Biblioteca Digital | FCEN-UBA

Biblioteca Digital ¿Por qué?
Objetivos
Impactos
Estadísticas
Documentos
Presentaciones
Notas
Autores y derechos
¿Por qué depositar?
¿Cómo depositar?
Autorización
Depositar y publicar
Editoriales
Publicar mi tesis Formulario Tesis Posgrado
Formulario Tesis Grado
Normativa
Res. CD 2053/05
Res. CD 2533/09
Res. CD 0272/13
Res. CD 2793/15

Colecciones Tesis Doctorales
Fotografías
Publicaciones
Archivo
Libros
Reportes Técnicos

Tesis > AÑO

2017 2016 2015 2014 2013 2012 2011 2010 2009 2008 2007 2006 2005 2004 2003 2002 2001 2000 1999 1998 1997 1996 1995 1994 1993 1992 1991 1990 1989 1988 1987 1986 1985 1984 1983 1982 1981 1980 1979 1978 1977 1976 1975 1974 1973 1972 1971 1970 1969 1967 1966 1965 1964 1963 1962 1961 1958 1957 1956 1955 1953 1952 1951 1950 1949 1947 1946 1945 1944 1943 1942 1941 1940 1939 1938 1937 1936 1935 1934 1933 1932 1931 1930 1928 1927 1925 1922 1921 1920 1919 1918 1915 1914 1912 1911 1910 1909 1907 1906 1904 1901 1891 1889 1888 1882

Wetzler, Diana E.. "Solvatación en mezclas de solventes, estudiada por técnicas fotoquímicas" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo de esta tesis es estudiar la dinámica de solvatación en mezclas de solventes. Para ello se emplearon técnicas espectrocópicas y fotoquímicas como la absorción y emisión de luz, y el decaimiento de fluorescencia y de estados metaestables. Se eligieron dos tipos de sondas cuyas propiedades son sensibles al medio. En el primer caso se estudió el solvatocromismo y la cinética de isomerización de una fotomerocianina (MC). Esta MC se obtiene por irradiación de luz UV de un espiropirano (SP). Se obtuvieron los espectros de absorción y emisión de la MC en mezclas de un solvente polar: etanol o acetonitrilo y un solvente no polar: hexano o tolueno. Se estudió además, la cinética de la reacción de vuelta (MC —>SP) en las mismas mezclas de solventes. Tanto las propiedades solvatocrómicas (corrimientos de Stokes) como los parámetros cinéticos (constantes cinéticas, k, energías de activación, Ea, y entropías de activación, ΔSα) se correlacionaron con el parámetro solvatocrómico de Reichardt, ET (30). Mientras los corrimientos de Stokes presentan una correlación lineal con ET (30), los parámetros cinéticos requiren un análisis por separado. El ln k presenta una correlación lineal con ET (30). En cambio, Ea presenta cambios abruptos con este parámetro que son compensados por cambios de ΔSα, resultando una única correlación lineal entre Ea y ΔSα para todas las mezclas estudiadas. En el segundo caso se estudió el solvatocromismo y el termocromismo de dos aminoftalimidas (AP y AMP) en mezclas de un solvente polar: etanol o acetonitrilo y un solvente no polar: tolueno o C02 supercrítico a través de medidas de absorción y fluorescencia en estado estacionario y resuelta en el tiempo. Las propiedades espectroscópicas estacionarias (máximos de absorción, máximos de emisión, distribución espectral) y su evolución temporal, presentan una fuerte dependencia con el medio. La correlación con parámetros solvatrocrómicos muestra que las aminoftalimidas son sondas sensibles a la polaridad del medio y a la capacidad donora de hidrógeno del mismo y presentan una solvatación preferencial por el solvente polar en mezclas como las estudiadas. En el caso de las aminoftalimidas, la escala de tiempo en la que ocurren los procesos de relajación de solvente es comparable con el tiempo de desactivación de la fluorescencia. Un análisis cinético de los resultados explica la evolución temporal de los espectros de emisión en mezclas mediante un modelo de intercambio de solvente por pasos. El análisis cinético, junto con la información espectral, permite formular un ciclo termodinámico que provee las constantes de asociación del solvente polar con el estado fundamental y el excitado de AP.

Abstract:
The aim of this work is to study the dynamic of solvation in solvent mixtures. Spectroscopic and photochemical techniques like absorption, light emission, fluorescence and metastable states decays were used. Two types of sensitive probes were chosen. In the first case solvatochromism and isomerization kinetic of a photomerocyanine (MC) were studied. This MC can be obtained by UV irradiation of a spiropyran (SP). Absorption and emission spectra of MC were measured in solvent mixtures of a polar solvent: ethanol or acetonitrile and a non-polar solvent: toluene or hexane. The back reaction kinetics (MC —>SP) was studied in the same solvent mixtures. Solvatochromic properties (Stokes shifts) and kinetic parameters (kinetic constants, k, activation energy, Ea, activation entropy, ΔSα) were correlated with Reichardt’s solvatochromie parameter, ET(30). Whereas Stokes shift shows a linear dependence with ET(30), kinetic parameters require a careful analysis. In k is linear in ET (30) while Ea shows abrupt variations with this solvatochromie parameter. This fact is compensated by changes in ΔSα, resulting in a linear correlation between Ea and ΔSα. In the second case, solvatochromism and thermochromism of two aminophtalimides (AP and AMP) in solvents mixtures of a polar solvent: ethanol or acetonitrile and a non-polar solvent: toluene or supercritical C02 were studied by absorption, and steady state and time-resolved emission spectroscopy. Steady state spectroscopic properties (absorption and emission maxima, spectral distribution) and their time evolution show a strong dependence with the medium. The correlation of these properties with solvatchromic parameters indicates that aminophtalimides are very sensitive to the polarity and hydrogen bond donating capability of the medium and that they manifest a preferential solvation. In this case, the characteristic relaxation time is comparable to the fluorescence decay time. The spectral time evolution can be explained by a kinetic analysis of the results using a stepwise solvent exchange model. A thermodynamic cycle can be written using the results of the kinetic model and spectral information. The cycle allows the calculation of polar solvent association constants with the ground an excited state of AP.

Weiler, Nilda Ester. "Evolución de los depósitos litorales en Bahía Anegada, Provincia de Buenos Aires, durante el cuaternario tardío" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se analizan desde el punto de vista geomorfológico, estratigráfico y geocronológioo, los depósitos litorales del Cuaternario (Pleistoceno tardío y Holoceno) en bahía Anegada. Esa área se extiende desde la desembocadura del río Colorado Viejo, por el norte, hasta Punta Rubia Falsa, por el sur (39° a 40° 43' S y 62°00' a .62°30' O). La misma tiene unos 100 Km de largo por 12 Km, de ancho. Desde el punto de vista geomorfológico se reconocieron, de norte a sur, cuatro zonas (A, B, C, y D) Cada una de ellas tiene sus propias características, las que dependieron de la morfología preexistente y de la dinámica litoral de cada sector en particular. Así, se reconocieron espigas en forma de gancho, espigas cuspidadas, islas de barrera, albuferas, barras y formas eólicas transversales y paralelas a la línea de costa. Al mismo tiempo, en cada zona existen tres niveles aterrazados (1, 2 y 3) ubicados a diferente altura respecto al nivel marino actual. El nivel de terraza más alto (Nivel 3) está comprendido entre las cotas de 10 y 5 m, el de altura intermedia entre los 5 y 1,50 m s.n.m. y el más bajo entre los 1,50 m y el nivel de baja marea. Mediante análisis estratigráficos y geocronológicos se determinó la existencia de depósitos litorales pertenecientes al Pleistoceno tardío y al Holoceno, formados durante tres episodios de nivel marino relativamente elevado denominados Transgresión Interglacial, Transgresión Interestadial y Transgresión Postglacial. Los depósitos correspondientes al Pleistoceno tardío (Transgresión Interglacial e Interestadial) se hallan entre las cotas de 10 y 5 m (Nivel 3), mientras que los correspondientes al Holoceno (Transgresión Postglacial) se los encuentra entre los 5 y 1,50 m s.n.m (Nivel 2). Los depósitos correspondientes a la Transgresión Interglacial están dentro del orden de más de 43.000 años AP. Las mismas son edades imprecisas dado que están más allá del límite técnico del método de datación. Por ello, se oonsidenó en forma tentativa que los mismos pertenecen a la transgresión ocurrida durante el Interglacial Sangamon (Interglacial Riss-Würm). Sobre esos depósitos y apoyados en forma discordante se encuentran sedimentos litorales con edades entre 38.500 y 25.000 años AP. Por la posición estratigráfica y los fechados obtenidos permitió correlacionar a esos depósitos con un nivel marino relativamente elevado que se produjo luego de la Transgresión Interglacial. El mismo se interpreta que ocurrió a consecuencia de un último gran interestadial dentro de la Glaciación Wisconsin. De allí su nombre de Transgresión Interestadial. Al producirse la regresión marina que acompañó a la última glaciación se produjo un episodio de gran aridez durante el cual se formaron dunas elongadas con rumbo O-E. El rumbo de las mismas estaría indicando la persistencia de los vientos del cuadrante oeste. Para el Holoceno se determinaron por lo menos 6 episodios de ascenso relativo del nivel marino, los mismos fueron denominados Estadios Transgresivos (ET 0 a V), durante los cuales se originaron crestas de playa. Las edades 14C de los respectivos ET son: ET-0= 6560±130; ET-|=: 6190±130; ET-II= 5570±120; ET-III=5200±100; ET-IV=4470±80; ET-V=3580±90 años AP. El ET-I representa al máximo alcance de la transgresión del Holoceno y el ET-O a un evento transgresivo anterior. Ambos estarían vinculados con picos de máxima actividad solar (transgresión termoeustática) Los ET más jóvenes (ET- II a V) indican episodios transgresivos menores asociadas a mareas excepcionalmente altas (coincidentes con el Ciclo de Progresión del perigeo Lunar) y a fuerte oleaje relacionado con fuertes tormentas excepcionales. Esos episodios de tormenta podrian estar condicionados por eventos episódicos de gran magnitud de EL Niño (eventos pasados del ENSO-EI Niño Oscilación Sur). Durante tales tormentas se habrían producido importantes acumulaciones de sedimentos en las playas y además cambios en la dirección de la corriente de deriva litoral. Las edades 14C obtenidas a partir de material biogénico (valvas de moluscos) removilizado se tomaron con carácter de Edad Geológica Probable. La misma tiene carácter de Edad Mínima ya que corresponde a la menor edad obtenida para un mismo depósito. En cambio, se consideró que las edades obtenidas a partir de valvas articuladas o en posición de vida tienen carácter de Edad Aproximada (EA). Dicha edad indica la posición del nivel del mar de ese momento pero no la antigüedad del depósito.

Abstract:
Coastal deposits from the Quatemary (late Pleistocene and Holocene) in bahía Anegada are analyzed from the geomorphologic, stratigraphic and geochronologic point of view. This area extends from the Colorado Viejo river outlet on the north side to Punta Rubia Falsa on the south (39° a 40° 43's y 62° 00’ a 62° 00' a 62° 30’) its measurements being about 100 km long by 12 km wide. From the geomorphplogical point of view, four zones were recognized going from north to south A, B, C y D. Each zone having its own characteristics depending on the preexisting morphology and the coastal dynamics from each particular area. That's how hook spits, cuspate spits, barrier islands, lagoons, bars, transversal and parallel eolic forms were recognized. At the time, there are three different altimetric levels in each area (1, 2 y 3) placed at different levels with respect to the actual marine level. The level of the highest terrace (level 3) is found between 10 and 5 m, the interrnediate high is between 5 and 1,50 m above sea level and the lowest is between 1,50 and low tide level. By means of stratigraphic and geochronological analysis the existence of coastal deposits to the late Pleistocene and Holocene were determined. These deposits were formed during three episodes of relatively high sea level called Interglacial Transgression., lnterestadial Transgression and Postglacial Transgression. The deposits corresponding to the late Pleistocene (Interglacial and Interestadial Transgression) are found between 10 and 5 m (Level 3), while those corresponding to the Holocene Postglacial Transgression are found between 5 and 1,50 m above sea level (Level 2). The deposits corresponding to the Interglacial Transgression are within the order of more than 43.000 years BP. The dates themselves are inaccurate because they go for beyond the technical limits of the datation methods. That's the reason why there where considered in a tentative approach that they belong to the transgression which occurred during the Sangamon Interglacial. Over these deposits and resting in a discordant way there has been found littoral sediments with the ages 38.000 and 25.000 years BP. The stratigraphic position and the dates obtained permitted a correlation of these deposits with a relatively high sea level, which was brought about after the Interglacial Transgression. This High sea level was interpreted to have taken place as a consequence of a last great interestadial within the Wisconsin glaciation. From these comes its name of Interestadial Transgression. The marine regression, which accompanied the last glaciation, was followed by a moment of great aridity in which elongated dunes with bearing West-East were formed. These bearing would be indicating the persistence of winds from the west. At least six major episodes of high wave-energy were found, which built the Holocene clastic ridges, and were identified as Transgressive Stages (TS-0 to V). Their Probable Geological Ages (PGA = the minimum 14C age) and Approximate Ages (AA+ with 14C ages obtained of mollusks in life position). are: TS-0 = 6560±130; TS-I = 6190±130; TS-II= 5570±120; TS-III= 5200±100; TS-IV = 4470±80; TS-V = 3580 ± 90 years BP. The TS-I represents the maximum Holocene Transgression and TS-) corresponds to a previous event. Both could be related to maximum solar activity peaks (thermoeustatic transgression). The younger TS (TS-II to V) show minor transgressive episodes could be related to exceptionally high tides (coincident with the Progression Cycle of the Lunar Perigees) and to high wave-energy episodes (exceptional storms). The storm episodes could be related to episodic events of great magnitudes such as the ENSO (past ENSO-like = El Niño Southern Oscillations events). These kind of events might have caused massive sediment pulses and changes in the direction of the of the littoral drift. The ages obtained by 14C from removed biogenic material (mollusk valves) were taken with the character of Probable Geologic Age. Minimum age oorresponds to the minor age obtained for a certain deposit. The ages obtains from articulate shells or in life position belong to Approximate Age (AA). This age indicates the position of sea level of that moment but not the antiquity of the deposit.

Vissio, Paula Gabriela. "Identificación y distribución de la hormona hipofisaria Somatolactina en el pejerrey, Odontesthes bonariensis (Teleostei, Atherinidae) : Su relación con el ciclo gonadal"" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La somatolactina (SL) es una hormona recientemente identificada en peces teleósteos. Por su estructura pertenece a la familia de la hormona de crecimiento (GH) y la prolactina (PRL). Su función es aún poco conocida, pero datos bibliográficos recientes la relacionan entre otros con los procesos reproductivos. Con el objeto de estudiar su participación en éstos se establecieron los _ siguientes objetivos: Estudiar la distribución de los diferentes tipos celulares de la adenohipófisis (ADH) y establecer la presencia de células productoras de SL en el pejerrey, Odontesthes bonariensis. Determinar la relación entre las variaciones morfométricas de las células SL y el ciclo gonadal tanto en machos como en hembras de pejerrey. Establecer si existe una relación entre SL y el neuropéptido liberador de gonadotrofinas (GnRH). Los resultados mostraron que las células productoras de las diferentes hormonas hipofisarias se localizaron en sitios específicos de la ADH. Las células productoras de PRL y de ACTH en la pars distalis rostral (PDR), las productoras de hormona de crecimiento (GH), de hormona tirotrófica (TSH) y de gonadotrofinas (GtHs) en la pars distalis proximal (PDP). Estas últimas también se encontraron en el borde externo de la pars intermedia (PI) junto con las células presuntivamente productoras de hormona melanocitoestimulante (MSH). Las células secretoras de SL, reconocidas específicamente con cuatro antisueros se ubicaron en estrecha proximidad con la neurohipófisis (NH) también en la PI. El área de las células productoras de SL mostró diferencias significativas entre hembras activas o vitelogénicas e inactivas o no vitelogénicas. Se observó también una correlación positiva entre el área de las células ir-SL y el Indice gonadosomático (GSI). En machos con altos valores de GSI las células productoras de SL eran más numerosas y de mayor tamaño en comparación con los individuos con valores menores de GSI. Sin embargo, esta diferencia no fue estadísticamente significativa. En este trabajo de Tesis se demostró una clara asociación morfológica entre las células productoras de SL y las fibras de GnRH. Por otra parte, se determinó la presencia de receptores a GnRH en estas células, utilizando un cultivo primario de hipófisis de pejerrey. Los sitios de unión se revelaron por autoradiografia de un análogo superactivo de GnRH (GnRH-A)y las células inmunoreactivas, ir-SL se identificaron por inmunocitoquímica. Una gran cantidad de gránulos de plata representando sitios de unión de GnRH-A se encontraron asociadas a estas células. Los resultados obtenidos aportan mayor información a la hipótesis sobre el papel que jugaría la SL en los procesos reproductivos de los peces teleósteos.

Abstract:
A pituitary hormone, somatolactin (SL), belonging to the growth hormone (GH)/prolactin (PRL) family is a recently discovered polypeptide produced in the pars intermedia (PI) of teleosts. Its function is still uncertain but several authors propose that SL may be involved in some physiological aspects of reproduction. In the present work the following objectives were established: To analyse the distribution of different cellular types in the adenohypophysis (ADH) of pejerrey, Odontesrhes bonariensis and to determine the presence of SL producing cells. To study in both sexes the relationship between morphometric changes of SL producing cells and gonadal development. To determine the association between ir-GnRH fibers and the SL expressing cells and analyse the presence of GnRH binding sites in the same cells. Results showed that prolactin (PRL) cells were immnunostained in the external border of the rostral pars distalis (RPD). Immunoreactive (ir-) corticotrophic (ACTH) cells were identified in the same area and crossreactivity was observed in the pars intermedia (PI), corresponding to presumptive melanocyte-stimulating hormones cells. Ir-growth hormone (GH) cells were identified in close contact with the neurohypophysis (NH) in the proximal pars distalis (PPD). Ir-gonadotrophic (GtH) cells were distributed in the PPD and in the external border of the PI. Ir-thyroidstimulating hormone (TSH) cells were revealed in the PPD. Ir-somatolactin (SL) cells were recognised specifically using four different antisera in the PI in close contact with the neurohypophysis. The area of the cells ir-SL showed a significant difference between the area of ir-SL cells of resting/reggresing and sexually active (vitellogenic) females. A significant positive correlation between the ir-SL cellular area and the GSI was also observed. In males with the highest GSI values the ir-SL cells appeared more numerous and showed an increase in the immunostained area when compared to those of individuals with lower GSI values. However, the correlation between the area of ir-SL cells and the GSI in males was not statistically significant. A close association of GnRH fibers and SL cells was determined. In addition, GnRH receptors were observed in SL cells , using a pituitary primary cell culture system. GnRH binding sites were revealed by autoradiography of an iodinated superactive GnRH agonist (GnRH-A)and pituitary cells were identified by immunocytochemistry using piscine antisera. Following autoradiography, silver grains representing specific GnRH-A binding were associated with SL cells. These results demonstrate the presence of GnRH binding sites in these cells.

Viscarret, Mariana Mabel. "Estudios biológicos sobre Aleyrodidae (Insecta: Hemiptera) con especial énfasis en el complejo Bemisia tabaci (Gennadius) y su posible control biológico" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Las "moscas blancas" (Homoptera: Aleyrodidae), se encuentran entre los insectos plaga de mayor importancia económica a nivel mundial. La presente tesis tuvo como objetivo conocer las especies de moscas blancas presentes en la Argentna su distribución, sus plantas hospederas y sus enemigos naturales parasitoides asociados; con particular énfasis en el complejo Bemisia tabaci y su posible control biológico. Como principales aportes de la investigación realizada pueden mencionarse: l-el mayor conocimiento de los aleiródidos de interés económico, sus plantas hospederas y sus enemigos naturales parasitoides. Estos resultados incluyen el registro de especies no citadas con anterioridad para la Argentina; 2-respecto al complejo B. tabaci, se ha registrado un aumento de su distribución geográfica original, las plantas hospederas que afecta y sus enemigos naturales parasitoides. Asimismo se ha determinado la presencia de diferentes biotipos para el mencionado complejo: el biotipo B y dos biotipos de carácter local; 3-la caracterización biológica y taxonómica de uno de los biotipos locales registrados para el complejo B. tabaci afectando cultivos de soja y algodón. Se ha propuesto denominar este biotipo como ARG1 (Argentina l); y 4-el análisis de los aspectos biológicos básicos de Encarsia porteri (Hymenoptera: Aphelinidae), el parasitoide más frecuentemente encontrado sobre el complejo B. tabaci biotipo ARGl.

Abstract:
Whiteflies (Homoptera: Aleyrodidae) are among the most relevant insect plagues with economical implicatiors worldiwide. The goal of this dissertation is to survey the whitefly species present in Argentina,establish their biopographical distribution, their host plants, and their associated parasitoids; special emphasis is placed on the Bembisia tabaci complex and its possible biological control. The following are among the main accomplishments of this dissertation: l-it improves the understanding of the economically relevant aleyrodids, their host plants, and their parasitoids. This survey has recorded species of previously unknown occurrence in Argentina; 2-it records an increase in the original biogeographical distribution of the B. tabaci complex, the number of host plants species it affects, and the number of its parasitoids species. In addition, it determines the presence of different biotypes for this complex: the B biotype and two local biotypes; 3-it characterizes one of the local biotypes for the B. tabaci complex biologically and taxonomically. This biotype affects soy and cotton crops. It is here named ARGl (Argentina l); and 4-it documents the basic biological characteristics of the parasitoid Encarsia porteri (Hymenoptera: Aphelinidae). This is the most frequent parasitoid for the biotype ARGl B. tabaci complex.

Villar, Ana Julia. "Métodos robustos para el modelo de análisis factorial" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los estimadores usuales de los parámetros del modelo de análisis factorial son los estimadores de máxima verosimilitud que corresponden a factores y errores normales. Estos estimadores dependen de la media y la covarianza muestrales, las cuales son muy sensibles a observaciones atípicas. En este trabajo se obtienen estimadores robustos para el modelo de análisis factorial reemplazando en las ecuaciones de verosimilitud la media y la covarianza muestral por estimadores robustos de posición multivariada y covarianza. Se prueba la consistencia de estos estimadores cuando éstos están basados en estimadores multivariados consistentes. También se prueba la normalidad asintótica de los mismos y se obtiene la matriz de covarianza asintótica cuando los estimadores en los que se basan son asintóticamente normales. Un estudio de Monte Carlo muestra que las familias propuestas contienen estimadores que combinan alta eficiencia bajo el modelo normal con alta robustez cuando la muestra contiene observaciones atípicas.

Abstract:
The usual estimates of the parameters of the factor analysis model are maximum likelihood estimates corresponding to gaussian factors and errors. These estimators depend on the sample mean and covariance matrix, which are very sensitive to few outliers. In this work, robust estimators for the factor analysis model are obtained replacing into maximum likelihood equations sample mean and covariance by robust multivariate location and scatter estimates. Consistency of the proposed estimates is proved when consistent multivariate location and scatter matrix are used. The asymptotic normality of the proposed robust estimates is proved and their asymptotic covariance matrix obtained, provided the location and scatter matrix are asymptotically normal A Monte Carlo study compares the behavior of the different robust proposals with maximum likelihood estimators, showing that it is possible to find estimates which combine highly efficient estimates under a normal model with a highly robust behavior when the sample contains outliers.

Vazquez Rovere, Cecilia. "Análisis del mecanismo de resistencia a la infección viral mediado por la expresión del ORF2b de PLRV en plantas transgénicas de Solanum tuberosum" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La expresión de secuencias nucleotídicas codificantes para replicasas virales en plantas transgénicas fue propuesta como un sistema eficiente para conferir resistencia contra enfermedades provocadas por virus induciendo mecanismos de protección en la planta. Una de las primeras enfermedades para las cuales este tipo de protección fue ensayado en plantas de papa, es la provocada por el virus del enrollamiento de la hoja de papa (PLRV). Sin embargo, no se describieron aún detalles sobre el mecanismo de protección. El marco de lectura abierto 2b (ORFZb) de un aislamiento argentino de PLRV fue clonado y secuenciado encontrándose un 94% y 97% de homología con las secuencias nucleotídicas de aislamientos de origen australiano y holandés, respectivamente. Con el fin de elucidar el mecanismo de protección contra las infecciones de PLRV, se construyeron tres versiones del ORF2b (no-traducible en orientación sentido, traducible en orientación sentido con el agregado del codón ATG en fase de traducción y una versión en orientación antisentido) y fueron introducidas en plantas de papa (cv Kennebec) por transformación genética mediada por Agrobacterium tumefaciens. Con las plantas transgénicas resultantes se realizaron ensayos de infección por injertos que mostraron que con cualquiera de las construcciones fue posible obtener líneas transgénicas resistentes, sugiriendo que el mecanismo de protección es independiente de la expresión de la proteína y es mediado por el RNA. No existió correlación entre el grado de metilación o el número de copias del transgén presentes en las líneas transgénicas y el nivel de protección. Los ensayos de infección natural a campo confirmaron la obtención de líneas transgénicas resistentes. También se realizaron experimentos de transformación transitoria mediante biolística de hojas derivadas de plantas transgénicas utilizando vectores que codifican proteínas de fusión GUS::ORF2b, seguidas de la visualización del nivel de la expresión del gen reportero. Los resultados apoyan la hipótesis de protección mediada por un mecanismo de silenciamiento post-transcripcional del gen de la replicasa. Con el objetivo de obtener plantas transgénicas simultáneamente resistentes al virus Y de la papa (PVY) y al PLRV se construyó una única construcción que expresa la proteína de cápside del virus del mosaico de la lechuga (LMV) y el gen de la replicasa de PLRV. Se obtuvieron plantas de papa (cv Kennebec) transgénicas por transformación mediada por Agrobacterium tumefaciens que fueron evaluadas en ensayos en condiciones controladas de invernadero desafiándolas con áfidos virulíferos e inoculación mecánica de PVY. Se encontró que 17/27 líneas transgénicas independientes exhibieron inmunidad a PLRV, 12/27 mostraron ausencia de infección con PVY y 8/27 líneas exhibieron inmunidad a ambos virus resultando buenas candidatas para los próximos ensayos de campo. Finalmente, con el fin de obtener plantas de papa simultáneamente resistentes a infecciones virales y fúngicas, se realizaron ensayos de co-transformación utilizando la construcción descripta en el párrafo anterior y el vector pZP-RIP-CHI capaz de expresar los genes de quitinasa y rip provenientes de cebada. Algunas de las plantas transgénicas múltiples fueron ensayadas en invernadero para determinar la resistencia a infecciones producidas por PVY y PLRV y evaluar protección a Rhizoctonia solani. Se encontró al menos una línea que revela gran resistencia a las infecciones virales y una protección aumentada a los ataques de los hongos. Resulta necesaria una evaluación más exhaustiva tanto de ésta como de todas las líneas seleccionadas en este trabajo, en condiciones naturales de infección a campo considerando no sólo la resistencia sino la performance agronómica y la preservación de la identidad del cultivar.

Abstract:
Genetically engineered expression of replicase encoding sequences has been proposed as an efficient system to confer protection against virus diseases by eliciting protection mechanisms in the plant. Potato leaf-roll was one of the first diseases for which this kind of protection was engineered in potato plants. However, details of the protecting mechanism were not reported, so far. The ORF2b of an Argentinean strain of potato leafroll virus (PLRV) was cloned and sequenced finding 94% and 97% of homology with Australian and Netherlander strains, respectively. To elucidate the mechanism of protection against PLRV infection, three versions of ORF2b (non-translatable sense, translatable sense with an engineered ATG and antisense) were constructed under the control of the 35S CaMV promoter and the nos terminator and introduced in potato plants (cv. Kennebec) by Agrobacteríum tumefaciens mediated transformation. Grafting infection experiments showed that resistant transgenic plants could be obtained with any of the constructs, suggesting that the mechanism of protection is independent of the expression of protein and RNA mediated. Neither DNA methylation, nor the number of transgene copies present in the transgenic lines correlated with protection. Field trial infection confirmed that resistant transgenic events were obtained. Biolistic transient transformation experiments of leaves derived from transgenic plants using a gene coding for the fusion protein GUS::ORF2b, followed by scoring of the number of GUS expressing leaf spots, supported that the protection is mediated by a post-transcriptional gene silencing mechanism. Several examples of transgenic plants carrying particular sequences able to confer protection against virus diseases were published. However, there are very few published cases of combined resistance and there are no published evidences on the simultaneous protection using only one genetic construct that elicits two different protection mechanisms. As it was previously described, potato plants that were transformed with PLRV replicase coding sequence exhibit resistance against virus infection mediated by a post-transcriptional gene silencing mechanism. Likewise, the expression of the coat protein coding sequence of Lettuce Mosaic Virus (LMV) conferred heterologous protection in tobacco Xanthi against several strains of potato virus Y (PVY). In this work a double construct carrying the LMV coat protein and PLRV replicase gene was constructed and introduced in potato plants (cv. Kennebec) by Agrobacterium tumefaciens mediated transformation. Greenhouse assays challenging transgenic plants with viruliferous aphids or mechanic inoculation were conducted and seventeen (out of twenty seven independent lines) exhibited immunity to PLRV, twelve of them showed absence of PVY replication and eight lines exhibiting immunity to both virus are very promising candidates for future field trials. Significant yield losses due to fungal attack limits crop productivity and can be very severe in local epidemic infections. To obtain multiple transgenic potato plants simultaneously resistant to virus and fungal infections we carried out co-transformation assays using the construct described above and the pZP-RIP-CHI vector carrying barley class-II chitinase and rip genes. Some of the multiple transgenic plants were assayed in greenhouse for PVY and PLRV infection resistance and for Rhizoctonia solani protection and we found one line that revealed high resistance to virus and enhanced protection against fungal attack.

Thyssen, Sandra Mariana. "Poliaminas en la ontogenia de la unidad hipotálamo-adenohipofisaria" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En los vertebrados superiores, la regulación de la función reproductora depende de la integración encéfalo-hipófiso-gonadal. Distintos sistemas neurosecretores interactúan entre si, y con la hipófisis, para regular la secreción de gonadotrofmas. LH y FSH controlan la gónada y ésta, a través de su secreción, regula la función central. Estos mecanismos se ponen en marcha durante la vida embrionaria y se desarrollan coordinadamente a medida que el animal crece, hasta completar su maduración en la pubertad, momento en que el individuo culmina su capacitación para reproducirse y mantener la especie. En este trabajo, nos propusimos estudiar la participación de las poliaminas en la regulación de la capacidad secretora del hipotálamo y la hipófisis en la rata de la cepa Sprague-Dawley, desde el nacimiento hasta la pubertad. Las poliaminas, putrescina (PUT), espermidina (SPD), espermina (SPM) y agmatina (AGM), son aminas policatiónicas relacionadas con múltiples funciones celulares, hallándose en elevada concentración en cerebro de mamífero. Desarrollamos un método de cuantificación práctico, preciso y rápido para la determinación de poliaminas por HPLC en diferentes matrices, siendo nuestro especial interés, su cuantificación en hipotálamo e hipófisis. Utilizando esta técnica, describimos la ontogenia de las diferentes poliaminas durante el desarrollo, en ambos tejidos. Los niveles de PUT, SPD y AGM tienen importantes cambios en el período analizado (1 a 29 días), observándose las mayores concentraciones durante la 1ra y/o 2da semana. En cambio SPM permanece constante en hipófisis y fluctuante en hipotálamo, con máximos los días 1 y 14. Se observaron diferencias sexuales sólo para SPM y AGM en ambos tejidos y para SPD en hipotálamo, siendo las concentraciones en los machos superiores a las de las hembras. PUT no presenta diferencias sexuales en ninguno de los dos tejidos. En cuanto a las diferencias halladas entre tejidos, PUT, SPD y SPM se encuentran en mayor concentración en hipófisis, en cambio con AGM ocurre lo contrario, siendo su mayor concentración hipotalámica. Tratamientos "in vivo" con DFMO, inhibidor de la síntesis de poliaminas, señalaron que existe un período de fundamental importancia (días 1 a 9) solamente en la hembra, donde la alteración de las concentraciones de poliaminas produce un retraso en la eclosión puberal, evento acompañado principalmente por valores aumentados de FSH en forma prolongada durante la etapa infantil. Tratamientos cortos o posteriores no producen ningún efecto. Este tratamiento con DFMO produce una inhibición de PUT y SPD, un aumento de SPM y ningún cambio en AGM, tanto en hipotálamo como en hipófisis. Observamos, utilizando modelos "in vitro", que los hipotálamos de estas hembras tratadas con DFMO poseen a los 10 dias de edad, una mayor sensibilidad de liberación de GnRH ante estímulos inespecíficos (KCl 11 mM), y que las hipófisis liberan más FSH ante GnRH (10-8M). No se observan cambios en la liberación de LH ni de PRL. Demostramos además, que el número de receptores hipofisarios de GnRH se halla disminuido en esta edad. En cultivos de células adenohipofisarias de ratas hembra de 6 y 15 días de vida, la incubación con DFMO durante 4 días, produce una mayor liberación basal de FSH, sin alterar LH, sólo en las células provenientes de animales de 6 días. Esto indica nuevamente, que el tratamiento es efectivo en edades tempranas del desarrollo y que la hormona principalmente afectada es FSH. Cuando se incuban explantes hipotalámicos o de adenohipófisis de ratas hembra de 6 días con las diferentes poliaminas, PUT, SPD y AGM son capaces de inhibir la secreción de GnRH, FSH y LH. SPM presenta un efecto inhibidor de FSH no persistente en el tiempo. Ante la liberación inespecífica de GnRH por el ion K+ para hipotálamo y específica de FSH y LH por GnRH para hipófisis, los tejidos incubados con poliaminas no presentan modificaciones en relación con los controles. Nuevamente, no se observan efectos si el mismo tratamiento se realiza con tejidos de animales de 15 días, momento en cual las poliaminas parecen no ejercer ninguna acción sobre la liberación hormonal. Concluimos que los niveles normales de poliaminas, en especial durante los primeros 10 días de vida donde las concentraciones de PUT, SPD y AGM están elevadas, son importantes para el desarrollo del eje hipotálamo-hipófiso-gonadal. El tratamiento con DFMO en ratas hembras neonatales, al inhibir PUT y SPD, altera directamente la regulación hormonal provocando una liberación prolongada de FSH con el consecuente retraso madurativo de la unidad hipotálamo-hipofisaria y el retraso puberal. Por ende, la participación de las poliaminas (especialmente PUT y SPD) seria de fimdamental importancia en la regulación de la secreción gonadotrófica y de GnRH durante los períodos neonatal e infantil, etapas críticas en las que se establece la diferenciación sexual.

Abstract:
In higher vertebrates, the regulation of reproduction depends on the central nervous system-hypophyseal-gonadal integration. Different neurosecretory systems interact within the central nervous system and with the pituitary to regulate gonadotropin secretion. LH and FSH control the gonads which, in turn, regulate central function through their secretory products. These mechanisms are established during embrionary life and develop as the animal grows, until maturation is completed at puberty, the time when the individual attains reproductive capacity and is able to sustain the species. In this work we studied the participation of polyamines in the regulation of hypothalamic and hypophyseal secretion in Sprague-Dawley rats from birth to puberty. Polyamines, putrescine (PUT), spermidine (SPD), spermine (SPM) and agmatine (AGM), are polycationic amines, related to multiple cell functions, which are found in high concentrations in mammal brains. We developed a simple, precise and quick method to quantitate polyamines by HPLC in different matrixes, taking special interest in the pituitary and the hypothalamus. With this technique, we described the ontogeny of various polyamines during development in both tissues. Levels of PUT, SPD and AGM presented characteristic profiles in the period analyzed (1 to 29 days of age); the highest concentrations were determined during the first and/or second week. In contrast, SPM remained constant in the pituitary and fluctuated in the hypothalamus with peaks on days 1 and 14. Sexual differences were only observed for SPM and AGM in both tissues and for SPD in the hypothalamus, being levels higher in males than in females. PUT did not show sexual differences. When comparing polyamine titers in the pituitary and the hypothalamus, PUT, SPD and SPM were found to be more concentrated in the pituitary while AGM was higher in the hypothalamus. "In vivo" treatment with DFMO, an inhibitor of polyamine synthesis, pointed to a critical period (days 1 to 9) in the female only, where alterations in polyamine concentrations induced a delay in puberty eclosion, event which was accompanied by high, sustained FSH levels during the infantile period. Shorter or later treatments had no effect. This DFMO treatment induced an inhibition of PUT and SPD, an increase in SPM and no change in AGM, both in the hypothalamus and the pituitary. In "in vitro" experiments, we showed that hypothalami of DFMO treated female rats possessed, at 10 days of age, a higher sensitivity of GnRH release by non-specific stimuli (KCl 11mM) and pituitary GnRH-induced FSH secretion was increased. Furthermore, GnRH pituitary receptors were decreased at this age. No changes were observed for LH or PRL. In 6 and 15 day-old female rat adenohypophyseal cell cultures, incubation with DFMO during 4 days, induced an increase in basal FSH secretion in 6 day-old rat cells only. This shows that the treatment is effective at early stages of development and that the main hormone affected is FSH. When hypothalami or anterior pituitaries of 6 day-old female rats were incubated with the different polyamines, PUT, SPD and AGM were able to inhibit GnRH, FSH and LH secretion. SPM showed a non-specific transient inhibitory effect on FSH. When challenged with either K+ or GnRH, the tissues incubated in the presence of polyamines showed no differences when compared to their controls. No effects of polyamines were observed with 15 day-old rat tissues. We conclude that the high, normal PUT, SPD and AGM levels during the first 10 days of life are important for the development of the hypothalamic-hypophyseal-gonadal axis. DFMO treatment in neonatal female rats, which decreases PUT and SPD, disrupts hormonal regulation inducing a sustained FSH increase with the consequent delay in the hypothalamic-hypophyseal maturation and puberty onset. Therefore, polyamine participation (specially PUT, SPD) is of utmost importance in the regulation of GnRH and gonadotropin secretion in the neonatal and infantile periods, critical stages in the establishment of sexual differentiation.

Taragano, Viviana M.. "Pectinasas fúngicas : estudios comparativos de producción por fermentación sumergida y en sustrato sólido y estabilidad en sistemas deshidratados" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se optimizaron las condiciones de fermentación en medio líquido (FEL)y sólido (FES) para obtener extractos con alta actividad pectinliasa y poca pectinesterasa a partirde la cepa Aspergillus niger 148, seleccionada entre 165 cepas. Se caracterizaron cinéticamente las fermentaciones para: azúcares reductores y proteínas en el medio de fermentación; biomasa (ajustó al modelo logístico siendo inversa a la evolución del pH); producción de las tres enzimas del complejo pectinolítico y conidiación (en FES) En FEL,se estudió el efecto combinado de la aw y la represión catabólica por glucosa, observándose efectos diferencialesen cada enzima. Los pesos moleculares de las pectinasas se determinaron por SDS-PAGE siendo: pectinliasa: 48,2 kDa; poligalacturonasa: 39,1 kDa; pectinesterasa: 26,9 kDa. Se utilizóun diseño experimental de red de Doehlert y una metodología de superficies de respuesta, para comparar el efecto de pH, aw y tiempo en la producción de pectinasas por FES y FEL. Una FES realizada a aw 0,981 y pH 7 por 3 días permitió obtener un extracto rico en pectinliasa

Abstract:
Aspergillus niger 148 was selected between 165 strains and fermentations in solid and submerged (SmF) state were carried out in order to optimize the production of pectinolytic extracts rich in pectinlyase and with low pectinesterase activity. Kinetics of: reducing sugars and proteins in fermentation medium; biomass (it fitted to the logistic model and was inverse to pH evolution]; production of the three pectinolytic enzymes and conidiotion (inSSF)were determined. Combined effect of aw and catabolite repression by glucose in SmF was studied. Differential effects for each enzyme were observed. Molecular weights of pectinoses were determined by means of SDS-PAGE: pectinlyase: 48,2 KDa; polygalacturonase: 39,1 KDa;pectinesterose: 26,9 KDa. A Doehlert experimental design and a surface response methodology were used in order to compare pH, aw and time effects in SSF and SmF. The following conditions for SSF allowed the production of a rich pectinlyase extract (65% of total proteins): aw:0,981; pH: 7 and 3 days of fermentation. Entholpy and denaturation temperatures, as well as glass transition temperature, were determined in the dehydrated and partially purified rich pectinlyase extract as affected by moisture. Comparative kinetic studies of denaturation and pectinlyase activity loss in dehydrated and solubilized pectinlyase extract indicated that denaturation might be the main mechanism of activity loss in solution. Contrarily, activity loss in dehydrated extract was not associated with denaturation.

Taboga, Oscar A.. "Expresión de antígenos derivados del virus de la fiebre aftosa en diferentes sistemas eucarióticos" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La fiebre aftosa es una enfermedad de gran importancia económica que afecta principalmente al ganado bovino. Esta enfermedad está causada por un picornavirus, el virus de la fiebre aftosa (VFA). El control de la enfermedad se lleva a cabo mediante eliminación de los animales infectados y vacunación con vacunas basadas en virus inactivado. Existen varias desventajas relacionadas con la producción y el uso de tales vacunas, entre las que están la reintroducción de la enfermedad debida a la manipulación de grandes masas virales o a la incorrecta inactivación del virus, por lo que el desarrollo de vacunas recombinantes más seguras aparece como una alternativa de gran interés. En el presente trabajo se estudió la posibilidad de expresar sitios antigénicos simples y complejos derivados del VFA en diferentes sistemas de expresión. La poliproteína P1, precursora de las proteínas estructurales del virus, pudo expresarse con éxito en un sistema bacteriano y en el sistema “baculovirus-células de insecto”. Sin embargo, las diferentes versiones de esta proteína no fueron capaces de montar una respuesta efectiva contra el VFA,probablemente debido a un incorrecto plegamiento espacial. Por otro lado, el sitio antigénico inmunodominante (sitio A) presente en el loop V-H de la proteína VP1 se expresó con éxito como fusión a la proteína transportadora core del virus de la hepatitis B (VHB) en células de insecto infectadas con baculovirus recombinantes. Esta proteína quimérica no adoptó Ia estructura multimérica esperada, la que se consiguió mediante coinfecciones con un baculovirus que expresaba la proteína core. De todos modos, las partículas obtenidas resultaron pobres inmunógenos cuando se inyectaron en animales experimentales, hecho debido probablemente a la baja densidad de epitopes derivados del VFA en las preparaciones vacunales. Finalmente, tanto el sitio A como la poliproteína P1 pudieron expresarse como fusión a la glicoproteína gp64 del baculovirus AcNPV. Estas proteínas quiméricas se localizaron tanto en la membrana de células infectadas como en la superficie de los baculovirus recombinantes. Esta localización asegura una conformación particulada sobre un soporte fosfolipídico (características relacionadas con el aumento de inmunogenicidad de sitios antigénicos) y facilita la purificación de los inmunógenos. Cuando se vacunaron ratones con estas construcciones, los baculovirus llevando el sitio A y las células infectadas con éstos despertaron una respuesta inmune humoral neutralizante contra el VFA, aún en ausencia de adyuvantes. De nuevo, las construcciones llevando P1 fallaron para montar una respuesta inmune humoral neutralizante, probablemente debido a un incorrecto plegamiento espacial. La posibilidad de producir baculovirus recombinantes y células infectadas que lleven en sus superficies sitios antigénicos derivados de patógenos de interés veterinario mediante infección de larvas puede convertirse en una manera sencilla y económica de producción de vacunas de nueva generación.

Abstract:
Foot-and-mouth disease (FMD)is an economically very important disease of cattle and other farm animals. It is caused by a picornavirus, foot-and-mouth disease virus (FMDV).The control is achieved by slaughter of infected and contact animals and systematic vaccination with inactivated virus-based vaccines. Although these vaccines have been effective in controlling the disease, there are a number of concerns about their production and use, such as the risk of reintroduction of the disease by handling of infectious virus or incomplete inactivation of the antigen. These disadvantages have led to efforts to develop safer recombinant vaccines using genetic engineering. In the present work, the possibility of expressing simple and complex antigenic sites from FMDV in different expression systems has been assessed. P1 polyprotein, the precursor of the four capsid proteins, has been successfully expressed in bacteria and insect cells. However, different versions of this protein failed to elicit a protective immune response to FMDV,probably due to an incorrect folding of the protein. On the other hand, immunodominant site A, located at the G-H loop of VP1, was successfully expressed as a fusion protein with the core protein of hepatitis B virus (HBV)in the baculovirus system. However, this chimaeric protein failed to adopt the expected multimerio conformation. Interestingly, multimerio particles were obtained by coinfections with a recombinant baculovirus expressing the wild type core protein, but the hybrid core particles obtained resulted poor immunogens in mice, probably due to low FMDV epitope density present in the particles. Finally, both site A and P1 polyprotein could be expressed as fusion proteins with baculoviral glycoprotein gp64 of baculovirus AcNPV. These chimaeric proteins localized in the membrane of the infected insect cells as well as onto the surface of recombinant baculoviruses. This localization ensures a particulate conformation on a phospholipidic layer (both characteristics related to an increase of immunogenicity of simple antigenic sites) and facilitates the purification of immunogens. Experimental mice inoculated with gp-site A fusion protein expressed both in the surface of recombinant baculoviruses or in the membrane of infected cells elicited a specific humoral immune response with neutralizing activity against FMDV,even in the absence of adjuvants. Similar constructions bearing gp-P1 fusions failed to elicit a humoral immune response with neutralizing activity when inoculated in mice. The expression of antigens from veterinary pathogens with economic importance on the surface of baculovirus and infected cells by infecting insect larvae could be an alternative, safe method to reduce the costs of this kind of vaccines.

Szapkievich, Valeria Beatriz. "El Río Paraná como modelador del ambiente de la distribución marginal sur de Alouatta caraya (Primates, Platyrrhini)" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En Primates, la distribución geográfica se asocia a diversos factores entre los cuales, los hábitos alimentarios y el tamaño corporal pueden ser considerados como los más importantes al momento de determinar su capacidad para superar posibles barreras ecológicas. Diversos estudios han tratado de caracterizar la posible relación entre la distribución geográfica y determinados parámetros biológicos. El genoma de las formas actuales de Platyrrhini y en especial el de ceboideos de distribución marginal sur, parecen mostrar diferentes estrategias adaptativas en su distribución. Es así como cobran importancia el estudio de las variantes alozímicas y su probable asociación con la distribución geográfica. La relación entre reordenamientos eucromáticos y heterocromáticos, como dos variables vinculadas con el proceso especiogénico no presentan los mismos patrones ya que mientras los cébídos muestran importantes regiones del cariotipo con secuencias altamente repetidas de tamaño y ubicación variables, detectables por bandas C, los atélidos exhiben una mínima proporción siendo el ejemplo paradigmático el de los aulladores. En especial la especie monotípica que muestra menor variabilidad estructural resulta ser Alouatta caraya cuya distribución marginal sur es la más austral dentro de los límites de nuestro país y se vincula con la cuenca del río Paraná. Esclarecer la posible relación entre Primates y grandes ríos en Argentina se consideró indispensable para comprender el proceso especiogénico. Para ello se caracterizó genéticamente poblaciones de Alouatta caraya y se la comparó con otros cinco ceboideos y en particular con Cebus apella de localidades argentinas y paraguayas cercanas al río Paraná. Para concretar los análisis comparativos se abordaron metodologías citogenéticas: técnicas de bandas G y C, y bioquímicas: electroforesis de proteínas. Siendo A. caraya una especie de gran tamaño, con dieta amplia y capacidad colonizadora, se esperaba que el río no se constituyera en una barrera, distnbuyéndose libremente en ambas márgenes. Esta especie constituyó así un modelo único para poner a prueba la hipótesis sobre los grandes ríos como barreras efectivas para la distribución en los Primates. En la distribución marginal sur de esta especie, el Paraná, por sus caracteristicas particulares de rio caudaloso podría comportarse como determinante del aislamiento reproductivo en la distribución marginal de Primates en Argentina. De allí que los objetivos fundamentales del trabajo de tesis fueron: Caracterizar la variabilidad genética de Alouatta caraya de Argentina y poner aprueba la hipótesis sobre los grandes ríos como barreras geográficas. Para ello se estudiaron 69 individuos de vida silvestre provenientes de 5 localidades y más de 70 individuos de Alouatta caraya, Cebus apella, Saimiri boliviensis, Aotus azarae y Ateles paniscus provenientes de diversos centros de cautiverio. Se observaron 4 loci polimórficos en Alouatta caraya, sobre 15 estudiados. Se compararon los perfiles electroforéticos de las 5 especies y los valores de diversidad y distancia genética de Alouatta caraya. A nivel citogenético se determinó el 2n de los individuos estudiados y se analizaron los patrones de bandas G y C. La similitud de los valores de las frecuencias alélicas y de la diversidad genética de las poblaciones, el bajo nivel de diferenciación observado entre las poblaciones y la homogeneidad cariotípica hallada, permitió decir que: en el límite austral de la distribución, el río Paraná no constituirá un barrera para los aulladores sino más bien actuaría como corredor, promoviendo la dispersión de la especie. La caracterización genética de las poblaciones de cautiverio pueden servir como reservorios de variabilidad para utilizar en programas de reproducción en cautiverio y reintroducción de especies amenazadas o en peligro de extinción.

Abstract:
In Primates, geographic distribution is associated to several factors among which, diet and body size can be considered as the most important ones when determining their ability to cross possible ecological barriers. Different studies have attempted to characterise the possible relationship between geographic distribution and certain biological patterns. The genome corresponding to the present Platyrrhini, specially the one of Ceboidea of southern marginal distribution, seems to show different adaptative strategies in its distribution. Thus the importance of the alozymic variability study and its probable association with geographic distribution. The relationship between the euchromatic and heterochromatic rearrangements, as two variables related to the speciogenic process, do not have the same pattern. While Cebidae shows important regions of the caryotype with highly repeated sequences of variable size and distribution, detected by C band pattern, Atelidae shows it in a minimun proportion, turning the howlers into the paradigmatical example. Alouatta caraya is a monotipic specie that shows less structural variability, whose distribution of the stream river banks is the southemmost within our country frontiers and is connected with the Paraná river. To understand the speciogenic process, the possible relationship between Primates and big rivers in Argentina was considered indispensable. To concrete the compared analysis, cytogenetic methodologies: G and C banding techniques and biochemical techniques: protein electrophoresis. Being Alouatta caraya a big species, with a huge diet and colonizing capacity, it was expected that the river wouldn't be a barrier, letting the species being freer distributed in both sides. This species became in that way an unique model to test the hypothesis about the big rivers as effective barriers for the distribution of the Primates. On the southern marginal distribution of this species, the Paraná river, because of their particular characteristics of being a river with strong currents could appear as the determining cause of the reproductive isolation in the marginal distribution of Primates in Argentina, So the objectives of this thesis were: characterise the genetic variability of Alouatta caraya of Argentina and to test the hypothesis about big rivers as geographic barriers. For that 69 Wildlife individuals from 5 localities and more than 70 captive specimens of A. caraya, Cebus apella, Saimiri boliviensis, Aotus azarae and Ateles paniscus from different breeding centres. From 15 loci studied, four of them were polymorphic in Aloualta caraya. Electrophoretic profiles from the 5 species were compared and diversity and genetic distances values from Alouatta caraya were obtained. To the cytogenetical level, 2n was determined for al the studied individuals and G and C banding patterns were analysed. The similar values of the allelic frequencies and those of the genetic diversity of the populations, the low level of differentiation observed between populations and the caryotipic homogeneity founded, allowed to say that: in the southernmost limit of black howlers distribution, the Paraná river wouldn't be a barrier, but a corridor , promoting the species dispersion. The genetic characterisation of captive populations could serve as variability reservoirs to use in reproductive programs in captivity and to reintroduce threatened species or in danger to extinction.

Simonelli, Silvia Carmen. "Modelo estadístico de pronóstico de convección para la zona norte de la Provincia de Mendoza" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En la provincia de Mendoza los fenómenos meteorológicos de mesoescala ocupan un lugar de importancia; entre ellos la convección adquiere características particulares y produce una gran variedad de fenómenos de tiempo que pueden considerarse "severos" y que representan un riesgo económico y social. La zona norte de Mendoza es singular en cuanto al inicio, desarrollo y evolución de la convección, dada su ubicación geográfica a sotavento de la Cordillera de los Andes y de la Precordillera, las que modifican el flujo de aire en forma muy compleja, y afectan la circulación de aire del oeste en la mayor parte de su extensión vertical. El período de ocurrencia de los desarrollos convectivos comprende la temporada cálida y están asociados a pasajes frontales, inestabilidad de masa de aire o al enfriamiento en niveles medios de la atmósfera. Las técnicas estadísticas avanzadas permiten separar de una muestra eventos convectivos y no convectivos, y finalmente obtener un porcentaje de probabilidad de ocurrencia de convección. Ello hace posible aplicar el análisis discriminante escalonado que elige los mejores predictores de una serie seleccionada a partir de la información meteorológica de superficie y de altura. Los mejores predictores de la ocurrencia de convección en la escala temporal y de precipitación convectiva en la escala espacial, resultaron índices de inestabilidad que involucran en su cálculo el contenido de humedad en capas bajas. Este resultado confirma la incidencia de las condiciones termodinámicas, y en particular la relación entre el aporte de humedad y el desarrollo de la convección. La evaluación del modelo muestra la asociación positiva entre los pronósticos y la ocurrencia del evento; observándose para los períodos de pronóstico que se encuentran más próximos a la hora de la observación altos porcentajes en la probabilidad de detección y bajos porcentajes de falsas alarmas, siendo ésta la condición necesaria para un buen pronóstico. Si bien para los períodos más alejados de la hora de observación la probabilidad de detección disminuye y aumentan los porcentajes de falsas alarmas, se mantiene la asociación positiva entre los pronósticos y la ocurrencia de los eventos. El modelo de pronóstico de ocurrencia de convección y de precipitación convectiva obtenido para la zona norte de la provincia de Mendoza desarrollado en este Trabajo de Tesis representa un avance respecto a la metodología actual de pronóstico de convección al proveer una nueva herramienta de fácil uso computacional que sintetiza la información meteorológica disponible y aplica una metodología estadística de evaluación de los pronósticos de convección en la región.

Abstract:
Mesoscale phenomena are relevant in the province of Mendoza, Argentina. Among them, severe weather related to convection represents a major economical and social hazard and has been addressed in the past by different hail suppression programs. This region has singular characteristics in regards to initiation, development and evolution of convection owing to its location leeward of the abrupt Andes range and of the Precordillera. These topographical features modify the airflow in a complex way and affect the westerlies in a deep tropospheric layer. The period of storm occurrence extends from October to March, although during some years the first storm events happen in September and the last ones in April. These events are related to frontal systems, air mass instability or cooling at middle levels. The use of a statistical technique, like the stepwise discriminant analysis, has permitted to separate convective and non-convective events from the sample, and to finally obtain a probability of convection occurrence from surface and upper air soundings data sets. The importance of thermodinamical conditions are stressed by the selection of instability indexes that include low-level relative humidity in their definition as the best predictors both for convection ocurrence in the time scale and for convective precipitation in the spatial scale. Model validation shows a positive association between predicted and observed occurrence with high probability of detection and low false alarm ratio during forecast periods closer to the observational time. The forecast model developed in this Tesis for the northern zone of Mendoza province represents an improvement respect to current operative routine and provides a statistical methodology to evaluate the forecast in the region.

Silber, Ariel M.. "Identificación de dos moléculas de Trypanosoma cruzi involucradas en la invasión de las células del huésped" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Sforza, Daniel Marcelo. "Cuantificación de sistemas con covariancia general" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En esta tesis se estudia la cuantificación de sistemas con covariancia general. En el marco de los formalismos BRST y de cuantificación canónica de Dirac, se estudian modelos de dimensión finita que emulan la estructura de vínculos de la Relatividad General. Se comienza con el estudio de un sistema sujeto a un vínculo cuadrático en los momentos y un conjunto de vínculos lineales en los momentos (correspondientes respectivamente a los vínculos "super-Hamiltoniano" y de "supermomentos" de Relatividad General). El punto de partida es discernir que las contribuciones no hermíticas de los fantasmas a los vínculos de supermomento pueden leerse en términos del volumen natural inducido por los vínculos sobre las órbitas. Este volumen juega luego un papel fundamental en la construcción del sector cuadrático de la carga BRST nilpotente. A nivel cuántico, la teoría permanece invariante ante transformaciones de escala del vínculo super-Hamiltoniano. En el caso en que el sistema posee un tiempo intrínseco, esta propiedad se traduce en una contribución del potencial al término cinético. En este aspecto el resultado difiere sustancialmente del tratamiento usual, donde la invariancia ante transformaciones de escala se fuerza con la introducción de un acoplamiento con la curvatura. Dicha contribución lejos de ser antinatural, se justifica elegantemente a la luz del principio variacional de Jacobi. Luego, el tratamiento se extiende al caso de sistemas con tiempo extrínseco. En este caso, dado que la métrica posea un vector de Killing temporal conforme y el potencial se comporte de manera adecuada respecto al mismo, el rol jugado por el potencial en el caso con tiempo intrínseco aquí es tomado por el módulo del vector de Killing de la teoría. Finalmente, los resultados obtenidos se extienden para un sistema con dos vínculos super-Hamiltonianos. Este paso es sumamente importante ya que la Relatividad General posee una infinidad de tales vínculos, con un álgebra entre ellos no trivial.

Abstract:
In this Thesis it is studied the quantization of generally covariant systems. Finite dimensional models which mimic the constraint structure of Einstein's General Relativity theory are studied in the framework of BRST formalism and Dirac's canonical quantization. First, it is studied a system featuring a quadratic constraint in the momenta and a set of linear constraints in the momenta (the "super-Hamiltonian" and "supermomentum" constraints of General Relativity respectively). The starting point is to realize that the ghost contributions to the supermomentum constraint operators can be read in terms of the natural volume induced by the constraints in the orbits. This volume plays a fundamental role in the construction of the quadratic sector of the nilpotent BRST charge. It is shown that the quantum theory is invariant under scaling of the super-Hamiltonian constraint. As long as the system has an intrinsic time, this property translates in a contribution of the potential to the kinetic term. In this aspect, the results substantially differ from other works where the scaling invariance is forced by introducing a coupling to the curvature. The contribution of the potential, far from being unnatural, is beautifully justified in light of the Jacobi's principle. Then, it is shown that the obtained results can be extended to systems with extrinsic time. In this case, if the metric has a conformal temporal Killing vector and the potential exhibits a suitable behavior with respect to it, the role played by the potential in the case of intrinsic time is now played by the norm of the Killing vector. Finally, the results for the previous cases are extended to a system featuring two super- Hamiltonian constraints. This step is extremely important due to the fact that General Relativity features an infinite number of such constraints satisfying a non trivial algebra among themselves.

Schebor, Carolina C.. "Estudios sobre la transición vítrea y la estabilidad de biomateriales de baja humedad" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La transición vitrea que se manifiesta macroscópicamente por cambios fisicos(ablandamiento del material) ocurre a una temperatura (Tg) que representa un punto critico para la movilidad de los componentes amorfos a nivel molecular. El objetivo de este trabajo de Tesis fue estudiar el efecto de la transición vitrea sobre la estabilidad enzimática y quimica en alimentos y biomateriales a muybajas humedades. El análisis se llevó a cabo estudiando reacciones susceptibles de estar afectadas por efectos de movilidad/difusión de los reactivos: resistencia térmica enzimática (enzima invertasa (β-fructofuranosidasa)) y pardeamiento no enzimático. Las conclusiones fueron las siguientes: 1. La temperatura de transición vitrea no puede ser utilizada como un umbral absoluto para predecir la inactivación térmica de la enzima invertasa, ni para definir la estabilidad con respecto a las reacciones de pardeamiento no enzimático en sistemas modelo y alimentos deshidratados. 2. Las matriz de trehalosa es superior a las matrices poliméricas en la protección de la enzima invertasa. 3. A altas temperaturas, la temperatura de almacenamiento per se es un factor más importante que T-Tg con respecto a la estabilización de la enzima invertasa y al desarrollo de pardeamiento no enzimático. 4. La estabilidad química de los azúcares frente a la hidrólisis, aun en condiciones de baja humedad, es un factor importante a tener en cuenta en la selección de matrices protectoras de biomateriales. 5. En sistemas de baja humedad los resultados obtenidos sugieren que el azúcar rafinosa podria considerarse como una alternativa de la trehalosa como matriz protectora de biomateriales.

Abstract:
The glass transition, which is manifested macroscopically by physical changes (softening of the material), occurs at a critical temperature (Tg) which promotes an increase in the mobility of amorphous components at a molecular level. The objective of present work was to study the effect of glass transition on enzymatic and chemical stability in low moisture biomaterials and food systems. These aspects were analyzed by studying reactions susceptible to be affected by mobility/diffusion effects of the involved reactants: thermal resistance of enzymes (the enzyme employed was invertase (β-fructofuranosidase)) and non-enzymatic browning. The conclusions were: 1. Glass transition temperature cannot be used as a threshold parameter for predicting invertase inactivation or non-enzymatic browning reactions in food and model dehydrated systems. 2. Trehalose was better than polymeric matrices to protect invertase. 3. At high storage temperatures, it is the temperature per se, rather than the value of T-Tg that determines the possibility of a significant extent of invertase inactivation or browning development. 4. When selecting sugars to protect labile biomaterials, the possibility of hydrolysis, even at low moisture conditions, has to be taken into account. 5. The results obtained suggested that in low moisture systems, raffinose could be considered as an alternative to trehalose to protect biomaterials.

Scarpa, Gustavo Fabián. "Estudio etnobotánico de la subsistencia de los "Criollos" del Chaco noroccidental Argentino" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Sauane, Moira. "Vías de señalización en la respuesta mitogénica a PGF 2 alfa, lif y citoquinas relacionadas, en células Swiss 3T3 que involucran la expresión de ciclinas D y CDKs" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Abstract:
Mammalian cell division, is a highly complex process, regulated and coordinated by mechanisms that are conserved through most species. The physiological control of eucariotic cell proliferation initiation is external, and it is excerted by humoral factors, made by the same or other cells, under certain requirements of the organism. Progression through the different phases of the cell cycle, is governed by a regulatory machinery conserved through most species, that not only coordinates the various events that made up the cell cycle, but also connects the cell cycle with extracellular signals, that regulates cell proliferation. Beginning with a given mitogenic stimulus acting through a specific receptor in a target cell, signalling mechanisms cascades are generated in the membrane and in the citosol of that cell. These early events, act on the cell cycle machinery, finally leading to cell division. The expression of proteins that regulate the cell cycle is in part induced by mitogen-stimulated signalling mechanisms. The passage from G0 to S phase, depends on the activity of cyclin-dependent kinases (CDKs). These kinases are CDK4 and CDK6, and they are activated when they form complexes with cyclins D (D1, D2 and D3), induced in the G1 phase. Cyclins D are considered as "sensors" of the extracellular medium, since their induction is triggered by mitogenic stimuli. The activated complexes cyclin D-CDK4 and cyclin D-CDKG catalyse the phosphorilation of the Rb protein. In Swiss 3T3 cells, PGF2α is capable of inducing DNA synthesis, by means of multiple signalling mechanisms, in the absence of other factors. However its mitogenic effect is potentiated by TGFβ1 addition. We have shown that PGF2α triggers cyclin D1 mRNA/protein expression prior to cellular entry into the S phase, but fails to raise CDK4 or cyclin D3 levels, while 1-oleoyl-2acetyllglycerol (OAG), a protein kinase C (PKC) and tyrosine kinase (TK) activator, induces only cyclin D1 expression with no mitogenic response. In contrast, in PKC-depleted or -inhibited cells, PGF2α, but not OAG, increases cyclin D1 expression with no mitogenic response. Finally, OAG, in the presence of orthovanadate (Na3VO4)or TGFβ1, induces DNA synthesis. Thus, it appears that PGF2α triggers cyclin D1 expression via two independent signalling events that complement with TGFβ1-triggered events to induce DNA synthesis. TGFβ1 cannot trigger cyclin D1 expression, but, stabilise cyclin D1 mRNA, after PGF2α-triggered its expression. Leukaemia inhibitory factor (LIF) was originally described on the basis of its ability to stimulate the differentiation of murine M1 leukemic cells into granulocytes and macrophages. In Swiss 3T3 cells, both LIF and prostaglandin F2α (PGF2α) trigger initiation of DNA synthesis and cell proliferation. LIF appears to exert its action through signals and processes markedly different from those elicited by PGF2α. While pre-treatment the cell culture with either GF 109203 (bysoindolmalemide), a specific PKC inhibitor, or 12-tetradecanoyl-13-phorbolacetate, which causes PKC down modulation, or lovastatin, known to block mevalonic acid synthesis and protein isoprenylation, totally impairs PGF2α mitogenic action. None of these treatments inhibited LIF-induced DNA replication. Agents capable of rising intracellular cAMP, enhanced both LIF and PGF2α ability to cause cellular entry into the S phase. However, H89 and PKI, both PKA inhibitors, prevented cAMP-mediated potentiation, but did not affect LIF induction of cellular entry into S phase. PD98059, a MEK (MAPKK)inhibitor, prevents PGF2α-mitogenic response but does not block LIF-induced initiation of DNA synthesis. Immunofluorescence studies revealed that LIF and PGF2α responses exhibit marked differences in STAT cytoplasmic-nuclear translocation. After 15 to 30 min, LIF causes STAT1 but not STAT3 or STAT5 translocation. In contrast, PGF2α failed to induce translocation of any of those transcriptional factors. Thus, it appears that LIF triggers mitogenic action through independent signalling events such as those involving PKC, PKA, MEK, p38MAPK and protein isoprenilation. In addition, its mitogenic effect is markedly potentiated by PKC, PKA, and probably PTK mediated signalling mechanisms. Western blot analyses of cyclin D1, D2 and D3 expression (implicated in most mitogen actions), revealed that PGF2α, after 7-9 h, caused an increase in cyclin D1 protein levels, and a later increase in cyclin D2 levels. In contrast, LIF failed to increase either cyclin D1, D2, D3, CDK4 or CDK6 protein levels. Finally, oncostatin M(OSM), a cytokine closely related to LIF, exerts its action through signals and processes markedly similar to those elicited by LIF. This conclusion is based in the following facts: both cytokines causes STAT1 tranlocation; the effect of Prostaglandin E1 and insulin, when added separately or in combination, enhances the effect of either LIF or OSM; PGF2α enhances the effect of LIF or OSM on DNA synthesis, both at subsaturant or saturant concentration. Moreover, LIF and OSM added together at subsaturating concentrations had an additive effect on DNA synthesis. LIF and OSM added together at saturating concentration had an similar effect to that of these same cytokines when added separately. Interleukin -6 and CNTF, fail to cause either cyclin D expression or mitogenic response. The results obtained suggest that the PGF2α-stimulated mitogenesis would occur through cyclin D1 expression, mediated by DAG/PKC and TK dependent mechanisms, while calcium dependent mechanisms would be involved in other processes. Finally, the LlF stimulated mitogenesis is not depend on signalling mechanisms such as those that act through PKC, PKA, MEK, p38MAPK and isoprenilated proteins, and also independently of the expression of cyclins D, CDK4 and CDK6.

Título :	Vías de señalización en la respuesta mitogénica a PGF 2 alfa, lif y citoquinas relacionadas, en células Swiss 3T3 que involucran la expresión de ciclinas D y CDKs = Signal transduction pathways in the mitogenic response to PGF 2 alfa LIF and related cytokines in Swiss 3T3 cells, including cyclins Ds and CDKs expression by diverse signalling pathways
Autor :	Sauane, Moira
Director :	Jiménez de Asúa, Luis
Año :	2000
Editor :	Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación :	Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Fundación Campomar. Instituto de Investigaciones Bioquímicas
Grado obtenido :	Doctor en Ciencias Biológicas
Ubicación :	Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_3289_Sauane
Idioma :	Español
Area Temática :
Palabras claves :	CELULAS DE RATON SWISS 3T3; FACTORES DE CRECIMIENTO; MECANISMOS DE TRANSDUCCION DE SEÑAES; MOLECULAS REGULATORIAS DEL CICLO CELULAR; FACTOR INHIBIDOR DE LA LEUCEMIA (LIF); ONCOSTATINA M (OSM); CITOQUINAS DE TIPO IL-6; TGFBETA1; PGF2ALFA; FASE G1; PROTEINAS QUINASAS DE TIROSINAS (PKT); PROTEINA QUINASA C (PKC); CALCIO; AMPC; PROTEINAS QUINASAS DEPENDIENTES DE AMPC (PTK); CICLINAS D; QUINASAS DEPENDIENTES DE CICLINAS (CDK); TRANSDUCTORES DE SEÑALES Y FACTORES DE TRANSCRIPCION (STATS); SWISS 3T3 CELLS; GROWTH FACTORS; SIGNALLING MECHANISMS; CELL CYCLE; LEUKAEMIA INHIBITORY FACTOR (LIF); ONCOSTATIN M (OSM); CILIARY NEUROTROPHIC FACTOR (CNTF); INTERLEUKIN-6 (IL-6); TRANSFORMING GROWTH FACTOR BETA1 (TGFBETA1); PROSTAGLANDIN 2ALPHA (PGF 2ALPHA); G1 PHASE; PROTEIN TYROSINE KINASE (PKT); CALCIUM; MITOGEN-ACTIVATED PROTEIN KINASE (MAPK); AMPC; PROTEIN KINASE A (PKA); CYCLIN-D; CYCLIN-DEPENDANT KINASE (CDK); SIGNAL TRANSDUCERS AND ACTIVATORS OF TRANSCRIPTION (STATS)
URL al Documento :	http://digital.bl.fcen.uba.ar/Download/Tesis/Tesis_3289_Sauane.pdf
URL al Registro :	http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_3289_Sauane

Rosenzvit, Mara Cecilia. "Secuencias repetidas en el genoma de Echinococcus granulosus : Su utilización para la detección del parásito y estudios de variabilidad genética" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Para determinar las cepas del parásito existentes en nuestro país, se analizaron quistes hidatidicos provenientes de distintos huéspedes intermediarios y zonas geográficas, mediante el estudio de polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción de un gen nuclear y la secuenciación de dos genes mitocondriales. Se detectó la presencia de cuatro cepas: oveja, oveja de Tasmania, camello y cerdo, determinándose además que las tres primeras pueden infectar al hombre. Se realizaron experimentos de Southern blot, utilizando TREG como sonda, para analizar la organización genómica, secuencia y número de copias de este elemento repetido en las cepas del parásito presentes en Argentina. EI patrón de bandas de restricción y la intensidad de señal observados en estos experimentos resultó claramente diferente para los dos grandes grupos de cepas presentes en nuestro país, el grupo oveja-oveja de Tasmania y el grupo camello-cerdo. Así mismo se observaron diferencias menores intra-cepa en algunos de estos patrones de restricción. Se determinó mediante experimentos de Southern blot que en el genoma de la cepa ovina hay 121 copias de una secuencia con por lo menos 85% de similitudcon TREG. Este valor es apreciablemente menor que el número de copias de TREG en el genoma de la cepa cerdo. TREG permitió la detección sensible y específica, mediante PCR, de todas las variantes genéticas encontradas en la Argentina. La técnica de PCR basada en la amplificación de TREG fue útil para detectar ADN parasitario extraído de heces caninas y para diferenciar heces de perros infectados con E. granulosus de perros infectados con T. hydatigena o no infectados con tenias. En conclusión, se ha aislado y caracterizado un elemento repetido en el genoma de E. granulosus con características de elemento satélite que pudo utilizarse tanto en la identificación del parásito como en la detección de sus cepas, así como también en la diferenciación de poblaciones pertenecientes a la misma cepa. La aplicación de un método diagnóstico en perros basado en la detección del elemento repetido de ADN aqui descripto y la descripción de las variantes genéticas del parásito en nuestro pais contribuyen significativamente a los estudios epidemiológicos y por lo tanto al mejoramiento de los programas de control de la hidatidosis. En este trabajo se demostró por primera vez la capacidad de las cepas oveja de Tasmania y camello para causar la hidatidosis en el hombre. Este hecho debería tenerse en cuenta para el estudio de la patología, el diseño de reactivos diagnósticos en humanos y la respuesta a vacunas profilácticasde esta enfermedad. Finalmente, los resultados obtenidos en esta tesis, en la que se ha demostrado diferencias importantes de cantidad, organización genómica y secuencia de un elemento repetido, refuerzan la idea que E. granulosus posee una plasticidad genómica de gran magnitud que se ve reflejada en las diferencias biológicas que presentan sus distintas variantes genéticas.

Rosato Siri, Marcelo Damián. "Estudio electrofisiológico y farmacológico de la transmisión sináptica en la unión neuromuscular de rata durante el desarrollo" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
l. Se estudió el efecto de diferentes bloqueantes de canales de calcio (ω-Aga IVA, ω-CgTx GVIA, y dihidropiridinas) sobre la liberación evocada del neurotransmisor en las uniones neuromusculares (UNs) de embriones y de ratas recién nacidas. 2. El contenido cuántico (m) de la liberación evocada por estimulación nerviosa fue reducido casi completamente por el bloqueante de los canales de calcio dependientes de voltaje (CCDV) de tipo P/Q, la (ω-Aga IVA (100 nM) en las placas neuromusculares recientemente formadas de embriones y de ratas de 0-11 días de edad, en concordancia con el efecto de este bloqueante sobre la liberación del neurotransmisor en músculos adultos y reinervados. 3. La ω-CgTx GVIA (1-5 μM), el bloqueante de los CCDV de tipo N, también causó una reducción significativa en los valores de m, en una etapa temprana del desarrollo (embriones y animales de 0-4 días de edad) mientras que no fue efectiva en animales más adultos (ratas de 5-11 días de edad). 4. Los bloqueantes del canal de tipo L, nitrendipina (1 μM) y nifedipina (1 μM), no afectaron en forma significativa la liberación evocada neuralmente en las UNs en desarrollo. Sin embargo, la nifedipina (10 μM) incrementó significativamente los valores de m en las UNs de ratas de 0-4 días de edad. 5. En animales de 0-11 días de edad, la liberación evocada por alto K+ extracelular fue dependiente de la entrada de calcio a través de los CCDV de tipo P/Q (100 nM de la ω-Aga IVA redujo ~70% de la frecuencia de los potenciales de placa miniaturas evocados por alto K+). Los bloqueantes de los CCDV de tipo N y de tipo L no afectaron este tipo de liberación. 6. Los CCDV de tipo P/Q se encuentran más eficientemente acoplados a la liberación (pendiente promedio = 3.6 ± 0.09) que los canales de tipo N (pendiente promedio = 2.6 ± 0.03). 7. La incubación de los músculos con 10 μM de BAPTA-AM (un quelante de calcio rápido) desacopló a los canales de calcio de tipo N del proceso de liberación sin afectar a los canales de tipo P/Q. Esta diferencia podría ser explicada por una localización diferencial de estos canales dentro del mismo sitio de liberación en las UNs de ratas de 0-4 días de edad. 8 . En este estadio del desarrollo (i.e. 0-4 días de edad), la ω-CgTx GVIA (1 μM), la ω-Aga IVA (100 nM) y el BAPTA-AM (10 μM) redujeron significativamente la facilitación de la liberación generada por doble pulso en estos terminales motores. 9. Ninguna de las neurotrofinas estudiadas (NGF, GDNF, BDNF y NT-3) modificó la liberación espontánea ni la evocada por estimulación nerviosa cuando se estudió el efecto agudo de estos compuestos sobre la transmisión sináptica en esta preparación. 10. Se estudió también la modulación de la liberación del neurotransmisor por el agregado de diferentes bloqueantes de proteínas kinasas y de proteínas fosfatasas. 1 μM del ácido okadaico (OA) incrementó la liberación solo cuando el canal de tipo P/Q mediaba la transmisión sináptica. Por otro lado, el efecto de un activador de la PKC (i.e. TPA 2 μM) involucró tanto a los CCDV de tipo P/Q como a los de tipo N. 11 . Podemos concluir que en las uniones neuromusculares de ratas en desarrollo, los canales de calcio involucrados en la liberación: - son de tipo P/Q y de tipo N, - sufren cambios asociados al desarrollo en una etapa postnatal temprana, - muestran una eficiencia de liberación diferente posiblemente debido a una localización diferencial dentro del mismo sitio de liberación, - cumplen un papel importante en la generación de un fenómeno de plasticidad presináptica de corta duración, - y podrían estar modulados diferencialmente por vías intracelulares que involucren distintos tipos de segundos mensajeros.

Abstract:
1. The effects of different calcium channel blockers (ω-Aga IVA, ω-CgTx GVIA, and dihydropyridines) were tested on evoked transmitter release at embryonic and new-born rat neuromuscular junctions (NMJs). 2. The nerve-evoked transmitter release quantal content (m) was strongly reduced by the P/Q-type voltage-dependent calcium channel (VDCC) blocker ω-Aga IVA (100 nM) at newly formed endplates of embryos and 0-11 day-old rats, in agreement with the effect of this blocker on transmitter release at mature and reinnervating muscles. 2. ω-CgTx GVIA (1-5 μM), an N-type VDCC blocker, also caused a significant reduction on m at newly formed NMJs early in development (embryos and 0-4 day-old rats), while it was ineffective in maturer animals (5-11 day-old rats). 4. L-type channel blockers, nitrendipine (1 μM) and nifedipine (1 μM), did not significantly affect neurally evoked release at developing NMJs. However, nifedipine (10 μM) was able to increase m significantly at 0-4 day-old rat NMJs. 5. At developing NMJs (O-11 day-old rats), K+-evoked transmitter release was dependent on Ca2+ entry through VDCCs of the P/Q-type family (100 nM ω-Aga IVA reduced ~70% of the K+-evoked miniature endplate potential frequency). N- and L-type VDCC blockers did not affect this type of release. 6. The P/Q-type VDCCs are more efficiently coupled to neurotransmitter release (average slope = 3.6 ± 0.09) than N-type VDCCs (average slope = 2.6 ± 0.03). 7. The muscle incubation with BAPTA-AM 10 μM differentially affected the coupling of the N-type VDCCs to neurotransmitter release, without affecting the P/Q-type VDCCs. This difference could be accounted for by a differential location of these channels at the release sites of 0-4 day-old rat NMJs. 8. At this stage of development (i.e. 0-4 day-old), ω-CgTx GVIA 1 μM, ω-Aga IVA 100 nM and BAPTA-AM 10 μM significantly reduced the double-pulse facilitation of transmitter release in these motor nerve terminals. 9. NGF, GDNF, BDNF and NT-3 were not able to modify either spontaneous or nerve-evoked transmitter release, when we studied their acute effect on synaptic transmission in this preparation. 10. We also studied the modulation of neurotransmitter release by different protein-kinase and protein-phosphatase blockers. 1 μM okadaic acid (OA) was able to increase neurotransmitter release only if P/Q-type VDCCs mediated synaptic transmission, while the effect of a PKC activator (i.e. TPA 2 μM) involved both P/Q- and N-type of VDCCs. 11.We conclude that at neonatal rat neuromuscular junctions the presynaptic calcium channel types involved in transmitter release: - are P/Q- and N-type, - undergo developmental changes during the early postnatal period, - show a different efficacy in triggering transmitter release because they are differentially located at the same release site, - have an important role on a short-term form of presynaptic plasticity - and could be differentially modulated by different intracellular enzymatic pathways.

Righetti, Claudio Enrique. "Fallas de escalabilidad en Internet" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Abstract:
This dissertation presents an Object Distribution System (ODS), a distributed system inspired by the ultra-large scale distribution models used in everyday life (e.g. food or newspapers distribution chains). Beyond traditional mechanisms of approaching information to readers (e.g. caching and mirroring), this system enables the publication, classification and subscription to volumes of objects (e.g. documents, events). Authors submit their contents to publication agents. Classification authorities provide classification schemes to classify objects. Readers subscribe to topics or authors, and retrieve contents from their local delivery agent (like a kiosk or library, with local copies of objects). Object distribution is an independent process where objects circulate asynchronously among distribution agents. ODS is designed to perform specially well in an increasingly populated, widespread and complex Internet jungle, using weak consistency replication by object distribution, asynchronous replication, and local access to objects by clients. ODS is based on two independent virtual networks, one dedicated to the distribution (replication) of objects and the other to calculate optimized distribution chains to be applied by the first network. The IRTF (Internet Research Task Force) has stated that resource discovery tools (RDT) have scalability problems. Danzing et. Al. has classified these problems in three dimensions: Data volume, number of users, and RDT diversity. Our work is focused on providing solutions to the lack of scalability mainly on the first two dimensions. The goal is to provide local access to relevant and pre-selected information; obtaining the best service from the ordered use of global interconnections where bandwidth is scarce, quality is unstable and network partitions occur too often; and providing a global and cooperative mechanism for content classification and qualification (meta-information). We focus on a model centered on communities or organizations that are producers and consumers of information: they may produce, classify, label, offer and publish information, and also look for and consume information produced by other distant communities. These interactions occur with a local (region, organization) service agent, while object distribution is done asynchronously, reliably and cooperatively among agents located anywhere in Internet. This model is appropriate because intra-community networking is usually adequate meanwhile external networking is usually poor and more expensive.

Reisenman, Carolina E.. "Fisiología del sistema visual de la vinchuca Triatoma infestans : un enfoque comportamental" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se estudiaron algunas propiedades del sistema visual de la vinchuca Triatoma infestans. La cuantificación de la respuesta fototáctica negativa de este insecto permitió: 1) establecer el umbral de sensibilidad de la respuesta a la luz blanca (<0.009 μW/cm²);2) demostrar que esta respuesta muestra una variación diaria, siendo mucho mayor durante la noche que durante el día; 3) demostrar que dicho ritmo es de naturaleza endógena, es decir, independiente de los ciclos luz-oscuridad; 4) demostrar la capacidad de los ocelos para mediar por si mismos la respuesta fototáctica; 5) estudiar la sensibilidad espectral de los ojos compuestos de T. infestans, la que fue establecida entre 357 nm (ultravioleta) y 665 nm (rojo lejano); 6) estudiar la dependencia de esta respuesta con la edad y las mutaciones. Por otra parte, mediante técnicas de morfología funcional se estudió la estructura de las omatidias y sus variaciones según el estado de adaptación y el momento del día. Estas variaciones incluyen movimientos de pigmento pantalla y cambios en la distancia focal, que permiten al ojo adaptarse a las condiciones de luz del ambiente. Estos cambios están bajo control de un oscilador endógeno. Se estudió, además, la interacción entre claves olfativas (presentes en las heces de este insecto) y visuales en el comportamiento de agregación de T. infestans. Los resultados muestran que existe una competencia y/o jerarquía entre las señales de distinta modalidad, dependiente de la composición espectral del estímulo visual. Finalmente, se midieron las condiciones luminosas (intensidad y composición espectral de la luz) en un ambiente natural, las que fueron relacionadas con los resultados presentados en este trabajo de Tesis.

Abstract:
Some aspects of the visual system of the haematophagous bug Triatoma infestans were studied. The quantitative analysis of the photonegative response of this insect allowed: 1) to establish the threshold for phototactic sensitivity to white light (<0.009 μW/cm²);2) to demonstrate that this response changes on a daily basis, being more intense during the night than during day hours; 3) to demonstrate that this rhythm is under endogenous control; 4) to demonstrate that ocelli can mediate the phototactic response by themselves; 5) to study the spectral sensitivity of the compound eye, being T. infestans sensitive to a wavelength range between 357 (ultraviolet) and 665 nm (far red); 6) to study the effects of age and mutations in this response. Besides, the morphological analysis allowed to study the structure of the ommatidia of the compound eye and its variations according to the state of adaptation and the daytime. These variations include changes in the distribution of screening pigments and in the focal length, which allow the eye to adapt to the environmental light conditions. These changes showed to be under endogenous control. In addition, the interaction between visual and olfactory cues in the assembling behavior of T. infestans was studied. Results showed that there is a hierarchy between sensory modalities, which depends on the spectral composition of the visual stimuli. Finally, the light conditions (intensity and spectral composition) in a natural environment were measured, and related with the results presented here.

Rawe, Vanesa Y.. "Eventos celulares durante la fecundación en humanos" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Para dilucidar distintos aspectos del proceso de fecundación y desarrollo temprano, en la presente tesis se analizaron oocitos humanos ‘no fecundados' y ‘fecundados anormalmente' luego de Fecundación In Vitro (FIV) e Inyección Intracitoplásmica de Espermatozoides (ICSI), haciendo hincapié en la arquitectura del citoesqueleto, estado de la cromatina, organización del áster y presencia de activaciones abortivas. Se estudiaron un total de 815 oocitos clasificados como ‘no fecundados’ y 153 oocitos clasificados como ‘fecundados anormalmente' luego FIV e ICSI. El material se procesó para inmunofluorescencia mediante la utilización de anticuerpos monoclonales para la detección de B tubulinas y a tubulinas acetiladas. El material genético se estudió con Hoechst 33258 y se analizó por microscopía óptica (UV). El análisis citogenético se realizó en 189 oocitos activados luego de FIV e ICSI según la técnica de Tarkowski (1966). Durante las fallas de fecundación, la principal causa luego de FIV, fue la ausencia de penetración espermática (59,2%), el 10,5% mostró una falla de activación oocitaria y el 15,2% presentó alteraciones en la nucleación o migración de pronúcleos. Luego de ICSI, la principal causa de falla de fecundación fue la alteración de la activación oocitaria (36,5%). Un 18,5% de los oocitos detuvieron su desarrollo en la primera placa metafásica. El estudio cromosómico, permitió identificar la presencia de activaciones abortivas; metafases III (MIII), núcleos reticulares (NR) y núcleos telofásicos (NT). En la fecundación anormal, el patrón más frecuentemente detectado luego de FIV fue la presencia de 3 ó 4 pronúcleos (PNs), (77,4%). Por el contrario, luego de ICSI resultó ser la presencia de 1PN (65,2%). Se observaron leves diferencias en el desarrollo de subnúcleos entre ambos grupos.

Abstract:
In order to dilucidate different aspects during fertilzation and early development, we analyzed “non-fertilized" and “abnormally fertilized" human oocytes after In Vitro Fertilization (IVF) and Intracytoplasmic Sperm Injection (ICSI). We focused on the cytoskeletal architecture, chromatin configuration, aster organization and the presence of abortive activations. We analyzed 815 “non-fertilized"and 153 “abnormally fertilized" oocytes after IVF and ICSI. The material was processed for immunofluorescence to detect B tubulins and a acetylated tubulins. DNA was studied using Hoescht. Chromosomal spreads were performed by Tarkowski's air-drying method in 189 IVFand ICSI oocytes. During fertilization failure, the main reason after IVF was no sperm penetration (59.2%). The remaining oocytes showed different abnormal patterns: oocyte activation failure (10.5%) and defects in pronuclei apposition (15.2%). On the other hand, fertilization failure after ICSI was mainly associated to incomplete oocyte activation (36.5%). An 18.5% of the studied oocytes stopped their development at the metaphase of the first mitosis of the pre-embryo. The Chromosomal spreads allowed identifying abortive activations, including metaphase III and others. Immunofluorescence analysis of abnormal fertilization showed that the most frequent abnormal fertilization pattern found after IVF was the presence of 3 or 4 PNs (77.4%). On the other hand, the presence of 1 PN (65.2%) was the main pattern found after ICSI. No differences between both groups were seen in terms of subnuclei development.

Rabossi, Alejandro. "Caracterización del proceso de degradación de tejidos larvales durante la metamorfosis en la Mosca del Mediterráneo, Ceratitis Capitata (Wiedemann)" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se han estudiado en detalle, por primera vez, los eventos moleculares más importantes responsables de la histolisis de tejidos larvales durante la transición larva-adulto de dípteros. Se han descrípto, por primera vez en los insectos, proteinasas lisosomales específicas de la histolisis y se ha correlacionado su actividad con la de otras enzimas degradativas y con las imágenes de cambios anatómicos degenerativos en músculos y cuerpo graso. Los principales resultados obtenidos son: l. Se aisló una nueva aspartil-proteínasa de 43.000 daltons, específica de la histolisis, denominada EMAP (Early metamorphosis aspartyl proteinase), con características bioquímicas similares al grupo de las Catepsinas tipo D y cuya secuencia amino terminal no presentó homología con este grupo. Usando la secuencia correspondiente al N- terminal se obtuvo un transcripto que fue clonado y secuenciado. La secuencia obtenida mostró homología del 59% con catepsina D de porcino, 51% con una proteinasa aspártica de mosquito y 60% con una proteinasa aspártica de arroz. 2. Se aislaron dos nuevas cisteín proteínasas lisosomales denominadas MCP I y MCPII (metamorphosis cystein proteinase), de 32.000 y 67.000 daltons respectivamente. Ambas enzimas fueron caracterizadas bioquímicamente y sus extremos amino terminales secuenciados. MCP I mostró características bioquímicas similares y alta homología N-terminal con las Catepsinas B de mamíferos (55.5%) y con una cisteín proteinasa de la mosca Sarcophaga (44%). MCP II es una endoproteinasa de nuevo tipo, cuyo N-terminal no presentó homología con ninguna cisteín proteinasa conocida en invenebrados, ni tampoco en vertebrados. 3. El perfil de actividad de las nuevas endopeptidasas coincidió con el de fosfatasa ácida, β-glucosidasa y β-galactosidasa lisosomales y correlacionó estrechamente con un marcado descenso en el contenido de proteínas registrado durante las etapas tempranas de la metamorfosis. El incremento en la actividad de enzimas lisosomales coincidió temporalmente (entre 20³º y 48 h desde la inmovilización definitiva de la larva) con la aparición de los primeros signos de muerte celular en los músculos y el cuerpo graso. 4. Es la primera vez que se describe en insectos el progreso temporal de la histolisis del cuerpo graso larval. Se determinó que la degradación de éste es un proceso gradual, que se inicia a las 20³ºh cuando las células que forman una red se separan unas de otras y finaliza alrededor de las 120 h cuando gran parte de las mismas se han fragmentado. Se determinó que los músculos esqueléticos correspondientes a los segmentos anteriores (l a 5) se fragmentan a partir de las 22 h, mientras que los correspondientes a la región abdominal, lo hacen recién a partir de las 72 h. 5. Se encontró una estrecha correlación entre la degradación del cuerpo graso larval y la depleción en el contenido de las principales moléculas de reserva. Cortes histológicos de cuerpo graso teñidos por PAS demostraron la completa desaparición del glucógeno en horarios posteriores a las 20³º h. El glucógeno fue consumido principalmente durante la etapa de salto y dispersión de la larva, mientras que el remanente (14% del contenido original, de acuerdo a dosaje directo) se consumió durante las primeras 20³ºh después de iniciada la metamorfosis. Los lípidos se consumieron principalmente a partir del estadio pupal (40 h), confirmando las imagenes histológicas obtenidas, donde se registró la disminución en el número y tamaño de las vesículas de grasa a partir de este horario Los resultados alcanzados han permitido obtener un panorama integral de la progresión de eventos degradativos durante la transición larva-adulto y mostraron por primera vez, que con muy pequeñas variantes, los eventos de la metamorfosis tienen idéntica duración relativa y representan etapas equivalentes del ciclo de vida en todos los insectos dípteros.

Abstract:
We have studied in detail for the first time the most important molecular events involved in larval tissue degradation during dipteran larva to pupa transition. We have described for the first time in insect, specific lysosomal proteinases of the hystolitic process. We have also correlated these activities with other degradative enzymes and with the anatomic changes in muscles and fat body registered during metamorphosis. The most important results obtained are: l. We isolated a novel aspartic proteinase with a relative molecular weight of 43,000, called Early Metamorphosis Aspartic Proteinase, that is specific of hystolisis. EMAP presented similar biochemical characteristics to the Cathepsin D group, but the amino terminal sequence did not present homology with this group. Using the sequence corresponding to the N-terminal, we obtained a transcript which was cloned and sequenced. The sequence obtained showed a 59% homology to pork Cathepsin D, 51% to a mosquito aspartic proteinase and 60% to a rice aspartic proteinase. 2. We isolated two novel lysosomal cysteine proteinases denominated MCP I and MCP II (Metamorphosis Cysteine Proteinases), with 32,000 and 67,000 daltons respectively. The biochemical characterization of the enzymes and the amino terminal sequences were obtained. MCP I showed similar biochemical characteristics and high homology in the N-terminal sequence with mammalian Cathepsin B group (55.5%) and with the fly Sarcophaga cystein proteinase (44%). MCP II is a novel endopeptidase with an N-terminal sequence which neither presented homology with any cysteine proteinase of invertebrate nor with vertebrate. 3. The novel endopeptidase activity profile during metamorphosis was coincident and correlated well with the acid phosphatase, β-glucosidase and β-galactosidase activities profiles. Endopeptidase profile activity also correlated with the decrease in the amount of proteins registered during pre-pupal and pupal stages. The increment in lysosomal enzymes activities observed (from 20³º h to 48 h), were coincident with the appearance of the first symptoms of cell death in muscles and fat body. 4. As far as we know, this is the first time that larval fat body histolytic process was described in insect. It was determined that this is a gradual process, that begins at 20³º h when larval fat body cells dissociate from the typical mesh structure and ends 120 h after when most of the cells are fragmented. Larval muscles from 1ˢͭ to 5ͭʱ segment were fragmented 22 h from the beginning of metamorphosis. Muscles from the abdominal region fragmented since 72 h. 5. Temporal larval fat body degradation agreed well with the depletion of storage molecules. PAS histologic stain demonstrated the complete disappearance of glycogen in samples later than 20³º h. While the glycogen content decreased during larva III jumping and dispersal stage, the remaining 14 % remanent glycogen disappeared during the first 20³º h since the beginning of metamorphosis. Lipids were degradated since the beginning of the pupal stage (40 h), confirming the histologic images obtained, where a decrease in the number and size of lipids vesicles were registered since 40 h. The results reached in this Thesis have allowed us to obtain a complete view of the degradation events during larva-adult transition and showed for the first time, that with very little variations, the metamorphosis events have an identical relative duration and represent equivalent stages of the life cycle in all the dipteran insects.

Poó Simonotti, Fernando. "Autofunciones de billar de Bunimovich en representación de estados coherentes" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Piva, Marcelo Fabián. "Estructuras de recirculación en un contenedor cilíndrico" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo se presenta un estudio experimental sobre el flujo producido por un rotor en el fondo de un cilindro vertical lleno parcialmente con un líquido. Esta configuracion geométrica genera un flujo rotante en el plano paralelo al eje de simetría y un flujo recirculante en planos meridionales. De entre los parámetros que gobiernan el proceso el número de Reynolds es, quizás, el más importante por lo que el estudio abarca una extensa gama de valores de este parámetro, cubriendo prácticamente cinco décadas. Se ha dividido el campode estudio en tres regiones: Reynolds pequeños, medianos y grandes. Trabajando en el primer régimen se observó el fenómeno de ruptura del vórtice (vortex breakdown)sólo en la configuración experimental en la que el disco cubre totalmente el fondo del recinto. Esta observación motivó la realización de experiencias numéricas que demuestran que la relación entre el radio del disco y el radio del cilindro es un factor muy importante en el umbral de ruptura del vórtice. En el rango de Reynolds medios se comprobó que el flujo pierde la simetría axial y transita a un estado caracterizado por la aparición de vórtices verticales encadenados al eje de rotación. Se caracteriza la inestabilidad a través de diferentes técnicas experimentales. En el rango de Reynolds grandes se observa la formación de un filamento vorticoso que presenta fluctuaciones en su intensidad. Analizando el movimiento de particulas en la superficie libre se identifica un movimiento corrotativo de precesión y mediante la colocación de una paleta deflectora se estudia la destrucción del filamento y la subsiguiente redistribución de la vorticidad.

Abstract:
An experimental study on the flow produced by a rotating disk at the bottom wall of a vertical cylinder partially filled with a liquid is presented. This geometrical configuration generate a rotating flow in a plane parallel to the symmetry axis and a recirculating flow in meridian planes. Several parameters govern the dynamics of the flow, among them the Reynolds number can be considered as one of the most important. Taking this into account this study covers a wide range of Reynolds numbers with values up to five decades. The working field has been divided into three regions: small, medium and large Reynolds numbers. In the first regime, vortex breakdown phenomena was observed only when the disk radius was equal to the cylinder radius. Numerical simulations demonstrated that the ratio between the disk radius and the cylinder radius is an important factor determining the onset of vortex breakdown. In the second region it was observed that the flow becomes unstable with a transition to a state with n vertical vortex around the symmetry axis. This shear instability was characterized with different experimental techniques. In the third region the formation of a vortical filament with fluctuating intensity is observed. with particles at the free surface a precessing motion of the filament was identified. By placing a deflective blade the destruction of the filament and the vorticity redistribution was studied.

Pignataro, Leonardo Antonio. "Neuroesteroides en el sistema nervioso central en desarrollo : biosíntesis y modulación del complejo receptor GABA sub A" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El ácido γ-aminobutírico (GABA) se une principamente al receptor GABAa y aumenta la conductancia de la membrana plasmática al ion Cl-, lo que suele estar acompañado de un hiperpolarización de la misma. Estas funciones del GABA son moduladas por diversas drogas como ser benzodiazepinas, barbitúricos y neuroesteroides. Los resultados aquí presentados demuestran que al igual que en los mamíferos los neuroesteroides son capaces de modular positivamente al receptor GABAa presente en el SNC de las aves, siendo este efecto mayor en los estadios embrionarios. Además, se comprobó que en el SNC de las aves existe un sitio esteroideo en la molécula receptora con requerimientos estrecuturales para la neuroactividad diferente a los hallados en mamíferos. La biosíntesis de derivados de la progesterona en el lóbulo óptico en desarrollo reveló que la misma es mayormente metabolizada a esteroides 5β-reducidos, que luego son 3β-hidroxilados resultando en el derivado epipregnanolona, el cual modula la unión del flunitrazepam en forma inversamente relacionada con la edad. Por último, el tratamiento crónico in ovo con este esteroide demostró que el mismo es capaz de reducir el acoplamiento alostérico entre los sitios benzodiazepínicos y GABA érgicos con el de los neuroesteroides y por otro lado facilitar la interacción enre los sitios de GABA con los de benzodiazepinas y barbitúricos. Estos datos sugieren que la epipregnanolona podría endógenamente modular las interacciones alostéricas del receptor GABAa de la aves afectando su funcionamiento.

Abstract:
γ-aminobutyric acid (GABA) binds mainly to GABAa receptor increasing membrane chloride conductance, that usually results in membrane hyperpolarization. GABA actions are modulated by several drugs such as benzodiazepine, barbiturates and neurosteroids. We demonstrated that neurosteroids positively modulate GABAa receptor present in avian CNS, in a manner inversely related to age. Results also disclosed that structural requirements for neuroactivity in birds are not identical to those of mammals. Pogesterone derived steroids produced in the optic lobe are mainly 5β-reduced metabolites, which are in turn 3-βhydroxilated to form epipregnanolone. Epipregnanolone biosynthesis is higher at early stages of development as well as its ability to modulate flunitrazepam binding. Lastly, in ovo chronic treatment with this steroid produced a reduction in the allosteric coupling between GABA and benzodiazepine sites and the steroid modulatory sites. On the other hand, this treatment increased the coupling between GABA receptor sites and benzodiazepine and barbiturate modulatory sites. These data suggest that epipregnanolone may endogenously modulate GABAa receptor interactions and consequently affects its function.

Parise, Alejandro Rubén. "Control de la transferencia electrónica en compuestos de valencia mixta" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En esta Tesis se investiga el efecto del solvente en la estructura electrónica de los complejos n-, y en las propiedades de valencia mixta de dímeros binucleares conteniendo fragmentos n- y n-. También se estudia el proceso de transferencia electrónica en dímeros de intervalencia asimétricos. Los coligandos CN- participan de interacciones ácido base con el solvente. En los complejos n-, este fenómeno incrementa el grado de mezcla π entre el Fe y el ligando L, reduce la energía de las transferencias de carga metal-ligando y vuelve más negativos los potenciales redox de las cuplas n-. La espectroscopía Stark de estos complejos permite cuantificar el grado de mezcla π metal-L, dentro del modelo de dos estados electrónicos. Se determina que los ligandos L más pequeños permiten un mayor solapamiento con el metal que los grandes, e inducen mayor mezcla. Para interpretar teóricamente el efecto del solvente en los espectros electrónicos y el grado de interacción π se usa el método semiempírico ZINDO junto con un modelo de cargas puntuales que rodean al complejo y simulan la presencia del solvente. Se estudia el mecanismo de oxidación del n- con S2O82- en el dímero -, mediado por el isómero electrónico -. El fragmento n+ participa de interacciones específicas con el S2O82-.Esta interacción, junto con la isomerización, es responsable de la mayor velocidad de reacción en comparación con el ataque directo del S2O82- al centro n-. El efecto de los solventes apróticos sobre los dímeros de intervalencia 5- también fomenta mezcla π entre los metales y el ligando puente L. En acetonitrilo, el dímero con M = Fe y L = piracina presenta un comportamiento cercano al de Clase III (Robin y Day). El espectro IR en la zona de VC=N de este dímero es dependiente del tipo de solvente, puesto que el tiempo de la isomerización electrónica es variable (10^-10 a 10^-12 s) e interfiere con las vibraciones de los cianuros. Se usa un modelo de tres estados electrónicos para interpretar el efecto del solvente en las propiedades de intervalencia, en especial el ensanchamiento de las bandas vibracionales.

Abstract:
This thesis is about how the solvent affects the electronic structure of n- complexes and the mixed valence properties on the binuclear dimers with n- and n- fragments. The electron transfer process in intervalence asymmetric dimers is also investigated. CN- coligands participate in acid-base interactions with the solvent. In n- complexes, this effect increases the degree of π mixing between the Fe and the ligand L, reducing the energy of the metal-to-ligand charge transfer, and shifting the redox potential of the n- process to more negative values. The Stark spectroscopy of these complexes allows measuring the degree of π mixing metal-L, under two electronic states model framework. Smaller ligands L allow a better overlap with the metal than bigger ones. In order to understand theoretically the solvent effect on the electronic spectra and degree of mixing ZINDO method is used with a point charge model that simulates the solvent. The oxidation of n- in - with S2O82- is also investigated. The reaction is mediated by the electronic isomer -. The n+ fragment participates in specific interactions with S2O82- This interaction and the isomerization, is responsible of the bigger reaction rate compared with the direct attack to the n-. The effect of aprotic solvents on the intervalence dimers of the type 5- also induces π mixing between metals and bridge ligand L. In acetonitrile the dimer with M = Fe and L = pirazine presents a near Class III (Robin and Day) behavior. The IR spectrum around VC=N stretching depends on the solvent, because the electronic isomerization time is variable (10^-10 a 10^-12) and interferes with the cyanide vibrations. A three-state model is used to explain the solvent effect of mixed valence properties, specially the vibrational bands broadening.

Otero Corchón, Verónica. "Participación del neuropéptido Somatostatina en el sistema nervioso central de ratones genéticamente modificados" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Neira, María Susana. "Influencia de los procesos de elaboración en el contenido de micotoxinas de alimentos de consumo masivo" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se llevó a cabo en la población de la Universidad Nacional de Luján una encuesta dietética de recordatorio de 24 horas con el objeto de evaluar los patrones de consumo de alimentos y el aporte de energía por parte de los alimentos derivados de cereales. La muestra (16% de la población total) estuvo compuesta por 901 personas. Los resultados evidenciaron que los productos derivados del trigo constituyen más del 90% de los cereales consumidos. El predominio de alimentos manufacturados con trigo, entre el consumo de cereales, secundado por la ingesta promedio de maiz, determinó la necesidad de evaluar la ocurrencia natural de micotoxinas en ambos cereales. Para ello se realizó un relevamiento de la ocurrencia de micotoxinas en muestras de maíz y trigo obtenidas durante los periodos de cosecha 1992/ 93 y 1993/94 en las principales zonas de producción. El 2.72 % de las 294 muestras de maiz analizadas en 1993 y el 31.8% de las 280 muestras correspondientes a la cosecha 1994 resultaron contaminadas por zearalenona, con valores promedios sobre muestras positivas de 151.5 μg/kg y 292.9 μg/kg, respectivamente. Es importante destacar que no se detectaron muestras positivas para aflatoxinas. El 37,4% de las 222 muestras de trigo de la cosecha 1992 resultó estar contaminado por deoxinivalenol (DON), con una valor promedio sobre muestras positivas de 201.3 μg/kg. En una etapa posterior, se procedió a estudiar la ocurrencia de DON en muestras de trigo (cosecha 1994), harina de trigo y subproductos. En los productos de panificación, previamente identificados entre los de mayor consumo por la población estudiada, se observó una elevada frecuencia de contaminación, un 83% en pan francés y el 100% en medialunas de manteca. Los niveles de contaminación por DON fueron significativamente menores en los productos finales con respecto al trigo y a la harina. Teniendo en cuenta los resultados obtenidos se estudió el proceso de panificación en establecimientos de elaboración artesanal, en donde se determinó que la reducción promedio de DON en los productos elaborados con harina naturalmente contaminada era de 44.3 %. En la etapa final que consistió en la elaboración a escala piloto de diferentes productos se comprobó que la fermentación (levado) de las masas produjo una disminución de la contaminación inicial de DON y se establecieron parámetros que permiten optimizar el proceso logrando mayor reducción de esta toxina durante la etapa de fermentación a 50°C, 41% en pan francés y 56% en pan de Viena.

Abstract:
A dietary intake survey employing a 24-hours recall was carried out at the National University of Luján, Argentina with the objective to evaluate the food consumption patterns and the energy and protein contribution through cereals intake. A representative sample of 901 persons (16% of the population) was assessed. Among cereal products, people consumed mainly wheat subproducts (90%) followed by maize products, considering the main daily intake. Due to the identification of a high intake of cereal products made of wheat and maize, it was considered valuable to assess the natural occurrence of mycotoxins in those cereals. The survey of the natural occurrence of mycotoxins in maize and wheat samples from the main production area in Argentina, was carried out during 1993 and 1994 harvests. The 2.72 % of 294 maize samples analyzed in 1993, and the 31.8% of 280 belonging to 1994 harvest, were contaminated by zearalenone with a mean contamination level over positive samples of 151.5 μg/kg and 292.9 μg/kg, respectively. None of the analyzed samples contained detectable aflatoxins. Among the 222 wheat samples of 1992 harvest, 37.4% were contaminated with deoxynivalenol (DON) with a mean contamination over positive samples of 201.3 μg/kg. In a next step, the natural occurrence of DON in wheat (1994 harvest), wheat flour and bakery products was studied. French bread and butter croissant identified among the mainly consumed products, showed 83 % and 100% of contaminated samples, respectively. DON contamination levels in bakery products were lower than those detected in wheat and flour. Based on these results, the effect of breadmaking process on DON contamination was evaluated in a low-technology bakery. A mean percent of reduction of 44.3% in DON initial contamination was observed as a consequence of the bread making process. Finally, using a pilot scale, the stability of DON during the fermentation stage of the breadmaking process was studied. Two different products, French bread and Vienna bread, were prepared with naturally contaminated wheat flour under controlled experimental conditions. Dough was fermented in a cabinet at 30°C, 40°C and 50°C according to standard procedures employed in Argentinean low technology bakeries. The maximum reduction during fermentation was obtained at 50°C, achieving a 41% and 56% of decrease in French bread and Vienna bread, respectively.

Moffat, Luciano. "Aspectos energéticos de la recolección de néctar en la abeja doméstica" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se analizó la modulación de la inversión energética de la abeja recolectora en la fuente de alimento en función del flujo de sacarosa provisto. Para ello, se puso a punto un dispositivo respirométrico que mide la tasa metabólica de la abeja en vuelo libre de recolección. Analizando el comportamiento de abejas individuales se encontró que tanto la tasa metabólica como Ia carga de buche aumentan con el flujo de sacarosa, pero para una misma carga la tasa metabólica aumenta con el flujo de sacarosa. Del mismo modo, se encontró una fuerte correlación entre la tasa metabólica y la temperatura. Analizando el comportamiento de grupos de abejas entrenadas, se encontró que su distribución depende del flujo de sacarosa provisto y que otro tanto ocurre con las abejas que son reclutadas a dicha fuente de alimento. Finalmente se encontró que la tasa metabólica de la abeja individual se halla correlacionada con la presión de recolección. Estos resultados sugieren que a nivel social, se regularia el número de abejas que intentan recolectar en cada fuente de alimento de acuerdo al flujo de sacarosa. A nivel individual, se regularían el nivel de actividad recolectora indicado por la tasa metabólica y la temperatura torácica.

Abstract:
The modulation of the energetic expenditure of the nectar foraging bee was experimentally analyzed. With that purpose, a respirometric device that allowed to measure the metabolic rate of a free flying foraging bee was developed. After analyzing the behavior of individual bees, it was found that both the metabolic rate and the crop load increased with the provided flow rate of sucrose solution. However, for a same average load carried in the crop, the metabolic rate increased with the flow rate. On the other hand, a strong correlation was found between the metabolic rate and the ambient temperature. After analyzing the behavior of a group of bees, it was found that the distribution of experienced foragers and naives recruits followed the flow rate of sucrose provided. Finally, a clear correlation was found between the metabolic rate and the foraging pressure. The results suggests that at the social level, the number of forager trying to collect at each food source might be regulated accordingly to the provided sucrose. At the individual level, on the other hand, they would be regulated different parameters related to the intensity of the foraging activity, in particular the metabolic rate and the thoracic temperature.

Marín Burgin, Antonia. "Neuromodulación en el sistema nervioso de la Sanguijuela Hirudo medicinalis" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La serotonina es un neuromodulador presente en diversos organismos, cuya regulación endógena es aún materia de investigación. En la sanguijuela Hirudo medicinalis 50% de la serotonina neuronal se encuentra en el par de células Retzius (Rz). Los objetivos de este trabajo fueron analizar: I) los componentes que median la entrada de señales mecanosensoriales a las neuronas Rz y, II) la modulación colinérgica de las neuronas Rz. Los resultados indican que: I. La señal mecanosensorial provocó respuestas complejas en un par de intemeuronas pasivas, las células 151, que mostraron una alta correlación temporal con las respuestas de las neuronas Rz. La hiperpolarización de las células 151 desacoplaron a las neuronas Rz de la entrada mecanosensorial. Los resultados sugieren que las señales mecanosensonales que excitan a las neuronas Rz son pre-procesadas por el par de células pasivas. II. Utilizando inhibidores de la enzima acetilcolinesterasa (AChE) se estudiaron los efectos de fuentes endógenas de acetilcolina (ACh) sobre las neuronas Rz. Se reveló la existencia de una liberación espontánea de ACh que, en condiciones fisiológicas, generó un tono colinérgico capaz de regular el potencial de membrana de las neuronas Rz.

Abstract:
Serotonin modulates motor behaviors in different organisms. In the leech Hirudo medicinalismore than 50% of the neuronal serotonin is contained in the pair of Retzius (Rz) cells. The goals of this work were to analyze: I) the neuronal elements that mediate the mechanosensory input onto the Rz neurons and, II) the cholinergic modulation of the Rz neurons. The results indicate that: l. The sensory input produced complex responses in the pair of nonspiking neurons, cells 151, that were highly correlated with the responses of the Rz neurons. Hyperpolarization of the cells 151 uncoupled the responses of the Rz neurons from the mechanosensory input. The results suggest that the mechanosensory signals that excite the Rz neurons are pre processed by the pair of nonspiking neurons. H. Using inhibitors of the acetylcholinesterase (AChE) activity we studied the effects of endogenous ACh on Rz cells. We found a spontaneous ACh release that, in physiological conditions, generated an ACh tonus that regulated the membrane potential of the Rz neurons.

Manifesto, María Marcela. "Caracterización de la variabilidad genética de germoplasma argentino de trigo (Triticum aestivum L) mediante marcadores moleculares" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
105 cultivares de trigo pan (Triticum aestivum L.), liberados comercialmente en Argentina entre 1932 y 1995, fueron caracterizados utilizando marcadores genéticos de tipo morfológico y molecular (microsatélites y AFLP) para obtener una estimación cuantitativa de la diversidad genética y su evolución a lo largo del tiempo, programas de mejoramiento. Un subgrupo de 10 diez SSR (microsatélites) altamente informativos fue seleccionado y utilizado para la construcción de la Matriz de Identificación, que permitió la discriminación de todos los cultivares estudiados aqui. Los datos moleculares fueron comparados con los datos morfológicos. Se observaron valores de correlación significativos,aunque bajos, para las distintas técnicas comparadas con los datos fenotípicos, presentando valores de correlación mayores los AFLP y SSR (r= 0.1334) siguiéndole el de coeficientes de parentesco (r = 0.12239). Los datos obtenidos mediante los marcadores SSR se complementaron con la información de datos de AFLP a fin de evaluar las relaciones genéticas entre cultivares. La correlación entre las matrices de similitud de datos combinados de SSR con AFLP y la matriz de coeficientes de parentesco fue estadísticamente significativa (test de Mantel, P<0 01), aunque baja (r = 0.34) Los datos moleculares fueron usados para cuantificar la diversidad genética a través de los criaderos y para evaluar la erosión genética. No se hallaron diferencias significativas en la diversidad genética entre los principales programas de mejoramiento privados y públicos. Sólo se hallaron diferencias significativas entre los principales criaderos y los menores, tanto con SSR como con AFLP. Un resultado interesante es que no se hallaron diferencias significativas en los valores de diversidad genética de los grupos de cultivares liberados antes de 1960 y aquellos liberados en las siguientes tres décadas. Los valores de diversidad promedio basados en marcadores SSR fueron casi idénticos para los cuatro periodos analizados La diversidad genetica estimada basada en datos de AFLP fue similar, pero diferencias levemente significativas fueron halladas entre cultivares liberados en los '70 (PIC= 0.28) y en los 80's (PIC = 0.34). Estos resultados contradicen la visión generalizada de la erosión genética de los cultivares modernos y muestran que el germoplasma Argentino de trigo pan ha mantenido relativamente constante el nivel de diversidad genética durante la última mitad del siglo. Se corroboró la factibilidad de la aplicación de microsatélites en dos aspectos: a) el estudio de caracteres cuantitativos de interes agronómico, como es la calidad panadera, en poblaciones segregantes y b) su aplicación en la caracterización de germoplasma. a) El microsatélite Xgwm3000 ubicado dentro del locus del gen de las γ-gliadinas (Xps2(Gli-1)) se halló completamente ligado al locus de RFLP XGli-B1 y estrechamente ligado (1 6 cM) a XGlu-B3 en la poblacion segregante Chinese Spring-Klein 32. La presencia del alelo 252 pb detectado en Klein32 se correlacionó con los aumentos detectados en los parámetros de calidad. Los microsatélites Xgwm2999 y Xgwm3000 ubicados dentro de los loci de γ-gliadinas y gluteninas de bajo peso molecular, respectivamente fueron útiles en la caracterización de la variación alelica de los loci de proteínas de reserva en 105 cultivares de Argentina y 90 de California.

Abstract:
In this study, 105 Argentine cultivars of bread wheat (Triticumaestivum L.) released between 1932 and 1995 were characterized using SSR, AFLP markers and morphological characters to obtain a quantitative genetic diversity estimation, its evolution along time and different breeding programs. A selected subset of ten highly informative microsatellites was used to construct an Identification Matrix that allowed the discrimination of all the cultivars included in this study. Molecular data was compared with morphological data. Significant correlation values, although low, were obtained for morphological data matrix and molecular data matrix. AFLP and SSR showing highest values of correlation (r = 0.1334), followed by kinship data (r = 0.1224) Data obtained from SSR markers was complemented by information derived from AFLPs, to evaluate genetic relationships among cultivars. The correlation between a combined SSR and AFLP similarity matrix and a kinship coefficients matrix was highly significant (Mantel test. P<0.01). but low (r= 0.34) Molecular data were used to quantify genetic diversity across the wheat breeding programs and to evaluate genetic erosion. No significant differences in genetic diversity were found between the largest private and public breeding programs. Significant differences were found only between the large and smallest breeding programs for both SSR and AFLP An interesting result from this study was that no significant differences in genetic diversity were found between the group of cultivars released before 1960 and those released in each of the following three decades. Average diversity values based on SSR markers were almost identical for the four analyzed periods Genetic diversity estimates based on AFLP data were also very similar but slightly significant differences were found between bread wheat cultivars released in the 70's (PIC = 0.28) and those released in the 80's (PIC= 0.34). These results contradict the general vision of significant genetic erosion in modern cultivars and showed the Argentine bread wheat germplasm has maintained a relativer constant level of genetic diversity during the last half century. Microsatellite application was corroborated in both aspects: a) studies of qualitative characters of agronomic interest, as bread making quality, in segregating populations and b) germplasm characterisation. a) SSR located within the γ-gliadin gene (Xps2(Gli-1))was completely linked to RFLP locus XGli-B1 and closer linked (1.6 CM)to XGlu-B3 in Chinese Spring-Klein 32 segregating population. Allele 252 pb at this loci detected in Klein 32 variety, was associated with significant increment in bread making quality parameters. b) SSR loci Xpsp 2999 and Xpsp 3000 located within a low molecular weight glutenin gene and gamma-gliadin gene, respectively are useful to characterize allelic variation at these two storage protein loci in 105 bread wheat cultivars from Argentina and 96 from California.

López-Malo Vigil, Aurelio. "La preservación multiobjetivo de alimentos: Efecto de factores tradicionales y emergentes en la respuesta de Aspergillus flavus" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo de esta tesis fue evaluar el efecto de la interacción de distintos factores de estrés (aw, pH, antimicrobianos sintetizados químicamente o antimicrobianos naturales y sus mezclas binarias) en la respuesta de crecimiento de Aspergillus flavus y determinar las condiciones de combinación inhibitorias sinérgicas o de cooperación de dichos factores, con miras a generar modelos predictivos para la conservación multiobjetivo de alimentos. Se determinó el efecto de distintas combinaciones de factores de estrés, tales como actividad de agua (0,99 o 0,95), pH (4,5 o 3,5) y presencia de antimicrobianos sintetizados artificialmente (benzoato de sodio, bisulfito de sodio o sorbato de potasio) y/o antimicrobianos naturales (vainillina, eugenol, carvacrol, timol o citral) sobre la respuesta de crecimiento de Aspergillus flavus. Se formularon sistemas modelo tomando como medio base al agar papa-dextrosa adicionando las cantidades necesarias de sacarosa y ácido clorhídrico para ajustar la actividad de agua y el pH según el caso y adicionando desde 100 hasta 1,800 ppm de los antimicrobianos en forma individual o en combinaciones binarias de los antimicrobianos. En cada caso los medios sólidos fueron inoculados con 2 μL de una suspensión de esporas del moho y se registró el tiempo para detectar el inicio del crecimiento de la colonia y/o su cambio en diámetro en función del tiempo de incubación. En los sistemas formulados con algún agente antimicrobiano y donde el moho se desarrolló, la velocidad de crecimiento radial varió de 0,037 (a.w 0,95; pH 3,5; 500 ppm eugenol) a 0,609 mm/h (aw 0,99; pH 4,5; 100 ppm benzoato de sodio). El tiempo lag se incrementó conforme aumentó la concentración del agente antimicrobiano, por ejemplo, el tiempo lag se alargó aproximadamente 330 horas (cerca de 14 días) en medios formulados con 200 ppm de timol, aw 0,99 y pH 3,5 y con 300 ppm de este agente el tiempo para detectar la presencia del moho se retraso 1400 horas (más de 55 días). Se determinaron las concentraciones mínimas inhibitorias de antimicrobianos comunes y naturales para Aspergillus flavus, mostrándose cuando se utilizó benzoato de sodio, bilsulfito de sodio o sorbato de potasio, una dependencia en el valor de pH, y esta dependencia fue más notoria a valores de aw altos (0,99). A valores de aw bajos (0,95), se observó la interacción de la presencia de 300 ppm sorbato de potasio y un pH de 4,5 en la inhibición del moho. El sorbato de potasio junto con carvacrol y timol fueron los antimicrobianos más efectivos para esta combinación aw- pH. Se modeló utilizando el modelo de Fermi la respuesta a la dosis (cantidad de agente antimicrobiano) para todas las combinaciones antimicrobiano - pH - aw evaluadas. La respuesta del moho se expresó como el cociente entre el tiempo lag con respecto al tiempo lag del sistema control mostrando la típica forma sigmoide de las curvas de respuesta a la dosis. Se observaron diferencias importantes en los valores de los coeficientes de la fución de Fermi (Pc y k) para los diferentes agentes antimicrobianos, así como para los distintos valores de aw y pH evaluados. Los resultados mostraron que las concentraciones de los agentes antimicrobianos naturales necesarias para duplicar el tiempo lag que se obtiene en el sistema control no dependen tanto del pH del sistema, como en el caso de los agentes antimicrobianos sintéticos. Se determinó la interacción entre los distintos factores cuando se aplicaron en distintos niveles sobre la interferencia de la homeostasis de Aspergillus flavus y se determinaron condiciones sinérgicas o de cooperación para la inhibición y retraso en el crecimiento del moho, evaluando la respuesta de Aspergillus flavus a diferentes mezclas binarias de antimicrobianos comunes y naturales. No se observó crecimiento del moho a tiempos de incubación largos conforme se aumentó la concentración de los agentes antimicrobianos en la mezcla. Se observaron también importantes diferencias en el comportamiento del moho en los medios formulados con distinto valor de pH, así como entre las diferentes mezclas de agentes antimicrobianos. Las mezclas de los distintos agentes retrasaron el crecimiento al menos 5 días en muchos de los casos, resaltando el comportamiento de las mezclas con citral en donde se observó que en el 58% de los casos (274 de un total de 474) a pH 3,5 y en el 53% (253 de 474) a pH 4,5 las observaciones fueron de no crecimiento después de 5 días y de crecimiento a los 30 días de incubación. Cada uno de los resultados de las observaciones del crecimiento o no crecimiento de Aspergillus flavus se representaron mediante un isobolograma, utilizando para las diferentes condiciones de pH (4,5 o 3,5) y períodos de incubación(5, 10, 15 o 30 días), las concentraciones fraccionales inhibitorias (CFI) de cada agente en la mezcla. Los CFI índices (calculados como la suma de los CFI de cada agente en la mezcla) para las combinaciones de agentes antimicrobianos evaluados después de 30 días de incubación, variaron de 0,125 (pH 4,5; 50 ppm timol y 800 ppm vainillina) a 1,764 (pH 3,5; 1600 ppm citral y 50 ppm timol). Los CFI índices mostraron comportamientos de sinergismo, aditividad o antagonismo dependiendo de los agentes y sus niveles en las diferentes mezclas, y también del tiempo de incubación. Se realizaron experimentos que permitieron el modelado matemático (probabilístico) de la interfase entre crecimiento y no-crecimiento de Aspergillus flavus bajo diferentes condiciones de actividad de agua (0,98; 0,96 o 0,94), pH (5,0; 4,0 o 3,0), temperatura de incubación (15 o 25°C) y concentración (0, 200, 400, 600, 800 o 1000 ppm) de benzoato de sodio o vainillina. Los resultados se interpretaron utilizando modelos predictivos con miras a ser utilizados en la conservación multiobjetivo de alimentos, evaluando la supervivencia del moho a los diferentes factores y prediciendo las condiciones letales y/o inhibitorias. Se observó un efecto importante del tiempo de incubación, ya que combinaciones inhibitorias del crecimiento del moho a tiempos cortos resultaron positivas (crecimiento) con tiempos de incubación más prolongados, demostrando el efecto sobre el tiempo lag de A. flavus de los factores empleados en las distintas combinaciones estudiadas. Utilizando regresión logística se obtuvo un modelo polinomial con alto porcentaje de concordancia entre los datos (>93%) además las pruebas de Hosmer y Lemeshow y de Chi-cuadrado dieron resultados significativos, lo que demuestra la bondad en el ajuste del modelo propuesto para predecir la respuesta (probabilidad de crecimiento) de Aspergillus flavus. El modelo permitió calcular la probabilidad de crecimiento del moho cuando fue inoculado en medios formulados con distintos valores de aw, pH, concentraciones de benzoato de sodio o vainillina e incubado por diferentes tiempos a distintas temperaturas. Se observó que la probabilidad de crecimiento del moho disminuyó conforme disminuyó la temperatura de incubación, el pH y la aw y conforme aumentó la concentración de los agentes antimicrobianos. La probabilidad de que el moho se desarrollara fue menor en los casos en los que el medio contenía benzoato de sodio. El modelo logístico permitió predecir la respuesta del moho bajo diferentes combinaciones de las variables si se establecía un nivel de probabilidad para que el evento (crecimiento) ocurriera. Al disminuir el valor de probabilidad los niveles de las variables empleadas en la combinación deberían ser más severos; menor temperatura de incubación, menor pH, menor aw, mayor concentración de agente antimicrobiano o menor tiempo de incubación o el uso de vainillina como antimicrobiano, para asegurar con esa probabilidad que el evento ocurriera (o con el complemento de la probabilidad que el evento no ocurriera).

Abstract:
The objective of this research was to evaluate the effects of several microbial stress factors interactions (aw, pH, chemical synthesized antimicrobials or natural antimicrobials and their mixtures) in the growth response of Aspergillus flavus and to determine those combinations and conditions that cause a synergic inhibition and permit modeling and predicting of mold response within a multitarget preservation of foods approach. The effects of several combinations of microbial stress factors such as water activity (0,99 or 0,95), pH (4,5 or 3,5) and the presence of synthetic antimicrobials (sodium benzoate, sodium bisulfite or potassium sorbate) or naturally occurring antimicrobials (vanillin, eugenol, thymol, carvacrol or citral) on Aspergillus flavus growth response were evaluated. Potato dextrose agar was adjusted with the necessary quantities of sucrose and chlorhydric acid to attain aw and pH. l00, 200, 300 up to 1,800 ppm of individual or combinations of each antimicrobial agent were incorporated to the agar. Each formulated and solidified media was inoculated with 2 μL of A. flavus spore suspension and time to growth and/or colony diameter was recorded as a function of incubation time. In those systems formulated with antimicrobial agents and where mold growth was observed, radial growth rate ranged from 0,037 (aw 0,95; pH 3,5; 500 ppm eugenol) to 0,609 mm/h (aw 0,99; pH 4,5; 100 ppm sodium benzoate). Lag time increased as antimicrobial agent concentration in the agar increased, in media containing 200 ppm thymol, aw 0.99 and pH 3.5 lag time was around 330 h (l4 days), with 300 ppm of the same phenolic compound the time to detect a visible colony was delayed around l400 h (55 days). Synthetic and natural antimicrobial minimal inhibitory concentrations to Aspergillus flavus, indicated that the use of sodium benzoate, sodium bisulfite or potassium sorbate were pH dependent, being more noticeable at aw 0,99. At aw 0,95, an interaction between 300 ppm potassium sorbate and pH 4,5 to inhibit mold growth was observed. Potassium sorbate, carvacrol and thymol were the most effective antimicrobials tested in this aw—pH combination. Using Fermi function, dose response models for each antimicrobial were obtained in each pH-aw combination. Mold growth response was expressed as the ration between the lag time with respect the lag time obtained in the control media without antimicrobial, showing typical sigmoid form of dose response curves. Important differences in Fermi function parameters (Pc y k) were observed depending the type of antimicrobial, aw and pH. The model demonstrated that natural antimicrobial concentration needed to duplicate lag time as compared with A. flavus lag time in the control a lesser pH dependence than the observed with synthetic antimicrobials. An interaction between pH, aw and antimicrobial agent concentration on mold growth response. Homeostatic Aspergillus flavus interference due to interactions of stress factors and selected levels were evaluated in order to determine synergic situations that inhibit mold growth. Several binary combinations of natural and synthetic antimicrobials were tested against mold spore in model systems. At short incubation times A. flavus was unable to grow but with longer incubation times higher antimicrobial concentration were needed to inhibit growth. Mold respond in a different way depending on pH and antimicrobial type and concentration. In many of the tested combinations no growth was observed after 5 days of incubation. Mold inoculated in media formulated with antimicrobial mixtures containing citral show a special behavior. 58% of the evaluated cases (274 of a total of 474) at pH 3,5 and in 53% (253 of 474) at pH 4,5; no growth was observed after 5 days and growth was observed after 30 days of incubation. Each growth or no growth result obtained at pH 3,5 or 4, 5 and after 5, 10, 15 or 30 days of incubation, was transformed into fractional inhibitory concentrations (FIC) and an isobologram plot was constructed for each evaluated antimicrobial mixture. FIC was calculated as the inhibitory concentration of each antimicrobial in the presence of the other divided by the individual inhibitory concentration. Isoblograms as well as FIC index show that values near to 1 represent additivity, values lower than 1 represent synergy and values higher than 1 represent antagonism. Calculated FIC index for 30 days of incubation ranged from 0,125 (pH 4,5; 50 ppm thymol and 800 ppm vanillin) to 1,764 (pH 3,5; 1600 ppm citral and 50 ppm thymol). FIC index presented synergy, additivity or antagonism depending of the antimicrobials mixed and their level in the mixture. Several experiments were carried out to mathematically model (probabilistic) Aspergillus flavus growth —no growth interface when inoculated in media formulated with selected water activity (0,98; 0,96 or 0,94), pH (5,0; 4,0 or 3,0), incubation temperature (15 or 25°C) and antimicrobial agent concentrations (0, 200, 400, 600, 800 o 1000 ppm) of sodium benzoate or vanillin. The results were interpreted using predictive equations that permit to describe and predict multi-target preservation of foods by using mold survival as a model. Incubation time has an important effect on mold inhibition, several inhibitory factor combinations inhibit mold growth for 100—200 h of incubation but with longer incubation times mold grew, demonstrating the effect of the evaluated factors on mold lag time. Using logistic regression a polynomial equation was obtained with a higher than 93% of concordance between observed and predicted data. Hosmer and Lemeshow and Chi-square tests were significant indicating the goodness of fit of the model and its adequacy to predict the probability of growth. The model permitted to calculate mold probability of growth when inoculated in media formulated with selected aw and pH values selected concentrations of sodium benzoate or vanillin and incubated at different temperatures for different times. The probability of growth diminished as incubation temperature, pH and aw decreased and as antimicrobial concentration increased. Lower probability of growth was obtained in those factor combinations that included sodium benzoate as antimicrobial than in those containing vanillin. The logistic model permitted to predict the probability of growth under several combinations and also permitted to calculate the levels of the variables in the combination if a tolerable probability level is pre-established. As the probability diminished, the levels of the variables in the combination were more severe, lower incubation temperature, lower pH, lower aw, greater antimicrobial concentration or shorter incubation time.

López Bergami, Pablo. "Estudio molecular y funcional de la patología cardíaca inducida por inmunización con proteínas ribosomales P de Trypanosoma cruzi" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El estudio de la respuesta inmune contra las proteínas ribosomales P de Trypanosoma cruzi en el suero de pacientes chagásioos crónicos sugirió que esta respuesta inmune podria jugar un importante rolen el desarrollo de la cardiomiopatía chagásica. En función de esos resultados se encaró una tarea de clonado de las proteinas ribosomales P213 y P0 de T. cruzi en vectores procariontes con el objeto de expresar y purificar abundantes cantidades de proteínas recombinantes. Estas proteínas se utilizaron para desarrollar modelos de inmunización en ratones. En primer término se determinó la especificidad de la respuesta inducida mediante estos modelos. Luego se estudió la respuesta contra los principales epítopes de éstas proteínas localizados en el extremo C-terminal (péptido R13 en TcP2β y P015 en TcP0). Se determinó que la respuesta contra estos epitopes fue similar a la observada en sueros humanos. Paralelamente, se realizaron estudios tendientes a determinar alteraciones en la función cardíaca de los animales inmunizados. De esta forma, mediante la realización de electrocardiogramas, se estableció el desarrollo de alteraciones en la generación del impulso nervioso (arritmias), alteraciones en la conducción intraventricular y en la repolarización. La participación de los anticuerpos anti-P en la generación de alteraciones cardíacas también fue confirmada en ensayos realizados sobre corazones aislados de conejo.

Abstract:
The study of the immune response against ribosomal P proteins of Trypanosoma cruzi in chronic Chagas disease patient's sera suggested that this immune response might play an important role in the development of Chagasic Cardiomiopathy. The molecular cloning of the ribosomal P26 and P0 proteins allowed us to express and purify high amounts of recombinant proteins. These proteins were used to develop animal models of immunization. First, we assessed the specificity of the induced response and determining the induction of high levels of anti-P antibodies. Then, we determined that the response against the C-terminal epitopes of these proteins (peptide R13 in Tc2β Band peptide P015 in TcP0) was similar to those observed in human sera. Immunized animals showed a modified electrocardiographic pattern compared to that in control mice. The participation of anti-P antibodies in the induction of cardiac disturbances was also assessed in a whole rabbit heart isolated system.

Lo Nostro, Fabiana Laura. "Espermatogénesis, ciclo anual e inducción hormonal de la espermiación en el pez protogínico diándrico, Synbranchus marmoratus Bloch, 1795 (Teleostei, synbranchidae)" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En el presente estudio se ha determinado que, en las zonas muestreadas en Argentina, la anguila criolla, S. marmoratus, es una especie protogínica diándrica, presentando dos tipos de machos: los primarios, que nacen como tales y los secundarios que provienen de la reversión sexual de hembras funcionales. La población estudiada presentó un 20% de machos primarios y un 80% de secundarios. Utilizando técnicas para microscopía óptica y electrónica, se caracterizaron anatómica e histológicamente las gónadas de ambos tipos de machos y de los revertantes así como la espermatogénesis y el ciclo testicular anual. Ambos machos poseen testículos de tipo lobular irrestricto y la espermatogénesis se desarrolla a lo largo del año. Las gónadas poseen un compartimiento germinal, organizado en lóbulos donde la diferenciación celular es sincrónica dentro de cada espermatocisto. En el compartimiento intersticial se observan células de Leydig, células mioides, fibras colágenas y vasos sanguíneos. El ciclo anual fue dividido en 5 clases reproductivas: regresada, maduración temprana, maduración media, maduración final y en regresión, basándose en los cambios del epitelio germinal y en la preponderancia de los distintos tipos de células germinales. Se observó la presencia de un epitelio germinal permanente y no se han encontrado diferencias entre ambos tipos de machos. Se identificaron las formas de GnRH en cerebro (salmón y chicken-II). Se indujo artificialmente la esperrniación utilizando un análogo superactivo de GnRH y un antagonista dopaminérgico, obteniéndose un 100% de liberación de esperma a la tercera semana de tratamiento. Esto se corroboró a nivel histológico. Se observó un aumento significativo de los niveles de testosterona y estradiol en sangre respecto de los animales control.

Abstract:
The swamp eel, Synbranchus marmoratus, is a protogynic, diandric fish having two types of males: primary males, constituting only 20% of the population studied, develop directly as males. Secondary males made up 80% of the population and develop from sex reversal of functional females. Light and electron microscopy were used to study the anatomy of testes in both types of males, spermatogenesis, and changes during the annual reproductive cycle. Testes were unrestricted, with respect to the distribution of spermatogonia, and lobular. Within the lobules, the germinal epithelium had distinct annual changes in spermatogenesis. When reproductive, spermatogenesis was confined to spermatocysts whose borders were composed of Sertoli cell processes and within which sperm maturation was synchronous. During the annual reproductive cycle, five maturation classes were observed that were defined by changes in the germinal epithelium: early maturation, mid maturation, late maturation, regression, and regressed. Sertoli and germ cells formed a permanent germinal epithelium, i. e. it was present throughout the year. The testis interstitial compartment was composed of Leydig cells, myoid cells, collagen, and blood vessels. Two gonadotropin releasing-hormone (GnRH) brain forms were characterized: salmon (sGnRH) and chicken II (cGnRHII). Hormonal induction of spermiation were carried out using a superactive GnRH analogue and a dopaminergic antagonist. Histological analysis demonstrated that the treatment induced 100% spermiation within three weeks. Serum testosterone and estradiol levels were significantly higher in treated than in control swamp eels.

Liberman, Rosa Gabriela. "Medición de radionucleicos cosmogénicos en el Meteorito de Campo del Cielo" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los meteoritos contienen en su interior el registro de parte de la historia del Universo. En su viaje por el espacio son alcanzados por las partículas energéticas que componen la radiación cósmica, básicamente protones y partículas alfa. Estas partículas penetran en la materia extraterrestre e inducen reacciones nucleares cuyos productos son isótopos cosmogénicos, estables o radiactivos. La presencia de este tipo de radioisótopos o las concentraciones anómalas de los nucleidos estables pueden ser utilizadas para el estudio de la intensidad de los rayos cósmicos en el pasado, su espectro de energía, la dosis de radiación acumulada sufrida por los meteoroides y el tiempo durante el cual han estado sometidos a ella. Por otra parte, una vez que los cuerpos celestes han caído a la Tierra, la medición de las concentraciones de ese tipo de elementos es útil para la estimación del tiempo transcurrido desde la caída a nuestro planeta y de la posición preatmosférica de las muestras, lo cual permite inferir el tamaño de los meteoritos antes de penetrar en la atmósfera terrestre. Las vidas medias de los radioisótopos cosmogénicos cubren un amplio rango de tiempos, los cuales pueden ser muy pequeños, fracciones de segundos o extremadamente largos, del orden de 10(10) años. En general, los meteoritos que se estudian han sido recogidos varios cientos o miles de años luego de su caída. Por ello sólo es posible medir aquellos radioisótopos con vidas medias largas. La técnica de espectrometría de masas con aceleradores de partículas (AMS) es particularmente útil para medir la concentración de isótopos cuyas vidas medias oscilan entre 10(3) y 10 (8) años. Los productos de decaimiento de esta clase de nucleidos no pueden ser detectados en períodos ordinarios y por medio de técnicas usuales de detección. Por otra parte, su concentración es del orden de 10(-12) o menor, por lo que no es posible detectarlos por medio de Ia espectrometría de masas convencional. AMS posee la sensibilidad adecuada para lograr mediciones confiables mediante el conteo individual de átomos del radionucleido en cuestión. Las muestras, que pueden ser tan pequeñas como l mg de material, deben pasar por un proceso químico previo el cual sirve para disminuir las contaminaciones y convertirlas a una forma apta para ser colocadas en la fuente de iones de los aceleradores de partículas. El objetivo del presente trabajo es el estudio de parte de la historia del meteorito caído en Campo del Cielo, Argentina. Para ello, se aplica la técnica de AMS a la medición de la concentración de cinco radioisótopos cosmogénicos de vida media larga: 10Be, 26Al, 36Cl, 41Ca y 59Ni, en muestras provenientes de dos fragmentos de dicho meteorito. Uno de ellos es, a su vez, parte de un fragmento expuesto en varios museos del mundo, El Taco, mientras que el otro fue levantado del suelo en las cercanías de los cráteres. Los resultados obtenidos y su comparación con los modelos teóricos existentes para las tasas de producción de radioisótopos cosmogénicos permitieron extraer conclusiones acerca de la edad terrestre del meteorito, de la posición de las muestras en el meteoroide madre y en consecuencia del tamaño del mismo antes de caer a la Tierra.

Abstract:
Meteorites record in their interior part of the history of the Universe. While they are travelling in space, the energetic particles from cosmic rays reach them, penetrate in the meteoritic matter and induce nuclear reactions whose products are both stable and radioactive cosmogenic nuclides. The presence of radioactive isotopes and abnormal abundances of stable isotopes tells us about the intensity of cosmic radiation in the past, its energy spectrum and the accumulated radiation dose to which the meteorite was exposed during its life as an independent object. Once the extraterrestrial bodies had fell onto the Earth, measurements of these concentrations are useful to estimate their terrestrial age and the sample preatmospheric position. Cosmogenic radioisotope half-lives can be very small. fractions of seconds, or extremely long, about 10 (10)years. In general. meteorites which are studied in laboratories have been picked up several cents or thousands years after their fall. For this reason only long-lived radioisotopes can be measured. The accelerator mass spectrometry technique (AMS) is particularly useful to measure the concentration of isotopes whose half-life is between 10(3) and 10(8)years. On the one side, their decay products can not be detected by conventional techniques over a reasonable counting period. On the other side, since their concentrations are usually lower than 10(-12), the use of conventional mass spectrometry is severely limited. AMS has the right sensitivity to obtain reliable measurements by means of the individual atom counting. Samples, which can be as small as l mg of material, must pass a previous chemical process to reduce the isobaric contamination and put them in a suitable form to be placed in the accelerator ion source. The goal of the present thesis is the study of part of the history of the meteorite “Campo del Cielo". The AMS technique was used to measure the concentration of five long lived cosmogenic radioisotopes: 10Be, 26Al, 36Cl, 41Ca y 59Ni in five samples from two fragments of that meteorite. One of them came from the El Taco fragment and the other one was picked up from the ground in one crater field. The obtained results and their comparison with theoretical predictions of radioisotope production rates led to extract some conclusions about the terrestrial age of this meteorite, the preatmospheric position of the samples in the parent meteoroid and, in consequence, its size before the fall to the Earth.

Levinton, Gad. "Bandas gemelas no idénticas en régimen de deformación normal" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El fenómeno de bandas rotacionales con iguales energías de transición (bandas gemelas) se estudia dentro del régimen de deformación normal para establecer si dicha similitud se corresponde con una igualdad en sus momentos de inercia, como se ha establecido en el régimen de superdeformación. La zona de núcleos en las tierras raras pesadas ofrece ejemplos de bandas gemelas, las cuales se analizan en el contexto de los formalismos del Cranking y del modelo de partículas mas rotor, siendo necesaria la identificación precisa de las configuraciones que dan origen a las bandas rotacionales. Para ello se aplican métodos de asignación de configuraciones de partícula en combinación con esquemas de acoplamiento para núcleos doblemente impares. Se establece en este trabajo la existencia de bandas gemelas en los núcleos Lu170 y Lu171. En base a la importante diferencia entre los momentos de inercia característicos de las bandas mencionadas se concluye que a pesar de ser gemelas no son idénticas. Se discute la posibilidad de que la notable similitud entre las energías de transición se deba a cancelaciones de carácter fortuito.

Abstract:
The phenomenon of different rotational bands with identical transition energies (twin bands) is studied in the normal deformation regime in order to asses if this similarity is related to equal the moments of inertia in the two bands, as demonstrated in the superdeformation regime. The region of heavy rare earths offers examples of twin bands, which are analyzed in the context of the Cranking model and the particle plus rotor model frameworks, giving rise to the need for a precise identification of the configurations involved in the rotational bands. To do so, methods of configuration assignment are used in combination with coupling schemes developed for doubly odd nuclei. The existence of twin bands in Lu170 and Lu171 is established in this first comprehensive study. Taking into account the important difference in the characteristic moments of inertia of the mentioned bands it has been concluded that in spite of being twins they are nonidentical. The possibility is discussed that the striking similarities in the transition energies are due to cancellations of fortuitous origin.

Lerner, Lorena R.. "Estudios relacionados con la síntesis de Novo del glucoceno en mamíferos" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El glucógeno es un polisacárído de α-D-glucosas altamente ramificado que se encuentra en distintos tipos celulares, desde bacterias a células humanas. El glucógeno tiene por función actuar como reservorio de glucosas. Sus uniones glucosídicas son α(l—)4) α(l—->6). Su estructura altamente ramificada le confiere alta solubilidad. Esta característica le posibilita almacenar grandes cantidades de glucosa, fácilmente movilizable en caso de ser requerida por el organismo y, a la vez ejercer una presión osmótica muy pequeña en comparación con la que ejercería la misma cantidad de moléculas de glucosa en estado libre. El músculo esquelético y el hígado son los tejidos donde se encuentra acumulado la mayor parte del glucógeno. En el músculo esquelético, el glucógeno es un substrato energético sumamente importante para la actividad muscular. Las características bioquímicas y las propiedades enzimáticas de las enzimas involucradas en la síntesis de novo del glucógeno fueron analizadas en los dos tipos de fibras de músculo esquelético (de contracción rápida y de contracción lenta). La concentración de glucógeno fue significativamente más elevada en el músculo de fibras rápidas (EDL) que en el músculo de fibras lentas (Soleus), pero el Soleus a diferencia del EDL, contenía una gran cantidad de moléculas intermedias, aceptores endógenos de tamaño molecular intermedios, capaces de actuar como sustrato de la Glucógeno Sintetasa. Cabe destacar que las actividades enzimáticas de las proteínas involucradas en la síntesis de novo del glucógeno en músculos EDL fueron muy fuertemente estimuladas en presencia de Glc-6-P, mientras que la presencia de este azúcar no fue capaz de modificar la actividad enzimática de las proteínas de músculo Soleus. El ejercicio en el músculo esquelético es uno de los estímulos fisiológicos más importantes para la síntesis de glucógeno. Resultó de interés examinar el efecto de la estimulación muscular crónica en músculos de fibras rápidas. Mediante este estudio fue posible hallar que la actividad contráctil no sólo afecta la concentración de glucógeno muscular, sino que también altera su estructura. Además, el ejercicio intenso y continuo fue capaz de alterar las actividades relacionadas con la biogénesis del glucógeno muscular. Adicionalmente, luego de un estímulo prolongado o luego de un estímulo seguido de reposo fue posible encontrar el fenómeno de supercompensacíón de glucógeno. Este fenómeno se caracteriza por un gran incremento de la concentración de glucógeno muscular, más allá de los valores hallados para músculos en buenas condiciones nutricionales y en reposo. Junto con este fenómeno, el metabolismo de los músculos EDL sometidos a este tipo de tratamiento, presentó una acumulación de propia de músculo Soleus. Como resultado de los datos presentados en este trabajo, se propuso un modelo que explica los pasos involucrados en la síntesis de novo del glucógeno de músculo esquelético de contracción rápida. En el hígado, donde el glucógeno se acumula como reserva de glucosa para tejidos extrahepáticos, las enzimas del metabolismo del glucógeno poseen propiedades que le permite al hígado actuar como sensor de los niveles de glucosa plasmática, y de esta manera, almacenar o movilizar dicho polisacárido de acuerdo con las necesidades periféricas. Por los tanto, el metabolismo del glucógeno hepático es muy importante en la homeostasis de la glucosa. A partir de hígado de rata, la Glucogenina, la proteína iniciadora del glucógeno fue parcialmente purificada y bioquímicamente caracterizada. En líneas de células de hepatoma (HUH-7; HepG2) se estudió la regulación de la síntesis del glucógeno y de las enzimas asociadas a su metabolismo. Las enzimas de estas células mostraron muchas de las características bioquímicas propias de las enzimas de hígado de rata. Por tal motivo, estas líneas de células de hepatoma humano representaron un modelo apropiado para el estudio de la síntesis de novo del glucógeno hepático. En experimentos orientados a develar las bases moleculares de la regulación de las enzimas involucradas en la síntesis de novo del glucógeno hepático, fue posible observar que tanto el suero como la insulina y la glucosa fueron capaces de incrementar la síntesis del glucógeno. Esta estimulación fue producida por un incremento en la actividad transcripcional y en la actividad enzimática de las proteínas involucradas en esta ruta metabólica (Glucogenina, Glucógeno Sintetasa). Por el contrario, el glucagon, el HGF y el TGF-β produjeron un descenso del contenido del glucógeno acumulado mediante principalmente la inhibición de las actividades enzimáticas involucradas en su síntesis o alterando la relación síntesis/ degradación del polisacárido. La Enzima Ramificante no mostró ningún tipo de alteración a nivel transcripcional ni en su actividad enzimática frente a la presencia de estos factores o nutrientes.

Abstract:
Glycogen is a mayor storage form of glucose in many cell types. It is highly branches structure composed of thousands of glucose molecules attached to each other in an α (1—>4) glucosidíc linkage with branching points covnsisting of a (l—>6) linkages. Skeletal muscle and liver are the major sites of glycogen accumulation. Skeletal-muscle glycogen is an extremely important energy substrate for muscular activity. The biochemical and enzymatic properties of the enzymes involved in the de novo glycogen synthesis were analyzed in the two different skeletal muscle type fiber (fast and low twitch). It was found that glycogen concentration was higher in fast twitch muscle (EDL) that in slow twitch fiber muscle (Soleus), but Soleus muscle contained much more intermediate- acceptor molecules that could act as Glycogen Synthase substrate, than EDL muscle. On the other hand, the enzymes involved in the de novo glycogen synthesis in EDL muscle were strongly stimulated by the presence of Glc-6P, but Soleus muscle’s ones were not. One of the most important physiological stimuli of glycogen synthesis in skeletal muscle is glycogen exercise. It was interesting examine the effect of chronic muscle stimulation and repose on the enzymes involved in the de novo glycogen synthesis on fast twitch skeletal muscle. It was found that contractile activity not only affect glycogen concentration in EDL muscles, but also its structure. Additionally, glycogen-depleting exercise altered the enzymatic activities here studied. Moreover, glycogen supercompensation phenomenon was found after prolonged stimulation or stimulation followed by repose in EDL muscle. This phenomenon was characterized by a large increase in glycogen concentration, far above the levels found in well-fed, sedentary state muscle. Besides, intermediate-acceptor molecules were accumulated, as it was found in slow twitch muscle. As a result of the data presented here, a model for the de novo glycogen synthesis in fast twitch skeletal muscle was proposed. In liver, where glycogen is stored as a reserve of glucose for extrahepatíc tissues, the glycogen-metabolizing enzymes have properties that enable the liver to act as a sensor of blood glucose, and store or mobilized glycogen according to the peripheral needs. Therefore, liver glycogen metabolism is very important for glucose homeostasis. Glycogenin, the initiator glycogen protein, was partial purified and biochemical characterized from rat liver tissue. The regulation of the glycogen synthesis and associated enzymes were studied in human hepatoma cells lines (HUH-7; HepG2). These cells showed many biochemical properties similar to the rat liver tissue. For that reason, human hepatoma cells lines represented an appropriate model system for the study for the de novo glycogen synthesis. It was found that serum, ínsulin and glucose stimulated glycogen de novo synthesis. This stimulation was accompanied by a transcripcional and enzymatic activity increased of the enzymes involved in this metabolic pathway (Glycogenin and Glycogen Synthase). On the other hand, glucagon, HGF and TGF-β reduced glycogen synthesis mostly by enzymatic activity inhibition or by changing the ratio between synthesis and degradation of this polysaccharide. Branching Enzyme did not show any kind of enzymatic or transcripcional alteration due to the presence of this factors or nutrients.

Kalesnik, Fabio Alberto. "Relación entre las comunidades vegetales de los neoecosistemas de Albardón y la heterogeneidad ambiental del Bajo Delta del Río Paraná : Tendencias sucesionales y proyecciones sobre la composición futura" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo general del presente trabajo fue analizar la relación existente entre la composición florística y las principales especies exóticas y nativas de los neoecosistemas de albardón y la heterogeneidad ambiental que caracteriza al Bajo Delta del Río Paraná. A su vez, se analizarán distintos patrones en la tendencia sucesional y las proyecciones de la composición futura de los últimos estadios sucesionales o neoecosistemas con alto período de abandono. En las tres unidades en que se divide el área de estudio (A, B y C) se seleccionaron áreas modales en las cuales se realizaron censos de cobertura y densidad de las especies vegetales y se tomaron muestras de suelo. En la unidad B, además, se tomaron muestras de suelo para determinar el banco de semillas. Mediante técnicas de clasificación y ordenamiento se identificaron grupos de censos y especies analizando su distribución a lo largo de la unidad. También se calcularon índices que permitieron analizar el grado de invasión de especies exóticas y al grado de recuperación de especies nativas a nivel de cada unidad y a nivel regional. Los resultados indican que el patrón de distribución de las especies y las composición de los neoecosistemas de albardón se relacionaron con el gradiente fluvial-mareal que se observa a nivel regional. Dicho gradiente diferencia a los neoecosistemas de la unidad A de aquellos pertenecientes a las unidades B y C. Del análisis de las tendencias sucesionales se observa que estas dos últimas unidades presentaron procesos sucesionales convergentes, presentando una respuesta similar a nivel de fisonomías, formas de vida y especies que se desarrollan a lo largo del eje temporal. Dicha convergencia se debió principalmente al elevado grado de invasión de siete especies exóticas. Sólo en el estadío tardío se observa la recuperación de individuos juveniles de especies arbóreas nativas. La tendencia sucesional observada en la unidad A, responde principalmente a las condiciones de mayor fluvialidad presentes en la misma, independientemente del tiempo de abandono de los neoecosistemas. La composición futura estos últimos seguirá siendo dominada por una matriz de especies herbáceas nativas con la presencia de individuos aislados de especies arbóreas nativas. A diferencia de ello, los neoecosistemas de las unidades B y C seguirán conformados por un bosque secundario en los cuales las especies exóticas invasoras dominarán cada uno de los estratos arbóreos del mismo. El análisis del banco de semillas confirma esta tendencia. El bosque nativo no regenera a escala regional relacionado a las condicionantes ambientales que se desarrollan en la unidad A y por el éxito invasivo de las especies exóticas a lo largo de un eje espacial y temporal en las unidades B y C. El análisis del banco de semillas refirerza esta predicción. Se genera un modelo conceptual a través de cual se plantea un nuevo paradigma en el sentido de comprender el funcionamiento ecológico de los neoecosistemas de albardón a una escala espacial y temporal.

Abstract:
The general objective of this work was to analyze the relationship between the floristic composition (including the main alien and native species) of the levee neoecosystems al the environmental heterogeneity that characterizes the Lower Delta of the Paraná River. In modal areas of the three units that compose the study area (A, B and C), plant cover and density, and soil characteristics were studied. In unit B, soil samples were also gathered for seed bank analysis. Classification and ordination techniques were employed to identify groups of censuses and species and their distribution was analyzed along each unit. Different indexes were calculated in order to analyze the degree of alien species invasion, and the degree of recovery of native species in the different units and at the regional scale. Results showed that patterns of distribution of species and floristic composition of levee neoecosystems were related to the fluvial-tidal gradient observed at the regional scale. In this gradient, neoecosystems of unit A differed from those present in units B and C. From the analysis of successional trends it was inferred that the latter units had convergent successional processes, with similar responses at physiognomic, life form and species levels developed along the temporal axis. That convergence was principally due to the high degree of invasion of seven alien species. Only at the later stage, a recover of native juveniles trees was observed. The successional trends in unit A were mainly related to the higher river influence that characterize the area, independently of the time of human abandonment of the neoecosystems. There, the future composition of plant communities would still be dominated by a matrix of native herbaceous species, but with the presence of isolated native arboreal ones. Conversely, neoecosystems of units B and C would continue to be conformed by secondary forests, in which invading exotic species would dominate each arboreal layer. Native forests did not regenerate at a regional scale due to environmental conditions of unit A and due to the invasive success of exotic species along the spatial and temporal axis in units B and C. Seed bank analysis confirmed that tendencies and reinforced the last prediction. Finally, a novel conceptual model was developed in order to permit the comprehension of the ecological functioning of the levee neoecosystems at spatial and temporal scales.

Josens, Roxana B.. "Recolección de néctar en la hormiga Camponotus mus" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El presente trabajo de tesis analizó diversos aspectos de la recolección individual de néctar en la hormiga Camponotus mus. Se estudiaron en forma cuantitativa la dinámica de ingestión y diferentes variables comportamentales, en relación con la concentración de la solución de sacarosa ofrecida, con el tamaño del insecto, y con el estado nutricional de nido. El tamaño de la hormiga determina su capacidad de carga y la velocidad de ingestión. Se discute este aspecto en un marco de eficiencia individual y social. La carga en el buche y la tasa de ingestión, esto es, la velocidad con la cual la solución es ingerida, presentan una modulación según la concentración de la solución y el estado nutricional de la colonia. Cuando el nido dispone de azúcar, las hormigas ingieren soluciones de baja concentración (menos de 20% p/p) en menor cantidad y a menor velocidad que cuando al nido se lo priva de azúcares. Estas variaciones en las tasas de ingestión se producen a través de una modulación de la frecuencia en el accionar de la bomba cibarial, lo que sugiere un control central de la dinámica de ingestión de néctar. Las decisiones que la hormiga toma en relación con el llenado de buche, con el tiempo de ingestión, y con la velocidad de ingestión, permiten caracterizar la estrategia de recolección de néctar en esta especie. Un análisis comparativo con la abeja Apis mellifera L. y el esfíngido europeo Macroglossum stellatarum (Sphingidae, Lepidoptera) sugiere que la modulación de las tasas de ingestión encontrada en la hormiga C. mus podrían aparecer en otros grupos de insectos.

Abstract:
The present Thesis work focus on several aspects of the individual nectar feeding by the ant Camponotus mus. Feeding dynamics and different behavioural variables were quantitatively studied in relation to the sucrose concentration of the fed solution, the insect size, and the nutritional state of the colony. Forager size determines load capacity and ingestion rates. These aspects are analysed by considering efficiency criteria at both individual and social level. Crop load and intake rate, i.e. velocity at which the solution is ingested, are modulated by the sucrose concentration of the solution and by the nutritional state of the colony. When the nest is sugar satiated, foragers ingest diluted solutions (less than 20% w/w) in smaller quantities and at slower speeds than under conditions of sugar deprivation. This variation in intake rate is the result of a modulation in the frequency of the cibarial’s pump activity, which suggests a central control of nectar feeding dynamics. Worker's decisions about crop filling, time spent at the source, and intake rate, allow to characterize the nectar foraging strategy in this species. A comparative analysis performed on the honeybee Apis mellifera L. and the European hawk-moth Macroglossum stellatarum (Sphingidae, Lepidoptera) suggests that modulation of intakes rates found in the ant C. mus could occur in other insects.

Hough, Guillermo. "Textura sensorial de galletitas crocantes en función de su composición, humedad y temperatura de transición vítrea" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los objetivos de la presente tesis fueron: (a) estudiar la variación de la textura sensorial en función de la actividad de agua (aw) para galletitas comerciales; (b) analizar la influencia del tipo y composición de azúcares sobre la textura de galletitas almacenadas en distintas condiciones de humedad; y (c) estudiar la posible relación de la textura sensorial de galletitas y su temperatura de transición vítrea (Tg). Las galletitas fueron almacenadas entre aw= 0,11 y aw= 0.70, midiendo sus propiedades sensoriales con un panel de evaluadores entrenados y su aceptabilidad sensorial con un panel de consumidores. Se varió la formulación de galletitas utilizando dos factores de variación: tipo de azúcar (sacarosa o glucosa), y concentración (entre 0 y 30% sobre base seca). La Tg se midió por calorimetría diferencial de barrido. Para analizar los resultados del análisis sensorial se utilizaron los siguientes métodos estadísticos: análisis de varianza, regresión no lineal, análisis por componentes principales y mapa de preferencia externo. Los cambios de crocante y aceptabilidad al variar la aw dependieron del tipo de galletita, pudiendo modelar las variaciones con la Ecuación de Fermi. Mediante el método de mapa de preferencia externo se observó poca dispersión de los consumidores individuales en cuanto a la dirección de su preferencia; ésta se orientó lejos de las galletitas con mayor aW y hacia los descriptores de crocante. La aw, el tipo y cantidad de azúcar, afectaron la textura, dulzor y color de galletitas, presentándose interacciones entre los factores de variación no documentadas en la literatura. En las galletitas comerciales y formuladas no se pudo medir satisfactoriamente la Tg utilizando calorimetria diferencial de barrido. La Tg no serla un parámetro adecuado para describir la textura de galletitas.

Abstract:
The objectives of the present thesis were: (a) study the variation of sensory texture in relation to water activity (aw) for commercial biscuits; (b) analyze the influence of sugar type and composition on the texture of biscuits stored in different humidity conditions; and (c) study the possible relationship between sensory texture of biscuits and their glass transition temperature (T9).The biscuits were stored between aw=0.11 and aw=0.70. Their sensory properties were measured with a panel of trained assessors and their sensory acceptability with a panel of consumers. The biscuit formulation was varied with two factors: sugar type (sucrose or glucose). and sugar concentration (between 0 and 30%, dry basis). Tg was measured by differential scanning calorimetry. The following statistical methods were used to analyze the sensory analysis results: analysis of variance, non linear regression. principal component analysis and external preference mapping. Changes in crispiness and acceptability in relation to aW depended on the type of biscuit. The changes were modeled using Fermi's equation. External preference mapping showed little dispersion among individual consumers as regards their preference direction, which was orientated away from the high aw samples and close to crispiness descriptors. The aw, sugar type and concentration, affected the texture, sweetness and color of the biscuits. Interactions were found between the variation factors not previously documented in literature. Tg was not measured satisfactorily using differential scanning calorimetry. Tg would not be an adequate parameter to describe biscuit texture.

Graña, Matías Alejo. "Algebras de Nichols y álgebras de Hopf punteadas de dimensión finita" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Gordillo, Susana Beatriz. "Estudio de las líneas de inestabilidad en la República Argentina" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Las lineas de inestabilidad en nuestro país traen aparejados con frecuencia fenómenos de tiempo severo , tormentas eléctricas con ráfagas intensas , fuertes precipitaciones con inundaciones repentinas , brusco descenso de temperatura , granizo y tornados con consecuencias importantes en lo socio-económico. El objetivo de la presente tesis es estudiar las características de las lineas de inestabilidad en la Argentina , las condiciones asociadas al desarrollo de las mismas y la factibilidad de obtener métodos objetivos para el pronóstico de las mismas. Para ello se analizaron tres líneas de inestabilidad en forma detallada a fin de encontrar los rasgos comunes de las mismas. La primera produjo una inundación repentina en Mina Clavero con importantes daños en esa ciudad provocada por una precipitación de 300 mm en cuatro horas en la Sierra de los Comechingones (Córdoba) , la segunda fue acompañada por una intensa depresión de estela que se produjo en la ciudad de Buenos Aires con intensidades de viento de 45 Kts mientras que la tercera fué captada por el radar meteorológico M33 en la estación meteorológica Ezeiza , lo que permitió el estudio de la disposición de las células convectivas en la misma . Las tres líneas de inestabilidad se desarrollaron dentro de una masa de aire caliente e inestable por delante de un sistemafrontal , en un campo de apreciable baroclinicidad . Una corriente en chorro en 850 hPa aportó calor y humedad y en la troposfera media una masa de aire seco penetró por detrás de las líneas de inestabilidad . Con el fin de determinar las condiciones sinópticas conducentes a la formación de las lineas de inestabilidad y las características de las masas de aire , se usaron los análisis diarios de 12 UTC del Centro Europeo a Mediano Plazo del Departamento de Ciencias de la Atmósfera de la Universidad de Buenos Aires y los análisis trihorarios del Servicio Meteorológico Nacional de los meses de Octubre a Marzo de los años 1982-1984. Se eligió un área de estudio delimitada por los paralelos 30°S y 40°S y los meridianos 5000 y 7000, se observaron 109 líneas de inestabilidad que afectaron el área indicada. Con respecto a la situación sinóptica asociada a la ocurrencia de las 109 líneas seleccionadas se observó queprevia a laformación de la línea de inestabilidad se produce una profundización de la Depresión del Noroeste Argentino con el consecuente aumento en la advección de calor y humedad lo que produce una anomalía positiva máxima de inestabilidad en el sur de Córdoba y noroeste de Buenos Aires. Asociado a una depresión en el sur de la Patagonia avanza un frente frío que el dia de la línea alcanza en promedio las provincias de Mendoza y La Pampa y el sudoeste de Buenos Aires , en tanto que una vaguada de onda corta en niveles medios se acerca desde el Océano Pacífico hacia la región central del pais. Estudiando la incidencia de distintos parámetros meteorológicos en la formación de líneas de inestabilidad se encontró que fueron preponderantes la influencia del viento de dirección norte hacia la región central del país , tanto en 1000 hPa como en 850 hPa ; la inestabilidad que adquiere la masa de aire alli presente y la entrada de aire frío desde el sudoeste del área de estudio. Con los resultados obtenidos previamente se seleccionaron dieciocho parámetros predictores a los que se aplicó el Análisis Discriminante con el propósito de encontrar un método objetivo de pronóstico. El procedimiento estadístico utilizado determinó que los parámetros de mayor significancia en el pronóstico de lineas de inestabilidad estaban relacionados con la inestabilidad de la masa de aire presente en la porción central del pais, la intensidad del flujo zonal en 500 hPa entre 30°S y 40°Sen 70°0 , la entrada de aire frío por Puerto Montt y la baroclinicidad entre Santa Rosa y Puerto Montt. La verificación en una serie independiente de 101 datos arrojó un 73% de acierto en el pronóstico de líneas de inestabilidad .

Giambiagi, Laura Beatriz. "Estudio de la evolución tectónica de la Cordillera principal de Mendoza, en el sector comprendido entre los 33°30’ y los 33°45’ S" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Gerez, Esther Noemí. "Cáncer hepatocelular y porfirinas : Regulación del camino del Hemo durante el estadío de iniciación de la Carcinogénesis química" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El principal objetivo de esta tesis ha sido el estudio de los cambios bioquímicos, histológicos y moleculares, que ocurren en las etapas tempranas de la hepatocarcinogénesis inducida químicamente. Se trabajó con ratones CF1 machos que recibieron p-dimetilaminoazobenzeno (DAB 0,5% p/p) en la dieta durante un período total de 184 días. En estos animales se estudió el sistema metabolizante de drogas, la regulación metabólica del hemo, y el equilibrio entre la formación de radicales libres y los sistemas de defensa antioxidante. Se observó que a partir de los 35 días el higado sufre cambios significativos tanto a nivel molecular como morfológicos. La administración del carcinógeno produjo un gran aumento en el contenido del P450 con la consecuente inducción de la síntesis y disminución de la degradación del hemo. A su vez, se comprobó una desregulación en esta vía metabólica, por la falta de respuesta a agentes porfirinogénicos. La disminución de las actividades de las enzimas de defensa antioxidante aumentó el grado de estrés oxidativo provocado por la metabolización del carcinógeno. Los antioxidantes ensayados previnieron parcialmente las alteraciones bioquímicas detectadas. El modelo experimental mostró dos patrones de comportamiento bioquímico diferentes según el tiempo de intoxicación. Esto nos llevó a proponer un probable mecanismo para la gestación del proceso hepatocarcinogénico que considera la existencia de un estado primario activante del hígado en su totalidad, referido como estadio de preiniciación, caracterizado por un patrón de alteraciones bioquímicas necesarias para la instauración del estadio de iniciación de la hepatocarcinogénesis.

Abstract:
The aim of this thesis has been to study the biochemical, histological and molecular aspects of the changes occurring during the onset of the chemically induced hepatocarcinogenesis. Male CF1 mice were fed with a diet supplemented with p- dimethylaminoazobenzene (DAB, 0.5% w/w) during a whole period of 184 days. Then, the drugs metabolizing enzyme system, the regulation of heme metabolic pathway, and the balance between free radicals production and the antioxidant defense system were investigated. Significant hepatic changes at the molecular and the morphological level were detected from day 35 of intoxication onwards. The carcinogen administration greatly increased P450 content with the consequent enhancement of heme synthesis and diminution of heme degradation. The lack of response to some porphyrinogenic agents showed the deregulation of this metabolic pathway in the animals exposed to the carcinogen. The decrease in the activities of the antioxidant defense enzymes further increased the oxidative stress provoked by the carcinogen metabolization. The antioxidants assayed partially prevented the observed biochemical alteration. This experimental model showed two different biochemical patterns during the course of the intoxication. This led us to propose the hypothesis about a probable mechanism for the onset of hepatocarcinogenesis that considers a primary activating liver state involving the whole organ, the so-called pre-initiation stage, resulting in a biochemical aberration which then leads to the actual initiation stage.

Gallardo Cabrera, Cecilia. "Estabilidad de benzodiazepinas : estudios de Alprazolam y compuestos derivados" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se ha estudiado la estabilidad de l,4 benzodiazepinas frente a diferentes factores ambientales. En primer lugar se estudian cinéticamente las reacciones de solvólisis de varias 0-aminobenzofenonas, los principales productos de degradación hidrolítica de Diazepam, (en estudios previos se había caracterizado cinco 0-aminobenzofenonas de la degradación por hidrólisis ácida de diazepam). El mecanismo de formación de estas cinco 0-aminobenzofenonas sigue un esquema complejo, en el presente estudio se describen los resultados de mediciones cinéticas realizados bajo diferentes condiciones de reacción, cálculo de las constantes de velocidad mediante la aplicación de un programa de calculo iterativo para proponer mecanismos de reacción consistentes con los resultados encontrados y diversas experiencias adicionales para confirmar los mismos. Por otra parte, también se presentan los resultados de los estudios de estabilidad de Alprazolam, (8-cloro-1-metil-6-fenil-4H-s-triazo-benzodiazepina), cuyo mecanismos de degradación es completamente diferente a las anteriores 1,4 benzodiazepinas ya que no es susceptible a la hidrólisis. Se estudió la estabilidad de este compuesto en diferentes condiciones de descomposición severas, mostrándose lábil solamente a la acción de la luz. Se aislaron los múltiples productos formados de este proceso de fotodegradación en soluciones de Alprazolam en medio acuoso y metanólico, mediante la aplicación de cromatografia de capa preparativa y se caracterizó los principales. Los resultados encontrados indican que el mecanismo de fotólisis es diferente de acuerdo al solvente. En solución acuosa se encontraron productos provenientes de la contracción del anillo diazepínico a un anillo de seis miembros, otro proveniente de la decloración de Alprazolam y otro de hidrólisis; mientras que en metanol predominaron dos compuestos provenientes de solvólisis. Se estudio mediante HPLC y Espectrofotometria de Fluorescencia la influencia del pH de las soluciones en la velocidad de descomposición, en orden a determinar las (kobs). Observándose que la fotodegradación es dependiente del pH de la solución: la velocidad de descomposición aumenta a medida que se disminuye el pH bajo condiciones naturales de estrés. Para concluir este trabajo se estudio la fotodegradación de Alprazolam en comprimidos comerciales, mediante un método de HPLC previamente validado. Dos de los productos aislados se forman bajo condiciones de radiación en estado sólido y bajo el influjo de la radiación solar.

Abstract:
The stability of 1,4-benzodiazepines was studied under several environmental conditions. First of all, kinetic solvolytic studies were carried out with several 0-aminobenzophenones, which are the main hidrolytic degradation products of diazepam (in previous studies five 0-aminobenzophenones were characterized from diazepam under acidic hydrolysis conditions). The present study describes kinetic determinations carried out under different reaction conditions to elucidate the complex mechanism of formation of these five o-aminobenzophenones. An iterative procedure was developed for the calculation of the several reaction constants involved in the reaction of each 0-aminobenzophenone, a complete reaction scheme consistent with all the observed results was proposed and new experiences carried out to confirm the proposed steps and the likely intermediate involved. On the other hand, studies carried out on the stability of Alprazolam, (8-chlorol- 1-methy l-6-phenyl-4H-s-triazolo- bcnzodiazepine), are described. The behaviour of this triazolobenzodiazepine is completely different from other 1,4-benzodiazepines, since it is not sensitive to hydrolysis. The stability of alprazolam was studied under several stress condition; it was found that this drug is only sensitive to light irradiation. The several products formed uner the photodegradative processes of alprazolam solutions in aqueous as well as methanolic solutions were isolated by thin layer chromatography and the main degradation products were fully characterized. The observed results indicate that the photolysis mechanism is highly dependent of the solvent. In aqueous solution products arisen from the diazepine ring contraction to a more stable six-membered ring, other formed by alprazolam dichlorination and another from hydrolysis were observed. On the contrary, two different products were obtained from the methanolic photodegradation. The influence of pH on the rate of degradation was studied by HPLC and by fluorescence spectrometry. The kobs is pH dependent, it was observed that the rate of degradation increases as the pH decreases. Finally, the photodegradation of Alprazolam tablets was studied by an HPLC method previously validated. It was observed that the two main products are formed by irradiation by sun light in the solid state.

Galelli, Mirta Esther. "Alteraciones proteicas debidas al estrés oxidativo promovido por la activación del tetracloruro de carbono a radicales libres" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El CCl4 afectó a proteínas por distintos mecanismos. In vivo disminuyó transitoriamente la incorporación de (14)C-Leucina a proteínas nucleares (totales y distintas fracciones proteicas) y microsomales hepáticas de rata, siendo el efecto máximo a la hora. La cicloheximida causó un efecto similar. Los metabolitos reactivos del CCl4 (tridonometilo ('CCl3) y triclorometilperoxilo (CCl3O2')) formados por activacióncon luz ultravioleta C (UVC)causaron el aumento de grupos carbonilos (↑CO)y la disminución del contenido de grupos sulfhidrilo (↓SH) en albúmina de huevo (alb) y el ↑CO en 20 aminoácidos. El ↑CO en alb fue parcialmente inhibido por Trolox y EDTA pero no α-tocoferol. Los metabolitos del CCl4;formaron HCCl3 por reacción con alb (parcialmente inhibido por Trolox) y cisteína, posiblemente por abstracción de hidrógeno, la luz UVC per se ↑CO,abrió el puente disulfuro, pero casi no afectó los SH de la alb. El 'CCl3 y el CCl3O2 ↑CO y ↓SH en proteínas microsomales in vitro, por acción directa o vía productos de peroxidación de lípidos (PL) ya que fue parcialmente inhibido por antioxidantes y EDTA. No afectaron los CO y SH de proteínas nucleares, mitocondriales y citosólicas in vitro. El NADPH in vitro (probablemente vía PL) ↑CO y ↓SH de proteínas microsomales y nucleares, pero no mitocondriales Produjo ↑SH pero no de CO de compustos citosólicos. El CCl4 in vivo aumentó transitoriamente el contenido de CO de proteínas microsomales pero no de nucleares hepáticas de rata. Las alteraciones causadas por los metabolitos reactivos del CCl4 en proteínas permitirían explicar algunas de las alteraciones observadas en la intoxicación por CCl4(pérdida de funciones celulares, daño a la bomba de calcio del retículo endoplásmico),que podrían causar la muerte o desencadenar mecanismos de protección celulares.

Abstract:
CCI4 affected proteins through different mechanisms. It temporarily decreased 14C-Leucine incorporation into both, nuclear proteins (total and different protein fractions) and microsomal proteins in vivo. The main effect was observed at 1-hour poisoning. The effect of cicloheximide on 14C-Leu incorporation was similar to that of CCl4. Trichloromethyl (CCl3) and trichloromethylperoxyl (CCl3O2') free radicals generated by ultraviolet C light (UVC) activation of CCl4 promoted both, carbonyl formation (COT) and sulfhydryl decrease (SH↓) in chicken egg albumin (alb) and CO↑ in the common 20 amino acids. They also led to HCCb formation from alb (partially inhibited by Trolox)and cysteine, probably by hydrogen abstraction. The CO↑ in alb was partially prevented by Trolox and EDTA,but not by α-tocopherol. UVC light by itself caused CO↑,opened disulfide bonds, but it did not affect SH in alb. 'CCl3 and CCl3O2 CO↑ and SH↓ in microsomal proteins in vitro. These effects were partially prevented by antioxidants and EDTA,which indicates these could be due to both, CCl4-free radical direct action or lipid peroxidation products (PL). CCl4-free radicals did not affect CO and SH in nuclear, mitochondrial and citosolic proteins in vitro.NADPH in vitro (probably through PL) caused CO↑ and ↓SH in microsomal and nuclear but not in mitochondrial proteins.It also produced SH increase but not CO↑ in citosolic substances. CCl4 in vivo caused a transitory CO↑ in rat liver microsomal but not in nuclear proteins. These CCl4-induced alterations might explain some of the effects of this hepatotoxin (for example, cellular function loss or damage to microsomal calcium pump) that might induce cellular death or trigger cellular protection mechanisms.

Ferreyra, Laura Inés. "Estudio de la variabilidad y la diferenciación genética por medio de técnicas de Isoenzimas y RAPD en poblaciones naturales de especies e híbridos del Género Prosopis (Leguminosae)" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se estudió por medio de la electroforesis de isoenzímas y RAPDs la variabilidad, diferenciación y estructura genética en poblaciones naturales de P. alba, P. nigra, P. ruscifolia, P. flexuosa y P. vinalillo y poblaciones de híbridos interespecificos (P. alba x P. nigra y P. alba x P. flexuosa). Se estudió además la posible correlación entre variables ambientales con loci isoenzimáticos y de RAPDs y si la diferenciación genética entre poblaciones podría estar asociada con las distancias geográficas entre las mismas. Las técnicas de isoenzímas permitieron el análisis de 21 loci de los cuales 16 fueron polimórficos. No se encontraron loci diagnósticos de especies. Estas sólo se diferenciaron por sus fiecuencias alélicas. La técnica de RAPDs identificó 28 locí de los cuales 5 permitieron reconocer inequívocamente las especies. Los valores de variabilidad genética promedio observados para isoenzímas (P = 37.5 — 66.7%; H = 0.14- 0.332) y para RAPDs (P = 32.1- 46.4 % ; H = 0.123- 0.246) fueron similares entre sí y con respecto a los estimados en estudios previos con ambas metodologías en especies de Algarobia. Se observó un exceso de homocigotas (F IS >0) en todos los loci polimórficos estudiados. Esto podría deberse a la existencia de cruzamientos endogámicos dentro de las poblaciones como consecuencia de la limitada dispersión de las semillas y el polen y a la autogamia parcial estimada en estudios previos (hasta un 28 %). Los niveles de diferenciación genética obtenidos entre poblaciones a partir de los datos de isoenzímas y RAPDs fueron similares (F ST-0.36 y 0.4 respectivamente) e indicaron una diferenciación altamente significativa entre poblaciones de diferentes especies. En ambos casos el flujo génico estimado (Nm = 0.8 y 0.3) fue menor que l individuo por generación, mientras que el flujo génico entre poblaciones de igual especie fue mayor que uno. Tanto para datos de isoenzímas y RAPDs la mayor diversidad ocurre dentro de las poblaciones (54-69%), es intermedia entre especies (23-42%) y baja entre poblaciones (416%). Se observaron correlaciones significativas entre frecuencias alélicas isoenzimáticas y algunas variables geográfico-climáticas mientras que no se observaron correlaciones significativas entre las variables geográfico-climáticas y las bandas RAPDs. También se observaron diferencias en los resultados cuando se evaluó la correlación entre las matrices de distancias genéticas y geográficas a partir de los datos de isoenzímas (correlación significativa) y RAPDs (correlación no significativa). La asociación de las variables de algunos loci isoenzimáticos con variables geográficas y/o climáticas sugiere un efecto selectivo de los mismos. El intervalo de distancias genéticas entre poblaciones coespecíficas obtenidas a partir de los datos de isoenzímas (0.04 y 0.12) fue similar al obtenido a partir de los datos de RAPDs (0.02 a 0.10). Tanto las isoenzímas como los RAPDs muestran una alta afinidad entre las especies estudiadas de Algarobia, ya que estas comparten la mayoría de los loci con similares frecuencias alélicas. La diferenciación entre especies medida por las distancias de Nei fueron en promedio con ambas metodologías relativamente bajas (0.10-0.27). Estos valores son esperados para sub o semiespecies según Ayala (1974). Los fenogramas obtenidos con ambas metodologías fueron similares entre sí y mostraron a poblaciones coespecíficas agrupadas. Las poblaciones hibridas analizadas no fueron en ningún caso intermedias entre sus progenitores putativos.

Abstract:
Isoenzyme electrophoresis and RAPD techniques were applied to analyze the genetic variability, differentiation and structure of natural populations of P. alba, P. nigra, P. flexuosa, P. vinalillo, P. ruscifolia and interspecific hybrid populations (P. alba x P. nigra and P. alba x P. flexuosa). The present study also evaluated if genetic variables (isozyme and RAPD loci) are correlated with environmental variables and if the genetic distances between populations are associated with geographic distances. Isozyme technique allowed analyzing 21 loci, 16 of which were polymorphic. Diagnostic loci of species were not found. Species were differentiated only by allelic frequencies. RAPD technique identified 28 loci. Only 5 of them allowed unequivocal species recognition. Estimates of genetic variability obtained from isozyme (P =37.5 —66.7 % ; H = 0.14 — 0.32) and RAPD (P = 32.1- 46.4 % ; H =0.123 —0.246) were similar to each other, and to previous estimates obtained using both techniques in other Algarobia species. Significant homozygote excess (F IS > 0) was observed in all polymorphic loci studied. It might be caused by endogamic crosses within populations, due to limited pollen and seed dispersal, and/or partial selfing, which, according to previous works, may reach a rate of 28%. The genetic differentiation among populations obtained from RAPD and isozyme data were similar (F ST = 0.36 and 0.40 respectively) and indicated highly significant differentiation among populations of different species. In both cases estimated gene flow (Nm = 0.8 and 0.3) was lower than one individual per generation. In contrast, gene flow estimates among cospecific populations were higher than one. The highest proportion of variation occurred within population (54 —69 %), the among species variation was intermediate (23 —42 %) and the lower value was observed among conspecific populations (4 —16 %). Significant correlation between isoenzymatic allelic frequencies and geographical or climatic variables was observed. They suggest selective effects of these loci. By contrast, no significant associations were found by RAPD bands. Differences in results were also found when the correlation between geographic distances and genetic distances were evaluated for isozyme (significant correlation) and RAPD (no significant correlation) data. Genetic distance range among cospecific populations from isozyme data (0.04 - 0.121) were similar to that obtained from RAPD data (0.017 —0.10). Both isozyme and RAPDs showed high similarity among the studied species of Algarobia, since most alleles are shared by almost species. The diferentiation among species within this section measured through Nei distance was relative low with both techniques, with values ranging within the expected according to Ayala et al. (1974) for sub to semispecies. The phenogram obtained with both methodologies were consistent and showed clusters of cospecific populations. Hybrid populations were not intermediate between putative parents.

Ferrari, Hernán Javier. "Dinámica de flujo magnético a tiempos cortos en superconductores de alta temperatura crítica" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Fernandez, Daniel Alfredo. "Caracterización histoquímica, distribución y crecimiento de las fibras musculares en nototénidos subantárticos : Análisis inicial de dos factores relacionados con la natación : flotabilidad y temperatura" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se caracterizó la musculatura natatoria de nototénidos subantárticos mediante técnicas histoquímicas, determinándose la presencia de cuatro tipos de fibras: SDF, rojas, intermedias y blancas. Se demostró la utilidad de la técnica de la mATPasa para diferenciar distintos tipos musculares. El proceso de hiperplasia muscular cesó al 40 - 70 % de la talla máxima de cada especie, encontrándose tres patrones distintos de incorporación de fibras directamente relacionados con las tallas finales de las mismas. Las fibras musculares de E. maclovinus y P. tessellata mostraron la misma tasa de crecimiento. Todos los nototénidos subantárticos estudiados presentan valores de flotabilidad propios de especies de hábitat bentónico. El rendimiento natatorio de E. maclovinus fue superior a 10°C que a 4°C. La velocidad, aceleración y potencia inercial de los arranques rápidos de E. maclovinus a 2 °C fueron superiores a los de una especie antártica (N. rosii), y el grado de curvatura del cuerpo y de estiramiento de las fibras blancas similares a los de especies de aguas templadas y tropicales. Los valores energéticos de distintos órganos y tejidos de las especies que se separaron antes del tronco ancestral de los nototénidos mostraron valores significativamente mayores que los del resto de las especies.

Abstract:
The swimming muscles of sub-Antarctic notothenioids were characterised using histochemical techniques. Four different fibre types were found: SDF, red, intermediate and white. The mATPase technique was found useful for muscle fibre type characterisation. Hyperplasia cessation occurred at 40 - 70 % of the final length of each species. Three different patterns of fibre incorporation were found and related to the final length of each species. All the sub-Antarctic notothenioid species studied had buoyancy values typical of benthic species. The swimming perfomance of E. maclovinus was higher at 10 °C than at 4°C. The velocity, acceleration and inertial power of the fast-starts of E. maclovinus were higher than the ones found in an Antarctic notothenioid (N. rosii), and the curvature of the body and the muscle strain of the white fibres were similar to those of species from template and tropical waters. The energetic content of different organs and tissues from the species that diverge earlier from the parent taxa of the notothenioids showed significantly higher values than the other notothenioid species.

Feldman, Mario F.. "Caracterización del proceso de translocación de poliprenol azúcares a través de membranas biológicas" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La biogénesis de estructuras complejas que contienen hidratos de carbono como el lipopolisacárido (LPS), los exopolisacáridos, el peptidoglicano y los ácidos teicoicos en procariotas y las glicoproteínas en eucariotas se realiza generalmente a partir de precursores nucleótido-azúcares que transfieren sus restos de azúcares a poliprenoles como el undecaprenol y el dolicol (Dol). Los nucleótido azúcares se encuentran normalmente disponibles en el citoplasma, mientras que los poliprenoles están asociados con una bicapa lipídica.Una vez ensamblados, los azúcares unidos al poliprenol deben atravesar membranas para su posterior procesamiento (polimerización como en el caso del LPS o transferencia a proteínas como ocurre en la formación de glicoproteínas). Este proceso no ocurre espontaneamente y parece estar mediado por proteinas, aunque sólo para el pasaje a través de Ia membrana interna procariótica de las subunidades de antígeno O (el componente más variable del LPS) se ha identificado una proteína, denominada Wzx con actividad translocasa o “flipasa”. Las diferentes translocasas Wzx poseen una muy baja homología de secuencias tanto a nivel de DNA como de proteínas. Los intentos para sobreexpresar Wzx han sido infructuosos, lo que no ha permitido la realización de experimentos tendientes a caracterizar estructural y mecanísticamente a las translocasas. En este trabajo se investigó si es necesario que las subunidades O se sinteticen completamente para poder ser translocadas. Se obtuvo una mutante en el gen glf, responsable de la síntesis de galactofuranosa, el último de los cuatro azúcares que componen la subunidad O16 en Escherichia coli. Se observó que esta mutante es capaz de translocar una subunidad incompleta conteniendo sólo tres azúcares a través de la membrana. Experimentos utilizando la lectina del germen de trigo (WGA) permitieron establecer que también es posible translocar una subunidad truncada conteniendo sólo uno o dos residuos e incorporar estos azúcares al core del LPS. Experimentos de complementación realizados en una mutante de E. coli O7 en el gen wzx con translocasas de Salmonella enterica y E. coli O16 demostraron que la translocación de subunidades de antígeno O es independiente de la naturaleza química de la porción glicosídica de la subunidad O. Por el contrario las putativas translocasas involucradas en la síntesis de exopolisacáridos no fueron capaces de complementar la mutación en wzx. Los resultados presentados en esta Tesis indican que no se requiere que la subunidad O esté completa para que sea reconocida por la maquinaria de translocación y se produzca su pasaje a través de la membrana, pudiendo translocarse subunidades truncadas o completamente diferentes a las que normalmente se producen en una determinada cepa. Los resultados obtenidos sugieren además un modelo de biosíntesis de antígeno O que involucra el reconocimiento del prenol-oligosacárido por un hipotético complejo compuesto por la putativa translocasa Wzx y otras proteínas que participan en la síntesis de antígeno O.

Etcheverry, Javier Ignacio. "Un nuevo método de aproximación de soluciones de Ecuaciones Parabólicas No Lineales" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo se presenta el desarrollo y análisis de un nuevo método numérico para la aproximación de soluciones de ecuaciones diferenciales en derivadas parciales del tipo de difusión no lineal, υt = α(υ)xx con α muy general. El método está basado en considerar aproximaciones de α(υ) por grafos maximales monótonos no decrecientes constantes a trozos. Se demuestra que, para ciertos datos iniciales, la solución del problema aproximado puede construirse explícitamente, a partir de la resolución un sistema de ecuaciones diferenciales ordinarias. Se presentan numerosos ejemplos de aplicación de esta técnica a la resolución de diferentes problemas clásicos de difusión no lineal, así como un análisis detallado de las propiedades del sistema aproximado. Finalmente, se desarrolla una teoría de convergencia, basada en obtener estimaciones de la diferencia entre las soluciones de ecuaciones de difusión no lineal con distintos α, mediante una extensión adecuada de las técnicas de Kruzkov de duplicación de variables para analizar leyes de conservación hiperbólicas no lineales.

Abstract:
In this work, we present and analyze a new numerical method for the approximation of solutions of the nonlinear parabolic partial differential equations υt = α(υ)xx for very general nonlinearities α. The method is based on the approximation of a by means of a piecewise constant maximal monotone graph. We prove that the solution corresponding to this new constitutive relation can be expressed in terms of the solution of a system of ordinary differential equations. We present a detailed analysis of the properties of the resulting system of ordinary differential equations and give several numerical examples of application of the proposed technique. In particular, we demonstrate the method on the heat equation, the porous media equations, and Stefan problems. Finally, we develop error estimates based in the comparison of solutions corresponding to two different constitutive functions α. These estimates are obtained by means of a suitable extension of the Kruzkov technique for nonlinear hyperbolic conservation laws.

Etala, María Paula. "Modelos hidrodinámicos anidados para el cálculo de la onda de tormenta en el estuario de Bahía Blanca" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Este trabajo trata el problema de la onda de tormenta desde un punto de vista dinámico para el estudio de algunos aspectos generales de la misma y, en particular, de su comportamiento en el estuario de Bahía Blanca. Las herramientas utilizadas para este estudio son un conjunto de modelos numéricos desarrollados para tal fin en conjunción con datos observacionales que validan los resultados y conclusiones alcanzados. Los modelos hidrodinámicos utilizados son bidimensionales e integrados en la vertical. Un modelo abarca la plataforma continental y otro cubre el estuario con mayor resolución. Este último contempla el secado e inundación de puntos del dominio. Una condición de radiación modificada permite la introducción de la onda de marea al dominio a través de los bordes abiertos de ambos modelos. La información acerca de la onda de tormenta se transfiere desde el modelo de la plataforma hacia el modelo del estuario. Algunos aspectos teóricos del intercambio de cantidad de movimiento en la capa límite atmosférica son considerados para la estimación de la tensión del viento sobre la superficie del mar. El carácter regional y local de las perturbaciones del nivel del agua requiere la consideración del factor atmosférico en ambas escalas. Se encuentran características particulares de la estabilidad atmosférica en el área de estudio que influyen sobre la transferencia de cantidad de movimiento al agua. Este trabajo está enfocado principalmente sobre los aspectos no lineales de la propagación de la onda de tormenta desde la plataforma y sobre su importante modificación dentro del estuario debido a su comportamiento altamente no lineal. La interacción entre la marea y la onda de tormenta se estudia en un caso típico de viento del sudeste. Se encuentran dos diferentes tipos de respuesta en el estuario. El mecanismo de interacción por fricción de fondo predomina en los canales mientras que en las zonas menos profundas, con corrientes más débiles, la principal causa de la interacción es la baja profundidad. Las corrientes de interacción llegan a ser muy intensas tanto en los canales como en la descarga de las planicies. Esta interacción modifica fuertemente la onda de nivel resultante en una forma que depende de la intensidad relativa de ambos fenómenos. La fase relativa del forzante meteorológico con respecto a la marea puede alejar varias horas el máximo nivel del agua del momento que estaría dado por un efecto aislado de la onda de tormenta.

Abstract:
This work deals with the problem of the storm surge from a dynamical point of view for the study of some of its general aspects and, particularly, of its behavior in the Bahía Blanca estuary. The tools used in this study are a set of numerical models developed with that purpose in conjunction with observational data that validate the results and conclusions reached. The hidrodynamical models are bidimensional depth-averaged. One of them covers the continental shelf and the other one covers the estuary with higher resolution. The latter considers the drying and flooding of points in the domain. A modified radiation condition allows the input of the tidal wave to the domain through the open boundaries in both models. The information on the storm surge is transferred from the shelf model to the estuary model. Some theoretical aspects of momentum exchange in the atmospheric boundary layer are considered for the estimation of wind stress at the sea surface. The regional and local character of water level perturbations requires the treatment of the atmospheric factor in both scales. Particular characteristics of atmospheric stability that influence the momentum transfer to water are found in the area of study. This work is mainly focused on the non-linear aspects of the storm surge propagation from the shelf and on its important modification within the estuary due to its highly nonlinear behavior. The surge - tide interaction is studied in a typical case of southeasterly winds. Two different responses are found within the estuary. The bottom friction interaction mechanism dominates in the channels while in the shallower areas, with weaker currents, the main cause of interaction is limited depth. The interaction currents in the channels can be very strong as well as the changes in discharge currents from the intertidal flats. This interaction strongly modifies the resulting water level wave in a way that depends on the relative intensity of both phenomena. The relative phase between the meteorological forcing and the tide can shift the water level peak several hours from its corresponding value due to an isolated storm surge effect.

Durán, Guillermo Alfredo. "Sobre grafos intersección de arcos y cuerdas en un círculo" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los grafos arco-circulares son los grafos intersección de arcos alrededor de un círculo. Presentamos en esta tesis los principales resultados conocidos sobre esta clase y definimos las principales subclases. Mostramos como a partir de la caracterización formulada por Tucker para grafos arco-circular propios surgen nuevas caracterizaciones para esta subclase y deducimos características de las estructuras prohibidas minimales para arco-circulares. Se estudian todas las posibles intersecciones de las subclases definidas, mostrando un ejemplo minimal en cada una de las regiones que se generan, excepto en una de ellas que se demuestra que es vacía. Este resultado asegura que dado un grafo arco-circular propio no unitario, si es clique-Helly debe ser arco-circular Helly. Los grafos circulares son los grafos intersección de cuerdas dentro de un círculo. También aquí presentamos una reseña de los resultados más importantes y definimos las principales subclases, demostrando algunas relaciones de inclusión entre ellas. Damos una condición necesaria para que un grafo sea circular Helly y conjeturamos que también es suficiente. De ser correcta esta conjetura tendríamos una caracterización y también un reconocimiento polinomial para esta subclase. Se muestra como a partir de la mencionada caracterización de Tucker para grafos arco-circular propios y de un teorema de caracterización de Bouchet para los circulares surgen estructuras prohibidas minimales para esta clase. Analizamos también todas las posibles intersecciones de las subclases definidas, mostrando un ejemplo minimal en cada una de las regiones que se generan. Estudiamos una superclase de los grafos circulares: los grafos overlap de arcos circulares. Se muestran nuevas propiedades sobre esta clase, poniendo énfasis en su relación con los grafos arco-circulares y los circulares. Damos una condición necesaria para que un grafo sea overlap de arcos circulares. Probarnos la polinomialidad de encontrar una partición en cliques mínima para la clase de grafos que no contienen como subgrafo inducido ciclos inducidos impares de longitud mayor ó igual a 5 ni una rueda de 5 vétices ni un abanico de 5 vértices. Usamos para ello resultados de teoría poliedral para programación lineal entera. Extendemos este mismo resultado para cubrimiento mínimo de cliques por vértices. Aplicamos estos resultados a grafos circular HelIy sin agujeros impares, lo que es interesante pues estos problemas son NP-Hard para la clase general de los grafos y de complejidad desconocida para la clase de los grafos circulares. También demostramos que el problema de cubrimiento mínimo de cliques por vértices es polinomial para grafos arco-circular Helly. Por último, presentamos algunas conclusiones que surgen de este trabajo y las líneas futuras de investigación en estos tópicos, destacando algunos problemas interesantes que permanecen abiertos.

D’Onofrio, Alejandro. "Dispersión de trazadores en flujos de soluciones poliméricas en medios porosos" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo se presenta el estudio de las propiedades de transporte a través de un medio poroso de un trazador salino diluido en una solución de polímero. Los medios porosos son fabricados a partir de microesferas de vidrio y pueden ser de simple o doble porosidad. El objetivo del trabajo es utilizar las caracteristicas reofluidizantes de las soluciones de polímero para aumentar la influencia de las heterogeneidades del medio poroso sobre el campo de velocidades de flujo y reforzar el contraste entre las zonas de alta y baja velocidad en el medio. Los experimentos consisten en la inyección de una solución salina de NaNO3 en el medio. La concentración de polímero permanece constante durante los mismos. En la entrada del medio se induce una variación abrupta de concentración de sal. A la salida del mismo se obtienen las curvas de dispersión (variación de la concentración de sal en función del tiempo) por medio de medidas conductimétricas. El análisis de las curvas se realiza por medio de ajustes con modelos teóricos (en ciertos casos mediante la evaluación directa del ancho del frente) para determinar un coeficiente de dispersión (la dispersividad es igual a la relación entre el coeficiente de dispersión y la velocidad media del flujo). Los experimentos han sido realizados tanto con la técnica clásica de “transmisión”, donde se deja que el frente de variación de concentración atraviese completamente la muestra, como con la técnica de “eco” en la cual se invierte la velocidad de flujo antes que el frente de variación de concentración llegue a la salida del medio y en ese caso se detecta la variación de concentración en la entrada de la muestra porosa. Esta ultima técnica nos provee información complementaria sobre la presencia eventual de heterogeneidades a gran escala (zonas estratificadas o canales de diferente permeabilidad) donde la contribución al aumento de la dispersividad es particularmente reversible en relación al cambio de la dirección del flujo. En este trabajo fueron usadas soluciones reofluidizantes de un polisacárido neutro (escleroglucano) de diferentes concentraciones: el exponente característico del decrecimiento de la viscosidad con la velocidad de deformación varió entre 0.4 y 0.8 en el rango donde la variación puede ser aproximada por una ley de potencia. Las medidas de esfuerzos normales muestran que estas soluciones son muy poco elásticas. Los medios porosos de simple porosidad utilizados están formados por empaquetamientos dc esferas de vidrio de un diámetro típico de l mm. Los medios de doble porosidad están formados por granos porosos de diámetro dg= 500 μm y de porosidad 30% que se obtiene por medio del sinterizado de esferas de vidrio de diámetro 110 μm (los blocs sinterizados son partidos y tamizados para obtener el grano poroso). Debido al pequeño contrataste de densidad asociado a la presencia del trazador, podemos observar inestabilidades inducidas por la gravedad según el sentido del contraste de densidad entre el fluido inyectado y desplazado (el flujo es dirigido hacia arriba). Las medidas de dispersividad, realizadas con las soluciones Newtonianas, confirman la existencia de un aumento mucho mas fuerte de la dispersividad con el numero de Péclet, para medios de doble porosidad que para los de simple. Esto se observa para Pe del orden de 10 (el numero de Péclet Pe = Udg/Dm caracteriza la relación entre los efectos de la convección y la difusión molecular). Este aumento es debido a la transición entre los regímenes de transporte convectivo y difusivo en el interior de los granos y al hecho que a velocidades elevadas, donde el transporte convectivo es dominante, el contraste de velocidad entre el interior y el exterior de los granos aumenta la dispersión en relación al los medios de simple porosidad. Esta característica de aumento neto de la dispersividad con el número de Péclet son globalmente conservadas para los medios de doble porosidad que hemos utilizado con soluciones poliméricas (siempre en el caso de configuración de desplazamiento estable). Para las soluciones de polímero, el resultado mas marcado es el hecho que, a un numero de Péclet dado, observamos un aumento neto de la dispersividad con la concentración de polímero (es decir con el exponente característico n de la variación de la viscosidad). Este resultado es atribuido a las características reofluidizantes de la solución que incrementa el contraste entre los caminos de alta y baja velocidad que pudieran encontrarse dentro de un medio poroso. El aumento es particularmente importante a números de Péclet intermedios (del orden de algunas decenas) y, en este dominio de velocidades, las curvas de dispersión se apartan notablemente de las predicciones clásicas de la ecuación de convección - difusión Gaussiana. Observamos un arribo anticipado del frente de variación de concentración - índice de la presencia posible de caminos de flujo preferencial en el interior del medio -. Una primer explicación natural es pensar en un aumento del contraste de velocidad entre el interior y exterior de los granos debido a las soluciones de polímero. Este aumento debería, sin embargo, en este caso ser particularmente fuerte a números de Péclet muy elevados lo cual no se observa experimentalmente. Por otra parte, este aumento significativo de la dispersividad se observa igualmente en los medios de doble porosidad y simple porosidad. Una hipótesis complementaria es la presencia de heterogeneidades a gran escala (canales preferenciales, estratificación, capas sobre las paredes ...) pero corresponden a contrastes relativamente débiles de permeabilidad. La influencia de las mismas pueden ser considerablemente amplificadas por las soluciones reofluidizantes. Esta hipótesis a sido evaluada comparando los resultados de las mediciones de dispersión en transmisión y eco: la dispersividad medida con esta ultima técnica puede en efecto ser reducida por la reversibilidad parcial del escalamiento del frente de concentraciones asociado a presencia de heterogeneidades a gran escala. Hemos efectivamente observado una reversibilidad parcial neta de la dispersión para las soluciones de polímero mas concentradas (η = 0.6) y mas débil para las menos concentradas (η = 0.4) y despreciable para las soluciones newtonianas. Estos resultados tienden a confirmar la influencia - al menos parcial - de grandes heterogeneidades. Ello indica igualmente que un aumento considerable de la sensibilidad de las medidas de dispersión a la presencia de heterogeneidades débiles pudo ser obtenida utilizando soluciones reofluidizantes en lugar de fluidos newtonianos elegidos en primer lugar para el transporte del trazador. Los electos de inestabilidad inducidos por gravedad en las configuraciones de flujo gravitacionalmente inestable son, sobre todo, importantes cuando las velocidades del flujo son bajas y los poros de gran tamaño. Para las soluciones newtonianas las inestabilidades no son observables para números de Péclet superiores a 200: las variaciones de concentración verifican la ecuación de convección - difusión clásica (curvas de dispersión Gaussiana) y el coefieiente de dispersión medido es el mismo en la configuración estable e inestable de desplazamiento de los fluídos. Para los números de Péclet entre 50 y 200, las curvas poseen forma Gaussiana pero la dispersividad es superior en el caso inestable. Para números de Péclet inferiores a 50, las curvas de dispersión se apartan sensiblemente de la solución de la ecuación de convección - difusión . Para los fluídos newtonianos (agua y solución de glicerol de viscosidad 7x10ˉ³ Pa.s), los valores de dispersividad dependen únicamente del número de Péclet tanto en el caso estable como en el caso inestable. Para los experimentos realizados con las soluciones de polímero reofluidizante, las inestabilidades aparecen para un número de Péclet mas bajo que para las soluciones newtonianas. La diferencia es mas notoria cuando el exponente característico de la viscosidad es mas elevado. Este resultado indica que el parámetro dominante que controla la aparición de las inestabilidades es la viscosidad de los fluídos y no la difusión molecular (esta posee el mismo valor para las soluciones poliméricas que para el agua, mientras que la viscosidad aumenta). Ha sido posible definir un criterio de aparición de las inestabilidades a partir del parámetro G que representa la relación entre los gradientes de presión de origen hidrostático y viscoso (en el caso de soluciones reofluidizantes, el termino de viscosidad es calculado a partir del valor de la viscosidad efectiva en el medio poroso, valor deducido de medidas de gradientes de presión en función del caudal). Hemos encontrado un valor único critico Gc que caracteriza la apararon de las inestabilidades para diferentes soluciones Newtonianas y no-Newtoniana utilizadas en nuestros experimentos.

Abstract:
In this work the study of the transport properties of a saline tracer diluted in a polymer solution through a porous medium is presented. The porous media are manufactured with glass micro-spheres and they can be of simple or double porosity. The aim of this work is to use the characteristic non-newtonian of the shear thinning polymer solution to increase the influence of the heterogeneities of the porous media on the flow velocity field, and to reinforce the contrast between the high and the low velocity zones in the media. The experiments consist of the injection of a saline solution of NaNO3 in the media. The polymer concentration remains constant during the experiences. At the inlet of the sample an abrupt variation of the salt concentration is induced. At the outlet of the sample the dispersion curves are obtained (variation of the salt concentration as a function of the time) by conductimetric measures. The analysis of the curves is carried out by means of adjustments with theoretical models (in certain cases by means of the direct evaluations of the Width of the front) to determine a dispersion coefficient (The dispersivity is the ratio between the dispersion coefficient and the flow velocity average). The experiments have been carried out whith the classic "transmission" technique, where the concentration variation front is allowed to cross the sample completely, and with the " echo " technique in which the flow velocity is inverted before the front of concentration variation arrives at the exit of the media, and in that case the concentration variation is detected at the inlet of the porous sample. The last technique provides us complementary information on the eventual presence of heterogeneities on a great scale (stratified areas or channels with different permeability) where the contribution to the increase of the dispersivity is particularly reversible in relation to the change of the flow direction. In this work shear thinning solutions of a neuter polysaccharide (escleroglucano) with different concentrations were used: the characteristic exponent of the viscosity decay with the deformation velocity varied between 0.4 and 0.8 in the range where the variation can be approached by a power law. The measures of normal efforts show that these solutions are not greatly elastic. The simple porosity media used are formed by packagings of glass spheres with a typical diameter of l mm. The double porosity media are formed by porous grains with diameter dg = 500 mm and with porosity 30% that one obtains by grinding sintered glass spheres with diameter 11O mm (the sintered blocks are left and sifted to obtain the porous grain). due to the small density contrast associated with the presence of the saline tracer, we can observe instability induced by the gravity according to the sense of the density contrast between the injected fluid and the displaced fluid (the flow is directed up). The dispersivity measures carried out with the Newtonian solutions, confirm that the increase of the dispersivity with the Péclet number for double porosity media is stronger than for those of simple porosity. This is observed for Pe of the order of 10 (the Péclet number, (Pe = Udg/Dm). this Pe characterises the ratio between the convection effects and the molecular diffusion effects). This increase is due to the transition between the convective transport and diffusive transport inside the grains and to the fact that high velocities, where the convective transport is dominant, the velocity contrast between the inside and the outside of the grains increases the dispersion in relation to the simple porosity media. This Characteristic, the net dispersivity increase with the Péclet number is globally conserved for the double porosity media that we have used (always in the stable displacement cases). The result, for polymer solutions, remarked the fact that, to a given Péclet number, we observe an increase of the dispersivity with the polymer concentration (with the characteristic exponent "n" ofthe viscosity variation). This result is attributed to the shear thinning character of the solution that increases the contrast between the high velocity and low velocity paths inside the porous media. The increase is particularly important to Péclet numbers of the order of dozens, and in this velocity domain the dispersion curves move notably away from the classic predictions of the convection-diffusion equation. We observe a premature arrival of the concentration variation front, index of the possible presence of preferential paths flow in the media. We find a first natural explanation in the increase of the velocity contrast between the inlet and the outlet of the grains due to the polymer solutions. This increase, however, would have been particularly strong to a high Péclet number that which is not observed experimentally. On other hand. this significant dispersivity increase is observed equally in the double and simple porosity media. A complementary hypothesis is the presence of heterogeneities on a great scale (preferential channels, stratification, layers on the walls...) but they correspond to relatively weak permeability contrast. The influence of the same ones can be amplified considerably by the shear thinning solutions. This hypothesis had been evaluated comparing the results of the dispersion measurements in transmission and echo: the dispersivity measured with the echo technique can be reduced by the partial reversibility of the scaling from the concentration front associated with the heterogeneities presence on a great scale. We have observed net partial dispersion reversibility indeed for the polymer solution more concentrated (n=0.6) and weak for the less concentrated ones (n=0.4) and worthless for the newtonian solutions. These results confirm -at least partially- big heterogeneities. It indicates that a considerable sensibility increase of the dispersion measures is due to the presence of weak heterogeneities that are observed using shear thinning solutions. The instabilities driven by gravity effects in the flow configurations are mainly important to a low flow velocity and for great pore size. For the newtonian solutions the unstable effects are not observable for Péclet numbers superior to 200: the concentration variation verifies the classic convection-diffusion equation (gaussian form ofthe curves) and the dispersion coefficient measured is the same for unstable and stable configuration of the fluid displacement. For Péclet numbers between 50 and 200, the curves have a gaussian form but the dispersivity is superior in the unstable cases. For Péclet numbers inferior to 50, the dispersion curves move sensibly away from the gaussian form. For newtonian fluid (glicerol solution in water with viscosity 0.007 Pas), the dispersivity values depend only on the Péclet number as much in the stable case as the unstable case. For the experiment carried out with shear thinning polymer solution, the instabilities appear for a Péclet number lower than the newtonian case. The difference is more notorious in high values of the characteristic exponent "n" of the polymeric solutions. This result indicates that the dominant control parameter of the appearance of the instabilities is the fluid viscosity and not the molecular diffusion. It has been possible to define an approach of appearance of the instabilities starting from the parameter G that represents the ratio among the gradients of hydrostatic pressure and the viscous pressure (in the case of shear thinning fluid, the viscosity is calculated starting from the effective viscosity value in the porous media, deduced from the pressure gradients measurements as a function of the flow). We have found a unique value of G that characterizes the appearance of instabilities as much for newtonian as non-newtonian fluids used in our experiences.

Di Noia, Javier Marcelo. "Familias de genes que codifican proteínas de tipo mucina en Trypanosoma cruzi" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Las mucinas son glicoproteínas cuyo esqueleto proteico está densamente cubierto por oligosacáiidos unidos a Thr y Ser. Los azúcares representan hasta un 80% de la molécula, confiriéndole una estructura extendida y un fuerte carácter hidrofílico. Participan en procesos de protección, lubricación y adhesión. Trypanosoma cruzi posee proteínas de tipo mucina en la superficie en todos sus estadios. En por lo menos dos de ellos las mucinas son las principales glicoproteínas de membrana y funcionan como aceptores de ácido siálico, azúcar que el parásito obtiene de glicoconjugados del medio mediante la trans-sialidasa, una enzima solo presente en Tripanosomátidos. Dado que el ácido siálico es importante en diversos procesos relacionados con la infección del parásito a vertebrados, el objetivode esta tesis fue caracterizar los genes de las mucinas de T. cruzi. Se describieron dos familias de genes tipo mucina en el parásito. La primera, denominada TcMUC, es muy compleja y polimórfica con unos 500 genes por genoma haploide. Esta familia puede dividirse en tres grupos de genes que comparten las regiones correspondientes al amino y carboxilo terminal del producto deducido, y que codifican para un péptido señal y para una señal de anclaje por glicosilfosfatidil inositol (GPI), pero difieren en su región central. El grupo I posee un número variable de repeticiones con la secuencia T8KP2 como región central. El grupo II posee regiones centrales no repetitivas pero diferentes para cada miembro, seguidas por repeticiones degeneradas ricas en Thr. El grupo III es homogéneo y no posee repeticiones de ningún tipo. Los productos derivados de los genes del grupo I y II presentan una región hipervariable en su amino terminal debida a la acumulación localizada de mutaciones. El análisis de la expresión de los genes mostró que los ARNm del grupo I se expresan en mayor abundancia en el estadío de tripomastigote mientras que los del grupo II pueden variar según cada miembro. Los productos de los genes del grupo I se identificaron como mucinas ancladas en la membrana por GPI. Sueros de ratones infectados reconocieron proteínas recombinantes del grupo I, indicando que las mucinas codificadas están efectivamente presentes en los estadios relacionados con la infección. De la misma forma, sueros de infección de ratones, humanos y conejos reconocieron algunas regiones hipervariables de mucinas del grupo I indicando que están presentes en la proteína madura y que más de una puede expresarse durante el curso de la infección. Dado que las repeticiones están muy O-glicosiladas deben adoptar una estructura extendida, con el N-terminal hipervariable como extremo externo y su C-terminal anclado a la membrana por GPI. La segunda familia, denominada TcSMUG, es mucho menos compleja, con alrededor de 70 genes por genoma haploide. Está compuesta por dos grupos de genes, denominados S y L, dispuestos en tándems independientes en el genoma. Los productos S y L están estructuralmente muy relacionados pero poseen una regulación diferencial específica de estadío de la abundancia del ARNm, ejercida al nivel de la estabilidad del mensajero. El ARNm del grupo S esta presente en los estadios relacionados con el insecto vector. El ARNm del grupo L está presente en todos los estadios pero es mucho más abundante en los estadios capaces de replicarse. Las proteínas deducidas de esta familia poseen regiones centrales compuestas por repeticiones (grupo L) o no repetidas (grupo S), pero ambas con un contenido alrededor del 50% en Thr y con una estructura muy similar a una apomucina. Sus productos poseen un peso molecular alrededor de 7.000 descontando las señales de importación al reticulo endoplasmático y de anclaje por GPI. La secuencia deducida de las proteinas del grupo S coincide con secuencias de péptidos obtenidos en otro laboratorio a partir de mucinas purificadas del estadio epimastigote. Se identificaron entonces genes que codifican mucinas de los estadios trlpomastigote sanguíneo (TcMUC grupo I) y epimastigote (TcSMUG grupo S). Si bien ambos grupos están estructuralmente muy relacionados, el parásito regula la expresión de ambos de acuerdo al hospedador y, mientras que las mucinas expresadas en el insecto son homogéneas en secuencia aquellas expresadas en el vertebrado poseen en la región más expuesta epitopes que varían entre los diferentes miembros de la familia.

Abstract:
Mucins are glycoproteins whose protein core is densely O-glycosylated in Thr and Ser residues. Sugars account for up to the 80% of the molecular mass, conferring it an extended structure and a strong hydrophilic character. They can be a protective barrier. serve for lubrication and act as adhesion molecules. Trypanosoma cruzi has mucin-type molecules on the surface of all its stages. In at least two of them, mucins are the main surface glycoproteins and sialic acid acceptors. This sugar is transferred to the parasite mucins from glycoconjugates at the medium by a unique Trypanosomatids-specific enzyme called trans-sialidase. Given that sialic acid is important in infection related processes the main objective of this Thesis was to characterize mucin genes in T. cruzi. Two mucin-type gene families were described. The first one, named TcMUC, is very complex and polymorphic with about 500 genes per haploid genome. There are three groups of genes within this family that share the regions corresponding to N and C termini of the deduced product, encoding a signal peptide and a GPI anchor signal respectively, but that differ in their central region. Group I central region is composed of a variable number of tandem repeats with the consensus sequence T8KP2. Each member of Group II has unique non-repetitive central regions followed by degenerated Thr-rich repeats. Group III is homogeneous and has no Thr runs. The products derived from Groups I and II have a hypervariable mature N-terminus due to the localized accumulation of mutations. Gene expression analyses showed that Group I is highly expressed in the cell-derived trypomastigote stage while Group II can vary in abundance among stages depending on the studied member. Group I gene products were identified as mucins GPI anchored to the parasite membrane. Infected mice sera recognized recombinant Group I proteins, indicating that mucins encoded by them are present in the stages of the parasite present during the infection. In the same way, mice, human and rabbit infection sera recognized some hipervariable regions from Group I mucins suggesting that they are present in the mature protein and that more than one can be expressed during the infection. Given that the Thr-rich repeats are highly O-glycosylated they must adopt an extended structure. with the hypervariable N-terminus as external end and GPI anchored to the membrane by its C-terminal end. The second family, named TcSMUG, is much less complex with about 70 genes per haploid genome. It is composed of two groups of genes, named S and L, arranged in independent tandems in the genome. The S and L products are structurally related but have differential stage-specific regulation of their mRNA abundance determined by mechanisms affecting their mRNA stability. Group S mRNA is present in the insect related stages. Group L mRNA is present in all the stages but is much more abundant in the replicative ones. Deduced proteins have central regions composed of tandem repeats (group L) or non-repeated sequences (group S) but both with about 50% Thr content. and with an apomucin-like structure. Their products have a molecular mass around 7 kDa without the signal and GPI anchor peptides. The sequence deduced from proteins of the group S matched peptide sequences obtained elsewhere from epimastigote purified mucins so having a positive identification. Then, genes encoding mucins from tripomastigote (TcMUC group I) and epimastigote (TcSMUG group S) stages were identified. Yet both groups are structurally related, their expression is regulated in a stage-specific manner in the parasite, according to the host. While those expressed in the insect are homogeneous in sequence, those expressed in the vertebrate that are targets of the immune response have variant epitopes in their exposed N-temini.

de Brito Sanchez, María Gabriela. "Estudios electrofisiológicos de estructura-actividad de la célula antenal receptora del ácido benzoico de la hembra de Bombyx mori L" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo de este trabajo fue caracterizar las respuestas electrofisiológicas de la célula receptora olfativa al ácido benzoico, presentes en las hembras de la mariposa del gusano de la seda Bombyx mori. Nuestros estudios permiten concluir que la célula receptora al ácido benzoico es un receptor especialista ya que responde máximamente a su compuesto llave y tiene un espectro idéntico para compuestos menos efectivos. Mediante estudios de estructura-actividad con substituyentes halogenados del ácido benzoico, se determinó que un factor crítico para el reconocimiento del sitio receptor es la generación de un efecto inductivo por el halógeno substituyente. Este efecto es mayor para halógenos más electronegativos (flúor) y para la posición meta. Cuando fue estimulada con iodo benzeno, la célula receptora al ácido benzoico respondió con una inhibición durante el estímulo y con una excitación post-estímulo. En base a diversos experimentos propusimos un modelo para la acción de sustancias excitatorias e inhibitorias a nivel receptor olfativo. En dicho modelo, sustancias como el iodo benceno actuarían directamente sobre los canales iónicos (proceso inhibitorio rápido y transitorio, no dependiente de segundos mensajeros), o sobre el sitio receptor del ácido benzoico (proceso excitatorio posterior y dependiente de segundos mensajeros). La célula receptora al ácido benzoico mostró un aumento de su actividad basal en el aire del laboratorio sin filtrar. Por medio de experimentos combinados de cromatografía gaseosa- electroantenograma y registro de células únicas encontramos que dicho aire contenía ácido benzoico y benzaldehido (estimulantes de la célula receptora al ácido benzoico en la sensilia tricodea) y nonanal (estimulante de la sensilia coelocónica). El umbral de la célula receptora al ácido benzoico se halla por debajo de una carga de estímqu de 0.01 μg de ácido benzoico por papel de filtro. Se analizó la composición química del meconio, producto de excreción de la pupa y único estímulo natural capaz de activar a la célula receptora del ácido benzoico. El meconio está compuesto por una gran cantidad de ácido succínico y ácido benzoico y cantidades menores de otros ácidos. La cantidad estimada de ácido benzoico presente en el meconio de machos y hembras fue 8.4 μg y 4.2 μg por 100 μl de meconio, respectivamente. De los componentes hallados, el único componente activador de la célula receptora al ácido benzoico fue el ácido benzoico. Sin embargo cuando éste fue adicionado al meconio, la respuesta disminuyó significativamente. Concluimos que el meconio obstruye estructuralmente el papel activador del ácido benzoico. Así, el ácido benzoico relevante para la hembra de B. mori no es aquel que está presente en el meconio. Fuentes alternativas de ácido benzoico en la planta de mora serían los frutos mismos de la mora y/o la reacción de defensa de la hoja que resulta en la producción de ácido benzoico como fitolexina. En ambos casos el ácido benzoico sería señal de buena “calidad”de planta y por ende de sustrato adecuado para la oviposición. Estas respuestas pueden sin embargo haber sido modificadas por innumerables generaciones de selección y cultivo de B. mori en sericultura.

Abstract:
The aim of this work was to characterize the electrophysiological responses of the olfactory benzoic-acid receptor cell, present in the females of the silk moth Bombyx mori. Our studies allow to characterize the benzoic-acid cell as a specialist as it responds maximally to its cue compound and has a similar response spectrum for less effective compounds. By means of studies of structure-activity relationships performed with halogenated substitutes of benzoic acid, we determined that the generation of an inductive effect by the halogen is a critical factor for the recognition of the odor molecule by the receptor site. Such an effect increased for the more electronegative halogens (fluoride) and for the meta position. When the benzoic-acid receptor cell was stimulated with iodine benzene, it was first showed inhibition during the stimulation and then an excitation post-stimulation. On the basis of various experiments we sμggested a model for the action of excitatory and inhibitory substances at the olfactory receptor level. In such a model, substances like the iodine benzene would act directly on the ion channels (inhibitory,fast, transient process that would not depend on second messengers), or on the benzoic-acid receptor site (excitatory, post-stimulation process that would depend on second messengers). The benzoic-acid receptor cell showed an increase of its basal activity when exposed to the unfiltered air of the laboratory. By means of experiments combining gas chromatography, electroantenograms and single-cell recordings we determined that the air of the laboratory contained benzoic acid and benzaldehyde (stimulants of the benzoic-acid cell in the sensilla trichoidea), and nonanal (stimulant of the sensilla coeloconica). The response threshold of the benzoic-acid receptor cell for was estimated to be below 0.01 μg of benzoic acid per filter paper. We analyzed the chemical composition of the meconium, an excretion product of the pupae and the only stimulus known capable of activating the benzoic-acid cell. It is constituted by large amounts of succinic and benzoic acid and by minor quantities of other acids. The amount of benzoic acid estimated per 100 μl meconium was 8.4 μg and 4.2 μg for the males and for the females, respectively. From the substances found, the only one capable of activating maximally the benzoic acid cell was benzoic acid. However, when it was added to or mixed with meconium, the response of the benzoic-acid cell significantly decreased. We concluded that the meconium structurally obstructs the excitatory role of benzoic acid. Thus, the benzoic acid that is relevant for the female of B. mori is not that naturally occurring in the meconium. Alternative sources of benzoic acid in the mulberry are the fruits themselves and/or the defense reaction to fungal infection of the leaves, which result in the release of benzoic acid as a phytolexin. In both cases the benzoic acid would signalize a plant of “good quality” and therefore an appropriated oviposition substrate. However, these responses may have been lost due to the innumerous generations of selection and domestication related to the exploitation of B. mori in sericulture.

Dasso, Sergio. "Emisión de ondas por Resonancia Iónica Ciclotrónica en Plasmoides Interplanetarios expulsados por el sol" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En esta tesis se realiza un estudio teórico de las condiciones de excitación de las ondas electromagnéticas iónicas ciclotrónicas (EICWs) en los plasmoides interplanetarios expulsados por el Sol (o eyecciones de masa coronal, CMEs). Cuando el viento solar es perturbado por estas eyecciones de plasma provenientes del Sol, la actividad de ondas cambia radicalmente. Mientras que en las condiciones típicas correspondientes al viento solar rápido están dadas las condiciones para la actividad de las ondas de polarización izquierda, cuando el viento es reemplazado por plasmoides interplanetarios de origen solar, el cambio de los parámetros físicos relevantes favorece la actividad de la rama de polarización derecha. Hemos caracterizado el espacio de parámetros típico de estos plasmoides y estudiamos, mediante la teoría cinética en plasmas magnetizados, las condiciones para la emisión y absorción de estas ondas. Hemos determinado fronteras del espacio de parámetros entre regiones estables e inestables. Para considerar la presencia de partículas supratérmicas hemos modelado la función de distribución de una fracción de la población de partículas del plasma con funciones Kappa. En un plasma de protones y electrones la inestabilidad resonante de las EICWs requiere ordinariamente grandes valores para el beta del plasma (beta aproximadamente 1 o mayor), sin embargo, hemos encontrado que las CMEs a pesar de su bajo valor de P son objetos con otras propiedades cinéticas favorables para el desarrollo de esta inestabilidad. Dada la gran heterogeneidad que caracteriza a estos objetos no todos ellos serán emisores de EICWs, sino que existe un subconjunto de CMEs con propiedades térmicas propicias para la amplificación de estas ondas. Se han encontrado configuraciones de parámetros, consistentes con las observaciones, en las que los tiempos característicos de crecimiento de la inestabilidad son mucho menores que los tiempos típicos de la evolución de la estructura interplanetaria, y en las cuales es posible la amplificación de las ondas en tiempos en los que la configuración de parámetros de la estructura interplanetaria se mantiene esencialmente constante. Estos resultados son de gran importancia para comprender la microturbulencia que ha sido observada en estos objetos por el satélite Wind. Hemos realizado un estudio estadístico de los parámetros de configuración de los CMEs, con el objetivo de seleccionar aquellos eventos con propiedades favorables para el desarrollo de la inestabilidad de los EICMs. Se analizaron datos aún no publicados de la sonda espacial Wind y específicamente se estudiaron: un conjunto de Halo-CMEs y un conjunto de nubes magnéticas interplanetarias. Los eventos que se consideran para este estudio han sido observados en forma continuada por la sonda Wind desde diciembre de 1996 hasta noviembre de 1997 (para Halo-CMEs) y desde febrero de 1995 hasta noviembre de 1998 (para nubes magnéticas). Finalmente, en base a los resultados de nuestro estudio estadístico, se selecciona la nube magnética que observó Wind el 7 y 8 de agosto de 1996 y se examinan las posibilidades de emisión de EICWs en este evento.

Cremona, María Laura. "TRANS-SIALIDASA en Trypanosoma cruzi: estudio de la estructura y función de esta familia de antígenos de superficie" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La enfermedad de Chagas es una de las parasitosis endémicas más importantes de América. Dieciocho millones de personas infectadas releva un informe reciente de la Organización Mundial de la Salud (WHO, 1998). Tryparzosoma cruzzi es el parásito responsable de esta enfermedad. Presenta en su superficie la trans-sialidasa, una enzima unida a la membrana por un enlace glicofosfatidilinositol. Esta enzima le otorga la capacidad de adquirir ácido siálico a partir de sialiglicoconjugados del organismo que infecta, ya que T cruzles incapaz de sintetizar este monosacárido. La trans-sialidasa fue involucrada en aspectos clave de la infección y la supervivencia del parásito en sangre. La familia de proteínas de la trans-sialidasa está codificada por al menos 140 genes que pueden clasificarse en tres sub-familias de acuerdo a la estructura y la función de sus productos proteicos. Dos de estos grupos son expresados en tripomastigotes, la forma infectiva del parásito, y se distinguen en su capacidad de trans-glicosidar: las trans-sialidasas activas y las trans-sialidasas inactivas. La comparación de la secuencia de la región N-terminal de proteínas de ambos grupos permitió deducir que la sustitución Tyr-His en la posición 342 de la proteína madura determina su capacidad de actuar como trans-sialidasa. Esta tirosina es imprescindible para que la molécula pueda actuar como enzima y su reemplazo por histidina, residuo presente en los integrantes de la familia sin actividad enzimática, determina la pérdida total de la capacidad trans-glicolítica. Además de la Tyr342,otro aminoácido, Pro231, también es necesario para la actividad enzimática: el cambio Pro231Ala resulta en una trans-sialidasa parcialmente activa con respecto a la enzima natural. Se examinó la capacidad de las proteínas inactivas para unir ácido siálico y galactosa en un ensayo de aglutinación y se comprobó que las trans-sialidasas enzimáticamente inactivas aglutinan glóbulos rojos desialidados que presentan betagalactosas terminales, la misma especificidad que requiere la enzima. La trans-sialidasa podría definirse como una sialidasa particular. En lugar de hidrolizar ácido siálico lo transfiere preferencialmente a beta-galactosas terminales presentes en glicoproteínas y glicolípidos y difiere de las sialil y glicosil-transferasas conocidas en que no requiere un nucleótido-azúcar como dador. De los 16 aminoácidos que constituyen el sitio activo de la sialidasa de Salmonella typhimurium, 14 aminoácidos, incluyendo la Tyr342, están presentes en las mismas o en similares posiciones en la estructura primaria de la trans-sialidasa. Tryparzosoma rangeli, parásito de origen americano no patógeno para el hospedador humano, libera al medio una sialidasa cuya secuencia primaria es 70 % homóloga a la trans-sialidasa de T. cruzi La estructura cristalográfica de la sialidasa obtenida en nuestro laboratorio permitió obtener el modelo de la trans-sialidasa. La comparación de ambas estructuras permitió la identificación de unos pocos aminoácidos que modularían la actividad de transferencia. Los experimentos de mutagénesis dirigida sugirieron la presencia de un sitio distinto de unión para el carbohidrato aceptor del grupo sialilo, y una probable diferencia en la arquitectura de ambos sitios activos.

Abstract:
Trypanosoma cruzzi is the protozoan haemoflagelate responsible for Chagas’ disease, which affects almost 18 million people in America, as reported recently by the World Health Organization (WHO, 1998). T. cruzzi trypomastigotes acquire sialic acid from host glycoconjugates by means of a plasma membrane associated trans-sialidase, as it is unable to synthesize this sugar. This enzyme differs from all other known sialyl- and glycosyl- transferases in that it does not require a nucleotide sugar as donor. It has been involved in key aspects of parasite’s infection and survival. This enzyme belongs to a large family of proteins encoded by at least 140 genes. These proteins contain the enzymatic region at the N-terminus, the only one required for trans-sialidase activity and an antigenic domain on the C-terminus. Some members of the family lack the enzymatic activity. Gene encoding inactive members are not a few, but rather are present in the same copy number, 60-80 per haploid genome, as those encoding active trans-sialidase. The complete sequences of the enzymatic region of active an inactive members were compared and it showed a limited divergence among them: 20 out of the 642 amino acids in the region were found to differ. From these 20 amino acids, only one was found to be essential for enzymatic activity. A Tyr residue at position 342 of the mature protein is deduced in active proteins while an His at the same position is present in inactive ones. This naturally occurring Tyr324His substitution completely abolished trans-sialidase activity. In addition to Tyr, a second amino acid, Pro231, was found to be necessary for full enzymatic activity. A Pro231Ala change rendered the trans-sialidase protein partially active. Recombinant inactive proteins were purified and assayed for sialic acid and galactose binding activity in agglutination tests. The enzymatically inactive trans-sialidases were found to agglutinated de-sialilated erythrocytes but not untreated red blood cells. Assays made with mouse and rabbit red blood cells suggest that inactive trans-sialidases bind to beta, rather than alpha terminal galactoses, the same specificity required by active trans-sialidases. At least some molecules in the trans-sialidase family that have lost their enzymatic function still retain their Gal-binding properties and might have a function as lectins in the parasite-host interaction. The trans-sialidase could be defined as a particular sialidase that, instead of hydrolyzing sialic acid, it preferentially transfers the monosaccharide to a terminal beta-galactose in glycolipids and glycoproteins. Fourteen amino acids residues, including Tyr342, out of the 16 amino acids that build the active site of the sialidase from Salmonella typhymurium, are present at the same or similar positions in the primary structure of trans-sialidase. The crystal structure of the sialidase from the closely related American trypanosome T. rangeli allowed the modeling of T. cruzi trans-sialidase. Comparison of these structures allowed the identification of few amino acids that may modulate transferase activity. Mutagenesis experiments suggest the presence of a distinct binding site for the acceptor carbohydrate and different arquitectural arrangements of both active sites.

Cortón, Eduardo. "Desarrollo y aplicaciones de biosensores enzimáticos y microbianos" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se construyeron biosensores enzimáticos cableados basados en la inmovilización de una oxidasa (glucosa oxidasa, lactato oxidasa ó peroxidasa) en un hidrogel redox formado por el entrecruzamiento de la enzima, polialilamina conteniendo un cornplejo de osmio (PAAOs) y polietilediglicidiléter (PEG) como entrecruzante, sobre electrodos de carbón vítreo y de oro. Se estudió el rango de linealidad y la reproducibilidad de estos electrodos al ser utilizados como detectores en un sistema FIA. Utilizando electrodos basados en glucosa oxidasa se estudió el efecto de distintas proporciones de entrecruzante (PEG); utilizando técnicas de voltametrías cíclicas se estudió el efecto del cambio de fuerza iónica en el medio. La leche afecta de manera irreversible a estos electrodos monoezimáticos. Se diseñaron distintos tipos de biosensores bienzimáticos bicapa, en los que peroxidasa entrecruzada con PAAOs se encuentra en la capa mas cercana al electrodo, y lactato oxidasa en la capa más externa. Se estudió el efecto de la leche sobre ambas capas enzimáticas, demostrandose que esta configuración es más apropiada para la determinación de la concentración de L-lactato en muestras Iácteas. Se ha descripto un método rápido para determinar la capacidad fermentativa de distintas especies de Lactobacillus. Este método permite cuantificar esta capacidad, proporcionando una información mas completa del metabolismo de los hidratos de carbono; posibilita el estudio de cepas mutantes suministrando inforrnación más completa acerca de las posibles modificaciones en el metabolismo de los fuentes de carbono utilizadas.

Abstract:
Enzymatic "wired" biosensors based in the immobilization of one oxidase (glucose oxidase, lactate oxidase or peroxidase) within an redox hydrogel formed by crosslinking of enzyme, polyallylamine containing an osmium complex (PMOS) and poly(ethy1ene glycol) (PEG), onto glassy carbon or gold electrodes were constructed. We study the reproducibility and lineal span of these electrodes when they were used as detectors in a FIA system. To complete their characterization we study the effect of different PMOS 1 PEG ratios in the construction of enzymatic biosensores, the effect of pH, temperature and ionic strength. The effect of milk samples and their response were analyzed, these complex analytical matrix affect these electrodes catalytic current. We designs bilayer bienzyme biosensors; in these system the peroxidase layer, over the electrode ("wired"), are separated from the outer membrane containing lactate oxidase (not "wired1'). We study the effect over both layer of milk samples; from these studies a bienzyme electrode configuration was found as the most appropriate array from the determination of L-lactate in milk samples. A microbial biosensor based on calcium alginate immobilized Lactobacillus cells coupled to a pH electrode was developed for quantitative determination of carbohydrate fermentation activity. The evolution of acid production in a continuous flow-stopped biorreactor was monitored for different sugar solution. The procedure can give quantitative results compared to other reported techniques for carbohydrate fermentation pattern from which only qualitative results are obtained.

Chiocchio, Viviana Mónica. "Influencia de las raíces sobre las poblaciones fúngidas del suelo : efecto rizoplano-rizósfera" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Cerveny, Silvina. "Influencia de la microestructura en las propiedades mecánicas dinámicas de caucho natural y estireno butadieno vulcanizados" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo se realiza un estudio experimental del comportamiento mecánico dinámico de compuestos elastoméricos vulcanizados mediante el sistema acelerante/azufre. El conocimiento de las variaciones que se provocan en los parámetros microestructurales de los elastómeros con el grado de vulcanización, es una herramienta imprescindible para la predicción de su comportamiento mecánico. Los materiales estudiados en este trabajo, caucho natural y estireno-butadieno, han sido seleccionados dada su importancia tecnológica actual. En los estudios realizados en caucho natural, se analizó el comportamiento del material con distinto grado de cura mediante ensayos de tracción axial y torsión. Los resultados de tracción, analizados dentro del modelo de reptación adaptado a redes poliméricas de alto peso molecular, permitió separar las componentes del módulo elástico proveniente de los entrecruzamientos fisicos de la red y de los entrecruzamientos químicos (crosslinks). Se establecieron el peso molecular entre crosslinks y la densidad de crosslinks elásticamente activos en función del tiempo de cura y se interpretó este resultado de acuerdo a las reacciones predominantes durante la vulcanización. En el caso de los ensayos dinámicos los resultados se analizaron mediante el modelo KMF que considera la estructura polimérica como una red de cadenas gaussianas ramificadas tipo árbol. A partir del modelo se obtuvo el espectro de relajación estableciendo el tiempo de relajación medio y se calculó la variación del coeficiente de fricción monomérico con el grado y temperatura de cura. Con la finalidad de discernir si los cambios observados en el coeficiente de fricción se atribuyen totalmente a la presencia de crosslinks elásticamente activos, se realizaron ensayos de hinchamiento por solvente (swelling) y resonancia magnética nuclear (RMN) para caracterizar la estructura formada durante la cura. Se observaron, además de los tipos de crosslinks antes mencionados, la presencia de grupos laterales y estructuras que no contribuyen a la elasticidad. Por otro lado, se realizaron ensayos en estireno-butadieno variando su microestructura (contenido cis, trans, vinil y estirenos) y su tiempo de vulcanización. En este caso se efectuaron ensayos dinámicos y dieléctricos, en un amplio rango de temperaturas y frecuencias, con la finalidad de analizar la influencia de la microestructura y el avance de la cura sobre las propiedades mecánicas. Utilizando ensayos mecánico-dinámicos se analizó la influencia del contenido de vinilo sobre muestras de estireno-butadieno en la zona de la transición vítrea. Los datos experimentales se analizaron dentro del marco de la función de Havriliak-Negami que permite modelar materiales que exhiben una distribución de tiempos de relajación muy extensa. A partir del análisis se encontró que la presencia de crosslinks, en redes altamente entrecruzadas, afecta la dinámica local del polímero. Se estableció la variación del coeficiente de fricción monomérico con el grado de cura y con el contenido de vinilo. Los resultados dieléctricos permitieron localizar una transición secundaria (relajación β) en copolímeros de estireno-butadieno. Los resultados muestran que, para polímeros sin vulcanizar, esta relajación es un proceso local que está influenciado por el entorno local de cada unidad monomérica sin fiierte interacción entre grupos vecinos. Además se analizaron la influencia del grado de cura y microestructura sobre esta relajación. Los resultados indican que el nivel de cura afecta la dinámica local del polímero, cuando las redes se encuentran altamente entrecruzadas. Finalmente, hemos podido cuantificar la variación del volumen libre con el grado de cura mediante la introducción de la técnica de aniquilación de positrones. Los resultados confirman las estimaciones indirectas sobre la fracción de volumen libre que hasta el presente se realizan por medio de técnicas mecánico-dinámicas.

Abstract:
An experimental study of the dynamic mechanical behavior of elastomeric compounds vulcanized with a sulfur/accelerator system was carried out. The knowledge of the variations of the microstructural parameters of elastomeric compounds with the cure degree, is an indispensable tool for the prediction of its mechanical behavior. The materials studied in this work, natural rubber and styrene-butadiene rubber, have been selected by their current technological interest. In the case of natural rubber, the network structure during vulcanization was analyzed by means of measurements of torsion and axial traction. The traction results, analyzed using the tube model adapted to polymeric networks of high molecular weight, allow the separation of constraint and crosslinks contributions. The molecular weight of network chain and crosslink density was calculated as a function of the cure degree. These results were interpreted according to the predominant reactions during the vulcanization. The dynamic mechanical results were analyzed in the frame of KMF model that considers the polymer as a symmetrically tree-like network. From this model the mean relaxation time and the monomeric friction coefficient was obtained for each cure condition. By means of swelling and solid state NMR techniques the network structure was also analyzed in order to distinguish the kinds of sulfur bridges formed during vulcanization. The results showed the presence of lateral groups and structures that do not contribute to the elasticity. On the other hand, we analyzed styrene-butadiene rubber (SBR) with different composition of 1,2 cis, 1,4 trans, 1,2 vinyl and styrene units. Also we analyzed different cure conditions for different compounds of this family. The influence of vinyl content was characterized by means of mechanical dynamical measurements. The experimental data were analyzed in the frame of Havriliak-Negami equation. From the fitting parameters, it was observed that the crosslinks, in highly crosslink networks, affects the local dynamic of the polymer. Also, the variation of the monomeric friction coefficient with the cure degree and vinyl content was calculated. From dielectric measurements of vulcanized SBR, a relaxation process appears at high frequency. This process, the β relaxation, shows an Arrhenius behavior. From our results, it can be assumed that the β relaxation is a local process influenced by the local environment of each monomeric unit without strong interaction between neighboring groups. The influence of the degree cure and microstructure was also analyzed on this relaxation. The results indicate that cure level affects the local dynamics of the polymer, when the networks are highly crosslinked. Finally, an experimental investigation was performed using positron annihilation spectroscopy in order to study the effect of the crosslinking reaction in the polymer free volume. The results confirm the increase free volume size when the crosslinking takes place.

Castro, Mariano J.L.. "Dímeros de glucósidos. Una nueva familia de tensoactivos no iónicos biodegradables : Sintesis y Propiedades Interfaciales" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los tensoactivos se encuentran entre los compuestos químicos más versátiles debido a sus múltiples aplicaciones. En los últimos años, los tensoactivos diméricos han adquirido un especial interés al demostrarse su mayor eficiencia en comparación con los tensoactivos monoméricos tradicionales. El objetivo del presente trabajo de tesis fue el diseño, síntesis y evaluación de las propiedades interfaciales de una nueva familia de tensoactivos diméricos no iónicos biodegradables: los dímeros de glucósidos. Los tensoactivos diméricos o “gemini” se definen como tensoactivos construidos a partir de dos moléculas anfifilicas idénticas que se conectan a través de sus cabezas polares. Los alquil glicósidos, tensoactivos ecológicamente seguros por su biodegradabilidad, carencia de toxicidad y facilidad de síntesis a partir de recursos naturales renovables, pueden ser unidos por un espaciador o puente a través del hidrato de carbono, formando tensoactivos diméricos. Ese fue el diseño básico de la nueva familia de compuestos sintetizada. La presencia de un hidrato de carbono como cabeza polar confiere a los dímeros versatilidad estructural, debido a que el espaciador o puente puede unirse a distintas posiciones de la glucosa. Se analizaron en forma sistemática las propiedades interfaciales de los dímeros de glucósidos sintetizados para lograr un mejor conocimiento de la influencia de los factores estructurales. En los ejemplos de tensoactivos diméricos no iónicos en general, y, en particular, en los que contienen hidratos de carbono, registrados en la literatura, no se ha profundizado el estudio de la relación estructura-actividad superficial. Las conclusiones de este trabajo constituyen por lo tanto, un aporte significativo al conocimiento de tensoactivos diméricos no iónicos biodegradables.

Abstract:
Surfactants are among the most versatile chemicals due to their multiple applications. In the last years, dimeric surfactants became relevant since they are more efficient than their traditional monomeric counterparts. The design, synthesis and evaluation of interfacial properties of a new family of biodegradable non ionic dimeric surfactants based on dimeric glucosides is described. Dimeric or gemini surfactants are defined as surfactants made up of two identical amphiphilic moieties connected at the level of their polar head groups. The use of ecologically safe surfactants such as alkyl glucosides as monomers is mainly due to their biodegradability and the fact that they can be easily prepared starting from renewable raw materials as carbohydrates and long hydrocarbon chain alcohols. This new type of amphiphilic molecules is composed by two alkyl glucosides linked through a spacer. Carbohydrate-based dimeric surfactants allow a great variability of structures. Interfacial properties of these new compounds were evaluated in order to analyze the influence of structural features on their behaviour. Previous reports on non ionic dimeric surfactants lack meaningful correlations of structural effects on surface phenomena. Therefore, the results of this study may contribute to their better knowledge.

Castilla Lozano, María del Rocío. "Rol de la quinasa de proteínas dependiente de AMPc (PKA) en la diferenciación de Candida albicans : Existencia de una nueva isoenzima de PKA" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo principal de esta Tesis fue profundizar el estudio de los mecanismos bioquímicos involucrados en la transición dimórfica de Candida albicans. Este trabajo está basado en resultados previos de nuestro laboratorio en los que se había demostrado que la vía de señalización del AMPc está involucrada en la respuesta del hongo a algunos de los factores ambientales que controlan su morfología. En consecuencia, continuamos nuestra investigación enfocando el estudio en la participación de la enzima blanco del AMPc, la quinasa de proteína dependiente de AMPc (PKA), en Ia transición levadura —>micelio. Los resultados de los experimentos realizados in vivo con la cepa salvaje 1001 demostraron que: - La inhibición in vivo de la actividad de PKA utilizando inhibidores específicos resultó en un bloqueo completo de la transición dimórfica en medio mínimo cuando la inducción se llevó a cabo con NAcGlc. Cuando el inductor usado fue suero, la inhibición de la PKA no tuvo un efecto tan drástico. - La inhibición de la PKA no promovió efectos deletéreos en la célula ya que el agregado de suero pudo reiniciar la diferenciación en células bloqueadas ni produce efectos generalizados sobre el crecimiento ya que la gemación de las células levaduriformes no fue afectada. - La inhibición de la PKA resultó en un bloqueo generalizado de la fosforilación total de proteínas in vivo. EI agregado de dbAMPc al medio aumentó globalmente la fosforilación de proteínas y aún en su presencia la inhibición de la PKA promueve una desaparición completa de las proteínas fosforiladas. Estos experimentos permiten concluir que la PKA es un elemento crucial en la transducción de señales desencadenadas por NAcGlc y que su ubicación en la cascada de fosforilaciones es tal que controla otras quinasas, algunas de las cuales podrian estar involucradas en el dimorfismo. Los experimentos de germinación realizados con una mutante que carece del gen para la única subunidad catalítica (subunidad C) conocida hasta ese momento (gen TPK2), y los datos aportados por el Proyecto genoma de Candida , permitieron demostrar la existencia y expresión de un segundo gen para C no conocido. Es más, esta nueva C tiene también un rol positivo en la diferenciación. Demostramos también que la subunidad R es una fosfoproteína in vivo. La autofosforilación de la subunidad R resultó en una marcada disminución de su afinidad por C Io que hizo a la holoenzima mas sensible a disociación por AMPc. In vivo esta situación permitiría a la holoenzima ser disociada con pequeñas fluctuaciones de AMPc.

Abstract:
The main objective of this Thesis was to go deep into studies on the biochemical mechanisms involved in the dimorphic transition of Candida albicans. This work is based on previous results from our laboratory that demonstrated that the CAMP signaling pathway is involved the fungus response to some environmental factors which control its morphology. Consequently, to go on with our investigations we focussed our interest on the participation of the cAMP target enzyme, the cAMP-dependent protein kinase (PKA) on the yeast-to-hypha transition. The results of the in vivo experiments performed with the C. albicans wild type strain 1001, demonstrated that: - The inhibition of the PKA activity with specific inhibitors resulted in a complete blockade of the dimorphic transition in minima medium when the process was induced with GlcNAc. When the inducer was serum, the inhibition of PKA was not so drastic. - The inhibiton of PKA did not promote deleterious effects on the cells since the addition of serum allowed blocked cells to resume differentiation, nor produced generalized effects on growth since duplication of yeast cells was not affected. - The inhibition of PKA resulted in a generalized blockade of the total protein phosphorylation in vivo. The addition of dbcAMP to the medium raised protein phosphorylation as a whole, but even in its presence PKA inhibition promoted the disappearance of phosphorylated proteins. These experiments allow us to conclude that PKA is a crucial element in the signal transduction triggered by GlcNAc and that its location in the phosphorylation cascade is such that it control other kinases , some of which could be involved in dimorphism. Germination experiments performed using a mutant strain lacking the gene for the sole catalytic subunit (C) known up this moment (TPK2 gene), and data arising from the Candida genome Project, allowed us to demonstrate the existence of a second gene for C still unknown. What is more, this new C isoform also have a positive role on differentiation of C. albicans. We also found out that R subunit is a phosphoprotein in vivo. Autophosphorylation of R resulted in an important decrease in its affinity for C making the holoenzyme more sensitive to dissociation by cAMP. In vivo this situation could allow the holoenzyme to be dissociated by small fluctuations in cAMP levels.

Cassinelli, María Martha. "Soluciones de la ecuación de curvatura media prescripta para superficies no paramétricas y de ecuaciones cuasilineales de segundo orden" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Carrió, Gustavo Gabriel. "Desarrollo y evaluación de un tratamiento multimomento para la microfísica de un modelo de nube convectiva" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Carmanchahi, Pablo Daniel. "El órgano Vomeronasal del armadillo Chaetophractus villosus (Xenarthra): Estudios sobre su morfología y papel fisiológico : Exploración de una posible nueva función" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El órgano vomeronasal (OVN) es una estructura quimiorreceptora presente en la mayoría de los mamíferos. No hay estudios sobre este órgano en el Orden Xenarthra. En la presente Tesis Doctoral, se realiza un estudio de las características ultraestructurales y lectinohistoquímicas de este órgano. Se propone el uso del diclobenil como instrumento útil para el estudio de la dinámica celular del mismo. También se propone a la Proteína G como marcadora de neuronas en diferente estado de desarrollo. Además, se caracteriza cualitativa y cuantitativamente la actividad bioeléctrica de los bulbos olfatorios y la neocorteza frontal de animales con desaferentación vomeronasal. Los hallazgos morfológicos y fisiológicos presentados, constituyen la base indispensable para ulteriores estudios sobre los factores que regulan la dinámica celular y la neoformación neuronal. Por último, se suministran evidencias de una nueva función del OVN relacionada con la neurofisiología del Sueño. Esto abre nuevas e inesperadas perspectivas para la investigación del papel fisiológico de este órgano.

Abstract:
The vomeronasal organ is a chemorreceptive structure present in most of the mammalian species. There are no studies of this organ in the order Xenartha. In this Doctoral Thesis we studied the ultrastructural features and the lectinhistochemístry of the organ. We propose the use of the herbicide diclobenil as a valuable tool for the study of the VNO cellular dynamics. We also propose to adopt protein G as a marker of the vomeronasal neurons in different developmental stages. Additionally, we studied the effect of vomeronasal deafferentation on the bioelectrical patterns of the olfactory bulb and frontal neocortex during wakefulnes and sleep. We provide evidence suggesting the existence of a new function of the VNO related to the display of brain electrical activity during Sleep. Our morphological and physiological findings provide a sound basis for the study of factors governing the cellular dynamics and neuronal regeneration of this organ.

Carlo, Gabriel Gustavo. "Teoría semiclásica de órbitas periódicas cortas" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Este trabajo constituye a nuestro entender un avance sustancial en el desarrollo de una nueva teoría semiclásica, cuyas ideas básicas fueron expuestas recientemente en la referencia (1).La misma se basa en la construcción de funciones de onda asociadas a trayectorias periódicas y provee toda la información cuántica de un sistema Hamiltoniano ligado cuya contraparte clásica es caótica. Una de las principales características de esta teoría consiste en la posibilidad de calcular autovalores y autofunciones de manera muy eficiente, haciendo uso de las órbitas periódicas más cortas solamente. Para calcular autovalores que se correspondan con un tiempo de Heisemberg TH (tiempo necesario para resolverlos) , la fórmula de trazas de Gutzwiller, una teoría muy conocida en Caos Cuántico, requiere de un número de órbitas No.p. del orden de No.p. ~ exp(hTH)/(hTH) donde h es la entropía topológica. Utilizando nuestra teoría este número se reduce a No.p. ~ hTH/ ln(hTH). Hemos efectuado una primera aplicación de la misma al billar estadio de Bunimovich, habiendo obtenido expresiones explícitas y sencillas que nos permitieron calcular las primeras 25 autofunciones de simetría impar-impar, usando unicamente las 5 trayectorias periódicas más cortas. En cálculos posteriores hemos llegado hasta el nivel 73ro. Finalmente, se expone un desarrollo posterior de la teoría que consiste en obtener funciones de onda asociadas a trayectorias individuales altamente localizadas en energía que reproducen el comportamiento de las variedades estables e inestables en el régimen lineal. Las hemos llamado funciones de scar. Esto ha sido muy útil para verificar algunos resultados previos y para mostrar el amplio rango de aplicaciones de esta nueva idea.

Abstract:
To our knowledge, this work is a substantial advance in the development of a new semiclassical theory, whose basic ideas have recently been exposed in reference (1). It is based on the construction of wavefunctions associated to periodic trajectories and provides all quantum information of a bounded Hamiltonian system whose classical counterpart is chaotic. One of the main features of this theory consists of the possibility of calculating eigenvalues and eigenfunctions in a very efficient way making use of the shortest periodic orbits only. In order to calculate eigenvalues corresponding to a Heisemberg time TH (time needed to resolve them), Gutzwiller trace formula, a very well known theory in Quantum Chaos, requires a number of periodic orbits Np.o. of the order Np.o.~ exp(hTH)/(hTH) where h is the topological entropy. Using our theory this number reduces to Np.o. ~ hTH/ ln(hTH). We have made a first application of it to the Bunimovich stadium billiard, having obtained explicit and simple expressions that allowed us to calculate the first 25 odd-odd eigenfunctions, using the 5 shortest periodic trajectories only. In later calculations we have reached up to the 73rd level. Finally, it is exposed a later development of the theory that consists of obtaining wavefunctions associated to individual trajectories highly localized in energy that reproduce the stable and unstable manifolds behaviour in the linear regime. We have called them scar functions. This has been very useful in order to verify some previous results and to show the wide range of applications of this new idea.

Cadenas, María Belén. "Mecanismos de señalización inducidos por el factor de crecimiento y transformación Beta 1 (TGF beta sub 1), en fibroblastos de ratón Swiss 3T3" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La superfamilia del TGFβ está formada por polipéptidos que regulan diferencialmente la división celular, en mamíferos. Dependiendo del tipo celular, el TGFβ1 puede inhibir, promover o potenciar la división celular. En monocapas confluentes y aquietadas de la línea celular Swiss 3T3, el TGFβ1 (O,5—2 ng/ml) no induce, ni inhibe la proliferación celular. Sin embargo, este factor es capaz de potenciar la proliferación inducida por la PGF2α (300 ng/ml) . De las señales activadas por la PGF2α, se buscó cúales eran las más importantes en la sinergia con el TGFβ1. Se comenzó estudiando la quinasa C (PKC), a través de la retromodulación con 12-tetradecanoilforbol l3-acetato (TPA, 800 nM, 96 hs.), o Briostatina l (lOO nM, 96 hs.). En la condición de retro-modulación de la PKC, se observó que el TGFβ1 (1,0 ng/ml) era capaz de inducir la proliferación celular (50 % de células en fase S, después de 28 hs. de estimulación, y 50 % de aumento en el número de células, después de 48 hs. de estimulación), siendo ésta dependiente, tanto de la concentración del factor, como de la concentración de los compuestos que retro-modulan la PKC. En las células pretratadas con TPA, la fase G1 tiene unas 6 a 7 horas más, que en las células sin pretratar. En la primer condición, el TGFβ1 induce la expresión de la ciclina D1, y en correlación a la mayor duración de la fase G1, ocurre horas más tarde después de la estimulación (lO-12 hs.), comparado con las células sin pretratar, estimuladas con PGF2α (6-9 hs.) . Fue interesante observar, que la PGF2α, induce la expresión de la ciclina Dl, en células pretratadas con TPA, aún cuando en esta condición no es mitogénica, y a pesar que la CDK4 se halle presente. Este resultado lleva a plantear que la expresión de la ciclina Dl, no necesariamente indica que la célula se dividirá, y además que es independiente de la PKC. Con el uso del anticuerpo monoclonal anti PKCα , se observó que esta enzima está ausente en el momento de agregado el TGFβ1, en células pretratadas con TPA. La inhibición directa de la PKC con el inhibidor específico GF 109203X (1O μM), agregado una hora antes a células sin pretratar, no fue suficiente para permitir que el TGFβ1 indujera la mitogénesis. El GF es capaz de inhibir parcialmente la sinergia entre el TGFβ1 y la PGF2α, mientras que inhibe totalmente la sinergia entre el TGFβ1 y el OAG, en células sin pretratar. Es decir que la PKC no es suficiente, pero sí necesaria en la primer sinergia, y sí muy importante en la última. El agregado de GF por períodos prolongados, no logra retro-modular la PKC. Los receptores del TGFβ1, detectados con el uso de anticuerpos, están presentes en ambas condiciones, y la medición del transporte de glucosa, inducido por este factor, pone en evidencia que la actividad de los mismos, no se ve alterada por el pretratamiento con TPA. El agregado de ácido okadaico (5 nM), junto al TGFβ1, en células sin pretratar, induce la síntesis de ADN (lO % de células en fase S), indicando la presencia de fosfatasas de ser/thr, pero no sería el único impedimento, por el cual el TGFβ1 no es mitogénico en las células Swiss 3T3. En el estudio de las sinergias del TGFβ1 con insulina y PGE1, se observó que, en células pretratadas con TPA, PGE1 no induce la proliferación, ni potencia la inducción de esta última por el TGFβ1 solo o agregado con insulina. De estos resultados se concluye, que la PKC es necesaria para que la PGE1 potencie la sinergia entre el TGFβ1 más insulina. La falta de potenciación entre el TGFβ1 y la PGE1, podría indicar un camino de señalización en común. Inhibiendo la PKA con PKI, péptido inhibidor (l nM), y también con el uso del inhibidor H-89 (l nM), se encontró que la inhibición de esta enzima no altera la inducción de la proliferación por el TGFβ1, en células pretratadas con TPA. Con el uso del inhibidor genisteina (10 μM), se observó que las quinasas de tirosina están involucradas en la sinergia del TGFβ1 y la PGF2α, en ambas condiciones, y en la inducción de la proliferación por el TGFβ1, en células pretratadas con TPA. El uso de lovastatina (80 μM) y mevalonato (800 μM), puso en evidencia la importancia relativa de la isoprenilación de proteínas, en la sinergia entre el TGFβ1 y la PGF2α, en ambas condiciones. El TGFβ1 no activa la MAPK (ERK 1/2) en ninguna condición, ni potencia la actividad, ni la presencia de la misma, en la sinergia con la PGF2α. La actividad de esta enzima se midió, a través de la inmunoprecipitación y fosforilación de la mielina básica, y con el anticuerpo anti ERK 1/2, bifosforilado (forma activa). El TGFβ1 induce la translocación de la Smad4 (medida por inmunoflourescencia, con anticuerpo anti Smad4), en ambas condiciones, y ésta no se ve alterada en las sinergias de este factor y la PGF2α. En conclusión, el TGFβ1 induce la proliferación celular en células Swiss 3T3, que han sido pretratadas con compuestos capaces de retro-modular la PKC, es decir, primero activada y luego degradada. La inducción de la ciclina Dl, debe ocurrir por una vía alternativa a ERK l y 2. El pretratamiento con TPA lleva a las células a una fase G0 diferente de la misma fase en la que se encuentran las células confluentes y aquietadas, sin pretratar. El TGFβ1 activa las moléculas señalizantes específicas de su camino de señalización, y éstas deben interaccionar con factores de transcripción u otros compuestos, que surgen por el pretratamiento con TPA, haciendo que la fase G1 sea más larga, tiempo en el cual se sintetizan y/o modifican compuestos necesarios para inducir la proliferación celular.

Abstract:
TGFβ is a superfamily of polypeptides that can differencially regulate mammalian cell division. Depending upon TGFβ1 interaction with various cell types, its action can cause inhibition, promotion, as well as potentiation of cell division. In confluent resting Swiss 3T3 cells, TGFβ1 (0,5-2 ng/ml) neither not induce, nor inhibits cellular proliferation. However, this factor enhances PGF2α (300 ng/ml) proliferative response, in this cell type . Of PGF2α-induced signalling activities, our endeavour was focused in to those involved in the synergy with TGFβ1. The first activity studied was protein kinase C (PKC), through it's “down-modulation” either with the phorbol ester, 12-tetradecanoylphorbol l3-acetate (TPA, 800 nM, 96 hs), or Bryostatin 1 (100 nM, 96 hs). In PKC “down-modulated” cells, TGFβ1 can induce entry in S phase (50 % of cells in S phase, after 28 hs of stimulation, and 50 % more cells, upon 48 hs of stimulation), being dependent upon factor concentration, as well as on PKC-“down-modulating” compounds concentration. In TPA-treated cells, the G1 phase is of 6 to 7 hs more, than cells without treatment. In the first condition, TGFβ1 induced cyclin D1 expression, and in correlation with the G1 phase extension time, this expression occurs hours latter after stimulation (10-12 hs), compared with cells without treatment, stimulated with PGF2α (6-9 hs) . It was interesting to observe that PGF2α induced cyclin D1 expression in TPA-treated cells, eventhough in this condition failed to induce mitogenesis, and even with CDK4 presence. This results implie that cyclin D1 expression, does not necessarily indicate that cells are going to divide, and that such event is independent of PKC activity. Using monoclonal antibody anti PKCα , we reveal that this enzyme is absent upon TGFβ1 addition, in TPA-treated cells. PKC direct inhibition with GF 109203X (10 μM), PKC-specific inhibitor, added 1 hour prior to cells without treatment, was not enough to allow TGFβ1 induce mitogenesis. GF inhibited parcially the synergy between TGFβ1 and PGF2α, and prevent totally the action between TGFβ1 and OAG, in cells without treatment. Thus, PKC is not sufficient, but yet necessary in the first synergy, and important in the last one. GF added for long periods of time, is not capable of down-modulates PKC. TGFβ1 receptors, detected by antibodies, are present in both conditions, and glucose transport measurements, induced by this factor, puts in evidence, that receptor activities are not altered by TPA treatment. Okadaic acid (5 nM) added with TGFβ1, in cells without treatment, induce DNA synthesis (10 % of cells in S phase), indicating the existence of ser/thr phosphatases. However, this would not be the only retrain for TGFβ1 to induce mitogenesis in Swiss 3T3 cells. In the synergies study between TGFβ1, insulin and PGE1, it was observed that in TPA-treated cells, PGE1 neither induce proliferation, nor enhances TGFβ1 action, added without or with insulin. From this findings we conclude that PKC is necessary for PGE1 to enhance the synergy between TGFβ1 and insulin. The lack of synergy between PGE1 and TGFβ1, may indicate that they share common signalling pathways. PKA inhibited using PKI (1 nM), peptide inhibitor, and H-89 (1 nM) inhibitor, reveal that this activity is not involved in TGFβ1-induced proliferation, in TPA-treated cells. The use of inhibitor Genistein (10 μM), enable to show that tirosine kinases activities might be involved in the synergy between TGFβ1 and PGF2α, in both conditions, as well as for the TGFβ1-induced proliferation in TPA-treated cells. Using lovastatin (80 μM) and mevalonate (800 μM), indicated the relative importance of protein isoprenylation in the synergy between TGFβ1 and PGF2α, under both conditions. TGFβ1 did not activate MAPK (ERKl/2) in any condition, nor enhanced it's activity or presence in the synergy between PGF2α. MAPK activity measured by immunoprecipitation and phosphorylation of myelin basic protein, as well as by immunodetection with antibody anti ERK 1/2 biphosphorylated (active form). Thus, this results indicated that MAPK activity was induced only by PGF2α, and was not altered by TGFβ1 addition. Smad4 translocation induced specifically by TGFβ1 (measured by immunofluorescence with antibody anti Smad4), in both conditions, is not altered in the synergy with PGF2α. We conclude that TGFβ1 induces proliferation in Swiss 3T3 cells, whose PKC had been “down-modulated” by specific compounds, thus, first activated and then degraded. Cyclin D1 induction by TGFβ1 may occurs via an alternative mechanisms to ERK 1/2 action. TPA treatment leave the cells in a different G0 state, compared with the same state in which confluent and resting Swiss 3T3 cells are. TGFβ1 activated its specific signalling molecules, and this ones may interact with transncription factors or other compounds, which appeared by TPA treatment, thus lengthening G1 phase duration, required for the synthetisis and/or modification of compounds necessaries to induce cellular multiplication.

Buscaglia, Carlos Andrés. "Análisis funcional del antígeno repetitivo presente en la trans-sialidasa de Trypanosoma cruzi" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El protozoario Trypanosoma cruzi, agente etiológico de la enfermedad de Chagas, expresa en su superficie moléculas con actividad trans-sialidasa. Esta actividad novedosa constituye la única vía de captación de residuos de ácido siálico en el parásito. La adquisición de estos azúcares en glicoconjugados aceptores de superficie es indispensable para el reconocimiento y/o la infección de células de mamífero. La trans-sialidasa presente en el estadío infectivo de T cruzi tiene una estructura quimérica, compuesta por una región responsable de la actividad catalítica y un dominio repetitivo altamente inmunogénico (SAPA). Esta proteína es también secretada espontáneamente a sangre del hospedador mamífero con propósitos inciertos. En el transcurso de la presente Tesis, hemos realizado un análisis funcional del antígeno SAPA. Más precisamente, hemos evaluado el rol que podría estar cumpliendo este dominio en la interacción de la trans-sialidasa con el sistema inmune y en la biodisponibilidad de la molécula secretada. Con este propósito, generamos y expresamos en bacterias distintas trans-sialidasas recombinantes conteniendo o no al dominio SAPA. Las mismas fueron administradas en ratones siguiendo distintos protocolos de inmunización a fin de analizar el curso de la respuesta inmune humoral contra uno y otro dominio. Por otro lado, realizamos un análisis farmacocinético de las distintas enzimas purificadas. De tal manera, demostramos que la presencia del dominio SAPA cumpliría un rol dual durante la infección; en un primer momento, estabilizando la actividad trans-sialidasa en sangre, lo cual podría estar asociado al mecanismo de infección y/o a las alteraciones del sistema inmune que se verifican durante la fase aguda de la enfermedad. En etapas más tardías, la presencia del dominio SAPA induce la formación de anticuerpos capaces de neutralizar la actividad trans-sialidasa. La respuesta inmune inicial dirigida contra el dominio SAPA y/o la estabilización en sangre de la molécula secretada en su conformación nativa podrían estar mediando la difusión de la respuesta humoral hacia epitopes presentes en la región catalítica. De hecho, también demostramos que los anticuerpos inhibitorios de trans-sialidasa están dirigidos contra epitope/s discontinuo/s en la secuencia primaria de la enzima. Estos resultados son coincidentes con los datos clínicos, en los que se observa una fase inicial de la infección en la que puede llegar a detectarse actividad trans-sialidasa en circulación (asociado a altos niveles de parasitemia) y una fase tardía caracterizada por la presencia de anticuerpos inhibitorios de dicha actividad (asociado a bajas o nulas parasitemias). La inducción de anticuerpos inhibitorios mediada por SAPA contradice el rol inmunodistractor propuesto para este antígeno repetitivo, y sugiere un mecanismo seleccionado en la interacción parásito-hospedador para el establecimiento de una infección crónica. La estabilización de la actividad trans-sialidasa en sangre requiere de un número mínimo de unidades repetitivas y no depende de las secuencias no repetitivas presentes en el antígeno SAPA. El mecanismo molecular por el cual estas repeticiones aumentan la vida media de la transsialidasa en circulación no ha podido ser dilucidado, aunque no está mediado por una mayor resistencia a la degradación por proteasas séricas ni por unión de estas repeticiones a alguna proteína endógena. De manera interesante, el dominio SAPA es también capaz de estabilizar la conformación nativa de otra proteína en sangre, en absoluto relacionada a la trans-sialidasa, por lo cual se sugiere una posible aplicación biotecnológica.

Abstract:
The protozoan Trypanosoma cruzi, the etiologic agent of Chagas' disease, expresses trans-sialidase molecules on its surface. The acquisition of sialic acid residues in T. cruzi could only be accomplished by virtue of this novel enzymatic activity. The sialylation of surface glycoconjugates is required in order to interact with and/or to infect mammalian cells. The trans-sialidase displayed by the infective form of the parasite resembles a naturally occurring chimera, made up of a catalytic region and a highly immunogenic, repetitive domain (SAPA). This protein is also spontaneously shed into the bloodstream of the mammalian host with unknown purposes. In the course of the present PhD work, we have performed a functional analysis of the antigen SAPA. In this respect, we have evaluated the possible role of this repetitive domain on the interaction between trans-sialidase and the immune system and on the bioavailability of the secreted molecule. For this purpose, we have constructed and expressed in bacteria different recombinant transsialidases, either containing or lacking the repetitive extension. These enzymes were used to perform different immunization protocols in mice in order to analyze the humoral immune response against each region. On the other hand, we have analyzed the pharmacokinetics of the purified trans-sialidases. We demonstrate that SAPA have a dual effect, first stabilizing the enzymatic activity in blood, which might be related to the infectious process and/or the modulation of the immune system. On a second step, the presence of SAPArepeats in cis promotes the generation of antibodies able to neutralize the trans-sialidase activity. The early immune reSponse against SAPA and/or the stabilization in blood of the enzyme on its native conformation might be involved in the spreading of the humoral response towards epitopes present on the catalytic region. In fact, we also demonstrate that antibodies able to inhibit trans-sialidase activity recognize discontinuous epitope(s) within the enzymatic region. These results are similar to those obtained in vivo during the course of infection. After an initial phase characterized by trans-sialidase activity in blood (and high levels of parasitemia) circulating antibodies able to inhibit trans-sialidase could be detected. The appearance of these antibodies correlate with the establishment of an indeterrninate phase where parasites are barely detected in blood. At variance with present views, SAPA does not act as an immunodistractor but instead promote the generation of inhibitory antibodies. This mechanism could have been selected for in the parasite-host interaction to modulate the infection. The stabilization of trans-sialidase activity in blood depends on a minimum number of repetitive units and not on non-repetitive sequences present in SAPA. The molecular basis of this stabilization are not yet understood. Even though, SAPA repeats do not protect the catalytic domain against serum proteases neither mediate the binding to an endogenous molecule. Interestingly, SAPA repeats also increases the half-life in blood of a protein unrelated to trans-sialidase. Thus, its biotechnological potential could be envisaged.

Braberman, Víctor Adrián. "Modelando y verificando diseños de sistemas de tiempo real" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Abstract:
Real-time systems are found in an increasing variety of application fields. Usually, they are embedded systems controlling devices that may risk lives or damage properties: they are safety critical systems. Hard Real-Time requirements (late means wrong) make the development of such kind of systems a formidable and daunting task. The need to predict temporal behavior of critical real-time systems has encouraged the development of an useful collection of models, results and tools for analyzing schedulability of applications (e.g., ). However, there is no general analytical support for verifying other kind of high level timing requirements on complex software architectures. On the other hand, the verification of specifications and designs of real-time systems has been considered an interesting application field for automatic analysis techniques such as model-checking. Unfortunately, there is a natural trade-off between sophistication of supported features and the practicality of formal analysis. To cope with the challenges of formal analysis real-time system designs we focus on three aspects that, we believe, are fundamental to get practical tools: model-generation, modelreduction and model-checking. Then, firstly, we extend our ideas presented in and develop an automatic approach to model and verify designs of real-time systems for complex timing requirements based on scheduling theory and timed automata theory (a wellknown and studied formalism to model and verify timed systems). That is, to enhance practicality of formal analysis, we focus our analysis on designs adhering to Fixed-Priority scheduling. In essence, we exploit known scheduling theory to automatically derive simple and compositional formal models. To the best of our knowledge, this is the first proposal to integrate scheduling theory into the framework of automatic formal verification. To model such systems, we present I/O Timed Components, a notion and discipline to build non-blocking live timed systems. I/O Timed Components, which are build on top of Timed Automata, provide other important methodological advantages like influence detection or compositional reasoning. Secondly, we provide a battery of automatic and rather generic abstraction techniques that, given a requirement to be analyzed, reduces the model while preserving the relevant behaviors to check it. Thus, we do not feed the verification tools with the whole model as previous formal approaches. To provide arguments about the correctness of those abstractions, we present a notion of Continuous Observational Bismulation that is weaker than strong timed bisimulation yet preserving many well-known logics for timed systems like TCTL . Finally, since we choose timed automata as formal kernel, we adapt and apply their deeply studied and developed analysis theory, as well as their practical tools. Moreover, we also describe from scratch an algorithm to model-check duration properties, a feature that is not addressed by available tools. That algorithm extends the one presented in .

Bottini, María Cecilia J.. "Estudios multidisciplinarios en las especies Patagónicas Argentinas del género Berberis L. (Berberidaceae)" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La familia Berberidaceae está integrada por 14 géneros que habitan Norteamérica. Sudamérica, Europa, Asia y Norte de Africa, de los cuales sólo Berberis extiende su distribución al Hemisferio Sur. El género Berberis esta representado en la Patagonia Argentina por 16 especies. Algunas de ellas presentan: delimitación morfológica inequívoca que pueden o no hibridar en zonas ecotonales y/o marginales sin perder su identidad; adaptación a ambientes muy contrastantes (rangos de precipitación, tipos de suelos. etc); distribución muy restringida a condiciones ambientales especificas; características de habitat similares a pesar de presentar un amplio rango de distribución. Se realizaron estudios multidisciplinarios con la finalidad de caracterizar y delimitar los taxa que componen al género y analizar los mecanismos de especiación del grupo con especial referencia a la "Especiación Hibrida Homoploide y Poliploide". A partir de diferentes metodologías (morfología, citogenetica, proteinas seminales, isoenzimas, AFLP e ITS) se analizaron numerosas poblaciones de las siguientes especies: B. bidentata, B. buxifolia, B. cabrerae, B. chillanensis, B. comberi, B. copahuensis, B. darwinii, B. empetrifolia, B. heterophylla, B. ilicifolia, B. linearifolia, B. michay, B. montana, B. parodii y B. serrato-dentata. Los principales resultados obtenidos a partir de las diferentes técnicas sugieren que: En Berberis se encontró que el contenido de ADN está fuertemente asociado con un conjunto de variables ambientales y ecológicas, apoyando la hipótesis del "nucleotipo". B. bidentata, B. darwinii y B. linearifolia conformarían un Complejo Hibrido Homogámico. B. buxifolia, B. heterophylla y B. parodii constituirian un Complejo Híbrido Poliploide. El proceso de especiación de B. montana, B. chillanensis y B. cabrerae no estaría completo y estas tres entidades podrian tratarse de semiespecies.

Abstract:
The Berberidaceae are a family of about 14 genera, widespread in Northern Hemisphere and with a single genus, Berberis, extending into South America. In the Argentinian Patagonian region there are 16 species of Berberis. Some of them present: sharp morphological discontinuities, although there are intermediate forms among some of the species indicating the probable ocurrence of hybridization; adaptation to very different habits (rainfall range. soil types, etc); restricted geographic range to specific environmental conditions; widespread distribution maintaing similar type of habit. Multidisciplinary studies were made wiht the aim to analyze the boundaries among the taxa of the genus. Moreover there studies could help to delimitate the mechanism of speciation of there taxa, with special enphasis in "Homoploid and Polyployd Hybrid Speciation". Morphological, cytogenetical, seed proteins and isozymes electrophoresis, AFLP and ITS studies were done to analize the relationships among several populations of: B. bidentata, B. buxifolia, B. cabrerae, B. chillanensis, B. comberi, B. copahuensis, B. darwinii, B. empetrifolia, B. heterophylla, B. ilicifolia, B. linearifolia, B. michay, B. montana, B. parodii and B. serratodentata. The principal conclusions suggest that: Berberis' DNA content is strongly associated with geographical and ecological variables, this data would support the nucleotype hypotesis. B. bidentata, B. darwinii and B. Linearifolia would constitute an Homogamic Hybrid Complex. B. buxifolia, B. heterophylla and B. parodii would conform a Polyployd Hybrid Complex. The speciation process of B. montana, B. chillanensis and B. cabrerae would not be complete being considered as semispecies.

Bertello, Laura Elena. "Inositolfoslípidos libres y como anclas de glicoproteínas en Trypanosoma cruzi : estructura y biosíntesis" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo se presenta un análisis detallado de los inositolfosfolípidos (IPLs) de células epimastigotes de T. cruzi y de la variación de lípidos libres durante el proceso de diferenciación celular de trypomastigotes a amastigotes y a epimastigotes. Los IPLs están formados por dos componentes que se caracterizaron como fosfatidilinositol (PI) e inositolfosfoceramida (IPC). El PI está constituido por diacilglicerol y 1-0-alquil-2-acilglicerol y la IPC por N-palmitoildihidroesfingosina, N-palmitoilesfingosina, N-estearoildihidroesfingosina y N-estearoilesfingosina. Testigos de alquilacilgliceroles, no disponibles comercialmente, fueron sintetizados por dos métodos, uno enzimático y otro químico. Durante la diferenciación de trypomastigotes a amastigotes hay un aumento de la ceramida libre, principalmente palmitoildihidroesfingosina, que coincide con la liberación progresiva de la glicoproteína Ssp-4, antígeno de superficie específico de células amastigotes, que se encuentra anclado por GPI. La porción lipídica del ancla de esta glicoproteína se identificó como la palmitoildihidroesfingosina; lo que abre la posibilidad de que la ceramida juegue algún rol en la diferenciación celular. Se determinó la presencia en membranas de T. cruzi de fosfolipasas A1, A2, C y de aciltransferasas. También se estudió el primer paso de la biosíntesis de las anclas GPI, es decir, la incorporación de GlcNH2 a partir de UDP-GlcNAc y se descartó a la IPC como aceptora de GlcNH2 para la formación de anclas con ceramida. Este resultado indicaría que las fosfolipasas identificadas estarían involucradas en procesos de remodelación de los lípidos de los GIPLs que son utilizados para la construcción de anclas GPI. Este trabajo contribuye al conocimiento de las estructuras y del camino biosíntético de los GPI de T. cruzi que anclan, a la membrana, glicoproteínas involucradas en procesos de diferenciación, reconocimiento y penetración celular. La inhibición del anclaje de estas glicoproteínas a la membrana constituye una alternativa atractiva como quimioterapia contra la enfermedad de Chagas.

Abstract:
A detailed analysis of inositolphospholipids (IPLs) from epimastigote cells of T. cruzi, and the regulated expression of free lipids during the cellular differentiation process from trypomastigotes to amastigotes and epimastiogtes is presented. The IPLs are formed by two components that were characterized as phosphatidylinositol (PI) and inositolphosphoceramide (IPC). The PI has a diacylglycerol and an l-O-alkyl-2-acylglycerol, and the IPC is constituted by N-palmitoyldihydrosphingosine, Npalmitoylsphingosine, N-stearoyldihydrosphingosine and N-stearoylsphingosine as the lipid moiety. The alkylacylglycerols needed as standards were synthesized by two different chemical and enzymatic methods. During the differentiation of trypomastigotes to amastigotes, there is an increase of free ceramides, mainly palmitoyldihydrosphingosine. This is coincident with the progressive shedding of the Ssp-4 glycoprotein, a surface antigen specific of amastigote cells, that is anchored through GPI. The lipid moiety of this glycoprotein anchor was identified as palmitoyldihydrosphingosine, which suggests that ceramide plays a role in cellular differentiation. The presence of phospholipases Al, A2,C and acyltransferases in T. cruzi membranes was ascertained. The two latter activities were also proved on IPC. The incorporation of GlcNH2 from UDP--GlcNAc, the first step of the GPI anchor biosynthesis, was also studied. The possibility of IPC acting as acceptor of GlcNH2 to form anchors with ceramides was disproved suggesting that the identified phospholipases may be involved in the process of remodelling GIPLs used in the formation of GPI anchors. This thesis contributes to the knowledge of structures and biosynthetic pathways of T. cruzi GPIs that anchor membrane glycoproteins involved in cellular differentiation, recognition and penetration processes. Inhibition of the anchoring to membranes, is an atractive alternative in Chagas disease chemoterapy.

Bais, Carlos E.. "El receptor acoplado a proteína G del herpes virus asociado al sarcoma de Kaposi (Kaposi’s Sarcoma associated herpevirus o KSHV) es una oncoproteína viral y un activador angiogénico" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Abstract:
The Kaposi's Sarcoma-associated herpesvirus (KSHV-HHV-8)is a γ-2 herpesvirus that is implicated in the pathogenesis of Kaposi's sarcoma and of primary effusion B-cell lymphomas (PELs), it encode putative oncogenes, and genes that may cause Kaposi's sarcoma lesions by stimulating angiogenesis. The G-protein-coupled receptor encoded by an open reading frame (ORF 74) of KSHV is expressed in Kaposi's Sarcoma lesions and in PELs, and stimulates signaling pathways linked to cell proliferation in a constitutive (agonist-independent) way. Here we show that signaling by this G-Protein Coupled Receptor leads to cell transformation an tumorigenicity, and induces a switch to an angiogenic phenotype mediated by vascular endothelial growth factor (VEGF), an angiogenesis and Kaposi's-spindle cell growth factor. We find that this receptor can activate ( in HEK293T) two protein kinases, JNK/SAPK and p38MAPK, by triggering signaling cascades like the ones induced by inflammatory cytokines that are angiogenic activators and mitogens for Kaposi's sarcoma-cells and B cells. Although this is a suggestive result, when we express KSHV-GPCR in different cell types it activate different signaling cascades, and induces different phenotypes. Using pathway specific dominant negatives and pharmacological inhibitors we show that, in the cell line NIH3T3, the activation of JNK and p38 play a major rol in the molecular mechanism of KSHV-GPCR induced cell transformation. Endothelial cells play a central rol in kaposi's sarcoma pathogenesis. KSHV infects endothelial cells and spindle-like cells, of suspected endothelial origin, wich are present in the kaposi's sarcoma lesions. Therefore, in the context of viral infection, KSHV-GPCR is expressed in endothelial cells. As the expression of KSHV-GPCR has different biological and biochemical effects in different cell types we decide to study the consecuences of KSHV-GPCR expression in human primary endothelial cells. KSHV-GPCR expression in endothelial cells induce strong morphologic changes, modifications in the citoskeleton structure, secretion of metaloproteases and resistence to serum starvation mediated by activation of the PI3K/AKT pathway's. All those changes are reminiscent of the transformed phenotype. Usually, the expression of transforming oncogenes in primary cells induces shortage of telomeres, premature senescence, and cell death. In sharp contrast the expression of KSHV-GPCR in primary endothelial human cells stabilize telomere length, by an alternative mechanism independent of telomerase activity (Alternative Lengthening of Telomeres or ALT ), and inmortalize endothelial cells. To our knowledge this is the first demostration that a protein encoded by KSHV is able to inmortailize primary human cells. Thus using a KSHV oncogenic protein we created a new inmortilized endothelial cell line that we call Ecs-KSGPCR. As predicted by the multistep carcinogenesis hypotesis, our preliminary experiments suggest that the mechanisms of Terminal Proliferation Arrest (TPA) are not completelly supressed by KSHV-GPCR and that additional oncogenic events are necessary in order to fully transform human primary endothelial cells. Further research will determine wether other KSHV's oncogenes can cooperate oncogenicaly with KSHV-GPCR. KDR/VEGFR-2 and Tie-2 are endothelial specific tyrosine kinase receptors that play key roles in vascular biology. These two receptors regulate cell survival and proliferation of endothelial cells during angiogenesis, as a consequence of this they appear to be minimally expressed in quiescent endothelium in vivo, and they are down regulated after a few passages, in vitro, of primary endothelial cells. Surprisingly KDR and Tie-2 are overexpressed in long term cultures of Ecs-KSGPCR. Altough in this work we show that the sustained expression of those receptors is functional, further experiments are required to determine if they play any rol in the inmortalization process. We conclude that KSHV-GPCR is a viral oncogene that can exploit cell signaling pathways to induce oncogenesis and angiogenesis in KSHV-mediated oncogenesis.

Armentano, María Gabriela. "Estimaciones de Error para aproximaciones obtenidas usando cuadrados mínimos con peso variable" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo de esta tesis es obtener estimaciones de error en RN para aproximaciones obtenidas usando cuadrados mínimos con peso variable. Probaremos que, bajo hipótesis apropiadas sobre la función de peso y la distribuución de puntos, se tienen estimaciones de error de orden óptimo en L∞ y L² para la aproximación de la función y sus derivadas. Estas estimaciones son importantes en el análisis de aproximaciones de Galerkin basadas en cuadrados minimos con peso variable. En particular, los resultados proveen estimaciones de error, óptimas en orden y regularidad, para problemas coercivos de segundo orden. También, nuestras estimaciones de error proveen la consistencia de los esquemas que resultan cuando el método es usado para generar fórmulas de diferencias finitas o colocación a partir de un conjunto arbitrario de puntos. Además, se introduce el método de cuadrados mínimos continuos y se obtienen también estimaciones de error de orden óptimo para este método. Finalmente, como ejemplo de aplicación de estos métodos se considera la ecuación de convección-difiusión y se propone una manera de introducir up-wind mediante el uso de una función de peso no simétrica. Se presentan varios ejemplos numéricos que muestran el buen comportamiento del método.

Abstract:
The aim of this thesis is to obtain error estimates for moving least square approximations in RN. We prove that, under appropriate hypotheses on the weight function and the distribution of points, the method produces optimal order error estimates in L∞ and L² for the approximations of the function and its derivatives. These estimates are important in the analysis of Galerkin approximations based on the moving least square method. In particular, the results provides error estimates, optimal in order and regularity, for second order coercive problems. Also, our estimates allows to control the consistency error of finite difference or collocation methods obtained from an arbitrary set of points by the moving least square method. Moreover, we introduce the continuous moving least square method and obtain the error estimates for this method too. Finally, as an application of these methods we consider a convection-diffusion equation and propose a way of introducing up-wind by means of a non-symmetric weight function. We present several numerical results showing the good behavior of the method.

Calvar, Jorge Andrés. "Espectroscopía in vivo por resonancia magnética : Capacidad de un resonador clínico de 1.5 Teslas de estimar grado de malignidad de tumores por espectroscopía" (2000-03). Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El presente trabajo analiza la posibilidad de establecer una relación entre los espectros de hidrógeno de resonancia magnética nuclear de tumores cerebrales obtenidos de un resonador clínico de 1.5 Teslas y el grado de malignidad de estos tumores. Los espectros de resonancia magnética nuclear (RMS) en cerebro son espectros que permiten identificar una serie de sustancias, de un volumen particular de cerebro, que caracterizan a este tejido. Las sustancias más fáciles de detectar y cuantificar por su buena señal respecto del ruido de fondo son lípidos (Lip), lactato (Lac), Nacetilespartato (NAA), creatina/fosforocreatina (Cr), colina (Co) y mioinositol (Mio). La concentración de estas sustancias en el tejido se refleja en el área debajo de cada pico. Cada una de estas sustancias tiene una función en el metabolismo cerebral y sus variaciones permiten estimar ciertas patologías y enfermedades. La utilidad de la RMS se basa en ofrecer una nueva herramienta de análisis diagnóstico, complementaria a las imágenes de resonancia magnética. Esto es así ya que a partir de las variaciones (respecto de valores normales) de las áreas de los picos de estas sustancias en un espectro, se puede confirmar ciertas patologías vistas en las imágenes. Es por esto que la RMS a tomado un papel de suma importancia en los centros de diagnóstico de imágenes del mundo que cuentan con un resonador magnético. En particular, desde hace muy pocos años se ha visto a la RMS como un medio preciso, rápido y no invasivo de poder caracterizar ciertos tumores cerebrales por su grado de malignidad y hasta por tipo de tumor. La reproducibilidad de esta técnica también le permite hacer el seguimiento del tumor para evaluar la respuesta al tratamiento y su evolución. En esta línea se centra este trabajo; ver si un equipo resonador de 1.5 Teslas permite, a pesar del pobre procesamiento de los datos, puede diferenciar distintos tipos de tumores. Este resonador es parte del instrumental de diagnóstico del centro de imágenes de FLENI (Fundación Lucha Enfermedades Neurológicas Infantiles), una institución médica especializada en cerebro de la Capital Federal, Argentina. Para eso se analizaron 9 pacientes con distintos tipos de tumores cerebrales a los cuales se les había realizado espectros de los tumores previo a ser operados o biopsiados. Los cocientes de las áreas de los picos más importantes de espectros (NAA/Co, NAA/Cr, NAA/Cr+Co y NAA/Mio) se compararon con los resultados anátomo patológicos que se realizaron del tejido obtenido de la cirugía. El objetivo era ver si existía algún tipo de correlación entre estos datos. De este modo se pudo determinar en nuestro caso, aun con la limitación dada por el equipo al no dejar procesar las señales fuera del resonador, los espectros permitieron diferenciar tumores de bajo grado (benignos) y tumores de alto grado (malignos) de un modo tal que solo existió solapamiento de valores en el cociente NAA/Cr entre tumor de bajo grado y normal. Con el resto de los cocientes se verificó que no hay solapamiento en los cocientes de los dos tipos de grados de tumores analizados y de ellos con los normales. Y si bien la cantidad de pacientes evaluados no es buena, los resultados hallados claramente muestran que aun sin mucho análisis de señal, la RMS puede diferenciar grandes grupos (alto y bajo grado) de tumores. Por último, dado los resultados de esta investigación, considerado de tipo preliminar, FLENI a decidió ampliar este trabajo para contrastar la información de estos espectros médicos con espectros de mayor campo a partir de preparados de tejido tumoral, junto con el seguimiento (espectros e imágenes de RM y SPECT) de los pacientes para evaluar la evolución del tumor al tratamiento.

http://digital.bl.fcen.uba.ar

Biblioteca Central Dr. Luis Federico Leloir - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales - Universidad de Buenos Aires
Intendente Güiraldes 2160 - Ciudad Universitaria - Pabellón II - C1428EGA - Tel. (54 11) 4789-9293 int 34