación del complejo GR-hsp90, la gran capacidad de inducción de la TAT y la inhibición de la incorporación de nucleótidos y aminoácidos a timocitos (respuestas A). Por el contrario, ninguno de los dos esteroides afecta el peso del timo, ni sensiblemente las propiedades apoptóticas habitualmente demostradas por otros GC Tampoco indujeron sensiblemente un gen reporter en una línea celular que expresa el receptor de GC. (respuestas B). Finalmente, a diferencia de las respuestas a todos los demás corticoides ensayados, incluyendo HOP, la respuesta inhibitoria a ΔHOP de la incorporación de nucleótidos y aminoácidos a timocitos no es bloqueada totalmente por el inhibidor RU486. Si consideramos las respuestas B, ni la progesterona ni sus derivados Δ1 u 11βhidroxilados las expresan. Experimentos con cultivos de timocitos o hepatocitos dependen de la presencia de suero de ternero para que los esteroides no 11βhidroxilados no expresen respuestas A. En ausencia de dicho suero no existen diferencias de estos derivados con progesterona o su Δ1 derivado: todos expresan respuestas A. Pero ¿es la diferencia observada puramente artificial o acaso encierra un trasfondo fisiológico? El experimento in vivo, que relaciona orden de potencia esteroidea para depósitos de glucógeno con unión a GR así como CBG, sugiere que las proteínas del suero homólogo ejercerían un rol fisiológico "dirigido" como uno de los factores que confieren especificidad GC a la 11β hidroxilación. Los razonamientos sobre ausencia de efectos MC y de unión a MR de moléculas muy torsionadas (grupo IV) permitieron desarrollar el primer antiglucocorticoide (competitivo por GR) específico, ya que carece de afinidad por MR o receptores a progesterona.

Abstract:
In this Thesis we study 1) The influence of 11βhydroxylation as well as a Δ1 double bond on the glucocorticoid (GC) responses to progesterone. With noticeable exceptions (dexamethasone (DEX), RU28362, 5βdihidroprogesterone) the affinities of 22 steroids under investigation exhibit with optimal linearity a correlation binding to glucocorticoid receptor (GR) vs binding to CBG. Most of them also exhibit an inverse correlation of their A/BCD angle vs their affinity for glucocorticoid receptors and hence, CBG, this correlation being symmetrical to the one observed for the mineralocorticoid (MC) properties. For the first correlation steroids may be divided into 4 groups: 1)high affinity, 2)conformationally planar steroids with low affinity, 3)Δ1 steroids correlating in a parallel with respect to their mother-steroids, amounting to smaller affinities for GR or CBG as those expected from their torsion angles, 4)Highly torsioned steroids with low affinity. Taken together, these correlations suggest an optimal torsion angle for steroid binding for GR, equalling approx. -20° to 28° for group 1 or -20° to -36° for groups 1 plus 3. In contrast to the similar correlation observed by Duax et al. for antiinflammatory properties of glucocorticoids, those here studied failed to exhibit any correlation of TAT induction vs A/BCD or C3/D. Properties of 11βhydroxyprogesterone (HOP) and Δ1-11βhydroxyprogesterone (ΔHOP): This steroid pair exhibits certain noticeable, occasionally intense GC properties but lacks others. Among the first group, binding to GR and/or CBG dissociation of the GR-hsp90 complex and an intense ability to induce TAT, as well as the inhibition of nucleotide and aminoacid uptake by thymocytes (responses A). In contrast, none of these steroids affects thymus weight, nor significantly exhibits apoptotic properties. Neither did they induce a reporter gene in a cellular line known to express GR (responses B). Finally, at variance with responses to all other steroids, including HOP, the inhibitory response to ΔHOP of nucleotide or aminoacid uptake by thymocytes is not blocked by the inhibitor RU486. Neither progesterone nor its Δ1 or 11βhydroxyderivatives express responses B. Experiments with thymocyte or hepatocyte cultures depend on the presence of calf serum for non-11βhydroxylated steroids not to express responses A. In the absence of this serum, all steroids express responses A. However, is this difference merely artifactual, or, to a certain degree, physiological? An in vivo experiment relating potency order of steroids for glycogen deposits to their affinity for GR as well as CBG suggests proteins of homologous serum to possess a physiological role as “target directing factors". They might indeed be one of several factors conferring GC specificity to 11βhydroxylation. The findings on the absence of MC effects and MR binding for very torsioned molecules allowed us to develop the first specific antiglucocorticoid, competitive for GR but lacking affinity for MR or progesterone receptors.

Viapiano, Mariano Sebastián. "Ontogenia del complejo receptor CABAa en el sistema nervioso central de la aves: modulación por barbitúricos, neuroesteroides y factores endógenos" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el presente trabajo de tesis se estudió el perfil de aparición y la modulación farmacológica del complejo receptor GABAA a lo largo de la ontogenia del lóbulo óptico de las aves. Dicha estructura mesencefálica presenta un tejido rico en sinapsis GABAérgicas involucradas en la funcionalidad de los circuitos de procesamiento visual y las variaciones bioquímicas de estos receptores se consideran representativas de eventos plásticos en las conexiones neuronales durante el desarrollo. En este estudio se utilizaron diversas técnicas en la preparación de las membranas sinápticas (ciclos de lavado y congelación-descongelación) como estrategia para determinar variaciones entre estadios del desarrollo en los complejos receptores que no hubieran sido detectables utilizando una única metodología. Los resultados obtenidos mostraron un período de sobre-expresión transitoria de los sitios receptores GABAérgicos correspondiente al nacimiento y período postnatal inmediato, coincidiendo con la etapa de mayor plasticidad sináptica a lo largo del desarrollo. Esta sobre-expresión se debió fundamentalmente a un incremento en la densidad máxima de sitios receptores. En la preparación de membranas sinápticas sometidas a congelación-descongelación se observaron dos poblaciones de sitios receptores, de alta y baja afinidad por GABA. Los mismos fueron detectados en todos los estadios del desarrollo estudiados con excepción de los más tempranos, en los cuales la fracción de receptores sensible a la congelación no se hallaría aun presente en el terminal sináptico. Por otro lado, en las membranas sinápticas no congeladas solamente fue detectable la población de baja afinidad. Al evaluar a lo largo de la ontogenia la modulación de la unión de GABA a sus sitios receptores por barbitúricos y neuroesteroides, se observó que dichos moduladores producían una estimulación alostérica de los sitios receptores GABAérgicos de baja afinidad en todos los estadios del desarrollo ensayados, indicando que los sitios modulatorios están acoplados a los sitios receptores GABAérgicos desde etapas prenatales tempranas. El perfil de acción fue diferente para cada modulador siendo en ambos casos edad-dependiente. Se observó una heterogeneidad de sitios modulatorios, tanto para barbitúricos en estadios prenatal y de recién nacidos, como para neuroesteroides en animales adultos. La mayor sensibilidad a los moduladores se manifestó en los estadios tempranos del desarrollo -prenatal para barbitúricos y recién nacidos para neuroesteroides-, coincidiendo con etapas en las cuales el receptor presenta gran variabilidad en sus respuestas funcionales. La heterogeneidad de sitios modulatorios para neuroesteroides, junto al hallazgo de una nueva relación estructura-actividad para estas sustancias, no coincidente con la previamente conocida en mamíferos, indican una compleja interacción de estos esteroides con el receptor GABAA en aves y sugieren un probable rol regulatorio de los mismos en etapas ontogenéticas tempranas. Por otro lado, los sitios receptores GABAérgicos de alta afinidad fueron insensibles a la acción de los moduladores empleados, y no presentaron además variaciones ontogenéticas significativas. Estos resultados permiten postular que, si bien dichos sitios pueden representar una subpoblación real de receptores revelada por la congelación, la misma careceria de una funcionalidad biológica explicable. La aplicación de diversas metodologías en la observación del perfil de aparición de los sitios receptores GABAérgicos, así como en el estudio de la modulación de dichos sitios, demostró que en todos los casos los estadios tempranos del desarrollo presentaban las mayores variaciones entre distintas preparaciones de membranas sinápticas. Estas diferencias en sensibilidad a la metodología entre estadios reflejarian una modificación en la estructura molecular del complejo receptor GABAA a lo largo de la ontogenia. Al analizar la acción estimulatoria conjunta de barbitúricos y neuroesteroides se manifestaron notorias diferencias en todos los estadios del desarrollo estudiados entre las dos preparaciones de membranas sinápticas empleadas. Se observó que en membranas sinápticas no congeladas ambos moduladores actuaban a través de un sitio de reconocimiento común, mientras que en membranas congeladas presentaban efectos aditivos y eran diferencialmente desplazados por un antagonista GABAérgico, indicando una diferenciación de sus sitios de acción. La fracción proteica extraída durante la congelación de membranas fire concentrada y aplicada a las mismas, produciendo una significativa disminución en la aditividad de efectos observada para ambos moduladores. Este resultado, conjuntamente con los anteriores permite postular la existencia de factores endógenos asociados al complejo receptor, removidos durante la congelación-descongelación de las membranas sinápticas. Los mismos serían mediadores de un efecto común de barbitúricos y neuroesteroides in vivo, estando por lo tanto relacionados con la modulación del receptor GABAA a lo largo de la ontogenia. Los resultados obtenidos demuestran por lo tanto significativas variaciones ontogenéticas en el complejo receptor GABAA, tanto en sus sitios de reconocimiento de GABA como de ligandos modulatorios. Estas variaciones son relevantes para comprender las modificaciones en las respuestas funcionales del complejo receptor a lo largo del desarrollo. En forma similar, la existencia de factores endógenos asociados al receptor es de importancia en la determinación de sus mecanismos naturales de modulación en la sinapsis. El presente estudio provee entonces los fundamentos bioquímicos que pueden utilizarse para comprender la función de estos receptores durante el desarrollo del Sistema Nervioso Central.

Abstract:
The presence and pharmacological modulation of GABAA receptor complex were studied in developing chick optic lobe. This mesencephalic structure presents a large amount of GABAergic synapses involved in visual processing so that biochemical modifications of GABAA receptors are representative of plasticity in neural connections during development. Synaptic membranes were prepared according to two different methodologies (washing cycles and freezing-thawing), as a strategy to detect variations among developmental stages not disclosed by a single procedure. Our results show a transient over-expression of GABA binding at hatching, the stage of greatest synaptic plasticity during development, most likely due to an increase in density of GABA receptor sites. In frozen-thawed membranes two populations of GABA binding sites, with high and low affinity for the radioligand, were observed at all developmental stages studied with the exception of the earliest one (l4-day embryos). This result suggests that the fraction of receptor complexes affected by the freezing-thawing procedure are not yet present in synaptic membranes at that prenatal stage. On the other hand, non-frozen (fresh) membranes only showed a population of low-affinity GABA binding sites. On analyzing the modulation of GABA binding by barbiturates and neurosteroids, both modulators were found to be allosteric stimulators of low-affinity GABA binding sites at all developmental stages studied, indicating that modulatory and GABA binding sites are coupled since early prenatal development. The observed stimulation was drug- and age-dependent. Modulatory sites presented heterogeneity for barbiturates at early developmental stages as well as for neurosteroids in adult animals. Maximal sensitivity to modulators was found at early development -prenatal stages and newly hatched chicks-, in agreement with the period of greatest variability in receptor functional responses. Neurosteroids stimulatory effect presented a new structure-activity relationship, different from the one previously known for mammals. This finding, along with the heterogeneity of steroid recognition sites, indicates a complex interaction of these endogenous substances with the receptor in avian Central Nervous System, suggesting a probable regulatory role during early stages of development. At all stages studied, high-affinity GABA binding sites were unaffected by modulatory drugs and showed few variations during ontogeny. These findings allow us to conclude that, although these binding sites may well represent a fraction of total receptors exposed by freezing-thawing, they would lack a relevant biological function. The use of diverse methodologies in the preparation of synaptic membranes to study GABA binding sites or modulatory sites showed the greatest variation at prenatal and hatching stages. This differential sensitivity to methodologies is indicative of molecular modifications in GABAAreceptor structure during development. On comparing the stimulatory effect of barbiturates and neurosteroids acting jointly, we found significant differences at all developmental stages between the two membrane preparation procedures. In fresh membranes both modulators acted through a common recognition site, whereas in frozen membranes they showed additive effects and differential displacement with a GABAergic antagonist, indicating dissimilar modulatory sites. Protein components extracted during the freezing-thawing procedure were concentrated and assayed on frozen membranes, decreasing the additive effect previously observed. Taken together, these results suggest the existence of endogenous factors associated to the receptor complex, removed during freezing-thawing cycles. They would produce a common effect for barbiturates and neurosteroids in vivo, related to GABAA receptor modulation during ontogeny. In conclusion, we have demonstrated ontogenetic variations in GABAA receptor properties supporting functional modifications of this receptor complex during development. We also postulate the existence of endogenous factors associated to the receptor, useful to determine its natural regulatory mechanisms in the synapse. Consequently, our present study provides a tentative biochemical basis to understand the role of these receptors during Central Nervous System development.

Varone, Cecilia Laura. "Regulación de la expresión génica de la delta-aminolevulinato sintetasa por cAMP y glucosa : participación de las quinasas de proteínas A y C" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El primer paso en la biosíntesis del hemo en las células animales es catalizado por la enzima mitocondrial δ-aminolevulinato sintetasa (ALA-S), que condensa glicina y succinil CoA para formar ácido 6-aminolevulínico y que, al menos en hígado, es la limitante de la velocidad. En hígado esta enzima constitutiva regula la producción de hemo necesario para sintetizar las proteínas citocromos P-450. Aunque en los tejidos animales el nivel de enzima es muy bajo, la transcripción del gen de ALA-S en hígado de animales de experimentación aumenta cuando se les administran compuestos porfirinogénicos como el fenobarbital. Diferentes mecanismos fueron propuestos por los que el hemo puede regular la expresión de ALA-S a nivel transcripcional reprimiendo la sintesis del RNA, a nivel postranscipcional disminuyendo la estabilidad del mensajero y a nivel postraduccional inhibiendo la entrada de la enzima a la mitocondria. En el presente trabajo examinamos el mecanismo ejercido por cAMP y glucosa sobre la expresión génica de ALA-S en hepatocitos de ratas normales y con diabetes experimental, y en cultivos de células HepG2. Se ha demostrado que el cAMP potencia la inducción mediada por fenobarbital, aumentando la cantidad del mRNA de ALA-S a través de la activación de la quinasa de proteínas dependiente de cAMP. El efecto inductor ejercido por el fenobarbital es mayor en hepatocitos diabéticos que en normales debido probablemente al nivel de cAMP elevado que presentan. Por otro lado, se ha demostrado que la glucosa inhibe la inducción de la expresión de ALA-S mediada por fenobarbital en hepatocitos normales pero no en diabéticos. Este efecto glucosa es revertido por la presencia de dibutiril CAMP,de activadores de la adenilil ciclasa o de un inhibidor de fosfodiesterasa. Se presentan evidencias que los efectos del cAMP y la glucosa son ejercidos a nivel transcripcional. La vida media del mRNA de ALA-S no se modifica en presencia de ellos. Mas aún, los efectos de cAMP y la glucosa se manifiestan en el análisis de tranfecciones transientes de células HepG2 con un vector que contenie la región promotora del gen ALA-S clonada en 5’ del gen de la cloramfenicol acetiltransferasa. En este tipo de experimentos hemos confirmado además que el efecto de cAMP requiere la activación de la proteina quinasa dependiente de cAMP ya que hemos obtenido resultados similares cotransfectando con la subunidad C de la PKA. Finalmente se demuestra que la activación de la PKC actúa negativamente sobre el mRNA de ALA-S, probablemente a nivel transcripcional, de acuerdo a las determinaciones por Northern, slot blot y análisis de transfecciones transientes de células HepG2. Asimismo se observa que el efecto del éster de forbol TPA anula el efecto inductor del cAMP. Es posible que ambos caminos de transducción de señales, que involucran la activación de PKA y PKC, estén interconectados en la regulación de la expresión génica de ALA-S.

Abstract:
The first step of heme biosynthesis pathway in animal cells is catalyzed by the mitochrondrial enzyme δ-aminolevulinate synthase (ALA-S), wich condensates glycine and succinyl-CoA to form δ-aminolevulinic acid, and -at least in liver- is rate controlling. ln liver, this housekeeping enzyme regulates the supply of heme necessary to form respiratory cytochrome P-450 proteins. Although the enzyme level in animal tissues is usually very low, the transcriptional rate of ALA-S gene is greatly increased in experimental animal livers after the administration of a variety of porphyrinogenic effectors such as phenobarbital. Different mechanisms have been proposed to show that heme can regulate ALA-S gene expression at the transcriptional level by repressing mRNA biosynthesis, at the posttranscriptional level by diminishing ALA-S mRNA stability, and at the post-traductional level by inhibiting the enzyme entrance to the mitochondria. In the present work we examined the mechanisms underlying the effect of cAMP and glucose on ALA-S synthase gene expression both in isolated hepatocytes from normal and experimental diabetic rats, and in HepG2 cells. It was demonstrated that cAMP potentiates phenobarbital-mediated induction, increasing the amount of ALA-S mRNA by means of the activation of cAMP dependent protein kinase. The inducing effect exerted by the phenobarbital is greater in diabetic hepatocytes than in normal cells, due probably to the high level of endogenous cAMP in diabetic cells. One the other hand, it was shown that glucose inhibits phenobarbitalinduced ALA-S expression in normal hepatocytes, but not in diabetic ones. This glucose effect can be prevented adding dibutyril cAMP, adenylate cyclase activators, or a phosphodiesterase inhibitor. There are evidences that both cAMP and glucose effects would operate at the transcriptional level. ALA-S mRNA half life was not modified in their presence. Moreover cAMP and glucose effects were manifested in transfection analysis of HepG2 cells using ALA-S promoter region cloned 5’ upstream chloramphenicol acetyltransferase reporter gene. With this kind of experiments we were also able to confirm that the effect of cAMP requires the activation of cAMP dependent protein kinase, since it was possible to bypass this activation cotransfecting with PKA subunit C. Finally there are evidences that protein kinase C activation influences negatively ALA-S mRNA -probably at the transcriptional level-, according to Northern, slot blot and transient transfection analysis of HepG2 cells. We could also observe that the effect of phorbol ester TPA overcomes dibutyril cAMP induction. Thus, it is feasible that both signal transduction pathways involving PKA and PKC activation are interconnected in the regulation of ALA-S gene expression.

Ubeda, Carmen A.. "Batracofauna de los bosques templados patagónicos: un enfoque ecobiogeográfico" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La batracofauna de los bosques australes de Suramérica está compuesta por tres familias de anuros: leptodactílidos, bufónidos y rinodermátidos. Está constituida por 38 especies y es altamente endémica, con una mayor proporción de endemismos restringidos en la vertiente occidental de la cordillera. Los bosques australes son los únicos bosques templados de Suramérica. Se ubican en el sur de la Cordillera de los Andes, principalmente sobre su vertiente occidental; sobre la vertiente oriental, en territorio argentino, se extienden en una estrecha franja aproximadamente entre 37° y 55° LS, abarcando una extensión de más de 2.000 km. Su historia evolutiva se vio afectada por transgresiones marinas, la orogenia andina, la desertización de vastas áreas, las glaciaciones y el vulcanismo y por un prolongado aislamiento de otros sistemas boscosos del continente. Todos estos sucesos actuaron sobre la historia de su batracofauna y, junto a procesos evolutivos y a las interacciones ecológicas, son responsables de su composición y estructura actual. La batracofauna de los bosques andinopatagónicos de la vertiente oriental de la cordillera está compuesta por 20 especies de anuros: 16 leptodactílidos (Alsodes australis, A. gargola, A. aff. monticola, Atelognathus aff. grandisonae, A. nitoi, A. salai, Batrachyla antartandica, B.fitzroya, B. leptopus, B. taeniata, Eupsophus calcaratus, E. emiliopugini, E. roseus, Hylorina sylvatica, Pleurodema bufonina, P. thaul), tres bufónidos (Bufo rubropunctatus, B. spinulosus papillosus, B. variegatus) y un rinodermátido (Rhinoderma darwinii). En la vertiente oriental de la cordillera la máxima riqueza específica de la batracofauna de los bosques se presenta entre los 41° y 42° LS. En relación con la disminución de la temperatura hay una disminución gradual de la cantidad de especies hacia el sur, hasta quedar sólo dos (Bufo variegatus y Pleurodema bufonina). La riqueza especifica disminuye drásticamente hacia el este, en relación con la disminución de las precipitaciones. Las especies más tolerantes a la sequedad llegan al límite oriental de los bosques e incluso una (Bufo spinulosus papillosus) lo sobrepasa extendiéndose por la estepa patagónica. Hay una neta disminución de la riqueza específica con la altitud. Sólo tres especies pueden vivir sobre los 1.700 m de altura: Alsodes gargola, Bufo varíegatus y Pleurodema bufonina. El amplio rango latitudinal y altitudinal en el que se extiende el bosque subantártico y la variación que se presenta en las precipitaciones determinan la existencia de una gran diversidad de ambientes terrestres y acuáticos. La selva valdiviana y varios tipos de bosques muy húmedos tienen la máxima riqueza y contienen a las especies más exigentes en cuanto a la humedad ambiental, a la densidad de la vegetación y a la temperatura (Batrachyla antartandica, B.fitzroya, Eupsophus emiliopugini, B. leptopus, E. calcaratus, E. roseus, Hylorina sylvatica, Rhinoderma darwinii, Alsodes aff. monticola y Bufo variegatus). Otras especies más tolerantes se extienden hasta los bosques y matorrales más xéricos y aún hasta las estepas. Casi todas las especies son habitantes del suelo del bosque, de las que sólo dos tienen, además capacidad trepadora (Batrachyla leptopus y Hylorina sylvatica). Otras dos especies (Alsodes gargola y A. australis) están estrechamente ligadas a ambientes acuáticos. Una mayoría de las especies tiene un modo reproductivo primitivo, con puestas y larvas acuáticas. Otras presentan modificaciones hacia un mayor grado de terrestrialidad con adaptaciones a la ovipostura y parte del desarrollo en el suelo húmedo del bosque (Rhinoderma, Batrachyla) o en pequeñas cavidades llenas de agua en el suelo (Eupsophus). Se identificaron cuatro grupos de larvas según sus adaptaciones ecológicas: un grupo de larvas grandes de desarrollo lento con adaptaciones a la vida en arroyos fríos de montaña (Alsodes), un grupo de larvas pequeñas de rápido desarrollo en aguas lénticas temporarias (Bufo), el grupo de larvas medianas a grandes de aguas lénticas permanentes (Hylorina, Batrachyla antartandica y Atelognathus) o temporarias (Pleurodema, Batrachyla taeníata y Batrachyla leptopus) y el grupo más divergente, que comprende las larvas de alimentación endotrófica (Eupsophus y Rhinoderma). La historia de la batracofauna patagónica puede ser rastreada desde el Jurásico, con fósiles de leptodactílidos desde el Cretácico, que indican que algunos de los grupos actuales (pertenecientes a los telmatobinos) tuvieron una distribución mucho más amplia que la actual, en relación con la mayor distribución que estos bosques tuvieron en el pasado en Patagonia. Sobre la base del análisis de los patrones de distribución actual, las relaciones filogenéticas, la antigüedad de algunos grupos y su distribución pasada, se pueden reconocer cuatro elementos batracofaunísticos. El primero está compuesto por leptodactílidos endémicos y primitivos de la subfamilia de los telmatobínos con fósiles en el Cretácico y Terciario de Patagonia y por el único representante de los rinodermátidos, endémico de los bosques templados australes; el segundo elemento contiene las dos especies de Pleurodema, género de zonas templadas de Suramérica que han invadido zonas tropicales; un tercer elemento está constituido por Atelognathus con una distribución actual en Patagonia andina y extraandina altamente endémica que debe interpretarse como relictual; el cuarto elemento está constituido por las tres especies de Bufo, género de posible origen suramericano y de amplia distribución en el mundo. Se postulan varias formas de recolonización postglacial de los anuros en los bosques de la vertiente oriental de la cordillera: una a partir de los bosques del oeste de la cordillera a través de pasos transcordilleranos bajos, otra a partir de refugios de bosque al este de la cordillera y la tercera, probablemente utilizada por las especies más tolerantes a la sequedad, a través de los ambientes no glaciados del este. Finalmente, se analiza el estado de conservación de las especies y se discuten los aspectos más críticos para su supervivencia. En general, la batracofauna de los bosques andinopatagónicos goza de una protección efectiva en territorio argentino, que abarca la posible variación de sus poblaciones en el gradiente latitudinal.

Abstract:
The batrachofauna of the austral forests of South America is made up of three anuran families: leptodactylids, bufonids and rhinodennatids. It comprises 38 species and is highly endemic, with a greater proportion of restricted endemisms on the western slopes of the cordillera. The austral forests are the only temperate forests in South America. They are located in the south of the Andes Cordillera, mainly on the western slopes, while on the eastern slopes, in Argentine territory, they stretch more than 2,000 km over a narrow strip between about 37° and 55° LS. The evolutionary history of the forests has been affected by marine transgressions, the Andean orogeny, the desertification of vast areas, glaciations, volcanism and long isolation from other forest systems in the continent. All these events affected the history of its batrachofauna, and added to evolutionary processes and ecological interaction, are the cause of the present composition and structure of the batrachofauna. The batrachofauna of the forests of the eastern slopes of the Patagonian Andes comprises 20 anuran species: 16 leptodactylids (Alsodes australis, A. gargola, A. aff. montícola, Atelognathus aff. grandisonae, A. nitoi, A. salai, Batrachyla antartandíca, B. fitzroya, B. leptopus, B. taeniata, Eupsophus calcaratus, E. emiliopugini, E. roseus, Hylorina sylvatica, Pleurodema bufonina, P. thaul) three bufonids (Bufo rubropunctatus, B. spinulosus papillosus, B. variegatus) and one rhinodennatid (Rhinoderma darwinii). On the eastern slopes of the cordillera, maximum species richness for forest batrachofauna is found between 41° and 42° LS. The number of species declines gradually southwards with declining temperatures, until only two species are lefi (Bufo variegatus and Pleurodema bufonina). Species richness declines drastically eastwards, with declining rainfall. The species which best tolerate the lack of moisture reach the eastern limits of the forests, and one (Bufospinulosus papillosus) even ranges beyond the forest and into the Patagonian steppe. There is a net drop in species richness with altitude. Only three species can live over 1,700 m above sea level: Alsodes gargola, Bufo variegatus and Pleurodema bufonina. The wide latitudinal and altitudinal range of the subantarctic forest and the variation in rainfall both determine a wide range of terrestrial and aquatic environments. The Valdivian forest and various types of very humid forest have maximum richness and contain all the most exacting species for environmental humidity, vegetation densityand temperature (Batrachyla antartandica, B. fitzroya, Eupsophus emiliopugini, B. leptopus, E. calcaratus, E. roseus, Hylorina sylvatica, Rhinoderma darwinii, Alsodes aff. monticola and Bufo variegatus). The range of other, more tolerant species extends to the driest forests and thickets, and even into the steppe. Nearly all the species inhabit the forest floor, and only two of them are able to climb (Batrachyla leptopus and Hylorina sylvatica). Another two species (Alsodes gargola and A. australis) are closely associated to aquatic environments. Most of the species have a primitive reproductive mode, with aquatic oviposition and tadpoles. Others show trends to a greater terrestriality with oviposition and part of their development taking place on the wet forest ground (Rhinoderma, Batrachyla) or in small water holes in the ground (Eupsophus). Four groups of larvae can be identified according to their ecological adaptation: a group of large, slow-developing larvae adapted to living in cold mountain streams (Alsodes), a group of small, rapidly-developing larvae in temporary lentic waters (Bufo), a group of medium to large larvae in permanent lentic waters (Hylorina, Batrachyla antartandica and Atelognathus) or in temporary lentic waters (Pleurodema, Batrachyla taeniata and Batrachyla leptopus) and the most divergent group, made up of the endotrophic larvae (Eupsophus and Rhinoderma). The history of the Patagonian batrachofauna can be traced back to the Jurassic, with leptodactylid fossils dating back to the Cretaceous, indicating that some present groups (belonging to the telmatobiines) were once much more widely distributed than they are today, related to the wider distribution of forests in Patagonia. On the basis of the analysis of present distribution patterns, phylogenetic relations, the antiquity of some groups and their past distribution, four batrachofaunistic elements can be recognized. The first comprises the primitive, endemic leptodactylids from the telmatobine subfamily with fossils in the Patagonian Cretaceous and Tertiary, and the only representative of the rhinodermatids, which is endemic to the austral temperate forests. The second element contains the two Pleurodema species, a genus from temperate zones in South America which has invaded tropical zones. A third element contains Atelognathus, which is now distributed in the andean and extra-andean Patagonia, is highly endemic and must be interpreted as a relic. The fourth element is made up of the three Bufo species, possibly of South American origin and now widely distributed in the world. Various theories are suggested to explain how anurans could have recolonized the forests on the eastern slopes of the cordillera after the glaciations either from the forests on the western slopes of the cordillera through low mountain passes, or from forest refuges on the east of the cordillera, or thirdly (probably used by the species most tolerant of lack of humidity) from eastern environments which were not glaciated. Finally, the state of conservation of the species is analyzed and the aspects most critical to their survival are discussed. On the whole, the batrachofauna of the Patagonian Andes forests has an effective protection in Argentina, which covers the possible variation of their populations on a latitudinal gradient.

Terebiznik, Mauricio R.. "Alfa-amilasa de Aspergillus oryzae : estudios de producción por fermentación en sustrato sólido, purificación y estabilización" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las condiciones de fermentación para obtener una máxima producción de α-amilasa utilizando salvado de trigo como sustrato de la FES resultaron: humedad inicial 58% (bh), temperatura 35°C, pH inicial 6,2-6,5. En estas condiciones el máximo de producción de enzima es alcanzado entre las 36 y 48 hs de fermentación. Se estudió la influencia del pH inicial en la sintesis de la α-amilasa relacionándose la falta de producción de la misma a pHs inferiores a 5,5 con un posible mecanismo de regulación de la sintesis de la enzima por el pH del medio de cultivo. Se desarrolló un modelo matemático que describe la pérdida de peso seco del sistema y el consumo de sustrato a lo largo de la fermentación. Este modelo vincula dichas variables con el desarrollo de la biomasa, por lo tanto tiene la potencialidad de ser un método sencillo para la estimación del crecimiento del micelio en FES. En las condiciones arriba mencionadas la cantidad de proteína correspondiente a la α-amilasa es de un 25-30 % de las proteínas totales presentes en el extracto de fermentación y la presencia de actividades enzimáticas contaminantes resultó minima. La α-amilasa fue purificada a partir de los extractos de fermentación empleando DEAE - Sepharose y Concanavalina A - Sepharose. El método de purificación desarrollado permite purificar a la α-amilasa 3-4 veces así como la remoción de otras actividades enzimáticas y pigmentos producidos durante la fermentación. Se estudió la inactivación térmica de la α-amilasa de Aspergillus oryzae deshidratada. La vida media de la enzima fue incrementada mediante su liofilización, pero este incremento resultó mayor cuando la enzima fue deshidratada en presencia de carbohidratos o polivinilpirrolidonade tal forma que ésta quede incluida dentro de una matriz sólida. Los efectos de protectores de las matrices no pudieron ser explicados solo en base al estado vitreo de los sistemas, dado que la inactivación térmica de la enzima así como el pardeamiento no enzimático ocurrieron en todas las matrices vitreas estudiadas y a una velocidad particular para cada sistema. Para una matriz dada la protección resultó máxima en el estado vitreo, mientras que las condiciones que favorecieron la cristalización de las mismas produjeron una rápida inactivación de la enzima y un incremento del pardeamiento no enzimático. La matriz de trehalosa demostró caracteristicas superiores brindando una mayor protección contra la inactivación térmica e inhibiendo más efectivamente el pardeamiento no enzimática, aún en condiciones en que la matriz se encontró en estado gomoso (hasta 100°C). Los resultados concernientes al distinto grado de protección dado por este azúcar a las diferentes enzimas presentes en el extracto sugieren la existencia de una interacción enzima-matriz necesaria para la estabilización y para la cual la naturaleza de la molécula proteica es de relevancia.

Abstract:
Maximal α-amylase production on wheat brand as substrate of the SSF was achieved by cultivating Aspergillus oryzae NRRL 3485 at initial moisture content of 58%, a temperature of 35°C and an initial pH range of 6,2-6,5. At these experimental conditions, the maximal production of the enzyme was reached between 36-48h of fermentation. The enzyme in the crude extract was around 25-30% of total proteins, being the amount of other contaminating enzymes produced by the fungus not significantly important. The effect of the initial pH of the SSF on the enzyme production was studied. Regarding the drop on the α-amylase yield when the initial pH of the substrate was lower than 5,5, a possible regulation mechanism related to the pH of the substrate was suggested for the synthesis of enzyme in SSF conditions. A mathematical model that describes the loss of dried weight and substrate consumption at the optimal conditions of the SSF was developed. As this mathematical model makes a connection between those fermentation variables and the biomass generation, it could be considered a potentially tool for mycelia growth indirect measurement in SSF. The α-amylase was purified from the fermentation extracts by chromatography on DEAE-Sepharose and Concanavaline A-Sepharose. This proposed method allowed us to obtain a 3-4 times purified α-amylase preparation, free of co-produced pigments and contaminating enzymes. Thermal inactivation of the dehydrated α-amylase was studied. Removal of water increased thermal stability of the enzyme. Furthermore, a greater enhanced of the thermal stability was reached when the enzyme was dehydrated in the presence of carbohydrates or polyvnylpyrrolidone, wich constitute a matrix that included the enzyme. Since inactivation of α-amylase and non enzymatic browning took place even in the glassy matrices, the protective effect could not be explained only based on the glassy conditions of the systems. For any particular matrix the protective effect was maximal when it was glassy, while conditions which favored matrix crystallization lead to rapid inactivation of the enzyme. Trehalose matrix was superior in order to stabilize Aspergillus oryze α-amylase and to prevent the non-enzymatic browning of the fermentation extract. These advantages of trehalose could be achieved even if the sugar matrix was in rubbery state (100°C). The effect of trehalose matrix on the thermal stability was different for each one of the enzymes present in the fermention extract. This fact suggests that specific trehalose-protein interactions, due to the nature of the protein molecule are of relevance for the stabilization of the enzyme.

Strachan, Alejandro Hernán. "Transiciones de fase en sistemas pequeños" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis estudiamos procesos de fragmentación en gotas clásicas desde un punto de vista microscópico. Utilizamos la técnica de dinámica molecular para simular el proceso de expansión y fragmentación de gotas excitadas térmicamente. Estudiamos gotas tridimensionales formadas por N = 147 partículas y bidimensionales de masa N = 100; en ambos caso las partículas interactúan mediante el potencial de Lennard Jones. Estudiamos el proceso de formación y emisión de fragmentos, utilizando avanzados algoritmos de reconocimiento de estructuras. Demostramos que los fragmentos se forman en el espacio de fases mucho antes de ser emitidos, i.e. antes de formarse en el espacio de las configuraciones. Proponemos y calculamos tres definiciones de temperatura para los sistemas en expansión, relacionadas a distintos grados de libertad: la temperatura local, la temperatura interna de los fragmentos y la temperatura local de fragmentos. Encontramos que las distintas definiciones dan valores similares, lo que indica que el sistema alcanza cierto grado de equilibrio local. Poder definir una temperatura en simulaciones de fragmentación nos permite extender el concepto de la curva calórica (temperatura vs. energía), para abarcar el proceso de fragmentación. La temperatura del sistema en el momento de formación de fragmentos es independiente de la energía en todo el rango estudiado, por lo que el fenómeno de fragmentación aparece como un “plateau” en la curva calórica. Por otro lado investigamos diversas señales que pueden indicar la presencia de un fenómeno crítico en fragmentación. Hicimos esto mediante el análisis del máximo exponente de Lyapunov local en el tiempo, de los espectros de masa y las fluctuaciones normalizadas de la masa del máximo fragmento y de energía potencial en función de la energía total del sistema. Encontramos que existen señales que indican la posibilidad de una transición de fase de segundo orden para una dada excitación. Para demostrar este punto es necesario realizar mas estudios.

Abstract:
In this thesis we study the process of fragmentation of small, classical drops, from a microscopic point of view. We performed molecular dynamics computer experiments in order to study the expansion and disassembly of thermally excited drops. We considered three dimensional drops formed by N = 147 particles and two dimensional drops with N = 100; in both cases the particles interact via the Lennard Jones pair potential. We studied the process of fragment formation and emission, using advanced cluster recognition algorithms. We showed that the fragments form in phase space, long before they are emitted. We define and calculate three different temperatures related to different degrees of freedom: the local temperature, the cluster internal temperature and the cluster local temperature. We showed that the different definitions of temperature yield very similar values, which means that the expanding system attains local equilibrium. Being able to define temperature in our simulations enables us to extend the concept of caloric curve (temperature vs. energy), to the high energy region of fragmentation. We find that the temperature at break-up time is almost independent of the total energy of the system, and consequently to the way it disassembles. In this way the process of fragmentation appears as a plateau in the caloric curve. We also studied several signals that might indicate the presence of a critical phenomena in fragmentation. In order to achieve this goal we analyzed the local maximum Lyapunov exponent, the mass spectra and normalized fluctuations of the size of the maximum cluster per event and fluctuations of potential energy. We found that several signals indicate the possible the presence of a second order phase transition. In order to prove this statement more studies are needed.

Sternik, Gabriel. "Estudio de la leucemia linfoblástica aguda: Interferón, genes supresores de tumor y el receptor T" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En líneas celulares de origen leucémico se han encontrado deleciones en el brazo corto del cromosoma 9, donde se localizan los genes del interferón de tipo I, lo que en un principio hizo suponer que el interferón se comportaba como un gen supresor de tumor. Se propuso ver si la producción de interferón estaba alterada en las leucemias linfoblásticas agudas (LLA), y si esas alteraciones génicas estarían relacionadas con la capacidad de producción de interferón a por las células malignas al ser inducidas con virus Sendai. Se determinó la capacidad de las células leucémicas de 21 pacientes de LLA, de la línea celular establecida K 562 y de dadores normales de producir interferón a "in vitro" al ser inducidos con virus Sendai con un priming de interferón α. La producción de interferón a por los blastos leucémicos y células normales fue muy variable oscilando entre 633 a 8850 pg/ml/5x10 6 células, no siendo estadísticamente significativo, tampoco se hallaron diferencias entre los subgrupos de LLA. En 4 de los 7 casos estudiados por Southern blot se pudo estudiar la producción de interferón α, presentando uno de ellos deleción de genes de interferón α. De las 21 leucemias en dos casos produjeron una cantidad de interferón α mínima. Esto sugiere que la malignidad en las LLA con baja producción de interferón α podría deberse a la pérdida de algún gen supresor de tumor. Se investigó la frecuencia y asociación de alteraciones del p 16, el interferón α y el interferón β en un total de 39 casos de LLA. De ellos, diez pacientes (25,6 %) presentaron anormalidades de al menos uno de los tres genes estudiados. Se encontró en un porcentaje del 13% deleciones en los genes del interferón α y β, así como también en los recientemente identificados genes supresores de tumor p15 y p16 (23%) los cuales se encuentran próximos a los genes el interferón. Estos datos indican que en las LLA, representando un cuarto de las LLA totales estudiadas el gen p16 está delecionado con mayor frecuencia que los genes de los interferones de tipo 1. Además de p16, el 37,5% está asociado con deleciones del interferón, sugiriendo una asociación entre ambas. Estos datos sugieren que la ausencia de p16, inhibidor de las ciclinas, podría modificar el ciclo celular normal y favorecer la transformación blástica. Su asociación con la deleción de los genes de los interferones de tipo I podría constituir eventos de la leucemogénesis. El porcentaje de deleciones, a su vez dependió del fenotipo de la célula leucémica, siendo mayor en los casos de LLA T que en aquellas precursoras B. Para un mejor tratamiento de la enfermedad es necesario partir de un buen diagnóstico, para lo cual se buscó detectar clonalidad, de tipo B o T por medio de la identificación de fragmentos reordenados, ya sea de la cadena pesada de las inmunoglobulinas (clonalidad B) o de la cadena γ del receptor de los linfocitos T (clonalidad T). A su vez por medio de un mapeo de restricción se llegó a una correcta identificación del subtipo de reordenamiento Vγl en las LLA T. Esto cobra importancia, sobre todo para el seguimiento posterior de la enfermedad mínima residual, sin embargo no es suficiente para la determinación del linaje celular.

Abstract:
Type I Interferon genes are located in the short arm of chromosome 9, where deletions have been found in cell lines originated from leukemia patients. This arised the idea of interferon acting as a tumor suppressor gene in acute lymphoblastic leukemia (ALL). Interferon production was measured in ALL and compared to normal healthy donors. No significative differences were found between groups. By Southern blot analysis α and β interferon gene deletions were found in 13% of ALL patients. The putative tumor-suppressor gene p16 was mapped to human chromosome 9p2l, close to the interferon α cluster. The frequency and association of gene alterations of pl6, interferon α and interferon β were investigated in a total of 39 Acute Lymphoblastic Leukemia (ALL) patients. Of them, ten patients (25.6%) presented abnormalities of at least one of the three genes studied. We also found p15 and p16 gene deletions in a higher frequency (23%). These fidings supports the idea that the role of the interferon as tumor suppressor gene is more related to its location than its function. To have a more accurate diagnosis of acute leukemias, we investigated B and T cell clonality by identifying PCR segments of rearranged immunoglobulin heavy chain genes and γ T cell receptor (TCR) genes, respectively. In order to identify the rearranged Vγl TCR gene to further detect minimal residual disease a restriction analysis was performed. Although we can detect clonality by PCR amplification of IgH and/or γTCR gene rearrangement, in ALL, it can not be use for cell lineage identification.

Sombra, Martín. "Estimaciones para el Teorema de Ceros de Hilbert" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Soler Illia, Galo Juan de Avila Arturo. "Estudio de la síntesis de precursores de óxidos mixtos de Cu-Ni y Cu-Zu por el método de alcanización homogénea" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el presente trabajo se exploran las posibilidades de la técnica de hidrólisis de urea a temperaturas moderadas (80-90°C) para la preparación de precursores de óxidos mixtos cobre-zinc y cobre níquel. En primer lugar, se caracteriza el comportamiento de precipitación de los sistemas simples de los tres metales: Ni(II), Cu(II) y Zn(II). Mas adelante, se establecen las condiciones para una coprecipitación controlada, regulando la relación Cu(II):M(II) -M Ni o Zn-, la estructura, la morfología y el tamaño de las particulas obtenidas. Desde un punto de vista básico, se estudia la compatibilidad de iones d8 y d¹°,con el Cu(II). Los entornos de coordinación son completamente diferentes, tanto en la solución como en los sólidos. Por otro lado, estos sistemas tienen un definido interés en Química de Materiales, como algunos de los precursores (hidróxidos de Ni(II), ZnO, o CuO). Los óxidos CuO-ZnO tienen aplicación en la síntesis de metanol. La actividad de los mismos depende de la estructura de los carbonatos básicos precursores. Los óxidos Cu-Ni también tienen interés en catálisis. En la primera parte se estudia la evolución de los sistemas simples de Cu, Zn y Ni. Se describen los procesos que llevan de la solución a los sólidos, y su evolución a lo largo del envejecimiento en las soluciones de partida. Estos procesos involucran una compleja interrelación de las químicas acuosa y coloidal de cada metal. La segunda parte describe los mecanismos de precipitación de fases mixtas. En el caso del sistema Cu-Zn, un hidróxido amorfo mixto puede evolucionar a auricalcita, (Zn1-xCux)5(OH)6(CO3)2, malaquita zinciana Cu2-XZnx(CO3)(OH)2 (x<0,l), o tenorita sustituida (Cu1-xZnxO) (x<0,05), o mezclas, según la proporción de Zn/Cu. Los precursores obtenidos en el sistema Cu-Ni en condiciones de alta proporción de Ni(II) corresponden a α-Ni1-xCux(OH)2 turbostrático, malaquita niqueleana, Cu2-xNix(CO3)(OH)2(x<0,06). Los sistemas intermedios conducen a mezclas. El α-Ni1-xCux(OH)2 se revela como un excelente precursor de óxidos mixtos de Cu-Ni, generando CuxNi1-xO (x≤0.3).

Abstract:
In the present work, the possibilities of urea hydrolysis (thermal ageing, at 80-90°C) as a low supersaturation method for the synthesis of mixed Cu-Zn and Cu-Ni oxide precursors are explored. First of all, the precipitation behaviour of the three single metal systems (Ni(II), Cu(II), Zn(II)) is characterised. The second step is to establish the conditions for a controlled coprecipitation, therefore controlling the structure, morphology and size of the particles. From a basic point of view, the compatibility of the d8 and d¹° ions with Cu(II) is studied. The coordination environments in solution and the solid phase are quite different in the three cases. Furthermore, these systems are very interesting in the field of Materials Chemistry: some precursors (nickel hydroxide, ZnO, CuO), or the mixed Cu-Zn oxides, mainly employed as catalysts in methanol synthesis. The activity of these catalysts is strongly determined by the precursor from which they were prepared. The first part is devoted to the single systems of Cu(II), Zn(II) and Ni(II). The processes leading form solution to the precipitated solids are followed, and the evolution in the mother liquors is discussed These behaviours involve a complex relationship of aqueous Chemistry and colloidal phaenomena. The second part describes the precipitation mechanisms of mixed phases. In the case of Cu-Zn, an amorphous mixed (hydrous) oxide is readily converted into aurichalcite, (Zn1-xCux)5(OH)6(CO3)2, zincian malachite, Cu2-xZn(CO3)(OH)2 (x<0,l), or zincian tenorite (Cu1-xZnxO) (x<0,05), upon ageing. Mixtures of two solid phases may turn out, depending on the Cu:Zn ratio. In the case of Cu-Ni systems, the amorphous precursor turns into a mixed turbostratic α-Ni1-xCux(OH)2 (x<0,4), or Ni(II) malachites, Cu2-xNix(CO3)(OH)2 (x<0,06), intermediate systems leading to segregation. The α-Ni1-xCux(OH)2 reveals itself as an excellent precursor of CuxNi1-xO (x≤O,3).

Sánchez Bettucci, Leda. "Evolución tectónica del cinturón DOM feliciano en la región minas - Piriápolis, República Oriental del Uruguay" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La región bajo estudio está representada por diversas unidades litológicas que fueron definidas y ubicadas estratigráficamente de diferente forma a través del tiempo. Entre ella se destaca el Grupo Lavalleja que conforma dentro de esta región una unidad litoestratigráfica y estructural que ha sido nominada, estudiada y caracterizada a través de distintas propuestas desde principios de siglo. Esta secuencia volcanosedimentaria, que ocupa la mayor parte de la zona estudiada, fue plegada y afectada por eventos metamórficos durante el ciclo brasiliano, en el Proterozoico superior, e intruida por numerosos cuerpos graníticos. Hacia el este afloran granitos, granitos protomiloníticos, mármoles esquistos biotíticos, anfibolitas, etc., correspondientes al Grupo Carapé el cual es tradicionalmente considerado como una unidad afectada por un metamorfismo en grado mas alto que aquel que afectó al Grupo Lavalleja. Uno de los exponentes mas característicos de la región lo conforma el Complejo Sierra de las Animas. Este se encuentra representado por unidades volcánicas, volcano sedimentarias y plutónicas neoproterozoicas a eopaleozoicas, en discordancia sobre las anteriores, que afloran desde la costa del Río la Plata en el balneario Piriapolis, hasta a unos 50 kilómetros tierra adentro en dirección norte-sur. Los depósitos postorogénicos estan representados por las Formaciones Las Ventanas, Playa Hermosa y San Carlos de edad cambro - ordovicica. Las rocas volcánicas y conglomerados asignados temporalmente al Mesozoico afloran en el norte del área estudiada. En dicha región el cerro Arequita, de composición riolítica, constituye el representante más conspicuo. Los esquemas y modelos interpretativos previos son escasos y han sido realizados fundamentalmente usando datos de índole general, faltando una base de datos mínima para realizar una interpretación sustentada a partir de información geológica, petrográfica, geoquímica, geocronológica y paleomagnética. El objetivo del presente trabajo es analizar la geología de la región Minas Piriápolis tanto desde el punto de vista petrográfico, estructural, geoquímico y geocronológico. Esto implica tratar de resolver la estratigrafia del Proterozoico superior y el Paleozoico inferior para esta región y reconstruir a través de la elaboración de un mapa geológico regional a escala 1:50.000 las relaciones espaciales de las diferentes unidades. Sobre la base de datos obtenidos se definen los ambientes de sedimentación de las secuencias postorogénicas y su relación con el Grupo Lavalleja, el Complejo Sierra de las Animas y granitoides asociados al Complejo Carapé.

Simonelli, Gabriela. "Simulación por computadora de defectos puntuales en Fe, Mo y Cr" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se estudian propiedades estáticas y dinámicas de defectos puntuales en metales de transición de estructura bcc, en particular, hierro, molibdeno y cromo. La técnica empleada es la de simulación por computadora utilizando potenciales semi-empíricos. Los modelos de potenciales utilizados son el Método de Átomo Embebido (EAM), ampliamente conocido en la literatura, y el modelo de Defecto Embebido (ED), extensión del primero que incorpora una descripción de interacciones angulares. A diferencia del EAM, el modelo ED, desarrollado en nuestro grupo de trabajo, permite reproducir correctamente el comportamiento elástico de materiales como el Cr con presión de Cauchy, Pc = (c12 - c44) / 2, negativa . Se construyen potenciales EAM y ED para Fe y Mo, y ED para Cr. Estos potenciales son utilizados para estudiar propiedades dinámicas de la red perfecta, propiedades estáticas de la vacancia, difusión a través de un mecanismo de vacancias y propiedades de configuraciones de autointersticiales. El esquema de construcción de los potenciales es similar en los tres metales estudiados y los datos experimentales ajustados son los mismos. Se desarrollan métodos para analizar las diferencias obtenidas con los dos modelos de potencial utilizados para Fe y Mo y para interpretar los resultados de Cr. Esto permite evaluar las contribuciones de los términos angulares a las propiedades calculadas y comparar nuestros resultados con datos experimentales y cálculos realimdos en la literatura. El estudio de propiedades de defectos en Cr es especialmente interesante, por ejemplo, se desconoce el mecanismo reSponsable de la difusión en el mismo. En este trabajo se obtiene un volumen de relajación de la vacancia positivo en este metal, resultado que mostrarnos es consistente con el hecho experimental Pc < 0. Otras propiedades calculadas no presentan diferencias cualitativas entre Fe, Mo y Cr. El proceso de migración de autointersticiales en Fe y Mo es otro tema en discusión en la literatura. Se encuentra aqui que para los tres metales estudiados el salto favorecido para la migración de la configuración estable, dumbbell <1lO>, involucra traslación y rotación. En Fe, se obtiene un buen acuerdo de la energía de migración calculada con el valor experimental.

Abstract:
Static and dynamical properties of point defects in bcc transition metals, in particular, iron, molybdenum and chromium, are studied. The computer simulation technique with semi-empirical potentials is employed. The potential models used are the Embedded Atom Method (EAM), well known in the literature, and the Embedded Defect (ED). The latter is an extension of the EAM that includes a description of angular interactions. Unlike the EAM, the ED model, developed in our workgroup, can reproduce correctly the elastic behavior of materials having a negative Cauchy pressure, Pc = (c12 - c44) / 2, such as Cr. EAM and ED potentials for Fe and Mo, and an ED potential for Cr are constructed. These potentials are used to study perfect lattice dynamical properties, vacancy static properties, vacancy diffusion and properties of self-interstitials configurations. The construction scheme of the potentials is similar for the three metals studied and the experimental data fitted are the same. Methods are developed in order to analyze the differences between the two models used in Fe and Mo and to explain the results in Cr. All this enables to evaluate the contributions of the angular terms to the properties calculated and to compare our results with experimental ones and calculations performed in the literature. The study of defect properties in Cr is specially interesting because the mechanism responsible for self-diffusion in this metal is not yet determined. In this work, a positive vacancy relaxation volume is obtained for this metal and the consistency of this result with the experimental Pc < 0 is shown. Other properties studied do not present qualitative differences in the results between Fe, Mo y Cr. The migration process of self-interstitials in Fe and Mo is another open discussion in the literature. We found here that for the three metals studied, the favored jump for the migration of the dumbbell <110> stable configuration, involves both rotation and translation. In Fe, a good agreement is obtained between the calculated migration energy and the experimental value.

Schilman, Pablo Ernesto. "Factores que afectan la reproducción de las vinchucas: Aspectos fisiológicos y comportamentales" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El presente trabajo de Tesis analizó diversos aspectos de la reproducción en dos especies de vinchucas, Rhodnius prolixus y Triatoma infestans, con un enfoque comportamental a partir del estudio de diferentes eventos puntuales del proceso reproductivo. En primer lugar, se analizaron en detalle las señales de estridulación producidas frente a una perturbación mecánica artificial y como respuesta de rechazo a los intentos de cópula de los machos en hembras de R. prolixus. Al igual que ocurre en T. infestans, se trata de dos señales diferentes que actúan en dos contextos comportamentales distintos. Se analizó en forma cuantitativa y controlada la importancia de la cópula tanto en la fecundidad, medida como número de huevos puestos, como en la fertilidad, porcentaje de eclosiones, para la especie T. infestans. Se verificó una distribución agrupada de los huevos puestos por hembras de R. prolixus, aunque no pudo hallarse ninguna clave química responsable de tal comportamiento. Se determinó la preferencia térmica para la oviposición en relación con la temperatura preferida para permanecer en R. prolixus, analizando si buscan activamente la temperatura del sitio de oviposición. Por último, se demostró la ritmicidad circadiana endógena de la eclosión del huevo en R. prolixus.

Abstract:
The present Thesis work analyses some aspects of the reproduction in two species of blood-sucking bugs, Rhodnius prolixus and Triatoma infestans, by means of a behavioural approach, and focussing on particular aspects of the reproductive process. First, stridulatory signals evoked by a mechanical perturbation or as a response of females to copulatory attempts performed by males were analysed in detail. As in T. infestans, they appear as two distinct signals acting in two different behavioural contexts. Second, quantitative measures of the role of the copula on fecundity, i.e., the number of eggs laid, and fertility, i.e., number of hatched eggs, were performed in T. infestans. An aggregated distribution of laid eggs was evinced in R. prolixus, although this behaviour does not seem to be mediated by chemical signals. Besides, the thermopreference for oviposition in relation to the temperature preference of R. prolixus was studied. Finally, the existence of an endogenous circadian clock controlling egg hatching was demonstrated for R. prolixus.

Sanchez Lopez, María Isabel. "Factores que limitan la abundancia de los roedores muridos en el Delta del Paraná" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se evalúan los efectos de: 1) el clima (precipitaciones, temperaturas y heladas), 2) el alimento y 3) La dispersión de los roedores, en la determinación de sus números poblacionales. Las especies estudiadas son: Akodon azarae, Oxymycterus rufus, Oligoryzomys delticola, Oligoryzomys flavescens y Scapteromys tumidus. Las fluctuaciones climáticas determinan cambios en el desarrollo de la vegetación y por lo tanto en la cantidad de alimento y refugio para los roedores. Este evento, sumado a las interacciones competitivas, influyen en la actividad reproductiva de los mismos. Altas abundancias de O. rufus restringen la fijación de territorios de los individuos de A. azarae, inhibiendo su actividad reproductiva y promoviendo su dispersión. Las precipitaciones abundantes contribuyen al incremento en el nivel de agua de los canales, favoreciendo la calidad del hábitat para O. rufus y S. tumidus. O. delticola asentúa el uso del estrato arbóreo durante la época reproductiva, evitando así las interacciones interespecíficas. Al finalizar este período su dispersión (a nivel del suelo) incrementa abruptamente como consecuencia de las altas densidades en los estratos superiores. O. flavescens es la especie con más características de "estratega r”, por lo que posee la menor capacidad competitiva. En consecuencia su capturabilidad y actividad reproductiva están fuertemente condicionadas por la densidad del resto de las especies de roedores.

Abstract:
The effects of: 1) climate (precipitations, temperatures, and frosts), 2) food, and 3) rodent dispersal, are evaluated in relation to the determination of their population numbers. The studied species are: Akodon azarae, Oxymycterus rufus, Oligoryzomys delticola, Oligoryzomys flavescens, and Scapteromys tumidus. Climatic fluctuations determine changes in vegetation development, and consequently in the amount of food and refuge for rodents. This event added to competitive interactions, influence rodent reproductive activity. High abundances of O. rufus limit the establishment of territories by the individuals of A. azarae, by inhibiting their reproductive activity and promoting their dispersal. Abundant rainfalls contribute to increase the water level in the channels, thus improving the habitat quality for O. rufus and S. tumidus. O. delticola emphasizes the use of the arboreal stratum during the reproductive season, avoiding in this way interspecific interactions. At the end of this period its dispersal (at the ground level) increases abruptly as a consequence of the high densities in the upper strata. O. flavescens is the species that presents more characteristics of a "r strategist", hence it has the lowest competitive ability. Therefore, its catchability and reproductive activity are strongly conditionated by the density of the rest of the rodent species.

Salles, María Alejandra. "La circulación atmosférica de superficie en el sur de Sudamérica y su relación con las anomalías de temperatura y precipitación" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El estudio de la circulación atmosférica diaria permite conectar su comportamiento con la temperie asociada a la misma y por este medio, obtener mayor conocimiento sobre las relaciones y causas de las anomalías climáticas observadas. El objetivo del presente trabajo es analizar la circulación atmosférica diaria sobre la región del sur de Sudamérica mediante el estudio de los campos de presión de superficie, así como también, deterrninar sus características y variaciones, a fin de relacionarlas con las anomalías de temperatura, precipitación y presión observadas en el área. Los resultados y conclusiones de este tipo de estudios constituyen una gran contribución al pronóstico climático de mediano plazo, proporcionando herramientas para el testeo de los resultados de los modelos climáticos al aportar información empírica sobre la relación entre la circulación y las fluctuaciones del clima. El período elegido para el estudio abarca los años comprendidos entre los años 1972 y 1983, durante el cual se presentaron los eventos ENSO 1972/73, 1976/77 y 1982/83, con diferentes características en cada uno de ellos. Durante este período también se registró un "salto" climático alrededor de 1977. Se analizan mediante Componentes Principales, los campos diarios de presión de superficie para el ciclo anual, a fin de obtener un catálogo de los tipos sinópticos que predominan en el área estudiada, determinando los patrones característicos y la frecuencia de los mismos. Estos resultados conforman la referencia climático-sinóptica que permite estudiar separadamente los 3 eventos ENSO, asociando las anomalías de presión, temperatura y precipitación encontradas con los cambios en la circulación. Por otra parte, se comparan los años de evento ENSO con aquellos intermedios considerados "normales", en los que no se detectaron anomalías en el Pacifico Ecuatorial, con el objetivo de constrastar sus caracteristicas. Para esto se utiliza el análisis de Componentes Principales y el Análisis Espectral, en cada uno de los años, veranos (diciembre, enero y febrero) e inviernos (junio, julio y agosto) del período correspondiente. Los resultados muestran que todos los meses del año presentan tipos sinópticos similares independientemente de la estación, observándose solo algunas diferencias intermensuales, que concuerdan con las características climáticas conocidas. Estos rasgos se observan además durante los años ENSO, así como también durante aquellos considerados "normales". La principal variabilidad de los campos de presión de superficie, podría ser adjudicada principalmente a cambios en la frecuencia de los principales tipos sinópticos, representada por la varianza explicada por cada modelo, más que a cambios de forma y ocurrencia de diferentes tipos. Se evidencia un cambio en la varianza explicada los tipos sinópticos entre las muestras anuales anteriores y posteriores a 1977, no observándose esta característica en las muestras correspondientes a los veranos y a los inviernos. El estudio de los años de ocurrencia de evento ENSO muestra que, en general, la presencia de este fenómeno tiene mayor impacto en el sur de Sudamérica durante los inviernos que durante los veranos. El área de estudio responde más sensiblemente al IOS que a la anomalía de TSM, observándose anomalías opuestas entre los sucesivos años, en especial para los inviernos de los dos años que conforman el ciclo ENSO. Esto podría utilizarse como una contribución al pronóstico estacional en los años de ocurrencia de ENSO. Los años "normales", no muestran características de anomalías opuestas ni particularidades que puedan aportar al pronóstico estacional.

Abstract:
Daily atmospheric circulation study allows to connect its behaviour to the associated weather and by this mean to obtain a major knowledge on causes and relationships of observed climatic anomalies. The main objective of the present work is analysing daily atmospheric circulation over the southern region of South America by means of studying surface pressure fields as well as determining its features and variations so as to relate them with observed temperature, rainfall and pressure anomalies over the area. Results and conclusions of this sort of studies are of great contribution to the medium range climatic forecast, proportioning tools for testing climatological model outcomes, as they give empirical information on the relationship between circulation and climate fluctuations. The chosen period of study takes those years between 1972 and 1983, in which 1972-73, 1976- 1977 and 1982-83 ENSO events were presented with different features in each of them. During this period a climatic "jump" was also registered near about 1977. Daily surface pressure fields for the annual cycle are analysed by Principal Components, so as to obtain a catalogue of synoptic types which predominate over the studied area, determining typical patterns and their fkequencies. These results form the climatic-synoptic reference which permits to study separately the three ENSO events, associating encountered pressure, temperature and rainfall anomalies with circulation changes. On the other hand, ENSO event years are compared to those intermediate years regarded as "normal": in which Pacific Equatorial anomalies were not detected, with the aim of contrasting their behaviours. For this, Principal Components and Spectral Analysis are utilized in each of the years, summers (December, January and February) and winters (June, July and August) for the corresponding period. Results show that all months year round present seasonally independent similar synoptic types, noting only intermonthly differences that agree with known climatic features. Moreover, these features are observed during ENSO years as well as in those considered to be "normal". The main surface pressure field variability could possible be due to frequency changes of the principal synoptic types, represented by the accounted for variance of each model, more than being due to form and occurrence changes of different types. For the synoptic types explained variance between anterior and posterior to 1977 annual samples, a change is evident, being this not such way for samples corresponding to summers and winters. The study of ENSO events occurrence years show that generally the presence of this phenomena has a great impact over southern South America during winters and summers. This region replies more sensitively to the SOI than to SST anomalies, observing apposite anomalies among successive years, specially for winters of the two-year ENSO cycle. This could be used as a contribution to seasonal forecasting during years of ENSO events. Normal years do not show either opposite anomalies or particularities that may contribute to the seasonal forecasting.

Rubel, Diana Nora. "Investigaciones sobre el impacto de la Cava San Nicolás (Florencio Varela) : una intervención epidemiológica" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se evaluó el impacto ambiental de un basural extenso de 25 metros de profundidad ubicado en Florencio Varela, Buenos Aires, en un marco de investigación participativa. El basural se investigó desde dos ángulos, evaluándose: - su influencia sobre la calidad del agua subterránea de los acuíferos de consumo en la zona; y - su rol como posible amplificador de la transmisión de la leptospirosis a la población canina. El impacto del basural sobre las aguas subterráneas se refleja en un aumento de los niveles medios de ciertos parámetros en los sitios de muestreo situados lateralmente o aguas abajo del basural, tales como dureza, cloruro, hierro y manganeso. Se detectaron contaminantes tóxicos, cianuro y mercurio, aunque el últimose originaria también en otras fuentes de contaminación. El basural sería un factor de riesgo adicional para la transmisión de leptospirosis a la población canina, si bien otros factores de riesgo pueden mantener seroprevalencias relativamente elevadas en la población del área. Esto representa un riesgo para la población humana residente, ya que los perros actúan corno un reservorio de la infección y contaminan el medio. La información producida se comunicó a los actores sociales involucrados, lo que contribuyó a la eliminación del basural.

Abstract:
The study was aimed to evaluate the environmental impact of an extensive dump 25 meters deep located in Florencio Varela, Buenos Aires, Argentina. The dump was investigated from two points of view: - their influence on the ground water quality of the acuifers exploited in the area; and - their role as an amplifying factor of leptospiroses tranmission to local dog population. With regards to the impact on ground water quality, the results indicated a increase in the mean levels of some parameters in the sample sites located downstream or Laterally from the dump, such as hardness, chloride, iron and manganese. Toxic contaminants, specially cyanide and mercury, were detected, although other contamination sources would be present. Contact with the dump involves an additional risk to leptospiroses transmission to the dog population, although others risk factors could maintain high seroprevalences in the dogs. This constitutes a risk for local people, since the dog population acts as a reservoir and can contaminate the environment. The produced information was communicated to the involved social actors.

Rodriguez Suarez, Roberto J.. "Estudios sobre el proceso de regulación reductiva de la Fructosa-1,6-Bisfostasa cloroplastídica de colza (Brassica napus)" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En las plantas, la Fructosa-1,6-Bisfosfatasa de cloroplastos (CFBPase) cataliza la defosforilación irreversible de la fructosa-1,6-fosfato en el ciclo de Benson-Calvin. La CFBPase es una enzima clave en la regulación de la asimilación del C02 y su actividad específica es fuertemente regulada por luz, a traves de una cascada reductiva via Tiorredoxina. Los principales objetivos fueron: i) obtener una CFBPase recombinante útil como modelo de la contraparte cloroplastídica, ii) empleando mutagénesis sitio-dirigida, caracterizar el rol de las cist(e)inas en su estabilidad estructural, modulación y actividad catalítica, iii) analizar la multiplicidad de loci para la CFBPase en el alotetraploide B.napus y en sus parentales diploides B.campestris y B.oleracea. Construímos una cDNA library de expresión de hojas de colza y obtuvimos varios clones codificando la CFBPase. Luego expresamos y purificamos de E.coli la proteína recombinante, que mostró alta actividad enzimática. Su caracterización estructural y funcional estableció que es virtualmente idéntica a la contraparte cloroplastídica. Preparamos varias mutantes sitio-dirigidas por reemplazo de cisteínas diferencialmente afectadas en sus propiedades regulatorias, algunas de las cuales resultaron parcial o constitutivamente activadas. Determinamos que la Cys157 es crítica y que las Cysl74 y 179 también son participantes de la modulación reductiva. Proponemos un mecanismo que involucra tres residuos Cys, y donde se requiere la formación de diferentes disulfuros en las distintas subunidades del homotetrámero. La actividad catalítica no disminuyó por el reemplazo de ninguna de las siete Cys de la enzima. También encontramos que existen al menos dos loci por complemento haploide para la CFBPase en B.napus y en sus parentales B.oleracea y B.campestris. Ambos loci se expresan en hojas verdes y las enzimas recombinantes poseen actividades muy similares. En conjunto, estos análisis podrían tener un elevado impacto en los estudios orientados a manipular la velocidad de asimilación de C02 y la partición "fuente/sumidero” del fotosintato en una especie económicamente importante como la colza.

Abstract:
In plants, CFBPase catalyses the irreversible dephosphorylation of fructose 1,6-bisphosphate in the Benson-Calvin Cycle. This enzyme is a key regulator of C02 assimilation rate and its specific activity is strongly modulated by light through a reductive cascade via Thioredoxin. The main goals were to, i) obtain a recombinant CFBPase suitable as a model of the plastidic counterpart, ii) using site-directed mutagenesis, characterise the role that cyst(e)ines play in its structural stability, activation and catalytic processes, iii) analyse the multiplicity of loci for the CFBPase in the allotetraploid B.napus and its parental diploids B.campestris and B.oleracea. We constructed a cDNA expression library from rapeseed leaves and obtained several clones coding for the CFBPase. We expressed and purified from E.coli the recombinant protein who evinced high enzymatic activity. Its kinetic and structural characterisation showed that it was almost identical to the plastidic counterpart. We prepared several site-directed cysteine replacement mutants differently affected in their regulatory properties, some of which were partially or constitutively activated. We determined that Cys157 is critical, and Cysl74 and Cysl79 are also participants in the reductive modulation. A novel mechanism involving three Cys residues, where the formation of mixed disulphides in distinct subunits of the enzyme tetramer are likely required, is suggested. None of the seven Cys residues were essential for the catalytic activity of CFBPase. We also found the occurrence of at least two loci per haploid genome coding for the CFBPase in B.napus, and its parental species B.oleracea and B.campestris. Both loci are expressed in green leaves and the recombinant enzymes behave very similarly. Taken together, these analysis would have a large impact in the manipulation of C02 fixation rate and source-sink photosynthate partition in economically important species such as rapeseed.

Rodríguez, María Fernanda. "Arqueobotánica de Quebrada Seca 3 : Recursos vegetales utilizados por cazadores-recolectores durante el período Arcaico en la Puna Meridional Argentina" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Este trabajo consiste en una investigación acerca de los recursos vegetales utilizados por grupos cazadores-recolectores durante el periodo Arcaico ca. 10000-3000 AP (8000-1000 AC). Se basa en los materiales recuperados en un sitio arqueológico de la Puna Meridional Argentina, Provincia de Catamarca: Quebrada Seca 3. Este sitio es un alero situado en la margen sur de la vega de Quebrada Seca, a 15 km de la villa de Antofagasta de la Sierra. Presenta una secuencia arqueológica comprendida entre ca. 9400-2500 AP. El punto de partida para el estudio del registro arqueobotánico (ecofactos y artefactos) de Quebrada Seca 3 fue el análisis de la vegetación actual del área y la información etnobotánica obtenida a partir de entrevistas a pobladores de la zona. El análisis anatómico y morfológico comparativo de los vegetales actuales y arqueológicos pennitió la determinación cientifica de los últimos. Los resultados indican el uso de siete especies leñosas de las familias Compositae, Leguminosae y Solanaceae como combustible, seis especies de la familia Gramineae en el acondicionamiento de pisos de ocupación y vegetales no locales y pocos locales de distintas familias en la confección de artefactos. Asimismoes factible el uso de algunas especies de las familias Compositae y Leguminosae como alimentos y medicinas. En base a las posibles áreas de captación de estos recursos se infiere una elevada movilidad para los grupos humnanos que ocuparon el sitio y/o la probable existencia de intercambios con otros sectores del Noroeste y otras regiones.

Abstract:
The subject of this Thesis is the research on vegetal resources used by hunters-gatherers during the Arcaic period ca. 10000-3000 BP (8000-1000 BC). It is based on materials recovered from Quebrada Seca 3, prov. Catamarca, an archaeological site of Meridional Puna of Argentine. The shelter is located on the south side of the swamp of Quebrada Seca, 15 km from Antofagasta de la Sierra village. It presents an archaeological secuence between ca. 9400-2500 BP. The analysis of the actual vegetation of the area and the ethnobotanic information obtained from inhabitants of the place was the starting point for the study of the archaebotanical record (ecofacts and artefacts) of Quebrada Seca 3. The comparative analysis of anatomical and morphological structures of present and archaeological plants allowed the scientif determination of the latter. The results indicate the use of seven woody species of Compositae, Leguminosae and Solanaceae families, as fuel and six species of Gramineae family in the conditioning of shelter floors. The no local as well as a few local plants from different families were used also for producing the artefacts. At the same time, it is probable that some species of the Compositae and Leguminosae were emploid as food and medicine. Based on the probable areas of procedence for the above mentioned resources, it can be inferred a high rate of displacement of these human groups and/or the probable exchange with inhabitants of other Norhwestern sectors or regions.

Rodríguez, Constantina. "Por qué es adaptativo el polimorfismo cromosómico de Drosophila buzzatii (grupo repleta, Drosophilidae)" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En este trabajo, analizamos las posibles causas del valor adaptativo de las inversiones cromosómicas. Realizamos el análisis simultáneo de un componente de selección, la longevidad, a nivel cromosómico y morfométrico en una población natural de Drosophila buzzatii. La comparación de la distribución de tamaños y de frecuencias cromosómicas entre muestras de individuos recién emergidos con las de adultos de la población, muestra que los individuos más grandes, así como los individuos portadores de las inversiones que lo confieren, son más longevos. Los efectos de las inversiones sobre el tamaño, así como la intensidad de selección, son diferentes en ambos sexos, y en hembras el efecto medio de las inversiones sobre el tamaño y la mayor viabilidad de las moscas más grandes, explican la longevidad diferencial detectada entre ordenaciones. Para indagar acerca de las diferencias genéticas entre inversiones, se analizó el desequilibrio de ligamiento entre siete marcadores enzimáticos (Est-1, Est-2, Lap, Aldox, Pep-1, Pep-2 y Xdh) y las inversiones. En las siete poblaciones analizadas se detectaron desequilibrios gaméticos consistentes, que indican un origen (o cuello de botella) reciente de las inversiones. Los patrones de estructuración para las ordenaciones y las enzimas estudiadas son diferentes, y los análisis de regresión con variables ambientales, indican que las ordenaciones y los alelos de Est-2 y Xdh varían sus frecuencias en respuesta al ambiente. En cambio, Aldox lo hace por deriva y Est-1 muestra efecto de arrastre de las inversiones y estructuración aleatoria. Pep-2 presenta un polimorfismo muy conservado que sería adaptativo

Abstract:
The possible causes of the adaptive value of the inversion polymorphism of Drosophila buzzatii were analyzed. First, we addressed the analysis of the longevity component of selection at two levels: phenotypic and karyotypic in a natural population. Pairwise comparisons between adult samples of flies newly emerged from the natural breeding sites and bait collected adults showed that larger individuals have an extended adult lifetime. Similarly some arrangements showed frequency shifts that can be attributed to differential longevity. The average effects of inversions on thorax length as well as the intensity of phenotypic selection were different in both sexes. Moreover, the average effects of inversions on the studied trait and the longevity selection favouring larger flies can account for the differential longevity conferred by each arrangement. Likewise, the genetic differences between arrangements were assayed by the analysis of the linkage disequilibria between inversions and seven allozymic loci (Est-1, Est-2, Lap, Pep-1, Pep-2, Xdh and Aldox) in seven natural populations. Gametic associations were consistent accross populations suggesting a recent origin or a recent bottleneck. The pattern of population structuration for inversions was different than the pattern showed by the allozyme loci. These patterns as well as the observed clinal variation along geographic and/or climatic gradients indicate that inversions and allozyme variation for Est-2 and Xdh are the result of adaptation to different environmental conditions. On the other hand, Aldox varied at random and Est-1 varied as the result of hitchhiking with inversions. Finally, Pep-2 exhibited a very conserved polymorphism possibly maintained by heterotic balance

Ramos, Araceli Marcela. "Estudios quimiotaxonómicos en especies del género Saccobolus. : (Ascobolaceae-Pezizales)" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los objetivos del presente trabajo fueron establecer, a partir del análisis de los patrones electroforéticos de isoenzimas intracelulares, de ciertos caracteres de cultivo, y de la producción y patrones electroforéticos de endo β-D-1,4 glucanasa, la delimitación de diez especies del género Saccobolus. Se utilizaron para el mismo 114 cepas monospóricas del género. Se analizaron seis sistemas isoenzimáticos intracelulares: AAT, ACP, G6PD, IDH, EST, SOD, y uno extracelular: endo β-D-1,4 glucanasa. El fenograma obtenido a partir del análisis de agrupamientos (UPGMA) muestra dos grupos principales de especies, correspondientes a cada una de las dos secciones en las que se divide el género. Se observó una alta homogeneidad intraespecífica ya que no se observaron diferencias en los estados de los caracteres entre las cepas monospóricas de cada aislamiento geográfico y aún entre distintos aislamientos geográficos. El análisis de los fenogramas muestra un alto grado de asociación entre las especies, lo cual concuerda con las observaciones morfológicas y el comportamiento fisiológico del grupo donde las especies aparecen como un continuo. Los resultados de este trabajo avalan el uso de los patrones isoenzimáticos de las enzimas testeadas, y las diferencias en los parámetros fisiológicos, para la delimitación de las especies del género. Los mismos indican que las diez especies estudiadas constituyen unidades taxonómicas independientes, avalando lo establecido, para alguna de ellas, a partir del análisis de los patrones morfológicos, y fisiológicos previamente estudiados. Esta metodologia constituye una herramienta adicional a la taxonomía tradicional del género, que utiliza sólo caracteres morfológicos.

Abstract:
The aim of this work was to establish the delimitation of ten species of the genus Saccobolus on the base of the analysis of electrophoretic patterns of intracellular enzymes, cultural characters and production and electrophoretic pattem of endo β-D-1,4 glucanase. A hundred and fourteen monosporic strains of the genus were used throughout, six intracellular and one extracellular isozyme systems were analyzed: AAT, ACP, G6PD, IDH, EST, SOD and endoglucanase. The phenogram obtained from the analysis of grouping (UPGMA) showed two groups of species, corresponding to the two sections of the genus. A high intraspecific homogeneity was observed, since there were not differences in the status of the characters among the monosporic strains of each geographical isolement, and not even among difierent geographical isolements. The analysis of phenograms showed a high degree of association among species, which correlates with morphological observations and physiological behavior of the taxa. The results of this research support the use of isozyme patterns of enzymes tested as well as the differences in physiological parameters for the delimitation of species in this genus. They show that the ten species studied are independent taxonomical entities, supporting the taxa established by the analysis of morphological and physiological patters previously studied. This methodology constitutes an additional tool to traditional taxonomy of the genus, that uses only morphological characters.

Quagliano, Javier Carlos. "Producción microbiológica del poliester biodegradable poli-3-hidroxibutirato (PHB) a partir de Azotobacter chroococcum 6B" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El poli-3-hidroxibutirato (PHB) es un poliéster de origen bacteriano obtenido bajo condiciones de estrés nutricional en el medio de cultivo. Se acumula en el citoplasma dentro de gránulos y representa para el microorganismo una reserva de carbono y poder reductor. El PHB es un polímero biodegradable, biocompatible, de regular cristalinidad y moderada resistencia mecánica, utilizable en varias aplicaciones una vez procesado, como por ejemplo en la fabricación de envases plásticos completamente biodegradables. Al obtenerse además a partir de fuentes de carbono naturales renovables, representa un material promisorio para reemplazar a los plásticos sintéticos en algunas áreas. En este Trabajo se optimizó en primer lugar un medio de cultivo para la obtención de PHB a partir de una cepa de Azotobacter chroococcum aislada de una muestra de suelo, para luego estudiar el efecto de distintas condiciones y sistemas de cultivo sobre el contenido de biomasa celular y PHB. Se estableció el efecto de la tasa de aireación y de la relación carbono/nitrógeno bajo cultivo en fermentador sobre el contenido de biomasa, PHB, rendimientos de biomasa y PHB a partir de la glucosa consumida, velocidad especifica de crecimiento y de formación de PHB. Un modelo para la obtención del rendimiento real de PHB que utiliza los datos experimentales del contenido de PHB, rendimiento de biomasa y el valor del rendimiento teórico fue aplicado a los resultados obtenidos. Por último, para contribuir al conocimiento de un área poco investigada en Azotobacter sp., se estudió el efecto de las condiciones fermentativas sobre las propiedades fisicoquimicas del PHB obtenido (cristalinidad, resistencia mecánica, estabilidad térmica y especialmente sobre el peso molecular relativo, factor que afecta en mayor medida al PHB en cuanto a su utilización). Tres potenciales aplicaciones del PHB fueron desarrolladas: i) como película de soporte para el cultivo de epidermis, ii) como película para el peleteado de semillas de alfalfa utilizadas como inoculante y iii) como matriz para el microencapsulamiento de enzima celulasa para su uso como aditivo en ensilado de pasturas.

Abstract:
Poly-3-hydroxybutyrate (PHB) is a bacterial polyester obtained under nutritional stress in the culutre media. It accumulates as granules inside the citoplasm and represents a carbon and reducing power source. PHB is a biodegradable and biocompatible polymer, with regular crystallinity and mechanical strength, utilizable in several applications once processed, such as for the production of completely biodegadable containers. Additionally, as it is obtained from natural and renewable carbon sources, it looks as a possible material for replacing synthetic plastics in some areas. At first, on this work, a culture media for PHB production was optimized, using a strain of Azorobacrer chroococcum isolated from a soil sample, then the effect of different conditions and culture systems was studied on biomass and PHB content. The effect of aeration rate and carbon/nitrogen ratio under fermentor cultivation was established over biomass and PHB contents, biomass and PHB yields from consumed glucose, specific growth rate and PHB formation. A model for obtaining overall PHB yields from the experimental data of PHB contents, biomass yield and theoretical yield value was applied to the obtained results. For contributing to the knowledge of a scarcely investigated area on Azorobacrer sp., the effect of fermentation conditions was studied on PHB physicochemical properties (crystallinity, mechanical strength, thermal stability and specially on the relative molecular weight, which affects PHB mostly for its utilization). Ihree potential applications were developed: i) as a film for supporting epiderrmal growth for burn cases, ii) as film for alfalfa seed pelleting used as inoculants and iii) as a matrix for the microencapsulation of the enzyme cellulase for its utilization as additive on grass silage.

Plá, Juan Carlos. "Tratamientos superficiales antirreflectantes y elaboración de junturas para celdas solares de silicio cristalino" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se analizaron los distintos tratamientos antirreflectantes (AR) para celdas solares de silicio monocristalino: las multicapas dieléctricas y la textura superficial. Se optimizaron numéricamente sistemas AR para superficies planas de silicio de una y dos capas dieléctricas considerando distintos espectros de la radiación solar incidente y diferentes caracteristicas del dispositivo. En particular, se evaluó la influencia del dióxido de silicio pasivante sobre el comportamiento AR de la multicapa. Asimismo, se estudió el caso específico de celdas solares para usos espaciales. Con respecto a la textura superficial, se realizó un análisis teórico original basado en la resolución electromagnética rigurosa de la dispersión de la radiación incidente, en lugar de los modelos de la óptica geométrica corrientemente utilizados en la literatura. Se realizaron cálculos para un medio conductor perfecto, los cuales constituyen una primera aproximación al problema real. Se pusieron a punto técnicas de elaboración de textura superficial mediante ataques quimicos básicos anisótropos, analizando los resultados obtenidos mediante observación por microscopía electrónica y medición de la reflectancia espectral. Utilizando estas técnicas, se fabricaron por primera vez en el pais celdas solares de silicio cristalino que utilizan textura superficial más una capa dieléctrica como técnica AR. El proceso completo incluye la preparación de muestras, el texturado superficial, la difusión de dopantes para la generación de las junturas, y el depósito de contactos por medio de técnicas fotolitográficas. Los dispositivos obtenidos fueron caracterizados midiendo la curva corriente-tensión, la cual fue comparada con el resultado de simulaciones numéricas. Las mejores celdas elaboradas poseen eficiencias de aproximadamente el l7%. En el caso particular del proceso de elaboración de las junturas, el análisis de métodos sencillos presentes en la literatura reciente condujo a proponer nuevas variantes que permiten superar algunas de sus desventajas. Finalmente, la caracterización electrónica de los dispositivos obtenidos se realizó utilizando un método original basado en la técnica OCVD (decaimiento de la tensión de circuito abierto), el cual permite mediante una interpretación sencilla de los resultados la obtención del tiempo de vida media efectivo de los portadores minoritarios en el dispositivo final.

Abstract:
Different antireflecting (AR) coatings for crystalline silicon solar cells were analyzed: dielectric multilayers and surface texture. One and two layers AR coatings for non textured silicon were optimized using numerical methods, considering several radiation spectra and devices with different electronic parameters. In particular, the influence of the passivating silicon dioxide on the characteristic of the AR coating was analyzed. Moreover, the specific case of solar cells for space applications has been also studied. With respect to the surface texture, an original theoretical analysis based on the rigorous electromagnetic solution of the incident radiation scattering was performed, instead of the usual ray optics analysis used in the literature. The calculations performed correspond to a perfect conducting medium, so they constitute a first approach to the real problem. Different texturization techniques based on anisotropic chemical etchings have been set up. The corresponding results were analyzed by means of electronic microscopy observations and spectral reflectance measurements. Crystalline silicon solar cells with surface texture plus a dielectric AR layer were elaborated for the first time in Argentine. The complete elaboration process includes sample preparation, texturization, dopants diffusion to generate the junctions, and contacts deposition by means of photolithographic methods. The devices obtained were characterized by measuring the current-voltage curves and this experimental results were compared with numerical simulations. The best cells show efficiencies of approximately 17%. In the particular topic of the junctions elaboration process, the analysis of simple methods recently published leaded to propose new variants which allow to overcome some of its disadvantages. Finally, the electronic characterization of the devices was performed using a novel method based on the OCVD (open circuit voltage decay) technique which allows to obtain, through a simple interpretation of the results, the effective lifetime of the minority carriers on the final device.

Picca, Pablo Ignacio. "Estudio exomorfológico y anatómico de las inflorescencias de las especies Austroamericanas del género Nothofagus BL. (Fagaceae)" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Pando, Marcelo. "Estudio molecular de la distribución de alelos HLA-DR-DQ en poblaciones normales argentinas y en pacientes con hepatitis crónica autoinmune" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Ozols, Andrés. "Producción y caracterización de polvos metálicos obtenidos por atomización y enfriado rápido" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Dentro de la variedad de procesos de producción que permiten en la actualidad obtener nuevos productos en el área de materiales, las tecnologías de solidificación rápida (SR) asociadas a velocidades de enfriamiento comprendidas entre 10 4a 10 10 K sˉ¹, ocupan un lugar destacado . En ese sentido, en el Laboratorio de Sólidos Amorfos de la Facultad de lngeniaría de la U.B.A. se ha trabajado en las últimas décadas en la producción y caracterización de vidrios metálicos obtenidos por SR a partir de la fase líquida. Las técnicas disponibles para tal fin han sido el enfriamiento por impacto, Splat Cooling, y la colada continua, Melt Spinning , con las que se producen materiales cuyos espesores, del orden de micrones, limitan sus aplicaciones tecnológicas. Esta situación condujo a explorar otras técnicas alternativas, como la atomización de metal fundido seguida de una solidificación rápida para la elaboración de aleaciones en polvo. La intensión inicial estuvo dirigida hacia la síntesis de estructuras amorfas con volúmenes significativos mediante un proceso de atomización del material fundido seguido de una solidificación rápida y una ulterior compactación de los polvos metálicos vítreos evitando la recristalización. Sin embargo, esta técnica permite obtener mayoritariamente estructuras con fases cristalinas metaestables y, solo eventualmente, amorfas . Pero aún en el caso de no obtenerse estructuras completamente amorfas, el material producido por el método de atomización y enfriamiento rápido posee propiedades mecánicas y químicas muy superiores a las de los materiales sintetizados con técnicas metalúrgicas convencionales. La formación de estructuras microcristalinas (compuestas por granos de 0,2 a 0,3 μm. de tamaño) o con una dispersión fina de fases intermetálicas (boruros, nitruros y carburos), es la más adecuada para en la fabricación de herramientas de corte y de abrasión, de piezas de matriceria, de revestimientos anti corrosivos y de electrodos de soldadura por arco . Por otra parte, el enfriamiento rápido permite extender los rangos de solubilidad sólida, controlar el tamaño del grano cristalino y la homogeneidad del material. Asimismo, mediante estas técnicas es posible analizar fenómenos ocurridos lejos del equilibrio, seguir los procesos de relajación estructural y difusivos , etc. Lo expuesto ha motivado encarar los trabajos de esta Tesis a partir de tres aspectos básicos: l. El desarrollo del proceso y del equipo adecuados para la obtención de aleaciones en polvo en condiciones de enfriamiento rápido. 2. El estudio de los mecanismos de fragmentación de aleaciones líquidas involucrados en la atomización y los correspondientes cambios energéticos ocurridos durante la solidificación rápida ulterior. 3. La producción de distintos sistemas de aleaciones y su caracterización, realizando una comparación estructural entre los materiales producidos por fundición y colada convencionales con los obtenidos por atomización.

Orgueira, Hernan Antonio. "Obtención de monómeros asimétricos bifuncionales a partir de productos naturales abundantes : Su uso para la síntesis de poliamidas quirales" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
la escasez prevista para un futuro cercano de los derivados del petróleo y el impacto del uso de los mismos sobre el medio ambiente, ha potenciado en las últimas décadas el desanollo de nuevos materiales, basados en productos naturales. Para éstos se prevé una biodegradabilidad y biocompatibilidadequiparables a la de los biopolímeros. La introducción de grupos funcionales y de estereocentros en las poliamidas las haría más similares a las proteínas que a los nylons convencionales. A partir de esta premisa, se planteó como objetivo de esta Tesis la síntesis y caracterización de poliamidas quirales estereoregulares, cuyos precursores monoméricos derivaran de productos naturales. Para la síntesis de poliamidas esteroregulares del tipo AB (nylons-n), se partió de monómeros bifuncionales , como el ácido (S)-5-amino-4-metoxipentanoico (AMP), el cual se sintetizóa partir de D-ribonolactona o del ácido L-glutámioo. Por policondensación por el método del éster activadose preparó el homopolímcro (AMP)... Se obtuvieron también, a partir de AMP y los aminoácidos naturales glicina (Gli) y L-alanina (Ala), las siguientes poliamidas estereoregulares: (AMP-Gli)n, (AMP-Ala)n,y (Gli-AMP-AMP)n. Por otra parte, se sintetizaron poliamidas quirales estereoregulares del tipo AABB (nylons-n,n). Se utilizó como molde quiral la 4-(S)-carboxil-1,4-butirolactona derivada del ácido L-glutámico. El grupo carboxilo se activó por preparación de un éster lábil y se estudió la policondensación al azar con l,6-diaminohexano obteniéndose una poliamida no estereoregular (arrégica). Por control de la estereoquímica de la polimerización, se sintetizaron una poliamida sindiorégica y otra isorrégica. También se sintetizó un análogo quiral estereoregular del nylon-2,5; con centros quirales tanto en la porción diácido como diamina. Finalmente se prepararon polimanaramidas. Los polímeros obtenidos en este trabajo se caracterizaron fisica y espectroscópicamente. Se estudió la distribución de pesos moleculares y el comportamiento térmico de estos materiales. A efectos de analizar su cristalinidad se efectuaron estudios de rayos X de polvo y de microscopía óptica de luz polarizada. Se determinaron también la higroscopicidad, solubilidad y actividad óptica de las poliamidas sintéticas.

Abstract:
The need for conservation of petroleum feedstocks and the increased awarness of the environmental impact of petroleum-based polymers, has drawn attention to the utilization of natural regrowing resources for polymer synthesis. The new materials are expected to display improved properties, such as biocompatibility and biodegradability. The introduction of new functionalities and stereocenters in a polyamide chain stronely modifies its properties, which become similar to those of biopolymers. For this reason, the main goal of this Thesis was the synthesis and characterization of stereoregular polyamides based on common natural products. Stereoregular polyamides of the AB type (nylons-n) were obtained from chiral, bifunctional monomers such as the (S)-5-amino—4—methoxypentanoic acid (AMP), which was synthesized employing D-ribonolactone or L-glutamic acid as starting material. Polycondensation of AMP, by the active ester method, yielded the homopolymer ,. Polymerization of derivatives of AMP with the natural amino acids glycine (Gly) and L-alanine (Ala) afforded stereoregular polyamides, such as n, n and n. On the other hand, chiral polyamides of the AABB type (nylons-n,n) were synthesized, employing 4-(S)-carboxyl-l,4-butyrolactone, as chiral template. The carboxyl group was activated by preparation of a labile ester and the resulting compound was subjected to random polymerization with l,6-diaminohexane. A non-stereoregular (aregic) polyamide was obtained. However, the polymerization performed under stereocontrol led to a syndioregic and an isoregic polyamides. A polyhydroxy analog of nylon-2,5, having stereocenters in the diacid as well as in the diamine co-monomers, was also synthesized. Finally, stereoregular polymannaramides were prepared. The polymers obtained in this work were physical and spectroscopically characterized. The molecular weight distribution and thermal behavior of these materials, were studied. The crystallinity was established by means of X ray diffraction analysis and by polarized optical microspcopy. The moisture sorption, solubility and optical activity of the synthetic polyamides were determined.

Ojeda, Carlos Alberto. "Estudio de la cinética de gelatinización y de las variables operativas en el parbolizado de arroz" (1998). Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El proceso de parbolizado de arroz requiere de una etapa que gelatinice el almidón presente en el grano. Para lograrlo, muchos de los sistemas de uso industrial recurren al vapor de agua. La gelatinización del almidón tiene por objeto darle al arroz parbolizado sus peculiares características, tales como su alto rendimiento durante la molienda y sus propiedades culinarias: flavour, mayor dureza, menor pegajosidad, y mayor resistencia a la sobrecocción. La generación de vapor de agua acarrea un costo de producción, por lo tanto cuanto mayor sea el conocimiento y la optimización de esta etapa mayor será el ahorro para la industria arrocera. Los objetivos de este trabajo son: a) Estudiar la cinética de gelatinización del arroz a partir de ensayos dinámicos de calorimetría diferencial de barrido (D.S.C.). Obtener los parámetros cinéticos del proceso de gelatinización: constantes de velocidad de reacción, energia de activación y orden de reacción usando dos modelos cinéticos propuestos en la bibliografia (Ozawa, 1970 ; Borchardt y Daniels, 1957). En base a estos resultados proponer una explicación teórica que los respalde. b) Estudiar la influencia de las variables operativas del proceso de cocción con V vapor tiempo y presión, sobre el porcentaje de gelatinización del grano de arroz. El desarrollo del item (a) requirió la puesta a punto del método calorimétrico. Este paso involucró la selección del grado de pulido del grano y la granulometria de la harina de arroz. También fue necesario determinar la relación de agua / harina más conveniente y la velocidad óptima de calentamiento, para lo cual se realizaron ensayos previos que fueron analizados mediante la metodologia de superficies de respuestas. Por otro lado la realización de los ensayos de cocción con vapor mencionados en el item (b) comprendió el diseño y construcción de un equipo experimental provisto de un control preciso de la presión de vapor. Al igual que en el item (a) se recurrió a la metodologia de superficies de respuesta para analizar la acción de los parámetros operativos del proceso de cocción sobre el porcentaje de gelatinización. Esta metodologia permite determinar la óptima combinación de parámetros para lograr la máxima gelatinización con el menor gasto (tiempo y energia) posible.

O’Donnell, Vivian K.. "Diferenciación de animales vacunados de infectados por el virus de la fiebre aftosa por métodos serológicos" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El virus de la Fiebre Afiosa (VFA), un Aftovirus de la familia Picornaviridae, es el agente causal de una enfermedad altamente contagiosa y de tremenda importancia económica, que afecta al ganado de pezuña hendida. La diferenciación entre animales infectados y vacunados así como la detección de animales portadores del virus o “carriers” es esencial para evaluar la efectividad de campañas de control y erradicación. La detección de anticuerpos (Ac) contra un antígeno (Ag) no estructural asociado con la replicación del virus, el Ag Asociado a la Infección Viral (Ag VIA), cuyo componente principal es la ARN polimerasa o proteína 3D, altamente conservada entre los diferentes serotipos, ha sido una herramienta útil para monitorear programas de control y erradicación, como un indicador indirecto para la evaluación de la actividad viral a nivel poblacional. Es conocido que vacunas inactivadas contra el VFA pueden inducir Ac contra el Ag VIA, si bien los niveles de estos Ac son muy bajos y su permanencia mas corta que en animales infectados. Esta respuesta transitoria y variable se atribuye a la presencia de restos de la polimerasa viral en el Ag vacunal, el cual sería antigénico y resultaría en la producción de Ac contra el Ag VIA. El método más ampliamente utilizado para medir Ac contra el Ag VIA es la Inmunodifusión en Agar Gel (IDAG). Este método es simple de realizar, pero su baja sensibilidad y el uso de un Ag parcialmente purificado derivado de cultivos infectados con el virus, llevó al desarrollo de otras metodologías. Con el objeto de sobrellevar estos inconvenientes, se desarrollaron ensayos inmunológicos capaces de detectar Ac contra proteínas no estructurales del VFA, para la identificación de animales infectados con el virus. Las proteínas no estructurales, 3D y 2C, se expresaron en Escherichia coli, como proteínas de fusión a glutation-S-transferasa (GST). Se desarrolló un método de ELISA en fase-líquida (ELISA-3D) capaz de detectar Ac específicos contra la proteína 3D o RNA polimerasa del VFA. El ELISA-3D, fue capaz de detectar Ac contra la proteína 3D en suero de bovinos luego de una infección natural o experimental, desde los 5 días postinfección (dpi) hasta los 565 dpi, mientras que sueros de bovinos provenientes de zona libre de Fiebre Aftosa, así como sueros de referencia de bovinos y porcinos infectados con diferentes virus ARN y ADN, fueron negativos, resultando en una especificidad del 100%. Los resultados de la comparación del ELISA-3D con la técnica de IDAG y con un ELISA-VIA descripto previamente (Alonso y col., 1990), los que utilizan el Ag VIA semipurificado, mostraron que el ELISA-3D es altamente sensible (95.2 %), específico (100%) y reproducíble (C.V. 2.75 %). Los ensayos en sueros de animales vacunados, mostraron una respuesta transitoria de Ac inducida por algunas vacunas. La evaluación del método de “Western blot” utilizando como Ag la proteína no estructural 2C, mostró una reacción positiva cuando se analizaron sueros de bovinos infectados, mientras que sueros de bovinos de zona libre no mostraron ninguna reactividad. El estudio de sueros de bovinos vacunados mostró 1/79 sueros con reactividad positiva para Ac contra 2C. Estos resultados indican que el método de ELISA-3D, es recomendable para ser utilizado como método complementario en estudios seroepidemiológicos para monitorear actividad viral. La respuesta de Ac contra 3D inducida por la vacunación en animales con una o dos vacunaciones es transitoria. El aumento en la frecuencia de reacciones positivas luego de la revacunación, indica que para el monitoreo de actividad viral en planes de control bajo vacunación, es necesario considerar los parámetros de reacción postvacunal contra 3D para una mejor interpretación de los resultados obtenidos por éstas técnicas. Finalmente, el uso de proteínas biosintéticas tiene ventajas en su estabilidad y pureza, evita el manejo de virus vivo y provee una fuente consistente de Ag. La detección de Ac contra otras proteínas no estructurales del VFA, como es el caso de 2C, proveería un mayor grado de confianza en la identificación de animales infectados con VFA.

Abstract:
Foot-and-mouth disease virus (FMDV), an Aphtovirus of the Picomaviridae family, is the causal agent of a highly contagious and economically important disease of cloven-hooved animals. Differentiation between infected and vaccinated animals and the detection of carriers animals are essential to evaluate the effectiveness of control and eradication campaigns. Detection of antibodies against a non-structural antigen associated with the replication of the virus, the virus-infection-associated (VIA) antigen, the main component of which is the viral RNA polymerase or 3D protein, highly conserved among all serotypes, has been a useful tool in monitoring control and eradication programmes, as an indirect indicator of viral activity at the population level. It is well known that inactivated vaccines against FMDV can induce antibodies against the VIA antigen, although the levels of antibodies and their persistence are lower than in infected animals. This transitory and variable response is attribuited to the presence of traces of the viral polymerase in the vaccine antigen, which could be antigenic and result in the production of antibodies against the VIA antigen. The most widely used method for measuring antibody to the VIA antigen is the Agar Gel Immunodiffusion (AGID). The method is simple to perform, but its low sensitivity and the use of partially purified antigen derived from infected cell cultures, made necesary the development of other methods. With the aim of overcome this difficulties, immunochemical assays were developed, able to detect antibodies against FIVHDV non-structural proteins for the identification of infected animals with the virus. Recombinant non-structural proteins, 3D and 2C, were expressed in Escherichia coli, as fusion proteins with glutathione-S-transferase (GST). A liquid-phase blocking sandwich ELISA assay (ELISA-3D) able to detect specific antibodies to the 3D protein or RNA polymerase of FMDV was developed. The ELISA-3D, was able to detect antibodies against the 3D protein in cattle sera after natural or experimental infection as early as 5 days postinfection (dpi) and at later stages, 565 dpi, whereas sera from naive cattle from the FMD free area as bovine and porcine reference sera raised against different RNA and DNA viruses were negative, resulting in a specificity of 100%. Comparison of the ELISA-3D with the AGID and the ELISA-VIA previously described (Alonso et al., 1990), which used the semipurified VIA antigen, shows that the ELISA-3D is highly sensitive (95.2%), specific (100%) and reproducible (C.V. 2.75%). Assays in vaccinated cattle sera, demostrated a transitory antibody response induced by some vaccines. The evaluation of the “Western blot”, using as antigen the non-structural 2C protein, shows a positive reaction with sera from infected cattle, whereas sera from naive cattle from FMDV free area did not react. One of 79 sera from vaccinated cattle shows a positive antibody reaction against 2C. The results obtained here indicate that the ELISA-3D method must be used as a complementary method for seroepidemiological studies for monitoring viral activity. Antibody response to 3D induce in vaccinated or revaccinated animals was transient. The increase in the frequency of positive reactions after revaccination, suggest that to monitor viral activity in control programmes under vaccination, it is necessary to take into account the parameters of the post-vaccination anti-3D response, to make a better evaluation of the results obtained. Finally, the use of bioengineered proteins has advantages such as stability and purity, it does not require handling infective virus and provied a consistent source of antigen. The detection of antibodies to other non-structural proteins, as 2C, provides confirmatory evidence for the identification of FMDV infected animals.

Novaro, Virginia. "Influencia de agentes vasoactivos en el proceso implantatorio embrionario : Alteraciones en la diabetes mellitus" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el presente trabajo abordamos la implantación embrionaria en ratas controles y diabéticas desde el punto de vista del fenómeno vasoactivo que conlleva. Las prostaglandinas son necesarias para permitir la implantación de los embriones en el lumen, ya sea incrementando el flujo sanguíneo y la vasodilatación del útero durante la decidualización endometrial, como regulando Ia actividad contráctil del tejido miometrial. El óxido nítrico ha sido reconocido como agente vasodilatador y miorrelajante, y parte de su efecto es mediado a través de la regulación de la síntesis de prostaglandinas en diversos procesos fisiológicos. Se ha determinado variaciones en la síntesis uterina de prostaglandinas y de óxido nítrico en la preñez temprana en la rata, y se ha establecido una relación causal entre ambos mecanismos fisiológicos durante la implantación embrionaria. En el útero dichos agentes vasoactivos aumentan durante los días peri-implantatorios de la preñez, como resultado de la combinación de la acción de los esteroides ováricos y de agentes locales derivados del embrión o de la madre. Las isoformas Cab-dependiente y Cap-independiente de la enzima sintetizadora de óxido nítrico son las responsables del incremento en la actividad enzimática en el día de la implantación. La inhibición de la síntesis intraluminal de óxido nítrico reduce el número de embriones implantados en un 50%, probablemente alterando la adecuada irrigación sanguínea al sitio de implantación. También se determinó que la producción uterina de prostaglandina E y qu depende tanto de la producción de óxido nítrico como de señales embrionarias tempranas. Nuestros resultados indican además, que la acción vasoactiva del óxido nítrico y de las prostaglandinas puede modularse de manera tal de compensar alteraciones metabólicas en la rata diabética de tipo no-insulino-dependiente, y permitir que el proceso implantatorio ocurra eficientemente en esta patología.

Abstract:
This thesis addresses the process of embryo implantation in control and diabetic rats focusing in the vasoactive changes it involves. We have established the role of prostaglandins and nitric oxide. The first group of molecules is required to allow embryo implantation in the uterine lumen, by increasing uterine blood flow and vasodilatation during endometrial decidualization and by regulating the contractile activity of the miometrial tissue. On the other hand, nitric oxide, a recognized vasodilating and muscular relaxing agent, exerts part of its effects in several physiological processes by modulating prostaglandin synthesis. In the present work we have determined the existence of significant changes in the uterine synthesis of prostaglandins and nitric oxide during the early pregnancy in the rat and we have established a causal relationship between both mechanisms during the embryonic implantation. The observed increase in the concentration of these vasoactive agents in the uterus takes places in the peri-implantation days, as a result of the combined action of ovarian steroids and local factors derived either from the embryo or the maternal tissue. Both the Cap-dependent and independent isoforms of the nitric oxide synthetase are responsible for the increase in enzymatic activity in the implantation day. The relevant role played by nitric oxide is revealed by the fact that inhibition of uterine nitric oxide synthesis reduces the number of implanted embryos by 50%, probably because it alters the appropriate blood supply to the implantation site. In addition, it was determined that the production of prostaglandin E and an depends both on the production of nitric oxide and on early embryonic signals. Our studies also indicate that the vasoactive effect of nitric oxide and prostaglandins is modified in the non-insulin dependent diabetic rat in such a way as to compensate the metabolic alterations that this pathology involves, thus allowing an efficient embryo implantation.

Noriega, Guillermo Osvaldo. "Estudios sobre la porfobiblinógeno-deaminasa de hígado y riñón de rata" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La porfobilinógeno-deaminasa (PBG-D) cataliza la condensación de cuatro moléculas de porfobilinógeno (PBG) para formar el hidroximetilbilano, el cual en presencia de la enzima isomerasa, origina el uroporfirinógeno m, precursor fisiológico en la síntesis de hemos, clorofilas y corrinas. Dado que bajo ciertas condiciones, la PBG-D podría actuar como segundo sitio de regulación, se resolvió estudiar la PBG-D de hígado y de riñón de rata, con un enfoque cinético. Se purificaron ambas enzimas empleando las siguientes técnicas: fraccionamiento con sulfato de amonio, filtración molecular (Sephadex G-lOO), intercambio aniónico (Q-Sepharosa) y cromatografla de afinidad (Blue Sepharosa). La purificación a homogeneidad de la enzima renal se logró mediante una electroforesis preparativa, que mostró una sola banda proteica con actividad, confirmada a través de Western blots. La actividad máxima se detectó en incubaciones a 65°C, a pH’s 7,8 y 8,2 con una energía de activación calculada de 16,8 kcal/mol y 19,3 kcal/mol y se detemiinaron las masas moleculares relativas: 41,7 ± 4,2 kDa y 39,8 ± 4,0 kDa para las enzimas hepática y renal respectivamente. La PBG-D de hígado de rata presenta un comportamiento michaeliano, con valores aparentes de Km y Vm de 12 ± 1,4 μM y 17,0 ± l,4 pmoles/mg.min. respectivamente y un n de Hill de 1, determinados a pH 8,2 y a 37°C. Estudios cinéticos revelaron que los iones Mg2+ (0-80 mM) y fosfato (0-20 mM) actúan como inhibidores incompetitivos, mientras que el amonio (0-50 mM) y la sulfarnerazina (0-2,0 mM) son inhidores no competitivos. En cambio, el ácido fólico (0-2,0 mM) actúa como un activador no esencial de la reacción. Para la enzima renal, los estudios cinéticos mostraron un comportamiento complejo, con una primera zona de saturación comprendida entre 5,0 y 7,0 μM y una segunda a partir de 66-70 μM. Los gráficos de dobles recíprocas son no lineales y exhiben un carácter bimodal que se traduce en dos constantes aparentes de afinidad, Km1: 0,8 ± 0,1 μM y Km2: 3,5 ± 0,4 μM. Comparando estas constantes cinéticas con las correspondientes para médula (Km: 0,8 ± 0,1 μM y Km2: 3,3 ± 0,4 μM) y corteza renal (Km: 0,9 ± 0,1 μM y Km2: 5,1 ± 0,6 μM), se sugiere que no existirian dos poblaciones proteicas distintas confinadas en diferentes estructuras. Además, la banda única obtenida (pI: 4,9) mediante la técnica de isoelectroenfoque, permitió descartar la presencia de isofonnas en riñón. Estudios cinéticos revelaron que el ion sodio (0-2,0 M) produjo un desplazamiento del punto de inflexión hasta obtener gráficos de inversas con una sola pendiente. A altas concentraciones de sustrato (7-66 uM) los iones Mg2+ (0-50 mM), fosfato (0-40 mM) y amonio (0-300 mM) actúan como inhibidores no competitivos. A bajas concentraciones de sustrato (0,8-7,0 pM) el Mg2+ es un inhibidor incompetitivo, el fosfato presenta un efecto dual y el amonio desplaza el punto de inflexión conforme aumenta su concentración. Estudios de inhibición realizados con PCMB, NEMI y DTNB demostraron la presencia de aminoácidos cisteína en el sitio activo, lo cual fue confirmado a través de estudios de grupos ionizables en la enzima y en los complejos enzima-sustrato. Se propone para la enzima renal, la existencia de por lo menos dos estados confonnacionales diferentes inducidos en el mismo sitio catalítico, ya sea por la unión del sustrato PBG o la no liberación del producto amonio o de ambos. La presencia de tales cambios confonnacionales permitiría la continuidad en la unión de las otras moléculas de PBG al sitio S, en presencia de intermediarios ES1, ES2 o ES3 en el sitio C, lo que originaria una diferente afinidad y actividad catalítr'ca final. Estos reordenamientos podrian producir finalmente cambios en los pasos limitantes de la reacción, lo cual sucedería a diferentes concentraciones de sustrato y daría lugar entonces a distintas constantes cinéticas.

Núnez, Carlos. "Bosonización en más de dos dimensiones" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Nicoletti, Daniel. "Heteroanálogos de esteroides naturales bioactivos : Síntesis de 6-oxapregnanos" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se describen las síntesis estereoselectivas de 6-oxapregnanos con fusión de anillos A/B cis y trans. Como material de partida se utilizó un 5,6-seco-6-norpregnano funcionalizado en C-l9, facilmente obtenible por ruptura de un 5,6-diol esteroidal con OHg/iodo en presencia de luz. Los oxapregnanos con fusión A/B cis se obtuvieron por ciclación reductiva de la unidad de delta-iodocetona presente en el secoesteroide (un 7-iodo-5-cetopregnano) con borohidruro de sodio, mientras que la fusión A/B trans se logró por ciclación oxidativa a través de un iodoso derivado generado in situ con ácido m-cloroperbenzoico. Los 6-oxaesteroides resultantes, funcionalizados en C-l9, fueron convertidos en los análogos 10-metilo mediante la reacción de desoxigenación de Barton-McCombie y posteriormente convertidos en los 6-oxa-análogos de hormonas esteroidales naturales y de neuroesteroides. La obtención de 3alfa-hidroxi-6-oxapregnanos se logró en la serie A/B cis por reducción estereoselectiva de un 3-ceto-derivado con un hidruro impedido (tri-t-butoxihidruro de aluminio y litio), mientras que en la serie A/B trans se utilizó la reacción de Mitsunobu sobre el 3-beta-alcohol. La reacción de formación de iodoso-derivados se aplicó tambien a l8-iodo y 20-iodopregnanos los cuales dieron lugar a reacciones de reordenamiento tipo Wagner-Meerwein y de sustitución (solo 20alfa-iodopregnanos) por un mecanismo concertado y/o através del carbocatión.

Abstract:
Stereoselective syntheses of 6-oxapregnanes with cis and trans A/B ring fusion are described. A 5,6-seco-6-norpregnane functionalized at C-l9 was used as starting material; this compound is readily available by photochemical cleavage of a steroidal 5,6-diol with HgO/iodine. The A/B cis fused oxapregnanes were obtained by reductive cyclization of the delta-iodoketone moiety present in the secosteroid (a 7-iodo-5-ketopregnane) with sodium borohydride, while the A/B trans fused compounds were obtained by oxidative cyclization via an iodoso derivative generated in situ with m-chloroperbenzoic acid. The resulting 6-oxasteroids, functionalized at C-l9, were converted into the 10-methyl analogs using the Barton-McCombie deoxygenation reaction and subsequently transformed into 6-oxa-analogs of natural steroid hormones and neurosteroids. 3alpha-Hydroxy-6-oxapregnanes in the A/B cis series were obtained by stereoselective reduction of a 3-keto derivative with a hindered hydride (lithium aluminum tri-t-butoxyhydride), while in the A/B trans series the Mitsunobu reaction was used on a 3beta-alcohol. The formation of iodoso derivatives was applied to 18-iodo and 20-iodopregnanes, which gave Wagner-Meerwein type rearrangements and substitution reactions (only 20alpha-iodopregnanes) by concerted mechanism or via the carbocation.

Mora García, Santiago. "Estructura y función en las tiorredoxinas factores que determinan su especificidad por enzimas del ciclo de fijación de CO sub 2" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las Tiorredoxinas (Trx) son proteínas citoplasmáticas halladas en todos los sistemas biológicos, que catalizan con alta eficiencia la reducción de puentes disulfuro en otras proteínas por medio de un par de cisteínas en su centro activo. En los organismos fotosintéticos oxigénicos, la reducción mediada por Trxs modula la actividad de numerosas enzimas de las vías asimilativas. En el estroma de los cloroplastos se encuentran dos tipos de Trxs, filogenéticamente distantes: Trx-f, de linaje eucariótico, y Trx-m, emparentada con las Trxs bacterianas. La actividad de la Fructosa-1,6-bisfosfatasa (cFBPasa), una enzima clave del ciclo de fijación de CO2, es estimulada selectivamente por la Trx-f, mientras que la Trx-m resulta ineficaz. Para caracterizar los factores involucrados en la interacción entre la Trx-f y la cFBPasa, y para indagar en la relación entre estructura y función en las Trxs, se utilizó como modelo la Trx de Escherichia coli, ineficaz en la activación de la enzima, pero muy estudiada funcional y estructuralmente, y se siguió una estrategia de mutagénesis dirigida. Un aspecto considerado fue la contribución de las cargas superficiales, ya que las interacciones electrostáticas son importantes para la afinidad entre proteínas. La introducción de cargas positivas alrededor del centro activo de la Trx de E.coli, sin modificar la estructura o la capacidad de reducción, aumentó considerablemente la capacidad de activar la enzima. Con altas concentraciones salinas en el medio, la afinidad de todas las Trxs por la enzima resultó similar, lo que corrobora la importancia de las interacciones electrostáticas. Las cisteínas reactivas de la cFBPasa se encuentran, de hecho, en una zona cargada negativamente, y regiones de carga negativa rodean el centro activo de la Trx-m y de E.coli, mientras que en la Trx-f la contribución de cargas positivas es mayor. Ciertas posiciones cercanas al centro activo, de importancia estructural en las Trxs, se han conservado estrictamente. Sin embargo. las Trx-f presentan desviaciones únicas. Se reemplazaron sucesivamente los residuos en la zona hasta alcanzar la secuencia encontrada en las Trx-f. Los cambios alteraron la conformación de un residuo triptofano conservado, y llevaron a una disminución tanto en la estabilidad estructural de las proteínas como en la capacidad reductora, que afectó a la activación de la enzima. La conformación de la zona inmediata al centro activo y la capacidad reductora son pues importantes para la activación de la enzima. En las Trx-f se deben dar cambios que permitan compensar los cambios, pero el significado funcional de los mismos permanece oscuro. Se aisló la secuencla codificante para la Trx-f de colza (Brassica napus), y la proteína se sobreexpresó y purificó. Si bien son potentes activadores de la cFBPasa, las Trx-f son pobres reductoras de puentes disulfuro en otras proteínas, y tampoco muestran una mayor actividad en la isomerización estos enlaces, lo que demuestra que el componente cinético es fundamental en la interacción con la enzima. Estos resultados sugieren que las interacciones electrostáticas y los aspectos conformacionales juegan un papel preponderante en la interacción entre las Trxs y (algunas de) sus proteínas sustrato, y que en los cloroplastos este factor podría determinar la especialización funcional de ambos tipos de Trx. Sin embargo, el significado fisiológico de la presencia de dos Trxs diferentes es aún esquivo.

Abstract:
Thioredoxins (Trx) are cytoplasmic proteins found in all living organisms. They efficiently catalyse the cleavage of disulfide bridges in other proteins through a pair of reactive cysteines in their active centre. In oxygenic photosynthetic organisms, Trx-mediated reduction modulates the activity of several assimilative enzymes. Two types of phylogenetically divergent Trxs coexist in the chloroplasts' stroma: Trx-f, of eukaryotic lineage, and Trx-m, akin to prokaryotic counterparts. The activity of Fructose-1,6-bisphosphatase (cFBPase), a key enzyme in the CO2 fixation cycle, is selectively stimulated by Trx-f, whereas Trx-m is inefficient. Escherichia coli Trx barely activates the enzyme, but instead is the most thoroughly studied Trx in both structure and function. Taking it as a model, we set out to characterise factors involved in the interaction between Trx-f and cFBPase, following a site-directed mutagenesis strategy. Surface charges are relevant features determining the association rate between proteins. Positive charges introduced around the active centre of E.coli Trx did not alter its structure nor its reductive capacity, but significantly enhanced its ability to activate the enzyme. At high salt concentrations, the affinity of all Trxs towards cFBPase converged to a limiting value, which stresses the importance of electrostatic interactions. Reactive cysteines in cFBPase are in fact included in a negatively charged region. Also, negative charges surround the active centre of E.coli and m type Trx, whereas in Trx-f there is a significant contribution from positive charges. In Trxs, several positions around the active site have been strictly conserved. Trx-f display however some peculiar deviations from consensus. Aminoacids were replaced so as to match the sequence found in Trx-f. Changes altered the conformation of a conserved tryptophan residue, and brought about a decrease in the structural stability of mutant proteins and in their reducing strength, damaging the activation of cFBPase. Conformation near the active centre, as well as reducing ability, are thus important for the activation of the enzyme. Compensatory shifts should take place in Trx-f, but their functional meaning, if any, remains obscure. Tha coding sequence of rapeseed (Brassica napus) Trx-f was determined, and the protein was overexpressed and purified. Though highly proficient in the activation of cFBPase, Trx-f are feeble in the reduction or isomerisation of disulfide bridges in other proteins. These facts suggest that there is a crucial kynetic component in the interaction with the enzyme. In brief, electrostatic interactions and the conformation of the active site seem to play a central role in the interaction between Trxs and (some of) its target proteins. This feature could be responsible for the functional specificity of both Trxs. Nonetheless, the physiological significance of two different Trxs in chloroplasts is still elusive.

Montes, Claudia. "Uso y abuso de anti-inflamatorios no esteroides en deporte humano y equino : Establecimiento de un amplio screening en sangre y orina con análisis y detección por GC-MSD" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los anti-inflamatorios no esteroides (NSAIDs)son muy usados por los atletas para reducir la inflamación y el dolor. Si bien estas drogas no forman parte de la lista de substancias prohibidas por el Comité Olímpico Internacional (COI), la presencia de las mismas en las muestras de sangre y Orina de los deportistas puede en muchos casos resultar una interferencia en los screening para detectar el uso indebido de drogas. Por otro lado, estas drogas son también utilizadas en forma abusiva en medicina veterinaria, principalmente en competencias ecuestres y en este caso los organismos oficiales han prohibido su uso. Las metodologías hasta hoy descriptas son costosas y complejas y la falta de especificidad en la detección es una de las mayores limitaciones en la determinación de estas drogas en las muestras biológicas. En este trabajo de tesis, se ha desarrollado un screening rápido y especifico para la detección de los NSAIDs y/o de sus metabolitos. El método consiste en una extracción alquilativa seguida de Cromatografía Gaseosa con Detector de Masas (GC-MSD), por lo que presenta las siguientes ventajas: pequeño volumen de muestra; un único solvente de extracción; el proceso de clean up y derivatización se produce en un solo paso; alta sensibilidad; obtención rápida de datos y bajo costo. El análisis de los espectros de masas demostró que la técnica es sensible y específica como para poder identificar a un gran número de NSAIDs. Un análisis detallado de la fragmentación de las molécula fue de gran utilidad en la identificación de metabolitos de los cuales no existen los patrones comerciales y de los mismos derivados metilados de los NSAIDs. Este análisis se presenta en una de las secciones de este trabajo de tesis. Un standard interno fue incluido para evaluar la recuperación luego de la extracción y para calcular los tiempos de retención relativos. El valor promedio de la recuperación fue de un 83% lo que indicaría una buena extracción. El límite de detección es de 50 ng/ml y se observó una buena linearidad hasta un valor de 10 μg/ml. La Electroforesís Capilar se presenta también como técnica de screening alternativa, sin embargo como no se disponía de detector de masas no se la pudo desarrollar como screening confirmatorio. La extracción metilativa (EM) acoplada a GC- MSD resultó ser una técnica específica. eficiente y sensible para la detección de NSAIDs. El presente trabajo es sin duda una herramienta de gran utilidad para los laboratorios de control del doping.

Abstract:
Non -steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) are widely used by athletes to reduce pain and inflammation. Although they are not included in the list of banned substances of the International Olympic Comitee (IOC).the presence of NSAIDs in blood and urine samples of sportsmen may result in undesired interference during screening for drug abuse. In addition, NSAIDs are frequently misused in racehorses competitions, and banned by International Federations that regulate equestrian sports. Current procedures far NSAIDs determination are tedious and expensive, and lack of specific tests constitutes a major limitation for determining NSAIDs in biological samples. In the present study, a comprehensive screening was developed in order to obtain a rapid and specific method far the detection of NSAIDs and/or their metabolites. This method, consisting of an alkylative extraction coupled to Gas Chromatography -Mass Spectrometry (GC-MSD), offers the following advantages over current methodologies: little sample volume, only one extraction solvent, clean up and derivatization in one step, high sensitivity, rapidity and low costs. Analysis of mass spectrum indicates that high resolution, and therefore improved selectivity was achieved with most NSAIDs. A deep study of mass fragmentation was useful to characterise non-commercial metabolites and methyl NSAIDs derivatives. These results are discussed in brief. An internal standard was included to evaluate post-extraction recovery and to define relative retention times. Mean recovery values of 83% were obtained indicating that a high yield was achieved during extraction procedures. Threshold values for most NSAIDs were around 50 ng/ml, and linearity was observed up to 10 μg/ml. Although Capillary Electrophoresis (CE) may potentially represent as an alternative screening method far NSAIDs, lack of availability of a suitable Mass Spectrometry Detector at the time the study was done prevented us from performing such a technique as a confirmatory procedure. In sum, Extractive Methylation coupled to GC-MSD, proves to be an efficient, rapid and reliable approach far high sensitivity detection of this group of substances. Methodology developed in the present study may constitute an useful tool for the evaluation of drug abuse during sport competitions.

Miralles, Mónica T.. "El recuperado térmico de los aglomerados de defector producidos por irradiación neutrónica en monocristales de cobreThermal annealing of defect clusters induced by neutron irradiation in copper single crystals" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La irradiación con particulas energéticas es una de las técnicas mas utilizadas para introducir. en forma controlada, defectos, en las redes cristalinas metalicas. La presencia de defectos altera sensiblemente las propiedades fisicas de los materiales. Si se eligen obserables físicos lo suficientemente sensibles a estas estructuras de defectos, se puede obtener información acerca del tipo, de la configuración espacial, de la concentración, y de las cineticas de reacción entre los mismos. La aplicación de tratamientos térmicos postirradiación permite proprocionar, en forma gradual, las energias de activacion necesarias para lograr la recombinación de los defectos y la consecuente recuperación de la propiedad fisica elegida. De este modo se obtienen las llamadas “Etapas de Recuperación" del observable fisico en cuestión, cuyos rasgos generales, si bien son comunes a todos los metales, identifican en forma univoca a cada uno de ellos. El tema del presente Trabajo de Tesis es: “El Recuperado Térmico (T > 450 K) de los Aglomerados de Defectos producidos por Irradiación Neutrónica a Bajas Dosis y a 77 K en Cu de alta pureza, a través de la Tensión Critica Resuelta de Corte, medida a 77 K". El recuperado térmico mencionado corresponde a la ultima etapa de recuperación del Cu, la Etapa V, la cual ha sido muy poco estudiada. La misma se asocia generalmente a la disociación de los aglomerados de vacancias con la aniquilación sistemática de los aglomerados de intersticiales por vacancias térmicas. Pero los detalles de este proceso no estan bien establecidos y su esclarecimiento, desde un punto de vista basico, es de fundamental importancia para la comprensión y predicción de los fenómenos asociados a las inestabilidades estructurales que ocurren en los materiales expuestos a severos entornos de radiación. En este trabajo, los aglomerados de defectos se introducen en las probetas de tracción monocristalinas de cobre, mediante la irradiación neutronica en el criostato instalado dentro del reactor RA-1 de la CNEA, a 77 K y dosis inferiores a la de saturación (4.5 x 10^6 n/cm^2). Esta elección de las condiciones experimentales asegura la no superposición de las cascadas de desplazamientos atómicos y la estabilidad de los defectos creados a la deformación plastica (ausencia de canalización de dislocaciones). La Tensión Critica Resuelta de Corte medida a 77 K. TCRC-k, es un observable físico ideal para el estudio de la Etapa V Los aglomerados de defectos actuan como obstáculos al movimiento de las dislocaciones dando lugar a un enorme incremento de esta propiedad, conocido como fenomeno de endurecimiento El 75 % del daño introducido durante la irradiaicón es recuperado en la Etapa V. medida por esta propiedad, mientras que sólo el 15% es retenido en esta Etapa cuando la recuperación se mide a traves del incremento de la resistividad electrica A partir de los recuperados isócronos e isotérmicos de la TCRC-k en el presente trabajo, se pudo establecer, por primera vez y con esta técnica, la existencia de, al menos, tres subetapas de recuperacion ubicadas en los intervalos de temperatura: ~ 220-250 °C (Va), ~ 250-290 °C (Vb) y ~ 290-325 °C, demostrando en forma concluyente que el proceso de disolución de los aglomerados que tiene lugar en esta etapa es multiactivado.

Abstract:
The irradiation with energetic particles is one of the most common techniques to introduce defects in a controlled way in metallic lattices. Defects alter sensitively the physical properties of the materials. By choosing physical observables sensitive enough to these defect structures it is possible to obtain knowledge about the type, space configuration, concentration and kinetic reactions involved. Post-irradiation thermal annealings provide the activation energies necessaries to recombine defects and the consequent recovery of the choosed physical property. In this way, the so called “Recover Stages” of the physical observable could be obtained, whose general characteristics identify univocaly the studied metal. The subject of this Ph. D. thesis is: “Thermal annealing (T > 450 K) of the defect clusters induced by neutron irradiation at low dose at 77 K in high purity copper, through the Critical Resolved Shear Stress mesured at 77 K, CRSS77k". This thennal annealing corresponds to the least studied last recovery stage of copper: the Stage V which is generally associated with the dissociation of the vacancy clusters with the systematic annihilation of the interstitial clusters by thermal vacancies. It is fundamental to know the details of this process in order to understand and to predict the phenomena associated with the structural inestabilities that occur in materials exposed to severe irradiation environments. In the present work, the defect clusters were introduced into copper single crystals by neutron irradiation at liquid nitrogen in the RA-l reactor of the Comisión Nacional de Energía Atómica (CNEA) up to a fast neutron dose of 4.5 x 10^6 n/cm^2. These experimental conditions prevent any superposition of the atomic displacements cascades and the stability of the plastic defonnation of the defects (abscence of dislocation channeling). The CRSS77k is an ideal physical observable to study the Stage V. The defect clusters act like obstacles to the dislocation movement producing an enormous increment of the CRSS: the radiation hardening. When the recovery is mesured through the increment of the CRSS, the 75 % of the radiation damage is recovered in Stage V, while only the 15 % is recovered when it is measured by the increment of the electrical resistivity. From the isochronal and isothermal annealings of the CRSS77k, it was possible to establish in the present work,for the first time and with this technique, the existence of at least three recovery substages in the temperature intervals: ~ 220-250 °C (Va), ~ 250-290 °C (Vb) y ~ 290-325 °C. In this way, it is conclusively demonstrated that the disolution of the clusters process of this stage is multiactivated, i.e., exists a spectrum of activation energies.

Mendez, Manuel. "Bioquímica y genética de la porfiria cutánea hepática" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Masuh, Héctor Mario. "Síntesis estereoselectiva, separación y actividad insecticida de compuestos piretroides" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los compuestos piretroides representan hoy dia la familia de insecticidas de mayor crecimiento de uso, fundamentalmente por su seguridad y alta efectividad. Está ampliamente aceptada y establecida su utilización no sólo con fines agropecuarios sino también en salud pública. Una característica de este tipo de compuestos es su particular estereoquímica y la marcada diferencia en el efecto insecticida de los diferentes isómeros geométricos y ópticos. Esta variación en la toxicidad de los isómeros ha sido justificada teniendo en cuenta el modo de acción de estos compuestos. En la búsqueda de nuevas composiciones insecticidas de relación isoméríca definida, este trabajo representa los resultados obtenidos en tres secciones: En la primera, se describen métodos de separación de los cuatro isómeros de la Permetrina y los ocho isómeros de la Cipermetrina por HPLC, y de la Permetrína cis y trans, en escala semipreparativa (placa y columna) y preparativa por recristalización, y se evalúó la acción insecticida de los isómeros, corroborando la mayor actividad del isómero cis. En la segunda sección se estudió la Permetrina en fase sólida, una vez separado el isómero cís en forma cristalina. A partir de allí, se formuló el insecticida en una matriz flowable y se evaluó su acción insecticida en distintas superficies, para varias especies de insectos plaga. El sólido fue caracterizado por difracción de rayos X y por microscopía electrónica. En la tercera y última parte se desarrolló un método novedoso de síntesis estereoselectiva de derivados de ácidos permetrínico (ácido cis, trans-2,2 dimetil - 3 - (2,2 diclorovinil) ciclopropanocarboxílico) RN 59042-49-8 y crisantémico (ácido cis,trans-2,2 dimetil - 3 - (2-metilpropenil) ciclopropanocarboxílico) RN 10453-89-1. Cada uno de los productos obtenidos fue caracterizado por espectrometria de masas. Se utilizaron métodos semiemplricos para sugerir posibles vías mecanísticas del proceso. Se intenta justificar el control cinético del proceso de esterificación, evidente según resultados experimentales, mediante métodos de modelado molecular; la reacción procedería como un ataque nucleofilico del ácido carboxilico a especies catiónicas en solución.

Abstract:
Pyrethroid insectícides have stability to atmospheric influences and at the same time this family includes the most effective insecticides known to date. Toxicological effects of this family of insecticides are closed related with stereochemical considerations. The most accepted hypothesis postulates that this effect is based in the interaction mechanism with membrane receptors, and affects sodium-potassium channels. In the search of new insecticides, with defined isomeric rate, this work was organized in three sections: In Section I new methods were described for isomer separation in analytical scale: four isomers in Permethrin and eight isomers in Cypermethrin were separated by HPLC. Column chromatography and recrystallization achieved semipreparative and preparative scale separations of cis and trans isomers respectively, and the cis isomer showed to be the most potent one. In section II the solid phase of cis Permethrin in crystalline form is studied. A new flowable insecticide was formulated, and its insecticidal effect in several surfaces was evaluated. X-ray diffraction methods complement this study. ln the last section a novel method for stereoselective synthesis of esters of permethrinic (cis, trans-2, 2 dimethyl - 3 - (2,2 dichlorovynyl) ciclopropanecarboxilic acid) - RN 59042-49- 8- and chrysantemic acid (cis, trans-2, 2 dimethyl - 3 - (2-methyl-propenyl) ciclopropanecarboxilic acid) -RN 10453-89-1- was described. Semiempirical methods were used to shed light in mechanistics aspects of this process. A kinetic control in the process of ester linkage formation was confirmed by molecular modeling methods; nucleophilic attack of carboxylic acids to cationic species formed in solution seems to be the mechanism of reaction.

Massaferro, Gabriela Isabel. "Estratigrafía, petrología y alteración hidrotermal en el Cerro Cuche, Departamento Futaleufú, Chubut" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las investigaciones geológicas realizadas en el área del cerro Cuche permitieron reconocer y mapear las distintas unidades aflorantes y elaborar, a través del estudio geoquímico, un modelo petrogenético para las unidades más importantes. El cerro Cuche se encuentra ubicado en el centro-oeste de la Provincia del Chubut, aproximadamente a 43° 30' de latitud sur y 71°12' longitud oeste y constituye el extremo sur de la Sierra de Caquel, en el límite entre la Cordillera Patagónica Central y la denominada Precordillera del Chubut. La unidad más antigua reconocida en el sector corresponde a lo que se designa informalmente como Vulcanitas del Cerro Cuche. Esta entidad está compuesta por lavas. piroclastitas y sedimentitas intercaladas, asignadas sobre la base de su contenido fosilífero al Pliensbachiano. Las vulcanitas son de composición intermedia y naturaleza calcoalcalina, típicas representantes de un vulcanismo de arco continental. Por sus características pueden ser correlacionadas con la Formación Lago La Plata o bien con la Formación El Córdoba. Las sedimentitas intercaladas constituyen secuencias silicoclásticas y carbonáticas, depositadas en ambientes marinos litorales. Posiblemente correspondan a pequeñas cuencas aisladas desarrolladas dentro del arco magmático. Por encima se encuentran afloramientos de vulcanitas más silíceas que fueron asignados tentavimente al Cretácico. Todo el conjunto volcánico se halla intruido por granitoides asignados al Batolito Andino. Son cuerpos de carácter epizonal, cuya fuente se ubicaría en el manto superior y habría recibido aportes de la placa subductada. Se caracterizan por la presencia de enclaves microgranulares máficos que evidenclan la existencia de fenómenos de “mingling” durante su ascenso. Estos cuerpos han sido asignados al Cretácico sobre la base de dataciones radimétricas. El Terciario estuvo dominado por sedimentación clástica continental que conforma los afloramientos de las Formaciones Huitrera y La Mimosa. La facies sedimentaria de la Formación Huitrera porta restos de flora fósil que permitieron asignarla al Eoceno inferior. Estas sedimentitas están intruidas por diques que se asignan a la fase volcánica de esta misma formación. Los depósitos glaciarios que constituyen el Drift Tecka y los depósitos aluviales y coluviales completan la columna estratigráfica. Las vulcanitas más antiguas (Jurásico-Cretácico) se encuentran afectadas por diversos fenómenos de alteración y metamorfismo, que en algunos casos se hallan superpuestos. En primer lugar, existe una alteración hidrotermal regional con características similares a un metamorfismo de bajo grado, caracterizada por la presencia de epidoto, clorita, calcita, cuarzo, albita, sericita y prehnita. Los estudios de termometría de inclusiones fluidas en la calcita, señalan una temperatura promedio de 226° C para los fluidos responsables de esta alteración. La intrusión de los cuerpos asignados al Batolito Andino habría generado zonas de mayor temperatura, donde esta asociación alcanzó el grado de esquistos verdes, con la aparición de actinolita y desaparición de prehnita. En las zonas de contacto con los mencionados intrusivos se generaron, según la composición de la roca de caja, hornfels o asociaciones de tipo skarn, estas últimas caracterizadas por la presencia de hornblenda y diópsido. Asimismo se verifica la existencia de fenómenos de alteración hidrotermal, dada la presencia en algunos sectores restringidos, de zonas de alteración potásica y venas epitermales de cuarzo. El estudio de termometría de inclusiones fluidas sobre las venas de cuarzo indican una temperatura promedio de 322° C.

Abstract:
Geologic investigations carried on in the Cerro Cuche area allowed to recognize and map the different outcropping units and to propose a petrogenetic model for the most important units. Cerro Cuche is located in the center-west of Chubut Province, approximately at 43° 30' South latitude and 71°12 ' West longitude and constitutes the Southern end of the Sierra de Caquel, in the border between the Cordillera Patagonica Central and the so called Precordillera of Chubut. The oldest recognized unit corresponds to the informally called Cerro Cuche Vulcanites. Lavic rocks, piroclastites and sedimentites, assigned on the base of its fossiliferous content to the Pliensbachian, compose this unit. The vulcanites are of intermediate composition and have calc-alkaline affinities. They are typical representatives of a continental arc volcanism. The Cerro Cuche Vulcanites can be correlated with the Lago La Plata and El Cordoba Formations. The interlayered sedimentites form silicoclastic and carbonatic sequences, deposited in coastal marine environment. They possibly correspond to small isolated basins developed within the magmatic arc. Volcanic rocks of more siliceous composition and assigned to the Cretaceous occur above. The volcanic assembly is intruded by Andean Batholith granitoids. They are bodies of epizonal characteristics, whose source could be located in the upper mantle with contributions of the subducted slab. They are characterized by the presence of mafic microgranular enclaves that show the existence of mingling processes during their ascent. These bodies have been assigned to the Cretaceous on the base of radimetric data. The Tertiary was characterized by continental clastic sedimentation that conforms the outcrops of the Huitrera and La Mimosa Formations. The sedimentary facies of the Huitrera Formation holds fossil flora that allowed to assign it to the Early Eocene. Dikes assigned to the volcanic phase of this Formation intrude the sedimentites. The glaciary deposits that constitute the Tecka Drift and the alluvial and coluvial deposits complete the stratigraphic column. The oldest vulcanites (Jurassic-Cretaceous age) are affected by diverse alteration and metamorphism phenomena that in some cases are superimposed. A regional hydrothermal alteration with similar characteristics to low grade metamorphism, characterized by the presence of epidote, chlorite, calcite, quartz, albite, sericite and prehnite exists. Calcite fluid inclusion thermometry studies indicate an average temperature of 226° C for the fluids responsible for this alteration. The intrusion of bodies related to the Andean Batholith would have generated zones of greater temperature, where this association reached the green schist grade, with the appearance of actinolite and disappearance of prehnite. Hornfels and skarn type associations were generated in the contact zones. The skarn type associations are characterized by the presence of hornblende and diopside. Hydrothermal alteration phenomena are also verified, given the presence of potassium alteration zones and epithermal quartz veins in some restricted sectors. Fluid inclusion thermometry studies on the quartz veins indicate an average temperature of 322° C.

Martins Alho, Miriam Amelia. "Síntesis de compuestos heterocíclicos nitrogenados, nitrogenados-oxigenados y nitrogenados-azufrados derivados de hidratos de carbono con posible actividad biológica" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el presente trabajo de Tesis se sintetizaron derivados de hidratos de carbono conteniendo heteroátomos, ya sea como tioéteres o formando parte de un heterociclo nitrogenado, nitrogenado-oxigenado o nitrogenado-azufrado. La construcción de dichos derivados se abordó por dos caminos: sustitución nucleofílica y heterociclización sobre precursores adecuados, ya sea por cicloadición 1,3-dipolar o bien por heterociclización de tiosemicarbazonas. Las síntesis por desplazamiento nucleofílico se llevaron a cabo utilizando reactivos comerciales azufrados (alifáticos, aromáticos y heterociclicos) y con heterociclos azufrados bioactivos no comerciales. La cicloadición 1,3-dipolar se empleó en la síntesis de tetrazoles obtenidos a partir de niuilos de azúcares protegidos. Estos tetrazoles a su vez dieron origen a derivados oxadiazólicos de interés. Las reacciones de heterociclización de tiosemicarbazonas condujeron a la obtención de derivados heterociclicos aromáticos y no aromáticos, además de derivados piranósicos nitrogenados y nitrogenados-azufrados. Se analizaron los productos principales y secundarios de estas reacciones sobre diversos sustratos, estudiándose los efectos de la temperatura, medio y tiempo de reacción, los que permitieron efectuar algunas especulaciones mecanísticas. Los productos nuevos que resultaron de interés fueron caracterizados fisica y espectroscópicamente, efectuándose algunos estudios de modelado molecular y simulación de espectros para avalar resultados experimentales.

Abstract:
In the present Thesis work some carbohydrate derivatives containing heteroatoms were synthesized. These heteroatoms are present as thioethers or in a nitrogenated, nitrogenated-oxigenated or nitrogenated-sulfured heterocycle. Construction of these compounds were made by nucleophilic substitution or applying heterocyclization reaction on appropriated precursors, using 1,3-dipolar cycloaddition or heterocyclization of thiosemicarbazones. Nucleophilic displacements were made using commercial sulfur containing reagents (aliphatics, aromatics and heterocyclic) and with sulfur containing non commercial reagents with biological activity. 1,3-Dipolar cycloaddition applied on nitriles which derived from protected carbohydrates yields tetrazolic derivatives. These tetrazolic derivatives were used to obtain oxadiazole derivatives. The heterociclization reaction of thiosemicarbazones produced sulfurated heterocyclic derivatives, aromatic and non aromatic, as well as other nitrogenated pyranosic derivatives with and without sulfur. This reaction was studied on different substrates and effect of temperature and reaction time were analyzed. We also present some mechanistic speculations, and in some cases, we perform some spectroscopic simulations and molecular mechanics analysis. The new products were characterized physically and spectroscopically.

Marcucci Poltri, Susana N.. "Caracterización molecular y cariotípica de la variabilidad genética de germoplasma argentino de Solanum L." (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La papa cultivada se encuentra relacionada con un gran número de especies del género Solanum con las que frecuentemente se cruza. Por tal motivo, las aproximadamente 200 especies silvestres que producen tuberculo, constituyen un importante reservorio de genes para distintos propósitos de mejoramiento. Las mismas se encuentran distribuidas en un amplio rango de hábitats y nichos ecológicos, constituyendo el Noroeste argentino, una gran fuente de germoplasma. Es conocido que poseen gran variabilidad tanto dentro como entre especies. La información sobre el grado de relación genética que existe entre las distintas entradas, reviste gran interés para las aplicaciones al mejoramiento genético, organización de los bancos de germoplasma. identificación de cultivares, reducción del número de entradas necesarias para que alberguen en una pequeña muestra, la mayor variabilidad genetica posible, para el mejoramiento molecular, etc. La variabilidad genetica puede medirse utilizando distintas herramientas las que incluyen datos morfológicos, citológicos, bioquímicos y moleculares. El objetivo de este trabajo es evaluar la variabilidad genética de 67 entradas silvestres y cultivadas del género Solanum, coleccionadas en el Banco de Germoplasma de EEA INTA- Balcarce, aplicando metodologías citológicas y moleculares y contrastar los resultados obtenidos con la clasificación taxonómica y su hipótesis evolutiva. Se analiza la utilidad de estas herramientas y la información generada mediante los polimorfismos de restricción correspondientes a los ADNs ribosomales. Se evaluó mediante microdensitometría, el contenido de ADN de individuos pertenecientes a 14 especies silvestres del género Solanum con el fin de detectar diferencias en el valor C. A pesar de que la mayoria de las especies no mostró diferencias significativas entre ellas (dentro de los distintos grupos de ploidías), pequeñas diferencias fueron detectadas entre algunas de ellas. S. tarijense y S. kurzianum (2.3 pg) difirieron significativamente (0,1%) de S. Spegazzini, S. vernei, S. venturii y S. commersonii (1,9 pg); y S.. megistacrobolum (2,2 pg) difirió de S. spegazzinii (1,9 pg) dentro de los citotipos diploides. Entre los tetraploides el rango fue desde 3,6 pg (S. tuberosum ssp tuberosum cv. Baraka) hasta 4,7 pg (S. tuberosum ssp andigena y S. gourlayi) hallándose diferencias significativas al 0,1%. En cuanto a la variabilidad de los genes que codifican para el ARN ribosomal, se detectaron diferentes tamaños de las subunidades completas, tanto dentro como entre especies, y aún, dentro de una misma especie; sugiriendo una alta tasa de mutaciones localizada fundamentalmente el extremo 5' del espaciador externo. La pérdida del sitio EcoRI del extremo 3'de dicho espaciador en todas las entradas de S. venturii fue característica de dicha especie. El desarrollo de las nuevas metodologías ha expandido el rango de los ensayos para detectar polimorfismos de ADN con propósitos de "fingerprinting", distancias genéticas, etc. Se han desarrollado distintos marcadores moleculares (RFLP, AFLP, SSR etc) con el fin de estudiar las relaciones genéticas y se evaluó su utilidad en varios cultivos, incluidos la papa cultivada, S. tuberosum ssp tuberosumm. En este trabajo, se ensayaron 4 combinaciones de "primers" de AFLP, 15 sondas genómicas de RFLP y 7 pares de "primers" para SSR; para un grupo de 67 genotipos diploides y poliploides que pertenecen al mismo grupo de especies silvestres y cultivadas. Se compararon las asociaciones generadas mediante todas las técnicas y se las comparó con la clasificación taxonómica tradicional. Se calcularon los indices de contenido polimórfico promedios correspondiente a cada sistema (con valores aproximados de 0,25 para RFLP, 0,32 para AFLP y 0.58 para SSR), número de polimorfismos por ensayo y también se determinaron los alelos comunes entre las entradas diploides y poliploides, incluyendo al cultivar de papa. En términos generales, las relaciones entre las especies variaron según la metodología utilizada. Se observó una gran variabilidad dentro de especies, lo que dificultó el establecimiento de las relaciones entre especies. Como se esperaba, las entradas pertenecientes a una misma especie, en general se agruparon con mayor similitud que entre especies, independientemente de la técnica utilizada. También se detectaron asociaciones de individuos concordantes con la procedencia geográfica. Promediando todos los indices de similitud obtenidos con los tres métodos. la especie que tuvo menor variabilidad fue S. venturii (0,681) y la de mayor variabilidad S. gourlayii(0,411). Los mejores valores de correlaciones entre los distintos sistemas correspondieron a AFLP y SSR, en los dos grupos de ploidías, aunque los coeficientes de correlación entre las matrices de similitud obtenidas mediante las distintas herramientas no difirieron demasiado. Los valores de correlaciones en los citotipos diploides fueron desde 0,510 (RFLP vs SSR), 0,552 (RFLP vs AFLP), 0,640 (AFLP vs SSR). Considerando todos los citotipos independientemente de la ploidía, los valores oscilaron desde 0,441 (RFLP vs SSR), 0,505 (RFLP vs AFLP) a 0,629 (AFLP vs SSR). Debido a los altos valores obtenidos en los coeficientes de correlación cofenéticos (matrices de similitud vs. matrices cofenéticas, AFLP r=0.92; SSR r=0.85; RFLP r=0.78), las asociaciones entre los individuos pueden visualizarse directamente a partir del dendrograma. Los AFLP mostraron el mejor ajuste con la clasificación taxonómica, asociando dos especies que pertenecen a la misma serie Yungasensa (S. tarijense y S. chacoense), como así también agrupando más próximo al grupo de referencia externo tomate, a las entradas pertenecientes a S. commersonii, considerada como la especie más primitiva según la hipótesis propuesta por Hawkes, 1990. Esto quizás sea debido al gran número de bandas compartidas entre el germoplasma y a la alta cobertura genómica. En el caso de RFLP, se observaron algunos individuos dispersos, sugiriendo que sería necesario evaluar un mayor número de sondas. Los SSR en general se utilizan para obtener información dentro de especies. pero no entre especies. Pudo observarse que la mayoria de los loci evaluados produjeron amplificaciones, indicando la conservación de las regiones flanqueantes. Sin embargo, el número de repeticiones, no fue muy conservado entre las distintas especies, transformándolos en inapropiados para establecer relaciones entre especies, pero si muy útiles dentro de especies. El análisis reverso de los datos, permitió la detección de bandas caracteristicas de especies y también de individuos. Casi todas las especies pudieron discriminarse con estas bandas, y muchos de los individuos mostraron bandas únicas. Se evaluaron asimismo el número de bandas novedosas respecto del cultivar Huinkul MAG, en especies como en individuos particulares, pudiendo identificarse aquellas más distantes genéticamente, que serían potencialmente interesantes para aumentar las bases genéticas de los cultivares comerciales. También se determinó es grado de homocigosis de los distintos genotipos diploides, merced al uso de los marcadores de tipo codominantes (RFLP y SSR) mostrando un mínimo de homocigosis de 26% en S. goniocalyx megistacrolobum Oka 3787.

Abstract:
Cultivated potato is related to a large number of Solanum sp and can easily be hybridized. This makes that the two hundred wild and cultivated tuber-bearing species of the genus Solanum form a valuable gene reservoir for different breeding purposes. They are distributed in a wide variety of habitats and niches (North-West Argentina is a source of a great number of these species), there is high genetic variation within and between species. Information on genetic relationships among accessions has several important applications for crop improvement: organizing germplasm banks, identifying cultivars, reducing the number of accessions needed to ensure a representative sample of broad range of genetic variability, molecular breeding, etc. Genetic variability can be assessed in different ways including the comparison of morphological, cytological, biochemical and molecular data. The objective of this work is to evaluate genetic variability of 67 wild and cultivated Solanum accessions belonging to the germplasm bank of EEA INTA Balcarce applying cytologic and molecular tools. The usefulness of this tools are compared with traditional taxonomy and its evolutive hypothesis. Ribosomal DNAcoding sequences are explored trough different restriction polymorphisms. Different subunits sizes were detected within and between species, and also in one specie, showing a high mutation rate mainly in the 5' end of the external spacer. All accessions of S. venturi showed the lost of an EcoRI restriction site located in the 3' end of the external intergenic spacer. DNA content of individuals belonging to 14 wild Solanum species was measured by microdensitometry to determine differences in their C value. Although most species did not show significant differences between them, slight differences could be detected between some of the species. Both S. tarijense and S. kurzianum (2.3 pg) differ from S. spegazzinii, S. vernei, S. venturii and S. commersonii (1,9 pg); and S. megistacrolobum (2,2 pg) differ from S. spegazzini (1,9 pg) at diploid level. Tetraploids ranged from 3.6 pg (S. tuberosum ssp tuberosum cv. Baraka) were found at 0.1% level. New technological developments have expanded the range of DNA polymorphism assays for genome fingerprinting, genetic relatedness, etc. Different molecular markers (RFLP, AFLP, SSR, etc.) has been developed to study genetic relationships and their usefulness was compared in many crop species including cultivated potato Solanum tuberosum ssp tuberosum In this work, 67 genotypes (diploids as well as tetraploids) belonging to the same group of wild and cultivated species, were assayed with, 15 RFLP genomic probes, 4 AFLP primers combinations and 7 microsatellite primers pairs. Associations generated by each technique were compared as well as how they fit with traditional taxonomy classification. Estimates of diversity indexes for each system (RFLP=O,25, O,32=AFLP and O,58=SSR), number of polymorphisms per assay as well as identification of common alleles between diploid and tetraploid accessions including cultivated potato were calculated. In general terms, quantification of relatedness between species varied depending on the technique applied. It was observed a very high level of variation within species, making more difficult to establish relationships between species. As expected, accessions of the same species grouped at a higher level of similarity than with the rest of the germplasm, independently of the molecular tool used for evaluation. Genotypes belonging to the same geographic origin, were also grouped. S. gourlayí showed to be the most variable specie calculated on the bases of the three methodologies with the with the smallest average similarity index (0,411) and the less variable was S. venturii with the highest average similarity index (0,681). Similarity indexes calculated on the bases of all three different methodologies were correlationed and r values were 0.510 (RFLP vs SSR), 0,552 (RFLP vs AFLP), 0,640 (AFLP vs SSR) for diploid species. Taking into account all citotypes, r values ranged from 0.441 (RFLP vs SSR), 0,505 (RFLP vs AFLP) a 0,629 (AFLP vs SSR). As similarity matrixes are comparable with cophenetic matrixes (AFLP r=0.92; SSR r=0.85; RFLP r=0.78), this allows us to roughly visualize the associations between accessions directly on dendograms. AFLP showed the best fit to taxonomic classification grouping two species (S. tarijense and S. chacoense) which belong to the same taxonomical serie Jungasensa, althogeter; also S. commersonii which is considered to be the most primitive taxon of this group (Hawkes. 1990) was grouped near the outgroup tomato. This might be due to the higher proportion of shared bands respect to the other and the relative better coverage of genomes. In the case of RFLP, some accessions were dispersed, suggesting that more probes need to be analyzed. SSR are usually used to obtain information within species and not between species, it was observed that the loci were conserved since amplification was possible in many of the genotypes analyzed. However, microsatellite loci showed very little conservation of alleles in different species (as expected for this very mutable loci) making them not appropriate for relatedness quantification when comparing different species while they keep their usefulness within species. Reverse analysis of data allowed the detection of specie specific bands as well as individuals ones. Nearly all of the species were able to be discriminated and most of single individuals had unique bands. Novel bands not found in potato cultivar Huinkul MAG were also computed in all species and in individuals allowing the knowledge of the more distant ones, which might be interesting for increasing genetic basis of commercial cultivars. Homozygous status of diploids genotypes were also estimated using codominant markers (RFLP and SSR) being of 36% for S. spegazzinii Oka 6108 and 64% for S. goniocalyx y S. megistacrolobums Oka 3787.

Marconi, Patricia Laura. "Estudio de la fisiología y metabolismo en plantas de Solanum Tuberosum obtenidas por variación somaclonal" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La presente Tesis se basa en la caracterización fisiológica, bioquímica y genómica de plantas de papa (Solanum tuberosum spp. tuberosum). Las mismas fueron obtenidas por cultivo in vitro luego de aplicar un mecanismo de selección recurrente con ClNa. A partir de los callos tolerantes a 150 mM de cloruro de sodio agregado al medio de cultivo se regeneraron plantas por embriogénesis somática denominadas clon 150 (Ochatt et al, 1998). El crecimiento, la distribución de asimilados y de los iones sodio y potasio fueron diferentes entre ambos clones. El clon 150 fue más tolerante a elevadas concentraciones externas de ClNa que el clon T. Los medios de cultivo con elevadas concentraciones de ClNa provocaron un estrés oxidativo. Las plantas del clon 150 mostraron una rápida y eficiente respuesta antioxidante a diferencia del clon T. Los análisis comparativos entre ambos clones a nivel de callos mostraron un patrón parecido al de los de planta entera, a excepción de la respuesta antioxidante. Además, se observó una correlación positiva para la acumulación de Na+ y K+ entre ambos niveles de organización. Los patrones de isoenzimas y RAPD,sumados a las diferencias anatómicas y fisiológicas descriptas, sugieren que el clon 150 difiere genéticamente del cultivar Kennebec. Estas diferencias son particularmente importantes para el crecimiento y la respuesta fisiológica de ambos genotipos cuando son cultivados en condiciones de estrés salino.

Abstract:
This Thesis attempt to made a physiological, biochemical and genomical characterization of potatoes plants (Solanum tuberosum spp. tuberosum) that were obtained by in vitro culture through recurrent selection. Cell line originated from Kennebec cultivar showed to be able to growth on a medium with 150 mM NaCI. Plants obtained by somatic embryogenesis from this cell line were named as 150 clone (Ochatt et al, 1998). Plant growth, assimilate and sodium and potassium distributions differed between the 150 clone and the control Kennebec cultivar. The 150 clone was also salt-tolerant at relatively high NaCl concentrations. Oxidative stress was observed when plants of both clones grown on saline medium. Plants of clone 150 showed a rapid and efficient response to oxidative stress, a pattern that was not observed for the Kennebec clone. Comparative analysis between clones at the callus level shown a similar pattern than that observed for whole plants, although the oxidative defense was not detected. Likewise, a positive correlation was obtained for the accumulation of Na+ and K+ between both organization levels. The pattern here describe for isozymes and RAPD's analyses, in addition to the anatomical and physiological differences above outlined, strongly suggest that the clone 150 differs genetically from the control Kennebec cultivar. These differences are likely to be especially relevant for the growth and the whole physiological response of both genotypes under salt stress conditions.

López, Silvia Noemí. "Estudios biológicos sobre encarsia formosa Gahan y Eretmocerus corni Haldeman para su uso en el control biológico de Trialeurodes vaporariorum (Westwood) " (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La mosca blanca de los invernáculos Trialeurodes vaporariorum (Hemiptera: Aleyrodidae) es una especie fitófaga que afecta numerosos cultivos hortícolas. El objetivo de esta tesis fue estudiar los principales atributos biológicos de los parasitoides Encarsia formosa y Eretmocerus corni (Hymenoptera: Aphelinidae), y evaluar su potencial como agentes de biocontrol del insecto plaga. Con el objetivo de realizar los estudios biológicos y la cría de los parasitoides, se determinó la preferencia de T. vaporariorum por cuatro hospederas de importancia económica. Además se estimó el tiempo de desarrollo y la supervivencia de sus estados inmaduros sobre zapallito y tomate. Los atributos biológicos de los parasitoides se evaluaron en laboratorio utilizando al tomate como planta hospedera. Se determinó el tiempo de desarrollo de ambos parasitoides a 26 °C y 30°C. E. corní tuvo un tiempo de desarrollo mayor que E. formosa a ambas temperaturas. y las dos especies alcanzaron el estado adulto más lentamente a 26°C que a 30° C (P<0,05). Para cada parasitoide se determinó la longevidad y los principales parámetros poblacionales mediante la construcción de una tabla de vida y de fertilidad. Los resultados para El formosa fueron: longevidad media del adulto: 10,4 días; fertilidad especifica por edades media (mx): 15,2 hembras/hembra/dia; tasa neta de reproducción (Ro): 150,5 hembras/hembra; tiempo generacional (T)= 18 días; tasa intrínseca de crecimiento poblacional (rm)=0,28 hembras/hembra/día. Los resultados para E. corni fueron: longevidad media del adulto: 12,8 días (hembras) y 7,0 días (machos); proporción de sexos: 0,57 hembras-0,43 machos; fertilidad específica por edades media (mx)= 5,9 hembras/hembra/día; tasa neta de reproducción (Ro): 100,8 hembras/hembra; tiempo generacional (T)= 23,7 días; tasa intrínseca de crecimiento poblacional (rm): 0,20 hembras/hembra/día. Se evaluó el parasitismo y la eficiencia de búsqueda de E. formosa en relación con la disponibilidad de huésped. El parasitoide exhibió una respuesta funcional de tipo ll de Holling con un parasitismo máximo de 13,8 ninfas/día a una densidad de 40 ninfas/día. La interacción entre ambos parasitoides se evaluó mediante dos estudios bajo condiciones experimentales diferentes: a) controladas en laboratorio: se analizó el efecto de |a interacción sobre el parasitismo de cada especie. E. formosa se vio afectada por la presencia de E. comi con recurso limitado y no limitado (P<0,05); b) semicontroladas en invernáculo: se analizó el efecto de la liberación múltiple de los parasitoides sobre la mortalidad de Ia plaga. La liberación múltiple provocó el mismo parasitismo total que cualquiera de los parasitoides por separado (P>0,05). Puede concluirse que ambos parasitoides son potencialmente eficientes para controlar a la plaga. E. formosa presentaría ventajas respecto de E. comi por poseer una mayor tasa intrínseca de crecimiento poblacional (rm) producto de su reproducción por partenogénesis deuterotoca, su mayor fertilidady su menor tiempo de desarrollo.

Abstract:
The greenhouse whitefly Trialeurodes vaporariorum (Hemiptera: Aleyrodidae) is a herbivore species that affects numerous crops of high economical value. The goal of this thesis was to study the main biological characteristics of the parasitoids Encarsía formosa and Eretmocerus corni (Hymenoptera: Aphelinidae), and to evaluate their potencial use as biological agents to control this pest. In order to carry out the biological studies and the rearing of the parasitoids, the preference of T. vaporariorum for four host plants was determined. Moreover developmental time and suvirval rate of its inmature stages were estimated on squash and tomato. The biological attributes of the parasitoids were determined in controlled conditions using the tomato as host plant. Preimaginal developmental time for both parasitoids was measured at 26°C and 30°C. E. corni had a longer developmental time than E. formosa at both temperatures, and both species reached their adult stage later at 26°C than at 30° (P<0,05). The Longevity and the main population parameters of each parasitoids were also analysed. In order to do so, a life table was constructed. The results for E. formosa were: mean Longevity of adults = 10,4 days; mean age-specific fertility (mx)= 15,2 females/female/day; net reproductive rate (Ro)= 150,5 females/female; generational time (T)= 18 days; intrinsic rate of natural increase (rm)= 0,28 females/female/day. Results for E. corni were as follows: mean longevity of adults= 12,8 days (females) and 7,0 days (males); mean sex rate= 0,57 females-O.43 males; mean age-specific fertility (mx)= 5,9 females/female/day; net reproductive rate (Ro)= 100.8 females/female; generational time (T)= 23,7 days; intrinsic rate of natural increase (rm)=0,20 females/female/day. Parasitism pattern and functional response of E. formosa were evaluated in relation to density of its host. It showed a Holling type II functional response with a maximum parasitism of 13,8 nynphs/day at 40 nynphs/day density. The interspecific interaction between parasitoids was analysed in two studies under different experimental conditions: a) laboratory controlled conditions: the goal was to analyse the effect of the interaction on the parasitism of each species. E. formosa was affected by the presence of E. corni with and without limited resourse (P<0,05); b) greenhouse semicontrolled conditions: the objetive was to study the effect of multiple release of the parasitoids on the whitefly's mortality. It was observed that the multiple release produced the same total parasitism as each parasitoid by itself (P>0,05). It can be concluded that both parasitoids are potentially efficient to control the pest. E. formosa could be more advantageous with respect to E. comi because of its bigger intrinsic rate of natural increase (rm)as a result of its deuterotokous reproductive tactics, its bigger fertilityand its shorter developmental time.

Lombardo, Fernando César. "Transición cuántico-clásica en teoría de campos" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta Tesis estudiamos el proceso de transición cuántico-clásica en teoría de campos. Extendiendo el formalismo de la funcional de influencia de Feynman y Vernon, estudiamos el proceso de pérdida de coherencia para campos autointeractuantes en espacios planos y para modelos de gravedad cuántica. En primer lugar, después de destacar los principales resultados para una partícula Browniana cuántica acoplada a un entorno de osciladores armónicos, consideramos una teoría de campos con autointeracción en el espacio de Minkowski. Calculamos una acción efectiva de granulado grueso integrando los modos del campos cuyas longitudes de onda sean menores que cierta longitud crítica. A partir de esta acción efectiva obtenemos la ecuación de evolución para la matriz densidad reducida. Calculamos los coeficientes de difusión de esta ecuación y analizamos el proceso de pérdida de coherencia para las longitudes de onda mayores que la crítica. Luego, con el objeto de analizar la formación de estructuras en modelos inflacionarios, generalizamos los resultados a campos acoplados conformemente a la métrica de de Sitter. Mostramos que la pérdida de coherencia es efectiva si la longitud de onda crítica es mayor que el radio de Hubble. Por otro lado, estudiamos el límite clásico en modelos de gravedad escalar-tensorial en dos dimensiones. Analizamos diferentes acoplamientos entre el campo dilatónico y el campo de materia. Discutimos el proceso de radiación de Hawking en los distintos modelos. A partir de un cálculo exacto de la funcional de influencia, estudiamos las condiciones bajo las cuales es posible que la pérdida de coherencia sea efectiva en métricas cosmológicas para asegurar la validez de la aproximación semiclásica. Finalmente estudiamos modelos en cuatro dimensiones donde campos masivos se acoplan a la geometria del espacio-tiempo de manera arbitraria. Calculamos las ecuaciones de Einstein-Langevin para estudiar el efecto de las fluctuaciones cuánticas inducidas por los campos de materia sobre la geometría clásica.

Abstract:
In this Thesis we study the quatum to classical transition process in the context of quantum field theory. Extending the influence functional formalism of Feynman and Vernon, we study the decoherence process for self-interacting quantum fields in flat space. We also use this formalism for arbitrary geometries to analyze the quantum to classical transition in quantum gravity. After summarizing the main results known for the quantum Brownian motion, we consider a self-interacting field theory in Minkowski spacetime. We compute a coarse grained effective action by integrating out the field modes with wavelength shorter than a critical value. From this effective action we obtain the evolution equation for the reduced density matrix (master equation). We compute the difflusion coefficients for this equation and analyze the decoherence induced on the long- wavelength modes. We generalize the results to the case of a conformally coupled scalar field in de Sitter spacetime. We show that the decoherence is effective as long as the critical wavelength is taken to be not shorter than the Hubble radius. On the other hand, we study the classical limit for scalar-tensorial models in two dimensions. We consider different couplings between the dilaton and the scalar field. We discuss the Hawking radiation process and, from an exact evaluation of the influence functional, we study the conditions by which decoherence ensures the validity of the semiclassical approximation in cosmological metrics. Finally we consider four dimensional models with massive scalar fields, arbitrary coupled to the geometry. We compute the Einstein-Langevin equations in order to study the effect of the fluctuations induced by the quantum fields on the classical geometry

Loaiza Pérez, Andrea Irene. "Estudios del mecanismo molecular de acción del hexaclorobenceno sobre la expresión del gen de la enzima málica citosólica hepatica" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El hexaclorobenceno (HCB) es un tóxico ambiental ampliamente distribuido en la biosfera. la exposición crónica de animales de laboratorio al HCB produce importantes efectos biológicos tales como desencadenamiento de porfiria, inducción de enzimas microsomales hepáticas, disfunciones tiroideas, inmunosupresión y carcinogénesis. Trabajos realizados en nuestro laboratorio habían demostrado que el HCB incrementa la actividad de enzimas lipogénicas hepáticas reguladas por hormonas tiroideas (HT) tales como la enzima málica (EM). En este trabajo hemos demostrado que el HCB provoca un incremento en los niveles de RNAm de EM hepática, siendo este efecto a nivel transcripcional. Estudios de los elementos en cis y en trans que median la respuesta descripta revelaron que el pesticida provoca la inducción de un complejo proteico sobre el elemento de respuesta a HT (TRE) presente en el promotor de EM, el cual presenta un 64% de homología con el elemento de respuesta a xenobióticos (XRE). RT3 no está involucrado en forma directa en dicha inducción aunque su presencia seria necesaria para dicha estimulación. Otros factores de trancripción tales como Ahr o factores de la familia "fork head" formarían parte del complejo inducido.

Abstract:
Hexachlorobenzene (HCB) is a widespread environmental pollutant. Chronical exposure of laboratory animals to HCB causcs a number of biological effects such as triggering porphyria, microsomal enzyme induction, thyroid dysfunction, inmunosupression and carcinogenesis. Previous data of our laboratory have demonstrated that HCB increases the activity of thyroid-responsive lipogenic enzymes such as malic enzyme(ME).In this work we have demonstrated that HCB increases ME mRNA levels as a consequence of stimulation of the transcription process. We have studied cis and trans elements that mediate that phenomena. Our data reveal that HCB induces protein/DNA complexes formed on TRE of ME promoter, that has a 64% of homology with consensus xenobiotic response element (XRE). RT3 would not be involved directly in that regulation but its presence would be necessary. Other transcription factors such as Ahr or fork head family members could participate in the HCB-induced complex formed on TRE.

Levin, Laura Noemí. "Biodegradación de materiales lignocelulósicos por Trametes trogii (Aphyllophorales, Basidiomycetes)" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los materiales lignocelulósicos se explotan en industrias tales como la madera, el papel y la agroindustria, cuyos residuos podrían transformarse en productos utilizables por bioconversíón. Dentro de los hongos existen algunos con mayor capacidad degradativa de lignina, los que producen “pudrición blanca”. Uno de ellos es Trametes trogii. Experiencias previas en biopulpado con la cepa utilizada en este estudio, demostraron que reducía el consumo de energia y mejoraba la calidad del papel obtenido. Este trabajo se inició con el objetivo de comprobar si dicho hongo es capaz de producir enzimas lignocelulolíticas in vitro, las cuales podrían utilizarse en procesos de bioconversíón de materiales lignocelulósicos de desecho y otros procesos biotecnológicos. El mismo comprende la detección y el estudio de las enzimas involucradas en la conversión de materiales lignocelulolíticos por T. trogii (celulasas, xilanasas, pectínasas y enzimas que intervienen en la degradación de lignina), la investigación de las condiciones nutricionales y de cultivo que favorecen la producción de las distintas actividades enzimáticas, asi como una caracterización de dichas actividades enzimáticas en el extracto crudo. Previamente a la aplicación industrial de los hongos de pudrición blanca, es necesario investigar el proceso de degradación y como éste afecta a los diferentes tipos celulares, por ello paralelamente se realizaron ensayos de degradación sobre madera y analizaron los cambios estructurales y ultraestructurales producidos por la acción de T. trogii. Los resultados obtenidos permiten afirmar que T. trogii bajo condiciones adecuadas produce los sistemas enzimáticos extracelulares necesarios para degradar activamente los principales componentes de las paredes celulares de las plantas superiores. Teniendo en cuenta los altos títulos y la tolerancia a situaciones extremas registrados para algunas de dichas enzimas, se podría considerar que constituye una buena fuente para la obtención de los sistemas enzimáticos empleados en diferentes procesos de bioconversíón.

Abstract:
Lignocellulosic materials are exploited in wood, paper and agroindustries, whose residues might be transformed in utilizable products by bioconversion. White-tot Basidiomycetes are the only type of wood-rotting fungi that can attack efficiently all wood components, including lignin. One of them is Trametes trogii. Biopulping research with the strain used in this study, showed that it reduces energy input and significantly improves strength characteristics of finished paper. The aim of the present work was proving its ability to produce lignocellulolytic enzymes in vitro, which could be used in biotechnological processes. It comprises the detection and study of the enzymes involved in the conversion of lignocellulosic materials by T. trogii (cellulases, xylanases, pectinases and enzymes which participate in lignin degradation), the investigation of the nutritional and culture conditions that promote the production of such activities, as well as their characterization in a crude extract. Prior to application of whiterotters for industrial use, knowledge of how these fungi degrade different cells and the process responsible for the degradation is necessary, because of this, degradation assays on wood were done, and structural and ultrastructural changes caused by the action of T. trogii were analyzed. The results obtained showed that under appropriate conditions T. trogii is capable of producing the enzymatic systems required to degrade the main components of plant cell walls. Taking into account the high titers and tolerance to adverse situations displayed by some of these enzymes, T. trogii might be considered a good source for the obtention of enzymatic systems employed in bioconversion processes.

Leit, Silvana Marcela. "Síntesis y análisis conformacional de oligosacáridos aniónicos" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Ladeda, Virginia Edith. "Expresión de CD44 en tumores murinos y humanos y su relación con el proceso metastásico" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
CD44, receptor del acido hialurónico, es una glicoproteína de membrana con un dominio extracelular altamente glicosilado, una porción transmembrana y una cola citoplasmática que interactúa con el citoesqueleto. Originalmente fue descripta como receptor “homing” en células linfocitarias, pero luego se vio que también se expresa en otros tipos celulares. Existen múltiples formas de esta molécula, llamadas variantes, que se generan por splicing alternativo de 10 exones. La forma mas abundante es la llamada estándar ó hemopoyética (CD44s/ H), que carece de los diez exones alternativos y se expresa predominantemente en células hemopoyéticas y mesenquimaticas. Su peso molecular es de 80-90 kDa. Sus principales funciones son participar en la activación de linfocitos y en la adhesión y migración celular. Las formas variantes tienen un peso molecular de 120-150 kDa y se expresan con predominio en tejidos epiteliales. Las funciones precisas de estas isoformas aún no estan claras. En 1991, Gunthert y col., demostraron que la ísoforma v6 confería capacidad metastasica al ser transfectada en células tumorales no metastásicas de rata. Como consecuencia de este hallazgo ha surgido un gran interés por el estudio de CD44 en otros modelos tumorales. En el desarrollo de este plan de Tesis, hemos estudiado la función, expresión y distribución de CD44 en una línea celular tumoral mamaria murina, F3II, altamente invasiva y metastasica. El estudio de la expresión de CD44 en cortes histológicos de tumores F3II, mostró una alta expresión de esta molécula asociada al crecimiento subcutaneo de los mismos, mientras que dicha expresión fue prácticamente nula en tumores F3II crecidos en forma peritoneal. El analisis de la expresión de CD44, por Western blot e inmunohistoquímica, en cultivos de células tumorales FSII y normales NMuMG, mostró que las monocapas de células FSII expresan mayores niveles que las células normales. En ambas líneas se pudo detectar, por Western blot, una banda principal de 80 kDa, correspondiente a CD44s. También se observó la presencia de bandas de mayor peso molecular, que podrian corresponder a la expresión de variantes de CD44, aunque dicha expresión fue menos evidente en las células NMuMG. Mediante el uso de un anticuerpo monoclonal específico antíCD44 (KM201), hemos demostrado que los procesos de adhesión y spreadíng dc células FSII pueden ser inhibidos en forma significativa. El análisis de la expresión de CD44, por inmunocitoquímica durante el spreading, mostró que esta molécula se distribuye en forma contínua (no punctata) sobre la membrana plasmática, particularmente en los bordes anteriores o de avance y en la zona perinuclear de la membrana plasmática. CD44 no fue detectado en estructuras como filopodios o lamelipodios, pero sí entre dichas estructuras. Las células totalmente extendidas sobre el sustrato, presentaron una significativa disminución de la tinción de CD44 sobre la membrana plasmática, comparado con los estadios iniciales del spreading. Este descenso en la expresión a lo largo del spreading fue confirmado por Western Blot. En ensayos de migración e invasión de células F3II en cámaras Transwell, demostramos que el anticuerpo anti-CD44, fue también capaz de inhibir en forma significativa ambos procesos. Además, el tratamiento de células FSII con anti-CD44 conjuntamente con anti-uPA, la inhibición de la migración se incrementó en un 90%, sugiriendo una acción sinergíca entre CD44 y uPA en favor de la migración de estas células tumorales. Además de la asociación funcional entre CD44 y el uPA en el en el proceso de migración, los resultados de ensayos de inmunoprecipitación con anticuerpos específicos, indicaron que el receptor CD44 estaría físicamente asociado con el uPA, sugiriendo la participación conjunta de ambas moléculas en algunas etapas de la cascada metastasica de células tumorales mamarias murinas. En conjunto estos resultados demuestran que, en la línea celular tumoral F3II, CD44 cumple un rol activo en eventos críticos que tienen lugar durante la cascada metastásica, como la adhesión, spreading, migración e invasión celular. Mediante un enfoque farmacológico, se estudiaron las vías de señalización que participarían en la regulación de la expresión de CD44 en células FSII. El tratamiento de células F3II con PMA, activador de PKC, o ácido fosfatídico, producto de la degradación de fosfatídilcolina dependiente de PLD, aumentaron en forma significativa la expresión de CD44. Cuando los cultivos fueron tratados con H7, inhibidor específico de PKC,o con propranolol, inhibidor de la conversión de acido fosfatídico a DAG,se observó una sensible disminución de la expresión de CD44. Los resultados de estos experimentos sugieren la participación de PKC y PLD en las vias de señales que regulan la expresión de este receptor. Los tumores cerebrales raramente metastatizan pero son muy invasivos a nivel local. Dado que el AH es un componente abundante de la matriz extracelular del sistema nervioso central y que CD44 participa en su degradación, la sobreexpresión de este receptor podría facilitar el proceso invasivo de estos tumores. En un trabajo colaborativo con los Servicios de Oncología y Patología del Hospital Italiano, hemos analizado la expresión de CD44 en 57 tumores de cerebro (14 astrocitomas de bajo grado, 13 astrocitomas anaplásicos, 22 glioblastomas multiformes, 5 ependimomas y 3 meduloblastomas). Cuando se analizaron los glioblastomas de distintos estadios, se observó que la sobreexpresión de CD44s se correlaciona en forma lineal con el grado de agresividad de estos tumores (Clasificación de Burger). En cambio, el mismo analisis en ependimomas, tumores poco agresivos, mostró una alta expresión de CD44s, mientras que, en meduloblastomas, tumores altamente agresivos, la expresión de esta molécula, fue casi nula. No se detectó expresión de variantes de CD44 en ninguno de los tumores estudiados. Nuestros resultados sugieren que la sobreexpresión de CD44s podria ser de importancia durante el desarrollo de tumores humanos de origen neuroglial.

Abstract:
CD44, the receptor of hyaluronan acid, is a transmembrane glycoprotein, which has an extracellular domain, a transmembrane portion, and a cytoplasmic tail which is connected to the cytoskeleton. CD44 was originally described as the lymphocyte “homing receptor” to lymph nodes endothelium. A large number of isoforms are generated by alternative splicing of up to IO variant exons. Further diversity is created by variable side chain glycosilation. The most abundant form is the so called standard or hematopoetic form, CD44s/H, expressed predominantly in hematopoetic and mesenchymal cells. CD44s lacks the variant exons and has a molecular weight of 80-90 kD. Its multiple functions include lymphocyte activation, cell adhesion and migration. The variant forms range from 120 to 250 kD and are expressed predominantly in epithelial tissues. The precise functions of these isoforms are not clear at present. A considerable amount of interest in this molecule was generated by the finding reported by Gunthert et al (1991), that a particular isoform (v6), when transfected into non metastatic rat pancreatic carcinoma cells, conferred metastatic capability. This was followed by a series of papers indicating increased expression of CD44s and variants in other tumor models. In this Thesis project, we have studied the function, expression and distribution of CD44 in the highly invasive and metastatic murine mammary tumor cell line, F3II. We detected a high CD44 expression on F311subcutaneous tumors, while the expression was almost nule when the tumor grew intraperitoneally. Confluent monolayers of normal murine mammary cells (NMuMG) and F311tumor cells were assayed for their capacity to express CD44 by Western blot and immunohystochemistry. F3II cells were found to express significantly higher levels of CD44 than NMuMG. The Western blot analysis showed a main specific band of 80 kDa on both cell lines, corresponding to CD44s, and minor bands of higher molecular weight suggesting the expression of CD44 variants. A mAb anti-CD44 (KM201) dramatically blocked F3II cell adhesion and spreading. Immunocytochemistry of spreading cells revealed that CD44 distributed in bands on the cell surface, particularly in the tip of leading edges and in the perinuclear zones of the cell membrane. CD44 antigen was never detected in filopodia or lamellipodia but was detected as strong interlamellar bands. CD44 staining never showed a distribution compatible with association to focal adhesion-like structures. Fully spread cells showed remarkably less CD44 staining compared to cells in early stages of spreading. This decrease observed by ICCstudies, correlated with a reduced expression of CD44, as detected by Western blot. KM201 mAb significantly inhibited F3II cell migration and invasion in Transwell Chambers. When F3II cells migration was assayed in the presence of both anti-CD44 and anti-uPA antibodies, the inhibition on migration was dramatically enhanced (90% inhibition). This result suggest a sinergistic cooperation between CD44 and uPA during migration of F3II cells. In addition to the functional cooperation between CD44 and uPA during cell migration, we demonstrated by immunoprecipitation with specific antibodies, a physical link between both molecules on F3II cells. These results may indicate that the close proximity of CD44 and uPA may be important for the functional synergy during the migration process of murine mammary tumor cells. Taken together, these results demonstrate that CD44 plays an important role during F3II cells adhesion, spreading, migration and invasion, all of them critical events during tumor metastasis. We used a pharmacologycal approach to study the signal pathways regulating CD44 expression in F3II cells. Treatment of F3II cells with PMA, a PKC activator, or phosphatidic acid, the product of PLD dependent phosphatidilcholine degradation, significantly enhanced CD44 expression. When F3II cells monolayers were treated with H7, a specific PKC inhibitor, or propranolol, which inhibits phosphatidic acid convertion to DAG, it was observed a dramatic decrease of CD44 antigen levels. These results suggest the involvement of PKC and PLD pathways in the regulation of CD44 expression. Primary brain tumors are characterized by their highly invasive behaviour, although they seldom metastasize to distant organs. HA, a main component of the extracellular matrix in the central nervous system, may be substrate for tumor cell invasion through CD44. In a collaborative study with the “Hospital Italiano”, we have analyzed CD44 expression on 57 human brain tumor biopsies (14 low grade astrocytomas, 13 anaplastic astrocytomas, 22 glioblastomas multiforme, 5 ependymomas and 3 medulloblastomas). In the astrocytomas group we found that overexpression of CD44s correlates with tumor aggresiveness (upon Burger grade). In contrast, in ependymomas, less aggressive tumors, CD44s expression was high, while CD44s expression was almost negative in medulloblastomas, highly aggressive tumors. No CD44 variants expression was detected in any of the samples analyzed. Our results suggest that overexpression of CD44s could be important during the development of human astrocytomas.

Kruczenski Gainza, Luis Martín. "Aspectos cuánticos de los solitones en teorías de campos" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En la presente tesis estudiamos dos métodos de cuantificación de solitones. En primer lugar utilizando el método de coordenadas colectivas se calculó la corrección a dos loops a los niveles vibracionales de un modelo que engloba distintas teorías que poseen solitones. Este modelo describe una partícula moviéndose en una variedad de Riemann en presencia de un potencial. Los resultados se especializaron para el caso del kink en 1 + l dimensiones y el modelo O(3) en 2 + l dimensiones. Los cáculos se realizaron introduciendo un sistema de coordenadas geodésico en la variedad. Las bandas colectivas asociadas a los niveles vibracionales se describen en términos de las cuantificaciones no equivalentes asociada a espacios cociente G/H, donde G es el grupo de simetría de la acción y H el de la solución solitónica. En segundo lugar se aplicó el método de funciones de Green al caso del skyrmión. Si bien las funciones de Green ya habían sido definidas, en la tesis mostramos como la introducción de condiciones de contorno alrededor de las singularidades permite descibir correctamente los grados de libertad internos del solitón (spin e isospin) asi como su carácter fermiónico. Un análisis del propagador demuestra que es el correcto para describir, en forma covariante, lu partículas que representa el skyrmión. Esto es un conjunto de partículas con spin igual al isospín.

Abstract:
In this thesis two different methods of soliton quantization are studied. Using the collective coordinates approach the two-loops correction to the vibracional states is obtained for a model which comprises several theories with solitons. The model describes a particle moving on a Riemann surface under the action of an external potential. The results are applied to the φ^4 kik in 1 + 1 dimensions and to the 0(3) model in 2 + l dimensions. To perform the calculation we use a geodesic coordinate system. The collective bands associated with each vibrational state are described in terms of inequivalent coset space quantizations. The coset space is given by G/H where G is the symmetry group of the action and H C G the symmetry group of the soliton. In the second part of the thesis the method of Green functions is applied to the Skyrme model. Although Green functions for the skyrmion have already been defined, we show that using certain boundary conditions around the singularities, the correct internal degrees of freedom (spin and isospin) appear and the Green functions describe fermions. A careful analysis of the propagator shows that it describes, in a manifestly covariant way, the particles which the skyrmion is known to represent. That is a tower os spin equal to isospin particles.

Kornisiuk, Edgar E.. "Toxinas proteicas del veneno de serpientes del género Dendroaspis que reconocen receptores colinérgicos muscarínicos" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Hace diez años se reportó la existencia de dos proteínas, MTx1 y MTx2, del veneno de la mamba verde oriental (Dendroaspis angusticeps) que inhibieron la unión de ligandos muscarínicos en cerebro de rata. Actualmente se han aislado más de diez toxinas muscarínicas (MTxs) de la mamba verde oriental, la mamba negra (D. polylepis) y la mamba verde occidental (D. viridis). Estas toxinas poseen 65-66 aminoácidos, con cuatro puentes disulfirro que les confieren una estructura de "tres dedos", tal como las α-neurotoxinas (bloqueantes de receptores nicotínicos), las dendrotoxinas (bloqueantes de canales de K+) y las fasciculinas (inhibidoras de la acetilcolinesterasa). Existen cinco subtipos de receptores colinérgicos muscarínicos (m1-m5), aunque sólo pueden discriminarse dificilmente cuatro subtipos farmacológicos (M1-M4) por agentes poco selectivos, que no pemiiten una clasificación confiable y, en consecuencia, una identificación clara. Nuestros experimentos de unión especifica en tejidos nativos pemiitieron sugerir que ambas toxinas, MTxl y MTx2, se unen selectivamente al subtipo farmacológico M1 de receptor muscarínico. Luego demostramos que ambas toxinas presentan alta afinidad y selectividad por los receptores muscarínicos humanos clonados m1 y m4, con muy bajas afinidades relativas por los otros. Estos resultados se confirmaron por experimentos de unión específica en diferentes tejidos centrales y periféricos de rata y conejo; se demostró una unión de alta afinidad en el hipocampo, rico en receptores m1 y m4, y en el estriado, rico en m4, pero no se observó interacción en páncreas, rico en m3, ni en auricula, rica en m2. El patrón de selectividad de MTxl fue m1 ≈ m4 >> m5 > m3, m2, siendo MTxl más potente que MTx2, pero con menor capacidad discriminativa entre m1 y m4. Tanto MTxl como MTx2 se comportaron como agonistas muscarínicos, facilitando la consolidación de la memoria cuando se inyectaron en el hipocampo de ratas entrenadas en una tarea de evitación inhibitoria. En el conducto deferente de conejo las toxinas actuaron como McN-A 343 y CPCP, agonistas relativamente selectivos por el receptor M1, reduciendo las contracciones fásicas del músculo liso, aunque los efectos de las toxinas no resultaron reversibles. En la misma preparación, las MTxs parecieron tener un efecto sobre los receptores adrenérgicos, que fue reversible. Además, MTxl y MTx2 resultaron capaces de desplazar la unión de ³H-prazosin, un antagonista α-adrenérgico, a membranas de corteza cerebral y conducto deferente de rata y conejo. La unión de MTxl y MTx2 a los receptores muscarínicos resultó irreversible, mientras que a los adrenérgicos resultó reversible. Recientemente hemos aislado dos fracciones proteicas (7000-8000 Da) del veneno de D. viridis que parecen ser ligandos potentes y específicos para subtipos de receptores muscarínicos. Una de ellas, DvMT4, mostró selectividad por el subtipo m4, mientras que otra, DvMT3-4, exhibió selectividad por los subtipos m3 y m4. Dada la carencia de agentes muscarínicos selectivos, estas MTxs resultan muy útiles para localizar y mapear subtipos muscarínicos en el sistema nervioso central, para caracterizados y estudiar sus funciones en órgano aislado o in vivo. La familia de las Msz ha ido creciendo rápidamente y parecen ser ligandos selectivos extremadamente promisorios para el estudio del rol y la distribución de los subtipos de receptores muscarínicos. La comparación de las secuencias permitió definir importantes residuos y regiones de las toxinas, probablemente responsables de su selectividad y acción agonista/antagonista. Esto podría llevar al desarrollo de nuevos ligandos muscarínicos aún más selectivos, tal vez más apropiados como agentes terapéuticos.

Abstract:
Ten years ago, two proteins from the venom of the Eastern green mamba snake (Dendroaspis angusticeps), MTxl and MTx2, which inhibited the binding of muscarinic ligands to rat brain, were reported. Actually, more than ten muscarinic toxins (Msz) have been isolated from Eastern green mamba, black mamba (D. polylepis) and Western green mamba (D. viridis). All these toxins have 65-66 aminoacids, with four disulphide bonds that confer a “three fingered” structure, shared by α-neurotoxins (nicotinic receptor blockers), dendrotoxins (K+ channel blockers) and fasciculins (acetylcholinesterase inhibitors). There are five muscarinic acetylcholine receptor subtypes (m1-m5), although only four pharmacological subtypes (M1-M4) are hardly discriminated by poorly selective agents, not enough to enable a reliable classification and a defined identification. From radioligand binding experiments in native tissues we have suggested that both toxins, MTxl and MTx2, bound selectively to M1 pharmacological subtype of muscarinic receptor. Then, we demonstrated that both toxins have high affinity and selectivity for m1 and m4 cloned human muscarinic receptors, with rather low relative affinity for the others. These results were confirmed by binding experiments in different central and peripheral tissues from rat and rabbit. High affinity binding was found in the hippocampus, rich in m1 and m4 receptors, and striatum, rich in m4, but no interaction was found in pancreas, rich in m3, nor in atria, rich in m2.The pattern of selectivity of MTxl was m1 ≈ m4 >> m5 > m3, m2, being MTxl more potent than MTx2, but less discriminative between m1 and m4. Both MTxl and MTx2 behaved as muscarinic agonists when infused into the hippocampus of rats trained in an inhibitory avoidance task, facilitating memory consolidation. On rabbit vas deferens the toxins acted as the relatively M1 selective agonists McN-A 343 and CPCP in reducing the twitch response of the smooth muscle, but the effects of toxins were not reversible. In the same preparation, MTxs seemed to have an effect on adrenergic receptors. Then it was shown that MTxl and MTx2 were able to displace ³H-prazosin binding, an α-adrenergic antagonist, to rat and rabbit cerebral cortex and vas deferens membranes. However, MTxl and MTx2 binding to muscarinic receptors appear irreversible, while it was reversible to adrenergic receptors. Recently, we have isolated two protein fractions (7000-8000 Da) from D. viridis venom that appear to be potent and specific ligands for subtypes of muscarinic receptors. One of them, DvMT4, showed selectivity for m4 subtype, while the other, DvMT3-4, exhibited selectivities for both m3 and m4 subtypes. Due to the lack of selective muscarinic agents, MTxs are useful to localise and to map muscarinic receptor subtypes in the central nervous system, to characterise them and to study their functions either in isolated organs or in vivo. The MTx family has been rapidly growing up and they appear as extremely promising selective ligands to study the role and distribution of muscarinic receptor subtypes. The comparison of sequences allowed to define important residues or regions in the toxins, putatively responsible of their selectivity and agonist/antagonist action. This would lead to the development of new more selective muscarinic ligands, that would likely be more appropriate as therapeutic agents.

Katzen, Federico. "Análisis estructural y bioquímico de la región gum de Xanthomonas campestris pv. campestris" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El xantano es un exopolisacárido acídico con importantes aplicaciones industriales producido por la bacteria gram-negativa fitopatógena Xamhomonas campestris pv. campestris. Está compuesto por unidades pentasacarídicas repetitivas que son ensambladas en orden secuencial a través del agregado de los residuos glucosa-1-fosfato, glucosa, manosa, ácido glucurónico, y manosa a un intermediario poliprenol-fosfato. Se ha sugerido que una región que comprende 12 marcos abiertos de lectura denominada xpsl o gum, codifica las proteínas responsables del ensamblado de la unidad repetitiva y de la polimerización del xantano. Sin embargo, hasta el momento no se ha publicado evidencia experimental que avale tal proposición. En esta tesis, mediante el análisis de un conjunto definido de mutantes de X. campestris se muestran datos experimentales para la asignación de funciones bioquímicas a los genes de la región gum. Además, se analiza la organización transcripcional de esta región a través de la construcción de fusiones transcripcionales gum-lacZ en combinación con mutagénesis por integración plasmídica. Estos análisis combinados con ensayos de primer extension y de RT-PCR, indicaron que la región gum es transcripta como un operón desde un promotor ubicado río arriba del primer cistrón gumB, extendiéndose hasta la finalización del gen gumM. Por último, ensayos de virulencia mostraron que alteraciones en las últimos pasos de la biosíntesis del xantano reducen la agresividad de X. campestris contra su hospedador.

Abstract:
Xanthan is an industrially important acidic exopolysaccharide produced by the phytopathogenic gram-negative bacterium Xanthomonas campestris pv. campestris. It is composed of polymerized pentasaccharide repeating units, which are assembled by the sequential addition of glucose-1-phosphate. glucose. mannose, glucuronic acid, and mannose on a polyprenol-phosphate carrier. A cluster of 12 genes, in a region designated xpsl or gum, has been suggested to encode proteins involved in the synthesis and polymerization of the lipid intermediate. However, no experimental evidence supporting this suggestion, has been published. In this thesis, from the biochemical analysis of a defined set of X. campestris gum mutants, experimental data for assigning function to the products of the gum genes are reported. In addition, the transcriptional organization of the gum region was analyzed by the construction of gum-lacZ transcriptional fusions in association with plasmid integration mutagenesis. This analysis, coupled with primer extension and RT-PCR assays, indicated that the gum region was mainly transcribed as an operon from a promoter located upstream of the first gene, gumB finishing downstream of the gumM gene. Finally, virulence tests showed that alterations in the later stages of xanthan biosynthesis reduce the aggressiveness of X. campestris against the plant.

Jabobo, Silvia Elena. "Síntesis y propiedades de óxidos mixtos de hierro y bario obtenidos por métodos suaves" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Este trabajo describe la síntesis de hexaferrita de bario, con buenos rendimientos, por un nuevo método de síntesis por vía húmeda. El precursor se obtiene por la adición de cloruro de bario a una solución de ferrato de sodio fuertemente alcalina (preparada por la oxidación del cloruro férrico por cloro en medio alcalino). Este precursor está formado, esencialmente, por ferrihidrita e hidróxido de bario cristalino, sin descartar la presencia de goetita y otros óxidos mixtos de bario y de hierro. El tratamiento térmico del precursor conduce a la formación de partículas de hexaferrita de bario a muy bajas temperaturas (~ 700°C); es la más baja temperatura informada en la preparación de este compuesto. Las partículas de la hexaferrita de bario tienen forma de plateletas con un diámetro basal del orden de 0,5 μm. Se emplearon diferentes técnicas para seguir la transformación térmica del precursor: difracción de rayos X, espectroscopía Mössbauer, microscopía electrónica de barrido, espectroscopía infrarroja, métodos dispersivos en energía, análisis termogravimétrico y análisis térmico diferencial. La cristalización ocurre a temperaturas relativamente bajas y los cristalitos formados alcanzan tamaños del orden de 50 nm a 800°C. La única fase cristalina que se detecta en el precursor es el Ba(OH)2; los otros picos de difracción corresponden a la ferrihidrita. Mediante el tratamiento térmico se forma la hexaferrita como única fase; sólo se detecta la presencia de monoferrita de bario cuando el calentamiento es prolongado y se realiza a una temperatura máxima relativamente baja (< 700°C). En el precursor, el contenido de agua es del orden del 16%, valor que concuerda con los resultados de difracción de rayos X. La pérdida de agua ocurre en diversas etapas. La mayoría de las bandas del espectro infrarrojo pueden asignarse a la ferrihidrita e indica sólo vestigios de carbonato. Los espectros Mössbauer de los sólidos calcinados muestran la transformación de ferrihidrita en hexaferrita de bario, a través de la transformación de los dobletes anchos de los espectros de partículas superparamagnéticas con HFD's característicos en los cinco sextupletes bien resueltos que caracterizan a la hexaferrita de bario. A través de los espectros Mössbauer se pudo conocer la distribución de los iones hierro (III) en los cinco sitios cristalográficos característicos y el producto final indica una buena distribución de los iones hierro en esos sitios, condición necesaria para un material con propiedades magnéticas adecuadas. Las características del precursor y su transformación térmica se discuten en base a la vía de síntesis elegida; los buenos resultados se relacionan con la química en solución y la cristaloquímica de los iones involucrados. Se midieron las propiedades magnéticas macroscópicas del material con un magnetómetro SQUID. Se prestó particular atención a la influencia de la relación estequiométrica Fe:Ba inicial; los resultados indican que cuando se emplea un ligero exceso de bario en la etapa inicial, se mejoran las propiedades del material final. Este resultado se analiza en función de la pérdida de material y en la facilidad de cristalización del precursor. Bajo estas condiciones puede formarse una delgada capa de monoferrita de bario a nivel superficial que puede ser removida fácilmente mediante el lavado con ácido clorhídrico. Los parámetros magnéticos de la hexaferrita sintetizada fueron: Ms = 7l emu g^-1, Mr = 39,9 emu g^-1, Hc = 4400 Oe y de la muestra sinterizada el producto |BH| máx. = 1,3 MG Oe. Estos valores indican que es un excelente material magnético, muy adecuado para el grabado magnético de información. Estas propiedades están influenciadas por la anisotropía magnética del material, y para estimar la contribución de las diversas formas de anisotropía se evaluaron los ciclos de histéresis magnéticos de los polvos diluidos en alúmina. Los resultados de estas mediciones junto con los obtenidos por la observación de las microfotografías (MEB), nos permiten demostrar que es difícil conseguir una buena dilución por una mezcla simple, porque las partículas magnéticas tienden a aglomerarse; la dilución no es homogénea, excepto tal vez en las muestras más diluidas. Se estudió la estabilidad de la hexaferrita de bario en solución acuosa debido a que se emplea un método por vía húmeda para su preparación. Se evaluó críticamente la información termodinámica disponible y se la complementó con determinaciones semicuantitativas de solubilidad, para poder construir el dlagrama de fases Fe203 + BaO + H2O + HCl (o NaOH), y poder así determinar los intervalos de estabilidad de la hexaferrita de bario y los intervalos en los cuales puede esperarse una disolución congruente o incongruente. Se muestra que en medios fuertemente ácidos podemos esperar una disolución total de la hexaferrita cuando es baja la relación sólido: líquido; en cambio en medios débilmente ácidos la reacción más importante es la transformación de hexaferrita en hematita (o goetita) con la disolución del bario. En medios levemente alcalinos, una moderada concentración de bario en solución es suficiente para estabilizar la hexaferrita. Se midió la cinética del ataque de la hexaferrita en medio ácido; los resultados indican que el proceso comienza con la lixiviación de bario en una capa de 15 nm de espesor. El proceso continúa con una disolución lenta del hierro, acompañada por una lixiviación de bario de las capas internas; en consecuencia la cinética de disolución del hierro es lineal mientras que la del bario es desacelerada a valores bajos de pH. A mayores valores de pH, la concentración de hierro se aproxima al límite de solubilidad, la disolución se frena. La velocidad de disolución del bario también disminuye pero no llega a cero; podemos sugerir un proceso de difusión a traves de una capa de espesor creciente. En este intervalo los resultados sugieren que el bloque S de la estructura no se disuelve y actúa como centro de nucleación para el crecimiento de las capas de óxido férrico incorporando los iones Fe que se disuelven del bloque R. Se estudió la naturaleza de los sólidos sometidos a un prolongado ataque ácido por espectroscopía Mössbauer; no se detectó la presencia de otras fases sólidas en concordancia con los resultados de los estudios cinéticos; tampoco se detectó una remoción selectiva de los iones hierro de algunos de los sitios cristalográficos característicos. Se hicieron también, estudios cinéticos comparativos de la disolución de la monoferrita de bario. En este caso, las velocidades de disolución son mayores; aunque se observa también una lixiviación del bario, la capa de óxido férrico que se forma tiene menor poder pasivante, lo cual origina un comportamiento similar al de una disolución congruente; posiblemente la diferencia en el componamiento frente a la disolución de ambos compuestos radica en la ausencia de bloques de hierro exclusivamente, en la monoferrita de bario. En consecuencia, la monoferrita puede ser removida por un lavado ácido en aquellos casos donde aparece durante el proceso de síntesis de la hexaferrita de bario.

Abstract:
Powdered barium hexaferrite has been synthesised by a new wet method with good yields. Barium chloride addition to a strongly alkaline sodium ferrate (VI) solution (prepared by oxidation of ferric chloride with chlorine in alkaline media) brings about the precipitation of a precursor, essentially composed of ferrihydrite and crystalline barium hydroxide; goethite and mixed barium-iron oxides may also be present. Thermal treatment of this precursor yields the desired product at temperatures as low as 700°C, which is the lowest reported temperature of formation of highly crystalline barium hexaferrite. The product is composed of particles with the form of hexagonal slabs, with basal diameter in the order of 0,5 µm. The evolution of the structure and composition of the precursor during the thermal treatment was followed using various techniques: X-ray diffraction, Mössbauer spectroscopy, scanning electron microscopy, infrared interferometric spectroscopy, electron dispersion spectroscopy, thermogravimetry and differential thermal analysis. Crystallisation takes place in the low temperature range, and the size of the crystallites increase up to 60 nm, at about 800°C. In the precursor, the only crystalline phase is Ba(OH)2; other diffraction peaks correspond to ferrihydrite. Upon heating, pure barium hexaferrite is formed; only in cases of heating at low heating rates, and reaching low maximum temperatures ( < 700 °C) is barium monoferrite observed. The particles of the precursor show diameters of around 0.08 µm, and do not grow much during the crystallisation stage, although the shape adopts the form of hexagonal slabs; at higher temperatures (> 800°C), particles grow quasiexponentially, due to sintering. Thus, particles of the obtained hexaferrite are composed of arrays of ordered crystallites, that resemble crystallographic habit. The water contents of the precursor is of the order of 16%, in good agreement with the X-ray diffraction observations. Water is lost in several, poorly resolved stages, the last of which coincides with the final crystallisation stage. The FTIR spectrum of the precursor is dominated by the bands assigned to ferrihydrite, and carbonate is shown to be practically absent. The Mössbauer spectra of the heated samples show the evolution from ferrihydrite to barium hexaferrite, in the form of changes from spectra dominated by broads doublets attributable to superparamagnetic small particles with characteristic HFD’s, to well resolved sets of sextuples characteristic of the hexaferrite. The occupancy of the different iron(III) crystallographic sites could be derived from the spectra, and the final product shows a good distribution of iron in the sites, as required for a material with good magnetic properties. The characteristics of the precursor and of its thermal evolution are discussed on the basis of the chosen synthetic route, which is shown to be adequate in view of the solution and crystal chemistry of the involved ions. The macroscopic magnetic properties of the synthesised material were measured using a SQUID magnetometer. In particular, attention was given to the influence of the starting Fe:Ba stoichiometric ratio; the results show that the best properties are obtained when some barium excess is used in the preparative stage. This result is discussed in terms of loss of material, and of the ease of crystallisation of the precursor. Under these conditions, some surface barium monoferrite may form, that can be easily removed by washing with hydrochloric acid. The magnetic parameters of the synthesised hexaferrite were: Ms = 7l emu g^-1; Mr = 39,9 emu g^-1; Hc = 4400 Oe; and in sinterized hexaferrite |BH| máx.= 1,3 MG Oe. These figures correspond to an excellent magnetic material, very swell suited for magnetic information recording. These properties are influenced by the magnetic anisotropy of the material, and the contribution of various forms of anisotropy was assessed by measuring the hysteresis cycle of the material diluted in alumina. The results, together with the results of MEB examination, demonstrate that the dilution by simple mixing is difficult to achieve, because the magnetic particles tend to agglomerate, and dilution is not homogeneous, except perhaps in the highest dilution limits. Because of the use of a wet synthetic method, the stability of barium hexaferrite in contact with aqueous solutions was also studied. The available thermodynamic data was critically assessed, and complemented with semiquantitative solubility determinations, in order to derive the phase diagram Fe203 + BaO + H20 + HCl (or NaOH), and find the ranges of stability of the hexaferrite, and the ranges in which congruent and incongruent dissolution stoichiometries could be expected. It is shown that in highly acid media, and especially when the ratio solid:liquid is low, total dissolution may take place, whereas in weakly acidic media the most important reaction is the transformation of the hexaferrite in hematite (or goethite), with dissolution of the barium. In alkaline media, modest dissolved barium concentrations (that depend on pH) suffice to stabilise the hexaferrite. The kinetics of hexaferrite attack by acid solutions was measured; the results demonstrate that the process starts through the leaching of barium from a layer of the order of 15 nm. The following process is the slower dissolution of iron, accompanied by further barium leaching from inner layers; accordingly, the kinetic of iron dissolution are linear, whereas those of barium, at the lowest pH (2,4) are desacelerator. At higher pH, the iron concentration eventually approaches the solubility limit, and iron dissolution is consequently arrested. Dissolution of barium is also slowed down, although it never reaches zero velocity; diffusion though layers growing in thickness and changing in diffusivity is diagnosed. In this range, data suggest that the S blocks of the ferrite structure may actually never dissolve, but act as nucleation centres for the growth of iron oxide layers, incorporating Fe(III) ions dissolved from the R blocks. The nature of the solids subjected to extensive acid attack was studied by Mössbauer spectroscopy; no other solid phases could be detected, in agreement with the implications of the kinetic studies; also, no preferential removal of any of the five crystallographically different iron ions could be detected. Fr comparison, the kinetics of dissolution of the monoferrite were also measured. The rates are larger; although barium leaching is also observed, the lesser passivity of the iron oxide layer leads easily to a behaviour that approaches congruent dissolution; probably, the non-existence of purely ferric structural blocks in the monoferrite are responsible for the difference. Consequently, whenever the monoferrite is formed in the course of hexaferrite synthesis, removal by acid washing is adequate.

Guevara, Alejandro Javier. "Estabilidad y propiedades electrónicas de agregados de metales de transición" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Durante los últimos años ha habido un gran interés en el estudio de pequeños agregados (clusters) metálicos. En particular, los clusters de metales de transición (MT) son muy atractivos por su magnetismo y reactividad química en conección con los procesos catalíticos. En esta tesis mostramos que es posible estudiar propiedades electrónicas de pequeños agregados de MT teniendo como punto de partida parámetros del estado sólido. Proponemos primero un porencial modelo semiempírico para simular propiedades de materiales y clusters de MT. La parte atractiva del potencial se obtiene a partir de un Hamiltoniano de uniones fuertes que tiene en cuenta la simetría de los orbitales d y conduce a una dependencia con la potencia 2/3 de la coordinación efectiva (o segundo momento de la densidad local de estados) en lugar de la dependencia usual de la raíz cuadrada. Para el uso de este modelo de potencial en materiales especificos, se deben ajustar cuatro parámetros con datos experimentales del volumen. Presentamos dos tipos de parametrización y calculamos propiedades del volumen, defectos, superficies, y de clusters, comparando con experimentos, cálculos ab initio, y la aproximación usual del segundo momento. En una segunda etapa mostramos que nuevamente el uso de parámetros del volumen con un buen tratamiento de las superficies da las herramientas necesarias para cálculos de estructura electrónica de clusters de MT, en el marco de un Hamiltoniano Hubbard parametrizado en la aproximación de Hartree-Fock irrestricta. El Hamiltoniano modelo tiene en cuenta el ”spillover” electrónico que se produce en la superficie del cluster. Hacemos los cálculos para clusters fcc y bcc de hasta 260 átomos haciendo uso de propiedades de simetría. Obtenemos momentos magnéticos (por átomo y capa) y potenciales de ionización para clusters de Ni, de Co y de Fe. También calculamos las propiedades magnéticas de clusters mixtos, específicamente clusters de Co recubiertos de Ag. Mostramos como el momento magnético total de estos sistemas presenta un amplio rango de posibles valores dependiendo de la distibución de los átomos de Ag en la superficie. Esto último podría tener importantes consecuencias en la magnetorresistencia de sistemas granulares. Comparamos con cálculos ab initio (FP-LAPW) periódicos hechos para algunas estructuras particulares.

Abstract:
During the last decade there has been great interest in the study of small metallic clusters. In particular, transition-metal (TM) clusters are very attractive because of their magnetic and chemical reactivity in connection with catalytic processes. In this thesis we show that it is possible to study the properties of small TM clusters by taking as starting point parameters from the bulk state. We propose first a semiempirical model potential to simulate properties of fcc TM materials and clusters. The attractive part of the potential is obtained from a tight-binding Hamiltonian that takes into account the symmetry of the d orbitals and leads to a 2/3 power dependence on the effective coordination (or second moment of the local density of states) instead of the usual square-root dependence. In order to use this potential for specific materials, four parameters are adjusted with bulk experimental data. We present two different parametrizations and calculate hulk. defect, surface, and cluster properties comparing with experiment, ab initio calculations. and the usual second-moment approximation. In a second step we show that. again. the use of bulk parameters with a good treatment of the surfaces gives the necessary tools for electronic structure calculations of TM clusters within a parametrized Hubbard Hamiltonian in the unrestricted Hartree-Fock approximation. The model Hamiltonian takes into account electron spillover on the cluster surface. We perform calculations for fcc and bcc clusters of up to 260 atoms making use of symmetry properties. We obtain magnetic moments per atom and shell. and ionization potentials for Ni, Co and Fe clusters. We also calculate the magnetic properties of mixed clusters, specifically, Co clusters covered by Ag atoms. We show that the total magnetic moment of these systems presents a wide range of possible values depending on the distribution of Ag atoms on the surface. This last finding could have important consequences for the Giant Magnetoresistance Effect of granular systems. We compare with 3D FP-LAPW calculations done for some particular structures.

González Audino, Paola Andrea. "Estabilidad térmica y actividad insecticida de compuestos piretroides y metoprene en formulaciones fumígenas" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las formulaciones fumígenas insecticidas son actualmente importantes en el control de vectores de la Enfermedad de Chagas impulsadas por trabajos previos de nuestro laboratorio. En esta Tesis se evaluaron el destino y los procesos de descomposición térmica de insecticidas piretroides a partir de la combustión de formulados fumígenos. Se estableció que la descomposición e isomerización térmica de los piretroides liberados en humos se revierte significativamente por agregado de agentes espumígenos (cianoguanidina y azodicarbonamida). Se demostró que uno de los componentes de la mezcla fumígena, el clorato de potasio, cataliza la isomerización térmica cis-trans de los piretroides, fenómeno también observado para otras sales de oxiácidos. Para la permetrina y β-cipermetrina se identificaron una serie de productos de descomposición comunes a distintos procesos de termólisis estudiados. Estos productos provienen de rupturas del enlace éster, oxidación y posible aromatización de los productos formados. La evaluación biológica de las formulaciones sobre T. infestans (vinchucas) determinó que la más efectiva fue la mezcla conteniendo azodicarbonamida como agente espumígeno y β-cipermetrina como principio activo. En la segunda parte de esta Tesis se planteó como objetivo evaluar las posibilidades de metoprene, un insecticida inhibidor del crecimiento de insectos de alta labilidad térmica, como activo en formulaciones fumígenas. A los fines de estabilizarlo se lo complejó con β-ciclodextrina y el complejo se caracterizó por difracción por rayos X, termogravimetría y Modelado Molecular. El complejo incorporado a formulaciones fumígenas permitió buenas recuperaciones en humos. Estos formulados mostraron un alto efecto insecticida sobre larvas de moscas, característico de compuestos inhibidores de crecimiento de insectos. El análisis conformacional del complejo demostró que la ciclodextrina adopta una forma elipsoide y que su estequiometría es 1:1.

Abstract:
Fumigant insecticide formulations are nowadays very important tools for the control of Chagas disease vectors owing to our laboratory work. In this work, we report the fate and thermal decomposition of pyrethroid insecticides in fumigant formulations. It was established that decomposition and thermal isomerization of pyrethroids in fumes are significantly decreased by incorporation of smoking agents to the mixture (cyanoguanidine and azodicarbonamide). It was demonstrated that potassium chlorate, one of the fumigant mixture components, catalyzes cis-trans thermal isomerization of pyrethroid insecticides. The same was observed for other oxoacids salts. We analysed decomposition products of permethrin and β-cypermethrin in fumigant smokes formed by thermolysis. These products mainly arise from ester bond cleavage and oxidation of the products. Mixtures containing β-cypermethrin as insecticide and azodicarbonamide as smoking agent showed the greatest insecticidal activity against T. Infestans. In the second part of this work, the aim was to evaluate methoprene, a juvenoid insecticide of low thermal stability, as the active ingredient in fumigant compositions. In order to increase its stability, it was included in β-cyclodextrin and the complex was characterised by X Ray diffraction, thermoanalytical techniques and molecular modelling. This complex when incorporated to fumigant mixtures allowed a significant increase in methoprene recovery in fumes as well as a significant improvement in its larvicidal activity against M. domestica. On the other side, the geometry of the inclusion complex was studied by conformation analysis and Molecular Modelling. it was observed that the β-cyclodextrin molecules are elliptically distorted and stoichiometry showed to he 1:1.

Giancola, Sandra M.. "Caracterización y diferenciación de Germoplasma de Soja (Glycine max (L.) Merr.) mediante marcadores moleculares" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La soja es una especie autopolinizante de escasa variabilidad genética. Esta variabilidad se ve aún más reducida en variedades cultivadas de soja (Glycine max (L.) Merr.) debido a que en los programas de mejoramiento, usualmente se utilizan los mismos ancestros. Debido a esta escasa variabilidad genética es que resulta difícil la identificación y diferenciación de nuevos cultivares. El objetivo de este trabajo fue testear la capacidad que tienen los diferentes marcadores moleculares tales como, RAPD (amplificación azarosa de ADN polimórfico), AFLP (Polimorfismo de longitud de fragmentos amplificados) y Microsatélites o SSR (secuencias repetitivas simples), para caracterizar y diferenciar un conjunto de 100 variedades de soja registradas en el Registro Nacional de Cultivares del Instituto Nacional de Semillas (INASE), perteneciente a la Secretaría de Agricultura, Ganadería, Pesca y Alimentación. Fueron utilizadas 16 características morfológicas, fisiológicas y fenológicas para comparar la relación genética obtenida con los marcadores moleculares. Se analizaron 424 loci genómicos polimórficos entre marcadores moleculares y morfológicos mostrando un porcentaje global de polimorfismo del 25.7% confirmando la baja variabilidad genética relativa de la soja comparada con otros cultivos y explicada por la estrecha base genética con que se maneja el mejoramiento de esta planta La variabilidad evidenciada por cada uno de los sistemas de marcadores fue diferente. Las variedades fueron agrupadas por el sistema de “cluster analysis” y los resultados comparados con los datos genealógicos de las variedades registradas, concluyéndose que los microsatélites son los marcadores que mejor reflejan la evolución genómica de las variedades y mejor se correlacionan con la diferenciación morfológica. Los AFLP mostraron un alto rango de multiplex, pero bajo polimorfismo, en cambio los RAPD mostraron un valor intermedio de polimorfismo y bajo rango de multiplex. Se logró establecer una “huella digital genética” para cada variedad y realizar un estudio de variabilidad genética, estimando la distancia mínima a considerar para la obtención de la propiedad.

Abstract:
Soybean is a self pollinating species of limited genetic variability. This variability is further reduced in soybean cultivars (Glycine max (L) Merr.) due to the fact that they are usually derived from crosses among members of an elite group of genetically related parents. This limited variability is sometimes insufficient to unambiguously identify new cultivars. The aim of this work is to test the feasibility of using different molecular markers such as “Random Amplified Polymorphic DNA” (RAPD), “Amplified Fragments Length Polymorphism” (AFLP) and Microsatellite or Simple-Sequence-Repeat (SSR) to characterize and differentiate a set of 100 soybean varieties registered at the National Register of Cultivars of the National Seed Institute of Argentina (INASE, Secretariat of Agriculture, Livestock, Fisheries and Food). Sixteen known basic morphological, physiological and phenological traits were also recorded for each variety in order to compare the relationships among varieties derived from molecular markers. The calculated variability indexes showed to be highly dependent on the specific technique used for the analysis ranging from 0.262 for SSR analysis, 0.401 for RAPD and AFLP analysis and 0.574 for morphological traits analysis. In total 109 polymorphic genomic loci were scored revealing a lower genetic variability when compared with published data of other species. The varieties were grouped by cluster analysis and the relationships derived from these cluster analysis was compared with known pedigree data of the registered varieties. The SSR data showed the best fit to pedigree data while mantaining an acceptable correlation to morphologically-based separation. AFLP showed a high multiplexity but low percentage of polymorphic bands while RAPD was low in multiplexity but with a better level of polymorphism. A genetic fingerprint was established for each one of the 100 varieties and a minimum genetic distance for distinctness definition within UPOV concept could be defined.

Gassmann, María Isabel. "Potencial de contaminación atmosférica en la República Argentina" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Una política adecuada en el desarrollo de un país debe contemplar todos aquellos aspectos relacionados con la protección y control de sus recursos. En la evaluación del costo - beneficio de la adjudicación de zonas rurales para la ubicación de centros industriales o urbanos, uno de los recursos a considerar es el aire. Entre los estudios que se deben realizar para conocer el impacto que produciría la ubicación de una zona industrial o urbana sobre la calidad del aire, es necesario estudiar el potencial de contaminación atmosférico de la región. Este potencial se define como la capacidad de la atmósfera de asimilar o diluir los contaminantes a ser emitidos al aire. En general, el potencial se estudia conociendo el comportamiento de dos variables atmosféricas: el espesor de la capa límite atmosférica y la velocidad del viento promediada dentro de la capa límite o viento transporte. El objetivo de este trabajo es estudiar los parámetros atmosféricos que determinan el potencial de contaminación atmosférico desde el punto de vista climatológico para la República Argentina, de manera de poder caracterizar zonas con mayor potencial de contaminación dentro del país y proveer de una herramienta sobre la cual basarse en la planificación urbana e industrial del país. Utilizando once años de información meteorológica correspondiente a ocho estaciones meteorológicas de altura de la red del Servicio Meteorológico Nacional (Salta, Resitencia, Córdoba, Mendoza, Ezeiza, Santa Rosa, Neuquén y Comodoro Rivadavia) se estudió el comportamiento estacional y anual de la altura máxima media de la capa límite diurna, calculada a partir de los sondeos como el tope de la capa con base en superficie en donde se produce mezcla vertical y el gradiente de temperatura es cercano al adibático seco. Se relacionó los resultados con las direcciones de viento en superficie. Se desarrolló y evaluó un modelo evolutivo para la capa límite nocturna, basado en la ecuación de energía térmica turbulenta, considerando únicamente los procesos turbulentos y radiativos. Se aplicó el modelo a seis estaciones sinópticas de superficie de la red del Servicio Meteorológico Nacional (Resistencia, Córdoba, Rosario, Ezeiza, Mar del Plata y Comodoro Rivadavia) y se analizó el comportamiento estacional y anual de la altura máxima media de la capa límite nocturna utilizando 10 años de información horaria observada en cada una de ellas. Se relacionó los valores obtenidos con las direcciones de viento en superficie. Para las condiciones diurnas se estimaron los valores medios estacionales y anual de la velocidad de viento transporte y del índice de ventilación. Este índice es el producto de la altura de la capa límite diurna por la velocidad de viento transporte y mide la capacidad de autodepuración de la atmósfera. Se trazaron los campos medios estacionales y anual de las alturas máximas de capa límite diurna y de índice de ventilación de la atmósfera. Asimismo, se estudió la frecuencia de ocurrencia de condiciones de baja ventilación atmosférica en la República Argentina y se trazaron los campos medios de estas frecuencias. A partir de todo este análisis se determinaron zonas con alto potencial de contaminación atmosférico en la República Argentina. Para las condiciones diurnas las zonas con mayor potencial de contaminación atmosférico se encuentran en la región noreste y centro este del país, que incluye el corredor industrial Rosario - La Plata y en la zona cordillerana cercana a Mendoza. Para las condiciones nocturnas las áreas menos favorables para la dispersión de los contaminantes resultan ser Resistencia y Ezeiza.

Abstract:
The development of a country must have an adequate policy that envisages all those aspects related to the protection and control of its resources. When rural areas are transformed into industrial or urban centres, one of the resources to be considered is the air. Air pollution potential is one of the studies that should be accomplished to evaluate the impact over the air quality that would produce the location of settlements or industrials in new sites. Air pollution potential is a measure of the conditions that are unfavourable to the dilution and dispersion of pollutants into the air. This potential can be studied in terms of two atmospheric variables: the depth of the atmospheric boundary layer (ABL) and the mean wind speed into the ABL or transport wind. The purpose of this work is to study the variables related to the air pollution potential for the Argentina Republic. Also, to distinguish regions with mayor air pollution potential, in the way to provide a tool for planning industrial or urban developments. The annual and seasonal behaviour of the mixing height, obtained as the top of a surface based layer in which vertical mixing is relatively vigorous and in which the lapse rate is near dry adiabatic, was studied for the country. Eleven years of surface and upper air observations of eight station (Salta, Resistencia, Córdoba, Mendoza, Ezeiza, Santa Rosa, Neuquén y Comodoro Rivadavia) belonging to the National Weather Service of Argentina were used. A prognostic model was developed and tested to study the depth of the stable nocturnal boundary layer, based on the turbulent thermal energy equation. Only turbulent and radiational processes were included in the equation. This model was applied to six synoptic stations belonging to the National Weather Service (Resistencia, Córdoba, Rosario, Ezeiza, Mar del Plata y Comodoro Rivadavia), using 10 years of hourly surface data. The annual and seasonal behaviour was analysed. For daytime conditions the annual and seasonal behaviour of transport wind speed and ventilation index, defined as the product of the mixing height and the transport wind speed were studied. The smallness of this quantity is one measure of adverse conditions for dispersion of air pollutants. Annual and seasonal mean fields of maximum mixing height and ventilation index were traced. Also, frequencies of low ventilation conditions over the country were studied and the mean fields of this frequencies were depicted. After this analysis, the areas with major air pollution potential in Argentina were identified. For diurnal conditions they are located in the north-east to the central - east part of the country and in the region named Cuyo, in the central - west part of Argentina. For the nocturnal case, the rural surroundings of the Resistencia and Ezeiza airports have the most unfavourable conditions for air pollutant dispersion.

Gallo, Carola. "Síntesis de oligosacáridos de galactofuranosa, componentes de glicoconjugados de tripanosomátidos" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La glicobiología de Ia galactofuranosa (Galf) es un tema de creciente interés. Dicho monosacárido es constituyente de glicoconjugados de bacterias, protozoarios y hongos, pero el mamífero huésped aparentemente no biosintetiza glicoconjugados con Galf . Recientemente se han identificado oligosacáridos de diferente tamaño, los cuales se liberan de glicoproteínas de T. cruzi por reacciones de β-eliminación. Todos estos oligosacáridos se encuentran ligados O-glicosídicamente a la proteína a través del disacárido β-D-GaIf-(1—>4)-GlcNAc(9). Dicho disacárido aparece luego ramificado con un número variable de unidades de Galp, que convierten a la cadena de azúcares en aceptora de ácido siálico a través de una reacción de trans-sialidación. En particular, el trisacárido β-D-GaIf-(1—>4)—-GlcNAc (23) representa el oligosacárido más simple de esta serie que puede ser aceptor de ácido siálico. Tanto 9 como 23 no habían sido sintetizados previamente y sólo se habían obtenido como los alditoles correspondientes por β-eliminación reductiva de las glicoproteínas. Por otra parte, aunque la galactofuranosa se encuentra generalmente como extremo terminal, se ha identificado una serie de glicoconjugados en donde la Galf se encuentra interna. Por ejemplo, el “core” del lipofosfoglicano (LPG) de especies de Leishmania así como los GIPLs del tipo 2 de L. majory L. mexicana presentan la unidad a-D-Galp-(1—>3)-D-Galf. Esta misma unidad es contituyente de bacterias patógenas. mientras que la unidad β-D-Galp-(1—>3)-D-Galf se encontró en polisacáridos capsulares de Streptoccocus neumoniae. Sintones para la introducción de estos dos disacáridos no habían sido sintetizados. En este trabajo se presentan: 1. Una revisión de la distribución de galactofuranosa en tripanosomatídeos 2. Un resumen del método de glicosidación por tricloroacetamidatos. 3. Una descripción detallada de las reacciones que se realizaron en este trabajo de investigación y la discusión de los resultados obtenidos. 4. Una descripción del trabajo experimental desarrollado. Para la sintesis de β-D-Galf-(1—>4)-GlcNAc (9), el compuesto de partida de la secuencia desarrollada fue el bencil 2-acetamido-2-desoxi-a-D-glucopiranósido (2), el cual se benzoiló regioselectivamente en HO-3 y HO-6 con N-benzoilimidazol para dar 3 (70 % rendimiento). El derivado perbenzoilado 4 se obtuvo como subproducto minoritario (9 % rendimiento). La condensación promovida por SnCl4 de la penta-Obenzoil- D-galactofuranosa (5) con 3 condujo al disacárido 6 (85% rendimiento) con formación altamente diasteroselectiva del enlace anomérico (configuración β). A efectos de obtener el disacárido libre, se procedió a eliminar los grupos protectores. Inicialmente, se intentó eliminar el grupo bencilo por hidrogenación catalítica bajo distintas condiciones y el mejor resultado se obtuvo cuando se utilizó Pd(OH)2 como catalizador a 1 atmósfera de H2 por 10 días. Se lograba así una hidrogenólisis parcial conduciendo a 7 con 77 % de rendimiento y se recuperaba un 11 % de 6 sin reaccionar. Cuando se trató de desbenzoilar 7 con NaOMe en MeOH se descomponía el material de partida por lo cual se optó por el camino inverso para la desprotección total de 6. Por desbenzoilación de 6 con metóxido de sodio en metanol se obtuvo el bencil glicósido del disacárido deseado (8) con 97 % de rendimiento. Así como ocurrió con 6, la desbencilación de 8 por hidrogenación catalítica con Pd/C o Pd(OH)2/C como catalizadores, resultaba extremadamente lenta y no se conseguía completar la reacción. Sin embargo 8 experimentó hidrogenólisis cuantitativa por transferencia catalítica heterogénea (Pd/C) de hidrógeno, utilizando formiato de amonio en metanol caliente obteniéndose el disacárido libre β-D-Galf(1—>4)GlcNAc(9), cristalino con excelente rendimiento (55 % de rendimiento total a partir de 2). La reducción de 9 con NaBH4 condujo al alditol cristalino (10) que mostró señales diagnósticas (C-anomérico 109,0 ppm, C-1 y C-4 de GlcNAc 61,8 y 78,8 respectivamente) casi idénticas a las informadas para el "disacárido alditol" aislado de glicoproteínas de T. cruzi. De esta manera se confirmó por síntesis la estructura de este disacárido natural, interesante desde el punto de vista biológico. Paralasíntesis de β-D-GaIf-(1—>4)--GlcNAc (23) el compuesto de partida de la secuencia desarrollada fue el bencil 2-acetamido-3-Obenzoil- 2-desoxi-a-D-glucopiranósido (14), que se preparó fácilmente a partir de un procedimiento que aumentó el rendimiento total (68 %) con respecto al anteriormente descripto (36 %). Para ello, se trató 2 con α,α-dimetoxitolueno según el procedimiento de Evans obteniéndose 12 con 88 % de rendimiento, que luego se benzoiló con cloruro de benzoílo en piridina para dar 13 con 95 % de rendimiento. La remoción del bencilidén según la técnica descripta condujo a 14 con 81 % de rendimiento. Por benzoilación de D-galactosa con cloruro de benzoilo en piridina a alta temperatura se obtuvo la mezcla de anómeros de la perbenzoil-α,β-D que el descripto en literatura y en este caso cristalino. La alta regioselectividad en favor del HO-6 era esperable, debido a que este hidroxilo primario se encuentra menos impedido que el HO-4 secundario. Además, se encontró que el HO-4 no podía ser glicosidado cuando se trataba tanto 14 como 16 con un exceso de 15 en presencia de SnCl4. Sin embargo, la glicosidación del HO-4 del disacárido 16 con un exceso de penta-O-benzoil-α,β-D-galactofuranosa (5) condujo al trisacárido protegido 19 con 41 % de rendimiento. En esta reacción también se aisló otro compuesto correspondiente al producto de transglicosidación, es decir, el derivado perbenzoilado de β-D-GaIf-(1->4)--GlcNAc (20). La estructura de 20 se confirmó por una síntesis directa e independiente. Por glicosidación de 14 con un exceso de 5 utilizando SnCl4 como promotor se obtuvo 20 con 63 % de rendimiento y presentó las mismas características físicas y espectroscópicas que el producto obtenido previamente. También se aisló el disacárido 21 con 27 % de rendimiento. El compuesto 21 se obtuvo con mayor rendimiento (66 %) por tratamiento de 14 con 1,1 equivalentes de 5 en presencia de SnCl4. Dado que tanto la conversión de 14 al disacárido 16 y de 16 al trisacárido 19 eran promovidas por SnCl4 en las mismas condiciones de reacción, se simplificó la síntesis de 19 mediante un procedimiento en un solo paso (“one-pot"). Así, a partir de 14 por adición secuencial de 15 y 5 se obtuvo 19 con formación altamente diasteroselectiva de los dos centros anoméricos de configuración β con 34 % de rendimiento. Este procedimiento, a pesar de que no significó un aumento en el rendimiento total de 19, resulta directo y sencillo, ya que conduce a 19 utilizando galactosas perbenzoiladas como precursores, evitando la purificación de los productos intermedios. Otra ventaja es que las galactosas perbenzoiladas, 5 y 15, se obtienen de manera sencilla en la misma reacción por cristalización fraccionada. A efectos de obtener el trisacárido libre β-D-Galf(1—>4)GlcNAc(23), objetivo de la síntesis, se procedió a eliminar los grupos protectores teniendo en cuenta que, para la desprotección del disacárido 6, se había encontrado que convenía primero desbenzoilar y luego desbencilar. La desbenzoilación de 19 con NaOMe en MeOH condujo al bencil glicósido del trisacárido deseado 22 con 99 % de rendimiento. Por hidrogenólisis del grupo bencilo de 22 utilizando formiato de amonio-10% Pd/C en metanol caliente se obtuvo el trisacárido libre 23 (99%). El trisacárido 23 representa una nueva estructura de oligosacáridos unidos a proteína por residuos de treonina o serina encontrados únicamente en glicoproteinas de T. cruzi. La reducción de 23 con NaBH4 condujo al alditol 24 (97 %) cuyos RMN 13C y ¹H mostraron ser idénticos a los informados para el alditol disubstituido liberado por β-eliminación reductiva de las mucinas de la cepa G de T. cruzi. Dado que el tipo de unión a proteína por GlcNAc ylapresencia de Galf resultaban novedosos y teniendo en cuenta que se obtuvieron por síntesis los productos secundarios 20 y 21, resultaba interesante su conversión a los alditoles correspondientes. Estos resultaban útiles en estudios sobre la influencia de la Galf en la cromatografía liquida de intercambio aniónico (Dionex) que forma parte de otro proyecto del laboratorio sobre determinación de estructuras de mucinas de T. cruzi. Se procedió pues a la desbenzoilación de 20 con NaOMe en MeOH obteniéndose 25 como producto cristalino con 98 % rendimiento. La desbencilación de 25 con formiato de amonio-10% Pd/C en metanol caliente condujo a 26 como una mezcla de anómeros α,β. La reducción de 26 con borohidruro de sodio dio 27 con 98 % de rendimiento. Siguiendo la misma secuencia de desprotección descripta, se obtuvieron los compuestos 28, 29 y 30. Para realizar la primera síntesis de sintones de los disacáridos β-D-Galp( 1-)3)-D-Galf y α-D-GaIp-(1—>3)-D-Galf para la introducción de Galf interna en la construcción de oligosacáridos de glicoconjugados, la estrategia fue utilizar como precursor de galactofuranosa un derivado de D-galactono-1,4-lactona con el OH-3 libre, que luego sería glicosidado con un derivado conveniente de Galp. Teniendo en cuenta que los grupos acilos son muy estables a las condiciones de glicosidación generales, y que sería conveniente obtener este derivado en un solo paso de reacción, se procedió a estudiar la acilación parcial de la D-galactono-1,4-lactona con cloruro de pivaloilo. Por tratamiento de esta lactona con un exceso de cloruro de pivaloilo en piridina se obtuvo el perpivaloil derivado 31 con 82 % de rendimiento. Asimismo, cuando se realizó la reacción con 2,2 equivalentes del reactivo acilante, se obtuvo el 2,6-di-O-pivaloil derivado 32, pues estas posiciones son las más reactivas debido a que el OH-6 es primario y el OH-2 se encuentra activado por efecto inductivo del carbonilo. Una vez sintetizados los dos testigos 31 y 32, se procedió a realizar la protección parcial de la D-galactono-1,4-lactona con 3,3 equivalentes de cloruro de pivaloilo. Se obtuvo una mezcla de 31; 2,3,6-tri-O-pivaloil (33) y 2,5,6-tri-O-pivaloil (34) derivados; y 32 con 21,6; 2,6; 9,6 y 30 % de rendimiento, respectivamente. La pobre selectividad enlaacilación parcial, aun con un grupo protector voluminoso como el pivaloilo, se debe a que el OH-3 se encuentra pseudo-ecuatorial y en una relación trans respecto del OH-2 y de la cadena lateral en el C-4. El bajo rendimiento obtenido para 34 sumado a la tediosa purificación demostraron que este método de protección parcial no resultaba conveniente y era necesario desarrollar una ruta alternativa. Sin embargo, se continuó el estudio de pivaloilación parcial de lactonas que presentaran una relación cis entre OH-2 y OH-3. La pivaloilación de D-gulono-1,4-lactona con 3,6 equivalentes de cloruro de pivaloilo resultó altamente regioselectiva en favor del 2,5,6-tri-Opivaloil derivado (35, 85 %) lo cual confirmaba la influencia de la configuración relativa de OH-2 y OH-3. También se aisló el perpivaloil derivado 36 como producto minoritario (2,6 %). A partir de D-manono-1,4-lactona en las mismas condiciones de reacción, cristalizó del crudo de reacción el 2,5,6-tri-O-pivaloil derivado 37 con 50 % de rendimiento. Se aisló además una pequeña cantidad del producto perpivaloilado 38. Considerando que la acilación selectiva de D-galactono-1,4-lactona conducía al 2,5,6-tri-O-acil derivado con bajo rendimiento. se pivaloiló selectivamente el OH-2 de la 5,6-O-isopropilidén-D-galactono-1,4-lactona (39) para obtener 5,6-O-isopropilidén- 2-O-pivaloil-D-galactono-1,4-lactona (40) cristalina con 79 % de rendimiento Una vez obtenido el aceptor deseado 40, era necesario efectuar la glicosidación con un derivado de galactosa piranósica. Dada la labilidad del isopropilidén frente al SnCl4. y teniendo en cuenta que se querían obtener los enlaces glicosídicos en las configuraciones α y β, se decidió utilizar el procedimiento del tricloroacetamidato para la activación del oxígeno anomérico de la galactosa convenientemente protegida. Para la síntesis del sintón de β-D-Galp-(1—>3)-D-Galf se trató 2,3,4,6-tetra-Oacetil- a,β-D-galactopiranosa con Cl3CCN y un equivalente de DBU por 30 minutos y se obtuvo el β-tricloroacetamidato 43 como un compuesto cristalino con 80% de rendimiento. Para formar el enlace glicosídico β, se condensó el aceptor 40 con el tricloroacetamidato 43, utilizando triflato de trimetilsililo(TMSOTf) como catalizador y se obtuvo el disacárido lactónico β 44 como un sólido amorfo con 84 % de rendimiento. La reacción fue altamente estereoselectiva como era de esperar debido a la asistencia anquimérica del acilo en C-2 de 40. La reducción de 44 con disiamilborano condujo a 45 como un sólido amorfo con 92 % de rendimiento. El rendimiento total del sintón de Galf interna 45, objeto de síntesis fue del 55 %. Debido a que la ruta desarrollada para la obtención de 45 era simple y teniendo en cuenta que la remoción de su isopropilidén conduciría al derivado en la configuración piranósica, se esbozó la posibilidad de que 45 fuera precursor también de β-D-Galp-(1—>3)-D-Galp. Por hidrólisis de 45 con AcOH acuoso. se obtuvo 46 como un sólido amorfo con 94 % de rendimiento. Se peracetiló 46 con anhídrido acético en piridina a 5°C , obteniéndose una mezcla de los derivados β-furanósico 47, α-furanósico 48; β-piranósico 49 y α-piranósico 50, en relación 12:8:33:47, respectivamente,y un 80 % en favor de la configuración piranósica, por lo tanto, esta mezcla podría utilizarse sin purificar para la introducción de β-D-Galp-(1—>3)-D-Galp en síntesis de oligosacáridos. Esta sintesis, por su simplicidad y rendimiento, se compara favorablemente con los metodos descriptos. Se aislaron y caracterizaron los compuestos 47, 49 y 50. Por otra parte, el compuesto 44 se redujo con NaBH4 y por posterior agregado de NaOMe en MeOH, se obtuvo β-D-galactopiranosiI-(1—>3)—D-galactitol (51) como un sólido cristalino con 98 % de rendimiento. Para la sintesis del sintón de α-D-Galp-(1—>3)-D-Galf se empleó un derivado de galactopiranosa que posee un grupo no participante en C-2 como el tricloroacetamidato de O-(2,3,4,6-tetra-O-bencil-β-D-galactopiranosilo) (52) que se obtuvo cristalino con 69 % de rendimiento siguiendo el procedimiento descripto. La condensación de la lactona 40 con el β-tricloroacetamidato 52 utilizando triflato de trimetilsililo como catalizador y éter como solvente a 0°C condujo al disacárido lactónico α 53 como un sólido amorfo con 74 % de rendimiento. Por hidrogenación catalítica de 53, tratamiento con ácido acético acuoso y posterior acetilación con anhídrido acético en piridina, se obtuvo 2,3,4,6-tetra-O-acetil-α-Dgalactopiranosil-( 1->3)-5,6-di-O-acetil-2-O-pivaloil-D-galactono-1,4-lactona (54) confirmando la configuración anomérica de su precursor 53. Una vez comprobada la alta diastereoselectividad de la glicosidación que condujo al disacárido lactónico α 53, se procedió a reducir lactona y así obtener el sintón objeto de síntesis. Por tratamiento de 53 con diisoamilborano se obtuvo 55 como un sólido amorfo con 88 % de rendimiento. La obtención del disacárido lactónico 44 no se pudo realizar utilizando SnCl4 como promotor y penta-O-benzoiI-β-D-galactopiranosa (15). Sin embargo, en las mismas condiciones, en presencia de SnCl4 y penta-O-benzoil-a,β-D-galactofuranosa, se obtuvo 56 cristalino con 58 % de rendimiento. Con el fin de confirmar la posición en donde ocurrió la glicosidación, se benzoiló 56 con cloruro de benzoilo en piridina y se obtuvo 2,3,5,6-tetra-O-benzoil-β-D-galactofuranosil-(1—>3)5,6- di-O-benzoil-2-O-pivaloil-D-galactono-1,4-lactona (57), confirmando la estructura de su precursor. Por tratamiento de 56 con NaBH4y posterior agregado de NaOMe en MeOH. se obtuvo β-D-galactofuranosil-(1—>3)-D-ga|actitol(58) como un sólido cristalino con 95 % de rendimiento. En este trabajo de tesis se han sintetizado 57 compuestos, de los cuales 46 (3, 4, 6-11, 15-17, 19-38, 40. 44-47, 49-51, 53-58) no se encontraban descriptos en literatura.

Galicio, Mariana. "Evaluación de métodos inmunológicos de importancia comercial en la Argentina para el análisis de maíz, "gluten meal" y "gluten feed"" (1998). Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Fuentes, Carlos Mariano. "Deriva de larvas de Sabalo, Prochilodus lineatus (Valenciennes, 1847) y otras especies de peces de interes comercial, en el Río Paraná Inferior" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Entre 1990 y 1997 se realizaron diversos muestreos para el estudio de la deriva de larvas de sábalo Prochilodus lineatus y otros peces de interés comercial en el río Paraná Inferior, a la altura del límite con el río Paraná Medio (ciudad de Diamante) y el rio Paraná de Las Palmas (ciudad de Zárate). Se observaron diferencias en la composición especifica y Ia densidad de larvas. No obstante, el sábalo fue la especie más abundante en ambos sitios, donde representó más del 40 % del ictioplancton. La presencia de huevos de peces, así como de estadios muytempranos de sábalo solamente en Diamante, al norte, sugiere que los desoves de los stocks meridionales de ésta, y otras especies migratorias, tienen lugar principalmente en el tramo medio del río Paraná. El sábalo se reprodujo activamente al final de la primavera y en el verano con temperaturas del agua entre 22 °C y 27 °C. Los datos sugieren que el ciclo de maduración podría ser controlado por el fotoperíodo y/o la temperatura, mientras que los ascensos sostenidos del nivel de las aguas dispararían Ia actividad reproductiva masiva. Estas investigaciones apoyan la hipótesis de que el sábalo, en el curso de su evolución, ha desarrollado una estrategia reproductiva compleja, que involucra desplazamientos ascendentes, desoves en el canal asociados a las crecientes, y dispersión de los estadios de desarrollo tempranos en una extensa área de cría aguas abajo. Esta es una de las características biológicas que explicarían la abundancia de la especie, pero, al mismo tiempo, la hacen particularmente vulnerable a las transformaciones ambientales, como las producidas por la construcción de represas

Abstract:
During 1990 to 1997, several sampling programs to study the larval fish drift of the "sábalo" Prochilodus lineatus, were carried out in the limit between the middle and the lower Paraná river (Diamante City) and southwards in Paraná de Las Palmas river (Zárate City). There were differences in the species composition and densities of larval fish between sites. However, the "sábalo" Prochilodus lineatus, was the most abundant species, reaching more than 40 % in both cases. Presence of fish eggs and newly hatched larvae of sábalo only at the northern site, suggests that the spawning areas of the meridional stocks of these and other migratory species are located in the Middle Paraná river. Sábalo actively spawned in late spring and summer with water temperatures between 22 °C and 27 °C. Data suggest that the maturation cycle could be overly controlled by factors as photoperiod and/or water temperature, while raising water levels may trigger massive spawning activity. These studies support the hypothesis that sábalo has evolved a complex reproductive strategy, involving upstream migrations, channel spawning during rising waters, and a wide dispersion of larvae in extensive downstream nursery areas. This may be one of the biological features that explain the great abundance of this species, but at the same time makes it particularly vulnerable to environmental transformations, as those produced by damming.

Franco, Marcela. "Resistencia concomitante antitumoral inducida por tumores murinos de distintos grados de inmunogenicidad" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La resistencia concomitante antitumoral (RC) es la capacidad de un individuo portador de un tumor de inhibir el crecimiento de un segundo implante tumoral realizado en un sitio distinto del primero. Se estudió este fenómeno en ratones eutímicos y atímicos, usando nueve tumores murinos con distintos grados de inmunogenicidad. Se describieron dos picos de RC durante el desarrollo del tumor primario. El primer pico fue generado sólo por tumores inmunogénicos pequeños, file específico e irreversible y estuvo asociado a mecanismos inmunológicos convencionales dependientes del timo. El segundo pico de RC fue compartido por tumores inmunogénicos y no inmunogénicos de gran volumen, fire inespecífico, timo-independiente y al menos en parte, reversible y estuvo asociado a la actividad de un factor/es inhibidor de aproximadamente 1000 D de peso molecular, presente en el suero de ratones portadores de tumor. Este factor ejercería un efecto inhibitorio directo e indirecto sobre el tumor secundario: el efecto directo se ejercería sobre las propias células tumorales; el efecto indirecto se ejercería a través de la inhibición de la neovascularización. El efecto inhibitorio se manifiesto como una inhibición de la proliferación —condisminución en el número de células en mitosis y de células positivas para el Antígeno Nuclear de Proliferación Celular (PCNA)- y como un aumento en el número de células en apoptosis. Asimismo, se observaron alteraciones en la cinética del ciclo celular, con un aumento de la fase S y disminución de las fases (G0-G1) y (G2-M).

Abstract:
Antitumor concomitant resistance is the phenomenon according to which a tumor-bearing host inhibits the development of secondary tumor implants carried out in a different site. This phenomenon was studied in euthymic and athymic mice, using nine murine tumors with widely different immunogenicity. Two temporally separate peaks of concomitant resistance were detected during primary tumor development. The first one was exhibited only by small immunogenic tumors; it was tumor-specific, irreversible and mediated by classical immunological T cell dependent mechanisms. The second peak was shared by both immunogenic and non-immunogenic large tumors; it was nonspecific, thymus-independent and partially reversible and correlated with the activity of an antitumor factor/s (molecular weight = 1000 D aprox.) present in the serum of tumor-bearing mice. This factor/s would exert direct and indirect inhibitory effects on secondary tumor growth, the former affecting tumor cells themselves and the latter limiting neovascularization. The inhibitory effect was associated with a decrease in the number of both cells in mitosis and cells expressing the Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA), with an increase in the number of apoptotic cells and alterations in cell cycle kinetics, such as an increase in the proportion of cells in S phase and a decrease in (G0-G1) and (G2-M) phases.

Fontana, Marcelo Raúl. "Cinética de cristalización de aleaciones amorfas base Te y base Mg" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En este trabajo, se estudió la cinética de cristalización de aleaciones amorfas binarias Ga-X (X = Te, Mg) y temarias Ga-X-Y (Y = Sn, Fe) en la zona de composiciones rica en X. Los materiales fueron caracterizados por difracción de rayos X, espectroscopía Mössbauer y calorimetría diferencial de barrido (DSC). Los sistemas binarios Ga-X presentan un pequeño rango de amortización centrado en 20 % atómico de Ga. Al agregar un tercer elemento Y (hasta un 10 % atómico) a los sistemas binarios se observan comportamientos disímiles en los rangos de amorfización temarios. Estos pueden ser explicados por la existencia de asociaciones Fuertes en el liquido que son retenidas en el enfriado rapido. Teniendo en cuenta las caracteristicas detectadas en la cinética de cristalización, los amorfos pueden dividirse en dos grupos: los de composición binaría (cercana a Ga20X80) y los de composición ternaria. Los amorfos ternarios son más estables y los productos de cristalización son diferentes a los de composición binaria. Se realizó un estudio detallado de la cinética de cristalización de la aleación amorfa de composición Ga20Te80. Se detectaron la existencia de tiempos de inducción y de mecanismos de cristalización compleja. La cristalización de los amorfos temarios base Te puede ser modelada suponiendo sólo modificaciones en la viscosidad con respecto al amorfo de composición Gaonego. En este trabajo se proponen elaboraciones originales que pueden ser aplicadas en general: se separa la señal correspondiente a una cristalización de una de cambio de capacidad calorifica en un barrido de DSC, se diseño un algoritmo que permite la construcción empírica de diagramas de transformación, se cuantifican los errores experimentales en calorimetría, se propone un modelo de cristalización compleja que explica la cinética de una cristalización primaria, se construyen los diagramas de transformación a partir de un modelo de cristalización.

Abstract:
In this work, the crystallization kinetic of binary Ga-X (X = Te, Mg) and ternary Ga-X-Y (Y = Sn, Fe) amorphous alloys has been studied. The materials have been characterized by x-ray diffraction, Mössbauer spectroscopy and differential scanning calorimetric (DSC). The binary systems Ga-X have a small glass forming range centered in 20 % atomic of Ga. When a third element Y (up to 10 % atomic) is added to the binary systems, dissimilar behaviors in the ternary glass forming range have been observed. These can be explained by the existence of strong associations in the liquid which are retained in the rapid quenched. Taking into account the determinate characteristics in the crystallization kinetics, the amorphous alloy can be classified in two groups: those of binary composition (near to Ga20X80) and those of ternary composition. Ternary amorphous alloys are more stable and the crystallization products are different. The crystallization kinetics of the amorphous alloy of composition Ga20Te80 have been studied widely. The existence of induction times and mechanisms of complex crystallization have been detected. The crystallization of Te-based ternary amorphous alloys can be modeled considering just viscosity modifications related to the amorphous alloy of composition Ga20Te80. In this work, original elaborations are formulated: a new procedure is developed to perform the kinetic analysis of continuous heating calorimetric data when the heat capacity of the sample changes during the crystallization, an empirical construction of transformation is presented, the uncertainties inherent to experimental differential scanning calorimetric data are evaluated, a model of complex crystallization which explains the kinetics of a primary crystallization is formulated, the diagrams of transformation for a model of crystallization are constructed.

Finkielstein, Carla V.. "Caracterización molecular de una fosfoproteína novel intermediaria en el mecanismo de acción de hormonas proteicas" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Trabajos previos de nuestro laboratorio han permitido caracterizar una fosfoproteína novel (p43), intermediaria en la síntesis de esteroides en la zona fasciculata de la corteza adrenal de rata (Paz C. et al. (1994) Eur. J. Biochem. 224:709-716). En la presente Tesis, se describe la caracterización molecular de p43 asi como también la regulación hormonal del transcripto. Los resultados obtenidos mostraron que p43 es homóloga a una acil-CoA tioesterasa mitocondrial. La secuencia aminoacídica deducida de la proteína presentó sitios consenso de fosforilación para diferentes proteínas quinasas y un motíf para serina Lipasa. Anticuerpos dirigidos contra un péptido sintético que incluye dicho motif y otro contra la región N-terminal de p43, bloquearon la actividad biológica de la proteína. El transcripto de p43 fue detectado en ovario de ratas pseudopreñadas, en zona fasciculata y glomerulosa de adrenal de rata, en una línea tumoral de células de Leydig, en cerebro de ratón y en placenta humana. El tratamiento de ratas con dexametasona (Dx) provoca una disminución en los niveles del ARNm de p43 de manera dosisdependiente en adrenales de rata. El tratamiento posterior con ACTH no sólo revierte el efecto de la Dx, sino que produce un aumento rápido (5 min) en los niveles del mensajero alcanzando un máximo a los 15 min (62%) y retornando a los valores basales a los 30 min posteriores al estímulo. El tratamiento con actinomicina D o cicloheximida antes del estímulo con ACTH provoca una disminución o un aumento en los niveles del ARNm de p43 respectivamente. Estos resultados relacionan por primera vez que una actividad de acil-CoA tioesterasa está involucrada en los procesos esteroidogénicos.

Abstract:
We have previously reported the purification of a phosphoprotein (p43) intermediary in steroid synthesis from adrenal zona fasciculata (Paz C. et al. (1994) Eur. J. Biochem. 224:709-716). Here we describe the cloning and sequencing of a cDNA encoding p43 as well as the hormonal regulation of p43 transcript. The protein resulted homologous to a very recently described mitochondrial peroxisome proliferator-induced very-long-chain acyl-CoA thioesterase. The deduced amino acid sequence of the protein shows consensus sites for phosphorylation by different protein kinases, and a Lipase serine motif. Antibodies raised against a synthetic peptide that includes the Lipase serine motif and against the N-terminal region of p43 block the action of the protein. The transcript of p43 was detected in ovary of pseudopregnant rats, rat adrenal zona fasciculata and glomerulosa, mouse Leydig tumor cell line, rat brain and human placenta. Inhibition of adrenocorticotropin hormone (ACTH)release and steroid synthesis by dexamethasone produced a dosedependent decrease in the abundance of the adrenal transcript. The transcript was induced by in vivo stimulation of the adrenals with ACTH. The effect had a rapid onset (5 min), reached maximal stimulation (62%) at 15 min and returned to basal levels at 30 min. ACTH effect on p43 transcript was inhibited by actinomycin D and enhanced by cycloheximide. Our results provide the first evidence linking acyl-CoA thioesterases, with very-long-chain specificities, and a protein intermediary in steroid synthesis, thereby supporting a regulatory role for acyI-CoA thioesterases in steroidogenic tissues.

Ferro, Sergio P.. "Movimiento de fluidos viscosos en canales con paredes porosas y efectos de acoplamiento viscoso-térmico" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se estudió el flujo de un fluido newtoniano que circula en regimen laminar por un canal plano. El flujo es forzado por succión o inyección constante y uniforme a través de paredes porosas y rígidas que se hallan a distintas temperaturas. Se supuso que la viscosidad depende de la temperatura, por lo que la ecuación de Navier-Stokes se halla acoplada a la ecuación de la energía. El problema admite soluciones de similaridad que fueron analizadas en detalle. Se desarrollaron rutinas numéricas basadas en métodos espectrales que resolvieron eficientemente tanto las ecuaciones estacionarias como las ecuaciones dependientes del tiempo. Esto permitió realizar la descripción de los campos de velocidades, presiones y temperaturas para un amplio rango de valores de los parámetros. Por otra parte, se analizó la estabilidad temporal y espacial de las soluciones estacionarias de similaridad. A tal fin se implementaron nuevos códigos numéricos que resuelven los problemas de valores característicos que surgen en este tipo de análisis. El problema en dos variables espaciales (sin efectos de temperatura) fue resuelto mediante un código en diferencias finitas. Esto permitío investigar las relevancia de las soluciones de similaridad bajo determinadas condiciones en la boca del canal.

Abstract:
The flow of a newtonian fluid along a plane channel was studied. The flow is driven by constant, uniform suction (or injection) through porous rigid walls at different temperatures. The viscosity was assumed to depend on the temperature and thus the Navier-Stokes and the energy equations are coupled. The problem admits a similarity solution which was analised in detail. Numerical schemes based on spectral methods were developed. These routines efficently solve both the time dependent and the steady state equations. This fact allows us to describe the velocity, pressure and temperature fields for a large range of values of the parameters. The temporal and spatial stability of steady similarity solutions was also studied. New numerical codes were written to solve the characteristic value problems which appear in this type of analysis. Finally, the two dimensional problem (without thermal effects) was solved using a finite difference code. The importance of similarity solutions under given conditions at the entrance of the channel was investigated.

Fernández, Gustavo Javier. "Ecología reproductiva del Ñandú común, Rhea americana" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el presente trabajo se realizó un estudio sobre la ecología reproductiva del ñandú común (Rhea americana) en la localidad de General Lavalle (Provincia de Buenos Aires, Argentina). En el mismo se analizó la estructura social, comportamiento reproductivo y el éxito reproductivo de esta especie durante el período 1992-1996. Los resultados obtenidos en este estudio fueron finalmente analizados en relación a la dinámica poblacional y la evolución de las estrategias reproductivas en esta especie. Durante la temporada no reproductiva (enero-julio), los ñandúes son altamente gregarios. El grado de agrupamiento afecta la asignación de tiempo a distintas actividades. En la temporada reproductiva (agosto-diciembre) se formaron los grupos reproductivos (harenes) donde l ó 2 machos defienden un grupo de 2 a 8 hembras. La postura de huevos comienza hacia finales de setiembre y se extiende hasta fines de diciembre. Las hembras ponen sus huevos en un nido comunal, mientras que el macho se encarga de la incubación y cuidado de los pichones una vez que éstos nacen. Una vez que las hembras finalizan la puesta de huevos en un nido pueden aparearse nuevamente con otro macho, constituyendo así, un sistema reproductivo que combina la poliginia y la poliandria secuencial, y cuidado uniparental del macho. El número de huevos puestos en un nido usualmente varió entre 20 y 30 huevos, y el período de puesta duró entre 10 y 15 días. Sin embargo, algunos nidos tuvieron puestas de mayor tamaño (de hasta 56 huevos). El número de pichones producidos se incrementó con el tamaño de puesta hasta 30-35 huevos, pero disminuyó significativamente cuando había más de 35 huevos. Cerca del 30 % de los machos adultos intentaron reproducirse cada año pero más del 65 % de los nidos fueron abandonados durante la incubación. En estos nidos tanto el número de huevos perdidos (producida por rotura accidental de huevos o predación) como el porcentaje de la puesta perdida fue significativamente mayor que en nidos que completaron la incubación. La probabilidad de deserción disminuyó a medida que avanzaba la incubación. Nidos abandonados en el último período de incubación tuvieron una mayor pérdida de huevos que aquellos abandonados más tempranamente. Solamente el 4-6% de los machos adultos de la población se reprodujo exitosamente cada año. Esto puede ser consecuencia del elevado costo energético del cuidado parental. El costo energético estimado de la incubación fue alrededor de 8 veces mayor al que posee la puesta de huevos en el nido que realiza una hembra. Sumado a esto, los machos con pichones invierten más tiempo en vigilar (y menos en alimentarse) que machos en grupos o solitarios, lo cual implica un costo adicional al costo de incubación. El comportamiento reproductivo de esta especie debe ser entonces analizada considerando los factores ecológicos y fisiológicos que determinan su éxito reproductivo, dentro del marco evolutivo del desarrollo de las estrategias reproductivas en las ratites.

Abstract:
I studied the reproductive ecology of a wild population of Greater Rheas (Rhea americana) from 1992 to 1996 at General Lavalle (province of Buenos Aires, Argentina). I studied rheas social structure and dynamics, breeding behavior and nesting success. The results were analyzed in relation to population dynamics and the evolution of reproductive traits in this species. Greater Rheas are gregarious during the non-reproductive season (January-July). Group size affect the time allocate to different activities. During the breeding season (August-December) 1-2 males monopolized a harem of 2-8 females. Egg laying started in late September and lasted to late December. Females laid eggs communally in a single nest, and the male incubated these eggs for 36 to 45 days. Once chicks hatched, the male care for them until they were 6 months old. After laying eggs for one male, females could move on to lay eggs for another male. Then, this mating system combines harem defense polygyny, sequential polyandry and exclusive male parental care. The number of eggs in a nest mostly varied from 20 to 30 eggs, and laying period lasted between 10-15 days. However a few nests had larger clutches (up to 56 eggs). The number of chicks hatched per nest increased with number of eggs up to 30-35 eggs but decreased for larger clutches. This decrease was the result of a lower hatchability in large clutches. About 30 % of adult males nested each year but more than 65% of these nests were deserted during incubation. Egg losses (produced by egg breakage or predation) and the percentage of clutch lost were higher in nests that were deserted than in nests that produced chicks. The probability of deserting the nest was higher during the laying stage and decreased progressively through incubation. Besides, late deserted nests had higher egg losses than those deserted during early incubation. Only 4-6% of the adult male population bred successfully each year. This could be the consequence of the high energetic cost of uniparental care in rheas. The energetic cost of incubation was about 8 times higher than the cost of egg laying for a female. Furthermore, after hatching, the male allocates more time to vigilance (and less time to feeding) than either solitary males or males or females in groups. Then, the reproductive behavior of Greater Rheas must to be analized considering the ecological and physiological constrains that determine their reproductive success, within the broadest frame of the evolution of the reproductive traits in the ratite species.

Feingold, Sergio. "Asociación de marcadores moleculares a la calidad panadera en trigos argentinos" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La variación en la calidad panadera ha sido asociada a el tenor proteico y a la composición de proteinas de reserva del grano. Entre las proteinas de reserva, variación alélica en las gluteninas de alto peso molecular han podido explicar hasta el 50% de la calidad en trigos europeos. Klein 32 (K32), un cultivar argentino de buena calidad cultivado en los años 30, presenta las mismas subunidades de gluteninas de alto peso molecular que Chinese Spring (CS) de mala calidad panadera. Estudios previos realizados sobre estos materiales mostraron que las gluteninas de bajo peso molecular y/o las gliadinas, cuyos genes están codificados en los brazos cortos de los cromosomas homeólogos de los grupos 1 y 6, podrian ser responsables de la diferencia en calidad entre estos genotipos. Se encontró que marcadores moleculares localizados en el cromosoma 1BS pudieron explicar alrededor del 20% de la variación en calidad de una población F23 derivada del cruzamiento de K32 y CS. Además, se encontraron efectos positivos de alelos de CS de marcadores localizados en el cromosoma 6AS. Los marcadores asociados a la calidad panadera se encontraron ligados a los loci X-Glu3 y X-Gli1 en el cromosoma 1BS; y a X-Gli2 el 6AS. El contenido proteico relativo influyó marcadamente en la calidad panadera estimada por la prueba de sedimentación en SDS. El uso de este caracter como covariable permitió mejorar la porción de varianza de la calidad explicada por los marcadores del 1BS. La determinación de la calidad mediante el uso del mixógrafo no se vieron tan influenciadas por el contenido proteico. La utilización de los marcadores moleculares identificados, para seleccionar los alelos de K32 en el 1BS y los de CS en el 6AS podría resultar en un incremento del 30% de la calidad a igualdad de contenido proteico. Asimismo, se encontraron evidencias de nuevos genes de proteínas de reserva recientemente reportados por otros investigadores.

Abstract:
Breadmaking quality variation is related to differences in protein content and protein composition. Among storage proteins, it has been reported that variation in the high molecular weight (HMW) glutenin subunit composition can explain about 50% of breadmaking quality in European varieties. Klein 32 (K32), an old Argentinean variety with good rheological properties presents the same HMW glutenin subunit composition than Chinese Spring (CS), a poor baking quality genotype. Previous studies indicated that low molecular weight glutenins and/or gliadins whose genes are coded on the short arms of chromosome groups 1 and 6 could be responsible of the difference in quality showed by these genotypes. The association of molecular markers located in these regions showed that the short arm of chromosome 1B, could explained around 20% of the variation in the trait in an F2:3 population derived from K32 and CS. Moreover, positive effects of alleles from CS located on chromosome 6A were found. Markers associated to breadmaking quality were found linked to the XGlu3 and X-Gli1 loci in chromosome 1BS; and to X-Gli2 in chromosome GAS. Protein content largely affected breadmaking estimation by SDS sedimentation test, and the use of this trait as a covariant improved the degree of explanation of the breadmaking quality by markers on chromosome 1BS. Mixing parameters behave more independently of protein content. The use of markers to select K32 alleles at 188 and CS alleles at 6AS in breeding programs could result in a 30% increase in quality at the same protein level. Evidence of novel storage protein genes proposed by other researchers was found.

Favret, Eduardo Alfredo. "Análisis y descripción de una superficie metálica mediante la iluminación laser oblicua y unidireccional de la microscopía óptica" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El presente trabajo de investigación introduce una descripción de la superficie metálica, ya sea luego de un desbaste mecánico o de un ataque químico específico, como composición de estructuras de bordes rectos en distintas direcciones superficiales, haciendo uso de la iluminación laser oblicua y unidireccional (ULOI) en el microscopio óptico. La intensidad I de la luz laser dispersada por la superficie de la muestra metálica, al rotar la misma un ángulo φ alrededor de un eje perpendicular a ella, exhibe máximos cuyas ubicaciones son características de cada grano cristalino. Estas curvas de intensidad luminica se deben a la difracción que sufre el haz de luz laser al incidir sobre la superficie. Se analiza la forma de uno de los máximos, es decir la curva I(φ), mostrando que una curva gaussiana ajusta bien los datos experimentales. Se considera un posible modelo para explicar dicha curva. Dicho modelo expresa a la curva experimental como combinación lineal de una curva teórica, que surge de aplicar la teoría de la difracción de FRESNEL-KIRCHHOFF y el concepto de THOMAS YOUNG acerca de que la difracción es un efecto de borde, del cual emana la teoria geométrica de la difracción de KELLER. De esta combinación lineal surge la idea de considerar a la rugosidad superficial como composición de estructuras de bordes rectos en distintas direcciones superficiales, denominando a dicha composición rugosidad lineal. Puesto que los cálculos tienen en cuenta las propiedades del instrumental utilizado para adquirir dichas curvas experimentales, fundamentalmente la apertura numérica del objetivo, surge la posibilidad de plantear un nuevo concepto sobre la topografia de la superficie a distintos aumentos. Defino a dicho concepto como orden de linealidad superficial o bien invariancia del diagrama de rugosidad lineal a distintos aumentos, la cual está representada por el parámetro a) (dispersión) de la curva gaussiana, producto del ajuste de la curva experimental. Se discuten estos análisis y se realizan observaciones cualitativas para distintos metales, como asi también para diversas redes de difracción, utilizando objetivos de aumentos 8x y 16x, y en algunos casos de 32x. Se presenta, además, una aplicación de la técnica ULOI a la metalografia, la cual consiste en el cálculo de orientaciones cristalinas.

Abstract:
The present research work introduces a description of a metallic surface, either after a mechanical grinding or after a chemical etching, as a composition of structures of right edges in different directions, making use of the ULOI Technique in the optical microscope. The intensity I of the laser beam dispersed by the surface of the sample, when the sample is rotated an angle φ around an axis perpendicular to its surface, exhibits maxima whose locations are characteristic of each crystalline grain. These curves of light intensity are due to the diffraction that suffers the laser beam when impacting on the surface. The I(φ) curve that represents one of the maxima is analyzed, showing that a gaussian curve adjusts the experimental data. It is considered a possible model to explain this result. This model explains the experimental curve as a lineal combination of a theoretical curve that arises of applying the theory of diffraction of FRESNEL-KIRCHHOFF and THOMAS YOUNG concept about that the diffraction is an edge effect, of which emanates the geometric theory of diffraction of KELLER. Using this idea, I consider the roughness of the metallic surface as a composition of structures of right edges in different directions, which I call “lineal rugosity”. Since the calculations keep in mind the properties of the instrumental used to acquire the experimental curves, fundamentally the numerical aperture of the objective, the possibility of outlining a new concept on the topography of the surface to different magnifications arises. I define this concept like lineal order of the surface or invariability of the diagram of lineal rugosity to different magnications, which is represented by the parameter a) (dispersion) of the gaussian curve. These analyses are discussed and qualitative observations are carried out for different metals, such as zinc, iron, aluminum and brass, and for diverse diffraction gratings, using objectives of different magnifications (8x, 16x and 32x). Besides, a metallographic application is shown.

Fascio, Mirta Liliana. "Síntesis de heterociclos nitrogenados a partir de hidratos de carbono vía cicloadiciones 1,3-dipolares" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el presente trabajo se describe la síntesis de heterociclos nitrogenados-oxigenados de cinco miembros tales como isoxazolinas, isoxazoles y oxadiazoles derivados de hidratos de carbono. La mayoría de los compuestos se obtuvieron por cicloadiciones 1,3-dipolares entre un dipolarófilo,generalmente comercial y un 1,3-dipolo proveniente de un hidrato de carbono libre o debidamente protegido. Se sintetizaron isoxazoles e isoxazolinas derivadas de 2-desoxiazúcares utilizando como dipolos las oximas de 2-desoxi-D-glucosa y 2-desoxi-D-ribosa, siendo los dipolarófilos alquinos y alquenos sustituidos con grupos atractores de electrones. Por otra parte, se obtuvieron también los derivados isoxazolínicos e isoxazólicos partiendo de la 1,2-O-isopropilidén-α-D-xílo-pentadialdo-1,4-furanosa oxima como precursor del 1,3-dipolo, utilizando una gama más variada de dipolarófilos algunos de los cuales se sintetizaron especialmente para este trabajo. Además partiendo de un hidrato de carbono protegido, como el 2,3,4,5,6-penta-O-benzoíl-D-manononitrilo, pudieron sintetizarse los derivados 1,3,4- y 1,2,4-oxadiazólicos correspondientes. Se realizó la cicloadición 1,3-dipolar intramolecular de la 1,2-O-isopropilidén-3-O- alil-α-D-xilopentadialdo-1,4-furanosa oxima que condujo a un producto tetracíclíco enantioméricamente puro. Finalmente se analizaron los resultados de la hidrogenación catalitica de algunos de los heterociclos isoxazolínicos sintetizados anteriormente, como probables intermediarios sintéticos. Todos los compuestos nuevos fueron caracterizados por sus constantes físicas y por espectroscopía de resonancia magnética nuclear y masa.

Abstract:
In the present work, the syntheses of some nitrogenated-oxigenated five member heterocycles such as isoxazolines, isoxazoles and oxadiazoles are described. Most of the compounds were obtained by 1,3-dipolar cycloadditions between dipolarophiles, commercially available, and an 1,3-dipole from a free or protectived carbohydrate derivatives. We synthesised isoxazoles and isoxazolines rings from 2-deoxysugars using 2-deoxy- D-glucose oxime and 2-deoxy-D-ribose oxime as 1,3-dipole and alkines and alkenes with electron-withdrawing substituents as dipholarophiles. In other way, we also obtained the isoxazolinic and isoxazolic rings from 1,2-O-isopropylidene- α-D-xylopentadialdo-1,4-furanose oxime as 1,3-dipole precursor, and a wide range of dipolarophiles, some of them was synthesised specially to this work. Beside this, from other protected sugar, such as 2,3,4,5,6-penta-O-benzoyl-D-mannononitrile, we could obtained the corresponding 1,3,4- and 1,2,4-oxadiazoles derivatives. We realized the intramolecular 1,3-dipolar cycloaddition from 1,2-O-isopropylidene- 3-O-allyl-α-D-xylopentadialdo-1,4-furanose oxime yielding an enantiomerically pure tetracyclic compound. We also analized the catalytic hydrogenation results of some isoxazolinic derivatives to explore their posibilities as synthetic intermediates. The new compounds were characterized physical and spectroscopically.

Etchenique, Roberto. "Aplicaciones analíticas de la balanza de cristal de cuarzo : microgravimetría y microrreología" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Ehrlich, Martín David. "Los primeros estadios de vida de la merluza Merluccius hubbsi, Marini 1933, en el Mar Argentino como aporte al conocimiento de su reclutamiento y estructura poblacional" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La merluza es la especie demersal más importante del Mar Argentino. Su captura en 1996 ha superado las 600.000 t y se encuentra en estado de sobrepesca. El estudio de los primeros estadios de esta especie se ha encarado bajo dos aspectos, por un lado el análisis de la condición reproductiva de los adultos a través de la determinación de su fecundidad y frecuencia reproductiva y por otra parte la determinación espacio-temporal de la distribución y abundancia de los primeros estadios de vida donde se incluyen huevos, larvas tempranas, larvas tardías y juveniles. Se ha observado que la merluza es un desovante parcial indeterminado que presenta desoves casi todo el año, pero con dos períodos de puesta más intensivos, el invernal (mayo-julio) en la zona norte de su amplia distribución (35°-38°S) y el estival (octubre-marzo) en la zona costera norpatagónica (43°-45°S). La fecundidad relativa para hembras entre 38-58 cm de largo total fue estimada, en este trabajo, entre 520 a 640 ovocitos por gramo de hembra. La fecundidad parcial o por camada osciló entre 267400 a 432240 ovocitos por puesta. La frecuencia reproductiva utilizando la presencia de folículos postovulatorios de edad 0 fue estimada en una puesta cada 22 días aproximadamente. De acuerdo a la presencia de folículos postovulatorios en las muestras y de huevos en estadio I en el plancton, la merluza desova a lo largo de todo el día con un pico matinal. Inmediatamente después del desove la proporción de machos se incrementa notablemente llegando a más del 80 %. A través de experimentos de fecundación artificial se ha establecido que la duración en días desde la fertilización del huevo hasta la eclosión es de 5,01 a 10°C y de 3,1 a 18°C. Con 1470 muestras de ictioplancton provenientes de 39 campañas realizadas entre 1973 y 1989 se ha logrado construir un cuadro sinóptico mensual bastante completo sobre las principales areas de desove de la merluza. En la parte norte de la plataforma (34°00’- 41°30°S) se observa la presencia de huevos en abril entre los 39°-37°S, en mayo y junio entre los 37°35° S y en julio y agosto entre los 34° y 35°S. Los desoves se producen en la plataforma entre los 50 a 160 m con temperaturas que a los 10 m de profundidad oscilan entre 9,4 a 13,3°C. En mayo, septiembre y noviembre se ha reconocido un área de desove entre los 40°- 42°S. En el norte del Golfo San Matías se encuentran huevos en septiembre y octubre. En la parte sur de la plataforma entre 41°30’-47°00’S existe una importante zona de puesta al sudoeste de Península Valdés y litoral del Chubut y otra menor al sur del Golfo San Jorge que se extiende desde noviembre a marzo con picos en diciembre. Los desoves estivales se producen en profundidades de 40 a 60 m en aguas con temperaturas entre l3-l8°C a 10 m. Se ha encontrado un patrón muy similar para la distribución de las larvas tardías y juveniles tempranos. Las áreas senaladas, tienen condiciones oceanográficas muy particulares que brindan a la merluza un hábitat reproductivo favorable por ser áreas de enriquecimiento, disponibilidad de alimento y/o retención. El área de desove invernal está bajo la influencia de frentes de variada naturaleza (talud, térmicos y halinos) y un transporte de Eckman hacia la costa que impide la deriva de larvas hacia las aguas subtropicales. El área de desove estival al sur y sudoeste de Peninsula Valdés está relacionado con frentes de marea. Las áreas de desove más restringidas localizadas en los Golfos San Matías y San Jorge están afectadas por frentes termohalinos. El ajuste que presentan las áreas y épocas de desove con los diferentes procesos hidrográficos, se corresponden con los distintos grupos o stocks de adultos, fortaleciéndose la hipótesis que la merluza presenta un stock múltiple en el Mar Argentino. En la zona de desove intensivo estival, caracterizada por frentes de marea, los huevos y larvas tempranas se encuentran en la zona frontal y estratificada donde las diferencias de temperatura entre la superficie y el fondo oscilan entre 3,8 a 4,0°C. No se ha notado ningún patrón definido en la distribución vertical de huevos en sus diferentes estadios de desarrollo y larvas tempranas. La presencia de larvas y juveniles en distintas épocas y áreas en el Mar Argentino ha permitido aplicar a los procesos de reclutamiento de la merluza la hipótesis de ajuste-desajuste a los ciclos de producción del mar de Cushing (1972) y la de miembro-errante de Sinclair e Iles (1989). Las modalidades reproductivas de los adultos y la distribución temporal y espacial de los primeros estadios permiten afirmar que la merluza es un exitoso desovante ubicuo y una especie eurioica a diversos factores de manera que le permite soportar una intensa presión pesquera.

Abstract:
Hake is the most important demersal species in the Argentine Sea. Its catch in 1996 exceeded 600.000 t and it seemed overfished. The study of the hake early life history was developed in two aspects, reproductive analysis like fecundity and spawning frequency, and early stags (eggs, early larvae, late larvae and juveniles) distribution and abundance. Hake is an indeterminate batch spawner, wich spawns all over the year, with two peak spawning times, one during winter (May-July) in the northern area of its wide distribution (35°-38°S) and the other in summer (October-March) in the north Patagonia coastal waters (43°-45°S). Female relative fecundity between 35-38 cm of total length, expressed as ovocites per ovary free-weight, varied between 520 to 640 and its batch fecundity ranged from 267400 to 432240 ovocites per spawn. The spawning frequency was estimated in 22 days. Considering the presence of post ovullatory follicles in the samples and stage 1 eggs in the plankton, hake spawns all over the day with a matinal peak. Male dominated schools after spawning have finished. The hatching time in reared eggs varied between 5,01 days at 10°C to 3,1 days at 18°C. The analysis of 1470 ichthyoplankton samples obtained in 39 research cruises between 1973 to 1989 allowed to study monthly the main important hake spawning and nursery areas. The eggs were caught in the northern area (34°-4l°30’S) during April (39°-37°S), May - June (37°-35°S) and July August (34°-35°S). Hake spawns in shelf, between 50 to l60 m depth, where temperatures at lO m ranged from 9,4 to l3,3°C. During May, September and November it spawns between 40°-42°S . In the San Matías Gulf northern area hake eggs were caught in September and October. ln the southern platform between 4l°30’ to 47°S it was detected an important spawning area off southwestern Peninsula Valdes and coastal Chubut and another less important in the southern San Jorge Gulf , both during November to March, with peaks in December. In summer hake spawns between 40 to 60 m depth, and temperatures at lO m ranged from l3 to 18°C. The late larvae and early juveniles distribution is consistent with spawning areas. The different spawning areas are related to very particular oceanographic conditions, wich determine an appropiate reproductive habitat associated with retention areas and disponibility of food. The winter spawning area is influenced by different fronts (shelf break and termohaline) and the Ekman’s transport to the coast prevents larval drift to subtropical waters. The summer spawning area is influenced in the south and southwestern Península Valdés by tidal fronts, while in San Matías and San Jorge Gulfs by termohaline ones. The spawning times and areas are related with different hidrographic processes, wich are associated with different adult groups or stocks, supporting the hypothesis that hake presents multiple stocks in the Argentine Sea. In the most important summer spawning area , related with tidal fronts, the eggs and larvae are distributed in frontal and stratified areas where differences of surface and bottom temperatures ranged between 3,8 to 4°C. Eggs in different stages and early larvae were distibuted in the whole water column. The presence of larvae and juveniles in different seasons and areas in the Argentine Sea allowed to associate to the hake recruitment process the match-mismatch production cycles (Cushing, 1972) and member vagrant hypothesis (Sinclair & Iles, l989). Because of the adults reproductive behavior and the early life history stages distribution, the hake may be considered as a succesful spawner, wich supports an important fishery pressure.

Destaillats, Hugo. "Interacciones moleculares y procesos de transferencia de carga en fluidos supercríticos" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En este trabajo se estudiaron propiedades termodinámicas de soluciones diluidas en la cercanía del punto crítico del solvente. La construcción de una celda espectrofotométrica de alta presión permitió determinar la solubilidad de I2 (s) en Xe y SF6 supercríticos. Se estudiaron dos isotermas con Xe, de 300.79 K y de 318.80 K en el ámbito de presiones de 5 a 10 MPa, y tres con SF6, de 323.95 K, 330.00 K y 340.55 K, en el rango de 2 a 10 MPa. En ambos solventes, las isotermas estudiadas corresponden a un intervalo de hasta 25 K por encima de las temperaturas críticas de los solventes puros. En esas condiciones se obtuvieron grandes variaciones de la densidad del sistema a través de pequeños cambios de la presión. Se observó en todos los casos un fuerte incremento de la solubilidad de I2 en la zona crítica. A partir de la variación de la solubilidad con la densidad del sistema, se calcularon el volumen parcial molar a dilución infinita del soluto, V2∞, y la derivada (∂p/∂x)t.v∞. Estas cantidades, lo mismo que el factor de incremento de la solubilidad E, permitieron comparar cualitativamente la magnitud de la interacción soluto-solvente en los sistemas estudiados. La incorporación de un cosolvente aromático (benceno o mesitileno) produjo un incremento moderado de la solubilidad de I2, que pudo ser explicado utilizando una ecuación de estado sencilla y potenciales intermoleculares de Lennard-Jones, sin necesidad de postular la formación de un complejo entre I2 y el areno. No obstante ello, la existencia de una banda de transferencia de carga en la región ultravioleta del espectro permitió cuantificar los pares donor-aceptor formados, y observar la disminución del cociente de equilibrio Kc a medida que se incrementó la densidad del sistema. El mismo comportamiento se observó al calcular Kc por un método alternativo, sin recurrir a la banda de transferencia de carga. No se observó evidencia de la existencia de clustering crítico en estos sistemas.

Abstract:
The thermodynamical properties of dilute solutions near the critical point of the solvent have been the subject of this study. The solubility of I2 (s) in supercritical Xe and SF6 has been measured using a high pressure spectrophotometric cell. Two isotherms have been measured xith Xe, at 300.79 K and 318.70 K over the pressure range from 5 to 10 MPa, and three with SF6, at 323.95 K, 330.00 K y 340.55 K over the pressure range from 2 to 10 MPa. In both solvents, the isotherms were within 25 K over the critical temperatures of the pure solvents. In those conditions, important variations of fluid density were obtained with small changes in pressure. A large increment of the solubility of I2 in the critical region was observed in every case. The partial molar volume of the solute at infinite dilution, V2∞, and the derivative (∂p/∂x)t.v∞ have been calculated from the variation of the solubility with the solvent density. The solute-solvent interaction forces present in the systems have been qualitatively compared from their values, and also from the solubility enhancement factor E. The addition of an aromatic cosolvent (benzene or mesitylene) produced a moderate enhancement of the solubility of I2. This fact was explained simply using an equation of state for mixtures and Lennard-Jones potentials, without any assumption of complex formation. Nevertheless, the concentration of donor-acceptor pairs has been calculated using the charge-transfer band in the ultraviolet region of the spectrum. A decrease in the equilibrium concentrations quotient Kc was observed with increasing solvent density. The same behaviour was observed when Kc was calculated with an alternative method. No evidence of the existence of critical clustering have been observed.

De Siervi, Adriana. "Genética molecular de la porfiria aguda intermitente : primer estudio en la población argentina" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Crespo, Fabián Alberto. "Morfología funcional en el sistema respiratorio de mamíferos marinos" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Comerio, Ricardo M.. "Influencia de la actividad acuosa sobre la producción de citrinina y deoxinivalenol en Trigo" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se estudió la influencia de la actividad de agua (aw) sobre la producción de dos micotoxinas importantes en relación a la contaminación potencial del trigo: el deoxinivalenol producido por Gibberella zeae (Schweinitz) Petch (anamorfo: Fusarium graminearum Schwabe), tipico hongo de campo, y la citrinina producida por el hongo xerófilo Penicillium citrinum Thom, mejor adaptado a las condiciones del almacenamiento. Ensayos preliminares realizados a fin de establecer el tratamiento más efectivo para reducir la micota de los cariopses de trigo con la menor alteración posible de sus caracteristicas naturales, determinaron que la desinfección del sustrato se realizara a una dosis de 6 kGy (600 krad). Este tratamiento arrojó el menor recuento fúngico manteniendo una elevada viabilidad de los granos. El trigo desinfectado y acondicionado a diferentes niveles de aw (0,985; 0,945; 0,925 y 0,900), se inoculó con una cepa de Gibberella zeae (Schweinitz) Petch BAFC 210 productora de deoxinivalenol e incubó a 30°C por períodos de aproximadamente dos meses. La influencia de la aw se estudió a través de parámetros cinéticos obtenidos a partir de las curvas de acumulación de la toxina a los diferentes niveles de aw. La mayor acumulación de deoxinivalenol (1000 μg/kg) se detectó a aw 0,980. Respecto de las aw menores (0,945 y 0,925) el máximo nivel de deoxinivalenol detectado fue 80 μg/kg. No fue detectado deoxinivalenol a aw 0,900. Se estudió la influencia de la aw sobre el crecimiento de Penicillium citrinum Thom en trigo. El trigo acondicionado a distintos niveles de aw fue inoculado con la cepa de P. citrimlm Thom BAFC 729 productora de citrinina e incubado a 30°C. El desarrollo de P. citrinum Thom en trigo fue examinado durante 17 días en el caso de las actividades acuosas mayores (0,885; 0,825; 0,810 y 0,800), y durante diez meses en el caso de las actividades acuosas menores (0,775; 0,760). El crecimiento fungico fue medido semicuantitativamente a través de la observación microscópica de los granos. P. citrimlm Thom fue capaz de desarrollarse a aw 0,775 inclusive. La influencia de la awsobre la producción de citrinina en trigo se estudió en el rango de aw 0,800 - 0,885. El trigo acondicionado a distintos niveles de awe inoculado con la cepa BAFC 729 fue incubado a 30°C durante dos meses aproximadamente. A partir de las curvas de acumulación de citrinina se obtuvieron parámetros cinéticos. A medida que decreció la aw, la citrinina fue detectada más tardíamente y los máximos de acumulación decrecieron notablemente (20,2 mg/kg a aw 0,885; 606 μg/kg a aw 0,825 y 57 μg/kg a aw 0,810). No fue detectada citrinina en el sustrato de aw 0,800. Se presenta un método para la determinación de citrinina en trigo con adecuados atributos de desempeño analítico (recuperación 79%; RSDr variable entre 5,1% y 18,1%, según el nivel de contaminación en el rango 10 μg/kg - 200 μg/kg; límite de detección 10 μg/kg).

Abstract:
The objective of present work was to study the influence of water activity (aw) on kinetics of deoxynivalenol and citrinin production in wheat. The substrate was desinfected by gamma irradiation at 6 kGy (600 krad). Preliminary studies shown that this treatment yields grains with the lowest level of contaminant mycota and high viability. The influence of aw on deoxynivalenol accumulation was studied by inoculating wheat conditioned at different aw levels with a toxigenic Gibberella zeae (Schweinitz) Petch BAFC 210 strain, and incubating at 30°C for about two months. Deoxynivalenol accumulation curves were analyzed to obtain kinetic parameters. At aw 0.980 was detected the highest accumulation of deoxynivalenol (1000 μg/kg). At the lower levels of aw 0.945 and 0.925 the maximum quantity of toxin accumulated was 80 μg/kg. Deoxynivalenol was not detected in the sustrate at aw 0.900. The influence of aw on Penicillium citrinum Thom growth in wheat was studied. Wheat conditioned at different levels of aw was inoculated with a citrinin producer strain of P. citrinum Thom BAFC 729, and incubated at 30°C. The experiments were carried out for l7 days at higher aw levels (0.885, 0.825, 0.810 and 0.800) and for ten months at lower ones (0.775, 0.760). Fungal growth was assesed by microscopic examination. P. citrimlm Thom grew down to aw 0.775. The influence of aw on the citrinin accumulation in wheat was studied. Wheat conditioned at different levels of aw and inoculated with the strain of P. citrinum Thom mentioned above, was incubated at 30°C for about two months. Citrinin accumulation curves were analyzed to obtain kinetic parameters. As awdecresed the citrinin was detected later and the maximum accumulation decresed markedly (20.2 mg/kg at aw0.885, 606 pg/kg at aw 0.825 and 57 pg/kg at aw0.810). Citrinin was not detected in the substrate at aw 0.800. An improved method for the detection of citrinin in wheat was studied. Analytical features of the proposed method were suitable for detection of this toxin in wheat (recovery 79%; RSDr between 5,1% and 18,1%, in the range 10 μg/kg - 200 μg/kg; detection limit lO μg/kg).

Chianelli, Mónica Silvia. "Sistemas de transporte de aminoácidos neutros en Saccharomyces cerevisiae, cepas silvestres y mutantes transporte-defectivas" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Evidencias cinéticas y genéticas muestran que en Saccharomyces cerevisiae, la incorporación de los aminoácidos de cadena ramificada L-leucina, L-isoleucina y L-valina es mediada por al menos tres sistemas funcionalmente distintos: la permeasa general de aminoácidos GAP1 (inactiva en presencia de iones amonio) y dos sistemas de transporte más específicos S1 y S2, previamente descriptos para el transporte de L-Leucina. En celulas silvestres cultivadas en medio conteniendo L-prolina, cada uno de los aminoácidos de cadena ramificada exhibe un solo sistema de transporte de alta afinidad y muy alta capacidad. Una mutante gap1 muestra dos sistemas de transporte para Leucina con valores de KT y Jmáx similares a aquellos descriptos previamente como S1 y S2, y un solo sistema de transporte de baja afinidad- alta capacidad para isoleucina o valina. Una cepa mutante defectiva en los sistemas S1 y S2 que transportan Leucina fue aislada a partir de la parental ya deficiente en la permeasa general de amingácidos, GAP1. La mutante fue seleccionada como una cepa espontánea resistente a triflúorleucina (TFL). Esta mutante fue cruzada con una cepa testigo gap1, y el análisis de tetradas indicó que la resistencia completa a TFL dependió de la presencia de al menos dos genes mutantes no ligados, denominados let (leucine transport). La mutación let1 inactiva completamente el sistema de transporte de Leucina de alta afinidad-baja capacidad definido cinéticamente como S1. Aunque la mutación let2 causó una marcada disminución en la Jmax del sistema S2 de baja afinidad, el transporte residual de Leucina en la mutante gap1let1let2 tuvo el mismo KT que el de la cepa parental gap1LET1LET2. Resultados similares se obtuvieron para los únicos sistemas de transporte de isoleucina o valina. La mutante gap1let1let2 exhibió una marcada disminución en el crecimiento sobre medio minimo conteniendo Leucina, isoleucina o valina como únicas fuentes de nitrógeno. Además, la asimilación de metionina, fenilalanina, serina, treonina y norleucina estuvo impedida severamente, mientras los aminoácidos básicos y ácidos sostuvieron un crecimiento normal. Esto indica que al menos una de las permeasas de Leucina tiene una considerablemente amplia pero aún limitada especificidad. La reversión del gen gap1 restauró el transporte de los aminoácidos de cadena ramificada. La cepa revertante fue sensible a TFL cuando creció en prolina, pero resistente cuando amonio fue la fuente de nitrógeno. La segregante (sensible a TFL) gap1let2 exhibió para cada uno de los aminoácidos de cadena ramificada, solamente un sistema de transporte de alta afinidad-baja capacidad. Esta cepa mostró parámetros cinéticos para el transporte de Leucina muy similares a aquellos caracterizados para el sistema S1 en la cepa gap1. Cada uno de los sistemas de transporte de alta afinidad de los aminoácidos de cadena ramificada es inhibido competitivamente por los otros dos aminoácidos de cadena ramificada. Además, metionina, norleucina y TFL actúan como inhibidores competitivos del transporte de Leucina por el sistema de alta afinidad. En la mutante gap1let2 la deficiencia en la actividad de S2 resulta en la perdida de la capacidad de crecer significativamente en medios de cultivo conteniendo treonina, serina y norleucina como únicas fuentes de nitrógeno y un crecimiento reducido sobre los aminoácidos de cadena ramificada individuales, metionina y fenilalanina. Por lo tanto, el gen LET1 codifica la permeasa de L-aminoácidos de cadena ramificada de alta afinidad-baja capacidad S1, y posiblemente transporte también metionina y -fenilalanina. La permeasa LET1 (St) es primariamente responsable de la acumulación intracelular de TFL a niveles tóxicos, porque este sistema no es detectable en la mutante resistente a TFL gap1let1let2. En contraste, la segregante gap1/eN exhibió para cada uno de los aminoácidos de cadena ramificada solamente un sistema de transporte de baja afinidad- alta capacidad. Esta cepa mostró para el transporte de Leucina un valor de KT muy similar a aquel caracterizado para el sistema S2 en la cepa gap1 aunque con un valor de Jmax mas alto. Un único sistema de transporte de baja afinidad -alta capacidad para isoleucina o valina mostró similares características. Esta cepa crece normalmente como la cepa gap1 sobre todas las fuentes de nitrógeno ensayadas. Isoleucina, valina, metionina, alanina y norleucina son inhibidores competitivos del transporte de Leucina por el sistema S2. Los valores de Ki están en el orden de los valores de KT determinados para el transporte de Leucina, isoleucina y valina. DL-TFL es un inhibidor competitivo del sistema S2 pero el valor Kies más grande que el valor de KTpara el transporte de Leucina. Por Io tanto. el sistema S2 de baja afinidad- alta capacidad tiene una relativamente amplia especificidad. transportando no sólo los aminoácidos de cadena ramificada sino también metionina, alanina, serina. treonina y norleucina. Estos resultados sugieren que el gen LET2 codifica un componente asociado a la óptima actividad del sistema S2. La regulación de la actividad de transporte por la fuente de nitrógeno presente en el medio de cultivo indica que la permeasa LET1 (S1) no está sujeta a la represión catabólica por nitrógeno ni a la inactivación catabólica por nitrógeno (NCI). En contraste, en la cepa gap1 la actividad de transporte de L-leucina por S2 es regulada negativamente por los iones amonio. Más aún, en esta condición, el transporte de L-leucina por el sistema S2 en las cepas gap1 y gap1let1let2 exhibió parámetros Cineticos similares. En la segregante gap1/en el comportamiento regulatorio fue diferente. Las activdades de transporte de los aminoácidos de cadena ramificada por S2 fueron más altas que aquellas obtenidas en las células mutantes gap1 o gap1let1let2 crecidas en los medios de cultivo conteniendo L-prolina o iones amonio como únicas fuentes de nitrógeno. Estos resultados sugieren una tercera mutación además de let1 y let2 que podría interferir con la incorporación de los aminoácidos de cadena ramificada o de una interacción entre los productos de los genes LET1 y LET2.

Abstract:
Kinetic and genetic evidence show that the uptake of L-branched-chain amino acids into Saccharomyces cerevisiae is mediated by at least three functionally distinct systems: the general amino acid permease GAP1 (inactive in the presence of ammonium ions), and two transport systems more specific S1 and 82, previously described for L-leucine transport. Wild type cells grown in medium containing L-proline as nitrogen source, exhibit a single transport system for each of the L-branched-chain amino acids of high-affinity and very high-capacity A gap1 mutant shows two transport systems for leucine wrth KTand Jma, values Similar to those previously described as S1 and 82, and a single low affinity-high capacity transport system for isoleucine or valine. A strain mutant defective in Systems S1 and S2 transporting L-leucine was isolated from the parental strain already deficient in the general amigo acid permease, GAP1. The mutant was selected as a spontaneous, trifluoroleucine-resistant (TFL) strain. This mutant was crossed with gap1 tester strain. and tetrad analysis indicated that full resistance to TFL was dependent upon the presence of at least two unlinked mutant genes, denominated let (leucine transport). The let1 mutation completely inactivates the high affinity-low capacity leucine transport system kinetically defined as S1. Although the let2 mutation caused a marked decrease in the Jmax of the low affinity system S2, residual transport in the gap1let1let2 mutant had the same KT as in the gap1LET1LET2 parental strain. Similar results were obtained for the single transport system of L-isoleucine or L-valine. The gap1let1let2 mutant exhibited a marked decrease in growth on minimal medium containing leucine, isoleucine or valine as a sole nitrogen source. Moreover, assimilation of methionine, phenylalanine, serine, threonine and norleucine, was severely impaired, whereas basic and acidic amino acids supported normal growth. This indicates that at least one of leucine permeases has a fairly broad, but yet limited specificity. Reversion of the gap1 gene restored branched-chain amino acids transport. The revertant strain was sensitive to TFL when grown on proline but resistant to TFL when ammonia was the nitrogen source. The gap1let2 (TFL-sensitive) segregant exhibited for each of the L-branched-chain amino acids only one transport system of high affinity-low capacity. This strain showed transport kinetic parameters for L-Leucine very similar to those characterized for system S1 in a gap1 strain. Each of the high-affinity transport systems for the L-branched-chain amino acids is inhibited competitively by the other two branched chain amino acids. ln addition, methionine, norleucine and trifluoroleucine act as competitive inhibitors of the high affinity transport system of leucine. In mutant gap1let2 the deficiency in L-leucine S2 activity results, in the loss of its ability to grow significantly in culture media containing threonine, serine or norleucine as the sole nitrogen source and in a decreased growth on individual branched chain amino acids, methionine and phenylalanine. Therefore, the gene LET1 encodes for the high affinity-low capacity L-branched-chain amino acids permease S1 and very likely for methionine and phenylalanine as well. The LET1 permease (S1) is primarily responsible for the intracellular accumulation of TFL up to toxic levels, because this system is not detectable in the TFL-resistant mutant gap1let1let2. In contrast, the gap1let1 segregant exhibited only one system transport of low affinity-high capacity for each of the Lbranched-chain amino acids. This strain, showed a transport KT value for leucine very similar to that characterized for system S2 in a gap1 strain although with the higher Jmax value. A single low affinity-high capacity transport system for isoleucine or valine shown similar characteristics. This strain, alike gap1 strain grows normally on all nitrogen sources assayed. lsoleucine, valine, methionine, alanine and norleucine are competitive inhibitors of the Ieucrne transport system S2. The Ki values are of the same order as the KT values determined for leucine, isoleucine and valine transport. TFL is a competitive inhibitor of the S2 system but its Ki value is larger than the KT value for -Leucine transport. Therefore, the low affinity-high capacity system S2 has a relatively broad specificity, transporting not only branched chain aminoacids but also methionine, alanine, serine, threonine and norleucine. These results suggest that LET2 encodes for a component which is associated to optimum activity of transport system S2. Regulation of transport activity by the nitrogen source indicates that S1 permease is not subject to nitrogen catabolite repression (NCR) nor to nitrogen catabolite inactivation (NCI). In gap1 strain the leucine transport S2 activity is negatively regulated by ammonium ions. Moreover, under this condition leucine transport by S2 system in gap1 and gap1/et1/e12 strains, exhibited similar kinetic parameters. In the segregant gap1let1 the regulatory behaviour was different. The branched-chain amino acids transport activities by S2 were higher that those obtained in gap1 or gap1let1/et2 mutant cells grown in culture media containing L-proline or ammonium ions as sole nitrogen source. These results suggest the existance of a third mutation, besides let1 and let2 which could interfere with the L-branched chain amino acids uptake or of an interaction between the products of the genes LET1 and LET2.

Cebral, Elisa. "Citotoxicidad del consumo crónico de alcohol sobre las gametas, la fecundación y embriogénesis preimplantatoria murina" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se ha descripto que la ingesta crónica y/o aguda de altas concentraciones de etanol durante la gestación produce el síndrome de alcoholismo fetal (FAS). El objetivo principal de este estudio fue profundizar los conocimientos sobre los efectos deletéreos del consumo preconcepcional de etanol y sus consecuencias sobre el desarrollo preimplantativo del embrión. Machos adultos y hembras prepúberes de ratón Fl de (C57 x CBA), ingirieron etanol al 10, 5 y 2.5% en el agua de bebida por 30 días. A los 27 días del tratamiento se indujo la ovulación. Se estudio la calidad de las gametas, la tasa de fecundación y el grado de desarrollo preimplantativo alcanzado por embriones in vitro e in vivo (hasta dia 4), y adicionalmente la incidencia del consumo de etanol en la maduración sexual de las hembras. La administración crónica de etanol al 10 y 5% produjo retraso en la maduración folicular. Como consecuencia, los ovocitos ovulados presentaron altos índices de activación espontánea, partenogenética, y la capacidad de sintesis de PGE por el complejo cúmulo-ovocitario fue reducida con el consumo del 10 y aumentada con el consumo del 5% de etanol. La tasa de fecundación in vitro e in vivo fue reducida cuando las hembras fueron tratadas con ambas dosis de etanol. Los ovocitos intactos de las hembras tratadas no fueron penetrados por los espermatozoides, y los ovocitos haploides oviductales permanecieron sin ser fecundados. El etanol afectó tanto la maduración del ovocito, la regulación y control de su calidad por las células del cúmulo, y también posiblemente la membrana plasmática ovocitaria y otros componentes celulares, lo que resultó en la pérdida de fecundabílidad. El consumo crónico de etanol al lO y 5%, en la fase preconcepcional de las hembras, produjo, tanto en el desarrollo in vitro como in vivo, tasa embrionaria diaria reducida, debido al crecimiento retrasado, al arresto embrionario en estadios de mórulas y en blastocistos tempranos, en los días 2, 3 y 4 (in vivo) y 5 de desarrollo in vitro, con ambas dosis de etanol. Asimismo, fue evidente la alta tasa de fragmentación embrionaria temprana, desde día 2 con etanol al 10%, y menor y más tardía en las hembras tratadas con etanol al 5%. El consumo de etanol al 10% produjo aumento de embriones anormales. El impacto del alcohol en el desarrollo embrionario fue menor con la dosis del 5%, debido a retraso y pérdida embrionaria de reducida intensidad. Se puede concluir que la dosis mínima perjudicial para la gameta femenina y el desarrollo ulterior del embrión preimplantativo, administrada cronicamente a hembras prepúberes, fue el etanol al 5%. Los efectos del consumo crónico de etanol al 5% podrian deberse en parte a las acciones "subcrónicas" del etanol en los días periovulatorios.

Abstract:
It was described that the chronic or acute consumption of high doses of ethanol during gestation produces the fetal alcohol syndrome (FAS). The main objetive of this study was to progress in the aknowledgement about the deleterious effects of preconceptional consumption of ethanol and the consequences on the preimplantation embryo development. Adult male and prepubertal female mice (C57 x CBA) F1), were treated with 10,5 and 2.5 % w/v of ethanol in drinking water for 30 days. On day 27 of the treatment, females were induce to superovulate. The quality of the gametes, the fertilization rates, the stages of preimplantation development reached by the embryos in vitro and in vivo (up to day 4) were studied, and the incidence of the ethanol ingestion on the sexual maturation in the female was determined. The chronic administration of 10 and 5% of ethanol produced delayed follicular maturation. In consequence, the ovulated oocytes showed increased levels of spontaneous parthenogenetic activation, and the capacity of PGE synthesis by cumulus-oocyte complex (COC) was reduced by the 10% ethanol intake and increased by the 5% ethanol. The in vitro and in vivo fertilization rate was only reduced when the females were treated with both doses of ethanol. The intact oocytes from the treated females were not penetrated by spermatozoa, and the increased oviductal haploid oocytes stayed unfertilized. The ethanol affected the maturation of the oocyte, the regulation and the control of the oocyte quality by the cumulus cells, also probably the oolema and others celular components, which resulted in fertility loss. The chronic consumption of 10 and 5% of ethanol by females in the preconceptional phase produced, in both in vitro and in vivo development, reduced daily rates of embryos, due to delayed growth, to embryonary arrest in morulae and early blastocyst stages, in days 2, 3 and 4 (in vivo) and 5 (in vitro) of the development, with both doses of ethanol. Also, it was evident high early embryo fragmentation rates, from day 2 with ethanol 10%, and lower and later in females treated with 5% of ethanol. The ingestion of 10% of ethanol produced increase of abnormal embryos. The ethanol impact in the embryo development was lower with the 5%, due to the reduced intensity of delayed growth and embryo loss. It was concluded that the lower deletereous dose of ethanol, administered chronically to prepubertal females, that affects the gamete an the ulterior development of preimplantation embryos, was the 5% of ethanol. The effects of the chronic alcohol consumption could due to, in part, the "subchronic" actions of the ethanol on the periovulatory days.

Caselli, Alberto Tomás. "Estratigrafía y sedimentología de las formaciones Patquía (Pérmico) y Talampaya (Triásico Inferior), en las Sierras Pampeanas Noroccidentales y Precordillera Central (Provincias de La Rioja y San Juan)" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Mediante el levantamiento de doce perfiles de detalle realizados en las sierras de Maz, Famatina, Sañogasta, Valle Fértil, Cerro Bola y Precordillera oriental (Huaco) se han estudiado las características sedimentológicas y estratigráficas de las Formaciones Patquía (Pérmico) y Talampaya (Triásico inferior), como también se mejoró el conocimiento acerca de la distribución regional de ambas unidades, obteniendo precisiones sobre sus relaciones estratigráficas. Estas columnas, inicialmente divididas en unidades de sedimentación o “facies”, fueron estudiadas mediante el análisis de los cuerpos tridimensionales en los que se organizan (elementos arquitecturales), analizando principalmente la distribución espacial de las litofacies. La Formación Patquía constituye un conjunto de bancos rojos continentales, sedimentados en un ambiente sujeto a una progresiva aridización, en los que se han reconocido seis facies sedimentarias. Dentro de las tres que se ubican en la base de la unidad, la de grano más grueso está compuesta por “aglomerados, conglomerados y areniscas groseramente estratificados” (facies Pa), correspondiente a depósitos de limitada extensión regional de abanicos aluviales proximales a distales (Cerro Noqués). Por ono lado, la facies de “areniscas con intercalaciones conglomerádicas” (facies Pb), también de carácter local (Cerro Guandacol), producto de sistemas fluviales entrelazados con importante participación de planicies arenosas mantiformes, posiblemente corresponde a depósitos distales de abanicos aluviales provenientes del noroeste. Sin dudas, la más extendida regionalrnente es la facies de “pelitas y areniscas rojas con intercalaciones lentiformes de conglomerados y sabulitas rosadas” (facies Pc), la cual muestra importantes depósitos finos de llanura de inundación, que incluyen cuerpos de agua someros, interpretados como sistemas anastomosados de climas semiáridos a áridos. Otra de las facies es la de “areniscas pelitas finamente estratificadas” (facies Pd), la cual se presenta recurrentemente en los perfiles analizados. Sólo la recurrencia basal incluye abundantes piroclastitas de caída, correspondiendo estas sedimentitas a depositos de cuerpos de agua someros. Potentes sucesiones de “areniscas con estratificación entrecruzada de gran escala” (facies Pe) de origen eólico, están ampliamente distribuidas en el área analizada y muestra además doble recurrencia en el extremo sur de Sierra de Maz. Por último, la facies de “pelitas con intercalaciones lenticulares de areniscas” (facies Pf), muestra importante participación de planicies de inundación con cuerpos de agua someros, en muchos casos con precipitación de evaporitas, corresponde a sistemas fluviales anastomosados áridos. En lo que respecta a la Formación Talampaya, también se encuentra constituida por extensas sucesiones de bancos rojos continentales, depositadas en un ambiente árido, en los que se reconocieron un total de diez facies sedimentarias. La de “areniscas y pelitas con intercalaciones de tobas blancas” (facies Ta), aflorante en el extremo sur de los Nevados del Famatina, comprende un conjunto de bancos arenosos tabulares de arreglo grano y estratodecreciente. Estas rocas resultan de flujos mantiformes, interpretados como sistemas efímeros medios a distales con importante participación de depósitos de lluvias de cenizas. La facies de “conglomerados, areniscas y pelitas rojas con intercalaciones tobáceas” (facies Tj) aflora en Sierra de Maz y muestra gran similitud con la anterior a diferencia de presentar cuerpos de agua someros, seguramente producto de endicamientos por el gran aporte de lluvias de cenizas o tal vez el derrame de lavas mesosilícicas y básicas presentes en las cercanías. Las dos facies anteriormente descriptas son seguidas por “areniscas y pelitas finamente estratificadas” con abundantes moldes de grietas de desecación (facies Te), correspondiente a depósitos de barreal. Estos son cubiertos por facies de “areniscas en bancos tabulares con intercalaciones pelíticas” (facies Td), con fuerte carácter grano y estratocreciente y moldes de grietas de desecación, que conforman un conjunto de lóbulos efímeros distales que progradan sobre la facies de barreal. Regularmente estos depósitos son seguidos por facies de “areniscas medianas con conglomerados intraformacionales basales y escasas pelitas” (facies Tb) constituyendo grandes espesores de depósitos de sistemas fluviales efímeros proximales confinados y no confinados. La facies de “areniscas y areniscas conglomerádicas rosadas” (facies Tc), sin dudas la más extendida regionalmente y que traslapa a todas las facies apoyándose incluso sobre el basamento sedimentario (Grupo Paganzo), es interpretada como depósitos de sistemas fluviales “entrelazados” efímeros, no confinados. Localmente (Agua de la Peña), la facies Tc está estrechamente vinculada con depósitos de “conglomerados y areniscas conglomerádicas” (facies Th) que corresponden a ríos entrelazados efímeros confinados. También en forma conspicua y en la misma localidad anterior, se intercala en Tc facies de “areniscas con estratificación entrecruzada de gran porte” (facies Ti) de indudable origen eólico. Finalmente, depósitos de abanicos aluviales proximales a distales ha sido convenientemente divididas por su génesis en dos facies: por un lado la de “conglomerados y brechas con clastos de vulcanitas básicas e intercalaciones de derrames lávicos” (facies Tf) cuyo origen se debería a la diferencia de relieve generada principalmente por el vulcanismo (Sierra de Maz); y por otro, la de “aglomerados, conglomerados, areniscas y pelitas” (facies Tg) apoyada directamente sobre el basamento cristalino (La Torre). A partir del estudio microscópico de secciones delgadas de areniscas de siete de los perfiles levantados para esta Tesis (Guandacol, Cerro Bola, Cerro Noqués, Quebrada Las Cuchillas, La Torre, Agua de la Peña y Huaco), se definieron siete petrofacies, tres correspondientes a la Formación Patquía y cuatro a la Formación Talampaya. Las petrofacies correspondientes a la Formación Patquía, con su composición (Q,F,L), son: litomíxtica (16,11,73), cuarzoféldica (63,36,1) y cuarzofeldlítica (64,30,6), mientras que las reconocidas para la Formación Talampaya son: litovolcánica (15,23,62), feldcuarcítica (43,55,2), cuarzofeldlítica (46,35,19) y cuarzolitoféldica (52,23,25). Al analizar la evolución de estas con el estudio de facies y paleocorrientes se pudieron establecer “discordancias petrográficas” que ayudaron, como una herramienta más, al estudio secuencial de las sucesiones en cuestión, como también a detectar cambios de procedencia por inversión de pendientes. Es de destacar que para dicha interpretación fue necesaria la subdivisión de los fragmentos líticos volcánicos presentes en intra y extracuencales como también en paleo y neovolcánicos. En base al análisis de facies y petrofacies efectuado se reconocieron dos Unidades Tectosedimentarias (UTS Patquía y UTS Talampaya) limitadas por superficies de discontinuidad de primer y segundo orden, ambas UTS han sido divididas en Unidades Eventosedimentarias (UES) separadas por superficies de tercer orden. A partir de los datos obtenidos se propone para la región de estudio un modelo de evolución paleoclimática durante el Pérmico y Triásico inferior. Durante la depositación de la Formación Patquía se produce un importante y definitivo cambio en las características del ambiente, pasando rápidamente de condiciones húmedas y reductoras durante buena parte de la sedimentación carbonífera, a un ambiente netamente oxidante y más seco. Estas condiciones se mantuvieron hasta el final del ciclo sedimentario pérmico observándose dos pulsos de máxima aridez con la formación de importantes campos eólicos. Durante la sedimentación de la Formación Talampaya continuaron las condiciones áridas, reflejadas principalmente en los sistemas fluviales de tipo efímero y los depósitos de barreales, ambos con importantes rasgos de exposición subaérea. En lo referente a la constitución paleogeográfica, y para la época en que se depositó la UTS Patquía, la región estudiada presentaba un paisaje maduro, caracterizado por un muy bajo gradiente topográfico regional, con pequeño coeficiente de sedimentación (UES P1) y que progresó hacia un importante “mar de arena” (UES P2). En la región de Guandacol, se propone la existencia de un depocentro relativamente pequeño, asociado al lineamiento de Valle Fértil, producto de reactivaciones de los depocentros ya existentes en las primeras etapas de la apertura de la Cuenca Paganzo. Con posterioridad al establecimiento de las eolianitas antes mencionadas se produce un lento basculamiento de la cuenca, con el establecimiento de lagos someros y posterior progradación de sistemas fluviales desde el oeste-noroeste (UES P3) que culminan con otro clímax árido y establecimiento de un nuevo “mar de arena” eólico (UES P4). Respecto a la Formación Talampaya, la relajación extensional que se generó en el oeste argentino, formó en el área de estudio un depocentro relativamente pequeño, probablemente del tipo hemigraben, limitado hacia el oeste por el lineamiento de Valle Fértil, dando lugar a la depositación de extendidos lagos efímeros (barreales) en el sector sudeste de Sierra de Maz - sur de Sierra del Famatina (UES T1). Sobre estos depósitos, se produce la progradación de sistemas fluviales efímeros arenosos (UBS T2), los que luego son cubiertos por sistemas fluviales entrelazados eflmeros arenosos-conglomerádicos, que cubren y sobrepasan ampliamente los límites de cuenca (UES T3). Finalmente, a partir de la información sedimentológica-secuencial obtenida se propone un modelo tectosedirnentario de evolución del relleno para cada una de las unidades analizadas. Los bancos rojos correspondientes a la UTS Patquía, son interpretados como la culminación de la etapa de subsidencia de la Cuenca Paganzo e inversión de la paleopendiente por el crecimiento de la faja volcánica en la región occidental de la cuenca. Por otro lado, la UTS Talampaya, corresponde a un estilo de acumulación que se propone podría atribuirse a la presencia de un campo de esfuerzos transtensivos-transpresivos del tipo de “disipación” (Releasing band), con altos estructurales transpresivos en la región sur (Sierra de Valle Fértil) y transtensivos, con derrames de mantos traquibasálticos, en la región norte (Sierra de Maz-Cerro Bola).

Abstract:
The sedimentological and stratigraphical characteristics of Patquía (Permian) and Talampaya (Lower Triassic) formations are described and a depositional model for each lithostratigraphic unit is proposed in the present Doctoral Thesis. The Patquía Formation is mainly composed of sandstones, mudstones and conglomerates with intercalations of thin layers of gypsum and cherts. The unit has been divided in six sedimentary facies. The marginal basin deposits are characterized by crudely stratified aglomerates and conglomerates (Pa facies), interpreted here as alluvial fan deposits, and a sandstone and conglomerate sequence (Pb facies) deposited by sandy braided fluvial systems. These margin sequences are related basinward into the more extended Pc facies, characterized by mudstones and sandstones interbedded with lenticular conglomerates and very coarse sandstone. The Pc facies corresponds to anastomosing fluvial system deposits. Asociated with the later is the Pd facies, composed of finely suatified sandstones and mudstones deposited in small and shallow water bodies. The fluvial sedimentation was interrumped overall the basin by eolian sandstones (Pe facies) represented by dune, interdune and extradune deposits. In one locality, probably related to the margin basin, this Pe facies is followed by the installation of a new shallow lacustrine deposit (Pd facies), which is covered to the top by alternating mudstones and sandstones related to anastomosing fluvial system developed under arid-semiarid climatic conditions (Pf facies). The Talampaya Formation comprises mainly a sucession of sandstones and mudstones related to fluvial sytems. The unit has been divided in ten sedimentary facies. Alluvial fans deposits, related to the basin margin, are represented by Tg and Tf facies. The latter, include basaltic and traquibasaltic lava flows. Basinward, ephemeral fluvial systems (Tj and Ta facies) are deloped. The Tj and Ta facies correspond to the proximal and distal ephemeral deposits, respectively. Upwards, these facies turn gradually to a playa lake sequence (Te facies), characterized by finely laminated mudstones and sandstones. The middle part of the Talampaya Formation is dominated by progradating coarsening upward sequences of ephemeral distal (Td facies) to proximal (Tb facies) deposits. In the whole basin, the top of the Talampaya Formation shows cross-bedded pebbly sandstones (Tc facies), deposited by ephemeral sandy braided rivers. In one locality, Tc facies begins with conglomerates and pebbly sandstones (Th facies) that correspond to braided river deposits. In the same locality, the sequence is finished by the eolian sandstones of the Ti facies. Petrographic analysis of both lithostratigraphic units allowed to recognized seven petrofacies. Upwards, the compositional evolution of the detritical modes, interpreted together with the facies and paleocurrents analysis, allowed to identify different petrosomes related to changes in the provenance and thus suggesting variations in the slope of the basin. Finally, a stratigraphic sequence analysis, resulted in the recognition of two major tecto-sedimentary units, Patquía and Talampaya UTS. The red beds of the Patquía UTS are interpreted as the end of the subsidence stage of the Paganzo Basin during the end of the Paleozoic. On the other hand, Talampaya UTS could be atributed to the filling under a realeasing-bend basin conditions, possibly during the Early Triassic.

Carril, Andrea F.. "Estudios de sensibilidad climática en el hemisferio sur de acuerdo al modelo de circulación general LMDZ/CIMA" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Este trabajo consiste, fundamentalmente, en la adaptación de un modelo de circulación general (el LMDZ/CIMA versión CIMA), para el estudio de la climatología del Hemisferio Sur. A fin de optimizar los campos medios simulados por el modelo sobre el Hemisferio Sur, se integraron tres experimentos. La experiencia "suave" difiere del "control" en el valor impuesto sobre el coeficiente de intercambio turbulento (Cd); mientras que la experiencia "zoom" es una sensibilidad a la distribución de los puntos del reticulado en la dirección meridional. De hecho, la experiencia de control indicó que la simulación de los campos medios básicos del Hemisferio Sur con el modelo en su versión original, no es del todo apropiada. Sin embargo, el ajuste del coeficiente Cd efectuado en el experimento "suave" mejoró la representación de la vaguada circumpolar, incrementando significativamente la intensidad de los ciclones marinos de latitudes medias, aunque poco modificó la estructura del jet invernal. La definición de una malla con zoom meridional, mejoró significativamente la representación de la presión a nivel del mar y del jet austral, dada la particular sensibilidad de las variables dinámicas a la resolución horizontal. Sin embargo, las falencias en la representación de las variables físicas (como la precipitación) parecen más dependientes de las parametrizaciones físicas, que de la resolución en sí misma. En un posterior esfuerzo por profundizar la validación del modelo en su versión con zoom, se observó que la energía cinética total es subestimada, principalmente debido a la inadecuada representación las perturbaciones transientes. La baja resolución del modelo es un factor determinante para la simulación de este campo. No obstante, el modelo reprodujo aceptablemente el flujo medio zonal de calor y de cantidad de movimiento por las perturbaciones transientes. En líneas generales se observó que la simulación de la baroclinicidad del flujo medio aproxima adecuadamente a la baroclinicidad del campo observado. No obstante, la energía cinética de las perturbaciones transientes es pobre, debido a la inadecuada representación del término de conversión baroclínica. Sin embargo, el modelo es capaz de reproducir el efecto de las perturbaciones sobre el flujo medio: las perturbaciones tienden a acelerar al flujo medio zonal al sur de 30º S. Asimismo, se validó la representación de la componente asimétrica del flujo medio, la cual presenta la estructura fuertemente barotrópica de las ondas observadas, aunque falla en modelar la propagación vertical de las mismas, debido a la baja resolución vertical del modelo (solo posee dos niveles estratosféricos). Con el fin de estudiar el alcance de los resultados obtenidos a través de la técnica de la inclusión del zoom meridional, se realizaron una serie de experimentos de sensibilidad a la resolución horizontal (baja, media y alta resolución). Los mismos fueron llevados a cabo con el modelo en su versión con zoom y sin zoom. De esta intercomparación surgió que: i) la introducción de un zoom en la región de los máximos gradientes de circulación no genera perturbaciones numéricas espúreas, sino que ii) favorece la representación de los campos simulados a punto tal que, un experimento con zoom en una resolución horizontal dada, produce campos comparables a los provenientes de una experiencia con malla regular pero con una resolución horizontal 50% mayor (sin incrementar los costos computacionales del experimento). Posteriormente, con el objeto de profundizar la validación del MCG LMDZ/CIMA, en cuanto a la representación de posibles estados climáticos futuros, se trabajó en la intercomparación de sus campos, con algunos campos medios provenientes de la integración de otros modelos. Se concluyó que el modelo LMDZ/CIMA es capaz de simular los procesos de interacción relevantes al estudio del cambio climático. Finalmente, se diseñó un experimento de sensibilidad forzado por un gradiente meridional anómalo en las temperaturas de la superficie del mar extratropical. Se observó que la circulación atmosférica responde al forzante anómalo impuesto en latitudes extratropicales, con el desplazamiento del jet polar hacia el norte. Particularmente se advierte que, el debilitamiento del transporte de cantidad de movimiento en latitudes extratropicales, sería el responsable del debilitamiento de la rama subpolar del jet y del fortalecimiento la rama subtropical. Cabe señalar que los resultados de este experimento de sensibilidad climática son coincidentes con estudios previos de remoción del hielo marino en los alrededores del continente antártico; aunque distintos a los resultados de otros autores que realizaron experimentos de calentamiento global. Estos resultados indicarían que los efectos derivados del incremento del vapor de agua en la atmósfera y de la intensificación del gradiente meridional de temperatura en altura, podrían ser de mayor relevancia al cambio climático, que la modificación del gradiente meridional de temperatura de superficie.

Abstract:
This thesis is mainly concerned with the adaptation of the LMDZ/CIMA General Circulation Model, in order to be able to study the Southern Hemisphere climatology. The first step of this work was to make the necessary adjustments to improve the representation of the mean fields. Three experiments were designed. The "smooth" experiment differs from the "control" one in the value imposed to the drag coefficient Cd; and the "zoom" experiment is an experiment with stretched grid scheme. In fact, the control experiment shows that the Southern Hemisphere simulation is not appropriate. Nevertheless, the tuning into the drag coefficient improved the subpolar throught representation. The "zoom" experiment improved the representation of the sea level pressure and the polar jet. Nevertheless, the physical variable misrepresentations appeares to be more related to the physical parameterizations than the resolution itself. The "zoom" experiment underestimates the representation of the transients disturbances, maybe because of the model coarse resolution. However, it reproduces acceptably the heat and angular momentum transients fluxes. In general, it is observed that the mean flow baroclinicity is well represented. However, the kinetic energy of the transient disturbances is underestimated, due to the inadequate representation of the baroclinic conversion term. Nevertheless, the model reproduces the effects of the eddies on the mean flow: the disturbances tend to accelerate the westerlies south of 30ºS. The zoom version model also represents the barotropic structure of the southern stationary waves, but not the vertical propagation of the waves due to its coarse vertical resolution. In order to determine the benefits of having applied the stretched grid scheme technique, horizontal resolution experiments were done (low, medium and high-resolution). These experiments were carried out with zoom and with regular grid. The results of this intercomparison showed that: i) the zoom introduction does not generate numerical disturbances, and ii) it is observed that the zoom experiments with a specified horizontal resolution compare well with those of regular grid and 50% greater resolution, without increasing the computational costs. In order to test the ability of LMDZ/CIMA GCM to reproduce different climate scenarios, an intercomparison with other model simulations were performed. It was found that the LMDZ/CIMA model is able to represent the interaction processes involved on the climate change. Finally, a sensitivity experiment forced by anomalous extratropical meridional gradient of sea surface temperature was designed. It was observed that the atmospheric circulation responds to the imposed anomalous temperatures, with a northern displacement of the polar jet. Particularly, it was conclude that the weakening of the transient momentum transport would induce the weakening of the subpolar jet and the intensification of the subtropical jet. It was found that the sensitivity experiment resembles to previous studies of Antarctic marine ice removal, whereas it differs than other experiments of global warming. This result could be explain by the fact that the increase of water-vapor and to the intensification of the temperature gradient at height levels, could be more relevant to the atmospheric circulation than the change in the meridional gradient of sea surface temperatures.

Carando, Daniel Germán. "Extensión de polinomios en espacios de Banach" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Calamante, Gabriela. "Utilización del virus X de la papa como vector de expresión transitoria en plantas" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El virus X de la papa (PVX) es el miembro tipo del grupo potexvirus. En este trabajo de Tesis se obtuvo una copia de ADNc completa e infectiva de PVX. Además, se evaluó la capacidad de PVX como vector de expresión transitoria en plantas. Se obtuvieron vectores virales de reemplazo e inserción capaces de expresar el gen bacteriano uid A. En el primer caso, se reemplazó el gen de la cápside (CP) por el gen marcador, y se evaluó en experimentos de complementación. Sólo se observó actividad de la enzima β-glucuronidasa (GUS) en ensayos de co-inoculación con viriones de PVX purificados. La actividad de GUS estuvo restringida a pocas células en la hoja inoculada. En el segundo caso, se obtuvo un vector de inserción donde el gen uíd A se expresó a partir de una duplicación del promotor subgenómico de CP y se observó actividad de GUS en las hojas inoculadas. También se obtuvo y evaluó un vector de inserción para expresar el gen del factor de crecimiento epidermal humano. Finalmente, se obtuvieron herramientas necesarias para implementar un sistema de trans-complementación entre plantas transgénicas que expresaban la replicasa de PVX y construcciones derivadas de PVX defectivas en la replicación.

Abstract:
Potato virus X (PVX) is the type member of the potexvirus group. In this Thesis an infections, full-length cDNA copy of PVX genome was obtained. Besides, the suitability of PVX as a transient expression vector in plants was evaluated. Replacement and insertion viral vectors able to express the uid A bacteria] gene, was developed. The first, in which the viral coat protein (CP) gene was replaced by the reporter gene, was evaluated in complementation assays. β-glucurunidase (GUS) activity was only detected in co-inoculation experiments with purified PVX virions. GUS activity was restricted to small areas of the inoculated leaves. The insertion vector was able to express uid A from a duplicated CP subgenomic promoter. GUS activity was only detected on the inoculated leaves. The insertion vector was also used to express the human epidermal growth factor gene in tobacco plants. Finally, a trans-complementation system was designed. Transgenic tobacco plants expressing the PVX replicase gene were obtained, and four replication defective versions of PVX were constructed. These tools will be used in the future to perform complementation assays in tobacco protoplasts and plants.

Broggi, Leticia Elvira. "Estudio de la distribución de la micoflora contaminante de arroz recién cosechado : Riesgo potencial de aparición de micotoxinas en la Región Arrocera Argentina" (1998). Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Botek, Edith Lilián. "Análisis CLOPPA-RPA de propiedades de respuesta lineal usando funciones de onda ab initio y semiempíricas" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el presente trabajo de tesis, por un lado, se analizan en forma teórica diversos problemas relacionados con el estudio de parámetros espectroscópicos de RMN y de polarizabilidades moleculares con el método IPPP-CLOPPA (Inner Projection of the Polarization Propagator-Contributions from Localized Orbitals to the Polarization Propagator Approach). Por el otro, se presentan modificaciones y/o nuevas implementaciones que son particularmente apropiadas para tratar algunos de estos problemas. Se analizan diferentes efectos electrónicos y estructurales en fenetoles en base al apantallamiento magnético. Se propone una modificación (AM1*) de los parámetros para Sn en el método RPA AM1 que mejora significativamente el cálculo de acoplamientos indirectos de espin nuclear J(XSn). Se presenta la implementación del método IPPP-CLOPPA en el contexto de cálculos semiempíricos INDO/S para el análisis tanto del tensor de acoplamiento de espin nuclear como del tensor de polarizabilidad estática molecular, lo que resulta muy promisorio dada la flexibilidad de dicho método semiempírico. Se obtienen, así, resultados de acoplamientos J(XSn) donde se produce una notable mejora con respecto a los hallados con el método AMI*. En lo referente a la polarizabilidad molecular, se comparan los valores de esta propiedad en la serie etano, etileno y acetileno con distintas bases a nivel semiempírico, agregándose orbitales de polarización, con un estudio similar a nivel ab initio para analizar la aplicabilidad del método. Se aplica luego al estudio de moléculas de interés biológico. La interrelación entre el efecto de sustituyente en acoplamientos ³J(C1M)α y la polarizabilidad del enlace C3—Mα en l-X-3-M-biciclopentanos sustituidos (X=H y M=H, F y CH3) se discute con los métodos mencionados tanto a nivel ab initio como INDO/S. Los métodos presentados demuestran ser una herramienta interesante para el análisis de diversos problemas en el campo de la química cuántica.

Abstract:
On the one hand, different problems related to the study of NMR parameters and molecular polarizabilities with IPPP-CLOPPA (Inner Projection of the Polarization Propagator - Contributions from Localized Orbitals to the Polarization Propagator Approach) method are analyzed. On the other hand, modifications and/or implementations particularly appropriated to deal with some of these problems are presented. Different electronic and structural effects in phenetols are analyzed with the magnetic shielding tensor. A modification (AM1*) of Sn parameters in RPA AM1 method is proposed, which significantly improves indirect nuclear coupling constants calculations J(XSn). Implementation of IPPP-CLOPPA method with INDO/S semiempirical approach is presented for the analysis of indirect nuclear coupling and static molecular polarizability tensors that results to be very promising taking account the flexibility of this semiempirical method. Results from J(XSn) couplings are obtained where a notable improvement is obtained over the results with AM1*. Values from semiempirical molecular polarizabilities with different basis adding polarization orbitals in the series ethane, ethylene and acetylene are compared with a similar ab initio study to analyze the applicability of the method. It is applied later to the study of molecules of biological interest. The relation between substituent effects in ³J(C1M)α and the polarizability of C3—Mα bond in 1-X-3-M-biciclo pentanes (X=H y M=H, F y CH3) is discussed with mentioned ab initio and semiempirical INDO/S methods. The methods presented here are a useful tool for the analysis of different problems related to Quantum Chemistry.

Boschiroli, María Laura. "Identificación, caracterización molecular y mutagénesis insercional de genes codificantes para antígenos proteicos de Brucella Abortus" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Brucella abortus, el agente etiológico de la brucelosis bovina, es una bacteria intracelular que replica en células fagocíticas y que también infecta a humanos, por lo que la enfermedad es considerada una zoonosis. Esta enfermedad produce grandes pérdidas en el sector pecuario y de salud pública del país y del mundo. Los factores de virulencia de esta bacteria son pobremente conocidos, y el diagnóstico de la enfermedad es aún dificultoso y poco confiable. Una manera de sobrellevar estas dificultades es por medio del estudio genético de la bacteria. En este trabajo se caracterizaron tres genes y las proteínas que éstos codifican de B.abortus S19, la cepa vacunal bovina. La estrategia para conocer el rol en la fisiología bacteriana fue por un lado obtener la de los genes y buscar homologías en bancos de datos, y por otro lado mutagenizartos por intercambio alélico y estudiar el comportamiento de las cepas mutantes in vivo e in vitro. Se lograron identificar genes del operón 2-oxoglutárico deshidrogenasa y la enzima superóxido dismutasa dependiente de cobre y zinc. En el primer caso, las mutantes muestran claras diferencias con respecto a la cepa salvaje, demostrando un rol fundamental de estas proteínas en la fisiología bacteriana. En el segundo caso, la cepa mutante no muestra diferencias significativas, confirmando resultados previos, por lo que se demuestra que esta proteína no es un factor de virulencia.

Abstract:
Brucella abortus, the causative agent of bovine brucellosis, is an intracellular bacteria which can replicate within phagocytic cells and can also infect humans, therefore the disease is considered a zoonosis. Brucellosis produces great economical and public health losses not only in our country but worldwide. Brucella’s virulence factors are poorly understood, and diagnosis is difficult and unreliable. A means to overcome this drawbacks is studying the bacterial genetics. In this work 3 genes from Brucella abortus vaccine Strain 19, and the proteins they codify for, were studied. In order to understand their physiological role, genes sequences were determined and compared to other known sequences in databases. On the other hand, these genes were knocked out by allelic replacement and mutant strains’ behavior was studied in vitro and in vivo. Genes from 2-oxoglutarate dehydrogenase operon and Cu/Zn superoxide dismutase were identified. Mutants for the former genes showed clear differences compared to the wild type strain, demonstrating an important physiological role in the bacteria. Confirming pre-existing results, mutants for the latter gene showed no significant differences, hence this protein is not a real virulence factor.

Bonazzola, Cecilia. "Estudio espectro-electroquímico de flavinas en diferentes matrices poliméricas" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se estudió comparativamente el comportamiento electroquímico de flavinas en solución acuosa, en hidrogeles redox de poli-alilamina altamente hidratados, y como anión dopante de polipirrol. Se utilizaron técnicas electroquímicas y espectroscópicas uv-visible de absorción y emision simultánea a la oxidación-reducción de las flavinas. En solución acuosa se encontró que la disproporcionación de la semiquinona de la flavina conduce a una complicación cinética respecto de un mecanismo simple de transferencia de dos electrones y dos protones. En los electrodos modificados se observó que los hidrogeles de poli-alilamina brindan un ambiente altamente hidratado y la electroquímica y la espectroscopía son similares a las soluciones acuosas. Sin embargo, la protonación de aminos primarios fijos en la caden polimérica afecta la energía libre del proceso redox a través de un potencial de membrana. Los electrodos modificados por polipirrol con flavina atrapada son los que se presentan como más complejos. La matriz rígida del polímero, que en este caso puede oxidarse y reducirse en la misma ventana de potencial que la flavina lleva a un comportamiento electroquímico y espectrocópico bien diferenciado. Se encuentran cambios espectrocópicos de la flavina y del polipirrol al cambiar el estado de oxidación. Además, las especies redox de ambos sistemas pueden interactuar por reacciones químicas acopladas.

Abstract:
The electrochemical behaviour of flavins has been studied comparatively in aqueous solutions, in highly hydrated redox hydrogels of poly-(allylamine), and as a dopant anion of polypyrrole. In aqueous solutions, it was found that the disproportionation of flavin simiquinone leads to a kinetic complication with respect to a simple two electron two proton electron transfer mechanism. In modified electrodes it was found that poly-(allylamine) hydrogels yield a highly hydrated environment and the electrochemistry and spectroscopy are similar than in aqueosus solutions. However, protonation of primary amine groups fixed to the polymer backbone affects the redox process free energy through a membrane potential. Modified electrodes with polypyrrole and trapped flavin are the more complex ones. The rigid polymer matrix, which in this case can be oxidised and reduced in the same potential window that flavin gives a distinct electrochemical and spectrocopic behaviour. Spectroscopic changes due to flavin and polypyrrole are observed when the oxidation state changes. Besides, both systems' redox species can interact through coupled chemical reactions.

Bocca, Silvia N.. "Caracterización bioquímica y molecular de la enzima UDP-glucosa: proteína transglucosilasa de Solanum tuberosum" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La enzima UDP-glucosa: proteína transglucosilasa (UPTG) es una glicosiltransferasa autocatalítica descripta inicialmente en tubérculo de papa (Solanum tuberosum L.). Se había propuesto que la UPTG era capaz de iniciar la síntesis de α-glucanos unidos a proteína in vitro y que tendría una función de proteína iniciadora de la biosíntesis del almidón. La UPTG de tubérculo de papa se purificó hasta aparente homogeneidad, se desarrollaron anticuerpos policlonales específicos contra la misma y se clonaron cADNs correspondientes a la UPTG por screening de genotecas de expresión de papa. Ensayos de Northern blot y Western blot mostraron que tanto el ARN mensajero como la proteína UPTG están presentes en un nivel semejante en todos los tejidos de la planta. Algunas de las secuencias clonadas se expresaron en E. coli obteniéndose UPTG recombinante enzimáticamente activa. Se encontró que tanto las proteínas recombinantes como la purificada de tubérculo pueden ser glicosiladas a partir de UDP-Glc, UDP-Xil o UDP-Gal y que la glicosilación es reversible. Dos cADNs obtenidos fueron secuenciados totalmente, esto permitió detectar un muy alto grado de identidad (~ 90%) entre la secuencia de la UPTG y varias secuencias de proteínas vegetales de función aún no determinada que localizan específicamente en la región trans del aparato de Golgi. La secuencia de la UPTG no presenta zonas hidrofóbicas que puedan corresponder a regiones transmembrana ni un posible péptido señal que permita su entrada a plástidos o al sistema de endomembranas de la célula. Estos resultados sugieren que la enzima localizaría en el lado citoplásmico del aparato de Golgi y no en los plástidos en donde ocurre la síntesis del almidón, por lo tanto están en contra de un posible rol de la UPTG en la síntesis de este polisacárido. En ningún organismo que no sea vegetal se encontró una proteína que pueda considerarse homóloga a la UPTG. Esta característica, sumada a su localización indicarían una posible función relacionada con la síntesis de los polisacáridos complejos de la pared, función exclusiva del aparato de Golgi de las células vegetales. La especificidad de la UPTG por distintos nucleótidos azúcares y la reversibilidad de la reacción de glicosilación hacen pensar que la UPTG podría estar formando parte de un sistema complejo que acople el transporte de nucleótidos azúcares con la síntesis de polisacáridos estructurales.

Abstract:
The enzyme UDP-glucose: protein transglucosylase (UPTG) is an autocatalytic glycosyltransferase reported in potato tuber (Solanum tuberosum L.). It was suggested that UPTG could in vitro initiate protein-bound α-glucan synthesis and postulated as the protein that primes starch biosynthesis. UPTG was purified to apparent homogeneity from potato tubers, polyclonal antibodies were raised against the protein and cDNAs coding for UPTG were cloned screening potato expression libraries. RNA hybridization studies and Western blot analysis indicated that UPTG mRNA and polypeptide are expressed in all potato tissues. When the cloned sequences were expressed in E. coli, the recombinant UPTG was enzymatically active. It was determined that purified as well as recombinant UPTG can be glycosylated by UDP-Glc, UDP-Xyl or UDP-Gal and that glycosylation is reversible. The complete sequence of two cDNAs was obtained and compared with the sequences present in the databanks. UPTG shows a high degree of similarity (~ 90%) with several plant sequences. The function of these sequences remains to be determined but it was demonstrated their specific localization in the trans-Golgi cisternae. UPTG sequence do not present hydrophobic segments that could correspond to transmembrane regions. The amino terminal sequence lacks a signal peptide that could allow the protein to enter into plastids or into endomembrane system of the cell. These results suggest that the enzyme localizes at the cytoplasmic face of the Golgi apparatus, and not in plastids were starch synthesis occurs, and are against a possible role of UPTG in starch synthesis. In no organism other than plants a sequence homologous to UPTG could be detected. This fact, added to its Golgi localization suggests a role in cell wall polysaccharide synthesis, a function present exclusively in the Golgi apparatus of plant cells. The specificity of UPTG for different sugar-nucleotides and the reversibility of the glycosylation might correspond to UPTG being part of a complex system that couples sugar-nucleotide transport with the synthesis of cell wall polysaccharides.

Binstok, Guillermo Francisco. "Reacciones entre sorbatos y nitritos en sistemas cárnicos" (1998). Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bigi, Fabiana. "Identificación y caracterización de antígenos de Mycobacterium bovis" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bertolesi, Gabriel Esteban. "Acción de la heparina y glicosaminoglicanos relacionados en el desarrollo tumoral" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se estudió el efecto de los mastocitos (MC), la heparina y heparinas sin actividad anticoagulante sobre el desarrollo tumoral. Empleando el fluorocromo tris (2,2’-bipiridina) rutenio (II), que se une a los grupos sulfatos de la heparina, se realizó la identificación citoquímica de MC de cavidad peritoneal y se cuantificó comparativamente el contenido de heparina de los gránulos de MC de ratones portadores de tumor (MCP) y de ratones normales (MCN) mediante análisis de imagen. Los MCN que poseen el doble de heparina que los MCP inhibieron la proliferación in vitro y la incidencia tumoral in vivo de un adenocarcinoma mamario murino de moderada capacidad metastásica en pulmón (M3). Observamos que las células M3 poseen receptores para heparina de alta afinidad, a los que pueden también unirse una heparina parcialmente N-desulfatada N-Acetilada (N-des N-Ac). Ambas heparinas inhibieron la proliferación de las células tumorales in vitro e incrementaron la adhesión celular mientras que otras heparinas modificadas (parcialmente O-desulfatada (Odes), N-desulfatada (N-des), O/N-desulfatada N-Acetilada (O/N-des N-Ac)) no se unen a los receptores y no tuvieron efecto sobre la proliferación y la adhesión. Estos resultados muestran que la unión de la heparina a los receptores se correlaciona con el efecto antiproliferativo y el aumento de la adhesión celular. Solamente la heparina inhibió la formación de metástasis experimentales en pulmón, siendo el efecto revertido por un inhibidor selectivo del activador de plasminógeno de tipo uroquinasa (uPA) (el compuesto B623). Para determinar el mecanismo por el cual la heparina posee efecto antimetastásico se estudió: a) el efecto fibrinolítico de las heparinas mediado por uPA; b) la actividad procoagulante de ratones portadores de tumor y el efecto de las heparinas en la coagulación y c) la producción de actividad heparinasa por parte de las células tumorales M3 y la susceptibilidad de las heparinas a ser degradadas por esta enzima. El análisis global de los resultados sugiere que el efecto antimetastásico se asocia a la actividad anticoagulante.

Abstract:
We have investigated the effect of mast cells (MC), heparin and chemically modified heparins, without anticoagulant activity, on tumoral development. We describe the use of tris (2,2’-bipyridine) ruthenium (II) (Rubipy) fluorochrome, which binds to N and O-sulfate grups of heparin, for MC cytochemical identification. Peritoneal cavity MC from normal mice (NMC) showed two-fold increase of heparin content than tumor-bearing mice (TMC), as measured by image analysis. NMC inhibited in vitro M3 cell proliferation (murine mammary adenocarcinoma with moderate metastatic lung capacity) and in vivo tumoral incidence, while TMC had not effect. Specific M3 cell-membrane heparin-receptors were described. Heparin and partially N-desulfated N-acetylated heparin (N-des N-Ac) had the capability of binding to heparin receptor, inhibited cell proliferation and increased cell adhesion. Chemically modified heparins without heparin-receptor interaction capacity, lacked the antiproliferative and adhesive cell effect. These results suggest that heparin-receptor interaction mediated the antiproliferative effect and the increase of cell adhesion. Heparin decreased M3 cells experimental lung metastasis. This effect was reverted by a selective inhibitor (B623) of the plasminogen activator type-urokinase (uPA). In order to know the mechanism by which heparin inhibit M3 metastasis formation, we studied a) heparins fibrinolytic activity mediated by uPA, b) procoagulant activity of M3 cells and tumor-bearing mice, as well as the heparins effect on coagulation, and c) the presence of heparinase activity produced by M3 cells and heparins susceptibility to this enzyme activity. The analysis of result suggests that antimetastatic effect was related to the anticoagulant activity.

Berensztein, Esperanza Beatriz. "Cultivo primario de células testiculares prepúberes humanas: Cambios madurativos de la regulación de la esteroidogénesis" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La regulación de la fase postnatal temprana de activación testicular así como de la posterior quiescencia en humanos es poco conocida. Tanto la secreción de hormonas hipofisarias como la composición celular del testículo correspondiente a la fase postnatal temprana son diferentes al testículo adulto. El objetivo fundamental del presente trabajo de tesis fue desarrollar el cultivo primario de células testiculares humanas provenientes de necropsia. Se estudiaron 50 testículos de pacientes neonatales (grupo 1, G1), de la etapa de activación postnatal (G2), de la etapa de quiescencia testicular (G3) y puberales (G4). El estudio de la secreción de testosterona (T), marcador de células de Leydig, en función del tiempo post mortem (tpm) encontró que el tpm debe ser de hasta 24 horas, ya que a tpm mayores no hay T y se activa la enzima aromatasa. Se comparó la T basal y la respuesta a gonadotrofinas en los 4 grupos, hallándose que la T basal es significativamente mayor en G1 y G2 que en G3 (p<0.05) y que sólo GZ responde a gonadotrofinas. Se encontró que Ia actividad estimada de las enzimas 17β-HSD, 3β-HSD y 17,20 liasa de la P450c17, fue significativamente mayor en G2 que en G3 y que 17β-HSD y 3β-HSD están más activas que 17,20 liasa. Por análisis con precursores tritiados de las vias Δ4 y Δ5 e identificación de metabolitos producidos por cromatografía en capa delgada se observó que la vía Δ5 es preferencial en testículo humano prepúber. Se observó un aumento de T en ausencia de gonadotrofinas bajo GH en G2 y bajo IGF-1 en los 4 G. Se estudió la secreción de inhibina-B, marcador de célula de Sertoli, encontrándose una disminución con la edad durante la prepubertad, un aumento en paralelo a la T y un efecto estimulador de FSH. Por el método de subcultivos y criopreservación de células testiculares humanas de necropsia, se encontró T, bajo colesterol ó pregnenolona, indicando que las enzimas esteroidogénicas están preservadas. El modelo experimental desarrollado ha demostrado además ser útil para estudiar la fisiopatogenia de diversas alteraciones de la función testicular en los niños.

Abstract:
The regulation of the ear1y postnatal activation and subsequent quiescence in human testicular development is poorly understood. The secretion of pituitary hormones and the testicular cell composition in prepubertal are different than adult men. The main aim of this study was to develop the primary culture of human testicular cells obtained from necropsy. A total of fifty testes was studied and divided into: neonatal stage or group 1 (G1), postnatal activation stage (G2), stage of quiescence (G3) and pubertal stage (G4). Testosterone secretion (T), as marker of Leydig cell function, was related with post mortem hours (pmh). It was found that pmh must be less than 24 hours, because at pmh a higher T dissapeared and aromatase activity increased. Basal T and response to gonadotrophins were analyzed in the 4 groups. Basal T was significantly higher in G1 and G2 than in G3 (p<0.05), and only in G2 an increment of T was found under LH/FSH. Seventeenβ-HSD, 3β-HSD and the 17,20 lyase of P450c17 activities were estimated in G2 and G3 and it was found that the three activities were higher in G2 than in G3, and 17β-HSD, 3β-HSD were more activated than 17,20 lyase. The analysis of the two pathways of steroidogenesis Δ5 and Δ4, studied after the incubation with radiolabeled precursors and the identification of products by TLC, showed that the preferential pathway is the Δ5. The stimulating effect of factors other than gonadotrophins was studied. An increment of T under GH in G2 and under IGF-1 in the four groups in the abscence of LH/FSH was observed. Inhibin-B secretion, as marker of Sertoli cells, was studied. A negative correlation between Inhibin-B secretion and age during prepuberty was found. Moreover, a positive correlation between Inhibin-B and T and a stimulating effect of FSH on Inhibin-B secretion was also shown. Human testicular cells obtained from necropsies were subcultured and cryopreserved and their ability to secrete T was maintained, under cholesterol or pregnenolone, showing that steroidogenic enzymes were preserved. The present model of human testicular cells in culture was found to be useful to study the physiopathogenesis of some alterations of testicular function in boys.

Basilio, Alicia Mabel. "Estudio melitopalinológico de los recursos alimentarios y de la producción de un colmenar en la región del Delta del Paraná (Argentina)" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Este trabajo estudia el contenido polínico de los recursos de la colmena (cargas corbiculares y miel inmadura) de un colmenar y de la producción de miel del mismo colmenar en la región del Delta del Río Paraná. El colmenar produce dos cosechas de miel anuales. La variabilidad intra-anual esta relacionada con la sucesión fenológica de las floraciones, y la inter-anual con el clima. El contenido de la miel inmadura refleja la floración de la vegetación que rodea las colmenas. La miel madura muestra un enriquecimiento en el polen de las floraciones tardías. El origen floral de las cargas corbiculares varió a Io largo de la temporada, en cantidad, diversidad y calidad de la cosecha. Un incremento de la densidad de 0,5 a 12,5 colmenas por hectarea no produjo diferencias ni en el contenido polínico de las cargas ni en el de la miel con respecto al histórico del colmenar. El trabajo permitió establecer el momento de la temporada en que los apicultores podrian trabajar en la producción de mieles monoflorales. La variabilidad de las floraciones de una temporada a otra hace difícilpredecir la magnitud de estas cosechas.

Abstract:
This work studied pollen content in the food (pollen loads and immature honey -or nectar inside hive-) of an apiary and the honey production from the same apiary, in the Delta region of the Parana River, along six seasons. The apiary produced two honey harvest a year. Intra-anual variability was found to be related to seasonal blossoms replacement and inter-anual variability to climatic effects. The origin of corbicular pollen loads varied throughout season in volume, diversity and quality. Pollen content of immature honey followed the floral phenology of the vegetation surrounding hive, while mature honey showed an increase in pollen from late florations. When compared with the apiary record of pollen contents, an increase in hive density from 0,5 to 12,5 hives /hectarea did not bring about significant differences in the pollen content of loads or in honey. As a practical application of this research, we established the time at season when beekeepers could work on monofloral honeys production. Inter-anual variability in blossoms makes it difficult to predict the magnitude of the annual harvest for every kind of monofloral honey type.

Barrio, María Marcela. "Obtención y caracterización del anticuerpo monoclonal Fc-5.01, reactivo con cáncer de mama, melanoma y otros tumores humanos" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Con el objeto de producir anticuerpos monoclonales (AMCs) dirigidos contra antígenos (Ags) expresados por células tumorales indiferenciadas, los cuales podrían ser comunes a varias neoplasias, se utilizaron las células IIB-BR-G como inmunógeno. Esta línea celular de carcinoma mamario presenta características sumamente indiferenciadas y fue derivada de un tumor primario de mama altamente indiferenciado, que no expresa receptores hormonales. Se seleccionó un AMC denominado FC-5.01 (lgG2a), el cual reconoce distintos carcinomas humanos y el 100% de los melanomas malignos. Su reactividad con la mayoría de los tejidos normales es escasa, ya que FC-5.01 reconoce algunas células del sistema neuroendócrino, macrófagos y algunos túbulos contorneados proximales en el riñón, mayormente con un patrón intracelular. A nivel bioquímico, el Ag reconocido por FC-5.01 es una glicoproteína heterogénea (banda ancha con un peso molecular de 30-60 kDa) en melanomas y carcinomas humanos. El epitope reside en el núcleo protéico (25kD) y es presumiblemente conformacional, con puentes disulfuro implicados en el reconocimiento del AMC. En esta Tesis se demuestra que FC-5.01 reacciona con el Ag CD63, inicialmente descripto como un Ag asociado a melanoma, y miembro de la superfamilia Tetraspan o Tetraspaninas. La reactividad de FC-5.01 con CD63 se demostró por Western blot, con ensayos de inmunodepleción con otro anticuerpo anti-CD63 y por análisis de FACS (fluorescence activated cell sorting) de la línea celular de melanoma KM3 (CDGB-negativa) luego de la transfección con la copia genómica de CD63. El epitope reconocido por el AMC FC-5.01 es diferente del reconocido por otro AMC anti-CD63 (ME491), como se demostró por un radioimmunoensayo de inhibición cruzada. Opuestamente a lo propuesto para el AMC ME491, no se observaron diferencias significativas en Ia expresión de CD63 entre melanomas primarios y metastásicos usando AMC FC-5.01, por medio de inmunohistoquímica. Por inmunofluorescencia indirecta realizada a 4°C con células vivas, se determinó que el Ag reconocido por FC-5.01 está presente en las membranas plasmáticas de células IIB-BR-G y otras células neoplásicas. En células permeabilizadas, FC-5.01 co-localiza con el colorante naranja de acridina en vesículas acídicas (compartimiento lisosomal/endosomal). Por análisis de Scatchard realizado con células IB-BR-G, se calculó una constante de afinidad de 1.4 ± 0.4 x 10^7 M^-1 y 2.1 x 10^6 sitios antigénicos por célula. El AMC FC-5.01 no media reacciones citotóxicas contra células CD63+ (fijación de complemento ni ADCC= antibody dependent cellular cytotoxicity), pero el complejo FC-5.01-CD63 es eficientemente internalizado hacia vesículas intracitoplasmáticas, como se observó en un ensayo de inmunofluorescencia posterior a la incubación a 37°C. El catabolismo celular del AMC unido por las células IIB-BR-G se estudió usando -FC-5.01. Luego de 18 hs a 37°C, >70% de la radioactividad se encontró en el sobrenadante del cultivo como fragmentos degradados (TCA-solubles). En células IIB-BR-G se demostró rápida re-expresión del Ag luego de la internalización. El AMC FC-5.01 disminuyó la migración de células CD63+ en un ensayo de cámara de Boyden. Estas propiedades permitirían el uso del AMC FC-5.01 como un vehículo para dirigir diferentes compuestos dentro de células CD63+. Luego de haber logrado la radioinmunolocalización de xenotransplantes de carcinoma mamario humano creciendo en ratones nude (IIB-BR-GNUDE ) con -FC- 5.01, se formuló un kit de marcación en un paso, para obtener -FC-5.01, con posible utilidad en diagnóstico por imágenes. Este kit se preparó por reducción del AMC con 2-mercaptoetanol y la adición de difosfonato de metileno (MDP) como ligando transquelante. Luego de la marcación con eluído de generador, las especies marcadas se analizaron por ITLC (instant thin layer chromatography) y HPLC (high performance liquid chromatography). La eficiencia de marcación fue superior al 90% y la conservación de la inmunoreactividad se verificó con células IIB-BR-G. En el modelo IIB-BR-GNUDE se realizaron biodistribuciones e imágenes en cámara gamma con -FC-5.01. A las 24 hs la radioactividad se incrementó en los tumores (14.4 ± 5.3 % de la dosis inyectada/ gr tumor) y disminuyó en la sangre y los principales órganos, y los tumores se radioinmunodetectaron perfectamente en la cámara gamma. Los controles de calidad demostraron que el kit resulta estable por un período de hasta 120 días. Alícuotas de este mismo kit se inyectaron a dos pacientes con melanoma maligno (0.5 mCi/paciente), y en uno de ellos fue posible localizar, a las 24 hs, una metástasis en un gánglio linfático axilar, que ya había sido detectada por medio de tomografía computada. Este kit preparado para radioinmunodetección (RID) in vivo podría ser utilizado en el futuro con fines diagnósticos en pacientes con melanoma u otros tumores CD63+. Dados estos resultados, se utilizó el mismo modelo in vivo para experimentos de radioinmunoterapia (RIT). Se investigó la capacidad de -FC-5.01 para controlar el crecimiento de los tumores IIB-BR-GNUDE. En un primer experimento de RIT se observó una inhibición significativa del crecimiento tumoral (p<0.05) en animales portadores de tumor, tratados con -FC-5.01(900 μCi) fraccionados en tres dosis semanales, respecto de los animales control. Se observó cierto grado de toxicidad hematológica (pérdida de peso corporal, hipoplasia de la médula ósea, bajos recuentos de leucocitos totales). No se observaron regresiones o curas. También se observó incremento de la probabilidad de supervivencia debida al tratamiento con -FC-5.01 en uno de los experimentos. El nivel de toxicidad fue disminuído reduciendo la dosis de -FC-5.01 y por administración de G-CSF (granulocyte-colony stimulating factor) como complemento de la RIT.

Abstract:
In a research project directed to produce monoclonal antibodies (mAbs) towards undifferentiation antigens (Ags), which could be common to several tumors, immunization with extremely undifferentiated tumor cells was attempted. One of such cells is the human breast cancer cell line, IIB-BR-G, developed in our laboratory and derived from a highly undifferentiated breast tumor. A mAb designated FC-5.01(IgG2a) was selected, that binds to several human carcinomas and malignant melanoma. It has null or very low reactivity with most human normal tissues, with the exception that FC-5.01 binds to some cells from the neuroendocrine system, macrophages and some renal proximal convolute tubules. Biochemical studies indicate that FC-5.01 recognizes an heterogeneous glycoprotein (broad band between 30-60 kDa) in melanoma tumors. The epitope resides in the protein core and is presumably conformational, with disulphide bonds implicated in mAb recognition. In this Thesis it is demonstrated that mAb FC-5.01 reacts with CD63 Ag, which has been initially described as a melanoma-associated Ag, and is a member of the tetraspan superfamily. Reactivity of mAb FC-5.01 with CD63 was demonstrated by Western blot, immunodepletion assays and FACS analysis of the CD63-negative melanoma cells (KM3) after transfection with the genomic copy of CD63. The epitope recognized by mAb FC-5.01 is different from the epitope recognized by another anti-CD63 mAb, ME491, as shown by an inhibition radioimmunoassay. Opposite to what has been stated for mAb ME491, no significant differences were found in CD63 expression between primary and metastatic melanoma using mAb FC-5.01. The Ag recognized by mAb FC-5.01 is located in the plasma membranes of IIB-BR-G and other neoplastic cells, as detected by indirect immunofluorescence performed at 4°C on live cells. When the cells are permeabilized, mAb FC-5.01 recognizes acidic vesicles which colocalize with acridine orange (lysosomal/ endosomal compartment). Scatchard plot analysis performed on IB-BR-G cells demonstrated a 1.4 ± 0.4 x 10^7 M^-1 affinity constant and 2.1 x 10^6 antigenic sites per cell. mAb FC-5.01 is not able to mediate C (complement) fixation or antibody dependent cellular cytotoxicity (ADCC) towards CD63+ cells, but the FC-5.01-CD63 complex is efficiently internalized into cytoplasmic vesicles, as shown by an acid wash immunofluorescence assay. Cellular catabolism of the bound antibody by IIB-BR-G cells was studied using -FC-5.01. At 18 hs, >70% of the radioactivity was present in the supernatant as degraded fragments (TCA-soluble). After internalization, rapid Ag re-expression could be demonstrated in IIB-BR-G cells. mAb FC-5.01 diminished migration of CD63+ cells, in a Boyden chamber assay. These properties would enable to use mAb FC-5.01 as a vehicle to target different compounds inside CD63+ cells. After demonstrating positive radioimmunolocalization with -FC-5.01 of human breast growing in nude mice, a one-step labelling kit was specially formulated for this mAb in order to obtain -FC-5.01. This kit was produced by mAb reduction with 2-mercaptoethanol and by adding methylene diphosphonate (MDP) as the transchelating ligand. The labeled species were analyzed by instant thin layer chromatography (ITLC) and high performance liquid chromatography (HPLC). Labeling efficiency was greater than 90%. Immunoreactivity was assessed on IIB-BR-G cells. Biodistribution of -labeled mAb FC-5.01 and tumor imaging were performed in nude mice bearing breast cancer IIB-BR-GNUDE xenografts. At 24 hs accumulation of increased in tumor (14.4 ± 5.3 % injected dose/ gr tumor) and decreased in blood and most organs. Quality control tests demonstrated that the kit was stable for up to 120 days. Therefore, animal studies demonstrated good and specific in vivo tumor targeting. Given these results, the ability of -FC-5.01 to influence tumor growth in vivo was further investigated. Preliminary radioimmunotherapy (RIT) experiments showed that there was a significative tumor growth inhibition (p<0.05) in animals treated with 900 μCi fractionated into three doses (one week apart), respect to control mice. Some degree of hematological toxicity was observed (bone marrow hipoplasia, low white blood cell counts). Increase in survival probability due to FC-5.01 treatment was also evident in one of such experiments. We did not observe tumor regressions or cures. Hematological toxicity was decreased by reducing -FC-5.01 dose and by administration of granulocyte-colony stimulating factor (G-CSF) as a complement for RIT.

Barderi, Patricia Alejandra. "Clonado, organización genómica y expresión de la glutamato dehidrogenasa NADP dependiente (GluDH-NADP) de Trypanosoma Cruzi" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Epimastigotes de Trypanosoma cruzi, el protozoo parásito que causa la enfermedad de Chagas, contienen dos glutamato dehidrogenasas diferentes (GluDHs), NAD y NADP dependientes. En este sentido los parásitos se asemejan a las bacterias, hongos y plantas y se diferencian de animales superiores que poseen sólo una enzima inespecífica para coenzima. La GluDH-NADP dependiente (EC 1.4.1.4) es un hexámero formado por subunidades idénticas de 47kDa, mostrando ser muy semejante a la correspondiente enzima de E. coli en cuanto a la secuencia de aminoácidos del extremo N-terminal. La forma NADP dependiente podría ser biosintética mientras la forma NAD dependiente podría tener un rol catabólico. La GluDH-NADP dependiente fue purificada a homogeneidad proteica a partir de epimastigotes de Trypanosoma cruzi mediante un protocolo mejorado que incluye cromatografía de afinidad en Blue Sepharose. Se determinó la secuencia de aminoácidos de 11 péptidos internos, obtenidos por digestión con BrCN, tripsina, endopeptidasa Arg-C o endopeptidasa Lys-C. Dichas secuencias, correspondientes aproximadamente al 30% de la molécula, mostraron una identidad del 74% con la enzima similar de E. coli. Utilizando un suero policlonal monoespecífico producido contra la proteína purificada se realizó el rastreo de una biblioteca de expresión genómica de T. cruzi en el vector λgt11. De esta forma pudo seleccionarse un único clon conteniendo 270 pb correspondientes al extremo 3' del gen que fue secuenciado completamente. Reacciones de PCR usando iniciadores construídos de acuerdo a la secuencia de aminoácidos del extremo N-terminal de la enzima madura y con la secuencia del clon correspondiente al extremo C-terminal pudieron clonarse y secuenciarse dos ORFs completos (TcGluDH1 y TcGluDH2). Las secuencias obtenidas muestran mayor homología con la enzima de Escherichia coli (70-72% de identidad), y menor homologia (52-57%)con la correspondiente enzima de eucariontes inferiores. A partir de la secuencia de ADN se predijo una proteína que contiene 446 aminoácidos. Usando el gen TcGluDH1 como sonda se realizaron experimentos de Southern blot, usando fragmentos de restricción o cromosomas enteros separados por electroforesis en campo pulsado, indicando variaciones entre los diferentes clones y cepas de parásitos, sugiriendo la presencia de varios genes codificando para la GluDH-NADP. La expresión de la enzima resultó ser diferente en los distintos estadíos del desarrollo. La forma epimastigote presenta mayor cantidad de ARNm y proteína (a juzgar por la actividad enzimática y ensayos de Western blot), en comparación con otras formas del parásito. El gen clonado TcGluDH1 fue expresado en E. coli, produciendo una enzima recombinante activa con constantes cinéticas similares a la enzima natural. A pesar de que las evidencias bioquímicas sugieren que la enzima se localiza tanto en el citoplasma como en la mitocondria, nuestros resultados indican una localización exclusivamente citosólica para la GluDH-NADP.

Abstract:
Epimastigotes of Trypanosoma cruzi, the parasitic protozoan which causes Chagas disease, contain two different glutamate dehydrogenases (GluDHs), one NADP-linked and one NAD-linked. The parasite therefore resembles bacteria, fungi and plants in this respect, and clearly differs from higher animals, which possess only one, coenzyme-unspecific, GluDH. The NADP-GluDH (EC 1.4.1.4), which is an hexamer made up of identical subunits of Mr 47.000, seems to be very similar to the enzyme from E. coli in terms of amino acid composition and N-terminal sequence. The HADP-GluDH might be biosynthetic, whereas the NAD-linked enzyme might have a catabolic role. The NADP-linked glutamate dehydrogenase has been purified to homogeneity from epimastigotes of Trypanosoma cruzi by an improved procedure using Blue Sepharose affinity chromatography. The amino acid sequences of 11 internal peptides obtained by digestion with CHBr, trypsin, Arg-C endopeptidase or LysC endopeptidase, showed 74% identity with the similar enzyme from E. coli, over about 30% of the molecule. Apolyclonal monoespecific antiserum against the purified enzyme was used for screening a genomic expression library of T.cruzi in λgt11. A clone containing 270 bps at the 3'-end of the gene was selected, and completely sequenced. Using PCR reactions with oligonucleotide primers synthesized according to the amino acid sequence of the N-terminus of the mature enzyme, and to the nucleotide sequence of a clone corresponding to the C-terminus, two complete ORFs (TcGluDH1 and TcGluDH2) were isolated and sequenced. The sequences obtained are most similar to that of the NADP-GluDH of Escherichia coli (70-72% identity), and less similar (52-57%) to those of lower eukaryotes. The protein predicted from DNA sequence contains 446 amino acids residues. Using TcGluDH1 as a probe, Southern blot experiments of both, restriction fragments and whole chromosomes separated by pulsed-field electrophoresis, indicated variations among different parasite strains and clones, and evidence for the presence of several genes. The expression of the enzyme was shown to be developmentally regulated, the epimastigote stage having a considerably larger amount of both, mRNA and protein (as judged from enzyme activity and Western blots), as compared with the other parasite forms. The cloned gene TcGluDH1 was expressed in E. coli, producing active recombinant enzyme with kinetic constants similar to those of the natural NADP-GluDH. Although biochemical evidence had previously suggested that the enzyme has a multiple localization (cytosolic and mitochondrial localization), our results suggested an exclusively cytosolic localization for NADP-GluDH.

Balañá, María Eugenia. "Receptores con actividad de tirosina-quinasa tipo I (erbB-2, erbB-3 y erbB-4) y su ligando, heregulina, en modelos experimentales de carcinogénesis mamaria" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La alta incidencia de cáncer de mama ha creado la necesidad de comprender el funcionamiento de las vias regulatorias de la glándula mamaria. Las alteraciones en la expresión y vias de señalización de los factores de crecimiento parecen críticas en el desarrollo y progresión de las neoplasias de mama. El conocimiento de los circuitos regulatorios del crecimiento celular en la glándula mamaria es de suma importancia para la prevención, diagnóstico y tratamiento del cáncer de mama. Con este objetivo, se ha prestado significativa atención a los miembros de la familia de ligandos de los erbBs y sus receptores con actividad de tirosina-quinasa en células mamarias tanto normales como transformadas. En el presente estudio se demostró la existencia de interacciones entre las vías de señalización de los progestágenos y las vias de la heregulina (HRG) y los erBs en tumores mamarios. Se utilizó un modelo de carcinogénesis hormonal, en el cual el progestágeno sintético acetato de medroxiprogesterona (MPA) indujo la aparición de adenocarcinomas mamarios en hembras vírgenes de la cepa Balb/c. Los estudios de los receptores con actividad de tirosina quinasa tipo I (erbB-2, erbB-3 y erbB-4 ) y de su ligando, HRG, fueron realizados utilizando tres tipos de tumores del modelo de carcinogenesis inducida por MPA: tumores ductales progestágeno- dependientes (HD) con altos niveles de receptores para estrógenos (RE) y progesterona (RP), las variantes tumorales progestágeno - independientes (HI) de los anteriores, que si bien conservan los RE y RP proliferan de manera MPA- independiente y tumores hormono- independientes de origen lobulillar que carecen de RE y RP. Se encontró sobreexpresión de erbB-2 y erbB-3 y bajos niveles de expresión de erbB-4 en todos los tumores estudiados. En todos los tumores lobulillares y en uno de los ductales la sobreexpresión del erbB-4 se debió a amplificación génica. Los mismos patrones de expresión se mantuvieron en los cultivos primarios de células epiteliales provenientes de estos tumores. El MPA indujo una regulación positiva de la expresión de ARNm de HRG, erbB-2 y erbB-3 en las líneas tumorales HD. La progresión hacia un fenotipo progestágeno independiente (HI) se acompañó de una mayor expresión constitutiva de HRG, erbB-2 y erbB-3. La expresión de HRG se detectó en las células tumorales epiteliales, indicando que la HRG actuaría a través de un mecanismo autocrino en cancer de mama. Al tratar células epiteliales malignas con oligodeoxinucleótidos antisentido (ASODN-1) al ARNm del erbB-2, se encontró una inhibición del crecimiento inducido por MPA en las líneas tumorales HD y del crecimiento autónomo de las líneas tumorales HI. Los mismos niveles de inhibición se obtuvieron usando ASODN-2 dirigidos a la secuencia consenso de tirosina- quinasa. El hecho de no haber encontrado efectos sinérgicos al tratar con una combinación de ambos ASODNs y MPA, otorgaria al oncogen erbB-2 una participación crítica en la proliferación mediada por MPA y el crecimiento autónomo de células HI. La HRG indujo un potente efecto proliferativo en en cultivos primarios de células HD y potenció el efecto mitogénico del MPA. En las células HI, que exhibieron fosforilación constitutiva del receptor erbB-2 , el tratamiento con HRG no tuvo efecto alguno sobre la proliferación, aportando evidencias de que la sobreexpresión del erbB-2 y su activación constitutiva conferida a estas células una ventaja proliferativa. El bloqueo de la síntesis endógena de HRG con ASODNs al ARNm de HRG en células HD inhibió el crecimiento inducido por MPA. El tratamiento de estas células tanto con HRG como con MPA resultó en la fosforilación en tirosina del erbB-2 y el erbB-3. Estos resultados indican que la HRG actuaría como mediador del efecto proliferativo del MPA. Se encontraron los mismos resultados in vivo, en tumores proveniente de ratones tratados con MPA. Además, los efectos proliferativos tanto del MPA como de HRG, fueron abolidos cuando las células se trataron con ASODNs al ARNm del erbB-2, otorgando al erbB-2 una participación fundamental en el crecimiento inducido por HRG. Finalmente, el bloqueo de la expresión del receptor tipo l de IGF (IGF-R I) con ASODNs especificos resultó en la completa inhibición de los efectos proliferativos de HRG, demostrando que la presencia de un IGF-R I funcional es esencial para la actividad mitogénica de HRG. Estos resultados aportan la primera evidencia de interacciones entre las vias de transducción de progestágenosy de HRG/erbBs en cáncer de mama y la primera demostración de que los efectos proliferativos de HRG requieren de IGF- R I.

Abstract:
The high incidence of breast cancer has created a compelling need to understand the growth regulatory pathways that function in the mammary gland. Alterations of growth factor pathways appear to be important in the development of breast cancer. The knowledge of the regulatory circuits for cell growth in the mammary gland will help us in prevention, diagnosis and treatment of the disease. The members of the erbB family of ligands and the receptor tyrosine kinases have received significant attention because of their involvement in proliferation of normal and transformed mammary cells. The present study addressed links between progestin and heregulin (HRG)/erbBs signaling pathways in mammary tumors. An experimental model of hormonal carcinogenesis, in which the synthetic progestin medroxyprogesterone acetate (MPA) induced mammary adenocarcinomas in female Balb/c mice, was used. Three types of tumors from the MPA-induced model of mammary carcinogenesis were included in this study. The first type were ductal progestin-dependent (HD) tumor lines that require MPA administration for their in vivo growth and express high levels of ER and PR content. The second were their progestin-independent (HI) variants, that are able to grow in absence of MPA administration. These HI tumors, in spite of an MPA independent pattern of growth, retain ER and PR expression. The third type of tumors analyzed were MPA-induced mammary carcinomas of lobular origin that lack ER and PR expression and evidence a HI behavior. Overexpression of erbB-2 and erbB-3 and low levels of erbB-4 expression were found in all tumors studied. In all HI-lobular tumors and in a HD-tumor the erbB-2 overexpression was due to a gene amplification. The same pattern of expression was maintained in primary cultures of epithelial cells from these tumors. MPA induced an in vivo up-regulation of HRG, erbB-2 and erbB-3 expression in HD tumor lines. Mammary tumor progression to a progestin-independent (HI) phenotype was accompanied by a high constitutive expression of HRG, erbB-2 and erbB-3. The HRG message arose from the tumor epithelial cell, indicating that HRG could play an autocrine role in mammary cancer. Incubation of malignant epithelial cells from HD tumors with antisense oligodeoxynucleotides to erbB-2 mRNA (ASODN-1) resulted in the complete inhibition of MPA-induced growth. Autonomous growth of HI cells was also inhibited by ASODN-1. The same level of inhibition was found using ASODN-2 to a tyrosine kinase consensus domain. The fact that we did not found synergistic effects of antisense oligonucleotides when we treated the cells with the combination of both ASODNs and MPA might confer to erbB-2 protein a pivotal role in tumor MPA-mediated proliferation. Primary cultures of malignant epithelial cells from a HD tumor line were used to investigate HRG involvement on cell proliferation. HRG induced a potent proliferative effect on these cells and potentiated MPA mitogenic effects. In HI cells, that exhibited a constitutive activation of erbB-2 receptor, treatment with HRG did not have effect on cell proliferation, providing evidence that erbB-2 overexpression and constitutive activation confers a proliferative advantage to these cells. Blocking endogenous HRG synthesis by ASODNs to HRG mRNA inhibited MPA-induced cell growth, indicating that HRG acts as a mediator of MPA-induced growth. Treatment of these cells with either MPA or HRG resulted in tyrosine phosphorylation of both erbB-2 and erbB-3. The same results were found in tumors growing in MPA-treated mice. Furthermore, both HRG and MPA proliferafive effects were abolished when cells were treated with ASODNs to erbB-2 mRNA, providing evidence for a critical role of erbB-2 in HRG-induced growth. Finally, blocking type I insulin-like growth factor receptor (IGF-IR) expression with ASODN resulted in the complete inhibition of HRG proliferative effect, demonstrating that a functional IGF-R I is required for HRG mitogenic activity. These results provide the first evidence of interactions between progestins and HRG/ErbB signal tranduction pathways in mammary cancer and the first demonstration that IGF-R I is required for HRG proliferative effects.

Apóstolo, Nancy Mariel. "Anatomía ecológica de la comunidad costera del Río Salado (Noroeste de la Provincia de Buenos Aires: Partidos de Alberti, Bragado y Junín)" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Este trabajo tiene como objetivo estudiar las características anatómicas adaptativas de la comunidad costera del río Salado (Noroeste de la Provincia de Buenos Aires). Geográficamente, el área en estudio pertenece a la Pampa Deprimida, fuera de los límites de la Depresión del Salado. A pesar de ello, la vegetación costera del río Salado tiene asociaciones vegetales similares a las de la Depresión, pero con dominancia de Diplachne uninervia, Cynodon dactylon, Paspalum vaginatum y especies con menor grado de corbertura, como Salicornia ambigua, Atriplex hastata, Sesuvium portulacastrum, Heliotropium curassavicum, Chenopodium macrospermum ssp. halophilum, Flaveria bidentis, Aster squamatus, Eclipta megapotamica, Apium leptophyllum, Sporobolus indicus, Chaetotropis imberbis, Bolboschoenus paludosus, Schenoplectus californicus, Distichlisspicata y Echinochloa crusgalli . Las 21 especies están adaptadas a un medio húmedo y salino, debido a que hay períodos extensos de inundación y el suelo tiene altas concentraciones de sales y pH alcalino. Por lo tanto, las especies muestran ventajas adaptativas representadas por características anatómicas tales como, aerénquima, tejido acuífero, cutícula gruesa y con ceras, glándulas de sal, estructura Kranz, cristales de oxalato de magnesio y de calcio, cistolitos, mucilagos y taninos. Esto se desprende de la descripción anatómica, del análisis de las estructuras y los contenidos celulares de cada una de las especies, en alguno de los casos estudiadas por primera vez. Es importante destacar que este trabajo contribuye a la ampliación de los estudios de la anatomía ecológica de las especies argentinas adaptadas a las condiciones de alta salinidad y humedad.

Abstract:
In the present work, the adaptive anatomical characteristics of coastal community of Río Salado (Northwest of Buenos Aires province) was studied. Geographically, this area belongs to the Flooding Pampas, but not to the Depression of Salado. In spite of this, the coastal vegetation of Rio Salado have similar associations to the Depression, but Díplachne uninervia, Cynodon dactylon and Paspalum vaginatum are the dominant species. Other species with less covering enclose the dominant species: Salicornia ambigua, Atriplex hastata, Sesuvium portulacastrum, Heliotropium curassavicum, Chenopodium macrospermum ssp. halophilum, Flaveria bidentis, Aster squamatus, Eclipta megapotamica, Apium leptophyllum, Sporobolus indicus, Chaetotropis imberbis, Bolboschoenus paludosus, Schenoplectus californicus, Distichlis spicata y Echinochloa crusgalli. Due to large flooding periods and high salts concentrations and alkaline pH of the soil, the 21 cited species were adapted to wet and saline environment. Therefore, the species showed adaptive advantage represented by anatomical characteristics, such as, aerenchyma, water storage tissue, thick cuticle with wax, salt glands, Kranz structure, magnesium and calcium oxalate crystals, cystolites, mucilage and tannins. Based on the anatomical description, the analysis of different structures and the cellular contents of each specie, some of these studied for the first time, demonstrated the presence of the mentioned characters. The importance of this work was the contribution to ecological anatomy studies of argentine species of wet and saline environment.

Amster, Pablo. "Existencia y unicidad de soluciones para ecuaciones del tipo curvatura media prescripta" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Alvarez, Daniela Elena. "Medición de la deposición de36 Cl mediante la técnica AMS" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La espectrometría de masas con aceleradores de partículas (AMS) es una técnica ultrasensible de medición que posibilita la identificación y medición de radioisótopos de vidas medias largas (en el rango de 10^3 a 10^8 años), con niveles de concentración tan bajos como una parte en 10^16. Estos radioisótopos son de interés en diferentes disciplinas puesto que pueden brindar información sobre muchos de los procesos interesantes que ocurren en la Tierra y en el sistema solar, los cuales tienen escalas temporales dentro del rango mencionado. Las vidas medias y los niveles de concentración involucrados dificultan, y en algunos casos imposibilitan, la identificación de estos radioisótopos utilizando técnicas convencionales de medición pero son fácilmente reconocibles con la técnica AMS. Uno de los radioisótopos que resulta muy interesante debido a su amplia utilización es el 36Cl. Este isótopo es empleado en diversos campos de investigación como: astrofísica, ciencias de la atmósfera, geofísica, etc, siendo de gran importancia en los estudios de medio ambiente. En particular, es un excelente trazador hidrológico con el cual, a partir de muestras de precipitación, se pueden estudiar procesos de transporte atmosférico. Este trabajo tiene dos finalidades. Por un lado, la de desarrollar e implementar la técnica AMS en nuestro país, empleando el acelerador de iones pesados existente en el Laboratorio TANDAR, lo que implica la aceleración e inequívoca identificación de los haces microscópicos de l4C y 36Cl por primera vez. El segundo objetivo consiste en la aplicación de la técnica empleando al radioisótopo 36Cl como trazador atmosférico. Para ello se midió la concentración de 36Cl respecto de cloro en muestras de precipitación recogidas entre 24° y 62° de latitud sur y los resultados fueron analizados basados en modelos teóricos ya existentes. Dichas mediciones fueron las primeras llevadas a cabo en este tipo de muestras, recolectadas en América del Sur y tratan de contribuir a extender la escasa cantidad de datos experimentales acerca de la deposición del 36Clpresente hasta el momento.

Abstract:
AMS is a very sensitive technique which is capable of tracing long-lived radionuclides (with half-lives between 10^3 and 108 years at extremely low concentrations, in the range from 10^-10 to 10^-16. These radioisotopes are particulary interesting since they can be used as tracers in many processes that occur in the Earth and the Solar system and have time scales in the above mentioned interval. In most cases, these radionuclides can not be measured at natural occuring levels, and mainly for small samples, by using conventional decay counting techniques but they are easily recognizable with AMS. One of the most extensively used radioisotopes is 36Cl. It finds application in several scientific domains like astrophysics, ciences of the atmosphere, geophysics, environmental research, etc. Particularly, its hydrophilic nature makes this radioisotope a well suited tracer to study-atmospheric transport processes from precipitation samples. The purpose of this work is two-fold. On the one side, it aims to the development of AMS technique at the electrostatic accelerator of TANDAR laboratory, which involves the acceleration and unambiguously identification of (microscopic) radioisotope beams like 14Cl y 36Cl, for the first time. On the other side, as application of this technique, 36Cl is used as an atmospheric tracer studying its fallout and latitudinal deposition distribution. For this purpose, precipitation samples collected at different latitudes in Argentina, Chile and Antarctic, covering a range from 24° S to 62° S, are measured and the results are analyzed based on existing theoretical models. These are the first 36Cl concentration measurements done from South American samples and they contribute to the rather scarce experimental information available concerning with this radioisotope fallout.

Alonso, Claudio Roberto. "Identificación y análisis funcional de los factores que regulan la transcripción del gen de fibronectina humana" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El presente trabajo de tesis esta centrado en el estudio de la region promotora del gen de la fibronectina humana (FN). En primer lugar se han definido los roles funcionales in vitro e in vivo de los elementos FN-CRE y FN-CCAAT. Ambos enfoques coincidieron en definir a los factores CRE y CCAAT como moduladores positivos de la actividad transcripcional del gen FN. Mediante experimentos de inmuno-precipitacion y retardo en gel se identificaron las proteinas NF-I y CPI como los factores hepaticos que se unen al elemento FN-CCAAT. Posteriormente a traves de la implementacion de una nueva metodología que combina la inmunoprecipitación con el entrecruzamiento covalente por luz U.V. se detectó la interacciín física entre la proteína de union a CRE, ATF-2 y los factores CCAAT, CPI y NF-I. Debido a la importancia fisiológica de los cambios cuali y cuantitativos en la expresion de la fibronectina vinculados a procesos de fibrosis hepática, se caracterizaron los factores que se unen al elemento FN-CRE en diferentes tipos celulares hepaticos. Los resultados mostraron que los factores ATF-2 y ATF-3 ocupan el elemento solo en hepatocitos, mientras que otros factores, como la proteina FRA-2 ocupan el elemento CRE tanto en hepatocitos como en celulas endoteliales sinusoidales (SEC). Experimentos de transfección transitoria de cultivos primarios de hepatocitos y SEC, permitieron definir elementos enhancer y silencer dentro del promotor asi como la region necesaria para conferir inducibilidad al factor de crecimiento TGF-β. Estos resultados proveen las primeras evidencias de una ocupacion y funcionamiento diferenciales del promotor FN específicos de tipo celular hepático.

Abstract:
The present work was focused in the study of the promoter region of the human fibronectin gene (FN). First, we defined the in vitro and in vivo functional roles of the FN-CRE and FN-CCAAT elements. Both approaches have agreed to define the CRE and CCAAT factors as positive modulators of the transcriptional activity of the FN gene. Through immunoprecipitation and gel shift experiments the proteins NF-I and CPI were identified as the liver factors that bind the FN-CCAAT element. Thanks to the development of a new methodology that combines immunoprecipitation and UV crosslinking techniques, it was possible to define the physical interaction among the CRE protein ATF2 and the CCAAT factors NF-I and CPI. In virtue of the physiological relevance of the qualitative and quantitative changes in the FN expression associated with hepatic fibrosis, the factors that bind the FN-CRE element in different liver cell types were characterized. Results showed that factors ATP-2 and ATP-3 bind the element only in hepatocytes, while other factors, such as FRA-2 were present in both hepatocytes and sinusoidal endothelial cells (SEC). Transient transfection experiments carried out on primary cultures of hepatocytes and SEC, allowed to define enhancer and silencer elements within the promoter, as well as the minimal region needed to confer inducibility to the growth factor TGF-B.These results provide the first evidences of a differential occupation and function of the FN promoter specific of liver cell types.

Alessandro, Adelia Perla. "Contribuciones al estudio de la climatología sinóptica en la Argentina" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El tema central de esta tesis es determinar en la Argentina, la influencia de una situación persistente en una escala mayor sobre el desarrollo de los sistemas migratorios, y la asociación de la misma con las variaciones de temperatura y precipitación. Para su estudio, se han utilizado datos y cartas sinópticas del Servicio Meteorológico Nacional y los valores diarios de 12 UTC de los análisis del Centro Europeo de Pronóstico de Mediano Plazo, de los años 1980-1988 en los niveles de 500 y 1000 hPA. Con estos datos se han obtenido los campos medios, base para el cómputo de las anomalías en casos particulares y para ver la influencia del continente sudamericano. La situación sinóptica en la escala regional se halla dominada por la posición y amplitud de las ondas largas en los oestes. A fin de cuantificar este aspecto se han seleccionado índices regionales de circulación meridional, zonal y de curvatura en 1000 y 500 hPA como también del espesor de 500/1000 hPA. La marcha anual del índice meridional entre 40 y 90°O en 40°S y el zonal entre 35 y 55°S en 60°O, coinciden en general con lo ya estudiado para el Hemisferio Sur, en cambio el índice de curvatura muestra una fuerte influencia térmica del continente sudamericano en 40°S. El espectro de ondas en el Hemisferio Sur, es suficientemente continuo como para no poder distinguir con claridad las ondas largas de las cortas como en el Hemisferio Norte, ocasionando considerable 'ruido' en los índices. Para caracterizar la posición de las ondas largas se han promediado los índices por períodos de 5, 10 y 30 días. En estos períodos se halló la asociación de estos últimos con el comportamiento de los sistemas sinópticos y con las variaciones de temperatura y precipitación. De este análisis surge en respuesta a anomalías del meridional, que una cuña de onda larga en el Pacífico o una vaguada en el Atlántico se asocia al desarrollo de una serie de anticiclones con trayectoria SO-NE y a anomalías negativas de temperatura y precipitación. Una vanguardia en el Pacífico o una cuña en el Atlántico se asocia a una serie de depresiones con trayectoria NO-SE, a una depresión del noroeste argentino profunda y anomalías positivas de las variables citadas anteriormente. Similarmente se obtienen claras relaciones entre estas últimas y las anomalías del índice zonal y de curvatura. Los campos de anomalías de temperatura y precipitación podrían ser transformados en campos pronosticados a medio y largo plazo, una vez establecidos los métodos de pronóstico hemisféricos de las ondas largas. Un comienzo ya está dado con los pronósticos de la Oscilación del Sur-el Niño, relacionados con los índices de circulación elegidos.

Acosta Rodríguez, Gabriel. "Estimaciones para el Error de Interpolación en elementos finitos Anisitrópicos" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En este trabajo estudiamos diferentes tipos de operadores de interpolación sobre elementos finitos anisotrópicos. Obtenemos estimaciones óptimas para el error, en la interpolación de Lagrange sobre P1 y en W(1,P) con p > 2, para tetraedros bajo la asi llamada condición del ángulo máximo. Para la interpolación de Lagrange sobre Q1, en cuadriláteros, hallamos una condición geométrica muy poco restrictiva bajo la cual obtenemos estimaciones óptimas para el error en H1. Esta condición admite elementos anisotrópicos y generaliza todos los resultados conocidos. También presentamos un nuevo interpolador de promedios sobre P1 y probamos que posee orden óptimo en W(1,2), en 3D, para tetraedros bajo la condición del ángulo máximo. En particular, posee un comportamiento mejor que el de Lagrange. Finalmente demostramos que la condición del ángulo máximo para tetraedros es necesaria y suficiente para obtener cotas óptimas del error en L2 para la interpolación de Raviart-Thomas. Damos además algunas aplicaciones de este resultado para ciertos métodos mixtos y no-conformes, tanto para problemas escalares elipticos como para las ecuaciones de Stokes.

Abstract:
In this work we study different kind of interpolant operators over anisotropic finite elements. We obtain Optimal order error estimates in W(1,p) with p > 2, for the P1-Lagrange interpolation, under the so called maximum angle condition for tetraedra. For Q1-isoparametric quadrilateral elements, we define a weak geometric condition which ensures optimal order error in H1. This condition allows anisotropic elements and generalize all the previously known results. We present, also, a new P1-average interpolant operator which has optimal order in W(1,2), in 3D, for tetraedra under the maximum angle condition. In particular, this operator, has a better behaviour than the Lagrange interpolation. Finally we prove that the maximum angle condition for tetraedra gives neccesary and sufficient conditions to obtain optimal order error, in L(2), for the Raviart-Thomas interpolation. We show some applications of this result for certain mixed and nonconforming methods, both, for scalar elliptic problems, and the Stokes equations.

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