Biblioteca Digital | FCEN-UBA

Biblioteca Digital ¿Por qué?
Objetivos
Impactos
Estadísticas
Documentos
Presentaciones
Notas
Autores y derechos
¿Por qué depositar?
¿Cómo depositar?
Autorización
Depositar y publicar
Editoriales
Publicar mi tesis Formulario Tesis Posgrado
Formulario Tesis Grado
Normativa
Res. CD 2053/05
Res. CD 2533/09
Res. CD 0272/13
Res. CD 2793/15

Colecciones Tesis Doctorales
Fotografías
Publicaciones
Archivo
Libros
Reportes Técnicos

Tesis > AÑO

2017 2016 2015 2014 2013 2012 2011 2010 2009 2008 2007 2006 2005 2004 2003 2002 2001 2000 1999 1998 1997 1996 1995 1994 1993 1992 1991 1990 1989 1988 1987 1986 1985 1984 1983 1982 1981 1980 1979 1978 1977 1976 1975 1974 1973 1972 1971 1970 1969 1967 1966 1965 1964 1963 1962 1961 1958 1957 1956 1955 1953 1952 1951 1950 1949 1947 1946 1945 1944 1943 1942 1941 1940 1939 1938 1937 1936 1935 1934 1933 1932 1931 1930 1928 1927 1925 1922 1921 1920 1919 1918 1915 1914 1912 1911 1910 1909 1907 1906 1904 1901 1891 1889 1888 1882

Zaremberg, Vanina. "Estudio del mecanismo de activación de la quinasa de proteínas dependiente de cAMP" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo general de esta tesis es contribuir al estudio del mecanismo de activación de las proteinas quinasas dependientes de cAMP (PK A). Algunos de los grandes problemas a dilucidar en este tema son: si la enzima necesita disociarse en sus subunidades catalltica y regulatoria para activarse por cAMP , si el cAMP es el único agente necesario para la activación de la enzima y cómo se adquiere la selectividad de sustratos. Para este trabajo se han utilizado como modelos dos eucariontes inferiores. 1) PKA parcialmente purificada del hongo dimórflco Mucor rouxii, y ensayos in vitro. 2) Mutantes de subunidad regulatoria (bcy1) de la PKA de la levadura Saccharomyces cerevisiae con un abordaje genético-bioquímico-molecular. Utilizando el primer modelo y trabajando a concentraciones de holoenzima del orden de nM hemos llegado a las siguientes conclusiones (Mechanism of activation of cAMP-dependent protein kinase. In Mucor rouxii the apparont specific activity of the CAMP activated holoenzyme is different to that of its free catalytic subunit”. V.Zaremberg, A.Donnella-Deana and S.Moreno. Enviado a Archives in Biochemistry and Biophysics). - en este rango de concentración la actividad enzimática utilizando péptidos sintéticos como sustratos no es lineal con la concentración de enzima. Con la proteina protamina, utilizada como referencia, la actividad es casi lineal en el mismo rango de concentración. - la dependencia de la actividad fosforilante de cada péptido, con el cAMP, el grado de inhibición por un péptido inhibidor especifico y la modulación por policationes dependen del péptido utilizado. - en todos los ensayos arriba mencionados la relación de las actividades fosforilantes de la enzima con los distintos péptidos, comparados entre si o con la protamina, es diferente a la misma relación estimada a partir de las actividades medidas con la subunidad catalitica libre. Estos resultados se explican con dos modelos posibles: a) la subunidad catalitica libre es la entidad que fosforila los sustratos y el nivel de producción de subunidad C depende del cAMP y del sustrato; b) a altas concentraciones de holoenzima, existe holoenzima sin disociar con cAMP unido; esta especie es cataliticamente activa y la selectividad de esta especie por los sustratos es diferente a la de la subunidad catalitica libre. En el segundo modelo se han utilizado mutantes espontáneas, cedidas por el Dr. Kelly Tatchell, en el gen que codifica para la subunidad regulatoria (bcy1) de la PKA. En un primer trabajo (Analysis of the mechanism of activation of cAMPdependent protein kinase through the study of mutants of the yeast regulatory subunit. ” V.Zaremberg and S.Moreno, Eur.J.Biochem. 237: 136-142, 1996) trabajando con las cepas mutantes se obtuvieron los siguientes resultados: - los niveles de las subunidades regulatoria ( R) y catalltica (C ) en las cepas mutadas son similares a los de la cepa salvaje. - Una medida aproximada de la afinidad de las subunidades R mutadas por el CAMP, indicó que se encuentra disminuida. - Midiendoactividad de PKA en células penneadas en ausencia y presencia de cAMP, se encontró que las mutantes demuestran actividad dependiente de cAMP,aunque tienen una actividad basal elevada. - Los fenotipos se hicieron más severos si el fondo genético de las levaduras era RAS2; y permanecieron iguales por sobreexpresión del gen para PDE2. En la tercera parte de la tesis, y utilizando el mismo modelo de S.cerevisiae se encaró la sobreexpresión de algunas de las mutantes bcy1: construcción de los vectores correspondientes, estudio de la sobreexpresión y análisis de los fenotipos resultantes. El conjunto de estos resultados (manuscrito en preparación) confirma la conclusión que obtuviéramos en la primera parte: las holoenzimas mutadas tienen actividad enzimática. Del conjunto de los resultados genético-bioquímicos obtenidos hasta ahora en el sistema de las mutantes de levadura hemos concluido, que las holoenzimas mutadas tienen actividad fosforilante de proteinas sin necesidad de disociarse en sus subunidades, que la capacidad fosforilante de proteinas es diferente para cada mutante (diferentes fenotipos) y proponemos que los cambios conformacionales producidos por las mutaciones pueden ser similares a los introducidos por el cAMP al interactuar con la holoenzima.

Abstract:
The general aim of this thesis is to contribute to the study of the mechanism of activation of CAMP-dependent protein kinases (PKA). Some of the questions to solve on this field are the following: is it necessary for the holoenzyme to dissociate to be activated by CAMP? ls cAMP the only agent that promotes activation? How do the holoenzymes select the substrate to phosphorylate? In this work we have used two lower eukaryotic models. 1) Partially purified PKA from the dimorphic fungus Mucor rouxii and in vitro assays. 2) Mutants of the regulatory subunit (bcy1) of protein kinase A from the yeast Saccharomyces cerevisiae , using a molecular-genetic-biochemical approach. Using the first model and working at holoenzyme concentrations in the range of nM we have arrived to the following conclusions (Mechanism of activation of cAMP dependent protein kinase. In Mucor muxii the apparent specific activity of the cAMP activated holoenzyme is different to that of its free catalytic subunit, V.Zaremberg, A.Donnella-Deana and S.Moreno; submitted to Archives in Biochemistry and Biophysics) - under this range of enzyme concentration, the enzymatic activity using peptide as substrates is non linear; while it is almost linear when using protamine as substrate. - the dependency of each peptide phosphorylating activity with cAMP, the degree of inhibition by a specific peptide inhibitor, and the activation by polycations depends on the peptide used as substrate. - in all the above mentioned assays. the relationship of the apparent specific activity of the holoenzyme with each peptide , is different from the one displayed by the isolated free catalytic subunit. These results can be explained by two posible models: a) the free catalytic subunit is the enzymatic species that phosphorylates the substrates and the level of production of free C depends on cAMP and on the protein or peptide substrate; b) at high holoenzyme concentration, the existance of the species cAMP-bound holoenzyme is posible; this species is catalytically active and the selectivity for the substrates of this species is different from the one of the free catalytic subunit. In the second model we have used spontaneous mutants on the bcy1 gene, isolated and generously provided by Dr. Kelly Tatchell. In first stage of this approach we have obtained the following results: (Analysis of the mechanism of activation of CAMP-dependent protein kinase through the study of mutants of the yeast regulatory subunit, V.Zaremberg and S. Morenoi, Eur.J.Biochem. 237: 136-142, 1996.) - the levels of the regulatory (R) and catalytic (C) subunits of PKA in the mutated strains is similar to the levels of the wild type strain. an approximate measurement of the affinity of the mutated R subunits for cAMP indicates that the affinity is decreased. measurement of PKA activity in the abscence and presence of CAMP in permeabilized mutated and wild type cells indicates that the holoenzymes are dependent on CAMP and that basal activity is high. - the phenotypes were more severe when working on a wild type RAS2 background; and were maintained alike when over expression the gene for PDE2 (CAMP phosphodiesterase). In the third part of this thesis, and using the same model of S.cerevisiae mutant strains, we began the over expression of some of the bcy1 mutants: vector construction, analysis of the over expression and analysis of the derived phenotypes. These results suggest that the mutated holoenzymes are active. From the results obtained from the molecular genetic approaches, taken as a whole, we conclude that the mutated holoenzymes have catalytic phosphorylating activity without dissociating into its subunits; that the selectivity of substrate phosphorylation for each mutated holoenzyme ¡s different (different phenotypes) and we propose that the conformational structural changes produced by the mutatioon can be similar to the changes promoted by cAMP upon interaction with the holoenzyme.

Zamaloa, María del Carmen. "Estudio palinológico de la Formación Cullen (Terciario superior), Tierra del Fuego, Argentina" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo de este trabajo es analizar el contenido palinológico de muestras pertenecientes a la Formación Cullen, aflorante en la costa noreste de la Isla Grande de Tierra del Fuego, caracterizar la paleovegetación y establecer correlaciones con asociaciones palinológicas de otras cuencas australes, en un contexto espacio-temporal y ajustado a un estrecho control estratigráfico. Se levantaron tres perfiles, se procesaron 126 muestras de las cuales 61 resultaron palinológicamente fértiles. Se describieron 64 especies, de las cuales 21 corresponden a esporas de algas, briofitas y pteridófitas; 8 a polen de coníferas y 35 a polen de angiospermas. De ellas, 3 son nuevos géneros y 6, nuevas especies. El tratamiento estadístico permitió realizar diagramas polinicos y análisis de agrupamiento. Su elaboración conjunta con datos sedimentológicos y tafonómicos, permitió reconstruir la historia de la vegetación y el paleoambiente en el lapso de depositación y proponer una zonación palinológica. Los resultados obtenidos indican la presencia de una flora diversa que combina elementos longevos gondwánicos con otros nuevos (algunos hoy ausentes en Patagonia). La vegetación circundante a la cuenca sedimentaria consistía en un bosque multiestratificado de Nothofagus y coníferas, un sotobosque bien desarrollado y comunidades locales especializadas de ambientes palustres y acuáticos, desarrollándose próximas a un curso fluvial meandriforme en un clima templado cálido y húmedo. Los términos inferiores del afloramiento muestran influencia marina. Las evidencias bio y cronoestratigráficas sugieren una edad entre el Oligoceno tardío y Mioceno medio para la Formación Cullen.

Abstract:
The purpose of this dissertation is to study the palynological content, paleoenvironment and correlations of the Cullen Formation. The latter is exposed in the northeast cliffs of Isla Grande de Tierra del Fuego (southernmost Patagonia). Three sections were studied, and 126 samples processed. Among them, 61 had palynomorphs, 64 species were described: 21 represent algae, bryophyte and pteridophyte spores; 8 gymnosperm pollen grains, and 35 angiosperm pollen grains. Three of them, are new genera and 6 are new species. Numerical methods with the Tilia Program were applied resulting in pollen diagrams and cluster analysis. The overall interpretation with sedimentary and taphonomic data allowed the reconstruction of past vegetational history and paleoenvironment at the time of deposition. A spore-pollen zonation was proposed. The diverse paleoflora included ancient gondwanic elements and new ones (some of which are not actually present in the region). The spore-pollen assemblages indicate a regional multistratified forest dominated by Nothofagus species and gymnosperms of podocarpaceous affinities, a well-developed herbaceous understorey and local occurrence of specialised freshwater, semi-aquatic and lake coast communities, growing under moist and warm temperate conditions. Sediments of the Cullen Formation accumulated in a predominantly terrestrial environment during phases of fluvial and lacustrine deposition. The marine influence is present in the lower levels only. Bio and chronostratigraphic evidences support a Late Oligocene to Middle Miocene age for the Cullen Formation.

Yanovsky, Marcelo Javier. "Control del crecimiento y desarrollo de las plantas por la luz: Funciones fotoperceptivas y mecanismos de acción del fitocromo A" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La luz es un factor ambiental crítico para el crecimiento y desarrollo de las plantas. Provee no solo la energía lumínica necesaria para el proceso fotosíntético, sino también señales informativas que las plantas utilizan para coordinar su crecimiento y desarrollo con el ambiente circundante. La percepción de las señales lumínicas esta mediada por fotorreceptores específicos como los fitocromos. Estos son una pequeña familia de proteínas codificada por cinco genes en Arabidopsis thaliana, FITOCROMO A-E (PHY A-E). El objetivo de esta tesis es dilucidar las funciones sensoriales y los mecanismos de acción de uno de los fitocromos más abundantes, el fitocromo A (phy A). Las funciones fotosensorias del phy A en condiciones naturales de radiación fueron investigadas comparando el comportamiento de plantas con niveles normales de phy A y de plantas mutantes y/o transgénicas con niveles incrementados o reducidos de este fotorreceptor. De los experimentos se puede concluir que el phy A actúa como un sensor de cambios en la irradiancia. En plantas etioladas el phy A es el único fotorreceptor que permite a las plantas distinguir la transición entre la oscuridad reinante bajo la superficie del suelo y la escasa luz presente bajo canopeos muy densos. Los cambios morfológicos y fisiológicos desencadenados por el phy A en respuesta a la percepción de dicho cambio en el ambiente lumínico incrementan notablemente la supervivencia de las plantas emergidas en tales condiciones. El phy A, además, está involucrado en la percepción de los cambios en el ambiente lumínico producidos por la presencia de plantas vecinas: percibe directamente la disminución de la cantidad de luz roja (R) y rojo lejana (RL) que se produce por el sombreado y modula, indirectamente, la sensibilidad a reducciones de la relación R/RL que se producen por la relexión selectiva de RL en las hojas de plantas vecinas. Estas acciones del phy A conducen finalmente a un incremento en la tasa de alargamiento del tallo que disminuyen el riesgo de sombreado. En plantas verdes el phy A también está involucrado en la percepción de las transiciones cotidianas oscuridad/luz que se producen al amanacer. En respuesta a la percepción de dicha señal el phyA sincroniza al reloj endógeno que controla el movimiento de las hojas y probablemente la actividad de numerosos procesos vitales en las plantas. El phy A actúa a través de dos modos de acción, el VLFR (por Very Low Fluence Responses) que se satura con muy bajos flujos de luz, y el HIR (por High Irradiance Responses) que se satura con altas irradiancias de RL. Aquí presento evidencias genéticas que indican que 1aacción del phy A en el VLFR y el HIR involucra dos mecanismos moleculares diferentes. Por un lado se identificaron dos loci, vlf1 (en el cromosoma 2) y vlf2 (en el cromosoma 5), polimórficos entre los ecotipos Landsberg erecta y Columbia de Arabidopsis thaliana, que afectan las respuestas VLFR pero no las HIR. También se caracterizaron las respuestas VLFR y HIR en dos mutantes de transducción de señales del phy A previamente identificados y se observó que uno de ellos, el fhy1, afectaba de manera similar las respuestas VLFR y HIR mientras que el otro, el fhy3, afectaba mucho más las respuestas HIR que las VLFR. En conjunto, estos resultados sugieren que el phy A desencadena las respuestas VLFR y HIR a través de dos vías de transducción de señales diferentes que poseen algunos elementos en común. Por otro lado, utilizando una estrategia novedosa de búsqueda, se identificaron dos mutantes débiles de phy A, denominadas phy A-301 y phy A-302, que afectaban mucho más las respuestas HIR que las VLFR. Tanto la mutante phy A-301 como la mutante phy A-302 presentaron niveles reducidos de phy A en ensayos de inmunodetección. La secuenciación del gen PH YAen el mutante phy A-301, reveló una mutación que da lugar a una proteína truncada que carece de 142 aa del extremo C-terminal. La secuenciación del gen PHYA en el mutante phyA-302 reveló una mutación puntual que convierte el glutamato 778 en lisina. Esta mutación se encuentra en una región previamente descripta como importante para la actividad regulatoria de los fitocromos. Estos resultados indican que las respuestas a muy bajos flujos, es decir las VLFR, y las respuestas a altas irradiancias, es decir las HIR, se diferenciarían en los niveles de phyA y/o en los dominios de ésta molécula necesarios para inducir cada una de las respuestas. En resúmen, hemos demostrado que el phyA está involucrado en la percepción de diferentes cambios en el ambiente lumínico durante distintas etapas del ciclo de vida de las plantas y hemos encontrado evidencias genéticas que indican que el phyA actuaría a través de dos vías de transduccíón de señales distintas, una inducida en respuesta a muy bajos flujos de luz y otra inducida en respuesta a altas irradiancias.

Abstract:
Light is a critical enviromental factor for plants. It provides not only the radiant energy for photosynthesis, but also the informational signals that plants use to adapt and optimize their growth and development in response to the ambient conditions. Perception of light signals is mediated by specific photoreceptors such as phytochromes. Phytochromes are a small family of proteins encoded by five genes in Arabidopsis thaliana (PHYA-PHYE). The aim of this thesis is to investigate the photosensory functions of phytochrome A (phyA) and to improve our understanding of the mechanisms by which this photoreceptor transduces different light signals. The photoperceptive functions of phyA were analyzed by comparing the behavior of mutant and transgenic plants with either reduced or increased phyA levels to that of wild type (WT) plants that have normal levels of this photoreceptor. It can be concluded, from the experimental results, that phyA acts as a sensor of irradiance. In etiolated plants phyA is the only photoreceptor capable of perceiving the transition from the dark envirnonment present below the earth surface to the low light levels present beneath very dense canopies. In response to the perception of that signal phyA induces several changes in the developmental pattern that are crucial for seedling survival. In light-grown plants phyA is directly involved in the perception of changes in the amount of red light (R) and far-red light (FR) produced as a consequence of vegetation shading, and modulates the sensitivity to changes in the R/FR ratio produced by the selective reflection of FR in the leaves of nearby plants. These actions of phyA lead to an increment in stem elongation that helps preventing future shading. In light-grown plants phyA is also involved in the perception of the dark/light transitions that occure daily at dawn. In response to such signal phyA sinchronizes the endogenous clock that controls the rhythm of leaf movement, and probably the activity of other vital processes. PhyA acts through two different action modes. The first, VLFR (for Very Low Fluence Responses) is saturated with very low fluences of either R or FR light. The second, HIR (for High Irradiance Reactions) is only saturated with high irradiances of FR. Here I present genetic evidence indicating that the action of phyA in the VLFR and HIR involve two different molecular mechanisms. First, I have identified two loci polyrnorphic between ecotypes Landsberg erecta and Columbia of Arabídopsis thalíana, vlf1 (on chromosome 2) and vlf2 (on chromosome 5), that affect VLFR but not HIR. Second, I have characterized two previously identified phyA signal transduction mutants, fhy1 and fhy3, and found that fhy3 is more affected in the HIR than in the VLFR, while fhy1 is similarly affected in both phyA action modes. These results suggest that phyA elicits VLFR and HIR through two different signal transduction pathways that have some common component(s). Finally, using a novel screening strategy, I have identified two mutants lacking HIR but retaining VLFR. The genetic complementation analysis indicated that they were weak alleles of phyA and therefore they were named phyA-301 and phyA-302. Western blott analysis revealed that both mutants had reduced phyA levels. The sequence analysis of the phyA-301 mutant indicated that the PHYA gene beared a mutation leading to a truncated phyA protein, lacking 142 aa from the C-terminal domain. The sequence analysis of the phyA-302 mutant revealed a mutation that converted glutamic acid 778 into lysine. These results indicate that the responses to very low fluences of light and the responses to high irradiances of FR are different either in the levels of phyA or in the domains of this molecule that are necessary to induce each type of response. In summary, we have shown that phyA is involved in the perception of different changes in the light environment during the whole life cycle of plants and we have found genetic evidence supporting the hypothesis that phyA activates two different signal transduction pathways, one in response to very low fluences of light and the other in response to high irradiances.

Wolansky, Marcelo Javier. "Estudio de posibles estrategias terapéuticas para neuroteratología funcional" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
A partir de los años 60s se creó una subdisciplina dentro de la Teratología llamada Neuroteratología Funcional o de la Conducta. Ésta estudia especificamente las anomalías comportamentales que persisten a través de la vida del individuo que fue expuesto a agentes químicos neurotóxicos durante el neurodesarrollo. Pese a que en los últimos 30 años se han acumulado numerosas pruebas en modelos animales experimentales y estudios longitudinales y relevamientos epidemiólogicos en humanos acerca del potencial neuroteratogénico funcional de muchos agentes químicos de consumo humano rutinario, son sumamente escasos los grupos de investigación que trabajan en el diseño de estrategias terapéuticas para revertir este tipo neurotoxicidad. En esta tesis se reportan los resultados dela aplicación de 3 aproximaciones experimentales distintas probadas en el modelo animal rata. En todas las estrategias terapéuticas ensayadas la evaluación de los cambios comportamentales inducidos se realizó a posteriori de los tratamientos farmacológicos o ambientales con el Test de Entrenamiento Circular (TEC), el cual fue desarrollado previamente en nuestro laboratorio y validado para el estudio durante el desarrollo postnatal de alteraciones de conducta inducidas a nivel perinatal. Primero, modificamos las condiciones ambientales de cría durante la pubertad para revertir las alteraciones persistentes -motoras y asociativo-espaciales- inducidas por exposición al psicofármaco Haloperidol (HAL) durante la lactancia. En segunda instancia, aprovechando los efectos dependientes de período de desarrollo que tiene el mismo HAL, administramos esta droga durante la lactancia para corregir la neuroteratología motora inducida con la exposición al mismo agente durante la gestación. El mismo abordaje fue realizado en otra serie de experimentos con la droga anticonvulsivante Difenilhidantoina (DFH). Aunque las alteraciones motoras que esta droga induce luego de la exposición prenatal no pudieron ser atenuadas con la administración postnatal, sí pudo observarse una corrección de la neuroteratología del comportamiento espacial. Por último, se trabajó con el Factor de Crecimiento Nervioso. Con este agente pudimos modificar un período crítico de plasticidad sináptica dependiente de actividad fisiológica que aparece en el núcleo estriado sólo durante la quinta semana de vida. La posibilidad de modular la calidad y la duración de ciertas propiedades plásticas del cerebro durante el desarrollo es un punto de partida para diseñar nuevas estrategias terapéuticas con fármacos, como ha sido ya demostrado en el caso de la maduración de la vía visual. En forma integral, los experimentos presentados confirman la utilidad del test TEC para evaluar con sensibilidad las alteraciones funcionales inducidas en modelos experimentales de Neuroteratología de Conducta. El TEC aparece también útil para determinar el éxito o el fracaso en la examinación de diferentes estrategias terapéuticas para este tipo de disfunciones.

Abstract:
In the sixty's was developed a new field born from Teratology which was named Behavioral or Functional Neuroteratology. That is devoted to the study of enduring behavioral anomalies present through the life of an individual after be exposed to neurotoxic chemical agents during neurodevelopment. In the last 30 years it was growing a great body of evidence in experimental animals models, longitudinal follow-ups and epidemiological surveys in humans about the potential risk on human consumption of functional neuroteratogens for brain maturation. Yet, there is an scarcity of research groups working in animal models related to the design of therapeutical strategies to revert this type of developmental neurotoxicity. In this doctoral thesis are reported the results of the application of three experimental approachs working with the rat. For all strategies, the evaluation of behavioral changes induced during the experiments was performed at different times after treatments submitting the animals to the Circling Training Test (CT) which was developed in our laboratory and validated to study alterations of the natural pattern of brain maturation. First of all, we modify the rearing-housing environmental conditions during infancy to revert the motor and spatial-associative alterations previously induced by exposure to the psychoactive drug Haloperidol (HAL) during lactation. Second, we take advantage of those HAL effects dependent on period of exposure during development. So, we administered this drug during lactation to recover the motor deficits induced with the same agent by exposing rats during gestation. The same approach was applied in other series of experiments working with the anticonvulsant drug Diphenylhydantoin (DPH). We had a partial success in this case. At last, we use the Nerve Growth Factor, a prototypic neurotrophin. With this agent we could modulate a critical period of activity-dependent synaptic plasticity in rat striatum that normally appears exclusively around the fifth week of life. The modification during development of the quality and extent of the brain plastic properties opens the way to design new pharmacological treatments for developmental alterations. Certainly, it is that happened for the visual model of plasticity, and we detect some analogies in the reported plastic responses to NGF in this cortical system and our striatal model. Altoghether, the present experiments confirm the value of the TEC to evaluate with sensitivity induced functional alterations in animal models of Behavioral Neuroteratology. Besides, the TEC appears also a good option to determine the success or failure in examining several therapeutical strategies for this type of dissability.

Wisniacki, Diego A.. "Caos cuántico en sistemas dependientes de un parámetro" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En esta tesis se estudian distintas manifestaciones cuánticas del caos en sistemas dependientes de un parámetro. Los sistemas considerados son de una y dos dimensiones. A fin de estudiar las leyes de decaimiento temporal de sistemas Hamiltonianos cuasiligados, hemos considerado dos pozos de potencial unidimensionales de paredes oscilantes, poblados con partículas no interactuantes. A nivel clásico, mostramos que las leyes de decaimiento pueden ser cualitativamente distintas para los diferentes movimientos de las paredes, de acuerdo con las características de las órbitas periódicas atrapadas en cada caso. Sin embargo, la dinámica cuántica no muestra esa diferencia. Por otro lado, hemos estudiado diferentes aspectos de la mecánica cuántica de un billar caótico de contorno deformable y area fija. En estos sistemas los niveles de energía experimentan interacción repulsiva que se manifiestan como cruces evitados cuando se varía un parámetro. Mostramos que si el parámetro se mueve muy lentamente, las transiciones entre niveles vecinos son como las del modelo de Landau-Zener. Se estudió la vinculación de la variación paramétrica y la localización en el espacio de fases en las autofunciones del sistema. Para esto se desarrolló un método que permite eliminar los cruces evitados en una región del espectro. Mostramos que la eliminación de los cruces evitados es el mecanismo natural para sacar a la luz las estructuras localizadas en órbitas de período corto embebidas en las autofunciones del sistema. Finalmente, se considera la influencia de dicha localización en la dinámica cuántica. En este caso se estudió la dispersión de la energía cuando las paredes del billar oscilan en forma armónica. Se observó que la distribución de la energía se dispersa difusivamente. Se estudió la constante de difusión como función de la velocidad del contorno donde se observaron diferencias con predicciones teóricas basadas en la teoría de matrices aleatorias. Mostramos que la localización es la responsable de dichas diferencias.

Abstract:
This thesis is devoted to study quantum manifestations of classical chaos in systems with a parameter. We have considered one and two dimensional systems. To study the time decay laws of quasibounded Hamiltonian systems we have considered two finite one-dimensional potential wells with oscillating walls filled with non interacting particles. We show that the time decay laws can be qualitatively different for different movement of the oscillating wall at classical level according to the characteristic of trapped periodic orbits. However, the quantum dynamics do not show such differences. On the other hand, we have studied different aspects of the quantum mechanics of a chaotic billiard with deformable boundary and fixed area. In these systems, the parametric motion of energy levels proceeds without crossing any other and the defined avoided crossings quantify the interaction between states. We have showed that for slow variations of the paremeter, the transitions between neighboring levels are like the Landau-Zener transitions. We have studied the relation between parametric variations and the phase space localization of the eigenfunctions of the system. We have developed a method to remove avoided crossings in chaotic billiards governed by a parameter. We have showed that the elimination of avoided crossings is the natural mechanism giving rise to localization in short periodic orbits. Finally, it is considered the influence of phase space localization on the quantum dynamics. In this case, the dispersion of the energy was studied when the boundary of the billiard oscillates armonically. The results showed that the distribution of energy spreads diffusively. We have studied the diffusion contant as a function of the boundary velocity and found differences with theoretical predictions based on random matrix theory. We have showed that localization was the responsible of such a differences.

Wilkowsky, Silvina Elizabeth. "Trypanosoma cruzi : transducción de señales y transporte endocitico en la interacción parásito-célula huésped" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Durante la invasión del Trypanosoma cruzi se producen alteraciones tanto en la célula huésped como en el parásito para facilitar el éxito de dicha invasión y el establecimiento del mismo en esa célula. En el análisis de estos temas se ha arribado a las siguientes conclusiones: El aumento citosólico del Ca²+ en la célula huésped es necesario para la invasión. La señal disparadora se encuentra en membranas parasitarias sólo del estadío infectivo. Se determinó la participación de una proteína G heterotrimérica del tipo Gαᵢ de la célula huésped que estimula la invasión. El contacto de la célula huésped con membranas del estadío infectivo produce un aumento de la actividad de la fosfatidilinositol 3 kinasa (PI3K) necesaria para la invasión. Existe también una activación temprana de la proteína blanco de la PI3K, la proteína kinasa B (PKB),que se confirma por el aumento de la invasión en células PKB+ y la disminución en PKB-. La participación de las proteínas Rab 5 y Rab 7 (marcadoras de endosomas tempranos y tardíos respectivamente) en la invasión se confirmó por microscopía confocal y experimentos en células transfectadas. Además, la PI3K y las proteínas Gαᵢ y Gαs, ,también presentes en el parásito, tienen influencia definitoria sobre su capacidad invasiva.

Abstract:
Several modifications are induced in the host cell and the parasite during Trypanosoma cruzi invasion that facilitate this process and further parasite establishment. The analysis of these issues led to the following conclusions : A cytosolic Ca²+ increase in the host cell is necessary for parasite invasion. The triggering signal is present in the parasite membrane of the infective stage only. The participation of a host heterotrimeric G protein, Gαᵢ, that is involved in parasite invasion was determined. The contact between host cells and membranes of the infective stage induce a host phosphatidylinositol 3 kinase (PI3K) activation that was necessary for succesful invasion. There is also an early activation of protein kinase B (PKB) which is a target of PI3K. This fact is confirmed by increased infection percentages in transfected PKB+ cells and decreased values in PKB-cells. The host proteins Rab 5 y 7 (early and late endosome markers respectively), are involved in parasite invasion. This fact was confirmed by confocal microscopy and infection experiments with Rab 5 and Rab 7-transfected cells. Besides. T. cruzi's PI3K, Gαᵢ and Gαs have a definitive role on its infective capacity.

Velázquez, Pablo Fabián. "Interacción de remanentes de Supernova con el medio interestelar circundante" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El presente trabajo estudia la interacción de remanentes de supernova (RSN) con el medio interestelar circundante como así también la generación y el desarrollo de inestabilidades hidrodinámicas que pueden darse en tales escenarios. Esta tarea se llevó a cabo tanto desde el punto de vista teórico como observacional. Una supernova es un evento que se produce y desenvuelve en escalas de tiempo sumamente cortas (la explosión en sí se da en cuestión de segundos y la supernova pueden ser visible hasta unos años después de la explosión). Sin embargo sus restos pueden mantenerse durante aproximadamente cientos de miles de años, modificando drásticamente su entorno y emitiendo energía en todo el espectro electromagnético, aunque la característica que identifica unívocamente los restos de supernova es que son fuentes extendidas (no puntuales) de radiación en radiofrecuencias de origen no térmico (emisión sincrotrónica). A los remanentes se los puede calificar como “laboratorios naturales” donde es posible estudiar diversos fenómenos, entre ellos física de ondas de choque y la evolución de inestabilidades en condiciones imposibles de reproducir en laboratorios terrestres. Estos objetos astrofísicos evolucionan pero la forma en que lo hacen depende de factores tanto endógenos como exógenos. Hasta el momento se supone que la dinámica de un remanente “joven” se encuentra gobernada por las características propias de la explosión mientras que en un remanente más desarrollado en el tiempo, son las características del medio las que priman. Para investigar la influencia de los factores internos y externos en la evolución de los RSN, en la presente tesis doctoral se abordó el estudio de cinco remanentes de supernova: Tycho, W28, W30, W50 y CTB80, los cuáles se encuentran en diferentes estados evolutivos y poseen distintas morfologías y características internas. Se realizaron observaciones en continuo de radio de W28, W30 y CTB80 utilizando el interferómetro del Very Large Array (Socorro, New Mexico, EUA) y se utilizaron imágenes de radio existentes de Tycho y W50. Debido a la extensión angular de las fuentes observadas fue necesario aplicar técnicas de mosaico en radio, para obtener imágenes de muy buena resolución angular en la frecuencia de 1465 MHz. Además se complementaron con observaciones en 328 MHz para W28 y W30. Estas observaciones permitieron obtener las mejores imágenes conocidas hasta el presente de estos remanentes en la banda espectral de radio, con una resolución angular nunca alcanzada previamente y con excelente sensibilidad. En base a estos datos en dos frecuencias se pudo investigar los índices espectrales a (Sυ α υ-α, donde Sυ es el flujo) para W28 y W30. En los casos de los RSNs de Tycho y W28 se llevó a cabo un examen de la distribución y Cinemática del gas en su entorno explorándolo a través de la línea de λ 21 cm del hidrógeno neutro. Los datos fueron adquiridos con el VLA y el radiotelescopio de Parkes (Australia), respectivamente. Para el caso de Tycho se encontró una nubecita o grumo muy denso, parcialmente embebida/o en el frente de choque, posicionalmente coincidente con la región donde la expansión de este remanente está más desacelerada. En el estudio del entorno de W28, se han hallado aglomeraciones de gas que pueden dar cuenta de la compleja morfología de esta fuente en la frecuencia de 328 y 1465 MHz. También se realizó un estudio de inestabilidades fluidodinámieas (del tipo de Rayleigh-Taylor y Kelvin Helmholtz entre otros) que se pueden desarrollar en la expansión de los remanentes de supernova, con el fin de encontrar una explicación a ciertas estructuras que son visibles en las imágenes en radio de estos remanentes. Los resultados de los modelos analíticos y numéricos implementados fueron comparados con las observaciones. De esta manera fueron analizados los RSN de Tycho y W50. Hacia el NE del RSN de Tycho se observa una estructura periódica la que fue interpretada como evidencia del desarrollo de la inestabilidad de Rayleigh-Taylor considerando efectos viscosos y magnéticos. Por otro lado, el sistema W50-SS433 muestra en su lóbulo oriental una formación helicoidal. La misma puede ser explicada como resultado de la inestabilidad de Kelvin Helmholtz en simetría cilíndrica y contemplando jets o chorros con velocidades iniciales relativistas.

Abstract:
This research deals with the interaction between supernova remnants (SNR) and the surrounding interstellar medium, as well as with the developement of hydrodynamical instabilities that may arise in such processes. This work involves both a theoretical and an observational approach. A supernova is an event that occurs in extremely short timescales (the explosion itself takes just a few seconds, and the supernova can be visible even years after the explosion). However, their remnants can hold on for hundreds of thousand years, drastically modifying their environs and emitting energy in the whole electromagnetic spectrum, although the characteristic feature of SNR is that they are strong sources of radio emission of non-thermal origin (synchrotronic radiation). SNR can be regarded as “natural laboratories” in which it is possible to study a variety of phenomena, as for instance shock-wave physics and plasma instabilities under conditions that would be impossible to reproduce in terrestrial laboratories. The way in which these astrophysical objects evolve, depends both on endogenous and exogenous factors. So far, it is accepted that the dynamics of a “young” remnant is governed by the intrinsic characteristics of the explosion, while in a more evolved remnant, the characteristics of the ambient medium are dominant. In order to disclose the influence of intrinsic and extrinsic factors in the evolution of SNRs, in this PhD Thesis, I have carried out the study of five SNR: Tycho, W28, W30, W50 and CTB80, which are in different evolutive phases and possess different morphologies and internal features. Radio emission was analyzed through high resolution radiocontinuum images obtained with the Very Large Array (VLA; Socorro, New Mexico, USA). For the present research I have conducted multifrequency radioobservations of W28, W30 and CTB80. Due to the large angular extension of the same, it was necessary to make use of radio mosaicing techniques in order to achieve high resolution images at 1465 MHz. In addition, observations at 328 MHz were performed for W28 and W30. These observations allowed to obtain the best images ever produced for these rcmnants in the radio band, with unprecedented angular resolution and with excellent sensitivity. Based on these data in two frequencies, it was possible to investigate the spectral index distribution (α, defined as Sυ α υ-α,where S, is the frequency-dependant flux density) for W28 and W30. Moreover, for W28 and Tycho’s SNR, the distribution and kinematics of the surrounding gas was explored using the λ 21 cm line of neutral hydrogen. The data were acquired with the Parkes (Australia) radiotelescope and the VLA, respectively. In the case of Tycho’s SNR, a dense clump was found in positional coincidence with the region where this remnant shows the lowest expansion velocity. The clump appears as partially embedded inside the shock front. The study of the environs of W28, has allowed to detect gas concentrations that may account for the complex morphology this remnant exhibits at the frequencies of 328 and 1465 MHz. Besides, I have investigated the fluid-dynamic instabilities likely to develop during the expansion of SNR (such as Rayleigh-Taylor and Kelvin Helmholtz instabilities, for instance), with the aim of explaining certain structures that appear in the radio images of these remnants. Analytical and numerical models were compared with observations of W50 and Tycho’s SNR. Toward the NE of Tycho’s SNR, a quite periodic structure is observed that is interpreted as the developement of Rayleigh-Taylor instabilities including viscous and magnetic effects. The W50-SS 433 system shows a helicoidal formation in its eastern lobe, which can be explained as arising in the Kelvin Helmholtz instability in cylindrical symmetry, taking relativistic jets into account.

Vazquez, Gustavo. "Análisis genético y bioquímico del metabolismo del poli(3-hidroxibutirato) (PHB) en Bacillus megaterium" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Las estrategias para poder clonar los genes involucrados en la síntesis, movilización o metabolismo del PHB en otras especies bacterianas abarcan 3 tipos: I) Complementación de cepas que no poseen actividad de alguna de las enzimas que intervienen en el camino biosintético del polímero. II) Hibridización de ácidos nucleicos utilizando sondas heterólogas de la zona conservada . III) Secuenciación directa de las proteínas de gránulo y construcción de sondas homólogas. Durante el desarrollo de mi tesis de investigación utilicé la estrategia de la secuenciación directa de las proteínas de gránulos. Para lograr esto era necesario saber que tipo de proteínas están asociadas al gránulo y comparar su patrón de corrida en PAGE con los patrones de corrida de otras especies y establecer cual era la probable PHB sintasa. El patrón de proteínas mostró 3 bandas intensas en el gel: una proteína de 22 kDa que cuyo extremo aminoterminal ya había sido secuenciado (Steinbüchel, dato no publicado). Está sería la proteína estructural de gránulo (fasina); las otras dos bandas son de proteínas de 40 kDa y 43 kDa. En cambio la proteína de 40 kDa, sería la PHB sintasa, debido a que se encuentra en gran cantidad el momento de recolección de las bacterias para analizar su patrón de proteínas, fue el de mayor acumulación de PHB. Por lo tanto procedí y logré el secuencimiento del extremo aminoterrninal de dicha proteína. Con las secuencias de las proteínas de 22 kDa y 40 kDa, diseñé dos sondas y con ellas realicé estudios de Southern tanto sobre ADN genómico como sobre plásmidos que contienen genes clonados de B. megaterium que intervienen en el metabolismo del PHB. Con estos experimentos se detectó un segmento de ADN cromosómico de B. megaterium que hibridaba con la sonda de fasina. Cuando se secuenció este fragmento se descubrió que contiene 3 genes que estuvieron involucrados en la transactivación de la Tiolasa II de E. coli. Dos de dichos genes mostraron, por comparación con secuencias proteínas y secuencias de ADN de los bancos de datos, que tenían una gran homología con un par de proteínas sensor-activador involucradas en la regulación del operón ato de E. col mediada por el complejo σ54 holoenzima RNA polimerasa. También mostraron una gran homología con otro activador de B. subtilis dependiente de σ54.El tercer gen mostraba homología con el gen pbt que codifica para la enzima Fosfobutiril transferasa (Pbt) en C. acetobutuylícum. Los análisis de la actividad enzimática de esta posible enzima Pbt de B. megaterium mostraron un patrón de expresión complejo: l) Sufre represión catabólica 2) Su pico de expresión se encuentra en el principio de la fase estacionaria 3) Se aumenta la expresión de este gen por la presencia de los aminoácidos valina, leucina e isoleucina. Finalmente, mediante experimentos de expresión en E. coli, tanto de la enzima Pbt como del activador dependiente de σ54 clonados de B. megaterium, corroboré que dicho activador está involucrado en la transcripción del gen pbt.

Vaena, Silvia Graciela. "Glicosilfosfatidilinositoles : su rol en transducción de señales en células de mamífero; estudio de su estructura" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los glicosilfosfatidilinositoles (GPIs) son una familia de compuestos que pueden actuar como anclas de proteínas a membranas celulares y también pueden estar libres en estas membranas. Por hidrólisis de GPI con fosfolipasa C específica de fosfatidilinositol (PI-PLC) se libera inositolfosfoglicano (IPG) que ha sido propuesto como segundo mensajero de insulina y otras hormonas. Resultados del laboratorio mostraron que ACTH es capaz de hidrolizar GPI y que un IPG con estructura conservada purificado de Trypanosoma cruzi es capaz de inhibir la acumulación de aldosterona mediada por ACTH en células adrenocorticales de vaca. El objetivo de este trabajo fue estudiar: a) GPIs presentes en corteza adrenal bovina, b) La participación de estos compuestos en la respuesta de ACTH y c) GPI y sus precursores en Schizosaccharomyces pombe, una sistema no estudiado hasta el presente, con el fin de buscar una fuente de GPI para los estudios biológicos. En este trabajo se mostró la presencia de anclas de GPI en corteza adrenal pues se encontraron compuestos suceptibles a ácido nitroso y se purificó parcialmente una enzima anclada por GPI la fosfatasa alcalina, FAL, cuyo ancla fue utilizada como fuente de IPG y se probó su efecto inhibitorio sobre la respuesta de ACTH. Con respecto a la participación de GPI en la respuesta de ACTH, se encontró que esta hormona es capaz de activar una PI-PLC, a través de una proteína G inhibible por toxina de pertussis, Gi/o, en células adrenocorticales, lo que muestra que el receptor de ACTH puede acoplarse a más de un tipo de proteína G (Gs, Gi). La activación de PI-PLC por la hormona sugiere la producción de IPG. Se encontró que un IPG purificado de T. cruzi, fue capaz de inhibir en células adrenocorticales la producción de aldosterona, corticosterona (en rata) y cortisol (en vaca). ACTH utiliza AMPc como segundo mensajero. Los resultados sugieren que el efecto inhibitoriode IPG estaría mediado por una activación de fosfodiesterasa, enzima que degrada AMPc, y una inhibición de PKA. Se sabe que IPG es liberado al medio extracelular y luego entra en la célula donde actúa. En concordancia con este hecho hemos visto que: a) los sobrenadantes de células tratadas con ACTH son capaces de inhibir la respuesta de la hormona y b) el agregado del anticuerpo anti-CRD contra IPG aumenta la acumulación de esteroides mediada por ACTH. Estos resultados muestran que ACTH es capaz de liberar IPG el cual inhibe su respuesta y reafirman la hipótesis de que el IPG participa en la respuesta fisiológica de esta hormona. Por otro lado, con el objeto de obtener una fuente de GPI para realizar los estudios biológicos, más fácil de trabajar que el trypanosoma, se estudiaron GPI y sus precursores, los inositolfosfolípidos, en S. pombe, pues se ha encontrado que en otra levadura, Saccharomyces cerevisiae, estas anclas son abundantes. S. cervisiae es la única levadura cuyos GPIs han sido estudiados hasta el momento por lo cual fue interesante encarar el estudio de otra levadura, Schizosaccharomyces pombe de caracteristicas biológicas diferentes a S. cervisiae. Se ha visto que los inositolfosfolípidos consisten principalmente en fosfatidilinositol y no contienen alquilglicerol ni ceramida. Se ha obtenido la estructura completa de estos inositolfosfolípidos por estudios en TLC, RPTLC y CGL, a partir de cultivos con o sin incorporaciones de palmitico radioactivo. Se encontró un único ácido graso esterificando la posición 2 de fosfatidilinositol y una mezcla en posición 1. A pesar de que no se incorporó ceramida en inositolfosfoceramidas, se demostró la existencia de -esfingomielina, esfingofosfolípido característico de mamíferos, conteniendo ceramida radioactiva. Se detectó una banda de proteínas de PM 19.000 aproximadamente que incorpora -ácido palmitico. Luego de digestión con proteasa e hidrólisis con GPI-PLD se liberaron lípidos marcados que prueban la existencia de anclas en esta fracción. Por otra parte, se evidenció la presencia de GPIs libres en extractos orgánicos por susceptibilidad a ácido nitroso y PIPLC. Estos compuestos, fueron utilizados como fuentes de IPG y se probó su efecto inhibitoriosobre la acumulación de corticosterona por ACTH.

Abstract:
Glycosylphosphatidylinositols (GPIs) are best known as membrane anchors found on many eukaryote plasma membrane proteins ranging from protozoal to mammalian molecules. The hydrolysis of GPI by phosphatidyl-inositol phospholipase C (PI-PLC) releases an inositol phosphoglycan (IPG) which has been proposed to mediate the action of different hormones. Previous studies from our group demonstrated that ACTH was able to induce hydrolysis of GPI and that the IPG derived from T.cruzi inhibited ACTH-mediated accumulation of aldosterone in bovine adrenocortical cells. In this study we have investigated: a) the presence of GPI in bovine adrenal cortex, b) the involvement of this compound in ACTH signaling c) the presence of GPI and its precursors in Schizosaccharomyces pombe in order to obtain a GPI source for biological studies. Compounds sensitive to nitrous acid treatment were found in adrenal cortex which proved the presence of GPI in this system. An enzyme anchored by GPI, alkaline phosphatase, was partially purified from this tissue and was used as a source for IPG. This IPG was able to inhibit ACTH-mediated steroid accumulation. It was found that ACTH activates PI-PLC through a pertussis toxinsensitive G protein, Gi/o, in adrenocortical cells. This indicates that the ACTH receptor can activate different G proteins (Gs, Gi). PI-PLC activation would release IPG. An IPG of chemically defined structure obtained from T. cruzi was shown to inhibit ACTH-stimulated aldosterone and corticosterone production in rat adrenocortical cells as well as cortisol accumulation in bovine adrenocortical cells, suggesting that IPG signaling could be a conserved mechanism in mammalian ACTH action. cAMP is the second messenger in ACTH response. In agreement, IPG inhibition of ACTH action was found to be a consequence of a phosphodiesterase activation and protein kinase A inhibition. It is known that IPG is released to the extracellular medium and then re-enters the cell by an energy-dependent mechanism. Accordingly, we found that: a) the supernatants from ACTH-treated cells were able to inhibit the stimulation of corticosterone production by the hormone; b) the addition of IPG antibodies (anti-CRD) to adrenocortical cells increased ACTH-response. These results demonstrate that ACTH stimulates IPG release which in turn inhibits adrenal steroids production by the hormone. In order to obtain GPI for signaling experiments from an enriched source different from Trypanosoma cruzi, GPI and related lipids from a fission yeast, S. pombe, were studied. At present, S. cerevisiae is the only yeast where GPI structures have been determined and seem to be abundant. It was interesting to study these compounds from another yeast, S. pombe, which differs from S. cerevisiae in several biological features. lnositolphosphoceramide was found to be the main usphingolipid in S. cerevisiae. In contrast, diacylglycerol containing inositol phospholipids have been identified as the unique inositolphospholipids (IPLs) in S. pombe extracts and the complete structure of these compounds have been determined by TLC, RPTLC and GLC from -palmitic acid labeled or non-labeled cultures. A unique fatty acid esterified the sn-2 position of IPLs. In contrast, different fatty acids were found in the sn-1 position of these compounds. Sphingomielin, a sphingophospholipid characteristic of mammalian cells, containing -palmitic acid-labeled ceramide was detected. A GPI-anchored protein of 19 kDa has been found by palmitic acid metabolic labeling. Evidence for free GPIs was shown by nitrous acid release of inositol phospholipids from sugar containing lipids. IPGs obtained from these GPIs by PI-PLC treatment proved to inhibit ACTH action.

Urtreger, Alejandro Jorge. "La fibronectina como moduladora del fenotipo metastásico en líneas tumorales murinas" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los procesos de invasión tumoral y diseminación metastásica involucran tanto moléculas de adhesión como proteasas tumorales. Entre las moléculas de adhesión la fibronectina (FN), una glicoproteína de alto peso molecular presente en la matriz extracelular (ME) y en varios fluidos corporales, juega un importante rol en muchos aspectos de la interacción célula-célula y célula-sustrato incluyendo adhesión, spreading y migración, cicatrización y transformación maligna. El activador del plasminógeno tipo uroquinasa (uPA) es una enzima proteolítica capaz de activar el sistema fibrinolítico por conversión del plasminógeno en plasmina e interviene en numerosos fenómenos de remodelación de matrices tisulares. Los tejidos cancerosos suelen contener un exceso de uPA, hecho que genera una intensa actividad degradativa en torno de la masa tumoral primaria. De esta manera, las células tumorales son capaces de degradar diferentes componentes de la matriz extracelular y migrar a través de estos defectos, constituyendo un paso crucial en el proceso de invasión y metástasis. En el presente trabajo se muestra el desarrollo de modelos de cáncer experimental útiles para estudiar el rol de las proteasas y los componentes de la ME en la biología de la progresión tumoral. En una primera instancia se establecieron y caracterizaron las líneas celulares LM3 y LMM3. obtenidas por subcultivos sucesivos in vitro a partir de cultivos primarios de los adenocarcinomas mamarios murinos M3 y MM3 respectivamente. Durante la evolución de la línea LM3 se observó un incremento en la capacidad de crecer en forma independiente del anclaje, un desplazamiento hacia un nivel triploide en la distribución del número cromosómico y la perdida gradual de la expresión de FN. La capacidad invasiva local y la capacidad metastásica espontánea de la línea LM3 se incrementaron con el aumento del número de repique, en asociación con la progresiva pérdida de expresión de FN y el incremento en los niveles de uPA unido a la membrana celular. Por otra parte, las células LMM3 mantuvieron la incapacidad para expresar FN y la alta capacidad metastásica espontánea ya observada en su tumor parental MMS, adquiriendo además una mayor invasividad local. Con el fin de analizar el rol de la FN en el proceso metastásico, células de la línea LMM3 se transfectaron en forma estable con distintas construcciones conteniendo variantes wt (salvaje) y RGD (-) del cDNA de FN humana y se obtuvieron, de esta manera, clones celulares capaces de re-expresar esta FN humana recombinante. Si bien ninguno de estos clones fue capaz de ensamblar una matriz extracelular in vitro, los mismos mostraron una reducción en su capacidad migratoria y un incremento en sus propiedades adhesivas. Todos los clones celulares analizados mostraron una reducción significativa en su potencial metastásico experimental cuando se los comparó con clones control y con la linea celular parental. Una tendencia similar se observó en la capacidad metastásica espontánea. Estos resultados indican que la re-expresión de FN, carente del sitio de unión a células RGD e incapaz de formar matriz extracelular. es suficiente para disminuir el potencial metastásico de las células tumorales. Además de tener un efecto directo en la adhesión y migración celular, la expresión de FN podría estar modulando otros eventos celulares asociados a la cascada metastásica. Con el fin de analizar esta hipótesis, se estudió el potencial angiogénico y la capacidad de producir uPA, una proteasa altamente correlacionada con el fenotipo invasivo, de los diferentes clones celulares. Independientemente de la integridad de la secuencia RGD, todos los clones transfectados con el gen de FN mostraron una reducción significativa en la capacidad angiogénica respecto del clon control, indicando que la FN podría prevenir el desarrollo de nuevos vasos sanguíneos, ya sea capturando o impidiendo la liberación de factores angiogénicos. Por otra parte, la re-expresión de FN produjo un incremento en los niveles de uPA secretados al medio condicionado en todos los clones analizados, si bien aquellos que expresan la variante RGD (-) secretaron un 50% menos de uPA que aquellos que expresan la variante wt. Por otro lado, los clones FNwt fueron incapaces de unir uPA a la superficie celular, mientras que los clones RGD (-), al igual que el clon control, conservan esta capacidad. El tratamiento de células LMM3 o del clon control con FN exógena indujo un aumento en la secreción de uPA y una caída en la capacidad de unir uPA a la membrana plasmática, en forma similar a los efectos inducidos por la re-expresión de FN en los clones. La modulación por FN de la actividad uPA secretada y asociada a la membrana celular mostró ser dependiente de la secuencia RGD y de la integrina β1. Estos resultados sugieren que la capacidad de la FN de bloquear el desarrollo de las metástasis en los clones celulares analizados puede también estar parcialmente generada por la disminución en la capacidad de unir uPA a la superficie celular mediada por la FN, generando la reducción de la capacidad migratoria e invasiva de las células. En la presente tesis se describe por primera vez un mecanismo por el cual la FN interviene en la prevención de la diseminación metastásica de manera independiente de la formación de ME y del principal sitio de unión a células, la secuencia RGD. Además, demostramos que la FN es capaz de modular la expresión de uPA y de su receptor uPAR. Por otra parte se sugiere la existencia de otros mecanismos que influyen en el potencial metastásico. En la presente tesis se proveen además nuevas evidencias acerca de cómo moléculas de la ME pueden modular el fenotipo metastásico.

Abstract:
Tumor invasion and metastasis is a multistep process involving adhesion molecules as well as tumor proteases. In order to study the role of fibronectin (FN) in the metastatic process, we transfected a new cell line (LMM3), obtained in our laboratory by sequential subcultures in vitro, with two variants of a full length human FN cDNA. Besides affecting the adhesion and migration, we also analyzed if the reexpresion of FN may be somehow modulating the production of urokinase-type plasminogen activator (uPA), a protease highly correlated with the invasive phenotype. Our results showed that FN may prevent the metastatic dissemination independently of matrix formation and RGD sequence, the main cellular binding site. The results presented here strongly support a novel activity for the multifunctional glycoprotein FN regarding the regulation of uPA production as well as the capacity of tumor cells to bind uPA. We believe that the present report also provides a new insight on how ECM molecules like FN, may reduce the metastatic phenotype.

Torga, Jorge Román. "Estudios de difusión rotacional en moléculas fluorescentes a través de una doble excitación con pulsos láser ultracortos" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Tonina, Alejandra C.. "Algunas propiedades de la interacción de apareamiento nuclear" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Tettamanzi, María Cristina. "Aislamiento y elucidación estructural de withanolidos de Salpichroa origanifolia : Su posible rol en la estrategia defensiva de la planta frente a insectos" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se describe el aislamiento y elucidación estructural de los withanólidos de S. origanifolia recolectada en Buenos Aires en invierno y de la misma planta recolectada en la Pcia. de Salta en primavera-verano. De plantas recolectadas en Buenos Aires en agosto se aislaron cuatro salpichrólidos novedosos con anillo D aromático: los salpichrólidos E y F de cadena lateral no cíclica, los salpichrólidos H e I como mezclas 26R/26S que presentan la apertura hidrolítica del 24,25-epóxido en la cadena lateral y además el salpichrólido A, mayoritario de esta especie y el salpichrólido C. De planta recolectada en noviembre se aislaron los salpichrólidos A y C y un withanólido fenólico nuevo, el 15-hidroxiderivado del salpichrólido A. De S. origanifolia recolectada en la Pcia. de Salta se aislaron además de los salpichrólidos A y C tres withanólidos nuevos con anillo D aromático: los salpichrólidos J y K con estado de oxidación de C-22 y C-26 invertido y el salpichrólido M, isómero del salpichrólido H con estereoquímica inversa en C-24 y C-25. También se obtuvieron dos withanólidos nuevos con anillo D de cinco miembros: los salpichrólidos L y N. Los withanólidos aislados permitieron aclarar los caminos biosintéticos y degradativos en Salpichroa origanifolia. El seguimiento cromatográfico anual de los salpichrólidos mayoritarios, junto con los resultados de ensayos de actividad antialimentaria frente a Tribolíum eastaneum y Musca domestica sugieren que estos compuestos desempeñan rol insecticida en la planta.

Abstract:
The isolation and structural elucidation of the withanolides from S. origanifolia collected in Buenos Aires in winter and spring and from the same plant collected in Salta Province in spring summer are described. From plants collected in August in Buenos Aires we isolated four new salpichrolides with an aromatic ring D: salpichrolides E and F with an alicyclic side chain, salpichrolides H and I as an epirneric mixture 26R/26S which have suffered hidrolytic opening of the 24,25-epoxide on the side chain and also salpichrolide A, the major compound in this species and salpichrolide C. From plants collected in November we isolated salpichrolides A and C and a new phenolic withanolide, the 15-hidroxyderivated of salpichrolide A. From S. origanifolia collected in Salta Province we isolated besides the salpichrolides A and C three new withanolides with an aromatic ring D: salpichrolides J and K which present the oxidation state of C-22 and C-26 reversed and salpichrolide M, an isomer of salpichrolide H with inverted stereochemistry at C-24 and C-25. Salpichrolides L and N, two new withanolides with a five membered ring D were also isolated. These withanolide structures shed light on the biosyntethics and metabolic pathways of withanolides of Salpichroa origanifolia. The annual chromatographic follow-up of the main salpichrolides combined with the results of antifeedant activity assays against Tribolium castaneum and Musca domestica, allowed suggest that these compounds may have an insecticidal role in the plants.

Tami, María Cecilia. "Evaluación de vacunas peptídicas contra el virus de la fiebre aftosa en bovinos : Aislamiento y caracterización de mutantes de escape" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
EI virus de la fiebre aftosa (VFA) pertenece a la familia Picomaviridae y es el agente causal de la fiebre aftosa (FA). Esta enfermedad causa grandes pérdidas económicas en el mundo y se controla mediante vacunación regular con una vacuna a virus inactivado. Esta vacuna presenta desventajas relacionadas principalmente con la manipulación de grandes cantidades de virus vivo y la inactivación incompleta de las preparaciones virales. En este trabajo se evaluó el potencial de vacunas peptídicas representando los sitios antigénicos A y C derivados del VFA serotipo C3 unidos a un epitope para células T derivado del VFA de seotipo O, como alternativa a las vacunas convencionales. Con este fin, se realizaron 5 experimentos de vacunación que involucraron 120 bovinos en total y se estudiaron los efectos de diferentes esquemas de vacunación y distintas dosis de inmunógeno. En cada experimento se evaluó la inducción de anticuerpos neutralizantes, la linfoproliferaciónen respuesta a antígenos virales y la protección frente al desafío con virus homólogo. Los mayores niveles de protección alcanzados fueron del 40% y no fue posible establecer una correlación entre protección y título de anticuerpos neutralizantes o respuesta linfoproliferativa frente a virus entero. En 12 de 29 lesiones rescatadas de los bovinos vacunados con péptidos sintéticos que no resultaron protegidos frente al desafío viral, se aislaron virus mutantes con sustituciones aminoacídicas únicas en la región del sitio A, en posiciones críticas para la antigenicidad del VFA. Las posiciones que se vieron alteradas fueron R (141) —>G incluida en el triplete RGD altamente conservado en los diferentes serotipos de VFA, L (144) —>P y L (147) —>P. Las variantes virales se caracterizaron fenotipicamente en cuanto al tamaño de placa y a su velocidad de crecimiento y antigénicamente mediante ensayos de ELISA y neutralización con un panel de anticuerpos monoclonales secuenciales y conformacionales. Los resultados mostraron que las sustituciones L(144)—P y L(147)-P tienen un efecto muy importante en la antigenicidad del VFA y afectaron múltiples epitopes dentro del sitio antigénico A. La mutación R(141)-G, en cambio, tuvo un efecto menor afectando sólo la reactividad con un AcM. Se discuten las posibles modificaciones en la formulación de las vacunas peptidicas para aumentar su capacidad protectiva y las implicancias de las sustituciones aminoacídicas encontradas en las variantes virales.

Abstract:
Foot-and-mouth disease virus (FMDV) belongs to the Picomaviridae family and is the causative agent of foot-and-mouth disease (FMD). FMD is the economically most important disease of cattle and other farm animals and its control is based on regular vaccination with an inactivated whole-virus vaccine. However, there are several disadvantages in the use of such vaccines related to the risk of reintroduction of the disease by the handling of large ammounts of infectious virus or by incomplete inactivation of the antigen. In this work, the potential of peptide vaccines bearing antigenic site A and C regions and a T-cell epitope of FMDV serotype C3. was evaluated as an alternative to conventional vaccines. For this purpose, 5 different vaccination experiments, involving a total of 120 bovines, were carried out and the efects of modifications in the timing of the immunizations and of different doses of peptides were studied. Induction of neutralizing antibodies, lymphoproliferation in response to viral antigens and protection against challenge with homologous infectious virus were examined. The highest level of protection achieved was of 40% and protection showed a limited correlation with serum neutralization activity and lymphoproliferation in response to whole virus. In 12 out of 29 lesions from peptide vaccinated cattle that were not protected after challenge, FMDV mutants with a unique amino acid substitutions at antigenic site A, were identified. The replacements found were R(141)-G, at the highly conserved RGD motif, L(144)-P and L(147)-P. The results showed that substitutions L(144)-P and L(147)-P were critically involved in FMDV antigenicity afecting multiple epitopes within antigenic site A. However, substitution R(141)—G had a minor effect, affecting the reactivity of just one Mab. Variant viruses were also phenotipically and antigenically characterized. Possible modifications of the vaccine formulation to increase protective activity as well as implications of the substitutions identified in the viral mutants are discussed.

Stefano, Andrea Virginia. "Caracterización bioquímica de las variantes de GnRH (gonadotropin-releasing hormone) presentes en cerebro e hipófisis de pejerrey, Odontesthes bonariensis : Localización neuroanatómica y relación con distintas hormonas hipofisisarias" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Slep, Leonardo Daniel. "Síntesis, caracterización y propiedades de pentaciano(L)osmatos(II)" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo se prepararon compuestos de fórmula n-, con L = piridinas o pirazinas sustituidas. El aspecto más saliente de sus espectros UV-Vis es la presencia de bandas TCML (transferencia de carga del metal al ligando) intensas afectadas por acoplamiento espín-orbital, y que presentan un marcado efecto solvatocrómico. Los compuestos de Os(II) pueden ser oxidados en forma química o electroquímica a los correspondientes compuestos de Os(III), con potenciales redox para las cuplas OsII,III el rango 0.6-1.0 (ENH). El parecido entre los valores de potencial redox (ca —O.53V) para N-metilpirazinio (Mepz+) libre y coordinado a los tres MII(CN)53+ (M = Fe, Ru, Os) sugiere que la capacidad de retrodonación π de los tres metales es similar. Lo mismo sugieren los gráficos lineales con pendiente unitaria que se obtienen a partir de la energía de las bandas TCML de n- (M = Fe, Ru) en función de las de Os, y los valores de pKa, de la pirazina coordinada a los tres centros metálicos. Los procesos de disociación de L en n- muestran un mecanismo disociativo similar al encontrado en los análogos de Fe y Ru. Sin embargo las constantes de disociación específica Kl a 25°C son son cuatro y cinco órdenes de magnitud más lentas que en n- y n-, respectivamente. Se preparó el compuesto binuclear puenteado por pirazina 6-, que puede ser aislado como sal de potasio o tetrabutilamonio. Este compuesto se oxidó en etapas a y en acetonitrilo/0.1 M BU4NPF6 registrando los espectros UV-Vis-NIR, IR y EPR. La especie de valencia mixta presenta una constante de comproporción Kc = 10^5.8, y propiedades espectroscópicas que indican un alto grado de acoplamiento entre los centros metálicos.

Abstract:
The series of complexes OsII(CN)5L]n-, with L = pyridine or pyrazine derivatives, were prepared in aqueous solution and, in some cases, as sodium or potassium salts. The main feature in the UV-visible spectra is the appearance of an intense, asymmetric MLCT band, split under spin-orbit coupling which shows strong solvatochromic energy shifts in different organic media. The Os(II) complexes can be oxidized chemically or electrochemically to the Os(III) species. The redox potentials for the OsII,III couples are in the range 0.6-1.0 V (NHE) depending on L. Reduction potenfials for the bound- and free Mepz+ ligand showed similar values, ca. -0.53 V (NHE), for the three n- complexes, suggesting similar back-bonding abilities of Fe, Ru and Os; this is confirmed by the linear plots with unit slope obtained for the energy of the MLCT bands of the n- complexes (M = Fe, Ru) against the values for the n- complexes and the values found for the pKa of bound pyrazine. The dissociation rate constant for L release in n- ions shows a saturation kinetic behavior, typical of dissociative mechanisms found for the Fe and Ru analog complexes; the specific dissociation rate constants kl, are about four and five orders of magnitude slower at 25°C than the values found in 3- and 3-, respectively. The pyrazine-bridged diosmium(II) complex 6- has been synthesizcd as the potassium salt and was converted to the tetrabutylammonium compound by ion exchange. Its stepwise oxidation to the and states was monitored spectroelectrochemically in acetonitrile/0.1 M BU4NPF6, in the UV-vis-NIR and IR regions and by EPR. The mixed-valent ion has a comproportionation constant Kc of 10^5-3 and several spectral features which point towards a high degree of metal-metal coupling.

Sivori, Andrea Silvia. "Estudio e identificación de enzimas extracelulares en Ascobolus gamundii" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se estudió la capacidad de Ascobolus gamundii (Pezizales, Ascomicetes) para producir enzimas degradativas extracelulares in "vitro". Luego de analizar el patrón enzimático producido en medios sintéticos líquidos, se concluyó que A. gamundii es un hongo coprófilo productor de enzimas celulolíticas, xilanolíticas y amilolíticas. Los tres complejos enzimáticos estudiados son inducibles por sustrato, y parcialmente inhibidos en presencia de glucosa en el medio de cultivo. Todos presentaron también una inducción específica, así como una inducción generalizada de menor intensidad con otros sustratos complejos no específicos. Los tres sistemas presentan además múltiples formas enzimáticas, isoenzimas. característica de este tipo de enzimas. Todas las enzimas son extracelulares, liberadas al medio después de sintetizarse durante el crecimiento activo y no se quedan adsorbidas a las paredes micelianas. Se determinaron además características bioquímicas de todas las enzimas estudiadas, así como el requerimiento de cationes en el medio de cultivo. El sistema celulolítico está compuesto por las tres enzimas componentes características de este complejo enzimático: actividad endoglucanasa, exoglucanasa y β-glucosidasa. Estos resultados confirman que este hongo es un verdadero agente celulolítico, adaptado al medio en el que vive naturalmente. El sistema celulolítico se induce preferencialmente en presencia de celulosa cristalina como sustrato. Se logró aún mejor inducción al utilizar un medio mixto de celulosa cristalina y xilano, que estaría reflejando en mejor medida las condiciones naturales en que crece A. gamundii. Con lactosa, se indujo el sistema celulolítico pero ésta fuente de carbono no logró promover el crecimiento del hongo. Lacelobiosa no resultó un buen inductor del sistema celulolítico. El sistema xilanolítico está representado mayoritariamente por la actividad endoxilanasa, ya que la actividad β-xilosidasa resultó muy baja, casi nula. Este sistema se indujo preferencialmente con xilano; pero al igual que en el caso del sistema celulolítico, el medio mixto resultó superior. La lactosa tuvo un comportamiento similar al obtenido con el sistema celulolítico. El sistema amilolítico está representado por la actividad α-amilasa y la actividad glucoamilasa. La inducción con almidón obviamente resultó la más favorable para este complejo enzimático, así como el uso de maltosa.

Abstract:
The ability of Ascobolus gamundii (Pezizales, Ascomycetes) to produce extracellular degrading enzymes "in vitro" was studied. After analysing the enzymes produced in artificial liquid media. A. gamundii appears to be a true cellulolytic fungus also showing xylanolytic and amylolytic activity. The three enzyme systems studied are truly extracellular. The enzymes in all cases are synthesised during active growth and diffuse out of the mycelium into the liquid media away from the hyphai walls. These enzyme systems can be induced not only by specific substrates, but also in a lower degree by other complex polymers as well. The three are partially inhibited in the presence of glucose (in no case total inhibition is achieved). For each enzymatic activity A. gamundii produces several isozymes, characteristic of these types of enzymes. Biochemical characterisation,of each enzyme as well as the need of several cations in the growth media was also determined. The cellulolytic system of A. gamundii produces its three characteristic enzymes: endoglucanases, exoglucanases and β-glucosidases, confirming its role as a decomposer and its adaptation to its natural habitat: dung. This enzyme system is induced specifically by crystalline cellulose. An even better induction was achieved when using a combined medium of crystalline cellulose and xylan which mirrors better this fungus' natural environment. When lactose was used as an inducer. high specific activity was obtained because growth was not promoted. Cellobiose proved to be a poor inducer for this enzyme system. The xylanolytic system is nearly entirely represented by the endoxylanase activity. β-xylosidase activity was found to be very low in all fractions studied, rendering a limitation for its survival in nature. Good induction was obtained with xylan, but as it happened with the cellulolytic system, the combined medium of crystalline cellulose and xylan proved better induction. With lactose, the results obtained were similar to those for the cellulolytic system. The amylolytic system is represented by the α-amylase and the glucoamylase activity. Induction with starch was the best for this enzyme system, as well as the use of maltose for this purpose.

Singer, Elisa. "Análisis de técnicas de radioterapia conformada para irradiación de superficies geométricas de poca profundidad" (1999). Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Silva, Adrian Angel. "Contribución al conocimiento de la geología e hidrogeología del sistema acuífero termal de la Cuenca Chacoparanense Oriental Argentina" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El alumbramíento de aguas termales de la región oriental de la Cuenca Chacoparanense (sector uruguayo) es conocido desde mediados de la década del 40 a consecuencia de la prospección en busca de petróleo. Las posibilidades de alumbramíento en el sector argentino han sido motivo de diversas especulaciones geológicas hasta mediados de la década del 90 donde las perforaciones en busca de aprovechar el recurso se sucedieron en pocos años con diversos resultados. En la República Oriental del Uruguay se ha realizado con anterioridad estudios parciales tendientes a la cuantificación del Recurso Hidrotennal y sus posibilidades, (TAHAL, 1986, HIDROSUD, 1988, entre otros). El objetivo de este estudio es la correlación e interpretación geológica e hidrogeológica, en un contexto regional, a consecuencia del alumbramíento en el sector Argentino Las Formaciones continentes y/o relacionadas con el Sistema Acuífero Termal de la Cuenca Chacoparanense Oriental son las denominadas Formación Piramboiá (Tacuarembó), Formación Botucatú (Rivera) y Formación Serra Geral, (Arapey), ampliamente estudiadas en afloramiento y que tienen continuidad en el subsuelo argentino. En el área de estudio han caracterizadas y correlacionadas en este estudio. El Sistema Acuífero Termal ha sido definido en función de sus características litológicas, hidráulicas e hidroquímicas relacionándolo con sus áreas de recarga en el Uruguay y diferenciándolo hidrogeologicamente de los acuíferos que en unidades las misma Formaciones se hayan en el subsuelo en brasileño. Se presentan aquí, la geofrsica de prospección, la geología de las perforaciones y cinco años de control hidráulico e hidroquímico del recurso que permitió confeccionar el mapa hidrogeológico del Sistema Acuífero Termal y la cartografia temática relacionada incluyendo una evaluación estimativa del recurso.

Abstract:
The presence of thermal water in the eastern area of Chacoparanense bowl (República Oriental del Uruguay) is known since the decade of 1940 because of the researches in search of petroleum. Although some institutions made studies to quantify the hydrothermal system, they said nothing about regional aspects. The possibility of finding hydrothermal groundwater in Argentina has motivated speculations until 1990. The formations which constitute the thermal system of the Chacoparanense bowl are: Piramboiá, Botucatú (Rivera) y Serra Geral (Arapey). This research characterize and correlate the continuity of them in Argentina. Their litology, hydraulics and hydrchemistry characteristics have been related to the areas in Uruguay y Brasil. The following thesis shows the geophisical exploration, geologic drilling and five years of hydraulics and hydrochemistry which let us made the Hydrogeological Map and the thematic mapers. It is included a evaluation about the amount of water that it could be found.

Semenas, Liliana Graciela. "Estructura comunitaria de parásitos en Galaxias maculatus (Pisces, Galaxiidae) y Percichthys trucha (Pisces, Percichthyidae) de lago Escondido (Río Negro, Argentina)" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se estudiaron durante 2 años los ecto y los endoparásitos de Galaxias maculatus y de Percichthys trucha en un ambiente andino oligotrófico, el lago Escondido, para caracterizar comunidades de parásitos en peces autóctonos de Patagonia. Los peces presentaron buen estado sanitario y características tales como sexo, peso, talla y edad fueron similares a las registradas en otras poblaciones de estas especies en lagos andinos. Se registraron un total de 26 taxones, de los cuales 16 parasitaron al puyen y 17 a la perca. Diplodon chilensis (Mollusca). Ergasilus síeboldi (Crustacea), Derogenes patagonicus, Tylodelphys barilochensis (Digenea) y Camallanus corderoí (Nematoda) se encontraron en ambos; Phílureter trigonopsis, Gymdactylus sp (Monogenea), Posthodiplostomum sp, metacercarias de Acanthostomoídes apophalliformis (Digenea), Contracaecum sp (Nematoda) y Nippotaenia sp (Cestoda) en puyen y adultos de Acanthostomoídes apophalliformis, Polylekithum sp (Digenea). Philonema percihthydis, Hysterothylacium patagonense (Nematoda), Acolpenteron sp y Tetracleídus sp (Monogenea) en perca. El gloquidio de D. chilensis ocupó el mayor número de localizaciones en ambos peces y la branquia fue el órgano con el mayor número de especies parásitas. De un total de 8 gremios, reconocidos en el presente trabajo, los parásitos del puyen conformaron 7 y los de las percas, 6. Las distribuciones presentaron un buen ajuste a la Binomial Negativa y las especies mayoritariamente endoparásitas y autogénicas. tienen ciclos heteroxenos. Los reclutamientos presentaron 2 máximos y uno de ellos se produjo durante los meses más cálidos. La abundancia y la intensidad media presentaron diferencias significativas en todas las especies. Las variaciones de la edad fueron importantes para las variables infrapoblacionales, infracomunitarias y de las comunidades componentes. La presencia de especies centrales fue escasa. Los valores de la dominancia, la riqueza, la diversidad, la equitabilidad, la similitud y la estabilidad fueron intermedios. Las características analizadas indicaron que los parásitos de peces del lago Escondido estarían en el continuo entre comunidades aislacionistas e interactivas, de modo que sus patrones no son totalmente estructurados ni totalmente estocásticos.

Abstract:
Ecto and endoparasites of Galaxias maculatus and Percíchthys trucha from lake Escondido, an oligotrophic andean lake, were studied during two years in order to charactenze parasite communities in autochthonous freshwater fishes from Patagonia. Fishes had a good sanitary condition and their population characteristics (sex, length, weigh and age) were similar to those registered for these species in other andean lakes. A total of 26 parasite species were registered, of these 16 were in puyen and 17 in perca. Diplodon chilensis (Mollusca), Ergasilus sieboldí (Crustacea), Derogenes patagonicus, Tylodelphys barilochensis (Digenea) and Camallanus corderoi (Nematoda) were ¡n both hosts, Philureter trigonopsis, Gymdactylus sp. (Monogenea), Posthodiplostomum sp., metacercariae of Acanthostomoídes apophalliformis (Digenea), Contracaecum sp. (Nematoda) and Nippotaenía sp. (Cestoda) in puyen and adult of Acanthostomoides apophallifonnis, Polylekithum sp. (Digenea), Philonema percíhthydis, Hysterothylacium patagonenese (Nematoda), Acolpenteron sp. and Tetracleidus sp. (Monogenea) in perca. The glochidium of D. chilensis had the greatest distribution among sites and, gills were the site parasitized by more species. Parasites defined 8 guilds, 7 of these were in puyen and 6 in perca. ln general, cycles were heterexoneous with autogenic endoparasites and distribution of species had a good fit to Negative Binomial. Recruitments had 2 maximums, one of which took place during the warm period. Significative differences were registered for median abundance and intensity for all the species. Variations of age were an important factor not only for infrapopulations variables but for infracommunities and component communities, too. There were few core species. Values of dominance, diversity, richness, equitability, similarity and stability were medium. All these characteristics showed parasites in lake Escondido were in the continuum between interactive and aislacionist communities so patterns found were neither structured nor stochastic.

Título :	Estructura comunitaria de parásitos en Galaxias maculatus (Pisces, Galaxiidae) y Percichthys trucha (Pisces, Percichthyidae) de lago Escondido (Río Negro, Argentina)
Autor :	Semenas, Liliana Graciela
Director :	Ostrowski, Margarita de Núñez
Año :	1999
Editor :	Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación :	Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Departamento de Biología
Grado obtenido :	Doctor en Ciencias Biológicas
Ubicación :	Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_3160_Semenas
Idioma :	Español
Area Temática :	Biología / Parasitología Biología / Ecología
Palabras claves :	GALAXIAS MACULATUS (PUYEN CHICO); PERCICHTHYS TRUCHA (PERCA DE BOCA CHICA); MONOGENEA (PHIURETER TRIGONOPSIS, GYRODACTYLUS SP, ACOLPENTERON SP, TETRACLEIDUS SP); DIGENEA (DEROGENES PATAGONICUS, TYLODELPHYS BARILOCHENSIS, T. CRUBENSIS, ACANTHOSTOMOIDES APOPHALLIFORMIS, POSTHODIPLOSTOMUM SP, POLYLEKITHUM SP); CESTODA (NIPPOTAENIA SP); NEMATODA (CAMALLANUS CORDEROI, CONTRACAECUM SP, PHILONEMA PERCIHTHYDIS, HYSTEROTHYLACIUM PATAGONENSE); MOLLUSCA (DIPLODON CHILENSIS); CRUSTACEA (ERGASILUS SIEBOLDI); DISTRIBUCION; LOCALIZACION; GREMIO; CICLO DE VIDA; INFRAPOBLACION; INFRACOMUNIDAD; COMUNIDAD COMPONENTE; CONJUNTO ESTOCASTICO; CONJUNTO ESTRUCTURADO; GALAXIAS MACULATUS (PUYEN CHICO); PERCICHTHYS TRUCHA (PERCA DE BOCA CHICA); MONOGENEA (PHIURETER TRIGONOPSIS, GYRODACTYLUS SP, ACOLPENTERON SP, TETRACLEIDUS SP); DIGENEA (DEROGENES PATAGONICUS, TYLODELPHYS BARILOCHENSIS, T. CRUBENSIS, ACANTHOSTOMOIDES APOPHALLIFORMIS, POSTHODIPLOSTOMUM SP, POLYLEKITHUM SP); CESTODA (NIPPOTAENIA SP); NEMATODA (CAMALLANUS CORDEROI, CONTRACAECUM SP, PHILONEMA PERCIHTHYDIS, HYSTEROTHYLACIUM PATAGONENSE); MOLLUSCA (DIPLODON CHILENSIS); CRUSTACEA (ERGASILUS SIEBOLDI); DISTRIBUTION; SITE; GUILDS; LIFE CYCLES; INFRAPOPULATIONS; INFRACOMMUNITIES; COMPONENT COMMUNITIES; SOCHASTIC - STRUCTURED ASSEMBLAGES
URL al Documento :	http://digital.bl.fcen.uba.ar/Download/Tesis/Tesis_3160_Semenas.pdf
URL al Registro :	http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_3160_Semenas

Segura, Enrique Carlos. "Memorias asociativas en espacios de dimensión infinita" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se presenta una generalización del modelo de red neuronal de Little-Hopfield para memorias asociativas que considera el caso de un continuo de unidades de procesamiento. El espacio de estados corresponde a un espacio euclideo de dimensión infinita. Se propone una dinámica que minimiza una funcional de energia que es una extensión natural del caso discreto. Se analiza el caso en que la matriz de pesos sinápticos es definida mediante la regla de autocorrelación (regla de Hebb) con memorias ortogonales, incluyendo estabilidad de las memorias, tamaño de sus cuencas de atracción y estados espurios. También se considera el caso en que las memorias no son ortogonales, demostrando que es posible imponer “resolución finita” a las memorias almacenables con una limitación del tamaño minimo de las áreas o “patches” de actividad; también indicamos dos formas posibles de hacerlo. Finalmente, se discute la generalización de la dinámica no deterministica con temperatura finita no nula, mostrando que el modelo continuo puede ser extendido al caso en que la ley de evolución no es deterministice, del mismo modo que el modelo discreto de Hopfield se extiende de manera de incluir los efectos de temperatura finita a través de la dinámica de Glauber.

Abstract:
A generalization of the Little-Hopfield neural network model for associative memories is presented that considers the case of a continuum of processing units. The state space corresponds to an infinite dimensional euclidean space. A dynamics is proposed that minimizes an energy functional that is a natural extension of the discrete case. The case in which the synaptic weight matrix is defined through the autocorrelation rule (Hebb rule) with orthogonal memories is analyzed, including stability of memories, size of basins of attraction and spurious states. We also consider the case of the memories that are not orthogonal, proving that it is possible to impose a “finite resolution” to the storable memories by limiting the minimum size of the activity patches; we also indicate two possible ways of doing this. Finally, we discuss the generalization of the non deterministic, finite temperature dynamics, showing that the continuous model can be extended to the case in which the evolution law is non deterministic, in the same way as the Hopfield, discrete model is extended to include finite temperature effects through the Glauber dynamics.

Scian, Beatriz Viviana. "Variabilidad interanual de la precipitación en la Pradera Pampeana y su relación con algunos índices de circulación atmosférica" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo de investigación se amplian los conocimientos de las relaciones entre los incrementos o deficiencias de las lluvias observadas en la pradera pampeana y las anomalías en la circulación de la atmósfera a través de algunos índices hemisféricos, en particular, el indice de Oscilación del Sur (SOI) y las anomalías de la temperatura superficial del mar en el Pacífico ecuatorial (SST3). Los datos utilizados son las lluvias mensuales de más de 40 localidades de la llanura pampeana con una longitud de registros desde comienzos de siglo hasta al menos la década del ‘80. Se hace una comparación de indices hídricos que acordes a la finalidades de sus concepciones: agronómica, climática, hidrológica, están mejor detallados en algunos rangos de valores extremos, que en otros. A fin de estudiar dichos extremos, sobre todo las sequías, se hace evidente los beneficios del Indice de Precipitación Estandarizada y normalizada, IPE, a escala mensual. Demuestra ser un buen indicador de sequías y episodios húmedos en la región, no sólo por su escala temporal variable sino por su mejor definición en rangos de bajos porcentajes de frecuencia. Empleando métodos estadísticos de clusters se circunscribe la zona de estudio a tres subregiones de la pampa central de Argentina: Sudoeste, Norte y Este, respectivamente. Los coeficientes de correlación del IPE para los meses estivales (Nov-Dic-Ene) con el SOI mensual muestran valores significativos al nivel del 5%, desde Junio a Agosto alcanzando un valor de -0.56 entre el SOI de Agosto y el IPE de Diciembre. El signo indica que una alteración en la posición del Anticiclón del Pacífico, que origina SOI negativos/positivos, produciría anomalías positivas/negativas en la precipitación de los meses de Noviembre y Diciembre cuando esta fase negativa/positiva del SOI se anticipa a partir del mes de Junio. Las correlaciones entre el IPE mensual y la serie de temperatura superficial del mar en la región Niño3 (SST3). a partir de 1949, son positivas y con valores máximos en las regiones Este y Norte; observándose valores de los coeficientes de hasta 0.58 entre la SST3 de Julio con el IPE de Diciembre y la SST3 de Octubre con el IPE de Noviembre, respectivamente. En la región Sudoeste sólo alcanza el 0.38 entre la SST3 de Octubre con el IPE de Noviembre. Este resultado sugeriría una mayor influencia del SOI que la SST3 sobre las lluvias en el sudoeste pampeano. Las anomalías de la precipitación para los episodios cálidos o fríos definidos por Ropelewski y Halpert (1996) tienen sus extremos al fin de la primavera y comienzos del verano. Los desfasajes en el comportamiento de las dos curvas se producen entre Noviembre y Diciembre, este último es el mes extremo húmedo. Existe un segundo pico, más débil entre 4 a 7 meses más tarde. Se analizan las anomalías del IPE mensual con las cinco fases del SOI establecidas por Stone y Auliciems (1992). En general, resulta en la región de estudio que la fase 2 y la fase 4 están asociadas a corrimientos negativos en la precipitación mediana, deficiencias de lluvia. Por otra parte, las fase 1 y 3 coinciden en relacionarse con desplazamientos positivos de las medianas de lluvia. Sin embargo, pueden darse situaciones con perturbaciones dentro de un ciclo positivo o negativo del SOI que verifican lo opuesto. De la inspección de los corrimientos medianos para la primera mitad del período de estudio, 1900-1940, y para la segunda, 1941-1988, se nota en toda la región la influencia positiva del mes de Marzo en fase 4 durante el último período pero no se encuentra notorio aumento (como era de esperar por las tendencias positivas de la lluvia en las últimas décadas) en los meses estivales, ni en fase 1 ni en fase 3. con respecto al primer período. Se obtuvieron buenos resultados al analizar los corrimientos significativos en las medianas de la precipitación de los meses de Noviembre y Diciembre ya que pueden anticiparse a partir de las condiciones del SOI (fases) desde el mes de Julio. Se considera a Agosto como el mejor mes predictor, con cuatro fases significativas, ya que las fases 1 y 3 del SOI provocarian anomalías positivas y fases 2 y 4 anomalías negativas para el mes de Diciembre, en la región Sudoeste.

Abstract:
In this study the relationship between anomalies in the pampean prairie precipitation and the anomalous behaviour of the atmospheric circulation, particularly focused on the Southern Oscilation Index (SOI) and the sea surface temperature anomalies in the equatorial Pacific (SST3) is examined. Data consist of secular month precipitation for more than 40 selected stations over the pampean plains. A comparison between different precipitation indexes based on agricultural, climatic and hydrological concepts is performed. In analyzing extreme events, such as drought, the Standarized Precipitation Index (SPI) or IPE in spanish, shows adequacy at a variable time scale. It has shown good properties when monitoring drought or wet episodes in the region, particularly, when classifying extreme conditions. Three coherent subregions in the central pampas of Argentina, Southwest, North and East, respectively were determined by clustering methods. The results indicate that precipitation over the whole region is significantly influenced by the SO phenomenon. A leading SOI correlated with the summer (Nov-Dec-Jan) anomalous rainfall shows significant coefficients, at 5% significance level, from June to August (peak values of -0.56, for August SOI-December IPE). A negative sign implies an anomalous position of the Pacific High that gives rise to negative SOI starting from June onwards, which in turn would produce positive anomalies in November and December precipitation. A positive SOI phase for the same two months, would be related to negative rainfall anomalies. Correlations were performed too, between monthly SPI values and the sea surface temperature of the Equatorial Pacific Niño3, SST3. From the latter, possitive and maximun coefficients result for the East and North regions, with values of 0.58 for each of July SST3 -December IPE and October SST3 November IPE, respectively. The Southwest portion reaches only a coefficient of 0.38 for October SST3 - November IPE, suggesting a Stronger SOI impact on the southwest prairies rainfall compare to that of the SST3. Anomalous precipitation for warm and cold events as defined by Ropelewski and Halpert (1996) have extreme values for spring and early summer. Maximum out of phase values between the two cases is reached in November and December, being the latter the extreme wet. A second and weaker peak occurs 4 to 7 months later. In order to clarify this behaviour SPI anomalies are analized through the SOI five phases established by Stone and Auliciems (1992). Results from the region evidence that: phases 2 and 4 are related to a negative shift in the median precipitation (rainfall deficit), while phases 1 and 3 are associated with a positive shift in median precipitation. Nevertheless, small perturbations during a positive or negative SOI cycle may produce opposite results. A significatively positive shift during March in phase 4 was observed in the period from 1941-1988, when an increase in summer rainfall during phase 1 and phase 3 had been expected as a consecuence of the high positive precipitation trends of the last decades in the region. Significative median rainfall shifts (a=0.05) for November and December are able to be forecasted from SOI conditions starting on July phases. August is the best predictor SOI month for December rainfall anomalies in the Southwest region. It shows four significative phases, 2 and 4 producing negative IPE shifts, and 1 and 3 positive ones.

Schulz, Hernán Gustavo. "Estudio teórico y experimental de reacciones con reactivos organometálicos involucrando enlaces C-Li y C-Cr" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se investigó la influencia del estado de agregación de varios compuestos organolíticos en su estructura y en su reactividad frente a reacciones de índole muy diversa. El estudio de la carbonilación de aril-litios monoméricos permitió controlar la relación entre los isómeros geométricos del 1,2-diacetoxi-1,2-bismesitileteno y condujo a1 desarrollo de un método de sintesis de diarildicetonas impedidas. La relación enérgetica entre los isómeros calculada por MNDO justifica la tendencia observada con dichos compuestos. Las características diméricas del fenil-litio en THF determinaron que al ser utilizado en exceso en la reacción con E-cinamaldehído se logre obtener especificamente dihidrochalcona, producto de un reordenamiento en el cual se evidencia la participación del dímero del organolítico, en lugar del producto de adición 1,2. Se propuso un mecanismo para esta nueva reacción que se verificó por medio de estudios experimentales, espectroscópicos y teóricos. La formación de posibles agregados mixtos amiduro de litio-amina se estudió por métodos semiempíricos, ab initio y DFT para el sistema morfolil-litio- morfolina. En dicha evaluación se tuvieron en cuenta los resultados obtenidos con el piperidil-litio y se determinó el probable sitio de unión entre la amina y el amiduro. Se sintetizaron y caracterizaron nuevos complejos organometálicos de cromo (III), que tienen la particularidad de ser altamente selectivos en sus reacciones de adición. Su reactividad se investigó por medio de adiciones a compuestos carbonílicos en diversas condiciones de reacción, incluyendo variaciones del solvente, de la relación reactivo:sustrato y de la naturaleza del compuesto carbonílico. Se sintetizó una variedad de aminoalcoholes quirales y se verificó su actividad como catalizadores quirales. Como modelo, se realizó un estudio preliminar sobre la enantioselectividad de los complejos de cromo del tipo RCrCl2(THF)3 en la adición a aldehídos en presencia de ligandos quirales.

Santos, Juan Miguel. "Contribución al estudio y el diseño de funciones de refuerzo" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Sanchez, Virginia E.. "Producción de proteasas fúngicas por fermentación en estado sólido para su aplicación en la industria de alimentos" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se evaluó la utilización de la fermentación en estado sólido para producción de proteasas por Aspergillus. A través de una selección entre 210 cepas sobre placas de agar leche en condiciones relevantes para la FES, se seleccionó a Aspergillus niger 91 como la más adecuada para estudios futuros. Se ensayó el efecto de diferentes sustratos naturales. La mejor producción de proteasa se obtuvo por fermentación de una mezcla de soja : afrechillo de arroz (7:3), con una relación carbohidrato/proteína de 0,8 y una proporción reducida de partículas de soja superiores a 3,35 mm. La adición de carbohidratos y fuentes de nitrógeno y proteína no tuvo efecto significativo. Se realizó un estudio cinético de la FES evaluando el efecto de parámetros ambientales (contenido de agua inicial - actividad de agua, pH y temperatura). La proteasa producida mostró un modelo mixto, de asociación parcial al crecimiento; se describió la cinética de producción de biomasa, consumo de sustrato, proteasa y conidios con una ecuación logística. En las condiciones óptimas (40% Ho, Aw 0,969, pH0 6, 37°C), Aspergillus niger 91 produjo 10000 UP/g SS0(15800 UP/g msk), siendo esto varias veces superior a otros sistemas de fermentación. La relación lineal encontrada entre la pérdida de peso seco y tanto la biomasa como la proteasa facilita la estimación de éstas a través de un parámetro facilmente medible. Se encontró una correlación entre la producción de proteasa y conidios y su asociación con un patrón común en la evolución del pH. Debido a la secreción diferencial de dos proteasas al medio se observaron variaciones en la actividad proteolítica y la estabilidad térmica de los extractos enzimáticos de acuerdo al tiempo de fermentación.

Abstract:
The feasibility of using solid state ferrnentation for the production of protease by Aspergillus fungi was evaluated. Aspergillus niger 91 was selected as being the most suitable for future studies, by screening among 210 strains on milk agar plates under relevant conditions for solid state fermentation. The effect of different natural substrates was tested. The best was obtained by fermenting a soybean : rice bran mixture (7:3), with a carbohidrate/protein around 0,8 and a reduced proportion of soybean particle size bigger than 3,35 mm. The addition of carbohidratos, nitrogen and protein sources had no significant influence on the protease yield. A kinetic study of solid state fermentation was conducted evaluating the effect of environmental parameters (initial water content - water activity, pH and temperature). The protease formed exhibited a mixed - growth associated pattern, and biomass, substrate consumption, protease and conidial kinetics were described with a logistic equation. At optima] conditions (40% Ho,Aw 0,969, pH0 6, 37°C), Aspergillus niger 9l produced 10000 PU/g SS0 (15800 PU/g dwk), several times higher than other fermentation systems. A linear relationship was found between the dry matter weight loss and both biomass and protease production allowing their estimation through an easily measurable parameter. A correlation between protease and conidial production and its connection with a pH evolution common pattern was described. Due to differencial secretion of two proteases, variations in the proteolitic activity pattern and different thermal properties of fermentation extracts were found during fungal growth.

Saint Martín, María Laura Gisela. "Evaluación de la sensibilidad en detectores de trazas nucleares" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Rossi, Eleonora Beatriz. "Niveles plasmáticos e interacciones del sistema cofactor 2 de la heparina-trombina-dermatan sulfato" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El Cofactor II de la Heparina (HCII) es un inhibidor fisiológico del sistema de coagulación, miembro de la familia de serpinas. Inhibe específicamente trombina, una enzima clave del sistema hemostático. La capacidad del HCII de inhibir trombina es potenciada mas de 1000 veces por la presencia de glicosaminoglicano el Dermatán Sulfato (DS),. Aún no está claramente definido el papel que desempeña el HCII en la fisiología de la Hemostasia, postulándose su deficiencia corno leve factor de riesgo de trombosis. Los objetivos de este trabajo fueron: a) Identificar y caracterizar el HCII plasmático. b) Investigar in vitro la interacción HCII - trombina - Dermatán Sulfato, así como la posible acción de proteínas moduladoras de esta interacción. C) Estudiar la respuesta fisiopatológica de este inhibidor, ante estímulos de distinta magnitud de activación del sistema de coagulación. (Sépsis, injuria térmica, hemodiálisis, etc.). Los estudios electroforéticos (SDS-PAGE / Western Blot) del HCII revelaron que fisiológicamente un porcentaje de este inhibidor circula unido a una proteína plasmática, el fibrinógeno. La investigación in vitro de la interacción HCII-trombina-DS en concentraciones plasmáticas reveló que el HCII inhibe más eficazmente pequeñas (hasta 30 nM) que grandes concentraciones de trombina humana. La presencia de fibrinógeno en los ensayos in vitro, disminuye en un 45% la capacidad antitrombínica del HCII, sugiriendo la existencia de una interacción HCII-fibrinógeno observada en los estudios electroforéticos de plasmas. La modulación del fibrinógeno sería tiempo, concentración y temperatura dependientes. Lo cual concuerda con los estudios electroforéticos. La determinación de los valores de referencia de actividad y antigenicidad del HCII estableció un rango de : actividad 75 - 120% ; antigenicidad: 70 - 130%. El nivel de actividad de HCII de embarazadas con más de 30 semanas de gestación fue de 108 (88 - 160)%, presentando niveles de actividad de Dermatán Sulfato en circulación 1,15 (0 - 3,7) µg/ml. En pacientes quemados se determinó niveles de actividad de HCII ligeramente disminuídos 81 (75-95)%, que se mantuvieron durante los siete días estudiados. La actividad de DS fue 0,5 (0-1,3) µg/ml. Pacientes en hemodiálisis presentaron leve disminución en los niveles de actividad de HCII 83,0 (60 - 105) %, detectándose actividad de DS en circulación 0,31 (0 - 1,5) µg/ml. El descenso de la actividad de HCII en pacientes sépticos fue marcado 29 (15-120) %. Los niveles elevados de DS alcanzaron valores de hasta 3,4 µg/ml . La anticoagulación con dicumarínicos y heparina no fraccionada no modifican significativamente los niveles de HCII (91 ± 6,9 % y 94,8 ± 6,5 % respectivamente). Pacientes con hiperhomocisteinemia niveles de HCII dentro del rango de referencia 95 (60 - 115)% y niveles de actividad de Dermatán Sulfato 1.8 (0-2,9) µg/ml, que si bien son elevados no difieren significativamente del grupo control de edad.

Abstract:
Heparin Cofactor II (HCII) is a coagulation system inhibitor, member of the serpins family. Specifically it inhibits thrombin (Hemostatic System's central enzyme) and meizothrombin. The rate of inhibition of thrombin by HCII increases more than 1000-fold in the presence of dermatan sulfate (DS). Physiological HCII rol is still undefined, but its deficiency is a weak thrombosis risk factor. The aims of this thesis were : a) Plasmatic HCII characterization and identification. b) To investigate HCII-thrombin- DS in vitro interaction and the possible proteins modulation. C) To measure HCII plasmatic levels in argentine population and in different pathologies (burn, sepsis, haemodialysis, etc.). Electrophoresis studies (SDS-PAGE/Western Blot) showed that a HCII fraction circulates bound to a plasmatic protein, fibrinogen. HCII-thrombin-Ds interaction studies demonstrated that physiological HCII levels inhibit efficiently low human thrombin concentrations (until 30 nM). HCII antithrombin activity was diminished when fibrinogen was present, so that we suppose a HCII - thrombin interaction. Fibrinogen - HCII modulation would be time and concentration dependent. This observation agrees with plasmatic HCII electrophoretic studies. HCII activity and antigenic range, for Buenos Aires population was : 75-120% activity ; 70 - 130% antigenic. Pregnant women showed increased HCII activity levels: 108 (88-160) % and dermatan sulfate plasmatic activity: 1,15 (0-3,7) µg/ml. Burnt patients HCII levels were slightly diminished 81 (75-95)% and dermatan sulfate plasmatic activity found in these plasma patients was 0,5 (0-1,3) µg/ml. Similarly, low HCII plasmatic levels were observed in hemosyalized patients 83 (60-105) % and dermatan sulfate measured in plasma was 0,31 (0-1,5) µg/ml. Markedly decreased levels of HCII were found in septic patients, 29 (15-120)% and DS plasmatic concentration reached elevated values, 1,9 (0,004-3,4) µg/ml. No HCII activity modification was found in patients with hiperhomocysteinemia.

Romero, Damián Gastón. "Regulación de la esteroidogénesis Adrenal: Efectos de endotelina y ACTH, y Rol de la 11beta-Hidroxiesteroide Deshidrogebnasa" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Este trabajo pretende dilucidar algunos de los mecanismos regulatorios de la esteroidogénesís adrenal por Endotelina (ET) y Adrenocorticotrofina (ACTH) y el rol de la 11β-hidroxiesteroide deshidrogenasa (11β-HSD). Con este fin se obtuvieron los siguientes aportes: Adrenales de ratas infundidas con ET presentan, además del efecto corticoidogénico ya conocido, a) un incremento de la captación del sustrato primario para la esteroidogénesís, colesterol, in vitro; este incremento es mediado por los receptores ETB. b) un incremento en la actividad del citocromo P-4505scc, mediado por los receptores ETA. La actividad de la 3β-hidroxiesteroide deshidrogenasa no se modifica por ET. La glándula adrenal de rata y vaca expresa actividad de las isoformas l y 2 de la 11β-hidroxiesteroide deshidrogenasa (11β-HSD). Ambas isoformas presentan características bioquímicas y cinéticas similares a las halladas en otros órganos de rata y en otras especies. En ratas, el tratamiento agudo con ACTH in vivo produce una disminución de la actividad adrenal de esta enzima, mientras que el tratamiento crónico (48 hs) causa un aumento de la misma. Este último incremento es mediado por un aumento en los niveles proteicos de la 11β-HSD-2 aunque no se modifican los niveles de su mRNA. Se propone un modelo de regulación de la esteroidogénesís adrenal por la actividad de la 11β-HSD. El tratamiento agudo con ACTH de células dispersas de fasciculata adrenal de rata produce una disminución de la actividad de 11β-HSD determinada en células enteras o en sus microsomas. Esta regulación sería mediada por la vía de cAMP-PKA ya que es revertida por inhibidores de esta kinasa y simulada por db-cAMP. Además, la presencia de fosforilaciones/desfosforilaciones se comprueba con experimentos con fosfatasa alcalina. Se realizó el clonado, expresión y caracterización de la 11β-HSD-2 bovina. Se estudiaron las características bioquímicas y cinéticas de la proteína expresada en células CHOP. La comparación estructural, cinética y funcional de la 11β-HSD-2 bovina demuestra estrecha similitud con su contraparte de rata y humana.

Abstract:
This work is focused on elucidation of some of the regulatory mechanisms of endothelin (ET)- or adrenocorticotrophic hormone (ACTH)- mediated adrenal steroidogenesis and the role of 11β-hydroxysteroid dehydrogenase (11β-HSD). To this propouse the following contributions were obtained: Adrenal glands from ET-infused rat shows, besides the well-known corticosteroidogenic effect, a) increase of cholesterol uptake (cholesterol is the primary substrate for steroidogenesis); this increment is mediated through ETB receptors. b) Increment of cytochrome P-450scc activity, which is mediated by ETA receptors. ET does not modify 3l3-hydroxysteroid dehydrogenase activity. Rat and bovine adrenal gland expresses isoforms l and 2 of 11β-hydroxysteroid dehydrogenase (11β-HSD) activity. Both isoforms present biochemical and kinetic characteristics similar to that reported for other rat organs and animal species. Treatment of rats with ACTH (acute experiment) produces a decrease in adrenal activity of this enzyme, while chronic treatment (48 hs) causes an increase. This last increment is mediated by an increase in 11β-HSD-Z protein levels although 11β-HSD-Z mRNA levels were not modified. A model for regulation of steroidogenesis by 11β-HSD is proposed. Acute ACTH treatment of dispersed rat fasciculata adrenal cells causes a decrease in 11β-HSD activity measured in whole cells or in their microsomes. The cAMP-PKA pathway mediates this regulation as it is reverted by inhibitors of this kinase and mimicked by db-cAMP. Also, the existence of phosphorylation/dephosphorylation process is proved by experiments with alkaline phosphatase. Cloning, expression and characterization of bovine 11β-HSD-2 were carried out. Biochemical and kinetic properties of this enzyme were studied in CHOP cells expressing bovine 11β-HSD-2. Structural, kinetic and functional comparisons of bovine 11β-HSD-2 show a high degree of similarity with its rat and human counterparts.

Ravaglia, Mario Aldo. "Biología reproductiva de la anguila criolla synbranchus marmoratus Bloch 1745, (Teleostei : Synbranchidae) oogenesis e inducción hormonal de la maduración final y ovulación" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El presente trabajo se dividió en dos panes. En el capítulo 1 se describió anatomo-liistológicamente el ovario. Se caracterimron las etapas de la oogénesis y la dinámica ovárica anual, que mostró cuatro periodos diferentes: (l) reproductivo, (2) de regresión, (3) de reposo y (4) Vitelogénesis. También se analimron la estructura y función de los centros melano-macrofágicos encontrados en las gónadas. Por último se describió a nivel ultraestructural la aparición y formación de las membranas oocitarias durante el desarrollo folicular. En el capítulo 2 fueron identificados los factores dc liberación de gonadotrofinas (GnRH) presentes en cerebro (variantes salmón y chicken-II). En hipóftsis no se inmunodetectó ninguna forma. Se analizaron las posibles causas. Finalmente se realizaron experiencias de inducción de la maduración final y ovulación de gametas usando un análogo superactivo de GnRH y un antagonista dopaminergico. Los efectos se evaluaron utilizando los siguientes parámetros: (l) liberación de gametas, (2) Histología gonadal y (3) niveles de esteroides sexuales en sangre. Los resultados obtenidos demostraron que: (l) El tratamiento no produjo liberación de gametas, (2) Las gónadas femeninas mostraron inicio de reversión sexual en la totalidad de los casos y (3) los niveles de testosterona y estradiol en sangre aumentaron significativamente respecto de los animales control.

Abstract:
In the first chapter, the anatomy and histology of ovaries were described and different stages of oogenesis and Ovarian dynamic were characterized. The annual ovarian dynamic showed four stages: (l) Reproductive, (2) Regressed, (3) Rest and (4) Vitelogenic period. The structure and function of melano-macrophage centers in gonads was also analyzed. Oocyte membranes were ultrastructurally studied along follicular growth. In chapter 2, brain and pituitary gonadotropin-releasing hormones (GnRH) were characterized. In the brain. salmon and chicken-II GnRH variants were identified. In the hypophysis none was immunodetected. The hormonal induction of final maturation and ovulation using a superactive GnRH analogue and a dopaminergic antagonist was also tested. Gamete releasing, gonadal histology and sex steroid levels were used to evaluate the effect of the hormonal induction. The results showed that: (l) there was no spontaneous gamete-releasing. (2) 100% of treated females begun sex-reversal and, in some cases. reverted totally. (3) testosterone and estradiol levels of treated animals showed significant increase respect to the control ones.

Randi, Andrea Silvana. "Mecanismo de acción del hexaclorobenceno sobre la transducción de señales de receptores de factores de crecimiento en hígado de rata" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Elhexaclorobenceno (HCB)es un tóxico ambiental ampliamente distribuido en la biósfera. La exposición crónica de animales de laboratorio al HCB, produce porfiria, inducción de enzimas microsomales hepáticas, disfunciones tiroideas, inmunosupresión, cambios en la función reproductiva y en el metabolismo lipídico e inducción de tumores tiroideos y hepáticos. En este estudio, hemos demostrado que el HCB, administrado a ratas hembras por intubación góstrica, induce cambios en la función de membrana celular hepática, de manera dependiente del tiempo y de la dosis. Nuestros resultados mostraron pa primera vez, que la intoxicación crónica con HCB, producía una internalización de los receptores de EGF (REGFs),acompañado de cambios en la actividad de quinasas de tirosina (PTKs)y de alteraciones en el contenido de fosfotirosina de numerosas proteínas endógenas de membrana y citosólicas. Estas modificaciones ocurrieron desde dosis muy bajas en las que no hay alteraciones en otros parametros indicativos de toxicidad manifiesta, como porfiria y disminución de T4 sérica. En un modelo de intoxicación aguda (24 horas post-tratamiento), el HCB aumenta las actividades de Ornitina Decarboxilasa (ODC) y Proteína quinasa C (PKC) dependiente de calcio y fosfolípidos, y el contenido de espermina, y disminuye la actividad de PTKs de membrana. El contenido de poliaminas (putrescina, espermidina y espermina) se incrementó significativamente a las 48 horas post-tratamiento. Nuestros resultados sugieren que el mecanismo de acción del HCB, estaría mediado por la transducción de señales de receptores de factores de crecimiento.

Abstract:
Hexaclorobenzene (HCB) is an environmental pollutant widely detected in the environment. Chronical exposure of laboratory animals to HCB elicits a number of effects such as porphyria, microsomal enzyme induction, thyroid dysfunction, immunosupression, reproductive changes, disruption of lipid metabolism and induction of thyroid adenomas and liver tumors. In the present study, we have demonstrated that administration of HCB to female rats by gavage, induced time and dose-dependent alterations in the hepatic membrane function. Our results showed that chronic exposure to HCB,induced the internalization of EGF receptors (EGFRs),accompanied by changes in protein tyrosine kinase activities (PTKs) and alterations of phosphotyrosine content of several membrane and cytosolic endogenous proteins. This changes were remarkable at very low doses, that did not induce alterations in other parameters that are biological indicators of HCB exposure, such as induction of porphyria and decreased serum T4 levels. HCB acute treatment (24 hours post-intoxication) induced an increase in Ornithine Decarboxilase (ODC) activity and spermine content, as well as induction of calcium and phospholipid dependent Protein Kinase C (PKC)activity, paralell to an inhibition of (PTKs) activities. The polyamines content (putrescine, spermidine and spermine) increased significantly 48 hours after one dose of HCB administration acompanied by an increase of PTKs activities.Our results suggest that HCB mechanism of action could be mediated by growth factors receptors signal transduction pathway.

Ramírez, Martín J.. "Revisión filogenética de los géneros de arañas de la subfamilia Amaurobioidinae (Anyphaenidae)" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La subfamilia Amaurobioidinae es revisada a nivel genérico, utilizando varios representantes de cada uno de los potenciales géneros. Se analizaron 88 terminales, como grupos externos se utilizaron las Anyphaeninae y Malenellinae. Se relevaron 179 caracteres, y la matriz de datos se analizó con programas de parsimonia bajo pesos implícitos. Como resultado, los 20 géneros son redefinidos y agrupados en dos tribus, Amaurobioidini Hickman y Gayennini, nuevo rango. Amaurobioidini se distingue por el bulbo copulador del macho con conductor primario, y una curva pronunciada en el conducto espermático, dorsal al conductor. Incluye a los géneros Acanthoceto Mello-Leitao, Amaurobioides O. Pickard-Cambridge, Axyracrus Simon, Aysenia Tullgren, Coptoprepes Simon, Ferrieria Tullgren, Gamakia gen. n., Negayan gen. n., Josa Keyserling y Selknamina gen. n. Las Gayennini se distinguen por tener un bolsillo medio en el epigino y las espermatecas esféricas, bien diferenciadas de los conductos copuladores, que son delgados. Incluye a los géneros Arachosia O. Pickard-Cambridge, Araiya gen. n., Gayenna Nicolet, Monapia Simon, Oxysoma Nicolet, Phidyle Simon, Philisca Simon, Sanogasta Mello-Leitao, Tasata Simon y Tomopisthes Simon. Se proponen cuatro géneros nuevos, todos de los bosques australes de Chile y Argentina: Gamakia(especie tipo G. hirsuta sp. n.), Negayan (especie tipo Gayenna tridenrata Simon), Selknamina (especie tipo S. minima sp. n.) y Araiya (especie tipo Gayenna pallida Tullgren). Se describen 22 nuevas especies: Aysenia segestrioides, A. araucana, A. cylindrica, A. spinifera, A. colecole, A. modesta, Coptoprepes nahuelbuta, C. campanensis, C. valdiviensis, Gamakia hirsuta, Sanogasta mandibularis, S. pehuenche, S. puma, S. tenuis, Philiscahuapi, P. puconensis, Gayenna molles, G. losvilos, Oxysoma itambezinho, Tasata taim, T. chiloensis y T. centralis. Se establecen 27 combinaciones nuevas: Josa lutea (Keyserling), J. riveti (Berland), J. personata (Simon), J. nigrifrons (Simon), Negayan tridentata (Simon), N. paduana (Karsch), N. coccinea (Mello-Leitao), Arachosia praesignis (Keyserling), A. striata (Keyserling), A. bergi (Simon), A. cubana (Banks), Sanogasta maculatipes Keyserling, S. alticola (Simon), S. maculosa (Nicolet), S. minuta (Keyserling), S. approximata (Tullgren), S. backhauseni (Simon), Araiya coccinea (Simon), A. pallida (Tullgren), Phillisca hyadesi (Simon), P. amoenum (Simon), P. tripunctata (Simon), P. doilu (Ramirez), Tomopisthes horrendus (Nicolet), T. pusi/lus (Nicolet), Oxysoma saccatum (Tullgren), Tasata unipunctata (Simon). Se establecen las siguientes nuevas sinonimias: Cluilius Simon = Amaurobioides O. Pickard-Cambridge; Schiapellia Mello Leitao = Axyracrus Simon; Schiapellia gerschmanni Mello Leitao = Axyracrus elegans Simon; Tetromma Keyserling, Haptisus Simon, Olbophtalmus Simon y Gayennella Berland = Josa Keyserling; Anyphaena pilosa Keyserling = Josa lutea (Keyserling); Pelayo insignis Banks: Josa nigrifrons (Simon); Gayenna strigosa Tullgren y Tomopisthes magellanícus Simon = Negayan paduana (Karsch); Samuza Keyserling, Abuzaida Keyserling y Gayennina Gertsch = Arachosia O. Pickard-Cambridge; Oxysoma ramboi Mello-Leitao: Arachosia honesta Keyserling; Sanogasra intermedia Mello-Leitao = Sanogasta macularipes (Keyserling); Clubiona sternalis Nicolet, Gayenna affinis Tullgren, Gayenna dubia Tullgren, Tomopisthes conspersus Simon, Tomopisthes modestus Simon y Tomopisthes taeniatus Simon = Sanogasta maculosa (Nicolet); Tomopisthes kraepelini Simon = Sanogasta approximata (Tullgren); Gayenna stellata Simon = Araiya coccinea (Simon); Liparotoma Simon = Philisea Simon; Philisca navarinensis Tullgren = Philisca hahni Simon; Hereromma Karsch = Tomopisthes Simon; Tomopisthes immanis Simon, Nonianus argentinas Mello-Leitao y Heteromma fuegiana Karsch = Tomopisthes horrendus (Nicolet); Gayenna chilensis Tullgren = Tomopisthes pusillus (Nicolet); Aporatea valdiviensis Simon, Oxysoma punctipes Nicolet, Oxysoma aurata Nicolet, Oxysoma longipes Nicolet, y Oxysoma lineata Nicolet = Oxysoma puncratum Nicolet. Se ponen a prueba y se discuten todas las hipótesis previas de parentescos dentro de Amaurobioidinae.

Abstract:
The subfamily Amaurobioidinae is revised at generic level, based on representative species of the potential genera. A cladistic analysis is made for 88 terminal taxa, including the outgroups Anyphaneninae and Malenellinae, scored for 179 characters. The data matrix was analyzed with parsimony programs under implied weights. The 20 resulting genera are redefined, and grouped in two tribes, Amaurobioidini Hickman and Gayennini, new rank. Amaurobioidini can be distinguished by the presence of a primary conductor on the male palpal bulb, and a distinct curve on the spermatic duct, dorsal to the conductor. Amaurobioidini includes the genera Acanthoceto Mello-Leitao, Amaurobioides O. Pickard-Cambridge, Axyracrus Simon, Aysenia Tullgren, Captoprepes Simon, Ferrieria Tullgren, Gamakia n. gen., Negayan n. gen., Josa Keyserling and Selknamina n. gen. Gayennini are distinguished by a median hood on the epigyne and spherical spermathecae, clearly distinct from the slender copulatory ducts. It includes the genera Arachosia O. Pickard-Cambridge, Araiya n. gen., Gayenna Nicolet, Monapia Simon, Oxysoma Nicolet, Phidyle Simon, Philisca Simon, Sanogasta Mello-Leitao, Tasata Simon and Tomopisthes Simon. Four new genera are proposed, all from austral temperate forests in Chile and Argentina: Gamakia (type species G. hirsuta n. sp.), Negayan (type species Gayenna tridentata Simon), Selknamina (type species S. minima n. sp.) and Araiya (type species Gayenna pallida Tullgren). 22 new species are described: Aysenia segestrioides, A. araucana, A. cylindrica, A. spinifera, A. colecole, A. modesta, Coptoprepes nahuelbuta, C. campanensis, C. valdiviensis, Gamakia hirsuta, Sanogasta mandibularis, S. pehuenche, S. puma, S. tenuis, Philisca huapi, P. puconensis, Gayenna molles, G. losvilos, Oxysoma itambezinho, Tasata taim, T. chiloensis and T. centralis. 27 new combinations are established: Josa lutea (Keyserling), J. riveri (Berland), J. personata (Simon), J. nigrifrons (Simon), Negayan tridentata (Simon), N. paduana (Karsch), N. coccinea (Mello-Leitao), Arachosia praesignis (Keyserling), A. striata (Keyserling), A. bergi (Simon), A. cubana (Banks), Sanogasta maculatipes Keyserling, S. alticola (Simon), S. macalosa (Nicolet), S. minute (Keyserling), S. approximata (Tullgren), S. backhausen/ (Simon), Araiya coccinea (Simon), A. pallida (Tullgren), Philisca hyadesi (Simon), P. amoenum (Simon), P. tripunctata (Simon), P. doilu (Ramirez), Tomopisthes horrendus (Nicolet), T. pusillus (Nicolet), Oxysoma saccarum (Tullgren), Tasara unipunctata (Simon). The following new synonymies are established: Cluilus Simon = Amaurobioides O. Pickard-Cambridge; Schiapellia Mello Leitao = Axyracrus Simon; Schiapellia gerschmanni Mello Leitao = Axyracrus elegans Simon; Tetromma Keyserling, Haprisus Simon, Olbophtalmus Simon and Gayennella Berland = Jose Keyserling; Anyphaena pilosa Keyserling: Josa lutea (Keyserling); Pelayo insignis Banks = Josa nigrifrons (Simon);Gayenna strigosa Tullgren and Tomopisthes magellanicus Simon = Negayan paduana (Karsch); Samuza Keyserling, Abuzaida Keyserling and Gayennina Gertsch = Arachosia O. Pickard- Cambridge; Oxysoma ramboi Mello-Leitao = Arachosia honesta Keyserling;Sanogasta intermedia Mello-Leitao = Sanogasta maculatipes (Keyserling); Clubiona sternalis Nicolet, Gayenna affinis Tullgren, Gayenna dubia Tullgren, Tomopisthes conspersus Simon, Tomopisthes modestas Simon and Tomopisthes taeniatus Simon = Sanogasta macalosa (Nicolet); Tomopisthes kraepelini Simon = Sanogasta approximata (Tullgren); Gayenna stellata Simon = Araiya coccinea (Simon); Liparotoma Simon = Philisca Simon; Phillisca navarinensis Tullgren = Philisca hahni Simon; Heteromma Karsch = Tomopisthes Simon; Tomopisthes immanis Simon, Nonianus argentinas Mello-Leitao and Heteromma fuegiana Karsch = Tomopisthes horrendus (Nicolet);Gayenna chilensis Tullgren = Tomopisthes pusillus (Nicolet);Aporatea valdiviensis Simon, Oxysoma punctipes Nicolet, Oxysoma aurara Nicolet, Oxysoma langipes Nicolet, and Oxysoma lineata Nicolet = Oxysoma punctatum Nicolet. The previously proposed hypothesis of relationships among amaurobioidines are tested and discussed.

Puebla, Andrea Fabiana. "Estudios bioquímicos y moleculares del metabolismo de fructanos en respuesta a estreses ambientales en Gramíneas nativas" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se ha estudiado la respuesta a estrés por bajas temperaturas y déficit hídrico en Gramíneas nativas de regiones con climas contrastantes de la Argentina. El modelo de trabajo se basó en el análisis comparativo del metabolismo de fructanos y sacarosa en relación con estreses abióticos en especies nativas de Patagonia y otras del mismo género adaptadas a regiones con climas más benignos. Bromus pictus y Bromus auleticus, se compararon como especies patagónicas y del centro y norte de Argentina, respectivamente. Se analizaron los azúcares que contienen fructosa en plantas control y tratadas. Se estudiaron los patrones de fructanos y se determinó la composición de oligosacáridos de ambas especies. Se estudiaron las enzimas del metabolismo de sacarosa y fructanos. Se midieron la actividad de las enzimas SPS, SS, INV y SST. La actividad SST mostró aumentos constantes frente al estrés por frío en la especie patagónica. Se desarrollo un nuevo método enzimático-colorimétrico para medir la actividad SST. Se estudiaron algunas propiedades bioquímicas de esta actividad parcialmente purificada de vástagos de B. pictus tratados a 4 °C. La actividad SST de Bromus pictus mostró un pH óptimo entre 5,5 y 6, no se saturó a altas concentraciones de sacarosa y mantuvo el 55% de la actividad a 30°C en incubaciones realizadas a 0°C. Se realizaron estudios de homología y expresión a partir de ácidos nucleicos de plantas de B. pictus tratadas con bajas temperaturas utilizando sondas heterólogas de la 6-SFT de cebada. Se demostró que en la especie patagónica hay secuencias homólogas de ADN y ARN a las existentes en cebada. Por la técnica de RT-PCR se clonó un fragmento de 760 pb del ADNc de Bromus pictus usando oligonucleótidos específicos en zonas altamente conservadas en otros genes de fructosil transferasas. La comparación de secuencias mostró una alta homología con la 6-SFT de cebada, con otras enzimas del metabolismo de fructanos de mono y dicotiledóneas y con INV ácidas de plantas.

Abstract:
Low temperature and water stress treatments were assayed in plants of various species of Gramineae, belonging to different regions of Argentina. The experimental model was based in comparative studies of fructan and sucrose metabolism in relation with the abiotic stresses in native plants from Patagonia and other species of the same generous adapted to northern regions of Argentina with mild climatic conditions. Bromus pictus and Bromus auleticus were compared as patagonic and northern species respectively. Fructose-containing sugars were analysed. The fructan pool was studied and oligosaccharide composition was determined. Sucrose and fructan enzymes were studied. SPS, SS, INV and SST were assayed in control and treated plants in both Bromus species. Increasing levels of SST activity were observed in patagonic plants exposed to low temperature. A novel enzymatic-colorimetric method to assay SST activity was developed. Some biochemical properties of SST activity partially purified from shoots of Bromus pictus treated with low temperatures, were studied. SST activity of Bromus pictus has pH optimum between 5,5-6, was non-saturated at high concentrations of sucrose and maintained high activity at 0°C. Southern and northern analysis were made with tissues of low temperature treated plants of Bromus pictus, using the ADNc of barley 6-SFT as a probe. Bromus sequences of DNA and RNA hybridised with the ADNc of barley. A ADNc fragment of Bromus pictus was cloned by RT-PCR using specific primers with high homology with plant fructosyltransferases. Sequence comparison has shown a high homology of the ADNc fragment with the ADNc of barley 6-SFT, other mono and dicotyledon fructan genes and acid invertases of plants.

Prezzi, Claudia Beatriz. "Evolución geodinámica de la Puna sobre la base de estudios paleomagnéticos" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los Andes Centrales presentan un combamiento pronunciado a los 18ºS. Este combamiento es denominado codo de Arica. Se determinó la existencia de rotaciones según ejes verticales en sentido antihorario al norte de Arica y en sentido horario al sur de Arica a partir de datos paleomagnéticos. Estos datos provienen de rocas mesozoicas y cenozoicas aflorantes en el antearco y el retroarco andinos. Varios autores han propuesto distintos modelos para tratar de explicar la evolución geodinámica de los Andes Centrales, pero el origen de las rotaciones continúa siendo discutido. Los modelos regionales propuestos involucran combamiento oroclinal y/o rotación local de bloques. Esta falta de consenso en parte se debe a la escasez de datos paleomagnéticos y a la incertidumbre en la edad de la mayoría de las rotaciones. Los objetivos de esta tesis doctoral son la obtención de nuevos datos paleomagnéticos a partir de rocas aflorantes en la Puna Argentina y tratar de definir los procesos generadores del patrón de rotaciones observado. En el campo se obtuvieron 831 muestras orientadas en distintas zonas: Siete Curvas, Juncal Grande, Tebenquicho, Chorrillos, Tiomayo, Morro Blanco, Rinconada, Mina Loma Blanca y Coranzulí. A los distintos especímenes se les aplicaron diferentes técnicas de desmagnetización. Algunos especímenes sufrieron cambios mineralógicos durante la desmagnetización térmica. Se determinó que durante el calentamiento se generaba maghemita como consecuencia de la descomposición y la oxidación de siderita y de la deshidratación de lepidocrocita. También se observó, la formación de hematita a partir de la deshidratación de goethita. Se aislaron magnetizaciones remanentes que indican la existencia de sitios no rotados, sitos rotados en sentido horario y sitios rotados en sentido antihorario. Se propone un modelo flexural muy simplificado para tratar de explicar el diacronismo observado en la deformación mio-pliocena a lo largo de la Puna Argentina. Dicha deformación finalizó en la Puna Septentrional y migró hacia el este a las Sierras Subandinas aproximadamente hace 10 Ma, pero continuó en la Puna Austral hasta los 4 Ma antes de que se produjera una migración similar. Se consideró una reología elástica. Se modelaron dos perfiles E-0 a los 22 y los 24ºS con espesores elásticos de 25 y 15 km respectivamente aplicando la carga de la topografía estimada para los Andes Centrales a los 10 Ma. Mientras la placa debajo de las Sierras Subandinas a los 22ºS sufría elevación, a los 24ºS debajo del Sistema de Santa Bárbara sufría subsidencia, explicando el diacronismo anteriormente mencionado. La base de datos paleomagnéticos de los Andes Centrales fue analizada y se determinaron algunas características del patrón de rotaciones. Estas características son explicadas considerando un modelo de rotación local de bloques en respuesta a cizalla distribuida en el antearco y en respuesta a cizalla penetrativa en niveles subcorticales en el retroarco.

Abstract:
The Central Andes show a pronounced bend at 18ºS. This bend is called the Arica elbow. The existence of counterclockwise vertical axis rotations north of Arica and clockwise ones to the south has been determined fiom paleomagnetic data. These data have been obtained from Mesozoic and Cenozoic rocks cropping out in the Andean forearc and backarc. Various authors have proposed different models to explain the geodynamic evolution of the Central Andes, but the origin of these rotations remains controversial. Proposed regional models involve oroclinal bending andlor local block rotations. This lack of agreement is partly due to the scarce paleomagnetic data base and the uncertain age of most of the rotations. The aims of this PhD Thesis are to obtain new paleomagnetic data fiom rocks cropping out in the Argentine Puna and to try to define the processes leading to the observed rotation pattern. 83 1 oriented samples were obtained in the zones of Siete Curvas, Juncal Grande, Tebenquicho, Chorrillos, Tiomayo, Morro Blanco, Rinconada, Mina Loma Blanca y Coranzuli. Different demagnetization techniques were applied to the specimens. Some specimens suffered mineralogcal changes when submitted to thermal demagnetization. It was determined that during heating, maghemite is produced by the decomposition and oxidation of siderite and by the dehydration of lepidocrocite. Also it was observed that hematite is produced by the dehydration of goethite. Remanent magnetizations were isolated which indicate the existence of non-rotated, clochse rotated and anticlochse rotated sites. A very simplified flexural model is proposed trying to explain the observed diachronism of Mio-Pliocene deformation along the Argentine Puna. It ceased in the Northern Puna and moved eastward to the Andean foreland belts at about 10 My, but it. continued to 4 My in the Southern Puna, before a similar shift. An elastic rheology was considered. Two E-W profiles at 22 and 24ºS were modelled with elastic thicknesses of 25 and 15 km respectively and applying the load of the estimated topography of the Central Andes at about 10 My. While under the model constrains the plate under de Andean foreland belts at 22ºS underwent elevation , at 24ºS it underwent subsidence, explaining the above mentioned diachronism. The Central Andes data base was analysed and some features of the rotation pattern were determined. These features are explained considering a model of local block rotations in response to distributed shear in the antearc and to shear-driven subcrustal ductile flow in the backarc.

Perez Martinez, Silvina L.. "Participación del óxido nítrico (NO) en la regulación del transporte ovular en el oviducto de la rata" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La síntesis del óxido nítrico (NO) ha sido descripta en diferentes órganos de mamíferos. Esta molécula ha sido involucrada en procesos fisiológicos tales como la relajación de la musculatura lisa, inhibición de plaquetas, neurotransmisión y regulación del sistema inmune. En el sistema reproductor de la hembra el NO está involucrado en la ovulación, fertilización, luteólisis y mantenimiento de la preñez. Sin embargo, hasta ahora no ha sido descripto la participación de esta molécula en el transporte de los ovocitos/embriones hacia la cavidad uterina. Trabajos previos realizados en nuestro laboratorio habían demostrado la participación del NO en la relajación de la musculatura lisa en útero de ratas estrogenizadas. En este trabajo hemos demostrado, mediante diferentes estrategias metodológicas, ya sea enzimáticas o inmunológicas, la presencia de tres isoformas de NO sintasa en el oviducto de la rata, las cuales parecen estar reguladas fisológicamente, en ciclo y preñez temprana. La evaluación del transporte ovular y transferencia de microesferas de dextrano al oviducto en presencia de diferentes inhibidores de la NO sintasa, revelaron que el NO participa en los mecanismos moleculares que controlan el proceso de transporte atenuando la actividad de dos efectores mecánicos: la musculatura lisa del órgano y el batido ciliar de las células epiteliales. En conjunto, los resultados obtenidos en el presente trabajo, sugieren que el óxido nítrico podría actuar como una señal paracrina o autocrina entre las diferentes capas de la pared oviductal, promoviendo un sistema de regulación inhibítoria y de esta manera contribuir al mantenimiento de la quiescencia oviductal en el transcurso del pasaje de los huevos hacia la cavidad uterina. En la regulación de este proceso estarían involucradas moléculas contráctiles tales como PGF2α u ocitocina y las hormonas ováricas.

Abstract:
The synthesis of nitric oxide (NO) has been found in different mammalian organs. NO actions have been previously described in the vascular, the nervous and the immune systems. In the female reproductive organs, it was found that NO is involved in ovulation, fertilization, luteolysis and pregnancy. Nevertheless, the role of nitric oxide in ovum transport in mammals has not been studied. In the present work we demonstrated the prescence of three isoforms of NO synthase in rat oviducts, using differents methodologies. These isoenzimes showed a differential synthesis rate in oestral cycle or in pregnancy. The assessment of ova transport and dextran blue microspheres transfer inside the oviduct, after NO synthase inhibitors administration, revealed that the endogenous NO is involved in the molecular mechanisms that regulate the ovum passage towards the uterus, by decreasing the oviductal smooth muscle contractions and the epithelial ciliar beat. Our results provide new evidence that nitric oxide could act as a paracrine or autocrine signal between different layers of the oviductal wall, providing a regulatory system that inhibits ovum transport allowing the oviductal quiescence. The control of these signal pathways could involve molecules such as PGF2α or oxytocin and ovarian hormones.

Pereyra, Elba Nora. "Morfogénesis y cAMP en el hongo Mucor rouxii" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
- El dibutiril - cAMP y los análogos de cAMP específicos para el sitio 2 de la subunidad regulatoria de la proteína quinasa A inhiben el crecimiento polarizado en el hongo Mucor rouxii en forma dosis dependiente, sin alterar los parámetros de crecimiento. - Este efecto se observa en todas las condiciones nutricionales o ambientales ensayada; puede lograrse también con inhibidores de la fosfodiesterasa de alta afinidad para cAMP. El efecto es reversible. - Los resultados experimentales sugieren que la proteina quinasa A está involucrada en esta inhibición y que la especificidad de los compuestos para producirla depende de las altas concentraciones enzimáticas presentes en los sistemas vivos. - Se postula la necesidad de una actividad especifica crítica de la proteína quinasa A. la cual debe ser alcanzada por las células para germinar. - El tratamiento con inhibidores de los microfilamentos produce las mismas alteraciones morfológicas. observadas al microscopio óptico, que los análogos de cAMP. - El análisis por microscopía electrónica de la ultraestructura de la pared celular revela que presenta alteraciones e irregularidades. - Estas alteraciones son similares a los efectos producidos por tratamiento con inhibidores de la polimerización de actina en hongos de especies relacionadas (datos de la literatura). Estas observaciones sugieren que la proteína quinasa A podría actuar a través de un mecanismo que involucre al citoesqueleto de actina.

Abstract:
- Dibutyryl-cAMP and cAMP analogs, site-2 selective for the regulatory subunit of protein kinase A impair polarized growth of the fungus Mucor rouxii in a dose dependent manner, without altering growth parameters. - The effect is observed under all the nutritional or ambient conditions of growth assayed; it can also be observed when using high affinity CAMP phosphodiesterase inhibitors. The effect is reversible. - The experimental results presented suggest that protein kinase A is involved in this inhibition and that the specificity of the cAMP analogs to promote this effect is related to the high concentration of enzyme present within the cell. - A proposal is presented that states that a critical specific activity of protein kinase A must be attained in order for the cell to emit the germ tube. - Treatment of the cells with microfilament inhibitors, produces the same effects, as observed by the light microscope, as the one obtained with cAMP analogs. - Electronic microscopio analysis of the cell wall ultrastructure indicates alterations in its structure. - This alterations resemble the ones described in the literature to be produced in other fungi, when incubated in the presence of inhibitors of actin microfilaments. These observations suggest that the actin cytoskeleton could be involved in the effect of protein kinase A in cell morphology.

Pereira, Claudio Alejandro. "Metabolismo de L-arginina en Trypanosoma cruzi" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Apartir de los resultados obtenidos en nuestro laboratorio sobre la modulación de la motilidad de los epimastigotes de Trypanosoma cruzi a través de los distintos efectores de la ruta metabólica del óxido nítrico, se planteó la necesidad de estudiar en forma más amplia el metabolismo del sustrato de la óxido nítrico sintasa, la L-arginina. Inicialmente se describió el transporte de este aminoácido en epimastigotes de T. cruzi en fase logaritmica de crecimiento. Se determinaron los parámetros cinéticos y sus características bioquímicas, siendo algunas de las más relevantes, las que se detallan a continuación: - El transportador presenta una alta afinidad por el sustrato (Km = 4.16 μM) en comparación con otros sistemas similares. - Es sumamente específico ya que no se inhibe competitivamente en presencia de aminoácidos naturales como así tampoco por análogos estructurales de la arginina. Sólo se observó una disminución significativa en la incorporación de L-arginina en presencia de homoarginina, canavanina y D-arginina. - Es saturable por sustrato, independiente de Na+,pero dependiente de ATP. - Es afectado en forma específica por el tiempo de "ayuno"de L-arginina. Cuando se estudió el destino de la arginina incorporada a las células en 30 minutos, se observó que el 4.3% se incorpora a proteínas, el 68.6% queda formando parte del conjunto de aminoácidos libres y un 27.1% se identificó como fosfoarginina. La presencia de fosfoarginina como fosfágeno involucrado en la regeneración del ATP,hidrolizado principalmente en el flagelo del parásito, explica probablemente la necesidad de un transportador específico de las caracteristicas descriptas. La relevancia de esta actividad biológica como posible blanco terapéutico tripanosomicida está dada por ser éste un sistema diferencial entre el parásito y el hospedador humano, quien carece de esta enzima pues utiliza la creatina como fosfágeno. Estas evidencias nos llevaron a centrar el interés del trabajo en el sistema transportador de arginina y la enzima arginina kinasa. En la segunda parte del trabajo se caracterizó bioquímicamente la enzima arginina kinasa. Se midió la actividad enzimática tanto in vivo como In vitro, se determinó su localización subcelular y sus parámetros cinéticos (Km para arginina, 0.33 mM y para ATP 0.31 mM). Se purificó parcialmente la actividad arginina kinasa en dos pasos cromatográficos, uno de intercambio iónico y el segundo de filtración molecular. También se estudiaron sus requerimientos de ATP y cationes bivalentes. Se ensayaron in vitro inhibidores potenciales de la enzima, siendo los más relevantes,el análogo natural canavanina, la homoarginina y la histidina. Se analizó también la presencia de la arginina kinasa en otros organismos, encontrándose dicha actividaden otras cepas y especies del género Trypanosoma y también en los denominados “trypanosomátidos inferiores" como Herpetomonas y Leptomonas. Finalmente se clonó el gen que codifica para la arginina kinasa de T. cruzi utilizando técnicas de reacción en cadena de la polimerasa (PCR)y rastreo en bibliotecas genómicas. El gen de 1074 pb codifica para una proteína de 357 aminoácidos y un peso molecular de 40 kDa (GenBank # AF070451),el cual probablemente se encuentre como copia única dentro del genoma. El análisis de la secuencia obtenida demuestra un alto grado de conservación evolutiva. El gen completo de la enzima se expresó en un sistema heterólogo (Escherichia coll) demostrándose actividad arginina kinasa de la proteína recombinante.

Pedreira, María Eugenia. "Dos tipos de memoria determinadas por la presentación repetida de un mismo estímulo de peligro : Estudio comportamental y farmacológico en Chasmagnathus" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Ortiz, Marcela Beatriz. "Síntesis de isoprenoides en el control de la respuesta proliferativa en células de mamíferos" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Obernauer, Silvia. "Inestabilidades entre fluídos miscibles en medios porosos" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo se presenta un estudio experimental de desplazamientos de fluidos miscibles dentro de medios porosos y celdas de Hele-Shaw empleando fluidos Newtonianos y no-Newtonianos con técnicas de visualización. La primera parte está dedicada al estudio de la inestabilidad que aparece en la interfase entre dos soluciones de una única especie difusíva cuando la solución más concentrada se ubica sobre la menos concentrada (inestabilidad de Rayleigh-Taylor). Esta inestabilidad se estudia en forma preliminar para una interfase sin condiciones de flujo y se complementa el estudio en desplazamientos dentro de una celda de Hele-Shaw colocada en forma horizontal. Se inyecta colorante que empuja agua pura y se observan con el tiempo la aparición de estrías paralelas a la dirección del flujo detrás del frente de avance. Los resultados experimentales son interpretados en términos de una inestabilidad gravitatoria debido a gradientes verticales de concentración del colorante inyectado inducidos por el perfil de velocidades del flujo. Dicho perfil, en el espesor de la celda, crea un gradiente de concentración que puede ser modelado como una estructura de tres capas. Si bien los experimentos muestran que la longitud de onda caracteristica de la estructura es del orden del espesor de la celda, se encuentra además una dependencia con el aumento de contraste de densidades entre ambos fluidos en acuerdo con modelos teóricos. Se encuentra experimentalmente que la periodicidad media es independiente del caudal es decir que es independiente de la velocidad de la interfase. Se estudia también el tiempo de aparición de estas inestabilidades en función del caudal de inyección, de la concentración del colorante y de la inclinación de la celda. En la segunda parte de esta Tesis se presenta el estudio de desplazamientos de fluidos donde uno de los mismos es una solución polimérica (soluciones de Xanthano) con un comportamiento tipo reofluidizante. Los desplazamientos son siempre horizontales y la inestabilidad aparece cuando el fluido menos viscoso empuja al más viscoso (inestabilidad de Saffman-Taylor). En primer término se analizan experiencias en donde el agua coloreada empuja soluciones poliméricas dentro de un medio poroso rectangular cuasi bidimensional consistente en empaquetamientos de microesferas de vidrio. Se encuentra una rica variedad de estmcturas al variar el caudal, la concentración del polímero y el tamaño de microesferas. Para altas concentraciones de polímero las mismas son del tipo fractal. A partir de la medición de la dimensión fractal en bandas a lo largo de la estructura se logra evidenciar propiedades de multiscaling. De la observación del crecimiento de los dedos individuales que aparecen encontramos dos tipos de comportamientos dinámicos. En segundo término se estudian desplazamiento con la misma solución polimérica pero en celdas de Hele-Shaw con inyección radial. En este caso la viscosidad del segundo fluido, de comportamiento Newtoniano, se elige de un valor intermedio entre las viscosidades del polímero a altas y bajas velocidades de corte. Se observa en cada experiencia una transición de un desplazamiento estable a inestable cuando la velocidad media del frente se vuelve menor que un valor crítico. Se investiga la dependencia de la velocidad critica con la viscosidad del fluido Newtoniano y con el caudal. La velocidad crítica es comparada con la velocidad donde la viscosidad de ambos fluidos es la misma si se desplazaran en forma independiente.

Abstract:
An experimental study of miscible fluid displacement inside porous media and Hele-Shaw cell employing Newtonian and non-Newtonian fluids is reported in this work. This miscible displacement process was studied by means of visualization techniques. The first part is concerned with the study of the instability that appears at the interface between two miscible solutions of a single diffusing species when the higher concentration solution is placed over the lower one (Rayleigh-Taylor instability). We have studied this instability in a preliminary way in a no flowing front. We completed the study with investigations of displacements where dye pushes pure water inside an horizontal Hele-Shaw cell. After a certain time striations parallel to the flow are observed near the displacement front. Experimental results suggest an interpretation in terms of the gravitational instability due to the vertical dye concentration gradients induced by the flow profile between the cell plates. The velocity profile in the cell thickness creates a gradient of concentration that can be modeled as a three-layer structure. Experiments show that the mean wavelength is of the order of magnitude of the cell thickness. This characteristic length is found to depend on the density contrast between both fluids in agreement with theoretical expectations. We found experimentally that the mean periodicity is independent of the flow rate and therefore independent of the interface velocity. We have also studied the onset time of these instabilities as a function of the flow rate, the dye concentration and the cell inclination. In the second part we present the experimental study of miscible displacements where one of the fluid is a polymeric solution (Xanthan solutions) with a shear-thinning behavior. The displacements are always horizontal and the instability appears when the less viscous fluid pushes the more viscous one (Saffman-Taylor instability). We analyze experiments where water pushes polymeric solution inside a rectangular pseudo-bidimensional porous media consisting of glass spheres packing. Experiments were performed with porous media with two different grain size and varying the polymer concentration and the flow rate. A rich variety of patterns were found. At high polymer concentration a fractal behavior was observed. The fractal dimension was measured on bands along the structure in order to verify experimentally the multiscaling properties. From the observation of the finger evolution in time we have found two different dynamic behaviors. We also studied displacements with the same polymeric solution in a radial Hele-Shaw cell. In this case, the viscosity of the second fluid, which has Newtonian behavior, is tuned to lie between high and low shear rate asymptotic apparent viscosities of the polymeric solutions. A crossover from a stable displacement to an unstable situation displaying viscous fingering patterns is observed, as the mean front velocity becomes lower than a critical value. The dependence of this critical velocity on Newtonian fluid viscosity and the injection rate is investigated. The experimental critical velocity is compared with the velocity at which the viscosity of both fluids is the same.

Morvillo, Verónica. "Influencia hormonal en el desarrollo del melanoma maligno humano" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El melanoma es una neoplasia que surge como consecuencia de la proliferación descontrolada de los melanocitos. El comportamiento de este tipo tumoral es impredecible dado que puede variar desde la regresión espontánea hasta una rápida progresión y muerte del portador del tumor. El aumento de la incidencia de esta enfermedad se halla entre las más altas, y hasta el momento no se han desarrollado terapias que sean realmente efectivas. Varios estudios, han demostrado que el desarrollo del melanoma de piel es más desfavorable en pacientes hombres que en mujeres, y que la supervivencia de las mujeres es considerablemente mayor. Ha sido teóricamente propuesto que los andrógenos tienen un papel clave en el peor pronóstico masculino, y que una terapia con antiandrógenos podría tenerse en consideración en pacientes hombres con melanoma. En este trabajo de Tesis se investigó, en primer lugar, la presencia de receptores androgénicos (RA) en el melanoma humano, se procedió luego a la caracterización bioquímica y biológica de los mismos y por último se analizó la influencia de la acción antiandrogénica en el curso clinico de esta enfermedad. En los estudios realizados se utilizaron tres lineas derivadas de melanoma humano obtenidas en el laboratorio: IIB-MEL-J, IIB-MEL-LES e IIB-MEL-LAN. Los análisis de Scatchard de las tres lineas estudiadas, utilizando la unión del andrógeno sintético marcado R1881, revelaron la presencia de un solo tipo de receptor con una constante de disociación aparente (Kd) de 11 nM a 37 °C y una capacidad de binding de 326 fmol/mg de proteina, 58,4 fmol/10 6 células o de 35.000 sitios por célula para IIB-MEL-J, una Kd de 15 nM a 37 °C y una capacidad de binding de 280,6 fmol/mg de proteína, 30,8 fmol/10 (6)células o de 18.500 sitios por célula en el caso de IIB-MEL-LES y Kd de 14 nM a 37 °C, capacidad de binding de 206,4 fmol/mg de proteína, 25,59 fmol/10 (6) células o de 15.400 sitios por célula en el caso de IIB-MEL-IAN. Los estudios sobre la especificidad de la unión del ligando radiactivo a estos receptores, revelaron un comportamiento atípico de los mismos en las tres líneas analizadas. No sólo los andrógenos testosterona (T), dihidrotestosterona (DHT), R1881 y el antiandrógeno hidroxi-flutamida (OH-Flu) compitieron con R188l, sino que estradiol (E2), progesterona (Pg) y cortisol (F), a 500 X de exceso, también fueron capaces de desplazar la unión del esteroide sintético al RA. A nivel inmunocitoquímico, no existieron evidencias de la presencia de receptores estrogénicos o de progesterona en las tres líneas de melanoma, mientras la inmuno- reactividad para RA fue positiva en las tres líneas estudiadas. La tinción nuclear fue vigorosa, y la intensidad marcada, por encima del 70% de las células analizadas. La presencia del RA fue analizada, además, en biopsias correspondientes a metástasis de melanomas provenientes de distintos pacientes. En todos los casos la reactividad obtenida con el anticuerpo monoclonal (AMC) ANI-IS fue positiva y la intensidad marcada. Estudios in vitro sobre la acción de distintas hormonas y antihormonas revelaron que DHT, T, E2, o Pg estimularon la proliferación celular de IIB-MEL-J, IIB-MEL- LES e IIB-MEL-IAN mientras OH-Flu, casodex (Cas) o Tamoxifeno (Tam) la inhibieron significativamente. La acción inhibitoria del crecimiento celular ejercida por los antiandrógenos también se manifestó in vivo cuando se utilizó flutamida (Flu) en ratones atímicos portadores de tumores. Estos animales mostraron una disminución significativa del crecimiento tumoral y un marcado aumento de la sobrevida respecto de animales controles o sometidos a distintas terapias. Los resultados indican la existencia de RA en melanoma humano y un claro efecto protector por parte del antiandrógeno Flu.

Abstract:
Cutaneous malignant melanoma is becoming increasingly important in western countries due to its rising incidence, especially on the white population. A significant difference in survival between male and female patients has been reported, and the proportion of females cured was much greater than that of males. It has been theoretically proposed that an androgen dependency of melanoma could explain the longer survival time in women patients irrespective of the hormonal status of the female host. To evaluate the presence of androgen receptors in human melanoma cell lines, Scatchard analysis was performed in whole cells with -Rl881. IIB-MEL-J cells in culture revealed a single binding component with an apparent dissociation constant (KD) at 37°C of 11 nM and a binding capacity of 326 fmol/mg protein, 58,4 fmol/10(6) cells or 35.000 binding sites/cell. For IIB-MELLES cell, the KDobtained was 15 nM at 37°C, with a binding capacity of 280,6 fmol/mg total cell protein, 30,8 fmol/10(6) cells, or 18.500 binding sites/cell. IIB-MEL- IAN cells showed a KD of 14 nM at 37°C with a binding capacity of 206,4 fmol/mg total cell protein, 25,59 fmol/10(6) cells, or 15.400 binding sites/cell. Competition analysis revealed an atypical relaxation of specificity, since not only androgen testosterone (T), dihydrotestosterone (DHT), R188] and antiandrogcn hydroxy-flutamide (OH-Flu) competed for -R1881 binding, but also estradiol (E2), progesterone (Pg), and cortiso] (F) at 500-fold excess concentration. Immunocytochemistry of human melanoma cell lines IIB-MEL-J, IIB-MEL-LES and IIB-MEL-IAN was performed with monoclonal antibody anti-AR ANI-IS. Cells lines were deeply stained,'the intensity of the staining being high in the majority of specimen. When the same cells were tested with monoclonal antibodies raised against estrogen and progesterone receptors, no staining was found. All of the specimens of melanoma metastases that were tested for the presence of AR were deeply stained, the intensity of the staining being high in the majority of the specimens. Several hormones and antihormones were tested for their ability to stimulate cell proliferation on both cell lines with similar results. DHT, T, E2 or Pg stimulate significantly cell proliferation, this increase being reversed by OH-Flu, casodex (Cas) or tamoxifen (Tam). In addition, male and nude mice transplanted with IIB-MEL-J tumors were treated with flutamide (Flu) when tumors were palpable. Flu was effective in diminishing tumor growth and increasing survival rate of animals. As a conclusion, the presence of functional androgen receptors in these cells has been demonstrated by growth inhibition in vitro and in vivo with antiandrogens. In this study, we demonstrate a clear stimulation of cell proliferation by an androgen in human melanoma cell lines. The pure antiandrogen Flu showed an inhibitory effect on the cell growth in nude mice and a remarkable increase in survival rates of nude mice. Binding studies by Scatchard plot and competition studies showed the presence of androgen receptor with atypical sensitivity to different steroids. An interesting consequence of the present results is the possibility of clinical application of antiandrogen treatment to melanoma patients with androgen receptor.

Montaño Xavier, Jorge. "Caracterización y vulnerabilidad de sistemas hidrogeológicos discontinuos. Cuenca del Arroyo Carrasco - Montevideo - Uruguay" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En la presente investigación se desarrolla una caracterización hidrogeológica de medios discontinuos y una metodología para cuantificar la vulnerabilidad en acuíferos fisurados. El subsuelo está constituido por rocas metamórficas con zonas de alta densidad de fracturas portadoras de agua, entre las que se destacan las de dirección N 40 - 50 E y conjugadas. Los caudales más frecuentes de los pozos se encuentran entre 1 y 5 m3/h, con un caudal específico medio de 0,5 m3/h.m. El volumen almacenado por el acuífero en la zona donde se emplazan las fracturas (11.475 ha), se estima en 22,9 hm3. Las aguas subterráneas son de composición bicarbonatada sódica dominante y clorurada cálcica subordinada, con una salinidad media de 480 mg/l. En lo referente a su utilidad, el agua es apta para uso humano y para riego, calificándose como dura para procesos de enfriamiento en la industria. Presentan anomalías en nitratos con valores mayores a 30 ppm, producidas por prácticas agrícolas y falta de saneamiento. Respecto a la vulnerabilidad de contaminantes, se definieron amortiguadores edafológicos y geológicos en la zona no saturada. La amortiguación edafológica (química) se estimó en función de los valores de capacidad de intercambio catiónico (CIC) y la física, a partir del tiempo de transferencia. Este último parámetro también se utilizó para medir la amortiguación geológica. Se identificaron zonas de baja vulnerabilidad constituidas por suelos brunosoles o planosoles, sobreyaciendo a las formaciones Libertad y Fray Bentos (54% de la superficie total de la cuenca), y de alta vulnerabilidad para el basamento cristalino aflorante o cubierto por arenosoles.

Abstract:
The present research relates to the hydrogeologic characterization of discontinuous media and with a methodology to measure vulnerability in fractured aquifer. The subsoil is formed by metamorphic rocks with zones of high density of fractures bearing water, among them are clearly noticeable the ones with N 40 - 50 E direction and their conjugates. The most frequently yield in the wells are between 1 and 5 m3/h with and specific capacity of 0,5 m3/h.m. The storage of the aquifer in the zone where are located the fractures (11.475 ha) is estimated in 22,9 hm3. The groundwater have a dominate bicarbonated - sodic composition and subordinate clorurated - calcic, with a medium salinity of 480 mg/l. It’s useful for human use and irrigation, and very hard for cooling industrial processes. Groundwater show anomalies in nitrates with values higher than 30 mg/l, which is the result of agriculture and lack of sanitation. With respect to vulnerability of contaminants, edafologic and geologic buffers were defined in the non - saturated zone. The edafologic buffering (chemical) is estimated taking into account the cationic exchange capacity (CIC) and the one of physical type is based on transfer time; the latter was used to measure the geologic buffering. There were observed zones of low vulnerability formed of brunosoles or planosoles soils, overlying the sedimentary formations Libertad and Fray Bentos (54% of de surface of the basin), and other zones of high vulnerability in the crystalline basement either outcropping or covered by arenosoles.

Montanari, Claudia Carmen. "Procesos de cambio de carga en colisiones de iones con átomos y con superficies" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo de esta Tesis es profundizar en el estudio de los procesos fundamentales que tienen lugar en las colisiones atómicas en los cuales la carga del ion incidente se modifica debido a la interacción. Esto es los procesos de captura y pérdida electrónica. Se estudian las propiedades y la sensibilidad de diferentes métodos pertubativos y de onda distorsionada para describir estos procesos básicos, y se los aplica luego al estudio de estados de carga del proyectil en colisiones con superficies de materiales sólidos. El rango de velocidades con el que trabajamos es el de velocidades intermedias y altas. El desarrollo de la Tesis se puede dividir en dos partes principales. En la primer parte se estudian colisiones ion-átomo, en particular procesos de captura en los cuales un ion medianamente cargado interactúa con un blanco con un solo electrón activo. Se utilizan distintos métodos perturbativos como la aproximación de Brinkman-Kramers a primer y segundo orden, y métodos de onda distorsionada como las aproximaciones continuum distorted wave (CDW) y eikonal impulsiva (EI). En la segunda parte se desarrolla un modelo para procesos de pérdida electrónica y se aplican los conocimientos sobre las colisiones ionátomo a las colisiones ion-superficie. En particular nos ocupamos de las variaciones del estado de carga del proyectil al colisionar en forma rasante con la superficie. Por colisión rasante entendemos aquella en la cual los ángulos de incidencia considerados son suficientemente pequeños como para que el ion no penetre en el sólido antes de ser reflejado. En estas colisiones el tiempo de interacción entre el ion y la superficie es grande, lo cual permite un testeo muy sensible de las distintas aproximaciones teóricas a medida que la distancia ion-superficie se modifica. Con respecto al estudio de las colisiones simples ion-átomo, se analiza la posibilidad de mejorar distintos métodos de onda distorsionada, como la aproximación CDW, tomando en cuenta la mezcla Stark de estados excitados degenerados para procesos de captura. En particular se estudian las colisiones de distintos proyectiles sobre átomos hidrogenoides en las cuales el electrón pasa del estado fundamental al nivel n = 2. Desde el punto de vista físico los mecanismos considerados son sencillos, consisten en los procesos de dos pasos 1s → 2s → 2pₒ y 1s → 2pₒ → 2s. Esta mezcla de estados con igual número cuántico magnético se debe a la acción persistente de uno de los núcleos sobre el electrón ligado al otro. Utilizando un formalismo perturbativo para altas velocidades encontramos que el segundo orden en la aproximación CDW no tiene la forma rotacional de incorporación de la mezcla Stark que sí tiene la aproximación de Brinkman-Kramers. Es más. demostramos que esta corrección es despreciable en el rango de altas velocidades, y concluimos que las amplitudes de transición en la aproximación CDW ya contienen la mezcla Stark en ese rango de velocidades. Se prueban también distintos métodos teóricos para el caso de captura desde estados con n > 1. Con este objetivo se estudia la captura electrónica por colisiones de iones de H+, He²+ y Li³+ con H(2s) y H(2p) a velocidades moderadas y altas. Las secciones eficaces que se obtienen empleando las aproximaciones EI y CDW se comparan con resultados de otros métodos teóricos y con datos experimentales. Por otro lado, se calculan los límites asintóticos de la primera y segunda aproximación de Brikman-Kramers, y se comprueba que el mecanismo de Thomas (doble colisión) es importante en el límite superior del rango de velocidades considerado. Se prueba una regla de escala para las secciones eficaces de captura desde n > 1, la cual nos permite reunir valores correspondientes a distintos proyectiles en una banda universal. Estudiamos, además, la propensión de los electrones a poblar ciertos subestados magnéticos en procesos de captura electrónica a energías intermedias y altas. La. importancia de la misma reside en la simplificación del número de cálculos necesarios para tratar procesos de captura a niveles excitados, permitiendo estimar los subestados que más contribuyen a la sección eficaz. Por ejemplo, en colisiones ion-sólido múltiples eventos pueden llevar a poblar estados con momento angular grande. Para velocidades moderadas. del orden de la velocidad del electrón en el blanco, existe una regla de propensión que dice que si el eje de cuantificación se toma en forma perpendicular al plano de colisión. los subestados finales con número cuántico magnético m = —l son los más poblados. Esto se explica. desde el punto de vista clásico, notando que un electrón con m = —l sigue la rotación del eje internuclear permaneciendo principalmente en el plano de colisión, de manera que la captura electrónica resulta más probable a estos estados. La validez de esta tendencia en el rango de altas velocidades no es previsible, ya que la explicación de la misma está dada en términos de la física clásica. Sin embargo en esta Tesis probamos que la regla de propensión mencionada es válida también para velocidades intermedias y altas. Para describir los procesos de pérdida electrónica (o ionización del proyectil), se presenta un modelo basado en la primera aproximación de Born, corregida según el método teórico de Kaneko. El modelo propuesto es puesto a prueba con buen resultado comparandolo con datos de otros modelos más complejos, como el de expansión multipolar definida en un centro para velocidades altas y el de Classical Trayectory Monte Carlo para velocidades intermedias. En la segunda parte de esta Tesis se aplican los conocimientos sobre las colisiones ionátomo a las colisiones rasantes ion-superficie. Abordamos el tema utilizando un formalismo que consiste en extender la teoría de colisiones atómicas a procesos que involucran sólidos en lugar de átomos. En particular calculamos los estados de carga del ion a lo largo de su trayectoria frente a la superficie. considerando velocidades de impacto intermedias y altas. Los procesos colisionales por los cuales el proyectil modifica su estado de carga son los de captura y pérdida de electrones, estudiados en la primer parte de esta Tesis. El procedimiento usual para tratar el problema de las variaciones del estado de carga del proyectil al colisionar con una superficie a grandes velocidades, consiste en obtener el estado de carga saliente como consecuencia del juego entre dos procesos colisionales distintos. Captura de electrones que pasan de estar originalmente en estados ligados (le los átomos de la superficie a estados ligados del proyectil, y pérdida de electrones que son ionizados desde estados ligados del proyectil debido a la interacción con los átomos de la superficie. Nosotros seguimos aquí este mismo procedimiento. Generalmente se espera que al ir aumentando el ángulo de incidencia del ion sobre la superficie (pero sin penetrar en la misma) su estado de carga tienda al de iones en sólidos, y luego se aleje de la superficie con este estado de carga. Sin embargo mostramos que, a grandes velocidades, ésto no es cierto. El estado de carga llega a un valor de equilibrio cuando se encuentra muy cerca de la superficie, y a otro cuando se aleja de la misma. La diferencia entre estos dos valores se debe a los distintos rangos de captura y pérdida de electrones a altas velocidades. Muy cerca de la capa externa de átomos de la superficie ambos mecanismos están presentes, pero a partir de cierta distancia la captura es despreciable y sólo sobrevive la pérdida de electrones, continuando la ionización del proyectil. Por esta razón el estado de carga con el cual el proyectil emerge de la superficie es mayor que el que tenía en las proximidades de la misma, y este efecto es más evidente a medida que las velocidades de impacto aumentan.

Abstract:
In this Thesis we study the main processes that take place in atomic collisions in which the incident ion charge changes because of the interaction with the atom. This processes are electron capture and loss. Different perturbative and distorted wave methods are tested to deal with these basic processes. Then, they are applied to the study of projectile charge states in ion-surface collisions. The velocities range here considered is that of intermediate and high velocities. The development of the Thesis can be divided in two main parts: In the first one we study electron capture in ion-atom collisions, in which a charged projectile interacts with a target with one active electron. Different theoretical methods are employed. such as the first (BK1) and second order (BK2) of the Brinkman-Kramers approximation, and distorted wave methods such as the continuum distorted wave approximation (CDW) and the eikonal impulse approximation (EI). In the second part a model is developed to deal with electron loss processes, and the knowledge about ion-atom collisions is applied to ionsurface collisions. Particularly we will be interested upon charge state of ions impinging grazingly on a solid surface. By grazing collision we understand that collision in which the incident angle is little enough for the ion not to penetrate the solid before being reflected. On the other hand, the ion-surface collision time is long enough to allow us a sensitive test of the different theoretical approximations as the interaction distance changes. As part of the study of simple ion-atom collisions, we begin trying to improve known distorted methods, as the CDW one, by including the Stark mixing among excited degenerate states in electron capture processes. We study the collision in which a heavy ion impacts on a hiydrogenlike atom and capture an electron from the atom ground state to the ion n = 2 state. From the physical viewpoint, the mechanisms considered are simple. It is a typical two step process, 1s → 2s → 2pₒ or 1s → 2pₒ → 2s. The mixing of states with the same quantum magnetic number is due to the persistent action of one of the nuclei on other one bounded electron. By using the perturbative formalism at high velocities for electron capture, we probe that the second order CDW approximation does not provide the rotational form of the BK2 approximation in the high energies regime. Even more, it is demonstrated that the second order correction is negligible in the high energies regime. It is concluded that the CDW amplitudes should not be Stark-rotated because they do contain the Stark mixing at high velocities. Another step in the study of ion-atom collisions is the test of different theoretical methods to describe capture from initial states with n > 1. With this aim, we study electron capture in collisions of H+, He²+ and Li³+ ions with H(2s) and H(2p). The cross sections obtained by employing the EI and CDW approximations at moderate and high impact velocities, are compared with other theoretical methods and with the experimental data available. On the other hand, asymptotic limits for the first and second Brinkman-Kramers approximations are calculated. We prove that the velocities for which the Thomas mechanism (double collision) is significant are included in the high energy limit considered. A scaling rule in terms of the projectile charge is presented for partial cross sections in capture from n > l, that let us to plot values corresponding to different projectiles in a universal band. We have also proved the validity of a propensity rule for populating magnetic_substates by electron capture processes in the intermediate and high energy range. The importance of such a rule is to reduce the number of calculations needed to deal with capture processes to excited states, because it allows us to estimate the substates that contributes mainly to the total cross section. For instance, in ion-solid collisions multiple collisional events tend to populate large angular momentum final states. For moderate velocities, it is velocities of the order of the electron velocity in the target, there is a propensity rule saying that if the quantization axis is chosen to be perpendicular to the scattering plane, the m = —1 final substates are predominantly populated. It is explained from the classical viewpoint by noting that an electron with m = -l follows the internuclear axis rotation staying mainly in the scattering plane. so the electron is more probable to be captured. The validity of this propensity rule in the high velocity regime is not obvious since it is explained classically. However in this Thesis we probe that the mentioned propensity rule is valid in the intermediate and high velocities range. For electron loss processes we present a theoretical model based upon the first Born approximation, improved using the Kaneko method. The model developed is tested with more complex theoretical methods such as the multipolar expansion defined in one center for high velocities, and the Classical Trajectory Monte Carlo in the intermediate velocities range. The agreement among the methods is very good. In the second part of the Thesis, the knowledge about the different processes present in the ion-atom collisions is applied to ion-surface collisions. We study ion-surface collisions using a formalism that consists in applying the atomic collisions theory to processes involving solids instead of atoms. Particularly, emerging charge states of heavy ions impinging grazingly on a surface are calculated at intermediate and high impact velocities. The collisional processes that play an essential role in determining the charge state of the ion are capture and loss processes, both studied in the first part of this Thesis. The standard approach to deal with the projectile charge state in the collision of the projectile with a surface at high velocities, consists in obtaining the charge state distribution as the result of the interplay of two different processes. Capture of electrons from bound states of the topmost atoms of the surface, and electron loss from the bound states of the projectile to its continuum due to collisions with the surface atoms. Here we will follow this standard approach. Usually it is expected that as the ion incident angle increases (but without penetrating the surface) its charge state tends to that of ion within solids. and then leaves the surface with this charge state. We will show that at high velocities this is not true. The ion charge state gets an equilibrium value very closed to the surface, and another value as the ion leaves the surface. The difference between these two values is explained in terms of the different ranges of capture and loss processes. Very closed to the surface topmost layer both mechanisms are present, but at a certain distance capture is no longer effective, and loss survives ionizing the projectile. For this reason, the emerging charge state of the ion is larger than that in the surface vicinity. And this effect is more evident at larger velocities.

Molinero, Valeria Paula. "Aspectos de equilibrio y dinámicos de solvatación en nanoagregados polares binarios" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Utilizando técnicas de Dinámica Molecular, se han estudiado propiedades estructurales y dinámicas de agregados binarios compuestos por moléculas polares. Caracterizamos las estructuras de solvatación de agregados compuestos por agua-acetonitrilo, agua-amoniaco y acetonitrilo-amoníaco con dimensiones lineales en el orden del nanometro. La ausencia de simetría traslacional impuesta por la existencia de una superficie libre cercana a todos los constituyentes del sistema, determina la existencia de estructuras de solvatación diferentes de las encontradas para fluidos macroscópicos. Estudiamos un amplio intervalo de composición y observamos que las estructuras obtenidas son completamente diferentes según cuál sea la especie mayoritaria (solvente) y cuál la minoritaria (soluto). Para los tamaños de agregados estudiados, nunca se obtuvo mezcla total de ambos componentes, aunque se encontraron signos incipientes de disolución, y se caracterizaron los aspectos dinámicos de la misma. Hemos también analizado de qué manera la solvatación de un ion modifica la estructura de los agregados binarios. Mostramos que la solvatación selectiva del ion por parte de uno de los componentes puede llevar a un cambio morfológico en la estructura del solvente. En este contexto, investigamos la dinámica de la colisión de K+ con agregados mesoscópicos de agua y amoniaco. El estado post colisional del agregado es determinado por dos procesos: primero, una transformación morfológica desde una estructura caracterizada por un núcleo de agua sólida y una cubierta de amoniaco liquido a un agregado formado por dos hemisferios liquidos, uno de amoniaco conteniendo al ion y el otro de agua. Segundo, la evaporación de amoniaco enfría al agregado durante y después de la transformación morfológica. La dinámica del cambio morfológico fue seguida mediante un parámetro de orden - la distancia entre los centros de masa dc agua y amoniaco- y los tiempos característicos de transformación fueron interpretados utilizando una Ecuación de Langevin Generalizada, y también fueron computados de manera independiente mediante simulaciones de equilibrio usando teoría de respuesta lineal. Encontramos que la dinámica del parámetro de orden está relacionada con la difusión mutua de los subagregados de agua y amoniaco. El enfriamiento evaporativo de estos complejos sistemas fue caracterizado cuantitativamente mediante la determinación de las constantes de velocidad de evaporación para cada tamaño de agregado.

Abstract:
Structural and dynamical properties of liquid-state, binary polar-molecule nanoclusters were studied using Molecular Dynamics. We characterized the solvation structures of water-acetonitrile, water-ammonia and acetonitrileammonia aggregates with linear dimensions in the order of nanometer. The lack of traslational symmetry imposed by the existence of a free surface close to all the constituents of the system, determine the existence of solvation structures that are different to those found in bulk fluids. We studied a wide range of composition and observed that the structures obtained were completely different depending on which is the major component (solvent) and which the minor (solute). Our results suggest that the spatial density correlations of the solvent strongly influences the stability of the solvation states of the solute. In the size range of systems studied, complete mixing of both components was never achieved, although incipient signs of dissolution were found and their dynamical aspects characterized. We also analyzed in which way ionic solvation modifies the structure of the binary clusters. We show that the selective solvation of the ion by one component can lead to a morphological change in the structure of the solvent. In this context, ion solvation dynamics following collision of a metal ion and a binary polar-molecule cluster was investigated. The solvation process was illustrated by considering the collision of K+ with mesoscopic water-ammonia aggregates. Two processes determine the post-collision state of the clusters: first, a morphological transformation from a structure characterized by a solid water core and a liquid-phase ammonia sheath into a dumbbell-shaped cluster composed of a liquid water droplet attached to an ammonia subcluster containing the solvated ion. Second, ammonia evaporation cools the cluster during and after the morphological change. The dynamics of the morphological change was monitored through an order parameter -the distance between the centers of mass of water and ammonia subclusters- and the characteristic time of the transformation were interpreted using a Generalized Langevin Equation and computed independently by means of equilibrium simulations using linear response theory. We found that the dynamics of the order parameter is related to the mutual diffusion of water and ammonia subclusters. The evaporative cooling of the cluster was quantitatively characterized by determining the size-dependent rate constants for the evaporation of these complex clusters.

Milano, Leonardo Julio. "Mecanismos estacionarios e impulsivos de disipación de energía en la Corona Solar" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La corona solar está formada por un plasma de alta temperatura cuya dinámica da lugar a una rica variedad de eventos de disipación de energía. Por un lado, las fulguraciones, capaces de liberar cantidades enormes de energía (hasta 10(32)erg) en tiempos del orden de minutos. Por el otro, el calentamiento estacionario de las regiones activas, con una tasa de 10(5)—10(7)erg cm (-2) s (-1), que las mantiene a una temperatura dos órdenes de magnitud mayor que la de la capa atmosférica inmediatamente inferior (la fotósfera). Estos fenómenos pueden ser descriptos, al menos parcialmente, en la marco de la magnetohidrodinámica. El problema principal al que se enfrenta esta descripción es que los coeficientes moleculares de disipación en la corona son lo suficientemente pequeños como para que los fenómenos disipativos solo puedan ser explicados en presencia de estructuras de escala pequeña. En ese sentido, la turbulencia magneto hidrodinámica y la reconexión magnética resultan tal vez los candidatos naturales a describir, respectivamente, el calentamiento estacionario de la corona y la disipación impulsiva en fulguraciones. Un estudio teórico-numérico de intermitencia magneto hidrodinámica nos permite relacionar las propiedades estadísticas de la turbulencia con la geometría (asintoticamente fractal) de las zonas de disipación, y afirmar que la disipación estacionaria en la corona solar se encuentra sumamente concentrada en zonas distribuidas en forma aleatoria. La aplicación de una teoría de clausura turbulenta a dos puntos indica que los arcos magnéticos son esencialmente calentados por corrientes eléctricas cuasi-estacionarias, inyectadas por el campo de velocidades fotosférico. Estudiamos, tanto en forma numérica como teórica, un caso de reconexión magnética turbulenta entre dos tubos de flujo dentro de un arco coronal, obteniendo una tasa de disipación acorde a la de las microfulguraciones. Por último, una serie de estudios observacionales de la dinámica de las estructuras coronales en la línea espectral Hα nos permite conjeturar que el aumento de la vorticidad de esas estructuras, presuntamente ligado a la evolución de los campos dinámicos, puede constituir una herramienta útil para la predicción de fulguraciones.

Abstract:
The hot plasma in the solar corona shows a very rich variety of energy dissipation events. On one hand, the solar flares release enormous amounts of energy (up to 10(32) erg) in typical times of the order of minutes. On the other hand, the steady heating in active regions, with rates within 10(5)—10(7) erg cm(-2) s(-1) maintain these regions at a temperature two orders of magnitude higher than that of the photosphere. These phenomena can be described, at least partially, within the framework of magneto hydrodynamics. The main problem faced by this description is that the molecular dissipation coefficients in the corona are so small that the previously described dissipation phenomena can only be explained if small scale structures are present. It is in this sense that magneto hydrodynamic turbulence and magnetic reconnection seem to be the natural candidates to describe, respectively, the steady heating of the corona and the impulsive energy release in flares. A numerical-theoretical study of magneto hydrodynamic intermittence allows us to relate the statistical properties of the turbulence to the geometry of the (asymptotically fractal) geometry of the dissipation regions, and state that the steady dissipation in the solar corona is highly concentrated in randomly distributed zones. Application of a two-point turbulent closure theory indicates that coronal loops are primarily heated by quasi-steady electrical currents pumped by the photospheric velocity field. We study, both by theoretical and numerical means, the turbulent magnetic reconnection between two flux tubes inside a coronal loop, obtaining a dissipation rate consistent with those observed for microflares. Finally, a series of observational studies in the Hα spectral line leads us to argue that the enhancement of the vorticity of these structures, presumably linked to the evolution of the dynamical fields, might be a useful tool for flare prediction.

Mejail, Marta Estela. "La distribución G0A en el modelado y análisis de imágenes de radar de apertura sintética" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los datos provenientes de un sistema de iluminación por radiación coherente, como lo son los datos de radar de apertura sintética - SAR (Synthetic Aperture Radar), pueden modelarse con el modelo multiplicativo. Este modelo es muy conveniente para explicar las características estadísticas de estos datos. El retorno multilook en formato amplitud se modela como una variable aleatoria que es el producto de otras dos variables aleatorias independientes. Estas variables aleatorias corresponden al backscatter y al ruido speckle. El modelo para el segundo, para el formato aquí considerado, es universalmente aceptado como la distribución Raiz Cuadrada de Gamma. Por otro lado, el modelo a utilizar para el backscatter solamente dependerá, idealmente, de algunos parámetros que representarán la información disponible a cerca de la rugosidad y de la textura de la imagen. Se pueden utilizar diferentes distribuciones para modelar el backscatter. Esta elección dependerá del grado de homogeneidad presente en las imágenes. Las distribuciones K han sido muy utilizadas para modelar datos que han sido generados por un sistema de iluminación coherente, en particular para imágenes SAR . El modelo multiplicativo clásico postula que el retorno en amplitud de áreas no homogéneas obedece un tipo de distribución K llamado KA. Si el área es homogénea la distribución Γ½ modelará bien los datos y, por ser ésta un caso particular de la anterior, se preserva la validez del modelo KA. Sin embargo, las distribuciones KA no modelan bien los datos provenientes de áreas muy heterogéneas. Se ha propuesto el uso de las llamadas distribuciones Gº, para el modelado de áreas extremamente heterogéneas. En este trabajo se estudia la factibilidad de substituir la distribución KA por la distribución GºA en el ajuste de datos. Con este fin se propondrá una aproximación entre ambas distribuciones. Se verificará que la aproximación de la distribución KA por la distribución GºA tiene sentido práctico, concluyendo que se debe adoptar como verdadero modelo a la distribución GºA.

Matkovic, Laura Beatriz. "Aspectos cinéticos metabólicos y estructurales en los últimos pasos de la biosíntesis de Aldosterona" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El presente trabajo tuvo como objetivo la elucidación de algunos aspectos (cinéticos, estructurales y metabólicos) relacionados con los últimos pasos de la biosíntesis de aldosterona (ALDO). La última etapa de la biosíntesís de ALDO involucra la oxidación mitocondrial de 11-desoxicorticosterona (DOC), a través de diferentes caminos siendo sus primeros metabolitos corticosterona (B) y 18-hidroxi-1 desoxicorticosterona (18-OHDOC). Todas estas reacciones son catalizadas por enzimas de la familia de los citocromos P-450. Una de estas enzimas es el citocromo CYP11B1 involucrado en la transformación de DOC a B y 18OHDOC. El otro citocromo involucrado, CYP11B2 es el responsable de la transformación de B a 18-hidroxicorticosterona (l8-OHB) y a ALDO. Mediante los resultados obtenidos al trabajar con cortisol como sustrato alternativo en este camino metabólico se pudo clasificar a las enzimas presentes corno sensibles a cortisol (SC) o insensible a cortisol (ISC), siendo esta clasificación compatible con la existencia de las dos enzimas clonadas CYP11B1 y CYP11B2. Cortisol inhibió competitivamente la transformación de B a ALDO y 18-OHDOC a ALDO. Por otro lado, se desarrollo un modelo matemático para el estudio de inhibidores suicidas. Se observó que 18-etinil-11-desoxicorticosterona (18-EtDOC) se comportaba como inhibidor suicida. Mediante la utilización del nuevo modelo propuesto se calcularon los diferentes valores de las constantes de inhibición para los diferentes pasos involucrados. Los valores obtenidos concuerdan nuevamente con la existencia de los dos citocromos CYP11B1 y CYP11B2. Por otro lado se logró caracterizar un intermediario dimérico del camino de 18OHB a ALDO, el cual resultó un buen sustrato para la biosintesis de aldosterona. Mediante los estudios realizados y utilizando como base de estudio animales tratados con litio, se observó que 1a secreción de ALDO por 1a vizcacha (Lagostomus maximus maximus) es más sensible a estos tratamientos que esta secreción por la rata, especie usualmente utilizada en estos tipos de estudio. Se puede concluir que dado que el litio produce efectos colaterales en estos animales, se debería estudiar en humanos si estos efectos se repiten en los tratamientos crónicos con este ión.

Abstract:
This work aims at clarifying certain kinetic, structural and metabolic aspects of the last steps of the biosynthesis of aldosterone (ALDO). These steps comprise the mitochondrial oxidation of 11-deoxycorticosterone (DOC) through different pathways, their first metabolites being corticosterone (B) and 18-hydroxy-11-deoxycorticosterone (18OHDOC). All these reactions are catalyzed by enzymes of the cytochrome P450 family. One of these enzymes is cytochrome CYP11B1 involved in the transformation of DOC to B and 18OHDOC, the other one being CYP11B2, catalyzing the transformation of B to l8-hydroxycorticosterone (18OHB)and ALDO. In view of the results obtained with cortisol as an alternative substrate, enzymes could be classified into those sensitive to cortisol (SC) or unsensitive to cortisol (USC), this categorization being compatible with the occurrence of two cloned enzymes CYP11B1 and CYP11B2. Cortisol inhibited competitiver the transformation ofB to ALDO and 18OHDOC to ALDO. We also developed a mathematical model for the study of suicide-inhibitors. Employing this new model, values were calculated for the inhibtion constants of the different steps involved. The obtained values again agree with those of the two cloned cytochromes CYP11B1 and CYP11B2. We also characterized a dimeric intermediate between 18OHB and ALDO, which showed to be a good substrate for aldosterone biosynthesis. In these studies and others with animals treated with lithium, we found that ALDO secretion by the “vizcacha” (Lagostomns maximus maximus) is more sensitive to these treatments than this secretion by the rat, the latter being the species usually employed in these studies. Since lithium produces collateral effects in these specimens, clinical investigations should be carried out on the effects of chronic treatments with lithium in human.

Martínez Vivot de Cavanagh, Elena. "Inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina : Su efecto sobre el metabolismo de las especies activas del oxígeno" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se ha demostrado que los inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina (IECA) atenúan ciertas modificaciones tisulares asociadas al envejecimiento. Numerosas evidencias indican que las especies activas del oxígeno (EAO) están involucradas en el proceso de envejecimiento. El objetivo de esta tesis fue investigar si los IECA poseían algún efecto sobre el metabolismo de las EAO. Con este fin se condujeron experimentos, in vitro e in vivo, para estudiar la posibilidad que los IECA pudieran a) atrapar radicales libres per se, y/o b) inducir las defensas antioxidantes endógenas. Los IECA utilizados fueron enalapril, lisinopril y captopril. Los estudios existentes en la literatura acerca de los efectos protectores de los IECA durante el envejecimiento utilizaron dosis hipotensoras de estos compuestos. Por ende, los resultados no pueden separarse de la acción de los mismos sobre la presión arterial. En el presente trabajo, a fin de poder independizar el efecto beneficioso de los IECA de su acción hipotensora, se estudió en primer lugar el efecto del tratamiento crónico (24 meses) con dosis de enalapril que no afectaran la presión arterial sobre cambios histológicos asociados al envejecimiento normal en ratones. Los resultados indican que, aún en las dosis utilizadas, el tratamiento crónico con enalapril atenúa i) las modificaciones en el peso del riñón y el corazón, ii) las fibrosis renal intersticial y cardíaca, y iii) la disminución del número de mitocondrias en los miocardiocitos asociadas al proceso normal de envejecimiento. En base a estos resultados, se emplearon tratamientos prolongados (11 semanas) con dosis no hipotensoras de enalapril o captopril para estudiar su efecto sobre parámetros de estrés oxidativo en el cerebro, corazón, riñón, hígado, pulmón, eritrocitos y plasma de ratón. Se evaluaron las actividades de las enzimas superóxido dismutasa, selenio-glutatión peroxidasa, catalasa, glutatión reductasa, el contenido de glutatión, a-tocoferol, Bcaroteno, ubiquinol, y los niveles de marcadores de daño oxidativo a los lípidos y las proteínas. Ambos tratamientos incrementaron los niveles de las defensas antioxidantes enzimáticas y no enzimáticas con respecto a los controles no tratados, aunque los resultados no fueron uniformes en cuanto a su magnitud, ni a la variedad de los tejidos involucrados. Esto podría explicarse por la diferente metabolización y/o penetración tisular del enalapril y el captopril. En los eritrocitos, utilizados como un sistema modelo ín vitro, el aumento de las defensas antioxidantes estuvo acompañado por protección contra el daño oxidativo. En ensayos in vitro se evaluó la capacidad antioxidante directa del enalapril, lisinopril y captopril. El captopril es un IECA que posee un grupo sulfhidrilo al que se le han atribuido propiedades antioxidantes, mientras que el enalapril y el lisinopril están desprovistos del mismo. Los resultados indicaron que el captopril posee capacidad atrapadora de radicales libres, aún en las bajas concentraciones plasmáticas que se alcanzan en los usos terapéuticos. Por el contrario, no se pudo detectar una acción antioxidante directa del enalapril y el lisinopril. Por último, se investigó el efecto de la administración prolongada de enalapril sobre las defensas antioxidantes enzimáticas y no enzimáticas en pacientes sometidos a tratamiento hemodialítico crónico. En este modelo se utilizaron dosis hipotensoras de enalapril. Los datos demuestran que los pacientes en hemodiálisis (HD) crónica se encuentran en condiciones de estrés oxidativo cuando se los compara con controles sanos. Además, la administración de enalapril durante por lo menos 6 meses incrementa varias de las defensas antioxidantes en los eritrocitos y el plasma, en relación a los pacientes en HD crónica no tratados con enalapril. La incubación de superóxido dismutasa o de selenio-glutatión peroxidasa en presencia de enalapril o captopril no tuvo efecto sobre las actividades enzimáticas. Esto sugiere que los IECA aumentarían la actividad de las defensas antioxidantes enzimáticas por un mecanismo indirecto. Los niveles plasmáticos de óxido nítrico estaban elevados en los ratones tratados con enalapril o captopril durante 11 semanas. Debido a que se ha demostrado que la sobreproducción de óxido nítrico conduce a un moderado estrés oxidativo, y que éste último es capaz de actuar como un estímulo para la síntesis de las defensas antioxidantes en diferentes sistemas, se postuló que el aumento de las defensas antioxidantes de síntesis endógena inducido por los tratamientos prolongados con enalapril o captopril estaría mediado por la producción de oxído nítrico derivada de la acumulación de bradiquinina. Se concluye que el aumento de las defensas antioxidantes enzimáticas y no enzimáticas sería uno de los mecanismos mediadores de los efectos protectores demostrados por los IECA en el envejecimiento, así como en diversas situaciones experimentales y clínicas. Este efecto de los IECA abriría nuevas perspectivas con respecto a los mecanismos que subyacen las acciones terapéuticas de estas drogas.

Martínez, Elena Julia. "Estimación robusta en modelos arma multivariados" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Martinez, Alicia Elba. "Estudio ecológico de los hongos del suelo de un bosque de Pinus Taeda" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Marquínez, Ana Claudia. "Glicoproteínas en reproducción : estudios en el espermatozoide humano normal y en el plasma seminal bovino sobre glicoproteínas conteniendo oligosacáridos n-unidos" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Como contribución al estudio del rol de los N-glicanos en la fertilización de mamíferos, estudiamos su presencia en la superficie del espermatozoide humano normal y en plasma seminal bovino. Usando lectinas específicas fluorescentes como sondas moleculares localizamos los dominios de glicoproteínas conteniendo oligosacáridos oligomanosídicos, híbridos y complejos en el espermatozoide humano. Con neoglicoproteínas demostramos que los receptores especificos para manosa, fucosa y galactosa, localizan respectivamente en las zonas de dichas glicoproteínas. Esto concuerda con la complementariedad molecular de la interacción espermatozoide-zona (por receptores de doble unión). Por cromatografía lectina-agarosa, demostramos la presencia de glicoproteínas conteniendo oligosacáridos oligomanosídicos, híbridos y complejos en plasma seminal bovino. Aislamos en microescala las proteínas BSP, demostramos que éstas y aSFP, participan (quizás junto con lípidos) en la modulación de la actividad "in vitro" de las proteasas espermáticas. Dicha actividad es incrementada cuando los oligosacáridos fucosilados conteniendo el antígeno Lex está presente. Además cada BSP sola es menos activa que el conjunto de ellas sugiriendo que potenciarían su actividad por efecto sinérgico. Dado que las BSP unen a lípidos, sugerimos que la modulación de la capacitación y reacción acrosomal por parte de las BSP (BSP-HDL)estaría relacionada con la actividad inhibitoriade proteasas acrosomales.

Abstract:
As a contribution to the study of the role of N-glycans in mammalian fertilisation, we studied the presence of this type of compounds on the surface of the normal human spermatozoon and in bovine seminal plasma. Using specific fluorescent lectins as molecular probes, we localised the domains of different oligosaccharides containing glycoproteins on the surface of the human spermatozoon. Using neo-glycoproteins we demonstrated that the specific receptors for mannose, fucose and galactose localize respectiver in same zones than the oligomannosidic. fucosylated and complex oligosaccharides containing glycoproteins. This is consistent with the molecular complementarity of sperm-zona pelucida interaction (by double binding receptors). By lectin-affinity chromatography, demonstrated the presence of oligomannosidic, hybrid and complex oligosaccharides containing glycoproteins in bovine seminal plasma. We isolated the BSP proteins in microscale and demonstrated that these and aSFP protein participate (perhaps together with lipids) in the modulation of sperm proteases activity “in vitro". This inhibitory activity is increased when fucosylated Lex containing oligosaccharides are in the environment of the BSP proteins. Besides each BSP alone is less active than when they are all together, suggesting that they potenciate each other the protease inhibitory activity. We suggest that the known modulation of capacitation and acrosomal reaction by BSP proteins (BSP-HDL)might be related with this activity.

Marquina, Silvia Andrea. "Estudio sobre la variabilidad genética del virus de la inmunodeficiencia humana" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El estudio de la variabilidad viral es importante para entender la patogenia, la evolución y la epidemiología del HIV. Esta tesis aborda la variabilidad del HIV desde diversos ángulos. Uno de ellos fue la caracterización molecular del HIV-1 en ciudades con corrientes migratorias importantes como Buenos Aires. San Petersburgo y Estocolmo. Se demostró que estas corrientes introdujeron subtipos del HIV-1 que no circulaban previamente y la existencia de un nuevo subtipo del HIV-1, conocido actualmente como subtipo J. Se caracterizaron cadenas epidemiológicas de transmisión de la infección determinando que las recombinantes virales son frecuentes y transmisibles por vía horizontal y vertical, lo que constituye un hecho de importancia epidemiológica. La presencia de recombinantes virales motivó el desarrollo de un método para buscar posibles sitios de recombinación genómica y otro filogenético que toma en cuenta el evento de recombinación, importante en la evolución de HIV.Además se demostró que la hipermutación G—>A está restringida por la estabilidad del ARN viral. Además del HIV-1 se estudió el HIV-2 y se confirmó el predominio del subtipo A en Guinea Bissau. La carga proviral y el recuento de linfocitos T CD4+ resultaron marcadores del estadio de la infección con HIV-2 similar a lo que ocurre con HIV-1. Existe relación entre el genotipo y el fenotipo viral ya que aislamientos "rapid/high" presentaron aminoácidos positivos con patrones similares al HIV-1. Por otra parte se estudió la contribución del ADN viral extracromosómica a la variabilidad genética in vitro e in vivo resultando que una linea celular persistentemente infectada con HIV-1 puede ser sobre infectada por otra variante cuyo ADN se localiza en la fracción extracromosómica y se dispersa sólo por contacto célula a célula. In vivo el ADN viral extracromosómico contribuye a la variabilidad genética en la población viral de individuos infectados con el HIV-1. En conclusión, aquí se discuten algunos aspectos acerca de la variabilidad genética del HIV desde los puntos de vista molecular, evolutivo y epidemiológico. Además la tesis sugiere posteriores estudios particularmente en los temas de recombinación y sobreinfección para enriquecer el conocimiento sobre la variabilidad del HIV.

Abstract:
Research on viral variability is a crucial issue to understand the pathogenesis, evolution and epidemiology of HIV. This work focuses on the variability issue from different angies. One of this is the HIV-1 molecular characterization in cities with great migratory influx such as Buenos Aires, St. Petersburg and Stockholm. These migrations resulted in the introduction of HIV-1 subtypes that were not previously circulating. The existence of a new HIV-1 subtype, currently known as subtype J was demonstrated. Epidemiological transmission chains were characterized demonstrating that viral recombinants are frequently found and that they are transmissible horizontally and vertically, fact that is epidemiological important. The evidence of viral recombinants lead to the development of a method for searching possible recombination sites and of a phylogenetic method which takes into account the recombination event, relevant during HIV evolution. Besides, G—>A hypermutation is restricted by RNA stability. Besides HIV-1, HIV-2 was studied and the predominance of subtype A was confirmed in Guinea Bissau. Proviral load and T CD4+ cell count demonstrated to be markers of stage of HIV-2 infection similar to HIV-1. There is a correlation between the genotype and the phenotype because "rapid/high" isolates presented positively charged amino acids in env region, similarly to HIV-1. On the other hand, extrachromosomic contribution to variability in vitro and in vivo was studied. A persistently infected cell line can be super infected with other variant whose DNAis in the extra chromosomic fraction and it spreads only by cell to cell contact. Extrachromosomic viral DNA contributes to in vivo genetic variability in HIV-1 infected individuals. Finally, several aspects of HIV genetic variability are discussed from different points of view such as molecular, evolutionary and epidemiological aspects. Besides, this work suggests further studies particularly in recombination and superinfection issues in order to enrich the knowledge about HIV variability.

Mareggiani, Graciela. "Efecto biológico de Withanolidos de Salpichroa oroganifolia y Datura ferox (Solanaceae) sobre Tribolium Castaneum (Coleoptera, Tenebrionidae) y Musca domestica (Diptera, muscidae)" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se investigó el efecto biológico de productos extraídos de plantas de Salpichroa origanífolia y Datura ferox sobre Tribolium castaneum y Musca domestica. Los productos evaluados fueron: extractos de S. origanifolia, withanólidos A, C y G (salpicrólidos) aislados de S. origanifolia, cinco análogos modificados a partir de los compuestos A y G, y withaferoxólido aislado de D. ferox. Los productos se incorporaron a la dieta de larvas y adultos o se aplicaron en forma tópica en adultos. Se produjeron demoras significativas en el desarrollo de T. castaneum desde larva a adulto con A, C, G y withaferoxólido, resultando los mejores compuestos A y G, que además produjeron efectos letales. El compuesto A produjo demoras significativas en el desarrollo de M. domestica desde larva a adulto, mientras que la aplicación de A, C y G produjo mortalidad, siendo G el compuesto más activo. Se observaron efectos subletales similares cuando se ofreció como alimento dietas de bajo valor nutritivo sin withanólidos. Cuando se efectuaron tratamientos con salpicrólido A con adultos, se evitó la permanencia de T. castaneum en la proximidad del alimento, produciéndose entonces inhibición de la alimentación. También se observaron efectos letales y subletales con algunos de los análogos modificados. Estos resultados sugieren que la actividad biológica puede deberse a un efecto de disuasividad alimentaria.

Abstract:
The biological effect of products extracted from plants of Salpichroa origanifolia and Datura ferox on Tribolium castaneum and Musca domestica was studied. Products tested were: extracts of S. origanifolia, withanolides A, C and G (salpichrolides) isolated from S. origanifolia, five chemically modified analogs of compounds A and G, and withaferoxolide, isolated from D. ferox. The products were incorporated to the diet of larvae and adults or topically applied to adults. Significant development delay from larva to adult of T. castaneum was produced by A, C, G and withaferoxolide, the best results corresponding to A and G, which also caused lethal effects. Significant development delay from larva to adult of M. domestica was produced by A, while application of A, C and G resulted in mortality, being G the most active compound. Similar sublethal effects were observed when poor nutritional diets without withanolides were offered as food. When salpichrolide A was applied in treatments to adults the permanence of T. castaneum in the proximity of food was avoided, producing in this way feeding inhibition. Similar lethal and sublethal effects with some of the chemically modified analogs were also observed. These results suggests that biological activity may be due to a feedant: deterrant effect.

Madanes, Nora. "Análisis de la dispersión y depositación polínica en una agroecosistema en el sudeste de la provincia de Buenos Aires (Argentina)" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo principal del presente trabajo fue analizar los mecanismos de la dispersión y depositación polínica en un sistema cultivo/malezas en relación con la estructura y la dinámica de la comunidad del sitio. El trabajo se realizó en la Estación Experimental - INTA Balcarce en una parcela de girasol (Helianthus annus). Se analiza la composición cuali y cuantitativa de la comunidad de malezas así como el desarrollo fenológico de éstas y del cultivo y su relación con las condiciones climáticas del área. Sincronicamente se realizaron muestreos aeropalinológicos en el cultivo. Además se elaboró una zonificación del área, se identificaron los ambientes, en cada una de alas cuales se hicieron censos de la estructura y composición florística para identificar el origen del polen. Los resultados mostraron que el desarrollo del sistema cultivo/malezas modifica los mecanismos involucrados en la dispersión y depositación a través del control del flujo y las fuentes polínicas como se pudo observar en la composición tipológica, riqueza y diversidad del diagrama polínico.

Abstract:
The purpose of this work was to analyse pollen dispersion-depositation mechanisms in a crop/ weeds system in relation with the structure and dynamics of the site community. The work was carried out in the Experimental Station of INTA Balcarce in a sunflower plot (Helianthus annus). Qualitative and quantitative composition of the weeds community was analysed as well as the phenologic development of both weeds and sunflower crop, and its relationship with the climatic conditions of the area. Aeropalynological samples in the crop were collected simultaneously. Furthermore, a zonation of the area was elaborated, and in the different environments identified, censuses of structure and floristic composition were made in order to find out the pollen origin. The results showed that the weeds/crop system's development modifies mechanisms involved in dispersion and deposition , through pollen flux control and pollen sources, as it can be seen through the typological composition, richness and diversity of the pollen diagram.

López Pumarega, María Isabel. "Estudio de la emisión acústica generada por deformación en tubos, sus fuentes y características" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En el presente Trabajo de Tesis, se diseñó e implementó un sistema experimental para estudiar la Emisión Acústica (EA) producida durante la deformación triaxial de probetas en forma de aros. Se construyeron todos los componentes necesarios para los ensayos. Se diseñaron y construyeron distintos tipos de probetas, cortadas transversalmente de tubos de acero microaleado sin costura, usados en la industria petrolera, a fin de inducir distintas fuentes de EA (deformación, creación y propagación de fisuras, rotura de la capa de óxido). Se caracterizaron química, mecánica y metalográficamente los materiales de las probetas ensayadas. Las superficies de rotura de los materiales empleados, fueron observadas en un microscopio electrónico de barrido (MEB), identificándose los distintos tipos de fractura. Se realizaron 22 ensayos, sirviendo los 10 primeros, para poner a punto todo el sistema de medición, eligiéndose los parámetros óptimos. Se logró caracterizar cada tipo de probeta por el comportamiento medio de los parámetros Amplitud, Duración y Risetime de las señales de EA, obteniéndose una clara separación en "clusters". Esto permitiría en ensayos en campo sobre tubos similares, hacer una identificación general de las posibles fuentes de EA. No se encontró un comportamiento temporal definido en la evolución de los parámetros de las señales de EA, a medida que avanzaba cada ensayo. Estadísticamente se demostró que dentro de cada tipo de probeta, los ensayos son réplicas entre sí. Se calcularon los coeficientes de correlación entre los tres parámetros de las señales de EA, para todos los ensayos, encontrándose la mayor correlación entre la Amplitud y la Duración. Para cada ensayo, se estudiaron estadísticamente las distribuciones de los parámetros Duración, Risetime y Amplitud. No encontrándose una única función de distribución que ajustase todos los histogramas experimentales de los dos primeros. En el caso de la Amplitud, primero, de acuerdo a la ley potencial, se obtuvieron valores del exponente comprendidos entre los citados en la literatura publicada. Luego, se encontró que una única función de distribución ajustaba todos los histogramas experimentales, dicha función fue la Log-normal, que ya aparecía citada en la literatura publicada. Buscando alguna explicación física al hecho anterior, se analizó primero la influencia del sistema de detección, demostrándose que el transductor piezoeléctrico de banda ancha empleado para recoger la EA producida, mantiene la linealidad entre la amplitud de los impulsos mecánicos incidentes en el sensor (deformación de la superficie del material) y la amplitud de las señales eléctricas salientes (Amplitud de las señales de EA). Luego, se demostró, teniendo en cuenta el comportamiento estadístico de los fenómenos físicos involucrados, que las amplitudes de las deformaciones dentro del material obedecen a una distribución Log-normal. Teniendo en cuenta la linealidad del sistema de registro de la EA, se concluyó que las Amplitudes de las señales de EA deben seguir la misma distribución Log-normal. Por último, se hacen algunos comentarios destinados a relacionar dos fenómenos que aunque ocurren a escalas muy diferentes, parecen responder a la misma dinámica, la E A a escala microscópica, y los terremotos a escala varios ordenes de magnitud mayor. Finalmente, se sugiere para estudios posteriores, la aplicación de los nuevos conceptos como criticalidad auto-organizada, fractales y ruido 1/f al fenómeno de la Emisión Acústica.

López Arbarello, Adriana. "Estudio taxonómico de los percíctidos (Osteichthyes : Perciformes) actuales de Argentina" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Lepone, Francisco Alejandro. "Nitruración y recubrimientos mediante Cañones Coxiales de plasma" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Ledda, María Fernanda. "Estudio del rol de la proteína en el desarrollo y progresión del melanoma humano" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
SPARC (Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteine) es una proteína extracelular asociada a tejidos que presentan altas tasas de proliferación celular y remodelación de la matriz. En este trabajo se muestra que las lineas celulares de melanoma humano IIB-MEL-LES, IIB-MEL-IAN e IIB-MEL-J así como varios melanomas humanos metastásicos expresan altos niveles de la proteína y del ARNm de SPARC. Mediante análisis por Western Blot, detectamos una única banda de 42 kDa secretada in vitro por fibroblastos diploides humanos y un doblete de 40 a 45 kDa secretado por las tres líneas celulares de melanoma y en todos los melanomas metastásicos testeados. Algunas de las muestras de melanomas y de las líneas celulares mostraron un doblete adicional de 34-36 kDa. El ARNm de SPARC fue detectado por ensayos de northern blot en las tres líneas de melanoma estudiadas, en las l4 muestras de melanomas metastásicos y en los tumores inducidos en ratones atímicos. El patrón heterogéneo de SPARC secretado por las células de melanoma humano es resultado de la glicosilación post-traduccional y de un clivaje extracelular específico. A diferencia de lo que sucede con los fibroblastos humanos, las células de melanoma no sobreexpresaron SPARC luego del agregado de TGF-β. El análisis inmunohistoquímico demostró que SPARC se expresó fuertemente en el 100% de los melanomas primarios (7/7) y metastásicos (29/29), con moderación en la mayoría de los nevos displásicos positivos (13/14) y débilmente en los nevos benignos (4/25). No se detectó expresión de SPARC en melanocitos normales. Los datos sugieren que la expresión de de esta proteína está asociada a la progresión neoplásica del melanoma humano. En el presente trabajo también se describe la supresión parcial de la expresion de SPARC en 2 líneas de melanoma humano utilizando un vector de expresión con la secuencia antisentido para SPARC. La reducción de los niveles de expresión de esta proteína dio como resultado una reducción en la capacidad adhesiva e invasiva in vitro de las células tumorales sobre membranas basales reconstituídas, eliminando completamente su capacidad tumorigénica in vivo. Esta es la primera evidencia de que SPARC desempeña un papel clave la progresión del melanoma humano.

Abstract:
SPARC (Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteine) is an extracellular protein associated with tissues exhibiting high rates of cell proliferation and matrix remodelling. The present work shows that the human melanoma cell lines IIB-MEL-LES, IIB-MEL-IAN and IIB-MEL-J and different human metastatic melanomas expressed high levels of SPARC mRNA and protein. By western blot analysis we detected a unique secreted 42 kDa band in human diploid fibroblast-conditioned medium and a 40 to 45 kDa doublet in the three melanoma cell lines and all the metastatic melanomas tested. Part of the melanoma samples and cell lines showed an additional doublet of 34-36 kDa. SPARC mRNA was expressed by the three established cell lines, 14 metastatic melanoma samples, and tumors raised in nude mice, and no spliced variants were found. The heterogeneous pattern of SPARC secreted by human melanoma cells is the result of post-translational glycosilation and specific extracellular cleavage. Unlike human fibroblasts, melanoma cells did not over express SPARC upon addition of TGF-β. Immunohistochemical analysis showed that SPARC was strongly expressed in 100 % of primary melanomas (7 of 7) and metastatic melanomas (29 of 29), moderately expressed in most of the positive dysplastic nevi (13 of 14), and only weakly expressed in nevocellular nevi (4 of 25). Normal melanocytes did not express SPARC. The data suggest that the expression of SPARC is associated with the neoplastic progression of human melanoma. The present study also reports that the suppression of SPARC expression by 2 human melanoma cell lines using a SPARC antisense expression vector, results in significant decrease in the in vitro adhesive and invasive capacity of tumor cells, completely abolishing their in vivo tumorigenicity. This is the first evidence that SPARC plays a key role in human melanoma development and progression.

Latorre, Fabiana. "El polen atmosférico como indicador de la vegetación y de su fenología floral" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En esta Tesis Doctoral se aborda a la Aerobiología de una manera integral, evaluando todos los aspectos involucrados en el proceso aerobiológico. Este incluye el estudio de los granos de polen desde su producción en la vegetación hasta su registro en la atmósfera, además de todos los factores que intervienen tanto biológicos como físicos. Para ello, se analizaron los datos cuantitativos de la vegetación, de su floración, de los tipos polínicos emitidos y presentes en la atmósfera y de las condiciones de ésta antes, durante y después de la floración. En principio, se estudió la composición de la flora urbana de Mar del Plata, caracterizando el tipo de estrategia reproductiva de sus componentes, y la diversidad, abundancia y distribución. Se determinó el período de floración de las especies y se estudió cuantitativamente la floración de las mismas. Especial atención y detalle tuvo la vegetación arbórea implantada. Se analizaron las diferencias interanuales en las fenofases florales principales y se determinaron las condiciones climáticas estacionales previas al inicio de la floración responsables de esa variabilidad interanual. Fue posible describir el comportamiento reproductivo general del conjunto de especies emisoras y su relación con el clima. Se estudió el contenido de polen de la atmósfera de Mar del Plata. Se confeccionó el calendario polínico de la zona que permite una caracterización precisa de la aeroflora y de su dinámica y la identificación de las tendencias generales. Se compararon las productividades polínicas relativas de cada taxón y los períodos de polinización entre especies y entre años. La estacionalidad del espectro polínico a lo largo del año responde a la fenología floral de las distintas formas de vida de las especies vegetales. Se analizó la relación polen-meteorología ya que la dispersión de partículas biológicas como la de los granos de polen, puede considerarse gobernada por los parámetros físicos atmosféricos de las masas de aire. En particular, se estudiaron los rasgos estacionales y diarios de la nube polínica para establecer el efecto de las variables meteorológicas instantáneas sobre los granos en suspensión. Se estableció que para elucidar de qué manera operan los factores responsables de la variación interanual del polen atmosférico, se requiere un estudio detallado separando el efecto de las condiciones climáticas estacionales previas o ritmos endógenos cíclicos sobre la productividad polínica, de los efectos instantáneos de las condiciones meteorológicas durante la emisión y dispersión. La vegetación local y extralocal resulta ser la fuente principal del polen que se registra en la atmósfera y sus atributos determinan la composición y abundancia de los tipos polínicos. Se determinó que para las especies anemófilas la concentración de polen depende de la abundancia de la vegetación. En la representatividad de la vegetación en el espectro de polen atmosférico, deben considerarse efectos particulares como cercanía y ubicación relativa de las principales fuentes potencialmente emisoras y la estrategia reproductiva de las especies. Se analizó la expresión de la variabilidad fenológica en el registro polínico, observándose que los porcentajes de floración se corresponden con los porcentajes de granos de polen emitidos. Se evaluó la efectividad del registro polínico como indicador de las tendencias fenológicas florales de la vegetación. Se verificó que los factores que determinan la no correspondencia entre el polen y la floración, en algún momento dentro de los períodos correspondientes, son principalmente, las precipitaciones y los vientos, además de la influencia de las características y tipo de fuentes emisoras del polen. La visión integradora de la problemática aerobiológica que se propuso, la rigurosidad y detalle que se planteó aquí para una aproximación de la relación polen-vegetación-floración-clima-meteorología no había sido abordado hasta ahora. En definitiva, se interpretó a la concentración de polen en la atmósfera como un complejo multidimensional de interacciones entre variables ecológicas y climático-meteorológicas. En resumen, los patrones de polen en la atmósfera reflejan los patrones fenológicos florales de la vegetación emisora por lo Cual la dinámica de la vegetación puede ser investigada a partir del análisis aerobiológico. Las condiciones climáticas determinan el momento e intensidad de la floración, y por lo tanto, la concentración de polen en el aire; las condiciones meteorológicas pueden modificar momentáneamente la cantidad de polen emitido, aunque no alteran el patrón general.

Abstract:
In this Doctoral Thesis, Aerobiology is considered in an integral way, evaluating all the aspects involved. The aerobiological pathway includes the study of pollen grains since they are produced by the vegetation until they are registered in the atmosphere, as well as all the biological and physical factors involved in the process. To achieve this purpose, quantitative data of plant source, floral phenology, pollen types emitted and present in the air, and weather conditions before, during and after the flowering period, were analysed. At the beginning, the urban vegetation composition of Mar del Plata city was studied. The reproductive strategies, the abundance and distribution of its components were also characterised. The flowering periods of species present in the urban flora were determined and their flowering developments were quantitatively studied. The principal floral phenophases of arboreal vegetation were analysed and interannual differences established. Seasonal weather conditions before the flowering start were responsible of such variabilities. It was possible to describe the general reproductive behaviour of the emitting species considered as an assemblage and its relation with the climate. The airborne pollen content of Mar del Plata atmosphere was studied. The pollen calendar of this area was constructed; it makes possible to characterise the aeroflora, its dynamics and the identification of the general trends. The relative pollen productivities and the pollination periods between species and between years were compared. The pollen seasonal trend along the year respond to the seasonal flowering phenology of the different plant species: arboreal and herbaceous types. Since the airborne pollen grains are influenced by the physical parameters of the atmosphere, pollen-meteorology relationship was analysed. To establish the effects of the instantaneous meteorological variables on airborne pollen, the seasonal and diurnal features of the pollen cloud were studied. A detailed analysis studying separately the seasonal climatic effects before the flowering or the endogenous rhythms effects on the pollen productivity, and the instantaneous effects of the meteorological conditions during the emission and dispersion phases, was required. Local and extralocal vegetation are the principal poIIen sources and its attributes determine the composition and abundance of pollen types. In anemophyllous species, the pollen concentration depends directly on the vegetation abundance. When the vegetation representativity in the airborne pollen spectrum is evaluated, particular effects like proximity and location of the potential emitting sources and their reproductive strategies, should be considered. The expression of phenological variability in the pollen record was analysed. The flowering percentages are in accordance with the emitted pollen grains percentages. The pollen record effectivity as indicator of floral phenological tendencies of vegetation was evaluated. It was verified that factors determining the lack of correspondence between pollen and flowering are mainly, precipitation and winds. Particular characteristics of emitting pollen sources also affect this relationship. In conclusion, airborne pollen patterns reflect floral phenological patterns of the emitting flora, so the vegetation dynamics could be investigated with the aid of aerobiological analysis. Climatic conditions determine the timing and intensity of flowering periods and then the airborne pollen concentration. Meteorological conditions could modify instantaneously the amount of emitted pollen but they do not alter the general pattern.

Lanuza, Guillermo. "Regulación del desarrollo folicular por factores péptidicos intraováricos" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo de esta tesis es el estudio de factores regulatorios, de producción y acción local, que controlan el desarrollo del folículo ovárico en mamíferos. En particular, se estudió el papel fisiológico de factores relacionados con el factor de crecimiento transformante-β (TGF-β).El modelo utilizado consistió en células de la granulosa inmaduras de rata cultivadas en condiciones definidas. Se determinó que las células de la granulosa producen TGF-β bioactivo, encontrándose su secreción bajo control hormonal. El TGF-β producido ejerce acciones autocrinas, estimulando el crecimiento de células de la granulosa. La activina, otro miembro de la misma superfamilia, también es producida por las células de la granulosa y regula positivamente la proliferación de manera significativamente mayor que la realizada por el TGF-β. Factores paracrinos derivados del ovocito, probablemente pertenecientes a la misma superfamilia, promueven el crecimiento de las células somáticas del folículo, indicando que el ovocito participa activamente en el desarrollo folicular. Las acciones mitogénicas del TGF-β, activina o del factor derivado del ovocito sobre las células de la granulosa, son amplificadas por bajas concentraciones de FSH, enfatizando la potencial relevancia de estos factores sobre la función ovárica. Asimismo, estos factores locales ejercieron un regulación diferencial de la producción de inhibinas A y B, llevando la relación entre las formas hacia la predominacia de inhibina B, de manera semejante a lo encontrado in vivo en los estadios de crecimiento folicular. Estos resultados indican que factores intraováricos, relacionados con el TGF-β, juegan un papel importante en el desarrollo folicular, regulando el crecimiento y la diferenciación de las células de la granulosa.

Abstract:
This thesis is aimed at studying the production and action of local regulatory factors that control ovarian follicular development in mammals. Specially, the physiological role of transforming growth factor-β (TGF-β) related factors was studied. Rat immature granulosa cells cultured under defined conditions was used as experimental system. Granulosa cells produce bioactive TGF-β, and its secretion is under hormonal control, TGF-β exerts autocrine actions, stimulating granulosa cells growth. Activin, another member of this superfamily, is also produced by granulosa cells and regulates proliferation,being its effect bigger than that elicited by TGF-β. Oocyte-derived paracrine factors, probably belonging to the same superfamily, promote follicular somatic cells growth, indicating that the oocyte play an active role during follicular development. The mitogenic actions of TGF-β, activin and the oocyte-derived factor on granulosa cells are further amplified by low dosis of FSH, emphasizing the potential relevance of these factors in ovarian function. Furthermore, dimeric inhibin A and B production are differentially regulated these local factors, with a shift of the ratio towards the predominance of inhibin B, as is found in vivo during follicular growth stages. These results indicate that TGF-β related intraovarian factors play an important role in follicular development, regulating granulosa cells growth and differentiation.

Landi, Sandra Marcela. "Efectos térmicos en microscopía túnel asistida por láser" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En la mayoria de los experimentos de microscopía túnel asistida por láser, se modula la intensidad de la luz incidente, a fin de discriminar la señal fotoinducida de la corriente túnel normal, y obtener la información adicional producida por la radiación. Al iluminar la muestra con un haz modulado en intensidad, la absorción no resonante de la luz produce la dilatación térmica de la punta y de la muestra a la frecuencia de modulación, oscureciendo otros posibles efectos inducidos por la radiación. Este ruido térmico limita el empleo de luz modulada, en los experimentos de fluorescencia u óptica no lineal de campo cercano, en los que se desea una alta resolución espacial. En esta tesis se propone un método en el cual la expansión térmica a la frecuencia de modulación puede ser reducida varios órdenes de magnitud. El método se basa en la iluminación de la muestra con la interferencia producida por dos haces con diferentes direcciones de propagación y frecuencias de modulación. El patrón de interferencia así formado da lugar a variaciones espacialmente periódicas de temperatura en la superficie de la muestra. Al variar la frecuencia de modulación de uno de los haces respecto al otro, la fase del patrón de interferencia se mueve dando lugar a ondas viajeras dentro de la zona iluminada. Se midió la reducción en la señal inducida con este esquema de ondas viajeras, obteniendo una reducción de más de tres órdenes de magnitud en la componente térmica de la señal.

Abstract:
Modulating the light intensity is a common technique for extracting the light induced information from background signal and noise in laser assisted scanning tunneling microscopy. When irradiating the sample with a modulated light intensity. nonresonant light absorption results in tip and sample heating and expansion at the modulation frequency, obscuring other possible laser induced mechanisms. This thermal noise limits the use of light modulation when very high spatial resolution is desired in fluorescence or nonlinear optics near field experiments. In this thesis we describe a method in which the thermal expansion at the modulation frequency can be reduced by orders of magnitude. The method is based on the irradiation of the sample with two interfering laser beams at different frequencies and incidence direction. When two light waves with different directions are superimposed, the interference pattern gives rise to spatially periodic temperature variations (thermal gratings). If the frequency of one of the beams is slightly shifted from that of the other beam, the phase of the interference pattem will move, giving light fringes travelling in the illuminated zone. In order to measure the quenching of the thermal expansion with this travelling fringe scheme, the reduction of the signal induced in a scanning tunneling microscope at the modulation frequency due to the optical heating was measured. With this setup, the thermally induced current was reduced more than three orders of magnitude.

Lamas, Diego Germán. "Estudio de las interfaces - Obtención de un nuevo sensor de gases" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo de Tesis Doctoral se estudiaron nuevos métodos de obtención de materiales funcionales nanoestructurados para sensores de gases por gelificación-combustión, como así también sus propiedades estructurales y eléctricas. Los materiales analizados fueron: dióxido de circonio (o “circonia”, ZrO2) dopado con Y203, MgO, CaO o CeO2 (óxidos de conducción iónica) y dióxido de estaño (SnO2, semiconductor). Sobre la base del conocimiento de las propiedades de la interfaz se obtuvieron dos sensores originales de monóxido de carbono (CO), construidos con discos cerámicos de circonia tetragonal policristalina estabilizada con itria (Y-TZP) y con electrodos de Sn02 de dos tipos (peliculas gruesas depositadas por técnicas serigráficas con polvos nanocristalinos de SnO2 como agente activo y películas delgadas crecidas por “flash-pyrolysis”), depositados en forma simétrica sobre ambas caras del disco. Se empleó la técnica de espectroscopía de impedancia electroquímica para la caracterización eléctrica de las interfaces. Ambos sensores resultaron operables en el rango 400-550°C, mostrando alta sensibilidad y respuesta rápida (lO-20 seg.) frente a bajas concentraciones (10-350 ppm) de CO en aire sintético, señalando un nuevo procedimiento para sensar gases. Se destacan ventajas de estos sensores con respecto al único dispositivo similar registrado por la literatura, el cual debe operar a altas temperaturas ya que emplea como óxido conductor iónico la circonia estabilizada en su fase cúbica.

Abstract:
In this Doctoral Thesis, novel synthesis methods by gel-combustion and structural and electrical properties of several nanostructured functional materials for gas sensors have been studied. Zirconium dioxide (‘Zirconia’, ZrO2) doped with Y203, MgO, CaO or CeO2 (solid ionic conductors) and tin dioxide (Sn02, semiconductor) were analyzed. Knowing the properties of the interface, two original carbon monoxide (CO) sensors were obtained with ceramic disks of yttria-stabilized tetragonal zirconia polycrystals (Y-TZP) and with two types of SnO2 electrodes (thick films deposited by serigraphic techniques with nanocrystalline SnO2 powders as active agent and thin films grown by flash-pyrolysis), symmetrically deposited on both faces of the disk. The electrochemical impedance spectroscopy technique was used for the electrical characterization of interfaces. Both sensors could be operated in the range of 400-550°C, showing high sensitivity and fast response (lO-20 sec.) for small CO concentrations (lO-350 ppm) in synthetic air. The advantages of these sensors are pointed out in comparison with the only similar device reported by literature, made of cubic stabilized zirconia (as ionic conductor oxide) that requires high operation temperatures.

Labriola, Carlos Alberto. "Purificación de la cruzipaína por cromatografía de afinidad : Su aplicación en el estudio del control de calidad del plegamiento de glicoproteínas en Trypanosoma cruzi" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Parte I: Purificación de cisteína proteinasas de trypanosomátidos por cromatografía de afinidad. Trypanosoma rangeli es un trypanosoma de América del sur capaz de infectar mamíferos pero aparentemente incapaz de causar patología. Tiene una alta reactividad inmunológica cruzada con Trypanosoma cruzi, el agante de la enfermedad de Chagas. La diferencia principal entre ambos parásitos parece ser la localización de las formas infectivas de T. rangeli en las glándulas salivales, comparada con la localización rectal de los trypomastigotes metacíclicos de T. cruzi, y la aparente pérdida de un estadío intracelular en el mamífero, en el caso del primer parásito. El último punto sugiere que algunos o todos de los diferentes factores postulados a estar involucrados en el reconocimiento, adherencia a, y penetración dentro de la célula de mamífero por los trypomastigotes de T. cruzi, podrían estar ausentes o fuertemente disminuidos en T. rangeli. Entre un número de factores de virulencia propuestos, la cruzipaína, cisteína proteinasa principal de T. cruzi ha sido descripta como una enzima esencial en distintos puntos del ciclo biológico del parásito y podría estar directamente involucrada en la penetración. Por esta razón, decidimos investigar actividades de cisteína proteinasa en epimastigotes de T. rangeli. Hemos purificado cruzipaína a homogeneidad proteica (de T. cruzi) y una cisteína proteinasa (de T. rangeli) utilizando cromatografía de afinidad, tanto en cistatina-Sepharosa, específica para cisteína proteinasas, como en concanavalina-A (ConA), específica para glicoproteínas con oligosacáridos de alta manosa, partiendo de extractos crudos de epimastigotes. La última enzima se expresa a un nivel de dos órdenes de magnitud menor que la cruzipaína en epimastigotes de T. cruzi. Ambas enzimas tienen masa molecular aparente, idéntica secuencia N-terminal y reacción inmunológica cruzada, pero difieren en la secuencia completa y en algunos parámetros cinéticos. Parte II: Control de calidad de plegamiento de glicoproteínas en Trypanosoma cruzi. Las N-glicoproteínas son al principio glicosiladas con la transferencia de un oligosacárido (Glc3Man9GlcNAc2, en la mayoría de las células) desde un derivado de dolicol-P-P a un residuo de Asn en el lúmen del retículo endoplásmico (RE). Los oligosacáridos unidos a proteína son procesados en la misma localización subcelular por la glucosidasa I (GI) que remueve la unidad de glucosa (Glc) mas externa y la glucosidasa II (GII) que remueve las dos glucosas remanentes. Un proceso adicional en el RE es la reacción catalizada por la UDP-Glc:glicoproteína glucosiltransferasa (GT). Esta enzima agrega una unidad de Glc a oligosacáridos libres de glucosa en glicoproteínas que no presentan su plegamiento terciario correcto. La GII deglucosila los oligosacáridos monoglucosilados generados por la GT. Las glicoproteínas adquiren su estructura terciaria final en el RE. Las glicoproteínas que fracasan en adquirir su plegamiento correcto son retenidas en el RE y posteriormente transportadas al citosol donde son degradadas en el proteasoma. Por otro lado, las moléculas que se pliegan correctamente pueden continuar su tránsito a través del camino secretorio a su destino final. Se han descripto en el lúmen del RE, dos chaperones no convencionales, calnexina (Cnx) y calreticulina (Crt). Se ha demostrado que la interacción de la Cnx/Crt con glicoproteínas monoglucosiladas facilita el plegamiento de las glicoproteínas en células de mamíferos previniendo la agregación y la supresión de uniones disulfuro incorrectas. Mas aún, la interacción antes mencionada provee uno de los mecanismos por los cuales las células retienen en el RE glicoproteínas mal plegadas. Las interacción Cnx/Crt con glicoproteínas monoglucosiladas fue considerado por lo tanto, como un control de calidad de plegamiento de glicoproteínas. Este modelo predice que la inhibición de la remoción de la Glc agregada por la GT, retardaría (o aboliría) la salida de las glicoproteínas del RE. Esta predicción no puede ser comprobada, sin embargo, en la mayoría de las células dado que la GII es la responsable de la remoción de ambas unidades de Glc unidas en α(1,3). Mas aún, los inhibidores conocidos de GII también inhiben GI. La adición de estas drogas a las células lleva a la acumulación de oligosacáridos con dos o tres Glc que no son reconocidos por la Cnx/Crt. La predicción puede ser comprobada en T. cruzi. Este parásito transfiere “in vivo” oligosacáridos no glucosilados (Man9GlcNAc2) a los polipéptidos nacientes y, por lo tanto, los oligosacáridos monoglucosilados se forman en ellos solamente vía GT. La cruzipaína, una cisteína proteinasa lisosomal de T. cruzi, teniendo tres sitios potenciales de N-glicosilación, al menos dos de los cuales están ocupados, se aisló en la forma glucosilada de células crecidas en presencia de 1-deoxinojirimicina (DNJ), un inhibidor de la GI y GII. El oligosacárido presente en el único sitio de glicosilación del dominio carboxilo-terminal de la cruzipaína se glucosiló en algunas moléculas de enzima pero no en otras, este resultado es consistente con un plegamiento asincrónico de las glicoproteinas en el RE. A pesar de no afectar la velocidad de crecimiento celular o el metabolismo celular general en incubaciones cortas y largas, la DNJ causó un marcado retraso en el arribo de la cruzipaína a los lisosomas. Este resultado es compatible con el modelo propuesto por el cual las glicoproteinas monoglucosiladas podrían ser transitoriamente retenidas en el RE por anclas tipo lectinas reconociendo oligosacáridos monoglucosilados. También se encontró que este protozoo expresa una molécula tipo Crt, el tercer componente (además de GT y GII) del control de calidad de plegamiento de glicoproteínas. No se detectó un gen que codifique para Cnx. La Crt recombinante de T. cruzi reconoció especificamente oligosacáridos monoglucosilados del tipo alta manosa. El agregado de suero anti-Crt a extractos obtenidos de células de un experimento de “pulse-Chase” con Met más Cys inmunoprecipitó dos proteínas que fueron identificadas como Crt y cruzipaína. La última proteína pero no la primera desapareció durante el período de “chase”. Contrariamente a lo que sucede en células de mamíferos, la adición de DNJ promovió la interacción Crt-cruzipaína. Este resultado es consistente con la vía conocida de N-glicosilación de proteínas y procesamiento de oligosacáridos que ocurren en T. cruzi y explica el retraso en el arribo de la cruzipaína a los lisososmas causado por la DNJ. El tratamiento de los complejos Crt-cruzipaína con endo-β-N-acetilglucosaminidasa H (Endo H) tanto antes como después del agregado del suero anti-Crt abolió por completo la interacción Crt-cruzipaína. Además, la cruzipaína madura monoglucosilada pero no la no glucosilada aislada de los lisosomas interactuó con la Crt recombinante. Concluimos que la Crt de T. cruzi se une a oligosacáridos monoglucosilados pero no a motivos proteicos en la cruzipaína. Mas aún, las evidencias indican que la GT glucosiló a la cruzipaína en sus últimos estados de plegamiento.

Abstract:
Part I: Purification of cysteine proteinases of Trypanosomatids by affinity chromatography. Trypanosoma rangeli is a South American trypanosome able to infect mammals, but apparently unable to elicit pathology. lIt has a high immunological cross-reactivity with Trypanosoma cruzi, the agent of Chagas disease. The major differences between both parasites seem to be the salivary gland location of the infective forms of T. rangeli, as compared with the rectal localization of the metacyclic trypomastigotes of T. cruzi, and the apparent lack of an intracellular stage in the mammal, in the case of the former parasite. The latter point suggest that some or all of the different factors postulated to be involved in recognition, adherence to, and penetration into the mammalian cell by T. cruzi trypomastigotes might be absent or strongly diminished in T. rangeli. Among a number of proposed virulence factors, cruzipain, the major cysteine proteinase of T. cruzi has been implied as an essential enzyme in several points of the biological cycle of the parasite, and may also be directly involved in penetration. For this reason, we decided to search for cysteine proteinase activities in epimastigotes of T. rangeli. We have purified to protein homogeneity cruzipain (from T. cruzi) and a cysteine proteinase (from T. rangeli), using affinity chromatography, both on cystatin-Sepharose, specific for cysteine proteinases, and ConA-Sepharose, specific for high mannose type N-linked glycoproteins, starting from crude epimastigote extracts. The latter enzyme is expressed at a level at least two orders of magnitude lower than is cruzipain in T. cruzi epimastigotes. Both enzymes have similar apparent molecular mass and identical N-terminal sequence, and cross-react immunologicaly, but differ in full sequence and in some kinetic parameters. Part II: The quality control of glycoprotein folding in Trypanosoma cruzi. N-glycoproteins are first glycosylated upon transfer of an oligosaccharide (Glc3Man9GlcNAc2 in most cells) from a dolichol-P-P derivative to Asn residues in the lumen of the endoplasmic reticulum (ER). Protein-linked oligosaccharides are then processed in the same subcellular location by glucosidase I (GI) that removes the more external glucose (Glc) unit and glucosidase II (GII) that excises the two remaining Glc. An additional ER processing reaction is that catalyzed by the UDP-Glc:glycoprotein glucosyltransferase (GT). This enzyme adds a single Glc unit to Glc-free, high mannose-type oligosaccharides in glycoproteins not displaying their properly folded tertiary structures. GII deglucosylates the monoglucosylated oligosaccharides generated by GT. Glycoproteins acquire their proper tertiary structure in the ER. Glycoproteins that fail to properly fold are retained in the ER and further transported to the cytosol where they are degraded in the proteasomes. On the other hand, properly folded species may continue their transit through the secretory pathway to their final destinations. Two unconventional chaperones calnexin (Cnx) and calreticulin (Crt), have been described in the ER lumen of mammalian cells. It has been shown that interaction of Cnx/Crt with monoglucosylated glycoproteins facilitates glycoprotein folding in mammalian cells by preventing aggregation and suppressing formation of non-native disulfide bonds. Moreover, the above mentioned interaction provides one of the mechanisms by which cells retain misfolded glycoproteins in the ER. The Cnx/Crt interaction with monoglucosylated glycoproteins has been considered to be, therefore, a quality control of glycoprotein folding. This model predicts that inhibition of removal of the Glc unit added by GT would delay (or abolish) exit of glycoprotein from the ER. This prediction can not be tested, however, in most eukaryotic cells as GII is responsible for removal of both α(1,3) linked Glc units. Moreover, known inhibitors of GII also inhibit GI. Addition of those drugs to cells leads to the accumulation of oligosaccharides having two or three Glc that are not recognized by Cnx/Crt. The prediction can be tested in T. cruzi. This parasite transfers “in vivo” unglucosylated oligosaccharides (Man9GlcNAc2)to nascent polypeptide and, therefore, monoglucosylated oligosaccharides are formed in them only by GT. Cruzipain, a T. cruzi lysosomal cysteine proteinase having three potential N-glycosilation sites, at least two of which are occupied, was isolated in a glucosylated form from cells grown in the presence of the GI and GII inhibitor 1-deoxynojirimycin (DNJ). The oligosaccharide present at the single glycosylation site of the carboxy-terminal domain of cruzipain was glucosylated in some enzyme molecules but not in others, this result being consistent with an asyncronous folding of glycoproteins in the ER. In spite of not affecting cell growth rate or the cellular general metabolism in short and long term incubation, DNJ caused a maeked delay in the arrival of cruzipain to lysosomes. This results is compatible with the model proposed by which monoglucosylated glycoproteins may be transiently retained in the ER by lectin-like anchors recognizing monoglucosylated oligosaccharides. It was found also that this protozoan expresses a Crt-like molecule, the third component (in addition to GT and GII) of the quality control of glycoprotein folding. No Cnx-encoding gene was detected. Recombinant T. cruzi calreticulin specifically recognized free monoglucosylated high mannose-type oligosaccharides. Addition of anti-Crt serum to extracts obtained from cells pulse-chased with Metplus Cys immunoprecipitated two proteins that were identified as Crt and the lysosomal proteinase cruzipain. The latter but not the former protein disappeared upon chasing cells. Contrary to what happens in mammalian cells, addition of DNJ promoted Crt-cruzipain interaction. This result is consistent with the known pathway of protein N-glycosylation and oligosaccharide processing occurring in T. cruzi and explains the delay in cruzipain arrival to lysosomes caused by DNJ. A treatment of the Crt-cruzipain complexes with endo-β-N-acetylglucosaminidase H (Endo H) either before or after addition of anti-Crt serum completely disrupted Crt-cruzipain interaction. In addition, mature monoglucosylated but not unglucosylated cruzipain isolated from lysosomes was found to interact with recombinant Crt. It was concluded that T. cruzi Crt binds monoglucosylated oligosaccharides but not the protein moiety of cruzipain. Furthermore, evidence is presented indicating that GT glucosylated cruzipain at its last folding stages. Journal of Cell Biology 130, N° 4 (1995) 771-

Kokot, Roberto Roque. "Cambio climático y evolución Costera en Argentina" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La costa argentina presenta un comportamiento heterogéneo, que depende de distintos parámetros. La variación en la intensidad del proceso erosivo permite dividir la costa según zonas, que responden al clima de olas, nivel del mar, resistencia a la compresión y meteorización de los afloramientos, características geomorfológicas y diseño de contorno costero. La energía de olas, según datos obtenidos, no muestra patrones que consecuentemente permitan efectuar una zonificación, según potencia incidente sobre la costa. Esta imposibilidad se adjudica a la falta de datos oceanográficos. De la observación de olas y geoformas consecuentes se determina que la energía de olas en la costa ubicada aproximadamente al sur del paralelo 42, es mayor que en el área norte. Esta observación puede estar enmascarada por una menor exposición del contorno a las olas. El nivel del mar como influyente en los procesos erosivos, se refiere a los eventos de tormenta y amplitudes de marea, que permitan una incidencia de olas a niveles superiores sobre la línea de costa. La incidencia de tormentas y los rangos de marea mayores, también se dan en el área austral. Los valores de resistencia a la compresión, que determinan el grado de erosionabilidad de los afloramientos indican que las rocas más resistentes corresponden a los afloramientos de volcanitas y sedimentitas muy consolidadas. Los afloramientos con bajo grado de consolidación, en general corresponden al Terciario y Pleistoceno, y presentan un bajo grado de resistencia a la erosión. La incidencia de olas, sumada a las características del contorno y la disponibilidadde sedimentos sueltos sobre la línea de costa indican grados de deriva litoral, que se traducen en movilidad, exposición a las olas de los afloramientos y consecuente erosión sobre la costa. En los principales ríos patagónicos, no se dan las condiciones hidráulicas para el transporte de gravas. La falta de aporte de material tamaño grava por parte de los ríos actuales a la costa, indica que las formas de acreción presentes en la faja litoral, constituidas por esa fracción clástica, corresponden a formas relícticas. La condición de formación de esos depósitos se daba en períodos en que los caudales imperantes estaban en relación con los tamaños de cauce. La erosión se da primero por falta de acumulación directa (la carga de los ríos no llega a la línea de costa) y segundo por el efecto de erosión inducida ya que al no saturarse los flujos por el aporte fluvial,estos lo hacen a expensas de la erosión de los afloramientos costeros. El nivel de base de los rios del Pleistoceno se hallaba unos 150 metros más bajo que en el presente, por ello es de esperar la presencia de líneas de costa sumergidas con abundante material proveniente de los mismos durante esos períodos. La presencia de cañones submarinos en el área costera, en continuidad con cauces de ríos actualmente efímeros o permanentes de baja capacidad erosiva, indica un cambio climático y no sólo un cambio en el nivel del mar. Entre las características de las geoformas de erosión marina, se describe la presencia de Terraplenes Litorales (Ramparts). Dentro de un modelo de evolución, elaborado en función de la relación entre olas incidentes y contorno costero, se presentan las tendencias a la erosión o acumulación de la faja costera. Los afloramientos del Terciario, presentes en el área costera patagónica, se hallan en erosión. Durante el Cuatemario alto, la costa fue afectada por variaciones relativas del nivel del mar y cambios climáticos que desactivaron en gran medida el sistema fluvial. La composición arenosa de las playas patagónicas habría provenido, principalmente, de la erosión de las rocas del Terciario mientras que las gravas provienen de los sedimentos glacifluviales genéricamente denominados "Rodados Patagónicos".

Abstract:
The Argentine coast presents a dissimilar behavior, which depends on various parameters. Regarding changes in the intensity of the erosive processes, the coast can be divided into zones that depend on wave climate, sea level, outcrop compression strength and resistance to meteorización, geomorphologic characteristics and coastal configuration. According to the obtained data, there are no wave energy patterns, which would allow coast zoning in terms of incident wave power. This is caused by the lack of oceanographic data. Wave energy on the coast south of parallel 42 appeared to be greater than northwards of the mentioned parallel from wave and consequent land form observations. This observation could be masked by a lesser exposure of the coastline to the waves. Sea level has influence on erosive phenomena, since storm surges and tide amplitude allow wave incidence at higher coastline levels. Storms and high tide ranges take place in the southern area. Extrusive rocks and very consolidated sedimentary rocks are the most resistant to erosion, which can be concluded from compression strength values. These values determine the outcrop vulnerability to erosion. The outcrops with a low degree of consolidation are generally Tertiary and Pleistocene and have a low resistance to erosion. Wave incidence added to the coastal configuration and loose sediments availability on the coastline mark degrees in littoral drift, which can be translated into mobility,outcrop exposition to waves and consequent coast erosion. Hydraulic conditions for gravel transport is not present in the main rivers of Patagonia. The accretion gravel landforms in the coast are relictic, due to the lack of gravel input by rivers at present. The generation of the mentioned gravel land forms took place when the volume of the river flows was related to the dimensions of the riverbeds. Erosion begins due to the lack of accumulation (the river load does not reach the coastline) and continues as induced erosion. Induced erosion means that, since littoral drift is not saturated due to river input, the coastal outcrops saturate it. The base level of the Pleistocene rivers was about 150 meters under the present base level, thus the presence of submerged coastlines with abundant fluvial material from that period is expected. Not only a sea level but also a climatic change can be concluded from the presence of submarine canyons in the coastal area, which are the continuation of river-beds belonging to rivers that are ephemeral or have a low erosive capacity. Among the characteristics of the erosion land forms, the presence of ramparts is described. The erosion or accretion trends of the coastal area are presented within an evolution model, based on the relationship between incident waves and coastal configuration. The Tertiary outcrops in the coastal area of Patagonia are undergoing erosion at present. During the High Quaternary, the fluvial system was deactivated due to relative sea level and climatic changes. Sand in the beaches of Patagonia could mainly arise from erosion of the Tertiary rocks, while gravel is originated from glacifluvial sediments, commonly called “Rodados Patagónicos”.

Koen Alonso, Mariano. "Estudio comparado de la alimentación entre algunos predadores de alto nivel trófico de la comunidad marina del norte y centro de Patagonia" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El estudio comparado de la alimentación de predadores de alto nivel trófico permite evaluar la forma en que estas especies utilizan los recursos tróficos, posibilitando así el análisis de las potenciales relaciones de competencia y el papel que estos predadores pueden tener en la regulación y estructuración de la comunidad a la cuál pertenecen. La comunidad marina del norte y centro de Patagonia se estructura alrededor del sistema tritrófico conformado por la anchoita (Engraulis anchoíta), el calamar común (Illex argentínus) y la merluza (Merluccius hubbsi). En este sentido, varias especies de mamíferos marinos y elasmobranquios utilizan a estas especies como recursos tróficos. Por esta razón, el objetivo de este trabajo es analizar comparativamente la dieta del lobo marino de un pelo (Otaria flavescens), el delfin oscuro (Lagenorhynchus obscurus), la tonina overa (Cephalorhynchus commersonni), la raya picuda (Raja flavirostris), el tiburón espinoso (Squalus acanthias) y el tiburón vitamínico (Galeorhinus galeus). Para ello, se estudió la dieta de estas especies sobre la base de los contenidos del tracto digestivo. Se utilizaron los restos hallados en los contenidos (huesos y otolitos de peces, picos y plumas de cefalópodos, exoesqueletos de crustáceos, etc.) para identificar y cuantificar a las presas. Las tallas y pesos de las presas al momento de la ingesta fueron reconstruidos empleando regresiones alométricas. La importancia relativa de las presas fue evaluada mediante el índice de importancia relativa IRI=(PH%+N%)FO%, donde PH% es el porcentaje en peso húmedo, N% es el porcentaje en número y FO% es la frecuencia de ocurrencia porcentual de la presa en la dieta. Este indice fue relativizado a 100% (IRI%). Las diferencias intraespecificas en la dieta permitieron determinar especies tróficas dentro de algunas de las especies biológicas estudiadas. Estas diferencias en la dieta fueron determinadas empleando dos índices de solapamiento, el solapamiento general (GO) y el solapamiento específico (SO). Estos índices fueron calculados utilizando las ocurrencias de aquellas presas que presentaron valores de IRI% mayores de 1% en la muestra total de cada especie biológica estudiada. Las diferencias en las tallas consumidas por las especies tróficas determinadas fueron estudiadas empleando la prueba de Mann-Whitney o el análisis de la varianza unifactorial por rangos de Kruskal-Wallis y contrastes de a pares. La dieta del lobo marino de un pelo fue estudiada a partir de muestras obtenidas de individuos hallados muertos en la costa y de animales recuperados de las capturas incidentales de la pesquería. Se identificaron 41 especies presa en los 59 contenidos estomacales estudiados. Las presas más importantes fueron la merluza, el pulpo colorado (Enteroctopus megalocyathus), el calamar común, la raneya (Raneya brasiliensis), el calamar patagónico (Loligo gahi) y la anchoíta. Sobre la base de las ocurrencias de estas presas y empleando el GO y el SO se estudiaron las diferencias en la dieta asociadas con la fuente de muestreo (ejemplares enmallados y ejemplares muertos en la costa) y sexo. Sólo se detectaron diferencias significativas en la dieta entre los sexos. Las hembras se alimentaron fundamentalmente de especies bentónicas (pulpo colorado), mientras que los machos se alimentaron mayormente de especies demersales-pelágicas (merluza). Estas diferencias en la dieta fueron asociadas con áreas diferentes de alimentación y/o diferentes rangos de acción (“home range") para cada sexo. Los resultados obtenidos sugieren que las hembras se estarian alimentando en aguas más costeras y someras, mientras que los machos se alimentarían en aguas más profundas y alejadas de la costa. Con referencia a las especies de importancia comercial consumidas por el lobo marino de un pelo, la merluza fue consumida mayormente en tallas no comerciales (largo total <30cm), mientras que el calamar común fue consumido mayormente en tallas comerciales (largo dorsal del manto >15cm). Aún así, las distribuciones de talla de las principales presas sugieren que los lobos marinos estarian utilizando a estos recursos de acuerdo a la oferta existente en el ambiente. La dieta del delín oscuro fue estudiada sobre la base de 25 ejemplares capturados, en su mayoría, en lances nocturnos pelágicos para la pesca de langostino (Pleoticus muelleri). Debido al pequeño tamaño muestral, no se analizaron las diferencias intraespecífrcas en la dieta de esta especie. Las principales presas del delfín oscuro fueron la anchoita, el calamar común, el calamar patagónico y la merluza. Las tallas consumidas de estas especies, tales como adultos de anchoíta, juveniles de calamares y juveniles primarios de merluza, permiten caracterizar a esta especie como un predador típicamente pelágico, predando sobre especies pelágicas o estadios pelágicos de especies demersales que forman cardúmenes. La dieta de la raya picuda fue estudiada a partir de una muestra de 274 ejemplares, obtenidos fundamentalmente de las capturas incidentales de la pesquería de merluza. Las presas más importantes para la raya picuda fueron la merluza, la nototenia (Patagonotothen ramsayi), el calamar común, el isópodo (Serolis schythei), la raneya y la anchoita, identificándose un total de 45 especies presa en la dieta de este predador. Los resultados obtenidos a partir de los análisis de solapamiento indicaron que no existen diferencias en la dieta entre sexos pero sí entre ejemplares maduros e inmaduros. La nototenia y la merluza fueron las presas más importantes de las rayas picudas inmaduras, aunque los crustáceos alcanzaron también altas importancias. En el caso de los ejemplares maduros, la merluza y el calamar común fueron las presas más importantes, disminuyendo notoriamente la importancia de los crustáceos. En términos generales, las rayas picudas inmaduras oonsumieron presas en tallas significativamente menores que las consumidas por los animales maduros. Asimismo, se encontraron correlaciones significativas entre el tamaño del predador y el tamaño de sus presas, tanto para los ejemplares inmaduros y maduros por separado, como para la muestra total. Puede concluirse que la raya picuda cambia su dieta a medida que crece y madura. Los ejemplares pequeños e inmaduros consumen fundamentalmente crustáceos, incorporando a los peces en su dieta a medida que crecen. A partir de la maduración sexual, la dieta de esta especie está constituida básicamente por peces y calamares. Asimismo, se evidencia un cambio del dominio del ambiente donde se alimentan, siendo las rayas inmaduras predadores típicamente demersales-bentónicos, mientras que los ejemplares maduros se alimentan predominantemente de especies demersales-pelágicas. La dieta del tiburón espinoso fue estudiada sobre la base de 132 ejemplares provenientes en su mayor parte de capturas incidentales en lances comerciales dirigidos a merluza y colectados en el período 1996-1998. Se estudió la alimentación de esta especie teniendo en cuenta las potenciales diferencias en la dieta relacionadas con el sexo y el estado de madurez sexual. Mediante el GO y el SO, se detectaron diferencias en la dieta entre ejemplares inmaduros (SAinm), machos maduros (SAmm) y hembras maduras (SAhm). Los resultados obtenidos indican que el calamar común, los ctenóforos y la merluza fueron las presas más importantes de los SAinm. En el caso de los ejemplares maduros, el calamar común y la merluza fueron las presas más importantes tanto para SAmm como para SAhm. Aún así, se detectaron diferencias en la dieta entre estas tres especies tróficas. Los SAinm son predadores fundamentalmente pelágicos, luego de la madurez sexual se produce un cambio en la dieta y los tiburones espinosos maduros (SAmm y SAhm) tienden a alimentarse más asociados al fondo, disminuyendo el consumo de los ctenóforos (IRI%SAinm=l8%,IRI%SAmm=4% y IRI%SAhm=0.4%) y aumentando el consumo de especies demersales-pelágicas y demersales-bentónicas. Comparativamente, los estudios de la dieta del tiburón espinoso en el período 1985-1994 indican que la merluza era la principal presa para esta especie en el área, seguida del calamar común (Garcia de la Rosa y Sánchez, 1997; García de la Rosa, 1998). En este trabajo, que abarca el periodo 1996-1998, los resultados indican que este orden de importancia se invierte, siendo el calamar común la presa más importante, seguida por la merluza. Este hecho, parece confirmar el carácter de predador generalista y oportunista del tiburón espinoso, dado que entre ambos periodos de estudio la abundancia de la merluza en la región ha disminuido drásticamente como consecuencia de la sobre-explotación. La dieta de la tonina overa fue estudiada a partir de 9 ejemplares capturados incidentalmente en redes de pesca. Si bien la muestra es pequeña y sólo permite un análisis preliminar, la merluza y el calamar común fueron las presas más importantes para esta especie. Las tallas consumidas de estas presas indican claramente que la tonina overa se alimento de juveniles primarios de merluza y juveniles pequeños de calamar. De esta forma, es posible caracterizar a esta especie, en el norte y centro de Patagonia, como un predador pelágico que se alimenta de especies o estadios de especies que forman cardúmenes. La dieta del tiburón vitamínico fue analizada a partir de 23 contenidos estomacales provenientes de animales capturados incidentalmente en lances de pesca. Las presas más importantes para el tiburón vitaminíco fueron la merluza, el calamar común y el pulpo colorado, además de la nototenia y el calamar patagónico. En términos de grupos ecológicos, las presas principales del tiburón vitaminíco fueron especies demersales-pelágicas y bentónicas, sugiriendo asi que esta especie se estaría alimentando asociada al fondo marino. En términos de tallas consumidas los resultados obtenidos sugieren que esta especie se estaría alimentando de acuerdo a la disponibilidad ambiental. Para el análisis comparativo interespecifico se utilizaron los IRI%, calculados tanto para las especies presa corno para los grupos ecológicos de las presas. Sobre la base de la información obtenida y de los tamaños muestrales, las especies de predadores fueron divididas en especies tróficas. Estas fueron los machos (OFm) y hembras (OFh) del lobo marino de un pelo, el delfin oscuro (LO), los ejemplares inmaduros (RFinm) y maduros (RFmad) de la raya picuda, los individuos inmaduros (SAinm), machos maduros (SAmm) y hembras maduras (SAhm) del tiburón espinoso, la tonina overa (CC) y el tiburón vitaminico (GG). Para determinar si la muestra de cada especie trófica era representativa de la población de la cuál proviene se empleó el método de cuadrados acumulados de Pielou y basado en el indice de diversidad de Brillouin. Asimismo, se empleó este procedimiento para estimar la diversidad trófica poblacional (Hp) de cada especie trófica. Las Hp fueron comparadas empleando la prueba de Kruskal-Wallis y contrastes de a pares. Además, se realizaron análisis de agrupamiento jerárquico utilizando los valores del IRI% obtenidos para las especies presa y los grupos ecológicos de las presas. Los resultados obtenidos indican que todas las muestras analizadas fueron representativas de las poblaciones de las cuáles provienen con la excepción de CC. Por esta razón, esta especie fue excluida del análisis. Asimismo, se detectó un gradiente de Hp, siendo OFh y L0 las especies tróficas que presentaron la máxima y minima Hp respectivamente. Este gradiente de Hp esta positivamente correlacionado con el IRI% de las presas bentónicas y demersales-bentónicas, sugiriendo asi que la diversidad trófica está reflejando la diversidad de los ambientes donde las distintas especies tróficas se alimentan. Asimismo, este resultado indica que todos los predadores estudiados pueden considerarse generalistas y oportunistas en el contexto del dominio del ambiente que utilizan para alimentarse. El análisis de agrupamiento considerando el IRI% de los grupos ecológicos de las presas permitió distinguir 3 grupos de predadores, aquellos que consumen presas demersales-pelágicas (OFm, RFmad, SAmm, SAhm y GG), aquellos donde las presas pelágicas son relevantes (SAinm y LO) y aquellos donde las presas bentónicas y demersales-bentónicas adquieren altas importancias (OFh y RFinm). El análisis de agrupamiento considerando el IRI% de las especies presa pemiitió distinguir 6 grupos de predadores. El grupo “OFm y RFmad”, está caracterizado por una alta importancia de la merluza en su dieta; el grupo “GG” está caracterizado por una distribución relativamente equitativa de la importancia de la merluza, el calamar común y el pulpo colorado; el grupo “RFinm” presenta alta importancia de nototenia, seguida por merluza e isópodos; el grupo “SAinm, SAmm y SAhm” esta asociado a altas importancias de calamar común y a la presencia de ctenóforos; el grupo “LO” esta definido por una alta importancia de anchoita, seguida de calamar común y calamar patagónico; y el grupo “OFh” está definido por la alta importancia del pulpo colorado en la dieta. Los análisis de solapamiento entre estas especies tróficas indican que los solapamientos tróficos son bajos y siempre significativamente diferentes del solapamiento total. De esta forma, estos predadores de alto nivel trófico estarían usando los mismos recursos, abundantes y frecuentes en el medio, pero en formas distintas y dependiendo del hábitat trófico que utilizan. De esta manera, este uso diferencial de los recursos implica una separación de sus nichos tróficos y una disminución de la posibilidad de competencia entre ellas.

Abstract:
The comparative analysis of the food habits between top predator allows the evaluation of how these species use the trophic resources. They also make possible the study of potentially competitive relationships and the role of these predators in the regulation and structure of the community. The marine community of northern and central Patagonia is structured on the tri-trophic system composed by the Argentine anchovy (Engraulis anchoita), the Argentine shortfin squid (Illex argentinus), and Argentine hake (Merluccius hubbsi). Several marine mammals and elasmobranchs use these species as food resources. For this reason, the objective of this work was to analyze comparatively the diet of the South American sea lion (Otaria flavescens), the dusky dolphin (Lagenorhynchus obscurus), the Commerson’s dolphin (Cephalorhynchus commersonii), the beaked skate (Raja flavirostris), the spiny dogfish (Squalus acanthias) and the school shark (Galeorhinus galeus). The diet of these predators was studied by stomach content analysis. The prey remains found in the contents (fish bones and otoliths, cephalopod beaks, crustacean exoskeletons, etc.) were used to identify and quantify the preys. The length and weight of prey at the moment of the ingestion were estimated by alometric regressions. The relative importance of prey species was evaluated by the relative importance index IRI=(PH%+N%)FO%, where PH% is the percent in wet weight, N% is the percent in number, and F0% is the frequency of occurrence of the prey species in the diet. This index was relativized to 100% (IRI%). Intraspecific differences in diet allow the determination of trophospecies within a biological species. These differences were evaluated using the general overlap (GO) and the specific overlap (SO) index. These index were calculated using the occurrences of those prey species which had IRI% values greater than 1% in the total sample of the biological species. Differences in the sizes consumed by the trophospecies were evaluated using the Mann-Whitney test or the Kruskal-Wallis non-parametric one way ANOVA and paired comparisons. The diet of the South American sea lion was studied using samples obtained from animals found dead on the beach and incidentally caught by the fishery. Forty-one prey species were identified from the 59 stomachs analyzed. The most important prey were the Argentine hake, the red octopus (Enteroctopus megalocyathus), the raneya (Raneya brasiliensis), the Patagonian squid (Loligo gahi), and the Argentine anchovy. The differences in the diet associated with the source of sampling (dead on beach or entangled) and sex were evaluated using the GO and SO. Only differences between sexes were found. Females fed mostly on benthic species (red octopus) while males fed mostly on demersal-pelagic species (Argentine hake). These differences were associated with different feeding grounds and/or different home ranges between sexes. The results suggest that females could be feeding in more coastal and shallow waters, while males could be feeding farther in deeper waters. With reference to commercial species, the Argentine hake was consumed mostly in non-commercial sizes (total length <30cm) while the Argentine shortfin squid was eaten mostly in commercial sizes (dorsal mantle length>15cm). Nevertheless, the size frequency distributions of the principal preys suggest that the South American sea lion use the food resources according to their environmental availability. The dusky dolphin diet was studied from a sample of 25 dolphins. Most of this sample was obtained from incidental catches in nocturnal midwater hauls directed to the capture of Argentine red shrimp (Pleoticus muelleri). Intraspecific differences in the diet were not analyzed due the small sample size. The most important prey of the dusky dolphin were the Argentine anchovy, the Argentine shortfin squid, the Patagonian squid, and the Argentine hake. The sizes of prey indicated that the dusky dolphin fed on adult anchovies, primary juveniles of hake, and juveniles of both species of squid. These results indicate that dusky dolphin is a pelagic predator, consuming pelagic species or pelagic stages of demersal species which have schooling behavior. The diet of the beaked skate was studied from a sample of 274 individuals obtained from the incidental catches of the hake fishery. The most important prey were the Argentine hake, the Southern cod (Patagonotothen ramsayi), the Argentine shortfin squid, the isopod (Serolis schythei), the raneya, and the Argentine anchovy. A total of 45 prey species were identified. The overlap analysis indicated no differences in the diet between sexes, but significant differences in the diet between immature and mature individuals. The Southern cod and the Argentine hake were the most important prey for the immature beaked skates, but the crustaceans showed high values of importance too. The most important prey for mature beaked skates were the Argentine hake and the Argentine shortfin squid, while the importance of crustaceans decreased. In general terms, the immature beaked skates consumed preys in sizes significantly smaller than the mature ones. Significant correlations were found between the size of the predator and the size of the prey, considering the immature individuals, the mature individuals or the total sample. This results indicate that the beaked skate change its diet with growth and sexual maturity. The small and immature individuals feed mostly on crustaceans, including fishes in the diet along its growth. When the beaked skate reach the sexual maturity, switch its diet and consume mostly fishes and cephalopods. Also, this diet switching imply a change in the trophic habitat. The immature individuals are benthic predators while the mature ones feed on demersal-pelagic species. The diet of the spiny dogfish was studied from a sample of 132 individuals obtained from the incidental catches of the hake fishery between 1996 and 1998. The food habits were analyzed taking into account the potential differences in diet related to sex and maturity condition. Using the GO and SO index, differences in diet were found between immature individuals (SAinm), mature males (SAmm) and mature females (SAhm). The Argentine shortfin squid, ctenophores, and the Argentine hake were the most important prey for SAinm. ln the cases of SAmm and SAhm, the Argentine shortfin squid and the Argentine hake were the most important prey species. Nevertheless, differences in diet were found between these trophospecies. The SAinm are pelagic predators. After the sexual maturity, the spiny dogfish switch its diet and the mature individuals tend to feed more associated to the bottom, reducing the consumption of ctenophores (IRI%SAinm=18%, IRI%SAmm=4% y IRI%SAhm=0.4%)and increasing the consumption of demersal-pelagic and demersal-benthic species. Previous studies of the diet of the spiny dogfish in the period 1985-1994 indicated that the Argentine hake was the most important prey in the area, followed by the Argentine shortfin squid (García de la Rosa and Sánchez, 1997; García de la Rosa, 1998). In this work, carried out within the period 1996-1998, the order of importance of these prey showed an inversion. The Argentine shortfin squid was the most important prey, followed by the Argentine hake. This result confirms the character of generalist and opportunistic predator of the spiny dogfish, because the abundance of Argentine hake decreased as a oonsequence of overfishing between these study periods. The diet of the Commerson’s dolphin was studied from 9 stomach contents obtained from incidentally caught individuals. Even that this sample is small and only allows a preliminary analysis, the Argentine hake and the Argentine shortfin squid were the most important prey species. The sizes of prey indicate that the Commerson’s dolphin fed on primary juveniles of hake and small juveniles of squid. Then, it is reasonable to consider that this species, in the north and central Patagonia, is a pelagic predator which feed on pelagic species or pelagic stages of species which exhibit schooling behavior. The diet of the school shark was analyzed from 23 stomach contents obtained from individuals incidentally caught in commercial hauls. The most important prey were the Argentine hake, the Argentine shortfin squid and the red octopus, followed by the Southern cod and the Patagonian squid. Considering the ecological groups of the prey, the school shark fed mostly on demersal-pelagic and benthic species, suggesting that this predator feeds associated to the bottom. The sizes of the prey suggest that the school shark consume its prey according to their environmental availability. The inter-specific comparative diet analysis was made using the IRI%, calculated for prey species and ecological groups of prey. Considering the previous results and the sample sizes, the predator species were divided in trophospecies. These trophospecies were the males (OFm) and females (OFh) of the South American sea lion, the dusky dolphin (LO), the immature (RFinm) and mature (RFmad) individuals of the beaked skate, the immature (SAinm), mature males (SAmm) and mature females (SAhm) of the spiny dogfish, the Commerson’s dolphin (CC) and the school shark (GG). In order to determine if the sample size of each trophospecies was representative of the putative population, the Pielou’s pooled quadrat method and the Brillouin’s diversity index were employed. Also, this procedure was used to estimate the population trophic diversity (Hp) for each trophospecies. The Hp were compared using the Kruskal-Wallis test and paired comparisons. Additionally, two cluster analysis were performed using the IRI% for the prey species and the ecological groups of prey. The results indicate that all the sample sizes were representative of the populations, with the exception of the CC sample. For this reason, this species was excluded from the analysis. A gradient of Hp was detected, where OFh and LO were the trophospecies which showed the maximum and minimum values for Hp respectively. This gradient was positively correlated with the IRI% of the benthic and demersal-benthic prey. It suggests that the trophic diversity is reflecting the biological diversity of the environments where the trophospecies are feeding. Moreover, this result indicates that all these predators could be considered as generalist and opportunistic in the context of the environmental patch that they use as trophic habitat. Considering the cluster analysis based on the IRI% of the ecological groups of prey, three groups were identified. These groups were related to the consumption of demersal-pelagic preys (OFm, RFmad, SAmm, SAhm and GG), the high importance of pelagic preys (SAinm and LO), and the high importance of demersal-benthic preys (OFh and RFinm). Considering the IRI% of the prey species, the cluster analysis allowed the identification of 6 groups of predators. The “OFm and RFmad” group was characterized by the high importance of Argentine hake in the diet. The “GG” group was characterized by a relatively even distribution of the importance of Argentine hake, Argentine shortfin squid, and red octopus. The “RFinm” group presented high importance of Southem cod, followed by Argentine hake and isopods. The “SAinm, SAmm and SAhm” was related to the high importance of Argentine shortfin squid and the presence of ctenophores. The “LO” group was defined by the high importance of Argentine anchovy, followed by Argentine shortfin squid and Patagonian squid. The “OFh” group was defined by the high importance of red octopus in the diet. The overlap analysis between trophospecies indicated that the overlaps were low, and always significantly different to the complete overlap. Then, these top predators will used the same, abundant and frequent, trophic resources, but in different ways according to their trophic habitats. These differential uses of the food resources lead to a separation of their trophic niches and to reduce the possibility of ecological competition between them.

Kleiman, Laura Elena. "Mineralogía y petrología del volcanismo permo-triásico del bloque de San Rafael en el área de Sierra Pintada, Provincia de Mendoza y su relación con las mineralizaciones de uranio." (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Abstract:
The southern portion of South America formed part of the supercontinent of Gondwana during most of the Paleozoic, and a broad magmatic belt was active in the west margin in the Carboniferous and Permo-Triassic. In the San Rafael Massif, Mendoza, Argentina a foreland basin developed behind the Carboniferous magmatic arc, which resulted in a thick accumulation of marine and continental sediments. Later, these sediments (El Imperial Formation) were deformed during the San Rafael orogenic phase which was related to an eastward migration of the arc in the Early Permian. Volcanism is Permo-Triassic and postdates the deformation of the El Imperial deposits, but the early volcanics and associated sediments (Cochicó Group) were synchronous with a compressive and/or transpressive stress regime, related to the San Rafael orogenic phase, indicating that subduction continued to the west. The volcanic sequences in the San Rafael Massif form part of the Choiyoi magmatic province. Field observations, in conjuction with mineralogy, petrology, major, trace and REE element data, indicate that two different suites can be distinguished within the Choiyoi, termed in here lower and upper Sections. The lower Section (Early Permian) comprises andesites, and dacitic to low-silica rhyolitic ignimbrites with associated sediments (Cochicó Group) and represents the products of the subduction-related magmatic arc. The upper Section (Early Permian- Early Triassic) which is mainly composed of rhyolitic ignimbrites (Agua de los Burros Formation), andesitic dyke intrusions (Quebrada del Pimiento Formation), caldera-related high-silica rhyolitic ignimbrites and lava flows, dacitic to rhyolitic subvolcanic bodies, some with garnet and topaz, and mildly alkalic basaltic andesites (Cerro Carrizalito Formation). This change in the character of volcanism is correlated with a shift from the compressive tectonic style to a progressive extensional regime, and is believed to represent the transition between Late Paleozoic subduction and Triassic rifting. A third suite of Middle Triassic age (Puesto Viejo Formation) could also be distinguished. It is bimodal, comprises basaltic andesites, basalts and rhyolitic ignimbrites and would correspond to the peak of extension (rift ?) in the area. Dacitic to rhyolitic ignimbrites of the subduction-related Cochicó Group contain biotite as the main mafic mineral, and evolved from andesitic magmas by crystal fractionation of the observed mineralogy (Toba Vieja Gorda Member, Yacimiento Los Reyunos Formation). They are homogeneous sequences that could be considered as “monotonous intermediates” (Hildreth, 1981). Disequilibrium textures suggest that magma mixing and/or lower crust contamination were important processes. High-silica rhyolites of the upper Section are similar to bimodal aluminous rhyolites and to topaz rhyolites. They contain biotites, arnphiboles and pyroxenes suggesting lower pressures, higher temperatures and dryer conditions of crystallization. Rhyolites from different volcanic centers show distinctive geochemical patterns. Besides, some textures suggest magma mixing processes and zoned magma chambers. They show low composition gradients suggesting crystal fractionation processes. The crust was thinned, magma Chambers were emplaced at higher crustal levels and crustal contamination and/ or melting seems to be a main process. They are transitional between subduction and continental intraplate conditions. Andesitic dykes emplaced in tensional normal faults (Quebrada del Pimiento Formation) can record the beginning of extension in the Early-Late Permian. These andesitic dykes could probably be the product of hibridization of a basaltic underplate and the lower crust. Extension could eventually be related to changes in the subduction geometry due to diminishing rates of plate motions, which finally produced the end of plate convergence. Triassic high-silica rhyolites (Puesto Viejo Formation) are also similar to bimodal aluminous rhyolites, no mafic minerals were observed, and they seem to be genetically unrelated to spatially associated basalts and andesites. The rhyolites would represent crustal melts which were produced by heating due to mafic magmas emplaced at the base of the crust, whereas the basalts and andesites are the product of this basaltic “underplating” that fractionated and/or interacted with the crust. The relationship between silicic volcanic rocks (mainly volcaniclastic) and uranium mineralizations has been known for many years, because uranium concentrates in felsic igneous rocks, due to its highly incompatible character. These rocks were widely recognized as source rocks through devitrification processes of volcanic glass. In recent years, however, their importance as potential hosts, mainly of those rocks related to a caldera cycle, was also evaluated: In order to be a potential host, post-magmatic processes, such as long-lived hydrothennal systems, are esential for uranium remobilization and concentration within this environment. In the San Rafael Massif, the Choiyoi lower Section (Grupo Cochicó) hosts the main uranium mineralization known, at present, in Argentina: the Dr. Baulíes-Los Reyunos deposit which is emplaced in sediments (Areniscas Atigradas Member) redeposited from dacitic and low-silica rhyolitic ignimbrites (Toba Vieja Gorda Member) with very low U background (up to 3 ppm). Field, mineralogical and geochemical data in this case, points to the role of volcanism to be limited to that of source rock. Besides, this type of magma is not very suitable for yielding great amounts of U. In contrast, the composition of magmas, the tectonic setting and the presence of caldera-related volcanics in the Choiyoi upper Section are more favourable conditions for uranium mineralizations to ocurr, according to worldwide examples, and seem to be a more adequate exploration target. Mineralogical and chemical data from some known uranium mineralizations associated to these rocks (Rincón del Atuel, Pircas del Mesón) show that some hydrothermal activity was relevant in the remobilization and concentration of U. The paucity of sediments associated to the upper Section volcanics makes ignimbrites and other caldera-cycle rocks, a more favourable host.

Iglesias, Margarita Diana. "Poliquistosis renal autosómica dominante : Diagnóstico mediante análisis de ligamiento familiar y detección de mutaciones en pacientes portadores de la enfermedad" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La poliquistosis renal autosómica dominante (ADPKD) es una enfermedad genética hereditaria que afecta aproximadamente a 1 en 1000 individuos. Cada hijo de un progenitor afectado posee un 50% de probabilidad de heredar el gen defectuoso y de éstos, aproximadamente el 50% desarrolla insuficiencia renal crónica. La característica patológica de esta enfermedad es el desarrollo progresivo de múltiples quistes de contenido líquido en ambos riñones y presentándose con distinta frecuencia en hígado, páncreas y bazo. La manifestación clínica de los quistes aparece entre los 20 y 30 años, aunque existe una gran variabilidad entre la población afectada. Al menos tres genes son responsables del desarrollo de la enfermedad: PKD1 localizado en la región cromosómica 16p13.3, PKD2 en 4q21-23 y PKD3, aún no localizado. La PKD1 constituye aproximadamente el 85% de los casos; un 10% presenta la forma PKD2 y el 5% restante se asociaría a la forma denominada PKD3. Los objetivos de este trabajo fueron: 1. Desarrollar un diagnóstico precoz de la enfermedad que permita detectar enfermos y portadores asintomáticos para la forma PKD1, utilizando marcadores microsatélite ya descriptos como cercanos al locus responsable de la misma. 2. Buscar y analizar las mutaciones presentes en el gen PKD1 en las familias afectadas con esta forma. 3. Desarrollar un diagnóstico precoz de la enfermedad que permita detectar enfermos y portadores asintomáticos para la forma PKD2, utilizando marcadores microsatélite ya descriptos como cercanos al locus responsable de la misma. 4. Determinar en forma fina la ubicación del gen PKD2 por medio del análisis de eventos de recombinación entre los marcadores descriptos y la enfermedad en las familias analizadas en este estudio. 5. Detectar y analizar mutaciones en el gen PKD2. 6. Analizar otras formas de poliquistosis renal. 7. Aplicar las herramientas hasta aquí desarrolladas en otras patologías quísticas hereditarias.

Abstract:
Autosomal dominant polycystic kidney disease (ADPKD) is an inherite0d genetic disease that affects approximately 1 in 1000 individuals. Each descendent from an affected parent has 50% probability of receiving the affected gene. 50% of patients with ADPKD develop end stage renal disease as a result of progressive cyst formation in both kidneys. Cysts can also occur in other organs, for example the liver, pancreas and spleen. Clinical manifestations may first be detected between 20-30 years of age, although there may be significant variability in an affected population. At least three different genes are known to cause ADPKD: PKD1 is located at chromosome 16p13.3, while PKD2 has been mapped to 4q21-23. PKDI accounts for about 85% of ADPKD, while in most of the remaining families the disease maps to PKD2. A small number of families (PKD3) have been reported that are unlinked to either of these loci. The major aims of this work were: l. To develop linkage analysis for early diagnosis of ADPKD by using microsatellite markets for the PKD1 loci. 2. To determine and characterize the mutations present in the PKD1 gene in affected families. 3. To develop linkage analysis for early diagnosis of ADPKD by using microsatellite markers for the PKD2 loci. 4. To refine the localization of the PKD2 gene by analyzing recombination events between the markers used in this study and the disease in affected families. 5. To determine and characterize the mutations present in the PKD2 gene in affected families. 6. To study other forms of ADPKD. 7. To introduce linkage analysis in the study of other hereditary cystic diseases.

Horowitz, Gabriel I.. "Estudio de reactores Trickle-Bed : Aplicación al tratamiento de aguas contaminadas" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El presente trabajo enfoca el estudio de Reactores Trickle-Bed (RTBs), tendiente a su aplicación al tratamiento de aguas contaminadas. Se examina el efecto de la mojabilidad del relleno y de las características espumantes del líquido sobre las transiciones de régimen de flujo pulsante-reptante en RTBs, analizando simultáneamente la capacidad de herramientas no convencionales para diagnosticar dichas transiciones. Estas se determinan por inspección visual y a partir del análisis de series temporales de fluctuaciones de presión, STFP, en el marco de las teorías estadística convencional, de fractales temporales y de caos. Las STFP se miden en la pared de la columna, empleando aire y soluciones acuosas de un surfactante, como fluidos modelo, y lechos conformados por mezclas de partículas hidrofóbicas e hidrofllicas en diferentes proporciones. Se encuentra que tanto la mojabilidad de las partículas como las características espumantes del líquido influyen sobre las transiciones de flujo en RTBs. Por otra parte, se analizan los efectos de emplear un catalizador hidrofóbico sobre la performance de RTBs, utilizando la oxidación catalítica de etanol como reacción modelo, a partir de ensayos en un equipo escala banco. Se determina la conversión de etanol en el RTB relleno con catalizador hidrofóbico, hidrofílico y mezclas de diferentes proporciones de catalizador hidrofóbico y soporte hidrofllíco inerte. Los resultados se interpretan teniendo en cuenta factores hidrodinámicos y de transporte, mediante el planteo y la resolución de un modelo matemático generalmente aceptado para describir el comportamiento de RTBs. Se encuentra que el empleo de catalizador hidrofóbico, diluido o sin diluir, favorece significativamente la performance de RTBs para oxidaciones catalíticas.

Abstract:
Present work is concerned with the study of Trickle-Bed Reactors (TBRs) and their application to wastewater treatment. The influence of packing’s wettabillity and the liquid foaming characteristics on the pulse-trickle flow regime transitions in a TBR is examined, testing simultaneously the suitability of non-conventional tools to diagnose these transitions. They are determined by visual inspection and from the analysis of pressure fluctuation time series, PFTS, according to the conventional statistical theory, a fractal approach and the theory of chaos. PFTS are measured on the column wall using air and aqueous solutions of a surfactant, as model fluids, and beds constituted by mixtures of hydrophobic and hydrophilic particles, in various proportions. Both, the particles wettability and the liquid foaming character, affect flow regime transitions in TBRs. On the other hand, the effect of employing hydrophobic catalysts on TBRs’ performance, taking ethanol catalytic oxidation as a model reaction, is analyzed by carrying out experiments in a bench scale installation. Ethanol conversion is determined in the TBR packed with the hydrophobic or hydrophilic catalyst and mixtures of different proportions of hydrophobic catalyst diluted with the inert hydrophilic support. The results are interpreted taking into account hydrodynamics and mass transfer resistances through a widely accepted mathematical model to describe TBRs’ behavior, which is formulated and solved. The use of hydrophobic catalyst, either diluted with the hydrophilic support or not, deeply improves TBRs’ performance for catalytic oxidations.

Haros, Claudia Mónica. "Molienda húmeda de Maíz : Optimización del proceso y desarrollo de nuevas técnicas tendientes a mejorar la calidad de sus productos" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El propósito de esta tesis fue investigar algunas aspectos básicas de la molienda húmeda convencional de maíz y evaluar la capacidad de molienda de tres híbridos regionales de este grana: dentada, semidentado y colorada dura. Otras objetivas fixeran evaluar la incidencia de las condiciones past-cosecha en el rendimiento y calidad de la fiacción amilácea, determinar la cinética de difusión y de reacción química del anhídrido sulfuraso en el grano de maíz y proponer modificaciones en la molienda húmeda tradicional con miras a reducir el tiempo y casta del procesa. Se evaluó el efecto del secado en el rendimiento de almidón de maíz dentada y colorada dura. El rendimiento decrece al aumentar la temperatura y contenida de humedad inicial de las granos. La reducción en la recuperación de almidón y la contaminación proteica fue mayor en maíz colorada dura. El hinchamiento, solubilidad y temperatura de gelatinización del almidón aislada fue afectada por el secado. La constante cinética de reacción de SO2 en maíz fue evaluada par un método isotérmico en el rango de temperaturas de 25-55°C. La pérdida de SO2 por reacción química sigue una cinética de primer arden con una constante que varía de 4.3 a 9.9x10-7 s-1 ; la energía de activación file de 60.6 kJ/mol. La cinética de difusión y reacción de SO2 en el grano se simuló mediante la ecuación de difusión con reacción química simultánea. Los coeficientes de difusión se evaluaron por resolución del modelo propuesta; la energía de activación del procesa difusivo fue de 39.8 kJ/mol. El efecto relativo del descascarado, pretratamiento con solución de KOH y emulsión de aleato de etila en la velocidad de absorción de agua durante la maceración se comparó can la absorción de muestras de maízsin pretratar. Dichas pretratamientos aumentan la absorción de agua tanto en maíz dentada cama en colorada duro. La absorción de agua en el grana macerado en presencia de ácida láctico. Para concentraciones de ácida láctico 0.5% (v/v)y mayores se encontró que se incrementa ligeramente la velocidad de absorción de agua durante la maceración. Las muestras de maíz pretratados can KOH tuvieran menor rendimiento que las muestras sin tratar. Sin embargo, la presencia de ácido láctico en las aguas de maceración aumentaron el rendimiento en almidón de las híbridos dentado y colorado duro, particularmente en las muestras tratadas en solución alcalina. Para el maíz colorado duro se encontraron condiciones de molienda óptimas a las 24 horas de maceración.

Abstract:
The purpose of this thesis was to investigate some fundamentals aspects of the conventional corn wet milling as well as to evaluate the millability of the three regional types: dent, semident and flint corn. Other objectives were to evaluate the incidence of post-harvesting conditions on the yield and quality of the isolated starch, to determine the kinetics of difusion and chemical reaction of sulfur dioxide in corn grain and to propose modifications of to the classical wet milling to reduce the time and cost of the hybrids under various drying conditions and the results compared with undried samples. The starch recovery of undried samples was similar for flint and dent corn. It decreased as both initial moisture content of the grains and drying air temperature increased. The reduction of starch recovery and contamination by protein was greater for flint than for dent corn. Swelling, solubility and gelatinization range of isolated corn was affect by the drying conditions. The reaction kinetics of sulfur dioxide in corn was evaluated by isothermal method at temperature range of 25-55°C.It was found that the loss of sulfur dioxide follows first-order kinetics with the range constant varying from 4.3 to 9.9x10-7 s-1; the activation energy for chemical reaction was 60.5 kJ/mol. The rate of diffusion and reaction of sulfur dioxide in corn grain during steeping was simulated by the diffusion coeficients, were evaluated by fitting of the experimental absorption curves of SO2 in corn grain to the model, being the activation for the diffusive process of 39.8 kJ/mol. The relative effectiveness of dehulling, potasium hydroxide dipping and ethyl oleate spraying aqueous emulsion to increase the rate of water absorption by dent and flint corn during steeping was compared with untreated corn samples. These pretreatments increased the water absorption rate of both hybrids when compared to the untreated control samples. Corn grain steeped in SO2 aqueous solution and variable lactic acid concentration ere performed. For lactic acid concentrations, about 0.5% higher absorption rates than those steeped only in SO2 solution were observed, this effect being more marked for dent than for flint corn. Corn samples pretreated with potasium hydroxide had lower starch yields than the control. However, the presence of lactic acid in steep water increased the starch yield of dent and flint corn, particularly for the samples treated with alkaline solution. This procedure was particularly beneficial for flint corn; an effective release of the starch granules was achieved within 24 hr of steeping.

Guerchicoff Lemcke, Alejandra. "Aspectos básicos y aplicados de la genética molecular de Bacillus thuringiensis" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los inoculantes basados en Rhizobium son ampliamente usados en plantas luguminosas. Actualmente cepas bacterianas con funciones duales (por ejemplo: fijación de nitrógeno y actividad insecticida) pueden ser una alternativa para el manejo orgánico de pestes de insectos (Madhavi et al., 1993 and 1994). También pueden ser usadas para proteger semillas, reduciendo el uso de insecticidas químicos. El gen cry 4B de B. thuringiensis israelensis que codifica para una proteína tóxica para díptero fue usado como modelo. Para introducir dicho gen se usó el plásmido pTR101, un vector altamente estable, en Rhizobium en ausencia de presión de selección. Las construcciones fueron introducidas en Rhizobium fredii 191 y Rhizobium meliloti 1021, mediante conjugación tripartita con un plásmido ayudante. La expresión fue estudiada mediante Western blot de extractos crudos utilizando un anticuerpo específico contra la proteína Cry4B recombinante. Se observaron reareglos que dieron lugar a deleciones, pero a pesar de esto un polipéptido reactivo se detectó en ambos Rhizobios. Dado que en Argentina muchas pestes de coleópteros y nematodos constituyen un serio problema para cultivos de alfalfa y soja, entre otros, el gen cry3A de B.thuringiensis tenebrionis (Krieg et al., 1983) fue introducido en Rhizobium meliloti 1021. Se eligió al vector de amplio rango pRK404, para evitar que se produzcan reareglos. Este plásmido posee un origen de replicación derivado del RK2, lleva resistencia a kanamicina, puede ser movilizado con una alta frecuencia usando un plásmido ayudante. Los análisis por PCR confirmaron la presencia de este gen en Rhizobium meliloti 1021 pero se observó un bajo nivel de expresión. La presencia del plásmido recombinante no afectó la capacidad nodulativa ni de crecimiento de las plantas inoculadas. La presencia de proteíans tóxicas con actividad citolítica y hemolítica es una característica de Bacillus thuringiensis entre este grupo la primera descubierta fue Cyt1 la citolisina de Bacillus thuringienisis israelensis (Bti) (Earp, D. J., et al. 1987, Ward, E. S., et al. 1984). En esta subespecie hemos detectado la presencia de otro gen cyt, altamente homólogo a la citolisina de 29 KDa, Cyt2 de la subespecie kyushuensis (Drobniewski, F, A., et al. 1989. Knowles, B, H. et al. 1992). Este gen mapea “río arriba “ del gen cry4B en el megaplásmido de 72 Md de la cepa 4Q2-72. El análisis de la secuencia reveló una región 5' estabilizadora del mARN similar a las descriptas para otros genes cry. Los análisis de Western blot revelaron la presencia de un polipéptido inmunoreactivo en Bacillus thuringiensis subespecie 1884 y 4Q2-72. Mediante experimentos de PCR y de Southern blot se confirmó la presencia de este gen en otras subespecies mosquitocidas de Bacillus thuringiensis. Notablemente la subespecie tenebrionis que clasifica dentro del serotipo morrisoni, con actividad tóxica para coleóptero, también lleva este gen. Por otro lado, se obtuvieron resultados negativos con las cepas tóxicas para lepidóptero kurstaki HD-l y aizawai HD-137. Así como los genes cry, que codifican toxinas larvicidas en Bacillus thuringiensis, los genes cyt también parecen constituir una amplia y diversa familia de genes altamente relacionados.La presencia de hemolisinas Cyt ha sido asociada típicamente con cepas de Bacillus thuringiensis con diferente patotipo(Chang, C., et al. 1993; Crickmore, N., et al. 1995). Este es el caso del serotipo morrisoni el cual incluye cepas bilógicamente activas contra larvas de lepidóptero y coleóptero. Mientras que las proteínas Cyt fueron encontradas en la mayoría de las cepas mosquitocidas estudiadas, es probable que más de una citolisina coexista en las cepas más tóxicas para dípteros, como las subespecies israelensis y morrisoni PG14, sugiriendo esto una correlación entre la potencia mosquitocida y la actividad hemolítica. La secuencia parcial de diferentes genes cyt de cepas mosquitocidas y no mosquitocidas fue determinada y en base a estos datos se construyó un árbol filigenético. , Nuestros encuentros sugieren que las proteínas Cyt tienen un espectro de distribución más amplio que el que hasta ahora se conocía y probablemente también de actividad contra insectos. Teniendo en cuenta las diferencias en el mecanismo de acción entre las proteínas Cry y Cyt se sugiere que éstas últimas pueden ser un factor importante en el manejo de la resistencia desarrollado por los insectos a toxinas Cry . Finalmente se sugiere que la actividad biológica de los cristales intactos de muchas subespecies de Bacillus thuringiensis puede ser considerada como la resultante de una compleja interacción entre las toxinas Cry y Cyt.

Abstract:
Rhizobium-based inoculants are widely used in leguminous crops. Improved strains with dual functions (i.e, nitrogen fixing and insecticidal) could be successfully applied to organic pest management (Madhavi et al., 1993 and 1994). They could also be used as seed protectants, reducing the use of chemical insecticides. The cry4B gene from B. thuringiensis israelensis coding for an anti-dipteran toxin (Goldberg, L., 1977) was used as a model for expression. A highly stable plasmid vector (pTR101) was chosen in order to introduce insecticidal genes in Rhizobium in the absence of selective pressure. Constructions were introduced into Rhizobium fredii 191 and Rhizobium meliloti 1021, through triparental matings with a helper plasmid. Expression was monitored by Western blotting of crude extracts using a specific antibody raised against recombinant Cry4B protein. Although rearrangements leading to deletions were observed, an immunoreactive polypeptide was reproducibly detected in both Rhizobia. Considering that pests such as Coleoptera in alfalfa or Nematoda in soybean constitute a serious problem in Argentina, the cry3A gene from B.thuringiensis tenebrionis (Krieg et al., 1983) was also introduced into Rhizobium meliloti 1021, in order to produce strains with anti-coleopteran activity. A broad host range cloning sistem vector, pRK404, was chosen as alternative vector in order to prevent rearrangements. The tetracycline-resistant plasmid component of this system, pRK404, contains a functional RK2 replicon and can be mobilized at high frequency by using a helper plasmid, but is non-self-transmisible. PCR amplification analysis confirmed the presence of this gene in Rhizobium meliloti 1021, low level of expression was observed. The presence of the recombinant plasmids did not affect either the nodulativen capacity or the growth of the inoculated plants. Mosquitocidal Bacillus thuringienisis strains show as a common feature, the presence of toxic proteins with cytolytic and hemolytic activities, being Cyt1 the characteristic cytolytic toxin of Bacillus thuringienisis israelensis (Bti) (Earp, D. J., et al. 1987, Ward, E. S., et al. 1984) In this species we have detected the presence of another cyt gene, highly homologous to cyt2, that codes for the 29 kDa cytolytic toxin from kyushuensis subspecies (Drobniewski, F, A., et al. 1989. Knowles, B, H. et al. 1992). This gene maps upstream cry4B, on the 72 Md plasmid of strain 4Q2. Sequence analysis revealed, as remarkable feature a 5’ mRNA stabilizing region similar to those described for other cry genes. As predicted by sequence analysis, Western blot reveal Cyt2 cross recating polypeptides in 4Q2 and Bti 1884. PCR amplification and Southern blot analysis confirmed the presence of this gene in other mosquitocidal subspecies. Interestingly, the anti-Coleopteran subspecies tenebrionis belonging to the morrisoni serotype, also showed this gene. On the other hand, negative results were obtained with the anti-Lepidopteran subspecies kurstaki HD-l and aizawai HD-137. As is the case with cry genes, coding for larvicidal delta endotoxins, in Bacillus thuringienisis, the cyt genes for hemolytic toxins seem to form a large and diverse family of highly related genes. The occurrence of Cyt hemolytic toxins has been tipically associated with the host range of Bacillus thuringienisis strains of different pathotypes. This is the case for the morrisoni serovar, that includes strains biologically active against both lepidopteran and coleopteran larvae. While Cyt proteins occur in almost all the mosquitocidal strains studied, it seems that more than one Cyt toxin coexist in highly toxic antidipteran strains, like Bacillus thuringienisis israelensis and morrisoni PG14, suggesting'a correlation betweeen mosquitocidal power and hemolitic activity. Partial DNA sequence for different cyt genes from mosquitocideal and no mosquitocidal strains were determined and a phyologenetic tree was constructed. This novel finding suggests that Cyt protein may have an even broader spectrum of distribution and probably of activity against insects and, owing to their different mechanism of action in comparation to Cry proteins, they might be useful in managing resistance to Cry toxins. These findings suggest that the biological activity of the parasporal cristal of many Bacillus thuringienisis strains, should be viewed as the result of a complex overall interaction between Cry and Cyt toxins.

Gorostiaga, María A.. "Caracterización de la línea celular VERO como sustrato para la producción de vacunas virales" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Las líneas celulares establecidas a partir de células de riñón del mono verde africano, se han usado durante años en Virología. La investigación y el desarrollo que involucra el uso de líneas celulares requiere el conocimiento preciso de las especies de origen y su pureza. Esto se lleva a cabo mediante un monitoreo periódico de los cultivos celulares que comprende varios marcadores genéticos, incluyendo isoenzimas y cromosomas. La estabilidad del cariotipo de la línea celular VERO se estudió con métodos de coloración diferencial de los cromosomas, en cultivos continuos estáticos (10 pasajes). Bajo estas condiciones el número modal (de 58 a 54) y la estructura del cariotipo variaron, tanto en el número de copias de cromosomas normales como en el de marcadores. Los cambios cuantitativos (el aumento del porcentaje de las células diploides, así como la variación en la fracción de células que tienen el número modal, ocurren a pesar de la estabilidad de la composición cromosómica, que limita el uso de las células Vero como sustrato para la preparación de vacunas. Para estandarizar las vacunas patrón en el proceso de producción, se estudió la influencia potencial que los diferentes pasajes podrían tener en la capacidad inmunogénica del virus, con el objetivo de establecer el número máximo y minimo de pasajes que cada tipo de virus admite, sin alterar las características biológicase inmunológicas de las vacunas virales que se usan en la actualidad. El método desarrollado y evaluado en diez pasajes es apto para la producción de vacunas antirrábicas de referencia en células VERO.

Abstract:
Non-tumorigenic cell lines established from African green monkey kidney cells have been used over years in virology. Research and development involving the use of cell lines requires precise knowledge of the species of origin and purity of the cell lines involved. This can only be assured by periodical monitoring of cultured cell lines that involves testing for a combination of genetic markers, including isoenzymes and chromosomes. The Vero cell line karyotypic stability was carried out by methods of differential chromosome staining in continuous static cultures (10 passages). Under these conditions, both the modal number of chromosomes (from 58 to 54) and the karyotype structure, namer the copy number of normal chromosomes and the market composition were shown to change. The quantitative changes (the rising percentage of diploid cells, as well as the change of cell fraction involving the modal number of chromosomes) were shown to occurr in spite of the chromosome composition stability, which limits the time of using Vero cells as a substrate for preparation of vaccines. To the standardization of pattern vaccines in the production process we studied the potential influence of different passages on the virus inmunogenic capability, to establish the minimum and maximum number of passages that each type of virus admit, without change in the biological and inmunological characteristics of viral vaccines that are currently being used. The method developed and evaluated is appropiate for the production of referencial antirrabic vaccines on Vero cells.

Goldfarb, Darío Leonardo. "Estudios de conductividad eléctrica y difusión en trifluorometano supercrítico" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se utilizó trifluorometano (CHF3) en condiciones supercriticas (sc) como solvente modelo para describir las propiedades de transporte de un soluto iónico en un medio de densidad variable. Se obtuvieron las conductividades molares a dilución infinita (A°) y constantes de asociación para la formación de pares iónicos (KA) de las sales hexafluorofosfato de tetrabutílamonio (TBAPF6) y hexafluorofosfato de decametílferrocinio (Fe(Cp*)2PF6;Cp* = nS-C5Me5) en CHF3 a 323.15 K utilizando una celda de conductividad de alta presión. Se diseñó y construyó una celda electroquímica de alta presión con microelectrodo, con la que se realizaron voltametrías de estado estacionario en CHF3 sc con TBAPF6 como electrolito soporte. Se utilizó una teoria que describe el efecto de la asociación iónica sobre las corrientes límites para calcular los coeficientes de difusión de las especies electroactívas presentes: Fe(Cp*)2+(ion libre), Fe(Cp*)2+,PF6- (par iónico) y Fe(Cp*)2 (especie neutra), en presencia de cantidades variables del electrolito soporte. La misma información se obtuvo para estos solutos en algunos solventes orgánicos subcriticos de baja constante dieléctrica para comparar con los resultados de especiación y transporte en CHF3 sc y analizar la validez de modelos de conünuo que sólo toman en cuenta la fricción viscosa (Stokes-Einstein, regla de Walden) Los resultados en CHF3 sc fueron analizados en términos de un modelo simple de solvatación supercrítico, que permite explicar las desviaciones de los coeficientes de difusión y conductividad en la región de alta compresibilidad.

Abstract:
Trifluoromcthane (CHF3) under supercritical (sc) conditions was used as a model solvent to describe the transport properties of an ionic solute in a variable density medium. Molar conductivities at infinite dilution (A°) and association constants for ion pair formation (KA) were obtained for tetrabutyl ammonium hexafluorophosphate (TBAPF6) and decamethylferrocinium hexafluorophosphate (FC(CP*)2PF6, Cp*=n5-C5Me5)in CHF3 at 323.15 K using a high pressure conductivity cell. It was designed and constructed a high pressure electrochemical cell with a microelectrode, to perform steady state voltammetry in CHF3 with TBAPF6 as supporting electrolyte. A theory describing the effect of ionic association on limiting currents was used to calculate the diffusion coefficients of existing electroactive species: Fe(Cp*)2+(free ion), Fe(Cp*)2+,PF6-(ion pair) and Fe(Cp*)2 (neutral species) in the presence of variable quantities of supporting electrolyte. Equivalent information was obtained for these solutes in low-dielectric-constant organic solvents under subcritical conditions. It was compared with speciation and transport results in CHF3 and contrasted against continuum models that take only viscous friction into account (Stokes-Einstein relation, Walden’s rule). The results in CHF3 were analized in terms of a simple supercritical solvation model that explains deviations of the diffusion coefficients and conductivity in the high compressibility region.

Gómez, Eliana Beatriz. "Clonado y caracterización de quinasas relacionadas con la CDC2 en el parásito Trypanosoma cruzi" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Gómez Abal, Ricardo Isaac. "Anisotropía magnética en películas delgadas de metales de transición" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Giudice, Aldo Mario. "Análisis del comportamiento de Cebus apella en jardines zoológicos" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se estudió el comportamiento de Cebus apella paraguayanus con el objetivo principal de caracterizar su relación con el ambiente de cautiverio generado por jardines zoológicos o cautiverio de exhibición, siguiendo los indicadores etológicos señalados por la Sociedad Internacional de Primatologia (1993): comportamientos anormales, patrón de actividad y comportamientos sociales. Ejemplares del taxón mencionado fueron estudiados en dos Instituciones: 1- Jardín Zoológico de Buenos Aires (J.Z.B.A) y 2- Estación de Cria de Animales Silvestres (E.C.A.S). La observación de la conducta se llevó a cabo utilizando los metodos “de barrido" para patrón de actividad y "todos los eventos de algunos comportamientos". para el aspecto social. Se contabilizaron once conductas anormales, siendo la principal el desplazamiento estereotipado. El 81% de la población expresó niveles de anormalidades cualitativas inferiores a 3.5% del patrón de actividad individual. Los resultados de efecto del espacio sobre anormalidades y patrón de actividad mostraron variabilidad interindividual, no permitiendo concluir con la generalidad de que a menor tamaño de recinto mayor producción de anormalidades. Los monos caí en cautiverio de exhibición no redujeron el nivel de actividad, destacándose que estos no se concentraron en actividades autodirigidas, sino por el contrario, se relacionaron de diversas formas con su ambiente, dato que contrasta con lo observado por varios autores en distintas especies de primates. Los resultados de efecto del público no son concluyentes a fin de aceptar o rechazar la hipótesis original del público como "estimulador de conductas anormales". Esta hipótesis fue aceptada en dos de los cinco recintos analizados (Rl y R2) y se contrapone a las hipótesis alternativas de "efecto neutro". avalada por R3 y R4 y “efecto reductor", avalada por lo encontrado en R5. El público aumentó el nivel de actividad, estimulando la expresión de las categorias conductuales "Alerta" y "Alimentación". El efecto del público se detecta como alteración del patrón de actividad hacia comportamientos de relación con este, en desmedro de conductas de integración de los ejemplares con su ambiente, independientemente de los niveles de anormalidades expresadas por los grupos. El público ejerció un efecto depresor en las conductas de integración de los ejemplares con su ambiente social. Se observó la expresión de comportamientos especie-específicos como "Caza", “Obtención espontánea de recursos alimentarios“, “Uso de herramientas“, “Obtención manual de agua“ y "Reacción vertical de escape", interpretándose su expresión como un indicador de comportamiento positivo para los fines de la conservación ex situ in situ. Con respecto al efecto de la rutina de manejo los resultados sugieren que el ajuste de los ejemplares al medio de cautiverio puede variar durante el dia ya que mientras que en un segmento del día los ejemplares pueden estar en "conflicto" con su ambiente, en otros momentos esa situación puede disminuir o desaparecer. En el grupo "ECAS" se evidenció un ciclo de expresión de anormalidades, asociado con la rutina de tareas de alimentación y limpieza: en JZBA en general no se evidenció un ciclo, ni momento del dia en el cual éstos desaparecieran. En este caso se observó fluctuación de niveles de anormalidades a lo largo del día de observación. El comportamiento social de los monos caí se ajustó a distintos patrones descritos en hábitats naturales y mas alla de preferencias interindividuales no se observaron ejemplares antisociales con elevadas dosis de agresividad ni ejemplares aterrados por la presencia de conespecíficos. Las estructuras sociales consideradas en el trabajo mostraron una dinámica de relaciones predominantemente afilitativas. Los resultados sugieren plasticidad y capacidad de autorregulación en el componamiento del mono caí en el cautiverio de exhibición en las condiciones de mantenimiento de estos recintos, sugiriendose su aptitud para el desarrollo de programas de conservación ex situ. Surgen como tareas para el futuro experiencias especificas de enriquecimiento ambiental en distintos ambientes asi como el seguimiento de monos en situaciones de libertad en ambientes forestales, aspectos que darían mayor énfasis al conocimiento sobre la capacidad de los monos caí para aclimatarse en diversos ambientes y su utilización en programas de conservación ex situ in situ.

Abstract:
This study investigated the behavior of the black-capped capuchin monkey, in order to characterize its relationship with the captive environment generated by zoological gardens, following the behavioral indicators pointed out by the Inteniational Primatological Society ( l993): stereotypes and related abnormalities, activity patterns and social behavior. Individuals of this species were observed in two institutions: l- Buenos Aires Zoological Garden (named JZBA) and 2- Station for Wild Animal Breeding (named ECAS). The behavioral observations were carried out rising "scan" and “all occurrences of some behavior" sampling methods. Eleven (ll) qualitative abnormalities were scored: stereotyped displacement was the more important abnormality observed. 81% of the monkeys showed null or low level of qualitative abnormalities in their behavioral repertories. The effect of cage size on abnormal behavior and activity pattern showed differences among monkeys, not fitting the generalization that smaller cage size, larger generation of abnormalities". It was detected in cages of smaller size a smaller expression of displacements and an increase in autogrooming increase, suggesting that cage size can affect the expression of behaviors in a differential way among sex-age classes. The influence of visitors on the behavior of monkeys isn't conclusive in order to accept or to reject the “visitor stimulate abnormalities" hypothesis. This hypothesis was accepted in two of the five cages (Rl: R2) and it was opposed to the alternatives hypotheses "visitors don‘t have an effect on abnormalities" (R3: R4) and "visitor reduce abnormalities (R5). Visitors increased the level of general activity. stimulating the expression of alert and feeding. On the other hand, visitors also exercised an depressor effect on integration behavior of those monkeys with their social environment. Natural behaviors such as "hunt", “spontaneous obtaining of alimentary resources", “tool use", “manual obtaining of water" and "vertical reaction of flight" were observed. These behaviors were interpreted as indicators of positive adaptation. Regarding the effect of the handling routine, results suggest that the acclimatization of monkeys to captive environment can vary during the day: while in a segment of the day monkeys can be in "conflict" with its environment, in other moments that "conflict" can diminish or to disappear. It was evidenced a cycle of expression of abnormalities at ECAS, associated with the handling routine. It was not evidence a cycle at JZBA. In this case, an erratic fluctuation of levels of abnormalities was observed. This aspect is in agree to activity variation along the day. The social behavior of black-capped capuchins was coincidental to different patterns described for the species of the genus Cebus in natural habitats. No antisocial monkeys were observed. The social structure showed a dynamics of predominantly affiliative relationships. The general results suggest plasticity and certain self-regulation capacity in the behavior of the monkey under the described conditions. Two task arise for the future: l-specific experiences of environmental enrichment in different captive conditions and 2- an evaluation of introduced monkeys under free ranging conditions. Both aspects would give a greater emphasis to the knowledge about the capacity of black-capped capuchins to adapt in diverse environments.

Gervini, Daniel. "Estimadores robustos y eficientes para el modelo de Regresión Lineal" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En esta Tesis presentamos una nueva clase de estimadores (que llamaremos REWLS) para el modelo de Regresión Lineal. Son estimadores de mínimos cuadrados pesados, con pesos que se calculan de manera adaptiva a partir de la distribución empírica de los residuos de un estimador robusto inicial. Se demuestra que el punto de ruptura de los REWLS no es menor que el del estimador inicial, de modo que pueden alcanzar el punto de ruptura máximo 1/2. Para el caso particular del estimador de mínima mediana de cuadrados (LMS) como estimador inicial y pesos “hard rejection”, se muestra numéricamente que los sesgos máximos del REWLS para contaminaciones puntuales son prácticamente iguales los del LMS. Pero además, y esto constituye el aporte original de la Tesis, se demuestra que bajo el modelo los REWLS son asintóticamente equivalentes al estimador de mínimos cuadrados y entonca alcanzan la máxima eficiencia asintótica para el modelo de errores normales En conclusión, los estimadores que proponemos logran alcanzar la máxima eficiencia asintótica bajo el modelo sin afectar las cualidades de robustez del estimador inicial.

Abstract:
In this Thesis we introduce a new class of estimators (that we will call REWLS) for the Linear Regession model. They are weighted least squares estimators, with weights adaptively computed from the empirical distribution of the residuals of some initial robust estimator. It is shown that the breakdown point of the REWLS is not smaller than the breakdown point of the initial estimator, so that they can attain the maximum 1/2 breakdown point. For the particular case of the least median of squares (LMS) as the initial estimator and hard rejection weights, it is shown that the maximum biases of the REWLS for point mass contaminations are practically equal to those of the LMS. Moreover —and this is the original contribution of this Thesis- it is shown that the REWLS are asymptotically equivalent to the least squares estimator under the model and hence they attain the maximum asymptotic efficiency for the normal error model. To summarize, the estimators we propose attain the maximum asymptotic efficiency under the model with no damage to the robust qualities of the initial estimator.

García Liñares, Guadalupe E.. "Estudio estructural y de reactividad de compuestos organolíticos con uniones con uniones N-Li Y C-Li : estudios mecanísticos - aplicaciones sintéticas" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se llevó a cabo un estudio estructural y de reactividad de compuestos organolíticos. Resultados basados en espectroscopía RMN-13C, intercambio isotópico y reacciones de carbonilación permitieron determinar que amiduros de litio cíclicos, como morfolil-litio y piperidil-litio, forman, en solución, agregados mixtos con moléculas de amina. Además, por difracción de rayos X se pudo confirmar, en el caso del piperidil-litio, la presencia de piperidina en la estructura cristalina: este amiduro de litio forma un agregado mixto , siendo el primero de este tipo descripto en la literatura. El análisis de los resultados obtenidos en la carbonilación en diferentes condiciones experimentales, permitió el desarrollo de una metodología con amplios alcances sintéticos y la postulación de los mecanismos de reacción de amiduros de litio con monóxido de carbono. El primer intermediario postulado, carbamoilo, es un anión acilo altamente reactivo que, usualmente, lleva a sistemas complejos. Se estudió entonces la reacción entre amiduros de litio y formamidas sustituidas mediante cromatografia gaseosa y Resonancia Magnética Nuclear. El equilibrio establecido ayudó a explicar la dependencia con las condiciones de reacción, por ejemplo, la naturaleza del amiduro. En el caso del morfolil-litio se logró identificar un intermediario monolitiado, el dimorfolinmetóxido de litio. Un aducto como éste, que puede considerarse como un aducto entre una molécula de amida y un amiduro de litio, no se habia encontrado anteriormente. Por otro lado, la reacción entre diciclohexilamiduro de litio y alquilformamidas produce principalmente un intermediario dilitiado en el que un carbono está unido a N, O, Li y un carbono carbonílico, siendo también la primera vez que se describe una entidad de este tipo. Estas investigaciones fueron de gran significancia para mayor conocimiento de la naturaleza de intermediarios y mecanismos de reacción que involucran reactivos organolíticos y para su aplicación en síntesis orgánica. Por otro lado, se investigó la reactividad de derivados litiados de heterociclos aromáticos frente a distintos electrófilos. Por reacción de 2-furil-litio, 5-metil-2-furil-litio y 2-litio-tiofeno con halogenuros orgánicos se logró sintetizar, en forma rápida y sencilla, furanos y tiofenos α sustituidos. La carbonilación de estos reactivos resultó de gran interés, ya que dio lugar a la formación de compuestos carbonílicos complejos. Además, la reacción se llevó a cabo en diversas condiciones estudiándose el mecanismo de la misma.

Abstract:
Structural and reactivity studies of organolithium compounds were carried out. Investigations based on 13C-NMR spectroscopy, isotopic exchange and carbonylation reactions allowed to determine that cyclic lithium amides, such as lithium morpholide and lithium piperidide, form, in solution, mixed aggregates with molecules of amine. Besides, the crystal structure of lithium piperidide was determined, which crystallizes with piperidine to form a mixed aggregate . This is a first aggregate of this type described in the literature. Analysis based on results of carbonylation carried out in different experimental conditions, to led to postulate the mechanism for reaction of lithium amides with carbon monoxide. The first intermediate postulated in the carbonylation, carbamoyl, is a very reactive acyl anion and usually lead to complex systems. Then, gas chromatography and Nuclear Magnetic Resonance analysis of reaction of lithium amides with substituted formamides were carried out. The equilibrium helpt to explain the striking dependence on the reactin conditions, for instance, the lithium amide nature. In the case of lithium morpholide an adduct of an amide with lithium amide, the lithium dimorpholinemethoxide, was identified. An adduct like had not been characterized before. The reaction between lithium dicyclohexylamide and formamides produces mainly a dilithiated intermediate in which a lithiated carbon atom is bonded to N, O, and a carbonyl functionality. Such an entity has not been described yet. These investigations were of relevance to get more insight into the nature of the intermediates and the mechanisms of reaction when organolithium reagents are involved. In addition, the reactivity of lithiated derivatives of aromatic heterocycles with different electrophiles was investigated. α-substituted furans and thiophens were synthesized by reaction of 2-furyl-lithium, 5-methyl-2-furyl-lithium and 2-lithium-tiophen with organic halides. The carbonylation of these reactives was the great interest because of the formation “one pot-one step” of complex carbonylic compounds. Besides, the reaction was carried out in different conditions and the mechanism was described.

Galíndez Girón, Itamar. "Algunos estudios multivariados aplicados a la Sistemática y Ecología de la Subfamilia Triatominae (Hemiptera, Reduviidae), con énfasis en Rhodnius prolixus Stal, 1859 y Rhodnius robustus Larrousse, 1927" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Con el objeto de revisar algunos aspectos sistemáticos y ecológicos de la subfamilia Triatominae, mediante análisis multivariados, se emplearon 1800 especímenes, provenientes de 30 muestras de cada sexo conformadas por 30 ejemplares pertenecientes a 8 especies, R. prolixus (5), R. robustus (11), R. neglectus (2), R. neivai (3), P. geniculatus (2), T. maculata (2), T. sordida (3) y T. infestans (2) a los cuales se le midieron 22 variables morfométricas, en milímetros. El procesamiento estadístico incluyó estadística descriptiva, tablas 1-60; correlaciones, tablas 61-120; Análisis de Componentes Principales (ACP) sobre las matrices de correlación y algunos Análisis Discriminantes como la Distancia Euclidiana. El análisis de correlación mostró la ausencia de un patrón determinado. Aunque se reconoce el dimorfismo sexual, la probabilidad de clasificación reveló errores totales de hasta el 17 y 18% para las muestras RRCTME y RRP1JAG respectivamente. Además se encontró que tanto el cautiverio, la procedencia geográfica y el microhabitat influyen en la expresión del fenotipo morfométrico. En general las hembras se presentan más homogéneas que los machos. La reducción de los caracteres a 14 que incluyeron 13 de la cabeza y la talla (C4) produjeron resultados satisfactorios. De acuerdo con los resultados, se concluye que, primero: los análisis multivariados constituyen una herramienta útil para análisis sistemáticos, ecológicos, genéticos, etológicos, filogenéticos y evolutivos. segundo: los triatominos poseen una elevada potencialidad de expresar la flexibilidad fenotípica y tercero que el microhabitat, el cautiverio y la procedencia geográfica influyen sobre el fenotipo de estos insectos. Se discuten los resultados en un contexto sistemático y ecológico.

Abstract:
In order to study some systematics and ecological aspects of subfamily Triatominae by means of multivariate analysis, 1800 specimens from 30 samples of each sex with 30 individuals in each case belonging to 8 species R. prolixus (5), R. robustus (11), R. neglectus (2), R. neivai (3), P. geniculatus (2), T. maculata(2), T. sordida (3) y T. infestans (2) were used, on which 22 variables were meassured, in milimiters. Descriptive statistics, tables 1-60; correlations, 61-120; Principal Components Analysis (ACP) on corelation matrix and some Discrminant Analysis as Euclidean Distance were employed. The absence of a determined pattern of correlation was shown. Although sexual dimorphism is accepted 17 and 18% of total errors were detected for RRCTME and RRP1JAG samples respectively. Moreover, the influence of captivity, geographical procedence and microhabitat on phenotypic expression was detected. Generally females were too much homogeneous than females. Satisfactory results were obtained when 14 characters were utilized, 13 from head and total longitude (C4). In agreement with the results it concludes that: first the multivariate analysis are a useful tool for systematics, ecologics, genetics, ethologics, phylogenics and evolutionary studies; second: the triatomines have a high potentiality to express the phenotypical plasticity and third: the microhabitat, captivity and geographical procedence have influence on phenotype of these insects. The results are discussed on a systematic and ecological context.

Fratantoni, Silvina Andrea. "Estudio inmunohistológico y electrofisiológico de la motoneurona en un modelo de transmisión pasiva de Esclerosis Lateral Amiotrófica" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La Esclerosis Lateral Amiotrófica (ELA) es la enfermedad neuromotora humana más común. Los individuos que la padecen muestran disfunción y degeneración progresiva de motoneuronas cerebrales, de la protuberancia y de la médula espinal lo cual se manifiesta clínicamente como una debilidad muscular progresiva, parálisis y muerte dentro de los 3 a 5 años del diagnóstico. No existe una cura para esta enfermedad y su patofisiología permanece sin aclarar. Evidencias clínicas y experimentales apoyan la posibilidad de que un mecanismo autoinmune esté involucrado en la patogénesis de ELA. En trabajos anteriores de nuestro laboratorio se ha demostrado que la aplicación de inmunoglobulina G (IgG) de pacientes con ELA sobre terminales motores inducen una disfunción de la transmisión neuromuscular. Estudios animales han establecido que fisiológicamente la IgG y otras proteínas séricas endógenas son endocitadas por los terminales nerviosos de la placa neuromuscular. Estas proteínas pueden ser localizadas por técnicas inmunocitoquímicas en los somas donde se acumulan luego de ser transportadas por transporte axonal retrógrado. El objetivo de la primera parte de la tesis fue analizar si la captación de IgG es cuantitativamente diferente en el caso que la misma provenga de pacientes con ELA o de IgG controles (pacientes con otras enfermedades neurológicas o personas sanas). Para ello, hemos investigado la presencia de IgG humana de pacientes con ELA e IgG control en los somas de las motoneuronas de ratón. La IgG fue aplicada sobre los terminales motores del músculo elevador de la oreja del ratón, Levator auris longus, el cual está inervado por una rama del nervio facial. La fracción sérica de 7 pacientes con ELA, 6 sujetos controles y 3 pacientes con otras enfermedades neurológicas fue inyectada subcutáneamente dos veces por día durante 5 dias (50 μl cada vez de una solución de IgG 20 mg/ml). Secciones del tallo cerebral conteniendo el núcleo del facial fueron procesadas por inmunocitoquímica para detectar IgG humana y la inmunotinción fue cuantificada con un analizador de imágenes. Para todas las IgG consideradas, la tinción en las motoneuronas del núcleo del facial del lado ipsilateral al sitio de la inyección fue significativamente más intensa. En los animales tratados con IgG de ELA, la marca ipsilateral fue significativamente más alta que la encontrada en el lado ipsilateral de los animales inyectados con IgG control. Nuestros resultados son compatibles con el concepto de que las motoneuronas preferencialmente captan, transportan y/o acumulan IgG de ELA. La captación de anticuerpos patogénicos por terminales motores podrían tener un rol en la patogénesis de la enfermedad de la motoneurona. Para definir el posible rol de las IgG de ELA en la inducción de la disfunción de la transmisión neuromuscular, fue nuestro interés estudiar si la participación de canales de calcio voltaje dependientes (CCVD) puede ser alterada por la transmisión pasiva dichos anticuerpos. En la placa neuromuscular de humanos adultos y también en la placa de ratón, la transmisión sináptica está mediada por la entrada de calcio a través de CCVD del tipo P/Q. Otros canales de calcio, como los de tipo L y N, no están involucrados en la liberación de neurotransmisor. Sin embargo, en nervios en regeneración, la conducción de señales y la transmisión sináptica se hacen altamente sensibles a la nitrendipina, una dihidropiridina bloqueante de los canales de calcio de tipo L, sugiriendo que este canal estaría involucrado en la liberación de neurotransmisor. A fin de estudiar si la aplicación de IgG humana sobre los terminales motores induce cambios en la transmisión neuromuscular, IgG de pacientes con ELA y de sujetos controles fue inyectada subcutáneamente sobre el músculo Levator auris del ratón. La fracción sérica de 8 pacientes con ELA y 6 sujetos controles (3 sujetos sanos y 3 pacientes con otras enfermedades neurológicas) fue inyectada subcutáneamente dos veces por día durante 5 días (50 μl cada vez de una solución de IgG 20 mg/ml). Una semana o un mes después de la ultima inyección, los ratones fueron anestesiados y los músculos removidos en solución Ringer normal. El músculo fue montado en una cámara de registro y el nervio fue estimulado por medio de un electrodo de succión. Los potenciales de placa fueron registrados en por lo menos l5 fibras musculares distintas antes y después de la incubación con Nitrendipina l μM o toxinas polipeptídicas. El contenido cuántico de la respuesta evocada fue evaluado por el método de la varianza. No se observaron cambios en el contenido cuántico de la liberación de neurotransmisor. En los músculos tratados con IgG de ELA o IgG control, la liberación del neurotransmisor permaneció sensible a los bloqueantes de CCVD de tipo P/Q e insensibles al bloqueante de tipo N, como ocurre en los músculos sin tratar. En contraste, las IgG de 5 pacientes distintos de ELA indujeron una reducción significativa en el contenido cuántico de la respuesta evocada luego de la aplicación de Nitrendipina. Esto indicaría que una sensibilidad nueva a este bloqueante de CCVD aparece en los terminales tratados con IgG de pacientes con ELA. Estos resultados sugieren la participación del canal de calcio voltaje dependiente de tipo L en el proceso que llevaría a la muerte neuronal inducida por las inmunoglobulinas de ELA.

Abstract:
Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is the most common human motor neuron disease. Affected individuals show progressive dysfunction and degeneration of brain, brainstem and spinal cord motor neurons, clinically manifested as progressive muscular weakness, paralysis and death within a mean of 3 years. There is no cure available for this disease and its pathophysiology remains unclear. Clinical and experimental evidence support an autoimmune etiopathogenesis for ALS. Previous studies in our laboratory have shown that local application of immunoglobulin G (IgG) of ALS patients onto nerve terminals induces dysfunction in neuromuscular transmission. In animal studies, it has been established that endogenous IgG and other circulating serum proteins can be taken up by motor nerve terminals. They can be detected by immunocitochemistry in the motoneurons somas where they accumulate following retrograde axonal transport. We investigated the presence of human ALS and control IgG in the soma of mice motoneurons. IgG was applied onto motor nerve terminals by injections on the levator auris longus muscle which is innervated by a branch of the facial nerve. The seric IgG fraction of 7 ALS patients, 6 control subjects and 3 patients with other neurological diseases was injected subcutaenously, twice a day for 5 days, on the surface of the left Levator auris longus muscle of adult mice (50 μl of 20 mg/ml IgG in PBS per application). Sections of the brainstem containing the facial nuclei were immunoprocessed to detect human IgG. For all lgG tested, motoneuron labeling was significantly more intense in the facial nucleus ipsilateral to the site of injection. In ALS-IgG-treated animals, ipsilateral labeling was significantly stronger than that found on the ipsilateral side of control IgG-treated animals. Our results are compatible with the concept that motoneurons preferentially take up, transport and/or accumulate ALS-IgG. Uptake of pathogenic antibodies by motoneuron terminals may play a role in the pathogenesis of motoneuron disease. At both the mature mouse and human neuromuscular junction, synaptic transmission is mediated by Ca² entry through voltage-sensitive calcium channels (VSCCs) of the P/Q-type family. Other calcium channels, like the L- and N-type, are not involved in neurotransmitter release. However. in regenerating nerves, signal conduction and synaptic transmission become highly sensitive to Nitrendipine, a dihydropyridine antagonist of L-type calcium channel, suggesting that this type of calcium channel mediate transmitter release. Therefore, to further define the possible role of ALS IgG in the induction of NMJ dysfunction, it was our interest to study if the participation of other types of VSCCs in transmitter release can be induced by passively transferring these antibodies, as it was found in regenerating NMJ. In order to search for early changes induced by the application of human IgG onto the motor nerve terminals, IgG from ALS patients and control subjects was injected on the mice Levator auris muscle. The seric IgG fraction of 8 ALS patients and 6 control subjects (3 healthy subjects and 3 with other neurological diseases) was injected subcutaenously, twice a day for 5 days, on the surface of the left Levator auris longus muscle of adult mice (50 μl of 20 mg/ml IgG in PBS per application). A week or a month after the last injection, mice were anesthetized and the muscle removed in Normal Ringer solution. The muscle was mounted in a recording chamber and the nerve was stimulated by a suction electrode. The end plate potentials were recorded from at least 15 different muscle fibers before and after the incubation with l μM Nitrendipine or polipeptidic toxins. The mean quantal content of the evoked response was evaluated by the coefficient of variation method. No changes in quantal content of transmitter release were observed. In control and ALS IgG treated muscles, neurotransmitter release remained sensitive to P/Q-type and insensitive to N-type VSCC blockers as in untreated muscles. In contrast, IgG from 5 of 8 different ALS patients induced a significant reduction in the quantal content of the evoked response afler the incubation with Nitrendipine, indicating that a novel sensitivity to this calcium channel blocker appears in these motor nerve terminals. These results suggest the involvement of L-type VSCC in the process leading to neuronal death induced by ALS IgG.

Ferrari, Valeria Paola. "Transporte en anillos mesoscópicos con un punto cuántico : del régimen de bloqueo de Coulomb al efecto Kondo" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El sistema estudiado en esta Tesis consiste en un punto cuántico insertado en un anillo mesoscópico que se encuentra atravesado por un flujo magnético. Nuestro objetivo es presentar una descripción completa para este dispositivo y predecir la física de un posible experimento con estas características. Para estudiar este sistema, hemos propuesto un modelo que tiene en cuenta las condiciones experimentales en que se trabaja usualmente en la física de los puntos cuánticos y los sistemas mesoscópicos. En él hemos incluído correlaciones entre electrones, debido a que en los puntos cuánticos éstas son importantes. Para resolver el modelo, hemos desarrollado una metodología que nos permite encontrar las funciones de Green del sistema mediante aproximaciones adecuadas. Este sistema presenta corrientes persistentes como función de un potencial de puerta aplicado en el punto cuántico. Hemos calculado dichas corrientes así como también la carga en el punto. Se ha estudiado la influencia tanto de las interacciones entre electrones como de la hibridización del anillo con el punto. Hemos encontrado varios regímenes de comportamiento que describen diferentes fenómenos físicos involucrados. Estos regímenes abarcan desde el fenómeno de Bloqueo de Coulomb (en el límite de interacciones fuertes) a un régimen prácticamente no interactuante. Entre ambos límites, hemos encontrado un régimen en el cual se manifiesta el efecto Kondo. En el régimen en el que el Bloqueo de Coulomb y el efecto Kondo coexisten, la corriente escalea con la longitud del anillo (L) como 1/L^{1/2} en contraposición al escaleo usual en un anillo mesoscópico perfecto que es 1/L

Abstract:
The system studied in this Thesis consists of a quantum dot inserted in a mesoscopic ring threaded by a magnetic flux. Our aim is to present a complete description for this device and to predict the physics of a potential experiment with these features. In order to study this system, we have proposed a model that takes into account the experimental conditions that are usual in experiments with quantum dots and mesoscopic systems. In the model we have included the electron-electron interaction because it is relevant in quantum dots. To solve it, we develop a methodology to find the Green'’s functions of the system by means of proper approximations. This system presents persistent currents as a function of a gate potential applied to the quantum dot. We have calculated the persistent currents and the charge inside the dot. We have studied the influence of both the interaction between electrons and the hybridization of the ring with the quantum dot. We have found several regimes that describe different physical phenomena involved in the system. These regimes range from the phenomenon of Coulomb Blockade (in the high correlation limit) to a quasi non-interacting regime. Between these two limits we have found an intermediate regime where the Kondo effect shows up. In the regime where both the Coulomb Blockade and Kondo effect coexist, the current scales with the length of the ring (L) as 1/L^{1/2} in contrast to the normal scaling of an ideal mesoscopic ring that is 1/L.

Fernández Iriarte, Pedro José. "Bases genéticas de la adaptación de Drosophila buzzatii al uso de los recursos" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo de Tesis se analizaron las bases genéticas de la adaptación de Drosophila buzzatii al uso de los recursos, asociadas con la variación en los caracteres de historias de vida, intentándose profundizar en el conocimiento de los procesos adaptativos que afectan la distribución de la variabilidad en las poblaciones naturales. Se ha demostrado que el polimorfismo de inversión del cromosoma 2 de D. buzzatii afecta a la viabilidad(VI), el tiempo de desarrollo (TD) y el largo del tórax (LT).Además,los efectos de las inversiones sobre el TD y la VT no son independientes del tipo de cactus usado como sustrato larval. Estos efectos de interacción genotipo x ambiente podrían proporcionar las bases para la especialización y partición del recurso. Por otra parte, los efectos entre el TD y el LT sugieren la existencia de compromisos (trade-off) en la aptitud. En poblaciones naturales se observó que la diferenciación microespacial de las frecuencias de inversión entre los sitios de cria individuales (rots), es mayor que la observada a una escala temporal. El nivel principal de diferenciación es el rot individual y una parte de la divergencia en las frecuencias cromosómicas podría deberse al efecto fundador producido por la colonización de un bajo número de individuos. Las inversiones cromosómicas no presentaron un patrón de atracción diferencial entre plantas hospedadoras diferentes (Opuntia quimilo y Trichocereus terschekii).La ordenación 2J mostró en ambos hospedadores efectos direccionales positivos en longevidad balanceados por efectos negativos en viabilidad pupal, mientras que la ordenación 2ST mostró efectos opuestos. Además, los cariotipos mostraron un leve efecto diferencial sobre la viabilidad pupal y un exceso de lieterocigotas significativo en la mayoria de los rots de ambos hospedadores. Este resultado podria ser explicado por aptitud diferencial entre cariotipos. Las comparaciones de las frecuencias de diferentes loci isoenzimáticos mostraron principalmente para el locus Est-2 efectos de atracción y viabilidad diferencial entre hospedadores lo que podría sugerir para su mantenimiento la existencia de selección de hábitat dependiente de la heterogeneidad de los recursos. Estos resultados mostraron, además, que la selección que opera sobre las ordenacione cromosómicas no puede explicar los patrones de variación en las frecuencias alélicas de los loci isoenzimáticos.

Abstract:
The genetic basis of adaptation of Drosophila buzzatti associated with life history variation is analized in this Thesis by study the adaptive processes in relation to the use of different resources affecting the distribution of variability in natural population. This work shows that D. buzzatii second chromosome polymorphic inversions affect viability(VI), developmental time (DT) and thorax lenght (TL). In addition, the effects of inversions on life history traits are not independent of the cactus rearing media. genotype x environment interactions for fitness components would provide the opportunity for resource specialization and resource partitioning. Moreover the effects on DT and TL suggest that a trade-offs between early and late fitness components may be invoked to explain the maintenance of the polymorphism. In natural populations temporal variation of inversion frequencies is lower than variation among individual breeding sites (rots), suggesting that the latter is more important in determining the distributions of inversion frequencies. The breeding structure of D. buzzatii populations is strongly affected by the discrete and ephemeral substrates that are colonized by a small number of mating pairs each generation. Chromosomal inversions do not affect attraction to O. quimilo and T. Terschekii rotting pads. Fitness component analysis showed that arrangement 2J increases longevity effects and decreases pupal viability while 2ST has opposite effects. However, there is a significant within-rot excess of inversion heterokaryotypes for the second chromosome and a slight effect of differential viability in both resources. These results can be explained by differential fitness among karyotype. Analysis of allozyme genotypes variation in a natural population showed differential effects of attraction and viability among alleles of locus list-2 in two types of resources, suggesting the existence of habitat selection. These results suggest that the selection operating on the inversion polymorphism cannot be account for the selective differences affecting allozyme loci.

Fernández, Facundo Martín. "Sistemas de análisis en flujo contínuo acoplados a analizadores discreto para la especiación en línea de Cadmio y Plomo" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En el presente trabajo se describe un método de análisis que consiste en el acople entre un sistema de preconcentración en flujo y un Espectrómetro de Absorción Atómica con Atomización Electrotérmica. El sistema se emplea en el análisis y especiación de metales tóxicos (Cd y Pb) en muestras de agua de mar. Los resultados obtenidos se analizan , enfatizando especialmente las figuras de mérito: límite de detección, frecuencia de análisis, repetitividad y sensibilidad. Se realiza además, una evaluación crítica de la performance del sistema de preconcentración (eficiencia, factor de amplificación etc.) utilizando para la separación distintas resinas quelantes (Chelex-100 y 8-hidroxiquinolina inmovilizada sobre sílica). Se estudian las variables que afectan la retención de las distintas especies de los iones metálicos en los materiales antes mencionados y se modela el proceso de partición. Las resinas se comparan también en función de su morfología la que se determina mediante técnicas cromatográficas de exclusión. El sistema de preconcentración se aplica al análisis de materiales de referencia certificados (CASS-3) y a muestras de agua de mar patagónica (Comodoro Rivadavia). Los resultados se comparan con las concentraciones intracelulares de metales en algas que habitan la zona y se establece una relación entre la bioacumulación de los mismos y su especiación en el ambiente marino. Se comparan, además, distintos materiales para la retención de complejos orgánicos de los metales tóxicos los que se incorporan a micro-sistemas de análisis automático. Se realiza la valoración de las distintas fracciones mediante extracción secuencial líquido-sólido de cada una de ellas.

Abstract:
The coupling between an Electrothermal Atomization-Atomic Absorption Spectrometer and a Flow Injection manifold is presented. This system is used for the preconcentration and determination of Cd and Pb in sea water samples. The performance of the method in terms of Detection Limits, Sampling Frequency, Sensitivity and Repeatability are fully discussed. Figures of merit for the preconcentration process such as Preconcentration Efficiency and Enhancement factors are evaluated for different preconcentration materials (Chelex-100 and silica immobilized 8-hydroxiquinoline). The influence of different variables of the flow manifold on the retention of different metal species is also investigated. The hyphenated technique was employed for Cd and Pb determination in certified reference materials (CASS-3) and South Atlantic sea-water samples. The metal contents in sea water at different sites is compared to those in algal tissues. A correlation was established between the bioaccumulation process and the metal speciation in sea water. Different sorbents for the isolation of metal-organic complexes were compared for their use in the Flow Injection-preconcentration manifold. A new micro-analytical automatic method is proposed for the sequential solid-liquid extraction of the different fractions of toxic metals.

Espinosa, Joaquín Maximiliano. "Estudio de proteínas de unión a ácidos nucleicos en el parásito Trypanosoma cruzi : identificación y caracterización de una proteína con múltiples dominios dedos de zinc" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Dokmetzian, Diana Ana. "Estudios quimiotaxonómicos en especies del género Ascobolus (Ascobolaceae-Pezizales)" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo del presente trabajo fue la delimitación de doce especies del género Ascobolus a partir de los caracteres morfológicos y de cultivo, los cruzamientos interespecíficos, el crecimiento vegetativo en cultivo y los patrones electroforéticos de isoenzimas intracelulares. Para ello se utilizaron 47 cepas monospóricas y 22 siembras mixtas de cepas sexualmente compatibles. En los cruzamientos interespecíficos de A. immersus x A. bistisii, los oídios colocados sobre el micelio base no gerrninaron y tampoco indujeron la formación de ascogonios. Los cruzamientos entre las demás especies formaron primordios incipientes pero no fértiles. Los resultados sugieren la existencia de una sustancia hormonal responsable en la formación de los apotecios muy similar en estas especies y por tal razón A. fiufuraceus está más relacionada a A. gamundii que a las otras especies. Los resultados obtenidos al estudiar el crecimiento vegetativo en cultivo en medio líquido muestran variación entre las especies, que difieren entre sí en la extensión de las fases de la curva. Considerando la duración de la fase de crecimiento exponencial, se reconocen tres grupos. La fase estacionaria, de variada longitud, frecuentemente es muy corta, entrando rápidamente en la fase de muerte, acompañada por la autólisis del micelio. Se examinaron los caracteres micro y macromorfológicos y se aplicaron técnicas numéricas. En el análisis isoenzimático se utilizaron los patrones de bandas de seis sistemas isoenzimáticos: AAT, EST, ACP, GDH, IDH y SOD. Los fenogramas obtenidos a partir del análisis de agrupamientos (UPGMA) mostraron dos gmpos principales de especies correspondientes a dos secciones del género: secc. Ascobolus y secc. Dasyobolus, con algunas diferencias dentro de cada sección. Aunque existe homogeneidad intraespecífica ya que no se observaron grandes diferencias en los estados de los caracteres entre las cepas monospóricas y siembras mixtas, se encontró variación para EST en A. gamundii y para ACP en A. ferrugineus. Los resultados de este trabajo permitieron establecer que las doce especies estudiadas constituyen unidades taxonómicas independientes.

Abstract:
The aim of this work was the delimitation of twelve species of the genus Ascobolus on the base of the analysis of morphological and cultural characters, the vegetative growth in liquid culture media and electrophoretic patterns of intracellular enzymes. Forty seven monosporic strains and twenty two mixed cultures of compatible strains of the genus were used. In A. immersus x A. bístisii interfertility crossing, when oidia were placed on a block of agar lying on a base mycelium, germination failed and there was no induction of ascogonium formation. Crossing between other species, formed incipient primordia, but none of them were fertile. These results suggest that hormonal substances responsible for apothecial formation are very similar in some of these species being, A. furfuraceus more closely related to A. gamundii than to other species. Vegetative growth of the different species showed variation in the duration of the different phases of the growth cycle. Three groups can be recognised considering the extension of the exponential phase of growth. The stationary phase, which differs in its length, is frequently very short, entering quickly in the phase of death, accompanied by the autolysis of the mycelium. Morphological characters were examined and numerical techniques were used. Six intracellular isozyme systems were analyzed: AAT, EST, ACP, GDH, IDH and SOD. The phenograms obtained from the analysis of grouping (UPGMA) showed two groups of species, corresponding to the two sections of the genus: sec. Ascobolus and sec. Dasyobolus with some differences within of each section. Though a high intraespecific homogeneity was observed since there were not differences in the status of the characters among monosporic strains and mixed cultures some variation was observed in EST patterns of A. gamundii and ACP patterns of A.ferrugineus. The results of this research let establish that the twelve species studied are independent taxonomical entities.

Do Campo, Margarita Diana. "Mineralogía, geoquímica y geocronología de la Formación Puncoviscana (Neoproterozoico) entre los 23°30’ y 25°50’ de Latitud Sur, Noroeste de Argentina" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La Formación Puncoviscana tiene un amplio desarrollo en el NO de Argentina, principalmente en el ámbito de la Cordillera Oriental y en menor medida en el borde oriental de la Puna; constituyendo el basamento del área. Está compuesta por secuencias clásticas de origen turbidítico, con intercalaciones de rocas volcánicas, calizas y conglomerados. Esta unidad se halla intruída por numerosos plutones y es cubierta en forma discordante por secuencias arenosas de plataforma de edad cámbrica (Grupo Mesón). Sobre la base de la información obtenida en esta Tesis el metamorfismo que afecta a la Formación Puncoviscana es, de acuerdo a los índices de cristalinidad (IC) de la mica blanca, de grado anquizona a epizona. Las características, tanto texturales como composicionales, evidenciadas por los filosilicatos en el estudio con microscopio de electrones de barrido (SEM) y microscopio de electrones de transmisión (TEM) indican un grado metamórfico equivalente. Para las secuencias que afloran en el borde oriental de la Puna, la presencia de biotita prograda indica un grado metamórfico mayor, correspondiente a la facies de esquistos verdes. Para el evento metamórfico, se estiman temperaturas entre 350 y 450 °C, sobre la base de los índices de cristalinidad y las evidencias de puesta a cero del sistema isotópico K-Ar a nivel roca total, en las metapelitas. Las presiones durante dicho evento habrían oscilado entre 5 y 7 Kbar, de acuerdo a los valores de bo registrados para las micas blancas y por la, aplicación del geobarómetro de la fengita. La petrografia, mineralogía e IC indican que las rocas metasedimentarias de muy bajo a bajo grado aflorantes en los cinturones Lules-Puncoviscana y Choromoro integran la misma Formación. El grado de fengitización evidenciado por las micas dioctaédricas de ambas zonas indica que las presiones pueden haber sido algo menores, del orden de 5 Kbar, en el cinturón Lules-Puncoviscana que en el cinturón Choromoro. La esmectita y la corrensita identificadas en numerosas muestras por difracción de rayos-X, SEM y TEM son productos de retrogradación que no reflejan el grado metamórfico alcanzado por las mismas. La anomalía de cerio, así como los altos contenidos de lantano, encontrados en rocas de la Formación Puncoviscana, se explica por la presencia de monacita; la cual habria sido concentrada por procesos de reciclado sedimentario. También son indicativas de reciclado sedimentario las altas relaciones Th/U (> 3,8) que presentan la mayoría de pelitas analizadas; así como los altos contenidos de SiO2 que presentan, tanto las metapelitas como muchas de las metaarenitas. El diagrama de discriminación de Roser y Korsch (1986) indica un ambiente de depositación de margen continental activo para esta secuencia. Los resultados de los análisis isotópicos K-Ar sugieren una edad de 620 ± 25 Ma (Neoproterozoico III) para el evento metamórfico principal que afectó a la Formación Puncoviscana. Los resultados isotópicos obtenidos en este estudio constituyen otro argumento en favor de que tanto las rocas metasedimentarias aflorantes en el cinturón Lules-Puncoviscana como en el cinturón Choromoro forman parte de la misma unidad. Sobre la base los resultados isotópicos y de la proporción de micas politipo 2M/1Md presentes en dos muestras se estima una edad de 670 ± 27 Ma para la diagénesis de las rocas que componen la Formación Puncoviscana. Las ‘edades’ K-Ar menores que 540 Ma indican reaperturas del sistema isotópico producidas por eventos téctono-térmicos ocurridos con posterioridad al episodio principal de deformación que afectó al basamento en el área de estudio.

Abstract:
The Puncoviscana Formation, which constitutes the basement of the area, has a wide development in NW Argentina; mainly in Cordillera Oriental and in lesser extent in the eastern border of Puna. It is composed by a pelite-greywacke turbidite sequence, with subordinate sandstones and locally interbedded conglomerates, limestones and volcanic rocks. This unit is unconformably covered by sandy sequences of Cambrian age (Mesón Group). The metamorphism that affects the Puncoviscana Formation is according to the illite Cristalinity Index (IC) results, medium anchizone to epizone grade. For the outcrops of the eastern border of Puna the presence of prograde biotite in several samples allows to specify that greenschists facies conditions were reached in that region. The textural and compositional characteristics, evidenced by phylosilicates in the study with Scanning Electron Microscopy (SEM) and Transmission Electron Microscopy (TEM) also correspond to a metamorphism of medium anchizone to epizone grade. For the metamorphic event, temperatures between 350 and 450 °C were estimated according to the illite Cristallinity Index and evidences of resetting of the isotopic K-Ar system at whole rock level, in some metapelites. The pressures during this event would have oscillated between 5 and 7 Kbar, according to the b0 parameter of white micas and the application of the phengite geobarometer. The petrography, mineralogy and IC of the metasedimentary rocks of very low to low grade metamorphism outcropping in Lules-Puncoviscana and Choromoro Belts indicates that they belong to the same unit: Puncoviscana Formation. The degree of phengitization evidenced by dioctahedral micas of both areas indicates that pressures would have been something lower in Lules-Puncoviscana than in Choromoro Belt, in the order of 5 Kbar. Smectite and corrensite identified in many samples by X-ray diffraction, SEM and TEM are the results of retrograde reactions that do not reflect the metamorphic degree reached by these rocks. The Cerio anomaly and the high Lantano contents, found in rocks of this unit, is explained by the presence of monacite; which would have been concentrated by sedimentary recycling. Other evidences of sedimentary recycling are the high Th/U ratios (> 3,8) that present most of analyzed metapelites and the high SiO2 contents that present, the metapelites and many sandstones. The discrimination diagram of Roser and Korsch (1986) indicates an active continental margin as the tectonic setting of deposition for this sequence. The geochronological results suggest an age of 620 ± 25 Ma for the main metamorphic event that affected the Puncoviscana Formation. Besides, an age of 670 ± 27 Ma is estimated for the diagenesis of this unit, based on the proportion of 2M/1Md mica polytypes present in two samples. Neoproterozoic ages were recorded for localities belonging to Lules-Puncoviscana and Choromoro Belts: Sierra de Guachipas, Cuesta de Muñano, Punnamarca and Quebrada de El Toro. These ages obtained in representative samples of faraway localities imply that this age corresponds to a geologic event that acted on the whole Puncoviscana Formation. The main deformation and metamorphism of the Puncoviscana through would be connected with the aggregation of Western Gondwana occurred at ca 600 Ma, with the orogeny closing the old, long lived Pan-African-Brasiliano tectonic cycle. The K-Ar dates lower than 540 Ma indicate reopening of the isotopic system produced by tectono-thermal events taken place after the main deformation of the Puncoviscana Formation.

Di Pasquo Lartigue, María de las Mercedes. "Palinología, bioestratigrafía y correlación de las asociaciones presentes en los grupos Machareti y Mandiyuti, neopaleozoico de la Cuenca Tarija, Provincia de Salta, Argentina" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La Cuenca Tarija se reconoce desde la latitud de Orán, en la provincia de Salta (Argentina), y se prolonga hacia el norte en el territorio boliviano, en la denominada Faja Subandina, hasta alcanzar la latitud de Santa Cruz. Las sedimentitas neopaleozoicas de los Grupos Macharetí y Mandiyuti afloran principalmente en las Sierras Subandinas, encontrándose también, en el este de la Cordillera Oriental y en el subsuelo de la Llanura Chaqueña. El Grupo Macharetí está compuesto por las Formaciones Tupambi, Itacuamí y Tarija, el cual se asienta sobre un basamento devónico en relación de discordancia y subyace al Grupo Mandiyutí, en el cual se reúnen las Formaciones Escarpment y San Telmo. El objetivo principal de esta Tesis consiste en el estudio sistemático de los palinomorfos hallados en 84 muestras fértiles de las citadas unidades litoestratigráficas, provenientes de 6 secciones que afloran en las siguientes localidades, de oeste a este: Sierra de las Pavas (perfil de Balapuca), Sierra de San Antonio (perfil en el anticlinal San Pedro), Sierra Aguaragüe (perfiles del arroyo Tuyunti, quebrada Iquira, río Yacuy, río Caraparí) y del subsuelo de la Llanura Chacosalteña (Pozos Tonono x-l y Fortín Alegre x-l). El análisis palinológico permite reconocer principalmente dos conjuntos de palinomorfos de acuerdo con su probable antigüedad, uno autóctono conformado por granos de polen, esporas y restos de algas, y otro compuesto de especies redepositadas de esporas, acritarcas, prasinofitas y muy escasos quitinozoarios. La determinación de 170 especies autóctonas se realiza utilizando la clasificación parataxonómica clásica y se basa en la comparación del material hallado con la información palinológica conocida de cuencas neopaleozoicas de América del Sur, Gondwana y otras regiones del mundo. Se discuten también, algunos aspectos relacionados con la taxonomía y morfotaxonomia de los granos de polen monosacado, cuya asignación específica se resume en dos láminas con esquemas interpretativos. Entre las especies autóctonas se describen 2 taxa nuevos, Apiculiretusispora ottonei y Cystoptychus azcuyi, mientras que otras 16 especies se mantienen sin asignación específica. Además, se proponen una nueva combinación y una enmienda. Se ilustran todas las especies autóctonas en las cuales se destacan sus principales rasgos diagnósticos. Como resultado del reconocimiento de la extensión estratigráfica de las especies autóctonas halladas en las unidades correspondientes a los Grupos Macharetí y Mandiyuti presentes en las regiones del norte de Argentina y sur de Bolivia, se definen cinco Palinozonas de Intervalo (tipo lª. Aparición), las cuales, en orden de mayor a menor antigüedad, son denominadas formalmente: Palinozona (l) Cystoptychus azcuyi — Apiculiretusispora ottonei, Palinozona (2) Raistrickia radiosa — Apiculatasporites spinulistratus, Palinozona (3) Dictyotriletes bireticulatus — Cristatisporites chacoparanensis, Palinozona (4) Cyclogranisporites microgranulatus — Reticulatisporites reticulatus, Palinozona (5) Marsupipollenites triradiatus Lundbladispora braziliensis. Las cinco palinozonas conforman la Superzona Kraeuselisporites volkheimerii — Circumplicatipollis plicatus, restringida al Carbonífero Tardío en la Cuenca Tarija. Las tres primeras palinozonas son atribuidas al Carbonífero Tardío temprano a medio y las otras dos, al Carbonífero Tardío tardío, esencialmente sobre la base del rango bioestratigráfico de especies clave. La antigüedad de cada palinozona se sustenta también, en su posición estratigráfica y en la estimación de un rango temporal basado en la litología, espesor y tasa de sedimentación promedio. La composición palinológica de las biozonas definidas en la Cuenca Tarija es comparada con otras palinozonas presentes en cuencas neopaleozoicas de América del Sur, principalmente de Argentina y Brasil y de otras regiones del resto del mundo como Australia, Europa Occidental, China, India, Africa, Antártida, de manera que se establece su correlación con aquellas palinozonas más afines basada en especies comunes clave. Entre estas últimas presentan estrechas similitudes con las Palinozonas Ancistrospora, Potonieisporites (Azcuy y Jelin, 1980) y Potonieisporites-Lundblmlíspora (Archangelsky y Gamerro, 1979) definidas en cuencas del Carbonífero Tardío de Argentina. De Io arriba expuesto surge que el Gmpo Macharetí es atribuido al Carbonífero Superior inferior a medio, mientras que el Grupo Mandiyutí inicia su depositación al final del Carbonífero Superior medio y llega hasta el límite con el Pérmico. Los resultados palinológicos obtenidos apoyan la interpretación de una depositación continua de los Grupos Macharetí y Mandiyutí, con posibles discontinuidades paralelas entre las unidades formacionales que los componen, de origen exclusivamente sedimentológico la cuales no involucran hiatos significativos. Con respecto al conjunto de especies redepositadas, se proponen algunos criterios para su distinción del conjunto de especies autóctonas y se ilustran la mayoría de las 150 especies reconocidas, de las cuales 63 corresponden a esporas, 36 son prasinofitas y otras algas, 51 son acritarcas y una especie de quitinozoario. Cabe destacar que, en la mayoria de las muestras estudiadas, el redepósito de palinomorfos es de 30% a 70 %. Tres asociaciones son establecidas informalmente sobre la base de sus registros previos en cuencas principalmente del Devónico s.l y también del Carbonífero Temprano del mundo. La más antigua comprende a la mayoría de las especies paleomicroplanctónicas y esporas de géneros como Geminospora, Grandispora, Emphanisporites, Verrucosisporites, atribuida al Devónico s.l; otra se restringe a especies características del Devónico Tardío como Retispora lepydophyta y Umbellasphaeridium saharicum, mientras que la más joven, corresponde a especies continentales registradas en secuencias del Carbonífero Inferior, como Tumulispora rarituberculata (Luber) Potonié, Verrucosisporites nitidus (Naumova) Playford, Convolutispora circumvallata Clayton, Knoxisporites heredatus (Ishchenko) Playford. El análisis y consideración de las especies redepositadas en los Grupos Macharetí y Mandiyutí, permite confirmar la redepositación de material del Devónico s.l. y del Carbonífero Temprano temprano en depósitos del Carbonífero Superior de la Cuenca Tarija. Estas evidencias palinológicas permiten asegurar que en la parte argentina de la cuenca se depositaron capas equivalentes en antigüedad a las Formaciones Iquirí y Saipurú (=Itacua). En la Argentina, estos estratos no han sido reconocidos ni en superficie ni en subsuelo, por haber sido expuestos a la erosión (principalmente glacial) debido a los movimientos de la fase Chánica. En la parte boliviana de la Cuenca Tarija está documentada palinológicamente una fase inicial al final del Fameniano y una fase final probablemente en el tope del Tournaisiano. En la región argentina de la cuenca, debido principalmente a los efectos de la erosión, no hay elementos de juicio que permitan asegurar la existencia de la segunda pero si de la primera. El estudio palinológico de más de un centenar de especies de miosporas autóctonas halladas en muestras del perfil del rio Caraparí, ubicadas en la transición entre las Formaciones Escarpment y San Telmo (Grupo Mandiyutí), y el reconocimiento de su afinidad botánica, condujo a la definición de cinco comunidades paleofloristicas cada una con requerimientos hidrofiticos diferentes: Paleocomunidad A (licofitas y esfenofitas), Paleocomunidad B (filicofitas), Paleocomunidad C (granos de polen monosacados dominantes), Paleocomunidad D (granos de polen poliplicados) y Paleocomunidad E (Botryococcus y otras probables algas). Sobre la base de datos palinológicos, tafonómicos y sedimentológicos se interpreta que las condiciones de depositación para la sección estudiada correspondiente a la transición entre las Formaciones Escarpment y San Telmo en el perfil del río Caraparí, fueron continentales y habrían evolucionado a partir de un depocentro lacustre en condiciones húmedas. Dos momentos o estadios pueden ser reconocidos en el depocentro: durante el primero, correspondiente a las muestras inferiores, éste habria recibido un caudal casi permanente de sedimentos con cortos periodos en que la descarga era más catastrófica; la ausencia de niveles carbonosos confirma el carácter lacustre permenente del depocentro el cual habría estado siempre en conexión con rios que ayudaron a mantener un nivel hídrico suficiente para impedir el desarrollo de pantanos. El segundo, correspondiente a la muestra superior, parece sugerir una estabilización del nivel de base del sistema fluvial con alternancia de periodos de moderada y escasa sedimentación clástica y la posible colmatación del sistema lacustre. Un reemplazo de las condiciones húmedas por otras semiáridas y más oxidantes es deducido del reemplazo de la Paleocomunidad A de requerimientos hidro-higrófilos por la Paleocomunidad D de características meso-xerófilas. Finalmente, esta evolución paleoclimática transicional observada en esta parte de la Cuenca Tarija para el limite Carbonífero — Pérmico es correlacionable con el mismo cambio transicional en otras cuencas argentinas para ese tiempo.

Abstract:
The Tarija Basin is recognized from the latitude of Orán, in the Salta province (Argentine), and it is prolonged toward the north in the Bolivian territory, in the one denominated Subandinas range, until reaching the latitude of Santa Cruz. The Macharetí and Mandiyutí Groups appear mainly in the Subandinas range, being also, in the east of the Eastern Mountain range and in the subsurface of the Chaco Salteña plain. The Macharetí Group is composed of the Tupambi, Itacuamí and Tarija Formations, which settles on a devonian basement in relationship of unconformity and it underlies to the Mandiyutí Group, in which two Formations, Escarpment and San Telmo meet. The main objective of this Thesis consists on the systematic study of the palynomorphs found in 84 fertile samples of the mentioned lithostratigraphical units. The latter are analysed from 6 sections that appear in the following locations, from west to east: Sierra de las Pavas (profile of Balapuca), Sierra de San Antonio (profile in the San Pedro anticline), Sierra Aguaragüe (profiles of the Tuyunti stream, Iquira creek, Yacuy and Caraparí rivers) and from the subsurface of the Chaco Salteña plain (wells Tonono x-1 and Fortín Alegre x-l). The palynological analysis allows to recognize mainly two groups considering its probable age, one autochthonous conformed by pollen grains, spores and remains of algae, and other made up of spores, acritarchs, prasynophytes and very scarce chitinozoans of reworked origin. The determination of 170 autochthonous species is carried out using the current parataxonomical classification and it is based on the comparison of the material found with the well-known palynological data from the Upper Palaeozoic basins of South America, Gondwana and other regions of the world. It is also discussed, some aspects related with the taxonomy and morphotaxonomy of the monosaccate pollen grains whose specific assignment is summarised in two plates with interpretive outlines. Among the autochthonous species 2 new taxa, Apiculiretusispora ottonei and Cystoptychus azcuyi are described, while other 16 species have been left in open nomenclature. Also, a new combination and an amendment are proposed. All the autochthonous species are illustrated in which stand out the most diagnostic features. Five Interval Palynozones (1st. Appearance type), based on the recognition of the stratigraphic range of the autochthonous species recorded in the units corresponding to the Macharetí and Mandiyutí Groups, that are present in the regions of northern Argentine and southern Bolivia, are defined. They are named formally, in a younger order: Cystoptychus azcuyi-Apiculiretusispora ottonei (l) Palynozone, Raistrickia radiosa-Apiculatasporites spinulistratus (2) Palynozone, Dictyotriletes bireticulatus-Cristatisporites chacoparanensis (3) Palynozone, Cyclogranisporites microgranulatus-Reticulatisporites reticulatus (4) Palynozone and Marsupipollenites triradiatus-Lumlbladispora braziliensis (5) Palynozone. The five palynozones conforms the Kraeuselisporites volkheimerii— Circumplicatipollis plicatus Palynozone restricted to the Late Carboniferous in the Tarija Basin. The first three palynozones are attributed to the early to middle Late Carboniferous and the other two, to the late Late Carboniferous, essentially on the base of the biostratigraphical range of key species. The age of each palynozone is also suggested by its stratigraphical position and by the estimate of spanning time range based on the lithology, thickness and an average of a sedimentation rate. The palynological composition of the palynozones defined in the Tarija Basin is compared with other palynozones found in Upper Palaeozoic basins of South America, mainly of Argentina and Brazil, and from other regions of the rest of the world like Australia, Western Europe, China, India, Africa, Antarctic, so that it is established a correlation with those palynozones that shared more key species. Among these last ones, they present narrow similarities with the Ancistrospora, Potonieisporites (Azcuy and Jelín, 1980) and Potonieisporites-Lundbladispora (Archangelsky and Gamerro, 1979) Palynozones defined in Late Carboniferous Basins of Argentina. Of the above, it arises that the Macharetí Group is attributed to the lower to middle Upper Carboniferous, while the Mandiyutí Group begins at the end of the middle Upper Carboniferous and it reaches the Permian boundary. The palynological results support the interpretation of a continuous deposit of the Macharetí and Mandiyutí Groups, with possible parallel discontinuities among the units that compose them, of only sedimentary origin, which do not involve significant hiatuses. With regard to the reworked assemblage, it is established some approaches for their distinction of the autochthonous species and they are illustrated most of the 150 species recognized, of which 63 correspond to spores, 36 are prasynophyceans and other algae, 51 are acritarchs and one is a chitinozoan. It is necessary to highlight that, in most of the studied samples, the reworked palynomorphs are from 30% to 70%. Three assemblages are established informally on the base of their previous records in basins mainly of the Devonian and also of the Early Carboniferous of the world. The oldest one is composed mainly of paleomicroplanktonic species and spores of several genera like Geminospora, Grandispora, Emphanisporites and Verrucosisporites, attributed to the Devonian. The other is restricted to characteristic species from the Late Devonian as Retispora lepydophyta and Umbellasphaeridium saharicum. While, the youngest corresponds to continental species registered in Lower Carboniferous sequences, such as Tumulispora rarituberculata (Luber) Potonié, Verrucosisporites nitidus (Naumova) Playford, Convalutispora circumvallata Clayton, Knoxisporites heredatus (Ishchenko) Playford. Palynological data obtained from Argentinean region of Tarija Basin, point out that the reworked material in beds of the Upper Carboniferous, includes not only Middle-Upper Devonian (=Givetian-Famennian) elements, but also from Uppermost Devonian (=Strunian) and Lower Carboniferous (=Tournaisian). These evidences enable to assure, at least in the localities of this basin where it has been carried out palynological studies, that the devonian sedimentation reached the limit with the Carboniferous and also occurred in the Lower Carboniferous (=Tournaisian). The analysis and discussion of some palynological and geological evidences which belong to Uppermost Devonian - Lower Carboniferous sections from Tarija Basin (Argentine and Bolivia), allow to reinterpret the chronological location of the movements of the Chanic phase: an initial one at the end of the Strunian, and a final one, at the end of the Tournaisian. The Saipurú, Retama and Cumaná Formations are relocated over the unconforrnity originated by the first movement (initial) of the Chanic phase and are attributed only to the Lower Carboniferous. In the Argentinean region of the Tarija Basin, the lack of deposits of this age only allows to recognize the initial movement of the Chanic phase. The palynological study of more than a hundred of species of autochthonous miospores found in samples of the outcrop of the Caraparí river, that are located in the transition between the Escarpment and San Telmo Formation (Mandiyutí Group), and the recognition of its botanical affinities, led to the definition of five palynofloral communities each one with different hydrophilous requirements. They have been defined as A Paleocommunity (lycophytes-sphenophytes), B Paleocommunity (filicophytes), C Paleocommunity (mainly monosaccate pollen grains), D Paleocommunity (poliplicate pollen grains) and E Paleocommunity (Botryocaccus and other probable algae). A continental condition is interpreted based on palynological, taphonomical and sedimentological analysis from the studied section. A trend of evolution for the depocentre starting with a lacustrine system under humid conditions that ends with a dryer alluvial plain, has been established. This paleoclimatic change is suggested as of the appearance of the Paleocommunity D with Equisetosporites in the sample M445 of the middle section. It is also observed a change in the sediment colour from grey in the lower and middle section to red in the upper palynological barren section. Finally, this transitional paleoclimatic evolution observed in this area of Tarija Basin for the Carboniferous / Permian boundary is correlated with the same transitional change in other Argentinean basins for this period.

Di Nardo, Christián Esteban. "Síntesis de productos naturales, fragmentos y análogos a partir de D-Glucoheptonolactona" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Las aldonolactonas son moldes quirales versátiles para la sintesis de una variedad de productos naturales. En este trabajo, se estudió la selectividad de reacciones efectuadas sobre el sistema carbonílico α,β-insaturado presente en derivados de la D-glicero-D-gulo-heptono-1,4-lactona (1). Los compuestos resultantes, enantioméricamente puros, se utilizaron en la síntesis de moléculas biológicamente activas, como cadenas de 1,3-polioles, ambos enantiómeros del ácido cis-4-hidroxipipecólico y análogos de ácidos 2-ceto-3-desoxialdónicos. Los derivados diinsaturados de 1 (4-ilidén-2-butenólidos) poseen un centro quiral en C-6, que controla la selectividad en la hidrogenación de los dobles enlaces. Las 3,5-didesoxiheptonolactonas resultantes presentaban una relación cis para los sustituyentes de C-2 y C-4 del anillo lactónico, obteniéndose únicamente los isómeros D-xilo y D-arabino, en proporciones que dependían del catalizador utilizado en la hidrogenación. Ambos diastereoisómeros fueron intermediarios clave en la síntesis de meso- y D-arabino-3,5-didesoxiheptitoles, estructuras presentes en antibióticos macrólidos poliénicos. Las 3,5-didesoxilactonas se usaron también como precursores quirales de los ácidos (2S,4R)- y (2R,4S)-4-hidroxipipecólicos. El primero se aisló de plantas y es un constituyente del palinavir, un poderoso inhibidor de La proteasa del HIV. Finalmente, se estudió la adición electrofílica de bromo al doble enlace de un derivado monoinsaturado de 1. La reacción fue altamente diastereoselectiva y se obtuvo un solo isómero, aunque se generaban dos centros quirales. El producto dihalogenado está estructuralmente relacionado con los ácidos 2-ceto-3-desoxialdónicos. Se realizó también la bromación de la enonolactona derivada de D-glucono-1,5-lactona.Se obtuvo un único diastereoisómero, cuya estereoquímica se confirmó por cristalografía de rayos X. A partir de la α,β-dibromolactona se sintetizaron análogos 3-bromados del ácido 2-ceto-3-desoxi-D-glucónico (KDG, un metabolito de bacterias) y se prepararon derivados marcados isotópicamente.

Abstract:
Aldonolactones are versatile chiral templates for the synthesis of non carbohydrate natural products. In this work, the selectivity of reactions performed on the α.β-unsaturated carbonyl system in unsaturated derivatives of D-glycero-D-gulo- heptono-1,4-lactone (1) were studied. The resulting enantiomerically pure compounds were employed in the synthesis of different biologically active molecules, such as 1,3-polyol chains, both enantiomers of cis-4-hydroxypipecolic acid and 2-keto-3-deoxyaldonic acid analogs. Diunsaturated derivatives of 1 (4-yliden-2-butenolides) possess a chiral center at C-6, which controls the selectivity in the hydrogenation of the double bonds. The resulting 3,5-dideoxyheptonolactones bear a cis relationship for the substituents of the lactone ring at C-2 and C-4. Therefore, the D-xylo and D-arabino isomers were obtained, in proportions which depended on the catalyst employed in the hydrogenation. Both diastereoisomers were the chiral key intermediates in the synthesis of the meso- and D-arabino-3,5-dideoxyheptitols, structures present in the polyol chain of polyene macrolide antibiotics. The diastereoisomeric 3,5-dideoxylactones were also used as chiral precursors of (2S,4R)- and (2R,4S)-4-hydroxypipecolic acids. The former was isolated from plants and it is a constituent of palinavir, a powerful inhibitor of the HIV protease. Finally, we studied the electrophilic addition of bromine to the double bond of a monounsaturated derivative of 1. The reaction was highly diastereoselective and a single isomer was obtained, although two chiral centers were generated. The dihalogenated product is structurally related to the 2-keto-3-deoxyaldonic acids. The bromination was also applied to the enonolactone derived from D-glucono- 1,5-lactone. The stereochemistry of the single diastereoisomer obtained was determined by X-ray crystallography. The α,β-dibromo lactone was readin converted into 3-bromo analogs of 2-keto-3-deoxy-D-gluconic acid (KDG, a metabolite from bacteriae), and isotopically labeled derivatives were prepared.

De Matos, Daniel Gustavo. "Producción de embriones de bovinos in vitro : Estimulación de la síntesis de glutation durante la maduración in vitro de ocitos y su efecto sobre el desarrollo de los embriones" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Durante la maduración in vivo de oocitos existe una activa síntesis de glutation (GSH) y cumple un rol importante en la fecundación y en el desarrollo embrionario, mediante su mecanismo de oxidación y reducción. En los sistemas de producción de embriones in vitro (PIV) la síntesis de GSH se encuentra disminuida. Por ello, el objetivo de la presente tesis fue estimular su síntesis durante la maduración in vitro (MIV) de oocitos bovinos y evaluar su efecto en el desarrollo de los embriones. Para esto se puso a punto la técnica de PIV. Los resultados demostraron que: l) Durante la MIV de bovinos existe síntesis de GSH. 2) Dicha síntesis se puede incrementar con el agregado de cisteamina, β-mercaptoetanol, cistina o cisteína al medio de MIV. 3) Esto generó incrementos del orden del 70% al 100 % en los porcentajes de desarrollo hasta blastocistos. 4) Se aumentó la velocidad de desarrollo encontrándose más blastocistos al dia 6; siendo estos los mejores embriones para congelar. 5) Los niveles intracelulares de GSH generados durante la MIV, se mantienen durante la fecundación y recién desaparecen luego de los primeros estadios de desarrollo. 6) El desarrollo de los embriones es altamente dependiente de los niveles intracelulares de GSH alcanzados durante la MIV. 7) La cisteamina y la cisteína demostraron ser capaces de estimular la síntesis de glutation aún en oocitos que carecen de células del cumulus. En conclusión, la estimulación de la síntesis de glutation durante la maduración in vitro de oocitos bovinos incrementó tanto la tasa como la velocidad de desarrollo, obteniéndose más blastocistos al día 6 de cultivo in vitro siendo estos los más aptos para el congelamiento. Más aún, la cisteína o la cisteamina estimularon la síntesis de GSH en oocitos sin cumulus y en ausencia de un co-cultivo de células del cumulus. Esto es útil ya que aumenta la eficiencia de la técnica de PIV cuando se tienen oocitos con muy pocas células del cumulus y se trabaja sin co-cultivo.

Abstract:
There is an active synthesis of glutathione (GSH) during in vivo maturation and plays an important rol during fertilisation and embryo development due to its redox cycle. However, this synthesis is impaired during in vitro embryo production (IVP). Due to this, the objective of the present thesis was to evaluate the effect of stimulating GSH synthesis during bovine in vitro maturation (IVM) on embryo development. To do this, first of all we made the setup of the IVP technique. The experimental results demonstrate that: l) Glutathione synthesis exists during IVM. 2) The addition of cysteamine, β-mercaptoethanol, cystine or cysteine to the IVM medium stimulates GSH synthesis. 3) An increase on embryo development (70-100%) was observed when GSH synthesis was stimulated during IVM. 4) Due to this stimulation, more embryos appeared at day 6 and these embryos were the best for cryopreservation. 5) The intracellular GSH levels obtained after stimulation its synthesis during IVM, continue after fertilisation and disappeared during the first stages of embryo development. 6) Embryo development depends on the intracellular oocyte GSH levels after IVM. 7) Moreover, cysteamine and cysteine can stimulate GSH synthesis in oocytes without cumulus cells. In conclusion, GSH synthesis stimulation during bovine oocyte IVM increases the rate of embryo development and more embryos developed faster and reached the blastocyst stage at day 6 of cultured being these the most suitable for freezing. Moreover, these results demonstrate that cysteine or cysteamine stimulate GSH synthesis in oocytes without cumulus mass and in the absence of a cumulus cell monolayer. This may be useful to increase the efficacy of IVM of those oocytes having few cumulus cell layers, in a system without co-culture.

Delprat, María Alejandra. "Estudio de reordenamientos polimórficos e inducidos en los cromosomas politénicos de la mosca del Mediterráneo: Ceratitis capitata" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La mosca del Mediterráneo, Ceratitis capitata, es una de las plagas más perjudiciales, pero como modelo experimental es aún poco conocido. Para erradicarla se aplica la Técnica del Insecto Estéril empleando líneas de sexado genético. Uno de los problemas de estas líneas es la pérdida del ligamiento entre el gen separador y el cromosoma Y, debido a eventos de recombinacíón. El siguiente trabajo se propuso aportar información a través de los cromosomas politénicos para implementar mejoras en la estabilidad de las líneas autosexantes Muestras de distintas poblaciones naturales de Argentina fueron estudiadas en busca de reordenamientos espontáneos que pudieran introducirse en las líneas autosexantes como supresores de la recombinacíón. Se localizó la posición del locus sw empleado como gen separador en las líneas obtenidas en nuestro laboratorio y se estudiaron además 17 nuevas líneas de sexado genético para caracterizar el tipo de reordenamiento producido por la radiación y seleccionar así aquellas con menores probabilidades de recombinacíón. Por último, se realizaron ensayos de Hibridación in situ, ajustando una técnica directa de sondas fluorescentes, tanto para cromosomas politénicos de glándulas salivares como para cromosomas mitóticos. Este trabajo en conjunto, aporta información novedosa que permitirá implementar mejoras en las líneas de sexado genético.

Abstract:
Although the Mediterranean fruit fly (Ceratitis capitata) is an important pest of many crops around the world, some aspects of its biology are still unknown. Currently, the Sterile Insect Technique is used to control or eradicate this pest. Genetic Sexing strains are being reared to release only males. One of the problems of such strains are recombination that end in the separation of the male—determining Y chromosome and the sexing gene. The aim of this study was to analyse aspects of the cytology of this species to implement improvements in the stability of these sexing strains. Samples from different localities of Argentina were analysed in order to detect spontaneous rearrangements that could suppress recombination. The sexing gene sw, isolated in this laboratory, was localised by means of polytenic chromosomes analyses. Moreover, 17 new strains were analysed to select those with lower recombination probabilities. Finally the In Situ Hybridisation direct technique was used to analyse both polytenic and mitotic chromosomes. To sum up this work provides novel information that will improve the genetic sexing strains and hence the eradication of such important pest.

Delorenzi, Alejandro. "Modulación de la memoria y osmorregulación en chasmagnathus : relación funcional y papel del sistema angiotensinérgico" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Díaz Añel, Alberto Marcelo. "Caracterización de una ARN Helicasa de Trypanosoma cruzi clonada por el método de Differential Display" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Una de las últimas técnicas aplicadas en biología molecular para detectar diferentes niveles de transcripción en distintos estadios de un mismo tipo celular es el Differential Display. Este ensayo se basa en la técnica de RT-PCR, utilizando un oligo dT “anclado” que se une al nacimiento del pon A+ de los ARN mensajeros, y un oligonucleótido corto de secuencia al azar que, en diferentes combinaciones, van a amplificar un set de bandas característico para cada par de oligos elegidos. Estas reacciones se corren en un gel de poliacrilamida desnaturalizante y se observan por autorradiografía. De esta forma se comparan ambos estadios celulares y se recuperan del gel aquellas bandas que muestren una amplificación diferencial como producto de distintos niveles de ARN mensajeros. Utilizando el Differential Display en los estadios no infectivo (epimastigotes) e infectivo (trypomastigotes metacíclicos) del parásito Trypanosomacruzi, causante de la enfermedad de Chagas, se purificaron varias bandas de expresión diferencial. Una de ellas aplicada como sonda en un Northern-blot demostró tener una transcripción entre 8 y 9 veces mayor en trypomastigotes metacíclicos. A partir de una biblioteca genómica realizada en el bacteriófago A Fix, se aisló un clon positivo para esta banda que, una vez secuenciado y comparado en bancos de datos, dió una homología de hasta el 46 % a nivel de aminoácidos con diferentes ARN helicasas. Estas proteínas pertenecen a la familia de las proteinas DEAD Box y participan en el relajamiento de estructuras de ARN doble cadena. Por lo tanto son importantes en procesos como transcripción, traducción, ensamblado de ribosomas, splicing y editing.Además se ha descripto su participación en diferenciación y desarrollo celular, por lo cual se abre un campo muy importante con en el estudio de la participación de estas proteinas en los procesos de metaciclogénesis e infectividad del Trypanosoma cruzi. Por otro lado se demostró por Southern-blot que, a diferencia de la mayoría de los genes conocidos de Trypanosoma cruzi, el gen de esta ARN helicasa es de única copia en el genoma. Ensayos de Cromo-blot con ia región que codifica al carboxilo terminal de la proteína mostraron que este gen se encuentra representado en por lo menos nueve cepas del parásito. Por último, se demostró que esta ARN helicasa posee una especificidad enzimática con dirección 3’-5’ sobre transcriptos realizados in-vitro, con una aparente independencia de ATP o GTP, como ocurre con algunos miembros de esta familia El descubrimiento de este gen de transcripción diferencial entre ambos estadios de la metaciclogénesis de T. cruzi y la caracterización parcial de su función enzimática, son el principio para estudiar su participación en la diferenciación y/o infectividad de este parásito y nos permitirá conocer un poco más de este proceso del cual se sabe tan poco y que es parte del comienzo de la enfermedad de Chagas en los huéspedes vertebrados, entre ellos el hombre.

Abstract:
One of the last techniques applied in molecular biology to detect different transcription levels in different stages of one cellular type is the Differential Display. This assay is based on the technique of RT-PCR, using an oligo dT “anchored” that anneals to the birth of the messenger RNAs poly A, and a short oligonucleotide of at random sequence that, in different combinations, they will amplify a characteristic set of bands for each couple of selected oligos. These reactions are run on a dennaturing polyacrylamide gel and they are observed by autoradiography. This way both cellular stages are compared and we can recover of the gel those bands that show a differential amplification as product of different levels of messenger RNAs. Using the Differential Display in the stages non infective (epimastigotes) and infective (metaciclic trypomastigotes) of the parasite Trypanosoma cruzi, causing of the Chagas’ illness, we purified several bands of differential expression. One of them applied as probe in a Northern-blot demonstrated to have a transcription level between 8 and 9 times higher in metaciclic trypomastigotes. Starting from a genomic library carried out in A Fix bacteriophage, a positive clone was isolated for this band that, once sequenced and compared in databases, showed an homology of until 46% at level of aminoacids with different RNA helicases. These proteins belong to the family of the DEAD Box proteins and they participate in the relaxing of RNA double chain structures. Therefore they are important in processes like transcription, translation, ribosome assembling, splicing and editing. Also it has been described their participation in diferentiation and cellular development, reason why a very important field opens up with in the study of the participation of these proteins in the metaciclogénesis processes and infectivity of Trypanosoma cruzi. On the other hand it was demonstrated by Southern-blot that, contrary to most of the well-known genes of Trypanosoma cruzi, the gene of this RNA helicase is single copy in the genome. Assays of Chromo-blot with the region that codes to the carboxy terminal of the protein, showed that this gene is represented in at least nine strains of the parasite. Lastly, it was demonstrated that this RNA helicase possesses an enzymatic specificity with 3’-5' direction with transcripts carried out in-vitro, with an apparent independence of ATP or GTP, like it happens with some members of this family. The discovery of this gene of differential transcription between both stages of the T. cruzi metacyclogenesis, and the partial characterization of their enzymatic function, is the principle to study their participation in the diferentiation and/or infectivity of this parasite, and it will allow to us to know a little more about this process of which is known so little and that it is part of the beginning of the Chagas’ illness in the vertebrate guests, among them the man.

Dans, Silvana L.. "Ecología poblacional del delfin oscuro Lagenorhynchus obscurus (Gray, 1828) en el Litoral Patagónico, Atlántico SudOccidental" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo general de esta Tesis comprende el estudio de la biología y ecología de la población de delfines oscuros. Lagenorhynchus obscurus, en Patagonia, Argentina, y particularmente la obtención de los parámetros necesarios para evaluar el estado y tendencia de la población y los efectos dela captura incidentalen pesquerias. Con el objetivo de analizar el rango de distribución de la especie en el litoral patagónico, se recopiló información a partir de: observadores entrenados a bordo de buques pesqueros y oceanográficos o ejemplares capturados accidentalmente en redes de pesca; observadores entrenados durante relevamientos aéreos; capitanes, patrones y marineros de buques pesqueros durante actividades de pesca; observadores menos entrenados y registros previos disponibles en la literatura. Los delfines oscuros se distribuyen desde Porto Alegre, Brasil (30°S), hasta Bahía Nassau (55°26'S 67°18'W), cerca de Cabo de Hornos, y desde la linea de costa hasta las 200mn (límite de la Zona de Exclusión Económica). El tamaño medio de las manadas avistadas en los relevamientos aéreos fue de 3,85 delfines/grupo, y aproximadamente el 95% de las manadas estuvieron formadas por menos de 10 individuos. Los pescadores por el contrario avistaron una mayor proporción de manadas formadas por 20-50 delfines y de más de 50 delfines. Se estudió la abundancia de los delfines oscuros entre los paralelos 40°44' y 47°S, estimando la densidad mediante transectas de línea desde una aeronave, analizando los datos con el programa DISTANCE2.2. La densidad fue estimada en 1.259 delfines/mn2 para el área comprendida entre Punta Ninfas e Isla Rasa (43° a 45°S), y en 0,219 delfines/mn2 en el Golfo San Jorge, y la diferencia fue estadisticamente significativa. El número de individuos y sus coeficientes de variación para los dos estratos fueron 4.570 (CV=32,88%) y 2.058 (CV=31,84%), respectivamente, con una estimación para las dos áreas agrupadas de 6.628 individuos (CV=25.54%). La distribución espacial de los avistajes sugiere la concentración de los animales en determinadas zonas. Se analizaron datos de edad, talla y estado reproductivo de 50 ejemplares de delfines oscuros, provenientes de la captura incidental o hallados muertos en las playas. La edad máxima registrada fue de 27 años en un individuode sexo desconocido. Las longitudes máximas registradas fueron 174 y 173cm en las hembras y en los machos respectivamente. La longitud asintótica en las hembras fue estimada en 167cm. A partir del análisis de gónadas, la edad de madurez sexual en las hembras fue estimada alrededor de los 6 años. La tasa de ovulación fue constante respecto de la edad, y estimada en 0.40 ovulaciones/año. El 45% de las hembras eran maduras, del cual el 44% estaban preñadas. Estos resultados sugieren un ciclo de cria bianual. Con el objetivo de caracterizar a la población de delfines oscuros del litoral patagónico, se analizó la estructura de la comunidad de parásitos gastrointestinales, a partir de una muestra de 23 delfines capturados incidentalmente en la pesquería de arrastre de Patagonia. Todos los delfines estaban infectados con un total de 3.936 individuos. Solamente cinco especies estuvieron presentes, de las cuales tres fueron clasificadas como componentes (Prevalencia ≥ 10%): Anisakis simplex, Braunina cordifonnis y Hadwenius sp. A. símplex presentó una prevalencia de 100%, y mostró las máximas abundancia e intensidad media (104,87 ind./hosp. infectado). B. cordiformis presentó una alta prevalencia de 86,96%. mientras que Hadwenius sp. se presentó con una prevalencia de 52.17%. El indice de diversidad de Brillouinpara la comunidad de helmintos intestinales fue 0,329 nit/individuo, con una equitatividad de 0,393. La diversidad y riqueza de las infracomunidades intestinales están dentro del rango de las de otros pequeños cetáceos. Las más altas tasas de captura incidental de delfines oscuros en la costa de Patagonia, han sido registradas en artes de arrastre pelágico para la pesca de langostino. El uso de este arte comenzó en 1982. Durante 1984, el esfuerzo de pesca ejercido alcanzó su valor máximo y el número de delfines capturados durante ese año fue estimado en 442-560 individuos, disminuyendo paulatinamente luego de este período. El uso de las redes pelágicas fue registrado hasta 1994, cuando las estimaciones de capturas anuales alcanzan un valor minimo igual a 36 delfines. La composición de edades de la muestra de la captura incidental presentó una mayor proporción de hembras que de machos, y la edad media de las hembras fue de 6 años y con poca dispersión. Esta muestra no sería representativa de la estructura de edades de la población, existiendo posiblemente mortalidad selectiva hacia los individuos cercanos a la madurez sexual. La estmctura de edades a la muerte, obtenida de individuosmuertos hallados en las playas, sugiere un patrón de mortalidad edad-especifica constante con la edad. Como último objetivo, se analizó la capacidad potencial de la población de revertir una posible declinación. La Comisión Ballenera Internacional recomienda establecer valores críticos en función de la tasa máxima de incremento poblacional expresada como R=λ-1,donde λ es la tasa finita o anual de incremento. La obtención de este parámetro se basó en la utilizaciónde tablas de vida modelo de otras especies de grandes mamíferos. Se utilizó una simulación de Monte Carlo para incorporar la incertidumbre en los parámetros (edad de primera reproducción, patrón de supervivencia, tamaño poblacional, capturas incidentales). La tasa de incremento se calculó a partir de un modelo basado en la matriz de Leslie, considerando solamente la fracción hembra de la población. Para la fertilidad se asumió una tasa anual de preñez constante can la edad correspondiente a un ciclo de cría de 2 o de 3 años y una relación de sexos al nacer de 1:1. Se consideró la edad de primera reproducción a los 7 años. En el caso de la supervivencia edad-específica, del espacio definido por el conjunto de curvas de supervivencia modelo se seleccionaron al azar curvas para el delfín oscuro. Mediante esta aproximación, se obtuvo una distribución de probabilidades de la tasa anual o finita de incremento. Los valores medianos fueron estimados en 1,79% para un ciclo de cria de 3 años y en 4,30% para un ciclo de cria de 2 años. Los valores obtenidos de tasa potencial de incremento poblacional se compararon con las tasas de captura, teniendo en cuenta las estimaciones de densidad para 1994-1995 y las capturas anuales mínimas y máximas estimadas para el período 1982-1995. Considerando como valor crítico a 1/2R, la tasa máxima de extracción se encontrarla en el orden del 2% del tamaño poblacional, y según el criterio 1/4R seria del 1% del tamaño poblacional, en las mejores condiciones reproductivas y el escenario más optimista de un ciclo de cria de 2 años. La incorporación de la incertidumbre tanto de los parámetros demográficos como de las tasas de captura, permite concluir que existe una probabilidad de 0,56 de que las capturas (estimadas para 1994), excedan el valor criticomás conservador, aún en las mejores condiciones reproductivas. Estos resultados, junto con el carácter dinámico de la pesqueria, la cual incluye un aumento en el esfuerzo de pesca con redes pelágicas, permiten sugerir que la especie presenta un carácter de vulnerable, requiriendo un seguimiento y evaluación continuos, y estimaciones precisas de tasas de captura.

Abstract:
The general objective of this work is the study of the biology and ecology of the dusky dolphin population off the coast of Patagonia, Argentina. In particular the objective included the estimation of parameters needed for the evaluation of the status and trend of the population and the effects of incidental catches in fisheries. Distribution of dusky dolphins off the coasts of Patagonia were reviewed by analysing information gathered by trained observers onboard vessels and aeroplanes, fishermen, entanglements in fishing gears and previous records in the literature. Dusky dolphins have been sighted from Porto Alegre, Brazil (30°S), to Bahía Nassau (55°26'S 67°18'W), near Cape Horn, and from the coast to the 200nmiles. The mean school size sighted from aerial surveys was of 3.42 dolphins/group and nearly 95% of herds (n=64) were equal to or less than 10 individuals. Fishermen sighted a larger proportion of schools ranging from 20 to 50 dolphins or more than 50 dolphins. The abundance of the species along the coasts of Patagonia was studied between 40°44'S and 47°. Line transect methods by means of aerial surveys, were applied to estimate the density of dolphins, and the data were analyzed using the program DISTANCE 2.2. Density was estimated in 1.259 dolphins/nm2 from Punta Ninfas to Isla Rasa (43° to 45°S), and 0.219 dolphins/nm2 for Golfo San Jorge, and they were significantly different. The total number of dolphins were 4,570 (CV=32.88%) and 2.058 (CV=31.84%), for the two areas respectively, with a pooled estimate of 6,628 (CV=25.54%). The spatial distribution of sightings suggests concentration of animals in some areas. A sample of 50 specimens found on the beaches or entangled in fishing gears were used to study age, length and reproductive status. The maximum age was 27 years old recorded in an individual of unknown sex. Maximum length were 174 and 173cm in females and males respectively. Asympthotic length of females was estimated in 167cm. By means of age determination and gonads analysis the age at sexual maturity was estimated close to six years old in the females. Mature females showed an ovulation rate of 0.40 ovulations/year, and 45% of the females were mature and 44% of them were pregnant. These results suggest a calving interval of 2 years. The structure of gastrointestinal helminth community was studied in order to improve the knowledge about population identity. The stomachs and intestines of 23 dusky dolphins were surveyed for helminths. All the dolphins were parasitized, with a total of 3.936 helminth individuals. Only five species occurred. of which three were common (Prevalence ≥ 10%): Anisakis simplex. Braunina cordifonnis and Hadwenius sp. A. simplex was present in all the dolphins and showed the highest abundance and mean intensity (104.9 individuals/infected host). B. cordiformis was next most common (87%). and Hadwenius sp. third (52.2%). Brillouin's diversity and evenness indices for the intestinal helminth community were 0.329 and 0.393. respectively. The diversity values and species richness were within the range for other small cetaceans. Highest rates of incidental catches of dusky dolphins off Patagonian coast, mostly occur in mid-water trawling for shrimp. At present, this fishing type is declining in use, but it was wider used during 80's. The use of this gear for shrimp began in 1982. During 1984, the fishing effort reached a peak and the number of dolphins caught was estimated in 442-560, decreasing during the following years. The use of mid-water nets for shrimp was recorded up to 1994. when mortality estimates by this gear reached a minimum value equal to 36 dolphins per year. The sample recovered from the fishery seems to be biased toward females and young mature classes, showing a mean age of 6 years in the females. This sample would not be representative of the age distribution in the population, suggesting selective mortality of young classes close to sexual maturity. The structure of the ages at death, collected from dead individuals found on the beaches, would suggest constant age-specific mortality pattern. Incidental mortality rates were evaluated by comparing them with critical values established by the International Whaling Commission by means of the potential rates of increase R=λ-1,where λ is the annual or finite rate of increase. This parameter was obtained by means of model life tables from other mammals with similar life histories. A Monte Carlo approach was used for taking into account the uncertainty in the parameters (age of first reproduction, survival rates, population size and incidental mortality rates). The rate of increase was computed by a Leslie matrix population model. Reproductive parameters of the projection matrix were obtained from the estimates of the calving interval and age at sexual maturity, considering two possible scenarios: a calving interval of 2 and 3 years. The space of model life tables was randomly sampled to obtain a survival pattern for the dusky dolphin. A probability distribution of the potential rate of increase was obtained. Median values were estimated in 1.79% if the calving interval is 3 years, and 4.30% if the calving interval is 2 years. Taking into account the criterion of 1/2R, maximum removal rate is 2% of the population size, and 1% for the other criterion 1/4R, if the calving interval is 2 years, representing the best scenario. Taking into account the uncertainty in parameters estimation, the probability that mortality rates estimated for 1994. which can be considered the current rates, exceeds the more conservative critical value were estimated in 0.56 in the best scenario of reproduction. These results suggest that incidental mortality in fisheries is a cause for concern in dusky dolphin population off Patagonia. The monitoring of this population and the improving of catch rate estimates are recommended, taking into account the dynamics of the fishery. which includes the possibility of an increase in the effort of mid-water gears and consequently a potential increase in dolphins mortality.

Cueto, Gerardo Rubén. "Biología reproductiva y crecimiento del carpincho (Hydrochoerus hydrochaeris) en cautiverio : Una interpretación de las estrategias poblacionales" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
A fin de aportar a la comprensión de las estrategias poblacionales del carpincho, se estudiaron diferentes aspectos de la biología reproductiva y del crecimiento de esta especie en cautiverio. Se describió por primera vez la existencia de una jerarquía lineal entre las hembras de los grupos reproductivos, la cual afecta tanto la posibilidad de acceder al alimento como de aparearse con el macho. Se calculó el periodo de gestación en 150 días. Antes de parir, las hembras debieron ser separadas del grupo reproductivo ya que las crias eran atacadas por el resto de las hembras. Las crías nacen muy desarrolladas con el pelaje completo y con los ojos abiertos y luego de media hora son capaces de caminar. Durante la primer semana las crías se alimentaron exclusivamente de leche materna y al finalizar este período comenzaron a incorporar alimentos sólidos a la dieta. A partir de la cuarta semana se alimentaron principalmente con alimentos sólidos y amamantaron con menor frecuencia. Las observaciones realizadas permiten proponer que, al contrario de lo que ocurre con la mayoría de los roedores, para las hembras de carpincho los costos asociados con la gestación serían superiores que los relacionados con el cuidado parental. Debido al avanzado desarrollo de las crias al nacer, el papel del cuidado parental apunta a garantizar la supervivencia de las crias evitando el ataque de predadores mediante los siguientes mecanismos: parir en lugares cubiertos, realizar la limpieza de todo rastro de sangre y heces en el sitio del parto y fijación de la hembra al sitio durante la primer semana con una disminución en la busqueda de alimento. El modelo que mejor describió el crecimiento en peso de esta especie fue el de von Bertalanffy. Se observó que los machos alcanzan un peso maximo mayor que el de las hembras y que la tasa de crecimiento de éstas disminuye a edades más tempranas. Estos resultados están asociados con el sistema de aparcamiento poligínico de esta especie. Se describió por primera vez la presencia de escorbuto en carpinchos y el efecto de la carencia de vitamina c en la dieta de los individuos sobre su sobrevida y reproducción. Se registró que cuando se les ofrece un alimento con un bajo contenido de vitamina c y en forma irregular la actividad reproductiva se detiene. Se detectó una concordancia con las predicciones derivadas de las hipótesis de Trivers y Willard (1973) sobre la manipulación de la proporción de sexos de las camadas en función de la condición materna. Se registró que las hembras en condiciones nutricionales pobres produjeron camadas de menor tamaño, las cuales presentan una mayor proporción de hembras. Las hembras en mejores condiciones presentaron camadas más numerosas y con una mayor proporción de machos, los cuales fueron significativamente más pesados que las hembras. Los resultados obtenidos a la luz del conocimiento de la especie me permiten sugerir que las estrategias reproductivas de las hembras de carpinchos son: l) Contar con un mecanismo de interrupción temprana de la preñez cuando las condiciones nutricionales son malas. 2) Contar con un sistema que permita reducir el número de machos gestados cuando las condiciones nutricionales son intermedias. En este punto adelantamos la hipótesis que la disponibilidad de vitamina c en la dieta actúa corno indicador de la calidad del ambiente.

Abstract:
Different aspects of reproductive biology and growth of capybaras in captivity were studied to understand population strategies of this species. A linear hierarchy among females of reproductive groups was registered, which affected the possibility of mating and acceding food. Gestation period was calculated as 150 days long. Females were separated from the reproductive groups before the birth because its offspring were attacked for the other females of the group. The offspring are born very well developed with open eyes and they are able to walk after half an hour to have been born. The offspring only fed maternal milk during the first week of life, and then they began to incorporate solid feed to their diet. From the forth week, pups principally ate solid feed and they nursed less frequently. The costs associated to gestation period in captivity would be higher than those related to the parental care, contrary to the observed in the majority of rodent species. According to the well development of the offspring, the role of parental care is to guarantee the survivorship of pups avoiding predation risks, as follows: l) to give birth in closed areas, 2) to clean blood tracks and feces in the birth site and 3) to settle the female in a place during the first week decreasing the food search. The growth of body mass of capybaras was best described by von Bertalanffy model. Males came up to the great maximum body mass than females and growth rates of females decreased at earlier ages than those of males. The results obtained are associated with the poligynium mating system of capybaras. The presence of scurvy in capybaras was described and the effect of the lack of vitamin c in the diet on survivorship and reproduction in this species. It was demonstrated that when the capybaras received food with low concentration of Vitamin c, reproduction activity stopped. It was detected a concordance with the derived predictions of Trivers and Willard (1973) hypotheses about the manipulation of sex proportion of litters related to the maternal condition. Females with a poor nutritional condition produced litters with less size, and those presented a great proportion of female pups. On the other hand, females with good conditions had litters more numerous and with great proportion of male pups, and those were significantly heavier than females. According to the results obtained, I can suggest two reproductive strategies for capybaras' females: l) to count with an early interruption mechanism of pregnancy when females have worse nutritional conditions or 2) to count with a system that reduces the numbers of male embryos when females are in intermediate nutritional conditions. At this point, I advance the hypothesis that Vitamin c availability in capybaras' diet acts as an indicator of environmental quality.

Creus, Silvina Florencia. "Caracterización de la hormona folículo-estimulante humana : Relación estructura-función" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La hormona folículo estimulante humana, producida y secretada por la hipófisis anterior, está estrechamente relacionada con la regulación y el mantenimiento de procesos reproductivos esenciales tales como el desarrollo y maduración de los folículos ováricos y la gametogénesis testicular. Esta hormona consiste en un heterodímero formado por dos subunidades, cada una de las cuales tiene unidas al polipéptidodos cadenas de oligosacáridos. Estas cadenas de carbohidratos, si bien comparten el mismo núcleo de azúcares formado por un pentasacárido en la porción interna de la cadena, difieren en la porción externa de la misma, variando en complejidad, grado de ramificación y en el contenido de residuos terminales de ácido siálico. Las variaciones en la estructura de la cadena carbohidratada, dan lugar a la aparición de una familia heterogénea de isoformas con diferentes propiedades fisicoquímicas y biológicas. Las isoformas presentan diferencias en: sus puntos isoeléctricos, la afinidad de unión a su receptor específico y la vida media en circulación. La abundancia relativa de cada una de estas isohormonas varía con el sexo y con las condiciones fisiológicas del donante. En los estudios realizados hasta el presente, el contenido de ácido siálico había sido considerado como el principal determinante de la heterogeneidad molecular de la hormona. EI propósito de esta Tesis fue analizar el polimorfismo de la FSH hipofisaria humana y la FSH circulante en diferentes condiciones fisiológicas: fase folicular de ciclos menstruales normales, postmenopausia y pubertad masculina. Este estudio fue especialmente diseñado para determinar los efectos producidos por el entorno hormonal sobre las características moleculares y biológicas de esta gonadotrofina. Las isoformas de FSH hipofisaria fueron aisladas, mediante cromatoenfoque, de acuerdo al contenido de ácido siálico, residuo terminal de las cadenas de oligosacáridos. Posteriormente se analizó la distribución de las diferentes isoformas de acuerdo a la estructura interna de sus cadenas de carbohidratos por cromatografía seriada en lectinas. Se relacionó la estructura interna de las cadenas carbohidratadas de las diferentes isoformas con su capacidad de inducir una respuesta biológica a nivel de la célula blanco. Esta respuesta biológica fue evaluada utilizando un bioensayo in vitro. Los resultados obtenidos demuestran que en la regulación de la biopotencia de la hormona participa no sólo el azúcar terminal, sino también el tipo de estructura de cadena carbohidratada interna al ácido siálico. Los estudios realizados en sueros obtenidos en distintas condiciones fisiológicas demuestran que el entorno hormonal modifica las características estructurales de la molécula, regulando así su biopotencia y su tiempo de permanencia en circulación. Se postula que cada una de las variantes moleculares de esta hormona sería responsable de la inducción diferencial de una determinada respuesta biológica.

Abstract:
FSH is produced and secreted by the anterior pituitary gland. It is closely involved in the regulation and maintenance of essential reproductive processes, as follicular development and testicular gametogenesis. This hormone is a heterodimeric protein composed of two different subunits; each subunit bears two oligosaccharide chains attached to its polypeptide backbone. Although the oligosaccharide moieties share the same pentasaccharide core, they differ in their external carbohydrate structure, which includes completion, degree of branching and sialic acid content. Variations in the structure of the oligosaccharide chains result in the existence of a family of isoforms with different physicochemical and biological properties. FSH isofonns differ in their isoelectric point, receptor binding activity and plasma half-life.Sex and physiological condition of the donor will determine me relative abundance of the different isoforms. Differences in sialic acid content of FSH isoforms have been considered the main determinant of hormone polymorphism since FSH heterogeneity was described. The aim of this Thesis was to analyse the polymorphism of FSH in human pituitaries as well as that of circulating FSH in different physiological conditions: the follicular phase of normal menstrual cycles, postmenopause and male puberty. This study was particulariy designed to determine the possible effects that changes in hormonal status may have upon the molecular and biological characteristics of this gonadotropin. Chromatofocusing was used to isolate pituitary FSH isoforms according to their silaic acid content. Serial lectin chromatography was used to determine the distribution of different FSH isoforms according to the inner structure of their carbohydrate chains. The relationship between the structure of the carbohydrate moiety of FSH isoforms and their capacity to produce a specific biological response on the target cell, was established. The biological response was determined using an in vitro bioassay. The results obtained in this study demonstrate that the biopotency of the hormone is not only regulated by sialic acid content of FSH isoforms but also by the inner structure of the carbohydrate chain. The characteristics of circulating FSH polymorphism determined in different physiological situations showed that changes in the hormonal status affect the proportion of circulating FSH isoforms bearing different structures in their carbohydrate chains, thus modulating the hormone biopotency and plasma half-life. It can be hypothesized that modifications in FSH heterogeneity express the need to obtain specific biological responses to different physiological situations.

Cramer, Paula. "Estudio de la relación entre transcripción y Splicing alternativo de mRNAs eucarióticos" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En el presente trabajo de tesis nos hemos propuesto buscar evidencias sobre la coordinación entre los procesos de transcripción y splicing alternativo. Nuestro modelo de estudio consistió en construir una batería de minigenes α-globina/ fibronectina que incluyen al exón EDI de la fibronectina capaz de sufrir splicing alternativo, clonados río abajo de diferentes promotores. Con estos minigenes se transfectaron líneas celulares en cultivo, analizándose luego el patrón de splicing alternativo por medio de las técnicas de Northern blot y/o RTPCR. Encontramos así que el tipo de promotor determina el patrón de splicing alternativo. Este efecto del promotor sobre el splicing alternativo no depende de la fuerza del promotor ni de la secuencia de la región 5' no codificante de los mRNAs, sino de la calidad de factores de transcripción reclutados en el promotor. Posteriormente intentamos dilucidar el mecanismo subyacente a este fenómeno. Para ello sobreexpresamos proteínas que participan del splicing general y/o alternativo en otros modelos. Encontramos que sólo las proteínas SF2/ASF, SRp40, SRp55 y SC-35 son capaces de modificar el patrón de inclusión de EDI, mientras que las proteínas SRp20, SRp30c y Tra2βno tienen efecto alguno. El efecto de SF2/ASF, la proteína con mayor actividad estimulatoria, es específico de promotor y opera a través de las secuencias regulatorias en cis presentes en EDI, tal como lo demuestran los experimentos con minigenes mutantes en estas regiones. Los resultados mencionados constituyen la primera evidencia de coordinación entre transcripción y splicing alternativo. A partir de los mismos proponemos un modelo de interacción entre el dominio carboxiterminal (CTD ) de la RNA polimerasa II y los factores de splicing, compatible con los resultados observados en nuestro laboratorio y en otros grupos de investigación.

Abstract:
In this work we searched for evidence of coupling between transcription and alternative splicing. Our model consisted in the construction of a series of alphaglobin/ fibronectin minigenes including the fibronectin alternative ED1 exon, cloned downstream of different promoters. Cell lines were transfected with the minigenes and the alternative splicing pattern was analyzed either by Northern blot and/or RT-PCR. We found that the type of promoter controls the pattern of alternative splicing. This effect is neither dependent on promoter strength nor on the 5' non-coding region of the mRNAs, but on the quality of the transcription factors recruited by the promoter. We then tried to elucidate the mechanism underlying this phenomenon. For this purpose, we overexpressed splicing factors involved in general and/or alternative splicing in other models. We found that SF2/ASF, SRp40, SRp55 y SC-35 were the only the splicing factors with ability to stimulate ED1 inclusion, whereas SRp20, SRp30c y Tra2β had no effect. The effect yielded by SF2/ASF, the protein with the highest stimulation activity, is promoter specific and is mediated by exon regulatory sequences, as revealed by experiments performed with mutants in these regions. The mentioned results comprise the first evidence of coupling between transcription and alternative splicing. Based on our results and evidences presented by other laboratories, we propose a model in which the carboxyterminal domain (CTD) of the RNA polymerase II interacts with the splicing factors.

Contin, Julia E.. "Inestabilidad de láminas de corriente con flujos de plasma y aplicaciones a la magnetopausa diurna" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se estudia la influencia de flujos de plasma sobre la estabilidad de láminas de corriente en el marco de la teoría magnetohidrodinámica. Se obtienen ecuaciones perturbativas generales para un modelo plano que incluye efectos de resistividad, viscosidad y densidad estratificadas en la configuración de orden cero, cizallas de la velocidad y del campo magnético, y la presencia de un campo gravitatorio. En las aplicaciones específicas de la teoría, se enfoca la atención sobre las inestabilidades de la magnetopausa terrestre diurna, y la propagación de las perturbaciones hacia los flancos, en condiciones de campo magnético inter-planetario orientado norte. Se analiza el desarrollo de inestabilidades Kelvin-Helmholtz, sin excluir la consideración de otros mecanismos de interacción, como por ejemplo cambios bruscos en la presión dinámica del viento solar. Se estudia la estabilidad de una estructura que representa la magnetopausa en condiciones estacionarias normales, sin compresión. También se analiza una configuración excepcional de flujo de plasma, con movimientos en contracorriente de capas de la magnetovaina y de la magnetosfera adyacentes a la magnetopausa, utilizando datos de observación de un cruce del ISEE 2 el 11/XI/79. Finalmente se presenta un estudio combinado de teoría, observaciones, e interpretación de las inestabilidades y ondas excitadas sobre una región del flanco ecuatorial cercano de la magnetopausa, durante el pasaje del final de la nube magnética del 11/1/97 a partir de datos satelitales de alta resolución (WIND e INTERBALL Tail) y de registros de magnetómetros terrestres.

Abstract:
The effect of plasma flows on the stability of current sheaths with the magnetohydrodinamíc theory is considered. General perturbation equations are derived for a plane model that includes effects of resistivity, viscosity and density stratification in the zero order configuration, velocity and magnetic shear and the presence of a gravitational field. Specific applications of the theory are focussed on the Earth dayside magnetopause instabilities and the propagation of perturbations towards the flanks, for northward interplanetary magnetic field. The development of Kelvin-Helmholtz instabilities are analyzed, without excluding other perturbative effects, such as sudden changes in the dynamical pressure of the solar wind. The stability of structure representing the magnetopause under normal Steady state conditions is studied. An unusual configuration of plasma flow, with a counter streaming flow in the magnetosheath and magnetosphere adjacent to the magnetopause is also analyzed using observational data of a crossing of ISEE 2 of XI/11/79. Finally a study combining theory, observational data, and interpretation of the instabilities and excited waves in a near equatorial flank of the magnetopause during the trailing edge of the 1/11/97 magnetic cloud, based on high resolution spacecraft data (WIND and INTERBALL Tail) and ground magnetograms, is presented.

Clemente, Marina. "Análisis de los polimorfismos para el largo de los fragmentos de restricción de ADN en Dichroplus elongatus y Eyprepocnemis plorans (Orthoptera) y su relación con la evolución de los cromosomas B" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los insectos ortópteros ofrecen excelentes oportunidades para estudiar diferentes aspectos de la genética de poblaciones, tales como la divergencia genética, flujo génico, introgresión, selección natural y adaptación. El estudio de la evolución paralela entre ADN genómico, ADN extracromosómico (ADN mitocondrial) y cromosomas supemumerarios o B permite evaluar la importancia relativa de las diferentes fuerzas evolutivas sobre la variabilidad genética y cromosómica. Entre los insectos, Dichroplus elongatus y Eyprepocnemis plorans constituyen excelentes modelos para este tipo de estudio ya que en poblaciones naturales de estas especies se detectaron polimorfismos para cromosomas B aparentemente estables. Sin embargo, los mecanismos de mantenimiento de estos cromosomas parece diferir entre estas especies. Mientras que en E. plorans el mantenimiento de los cromosomas B se apoya sobre las bases de un modelo cercano a la neutralidad, en D. elongarus los resultados previos sugieren un posible efecto selectivo. D. elongatus es un saltamontes fitófago que se distribuye ampliamente en la Argentina. Las poblaciones argentinas de esta especie se caracterizan por presentar polimorfismos paralelos para cromosomas B y segmentos supernumerarios en los pares S10 (SS10), S9 (SS9) y M6 (SS6). Estudios cromosómicos previos revelaron que algunas poblaciones naturales de la provincia de Tucumán presentan polimorfismos para cromosomas B que afectan la condición de quiasmas y comprometerían la fertilidad de los portadores. Asimismo, se detectó interacción entre las distintas formas de heterocromatina. Esta interacción podría afectar los patrones de distribución de los polimorfismos con respecto a lo esperado por el azar. Estudios isoenzimáticos y citogenétícos previos demostraron que los B y dos loci alozímicos estuvieron asociados a variables geográficas o climáticas. Estas observaciones han abierto nuevos interrogantes acerca de los mecanismos de mantenimiento de las diferentes formas de heterocromatina supemumeraria en D. elongatus y cual es la importancia relativa de las diferentes fuerzas evolutivas sobre la diferenciación genética en esta especie. Se analizó la variación genética de D. elongatus a nivel del ADN mitocondrial (ADNmt), con un enfoque filogeográfico. Mediante la técnica de RFLP (polimorfismos para la longitud de fragmentos de restricción) se estudiaron 171 individuos provenientes de poblaciones cromosómicamente polimórficas localizadas en las regiones Noroeste y Este de Argentina pertenecientes a las provincias biogeográficas: Las Yungas, Espinal y Pampeana. Las 10 enzimas de restricción utilizadas generaron 59 fragmentos de ADNmt. Se detectaron polimorfismos para los fragmentos producidos por HindIII, HaeII y HinfI. El número de substituciones por sitio entre pares de haplotipos varió entre 0.65 y 3.84%. El fenograrna obtenido por el método de Neigbor-Joining (empleando el número de sustituciones nucleotídicas por sitio) mostró dos grupos principales: uno agrupa a los haplotipos propios de la región Este y el otro agrupa a los haplotipos presentes en la región Noroeste. El árbol filogenético de consenso entre haplotipos mitocondriales permitió postular al haplotipo ancestral. Este ocupa el centro de la red y de él habrian derivado los dos grupos principales de haplotipos (Noroeste y Este). El dendrograma de la divergencia nucleotídica entre poblaciones mostró un agrupamiento de las poblaciones de acuerdo con su distribución geográfica. El grado de heterogeneidad del ADNmt entre las poblaciones de las regiones del Noroeste y Este fueron altamente significativo. Dentro de la región Este se observó homogeneidad entre las poblaciones pertenecientes a la provincia biogeográfica del Espinal, pero heterogeneidad entre las pertenecientes a la provincia biogeográfica Pampeana. Se observó también heterogeneidad significativa entre diferentes zonas de la provincia de Las Yungas (región Noroeste). Estos resultados sugieren que los patrones de distribución del ADNmt en D. elongatus podrian deberse: l) Aislamiento por distancia entre las provincias biogeográficas y 2) Factores ecológicos dentro de las mismas. Se estudió la variación en el ADNr en las mismas poblaciones analizadas a nivel del ADNmt de D. elongatus con el fin de comparar los patrones de distribución detectada a ambos niveles y evaluar las diferentes fuerzas evolutivas asociadas a la diferenciación genética detectada, incluyendo, en el caso del ADNr, la importancia relativa de la evolución concertada. Se analizaron a través de RFLP, 156 individuos de las 13 poblaciones. Se utilizó una sonda de 0.8kb del espaciador no transcripto (NTS) del saltamontes Calediu captiva. Se analizaron los patrones de restricción producidos por cinco enzimas (BamHI, EcoRI, PstI, HindIII y XbaI) detectándose un total de 21 fragmentos. Todos ellos, excepto los de BamHI, mostraron variación intra e interpoblacional. PstI reveló tres fragmentos cuya combinación originó cinco patrones ampliamente distribuidos. HindIII produjo 5 fragmentos, que originaron 10 patrones, algunos de los cuales son privados de Las Yungas. Las digestiones con XbaI produjeron 2 fragmentos, uno de ellos polimórfico. El mayor número de bandas y los tamaños más pequeños se produjeron al digerir el ADN con EcoRI donde se encontraron 9 bandas. Se analizó la variación intrapoblacional e interpoblacional a través de los indices de distancia: i) Lynch (1990), basado en la presencia y ausencia de bandas y ii) Hedrick (1983), empleando la intensidad de las bandas. Las poblaciones que presentaron mayor variabilidad intraindividual e intrapoblacional pertenecen a Las Yungas. Los árboles obtenidos por Neighbor-Joining a partir de los índices de Lynch y Hedrick son muy semejantes y evidencian dos grandes grupos. El primero de ellos reúne a la mayoría de las poblaciones de la provincia Pampeana, a las de la región sudeste de Las Yungas y una población del Espinal. El otro nuclea al resto de las poblaciones del Espinal y la población restante de la provincia Pampeana. Un rasgo interesante es la alta distancia genética entre las poblaciones de la región oeste de Las Yungas entre sí y con respecto al resto de las poblaciones. El alto nivel de variación intraindividual, intra e interpoblacional implicaría que los mecanismos de evolución concertada serian poco eficientes en esta especie. Los patrones de distribución del ADNr no se corresponden con los hallados para el ADNmt sugiriendo que la deriva y la migración no podrían explicar por sí solas la variabilidad detectada para el ADNr, similarmente a lo encontrado para la heterocromatina supemumeraria, sugiriendo la posibilidad de que existan factores adaptativos que podrían afectar la variación de la heterocromatina supemumeraria y del ADNr limitando los efectos de los factores estocásticos. E. plorans se distribuye a lo largo de la costa mediterránea en Europa. En el sur de España las poblaciones naturales presentan un complejo polimorfismo para cromosomas B. Se han identificado hasta cuarenta tipos de cromosomas B, los cuales no solamente se generan por recombinación sino también como consecuencia de una alta tasa de mutación. El número de tipos de B predominante en las poblaciones naturales de E. plorans es comparativamente bajo pero es marcado el hecho de que cada uno de ellos dominan en diferentes regiones a lo largo de la costa sur de España. Se propuso a B1 como el tipo original. A este cromosoma lo reemplazó B2 en la provincia de Granada y este de Málaga, mientras que B5 lo hizo en la zona central de Málaga dejando una isla de B1 entre ambas áreas. No hay razones obvias que expliquen la sustitución de un B por otro. Se propuso un modelo cíclico para la evolución de los cromosomas B de E. plorans que sostiene que coadaptación y evolución de genes supresores en el complemento A eliminaría el mecanismo de acumulación de los B. El sistema alcanzaría un estado cercano a la neutralidad hasta que una nueva variante recupere el mecanismo de acumulación y todo el proceso comenzaría nuevamente. Este modelo sugeriría que factores preexistentes en el genoma A podrían favorecer o no a un determinado tipo de B. Si esto es cierto, entonces debería existir alguna diferenciación genética en E. plorans entre las regiones donde predominan diferentes variantes de B. En este trabajo se analizaron los patrones de restricción del ADNmt de E. plorans como marcador para detectar diferenciación genética entre poblaciones que difieren en el tipo de cromosoma B. Se analizaron 197 individuos provenientes de 12 poblaciones que comprenden el área en estudio. La digestión del ADN mitocondrial de E. plorans con nueve enzimas de restricción reveló una baja variabilidad. Solamente EcoRI produjo tres patrones diferentes, denominados morfo I, II y III. En los demos del área central está presente el B1 y el morfo II del ADNmt. Al sudoeste del área central, los demos vecinos muestran una zona híbrida entre el B1 y el B5 y entre los morfos I y II. Sin embargo, el morfo I presenta una amplia distribución en el área de estudio y en algunos casos es predominante o es el único encontrado en las poblaciones donde existen otros tipos de Bs. Considerando al ADNmt como un marcador no relacionado con los Bs, deberían existir ciertas diferencias entre la distribución del ADNmt y las áreas definidas por los cromosomas B. Sin embargo, estos resultados sugieren que la evolución de los cromosomas B en E. plorans no sería independiente del genoma básico y que la sustitución de un B por otro podría estar acompañada en algunos demos por cambios en el complemento extracromosómico, en contraposición a lo que sucede en D. elongatus, donde la distribución de las variantes heterocromáticas no puede ser explicada a través de marcadores supuestamente neutros como el ADNmt.

Abstract:
The orthopteran insects offer excellent opportunities to study many aspects of the population genetics, such as genetic divergence, gene flow, introgression, natural selection and adaptation. The study of parallel evolution among nuclear DNA, extrachromosomic DNA (mitochondrial DNA) and B chromosomes allow evaluating the relative importance of the different evolutive forces on the genetic and chromosomal variability. Among insects, Dichroplus elongatus and Eyprepocnemis plorans are excellent models for these studies because stable polymorphisms for B chromosomes were detected in natural populations of these species. However, the maintenance of these chromosomes differs between these Species. While in E. plorans the maintenance of B chromosomes is explained by a “near neutral” model, in D. elongatus the previous results suggest a possible selective effect. D. elongatus is a phytophagous grasshopper widely distributed in Argentina. Some Argentinean populations exhibit parallel polymorphisms for B chromosome and supernumerary segments in chromosomes S10 (SS10), S9 (SS9) and M6 (SS6). In populations of Tucumán province, the polymorphisms for B chromosomes would affect the quiasma conditions and fertility of the carriers. Besides, an interaction among the different forms of supernumerary heterochromatin was detected. This interaction may affect the random distribution of these polymorphisms. Simultaneous isoenzymatic and citogenetic studies revealed that B’s and two loci are associated with climatic and geographic variables. These results have opened new questions about the mechanisms of maintenance of the different forms of supernumerary heterochromatin and the relative importance of the different evolutive forces on the genetic differentiation in this species. The genetic variation and phylogeography of D. elongatus was studied at the mitochondrial DNA (mtDNA) level. A total of 171 individuals from Northwest (Las Yungas biogeographic province) and East (Espinal and Pampeana biogeographic provinces) Argentinean populations were analyzed using restriction fragment length polymorphism (RFLP). With 10 restriction endonucleases, 59 mtDNA fragments were generated. Polymorphisms for HindIII, HaeIII and HinfI were found. The number of substitutions per site between pairs of haplotypes ranged from 0.65 to 3.84 per cent. The Neighbor-Joining phenogram (using the number of nucleotide substitutions per site) yielded two main groups; one clusters together the private haplotypes of the East region and the other the private haplotypes of the Northwest. Phylogenetic consensus unrooted tree among mtDNA haplotypes allowed us to propose the ancestral haplotype. This haplotype occupies the central position of the network. Three groups of haplotypes would have derived from the ancestral one. The UPGMA dendrogram from nucleotide divergence among populations showed that populations are roughly grouped according to their geographic distribution. There was a significant heterogeneity of the mtDNA distribution when populations from the East and Northwest regions were compared. In the East region, homogeneity was observed among populations from “Espinal” province, but significant differences were detected within “Pampeana” province. Heterogeneity was also observed between different borders of “Las Yungas” province (Northwest region). The distribution patterns of mtDNA variation observed in D. elongatus may be explained by isolation by distance when referring to the main biogeographic provinces. In “Las Yungas” and “Pampeana” provinces ecological factors seem to have contributed to the genetic differentiation among populations. The patterns of rDNA variation were analysed in the same natural populations of D. elongatus. The results were compared with those obtained from mtDNA data. The relative importance of different evolutive forces and the concerted evolution were considered to discuses the observed distribution. A total of 156 individuals from 13 populations were analyzed using RFLP. The 0.8kb cloned sequence from a 26s nontranscribed Spacer (NTS) from the Caledia captiva rDNA was used as probe. A total of 21 restriction fragments were obtained by simple digestion with five enzymes (BamHI, EcoRI, PstI, HindIII and XbaI). All the enzymes, except BamHI, exhibit intra and interpopulation variation. PstI revealed three restriction fragments and five patterns wider distributed. HindIII digestions showed five restriction fragments and 10 patterns, some of them were private of Las Yungas. XbaI digestions revealed two fragments, one of them polymorphic. EcoRI produced the greatest number of bands and the smallest fragments. The intra and interpopulation variation was analyzed by two distance indices: i) Lynch (1990) using presence and absence of bands and ii) Hedrich (1983) using band intensities. The highest values of intraindividual and intrapopulation variability were observed in the populations of Las Yungas. Both Neighbor-Joining trees are very similar and yield two main groups: one clusters together some populations of Pampeana province, the two southeastern populations of Las Yungas and one population of Espinal. The other clusters together the remained populations of Pampeana and Espinal provinces. An interesting point is the high genetic distance between the two northwestern populations of Las Yungas and the high differentiation of both populations from the remaining ones. The high level of intraindivual, intra and interpopulation variation would imply that the mechanisms of concerted evolution are not efficient in this species. The rDNA distribution does not agree with the mtDNA distribution, suggesting that genetic drift and migration could not explain the detected rDNA variability. Similarly to supernumerary heterochromatin, these results suggest that adaptive factors may affect the supernumerary heterochromatin and rDNA variation limiting the effects of stochastic factors. The grasshopper E. plorans shows a very complex polymorphism for B chromosomes distributed along the Mediterranean coasts in the Iberian Peninsula. There are more than 40 different B chromosome described variants, which are originated not only from recombination but also from high mutation rate. The number of B types predominant in natural populations of E. plorans is comparatively low but it is remarkable the fact that they dominate in different regions along the southern coast of Spain. It has been proposed that the original type, B1 was replaced by B2 in the Granada province and eastern Málaga, B5 did the same in central Málaga, leaving a relict “island” of B1 between those two areas. There are no obvious reasons that explain the substitution of one B by other. A cycle model to the B chromosome evolution in E. plorans was proposed. Co-adaptation and suppressor genes’ evolution in A chromosome neutralizes the B drive. The system would become inn a “near neutral” status until a new variant recovers the accumulation mechanism and the whole process starts over. This model implies that pre-existing factors in the genome may or may not favor a given B. If it were true, then in E. plorans some genetic differentiation should exist among the regions where different B variants predominate. We analyzed the restriction patterns of mtDNA of E. plorans as a marker for detecting any genetic differentiation among populations that differ in the B chromosomes. A total of 197 individuals from 12 populations that encircle the studied area were analyzed. The digestion of the mtDNA of E. plorans with 9 restriction enzymes revealed a low variability as only EcoRI produced 3 distinguishable patterns named morphs I, II and III. The demes from the central area show the B1 type and also the morph II of mtDNA. In the southwestern neighboring demes, a hybrid zone is shown between B1 and B5 types and between morph I and II of mtDNA. However, the morph I had a wider distribution and is predominant of even the only one found in most other samples where other B’s exist. Taking into account that mtDNA is a marker nonrelated with B’s, some differences should be expected between mtDNA distribution and the B-defined areas. However, the present results suggest that the evolution of B chromosomes of E. plorans was not independent from the basic genome and the substitution of one B by other, in some demes, might be accompanied by changes in the mtDNA. In contrast, in D. elongatus neutral markers as mtDNA may not explain the distribution of heterochromatin variants.

Cingolani, Ana María. "Efectos de 100 años de pastoreo ovino sobre la vegetación y suelos del norte de Tierra del Fuego" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En la estepa de Tierra del Fuego se realizó un estudio retrospectivo en líneas de alambrado para discriminar las influencias ambientales de las antrópicas, sobre la composición floristica, la fisonomía y los suelos. Se hicieron 26 pares de muestreos de vegetación, suelos e indicadores de disturbio en líneas de alambrado. Los pares fueron usados para clasificar tipos de hábitat en base a variables ambientales que tienen valores similares en los dos lados de cada par (o sea, variables inalteradas o poco modificadas por el régimen de uso). Utilizando el valor máximo de cada especie dentro de cada par muestreado se combinaron los dos censos en una única unidad de análisis, y con un Análisis de Correspondencias Canónicas se determinó cuáles de las variables ambientales son las más influyentes sobre la vegetación. Los gradientes floristico-ambientales obtenidos se dividieron en tres sectores bien definidos sobre el eje 1 del análisis. Resultaron tres ambientes tróficos con diferente fertilidad de los suelos que se analizaron separadamente en su variabilidad floristica con Análisis de Correspondencia. La influencia del disturbio sobre los gradientes floristicos se puso a prueba correlacionando los gradientes con variables relativas al régimen de uso, comportamiento animal y degradación del suelo, y analizando las diferencias entre los censos apareados según la posición de los mismos en los gradientes. Los tres tipos de ambientes tróficos han sufiido grandes cambios florísticos y fisonómicos por causa del uso ganadero, con cambios importantes en la impedancia de los suelos y algunos cambios menores en sus propiedades químicas. Bajo regímenes intensivos y persistentes, en los tres ambientes se originan céspedes, en algunos casos acompañados de cierto grado de eutrofización en los suelos, aunque en el ambiente más pobre (hábitat oligotrófico) los Céspedes son poco frecuentes y en muchos casos están muy erosionados. Se sugiere que en la mayoria de los casos de este ambiente, el pastoreo ha retroalimentado la acidificación del suelo y acentuado la fisonomía de murtillar o brezal enano. Información histórica sobre el aspecto de la vegetación antes de la colonización europea avalan esta hipótesis. Se hizo un análisis espacial con imágenes SPOT en el que se relacionó la heterogeneidad a nivel de cuadro alambrado con variables relativas al régimen de uso de los mismos. Este análisis corroboró lo obtenido mediante el análisis de gradientes, en general los cuadros que han tenido usos más intensivos tienen mayor superficie cubierta por céspedes, para los casos de los hábitats de fertilidad intermedia a alta (mesotrófico y eutrófico), mientras que para el hábitat oligotrófico se detectaron grandes áreas cubiertas por murtillares, que se asocian a usos tradicionales normales, pero tienen muchas evidencias de erosión. Mapas y censos actuales de vegetación en sitios descriptos por viajeros y científicos antes de la introducción del ganado apoyan la idea de que los Céspedes y algunos murtillares son de origen antrópico, y de que muchos sitios conservan la fisonomía original.

Abstract:
In order to discriminate environmental and human influences on the floristic composition, physiognomy and soils of the steppes of Tierra del Fuego, we made a retrospective study along fencelines. In 26 pairs of fence contrasts we sampled vegetation, soils and disturbance indicators. We use environmental variables that showed similar values on both sides of each contrast (i. e. variables scarcely influenced by human disturbance) to classify habitat types. Using the higher value of species for each pair of samples we combined the two samples in one unit of analysis. With Canonical Correspondence Analysis the environmental variables more related to floristic composition were chosen. The floristic-environmental gradients obtained were divided in three sectors along the first axis extracted by the analysis. These sectors resulted in three trophic habitats with different soil fertility which were analyzed in their floristic variability with Correspondence Analysis. Influences of disturbance on the floristic gradients were tested by correlating the gradients with variables related to grazing regimes, animal behaviour and soil degradation, and analyzing the differences between paired samples with contrasting scores on the axes. The three trophic habitat types have changed drastically in composition and physiognomy because of grazing disturbance. Soils have also changed notably in impedance, and in a lesser extent in some chemical variables. With persistent heavy stocking rates, lawns of grasses and forbs were originated in the three habitats, together, in some cases, with a certain degree of soil eutrophication. However, in the poorest environment (oligotrophic habitat) lawns are infrequent and generally very eroded. We think that in most cases of the oligotrophic habitat type grazing caused a positive feedback in soil acidification favoring the heathland physiognomy. This last hypothesis has been supported by historic information about vegetation aspect before European colonization. A spatial analysis using SPOT images was performed in order to relate vegetation heterogeneity and variables related to use regimes at paddock level. The analysis corroborate the results obtained by gradient analysis; in general, the paddocks with more intensive use have more surface covered by lawns for the habitats with high and intermediate fertility (mesotrophic and eutrophic), while for the oligotrophic habitat, extensive areas were detected to be covered by heathlands which are associated to normal traditional use but are very much eroded. Maps and present phytosociological relevés in sites described by travelers and scientists before sheep introduction support the idea that lawns and some heathlands' origin is anthropic, and that many sites have the original physiognomy.

Chamson, Astrid de Reig. "Desarrollo y control de un tumor experimental de ovario" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo de esta tesis fue el estudio de un modelo animal de tumor ovárico con ciertas similitudes con patologías ováricas hormono-dependientes y endocrinamente funcionales. El luteoma se desarrolla al autoinjertar un ovario en el bazo de una rata hembra adulta bilateralmente ovariectomizada, por la hipergonadotrofinemia resultante. En estudios de un año de duración determinamos que son tumores benignos y no modifican el estado general del animal. La mayoria de los animales portadores de tumor cursan con gonadotrofinas elevadas por un período de tiempo prolongado. Los luteomas secretan inhibina determinando un patrón particular de secreción de FSH. In vitro estos tumores presentan la esteroidogénesis basal alterada. La administración crónica de buserelina (análogo de GnRH)tuvo un claro efecto antitumoral: redujo la aparición de tumores e inhibió su crecimiento. A través de receptores específicos de afinidad similar al ovario control, la buserelina ejerce un efecto directo sobre las células de luteomas: inhibe la secreción de progesterona estimulada por LH. Las células tumorales son más sensibles a este efecto que las células lúteas control. Sin embargo, los receptores para GnRH en las células de los luteomas se encuentran desacoplados de su via clasica de segundos mensajeros: fosfolipasa C. En nuestros trabajos caracterizamos los luteomas en diversos aspectos que abarcan al animal entero hasta estudios subcelulares.

Abstract:
The aim of the present thesis was the study of an animal model of ovarian tumor. The interest of this tumor lies in its similarities with ovarian pathologies which are hormone-dependent and endocrinologically active. This luteoma develops when an ovary is grafted into the spleen of a bilaterally ovariectomized adult female rat, as a consequence of the resulting hipergonadotrophinemia. In a year-long study we determined that these tumors are benign and do not alter the general condition of the animals. The majority of the tumor-bearing animals display high gonadotrophin levels for long periods of time. Luteoma secrete inhibins, which determine the particular FSH secretion pattern. In vitro these tumors show basal steroidogenesis alterations. Chronic buserelin (a GnRH analog) administration had a clear antitumoral effect: it inhibited initial tumor development and induced a reduction in tumor volume. Buserelin, acting on specific receptors with affinity similar to that in control ovaries, has a direct effect on luteoma cells: it inhibits LH-stimulated progesterone secretion. Tumoral cells are more sensitive to this effect than control luteal cells. However, GnRH receptors in luteoma cells are uncoupled from their classic second messenger generating system: phospholipase C. In our work we have characterized these luteoma in a variety of aspects including the whole animal and subcellular studies.

Cerdán, Pablo Diego. "Fotocontrol de la expresión de genes del complejo antena en plantas" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objeto de estudio del presente trabajo es la regulación de la expresión de genes por la luz en plantas. Dos familias de fotorreceptores ya han sido identificadas, los fitocromos que absorben en la región del rojo y rojo lejano del espectro, y los criptocromos que absorben en la región del UV-A-azul. En Arabidopsis thaliana han sido caracterizados cinco fitocromos (phyA, phyB, phyC, phyD y phyE) y dos criptocromos (cry1 y cry2). Me he centrado en la regulación transcripcional del gen Lhcbl*2 como sistema modelo. Deleciones del promotor Lhcbl*2 fueron fusionadas a un gen reportero y empleadas para transformar plantas de tabaco y Arabidopsis via Agrobacterium tumefaciens. La T1 fue utilizada en experimentos fisiológicos y se determinó que al menos cuatro fotorreceptores, phyA, phyB, cryl y al menos otro criptocromo están involucrados en la regulación del gen Lhcbl *2. Es sabido que los fitocromos operan fisiológicamente en tres modos de acción que difieren en los requerimientos de flujo, duración y calidad de luz: el modo VLFR ("very low fluence response"), LFR ("low fluence response") y HIR ("high irradiance response"). Las bases moleculares para esta diferencia no se conocen. phyA es responsable de la VLFR y HIR, mientras que phyB lo es por la LFR. Se ha demostrado que los niveles de ARNm de los genes Lhcb l es regulado por los tres modos de acción de los fitocromos. Como los genes Lhcb l comprenden una familia extensa este resultado podría ser el resultado de muchos genes siendo regulados de forma diferente. En este trabajo demuestro que los tres modos de acción de los fitocromos pueden regular la expresión de un único gen, el Lhcbl*2. Inclusive, 146 bp de este promotor son suficientes para responder a los tres modos de acción mencionados. Usando plantas transgénicas de Arabidopsis thaliana deficientes en phyA o phyB he observado que ambos fotorreceptores están involucrados en la regulación de la expresión del gen Lhcbl*2 y que simultaneamente existen interacciones sinérgicas y antagónicas entre ambos fotorreceptores en la regulación de la expresión del gen mencionado. La interacción depende del modo de acción de phyA (VLFR es antagónica, mientras que la HIR es más sinérgica), mientras que phyB por si solo no puede mostrar el mismo nivel de interacción. Finalmente el análisis de un mayor número de deleciones del promotor Lhcbl*2 indica que diferentes elementos que actuan en cis pueden estar involucrados en la HIR (phyA) comparado con la LFR (phyB) y VLFR (phyA). En conjunto estos datos sugieren fuertemente que los fitocromos A y B controlan la expresión de un único promotor por vías diferentes. En este momento la cadena de transducción de la señal percibida por los fitocromos es desconocida. Inclusive si alguno de los elementos centrales de esta cadena son caracterizados en un futuro cercano, todavía habrá que hacer un considerable esfuerzo para poder entender como estos y otros factores interaccionan bajo diferentes condiciones permitiendo a las plantas responder con precisión a los factores ambientales.

Abstract:
The subject of the present work is the regulation of gene expression by light in plants. Two major families of plant photoreceptor genes have already been identified. The red and far redabsorbing pigments called phytochromes and the blue/UVA-absorbing cryptochromes. In Arabidopsis thaliana, five phytochrome family members (phyA, phyB, phyC, phyD and phyE) and two cryptochromes (cry1 and cry2) have been described. I have focused on transcriptional regulation of the tobacco Lhcbl*2 gene as a model system. I have obtained deletion derivatives of the Lhcbl*2 promoter, fused to a reporter gene, and introduced them both in tobacco and Arabidopsis, using Agrobacterium lumefaciens-mediated transformation. I have used T1 transgenic plants for physiological experiments and have found that at least four photoreceptors, phyA, phyB, cryl and another cryptochrome are involved in the regulation of the Lhcbl*2 gene. It is known that phytochromes operate in three different physiological modes of action that differ in fluence, duration and wavelength requirements. The very low fluence response (VLFR) mode, the low fluence response (LFR) mode and the high irradiance response (HIR) mode. The molecular basis of this heterogeneity is not known. phyA is responsible for VLFR and HIR, and phyB for LFR. The mRNA level of Lhcb l genes has been shown to be regulated by the three phytochrome action modes. As Lhcbl genes comprise an extended family this fact could be the result of several genes being regulated differently. I report here that the three phytochrome action modes can operate in the regulation of the transcription of a single Lhcbl gene. Further-more, 146 bp fragment of the Lhcbl*2 gene promoter is sufficient to show the three phytochrome action modes. Using transgenic Arabidopsis mutants lacking phyA or phyB I have observed that both photoreceptors are involved in the regulation of transcriptional activity of the Lhcbl*2 gene and that there exist synergistic and antagonistic interactions between phyA and phyB in the control of Lhcbl *2 gene expression. The signal of this interaction depends on the mode of action of phyA (the VLFR mode is antagonistic whereas the HIR mode is synergistic) and phyB itself is unable to show at least the same degree of interaction. Finally, the continued deletion analysis of the tobacco Lhcbl*2 promoter, indicates that different cis-acting elements could be involved in HIR (phyA) compared to LFR (phyB) and VLFR (phyA). Taken together, these data strongly suggest that phytochromes A and B have differences in signal transduction chains controlling the activity of a gene promoter. At this stage the phytochrome signal transduction remains obscure. Even if some central players of the signal transduction were unraveled in the near future, considerable more effort will be needed to understand the degree to which both phyA and phyB (or their derived signals) interact with these players under different conditions allowing the fine tuning to the light environment observed in plants.

Cerdán, Marcelo Guido. "Especificidad tisular de la expresión de genes Eucariotas en ratones transgénicos : 1) 3,8 kilobases del promotor de beta-caseína bovino dirigen la expresión de proteínas recombinantes a la glándula mamaria y 2) expresión específica del gen de proopiomelanocortina en el sistema nervioso central" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Durante este trabajo se estudio la regulación tejido especifica de dos genes mediante la utilización de ratones transgénicos. l) Se estudio con que eficacia un fragmento de 3,8 kb del promotor bovino de β-caseina puede dirigir una expresión tejido especifica a la glándula mamaria. El patrón de expresión espacial, temporal y hormonal del gen de fusión, resultó altamente regulado y confinado estrictamente a celulas epiteliales de la glándula mamaria lactante. En estudios previos realizados sobre una línea celualar de glándula mamaria de ratón, se había demostrado que con 1,7 kb del promotor bovino de β-caseína era posible obtener expresión celular específica, a su vez regulada hormonalmente. Esta misma construcción no funcionó al intentar dirigir la expresión específica a glándula mamaria de ratones transgénicos. En este trabajo utilizamos un promotor de mayor tamaño del mismo gen, 3.8 kb, para direccionar la expresión del gen de la hormona de crecimiento humana (hGH) a glándula mamaria de ratones transgénicos. Por medio de un ensayo de Northern blot se determinó la presencia de ARNm de hGH únicamente en glándula mamaria de hembras en período de lactancia. Este ARNm no se detectó en glándula mamaria de hembras vírgenes. Un análisis durante el desarrollo de la glándula mamaria demostró que el transgén sigue un patrón de expresión que se asemeja mucho más al bovino que al murino. En estudios de hibridización in situ, realizados sobre secciones de glándula mamaria, se observó que el patrón de expresión del transgén resultó homogeneo en todos los lóbulos, tanto en animales heterocigotas como homocigotas. La cantidad de granos de plata contados sobre tejido mamario se correlacionó áltamente con el contenido de hGH en leche, previamente determinado por radioinmunoensayo (r=0 996). Por lo tanto, las 3,8 kb del promotor bovino de β-caseína pueden direccionar altos niveles de expresión de proteínas terapéuticas a la glándula mamaria de ratones transgénicos con especificidad celular y regulación correcta durante el desarrollo. 2) Se evaluó la expresión celular especifica del gen de Pro-Opiomelanocortin (POMC) en neuronas. El gen de POMC se expresa en una serie de neuronas del hipotálamo y tracto solitario, y en corticotrofos y melanotrofos hipofisarios. En estudios previos se determinó que una porción proximal del promotor de POMC de rata o ratón era suficiente para dirigir expresión celula-específica, regulada hormonalmente y en forma correcta durante el desarrollo, a melenotrofos y corticotrofos, pero no a neuronas. Más recientemente se identificó la presencia de posibles activadores de la transcripción dentro de una zona de 11 kb en la región 5’flanqueante del gen de POMC (entre —13kb y —2kb). En el presente trabajo, por medio de un análisis delecional se ubicó el elemento neuronal específico a una resolución de 4 kb. Se generaron 3 construcciones conteniendo secuencias genómicas de POMC (6 kb de la unidad transcripcional y 2 kb de la región 3’flanqueante) con diferentes longitudes de la región 5’flanqueante, 13 kb (-13/+8POMC-EGFP), 9 kb (—9/+8POMC-EGFP) y 5 kb (-5/+8POMC-EGFP). A estas secuencias se les introdujo en el exón 2, previo al sitio ATG, una versión mamiferizada de la proteína verde fluorescente de medusa (EGFP). Esta innovación permitió visualizar la expresión transgénica en el cerebro e hipófisis en forma inmediata luego de realizar los cortes de los tejidos. En tres de un total de cuatro lineas de animales transgénicos generados para las construcciones -5/+8POMC-EGFP y -9/+8POMC-EGFP se observó fluorescencia en corticotropos y melanotropos. Estos transgenes se expresaron en neuronas. Contrariamente, la construccion -13/+8POMC-EGFP se expresó correctamente en hipófisis y neuronas de POMC Este resultado nos sugiere que la presencia del elemento neuronal específico buscado se encuentra entre —9 y —l3kb del inicio de la transcripción. En experimentos futuros, nuestro objetivo será clonar e identificar el factor de transcripción neuronal que interactúa con los elementos en cis. Nosotros proponemos inmortalizar un linea celular neuronal que exprese POMC mediante oncogénesis dirigida en ratones transgénicos. Hemos generado 4 lienas de ratones transgénicos con una construcción similar a —l3/+8POMC-EGFP, pero conteniendo una versión termo-sensible del antígeno T largo (AgT-tsA58) insertada en el segundo exón del gen de POMC de ratón. En estas 4 líneas se desarrollaron tumores prematuramente en la región hipofisaria-lúpotalámica, a pesar de que la temperatura corporal del ratón es no permisiva. Tres de estos ratones murieron antes de reporoducirse. Sólo una líena pudo ser mantenida con un programa de aparcamientos utilizando machos jóvenes. En estudio realizado con un Northern blot se observó una expresión considerable de POMC en esos tumores. En próximos experimentos evaluaremos la prsencia de marcadores neuronales e hipofisafios para determinar la naturaleza de dichos tumores.

Abstract:
During this study the tissue specific regulation of two different promoter genes were studied using transgenic mice. 1) The ability of a 3.8-kilobase promoter of the bovine β-casein gene to drive cell specific expression to the mammary gland was evaluated in transgenic mice. The spatial, temporal, and hormonal pattern of expression of the fusion gene is highly regulated and confined to the epithelial cells of the lactating mammary gland. Previous studies have shown that l.7 kb of the bovine β-casein promoter were able to drive cell-specific and hormone-dependent expression in a mouse mammary cell line but failed to induce accurate expression to the mammary gland of transgenic mice. We investigated here the ability of a larger sequence consisting of 3.8 kb of the bovine β-casein gene promoter to drive the expression of the human growth hormone (hGH) gene in transgenic mice. A Northern blot analysis using total RNA obtained from different tissues of lactating and non lactating females revealed the presence of hGH mRNA only in the mammary gland of lactating females. hGH mRNA was not detectable in the mammary gland of Virgin females. A developmental analysis showed that hGH mRNA only peaked on parturition, resembling more closely the bovine β-casein temporal expression pattern rather than the murine. In situ hybridization studies performed on mammary gland sections showed that the cellular pattern of hGH expression was homogeneous in all lobules from heterozygous and homozygous transgenic mice. Silver grain counts on the tissue sections highly correlated with the hGH contents in the milk determined by radio immunoassay (r = 0.996). Thus 3.8 kb of the bovine β-casein promoter direct a high-level expression of therapeutic genes to the lactating mammary gland of transgenic mice in a tissue-specific and developmentally regulated manner. 2) The cell-specific expression of the Pro-Opiomelanocortin (POMC) gene in hypothalamic neurons was evaluated in transgenic mice. The POMC gene is expressed in a subset of hypothalamic and hindbrain neurons and in pituitary melanotrophs and conicotrophs. Previous studies demonstrated that the presence of a proximal promoter of the rat or mouse POMC gene was sufficient to drive cell-specific, developmentally and hormonally regulated expression in melanotrophs and conicotrophs of transgenic mice, but not in neurons. More recently we identified the presence of a putative neuron-specific enhancer/s within 11 kb of 5‘flanking sequences of the mouse POMC gene (-l3 kb to —2 kb). In the present work, by using a deletional analysis in transgenic mice we localised this site/s within a 4 kb resolution. Three different constructs were generated containing genomic sequences of the POMC gene (6 kb of the transcription unit and 2 kb of the 3’flanking region) with different lengths of the 5’flanking region, 13 kb (-13/+ 8POMC-EGFP), 9 kb (-9/+8POMC-EGFP) and 5 kb (-5/+8POMC-EGFP). We also introduced in the exon 2 of the POMC gene, previous to the ATG site, a “mammalianized” version of the green fluorescent protein (EGFP). This innovation allowed us to visualise transgenic expression in the brain and the pituitary immediately after tissue sectioning. Three out of four lines of transgenic mice generated with each of the constructs, -9/+8POMC-EGFP and -5/+8POMC-EGFP showed green fluorescence in pituitary melanotrophs and conicotrophs. These transgenes failed to direct expression of EGFP to POMC neurons. However, the construct —l3/+8POMC-EGFP showed correct expression in pituitary and hypothalamic neurons, suggesting that a specific neurone element is located between -9 kb and —l3 kb from the transcription initiation point. In future experiments our goal is to clone and identify the neuronal transcription factor that interacts with the cis-acting elements. We propose to immortalise neuronal cell lines expressing POMC by targeted oncogenesis in transgenic mice. We have generated 4 transgenic mouse lines with a construct similar to the —l3/+8POMC-EGFP, but containing the temperature sensitive version of the oncogenic large T antigen (tsA58-Tag) inserted into the second exon of the mouse POMC gene. These four lines showed premature tumors in the pituitary-hypothalamic region despite the non-permissive temperature of the mouse body. Three of these mice died before breeding. Only one line could be maintained by mating young males. Interestingly, Northern blots experiments showed high POMC expression in these tumors. In further experiments we are going to evaluate the presence of neuronal and pituitary markers to establish the nature of these tumors.

Cecere, María Carla. "Dinámica poblacional de Triatoma infestans en comunidades rurales y en un modelo experimental bajo condiciones naturales" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Triatoma infestans es el principal vector de Trypanosoma cruzi, agente causal de la Enfermedad de Chagas. En este estudio se utilizaron técnicas multivariadas para identificar los factores asociados a la infestación y abundancia domiciliaria de T. infestans en las comunidades rurales vecinas de Amamá y Trinidad-Mercedes (Santiago del Estero, Argentina) antes y después de un rociado de insecticidas. Antes del rociado, una mayor disponibilidad de refugios en los techos y paredes de las viviendas, y la presencia de gallinas empollando en interiores se hallaban asociados en forma positiva y estadísticamente significativa a la abundancia domiciliaria de T. infestans en un modelo de regresión lineal múltiple. Se evaluaron los efectos a largo plazo sobre la dinámica de reinfestación domiciliaria por T. infestans de un programa combinado de manejo ambiental y aplicación de insecticidas (en Amamá) en relación con otro programa basado sólo en aplicación de insecticidas (en Trinidad Mercedes) durante 1992-1997. El programa de control combinado mejoró el revoque de las paredes internas de las viviendas antes del rociado con deltametrina del domicilio y peridomicilio. Se evaluó la reinfestación domiciliaria y peridomiciliaria mediante múltiples métodos, y los atributos demográficos y ambientales de cada familia cada 6 meses. Durante 1993-1995, la comunidad bajo un programa de control combinado alcanzó una infestación domiciliaria significativamente menor que la comunidad donde sólo se hizo control químico. Los peridomicilios fueron los primeros en reinfestarse, y alcanzaron poblaciones de T. Infestans más densas que los domicilios. En un análisis de regresión logística múltiple, los únicos predictores significativos de la probabilidad de reinfestación domiciliaria fueron la presencia de un sitio peridoméstico infestado en la propia casa (en 1993-1995), y la captura de 10 o más T. infestans en domicilio antes del rociado de 1992 (en 1996). Los efectos de la disponibilidad de refugios sobre la dinámica poblacional de T. infestans bajo condiciones climáticas naturales fueron evaluados en pequeños ranchos experimentales que simulan la típica vivienda rural en Punilla (Córdoba). Cada rancho albergó una gallina, fue colonizado con 8 adultos de T. Infestans en Febrero de 1994, y constituyó una población cerrada. Cada una de las 9 poblaciones fue censada mensualmente, y los 3 controles fueron censados anualmente. Los ranchos con máxima disponibilidad de refugios alcanzaron una abundancia de T. infestans y fecundidad significativamente mayores que aquellos con intermedia o mínima disponibilidad de refiigios, y esto se reflejó en una tasa de reproducción básica también mayor. Sólo 2 de las 9 réplicas se extinguieron espontáneamente, y ambas tenian mínima disponibilidad de refugios. La menor disponibilidad de refugios reduciría la disponibilidad de sitios adecuados para la oviposición y la supervivencia de las hembras. Estos resultados son consistentes con las raciones realizadas en ranchos de Santiago del Estero, y apoyan la hipótesis que el o actúa como factor limitante del crecimiento poblacional de T. infestans.

Abstract:
Triatoma Infestans is the principal vector of Trypanosoma cruzi; the causal agent of Chagas disease. In this study multivariate techniques were used to identify factors associated with the domiciliary infestation and abundance of T. infestans in the neighboring rural communities of Amamá and Trinidad-Mercedes (Santiago del Estero, Argentina) before and after insecticide sprays. Before the sprays, refuge availability in roofs and walls, and the presence of chickens nesting indoors were positiver and significantly associated with the domiciliary abundance of T. infestans in a multiple lineal regression model. The long-term effects on the dynamics of domiciliary reinfestation of T. infestans of a combined program of environmental management and insecticide application (in Amamá) relative to other program based only on insecticide application (in Trinidad-Mercedes) were evaluated during 1992-1997. The combined control program improved the plaster of indoor walls, and sprayed with deltamethrin all domestic and peridomestic areas. Each 6 months, domiciliary and peridomestic infestations were evaluated by multiple methods, and demographic and ambient attributes of each household were recorded. During 1993-1995, the community under a combined control program reached a significantly lower domiciliary infestation than the one only subjected to chemical control. Peridomestic sites were the first in reinfesting, and reached more abundant triatomine populations than domiciliary areas. In a multiple logistic regression analysis, the only significant predictors of the probability of domiciliary reinfestation were the presence of an infested peridomestic site in a house (in 1993-1995), and the catch of 10 or more T. infestans in domestic areas before the 1992 insecticide spray (in 1996). The effects of refuge availability on the population dynamics of T. infestans under natural climatic conditions were evaluated in small experimental huts that simulate the-typical rural house in Punilla (Córdoba). Each hut hosted a chicken, was colonized with 8 T. Infestans adults in February 1994, and constituted a closed population. Each one of the 9 populations was censused monthly, and the 3 controls were censused annually. The huts with maximum refuge availability reached significantly greater T. infestans abundance and fecundity than those with intermediate or minimum refuge availability, and this also reflected in a greater basic reproductive rate. Only 2 of the 9 replicates went extinct spontaneously, and both had minimum refuge availability. This would reduce the availability of adequate oviposition sites and decrease female survivorship. This results are consistent with the data collected in ranchos in Santiago del Estero, and support the hypothesis that the resource space is a limiting factor of T. infestans population growth.

Ceballos, Nora Raquel. "Biosíntesis de aldosterona y su regulación en Bufo arenarum (Amphibia, anura)" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En la presente Tesis Doctoral se realizaron estudios sobre la biosíntesis de aldosterona, en la glándula interrenal de Bufo arenarum, a partir de distintos sustratos tales como corticosterona, 18-hidroxicorticosterona (18-OH-B) y el compuesto "N" que se biosintetiza a partir de pregnenolona pero no de progesterona. A diferencia de lo que ocurre con la 18-OH-B comercial o de rata, la proveniente de interrenales de sapo presenta una forma menos polar única y distinta de las conocidas hasta el momento. Con respecto a la precursoriedad de aldosterona que posee este esteroide 18-hidroxilado, los resultados mostrados indican que esta hormona no es intermediario en la biosíntesis de aldosterona, por lo menos en las condiciones utilizadas para los experimentos presentados en esta Tesis. También se ensayó la capacidad precursora de aldosterona que tiene corticosterona y la conclusión a la que se arribó es que la capacidad biosintética de este conocido intermediario en la síntesis de aldosterona es, también, muy baja. Se caracterizó por diversos métodos el compuesto "N", esteroide muy polar con movilidad intermedia entre 18-OH-B y cortisol en el sistema Bush B5, como el 3β -hidroxi-5-ene análogo de aldosterona (3β ,11β ,21-trihidroxi-5-pregnen-20-ona-18-al). Cuando se estudiaron las propiedades biosintéticas del compuesto "N", este esteroide demostró ser un muy buen precursor para la síntesis de aldosterona. La importante capacidad precursora de aldosterona que posee "N", a la menor precursoriedad de corticosterona y a la falta de capacidad de 18-OH-B, indican que en Bufo arenarum, la isomerización del doble enlace Δ 5 a Δ 4 es un paso muy tardío en el camino biosintético de aldosterona. La transformación del análogo de aldosterona en el mineralocorticoide es catalizada por la enzima 3β -hidroxiesteroide deshidrogenasa-Δ 4 isomerasa de localización mitocondrial. La actividad de la enzima mencionada es regulada por la concentración de sodio del medio, la que parece regular la cantidad de enzima presente en aquella fracción.

Abstract:
This thesis describes studies on the biosynthesis of aldosterone by the interrenal gland of Bufo arenarum from substrates such as corticosterone, 18-hydroxycorticosterone (18-OH-B) and compound "N", a metabolite synthesized from pregnenolone but not from progesterone. At variance with commercial or rat 18-OH-B, toad 18-OH-B exhibits only one single "less polar form". This form differs from those currently described. Under the present conditions, that 18-hydroxylated steroid is not an intermediate in the biosynthesis of aldosterone. Likewise, corticosterone proved to be a poor precursor for the mineralocorticoid. Several methods were applied to the study and characterization of compound "N", a highly polar metabolite migrating in the Bush B5 paper-chromatographic system as migrates the 3β -hydroxy-5-ene analog of aldosterone (3β ,11β ,21-trihydroxy-5-pregnen-20-one-18-al). This steroid showed to be a good precursor for aldosterone. Its precursorship, surpassing by far those exhibited by 18-OH-B or even corticosterone, suggests that isomerization Δ 5 Δ 4 is a final step of aldosterone biosynthesis. The transformation of the aldosterone-analog into aldosterone is catalised by the enzyme 3β hydroxysteroid dehydrogenase-Δ 4 isomerase, of mitochondrial localization. Enzyme activity is regulated by the sodium concentration of the medium, which apparently controls the amount of enzyme in mitochondria.

Cavasotto, Claudio Norberto. "Estudio sobre aproximaciones racionales al problema de la función de Green en sistemas de muchas partículas" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Las correcciones de primer, segundo y tercer orden a la autoenergía del propagador partícula-agujero se calcularon, tanto a partir de la ecuación de Dyson utilizando el formalismo del superoperador, como en el marco de una formulación Liouvilliana. El cálculo a primer orden con el primer método se hizo para un sistema descrito por un operador grand canónico de Hartree Fock, permitiendo de esta manera su aplicación a sistemas a T ≠ 0. En los otros cálculos se utilizó un estado de referencia puro de Hartree-Fock. En estas formulaciones el orden perturbativo se identifica fácilmente como potencias del potencial residual. En todos los casos se compararon los resultados con los obtenidos por el método perturbativo y diagramático y se discutió la forma de incorporar correcciones que den cuenta de efectos colectivos. Se presenta también un nuevo método para el desarrollo de la matriz inversa como suma finita de términos, derivandose las ecuaciones generales correspondientes. Este desarrollo aplicado a la función de Green permitió interpretar cada término de la expansión comouna contribución a la propagación de la interacción por diferentes caminos de transmisión y da cuenta en forma directa, de efectos colectivos, representando por tanto un aproximante racional a la autoenergía del propagador de polarización. Con este método de la expansión finita se efectuó también un análisis cuantitativo del propagador de polarización en la molécula de agua.

Abstract:
First, second and third order corrections to the particle-hole polarization propagator self-energies are derived both from the Dyson equation in the scenario of the superoperator algebra and from Liouville-spacebased methods. First order analysis with former method was performed using a grand canonical Hartree-Fock ensemble, allowing its application to systems at T ≠ 0,and in the other cases, a Hartree-Fock reference state was used. The perturbative order is easily identified as powers of the residual potential. These results were compared to those obtained with the perturbative and diagrammatic methods and alternative formulations to include colective motion effects were considered. A new method to expand the inverse matrix as a sum of finite terms is also introduced, obtaining the corresponding general equations. This method applied to the Green function analysis allowed to consider each term of the expansion as a contribution to the propagation of interaction through different transmission paths, taking into account in a direct way collective motion effects, and thus representing a rational approximation to the polarization propagator self-energy. This finite expansion method was applied also to perform a cuantitative analysis of the polarization propagator in the water molecule.

Castañera, Mónica Beatriz. "Contribución de los perros a la transmisión de Trypanosoma cruzi en un área rural de Argentina: demografía, rol centinela y modelado matemático" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los perros son los principales reservorios domésticos de Trypanosoma cruzi, el agente causal de la Enfermedad de Chagas. Con el objetivo de estudiar la dinámica poblacional de los perros de Amamá y localidades vecinas (Provincia de Santiago del Estero, Argentina), se realizaron 8 censos cada 6 meses desde Mayo de 1994 a Diciembre de 1997. La abundancia varió muy poco entre años desde 294 hasta 345 perros. La tasa instantánea de crecimiento poblacional (r = 0,016/semestre) no fue significativamente diferente de 0. El 96% de las viviendas habitadas tenían uno o más perros (media, 3,1 perros por casa). La distribución de edades presentó una estructura estable, con un 76% de perros con 3 o menos años de edad, y un 75% de machos. Un 34% de las hembras tuvieron al menos una parición en los 6 meses previos, con una camada promedio de 5,1 cachorros que no fluctuó estacionalmente. En un análisis de factores clave de mortalidad, el sacrificio de los cachorros fue el único factor estadísticamente significativo, pero no se halló evidencia de que actuara en forma densodependiente. La probabilidad de morir específica por edades tuvo la típica forma en U de los mamíferos grandes, y fue superior en las hembras que en los machos. La población de perros se hallaría en estado estacionario y regulada por los propietarios mediante la manipulación de la tasa de mortalidad de los cachorros recién nacidos, especialmente hembras. La reacción de inmunoensayo enzimático (ELISA)fue utilizada para detectar anticuerpos específicos anti-T. cruzi en sueros de 182 perros mestizos rurales también analizados por hemoaglutinación e inmunofluorescencia indirectas. El 86% de los sueros tuvieron resultados concordantes para todas las técnicas serológicas. La especificidad de ELlSA fue del 96,2%. Entre 34 perros adultos con xenodiagnóstico positivo, la sensibilidad estimada fue del 94% para ELlSA e IFI. ELISA es la técnica de elección para la vigilancia serológica de infecciones por T. cruzi en poblaciones de perros de áreas que han sido rociadas con insecticidas. Se investigó si el perro podría ser un eficaz centinela de la transmisión vectorial de T. cruzi en el contexto de la fase de vigilancia. La seroprevalencia global de T. cruzi en la población canina disminuyó del 65,0% (54/83) en 1992, antes de un rociado con deltametrina, al 38,5% (70/182) en 1994, y al 15.2% (36/237) en 1996. Se registraron 12 cachorros nativos infectados nacidos después del rociado. De 13 variables consideradas en un análisis por regresión logística múltiple, las que resultaron significativamente asociadas con la probabilidad de estar infectado fueron (i) el número de Triatoma guasayana capturado en el domicilio para el período 1993-94, y (ii) la seropositividad a T. cruzi de la madre, y el número de perros cohabitantes infectados para 1995-96. La evidencia sugiere que los casos nuevos de infección podrían explicarse por diferentes rutas de transmisión que implicarían a T. guasayana como un vector secundario durante la vigilancia. Con el objetivo de investigar la contribución de los animales domésticos a la transmisión vectorial de T. cruzi, se construyó un modelo matemático de la dinámica poblacional de Triatoma infestans estructurado por estadios, a tiempo continuo, con una dependencia respecto de la temperatura en el tiempo de desarrollo de cada estadio y en la tasa de oviposición de las hembras. y que incorpora estocasticidad demográfica. La abundancia de T. infestans presentó fluctuaciones estacionales con un pico de densidad en los meses de verano. La abundancia promedio de triatominos en la vivienda y la amplitud de las oscilaciones dependió del tipo y número de hospedadores presentes. La incorporación de una gallina durante la estación cálida produjo un incremento del 40% en la densidad promedio de triatominos y oscilaciones de mayor amplitud. Cuando se enfrentó a humanos y perros susceptibles a distintas prevalencias de infección por T. cruzi en el vector, los perros se infectaron más rápidamente que los humanos. La inclusión de estocasticidad demográfica permitió una buena descripción de la evolución del sistema, estimar la probabilidad de que el sistema persista y de la ocurrencia de un evento de infección.

Abstract:
Dogs are the main domestic reservoirs of Trypanosoma cruzi, the causal agent of Chagas disease. To study the population dynamics of dogs from Amamá and neighboring villages (Province of Santiago del Estero, Argentina), 8 censuses were carried out each 6 months from May 1994 to December 1997. The abundance varied very little over years, from 294 to 345 dogs. The instantaneous rate of population increase (r = 0.016/semester) was not significantly different from 0. Ninety nine percent of the inhabited houses owned at least a dog (mean, 3.1 dogs per house). The age distribution was stable, with 76% of dogs aged 3 or less years, and 75% of males. One-third of the females had at least one litter in the preceding 6 months, with a mean litter size of 5.1 pups that did not fluctuate seasonally. Key factor analysis showed that slaughtering of newborn pups was the sole statistically significant factor, but no evidence of a density-dependent relationship was found. The age-specific probability of dying had the typical U-shape of large mammals, and was greater in females than in males. The dog population was in a stationary state, regulated by the owners through manipulation of the mortality rate of recently born pups, especially females. An immunosorbent enzymatic assay (ELISA) was used to detect specific antibodies against T. cruzi in sera from 182 rural dogs that were also examined by indirect hemagglutination and immunofluorescence (IFI). 86% of sera showed concordant results for all serologic techniques. ELISA specificity was 96.2%. Among 34 adult dogs with a positive xenodiagnosis, a 94% sensitivity was estimated for ELISA and IFI. ELISA is the assay of choice for serological surveillance of T. cruzi infection in dog populations residing in areas that had been sprayed with insecticides. I investigated whether the dog could be an effective sentinel of the vectorial transmission of T. cruzi during the surveillance phase. The overall seroprevalence of T. cruzi in the dog population decreased from 65.0% (54/83) in 1992, before the deltamethrin spraying, to 38.5% (70/182) in 1994, and 15.2% (36/237) in 1996. A total of 12 pups infected with T. cruzi were detected among native pups born after the spraying. Of 13 variables considered in logistic multiple regression analysis, those that were significantly related to the likelihood of being infected were (i) the number of Triatoma guasayana captured in domestic areas during 1993-94, and (ii) seroreactivity to T. cruzi of the mother, and the number of infected dogs in the household during 1995-96. The evidence suggests that the occurrence of new cases might be explained by different transmission routes that would also implicate T. guasayana as a secondary vector during the surveillance phase. To investigate the contribution of domestic animals to the vectorial transmission of T. cruzi, a mathematical model of the stage-structured population dynamics of Triatoma infestans was built. The model included temperature-dependent developmental times for each stage and female fecundity, and demographic stochasticity. The abundance of T. infestans fluctuated seasonally with a peak in the summer. The mean abundance of bugs in the house and the amplitude of oscillations depended on the type and number of available hosts. Introduction of a hen during the warm season produced a 40% increase in the mean density of bugs and oscillations of greater amplitude. When susceptible humans and dogs faced different prevalence rates of T. cruzi infection in the bugs, the dogs acquired the infection sooner than humans. Inclusion of demographic stochasticity allowed a good description of the system evolution, estimation of the probability of persistence, and the occurrence of an infection event.

Casanova, Jorge Ramón. "Estudio de estabilidad termodinámica del Ag7PO4I4 en presencia de Iodo y procesos de transporte relacionados" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Sales sólidas con conducción iónica han sido utilizadas para la obtención de pilas galvánicas y sensores de gases. El compuesto Ag7PO4I4, (API) es un electrolito conductor por ión Ag+ de conductividad elevada y baja movilidad difusional del I2(g) en el volumen del electrolito. Se ha estudiado en este trabajo la absorción de I2(g) por API considerando al fenómeno desde el punto de vista de una reacción química acoplada con un proceso de difusión del gas en el sólido. La cantidad de I; absorbida resulta ser hasta 1,8 moles de gas por mol de API (aún mayor que la absorción de hidrógeno por paladio). Se realizaron mediciones gravimétricas y de difracción de rayos X en función del tiempo, utilizando muestras en polvo y compactadas. La evolución con el tiempo es distinta si la atmósfera que contiene I2(g) está formado por aire húmedo o seco. En ambos casos, se observa una marcada dependencia con la fugacidad del yodo en el gas. La humedad juega un papel catalítico ya que se observa la misma reacción global en ambos casos (atmósfera seca o húmeda). Se interpretaron los resultados experimentales con modelos de difusión con reacción química, calculándose las constantes cinéticas y los coeficientes de difusión, para muestras compactadas. El coeficiente de difusión resultó dos órdenes menores que el obtenido por otros autores que no tomaron en consideración la posibilidad de una reacción quimica.

Abstract:
Solid salts with ionic conduction have been used to obtain galvanic cells and gas sensors. The Ag7PO4I4 compound (API) is a solid elecrolyte with high electric conductivity by Ag+ ion and of low iodine (12)diffusional mobility in the solid state. In the present work, the absorption of I2(g) by API has been studied. The investigated phenomena is considered as a gas diffusional process in the solid simultaneous with a chemical reaction. The absorbed amount of iodine results as high as 1.8 gas moles per API mole, being this absorption even larger than the hydrogen absorption by paladium Time dependent gravimetric measurements as well as of X-rays diffraction have been performed using powder and pressed specimens. The evolution with time is different according to that the iodine atmosphere is made up with dry or with wet air. En both cases, a marked dependency on the iodine fugacity is observed. Humidity plays a catalytic role, but the global reaction is the same for both dry and wet atmospheres. The experimental results habe been are analysed in terms of models of diffusion with chemical reaction; numerical values of the kinetic constants and the diffusion coefficients are obtained in case of pressed specimens. The diffusion coefficient is two order of magnitude lower than the one reported by other authors, who did not take into account the probability of a simultaneous chemical reaction.

Capurro, Mariana Isabel. "Caracterización del anticuerpo monoclonal FC-2.15, dirigido contra carcinomas humanos y reactivo con LewisX : Estudio de sus propiedades funcionales in vitro y ex vivo" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Este trabajo de Tesis se ha basado en la producción de anticuerpos monoclonales (AMC) dirigidos contra las células troncales de carcinoma mamario humano. la caracterización e identificación de los antígenos (Ag) reconocidos por los mismos y la evaluación de la posible utilidad diagnóstica y terapéutica de dichos AMCs. Para su obtención, se inmunizaron ratones Balb/c con células provenientes de un paciente con un carcinoma de mama agresivo y altamente indiferenciado, negativo para la expresión de ER y PgR, estrategia seguida con la idea de minimizar la producción de AMCs dirigidos contra Ags asociados a la diferenciación celular. De los hibridomas obtenidos fue seleccionado el AMC FC-2.15, de isotipo IgM, el cual reacciona con la mayoría de los carcinomas mamarios humanos, independientemente de su tipo histológico y grado de diferenciación, reconociendo en los mismos al 80 % de las células tumorales y al 90 % de las células proliferantes del tumor, entre las que se encuentran las células troncales. El AMC FC-2.15 reconoce otras neoplasias, como carcinoma de colon y leucemia mieloide crónica y presenta escasa reactividad con la mayoria de los tejidos normales, siendo la principal reacción cruzada con los leucocitos polimorfonucleares (PMN). En cuanto al Ag FC-2.15, la caracterización bioquímica inicial indicó un Ag de naturaleza glicoproteica, residiendo el epitope en la parte hidrocarbonada del mismo. Posteriores experimentos demostraron que el AMC FC-2.15 reconoce específicamente al trisacárido Lewis˟ o CD15, terminalmente expuesto. Esta conclusión está basada tanto en el reconocimiento específico del AMC FC-2.15 por diferentes estructuras conteniendo Lewis˟ como en la inhibición observada en un ELISA realizado utilizando un AMC comercial anti-CD15 como inhibidor. Asimismo, se determinó que el AMC FC-2.15 no presenta reacción cruzada con el tetrasacárido sialil Lewis˟, ni con su isómero Lewisª, así como tampoco con antígenos de grupo sanguíneo A o B La reactividad del AMC FC-2.15 en los diferentes tejidos FC-2.15 -positivos fue analizada por Western Blot sobre extractos de membrana y caracterizada determinando el efecto de digestiones enzimáticas (con PNGasaF y Neuraminidasa) en la persistencia del Ag. Los resultados obtenidos revelaron que Lewis˟ puede estar formando parte tanto de N-glicoproteínas como de O-mucinas. Según el tipo celular estudiado, Lewis˟ está presente en N-glicoproteínas exclusivamente (bandas de 250, 185 y 105 kDa en muestras de PMN y leucemia), predominantemente en N-glicoproteínas (bandas de 155 y 135 kDa, acompañadas con mucinas de mayor peso molecular, en células de carcinoma de colon T-84) o predominantemente en O-mucinas (células de carcinoma de mama MCF-7).También puede variar la cantidad de lactosaminoglicanos portando sialil Lewis˟, desde la ausencia (MCF-7), pasando por una baja proporción respecto de los Lewis˟-lactosaminoglicanos (PMN) hasta llegar a un gran predominio de los mismos en leucemias y T-84. Puede concluirse, por lo tanto, que PMN normales y diferentes células tumorales pueden expresar residuos Lewis˟ y sialil Lewis˟ en muy diferente proporción y unidos a diferentes proteínas, aunque la relevancia de Lewis˟ en condiciones normales y patológicas tiene que ser aún establecida. En cuanto a las propiedades funcionales del AMC FC-2.15, numerosos experimentos se han realizado en esta Tesis tendientes a caracterizar la interacción del AMC FC-2.15 con PMN y con MCF-7, tanto in vitro como en un sistema ex vivo de circulación sanguínea (SEVCS). Ensayos de aglutinación han demostrado que el AMC FC-2.15 induce la agregación homotípica de PMN in vitro y forma agregados heterotípicos entre PMN y células tumorales Lewis˟-positivas. Ensayos de liberación de han revelado que el AMC FC-2.15 ejerce un fuerte efecto citotóxico sobre los PMN y células MCF-7 por fijación de complemento humano. Posteriormente, con la idea de aproximar a las condiciones en las que el AMC FC-2.15 interacciona in vivo, el ensayo de liberación de fue realizado en sangre entera en circulación en un SEVCS. Contrariamente a lo esperado, el AMC FC-2.15 aglutina, pero no lisa, a los PMN mientras que la lisis de MCF-7 en dicho sistema es prácticamente normal. Estas observaciones permitieron plantear la posibilidad de que en el SEVCS los PMN serían inducidos a agregarse mas rápidamente por la suma de dos mecanismos distintos: el AMC FC-2.15 que activa a los PMN y el flujo aplicado. En la medida que los agregados van siendo formados, habría un impedimento estérico progresivo para el acceso de los factores del sistema de complemento a la porción Fc del AMC FC-2.15 y por ende los grumos de PMN formados no serían lisados. Los experimentos realizados posteriormente validaron esta hipótesis puesto que demostraron que el AMC FC-2.15 no lisa agregados homotípicos de PMN preformados en ensayos in vitro por un lado y que el AMC FC-2.15 es capaz de lisar a los PMN en el SEVCS, cuando la aglutinación de los mismos se impide por pretratamiento con colchicina, por otro. La lisis de MCF-7 en el SEVCS tendría lugar de todas formas debido a su incompleta agregación con los PMN. Puede concluirse entonces que la falta de lisis de los PMN por el AMC FC-2.15 en circulación y, que por el contrario, las células tumorales Lewis˟-positivas sean eficientemente lisadas, son dos caracteristicas importantes que avalan el uso del AMC FC-2.15 en el tratamiento de tumores Lewis˟-positivos, sin riesgo de producir una lisis masiva de los PMN circulantes. Los resultados presentados indican que el AMC FC-2.15 podría ser útil en la inmunoterapia pasiva de pacientes con carcinomas Lewis˟-positivos, sin necesidad de conjugarlo con drogas ni toxinas.

Abstract:
In order to produce monoclonal antibodies (mAb)against antigens (Ags) expressed by breast carcinoma stem cells, nude mice were immunized with tumor epithelial cells from a human undifferentiated primary breast carcinoma. This strategy was followed in order to minimize the production of mAb directed against differentiation-associated Ags. A mAb designated FC-2.15 (IgM) was selected. FC-2.15 reacts with the majority of human breast primary tumors, independently of their histology and hormone receptor content. Moreover, FC-2.15 reacts with 80% of total breast malignant tumor cells and with 90% of proliferanting tumor cells. It recognizes other neoplasia such us colon carcinoma and chronic myeloid leukemia and, among the normal tissues examined, strong cross reactivity was found principally with peripheral granulocytes (PMN). Biochemical studies indicate that FC-2.15 recognizes the carbohydrate moiety of different glycoproteins. Anaysis of epitope specificity has demonstrated that FC-2.15 specifically recognizes terminally exposed Lewis˟ (Lex)(CD15) trisaccharide, but not sialyl Lex, Lewisª, trifucosylated Lewis y, blood group Ags A and B, globo H and gangliosides. FC-2.15 reactivity with different FC-2.15-positive tissues was analyzed by Western blot and characterized by enzymatic digestions (PNGaseF and Neuraminidase). In PMN, myeloid leukemic cells and colon carcinoma T-84 cells, Lewis˟ was found to be almost exclusively N-linked to the protein core, whereas in breast carcinoma MCF-7 cells, Lewis˟ appears to be mostly O-linked. Treatment with Neuraminidase increased detection by FC-2.15 in normal PMN, myeloid leukemic cells and T-84 cells but not in MCF-7 cells. It may be concluded that normal PMN and different tumor cells may express Lex and sialyl Lex residues in quite different proportions and be bound to different proteins. The relevance of Lex in normal and pathological conditions remains to be established. Several experiments were performed in order to characterize the interaction of FC-2.15 with PMN and MCF-7 cells both in vitro and in ex vivo circulating blood (EVCB), as an approach to in vivo conditions. In vitro, the binding of Lex-epitopes by FC-2.15 induces PMN homotypic aggregation. When PMN and Lex-positive MCF-7 cells are co-incubated, FC-2.15 induces heterotypic aggregation. In 51Cr-release assays employing human complement, FC-2.15 exerts a rapid and strong cytotoxic effect against PMN. However, when the effect of FC-2.15 was tested in EVCB, no lytic activity against PMN was detected, whereas MCF-7 cells were still lysed. Blood smears demonstrated that FC-2.15 induced PMN agglutination and heterotypic aggregates when MCF-7 cells were present. A pre-treatment of PMN with colchicine impaired PMN agglutination both in vitro and in EVCB. In the latter conditions FC-2.15 lytic activity was restored, suggesting that PMN homotypic aggregation by FC-2.15, but not lysis is dependent of microtubules integrity and that PMN agglutination hinders their lysis. Moreover, when the 51Cr-release assays were performed following agglutination, FC-2.15-cytotoxicity was restricted to isolated PMN. It may be concluded the lack of PMN lysis by FC-2.15 in circulation is reassuring, and since Lex-positive tumor cells are efficiently lysed. FC-2.15 could be useful to eliminate circulating Lex-positive tumor cells.

Canosa, Luis Fabián. "Biosíntesis de esteroides testiculares y su regulación en el sapo Bufo arenarum (Amphibia, Anura)" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La presente Tesis describe el metabolismo de esteroides del testículo de Bufo arenamrm como así también algunos aspectos de la regulación del mismo. Durante el período no reproductivo, la biosíntesis de andrógenos (T y DHT) se realiza por una vía Δ5 que incluye al 5Diol como intermediario. P4 se transforma mayoritariamente en derivados reducidos como 5αP y 5αP3αol,20ona. La función biológica de estos esteroides reducidos en el testiculo de B. arenam se desconoce hasta el momento. En los animales capturados durante el período de reproducción, la capacidad biosintética del testículo se modifica. Este cambio va desde el predominio de esteroides con 19 átomos de carbono, que se observa en el período no reproductivo, hacia la formación de esteroides de 21 átomos de carbono. Así, se encuentra aumentada la transformación de P5 en P4 y la producción de 5αP; 5αP3α,20ona; 5αP3α,20(α/β)diol y un metabolito no caracterizado. La disminución de la síntesis de andrógenos, in vitro, se correlaciona con una disminución de la concentración plasmática de los mismos. Este cambio en el patrón esteroidogénico podría relacionarse con el final de la espermatogénesis (que depende de andrógenos) y el comienzo de la época de apareamiento. El mecanismo por el cual ocurren estos cambios consistiría, principalmente, en la reducción de la actividad de la enzima P450C17. Se confirma el fuerte efecto inhibitorio de CNK sobre la actividad de 3βHSD reportado previamente para interrenal de esta especie. SPNL ejerce un 50 % de inhibición de la actividad de C17-20 liasa, pero presenta un menor efecto sobre la hidroxilación en la posición C17. Finasteride es incapaz de inhibir a la 5αRed de sapo independientemente del sustrato utilizado. Esta enzima es de localización microsomal, tiene dependencia de NADPH como cofactor, presenta un Km menor para P4 que para T y un amplio rango de pH óptimo, entre 6 y 8. Las características mencionadas previamente son válidas tanto para la conversión de P4 como de T, lo que estaría sugiriendo la existencia de un único tipo enzimático para ambas reacciones. La falta de sensibilidad a Finasteride y el rango de pH óptimo de esta enzima se asemejan al tipo I caracterizado en mamíferos. Independientemente de la concentración utilizada, el tratamiento agudo con hCG in vitro no tiene efecto sobre la actividad de 5αRed. Sin embargo, el tratamiento crónico con hCG y FSH provoca una reducción de la actividad enzimática. Por otro lado, GnRH induce un aumento de la actividad de 5αRed, sólo en la menor concentración utilizada. Las actividades asociadas a la enzima P450c17 son inhibidas por el tratamiento crónico tanto con FSH como con GnRH en todas las concentraciones utilizadas y con hCG sólo en la mayor concentracion ensayada. Sin embargo, la actividad de 3βHSD no se ve influenciada por ninguno de estos tratamientos. GnRH, cuyos receptores testiculares se caracterizan en esta tesis, reduce la liberación de T inmunoreactiva tanto basal como estimulada por hCG. El efecto sobre la liberación basal de T solo se observa en la concentración más baja, al igual que lo que ocurre sobre la 5αRed. Por otro lado, el bloqueo de la acción de hCG sobre la secreción de andrógenos se ejerce en todas las concentraciones probadas. Estas diferencias sugieren que los mecanismos subyacentes para cada una de las inhibiciones provocadas por GnRH son diferentes.

Abstract:
This thesis describes studies on the steroid metabolism by the testes of Bufo arenarum as well as some aspects of its regulation. During the reproductive period, androgen biosynthesis (T and DHT) proceeds by a Δ5 pathway including 5Diol as intermediate. P4 mainly converts to reduced metabolites as 5αP and 5αP3αol,20one. At the moment, the function of those steroids in the testis of B. aremm remains unknown. In animals collected during the reproductive period, the biosynthetic properties changes from the predominance of C19-steroids observed during the non-reproductive period, to the formation of C21-steroids. The conversion of P5 to P4 increases together with the production of 5αP; 5αP3α,20one; 5αP3α,20(α/β)diol and an uncharacterized metabolite. Otherwise, there is a correlation between the reduction of androgen biosynthesis in vitro and its plasmatic concentration. These changes in biosynthetic characteristics could be related to the end of androgen-dependent spermatogenesis and the beginning of the breeding season. These changes could be mainly due to a reduction in P450c17 activity. The strong inhibitory effect of CNK on 3βHSD, previously reported for interrenal of this species, is confirmed. SPNL, inhibits 70% the C17-20 lyase activity, but has a lower effect on C17-hydroxylation. Finasteride fails to affect toad enzyme activity when T or P4 are used as substrates. 5α-Red activity localizes in microsomal fraction, uses NADPH as a cofactor and Krn values for P4 is lesser than for T, having broad pH-optima for both substrates. Taken together, these results suggest that toad 5α-Red possesses some characteristics (pH-dependence and Finasteride insensitivity) resembling of type I mammalian enzyme. Acute in vitro treatments with hCG, independently of the concentrations used, do not affect 5αRed activity. However, chronic administration of hCG and FSH provokes a strong reduction of the enzyme activity. Besides, GnRH induces an increment of the mentioned activity only at the lower concentration used. Both FSH and GnRH at all tested concentrations and hCG at the higher concentration inhibit P450cl7 associated activities. However, 3βHSD activity is not modified by any of these treatments. GnRH receptors in testicular tissue were characterized. GaRH reduces basal irnmunoreactive-T secretion only at the low concentration used as it was mentioned for 5α-Red However, in all concentrations employed, GnRH inhibits hCG-stimulated increase of ir-T. These differences suggest that the undergoing mechanisms for each type of GnRH-inhibition are different.

Calzetta Resio, Andrea Nilda. "Almidón de amaranto : Obtención y evalución de sus características fisicoquímicas" (1999). Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Buschiazzo, Alejandro. "Estudios moleculares de sialidasas de Trypanosomátidos : relación estructura/función" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La trans-sialidasa de Trypanosoma cruzi es una enzima cuya existencia fue postulada en 1985 cuando se probó que este parásito intracelular de células de mamífero, posee ácido siálico conjugado a sus propias moléculas de superficie. La trans-sialidasa fue posteriormente purificada, caracterizada enzimáticamente y su gen clonado. Así se demostró en primer lugar, que era una actividad novedosa como transglicosidasa, ya que no utiliza como sustrato un dador nucleótido-azúcar, que en todas las otras sialiltransferasas cucarióticas conocidas, es el CMP-siálico. En segundo lugar, el análisis de secuencia reveló una lejana pero evidente homología con varias sialidasas bacterianas, y no con las sialiltransferasas eucariotas. En los últimos años han surgido distintos tipos de evidencias experimentales, que involucran a la trans-sialidasa en los mecanismos de adhesión/invasión de T. cruzi a las células del mamífero huésped, en el escape temprano de parásitos invasivos de la vacuola parasitófora de la célula hospedadora y en la evasión del camino alternativo de fijación del complemento. La actividad de trans-sialidasa, ha sido detectada hasta el momento sólo en T. cruzi y en dos parásitos tripanosomátidos emparentados, T. brucei y Endotrypanum sp. En algunos otros tripanosomátidos se han encontrado sialidasas, pero sin actividad de transferasa detectable, como en el caso de T. rangeli. Hasta ahora no se sabía si la sialidasa de este parásito no patogénico, estaba relacionada con la trans-sialidasa. Con el objetivo de comprender el(los) mecanismo(s) en el(los) que la trans-sialidasa está involucrada, en relación a la interacción huésped/parásito, en este trabajo de Tesis se ha avanzado en distintos aspectos del estudio molecular de la trans-sialidasa de T. cruzi y la sialidasa de T. rangeli: 1. Se optimizaron los sistemas de expresión y purificación de la trans-sialidasa recombinante con el fin de obtener grandes cantidades de proteína >95% pura. 2. Se utilizó trans-sialidasa recombinante pura como material inicial para cristalizar y comenzar estudios cristalográficos por difracción de rayos X, tendientes a resolver la estructura tridimensional de la misma. Además de las variaciones convencionales en los métodos y condiciones de cristalización, y mientras no se obtengan cristales adecuados, se procedió a buscar la separación de dominios parciales de la proteina para cristalizar de forma independiente. 3. En paralelo con los puntos anteriores, se demostró que la sialidasa de T rangelí es homóloga a la trans-sialidasa dc T. cruzi. Para ello se purificó la sialidasa nativa a partir de sobrenadantes de cultivo de T. rangeli, se microsecuenció y se logró clonar trece genes homólogos, miembros de lo que hemos denominado la familia multigénica de la sialidasa de T. rangeli. 4. Tres de los genes clonados codifican proteínas recombinantes con actividad de sialidasa comparable a la de la enzima nativa cuando se expresan en Escherichia coli. Uno de ellos fue secuenciado completamente, revelando una identidad en aminoácidos de 68.9% cuando se lo compara con la trans-sialidasa de T. cruzi, aumentando a una similitud dc 86.7% si se admiten sustituciones conservativas. 5. Se cristalizó la enzima nativa de T.rangeli sola y ligada a un inhibidor competitivo. Se resolvió su estructura tridimensional a partir del patrón de difracción de rayos X, hasta una resolución de 2.2Å. En paralelo se resolvió la estructura tridimensional de la misma proteína acomplejada al inhibidor hasta 2.9Å. 6. Se modelizó la estructura tridimensional de la trans-sialidasa, tomando como referencia inicial las coordenadas atómicas de la sialidasa, dada la gran homología entre las dos proteínas. 7. Se construyeron y expresaron moléculas quiméricas entre ambas enzimas con el objetivo de avanzar en la definición de regiones y/o residuos claves en la transglicosilación.

Abstract:
The trans-sialidase from Trypanosoma cruzi is an enzyme, which was predicted to exist in 1985, in order to explain the presence of sialic acid bound to surface molecules of this intracellular parasite of mammalian cells. Trans-sialidase was later purified, enzymatically characterized and its gene cloned. In this way it was shown in the first place, that it is a novel type of transglycosidase, since it does not use a sugar-nucleotide as the donor substrate, which is CMP-sialic acid in all the other known cukaryotic sialyltransferases. In the second place, the sequence analysis revealed a low level of homology with several bacterial sialidases, and not with eukaryotic sialyltransferases. Over the last few years different types of experimental evidence have appeared. involving the trans-sialidase of T. cruzi in the adhesion/invasion mechanisms that the parasite uses in the interaction with mammalian host cells, in the early escape of invasive parasites from the parasitophorous vacuole in recently invaded host cells and in the parasite evasion from the alternative pathway of complement activation. Trans-sialidase activity has been detected only in T. cruzi and in two related Trypanosomatidae parasites. T. brucei and Endotrypunum sp. Sialidases have been identified in some other Trypanosomatidae, but lacking detectable transferase activity, as in the case of T. rangeli. Until now it was not known if the sialidase from this non-pathogenic parasite, was related with trans-sialidase. In order to understand the mechanism(s) in which trans-sialidase is involved, with respect to hostcell/ parasite interaction, this PhD Thesis has contributed to advance in different aspects of the molecular study of the trans-sialidase from T. cruzi and the sialidase from T. rangeli: 1. The systems ofexpression and purification of recombinant trans-sialidase were optimized with the purpose of obtaining great quantity of highly pure (>95%) protein. 2. Pure recombinant trans-sialidase was used as the starting material in crystallization screenings, looking for suitable crystals to perform crystallographic studies by X ray diffraction, that would render its three-dimensional structure. Added to the conventional matrix variations in the crystallogonesis screenings, and until suitable crystals appear, a simultaneous approach was performed, searching for the separation of partial domains of the protein that could be crystallized independently. 3. In parallel with these points, it was demonstrated that the sialidase from T rangei is homologous to the the trans-sialidase of T. cruzi. With this purpose, the native sialidase was purified from culture supernatants of T. rangeli, and microsequenced. Thereafter, thirteen homologous genes were cloned, and grouped in what we have denominated the multigenic sialidase family of T. rangeli. 4. Three of the cloned genes encode recombinant proteins with sialidase activity, similar to the native enzyme's, when they are expressed in Escherichia coli. One of them was completely sequenced, showing an overall identity of 68.9% at the amino acid level, compared to the trans-sialidase from T cruzi. The similarity increases to 86.7% if conservative substitutions are admitted. 5. The T. rangeli native enzyme was crystallized, alone and complexed with a competitive inhibitor. Its three-dimensional structure was solved by X ray diffraction pattern analysis, up to 2.2Å resolution. The three-dimensional structure of the complex with the inhibitor was solved simultaneously to 2.9Å. 6. The three-dimensional structure of the trans-sialidase from T. cruzi was modelled, taking the atomic coordinates of the sialidase, as initial reference, given the high homology level between both proteins. 7. Chimeric molecules between both proteins were constructed and expressed. with the purpose of advancing in the definition of key regions and/or residues responsible for the transglycosylation activity.

Bruttomesso, Andrea Claudia. "Síntesis estéreoselectivas de (20S) 3 beta,16 beta-dihidroxi-5 -pregnan-20,16-carbolactona (Tigogeninlactona) y (20S) 3 beta, 16 beta-dihidroxi-5-pregnen-20,16-carbolactona (Diosgeninlactona) : Aplicaciones de reacciones biocatalíticas a la preparación de derivados esteroidales relacionados" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se llevaron a cabo las síntesis estéreoselectivas de (20S)-3β,16β-dihidroxi-5α- pregnan-20,16-carbolactona (Tigogeninlactona) y de (20S)-3β,16β-dihidroxipregn-5- en-20,16-carbolactona (Diosgeninlactona), con excelente rendimiento utilizando 3β-hidroxi- 5α-androstano ó 3β-hidroxi-5-androsteno, respectivamente como materiales de partida. Ambas lactonas son posibles intermediarios catabólicos en la transformación de esteroides alcaloidales en 3β-hidroxi-5α-pregn-16-en-20-ona. Para obtener el anillo E γ-lactónico β-fusionado se estudiaron varias estrategias. La clave del éxito fue la construcción de una cadena lateral de 2 átomos de carbono en C-l7, previamente a la oxigenación de la posición alílica C-16. Por posterior adición de Michael de cianuro a una cetona conjugada y lactonización se obtuvieron las mencionadas lactonas. Estudios anteriores que involucraban la construcción de una cadena lateral de tres átomos de carbono sobre el C- l7 de un derivado l7-oxo-l6β-hidroxi, dieron por resultado la obtención de la γ-lactona epímera en C-16 y C-l7. La síntesis de Tigogeninlactona realizada en este trabajo es la primera de alto rendimiento mientras que la de Diosgeninlactona, producto natural aislado de Solanum vespertilio, constituye la primera síntesis informada. Por último se realizó la desacetilación regioselectiva en solventes orgánicos de una serie de derivados di y triacetilados de androstanos utilizando diferentes lipasas. Los mejores resultados se obtuvieron con las lipasas de Candida cylindracea (CCL) y de Candida antarctica (CAL). En algunos derivados dichas enzimas actuaron en forma complementaria y regioselectiva removiendo el grupo acetilo de la posición 3β o l7β.

Abstract:
(20S)-3β,16β-dihydroxy-5α-pregnan-20,l6-carbolactone (tigogeninlactone) and (20S)-3β,16β-Dihydroxypregn-5-en-20, 16-carbolactone (Diosgeninlactone) were stereoselectively synthesized in high yield from 3β-hydroxy-5α-androstane or 3β-hidroxi- 5-androsteno respectively. Both lactones are possibly intermediaries on the catabolic pathway from steroidal alkaloid to 3β-hydroxy-5α-pregn-16-en-20-one. Many strategies have been explored for the construction of the β-fused γ-lactonic ring E. The attachment of a 2-carbon side chain on C-17 previously to the allylic oxidation of C-16 was the key step in the synthesis. The above lactones were finally obtained by a Michael addition of cyanide to a conjugated ketone and lactonization. Early studies involving the connection of a 3-carbon side chain on C-17 of a l7-oxo- l6β-acetoxyandrostane led to the epimeric α-oriented lactone. This is the first high efficient stereoselective protocol for the preparation of Tigogeninlactone and is the first synthesis of Diosgeninlactone, natural product from Solanum vespertilio. Finally, a series of di and triacetoxy derivatives of androstane was regioselectively deacetylated in organic solvents by several lipases. The most satisfactory results were obtained with lipase from Candida cylindracea (CCL) and Candida antarctica (CAL). In some derivatives, CCL and CAL acted in a complementary and regioselective manner, removing the 3β- or the l7β-acetyl group.

Bragas, Andrea Verónica. "Interacciones de la luz con una unión túnel (en un Microscopio de Efecto Túnel)" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Borodinsky, Laura Noemí. "Influencia de la actividad neuronal sobre el desarrollo y trofismo de las células granulares del cerebelo en cultivo" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo de tesis se presenta un estudio sobre los mecanismos por los cuales la actividad neuronal modularía el desarrollo y el trofismo del Sistema Nervioso Central. Se evaluó la influencia de concentraciones despolarizantes de KCI y de GABA sobre la proliferación de células granulares del cerebelo inmaduras y sobre la morfología y la supervivencia de neuronas diferenciadas in Vitro. Se disecaron cerebelos de ratas de 6 a 8 días de edad, y se obtuvieron suspensiones celulares que fueron sembradas en medio de cultivo libre de suero o bien en medio suplementado con un 10% de suero fetal bovino. Apartir de los estudios de incorporación de timidina ³H se observó que las células una vez sembradas poseen un pico proliferativo en las primeras 24 horas de cultivo, que desciende significativamente a las 48 horas y alcanza valores blanco luego de las 72 horas. El agregado de KCl 25 mM en el momento de la siembra conduce a un aumento de la síntesis de ADN del 34 ± 4% (n: 14), y este efecto es completamente bloqueado por MgCl2 10 mM y por nifedipina 10 μM (bloqueante de canales de Ca²+ tipo L). El GABA(0.1-100μM) también induce un incremento de la proliferación de las células granulares inmaduras (23 ± 1%, n: 10) y dicho efecto también es bloqueado por MgCl2 10 mM y por nifedipina 10 μM así como por bicuculina (antagonista de receptores GABAa) y picrotoxina (bloqueante del canal de Clˉ). La preincubación con un inhibidor de la quinasa -MEK1- de la proteína quinasa activada por mitógeno (MAPK), PD98059, bloquea en forma efectiva la proliferación celular inducida por KCl 25 mM y GABA. El efecto proliferativo del KCl parece ser debido a una directa activación de los canales de Ca²+ que se produce como consecuencia de la despolarización y no requiere de sustancias tróficas presentes en el suero o de glutamato que se podría liberar como consecuencia de Ia despolarización. Por el contrario, el mecanismo por el cual el GABA aumenta la proliferación es más complejo pues requiere de una membrana despolarizada y de la interacción de sustancias tróficas presentes en el suero. Al evaluar la influencia del GABA y de concentraciones despolarizantes de KCl sobre la neuritogénesis, se observó que ambos agentes producen un aumento de la complejidad de la red neurítica, cuantificada a través de la medición de la dimensión fractal de neuronas aisladas sembradas por 48 horas en cultivos de baja densidad. Este efecto es bloqueado por el agregado de nifedipina 10 μM. El tratamiento de los cultivos con KCl 25 mM promueve la supervivencia neuronal a los 7 días de la siembra, produciendo un incremento de la misma del 100 ± 20% (n: 6) cuando se la compara con la supervivencia celular en cultivos crecidos en KCl 5 mM (condiciones de reposo). Este aumento fue bloqueado por MgCl2 y nifedipina, pero no fue bloqueado por PD98059. Por el contrario, el tratamiento con GABA no afecta la supervivencia neuronal. Se concluye que altas concentraciones de KCl y el agregado de GABA inducen un aumento de la proliferación y de la complejidad neuronal debido al influjo de calcio a través de canales voltaje dependientes de tipo L y la consecuente activación de la cascada de la MAPK. El hecho de que el GABA no afecte la supervivencia neuronal parece estar relacionado con la pérdida de la capacidad del GABA para activar un influjo de calcio ya que el KCl sí aumenta la supervivencia. A diferencia de lo que sucede en el caso de la proliferación, el aumento de la supervivencia neuronal debido a concentraciones despolarizantes de KCl no parece ser mediado por la cascada de la MAPK.

Bonomo, Néstor Eduardo. "Haces electromagnéticos espacialmente limitados : estudio vectorial de la dispersión en superficies" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Bilotti, Luis Gustavo. "Evaluación de triticale, trigo y centeno como sustratos para la producción de aflatoxinas" (1999). Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El triticale, cereal sintético derivado del cruzamiento del trigo con centeno, es un cultivo con promisorias perspectivas en cuanto a satisfacer las necesidades del hombre de más y mejores alimentos. Además de su buen rendimiento, ya sea como forrajera o para la producción de grano, el triticale parece combinar algunas de las mejores cualidades de sus antecesores. Junto con las aptitudes del trigo para la elaboración de diferentes tipos de alimentos, posee la capacidad que tiene el centeno de adaptarse a ambientes adversos, así como la resistencia a diversas plagas y enfermedades. La información existente sobre la contaminación de este cereal con micotoxinas es muy escasa. El principal objetivo de este trabajo de Tesis fue evaluar el comportamiento del triticale como sustrato para la biosíntesis de aflatoxinas, en comparación con los cultivos parentales. Para ello se obtuvieron las curvas de acumulación de aflatoxinas B1, B2, GI y G; en función del tiempo para los tres sustratos inoculados con una cepa toxicogénica (Aspergillus parasiticus NRRL 2999) e incubados en condiciones ambientales controladas (25°C y actividad acuosa 0,925) durante 10 semanas. Los parámetros cinéticos obtenidos de estas curvas ( Pi: período de iniciación de la producción de aflatoxinas; Am: máxima concentración acumulada; Tm: tiempo necesario para alcanzar la acumulación máxima) permitieron comprobar que los dos cereales progenitores se comportan de manera diferente. Las concentraciones máximas de aflatoxinas fueron mayores en el centeno que en el trigo (de 5 a 10 veces para las diferentes toxinas), observándose también en el centeno una rápida coloniución por parte del hongo toxicogénico. El triticale mostró un comportamiento similar al del trigo y ambos, también en comparación con otros granos como maíz y girasol, parecen ser sustratos poco propensos a la contaminación con aflatoxinasla diferencia de comportamiento no parece estar relacionada con el tamaño de los granos, como se ha sugerido, sino con algunos de los constituyentes de la composición química que podrían tener influencia en la biosíntesis de las aflatoxinas. Otro aporte del presente trabajo es la puesta a punto de un método modificado de análisis de aflatoxinas que demostró poseer adecuadas caracteristicas de ejecución en los tres sustratos estudiados.

Abstract:
Triticale is a hybrid resulting from crossing wheat and rye. It combines many of the best qualities of both its prodigious parents. It can have most of wheat’s qualities for making various types of noodles, pastries and some breads; and it can have most of rye’s disease resistance, drought tolerance and adaptability to harsh environments. Little is known about mycotoxins contamination in this promising crop. The main purpose of this Thesis was to evaluate the triticale as substrate for aflatoxin accumulation in comparison with its parents. Aflatoxins (B1, B2, G, and G2 ) accumulation curves were obtained for the three substrates inoculated with Aspergillus parasiticus NRRL 2999 and incubated at 25°C and water activity 0,925 for 10 weeks. Kinetic parameters from the accumulation curves (Pi: initiation period; Am: maximum accumulation ; Tm: time for maximum accumulation) were analyzed. Rye was more prone than wheat to a fast colonization by A. parasiticus and accumulated larger aflatoxins quantities over the whole incubation period. Maximum aflatoxins concentrations on rye were larger (5 to 10 times for each toxin) than those obtained on wheat. Triticale behaved similarly to wheat: both of them were poor substrates for aflatoxins production, also in comparison with other grains such as corn and sunflower. It is well known that, in general, natural incidence of aflatoxins is low in small grains, but this behaviour seems to bc more related with chemical composition than with the size of the seeds. In this work a modified method was proposed for the aflatoxin analysis. According to its analytical attributes, this method is suitable for aflatoxins analysis on wheat, rye and triticale.

Becher, Verónica Andrea. "Funciones binarias para el cambio de teorías" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Barja, Beatriz Carmen. "Interacción química del herbicida glifosato y compuestos relacionados con Fe (III)" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo se realizó el estudio de las reacciones químicas en solución acuosa y en estado sólido del herbicida glifosato (N-fosfonometilglicina, (PMG)) y compuestos relacionados (ácidos metilfosfónico (MPA), aminometilfosfónico (AMPA), sarcosina (N-metilglicina (MG)) con Fe(III) así como el de las reacciones de adsorción sobre la superficie de óxidos en suspensión acuosa. Se evaluaron los espectros ATR-FTIR en solución acuosa de los cuatro ligandos y se determinaron las constantes ácido-base del MPA y del PMG. Se estudiaron las interacciones químicas del PMG,el MPA y el AMPA con Fe (III) en solución acuosa obteniéndose un complejo de relación 1:1 metal:ligando. Para la Sarcosina no se observo formación del complejo en las condiciones del presente trabajo. Se sintetizaron los complejos en estado sólido del MPA,AMPA, y PMG con Fe(III), Al(III) y Co(III). Se obtuvieron compuestos de relación 2:3, 1:2 y 1:1 para Fe(III):MPA, Fe(III):AMPA y Fe(III):PMG respectivamente; 1:2 para Co(III):PMG y 1:1 para Al(III):PMG. Se estudiaron e interpretaron los espectros interfaciales de los complejos superficiales formados por los diferentes ligandos sobre la goethita. Se propusieron tres estructuras para los complejos con MPA y AMPA a las que se agrega una cuarta para el caso del PMG. Se midieron las movilidades electroforéticas de MPA/goethita y PMG/goethita para evaluar las cargas superficiales remanentes sobre el óxido de hierro debidas a la presencia de los complejos superficiales propuestos. Se realizó un estudio detallado de las isotermas de adsorción sobre goethita en función del pH y concentraciones variables de MPA,AMPA y PMG. Se determinaron las constantes de complejación superficial utilizando el modelo de la capacitancia constante.

Abstract:
The study of the chemical reactions in aqueous solution and solid state of glyphosate (N-phosphonomethylglycine, (PMG)) and related compounds (methylphosphonic acid (MPA), aminomethylphosphonic acid (AMPA), sarcosine (N-methylglycine (MG)) with Fe(III) was performed. The adsorption processes onto iron (III) oxides are also presented. The ATR-FTIR spectra of the four ligands were evaluated and the acid-base constants for MPA and PMG were calculated. The chemical interactions in aqueous solutions of PMG, MPA and AMPA with Fe (III) were evaluated. A 1:1 metal:ligand ratio complex was obtained for each ligand. The sarcosine complex formation was not observed for our experimental conditions. The complexes of MPA, AMPA, and PMG with Fe(III) in solid state were synthesized. A metal:ligand ratio of 2:3, 1:2 and 1:1 for Fe(III):MPA, Fe(III):AMPA and Fe(III):PMG respectiver are reported. The complexes of PMG with Co(III) and Al(III) were also obtained with a metal:ligand ratio of 1:2 and 1:1 respectively. The interfacial spectra of the surface complexes onto goethite were studied. Three surfaces complexes were postulated for MPA and AMPA, while a fourth one was necessary to explain the PMG/goethite adsorption behaviour. Electrophoretic mobilities were measured for MPA/goethite and PMG/goethite systems. The surface charge on iron oxide due to the presence of the surface complex was evaluated. The adsorption isotherms were studied for MPA,AMPA and PMG. The pH and concentration dependence was measured and the surface complexes formation constants were calculated using the constant capacitance model.

Aparicio, Juan Pablo. "Dinámica de procesos epidémicos" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los sistemas de poblaciones interactuantes se encuentran en áreas tan diversas como ecología, interacción de la luz con la materia, cinética química o economía. En esta tesis hemos abordado dos problemas concretos de carácter epidemiológico. Por un lado estudiamos un caso prototípico de control biológico: la mixomatosis. Esta enfermedad altamente mortal de los conejos europeos (Orictolagus cuniculus) es el principal factor regulatorio de las poblaciones silvestres de O. cuniculus en Australia y gran parte de Europa. Nosotros estudiamos la dinámica y coevolución del sistema poniendo especial énfasis en la coexistencia de cepas de myxoma. Considerando la resistencia diferencial a la enfermedad observada en los hospedadores, podemos obtener coexistencia local de cepas de myxoma. Se exploran las consecuencias de la espacialidad y se muestra que bajo condiciones compatibles con la estructura y distribución de las poblaciones silvestres de conejos europeos, la coexistencia metapoblacional es posible. Finalmente discutimos sobre la aplicación a estrategias de control y qué podemos prever sobre el futuro de la interacción. El otro caso de estudio fue la tuberculosis, una enfermedad usualmente considerada como del pasado, pero que continua siendo una de las principales causas de muerte por enfermedad en el mundo. Durante al menos siglo y medio las tasas de tuberculosis mostraron una sostenida declinación, pero por alrededor de mediados de la década del 80 comenzaron a aumentar sus indices en varias partes del mundo incluyendo Argentina, Estados Unidos, y varios países de Europa occidental. La busqueda de las causas detrás de este inesperado y no bien venido regreso motivó el desarrollo de numerosas hipótesis y trabajos. Nosotros desarrollamos nuevos modelos para la transmisión y dinámica de la tuberculosis basados en la diferenciación entre los tipos de contactos que cada persona tiene con los demás. Encontramos la expresión para el número reproductivo básico, y mostrarnos que nuestros modelos se pueden aproximar por modelos clásicos con mezcla homogénea donde el coeficiente de transmisión es directamente proporcional al numero reproductivo básico encontrado. De la formulación surge en forma natural que, en la aproximación de mezcla homogénea, debe utilizarse la Ley de acción de masas verdadera. Utilizando el modelo aproximado con mezcla homogénea estudiamos la historia natural de la tuberculosis. Desde la industrialización hasta mediados del siglo veinte tuvo lugar un período de transición histórica produciéndose un abrupto cambio en las condiciones de vida de la población. Nuestra hipotesis fundamental es que el riesgo de desarrollar tuberculosis activa varió pronunciadamente durante este corto periodo de tiempo, y que la forma funcional de la misma puede inferirse de la evolución observada de la expectativa de vida al nacer. Bajo esta hipotesis nuestro modelo posee, esencialmente, solo dos parámetros libres, los cuales alcanzan para ajustar los doscientos últimos años de evolución de la tuberculosis. En particular mostramos que la reemergencia de la tuberculosis puede ser un fenómeno natural de la dinámica de la enfermedad y que no necesariamente tiene que estar ligado a un empeoramiento de las condiciones epidemiológicas. En la busqueda de respuestas a los diversos problemas que nos plantearon los casos de estudio surgieron procedimientos metodológicos y otros problemas de características generales. Este material se colectó en un capitulo separado. Es conocido que para los sistemas con estocasticidad demográfica el tratamiento por medio de ecuaciones diferenciales estocásticas de tipo Langevin no es aplicable, sin embargo su uso y abuso es muy difundido, en muchos casos con buenos resultados, y en otros con resultados absolutamente erroneos. Nosotros mostramos que todo sistema con estocasticidad demográfica puede aproximarse por un sistema de ecuaciones en diferencias estocástica. Bajo ciertas condiciones este sistema puede aproximarse además, por uno conteniendo términos de deriva deterministica y difusión estocástica similares a los de la formulación de Langevin. En este último caso, nuestros resultados y los obtenidos por medio de ecuaciones tipo Langevin son esencialmente los mismos. Finalmente explicamos la propiedad que tienen ciertos sistemas estocásticos de generar oscilaciones y mantenerlas indefinidamente en contraposición de los correspondientes sistemas determinísticos que muestran oscilaciones rápidamente amortiguadas.

Abstract:
Systems of interacting populations are frequently found in a diversity of fields including ecology, light-matter interaction, chemical kinetics and economy. In this thesis we work on two problems arising from host-parasite systems. First, we studied some dynamical aspects of the myxomatosis, the highly lethal viral disease of European rabbits Orictolagus cuniculus. Myxomatosis is a classical example of successful biological control, and still is the main regulatory factor of the wild European rabbit populations in Australia and large parts of Europe. We developed and analyzed several models for the dynamics of the system including the coevolution process. A significant part of the work was devoted to explain the coexistence of different strains of myxoma observed in the field. Accounting for the observed differential host resistance to the disease in the host individuals, coexistence of two viral strains was achieved. We also explore the consequences of spatiality. We show that the structure, size, and distribution of the wild rabbits populations are compatible with a coexistence based in the concept of metapopulations. Finally, We discuss the application of our results to control strategies, and what can be expected for the future of this host-parasite interaction. The other case-study was tuberculosis (TB). Considered as a disease of the past until the 80’, it remains as one of the main causes of death by an infections disease around the world. Over the last 150 years, TB rates has shown a marked declining tendency, but in the last two decades, TB cases reached an almost stable levels in several countries including Argentina, United States, and many countries of western Europe. The explanation of this paradoxically behavior remains as an open problem of the epidemiology. We developed and studied new models for the transmission and dynamics of the tuberculosis. Our main modeling goal resides in the distinguishing between the different types of contact networks for each person. We find the basic reproductive number for the models, and we show that our models can be reduced to a corresponding approximate model with homogeneous mixing. In this case the transmission coefficient is proportional to the basic reproductive number of the complete systems. It follows from our formulation that under the homogeneous mixing approximation, the true mass action law holds. Using the approximate model we propose a new explanation for the natural history of tuberculosis. We point out that over the past 150 year a historical transition period took place. We assume that the risk of developing active TB changed abruptly between the days of industrialization and our days. Our main liypothesis is that we may infer the functional form for the variation of this risk from the observed variation of the life expectancy at birth. In such circumstances our model posses only two free parameters. We show that there are parameter values, within the range accepted, which allows us to reproduce the last 150 years of the natural history of tuberculosis. We also show that the present re-emergence may be a dynamical phenomenon of the systems not necessarily linked with the deterioration of the epidemiological conditions. In the course of our work, we developed new methodologies, while new and general problems arouse. We collect this new material in a separate chapter. It is known that, in general, the Langevin formulation does not apply to system with stochastic demography (or internal noise). However there is an extended use (and abuse) of the Langevin formalism in a variety of problems with stochastic demography, and in some cases it reaches success. We show that every system with stochastic demography can be approximated by a system of stochastic difference equations. A further approximation may be performed producing a system with drift and diffusion terms corresponding with the Langevin formulation. In this last case the results obtained with both formalism are, essentially, identical. Finally, we explain the sustained oscillation presented by some stochastic systems which have deterministic counterparts with damped oscillations.

Amela García, María T.. "Biología floral y sistema reproductivo de especies nativas de Passiflora (Passifloraceae) de la Argentina" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se estudió el sistema reproductivo, el sindrome de polinización y los polinizadores de especies de Passiflora pertenecientes a 3 subgéneros: P. mooreana, P. caerulea, P. palmarisecla (subg. Passiflora), P. foelida, P. chrysophylla (subg. Dysosmia), P. capsularis, P. misera, P. urnaefolia y P. suberosa (subg. Decaloba). P. mooreana y P. caerulea son autoincompatibles, melitófilas, polinizadas por varias especies de Xylocopa. P. palmatisecta parece esfingófila. P. foetida y P. chrysophylla son parcialmente autocompatibles, melitófilas, polinizadas por Ptiloglossa sp. P. misera no se autopoliniza espontáneamente, es melitófila, polinizada por Ptiloglossa sp. P. urnaefolia es melitófila, polinizada por Xylocopa eximia y Bombus tucumanus. P. suberosa es altamente autocompatible, presenta características de flores polinizadas por avispas, abejas y moscas. P. capsularis es parcialmente autocompatible, aparentemente falaenófila. Se distinguieron 3 fases florales: la 1 y la 3 dadoras de polen, 1 a 2, receptora. Sólo existe hercogamia en las fases 1 y 3, debido a los movimientos estilares. La receptividad estigmática es continua, más intensa en la fase 2. En las especies que se detectaron guías de néctar en los espectros visible y UV, éstas consisten en círculos concéntricos, siendo el central más oscuro. Las precipitaciones, nubosidad, temperatura baja, humedad elevada y sombra prolongan la antesis.

Abstract:
The breeding system, the pollination syndrome and the pollinators of Passiflora species belonging to 3 subgenera were studied: P. mooreana, P. caerulea, P. palmatisecta (subg. Passiflora), P. foetida, P. chrysophylla (subg. Dysosmia), P. capsularis, P. misera, P. urnaefolia and P. suberosa (subg. Decaloba). P. mooreana and P. caerulea are self-incompatible, melittophilic, pollinated by several species of Xylocopa. P. palmatisecta seems sphingophilic. P. foetida and P. chrysophylla are partially self compatible, melittophylic, pollinated by Ptiloglossa sp. Spontaneous self pollination does not occur in P. misera, it is melittophylic, pollinated by Ptiloglossa sp. P. urnaefolia is melittophylic, pollinated by Xylocopa eximia and Bombus tucumanus. P. suberosa is highly self-compatible and has features of flowers pollinated by wasps, bees and flies. P. capsularis is partially self-compatible, presumably phalaenophilic. Three floral phases were distinguished: the first and the third pollen donors, the second, pollen receptor. Due to the stylar movements, herkogamy is only present in phase 1 and 3. Stigmatic receptivity is continuous, more intense in phase 2. In the species where nectar guides were detected in the visible and UV spectra, those consist in concentric circles, the central one darker. Precipitation, cloudiness, low temperature, high humidity and shade make anthesis longer.

Allocati, Patricia Andrea. "Proteolisis en leche cruda y procesada" (1999). Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Alcober, Carlos Santiago. "Películas delgadas de semiconductores en medios acuosos" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Agustí, Rosalía. "Estudio estructural de componentes de membrana de formas infectantes de Trypanosoma cruzi liberados al medio de cultivo" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En el presente trabajo de tesis se realizó la determinación estructural de compuestos liberados al medio de cultivo por formas infectantes de T. cruzi. El estudio comprendió tres aspectos: Estudio químico de los compuestos lipídicos liberados: Sólo ciertos componentes de la membrana son liberados (PC, LPC, sulfátido, IPL, ácidos grasos). Es significativa la ausencia de PE ya que es un componente importante de la membrana. Por otra parte, algunos de los compuestos liberados presentan diferencias estructurales con los análogos del parásito, principalmente en los ácidos grasos componentes. La segunda parte abarcó el estudio estructural del ancla glicolipídica de la trans-sialidasa: se caracterizó una estructura de glicoinositolfosfolípido, formada mayoritariamente por ceramida en las formas trypomastigote metacíclicas y ceramida y alquilglicerol en relación 3:1 en las formas trypomastigote. La fracción oligosacarídica contiene una unidad de α-galactosa caracterizada por primera vez como componente de anclas en Trypanosoma cruzi. El tercer aspecto consistió en un estudio estructural de la cadena N-glicosidica de Tc-85 liberada al medio: el análisis por HPAE-PAD permitió determinar tres cadenas de menor longitud que las presentes en el oligosacárido de la proteína aislada de parásitos. Las cadenas difieren en el monosacárido presente en el extremo no reductor.

Abstract:
In this Thesis a structural determination of compounds shed to the culture medium by infective forms of Trypanosoma cruzi was performed. The study covered three topics: Chemical study of the lipidic compounds: only some membrane components were shed (PC, LPC, sulfatide, IPL, fatty acids). It was striking the absence of PE, considering that it is an important component of the membrane. Besides, some of the shed compounds evidenced structural differences with the analogues isolated from the parasite, mostly in their fatty acid composition. The second part comprised the structural study of the glycolipidic anchor of the trans-sialidase. It was characterized a glycoinositolphospholipid structure, containing a ceramide in the metacyclic trypomastigote forms and, ceramide and alkylglycerol in a 3:1 ratio in the trypomastigote forms. The oligosaccharide fraction contained an α-galactose unit, characterized for the first time as a component of an anchor in T. cruzi. The third topic was the study of the N-linked oligosaccharides of the glycoprotein Tc-85 shed to the culture medium. An analysis by HPAE-PAD allowed the determination of three chains shorter than the oligosaccharide present in the protein isolated from trypomatigote forms. The three chains differed in the monosaccharide unit at the non-reducing terminus.

http://digital.bl.fcen.uba.ar

Biblioteca Central Dr. Luis Federico Leloir - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales - Universidad de Buenos Aires
Intendente Güiraldes 2160 - Ciudad Universitaria - Pabellón II - C1428EGA - Tel. (54 11) 4789-9293 int 34