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Tesis > TÍTULO

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"GABA y receptores GABA B en el eje reproductivo: su relación con GnRH y kisspeptinas" (2013). Di Giorgio, Noelia Paula. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Kisspeptina, GnRH y GABA juegan un papel fundamental en la regulación del eje gonadotrófico, si bien la interacción entre ellos está poco caracterizada. Estudios previos en ratones carentes del RGABAB funcional (GABAB1KO) sugerían alteraciones reproductivas, principalmente en la hembra. Nuestra hipótesis fue que GABA, a través de sus RGABAB, interviene en la regulación de la reproducción impactando sobre los sistemas GnRH/kisspeptina en el cerebro, durante el desarrollo y en la adultez. Demostramos por primera vez la co‐localización del RGABAB1 en neuronas Kiss1 del AVPV/PeN y ARC. La falta de un RGABAB funcional impacta diferencialmente según la edad evaluada. En ratones de 4 días de edad los cambios se observan en el hipotálamo medio basal, mientras que en ratones adultos aparecen en el hipotálamo anterior. Sin embargo, no se deberían a alteraciones hipotalámicas de Kiss1 ni a los niveles de esteroides circulantes. Además, los ratones GABAB1KO adultos presentaron un aumento drástico de Kiss1 en áreas extra hipotalámicas (MeA, BNST y Septum) relacionadas con la reproducción y la conducta sexual. En conclusión, GABA, a través de sus RGABAB, interactuaría con GnRH y kisspeptina en la regulación del eje gonadotrófico de manera diferencial durante el desarrollo y entre los sexos, alterando la reproducción.

Abstract:
Kisspeptin, GnRH and GABA play an important role in the control of the gonadotrophic axis, although the interaction between them is not well known. Previous studies in mice which lack of functional GABAB receptors (GABAB1KO) point to reproductive alterations, mainly in females. Our hypothesis was that GABA, through GABAB receptors (GABABRs), acts in the regulation of reproduction and impacts on the GnRH/Kisspeptin systems in the brain, along development and in adulthood. We demonstrated for the first time the co-localization of the RGABAB1 subunit in AVPV/PeN and ARC Kiss1 neurons. The lack of functional GABABRs impact differentially according to the stage of life evaluated. While at postnatal day 4 we observed changes in the medial basal hypothalamus, in adulthood we found them in the anterior hypothalamus. However, these changes were not due to alterations in hypothalamic Kiss1 or serum steroid levels. Moreover, adult GABAB1KO mice showed a dramatic increase in Kiss1 expression in extra-hypothalamic areas (MeA, BNST y Septum), which are related to reproduction and sexual behaviour. In conclusion, GABA, through GABABR, interacts with GnRH and kisspeptin in the regulation of the gonadotrophic axis in a different way between sexes and along development. Lack of GABABRs impairs normal reproduction in females.

"Gametas femenina y masculina de Calomys laucha y Calomys musculinus : características, comportamiento y sus interacciones" (1997). Lasserre, Andrea. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo se analizaron las características biológicas de las gametas femenina y masculina de C. musculinus y C. laucha y sus interacciones interespecíficas dentro y fuera del género. Brevemente, los parámetros estudiados (superovulación, activación partenogenética, dinámica de capacitación in vitro del espermatozoide, fecundaciones homólogas interespecíficas) han mostrado para estas especies que: 1- tienen características propias inherentes a su propio género y especie (por ejemplo, ritmo endógeno de LH, activación partenogenética, capacitación in vitro del espermatozoide) por lo cual no pueden ser homologables a los modelos convencionales de roedores de laboratorio sino que constituyen en sí mismos un modelo nuevo para estudios de biología del desarrollo. 2- las células del cúmulo, la zona pelúcida, y/o la membrana plasmática del oocito no constituyen una barrera efectiva a la fecundación heteróloga intragenérica. 3- la diferencia en la morfología espermática entre C. musculinus (con gancho acrosomal) y C. laucha (ausencia total de gancho acrosómico) mostró una relación especie-específica en el proceso de activación 4- las gametas de Calomys mostraron mayor afinidad en la interacción con las gametas de hamster (Cricetidae) que con las gametas de ratón (Muridae). Estas observaciones apoyan la hipótesis de Reig (1982) que sostiene que estas especies pertenecen a la familia Cricetidae.

Abstract:
The present study focused on the characterization of the biological properties of female and male gametes in C. musculinus and C. laucha and the interspecific interactions between them and with other extra-generic rodent species. Briefly, the main parameters analyzed (superovulation, parthenogenetic activation, in vitro capacitation of spermatozoa, interespecies fertilization) showed that: 1- C. musculinus and C. laucha had specific and inherent features related to their genus and species (i.e. endogenous LH rhythm, a high parthenogenetic activation, in vitro capacitation of spermatozoa). They can not be directly related to the typical laboratory rodents. They constitute a new model for developmental biology research. 2- cumulus cells, zona pellucida and plasma membrane of the oocyte are not effective barriers to interspecific fertilization. 3- the differences on sperm head morphology between C. musculinus (hooked head) and C. laucha (hookless head) showed a specific relation to the activation process. 4- Calomys' gametes interacted more easily with golden hamster (Cricetidae) than Mus musculus (Muridae) gametes. This observations support the hypothesis that Calomys species belong in the Cricetidae family, as previously described by Reig (1982).

"Garantías cuantitativas para espacios de estados no tratables" (2015-10-19). Pavese, Esteban. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los lenguajes basados en máquinas de estados finitos (también llamados automátas finitos) son usados de manera ubicua para la especificación de sistemas de software. La formalidad de estos modelos permite la aplicación de técnicas de validación tales como el model checking. De esta manera, pueden responder con seguridad si un sistema cumple o no las propiedades de interés. Al mismo tiempo, estás máquinas pueden ser utilizadas de manera composicional, especificando comportamientos aislados mediante varias máquinas, y estableciendo el comportamiento global mediante su composición en paralelo. Este enfoque reduce el esfuerzo de validación, ya que la validez de las propiedades en el sistema deberían ser dependientes de la validez de las propiedades en cada componente. Sin embargo, este enfoque es amenazado por la complejidad del sistema especificado, dando lugar al problema de la explosión de estados, que puede impedir la aplicación de estas técnicas. En esta tesis presentamos un enfoque que intenta paliar este problema, proveyendo información cuantitativa respecto de la propiedad que se intentó validar sin éxito. Nuestro enfoque se sostiene sobre dos contribuciones distintas, donde cada una de ellas puede, además, ser aplicada en el contexto de problemas relacionados. Esta tesis se inspira en el modelado y model checking probabilísticos, que pueden proveer información cuantitativa respecto de la validez de una propiedad. Esta cuantificación nos sirve de validación parcial en el contexto del problema que nos interesa. Sin embargo, un enfoque composicional tiene sus propios problemas en un contexto probabilístico. Las anotaciones probabilísticas asociadas a eventos independientes precisan ser contrastadas con estimaciones obtenidas de la observación del comportamiento a modelar. Al agregar estas anotaciones, es preciso distinguir las fuentes de estas probabilidades; en otras palabras, las probabilidades de eventos independientes deberían estar asociadas al comportamiento de los componentes que generan este comportamiento. A su vez, es preciso mantener la relación entre la validez de los componentes de manera aislada, y la validez de los comportamientos en el sistema compuesto. Los formalismos disponibles al momento, sin embargo, no proveen la seguridad de que estos resultados de validez sean preservados durante la composición. La primera contribución de esta tesis es, entonces, una extensión probabilística al formalismo de Interface Automata. Esta extensión asegura la preservación de comportamiento tal como es observado por la lógica probabilística pCTL. La segunda parte de esta tesis apunta al análisis de estos modelos, en particular cuando un análisis exhaustivo no es factible, teniendo en cuenta que la complejidad del model checking probabilístico es aún mayor que en el caso clásico. Nuestra hipótesis en este trabajo es que una exploración parcial, pero sistemáticamente controlada, puede proveer cotas a los valores de interés con un costo computacional reducido. Los experimentos realizados sugieren que un análisis mediante este enfoque puede ser más efectivo que tanto el model checking exhaustivo como así también enfoques estadísticos relacionados.

Abstract:
System specifications have long been expressed through automatabased languages, which enable automated validation techniques such as model checking. Automata-based validation has been extensively used in the analysis of systems, where they have been able to provide yes/no answers to queries regarding their temporal properties. Additionally, a compositional approach to construction of software specifications reduces the specification effort, allowing the engineer to focus on specifying individual component behaviour; and then analyse the composite system behaviour. This also reduces the validation effort, since the validity of the composite specification should be dependent on the validity of the components. However, even in a compositional approach, automatic validation techniques usually cannot cope with systems under analysis that grow complex enough. Problems such as state space explosion seriously hamper the applicability of these approaches. In this thesis, we present an approach that can help cope with these absence of results by providing quantitative validation information related to the property being validated, even when the model checking approach is unable to handle the whole system. Our proposed technique stands on two different approaches, with each of them being applicable on its own to related problems. The inspiration is that probabilistic modelling and checking can provide quantitative information, which can in turn serve as partial validation when full checking is infeasible. Compositional construction, however, poses additional challenges in a probabilistic setting. Numerical annotations of probabilistically independent events must be contrasted against estimations or measurements, taking care of not compounding this quantification with exogenous factors, in particular other system components’ behaviour. The validity of compositionally constructed specifications requires that the validated probabilistic behaviour of each component continues to be preserved in the composite system. However, existing probabilistic automata-based formalisms do not support behaviour preservation of non-deterministic and probabilistic components over their composition. The first contribution of this thesis is a probabilistic extension to Interface Automata which preserves pCTL properties. This extension not only supports probabilistic behaviour but also allows for weaker prerequisites to interfacing composition, allowing for specification refinement of internal behaviour. The second part of our approach aims at analysing these probabilistically enriched models, obtaining quantitative information that can be related to the validity of the property under analysis, even when a complete analysis is infeasible. Computational complexity of estimating these metrics can be prohibitive, even more so than classic model checking. Our hypothesis is that a (carefully crafted) partial systematic exploration of a system model can provide better bounds for these quantitative model metrics at lower computation cost than exhaustive exploration. Our technique combines simulation, invariant inference and probabilistic model checking to produce a probabilistically relevant portion of the model, which is then exhaustively analysed. We report on experiments that suggest that metric estimation using this technique (for both fully probabilistic models and those exhibiting non-determinism) can be more effective than (full model) probabilistic and statistical model checking.

"Gases cuánticos confinados en trampas magnéticas múltiples" (2002). Capuzzi, Pablo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
A partir del descubrimiento de la condensación de Bose-Einstein en gases diluidos confinados, a mediados de 1995, una nueva rama de la física comenzó a desarrollarse fuertemente. Dentro de esta área, esta tesis abarca el estudio de las propiedades en equilibrio y de las excitaciones de un gas de átomos confinados y enfriados a temperaturas donde la degeneración cuántica juega un papel fundamental. Motivados por los hallazgos experimentales, se estudiaron sistemas con múltiples componentes bosónicas y fermiónicas. El análisis se enfocó en tres sistemas particulares: bosones en pozos dobles, fermiones puros, y mezclas fermiones-bosones. Dentro de estos temas exploramos, entre otras cosas, la dependencia de las funciones termodinámicas con la geometría de pozo doble, la influencia de la interacción en la temperatura crítica y en las excitaciones, la respuesta lineal de mezclas fermiónicas puras y mezclas bosón-fermión ante perturbaciones multipolares. En todos los casos la formulación de campo medio escogida dio resultados confiables e interesantes a la vez.

Abstract:
Since the discovery of the Bose-Einstein condensation in dilute trapped gases in 1995, a new area in atomic physics began to develop strongly. Within this field, this PhD thesis embraces the study of the stationary properties and excitations of a confined gas which has been cooled down to a temperature where quantum degeneracy sets in. Encouraged by the latest experimental breakthroughs, we studied systems with multiple bosonic and fermionic components. The analysis was focused on three especific systems: bosons in double-well traps, pure confined fermions, and Bose-Fermi mixtures. We explored, within other topics, the dependence of the thermodynamical functions upon the trap geometry, the influence of interparticle interaction on both the critical temperature and the excitations, and the linear response of the gas mixtures against multipolar deformations of the trap. We found that the mean-field formulation yields both reliable and interesting results.

"Generación de células madre pluripotentes inducidas y estudio de la regulación de la expresión del gen Sod2 en células madre pluripotentes" (2015-03-16). Solari, Claudia María. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las células madre embrionarias (CME) son células derivadas del macizo celular interno del blastocisto de mamíferos. Poseen la capacidad de auto-renovarse indefinidamente en cultivo en condiciones apropiadas mientras que, ante los estímulos adecuados, pueden dar origen a células de las tres capas germinales, propiedad conocida como pluripotencia. En la última década ha sido posible reprogramar células terminalmente diferenciadas obteniendo así las denominadas células madre pluripotentes (CMP) inducidas (CMPI), que presentan características similares a las CME, como el perfil de expresión génica, las modificaciones epigenéticas, y sus propiedades fundamentales, auto-renovación y pluripotencia. Por esta razón y dado que además presentan ciertas ventajas, las CMPI son consideradas posibles sustitutos de las CME para diferentes aplicaciones. En el área de la medicina regenerativa, la posibilidad de generar células específicas para grupos de pacientes disminuye el riesgo de rechazo en terapias de trasplante. Por otra parte, a partir de estas células pueden desarrollarse modelos de enfermedades y evaluar fármacos en diferentes contextos genómicos. A pesar del gran avance desde el establecimiento de las CMPI, su obtención y propagación aún es un área de gran interés. Uno de los objetivos de este trabajo de tesis fue desarrollar CMPI, como modelo complementario a las CME para estudiar diversos mecanismos moleculares relevantes para el mantenimiento de las propiedades fundamentales de estas células. Para tal fin, hemos generado CMPI mediante reprogramación de fibroblastos embrionarios de ratón y comprobado que las líneas obtenidas son capaces de auto-renovarse y son pluripotentes, evaluado tanto in vitro como in vivo. Una vez validadas, las utilizamos como sistema de estudio en distintos proyectos. En primer lugar, en base a resultados obtenidos previamente en el laboratorio y a la semejanza de las CMPI con las CME, estudiamos si el medio condicionado por una línea celular de granulosa bovina que permite el cultivo de CME, también proporcionaba un contexto favorable para las CMPI. Mediante la detección de la expresión de marcadores específicos y de protocolos de diferenciación in vitro e in vivo, determinamos que las CMPI pueden ser propagadas en este medio condicionado, conservando sus propiedades fundamentales. En una segunda parte de este trabajo nos centramos en el estudio de la regulación de genes relacionados con uno de los mecanismos que aseguran la estabilidad genómica de las CMP, el sistema de defensa frente al estrés oxidativo. A pesar de que ha sido reportado que la actividad antioxidante disminuye a lo largo de la diferenciación, poco se sabe acerca de la regulación transcripcional de los genes involucrados. Dada la importancia de este sistema, nos propusimos estudiar su regulación a partir de la hipótesis de que algunos de estos genes podrían ser modulados por los factores de transcripción (FT) esenciales para la auto-renovación y la pluripotencia de las CMP. Estudiamos el perfil de expresión de genes seleccionados, tanto en líneas comerciales de CME como en las CMPI obtenidas. Si bien hallamos perfiles de expresión muy variados para la mayoría de los genes analizados, observamos que el gen de la superóxido dismutasa 2 (Sod2) fue reprimido durante el proceso de diferenciación, en todos los modelos estudiados. A continuación estudiamos su regulación mediante la modulación de la expresión de los FT. Además generamos construcciones reporteras y evaluamos la actividad del promotor de Sod2 en ensayos de trans-activación. En conjunto, los resultados obtenidos a partir de las diferentes estrategias experimentales empleadas nos permitieron confirmar nuestra hipótesis, concluyendo que el gen de Sod2 es regulado por los factores fundamentales en CMP. Esperamos que las herramientas generadas y los resultados obtenidos en este trabajo contribuyan a la comprensión de los mecanismos moleculares relevantes en el mantenimiento de las propiedades fundamentales de las CMP, crítico para sus aplicaciones futuras.

Abstract:
Embryonic stem cells (ESC) are derived from the inner cell mass of the blastocyst in mammals. They have the ability to self-renew indefinitely in culture under appropriate conditions whereas, with the appropriate stimuli, they can give rise to cells of all three germ layers, property known as pluripotency. In the last decade, it has been possible to reprogram terminally differentiated cells obtaining the so-called induced pluripotent stem cells (iPSC), which have similar characteristics to the ESC, like the profile of gene expression, epigenetic modifications, and their essential properties, self-renewal and pluripotency. For this reason and since iPSC have some advantages, they are considered as possible substitutes for ESC for several uses. In the area of regenerative medicine, the possibility to generate specific cells for groups of patients decreases the risk of rejection in transplantation therapies. Moreover, disease models can be developed from these cells and drugs can be evaluated in different genomic backgrounds. Despite great progress since the establishment of iPSC, their production and propagation is still an area of great interest. One aim of this thesis was to develop iPSC as a complementary model to ESC for the study of relevant molecular mechanisms for the maintenance of the fundamental properties of these cells. To this end, we generated iPSC by reprogramming mouse embryonic fibroblasts and found that the obtained lines are capable of self-renew and are pluripotent, and this was tested in vitro and in vivo. Once validated, we used them in different projects. First, based on results previously obtained in our laboratory and the similarity of iPSC and ESC, we examined whether the conditioned medium by a bovine granulosa cell line that allows the maintenance of ESC, also provided a favorable context for iPSC culture. We detected the expression of specific markers and performed in vitro and in vivo differentiation protocols, and we determined that iPSC can be propagated in this conditioned medium, while retaining their basic properties. In the second part of this thesis, we focused on the study of gene regulation related to one of the mechanisms that ensure genomic stability of pluripotent stem cells (PSC), the defense system against oxidative stress. Although it has been reported that the antioxidant activity decreases along differentiation, little is known about the transcriptional regulation of the genes involved. Because of the relevance of this system, we decided to study its regulation based on the hypothesis that some of these genes could be modulated by transcription factors (TF) essential for PSC’ self-renewal and pluripotency. We studied the expression profile of selected genes in commercial ESC lines and in the obtained iPSC. Though we found very different expression profiles for most of the analyzed genes, we observed that superoxide dismutase 2 gene (Sod2) was repressed during the differentiation process in all studied systems. Next, we studied its regulation by modulating the expression of the mentioned TF. We also generated reporter constructions and evaluated Sod2 promoter activity in transactivation assays. Overall, the results obtained from the different experimental strategies allowed us to confirm our hypothesis, concluding that Sod2 gene is regulated by the fundamental factors in PSC. We hope that the tools generated and the results obtained in this study contribute to the understanding of the molecular mechanisms relevant for PSC’s fundamental properties, critical for future applications.

"Generación de pulsos ultracortos con acople perfecto de modos por una doble modulación pasiva en láseres sólidos" (1981). Martínez, Oscar Eduardo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Generación y análisis de ratones geneticamente modificados en los genes Chrna9 y Chrna10" (2009). Taranda, Julián. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El receptor colinérgico nicotínico (nAChR) compuesto por la subunidades α9 y α10 y acoplado al canal de potasio dependiente de Ca2+ SK2, media la transmisión sináptica inhibitoria entre la inervación eferente medial (MOC) y las células ciliadas de la cóclea. En este trabajo hemos generado dos animales geneticamente modificados con alteraciones en el funcionamiento del receptor α9α10. Con el objetivo de estudiar el papel del sistema eferente olivococlear en el funcionamiento del oído interno generamos un ratón knock in que alberga una sustitución de una leucina (L) por una treonina (T) en la posición 9’ de la región transmembrana 2 de la subunidad α9 del receptor colinérgico nicotínico. Esta mutación le confiere al receptor una menor tasa de desensibilización y una mayor afinidad aparente para la ACh, la cual se refleja en un marcado aumento de la actividad del sistema eferente olivococlear in vivo. Es así que los animales mutados presentaron un aumento en los umbrales de las respuestas eléctricas evocadas del tronco encefálico (BERA) y en los productos de distorsión de emisiones otoacústicas (PD- EOAs). Más aún, la estimulación eléctrica del sistema eferente en la base del IV ventrículo, produjo un dramático aumento de la supresión de los PD-EOAs. Todos estos efectos fueron bloqueados por estricnina, un bloqueante de receptores α9α10. Finalmente, los animales mutados presentaron una mayor resistencia al trauma producido por sonidos intensos. Estos resultados demuestran que el sistema olivococlear es un sistema inhibitorio que protege al oído del trauma acústico. En la segunda parte del presente trabajo generamos un ratón transgénico que expresa a la subunidad α10 de receptores nicotínicos en forma constitutiva. Las células ciliadas internas (CCIs) de la cóclea reciben una inervación eferente colinérgica antes del comienzo de la audición (P12 en roedores). Luego del comienzo de la audición, estas fibras se retraen, y esto se correlaciona con el cese de la transcripción del gen que codifica para la subunidad α10 (Chrna10) y la ausencia de receptores colinérgicos funcionales. Para evaluar si estos cambios durante el desarrollo se deben en parte al cese de la transcripción de Chrna10, generamos un ratón transgénico que expresa a la subunidad α10 en forma constitutiva. A tal fin, el ADNc que codifica para la subunidad α10 fue introducido rio abajo del promotor del Pou4f3, factor de transcripción que se expresa en las CCIs y CCEs desde estadios embrionarios. Este transgén se expresó correctamente en las CCIs y codificó para una subunidad α10 funcional. Sin embargo, a pesar de la presencia de la subunidad α10, no se detectaron corrientes colinérgicas luego del comienzo de la audición. Por lo tanto, la desaparición de las respuestas colínergicas que acompañan al desarrollo de las CCIs no es consecuencia del cese de la transcripción de Chrna10.

Abstract:
The nicotinic cholinergic receptor (nAChR) composed of the α9 and α10 subunits and functionally coupled to calcium-activated, small conductance (SK2) potassium channels, mediates the inhibitory synaptic transmission between the medial efferent fibers (MOC) and the hair cells of cochlea. In this work we have generated two genetically modified animals with alterations in the function and expression of the α9α10 receptor. To study the function of the olivocochlear efferent system in the inner ear, we generated a knock in mice, which harbors a threonine (T) for leucine (L) substitution at 9’ position (L9’T) of the second transmembrane domain of the α9 subunit. This mutation confers a decreased rate of desensitization and a higher apparent affinity for Ach. This was reflected in increase of the olivocochlear efferent activity in vivo. The knock in mice presented an increase in the thresholds of the auditory brainstem responses (ABR) and the distortion product otoacoustic emissions (DPOAEs). Moreover, the electrical stimulation of the efferent system at the base of the fourth ventricle produced a dramatic increase in the suppression of the DPOAEs. All these effects were blocked by strychnine, a potent antagonist of α9α10. Finally, the knock in mice presented a greater resistance to acoustic trauma produced by intense sounds. These results demonstrate that the olivocochlear system is an inhibitory system that protects the ear from acoustic injury. In the second part of this work we generated a transgenic mouse that constitutively expresses the α10 subunit. Inner hair cells (IHCs) of the cochlea receive cholinergic efferent innervation before the onset of hearing (P12 in rodents). After the onset of hearing, these fibers retract, and this is correlated with the cessation in the transcription of the gene that codes for the α10 subunit (Chrna10). In order to analyze these development changes around the onset of hearing, we generated a transgenic mouse that expresses the α10 subunit constitutively. For this purpose, the cDNA that codes for the α10 subunit was introduced downstream of the Pou4f3 promoter, a transcription factor that is expressed in IHCs and outer hair cells (OHCs) since embryonic stage. This transgene was correctly expressed in the IHCs and encoded a functional α10 subunit. Nevertheless, this manipulation was not sufficient for maintaining a functional cholinergic receptor after the onset hearing. Therefore, the disappearance of cholinergic responses that accompanies the development of IHCs is not a consequence of the cessation in the transcription of Chrna10.

"Generación, caracterización y aplicaciones de pulsos láser ultracortos" (2002). Libertum, Ariel R.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se presenta el diseño y construcción de un láser de Titanio-Zafiro de pulsos ultracortos, sus sistemas de monitoreo y se explican los efectos principales que contribuyen a su funcionamiento pulsado. El láser construido emite pulsos de 50 a 100 fs de duración a una frecuencia de repetición de 90 MHz, con un ancho espectral de entre 20 y 50 nm centrado alrededor de los 800 nm y con una potencia media de 400 mW aproximadamente. Se describe una cavidad láser del Ti:Za modificada que emite pulsos cinco veces más energéticos que la cavidad convencional y a una frecuencia de repetición cinco veces más baja. También se presenta un diseño de un amplificador multipasaje tipo corbata de moño girada para la amplificación de los pulsos de láser de Ti:Za, y se analiza su desempeño a partir de un modelo teórico simple. Se expone el montaje experimental del mismo y se presentan las pruebas realizadas. Asimismo, se detalla la construcción y características de un láser construido para bombear la etapa amplificadora. El mismo consiste en un Nd:YAG, pulsado por la técnica de modulación de perdidas, doblado intracavidad que emite pulsos de 25 ns de duración a 4 kHz y con una potencia media de 160mW a 532 nm. Se explica un método para introducir variaciones rápidas de camino óptico y un sistema óptico para monitorearlo. Como resultado de la implementación experimental, se muestra la generación de retardos del orden de los 100 ps a una frecuencia de 10 Hz. Finalmente se presenta una nueva técnica para la caracterización de pulsos ultracortos en fase y amplitud. La técnica, denominada DGDOM, mide en forma directa el retardo de grupo de las componentes de frecuencia de un pulso ultracorto. DGDOM es demostrado a partir de un desarrollo teórico, es probado a partir de simulaciones numéricas y validado en forma experimental.

Abstract:
The design and construction details of an ultrashort pulse Titanium-Sapphire laser with its monitoring systems is presented and the main effects contributing to its pulsed behavior are described. The built laser emits pulses 50 to 100 fs in duration at a repetition rate of 90 MHz, with a bandwidth of 20 to 50 nm centered around 800 nm and an average output power of 400 mW approximately. A modified Ti:sapphire laser cavity that emits pulses five times as energetic as the standard cavity, at a repetition rate five times lower, is described. A design of the twisted bow tie multipass amplifier for amplifying Ti:sapphire pulses is presented and its performance is analyzed with a simple theoretical model. Its experimental set-up is showed and test results are presented. The construction and characteristics of the laser built for pumping the amplifying stage it is also detailed. The laser is a Q-Switched Nd:YAG intracavity-doubled that emits 25 ns long pulses at 4 kHz and with an average output power of 160mW at 532 nm. A method to produce rapid changes in optical path lengths and a system to monitor it are explained. As a result of experimental implementation, 100 ps of optical delays at a repetition rate of 10 Hz is shown. Finally, a new technique for ultrashort pulse characterization in phase and amplitude is presented. The technique, called DGDOM, directly measures the group delay of the frequency components of an ultrashort pulse. DGDOM is theoretically demonstrated, proved with numerical simulations and experimentally validated.

"Generalización de resonancia estocástica" (2004). Méndez, Jorge Manuel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis se estudian algunos aspectos de la codificación de información en sistemas excitables en entornos ruidosos. Es interesante entender la interacción entre la estructura determinista y la acción del ruido. En particular, se estudia un sistema excitable que bajo la acción del ruido tiene dos tiempos característicos. Se analiza la acción cooperativa entre estas escalas de tiempo inducidas por ruido y la escala de tiempo introducido exteriormente a través de un forzado periódico de una de sus variables. Esto lleva a una generalización del concepto habitual de resonancia estocástica. Además, se estudia la existencia de excitabilidad en dos sistemas láser, focalizando especialmente en el láser de semiconductores realimentado ópticamente. Este sistema presenta caídas en la intensidad que son identificadas como los eventos del sistema excitable (pulsos). Al medir un observable típico de los sistemas excitables, el histograma de tiempos entre eventos, se identificó que el mismo era bimodal. Estos dos tiempos característicos de respuesta pueden ser comprendidos en términos de un modelo dinámico en el entorno de una bifurcación de codimensión dos y puede ser utilizado como sistema experimental para el análisis de las interacciones entre las escalas de tiempo intrínsecas inducidas por ruido y las introducidas externamente.

Abstract:
In this thesis, some aspects of the codification of information of excitable systems in noise environment have been studied. It is interesting to understand the interaction between the deterministic structure and the noise-induced time scales and other externally introduced by a periodic forcing of one of its variables has been analyzed. This has driven to a generalization of the usual concept of the stochastic resonance. Furthermore, the existence of excitability in two laser systems has been explored, with focus on the semiconductor laser with optical feedback. This system has drops in the laser output intensity that can be identified as the events of the excitable system (pulses). Besides, two characteristic times have been identified in the inter-event time histogram, which is typical observable of the excitable systems. These two response times can be understood by means of a dynamical model in the vicinity of a codimension two bifurcation point and it can be used as an experimental system for studdind the interaction between two noise induced characteristic times and other externally introduced.

"Genomica funcional de transportadores de aminoacidos y poliaminas de Trypanosoma cruzi" (2010). Canepa, Gaspar Exequiel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El trabajo en el que se basa esta tesis representa un aporte al conocimiento de nuevos elementos del metabolismo del parásito Trypanosoma cruzi. En particular, describe genes encargados de transportar metabolitos esenciales para este organismo. Pero, más que nada, es un aporte para una futura sistematización en el estudio de moléculas transportadoras. Acerca del organismo estudiado podemos describir al Trypanosoma cruzi como el agente causal de la enfermedad de Chagas, una enfermedad endémica en Argentina y en toda América Latina. Este parásito presenta numerosas características metabólicas diferenciales respecto a sus hospedadores insectos y mamíferos, siendo incapaz de sintetizar numerosos componentes celulares. Sin embargo, esta incapacidad metabólica es compensada mediante sistemas transportadores de múltiples metabolitos desde el hospedador. Luego de la reciente secuenciación del genoma de T.cruzi, se estima que existen al menos 374 genes que codifican para distintos transportadores distribuidos en tres grupos principales: canales iónicos, transportadores dependientes de ATP y transportadores secundarios. En este trabajo se estudio con énfasis a la familia de transportadores de aminoácidos denominada AAAP (Amino Acid Auxin Permease) de T. cruzi (TcAAAP). El estudio bioinformático de esta familia demostró que todos sus miembros poseen diferencias en sus extremos amino terminales pero tienen un alto nivel de identidad en el resto de sus secuencias, llegando hasta el 75% de similitud. Luego de evaluar diferentes estrategias para la correcta expresión heteróloga de estas moléculas, se encontraron exitosas las llevadas a cabos en ovocitos de Xenopus laevis y células de Saccharomyces cerevisiae. El modelo de ovocitos de Xenopus permitió identificar y caracterizar a un transportador con afinidad para la poliamina espermidina, la cual T. cruzi es incapaz de sintetizar de novo. En cuanto al estudio en diferentes modelos de levaduras, se logró expresar funcionalmente tres transportadores específicos para los aminoácidos prolina, arginina y lisina. En el caso de los dos primeros, estos pudieron ser caracterizados desde el punto de vista molecular y relacionados con datos bioquímicos previos, que integran el transporte de estos aminoácidos con el metabolismo energético del parásito. Finalmente, la permeasa de lisina fue extensamente estudiada. Se realizó una caracterización bioquímica del transporte de este aminoácido en epimastigotes en cultivo y se produjeron numerosas construcciones para su manipulación génica. Esta metodología se utilizó para comprobar la actividad y especificidad de la permeasa, además de su localización subcelular en el bolsillo flagelar, donde, probablemente, ocurre el ingreso de diversos metabolitos a la célula a través de transportadores. Por lo tanto y como se mencionó anteriormente, en este trabajo se identificaron y estudiaron por primera vez moléculas involucradas en el transporte de aminoácidos y poliaminas en Trypanosoma cruzi, nutrientes esenciales para la vida de este parásito.

Abstract:
The work in behind this thesis represents a contribution to knowledge of new features of the metabolism of the parasite Trypanosoma cruzi. In particular, it describes genes responsible for transporting essential metabolites for this organism. But more than anything is a contribution for future systematization in the study of carrier molecules. About the studied organism Trypanosoma cruzi, it can be described as the ethiological agent of Chagas disease, endemic in Argentina and throughout Latin America. This parasite has many differential metabolic characteristics with respect to their vector insects and host mammals, being unable to synthesize many cell components. However, this metabolic inability is compensated by multiple conveyor systems of metabolites from the host. Following recent sequenciation of the T. cruzi genome, it is estimated that there are at least 374 different genes that encode transporters distributed in three main groups: ion channels, ATP-dependent and secondary transporters. In this study we focus on the amino acid transporter family called AAAP (Amino Acid Auxin permease) of T. cruzi (TcAAAP). The bioinformatic study of this family showed that all members have differences in their amino terminal but have a high level of identity in the rest of the sequences, reaching 75% of similarity. After evaluating different strategies for the successful heterologous expression of these molecules, we found that the best ones were those carried on Xenopus laevis oocytes and Saccharomyces cerevisiae cells. The model of Xenopus oocytes allowed the identification and characterization of a transporter with affinity for the polyamine spermidine, which T. cruzi is unable to synthesize de novo. Regarding the study on different models of yeast, functional expression was achieved with three transporters specific for the amino acids proline, arginine and lysine. For the first two, they could be characterized molecularly and biochemically, findings that could be related to prior data, which includes the link between transport of these amino acids to energy metabolism of the parasite. Finally, the lysine permease was extensively studied. We performed a biochemical characterization of this amino acid transport in T. cruzi epimastigotes cultures and there were produced numerous constructs in order to manipulate its gene. This methodology was used to test the activity and specificity of the permease, in addition to its subcellular localization in the flagellar pocket, where, presumably, occurs the entry of various metabolites into the cell through transporters. Therefore, and as mentioned above, in this work were identified and first studied, molecules involved in the transport of amino acids and polyamines in Trypanosoma cruzi, nutrients essential for the life of this parasite.

"Genética molecular de hemofilia: caracterización de mutaciones en hemofilia B, expresión de hemofilia en mujeres y desarrollo de nuevos métodos de análisis de inversiones" (2010). Radic, Claudia Pamela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las hemofilias A (HA) y B (HB) son coagulopatías hereditarias, ligadas al cromosoma X (X), sufridas por varones (1:5000) y raramente por mujeres, causada por defectos génicos del factor VIII (F8) y IX (F9), respectivamente. Para caracterizar el espectro de mutaciones causales de HB en Argentina se aplicó un esquema original de 12 amplímeros para el F9, incluyendo un screening por CSGE (conformation sensitive gel electrophoresis), en 49 familias, y se identificaron 29 cambios missense (60%), 7 nonsense (14%), 4 defectos de splicing (8%), 2 pequeñas inserciones‐deleciones (4%), 6 grandes deleciones (12%) y un cambio en región promotora del F9. Dos cambios missense no reportados mostraron, uno la disrupción de un puente disulfuro y otro la destrucción de un sitio de γ‐carboxilación condicionando el fenotipo de HB severa. Para mejorar la estrategia de detección de grandes rearreglos que involucran int22h e int1h en el F8, causales del 50% de las HA severas, se desarrolló un abordaje nuevo, inverse‐shifting‐PCR (IS‐PCR). Mediante el uso de un test diagnóstico para la inversión del intron 22 (Inv22), los resultados de IS‐PCR fueron validados por perfecta concordancia en 32 y 43 casos previamente estudiados por Southern blot y PCR inversa, y en 34 casos nuevos. El uso conjunto del test diagnóstico y complementario sobre las series de nuestra población, no mostró las variantes estructurales, i.e., deleciones y duplicaciones hipotetizadas en la literatura. El test para la inversión del intrón 1 fue validado por perfecta concordancia en 21 casos estudiados por doble PCR y en 13 casos nuevos. Para investigar la utilidad de IS‐PCR en diagnóstico prenatal, muestras de vellosidades coriónicas de una madre portadora de la Inv22 y su feto nonato fueron diagnosticadas. Para estudiar la causa de la expresión de HA severa en mujeres portadoras heterocigotas se ajustó y validó el sistema del gen HUMARA para estimar el patrón de inactivación del X (XIP). Se estudiaron 6 mujeres con HA severa: una mostró la mutación c.3633delA en hemi‐homocigosis, 4, mostraron la mutación en heterocigosis y sesgo extremo en el XIP, y un caso, heterocigota para c.4388_4391delCTTT, mostró XIP no sesgado en leucocitos de sangre periférica (hipotetizando una inactivación hepática distinta). En una serie de 37 portadoras heterocigotas, y un grupo control de 20 no portadoras, se estudió la correlación XIP‐FVIII:C mediante análisis de contingencia y de errores respecto a un modelo teórico original (Obs.‐Esp.), obteniéndose modestas diferencias significativas (p menor a 0,05) asociadas a una gran dispersión de FVIII:C. Este trabajo presentó la primera serie molecular de mutaciones causales de HB en Argentina, el desarrollo de una nueva estrategia para el estudio de las grandes invers.

Abstract:
Hemophilia A (HA) and B (HB) are X‐chromosome (X) linked inherited coagulation disorders suffered by men (1:5000) and rarely by women, which are caused by gene defects of factor VIII (F8) and IX (F9), respectively. To characterize the spectrum of HB causative mutations in Argentina, an original scheme of 12 amplicons for F9 including a screening by CSGE (conformation sensitive gel electrophoresis) was applied in 49 families identifying 29 missense mutations (60%), 7 nonsense (14%), 4 splicing defects (8%), 2 small insertions‐deletions (4%), 6 large deletions (12%) and one change in the F9 promoter region. Two previously unreported missense changes showed a disruption of a disulfide bridge, and the destruction of a site for γ‐ carboxylation by analysis in silico, both conditioning the severe HB phenotype. To improve the genotyping strategy for large rearrangements involving int22h and int1h in the F8 that cause 50% of severe HAs worldwide, we design and developed a new approach, inverse‐shifting‐PCR (IS‐PCR). Using a diagnostic test for analysis of the intron 22 inversion (Inv22), IS‐PCR results were validated by obtaining perfect agreement, in 32 and 43 cases previously studied by Southern blot and a former inverse PCR approach; and in 34 new cases. The combined use of a complementary and a diagnostic test over our population series showed no structural variants, i.e., deletions and duplications hypothesized in the literature. The test for genotyping F8 intron 1 inversion was validated by perfect result agreement in 21 cases previously studied by double PCR, and 13 new cases. To investigate the usefulness of IS‐PCR in prenatal diagnosis, chorionic villus samples from an Inv22 carrier mother and her fetus were diagnosed. To study the cause of severe HA expression in heterozygous female carriers a system of the gene HUMARA for estimating X‐inactivation patterns (XIP) was adjusted and validated. We studied 6 women with severe HA: one showed an hemi‐homozygous mutation, c.3633delA, 4 showed heterozygous mutations with extremely skewed XIP; and one case, heterozygous for c.4388_4391delCTTT, showed a non skewed XIP in peripheral blood leukocytes (hypothesizing a different hepatic inactivation). A series of 37 heterozygous carriers and a control group of 20 non‐carriers were studied for XIP‐FVIII: C correlation. We analyzed contingency tables and relative errors (Obs.‐ Esp.) applying an original theoretical model and found modest significant differences (p minor than 0.05) associated with a wide variation of FVIII:C. This work presented the first molecular series of HB causative mutations in Argentina, the development of a new strategy for characterization of large DNA inversions causing severe HA and investigate the causes of a full expression of severe HA phenotype in women.

"Genética molecular de la porfiria aguda intermitente : primer estudio en la población argentina" (1998). De Siervi, Adriana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Genética y citogenética de la determinación del sexo en Diachasmimorpha longicaudata (Hymenoptera, Braconidae)" (2011). Carabajal Paladino, Leonela Z.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El parasitoide bracónido Diachasmimorpha longicaudata es ampliamente utilizado como controlador biológico de moscas de los frutos; sin embargo, es escaso el conocimiento disponible sobre su genética. A fin de aportar información y mejorar su cría masiva, se estudió su sistema de determinación del sexo mediante la realización de cruzamientos de alta y baja endogamia, utilizando herramientas de citogenética para determinar el nivel de ploidía de la descendencia. Asimismo, se analizó su espermatogénesis y su cariotipo en detalle, realizando aportes a la Teoría de Interacción Mínima, desarrollada para el estudio de la evolución del cariotipo en Hymenoptera. En este parasitoide el sexo se determina por haplodiploidía (machos haploides, hembras diploides), pero en condiciones de alta endogamia ocurre un sesgo significativo de la proporción de sexos hacia machos, debido a la generación de machos diploides. El sexo estaría determinado por el estado de un promedio de tres loci no ligados. Los individuos homocigotas para los loci sexuales se desarrollan en machos diploides. Esta información permitirá mejorar los protocolos de cría masiva de la especie, tratando de minimizar el nivel de endogamia a fin de evitar un incremento en la producción de machos. El estudio citogenético permitió corroborar el número cromosómico descripto previamente. Se analizó la cantidad, composición y distribución de la heterocromatina constitutiva, se mapearon los “clusters” de genes ribosomales y se determinó la cantidad de “clusters” activos. La información obtenida permitió aportar más evidencias a favor de la Teoría de Interacción Mínima.

Abstract:
Diachasmimorpha longicaudata is a braconid parasitoid widely used as biological control agent against fruit flies. In spite of its importance, little is known about its genetics. Different aspects were studied in order to provide more information and to optimize its massive production. Its sex determination system was analyzed using inbred and outbred crosses, and cytogenetic tools to analyze the ploidy level of the descendants. Also its spermatogenesis and karyotype were analyzed in detail, contributing to the Minimum Interaction Theory proposed for the study of karyotype evolution in Hymenoptera. Sex is determined by haplodiploidy (males are haploid, females are diploid), but under inbreeding a significant bias towards male progeny is observed due to the generation of diploid males. Sex is presumably determined by a mean of three independent loci. Homozigotes for the sex loci develop into diploid males. In order to avoid an increment in male production, this information would be useful to improve the protocols of massive production of this species, regarding to minimizing the inbreeding levels. The cytogenetic study allowed the corroboration of the chromosome number of the species. The amount, composition and distribution of constitutive heterochromatin were analyzed. The ribosomal gene clusters were located and the quantity of active sites was determined. The obtained information gave more evidence in favor of the Minimum Interaction Theory.

"Genética-poblacional y sistemática del género Dichroplus (Orthoptera : Acrididae) : análisis de polimorfismos enzimáticos y de ADN mitocondrial" (1996). Sequeira, Andrea Silvia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este estudio se realizaron dos análisis diferentes dentro del género Dichroplus. El primero involucra un análisis microevolutivo entre especies de Dichroplus elongatus. Se midió entonces la variabilidad intra e interpoblacional en siete poblaciones de Dichroplus elongatus localizadas en las Provincias de Tucumán y de Buenos Aires utilizando marcadores enzimáticos y de fragmentos de ADN amplificados al azar (RAPDs). Al estudiar la estructura poblacional por regiones (provincias) y globalmente se observó una tendencia hacia un exceso de homocigotas dentro de las poblaciones como se esperaría en poblaciones subestructuradas. La diferenciación entre poblaciones es significativa para tres loci enzimáticos, en concordancia con lo esperado para alelos que muestran una distribución clinal de sus frecuencias (Singh y Rhomberg, 1987). Hay cuatro lineas de evidencia que sugieren causas alternativas al "contacto secundario" (interacción entre deriva y migración) para explicar los patrones de variación direccional encontrados para dos loci en Dichroplus elongatus. En primer lugar, si se encuentran ejes concordantes para diferentes loci, el flujo génico en gran escala podría ser responsable de la variación clinal de las frecuencias alélicas; pero si, como en el caso de D. elongatus se encuentran diferentes variables en asociación con distintos loci entonces se debe invocar a la selección, excepto que estos loci se encuentren ligados (Barbujani 1988). Nuestros resultados apoyarían la hipótesis selectiva ya que Aat-1 y Pep-1 estan correlacionados con diferentes variables (Lat, Long, T.Min y T.Max: T.Max.Abs y T.Min.Abs respectivamente) sin mostrar ninguna correlación concordante con ninguna de las nueve variables estudiadas. En segundo lugar, el fenograma construido a partir de las distancias genéticas no se vinculan de acuerdo con lo esperado considerando las distancias geográficas. Concordantemente, la matriz de distancias geogróficas no esta correlacionada con la de distancias genéticas. En tercer lugar, el flujo génica estimado seria lo suficientemente elevado como para enmascarar las diferencias en las frecuencias alélicas si estas fueran originadas solamente por deriva genética. Por último, el patron de variación encontrado se mantiene incluso al incluir poblaciones muestreadas en distintos años. Esto sugiere que de alguna manera la variación clinal encontrada es estable en el tiempo. Un gradiente temporalmente estable debe ser mantenido por algún tipo de selección, de lo contrario el gradiente desaparecería. De esta manera, los resultados obtenidos sugieren la existencia de un probable efecto adaptativo de algunos loci alozímicos, que estaría determinado en última instancia por variables ambientales como la temperatura mínima, relacionadas con la latitud. A partir de los datos de variabilidad resultante del analisis de marcadores de ADN amplificados al azar se desprende que la variabilidad obtenida mediante isoenzimas no difiere significativamente de la obtenida mediante RAPDs. Si muchos de los productos de amplificación obtenidos mediante RAPDs representan ADN repetitivo deberíamos esperar niveles mas altos de variabilidad con marcadores RAPD que con isoenzimáticos. La ausencia de disparidad entre ambos estimadores es sugerida como una posible evidencia indirecta de la cantidad de ADN repetitivo presente en un genoma en particular. El valor de Fst calculado a partir de RAPDs es mucho mayor que el calculado a partir de datos alozímicos. Los primeros por ser considerados marcadores genéticos neutros daría más exactitud al valor de Fst comparado con uno que surge del calculo utilizando loci alozímicos que muestren alguna evidencia de no neutralidad. En los fenogramas construidos a partir de datos de RAPDs, las poblaciones se vinculan de acuerdo con lo esperado por las distancias geográficas. Este resultado no es consistente con los resultados alozímicos previos. Nuevamente esto podría deberse al uso de loci enzimóticos con una posible función selectiva y reforzaría la noción de neutralidad de los marcadores RAPD (que dan como resultado distancias genéticas y geográficas concordantes). Realizando un análisis macroevolutivo se llevaron a cabo también estudios sistemáticos dentro del género Díchroplus a través del análisis de los polimorfismos para fragmentos de restricción del ADN mitocondrialcon el finde llevar a cabo una reconstrucción filogenética dentro del género. Se desprende que a pesar que S. lemniscattase dispone naturalmente como grupo externo, tal como se esperaba de acuerdo a los datos morfológicos, el resto de los datos moleculares compilados no se corresponden con la clasificación taxonómica inferida para este grupo. La propuesta para un estudio mas exhaustivo sería la de incluir caracteres provenientes de genes nucleares y comparar las filogenias obtenidas con los tres métodos, construyendo matrices que incluyan todos los caracteres. A pesar de que los datos moleculares superan a los morfológicos en número generalmente son muy uniformes, dando como resultado pocos árboles. Se aplicaría entonces la combinación de caracteres, descartando la partición, ya que estudios que combinen ambos enfoques pueden maximizar la cantidad y utilidad de la información y darnos una visión mas comprensible de la evolución de los organismos.

Abstract:
In this study two different analysis were performed in the genus Dichroplus. The first one involves a micrevolution model analysis between populations of Dichroplus elongatus. Within and between population differentiation was measured in seven populations of Dichroplus elongatus located in Tucumán and Buenos Aires through enzyme variation and randomly amplified polymorphic DNA (Rapds). When studying population structure for two different arrangements (divided in regions and globally) a tendency towards homozygote excess was observed, as expectad in stuctured populations. Differentiation between populations showed to be significant for three loci, concordntly with what is expected for loci displaying clinal distribution for allele frecuencies. There are four lines of evidence suggesting causes other that secoundary contact (i.e. interaction between migration and genetic drift) to explain the observed directional patterns of variation for two loci in Dichroplus elongatus. First, if concordant axes are found showing concordant oriented patterns of gene frequencies for genetically independent markers, this could only be accounted for by a systematic cause, such as gene flow. On the other hand if, as in the case of Dichroplus, when different variables are associated for different loci then selection must be invoqued, unless these loci are linked. Our results support the selection hypothesis, because Aat-1 and Pep-1 are correlated with different variables (Lat, Long, Min.T. and Max.T.; Abs.Max.T. and Abs.Min.T. respectively) showing no concordant correlation with any of the nine variables studied. Second, the phenetic tree based on genetic distances does not fit with the expected according to geographical distances, as would be expected if genetic differentition answered solely to migration and genetic drift. Concordantly, genetic distances are not correlated with geographical distances. Third, the estimated gene flow should be high enough to mask differences of allelic frequencies due solely to genetic drift. Finally, the pattern of variation is maintained even including populations sampled in different years suggesting that the clinal variation is somehow temporally stable. A stable gradient must be maintained by selection of some sort, otherwise the gradient would have presumably eroded by now. The results obtained suggest the existence of an adaptative effect for some allozyme loci, which would be determined by environmental variables related to latitude. From the variability estimates obtained from RAPD loci we can observe that the variability derived from isozymes is simmilar to that obtained from RAPD data. Two possible explanations for this concordance are supplied in this report. In most species, considerably more variation can be found to exist in terms of nucleotide sequence changes in noncoding or repetitive DNA than in coding DNA. If indeed many of the amplification products represent repetitive DNA, then higher levels of variability should be expected with RAPD markers than with allozyme ones. Would not the disparity or similarily between both variability estimates hence constitute an indicator of the amount of repetitive DNA present in a particular genome? The total Fst estimate calculated using Rapd data yields a higher value. The fact that RAPDs are genetic markers of relative phenotypic neutrality would grant more accuracy to this estimate when compared to that calculated using some isozyme loci that display clinal variation (or some evidence of non-neutrality). Cluster analysis of Nei's genetic distances revealed an overall agreement with the geographical location of the populations studied . This is not consistent with the previous allozyme study where no correspondence was found between genetic and geographical distances. Again this would answer to the use of loci displaying clinal variation (with a possible selective role) for the non correspondent isozyme genetic distances and would reinforce the notion of RAPDs as neutral markers displaying genetic distances that agree with geographical distances. With the purpose of reconstructing the phylogeny of the genus Dichroplus, six species were analyzed by means of restriction fragment length polymorphisms of mitochondrial DNA and their patterns were compared using cladistic methods. The observed relations are that even though S. lemniscatta is naturally located as an outgroup —what is expected from morphological data - the rest of the data collected do not agree with the previous taxonomic clasification infered from morphological evidence. Further studies should have to be performed in order to study characters from nuclear genes and compare the phylogenies obtained with the three methods (morphology, mitochondrial DNA and nuclear DNA). Building matrices including all the characters, even though molecular data are more numerous than morphological data these are usually very homogeneous, resulting in very few trees. The combination of characters should therefore be applied, ruling out character separation. Such studies that combine the two approaches can thereby maximize both information content and usefulness and provide a truly comprehensive view of biotic evolution.

"Genómica comparativa en micobacterias responsables de enfermedades zoonóticas pertenecientes al Complejo Mycobacterium tuberculosis" (2004). Caimi, Karina Cynthia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El Complejo M tuberculosis (CMT) está formado por distintas especies de micobacterias entre las que se encuentra el agente causal de la tuberculosis en humanos, Mycobacterium tuberculosis y micobacterias responsables de enfermedades zoonóticas como M. bovis, M. microti y M. pinnipedii. La genómica comparativa en micobacterias brinda una vasta información acerca de la relación entre los genomas de distintas micobacterias pertenecientes al CMT. En la primera parte de este trabajo se estudió la Región de Repeticiones Directas (DR). Esta región está compuesta por repeticiones directas conservadas de 36pb separadas por secuencias no repetitivas llamadas espaciadores (sps). El polimorfismo observado en esta región entre aislamientos de micobacterias pertenecientes al CMT dio origen a la técnica de tipificación, ampliamente aplicada en tuberculosis denominada Spoligotyping. La secuenciación y comparación de la región DR entre distintos aislamientos argentinos de M. bovis permitió encontrar 5 espaciadores nuevos. Estos espaciadores conjuntamente con una colección de otros descriptos previamente, fueron incluidos en una nueva membrana de spoligotyping obteniéndose un total de 104 espaciadores. La utilización del spoligotyping de lO4-sps. permitió la diferenciación de aislamientos del CMT en 174 spoligotipos, mientras que el uso de la membrana tradicional tipificó estos mismos aislamientos en 160 spoligotipos distintos. Particularmente para M. bovis se obtuvo un incremento de 17 a 26 spoligotipos respectivamente. El análisis comparativo in silico en micobacterias no pertenecientes al CMT como M. smegmatis, M. avium, M. marinum y M. leprae, permitió establecer que los marcos de lectura abiertos (MLAs) flanqueantes a la Región DR de M. tuberculosis, se encuentran adyacentes entre sí en estas otras micobacterias. En cambio en el genoma de M. tuberculosis esta región comprende 24kb. que incluyen 23 MLAs así como la región DR ausentes en las mencionadas micobacterias. Este resultado fue corroborado in vitro mediante amplificación por PCR. Debido a la ausencia del locus DR descripto y los MLAs adyacentes, en M. avium y M. smegmatis y debido a que estas micobacterias fueron descriptas como más antiguas que M. tuberculosis, se postula que esta región podría haber sido adquirida por las especies del CMT o por un ancestro común a ellas a lo largo del proceso evolutivo. La segunda parte de este trabajo implicó el estudio de la variabilidad genética entre distintos aislamientos de M. bovis, M. microti y M. pinnipedii, estas últimas responsables de tuberculosis en ratones de campo denominados “vole” y en mamíferos marinos respectivamente, mediante comparación de genomas completos. Se encontró una nueva deleción en M. microti denominada MiD4. Esta región remueve 5 genes que codifican para antígenos de la familia ESAT-6 y PE-PPE. En M. pinnipedii se encontraron dos nuevas deleciones, PiD1 que removió dos genes, uno de los cuales codifica para una oxidoreductasa (Rv3530c) involucrada en el metabolismo celular. La segunda deleción PiD2, fue denominada como RD2seal debido a estar superpuesta con la región de 10.7kb, RD2, ausente en algunas M. bovis BCG. Esta región abarca los genes Rv1977 y Rv1978. Los experimentos de Southern blot mostraron que MiD4 está también ausente en M pinnipedii, en cambio PiDl es una deleción específica para M. pinnipedii. Por otra parte mediante la comparación del genoma de M. bovis con el genoma de M. tuberculosis in silico, se pudieron identificar nuevos marcadores capaces de diferenciar entre estas dos especies y respecto de otras especies del CMT. Uno de estos nuevos marcadores denominado rpfA presentó polimorfismos en los aislamientos de M. bovis estudiados, lo que podría ser usado en la tipificación y diferenciación.

Abstract:
The Mycobacterium tuberculosis complex (MTC) is composed by different mycobacteria species, the agent of human tuberculosis and mycobacteria responsible of zoonotic disease as M. bovis, M. microti and M. pinnipedii are among them. Comparative genomics gives broad information about the relationship between the different micobacterial genomes of the MTC. In the first part of this work the Direct Repeat (DR) region was studied. The DR region is composed of multiple well-conserved 36-bp DRs interspersed with non-repetitive DNA spacer sequences (sps). The polymorphism in the DR region has led to the development of a methodology highly applied in tuberculosis research called Spoligotyping. Upon analysis of this region in argentine bovine isolates of M. bovis, five new spacers were detected. These spacers and a collection of others previously described were included in a new spoligotyping membrane reaching a total of 104 different spacers. The application of the lO4-sps spoligotyping allows the differentiation of isolates from the MTC in 174 spoligotypes while with the application of the traditional membrane 160 spoligotypes were obtained. The discriminatory power of M. bovis isolates was increased from l7 to 26 different patterns respectively. The comparative analysis in silico performed in mycobacteria not-belonging to the MTC as M. smegmatis, M. avium, M. marinum and M. leprae allow to establish that the open reading frames (ORFs) flanking the DR region of M. tuberculosis are adjacent in these mycobacteria. In M. tuberculosis genome, this fragment includes 24kb. with 23 ORFs absent from the referred mycobacteria. This observation was experimentally confirmed by PCR. As the DR locus and the ORFs around it, are absent in M. smegmatis and M. avium and, as it is possible that these species are older than M. tuberculosis, we postulated that the DR locus was acquired by the MTC species or by an ancestor bacterium during evolutionary process. In the second part of this work the genetic variability of different isolates of M. bovis, M. microti and M pinnipedii, these last species agents of tuberculosis in wild voles and marine mammals respectively, was studied by whole genome sequence analysis. A novel M. microti deletion was found here called MiD4. This region removes 5 genes that code for ESAT-6 family antigens and PE-PPE. Two new deletions were found in the M. pinnipedii isolates: PiD1, which removes two genes where one of them code for an oxidoreductase (Rv3530c) involved in cellular metabolism. A second deletion found in M. pinnipedii isolates, PiD2, has been recently defined as RD2 seal since it overlaps the 10,7 kb RD2 region. This region encompasses Rv1977 and Rv1978 genes. Southern blot experiments showed that MID4 was also deleted from M. pinnipedii, but PID1 is a deletion specific to M. pinnipedii. By the other hand the analysis in silico between the M. bovis and M. tuberculosis genomes, allow the identification of new markers. These markers were used to differentiate between both species and from another species. One of these new markers called rpfA, present polymorphism between M. bovis isolates. This polymorphism could be used in typification and differentiation.

"Geología de la cordillera patagónica entre las localidades de Lago Puelo y Leleque, Provincia del Chubut" (1983). Lizuain Fuentes, Antonio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La región estudiada está ubicada en el extremo noroeste de la provincia del Chubut, unos 135 km al sur de San Carlos de Bariloche, en el ámbito de la Cordillera Patagónica. La característica geográfica mas destacable es el conjunto de cordones montañosos (cordones Piltriquitrón, Cholila, Leleque, etc.) de rumbo meridional separados por valles de igual disposición (lagos Puelo, Epuyen, Lezama,etc.). La red hidrográfica es densa. Sobre el límite oriental está ubicado el río Chubut,- mientras que los rios Turbio, Azul, Epuyen y Tigre vuelcan sus aguas al océano Pacífico. El 90% de la masa boscosa tiene comoespecies casi exclusivas a los distintos Nothofagus salvo Austrocedrus o Fitzroya en sectores aislados. Las primeras observaciones geológicas de la comarca correspondieron a Kruger(1909), Quensell(1911), Rigal(1923) y Petersen y Gonzalez Bonorino(1947). Geologicamente las rocas mas antiguas son los esquístos, gneises y anfibolitas de la Formación Cushamen (Volkheimer, 1964), con un metamorfismo de mediano a alto grado. Sus asomos se distribuyen en forma saltuaria en los sectores centro-norte y sureste de la región. La Formación Cushamen se considera de edad pre-devónica media, representando en el área estudiada los asomos mas australes del zócalo metamórfico. El rumbode la esquistosidad muestra una tendencia a situarse en el cuadrante noroeste. En discordancia angular sobre el zócalo metamórfico se produce la sedimentación de la Formación Piltriquitrón (Gonza1ez Bonorino, 1974; Lizuain, 1980), integrada por pelitas areniscas, calizas, microconglomerados y conglomerados, que fueron depositados en un ambiente de llanura de mareas y aportes del continente retrabajados por el oleaje y las mareas. La entidad tiene un espesor maximo que supera los 500 metros, ubicandose los asomos principales en los cerros Piltriquitrón, Los Patos, Pirque Y Gladys. La secuencia es intruída por el pulso cretácico del "Complejo Granítico Lago Puelo" e infrayace a términos volcánicos cretácicos y terciarios. Se le otorga edad liásica en base a 1a documentación paleontológica (Weyla alata v. Buch., Clamys textoria Schloth var torulosa Quenst, Cardium asaphum Leanza). Un conocimiento mas acabado de la entidad dado por la determinación de facies y ambientes de sedimentación, litología, perfiles tipo y por primera vez el hallazgo de restos fósiles, permitió fijar con precisión 1a edad de la unidad, extender el dominio paleogeográfico de los terrenos jurásicos, rescatar la denominación de Formación Píltriquitrón y ampliar dicha denominación para los asomos jurásicos ubicados entre el lago Nahuel Huapí y 1a localidad de Esquel. Durante el Cretácico se produce la implantación de un vulcanismo mesosilíceo a ácido (andesitas, riodacitas y riolitas) que conforma la Formación Pico Solo (Aptiano). Sus asomos mas importantes se localizan al suroeste del cerro Plataforma y sur del lago Cholila, con un espesor máximode 700 metros y una disposición homoclinal. La entidad está intruida por granitoides cretácicos e infrayace a sedimentos eoterciarios. La Formación Pico Solo representa la extensión paleogeografica, al norte del paralelo de 43°de latitud sur, del vulcanismo cretácico descripto por Ramos(1978). Se interpreta su origen en la existencia de un arco volcánico calcoalcalino. La Formación ventana caracteriza a un ciclo eruptivo de edad eocena ampliamente difundido en el ámbito de la Cordillera Patagónica, con su génesis vinculado al desarrollo de una arco volcánico calcoalcalino con una subducción simple del tipo nonmal. La entidad aflora en la mitad oriental de la comarca, tiene una yacencia homoclinal con valores que no superan los 30° y un espesor maximo que a1canza los 900 metros. Integrada por andesitas, basandesitas y basaltos, estos últimos localizados en los tramos medio y superior de la secuencia, se intercala entre el basamento paleozoico-mesozoico y sedimentitas eoterciarias con las que tiene una relación discordante. Posteriormente, con la extinción del vulcanismo eoceno y luego de un período de erosión, comienza una etapa de sedimentación que se inicia con una facies psefítica que sirve de base para los depósitos marinos de la Formación Rincón de Cholila y los depósitos continentales de la Formación Ñorquinco. El conglomerado basal tiene una extensión regional, localizandose entre los paralelos 41°30' y 43°00' de latitud sur. Los depósitos marinos y continentales presentan un pasaje gradual entre ambos. La Formación Rincón de Cholila (Cazau, 1972) está integrada por areniscas, pelitas y conglomerados, portadoras de fauna marina (Venus ovallei Phil, Chlamys centralis Sow, Ostrea hatcheri Ortm, etc.). Los asomos mas importantes son los del lago Lezama, Epuyen y el cerro Plataforma. En este último se reconocieron siete niveles fosilíferos. Los bancos en general muestran una disposición homoclinal aunque se reconocieron dos sinclinales levemente asimétricos en el cerro Plataforma y en el lago Lezama. El espesor máximo alcanza los 400 metros. La Formación Ñorquinco (Cazau, 1972) caracteriza a areniscas, arcilitas calizas y conglomerados, dispuestos en forma homoclinal y portadora de fósiles de agua dulce, diplodon, gastrópodos, cangrejos, peces y plantas. La microflora presenta un dominio de granos de polen de Nothofagidites. La mayor parte de los afloramientos se sitúan en la mitad oriental de la comarca. La secuencia habríase desarrollado en un ambiente palustre y fluvial y en menor medida parálico y lagunar, destacandose la formación de depósitos de carbón. En el Mioceno tiene lugar un episodio subvolcánico de distribución restringida, que determina el emplazamientode la Andesita Cerro Plataforma; integrada por diques, filones capa y pequeños cuerpos de composición andesítica que afloran en el cerro homónimo. Luego se acumulan en la comarca depósitos glaciarios (Pleistoceno superior) y conos de deyección y sedimentos aterrazados y recientes (Holoceno). los episodios plutónicos fueron agrupados con 1a denominación de "Complejo Granítico Lago Puelo"; integrado por dioritas, tonalitas, granodiotitas y granitos. Los granitoides tienen una relación de intrusividad con el sustrato pre-cretácico superior e infrayacen a los términos volcánicos y sedimentarios eoterciarios. El fechado radimétrico señala la existencia de cinco pulsos magmáticos: Eoceno superior- oligoceno inferior, Cretácico superior, Jurásico superior-Cretácico inferior, Jurásico inferior y Devónicom edio. El Granito Leleque caracteriza a granitoides de edad jurásica superior que intrusan a sedimentos liásicos e infrayacen al vulcanismo cretácico. El fechado radimétrico dió un valor de 141 ±5 m.a. para esta formación. Estructuralmente el área muestra una ruptura en bloques integrados por un núcleo de granitoides y metamorfitas y una cobertura volcano-sedimentaria mesozoica y terciaria. La inclinación de la cubierta terciaria generalmentecoincide con la inclinación de los bloques. Las fracturas mas conspicuas son las que delimitan los flancos occidentales de los cerros Currumahuída, Derrumbe y Tres Picos, la que flanquea por el oeste el cerro El Maitén, flanco occidental de la sierra de El Maitén y por último la fractura que delimita la ladera este del cordón Leleque. El análisis estructural se completó con lineamientos LANDSAT que permitieron inferir una dirección oeste-este para los esfuerzos actuantes en el Terciario, con un caracter compresivo responsable de la fracturación inversa que caracteriza al sector preandino. Los mapas de isodensidad e isointersección de lineamientos permitieron pronosticar la existencia de tres áreas potencialmente mineralizadas: noroeste de El Bolsón, cerro Tres Picos y cordón Leleque-cordón Esquel.

"Geología del cuaternario y ciencia del suelo : Relaciones geomórficas-estratigráficas con suelos y paleosuelos" (1996). Súnico, Alejandro. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la región nororiental de la provincia del Chubut (Patagonia-Argentina) fueron estudiadas las relaciones existentes entre las geoformas y los suelos y paleosuelos que sobre ellas evolucionaron. Estos últimos fueron analizados con un criterio estratigráfico utilizando para ese fin sus características macromorfológicas más sobresalientes. El rasgo morfológico característico de los depósitos Cenozoicos (Rodados Patagónicos) son las costras calcáreas. Sus distintos tipos de estructuras, grado de consolidación, espesores y otros caracteres pedológicos y sedimentarios y su asociación o no a rasgos criogénicos fueron utilizados como indicadores estratigráficos y morfoestratigráficos. Sobre la base del análisis e interpretación de fotografías aéreas y registros satelitales NOAA, Land Sat MSS y ERS-1 complementada con características pedológicas, paleopedológicas y sedimentarias de los depósitos e información topográfica digital, se definieron varios Niveles de depositación de Rodados Patagónicos. Estos niveles se corresponden con distintas geoformas como ser distintos niveles de terrazas (principalmente de erosión), pedimentos y otras formas menores. En la mayoría de los casos se estableció que estas geoformas poseen un conjunto de características pedológicas y sedimentarias propias que las identifican. Este trabajo doctoral tiene como objetivo general establecer la dinámica y evolución de los ambientes continentales cuaternarios a través de la caracterización de las relaciones espacio-temporales existentes entre los depósitos, las formas, los suelos y los paleosuelos.

Abstract:
In the northeastern area of Chubut province (Patagonia-Argentine) were studied the existing relationship among geoforms and soils and paleosoils that on them evolved. These last were analyzed from a stratigraphic point of view using their most important macromorphological characteristics. Carbonatic accumulations (Calcretes) are the most significant feature of Cenozoic deposits (Rodados Patagonicos). Crust structures, consistences, thicknesses and other sedimentary and pedologic characters and his association or not to cryogenic structures are used us stratigraphic and morphostratigraphic markers. Several depositational levels of Rodados Patag—nicos were determined through of the analysis of aerial photographs, NOAA, LandSat - MSS and ERS-1 magnetic records integrated to edaphic, paleopedologic and sedimentary information of the deposits and digital topographic information. These levels are corresponded with several fluvial terrace levels, pediments and another minor forms. In most cases these geoforms posses a set of sedimentary and pedologic features that identify them. The general aim of this thesis is establish the dynamic and evolution of the Quaternary continental environment through the characterization of space--temporary existing relationship among forms and soils, paleosoils and deposits.

"Geología y Paleomagnetismo en el ámbito de las Sierras Australes de la Provincia de Buenos Aires" (1997). Tomezzoli, Renata Nela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Geología y metalogenia del distrito minero Cerro Aspero, Sierras Pampeanas de Córdoba, Argentina" (2004). González Chiozza, Sebastián. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La caracterización geológica del Distrito Minero Cerro Aspero (DMCA)y el estudio específico de sus depósitos minerales, constituyeron la base para la elaboración de un modelo metalogenético correspondiente a los yacimientos wolframíferos vinculados espacialmente al Batolito Cerro Aspero (BCA). Depósitos básicamente conformados por greisens, brechas y vetas de cuarzo con mineralización principal de wolframita, se encuentran emplazados en el Plutón Los Cerros (PLC) y su entorno metamórfico. El PLC es el más joven de los cuerpos que integran el BCA, complejo magmático post-orogénico originado en la etapa póstuma del ciclo Famatiniano. La asociación metamórfica que hospeda al BCA está constituida por rocas metasedimentarias (esquistos miloníticos, gneises y migmatitas) y metabásicas (esquistos miloníticos y 3 variedades de ortoanfibolita), que guardan registros de la evolución tectono-metamórfica del distrito desde el ciclo Pampeano hasta el Andico. Las ortoanfibolitas, gneises anatécticos y migmatitas preservan evidencias de deformación dúctil y metamorfismo de alto y mediano grado, correspondientes al episodio pampeano D2-M2, vinculado a la aproximación y colisión de Pampla con el cratón del Río de la Plata. Los esquistos miloníticos se extienden regionalmente constituyendo la Faja de Cizalla de Guacha Corral (FCGC), formada durante el evento D4M4 del ciclo Famatiniano a través del cizallamiento dúctil de las metamorfitas pre-existentes y bajo condiciones de facies de esquistos verdes. Esta faja de cizalla de orientación submeridional representó una zona de debilidad que favoreció la intrusión del BCA. La formación de depósitos wolframíferos vinculados al BCA, se produjo durante la etapa final del ciclo Famatiniano y progresó desde una fase magmática tardía hasta una fase netamente hidrotermal; habiéndose subdividido la evolución en 5 estadios paragenéticos: el estadio 1 (e1) constituyó la transición entre fluidos magmáticos e hidrotermales a través de la formación de cuerpos pegmatiticos y aplíticos estériles y depósitos de greisen; el estadio 2 (e2) marcó el comienzo de la etapa netamente hidrotermal, originando vetas con grandes volúmenes de cuarzo y mineralización muy escasa; el estadio 3 (e3) dio lugar a la formación de brechas, vetas menores y depósitos de reemplazo y relleno a partir de microfracturas, con los mayores contenidos de W y Mo; el estadio 4 (e4) desarrolló sistemas de vetas hidrotermales de cuarzo estéril, cuya ubicación en la secuencia evolutiva es dudosa; el estadio 5 (e5) depositó mena metalífera rica en sulfuros con participación de Bi, Cu, Zn, Pb, Mo, Fe, Mn,W, Sn, Ag, Au, en vetas menores y a partir de fracturas milimétricas sobre materiales de los estadios previos. A los procesos tardío-magmáticos del estadio 1 se asocia el desarrollo de alteraciones potásica y ocasionalmente albítica en granitoides, que precedieron a la formación de endo y exogreisens; en tanto que a los estadios 2 y 3 se vincula el profuso desarrollo de alteraciones silicica, fílica y propilítica sobre las rocas de caja de los depósitos hidrotermales. La aplicación de técnicas analíticas especificas y la realización de cálculos termodinámicos y geoquímicos permitieron caracterizar cuantitativamente las condiciones físico-químicas de formación de los depósitos. Los estudios de inclusiones fluidas revelan sistemas esencialmente compuestos por H20 + NaCl con probable participación de C02 y materia orgánica. Los valores medios de temperatura de homogeneización y salinidad obtenidos son de 384°C y 6,8 %peso NaCleq para el estadio 2 y de 279°C y 5,4 %peso NaCleq para el estadio 3. Los contenidos de isótopos estables de oxígeno, hidrógeno y azufre calculados para los fluidos de estos mismos estadios (e2 y e3) proporcionan los siguientes rangos: δ16O(vsmow) entre 7,1 y 8,7 ‰; δD(vsmow) entre — 89,6 y -68,9 ‰; y δ34S(cdt) entre 3,8 y 3,9 ‰. Diversos cálculos termométricos y barométricos permitieron establecer una temperatura de formación comprendida entre los 338 y 415°C, y una presión entre 0,5 y 1,5 Kb. Otras estimaciones indican valores de pH entre 3,5 y 5,8, log ƒ02 entre -27,6 y —22,2,y log ƒS2 entre —5,4 y —3,5. La edad de la mineralización del e3, fue determinada en 343,8 ╧ 10,8 Ma mediante una datación K/Ar efectuada sobre muscovita, y se restringió la formación de los depósitos a un lapso comprendido entre 4,6 y 25 Ma, luego del emplazamiento del BCA. El modelo metalogenético propuesto se basa en la manifiesta y estrecha vinculación de depósitos wolframíferos del DMCA con fases tardías del emplazamiento del PLC. La anomalía térmica generada por el intrusivo, junto con el desarrollo y reactivación de estructuras, promovieron la circulación convectiva de fluidos hidrotermales que propiciaron la precipitación de minerales ricos en W, Bi, Mo, Fe, Mn, Cu, y con participación minoritaria de Pb, Zn, Sn, Ag y Au. Estos elementos son los componentes principales de la mineralización metalífera del distrito, que incluye wolframita y proporciones accesorias de molibdenita, tetradimita, wittichenita, pavonita, miharaita, estanoidita, bomita, calcopirita, pirita, esfalerita, galena, altaita y oro. La formación de los depósitos fue controlada por estructuras subsidiarias transtensivas, como juegos de fracturas que se ajustan al modelo de Riedel, e intersecciones de planos de debilidad estructural. Los fluidos hidrotermales responsables de la mineralización tuvieron un origen netamente magmático en la etapa inicial (estadios 1, 2 y 3), pero adquirieron un carácter mixto en la etapa final (estadios 4 y 5) al incorporar componentes meteóricos. La fuente magmática aportó W, Mo, Fe y Mn en la etapa inicial (estadios 1, 2 y 3) y adicionó Bi, Cu, Zn y Sn en la etapa final (estadio 5), cuando disminuyó la actividad de flúor en el sistema. En esta última etapa fueron suministrados Cu, Pb, Mn, Ag, Au y azufre a las soluciones, a partir de la lixiviación del basamento. Asimismo se propone como principal mecanismo de depositación para los estadios 2 y 3, la reacción entre las rocas de caja y los fluidos hidrotermales, con las consecuentes modificaciones químicas de estos últimos (aumento del pH y saturación en sílice). También es probable que el descenso de la presión haya contribuido a la precipitación de minerales durante estos estadios; destacándose particularmente, que en los cuerpos de brecha, tuvo gran relevancia la precipitación de minerales debida al enfriamiento abrupto vinculado con la despresurización por brechamiento. En lo que respecta a la depositación de la asociación rica en sulfuros del estadio 5, se presume que estuvo relacionada con procesos de dilución y aumento del potencial de oxidación, derivados de la mezcla de fluidos.

Abstract:
Geological characterization of the Cerro Aspero Mining District (DMCA)located at Córdoba Pampean Ranges, Argentina, and specific study of its mineral deposits, made up the basis to develop a metallogenetic model for the wolframiferous ore deposits that are spatially related to the Cerro Aspero Batolith (BCA). Quartz veins and breccia with main wolframite mineralization, together with greisen type diseminated deposits were emplaced in the Los Cerros Pluton (PLC) and its metamorphic country rocks. The PLC is the younguest of the bodies that comprise the BCA, post-orogenic magmatic complex originated during the late phase of the Famatinian cycle. The metamorphic association that hosts the BCA is constituted by metasedimentary (milonitic schists, gneises and migmatites) and metabasic rocks (milonitic schists and 3 types of ortoamphibolite), that keep registers of the tectono-metamorphic evolution of the district from the Pampean to the Andic cycle. The ortoamphibolites and migmatites preserve evidences of ductile strain and high to medium grade metamorphism, which correspond to the M2-D2 pampean episode, related with the aproximation and colision of Pampia with the Rio de la Plata craton. The milonitic schists extend regionally giving conformation to the Guacha Corral Shear Belt (FCGC), formed during the M4-D4 event of the Famatinian cycle through the ductile shearing of the preexisting metamorphic rocks, and under green-schist facies conditions. This shear belt with submeridional orientation, constituted a weakness zone that favoured the BCA intrusion. The formation of the BCA related wolframiferous ore deposits progressed from a late magmatic phase to an hydrothermal phase and its evolution has been subdivided into 5 paragenetic stages: stage 1 (e1) constituted the transition between magmatic and hydrothermal fluids through the formation of barren pegmatitic and aplitic bodies, and mineralized greisen deposits; stage 2 (e2) marked the beggining of the net hydrothermal phase, giving birth to veins with large volumes of quartz and scarce mineralization; stage 3 (e3) gave place to the formation of breccia, minor veins and replacement deposits in microfractures, with the major contents of of W and Mo; stage 4 (e4) developed hydrothermal vein systems of sterile quartz, with an unclear position in the evolutive secuence; stage 5 (e5) deposited sulphide rich metalliferous ore with Bi, Cu, Zn, Pb, Mo, Fe, Mn, W, Sn, Ag, Au in microfractures within materials generated at previous stages. The late magmatic processes of stage 1 were associated to potasic and, ocassionaly sodic alteration in granitoids. These alterations preceded the formation of endo and exogreisens during stage 1; while stages 2 and 3 were linked to the developement of profuse silicic, philic and propilitic alterations in the country rocks of the hydrothermal deposits. The aplication of specific analytic technics and the realization of thermodynamic calculations were used to quantify the phiyico-chemical conditions of deposit formation. Fluid inclusion studies revealed systems essentially composed by H2O + NaCl and probable participation of C02 and organic matter. The mean values of homogeneization temperature and salinity are of 384°C and 6,8 %wt NaCleq for stage 2 and of 279°C and 5,4 %wt NaCeq for stage 3. Oxigen, hydrogen and sulphur stable isotope contents calculated for the fluids of these same stages (e2 and e3) indicate the following ranges: δ18O(VSMOW) between 7,1 and 8,7 ‰,δD( VSMOW) between —89,6 and —68,9 ‰, and δ34S(CDT) between 3,8 and 6.1 ‰. Several thermometric and barometric calculations permited to establish a formation temperature comprised between 338 and 415°C, with a fluid pressure between 0,5 and 1,5 Kb. Other estimations indicate pH values of 3.5 to 5,8, log ƒ02 between -27,6 y —22.2,and log ƒS2 between —5.4 y -3.5. The age of the e3 mineralization was determined in 343,8 ╧ 10,8 Ma through K/Ar dating in muscovite, and the formation of the deposits was restricted to a lapse of time between 4,6 and 25 Ma, after the BCA emplacement. The metallogenetic model proposed is based in the close relation of wolframiferous deposits of the DMCA with late phases of the PLC emplacement. The thermic anomaly generated by the intrusive body, together with the developement and reactivation of structures, promoted the convective circulation of hydrothermal fluids that caused the precipitation of minerals rich in W, Bi, Mo, Fe, Mn, Cu and with minor participation of Pb, Zn, Sn, Ag, and Au. This elements are the main components of the metalliferous mineralization of the district, which includes wolframite and accesory proportions of molybdenite, tetradymite, wittichenite, pavonite, miharaite, stannoidite, bomite, chalcopyrite, pyrite, sphalerite, galena, altaite and gold. The deposit formation was controlled by subsidiary transtensive structures, like fracture sets that adjust to the Riedel's model, and intersections of planes of structural weakness. Hydrothermal fluids responsible for mineralization had a net magmatic origin at the initial phase (stages 1, 2 and 3), but acquired a mixed character during the final phase (stages 4 and 5) due to incorporation of meteoric components. The magmatic source provided W, Mo, Fe and Mn at the initial phase (stages 1, 2 and 3) and added Bi, Cu, Zn and Sn at the final phase (stage 5), when the fluorine activity of the system diminished. At this last stage, Cu, Pb, Mn, Ag, Au and S were suplied to the solutions through basement leaching. Likewise, the reaction between country rocks and hydrothermal fluids, with the cosequent chemical modifications of the latter (pH increase and silica saturation), is propposed as the main deposition mechanism for stages 2 and 3. It is also probable that pressure descent had contributed to the mineral precipitation during these stages; being particularly outstanding that within breccia bodies, mineral precipitation caused by abrupt cooling related to depressurization due to brecciation, was highly relevant. With respect to the deposition of the sulphide rich association of stage 5, it has been presummably related to dilution and oxidation potential increase of the solutions, both mechanisms related to fluid mixing.

"Geología y petrología de los volcanes cenozoicos Pocitos, Del MEdio y Tul Tul, provinciade Salta, Argentina" (2003). Etcheverría, Mariela Patricia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el NO de la provincia de Salta, Argentina, en el ambiente geológico de la Puna, existe un grupo de tres estratovolcanes de edad miocena superior (Pocítos, Del Medio y Tul Tul) dispuestos con rumbo noroeste-sudeste vinculados a un lineamiento regional conocido como Cerro Rincón - Cerro Quevar. En disposición transversal al volcán Del Medio se destacan cuatro domos lávicos denominados Pozo Cavado que son posteriores al conjunto nombrado. Sobre la base de la petrografía y los rasgos morfoestiucturales se determinó la secuencia estratigráfica y se estableció la morfogénesis del grupo. Geoquímicamente las composiciones son basáltico-andesíticas y andesíticas para el volcán Pocitos; andesíticas, traquiandesíticas y dacíticas para los volcanes Del Medio y Tul Tul; y andesíticas para los domos Pozo Cavado. Representan a series calcoalcalinas, muy cercanas a las levemente alcalinas, de alto contenido en potasio para el volcán Tul Tul y de potasio medio para los volcanes Pocitos y Del Medio y los domos Pozo Cavado. Los contenidos geoquímicos e isotópicos de Sr y evidencias petrográficas tanto texturales como mineralógicas permiten inferir que los magmas se originaron a partir de mezclas con importante participación de fundidos del manto (baja proporción de fusión) y fundidos corticales y que la cristalización fraccionada habría actuado en forma subordinada. La asimilación de rocas ultramáficas también habría jugado un papel importante. Los diseños geoquímicos ponen en evidencia la influencia del ambiente de subducción en su génesis y las asignan a ambientes transicionales entre arco y retroarco con la excepción de los domos Pozo Cavado, quizá pliocenos, que corresponderían a retroarco, localizando de ese modo, a la región cerca del límite arco-retroarco mioceno superior. La mineralogía de los fenocristales y el quimismo de anfíboles indican una presión de 8 kb para su formación lo que equivale a una profundidad de 26 km para la probable cámara magmática e indica un espesor mínimo de corteza para los tiempos del Mioceno superior (8,6-6,5 Ma).

Abstract:
Pocitos, Del Medio and Tul Tul are three Late Miocene (8,6-6,5 Ma) stratovolcanoes located in the Argentinian Puna, at northwestem Salta province. NW-SE trending, they are associated to a regional structure known as Cerro Rincón-Cerro Quevar lineament. Tentatively Pliocene, Pozo Cavado domes lie perpendicularly to the Del Medio volcano. The volcanic stratigraphy and morphogenesis were established, based on petrographic, geochemical and morphostructural studies. Pocitos volcano is composed of basaltic andesites and andesites, whereas Del Medio and Tul Tul centers encompas andesites, trachyandesites and dacites. Pozo Cavado lavas correspond to andesites. All of them represent calc-alkaline to slightly alkaline series; ranging from medium-K (Pocitos, Del Medio and Pozo Cavado) to high-K (Tul Tul). Sr isotopes, geochemical, mineralogical and textural evidences strongly indicate that the magmas had been originated by mixing of mantle and crustal melts, with low percentage of mantle melting. Fractional crystallization might have played a secondary role. The assimilation of ultramafic rocks might have been important. Trace-element indicate an transitinal signature between arc and back-arc for Pocitos, Del Medio and Tul Tul volcanoes and a retroarc signature for Pozo Cavado domes. Mineralogy and amphibole composition indicate an 8 kb pressure, equivalent to a depth of 26 km for the magmatic chamber, thus constraining the crustal thickness. A subduction-related tectonic setting, close to the boundary arc-retroarc, is inferred for the studied area during Late Miocene times.

"Geología, geocronología y caracterización geoquímico-isotópica del magmatismo terciario en el área del Cerro Serrucho, Departamento Malargüe, Mendoza, Argentina" (1996). Ostera, Héctor A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El magmatismo Terciario en el rea del cerro Serrucho conocido previamente como "Mollelitense" est representado por tres unidades informales: el Stock del arroyo Serrucho (SAS), los Cuerpos Hipabisales Relacionados (CHR) y las Vulcanitas Relacionadas (VR). Las mismas est n emplazadas en la secuencia sedimentaria Jurásica (Formación Puchenque), dentro del ámbito surmendocino de la Cuenca Neuquina. Las tres unidades se diferencian desde el punto de vista geológico, petrográfico, geoquímico, isotópico y geocronológico. El SAS es un stock epizonal, compuesto, asimétricamente zonado, donde pueden diferenciarse al menos cinco facies: a) Facies Monzodior¡tica Cuarzosa; b)Facies Granodiorítica A, de grano grueso a medio; c) Facies Granodioritica B , de grano fino a medio; d) Facies de Mezcla y e) Facies Granofírica. Es predominantemente metaaluminoso y calcoalcalino, correspondiendo a los granitoides de alto potasio y alto Ba-Sr. Las variaciones composicionales podrían explicarse a partir de una cristalización fraccionada "in situ". La fuente correspondería al manto superior-corteza inferior enriquecido en elementos LIL por la corteza subductada. Durante su emplazamiento y cristalización ha desarrollado una interacción agua-magma que se refleja en las variaciones isotópicas del oxígeno e hidrógeno. La edad del enfriamiento es miocena tardía (9,5ñ0,5 Ma) y se considera casi simultánea con el emplazamiento. Se estima que el emplazamiento, producido a presiones no muy superiores al Kb, est relacionado con la propagación de diques asociados al fracturamiento generado por el campo de esfuerzos regional. Los CHR est n constituidos por diques, filones capa y lacolitos de composición riolítica, asociados en el espacio con el SAS. Media un intervalo de tiempo registrable en términos absolutos entre el SAS y los CHR. Los cuerpos son predominantemente peraluminosos y calcoalcalinos. La edad de los mismos es miocena tardía (7,5+-1 Ma). Presentan mayores evidencias de contaminación cortical, sin que ‚esta sea sustantiva y la misma se considera asociada al emplazamiento a menor profundidad. Los rasgos geoquímicos de tierras raras y elementos incompatibles guardan similitud con la del SAS, con abundancias normalizadas menores. Se considera que los CHR no corresponden a un episodio único, sino que corresponden a un conjunto de eventos que han aportado material proveniente de la misma fuente, con diferente grado de evolución. Su asociación con los recursos minerales del rea est probablemente vinculada con la interacción de aguas meteóricas ricas en sales disueltas, que son removilizadas. Las Vulcanitas Relacionadas est n constituidas por andesitas y dacitas, calcoalcalinas y metaaluminosas. Desde el punto de vista de su desarrollo, son las manifestaciones de menor importancia relativa del rea. Se considera que su erupción constituye el episodio póstumo del magmatismo Terciario en el rea, con una edad miocena tardía- plioceno temprana (4,8+-1 Ma). La fuente del magmatismo Terciario parece haberse mantenido constante durante El intervalo de tiempo considerado (10-5 Ma). Es similar en sus características geoquímicas e isotópicas a la fuente que origina el magmatismo de arco y retroarco actual. Se postula que una fuente de tal homogeneidad sólo puede estar representada por la cuña del manto subductada, modificada con el aporte de elementos LIL por la placa que subduce.

Abstract:
The Tertiary magmatism in cerro Serrucho, previously known as "Mollelitense" is represented by three non-formal units: Arroyo Serrucho Stock (SAS), Hypabyssal Related Bodies (CHR) and Related Vulcanites (VR). All of them are emplaced in the Jurassic sedimentary sequence (Puchenque Formation), in the Southern Mendoza scope of the Neuquen basin. The three units can be differentiated from the geologic, petrographic, geochemichal, isotopic and geochronologic point of view. The Arroyo Serrucho Stock (SAS) is a composed, epizonal body, asymetrically zoned. Five facies have been differentiated : a) Quartz- Monzonite facies; b) Granodioritic Facies A, medium and coarse grained; c) Granodioritic Facies B, fine to medium grained; d) Mixing Facies and e) Granophyric Facies. The SAS is predominantely peraluminous, calc-alkaline, belonging to the high-K, high Ba-Sr granite group. The compositional trends may be explained by in-situ fractional crystallization. The most probable source is the upper mantle-lower crust LIL-enriched by the subducted plate. During its emplacement, a water-rock interaction revealed by the oxygen and hydrogen isotopes can be postulated. The cooling age is Late Miocene (9,5 ñ 0,5 Ma); it is considered simultaneous with the emplacement. Dyke propagation, associated with faulting related with regional stress field is considered the most suitable way for ascent and emplacement in this case. The Hypabyssal Related Bodies (CHR) are dykes, laccoliths and sills of rhyolitic composition, associated in space with the SAS. There is a measurable time interval between the emplecement of SAS and CHR. The CHR are peraluminous and calc-alkaline. The absolute age is Upper Miocene (7,5+- 1 Ma). They have more evidences of crustal contamination, but it is not very relevant and is related with the more surficial emplacement. The geochemical pattern is similar to the SAS pattern, with lesser normalized abundances. The CHR are not an isolate episode; they are probably a group of events from the same source with different degrees of evolution. The mineral resources of the area are probably related with the interaction and remobilization by meteoric waters, plenty of salts, and the CHR. The related vulcanites (VR) are andesites and dacites, calc-alkaline and metaaluminous. They are the less extendedt episode, and the last one. Its absolute age is Later Miocene-Early Pliocene (4,8+- 1 My). The source for the Tertiary magmatism has been constant during the time span considered. Is similar to the present arc and retro-arc volcanism source. Such an homogeneous source can be represented only for the subducted mantle wedge, modified with LIL enrichment by the subducted plate.

"Geometría Riemanniana de grupos de operadores y espacios homogéneos" (2016-03-14). López Galván, Alberto Manuel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Geometría de la variedad de polarizaciones" (1994). Pavón, Martín Roberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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La noción de polarización subordinada a una forma lineal dada de un álgebra de Lie L juega un papel central en la teoría de representaciones de álgebras y grupos de Lie nilpotentes y resolubles. Esta noción fue introducida por A. A. Kirillov en su célebre trabajo Représentations unitaires de grupes de Lie nilpotentes (Uspechi Mat. Naouk., 1962) donde establece el “método de de las órbitas” y señala que este método podría ser útil para estudiar las representaciones de otra clase de grupos. Este estudio fue realizado entre otros por Auslander, Konstant, Pulianszky y Duflo, además de Kirillov. Otros problemas en teoría de representaciones de álgebras de Lie también fueron atacados con este método, en particular el estudio del centro del álgebra envolvente y su cuerpo de fracciones. Desde un punto de vista algebraico, la correspondencia entre polarizaciones y representaciones esta esbozada en la página 5 de este trabajo. Esencialmente, si P es una polarización de una C-álgebra de Lie L subordinada a f, entonces podemos pensar a C como un U(P) módulo y U(L) ou(p)C resulta un U(L)-módulo simple (aquí U(.) nota al álgebra envolvente). En el presente trabajo tomamos como punto de partida una observación de M. Vergne (cf. )que establece que el conjunto de polarizaciones subordinadas a una forma lineal dada de un algebra de Lie L es una variedad algebraica; nos dedicaremos estudiar esta variedad en los casos en que L es un álgebra central (i.e. ] = 0) y en algunos otros casos. Los resultados obtenidos establecen que la variedad algebraica en estos casos es “suave”. Su homología se determina asimismo en forma completa. El trabajo de tesis está dividido en cuatro capítulos. El capítulo 0 es de carácter introductorio; en él se exponen los resultados básicos de geometria y topología que serán utilizados luego y se fija la notación. En el capítulo 1 comenzamos estudiando el caso en que el álgebra de Lie es el álgebra de Heissenberg Hn ; en el mismo se prueba que la variedad de polarizaciones es una variedad compleja de dimensión n(n + l)/ 2 y se introduce una filtración conveniente que será usada en el capítulo siguiente para analizar la homología. En el capítulo 2 se establece una fórmula para la homología de la variedad de polarizaciones del álgebra de Heissenberg presentada como subvariedad de una Grassmaniana. Finalmente en el capítulo 3 se introduce la noción de algebra de tipo Heissenberg, que incluye a algunas algebras resolubles, y se generalizan los resultados obtenidos para este caso. La teoría de representacionm unitarias de grupos de Lie queda bien clasificada mediante las órbitas de polarizaciones en el caso nilpotentes y resolubles. Del presente trabajo sigue que estas representaciones en los casos considerados pueden ser parametrizadas en forma “suave” por la variedad de polarizaciones.

"Geometría de variedades de Maurer-Cartan" (2011). Massri, César. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
A cada problema de deformación se le asocia un álgebra de Lie diferencial graduada, E. El espacio de móduli asociado al problema de deformación viene dado por la variedad de Maurer-Cartan de E módulo la acción de gauge. Esta tesis se divide en dos partes. En la primera parte nos concentraremos en comprender la geometría de la variedad de Maurer-Cartan de un ́álgebra de Lie graduada donde el grupo de gauge es simple. Obtendremos que son variedades proyectivas invariantes por una acción lineal y generadas en grado dos. Hemos demostrado que cuando se toma el ideal de una ́órbita en grado dos, la variedad de Maurer-Cartan asociada es irreducible. Para esto hemos utilizado, entre otras cosas, el ́álgebra envolvente y la estructura de pesos de las representaciones. En la ultima parte de esta tesis hemos necesitado introducir variedades Grassmannianas y determinantales de complejos y de módulos de Lie. El objetivo fue el de analizar la variedad de estructuras de ́álgebras de Lie diferenciales graduadas. Veremos que cuando el grupo de gauge de las ́álgebras en cuestión es simple, las variedades de Maurer-Cartan de estas ́álgebras diferenciales graduadas son las estudiadas en la primera parte de la tesis.

Abstract:
Each deformation problem has associated a differential graded Lie algebra, E. The moduli space of the deformation problem is given by the Maurer-Cartan variety of E modulo the gauge action. This thesis is divided in two parts. In the first part we will focus on understanding the geometry of the Maurer-Cartan variety on a graded Lie algebra where the gauge group is simple. We obtain that they are projective varieties generated in degree two and invariant under a linear action. We will show that if we take the ideal in degree two of an orbit then the associated Maurer-Cartan variety is irreducible. Proving this we needed, among other things, the enveloping algebra and the structure of weights of representations. In the last part of the thesis we will introduce the Grassmannian and determinantal varieties of com- plexes and of Lie modules. The aim is to analyze the variety of structures of differential graded Lie algebras. We will see that when the gauge group of the structure is simple, the Maurer-Cartan variety associated to this structure are the varieties studied in the first part of the thesis.

"Geometría diferencial de órbitas de estados en álgebras de operadores" (1996). Varela, Alejandro. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Geometría integral del plano y del espacio hiperbólico : Mosaicos aleatorios" (1985). Gutiérrez Giusti, Flora Mercedes. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Glicoproteínas de envoltura del virus Junin : aislamiento y caracterización" (1995). Padula, Paula Julieta. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Glicoproteínas en reproducción : estudios en el espermatozoide humano normal y en el plasma seminal bovino sobre glicoproteínas conteniendo oligosacáridos n-unidos" (1999). Marquínez, Ana Claudia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Como contribución al estudio del rol de los N-glicanos en la fertilización de mamíferos, estudiamos su presencia en la superficie del espermatozoide humano normal y en plasma seminal bovino. Usando lectinas específicas fluorescentes como sondas moleculares localizamos los dominios de glicoproteínas conteniendo oligosacáridos oligomanosídicos, híbridos y complejos en el espermatozoide humano. Con neoglicoproteínas demostramos que los receptores especificos para manosa, fucosa y galactosa, localizan respectivamente en las zonas de dichas glicoproteínas. Esto concuerda con la complementariedad molecular de la interacción espermatozoide-zona (por receptores de doble unión). Por cromatografía lectina-agarosa, demostramos la presencia de glicoproteínas conteniendo oligosacáridos oligomanosídicos, híbridos y complejos en plasma seminal bovino. Aislamos en microescala las proteínas BSP, demostramos que éstas y aSFP, participan (quizás junto con lípidos) en la modulación de la actividad "in vitro" de las proteasas espermáticas. Dicha actividad es incrementada cuando los oligosacáridos fucosilados conteniendo el antígeno Lex está presente. Además cada BSP sola es menos activa que el conjunto de ellas sugiriendo que potenciarían su actividad por efecto sinérgico. Dado que las BSP unen a lípidos, sugerimos que la modulación de la capacitación y reacción acrosomal por parte de las BSP (BSP-HDL)estaría relacionada con la actividad inhibitoriade proteasas acrosomales.

Abstract:
As a contribution to the study of the role of N-glycans in mammalian fertilisation, we studied the presence of this type of compounds on the surface of the normal human spermatozoon and in bovine seminal plasma. Using specific fluorescent lectins as molecular probes, we localised the domains of different oligosaccharides containing glycoproteins on the surface of the human spermatozoon. Using neo-glycoproteins we demonstrated that the specific receptors for mannose, fucose and galactose localize respectiver in same zones than the oligomannosidic. fucosylated and complex oligosaccharides containing glycoproteins. This is consistent with the molecular complementarity of sperm-zona pelucida interaction (by double binding receptors). By lectin-affinity chromatography, demonstrated the presence of oligomannosidic, hybrid and complex oligosaccharides containing glycoproteins in bovine seminal plasma. We isolated the BSP proteins in microscale and demonstrated that these and aSFP protein participate (perhaps together with lipids) in the modulation of sperm proteases activity “in vitro". This inhibitory activity is increased when fucosylated Lex containing oligosaccharides are in the environment of the BSP proteins. Besides each BSP alone is less active than when they are all together, suggesting that they potenciate each other the protease inhibitory activity. We suggest that the known modulation of capacitation and acrosomal reaction by BSP proteins (BSP-HDL)might be related with this activity.

"Glicosidasas de pared celular y su regulación hormonal durante el crecimiento, maduración y postcosecha del fruto de tomate (Lycopersicon esculentum Mill.)" (2001). Sozzi, Gabriel Oscar. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las α- y ,β-D-galactosidasas (α- y ,β-Gal)y α-L-arabinofuranosidasas (α-Af) son enzimas capaces de liberar restos galactosilos y arabinofuranosilos de polímeros pécticos y hemicelulósicos como así también de diferentes glicoconjugados. Algunas de estas glicosidasas han sido vinculadas al ablandamiento de los frutos. En esta Tesis, se desarrollaron métodos de separación de la β-Gal II y de 3 isoformas de la α-Af. Se demostró que la ,β-Gal II es la única ,β-Gal involucrada en la maduración. Asimismo, mediante el uso de frutos de tomate antisentido para la enzima 1-aminociclopropano-l-carboxílico sintasa (ACC-S)se determinó que la actividad de β-Gal lI responde a muy bajas concentraciones de etileno. Los frutos ACC-S presentan una disolución incipiente de los polímeros pécticos de la lámina media, la cual puede ser atribuirse, entre otras causas, a hidrolasas de pared celular capaces de responder a muy bajas concentraciones de etileno. Las isoformas α-Af I y II mostraron actividad durante toda la ontogenia del fruto. α-Af I es la primera enzima de pared dependiente de zinc extraída del pericarpo de fruto de tomate, y sugiere la participación del catión en el metabolismo de la pared celular de los frutos. La actividad de α-Af II es superior al 80% de la actividad arabinofuranosidásica total en frutos de 10 días, pero disminuye durante la maduración. La isoforma α-Af III, en cambio, es específicamente activa durante la maduración y sensible al etileno, aún a muy bajas concentraciones. Se obtuvieron diferentes respuestas de las α-Af al ácido giberélico, auxinas sintéticas y etileno, mediante un nuevo sistema de discos de pericarpo de tomate ACCS. Las isofonnas I y II mostraron incrementos significativos de actividad por la aplicación de ácido giberélico o ácido 2,4-diclorofenoxiacético, mientras que la aplicación de etileno exógeno sólo incrementó la actividad de la isoforma III. Estos y otros resultados sugieren que las enzimas α-Afs están codificadas por una familia multigénica sujeta a distintos comroles hormonales, cuyos miembros desempeñan diferentes funciones in vivo. Esto último se sustenta en la capacidad de extractos de las isoformas de α-Af para liberar arabinosa de diferentes fracciones de la pared celular. Se discuten además los resultados de la influencia de atmósferas controladas y estrés por altas temperaturas in vivo sobre la actividad de α- y β-Gal y α-Af. El sistema in vitro que utiliza pericarpo ACC-S permitirá por vez primera la realización de estudios completos referidos a los efectos fisiológicos de diferentes reguladores sobre la expresión génica y la actividad de diversas enzimas, sin interferencia del etileno generado por heridas al tejido.

Abstract:
α- and ,β-D-galactosidases(α- and ,β-Gal)and α-L-arabinofuranosidases (α-Afs) are plant enzymes that have the capacity to release galactosyl and arabinofuranosyl residues from pectic and hemicellulosic polymers, as well as from different glycoconjugates. Some of these glycosidases have been related to fruit sofiening during ripening. Here, different separation methods for , β-Gal II and three α-Af isoforms were assessed. This thesis shows that , β-Gal II is a ripening-dependent β-Gal in tomato fruit. Moreover, its activity is responsive to very low levels of ethylene, as determined in antisense l-aminocyclopropane-l-carboxylic synthase tomatoes (ACC-S). In electron micrographs, ACC-S fruits showed the incipient dissolution of the middle lamella pectic polymers. This may be attributable, among other causes, to cell-wall hydrolases responsive to very low levels of ethylene. α-Af I and II are active along the entire ontogeny of the fruit. α-Af I is the first zinc-dependent cell wall enzyme isolated from tomato pericarp tissues, and provides evidence for the involvement of zinc in fruit cell wall metabolism. α-Af II is active at a very high level (accounting for over 80% of the total α-Af activity) in 10-day fruit but its activity drops during ripening. In contrast, α-Af III is ethylene-dependent and specifically active during ripening. Moreover, it is sensible even to very low levels of said plant growth regulator. Different α-Af responses to gibberellic acid, synthetic auxins, and ethylene were obtained in a novel ACC-S mature-green tomato pericarp disc system. α-Af I and II displayed increased activity levels when gibberellic acid or 2,4-dichlorophenoxyacetic acid were applied while exogenous ethylene enhanced only α-Af III activity. These and other results suggest that tomato α-Afs are likely to be encoded by a gene family under various hormonal controls, and probably have different in vivo functions. This is based on the capacity of α-Af I- and III-enriched extracts to release arabinose from different cell wall fractions. The influence in Vivo of controlled atmosphere storage and high temperature stress on α- y ,β-Galand α-Af activity are also discussed. The ACC-S pericarp in vitro system will allow comprehensive studies involving the effects of physiological levels of different growth regulators on gene expression and enzyme activity with negligible wound-induced ethylene interfering.

"Glicosilaciones no convencionales en protozoarios" (1995). Merello, Silvana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Parte 1 El mecanismo de glicosilación de los residuos de asparagina de las proteinas es similar en todos los eucariotas: un oligosacárido preformado es transferido co-traduccionalmente a la proteína en el reticulo endoplasmático. Comienza entonces en dicha localización subcelular el procesamiento del mismo. Posteriormente en el aparato de Golgi continúa este proceso que habrá de conducir finalmente a la gran diversidad de oligosacáridos unidos N-glicosidicamente a las proteínas. Los tripanosomátidos son parásitos de considerable importancia médica y económica dado que existe una gran variedad de organismos (vertebrados, invertebrados y plantas) que pueden ser infectados por dichos parásitos. La N-glicosilación en tripanosomatidos presenta caracteristicas especiales como la existencia de moleculas de dolicol extremadamente cortas, la incapacidad de sintetizar oligosacaridos glucosilados unidos a dolicol-P-P, la presencia de oligosacariltransferasas que en sistemas libres de células catalizan la transferencia de oligosacáridos glucosilados y no glucosilados a la misma velocidad, el hecho de que ciertas especies solamente transfieran compuestos truncados (Man6GlcNAc2y Man7GlcNAc2) y, uno ó dos oligosacáridos (Man7GlcNAc2 y/o Man9GlcNAc2 simultáneamente) dependiendo del estadío de diferenciación, la adición de galactofuranosas a compuestos de alta manosa y finalmente la adición de ácido siálico a través de una trans-sialidasa y no por una enzima dependiente de CMP-siálico. En base a esto se decidió estudiar a dos tripanosomátidos con el objeto de determinar la presencia de otras caracteristicas distintivas. Por un lado se analizó a Blastocrithidia culicis, un tripanosomátido monogenético que vive en forma libre en el intestino de varias especies de mosquitos. Ese protozoario transfiere Man6GlcNAc en N-glicosilación. En el presente trabajo se encontró que los oligosacáridos sensibles a endo-β-N-acetilglucosaminidasa H, obtenidos a partir de glicoproteínas totales del parásito, contienen residuos de manosa, xilosa y ramnosa. La composición de alguno de ellos fue la siguiente: Man5GlcNAc2, Man6GlcNAc2, Rha1Man5GlcNAc2, Rha2Man6GlcNAc2, Xyl1Rha2Man6GlcNAc2, Xyl1Rha3Man6GlcNAc2 y Xyl2Rha3Man6GlcNAc2. En oligosacáridos resistentes a endo-β-N-acetilglucosaminidasa H pero sensibles a N-glicanasa, se halló la presencia de unidades de manosa, xilosa, ramnosa y ribosa. Por el otro lado se analizaron las glicoproteinas de Endotrypanum schaudinni, tripanósomátido digenético que alterna su ciclo de vida entre un invertebrado y un vertebrado (perezoso). Se encontró que este parásito transfiere Man7GlcNAc2en la N-glicosilación de proteínas. Los oligosacáridos sensibles a endo-β-N-acetilglucosaminidasa H se identificaron como Man7GlcNAc2, Man6GlcNAc2, Rib1Man6GlcNAc2 y/o Gal1Man6GlcNAcl Man5GlcNAc2 conteniendo dos residuos de ribosa ó galactosa ó uno de cada uno, Rib1Man5GlcNAc2 y Gal1Man5GlcNAc2. Las galactosas se hallan en configuración furanosa. Los glicopéptidos resistentes a endo-β-N-acetilglucosaminidasa H que fueron retenidos por concanavalina A-Sepharose y eluídos con α-metilmanósido contienen residuos de manosa, galactosa y ribosa. Es importante de mencionar que es la primera vez que se describe la presencia de residuos de ribosa en glicoconjugados de eucariotas, de residuos de ramnosa en oligosacáridos unidos a asparagina y de unidades de xilosa en compuestos del tipo de alta manosa. Finalmente, la presencia de galactofuranosas habia sido descripta en varias especies monogenéticas, pero tan sólo en un tripanosomátido digenético como Trypanosoma cruzi. Parte 2 En el presente trabajo se muestra, en membranas de Dictyostelium discoideum, la presencia de una actividad enzimática que transfiere N-acetilglucosamina-I-P, a partir de UDP-GlcNAc, a las proteinas en residuos de serina (UDP-GlcNAc: Ser-proteína N-acetilglucosamina-I-fosfotransferasa). Dicha actividad fue parcialmente purificada por cromatografia de afinidad en concanavalina A-Sepharose y por cromatografia de intercambio iónico en una columna de Mono Q. La enzima mostró una absoluta dependencia de cationes divalentes, siendo el Mn++ más efectivo que el Mgˉˉ. Posee un amplio rango de pH óptimo (6.5-9.0). El Km para el UDP-GlcNAc fite de 18 μM. En ensayos libres de células se utilizaron como sustratos exógenos apomucina y tiroglobulina nativa ó desnaturalizada, mientras que proteínas como la sero albúmina bovina y la uteroferrina nativa o desnaturalizada no mostraron capacidad aceptora para dicha actividad. A partir de un cultivo de células realizado en presencia de fosfato se aislaron proteínas celulares (solubles y de membrana) y del medio de cultivo. En todas las fracciones se encontró la estructura de GlcNAc-1-P-Ser, sin embargo, la mayor proporción se halló en las proteinas secretadas. Al someter microsomas a centrifugaciones en gradientes de sacarosa , la actividad apareció en membranas de menor densidad al compararla con la actividad que fosforila oligosacáridos de alta manosa. Esto mostró que la actividad que fosforila residuos de serina en las proteinas (UDP-GlcNAc: Ser-proteina N-acetilglucosamina-I-fosfotransferasa) es diferente a la que fosforila oligosacáñdos del tipo de alta manosa unidos a las proteinas (UDP-GlcNAc: glicoproteína N-acetilglucosamina-I-fosfotransferasa).

"Glicosilfosfatidilinositoles : su rol en transducción de señales en células de mamífero; estudio de su estructura" (1999). Vaena, Silvia Graciela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los glicosilfosfatidilinositoles (GPIs) son una familia de compuestos que pueden actuar como anclas de proteínas a membranas celulares y también pueden estar libres en estas membranas. Por hidrólisis de GPI con fosfolipasa C específica de fosfatidilinositol (PI-PLC) se libera inositolfosfoglicano (IPG) que ha sido propuesto como segundo mensajero de insulina y otras hormonas. Resultados del laboratorio mostraron que ACTH es capaz de hidrolizar GPI y que un IPG con estructura conservada purificado de Trypanosoma cruzi es capaz de inhibir la acumulación de aldosterona mediada por ACTH en células adrenocorticales de vaca. El objetivo de este trabajo fue estudiar: a) GPIs presentes en corteza adrenal bovina, b) La participación de estos compuestos en la respuesta de ACTH y c) GPI y sus precursores en Schizosaccharomyces pombe, una sistema no estudiado hasta el presente, con el fin de buscar una fuente de GPI para los estudios biológicos. En este trabajo se mostró la presencia de anclas de GPI en corteza adrenal pues se encontraron compuestos suceptibles a ácido nitroso y se purificó parcialmente una enzima anclada por GPI la fosfatasa alcalina, FAL, cuyo ancla fue utilizada como fuente de IPG y se probó su efecto inhibitorio sobre la respuesta de ACTH. Con respecto a la participación de GPI en la respuesta de ACTH, se encontró que esta hormona es capaz de activar una PI-PLC, a través de una proteína G inhibible por toxina de pertussis, Gi/o, en células adrenocorticales, lo que muestra que el receptor de ACTH puede acoplarse a más de un tipo de proteína G (Gs, Gi). La activación de PI-PLC por la hormona sugiere la producción de IPG. Se encontró que un IPG purificado de T. cruzi, fue capaz de inhibir en células adrenocorticales la producción de aldosterona, corticosterona (en rata) y cortisol (en vaca). ACTH utiliza AMPc como segundo mensajero. Los resultados sugieren que el efecto inhibitoriode IPG estaría mediado por una activación de fosfodiesterasa, enzima que degrada AMPc, y una inhibición de PKA. Se sabe que IPG es liberado al medio extracelular y luego entra en la célula donde actúa. En concordancia con este hecho hemos visto que: a) los sobrenadantes de células tratadas con ACTH son capaces de inhibir la respuesta de la hormona y b) el agregado del anticuerpo anti-CRD contra IPG aumenta la acumulación de esteroides mediada por ACTH. Estos resultados muestran que ACTH es capaz de liberar IPG el cual inhibe su respuesta y reafirman la hipótesis de que el IPG participa en la respuesta fisiológica de esta hormona. Por otro lado, con el objeto de obtener una fuente de GPI para realizar los estudios biológicos, más fácil de trabajar que el trypanosoma, se estudiaron GPI y sus precursores, los inositolfosfolípidos, en S. pombe, pues se ha encontrado que en otra levadura, Saccharomyces cerevisiae, estas anclas son abundantes. S. cervisiae es la única levadura cuyos GPIs han sido estudiados hasta el momento por lo cual fue interesante encarar el estudio de otra levadura, Schizosaccharomyces pombe de caracteristicas biológicas diferentes a S. cervisiae. Se ha visto que los inositolfosfolípidos consisten principalmente en fosfatidilinositol y no contienen alquilglicerol ni ceramida. Se ha obtenido la estructura completa de estos inositolfosfolípidos por estudios en TLC, RPTLC y CGL, a partir de cultivos con o sin incorporaciones de palmitico radioactivo. Se encontró un único ácido graso esterificando la posición 2 de fosfatidilinositol y una mezcla en posición 1. A pesar de que no se incorporó ceramida en inositolfosfoceramidas, se demostró la existencia de -esfingomielina, esfingofosfolípido característico de mamíferos, conteniendo ceramida radioactiva. Se detectó una banda de proteínas de PM 19.000 aproximadamente que incorpora -ácido palmitico. Luego de digestión con proteasa e hidrólisis con GPI-PLD se liberaron lípidos marcados que prueban la existencia de anclas en esta fracción. Por otra parte, se evidenció la presencia de GPIs libres en extractos orgánicos por susceptibilidad a ácido nitroso y PIPLC. Estos compuestos, fueron utilizados como fuentes de IPG y se probó su efecto inhibitoriosobre la acumulación de corticosterona por ACTH.

Abstract:
Glycosylphosphatidylinositols (GPIs) are best known as membrane anchors found on many eukaryote plasma membrane proteins ranging from protozoal to mammalian molecules. The hydrolysis of GPI by phosphatidyl-inositol phospholipase C (PI-PLC) releases an inositol phosphoglycan (IPG) which has been proposed to mediate the action of different hormones. Previous studies from our group demonstrated that ACTH was able to induce hydrolysis of GPI and that the IPG derived from T.cruzi inhibited ACTH-mediated accumulation of aldosterone in bovine adrenocortical cells. In this study we have investigated: a) the presence of GPI in bovine adrenal cortex, b) the involvement of this compound in ACTH signaling c) the presence of GPI and its precursors in Schizosaccharomyces pombe in order to obtain a GPI source for biological studies. Compounds sensitive to nitrous acid treatment were found in adrenal cortex which proved the presence of GPI in this system. An enzyme anchored by GPI, alkaline phosphatase, was partially purified from this tissue and was used as a source for IPG. This IPG was able to inhibit ACTH-mediated steroid accumulation. It was found that ACTH activates PI-PLC through a pertussis toxinsensitive G protein, Gi/o, in adrenocortical cells. This indicates that the ACTH receptor can activate different G proteins (Gs, Gi). PI-PLC activation would release IPG. An IPG of chemically defined structure obtained from T. cruzi was shown to inhibit ACTH-stimulated aldosterone and corticosterone production in rat adrenocortical cells as well as cortisol accumulation in bovine adrenocortical cells, suggesting that IPG signaling could be a conserved mechanism in mammalian ACTH action. cAMP is the second messenger in ACTH response. In agreement, IPG inhibition of ACTH action was found to be a consequence of a phosphodiesterase activation and protein kinase A inhibition. It is known that IPG is released to the extracellular medium and then re-enters the cell by an energy-dependent mechanism. Accordingly, we found that: a) the supernatants from ACTH-treated cells were able to inhibit the stimulation of corticosterone production by the hormone; b) the addition of IPG antibodies (anti-CRD) to adrenocortical cells increased ACTH-response. These results demonstrate that ACTH stimulates IPG release which in turn inhibits adrenal steroids production by the hormone. In order to obtain GPI for signaling experiments from an enriched source different from Trypanosoma cruzi, GPI and related lipids from a fission yeast, S. pombe, were studied. At present, S. cerevisiae is the only yeast where GPI structures have been determined and seem to be abundant. It was interesting to study these compounds from another yeast, S. pombe, which differs from S. cerevisiae in several biological features. lnositolphosphoceramide was found to be the main usphingolipid in S. cerevisiae. In contrast, diacylglycerol containing inositol phospholipids have been identified as the unique inositolphospholipids (IPLs) in S. pombe extracts and the complete structure of these compounds have been determined by TLC, RPTLC and GLC from -palmitic acid labeled or non-labeled cultures. A unique fatty acid esterified the sn-2 position of IPLs. In contrast, different fatty acids were found in the sn-1 position of these compounds. Sphingomielin, a sphingophospholipid characteristic of mammalian cells, containing -palmitic acid-labeled ceramide was detected. A GPI-anchored protein of 19 kDa has been found by palmitic acid metabolic labeling. Evidence for free GPIs was shown by nitrous acid release of inositol phospholipids from sugar containing lipids. IPGs obtained from these GPIs by PI-PLC treatment proved to inhibit ACTH action.

"Glicómica: la espectrometría de masa UV-Maldi-Tof como herramienta en la determinación de la vía biosintética de esfingolípidos de hemoparásitos" (2010). Landoni, Malena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Un estudio de “glicómica” sobre un sistema biológico en particular, intenta determinar los hidratos de carbono que una célula u organismo en particular es capaz de sintetizar bajo condiciones fisiológicas específicas. Este tipo de estudio por lo tanto, refleja el perfil de expresión de genes que codifican glicosiltransferasas, glicosidasas y otros componentes dentro de un camino biosintético. La glicómica es un nuevo campo de investigación que permitirá determinar nuevos blancos para diseñar drogas que tendrán un impacto sobre problemas relevantes. La inherente complejidad de los hidratos de carbono exige la utilización de un gran número de técnicas para ese fin. En los últimos años, la espectrometría de masa de alta resolución UV-MALDI-TOF ha sido una de las herramientas más útiles. El presente trabajo presenta un estudio glicómico en la vía biosintética de glicoesfingolípidos de Plasmodium falciparum y Trypanosoma cruzi. Además de la caracterización estructural de los productos de dicha vía, se ha aislado y caracterizado la UDP-glucosa:ceramida glucosiltransferasa, enzima clave de este camino biosintético de ambos hemoparásitos y posible blanco quimioterapéutico. Por otra parte el presente trabajo ha contribuido con el desarrollo de dos metodologías de análisis por espectrometría de masa que trascienden el campo de la química de parásitos: 1- La utilización de esfingolípidos unidos covalentemente a un grupo fluorescente donde el mismo actúa como fotosensibilizador permitiendo el análisis directo por EM. 2- Siendo conocido que los hidratos de carbono pueden ser responsables de la antigenicidad de un glicoconjugado, se llevó a cabo la síntesis de diferentes conjugados carbohidrato-proteína y su caracterización por EM como herramienta para su utilización en ensayos biológicos.

Abstract:
A “Glycomic” study on a particular biological system, attempts to identify the carbohydrate in a particular cell or organism is able to produce under specific physiological conditions. This type of study therefore reflects the expression profile of genes that encode glycosyltransferases, glycosidases and other components in the biosynthetic pathway. The Glycomics is a new field of research that will identify new targets for designing drugs that may have an impact on relevant issues. The inherent complexity of the carbohydrate requires the use of a large number of techniques for this purpose. In recent years, high-resolution mass spectrometry, UV-MALDI-TOF has been one of the most useful tools. In this work we present a glycomic study on the biosynthetic pathway of glycosphingolipids of Plasmodium falciparum and Trypanosoma cruzi. In addition to the structural characterization of the products of this pathway, the UDP-glucose: ceramide glucosyltransferase has been isolated and characterized. This key enzyme of the biosynthetic pathway of both parasites arises as a putative chemotherapeutic target. Moreover this work has contributed to the development of two methods of analysis by mass spectrometry that exceeds the chemistry of parasites: 1 - The use of sphingolipids covalently bound to a fluorescent tag which acts as photosensitizer allowing direct analysis by MS. 2 - Being known that carbohydrates may be responsible for the antigenicity of a glycoconjugate, the synthesis of different carbohydrate-protein conjugates and their characterization by MS was carried out as a tool for use in biological assays.

"Grafos self-clique y otras clases de grafos clique" (2001). Lin, Min Chih. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Dada una familia de conjuntos, el grafo intersección de esta familia es generado colocando un vértice por cada conjunto de la familia y dos vértices son adyacentes si y sólo sí los conjuntos correspondientes se intersecan. El grafo clique de un grafo G (se denota como K (G)) es el grafo intersección de los cliques (cada uno de ellos es un subconjunto de vértices de G que induce un subgrafo completo maximal de G) de G. Por lo tanto, K es un operador que transforma un grafo en otro grafo. Si aplicamos t veces este operador K a un grafo G, el grafo resultante (denotamos como Kt(G)) es isomorfo a G, G se llama grafo t-self-clique (si t = 1, se abrevia como self-Clique). Una familia de subconjuntos S satisface la propiedad de Helly cuando toda subfamilia de S consistente en subconjuntos que se intersecan de a pares tiene intersección no vacía. Un grafo es llamado Clique-Helly si la familia de los cliques del grafo verifica la propiedad de Helly. Presentamos aquí una condición suficiente relacionada con el grado mínimo δ(G) y el girth g(G) de un grafo G para que algunas potencias pares de este grafo sean grafos self-Clique. A través de esta condición conseguimos una nueva familia de grafos self-Clique.También presentamos otra familia de grafos self-Clique generados a partir de los grafos bipartitos que poseen una matriz de adyacencia reducida, simétrica. Además presentarnos una caracterización de los grafos self-Clique para los grafos Clique-Helly. Esta caracterización indica que un grafo G posee una matriz clique AG quasi-simétrica si y sólo sí G es un grafo self-Clique y Clique-Helly. A su vez conjeturamos que en lugar de “una matriz clique quasi-simétrica”, puede ser reemplazada por “una matriz clique simétrica” en la caracterización anterior. A continuación presentarnos dos condiciones suficientes para encontrar grafos 2-self-clique. Las familias de grafos 2-self-clique que surgen de estas condiciones están contenidas en la clase de los grafos Clique-Helly y una de ellas es una extensión de la familia descripta por Escalante en . Los grafos arco-circular son los grafos intersección de arcos alrededor de un círculo. Un grafo arco-circular que tiene una representación de arcos alrededor de un círculo y a su vez estos arcos verifican la propiedad de Helly, se denomina arco-circular Helly. Presentamos también en esta tesis, una caraterización de los grafos clique de los grafos arco-circular Helly. También probamos que los grafos clique de los grafos arco-circular Helly son una subclase de los grafos arco-circular y analizamos la relación entre esta subclase con las otras ya conocidas. Además analizamos algunas propiedades sobre la segunda iteración de grafos clique de los grafos arco-circular Helly. Los grafos circular son los grafos intersección de cuerdas dentro de un círculo. Una subclase de los grafos circular es la de los grafos circular Helly, aquellos que tienen un modelo de cuerdas que verifican la propiedad de Helly. Presentamos una clase de grafos llamada dualmente circular Helly y probamos que los grafos clique de los grafos circular Helly son exactamente los grafos dualmente circular Helly y viceversa. Probamos además que estas dos clases de grafos son distintas. A continuación, introducimos otros conceptos relacionados con los cliques de un grafo, revisamos la definición de los grafos Clique-perfectos y presentamos una familia de grafos altamente clique-imperfectos. Por último, presentamos algunas conclusiones que surgen de este trabajo y las líneas futuras de investigación en estos tópicos, destacando algunos problemas interesantes que permanecen abiertos.

"Granivoría por hormigas del género Pogonomyrmex en el Monte Central: consumo de semillas e impacto sobre el banco de suelo" (2007). Pirk, Gabriela Inés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudió la ecología trófica de Pogonomyrmex rastratus, P. pronotalis y P. inermis para establecer el papel que cumplen como consumidoras de semillas en el Monte central. Las semillas de gramíneas predominaron en la dieta de estas especies. La abundancia de semillas de gramíneas en el ambiente influyó en la dieta: las tres especies acarrearon una mayor proporción de estructuras vegetales e invertebrados, P. rastratus y P. pronotalis consumieron otro tipo de semillas y P. inermis presentó una menor actividad, cuando estas semillas eran escasas. Las semillas de gramíneas fueron también altamente preferidas en experimentos de oferta, siendo la dieta un reflejo de las preferencias. El tamaño de las semillas mostró ser un factor importante en la determinación de las preferencias y de la dieta. La actividad forrajera de P. rastratus y P. inermis disminuyó la abundancia de las semillas más consumidas en las cercanías de los nidos, al menos desde el verano hasta comienzos del otoño. El efecto de la abundancia de semillas sobre el consumo de las hormigas (“desde abajo”) parece prevalecer sobre el efecto del consumo de las hormigas sobre la abundancia de semillas (“desde arriba”) en primavera, mientras que este último podría ser más importante durante el verano y hasta comienzos del otoño. Este estudio muestra que las especies del género Pogonomyrmex son importantes consumidoras de semillas en el Monte central.

Abstract:
The trophic ecology of Pogonomyrmex rastratus, P. pronotalis and P. inermis was studied in order to determine the role they play as seed consumers in the central Monte desert. Grass seeds prevailed in their diet. Grass seed abundance in the environment influenced diet patterns: the three species carried a greater proportion of vegetative plant structures and invertebrates, P. rastratus and P. pronotalis consumed other types of seeds and the activity of P. inermis was lower when grass seed abundance was low. Grass seeds were also highly preferred in seed offer experiments showing that the diet of these species reflects their preferences. Seed size proved important in determining preference and diet patterns. Seed harvesting by P. rastratus and P. inermis affected seed abundance of the most consumed species close to the nest, at least from summer to the beginning of autumn. The effect of seed abundance on ant foraging behaviour ("bottom-up") was more important in spring, whereas the effect of ant consumption on seed abundance ("top-down") prevailed during the summer and the beginning of autumn. This study shows that Pogonomyrmex species are important seed consumers in the central Monte desert.

"Gravedad en tres dimensiones y la conjetura AdS/CFT" (2012). Garbarz, Alan Nicolás. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis son estudiados desarrollos recientes en gravedad en tres dimensiones. Luego de una descripción concisa de los hechos fundamentales de gravedad AdS3, principalmente dentro del marco de AdS/CFT, se presentan los últimos intentos para calcular la función de partición de dicha teoría. En particular, presentamos en gran detalle una novedosa construcción de geometrías con singularidades cónicas, tanto estáticas como rotantes. Estas geometrías darían contribuciones adicionales a la función de partición de gravedad en tres dimensiones. Por otro lado, el rol de la factorización holomorfa es enfatizado con el propósito de motivar la búsqueda de un dual gravitacional a una CFT holomorfa. Explicamos en detalle un posible ejemplo de Li, Maloney, Song y Strominger llamado gravedad quiral, el cual está definido en un punto especial de la gravedad topológicamente masiva con condiciones de contorno de Brown- Henneaux. Comentamos los pros y contras de tal teoría como un dual a una CFT holomorfa y también consideramos la teoría que aparece cuando se imponen condiciones de contorno más relajadas, llamada gravedad logarítmica, que sera dual a una CFT logarítmica. En este contexto, una solución exacta que obedece estas nuevas condiciones de borde, la cual fue encontrada por el autor y colaboradores, es descrita. Finalmente, formulamos en detalle una propuesta original para una nueva gravedad quiral, la cual está dfinida en un punto especial de la teoría de Mielke-Baekler con condiciones de contorno de Brown-Henneaux. Aunque dicha dualidad pueda contenter soluciones con torsión, evita las complicaciones de tener un zoológico de soluciones como es el caso de gravedad quiral: cualquier solución en nuestra propuesta tiene curvatura y torsión constantes. La teoría de Mielke-Baekler genéricamente exhibe un álegbra asintótica dada por dos copias del álgebra de Virasoro. El análisis canónico en el punto quiral donde nuestra propuesta reside es presentado y se muestra como la mitad de los generadores de las simetrías asintóticas desaparecen y la carga central izquierda se anula. Por esto, la quiralidad es manifiesta. Esta tesis está parcialmente basada en resultados que el autor ha publicado en las referencias .

Abstract:
In this thesis, recent developments on three-dimensional gravity are studied. After a concise description of the fundamental facts on AdS3 gravity, mainly within the context of AdS/CFT, recent attempts to compute the partition function of such theory are presented. In particular, we present in great detail a novel construction of geometries with conical singularities, both static and rotating. These are believed to give further contributions to the partition function of three- dimensional gravity. On the other hand, the r^ole played by holomorphic factorization in the dual conformal theory is emphasized in order to motivate the search for a gravitational dual to a holomorphic CFT. We explain in detail one possible example given by Li, Maloney, Song and Strominger, called chiral gravity, which is defined at a special point of topologically massive gravity with Brown- Henneaux boundary conditions. We comment on the pros and cons of such theory as a dual to a holomorphic CFT. We also consider the theory that appears when more relaxed boundary conditions are imposed, dubbed log gravity, presumably being dual to a logarithmic CFT. In this context, an exact solution obeying these new boundary conditions, which was found by the author and collaborators, is described. Finally, we formulate in detail an original proposal for another chiral gravitational theory which is defined at a special point of Mielke-Baekler theory with Brown-Henneaux boundary conditions. Although it may contain solutions with torsion, it avoids the complications of having a wild zoo of solutions as chiral gravity does: Any solution in our proposal is of constant curvature and constant torsion. Mielke-Baekler theory generically exhibits an asymptotic symmetry algebra that can be cast in the form of two copies of the Virasoro algebra. The canonical analysis at the critical point where our proposal takes place is presented and it is shown how half of the generators of asymptotic symmetries disappear and the left central charge vanishes. Thus, chirality is manifest. This thesis is partially based on results that the author has published in references .

"Grupo de renormalización fuera del equilibrio" (2010). Zanella Béguelin, Juan Francisco. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis aplicamos las técnicas del grupo de renormalización para tratar teorías de campos fuera del equilibrio. Dos elementos se combinan en este trabajo: i) la formulación wilsoniana del grupo de renormalización, es decir, la eliminación recursiva de grados de libertad en cierto intervalo de escalas; y ii) el análisis de sistemas cuánticos abiertos mediante las técnicas del funcional de influencia y de las integrales de camino temporal cerrado. El sistema que analizamos es el de un campo escalar con un corte ultravioleta en el impulso. Usamos para describirlo una funcional generadora de camino temporal cerrado, adecuada para calcular la evolución causal y real de los valores de expectación. Integrando explícitamente sobre los modos con impulsos que se encuentran en una capa infinitesimal alrededor del corte, obtenemos una descripción efectiva para el resto de los modos. Iterando el procedimiento, deducimos las ecuaciones de grupo de renormalización, cuyo flujo genera de manera natural términos de ruido y disipación. Este método es usado para estudiar un campo con interacciones de tipo λΦ4 , y los resultados son aplicados a un modelo para calcular el espectro del campo del inflatón en el universo temprano. Mostramos también que las mismas ideas, desarrolladas en principio para una teoría cuántica de campos, pueden emplearse para tratar ecuaciones diferenciales estocásticas. El método es ilustrado deduciendo varios resultados conocidos acerca de la ecuación de Kardar−Parisi−Zhang.

Abstract:
In this thesis we investigate the renormalization group approach to nonequilibrium field theory. To this end, we combine the Wilsonian momentum-space renormalization group (where an effective theory for the long wavelength modes is obtained through the coarse graining of shorter wavelengths) with the closed-time path and influence functional techniques used to describe open quantum systems. The system we deal with in this thesis is a scalar field with a sharp ultraviolet cutoff. Infinitesimal momentum shells are coarse-grained one at a time on a generating functional suitable to cope with systems out of equilibrium. By iterating this operation, we obtain a set of renormalization group equations, which intrinsically generate noise and dissipation. We use these methods to study a scalar field theory with λΦ4 -type interaction terms. In its turn, the results thus obtained are applied to compute the power spectrum of an interacting field in a toy model of inflation. Finally, we show that essentially the same ideas, derived in the context of quantum field theory, can be used to define a convenient nonequilibrium action for stochastic differential equations. We illustrate this point by deducing a number of results related with the Kardar−Parisi−Zhang equation.

"Grupos de compatibilidad miceliana (MCGs) en poblaciones Bonaerenses de Sclerotinia Sclerotiorum" (2003). Durman, Sandra Beatriz. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este estudio se obtuvieron 142 aislamientos de Sclerotinia sclerotíorum (Lib.) DeBary en un área de 25000 km² dentro de la provincia de Buenos Aires,provenientes de cultivos de soja, lechuga y girasol. Se distinguieron 49 grupos de compatibilidad miceliana (MCGs),de los cuales 28 estaban constituidos por dos o mas aislamientos. Las diferentes poblaciones de S. sclerotíorum estaban compuestas por numerosos MCGsy compartieron un perfil de frecuencias de MCGs similar, independientemente del hospedante o del sitio. La aparición de los MCGs difirió entre los diferentes cultivos, solo se encontraron dos MCGs en común entre los tres hospedantes, y aproximadamente el 60% de los MCGs fueron exclusivos para cada uno de ellos. El índice de diversidad de Shannon para los MCGs fue de 0.314 y el 98.4% de la diversidad total correspondió a variaciones dentro de las poblaciones. Las características morfológicas no fueron significativamente diferentes entre MCGs, excepto por el crecimiento miceliano en medio sólido y en medio liquido, y por la cantidad de esclerocios producidos por caja de Petri. Sin embargo, varios de los caracteres morfológicos pudieron relacionarse con el sitio o el hospedante al cual pertenecían los aislamientos. La fecundidad no fue diferente entre los MCGs, si bien pudieron detectarse aislamientos individuales especialmente fecundos. Sobre la base del ensayo in vitro sobre peciolos de apio, no pudieron detectarse diferencias en la agresividad entre los MCGs, siendo mas agresivos los aislamientos provenientes tanto de cultivos de girasol como los recolectados en 9 de Julio y Otamendi. El viraje del colorante azul de bromofenol (BPB),provocado especialmente por la liberación de ácido oxálico, pudo correlacionarse con la cuantificación de dicho ácido por espectrofotometría. Sin embargo, con las condiciones utilizadas en este trabajo no fue posible asociar la liberación de ácido oxálico con la agresividad. Las diferencias en la capacidad para liberarlo variaron entre los MCGs, y entre los aislamientos según su sitio u hospedante de origen, independientemente del método utilizado. El estudio de diferentes medidas fitosanitarios para el control de este patógeno demostró que aunque el uso de fungicidas de la familia de los bencimidazoles puede resultar muy efectivo, existen MCGs que se ven significativamente menos afectados que otros. Otras medidas menos convencionales, tales como la solarización, el anegamiento o el control biológico, no pudieron establecer efectos diferenciales sobre los MCGs, ni sobre los aislamientos según su origen. Un último análisis utilizando las herramientas de la taxonomía numérica indicó que las variables podian agruparse, en varios casos, coincidiendo con su naturaleza, morfológica o fisiológica. Por otro lado, ese mismo analisis evidenció una interesante asociación entre aquellos MCGs mas frecuentes, indicando que estarían compartiendo varias características en común que los harían altamente exitosos al momento de verse reflejados en mayor número en las muestras. A pesar de que los analisis estadísticos detectaron diferencias significativas entre los MCGs a partir de varios de los caracteres analizados, el gran solapamiento de estas diferencias significativas ha impedido establecer grupos discretos claramente definidos a partir de estos caracteres.

Abstract:
In this study 142 isolates of Sclerotinia sclerotiorum (Lib.)DeBary were obtained in a 25000-km² area of the Buenos Aires province, collected from soybean, Lettuce and sunflower fields. Forty-nine mycelial compatibility groups (MCGs) were distinguished overall, 28 of which consisted of two or more isolates. Each of the S. sclerotiorum populations were made up by numerous MCGsand shared a similar frequency profile regardless the host or the site. The occurrence of the MCGs differed among the crops, it was only found two MCGs shared by the three hosts and approximately 60% of the MCGs were unique for each one. The Shannon diversity index for the MCGs was 0.314 and 98.4% of total diversity corresponded to variations of diversity within populations. Morphological characteristics were not significantly different among MCGs, except for the mycelial growth in solid medium and in liquid medium, and for the number of sclerotia produced by Petri plate. Anyway, some of the morphological characters could be related to the site or the host to which the isolates belonged. Fecundity it was not different among MCGs, though some especially fecund isolates could be detected. On the basis of the detached celery petiole assay, it was detected no differences in aggressiveness among MCGs,being more aggressive isolates from sunflower crops and those collected at 9 de Julio and Otamendi. Turning of bromophenol blue dye (BPB),mainly caused by oxalic acid releasing, could be correlated to the spectrophotometric quantitation. But in the present conditions it was not possible to associate oxalic acid releasing with aggressiveness. Differences in ability to release varied among MCGs,and among isolates according their site or host source, irrespective of the used method. The study of different phytosanitary measures for the control of this pathogen showed that though the use of fungicides from benzimidazol family could be very effective, some MCGs were significantly less affected than the others. Others measures, less conventional, such as solarization, flooding or biologícal control, could set neither differential effects on MCGs,nor on isolates according to their source. A last analysis made with the tools of numeric taxonomy indicated that the variables could be grouped, in many cases, in agreement with their nature, morphological or physiological. In addition to that, the same analysis made evident an interesting association among those more frequent MCGs,painting out that such MCGs could be sharing some common characteristics, that made them more successful as to be the most sampled. In spite of the significant differences detected among MCGsby the statistical analysis in many of the analyzed characters, the high overlapping of these differences has made impossible to establish discrete groups clearly defined from those characters.

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