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"Calibración de nucleidos por conteo de coincidencias gamma-gamma en pico suma" (1985). Guevara, Ernesto Alfredo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Calibración radiométrica de pre-lanzamiento de la cámara infrarroja NIRST a bordo del SAC-D" (2015-02-13). Ganopol, Abigail. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo de este trabajo es presentar la calibración radiométrica de pre lanzamiento de la cámara infrarroja New Infrared Sensor Technology (NIRST). NIRST es uno de los ocho instrumentos a bordo de la misión SAC-D/Aquarius puesta en órbita el 10 de junio de 2011. Está compuesta por una cámara en el infrarrojo medio (Middle Wave Infrared) y otra en el infrarrojo térmico (Long Wave Infrared), cada una con 3 arreglos de 512 microbolómetros. NIRST además cuenta con un espejo móvil de berilio con el fin de reducir el período de revisita del instrumento. Con el propósito de calibrar radiométricamente la NIRST en tierra, se llevó a cabo una serie de mediciones en laboratorio utilizando fuentes de cuerpo negro. La calibración absoluta del instrumento se realizó mediante ajustes polinomiales de los datos obtenidos, relacionando la temperatura sensada y la potencia recibida por los detectores con las cuentas digitales. También se realizó la calibración relativa con el fin de obtener una respuesta ecualizada en cada uno de los arreglos. En este caso, se realizaron ajustes polinomiales relacionando las cuentas medidas en cada uno de los microbolómetros de un dado arreglo con respecto a un detector de referencia dentro del mismo arreglo. El grado del polinomio para las calibraciones absoluta y relativa de NIRST, así como la elección del detector de referencia son objeto de análisis en el presente trabajo. También se llevó a cabo la caracterización del espejo estudiando la respuesta en función del ángulo de apuntamiento. El análisis de los datos obtenidos durante la calibración radiométrica puso en evidencia la no uniformidad en la sensibilidad de los microbolómetros que conforman cada arreglo. Por otro lado, resultó necesario utilizar grados elevados en los polinomios de calibración absoluta y relativa indicando esto la no linealidad de los detectores. Con respecto al espejo, si bien el mismo presenta una respuesta lineal, se observó que ésta se depende del ángulo de apuntamiento β. Asimismo, los resultados correspondientes a la caracterización del espejo permitieron descubrir la existencia de un gradiente de temperatura en la superficie emisora de los cuerpos negros de laboratorio empleados durante la calibración radiométrica. En base a los resultados obtenidos en el presente trabajo, se proveen algunas recomendaciones con el objetivo de contribuir a futuras misiones espaciales de la CONAE. Estas sugerencias son aplicables tanto al dise~no del instrumento como a las metodologías de calibración radiométrica de cámaras infrarrojas.

Abstract:
The aim of this work is to present the pre-launch radiometric calibration of the New InfraRed Sensor Technology (NIRST) infrared camera. NIRST is one of the eight instruments on board of SAC-D/Aquarius mission, launched on June 10th 2011. It is composed of a Middle Wave Infrared camera in the mid-infrared region and a Long Wave Infrared camera in the thermal region, with 3 arrays of 512 microbolometers each. NIRST also has a pointing beryllium mirror to reduce instrument' s revisit time. In order to achieve on ground radiometric calibration, several measurements were performed using blackbody sources. The instrument absolute calibration was performed by means of polynomial fits that relate the sensed temperature and its equivalent radiated power to digital numbers. Relative calibration was also performed in order to obtain an equalized response for each array. In this case, polynomial fits relate the counts of an arbitrary detector to those of a reference detector within a given array. Absolute and relative calibration polynomial orders as well as the reference detector selection are matter of analysis in the present work. The mirror characterization studying the response versus scan angle is presented as well. The analysis of the data obtained during the radiometric calibration revealed that microbolometers sensibity within each array is not uniform. High polynomial orders for both absolute and relative calibrations were found necessary, revealing detectors nonlinearity. The mirror presents a linear response that was found to depend on the pointing angle β. The on ground mirror characterization revealed that the laboratory blackbody sources used present a temperature gradient on their emitting surfaces. Considering the results provided in this work, some recommendations for future CONAE missions are presented. These suggestions apply to the instrument design as well as to infrarred cameras calibration methodologies.

"Calor de reacción y constante de velocidad en las transformaciones químicas : Caso particular: oxidación de aldehídas" (1922). Seijó, Margarita I.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Cambio climático y evolución Costera en Argentina" (1999). Kokot, Roberto Roque. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La costa argentina presenta un comportamiento heterogéneo, que depende de distintos parámetros. La variación en la intensidad del proceso erosivo permite dividir la costa según zonas, que responden al clima de olas, nivel del mar, resistencia a la compresión y meteorización de los afloramientos, características geomorfológicas y diseño de contorno costero. La energía de olas, según datos obtenidos, no muestra patrones que consecuentemente permitan efectuar una zonificación, según potencia incidente sobre la costa. Esta imposibilidad se adjudica a la falta de datos oceanográficos. De la observación de olas y geoformas consecuentes se determina que la energía de olas en la costa ubicada aproximadamente al sur del paralelo 42, es mayor que en el área norte. Esta observación puede estar enmascarada por una menor exposición del contorno a las olas. El nivel del mar como influyente en los procesos erosivos, se refiere a los eventos de tormenta y amplitudes de marea, que permitan una incidencia de olas a niveles superiores sobre la línea de costa. La incidencia de tormentas y los rangos de marea mayores, también se dan en el área austral. Los valores de resistencia a la compresión, que determinan el grado de erosionabilidad de los afloramientos indican que las rocas más resistentes corresponden a los afloramientos de volcanitas y sedimentitas muy consolidadas. Los afloramientos con bajo grado de consolidación, en general corresponden al Terciario y Pleistoceno, y presentan un bajo grado de resistencia a la erosión. La incidencia de olas, sumada a las características del contorno y la disponibilidadde sedimentos sueltos sobre la línea de costa indican grados de deriva litoral, que se traducen en movilidad, exposición a las olas de los afloramientos y consecuente erosión sobre la costa. En los principales ríos patagónicos, no se dan las condiciones hidráulicas para el transporte de gravas. La falta de aporte de material tamaño grava por parte de los ríos actuales a la costa, indica que las formas de acreción presentes en la faja litoral, constituidas por esa fracción clástica, corresponden a formas relícticas. La condición de formación de esos depósitos se daba en períodos en que los caudales imperantes estaban en relación con los tamaños de cauce. La erosión se da primero por falta de acumulación directa (la carga de los ríos no llega a la línea de costa) y segundo por el efecto de erosión inducida ya que al no saturarse los flujos por el aporte fluvial,estos lo hacen a expensas de la erosión de los afloramientos costeros. El nivel de base de los rios del Pleistoceno se hallaba unos 150 metros más bajo que en el presente, por ello es de esperar la presencia de líneas de costa sumergidas con abundante material proveniente de los mismos durante esos períodos. La presencia de cañones submarinos en el área costera, en continuidad con cauces de ríos actualmente efímeros o permanentes de baja capacidad erosiva, indica un cambio climático y no sólo un cambio en el nivel del mar. Entre las características de las geoformas de erosión marina, se describe la presencia de Terraplenes Litorales (Ramparts). Dentro de un modelo de evolución, elaborado en función de la relación entre olas incidentes y contorno costero, se presentan las tendencias a la erosión o acumulación de la faja costera. Los afloramientos del Terciario, presentes en el área costera patagónica, se hallan en erosión. Durante el Cuatemario alto, la costa fue afectada por variaciones relativas del nivel del mar y cambios climáticos que desactivaron en gran medida el sistema fluvial. La composición arenosa de las playas patagónicas habría provenido, principalmente, de la erosión de las rocas del Terciario mientras que las gravas provienen de los sedimentos glacifluviales genéricamente denominados "Rodados Patagónicos".

Abstract:
The Argentine coast presents a dissimilar behavior, which depends on various parameters. Regarding changes in the intensity of the erosive processes, the coast can be divided into zones that depend on wave climate, sea level, outcrop compression strength and resistance to meteorización, geomorphologic characteristics and coastal configuration. According to the obtained data, there are no wave energy patterns, which would allow coast zoning in terms of incident wave power. This is caused by the lack of oceanographic data. Wave energy on the coast south of parallel 42 appeared to be greater than northwards of the mentioned parallel from wave and consequent land form observations. This observation could be masked by a lesser exposure of the coastline to the waves. Sea level has influence on erosive phenomena, since storm surges and tide amplitude allow wave incidence at higher coastline levels. Storms and high tide ranges take place in the southern area. Extrusive rocks and very consolidated sedimentary rocks are the most resistant to erosion, which can be concluded from compression strength values. These values determine the outcrop vulnerability to erosion. The outcrops with a low degree of consolidation are generally Tertiary and Pleistocene and have a low resistance to erosion. Wave incidence added to the coastal configuration and loose sediments availability on the coastline mark degrees in littoral drift, which can be translated into mobility,outcrop exposition to waves and consequent coast erosion. Hydraulic conditions for gravel transport is not present in the main rivers of Patagonia. The accretion gravel landforms in the coast are relictic, due to the lack of gravel input by rivers at present. The generation of the mentioned gravel land forms took place when the volume of the river flows was related to the dimensions of the riverbeds. Erosion begins due to the lack of accumulation (the river load does not reach the coastline) and continues as induced erosion. Induced erosion means that, since littoral drift is not saturated due to river input, the coastal outcrops saturate it. The base level of the Pleistocene rivers was about 150 meters under the present base level, thus the presence of submerged coastlines with abundant fluvial material from that period is expected. Not only a sea level but also a climatic change can be concluded from the presence of submarine canyons in the coastal area, which are the continuation of river-beds belonging to rivers that are ephemeral or have a low erosive capacity. Among the characteristics of the erosion land forms, the presence of ramparts is described. The erosion or accretion trends of the coastal area are presented within an evolution model, based on the relationship between incident waves and coastal configuration. The Tertiary outcrops in the coastal area of Patagonia are undergoing erosion at present. During the High Quaternary, the fluvial system was deactivated due to relative sea level and climatic changes. Sand in the beaches of Patagonia could mainly arise from erosion of the Tertiary rocks, while gravel is originated from glacifluvial sediments, commonly called “Rodados Patagónicos”.

"Cambios en el uso del suelo y sus efectos a diferentes escalas espaciales y temporales sobre la diversidad de aves en el Bajo Delta del río Paraná" (2016-03-29). Sica, Yanina Vanesa. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las actividades humanas han modificado una gran proporción de la superficie terrestre. Sus impactos son extensos en particular sobre la biodiversidad y los bienes y servicios que proveen los ecosistemas. Los humedales son uno de los ecosistemas más afectados por el cambio en el uso del suelo poniendo en riesgo su elevada biodiversidad y los numerosos bienes y servicios ecosistémicos que brindan. En Argentina, el Bajo Delta del Río Paraná es un extenso mosaico de humedales que sostiene una alta biodiversidad. Sin embargo, es una región de alta vulnerabilidad frente a procesos naturales y actividades humanas. En los últimos años el incremento en la actividad ganadera y forestal en la zona ha propiciado una intensificación de las prácticas de manejo de agua (terraplenes, diques y zanjas) que provocan el desecamiento de la vegetación palustre generando un proceso de pampeanización del humedal. Los cambios en el uso y las coberturas del suelo pueden generar cambios e impactos negativos en la biodiversidad. El objetivo de este trabajo fue evaluar el cambio en la diversidad de aves asociado al cambio en el uso del suelo. En primer lugar, se caracterizó el cambio en el uso y las coberturas del Bajo Delta en los últimos 14 años. Mediante imágenes satelitales Landsat 5 TM y 8 OLI se desarrollaron mapas de cobertura y uso del suelo para 1994/99 y 2013, y con árboles de regresión potenciados (BRT) se cuantificó la influencia de variables socioeconómicas, biofísicas y de manejo en la pérdida de humedales (cobertura de vegetación palustre). En segundo lugar, se identificaron los efectos del cambio en el paisaje sobre las aves utilizando dos aproximaciones: un análisis espacial de la riqueza de especies asociada a la estructura del paisaje actual resultante del proceso de pampeanización, y un análisis temporal de los cambios en la riqueza de especies asociados a los cambios en el paisaje en los últimos 14 años. Por un lado, se estudió la relación entre las aves y la composición y configuración del paisaje. Se muestrearon aves por censo de puntos cubriendo todas las coberturas y usos del suelo del Bajo Delta no insular y se cuantificó la influencia de la estructura del paisaje y usos en la riqueza y densidad de aves. Por otro lado, se evaluó la relación entre el cambio temporal en la comunidad de aves (1997-99 vs. 2011-12-13) y el cambio temporal en la composición del paisaje (1999 y 2013). A partir de un muestreo de aves por censo de puntos realizado en 1997 y 1999 en el Bajo Delta no insular, se remuestrearon los mismos puntos en 2011, 2012 y 2013 y se analizó el cambio temporal en la riqueza y composición de aves asociado al cambio en el uso y la cobertura del suelo. En sólo 14 años, un tercio de la cobertura de vegetación palustre del Bajo Delta se perdieron (163.000ha), el 70% de los mismos fueron convertidos en tierras ganaderas y el 20% en plantaciones forestales. Las variables que representan el uso del suelo resultaron los factores determinantes de la pérdida de vegetación palustre, en particular la densidad ganadera y el área endicada. Aunque la densidad de ganado no tiene un efecto negativo sobre la riqueza de aves, la homogeneización del paisaje (producto de la pampeanización del Bajo Delta no insular) caracterizada por una reducción de la cobertura de vegetación palustre y una expansión de la cobertura de pastizales, tuvo un efecto negativo sobre la riqueza total de aves y por gremio de hábitat. La comunidad de aves cambió de 1997/99 a 2011/13. La especies de humedal fueron las más afectadas especialmente si se comparan años húmedos, indicando un efecto importante tanto de la dinámica hidrológica natural como de los cambios en las coberturas del Bajo Delta no insular. A largo plazo, la comunidad de aves estaría controlada por la estructura del paisaje, aunque respondería débilmente a los cambios en la estructura del paisaje en sólo 14 años. En resumen, el proceso de pampeanización del Bajo Delta se ha extendido, convirtiendo grandes extensiones de vegetación palustre en pastizales secos aptos para la actividad ganadera. Las aves del Bajo Delta no insular responden a esta pampeanización con cambios en la composición de especies. Por ello, es urgente y necesaria la gestión sostenible de los humedales del Delta del río Paraná. Los resultados de este trabajo pueden ser insumos para el desarrollo de normativas nuevas y otras existentes que, de manera efectiva, desaceleren la pérdida de humedales en esta región tan importante no sólo por la alta biodiversidad que alberga sino por los bienes y servicios que brinda a la comunidad local y a los pobladores de la principal área urbana de Argentina.

Abstract:
Wetlands are among the most productive and diverse ecosystems on Earth. Land use changes that modify its original landscape are one of the main threats to global biodiversity. In Argentina, the Lower Delta of Paraná River is characterized by its high biodiversity due to its particular environmental heterogeneity. However, it is being extremely modified. Forestation and intensification of livestock have caused profound landscape alterations by converting the original land covers (freshwater marshes and rushes) into pastures. This conversion can affect biodiversity in the region, especially birds that rely on wetland habitat. This project aims to understand fist, the effects of land use changes on land covers and second, avian response to land use change to contribute to landscape management and avian conservation in the Lower Delta of Paraná River. First, we detected land use change in the Lower Delta of Paraná River with Landsat images from 1999 and 2013. Then, we analyzed the relationship between birds and landscape composition and configuration. Finally, we related land use changes with changes detected in the avian community from 1997-99 to 2011-12-13. We found that one third of the freshwater marshes of the Lower Delta were lost in only 14 years (163,000 ha). The majority (70%) of the losses were due to conversion to pastures and 20% due to conversion to forestry plantations. Cattle density, dammed area and accessibility were the most important factors determining freshwater marshes conversion. Avian richness responded negatively to landscape homogenization on the long term, characterized by a decrease in freshwater marshes and an increase in grasslands. The community differed from 1997-99 to 2011-12-13, wetlands species richness decreased, especially when comparing years of wet hydrological condition. However, the relationship between avian richness change and landscape change in the last 14 years was weak. In summary, freshwater marshes loss is widespread in the Lower Delta, it has eroded the avian community, and further habitat loss seems imminent. Conservation efforts should be focused in this vulnerable ecosystem before full-scale land conversion occurs. Our results show that cattle management intensification has profoundly changed the landscape structure of the Lower Delta of Paraná River with substantial wetlands loss, likely having deep negative impacts in birds and potentially other biodiversity groups and ecosystem services. As a consequence, these results can be used as inputs for the development of land use planning and natural resource management to ensure conservation of biodiversity and ecosystem services to benefit local communities.

"Cambios en la propagación de la onda de marea en la Plataforma Continental y el Río de la Plata, asociados a cambios en el nivel medio del mar y los ciclos de la descarga continental" (2014-03-07). Tejedor, Moira Luz Clara. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El conocimiento de la marea es de gran importancia para todas las regiones costeras del mundo, sobre todo aquellas que poseen grandes ciudades ubicadas sobre las costas. Aunque clásicamente la marea ha sido pensada como un fenómeno estable y determinístico, una serie de estudios recientes sugieren que las mismas podrían sufrir cambios significativos a lo largo del tiempo, como consecuencia de cambios morfológicos, de la ocurrencia de ciclos en el forzante atmosférico del océano o del aumento del nivel del mar debido al cambio climático. Las consecuencias ambientales, sociales y económicas que podrían provocar cambios en las mareas son amplias y variadas, e involucran las inundaciones, la generación de energía renovable, el transporte de sedimentos, la navegación, la morfología costera y de fondo, la ubicación de los frentes de marea y los hábitats inter-mareales y la circulación termohalina, entre otros aspectos. Los cambios de escala grande podrían tener impacto global, pero aún los cambios más regionales y locales deben ser comprendidos tanto como sea posible para incorporarlos en los esquemas de predicción de la marea y los modelos de marea que se utilizan con muchos fines prácticos. Por lo tanto, el estudio de dichos cambios ya sea a través del análisis de observaciones históricas como de modelado numérico es muy relevante. En consecuencia, el objetivo general de esta Tesis es estudiar y cuantificar potenciales cambios en la propagación de la marea en las aguas costeras argentinas que puedan resultar del cambio climático y la variabilidad climática, así como comprender los mecanismos intervinientes. La primera parte tiene como objetivo particular estudiar el impacto de un potencial aumento del nivel del mar que pudiera ocurrir como consecuencia del cambio climático en la propagación de la marea en la Plataforma Continental Argentina, contribuir a la comprensión de los mecanismos de los potenciales cambios e identificar las áreas más sensibles. En la segunda parte se postula que, en el caso particular del Río de la Plata, las constantes armónicas de marea podrían también cambiar con la descarga continental, que muestra significativas variaciones temporales asociadas a los ciclos de El Niño - Oscilación del Sur. Éste podría ser un efecto adicional y potencialmente mucho más significativo que el aumento del nivel del mar por efecto invernadero, al menos en el corto plazo. El segundo objetivo particular de esta Tesis fue, por lo tanto, estudiar el potencial impacto de los ciclos naturales de variabilidad inter-anual de la descarga continental en la propagación de la marea en el Río de la Plata, comprender los procesos físicos involucrados y determinar la porción del estuario que puede ser afectada por este fenómeno. El estudio, en general, es realizado mediante el análisis de las pocas observaciones históricas disponibles y simulaciones numéricas.

Abstract:
The knowledge of tides is very important for coastal regions, especially those with large cities located on their coasts. Although classically the tide has been thought as a stable and deterministic phenomenon, a number of recent studies suggest that they could undergo significant changes over time as a result of morphological changes, the occurrence of cycles in the atmospheric forcing of the ocean or the sea level rise due to climate change. The environmental, social and economic consequences of changes in the tides are wide and varied, and involve flooding, renewable energy generation, sediment transport, navigation, coastal and bottom morphology, location of tidal fronts and intertidal habitats, and the thermohaline circulation, among others. The large scale changes might have global impact, but even the more regional and local ones should be understood as much as possible to incorporate them into the tidal prediction schemes and tidal models used for many practical purposes. Therefore, the study of such changes either through the analysis of historical observations or numerical models is very relevant. Accordingly, the general aim of this Thesis is to study and quantify potential changes in the propagation of the tide in the Argentine coastal waters that may result from climate change and climate variability and to understand the mechanisms involved. The first part has the particular aim of studying the impact of a potential sea level rise that might occur as a consequence of climate change on the propagation of the tide in the Argentinean Continental Shelf, contributing to the understanding of the mechanisms of the potential changes, and identifying the most sensitive areas. In the second part it is postulated that, in the particular case of the Río de la Plata, tidal harmonic constants might also change with continental discharge, which shows significant temporal variations associated with El Niño - Southern Oscillation cycles. This could be an additional effect, potentially much more significant than the increase in sea level by greenhouse effect, at least in the short term. The second specific aim of this Thesis is, therefore, to study the potential impact of the natural cycles of inter-annual variability of the continental runoff in the propagation of the tide in the Río de la Plata, to understand the involved physical processes and to determine the portion of the estuary that may be affected by this phenomenon. The study, in general, is faced by analyzing the few available historical observations and by means of numerical simulations.

"Cambios morfológicos y funcionales en la corteza adrenal en un modelo animal de resistencia a la insulina inducida por la administración de una dieta rica en sacarosa" (2013-03-11). Martinez Calejman, Camila. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La activación del eje hipotálamo-hipófiso-adrenal ha sido ampliamente descripta tanto en pacientes como en modelos animales de insulinorresistencia (IR). Sin embargo, el efecto del desarrollo de este estado de IR sobre la función adrenal no ha sido dilucidado por completo. En este sentido, el objetivo del presente trabajo de tesis fue estudiar los cambios morfológicos y funcionales que ocurren en la glándula adrenal en animales con insulinorresistencia inducida por una dieta rica en sacarosa (DRS). Los animales del grupo DRS mostraron un mayor peso corporal y de sus depósitos lipídicos junto con una alteración en el perfil metabólico característica de la IR en la séptima semana de tratamiento. En cuanto a la función adrenal, estos animales presentaron mayores niveles basales de corticosterona circulantes y una respuesta disminuida al ACTH exógeno. En forma paralela observamos un aumento en los niveles de expresión de proteínas claves de la esteroidogénesis (StAR y CYP11A1) y una disminución en la expresión del receptor de ACTH (MC2R). Las glándulas adrenales del grupo DRS fueron más pequeñas y livianas que las de los correspondientes controles y mostraron un aumento en la infiltración lipídica con predominio de triglicéridos. Demostramos también que los animales alimentados con DRS desarrollan en forma local un estado inflamatorio evidenciado por el aumento en la expresión de citoquinas y marcadores proinflamatorios, en la actividad de NOS y en la expresión de COX-2. También observamos un incremento del sistema de HO-1, posiblemente como respuesta a la generación de estrés oxidativo en la corteza adrenal. La desregulación en la actividad de estos sistemas posiblemente también afecte la esteroidogénesis adrenal. Finalmente estudiamos el efecto de dos tratamientos insulinosensibilizadores. Tanto el tratamiento farmacológico como la implementación del protocolo de ejercicio lograron prevenir las alteraciones funcionales y morfológicas observadas en la corteza adrenal de los animales alimentados con DRS.

Abstract:
Studies performed both in humans and in animal models of insulin resistance (IR) show hyperactivation of the hypothalamus-pituitary-adrenal axis. However, a possible direct effect of the IR state on the adrenal function has not been fully investigated. The aim of the present studies was to analyze morphological and functional changes arising in the adrenal cortex of adult Wistar male rats rendered insulin resistant by means of a sucrose rich diet (SRD). The SRD group showed an increase in body weight and lipid depots, as well as a characteristically altered metabolic profile at the seventh week of dietary treatment. At this time point, SRD animals showed elevated basal serum corticosterone concentrations, and a diminished response to ACTH injection. In parallel, higher expression levels of key proteins involved in steroidogenesis (StAR and CYP11A1), and a lower expression of the ACTH receptor (MC2R) were detected. Adrenal glands from the SRD group were smaller and lighter than those from the matching control group and showed an increased lipid infiltration. Animals fed a SRD also developed a local inflammatory state evidenced in the adrenal cortex by an increased cytokine and proinflammatory markers expression as well as an increase in NOS activity and in the expression of COX-2. We also detected an induction of the HO-1 system, possibly as a response to the oxidative stress generated within the adrenal cortex. Dysregulation of these systems may also affect adrenal steroidogenesis. Finally we studied the effect of two proven insulin-sensitizing treatments. Both therapies were able to prevent the morphological and functional changes observed in the adrenal cortex of the animals that received the SRD.

"Cambios poblacionales y comportamentales en guanacos (Lama guanicoe) asociados con la caza furtiva y su restricción en Patagonia norte" (2016-06-06). Radovani, Natalia Inés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La sobreexplotación por cacería es una de las amenazas más importantes para la supervivencia de los mamíferos a escala mundial, siendo los ungulados uno de los grupos de mamíferos más afectados. En algunos casos el aumento de la caza está asociado a la apertura de accesos que facilitan la llegada de cazadores a sitios previamente inaccesibles. El guanaco ha sido extirpado del 70% de su rango de distribución debido al impacto de actividades humanas como la caza y la ganadería. En esta tesis presento un análisis de los cambios poblacionales y comportamentales del guanaco asociados al incremento del acceso de cazadores a través de una extensa red de caminos de exploración petrolera en el norte de Patagonia y la reversión de algunos de esos cambios luego de 10 años de cierre de caminos y aumento del contralor. En el capítulo 1 analizo los cambios en la densidad, estructura social y proporción de crías de guanaco en un área de 15.000 km² en el norte de la provincia de Neuquén en el período 1982 a 2007. Estimé estas variables por medio de transectas de conteo estacional de guanacos a lo largo de caminos secundarios durante 2002-2007 y las comparé con datos disponibles para 1982-3 de transectas terrestres y aéreas. Luego de 25 años de caza furtiva desde una amplia red de caminos petroleros y con escaso contralor por guardas las densidades promedio disminuyeron 93-96% en tres sitios. El tamaño promedio de los grupos se redujo de 11.4 (ES=1.4) y 8.1 (ES=1.6) a 5.0 (ES=0.7) y 5.0 (ES 0.4) guanacos por grupo en dos de los sitios de muestreo. Las proporciones de crías no cambiaron significativamente. En base a una comparación entre siete sitios con diferente densidad de caminos petroleros, puntos de acceso desde caminos principales y densidad de ganado concluí que la densidad en 2002-2007 estuvo asociada de manera negativa principalmente con la disponibilidad de puntos de acceso a los caminos petroleros y en menor medida con la densidad de ganado. En el capítulo 2 presento los resultados de un experimento de restricción de caza furtiva en un sector de 3.990 km² del área de estudio considerada en el capítulo 1. Entre 2002 y 2005 diseñé junto a mi grupo de trabajo y técnicos provinciales una serie de cierres para restringir el acceso por cazadores furtivos. Hipoteticé que la caza furtiva limita la abundancia de guanacos y provoca cambios en su estructura social, distribución y comportamiento a través del aumento de la mortalidad y el acoso y que si la caza es restringida sus efectos se revierten. En febrero de 2006 una empresa petrolera, por solicitud de la Dirección de Áreas Protegidas de Neuquén, cerró 376 caminos petroleros en los sitios que indiqué y en 2010 reforzó 94 de esos cierres en un área de 2200 km² que abarcó cinco de los sitios experimentales, manteniéndose tres sitios sin cierres. Paralelamente a partir de 2005 la Dirección de Áreas Protegidas y la de Contralor incrementaron el esfuerzo de patrullaje. Entre 2002 y 2015 registré en los ocho sitios el esfuerzo de patrullaje y el ingreso de vehículos no autorizados por medio de sensores de tránsito y monitoreé la densidad estacional, estructura social, proporción de crías y comportamiento de escape relevando 6.417 km en 37 transectas permanentes. Clasifiqué a los ocho sitios por esfuerzo de restricción de caza alto, medio y bajo por el porcentaje de caminos cerrados y los kilómetros recorridos mensuales para contralor por guardafaunas y guardaparques. El contralor se incrementó en el período 2005-15. El número de vehículos por mes no autorizados que registré con los sensores disminuyó significativamente en todos los sitios de estudio y fue menor en los sitios con esfuerzo medio y alto de restricción. Registré un total de 5.978 grupos de guanacos en las transectas. En dos de los cinco sitios con esfuerzo medio y alto de restricción de caza hubo aumentos de densidad de guanacos. En otros dos de esos cinco sitios hubo aumentos iniciales de densidad pero en ambos las densidades se redujeron significativamente durante el resto del estudio. Estas tendencias declinantes pudieron estar asociadas a la actividad de caza de las únicas dos familias de pobladores locales que cazaron con frecuencia en el área de estudio. En los tres sitios sin cierre de caminos (esfuerzo bajo de restricción) y en otro de los sitios de esfuerzo medio no hubo aumentos de densidad durante el estudio. La distancia de acercamiento hasta escape aumentó en todos los sitios con esfuerzo medio y alto de restricción de caza y no se modificó en los sitios con esfuerzo bajo. El tamaño de grupos familiares y de solteros y la proporción de solitarios no respondieron positivamente en ninguno de los sitios. Otros factores que pueden haber afectado mis resultados fueron las distancias de cada sitio a las ciudades de las que provienen los cazadores que operan con vehículos y las distancias a fuentes de inmigración poblacional de guanacos. Mis resultados ilustran la necesidad de enfoques de largo plazo y gran escala espacial para entender los procesos biológicos que afectan a las poblaciones sometidas a intensa caza furtiva y provee fundamentos para planificar acciones de recuperación y monitoreo de poblaciones y de evaluaciones de la efectividad de las intervenciones. En el capítulo 3 evalué la contribución relativa de la restricción de caza furtiva, la densidad relativa de ganado y la productividad primaria (EVI) sobre la densidad de guanacos durante un período de restricción progresiva de la caza). Analicé la asociación entre las estimaciones de densidad anuales de guanacos durante 2004-10 y las covariables mencionadas mediante un modelo lineal mixto de tipo Poisson considerando el año como variable aleatoria. El análisis indicó que la productividad primaria y la tasa de encuentro de ganado tuvieron asociaciones negativas con la densidad de guanacos y que hubo más guanacos en sitios con alta y media restricción de caza. Sin embargo, para ganado y EVI los coeficientes de la regresión fueron muy bajos, indicando que estas dos variables tuvieron escasa influencia sobre la densidad de guanacos. El ganado en la región tuvo una tendencia declinante en el período de estudio. Este estudio resalta la importancia de la restricción de caza furtiva (a través de un conjunto de acciones como el cierre de caminos y el aumento de contralor como algo fundamental en la recuperación de guanacos a través de los años. Esta tesis es la primera evaluación sistemática de las respuestas poblacionales y comportamentales del guanaco a la caza y su restricción. En el estudio consideré diferentes escalas temporales y espaciales para evaluar los efectos de la caza favorecida por el desarrollo hidrocarburífero y compararlos con otros disturbios antrópicos y ambientales. Mis resultados pueden ser aplicados a la remediación de los impactos de la caza y al monitoreo de la efectividad de las acciones implementadas y de las respuestas de las poblaciones a dicha remediación.

Abstract:
Unsustainable hunting is one of the major threats to the persistence of mammals worldwide, and ungulates are one of the groups of mammals that is most affected. In some cases hunting is greatly increased when hunters gain access to previously inaccessible sites with the construction of new roads. Guanacos have been extirpated from 70% of their range due to the impact of human activities such as hunting and livestock husbandry. In this thesis I present an analysis of the changes in demography and behavior of guanacos associated with an increase in access for hunters through an extensive network of oil exploration trails in northern Patagonia, and the reversal of some of these changes over 10 years after closing of oil trails and an increase in control of illegal hunting. In Chapter 1, I analyze the changes in density, social structure, and proportion of guanaco young in a 15,000 km² area in northern Neuquén Province in the period between 1982 and 2007. I estimated these variables by means of seasonal transect counts of guanacos along secondary roads during 2002-2007 and compared them to data available for 1982-3 from terrestrial and aerial transects. After 25 years of poaching from a wide network of oil trails and with little control by rangers the mean densities decreased 93-96% in three sites. The mean group size reduced from 11.4 (SE=1.4) and 8.1 (SE=1.6) to 5.0 (SE=0.7) and 5.0 (SE=0.4) in two of the study sites. The proportions of young did not change significantly. Based on a comparison between seven sites with different density of oil trails, access points from main roads, and guanaco density, I concluded that the density in 2002-2007 was negatively associated mainly with availability of access points to oil trails and to a lesser extent with livestock density. In Chapter 2, I present the results of an experiment of restriction of poaching in a 3,990 km² section of the study area considered in Chapter 1. Between 2002 and 2005 I designed together with my work group and provincial technicians a series of oil trail closings to restrict access by poachers. I hypothesized that poaching limits the abundance of guanacos and causes changes in their social structure, distribution, and behavior due to increase in mortality and harassment, and that if poaching is restricted its effects will be reverted. In February 2006 an oil company, by request of the Department of Protected Areas of Neuquén, closed 376 oil trails and in 2010 reinforced 94 of those closings in sites which I indicated in a 2,200 km² area that included five of the experimental sites. Three of the sites remained without closings. Simultaneously, since 2005 the Department of Protected Areas of Neuquén and the Department of Wildlife Rangers increased their patrolling efforts. Between 2002 and 2015 I obtained records of patrolling by rangers and recorded entrance of unauthorized vehicles in the eight sites by means of traffic sensors. I also monitored the seasonal density, social structure, proportion of young, and flight behavior of guanacos in these sites by surveying 6,417 km in 37 permanent transects. I classified the eight sites into high, medium, and low effort of restriction of poaching based on the percentage of oil trails that were closed and kilometers traveled each month by rangers for control of poachers. Control increased in the 2005-15 period. The number of unauthorized vehicles entering per month that I registered with traffic sensors diminished significantly in all the study sites, but was lower in the sites with medium and high restriction efforts. I registered a total of 5,978 guanaco groups in the transects. In two of the five sites with medium and high restriction effort there was an increase in guanaco density. In another two of the five sites there were initial increases in density, but in both the densities were reduced significantly during the rest of the study. These declining tendencies may have been associated with hunting activities by the only two families of local residents who hunted with frequency in the study area. In the three sites without road closings (low restriction effort) and the other medium effort site there was no increase in density during the study. The distance observers could approach until there was a flight response increased in every site with medium and high hunting restriction and was not modified in the sites with low effort. The size of family groups and bachelor groups and the proportion of solitary animals did not respond positively in any of the sites. Other factors that could have affected my results were the distances of each site to the cities that hunters with vehicles come from and the distances to source populations for immigration by guanacos. My results illustrate the need for long-term and large-scale approaches in order to understand the biological processes that affect the populations subjected to intensive poaching, and provide foundations for planning population recovery and monitoring effectiveness of interventions. In Chapter 3, I evaluated the relative contributions of restriction of poaching, livestock density, and primary productivity (EVI) on guanaco densities, during a period of increasing restriction of hunting. I analyzed the association between annual guanaco density during 2004- 10 and the covariates by means of a mixed linear Poisson model considering the year of the survey as a random variable. The analysis indicated that primary productivity and had negative associations with the density of guanacos, and that there were more guanacos in sites of high and medium restriction of hunting. Nevertheless, the coefficients for EVI and livestock were very small, indicating that these two variables had a very small influence on density of guanacos. Livestock density had a declining tendency during the study period. This study demonstrates the importance of reducing poaching (through a combination of actions such as closing roads and increasing patrols as fundamental for the recuperation of guanaco populations over time. This thesis is the first systematic evaluation of the population and behavioral responses of guanacos to hunting and its restriction. I considered different temporal and spatial scales to evaluate the effects of hunting that was favored by hydrocarbon development and compare them to other human and environmental disturbances. My results can be applied to the mitigation of poaching, and to monitoring the effectiveness of actions implemented and population responses of guanacos to mitigation efforts.

"Canales Kv1.3 median la hiperexcitabilidad de las interneuronas colinérgicas estriatales en un modelo de ratón de la enfermedad de Parkinson" (2016-09-01). Tubert, Cecilia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La acetilcolina moduladores de la función córticoestriatal. Desbalances en su disponibilidad pueden resultar en desórdenes neuropsiquiátricos como la enfermedad de Parkinson. La acetilcolina es liberada por las interneuronas colinérgicas estriatales (ICE), que presentan actividad tónica dependiente de mecanismos intrínsecos, y respuestas fásicas a entradas excitatorias talámicas que codifican eventos ambientales relevantes como recompensas. Un trabajo reciente demostró que las ICE se encuentran hiperactivas en un modelo de rata de la enfermedad de Parkinson. Nuestro primer objetivo fue identificar las corrientes que regulan la excitabilidad de las ICE en rodajas de cerebro de ratón, utilizando la acomodación (disminución de la descarga de potenciales de acción durante una despolarización sostenida) como indicador. Encontramos que la margatoxina, así como otros bloqueantes selectivos y el knock out de la subunidad Kv1.3, reducen fuertemente la acomodación de las ICE y la corriente de K+ subyacente. También encontramos que este canal regula la actividad tónica de estas neuronas, como así también la integración sináptica de inputs glutamatérgicos. Sorprendentemente, también encontramos que este canal participa de la corriente IsAHP de las ICE, descripta clásicamente como una corriente de K+ sensible a Ca2+, pero de la cual hasta el momento no se habían identificado sus componentes. Luego nos propusimos evaluar si cambios en los canales que contienen la subunidad Kv1.3 contribuyen generar las alteraciones de excitabilidad que se observan en ICE de ratones modelo de la enfermedad de Parkinson. Observamos que, al igual que en ratas, las ICE tienen una excitabilidad aumentada en ratones modelos de la enfermedad de Parkinson, la cual es insensible a la margatoxina. También encontramos que las ICE de los ratones parkinsonianos poseen una integración sináptica aumentada y que las corrientes sensibles a margatoxina son de menor amplitud. En conjunto, nuestros resultados revelan un rol importante de los canales que contienen la subunidad Kv1.3 en la excitabilidad de las ICE, en la regulación de su actividad tónica y en la integración de señales externas. En animales modelo de la enfermedad de Parkinson la función de estos canales estaría alterada, contribuyendo a su fenotipo hiperexcitable. Estos resultados nos permiten pensar en los canales Kv1.3 como un potencial nuevo blanco terapéutico para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson.

Abstract:
Acetylcholine (ACh) and dopamine are the main modulators of corticostriatal function. Disbalances in their availability may result in neuropsychiatric disorders like Parkinson´s disease (PD). ACh is released by striatal cholinergic interneurons (SCINs), which present tonic activity that depends on intrinsic mechanisms, and phasic responses to excitatory thalamic inputs that codify salient stimuli like rewards. Recent work showed hyperactive SCINs in a rat model of PD. Here our first aim was to identify currents that regulate SCINs excitability in mouse brain slices, using accommodation (reduction of firing during a sustained depolarization) as an index of excitability. Our results show that margatoxin, as well as other selective blockers and the knock-out of Kv1.3 subunit, reduce accommodation and the underlying K+ current in SCINs. We also found that this channel regulates tonic activity and integration of glutamateric inputs in SCINs. Surprisingly, we also found that in SCINs this channel contributes to the IsAHP current, which so far is described as a Ca2+ dependent K+ current whose molecular correlates have not been identified. We then decided to evaluate if changes in the kv1.3 current contribute to alterations observed in SCINs excitability in a mouse model of PD. As it is the case in rats, SCINs become hyperactive after chronic nigrostrital degeneration in the mouse. Importantly, hiperexcitable SCINs are insensitive to margatoxin in the mouse PD model. Moreover, SCINs of parkinsonian mice have an increased synaptic integration and smaller margatoxin sensitive currents compared to sham mice SCINs. Altogether, our results reveal an important role of channels containing Kv1.3 subunit in SCINs excitability, in the regulation of their tonic activity and in their synaptic integration of external signals. In PD the function of these channels might be altered, contributing to their hyperexcitable phenotype. These results let as nominate Kv1.3 channels as potential new target of antiparkinsonian therapy.

"Canales de calcio y liberación del neurotransmisor en sinapsis normales y en regeneración de la placa neuromuscular de vertebrados" (1997). Katz, Eleonora. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El Ca²+ es un eslabón clave entre la llegada del potencial de acción al terminal sináptico y la liberación del neurotransmisor (Katz, 1969; Katz & Miledi, 1970). El rápido incremento en ext que ocurre ante la despolarización de la membrana terminal es el resultado de la apertura de canales de Ca²+ dependientes de voltaje (CCVD) que permiten la entrada de Ca²+ desde el medio extracelular (Llinás y col., 1976; Augustine & Charlton, 1986). Basándose en sus características biofísicas y farmacológicas se han descripto varias clases de CCVD, los cuales han sido clasificados en los tipos T, L, N y P (Bean 1989; Llinás y col., 1992; Olivera y col., l994; Dunlap y col., 1995). Más recientemente han sido descriptos los canales de tipo Q, un tipo de canal estrechamente relacionado con los de tipo P, y los canales tipo R, los cuales son resistentes a cualquiera de las drogas y toxinas antagonistas de los otros tipos de CCVD (Zhang y col., l993; Randall & Tsien, l995). Se ha mostrado que varios de estos CCVD, particularmente los de tipo N, L, P y Q, están involucrados en la liberación del neurotransmisor en diferentes sinapsis (ver Olivera y col., 1994; Dunlap y col., 1995). En Ia placa neuromuscular madura del ratón, la transmisión sináptíca es mediada por la entrada de Ca²+ a través de canales de tipo P (y/o Q) (Uchitel y col, l992; Protti & Uchitel, 1993; Bowersox y col., 1995; Hong & Chang, 1995; Wright & Angus, 1996). En esta preparación se ha demostrado que la w-AgaIVA, un bloqueante de CCVD de tipo P y Q, ejerce un fuerte efecto inhibitorio sobre la liberación de ACh (Wessler y col., 1995), las corrientes presinápticas de Ca²+ y sobre la liberación evocada neuralmente y por alto K+ (Protti & Uchitel, l993, Hong & Chang, 1995; Bowersox y col., 1995; Wright & Angus, 1996). En vista de la falta de efectos de la (w-CgTx (Sano y col., 1987, Protti y col., 1991; Bowersox y col., 1995) y las DHPs (Atchinson, 1989), se piensa que los canales de tipo N y L no tienen una participación significativa en el proceso de liberación en condiciones normales. En la placa neuromuscular de la rana, se demostró que la w-CgTx ejerce un fuerte efecto antagónico sobre la liberación (Kerr & Yoshikami, 1984; Sano y col., 1987; Koyano y col., 1987) mientras que los antagonistas de los canales de tipo L resultan ineficaces (Sano y col., 1987). Se ha demostrado también que los sitios de unión de la w-CgTx están co-localizados con las zonas activas de liberación dela presinapsis enfrentados justo a los sitios de unión de la α-bungarotoxina en la postsinapsis (Robitaille y col., 1990; Cohen y col., 1991). Estas evidencias indican que los canales de tipo N se hallan involucrados en el proceso de liberación en este sistema. Durante el curso de la maduración de la unión neuromuscular de vertebrados, se han reportado cambios en la farmacología de los CCVD acoplados al proceso de liberación en aves (Gray y col., l992) y anfibios (Fu & Huang, 1994). Se desconoce, sin embargo, la farmacología de los canales de Ca²+ acoplados al proceso de liberación en las sinapsis recientemente formadas de la unión neuromuscular de mamíferos. Objetivos El propósito de este estudio fue evaluar por medio de técnicas electrofisiológicas y farmacológicas que tipos de CCVD están involucrados en la liberación del neurotransmisor en la placa neuromuscular normal de mamíferos (ratón) y anfibios (rana) y correlacionar el perfil farmacológico del proceso de liberación con el de las corrientes presinápticas de calcio y de potasio activada por calcio, Ica, y Ikca, respectivamente. Otro objetivo del presente trabajo fue evaluar si se producen cambios en los CCVD acoplados al proceso de liberación durante la reinervación de la placa neuromuscular. Métodos Para estudiar la placa neuromuscular normal del ratón, los experimentos se llevaron a cabo en el músculo diafragma o en el levator auris longus de ratones macho adultos de la cepa Swiss de 20-30 g de peso corporal. Para estudiar las placas del ratón durante la regeneración, se utilizaron ratones adultos a los cuales se les había provocado un daño “crush” a la rama auricular posterior del nervio facial que inerva al levator auris izquierdo. Los animales control y los desnervados en diferentes etapas luego de la restauración de la transmisión sináptica fueron anestesiados e inmediatamente desangrados. Par estudiar la placa neuromuscular de la rana los experimentos se realizaron en el músculo cutaneous pectoris de Rana caluesbiana de 40-60 g de peso corporal. Las ranas fueron matadas por doble punción (medular-cerebral). El músculo correspondiente, junto con el nervio motor que lo inerva, fue removido y luego disecado en una caja de Petri con base de Sylgard conteniendo la solución de Ringer normal adecuada para cada preparación. Para ratón, (en mM): NaCl, l37; KCl, 5; CaCl2, 2; MgSO4, 1; NaHCO3, 12; Na2HPO4, 1; glucosa, 11, continuamente burbujeados con 95% O2/5% CO2. Para rana, (en mM): NaCl, ll5; KCl, 2; CaCl2, l.8; MgCl2, 1 y HEPES, 5; pH 7.3. La preparación fue luego transferida a la cámara de registros a la cual se le suministró las distintas soluciones de trabajo. Los experimentos fueron realizados a temperatura ambiente (19-23 °C), excepto en algunos casos en los cuales se varió la temperatura de la cámara de registros. la misma fue controlada (i l °C) por medio de dispositivos termoeléctricos Peltier. Los potenciales de placa evocados (EPPs) y espontáneos (MEPPs) fueron registrados intracelularmente con microelectrodos de vidrio convencionales llenados con KCl 3M (resistencia 10-20 MΩ). El contenido cuántico de la respuesta evocada en solución de Ringer normal se evaluó por el método de la varianza (Martin, 1966). La contracción muscular fue suprimida por medio de d-tubocurarina. Luego de impalar una fibra muscular, el nervio fue estimulado, mediante un electrodo de succión, en forma continua durante 1 min a 0.5 Hz y luego se registraron 50-100 EPPs sucesivos. En las solución de bajo Ca²+-alto Mg²+, el contenido cuántico se evaluó por el método directo o por el método de las fallas (Martin, 1966). Las corrientes presinápticas se registraron mediante microelectrodos de vidrio llenados con NaCl 2M (resistencia 5-15 MΩ) insertados, bajo control visual, en la vaina perineural de las ramas finas del nervio (Mallart, l985a). Los músculos fueron incubados en solución de Ringer normal en presencia d-tubocurarina 30-50 μM. La Ica y la Ik(ca) se obtuvieron mediante el agregado de bloqueantes de los canales de potasio. Para discriminar los distintos tipos de canales de Ca²+ presentes en estos terminales motores se utilizaron las siguientes drogas y toxinas: Nitrendipina, una dihidropiridina antagonista de los CCVD de tipo L. FTX, toxina derivada del veneno de la araña Agelenopsis aperta, bloqueante de los CCVD de tipo P w-AgaIVA, toxina derivada del veneno de la araña Agelenopsis aparta, bloqueante de los CCVD de tipo P y Q. w-CgTx, toxina derivada del veneno del caracol marino Conus geographus bloqueante de los CCVD de tipo N. w-MVIID y w-MVIIC toxinas derivadas del veneno del caracol marino Conus magus, bloqueantes de los canales de tipo N, P y Q. Resultados Placa Neuromuscular Normal del Ratón La w-AgaIVA (l00 nM) y las omega conotoxinas w-MVIIC (1 μM) y w-MVIID (3 μM), antagonizaron fuertemente la liberación del neurotransmisor (> 80-90% de bloqueo). La w-CgTx (5 μM) y la nitrendipina (10-20 μM) no resultaron efectivas. La liberación fue más sensible a la acción de la w-MVIIC (IC50 = 39 nM) que a la w-MVIID (le0 = 1.37 pM). Luego de bloquear la liberación casi completamente (contenido cuántico ~ 0.3% de su valor control) con w-MVIIC 3 μM, elevar la ext de 2 a lO mM causó un incremento de ~2Ox, tanto en el contenido cuántico estimado como en la amplitud del EPP. La liberación evocada en solución de bajo Ca²+-alto Mg²+ (baja probabilidad de liberación, contenido cuántico = 2.02 ± 0.08) y la liberación evocada en Ringer normal (contenido cuántico = 90.5 ± 3.7) presentaron la misma sensibilidad a la acción de la w-AgaIVA (IC50= 16.8 nM y 14.4 nM, respectivamente) Tanto la Ica como la Ikca, resultaron altamente sensibles a bajas dosis de w-AgaIVA (10-30 nM). Estas corrientes presinápticas fueron también fuertemente antagonizadas por la w-MVIIC (1 μM). Placa Neuromuscular Normal de la Rana La liberación evocada fue bloqueada por la FTX (IC50 = 0.02 μl/ml) y por la w-CgTx (1 μM) pero no fue afectada por la w-AgaIVA (0.5 μM). La FTX (0.1 μl/ml) causó un incremento de ~2x en la frecuencia de MEPPs tanto en la solución de Ringer normal como en la de bajo Ca²+/alto Mg²+ y no afectó la amplitud de los MEPPs en ninguna de las dos condiciones. La Ica fue bloqueada completamente por la w-CgTx (5 μM), parcialmente bloqueada por la FTX (l μl/ml) y no fue afectada por la w-AgaIVA (0.5 μM). La Ikca resultó fuertemente antagonizada por la caribdotoxina (300 nM), bloqueante de los canales de K+ activados por Ca²+, y completamente suprimida por BaCl2 (200 μM). Esta corriente fue también bloqueada por la w-CgTx (5 μM) y por CdCl2 (200 μM) pero no fue afectada por la FTX (1 μl/ml). El bloqueo ejercido por la w-CgTx no pudo ser revertido por el aumento del ext a 10 mM. Placa Neuromuscular de Ratón en Regeneración La liberación evocada neuralmente fue bloqueada por la w-AgaIVA, (30 y 100 nM causaron ~50 y 90% de inhibición, respectivamente). La w-CgTx (1 y 5 μM), como ocurre en las placas normales, no afectó significativamente este tipo de liberación durante la reinervación. La nitrendipina (1-10 μM), antagonizó fuertemente la liberación (~40-60% de bloqueo) en estos terminales inmaduros. La liberación espontánea no resultó dependiente de la entrada de Ca²+ a través de los CCVD de tipo P ni de tipo L. Ni la w-AgaIVA 100 nM ni la nitrendipina 10 μM, afectaron la amplitud o la frecuencia de los MEPPs. La liberación evocada por alto K+ fue dependiente de la entrada de Ca²+ a través de CCVD de tipo P y/o Q (w-AgaIVA 100 nM redujo ~ 70% de la frecuencia de MEPPs evocada por K+). Los canales de tipo L no parecen participar de este tipo de liberación ya que la nitrendipina 10 μM careció de efecto alguno. En los músculos en reinervación, la nitrendipina (10 μM), indujo un aumento significativo (~ 25%) en la latencia del EPP. Esta droga también provocó un incremento (~ 0.3 ms) en la latencia de las corrientes perineurales. La w-CgTx y la w-AgaIVA no causaron ningún efecto sobre la latencia del EPP. Conclusiones El fuerte efecto inhibitorio sobre la liberación del neurotransmisor y las corrientes presinápticas Ica, e Ikca, ejercido por todas las toxinas que tienen como blanco a los canales de tipo P y Q y la falta de efecto de los bloqueantes específicos de los canales de tipo N y L, aportan más evidencias de que la transmisión sináptica en los terminales motores normales de la placa neuromuscular de mamíferos, es mediada por la entrada de Ca²+ a través de CCVD de tipo P (y/o Q) y que los canales de tipo N y L, no tienen una participación significativa en este proceso. En los terminales sinápticos normales de la rana, el influjo de Ca²+ es mediado principalmente por CCVD de tipo N. Sin embargo, el hecho de la w-CgTx antagonizara todos los procesos dependientes de Ca²+ mientras que la FTX afectara fuertemente la liberación y parcialmente la lcu sin afectar la Ikca, sugiere que en estos terminales motores habría dos poblaciones de canales w-CgTx sensibles, una de las cuales no tiene un perfil farmacológico compatible con los canales de tipo N clásicos. La liberación del neurotransmisor estaría mediada por esta población de CCVD con farmacología mixta. En las sinapsis recientemente formadas de la placa neuromuscular del ratón, como ocurre en las sinapsis maduras, los canales de tipo P (y/o Q) tienen un rol prominente en la liberación evocada del neurotransmisor y los canales de tipo N no participan significativamente de este proceso. Asimismo, la conducción de la señal nerviosa y la liberación del neurotransmisor se vuelven altamente sensibles a la nitrendipina. Esto sugiere que los canales de tipo L participan del proceso de liberación del neurotransmisor en las sinapsis inmaduras de la placa neuromuscular de mamíferos. Podemos concluir que en la placa neuromuscular de vertebrados, desde un punto de vista farmacológico, existe heterogeneidad en los tipos de canales de Ca²+ acoplados a la liberación de Ach en diferentes especies. Asimismo, en una misma especie, las condiciones fisiológicas y/o patológicas modifican el grado de participación de los diferentes tipos de CCVD en el proceso de liberación.

Abstract:
Ca²+ is a key link between the arrival of an action potential to the synaptic terminal and the release of neurotransmitter (Katz, 1969; Katz & Miledi, 1970). The rapid increase in i that occurs upon depolarization of the terminal membrane is accomplished by the opening of voltage gated calcium channels (VDCC) that allow the entry of Ca²+ from the extracellular space (Llinás et al, 1976; Augustine & Charlton, 1986). Several types of VDCC have been described based on their biophysical and pharmacological characteristics and classified into the types T, L, N and P (Bean 1989; Llinás et al., l992; Olivera et al, 1994; Dunlap et al, 1995). More recently, the Q-type, a channel closer related to the P-type, and the R-type, a channel resistant to any of the drugs and toxins commonly used to block and discriminate the other types of VDCC, have been described (Zhang et al., 1993; Randall & Tsien, 1995). Many of these VDCC, particularly the N, L, P and Q-types, have been shown to play a role in synaptic transmission at different synapses (for reviews see Olivera et al., 1994 and Dunlap et al., 1995). At the mature mouse neuromuscular junction, synaptic transmission is mediated by Ca²+ entry through P-type channels (and/or Q-type) (Uchitel et al., l992; Protti & Uchitel, 1993; Bowersox et al., 1995; Hong & Chang, 1995; Wright & Angus, 1996). In this preparation, omega agatoxin IVA, w-AgaIVA, a P- and Q-type VDCC blocker has been demonstrated to exert a strong inhibitory effect on ACh release (Wessler et al., 1995), calcium presynaptic currents and on both neurally and K+-evoked transmission (Protti & Uchitel, 1993, Hong & Chang, 1995; Bowersox et al, 1995; Wright & Angus, 1996). In view of the lack of effects of the w-CgTx (Sano et a|., 1987, Protti et al., 1991; Bowersox et al., 1995) and DHPs (Atchinson, 1989), the N and L type channels are thought not to have a significant participation in the release process under normal conditions. At the frog neuromuscular junction, w-CgTx, was shown, by electrophysiological studies, to strongly antagonize transmitter release (Kerr & Yoshikami, 1984; Sano et al., 1987; Koyano et al, 1987) whereas L-type channel antagonists are ineffective (Sano et al., 1987). It has also been demonstrated that w-CgTx binding sites are in close proximity to the presynaptic release active zones in register with the α-bungarotoxin binding sites at the postsynapsis (Robitaille et al., 1990; Cohen et al., 199l). These results point to N-type channels as those most likely to be involved in the release process in this system. During the course of maturation of the vertebrate neuromuscular junction, there have been reported changes in the pharmacology of the VDCC coupled to the process of release in avian (Gray et al., 1992) and amphibian (Fu & Huang, 1994) preparations. Little is known, however, about the pharmacology of Ca²+ channels coupled to the release process in recently formed synapses of the mammalian neuromuscular junction. Aims In the present study we aimed at evaluating, by means of an electrophysiological and pharmacological approach, which type/s of VDCC are involved in transmitter release at the mature mammalian (mouse) and amphibian (frog) neuromuscular junctions and to correlate the pharmacological profile of the release process with that of the calcium and the calcium activated potassium presynaptic currents, Ica, and Ikca,respectively. We also aimed at evaluating whether there are changes in the channels coupled to the release process during the process of reinnervation of the mouse neuromuscular junction. Methods To study the mature mouse NMJ, the experiments were carried out on either the diaphragm or the levator auris longus muscles of adult male Swiss mice weighing 20-30 g. To study the immature mouse NMJ, adult mice were anesthetized with 2% tribromoethanol (0.15 ml/10 g body wt; I.P.) and the posterior auricular branch of the facial nerve that supplies the left levator auris was crushed with forceps close to its entry to the caudal part of the muscle. Control (normal) and denervated animals at different stages after restoration of functional transmission were anesthetized and immediately exsanguinated. To study the frog NMJ, the experiments were carried out on the isolated cutaneous pectoris preparation of the frog Rana cataesbiana weighing around 40-60 g. Frogs were killed by stunning immediately followed by double-pithing. The corresponding muscle with its nerve supply was excised and dissected on a Sylgard-coated Petri dish containing the corresponding normal Ringer solution. For mice, (in mM): NaCl, 137; KCl, 5; CaCl2, 2; MgSO4, 1; NaHC03, 12; Na2HPO4, 1; glucose, 11, continuously bubbled with 95% O2/5% CO2. For frogs, (in mM): NaCl, 115; KCl, 2; CaCl2, 1.8; MgCl2, 1 and HEPES, 5; pH 7.3). The preparation was then transferred to the recording chamber to which the different working solutions and drugs were supplied. Experiments were performed at room temperature (19-23 °C). In some experiments the temperature in the recording chamber was controlled (± 1 °C) throughout the experiment by means of Peltier thermoelectric devices. Evoked endplate potentials (EPPs) and miniature endplate potentials (MEPPs) were recorded intracellularly with conventional glass microelectrodes filled with 3M KCl (10-20 MΩ resistance). The mean quantal content of the evoked response in normal Ringer solution was estimated by the coefficient of variation method (Martin, 1966). Muscle contraction was prevented by d-Tubocurarine (d-Tc). After impalement of a muscle fibre, the nerve was continuously stimulated for 1 min at 0.5 Hz and then 50-100 successive EPPs were recorded (minimum 10 fibres per muscle). In the low Ca²+-high Mg²+ solutions the mean quantal content was evaluated by the either the direct or the failures method (Martin, 1966). Presynaptic currents were recorded by means of glass microelectrodes filled with 2 M NaCl (5-15 MΩ resistance) inserted, under visual control, into the perineurial sheath of small diameter nerve bundles (Mallart, l985a). The muscles were incubated in normal Ringer solution in the presence of 30-50 μM d-Tc in order to avoid any postsynaptic contribution to the records. The Ica and Ikca were obtained in the presence of potassium channel blockers. To discriminate the different types of Ca²+ channels the following drugs and toxins were used: Nitrendipine, a dihydropyridine antagonist of the L-type VDCC. FTX, a toxin derived from the venom of the funnel-web spider Agelenopsis aperta, a P-type VDCC antagonist. The toxin w-AgaIVA, also derived from the venom of A. aperta, which blocks both P and Q-type VDCC. The toxin w-CgTx, derived form de venom of the marine snail Conus Geographus, which specifically blocks N-type channels and the toxins w-MVIIC and w-MVIID, both derived from the venom of the marine snail Conus magus, which target P, Q and N-type VDCC. Results Normal mouse NMJ w-AgaIVA (100 nM) and the omega contoxins w-MVIIC (1 μM) and w-MVIID (3 μM) strongly antagonized transmitter release (> 80-90% blockade) whereas w-CgTx (5 μM) and nitrendipine (10-20 μM) were ineffective. The process of release was much more sensitive to w-MVIIC (IC50= 39 nM) than to w-MVIID (IC50 = 1.37 μM). After almost completely blocking transmitter release (quantal content ~ 0.3% of its control value) with 3 μM w-MVIIC, elevating the external from 2 to 10 mM induced an increase of ~20-fold on the amplitude and quantal content of the EPP. Nerve-evoked transmitter release in a low Ca²+-high Mg²+ medium (low release probability: quantal content = 2.02 ± 0.08) and in the normal Ringer solution (quantal content = 90.5 ± 3.7) presented the same sensitivity to w-AgaIVA (IC50 = 16.8 nM and 14.4 nM, respectively). Both the calcium and calcium-dependent potassium presynaptic currents, Ica and Ikca, respectively, were highly sensitive to low doses (10-30 nM) of w-AgaIVA. The Ica and the Ikca, were also strongly antagonized by 1 μM w-MVIIC. The most remarkable difference between the action of these two toxins was the long incubation times required to achieve maximal effects with co-MVIIC. Normal Frog NMJ Evoked transmitter release was blocked by FTX (IC50 = 0.02 μl/ml) and by w-CgTx (1 μM) but was not affected by co-AgaIVA (0.5 μM). When FTX (0.1 μl/ml) was assayed on spontaneous release either in normal Ringer's or in low Ca²+/high Mg²+ solution, it was found not to affect miniature endplate potential (MEPP) amplitude but to increase MEPP frequency by ~2-fold in both conditions. The Ica was blocked by w-CgTx (5 μM), partially blocked by FTX (1 μl/ml) and not affected by w-AgaIVA (0.5 μM). The Ikca was strongly affected by charybdotoxin (ChTx) (300 nM), an antagonist of the calcium-activated K+ channels and completely abolished by BaCl2 (200 μM). This current was also blocked by w-CgTx (5 μM) and by CdC12(200 μM) but was not affected by FTX (1 μl/ml). The blockade by w-CgTx could not be reversed by elevating o to 10 mM. Newly formed Mouse NMJ Nerve-evoked transmitter release was blocked by w-AgaIVA, (30 and 100 nM w-AgaIVA caused ~50 and 90% inhibition, respectively). The toxin w-CgTx (1 and 5 μM), as occurs in normal preparations, did not significantly affect this type of release during reinnervation. Nitrendipine (1-10 μM), strongly antagonized release in these reinnervating muscles (~40-60% blockade). Spontaneous release was not dependent on Ca²+ entry through either P- or L-type VDCC. Neither 100 nM w-AgaIVA nor 10 μM nitrendipine affected the miniature endplate potential (MEPP) frequency or amplitude. K+-evoked release was dependent on Ca²+ entry through VDCC of the P-type family (100 nM w-AgaIVA reduced ~70% of the K+-evoked MEPP frequency). L-type VDCC were found not to participate in this type of release (10 μM nitrendipine lacked any effect). In reinnervating muscles, nitrendipine (10 μM), induced a significant increase (~ 25%) in the latency of the evoked endplate potential (EPP). This drug also caused an increase (~ 0.3 ms) in the latency of the presynaptic currents. Neither w-CgTx nor w-AgaIVA affected the latency of the EPP. Conclusions The strong inhibitory effects on transmitter release and presynaptic calcium and calcium-activated K+ presynaptic currents exerted by the toxins that target P- and Q-type VDCC (w-AgaIVA, w-MVIIC and w-MVIID) and the lack of effect of the selective N-type and L-type VDCC antagonists (w-CgTx and nitrendipine, respectively) provides more evidence that synaptic transmission at the mature mammalian neuromuscular junction is mediated by Ca²+ entry through P and/or Q-type channels and that N and L-type VDCC are not involved. In frog synaptic terminals, Ca²+ influx is mediated mainly by VDCC of the N-type. However, the fact that w-CgTx antagonized all the Ca²+ dependent processes whereas FTX affected transmitter release and the Ica without affecting the Ikca, suggests that two populations of w-CgTx- sensitive channels might coexist, one of them bearing a pharmacological profile not consistent with the N-type as described in mammals. Transmitter release seems to be mediated by this latter population of VDCC. At the newly formed mouse neuromuscular junctions, as occurs in mature preparations, VDCC of the P-type family play a prominent role in evoked transmitter release whereas N-type channels are not involved in this process. Besides, signal conduction and transmitter release become highly sensitive to nitrendipine during reinnervation. This suggests that L-type VDCC may play a role in synaptic transmission at the immature mammalian neuromuscular junction. We conclude that at the vertebrate neuromuscular junction, from the pharmacological point of view, there is heterogeneity in the types of Ca²+ channels coupled to the release of Ach in different species. Besides, within the same species, the physiological and or pathological conditions modify the degree of participation of the different types of VDCC in the release process.

"Canales de potasio activados por calcio : aspectos de su regulación y papel fisiológico en la función uterina" (1995). Pérez, Guillermo Javier. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Cancrosis del álamo en plantaciones comerciales de la región del Comahue. Estado actual y perspectivas" (2014-03-26). Pozzo Ardizzi, María Cristina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El agente causal de la Cancrosis del Álamo es Septoria musiva y entre las especies e híbridos del género Populus hay genotipos que van desde tolerantes a muy susceptibles. La hipótesis de esta tesis estableció que esos diferentes comportamientos se debían a diferencias anatómicas y fisiológicas en los órganos susceptibles que constituían mecanismos de defensa pasiva que podían regular la intensidad de los síntomas. Utilizando métodos histológicos se describieron y compararon diversas características foliares y caulinares en clones susceptibles (´I 214`e ´I 488`) y tolerantes (´Conti 12` y ´Ballestra`). Mediante análisis de Componentes Principales se determinó que los clones tolerantes poseían hojas más gruesas, con células epidérmicas y cutículas de mayor espesor generando una superficie foliar lisa, con un menores densidades estomáticas y tallos con peridermis más gruesas, con una menor superficie lenticelar, y con cortezas que forman las peridermis necrofilacticas más próximas a las lesiones, que los clones susceptibles. Debido a que los clones más difundidos presentaban diferentes niveles de incidencia en los diferentes valles irrigados de la región del Comahue, se realizaron muestreos en diferentes localidades y el patógeno sólo fue encontrado en los valles de Viedma, General Conesa y Río Colorado.

Abstract:
The causal agent of the Septoria Leaf Spot and Stem Canker is Mycosphaerella populorum and there are genotypes that ranging from tolerant to very susceptible among Populus species and hybrids. The hypothesis of this thesis established that those different behaviors were due to anatomical and physiological differences in the susceptible organs constituting passive defense mechanisms that could regulate the symptoms intensity. Different characteristics of the stem and foliage were described and compared in susceptible (´I 214 'e ´I 488') and tolerant (´Conti 12' and ´Ballestra') clones using histological methods. Through Principles Components Analysis was determined that the tolerant clones had thicker leaves, with thicker epidermis and cuticles, with a lower stomata densities and thicker peridermis stems, with a lower lenticelar surfaces, and with cortex that form the necrophilactic periderm closer to injuries, than the susceptible clones. Since the most widespread clones had different levels of incidence in the different irrigated valleys of the region of Comahue, samplings were carried out in different locations and the pathogen was only found in the Viedma, General Conesa and Colorado River valleys.

"Caos cuántico en sistemas dependientes de un parámetro" (1999). Wisniacki, Diego A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis se estudian distintas manifestaciones cuánticas del caos en sistemas dependientes de un parámetro. Los sistemas considerados son de una y dos dimensiones. A fin de estudiar las leyes de decaimiento temporal de sistemas Hamiltonianos cuasiligados, hemos considerado dos pozos de potencial unidimensionales de paredes oscilantes, poblados con partículas no interactuantes. A nivel clásico, mostramos que las leyes de decaimiento pueden ser cualitativamente distintas para los diferentes movimientos de las paredes, de acuerdo con las características de las órbitas periódicas atrapadas en cada caso. Sin embargo, la dinámica cuántica no muestra esa diferencia. Por otro lado, hemos estudiado diferentes aspectos de la mecánica cuántica de un billar caótico de contorno deformable y area fija. En estos sistemas los niveles de energía experimentan interacción repulsiva que se manifiestan como cruces evitados cuando se varía un parámetro. Mostramos que si el parámetro se mueve muy lentamente, las transiciones entre niveles vecinos son como las del modelo de Landau-Zener. Se estudió la vinculación de la variación paramétrica y la localización en el espacio de fases en las autofunciones del sistema. Para esto se desarrolló un método que permite eliminar los cruces evitados en una región del espectro. Mostramos que la eliminación de los cruces evitados es el mecanismo natural para sacar a la luz las estructuras localizadas en órbitas de período corto embebidas en las autofunciones del sistema. Finalmente, se considera la influencia de dicha localización en la dinámica cuántica. En este caso se estudió la dispersión de la energía cuando las paredes del billar oscilan en forma armónica. Se observó que la distribución de la energía se dispersa difusivamente. Se estudió la constante de difusión como función de la velocidad del contorno donde se observaron diferencias con predicciones teóricas basadas en la teoría de matrices aleatorias. Mostramos que la localización es la responsable de dichas diferencias.

Abstract:
This thesis is devoted to study quantum manifestations of classical chaos in systems with a parameter. We have considered one and two dimensional systems. To study the time decay laws of quasibounded Hamiltonian systems we have considered two finite one-dimensional potential wells with oscillating walls filled with non interacting particles. We show that the time decay laws can be qualitatively different for different movement of the oscillating wall at classical level according to the characteristic of trapped periodic orbits. However, the quantum dynamics do not show such differences. On the other hand, we have studied different aspects of the quantum mechanics of a chaotic billiard with deformable boundary and fixed area. In these systems, the parametric motion of energy levels proceeds without crossing any other and the defined avoided crossings quantify the interaction between states. We have showed that for slow variations of the paremeter, the transitions between neighboring levels are like the Landau-Zener transitions. We have studied the relation between parametric variations and the phase space localization of the eigenfunctions of the system. We have developed a method to remove avoided crossings in chaotic billiards governed by a parameter. We have showed that the elimination of avoided crossings is the natural mechanism giving rise to localization in short periodic orbits. Finally, it is considered the influence of phase space localization on the quantum dynamics. In this case, the dispersion of the energy was studied when the boundary of the billiard oscillates armonically. The results showed that the distribution of energy spreads diffusively. We have studied the diffusion contant as a function of the boundary velocity and found differences with theoretical predictions based on random matrix theory. We have showed that localization was the responsible of such a differences.

"Capacidad de depuración de sustancias bioaprovechables en arroyos de llanura y su relación con el arsénico" (2015-03-30). Rodríguez Castro, María Carolina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los arroyos pampeanos tienen elevados niveles de fósforo y una alta producción primaria, mayoritariamente debida al perifiton. Esta comunidad es esencial en la retención del fósforo. Otra característica relevante de estos arroyos es la presencia de arsénico, considerado tóxico para las algas. La similitud química entre el arseniato, forma oxidada del As, y el fosfato, ocasiona toxicidad celular debida a la competencia por la entrada a la célula lo que, a una escala mayor, deriva en cambios en los procesos ecosistémicos. Nuestros objetivos fueron relevar la calidad del agua de arroyos pampeanos en relación al P y al As y entender el efecto del As sobre el metabolismo, la retención de P y la tolerancia del perifiton a distintas escalas. Se realizaron experimentos en microcosmos, colonizaciones a campo y experimentos en el campo. En microcosmos se observó que la exposición crónica al As y al P aumenta la tolerancia al As y que este disminuye la retención de P del perifiton. Con los sustratos colonizados en el campo se observó que la relación As/P podría explicar el escaso desarrollo de biomasa en algunos ambientes que, aunque tienen adecuadas concentraciones de P, el crecimiento se vería inhibido por altas concentraciones de As. Asimismo, el As reduciría la colonización del perifiton excepto en ambientes con alto contenido de P donde el As reduciría su efecto. Este estudio ayuda a dilucidar las implicancias ecológicas de la presencia de As en arroyos sistemas fluviales. Los cambios en el metabolismo de los organismos, debidos a la exposición crónica al As pueden derivar en una disminución de la retención de nutrientes, una menor eficiencia en la depuración del curso de agua o una menor capacidad para sostener una red trófica.

Abstract:
Pampean streams have high phosphorus concentration and primary production, mainly due to periphyton. This community is essential in phosphorus retention. Another important feature of these streams is the presence of arsenic, considered toxic to algae. The chemical similarity between arsenate, oxidized form of As, and phosphate causes cellular toxicity due to competition for entry into the cell which, on a larger scale, results in changes in ecosystem processes. The aim of this investigation was to study the occurrence of P and As in pampean streams and understand the effect of As on the metabolism, P retention and tolerance of periphyton at different scales. Microcosm experiments, in field colonization and field experiments were conducted. Chronic exposure to As and P in microcosms increased tolerance to As, but As and diminished P retention in periphyton. Also the As/P ratio could explain the lack of development of biomass in fieldcolonized- substrata of some environments that, despite having adequate concentrations of P, the growth would be inhibited by high concentrations of As. Also, As would reduce periphyton colonization except in environments with high P where As effect is reduced. This study helps elucidate the ecological implications of the presence of As in fluvial systems. Changes on the metabolism of organisms, due to the chronic exposure of As may result in decreased nutrient retention, reduced autodepuration of the stream or less ability to sustain a trophic web.

"Captura neutrónica en boro (BNCT) para el tratamiento del cáncer bucal: desarrollo de nuevas modalidades de BNCT, evaluación de su radiobiología, eficacia terapéutica y potencial radiotoxicidad en un modelo de hámster" (2013). Molinari, Ana Julia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Captura Neutrónica en Boro (BNCT) es una terapia binaria que se basa en la acumulación selectiva de compuestos borados dentro del tumor y la subsiguiente irradiación con neutrones térmicos. La reacción de captura que se produce entre el 10B y los neutrones genera partículas letales de corto alcance que dañan el tumor sin causar daño significativo al tejido normal. Previamente en nuestro laboratorio se reportó el éxito terapéutico de una única aplicación de BNCT mediada por los compuestos borados borofenilalanina (BPA), decahidrodecaborato de sodio (GB-10) o la administración combinada de ambos, para el tratamiento del cáncer bucal en un modelo de hámster. Si bien los resultados en términos de eficacia terapéutica fueron muy buenos, pueden ser mejorados. En este trabajo de tesis, buscamos optimizar la terapia de BNCT potenciando el control tumoral y minimizando su radiotoxicidad. Para ello desarrollamos una nueva modalidad terapéutica denominada BNCT secuencial (BPA-BNCT seguido de GB-10-BNCT luego de 24 ó 48 horas), establecimos un método para inducir la normalización de los vasos sanguíneos tumorales (con talidomida) y evaluamos el efecto de esta normalización en la eficacia terapéutica del BNCT mediado por BPA. Complementariamente estudiamos la combinación de ambas modalidades (normalización con talidomida y BNCT secuencial). Asimismo, realizamos un análisis exhaustivo de los posibles cambios en la microdistribución de los compuestos borados por autorradiografía neutrónica. En el presente estudio demostramos que el BNCT secuencial mejora el control del cáncer bucal, que el tratamiento previo con talidomida aumenta la eficacia terapéutica del BNCT mediado por BPA a través de la normalización de los vasos sanguíneos aberrantes del tumor, y que con el tratamiento con talidomida previo al BNCT secuencial se alcanza una respuesta tumoral total (respuesta completa + parcial) del 100% de los tumores. Además, en todos los casos se redujo la radiotoxicidad en el tejido precanceroso circundante al tumor.

Abstract:
Boron Neutron Capture Therapy (BNCT) is based on targeting of tumor cells with boron compounds followed by irradiation with thermal neutrons. The capture reaction that occurs between the 10B and the neutrons generates short-range lethal particles that destroy the tumor cells but spare normal tissue. We previously reported the therapeutic success of a single application of BNCT mediated by boronophenylalanine (BPA), decahydrodecaborate (GB-10) or by the combined administration of BPA and GB-10, for the treatment of oral cancer in the hamster cheek pouch experimental model. These previous BNCT studies showed marked therapeutic efficacy but left room for improvement. In this thesis, we explored the way to improve the therapeutic effect without causing unacceptable toxicity in normal or dose-limiting precancerous tissue. Here we developed a novel approach to BNCT termed Sequential BNCT based on the sequential application of BPA-BNCT followed by GB-10-BNCT with an interval of 24 or 48 h between the two treatments. We developed a technique to normalize aberrant blood vessels with thalidomide and assessed its effect prior to the administration of BPA on the therapeutic efficacy of BNCT. As a third new protocol we studied the combination of both modalities, thalidomide treatment prior to Sequential BNCT. Additionally, we performed an autoradiography analysis to explore potential changes in boron microdistribution and content that are not detectable by gross boron measurements. We can conclude based on the observations reported in this thesis that Sequential BNCT enhanced tumor response, that the pretreatment with thalidomide prior to BNCT mediated by BPA was therapeutically beneficial, and that tumor blood vessel normalization before Sequential BNCT controlled the entire population of tumors. For all the new protocols, no extra cost in terms of mucositis in the dose-limiting precancerous tissue was observed.

"Caracterizaciones estructurales de grafos de intersección" (2011). Grippo, Luciano Norberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis estudiamos caracterizaciones estructurales para grafos arcocirculares, grafos circulo, grafos probe de intervalos, grafos probe de interva 10s unitarios, grafos probe de bloques y grafos probe co-bipartitos. Un grafo es arc0 circular (circulo) si es el grafo de interseccion de una familia de arcos (cuerdas) en una circunferencia. Dada una familia hereditaria de grafos G, un grafo es probe G si sus vertices pueden particionarse en dos conjuntos: un conjunto de vertices probe y un conjunto de vertices nonprobe, de forma tal que el conjunto de vertices nonprobe es un conjunto independiente y es posible obtener un grafo en la clase G agregando aristas entre ellos. Los grafos probe G forman una superclase de la familia G. Por lo tanto, 10s grafos probe de intervalos y 10s grafos probe de intervalos unitarios generalizan la clase de 10s grafos de intervalos y 10s grafos de intervalos unitarios respectivamente. Caracterizamos parcialmente a 10s grafos arco-circulares, grafos circulo, grafos probe de intervalos y probe de interval0 unitario mediante subgrafos prohibidos dentro de ciertas familias hereditarias de grafos. Finalmente, es presentada una caracterizacion de 10s grafos probe co-bipartitos que lleva a un algoritmo de reconocimiento de tiempo polinomial para dicha clase y 10s grafos probe de bloques son caracterizados mediante una lista de subgrafos prohibidos.

Abstract:
In this Thesis we study structural characterizations for six classes of graphs, namely circular-arc graphs, circle graphs, probe interval graphs, probe unit interval graphs, probe co-bipartite graphs, and probe block graphs. A circular-arc graph (circle graph) is the intersection graph of a family of arcs (chords) on a circle. Let G be a hereditary class of graphs. A graph is probe G if its vertices can be partitioned into two sets: a set of probe vertices and a set of nonprobe vertices, so that the set of nonprobe vertices is a stable set and it is possible to obtain a graph belonging to the class G by adding edges with both endpoints in the set of nonprobe vertices. Probe G graphs form a superclass of the class G. Hence, probe interval graphs and probe unit interval graphs are extensions of the classes of interval graphs and unit interval graphs, respectively. We partially characterize circular-arc graphs, circle graphs, probe interval graphs and probe unit interval graphs by forbidden induced subgraphs within certain hereditary families of graphs. Finally, a structural characterization for probe co-bipartite graphs that leads to a polynomial-time recognition algorithm and a complete characterization of probe block graphs by a list of forbidden induced subgraphs are presented.

"Caracterización de la variabilidad genética de germoplasma argentino de trigo (Triticum aestivum L) mediante marcadores moleculares" (2000). Manifesto, María Marcela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
105 cultivares de trigo pan (Triticum aestivum L.), liberados comercialmente en Argentina entre 1932 y 1995, fueron caracterizados utilizando marcadores genéticos de tipo morfológico y molecular (microsatélites y AFLP) para obtener una estimación cuantitativa de la diversidad genética y su evolución a lo largo del tiempo, programas de mejoramiento. Un subgrupo de 10 diez SSR (microsatélites) altamente informativos fue seleccionado y utilizado para la construcción de la Matriz de Identificación, que permitió la discriminación de todos los cultivares estudiados aqui. Los datos moleculares fueron comparados con los datos morfológicos. Se observaron valores de correlación significativos,aunque bajos, para las distintas técnicas comparadas con los datos fenotípicos, presentando valores de correlación mayores los AFLP y SSR (r= 0.1334) siguiéndole el de coeficientes de parentesco (r = 0.12239). Los datos obtenidos mediante los marcadores SSR se complementaron con la información de datos de AFLP a fin de evaluar las relaciones genéticas entre cultivares. La correlación entre las matrices de similitud de datos combinados de SSR con AFLP y la matriz de coeficientes de parentesco fue estadísticamente significativa (test de Mantel, P<0 01), aunque baja (r = 0.34) Los datos moleculares fueron usados para cuantificar la diversidad genética a través de los criaderos y para evaluar la erosión genética. No se hallaron diferencias significativas en la diversidad genética entre los principales programas de mejoramiento privados y públicos. Sólo se hallaron diferencias significativas entre los principales criaderos y los menores, tanto con SSR como con AFLP. Un resultado interesante es que no se hallaron diferencias significativas en los valores de diversidad genética de los grupos de cultivares liberados antes de 1960 y aquellos liberados en las siguientes tres décadas. Los valores de diversidad promedio basados en marcadores SSR fueron casi idénticos para los cuatro periodos analizados La diversidad genetica estimada basada en datos de AFLP fue similar, pero diferencias levemente significativas fueron halladas entre cultivares liberados en los '70 (PIC= 0.28) y en los 80's (PIC = 0.34). Estos resultados contradicen la visión generalizada de la erosión genética de los cultivares modernos y muestran que el germoplasma Argentino de trigo pan ha mantenido relativamente constante el nivel de diversidad genética durante la última mitad del siglo. Se corroboró la factibilidad de la aplicación de microsatélites en dos aspectos: a) el estudio de caracteres cuantitativos de interes agronómico, como es la calidad panadera, en poblaciones segregantes y b) su aplicación en la caracterización de germoplasma. a) El microsatélite Xgwm3000 ubicado dentro del locus del gen de las γ-gliadinas (Xps2(Gli-1)) se halló completamente ligado al locus de RFLP XGli-B1 y estrechamente ligado (1 6 cM) a XGlu-B3 en la poblacion segregante Chinese Spring-Klein 32. La presencia del alelo 252 pb detectado en Klein32 se correlacionó con los aumentos detectados en los parámetros de calidad. Los microsatélites Xgwm2999 y Xgwm3000 ubicados dentro de los loci de γ-gliadinas y gluteninas de bajo peso molecular, respectivamente fueron útiles en la caracterización de la variación alelica de los loci de proteínas de reserva en 105 cultivares de Argentina y 90 de California.

Abstract:
In this study, 105 Argentine cultivars of bread wheat (Triticumaestivum L.) released between 1932 and 1995 were characterized using SSR, AFLP markers and morphological characters to obtain a quantitative genetic diversity estimation, its evolution along time and different breeding programs. A selected subset of ten highly informative microsatellites was used to construct an Identification Matrix that allowed the discrimination of all the cultivars included in this study. Molecular data was compared with morphological data. Significant correlation values, although low, were obtained for morphological data matrix and molecular data matrix. AFLP and SSR showing highest values of correlation (r = 0.1334), followed by kinship data (r = 0.1224) Data obtained from SSR markers was complemented by information derived from AFLPs, to evaluate genetic relationships among cultivars. The correlation between a combined SSR and AFLP similarity matrix and a kinship coefficients matrix was highly significant (Mantel test. P<0.01). but low (r= 0.34) Molecular data were used to quantify genetic diversity across the wheat breeding programs and to evaluate genetic erosion. No significant differences in genetic diversity were found between the largest private and public breeding programs. Significant differences were found only between the large and smallest breeding programs for both SSR and AFLP An interesting result from this study was that no significant differences in genetic diversity were found between the group of cultivars released before 1960 and those released in each of the following three decades. Average diversity values based on SSR markers were almost identical for the four analyzed periods Genetic diversity estimates based on AFLP data were also very similar but slightly significant differences were found between bread wheat cultivars released in the 70's (PIC = 0.28) and those released in the 80's (PIC= 0.34). These results contradict the general vision of significant genetic erosion in modern cultivars and showed the Argentine bread wheat germplasm has maintained a relativer constant level of genetic diversity during the last half century. Microsatellite application was corroborated in both aspects: a) studies of qualitative characters of agronomic interest, as bread making quality, in segregating populations and b) germplasm characterisation. a) SSR located within the γ-gliadin gene (Xps2(Gli-1))was completely linked to RFLP locus XGli-B1 and closer linked (1.6 CM)to XGlu-B3 in Chinese Spring-Klein 32 segregating population. Allele 252 pb at this loci detected in Klein 32 variety, was associated with significant increment in bread making quality parameters. b) SSR loci Xpsp 2999 and Xpsp 3000 located within a low molecular weight glutenin gene and gamma-gliadin gene, respectively are useful to characterize allelic variation at these two storage protein loci in 105 bread wheat cultivars from Argentina and 96 from California.

"Caracterización de los mecanismos celulares involucrados en la regresión tumoral según la dependencia hormonal de los tumores mamarios" (2014). Polo, María Laura. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las similitudes morfológicas y fenotípicas entre los carcinomas mamarios más frecuentes en mujeres (carcinomas ductales, positivos para los receptores de estrógenos (ER) y progesterona (PR)), y el modelo de carcinomas mamarios murinos inducidos con acetato de medroxiprogesterona (MPA), hacen de este modelo una herramienta útil para estudiar los mecanismos celulares asociados al tratamiento antitumoral con agentes endocrinos (antagonistas del ER y PR), e inhibidores de quinasas, entre otros. En este trabajo de Tesis hemos evaluado en el modelo de carcinomas mamarios inducidos con MPA, mecanismos tempranos de regresión tumoral asociados al tratamiento endocrino con el antiprogestágeno mifepristona (MFP) y el inhibidor de PI3K wortmanin (WORT). En vista de la evidencia clínica actual, que demuestra que la combinación de agentes endocrinos e inhibidores de la vía PI3K/Akt resulta beneficiosa para el tratamiento adyuvante de pacientes con tumores ER y PR positivos, y de los estudios que señalan a los antiprogestágenos como una terapia válida para el tratamiento del cáncer de mama, creemos que este trabajo resulta valioso ya que constituye el primer estudio realizado en un modelo experimental de cáncer de mama en donde se evalúan los efectos de la terapia combinada de antiprogestágenos e inhibidores de PI3K. Analizando variantes tumorales que representan distintos estadios dentro de la progresión del cáncer de mama (desde la hormono-dependencia a la resistencia endocrina), comprobamos que los agentes MFP y WORT poseen mecanismos diferenciales de acción, tanto en el parénquima como en el estroma tumoral. Dichos mecanismos posibilitan en ciertas variantes que la combinación de ambos sea más efectiva que el tratamiento con cada droga por separado, y que en otras variantes, en cambio, la combinación no sea beneficiosa. De acuerdo a la creciente importancia que ha adquirido el microambiente tumoral tanto en la regulación del crecimiento de los tumores como en la respuesta a las terapias, demostramos que en algunas de las variantes analizadas el estroma tumoral juega un papel activo durante la regresión inducida por el tratamiento endocrino y por la inhibición de PI3K. Los resultados obtenidos en el modelo experimental plantean la posibilidad de que la expansión del compartimiento estromal que se asocia tempranamente con la regresión de los tumores (fenómeno definido como reacción estromal), actúe como un indicador de la eficacia de la terapia antitumoral utilizada. Hemos demostrado también que el modelo de cultivo tridimensional en Matrigel es una herramienta eficaz para evaluar in vitro la sensibilidad diferencial de las células epiteliales derivadas de las variantes tumorales a los distintos agentes ensayados, lo que apoya el uso de este sistema para predecir el comportamiento de las células neoplásicas frente a distintos compuestos antitumorales. En conclusión, los resultados obtenidos en este trabajo de Tesis contribuyen al estudio de la terapia endocrina del cáncer de mama, presentando evidencia que se suma a los trabajos que plantean el uso de los antiprogestágenos en el tratamiento de esta patología, y demostrando por primera vez el beneficio potencial, para determinado grupo de tumores, de una terapia combinada de antiprogestágenos con inhibidores de vías de señalización como la vía PI3K/Akt.

Abstract:
The morphological and phenotypic similarities among the most frequent mammary carcinomas in women (ductal carcinomas, positive for estrogen (ER) and progesterone receptors (PR)) and the medroxyprogesterone acetate (MPA)- induced mammary tumor model in mice, make this model suitable for the evaluation of mechanisms associated with endocrine treatment (ER and PR antagonists), and protein kinase inhibitors, among others. In this Thesis we evaluated for the first time cellular mechanisms of early tumor regression after antiprogestin therapy in combination with PI3K inhibitors. In light of the current clinical evidence, showing that combination therapies with endocrine agents and PI3K/Akt inhibitors are beneficial for ER and PR positive patients, and based on recent studies pointing to PR as a valid target for breast cancer treatment, we believe that these results may shed light to choose which patients may be selected for this kind of adjuvant therapies. Evaluating tumor variants from the MPA–induced breast cancer model that represent different stages of breast cancer progression (from hormone dependency to endocrine resistance), we found that the antiprogestin mifepristone (MFP) and the PI3K inhibitor, wortmannin (WORT) inhibit tumor growth affecting both the parenchyma and the tumor stroma. However, different type of tumors showed a differential sensitivity to both agents and their combination resulted to be effective in certain tumor variants and not in others. In agreement with the increasing evidence supporting that the tumor microenvironment exerts a pivotal role regulating tumor growth and influencing their response to therapies, we have demonstrated that tumor stroma plays an active role during the early stages of endocrine and PI3K inhibition-induced regression. According to our results, stromal reaction (defined as the increase in the stromal compartment that occurs during tumor regression), may act as a biological marker for antitumor therapy’s effectiveness. Furthermore, we have also confirmed that three-dimensional culture on Matrigel is an effective tool to evaluate in vitro, tumor cell differential responses to several agents, and thus supports the use of this system to predict neoplastic cell behavior after anti-tumor treatment. In conclusion, this Thesis contributes to the study of endocrine therapy, by presenting evidence that supports the use of antiprogestins in breast cancer treatment, and by showing for the first time the potential benefit in certain type of tumors of combined therapies of antiprogestins together with signaling pathway inhibitors such as those of the PI3K/Akt pathway.

"Caracterización bioquímica de las variantes de GnRH (gonadotropin-releasing hormone) presentes en cerebro e hipófisis de pejerrey, Odontesthes bonariensis : Localización neuroanatómica y relación con distintas hormonas hipofisisarias" (1999). Stefano, Andrea Virginia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Caracterización bioquímica y estructural de glicosiltransferasas bacterianas" (2013-06-19). Salinas, Silvina R.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los polisacáridos juegan un papel esencial en el metabolismo celular y en el funcionamiento de los organismos. Son sintetizados empleando enzimas glicosiltransferasas (GTs), cuyas propiedades determinan el tamaño y la estructura del producto final. Muchas GTs están localizadas en membranas celulares, dificultando su purificación y caracterización. En este trabajo de Tesis se estudian bioquímica y biofísicamente dos GTs que participan en la síntesis del polisacárido xantano producido por Xanthomonas campestris. La primer GT es GumI, de la cual sólo había escasos antecedentes genéticos. En esta Tesis se presenta la primera caracterización bioquímica y funcional de GumI, demostrando su actividad glicosiltransferasa previamente propuesta. Se realizaron ensayos de complementación funcional, demostrando su actividad manosiltransferasa in vivo. Además, se demostró que GumI está unida a la membrana, y que la interacción está mediada por interacciones hidrofóbicas y electrostáticas. GumI fue purificada y su actividad fue estudiada in vitro, obteniéndose los parámetros óptimos de reacción. GumI dio origen a una nueva familia, GT-94, en la clasificación Carbohydrate Active EnZymes. Finalmente, mediante ensayos de cristalización se obtuvieron agujas bidimensionales que al presente no fueron aptas para resolver la estructura de GumI por cristalografía de rayos-X. La segunda GT es GumK, cuya estructura cristalina se resolvió en el laboratorio y, como GumI, es una GT monotópica de membrana. Se profundizó sobre las bases moleculares de la unión a sus sustratos y a la membrana. Se realizaron diferentes mutaciones sobre la zona propuesta de unión a la membrana, demostrando la complejidad de dicha interacción. Además, se realizaron estudios por simulación computacional con el fin de obtener la estructura del complejo GumK/UDP-GlcA. El modelo obtenido explicaría la especificidad por este sustrato. Estudios realizados en este trabajo mediante diversas técnicas -tales como proteólisis limitada, fluorescencia, dicroísmo circular, calorimetría isotérmica de titulación, resonancia magnética nuclear y dispersión de rayos-X a bajo ángulo- sugieren fuertemente la presencia de cambios conformacionales disparados por la unión de UDP-GlcA.

Abstract:
Polysaccharides, which play a crucial role in cellular metabolism and in the performance of organisms, are synthesized by glycosyltransferase (GT) enzymes, whose properties determine the size and structure of the final product. Many GTs are localized in cellular membranes, difficulting their purification and characterization. In this Thesis, two GTs (GumI and GumK) which participate in the synthesis of the polysaccharide xanthan produced by Xanthomonas campestris were studied biochemically and biophysically. The genetic background data on GumI is limited. This Thesis reports the first functional and biochemical characterization of GumI, demonstrating its previously proposed glycosyltransferase activity. Functional complementation demonstrated its in vivo mannosyltransferase activity. Results also show that GumI is a membrane-associated protein, and that the interaction is mediated by hydrophobic and electrostatic forces. GumI was purified and its activity was studied in vitro, obtaining optimal reaction parameters. Finally, crystallization experiments allowed obtaining bidimensional needles, which were not suitable to resolve GumI structure by X-ray crystallography. GumK, whose structure was resolved in the laboratory, is a monotopic GT, like GumI. This Thesis deepened on the molecular basis of the binding to its substrate and the membrane. Mutagenesis of residues of the region proposed for membrane binding was performed, resulting in no-soluble protein and thus demonstrating the complexness of membrane interaction. Moreover, computational simulation studies were carried out with the aim to obtain a model of the GumK/UDP-GlcA structure. The model obtained may explain the GumK specificity for this substrate. Studies performed by various techniques, such as fluorescence, circular dichroism, isothermal titration calorimetry, nuclear magnetic resonance, and small-angle X-ray scattering, strongly suggest the presence of conformational changes in GumK triggered by the UDP-GlcA binding.

"Caracterización bioquímica y funcional de las dos UDP-Glc: glicoproteína glucosiltransferasas codificadas en el genoma de C. elegans" (2013). Buzzi, Lucila Inés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La UDP-Glc:glicoproteína glucosiltransferasa (UGGT) es el sensor de la conformación de las glicoproteínas en el “Control de Calidad de Plegamiento de Glicoproteínas” ya que sólo presenta actividad sobre glicoproteínas que no se encuentran en su conformación nativa. Las glicoproteínas que presentan oligosacáridos monoglucosilados interaccionan con lectinas-chaperonas presentes en el Retículo endoplásmico (RE) como Calnexina y Calreticulina lo cual previene que los intermediarios de plegamiento inmaduros continúen su camino hacia el Aparato de Golgi. En C. elegans existen dos genes, uggt-1 y uggt-2, homólogos a los que codifican para las UGGT en diferentes organismos. La expresión de las proteínas UGGT-1 y UGGT-2 en S. pombe alg6 gpt1-, que carece de actividad de UGGT, permitió demostrar que uggt-1 codifica para una UGGT activa (CeUGGT-1), mientras que la proteína codificada por uggt-2 carece de actividad de UGGT (CeUGGT-2). Mediante la construcción de proteínas quiméricas, se determinó que el dominio C-terminal de CeUGGT-2 es incapaz de transferir glucosa a proteínas mal plegadas. El estudio del gusano mutante de uggt-2 (VC1961) reveló que CeUGGT-2 es esencial para la viablidad del nematodo ya que los gusanos uggt-2 -/- se arrestan en estadíos embrionarios y en L1 mostrando un tamaño menor y posibles defectos en la cutícula. Mediante Real Time PCR observamos que ambos genes se expresan durante todo el ciclo de vida de C. elegans. Mediante la construcción de gusanos transgénicos pudimos detectar expresión de CeUGGT-1 en todas las células y tejidos del nematodo. uggt-1 se induce en condiciones de estrés de RE a través de la vía de señalización de ire-1 en la respuesta a proteínas mal plegadas (UPR), mientras que uggt-2 no lo hace. El silenciamiento de la expresión de la proteína UGGT-1 y UGGT-2 por ensayos de RNAi produjeron un retraso en el desarrollo en gusanos uggt-1(RNAi) y uggt-2(RNAi) y resultaron en una disminución de la sobrevida de gusanos uggt-1(RNAi). CeUGGT-1 y CeUGGT-2 juegan un rol protector ante condiciones de estrés de RE ya que con 10 μg/ml de Tunicamicina (TN) se arrestó el crecimiento de gusanos uggt-1(RNAi) y uggt-2(RNAi) en L2/L3 pero no el de gusanos control. Además ensayos de RNAi a bajas concentraciones de TN en ausencia de ire-1, sugirieron que CeUGGT-2 es importante para aliviar los bajos niveles de estrés de RE en ausencia de esta vía de la UPR. Estos resultados indicarían que ambos homólogos de UGGT de C. elegans poseerían distintas funciones biológicas.

Abstract:
The UDP-Glc:glycoprotein glucosyltransferase (UGGT) is the sensor of glycoprotein conformations in the glycoprotein folding quality control as it exclusively glucosylates glycoproteins not displaying their native conformations. Monoglucosylated glycoproteins thus formed may interact with the lectin-chaperones calnexin and calreticulin. This interaction prevents premature exit of folding intermediates to the Golgi. Bioinformatic analysis showed that in C. elegans there are two genes, uggt-1 and uggt-2, coding for UGGT homologues. Expression of both genes in S. pombe mutants devoid of UGGT activity showed that uggt-1 codes for an active UGGT protein (CeUGGT-1). On the other hand, uggt-2 coded for a protein (CeUGGT-2) apparently not displaying a canonical UGGT activity and conversely to what happens in humans, the C-terminal domain of CeUGGT-2 is inactive. However, uggt-2 is not a pseudogene as we can detect its expression along the entire development. The study of the mutant worm VC1961 revealed that CeUGGT-2 is essential for viability. Worms uggt-2 -/- were arrested in embryonic and L1 stages and they showed smaller size and possible defects in the cuticle. Furthermore, Real-time PCR analysis showed that both uggt-1 and uggt-2 genes are expressed during the entire C. elegans life cycle. Moreover, transgenic worms constructed by fosmid recombineering technique carrying the gfp under the control of uggt-1 promoter indicated that that CeUGGT-1 is expressed in all cells and tissues of the nematode. uggt-1, but not uggt-2, is upregulated under ER stress through the ire-1 arm of the unfolded protein response (UPR). RNAi-mediated depletion of CeUGGT-1 but not of CeUGGT-2 resulted in a reduced lifespan and that of CeUGGT-1 and CeUGGT-2 in a developmental delay. We found that both CeUGGT1 and CeUGGT2 play a protective role under ER stress conditions, since 10 μg/ml tunicamycin (TN) arrested development at the L2/L3 stage of both uggt-1(RNAi) and uggt-2(RNAi) but not of control worms. Furthermore, we found that the role of CeUGGT-2 but not CeUGGT-1 is significant in relieving low ER stress levels simulated with TN in the absence of the ire-1 unfolding protein response signaling pathway. Our results indicate that both C. elegans UGGT homologues may have distinct biological functions.

"Caracterización bioquímica y molecular de la enzima UDP-glucosa: proteína transglucosilasa de Solanum tuberosum" (1998). Bocca, Silvia N.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La enzima UDP-glucosa: proteína transglucosilasa (UPTG) es una glicosiltransferasa autocatalítica descripta inicialmente en tubérculo de papa (Solanum tuberosum L.). Se había propuesto que la UPTG era capaz de iniciar la síntesis de α-glucanos unidos a proteína in vitro y que tendría una función de proteína iniciadora de la biosíntesis del almidón. La UPTG de tubérculo de papa se purificó hasta aparente homogeneidad, se desarrollaron anticuerpos policlonales específicos contra la misma y se clonaron cADNs correspondientes a la UPTG por screening de genotecas de expresión de papa. Ensayos de Northern blot y Western blot mostraron que tanto el ARN mensajero como la proteína UPTG están presentes en un nivel semejante en todos los tejidos de la planta. Algunas de las secuencias clonadas se expresaron en E. coli obteniéndose UPTG recombinante enzimáticamente activa. Se encontró que tanto las proteínas recombinantes como la purificada de tubérculo pueden ser glicosiladas a partir de UDP-Glc, UDP-Xil o UDP-Gal y que la glicosilación es reversible. Dos cADNs obtenidos fueron secuenciados totalmente, esto permitió detectar un muy alto grado de identidad (~ 90%) entre la secuencia de la UPTG y varias secuencias de proteínas vegetales de función aún no determinada que localizan específicamente en la región trans del aparato de Golgi. La secuencia de la UPTG no presenta zonas hidrofóbicas que puedan corresponder a regiones transmembrana ni un posible péptido señal que permita su entrada a plástidos o al sistema de endomembranas de la célula. Estos resultados sugieren que la enzima localizaría en el lado citoplásmico del aparato de Golgi y no en los plástidos en donde ocurre la síntesis del almidón, por lo tanto están en contra de un posible rol de la UPTG en la síntesis de este polisacárido. En ningún organismo que no sea vegetal se encontró una proteína que pueda considerarse homóloga a la UPTG. Esta característica, sumada a su localización indicarían una posible función relacionada con la síntesis de los polisacáridos complejos de la pared, función exclusiva del aparato de Golgi de las células vegetales. La especificidad de la UPTG por distintos nucleótidos azúcares y la reversibilidad de la reacción de glicosilación hacen pensar que la UPTG podría estar formando parte de un sistema complejo que acople el transporte de nucleótidos azúcares con la síntesis de polisacáridos estructurales.

Abstract:
The enzyme UDP-glucose: protein transglucosylase (UPTG) is an autocatalytic glycosyltransferase reported in potato tuber (Solanum tuberosum L.). It was suggested that UPTG could in vitro initiate protein-bound α-glucan synthesis and postulated as the protein that primes starch biosynthesis. UPTG was purified to apparent homogeneity from potato tubers, polyclonal antibodies were raised against the protein and cDNAs coding for UPTG were cloned screening potato expression libraries. RNA hybridization studies and Western blot analysis indicated that UPTG mRNA and polypeptide are expressed in all potato tissues. When the cloned sequences were expressed in E. coli, the recombinant UPTG was enzymatically active. It was determined that purified as well as recombinant UPTG can be glycosylated by UDP-Glc, UDP-Xyl or UDP-Gal and that glycosylation is reversible. The complete sequence of two cDNAs was obtained and compared with the sequences present in the databanks. UPTG shows a high degree of similarity (~ 90%) with several plant sequences. The function of these sequences remains to be determined but it was demonstrated their specific localization in the trans-Golgi cisternae. UPTG sequence do not present hydrophobic segments that could correspond to transmembrane regions. The amino terminal sequence lacks a signal peptide that could allow the protein to enter into plastids or into endomembrane system of the cell. These results suggest that the enzyme localizes at the cytoplasmic face of the Golgi apparatus, and not in plastids were starch synthesis occurs, and are against a possible role of UPTG in starch synthesis. In no organism other than plants a sequence homologous to UPTG could be detected. This fact, added to its Golgi localization suggests a role in cell wall polysaccharide synthesis, a function present exclusively in the Golgi apparatus of plant cells. The specificity of UPTG for different sugar-nucleotides and the reversibility of the glycosylation might correspond to UPTG being part of a complex system that couples sugar-nucleotide transport with the synthesis of cell wall polysaccharides.

"Caracterización bioquímica y molecular de la glicosiltransferasa autocatalítica UDP-glucosa : proteína transglucosilasa" (2001). Wald, Flavia A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La enzima UDP-glucosa: proteína transglucosilasa (UPTG) es una glicosiltransferasa autocatalítica descripta tanto en tubérculo de papa (Solanum tuberosum L.) como en endosperma de maíz (Zea mays), involucrada en la síntesis de polisacáridos. Encontramos diferentes isoformas de UPTG de papa las cuales se expresaron en E. coli y se caracterizaron bioquímicamente. Las isoformas UPTG1 y UPTG2 no sólo presentan características cinéticas diferentes sino que además se expresan diferencialmente en los diversos tejidos de la planta. Se encontró una alta expresión de los transcriptos de UPTGl en estolones, tubérculos y raíces mientras que la expresión de los mensajeros de UPTG2 era elevada en todos los tejidos analizados, principalmente en hojas y tallos. El análisis del ADN genómico de papa sugiere la existencia de nuevas isoformas de UPTG, lo que sumado a la presencia de proteínas homólogas a la UPTG en otras especies vegetales, muestran que dichas glicosiltransferasas autocatalíticas constituirían una pequeña familia multigénica presente sólo en plantas superiores. Los estudios bioquímicos de la reacción de glicosilación de la UPTG mostraron que un único residuo de glucosa, xilosa o galactosa se une a la enzima en configuración β, con un tipo de unión que se comportaria más bien como las del tipo N. Además, el análisis de la reversibilidad de la reacción de glicosilación mostró que la UPTG catalizaría la ruptura del enlace glicosídico. El estudio de la naturaleza del inhibidor de la UPTG en maíz reveló que éste seria la isoforma SS1 de la sacarosa sintetasa presente principalmente en el endosperma. La isoforma SS1 ha sido relacionada recientemente con la biosíntesis de polisacáridos de pared celular y su asociación con la UPTG de maíz aporta una nueva evidencia a favor de dicha hipótesis. Los resultados de esta Tesis muestran que la UPTG de papa podía ser fosforilada in vitro. El tratamiento con fosfatasa de la proteína UPTG recombinante mostró que la defosforilación de la UPTG incrementa su glicosilación y que a su vez, la glicosilación de la enzima favorece la aparición de formas de mayor tamaño molecular inmunológicamente relacionadas con la UPTG. Se piensa que la defosforilación de UPTG incrementaría su glicosilación promoviendo la asociación de la proteína a otras proteínas o a sí misma. Se propone que la proteína UPTG se asociaría funcionalmente a elementos de anclaje, desconocidos hasta el momento, presentes en la membrana del Golgi facilitando el transporte de los UDP-azúcares sustratos de la biosíntesis de pectinas y hemicelulosas. Así, no podemos descartar que la defosforilación de la UPTG favorezca su asociación a membranas lo que podria involucrar un mecanismo de localización de la enzima. Los resultados con respecto al análisis de la expresión de ARNm de UPTG, sugieren que la enzima se expresaría principalmente en tejidos cuyas células estarían en estado de activo crecimiento y/o elongación. Basados en el hecho que en tejidos en elongación hay una activa síntesis principalmente de pectinas y hemicelulosas, los datos mostrados constituyen una fuerte evidencia que apoya la hipótesis que propone que la UPTG estaría involucrada en la síntesis de los polisacáridos no celulósicos que componen la pared celular vegetal. Más aún, la existencia de isoenzímas redundantes de UPTG sugiere que la enzima formaría pane de un sistema complejo esencial para la viabilidad de la célula vegetal.

Abstract:
The enzyme UDP-glucose: protein transglucosylase (UPTG) is an autocatalytic glycosyltransferase involved in the biosynthesis of polysaccharides, which was described in potato tubers (Solanum tuberosum L.) and in maize endosperm (Zea mays). We found at least two different UPTG isoforms from potato, we expressed the recombinant proteins in E. coli and their biochemical characteristics were determined. UPTG1 and UPTG2 isoforms not only showed different kinetic properties but also a differential mRNA expression in potato plants was observed. While UPTG1 expression was found predominantly in stolons, tubers and roots, UPTG2 expression was high in all the analyzed tissues but mainly in stems and leaves. The analysis of the potato genomic DNA suggested the existence of new isoforms of UPTG, what in addition to the presence of homologue UPTG proteins showed that these autocatalytic glycosyltransferases constitute a small multigenic family present only in higher plants. The biochemical analysis of the UPTG glycosylation reaction showed that only one residue of glucose, xylose or galactose was bound to the enzyme in β configuration and that the carbohydrate behaved like N-glycosidically linked. Furthermore, when we analyzed the reversibility of the glycosylation reaction we found that in the presence of UDP, the glycosidic bond between UPTG and glucose was broken. The nature of the UPTG inhibitor in maize was studied. We found that the SS1 isoform of sucrose synthase that is expressed predominantly in the endosperm, was responsible for UPTG inhibition. This isoform was recently related to cell wall polysaccharide biosynthesis and its association with UPTG provides a new evidence that supports this hypothesis. The Thesis work showed that the potato UPTG can be phosphorylated in vitro. After phosphatase treatment, an increase in UPTG glycosylation was observed. Furthermore, the enzyme glycosylation promotes the appearance of high molecular weight polypeptides, which are immunologically related to UPTG. We think that UPTG dephosphorylation could stimulate its glycosylation favoring its association with other proteins or with itself. We suggest that UPTG may functionally associates to anchoring elements, yet unknown, that are present in Golgi membranes facilitating the UDP-sugars transport from the cytosol for the synthesis of pectins and hemicelluloses. We cannot rule out that UPTG dephosphorylation could favor its association to membranes what may involve a localization mechanism of the enzyme. The results related to the expression of UPTG mRNA, suggested that the enzyme might be mainly expressed in actively growing or elongating tissues. The fact that in elongating tissues there is an active synthesis of pectins and hemicelluloses in addition to the results presented here, represent a strong evidence that supports the hypothesis that UPTG is involved in the synthesis of noncellulosic polysaccharides that constitute the plant cell wall. Moreover, the existence of redundant UPTG isozymes points out that the enzyme may form part of a complex system essential for the viability of the plant cell.

"Caracterización bioquímica y molecular de los sitios de unión a zona pellucida presentes en proacrosina humana" (2002). Furlong, Laura Inés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El presente trabajo tuvo como objetivo estudiar el rol de la proteina espermática humana proacrosina/acrosina como molécula de adhesión a las glicoproteínas de la zona pellucída (ZP). En una primera etapa, se llevó a cabo un análisis bioinformático sobre la secuencia aminoacídica de proacrosina con el propósito de identificar sitios potenciales de unión a glicoproteínas de la ZP. El resultado de este análisis reveló que los residuos Lys74. Lys169, Arg172, Arg199, Arg249, Lys251, Arg252 y la secuencia KRLQQKLIE, localizada entre los residuos 367-374, conformarían sitios potenciales de unión a la ZP. A continuación se realizaron experimentos para evaluar la interacción entre proacrosina/acrosina con glicoproteínas de la ZP. Para ello se desarrolló una estrategia de subclonado del ADNc de proacrosina humana en vectores de expresión procariotas (pET-22b, pGEX-3X) para la expresión de proacrosina recombinante. Utilizando el sistema de expresión en forma directa (pET-22b) se obtuvo un producto de expresión recombinante correspondiente a la proenzima (Rec-40), y productos truncados del extremo N-terminal de la proteína (Rec-30, Rec-20, Rec-10). Estas proteinas fueron caracterizadas mediante la utilización de anticuerpos especificos y análisis de secuenciación de aminoácidos, determinándose que Rec-30 correspondería a los residuos 1-300, Rec-20 a 1-190 y Rec-10 a 1-160 de proacrosina humana. Utilizando el mismo sistema de expresión se sintetizó un producto de expresión correspondiente a los residuos 1-59 de proacrosina (Rec-6). Los productos de expresión, obtenidos como cuerpos de inclusión, fueron solubilizados y aislados mediante electroforesis preparativa. El estudio de la interacción entre proacrosina/acrosina recombinante y las glicoproteínas de la ZP se llevó a cabo utilizando ensayos de unión en fase sólida ("Ligand blot", "Dot blot", ensayo en placa de poliestireno). Se utilizaron glicoproteínas obtenidas de ovocitos humanos de descarte de programas de fecundación in vitro, así como glicoproteínas obtenidas por expresión en células CHO a partir del ADNc (rec-hZPA, rec-hZPB, rec-hZPC). El resultado de estos estudios indicó que proacrosina recombinante (Rec-40) y fragmentos del extremo N-terminal de la proteína (Rec-30, 20 y 10) tienen capacidad de unión a glicoproteínas de la ZP y a azúcares. Las glicoproteínas de la ZP mostraron diferente capacidad de unión a proacrosina/acrosina, siendo hZPA el ligando principal. El mecanismo de unión involucraría interacciones electrostáticas entre aminoácidos cargados positivamente en proacrosina/acrosina, y oligosacáridos sulfatados en la ZP, así como el reconocimiento de residuos de fucosa y manosa presentes en los oligosacáridos de la ZP. El resultado del mapeo de los sitios de unión en la molécula de proacrosina permite proponer que éstos estarían localizados en dos regiones de la proteína. Una región estaría comprendida entre los residuos 59-160 (Dominio II), y otra entre los residuos 300-402 (Dominio III). Los sitios de unión localizados en el Dominio II de la proteina estarían estabilizados por uniones no covalentes y puentes disulfuro, mientras que los sitios localizados en el Domino II estarían estabilizados por interacciones no covalentes, y tendrían una contribución principal a la afinidad de la interacción. En dichas regiones, los residuos Lys74, Lys108, Lys114 y el motivo KRLQQKLIE (residuos 367-374), identificados mediante el análisis de secuencias, participarían en la interacción con glicoproteinas de la ZP y azúcares. En resumen, este trabajo muestra que proacrosina/acrosina humana presenta La capacidad de reconocer glicoproteinas de la ZP. de manera independiente de la actividad de proteasa. Esto permite proponer que proacrosina/acrosina participaría como molécula de adhesión en la unión secundaria del espermatozoide a la ZP en el humano.

"Caracterización bioquímica y molecular de nucleósido difosfato quinasas de Solanum tuberosum (StNDPKs): análisis de su expresión en la planta de papa en respuesta a estreses" (2012). Bachmann, Sandra D.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La capacidad de respuesta de una planta ante los cambios ambientales circundantes asegura su supervivencia. Los mecanismos de respuesta a estres biótico y abiótico están regulados por vías que dependen de la activación de genes en la cual una red de transducción de señales abarca desde la percepción de las señales hasta la expresión de genes de respuesta permitiendo la adaptación de la planta a su entorno, debiendo para ello integrar las señales externas e internas. Las nucleosido di fosfato quinasas (NDPKs) son enzimas que transfieren el fosfato γ de nucleósidos tri fosfatos (NTPs) a nucleósidos di fosfatos (NDPs) a través de un intermediario fosforilado en una histidina conservada, participando de la red de comunicación energética intracelular y pudiendo alterar el pool de NTPs. En plantas se han visto recientemente involucradas en varias cascadas de señalización. El objetivo general del trabajo es caracterizar las isoformas de NDPK en plantas de papa (S. tuberosum, var. Spunta) y estudiar su participación en la percepción de señales ambientales, analizando su expresión en respuesta a señales de estrés biótico y abiótico. La hipótesis planteada es que, dado que en toda situación de estrés subyace un compromiso energético y considerando que las NDPKs poseen actividad de fosfo-transferasa, éstas podrían estar involucradas en las respuestas a estímulos ambientales. A partir de los EST correspondientes a isoformas de NDPKs (STMED71, STMHY37) detectados en los microarreglos TIGR 10K de ARNm de brotes de papa cultivados en luz/oscuridad, se clonó de la secuencia codificante completa de StNDPK1 (GB FJ743686) a partir de brotes de papa y se sub-clonó un fragmento de la secuencia codificante de StNDPK2 (GB JF832386) a partir de una biblioteca de estolones. Se comparó la expresión de ambas en los distintos tejidos vegetativos y reproductivos de la planta y en tres estadios de tuberización por RT-PCR semi cuantitativa. StNDPK1 se expresa con distintos niveles de ARNm tanto en los tejidos como en los estadios de tuberización, mientras que StNDPK2 se expresaría en algún estadio de estolón tuberizante que no se pudo determinar. El análisis in silico de la secuencia aminoacidica de StNDPK1 muestra que tiene 238 amino ácidos de longitud, un peso molecular aproximado de 26 kDa y un punto isoeléctrico de 9.24. Codificaría para una proteína mitocondrial, el péptido señal comprendería los primeros 56 aa y el PM de la proteína madura sería de aprox. 20 kDa. La proteína recombinante StNDPK1 marcada con seis histidinas (6xHis) en su N-terminal producida se analizó por Western blot. Un anticuerpo anti-His detectó una banda de 26 kDa, mientras que un anticuerpo anti-NDPK1 dirigido contra el extremo Cterminal de la proteína reveló la banda de 26 kDa y una banda de 18kDa que podría corresponder a la proteína madura. Se detectó actividad de NDPK en extractos crudos y fracciones mitocondriales de brotación tubérculos, pero no en fracciones de cloroplastos. Además, los ensayos de Western blot realizados con el anticuerpo específico antiNDPK1 detectó la enzima en la fracción mitocondrial. El análisis filogenético de la proteína muestra que StNDPK1 está directamente emparentada con NDPK de Spinacia olaracea (que localiza en cloroplastos) y que posee un ancestro común con las otras isoformas de NDPKs de localización mitocondrial (AtNDPK3, BrNDPKIII y PsNDPK3). Además se pudo clonar la secuencia genómica completa de Stndpk1 (GB GU144806) de 3358 nts, posee 7 exones y 6 intrones. El Southern Blot usando como sonda la secuencia codificante de StNDPK1 sugiere que este gen pertenece a una familia multigénica. Por otro lado, se obtuvo el promotor de éste gen de 2385 pb cuyo análisis in silico revela la presencia de elementos regulados por luz, frío, daño mecánico, respuesta a defensa y dos sitios reguladores de los niveles transcripcionales (CAATbox y 5UTR Py-rich stretch). Dado que se disponía de mayor información respecto de la estructura del gen y de los elementos regulatorios que contiene la isoforma 1 de StNDPK y considerando que ésta tenía un perfil de expresión menos complejo que la isoforma 2, se realizaron los estudios de expresión en condiciones de estrés abiótico y biótico sólo para la isoforma 1. Los resultados de las RT-PCR semi-cuantitativas muestran que el nivel de ARNm de StNDPK1 aumenta en la exposición de plantas a oscuridad por tiempos cortos, mientras que en la exposición a bajas temperaturas se produce una disminución inicial de la expresión para luego recuperar los niveles normales. Se observó que tanto en el tratamiento con daño mecánico como el agregado de AJ (10μM) producen un aumento del mensajero de StNDPK1. Por otro lado, se midió actividad de NDPK en extractos de proteínas nativas de fracciones mitocondriales y de cloroplastos; tanto el extracto crudo, como la fracción mitocondrial presentan actividad de NDPK, sin embargo en la fracción de cloroplastos no se detectó actividad alguna. El análisis bio-informático sugiere que las dos isoformas, son de localización sub-celular. Pero en particular, StNDPK1 fue detectada por Western blot en la fracción mitocondrial donde también se midió la actividad enzimática; por lo que StNDPK1 sería una isoforma que localiza en la mitocondria. Al menos dos isoformas de NDPK en plantas de papa muestran un patrón muy diferente de expresión, StNDPK1 tiene diferentes niveles de expresión en tejidos, pero su expresión es ubicua, mientras StNDPK2 muestra un patrón más restringido y sólo se expresa en ciertas etapas de estolones, lo que sugiere que posiblemente su expresión esté asociada a ciertas etapas del desarrollo del tubérculo. Nuestros resultados sugieren fuertemente que StNDPK1 está dirigida a la mitocondria. El análisis de los datos de Stndpk1 promotor es consistente con los resultados de la expresión, lo que sugiere que StNDPK1 podrían estar involucrados en las respuestas ambientales a la disponibilidad de luz, temperaturas bajas o ataque herbívoro.

Abstract:
The responsiveness of a plant to environmental changes ensures its survival. Response mechanisms to biotic and abiotic stresses are regulated by signal transduction networks that extend from signal perception to gene activation allowing the plant´s adaptation to the environment through a process that integrates external and internal signals. Nucleoside diphosphate kinases (NDPKs) participate in the intracellular energy communication network by altering the nucleoside triphosphates (NTPs) pool; they catalyze the transfer of γ phosphates from NTPs to nucleoside diphosphate (NDPs) through a phosphorylated protein intermediary at a conserved histidine. NDPKs have been involved in several signaling cascades in plants. The overall aim of this study is to characterize NDPK isoforms in potato (S. tuberosum, var. Spunta) plants and to study their involvement in the perception of environmental signals by analyzing their expression in response to biotic and abiotic stress signals. Our hypothesis is that, as in all stress situations there is an underlying commitment to energy; NDPKs could be involved in responses to environmental stimuli. ESTs from NDPKs isoforms (STMED71, STMHY37) were detected in a TIGR 10K microarray probed with total RNA from potato sprouts grown under different conditions (light/dark). StNDPK1 complete coding sequence (GB FJ743686) was cloned using total RNA from potato sprouts while a fragment of StNDPK2 coding sequence (GB JF832386) was amplified from a cDNA library from tuberizing stolons. Bioinformatic analysis suggested that both isoforms have a sub-cellular localization because they don´t have the characteristic YE motif present in cytosolic NDPKs. Phylogenetic analysis shows that StNDPK1 protein is directly akin of Spinacia olaracea NDPK (which is located in chloroplasts) and shares a common ancestor with other NDPK isoforms with mitochondrial localization (AtNDPK3, BrNDPKIII and PsNDPK3). In silico analysis of StNDPK1 sequence shows that it encodes a protein of 238 aminoacids (aa) with a molecular weight of 26 kDa and an isoelectric point of 9.24. A mitochondrial signal peptide of 56 aa was predicted, thus the mature protein would be of approx. 20 kDa. The recombinant StNDPK1protein tagged with six histidines (6xHis) in its N-terminus was produced and analyzed by Western blot. An anti-His antibody detected a 26 kDa band while an anti-NDPK1 antibody directed against the C-terminus of the protein revealed the 26 kDa band and an 18kDa band that could correspond to the mature protein. NDPK activity was detected in crude extracts and mitochondrial fractions from sprouting tubers, but not in chloroplast fractions. In addition, Western blot assays performed with the specific antiNDPK1 antibody detected the enzyme in the mitochondrial fraction. A Southern blot probed with StNDPK1 complete coding sequence suggests that this gene belongs to a multigene family. The complete genomic sequence of Stndpk1 (GB GU144806) and its promoter region (2385 bp) were cloned. Stndpk1 is 3358 bp long and has seven exons and six introns. In silico analysis of the promoter region reveals the presence of elements regulated by light, cold, wounding, defense and two regulatory sites of transcriptional levels (CAATbox and Py-rich 5UTR stretch). We compared the expression of both isoforms in various vegetative and reproductive tissues of the plant and in three stages of tuberization by semiquantitative RT-PCR. StNDPK1 is expressed in all tissues and tuberization stages being most abundant in shoot apex, flowers and leaves, while StNDPK2 expression was undetectable in the tissues analyzed. Expression studies under abiotic and biotic stress conditions were performed only for StNDPK1. Semiquantitative RT-PCR results show that StNDPK1 transcripts increased in plants exposed to short periods of darkness, while exposure to low temperatures produced an initial decrease in the expression recovering after 6hs. Both, mechanical wounding or the addition of 10μM jasmonic acid (JA) produced an increase in StNDPK1´s mRNA. According to our results we propose that at least two NDPK isoforms are present in potato plants that show different expression patterns, StNDPK1 is ubiquitous being most abundant in aerial tissues, while StNDPK2 is restricted to tuberizing stolons. Our results strongly suggest that StNDPK1 is targeted to mitochondria. The data analysis of Stndpk1 promoter is consistent with the expression results, suggesting that StNDPK1 could be involved in environmental responses to light availability, low temperatures or herbivore attack.

"Caracterización cuantitativa de señales intracelulares de calcio" (2011). Sigaut, Lorena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las señales de calcio son utilizadas por una enorme variedad de células para regular procesos tan distintos como la fertilización o la muerte celular, entre muchos otros. La versatilidad del ión calcio como agente señalizador se basa en la gran diversidad de comportamientos que su concentración puede desplegar dentro de las células. Desentrañar la compleja trama de mecanismos que determinan dichos comportamientos es un enorme desafío que requiere la combinación de estrategias múltiples tanto experimentales como de modelado. En particular, el amplio rango de escalas espaciales y temporales involucradas no puede ser abarcado con un unico tipo de experimentos y es entonces que la elaboración de modelos que permitan conectar observaciones dispares se vuelve indispensable. Por otro lado, para que los modelos puedan cumplir este rol es necesario contar con estimaciones confiables, idealmente obtenidas in situ, de algunas de las cantidades que caracterizan a los fenómenos físicos y químicos involucrados en las señales. El objetivo de esta Tesis ha sido avanzar en la obtención de estas estimaciones realistas realizando experimentos opticos y desarrollando el marco teórico necesario para extraer información cuantitativa de los mismos. Una de las propiedades pobremente caracterizadas es la tasa a la que el calcio se transporta dentro de las células. Existen distintas técnicas opticas para estimar coeficientes de difusión, entre las que se encuentran la espectroscopía de correlación de fluorescencia (FCS) o la recuperación de fluorescencia tras fotoblanqueo (FRAP). La aplicación de las mismas al caso del calcio no es totalmente directa, ya que este ión no sólo difunde al entrar al citosol a través de canales específicos, sino que también reacciona con distintas sustancias (“buffers”) que poseen las células. Para describir este tipo de transporte es posible definir coeficientes efectivos, que contienen información sobre la difusión y las reacciones. Estudios preliminares habrán mostrado la existencia de más de un coeficiente de este tipo. Una de las contribuciones de esta Tesis ha sido estudiar de forma detallada la información que es posible extraer a partir de experimentos de FCS en donde la sustancia observada difunde y reacciona. En particular, se demostró que las técnicas de FCS y FRAP brindan información sobre coeficientes distintos, que puede ser combinada para inferir tasas de reacción yo de difusión libre. Se realizó este estudio teórico para el caso en que la sustancia de interés está marcada fluorescentemente y cuando existen moléculas marcadas y no marcadas en el mismo sistema. Parte de los resultados fueron aplicados para explicar las diferencias observadas en experimentos de FCS y FRAP, realizados para deter minar el coeficiente de difusión del producto del gen bicoid en embriones de moscas Drosophila melanogaster, una sustancia fundamental para el establecimiento del eje dorsoventral en este organismo. La aplicación de técnicas opticas para estudiar el transporte de calcio en células presenta dificultades adicionales. En primer lugar, la observación de la distribución del calcio se hace de modo indirecto, mediante fluoróforos que reaccionan con este ión y cambian sus propiedades espectrales como por ejemplo, aumentar notablemen te la fluorescencia al ligar calcio. Es decir, la sustancia observable (indicador ligado a calcio) está permanentemente transformándose en otra. Por otro lado, para poder inferir a partir de ella la distribución de calcio libre es necesario conocer propiedades del indicador que típicamente no son provistas por quienes lo comercializan, como por ejemplo, los coeficientes de difusión. Otra de las contribuciones de esta Tesis ha sido establecer las bases para la determinación de los coeficientes de difusión y tasas de reacción del calcio y sus fluoróforos, en células. Para tal fin se hicieron, en primer lugar, experimentos de FCS en distintos tipos de soluciones conteniendo calcio e indicador. Se trabajó simultáneamente en los desarrollos teóricos necesarios para el análisis de los mismos. De su aplicación se pudieron determinar coeficientes de difusión y parámetros de reacción en solución. Entre los experimentos se realizó un subconjunto conteniendo calcio, indicador y un “buffer” adicional. A partir del estudio detallado de estos ultimos se elaboró una propuesta de cómo obtener estos coeficientes en células intactas donde las propiedades de los “buffers” presentes son desconocidas. La versatilidad de las señales intracelulares de calcio depende, entre otras cosas, de la distribución espacial y de la cinética de los canales a través de los cuales los iones ingresan al citosol. Entre estos, los receptores de inositol (1,4,5)-trifosfato (IP3 R) constituyen una de las vías más importantes para este ingreso. Estos canales se encuentran en la membrana del retículo endoplasmático organizados en cúmulos que se supone son de unos 100 nm de lado y que están, a su vez, separados por algunos milímetros entre sí. Los canales se abren cuando ligan calcio e IP3 R el que, en condiciones fisiológicas, es sintetizado a partir de elementos presentes en la membrana plasmática cuando la célula recibe una señal. La distribución inhomogénea de los canales junto con el efecto del calcio liberado sobre la probabilidad de aper- tura se combinan para dar lugar a una jerarquía de señales que van desde las muy localizadas hasta las ondas que viajan por toda la célula. Contar con información cuantitativa sobre la geometría de los cúmulos y sobre la cinética de los canales in situ es fundamental para entender la variedad de señales que pueden evocarse. Experimentalmente es posible observar las señales usando los fluoróforos antes mencionados e induciendo la apertura de los canales con IP3 , que es introducido en la célula en forma enjaulada y posteriormente fotoliberado con luz ultravioleta. Otra de las contribuciones del presente trabajo de Tesis ha sido el diseño e implementación de una adaptación relativamente barata de un microscopio confocal Olympus FV1000 para realizar este tipo de experimentos. La habilidad del sistema para fotolizar compuestos enjaulados fue comprobada en distintas situaciones experimentales. Por otro lado, la potencia que llega a la muestra y el tamaño de la zona iluminada fueron cuantificados. Finalmente, en el trabajo se ha mostrado también que con esta adaptación es posible generar un est ́mulo preciso y controlado de IP3 simultáneamente a la obtención de imágenes confocales de señales de calcio, registrando y caracterizando a las mismas en ovocitos de Xenopus Laevis.

Abstract:
Calcium signals are used by an enormous variety of cells to regulate processes as diverse as fertilization or cell death, among others. The versatility of calcium as a signaling agent is based on the great diversity of behaviors that its concentration can display inside cells. Unveiling the complex network of mechanisms that determine these behaviors is an enormous challenge that requires the combination of multiple strategies which include experiments and modeling. In particular, the wide range of spatial and temporal scales involved can not be covered with a single type of expe- riment, so that the development of models that can connect different observations becomes unavoidable. On the other hand, for models to fulfill this role is necessary to have reliable estimates, ideally obtained in situ, of some of the quantities that cha- racterize the physical and chemical phenomena involved in the signals. The aim of this Thesis has been to advance in obtaining these realistic estimates by performing optical experiments and developing the theoretical framework necessary to extract quantitative information from them. One poorly characterized property is the rate of calcium transport inside cells. There are several optical techniques to estimate diffusion coefficients, among them, Fluorescence Correlation Spectroscopy (FCS) and Fluorescence Recovery After Photobleaching (FRAP). Applying these techniques to the case of calcium is not entirely straightforward, since this ion not only diffuses, when it enters the cytosol through specific channels, but also reacts with various substances (“buffers”) inside cells. Effective coefficients can be defined to describe this type of transport, which contain information on the diffusion and reaction parameters. Preliminary studies had shown the existence of more than one of these coefficients. One contribution of this Thesis has been a detailed study of the information that can be obtained from FCS experiments in which the particles observed diffuse and react. In particular, it was proved that FCS and FRAP provide information about different coefficients which can be combined to infer reaction and free diffusion rates. A theoretical study was done for the case in which the molecule of interest is fluorescently labeled and when there are fluorescently labeled and unlabeled molecules in the same system. Part of the results were applied to explain the differences observed in FCS and FRAP experiments, performed to determine the diffusion coefficient of bicoid in Drosophila melanogaster embryos, an essential substance for the formation of the dorsoventral axis in this organism. The application of optical techniques to study calcium transport in cells offers additional difficulties. First of all, the observation of the calcium distribution is indirect, by means of fluorophores that react with this ion and change their spectral properties upon binding (e.g. increasing their fluorescence when they are bound to calcium). Thus, the observable particle (indicator bound to calcium) is permanently transforming into another. On the other hand, to infer the distribution of free cal- cium it is necessary to know indicator properties that are not usually provided by the vendor, for example, diffusion coefficients. Another contribution of this Thesis has been to establish the basis for the determination of diffusion coefficients and reaction rates of calcium and fluorophores in cells. To this aim, firstly, FCS experiments in different types of solutions containing calcium and indicator were performed. At the same time, the theoretical framework for the analysis of the results was developed. Applying this theory, diffusion coefficients and reaction parameters could be deter- mined for the experiments in solution. Among the experiments, a subset containing calcium indicator and an additional buffer was performed. From a detailed study of the latter, a proposal was made on how to obtain these coefficients and parameters in intact cells where the properties of the endogenous buffers are unknown. The versatility of intracellular calcium signals depends, among other things, on the spatial distribution and kinetics of the channels through which the ions enter the cytosol. Among them, the inositol (1,4,5)-triphosphate receptors (IP3 R) are one of the most important ways for this entry. These channels are located on the mem- brane of the endoplasmic reticulum, organized in clusters of about 100 nm in side which are separated by a few millimeters. These channels become open when they bind calcium and IP3 which, under physiological conditions, is synthesized from elements present in the plasma membrane upon the arrival of a signal. The inhomogeneous distribution of the channels together with the effect of the free calcium on the open probability are combined to give rise to a hierarchy of signals, ranging from very localized ones to waves that travel throughout the cell. Having quantitative information on the clusters geometry and channels kinetics it in situ is essential for understanding the variety of signals that can be evoked. Experimentally, it is possible to observe these signals using the fluorophores mentioned before and indu- cing the opening of IP3 receptor/channels by introducing a caged form of IP3 into the cell and then fotoreleasing it with ultraviolet light. Another contribution of this Thesis has been the design and implementation of a relatively inexpensive adapta- tion of an Olympus FV1000 confocal microscope to perform such experiments. The system’s ability to photolyze caged compounds was tested in different experimental situations. The power that reaches the sample and the size of the illuminated area were also quantified. Finally, in this work it has also been demostrated that with the modified microscope it is possible to generate a precise and controlled IP3 stimulus, simultaneously with the confocal imaging of the evoked calcium signals. This has been proved by recording and characterizing such images in Xenopus laevis oocytes.

"Caracterización de antígenos recombinantes de la glicoproteína E2 del virus de la diarrea viral bovina y su utilización como vacunas y reactivos de diagnóstico" (2003). Marzocca, Marina Patricia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El Virus de la Diarrea Viral Bovina (BVDV) pertenece al género Pestivirus de la familia Flaviviridae y es causante de importantes pérdidas económicas en la industria ganadera regional y mundial. Las manifestaciones clinicas de la infección son variadas y las pérdidas en la producción ganadera se deben principalmente a la disminución en la producción de leche, retraso en el crecimiento, aumento de infecciones secundarias y aumento de la mortalidad en animales jóvenes. El control epidemiológico de BVDV se realiza a través de programas de vacunación masiva y eliminación de animales persistentemente infectados, principales diseminadores del virus en los rebaños. Los bajos títulos virales obtenidos en cultivo de tejidos constituyen una dificultad importante en la elaboración industrial de vacunas inactivadas. La utilización de cepas atenuadas como vacunas anti BVDV es, por otra parte, un riesgo mayor ya que la aparición de revertantes en un animal pre-infectado con BVDV podría desencadenar la “enfermedad de las mucosas”, que es fatal y en vacas preñadas podría dar origen a una camada de terneros persistentemente infectados. El diagnóstico de las infecciones con BVDV, realizada a través de la detección de anticuerpos en suero bovino por seroneutralización y/o inmunoensayo enzimática (ELISA) también presenta dificultades debidas, entre otras, a la necesidad de contar con infraestructuras adecuadas para el cultivo de células y a los desafios técnicos que presenta la obtención de antígeno purificado. En este trabajo se expresó en sistemas recombinantes y se caracterizó bioquímica e inmunológicamente al principal inmunógeno de BVDV, la glicoproteína E2. La proteína fue expresada en células de mamífero y de insecto, en su forma entera (rE2) y delecionada en su extremo carboxilo terminal de anclaje a membrana (ΔrE2) y se ensayó su desempeño como vacuna y como antígeno para diagnóstico. La proteína recombinante E2 (rE2) presento características electroforéticas e inmunoquímicas idénticas a la E2 viral y resultó ser un potente inmunógeno en bovinos. La incorporación del gen de rE2 en el genoma de un Virus de la estomatitis vesicular (VSV) recombinante permitió, también , la creación de un virus atenuado de VSV (VSV-E2) capaz de inducir una excelente respuesta humoral anti BVDV en ratones y óptima producción de E2 recombinante en células de BHK en cultivo. En este trabajo también se demostró que la proteína ΔrE2 es expresada y liberada al sobrenadante del cultivo de células de Drosophila melanogaster lo que permitió contar con una preparación rápida y relativamente pura de antígeno. Este fue utilizado en un test de ELISA de captura (a través de un anticuerpo monoclonal anti rE2, también desarrollado en el curso de este trabajo de Tesis) que presenta alta sensibilidad y especificidad para la detección de anticuerpos anti BVDV en sueros bovinos.

Abstract:
The Bovine Viral Diarrhea Virus (BVDV) belongs to the genus Pestivirus of the family Flaviviridae and is responsible for important economic losses in the cattle industry throughout the world. The clinical manifestations of the infection are varied and the looses in the cattle production are mainly due to the decreased production of milk, delay in the growth, increase of secondary infections and increase of the mortally in young animals. Control of BVDV is carried through programs of massive vaccination and elimination of persistently-infected animals that are the main source of contagious virus in the field. Deficient virus production in cell culture constitutes an important difficulty in the industrial elaboration of inactivated vaccines. The use of attenuated viruses as BVDV immunogens on the other hand, is risky since revertants could produce mucosal disease in preinfected animals. This is eventually fatal and, in the case of pregnant cows, could give origin to persistently infected calves. The diagnosis of BVDV infections is accomplish by detection of specific antibodies in bovine serum in seroneutralization and/or enzyme linked immuno (ELISA) assays. These techniques also present difficulties related, for instance, to the necessity of having appropiate infrastructures for cell culture and obtaining purified antigen in workable amounts, as well. In this work the main immunogenic protein of BVDV, the glycoprotein E2, was expressed in different recombinant systems and characterized, subsequently , biochemically and immunologically. The protein was expressed in mammalian and in insect cells either as a whole protein (rE2) or as a deleted form lacking its carboxi terminal membrane anchor (ΔrE2) and its potential as immunogen and as a diagnostic antigen was explored. The recombinant protein E2 (rE2) showed electrophoretic and immunochemical characteristics identical to those of its viral counterpart and also induced a potent anti BVDV serum response in bovines when administerd in an oil emulsion. Incorporation of the rE2 gene in a recombinant Vesicular stomatitis virus (VSV) genome allowed us, in addition, to generate an attenuated virus of VSV (VSV-E2) able to induce an excellent humoral anti-BVDV response in mice and to produce recombinant E2 in infected BHK cell cultures. The protein ΔrE2 is expressed and released to the extracellular medium of transformed Drosophila melanogaster cells expressing the recombinant protein, in what turned to be a quick and simple way to get relatively pure and soluble antigen. This allowed the design of an ELISA test using soluble rE2 as antigen and a specific anti E2 capture MAb (developed during this Thesis work using rE2 expressed by baculovirus) that presents high sensibility and specificity for the detection of anti BVDV antibodies in bovine sera.

"Caracterización de distintas fuentes de cAMP en la señalización del GPCR CRHR1" (2017-03-15). Inda, María Carolina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los receptores acoplados a proteína G (GPCRs) son los mediadores de las respuestas celulares a una gran cantidad de estímulos, así como también el blanco de muchas drogas terapéuticas. El rol clásico de los GPCRs es acoplar la unión de ligandos a la activación de proteínas G heterotriméricas, que a su vez regulan a múltiples proteínas efectoras. Recientemente se ha demostrado que los modos de señalización de los GPCR son mucho más complejos, involucrando también mecanismos independientes de proteínas G y señalización dependiente de la internalización del receptor. La hormona liberadora de corticotropina (CRH) ejerce un rol clave en la respuesta integrada al estrés. Además de regular la activación del eje hipotálamo-pituitario-adrenal (HPA), CRH está ampliamente distribuida en el sistema nervioso central, donde funciona como un neuromodulador, integrando aspectos comportamentales y afectivos de la respuesta a estrés. Se ha demostrado que la desregulación de la acción de CRH a través de su receptor de alta afinidad, CRHR1, se encuentra involucrada en el desarrollo de estadios patológicos asociados al estrés como ansiedad y depresión. CRHR1 es un GPCR de clase B, que al activarse principalmente se acopla a proteína Gs y lleva a un aumento del segundo mensajero AMP cíclico (cAMP) y la activación de múltiples vías de señalización. Es de particular interés la fosforilación de la MAPK ERK1/2, que induce la transcripción de Pomc para activar el eje HPA en corticotrofos, y se dispara en estructuras del cerebro asociadas a aspectos comportamentales de la respuesta a estrés frente a la estimulación con CRH. Habíamos descripto previamente que CRHR1 activa mecanismos de señalización dependientes de proteína G y otros dependientes de la endocitosis del receptor. Estos dos componentes de respuesta pueden evidenciarse como dos fases diferentes de activación de ERK1/2 en la línea celular hipocampal murina HT22 transfectada establemente con CRHR1 (HT22-CRHR1). En este trabajo, nos focalizamos en la respuesta de cAMP mediada por CRHR1, utilizando métodos clásicos de biología molecular en combinación con biosensores basados en la transferencia de energía resonante de Förster (FRET) para estudiar por visualización dinámica de célula única los mecanismos de señalización de CRH. En primer lugar demostramos que al estimular CRHR1, el aumento en los niveles de cAMP no sólo está mediado por las adenilil ciclasas transmembrana (tmACs) sino también por una adenilil ciclasa soluble (sAC) en las células HT22-CRHR1. sAC es una fuente atípica de cAMP ya que es insensible a proteína G y es regulada por calcio y bicarbonato. Además, se ha reportado que sAC está presente en distintas localizaciones subcelulares, formando microdominios de señalización. La respuesta de cAMP a CRH también se encontró mediada tanto por tmAC como por sAC en la línea celular derivada de corticotrofos AtT20, pero no así en las células 3T3L1-CRHR1. Sin embargo, observamos que tanto en células HT22-CRHR1 como en AtT20, sAC no participa en la señalización de otros ligandos de GPCRs, como isoproterenol o PACAP38, respectivamente. Estos resultados indican que el rol de sAC en la transducción de señales de un GPCR depende del contexto celular y del receptor involucrado. La estimulación con CRH genera un aumento en los niveles de calcio intracelular, y al bloquear la respuesta de calcio se observó un patrón de cAMP y ERK1/2 en respuesta a CRH similar al que se obtiene al bloquear sAC. Esto sugiere que calcio es el activador de sAC río abajo de CRHR1. Luego, nos propusimos caracterizar si ambas fuentes de cAMP contribuyen a un pool común de cAMP o si pueden identificarse roles particulares para cada adenilil ciclasa en la respuesta. Observamos que tanto tmACs como sAC participan en la fase aguda de activación de ERK1/2, pero que en la fase sostenida de fosfo-ERK1/2, dependiente de la internalización de CRHR1, sólo sAC está involucrada. Más aún, demostramos que el CRHR1 continúa generando cAMP desde estaciones endocíticas, y que es sAC la responsable de esta producción una vez internalizado CRHR1. En conclusión, a través de la caracterización de los mecanismos moleculares activados por CRHR1, se hallaron nuevas evidencias que refuerzan el modelo emergente de señalización por GPCR en el que la respuesta de cAMP no ocurre exclusivamente a nivel de la membrana plasmática y donde sAC representa una fuente alternativa de cAMP regulada por GPCRs.

Abstract:
G protein–coupled receptors (GPCRs) are the mediators of cellular responses to a wide variety of stimuli, as well as the target of many therapeutic drugs. The classical role of GPCRs is to couple the binding of ligands to the activation of specific heterotrimeric G proteins, leading to the regulation of downstream effector proteins. Recently, it has been demonstrated that GPCR signaling is much more complex, including G protein–independent mechanisms and receptor internalization dependent signaling. Corticotropin-releasing hormone (CRH) plays a critical role in the integrated stress response. Besides being the driver of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis, CRH is widely distributed in the central nervous system, where it functions as a neuromodulator, integrating affective and behavioral aspects of the stress response. It has been demonstrated that the dysregulation of CRH action through its high-affinity type 1 receptor (CRHR1) is crucial in the pathogenesis of stress-related affective disorders. CRHR1 is a class B GPCR that, upon ligand activation, signals mainly by Gs coupling, leading to the increase of the second messenger cyclic AMP (cAMP) and the activation of multiple signaling cascades. Of particular interest is the phosphorylation of the MAPK ERK1/2, which is involved in the induction of Pomc transcription to activate the HPA axis in pituitary corticotrophs, and that is activated in specific brain structures related to behavioral aspects of the stress response upon CRH stimulation. We have previously described that CRHR1 activates G protein-dependent and receptor endocytosis-dependent mechanisms. These two components of the response can be evidenced as two distinct phases of ERK1/2 activation in the mouse hippocampal cell HT22 stably transfected with CRHR1 (HT22-CRHR1). In this work, we focused on the cAMP response of CRHR1, using classical cell biology tools in combination with Förster resonance energy transfer (FRET)–based biosensors, to study CRH signaling mechanisms at the single cell level by live imaging. First, we demonstrated that upon CRHR1 stimulation, cAMP level increase is not only mediated by transmembrane adenylyl cyclases (tmACs), but also by a soluble adenylyl cyclase (sAC) in HT22-CRHR1 cells. sAC is an atypical cAMP source, insensitive to G protein but regulated by bicarbonate and calcium. In addition, it has been reported that sAC is localized in different intracellular locations, generating particular signaling microdomains. cAMP response to CRH was also found mediated by both tmACs and sAC in the corticotroph-derived cell line AtT20, but sAC was not involved in the response in 3T3L1-CRHR1 cells. However, we determined that in HT22-CRHR1 cells as well as AtT20 cells, sAC does not participate in the signaling pathway of other GPCR ligands such as isoproterenol or PACAP38, respectively. These results indicate that the role of sAC in the signal transduction of a GPCR depends on the cellular context and the receptor involved. CRH stimulation leads to a rise in intracellular calcium levels, and when the calcium response is blocked the cAMP and ERK1/2 pattern in response to CRH is similar to the one observed when sAC is blocked. This suggests that calcium is the activator of sAC downstream CRHR1. Then, we aimed to characterize if both cAMP sources contribute to a common cAMP pool or if particular roles for each type of adenylyl cyclase may be identified in the response. We observed that both tmACs and sAC participate in the acute activation of ERK1/2, but in the sustained phospho-ERK1/2 phase only sAC is involved. Moreover, we demonstrated that CRHR1 continues to generate cAMP from endocytic stations, and that sAC is the enzyme responsible for this production once CRHR1 is internalized. In conclusion, by characterizing the molecular mechanisms activated by CRHR1, we found new evidences that strengthen the emerging model of GPCR signaling in which the cAMP response does not occur exclusively at the plasma membrane and introducing the notion of sAC as an alternative source of cAMP.

"Caracterización de distintos miembros de la familia de proteínas CAP en tracto reproductor masculino y femenino y su participación en el proceso de fertilización" (2012-10). Ernesto, Juan Ignacio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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A pesar de la importancia del proceso de fertilización, es aún muy escasa la información disponible acerca de las moléculas involucradas. Las evidencias de nuestro laboratorio indican que las proteínas de la familia CRISP, miembro de la superfamilia CAP, serían claros mediadores del proceso de interacción de gametas. Teniendo en cuenta que las CRISP se expresan principalmente en el tracto reproductor masculino, el primer objetivo de esta Tesis ha sido investigar si las mismas también se expresan en el tracto reproductor femenino y cumplen un rol en el proceso de fertilización. Los resultados obtenidos utilizando los modelos de rata y ratón indicaron que mientras CRISP1 se encuentra presente en útero, oviducto, ovario, y células del cúmulus, CRISP2 se detecta sólo en ovario, y CRISP4 no se expresaría en el tracto de la hembra. Ensayos de fertilización in vitro utilizando espermatozoides y COC (complejos ovocito-cúmulus) provenientes de ratones knockout para CRISP1 indicaron que la proteína presente en el cúmulus cumpliría una función en el proceso de fertilización. Estudios posteriores revelaron que CRISP1 exhibe propiedades quimioatractantes hacia los espermatozoides, sugiriendo que éste podría ser el mecanismo por el cual CRISP1 del cúmulus participa en el proceso de fertilización. Dada la gran homología entre las CRISP y las GLIPR1, las cuales constituyen las dos familias mejor caracterizadas de la superfamila CAP, el segundo objetivo de este trabajo consistió en estudiar la presencia de proteínas GLIPR1 en el tracto reproductor masculino y su participación en la fertilización. Los resultados indicaron la expresión de GLIPR1L1 a nivel testicular y de GLIPR1L2 tanto en testículo como en epidídimo de ratón. La generación de ambas proteínas en forma recombinante y de sus correspondientes anticuerpos confirmó la presencia de las mismas en el espermatozoide y su participación específica en la primera etapa de unión a la zona pellucida. La información obtenida acerca del rol de las proteínas CRISP y GLIPR1 contribuirá a una mayor comprensión de los mecanismos moleculares involucrados en la interacción de gametas como así también al desarrollo de futuros métodos de regulación de la fertilidad tanto en animales como en el humano.

Abstract:
Despite the importance of the fertilization process, there is still little information about the molecules involved in it. Evidence from our laboratory indicates that proteins from de CRISP family, members of the CAP super family, would be clear mediators of the gamete interaction process. Considering that the CRISP are expressed primarily in the male reproductive tract, the first objective of this thesis was to investigate whether these proteins are expressed in the female reproductive tract and if they play a role in the fertilization process. The results indicated that while CRISP1 is present in uterus, oviduct, ovary and cumulus cells, CRISP2 is detected only in the ovary and CRISP4 is not expressed is the female reproductive tract. In vitro fertilization assays using both sperm and COC (oocyte-cummulus complex) from CRISP1 knockout mice indicated that the protein present in the cumulus fulfill a role in the fertilization process. Further studies revealed that CRISP1 exhibit sperm chemoattractant properties, suggesting that this might be the mechanism by which CRISP1 present in the cumulus participates in the fertilization process. Given the high homology between CRISP and GLIPR1, which are the two best characterized families from the CAP super family, the second objective of the present work was to study the presence of GLIPR1 proteins in the male reproductive tract and their participation in the fertilization process. Our results indicated that GLIPR1L1 is expressed in the testis while GLIPR1L2 is present in the testis and the epididymis. The generation of both recombinant proteins and their corresponding antibodies confirmed the presence of these proteins in the sperm (human and mouse) and their specific involvement in the first stage of binding to the zona pellucida. The information obtained about the role CRISP and GLIPR1 proteins will contribute to a greater understanding of the molecular mechanisms involved in gamete interaction as well as to the development of future methods to regulate fertility both in animals and humans.

"Caracterización de efectos mediados por complejos inmunes durante la diferenciación de células dedríticas" (2010). Laborde, Evangelina A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La interacción entre los complejos inmunes (CI) y los receptores para el fragmento Fc de las inmunoglobulinas G, induce respuestas inmunes regulatorias y efectoras. En este trabajo, nos propusimos investigar el efecto de los CI precipitantes sobre la diferenciación y las funciones biológicas de las células dendríticas (CD) derivadas de monocitos. Demostramos que el agregado de CI al inicio del cultivo altera la normal diferenciación de las CD. Así, las CD-CI diferenciadas durante 6 días en presencia de CI presentaron una baja expresión de los marcadores CD1a, CD1b, y una alta expresión de los marcadores CD14, MHC II y CD68, en comparación con las CD diferenciadas convencionalmente, sin embargo, no observamos diferencias en la expresión del marcador de células dendríticas CD11c. Estas alteraciones en el fenotipo correlacionaron con alteraciones en la morfología de las CD. Asimismo, evaluamos el efecto de CI solubles y observamos que sólo los CI solubles preparados con ligero exceso de antígeno, ejercieron un efecto sobre la diferenciación de las CD similar al observado con CI precipitantes. Demostramos además, que el efecto de los CI es tiempo y dosis dependiente e irreversible. Mediante el uso de anticuerpos bloqueantes específicos para los distintos FcγRs, determinamos que el efecto de los CI, es ejercido principalmente a través del FcγRI y en menor medida a través del FcγRII. Las CD-CI inmaduras mostraron altos niveles de CD83, CD86 y CD40, y el tratamiento con LPS no indujo un aumento en la expresión de las mismas. Esta alteración en la maduración de las CD se encontró asociada con una menor producción de IL-12 en respuesta al LPS, mientras que la producción de IL-10 no se vio alterada. Las CD-CI mostraron un perfil de producción de quimioquinas alterado, con un incremento en la producción de CXCL8, CCL2 y CCL3. Asimismo, las CD-CI mostraron una capacidad reducida para inducir una respuesta T alogénica y una menor capacidad endocítica. Demostramos que el efecto ejercido por los CI es independiente de IL-10 y prostaglandinas, mientras que la inhibición de la p38 MAP quinasa, abolió dicho efecto. Nuestros resultados demuestran que los CI afectan severamente la diferenciación, maduración y las funciones biológicas de las CD. Por esta razón, creemos que este estudio puede contribuir a un mejor entendimiento de los eventos involucrados en la patogénesis de las enfermedades autoinmunes y los desórdenes inflamatorios crónicos como el lupus eritematoso sistémico (LES), la granulomatosis de Wegener, la crioglobulinemia esencial y artritis reumatoidea (AR).

Abstract:
The interaction between immune complexes (IC) and the receptors for the Fc portion of IgG triggers regulatory and effector functions in the immune system. In this study, we investigated the effects of precipitating IC on differentiation and biological functions of human monocyte-derived dendritic cells. Herein, we demonstrated that IC added at the beginning of the culture altered the normal differentiation of DC. IC-DC obtained on day 6, had lower levels of CD1a, CD1b and increased expression of CD14, MHC class II, and the macrophage marker CD68, as compared with normally differentiated DC, however we did not observed any differences in the expression of CD11c, a dendritic cell marker. These alterations on DC phenotype were correlated with morphological alterations on IC-DC. In addition, we also evaluated the effects of soluble immune complexes, and we found that only soluble immune complexes prepared with antigen excess, had similar effects on DC differentiation. Additionally, these effects resulted time and dose dependent, and were irreversible. By using specific blocking FcγR antibodies we demonstrated that the effects of IC were exerted mainly through their interaction with FcγRI and to a lesser extend with FcγRII. Immature IC-DC also showed higher levels of CD83, CD86, and CD40 and the expression of these maturation markers was not further regulated by lipopolysacharide (LPS) treatment. The apparent lack of maturation following TLR stimulation was associated with a decreased production of IL-12, nevertheless, the production of IL-10 was normal. DC-CI showed an altered profile of chemokine production with an increased secretion of CXCL8, CCL2 and CCL3. Furthermore, IC-DC showed a reduced ability to induce allogeneic T cell proliferation, and a lower capacity to uptake dextran-FITC particles. We have found that neither IL-10 nor prostaglandins were involved in immune complexes-mediated inhibition of DC differentiation; however, these effects were abrogated by p38 MAPK inhibition. Take into account our findings reveal that IC strongly affects DC differentiation, maturation and biological functions of DC. Therefore, this study contributes to a better understanding of events involved in the pathogenesis of autoimmune diseases and chronic inflammatory disorders such as Systemic lupus erythematosus (SLE), Rheumatoid arthritis (RA) samples, Wegener's granulomatosis and essential cryoglobulinemia.

"Caracterización de equipos y medios multifásicos con métodos que emplean fuentes radiactivas" (2016-03-30). Salierno, Gabriel Leonardo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los sistemas multifásicos se encuentran en una gran cantidad de operaciones y en la gran mayoría de los procesos de la industria química, donde es necesario contactar reactivos presentes en distintas fases. Ejemplos de ellos pueden ser los procesos de fermentación que requieren del aireado de una suspensión densa de aglomerados de biomasa o la producción de jugos, que requiere de la trituración de frutas de manera continua minimizando el contacto con aire, o el proceso Fisher-Tropsch, que produce combustibles líquidos a partir de gas natural por reacción catalítica en torres de lecho fluidizado gas-líquido-sólido. Un ejemplo de creciente impacto económico-social son los tratamientos de efluentes líquidos o gaseosos, que requieren lidiar con sistemas de composición y reología complejos. Para controlar, diseñar u optimizar un equipo a escala industrial o para contrastar resultados de simulación computacional de fluido dinámica o de dinámica granular, se requiere de información experimental del movimiento y la distribución de las fases presentes. La información que se utiliza para evaluar la performance y verificar modelos que describen el movimiento de las fases presentes en un reactor, vinculando la fluidodinámica del sistema con el transporte de materia y energía son los campos de velocidad de las fases presentes, parámetros de turbulencia, distribución de fases o patrón de flujo, tiempos de residencia y de mezclado. Los equipos industriales suelen ser de paredes opacas y, aún si se operara con paredes translúcidas, los mismos sistemas multifásicos tienen la característica de dispersar la luz intensamente. En consecuencia, las técnicas que explotan la interacción con la luz visible por parte del sistema poseen aplicaciones muy limitadas y resulta apropiado recurrir a técnicas que utilizan radiación de alta energía para obtener información sobre el comportamiento de las fases en sistemas multifásicos que contribuya a optimizar diseños y monitorear la operación de un equipo. El objetivo general de este trabajo es el estudio de la fluido dinámica de sistemas multifásicos en equipos de escala piloto, empleando técnicas no-invasivas basadas en el uso de métodos que utilizan la detección de radiación γ. En particular, se optimizó y utilizó la técnica conocida como Radioactive Particle Tracking (RPT) para caracterizar la fluidodinámica de columnas de burbujeo bifásicas y trifásicas y de un reactor slurry agitado. Además, se propuso una simplificación de la técnica de RPT que facilitaría su empleo en instalaciones industriales, comparándose la información extraíble.

Abstract:
Multiphase systems are found in a large number of operations and in most of the processes of the chemical industry where contact of reagents present in different phases is necessary. Examples of these processes are the aerated fermentation that requires a slurry of biomass agglomerates, or juice production, requiring crushing fruit continuously minimizing contact with air, or Fisher-Tropsch process, that produces liquid fuels from natural gas by gas-liquid-solid catalytic reaction fluidized beds. An example of growing economic and social impact are gaseous or liquid effluent treatments that deal with systems of complex composition and rheology. To control, design or optimize industrial scale of multiphase units, or for validation of computational fluid or granular dynamics simulations, experimental data of the motion and distribution of the phases present is required. The information used to assess the performance and verify models describing the motion of the phases present in a reactor are the velocity fields of the phases present, turbulence parameters, phases distribution, flow patterns, residence times and mixing times. Industrial equipments have usually opaque walls, and they were translucent, multiphase systems have the property of scattering light intensely. Consequently, techniques that exploit interaction of the system with visible light have very limited applications, high-energy radiation is more appropriate to use to obtain information about the behavior of the phases in multiphase systems with the aim to optimizing design and monitoring. The objective of this work is the study of fluid dynamics of multiphase pilot scale vessels, using and developing non-invasive techniques based on detecting γ radiation. Particularly, the technique known as Radioactive Particle Tracking (RPT) was used to characterize the fluid dynamics of two and three phase bubble columns and a slurry stirred tank. Moreover, a simplification of the RPT technique is proposed to promote its use in industrial installations, making a comparison of the arising information.

"Caracterización de eventos de corriente en chorro en capas bajas de la atmósfera en base a reanálisis y la precipitación asociada en el Sudeste de Sudamérica" (2002). Salio, Paola Verónica. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El interés de esta Tesis se centra en la caracterización climática de los episodios de corriente en chorro en capas bajas al este de los Andes (SALLJ) y los campos de precipitación asociados a estos eventos, con énfasis en el impacto sobre la región Sudeste de Sudamérica (SESA). Este estudio utiliza los datos del reanálisis perteneciente al European Center Medium Weather Forecast (ERA), datos de radiación de onda larga saliente, datos de precipitación acumulada diaria y radiosondeos en Resistencia durante la estación cálida de 1979 - 1993. Estudios previos mostraron una relación entre el máximo de precipitación y la convergencia de vapor de agua sobre SESA. Nicolini and Saulo exploraron la hipótesis de una intensificación mutua en esta dependencia durante los eventos Chaco Jet (CJE). Estos eventos fueron definidos como casos SALLJ que penetran al sur de los 25ºS usando los productos del modelo operativo ETA durante la estación cálida de 1997 - 1998. Los CJEs representan un subensamble de eventos SALLJ poco frecuentes en los datos del ERA. Su duración oscila entre 1 a 10 días extendiéndose más frecuentemente entre 1 a 5 días. Las principales características de la circulación y de los campos termodinámicos que representan este ensamble son: un contraste máximo de masas de aire en 39ºS, la presencia de una vaguada con su eje sobre la cordillera de los Andes, un tren de ondas baroclínicas que penetra desde el Océano Pacífico y un máximo de calor y humedad sobre el norte de Argentina y Paraguay. Durante los CJEs existe un importante flujo de humedad y convergencia en los niveles bajos y medios que es 10 veces más intenso que la media del verano. La intensidad encontrada en las anomalías del flujo de humedad refuerza la importancia del estudio de estos episodios con el propósito de determinar el balance de vapor de agua sobre la SESA. El hecho que los CJEs representan una importante característica del clima de la SESA se basa en que los CJEs sólo representan el 17% (28%) del verano (primavera) y ellos son capaces de explicar una fracción significativa de la precipitación (un máximo de 55%) sobre el noreste de Argentina. Una comparación entre los CJEs y los eventos SALLJ - No Chaco muestra que estos últimos son más (menos) frecuentes durante el verano (primavera), llevando a la estación a comportarse como los SALLJ - No Chaco, mientras los CJEs presentan una fuerte componente baroclínica desarrollada en la escala sinóptica. Los campos medios de geopotencial en niveles bajos, dominados por una baja térmica y el Anticiclón del Atlántico Sur aumentan un patrón frontogenético que finalmente evoluciona en un pasaje frontal que marca el fin del CJE. Un estudio preliminar sobre el ciclo diurno de la convección es presentado en este trabajo utilizando observaciones de tiempo presente en Argentina. Una fase nocturna - matutina (03-09 hora local) en la convección prevalece durante primavera, mientras en verano se desarrolla por la tarde sobre el noreste de Argentina. Por otra parte, en el centro de Argentina la convección presenta una fase nocturna en verano. La misma fase que en primavera se manifiesta durante los CJEs, mientras un máximo a las 18UTC centrado en Formosa y Concordia se observa en los SALLJ - No Chaco durante toda la estación cálida. Otro máximo durante los SALLJ - No Chacho es identificado en verano en Mendoza, Salta y Neuquén en las horas de la mañana.

Abstract:
The interest of the present thesis centers on the climatic characterization of South American Low Level Jet (SALLJ) episodes and their associated precipitation fields, with emphasis on their impact on precipitation over Southeastern South America region (SESA). This study includes results using European Center Medium Weather Forecast reanalyses (ERA), outgoing longwave radiation data, raingauge network rainfall data and soundings at Resistencia during the 1979 - 1993 warm season. Previous studies showed a relationship between precipitation maximum and the convergence of vapor flux over SESA. Nicolini and Saulo explored the hypothesis of an intensification of this mutual dependency during Chaco Jet events (CJE). They defined these events as cases of SALLJ that penetrates southernmost 25ºS using ETA operative products during 1997 - 1998 austral warm season. The CJEs represent a subensemble of SALLJ infrequent in the ERA data set. Their duration varies from 1 to 10 days extending more frequently between 1 to 5 days. The outstanding features of the circulation and the thermodynamic field that represent this ensemble are: a maximum contrast of air masses in a latitude close to 39ºS, the presence of a trough with its axis over the Andes within a baroclinic wave train penetrating from the Pacific Ocean and a maximum of heat and moisture over northern Argentina and Paraguay. During the CJEs there is an important flux of moisture and convergence at low and mid levels that is about 10 times more intense than the summer mean. The intensity found in the water vapor flux anomaly reinforces the importance of studying these episodes for the purpose of determining the water balance over SESA. The statement that the CJEs represent an important characteristic of SESA climate is found on the fact that, although the CJEs only represent 17 per cent (28%) of the austral summer (spring) days, they account for a significant fraction of the precipitation (a maximum of 55%) over northeastern Argentina. A comparison between CJEs and SALLJ - No Chaco events shows that the latter are more (less) frequent during summer (spring), pushing the mean summer behavior toward the SALLJ No Chaco, while the former present a stronger baroclinic component in the synoptic scale. The mean geopotential field at low levels, dominated by a thermal low and a shifted toward the continent South Atlantic Anticyclone, enhance a frontogenetical pattern that finally evolves in a frontal passage that marks the demise of the CJE. A preliminary study about the diurnal cycle of the convection is addressed using present weather observations in Argentina. A nocturnal - morning phase (03 -09 local time) in convection prevails during spring, while it dominates in the afternoon during summer, over northeastern Argentina. In turn, Central Argentina presents a nocturnal phase in summer. The same phase as in spring is showed during the CJEs, while a maximum at 18UTC is centered on Formosa and Concordia during the SALLJ - No Chaco during the warm season. The SALLJ-No Chaco events present another maximum during summer at Mendoza, Salta and Neuqueén at the morning synoptic time.

"Caracterización de factores presentes en el fluído folicular humano : I-Factores de acción local: regulación ovárica; II-Factores de acción distal:inducción de la reacción acrosomal en espermatozoides humanos" (1994). Saragüeta, Patricia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Caracterización de fosfatasas de proteínas 2 A en Solanum tuberosum L. y su participación en vías de señalización asociadas a tuberización y estrés" (2010). Pais, Silvia Marina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La fosforilación reversible de proteínas tiene un rol importante en la señalización asociada al desarrollo y al estrés en plantas. Algunos estudios sugieren que las fosfatasas de proteínas 2A (PP2A) están involucradas en estos procesos. El objetivo de este trabajo fue caracterizar las subunidades catalíticas de PP2A (PP2Ac) en Solanum tuberosum L. y estudiar su participación en la señalización asociada a la tuberización y el estrés. Búsquedas bioinformáticas en bases de datos de ESTs revelaron la presencia de seis isoformas de PP2Ac en S. tuberosum. Estas isoformas muestran patrones de expresión diferentes en distintos órganos de la planta y sus niveles cambian durante la formación del tubérculo. Se ha propuesto que las señales hormonales y ambientales que modulan la tuberización son integradas en las hojas. Para estudiar el rol de las PP2As en respuesta a condiciones que afectan la tuberización, se analizó la expresión en hojas de los genes “específicos de tubérculo” Patatina y Pin2, en presencia o ausencia de inhibidores de estas fosfatasas. Se encontró que una alta relación sacarosa/nitrógeno en el medio (condición promotora de la tuberización) estimula la expresión de Patatina y Pin2 posiblemente mediante el aumento de la actividad de PP2A, sin afectar los niveles de ARNm y proteínas de PP2Ac. Por otro lado, el ácido giberélico (GA, regulador negativo de la tuberización), disminuye el nivel de ARNm de algunas de las subunidades catalíticas, lo que se correlaciona con una menor cantidad de proteínas PP2Ac. Esta disminución causada por el GA inhibiría las señales de tuberización río abajo de los efectos inductores de una alta relación sacarosa/nitrógeno. Por otro lado, para estudiar la participación de las PP2As en la señalización asociada al estrés, se estudió la expresión de genes de respuesta a estrés en presencia o ausencia de un inhibidor de estas fosfatasas y se determinaron los patrones de expresión de las subunidades catalíticas en dichas condiciones. Se observó que las isoformas de PP2Ac son diferencialmente reguladas en respuesta a estrés y que estas fosfatasas tendrían un rol positivo en la señalización asociada a salinidad, mientras que regularían negativamente la transducción del estrés biótico.

Abstract:
Protein phosphorylation/dephosphorylation plays critical roles in development and stress signaling in plants, and some studies have suggested that protein phosphatases 2A (PP2A) are involved in these processes. The aim of this work was to characterize PP2A catalytic subunits (PP2Ac) in Solanum tuberosum L. and to study their involvement in tuberization and stress signaling. Bioinformatic searches of EST databases revealed the presence of six PP2Ac isoforms in S. tuberosum. PP2Ac isoforms show distinct expression patterns in different organs and are developmentally regulated during tuber formation. The hormonal and environmental signals that modulate potato tuberization are thought to be integrated in the leaves. To study the roles of PP2A in the leaf responses to conditions that affect tuberization, the expression of the “tuber-specific” genes Patatin and Pin2 was analyzed in the presence or absence of PP2A inhibitors. It was found that a high sucrose/nitrogen ratio, which promotes tuber formation, increases the transcript levels of Patatin and Pin2 possibly by increasing the activity of PP2As, without affecting PP2Ac mRNA or protein levels. In addition, gibberellic acid (GA), a negative regulator of tuberization, down-regulates the transcription of some of the PP2Ac isoforms, decreasing their protein levels. PP2Ac downregulation by GA may inhibit tuberization signaling downstream of the inductive effects of a high sucrose/nitrogen ratio. These results suggest that PP2As may act as molecular switches that can be regulated by signals that affect tuberization to activate or inhibit the response. In addition, to determine if PP2As are involved in stress signaling in potato plants, the expression of stress-responsive genes was analyzed in the presence or absence of a PP2A inhibitor. PP2Ac expression profiles in response to different environmental stresses were also determined. The results obtained show that the expression of different PP2Ac isoforms is modified in response to stress, and that these phosphatases may positively regulate salt stress signaling while having a negative role in biotic stress signal transduction.

"Caracterización de genes codificantes de glicosidasas de pared celular relacionadas al crecimiento y a la maduración de prunoideas" (2011). Di Santo, Mariana Carolina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La arabinosa es el prinicipal azúcar neutro no celulósico de la pared celular de durazno (Prunus persica (L.) Batsch) y de ciruela japonesa (Prunus salicina Lindl), observándose una pérdida neta de arabinosa tanto durante la maduración y el ablandamiento como en etapas previas a dicho proceso. Las α-L-arabinofuranosidasas y α-L-arabinofuranosidasas/β-D-xilosidasas son enzimas responsables de estas modificaciones en la pared celular de Prunus persica (L.) Batsch y de Prunus salicina Lindl. Se obtuvieron clones completos de ADNc desconocidos de durazno (PpARF1) y de ciruela japonesa (PsARF/XYL). Además, el gen PsARF/XYL fue clonado y secuenciado. PsARF/XYL presentó dos variantes de ARNm maduro, uno completamente spliceado y otro con un intrón terminal retenido, probablemente debido a splicing alternativo. La proteína deducida a partir de este último, resulta en un péptido truncado en su porción carboxi-terminal que podría alterar su funcionalidad pero que no implica la pérdida de los aminoácidos del sitio activo. También se obtuvieron secuencias parciales de un gen de ciruelo japonés denominado PsARF1 (por su homología con PpARF1) el cual fue incluido en los análisis de expresión génica. Reacciones de RT-PCR para el gen PsARF/XYL en distintas fases de la ontogenia y maduración del fruto reveló una expresión diferencial de los dos transcriptos alternativamente spliceados. Aunque PsARF1 se expresa durante el climaterio, se inhibe fuertemente ante tratamientos con etileno. En todos los casos analizados, los transcriptos se detectaron en otros tejidos de la planta, tanto vegetativos como reproductivos. Los resultados sugieren fuertemente que la expresión de estos genes de pared celular se encuentra regulada a nivel transcripcional y post-transcripcional en distintos tejidos y estados de desarrollo y que el etileno, hormona de la maduración en frutos climatéricos, podría participar en esa regulación.

Abstract:
Arabinose es the major non-cellulosic neutral sugar in the peach (Prunus persica (L.) Batsch) and japanese plum (Prunus salicina Lindl) cell wall and a net loss of arabinose residues accurs during ripening and softening and even in stages prior to this process. The α-L-arabinofuranosidases and α-L-arabinofuranosidase/β-D-xylosidases are enzymes responsible for these changes in the cell wall. In this work we characterized genes encoding cell wall glycosidases of Prunus persica (L.) Batsch and Prunus salicina Lindl. We obtained unknown full cDNA clones of peach (PpARF1) and Japanese plum (PsARF1/XYL). In addition, the gene PsARF/XYL was cloned and sequenced. PsARF/XYL presented two variants of the mRNA, a completely spliced and another terminal intron retained probably due to alternative splicing. The protein deduced from the latter, resulting in a truncated peptide at its carboxy-terminal portion tha could affect their functionality but that does not involve the loss of active site amino acids. Partial sequences of a gene called PsARF1 of Japanese plum (given its homology with PpARF1) were also obtained, which was included in the analysis of gene expression. PpARF1 expression was detected in mesocarp throughout development and ripening stages showed a differential expression of two alternatively spliced transcripts. Although PsARF1 is expressed during the climateric stage, it is strongly inhibited when ethylene treatment is applied. In all cases analyzed , transcripts were detected in other vegetative and reproductive tissues. The expression of both PsARF/XYL transcripts was detected in flower organs, roots and leaves. Results strongly suggest that the expression of these cell wall genes is regulated at the transcriptional and postranscriptional level in different tissues and developmental stages and that ethylene, the ripening hormone in climateric fruit, could be involved in the regulation of these enzymes.

"Caracterización de genes nuevos involucrados en neurodegeneración en Drosophila melanogaster" (2014-12-22). Bernabó, Guillermo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo de esta tesis es identificar nuevos genes involucrados en neurodegeneración en Drosophila melanogaster y comprender su función y el mecanismo por el cual provoca dicha patología. En particular, se hizo foco en orsai. Encontramos que adultos envejecidos con la expresión de orsai reducida en las neuronas que controlan el comportamiento rítmico locomotor presentaban una caída en la ritmicidad y un alargamiento del período. La reducción de ORSAI en el cerebro adulto envejecido provoca que estos presenten signos de neurodegeneración más severos que sus controles. También se encontró que la reducción de los niveles de este gen en larvas provoca arresto en el segundo estadio y la consiguiente letalidad temprana. Estas larvas tienen un comportamiento anómalo frente a la comida, alejándose de la misma y reptando en un modo de clásico forrajeo, a pesar de tener alimento disponible, hasta su muerte. Encontramos que acotando la reducción de ORSAI a las tráqueas fenocopia al mutante. También determinamos que la respiración mitocondrial está severamente reducida en el mutante. La alteración de los niveles de ORSAI en distintos tejidos, tanto larvales como adultos, provoca diversos fenotipos, lo que demuestra la importancia de este gen para la homeostasis celular. El fenotipo en las tráqueas podría, a través de procesos hipóxicos, explicar el comportamiento de forrajeo en larvas y, sumando a esto la disfunción mitocondrial, los fenotipos observados en adultos.

Abstract:
The goal of this thesis was to identify new genes involved in neurodegeneration in Drosophila melanogaster and to understand their function and the mechanisms triggered upon their deregulation. In particular, we focused on orsai. We found that aged adult flies with reduced orsai expression in neurons that control rhythmic locomotor behavior showed declined rhythmicity and a lengthened period. Reduced ORSAI levels in aged adult brains correlate with signs of neurodegeneration more severe than controls. We also found that reduced orsai levels cause second instar developmental arrest and the ensuing early mortality. These larvae display an anomalous feeding behavior; they crawl away from the food source as if were foraging, and, despite food availability, they do so until their death. We found that limiting ORSAI depletion to the tracheal system phenocopies the mutant behavior. We also determined that mitochondrial respiration is severely reduced in the mutant. Importantly, reducing ORSAI levels in different tissues, both larval as well as adult, triggers diverse phenotypes, highlighting its relevance in cellular homeostasis. The tracheal phenotype could, through hypoxic processes, account for the abnormal larval foraging behavior and, taking into account the mitochondrial dysfunction, the observed adult phenotypes.

"Caracterización de hábitats naturales de triatominos (Heteroptera: Reduviidae): influencia de la temperatura,la humedad relativa y la luz en su distribución espacial" (2004). Minoli, Sebastián A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La presente tesis Doctoral analiza cómo variables ambientales, tales como la temperatura (T°), la humedad relativa (HR) y la iluminación pueden afectar la selección de hábitats por parte de los insectos triatominos. El análisis se llevó a cabo integrando estudios de laboratorio y de campo, a fin de realizar una evaluación global de la problemática. En el laboratorio, en 4 especies de triatominos y en individuos de diverso estado nutricional (i.e. ayunados o alimentados), se realizaron experimentos de preferencia térmica e hígrica en gradientes artificiales de T° y de HR,respectivamente. Las diferentes especies prefirieron permanecer en zonas con temperaturas entre 21°C y 32°C. En todos los casos se pudo constatar una preferencia por parte de las vinchucas por ammbientes de baja humedad relativa. La comparación entre especies reveló que Triatoma sordida y T. guasayana presentaron una marcada preferencia por temperaturas relativamente más elevadas (Ayunos: 31,5°C y31,76°C; Alimentados: 31,79°C y 31,87°C, respectivamente) y una preferencia por ambientes relativamente más secos (Ay: 11,52% y 13,80%, Al: 7,21% y 8,16%, respectivamente). Por otro lado, Rhodnius prolixus prefirió ambientes con los menores valores de T° (Ay: 25,35°C, Al:21,41°C) y humedades relativas no tan bajas (Ay: 18,48%, Al: 13,17%). T. infestans prefirió T° intermedias (Ay: 26,28°C, Al: 29.38°C), presentando una marcada diferencia entre insectos ayunados y alimentados en cuanto a su higropreferencia (Ay: 21,30%, Al: 10,74%). Los estudios de campo realizados en distintas regiones de la Antártida y Brasil con alta incidencia de triatominos, permitieron el análisis de la dinámica diaria de temperatura y de humedad relativa en el interior de refugios naturales de vinchucas (microclima) y compararla con la dinámica ambiental local (macroclima). En el interior de la gran mayoría de los refugios analizados, se registraron variaciones microambientales de menor amplitud diaria respecto de la T° y la HR macroambiental, evidenciando un efecto de amortiguación de la variación de dichas variables por parte de los refugios. En algunos casos, tal amortiguación fue claramente asimétrica, generando en el interior de los refugios valores medio de T° y HR diferentes de la media macroambiental. Este resultado revela que las vinchucas pueden experimentar en el interior de los refugios un microclima considerablemente diferente al clima regional. El efecto de la luz en la distribución espacial de las vinchucas se analizó a través del estudio de su atracción hacia fuentes de la luz artificial. En el laboratorio se estudió la orientación de T. infestans y R. prolixus en vuelo frente a fuentes de luz artificial de distinta calidad espectral. T. infestans mostró una tendencia significativa a volar en dirección a una fuente de luz blanca, pero no mostró la misma respuesta frente a una fuente de luz UV. R. prolixus, por su parte, se orientó marcadamente hacia la fuente de luz blanca, y presentó un comportamiento bimodal de atracción/repulsión con respecto a la fuente de luz UV. En los estudios de campo se instalaron trampas de luz endémicas de triatominos. Se probaron fuentes de luz portálites de distinto tipo y calidad espectral en cuanto a su capacidad para atraer a las vinchucas. Las trampas se colocaron en diversas zonas de la Argentina y Brasil, pero sólo se capturaron T. brasiliensis y T. pseudomaculata en la localidad de Curaçá (Brasil). A partir de los resultados obtenidos, se discute la relación entre el microclima en el interior de los refugios de las vinchucas y el clima local, así como la influencia de ambos en la distribución actual y potencial de las vinchucas. Se discute, además, la importancia de la presencia de luces artificiales, como factor que favorecería el ingreso de las vinchucas a las viviendas humanas.

Abstract:
The present Doctoral Thesis analyses how environmental variables, such as the temperature (T°), the relative humidity (HR) and the illumination can affect the selection of habitats by triatomine insects. The analysis was carried out integrating laboratory and field studies, as a global evaluation of the query. ln the laboratory, ¡n 4 triatomine species and in individuals with different nutritional states (i.e., starued or fed), we carried out thermo- and hygropreference experiments using artificially generated gradients of T° and HR, respectively. The different species preferred ambients with temperatures between 21°C and 32°C. ln all cases we could corroborate the preference of these bugs for ambients with low relative humidity. The comparison between species, revealed that Triatoma sordida and T. guasayana exhibited a marked preference for relatively higher temperatures (Starved: 31.5°C and 31.76°C; Fed: 31.79°C and 31.87°C, respectively), and for relatively drier ambients (St: 11.52% and 13.80%; Fed: 7.21% and 8.16%, respectively). On the other hand, Rhodnius prolixus preferred ambients with the lower values of T° (St: 25.35°C; Fed: 21.49°C) and not so low relative humidities (St: 18.48%; Fed: 13.17%). T. infestans preferred interrnediate T° (St: 26.28°C; Fed: 29.38°C), expressing a marked difference between starued and fed insects in their hygropreference (St: 21.30%; Fed: 10.74%). Field studies carried out in different regions of Argentina and Brasil with high incidence of triatomines. allowed the analysis of the daily dynamic of temperature and relative humidity inside natural refuges of these bugs (microclimate), and to compare it with the local ambient dynamic (macroclimate). ln the interior of most analysed shelters, microambiental daily variations of less amplitude than the macroambiental T° and HR were registered, evincing a damping effect of the variation of such variables caused by the refuges. ln some cases the damping was clearly asymmetric, generating averaged values of T° and HR inside the shelters different from the macroambiental ones. This result reveals that triatomines can be experiencing a microclimate considerany different from the regional weather. The effect of the light in the spatial distribution of triatomines was analysed studying their orientation towards artificial lights. In the laboratory, the orientation of flying T. infestans and R. prolixus confronted to different spectral quality lights was studied. T. infestans showed a significant tendency to fly towards a white light, but did not show the same response when confronted to an UV light. R. prolixus, stroneg preferred to fly towards the white light, and exhibited a bimodal attraction/repellency behaviour in respect to the UV light. ln field studies, we mounted light-traps in endemic triatomine areas. We tested the efficiency of different illuminating devices as attractants. The traps were located in diverse regions of Argentine and Brasil, but triatomines were captured only in the locality of Curagá (Brasil). The results here obtained are analysed in order to discuss the relation between the microclimate in the interior of the refuges occupied by triatomines and the local climate, as well as the influence of both of them in the actual and potential distribution of these insects. Moreover, we discuss the importance of the presence of artificial lights as a feature that could favour the incoming of triatomines to human dwellings.

"Caracterización de interneuronas visuales y su relación con el aprendizaje en el cangrejo Chasmagnathus granulatus" (2005). Berón de Astrada, Martín. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La formación y mantenimiento de la memoria tienen lugar como resultado de procesos fisiológicos que ocurren en el ámbito de neuronas individuales. Sin embargo, los modelos experimentales para el estudio de la memoria no permiten investigar estos procesos en el animal vivo en momentos en que se encuentra aprendiendo. El propósito de este trabajo fue desarrollar una preparación experimental que permitiese indagar los cambios neurofisiológicos que ocurren en las neuronas de un animal intacto en el momento mismo del aprendizaje. La preparación desarrollada se basa, por un lado, en la capacidad del cangrejo Chasmgnathus para formar diferentes tipos de memorias visuales y retenerlas por largo tiempo, y por otro lado en que la rigidez del caparazón del animal y la fácil accesibilidad a buena parte de su cerebro ofrecen importantes ventajas metodológicas para la realización de registros intracelulares estables en el animal intacto. Al tratarse de un animal intacto, pudimos investigar el funcionamiento de diversos tipos de neuronas cerebrales frente a la presentación de estímulos casi naturales y biológicamente relevantes. Además, la estabilidad de los registros intracelulares nos permitió teñir las neuronas y estudiar su ubicación y morfología. Efectuamos una caracterización funcional de las neuronas de los primeros neuropilos visuales, realizada en base a la respuesta frente a un pulso de luz, que incluye tanto elementos con respuestas pasivas (depolarizantes e hiperpolarizantes) como neuronas que disparan potenciales de acción. Elementos que a su vez pueden presentar respuestas tónicas o fásicas. Una caracterización morfológica de estos tipos celulares incluye tanto interneuronas locales como de proyección. La comparación de estos resultados con los de otros estudios en insectos y crustáceos apoya la hipótesis de que en los artrópodos los elementos que conforman los primeros neuropilos del sistema visual estarían evolutivamente conservados. El paradigma de memoria visual ampliamente caracterizado en Chasmagnathus implica una modificación duradera de la respuesta de escape del animal frente a un estimulo visual de peligro (EVP) consistente en el movimiento de un objeto por sobre el animal. En el cerebro del cangrejo encontramos interneuronas visuales especializadas en responder al mismo EVP que provoca la respuesta de escape del cangrejo, a las que denominamos neuronas detectoras de movimiento (NDM). Una caracterización de las NDM en función de sus propiedades biofísicas intrínsecas, como también de sus campos receptivos, direccionalidad, adaptabilidad, capacidad de integración multimodal, sensibilidad por el contraste, etc., indican que se trata de un grupo heterogéneo de neuronas. No obstante, todas las NDM se ubican en la lóbula (tercer neuropilo óptico) y proyectan al cerebro medio. La morfología general de las NDM esta representada en dos tipos de patrones de arborización, ambos definidos por la típica disposición colectora de neuronas detectoras de movimiento descriptas en insectos. Encontramos que la presentación repetida del EVP produce modificaciones en la respuesta de las NDM que reflejan de manera muy ajustada las modificaciones comportamentales que ocurren durante el aprendizaje. Más aún, las modificaciones ocurridas como resultado del aprendizaje permanecen en las NDM por largo tiempo, reflejando la memoria de larga duración observada 24 hs luego de la adquisición. Los artrópodos hacen uso de importantes habilidades cognitivas para ejecutar un rico repertorio de comportamientos, muchos de los cuales están dirigidos visualmente. No obstante, el presente constituye el primer trabajo en el que se identifican neuronas individuales que sirven a un aprendizaje visual en un artrópodo. La ubicación y morfología de estas neuronas indican que, contrariamente a la idea general presupuesta, la lóbula de los artrópodos constituye un núcleo cerebral superior involucrado en funciones de aprendizaje y memoria. Los resultados se discuten también en función de su aporte a la fisiología comparada de la visión.

Abstract:
Memory formation and its maintenance result from physiological processes that take place in individual neurons. Nevertheless, due to methodological limitations current experimental models do not allow to investigate these processes while they occur in the living animal. The aim of the present study was to develop an experimental model to overcome such limitations. A model that will allow us to assess the changes occurring in individual cells during learning by recording their activity intracellularly in the intact animal. The model was based on the visual memory abilities of the crab Chasmagnathus, and on the advantages this animal offers to perform in vivo intracellular recordings from its brain neurons. Because the animal is intact and awaken, we were able to investigate the functioning of many different classes of neurons by their responses to cuasi-natural and biologically relevant stimuli. The neurons were dye filled intracellularly, which allowed us to describe their morphologies. A physiological characterization based upon the neuronal responses to a pulse of light revealed many different cellular classes. There are spiking and non-spiking neurons, some of which respond to the light stimulus with depolarization while others show hiperpolarization. In addition, their responses can be either tonic or phasic. On the other hand, the morphological study of these cells reveals that they can be local or projecting interneurons. The comparison of these results with those obtained from insects and other crustaceans supports the idea that neuronal element of the first visual neuropils are largely conserved among arthropods. The memory paradigm studied in Chasmagnathus implies a long-term change of the animal escape response occurred upon the repeated presentation of a visual danger stimulus (VDS), which consists of an object moving overhead. Recording from the brain we found neurons that respond to the same VDS that elicits the escape response. We termed these elements movement detector neurons (MDN). A characterization of MDN based on their intrinsic properties and also on parameter such as their receptive field, direction and contrast sensitivity, multimodal integration abilities, etc., indicates that the group of MDNs is formed by several neuronal subclasses. Yet, all stained MDNs were found to be localized in the lobula (third optic neuropil) and project to the midbrain. Their general morphologies resemble the collator neurons described in insects. Upon repeated VDS presentations, the response of MDNs shows changes that are remarkably identical to the modifications that are observed at the behavioral level. Moreover, the long-lasting behavioral changes, i. e. the long-term memory, are fully acquainted by the changes of performance retained by MDNs. Arthropod are now known to posses important cognitive abilities, many of which are based on the visual sense. Surprisingly enough, the brain areas involved in the visual memories of these animals were completely ignored. Here, we show the first identification of individual neurons involved in the memory of an arthropod. In contradiction with the general assumption, our results point to the lobula of arthropods as a higher brain center involved in learning and memory. The results are also discussed in terms of their contribution to the comparative physiology of vision.

"Caracterización de la circulación atmosférica y la temperatura superficial del mar asociadas a extremos de caudal de ríos andinos y su variabilidad en baja frecuencia" (2006). Araneo, Diego C.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo principal del presente trabajo se centra en determinar los mecanismos asociados a la variabilidad de los caudales de los ríos andinos en relación con la circulación atmosférica y la Temperatura Superficial del Mar (TSM) como forzante del sistema climático. Para la circulación atmosférica el estudio se extiende desde la escala sinóptica a la climática. A lo largo de la Cordillera de los Andes se identifican dos zonas en las cuales el comportamiento de los caudales de los ríos muestra similar variabilidad temporal. Estas regiones están representadas por los ríos Chubut (para el área entre el río Neuquén y el río Senguer) y Atuel (para el área entre el río Jachal y el río Colorado). Es de destacar la baja correlación existente entre los caudales de los ríos de una y otra región, lo cual expresa la independencia estadística entre las mismas. Las condiciones topográficas y climáticas dan regímenes hídricos diferenciables. El río Atuel acumula casi el total de su derrame anual de Noviembre a Marzo, como producto del deshielo estival de la nieve precipitada en altas cumbres durante el invierno previo. Por su parte, el caudal del Chubut presenta un máximo invernal debido a precipitación líquida y otro primaveral debido a la precipitación y el derretimiento de nieve. La relación entre los caudales y la TSM es significativa en amplias regiones del Pacífico central del Hemisferio Sur (HS). Sin embargo, mientras la variabilidad del Atuel parece estar íntimamente ligada a los patrones observados del ciclo El Niño / Southern Oscillation (ENSO), con fuertes señales en el Pacífico ecuatorial-tropical y el Océano Indico; el Chubut parece estar menos vinculado con el ENSO, mostrando señales restringidas sólo al área del Pacífico central subtropical del HS. A partir de la relación entre los caudales de los ríos cordilleranos y las anomalías estandarizadas de TSM en la región Niño3+4, se pueden diferenciar cuatro subregiones: 1) Cuyo Norte, donde la relación entre Niño3+4 y los caudales alcanza a alrededor de 14 meses de antelación al período de máximo caudal, 2) Cuyo Sur, donde esta antelación se produce con alrededor de 8 meses, 3) Patagonia Norte, donde la relación entre caudales y Niño3+4 ocurre en forma simultánea y 4) Patagonia Sur, con características similares a Cuyo Norte. Para las regiones 1, 2 y 4 los campos de correlaciones entre TSM y caudales muestran patrones típicos de eventos El Niño / La Niña, evidenciando la relación entre estas anomalías del Pacífico y la precipitación en Cordillera. Altos caudales en la región del río Atuel estarían asociados al frecuente pasaje de bajas presiones que transitan por el Pacífico en dirección al Este, las cuales inducen una convergencia de humedad desde bajas latitudes y una advección de la misma hacia la región cordillerana. Al legar a las costas de Chile central estos sistemas producirían ascenso con intensas nevadas en las cumbres y un descenso con alta presión relativa a sotavento de la Cordillera. En estas condiciones, sobre la zona del litoral argentino y sur de Brasil se produciría una posterior ciclogénesis y un aumento de la baroclinicidad vinculada a un frente asociado, con una consecuente convergencia de humedad desde Brasil, ascenso y altas temperaturas prefrontales. En los casos de alto caudal en la región del río Chubut, los sistemas de baja presión llegarían desde el Pacífico alcanzando latitudes superiores y pasarían la Cordillera sin discontinuidad arrastrando humedad desde regiones subtropicales hacia mayores latitudes. Estos sistemas están acompañados por una marcada reducción de los Oestes asociada al frecuente pasaje de altas presiones sobre el Pacífico sud-oriental. Estas altas presiones han sido asociadas por varios autores a las anomalías de TSM en el Pacífico ecuatorial y a la variabilidad decadal del tipo ENSO, y forman parte de un tren de ondas que se observa sobre el Pacífico Sur proveniente del Océano Indico. Este tren de ondas se observa al correlacionar la altura geopotencial con los caudales del río Atuel aunque no con los caudales del río Chubut. Configuraciones inversas de circulación y TSM estarían asociadas a condiciones de bajo caudal en las regiones estudiadas. Finalmente, los casos de exceso de caudal en la cordillera cuyana y déficit en la patagónica, presentan un patrón de anomalías de circulación similar al observado para casos de exceso de caudal en Cuyo, pero con anomalías de alta presión sobre el Pacífico Sur al Sudoeste de Sudamérica retiradas más hacia la Patagonia; las cuales, por un lado se interponen en la normal trayectoria de las bajas presiones que circulan por el océano en esas latitudes —desviándolas hacia latitudes subtropicales donde alcanzan las costas de Chile central y provocan precipitaciones en Cuyo—; y por otro, contribuyen a inhibir la precipitación en la Cordillera Patagónica. Las condiciones inversas (i.e. bajas presiones sobre el Sur patagónico provenientes del Pacífico Sur con alta baroclinicidad, e intensificación del anticiclón semipermanente del Pacífico) explicarían las situaciones inversas.

Abstract:
The main of this work is to determine the mechanisms associated to the variability of the Andean rivers flows, in connection with the atmospheric circulation and the Sea Surface Temperature (SST) like a system forcing. For the atmospheric circulation the study extends from the synoptic scale to the climatic one. Two zones are identified alongside the Argentinean Andes where river streamflows show similar time variability behavior. The zones are represented by the Chubut river (between the Neuquén and the Senguer) and the Atuel river (between the Jachal and the Colorado). It is noticeable the low correlation between the streamflows from one another, which means statistical independence between them. The different topography and climates give different hydrological regimes. The Atuel water-volume from November to March is a product of summer melting of high- Andean snows accumulated in the previous winter. In turn, the Chubut water-volume shows a maximum in winter due to winter precipitation, and a secondary peak in spring due to precipitation and snow melting. The relationship between streamflows and SST is significant in large areas of the Southern Hemisphere (SH) central Pacific. However, the Atuel variability seems to be highly linked to El niño / Southern Oscillation (ENSO) patterns with strong signal in the tropical-equatorial Pacific and the Indian Ocean, whereas the Chubut seems to be less associated with the ENSO, showing signal restricted to the SH central subtropical Pacific. From the relationship between the studied flows and the standardized TSM anomalies Niño3+4 region, the following four subregions can be determined: 1) Northern Cuyo, where the relationship between Niño3+4 and the flows reaches to around 14 months of advance to the period of maximum flow, 2) Southern Cuyo, where this advance takes place around 8 months earlier, 3) Northern Patagonia, where the relationship between the flows and Niño3+4 occurs simultaneously and 4) Southern Patagonia, with similar characteristics to Northern Cuyo. For the regions 1, 2 and 4 the correlations fields between TSM and flows show the typical patterns of El Niño / La Niña events, showing the relationship between these Pacific anomalies and the Andean Mountains precipitation. High streamflows in the Atuel zone are associated with frequent passage of low-pressure systems moving eastward over the Pacific, which induce moisture convergence from lower latitudes and its advection toward the Andean region. The lows reaching the central Chilean coast would produce upward air motion with intense snowstorms in the high mountains and downward air motion with relative high pressures leeward the Andes. Hence, over northeastern Argentina and southern Brazil, a later cyclogenesis and an increase of the baroclinicity linked to a frontal zone would be produced, with consequent moisture convergence from Brazil, upward air motion and high pre-frontal temperatures. In cases of high streamflows in the Chubut zone, the low-pressure systems from the Pacific would reach the Chilean coast at higher latitudes, crossing over the natural further low Andes with no discontinuity and transporting moisture from subtropical latitudes. The subtropical low systems are linked to a remarkable reduction of the westerlies owing to higher frequency of highs at the southeast Pacific. Some researchers associate these highs with equatorial SST anomalies and the decadal ENSO-like variability and they may take part of a wave-train from the Indian Ocean extended over the southern Pacific. The wave-train can be observed by the correlation between the Atuel streamflows and the geopotential height, but not for the Chubut streamflows. Inverse circulation and SST features would be associated to low streamflows in the studied regions. Finally, the cases of high flows in Cuyo and low flows in Patagonia, present a pattern of anomalous circulation similar to the one observed for cases of high flows in Cuyo, but with high-pressure anomalies on the South Pacific at the Southwest of South America moved over the Patagonia. Those high-pressure anomalies interfere the normal track of the low-pressures systems —which usually circulate through the ocean at these latitudes—, which change their trajectory going toward subtropical latitudes where they reach the central Chile costs and generate precipitations in Cuyo. Additionally, those high-pressure anomalies contribute to inhibit the precipitations in the Patagonia. The inverse conditions (low-pressures systems coming from the South Pacific, with high baroclinicity on Southern Patagonia, and the enhance of the Pacific semi-permanent anticyclone), would explain the inverse cases.

"Caracterización de la confianza en las instituciones del gobierno del Perú" (2016-07-12). Arcaya Arhuata, Ludmer Edward. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Este trabajo consiste en un análisis sobre la percepción de la confianza en las instituciones públicas del gobierno, usando técnicas de Minería de datos, se busca obtener los 5 factores más influyentes en el año 2014, con respecto a la percepción de confianza en las instituciones del gobierno del Perú, y cómo es su comportamiento desde el 2007 al 2014. Para conseguir este objetivo se usan datos públicos de encuestas, que están disponibles en el repositorio digital del Instituto Nacional de Estadísticas e Informática de Perú (INEI), que, siendo órgano rector de las estadísticas del Perú, ejecuta todos los años un programa de Encuestas Nacional de Hogares (ENAHO), el cual cuenta con 29 categorías de estudios, siendo algunas de ellas: Educación, Empleabilidad, Características del hogar, Gobernabilidad y Democracia. El trabajo comenzó con la búsqueda de datos en los repositorios del INEI, continúo con la carga en una base de datos, luego se efectuó la limpieza e integración usando SQL, hasta la construcción de una tabla Analítica. Sobre estos datos se aplicaron métodos descriptivos para la selección de variables potenciales. Luego ejecutando el algoritmo de árbol de decisión, se obtuvieron las 5 variables más influyentes, con el Análisis Factorial de correspondencias se vio las atracciones entre las modalidades de estas variables y la confianza. Los resultados del trabajo muestran que el Congreso de la República es la institución con mayor desconfianza, seguida por el Gobierno regional, La Policía Nacional y el Poder Judicial. Estas instituciones fueron las que se seleccionaron para realizar el análisis de influencia, no combinando estas ya que las instituciones son autónomas y se sospecha que las influencias son independientes. Las variables más influyentes son: , y y estas son las mismas para las instituciones estudiadas, las variables restantes son y , y . El trabajo también muestra la evolución temporal de influencia, comportamiento de las variables.

"Caracterización de la emisión neutrónica y del espectro de radiación x de alta energía generados en una descarga plasma focus" (2011-11-29). Knoblauch, Pablo Tomás. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la presente tesis se exponen los resultados del estudio de la radiación x de alta energía y de los neutrones que son emitidos por un dispositivo plasma focus de 4.7 kJ operado con mezclas de deuterio y argón. La anisotropía de emisión neutrónica fue estudiada empleando 2 detectores por activación de plata. Dichos detectores se ubicaron sobre el eje de simetría de los electrodos y a 90º. Se exploraron presiones de carga entre 3 y 6 mbar y mezclas de deuterio con 2.5% y 5% de argón además de deuterio puro. La anisotropía medida varía entre 1.6 para 3 mbar con 0% de argón y 1.4 para 5 mbar con 5% de argón. Mediante simulaciones de Monte Carlo, con el código MCNP, se estudió la influencia que tienen los materiales que componen la cámara de descargas y los objetos que rodean al dispositivo en la anisotropía medida. Los resultados de las simulaciones mostraron que la base de la cámara, construida en Nylon, influye significativamente en la anisotropía de emisión detectada. Las investigaciones correspondientes a la producción neutrónica, mostraron que una mezcla de deuterio con 2.5% de argón, respecto del caso con deuterio puro, aumenta la emisión de neutrones. El análisis de los resultados se completó con un modelo que tiene en cuenta el agregado de argón, lográndose un buen acuerdo con los datos experimentales. Para determinar los componentes espectrales de la radiación x, se desarrolló un formalismo que considera el efecto dispersor de los fotones que atraviesan un conjunto de filtros metálicos acoplados a un sistema pantalla-película. La dispersión de los fotones se calculó con el código MCNP, estudiando el espectro generado por fotones monocromáticos de energías entre 20 keV y 600 keV, que inciden sobre una muestra metálica. La información experimental se obtiene del análisis densitométrico de las radiografías, que fueron expuestas a la radiación atenuada en muestras de plata, cobre, níquel y titanio con espesores entre 0.01 cm y 1.0 cm. Los resultados del espectro reconstruido para distintas presiones y mezclas de gases muestran un pico predominante alrededor de 80 keV con componentes espectrales relevantes entre 55 keV y 150 keV. A partir de simulaciones con MCNP, los espectros experimentales fueron comparados con los espectros generados por fuentes monocromáticas de electrones que impactan en la base del ánodo.

Abstract:
The hard x ray radiation and neutrons emitted by a 4.7 kJ plasma focus operated with deuteriumargon mixtures are studied. The anisotropy of neutrons was measured with 2 dectectors based in silver activation. The detectors were located on the electrode’s axis simetry and 90º. Pressures between 3 to 6 mbar and mixtures of deuterium with 0%, 2.5% and 5% argon were explored. Values of measured anisotropy are between 1.6 for 3 mbar with 0% of argon and 1.4 for 5 mbar with 5%. Monte Carlo simulations with the MCNP code were carried out to study the influence of the materials of the discharge chamber and the objects that sorround the device on the anisotropy. The simulations show that the base of the chamber, build in Nylon, affect the measured anisotropy. The experimental measurements of the neutronic production have shown that a mixture of deuterium with 2.5% argon increases the emission of neutrons, in comparison with pure deuterium. To complete the analysis, a model including the additon of argon was developed, showing a good agreement with experimental data. To determine the spectral components of hard x rays, the attenuation and scattering of the photon beams produced by the discharges in a set of metallic filters was studied. The scattering and the attenuation of photons were calculated with MCNP code, considering the spectrum generated by sources of monochromatic photons of energies between 20 keV and 600 keV that impact a metallic sample. Experimental data was obtained from the densitometric analysis of radiographies that were impressed by attenuated radiation in silver, copper, nickel and titanium samples of thickness in the range of 0.01 cm to 1.0 cm. Spectrums obtained from experimental data for different pressures and gas mixtures were obtained, showing a dominant peak around 80 keV with spectral components between 55 keV and 150 keV. Numerical simulations with MCNP were conducted to compare the experimental spectrum with spectrums generated by monochromatic sources of electrons that impact the anode base.

"Caracterización de la expresión y actividad de las fosfatasas de Serina y treonina durante el desarrollo del sistema nervioso central : función de la Calcineurina" (2002). Vilá Ortiz, Guillermo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo en esta tesis fue caracterizar el comportamiento de las fosfatasas de serina y treonina (STPasas) durante el desarrollo del sistema nervioso. Como modelo experimental se empleó en primera instancia el desarrollo postnatal del cerebelo de ratón, ya que durante este período se dan numerosos procesos, como el crecimiento axonal, la formación de sinapsis y la apoptosis, en los cuales las distintas STPasas podrían llegar a estar involucradas. Para caracterizar la expresión de los ARNm de las fosfatasas, se diseño una nueva estrategia, SSDD (Single-Strand Differential Display), la cual nos permitió determinar como era la expresión de los distintos mensajeros a distintas edades. Esta técnica no solo nos permitió observar que cada una de las STPasas detectadas presenta una expresión diferencial, sino que también identificar una nueva variante de splicing de la isoforma gamma de la PP1. Esta técnica también fue empleada con éxito para el estudio de STPsas en tumores del sistema nervioso, pudiéndose observar que tanto la expresión de la isoforma alfa de la PP1 como de las isoformas alfa y beta de la PP2A era mayor en tumores de índole maligna que en benignos. Además, se detectó por primera vez la isoforma gamma de la calcineurina (CaN Aγ) en tumores del sistema nervioso. Durante el desarrollo del cerebelo, se observó que PP2A no muestra variaciones significativas ni en la expresión de proteínas ni en la actividad fosfatasa que posee. Por otro lado, PP1 sí muestra diferencias no solo en la expresión de proteínas, donde se observa un aumento a P13 y una disminución posterior a P20, sino también en lo que respecta a su actividad, cuyo incremento coincide con el período en el cual se empiezan a formar las sinapsis entre los axones de las células grano y las espinas dendríticas de las células de Purkinje. En el mutante cerebeloso staggerer, en el cual se encuentran afectadas las células de Purkinje y no se produce la estabilización sináptica, se encontró que los niveles proteicos de PP1 no disminuyen a P20 como ocurre en el cerebelo normal, y que la actividad no se incrementaba. Por otro lado, la fosfatasa que mostró mayores variaciones durante el desarrollo fue la calcineurina. Específicamente, los niveles de proteínas de la isoforma CaN Aα se incrementan gradualmente con el tiempo, lo cual coincide con el período de formación de sinapsis. En este período además, se produce un incremento en la actividad de la calcineurina. En el mutante staggerer, los niveles de esta isoforma son similares hasta P11, pero después no se incrementan como sucede en el ratón normal. La actividad fosfatasa en el mutante decae también a partir de esta edad. Con el fin de estudiar con mayor detalle la función de la calcineurina, se estudió lo que ocurría en distintos cultivos del sistema nervioso (células PC12, células NT2 y cultivos primarios de células grano). Para esto se incubaron los distintos cultivos con inhibidores de la calcineurina y con oligonucleótidos antisentido contra las dos isoformas. En todos los casos se observó que, tanto la inhibición de la actividad como de la expresión, particularmente de la isoforma CaN Aβ, provocaba que las células murieran por apoptosis, independientemente del estadío de diferenciación en el que ellas se encontraran. Este proceso estaba relacionado con un aumento en los niveles de Bax y una disminución de Bad. Particularmente en el caso de las células NT2, se pudo observar que el aumento de la expresión de Bax coincidía con un incremento en la translocación de la proteína al núcleo, mientras que la disminución de Bad lo hacía con la aparición de “parches” en el citoplasma, lo que es indicativo de una translocación a mitocondria. Posteriormente se estudió lo que ocurría con estas proteínas pro-apoptóticas en el mutante staggerer, el cual presentaba una muy baja actividad de calcineurina. Bad no mostró variaciones pero los niveles de Bax a P20 aumentaron considerablemente. Todos estos resultados sugieren que la inhibición de la expresión o de la actividad de la calcineurina ocasiona que las células entren en apoptosis por un mecanismo que involucra, por lo menos, un aumento en los niveles de Bax.

Abstract:
The objective of this work was to characterize the behavior of serine/threonine phosphatases (STPases) during development in the nervous system. As first approach, mouse cerebellum postnatal development was employed as experimental model, because several processes during this period, such as axonal growth, synapses formation and apoptosis, might involved several STPases. A new method was developed, SSDD (Single-Strand Differential Display), to characterize mRNA expression of STPases, which allowed us to analyze the expression of these messengers at different ages. Using this method, not only a different pattern of mRNA expression was obtained but the identification of a new splicing form of PP1 gamma isoform was achieved. This technique was successfully applied to the study of the mRNA of STPases in tumors of the nervous system too, showing that the PP1 alpha, PP2A alpha and beta isoforms have a increased expression in malign tumors than in benign. In addition, for the first time, calcineurin gamma isoform (CaN Aγ) was detected in tumor of the nervous system. During cerebellum development, PP2A showed no significant changes in protein expression or in the phosphatase activity. On the other hand, PP1 shows differences, not only in protein expression, with an increase in expression at P13 and a posterior decrease at P20. The activity of PP1 was also modified, showing an increase that correlates with the period when synapses begin to form between granule cell axons and dendritic spines of Purkinje cells. When the cerebellar mutant mouse staggerer was analyzed, in which Purkinje cells are affected and synaptic stabilization are impaired, it was found that the protein PP1 levels do not decreased at P20, as in normal cerebellum, and that the activity no increased. On the other hand, the phosphatase that shows the most important changes was calcineurin. Specifically, protein levels of the CaN Aα isoform increased gradually with time, in correlation with the period of synapses formation. In addition, calcineurin showed a raise in its activity. In the staggerer mutant, similarily levels of this protein at P11 were observed, but after this time no increase in expression or activity were observed. With the objective to obtain a more detailed knowledge of calcineurin function, studies using several cultures of nervous system (PC12, NT2 and primary cultures of cerebellar granule cells) were conduced. Incubations with calcineurin inhibitors and oligonucleotide antisenses against both isoforms were performed. In all the cases, inhibition of either the activity or the expression, in particular of the CaN Aβ isoform, produced cell apoptosis, independently of the differentiated state in which the cells are found. In this process, increased Bax and decreased Bad levels were involved. In particular, in NT2 cells, the increased Bax expression was associated with an increased protein translocation to nucleus, while decreased Bad levels with a punctate staining pattern in the cytoplasm, indicating a translocation to mitochondria. Later, we study what happened with these pro-apoptotic proteins in the staggerer mutant mice, that presents a very low calcineurin phosphatase activity. In this case, Bad showed no modifications, but Bax levels increased condisederably. All these results sugget that expression or activity inhibition of calcineurin induce cells to enter in apoptosis, through a mechanism that involved, at least in part, increased in Bax levels.

"Caracterización de la fosfodiesterasa de AMP cíclico del hongo dimórfico Mucor rouxii : Regulación de la actividad enzimática por fosforilación-desfosforilación" (1981). Galvagno, Miguel Angel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Caracterización de la hormona folículo-estimulante humana : Relación estructura-función" (1999). Creus, Silvina Florencia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La hormona folículo estimulante humana, producida y secretada por la hipófisis anterior, está estrechamente relacionada con la regulación y el mantenimiento de procesos reproductivos esenciales tales como el desarrollo y maduración de los folículos ováricos y la gametogénesis testicular. Esta hormona consiste en un heterodímero formado por dos subunidades, cada una de las cuales tiene unidas al polipéptidodos cadenas de oligosacáridos. Estas cadenas de carbohidratos, si bien comparten el mismo núcleo de azúcares formado por un pentasacárido en la porción interna de la cadena, difieren en la porción externa de la misma, variando en complejidad, grado de ramificación y en el contenido de residuos terminales de ácido siálico. Las variaciones en la estructura de la cadena carbohidratada, dan lugar a la aparición de una familia heterogénea de isoformas con diferentes propiedades fisicoquímicas y biológicas. Las isoformas presentan diferencias en: sus puntos isoeléctricos, la afinidad de unión a su receptor específico y la vida media en circulación. La abundancia relativa de cada una de estas isohormonas varía con el sexo y con las condiciones fisiológicas del donante. En los estudios realizados hasta el presente, el contenido de ácido siálico había sido considerado como el principal determinante de la heterogeneidad molecular de la hormona. EI propósito de esta Tesis fue analizar el polimorfismo de la FSH hipofisaria humana y la FSH circulante en diferentes condiciones fisiológicas: fase folicular de ciclos menstruales normales, postmenopausia y pubertad masculina. Este estudio fue especialmente diseñado para determinar los efectos producidos por el entorno hormonal sobre las características moleculares y biológicas de esta gonadotrofina. Las isoformas de FSH hipofisaria fueron aisladas, mediante cromatoenfoque, de acuerdo al contenido de ácido siálico, residuo terminal de las cadenas de oligosacáridos. Posteriormente se analizó la distribución de las diferentes isoformas de acuerdo a la estructura interna de sus cadenas de carbohidratos por cromatografía seriada en lectinas. Se relacionó la estructura interna de las cadenas carbohidratadas de las diferentes isoformas con su capacidad de inducir una respuesta biológica a nivel de la célula blanco. Esta respuesta biológica fue evaluada utilizando un bioensayo in vitro. Los resultados obtenidos demuestran que en la regulación de la biopotencia de la hormona participa no sólo el azúcar terminal, sino también el tipo de estructura de cadena carbohidratada interna al ácido siálico. Los estudios realizados en sueros obtenidos en distintas condiciones fisiológicas demuestran que el entorno hormonal modifica las características estructurales de la molécula, regulando así su biopotencia y su tiempo de permanencia en circulación. Se postula que cada una de las variantes moleculares de esta hormona sería responsable de la inducción diferencial de una determinada respuesta biológica.

Abstract:
FSH is produced and secreted by the anterior pituitary gland. It is closely involved in the regulation and maintenance of essential reproductive processes, as follicular development and testicular gametogenesis. This hormone is a heterodimeric protein composed of two different subunits; each subunit bears two oligosaccharide chains attached to its polypeptide backbone. Although the oligosaccharide moieties share the same pentasaccharide core, they differ in their external carbohydrate structure, which includes completion, degree of branching and sialic acid content. Variations in the structure of the oligosaccharide chains result in the existence of a family of isoforms with different physicochemical and biological properties. FSH isofonns differ in their isoelectric point, receptor binding activity and plasma half-life.Sex and physiological condition of the donor will determine me relative abundance of the different isoforms. Differences in sialic acid content of FSH isoforms have been considered the main determinant of hormone polymorphism since FSH heterogeneity was described. The aim of this Thesis was to analyse the polymorphism of FSH in human pituitaries as well as that of circulating FSH in different physiological conditions: the follicular phase of normal menstrual cycles, postmenopause and male puberty. This study was particulariy designed to determine the possible effects that changes in hormonal status may have upon the molecular and biological characteristics of this gonadotropin. Chromatofocusing was used to isolate pituitary FSH isoforms according to their silaic acid content. Serial lectin chromatography was used to determine the distribution of different FSH isoforms according to the inner structure of their carbohydrate chains. The relationship between the structure of the carbohydrate moiety of FSH isoforms and their capacity to produce a specific biological response on the target cell, was established. The biological response was determined using an in vitro bioassay. The results obtained in this study demonstrate that the biopotency of the hormone is not only regulated by sialic acid content of FSH isoforms but also by the inner structure of the carbohydrate chain. The characteristics of circulating FSH polymorphism determined in different physiological situations showed that changes in the hormonal status affect the proportion of circulating FSH isoforms bearing different structures in their carbohydrate chains, thus modulating the hormone biopotency and plasma half-life. It can be hypothesized that modifications in FSH heterogeneity express the need to obtain specific biological responses to different physiological situations.

"Caracterización de la liberación del neurotransmisor en la sinapsis eferente olivococlear durante el desarrollo" (2012). Zorrilla de San Martín, Javier. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el órgano de Corti, el epitelio sensorial del sistema auditivo de los mamíferos, las células ciliadas internas (CCIs) transducen los estímulos sonoros a señales eléctricas que son enviadas al sistema nervioso central, mientras que las células ciliadas externas (CCEs) participan del proceso de amplificación y sintonización fina de estos estímulos. Durante el desarrollo, las CCIs presentan actividad espontánea, la cual promueve la liberación de glutamato en la sinapsis entre las CCIs y las dendritas de las neuronas aferentes que forman el nervio auditivo. La actividad espontánea en el sistema auditivo en desarrollo es fundamental tanto para la supervivencia neuronal como para el refinamiento y mantenimiento de los mapas tonotópicos en el cerebro. Desde el nacimiento hasta el comienzo de la audición (postnatal 12-13 en ratones), las CCIs reciben una inervación eferente axo-somática transitoria desde la oliva superior en el tallo cerebral, la cual se postula estaría modulando la actividad espontánea de las CCIs en este período del desarrollo. La sinapsis entre las fibras eferentes mediales olivococleares (MOC) y las células ciliadas es colinérgica, rápida e inhibitoria y está mediada por la activación conjunta del receptor colinérgico nicotínico (nAChR) α9α10 y el canal de potasio activado por calcio SK2. En trabajos previos, se han caracterizado extensamente los cambios que ocurren en la expresión y función del nAChR α9α10 y su acople con el canal SK2, en el corto período en el cual la sinapsis MOC-CCIs es funcional. Sin embargo, es poco lo que se conoce sobre las propiedades de liberación del neurotransmisor y los cambios que ocurren en la presinapsis durante este período. El principal objetivo de esta tesis fue caracterizar las propiedades biofísicas y funcionales de la sinapsis transitoria MOC-CCI durante el desarrollo postnatal previo al comienzo de la audición. Para esto se realizaron registros electrofisiológicos en el modo “whole-cell“ en las CCIs presentes en preparaciones del órgano de Corti del ratón, aisladas en forma aguda, en dos períodos postnatales, mientras se estimulaban eléctricamente los axones eferentes para provocar la liberación del neurotransmisor. Los resultados de este trabajo de investigación muestran que la eficacia sináptica aumenta significativamente entre los días postnatales (P) 5-7 y 9-11. Este fenómeno está acompañado por cambios en el tipo de plasticidad de corto término, en los tipos de canales de Ca²+que median y/o modulan la liberación del neurotransmisor y también por un cambio en la cantidad de vesículas sinápticas disponibles para ser liberadas, sin modificaciones en la probabilidad de liberación de cada sitio activo.

Abstract:
In the organ of Corti, the sensory epithelium of the mammalian auditory system, inner hair cells (IHCs) transduce sound stimuli into electrical signals which are conveyed to the central nervous system, while outer hair cells (OHCs) participate in the amplification and fine tuning of sounds. During development, the IHCs present spontaneous activity which promotes the release of glutamate at the synapse between the IHCs and the afferent dendrites of the neurones that make up the auditory nerve. Spontaneous activity in the auditory system is fundamental both for neuronal survival as well as for the refinement and maintenance of tonotopic maps in the brain. Since birth until the onset of hearing (postnatal day (P) 12-13 in mice), the IHCs receive a transient axo-somatic innervation from the superior olive in the brain stem, which is postulated to modulate IHC spontaneous activity during this developmental period. The synapse between the medial olivocochlear (MOC) fibers and the IHCs is cholinergic, fast and inhibitory and is mediated by the combined activation of the α9α10 cholinergic nicotinic receptor (nAChR) and the SK2 calcium-activated potassium channel. In previous work, the changes that occur in the expression and function of the α9α10 nAChR and its coupling to the SK2 channel have been extensively characterized during the short period at which this synapse is functional. However, little is known about the properties of transmitter release and the changes that take place at the presynaptic level during this period. The main goal of this Thesis work was to characterize the biophysical and functional properties of the transient MOC-IHC synapse during postnatal development prior to the onset of hearing. For this purpose, electrophysiological recordings in the whole-cell mode were performed in IHCs, present in acutely isolated organs of Corti from mice at two postnatal ages, while the MOC efferent axons were electrically stimulated to promote the release of transmitter. The results of this work show that the efficacy of the MOC-IHC synapse significantly increases from P5-7 to P9-11. This is accompanied by changes in the pattern of short term synaptic plasticity, in the types of calcium channels that support and/or mediate neurotransmitter release as well as in the number of synaptic vesicles ready to be released, without modifications in the release probability of each active site.

"Caracterización de la línea celular VERO como sustrato para la producción de vacunas virales" (1999). Gorostiaga, María A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las líneas celulares establecidas a partir de células de riñón del mono verde africano, se han usado durante años en Virología. La investigación y el desarrollo que involucra el uso de líneas celulares requiere el conocimiento preciso de las especies de origen y su pureza. Esto se lleva a cabo mediante un monitoreo periódico de los cultivos celulares que comprende varios marcadores genéticos, incluyendo isoenzimas y cromosomas. La estabilidad del cariotipo de la línea celular VERO se estudió con métodos de coloración diferencial de los cromosomas, en cultivos continuos estáticos (10 pasajes). Bajo estas condiciones el número modal (de 58 a 54) y la estructura del cariotipo variaron, tanto en el número de copias de cromosomas normales como en el de marcadores. Los cambios cuantitativos (el aumento del porcentaje de las células diploides, así como la variación en la fracción de células que tienen el número modal, ocurren a pesar de la estabilidad de la composición cromosómica, que limita el uso de las células Vero como sustrato para la preparación de vacunas. Para estandarizar las vacunas patrón en el proceso de producción, se estudió la influencia potencial que los diferentes pasajes podrían tener en la capacidad inmunogénica del virus, con el objetivo de establecer el número máximo y minimo de pasajes que cada tipo de virus admite, sin alterar las características biológicase inmunológicas de las vacunas virales que se usan en la actualidad. El método desarrollado y evaluado en diez pasajes es apto para la producción de vacunas antirrábicas de referencia en células VERO.

Abstract:
Non-tumorigenic cell lines established from African green monkey kidney cells have been used over years in virology. Research and development involving the use of cell lines requires precise knowledge of the species of origin and purity of the cell lines involved. This can only be assured by periodical monitoring of cultured cell lines that involves testing for a combination of genetic markers, including isoenzymes and chromosomes. The Vero cell line karyotypic stability was carried out by methods of differential chromosome staining in continuous static cultures (10 passages). Under these conditions, both the modal number of chromosomes (from 58 to 54) and the karyotype structure, namer the copy number of normal chromosomes and the market composition were shown to change. The quantitative changes (the rising percentage of diploid cells, as well as the change of cell fraction involving the modal number of chromosomes) were shown to occurr in spite of the chromosome composition stability, which limits the time of using Vero cells as a substrate for preparation of vaccines. To the standardization of pattern vaccines in the production process we studied the potential influence of different passages on the virus inmunogenic capability, to establish the minimum and maximum number of passages that each type of virus admit, without change in the biological and inmunological characteristics of viral vaccines that are currently being used. The method developed and evaluated is appropiate for the production of referencial antirrabic vaccines on Vero cells.

"Caracterización de la proteína de 24 kDa de PVX, y obtención de plantas transgénicas resistentes a tobamovirus" (1997). Ares, Vera Ximena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La proteína de 24 kDa (p24) del potato virus X (PVX) es una de las tres proteínas responsables del transporte de este virus en plantas infectadas. En este trabajo de Tesis se obtuvieron anticuerpos específicos contra p24, con los cuales se pudo detectar y caracterizar su expresión en protoplastos y en tejido de plantas de tabaco infectadas. También, se obtuvieron plantas transgénicas que expresan p24 y que pueden complementar el transporte de un mutante de PVX defectivo en este gen. Las plantas transgénicas que producen altos niveles de p24 presentan un fenotipo alterado, que consiste en plantas enanas y cloróticas. Estas plantas mostraron resistencia a la infección con los tobamovirus tobacco mosaic virus (TMV)y tomate virus Ob (ToMV-Ob). Sin embargo, cuando se las infectó con PVX o con el potato virus Y (PVY), no mostraron diferencias en los niveles de virus con respecto a las plantas no transformadas, aunque los síntomas de infección con PVX fueron más severos. Recíprocamente, las plantas transgénicas que expresan la proteína de movimiento (MP) de TMV mostraron resistencia a PVX cuando se inocularon con este virus. Por último, se realizaron estudios de complementación entre mutantes de TMV y de PVX defectivos en transporte, con las plantas transgénicas que expresan p24 y la MP de TMV, para estudiar el grado de interacción entre los sistemas de transporte de ambos virus.

Abstract:
The p24 protein, one of the three proteins implicated in local movement of potato virus X (PVX). was expressed in transgenic tobacco plants (Nicotiana tabacum, Xanthi D8 NN). Plants with the highest level of p24 accumulation exhibited a stunted and slightly chlorotic phenotype. These transgenic plants facilitate the cell-to-cell movement of a mutant of PVXthat contained a frameshift mutation in p24, indicating that the transgenic protein provides movement function and is able to act in trans. Upon inoculation with tobacco mosaic virus (TMV),the size of necrotic local lesions was significantly smaller in p24 plants than in nontransgenic. control plants. Resistance to tobamoviruses was also evidenced after inoculation of p24 plants with Ob, a virus that evades the hypersensitive response provided by the N gene. In the later case. no systemic symptoms were observed. and virus accumulation remained low or undetectable by Western immunoblot analysis and back-inoculation assays. In contrast, no differences were observed in virus accumulation after inoculation with PVX, although more severe symptoms were evident on p24 expressing plants compared with control plants. Similarly, infection assays conducted with potato virus Y (PVY) showed no differences between control and transgenic plants. On the other hand, a considerable delay in virus accumulation and symptom development was observed when transgenic tobacco plants containing the MP of TMV were inoculated with PVX. Finally, a movement detective mutant of TMV was inoculated on p24 plants or in mixed infections with PVX on non-transgenic plants. Both types of assays failed to produce TMV infections, implying that TMV MP is not interchangeable with the PVX movement proteins.

"Caracterización de la resistencia a insecticidas piretroides en pediculus humanus capitis De Geer 1778 : estudio comparativo entre estados embrionarios y postembionarios" (2004). Mougabure Cueto, Gastón Adolfo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los objetivos de este trabajo de tesis están relacionados a la evaluación de la resistencia a insecticidas piretroides en los estados embrionarios t postembrionarios de poblaciones de Pediculus humanus capitis de Buenos Aires resistentes a permetrina. Durante el desarrollo de la tesis fueron planteados objetivos a posteriori necesarios para el desarrollo de los objetivos originales. Los objetivos fueron: Observar la posible expresión de resistencia a insecticidas en embriones en poblaciones de P. humanus capitis con resistencia detectada en estadios postembrionarios. Estudiar los mecanismos de resistencia a insecticidas expresados en embriones y estados postembrionarios. Estudiar los mecanismos de resistencia a insecticidas expresados en embriones y estados postembrionarios de P. humanus capitis. Los objetivos a posteriores fueron: Caracterizar morfológicamente el desarrollo embrionario de P. humanus capitis y P. humanus humanus a fin de trabajar con homogéneo en cuanto al tiempo de desarrollo. Determinar las condiciones ambientales óptimas (T°C y HR%) para el desarrollo de P. humanus capitis en laboratorio. Puesta a punto de los métodos de medición de actividad enzimática en los embriones. De acuerdo a estos objetivos se obtuvieron los siguientes resultados y conclusiones: Se caraterizó el desarrollo embrionario según caracteres morfológicos vistos a través de la transparencia del corion. Los caracteres morfológicos fueron: apéndices y manchas oculares. La ombinación de los distintos estados de desarrollo de estos caracteres permitieron determinar rtes etapas en la embriogénesis:etapa temprana, etapa media, y etapa tardía (manchas oculares negras). Se determinaron las condiciones ambientales optimas (temperatura y humedad relativa) en laboratorio para la embriogénesis de P. humanus capitis: 27-31°C de temperatura y 45-75% humedad relativa. Se observó que en poblaciones con resistencia a piretroides y DDT expresada en los estados postembrionarios los embriones también expresan resistencia a los mismos insecticidas. En estados postembrionarios, no se observó resistencia a carbaril ni a spinosad. En embriones no se observ+o resistencia a spinosad pero se determinó una incipiente resistencia a carbaril. Se midió actividad esterasa en embriones por la stres metodologías utilizadas (Gomori, Ellman y Fluorométrico), por el contrario no fue posible determinar actividad del complejo P450 por el método fluorométrico utilizado. Según los resultados de inhibición enzimática in vivo y la determinación de las actividades enzimáticas una mayor actividad esterasa no parece estar involucrada en la resistencia observada en adultos y en embriones. Según el análisis global de los resultados, la resistencia en las poblaciones de P. humanus capitis utilizadas en este trabajo se debería: 1) modificación de sitio de acción de piretroides y DDT (tipo-kdr) (estados embrionarios y postembrionarios), 2) aumento metabolismo oxidativo (estados postembrionarios). Se plantea al insecticida spinosad como posible activo en formulaciones pediculicidas.

Abstract:
The aim of this thesis are related to the evolution of the pyrethroids insecticide resistance in embryonic and postembryonic stages of Pediculus humanus capitis populations from Buenos Aires resistant to permethrin. During the development of the thesis a posteriori objetives were settled necessary for the development of the original aims. The original aims were: To observe the possible expression of insecticide resistance in embryos in P. humanus capitis population with detected resistance in postembryonic stages. To study the insecticide resistance mechanism expressed in P. humanus capitis embryos and postembryonic stages. The a posteriori aims were: To characterize morphologically the embryonic development of P. humanus capitis and P. humanus in order to work with homogeneous material as regards development time. To determinate the optimal environmental conditions (T°C and HR%) for the P. humanus capitis in laboratory. To determinate the measure methods of enzimatic activity in embryos. According to these aims the following results and conclusions were drawn: The embryonic development according to morophological characters seen through the corion transparence were characterized. The morphological characters were: appendages and oculars spots. The combinations of different development stages of these characters allowed to determinate three periods of time in the embryogenesis: early period, middle period and late period. Optimal environmental conditions were determinated (T°C and HR%) in the laboratory for P. humanus capitis: 27-31°C temperature and 45-75 relative humidity. It was observed that in populations with resistance to pyrethoids and DDT expressed in postembryonic stages, the embryos also express resistance to the same insecticides. In postembryonic stages, carbaryl and spinosad resistance was not observed. Resistance to spinosad was not observed in embyos but an incipient carabryl resistance was determined. Esterase activity embryos was measured by the three used methods (Gomori, Ellman and Fluorometric) on the contrary it was not possible to determine P450 complex activity by the fluorometric method. According to in vivo enzimatic inhibition results and the enzimatic activities determination, an increased in esterase activity is not involved in the resistance observed in adults and embryos. According to the global analysis of results, the resistance in P. humanus capitis population used in this research would be due to: 1)pyrethroids and DDT site of action modification (kdr-like) (embryonic and postembryonic stages), 2) oxidative metabolism increase (postembryonic stage). Spinosad insecticide as a possible active in pediculicide formulations is questioned.

"Caracterización de la respuesta a estrés osmótico en Lactobacillus casei : rol del sistema proteolítico" (2003). Piuri, Mariana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Lactobacillus casei es una bacteria que desde larga data ha sido empleada por el hombre en procesos fermentativos para la producción de quesos y chacinados y en los últimos años ha adquirido gran relevancia por su uso como probiótico. Durante los procesos mencionados y en el tracto gastrointestinal, Lb casei es sometida a diferentes tipos de estrés, entre ellos el estrés osmótico. El objetivo de este trabajo fue estudiar las modificaciones genéticas, fisiológicas y estructurales de este microorganismo cuando es sometido a un estrés hipersalino, priorizando el estudio de las actividades relacionadas con los procesos de elaboración de alimentos. En esta tesis se demostró que además de los solutos osmocompatibles generales glicín betaína y camitina, di y tripétidos pueden aumentar la osmotolerancia de Lb casei. Además de estimular el crecimiento en un medio hiperosmótico lograron restituir el grado de superenrollamiento del ADN (recuperación del linking number) de modo análogo a la camitina. La construcción y el análisis de una mutante deficiente en el transporte de di-tripéptidos, dtpT, mostró que aquellos péptidos que no son transportados eficientemente no ejercen osmoprotección, mientras que sí lo ejercen aquellos que son transportados de manera eficiente. Así mismo, se describió la pérdida de la represión ejercida por péptidos en las actividades de PrtP y Per , dos de las enzimas principales del sistema proteolítico y principales proveedoras de péptidos en el extracelular e intracelular respectivamente. En el caso de PrtP, se pudo demostrar que el aumento de la actividad se debe a una pérdida de la represión a nivel transcripcional. La demostración de la interacción de CodY (que había sido postulado como el efector de la represión por péptidos de varios componentes del sistema proteolítico en Lactococcus lactis) de Lb casei con la región promotora de prtP apunta a que ésta proteína reguladora mediaría la pérdida de represión en medio hiperosmótico. En un medio carente de péptidos y en alta sal, en cambio, la elevada actividad de PrtP se debe a un aumento de la velocidad máxima de la enzima durante el crecimiento en alta sal y no a un aumento de la actividad transcripcional. Dado que PrtP se encuentra anclada a la pared celular, la modificación de la actividad de la enzima podría ser consecuencia de modificaciones en el entorno de la proteína. Se describió una sensibilidad diferencial a la lisis y a antibióticos que actúan a nivel de envolturas en células provenientes de un medio con alta sal. El aumento de la sensibilidad a la lisis se debe directamente a alteraciones de la pared, ya que el mismo efecto se observó al emplear paredes purificadas. El análisis de las fotografias de microscopía electrónica reveló un aumento en el tamaño de las células crecidas en alta sal y claras diferencias en la pared de la misma. De estos resultados, se desprende la posibilidad de emplear el precrecimiento en NaCl como un método para facilitar la lisis de un microorganismo que normalmente es resistente a la misma. Los resultados obtenidos en esta tesis, contribuyen al conocimiento de la fisiología de bacterias lácticas en presencia de un efector de estrés que normalmente se encuentra durante los procesos en los que estos microorganismos participan.

Abstract:
Since long time, Laclobacillus casei has been used for the production of Cheese and sausages. In and the last few years they acquired relevance because of its use as a probiotic. During the fermentation process and in the gastrointestinal tract, Lb casei is subjected to a wide range of stressors and particularly to osmotic stress. The aim of this work was the analysis of the genetic, physiological and structural changes in this microorganism when it grows in a hyperosmotic saline condition, mainly the study of those activities related to the process involved in food production. In this thesis, it was demonstrated that as well as generally osmocompatible solutes, camithine and glycin betaine, di and tripeptides can improve osmotolerance in Lb. casei. Besides their role in stimulation of growth in high osmolarity media, they were able to re-establish the degree of DNA supercoil (recovery of linking number) as camithine did. The construction and analysis of a mutant,dtpT, unable to transport di-tripeptides, enable to show that those inefficiently transported peptides can not exert an osmoprotective role, in distinction from those efficiently transported. The lost of the repression exerted by peptides in PrtP and Per activities, two of the key enzymes of the proteolytic system and main providers of peptides was described. The lost of repression for PrtP took place at the transcriptional level. The interaction of CodY protein of Lb casei with the promoter region of prtP gene was demonstrated, this result suggests that this regulator protein would be involved in the lost of repression by peptides in a hyperosmotic media. In a hypersaline media in the absence of peptides, the high levels of PrtP activity were essentially through an increase of apparent Vmax instead of an increment of transcriptional activity. Since PrtP is anchored to the cell wall, the enzyme activity could be related to changes in the environment of the protein. The differences in the sensitivity to lysis and antibiotics, that exert their effect on the cell envelope in cells grown in the presence of salt, were indicative of these variations. The high level of lysis of the cells grown in NaCl, was also a direct consequence of changes in the cell wall; the same effect was observed when purified cell walls were used instead of whole cells. The analysis of electronic microscopy photographs revealed and increase in the size of cells grown in high salt as well as clear differences in the cell wall. These results raises, that pregrowth in hyperosmotic media could be used as an efficient method to improve lysis of this resistant to lysis bacteria. The results of this study, increase the knowledge about lactic acid bacteria physiology in the presence of NaCl, a stress effector that is usually found in fermentative process.

"Caracterización de la sialoadenitis en los ratones NOD: participación del óxido nítrico en la disfunción secretoria" (2004). Rosignoli, Florencia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La autoinmunidad es una causa importante de enfermedad en los seres humanos. El síndrome de Sjögren es una enfermedad inflamatoria crónica que se caracteriza por una pérdida progresiva de la secreción salival y lagrimal. La cepa de ratones diabéticos no obesos (NOD) es el modelo murino más ampliamente utilizado para el estudio de esta enfermedad debido a que el desarrollo de la sialoadenitis está acompañado por una disminución de la respuesta secretoria. Estudios en las glándulas salivales sugieren que el óxido nítrico podría tener un papel en la regulación de la secreción salival. Por tal motivo nuestro objetivo es investigar si la disfunción secretoria de los ratones NOD está asociada a alteraciones en la actividad de la óxido nítrico sintasa y su relación con la aparición de infiltrados linfocitarios en las glándulas o la expresión de citoquinas en las mismas. Los resultados expuestos indican que las glándulas salivales de ratones NOD presentan una menor actividad de NOS a partir de las 12 semanas comparada con la de BALB/c de la misma edad y ratones NOD de 8 semanas. La disminución es total en el caso de las glándulas submaxilares. El efecto sobre la NOS coincide con una reducción del flujo salival estimulado por pilocarpina sola o pilocarpina y VIP. Ambos efectos preceden al aumento de los niveles de citoquinas proinflamatorias en las glándulas y en el suero y a la aparición de infiltrados linfomononucleares en las glándulas. Además los resultados apoyan la hipótesis de una regulación negativa de la NOS por CaM KII, como el mecanismo responsable de la disminución de la actividad observada.

Abstract:
Autoimmunity is an important cause of disease in human beings. Sjögren´s syndrome is a chronic autoimmune disorder characterized by histological and functional alterations of exocrine glands that result in a severe dryness of the mouth and the eyes. The non obese diabetic (NOD) mouse model of Sjögren´s syndrome is the widest model used due to the fact that the development of sialoadenitis is associated to a decrease of salivary secretion. Studies in salivary glands suggest that nitric oxide could play a role in the regulation of the salivary secretion. Our objetive is to determine if the secretory dysfunction of NOD mice is associated to alterations in the activity of nitric oxide synthase and if this is previous to the appearance of lymphocytic infiltrates or cytokine expression in the glands. Our results show that the salivary glands of NOD mice present a diminished activity of NOS compared with BALB/c of same age and NOD mice of 8 weeks old. The loss of activity is complete in submandibular glands. The effect of NOS is associated with a reduction of the salivary flow stimulated by pilocarpine or pilocarpine and VIP. Both effects precede the increase of the levels of proinflammatory cytokines in glands and serum and the appearance of infiltrates in the glands. In addition the results support the hypothesis of a negative regulation of NOS by CaMKII, as the responsible mechanism for the decrease of the activity observed.

"Caracterización de la toxicidad de insecticidas piretroides en Triatoma infestans (Klug)" (1996). Alzogaray, Raúl A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se evaluaron los síntomas de intoxicación con deltametrina y cis-permetrina en ninfas III de T. infestans. Se estimaron los TE 50s de distintas dosis para dos efectos: (a) incoordinación, y (b) parálisis total. Deltametrina fue tanto o más rápida en producir el primer efecto (según la dosis), cis-permetrina fue más rápida en producir el segundo. No hubo diferencia significativa entre las DE 50 a diferentes tiempos de los dos piretroides, y las ninfas tratadas con cualquiera de ellos mostraron una importante recuperación en función del tiempo. La recuperación fue inhibida cuando se aplicó simultáneamente butóxido de piperonilo. Se estudió la influencia de distintas variables sobre la toxicidad de deltametrina y cis-permetrina. La temperatura tuvo un efecto importante sobre las CE 50s y DE 50s de los piretroides estudiados. En general la toxicidad aumentó al disminuir la temperatura; pero hubo excepciones que dependieron del insecticida, el estadio ninfal y el rango de temperatura. El efecto de la temperatura sobre los TE 50s fue poco importante. En general la velocidad de acción aumentó al disminuir la temperatura; pero hubo excepciones que dependieron del insecticida, el estadio ninfal y el rango de temperatura. En experimentos con ninfas de distintas edades y estados alimentarios, resultaron más sensibles los individuos de 1 día de edad, y más tolerantes los alimentados 7 días antes. La aplicación tópica en el tórax produjo síntomas de intoxicación más rápidamente que la aplicación tópica en el extremo abdominal. Deltametrina actuó más rápidamente que cis-permetrina en un amplio rango de dosis (2-1.000 ng/insecto). En ninfas I, el isómero cis de la permetrina fue más tóxico que el isómero trans a 26 y 36°C, e igual de tóxico a 16°C. El pretratamiento con butóxido de piperonilo sinergizó la toxicidad de cis-permetrina pero no la de trans-permetrina. El pretratamiento con trifenilfosfato tuvo el efecto opuesto. La mezcla de los dos isómeros produjo un efecto de aditividad (ausencia de interacción). En ninfas III, el isómero cis de la permetrina fue más tóxico que el isómero trans a 16 y 26°C, e igual de tóxico a 36°C. Los pretratamientos con butóxido de piperonilo o trifenilfosfato no modificaron las DE 50s. La mezcla de los dos isómeros produjo un efecto de antagonismo. Ambos piretroides produjeron hiperactividad locomotora en ninfas III. Este efecto estuvo influenciado por el modo y el lugar de aplicación de los insecticidas. La hiperactividad fue inhibida por el pretratamiento con N-etilmaleimida y por el descenso de la temperatura. Ninguno de los dos insecticidas tuvo efectos subletales sobre la ingesta y la mortalidad de ninfas I y III, y sólo deltametrina produjo una disminución en la cantidad de ninfas I mudadas.

Abstract:
Symptoms of poisoning by deltamethrin and cis-permethrin in third instars of T. infestans were described. The ET 50s for two effects, (a) incoordination, and (b) total paralysis were calculated. Deltamethrin was equal or more rapid to produce the onset of the first effect (according the dose), and cis-permethrin to produce the onset of the second one. There was not significant differences between DE 50s at different times for the two pyrethroids. They showed equivalent initial knockdown performance, but instars recovery was observed. The synergist piperonyl butoxide inhibited recovery. The toxicities of deltamethrin and cis-permetrhrin at different intrinsec and extrinsec conditions were compared. After treatment temperature had an important effect on ED 50s of both pyrethroids, which tended to decrease when temperature decreased (but excepts depending of the insecticide, the instar, and the temperature range were observed). A low influence of temperature on ET 50s was observed. At all temperatures assayed deltamethrin was faster than cis-permethrin to produce symptoms of poisoning. The symptoms rapidly desappeared when instars intoxicated were moved from 16 to 28°C. Instars exposed to low doses of pyrethroids at 28°C, which did not show symptoms of poisoning, were rapidly affected when they were moved to 16°C. The toxicity of both pyrethroids was affected by the age and the nutritional estate of the instars. Topical application on the thorax was faster to produce the onset of incoordination than on the abdomen. The toxicity of pure and mixed cis- and trans-permethrin was evaluated. The cis isomer was more active than the trans one in both first and third instars. When the two isomers were simultaneously applied an additive effect (lack of interaction) was observed in first instars, while an antagonistic effect in third instars occured. In first instars, the toxicity of cis-permethrin was increased by piperonyl butoxide; and the toxicity of trans-permethrin was increased by triphenyl phosphate. In third instars, the toxicity of both isomers was not modified by neither piperonyl butoxide nor triphenyl phosphate. Deltamethrin and cis-permethrin caused an increase in the locomotor activity of third instars. This effect was inhibited by a temperature decrease, and by N-ethylmaleimide pretreatment. Sublethal effects on blood meal ingestion and moulting were evaluated in both first and third instars. Only deltamethrin yielded a substantial decrease in the number of moulted nymphs.

"Caracterización de la vía de señalización de LOVHK implicada en mecanismos de respuesta a estrés y virulencia en Brucella spp" (2015-04-13). Sycz, Gabriela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Brucella spp. son bacterias Gram-negativas que pertenecen al grupo de las α-2- proteobacterias. Son el agente causal de la brucelosis, una enfermedad zoonótica que produce abortos e infertilidad en animales, y fiebre en humanos. Brucella es un patógeno intracelular facultativo, el cual reside en un nicho replicativo derivado del retículo endoplásmico. Su capacidad de sobrevivir dentro de las células hospedadoras se debe a los diversos mecanismos que ha desarrollado para tolerar las distintas condiciones de estrés presentes en el proceso de infección. Las bacterias pueden detectar y responder a cambios en el ambiente por medio de los sistemas de dos componentes, los cuales están formados por una Histidina Quinasa sensora (HK) y un Regulador de Respuesta (RR). Previo al inicio de este trabajo, se caracterizó en Brucella abortus 2308 una proteína histidina quinasa (LOVHK), la cual posee un dominio LOV sensible a la luz azul, un dominio PAS, seguido de un domino HK. Cuando la proteína es iluminada con luz azul, el dominio LOV inicia un fotociclo, el cual promueve la autofosforilación del dominio HK iniciando una cascada de transducción de señales que culmina con un incremento en la virulencia de Brucella. En el presente trabajo se ha estudiado la vía de señalización iniciada por LOVHK en Brucella abortus 2308. Por medio de ensayos de doble híbrido y experimentos de fosfotransferencias, se identificaron dos RRs como compañeros de interacción de LOVHK: PhyR y LovR. Los resultados in vitro sugieren que LovR podría funcionar como un sink de fosfato de LOVHK. Ensayos realizados in vivo sugieren que LOVHK, por medio de PhyR, contribuye a la activación del sistema de Respuesta General a Estrés (GSR- por sus siglas en inglés). Además, en ausencia de LOVHK la expresión de virB se encuentra alterada. Estos resultados sugieren que LOVHK podría participar en más de una vía de señalización intracelular. En resumen, los hallazgos del presente trabajo contribuyen al conocimiento del mecanismo de señalización de LOVHK y el efecto de dicha vía en la virulencia de Brucella.

Abstract:
Brucella spp. are Gram-negative bacteria that belong to the α-2-proteobacteria group. They are the causative agent o brucellosis, a zoonotic infection that causes miscarriage and infertility in animals, and a febrile disease in humans. Brucella is a facultative intracellular pathogen, which resides in a replicative niche derived from the endoplasmic reticulum. Its ability to survive inside its host is due to the different mechanisms that it has developed in order to cope with the different stress conditions that it encounters during the infection process. Bacteria can detect and respond to environmental changes through two-component signalling systems (TCS), which consist of a sensor Histidine Kinase (HK) and its cognate Response Regulator (RR). Previously, it has been characterized in Brucella abortus 2308 a histidine kinase protein (LOVHK), which has a LOV domain sensible to blue-light, a PAS domain and a C-terminal HK domain. After exposure to blue-light, the LOV domain initiates a self-contained photocycle, which promotes autophosphorylation of the HK domain, initiating a signal transduction pathway that produces an increment in Brucella virulence. In the present work, the intracellular signalling pathway initiated by LOVHK in Brucella abortus 2308 is characterized. Using two-hybrid assays and phosphotransfer experiments we identified two RRs as interacting partners of LOVHK: PhyR and LovR. These in vitro results suggest that LovR could be functioning as a phosphate-sink for LOVHK. In vivo results suggest that LOVHK, through PhyR, contributes to the activation of the General Stress Response System (GSR). Furthermore, the expression of virB is altered in the absence of LOVHK. Altogether, these results suggest that LOVHK could be involved in more than one intracellular signaling pathway. In conclusion, the results obtained in the present work contribute to the understanding of the signaling mechanism initiated by LOVHK and the effect of this pathway on Brucella virulence.

"Caracterización de las comunidades de pequeños roedores en granjas avícolas del partido de Exaltación de la Cruz (provincia de Buenos Aires)" (2003). Miño, Mariela Haydée. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta Tesis se caracterizan las comunidades de pequeños roedores presentes en granjas avícolas del partido de Exaltación de la Cruz (Provincia de Buenos Aires) en cuanto a su riqueza, diversidad específica y abundancias relativas. También se analizan algunas variables reproductivas de las especies presentes con el objetivo final de reunir información que sirva para aplicar al control de roedores. Para eso se realizaron muestreos estacionales con trampas de captura múltiple continua durante dos años en 30 granjas. En cada granja se distinguieron 3 hábitats: galpones, perímetros e interfases (perímetros vecinos a los galpones). Las trampas se ubicaron cada 20m rodeando 3 galpones, alrededor del perímetro y a lo largo de las interfases de cada granja. Los animales capturados fueron determinados específicamente, medidos, sexados y caracterizados según su estado reproductivo. También se extrajeron los cristalinos para determinar las edades a partir de su peso seco y los úteros para registrar la presencia y número de embriones. Tanto en las granjas como en cada uno de los hábitats se capturaron 5 especies: Calomys lancha, Mus musculus, Akodon azarae, Oligoryzomysflavescens y Calomys musculinus (según el orden decreciente de sus abundancias en las granjas). La diversidad resultó significativamente mayor en los galpones que en los perímetros debido a que en los primeros hubo 2 especies dominantes (C. laucha y M. musculus), mientras que en los perímetros sólo dominó A. azarae. Todas las especies silvestres fueron más abundantes en las interfases que en los demás hábitats, pero sólo A. azarae resultó significativamente más abundante en las interfases y los perímetros que en los galpones. M. musculus, por su parte, fue más abundante en los galpones que en los perímetros. La abundancia de las especies silvestres fue significativamente mayor en las épocas frías que en las cálidas tanto en las granjas como en cada uno de los hábitats, en cambio, M. musculus no mostró diferencias significativas entre épocas en ningún caso. Esta especie, que se estaría reproduciendo en los galpones, presentó un período reproductivo prácticamente continuo alo largo del año. C. laucha, en cambio, también se estaría reproduciendo en los galpones, pero interrumpiría su reproducción durante el invierno, mientras que A. azarae se reproduciría en los perímetros y prolongaría su temporada reproductiva con respecto a la que muestra en el sistema campo-borde. En base a los resultados obtenidos se concluye que las granjas avícolas son colonizadas por roedores silvestres que ingresan del sistema campo-borde a través del perímetro y las interfases, mientras que M. musculus ingresaría además junto con el alimento balanceado directamente a los galpones. Su ingreso directo y los recursos y condiciones favorables de los galpones, facilitarían su establecimiento en ellos. Sin embargo, la aplicación de rodenticidas determinaría que desarrolle en este hábitat una estrategia ruderal. A. azarae, por su parte, se establecería en los perímetros por ser un hábitat menos disturbado, pero prolongaría su período reproductivo como consecuencia de alimentarse en los galpones durante el invierno. La reproducción prolongada en M. musculus y la aplicación de rodenticidas serían las causas de que esta especie no muestre variaciones significativas de abundancia entre épocas, mientras que las especies silvestres en conjunto muestran un hiato invernal en su período reproductivo que causaría la disminución de sus abundancias en las épocas cálidas. Finalmente, los resultados de esta Tesis permiten hacer algunas recomendaciones para el control de roedores en las granjas: mantener en el perímetro y todo el predio una cobertura vegetal baja, evitar la presencia de interfases y aplicar rodenticidas en los galpones en forma periódica.

Abstract:
The goal of this Thesis is to characterize the small rodent communities present in poultry farms in Exaltación de la Cruz, Buenos Aires Province, as to species richness, diversity and relative abundances. Some reproductive variables of the species present there, are also analized in this work with the final aim of collecting information useful to apply to rodent control. Seasonal samples using pitfall traps have been taken for two years on 30 farms. Three habitats were considered on each farm: poultry sheds, perimeters and interphases (perimetres close to the sheds). Traps were placed every 20m. surrounding 3 sheds, around the perimetres and along the interphases of every farm.The animals captured were specifically identified, measured, sexed and characterized according to their reproductive condition. Lenses and uterus were removed in order to estimate their age through dry weight, and to register the presence and number of embryons. Five species were captured on the farms and on each habitat: Calomys lancha, Mus musculus, Akodonazarae, Oligoryzomysflavescens and Calomys musculínus (according to their decreasing order of abundances on the farms). Diversity was significantly greater in the sheds than in the perimetres due to the fact that there were 2 dominating species C. laucha and M. musculus, while in the perimeters A. azarae was the only dominating one. All the wild species were more abundant in the interphases than in the other habitats, but only A. azarae was significantly more abundant in interphases and in perimeters than in sheds. On the other hand. M. musculus was more abundant in the sheds than in the perimeters. Abundance of the wild species was significantly greater in cold seasons than in warm seasons on the farms as well as on each habitat, whereas no significant differences between cold and warm seasons were shown as regards M. musculus. This species, which would be breeding in the sheds, showed a continous reproductive period throughout the year. On the other hand, C. laucha which would be also breeding in the sheds, would interrupt its reproductive period in winter, whereas A. azarae would breed in the perimeters and would carry on its reproductive period in reference to what it shows in the field-border system. According to these results the conclutions are that poultry farms are colonized by wild rodents that enter from the field-border system through the perimeter and the interphases, while M. musculus would also go in together with balanced food, directly into the sheds. Its direct entrance and the favourable resources and conditions of the sheds favour its settlement there.Nevertheless, the use of rodenticides would make this species develop a ruderal strategy in this habitat. A. azarae would settle in the perimeter as it is a less disturbed habitat, but it would carry its reproductive period longer as a consequence of being fed in the sheds in winter. The long reproductive period and the use of rodenticides would make M. musculus not show significant varations of abundance between cold and warm seasons,while the wild species in general show an interruption of the reproductive period which would cause the decrease of its abundance in warm seasons. Finally, the results of this Thesis allow some recommendations for rodent control on the farms: keep vegetal cover low in the perimeters as well as in all the site. avoid the presence of interphases and use rodenticides in the sheds periodically.

"Caracterización de las creencias sobre sexualidad de los profesores y su incidencia en las prácticas sobre educación sexual en la escuela media" (2015-12-16). Plaza, María Victoria. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Esta tesis doctoral se llevó a cabo con la intención de realizar una contribución original al conocimiento de las creencias sobre sexualidad y género en el marco del conocimiento profesional del profesorado, a partir de revisar el currículo oculto, considerado un componente esencial de las prácticas docentes. A través de dicho currículo se ponen en juego las creencias que poseen los y las docentes sobre determinados contenidos y que inciden fuertemente en la construcción de las subjetividades de los y las estudiantes. Para alcanzar dicho objetivo se implementaron métodos de investigación educativa de tipo cualitativo. El trabajo de investigación se dividió en 2 etapas. En la primera se trabajó con tres docentes de una escuela estatal de la Ciudad Autónoma de Buenos Aires. Se realizaron observaciones de clase no participantes y luego, los datos obtenidos fueron categorizados y analizados para identificar posibles creencias sobre sexualidad y género. En la segunda etapa, en la que se trabajó con dos de los docentes de la muestra inicial, se realizaron encuentros en los que se implementaron diversas metodologías en la modalidad de taller, en los que se procuró la reflexión conjunta, la estimulación del recuerdo y la metacognición. Como resultado de nuestro trabajo hemos identificado y caracterizado numerosas creencias del profesorado sobre sexualidad y género, un componente central del conocimiento profesional, que se expresan a través del currículo oculto escolar. También, mostramos que la implementación de estrategias de reflexión metacognitiva permiten hacer explícitas dichas creencias, lo que es considerado un primer paso para su vigilancia y revisión por parte de los y las docentes. Este proceso de análisis a través de una reflexión metacognitiva sobre las propias creencias y cómo luego estas se pueden vigilar para la regulación del currículo oculto escolar, no había sido investigado hasta la fecha. De esta forma, consideramos que el aporte más importante de esta tesis ha sido vincular las creencias del profesorado con el currículo oculto escolar y con las estrategias de reflexión metacognitivas como posibles instrumentos para la explicitación, por parte del profesorado, de dichas creencias. Nuestros resultados contribuyen a generar conocimiento relacional sobre dichos campos teóricos y sobre posibles formas de intervención para la regulación del currículo oculto Palabras clave: Conocimiento Profesional del Profesorado – Creencias – Sexualidad y Género – Currículo oculto – Metacognición

Abstract:
This doctoral thesis was written with the purpose of contributing an original knowledge about gender and sexuality beliefs of teacher’s knowledge. These beliefs were studied by analyzing the hidden curriculum that it is considered an essential component of teaching practices. The curriculum shows the teachers´ beliefs about certain subjects that are highly decisive components in the creation of students´ own subjectivities. In order to achieve this purpose, educational research methods of the qualitative kind were implemented. The research was divided into 2 stages. During the first stage, we worked with three teachers from a public school in Buenos Aires city. We made passive classroom observations. The date obtained was analyzed in order to identify possible beliefs about sexuality and gender. During the second stage, we worked with two of these teachers in a workshop. We implemented different methodologies and reached joint reflection, discussion and metacognition. As a result of our research, we have identified and characterized several teachers´ beliefs as the components of the school hidden curriculum. We also showed that these beliefs become explicit by working with metacognitive reflection strategies. This is considered a first step for the teachers to make a revision of what they believe. This subject had not been studied before. Thus, we think that the most important legacy of this thesis has been the fact of linking the teachers´ beliefs with the school hidden curriculum and the metacognitive reflection strategies as possible resources to make these beliefs explicit by teachers. Our results contribute to generate knowledge about such theoretical subjects and about possible ways of regulating the hidden curriculum. Keywords Teacher professional knowledge – Beliefs – Sexuality and gender – Hidden curriculum - Metacognition

"Caracterización de las etapas tempranas de la agregación de alfa-sinucleína in vitro mediante sondas fluorescentes ESIPT y microscopia de fuerza atómica" (2013). Fauerbach, Jonathan Arturo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La Enfermedad de Parkinson (EP) es el desorden neurodegenerativo motor más frecuente, caracterizado por la presencia de agregados proteicos amiloideos intra y extraneuronales conocidos como Cuerpos de Lewy (CL). El principal componente de estas estructuras es alfa-sinucleína (AS), una proteína presináptica de 140 aminoácidos abundante en células dopaminérgicas del cerebro aunque su función fisiológica permanece aún desconocida. En su forma libre nativa AS carece de una estructura secundaria definida pudiendo adoptar múltiples conformaciones en solución y en asociación con otras proteínas y membranas. Se cree que los CL y las fibras amiloides maduras (mafs) son el resultado de un proceso de mal plegamiento, auto-ensamblado y asociación de AS y que posiblemente sirven como mecanismos de protección para la célula, a través de la redistribución en la población de las especies tóxicas intermediarias solubles asociadas a etapas tempranas. Estudio in vitro de las especies y procesos involucrados en la agregación de AS brindan la posibilidad de entender los mecanismos subyacentes en EP. El diseño de nuevas formas de detección de las especies intervinientes en el proceso de agregación y el estudio de los mecanismos de formación de dichos intermediarios tempranos poseen una alta importancia. En esta tesis, se sintetizaron sondas fluorescentes sensibles a cambios en la polaridad de su microentorno que permiten monitorear el proceso de auto-ensamblado y asociación de AS marcada covalentemente con estos compuestos. Dichas sondas demuestran una muy alta sensibilidad al proceso en estudio, proveyendo una novedosa metodología de monitoreo en continuo con la mínima perturbación del sistema. Diversas sondas fueron sintetizadas basándose en la familia de las 3-hidroxicromonas (3HC), compuestos altamente sensibles a los cambios de polaridad de su entorno. Su particular estructura química posibilita el fenómeno conocido como ESIPT (‘Excited State Intramolecular Proton Transfer o Transferencia Protónica Intramolecular en el Estado Excitado’). En ESIPT se produce una transferencia protónica intramolecular en el estado excitado obteniendo dos formas excitadas cada una con un nivel de energía distinto. Con lo cual estos compuestos fluorescentes ESIPT presentan dos bandas de emisión en lugar de una sola. La posición, intensidad y relación entre las bandas de emisión se modifican de acuerdo a los cambios en la polaridad, formación de enlaces por puentes de hidrógeno, y acidez/basicidad del microentorno de la sonda. Las nuevas sondas 3HC sintetizadas resultaron reporteros muy versátiles para el proceso de agregación de AS, particularmente sensibles a las etapas tempranas a cuyos agregados de AS se les adjudica la mayor citotoxicidad. La combinación de distintas sondas de polaridad han permitido obtener datos experimentales acerca de la formación y desaparición de intermediarios pre-amiloideos transientes. Las curvas de agregación obtenidas y sus cambios espectroscópicos fueron complementadas con un análisis por Microscopia de Fuerza Atómica (AFM). Mediante un estudio sistemático por AFM se lograron identificar las diferentes especies provenientes del proceso de autoensamblado de AS, donde cada una de las especies fue caracterizada y catalogada. Estudios a diferentes temperaturas permitieron evaluar su influencia en la cinética y termodinámica del proceso de agregación. Incubaciones a baja temperatura (4°C) permitieron definir un mínimo local de energía en la coordenada de la agregación, revelando una novedosa especie supramolecular (la "acuna") que muestra indicios de estar directamente involucrada en el paso clave de la formación de estructuras fibrilares. Estudios preliminares sobre células SH-SY5Y en cultivo dan indicios de que las acunas son citotóxicas. A través de la Crio-Microscopía de Transmisión Electrónica (Cryo-ET) se obtuvo información estructural con resolución sub-nm de esta novedosa especie supramolecular. Los estudios dieron lugar a la formulación de un nuevo esquema secuencial de agregación (SAS) para AS, basándose en conceptos de química coloidal, de polímeros y supramolecular. SAS distingue 3 etapas de la agregación: molecular, coloidal y fibrilar, en función de las estructuras halladas, su orden secuencial lineal y orquestado de interconversión, su presencia transiente (aparición y desaparición) y morfología característica. Además, SAS distingue etapas exergónicas y endotérmicas del proceso global, señalando un mínimo local de energía correspondiente con la formación de la acuna. Se prevé que este modelo pudiera ser útil no sólo para AS sino para otras proteínas amiloideas “intrínsicamente desordenadas” asociadas a enfermedades neurodegenerativas similares, abriendo la posibilidad de la existencia de un mecanismo común y unificado. Esta tesis doctoral involucra un estudio desde lo sintético orgánico y la biofísica estructural, utilizando microscopias de alta resolución y herramientas fluorescentes avocadas al estudio y la descripción del proceso integro de agregación de AS, obteniendo nuevos datos relevantes al área que son interesantes de continuar y ser explorados por el aporte que puedan rendir en el contexto biomédico.

Abstract:
Parkinson's disease (PD) is the most common neurodegenerative motor disorder, characterized by the presence of intra and extraneuronal amyloid protein aggregates known as Lewy bodies (LB). The main component of these structures is alpha-synuclein (AS), a presynaptic protein of 140 aminoacids abundant in dopaminergic brain cells, although its function is not fully understood. In its native form AS has no defined secondary structure and can adopt multiple conformations in solution and in association with other proteins and membranes. It is believed that LB and mature amyloid fibers (mafs) are the result of a process of AS misfolding, self-assembly and association (where the trigger remains unknown), which are believed to play a neuroprotective role through the redistribution of the population of intermediate toxic soluble species associated with early stages. In vitro studies of the process provide the means for controlling the conditions under which aggregation occurs and offer the possibility to study their dynamics so as to understand the underlying mechanisms. The design of new means for detecting the involved species in AS aggregation has high priority in order to elucidate the mechanisms of formation of these early intermediates and certain their potential role in the context of PD. This thesis describes the synthesis of fluorescent probes sensitive to changes in the polarity of their microenvironment’s which have served to monitor the process of self-assembly and association of AS. Such probes show a high sensitive for the early stages of the process under study, providing a novel continuous monitoring methodology with minimal perturbation of the system. Different probes based on the family of 3-hydroxychromones (3HC) were synthesized, being organic compounds highly sensitive to changes in the polarity of their environment. Their unique chemical structure leads to the phenomenon known as ESIPT (‘Excited State Intramolecular Proton Transfer’), a process by which an intramolecular proton is transfered in the excited state leading two the formation of two states with different energy levels. As a consequence, these compounds exhibit two emission bands instead of one. The position, intensity and ratio of the bands are modified according to changes in the polarity, hydrogen-bonding potential, and acidity/basicity of the microenvironment of the probe. The new probes are versatile reporters of AS aggregation, particularly sensitive to the early stages and species to which the highest cytotoxicity is attributed. The combination of different polarity probes have provided experimental data on the formation and disappearance of pre-amyloid transient intermediates. Spectroscopic data for the progress curves of aggregation were complemented by analysis by Atomic Force Microscopy (AFM). Through a systematic study by AFM it was possible to identify the different species in the self-assembly process of AS, where each species was characterized and cataloged. Studies at different temperatures allowed the evaluation of their influence on the kinetics and thermodynamics of the aggregation. Incubations at low temperature (4°C) helped to define a local energy minimum of the aggregation coordinate, revealing a novel supramolecular species (the "acuna") with evidence that it is directly involved in key steps leading to the formation of fibrillar structures. Preliminary studies on SH-SY5Y cells provided evidence that these species are cytotoxic. Through cryotransmission electron microscopy (Cryo-ET) structural information was obtained with subnm resolution of the so-called "latent" acunas. These studies have led to the formulation of a new sequential aggregation scheme (SAS) for AS, based on concepts of colloidal, polymers and supramolecular chemistry. SAS distinguishes 3 stages of aggregation: molecular, colloidal and fibrillar according to the found structures, their sequential orchestrated interconversion, their transient presence (or absence) and their particular morphology. In addition, SAS distinguishes exergonic and endothermic stages of the overall process, pointing to a specific local energy minimum. It is anticipated that this model could be useful not only for AS and PD but for other "intrinsically disordered" amyloid proteins associated with neurodegenerative diseases, opening the possibility that a common and unified mechanism may exist. This thesis features a study encompassing synthetic organic chemistry and structural biophysics, using high-resolution microscopy and fluorescent tools to study and describe the entire process of the in vitro aggregation of AS, obtaining new relevant data to the field and with implications in the biomedical context, which required and justify further exploration.

"Caracterización de las variantes de GnRH y las gonadotrofinas en Cichlasoma dimerus (Teleostei, Perciformes) y su relación con la diferenciación sexual" (2005). Pandolfi, Matías. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El presente trabajo se basa en el estudio de las múltiples formas de GnRH (hormona liberadora de gonadotrofinas) en un pez teleósteo de agua dulce del Orden Perciformes mediante técnicas histológicas, inmunohistoquímicas, de hibridación in situ y Western blot. Aunque el objetivo inicial fue localizar anatómicamente las diferentes poblaciones de GnRH y analizar la distribución de sus axones desde un punto de vista morfológico- funcional, también se caracterizaron las gonadotrofinas a lo largo del desarrollo y en adultos, encontrandose expresión de las mismas en cerebro y ovario. A la luz de los resultados obtenidos sobre el origen y la ontogenia de las variantes moleculares de GnRH, se propone una correlación entre la diferenciación de una de estas poblaciones y la diferenciación sexual gonadal. Se discute el uso de una nueva metodología para el estudio de las múltiples formas de GnRH dentro de una misma especie que evita las reacciones cruzadas, comúnmente observadas entre anticuerpos y sondas. Finalmente se propone un nuevo patrón de distribución de dichas poblaciones y un origen diferente para una de ellas que contradice el patrón descripto para el resto de las especies de Perciformes, pero que es consistente con lo observado en el resto de los vertebrados.

Abstract:
The present study examined different GnRH (gonadotrophin-releasing hormone) expressing neuronal populations in a Teleost Perciform fish, using histological, immunohistochemical, in situ hibridization, and Western blot techniques. The main purpose was to localize the different GnRH-expressing populations (salmon, seabream and chicken II GnRH) and to analyze their axons pathways from a morphophysiological point of view. Gonadotrophins (FSH and LH) in this species during different developmental stages and in adults were also characterized, finding expression of them not only in pituitary but in brain (hypothalamic Nucleus lateralis tuberis) and ovary (previtellogenic and early vitellogenic oocytes). The origin and ontogeny of GnRH variants was also examined, and a correlation between the differentiation of one of them (sbGnRH) and the sexual differentiation process was proposed. A new methodological approach using the GnRH associated peptides (GAPs) for the study of multiple GnRH variants in a single species, avoiding cross reactivity was also discussed. Taken together, the results demonstrate the existence of a novel distribution GnRH neurons and an olfactory origin for sbGnRH that was not in accordance with other studies in Perciforms, but that was consistent with results obtained in other vertebrates groups.

"Caracterización de los mecanismos de defensa a sclerotinia sclerotiorum, agente causal de la podredumbre del estudio de perfiles metabólicos y transcripcionales" (2010). Peluffo, Lucila. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En Argentina, la podredumbre húmeda del capítulo, causada por el patógeno necrotrófico Sclerotinia sclerotiorum, es una enfermedad que provoca serias mermas en la producción y tiene una incidencia anual promedio sobre la producción de la pampa húmeda del 10-20%. Los síntomas de la enfermedad se manifiestan al final de la etapa de floración o durante el llenado de granos por lesiones en el receptáculo que pueden extenderse y afectar todo el capítulo, produciendo la caída del mismo. En estados avanzados de podredumbre, se forman esclerocios, estructuras de resistencia del hongo, que pueden permanecer en los tejidos o en suelo y mantenerse viables por más de 8 años constituyendo el inóculo para futuras infecciones. La resistencia a Sclerotinia sclerotiorum en girasol es compleja, habiéndose detectado varios loci de carácter cuantitativo (QTL) específicos de línea, órganos y condiciones ambientales de crecimiento. Dicha complejidad ha limitado el desarrollo de germoplasma resistente por medio del mejoramiento clásico, reforzando la necesidad de la utilización de herramientas genómicas que incluyan tanto marcadores neutros para el mapeo de QTL como el desarrollo de marcadores funcionales desarrollados sobre genes candidatos para la resistencia al patógeno. El conocimiento de los factores determinantes de la patogénesis y las respuestas de defensa del hospedante constituyen factores claves para la identificación de dichos genes candidatos. Uno de los aspectos más destacados del mecanismo de invasión de S. sclerotiorum es la degradación de la pared celular, siendo el ácido oxálico producido por el patógeno uno de los determinantes de la patogénesis, a través de la acidificación y el secuestro de Ca^2+ de la pared celular del tejido hospedante. Asimismo, el ácido oxálico ejerce una regulación dual de la producción de especies reactivas de oxigeno (ROS). Por un lado, en los primeros estadios de la infección el ácido oxálico induce la generación de ROS y la inducción de una muerte celular programada (PCD) en una marera dependiente del pH generando un ambiente favorable para el desarrollo del patógeno, la adquisición de nutrientes y el establecimiento de la relación necrotrófica. Por el otro lado a medida que la infección progresa y al ácido oxálico se acumula en los tejidos del hospedante, el pH disminuye acompañado de la inhibición del estallido oxidativo y la PDC provocando así la muerte celular pero de una manera necrotrófica. En el presente trabajo se abordó el análisis del perfil metabólico primario, el perfil transcripcional de genes candidatos y los perfiles hormonales de dos líneas de girasol con comportamiento contrastante frente a la infección producida por S. sclerotiorum (HA 89 susceptible y RHA801 moderadamente resistente). Aplicando un método de estudio de perfiles metabólicos basado en la técnica de GC/MS, fue posible detectar diferentes patrones involucrando 63 metabolitos entre ellos azucares, aminoácidos, ácidos orgánicos, ácidos grasos y algunos metabolitos secundarios en flores de girasol que constituyen el órgano principal de infección de este patógeno. Los análisis estadísticos paramétricos y multivariados mostraron diferencias metabólicas entre estos dos líneas, así como también efectos de interacción entre línea y los días post inoculación. Los análisis de correlación de redes sugieren que estos cambios metabólicos están sincronizados en una manera dependiente del tiempo en respuesta al patógeno. Se detectaron mayor cantidad de cambios metabólicos diferenciales en la línea susceptible que en la resistente, esto se evidencia en el mayor número de interconexiones que presenta la línea susceptible entre los módulos de metabolitos formados por compuestos pertenecientes a las mismas vías. Por otro lado, la línea resistente muestra mayor interconexión entre metabolitos pertenecientes a las mismas vías. La evaluación de estos datos también demuestra una regulación línea específica de las distintas vías metabólicas, sugiriendo la importancia de detección de patrones metabólicos, en lugar de cambios específicos de metabolitos individuales, cuando se buscan marcadores metabólicos que responden diferencialmente a la infección der patógenos. Por otra parte el análisis de patrones de actividad de enzimas claves del metabolismo primario del carbono (sacarosa sintasa y las invertasas de pared celular, citológica y vacuolar), foto-respiración (catalasa) y del metabolismo de los fenilpropanoides (fenilalanina-amonio-liasa-PAL), mostró también diferencias entre líneas a tiempos tempranos del proceso de infección. La actividad catalasa presentó un aumento significativo en la línea resistente, que indicaría una regulación diferencial de la fotorespiración frente a la infección del patógeno, disminuyendo el nivel de ROS. Para la identificación de nuevos genes candidatos involucrados en la resistencia a este patógeno se construyeron colecciones de ADNc basadas en la técnica SSH de flores de girasol inoculadas y no inoculadas a partir de una línea resistente a los 2 y 4 días post inoculación. Esta estrategia dio como resultado la obtención de secuencias diferencialmente expresadas entre las flores inoculadas y no inoculadas. La mayoría de estos genes están involucrados en los procesos de traducción de proteínas, en los procesos de óxido reducción entre los cuales se encuentra un gran número de genes de respuesta a estreses biótico y abiótico, numerosos genes involucrados en el metabolismo primario. Del mismo modo, también se detectó un alto porcentaje de secuencias sin similitud con secuencias disponibles en bases de datos, sugiriendo que podrían codificar para genes no descriptos previamente, involucrados en la respuesta del girasol frente a este patógeno. De las clonotecas generadas se seleccionó un conjunto de genes para validar su comportamiento por qRT-PCR. De este conjunto, los genes quitinasa, un elemento de respuesta a etileno y el factor de transcripción WRKY7 mostraron patrones de expresión diferenciales entre las muestras inoculadas y controles a los distintos días post inoculación, sugiriendo que estos genes se encuentran involucrados en la respuesta del girasol frente a S. sclerotiorum. Asimismo se identificó un número importante de genes asociados a defensa a patógenos que se expresan en altos niveles en flores de girasol de la línea resistente aún en condiciones control, sin inoculación con el patógeno. Se estudiaron los perfiles hormonales para el ácido salicílico y para el ácido jasmónico por medio de la técnica LC-ESI-MS/MS. Estos estudios corroboraron que el ácido salicílico no contribuye a la resistencia contra S. sclerotiorum y que además se acumula en los tejidos infectados por este hongo, particularmente en la línea susceptible. A su vez, estos estudios demostraron que el jasmónico estaría asociado a la resistencia frente a este patógeno en las flores de girasol de la línea resistente. La integración del análisis de perfiles metabólicos, transcripcionales y perfiles hormonales contribuyó a una mejor comprensión de los cambios en el metabolismo en los capítulos de girasol durante los primeros estadios de la infección facilitando la identificación de genes y vías metabólicas involucradas en la respuesta al patógeno necrotrófico S. sclerotiorum. Asimismo la identificación de cambios en perfiles metabólicos y transcripcionales de genes candidatos, entre líneas resistentes y susceptibles, posibilita el desarrollo de biomarcadores metabólicos y marcadores funcionales para su aplicación en el mejoramiento asistido del cultivo de girasol.

Abstract:
Sclerotinia sclerotiorum, the causal agent of sunflower head rot, represents one of the main constrains in sunflower production in Argentina, with an average annual incidence of 10-20% of total yield of the main growing area, especially when flowering takes place during periods ofexcessive rainfall. The symptoms appeared at the end of the flowering stage or during grain filling, as water-soaked lesions on the receptacles. The fungus can decay the entire receptacle leaving only a bleached, shredded skeleton with large sclerotia. These sclerotia are resistance structures that can remain viable for more than 8 years in the soil and are main sources of inoculum for future infection. S. sclerotiorum resistance in sunflower is complex; several underlying QTLs were found to be specific for genotype, organ and environmental conditions. This complexity has limited the development of resistant genotypes by classical breeding, thus strengthening the need of using genomic tools such as neutral markers for QTL mapping and the development of functional markers based on candidate genes for resistance to this pathogen, for association mapping.. Insights into pathogenesis determinant factors and host defense responses are key factors for the identification of candidate genes. Degradation of plant cell wall is of major importance in the S. sclerotiorum invasion. Oxalic acid (OA) secreted by this pathogen induced pathogenesis by lowering the pH and chelating host cell-wall-Ca^2+ In the early stages of the infection process, low levels of OA elicits reactive oxygen species production (ROS) in host plant tissues, triggering programmed cell death and thus, creating a favorable environment for its development. As OA accumulates, the pH is lowered and the interaction becomes necrotrophic in nature, with the concomitant suppression of ROS and PCD, enabling further pathogen invasion of plant tissue. In the present work primary metabolic profiling, transcriptional profiling of candidate genes and phytohormone profiling was conducted in two sunflower inbred lines with contrasting behavior to S.sclerotiorum infection (HA89 susceptible, RHA801 resistant) Applying a metabolic profiling approach based on GC/MS, different patterns were identified, involving 63 metabolites including major and minor sugars and sugar alcohols, organic acids, amino acids, fatty acids and few soluble secondary metabolites in the sunflower capitulum, the main target organ of pathogen attack. Both point-by-point and non-parametric statistical analyses showed metabolic differences between genotypes as well as interaction effects between genotype and time after inoculation. Network correlation analyses suggested that these metabolic changes were synchronized in a time-dependent manner in response to the pathogen. Differential metabolic changes were detected to a higher extent in the susceptible line rather than in the moderate resistant line, this is in the susceptible line a higher number of interconnection are observed between modules composed by intermediates of the same pathway. Instead, in the resistant one, larger connections of metabolites within modules were detected. Evaluation of these data also demonstrated a genotype specific regulation of distinct metabolic pathways, suggesting the importance of detection of metabolic patterns rather than specific metabolite changes when looking for metabolic markers differentially responding to pathogen infection. The enzymatic activity analysis of key enzymes of the primary carbon (sucrose synthase and cell wall, cytosolic and vacuolar invertases), photorespiratory (catalase) and phenylpropanoid metabolism (phenylalanine ammonia-lyase -PAL-) showed differences between genotypes at early time point of the infection progress. A significant threefold increase in the catalase activity of the resistant genotype was observed, indicating a differential regulation in photorespiration in response to pathogen infection by lowering ROS levels. Subtractive cDNA libraries of inoculated and mock inoculated flowers at 2 y 4 DPI were constructed for identification of candidate genes involved in S. sclerotiorum resistance using a PCR-based suppression subtractive hybridization (SSH) method. Differentially expressed sequences between inoculated and mock inoculated flowers were obtained, including sequences coding for genes involved in protein transduction process, oxidorreduction process, genes involved in abiotic and biotic stress responses, genes involved in primary metabolism and a high number of sequences with no homology to sequences deposited in data bases, suggesting that they could be coding for new genes involved in sunflower response to S. Sclerotiorum. A group of 16 genes was selected for validating these libraries by qRT-PCR, genes coding for chitinase (AN: ABJ74186), Ethylene responsive element (AN: XP_002275892) and the transcription factor WRKY7 showed differential expression patterns between inoculated and mock inoculated flowers, suggesting that these genes are involved in sunflower response to S. sclerotiorum. Besides, a large number of defense-related genes were identified as constitutively expressed in mock inoculated flowers of the resistant genotype. Hormonal profiling analysis of Salicylic and jasmonic acid levels were determined by LC-ESI- MS/MS at different time points after inoculation in inoculated and mock inoculated sunflower flowers. These studies support the findings that SA does not contribute to resistance against S. sclerotiorum, moreover SA accumulation was induced in diseased tissues particularly in the susceptible genotype. Furthermore this work showed that JA was associated to resistance against this pathogen in sunflower capitula. The integration of metabolic, transcription and hormone profiling analysis contributed towards a better understanding of sunflower capitulum metabolism changes during the early stages of infection, greatly facilitate the selection of candidate genes for this plant-pathogen interaction, thus allowing the development of metabolic biomarkers and functional markers based on candidate genes, for application in sunflower breeding programs.

"Caracterización de los mecanismos moleculares y celulares activados por ROR1 durante la progresión de melanoma" (2016-08-30). Fernández, Natalia Brenda. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El receptor huérfano de tipo tirosina quinasa, ROR1, se expresa y cumple diversas funciones durante el desarrollo embrionario, mientras que en la adultez, su expresión en los tejidos normales es baja o nula. Sin embargo, se ha descripto que ROR1 se expresa abundantemente en diversos tipos de tumores y leucemias. A su vez, ROR1 actúa como un receptor celular de Wnt5a, un ligando extracelular que ha sido implicado en la tumorigénesis. Es por esto que decidimos determinar la expresión y participación de ROR1 en los procesos celulares y moleculares implicados en la progresión de melanoma. Nuestros resultados indican que ROR1 se expresa en líneas celulares y muestras tumorales de melanoma humano, y que su expresión se asocia con una menor sobrevida postrecurrencia de los pacientes. Empleando estrategias de pérdida y ganancia de función determinamos que ROR1 favorece el crecimiento celular, tanto de manera dependiente como independiente de un sustrato sólido. A su vez, ROR1 disminuye la adhesión y aumenta la motilidad y migración de las células de melanoma. Estos procesos son mediados, en parte, a través de la regulación positiva de la vía de Akt y del aumento de la expresión de los marcadores mesenquimales N-cadherina y vimentina. La regulación de N-cadherina depende tanto de la presencia de ROR1 como de la activación de la vía de Akt. En conclusión, demostramos que ROR1 contribuye a la progresión de melanoma y constituye un posible nuevo marcador pronóstico y blanco terapéutico.

Abstract:
The Receptor tyrosine kinase-like Orphan Receptor 1, ROR1, is primarily expressed during different stages of embryogenesis, while in the adult its expression in the normal tissues is downregulated. However, it has been shown that ROR1 re-express in various types of cancers and leukaemias. Interestingly, ROR1 acts as a Wnt5a receptor, an extracellular ligand that has been implicated in tumorigenesis. For these reasons, we decided to study ROR1 expression in melanoma and its role in the cellular and molecular processes implicated in melanoma progression. Here we show that ROR1 is aberrantly expressed in melanoma cell lines and tumours, and that its expression associates with poor post-recurrence survival of patients with melanoma. Using gain- and loss-of-function approaches we found that ROR1 enhances both anchoragedependent and -independent growth of melanoma cells. In addition, ROR1 decreases cell adhesion and increases cell motility and migration. These processes are mediated, in part, by an upregulation of the Akt pathway and an increased expression of the mesenquimal markers N-cadherin and vimentin. The regulation of N-cadherin relies on the presence of ROR1 and the activation of Akt. In summary, we show that ROR1 contributes to melanoma progression and is a candidate biomarker and a prospective therapy target.

"Caracterización de transportadores de aminoácidos en Echinococcus granulosus" (2011). Camicia, Federico. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Echinococcus granulosus es un pequeño parásito cestode cuyo estadío larval causa la equinococcosis quística o hidatidosis. El objetivo de esta tesis fue analizar el transporte de aminoácidos en el estadío de metacestode y diseccionar los componentes moleculares involucrados en el mismo. Los análisis bioinformáticos realizados han mostrado que en Echinococcus spp. los transcriptos codificantes para transportadores de aminoácidos de la familia DAACS (transportadores de aminoácidos/ dicarboxilatos y catión) se encuentran entre los más representados, siendo los transportadores de aminoácidos excitatorios los más expresados dentro de los miembros de esta familia. Los ensayos de transporte efectuados en quistes hidatídicos infértiles indican que la incorporación de glutamato se daría mediante difusión simple, lo cual sugiere que dicho aminoácido podría ser sintetizado endógenamente. Este resultado estaría en concordancia con el hallazgo bioinformático de genes codificantes para enzimas que intervendrían en la síntesis de novo del aminoácido glutamato. Los análisis transcriptómicos sugieren que habría un aumento muy importante en la expresión de transportadores a nivel del parásito adulto con respecto a la forma lavaria, lo cual sugiere que en el estadío adulto la incorporación de glutamato en forma mediada podría ser esencial. Así mismo, en el protoescólex se han identificado ADNs copia codificantes para transportadores de aminoácidos que podrían estar involucrados en dicho transporte y se han denominado egat1-4. Con el fin de caracterizarlos, se han clonado y determinado las secuencias completas de los ADNs copia correspondientes y se ha hallado que poseen similaridad de secuencia y estructura con miembros de la familia DAACS. Los ensayos de hibridación in situ mostraron que el mensajero de egat1 se localiza en la zona tegumentaria del protoescólex y el correspondiente de egat3 en células del parénquima del protoescólex y en brotes de la capa germinal. Los anticuerpos contra fragmentos de EgAT1 y EgAT2 reconocieron proteínas en extractos del metacestode en ensayos de Western-blot. Se ha observado que EgAT1 se localiza en el subtegumento del protoescólex, ventosas, almohadilla rostelar y en fibras internas. EgAT1 también se localiza en capa germinal y en el subtegumento del parásito adulto. Por otro lado, EgAT2 se localiza en el parénquima del protoescólex y en brotes de la capa germinal. La diferente expresión espacial y temporal de los transportadores de aminoácidos analizados sugiere que cada uno de ellos cumpliría con las distintas necesidades de aminoácidos en diferentes territorios celulares y/o estadíos del ciclo de vida del parásito. EgAT1 se logró expresar en células de mamífero y los estudios funcionales efectuados en dichas células mostraron un pequeño pero significativo nivel de transporte de glutamato. La expresión de los transportadores a lo largo del ciclo de vida del parásito, su localización en estructuras claves para la interacción con el hospedador, su capacidad aunque limitada de incorporar glutamato, junto a las diferencias de estructura primaria y secundaria con sus ortólogos en mamíferos sugieren que estas moléculas podrían ser blancos de drogas contra la hidatidosis, además de proveer las bases moleculares para profundizar en la biología del parásito en lo que respecta al intercambio de metabolitos con el hospedador.

Abstract:
Echinococcus granulosus is a small parasitic cestode whose larval stage causes cystic echinococcosis or hydatidosis. The aim of this thesis was to analyse the amino acid transport in the metacestode stage and characterise the involved molecules. Bioinformatic analysis performed in Echinococcus spp showed that the transcripts coding for amino acid transporters of the DAACS family (Dicarboxylate/Amino Acid Na+ and/or H+ Cation Symporter family) are among the more represented, being the excitatory amino acid transporters the more expressed among the members of this family. Transport assays have shown that infertile hydatid cysts incorporate the amino acid glutamate from the external milleu by simple difussion. This is in concordance with the bioinformatic finding of the genes encoding enzymes possibly involved in glutamate synthesis. However, the transcriptomic analyses suggest an important increase in the expression levels of amino acids transporters in the adult form and this could imply that glutamate uptake is essential in the adult stage. Also, in the protoscolex stage, cDNAs encoding amino acid transporters were identified and named egat1-4. The corresponding cDNAs were cloned and their sequences were determined. The bioinformatic analyses revealed that they have sequence and structure similarity to DAACS family members. The in situ hybridization labelling indicates the distribution of egat1 mRNA throughout the tegument and egat3 mRNA in parenchimal cells of the protoscolex as well as in buds of the germinal layer. Monospecific polyclonal antibodies against the hydrophilic portions of EgAT1-3 were obtained from which only anti-Egat1 and anti-EgAT2 recognised metacestode proteins by Western-blot. These antibodies showed that EgAT1 protein is localized in the subtegumental region of the metacestode, particularly around suckers and rostellum of protoscoleces and in internal fibers compatible with nervous or muscular structures. EgAT1 was also localised in the germinal layer of the metacestode and in the subtegumental region of the adult worm. EgAT2 was localised in the parenchima of the protoscolex and in buds of the germinal layer. The differencial spatial and temporal expression of the amino acid transporters analysed in this thesis, suggest that each of them fulfil the specific amino acid requirements of the different cellular territories and/or life cycle stages. In addition, EgAT1 was expressed in mammal cells in which functional studies were performed. These studies showed a low but significant glutamate transport level. The low level of transport detected in this system could be due to the difficulty of the mammal cells to get the correct folding, subcellular location and post-translational modifications of the heterologous protein. The expression of the E. granulosus amino acid transporters all along the life cycle, their localisation in organs like suckers and rostellum, which are of major importance for the survival in the final host, and in buds of the germinal layer which give rise to protoscoleces, together with the capacity to transport glutamate and the structural differences with their mammal orthologous, suggest that these molecules could be amenable target for antihelmintics. The results obtained in this thesis could also help to understand the molecular basis of the metabolites interchange between the parasite and their hosts.

"Caracterización de un modelo de ratones transgénicos hipersecretores de hCG que desarrolla tumores gonadales" (2010). Gonzalez, Betina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta Tesis Doctoral se estudiaron distintos aspectos de la regulación del eje hipotálamo-hipófiso-gonadal (HHG) en un modelo de ratones transgénicos que produce niveles elevados de la hormona gonadotrofina coriónica humana (hCG) y desarrolla tumores gonadales (ratones hCGDE+). Se partió de la hipótesis que los elevados niveles de esteroides sexuales inducidos por la hipersecreción de hCG desde edades tempranas del desarrollo, actuarían sobre el eje HHG alterando la síntesis y secreción de hormonas y factores claves en la función reproductiva, participando directa o indirectamente en el inicio y progresión de los tumores gonadales que presentan estos ratones. En una primera etapa se caracterizó en profundidad el fenotipo de machos y hembras hCGDE+, estudiando parámetros morfológicos, bioquímicos y moleculares de la función gonadal e hipotálamo- hipofisaria. Se observaron marcadas diferencias sexuales en el modelo, donde los machos transgénicos resultaron severamente comprometidos a nivel de la regulación de la unidad hipotálamo-hipofisaria desde edades tempranas del desarrollo, mientras que las hembras mostraron alteraciones gonadales que condujeron al desarrollo de teratomas ováricos al inicio de la edad reproductiva. En una segunda etapa se aplicaron tratamientos antihormonales y gonadectomía, siendo nuestro particular interés estudiar el rol de los esteroides sexuales en el fenotipo de los machos y hembras hCGDE+. Los resultados obtenidos ponen de manifiesto que la hipersecreción de hCG, a través de la estimulación de la esteroidogénesis gonadal, altera la funcionalidad del eje reproductivo y participa en el desarrollo de patologías gonadales.

Abstract:
In the present Doctoral Thesis, several aspects of the hypothalamic-pituitary-gonadal (HPG) axis were evaluated in a transgenic mouse model that produces elevated levels of human chorionic gonadotropin (hCG) and develops gonadal tumours (hCGDE+ mice). We hypothesized that the elevated levels of sex steroids induced by hCG hypersecretion from early development, would act on the HPG axis by altering the synthesis and secretion of key hormones and factors involved in the reproductive function, thus participating either directly or indirectly in the onset and progression of the gonadal tumours. First, we characterized in deep the male and female phenotype of hCGDE+ mice, through morphological, biochemical and molecular studies of the gonadal and hypothalamic-pituitary function. Sex differences were observed in this model, where transgenic males were severely compromised at the hypothalamic- pituitary unit regulation, whereas transgenic females showed gonadal alterations that derived in the development of ovarian teratomas at the beginning of the reproductive age. Further in this study, we carried out antihormonal treatments and gonadectomy, being our particular interest to study the role of sex steroids in the hCGDE+ male and female phenotype. Our results demonstrate that hCG hypersecretion, through the stimulation of gonadal steroidogenesis, alters the reproductive axis function and participates in the development of gonadal pathologies.

"Caracterización de un segmento del cromosoma seis de una línea de maíz portadora de un Sistema de Letales Balanceados (BLS)" (2012). Robredo, Claudio Gabriel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La línea BLS1A posee un sistema de letales balanceados localizado en las cercanías del centrómero del cromosoma 6 de maíz formado por un gen letal clorofílico estrechamente ligado en fase de repulsión con un gen letal gamético. Los objetivos de esta tesis fueron los de caracterizar agronómica y molecularmente el segmento cromosómico balanceado de la línea de maíz BLS1A. Los resultados de ensayos a campo mostraron diferencias estadísticamente significativas entre BLS1A y algunos de sus recombinantes. La línea BLS1A mantuvo su vigor a pesar de los años de endocría. La caracterización genética a nivel molecular se realizó a través de la búsqueda de polimorfismos con marcadores moleculares de RAPD, RFLP, STS, AFLP y Microsatélites. Se analizaron más de 13200 loci génicos en todo el genoma de las líneas. Cinco microsatélites resultaron polimórficos para en el segmento y se lograron clonar y secuenciar siete bandas de RAPD y AFLP que mapearon en la región cromosómica en estudio. Las técnicas moleculares permitieron demostrar la alta homocigosis de la línea BLS1A, por fuera del segmento balanceado, luego de más de 25 años de endocría Del resultado de algunos de los ensayos de rendimiento de híbridos se observó que las líneas Rec 9 y Rec 10 que perdieron los letales, debido a la recombinación, parecerían corresponderse a los “homocigotas” de cada uno de los brazos del segmento balanceado original. La línea BLS1A como sus Recombinantes presentan buena aptitud combinatoria con las líneas públicas Mo17 y B73 representativas de los 2 grupos heteróticos más importantes en la producción de híbridos comerciales.

Abstract:
BLS1A maize line has a Balanced Lethal System located near the centromeric region of chromosome 6, formed by a chlorophyll lethal gene closely linked in repulsion phase with a gametic lethal gene. The objective of this tesis was to characterize agronomic and at the molecular level the Balanced Lethal System of BLS1A corn line. The results of field trials showed statistically significant differentces between BLS1A and some of their Recominant lines. BLS1A remained strong vigor despite the 25 years of inbreeding. Genetic caracterización was performed at the molecular level by searching for polymorphisms with RAPD, RFLP, STS,AFLP and microsatellites molecular markers. More than 13,200 gene loci were analized across the lines genome. Five microsatellites were polymorfic for the segment and seven RAPS and AFLP bands, that mapped in the chromosomal region under study. The molecular markers allow to demostrate the high hozygosity of the BLS1A, outside the balanced system, after more than 25 years of inbreeding. At the field yield trials of hybrids was observed that the lines Rec 9 and Rec 10, that lost the lethal ones due to the recombination, would seem to correspond to the "homozigous" of each arms of the original balanced lethal system. The BLS1A as its Recombinants present good (ac) with the public lines Mo17 and B73 representative of the 2 more important heterótic groups in the production of commercial hybrids

"Caracterización de un sustituto de piel humana a base de dermis porcina" (2004). Pazos, Adriana Alejandra. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las lesiones cutáneas que abarcan una gran superficie de la piel, requieren el recubrimiento inmediato de la zona afectada para reducir riesgos se sepsis y facilitar la regenración tisular. Entre los múltiples procedimientos terapéuticos aplicados en el tratamiento de estas lesiones, los injertos de piel proveen un medio adecuado y seguro para la regeneración tisular. En esta tesis se estudió un sustituto de piel humana a base de dermis porcina utilizado para ese fin terapéutico, el cual essometidopara su comercialización a un tratamiento industrial que incluye liofilizacipon. El objetivo de la tesis, consistió en la caracterización de este producto comercial, su comparación con la dermis fresca original, y la descripción de ciertos aspectos de su actividad biológica. El análisis consistió en desarrollar la metodología adecuada para el aislamiento y cuantificación de los componentes de importancia biológica. Estos fueron los colágenos del tipo I y III, las proteínas fibronectina y laminina, y los proteoglicanos de ácido hialurónico, keratán sulfato, dermatán sulfato y condroitín sulfatos A y C. Los resultados se esta etapa sugieren que el tratamiento industrial aplicado para su comercialización, no los modificó de manera importante, ya que no hubo alteraciones cuali-cuantitativas relevantes. Además, el análisis de su actividad biológica en un " modelo de cultivo in vitro" de fibroblastos humanos, mostró que la dermis induce un aumento de la proliferación celular. Por lo tanto, este sustituto dérmico puede considerarse una excelente herramienta para el tratamiento de pacientes con heridas cutáneas extensas.

Abstract:
Extended skin damage requires immediate covering of the wounded area in order to avoid sepsis and to facilitate tissue regeneration. There are multiple approaches to treat these injuries, however skin graft is one of the most suitable and safe measures to accomplish this issue. In the present thesis, it was examined a human skin substitute based on porcine dermis used for this kind of treatments, which was previously submitted to an industrial treatment that includes dried-freeze. The objective of this was, characterization of the product, later comparison to the original fresh tissue, and description of certain aspects of this biological activity. The analysis was focused on the development of an appropriate methodology to isolate and quantify those components considered of biological interest. These compounds were collagen types I and III, fibronectin, laminin, and hyaluronic acid, keratan sulphate, dermatan sulphate, and chondroitin sulphates A and C-containing proteoglycans. The results of this step suggest that the industrial treatment applied to the dermis for marketing purposes did not modify greatly the product, since there were no relevant qualitative and quantitative alterations. Besides, the biological activity analysis performed in an "in vitro culture model" of human fibroblasts showed that the dermis induces an increment of cellular proliferation and DNA synthesis, and a consequent shorten of cell cycle. Therefore, the studied dermal substitute could be considered as an excellent tool for the treatment of patients with extended skin injuries.

"Caracterización de una ARN Helicasa de Trypanosoma cruzi clonada por el método de Differential Display" (1999). Díaz Añel, Alberto Marcelo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Una de las últimas técnicas aplicadas en biología molecular para detectar diferentes niveles de transcripción en distintos estadios de un mismo tipo celular es el Differential Display. Este ensayo se basa en la técnica de RT-PCR, utilizando un oligo dT “anclado” que se une al nacimiento del pon A+ de los ARN mensajeros, y un oligonucleótido corto de secuencia al azar que, en diferentes combinaciones, van a amplificar un set de bandas característico para cada par de oligos elegidos. Estas reacciones se corren en un gel de poliacrilamida desnaturalizante y se observan por autorradiografía. De esta forma se comparan ambos estadios celulares y se recuperan del gel aquellas bandas que muestren una amplificación diferencial como producto de distintos niveles de ARN mensajeros. Utilizando el Differential Display en los estadios no infectivo (epimastigotes) e infectivo (trypomastigotes metacíclicos) del parásito Trypanosomacruzi, causante de la enfermedad de Chagas, se purificaron varias bandas de expresión diferencial. Una de ellas aplicada como sonda en un Northern-blot demostró tener una transcripción entre 8 y 9 veces mayor en trypomastigotes metacíclicos. A partir de una biblioteca genómica realizada en el bacteriófago A Fix, se aisló un clon positivo para esta banda que, una vez secuenciado y comparado en bancos de datos, dió una homología de hasta el 46 % a nivel de aminoácidos con diferentes ARN helicasas. Estas proteínas pertenecen a la familia de las proteinas DEAD Box y participan en el relajamiento de estructuras de ARN doble cadena. Por lo tanto son importantes en procesos como transcripción, traducción, ensamblado de ribosomas, splicing y editing.Además se ha descripto su participación en diferenciación y desarrollo celular, por lo cual se abre un campo muy importante con en el estudio de la participación de estas proteinas en los procesos de metaciclogénesis e infectividad del Trypanosoma cruzi. Por otro lado se demostró por Southern-blot que, a diferencia de la mayoría de los genes conocidos de Trypanosoma cruzi, el gen de esta ARN helicasa es de única copia en el genoma. Ensayos de Cromo-blot con ia región que codifica al carboxilo terminal de la proteína mostraron que este gen se encuentra representado en por lo menos nueve cepas del parásito. Por último, se demostró que esta ARN helicasa posee una especificidad enzimática con dirección 3’-5’ sobre transcriptos realizados in-vitro, con una aparente independencia de ATP o GTP, como ocurre con algunos miembros de esta familia El descubrimiento de este gen de transcripción diferencial entre ambos estadios de la metaciclogénesis de T. cruzi y la caracterización parcial de su función enzimática, son el principio para estudiar su participación en la diferenciación y/o infectividad de este parásito y nos permitirá conocer un poco más de este proceso del cual se sabe tan poco y que es parte del comienzo de la enfermedad de Chagas en los huéspedes vertebrados, entre ellos el hombre.

Abstract:
One of the last techniques applied in molecular biology to detect different transcription levels in different stages of one cellular type is the Differential Display. This assay is based on the technique of RT-PCR, using an oligo dT “anchored” that anneals to the birth of the messenger RNAs poly A, and a short oligonucleotide of at random sequence that, in different combinations, they will amplify a characteristic set of bands for each couple of selected oligos. These reactions are run on a dennaturing polyacrylamide gel and they are observed by autoradiography. This way both cellular stages are compared and we can recover of the gel those bands that show a differential amplification as product of different levels of messenger RNAs. Using the Differential Display in the stages non infective (epimastigotes) and infective (metaciclic trypomastigotes) of the parasite Trypanosoma cruzi, causing of the Chagas’ illness, we purified several bands of differential expression. One of them applied as probe in a Northern-blot demonstrated to have a transcription level between 8 and 9 times higher in metaciclic trypomastigotes. Starting from a genomic library carried out in A Fix bacteriophage, a positive clone was isolated for this band that, once sequenced and compared in databases, showed an homology of until 46% at level of aminoacids with different RNA helicases. These proteins belong to the family of the DEAD Box proteins and they participate in the relaxing of RNA double chain structures. Therefore they are important in processes like transcription, translation, ribosome assembling, splicing and editing. Also it has been described their participation in diferentiation and cellular development, reason why a very important field opens up with in the study of the participation of these proteins in the metaciclogénesis processes and infectivity of Trypanosoma cruzi. On the other hand it was demonstrated by Southern-blot that, contrary to most of the well-known genes of Trypanosoma cruzi, the gene of this RNA helicase is single copy in the genome. Assays of Chromo-blot with the region that codes to the carboxy terminal of the protein, showed that this gene is represented in at least nine strains of the parasite. Lastly, it was demonstrated that this RNA helicase possesses an enzymatic specificity with 3’-5' direction with transcripts carried out in-vitro, with an apparent independence of ATP or GTP, like it happens with some members of this family. The discovery of this gene of differential transcription between both stages of the T. cruzi metacyclogenesis, and the partial characterization of their enzymatic function, is the principle to study their participation in the diferentiation and/or infectivity of this parasite, and it will allow to us to know a little more about this process of which is known so little and that it is part of the beginning of the Chagas’ illness in the vertebrate guests, among them the man.

"Caracterización de variantes del virus de Epstein Barr en la infección aguda en pacientes pediátricos y su comparación con linfomas pediátricos EBV +" (2012). Lorenzetti, Mario Alejandro. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El virus de Epstein Barr (EBV) posee dos ciclos de infección, lítica y latente, en linfocitos B, el segundo está asociado a procesos neoplásicos. Se han descripto polimorfismos en los genes BZLF1, BKRF1 (EBNA1) y BNLF1 (LMP1), algunos asociados a linfomas EBV+, a los compartimentos del hospedador o al origen geográfico del virus. Con el objetivo de identificar polimorfismos en estas regiones génicas y su dinámica de distribución en el tiempo y entre los compartimentos del hospedador, se estudió una serie de 35 pacientes pediátricos, 15 con mononucleosis infecciosa (MNI) y 20 con linfoma EBV+, todos de nuestra región geográfica. Mediante amplificación por PCR y posterior secuenciación, se caracterizaron las variantes virales de dichos genes en distintos compartimentos de pacientes i) con MNI al momento del diagnóstico (D0), al mes (D30) y a los tres meses (D90) durante la convalecencia y ii) en muestras de biopsias ganglionares de linfomas EBV+. Se identificaron variantes de BZLF1 estadísticamente asociadas a tumores EBV+, variantes de EBNA1 de circulación exclusiva en nuestra región geográfica y variantes de LMP1 preferentemente asociadas a patologías EBV+, tanto malignas como benignas.

Abstract:
Epstein Barr virus (EBV) displays two infective cycles, lytic cycle and latency within B cells, and it is the latter which is associated with neoplasic processes. Polymorphisms within BZLF1, BKRF1 (EBNA1) and BNLF1 (LMP1) genes were described, and some seemed to associate with malignancy, distribution between compartments or the geographical origin of the virus. With the aim to characterize polymorphisms within these genetic regions and their distribution over time and/or anatomical compartments, we studied a series of 35 pediatric patients from our geographic region: 15 with infectious mononucleosis (IM) and 20 with EBV-related lymphomas. Viral variants from these genes were characterized after direct sequencing of PCR products obtained from different anatomical compartments from patients with IM at diagnosis (D0), at a month time (D30) and after three months (D90), during the convalescence and also from EBV+ tumor biopsies. We identified BZLF1 variants statistically associated with EBV-related lymphomas, EBNA1 variants exclusively circulating in our region and LMP1 variants preferentially occurring in EBV-related pathologies, both malignant and benign.

"Caracterización del anticuerpo monoclonal FC-2.15, dirigido contra carcinomas humanos y reactivo con LewisX : Estudio de sus propiedades funcionales in vitro y ex vivo" (1999). Capurro, Mariana Isabel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Este trabajo de Tesis se ha basado en la producción de anticuerpos monoclonales (AMC) dirigidos contra las células troncales de carcinoma mamario humano. la caracterización e identificación de los antígenos (Ag) reconocidos por los mismos y la evaluación de la posible utilidad diagnóstica y terapéutica de dichos AMCs. Para su obtención, se inmunizaron ratones Balb/c con células provenientes de un paciente con un carcinoma de mama agresivo y altamente indiferenciado, negativo para la expresión de ER y PgR, estrategia seguida con la idea de minimizar la producción de AMCs dirigidos contra Ags asociados a la diferenciación celular. De los hibridomas obtenidos fue seleccionado el AMC FC-2.15, de isotipo IgM, el cual reacciona con la mayoría de los carcinomas mamarios humanos, independientemente de su tipo histológico y grado de diferenciación, reconociendo en los mismos al 80 % de las células tumorales y al 90 % de las células proliferantes del tumor, entre las que se encuentran las células troncales. El AMC FC-2.15 reconoce otras neoplasias, como carcinoma de colon y leucemia mieloide crónica y presenta escasa reactividad con la mayoria de los tejidos normales, siendo la principal reacción cruzada con los leucocitos polimorfonucleares (PMN). En cuanto al Ag FC-2.15, la caracterización bioquímica inicial indicó un Ag de naturaleza glicoproteica, residiendo el epitope en la parte hidrocarbonada del mismo. Posteriores experimentos demostraron que el AMC FC-2.15 reconoce específicamente al trisacárido Lewis˟ o CD15, terminalmente expuesto. Esta conclusión está basada tanto en el reconocimiento específico del AMC FC-2.15 por diferentes estructuras conteniendo Lewis˟ como en la inhibición observada en un ELISA realizado utilizando un AMC comercial anti-CD15 como inhibidor. Asimismo, se determinó que el AMC FC-2.15 no presenta reacción cruzada con el tetrasacárido sialil Lewis˟, ni con su isómero Lewisª, así como tampoco con antígenos de grupo sanguíneo A o B La reactividad del AMC FC-2.15 en los diferentes tejidos FC-2.15 -positivos fue analizada por Western Blot sobre extractos de membrana y caracterizada determinando el efecto de digestiones enzimáticas (con PNGasaF y Neuraminidasa) en la persistencia del Ag. Los resultados obtenidos revelaron que Lewis˟ puede estar formando parte tanto de N-glicoproteínas como de O-mucinas. Según el tipo celular estudiado, Lewis˟ está presente en N-glicoproteínas exclusivamente (bandas de 250, 185 y 105 kDa en muestras de PMN y leucemia), predominantemente en N-glicoproteínas (bandas de 155 y 135 kDa, acompañadas con mucinas de mayor peso molecular, en células de carcinoma de colon T-84) o predominantemente en O-mucinas (células de carcinoma de mama MCF-7).También puede variar la cantidad de lactosaminoglicanos portando sialil Lewis˟, desde la ausencia (MCF-7), pasando por una baja proporción respecto de los Lewis˟-lactosaminoglicanos (PMN) hasta llegar a un gran predominio de los mismos en leucemias y T-84. Puede concluirse, por lo tanto, que PMN normales y diferentes células tumorales pueden expresar residuos Lewis˟ y sialil Lewis˟ en muy diferente proporción y unidos a diferentes proteínas, aunque la relevancia de Lewis˟ en condiciones normales y patológicas tiene que ser aún establecida. En cuanto a las propiedades funcionales del AMC FC-2.15, numerosos experimentos se han realizado en esta Tesis tendientes a caracterizar la interacción del AMC FC-2.15 con PMN y con MCF-7, tanto in vitro como en un sistema ex vivo de circulación sanguínea (SEVCS). Ensayos de aglutinación han demostrado que el AMC FC-2.15 induce la agregación homotípica de PMN in vitro y forma agregados heterotípicos entre PMN y células tumorales Lewis˟-positivas. Ensayos de liberación de han revelado que el AMC FC-2.15 ejerce un fuerte efecto citotóxico sobre los PMN y células MCF-7 por fijación de complemento humano. Posteriormente, con la idea de aproximar a las condiciones en las que el AMC FC-2.15 interacciona in vivo, el ensayo de liberación de fue realizado en sangre entera en circulación en un SEVCS. Contrariamente a lo esperado, el AMC FC-2.15 aglutina, pero no lisa, a los PMN mientras que la lisis de MCF-7 en dicho sistema es prácticamente normal. Estas observaciones permitieron plantear la posibilidad de que en el SEVCS los PMN serían inducidos a agregarse mas rápidamente por la suma de dos mecanismos distintos: el AMC FC-2.15 que activa a los PMN y el flujo aplicado. En la medida que los agregados van siendo formados, habría un impedimento estérico progresivo para el acceso de los factores del sistema de complemento a la porción Fc del AMC FC-2.15 y por ende los grumos de PMN formados no serían lisados. Los experimentos realizados posteriormente validaron esta hipótesis puesto que demostraron que el AMC FC-2.15 no lisa agregados homotípicos de PMN preformados en ensayos in vitro por un lado y que el AMC FC-2.15 es capaz de lisar a los PMN en el SEVCS, cuando la aglutinación de los mismos se impide por pretratamiento con colchicina, por otro. La lisis de MCF-7 en el SEVCS tendría lugar de todas formas debido a su incompleta agregación con los PMN. Puede concluirse entonces que la falta de lisis de los PMN por el AMC FC-2.15 en circulación y, que por el contrario, las células tumorales Lewis˟-positivas sean eficientemente lisadas, son dos caracteristicas importantes que avalan el uso del AMC FC-2.15 en el tratamiento de tumores Lewis˟-positivos, sin riesgo de producir una lisis masiva de los PMN circulantes. Los resultados presentados indican que el AMC FC-2.15 podría ser útil en la inmunoterapia pasiva de pacientes con carcinomas Lewis˟-positivos, sin necesidad de conjugarlo con drogas ni toxinas.

Abstract:
In order to produce monoclonal antibodies (mAb)against antigens (Ags) expressed by breast carcinoma stem cells, nude mice were immunized with tumor epithelial cells from a human undifferentiated primary breast carcinoma. This strategy was followed in order to minimize the production of mAb directed against differentiation-associated Ags. A mAb designated FC-2.15 (IgM) was selected. FC-2.15 reacts with the majority of human breast primary tumors, independently of their histology and hormone receptor content. Moreover, FC-2.15 reacts with 80% of total breast malignant tumor cells and with 90% of proliferanting tumor cells. It recognizes other neoplasia such us colon carcinoma and chronic myeloid leukemia and, among the normal tissues examined, strong cross reactivity was found principally with peripheral granulocytes (PMN). Biochemical studies indicate that FC-2.15 recognizes the carbohydrate moiety of different glycoproteins. Anaysis of epitope specificity has demonstrated that FC-2.15 specifically recognizes terminally exposed Lewis˟ (Lex)(CD15) trisaccharide, but not sialyl Lex, Lewisª, trifucosylated Lewis y, blood group Ags A and B, globo H and gangliosides. FC-2.15 reactivity with different FC-2.15-positive tissues was analyzed by Western blot and characterized by enzymatic digestions (PNGaseF and Neuraminidase). In PMN, myeloid leukemic cells and colon carcinoma T-84 cells, Lewis˟ was found to be almost exclusively N-linked to the protein core, whereas in breast carcinoma MCF-7 cells, Lewis˟ appears to be mostly O-linked. Treatment with Neuraminidase increased detection by FC-2.15 in normal PMN, myeloid leukemic cells and T-84 cells but not in MCF-7 cells. It may be concluded that normal PMN and different tumor cells may express Lex and sialyl Lex residues in quite different proportions and be bound to different proteins. The relevance of Lex in normal and pathological conditions remains to be established. Several experiments were performed in order to characterize the interaction of FC-2.15 with PMN and MCF-7 cells both in vitro and in ex vivo circulating blood (EVCB), as an approach to in vivo conditions. In vitro, the binding of Lex-epitopes by FC-2.15 induces PMN homotypic aggregation. When PMN and Lex-positive MCF-7 cells are co-incubated, FC-2.15 induces heterotypic aggregation. In 51Cr-release assays employing human complement, FC-2.15 exerts a rapid and strong cytotoxic effect against PMN. However, when the effect of FC-2.15 was tested in EVCB, no lytic activity against PMN was detected, whereas MCF-7 cells were still lysed. Blood smears demonstrated that FC-2.15 induced PMN agglutination and heterotypic aggregates when MCF-7 cells were present. A pre-treatment of PMN with colchicine impaired PMN agglutination both in vitro and in EVCB. In the latter conditions FC-2.15 lytic activity was restored, suggesting that PMN homotypic aggregation by FC-2.15, but not lysis is dependent of microtubules integrity and that PMN agglutination hinders their lysis. Moreover, when the 51Cr-release assays were performed following agglutination, FC-2.15-cytotoxicity was restricted to isolated PMN. It may be concluded the lack of PMN lysis by FC-2.15 in circulation is reassuring, and since Lex-positive tumor cells are efficiently lysed. FC-2.15 could be useful to eliminate circulating Lex-positive tumor cells.

"Caracterización del proceso de degradación de tejidos larvales durante la metamorfosis en la Mosca del Mediterráneo, Ceratitis Capitata (Wiedemann)" (2000). Rabossi, Alejandro. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se han estudiado en detalle, por primera vez, los eventos moleculares más importantes responsables de la histolisis de tejidos larvales durante la transición larva-adulto de dípteros. Se han descrípto, por primera vez en los insectos, proteinasas lisosomales específicas de la histolisis y se ha correlacionado su actividad con la de otras enzimas degradativas y con las imágenes de cambios anatómicos degenerativos en músculos y cuerpo graso. Los principales resultados obtenidos son: l. Se aisló una nueva aspartil-proteínasa de 43.000 daltons, específica de la histolisis, denominada EMAP (Early metamorphosis aspartyl proteinase), con características bioquímicas similares al grupo de las Catepsinas tipo D y cuya secuencia amino terminal no presentó homología con este grupo. Usando la secuencia correspondiente al N- terminal se obtuvo un transcripto que fue clonado y secuenciado. La secuencia obtenida mostró homología del 59% con catepsina D de porcino, 51% con una proteinasa aspártica de mosquito y 60% con una proteinasa aspártica de arroz. 2. Se aislaron dos nuevas cisteín proteínasas lisosomales denominadas MCP I y MCPII (metamorphosis cystein proteinase), de 32.000 y 67.000 daltons respectivamente. Ambas enzimas fueron caracterizadas bioquímicamente y sus extremos amino terminales secuenciados. MCP I mostró características bioquímicas similares y alta homología N-terminal con las Catepsinas B de mamíferos (55.5%) y con una cisteín proteinasa de la mosca Sarcophaga (44%). MCP II es una endoproteinasa de nuevo tipo, cuyo N-terminal no presentó homología con ninguna cisteín proteinasa conocida en invenebrados, ni tampoco en vertebrados. 3. El perfil de actividad de las nuevas endopeptidasas coincidió con el de fosfatasa ácida, β-glucosidasa y β-galactosidasa lisosomales y correlacionó estrechamente con un marcado descenso en el contenido de proteínas registrado durante las etapas tempranas de la metamorfosis. El incremento en la actividad de enzimas lisosomales coincidió temporalmente (entre 20³º y 48 h desde la inmovilización definitiva de la larva) con la aparición de los primeros signos de muerte celular en los músculos y el cuerpo graso. 4. Es la primera vez que se describe en insectos el progreso temporal de la histolisis del cuerpo graso larval. Se determinó que la degradación de éste es un proceso gradual, que se inicia a las 20³ºh cuando las células que forman una red se separan unas de otras y finaliza alrededor de las 120 h cuando gran parte de las mismas se han fragmentado. Se determinó que los músculos esqueléticos correspondientes a los segmentos anteriores (l a 5) se fragmentan a partir de las 22 h, mientras que los correspondientes a la región abdominal, lo hacen recién a partir de las 72 h. 5. Se encontró una estrecha correlación entre la degradación del cuerpo graso larval y la depleción en el contenido de las principales moléculas de reserva. Cortes histológicos de cuerpo graso teñidos por PAS demostraron la completa desaparición del glucógeno en horarios posteriores a las 20³º h. El glucógeno fue consumido principalmente durante la etapa de salto y dispersión de la larva, mientras que el remanente (14% del contenido original, de acuerdo a dosaje directo) se consumió durante las primeras 20³ºh después de iniciada la metamorfosis. Los lípidos se consumieron principalmente a partir del estadio pupal (40 h), confirmando las imagenes histológicas obtenidas, donde se registró la disminución en el número y tamaño de las vesículas de grasa a partir de este horario Los resultados alcanzados han permitido obtener un panorama integral de la progresión de eventos degradativos durante la transición larva-adulto y mostraron por primera vez, que con muy pequeñas variantes, los eventos de la metamorfosis tienen idéntica duración relativa y representan etapas equivalentes del ciclo de vida en todos los insectos dípteros.

Abstract:
We have studied in detail for the first time the most important molecular events involved in larval tissue degradation during dipteran larva to pupa transition. We have described for the first time in insect, specific lysosomal proteinases of the hystolitic process. We have also correlated these activities with other degradative enzymes and with the anatomic changes in muscles and fat body registered during metamorphosis. The most important results obtained are: l. We isolated a novel aspartic proteinase with a relative molecular weight of 43,000, called Early Metamorphosis Aspartic Proteinase, that is specific of hystolisis. EMAP presented similar biochemical characteristics to the Cathepsin D group, but the amino terminal sequence did not present homology with this group. Using the sequence corresponding to the N-terminal, we obtained a transcript which was cloned and sequenced. The sequence obtained showed a 59% homology to pork Cathepsin D, 51% to a mosquito aspartic proteinase and 60% to a rice aspartic proteinase. 2. We isolated two novel lysosomal cysteine proteinases denominated MCP I and MCP II (Metamorphosis Cysteine Proteinases), with 32,000 and 67,000 daltons respectively. The biochemical characterization of the enzymes and the amino terminal sequences were obtained. MCP I showed similar biochemical characteristics and high homology in the N-terminal sequence with mammalian Cathepsin B group (55.5%) and with the fly Sarcophaga cystein proteinase (44%). MCP II is a novel endopeptidase with an N-terminal sequence which neither presented homology with any cysteine proteinase of invertebrate nor with vertebrate. 3. The novel endopeptidase activity profile during metamorphosis was coincident and correlated well with the acid phosphatase, β-glucosidase and β-galactosidase activities profiles. Endopeptidase profile activity also correlated with the decrease in the amount of proteins registered during pre-pupal and pupal stages. The increment in lysosomal enzymes activities observed (from 20³º h to 48 h), were coincident with the appearance of the first symptoms of cell death in muscles and fat body. 4. As far as we know, this is the first time that larval fat body histolytic process was described in insect. It was determined that this is a gradual process, that begins at 20³º h when larval fat body cells dissociate from the typical mesh structure and ends 120 h after when most of the cells are fragmented. Larval muscles from 1ˢͭ to 5ͭʱ segment were fragmented 22 h from the beginning of metamorphosis. Muscles from the abdominal region fragmented since 72 h. 5. Temporal larval fat body degradation agreed well with the depletion of storage molecules. PAS histologic stain demonstrated the complete disappearance of glycogen in samples later than 20³º h. While the glycogen content decreased during larva III jumping and dispersal stage, the remaining 14 % remanent glycogen disappeared during the first 20³º h since the beginning of metamorphosis. Lipids were degradated since the beginning of the pupal stage (40 h), confirming the histologic images obtained, where a decrease in the number and size of lipids vesicles were registered since 40 h. The results reached in this Thesis have allowed us to obtain a complete view of the degradation events during larva-adult transition and showed for the first time, that with very little variations, the metamorphosis events have an identical relative duration and represent equivalent stages of the life cycle in all the dipteran insects.

"Caracterización del proceso de translocación de poliprenol azúcares a través de membranas biológicas" (2000). Feldman, Mario F.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La biogénesis de estructuras complejas que contienen hidratos de carbono como el lipopolisacárido (LPS), los exopolisacáridos, el peptidoglicano y los ácidos teicoicos en procariotas y las glicoproteínas en eucariotas se realiza generalmente a partir de precursores nucleótido-azúcares que transfieren sus restos de azúcares a poliprenoles como el undecaprenol y el dolicol (Dol). Los nucleótido azúcares se encuentran normalmente disponibles en el citoplasma, mientras que los poliprenoles están asociados con una bicapa lipídica.Una vez ensamblados, los azúcares unidos al poliprenol deben atravesar membranas para su posterior procesamiento (polimerización como en el caso del LPS o transferencia a proteínas como ocurre en la formación de glicoproteínas). Este proceso no ocurre espontaneamente y parece estar mediado por proteinas, aunque sólo para el pasaje a través de Ia membrana interna procariótica de las subunidades de antígeno O (el componente más variable del LPS) se ha identificado una proteína, denominada Wzx con actividad translocasa o “flipasa”. Las diferentes translocasas Wzx poseen una muy baja homología de secuencias tanto a nivel de DNA como de proteínas. Los intentos para sobreexpresar Wzx han sido infructuosos, lo que no ha permitido la realización de experimentos tendientes a caracterizar estructural y mecanísticamente a las translocasas. En este trabajo se investigó si es necesario que las subunidades O se sinteticen completamente para poder ser translocadas. Se obtuvo una mutante en el gen glf, responsable de la síntesis de galactofuranosa, el último de los cuatro azúcares que componen la subunidad O16 en Escherichia coli. Se observó que esta mutante es capaz de translocar una subunidad incompleta conteniendo sólo tres azúcares a través de la membrana. Experimentos utilizando la lectina del germen de trigo (WGA) permitieron establecer que también es posible translocar una subunidad truncada conteniendo sólo uno o dos residuos e incorporar estos azúcares al core del LPS. Experimentos de complementación realizados en una mutante de E. coli O7 en el gen wzx con translocasas de Salmonella enterica y E. coli O16 demostraron que la translocación de subunidades de antígeno O es independiente de la naturaleza química de la porción glicosídica de la subunidad O. Por el contrario las putativas translocasas involucradas en la síntesis de exopolisacáridos no fueron capaces de complementar la mutación en wzx. Los resultados presentados en esta Tesis indican que no se requiere que la subunidad O esté completa para que sea reconocida por la maquinaria de translocación y se produzca su pasaje a través de la membrana, pudiendo translocarse subunidades truncadas o completamente diferentes a las que normalmente se producen en una determinada cepa. Los resultados obtenidos sugieren además un modelo de biosíntesis de antígeno O que involucra el reconocimiento del prenol-oligosacárido por un hipotético complejo compuesto por la putativa translocasa Wzx y otras proteínas que participan en la síntesis de antígeno O.

"Caracterización del receptor de glutamato tipo NMDA en el cangrejo Neohelice granulata y estudio de su rol en procesos de aprendizaje y memoria" (2012). Hepp, Yanil. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis se estudió la localización y dinámica de receptores glutamatérgicos tipo NMDA (NMDARs), y su relación con la memoria, en el cangrejo Neohelice granulata. Se realizó un esquema neuroanatómico de su sistema nervioso central (SNC), y se diseñaron mapas detallados de neuropilos y clusters neuronales del cerebro. Se evaluó la presencia y localización de NMDARs, realizando técnicas inmunohistoquímicas y ensayos de Western blot. Se demostró que están ampliamente distribuidos, compuestos por subunidades tipo NR1 y NR2, y con distribución similar a proteínas de anclaje tipo PSD95. Se desarrolló un sistema estereotáxico, para realizar microinyecciones en áreas específicas del SNC, corroborándose con esta técnica el efecto del ácido iboténico sobre de los NMDARs. Luego se estudió la dinámica de NMDARs (tráfico) asociada a procesos mnésicos, demostrando cambios en la proporción entre receptores vesiculizados e insertos en membrana celular, después de un entrenamiento que genera una memoria de largo término. Al evocar esta memoria los cambios correlacionan con el grado de variación de respuesta de los animales durante el entrenamiento. Estos resultados sugieren la participación de NMDARs en procesos mnésicos en este modelo, permitiendo establecer comparaciones con otras especies, y posibilitando el posterior análisis del tráfico de estos receptores en otras fases de la memoria.

Abstract:
This thesis studied the localization and dynamic of NMDA-like glutamate receptors (NMDARs), and their role in long term memory in the crab Neohelice granulata. A detailed neuroanatomic description of the central nervous system (CNS) was performed, as well as maps of neuronal clusters and neuropils. The presence and localization of these NMDA-like receptors were evaluated in the CNS by inmunohistochemitry and Western blot techniques. We found a NMDARs broad distribution, constituted by NR1- and NR2-like subunits, with a pattern similar to the one found for PSD95 scaffold proteins. A stereotaxtic device was developed in order to make microinjections in specific areas of the CNS, confirming with this technique the ibotenic acid effect on the NMDARs. Afterwards, the receptor’s dynamic (traffic) was studied in relation to mnesic processes. Changes in the proportion between vesiculized and membrane receptors were seen after a training that induces long term memory. After retrieval this change correlates with the degree of variation in the animal response. These results suggest the NMDARs participation in mnesic processes in this model, allow comparisons between species, and encourage future analysis of receptor’s traffic in other memory phases.

"Caracterización del sistema TGF-ß/TßRs en carcinomas de mama y pulmón murinos. Rol en la progresión tumoral" (2004). Daroqui, María Cecilia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo analizamos el rol de TGF-β en la progresión tumoral, empleando dos modelos de adenocarcinoma murino, de mama y de pulmón. Nuestro modelo de tumor de mama está constituido por los tumores parentales M3 y MM3, poco y altamente metastásicos, respectivamente, y por las lineas celulares derivadas LM3 y LMM3, altamente invasivas y metastásicas. Todas las células de nuestro modelo expresan el sistema completo TGF-β y sus receptores específicos TβRs, y éste es funcional. Además, mediante estudios in vitro determinamos que TGF-β activa la vía de transducción de señales Smads y otras vias, como p38Mapk y MEK/ERK, en las células de carcinoma de mama de nuestro modelo. En cuanto a su acción biológica, TGF-β tiene un efecto antiproliferativo sobre los cultivos primarios de M3 y MM3, mientras que las líneas son resistentes a dicho efecto. Por otra parte, TGF-β induce la actividad de MMP-9 en todas las células de nuestro modelo. Determinamos por primera vez que las vías de señalización p38Mapk y MEK/ERK bloquean la inducción de MMP-9 por TGF-β y que los receptores de señalización TβRI y TβRII son esenciales en esta respuesta. Además, estudiamos el rol de TGF-β sobre la expresión y/o actividad de distintos componentes del sistema de activación del plasminógeno, incluyendo activadores como el uPA y el uPA unido a membrana, e inhibidores como PAI-1. Detectamos que TGF-β inhibe el balance neto de este sistema en las células poco metastásicas, mientras que lo estimula en las células de fenotipo más agresivo. Por otro lado, analizamos la función de TGF-β en la reorganización del citoesqueleto de acfina y determinamos que TGF-β no modula las tropomiosinas ni la proteina HSP27, moléculas relacionadas con actina. Sin embargo, demostramos por primera vez que la actividad del complejo Arp2/3, fundamental en la polimerización de actina, aumenta en respuesta a TGF-β,si bien su consecuencia biológica debe aún esclarecerse mediante otros estudios. Además, TGF-β induce una leve remodelación de la actina cortical en nuestro modelo, sin producir cambios fenotípicos como la formación de fibras de stress y la transición epitelio-mesenquimática como ocurre en sistemas epiteliales no-tumorigénicos. Asimismo, determinamos que la via de señaligación MEK/ERK bloquea la formación de fibras de stress en las células tumorales en estudio y que además está involucrada en la inducción de la migración celular por TGF-β, junto con la vía p38Mapk. Por otra parte, TGF-β estimula la capacidad invasiva in vitro de todas las células de nuestro modelo de tumor de mama. Observamos que la presencia de TβRI y TβRII funcionales, así como las vías de señalización p38Mapk y MEK/ERK, son esenciales en este proceso. Estos datos son muy novedosos, ya que no ha sido descripto previamente un mecanismo de acción de TGF-β en la invasión celular. Mediante estudios in vivo determinamos que TGF-β no modula la capacidad angiogénica en nuestro modelo. Por otro lado, empleando células LM3 transfectadas con formas dominantes negativas de los receptores de señalización de TGF-β, encontramos que la tasa de crecimiento tumoral y la capacidad metastásica de las células de adenocarcinoma mamario en estudio dependen de un sistema funcional TGF-β/TβRs. Por otro lado, estudiamos el sistema TGF-β/TβRs en la línea de adenocarcinoma de pulmón LP07, altamente metastásica. Encontramos que estas células han perdido la capacidad de expresar la proteina TGF-β, respecto del tumor P07 que le dio origen. Además, determinamos que las células LP07 expresan los receptores de señalización TβRI y TβRII. Por medio de estudios in vitro detectamos que si bien las células LP07 no producen TGF-β, la via de Smads y otras vías de transducción de señales pueden ser activadas por TGF-β, por lo que son capaces de responder a la citoquina. Así, TGF-β es un potente inhibidor del crecimiento de LP07. Además, TGF-β inhibe marcadamente la actividad de las proteasas uPA y MMP-2 en las células LPO7 y controla su motilidad in vitro. Y también es capaz de inhibir la angiogénesis in vivo de LP07. De este modo, nuestros resultados indican que TGF-β podría funcionar como un supresor tumoral en nuestro modelo de adenocarcinoma de pulmón, y que la pérdida de funcionalidad del sistema TGF-β/TβRs podria contribuir a la progresión tumoral en estas células.

Abstract:
In the present work we have studied the role of TGF-β in tumor progression, by using a mammary and a lung murine adenocarcinoma experimental models. The mammary tumor model is composed by two closer related tumors, the poorly metastatic M3 and the highly metastatic MM3 ones, as well as the derived highly invasive and metastatic cell lines, LM3 and LMM3. We determined that all these cell types express both TGF-β and its receptors (TβRs), so they present the complete TGF-β/TβRs system. By in vitro studies we found that TGF-β induces the activation of different signaling pathways in our model, including Smads, p38Mapk and MEK/ERK. Besides, TGF-β exerts an antiproliferative action on M3 and MM3 primary cultures while the derived cell lines are resistant to this effect. On the other hand, TGF-β estimulates MMP-9 activity in all the cell types of our tumor model. We show here for the first time that p38Mapk y MEK/ERK pathways block MMP-9 by TGF-β, as well as that the TGF-β signaling receptors, TβRI and TβRII, are key components of this response. We also studied the role of TGF-β on the expression and/or activity of distinct components of the plasminogen activation system, including activators like uPA and membrane-bound uPA and inhibitors like PAI-1. We found that TGF-β inhibits the net balance between activators and inhibitors in the poorly metastatic cells, enhancing it in those cells with the more aggressive phenotype. On the other hand, we studied TGF-β action on actin cytoskeleton reorganization and we determined that TGF-β is not able to modulate the actin-related molecules tropomyosins and HSP27. However, we show here for the first time that TGF-β enhances Arp2/3 complex activity, although its biological significance remains to be fully determined. Besides, we found that TGF-β induces only a slight remodelling on the cortical actin in our tumor model, without affecting the cellular phenotype like the formation of stress fibers and the epithelial-to-mesenchymal transition showed by some normal epithelial cells. We also demonstrate that the MEK/ERK pathway blocks stress fiber formation in the tumor cells studied here, and that this pathway is also implicated in TGF-β-mediated cell migration, together with the p38Mapk pathway. Besides, we found that TGF-β induces the in vitro invasive ability of all the cell types studied here, and that this effect requires TβRI and TβRII activity as well as p38Mapk and MEK/ERK pathways. This is the first time that a signaling pathway is implicated in TGF-β-induced cellular invasion. By in vivo studies we showed that TGF-β is not able to modulate the angiogenic ability of the mammary tumor cells studied here. Finally, by using LM3 cells stably transfected with dominant negative forms of TGF-β signaling receptors, we determined that the tumor growth rate as well as the ability to form metastases depend on a functional TGF-β/TβRs system. On the other hand, we studied the role of the TGF-β/TβRs system in the highly metastatic lung tumor LP07 cell line. We found that LP07 cells do express TβRs but they have lost the ability to express TGF-β at the protein level showed by P07 parental cells. Using in vitro studies we detected that despite LP07 cells do not produce TGF-β, Smads and other signaling pathways can be activated by TGF-β, so these cells are able to respond to the cytokine. Besides, TGF-β markedly inhibits the activity of proteases like uPA and MMP-2 in LP07 cells as well as it reduces the in vivo angiogenic ability of these cells. So, our data suggest that TGF-β could function as a tumor suppressor in our lung tumor model, and that a disruption in the TGF-β/TβRs system regulation may thus contribute to tumor progression.

"Caracterización del sistema TGF-ß1 hipofisario: en búsqueda de un blanco terapéutico para prolactinomas resistentes a agonistas dopaminérgicos" (2012). Recouvreux, María Victoria. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los prolactinomas son tumores benignos que en general responden bien al tratamiento con agentes dopaminérgicos. Sin embargo alrededor del 15% de estos tumores son resistentes y aún no existen terapias médicas alternativas. TGF-β1 es un inhibidor de las funciones del lactotropo, y un intermediario de la inhibición que ejerce la dopamina, por lo tanto, resulta un candidato atractivo como blanco terapéutico para prolactinomas resistentes. El objetivo de la presente tesis fue caracterizar el sistema TGF-β1 hipofisario y la regulación de sus componentes, incluyendo los niveles de citoquina total y activa, sus proteínas de latencia (LTBPs) y activadores locales, para evaluar su posible utilidad para el desarrollo de nuevas terapias. Utilizamos dos modelos experimentales de prolactinomas: 1) ratones hembra con mutación nula del receptor dopaminérgico D2 (Drd2-/-); y 2) ratas tratadas crónicamente con estrógenos. Nuestros resultados demuestran que el sistema TGF-β1 se encuentra inhibido en las hipófisis tumorales de ambos modelos. Describimos por primera vez en la literatura una regulación diferencial de los niveles de TGF-β1 activo hipofisario por dopamina y estrógenos que podría explicar en parte las diferencias sexuales en la formación de prolactinomas. Determinamos la expresión de las tres isoformas de LTBPs capaces de unir TGF-β1, y su regulación frente a estímulos con estrógenos y agentes dopaminérgicos. Por último, identificamos a trombospondina 1 (TSP1) y calicreína 1 (KLK1) como posibles activadores de TGF-β1 a nivel local. Asimismo, ensayamos la eficacia de un tratamiento con péptidos análogos de TSP1 (ABT-510 y ABT-898) en el modelo de ratas estrogenizadas. Este tratamiento logró disminuir los niveles de prolactina sérica y el tamaño hipofisario incrementados por los estrógenos. Nuestro estudio contribuye al conocimiento del sistema TGF-β1 hipofisario y su regulación local. Siendo TGF-β1 un inhibidor de la función del lactotropo, proponemos que la restauración de su actividad local podría ser efectiva para frenar el crecimiento de prolactinomas resistentes a los tratamientos clásicos.

Abstract:
Prolactinomas are common benign adenomas that are generally treated with dopaminergic agonists. However, around 15% of these tumors become resistant, and there are still not alternative therapeutical approaches. TGF-β1 is a potent cytokine that inhibits lactotrope function and, that mediates dopamine inhibitory action. Therefore, we postulate TGF-β1 as a candidate for developing new therapies against dopamine - resistant prolactinomas. The aim of this thesis was to characterize the pituitary TGF-β1 system (active and total cytokine levels, latent TGF-β1 binding proteins (LTBPs) and local activators) and its regulation, in order to identify potential therapeutical targets. We used two different experimental models of prolactinoma development: 1) the female dopamine D2 receptor knock-out mice (Drd2-/-) and 2) the estrogen-treated rat. We demonstrated that TGF-β1 system is down-regulated in both prolactinoma models. We described for the first time in the literature a differential regulation of pituitary active TGF-β1 levels by dopamine and estradiol in vivo. These differences may contribute to sexual dimorphism found in prolactinoma development. We found that LTBPs isoforms were differentially expressed in normal vs. tumoral pituitaries in both prolactinoma models, and each isoform was also differentially regulated by dopamine and estradiol. We identified thrombospondin 1 (TSP1) and kallikrein 1 as candidates to mediate pituitary TGF-β1 activation. Finally we explored the efficacy of an in vivo treatment with TSP1 mimetic peptides (ABT-510 and ABT-898) in the rat prolactinoma model. TSP1 analogs treatment caused a significant reduction in prolactin serum levels and pituitary weight induced by estrogen after 2-weeks treatment. Our findings provide novel evidence of TGF-β1 system function and regulation in pituitary tumorogenesis. Since TGF-β1 exerts a negative control on lactotrope cells, we postulate that recovering its local activity could be effective in inhibiting tumor growth of dopamine agonist resistant prolactinomas.

"Caracterización del sistema geotermal de Valle del Cura, San Juan" (2015-04-17). Barcelona, Hernán. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Esta Tesis se enfoca en las manifestaciones geotermales del Valle del Cura, ubicado a los 29,5°S y 69,5°O en la Cordillera Frontal de los Andes y sobre el segmento de subducción subhorizontal pampeano-chileno. Se realizó un estudio de prospección geotérmica que incluyó métodos geofísicos (especialmente magnetotelúrica), análisis de la composición química e isotópica de fluidos (fase liquida y gaseosa), modelado geoquímico de los fluidos termales profundos, mediciones de gases en suelos, dataciones radiocarbono, análisis morfoestructural y geomorfológico, litoestratigráfico mediante testigos de pozos y de isotermas locales. Se pudo caracterizar los reservorios, zona de recarga y surgencia, tipo de fluidos, procesos profundos y controles principales y con los resultados integrados al contexto geológico-estructural se confeccionó un modelo conceptual de un sistema geotermal que incluyo su variabilidad espacial y clasificación. Los fluidos termales en Valle del Cura son de origen meteórico y el principal aporte proviene del deshielo (según δ18O, δD y Tritio). Las zonas de recarga tienen un fuerte control estructural-litoestratigráfico y la infiltración puede ser somera o hasta niveles basales de la cuenca (anomalía conductiva identificada a 5 km de profundidad infiere la presencia de salmueras), activando un sistema de circulación profunda conductivo-dominado. El reservorio está constituido por rocas volcaniclásticas del Grupo Choiyoi, es del tipo líquido-dominado y su temperatura alcanza los 180°C y hacia el sur de Despoblados experimenta un incremento en su profundidad, en la fugacidad de CO2 y una disminución de la permeabilidad. Los modelos magnetotelúricos muestran imágenes de la geometría de las zonas de surgencia: están controladas por estructuras permeables enraizadas en la corteza que actúan como conductos de circulación de fluidos termales profundos hasta niveles superficiales fríos. Durante el ascenso, los fluidos termales interactúan con acuíferos someros saturados en componentes atmosféricas a partir de procesos de mezcla, dilución y precipitación de fases minerales (más intensamente en Gollete y Bañitos). Los fluidos termales que alcanzan la superficie descargan aguas cloruradas sódicas con pH neutro y forman manantiales, suelos calcretizados y terrazas de travertino. Los manantiales están comúnmente asociados a intensa emanación de gases (principalmente CO2; mayor a 96%) y se destaca la ausencia de vapor de agua (por enfriamiento conductivo durante el ascenso) y de especies acidas en general (p.ej. H2S). Se propone la existencia de una anomalía térmica que activa la convección local, posiblemente vinculada a cuerpos subvolcánicos recientes con características similares a los emplazados en Despoblados durante el Cuaternario. La magnitud del flujo de CO2, de He y de actividad de Rn es consistente con sistemas convectivos-volcánicos. Además, el aporte de CO2 magmático al sistema geotermal fue confirmado con las composiciones isotópicas del Carbono y del Helio de las manifestaciones termales de Valle del Cura (δ13C ~-6‰ vs. PDB y R/Ra~1,45). La permeabilidad efectiva y el gradiente térmico local controlan selectivamente el dominio de la convección térmica sobre la conducción térmica de las áreas termales estudiadas. La dinámica del sistema es más intensa en Despoblados (mayor complejidad estructural, relación e interacción fluido-roca, temperatura del reservorio y aguas menos evolucionadas, con menor shift de δ18O y un reservorio más superficial) que en Gollete y Bañitos. El área de Bañitos es considerada una posición distal del sistema convectivo y no se descartan celdas de circulación de fluidos parcialmente compartimentalizadas por los lineamientos N120° del basamento. Las características químicas de los fluidos termales y del reservorio son típicas de un sistema geotermal evolucionado –maduro- y consistentes con un cuerpo magmático desgasado que originó la anomalía térmica. La neotectónica regional moderada asegura un ambiente geológicoestructural y magmático suficientemente activo para imponer una evolución del sistema geotermal mediante pulsos de actividad. Como conclusión, el sistema geotermal de Valle del Cura está caracterizado por a) una leve anomalía térmica local que vigoriza una convección tenue sobreimpuesta al sistema termal conductivo-dominado, b) reservorios de media a alta entalpía, líquido-dominados y por debajo de los 800 m de profundidad y c) una dinámica modulada por la permeabilidad efectiva y por la cercanía a la anomalía térmica, con mayor intensidad en Despoblados y que se atenúa hacia el sur. En general, se comprobó que un sistema de fallas enraizados en niveles corticales medios que favorecen la infiltración de agua en profundidad sumado a pequeñas anomalías térmicas vinculadas a la actividad magmática modulada por la neotectónica pueden generar sistemas hidrotermales profundos y sistemas geotermales de alta entalpía. Por consiguiente, el ejemplo del sistema geotermal de Valle del Cura fuerza a reevaluar el potencial geotérmico de los segmentos de subducción subhorizontal actuales, hasta el momento considerado de baja entalpía-conducción-dominados, y abre nuevas perspectivas en la exploración de estos recursos a lo largo de los Andes en zonas previamente desestimadas.

Abstract:
This thesis focuses on the geothermal manifestations of the Valle del Cura, located at 29.5°S and 69.5°W, on the Cordillera Frontal and on the Pampean-Chilean flat-slab subduction segment. A study of geothermal exploration including geophysical methods (especially magnetotellurics), analysis of the chemical and isotopic composition of fluids (liquid and gaseous phases), geochemical modeling of the deep thermal fluids, measurements of soil flux gases, radiocarbon dating, and morphostructural, geomorphological and lithostratigraphic analysis of core samples and local isotherms was carried out. The reservoirs, refilling and upwelling areas, type of fluids, deep processes and key controls were characterized. The results were constrained by the geological-structural framework, and then a conceptual model of a geothermal system that included its spatial variability and classification was made. It was concluded that the thermal fluids in Valle del Cura are of meteoric origin and that the main contribution comes from thawing (according to δ18O, δD and tritium). The recharging areas have a strong structurallithostratigraphic control and infiltration may be shallow or up to the basal levels of the basin (the conductive anomaly identified at a depth of 5 km allows inferring the presence of brines), activating a conductive-dominated deep circulation system. The reservoir consists of volcaniclastic rocks of the Choiyoi Group, is of the liquid-dominated type and its temperature reaches 180°C. South of Despoblados, it experiences an increase in its depth and in the CO2 fugacity and a decrease in permeability. The magnetotelluric models show images of the geometry of the upwelling zones that indicate that they are controlled by permeable structures rooted in the cortex which act as a circulation conduit of deep thermal fluids to cold surface levels. During the ascent, the thermal fluids interact with shallow aquifers saturated in atmospheric components from mixing, dilution and precipitation processes of mineral phases (more intensely in Gollete and Bañitos). The thermal fluids that reach the surface discharge sodium-chloride waters with neutral pH and form springs, calcretized soils and travertine terraces. The springs are commonly associated with intense emission of gases (mainly CO2; higher than 96%) and characterized by the absence of steam (by conductive cooling during the ascent) and generally acid species (e.g. H2S). There seems to exist a thermal anomaly that slightly activates local convection, possibly linked to recent subvolcanic bodies with characteristics similar to those located in Despoblados during the Quaternary period. The magnitude of the CO2 and He flux and Rn activity is consistent with convective-volcanic systems. In addition, the contribution of magmatic CO2 to the geothermal system was confirmed with the isotopic compositions of carbon and helium thermal manifestations of Valle del Cura (δ13C ~-6‰ vs. PDB and R/Ra ~ 1.45). The effective permeability and the local thermal gradient selectively control the convectivedomain over the conductive-domain of the thermal areas studied. The dynamics of the system is more intense in Despoblados (greater structural complexity, fluid-rock relationship and interaction, temperature of the reservoir and less evolved water, lower δ18O shift and a more surface reservoir) than in Gollete and Bañitos. The area of Bañitos is considered a distal position of the slightly convective system. In addition, cells of fluid circulation partially compartmentalized by the N120° lineaments of the basement cannot be discarded. The chemical characteristics of the thermal fluid and the reservoir are typical of an evolved -i.e. maturegeothermal system and consistent with a degassed magmatic body that originated the thermal anomaly. The moderate regional neotectonics ensures a geological-structural and magmatic environment sufficiently active to impose an evolution of the geothermal system using pulses of activity. In conclusion, the geothermal system of Valle del Cura is characterized by: a) a mild local thermal anomaly that invigorates a convection overimposed to the conductive-dominated circulation system, b) reservoirs of medium to high enthalpy, liquid-dominated and below 800 m depth, and c) dynamics modulated by the effective permeability and proximity to the thermal anomaly, with greater intensity in Despoblados, which decreases to the south. In general, it was shown that a system of failures rooted in crust levels that favor the infiltration of water in depth, together with small thermal anomalies related to the magmatic activity modulated by the neotectonics, can generate deep hydrothermal systems and high-enthalpy geothermal systems. Accordingly, the example of the geothermal system of Valle del Cura forces to re-evaluate the geothermal potential of the current flat-slab subduction segments, so far considered of low enthalpy and conductive-dominated, and opens up new perspectives in the exploration of these resources throughout the Andes in previously ignored areas.

"Caracterización electrofisiológica y farmacológica de los canales de calcio voltaje dependientes de los terminales motores del ratón" (1995). Protti, Darío Alejandro. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Abstract:
Calcium has been identified in a wide variety of biological systems as a second messenger. It has been demonstrated that it has a key role in different processes such as excitation-contraction coupling, neurotransmitter and hormone release, gene activation, some mechanisms associated with learning and memory and many other physiological processes. According to the vesicular hypothesis, Ca²+ entry into the presynaptic nerve terminals is a pre-requisite for transmitter release. It has been shown that Ca²+ fluxes are activated by depolarization and that the amount of transmitter release is dependent on the level of intracellular calcium concentration. This increase in Cap concentration is achieved by the opening of voltage dependent calcium channels (VDCC) after the arrival of the action potential to the nerve terminal. The neuromuscular junction and the squid giant synapse have proved to be excellent preparations to study the sequence of events that take place during synaptic transmission and are a model for understanding the synaptic mechanisms involved in chemical synapses throughout the animal kingdom. Different types of calcium channels have been described, according to their biophysical and pharmacological properties. Llinas y Yarom (l981) demonstrated the coexistence of at least two different types of calcium channels, being one of them of low threshold, LVA low voltage activated- and the other of high threshold HVA - high voltage activated. Later, the presence of these different calcium currents were shown in chicken DRG (dorsal root ganglion) neurones. LVA currents are activated by weak depolarizations from negative potentials and decay rapidly after their activation. HVA currents are activated from more positive holding potentials, and inactivate slowly. The LVA channels are known as T-type calcium channels due to their transient activation. The HVA channels include a great number of subtypes. At least four different types of HVA channels have been distinguished at nerve cells. The L-type calcium channel is sensitive to a family of organic compounds, the dihydropyridines (DHP). There are different DHP, some of them are agonists and others antagonists of the calcium channels. The N-type calcium channels were first described as sensitive to a toxin derived from a marine snail, omega-conotoxin GVIA (ω-CgTx GVIA). There are many other polipeptides obtained from snail and spider venoms which block N-type calcium channels, however, ω-CgTx GVIA is the most wider used. The P-type calcium channel, was initially described in cerebellar Purkinje cells, it was found to be insensitive to DHP and ω-CgTx GVIA, but was potently blocked by a low molecular weight fraction (FTX) and a polypeptide (ω-Aga-IVA), both toxins purified from the venom of the funnel-web spider Agelenopsis aparta. More recently the Q-type calcium channel was described in cerebellar granule cells. This new type of channel is insensitive to DHP and ω-CgTx GVIA, but sensitive to high concentrations of ω-Aga-IVA (hundreds of nanomolar), and also blocked by a polypeptide purified from the snail venom, ω-CgTx M-VIIC. All these different channels, may coexist at a neuronal soma and also at the nerve terminals. However, in some preparations the combined use of all the calcium channel blockers, cannot suppress Ca²+ currents completely, indicating the existence of still unidentified VDCC. Increasing information about VDCC is coming from the field of molecular biology. Molecular cloning of genes which code for the al subunit of VDCC, provided information about the structure of this transmembrane proteins, and the expression of its products in Xenopus oocytes made their biophysical and pharmacological characterization possible. Although it is possible to establish a relationship between the product of the genes and calcium channels characterized ‘in situ', in many cases there is no good correlation between the properties of the expressed calcium channels and those studied in situ. The existence of different VDCC, made it interesting to explore about their specific function and whether a particular type was responsible for synaptic transmission. Electrophysiological recording is the most confident technique to study the channels which take part in synaptic transmission. In 1984, Kerr and Yoshikami showed that frog neuromuscular transmission was abolished by ω-CgTx GVIA, which acted by blocking Ca²+ entry into the presynaptic terminal. In contrast, ω-CgTx GVIA does not produce any effect in mammalian synaptic transmission electrically evoked in normal conditions. In the central nervous system (CNS), depending on the structure, it was shown that different VDCC subtypes are involved. At the neurosecretory terminals of the neurohypophysis it seems that both L- and N- type VDCC mediate neurosecretion (Lemos and Nowicky, 1989). Takahashi and Momiyama (1993) showed that in three different areas of the CNS, P-like and N-type VDCC are involved to varying degrees in synaptic transmission, while L-type seems not to be related with transmitter release. In the synapse between hipocampal CA3 and CAI neurons, transmitter release is mediated by N-type calcium channels and other type of channels, whose pharmacology resembles Q-type calcium channels. Stanley (1991) determined that transmitter release at the calyx synapse of chicken cilliary ganglion is due to Ca²+ flux through N-type calcium channels It is also possible to have an approach about the VDCC involved in transmitter release, by means of colorimetric and biochemical techniques. Yawoo et al. showed that Ca²+ concentration was diminished in the presence of ω-CgTx GVIA, from what derives that N-type calcium channels mediate calcium entry at the chick cilliary ganglion synapse. Many groups showed that K+ evoked neurotransmitter release in CNS slices, is inhibited by coCng GVIA as well as by ω-Aga-IVA, depending on the neurotransmitter and the area studied (Turner et al., 1992; Kimura et al., 1994). At the mammalian neuromuscular junction, under normal conditions, transmitter release is resistant to DHP and to ω-CgTx GVIA, indicating that neither L nor N-type VDCC are mediating transmitter release. However, in cut muscle fibres it was reported that L-type channels antagonists diminish quantal content, when release is previously stimulated by the L-type channel agonist BayK 8644 (Atchinson, 1987). It was also reported that ω-CgTx GVIA prevents the facilitatory effects of noradrenaline on the evoked release of Acetylcholine from mammalian motor nerve terminals (Wessler et al., 1990).

"Caracterización espacial y temporal de la estructura genética del primer insecto blanco del maíz transgénico Bt en Argentina, el barrenador Diatraea saccharalis (Fabricius)" (2011). Parody, Betiana Paula. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Durante la última década, distintos eventos de maíz transgénico resistente a insectos (maíz Bt) han sido cultivados extensamente en la Argentina. La principal plaga blanco de los primeros eventos de maíz Bt en Argentina ha sido el barrenador del tallo, Diatraea saccharalis (F.) (Crambidae). La eficacia de estos eventos puede verse limitada por la capacidad de los insectos blanco de desarrollar resistencia. La evolución de la resistencia de los insectos a los cultivos Bt depende de muchos factores biológicos, ambientales y genéticos, como la estructura genética espacial de las poblaciones de los insectos blanco, y el flujo génico entre las poblaciones. En Argentina, la CONABIA propicia un plan de manejo de la resistencia de insectos al maíz Bt, el cual es cumplimentado por las compañías semilleras por medio de programas de monitoreo. Hasta el momento, en Argentina, no se ha documentado la aparición de resistencia en poblaciones de campo de D. saccharalis. Aún no se ha investigado la genética las poblaciones del barrenador a fin de entender la estructura genética espacial de esta especie. La estructura genética del insecto blanco del cultivo Bt puede ser una información útil a la hora de determinar las unidades de monitoreo. En este contexto, el principal objeto de la investigación aquí presentada fue el estudio de la estructura genética espacial y temporal de las poblaciones de Diatraea saccharalis para aportar conocimiento sobre esta especie en un contexto de ecología molecular. Se colectaron muestras de poblaciones de D. saccharalis de varias localidades de nuestro país, incluyendo regiones con diferente perfil agroproductivo y relieve geográfico, desde el Noroeste argentino hasta el sur de la provincia de Buenos Aires, incluyendo varias localidades de la región maicera central. También se estudió la posibilidad de existencia de razas asociadas a los diferentes cultivos hospedadores en simpatría y la evolución de los parámetros genético-poblacionales durante un continuo de ocho generaciones a lo largo de dos campañas agrícolas en una misma localidad. Debido a la falta de estudios genéticos previos sobre esta especie, se utilizaron marcadores moleculares RAPD, AFLP y secuencias mitocondriales (COI) en un contexto de genética del paisaje y análisis filogeográfico. El estudio filogeográfico se realizó con el objetivo de discernir si la baja diferenciación genética detectada entre las poblaciones en un rango geográfico tan grande se podría deber a causas pasadas o presentes. Finalmente se analizó la variación en la estructura genética de las poblaciones entre el año 2005 y el 2009 en función de los cambios en la diversidad y en la diferenciación de cada localidad en dicho período de tiempo. Los resultados sugieren que el nivel de estructura genética es bajo con los marcadores nucleares utilizados y la mayor parte de la diversidad genética se encuentra al nivel individual dentro de las poblaciones. A nivel nuclear también se detectó un buen ajuste al modelo genético espacial de aislamiento por distancia en el rango geografico estudiado. No se detectó diferenciación genética entre los grupos de insectos que se desarrollaron simpátricamente sobre hospedadores diferentes. En el contexto de la evolución de la resistencia al maíz Bt, la falta de diferenciación entre hospedadores sugeriría que no habría restricciones para el apareamiento aleatorio entre individuos provenientes de diferentes cultivos hospedadores, pudiendo estar funcionando en el campo estos cultivos no Bt como refugios no estructurales. La variación temporal de la estructura genética a nivel generacional durante dos campañas agrícolas mostró un patrón relacionado a la densidad poblacional, con valores máximos en la última generación estival y mínimos luego del invierno. El análisis filogeográfico detectó una posible expansión demográfica reciente y que las poblaciones estudiadas compartirían el mismo tiempo al ancestro común más reciente, y con una alta migración desde la región núcleo hacia el sur de Buenos Aires. Por lo tanto, los altos niveles de conectividad entre las poblaciones podrían ser el resultado mayoritariamente de la expansión poblacional reciente, y en menor escala del flujo génico actual dado por la vagilidad de la especie y por posibles migraciones pasivas asociadas a la actividad agrícola. En el período comprendido entre el año 2005 y 2009, no se detectaron cambios biológicamente significativos en la estructura genética de la especie a nivel país, acorde a la evolución de los parámetros de diversidad y diferenciación genética.

Abstract:
Different events of transgenic insect resistant maize (Bt corn) have been grown extensively across Argentina during the last decade. The main lepidopteran target pest of Bt corn in this country is the sugarcane borer, Diatraea saccharalis (F.) (Crambidae). The efficacy of these transgenic events might be limited by the capacity of the target insect to develop resistance. The evolution of insect resistance to Bt crops depends on many different biological, environmental and genetic factors, such as insect population structure and gene flow among populations. In Argentina, an insect resistance management plan for Bt corn is encouraged by the Regulatory Agency (CONABIA) and complied with by the seed companies by means of a monitoring program. So far, no resistance has been documented for field populations of D. saccharalis in this country. Additionally, there has been no research into the genetics of the local sugarcane borer populations intended to understand the genetic structure of this species. The genetic structure of a Bt-crop target insect might be useful information for the determination of the monitoring units. In this context, the main object of the research presented here was to study the spatial and temporal population genetic structure of this target insect in a molecular ecology framework. Samples of Diatraea saccharalis populations were collected from several locations along the country, including regions with different agricultural practices and geography, from the northwestern province of Salta to the southern region of the province of Buenos Aires, covering several corn producing locations. Additional studies were carried out in one location to determine whether this species presents host-races and to evaluate the variation of genetic parameters along eight consecutive generations during two cropping seasons. Due to the lack of previous genetic studies on this species, RAPD, AFLP and mitochondrial sequences (COI) were used as molecular markers for landscape genetics and phylogeographic analysis. The phylogeographic analysis was performed to understand the possible historical demographical reasons that might have still an impact on the genetic structure of this species. The last study was carried out to characterize the temporal variation in the genetic structure of D. saccharalis from 2005 to 2009 in all the locations included in the spatial analysis. The results obtained using molecular markers (AFLP) suggest that the level of genetic structure is low and that most of the genetic diversity is at the individual level within populations. These markers also determined a good fit to the model of isolation by distance at the spatial range studied. No genetic differentiation was detected among groups of insects which develop on different hosts. In the context of resistance evolution, the lack of host race differentiation would suggest no mating restriction for insects developing on different crops in neighboring fields, which are considered as functional non-structural refuges. The temporal variation of genetic structure for the continuous of eight generations within one location demonstrated that the diversity levels are associated with population density levels, highest in the last summer generation and lowest after the wintering period. The phylogeogrphic analysis detected a recent demographic and range expansion event, probably a common genetic pool as ancestry for all the populations included in this study and high levels of gene flow from the corn-belt region to the southern region. Therefore, the high level of connectivity among the populations might be mainly the result of the recent expansion, and as a second and minor reason for high correlation among populations, current gene flow restricted by the vagility of this species could be also be probable at the short distance together with some low level of long distance dispersal associated with agricultural practices. No biologically significant changes were detected for the temporal genetic study from 2005 to 2009 based on diversity and differentiation parameters.

"Caracterización espectroscópica y fotofísica del estado triplete de colorantes en sistemas heterogéneos" (2010). Tomasini, Eugenia Paula. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El estudio de los procesos fotofísicos primarios de colorantes en medios heterogéneos tiene gran importancia en el desarrollo de materiales fotoactivos de utilidad en diversos campos de aplicación. El creciente interés en este tipo de sistemas, en particular aquellos compuestos por colorantes incorporados a soportes sólidos, fue acompañado por el desarrollo de métodos y técnicas específicos para su caracterización. Sin embargo, debido a dificultades experimentales, no existen métodos confiables para la determinación de rendimientos cuánticos de formación de estados triplete en medios sólidos dispersores de luz. En este trabajo de Tesis se presenta un método para la determinación de dichos rendimientos basado en la aplicación de la espectroscopia optoacústica inducida por láser (LIOAS). El estudio incluye la aplicación de técnicas resueltas en el tiempo que complementan la caracterización de los estados excitados. De esta manera, la Tesis avanza sobre el conocimiento de los procesos fotofísicos primarios de colorantes adsorbidos sobre celulosa, en particular las propiedades del estado triplete de colorantes xanténicos como la Eritrosina B y el Rosa de Bengala. Los resultados obtenidos se interpretan en términos de las interacciones entre las moléculas de colorante y entre éstas y la matriz sólida.

Abstract:
The study of primary photophysical processes of dyes in heterogeneous media is relevant to the development of photoactive materials useful in various application fields. The growing interest in such systems, particularly those composed of dyes incorporated into a solid matrix, was accompanied by the development of specific methods and techniques for their characterization. However, due to experimental difficulties, there are no reliable methods for the determination of triplet quantum yields in solid light-scattering media. In this Thesis a method for the determination of such yields based on the application of laser induced optoacoustic spectroscopy (LIOAS) is presented. The study includes the application of time-resolved techniques as a complement for the characterization of the excited states. Thus, this Thesis advances in the knowledge of primary photophysical processes for dyes adsorbed on cellulose, in particular those related to the triplet state of xanthene dyes such as Erythrosin B and Rose Bengal. Results are interpreted in terms of the interaction among dye molecules and among them and the solid matrix.

"Caracterización estructural y propiedades funcionales de las harinas de los frutos de Prosopis alba Griseb., P. chilensis (Molina) Stuntz emend. Burkart y P. flexuosa DC. Desarrollo de un proceso de secado, molienda y mezcla para optimizar la calidad del producto" (2012-12-17). Mom, María Pía. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Prosopis alba, P. chilensis y P. flexuosa "algarrobos", características en las regiones fitogeográficas del Chaco y Monte, Argentina, constituyen un recurso natural con innumerables aplicaciones. Si bien el progresivo avance de la desertización ha puesto en riesgo a estas comunidades vegetales, es indudable que en la actualidad constituyen una fuente inagotable de productos y subproductos. A partir del estudio de los caracteres estructurales (micro, ultra, nano), propiedades funcionales y color de los frutos y harinas de P. alba, P. chilensis y P flexuosa, se desarrolló un proceso de secado, molienda y mezcla. Se analizaron y discutieron las observaciones con microscopio óptico (MO), microscopio electrónico de barrido ambiental (MEBA) y con campo de emisión (FESEM), microscopio electrónico de transmisión (MET) y microscopio de fuerza atómica (MFA). Se caracterizaron las harinas de las distintas especies en función de la granulometría, la capacidad de absorción de agua, la capacidad de absorción de aceite, la solubilidad y el color. La investigación permitió optimizar el proceso, elaborar harina enriquecida con proteínas a partir de P. chilensis y proponer una mezcla de fácil formulación. El estudio constituye un aval para lograr la incorporación de P. chilensis al Código Alimentario Argentino.

Abstract:
Prosopis alba, P. chilensis and P. flexuosa "algarrobos", are natives resources from the phytogeographic regions of Chaco and Monte, Argentina, with multiple applications. Although the progressive advance of desertification has affected these species, they still constitute a valious source to obtain products and subproducts. A drying and grinding process to optimize the production and quality of the flours was assayed. Light microscope (LM), environmental scanning electron microscope (ESEM) and field emission (FESEM), transmission electron microscope (TEM) and atomic force microscope (AFM) observations were analyzed and discussed. Structural features (micro, ultra, nano), functional properties (granulometry, water and oil absorption capacity, solubility) and color of raw fruits and flours were documented. The present research allowed to obtain protein-enriched flour from P. chilensis and also contributed to propose a simple formulation mixture with high nutritional value. The study would constitute a certification to attain the P. chilensis inclusion into the Código Alimentario Argentino.

"Caracterización farmacológica y biofísica de los receptores ionotrópicos de Gaba" (2003). Goutman, Juan D.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El ácido γ-aminobutírico (GABA) es el principal neurotransmisor inhibitorio del sistema nervioso central de vertebrados y hasta el momento se han caracterizado tres tipos de receptores de GABA, según sus propiedades farmacológicas: GABAa, GABAb y GABAc. Los receptores de GABAa (GABAaR) y GABAc (GABAcR) comparten además su mecanismo de señalización, ambos son receptores ionotrópicos con una alta permeabilidad a iones cloruro. Los receptores de GABAb son metabotrópicos, generalmente acopladas a proteínas G. En esta tesis se presenta una extensa caracterización de las propiedades farmacológicas y biofísicas de los receptores de GABA, con especial énfasis en los GABAcR Este subtipo de receptores de GABA fue el último en ser identificado y se caracteriza por su insensibilidad al antagonista clásico GABAérgico, bicuculina y por el lento curso temporal de sus respuestas. Este trabajo se realizó expresando los receptores en ovocitos de Xenopus laevis y estudiando sus propiedades con dos diferentes técnicas electrofisiológicas: fijación de voltaje con dos electrodos (FVDE) y patchclamp en la configuración outside out. Los receptores ionotrópicos de GABA (GABA-R) son modulables por una diversidad de compuestos de diferente naturaleza química. Entre ellos se encuentran los flavonoides (F), una familia de compuestos aislados de plantas vasculares que presentan una gran variedad de acciones neurofarmacológicas. Algunos son ansiolíticos y sedantes, y se ha propuesto que su mecanismo de acción sería a través de los GABAaR. En este trabajo, evaluamos la acción de un grupo de F sobre las respuestas mediadas por GABA-R. Los F utilizados en este trabajo fueron: quercetina, crísina, apígenina, morina, flavona y α-naftoflavona. Contra lo esperado, los F evaludados tuvieron un efecto inhibitorio general tanto sobre los GABAaR como los GABAcR. Quercetina fue el más potente para ambos receptores con un IC50 de aproximadamente 4 µM en cada caso. También se evaluó la acción de quercetina en otros receptores ionotrópicos de neurotransmisores, como los colinérgicos nicotínicos, serotonina y kainato. En todos ellos se observaron efectos inhibitorios con distinta potencia. Tanto los GABAaR como los GABAcR son sensibles al alcaloide picrotoxina. Se han propuesto distintos mecanismos para su acción sobre los GABAaR incluyendo efectos no-competitivos y mixtos. Sin embargo, aún no se ha esclarecido suficientemente el mecanismo de acción en los GABAcR. Picrotoxina produjo una inhibición reversible con un IC50 = 0.6 ǂ 0.1 µM. La curva dosis-respuesta (D-R) para GABA en presencia del antagonista (1, 10 y 100 µM) sufrió un desplazamiento hacia la derecha y para las concentraciones más altas de esta toxina, una reducción en la respuesta máxima. Este resultado sugeriría un mecanismo de acción de tipo no-competitivo. No obstante, al igual que los antagonistas competitivos, las respuestas a concentraciones bajas de GABA fueron más sensibles a picrotoxina que las más altas. La inhibición por esta toxina fue también dependiente del uso, es decir, requirió la activación de los receptores para ejercer su efecto. La recuperación de la inhibición también fue facilitada por la acción de GABA. Además, picrotoxina produjo un aumento en la velocidad de de-activación de las respuestas al GABA, sugiriendo un mecanismo de tipo no-competitivo. En resumen, la inhibición de los GABAcR por picrotoxina tendría un mecanismo de acción no-competitivo o mixto, y dependiente del uso aunque menos que los GABAaR. Los GABAcR son sensibles a la modulación por iones trivalentes de la serie de los lantánidos (L) que producen un incremento en las respuestas a GABA. En un estudio previo se caracterizó la acción de uno de los elementos pertenecientes a los L, lantano (La³+); mientras que en este trabajo se analizaron los efectos de otro, lutecio (Lu³+). Ya en experimentos preliminares, se observó que la acción de Lu³+ sería más compleja ya que produjo un aumento rápido de la corriente, seguido de una atenuación durante la aplicación del ión sobre la respuesta a GABA. Lu³+ provocó una aumento en la afinidad aparente por GABA (0.4 ǂ 0.1 µM) y un incremento en la respuesta máxima a concentraciones saturantes de agonista. También se evaluó cómo afectaba la presencia de Lu³+ a la acción de ciertos antagonistas, como parámetro de la función de los GABAcR. El antagonista competitivo, TPMPA, inhibió las respuestas evocadas por GABA en presencia de Lu³+ con una potencia semejante a lo observado en ausencia de este ión. No obstante, no tuvo un efecto protector de la atenuación de la respuesta mediada por Lu³+, sugiriendo que este proceso sería operado por este ión independientemente de GABA. Las respuestas evocadas en presencia de Lu³+ también fueron sensibles a picrotoxina pero con caracteristicas diferentes a lo ya descripto. Se elaboró, además, un modelo de gating de los GABAcR y de la acción de Lu³+, donde se propone la existencia de dos estados abiertos, revelado por la presencia de este ión, que además mediaría un proceso de desensibilización independiente de GABA. Los estudios existentes sobre la cinética de los GABAcR fueron hechos con técnicas de pobre resolución temporal, y por esto decidimos realizar esta serie de experimentos en parches de membrana con la técnica de patch-clamp en la configuración outside out. Las respuestas al GABA obtenidas con esta metodología presentaron un curso temporal característico de los GABAcR: activación y de-activación lentas, de varios segundos de duración, con escasa desensibilización. La afinidad aparente por GABA calculada fue 4.0 ǂ 0.8 µM con un n de Hill = l.7 ǂ 0.5. La relación corriente-voltaje fue lineal, y el canal mostró una permeabilidad alta a cloruro. Se evaluó la sensiblidad de los GABAcR en parches de membrana a una serie de agonistas (TACA, β-alanina, glicina), antagonistas (TPMPA, picrotoxina, quercetina, zinc) y moduladores (La³+ y Lu³+) conocidos. Todos estos produjeron efectos similares al descripto previamente. Un estudio más profundo de la cinética de de-activación de las respuestas mostró que a concentraciones altas de agonista, la relajación era mejor descripta por ecuación de decaimiento exponencial de segundo orden; mientras a dosis cercanas al EC50,de primer orden. Esto sugeriría un modelo de gating con dos estados abiertos con distinta cantidad de moléculas de agonista unido, que fue evaluado realizando simulaciones numéricas de la actividad del receptor.

Abstract:
γ-arninobutyric acid (GABA) is the main inhibitory neurotransmitter in vertebrate central nervous system. Three GABA receptors subtypes have been described according to their pharmacological properties: GABAa, GABAb, and GABAc. GABAa (GABAaR) and GABAc (GABAcR) receptors also share their signaling mechanism, they are both ionotropic receptors with high chloride permeability. GABAb receptors are metabotropic and commonly coupled to G protein. In this thesis, we show an extent pharmacological and biophysical description of GABA receptors with special interest in GABAcR. This is the more recently identified GABA receptor and characterizes by its resistance to the classic GABAergic antagonist, bicuculine, and its slow time-course responses. Receptors were studied in this work by means of the expression in Xenopus laevis oocytes and two different electrophysiological techniques: two electrode voltage clamp (TEVC) and patch-clamp in outside out configuration. Ionotropic GABA receptors (GABA-R) can be modulated by a variety of compounds with different chemical structure. Flavonoids (F) are a group of compounds isolated from vascular plant that show distinct neuropharmacological effects. Some of them are anxiolytic and sedative, and a mechanism mediated by GABA receptors has been suggested. In this study, we have evaluated the effects of a group of F on GABA receptors function. The F tested were: quercetin, chrisin, apigenin, morin, flavone and α-naphtoflavone. Unexpectedly, these F showed an overall inhibitory effects on GABAaR and GABAcR. Quercetin was the most potent antagonist on both types of receptors with an IC50 value of approximately 4 µM. The actions of quercetin on other ionotropic neurotransmitter receptors, like cholinergic nicotinic, serotonin and kainate, were also tested. Different degrees of inhibition were observed in all of them. Both GABAaR and GABAcR can be blocked by the alkaloid picrotoxin. Different mechanisms of action have been proposed for the inhibition of this antagonist on GABAaR, including non-competitive and mix effects. However, the exact mechanism of action for GABAcR has not been clarified yet. Picrotoxin produced a reversible inhibition on GABAcR with an IC50 = 0.6 ǂ 0.1 µM. Dose-responses (D-R) curves in the presence of this antagonist (1, 10 and 100 µM) were right-shifted and an insumountable blockage was seen for high concentrations of toxin. All these suggest a non-competitive mechanism of action. However, as described for competitive antagonists, inhibition was more profound with low agonist concentrations than higher. Picrotoxin action was also use-dependent, i.e., receptor activation was required to exert its effect. Antagonist wash out was also facilitated by GABA action. In addition, picrotoxin produced an increase in de-activation rate of GABA-evoked responses, suggesting a non competitive effect. In summary, GABAcR inhibition by picrotoxin would present a non-competitive or mix mechanism of action, and also use-dependent effect, but in a lower degree than GABAaR. GABAcR can be modulated by trivalent cations from lanthanides (L) series that produce an increase in GABA evoked responses. The actions of lanthanum (La³+), one of the L, on GABAcR have been characterized in a previous study, and here we have analyzed the effects of other L, lutetium (Lu³+). In preliminary experiments, Lu³+ showed more complex actions, with a fast increase in GABA-evoked current, followed by attenuation during ion application. An increase in apparent affinity for GABA (0.4 ǂ 0.1 µM) and also in maximal efficacy was observed in the presence of Lu³+. The inhibition of some antagonists was evaluated in the presence of Lu³+ as a parameter for GABAcR function. TPMPA, a competitive antagonist, inhibited the action of GABA and Lu³+ with a potency similar to that was observed in the absence of this ion. However, Lu³+ mediated current attenuation was not protected by this antagonist, suggesting that this process would be operated by this modulator independently of GABA. GABA-evoked responses in the presence of Lu³+ could also be inhibited by picrotoxin but with a different profile than was previously described. In addition, a model for GABAcR gating and Lu³+ actions has been elaborated, in which two open states were proposed based on this ion effect, that would also mediate a desensitization process independent of GABA. Currently available studies on GABAcR kinetics have been carried out with techniques devoid of a proper time resolution. This is why we decided to perform experiments on membrane patches with the patch-clamp technique in outside out configuration. GABA-evoked responses showed typical GABAcR characteristics when obtained with this methodology: slow activation and de-activation kinetics, and poor desensitization even at high agonist concentrations. An apparent affinity for GABA of 4.0 ǂ 0.8 µM was calculated with a Hill coefficient = 1.7 ǂ 0.5. Current-voltage relation was lineal, and the channel was highly permeable to chloride. GABAcR present in membranes patches were tested with distinct already-known agonists (TACA, β-alanine, glycine), antagonists (TPMPA, picrotoxin, quercetin, zinc) and modulators (La³+ and Lu³+). They all showed similar effects to what was already described. An extensive study on de-activation kinetics of GABA-evoked currents showed that relaxation at high concentrations was better fit by a second order exponential decay equation, while at EC50 doses a first order was used. This would suggest a gating model with two open states with distinct number of agonist bound molecules, that was evaluated by numerical simulations of receptors function.

"Caracterización farmacológica y estudio de la relación estructura - Función del receptor nicotínico alfa 9" (2001). Verbitsky, Miguel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo se presenta una extensa caracterización del receptor colinérgico nicotínico α9, utilizando el sistema de expresión heteróloga de ovocitos de Xenopus laevis. Durante la mayor parte del desarrollo del mismo se tuvo como hipótesis de trabajo que α9 sería la única subunidad integrante del receptor colinérgico nativo de las células ciliadas externas de la cóclea y de las células tipo II del aparato vestibular. Este receptor es responsable de la inhibición de la actividad de dichas células, mediada por la inervación colinérgica eferente coclear y vestibular. En 2001 se identificó y clonó una nueva subunidad de receptores nicotínicos, α1O. Esto condujo a modificar la hipótesis de trabajo, para incluir la posibilidad de un receptor heteromérico α9αl0 en las células ciliadas, pero sin excluir la posible existencia del receptor homomérico α9 en otros tipos celulares. La caracterización del receptor homomérico recombinante α9 incluyó el estudio de las propiedades farmacológicas del mismo. En particular, se demostró que a pesar que α9 es un miembro de la familia de genes de subunidades de receptores nicotínicos, el receptor no puede ser clasificado farmacologicamente como nicotínico o muscarínico y presenta un perfil farmacológico mixto, en coincidencia con lo reportado para el receptor nativo de las células ciliadas. Se mostró que tanto agonistas colinérgicos no específicos como la acetilcolina y el carbacol, agonistas nicotínicos como el metilcarbacol, la suberildicolina y el DMPP y agonistas muscarínicos como la oxotremorina - M, el metilfurtretonio y el McN-A-343 son capaces de activar al receptor α9. También la colina, un producto de degradación y precursor en la síntesis de la acetilcolina, activó al receptor α9. Notablemente, agonistas nicotínicos clásicos como la epibatidina, la nicotina y la citisina bloquearon al receptor α9 (IC50 : 1.6±0.l, 31.5±l.0 y 43.1±3.5 µM, respectivamente). Se estudió la sensibilidad de α9 a diversos antagonistas nicotínicos. En particular la metillicaconitina, un antagonista selectivo de receptores nicotínicos neuronales sensibles a la α-bungarotoxina, inhibió las respuestas de α9 a la acetilcolina en forma competitiva (IC50 : l.l±0.2 nM), siendo este el antagonista más potente de α9 hasta ahora reportado. Se demostró también que el receptor α9 es bloqueado tanto por agonistas como por antagonistas muscarínicos con el siguiente orden de potencia: atropina (IC50: l.0±0.1µM, ) ~ galamina (IC50: 1.5±0.2 µM) > pilocarpina (IC50: 76±9 µM) ~ muscarina (IC50: 84±6 µM) ~ betanecol (IC50: 105±14 µM), un rango de concentraciones comparable con las requeridas para el bloqueo producido por compuestos nicotínicos. Por otra parte, se demostró la inhibición de la respuesta a acetilcolina de los receptores α9 y α9α10 por morfina y péptidos opioides. Estos péptidos estarían presentes en la inervación eferente a las células ciliadas del aparato vestibular y modularían su actividad a través de su acción sobre α9αl0. Se demostró también que el receptor homomérico α9 es bloqueado por Ca++ extracelular (IC50: 100±10 µM a -70 mV), en forma dependiente del potencial de membrana. Este resultado es relevante para la fisiología de las células ciliadas. Mediante la construcción de una subunidad quimérica entre α9 y el receptor de serotonina de tipo 3A, se aportó evidencia de que el dominio aminoterminal de α9 es el determinante estructural de la interacción de α9 con agonistas y antagonistas. También se construyó una subunidad quimérica mediante el empalme de porciones de las subunidades α7 y α9. Los resultados obtenidos con las dos quimeras mencionadas, indican que los determinantes estructurales de la particular relación corriente - potencial de α9 (relacionada con la presencia de Ca++ extracelular), estarían confinados a la región que se extiende desde el comienzo del segundo segmento hidrófobo, supuestamente transmembranal, hasta el extremo carboxiterminal. Se identificó un residuo en el segmento hidrófobo M2 (Q261) involucrado en la rectificación de la corriente y en el bloqueo por el Ca++. En suma, el presente trabajo demuestra que el receptor α9 presenta una farmacología mixta nicotínica - muscarínica coincidente con la del receptor colinérgico de las células ciliadas. Esta coincidencia incluye también la sensibilidad de los receptores que contienen la subunidad α9 a péptidos opioides y a cationes divalentes. Por otro lado aporta evidencia de la importancia clave del dominio aminoterminal en determinar características farmacológicas de α9 y del segundo segmento hidrófobo en las propiedades del canal de los receptores α9 y α9α10.

Abstract:
This work provides an extensive characterisation of the α9 nicotinic acetylcholine receptor, making use of the Xenopus laevis oocytes heterologous expression system. As a working hypothesis during most of the process of this work, the α9 protein was thought to be the only subunit present at the native acetylcholine receptors of cochlear outer hair cells and type II vestibular hair cells. These receptors mediate inhibition of the activity of these cells by cholinergic cochlear and vestibular efferent innervation. In 200l α10, a new nicotinic subunit, was identified and cloned. This led to the modification of the previous hypothesis, in order to include the possibility of an heteromeric α9α10 receptor present in hair cells, not excluding the occurrence of homomeric α9 receptors in other cell types. The characterisation of the homomeric recombinant α9 receptor included the study of its pharmacological properties. It is demonstrated that although α9 is a member of the nicotinic receptor subunit gene family, the receptor cannot be pharmacologically classified either as nicotinic or muscarinic, since it displays a mixed pharmacological profile, in coincidence with what has been reported for the hair cells native receptor. It is shown that the α9 receptor is activated by the non-specific cholinergic agonists acetylcholine, and carbachol, as well as by the nicotinic agonists methylcarbachol, suberyldicholine and DMPP and the muscarinic agonists oxotremorine-M, methylfurthretonium and McN-A-343. Moreover choline, both a degradation product and a precursor of the synthesis of acetylcholine activates α9. Remarkably nicotinic agonists such as epibatidine, nicotine and cytisine blocked the α9 receptor (IC50 : 1.6±0.l, 31.5±l.0 y 43.l±3.5 μM, respectively). The sensitivity of α9 to various nicotinic antagonists is reported. Methyllycaconitine, a specific antagonist for α-bungarotoxin-sensitive neuronal nicotinic receptors, inhibited α9 acetylcholine-evoked responses in a competitive manner (IC50: l.1±0.2 μM), thus being the most potent α9 antagonist identified so far. It is also demonstrated that the α9 receptor is blocked by both muscarinic agonists and antagonists with the following rank order of potencies: atropine (IC50: l.0±0.1 μM) ~ gallamine (IC50: 1.5±0.2 µM) > pilocarpine (IC50: 76±9 µM) ~ muscarine (IC50: 84±6 µM) ~ betanechol (IC50: 105±14 µM), a concentration range which is similar to that required for the block by nicotinic compounds. It is also demonstrated that morphine and opioid peptides inhibit acetylcholine-evoked responses in α9 and α9αl0 receptors. These peptides are present at the efferent innervation to vestibular hair cells and would modulate their activity through their action on α9αl0. It is also demonstrated that the α9 homomeric receptor is blocked by extracellular Ca++ (IC50: 100±10 µM a -70 mV) in a voltage-dependent manner, a result relevant to hair cell physiology. By means of the construction of a chimeric subunit between α9 and the type 3 serotonin receptor, evidence is provided that the α9 aminoterminal domain is the structural determinant of the α9 interaction with agonists and antagonists. A chimeric subunit was also constructed by splicing portions of the α7 and α9 subunits. Results obtained with the aforementioned chimeras, indicate that the structural determinants underlying the peculiar α9 current-voltage relationship, are confined within the region that extends from the beginning of the putative transmembrane second hydrophobic segment, to the carboxiterminus. A residue (Q26l) within the the hydrophobic region M2 was identified as being involved in the rectification properties and in the block by Ca++. In summary, the present work demonstrates that the α9 receptor displays a mixed nicotinic-muscarinic pharmacology that matches that of the cholinergic receptor of cochlear and vestibular hair cells. The similarities between the native and the recombinant receptors extends to the sensitivity of the α9-containing receptors to opioid peptides and divalent cations. Evidence indicating the key importance of the aminoterminal domain in determining the α9 receptor pharmacological characteristics and of the second hydrophobic segment in the channel properties of the α9 and α9α10 receptors are also presented.

"Caracterización farmacológica y modulación de los canales de calcio voltaje-dependientes de terminales sinápticos" (1996). Alvarez Maubecin, Verónica. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El Ca²+ juega un papel preponderante en la regulación de numerosos procesos celulares tales como el acoplamiento excitatorio-contráctil, la secreción hormonal, la expresión de genes y la proliferación celular. Además, en la neuronas, el Ca²+ que entra a través de los canales de Ca²+ voltaje-dependientes (CCVD) participa en la transmisión sináptica como una señal intracelular que dispara el proceso de liberación de neurotransmisor en respuesta a la despolarización de la membrana. Así, entre todos los procesos celulares en los que participa el Ca²+ en el sistema nervioso, el papel que cumple en la exocitosis es, sin lugar a dudas, uno de los más prominentes. Los canales de Ca²+ voltaje-dependientes (CCVD) conforman una de las familias de canales iónicos más heterogéneas. Muy probablemente, esta característica refleja la gran diversidad de procesos celulares en los que participan. De acuerdo a sus propiedades de activación, los CCVD han sido divididos en dos clases: los canales que se activan por pequeñas despolarizaciones (low voltage activated, LVA) y los canales que requieren grandes despolarizaciones para su activación (high voltage activated, HVA). Entre los HVA, han sido descriptos al menos tres tipos de canales de Ca²+: los CCVD de tipo L, los de tipo N y los canales de tipo P/Q, distinguidos por su sensibilidad a bloqueantes. Los CCVD de tipo L son sensibles a las dihidropiridinas, compuestos que pueden actuar como antagonistas o agonistas; los de tipo N son canales bloqueados por la toxina w-CgTx GVIA, y los de tipo P/Q son inhibidos por las toxinas w-AgaIVA y FTX. Uno de los objetivos de este trabajo es la caracterización farmacológica de los CCVD en los terminales sinápticos del cerebro de dos especies de vertebrados, el pollo y la rata. En el primer capítulo se determina la sensibilidad a los distintos bloqueantes que presenta el influjo de Ca²+ voltaje-dependiente en sinaptosomas de cerebro anterior de pollo y corteza frontal de rata. En los terminales sinápticos de corteza frontal de rata, los CCVD que median la entrada de Ca²+ inducida por despolarización (c= 40 mM) son de alto umbral de activación y sensibles a w-AgaIVA, FTX y altas concentraciones de w-CgTx MVIID, características de los CCVD de tipo P/Q. Contrariamente, el influjo de Ca²+ voltaje-dependiente en los terminales nerviosos del cerebro anterior del pollo es mediado por CCVD de alto umbral de activación sensibles a w-CgTx GVIA. Sin embargo, este proceso también es bloqueado, aunque parcialmente, por FTX, w-AgaIVA y w-CgTx MVIID. Estos resultados presentan evidencias de la existencia, en los terminales sinápticos del cerebro anterior del pollo, de un canal de Ca²+ con características farmacológicas no descriptas anteriormente. Por otro lado, los CCVD son componentes de membrana altamente regulados y, como consecuencia de la modulación de su actividad, los procesos que dependen de la entrada de Ca²+ a través de los mismos puede ser ajustados de manera muy precisa. Otro objetivo de este trabajo es el estudio de la modulación de la actividad de los CCVD de los terminales sinápticos. En el capítulo 2 se determinan los posibles cambios en las propiedades del influjo de Ca²+ a través de los CCVD en los terminales nerviosos aislados a partir de corteza frontal de rata, producidos como consecuencia del tratamiento de los animales con el ácido 3-mercaptopropiónico (MP), una droga convulsivante que provoca una generalizada hiperactividad neuronal. Los animales fueron sometidos a dos tratamientos distintos con MP: tratamiento agudo (1 dosis MP 150 mg/kg) y tratamiento crónico (1 dosis MP 35 mg/kg cada 24 horas, durante 3 días) y estudiados en los periodos de convulsión o postconvulsión. Las propiedades farmacológicas de los CCVD que participan del influjo de Ca²+ a los terminales sinápticos no son modificadas como consecuencia del tratamiento agudo ni del tratamiento crónico con MP. Más aún, tampoco es afectada significativamente la dependencia de la captación de Ca²+ con la concentración extracelular de KCl en los animales tratados con MP, lo que podría sugerir que las características de activación de los CCVD tampoco son alteradas por el tratamiento. En el estudio desarrollado en el capítulo 3, se determina el efecto modulador del péptido atrial natriurético (ANP) sobre la actividad de los CCVD de los terminales sinápticos de hipotálamo de rata. ANP, además ser liberado por los miocitos atriales en respuesta al estiramiento de la pared del atrio, es sintetizado y liberado en el sistema nervioso central, en particular, en el hipotálamo. En este trabajo se analiza el efecto del ANP sobre la entrada de Ca²+ a los terminales nerviosos aislados de hipotálamo de rata. ANP inhibe potentemente y de manera dependiente de la concentración la entrada de Ca²+ voltaje-dependiente (IC50= 2 nM). Este proceso es también bloqueado por la toxina w-Aga IVA, indicando que los CCVD involucrados en el influjo de Ca²+ a los terminales de hipotálamo podrían pertenecer a los tipo P/Q. Por otro lado, otro péptido de la familia de los factores natriuréticos, el péptido natriurético tipo C, no afecta el influjo de Ca²+ en esta preparación, lo que sugiere la especificidad de la acción de ANP. En este trabajo tesis se identifican las propiedades farmacológicas de los CCVD de terminales sinápticos del SNC del pollo y la rata, y de esta manera, los resultados aportan a la comprensión de los componentes involucrados en la transmisión sináptica en el SNC de vertebrados. Por otro lado, este estudio proveen evidencias del papel modulador del péptido atrial natriurético sobre la actividad de los CCVD de los terminales sinápticos de hipotálamo de rata. Estos resultados podrían facilitar la comprensión de los efectos fisiológicos de ANP sobre el sistema nerviosos central y de los mecanismos involucrados en el control de la volemia y la presión arterial.

"Caracterización fenotípica y molecular de Aspergillus sección Flavi. Estudio de la genética poblacional y capacidad toxigénica de Aspergillus flavus en maní" (2006). Pildain, María Belén. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Aspergillus flavus es uno de los principales productores de aflatoxinas, carcinógeno de grado 1. La Argentina es un país agrícola donde el cultivo de maní (Arachis hypogaea) es uno de los más rentables, pero también uno de los más susceptibles de ser atacados por Aspergillus. El origen del maní cultivado proviene de Argentina y Bolivia, donde se encuentran distribuidas las especies nativas del género y sobre las cuales no existen estudios sobre los hongos productores de micotoxinas asociados. Por primera vez se realizó un relevamiento de especies nativas de Arachis y se aislaron Aspergillus de la sección Flavi, comparando la diversidad fúngica de las especies nativas y cultivadas. Se estudió la estructura poblacional de A. flavus de semillas de maní en base a la técnica de compatibilidad vegetativa, potencial toxigénico y producción de esclerocios de tipo S o L. Se llevó a cabo una revisión de la sección Flavi utilizando características morfológicas, filogenia molecular y perfil de producción de extrolitos. Los resultaron mostraron que existen diferencias en la proporción y especies de la sección Flavi asociados a las especies de Arachis. Mas del 90% de A. flavus produjeron aflatoxinas y cerca del 100%, ácido ciclopiazónico. Las cepas S produjeron aflatoxinas tipo B y G. El porcentaje de las cepas L es mas alto que el de las cepas S. La presencia de un alto numero de VCGs con un solo aislamiento y el bajo número de grupos de compatibilidad vegetativa que incluyeron aislamientos de diferentes zonas agroecológicas demostraron la alta diversidad poblacional de A. flavus en nuestro país. Cepas tipo L y S de A. flavus actúan de diferente manera, presentan diferencias morfológicas, perfil de producción de extrolitos y quedan agrupadas en diferentes clados. Las especies nativas de Arachis podrían actuar como reservorios de Aspergillus sección Flavi. El alto potencial toxigénico de las especies de Aspergillus y la alta diversidad genética de A. flavus son factores importantes cuando se debe elegir y formular medidas de control a aplicar en el campo. La heterogeneidad en las poblaciones derivadas de las semillas de maní sugiere que las poblaciones de A. flavus se encuentran bajo continuos cambios temporales y espaciales. La sección Flavi se caracteriza por la superposición de caracteres entre los miembros del grupo por lo cual el estudio taxonómico requiere de la utilización de diferentes disciplinas. Del análisis filogenético se concluye que la habilidad de producir aflatoxinas fue perdida (o ganada) varias veces en la evolución de los integrantes de la sección. Se describen 2 nuevas especies.

Abstract:
Aspergillus flavus is one of the principal producers of aflatoxins, a class 1 carcinogen. Argentina is an agricultural country where peanut (Arachis hypogaea) is one of the best profitable but also one of the most susceptible to be attacked for Aspergillus. The origin of the cultivated peanut was in Argentina and Bolivia and until now does not exist studies of micotoxin producers fungi associated with the natural native species of Arachis. For the first time Aspergillus section Flavi strains were isolated from native species of Arachis and a comparison of the fungal diversity between native and cultivated peanut was made. The population structure of A. flavus from stored peanut seeds was studied by using vegetative compatibility toxigenic potential and L and S sclerotial production. A taxonomic revision of the section Flavi was made, by using morphologic characteristics, molecular phylogeny and extrolite production. The result shows differences in the proportion of section Flavi species associated with Arachis species. More than 90% of the A. flavus isolates were aflatoxin producers and almost 100% of them produce cyclopiazonic acid. The S strain produces aflatoxins type B and G. The percentage of the L strain is higher than S strain. Genetic diversity of A. flavus in Argentina is elevated and was indicated by the presence of many single-isolate vegetative compatibility groups as well as by the lower number of vegetative compatibility groups that have members of different agroecological zones. S and L strains acts different, they present different morphological characteristics, extrolite production and are in different clades. The native species of Arachis could act as reservoirs of Aspergillus section Flavi. The elevated toxigenic potential of the Aspergillus species strains isolated and the high diversity stabilized for A. flavus are important factors for the application and development of control measures in the field. The heterogeneity in the populations derived from peanut seeds at diverse locations in Argentina suggests that A. flavus populations have undergone spatial and temporal changes. The Section Flavi is characterized by the superposition of characteristics between their members, for this reason the taxonomic study requires the use of of different disciplines. The phylogenetic study shows that the ability of aflatoxin production was lost (or gained) several times during evolution. Two new species were described.

"Caracterización fisiológica y genética de la respuesta a estrés osmótico en Bacillus Subtilis" (1994). Ruzal, Sandra Mónica. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Caracterización funcional de proteínas del tipo acuaporinas en polen maduro de Arabidopsis thaliana" (2009). Soto, Gabriela Cynthia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La reproducción sexual en plantas incluye procesos en donde el movimiento de agua y solutos se encuentra finamente regulado, lo cual sugiere la participación de acuaporinas. La existencia de acuaporinas, facilitando estos flujos, provee una base molecular sólida para la regulación del transporte de agua y solutos a través de las membranas y de esta forma establecen conexiones entre dicho transporte, el desarrollo de las plantas y sus respuestas adaptativas a las condiciones a las que se encuentran expuestas tanto a nivel organismo, como tejido e incluso a nivel intracelular. Este trabajo de tesis se centró principalmente en la identificación y caracterización de las acuaporinas potencialmente involucradas en la reproducción desde los órganos reproductivos masculinos en Arabidopsis thaliana. Primeramente identificamos las tres acuaporinas específicas de granos de polen de Arabidopsis, AtTIP5;1, AtTIP1;3 y AtNIP4;1. En base a experimentos funcionales, utilizando ovocitos de Xenopus laevis como sistema heterólogo, pudimos determinar que AtTIP5;1, AtTIP1;3 y AtNIP4;1 son transportadores de agua. AtTIP5;1 y AtTIP1;3 son también transportadores de urea y solamente AtTIP5;1 se encuentra regulado por pH externo. Estudios de localización subcelular evidenciaron que AtTIP5;1 se expresa en mitocondrias de polen. Por otro lado, AtTIP1;3 se encuentra en estructuras intracelulares no vacuolares del tipo vesículares, pero que no participan de mecanismos de endocitosis ni exocitosis. Finalmente, los experimentos fisiológicos in vitro sugirieron un papel de AtTIP5;1 en germinación del grano de polen actuando como regulador negativo. AtTIP5;1, AtTIP1;3 y AtNIP4;1 se vincularon de forma directa o indirecta con el proceso de elongación del tubo polínico, destacándose los efectos más drásticos para AtTIP1;3. En cuanto a los experimentos fisiológicos in planta, encontramos que solamente AtNIP4;1 tiene afectados los parámetros de fertilidad con una reducción significativa en el número de semillas. En el marco de esta tesis doctoral hemos realizado una revisión de la información disponible de acuaporinas de plantas, evaluando los perfiles de expresión de las mismas en los diversos tejidos. Hemos discutido la nomenclatura utilizada para clasificar esta familia proteica y analizado la posibilidad de establecer relaciones filogenéticas y funcionales entre los distintos subgrupos: PIPs, TIPs, NIPs y SIPs. El conjunto de resultados desarrollados en esta tesis, en concordancia con los trabajos publicados en estos últimos años, nos ha permitido aventurar posibles roles en relación con la actividad de transporte de agua y/o solutos de las acuaporinas de polen; que van desde la migración celular hasta el control del daño y prevención de apoptosis. También nos ha permitido generar un modelo sobre el mecanismo de acción de las acuaporinas en el polen relativo a la actividad como transportadores de urea. Este modelo vincula la actividad de AtTIP5;1 y AtTIP1;3 con el reciclado del nitrógeno descripto en polen.

Abstract:
Sexual reproduction involves processes where water and solute movement is finely regulated, suggesting the involvement of aquaporins. The existence of aquaporins facilitating these flows, provides a solid molecular basis for the regulation of water and solute transport through membranes and thus make connections between the transport, plant development and adaptive responses to conditions to which the plant is exposed at both the organism such as tissue or even intracellular level. This thesis is focused mainly on the identification and characterization of aquaporin potentially involved in reproduction from the male reproductive organs in Arabidopsis thaliana. We first identified the three Arabidopsis pollen grains specific aquaporins, AtTIP5;1 AtTIP1,3 and AtNIP4;1. Based on functional experiments using Xenopus laevis oocytes as a heterologous system, we could determine that AtTIP5;1 AtTIP1;3 and AtNIP4;1 are water carriers. AtTIP5;1 and AtTIP1;3 are also carriers of urea and only AtTIP5;1 is regulated by external pH. Subcellular localization studies showed that AtTIP5;1 is expressed in pollen ́s mitochondria. Furthermore, AtTIP1;3 is located in intracellular structures not vesicular vacuolar-type, but not participating in endocytosis and exocytosis mechanisms. Finally, in vitro physiological experiments suggested a role AtTIP5;1 in pollen grain germination by acting as negative regulator. AtTIP5;1, AtTIP1,3 and AtNIP4;1 is linked directly or indirectly with the process of pollen tube elongation, especially the more drastic effects for AtTIP1;3. For physiological experiments in planta, we found that only AtNIP4;1 has affected fertility parameters with a significant reduction in the number of seeds. As part of this thesis, we have conducted a review of available information of plant aquaporins, evaluating the expression profiles of the same in various tissues. We discussed the nomenclature used to classify this protein family and discussed the possibility of phylogenetic and functional relationships between different subgroups: PIPs, TIPs, NIPs and SIPs. Together, the results obtained in this thesis, along different reports published in recent years has allowed us to venture possible roles in relation to water and urea transport activity of pollen's aquaporins ranging from cell migration, to damage control the and prevent apoptosis. It also allowed us to generate a model on the mechanism of action of aquaporins on the activity of urea transporters in pollen. This model links specially AtTIP5;1 activity, and AtTIP1;3 with nitrogen recycling in pollen.

"Caracterización funcional de virus de la inmunodeficiencia de simios (SIV) quiméricos expresando diferentes dominios de la proteína cápside del virus de la inmunodeficiencia de felinos (FIV)" (2016-12-12). Esteva, María Jimena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La formación de partículas lentivirales resulta de la multimerización de la poliproteína Gag, la cual contiene toda la información necesaria para autoensamblarse y brotar al medio extracelular a través de la membrana plasmática. Durante la maduración de los viriones, la proteína cápside (CA), que corresponde al dominio central de Gag, se condensa generando el core viral que preserva la integridad del complejo ribonucleoproteico requerido para iniciar un nuevo ciclo de replicación viral. Los virus de la inmunodeficiencia de simios (SIV) y de felinos (FIV) son dos lentivirus evolutivamente distantes cuyas proteínas CA no han sido aún estudiadas. Con el objeto de establecer la relación funcional entre los dominios CA de SIV y de FIV, construimos SIV quiméricos en los cuales la región codificante para la CA fue parcial o totalmente reemplazada por su equivalente de la CA de FIV. La caracterización fenotípica de las quimeras nos permitió agruparlas en tres categorías: un grupo formado por virus quiméricos capaces de ensamblarse en viriones, pero cuya maduración causa la inestabilidad de la CA de FIV; un segundo grupo representado únicamente por el SIV quimérico llevando el dominio N-terminal (NTD) de la CA de FIV y que exhibe un fenotipo de ensamblado defectivo; y un tercer grupo formado por los virus quiméricos que se ensamblan en viriones exhibiendo una CA de FIV madura estable, que incorporan la glicoproteína de envoltura, y que contienen niveles salvajes del ARN genómico viral y de la transcriptasa reversa. Sin embargo, este último grupo de SIV quiméricos resultó ser no infeccioso debido a defectos en alguna etapa posterior a la entrada viral. Por otra parte, demostramos que el dominio C-terminal (CTD) de la CA de FIV presenta la capacidad intrínseca de dimerizar in vitro y de formar oligómeros de alto peso molecular. Esto, junto con nuestros resultados que muestran que el CTD de la CA de FIV es suficiente para el ensamblado de la poliproteína quimérica Gag de SIV, provee evidencia de que el CTD de la CA exhibe mayor plasticidad funcional que el NTD. En su conjunto, nuestros resultados aportan información relevante sobre la homología funcional entre los dominios CA de las poliproteínas Gag de los lentivirus de primates y de no primates y contribuyen a nuestro conocimiento sobre cómo han evolucionado los requerimientos para el ensamblado de viriones infecciosos en los retrovirus.

Abstract:
The formation of lentiviral particles results from the multimerization of the Gag polyprotein, which contains all the information necessary for its self-assembly and budding into the extracellular medium. During virion maturation, the capsid (CA) protein, which corresponds to the central domain of Gag, generates the core structure that preserves the integrity of the ribonucleoprotein complex required to initiate a new round of viral replication. The simian and feline immunodeficiency viruses (SIV and FIV, respectively) are two evolutionarily distant lentiviruses whose CA proteins have not as yet been studied. To gain insight into the functional relationship between the SIV and FIV CA domains, we constructed chimeric SIVs in which the CA-coding region was partially or totally replaced by the equivalent region of the FIV CA. The phenotypic characterization of the chimeras allowed us to group them into three categories: the chimeric viruses that, while being assembly-competent, exhibit a virionassociated unstable FIV CA; a second group represented only by the chimeric SIV carrying the N-terminal domain (NTD) of the FIV CA which proved to be assemblydefective; and a third group constituted by the chimeric viruses that produce virions exhibiting a mature and stable FIV CA protein, and which incorporate the envelope glycoprotein and contain wild-type levels of viral genome RNA and reverse transcriptase. However, further analysis of the latter group of chimeric SIVs demonstrated that they are non-infectious due to a post-entry impairment. Furthermore, we show that the carboxyl-terminus domain (CTD) of the FIV CA has an intrinsic ability to dimerize in vitro and form high-molecular-weight oligomers, which, together with our finding that the FIV CA-CTD is sufficient to confer assembly competence to the resulting chimeric SIV Gag polyprotein, indicates that the CA-CTD exhibits more functional plasticity than the CA-NTD. Taken together, our results provide relevant information on the functional homology between the CA domains of primate and nonprimate lentiviral Gag polyproteins and contribute to our understanding of how the requirements for the assembly of infectious virions have evolved among retroviruses.

"Caracterización funcional y molecular de la regulación del transporte de agua y del pH intracelular en células del túbulo colector cortical" (2002). Rivarola, Valeria. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los túbulos colectores corticales (CCD) del riñón de mamífero juegan un papel central en la regulación del transporte de agua-solutos y en el equilibrio ácido-base del organismo. Si bien muchos estudios han sido realizados para tratar de entender los mecanismos implicados en estos procesos, los mismos no han sido completamente aclarados. En la presente tesis hemos utilizado a la línea celular RCCD1 (modelo de CCD) para intentar clarificar los mecanismos por los cuales se produce el movimiento de agua y la regulación del pHi en este segmento del nefrón. En lo referente al movimiento de agua observamos que la línea celular desarrolla importantes flujos en ausencia de fuerzas impulsoras osmóticas e hidrostáticas. Demostramos, además, que los mismos ocurrirían por un mecanismo de cotransporte agua-soluto ya que la línea no expresa acuaporinas. Basalmente predominaría un flujo secretor asociado al movimiento de Cl-, HCO3- y K+. La hormona AVP estimularía, a “corto plazo”, una absorción de fluido acoplada a la de Na+ y, a “largo plazo”, un flujo secretor acoplado al Cl- probablemente mediado por el canal CFTR. En cuanto a la regulación del pHi demostramos funcional y molecularmente que la linea expresa, basolateralmente, las isoformas NHE-1 y NHE-2 del intercambiadores Na+/H+. La NHE-1 sería la encargada de la regulación del pHi ante una carga ácida y la NHE-2 mantendría el pHi basal. En lo que respecta a los intercambiadores Cl-/HCO3- demostramos que la línea celular RCCD1 expresa las isoforrnas AE2, AE3 y AE4. Las dos primeras se localizarían en la membrana basolateral y la AE4 estaría en la membrana apical. Funcionalmente AE3 y AE4 se encargarían de mantener el pHi basal mientras que la AE2 se activaría ante cargas alcalinas. Además proponemos que las células RCCD1 tendrían plasticidad en la expresión de sus intercambiadores Cl-/HCO3-. Finalmente mostramos que la AVP es capaz de modular tanto a los intercambiadores Na+/H+ como a los Cl-/HCO3-. Interesantemente hallamos que esta hormona, tradicionalmente asociada a las células principales, podría también regular a los transportadores Cl-/HCO3- presentes en las células intercalares.

Abstract:
The mammalian cortical collecting duct (CCD) plays an important role in the regulation of water-ion coupling and acid-base balance. Although several studies have been performed in order to study the bases of these processes, these have not been completely clarified. During this thesis we used the RCCD1 cell line (as a CCD model) to elucidate the mechanisms of water movement and pHi regulation in this part of the nefron. Conceming water movement this cell line developed important water fluxes in the absence of osmotic or hydrostatic driving forces. As this cell line does not express aquaporins, the mechanism involved in these movements is associated to a water-solute cotransport. In basal conditions RCCD1 cells developed a secretory flux associated to Cl-, HCO3- and K+ movements. A “short term” effect of AVP resulted in an absortive flux associated to Na+ and, a “long term” effect in a secretory flux associated to Cl- probably driven by CFTR channel. Conceming pHi regulation our functional and molecular studies showed that RCCD1 cells express, in the basolateral membrane, the NHE-l and NHE-2 isoforms of the Na+/H+ exchanger. NHE-1 would be responsible of pHi recovery after an acid load and NHE-2 would mainly be involved in steady-state pHi. On the other hand RCCD1 cells express AE2, AE3 and AE4 isoforms of the Cl-/HCO3- exchanger. AE2 and AE3 would be localized in the basolateral membrane and AE4 in the apical one. AE3 and AE4 would be involved in Steady-state pHi while AE2 would be activated after an alkaline load. Moreover we demonstrated that RCCD1 cells would have plasticity in Cl- /HCO3- exchanger expression. Finally our studies showed that AVP can activated both NHE and AE exchangers. Interestingly, we propose that the hormone action, traditionally associated to the principal cells, would be also able to regulate Cl-/HCO3- exchanger in the intercalated cells.

"Caracterización físico-química de la membrana de Bacillus subtilis frente al estrés osmótico : relevancia de los fosfolípidos aniónicos en la osmorrespuesta" (2002). López, Claudia S.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La respuesta de las bacterias al estrés osmótico es actualmente de gran interés debido a los aspectos importantes de su aplicación. La mayoría de los estudios realizados en procariotas se han focalizado sobre la regulación genética y sobre aspectos fisiológicos de la adaptación a la alta osmolaridad. El comportamiento de las envolturas no ha sido prácticamente estudiado, sin embargo, existen diversas evidencias que sugieren que la composición de las envolturas celulares posee un rol importante durante el mecanismo de osmosensado. El objetivo de este trabajo fire el de estudiar el efecto del estrés osmótico sobre la estructura y composición bioquímica y biofisica de las membranas de Bacillus subtilis YB886 utilizando diferentes enfoques como la bioquímica, espectroscopía de fluorescencia y biología molecular. En esta tesis demostramos que se producen importantes variaciones en la composición de lípidos polares y de ácidos grasos (AG) durante la adaptación de B. subtilis. Entre los principales fosfolípidos presentes en la membrana de esta especie, se observó que cuando la bacteria es crecida en medios hipersalinos se produce una disminución en el contenido de fosfatidilglicerol de 40 a 31% y un aumento en el de cardiolipina de 24 a 46%. Además de las variaciones observadas a nivel del grupo polar de los lípidos, se determinó un cambio significativo en la composición de AG entre las diferentes condiciones de cultivo. Las células crecidas en el medio hipersalino presentan una marcada disminución en el contenido de AG saturados ramificados y un aumento en el de los saturados lineales. Asimismo, se observó un aumento en el contenido de los AG monoinsaturados, los cuales representan un 6% bajo condiciones normales de crecimiento y alcanzan un 18% en estrés osmótico. Con el objetivo de caracterizar la estructura y dinámica de la membrana, se utilizaron diferentes técnicas espectroscópicas. Se determinó que en respuesta al estrés osmótico se produce un aumento en el empaquetamiento de los lípidos de las membranas, hecho que fue evidenciado por medio de las tres sondas fluorescentes utilizadas. No obstante, esta variación no se observó en los liposomas preparados con los lípidos extraídos a partir de las células, indicando que el aumento en el empaquetamiento de los lípidos depende de la presencia de las proteínas de membrana. En este trabajo también se determinó que en las membranas de B. subtilis otras propiedades fisicas de la membrana, como la hidratación de la interfaz, cambia en fimción de la osmolaridad del medio exterior. Además, se construyeron diversas cepas mutantes para la biosíntesis de fosfolípidos. Los resultados obtenidos demostraron la importancia de los lípidos aniónicos (cardiolipina y fosfatidilglicerol específicamente) en la adaptación al estrés osmótico en esta especie. Nuestros resultados indican que la interrupción del gen cls2 provoca una deficiencia total en la síntesis de cardiolipina, sugieriendo que el producto del gen cls2 es la principal cardiolipina síntasa en esta especie. En esta tesis se demostró por primera vez los cambios biofisícos y bioquímicos que se producen en la membrana de B. subtilis en respuesta al estrés osmótico. Estos cambios serian indispensables para contrarrestar el desbalance osmótico presente entre las células y el medio externo.

Abstract:
Bacterial response to osmotic stress is of current and increasing interest due to the important aspects of its applications. Most of the studies on prokaryotes have centered on genetic regulation and physiological aspects of their adaptation to high osmolarity. The behavior of the envelopes has been practically unexplored; nevertheless, several evidences suggest that the cell envelope composition plays an important role during the osmosensing mechanism. The aim of the present work was to study the effect of osmotic stress on the biochemical and biophysical parameters of structure and composition of the Bacillus subtilis YB886 membrane using different approaches such as biochemistry, fluorescence spectroscopy and molecular biology. In this thesis we demonstrated that there are important variations in membrane polar lipid composition and fatty acids (FA) during osmoadaptation in B. subtilis. Among the major phospholipids present in the B. subtilis membrane, a decrease in phosphatidylglycerol content from 40 to 31%, and an increase in cardiolipin content from 24 to 46% were observed when the bacteria were grown in hypsaline medium. In addition to the variations observed at the polar group level, the FA composition, in particular, showed a significant change between different growth conditions. Bacterial growth in hypertonic medium resulted in a remarkable decrease in the branched-chain saturated FA content, and an increase in straight-chain saturated FA. There was also a significant increase of unsaturated FA, which represented 6% in normal conditions and reached 18% during osmotic stress. In order to characterize membrane structure and dynamics, different spectroscopic techniques were used. Bacteria growth in hyperosmotic media evoked an increase in the lipid packing in isolated whole membranes, fact that was evidenced by the three fluorescent probes used. However, this effect was not observed in liposomes prepared with the extracted bacterial lipids indicating that it was strongly dependent on the presence of membrane proteins. In this work we also indicate that in B. subtilis membranes, other physical properties as interface hydration change as a function of the external medium osmolarity. In addition, several mutants for phospholipids biosynthesis were constructed. We demonstrated the importance of anionic lipids (cardiolipin and phosphatidylglyerol specifically) for the adaptation of this specie to osmotic stress. Our results indicated that the interruption in gene cls2 resulted in a complete deficiency in cardiolipin synthesis, suggesting that B. subtilis cls2 gene product to be the major cardiolipin synthase. In our knowledge this is the first report about the biophysical and biochemical adaptation of the B. subtilis membranes to osmotic stress. These changes would be indispensable to counteract the osmotic imbalance between the cells and the external medium.

"Caracterización genética del germoplasma de razas de maíz autóctonas provenientes del noreste argentino" (2012-11-13). Bracco, Mariana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El maíz, Zea mays ssp. mays, se cultiva en todo el mundo y ocupa el tercer lugar entre los destinados al consumo alimentario. La Argentina es el segundo exportador mundial, precedida por los Estados Unidos. Esto coloca a la producción de maíz como una de las actividades económicas más rentables para nuestro país. En el norte de la Argentina habitan comunidades aborígenes que cultivan razas nativas de maíz. La caracterización genética del germoplasma autóctono de las razas de la región noreste de la Argentina (NEA) ha sido prácticamente nula hasta la concreción de esta Tesis. Con el fin de aportar al conocimiento de la diversidad genética y la estructura poblacional de las razas nativas del NEA, contribuir a su conservación y evaluar su potencial como reservorio de nuevos alelos, se evaluaron 15 loci microsatélites nucleares en 572 individuos. Los resultados del presente estudio permiten concluir que: 1) las razas de Misiones se encuentran constituidas por acervos génicos diferentes, que concuerdan con el tipo de grano que poseen (harinosos y córneo-harinosos vs. reventadores), éstos deberían ser considerados como unidades de conservación diferentes; 2) las razas nativas del NEA constituyen una reserva de diversidad significativa, con potencial para ampliar la base genética de los programas de fitomejoramiento; 3) las razas de Misiones no parecen haber sufrido un proceso de erosión genética severo en tiempos recientes, ya que los ejemplares actuales conservan gran parte de la diversidad detectada en las colecciones del NEA de los años 1977 y 1978; 4) la comparación entre las razas del NEA y del NOA apoyan la existencia de dos centros de diversidad diferentes en Sudamérica; la comparación con otras razas del Continente Americano avala la hipótesis de ocurrencia de una via de introducción del germoplasma nativo del NEA a través del este de Sudamérica; 5) la ausencia de cromosomas B en las razas del NEA coincide con la constitución cromosómica esperada para el grupo de las razas de regiones bajas.

Abstract:
Zea mays ssp. mays is cultivated worldwide and ranks third in importance among crops for human consumption. Argentina is the second largest exporter, preceded by the United States. Corn production is one of the most profitable economic activities in our country. Northern aboriginal communities from Argentina cultivate maize landraces for self-sufficiency. Genetic characterization of indigenous germplasm from the northeastern region of Argentina (NEA) was practically nil until the completion of this Thesis. To contribute to the knowledge and conservation of the genetic diversity of native maize landraces from NEA and to assess their potential as a reservoir of novel alleles, 572 individuals were evaluated using 15 nuclear microsatellite loci. The results of this study allow to conclude that: 1) landraces from Misiones can be divided into two different gene pools, which are consistent with the type of corn (flints and flours vs. popcorns), these should be regarded as different conservation units; 2) NEA landraces represent a significant reservoir of diversity, useful to broaden the genetic base of breeding programs; 3) landraces from Misiones do not seem to have undergone a severe genetic erosion in recent times, since much of the extant diversity is detected in NEA seed bank collections from 1977-1978; 4) the comparison between landraces from NEA and NOA support the existence of two different centers of diversity in South America; the comparison with other races of the Americas supports the hypothesis of the introduction of NEA germplasm through eastern South America; 5) the absence of B chromosomes in NEA landraces agrees with the expected chromosomal constitution of the landraces from lowland South America.

"Caracterización genómica y funcional de los genes AtNIP4;1 y AtNIP4;2 que codifican para proteínas de tipo acuaporinas en Arabidopsis thaliana" (2015-03-25). Pérez, Juliana Andrea. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En las Angiospermas, la reproducción incluye procesos en los cuales el transporte de agua está espacial y temporalmente regulado. Durante la microgametogénesis del polen, el contenido de agua del grano de polen comienza a aumentar de manera significativa desde el estadio temprano de la microespora y continúa haciéndolo hasta la deshidratación parcial. El volumen de polen, al igual que el contenido de agua, disminuye durante la deshidratación de las anteras y el polen, se adapta a las condiciones ambientales durante la dispersión y aumenta durante la rehidratación en el estigma. En plantas con estigmas secos, la regulación de la rehidratación del polen proporciona una barrera temprana y eficaz para las polinizaciones incompatibles. El agua, los nutrientes y otras moléculas pequeñas son transportados rápidamente desde las papilas estigmáticas al grano de polen para promover su germinación por mecanismos que aún no se conocen completamente. Luego durante la elongación del tubo polínico, la entrada adicional de agua a través de la membrana plasmática permite el ajuste citosólico de iones (Ca2+, K+, H+ y Cl–) y de la presión de turgencia. Se ha propuesto que las acuaporinas estarían involucradas en el transporte de agua y/o solutos durante la germinación del polen y el crecimiento del tubo polínico. En Arabidopsis thaliana sólo 4 genes (de un total de 35 loci) se expresan específicamente en los granos de polen maduros y/o tubos polínicos: AtTIP5;1, AtTIP1;3, AtNIP4;1 y AtNIP4;2. En este trabajo de tesis se demuestra la participación de AtNIP4;1 y AtNIP4;2 en los procesos asociados a la reproducción. Los genes AtNIP4;1 y AtNIP4;2 presentan alta identidad de secuencia nucleotídica, estructura génica similar (5 exones, 4 intrones) y están dispuestos en tándem. A nivel de proteínas, tienen un 84% de identidad aminoacídica, y comparten los mismos dos motivos NPA y el filtro de constricción ar/R (W, V, A, R), involucrados en la selectividad del transporte. Sin embargo, AtNIP4;1 y AtNIP4;2 muestran diferentes patrones de expresión. Ensayos de PCR en tiempo real demostraron que AtNIP4;1 tiene niveles relativos de expresión bajos en polen maduro y que AtNIP4;2 presenta un pico de expresión durante la elongación del tubo polínico. Además, flores transgénicas promotorNIP4;1::GUS mostraron una fuerte actividad de GUS en los granos de polen maduros y persistente en los tubos polínicos, mientras que las flores promotorNIP4;2::GUS mostraron una fuerte actividad de GUS solamente en el tubo polínico. Por lo tanto, nuestra hipótesis es que AtNIP4;1 y AtNIP4;2 podrían tener redundancia funcional durante la reproducción, pero desempeñar roles diferentes y específicos en el desarrollo del polen, la polinización y/o fertilización. Con el objetivo de llevar a cabo experimentos fisiológicos in vitro e in planta, se obtuvieron plantas mutantes simples de inserción de ADN-T y se generaron líneas amiARN doble knockdown. Las plantas simple mutante y doble knockdown mostraron parámetros de fertilidad afectados: reducción del número de semillas por silicua y segregación distorsionada asociada solamente al gametofito masculino. Además, las plantas doble knockdown mostraron reducción de la viabilidad y del diámetro de los granos de polen maduros, aumento del número de granos de polen inmaduros (granos de polen uni y bi-celulares), defectos en la rehidratación de polen, reducción de la tasa de germinación y de la longitud del tubo polínico (especialmente en condiciones limitantes de ácido bórico), y aumento del porcentaje de las flores no polinizadas. También se generaron líneas de complementación que expresan las proteínas de fusión eGFPAtNIP4; 1 y eGFP-AtNIP4;2 bajo sus promotores endógenos en el background de sus respectivas líneas simple mutantes. Los análisis de segregación demostraron que estas líneas de complementación rescatan el fenotipo mutante. Además, mediante microscopía confocal se observó que la proteínas de fusión eGFP-AtNIP4;1 y eGFP-AtNIP4;2 están localizadas en la membrana plasmática y en vesículas intracelulares de los granos (AtNIP4;1) y tubos polínicos (AtNIP4;1 y AtNIP4;2). Ensayos de expresión heteróloga de eGFP-AtNIP4;1 y eGFP-AtNIP4;2 en ovocitos de Xenopus laevis confirmaron que ambas acuaporinas presentan una baja permeabilidad al agua y un significativo transporte de glicerol. Ensayos de actividad quinasa in vitro demostraron que los dominios C-terminales de AtNIP4;1 y AtNIP4;2 son fosforilados específicamente en Ser267 por AtCPK34, una proteína quinasa dependiente de calcio expresada en polen, sugiriendo que la fosforilación puede regular su actividad de transporte in planta. En resumen las evidencias obtenidas en esta tesis doctoral permiten sugerir que AtNIP4;1 estaría involucrada principalmente en las etapas del desarrollo del polen, polinización y germinación, y AtNIP4;2 tendría un rol preponderante en la elongación del tubo polínico. Palabras claves: acuaporinas de polen, transporte de agua, reproducción

Abstract:
In Angiosperms, reproduction involves processes where water and solutes transport is temporally and spatially regulated. During pollen development, pollen water content starts increasing significantly at the early microspore stage and continues to increase until partial dehydration. Then, pollen volume decreases during anther and pollen dehydration and, similar to water content, adapts to environmental conditions during dispersal, increasing later during rehydration. In plants with dry stigmas, regulated pollen hydration provides an effective early barrier to incompatible pollinations. Water, nutrients, and other non-polar small molecules are transported rapidly into pollen from the stigma papillae to promote its germination by mechanisms that are still unknown. Then, additional entry of water through the plasma membrane allows cytosolic adjustment of ions (Ca2+, K+, H+, and Cl–) and maintenance of turgor pressure during tip elongation. It has been proposed that aquaporins may mediate water and solute transport during pollen germination and pollen tube growth. In Arabidopsis thaliana only 4 genes (out of 35 loci) are specifically expressed in mature pollen grains and/or pollen tubes: AtTIP5;1, AtTIP1;3, AtNIP4;1 and AtNIP4;2. Here, we show the involvement of AtNIP4;1 and AtNIP4;2 in reproduction processes. Interestingly, AtNIP4;1 and AtNIP4;2 are genes with high nucleotide sequence identity, similar gene structure (5 exons, 4 introns), and disposed in tandem. At protein level, they have 84% amino acidic identity, and share the same two NPA motifs and the ar/R constriction (W,V,A,R), involved in transport selectivity. However, they displayed different expression patterns. Real time PCR assays showed that AtNIP4;1 has low relative expression levels in mature pollen while AtNIP4;2 peaks during pollen tube elongation. Additionally, NIP4;1promoter::GUS flowers showed strong GUS activity in mature pollen grains, remaining in the pollen tubes, whereas NIP4;2promoter::GUS flowers, showed strong GUS activity upon pollen tube germination. Therefore, we hypothesized that they could have a functional redundancy during reproduction, even though they may play different roles in pollen development, pollination and/or fertilization. In order to perform in vitro and in planta physiological experiments, we obtained simple mutant T-DNA insertion lines and developed double knockdown amiRNA lines. Simple mutant and double knockdown plants showed affected fertility parameters: reduced number of seeds per silique, and distorted segregation ratios. Furthermore, double knockdowns displayed reduced mature pollen grain viability and diameter, increased number of immature pollen grains (increased number of pollen grains arrested at uni- and bi-cellular stages), defects in pollen rehydration, reduced germination rate and pollen tube length (specially under low boric acid conditions), and increased percentage of non-pollinated flowers. Complementation lines expressing eGFP-tagged AtNIP4;1 and AtNIP4;2 under their own promoters, in each mutant line background, rescued the mutant phenotype in segregation analysis. Additionally, confocal microscopy showed that eGFP-AtNIP4;1 and -AtNIP4;2 are localized in the plasma membrane and intracellular vesicles of pollen grains (AtNIP4;1) and tubes (AtNIP4;1 and AtNIP4;2). Functional expression of eGFP-AtNIP4;1 and eGFP-AtNIP4;2 in Xenopus laevis oocytes confirmed that both aquaporins have relatively low water permeability and significant glycerol transport. In vitro kinase assays showed that the C-terminal domains of AtNIP4;1 and AtNIP4;2 are specifically phosphorylated at Ser267 by AtCPK34, a pollen Calcium-dependent protein kinase, suggesting that phosphorylation might regulate their transport activity in planta. In summary, the obtained results suggest that AtNIP4;1 might be involved mainly in pollen development, pollination, and germination, and AtNIP4;2 could play a major role in pollen tube elongation. Keywords: aquaporins, pollen, water transport, reproduction

"Caracterización hidráulica del fruto de Fragaria x ananassa durante el proceso de maduración" (2015-04-07). Márquez, María Mercedes. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Durante la maduración de los frutos, procesos como la división celular, la expansión celular y la pérdida de turgencia requieren un control estricto de los flujos de agua. Estos flujos tienen lugar a través del sistema vascular en coordinación con los movimientos de agua celulares, dando como resultado un fenómeno hidráulico complejo. Si bien son pocos los estudios sobre procesos hidráulicos en frutos, se pudo comprobar que en etapas tardías de la maduración se pierde relación con el estado hídrico del resto de la planta. Este fenómeno se asocia a menudo con una alteración o pérdida de la función del xilema que en consecuencia determina un descenso en la conductancia hidráulica. Y si bien es sabido que los canales de agua (acuaporinas) expresados en las membranas celulares pueden jugar un rol importante en estos procesos, su participación específica resta ser elucidada. El trabajo de tesis aquí presentado se centró fundamentalmente en llevar a cabo un estudio integral de la frutilla contemplando aspectos anatómicos, fisiológicos y moleculares, que nos permitió entender el proceso general del movimiento de agua de este fruto compuesto en diferentes estadios madurativos. En base a los datos anatómicos y fisiológicos aquí presentados pudimos determinar que no existe en frutilla interrupción de la continuidad física de los vasos del xilema o pérdida de funcionalidad de los mismos. El conjunto de resultados aquí expuestos, en consonancia con los trabajos publicados acerca de la maduración de la frutas, nos ha permitido además exponer y discutir que los cambios en las fuerzas impulsoras serían responsables de la disminución de la entrada de agua vía xilema en las frutas maduras. Nuestros resultados también indican que las acuaporinas PIP1 y PIP2 presentan un patrón de expresión asociado a diferentes etapas de la maduración y que ambos subtipos se encuentran localizados en la misma membrana plasmática. En cuanto a las posibilidades de modulación del flujo de agua a través de la membrana plasmática detectamos la capacidad de regularlo mediante la co-expresión e inhibición por pH citosólico. En resumen, estos hallazgos integran la dinámica hidráulica en el proceso de maduración como un aspecto que debería ser considerado en el análisis de este proceso, no solamente para comprender la fisiología del fruto sino también para aumentar las herramientas que permitan introducir mejoras en el manejo comercial de las frutas.

Abstract:
Fruit ripening includes processes as cell division, cell expansion and loss of turgor, that request a strict control of water flows. These flows take place not only through the fruit vascular system but also are coordinated with the transcellular water movements resulting in a complex hydraulic phenomenon. Despite studies on fruits hydraulic processes are scarce, it is generally stated that at later stages of ripening the relationship between fruit and the plant water status is lost. This phenomenon is often associated with a disruption or loss of function of the xylem which consequently determines a drop in hydraulic conductance. In this context, although evidence is fueling that water channels (aquaporins) expressed in cell membranes should play an important role in these processes, their participation and specific function still demands to be elucidated. The thesis presented here intends to perform a comprehensive study of strawberry fruits, contemplating anatomical, physiological and molecular aspects, allowing us to understand the general process of water movement in different stages of fruit ripening. Based on anatomical and physiological data we determined that there is neither interruption of the physical continuity nor loss of functionality of the xylem vessels in the strawberry fruit unto the later stages (100% Red). On the other hand, the results presented here, in line with published work on other fruits, allowed us to discuss that changes in the driving forces would be responsible for the decrease in water intake by xylem in mature fruits. At the cellular level, our results also indicate that PIP1 and PIP2 aquaporins are both located in the same plasma membrane, have an expression pattern associated with different stages of ripening and can be regulated by co-expression (increasing water permeability) and cellular acidification (decreasing water permeability). In summary, these findings are integrated at hydraulic dynamics into the ripening process, as a trait that should be considered in the analysis of the overall process not only to understand the fruit physiology but also to consider when exploring the management of fruit.

"Caracterización histoquímica, distribución y crecimiento de las fibras musculares en nototénidos subantárticos : Análisis inicial de dos factores relacionados con la natación : flotabilidad y temperatura" (2000). Fernandez, Daniel Alfredo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se caracterizó la musculatura natatoria de nototénidos subantárticos mediante técnicas histoquímicas, determinándose la presencia de cuatro tipos de fibras: SDF, rojas, intermedias y blancas. Se demostró la utilidad de la técnica de la mATPasa para diferenciar distintos tipos musculares. El proceso de hiperplasia muscular cesó al 40 - 70 % de la talla máxima de cada especie, encontrándose tres patrones distintos de incorporación de fibras directamente relacionados con las tallas finales de las mismas. Las fibras musculares de E. maclovinus y P. tessellata mostraron la misma tasa de crecimiento. Todos los nototénidos subantárticos estudiados presentan valores de flotabilidad propios de especies de hábitat bentónico. El rendimiento natatorio de E. maclovinus fue superior a 10°C que a 4°C. La velocidad, aceleración y potencia inercial de los arranques rápidos de E. maclovinus a 2 °C fueron superiores a los de una especie antártica (N. rosii), y el grado de curvatura del cuerpo y de estiramiento de las fibras blancas similares a los de especies de aguas templadas y tropicales. Los valores energéticos de distintos órganos y tejidos de las especies que se separaron antes del tronco ancestral de los nototénidos mostraron valores significativamente mayores que los del resto de las especies.

Abstract:
The swimming muscles of sub-Antarctic notothenioids were characterised using histochemical techniques. Four different fibre types were found: SDF, red, intermediate and white. The mATPase technique was found useful for muscle fibre type characterisation. Hyperplasia cessation occurred at 40 - 70 % of the final length of each species. Three different patterns of fibre incorporation were found and related to the final length of each species. All the sub-Antarctic notothenioid species studied had buoyancy values typical of benthic species. The swimming perfomance of E. maclovinus was higher at 10 °C than at 4°C. The velocity, acceleration and inertial power of the fast-starts of E. maclovinus were higher than the ones found in an Antarctic notothenioid (N. rosii), and the curvature of the body and the muscle strain of the white fibres were similar to those of species from template and tropical waters. The energetic content of different organs and tissues from the species that diverge earlier from the parent taxa of the notothenioids showed significantly higher values than the other notothenioid species.

"Caracterización inmunohistoquímica de la glándula adrenal de la culebra Waglerophis merremii" (1995). Orezzoli, Andrea Ana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los trabajos científicos que se basan en "hechos" experimentales y descriptivos tienen un marco teórico dado por una serie de publicaciones previas relacionadas entre sí, las cuales en su mayoria han sido "juzgadas y aceptadas" por la comunidad científica especializada. En algunas áreas el surgimiento de ideas originales y la aplicación de nuevas técnicas han conducido a la producción de una amplia variedad de publicaciones que a su vez sirven como punto de partida para nuevos estudios. En cambio, en otras áreas, el material previo es escaso y los desarrollos nuevos deben sustentarse en estudios que son menos específicos, aunque permiten hacer comparaciones dentro de ciertos límites. Un ejemplo de esto último es el caso de los reptiles, que entre los vertebrados es un grupo poco estudiado, a pesar de que algunas especies llegan a tener gran valor comercial y otras, como las culebras, puedan servir como modelos biológicos. En este trabajo se tomará como modelo a la culebra Waglerophis merremii, se describirá la morfología e histología de la glándula adrenal poniendo un interés principal en el tejido cromafin. Dicho nombre deriva de la reacción positiva que se observa en estas células cuando se emplean sales de cromo (Henle, 1865), las cuales reaccionan con las catecolaminas que se sintetizan y almacenan en los gránulos secretorios. El tejido cromafin está formado por dos tipos de células, unas que sintetizan adrenalina y otras noradrenalina (Hillarp y Hökfelt, 1953; Eränkö, l955a, b). En la mayoría de los vertebrados (anfibios, aves y mamíferos) ambos tipos celulares se encuentran mezclados en la glándula adrenal, en cambio en los reptiles poseen una ubicación diferencial. La glándula adrenal de la W. merremii tiene forma cilíndrica y alargada, está compuesta por dos regiones relativamente separadas, una pequeña dorsal y otra ventral que constituye el cuerpo principal de la glándula. La región dorsal es un delgado cordón longitudinal compuesto por células noradrenérgicas. El cuerpo principal de la glándula se conforma por dos tipos de tejidos, el adrenérgico y el interrenal (que equivale al cortical de mamíferos). En un principio analizaremos el desarrollo de las células que dan origen al tejido cromafin y se comparará su evolución en los distintos grupos de vertebrados. Luego se estudiarán las relaciones que posee con el resto de los elementos que componen la glándula adrenal y su posible rol a partir de la descripción inmunocitoquímica de los componentes celulares, nerviosos y vasculares. En anfibios, reptiles, aves y mamíferos, el tejido cromafin forma la glándula adrenal y en menor medida se distribuye en acúmulos celulares en distintos tramos del sistema vascular y del sistema nervioso. En cambio en los vertebrados inferiores (ciclóstomos y peces) el tejido cromafín se distribuye en distintas regiones del cuerpo, principalmente en los grandes vasos y en el sistema simpático, no se observa aún la organización de un órgano secretor aunque hay una incipiente polarización hacia la región renal.

"Caracterización molecular de las proteínas SNSP y NSF en ovocito de ratón: su rol en la exocitosis de gránulos corticales e implicancias en la fertilidad" (2016-03-10). de Paola, María Matilde. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La exocitosis de gránulos corticales (EGC) es un tipo de secreción regulada por Calcio que involucra un proceso de fusión de membranas esencial para la fecundación. Luego de la fusión del espermatozoide, los gránulos corticales son exocitados y liberan su contenido al espacio perivitelino. Esta secreción difunde hacia la zona pelúcida, y la transforma en una barrera física, evitando así la poliespermia, y asegurando un desarrollo embrionario normal. El mecanismo molecular que media la fusión de membranas durante la EGC se encuentra escasamente caracterizado y se cree que es mediado por la vía de las SNARE (SNAP receptors). El objetivo principal de este trabajo fue investigar si las SNAP (soluble NSF attachment proteins) y NSF (N-ethilmaleimide sensitive factor), proteínas clave en la vía de las SNARE, median la EGC en ovocito. El análisis de la expresión génica mostró que α SNAP, γ SNAP y NSF se expresan en ovocitos de ratón. Ensayos de Western blot mostraron que la expresión de estas proteínas se mantiene en niveles similares durante la maduración y activación temprana del ovocito. Su localización fue observada principalmente en la región cortical, enriquecida en GC. Para evaluar la función de estas proteínas en la EGC, se perturbó a las SNAP y NSF endógenas previo a la activación de ovocitos en metafase II. La microinyección de α SNAP salvaje y de la mutante dominante negativa L294A de α SNAP inhibió la EGC estimulada por Estroncio. NEM, un inhibidor irreversible de NSF y la microinyección de la mutante dominante negativa D1EQ de NSF inhibieron la EGC. La microinyección de los anticuerpos anti-α SNAP y anti-NSF fueron capaces de inhibir la EGC. Para comprender el rol de α SNAP en la fertilidad femenina, utilizamos la cepa de ratones hyh (hydrocephalus with hop gait), portadora de una mutación puntual (M105I) en el gen de α SNAP. Debido a que el ratón knockout para α SNAP es letal embrionario, los ratones hyh proveen un modelo único para el estudio de su función in vivo. Los resultados obtenidos indicaron que las hembras hyh presentan una severa reducción en su fertilidad debido a una combinación de defectos producidos por la proteína mutada. Nuestros resultados revelan que α SNAP, γ SNAP y NSF son expresados en ovocitos de ratón, que α SNAP y NSF son requeridos para la EGC y que la mutación M105I en α SNAP conduce a defectos multifactoriales en la fertilidad de las hembras hyh. Estos datos demuestran por primera vez que α SNAP y NSF juegan un rol importante en la reproducción femenina.

Abstract:
Cortical granule exocytosis (CGE) is a calcium-regulated secretion that represents a membrane fusion process essential for fertilization. Following sperm fusion, cortical granules (CG) undergo exocytosis to release their content into the perivitelline space. The secretion diffuses into the zona pellucida and transforms it into a physical barrier, avoiding polyspermy and ensuring normal embryonic development. The molecular mechanism of membrane fusion during CGE is still poorly understood and is thought to be mediated by the SNARE (SNAP receptors) pathway. The main purpose of the present study was to investigate if SNAP (soluble NSF attachment proteins) and NSF (N-ethilmaleimide sensitive factor), two key proteins in the SNARE pathway, mediate CGE in an oocyte model. We first investigated the gene expression of SNAP and NSF. RT-PCR results showed that α and γ SNAP (but not β), and NSF are expressed in mouse oocytes. Immunoblotting analysis showed that the expression of these proteins maintains a similar level during oocyte maturation and early activation. Their localization was mainly observed at the cortical region, which is enriched in CGs. To evaluate the function of these proteins in CGE, endogenous SNAP and NSF proteins were perturbed prior to CGE activation in metaphase II oocytes. The microinjection of wild type α SNAP and L294A mutant of α SNAP inhibited CGE stimulated by strontium. NEM, an irreversibly inhibitor of NSF, and the microinjection of the dominant negative mutant D1EQ NSF inhibited CGE. The microinjection of anti-α SNAP and anti-NSF antibodies was able to abolish CGE. Furthermore, in an attempt to further understand the role of α SNAP in female fertility, we used a spontaneous mutant mouse model for α SNAP known as hyh (hydrocephalus with hop gait), carrying a point mutation M105I. Due to α SNAP knockout mice is embryonic lethal, the hyh mice provide a unique in vivo model for in-depth research of α SNAP function. We have demonstrated that hyh female mice exhibit strongly reduced fertility parameters. Our findings revealed that α SNAP, γ SNAP, and NSF are expressed in mouse oocytes, that α SNAP and NSF are required for CGE and that M105I mutation in α SNAP leads to multifactorial fertility defects in hyh female mice. These data demonstrate for the first time that α SNAP and NSF play an important role in female reproduction.

"Caracterización molecular de mutantes derivadas del genotipo mutador de cloroplastos de cebada" (2008). Colombo, Noemí. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La coordinación de la expresión génica entre los genomas nuclear, plastídico y mitocondrial es de importancia crucial para las células vegetales. Un caso particular de la interacción núcleo-plástido está dado por los genes nucleares mutadores de cloroplasto, que inducen un dramático aumento de la tasa de mutación espontánea del plastoma. En esta tesis se estudió molecularmente el plastoma de cuatro mutantes inducidas por el mutador de cloroplastos de cebada en las que no se observaron cambios mayores, ni en el tamaño, ni en el arreglo génico del plastoma. Sin embargo, no debe descartarse en las mismas la presencia de alteraciones menores, como pequeñas deleciones, duplicaciones o sustituciones. Por otro lado, se hicieron estudios de expresión génica en la lámina de la primera hoja de una de ellas, la línea citoplásmica 2 (LC2) caracterizada por presentar retraso en la traducción plastídica durante embriogénesis, afectando el desarrollo temprano de los cloroplastos. En la base y el ápice LC2 presentó: a) incremento en los transcriptos de las ARN polimerasas plastídica (NEP) y mitocondrial; b) incremento en la acumulación de ARN mensajeros para genes transcriptos por NEP; c) menor acumulación de ARN ribosomales plastídicos; d) menor acumulación de proteínas tilacoidales. La acumulación de la ARN polimerasa plastídica (PEP) fue similar al control, al igual que los patrones de sus transcriptos. Se observó expresión diferencial de Rubisco entre células del mesófilo y de la vaina parenquimática del haz vascular en el ápice de LC2. Mediante parámetros de fluorescencia de clorofila se comprobó la alteración temprana y posterior recuperación de la fotosíntesis en LC2. Los resultados aportan nuevas evidencias sobre la relación entre la traducción plastídica y el desarrollo de los cloroplastos y muestran a LC2 como un material experimental útil para el estudio de la traducción plastídica y del efecto de ésta y de los plástidos sobre la expresión concertada de los distintos genomas de la célula vegetal.

Abstract:
The coordination of gene expression between the nuclear, plastidic and mitochondrial genomes is crucial for plant cells. A particular case of the nuclear-plastid interaction is that of the chloroplast mutator nuclear genes, which dramatically increase the plastome spontaneous mutation rate. In this thesis, the plastome of four mutants induced by the barley chloroplast mutator was characterized at the molecular level. No major changes were observed, either in plastome size or in gene arrangement. However, minor changes like small deletions, duplications or substitutions should not be discarded. Additionally, studies on gene expression along the first leaf blade were carried out in one of the mutants, the cytoplasmic line 2 (CL2). CL2 presents a delay in plastid translation during embryogenesis, affecting early chloroplast development. In the basal and top sections CL2 showed: a) an increase in transcripts levels of plastid (NEP) and mitochondrial RNA polymerases; b) an increase in mRNA accumulation of NEP- transcribed genes; c) lower levels of plastid ribosomal RNAs; d) lower accumulation of thylakoid proteins. The accumulation of plastid RNA polymerase (PEP) in CL2 was similar to that of the control, as were its transcripts patterns. Differential expression of Rubisco was observed between mesophyll and parenchymatous bundle sheath cells in CL2 top. Early photosynthesis impairment and subsequent recovery was determined using chlorophyll fluorescence parameters. Results provide new evidences about the relationship between plastid translation and chloroplast development and show CL2 is a useful material for studying plastid translation and its effect on the concerted expression of different plant cell genomes

"Caracterización molecular de superficies de óxido de hierro en relación a modificaciones químicas por adsorción de fosfatos y fosfonatos" (2001). Castro, Pablo A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo de este trabajo de Tesis es el estudio de la interacción a nivel molecular entre fosfatos (fosfato inorgánico y ácidos fosfóricos y fosfónicos de cadena larga) y superficies de óxidos dc hierro. El estudio dc la adsorción sobre óxidos de hierro de compuestos que contienen el grupo funcional fosfato es de gran interés en varios campos de la ciencia que van desde la química del suelo y las aguas naturales hasta la protección contra la corrosión. Como óxido de hierro modelo se emplearon superficies de hierro pasivadas en medio alcalino y magnetita (Fe3O4), tanto de origen geológico como artificial. geological and artificial. Para el estudio de la adsorción de fosfatos inorgánicos se emplearon soluciones de ortofosfato de sodio (Na3PO4, Na2HPO4 y NaHgPO4). La adsorción de ácidos fosfóricos y fosfónicos dc cadena larga fue estudiada a partir de soluciones de acido dodecanfosfórico (DPA) y ácido octadecilfosfónico (OPA), respectivamente. La interacción fosfato/óxido de hierro fue estudiada mediante una variedad dc técnicas tales como Espectroscopía de Impedancia Faradaica (ElS), Microbalanza de cristal de cuarzo (QCM), Espectroscopía infrarroja de reflexión-absorción por transformada dc Fourier (FT-IRRAS), Espectroscopía infrarroja in situ por transformada de Fourier (Substractively Nonnalized Interracial Fourier InfraRed Spectroscopy, SNIFTIRS), ángulo de contacto, y Espectroscopia electrónica para el análisis químico (ESCA o XPS). Los experimentos SNIFTIRS y QCM indican que a valores altos de pH y bajo control potenciostático, los fosfosfatos inorgánicos forman un complejo superficial bidentado, aunque no puede descartarse totalmente la formación de complejos monodentados. Los experimentos de FT-IRRAS y QCM muestran que los ácidos DPA y OPA forman una monocapa de complejos superficiales bidentados al adsorberse sobre hierro pasivo y magnetita desde soluciones etanólicas. Estos filmes presentan un nivel de ordenamiento bajo, pero continúan ordenándose con el tiempo. Estos resultados son muy interesantes desde el punto de vista de la mejora de la estabilidad de los recubrimientos poliméricos sobre metales. Una parte importante del trabajo presentado aqui fue realizado bajo la dirección del Prof. Dr. Martin Stratmann at the "Institut für Werkstoffwisscnchaften, Lehrstuhl für Korrosion und Oberflächentechnik (LKO), Friedrich-Alexander-Universität Erlangen-Nürnberg", Erlangen, Alemania.

Abstract:
The objective of this thesis research is the study of the interaction between phosphate species (inorganic phosphate and long chain organic phosphoric and phosphonic acids) and iron oxide surfaces at the molecular level. The study of the adsorption of compounds containing the phosphate group on iron oxide is of great interest for many fields of science and technology from soil and natural water Chemistry to corrosion protection. As a model iron oxide surface alkaline passivated iron surfaces and geological and artificial magnetite (Fe3O4) were chosen. For the study of inorganic phosphate adsorption on these surfaces solutions of sodium orthophosphate salts (i.e. Na3PO4, Na2HPO4 and NaH2PO4) were used. The adsorption of long chain organic phosphoric and phosphonic acids was studied using dodecanphosphoric acid (DPA) and octadeylphosphonic acid (OPA), respectively. The phosphate/iron oxide interaction was studied by a variety of techniques such as Electrochemical impedance Spectroscopy (EIS), Quartz Crystal Microbalance (QCM), Fourier Transform infraRed Reflection-Absorption Spectroscopy (FT-IRRAS), Substractively Nonnalized Interracial Fourier InfraRed Spectroscopy (SNIFTIRS), contact angle and X-ray Photoelectron Spectroscopy (XPS). The SNIFTIRS and QCM experiments indicates that at high pH values and under potentiostatic control the inorganic phosphates form a bidentate surface complex, even though based solely on the evidence presented here it is not possible to rule out the formation of a mixture of bi and monodentate surface complexes. The FT-IRRAS and QCM results show that the organic phosphoric and phosphonic acids (DPA and OPA) forms a monolayer of bidentate complexcs upon adsorption from ethanolic diluted solutions. These monolayers formed rapidly (in approximately 2000 seconds) on passive iron and magnetitc but they continue to rearrange from a liquid like state to a more crystallinc state. The alkyl chains presents low order even for large adsorption times this could indicate the existence of domains with different molecular orientation or order. These results are very interesting from the point of view of the enhancement of the metal/polymer stability. There is a good possibility that long chain phosphonic or phosphoric acid monolayers adsorpted on iron or steel surfaces and covalentely attached to a polymer using a proper terminal group (such a amino group) could be used to enhance the adhesion and stability of coatings. A significant pan of the research presented here was done under the direction of Prof. Dr. Martin Stratmann at the "Institut für Werkstoffwisscnchaften, Lehrstuhl für Korrosion und Oberflächentechnik (LKO), Friedrich-Alexander-Universität Erlangen-Nürnberg", Erlangen, Germany.

"Caracterización molecular de una fosfoproteína novel intermediaria en el mecanismo de acción de hormonas proteicas" (1998). Finkielstein, Carla V.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Trabajos previos de nuestro laboratorio han permitido caracterizar una fosfoproteína novel (p43), intermediaria en la síntesis de esteroides en la zona fasciculata de la corteza adrenal de rata (Paz C. et al. (1994) Eur. J. Biochem. 224:709-716). En la presente Tesis, se describe la caracterización molecular de p43 asi como también la regulación hormonal del transcripto. Los resultados obtenidos mostraron que p43 es homóloga a una acil-CoA tioesterasa mitocondrial. La secuencia aminoacídica deducida de la proteína presentó sitios consenso de fosforilación para diferentes proteínas quinasas y un motíf para serina Lipasa. Anticuerpos dirigidos contra un péptido sintético que incluye dicho motif y otro contra la región N-terminal de p43, bloquearon la actividad biológica de la proteína. El transcripto de p43 fue detectado en ovario de ratas pseudopreñadas, en zona fasciculata y glomerulosa de adrenal de rata, en una línea tumoral de células de Leydig, en cerebro de ratón y en placenta humana. El tratamiento de ratas con dexametasona (Dx) provoca una disminución en los niveles del ARNm de p43 de manera dosisdependiente en adrenales de rata. El tratamiento posterior con ACTH no sólo revierte el efecto de la Dx, sino que produce un aumento rápido (5 min) en los niveles del mensajero alcanzando un máximo a los 15 min (62%) y retornando a los valores basales a los 30 min posteriores al estímulo. El tratamiento con actinomicina D o cicloheximida antes del estímulo con ACTH provoca una disminución o un aumento en los niveles del ARNm de p43 respectivamente. Estos resultados relacionan por primera vez que una actividad de acil-CoA tioesterasa está involucrada en los procesos esteroidogénicos.

Abstract:
We have previously reported the purification of a phosphoprotein (p43) intermediary in steroid synthesis from adrenal zona fasciculata (Paz C. et al. (1994) Eur. J. Biochem. 224:709-716). Here we describe the cloning and sequencing of a cDNA encoding p43 as well as the hormonal regulation of p43 transcript. The protein resulted homologous to a very recently described mitochondrial peroxisome proliferator-induced very-long-chain acyl-CoA thioesterase. The deduced amino acid sequence of the protein shows consensus sites for phosphorylation by different protein kinases, and a Lipase serine motif. Antibodies raised against a synthetic peptide that includes the Lipase serine motif and against the N-terminal region of p43 block the action of the protein. The transcript of p43 was detected in ovary of pseudopregnant rats, rat adrenal zona fasciculata and glomerulosa, mouse Leydig tumor cell line, rat brain and human placenta. Inhibition of adrenocorticotropin hormone (ACTH)release and steroid synthesis by dexamethasone produced a dosedependent decrease in the abundance of the adrenal transcript. The transcript was induced by in vivo stimulation of the adrenals with ACTH. The effect had a rapid onset (5 min), reached maximal stimulation (62%) at 15 min and returned to basal levels at 30 min. ACTH effect on p43 transcript was inhibited by actinomycin D and enhanced by cycloheximide. Our results provide the first evidence linking acyl-CoA thioesterases, with very-long-chain specificities, and a protein intermediary in steroid synthesis, thereby supporting a regulatory role for acyI-CoA thioesterases in steroidogenic tissues.

"Caracterización molecular del Mal de Río Cuarto virus (MRCV) del maíz : estudio de los segmentos genómicos S1-S6, S8 y S10 y de las proteínas codificadas por los mismos" (2003). Distéfano, Ana Julia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El Mal de Rio Cuarto es la principal enfermedad del maíz en la Argentina. Es causado por el Mal de Río Cuarto virus (MRCV) y transmitido por una chicharrita de la especie Delphacodes kuscheli. El MRCV pertenece a la familia Reoviridae, género Fijivirus, y tiene la propiedad de multiplicar tanto en plantas de maíz como en el insecto vector. Las particulas virales consisten en una cápside icosahédrica formada por una doble capa de proteínas y contiene en su interior lO segmentos genómicos de RNA de doble cadena (dsRNA) llamados Sl a SlO, siendo el tamaño del genoma de aproximadamente 29 kbp. En los últimos años, y en muchos casos en paralelo con el desarrollo de éste trabajo, se han reportado las secuencias de algunos segmentos de virus relacionados: el MRDV (Maize rough dwarf virus), el FDV (Fiji disease virus), el ODSV (Oat sterile dwarf virus), el genoma completo del RBSDV (Rice black streaked dwarf virus) y del NLRV (Nilaparvata lugens reovirus). En este trabajo se clonaron, secuenciaron y analizaron los segmentos genómicos Sl, S2, S3, S4, S5, S6, S8 y SlO completos del MRCV. Se determinó que todos los segmentos genómicos analizados poseen secuencias 5’ y 3’ terminales conservadas y características del serogrupo al cual pertenece el MRCV: 5’AAGUUUUU3’ (extremo 5’) y 5’CAGCUnnnGUC3’ (extremo 3’). Adyacente a los extremos conservados se encuentran repeticiones de 7 a 12 nucleótidos invertidas e imperfectas que son segmento específicas. La predicción de la estructura secundaria de las cadenas codificantes de todos los segmentos estudiados, muestra que las regiones terminales son capaces de formar estructuras secundarias determinadas y estables que fueron propuestas como señales de replicación y empaquetamiento en virus del género Rotavirus. Se compararon las secuencias de nucleótidos obtenidas y las secuencias de aminoácidos deducidas con las secuencias de otros reovirus depositadas en las bases de datos, y se identificó la presencia de motivos característicos, a menudo indicativos de función. Se determinó que el MRCV Sl codifica para una proteína básica de 168,4 kDa que contiene motivos conservados en las RNA polimerasas dependientes de RNA y es homóloga a las RNA polimerasas codificadas por los virus RBSDV, FDV y NLRV, asi como a las codificadas por miembros de otros géneros de la familia Reoviridae. El MRCV S2 codifica para una proteína de 134,4 kDa y posee homología con las proteínas codificadas por el RBSDV S4, el FDV S2 y NLRV S2. En este trabajo presentamos evidencias de que la proteína codificada en éste segmento es no estructural. El MRCV S3 codifica para una proteína de 141,7 kDa, y hemos demostrado que es la proteína mayoritaria de la cápside interna o “core” viral y posee una alta homología con las proteínas correspondientes codificadas por el RBSDV S2 y FDV S3. El MRCV S4 codifica para una proteina de 131,7 kDa y su función se desconoce. Presenta una relativamente alta homología con miembros del género Fijivirus como así también con otros miembros de la familia Reoviridae. El MRCV S5 codifica para una proteína de 106,9 kDa cuya función se desconoce. Esta proteína presenta homología con las proteínas codificadas por los segmentos S5 del RBSDV y del FDV. El MRCV S6 codifica para una proteína de 90 kDa cuya función se desconoce. Esta proteína presenta una llamativa baja homología con las proteínas codificadas por los segmentos S6 del RBSDV y del FDV. El MRCV S8 codifica para una proteína de 68,3 kDa que contiene un motivo de unión de ATP/GTP que es característico de helicasa. Además la proteína es homóloga con las proteínas codificadas por el RBSDV S8, el MRDV S7, el OSDV S9 y el NLRV S7, todas con probable función de helicasa. El MRCV SlO codifica para una proteína de 63,5 kDa y su probable función sería la de proteína de cápside externa. Esta proteína presenta una alta homología con las proteínas correspondientes codificadas por los segmentos SlO de los virus RBSDV, MRDV y FDV. El análisis de los valores de homología encontrados entre los distintos segmentos del MRCV y los segmentos de virus relacionados, apoyaría la idea de evolución independiente de cada segmento viral. El análisis filogenético realizado con las secuencias obtenidas del MRCV permitió proponer que a pesar de que el MRCV está relacionado con el MRDV y el RBSDV, debe ser considerado una especie diferente del género Fijivirus (Distéfano y col., 2002) y no una raza geográfica del MRDV, como había sido inicialmente propuesto. El análisis filogenético realizado con las secuencias de aminoácidos de polimerasas representativas de todos los géneros de la familia Reoviridae mostró la existencia de dos grupos evolutivos separados: uno agrupa a los Orthoreovirus, Aquareovirus, Orbivirus y Rotavirus, y otro agrupa a los Fijivirus, Cypovirus, Olyzavirus y Coltivirus. Se expresaron algunos de los segmentos virales en estudio en bacterias obteniéndose proteínas de fusión con un péptido rico en histidinas que facilita su posterior purificación. Se obtuvieron antisueros policlonales contra las proteínas codificadas por los segmentos S2, S3, S4 y S6. El antisuero obtenido contra la proteína codificada por el MRCV S3 fue capaz de reconocer específicamente una de las proteína estructurales presentes en partículas virales purificadas del MRCV en un ensayo de “Western blot”. Esta proteina correspondería a la proteína mayoritaria de la cápside interna o “core” viral. En un experimento complementario, un antisuero obtenido contra las proteínas de la partícula viral fue capaz de reconocer a la proteína del MRCV S3 expresada en bacterias. Asimismo el antisuero obtenido contra la proteína codificada por el MRCV S3 reconoce una proteína de tamaño similar al esperado en extractos de plantas enfermas. Mediante experimentos de inmunomicroscopía electrónica sobre cortes de hojas de maíz infectadas el con MRCV se confirmó que la proteína codificada por el S3 del MRCV es una proteína estructural del virus y se demostró que forma parte del “core” viral El antisuero obtenido contra la proteína codificada por el MRCV 82, reconoció específicamente a una proteína de menor tamaño al esperado en extractos proteicos totales de plantas enfermas. Mediante experimentos de inmunomicroscopía electrónica sobre cortes de hojas de maíz infectadas el con MRCV se confirmó que la proteína codificada por el S2 del MRCV seria una proteína no estructural presente en los viroplasmas. En experimentos de “Far-Western blot” se observó que la proteína codificada por el MRCV S3 era capaz de interactuar consigo misma, con una proteína de 130 kDa que correspondería a la espícula viral de tipo B y con la RNA polimerasa dependiente de RNA codificada por el MRCV Sl. En Rotavirus se demostró que las proteínas equivalentes interaccionan entre sí. Los resultados presentados en este trabajo contribuyeron al avance en el estudio del virus que causa la enfermedad del Mal de Río Cuarto, a la clasificación taxonómica del mismo y al estudio de su origen evolutivo. Además los datos obtenidos permitieron el diseño de una estrategia de resistencia al MRCV en plantas transgénicas de maíz basada en el desencadenamiento del silenciamiento génico post-transcripcional (PTGS).

Abstract:
Mal de Río Cuarto is the most important maize disease in Argentina. lt is caused by the Mal de Río Cuarto virus (MRCV) and transmitted by the planthopper Delphacodes kuschell. MRCV belongs to the Reoviridae family, Fijivirus genus, and has the interesting feature of being able to multiply both phloem cells of maize plants and in vector insects. The viral icosahedral double-shelled particles contain lO double-stranded RNA segments (dsRNA) called Sl -SlO, with a total genome size of nearly 29 kbp. In the last years, and in many cases simultaneously with this work, the nucleotide sequences of some Fijivirus genome segments have been reported: MRDV (Maize rough dwarf virus), FDV (Fiji disease virus) and ODSV (0at sterile dwarf virus). In addition the entire RBSDV (Rice black streaked dwarf virus) and NLRV (Nilaparvata lugens reovirus) has been published. This work reports the cloning, sequence and analysis of the genomic nucleotide sequences of MRCV Sl, S2, S3, S4, S5, S6, S8 and SlO. All the analyzed segments have the conserved 5’ and 3’ ends that were reported for viruses of the same serogroup to which MRCV belongs: 5’AAGUUUUU3’ and 5’CAGCUnnnGUC3’, respectively. In addition segment-specific imperfect inverted repeats of 7-12 nucleotides were identified immediately adjacent to the conserved sequences. Prediction of the secondary structure of all segments coding strands showed that terminal regions were able to form defined and stable secondary structures that are proposed to be replication and packaging signals in Rotavirus. We compared their nucleotide and amino acidic sequences with the ones deposited in Genebank for other reoviruses. MRCV Sl potentially encodes a 168.4 kDa basic protein that contains RdRp distinctive motifs and has identity with the RdRps encoded by RBSDV, FDV and NLRV as well as with RNA polimerases coded by virus belonging to other genera of the Reovirdae family. MRCV S2 encodes a single 134.4 kDa protein which has and intermediate identity to RBSDV S4, FDV S2 and NLRV S2-encoded proteins. In this work we showed that the protein coded by this segment is a non-structural protein. MRCV S3 codes for a l4l .7 kDa protein and we demonstrated that is the major core protein and has an extremely high homology with the proteins coded by RBSDV S2 and FDV S3. MRCV S4 codes for a 131.7 kDa protein and its function is unknown. It shows identity to members of Fijivirus as well as to two other genera of the Reoviridae family. MRCV S5 codes for a 106.9 kDa protein and its function is unknown. It shows identity with RBSDV SS and FDV S5-encoded protein. MRCV S6 codes for a 90 kDa protein and its function is unknown. It has a very low homology with the proteins coded by RBSDV S6 and FDV S6. MRCV SBcodes for a 68.3 kDa protein Significantly, MRCV S8 encoded protein contains an ATP/GTP-binding site motif that is a common feature of dsRNA helicases. In addition, MRCV S8 revealed identity with the proteins coded by RBSDV S8, MRDV S7, OSDV S9 and NLRV S7, all of them with proposed helicase function. MRCV SlO codes for a 63.5 kDa protein that probably corresponds to the outer capsid protein. This protein shows a high identity with the proteins coded by RBSDV SlO, MRDV SlO and FDV SlO. The comparative level of homology between different MRCV encoded proteins varied noticeably, supporting an independent evolution of the different genome segments. We discussed the evolutionary relationships of MRCV to other Reoviridae, and based on phylogenetic analysis we proposed that although MRCV is related to MRDV and RBSDV, it could be regarded as a new species of the Fijivirus genus and not a geographic race of MRDV as it was previously proposed. Phylogenetic analysis based on RdRps amimo acidic sequences of viruses belonging to all the genus of the Reoviridae family, showed the existence of two major evolutionary divisions of polymerase proteins among them: one grouped Orthoreovirus, Aquareovirus, Orbivirus and Rotavirus, and the second one grouped Fijivirus, Cypovirus , Oryzavirus and Coltivirus. Some of the studied segments were expressed in bacteria as fusion proteins with an histidine-rich peptide. Polyclonal antibodies were raised against S2, S3, S4 and S6 coded proteins. The antiserum obtained against the protein coded by MRCV S3 was able to specifically recognize a single structural protein present in the purified virus particles in a Western blot assay and a 140 kDa protein present in infected plants. This protein corresponds to the major core protein. On the other side, a polyclonal antiserum against the purified virus particle was able to recognize a MRCV S3 fusion protein expressed in bacteria. Inmuno-electron microscopy revealed that antiserum against the protein coded by MRCV S3 reacted with viral cores. The antiserum obtained against the protein coded by MRCV S2 was able to specifically detect a single protein of a smaller size as predicted in total proteins extracts from infected maize plants. Inmuno-electron microscopy revealed that antiserum against the protein coded by MRCV S2 reacted with viroplasms present in the phloem cells of infected maize plants. “Far-Westem blot” experiments showed that MRCV S3 coded protein interacts with itself with a protein of l30 kDa that probably correspond to the B-spike and with the RNA dependent RNA polimerase encoded by MRCV Sl. In Rotavirus the correspondent proteins also interact. The results showed in this work contribute to the understanding of the virus that cause Mal de Rio Cuarto disease, helped redefine the virus taxonomic classification within the genera, and collaborated with the determination of the evolutionary origin of the fijivirus genus. Also these results allowed to the design of a MRCV resistance strategy in trasgenic maize plants based on the triggering of post-transcriptional gene silencing (PTGS).

"Caracterización molecular del gen que codifica para una proteína flagelar ligadora de calcio del Trypanosoma cruzi, altamente consevado en Tripanosomátidos" (1996). Porcel, Betina Mabel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La fracción flagelar de epimastigotes de Trypanosoma cruzi, enriquecida en flagelos y elementos de membrana, ha mostrado en modelos experimentales murinos las mejores propiedades inmunogénicas, protectivas y no agresivas contra el desafío con el T. cruzi Quizás sólo un pequeño número de los componentes de esta fracción están involucrados en esta inmunidad protectiva en el huésped, en tanto que el resto de ellos podrían actuar en otros procesos esenciales para el parásito. Las señales de calcio juegan un papel preponderante en diversos mecanismos de transducción de señales en parásitos, tanto en relación a la invasión a la célula hospedadora como en los cambios morfo-fisiológicos del mismo a lo largo de su ciclo de vida. Asimismo, la alta conservación de las proteínas moduladoras de calcio en distintos tripanosomátidos, ha sugerido su posible implicancia en dichos procesos de transducción. En este trabajo se describe la caracterización a nivel molecular del gen que codifica para una proteína flagelar ligadora de calcio en T. cruzi, y su versión homóloga en Trypanosoma rangeli. Varios clones de ADN recombinante fueron detectados en una genoteca de expresión construida a partir del ADN total de la forma epimastigote de T. cruzi (clon Miranda/76), en el vector de expresión λgt11 , utilizando suero de conejo anti-fracción flagelar. Dos de esos clones recombinantes fueron seleccionados para la caracterización de sus productos de expresión. La expresión de estos clones recombinantes en bacterias produjo proteínas fusionadas a la enzima g-galactosidasa, las que mostraron poseer epitopes reconocidos por anticuerpos dirigidos contra la fracción flagelar del parásito. La adsorción del suero anti-fracción flagelar por las proteínas expresadas, permitió obtener anticuerpos que identificaron por "inmunoblotting" moléculas de 29 kDa en ambos casos, en homogeneizado total de epimastigotes y fracción flagelar, mientras no reaccionaron con antígenos de Leishmania brasiliensis. Posteriormente, el análisis de la secuencia de bases de ambos fragrnentos confirmaron que los insertos provenientes de ambos clones codifican para una misma proteína de 29 kDa. en T. cruzi. La presencia de este antígeno F29 en la superficie del parásito fue comprobada por inmunofluorescencia. La expresión del gen completo que codifica para la proteína flagelar F29 en el vector pMAL-p2 permitió obtener una proteína recombinante fusionada a proteína de unión a maltosa, que mostró ser ligadora de calcio. Cuando se ensayó la inmunogenicidad del antígeno recombinante F29-MBP, utilizando Bordetella pertussiscomo adyuvante, se observó que esta proteína es capaz de generar una respuesta inmune humoral contra el T. cruzi, demostrada por anticuerpos dirigidos contra la proteína pura y el homogenato total del parásito. Los epitopes generadores de respuesta en F29-MBP fueron reconocidos en un gran número de otras proteínas en el parásito, a igual que se mostraron altamente representados en el T. rangeli. El gen que codifica para la proteína flagelar ligadora de Ca++ F29 mostró encontrarse organizado en al menos 20 copias, altamente conservadas entre cepas pertenecientes a distintos zimodemas, adyacentes una a la otra con una disposición cabeza-cola en el genoma del parásito. Dicho gen se expresa en epimastigotes de T. cruzi transcribiendose a un mensajero policistrónico, el cual podría sufrir un procesamiento post-transcripcional de clivaje y poliadenilación, también observado para otros genes del parásito. El perfil encontrado para diferentes clones y cepas de T. cruzi estudiados por hibridización a cromosomas enteros fraccionados por electroforesis en campo pulsado reveló que el gen que codifica para la proteina flagelar F29 se halla ampliamente representado en T cruzi, mostrando una conservación intraspecífica en las cepas y clones evaluados. Asimismo, estos patrones de hibridización mostraron una alta correlación con la clasificación isoenzimática de las distintas cepas y clones analizadas de acuerdo a su perfil isoenzimático basado en 2, 12, 13 y 19 loci. A su vez, la existencia de al menos dos arreglos de repeticiones de genes, ubicados en un par de cromosomas homólogos fue observada al enfrentar la misma sonda a productos de digestión provenientes de la digestión de cromosomas enteros de distintas cepas, con enzimas sin sitios de corte dentro del inserto. La amplificación por reacción en cadena de la polimerasa sobre ADN genómico total de T. rangeli (aislado LDG) usando como iniciadores de la síntesis oligonucleótidos diseñados a partir de la secuencia completa del gen que codifica en T cruzi para la proteína flagelar ligadora de calcio F29, permitió la obtención de un fragmento de ADN que codifica para una proteína de 23 kDa con alta homología con proteínas flagelares responsables de la unión a Ca2+ en otros tripanosomátidos. La hibridación a ARN de T. rangeli reveló que esta proteína se expresa como un transcripto poliadenilado de 1.6 kb, a raiz, al igual que en T. cruzi, de un procesamiento post-transcripcional. El gen que codifica para TrCaBP en T. rangeli tambien se encontró organizado en al menos 20 copias por célula, en dos cromosomas de gran tamaño en ciertos aislados del T. rangeli, y a dos pequeños en otros aislados. Los resultados presentados demuestran que la información genética que codifica para la proteína flagelar ligadora de Ca2+ F29 del T. cruzi se encuentra altamente conservada en el genoma de otros tripanosomátidos, sin encontrarse presente en el género Leishmania.

Abstract:
The flagellar fraction of Trypanosoma cruzi epimastigotes contains flagellar membrane components such as glycoproteins and parasite surface enzymes. This fraction has the best immunoprotective properties in the murine model. Just a few of these components would be involved in this protective response, whereas others would play a key role in parasite's essential processes. Calcium signals would play an important regulatory role in signal transduction processes in parasites, being critically involved in the coordination of life cycle events and cell invasion. Likewise, the high conservation of calcium-modulated proteins among different trypanosomatides supports the notion that these cell-surface calflagins would play common roles in these caZ+-transduction processes. In the present study, we report the cloning and molecular characterisation of genes encoding EF-hand calcium-binding proteins in Trypanosoma rangeli and T. cruzi, showing that these genes are highly conserved in these related trypanosomes. A T. cruzi, Miranda/76 clone, genomic Agtl 1 expression library was screened with rabbit anti flagellar fraction polyclonal antibodies and several clones were obtained. Two of them, with inserts of 550 and 750 bp respectively, were selected for recombinant protein production. The IS-galactosidase fusion proteins produced in bacteria by IPTG induction possesed epitopes recognized by antibodies raised against T. cruzi flagellar fraction. Antibodies selected from the anti-flagellar fraction polyclonal sera using these fusion proteins, detected a 29 kDa. protein in T. cruzi epimastigote whole homogenate and flagellar fraction by immunoblotting, whereas no reactivity was observed against Leishmania brasiliensis . Subsequently sequence analysis showed that both inserts encoded for the same 29 kDa. protein in T. cruzi. The presence of F29 antigen on the parasite surface was confirmed by indirect immunofluoresence. Expression of the complete F29 encoded-gene into pMAL-p2 expression vector showed that F29 is a calcium-binding protein. Furthermore, this recombinant protein was inmunogenic in mice, using Bordeteila pertussis as adyuvant. Antibodies raised against F29recognized several proteins in T. cruzi by immunobloting as well as in T. rangeli. F29 is encoded by at least twenty tandemly arranged highly conserved genes, organized in a head-to-tail fashion in the parasite genome. F29-encoding gene is transcribed as a polyadenylated transcript in the parasite. PFGE hybridization experiments revealed the presence of the F29 genes in different T. cruzi isolates, cloned stocks and strains, with common features between T. cruzi isoenzimatic classification and chromosomal hybridization patterns. Similar pattern of one or two bands were seen after PFGE-Southern analysis with rare cutting restriction enzymes, which do not cut inside the tandem array, indicating a disomic chromosomal constitution for F29 genes. PCR amplification of T. rangeli genomic DNA, using primers derived from the T. cruzi F29-encoding sequence made it possible to isolate the homologous gene in T. rangeli, encoding a 23 kDa highly homologous to calcium-binding proteins from trypanosomatids. Northern blot analysis revealed that the Tr CaBP gene is also expressed in T. rangeli as a polyadenylated transcript. The TrCaBP-encoding genes are present in at least 20 copies per cell, organized in tandem arrays on large T. rangeli chromosomes in some isolates, and on two smaller in others. Hence, the calcium-modulated proteins encoding genes, as well as their genomic organization, are well conserved in trypanosomes. The gene, however, seems to be absent from Leishmania sp.

"Caracterización molecular y bioquímica de una nueva proteína quinasa de Trypanosoma cruzi" (1997). Pascuccelli, Verónica. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En los organismos eucariotas, la regulación de las complejas interacciones requeridas para la diferenciación y proliferación, está mediada en parte por los sistemas de fosforilación de proteínas. En Trypanosoma cruzi, se han podido caracterizar varias vías de transducción de señales a partir de la identificación y caracterización de sus distintos componentes como proteínas quinasas (PKA, PKC, Cam quinasa, CDK), adeninililciclasa (AC) y proteína G, entre otros. Dentro de la familia de las serina/treonina quinasas, recientemente ha sido identificada una nueva subfamilia de quinasas Llamadas RAC o PKB, cuya principal característica radica en la similitud de identidad que existe a nivel de su secuencia aminoacídica con PKA y PKC por igual. Estas proteínas han sido identificadas en células de mamíferos, Drosophila melanogaster, Caenorabhditis elegans, Dyctiostelium discoideum y Entamoeba histolytica pero no han sido aún detectadas en ningún tripanosomátido. Por lo tanto, nos hemos propuesto clonar el o los genes que codifican para esta nueva proteína quinasa en T. cruzi, para su posterior caracterización molecular y bioquímica y si es posible dilucidar su probable rol in vivo. Como resultado, hemos clonado el gen que codifica para una proteína quinasa RAC homóloga (PKTc), cuyo tamaño es de 1287 pb y codifica para una proteína de 428 aminoácidos. Esta proteína mostró tener entre un 60 y un 70% de homología con otras RAC quinasas. La PKTc recombinante es capaz de fosforilar a la histona IIAS, y de autofosforilarse, fosforilando específicamente residuos de treonina en ambos casos. Utiliza ATP como dador de fosfatos, requiere exclusivamente Mn²+ para su actividad, su valor de pH óptimo es entre 6-8 y su temperatura óptima es de 37°C. El Km aparente para el ATP resultó ser de 1.6 μM. La presencia de diferentes activadores (Ca²+/Cam) o inhibidores (PKI, H7, GF, staurosporina) no mostró tener un efecto significativo sobre su actividad. Experimentos de inmunolocalización utilizando anticuerpos contra la proteína recombinante, demostraron que la enzima se encuentra anclada en la membrana posiblemente, a través de ácido palmítico. Por otro lado, a través de experimentos de Western blot pudimos establecer que la PKTc está presente en los estadios de amastigote, epimastigote y tripomastigote metacíclico sin mostrar un patrón de expresión diferencial, que demuestra que esta proteína sería de carácter constitutivo. Experimentos de inmunoprecipitación nos permitirán en el futuro, identificar otras proteínas que interactúan con PKTc in vivo y dilucidar así la vía de transducción de señales en la que PKTc estaría involucrada.

Abstract:
In eucariotes, the regulation of the complex interactions required for differentiation and proliferation, is partially control by protein phosphorylation. The characteristics of several signal transduction pathways have been described in Trypanosoma cruzi from the dentification and characterization of several components such as protein tinases (PKA,PKC, Cam kinase, CDK), adenylyl cyclase (AC), protein G. Recently, a new subfamily of serine/threonine kinases have been identified, called RAC or PKB, which are closely related to PKC and PKA families at their aminoacidic sequences. This proteins have been identified in mammals cells, Drosophila melanogaster, Caenorabhditis elegans, Dyctiostelium discoideum and Entamoeba histolytica but they haven’t been detected yet in trypanosomatids. So, our objective was the cloning of the gene/s that codifies for these new protein kinase in T. cruzi, its later characterization at the molecular and biochemical level and if it’s possible, elucidate its function in vivo. As results, we cloned the gene that codifies for a protein kinase RAC homolog (named PKTc), with an open reading frame of 1287 pb that corresponds to a protein of 428 aminoacids long. This protein shares 60-70% homology with other RAC proteins. The recombinant PKTc can phosphorylate histone IIAS and itself, in both cases, exclusively in threonine residues. Uses ATP as phosphate donor, requires Mn²+ exclusively for its activity, the optime pH is neutral (6-8) and the optime temperature is 37°C. The apparent Km for the ATP is 1.6 μM. The presence of different activators (Ca²+/Cam) or inhibitors (GF, H7, staurosporine, PKI) did not affect the kinase activity significatly. Experiments of inmunolocalization using antibodies against the recombinant enzyme showed that PKTc is anchored to a membrane probably by a palmitic acid. Western blots experiments were done in order to investigate the differential expression of PKTc during the different stages of the life cycle of T. cruzi. The results demonstrated that this enzyme is present in the 3 stages (amastigote, epimastigote, metacyclic trypomastigote), without a differential expression pattern, so we supposed that it’s a constitutive protein. In the future, inmunoprecipitation experiments will allow us to identified other proteins that could interacted with PKTc in vivo and elucidate the signal transduction pathway in which this enzyme is involved.

"Caracterización molecular y cariotípica de la variabilidad genética de germoplasma argentino de Solanum L." (1998). Marcucci Poltri, Susana N.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La papa cultivada se encuentra relacionada con un gran número de especies del género Solanum con las que frecuentemente se cruza. Por tal motivo, las aproximadamente 200 especies silvestres que producen tuberculo, constituyen un importante reservorio de genes para distintos propósitos de mejoramiento. Las mismas se encuentran distribuidas en un amplio rango de hábitats y nichos ecológicos, constituyendo el Noroeste argentino, una gran fuente de germoplasma. Es conocido que poseen gran variabilidad tanto dentro como entre especies. La información sobre el grado de relación genética que existe entre las distintas entradas, reviste gran interés para las aplicaciones al mejoramiento genético, organización de los bancos de germoplasma. identificación de cultivares, reducción del número de entradas necesarias para que alberguen en una pequeña muestra, la mayor variabilidad genetica posible, para el mejoramiento molecular, etc. La variabilidad genetica puede medirse utilizando distintas herramientas las que incluyen datos morfológicos, citológicos, bioquímicos y moleculares. El objetivo de este trabajo es evaluar la variabilidad genética de 67 entradas silvestres y cultivadas del género Solanum, coleccionadas en el Banco de Germoplasma de EEA INTA- Balcarce, aplicando metodologías citológicas y moleculares y contrastar los resultados obtenidos con la clasificación taxonómica y su hipótesis evolutiva. Se analiza la utilidad de estas herramientas y la información generada mediante los polimorfismos de restricción correspondientes a los ADNs ribosomales. Se evaluó mediante microdensitometría, el contenido de ADN de individuos pertenecientes a 14 especies silvestres del género Solanum con el fin de detectar diferencias en el valor C. A pesar de que la mayoria de las especies no mostró diferencias significativas entre ellas (dentro de los distintos grupos de ploidías), pequeñas diferencias fueron detectadas entre algunas de ellas. S. tarijense y S. kurzianum (2.3 pg) difirieron significativamente (0,1%) de S. Spegazzini, S. vernei, S. venturii y S. commersonii (1,9 pg); y S.. megistacrobolum (2,2 pg) difirió de S. spegazzinii (1,9 pg) dentro de los citotipos diploides. Entre los tetraploides el rango fue desde 3,6 pg (S. tuberosum ssp tuberosum cv. Baraka) hasta 4,7 pg (S. tuberosum ssp andigena y S. gourlayi) hallándose diferencias significativas al 0,1%. En cuanto a la variabilidad de los genes que codifican para el ARN ribosomal, se detectaron diferentes tamaños de las subunidades completas, tanto dentro como entre especies, y aún, dentro de una misma especie; sugiriendo una alta tasa de mutaciones localizada fundamentalmente el extremo 5' del espaciador externo. La pérdida del sitio EcoRI del extremo 3'de dicho espaciador en todas las entradas de S. venturii fue característica de dicha especie. El desarrollo de las nuevas metodologías ha expandido el rango de los ensayos para detectar polimorfismos de ADN con propósitos de "fingerprinting", distancias genéticas, etc. Se han desarrollado distintos marcadores moleculares (RFLP, AFLP, SSR etc) con el fin de estudiar las relaciones genéticas y se evaluó su utilidad en varios cultivos, incluidos la papa cultivada, S. tuberosum ssp tuberosumm. En este trabajo, se ensayaron 4 combinaciones de "primers" de AFLP, 15 sondas genómicas de RFLP y 7 pares de "primers" para SSR; para un grupo de 67 genotipos diploides y poliploides que pertenecen al mismo grupo de especies silvestres y cultivadas. Se compararon las asociaciones generadas mediante todas las técnicas y se las comparó con la clasificación taxonómica tradicional. Se calcularon los indices de contenido polimórfico promedios correspondiente a cada sistema (con valores aproximados de 0,25 para RFLP, 0,32 para AFLP y 0.58 para SSR), número de polimorfismos por ensayo y también se determinaron los alelos comunes entre las entradas diploides y poliploides, incluyendo al cultivar de papa. En términos generales, las relaciones entre las especies variaron según la metodología utilizada. Se observó una gran variabilidad dentro de especies, lo que dificultó el establecimiento de las relaciones entre especies. Como se esperaba, las entradas pertenecientes a una misma especie, en general se agruparon con mayor similitud que entre especies, independientemente de la técnica utilizada. También se detectaron asociaciones de individuos concordantes con la procedencia geográfica. Promediando todos los indices de similitud obtenidos con los tres métodos. la especie que tuvo menor variabilidad fue S. venturii (0,681) y la de mayor variabilidad S. gourlayii(0,411). Los mejores valores de correlaciones entre los distintos sistemas correspondieron a AFLP y SSR, en los dos grupos de ploidías, aunque los coeficientes de correlación entre las matrices de similitud obtenidas mediante las distintas herramientas no difirieron demasiado. Los valores de correlaciones en los citotipos diploides fueron desde 0,510 (RFLP vs SSR), 0,552 (RFLP vs AFLP), 0,640 (AFLP vs SSR). Considerando todos los citotipos independientemente de la ploidía, los valores oscilaron desde 0,441 (RFLP vs SSR), 0,505 (RFLP vs AFLP) a 0,629 (AFLP vs SSR). Debido a los altos valores obtenidos en los coeficientes de correlación cofenéticos (matrices de similitud vs. matrices cofenéticas, AFLP r=0.92; SSR r=0.85; RFLP r=0.78), las asociaciones entre los individuos pueden visualizarse directamente a partir del dendrograma. Los AFLP mostraron el mejor ajuste con la clasificación taxonómica, asociando dos especies que pertenecen a la misma serie Yungasensa (S. tarijense y S. chacoense), como así también agrupando más próximo al grupo de referencia externo tomate, a las entradas pertenecientes a S. commersonii, considerada como la especie más primitiva según la hipótesis propuesta por Hawkes, 1990. Esto quizás sea debido al gran número de bandas compartidas entre el germoplasma y a la alta cobertura genómica. En el caso de RFLP, se observaron algunos individuos dispersos, sugiriendo que sería necesario evaluar un mayor número de sondas. Los SSR en general se utilizan para obtener información dentro de especies. pero no entre especies. Pudo observarse que la mayoria de los loci evaluados produjeron amplificaciones, indicando la conservación de las regiones flanqueantes. Sin embargo, el número de repeticiones, no fue muy conservado entre las distintas especies, transformándolos en inapropiados para establecer relaciones entre especies, pero si muy útiles dentro de especies. El análisis reverso de los datos, permitió la detección de bandas caracteristicas de especies y también de individuos. Casi todas las especies pudieron discriminarse con estas bandas, y muchos de los individuos mostraron bandas únicas. Se evaluaron asimismo el número de bandas novedosas respecto del cultivar Huinkul MAG, en especies como en individuos particulares, pudiendo identificarse aquellas más distantes genéticamente, que serían potencialmente interesantes para aumentar las bases genéticas de los cultivares comerciales. También se determinó es grado de homocigosis de los distintos genotipos diploides, merced al uso de los marcadores de tipo codominantes (RFLP y SSR) mostrando un mínimo de homocigosis de 26% en S. goniocalyx megistacrolobum Oka 3787.

Abstract:
Cultivated potato is related to a large number of Solanum sp and can easily be hybridized. This makes that the two hundred wild and cultivated tuber-bearing species of the genus Solanum form a valuable gene reservoir for different breeding purposes. They are distributed in a wide variety of habitats and niches (North-West Argentina is a source of a great number of these species), there is high genetic variation within and between species. Information on genetic relationships among accessions has several important applications for crop improvement: organizing germplasm banks, identifying cultivars, reducing the number of accessions needed to ensure a representative sample of broad range of genetic variability, molecular breeding, etc. Genetic variability can be assessed in different ways including the comparison of morphological, cytological, biochemical and molecular data. The objective of this work is to evaluate genetic variability of 67 wild and cultivated Solanum accessions belonging to the germplasm bank of EEA INTA Balcarce applying cytologic and molecular tools. The usefulness of this tools are compared with traditional taxonomy and its evolutive hypothesis. Ribosomal DNAcoding sequences are explored trough different restriction polymorphisms. Different subunits sizes were detected within and between species, and also in one specie, showing a high mutation rate mainly in the 5' end of the external spacer. All accessions of S. venturi showed the lost of an EcoRI restriction site located in the 3' end of the external intergenic spacer. DNA content of individuals belonging to 14 wild Solanum species was measured by microdensitometry to determine differences in their C value. Although most species did not show significant differences between them, slight differences could be detected between some of the species. Both S. tarijense and S. kurzianum (2.3 pg) differ from S. spegazzinii, S. vernei, S. venturii and S. commersonii (1,9 pg); and S. megistacrolobum (2,2 pg) differ from S. spegazzini (1,9 pg) at diploid level. Tetraploids ranged from 3.6 pg (S. tuberosum ssp tuberosum cv. Baraka) were found at 0.1% level. New technological developments have expanded the range of DNA polymorphism assays for genome fingerprinting, genetic relatedness, etc. Different molecular markers (RFLP, AFLP, SSR, etc.) has been developed to study genetic relationships and their usefulness was compared in many crop species including cultivated potato Solanum tuberosum ssp tuberosum In this work, 67 genotypes (diploids as well as tetraploids) belonging to the same group of wild and cultivated species, were assayed with, 15 RFLP genomic probes, 4 AFLP primers combinations and 7 microsatellite primers pairs. Associations generated by each technique were compared as well as how they fit with traditional taxonomy classification. Estimates of diversity indexes for each system (RFLP=O,25, O,32=AFLP and O,58=SSR), number of polymorphisms per assay as well as identification of common alleles between diploid and tetraploid accessions including cultivated potato were calculated. In general terms, quantification of relatedness between species varied depending on the technique applied. It was observed a very high level of variation within species, making more difficult to establish relationships between species. As expected, accessions of the same species grouped at a higher level of similarity than with the rest of the germplasm, independently of the molecular tool used for evaluation. Genotypes belonging to the same geographic origin, were also grouped. S. gourlayí showed to be the most variable specie calculated on the bases of the three methodologies with the with the smallest average similarity index (0,411) and the less variable was S. venturii with the highest average similarity index (0,681). Similarity indexes calculated on the bases of all three different methodologies were correlationed and r values were 0.510 (RFLP vs SSR), 0,552 (RFLP vs AFLP), 0,640 (AFLP vs SSR) for diploid species. Taking into account all citotypes, r values ranged from 0.441 (RFLP vs SSR), 0,505 (RFLP vs AFLP) a 0,629 (AFLP vs SSR). As similarity matrixes are comparable with cophenetic matrixes (AFLP r=0.92; SSR r=0.85; RFLP r=0.78), this allows us to roughly visualize the associations between accessions directly on dendograms. AFLP showed the best fit to taxonomic classification grouping two species (S. tarijense and S. chacoense) which belong to the same taxonomical serie Jungasensa, althogeter; also S. commersonii which is considered to be the most primitive taxon of this group (Hawkes. 1990) was grouped near the outgroup tomato. This might be due to the higher proportion of shared bands respect to the other and the relative better coverage of genomes. In the case of RFLP, some accessions were dispersed, suggesting that more probes need to be analyzed. SSR are usually used to obtain information within species and not between species, it was observed that the loci were conserved since amplification was possible in many of the genotypes analyzed. However, microsatellite loci showed very little conservation of alleles in different species (as expected for this very mutable loci) making them not appropriate for relatedness quantification when comparing different species while they keep their usefulness within species. Reverse analysis of data allowed the detection of specie specific bands as well as individuals ones. Nearly all of the species were able to be discriminated and most of single individuals had unique bands. Novel bands not found in potato cultivar Huinkul MAG were also computed in all species and in individuals allowing the knowledge of the more distant ones, which might be interesting for increasing genetic basis of commercial cultivars. Homozygous status of diploids genotypes were also estimated using codominant markers (RFLP and SSR) being of 36% for S. spegazzinii Oka 6108 and 64% for S. goniocalyx y S. megistacrolobums Oka 3787.

"Caracterización morfológica de las larvas y de los receptores olfativos del parasitoide Mallophora ruficauda (Diptera: Asilidae) y determinación del origen de las claves químicas en el hospedador Cyclocephala signaticollis (Coleoptera: Scarabaeidae)" (2014-03-14). Groba, Hernán F.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En un ambiente complejo y heterogéneo, el éxito de los individuos y de su descendencia depende de la capacidad de localizar los recursos y las condiciones necesarias para su supervivencia. El encuentro de los recursos y la evaluación de las condiciones se logran a través de la percepción de estímulos o claves, y particularmente en los insectos, los estímulos químicos juegan un rol central en estos procesos. En los parasitoides, la búsqueda y localización de los hospedadores, los cuales constituyen el recurso fundamental en su vida, puede involucrar diferentes tipos de estímulos, pero en particular son las claves químicas volátiles las que están mayormente implicadas en este comportamiento. El moscardón cazador de abejas Mallophora ruficauda es un parasitoide solitario de larvas de coleópteros de la familia Scarabaeidae (gusanos blancos del suelo) y una plaga de la apicultura de la Región Pampeana Argentina. En estado adulto es depredador de insectos, en particular de abejas melíferas, y en estado larval parasita preferentemente a larvas de tercer estadio de Cyclocephala signaticollis. La localización del hospedador por M. ruficauda está compartida entre la hembra y la larva. En primer lugar, la hembra localiza el hábitat del hospedador y ovipone en sustratos altos maximizando la dispersión de su progenie por el viento. En una segunda fase, las larvas que llegan al suelo se entierran, mudan y buscan activamente a su hospedador por medio de claves químicas que se originan en el tubo digestivo del gusano blanco. Hasta el momento, existen algunos aspectos de este mecanismo de localización que se desconocen. Por tanto, en la presente Tesis se estudiaron aspectos asociados al comportamiento de localización del hospedador por parte de M. ruficauda, tales como las características morfológicas de las estructuras sensoriales de los adultos y las larvas, los aspectos fisiológicos y morfológicos de las larvas sociados al período de búsqueda, y el rol ecológico y origen de las claves químicas producidas por los hospedadores. Se encontró que las antenas de los adultos de M. ruficauda están especializadas en la captura e intercepción de estímulos químicos volátiles, posiblemente involucrados en los comportamientos de apareamiento y oviposición. Las larvas de primer y segundo estadio del parasitoide poseen una clara diferencia morfológica en sus estructuras cefálicas, lo que podría estar vinculado al comportamiento diferencial observado entre estos estadios durante el proceso de búsqueda del hospedador. Además el estudio del tamaño corporal de las larvas de primer estadio que nacen a lo largo de la temporada reproductiva sugiere que habría una asignación diferencial de recursos energéticos por parte de las hembras, pero no se ha encontrado un patrón claro al respecto. Por último, se determinó que tanto las larvas de estadio II de M. ruficauda como las de estadio III de C. signaticollis se orientan positivamente hacia extractos de la cámara de fermentación de las larvas de estadio III de C. signaticollis. Estos resultados sugieren que las larvas de M. ruficauda podrían estar explotando el sistema de comunicación química de su hospedador durante la búsqueda y localización. Se determinó indirectamente el origen de estas claves, observándose la presencia de microorganismos asociados al hospedador en esta región del tubo digestivo. Mediante experimentos comportamentales se demostró que los productos metabólicos de estos microorganismos serían las claves que orientan a las larvas del parasitoide durante la localización del hospedador. Sin embargo, no se determinó la función de estas sustancias químicas en las interacciones intraespecíficas de C. signaticollis. En conclusión, M. ruficauda presenta estructuras sensoriales especializadas vinculadas a la percepción de estímulos químicos volátiles, aspectos fisiológicos que permiten la sobrevida de las larvas hasta el encuentro con el hospedador, y el uso de claves altamente confiables y específicas durante la búsqueda, las cuales contribuyen a la eficiencia en la localización de recursos por larvas y hembras de M. ruficauda. Esta Tesis es una contribución al conocimiento de la historia de vida de M. ruficauda y un aporte al entendimiento de otras especies de parasitoides con características y estrategias de vida similares.

Abstract:
Individuals and their offspring success depend on their ability to locate the resources and optimal conditions required for survival in a complex and heterogeneous environment. The finding of resources and evaluation of these conditions is given through stimuli or cues. In most animals, especially insects, chemical cues play a central role in the location of resources. Parasitoid’s hosts are a fundamental resource on parasitoid life history, as without those parasitoids are not able to develop its life cycle. Host-seeking behaviour may include different types of cues or stimuli but particularly volatile chemicals are mainly involved. The robber fly Mallophora ruficauda is a solitary ectoparasitoid of scarab beetle larvae (white grubs) and a major pest of beekeeping in the Pampas Region of Argentina. Adults are predators of flying insects, especially honeybees, and larvae parasitized mainly third instar larvae of Cyclocephala signaticollis. Mallophora ruficauda have a split host location strategy between female and larva. First, female locates the host habitat and lay eggs in clusters on elevated available sites increasing larval dispersal and hence encounter success with larval hosts. Second, once in the ground, larva starts to dig and actively seeks for its host detecting chemical cues arisen from white grub’s digestive tube. So far, some characteristics of host finding mechanism are still unknown. Therefore, in this Thesis some features associated to M. ruficauda host searching behaviour, such as morphological characteristics of sensory structures of adults and larvae, larvae morphological and physiological aspects associated to searching process, and ecological role and origin of chemical cues produced by hosts were studied. Antennae of M. ruficauda adults are specialized for interception and capture of volatile chemical stimuli, possibly involved in mating and oviposition behaviour. First and second parasitoid larval instars showed morphological differences in cephalic structures which could be associated with the differential behaviour observed between them during host searching process. Furthermore, study of body size of first instar larvae that born along reproductive season suggests a differential energetic resources allocation, but a clear pattern have not found. Finally, it was established that both second instar larva of M. ruficauda and third instar larva of C. signaticollis are attracted to fermentation chamber’s extracts of third instar larva of C. signaticollis. These results suggest that M. ruficauda larvae could be exploiting the conspecific chemical communication system of their host during seeking behaviour. Study of cues origin indirectly revealed the presence of microorganisms associated to host in this region of the digestive tube. Experimental studies have shown that metabolic products of these microorganisms would be involved in the location of the host by parasitoid larvae. However, there were no conclusive results related to the role of the chemical cues involved in host conspecific interactions. In conclusion, M. ruficauda parasitoid presents different adaptations related to host location behaviour, such as specialized sensory structures involved in the volatile chemical stimuli perception, physiological aspects that ensure larval survival until the successful encounter occurs and the use of highly reliable and specific host cues during searching behaviour, which contribute to enhance M. ruficauda resources location. Therefore, this Thesis is a contribution to the knowledge of M. ruficauda life history, as well as to the understanding of the biology of other parasitoid species with similar characteristics and life strategies as those observed in this species.

"Caracterización morfológica y reproductiva de la población de Artemia persimilis (crustacea branchiopoda:Anostraca) de la Laguna Colorada Chica" (2003). Pastorino, Ximena Inés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los crustáceos anostracos del género Artemía se encuentran globalmente distribuidos en todos los continentes excepto la Antártica. A pesar de la amplia distribución del género, los hábitats que puede ocupar se encuentran restringidos a salinas y lagos o lagunas salados, donde la salinidad puede variar ampliamente entre 30 y 300 g l^-1. Estos crustáceos anostracos, son utilizados habitualmente en Acuicultura, como presa viva en la cría de peces y crustáceos marinos y/o de agua dulce de interés comercial. El género Artemia muestra una notable flexibilidad reproductiva que le permite adecuarse a las más diversas presiones de selección del medio; variando el tipo de descendencia que es liberada al medio en forma de quistes o larvas vivas, (reproducción ovípara u ovovivipara), y distribuyendo temporalmente la descendencia durante el período reproductivo. La reproducción es generalmente bisexual, aunque en Artemia puede presentarse también partenogénesis; en este último caso ambas modalidades son excluyentes. Esta variedad de estrategias reproductivas, sumada al potencial económico de este recurso natural, resalta la necesidad de profundizar el conocimiento de la biología de la reproducción de cada población. Esta tesis analiza en detalle la biología reproductiva de Artemía, realizando la caracterización morfológica, morfométrica y reproductiva de una población Argentina localizada en la provincia de La Pampa. Los resultados obtenidos nos permiten confirmar la ubicación taxonómica de la población de Anemia de la laguna Colorada Chica dentro de la especie A. persimilis mediante el uso de caracteres morfológicos simples y morfometría. Se caracterizaron los 5 estadios que forman parte del ciclo reproductivo de las hembras y se determinaron las fases que forman parte del ciclo de puesta, como resultado de la superposición de ciclos reproductivos sucesivos. El ciclo reproductivo tiene una duración aproximada de 6 días y presenta dos períodos principales, uno que transcurre en los ovarios (aproximadamente 3 días) y otro que transcurre en los oviductos y el útero. Mediante el análisis del comportamiento reproductivo de las hembras mantenidas en estado virginal (aisladas de machos) se descartó la presencia de partenogénesis como una modalidad reproductiva de esta población. El estudio de las variables reproductivas reveló la presencia de un mayor porcentaje de ovíparismo que ovoviviparismo, encontrándose hembras que fueron capaces de presentar estas dos modalidades reproductivas en camadas sucesivas. Las hembras criadas en diferentes condiciones de salinidad presentaron un mayor rendimiento reproductivo en la salinidad de 90 g l^-1, medido en función del número total de descendientes producidos por una hembra y al número total de puestas. Finalmente, un estudio a nivel microscópico, realizado en hembras y machos de las especies A. persimilis y A. franciscana, permite describir la morfología de Ia zona involucrada en el abrazo copulatorio.

"Caracterización morfológico-funcional de neuronas sensibles al movimiento involucradas en comportamientos visuales del cangrejo Chasmagnathus" (2008). Medan, Violeta. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los comportamientos que se realizan en ambientes visualmente complejos requieren que los artrópodos, como los vertebrados, extraigan información de la escena visual. Experimentos comportamentales sugieren que principios similares a los que operan en mamíferos subyacen al análisis de patrones visuales en artrópodos (Mizunami et al., 1998; Srinivasan et al., 1993). Registros electrofisiológicos revelan la existencia de neuronas de artrópodos funcionalmente similares a las de la corteza visual de mamíferos (Glantz, 1998; O'Carroll, 1993). Insectos y crustáceos han demostrado su extraordinaria capacidad visual para categorizar y memorizar objetos. No obstante, la identificación de neuronas involucradas en esas capacidades es casi desconocida. En el cangrejo Chasmagnathus, se ha identificado un grupo de neuronas sensibles al movimiento que participa en la detección visual de objetos y en memorias de largo término. Sin embargo, tempranamente se reconoció que el grupo estaba constituído por varias clases distintas de neuronas cuya identificación estaba pendiente. En el transcurso de esta tesis, registramos, en el animal intacto y no anestesiado, respuestas de neuronas LG a un amplio rango de estímulos visuales presentados en distintas partes del campo visual del animal. Esta caracterización fisiológica fue seguida por marcación intracelular, lo que permitió la comparación de los rasgos anatómicos y funcionales de cada célula. Todas las LG presentan extensas arborizaciones en la lóbula y poseen axones que proyectan hacia el cerebro medio. Funcionalmente, las LG demostraron ser más sensibles al movimiento de objetos que a desplazamientos de todo el panorama. No obstante estas similitudes, claras diferencias morfológicas y fisiológicas nos permitieron identificar cuatro tipos distintos de LG. Asimismo determinamos que muchas de ellas se hayan acopladas eléctricamente a otros tipos de LG y avanzamos en la determinación de sus áreas de proyección. El conjunto de los datos nos permite proponer una función para cada tipo de LG así como establecer las bases anatómico-fisiológicas que permitirán analizar el rol de cada tipo de LG en la ejecución de comportamientos guiados por la visión en el cangrejo.

Abstract:
Adaptive behavior in a cluttered visual environment requires that arthropods, like vertebrates, extract information from the visual scene. Behavioral experiments suggest that principles similar to those occurring in mammals underlie the analysis of visual patterns in arthropods (Mizunami et al., 1998; Srinivasan et al., 1993), whereas electrophysiological recordings reveal the existence of neurons that are, in many respects, functionally similar to those of the mammalian cortex (Glantz, 1998; O'Carroll, 1993). Insects and crabs have revealed their remarkable capacity to categorize, learn, and memorize visual features, but individual neurons sub serving these abilities have never been identified. In Chasmagnathus, a group of movement sensible neurons that participates in visual object detection and long term memory formation has been identified. But it was early recognized that this group was in fact composed by several types of neurons whose characterizations was still lacking. Here, we recorded in vivo the responses of individual LG neurons to a wide range of visual stimuli presented in different segments of the animal’s visual field. Physiological characterizations were followed by intracellular dye injections, which permitted comparison of the functional and morphological features of each cell. All LG neurons consisted of large tangential arborizations in the lobula with axons projecting toward the midbrain. Functionally, these cells proved to be more sensitive to single objects than to flow field motion. Despite these commonalities, clear differences in morphology and physiology allowed us to identify four distinct classes of LG neurons. We also found that the LG are electrically coupled among themselves and traced projections of optic lobe elements to supraesophageal ganglia. The sum evidence allow us to propose a specific functional role for each type of LG as well as to establish the functional and morphological characteristics of LG, that will permit a deeper analysis of the role of each neuronal type for visually guided behaviors.

"Caracterización morfotectónica de las Lomadas de Otumpa (Gran Chaco, Santiago del Estero y Chaco): Influencias en el control del drenaje" (2012). Peri, Verónica Gisel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se realizó una caracterización morfotectónica multiescalar de las Lomadas de Otumpa, ubicadas en el Gran Chaco Argentino, vinculada con un análisis dinámico del diseño y evolución de la red de drenaje. La caracterización morfotectónica profunda se llevó a cabo mediante un relevamiento magnetotelúrico en una transecta dispuesta sublatitudinalmente a los 27° Latitud Sur, que permitió detectar la estructura eléctrica a escala de corteza-manto y a escala somera, identificándose las cuencas sedimentarias. Asimismo, se realizó un análisis de la sismicidad profunda (500-600 kilómetros) de la región, para complementar los rasgos profundos. La caracterización morfotectónica intermedia se apoyó en sísmica de reflexión, anomalías gravimétricas residuales, registros litológicos de perforaciones petroleras y datos mundiales del campo de esfuerzos, con los que se esbozó un modelo estructural. La caracterización morfotectónica somera llevada a cabo a partir de dos perfiles de audiomagnetotelúrica (600 metros) y de un perfil geoeléctrico, permitió identificar horizontes eléctricos que fueron correlacionados a unidades litológicas reconocidas en perforaciones. La caracterización morfotectónica de superficie, basada en la identificación de unidades geomorfológicas y en el cálculo de parámetros geomorfométricos, evidencian anomalías del relieve y del drenaje, manifiestas principalmente sobre la planicie aluvial y paleocauces del río Saldo del Norte. Además, se estudiaron los afloramientos rocosos de la zona oriental de las Lomadas de Otumpa que, finalmente fueron correlacionados a los depósitos eólicos del Jurásico superior-Cretácico inferior o Formación Misiones. Sobre estas eolianitas se evidencian importantes y posteriores eventos de silicificación y meteorización. Las Lomadas de Otumpa constituyen una morfoestructura relíctica gondwánica con reactivaciones mesozoicas y cenozoicas influyentes en el desarrollo de los patrones de la paleored y actual red de drenaje. Es importante en la determinación del posible límite occidental del Sistema Acuífero Guaraní y en el aporte de materiales pétreos aplicados para la construcción.

Abstract:
A multi-scale morphotectonic characterization of Otumpa hills (Gran Chaco Argentino) was made linked to a dynamic analysis of the design and evolution of the drainage network. The morphotectonic deep characterization was carried out by a magnetotelluric survey in a sublatitudinal transect at 27 ° south latitude, that show the electrical structure at crust-mantle scale and led identified the sedimentary basins at shallow scale. Furthermore, an analysis of deep seismicity in the region was made (500-600 km), to complement the deep characteristics. The morphotectonic intermediate characterization was based on seismic reflection, residual gravity anomalies, lithology logs from oil drilling and global data field stress, which outlined a structural model. The morphotectonic shallow characterization was based on two audiomagnetotelluric and a geoelectrical profiles, which identified electrical horizons that were correlated to lithological units recognized in boreholes. Morphotectonic surface characterization based on the identification of geomorphological units and calculation of parameter geomorphometrics, show abnormalities of the relief and drainage manifest mainly on the floodplain and old channels of Salado North river. Also were explored the rocky outcrops of the eastern Otumpa hills which finally were correlated to the Upper Jurassic-Lower Cretaceous aeolian deposits or Misiones formation. Evident and important events of silicification and weathering were observed on it. The Otumpa hills are a relict gondwanan morphostructure with Mesozoic and Cenozoic reactivation influential in the development of patterns of old and current drainage network. It is important in the determination of possible western boundary of the Guarani Aquifer System and the contribution of applied stone materials for construction.

"Caracterización tectónica y metalogénica de los depósitos estanníferos argentinos" (1995). Idoyaga, Marcelo Gastón. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se propone la caracterización geológico - tectónica y metalogénica de los depósitos de estaño conocidos en la República Argentina. Se analizaron los controles específicos individuales de los depósitos, su potencialidad geológico - económico, los ambientes geológico - tectónicos donde se presentan, la distribución espacial de las regiones estanníferas, y su correlación con la distribución temporal y la vinculación entre los procesos metalogénicos y geotectónicos actuantes. Mina Pirquitas, en la provincia de Jujuy, representa el principal distrito, destacándose por su mineralización hidrotermal polimetálica en un depósito stockwork diseminado cuyo potencial se estima en cientos de millones de toneladas de mena con O,2-0,4 % Sn; 50-180 g/t Ag; 0,7-0,8 % Zn; 0,1-0,4 % Pb; asociado a un sistema de vetas con 1,5 millones de toneladas con 1,25 % Sn; 440 g/t Ag; y Zn, As, Ga, Cd, In y otros. Movimientos tectónicos intraminerales influyeron notablemente en las condiciones de localización, estructuras y composición de los cuerpos minerales. Asimismo, la estructura y litología de la roca de caja ejercieron un control en la distribución espacial de la fracturación y en la mineralización. Se distinguen dos provincias estanníferas con diferente caracteristicas, una en la Puna Jujeña que forma parte del Cinturón Estannífero Boliviano (CEB), y otra que se propone denominarla Provincia Estannífera de las Sierras Pampeanas Noroccidentales (PESPN) en las provincias de Catamarca y La Rioja. El CEB, representa el 99 % de los recursos conocidos del país; Se encuadra dentro del tipo orogénico subvolcánico con el tipo volcánico subordinado, con predominio de la mineralización de edad miocénica, de sulfuros polimetálicos en varios estadios de depositación, en vetas, stockwork y diseminada. Por otro lado, la PESPN se encuadra dentro del tipo oroge'nico epizonal con el tipo orogénjco batolitico subordinado, de edad Devónico-Carbónico, con estaño en vetas de cuarzo, fajas de greisen, vetas - stockwork de magnetita - fluorita, o en greisen masivo, regionalmente asociados a depósitos de W, Pb-Zn y U, generalmente distribuidos en secuencias de zonación.

"Caracterización y desarrollo de promotores quimera que permitan la replicación viral específica en el entorno tumoral" (2010). Viale, Diego Luis. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los tumores están compuestos de una masa heterogénea de células tumorales que incluyen células estromales asociadas que pueden convertirse en una barrera para la lograr una terapia exitosa contra la enfermedad. En los últimos años, los Adenovirus Replicativos Condicionales (CRAds) regulados por promotores recombinantes surgieron como una nueva modalidad de terapia para el cáncer. SPARC se encuentra expresada en forma muy elevada tanto en células tumorales como en endotelio y en los fibroblastos activados de tumores. A partir de estos datos, decidimos utilizar al promotor de SPARC para dirigir la replicación de los virus tanto en las células tumorales como en las células que forman parte del tumor. Logramos clonar un promotor que demostró mayor actividad en las células que expresan SPARC (F512) que se utilizó para dirigir la replicación de un CRAd (Ad-F512). Ad-F512 tiene efecto oncolítico en diferentes líneas celulares de melanoma y en ensayos in vivo se observó la eliminación de tumores SB2. Por el contrario, los tumores de melanoma A375N, Mel J y el tumor SB2/WI-38, que combina células de melanoma con fibroblastos, su efecto oncolítico es muy reducido. Para aumentar su eficacia adicionamos secuencias de ADN conteniendo elementos de respuesta a diferentes condiciones pato‐fisiológicas que caracterizan al tejido tumoral para aumentar la replicación. A partir de los resultados obtenidos, seleccionamos el promotor kBF512HRE conteniendo elementos de respuesta a hipoxia (HRE) y elementos de respuesta a NFkB (kB). Construimos el CRAd Ad-kBF512HRE que eliminó el tumor SB2/WI-38 en todos los ratones pero no se observa el mismo efecto sobre tumores Mel-Les y A375N. A partir de estos resultados se cambió la fibra adenoviral involucrada en el pegado al receptor celular y el virus resultante, Ad-5/3-kBF512HRE tiene efecto anti-tumoral sobre los tumores Mel-Les. Estos resultados indican que la adición de elementos de respuesta a condiciones que caracterizan al tejido tumoral y el cambio de la proteína involucrada en la unión al receptor celular aumentan el efecto terapéutico de un CRAd en las líneas celulares resistentes y, además, pueden sobrepasar la restricción en la replicación que implica la presencia de células estromales.

Abstract:
Human tumors are composed of a heterogeneous mass of malignant cells that also include tumor‐associated stromal cells that might become a barrier for successful therapies. In the last years, Conditionally Replicative Adenoviruses (CRAds) regulated by recombinant promoters appear as a new modality for cancer therapy. SPARC is over‐expressed in tumor cells and associated-endothelial and –fibroblast cells. Due to these results we utilized SPARC promoter for transcriptional regulation due to its overexpression on tumor melanoma cells and tumor associated stromal cells. We cloned a promoter that shows higher transcriptional activity in SPARC-expressing cells (F512) and we used to drive adenoviral replication (Ad-F512). This CRAd shows oncolytic activity in different melanoma cell lines and stromal cells and eliminated SB2 tumors in vivo, however, in A375N, Mel J and mixed tumor cell /fibroblast SB2/WI-38, its oncolytic effect was strongly reduced. In order to improve its efficacy we added DNA sequences containing responsive elements to different patho‐physiological conditions that characterize tumor tissue to increase its replication. Based on their activity/ specificity ratio we selected kBF512HRE, containing Hypoxia Response Elements (HRE) and NFkB response elements (kB). We constructed Ad-kBF512HRE and eliminated SB2/WI-38 tumor in all mice, on the other side, this effect was not observed on A375N and Mel-Les tumors. After this, we changed the adenoviral fiber, protein responsible of cellular receptor attachment. Ad-5/3-kBF512HRE eliminates 2/4 tumors of AdkBF512HRE-resistant Mel-Les tumors. These results indicate that addition of enhancer elements responsive to tumor-environmental conditions and fiber change improved the therapeutic effect of a CRAd over resistant cells and might overcome the restriction imposed by the presence of stromal cells.

"Caracterización y diferenciación de Germoplasma de Soja (Glycine max (L.) Merr.) mediante marcadores moleculares" (1998). Giancola, Sandra M.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La soja es una especie autopolinizante de escasa variabilidad genética. Esta variabilidad se ve aún más reducida en variedades cultivadas de soja (Glycine max (L.) Merr.) debido a que en los programas de mejoramiento, usualmente se utilizan los mismos ancestros. Debido a esta escasa variabilidad genética es que resulta difícil la identificación y diferenciación de nuevos cultivares. El objetivo de este trabajo fue testear la capacidad que tienen los diferentes marcadores moleculares tales como, RAPD (amplificación azarosa de ADN polimórfico), AFLP (Polimorfismo de longitud de fragmentos amplificados) y Microsatélites o SSR (secuencias repetitivas simples), para caracterizar y diferenciar un conjunto de 100 variedades de soja registradas en el Registro Nacional de Cultivares del Instituto Nacional de Semillas (INASE), perteneciente a la Secretaría de Agricultura, Ganadería, Pesca y Alimentación. Fueron utilizadas 16 características morfológicas, fisiológicas y fenológicas para comparar la relación genética obtenida con los marcadores moleculares. Se analizaron 424 loci genómicos polimórficos entre marcadores moleculares y morfológicos mostrando un porcentaje global de polimorfismo del 25.7% confirmando la baja variabilidad genética relativa de la soja comparada con otros cultivos y explicada por la estrecha base genética con que se maneja el mejoramiento de esta planta La variabilidad evidenciada por cada uno de los sistemas de marcadores fue diferente. Las variedades fueron agrupadas por el sistema de “cluster analysis” y los resultados comparados con los datos genealógicos de las variedades registradas, concluyéndose que los microsatélites son los marcadores que mejor reflejan la evolución genómica de las variedades y mejor se correlacionan con la diferenciación morfológica. Los AFLP mostraron un alto rango de multiplex, pero bajo polimorfismo, en cambio los RAPD mostraron un valor intermedio de polimorfismo y bajo rango de multiplex. Se logró establecer una “huella digital genética” para cada variedad y realizar un estudio de variabilidad genética, estimando la distancia mínima a considerar para la obtención de la propiedad.

Abstract:
Soybean is a self pollinating species of limited genetic variability. This variability is further reduced in soybean cultivars (Glycine max (L) Merr.) due to the fact that they are usually derived from crosses among members of an elite group of genetically related parents. This limited variability is sometimes insufficient to unambiguously identify new cultivars. The aim of this work is to test the feasibility of using different molecular markers such as “Random Amplified Polymorphic DNA” (RAPD), “Amplified Fragments Length Polymorphism” (AFLP) and Microsatellite or Simple-Sequence-Repeat (SSR) to characterize and differentiate a set of 100 soybean varieties registered at the National Register of Cultivars of the National Seed Institute of Argentina (INASE, Secretariat of Agriculture, Livestock, Fisheries and Food). Sixteen known basic morphological, physiological and phenological traits were also recorded for each variety in order to compare the relationships among varieties derived from molecular markers. The calculated variability indexes showed to be highly dependent on the specific technique used for the analysis ranging from 0.262 for SSR analysis, 0.401 for RAPD and AFLP analysis and 0.574 for morphological traits analysis. In total 109 polymorphic genomic loci were scored revealing a lower genetic variability when compared with published data of other species. The varieties were grouped by cluster analysis and the relationships derived from these cluster analysis was compared with known pedigree data of the registered varieties. The SSR data showed the best fit to pedigree data while mantaining an acceptable correlation to morphologically-based separation. AFLP showed a high multiplexity but low percentage of polymorphic bands while RAPD was low in multiplexity but with a better level of polymorphism. A genetic fingerprint was established for each one of the 100 varieties and a minimum genetic distance for distinctness definition within UPOV concept could be defined.

"Caracterización y fotoestabilidad de compuestos fluorescentes y pardos generados en reacciones enzimáticas y no enzimáticas. Implicancias en la conservación de materiales orgánicos" (2008). Matiacevich, Silvia Beatriz. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las reacciones de pardeamiento no enzimático (reacción de Maillard) y enzimático (polimerización de polifenoles oxidados) generan productos fluorescentes y pigmentos pardos que contribuyen a las características físico-químicas de materiales orgánicos (biomoléculas, alimentos, fármacos). El objetivo de esta tesis fue analizar las características cromáticas y de fluorescencia y la fotoestabilidad de los compuestos generados por la reacción de Maillard y de pigmentos polifenólicos, para dilucidar mecanismos de deterioro y control. Se estudiaron sistemas modelo susceptibles de desarrollar productos pardos: pigmentos de Maillard (aminoácidos ó proteínas con azúcares) y polifenólicos (extraídos de té) y semillas sometidas a envejecimiento acelerado. Los distintos tipos de pigmentos pardos tienen similares características cromáticas y fluorescentes. La observación más notable es la elevada fotoestabilidad de compuestos fluorescentes y pigmentos generados en la reacción de Maillard comparada con los polifenólicos. La irradiación en presencia del sensibilizante rosa de bengala produjo degradación tanto del colorante como de los pigmentos y permitió establecer diferencias en el mecanismo de fotodegradación de ambos tipos de pigmentos. El agregado de MgCl2 afectó la cinética de desarrollo de pigmentos de Maillard pero no tuvo efecto sobre sus características espectroscópicas ni sobre su fotoestabilidad. El conocimiento del efecto de la luz y de la interacción de los pigmentos con distintos agentes es relevante para controlar y predecir la estabilidad de diferentes materiales orgánicos y ofrecer alternativas para modular la cinética de su generación.

Abstract:
Non-enzymatic (Maillard) and enzymatic (polymerisation of oxidized polyphenols) browning reactions generate fluorescent products and brown pigments that contribute to the physico-chemical properties of organic materials (biomolecules, foods, pharmaceuticals). The objective of this Thesis was to analyse chromatic and fluorescent characteristics and photostability of brown products generated by Maillard reaction and of polyphenolic pigments, in order to elucidate deteriorative and controlling mechanisms. Model systems susceptible to develop brown pigments were analysed: Maillard pigments (systems aminoacids or proteins with sugars) and polyphenolics (extracted from tea) and seeds submitted to accelerated aging. The different types of brown pigments have similar chromatic and fluorescent characteristics. The most noticeable observation was the high photostability of fluorescent compounds and pigments from the Maillard reaction, in comparison to that of polyphenolic compounds. The irradiation in presence of the sensitizer rose bengal promoted colorant degradation and allowed to establish differences in the photodegradative mechanisms of both types of pigments. MgCl2 addition affected the kinetics of brown pigments development by the Maillard reaction but it had no effect on the spectroscopic properties or on its photostability. The knowledge of the effects of light and of the interactions of pigments with different agents is relevant for controlling and predicting the stability of organic materials in order to offer alternatives to modulate the kinetics of its generation.

"Caracterización y modulación del reciclado vesicular en placa neuromuscular de ratón" (2010). Perissinotti, Paula Patricia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El proceso de reciclado de las vesículas sinápticas es una característica integral de la función presináptica y determina su habilidad para mantener la liberación del neurotransmisor durante una actividad repetitiva. En esta tesis, caracterizamos el reciclado de las vesículas sinápticas en el terminal neuromuscular de ratón y estudiamos su regulación por los canales de calcio dependiente de voltaje (CCDV), específicamente el canal de calcio tipo L, y por el neuromodulador adenosina. Para desarrollar este trabajo, utilizamos indicadores fluorescentes tipo FM para marcar la membrana de las vesículas sinápticas y técnicas electrofisiológicas para cuantificar la liberación de las vesículas sinápticas. En el terminal neuromuscular de ratón, determinamos que el reciclado vesicular es regulado por el nivel de actividad neuronal. La estimulación a alta frecuencia produce la movilización de dos pooles funcionales de vesículas sinápticas que difieren en su disponibilidad de liberación. En base a esta característica, definimos estos pooles como pooles vesiculares de liberación rápida o lenta. Por otro lado, evidenciamos que la duración de la estimulación a alta frecuencia determina un reciclado vesicular selectivo y secuencial hacia estos pooles vesiculares funcionales. El influjo de calcio a través de los CCDV tiene un papel clave en la señalización neuronal durante el proceso de la neurotransmisión, coordinando el reciclado de las vesículas sinápticas. En este trabajo presentamos evidencias directas que vinculan al CCDV tipo L con la regulación del reciclado vesicular. Hemos confirmado la funcionalidad de CCDV tipo L durante estadios plásticos del terminal neuromuscular. Es decir, observamos la participación de estos canales únicamente durante períodos de actividad neuronal sostenida e intensa. Se demostró que el influjo de calcio a través del CCDV tipo L promueve la endocitosis y la recuperación de las vesículas sinápticas hacia el pool vesicular de liberación rápida, regulando la eficiencia sináptica durante la actividad neuronal intensa. La adenosina es un neuromodulador bien establecido en la unión neuromuscular de ratón. En ausencia del efecto de la adenosina endógena sobre los receptores A1, evidenciamos un incremento en la exocitosis vesicular y en el tamaño del pool de reciclado vesicular, y un direccionamiento de reciclado vesicular hacia el pool de liberación rápida. Debido a que la adenosina y el bloqueo del CCDV tipo L presentaron un efecto similar sobre el reciclado vesicular, una hipótesis plausible fue que la adenosina a través de un efecto inhibitorio sobre el CCDV tipo L afectaría el reciclado vesicular. A través de evidencias experimentales esta hipótesis fue rechazada. En base a las similitudes observadas en el reciclado vesicular, es factible suponer que tanto la adenosina como el bloqueante del CCDV tipo L inhiben un mecanismo común.

Abstract:
The recycling of synaptic vesicles is an integral property of presynaptic function and it determines its ability to sustain neurotransmitter release during repetitive activity. In this thesis, we characterized vesicular recycling at mouse neuromuscular terminal and studied its regulation by voltage dependent calcium channels (VDCC), in particular the L-type calcium channel, and by the neuromodulator adenosine. We used FM fluorescent dyes in order to label synaptic vesicle membrane and electrophysiological techniques to quantify vesicle release. We found that vesicle recycling at mouse neuromuscular terminal is regulated by the level of neuronal activity. High frequency stimulation mobilizes two functional synaptic vesicle pools that differ in their release availabilities. Based on this characteristic, we defined these pools as the fast release pool and the slow release pool. On the other hand, we found that the duration of the high frequency stimulation produces selective and sequential vesicle recycling to these functional vesicle pools. Calcium influx through VDCC plays a key role in neuronal signaling during neurotransmission since it coordinates vesicle recycling. In this thesis, we show direct evidence that relate the L-type VDCC to vesicle recycling regulation. We have confirmed the L-type VDCC functionality during the plastic phase of the neuromuscular terminal. In other words, these channels participate only during intense and sustained neuronal activity. We demonstrate that calcium influx through L-type VDCC promotes endocytosis and vesicle retrieval towards the fast release vesicle pool, regulating synaptic efficiency during intense neuronal activity. Adenosine is a well known neuromodulator at the mouse neuromuscular junction. In the absence of the effect of endogenous adenosine on A1 receptors, we found an increase of the amount of vesicle exocytosis and the size of the vesicle recycling pool. In addition, we found out that vesicles are preferentially recycled under this condition to the fast release pool. Since both the addition of adenosine and an L-type VDCC blocker give rise to a similar effect on vesicle recycling, we hypothesized that adenosine produce an inhibitory effect on the L-type VDCC, affecting vesicle recycling. However, our experimental evidence allows rejecting this hypothesis and suggests that both adenosine and the L-type VDCC blocker inhibit the same mechanism.

"Caracterización y vulnerabilidad de sistemas hidrogeológicos discontinuos. Cuenca del Arroyo Carrasco - Montevideo - Uruguay" (1999). Montaño Xavier, Jorge. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la presente investigación se desarrolla una caracterización hidrogeológica de medios discontinuos y una metodología para cuantificar la vulnerabilidad en acuíferos fisurados. El subsuelo está constituido por rocas metamórficas con zonas de alta densidad de fracturas portadoras de agua, entre las que se destacan las de dirección N 40 - 50 E y conjugadas. Los caudales más frecuentes de los pozos se encuentran entre 1 y 5 m3/h, con un caudal específico medio de 0,5 m3/h.m. El volumen almacenado por el acuífero en la zona donde se emplazan las fracturas (11.475 ha), se estima en 22,9 hm3. Las aguas subterráneas son de composición bicarbonatada sódica dominante y clorurada cálcica subordinada, con una salinidad media de 480 mg/l. En lo referente a su utilidad, el agua es apta para uso humano y para riego, calificándose como dura para procesos de enfriamiento en la industria. Presentan anomalías en nitratos con valores mayores a 30 ppm, producidas por prácticas agrícolas y falta de saneamiento. Respecto a la vulnerabilidad de contaminantes, se definieron amortiguadores edafológicos y geológicos en la zona no saturada. La amortiguación edafológica (química) se estimó en función de los valores de capacidad de intercambio catiónico (CIC) y la física, a partir del tiempo de transferencia. Este último parámetro también se utilizó para medir la amortiguación geológica. Se identificaron zonas de baja vulnerabilidad constituidas por suelos brunosoles o planosoles, sobreyaciendo a las formaciones Libertad y Fray Bentos (54% de la superficie total de la cuenca), y de alta vulnerabilidad para el basamento cristalino aflorante o cubierto por arenosoles.

Abstract:
The present research relates to the hydrogeologic characterization of discontinuous media and with a methodology to measure vulnerability in fractured aquifer. The subsoil is formed by metamorphic rocks with zones of high density of fractures bearing water, among them are clearly noticeable the ones with N 40 - 50 E direction and their conjugates. The most frequently yield in the wells are between 1 and 5 m3/h with and specific capacity of 0,5 m3/h.m. The storage of the aquifer in the zone where are located the fractures (11.475 ha) is estimated in 22,9 hm3. The groundwater have a dominate bicarbonated - sodic composition and subordinate clorurated - calcic, with a medium salinity of 480 mg/l. It’s useful for human use and irrigation, and very hard for cooling industrial processes. Groundwater show anomalies in nitrates with values higher than 30 mg/l, which is the result of agriculture and lack of sanitation. With respect to vulnerability of contaminants, edafologic and geologic buffers were defined in the non - saturated zone. The edafologic buffering (chemical) is estimated taking into account the cationic exchange capacity (CIC) and the one of physical type is based on transfer time; the latter was used to measure the geologic buffering. There were observed zones of low vulnerability formed of brunosoles or planosoles soils, overlying the sedimentary formations Libertad and Fray Bentos (54% of de surface of the basin), and other zones of high vulnerability in the crystalline basement either outcropping or covered by arenosoles.

"Caracterización, procesamiento y optimización del aprovechamiento industrial de la calabacita Cucurbita moschata Duchesne ex Poiret" (2006). de Escalada Pla, Marina Francisca. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Características de historia de vida y explotación comercial de la raya Sympterygia bonapartii en el Golfo San Matías" (2012). Estalles, María Lourdes. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Sympterygia bonapartii se distribuye desde Río de Janeiro (23º S), Brasil hasta Santa Cruz (51º S), Argentina. El objetivo de este estudio fue estimar los parámetros de historia de vida y caracterizar los desembarques comerciales de la especie en la pesquería de arrastre de fondo del Golfo San Matías (GSM). Los ejemplares se colectaron en el GSM durante los años 2004-2010. Los mismos provinieron de las campañas de evaluación de recursos demersales realizadas por el Instituto de Biología Marina y Pesquera ―Alte. Storni‖; del programa de observadores a bordo de las embarcaciones pesqueras de la Provincia de Río Negro y de los muestreos mensuales de desembarques de la flota de arrastre local. Las mayores concentraciones de individuos se registraron entre los 80 y 100 m de profundidad en el sector este del golfo. La talla de madurez sexual para los machos y las hembras se estimó en 545 y 594 mm, respectivamente. La especie presentó un ciclo reproductivo estacional. La época de apareamiento ocurriría de julio a diciembre y la de puesta de septiembre- octubre a febrero. De acuerdo al análisis de la dieta, la especie se consideró como consumidora secundaria, de hábitos bentónicos. La dieta se describió como carcinófaga y presentó variaciones de acuerdo al sexo, talla y período del año. En la pesquería de arrastre local, S. bonapartii fue la raya con mayor cantidad de individuos desembarcados y la segunda por su contribución en peso. Los desembarques de la especie se caracterizaron por un predominio de ejemplares maduros y de hembras. Esto sugiere la presencia de segregación sexual y de una selección de tallas a bordo de las embarcaciones por parte de la tripulación.

Abstract:
Sympterygia bonapartii is distributed from Rio de Janeiro (23º S) Brazil to Santa Cruz (51º S) Argentina. The objective of this study was to describe its life history traits and to characterize its commercial landings in the bottom trawl fishery of San Matías Gulf (SMG). Individuals of S. bonapartii were sampled in GSM during 2004-2010. They were collected during research surveys performed by the Institute of Marine Biology and Fisheries ―Alte. Storni‖ aiming at assessing demersal resources; the onboard observer program of Río Negro Province and monthly samples of port landings from the local fishery. Sympterygia bonapartii showed the highest concentrations of individuals between 80 and 100 m deep, in the eastern region of SMG. Size at maturity (TL50%) was estimated at 545 and 594 mm for males and females respectively. The skate exhibited a seasonal reproductive pattern. The mating season was estimated to take place from July to December and the egg-laying season from September-October to February. The skate was considered a secondary consumer with benthic habits. Its diet was mainly composed of crabs and showed significant differences depending on sex, size group and period of the year. Sympterygia bonapartii exhibited the highest number of individuals and it was the second one for its contribution in weight in commercial landings from the local fishery. The presence of the species was detected throughout the year, with predominance of females and of mature individuals. These suggest that the species may segregate by sex and that the crew may perform a selection of the individuals on board the vessels.

"Características de las precipitaciones orográficas de invierno sobre los Andes Subtropicales Centrales" (2010). Viale, Maximiliano. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las precipitaciones sobre las montañas son en gran parte originadas o incrementadas cuando el flujo horizontal de aire húmedo es forzado a ascender por la topografía. Esta situación se produce mayormente en el invierno sobre los Andes Centrales (30º -37ºS), cuando el flujo del oeste intenso de un ciclón extratropical llega hasta latitudes subtropicales. Debido a la escasa información disponible en la cordillera, las variaciones de la precipitación son documentadas en una escala transversal a la misma que no tiene en cuenta variaciones entre valles y picos. A partir de 7 años (1970-1976) de datos de precipitación de invierno (Abr-Sep) disponible, la máxima cantidad de precipitación se observó sobre zonas pendiente arriba de la cordillera antes de alcanzar la cresta, siendo aproximadamente el doble de la cantidad de precipitación observada en zonas bajas a barlovento. Inmediatamente a sotavento de los picos más altos, la cantidad de precita- ción cae drásticamente generando un notorio gradiente transversal a la cordillera, con precipitaciones largamente disminuidas en zonas bajas a sotavento. Esta disminución fue mayor en zonas bajas del norte de Mendoza (31.5º-34.5ºS) que del sur (35º -36.5ºS), probablemente debido a la mayor actividad baroclinica y un decaimiento de la altura de la cordillera hacia el sur, permitiendo que una mayor cantidad de precipitación logre atravesar la cordillera. El efecto de bloqueo de los Andes es tan marcado que altera los regimenes de precipitación de las zonas bajas aledañas, siendo de invierno a barlovento y de verano a sotavento al norte de 35º. Las series de precipitaciones diarias revelaron, además, que las tres cuartas partes de la precipitación acumulada en el invierno sobre la cordillera, representativa a su vez de la total anual, es producto de solo 4 o 5 eventos significativos en promedio durante el invierno. Las condiciones sinópticas típicas de los eventos significativos exhibieron un ciclón extratropical intenso sobre las costas sudamericanas del océano Pacifico, con un fuerte flujo concentrado de humedad paralelo al frente frío, el cual ha sido denominado “río atmosférico” en estudios previos en las costas norteamericanas del Pacifico. Dicho flujo de humedad dispuesto mayormente perpendicular a la cordillera impacta y descarga grandes cantidades de vapor de agua en forma de precipitación sobre los Andes Centrales. A barlovento de los Andes, una corriente en chorro paralela a la cordillera es frecuentemente observada en niveles bajos, consistentemente con el predominio de condiciones de estabilidad que favorecerían un bloqueo orográfico y un desvío del flujo hacia el polo; mientras que a sotavento de los Andes, un flujo descendente intenso usualmente alcanza la superficie produciendo tormentas de viento Zonda. Simulaciones numéricas con alta resolución (i.e., ≤ 15 km) confirmaron durante dos casos de estudio que el flujo del oeste es bloqueado y desviado hacia el polo en ni- veles bajos, originando una corriente en chorro paralela a la cordillera. Por otro lado, el flujo de humedad que logró atravesar el sector de los Andes más altos (33º-34ºS) des- cargó el 49% de su contenido de vapor de agua de la atmósfera en forma de precipita- ción a través de mecanismos de ascenso orográfico, mientras que el flujo que atravesó los Andes más bajos (35º - 36ºS) descargó el 25% de su contenido de vapor. Este resulta- do explicaría la mayor precipitación observada en el sur que en el norte de Mendoza, a sotavento de la cordillera. Las observaciones y simulaciones numéricas indican que rol de la topografía de los Andes Centrales es dominante sobre las precipitaciones de invierno en la cordillera misma y en las regiones bajas adyacentes. En las simulaciones sin topografía, la precipi- tación queda limitada exclusivamente al forzante sinóptico, y por lo tanto la cantidad de precipitación cae abruptamente al desaparecer el patrón de precipitación orográfico do- minante. Además, las simulaciones sin la cordillera de los Andes sugieren, por un lado, que las zonas bajas de Cuyo recibirían una mayor cantidad de precipitación y las condi- ciones atmosféricas serían más húmedas a la real durante el invierno. Y por otro lado, cantidades mucho menores de vapor de agua serían removidas de la atmósfera en forma de precipitación, sin la acción de mecanismos de ascensos orográficos adicionales al sinóptico, lo cual implicaría una disponibilidad de agua dulce bastante menor para las regiones de Chile y Cuyo en un escenario sin cordillera de los Andes.

Abstract:
The precipitations over the mountains are mostly originated or incremented when the moisture air flow is forced to rise by the high terrain. This situation typically occurs in winter over the Central Andes (30º-37ºS), when the strong cross-barrier flow from an extratropical cyclone reach subtropical latitudes. Due to the few precipitation gauges available, large-scale variation in cross-barrier precipitation is focuses on this thesis, not taking account the fine ridge-valley scale. The maximum amount of precipitation was observed on upslope of the mountain range before the crest, and was about twice larger than that observed on windward lowlands between 33º-34ºS. To immediately leeward of the crest, the precipitation amount sharply drops generating a strong cross-barrier gradient. The rain shadow effect is greater in the north (32º-34.5ºS) than in the south (35º-36.5ºS) of the lee side, probably due to more baroclinic activity to southernmost latitudes and a southward decrease in the height of the Andes enabling more spillover precipitation. The blocking effect of the Andes on winter precipitation is so marked, that it modifies the precipitation regimes in the low adjacent areas at windward and lee side north of 35ºS. The daily precipitation series also revealed that 4 or 5 cool-season heavy events account for almost the winter total precipitation, which is almost equal to the annual total. The heavy orographic precipitation events are strongly related to strong and concentrated water vapor transport from Pacific ocean in the pre-cold-frontal environment of extratropical cyclones, which has been named “atmospheric rivers” in previous studies on the western coast of North America. The strong cross-barrier moisture flux impinging on the high Andes leads to heavy orographic precipitation episodes. In addition, local air flow characteristics suggested that the low-level flow is typically blocked and diverted poleward in the form of an along-barrier jet. In the lee side, the downward flow dominate during heavy events producing a prominent rain shadow effects, as denoted the domain of downslope winds extending to low-laying areas. Simulation with high resolution models (i.e., ≤ 15 km) confirmed during two case studies that low-level cross-barrier moisture flow is blocked and diverted southward, in the form of a barrier-jet at low-levels. At same the time, the cross-barrier mois-ture flow that crossed the higher Andes between 33º-34ºS discharged 49% of their water vapor content by orographic lifting, while the cross-barrier flow that crossed the lower Andes between 35º-36ºS discharged 25% of their water vapor content. This result would explain the higher precipitation on low lands at southern (35º-36ºS) than northern (33º-34ºS) lee side. The observation and simulations indicate that the role of the Andes cordillera is dominant on the winter precipitation over the region. The simulation without topography produced much less precipitation as the orographic lifting disappears. The experiment with flat terrain suggests, on the one hand, the lowlands of the Cuyo region would receive higher winter precipitation amounts and the atmospheric environment would be wetter than current time. On the other hand, with no terrain forcing additional ascent to frontal lifting, significant less amount of water vapour content would be removed from the atmosphere as precipitation, which would imply a much less water availability for the region in a flat scenario.

"Carbones vegetales argentinos : Datos para su estudio" (1911). Pattin, Miguel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Carburos estables en aleaciones de metales de transición" (1990). Piotrkowski, Rosa. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Carcinogénesis mamaria murina por metilnitrosourea (MNU) y acetato de medroxiprogesterona (MPA)" (1996). Pazos, Patricia Adriana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo de tesis presentamos un modelo experimental de carcinogénesis mamaria por MNU y MPA en el ratón BALB/c. En nuestro laboratorio ya se había desarrollado un modelo de inducción de adenocarcinomas mamarios por MPA, en el cual los tumores, que aparecen con una latencia mayor al año, son en su mayoria ductales, hormono-dependientes y expresan en su mayoría altos niveles de RE y RP. En este trabajo hemos desarrollado la caracterización de los tumores inducidos por MNU + MPA en cuanto a su morfología y hormono-dependencia. Además caracterizamos el rol de MPA como promotor tumoral y los efectosde la ovariectomía y de la sialoadenectomía en la inducción de tumores. Hemos desarrollado las condiciones de dosis necesarias como para poder estudiar al carcinógeno MNU como un agente exclusivamente iniciador en el proceso de carcinogénesis mamaria y pudimos definir la acción de promotor tumoral del progestágeno MPA. A partir de los experimentos aquí presentados, definimos también una acción especifica del MPA que es previa a la iniciación, favoreciendo ya sea por modificación o por incremento en el número celular, la transformación neoplásica. A este efecto lo denominamos "permisividad". Las experiencias realizadas en los animales ovariectomizados, demostraron la importancia de las hormonas ováricas. La ovx generó un patrón de atrofia mamaria evidenciable por la técnica de montaje total de las mamas y en este caso, la acción de MNU fue casi nula, lo que sugiere que éste ejerce su acción sobre una celula o grupo de células presente en una glándula sometida a estímulos hormonales. El MPA pudo suplir la ausencia de los ovarios debido quizá a su acción progestacional, elevando los valores de incidencia tumoral a niveles del control positivo. Se obtuvieron resultados interesantes en el análisis del rol de las glándulas salivares en animales pretratados con MPA y MNU en la inducción tumoral. Registramos una significativa disminución en los valores de incidencia tumoral en aquellos animales tratados con MPA y sialo, frente a los controles intactos. Considerando que el MPA provoca un aumento de EGF sérico proveniente de las glándulas salivares y basándonos en datos previos de este efecto en el modelo de carcinogénesis mamaria por MPA, confirmamos también que el EGF también juega un importante rol en el modelo de cocarcinogénesis MNU+MPA, probablemente afectando la fase de promoción. Los tumores de mama surgidos en estos experimentos fueron clasificados como adenocarcinomas con distintos grados de metaplasia pavimentosa. Las diferencias histológicas tan marcadas entre los tumores inducidos por MNU y MPA y la mayoría de los tumores inducidos exclusivamente por MPA nos indujeron a definir estos fenómenos como tipos diferentes de carcinogénesis. La metaplasia pavimentosa fue un atributo exclusivo del MNU, siendo más evidente en los grupos expuestos a un mayor número de dosis de MNU. También fue evidente el la mayor incidencia de fenómenos metaplásicos en animales inoculados con MNU a los dos meses de MPA que a la semana. Todo lo analizado más datos previos nos inducen a pensar que existe una fuerte correlación entre la histología y el agente iniciador (en nuestro modelo MNU). Estudios de montajes de glándulas mamarias revelaron que la metaplasia pavirnentosa precede al desarrollo de la lesión invasora. Los estudios de parámetros biológicos confirman los resultados anteriores demostrando una diferencia muy notable entre ambos modelos experimentales. Como ya se mencionó anteriormente, si bien la mayoría de los inducidos por MPA son hormono-dependientes, todos los inducidos en estos experimentos salvo alguna excepción fueron tumores autónomos. Nuevamente estos resultados nos llevaron a teorizar sobre posibles mecanismos de acción de las hormonas y el carcinógeno en los distintos grupos experimentales discutiendo la probabilidad de que ambos compuestos actúen sobre poblaciones celulares diferentes o si actuarían sobre la misma población de células madre induciendo diferentes cambios genéticos que las llevan a diferenciar en forma diferencial. Por otra parte comprobamos que en este modelo de inducción tumoral, el MPA actúa como un verdadero promotor tumoral, eliminando la posibilidad que esta hormona favorezca la aparición de las neoplasias mamarias, por un mecanismo inmunosupresor hipotético, ya que el estado inmunológico de los animales tratados con ambas sustancias estaba en valores normales e inclusive superiores a los normales. Curiosamente hemos demostrado que el MPA produce una muy fuerte inmunoestimulación, confirmando a su vez que este efecto es netamente hormonal y no un mero efecto adyuvante inespecífico ya que fue revertido por un antiprogestágeno. Por último hemos demostrado también por primera vez que el MPA y el MNU actúan como co-carcinógenos en el útero. Si bien el MPA y el MNU ambos inducen HGQ, los deciduomas sólo fueron inducidos en animales tratados con MPA en presencia o ausencia de MNU, pero en distintos protocolos en los cuales los animales han sido tratados por un tiempo con MPA se han observado algunos carcinomas de endometrio e hiperplasias epiteliales severas, no detectadas cuando los animales tuvieron un inóculo de MNU muy cercano al de MPA. También hemos demostrado que MNU induce un alto porcentaje de leucemias cuya incidencia fue mucho menor en los grupos pretratados con MPA. En resumen, este modelo experimental si bien es interesante para dilucidar las funciones del MPA en el proceso de carcinogénesis no resulta un buen modelo de cáncer de mama humano ya que las características biológicas y morfológicas de los tumores son bastante diferentes a la mayoría de lo tumores humanos.

Abstract:
In this thesis we have put forward an experimental model of mammary carcinogenesis induced by MNU and MPA in BALB/c mice. In our laboratory a model of induction of mammary adenocarcinomas by MPA had been previously developed; tumors appeared with a latency of one year, being mostly ductal, hormone dependent and expressing in most cases high levels of ER and PR. In this proyect we have characterized the tumors induced by MNU+ MPA regarding morphology and hormone dependence. We have also characterized the role of MPAas a tumor promotor and the effects of ovariectomy and sialoadectomy on tumor induction. Experiments were designed to evaluate the possible role of MPA as a modulator of mammary carcinogenesis by MNU. This was done by pretreating the animals with MPA. Doses necessary to study MNU as an agent involved exclusively in the initiation of the carcinogenic process were found, and we were able define the action of MPA as a tumor promotor. The experiments presented herein enable us to define a specific action of MPA, which is previous to initiation, favouring neoplasic transformation, either by modifying or increasing the number of cells. We have called this a "permisive" effect. The importance of ovarian hormones was proved in the experiments carried out in ovariectomized animals. Ovariectomy generated a pattern of mammary atrophy which was clearly seen in whole mounts. In this case the action of MNU was almost null sugesting that it is able to carry out its effects only on a cell or group of cells which have been under hormonal stimulus. MPA was capable of substituting the ovaries probably due to its progestational action, increasing tumor incidence to positive control values. interesting results were found in tumor induction when analizing the role of the salivary glands in animals pretreated with MPA and MNU. A significant decrease in tumor incidence was found, compared to intact controls, in sialoadectomized animals treated with MPA. Taking into account the fact that MPA increases the levels of seric EGF generated by the salivary glands, and considering previous results obtained in the model of mammary carcinogenesis by MPA, we confirm that EGF plays an important role in the model of co-carcinogenesis of MNU + MPA, probably affecting the promotion phase. The mammary tumors induced in these experiments were classified as adenocarcinomas with various degrees of squamous metaplasia. The definite histologic differences found between tumors induced by MNU + MPA and those induced exclusively by MPA have made us consider these processes as two different types of carcinogenesis. The squamous metaplasia was an exclusive atribute of MNU, being more evident in those groups exposed to a greater number of MNU doses. An increase in the incidence of these lesions was also found in animals inoculated with MNU two months after treatment with MPA compared to those pretreated a week before. All this, together with previous results makes us think that there is a strong correlation between histology and the initiating agent (in our case we refer to MNU). Whole mount studies of mammary glands revealed that this squamous metaplasia precedes the development of the invasive lesion. The study of biological parametres confirm our results showing a remarkable difference between both experimental models. As we have previously mentioned, although most tumors induced by MPA were hormone dependent, all those induced in these experiments, except for a couple of exceptions, were autonomous. Once again our results have taken us to hypothesize over the possible mechanisms of action of the hormones and the carcinogen on the different experimental groups, arguing over the possibility that both compounds are acting on different cellular populations or, on the contrary, on a unique stem population but inducing genetic changes that lead to diverse routes of differentiation. On the other hand, we have demonstrated in this model of tumor induction, that MPA acts as a real tumor promotor, eliminating the possibility that it could be acting through a hypothetic immunosuppressing mechanism that would favour the development of mammary tumors. The immunological state of animals treated with both compounds together were equal, or even higher than those observed in normal controls. Curiously we have proved that MPA produces a strong immunostimulation, confirming as well that this effect is exclusively due to its action as a hormone and not to an inespecific adjuvant effect, because it was reverted by an antiprogestagen. Finally we have also demonstrated, for the first time, that MPA and MNU act as co-carcinogens in the uterus. Although both MPA and MNU induce HGQ, deciduomas were only induced in animals treated with MPA in the presence or absence of MNU. However in various protocols in which animals were treated with MPA for some time, endometrium carcinomas and severe epithelial hiperplasias were observed. This was not so when MNU was inoculated shortly after MPA. We have also proved that MNU induces a high percentage of leukemia; however the incidence was much lower in groups pretreated with MPA.

"Catecolamina - beta alanil ligasa (cbal), enzima clave en el metabolismo de neurotransmisores en los insectos" (2004). Pérez, Martín Mariano. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la presente Tesis se ha estudiado la enzima NBAD-sintetasa, responsable de la síntesis de NBAD, el principal precursor de esclerotización de las cutículas marrones de los insectos. Se la caracterizó en detalle y se estudió su expresión en el ciclo de vida de C. capitata. El aporte principal ha sido, justamente, el estudio en detalle de esta enzima. Anteriormente a esta Tesis, ésta era una enzima prácticamente desconocida. Si bien se había postulado que el NBAD era el principal precursor de esclerotización de las cutículas marrones de los insectos, excepto nuestro laboratorio, nadie había publicado nada sobre la enzima que lo sintetiza. Se determinó la expresión de la NBAD-sintetasa en la metamorfosis. Se la caracterizó y se demostró que la misma posee una amplia especificidad de sustratos. Se demostró por primera vez la actividad de esta enzima en sistema nervioso y respuesta inmune. Se clonó y secuenció por primera vez un mutante melánico de D. melanogaster, carente de esta actividad enzimática. Por su amplía especificidad de sustratos hemos denominado a esta enzima como Catecolamina-B-alanil ligasa (CBAL). Los principales resultados obtenidos son: -Se determinó el patrón de expresión de la enzima en el tejido epidérmico durante el ciclo de vida de C. capítata. La actividad de esta enzima se detectó en momentos muy acotados del ciclo de vida, coincidiendo con los momentos en que los individuos necesitan esclerotizar sus cutículas. Esta actividad es dependiente de la hormona de la muda 20-OH-ecdisona. La actividad está ausente en el tegumento de las larvas, pues las mismas son de cutícula blanda y no sufren el proceso de esclerotización. El primer momento durante el ciclo de vida en que se detectó la actividad fue en las prepupas cuando se forma el pupario. Luego de varias horas la actividad fue indetectable hasta el estadío de adulto farado donde se volvió a registrar la actividad extendiéndose ésta hasta la emergencia del adulto. -Se descubrió y se dosó por primera vez in vitro la actividad NBAD-sintetasa en tejido nervioso. Se estudió el patrón de expresión y se determinó que la actividad en este tejido es constante a lo largo del ciclo de vida. Incluso se detectó actividad en el “cerebro” de las larvas, hecho significativo puesto que en este estadío nunca se detectó esta actividad en la epidermis. En adultos se demostró que la actividad en el sistema nervioso permanece constante durante todo el estadío, mientras que en la epidermis, luego de las primeras 48 horas, cuando ya ha finalizado el proceso de la esclerotización, no se detecta más la actividad. - Por primera vez se observó que la NBAD-sintetasa participa en la respuesta inmune innata de los insectos. Esta actividad se manifiesta solamente cuando los individuos son invadidos por un patógeno o cuando se produce una injuria en la cutícula. También se determinó la función antibacteriana del NBAD. - Se caracterizaron las diferentes actividades enzimáticas y se concluyó que todas corresponderían a una misma enzima. La misma mostró una amplia especificidad de sustrato, siendo capaz de conjugar β-alanina con catecolaminas, indolaminas e imidoaminas. Por primera vez se logró sintetizar in vitro: NBANE, NBAOA; NBATA, NBASHT, NBAHA (carcinina) y NBATyr (sarcofagina). Debido a la amplia especificidad de sustrato que mostró, hemos denominado a esta enzima como “Catecolamina-β-alanil ligasa” (CBAL). - Se estudiaron los mutantes melánicos niger de C. capitata y ebony de D. melanogaster. Se determinó que ambos mutantes son homólogos; los dos carecen de la actividad NBAD-sintetasa en epidermis (esclerotización y respuesta inmune) y en sistema nervioso. Ambos mutantes muestran deficiencias en el comportamiento. El estudio de los mutantes demostró que las proteínas responsables de las actividades enzimáticas corresponden a un único gen. - Se clonó y secuenció el gen ebony de D. melanogaster en la cepa salvaje y el mutante e4. Se demostró, mediante Northern blots, que el ARNm del mutante es de menor tamaño que el de la cepa salvaje. Luego se secuenció y se comprobó que el gen del mutante posee una deleción de 447 pb en el primer exón. Además se observó que en el sitio de la deleción se insertaron 15 nucleótidos pertenecientes a una secuencia extraña, la cual fue analizada y arrojó homología con una secuencia perteneciente a un gen de baculovirus. Se analizó, además, la región promotora y se encontraron secuencias de reconocimiento para genes que responden a 20-OH-ecdisona, factores de transcripción que actúan en tejido epidérmico, tejido nervioso o en la respuesta inmune. - Se comenzó a estudiar preliminarmente la enzima NBAD-hidrolasa. La misma mostró un patrón de expresión diferente a la sintetasa. La expresión de esta enzima se registró durante todo el ciclo de vida. También se observó que se expresa en tejido nervioso. Esta enzima también mostró una amplia especificidad de sustrato, siendo capaz de hidrolizar los diferentes productos que sintetiza la NBAD-sintetasa. Los resultados obtenidos han permitido poner en evidencia la actividad de la enzima CBAL durante el ciclo de vida de C. capitata y los procesos fisiológicos en los que interviene, claves en la evolución de los insectos. También se abrió un nuevo panorama en el estudio del metabolismo de aminas biogénicas y se aportó información para conocer el metabolismo de β-alanina en insectos.

Abstract:
In the present Thesis it has been studied the enzyme NBAD-synthase, responsible for the syntesis of NBAD the main precursor for tanning and sclerotization the insect brown cuticles. This enzyme has been characterized and was studied its expression profile in the C. capitata life cycle. The principal contribution has been the detailed study of this enzyme. Before this Thesis, it was an almost unknown enzyme. It has been postulated that the NBAD is the main precursor for the sclerotization of insect brown cuticles, but except our laboratory, nobody has published anything about the synthesizing enzyme. It has been determined the expression profile of the enzyme during C. capitata metamorphosis. It has been observed that this enzyme showed a wide substrate specificity. For the fisrt time it has been demonstrated the activity of this enzyme in nervous tissue and in innate immune response. It has been cloned and sequenced for the first time a Drosophila melanogaster melanic mutant, lacking the NBAD-synthase activity. Due to its wide substrate specificity we proposed identify it as Catecholamine B-alanyl-ligase (CBAL). The main obtained result are: - It has been determined the expression profile of the enzyme in the epidermal tissue during the life cycle of C. capitata. The activity of this enzyme has been detected in narrow developmental windows in differents stages during the life cycle. All those developmental windows where the enzyme was expressed were in coincidence with the momment when the fly must sclerotize its cuticle. This activity is absent in the larval integument, this is because they are maggots with soft cuticle and it never suffer the sclerotization process. The first time when this activity has been observed was in the prepupa, during puparium formation. After several hours the activity disappeared until the pharate adult stage when it was evident again and remained until the imago emergence. - It has been discovered and determined for the first time the activity of this enzyme in the nervous system of insects and we showed that this activity is expressed constitutively during the whole life cycle. Indeed the activity was measured in the larval brain, this is striking because the activity is absent from the epidermal tissue. It has been shown that in the adult stage while the epidermal activity drops to undetectable levels, after the first 48 hours, when the sclerotization process had finished, in nervous tissue it kept on constant. - It was observed for the first time that NBAD-synthase is activated during the immune response in insects. The NBAD-synthase is activated only when the insect is infected by a microorganism. It has been also demonstrated the antibacterial activity of NBAD. - It has been characterized the different enzymatic activities and it was observed that all of them belong to the same enzyme. This enzyme showed a wide substrate specificity, being capable of synthesize different β-alanyl derivatives of catecholamines, phenolamines, indolamines and imidoamines. It has been synthesized, for the first time in vitro: NBANE, NBAOA, NBATA, NBASHT, NBAHA (carcinine) and NBATyr (sarcophagine). Due to its broad substrate specificity we proposed identify it as Catecholamine β-alanyl ligase (CBAL). - It has been studied the melanic mutants niger of C. capitata and ebony of D. melanogaster. It has been shown that both mutant are homologous, this two mutants lack the NBAD-synthase activity in the integument (sclerotization and immune response) and in the nervous tissue. These both mutants also have behavioural anomalies. The studies carried out on these mutants demonstrated that the responsible enzymatic activities are codified by an unique gene. - It has been cloning and sequenced the ebony gene from D. melanogaster wild type and ebony4 (e4) strains. By Northern blot assays has been observed that the mutant mRNA is smaller than the wild type one. Thereafter by sequencing it has been demonstrated that the mutant gene has a 447 bp deletion in its first exon. Moreover it has been observed in the deletion site 15 exogenous nucleotides inserted, and it sequence showed great similarity with a baculovirus gene. It has been studied the expression pattern in the D. melanogaster life cycle. Using a computational program it has been analized the promoter region of this gene and it has been observed the presence of sequences for different transcription factor recognition sites, such as those that respond to 20-OH ecdysone, transcription factor that are expressed in epidermal or nervous tissue and those that modulate the immune response. - Preliminary it has begun to be studied the enzyme NBAD-hydrolase. This enzyme showed an expression pattern different for that of NBAD-synthase. The expression of the former has been detected during the whole life cycle of C. capitata. As it occurs with the NBAD-synthase, the NBAD-hydrolase is also expressed in nervous system and is capable to hydrolisate the alternative products synthesized by the NBAD-synthase. All these results has allowed to show the activity of CBAL during the whole life cycle of C. capitata and the physiological process where it participates, very important during the evolution of insects. A new subjet in the study of metabolism of biogenic amines has been opened and it has been given a new information on the metabolism of β-alanine in insects.

"Celdas fotovoltaicas de silicio cristalino : Simulación, diseño, elaboración y caracterización" (1997). Venier, Guillermo Luis. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se desarrollaron modelos teóricos a fin de optimizar el diseño de dispositivos fotovoltaicos de silicio monocristalino. En especial, se analizó la dependencia de la eficiencia de las celdas con algunos parámetros de relevancia como por ejemplo la concentración de dopante y la profundidad de juntura, y se implementó además un método para encontrar la grilla de contacto óptima. En cuanto a la parte experimental, se encaró el proceso de elaboración de celdas de silicio cristalino, el cual no registraba antecedentes en el país. Ello dio lugar al desarrollo y adaptación de diversas técnicas, entre las que cabe destacar: preparación de muestras, difusión de dopantes, depósito de contactos mediante fotolitografía y aplicación de tratamientos antirreflectantes, alcanzándose buen control sobre las mismas. En particular, se pusieron a punto dos métodos de difusión propuestos recientemente en la bibliografía, investigándose sus principales características y ventajas relativas. Los desarrollos realizados dieron lugar al diseño, elaboración y caracterización de celdas solares de hasta un 15% de eficiencia. Un conjunto importante de los dispositivos construidos se utilizó en la confección de un panel para ensayo de celdas en el espacio que será incluido en un satélite argentino. En lo que concierne a la caracterización del material, se desarrollaron teórica y experimentalmente dos métodos novedosos para la estimación de dos parámetros fundamentales en el comportamiento de un dispositivo fotovoltaico, como son la longitud de difusión de portadores minoritarios y la velocidad de recombinación superficial. Las principales características de los métodos propuestos radican en su simplicidad y bajo requerimiento de equipamiento, así como en la determinación de los parámetros en el dispositivo final.

Abstract:
Theoretical models were developed in order to optimize the design of single crystal silicon photovoltaic devices. As an example, the dependence of the cell efficiency on certain relevant parameters -i.e. surface dopant concentration and junction depth- was analysed, implementing a method of finding the optimum contact grid. As for the experimental part, the process of manufacturing crystalline silicon cells -which showed no antecedents in the country- was started. This allowed the development and adaptation of several techniques, such as sample preparation, diffusion of dopants, deposition of electrical contacts through photolithography and AR coating, achieving a good degree of control over them. In particular, two methods of diffusion, recently proposed in the bibliography, were set up and adjusted, investigating their main features and relative advantages. The developments performed gave place to the design, elaboration and characterization of cells up to an efficiency of 15%. Un important set of these devices were used to put up a module for cell testing in espace, to be included in an Argentinian satellite. In what concerns to the characterization of the material, two new methods of estimating two fundamental parameters in any device performance (i.e. diffusion length and surface recombination velocity) were developed, theoretically and experimentally. Their main features lie on simplicity, low equipment requirement, and determination of the parameters right in the final device.

"Ciclo de vida y distribución espacial de Gondogeneia antarctica Chevreux (Crustacea, Amphipoda)" (1995). Momo, Fernando Roberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Ciclo energético de ondas planetarias en el Hemisferio Sur" (1993). Solman, Silvina Alicia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Con el fin de analizar los procesos que se llevan a cabo durante el desarrollo de la inestabilidad barocllnica, se estudid la evolución no lineal de perturbaciones baroclinicas que se desarrollan en el seno de un flujo zonal baroclinicamente inestable. El ciclo energético asociado a las perturbaciones puso de manifiesto el desarrollo de un ciclo principal y ciclos secundarios. El ciclo principal estd caracterizado por la conversión de energía potencial a energía cinética, amortiguado por procesos barotrópicos, cuyo efecto se incrementa durante la etapa de decaimiento de la perturbación. Durante el desarrollo del sistema se produce el desdoblamiento de la zona baroclínica inicial en dos bandas baroclínicas, asociadas a dos jets, o corrientes en chorro, baroclínicos. La banda subtropical mantiene un gradiente térmico meridional intenso y, en consecuencia, una cortante vertical del flujo zonal intensa. La banda polar está asociada a la parte ocluida del sistema frontal y presenta una estructura barotrópica. El jet asociado, el jet Polar, es muy intenso y tiene asociada una cortante meridional importante. El transporte meridional de cantidad de movimiento que se establece durante el desarrollo de la inestabilidad baroclínica es hacia el Polo con un máximo en capas altas y un máximo secundario cercano a superficie, centrado en la latitud donde se ubica el corazón del jet inicial. Esta configuración induce una aceleración del flujo zonal hacia el Polo, por convergencia de flujo de cantidad de movimiento y una desaceleración hacia el Ecuador, por divergencia de flujo de cantidad de movimiento, que contribuye a la formación de estes en capas bajas. Durante el desarrollo de los ciclos secundarios las perturbaciones crecen barotrópicamente. Este comportamiento está asociado con el desarrollo de cortantes meridionales inestables en el flanco polar de los jets. Se evaluó la sensibilidad del desarrollo del sistema baroclínico a factores tales como la fricción superficial y la presencia de una componente barotrópica superpuesta al flujo zonal inicial. Los resultados obtenidos mostraron que durante la etapa de evolución no lineal del sistema baroclínico, la fricción superficial tiende a inhibir el desarrollo de la componente barotrópica, con lo cual, inhibe el desarrollo de la inestabilidad barotrópica durante los ciclos secundarios. Tanto la fricción superficial como la presencia de la componente barotrópica actúan como factores estabilizadores del desarrollo baroclínico.

"Ciclo silvestre de transmisión de Trypanosoma cruzi en el noroeste de Argentina" (2010). Ceballos, Leonardo Adrián. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La enfermedad de Chagas mantiene ciclos de transmisión tanto domésticos como silvestres. Con el fin de avanzar en el conocimiento sobre el ciclo silvestre de transmisión de T. cruzi en la región del Gran Chaco, se realizaron los siguientes estudios: a) Prevalencia de infección por T. cruzi en mamíferos silvestres tras dos décadas de control vectorial sostenido de T. infestans. Se determinó la prevalencia de infección de T. cruzi en mamíferos silvestres alrededor de ocho parajes rurales en una zona semiárida de Santiago del Estero entre 2002-2007, donde los tres parajes núcleo del área habían sido estudiados con el mismo objetivo dos décadas atrás (1984-1991). Se observaron variaciones a largo plazo en la dinámica e intensidad de la transmisión silvestre de T. cruzi al comparar ambos períodos. Se analizaron mediante xenodiagnóstico 605 mamíferos silvestres pertenecientes a 19 especies identificadas. Solo 4 (9,1%) de 48 zarigüeyas (Didelphis albiventris) y 1 (0,9%) de 107 zorrinos (Conepatus chinga) estuvieron infectados por T. cruzi. La prevalencia de infección por T. cruzi de las zarigüeyas del periodo entre 2002-2007 fue casi cuatro veces menor que en 1984-1991 y aumentó con la edad; la mayor prevalencia se detectó en primavera y la menor en otoño en ambos periodos de estudio. La prevalencia de infección de los zorrinos también disminuyó cinco veces entre ambos periodos. La fuerza de infección promedio de las zarigüeyas cayó más de 5 veces, desde 8,2 por cada 100 meses- zarigüeya entre 1988-1991 a 1,6 entre 2002-2007. En ambos periodos la Unidad Discreta de Tipificación (UDT) predominante en las zarigüeyas fue TcI, mientras que en los zorrinos fue TcV entre 1984-1991 y TcIII entre 2002-2007. Se discute si la deforestación masiva, cambios en la fauna silvestre y la muy reducida infestación por T. infestans en hábitats domésticos y peridomésticos desde 1992 hasta 2007 (debido al control vectorial por rociados con insecticidas) podrían explicar la importante disminución de la infección por T. cruzi en sus principales reservorios silvestres. b) Estudio de focos silvestres de T. infestans y otros triatominos en el chaco seco santiagueño. Se realizaron búsquedas de triatominos en el medio silvestre con el fin de investigar cuál o cuáles eran los vectores involucrados en la transmisión de T. cruzi. El principal resultado fue el inesperado hallazgo de varias colonias de T. infestans alejadas hasta 1.900 m de las casas más cercanas, y a 2.300 m de la casa más cercana con infestación detectada en las evaluaciones entomológicas después de un rociado de insecticidas con poder residual de todas las viviendas realizado 18 meses previos al hallazgo. Este es el primer hallazgo confirmado de múltiples colonias de T. infestans en hábitats silvestres fuera de Bolivia. A diferencia de otras capturas aisladas de T. infestans en el pasado, los hallazgos presentes de T. infestans en hábitats silvestres se realizaron en el contexto de la fase de vigilancia, con muy pocos focos (peri)domésticos de baja densidad en un bosque xerófilo secundario con diferentes grados de degradación. De los 174 triatominos silvestres totales capturados (24 Triatoma infestans, 138 Triatoma guasayana, 4 Triatoma garciabesi, 1 Triatoma platensis y 7 ninfas pequeñas no identificadas), 7 T. guasayana y 2 T. infestans fueron detectadas infectadas por T. cruzi mediante PCR-kADN. Estudios complementarios realizados con marcadores de ADN mitocondrial y de microsatélites, morfometría geométrica de alas y análisis espacial, permitieron concluir que los T. infestans hallados en hábitats silvestres muy probablemente eran derivados de poblaciones (peri)domésticas. Se discute si los hábitats silvestres proveerían un refugio efímero o permanente para las poblaciones (peri)domésticas de T. infestans después de las intervenciones con insecticidas y si las colonias serían viables en ausencia de inmigración. c) Estudio de focos silvestres de T. infestans melánicos en el chaco argentino. Siguiendo la identificación tentativa como T. infestans de dos triatominos melánicos colectados de nidos de loros en una reserva natural protegida del chaco argentino, se realizó una búsqueda intensiva dirigida a su captura. El muestreo abarcó tanto árboles con nidos de psitácidos (i.e., Amazona aestiva y Aratinga acuticaudata) como otros ecotopos (i.e., árboles vivos o muertos y troncos, ambos en pie o en el suelo, etc.). De un total de 33 triatominos silvestres capturados, 14 eran T. infestans. Todos los T. infestans adultos o ninfas que se pudieron criar hasta adulto fueron melánicos. La mayoría (64%) de los triatominos (incluyendo 10 T. infestans) fueron colectados de huecos en troncos de quebrachos que albergaban nidos de loros. Todos los T. infestans colectados en la vivienda infestada más cercana, localizada a 8 km del foco silvestre más cercano, mostraron caracteres cromáticos normales. Éste es el primer hallazgo confirmado de colonias de T. infestans en hábitats silvestres y melánicos (‘dark morphs’) en el chaco argentino. Los resultados aquí presentados refuerzan el rol que tienen de las zarigüeyas (D. albiventris) como hospedador silvestre de T. cruzi, ponen en relieve el hecho que existen focos silvestres de T. infestans mucho más frecuentemente que lo aceptado hasta ahora, remarcando una potencial fuente de reinfestación del ambiente humano habitualmente no tenida en cuenta por los programas de control vectorial, y apoyan la hipótesis que T. guasayana es el principal vector silvestre de T. cruzi en el área.

Abstract:
Chagas disease has both domestic and sylvatic transmission cycles. In order to have a better understanding of the sylvatic transmission cycle of T. cruzi in the Gran Chaco region, the following studies have been carried out: a) Prevalence of infection with T. cruzi in wild mammals after two decades of sustained vector surveillance of T. infestans. The prevalence of infection with T. cruzi in wild mammals was determined in eight rural villages in a semiarid region of Santiago del Estero during the years 2002-2007. The 3 central villages in the study area had been studied with the same goal two decades before (1984-1991). Long-term variations in the dynamics and intensity of the sylvatic transmission of T. cruzi were observed when comparing the two time periods. A total of 605 wild mammals divided into 19 identified species was examined by xenodiagnosis. Only 4 (9.1%) of 48 opossums (Didelphis albiventris) and 1 (0.9%) of 107 skunks (Conepatus chinga) were infected with T. cruzi. The prevalence of infection with T. cruzi in opossums during the period 2002-2007 was almost 4 times lower than during 1984- 1991 and increased with age; the highest infection prevalence was detected in spring and the lowest in the fall in both study periods. The prevalence of infection in skunks was also 5 times lower when comparing the two time periods. The average force of infection in opossums decreased more than 5 times, from 8.2 per 100 opossum-months during 1988-1991 to 1.6 during 2002-2007. In both periods the main Discrete Typing Unit (DTU) in opossums was TcI whereas in skunks was TcV during 1984-1991 and TcIII during 2002-2007. We bring into discussion whether massive deforestation, changes in wildlife and the very reduced infestation with T. infestans in domestic and peridomestic habitats from 2002 to 2007 (due to vector control with insecticide spraying), could explain the dramatic decrease of T. cruzi infection in the main sylvatic reservoir hosts. b) Study of sylvatic foci of T. infestans and other triatomines in Santiago del Estero’s arid chaco. Searches of triatomines in the wild were undertaken in order to assess which were the vectors involved in the transmission of T. cruzi. The main result was the unexpected finding of several T. infestans colonies located up to 1900 m of the nearest house, and more than 2 km from the nearest house with infestation detected during the previous 18 months after a community-wide residual spraying with insecticides. This is the first confirmed finding of multiple T. infestans colonies in wild habitats outside Bolivia. Unlike previous, isolated captures of T. infestans, the present findings of T. infestans in wild habitats were obtained in the context of surveillance efforts, when very few (peri)domestic foci T. infestans with low-density occurred in a secondary xerophytic forest. Among the 174 triatomines captured (24 T. infestans, 138 Triatoma guasayana, 4 Triatoma garciabesi, 1 Triatoma platensis and 7 unidentified small nymphs), T. cruzi infection was detected by kDNA-PCR in 7 T. guasayana and 2 T. infestans. Further complementary studies done with mitochondrial DNA markers and microsatellites, wing geometric morphometry and spatial analysis, led to the conclusion that the T. infestans found in wild habitats were probably derived from (peri)domestic populations. We discuss whether wild habitats provide an ephemeral or permanent refuge for (peri)domestic T. infestans populations after the intervention with insecticides, and whether the colonies would be viable in the absence of immigration. c) Study of sylvatic foci of dark morphs T. infestans in argentine chaco. Taking into account the tentative identification of two dark morph specimens that were collected from parrots’ nests in a natural protected reserve of the Argentine chaco as T. infestans, intensive searches towards its capture were undertaken there. The search sites comprised trees with psitacids nests (i.e., Amazona aestiva y Aratinga acuticaudata) as well as other ecotopes (i.e., living or dead trees and trunks, standing or on the ground, etc). Of 33 wild triatomines captured, 14 were T. infestans. All the adult T. infestans or nymphs that succeeded in growing to the adult stage were dark morphs. Most of the triatomines (64%, including 10 T. infestans) were collected from holes in ‘quebracho’ tree trunks that harbored parrots’ nests. All of the T. infestans collected in the closest infested house -8 km away to the closest sylvatic focus- displayed normal chromatic characters. This is the first confirmed finding of T. infestans colonies in wild habitats and of dark morphs in the Argentine chaco. The results presented here reinforce the role of opossums (D. albiventris) as sylvatic T. cruzi reservoir hosts, stands out the fact that sylvatic T. infestans foci appeared to be more frequent than accepted until now, highlighting a potential source of reinfestation of the human environment, usually not taken into account by the vector control programs, and support the hypothesis that T. guasayana is the main sylvatic vector of T. cruzi in the area.

"Cinética de cristalización de aleaciones amorfas base Te y base Mg" (1998). Fontana, Marcelo Raúl. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo, se estudió la cinética de cristalización de aleaciones amorfas binarias Ga-X (X = Te, Mg) y temarias Ga-X-Y (Y = Sn, Fe) en la zona de composiciones rica en X. Los materiales fueron caracterizados por difracción de rayos X, espectroscopía Mössbauer y calorimetría diferencial de barrido (DSC). Los sistemas binarios Ga-X presentan un pequeño rango de amortización centrado en 20 % atómico de Ga. Al agregar un tercer elemento Y (hasta un 10 % atómico) a los sistemas binarios se observan comportamientos disímiles en los rangos de amorfización temarios. Estos pueden ser explicados por la existencia de asociaciones Fuertes en el liquido que son retenidas en el enfriado rapido. Teniendo en cuenta las caracteristicas detectadas en la cinética de cristalización, los amorfos pueden dividirse en dos grupos: los de composición binaría (cercana a Ga20X80) y los de composición ternaria. Los amorfos ternarios son más estables y los productos de cristalización son diferentes a los de composición binaria. Se realizó un estudio detallado de la cinética de cristalización de la aleación amorfa de composición Ga20Te80. Se detectaron la existencia de tiempos de inducción y de mecanismos de cristalización compleja. La cristalización de los amorfos temarios base Te puede ser modelada suponiendo sólo modificaciones en la viscosidad con respecto al amorfo de composición Gaonego. En este trabajo se proponen elaboraciones originales que pueden ser aplicadas en general: se separa la señal correspondiente a una cristalización de una de cambio de capacidad calorifica en un barrido de DSC, se diseño un algoritmo que permite la construcción empírica de diagramas de transformación, se cuantifican los errores experimentales en calorimetría, se propone un modelo de cristalización compleja que explica la cinética de una cristalización primaria, se construyen los diagramas de transformación a partir de un modelo de cristalización.

Abstract:
In this work, the crystallization kinetic of binary Ga-X (X = Te, Mg) and ternary Ga-X-Y (Y = Sn, Fe) amorphous alloys has been studied. The materials have been characterized by x-ray diffraction, Mössbauer spectroscopy and differential scanning calorimetric (DSC). The binary systems Ga-X have a small glass forming range centered in 20 % atomic of Ga. When a third element Y (up to 10 % atomic) is added to the binary systems, dissimilar behaviors in the ternary glass forming range have been observed. These can be explained by the existence of strong associations in the liquid which are retained in the rapid quenched. Taking into account the determinate characteristics in the crystallization kinetics, the amorphous alloy can be classified in two groups: those of binary composition (near to Ga20X80) and those of ternary composition. Ternary amorphous alloys are more stable and the crystallization products are different. The crystallization kinetics of the amorphous alloy of composition Ga20Te80 have been studied widely. The existence of induction times and mechanisms of complex crystallization have been detected. The crystallization of Te-based ternary amorphous alloys can be modeled considering just viscosity modifications related to the amorphous alloy of composition Ga20Te80. In this work, original elaborations are formulated: a new procedure is developed to perform the kinetic analysis of continuous heating calorimetric data when the heat capacity of the sample changes during the crystallization, an empirical construction of transformation is presented, the uncertainties inherent to experimental differential scanning calorimetric data are evaluated, a model of complex crystallization which explains the kinetics of a primary crystallization is formulated, the diagrams of transformation for a model of crystallization are constructed.

"Cinética de la descomposición monomolecular de los dicloroioduros aromáticos : aplicación d elas conclusiones de este estudio a la medida de las "capacidades afinitarias"" (1933). Hermitte, Enrique. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En mi trabajo anterior sobre la descomposición de los dicloroioduros aromáticos presentado a la Institución Mitre en 1930, traté de establecer la naturaleza de la reacción mediante un estudio cinético que se efectuaba analizando a intervalos convenientes el contenido en cloro desprendido por ioduro de potasio en diferentes dicloroioduros dejados a la oscuridad en un ambiente renovado y seco. Con los resultados de dichos análisis repetidos un número suficiente de veces, fueron construidas curvas de descomposición tomando como ordenadas las cantidades (a-x) remanentes de dicloroioduro y como absisas los tiempos trancurridos. Estas curvas, que representaban los valores medios de las diversas experiencias para cada una de las sustancias estudiadas, se examinaron bajo el punto de vista de la constancia de los valores de k1, k2, etc., en las ecuaciones de integración en que intervienen una, dos o mas moléculas, obteniendo los mejores resultados en el caso de una reacción monomolecular, aunque se comprobó una disminución en el valor de la constante con el transcurso del tiempo que alcanzaba termino medio al 17% de su valor absoluto durante los intervalos considerados. Algunos detalles viciaban aquellas experiencias, poniendo una cierta inseguridad en las conclusiones, pero como aparecia evidente la conveniencia de continuar la experimentación en ese terreno con miras a mejores resultados, segui adelante, y es asi para la serie actual de experiencias me propuse operar en un medio homógeneo y termicamente regulado con precisión, manteniendo la idea de arrastrar los gases desprendidos de la sustancia en descomposición mediante una corriente de aire limpio y seco, a la vez que procediendo en la oscuridad. Una vez conseguidas las condiciones necesarias, y recorrido el indispensable camino de orientación, he comprobado que todos los dicloroioduros estudiados, en soluciones de tetracloroetano de dilución normal vigésimo e inferiores se descomponen, cuando se los lava en las condiciones elegidas, mediante aire seco, etc., obedeciendo a las reglas de una ecuación monomolecular. Con respecto a ciertos dicloroioduros disueltos en concentraciones superiores a 0.05 N., he comprobado que el valor de k1 aumenta, pero se mantiene constante a si mismo durante la desconposición. Este hecho, cuya explicación definitiva requerirá mas trabajo experimental, no condiciona el valor absoluto ni el relativo de las diversas constantes halladas con soluciones diluidas. Por consiguiente, el presente trabajo constituye, según mi modo de ver, un paso mas en el conocimiento del modo de descomponerse los dicloroioduros aromáticos, y permite disponer de un método para medir las "capacidades afinitarias" de los radicales nucleares (los únicos que hasta ahora dan dicloroioduros con facilidad), en un todo de acuerdo con los principios sustentados por Tiffeneau y otros que se han ocupado como él de la interpretación sistemática del modo de reaccionar los radicales de la Química Orgánica. Particularmente desde este punto de vista es interesante el trabajo que resumimos, ya que el nuevo método propuesto reune las ventajas de una exactitud muy aceptable, y al parecer una considerable universalidad, pues sabemos lo extensa que es la serie de los dicloroioduros aromáticos, y seguramente la mayoria es suceptible de ser estudiada como se ha hecho con los nueve que presentamos en este trabajo. De ellos, seis ya habian sido estudiados por otros métodos y figuran en las tablas de Tiffeneau. La concordancia de valores entre lo existente y lo nuestro confirma los conceptos enunciados y da autoridad al nuevo método, además de apoyar nuestra hipótesis de que los dicloroioduros se descomponen de acuerdo a la distinta "fuerza de unión" de los radicales ligados al iodo del grupo I:Cl2. Uno solo de los ejemplos elegidos entre nueve, dio un resultado contrario a lo esperado, por lo cual este deberá permanecer a la espectativa de nuevas experiencias. Finalmente, dos ejemplos nuevos, cuyos valores están de acuerdo con las propiedades conocidas, forman la contribución del método a las tablas antes mencionadas, cuya utilidad se acrecienta a medida que van resultando mas completas.

"Cinética de reacciones fotoquímicas con participación de átomos y radicales libres" (1981). González, Mónica Cristina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Hasta el presente se han publicado un gran número de trabajos sobre estudios cinéticos de halogenaciones fotoquímicas de compuestos orgánicos en fase gaseosa. En la bibliografía (1) se encuentra abundante información sobre fotocloraciones de hidrocarburos saturados, no saturados, y sus derivados halogenados sutituídos. Una gran parte de los estudios sobre fotocloraciones de hidrocarburos no saturados, fueron realizados por el profesor Shumacher y colaboradores. En particular se ocuparon del estudio sistemático de la fotohalogenación del etileno y de sus derivados halogenados (2), (3), (4), (5), (6), (7), (8), (9), (10), (11), (12). La mayor parte de las fotocloraciones se estudiaron con iluminación continua, estableciéndose el mecanismo de reacción y determinándose la constante global de velocidad. La introducción del método del sector rotatorio, permitió a partir del año 1950 completar el estudio de algunas de estas reacciónes observando su comportamiento bajo condiciones de iluminación intermitente. Esto permitió en la mayor parte de los casos, determinar las constantes de las reacciones parciales entre las que están comprendidas las de recombinación de radicales. Estas últimas se han estudiado también en forma sistemática, mediante diferentes métodos experimentales. En la tabla VI puede observarse un resumen de los valores numéricos de los parámetros cinéticos mas importantes para las reacciones de recombinación de radicales, obtenidos por diferentes autores usando distintos métodos. No se conocen hasta el momento métodos teóricos aceptables para el cálculo de constantes de recombinación en finción de las características estructurales (13), (14), (15). Prosiguiendo con el estudio sistemático de la adición del átomo de cloro sobre dobles ligaduras, en el presente trabajo se encaró el estudio de la reacción fotoquímica entre el exafluoro-propeno y cloro, y entre perfluoro 2-buteno y cloro. De la primera no se encontraron datos en la bibliografía consultada salvo un trabajo (16) realizado por espectroscopía cinética, referente a la recombinación de radicales C3F6Cl y en el cual se calcula su constante de velocidad sobre la base de una serie de analogías de comportamiento con sistemas supuestamente semejantes. De la segunda se conoce el mecanismo de la reacción con iluminación continua establecido por Schumacher y Roselli en 1963 (11). En consecuencia, en el presente trabajo se estudió: -El sistema hexafluoropropeno - cloro con iluminación continua. Se estableció su mecanismo, su ecuación de velocidad y la constante global de velocidad correspondiente. - El mismo sistema con iluminación intermitente, determinándose las constantes de las reacciones parciales. - El sistema perfluoro 2/buteno con iluminación intermitente, determinándose las constantes de las reacciones parciales. En ambos casos, la iluminación intermitente se obtuvo aplicando la técnica del sector rotatorio.

"Citocromo P450 reductasas y metabolismo redox en Trypanosoma cruzi" (2013-03-22). Portal, Patricio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La citocromo P450 reductasa (CPR) es una flavoproteína que coordina la transferencia de electrones desde el NADPH hacia distintas hemoproteínas, como los citocromo P450 (CYPs), el citocromo b5, y la hemooxigenasa. Los CYPs se encuentran involucrados tanto en la síntesis de compuestos endógenos, tales como esteroles y ácidos grasos, como en la activación y detoxificación de compuestos exógenos. Pese a que existen numerosos genes CYP funcionales en mamíferos, existe sólo una CPR en cada especie. La producción de una clase especial de esteroles, entre los que se incluyen el ergosterol y otros metil-esteroles, es una importante vía metabólica involucrada en el crecimiento y la viabilidad celular de microorganismos eucarióticos, como protozoos u hongos, que se encuentra ausente en mamíferos. En T. cruzi se han identificado y caracterizado bioquímicamente una familia de genes integrada por tres putativas CPRs, llamadas TcCPR-A, TcCPR-B y TcCPR-C, cuyas secuencias poseen los dominios conservados para FMN, FAD y NADPH. TcCPR-A carece del domino hidrofóbico amino terminal. La sobreexpresión de TcCPR-B en epimastigotes incrementa su resistencia a drogas, sugiriendo su participación en el metabolismo de detoxificación del parásito. En la búsqueda de un rol fisiológico para las TcCPRs, en el presente trabajo se analizó el efecto de la sobreexpresión de las mismas, centrándose principalmente en su posible participación en la biosíntesis de esteroles. Una cepa de Saccharomyces cerevisiae deficiente para CPR fue utilizada en ensayos de complementación con las TcCPRs recombinantes de T. cruzi. La baja tasa de crecimiento y la disminución de la resistencia al ketoconazole de la levadura mutante, lograron revertirse parcialmente sólo con TcCPR-B y -C. La sobreexpresión de TcCPR-A en células de epimastigotes resulta letal, produciendo un aumento del contenido de ADN, una morfología aberrante y numerosas alteraciones ultraestructurales. La sobreexpresión de TcCPRB y -C incrementó la biosíntesis de ergosterol y la relación NADP+/NADPH. Los parásitos transgénicos con mayor contenido de ergosterol presentaron un aumento en el orden de membrana, con la respectiva disminución de la endocitosis. Notablemente, TcCPR-B se ha encontrado en reservosomas mientras que TcCPR-C se ha localizado en el retículo endoplasmático. Los resultados obtenidos en esta Tesis junto al correspondiente análisis bibliográfico permiten proponer un rol para las TcCPRs en mecanismos de estrés (TcCPR-A), en reacciones de detoxificación (TcCPR-B) y en la biosíntesis de esteroles (TcCPR-C).

Abstract:
Cytochrome P450 reductase (CPR) is a flavoprotein that coordinates transfer of electrons from NADPH to various hemoproteins such as cytochrome P450 (CYPs), cytochrome b5, and heme oxygenase. CYPs are involved both in the synthesis of endogenous compounds, such as sterols and fatty acids, as in the activation and detoxification of exogenous compounds. Although there are numerous functional CYP genes in mammals, there is only one CPR in each species. Sterol production is an important metabolic pathway involved in cell growth and viability. Eukaryotic microorganisms such as protozoa and fungi produce a special class of sterols absent in mammals, including ergosterol and other methyl-sterols. It has been identified and biochemically characterized three putative CPRs in Trypanosoma cruzi, called TcCPR-A, TcCPR-B and TcCPR-C. These sequences have the characteristic conserved domains for FMN, FAD and NADPH. However TcCPR-A lacks the Nterminal hydrophobic domain. Overexpression of TcCPR-B epimastigotes of T. cruzi increased drug resistance, suggesting it involvement in detoxification metabolism of the parasite. In search for a physiological role of TcCPRs, function of these enzymes and the effect of overexpression were analyzed, focusing mainly on their possible involvement in sterol biosynthesis. A Saccharomyces cerevisiae mutant, CPR deficient strain, was used in complementation assays with recombinant TcCPRs. Only TcCPR-B and -C partially succeed to reverse low growth rate and decreased resistance to ketaconazole of the mutant. Overexpression of TcCPR-A is lethal in epimastigote cells, producing an increase in DNA content, aberrant morphology and numerous ultrastructural alterations. TcCPR-B and -C overexpression increased ergosterol biosynthesis and NADP+/NADPH ratio. Moreover, transgenic parasites present more ergosterol and higher membrane order, with a corresponding decrease in endocytosis. Notably, TcCPR-B was found in reservosomas, while TcCPR-C was located in the endoplasmic reticulum. Results obtained in this Thesis suggest a role for TcCPRs in stress mechanisms (TcCPR-A), in detoxification reactions (TcCPR-B) and in biosynthesis of sterols (TcCPR-C).

"Citogenética molecular y reproducción de la tribu Euphractini Winge, 1923 (Dasypodidae, Xenarthra, Mammalia) de Argentina" (2011-12-12). Luaces, Juan Pablo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los armadillos de la tribu Euphractini son un grupo de mamíferos xenartros, que se encuentran clasificados en 5 especies cuya distribución ocurre principalmente en la Argentina (salvo Euphractus sexcinctus). Por su condición filogenética basal en placentados, su biología requiere ser cuidadosamente revisada y estudiada. Se caracterizó citogeneticamente y desde el punto de vista reproductivo a Euphractini, para poder esclarecer posibles mecanismos de aislamiento reproductivo (MAR) acontecidos durante su historia evolutiva: 1). MAR post-cigóticos: mediante la caracterización citogenético-molecular de: 223 ejemplares (131 machos y 92 hembras) de Chaetophractus villosus, 2n=60 y NF=88; 103 ejemplares de Chaetophractus vellerosus, en sus dos distribuciones disyuntas, 2n=62 y NF 88-90 ; 14 ejemplares (4 machos y 10 hembras) de Zaedyus pichiy, 2n=62 y NF=98; y 7 ejemplares (4 machos y 3 hembras) de E. sexcinctus, 2n=58 y NF=106. 2). MAR precigóticos: con el estudio de la morfología del tracto genital masculino en machos de Ch. villosus, y de la fisiología reproductiva, con estudio del ciclo reproductivo en machos de Ch. villosus y en hembras de Ch. villosus y Ch. vellerosus.

Abstract:
The armadillos of the tribe Euphractini are a group of xenarthrous mammals, which divided in five species, are manly distributed in Argentina (except for Euphractus sexcinctus). Due to its basal phylogenetic position within placentals, its biology has to be carefully analysed. Cytogenetic and reproductive characterization of Euphractini were carried out in order to bound reproductive isolation mechanisms (RIM) that occurred during its evolutive history: 1). Post-mating RIM: throughout a molecular cytogenetic study of the group in: 223 individuals (131 males and 92 females) of Chaetophractus villosus, 2n = 60 and NF = 88; 103 individuals of Chaetophractus vellerosus in it two disjunct distributions, 2n = 62 and NF 88 -90 ; 14 individuals (4 males and 10 females) Zaedyus pichiy, 2n = 62; and NF = 98 and 7 specimens (4 males and 3 females) E. sexcinctus, 2n = 58 and NF = 106. 2). Pre-mating RIM: throughout the study of the reproductive morphology, of the male genital tract in Ch. villosus and physiology, with the study of the reproductive cycle in males of Ch. villosus and in females of Ch. villosus and Ch. vellerosus.

"Citogenética y biología de la reproducción en Myrmecophagidae (Xenarthra) de Argentina" (2013-02-22). Rossi, Luis Francisco. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La familia Mymercophagidae, constituida por cuatro especies, son mamíferos xenartros con distribución endémica del Neotrópico. Al pertenecer esta familia a un grupo basal en placentados, es de particular interés para el establecimiento de las relaciones filogenéticas en mamíferos. Como constituyente de nuestra fauna autóctona su biología requiere ser cuidadosamente analizada. Se caracterizó citogenética-molecularmente a 39 ejemplares (20 machos y 19 hembras) de Mymercophaga tridactyla (2n=60 y NF=110-12) y 29 ejemplares (17 machos y 12 hembras) de Tamandua tetradactyla (2n=54 y NF 108). Se establecieron dos poblaciones cariológicas para M. tridactyla y una para T. Tetradactyla en su distribución Argentina. El par 1 al igual que otros pares cromosómicos, como los sexuales, resultaron estar compartidos en la familia. Se describió también la morfología de los tractos reproductivos en machos y hembras. El tracto reproductor femenino, reveló características arcaicas (seno-urogenital) presentes en otras especies de Xenarthra. Los machos de Tamandua tetradactyla presentaron inhibición testicular, en relacion con una variación en el tamaño del tracto reproductor y se caracterizó morfométricamente el espermatozoide. Tambien se determinó el ciclo hormonal en hembras de ambas especies resultando poliéstricas anuales.

Abstract:
The four species of the Mymercophagidae family are Xenarthra mammals with endemic distribution in the Neotropics. The basal status of this family, in the placental mammals, makes them important for establishing phylogenetic relationships in mammals. Being part of our native fauna makes it necessary for us to carefully analyze and reformulate again their biology. 39 specimens (20 males and 19 females) of Mymercophaga tridactyla (2n = 60 and NF = 110-12) and 29 individuals (17 males and 12 females) of Tamandua tetradactyla (2n = 54 and NF 108) were characterized cytogenetic and molecularly. Two karyological populations of M. tridactyla and one of T. Tetradactyla were established for their Argentine distribution. The pair 1, as other pairs like the sex chromosomes, was found to be shared in the family. The morphology of the reproductive tracts and hormone cycle in females of both species, which were determined as annual polyestrous, were described. The female reproductive tract showed archaic features (urogenital sinus) present in other species of Xenarthra. The males of Tamandua Tetradactyla showed testicular inhibition, correlated to a size variation of the reproductive tract and the spermatozoon was morphometrically characterized.

"Citotoxicidad del consumo crónico de alcohol sobre las gametas, la fecundación y embriogénesis preimplantatoria murina" (1998). Cebral, Elisa. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se ha descripto que la ingesta crónica y/o aguda de altas concentraciones de etanol durante la gestación produce el síndrome de alcoholismo fetal (FAS). El objetivo principal de este estudio fue profundizar los conocimientos sobre los efectos deletéreos del consumo preconcepcional de etanol y sus consecuencias sobre el desarrollo preimplantativo del embrión. Machos adultos y hembras prepúberes de ratón Fl de (C57 x CBA), ingirieron etanol al 10, 5 y 2.5% en el agua de bebida por 30 días. A los 27 días del tratamiento se indujo la ovulación. Se estudio la calidad de las gametas, la tasa de fecundación y el grado de desarrollo preimplantativo alcanzado por embriones in vitro e in vivo (hasta dia 4), y adicionalmente la incidencia del consumo de etanol en la maduración sexual de las hembras. La administración crónica de etanol al 10 y 5% produjo retraso en la maduración folicular. Como consecuencia, los ovocitos ovulados presentaron altos índices de activación espontánea, partenogenética, y la capacidad de sintesis de PGE por el complejo cúmulo-ovocitario fue reducida con el consumo del 10 y aumentada con el consumo del 5% de etanol. La tasa de fecundación in vitro e in vivo fue reducida cuando las hembras fueron tratadas con ambas dosis de etanol. Los ovocitos intactos de las hembras tratadas no fueron penetrados por los espermatozoides, y los ovocitos haploides oviductales permanecieron sin ser fecundados. El etanol afectó tanto la maduración del ovocito, la regulación y control de su calidad por las células del cúmulo, y también posiblemente la membrana plasmática ovocitaria y otros componentes celulares, lo que resultó en la pérdida de fecundabílidad. El consumo crónico de etanol al lO y 5%, en la fase preconcepcional de las hembras, produjo, tanto en el desarrollo in vitro como in vivo, tasa embrionaria diaria reducida, debido al crecimiento retrasado, al arresto embrionario en estadios de mórulas y en blastocistos tempranos, en los días 2, 3 y 4 (in vivo) y 5 de desarrollo in vitro, con ambas dosis de etanol. Asimismo, fue evidente la alta tasa de fragmentación embrionaria temprana, desde día 2 con etanol al 10%, y menor y más tardía en las hembras tratadas con etanol al 5%. El consumo de etanol al 10% produjo aumento de embriones anormales. El impacto del alcohol en el desarrollo embrionario fue menor con la dosis del 5%, debido a retraso y pérdida embrionaria de reducida intensidad. Se puede concluir que la dosis mínima perjudicial para la gameta femenina y el desarrollo ulterior del embrión preimplantativo, administrada cronicamente a hembras prepúberes, fue el etanol al 5%. Los efectos del consumo crónico de etanol al 5% podrian deberse en parte a las acciones "subcrónicas" del etanol en los días periovulatorios.

Abstract:
It was described that the chronic or acute consumption of high doses of ethanol during gestation produces the fetal alcohol syndrome (FAS). The main objetive of this study was to progress in the aknowledgement about the deleterious effects of preconceptional consumption of ethanol and the consequences on the preimplantation embryo development. Adult male and prepubertal female mice (C57 x CBA) F1), were treated with 10,5 and 2.5 % w/v of ethanol in drinking water for 30 days. On day 27 of the treatment, females were induce to superovulate. The quality of the gametes, the fertilization rates, the stages of preimplantation development reached by the embryos in vitro and in vivo (up to day 4) were studied, and the incidence of the ethanol ingestion on the sexual maturation in the female was determined. The chronic administration of 10 and 5% of ethanol produced delayed follicular maturation. In consequence, the ovulated oocytes showed increased levels of spontaneous parthenogenetic activation, and the capacity of PGE synthesis by cumulus-oocyte complex (COC) was reduced by the 10% ethanol intake and increased by the 5% ethanol. The in vitro and in vivo fertilization rate was only reduced when the females were treated with both doses of ethanol. The intact oocytes from the treated females were not penetrated by spermatozoa, and the increased oviductal haploid oocytes stayed unfertilized. The ethanol affected the maturation of the oocyte, the regulation and the control of the oocyte quality by the cumulus cells, also probably the oolema and others celular components, which resulted in fertility loss. The chronic consumption of 10 and 5% of ethanol by females in the preconceptional phase produced, in both in vitro and in vivo development, reduced daily rates of embryos, due to delayed growth, to embryonary arrest in morulae and early blastocyst stages, in days 2, 3 and 4 (in vivo) and 5 (in vitro) of the development, with both doses of ethanol. Also, it was evident high early embryo fragmentation rates, from day 2 with ethanol 10%, and lower and later in females treated with 5% of ethanol. The ingestion of 10% of ethanol produced increase of abnormal embryos. The ethanol impact in the embryo development was lower with the 5%, due to the reduced intensity of delayed growth and embryo loss. It was concluded that the lower deletereous dose of ethanol, administered chronically to prepubertal females, that affects the gamete an the ulterior development of preimplantation embryos, was the 5% of ethanol. The effects of the chronic alcohol consumption could due to, in part, the "subchronic" actions of the ethanol on the periovulatory days.

"Citotoxicidad y genotoxicidad de dos extractos naturales" (2003). García Franco, Susana Nora. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Es de actual importancia el desarrollo y uso de extractos vegetales en el control biorracional de plagas e insectos. Existe además una creciente inclinación por el uso de extractos naturales como parte de la dieta o en aplicaciones benéficas como ungüentos o lociones. Por otra parte, hay un intenso avance en la búsqueda e implementación de técnicas alternativas al uso de animales en la evaluación de la toxicidad de drogas y compuestos químicos. Estas razones motivaron el interés por llevar a cabo estudios de citotoxicidad y genotoxicidad, sobre extractos acuosos y metanólicos de dos vegetales autóctonos regionales de Argentina y parte de la zona subtropical de América: Vallesia glabra o Ancoche e Ilex paraguaiensis o Yerba Mate. Se efectuaron por lo tanto estos estudios, aplicando técnicas in vitro basadas en cultivos celulares, sometidos a tres tipos de exposiciones : I ) aguda ll ) repetida Ill ) crónica La Citotoxicidad se evaluó mediante a) ensayos de coloración (Cristal Violeta, Rojo Neutro) o por medición de actividades enzimáticas (Láctico deshidrogenasa, Succinato deshidrogenasa) o por determinación de la Concentración de Proteínas. b) Eficiencia de Clonado La Genotoxicidad se determinó por medición del Indice de Daño del ADN en el Ensayo del Cometa. Mediante exposiciones agudas se concluyó que los extractos metanólicos de Ancoche presentaron mayor comportamiento citotóxico que los acuosos para los ensayos que indican viabilidad celular (RN, CV, Proteínas, MTT) y menores para los que indican daño celular (LDH). Mediante el ensayo de Eficiencia de Clonado el extracto acuoso de Ilex paraguaiensis mostró ser más tóxico que el metanólico. El extracto acuoso de Ancoche a bajas concentraciones brindó cierto grado de protección de los cultivos. Las exposiciones repetidas evidenciaron aumento de las respuestas en el pasaje sexto. Las exposiciones crónicas de los cultivos con los extractos durante nueve pasajes consecutivos permitieron observar un aumento de la repuesta citotóxica a partir del cuarto (extracto metanólico) o del quinto (extracto acuoso) tratamiento para Ancoche. En exposiciones crónicas de los cultivos con los extractos durante nueve pasajes consecutivos permitieron determinar un aumento de la repuesta citotóxica a partir del cuarto (extracto acuoso) o del quinto (extracto metanólico) tratamiento para Yerba Mate. Las Cl50 que se determinaron por estos ensayos fueron: Ancoche en extracto acuoso : 500 μg / ml Ancoche en extracto metanólico : 250 μg / ml Yerba Mate en extracto acuoso : 1500 μg / ml Yerba Mate en extracto metanólico : 2000 μg / ml Sería interesante profundizar estas evaluaciones con estudios in vitro complementarios que permitan caracterizar mejor estos productos y asociar, si fuera posible, actividad biológica con estructura química.

Abstract:
The development and use of plant extracts is presently of key importance in the biorational control of plagues and insects. Besides, natural extracts have become increasingly important as dietary components or as beneficial applications, such as ointments or lotions. At the same time, there is an intense advance in the search and implementation of alternative techniques to the animal use in the evaluation of drugs and chemical compounds toxicity. These reasons motivated the interest to carry out studies of cytotoxicicity and genotoxicity on aqueous and methanolic extracts of two regional native plants of Argentina and part of the subtropical area of America: Vallesia glabra or Ancoche and Ilex paraguaiensis or Yerba Mate. These studies were conducted using in vitro techniques based on cell cultures, which underwent three kinds of expositions: I) acute II) repeated lll) chronic Cytotoxicity was evaluated by means of colorimetric staining assays with dyes (Crystal Violet, Neutral Red) or through the measurement of enzymatic activities (Lactic dehydrogenase, Succinate dehydrogenase) or by Protein Concentration assays. Cloning Efficiency assays for each extracts of both plants were also run. Genotoxicity was determined by measurement of the Index of DNA Damage in the Comet assay . From the acute expositions it could be concluded that methanolic extracts of Ancoche displayed greater cytotoxic behavior than aqueous ones by all the tests run. Low concentrations of aqueos extract of Ancoche exhibited certain levels of protection of the cultures. For Ilex paraguaiensis, aqueous extracts resulted as more toxic than methanolic, mostly by means of microscopy observations and Cloning Efficiency. Repeated expositions demonstrated an increase of the response on the sixth passage. Chronic exposure of the cultures with the extracts during nine consecutive passages allowed us to observe an increase of the cytotoxicity on the fourth exposure (methanolic extract) or on the fifth (aqueous extract) treatment for Ancoche. Chronic exposure of the cultures with both extracts of Ilex paraguaiensis during nine consecutive treatment showed an increase of the cytotoxicityon the fourth exposure (aqueous extract) or on the fifth(methanolic extract). Cl50 determined through this assays are: Ancoche ; aqueous extract : 500 μg / ml Ancoche; methanolic extract: 250 μg / ml Yerba Mate; aqueous extract : 1500 μg / ml Yerba Mate; methanolic extract : 2000 μg / ml Chemical composition of the extracts still have to be determined. To better characterize these products and, if possible, to associate biological activity with chemical structure, further complementary in vitro studies have to be carried out.

"Claves utilizadas por la avispa social Vespula germanica durante el forrajeo" (2002). D’Adamo, Paola. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La avispa social Vespula germanica es una especie invasora exitosa. En la mayoría de los países que ha invadido, se la considera perjudicial por causar daños económicos y ecológicos, además de ser una especie molesta y poseer una picadura dolorosa. Con el objeto de describir la situación de la especie en nuestro país y ahondar en las causas para su éxito de invasion, en primero lugar realizamos estudios de dieta y de su distribución, utilizando para esto último, un modelo ecoclimático. Los resultados indican que la avispa chaqueta amarilla se encuentra establecida en la Patagonia, donde es considerada plaga, a pesar de que desde el punto de vista ecoclimático ésta no seria un área muy favorable para la especie. Dadas las características de la especie y de los ambientes invadidos, es probable que su comportamiento de forrajeo constituya un factor relevante en su éxito colonizador. Para V.germanica se demostró la existencia de incremento local, un tipo de facilitación social por medio del cual, durante el forrajeo, las avispas son atraídas por conespecíficas a explotar una fuente de alimento. Estudios realizados previamente en la especie han propuesto a las claves visuales como principales responsables del proceso. Sin embargo, a través de varios experimentos nosotros demostramos que las claves olfativas serían las que prevalecen. Las avispas forrajeadoras son atraídas por el olor que emana de sus con-especificas. Los machacados de cabezas de estas avispas atraen conespecíficas desencadenando el aterrizaje y la remoción de fragmentos de cabezas. Los extractos de cabeza, aplicados sobre un papel de filtro desencadenan la atracción y aterrizaje de avispas, y la respuesta comportamental difiere de acuerdo a si el experimento es realizado cerca del nido o en condiciones de forrajeo. Postulamos que existe una feromona vinculada al forrajeo que se encuentra en las cabezas de las obreras de V. germanica. A nivel individual analizamos qué claves (visuales o de micro localización) prevalecen al re-localizar una fuente de alimento. Encontramos diferencias según el origen proteico o carbohidratado de la fuente explotada.

Abstract:
Vespula germanica is a social wasp that has successfully colonized many parts of the world. It affects economic activities and natural communities in invaded countries, and is responsible of painful sting. In order to describe the species situation in our country, we did studies on its diet and on its distribution using an ecoclimatic model. Our results show that yellow jackets are well established in Patagonia, where it is considered a pest, although according to ecoclimatic model this would not be a suitable place for the species establishment. Foraging behaviour probably constitutes a relevant characteristic for wasp invasion success. Local enhancement is a variant of social facilitation in which foragers are attracted by conspecifics exploiting a feeding source. Through a series of experiments we show that odour cues mediate this process. Forager wasps are attracted by the odour elicited by conspecifics. Wasps head squashes attract conspecifics eliciting landing and removal of head fragments. Head extract applied on filter paper attracts forager wasps eliciting landing, but behaviour differs according to the context of proximity to the nest or foraging conditions. We propose that a foraging related pheromone exists on Vespula germanica workers’ heads. We also analysed the cues used by an individual forager to relocate a feeding source. We found differences between the visual and micro-location cues utilised, depending on the type of food (protein or carbohydrates) offered during training sessions.

"Climatología numérica del acople suelo-temperatura y de períodos secos en Sudamérica: retroacciones, incertidumbre y cambio climático" (2015-03-16). Zaninelli, Pablo Gabriel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis doctoral se estudiaron las interacciones entre las variables ligadas a los procesos de acople suelo-atmósfera, sus posibles vínculos con la duración de los periodos secos y sus potenciales cambios bajo un escenario intermedio de emisiones de gases de efecto invernadero sobre Sudamérica (SA). Para ello, se utilizaron datos provenientes de simulaciones numéricas realizadas con modelos climáticos regionales. Asimismo, se evaluó la capacidad de diferentes reanálisis para reproducir la climatología de las temperaturas máximas de verano y mínimas de invierno para el sudeste de SA (SESA). La incertidumbre inherente al uso de datos de reanálisis de temperatura máxima y mínima en SESA se estudia a través de la comparación de campos medios estacionales y de variabilidad de tres reanálisis con una base de datos observacional para el periodo 1961- 2000. El error del ensemble de reanálisis presenta magnitudes similares para ambas variables, pero la dispersión entre los reanálisis individuales es mayor en verano. Los errores en la temperatura están en parte vinculados con errores en la determinación de los flujos de calor sensible y latente así como de la radiación neta. Los errores en la distribución geográfica de las anomalías espaciales de temperatura tienen una magnitud similar para los reanálisis y para los modelos regionales analizados. También se estudian los cambios entre los periodos 1981-2000 y 1961-1980 en la variabilidad diaria, en la interanual y en los extremos (percentiles 75 y 25) de la temperatura máxima en verano y mínima en invierno. El patrón geográfico de los cambios entre los dos períodos de la variabilidad diaria de ambas variables es similar al patrón geográfico de los cambios en los extremos de éstas. Sobre la Argentina, en general, se encuentra una disminución en la frecuencia de días calurosos en verano y de noches frías en invierno consistente con una disminución en la variabilidad diaria. Los cambios entre los dos períodos sugieren un corrimiento hacia el sudoeste en la zona de máxima variabilidad interanual de la temperatura máxima para la climatología observacional posiblemente asociado con cambios en la variabilidad de la precipitación. En general, los reanálisis tienen dificultades para capturar los principales patrones geográficos de los cambios de la variabilidad diaria e interanual de las variables estudiadas entre los dos períodos. La respuesta de la precipitación, la temperatura y la evapotranspiración al cambio climático para el verano austral son analizadas para SA utilizando proyecciones de tres modelos regionales. Los feedbacks locales entre la superficie continental y la atmósfera pueden ayudar a los vínculos entre estas variables en algunas regiones de SA. Los cambios en la precipitación proyectados para el periodo 2071-2100 presentan una respuesta positiva en SESA. La variabilidad interanual de la evapotranspiración tiene una distribución geográfica similar a la de la variabilidad de la temperatura, con un máximo en SESA, sugiriendo que estas dos variables están interrelacionadas. En el clima actual, SESA es una zona de transición donde la evapotranspiración depende de la disponibilidad de agua en la superficie (régimen controlado por el contenido de humedad del suelo). Mientras que las proyecciones muestran que el régimen de la evapotranspiración continuará siendo controlado por la humedad del suelo, la magnitud de la correlación negativa entre la temperatura y la evapotranspiración disminuye (en valor absoluto) para el periodo 2071-2100 en áreas donde se incrementa la disponibilidad de agua en el suelo. La variabilidad interanual de la temperatura y la evapotranspiración tiende a disminuir en SESA. En cambio, en la Meseta Brasileña los modelos proyectan cambios opuestos a los de SESA. Además, el estudio de la circulación regional muestra que un flujo medio intensificado del norte en niveles bajos tiende a inhibir las condiciones de acople sobre SESA, i. e. contribuye a disminuir la sensibilidad de la temperatura y la evapotranspiración a variaciones en la precipitación, mientras que un flujo debilitado favorecerá el acople. De acuerdo a los modelos, esta intensificación del viento del norte está asociada a un aumento en la circulación ciclónica asociada a la baja del Chaco y un incremento del flujo proveniente del alta subtropical del Atlántico. Por último, utilizando una definición dependiente del modelo y del punto de retícula se determinan periodos secos sobre SA y se analiza su duración media, a escala anual, para simulaciones de clima presente y para un posible escenario de cambio climático. A su vez, estos resultados son comparados con los regímenes de aridez generados por el índice de Budyko y se muestra que la transición hacia un régimen más árido en la Meseta Brasileña estaría acompañada por un incremento en la duración de los periodos secos y una disminución en su frecuencia de ocurrencia. El aumento de las condiciones secas sobre la Meseta Brasileña favorecería al incremento de feedbacks locales entre el suelo y la atmósfera que pueden contribuir a la generación de periodos secos de mayor duración.

Abstract:
In this PhD thesis the interactions among variables associated to land surface-atmosphere coupling processes, their possible links with dry spells length and their potential changes under an intermediate emissions scenario of GHG were studied in South America (SA). To do this, numerical simulations data generated with regional climate models were used. Moreover, it was evaluated the skills of reanalysis to reproduce the climatology of austral summer maximum temperature and winter minimum temperature in southeastern of SA (SESA). The inherent uncertainty due to use of data from reanalysis of maximum (TX) and minimum temperature (TN) in SESA is studied through the comparison of seasonal mean fields and the variability of the three reanalysis with an observational dataset for the period 1961-2000. The bias of ensemble of reanalysis presents similar magnitudes for both variables, but the dispersion among reanalysis datasets is greater in summer. The bias in temperature is, hence, in part linked to the error in determination of the sensible and latent heat flux as well as the net surface radiation. The errors in the geographical distribution of spatial anomalies of temperature have a similar magnitude for both reanalysis and regional climate models analyzed. The changes in daily and interannual variability and extremes of maximum temperature of summer and minimum temperature of winter between periods 1981-2000 and 1961-1980 are also studied. The geographical pattern of change of daily variability between both periods and for both variables is similar to geographical pattern of change of extremes. In Argentina, there is a decrease in the frequency of hot days in summer and cold nights in winter, consistently with a decrease in daily variability. The changes between both periods suggest a shift toward southwest in the zone of maximum interannual variability of maximum temperature according to the observational climatology, possibly linked with changes in precipitation variability. In general, the reanalysis analyzed have difficulties to reproduce the main geographical patterns of changes in daily and interannual variability of studied variables between both periods. The response to climate change of precipitation, temperature and evapotranspiration (ET) for austral summer is analyzed in SA using projections of three regional models. The local feedbacks between land surface and atmosphere can help to the links among these variables in some regions of SA. The projected changes of precipitation for 2071-2100 present a positive response in SESA. The interannual variability of ET has a geographical distribution similar to the variability of temperature, with a maximum in SESA, suggesting that these two variables are intercorrelated. In the present climate, SESA is a transition zone where ET depends on surface water availability (soil moisture-controlled regime). Although the projections show that ET regime will remain soil moisture-controlled, the magnitude of correlations between temperature and ET decrease (in absolute value) for 2071-2100 in areas where increase soil water availability. The interannual variability of temperature and ET tends to decrease in SESA. However, in the Brazilian Highlands the models project opposite changes to SESA. On the other hand, the study of regional circulation shows that a strengthening northerly mean wind in low levels tends to inhibit the coupled conditions in SESA, i. e. it promotes the reduction of sensibility of temperature and ET to variations of precipitation, whereas a weakening northerly mean wind favors coupling conditions. According to the models, this strengthening of the northerly wind is mainly produced by the increase in the cyclonic circulation associated to the Chaco Low and to an increment of the easterly flux from the Atlantic subtropical High. Finally, it is using a gridpoint- and model- dependent definition to determine dry spells in SA and to analyze its mean length, at annual scale, for simulations of present climate and under a possible climate change scenario. In turn, these results are compared with the aridity regimes calculated with the Budyko Index and it is shown that the transition projected toward a drier regime in the Brazilian Highlands could be accompanied by a lengthening of dry spells and a reduction of their frequency. The strengthening of dry conditions in the Brazilian Highlands could favor the increase of local feedbacks between land surface and atmosphere which contribute to lengthen dry spells.

"Climatología sinóptica de las masas de aire que afectan a la República Argentina" (2001). Coronel, Alejandra Silvia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El análisis de las masas de aire fue ampliamente usado en los primeros estudios de fenómenos de tiempo en la década del ’30 y ’40. Ya en la década del ’50, con el desarrollo de los modelos numéricos y la información en niveles de la troposfera disminuyó la importancia del uso de las masas de aire como herramienta de pronóstico. En las dos últimas décadas el análisis de masas de aire tuvo un gran impulso principalmente desde el punto de vista del análisis sinóptico, ya que esta variable permite examinar relaciones entre procesos en superficie y características del campo de circulación en la atmósfera. El desarrollo de esta Tesis tiene como objetivo conocer la estructura espacial y temporal y los campos de circulación asociados a las masas de aire que afectan la República Argentina. Los datos utilizados, del Servicio Meteorológico Nacional, corresponden a observaciones de radiosondeo (1958-1997) (altura geopotencial, temperatura, humedad relativa, temperatura de rocío y viento) y de superficie (1959-1991) (temperatura máxima, mínima, viento, humedad relativa, tensión de vapor, presión atmosférica y precipitación) obtenidas en las estaciones aerológicas de la Argentina. También se utilizaron los reanálisis del ECMWF (1979-1993) en los niveles 1000 y 500 hPa. Se identifica la masa de aire a través de la temperatura adiabática equivalente (Өae) en 850 hPa. en cada estación aerológica. Los valores de Өae incluyen las características de la región fuente, de la trayectoria y de la transformación que sufrió la masa de aire a lo largo de su recorrido. A partir de esta premisa se analizaron características estadísticas de las masas de aire en cada estación aerológica. Los resultados mostraron que en invierno Resistencia es afectada en forma similar por tres masas de aire: las cálidas, las frías y las retrógradas, característica que no se observa en otro lugar del país. En verano en general la distribución de frecuencias es unimodal. El análisis de la estabilidad mostró mayor inestabilidad en verano respecto del invierno principalmente en el centro y norte del país. El análisis de la persistencia de las masas de aire frías y cálidas (identificadas a partir de los dos primeros y dos últimos deciles) permitió detectar situaciones que oscilan entre 9 y 14 días en invierno y 5 y 10 días en verano. También pudo encontrarse que la probabilidad de que una masa de aire cálida sea desalojada por una masa fría es mayor que la situación inversa. En su relación con parámetros de superficie se encontró que las masas frías y cálidas podían discriminar la temperatura, presión y parámetros de humedad en diferentes horas, el día de la ocurrencia del evento (primer día de ocurrencia de masa cálida o fría). La evolución temporal de las variables en superficie y en la troposfera, en los días previos y posteriores a la ocurrencia del evento frío permitió identificar: en superficie un máximo de presión que ocurre el día posterior al evento, un mínimo de temperatura que ocurre el día del evento (excepto la temperatura mínima que ocurre en general uno o dos días después) y una mayor probabilidad de precipitación previa a la ocurrencia del evento. En la troposfera se observó un máximo enfriamiento y estabilización de la masa de aire a partir del día del evento. Con referencia al evento cálido se pudo identificar: en superficie un mínimo de presión y un máximo de temperatura y una mayor probabilidad de precipitación posterior a la ocurrencia del evento. En la troposfera se observó el máximo calentamiento el día del evento y una disminución en la estabilidad de la masa de aire. Como paso final se analizó la variabilidad interanual de la frecuencia relativa de masas de aire frías y cálidas que permitió inferir anomalías importantes en el campo de circulación en algunos años del período analizado. Como conclusión general se puede destacar un calentamiento en verano, identificado a través de una tendencia positiva y significativa de temperatura en las estaciones y período analizado. La variabilidad interanual de la temperatura en superficie está correlacionada con la frecuencia relativa de las masas de aire extremas y en forma indirecta con patrones de circulación. Como corolario, esta Tesis permitió avanzar en el conocimiento de la Climatología Sinóptica de eventos identificados a partir de la ocurrencia de masas de aire extremas en diferentes estaciones de la Argentina.

Abstract:
The analysis of air masses was widely used in the early weather studies, in the 30´s and 40´s. Already in the 50´s, with the advent of numerical models and tropospheric observations the importance of air masses as a forecast tool decreased. During the last two decades the air mass analysis enjoyed a rebirth from the perspective of synoptic analysis, given that this variable allows the study of relations between surface processes and the characteristics of atmospheric circulation fields. This aim of this thesis is to understand the spatial and temporal structure and the circulation fields associated with the air masses that evolve over the Argentine Republic. The data used, from the Servicio Meteorológico Nacional, correspond to aerological observations (1958-1977), specifically geopotencial, temperature, relative humidity, dew point temperature and wind) as well as surface observations (1959-1991), specifically maximum and minimum temperature, wind, relative humidity, atmospheric pressure and precipitation, obtained at the Argentine aerological stations. ECMWF products (1979-1993) at 1000 and 500 hPa were used too. The air mass is identified using the equivalent adiabatic temperature at 850 hPa at each aerological station. The Өae values include the characteristics of the source region, of the trajectory and the modifications that the air mass endured along its displacement. Given this premise, the characteristic statistics for the air masses were analysed at each station. The results showed that the winter in Resistencia is equally influenced by three air masses: warm ones, cold ones and retrogressive ones. Such characteristics are not observed in other regions of Argentina. In summer the frequency distribution is mostly unimodal. The stability analysis yielded a greater instability in summer, with respect to winter, mainly in the center and north of the country. The air mass persistency analysis for both cold and warm air masses, allowed for the detection of events that can last between 9 and 14 days in winter and 5 to 10 days in summer. It was also possible to find that the probability that a cold one could displace a warm air mass is greater than the inverse process. Regarding the surface parameters, it was found that cold and warm air masses could discriminate the temperature, pressure and humidity parameters at different times, the day of the event occurrence (first day of the existence of the cold or warm air masses). The temporal evolution of the surface variables at the surface and in the troposphere, during the days before and after the occurrence of the cold event helped determine that: on the surface a pressure maximum that takes place on the following day, a temperature minimum that takes place on the day of the event (except when the minimum temperature that takes place two or three days later) and a greater precipitation probability before the event occurrence. A maximum cooling and air mass stabilisation is observed in the troposphere from the day of occurrence of the event. As for the warm event, it was possible to identify on the surface a pressure minimum and a temperature maximum and a greater precipitation probability subsequent to the event. A maximum warming was observed in the troposphere on the day of the event and a decrease in the air mass stability. Finally the interannual variability in the relative frequency of the cold and warm air masses was studied. Important anomalies in the circulation field were inferred for some of the years sampled. As a general conclusion it is possible to point out a warming during summer, identified in the positive, significant trend for the stations and period under study. The surface temperature interannual variability correlates well with the relative frequency of the extreme air mases and indirectly with circulation pattern. Finally, this thesis has made way in the understanding of Synoptic Climatology of events identified through the occurrence of extreme air masses in different Argentine stations.

"Climatología sinóptica de las precipitaciones en Cuyo" (1988). Compagnucci, Rosa Hilda. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Clonado y caracterización de proteínas relacionadas al control del ciclo celular del parásito Trypanosoma cruzi" (2002). Santori, María Isabel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En nuestro laboratorio se clonaron dos CRKs (CDK1 Related Kinases) de T. cruzi, TzCRK1 y TzCRK3 (Gómez y col., 1998) y se identificaron, por doble híbrido, proteínas que se asocian a TzCRK1 con similitud a una familia de ciclinas (Gómez y col., 2001). En el presente trabajo de tesis se caracterizaron y clonaron proteínas candidatas a participar en el control del ciclo celular de T. cruzi. Se secuenciaron en su totalidad los fragmentos de los genes obtenidos por doble híbrido y se los denominó TzCYC4, TzCYC5 y TzCYC6. Además se clonaron los genes completos y se secuenciaron. La secuencia predicha para las tres proteinas mostró similtud con ciclinas denominadas PHO, presentes en S. cerevisiae. TzCYC5 posee una región rica en histidinas próxima al amino terminal. Se determinó que los tres genes son de copia única mediante Southern blot y por rastreo de una biblioteca genómica. La expresión de los tres genes mostró variaciones particulares en distintos estadios de T. cruzi. TzCYC6 complementó una cepa mutante de S. cerevisiae, deficiente en las ciclinas de G1, demostrando que es una ciclina funcional. Se determinó el patrón de expresión de TzCRK3 en estadíos de T. cruzi. El ARNm de TzCRK3 es más abundante en el estadío amastigotes que en epimastigotes o tripomastigotes. Se obtuvo un suero específico contra TzCRK3, inmunizando conejos con la proteína recombinante expresada en bacterias. Ensayos de Western blot mostraron, en epimastigotes la presencia de una proteína del peso molecular esperado, 35 kDa. En amastigotes y tripomastigotes, se observaron bandas específicas de menor movilidad. Se estableció que la proteina identificada en epimastigotes se asocia a p13ˢͧͨ¹-agarosa, proteína con alta afinidad por CDK1. TzCRK3 endógena mostró actividad quinasa de histona H1 y fue inhibida por inhibidores de CDKs: flavopiridol, roscovitina y olomoucina. Flavopiridol inhibió el crecimiento de epimastigotes en cultivo, aunque no en forma total. La actividad quinasa de la TzCRK3 de dichos epimastigotes se inhibió en forma dosis dependiente. La actividad de quinasa de histona H1 asociada a p13ˢͧͨ¹ mostró las mismas variaciones estadío especificas y similar sensibilidad a los CK1s que TzCRK3. En los cultivos con flavopiridol el IC50 no mostró diferencias significativas con el de TzCRK3. La actividad de TzCRK3 en epimastigotes sincronizados mostró un pico en G2/M mientras que la actividad asociada a p13ˢͧͨ¹ aumentó al mismo tiempo pero no disminuyó hasta M. La expresión de TzCRK3 fue constante. Los patrones de actividad y expresión de TzCRK3 son tipicos de una CDK. Esta evidencia indica que TzCRK3 está involucrada en el control del ciclo celular de T. cruzi, controlando el pasaje de G2/M, aunque no se puede excluir la presencia de otra CDK. Se identificó un EST con alta similitud de secuencia con Lmmp12ͨᴷˢ¹, el gen homólogo a p13ˢͧͨ¹ en Leishmania mexicana. Se clonó el gen completo y se determinó que es copia única. La secuencia esperada de la proteína muestra una alta identidad de secuencia con la familia de proteinas CKS. Su expresión mostró variaciones estadío especificas. La proteina recombinante se expresó en bacterias, en fusión a histidinas, se la purificó y se inmunizaron conejos para obtener un anti suero.

Abstract:
In our laboratry two CRK genes: TzCRK1 and TzCRK3 from T. cruzi were previously isolated (Gómez et al., 1998), and using the yeast two-hybrid system open reading frames coding for proteins able to associate with TzCRK1 were identified (Gómez et al, 2001). Positive clones obtained in the two hybrid screen were sequenced and compared in data banks. Clones sharing identity with S. cerevisiae PHO cyclins were named TzCYC4, TzCYC5 y TzCYC6. Full lenght genes were cloned and sequenced. Identity with proteins from the PHO family was still observed when the predicted aminoacidic sequences were compared. An histidine-rich domain was observed in the TzCYC5 amino terminal region. All three genes were shown to be single copy. Cyclins mRNA levels varied in a stage specific manner. TzCYC6 was able to functionally complement a S. cerevisiae deficient for G1 cyclins. To establish if TzCRK3 has a role in the regulation of the parasite cell cycle, its expression and activity were studied. Northern and Western blot analyses detected the enzyme in three forms of the parasite; mRNA levels, subcellular localization and apparent molecular weight of the protein varied throughout the stages. TzCRK3 from epimastigote soluble extracts interacted with p13ˢͧͨ¹-beads. Endogenous TzCRK3 phosphorylated histone H1 and this activity was inhibited by specific CDK inhibitors (CKIs): olomoucine, flavopiridol and roscovitine. In addition, p13ˢͧͨ¹ beads coprecipitated with a kinase activity that was inhibited by the CDK inhitors mentioned above. Flavopiridol partially inhibited the growth of T. cruzi epimastigotes at 50 nM, the lowest concentration used, but even with the highest (5 mM), cell growth was not completely arrested. TzCRK3 from flavopiridol inhibited epimastigotes extracts exhibited a dose dependent inhibition of histone H1 phosphorylation. T. cruziˢͧͨ¹- binding CRK displayed the same inhibition profile. TzCRK3 IC50 did not significatively differed from the shown by the kinase activity associated to p13ˢͧͨ¹. This indicates that TzCRK3 is the enzyme responsible for the majority of the kinase activity associated to p13ˢͧͨ¹. TzCRK3 activity of hydroxyurea (HU) synchronized epimastigotes peaked in G2/M boundary while the kinase activity associated to p13ˢͧͨ¹ beads increased at the same time point but remained high until late G2/M. In addition, TzCRK3 expression was constant along the cell cycle. This is a common pattern of CDK activity regulation. Taken together, these results contribute to support the idea that TzCRK3 is involved in control of the cell cycle in T. cruzi. A T. cruzi EST sharing high identity values with the Leishmania mexicana p13ˢͧͨ¹ homologous, Lmmp12ͨᴷˢ¹ was identified. The full lenght gene was cloned. The predicted aminoacidic sequence showed high identity scores with proteins belonging to the CKS family. This protein was named Tzp12ͨᴷˢ¹. mARN levels in different stages of the parasite varied. The recombinant protein, fused to a histidine tag, was expressed in bacteria. It was purified and used to immunize rabbits, in order to obtain a specif antibody.

"Clonado y caracterización de quinasas relacionadas con la CDC2 en el parásito Trypanosoma cruzi" (1999). Gómez, Eliana Beatriz. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Clonado y caracterización de un antígeno rico en aminoacidos ácidos de Trypanosoma cruzi y su posible rol en la inmunopatogenia de la cardiopatía chagásica crónica" (2003). Ghio, Sergio Claudio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se ha postulado la hipótesis de un origen autoinmune para explicar la etiología de la enfermedad de Chagas. Este proceso autoinmune podría ser el resultado de una respuesta inmune cruzada contra componentes específicos de células cardíacas que comparten epítopes con antígenos de Trypanosoma cruzí (mimetismo molecular). En trabajos anteriores demostramos que los anticuerpos de pacientes crónicos, inmunopurificados con el péptido correspondiente a los 13 aa C-terminales de la proteína ribosomal P28 de T. cruzi (TcP2β),alteraron la frecuencia de latidos de cardiocitos en cultivo ya que también podían reconocer el segundo bucle de los receptores cardiacos (M2 muscarínicos y β-adrenérgícos). Lo mismo ocurrió con los inmunopurificados contra un péptido correspondiente a la proteína ribosomal P0 (TcP0). Tanto los epítopes parasitarios como los del hospedador reconocidos por estos anticuerpos estaban formados por secuencias aminoacídicas ácidas. En la búsqueda de nuevos antígenos que pudieran producir este tipo de reacción cruzada, se propuso el rastreo de ESTs (Expressed Sequence Tags) producidos en el Proyecto Genoma T. cruzi que codificaran para proteínas ricas en secuencias ácidas. De este modo se aisló un EST de 718 pb. Se obtuvo la secuencia completa del gen que denominamos garp (glutamic acid rich protein) de 3500 pb, que es de copia única y origina un único ARNm de aproximadamente 4 kb. Según la comparación de secuencias se encontró una identidad de hasta 72% con secuencias de T. brucei. La proteína es de 130 KDa, y según ensayos de Western blot e inmunofluorescencia se localiza en el citoplasma del parásito. Aproximadamente el 20% de los sueros de pacientes con la enfermedad de Chagas crónica fueron capaces de reconocer la proteína recombinante GARP, y todos ellos lo hicieron con la región más C-terminal de la proteína, que contiene los aminoácidos ácidos. La inmunización con la proteína recombínante GARP provocó la aparición de anticuerpos dirigidos contra toda la proteína. Estos anticuerpos no modificaron la frecuencia de latidos de los cardiocítos en cultivo, y consecuentemente los ratones no sufrieron alteraciones electrocardiográficas. Como un método alternativo de inmunización, ensayamos la metodologia de inmunización con ADN. Con esta técnica de inmunización se pretendía reflejar mejor la situación de la infección crónica, ya que la presentación constantes de los antígenos parasitarios por las células musculares del hospedador podría ser mas adecuada para estudiar la patogenicidad de la enfermedad. Para poner a punto esta metodología, realizamos inmunizaciones con las proteínas ribosomales TcP2β y TcP0. Las inmunizaciones de ADN con TcP2β ,TcP0 y GARP generaron anticuerpos capaces de reconocer epítopes diferentes a los reconocidos en la infección natural. Los anticuerpos no provocaron alteraciones en la frecuencia de latidos de cardiocitos en cultivo ni se observaron alteraciones electrocardiográficas tales como las ocurridas cuando ratones fueron inmunizados con proteínas recombinantes TcP2β y TcP0. Por tanto concluimos que la inmunización con ADN es capaz de generar anticuerpos que reconocen epítopes diferentes a los inducidos por inmunizaciones con proteínas recombinantes o por la infección natural, lo cual es de utilidad al momento de generar una vacuna contra T. cruzi.

Abstract:
The hypothesis of an autoimmune origin has been postulated to explain the etiology of the Chagas' heart disease. This autoimmune process could be the result of an immune response capable of cross-reacting to specific components of heart (issues that share epitopes with antigens of Trypanosoma cruzi (molecular mimicry). As we have previously reported, antibodies of chronic patients, recognizing a peptide corresponding to the 13 aminoacid C-terminus (peptide R13) of the T. cruzi ribosomal P2 β protein (TcP2β) altered the frequency of cardiomyocyte beating culture. This antibodies were also able to recognize the second extracellular loop of the G-protein coupled receptors (M2 muscarinic and β-adrenergic receptors). Antibodies immunopurified against the C-terminus of the T. cruzi ribosomal P0 protein (TcP0) present a similar functional and physicochemical features. Both the parasitic and the host epitopes recognized by these antibodies are composed of acidic sequences. In the search of new antigens that could produce this type of cross-reaction, we looked for ESTs (Expressed Sequence Tags) in the Genome Project of T. cruzi coding for acidic residues rich proteins. So we identified a EST of 718 bp. The complete sequence of the gene (3500 bp) was obtained and we named it garp (glutamic acid rich protein). This gene exists in a single copy and gives origin to only transcript of approximately 4 kb. Its sequence was compared with database, finding a identity up to 72% with T. brucei sequences. The protein has 130 KDa, and both Western blot and immunofluorescence assays located it into cytoplasm. Approximately 20% of the sera of chronic chagasic patients were capable to recognize the recombinant protein GARP, and all of them recognized only the C-terminus of GARP, which contains the acidic sequences. When we immunized mice with the recombinant protein GARP, we achieved antibodies against the whole protein GARP. With anti-GARP serum we carried out assays on beating rat cardiomyocytes. With neither of the antisera beating frequency was altered and immunized mice with high anti-GARP titers showed no electrocardiografic alterations. As alternative method of immunization, we assayed immunizations with DNA plasmids. With this immunization technique we attempted to reflect better the situation of the chronic infection, since the constant presentation of the parasitic antigens from the host’s muscular cells could be more appropriate to study the pathogenicity of the disease. To set up this methodology we achieved immunizations with DNA coding genes of ribosomal TcP2β and TcP0 proteins. The DNA immunizations with TcP2β, TcP0 and GARP generated antibodies capable to recognize different epitopes to those obtained in the natural infection. No alterations in cardyocytes culture nor electrocardiografics recording in mice were observed. In contrast, immunization with TcP2β and TcP0 recombinant proteins generated functionally active antibodies. So we conclude that DNA immunization is useful to generate antibodies against epitopes that are different than the antibodies obtained in immunization with recombinant protein o in the natural infection. This could be useful to generate a vaccine against T. cruzi.

"Clonado y caracterización de un gen de tomate modulable por ácido abscísico" (1996). Rossi, María Magdalena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Clonado, caracterización y estudios funcionales de las enzimas poli (ADP-ribosa)polimerasa y poli (ADP-ribosa) glicohidrolasa de Trypanosoma brucei" (2015-03-20). Schlesinger, Mariana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El metabolismo de polímeros de ADP-ribosa (PAR) está involucrado en múltiples funciones celulares, como la señalización y reparación del ADN, el mantenimiento de la integridad genómica, la decisión entre la supervivencia y muerte celular y el mecanismo de muerte. Poli(ADP-ribosa)polimerasa (PARP) y poli(ADPribosa) glicohidrolasa (PARG) son las proteínas involucradas en esta vía metabólica. PARP es la enzima encargada de sintetizar al polímero, mientras que PARG es responsable de su degradación. En Trypanosoma brucei ambas proteínas, denominadas TbPARP y TbPARG, son codificadas por un gen de copia única. En la presente tesis se muestra la caracterización de la actividad de TbPARP in vitro en la reacción de PARilación. Estudios funcionales de TbPARP y TbPARG en el contexto del parásito permitieron identificar su localización subcelular en condiciones normales y de estrés oxidativo. También se describe aquí la cinética de aparición de PAR en el núcleo. Mediante la obtención de líneas transgénicas de parásitos procíclicos sobreexpresantes de TbPARP y silenciados (ARNi) para ambas enzimas se realizaron ensayos de supervivencia a distintas concentraciones del agente genotóxico H2O2. Los mismos presentaron diferentes grados de citotoxicidad y variaciones en el mecanismo de muerte celular de acuerdo a la presencia o ausencia de polímero en el núcleo. También se estudió el efecto de la acumulación nuclear del polímero sobre la progresión del ciclo celular en cultivos transgénicos sincronizados. Palabras claves: Trypanosoma brucei, PARP, PARG, PAR, ciclo celular, estrés oxidativo, Enfermedad del sueño.

Abstract:
Poly(ADP-ribose)polymerase (PAR) metabolism is involved in multiple cellular functions such as DNA signaling and repair, maintenance of genomic integrity, switching between cell survival and death, and decision of death pathways. Poly(ADPribose) polymerase (PARP) and poly(ADP-ribose)glycohydrolase (PARG) are proteins involved in this metabolic pathway. PARP synthesizes the polymer while PARG is in charge of its hydrolysis. In Trypansoma brucei both proteins, named TbPARP and TbPARG, are codified by a single copy gene. The present thesis shows the characterization of in vitro activity of TbPARP carried out in the PARylation reaction. Functional studies of TbPARP and TbPARG in the context of the parasite allowed the identification of their subcelular localization in normal conditions and under oxidative stress. Kinetics of PAR appearance in the nucleus is also described here. We obtained transgenic lines of procyclic parasites which over-expressed TbPARP or downregulated both enzymes to perform survival assays at different concentrations of the genotoxic agent H2O2. They presented variation in the cytotoxicity levels and in the death pathway involved according to the presence or absence of PAR in the nucleus. It has also been studied the effect of PAR nuclear accumulation on cell cycle progression in synchronized transgenic cultures. Key words: Trypanosoma brucei, PARP, PARG, PAR, cell cycle, oxidative stress, African trypanosomiasis.

"Clonado, organización genómica y expresión de la glutamato dehidrogenasa NADP dependiente (GluDH-NADP) de Trypanosoma Cruzi" (1998). Barderi, Patricia Alejandra. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Epimastigotes de Trypanosoma cruzi, el protozoo parásito que causa la enfermedad de Chagas, contienen dos glutamato dehidrogenasas diferentes (GluDHs), NAD y NADP dependientes. En este sentido los parásitos se asemejan a las bacterias, hongos y plantas y se diferencian de animales superiores que poseen sólo una enzima inespecífica para coenzima. La GluDH-NADP dependiente (EC 1.4.1.4) es un hexámero formado por subunidades idénticas de 47kDa, mostrando ser muy semejante a la correspondiente enzima de E. coli en cuanto a la secuencia de aminoácidos del extremo N-terminal. La forma NADP dependiente podría ser biosintética mientras la forma NAD dependiente podría tener un rol catabólico. La GluDH-NADP dependiente fue purificada a homogeneidad proteica a partir de epimastigotes de Trypanosoma cruzi mediante un protocolo mejorado que incluye cromatografía de afinidad en Blue Sepharose. Se determinó la secuencia de aminoácidos de 11 péptidos internos, obtenidos por digestión con BrCN, tripsina, endopeptidasa Arg-C o endopeptidasa Lys-C. Dichas secuencias, correspondientes aproximadamente al 30% de la molécula, mostraron una identidad del 74% con la enzima similar de E. coli. Utilizando un suero policlonal monoespecífico producido contra la proteína purificada se realizó el rastreo de una biblioteca de expresión genómica de T. cruzi en el vector λgt11. De esta forma pudo seleccionarse un único clon conteniendo 270 pb correspondientes al extremo 3' del gen que fue secuenciado completamente. Reacciones de PCR usando iniciadores construídos de acuerdo a la secuencia de aminoácidos del extremo N-terminal de la enzima madura y con la secuencia del clon correspondiente al extremo C-terminal pudieron clonarse y secuenciarse dos ORFs completos (TcGluDH1 y TcGluDH2). Las secuencias obtenidas muestran mayor homología con la enzima de Escherichia coli (70-72% de identidad), y menor homologia (52-57%)con la correspondiente enzima de eucariontes inferiores. A partir de la secuencia de ADN se predijo una proteína que contiene 446 aminoácidos. Usando el gen TcGluDH1 como sonda se realizaron experimentos de Southern blot, usando fragmentos de restricción o cromosomas enteros separados por electroforesis en campo pulsado, indicando variaciones entre los diferentes clones y cepas de parásitos, sugiriendo la presencia de varios genes codificando para la GluDH-NADP. La expresión de la enzima resultó ser diferente en los distintos estadíos del desarrollo. La forma epimastigote presenta mayor cantidad de ARNm y proteína (a juzgar por la actividad enzimática y ensayos de Western blot), en comparación con otras formas del parásito. El gen clonado TcGluDH1 fue expresado en E. coli, produciendo una enzima recombinante activa con constantes cinéticas similares a la enzima natural. A pesar de que las evidencias bioquímicas sugieren que la enzima se localiza tanto en el citoplasma como en la mitocondria, nuestros resultados indican una localización exclusivamente citosólica para la GluDH-NADP.

Abstract:
Epimastigotes of Trypanosoma cruzi, the parasitic protozoan which causes Chagas disease, contain two different glutamate dehydrogenases (GluDHs), one NADP-linked and one NAD-linked. The parasite therefore resembles bacteria, fungi and plants in this respect, and clearly differs from higher animals, which possess only one, coenzyme-unspecific, GluDH. The NADP-GluDH (EC 1.4.1.4), which is an hexamer made up of identical subunits of Mr 47.000, seems to be very similar to the enzyme from E. coli in terms of amino acid composition and N-terminal sequence. The HADP-GluDH might be biosynthetic, whereas the NAD-linked enzyme might have a catabolic role. The NADP-linked glutamate dehydrogenase has been purified to homogeneity from epimastigotes of Trypanosoma cruzi by an improved procedure using Blue Sepharose affinity chromatography. The amino acid sequences of 11 internal peptides obtained by digestion with CHBr, trypsin, Arg-C endopeptidase or LysC endopeptidase, showed 74% identity with the similar enzyme from E. coli, over about 30% of the molecule. Apolyclonal monoespecific antiserum against the purified enzyme was used for screening a genomic expression library of T.cruzi in λgt11. A clone containing 270 bps at the 3'-end of the gene was selected, and completely sequenced. Using PCR reactions with oligonucleotide primers synthesized according to the amino acid sequence of the N-terminus of the mature enzyme, and to the nucleotide sequence of a clone corresponding to the C-terminus, two complete ORFs (TcGluDH1 and TcGluDH2) were isolated and sequenced. The sequences obtained are most similar to that of the NADP-GluDH of Escherichia coli (70-72% identity), and less similar (52-57%) to those of lower eukaryotes. The protein predicted from DNA sequence contains 446 amino acids residues. Using TcGluDH1 as a probe, Southern blot experiments of both, restriction fragments and whole chromosomes separated by pulsed-field electrophoresis, indicated variations among different parasite strains and clones, and evidence for the presence of several genes. The expression of the enzyme was shown to be developmentally regulated, the epimastigote stage having a considerably larger amount of both, mRNA and protein (as judged from enzyme activity and Western blots), as compared with the other parasite forms. The cloned gene TcGluDH1 was expressed in E. coli, producing active recombinant enzyme with kinetic constants similar to those of the natural NADP-GluDH. Although biochemical evidence had previously suggested that the enzyme has a multiple localization (cytosolic and mitochondrial localization), our results suggested an exclusively cytosolic localization for NADP-GluDH.

"Clusterina Fucosilada: una nueva glicoforma de clusterina capaz de interactuar con células dendríticas y de modular su funcionalidad" (2017-03-16). Merlotti Ippólito, Antonela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Clusterina es una glicoproteína de 70 kDa, secretada por diferentes tipos celulares y presente en casi todos los tejidos y fluidos corporales. Nuestro grupo de investigación demostró anteriormente que la clusterina presente en el semen se une a la molécula DC-SIGN, un receptor expresado por las células dendríticas (CDs), inhibiendo su interacción con el HIV. Esta propiedad no es compartida por la clusterina sérica debido a que clusterina del plasma seminal expresa un patrón inusual de glicosilación, caracterizado por la presencia de abundantes motivos fucosilados que le confieren la habilidad de unirse a DC-SIGN. De esta forma, la clusterina fucosilada presente en el semen representa una nueva glicoforma con propiedades biológicas diferentes a la clusterina sérica, la cual se encuentra glicosilada principalmente con motivos sialidados. Clusterina fue la primera chaperona extracelular descripta. La principal propiedad de las chaperonas extracelulares es su capacidad de interactuar con proteínas estresadas previniendo su agregación e inhibiendo el desarrollo de las enfermedades por depósito de proteínas. Posteriormente, los complejos chaperona- proteína son endocitados por diferentes tipos celulares y degradados. En la presente tesis demostramos que clusterina fucosilada aislada del plasma seminal, de igual forma que su contraparte sérica, actúa como chaperona extracelular interactuando con proteínas estresadas y previniendo su agregación. Demostramos la capacidad de clusterina fucosilada de dirigir proteínas estresadas hacia DC-SIGN presente en CDs, promoviendo la endocitosis de las mismas y su posterior degradación. Este proceso podría modular la función de las CDs y favorecer la presentación de los péptidos derivados de estas proteínas estresadas a los linfocitos T. En este sentido, demostramos que la unión de clusterina fucosilada a las CDs a través de DC-SIGN ejerce un importante efecto modulatorio ya que es capaz de estimular la expansión células T CD4+FOXP3+CD25+ promoviendo la tolerancia inmunológica. Estos hallazgos sugieren que clusterina fucosilada presente en el semen podría promover la tolerancia hacia antígenos paternos y de esta forma, la tolerancia materno-fetal. Numerosos trabajos demuestran que la producción de clusterina se encuentra incrementada en diferentes tumores malignos. Más aún, la producción exagerada de clusterina suele asociarse a una mayor agresividad tumoral y a un peor pronóstico. Sin embargo, la naturaleza de esta asociación no ha sido aún definida. En una segunda parte de la tesis, nos preguntamos si la clusterina producida por tumores podría expresar, tal como lo hace la clusterina seminal, un patrón de glicosilación que le permitiese interactuar con DC-SIGN y, de este modo, modular la funcionalidad de las CDs promoviendo la tolerancia hacia antígenos tumorales. Para contestar esta pregunta, realizamos una serie de ensayos utilizando muestras de tumores de mama de tipo Luminal. Los principales hallazgos luego de realizar estos ensayos fueron los siguientes: a) Clusterina presente en los tumores mamarios presenta motivos fucosilados; b) es capaz de unirse a DC-SIGN; c) DC-SIGN es expresado por células mieloides intratumorales. Estos resultados sugieren que clusterina fucosilada podría actuar como un mecanismo de escape tumoral a la respuesta inmune.

Abstract:
Clusterin is a secreted glycoprotein of 80 kDa present in almost all tissues and body fluids. Our group previously showed that semen clusterin binds to DC-SIGN, a C-type lectin receptor present on dendritic cells (DCs), inhibiting the interaction of HIV. This activity was dependent on fucosylated Lewis X and Lewis Y type glycans that confer clusterin the ability to bind with high affinity to DC-SIGN. Interestingly, in contrast with seminal plasma clusterin, serum clusterin does not interact with DC-SIGN. Clusterin was the first extracellular chaperone described. Extracellular chaperones bind to stress-damaged proteins, preventing the formation and deposition of insoluble aggregates and promoting the clearance of extracellular stressed proteins by receptor-mediated endocytosis followed by lysosomal degradation. Failure of these mechanisms contributes to the development of the so-called protein deposition diseases. In this thesis, we showed that fucosylated clusterin from seminal plasma, as its serum counterpart, acts as an extracellular chaperone interacting with stressed proteins and preventing their aggregation. We proved that fucosylated clusterin targets stressed proteins to DC-SIGN present on DCs, promoting their endocytosis and degradation. This process could modulate DC function favoring the presentation of stressed protein derived peptides to T lymphocytes. We demonstrated that fucosylated clusterin binding to DCSIGN on DCs promotes the expansion of CD4+FOXP3+CD25+ T-cells. These findings suggest that fucosylated clusterin present in semen could promote tolerance to paternal antigens favoring fetomaternal tolerance. Several works have shown that clusterin production is increased in malignant tumors. Moreover, the over-expression of clusterin is associated with more aggressive tumors and bad prognosis. Nevertheless, the nature of this association has not been defined. In the second part of this thesis, we analyzed the properties of clusterin expressed on Luminal breast cancer samples. The main results were the following: a) clusterin produced by breast tumors bears fucosylated motifs; b) it is able to bind to DCSIGN; c) DC-SIGN is expressed by intra-tumoral macrophages. We propose that fucosylated clusterin could be a novel mechanism of tumor escape from the immune response.

"Coeficientes de actividad del ión hidrógeno en soluciones acuosas diluídas de SO4H2 en presencia de diferentes tipos de electrolitos : estudio experimental de la hipótesis de la independencia de los coeficientes de actividad de los iones" (1939). Puente, Heberto A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Coeficientes de partición de los ácidos clorobenzoicos y su aplicación analítica" (1944). Zwaig, Beatriz. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Coinfección HIV-HBV en regiones genómicas reguladoras" (2011). Cassino, Lucila. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La coinfección con HIV y HBV es común en virtud de que ambos virus comparten similares vías de transmisión. La coexistencia de HIV puede modificar la historia natural de la infección por HBV favoreciendo la progresión a cronicidad y aumentando la tasa de replicación de éste. Estos eventos encuentran sustento en la potencial capacidad de modificar el accionar de elementos que regulan la expresión génica. Desde allí surge como objetivo principal de la presente tesis estudiar el impacto de HIV sobre la variabilidad y la evolución molecular de HBV desde las regiones genómicas S, pol, preC/C y X a partir de pacientes crónicamente monoinfectados con HBV y HIV-coinfectados, estudiados longitudinalmente. El genotipo A2 de HBV resultó el más prevalerte ante la coinfección. Sin embargo, comparativamente los aislamientos de tal genotipo caracterizados en pacientes monoinfectados mostraron mayor propensión a cambios en regiones regulatorias. En línea con ello, la evolución molecular de HBV exhibió diferentes tasas de evolución así como menor heterogeneidad y diversidad de cuasiespecies cuando HIV está presente. Este estudio muestra por vez primera el impacto que le imprime la concomitante infección por HIV sobre diferentes parámetros relacionados a la evolución molecular del HBV.

Abstract:
Coinfection with HIV and HBV is a common event since both viruses share blood-borne transmission routes. The natural history of HBV infection is modified by HIV infection leading to an increased risk of hepatitis B evolution to chronicity and a higher replication rate. These events are related with a potential capacity of HIV to modify the activity of regulatory elements of genomic expression. Taking this into account, this thesis is aimed to study HIV impact on HBV variability and molecular evolution in S, pol, preC/C and X HBV genomic regions from HBV monoinfected and HIV coinfected patients, longitudinally studied. Hepatitis B genotype A2 was the most prevalent in coinfected individuals. However, genotype A2 isolates from monoinfected patients showed more changes in regulatory regions. In line with these results, HBV molecular evolution exhibited different evolutionary rates and less heterogeneity and quasispecies diversity when HIV coexists. This study demonstrates HIV influence in different parameters related with HBV molecular evolution.

"Coinfección HIV-Hepatitis C: análisis molecular de factores genéticos del HCV que influyen sobre la respuesta al interferón" (2012). Bolcic, Federico Martín. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El virus de la hepatitis C y el HIV comparten las mismas vías de transmisión, lo que conlleva a una elevada tasa de coinfección. En este escenario, la tasa de respuesta al peg-IFN+RBV es más baja que en pacientes monoinfectados con HCV. El objetivo central de este trabajo fue estudiar si diferentes proteínas del HCV, estructurales (E2) y no estructurales del HCV (NS5A), son capaces de interrumpir las acciones antivirales desencadenadas por el IFN, contribuyendo hacia una respuesta disminuida a la terapia. El genotipo de HCV implicado en la infección denotó una prevalencia elevada del 1a así como un crecimiento del 4. Ambos son conocidos por su baja tasa de respuesta al IFN. Se encontró una relación temporal en la introducción en Argentina del genotipo 1a del HCV y el subtipo BF de HIV. La glicoproteína E2 no dio evidencia de rol alguno en la respuesta al tratamiento. Dominios definidos de la proteína NS5A arrojaron resultados encontrados dependiendo de la población bajo estudio. La co-presencia de HIV no parece impactar en la génesis de variantes de escape de HCV, ni modificar la composición de cuasiespecies. No obstante el HCV tendría capacidad replicativa en sitios extrahepáticos aunque las variantes virales halladas en células mononucleares de sangre periférica no exhibieron diferencias con las presentes en plasma. La menor respuesta al tratamiento con peg-IFN+RBV en la coinfección guardaría relación con la mayor presencia de genotipos 1a y 4. La proteína NS5A podría contribuir en tal sentido. Es necesario analizar el rol que desempeñan factores inherentes al hospedador.

Abstract:
The HIV and HCV share the same transmission routs which lead to a high prevalence of coinfection. In this scenario, the rate of response to peg-IFN + RBV is lower than in HCV monoinfected patients. The aim of this work was to analyze whether different HCV proteins, structural (E2) and nonstructural HCV (NS5A), are able to disrupt viral actions triggered by IFN, contributing to a decreased response to therapy. The HCV genotype infection epidemiology denoted that the most prevalent was 1a and growth of 4. Both are known for their low response rate to IFN. We found a temporal relationship in the introduction in Argentina of HCV genotype 1a and BF subtype of HIV. The E2 glycoprotein gave no evidence of any role in the response to treatment. Defined domains of the NS5A protein yielded results depending on the population under study. The co-presence of HIV does not appear to impact the selection of HCV resistant variants, or modify the composition of quasispecies. However, the HCV may have replicative capacity in extrahepatic compartments but viral variants found in peripheral blood mononuclear cells did not differ with those present in plasma. The lower response to treatment with peg-IFN + RBV in HIV coinfected patients would be related to the increased presence of genotypes 1a and 4. NS5A protein could contribute to this effect. It is necessary to analyze the role that factors inherent to the host.

"Colisiones de iones con sólidos" (2001). Arbó, Diego Gabriel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo de este trabajo de tesis ha sido investigar algunos aspectos de la interacción de iones con sólidos. Para ello hemos analizado los formalismos colisional y dieléctrico para calcular la fuerza de frenamiento de un proyectil que viaja dentro de un sólido. Además hemos indagado sobre el problema de transporte de iones, haciendo hincapié en el estado electrónico de los mismos. El rango de velocidades con el que hemos trabajado es el de velocidades medias y altas. El desarrollo de la tesis se puede dividir en tres partes principales. En la primera parte se ha estudiado la fuerza de frenamiento de un ion pesado con carga Zp que viaja dentro de un sólido en la primera aproximación de Born. Dentro del formalismo colisional binario (BCF), hemos usado el potencial inducido por iones pesados en un gas de electrones libres (FEG) como el potencial de interacción. Presentamos resultados detallados de la fuerza de frenamiento (stopping power), distribuciones de pérdida de energía, libre camino medio y distribuciones angulares electrónicas de H+, H0, y H-, a través de blancos de Al y Ag. Hemos comparado los resultados con aquellos obtenidos con el potencial central de Yukawa y el formalismo dieléctrico (DF). Hemos establecido una relación entre los formalismos dieléctrico y colisional binario. Se ha encontrado que el BCF es muy sensible a la función dieléctrica usada en el potencial inducido. También se ha examinado el frenamiento de los proyectiles vestidos y se ha comparado sus distribuciones de pérdida de energía. De acuerdo con lo esperado, a velocidades de impacto altas el formalismo binario provee sólo el término colisional, no teniendo en cuenta la excitación del modo colectivo. En la segunda parte de esta tesis se ha ido más allá de la primera aproximación de Born incorporando la contribución que viene de la segunda aproximación de Born. Se ha estudiado la pérdida de energía de un proyectil ‘desnudo’ y pesado con carga Zp que se mueve en un gas de electrones libres. Dentro del marco del formalismo colisional binario (BCF), se ha desarrollado el elemento de matriz de transición (al cuadrado) en una serie perturbativa, conservando términos hasta Z(3p), (segunda aproximación de Born). Se emplea la función respuesta dieléctrica de Mermin-Lindhard para describir el potencial cilíndrico inducido por el proyectil. Se ha aplicado el formalismo al cálculo de las distribuciones de perdida de energía para cargas fijas (protones, hidrógeno neutro y antiprotones) chocando con aluminio. También hemos investigado cómo la corrección colisional Z(3p), afecta el frenamiento total para antiprotones en Aluminio y Silicio, y para hidrógeno en Aluminio. En este último caso se han considerado los diferentes estados de carga del proyectil. Los resultados tienen un buen acuerdo con los datos experimentales en la región de alta energía. También se ha investigado la energía perdida dentro del marco del formalismo dieléctrico (DF). En este modelo, se ha desarrollado el potencial inducido por el proyectil en una serie perturbativa, y se han conservado los términos hasta segundo orden en Zp. El potencial cuadrático obtenido se ha expresado en función de la respuesta dieléctrica a primer orden o función dieléctrica de Lindhard. Hemos aplicado el formalismo al cálculo del frenamiento de diferentes cargas determinadas (protones, hidrógeno neutro y antiprotones) moviéndose en Aluminio. Se ha investigado las distribuciones de pérdida de energía, y en el caso de antiprotones se ha modificado el término de segundo orden para evitar probabilidades negativas. Se ha comparado la fuerza de frenamiento total, calculada teniendo en cuenta la contribución de las capas internas y los diferentes estados de carga en el equilibrio, con datos experimentales. Se ha estudiado también la densidad electrónica inducida, y los resultados guardan un buen acuerdo con aquellos calculados con la teoría de la funcional densidad (DFT). En la tercera parte centramos nuestra atención en el estado electrónico del proyectil, y cómo el proceso de transporte influye sobre el mismo. Presentamos una descripción cuántica para la evolución de estados atómicos de proyectiles viajando a través de la materia. Nuestra aproximación se basa en la solución de la ecuación cuántica de Langevin -una ecuación de Schródinger estocástica dependiente del tiempo- que describe las excitaciones electrónicas de los átomos durante su transporte a través de los sólidos. Se puede considerar nuestra descripción presente como la versión cuantizada de una teoría de transporte clásica. Hemos presentado aplicaciones a la pérdida de electrones (shipping) de H- y H relativistas, y a la dinámica de la población de los subestados electrónicos de Ar17+ con 13.6 MeV/ u a causa de la transmisión a través de láminas de carbono. Hemos analizado la correspondencia entre las simulaciones de transporte cuántico y clásico y hemos mostrado que la naturaleza estocástica de la interacción destruye la mayoría de los efectos cuánticos.

Abstract:
The aim of this thesis work has been to investigate some aspects of the interaction of ions with solids. To that end, we have analyzed the different formalisms used to calculate the stopping power of a projectile traveling inside a solid. We have also investigated the problem of transport of ions in solids, focalizing our attention on their electronic states. We deal with the range of medium and high velocities. The body of the thesis can be divided in three main parts. In the first one, the stopping power of a heavy ion with charge Zp traveling inside a solid has been studied in the first Born approximation. Within the binary collisional formalism (BCF), we have used the potential induced by heavy ions in a free-electron gas (FEG) as the interaction potential. We present detailed results of the stopping power, distributions of energy-loss, mean free path and electronic angular distributions of H+, H0, and H-, through targets of Al and Ag. We have compared the results with those obtained with the Yukawa central potential and the dielectric formalism (DF). We have established a link between the dielectric and binary collisional formalisms. The BCF has been found to be very sensitive to the dielectric function used in the induced potential. We have also examined dressed projectiles and have compared their energy-loss distributions. As expected, at high impact velocities the binary formalism only provides the collisional term, neglecting the excitation of the collective mode. In the second part of this thesis we have gone beyond the first Born approximation, incorporating the contribution coming from the second Born approximation. The energy-loss of a ‘naked’ and heavy projectile with charge Zp moving in a free electron gas has been studied. Within the binary collisional formalism (BCF), the squared-transition-matrix element has been expanded in a perturbative series, conserving terms up to Z(3p) (second Born approximation). The Mermin-Lindhard dielectric response function is used to describe the cylindrical potential induced by the projectile. The formalism has been applied to the calculation of the energy loss distributions of fixed charges (protons, neutral hydrogen and antiprotons) colliding with aluminum. We have also investigated how the collisional correction Z(3p) affects the total stopping power for antiprotons in Aluminum and Silicon, and for hydrogen in Aluminum. In the latter case the different states of charge of the projectile have been considered. The results are in good agreement with the experimental data in the high energy region. The energy-loss has also been investigated into the frame of the dielectric formalism (DF). In this model, the potential induced by the projectile has been expanded in a perturbative series, and the terms up to second order in Zp have been conserved. The obtained quadratic potential has been expressed in function of the first-order dielectric response or Lindhard dielectric function. We have applied the formalism to the calculation of the stopping of different charges (protons, neutral hydrogen and antiprotons) moving in Aluminum. Distributions of energy-loss has been investigated, and in the case of antiprotons the second-order term has been modified to avoid negative probabilities. The total stopping power (calculated considering inner-shell contributions and the different charge states in equilibrium) has been compared with experimental data. The induced electronic density has also been studied, and the results keep a good agreement with those deduced from the density functional theory. In the third part we center our attention in the electronic state of the projectile, and how the process of transport influences on it. We present a quantum description for the evolution of atomic states of projectiles traveling through matter. Our approach is based on the solution of the quantum equation of Langevin -a stochastic time-dependent Schrôdinger equation- that describes the electronic excitations of atoms during transport through solids. Our present description can be considered as the quantized version of a classic theory of transport. Applications to the electron-loss (stripping) of relativistic H- and H, and to the dynamics of the population of the electronic substates of 13.6 MeV/u Ar17+ due to the transmission through carbon foils have been presented. We have analyzed the correspondence between the quantum and classical transport simulations and we have shown that the stochastic nature of the interaction destroys most of the quantum effects.

"Coloración del plumaje, sistema de apareamiento y elección de pareja en el Capuchino Canela (Sporophila hypoxantha)" (2012). Fachinetti, Carolina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El Capuchino Canela, Sporophila hypoxantha, es una especie sexualmente dicromática, siendo los machos adultos más coloridos y los machos juveniles indistinguibles a simple vista de las hembras. Poco se conoce sobre esta especie y los objetivos de este trabajo fueron estudiar algunos aspectos de su biología reproductiva y el posible rol de la coloración de los machos en la elección de pareja por parte de las hembras y/o en la competencia intraespecífica. Se estudió el sistema de apareamiento social y genético y la participación de machos y hembras en el cuidado parental de los huevos y/o pichones, utilizando filmaciones de nidos y herramientas moleculares. Por otro lado, se analizaron la microestructura de cortes de bárbulas de machos y hembras y la maduración de la coloración del plumaje de los machos, evaluando si existen diferencias cripticas con la coloración del plumaje de las hembras utilizando espectrofotometría de reflectancia y un modelo visual de discriminación del color. Finalmente, en experimentos con animales en cautiverio, se evaluó si la elección de pareja por parte de las hembras y la dominancia en contiendas por acceso a recursos estaban asociadas a la coloración y/o edad de los machos. El Capuchino Canela presenta monogamia social con cuidado biparental sesgado hacia las hembras. Sin embargo, se encontró que existe un mínimo del 13% de los pichones que son el resultado de fertilizaciones por fuera de la pareja social, lo que indica que el sistema de apareamiento social difiere del genético. La coloración del pecho es principalmente el resultado de la presencia de melanina y las diferencias observadas en la coloración de machos adultos y hembras se debe principalmente a la concentración de los gránulos de melaninas, mientras que las diferencias entre machos adultos y juveniles, a la distribución de los mismos en las bárbulas. La coloración de la corona es principalmente estructural, y las diferencias entre machos adultos y hembras se deben a diferencias en la organización de los gránulos de melanina en las bárbulas. Los machos presentan maduración tardía del plumaje adquiriendo el plumaje definitivo a los dos años de edad, y durante el primer año de vida, si bien parecen ser indistinguibles de las hembras, presentan diferencias en la coloración del pecho y de la corona que podrían ser percibidas por su sistema visual. En los experimentos de elección de pareja y dominancia se observó que las hembras no mostraron una clara preferencia por la coloración o edad de los machos, y que la coloración del pecho de los machos no parece ser un indicador de la dominancia social bajo estas condiciones de estudio.

Abstract:
The Tawny-bellied Seedeater, Sporophila hypoxantha, is a sexually dichromatic species, with adult males more colorful and juvenile males indistinguishable from females. Little is known about this species and the aims of this work were to study some aspect of the reproductive biology and evaluate if male coloration is a sexually selected trait or an indicator of male social dominance. I studied the social and genetic mating system and the extent of parental care provided by females and males using videotapes of nest activity and molecular tools. I also examined electronic micrographs of barbules from males and females and studied plumage maturation of males and determined if juvenile males and females differ in plumage coloration using reflectance spectrometry and an avian model visual system. Finally, I conducted mate choice and dominance experiments in captivity. I found that the Tawny-bellied Seedeater is a social monogamous species with biparental care biased towards the females. However, I found a minimum of 13% of young that were the result of extra pair fertilizations, which indicates that the social and genetic mating systems are different. Breast plumage coloration was melanin-based, the differences between adult males and females were the result to differences in melanin concentration, while differences between adult and juvenile males were the result of differences in the distribution of the pigment in the barbules. Crown coloration was mainly structurally-based, and the differences between adult males and females were the result to differences in the organization of the melanin granules in the barbules. Males showed delayed plumage maturation and acquired the definitive plumage before the second reproductive season. During the first year of life juvenile males were distinguishable from females in breast and crown coloration and these differences can be detected by the visual system of conspecifics. Finally, in mate choice and dominance experiments, females did not show a clear preference for males breast coloration or age, and breast coloration of males appears not to be an indicator of social dominance under my experimental conditions.

"Colorantes artificiales en substancias alimenticias" (1918). Cromberg, Teodoro. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Comparación de control de calidad de tratamientos de IMRT paciente específico mediante films radiocrómicos, films radiográficos y arreglo bidimensional de cámaras de ionización" (2013). Medina Pinzón, Luis Carlos. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En los últimos años la utilización de técnicas de tratamientos radiante por modulación de intensidad (IMRT) ha ido creciendo hasta convertirse casi en un estándar en la Radioterapia moderna. La razón fundamental se basa en la posibilidad de obtener distribuciones de dosis más conformadas comparadas a técnicas conformadas 3D (CRT3D), aun en geometrías desfavorables, permitiendo una mayor protección de los tejidos sanos que circundan al tumor. El resultado de cada planificación produce como resultado un conjunto de complejos haces de intensidad modulada, que incluyen pequeños haces, irregulares y fuera de eje, donde es dificultoso predecir la dosis de cada uno. Estas características especiales de los haces obliga a que la fluencia de los mismos deban ser verificadas para garantizar que la dosis planificada a un paciente sea la que se desea entregar. En este trabajo se realizó una comparación del control de calidad de tratamientos de IMRT con MLC para distribuciones de dosis individuales y totales mediante film radiocrómicos, film radiográficos y arreglo bidimensional de cámaras de ionización en el Instituto de Radioterapia – Fundación Marie Curie, para tal fin se han implementado protocolos que abarcan la caracterización de los sistemas dosimétricos y evaluación de controles de calidad usando el criterio de análisis gamma para comparación de dosis medida y calculada registrando el número de píxeles con Y>1. Se analizaron 50 distribuciones de dosis del plan total con un criterio de análisis de 3% y un DTA 3mm (3%/3mm) y 50 campos individuales (5%/3mm) con los tres sistemas independiente y absoluta para cada plan empleando una cámara de ionización.

Abstract:
In the last years the use of Intensity Modulation Radiation Therapy (IMRT) techniques had grow until becoming almost in a standard on the modern Radiotherapy. The reason of this success is the possibility to obtain better conformation of dose distribution compared to 3D Conformal Radiation Therapy (3DCRT), even with unfavorable geometries, allowing better normal tissue sparing. The result of each planning produced as a result a set of complex beams intensity modulated beams, including small beams, irregular and off-axis, where it is difficult to predict the dose. These special features of the beams require that the fluence the same should be verified to ensure that the planned dose to a patient is the one you want to deliver. In this work, a comparison of quality control with MLC IMRT treatments for individual dose distributions and total dose distributions using film radiochromic, film radiography and 2D cell array at the Instituto de Radioterapia – Fundación Marie Curie, for this purpose protocols have been implemented that cover dosimetry systems characterization and quality control evaluation using the criteria the gamma index to doses compared to measured and calculated recording the number of pixels with Y>1. 50 plans analyzed dose distributions of total plan with criteria ranging from 3% of dose difference or 3mm of distance to agreement (3%/3mm), and single distribution (3%/5mm) with the three independent systems y the absolute dosimetry for each composite plan is performed using an ionization chamber.

"Comparación de las comunidades de roedores sigmodontinos entre parcelas de maíz y soja en agroecosistemas pampeanos" (2003). Courtalon, Paula. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El propósito de este trabajo fue estudiar las comunidades de roedores sigmodontinos en parcelas de cultivo de maíz y soja en Agroecosistemas Pampeanos. Se realizó en la localidad de Diego Gaynor, Partido de Exaltación de la Cruz. Provincia de Buenos Aires, Argentina, en dos años consecutivos (períodos) en que se siguió parcelas de cultivo desde su siembra (o etapa temprana) hasta la post cosecha (rastrojos). Para cada tipo de cultivo, tuvimos en cuenta la parcela completa y cada uno de los hábitats (campo de cultivo y sus márgenes enmalezados, bordes). En una primera parte se estudiaron las características de la comunidades a lo largo del ciclo completo de los cultivos en cuanto a composición específica, abundancia relativa y diversidad; y en una segunda parte describimos las características de las poblaciones de las distintas especies según el tipo de parcela de cultivo en cuanto a abundancia, estructura poblacional y condición fisica de los individuos. Se evaluó también si las diferencias en la abundancia de los cultivos a término y en la poscosecha pueden ser debidas al tiempo transcurrido desde la siembra. Las comunidades de roedores estuvieron compuestas por las mismas especies en ambos tipos de parcela: Akodon azarae, Calomys laucha, Calomys musculinus y Oligoryzomys flavescens, aunque no estuvieron siempre presentes todas las especies en todos los meses de muestreo en los dos cultivos. A. azarae y C. laucha fueron las especies más abundantes, la primera fue más capturada en los bordes de campos de cultivo y la segunda en los campos, independientemente del tipo de cultivo. La diversidad fue mayor en las parcelas de maíz que en las de soja cuando los cultivos estaban maduros o luego de la cosecha. Las diferencias en diversidad se debieron tanto a cambios en la riqueza (generalmente por ausencia de C. musculinus u O. flavescens) como a cambios en la equitatividad (por una mayor similitud en las densidades entre C. laucha y A. azarae). Las diferencias en abundancia entre las parcelas de maíz y soja, así como para los hábitats de campo y borde, variaron según el período y el momento de muestreo. La abundancia total de roedores fue mayor en las parcelas de maíz que de soja, aunque las diferencias no fueron estadísticamente significativas. C. laucha fue la especie que mostró mayores diferencias entre tipos de cultivo, ya que fue más abundante en las parcelas (incluyendo campos y bordes) y en los campos de maíz respecto a los de soja en el primer período, mientras que en el segundo fue significativamente más abundante en los bordes de maíz que en los de soja. El mayor uso del hábitat de campo por C. laucha respecto a las otras especies de roedores podría ser la causa de que esta especie sea la que muestra mayores variaciones de acuerdo al tipo de cultivo, ya que sufre en mayor grado los efectos de las labores, que difieren entre parcelas de maíz y soja. A. azarae fue más abundante en las parcelas de soja que las de maíz en el segundo período, pero en la pos cosecha del primer período fue más abundante en las parcelas de maíz. Una respuesta diferencial de estas especies frente a los tipos de cultivo es consistente con las diferencias que muestran en la selección de macro y microhábitat observadas en trabajos previos. C. musculinus fue más abundante en los campos de maíz en el primer período, pero no mostró diferencias significativas en el segundo. O. flavescens fue más abundante en los bordes de maíz que de soja en ambos períodos, pero las diferencias fueron significativas sólo en el primer período. Ambas especies fueron muy escasas. La mayor abundancia de A. azarae en la soja respecto a maíz en el segundo período puede atribuirse a distintos factores, en primer lugar a una mayor densidad en primavera, a una mayor duración de la estación reproductiva (que se extendió hasta mayo, mientras que en el maíz se interrumpió antes) y a una mayor supervivencia de adultos viejos luego de la cosecha. Las parcelas de maíz y soja mostraron las mayores diferencias luego de la cosecha, probablemente porque los rastrojos de maíz habían permanecido mayor tiempo sin disturbios luego de la cosecha que los de soja, permitiendo la recuperación de las poblaciones, ya que la cosecha de maíz se produce cuando aún hay reproducción.

Abstract:
The goal of this Thesis was to study rodent communities in corn and soybean fields in pampean agroecosystems. The study was conducted at Diego Gaynor, Exaltación de la Cruz Department, Buenos Aires Province, Argentina in two consecutive cycles of development of crops (periods). For each type of field (soybean and maize) I considered two habitats: the cropfields and the edges (borders). In a first section I studied diversity, species composition and relative abundance along the different stages of crops, and in a second section I described the variations between soybean and maize fields (taking in account the variability according to the month of sampling and habitats) in abundance, population structure, reproductive activity and individual physical condition for the different species. The effect of the time elapsed between sowing and sampling was also assessed. Species composition of rodent communities in soybean and maize fields were the same: Akodon azarae, Calomys laucha, Calomys masculinas and Oligoryzomys flavescens, but the 4 species were not present in all samplings in both types of fields. The first two species were the more abundant, A. azarae in borders and C. laucha in fields. Rodent diversity was higher in corn than in soybean fields when crops were mature or after the harvest. Differences in diversity were the result of changes in both richness (specially because of absence of C. musculinus or O. flavescens) and evenness, specially when A. azarae and C. laucha showed similar densities. Differences in abundance between maize and soybean fields, as well as in their habitats, varied according to the period and the month of sampling. Total abundance of rodents was higher in maize than in soybean fields, but differences were not significant. C. laucha was the species which showed more differences between types of crops, being more abundant in the whole maize field (including the cropfield and the edges) in both periods and in corn cropfields with respect to soybean cropfields in the first period, while in the second it was more abundant in maize than in soybean edges. A higher response of C. laucha to crop type than the other studied species may have been expected because it is the more abundant species in cropfields, and suffers in a high degree the effect of labors which are different for both crops. A. azarae was more abundant in soybean than in maize fields in the second period but in the post harvest (May) of the first period maize stubbles appeared to be a better habitat than soybean stubbles, because there was a higher density, individuals showed a higher physical condition than in soybean fields, there was reproductive activity and old individuals, whereas in soybean fields there was not reproductive activities and old individuals were not captured. A differential response to crop type by C. laucha and A. azarae is consistent with their differences in macro and microhabitat selection observed in previous studies. C. musculinus was more abundant in cornfields in the first period (considering all samplings and in May), but did not show differences between types of cropfields in the second period. O. flavescens was more abundant in maize than in soybean borders in both periods, but differences were significant only the first year. Both species were rarely captured. The higher abundance of A. azarae in soybean with respect to maize fields in the second period may be attributed to many factors, as a higher initial density in spring, a longer reproductive period, and a higher survival of adults to the post harvest period. Maize and soybean fields showed the highest differences in the post harvest period, probably because maize stubbles had remained undisturbed more time after harvest than soybean fields, allowing a recover of populations.

"Comparación del punto del balance material de la glucosa de cepas de comportamiento intermedio con Escherichia Coli y Aerobacter Aerogenes" (1934). De la Serna, Carlos Santiago. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Comparación interactiva de modelos de minería de datos utilizando técnicas de visualización" (2014-07-24). Padua, Luciana María. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Compartimentación de variantes virales entre plasma y células mononucleares de sangre periférica en pacientes con infección crónica por virus de hepatitis C" (2014-08-19). Díaz Carrasco, Juan María. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El virus de hepatitis C (VHC) afecta al 3% de la población mundial, representando una de las principales causas de hepatitis crónica y trasplante hepático. En el paciente infectado, el virus existe como un espectro de mutantes que difieren en su potencial de replicación, denominado cuasiespecie. La extensa variabilidad del VHC proporciona a la cuasiespecie una alta plasticidad fenotípica y capacidad de adaptación, que favorece el mantenimiento de la infección crónica. Si bien el principal sitio de replicación del VHC es el hígado, numerosos estudios han descripto la replicación del virus en tejidos extrahepáticos, en particular en células mononucleares de sangre periférica (CMSP) y esto se ha asociado con el desarrollo de distintas manifestaciones extrahepáticas. Se ha relacionado a distintos genes del VHC con la compartimentación en CMSP, pero aún no está claro cuáles son los factores celulares y virales requeridos para la infección de las células linfoides, por lo que la búsqueda de patrones moleculares asociados con el linfotropismo podría aportar datos valiosos para la comprensión de este fenómeno. Además, la gran mayoría de los estudios de compartimentación se han realizado en pacientes adultos y se basan únicamente en la región HVR1 de E2. El objetivo del trabajo fue evaluar la compartimentación del VHC en CMSP y su dinámica durante la infección crónica por VHC en pacientes pediátricos mediante el análisis de genes virales involucrados en distintas etapas del ciclo de replicación viral. Se evaluó la compartimentación y la existencia de patrones moleculares asociados con el linfotropismo mediante el análisis filogenético de las secuencias de tres regiones del genoma viral: IRES, E1E2 y NS5B, obtenidas a partir de muestras seriadas de plasma y CMSP de 6 niños. Se demostró estadísticamente que existe compartimentación viral en niños, principalmente en regiones discretas dentro de E1E2 que incluyen sitios de unión a receptores, lo que sugiere que el linfotropismo del VHC podría estar determinado por restricciones en la interacción de las glucoproteínas con factores celulares involucrados en el proceso de adsorción y entrada. Si bien no se evidenció un patrón molecular asociado con el linfotropismo común a todos los casos estudiados, se observó que las regiones identificadas están sujetas a presiones selectivas diferentes en plasma y CMSP y se describieron variaciones aminoacídicas asociadas con las variantes linfotrópicas. Además de contribuir al conocimiento general acerca de la compartimentación del VHC, nuestro trabajo pone de manifiesto el importante papel que juegan las CMSP como reservorios de variabilidad genética y como compartimentos de replicación extrahepática, favoreciendo la persistencia y contribuyendo al mantenimiento de la cronicidad durante la infección por VHC en niños.

Abstract:
Worldwide prevalence of chronic hepatitis C virus (HCV) infection is estimated at 3%, representing the major cause of chronic hepatitis and liver transplantation. Within the infected patient, the virus exists as a spectrum of mutants which differ in their replication potential, termed quasispecies. The large variability of HCV quasispecies provides high phenotypic plasticity and adaptability, which favors the maintenance of chronic infection. Although the primary site of HCV replication is the liver, numerous studies have described replication in extrahepatic tissues, particularly in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and this has been associated with the development of different extrahepatic manifestations. Several viral genes have been linked to HCV PBMCs compartmentalization, but the factors required for the infection of lymphoid cells still remain unclear, and therefore the search for molecular patterns associated with lymphotropism could provide valuable data for the understanding of this phenomenon. In addition, most studies examining compartmentalization have been conducted in adult patients and are based solely on the HVR1 region of E2. The aim of this study was to assess the compartmentalization of HCV in PBMCs and its evolution dynamics during chronic HCV infection in pediatric patients by means of the analysis of certain genes involved in different stages of the viral replication cycle. Compartmentalization and the existence of molecular patterns associated with lymphotropism were evaluated by phylogenetic analysis of the sequences of three viral genes, namely IRES, E1E2 and NS5B, which were obtained from serial samples of plasma and PBMCs of 6 children. We showed that there is statistically significant compartmentalization in children, mainly in discrete regions within E1E2 that includes receptor binding sites, suggesting that HCV lymphotropism could be influenced by restrictions in the interaction of the glycoproteins with cellular factors involved in viral attachment and entry. While a common molecular pattern associated with lymphotropism was not evident in all the studied cases, it was found that the identified regions were influenced by different selective pressures both in plasma and PBMCs. Moreover, amino acid variations associated with lymphotropic variants were described. Besides contributing to general knowledge about the compartmentalization of HCV, our work highlights the important role played by PBMCs as reservoirs of genetic variability and as compartments for extrahepatic replication, favoring persistence and contributing to the maintenance of chronicity during HCV infection in children.

"Compatibilidad reproductiva entre poblaciones de Ceratitis Capitata (Díptera : Tephritidae)" (2002). Vera, María Teresa. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La mosca de la fruta del Mediterráneo, Ceratitis capitata (Diptera: Tephritidae), es una de las principales plagas frutícolas y hortícolas del mundo. Sus larvas se desarrollan en la pulpa de la fruta, de aproximadamente 250 especies vegetales, produciendo daño directo sobre la producción y daño indirecto al restringir los mercados de exportación. Mundialmente, y en ciertas regiones de la Argentina, se la combate con la técnica del insecto estéril. El estudio de la compatibilidad entre poblaciones silvestres y entre poblaciones y líneas de laboratorio puede brindar información relevante para la mejora de dicha medida de control. En el presente trabajo se buscaron evidencias de incompatibilidad en distintas etapas del proceso reproductivo. Se puso especial énfasis en tres aspectos: compatibilidad para el apareamiento, comportamiento de recópula, y compatibilidad post-cigótica. El estudio de la compatibilidad para el aparcamiento se realizó en condiciones semi-naturales entre dos poblaciones silvestres y entre cuatro poblaciones silvestres y una línea de laboratorio. El estudio de distintos aspectos del comportamiento de recópula analizó principalmente el efecto del origen del macho con el que se aparea una hembra por primera vez en la propensión a recópula. El mismo se llevó a cabo con hembras de laboratorio bajo condiciones de laboratorio, y con hembras silvestres, en condiciones semi-naturales, con machos silvestres y de laboratorio. Estos últimos, en algunos casos, habian sido esterilizados con irradiación. El estudio de la compatibilidad post-cigótica analizó el desempeño de la progenie de cruzas híbridas en atributos relacionados con la viabilidad, la proporción de individuos de cada sexo, o la fertilidad. Se analizó la compatibilidad entre dos poblaciones silvestres, entre 19 poblaciones silvestres y una de dos líneas de laboratorio y entre 22 cruzas híbridas y las 8 líneas que las originaron. Asimismo, se comparó el desempeño de todas las cruzas con valores de referencia. Los resultados mostraron la presencia de compatibilidad entre la población silvestre de Sáenz Peña, Chaco, y la de Reconquista, Santa Fe, tanto para el aparcamiento como post-cigótica. En el estudio de la compatibilidad para el aparcamiento entre cuatro poblaciones silvestres y la linea Argl7y-80, se obtuvieron todas las combinaciones de pareja posibles, mostrando la ocurrencia de aparcamientos entre los individuos del campo y la línea de laboratorio en ambos sentidos. Sin embargo, se observaron también algunas diferencias en el comportamiento sexual entre la línea de laboratorio y los individuos silvestres. Las hembras de las poblaciones de Santa Rosa, Catamarca, y Concordia, Entre Ríos, mostraron una tendencia hacia una falta de aceptación de los machos de laboratorio, sugiriendo un grado incipiente de aislamiento. El estudio del comportamiento de recópula mostró diferencias entre líneas, tanto en machos como en hembras y confirmó que los machos de laboratorio tienen disminuida la capacidad de inducir refractariedad tanto en hembras silvestres como de laboratorio. Se concluyó que la duración de la primera cópula no es una buena medida del éxito post-copulatorio. Además, mostró que la irradiación tiene un efecto adverso sobre el comportamiento post-copulatorio. En cuanto a la compatibilidad post-cigótica, en ningún caso se detectó incompatibilidad en forma generalizada en todas las parejas obtenidas de la cruza entre dos origenes. Sin embargo, para todas las variables analizadas, viabilidad, relación macho:hembra y desarrollo de los ovarios, se observaron familias con anomalías, evidenciando cierto grado de incompatibilidad entre algunos origenes. En el caso puntual de atrofia gonadal, el fenómeno fue encontrado con mayor frecuencia en las líneas de laboratorio, y en las cruzas híbridas, que en las poblaciones silvestres o en cruzas entre poblaciones silvestres y líneas de laboratorio. Se postula que en C. capitata este fenómeno no está asociado al encuentro entre poblaciones silvestres, o líneas con pocas generaciones bajo cría artificial y líneas con muchas generaciones en el laboratorio como se observó en Drosophila melanogaster. Cuando la disponibilidad de material lo permitió y se realizaron las dos cruzas recíprocas, se observó que el comportamiento no fue similar entre ellas. Esto llevó a proponer la presencia de factores citoplasmáticos, y a recomendar que los estudios futuros involucren las cuatro cruzas posibles.

Abstract:
The Mediterranean fruit fly, Ceratitis capitata (Diptera: Tephritidae), is one of the main fruit pests of the world. Their larvae develop in the pulp of approximately 250 fruit or vegetable species, producing direct damage on the production and indirect damage by restricting the export markets. Worldwide, and in certain regions of Argentina, this pest is controlled with the Sterile Insect Technique (SIT). The study of the compatibility among wild populations, and between populations and laboratory strains, can provide useful information for the improvement of this control technique. The present work looked for evidences of incompatibility at different stages of the reproductive process. Special emphasis was placed in three aspects: mating compatibility, remating behaviour, and post-zygotic compatibility. The study of mating compatibility was carried out in field cages under semi-natural conditions between two wild populations and between each of four wild populations and a well-established laboratory strain. The study of different aspects of the remating behaviour focused mainly on the effects of the origin of the first male mated to a female, on the propensity of the female to remate. This study was carried out with laboratory females, under laboratory conditions, with males from different strains, and also with wild females in field cages under semi-natural conditions with wild and laboratory males. These last laboratory strain males, in some cases, had been sterilised with irradiation. Post-zygotic compatibility was analysed by hybrid crosses for traits related to viability and sex ratio of the progeny, as well as female fertility. This study was performed between two wild populations, between nineteen wild populations and one of two laboratory strains, and among eight laboratory strains. A global analysis was performed to compare all the crosses with reference values. The results showed the presence of both mating and post-zygotic compatibility between the populations of Sáenz Peña, Chaco, and Reconquista, Santa Fe. In the study of mating compatibility among four wild populations and the laboratory strain Argl7y-80, all the possible mating combinations were obtained, showing the presence of matings between wild individuals and the laboratory strain in both directions. However, some differences were also observed in the sexual behaviours of the laboratory compared to wild populations. Females from Santa Rosa, Catamarca, and Concordia, Entre Ríos, showed a tendency toward reduced acceptance of laboratory males, suggesting an incipient degree of behavioural isolation. The study of the remating behaviour showed differences among strains, as much in males as in females. It confirmed the fact that laboratory males have a diminished capacity to induce refractoriness to subsequent matings in wild and laboratory females compared to wild males. It is concluded that first mating duration is not a good indirect measure of post-copulatory success. This study also showed that irradiation has an adverse effect on post-copulatory female behaviour. As for post-zygotic compatibility, in no case was incompatibility detected in a generalised way. However, for all the analysed variables (viability, sex ratio and gonadal development), some abnormal families were observed, demostrating a certain degree of incompatibility among some strains. In the case of gonadal atrophy, the phenomenon was more frequent in laboratory strains, and in hybrid crosses among them, compared to wild populations or compared to crosses between wild populations and laboratory strains. It is suggested that in C. capitata this phenomenon is not associated to the encounter between wild populations, or strains with few generations under artificial rearing, and well-established strains with many generations in the laboratory like it was observed for Drosophila melanogaster. When the two reciprocal crosses were performed, they did not behave equally, suggesting the presence of cytoplasmatic incompatibility factors. It is recommend that future studies should involve the four possible crosses. The results obtained here provide bases for the improvement of certain aspects of the SIT, and allow the formulation of hypothesis related to the reproductive success and the compatibility among strains of various origins in this species.

"Complejos convectivos de mesoescala en Sud América" (1994). Velasco, Inés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La información satelital en forma de imágenes de infrarrojo realzado, conjuntamente con los datos convencionales de superficie y altura fueron utilizados para documentar la existencia y las características climatológicas de los complejos convectivos de mesoescala (MCCs) sobre el continente sudamericano y los mares adyacentes. También se determinaron las características ambientales en la que estos sistemas se desarrollan, así como determinadas condiciones ed circulación y caracterśticas de la escala sinóptica, discutiéndose los resultados en relación con la estructura y dinámica de los MCCs.Se encontró que los MCCs sobre latitudes medias ocurren aproximadamente con la misma frecuencia sobre Sud América y sobre Norte América, siendo la mayoría de las características de ambas poblaciones de MCCs muy similares. La diferencia más notable entre las MCCs de Norte América y los de Sud América es que estos últimos en promedio son alrededor de un 60 % más extensos. Aparte de la numerosa población de MCCs en latitudes medias de Sud América se encontró un gran número de MCCs en latitudes bajas (tropicales). En general, tanto los sistemas de latitudes medias como los de latitudes bajas son nocturnos y preferentemente continentales (es decir la mayoría de los sistemas ocurren durante la noche y sobre superficies de tierra]). La mayor frecuencia de ocurrencia se da en cada una de las regiones fisiográficas similares de Norte América y Sud América donde es frecuente el desarrollo de una corriente en chorro de los niveles bajos. Sobre la región del Amazonas, al igual que sobre el Sudeste de los EEUU la ocurrencia de MCCs es casi nula pese a ser ambas regiones,áreas que exhiben gran actividad convectiva. Todos los centros de máxima ocurrencia de MCCs se observan en zonas latitudinales de los estes u oestes, inmediatamente a sotavento de las principales cadenas montañosas. Uno de los dos años de datos investigados fue un año en el que se observó el episodio de El Niño. Durante ese año, el número de MCCs sobre latitudes medias de Sud América fue más del doble del número de sistemas para el año de no El Niño. Más aún, varios MCCs se formaron sobre las anómalas aguas calientes que aparecieron a lo largo de la costa del Perú. En base a esta muestra pequeña parecería existir una conexión entre la frecuencia de MCCs y el episodio de El Niño.

"Complejos de hierro no hémico con nitroxilo y sus precursores: síntesis, caracterización y reactividad" (2011). Montenegro, Andrea Constanza. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Complejos de metales de transición con el ligando rédox activo NO: estructura electrónica, interconversión y reactividad" (2012). Pellegrino, Juan. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El óxido nítrico (NO) puede unirse a los metales como NO+ (nitrosonio), NO● o NO¯ /HNO (nitroxilo), resultando ambiguos los estados de oxidación del metal y el ligando en los fragmentos M-NO. Por eso, Enemark y Feltham propusieron designar estos fragmentos como NO}n con dos enfoques diferentes. El primero se enmarca en el área de química bioinorgánica y está relacionado con el estudio de complejos NO}n organometálicos y el objetivo específico es estudiar la estructura electrónica y reactividad de complejos eNO}n con un ligando derivado de ciclopentadienilo. En la primera parte, nos enfocamos particularmente en complejos eNO}7 Fe(TFPPBr8)NO (1●) (TFPPBr8 = meso--octabromoporfirina), cuyo voltagrama presenta dos ondas de reducción reversibles y una onda de oxidación. Se presentan resultados del estudio de los tres procesos de transferencia electrónica observados para 1● por métodos químicos, espectroelectroquímicos y cálculos DFT. El producto de reducción por un electrón, eNO}8 no hémicos, mejor descriptos principalmente como FeIINO¯. También se estudió la reactividad de 1¯ con ácidos; el complejo eNO}7: Este resultado motivó la realización de cálculos DFT para dilucidar los factores determinantes de la estabilidad de complejos eNO}8 en un modelo hémico permita futuros estudios de reactividad de esta especie biológicamente relevante. También se estudió la oxidación de 1● al complejo eNO}6 1+, se preparó el complejo NO}6 pero no para derivados de porfirinatos de hierro. En el marco del estudio de complejos hNO}8 con ligandos pinza tipo PCP y PNP previamente sintetizados y caracterizados en nuestro laboratorio y con un complejo eNO}6 presentó una reducción cuasirreversible de dos electrones, pero el complejo hNO}8 con ligando PCP presentaron reducciones monoelectrónicas para dar los complejos paramagnéticos hNO}9 presentaron una reactividad interesante, activando enlaces carbonohal ógeno, similar a la reportada para otros complejos paramagnéticos no nitrosilados de otros metales. La reactividad con halogenuros de alquilo y arilo fue estudiada para uno de los complejos

Abstract:
Nitric oxide (NO) can bind to metals as NO+ (nitrosonium), NO● or NO¯/HNO (nitroxyl). Consequently, the oxidation states of the metal and the ligand are found ambiguous in M-NO moieties. For this reason, Enemark and Feltham introduced the rationalized description of these fragments as NO}n complexes are studied from two different approaches. The first one is related to bioinorganic chemistry and presents the study of biorelevant NO}n organometallic complexes and the specific goal is to study the structure and reactivity of eNO}n complexes with a cyclopentadienyl derivative ligand. In the first part, eNO}7 Fe(TFPPBr8)NO (1●) (TFPPBr8 = meso--octabromoporphyrin), which voltamogramm exhibits two reversible reduction waves and one oxidation process. This work presents the results obtained for the three electron transfer processes observed for 1● by chemical methods, spectroelectrochemistry and DFT calculations. The one-electron reduced product, eNO}8 complexes, which are better described as FeIINO¯. Also, the reactivity of 1¯ with acids was studied; the protonated eNO}7 species. This result inspired us to do theoretical DFT calculations in order to study the relevant factors associated with the stabilization of protonated eNO}8 species as an hemic model could inspire other future reactivity studies. Also, the oxidation of 1● to the eNO}6 complex derived from a porphyrinate without withdrawing substituents was prepared, + (TPP = meso--porphyrin), which was surprisingly stable towards NO loss. Its reactivity with hydride was studied, reaction that was reported for many NO}n organometallic complexes, the precursors used were eNO}6 complex, 2. The electrochemistry of all the organometallic complexes was studied by cyclic voltammetry and the oxidized or reduced species were characterized by FTIR spectroelectrochemistry. Also, DFT calculations were performed to get more insight into the electronic structure of the different species. The eNO}8 complex was not stable, it decomposed to other diamagnetic complexes with and without NO ligand. In contrast, the PCP hNO}9 complexes, one of which was stable enough to be well characterized by IR and EPR, showing a predominant RhINO● structure. These hNO}9 complexes by 31P, 1H and 19F NMR spectroscopies and gas chromatography coupled to mass spectrometry, and a mechanism was proposed supported by DFT calculations.

"Complementación de baculovirus que no forman cuerpos de oclusión mediante líneas celulares establemente transformadas con el gen poliedrina" (2010). López, María Gabriela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los baculovirus son un grupo diverso de virus que infectan artrópodos. AcMNPV presenta un ciclo de vida bifásico, con dos fenotipos virales: los virus brotantes y los virus derivados de los cuerpos de oclusión (ODV). Los ODV, responsables de la infección primaria, se embeben en una matriz de poliedrina, proteína que no es esencial para la propagación de los virus en cultivos celulares. Este trabajo de tesis tuvo como objetivo desarrollar una línea transformada de insecto empaquetadora de baculovirus defectivos en poliedrina, bajo la hipótesis de que es posible complementar esta deficiencia en trans desde el genoma celular. Para ello, en primer lugar, se evaluaron diferentes secuencias regulatorias del promotor del gen poliedrina controlando el gen reportero CAT, en ensayos de transfección transitoria. Luego de la infección con un baculovirus occ-, los mayores niveles de actividad reportera se obtuvieron con una región regulatoria de 2.735 pb que incluye el promotor mínimo de poliedrina y secuencias con funciones de enhancer de la transcripción en baculovirus (hr1, AcSp). Esta región fue seleccionada para regular la transcripción de poliedrina en las líneas establemente transformadas. La infección de una de estas líneas, Sf9POL, demostró que la morfogénesis de poliedros ocurre de manera similar a la de la infección natural y los baculovirus resultantes mostraron además una infectividad similar a los salvajes, en larvas de Rachiplusia nu. Las larvas infectadas oralmente mostraron sólo una progenie viral de genotipo pol- y fenotipo occ-, incapaz de propagar la infección por vías naturales. Colateralmente, se describe una mutación en la posición 130 del gen poliedrina, responsable de alteraciones en tamaño, morfología y capacidad de oclusión de poliedros. En conjunto, los resultados y conclusiones de este trabajo contribuyen al conocimiento de los mecanismos de morfogénesis de los cuerpos de oclusión en el baculovirus AcMNPV, con importantes implicancias en el diseño de baculovirus recombinantes para el control de plagas y la producción de proteínas recombinantes en larvas de lepidópteros.

Abstract:
Baculovirus is a diverse family of virus infecting arthropoda. AcMNPV has a bifasic life cycle, with two viral phenotypes: budded virus and occlusion-derived virus (ODV). ODVs are responsible of primary infection and occlude into a polyhedrin matrix to form polyhedra. Polyhedrin is a non- essential protein for multiplication in cell cultures. The main goal of this work was to develop a transformed insect cell line for packaging polyhedrin defective virus, hypothesizing that it is possible to complement this deletion in trans from the cellular genome. In this way, different polh gene regulatory sequences driving CAT were evaluated by reporter gene assays. After infection of transiently transformed insect cells with pol- baculovirus, the highest CAT levels were obteined when a 2,735 bp regulatory region containing the minimum polyhedrin promoter preceded by hr1 and AcSp sequences with known enhancer activities, was positioned upstream CAT gene. This region was selected to regulate the transcription of polyhedrin in stably transformed cell lines. The infection of one line named Sf9POL demonstrated that morphogenesis of polyhedra occurred in a similar way to the natural infection and that rendered baculovirus also showed similar infectivity for Rachiplusia nu larvae. Oral infection of larvae with polyhedra from infection of Sf9POL line, generated a viral progeny genotypically pol- and phenotypically occ-, unable to propagate the infection by natural means. Colaterally, a mutation in the polyhedrin gene mapped in the position 130 and responsible for alterations in size, shape and capacity for virion occlusion, is described. Together, results and conclusions presented here contribute to the knowledge of the morphogenesis of occlusion bodies in AcMNPV, with important implicances in the design of recombinant baculovirus for plague control and production of heterologous proteins in lepidoptera larvae.

"Componentes alcohólicos de aceites esenciales : determinación de sus características físicas y químicas, aislamiento, identificación y valoración" (1953). Grosso, Aníbal B. A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo se ha partido de alcoholes, a los cuales se les ha controlado sus constantes físicas, procediéndose a la purificación de aquellos no puros, después de lo cual se han estudiado sucesivamente los métodos de determinación cuali y cuantitativos de la función hidroxilo, así como también algunos métodos paro resolver mezclas de alcoholes. En cuanto a los métodos ensayados, se procedió tratando de economizar alcoholes y reactivos, de por si ya escasos. De los métodos cualitativos ensayados, la formación de uretanos y benzoatos no condujo a resultados positivos con ninguno de los alcoholes ensayados, si bien en lo que respecta a los primeros puede atribuirse a mal estado del reactivo, ya que en trabajos anteriores dirigidos por el Dr. Montes ha sido utilizado con éxito. Los métodos de formación de 3,5 - linitrobenzoatos y xantatos dieron mejores resultados, sobre todo con alcoholes primarios, tanto de cadena abierta como cíclicos. El método clásico de valoración por acetilación, condujo a resultados parejos — excluído el geraniol - con rendimientos elevados, que unidos a la facilidad de manipulación lo hacen sumamente recomendable. El método del cloruro de acetilo — dimetilenilina proporciona resultados muy satisfactorios, tanto en cuánto en rendimiento elevado como a la posibilidad de valorar alcoholes secundarios y terciarios. La ftalización bencénica no condujo a resultados exactos, amén de presentar dificultades operatorias, como la transformación del excedente de anhídrido ftálico en ester neutro, operación sumamente larga y penosa. La ftalización bencénica simplificada no llevó tampoco a resultados exactos, pero en cambio no presenta las dificultades operatorias del anterior. Siendo sus resultados semejantes a la clásica, la conceptuamos preferible por su más fácil manipuleo, para alcoholes primarios especialmente en presencia de secundarios y terciarios. La ftalización aplicada a alcoholes secundarios dió valores sumamente bajos, y la disolución del excedente de anhídrido ftálico resultó aún más penosa que en el caso de la ftelización clásica, bencénica. Las mezclas resueltas llevaron a datos concordantes, en general, con las apreciaciones anteriores, tanto para los métodos de ftalización como para el del cloruro de acetilo — dimetilanilina.

"Componentes lipídicos de formas trypomastigote de Trypanosoma cruzi : marcación metabólica y estudio estructural" (1996). Uhrig, María Laura. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo de Tesis se realizó un estudio estructural de los componentes lipídicos de formas trypomastigote de Trypanosoma cruzi, con el fin de aclarar algunos aspectos esenciales en los caminos biosintéticos del estadío infectante. A partir de la incorporación de ácido -palmítico se caracterizaron triglicéridos, ácidos grasos libres y lípidos zwiteriónicos como fosfatidiletanolamina, fosfatidilcolina y sus lisoderivados. Cada uno de ellos fue purificado, cuantificado y caracterizado químicamente. Fue determinada la limitada capacidad de formas trypomastigote para elongar ácidos grasos, y en contraposición con otras formas no infectantes del parásito se observó la ausencia de ácidos grasos insaturados atribuíble a una baja actividad de desaturasas en este estadío. A partir de la incorporación de -etanolamina se purificaron fosfatidiletanolamina, lisofosfatidiletanolamina y dimetilfosfatidiletanolamina marcados. Se determinó que la fosfatidiletanolamina no es biosintetizada por metilación secuencial de la fosfatidiletanolamina y que por otra parte, ésta es biosintetizada a través del camino de Kennedy. Entre los lípidos ácidos, fueron caracterizados dos tipos de inositolfosfolípidos: IPL1 compuesto por una mezcla de N-palmitoilesfingosina y N-palmitoildihidroesfingosina, e IPL2 constituido por 1,2-diacil- y 1-0-alquil-2-acilglicerol con la misma cabeza polar. Estos compuestos serían posibles precursores biosintéticos de las anclas de glicoproteínas a la membrana descriptas en formas trypomastigote. Por otra parte, fue aislado y purificado por primera vez un sulfoglicolípido formado por N-palmitoilesfingosina unida a un oligosacárido que contiene galactosa, glucosa, N-acetilgalactosamina y ácido glucurónico. La presencia de este sulfoglicolípido en las formas infectantes del parásito podría estar relacionada con la inmunopatología asociada a la enfermedad de Chagas.

Abstract:
In this Thesis, a structural characterization of the lipidic components obtained from the trypomastigote stage of Trypanosoma cruzi was performed. Metabolic incorporation of -palmitic acid allowed the isolation and purification of triacylglycerols, free fatty acids and zwitterionic lipids. Each of these components was quantified and chemically characterized. The limited capacity of trypomastigote forms to elongate fatty acids was determined. in contrast with other non-infective forms of the parasite, the absence of unsaturated fatty acids due to a low activity of desaturases was observed. From the metabolic incorporation of -ethanolamine, phosphatidylethanolamine, lysophosphatidylethanolamine and dimethylphosphatidylethanolamine were isolated and characterized. Interestingly, no labeled phosphatidylcholine was observed indicating that this phospholipid is not biosynthesized by secuencial methylation of phosphatidylethanolamine. Among the acidic lipids, two classes of inositolphospholipids were characterized: IPL1 formed by N-palmitoylsphingosine and N-palmitoyldihydrosphingosine, and IPL2 formed by 1,2-diacyl- and 1-0-alkyl-2-acylglycerol, both of them linked to the same polar moiety. These components can be considered putative precursors of the anchors of membrane glycoproteins described in the trypomastigote stage. Finally, a sulfoglycolipid was, for the first time, isolated and purified from the infective stage; N-palmitoylsphingosine linked to an oligosaccharide with galactose, glucose N-acetilgalactosamine and glucuronic acid as components, was determined. The presence of this sulfoglycolipid may be related to the immunopathology associated with Chagas' disease.

"Comportamiento asintótico para sistemas de ecuaciones parabólicas con condiciones de borde no lineales" (1995). Rossi, Julio Daniel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Comportamiento de agregación y comunicación Intra- e Interespecífica en triatominae" (1997). Lorenzo Figueiras, Alicia Nieves. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los triatominos activos durante la noche, permanecen durante el día agrupados en sitios protegidos. El comportamiento de agregación está mediado por tigmotaxis y por señales químicas. Experimentos utilizando arenas y olfatómetros muestran que Triafoma infestans es atraída a papeles impregnados con sus heces secas. La respuesta de agregación depende del tiempo transcurrido luego de la ingesta: insectos recién alimentados no se agrupan, cambiando su respuesta cambia al cabo de 8-10 horas. Los compuestos activos pudieron ser extraídos de las deyecciones con solventes polares. Los mismos podrían ser productos finales de la digestión de la sangre o secreciones adicionadas al contenido del recto antes de la deposición. El significado biológico de está señal ha sido relacionado con la orientación hacia los refugios. Una kairomona de agregación está presente en las heces de T. infestans, T. sordida, T. guasayana y Rhodnius prolixus. Los excrementos de T. infesfans promueven la agregación en T. sordida y T. guasayana, pero no en R. prolixus. Las heces de estas tres especies inducen la agregación en T. infesfans. Otro factor de agregación, extraible por solventes no-polares, está presente en la cutícula de las vinchucas.. Esta señal actúa a través de un mecanismo de quimiorrecepción de contacto.

Abstract:
Night-active triatomines spend daytime hours assembled in protected places. The aggregation behaviour is mediated by thigmotaxis and by chemical cues. Experiments using arenas and wind-tunnel olfactometers show that Triatoma infesfans are attracted to papers impregnated with their own dry faeces. The assembling response depends on the time elapsed after feeding: recently fed animals are not attracted, but a switch in the response takes place after 8-10 hours. The active compounds can be extracted from faeces by polar solvents. It may be a product of the final breakdown of the blood meal or could be a secretion added to the contents of the rectum prior to defecation. It has been proposed that the faecal signal help the insects to orientate towards refuges. An aggregation kairomone is present in the faeces of T. infesfans, T. soradida, T. guasayana and Rhodnius prolixus. We found that excrements of T. infesfans elicit assembling in T. sordida and T. guasayana, but not in R. prolixus. The excrement of the last three named species induce aggregation in T. infestans. A novel aggregation factor is described, which can be extracted from the cuticle of the insects by non-polar solvents and acts through contact chemoreception.

"Comportamiento de alimentación de las aves insectívoras del desierto del Monte central: aspectos espaciales y temporales" (2016-08-26). Guerra Navarro, Carolina Isabel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo se estudió el comportamiento de alimentación de tres especies de aves insectívoras en el desierto del Monte central: Stigmatura budytoides, Poospiza torquata y Serpophaga griseicapilla. Se evaluó la selección de especies de plantas como sitios de alimentación, el comportamiento de búsqueda del alimento y las maniobras utilizadas por las aves para capturar a sus presas. El comportamiento fue analizado tanto a escala espacial (entre ambientes con diferente estructura de la vegetación: algarrobales y jarillales), como a escala temporal (cambios estacionales e interanuales). Durante las estaciones de primavera-verano las tres especies de aves mostraron un fuerte patrón de selección por Prosopis flexuosa (algarrobo) como sitio de alimentación en los dos tipos de ambientes estudiados. Además, para S. budytoides este patrón se mantuvo durante el otoño-invierno. Comparado con el resto de las especies leñosas, la mayor abundancia y biomasa de artrópodos por individuo de algarrobo, tanto en la época estival como la invernal, podría estar explicando esta selección por parte de las tres especies. No obstante, se registraron para S. budytoides cambios estacionales en el uso de maniobras de captura. Durante la época invernal se observó un mayor uso de maniobras aéreas y menor uso de maniobras de recolección comparado con las temporadas de primavera-verano; esto podría deberse a los cambios en el tipo de artrópodos y sus abundancias. Las tres especies de aves variaron interanualmente el uso de los distintos tipos de movimientos de búsqueda, y en S. griseicapilla se observó además una variación interanual en el tipo de maniobras de captura utilizado. La variación en los tipos y tamaños de presas podría haber determinado los cambios observados interanualmente en el comportamiento de las aves. A escala espacial no se encontraron diferencias en el comportamiento de las aves a pesar de las diferencias estructurales de los ambientes estudiados. La flexibilidad encontrada en algunas variables del comportamiento de alimentación de las aves estudiadas aporta información sobre los posibles mecanismos que les permitirían mantener el patrón de selección por Prosopis flexuosa como sitio de alimentación en la porción central del desierto del Monte.

Abstract:
I studied the foraging behavior of three species of insectivorous birds in central Monte desert: Stigmatura budytoides, Poospiza torquata and Serpophaga griseicapilla. For each species I evaluated their selection of plant species as feeding sites, searching behavior, and maneuvers used to capture prey. I also evaluated the changes in their foraging behavior both at a temporal (seasonal and interannual) and spatial scale (i.e., between two habitats with different vegetation structure: mesquite open woodland and creosotebush shrubland). The three bird species strongly selected Prosopis flexuosa (mesquite) as feeding site on both habitat types during spring-summer. Stigmatura budytoides also selected P. flexuosa during autumn-winter despite phenological changes of these trees. Prosopis flexuosa showed the highest arthropod abundance and biomass per individual plant (both in summer and winter), which could explain the strong selection patterns observed in the insectivorous birds. The maneuvers, used for catching prey by S. budytoides changed seasonally (with more aerial maneuvers used and less use of gleaning maneuvers in autumn-winter, compared to the spring-summer seasons); probably due to the seasonal changes in the abundance and types of arthropods by the loss of foliage in P. flexuosa trees. The three bird species showed interannual variation in their searching movements, and S. griseicapilla also showed interannual variation in the type of capture maneuvers. Interannual variation in prey type and size could have determined the observed changes in the bird behavior. I did not observe differences at the spatial scale, since foraging behavior was similar in both habitats. The flexibility in some foraging behavior variables observed in the bird species studied in this thesis, provides information on the possible mechanisms that would allow these birds to maintain a strong selection for P. flexuosa trees as feeding site in central Monte desert.

"Comportamiento de alimentación del pingüino penacho amarillo del sur Eudyptes chrysocome y del pingüino de Magallanes Spheniscus magellanicus en Isla de los Estados, Tierra del Fuego, Argentina" (2016-08-22). Rosciano, Natalia Gimena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El comportamiento de alimentación y dieta de las aves marinas, en general, varía con la localidad, el sexo y el estadio del ciclo anual. Además, en una misma región pueden alimentarse distintas especies con requerimientos tróficos similares, aunque no podrían co-existir sin diferencias ecológicas (principio de exclusión competitiva). Así, estudiar la segregación inter- e intra-específica es relevante para entender la estructura y funcionamiento de estas comunidades. Dos especies de pingüino anidan en simpatría en Bahía Franklin, Isla de los Estados, el pingüino penacho amarillo del sur Eudyptes chrysocome (PPA) y el pingüino de Magallanes Spheniscus magellanicus (PM). El objetivo general de esta tesis fue estudiar las áreas de alimentación, las estrategias de búsqueda de alimento y el uso de la columna de agua y el nivel trófico durante distintas etapas del ciclo anual de dichas especies y sus diferencias inter- e intra-específicas. El estudio se realizó durante tres temporadas reproductivas (2011–2013), utilizando registradores con sensores de posicionamiento satelital, profundidad y temperatura, modelados en un sistema de información geográfico e isótopos estables. Los PM mostraron leves diferencias entre sexos en su comportamiento de buceo y una gran superposición en las áreas del mar utilizadas para alimentarse. También se registró variabilidad inter-anual en el comportamiento alimentación y el nivel trófico de la especie, aunque no se reflejó en una menor supervivencia de los pichones. Por su parte, las hembras de PPA mostraron segregación intra-específica en la población, utilizando distintas áreas de alimentación y zonas en la columna de agua, durante la etapa de cuidado temprano de pichones. Durante la etapa de cuidado tardío, los análisis de isótopos estables de PPA mostraron un comportamiento de aprovisionamiento selectivo, siendo los pichones alimentados con presas de mayor calidad energética que las que ingieren sus padres; aunque no se observaron diferencias en las áreas utilizadas por los adultos para auto-aprovisionamiento y aprovisionamiento de los pichones. Los nichos isotópicos de ambas especies mostraron una fuerte segregación inter-específica durante la etapa de cuidado temprano, reduciendo la competencia durante esta etapa, en la que están restringidos a explotar recursos dentro de un área limitada. Las hembras de PPA se alimentaron en un nivel trófico menor y en aguas abiertas en comparación con los PM, que se alimentaron en un nivel trófico mayor y en aguas costeras. Fuera de la temporada reproductiva, durante el viaje de pre-muda, se mantuvo la segregación inter-específica en las áreas utilizadas para alimentarse y el nivel trófico, prevaleciendo las diferencias ecológicas observadas dentro la temporada de cría en el comportamiento de alimentación de ambas especies en esta localidad. Este estudio aporta aspectos novedosos sobre el comportamiento y la ecología trófica de las dos especies de pingüinos que viven en simpatría en Isla de los Estados. Además, resulta importante para comprender el funcionamiento del ecosistema marino del Atlántico Sudoccidental a través de sus predadores tope, y para realizar futuras acciones de conservación en el área de estudio, a través de la información sobre las áreas de importancia para los pingüinos en la región.

Abstract:
Foraging behavior and diet of seabirds, in general, varies with locality, sex and the life stage. Also, different species with similar trophic requirements can feed in the same region, though they could not co-exist without ecological differences (principal of competitive exclusion). Studying the inter- and intra-specific segregation is relevant to understand the structure and functioning of this communities. Two penguin species nest in sympatry in Bahia Franklin, Isla de los Estados, southern rockhopper penguins Eudyptes chrysocome (RHP) and Magellanic penguins Spheniscus magellanicus (MP). The general objective of this thesis was to study the foraging areas, search for food strategies, the use of the water column and trophic level during different stages of the annual cycle of the species mentioned and their inter- and intra-specific differences. The study was carried on during three breeding seasons (2011-2013) using devices with GPS, depth and temperature sensor, modelling in geographic information system and stable isotopes. MP showed small differences between sexes in their diving behavior and great overlap in the foraging areas at sea. Even though they showed inter-annual variability in the foraging behavior and the trophic level, it was not reflected in a smaller survival of the chicks. On their behalf, female RHP showed intra-specific segregation in the population, using different foraging areas and zones in the water column, during the early chick rearing period. During the late chick rearing period, stable isotope analysis on RHP showed a selective provisioning behavior, being the chicks fed with higher quality prey type than their parents; though no differences were found in the foraging areas used for adult self-provisioning and chick provisioning. Isotopic niche of both species showed a strong inter-specific segregation during early chick rearing period. Female RHP fed on a lower trophic level and off-shore compared to MP that fed at higher trophic leve coastal areas. Outside the breeding season, during the pre-molt trip, the inter-specific segregation in the foraging areas and trophic level was maintained, suggesting that the ecological differences observed in the foraging behaviour during the breeding season prevailed on this location. This study shows novel aspects of the behavior and trophic ecology of the two species of penguins that live in sympatry on Isla de los Estados. Also, it is important to understand how the South-Atlantic marine ecosystem works though their top predators and for future conservation actions regarding marine protected areas for penguins in the region.

"Comportamiento de búsqueda de alimento del Cormorán Imperial (Phalacrocorax atriceps): caracterización, consistencias individuales y factores determinantes" (2014). Harris, Sabrina Evelyn. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudió el comportamiento de búsqueda de alimento del Cormorán Imperial (Phalacrocorax atriceps) en la colonia de Punta León (42°05´S; 64°30´O) utilizando sistemas de posicionamiento global (GPS). A partir del análisis de diversos parámetros de los viajes de alimentación de individuos reproductores se distinguieron cuatro tipos de búsqueda. Se evaluó la consistencia que presentan los individuos en diversos parámetros de sus viajes entre días sucesivos, entre períodos y entre temporadas reproductivas, siendo en general más alta a menores intervalos de tiempo y menor a largo plazo. A su vez, al comparar los viajes de alimentación de individuos que se reproducían por primera vez con aquellos con experiencia, los machos sin experiencia reproductiva difirieron de aquellos que se habían reproducido anteriormente. Se registraron diferencias en el comportamiento de búsqueda de alimento entre aquellos que consumieron presas bentónicas y pelágicas, a partir del análisis de isótopos de carbono y nitrógeno. Por último, se describió el comportamiento de los individuos a lo largo del año a partir del uso de dispositivos de geolocalización (GLS). La consistencia en el comportamiento y la especialización en un tipo de presa particular por parte de los individuos podría estar reflejando una disponibilidad de recursos estable a largo plazo, pero también podría eventualmente disminuir la plasticidad que dichos individuos serían capaces de desarrollar frente a cambios en el ambiente.

Abstract:
Foraging behavior of Imperial Shags (Phalacrocorax atriceps) breeding at Punta León colony (42°05´S; 64°30´W) was analyzed with Global Positioning System (GPS) devices. Four types of prey search behavior were distinguished using several parameters of the foraging trips of breeding individuals. Consistency in foraging behavior was evaluated for the same individuals on successive days, between periods within the season and amongst years and consistency was highest for most parameters within short intervals of time than on longer intervals. Individuals breeding for the first time were compared with individuals with breeding experience and males without breeding experience differed in their prey search behavior from their experienced counterparts. Differences in some foraging trips parameters were associated with benthic and pelagic diets, evaluated through carbon and nitrogen stable isotope analysis. Behavior of individuals was assessed throughout the year with the use of Geolocation Light Sensors (GLS). Behavioral consistency and dietary specialization may reflect long term environmental stability and prey abundance, but may also eventually reduce the plasticity individuals are able to develop if the environment changes.

"Comportamiento de hidroxipropilmetilcelulosas y sus mezclas con ß-lactoglobulina en solución, interfases y emulsiones" (2010). Camino, Nerina Andrea. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo del presente trabajo fue estudiar la funcionalidad de hidroxipropilmetilcelulosas y sus mezclas con beta-lactoglobulina en coloides alimentarios. Los estudios realizados muestran que estos polisacáridos en solución presentan un comportamiento complejo que se manifiesta en la asociación/autoensamblaje mediado por interacciónes hidrofóbicas y modulado fuertemente por el pH, como tambien por la concentración y la temperatura. A pH3 la asociación/autoensamblaje de hidroxipropilmetilcelulosas se ve impedida en solución. El grado de asociación/autoensamblaje tambien puede modificarse por la aplicación de ultrasonidos de lata intensidad, impactando en algunas propiedades físicoquímicas de las celulosas. En la interfase aceite/ agua, las hidroxipropilmetilcelulosas, especialmente las de bajo peso molecular, presentan una importante actividad, la cual está modulada tambien por el pH. Las hidroxipropilmetilcelulosas presentan buenas propiedades emulsificantes a ambos pH. En las mezclas con beta-lactoglobulina se observa la misma tendencia con la variación del pH y la concentración de los biopolimeros en las mezclas. Existe distinta interacción entre ellos lo cual afecta su comportamiento en solución y en los coloides estudiados. Asi, el conocimiento y la caracterización de estos biopolimeros permitiran la manipulación de propiedades macroscopicas de productos alimenticios, controlando las interacciónes de un modo deseable, logrando asi la optimización en el uso de los ingredientes.

Abstract:
The objective of the present work was to study the hydroxypropylmethylcelluloses and their mixtures with beta-lactoglobulin in food colloids. The studies showed that these polysaccharides have a complex behavior in solution, leading to self-assembled structures by hydrophobic interactions, strongly modulated by pH, but also by polysaccharide concentration and temperature. Particularly at pH3, the hydroxypropylmethylcelluloses self-assembly would be impeded. The self- assembly degree could also be modified by the application of highintensity ultrasound that impacted in some physico-chemical properties. At the oil-water interface, the hydroxypropylmethylcelluloses, especially those with low molecular weight, showed a high interfacial activity also modulated by pH. Good emulsifying activity was observed for all the hydroxypropylmethylcelluloses at both pH. The same was observed in the mixtures with beta-lactoglobulin as affected by pH and concentration of componenets. The different interactions observed affected their behavior in solution and in food colloids (interfaces and emulsions). Thus, the knowledge and the characterization of these biopolymers would allow the manipulation of the macroscopic properties of food products and optimizing the use of these ingredients.

"Comportamiento de interfases y emulsiones submicrónicas estabilizadas por biopolímeros en simulaciones de procesos de digestión gastroduodenal in vitro" (2016-11-24). Bellesi, Fernando Alberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En años recientes un gran número de trabajos se han enfocado a estudiar la forma de reducir la elevada absorción de lípidos, asociada a numerosos problemas de salud, tales como obesidad y problemas cardiovasculares. Si bien las metodologías para abordar el tema son variadas, al ser la lipólisis una reacción interfacial (la lipasa debe adsorberse a la interfase para llevar a cabo la digestión de los lípidos), las interfases aceite/agua (tanto la estructura como el área interfacial) resultan un punto crítico a estudiar. Por tal motivo, el objetivo del presente trabajo consiste en evaluar el impacto que presentan diferentes estructuras interfaciales en el proceso digestivo con el propósito de encontrar aquella que retarde (o inhiba) la acción digestiva llevada a cabo por la lipasa pancreática. Se analizaron estructuras interfaciales y emulsiones estabilizadas por: proteínas (β-lactoglobulina (βlg) y aislado proteico de soja (SPI)) y polisacáridos (hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC)). Se desarrolló un modelo de digestión in vitro constituido por dos etapas: gástrica (1h, pH 2,5) y duodenal (1h, pH 7), que contemplan la presencia de las principales enzimas y biopolímeros a concentraciones fisiológicas. El estudio se realizó en dos niveles: (1) Estudios de digestión de interfases aceite/agua (tensiómetro interfacial de gota) para obtener información sobre cómo los fluidos característicos de la digestión perturban tales películas interfaciales, caracterizándolos mediante los parámetros: tensión interfacial y módulo dilatacional interfacial; (2) Estudios de digestión de emulsiones estabilizadas por los mismos emulsionantes obtenidas mediante la técnica de ultrasonidos de alta intensidad. Se analizaron los cambios microestructurales de las gotas de aceite (microscopía óptica y técnicas de dispersión de luz) y se monitoreó el porcentaje de ácidos grasos liberados (% AGL) por acción de la lipasa pancreática. Se comprobó que tanto las estructuras interfaciales como las emulsiones presentan diferencias en cuanto a la resistencia a la acción digestiva llevada a cabo por la lipasa. Estas vienen determinadas por la naturaleza de cada estructura y las características interfaciales de cada una. Las emulsiones estabilizadas por SPI y HPMC mostraron los menores % AGL en comparación con las emulsiones de βlg. El comportamiento observado no presentó relación con el área interfacial expuesta a la lipasa, sino más bien a la capacidad que presenta cada emulsionante en dificultar la acción de las sales biliares (SB), agentes indispensables para la acción de la lipasa. De esta manera, los resultados permitieron identificar a las SB como un factor clave en la regulación del proceso. En términos generales, los resultados contribuyen al mayor entendimiento sobre los mecanismos involucrados en la digestión de emulsiones y del rol crucial que juegan las estructuras interfaciales en el control de la lipólisis.

Abstract:
In recent years an important number of works have been focused on modulating the lipid digestion, since the high lipid absorption has been associated with an important number of health problems, such as obesity and cardiovascular diseases. Although different methodologies exist to evaluate the lipolysis process that is an interfacial reaction (pancreatic lipase has to bind to the oil-water (o/w) interface), o/w interfaces (both structure and interfacial area) suppose a critical issue to study. So, the objective of the present work is to evaluate the impact of different interfacial structures in the digestion in order to find the interfacial film that could retard (or inhibit) the pancreatic lipase activity. Different interfacial structures and proteins (ß-lactoglobulin (ßlg) and soy protein isolate (SPI)) and polysaccharides (hydroxypropylmethylcelullose (HPMC)) stabilized emulsions were analyzed. An in vitro digestion protocol was developed consisting of two stages: gastric (1h, pH 2.5) and duodenal phase (1h, pH 7.0), in the presence of the main enzymes and biopolymers at physiological concentrations. The investigation was carried out at two levels: (1) interfacial digestion of the different interfacial films formed (using a pendant drop tensiometer) to understand the way the digestive fluids affect the interfacial films, thus analyzing the evolution of interfacial tension and the dilatational interfacial modulus; (2) analysis of the behavior of emulsion (formed by using ultrasound techniques) stabilized by each emulsifier under in vitro gastrointestinal digestion. The microstructural changes of the oil droplets (optical microscopy and light scattering techniques) were analyzed and it was also monitored the free fatty acid release (% FFA) due to the pancreatic lipase activity. Both the interfacial structures as well as the o/w emulsions showed different resistance to the lipolysis. These differences depended on the nature of the interfacial structure and the interfacial properties formed by the emulsifiers. SPI and HPMC stabilized o/w emulsions presented the lowest % FFA values in comparison to ßlg stabilized emulsions. No correlation did exist with the interfacial available area for the lipase adsorption. It was the capacity of the different emulsifiers to reduce the bile salts (BS) activity (essential molecules for the lipase activity) the reason of the existing differences. The results allowed to identify the BS as the key molecules in the lipolysis modulation. These results have contributed to a better understanding of the mechanisms affecting the digestion of the emulsions and the important role of the interfacial structures in the vitro lipolysis control.

"Comportamiento de la vicuña durante la temporada reproductiva" (1990). Vila, Bibiana Leonor. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Comportamiento de localización y patrones de explotación de hospedadores (Coleóptera: Scarabaeidae) por el moscardón cazador de abejas Mallophora ruficauda (Díptera: Asilidae)" (2003). Castelo, Marcela K.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El moscardón cazador de abejas, Mallophora ruficauda, es la plaga de la apicultura más importante de la región pampeana argentina. Durante el estado adulto es depredador de insectos como las abejas melíferas y durante el estado larvario es parasitoide de larvas de Scarabaeidae, comúnmente denominadas gusanos blancos del suelo. El objetivo de esta Tesis es estudiar aspectos básicos de la biología y ecología de esta especie, con especial énfasis en los mecanismos de localización y explotación de sus hospedadores. Particularmente, se estudia cuál es la contribución relativa de las hembras y de las larvas en estos procesos y cómo son los patrones de parasitismo resultantes. Mallophora ruficauda deposita los huevos en ootecas, las cuales son puestas en vegetación herbácea elevada y alambrados. Las hembras regulan el número de huevos por ooteca en función de la altura de oviposición en el sustrato, depositando más cantidad de huevos a medida que se incrementa la altura. Además, seleccionan fuertemente la altura de oviposición en el sustrato, la cual es l,25-1,50 m sobre la vegetación (principalmente sobre Carduus acanthoides) y l,00-l,25 m sobre los alambrados. Las larvas son dispersadas por el viento y este proceso sería clave para el encuentro del hospedador. La altura mínima de oviposición, estimada mediante un modelo de simulación, que asegura la segregación de las larvas y maximiza el éxito reproductivo del parasitoide es 1,25 m, y es coincidente con la selectividad determinada a campo en ambos sustratos. La temporada de oviposición de M. ruficauda tiene una duración de 80 días. Las ootecas poseen 327,7 huevos en promedio y el período embrionario es de siete días. La fertilidad media es 96,2 % y no es afectada por fenómenos negativos de denso-dependencia. La larva de M. ruficauda es capaz de localizar activamente a su hospedador dentro del suelo usando información quimica, y la respuesta de orientación esta mediada por claves originadas en el intestino posterior del gusano blanco. Los gusanos blancos son capaces de detectar a los coespecíficos a través de una señal química que sería la misma que la usada por las larvas de M ruficauda para localizar a sus hospedadores. Las larvas parasitoídes que se encuentran superparasitando a un hospedador no evitan a sus coespecíficos y no se movilizan a otro hospedador libre de larvas. Mallophora ruficauda parasita a siete de las nueve especies de gusanos blancos que habitan en su área de distribución, con marcada preferencia hacia Cyclocephala signaticollis. Entre las especies de gusano blanco, C. signaticollis tiene mayor probabilidad de ser parasitada, incluso cuando individuos de otras especies se encuentran accesibles al parasitoíde. El porcentaje de parasitismo disminuye a medida que aumenta la densidad del hospedador, en las escalas espaciales más pequeñas que el radio de acción de los parasitoídes adultos. La denso-dependencia inversa hallada en el parasitismo sería explicada por el comportamiento de localización simultáneo entre hembras y larvas. Se observó que a escalas mayores que el radio de acción de los parasitoídes adultos, el patrón de denso-dependencia se diluye, y el parasitismo es independiente de la densidad del hospedador. Este fenómeno podría ser consecuencia de limitaciones de las hembras para detectar sitios de alta calidad de hospedadores. Mallophora ruficauda posee un limitado potencial como regulador de las poblaciones de gusanos blancos, sugiriendo que las acciones de control sobre sus poblaciones en los apiarios, traerían aparejadas limitadas consecuencias sobre la dinámica poblacional de sus hospedadores.

Abstract:
Mallophora ruficauda is the most important pest of apiculture in the Pampas region of Argentina. As an adult, it is a predator of insects like honey-bees and as a larva it behaves as a parasitoid of Scarabaeidae larvae, commonly known as white grubs. The aim of this Thesis was to study ecological and biological aspects of this species, setting the emphasis on both the host location and host exploitation mechanisms. Specifically it reports the results of studies on the relative contributions of females and larvae to these processes, and on the resulting patterns of parasitism. Mallophora ruficauda lays eggs in egg-clusters which are placed on tall grasses and wire fences. Females are able to regulate the number of eggs per egg-cluster according to oviposition height on substrates, laying a greater number of eggs when the height is increased. Furthermore, they select the oviposition height, which is 1.25-l.50 m on vegetation (mainly on Carduus acanthoides) and 1.00-1.25 m on wire fences. Larvae are dispersed by wind and this process would be key for host encounter. The minimum oviposition height, estimated by means of a simulation model, that secures maximal spread of larvae and hence maximizes the parasitoid fitness is 1.25 m, which is in agreement with the height selectivity measured in the field. The oviposition season of M. ruficauda has a duration of 80 days. Egg-clusters have 327.7 eggs in average and egg development takes seven days. Mean fertility is 96.2 % and is not affected by negative density dependence phenomena. Mallophora ruficauda larvae are able to actively locate its host underground, using chemical information and the orientation response is mediated by cues originated in the hindgut of the white grub. White grubs are able to detect conspecifics through chemical signals that would be the same that those used by the larvae of M. ruficauda to locate hosts. Parasitoid larvae superparasiting a host do not avoid conspecifics and do not move to another healthy host. Mallophora ruficauda parasites seven out of nine species of white grubs present within its distribution area, with a remarkable preference towards Cyclocephala signalicollis. Among white grub species, C. signaticollis has the highest probability to be parasitized, even when individuals of other species are available to parasitoids. The percentage of parasitism decreases when the host density increases, at spatial scales lower than the home range of adults. Inverse density dependent patterns observed may be explained by the host location behavior performed simultaneously by females and larvae. It was observed that at spatial scales higher than the home range of adult parasitoids, the density dependence pattern is diluted, and parasitism is independent of the host density. This may be a consequence of the constraints of females to detect sites with high host quality. Mallophora ruficauda has a limited potential a regulating agent of white grub populations, suggesting that the control actions againts M. ruficauda populations in apiaries bring minimal consequences on the host population dynamics.

"Comportamiento del plomo, talio y tungsteno en la primera división de cationes : Estudio cuantitativo de su separación" (1941). Jáuregui, Pedro José. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Comportamiento dinámico y problema del diseño de etapas amplificadoras de láseres de colorantes orgánicos" (1985). Hnilo, Alejandro Andrés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Comportamiento exploratorio en el cangrejo Chasmagnathus granulatus : habituación y aprendizaje apetitivo" (1991). Dimant, Beatriz. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Comportamiento fotoquímico del carbazol, N-acetil carbazol y N-benzoíl carbazol en solución, en presencia de halometanos" (1995). Bonesi, Sergio Mauricio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Comportamiento hidrogeológico-hidroquímico del acuífero pampeano en la Cuenca inferior del Río Carcaraña, Provincia de Santa Fe" (2001). Fresina, Mirta Elida. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo de Tesis, se encara el estudio de la evolución hidroquímica creciente de las aguas freáticas de la cuenca inferior del río Tercero - Carcarañá desde las posibles áreas de recarga a la de descarga. Para tal fin se analizaron y establecieron los parámetros, que permitieron subdividir la Cuenca inferior en cuatro Sub-cuencas respondiendo a una litología, hidrología y química. Para la realización del trabajo se partió de la interpretación cartográfica que permitió complementar la información geomorfológica existente, además de establecer el diseño de la red hidrográfica y poder definir la división del area considerada en Sub-cuencas. Se individualizaron los suelos presentes en la región y sus usos tanto actuales como potenciales. En base a datos climatológicos de 90 años se determinaron los tipos de clima, se evaluó el escurrimiento superficial y se calculó la infiltración a partir del Balance Hídrico. El estudio textura], mineralógico y químico de siete perfiles permitió conocer detalladamente las caracteristicas los sedimentos pampeanos, en los cuales se aloja el acuífero libre. Por último se realizó un análisis hidrodinámico e hidroquímico del acuífero freático comprobando estadísticamente las relaciones presentes entre iones. Los estudios anteriores permitieron individualizar cuatro Sub-cuencas superficiales, delimitadas por las divisorias y que presentan ligeras variaciones de clima, distintos tipos de suelos y diferentes pendientes topográficas; estas Sub-cuencas superficiales coinciden con cuatro zonas con distinta hidrodinámica, en donde la calidad química del agua subterránea presenta notorias diferencias. A su vez se estableció un orden de ponderación en la participación de las variables fisicoquímicas, en la sensibilidad del sistema. De esta manera, se verificó que, cuando la pendiente de la llanura es inferior al 0.55 ‰,actúan principalmente los parámetros fisicos de desplazamiento vertical del agua, infiltración (I), precipitación (Pp), evapotranspiración real (EvR) y cuando la pendiente topográfica supera el 0.55 ‰ comienzan a actuar los parametros físicos con tendencia al desplazamiento horizonta del agua, escurrimiento superficial (Es), gradiente subterráneo (G.S), velocidad efectiva (Ve), pendiente topográfica (Pte). Así, las cuencas en donde predominan las variables fisicas de actividad horizontal sobre las de actividad vertical, presentan mejor calidad química en el agua subterránea, que a la inversa. Las cuencas en donde predominan tanto las variables físicas de actividad horizontal como las variables físicas de actividad verticales, tienen la mejor calidad química. Las cuencas en donde no predominan ningua de las variable físicas, ni de actividad horizontal ni vertical, tienen la mala calidad química.

Abstract:
The following doctoral paper concerns the study of the increasing hydrochemical evolution of the freatic waters of the lower basin of the Tercero- Carcarañá River from the possible area of refilling to that of the refill itself. To that aim, parameters were established and analyzed in order to subdivide the lower basin into four sub-basins according to certain lithography, hydrology and chemistry. In order to perform this task, the starting point considered was the cartographic interpretation which allowed to complete the already existing geomorphologic information, apart from allowing for the mapping of the hydrographic net and to be able to define the division of the areas considered under sub-basins. The soil surfaces present in the region were individualized as well as their present and potential uses. Based on 90- year climatology data, kinds of weather were determined, superficial oozing was evaluated and the infiltration as from the Hydro. Balance was estimated. The textural, mineralogical and chemical 7- profile study made it possible to know in detail the characteristics of the Pampean sediments, in which the free aquifer is located. Lastly, a hydrodynamic and hydrochemical analysis of the freatic aquifer was made statistically checking the present relationships among ions. The above mentioned studies allowed us to individualize four superficial sub-basins, limited by divisor lines and which present slight variations in weather, different kinds of soil and different topographic slopes; these superficial sub-basins coincide with four areas of different hydrodynamics, in which the chemical quality of underground water shows notorious differences. At the same time, a weighting order was established in the participation of the physical chemical variables in the sensitivity of the system. In this way, it was verified that when the slope of the plain is lower than 0,55 ‰ the main determiners are the physical parameters of vertical moving of the water, infiltration (I), precipitation (Pp), real evapotransportation (EvR) and when the topographic slope is higher than 0,55 ‰ the physical parameters beginning to act tend to horizontal moving of the water, superficial moving (Es), underground gradient (S G), effective velocity (E V) and topographic slope (Pte). In this way, those basins in which physical variables of horizontal activity prevail over those of vertical activity present better chemical quality in underground water than in the opposite case. Those basins, in which both physical variables of horizontal activity as well as physical variables of vertical activity prevail, possess the best chemical quality. Those basins in which neither of the physical variables predominate- that is- neither horizontal nor vertical activity- present bad chemical quality.

"Comportamiento no-lineal de Polímeros a altas frecuencias" (1996). Goyanes, Silvia Nair. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El trabajo de tesis doctoral realizado puede dividirse fundamentalmente en 3 partes: a) Se diseño y construyó un dispositivo experimental capaz de caracterizar la respuesta dinámica de un material polimérico para temperaturas entre ambiente y 480 K. La importancia del mismo consiste en que permite medir la respuesta del material a 50 kHz, cuando se lo somete a deformaciones entre 10ˉ7 y 10ˉ4. Su frecuencia de trabajo así como el rango de deformaciones son muy diferentes a los de los equipos disponibles comercialmente. Consecuentemente la información que brinda es prácticamente única en la literatura. b) Se observó por primera vez que, en los polímeros del tipo Vinil la fricción interna y los módulos elásticos dependían de la amplitud de deformación para deformaciones tan bajas como 10ˉ5. Se calculó el tipo de dependencia de la fricción interna con la amplitud de deformación que predecía cada uno de los modelos fenomenológicos, usuales en la literatura, en los que se considera una relación no lineal entre la tensión aplicada y la deformación producida. Se demostró que el único capaz de describir los resultados presentados en este trabajo, es el de Ree - Eyring. Los parámetros obtenidos de los ajustes de los datos experimentales por este modelo, dieron información acerca de los micromecanismos que controlan la dependencia con la amplitud de deformación. c) Se desarrolló un modelo molecular basado en analogías topológicas con dislocaciones del tipo de Somigliana. Dicho modelo permitió analizar los resultados de la zona dependiente de la amplitud de deformación, en función de parámetros moleculares conocidos. La importancia del desarrollo de este modelo radica no sólo en que éstos son escasos en la literatura sino en que además permite visualizar claramente los mecanismos que generan la dependencia de la fricción interna con la amplitud de deformación.

Abstract:
This Doctoral Thesis can be separated in three parts: a) An experimental apparatus able to characterize the dynamical behavior of polymeric materials was designed and constructed. This device can be operated between room temperature and 480 K, at a frequency of 50 kHz and in a strain range of 10-7 to 10-4. Both its work frequency and strain range are quite different from those of commercially available equipment. Therefore, the information it provides is practically unique in literature. b) It was observed, for the first time, that the internal friction and elastic moduli depend on strain amplitude even for strains as low as 10-5, for polymers of the vinyl type. The internal friction dependence with the strain amplitude was calculated for each non-linear phenomenological model found in literature, where it is considered a non-linear relationship between the applied stress and the obtained strain. It was shown that the Ree-Eyring model is the only one able to describe the results of this work. The parameters obtained from the fitting of the experimental data to this model give information about the micromechanisms which determine the internal friction and elastic moduli dependence with the strain amplitude. c) A molecular model, based on topological analogues with Somigliana dislocations, was developed. This model permitted to analyze the results from the amplitude-dependent strain zone as a function of known molecular parameters. The importance of the development of this model lays not only in the fact that they are scarce in literature, but also they allow a clear visualization of the mechanisms that produce the dependence of the internal friction on the strain amplitude.

"Comportamiento recolector de la abeja Apis mellifera en cultivos comerciales: estudios descriptivos y evaluación de herramientas que mejoran su eficacia como polinizador" (2015-04-01). Susic Martín, Cinthia S.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta Tesis se estudiaron aspectos del comportamiento recolector de la abeja Apis mellifera vinculados con el rendimiento de diferentes cultivos agrícolas. Estos estudios abarcaron la descripción de la conducta de la abeja en campos de girasol Helianthus annuus (L.) cultivados para producir semilla híbrida (girasol-semilla) y la evaluación de los efectos de formulaciones sintéticas aplicadas en colmenas que se utilizaron para la polinización de cultivos de girasol-semilla, de manzana Malus domestica (L.) y de pera Pyrus communis (L.). El comportamiento recolector de la abeja melífera en cultivos de girasol-semilla fue estudiado en campos con líneas parentales macho fértil (MF) y macho estéril (ME) que presentaban distinto grado de variabilidad morfológica. En todos los casos evaluados, las abejas mostraron una marcada constancia por visitar inflorescencias del mismo parental, conducta que disminuye su potencialidad para transferir polen desde las líneas MF hacia las ME. Este comportamiento fue aun más marcado en cultivos cuyos parentales presentaron acentuadas diferencias morfológicas. Los resultados obtenidos sugieren que en campos con parentales dimórficos la transferencia de polen tiene lugar en las colmenas por medio de contactos corporales entre abejas ubicadas en la entrada del nido. Estos individuos facilitarían el intercambio de polen entre las abejas que retornan y las que parten a recolectar. También se estudió el efecto de herramientas tendientes a mejorar la eficiencia polinizadora de la abeja melífera. Para ello se evaluó el uso de formulaciones sintéticas que imitan olores florales en colmenas utilizadas para polinizar cultivos de las tres especies agrícolas previamente mencionadas. Se aplicó Facilitador Girasol (FG) en colmenas ubicadas en cultivos de girasol-semilla. Las colmenas tratadas con FG presentaron mayores niveles de actividad que las colmenas control, tanto en el número de abejas ingresantes como en la densidad de abejas en el cultivo adyacente a las mismas. El rendimiento informado por cosechadoras con sistema GPS evidenció aumentos de al menos un 25% en los lotes aledaños a las colmenas tratadas. En colmenas situadas en cultivos de manzana se aplicó el Facilitador Manzana (FM), y su utilización incrementó el rendimiento en al menos un 15%. Esto se observó contabilizando los frutos por árbol en las cercanías de las colmenas tratadas y a partir del análisis de los datos de rendimiento proporcionados por el establecimiento en donde se desarrolló el estudio. Finalmente, en cultivos de pera se aplicó el Facilitador Pera (FP) en las colmenas utilizadas para realizar el servicio de polinización de los mismos. Se monitoreó la actividad, la recolección de polen y el desarrollo del área de cría de las colmenas, y el rendimiento final de los cultivos lindantes. La actividad de las colmenas tratadas con FP no difirió de la de las colmenas control. En las colmenas expuestas a FP, el peso de las cargas de polen fue significativamente superior al de las colmenas control, así como también el área de cría. Finalmente, el rendimiento obtenido contabilizando el número de frutos por árbol en las cercanías de las colmenas tratadas mostró un incremento promedio del 20%. Estos resultados permiten concluir que las estimulaciones cultivoespecíficas realizadas en colmenas de abejas melíferas promueven la actividad de este insecto en el campo, además de mejorar el estado sanitario de las colmenas e incrementar el rendimiento de los cultivos. Estos aspectos permiten considerar a estas estimulaciones como herramientas adecuadas para un sistema agrícola que debe ser cada vez más rentable, pero además sustentable y amigable con el medio ambiente.

Abstract:
In this Thesis we studied aspects of the honeybee foraging behavior that concern crop yield in different agricultural settings. We described its behavior in sunflower Helianthus annuus (L.) crops for hybrid seed production and studied the effects of synthetic mixes applied in hives used to pollinate sunflower hybrid seed crops, apple Malus domestica (L.) crops, and pear Pyrus communis (L.) crops. Studies on honeybee foraging behavior at sunflower hybrid seed crops were pursued at fields with Male Fertil (MF) and Male Sterile (MS) parental lines that showed variable dimorphism between them. Honeybees showed constancy on inflorescences within each parental, and therefore a decreased potential to transfer pollen from MF to MS lines. This behavior was even more persistent at fields whose parentals differed sharply. Our results suggest that at fields with dimorphic parentals the transfer of pollen occurs by means of body contacts between bees at the hive entrance. Individuals remaining at the hive entrance would enable pollen transference between incoming bees and those departing to forage. We also studied the effect of tools which tend to improve honeybee pollination efficiency. We evaluated the application of synthetic mixes that mimic flower odors in hives pollinating crops of the three previously mentioned agricultural species. We applied Sunflower Synthetic Mix (SSM) in hives located at sunflower hybrid seed crops. Activity in hives with SSM was higher both in terms of number of incoming bees and honeybee density in the crop. Yield revealed by GPS harvesters showed a 25% increase in crops adjacent to treated hives. We applied Apple Synthetic Mix (ASM) in hives used to pollinate apple crops, and recorded an increment of at least 15% regarding yield levels. This result was obtained by counting fruits at trees in the hives’ surrounding and analyzing final yield data provided by the farmers. Finally, at pear crops we applied Pear Synthetic Mix (PSM) in hives pollinating them. We recorded activity, pollen gathering and brood area in hives, as well as nearby crop yield. Activity in hives treated with PSM did not differ from control ones. Pollen load weight in PSM hives was significantly higher than in control ones, and the same was true for brood area. Finally, when we counted the amount of fruits per tree at the vicinity of the treated hives, we obtained a 20% increasing mean. Our results suggest that treatment of honeybee hives with crop-specific synthetic mixes promotes the activity of this insect in the field, improves hive health conditions and increases crop yield. As a result, these treatments should be considered appropriate tools within the context of an agricultural system which must be much more profitable as well as sustainable and environmentally friendly.

"Comportamiento reproductivo en dos especies de Otaridos de América del Sur" (1995). Cappozzo, Humberto Luis. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Este es un estudio del comportamiento reproductivo de dos especies de otáridos de América del Sur: el lobo marino peletero sudamericano, Arctocephalus australis, y el león marino del Sur, Otaria flavescens. La primer especie se estudió en la Isla de Lobos, Uruguay. El comportamiento reproductivo de los machos de esta especie se ve afectado por los recursos disponibles para la termorregulación presentes en sus territorios. Los machos que posean territorios con una ubicación desfavorable y sin recursos requeridos por las hembras, desarrollaron estrategias que involucraron el abandono y la posterior recuperación del territorio. Las hembras se movieron a través de los territorios, sugiriendo que podrian desarrollar una estrategia de apareamiento que implique copular con machos exitosos en territorios diferentes a los que parieron. El estudio del comportamiento reproductivo del león marino del Sur, se llevó a cabo en Punta Norte, Peninsula Valdés, Argentina. Esta es una loberia en la que los machos adultos defienden hembras en lugar de territorios. En estas condiciones, los machos maximizarian su éxito reproductivo defendiendo en forma selectiva aquellas hembras que se encuentran próximas al estro. Por su parte, las hembras podrian ejercer algún tipo de elección del macho con el que se aparean cambiando de macho antes de parir y apareándose con más de un macho durante el estado de máxima receptividad sexual. Las crias de esta especie presentan diferencias entre los sexos en el peso y la longitud estándar al momento de nacer. Esto sugiere que las madres podrian estar realizando una inversión en la progenie sesgada hacia los machos durante la gestación. Sin embargo, no existieron diferencias relacionadas al sexo de la cria en la duración de los periodos de alimentación y la permanencia en tierra de las madres. Tampocohubo diferencias ligadas al sexo de las crias en el tiempo que las madres asignaron a amamantarlas, interactuar con éstas y permanecer inactivas en la loberia. La adopción es un fenómeno muy poco frecuente en esta especie y podría estar relacionado con errores en el reconocimiento y en la identificación de la hembra. Los resultados obtenidos sugieren cierta plasticidad en el comportamiento reproductivo de ambas especies estudiadas. Los factores meteorológicos y la topografía del área de reproducción determinarian el grado y la forma de poliginia. Surgen comotareas para el futuro la aplicación de técnicas genéticas sofisticadas, como la determinación de paternidad a través del estudio del ADN, o el seguimiento de la diada madre cria para estudiar la inversión progenitora durante todo el periodo de lactación.

"Comportamiento reproductivo en la Mosca del Mediterráneo, Ceratitis capitata (Díptera: Tephritidae) y su aplicación en programas de Control Genético" (2001). Calcagno, Graciela Elena. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La mosca del Mediterráneo, Ceralitis capirata (Wiedeman), constituye una de las plagas de los frutales de mayor importancia en el mundo por los graves perjuicios económicos que produce. En la actualidad la prosperidad de una región fruti-horticola depende principalmente de que pueda ser declarada zona libre de la mosca del Mediterráneo. Un método no contaminante para su control es la técnica del insecto estéril (TIE), este está siendo aplicado con éxito en algunas regiones de nuestro país. La eficiencia de esta técnica depende de la capacidad de los machos esterilizados, producidos por cría masiva, para aparearse en el campo con hembras salvajes. Por ello el análisis del comportamiento sexual de esta especie es fimdamental para establecer controles de calidad de las líneas a ser utilizadas en la TIE. El presente trabajo se refirió al análisis del comportamiento reproductivo y la selección sexual en la mosca del Mediterráneo. Se comparó el comportamiento reproductivo de líneas de cría masiva de C. capitala con el de las moscas salvajes. Asimismo se analizó el efecto que produce la radiación sobre dicho comportamiento. Esto se hizo en dos condiciones experimentales: a) En condiciones seminaturales por observación directa en jaulas de campo y b) En condiciones simuladas en laboratorio, por observación fina a través de videograbaciones. Se verificaron diferencias entre líneas en cuanto al patrón de comportamiento en el cortejo. Los machos de laboratorio tendieron a usar menos tiempo que los salvajes en actividades que no conducen directamente a la cópula. Como consecuencia, hay una tendencia de las líneas de laboratorio a alcanzar la cópula antes que las salvajes en condiciones de laboratorio. Por otro lado, se observó una disminución de la eficiencia de las moscas irradiadas en su capacidad para competir por el aparcamiento tanto en laboratorio como en jaulas de campo.

Abstract:
The Mediterranean fruit fly (medfly), Ceratitis capitata (Wideman), is one of the most important world wide pest of commercial orchards, causing severe economical damages. Nowadays the prosperirty of a production areas is highly dependent of it could get the status of medfly free zone. The sterile insect technique (SIT) is a non-contaminating method currently applied in Argentina for medfly control. The efficiency of this technique depends on the ability of mass-reared and sterilized males to mate wild females in the field. Consequently, the analysis of sexual behavior in this species is paramount to set quality control procedures to test the strains used in SIT programmes. This work dealt with the analysis of mating behavior and sexual selection in the medfly. Mating behavior was compared between mass-reared strains and wild flies. Two experimental conditions were used: a) Semi-natural conditions, through direct observations in field cages, and b) laboratory simulated optimal conditions, through video-recording fine observations. Differences in courtship behavior were verified between strains. Usually laboratory males spend less time in activities that do not lead to copulation than wild males do. Consequently, laboratory strains tend to reach copulation before than wild males in laboratory conditions. By contrast, the efficiency of radiation sterilized laboratory males is lower than that of wild males in laboratory and field cage conditions.

"Comportamiento sexual y comunicación intraespecífica en la vinchuca, Triatoma infestans" (1997). Manrique, Gabriel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se analizó el comportamiento sexual y el papel de las señales olfativas y vibratorias en la comunicación intraespecífica de la vinchuca Triatoma infestans. Se distinguieron diferentes tipos de comportamiento de rechazo realizados por la hembra frente a los intentos de cópula del macho, concluyéndose que la receptividad de la misma es un factor de importancia que afecta el éxito de la cópula en esta especie. Se presentan evidencias comportamentales y electrofisiológicas que apoyan la existencia de una señal química sexual producida durante el aparcamiento, la cual promueve la agregación de machos en torno a una pareja en cópula. La respuesta de orientación de los machos hacia la pareja en cópula, ocurriría por un gradiente químico y no a través de una respuesta anemotáctica. Se demostró que el canal vibratorio es utilizado para la comunicación intraespecífica en T. infestans, ya que las señales vibratorias producidas por la hembra no receptíva fueron altamente efectivas en rechazar al macho que intenta aparearse. Las estridulaciones realizadas en un contexto defensivo difirieron de las de rechazo de la cópula en: duración de las sílabas, tasa de repetición y frecuencia portadora principal. Se sugiere que las estridulaciones por perturbación estarían relacionadas con el rechazo a depredadores.

Abstract:
The sexual behaviour and the role of olfactory and vibratory signals in the intraspecific communication of the blood-sucking bug Triatoma infestans, was analyzed. Different kinds of female rejection behaviour in response to male copulatory attempts were distinguished, demonstrating the importance of female receptivity as a factor affecting copulation success in this species. We present behavioural and electrophysiological evidences that support the existence of a chemical sex signal produced during mating, which promotes the aggregation of males around the mating couple. The orientation response of the males towards the mating couple would occur by way of a chemical gradient, but not through an anemotactic response. We demonstrated that the vibratory channel is used in intraspecific communication in T. infestans, since the vibratory signals produced by a non-receptive female were highly effective in rejecting the male copulatory attempts. The stridulations performed in a defensive context differed from male-deterring stridulations in: syllable duration, repetition rate and main carrier frequency. We suggest that disturbance stridulations would be shaped to deter predators.

"Comportamiento singular de las amplitudes de scattering en el límite colineal" (2014-09-03). Sborlini, Germán Fabricio Roberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Actualmente los grandes aceleradores de partículas permiten obtener resultados experimentales muy certeros. Como máximo ejemplo tenemos el LHC, que recientemente descubrió una nueva partícula con propiedades compatibles con las correspondientes al bosón de Higgs. Para poder comprender mejor la naturaleza de dicha partícula, así como también otros fenómenos en el área de física de altas energías, se está realizando un gran esfuerzo para mejorar las mediciones experimentales. Es por ello que las predicciones teóricas deben tener una precisión acorde, de forma tal de poder realizar una comparación relevante entre los modelos disponibles y los datos experimentales. Trabajando desde la perspectiva teórica, la principal motivación de esta tesis fue el estudio de métodos que permitan efectuar cálculos precisos en el contexto de teoría de perturbaciones aplicada al modelo estándar. En particular, nos restringimos al análisis de los límites colineales de amplitudes de scattering en teorías de gauge a next-to-leading order (NLO). Los teoremas de factorización establecen que, en ciertas configuraciones cinemáticas generales, es posible caracterizar de forma universal el comportamiento divergente de las amplitudes de scattering en el límite colineal. Este comportamiento es regido por las llamadas splitting functions o splitting amplitudes, que son los objetos de estudio centrales en este trabajo. Cuando se consideran correcciones a órdenes superiores es necesario tener en cuenta las contribuciones que involucran estados virtuales o loops, las cuales se asocian a integrales de Feynman. Por lo tanto, en la primer parte del trabajo, se estudiaron estos objetos y se exploraron algunos métodos de cálculo. Tras comentar los procedimientos estándar, nos centramos en el estudio de las identidades de integración por partes (IBP, por sus siglas en inglés) y en el método de ecuaciones diferenciales. Esta técnica permite reescribir las integrales de Feynman en términos de ecuaciones diferenciales acopladas de primer orden. Bajo ciertas circunstancias, es sencillo determinar las condiciones de contorno y resolver el sistema, lo que nos provee de un poderosa herramienta para tratar este problema. Por otro lado, también se analizaron las integrales tensoriales y técnicas de reducción que permiten expresarlas utilizando únicamente integrales escalares. El próximo paso consistió en estudiar los límites colineales de amplitudes de scattering mediante el cálculo de las funciones de splitting a NLO. Debido a que hay ciertas singularidades al momento de considerar estos límites, es necesario complementar la teoría con un método de regularización. A su vez, la implementación concreta de un método de regularización permite definir un esquema de regularización. Usando regularización dimensional (DREG), empezamos analizando como se manifiesta la dependencia con el esquema elegido al momento de calcular las funciones de splitting en el límite doble colineal. Ello nos llevó a adentrarnos en las definiciones y convenciones de DREG, así como también a introducir partículas artificiales (esto es, los gluones escalares) para conectar los diversos esquemas usando argumentos físicos. Tras investigar el límite doble colineal, procedimos al cálculo de las funciones de splitting a NLO para el caso en el cual tres partículas se vuelven colineales. Se trata de resultados que son cruciales para llevar a cabo cálculos de secciones eficaces hadrónicas a órdenes superiores. De hecho, muchos métodos de cálculo y simuladores aprovechan las propiedades del límite colineal para dar resultados aproximados de observables de interés experimental. En concreto, en este trabajo nos limitaremos a presentar las funciones de splitting para procesos que involucren al menos la presencia de un fotón. Apelando a las técnicas de reducción tensorial estudiadas en la primer parte, se pudieron calcular los núcleos de Altarelli-Parisi polarizados, los cuales son esenciales para caracterizar el límite colineal cuando el estado intermedio es una partícula vectorial. Todos los resultados provistos en este trabajo revisten interés práctico en el contexto de la fenomenología de colisionadores hadrónicos, puesto que apuntan al fin último de mejorar la precisión de los cálculos teóricos. El conocimiento de las funciones de splitting colineal de orden superior es crucial para avanzar en la descripción de procesos multipartícula con niveles de precisión next-to-next-to-next-to-leading order (NNNLO) o incluso superior.

Abstract:
Singular behaviour of scattering amplitudes in the collinear limit Modern particle accelerators allow to obtain highly-accurate experimental results. As the summit example, we can consider the LHC, which recently allowed to discover a new particle whose properties are compatible with Higgs boson. In order to better understand the origin of this particle as well as many other phenomena in high-energy physics, a huge effort is being done to improve experimental measures. For this reason, theoretical predictions have to be done with a compatible accuracy level, since that is relevant to perform a comparison among available models and experimental data. Working from the theoretical point of view, the main motivation of this thesis is the study of methods to perform accurate computations in the context of perturbation theory applied to the standard model. In particular, we restrict ourselves to the analysis of the collinear limit of scattering amplitudes in gauge theories, up to next-to-leading order (NLO). The factorization theorems assert that, in some general kinematic configurations, it is possible to obtain a universal description of the divergent behaviour of scattering amplitudes in the collinear limit. This behaviour is controlled by the so-called splitting functions or splitting amplitudes, which are the main objects studied in this work. When higher-order corrections are considered, it is mandatory to take into account contributions that involve virtual states or loops, which are associated with Feynman integrals. So, in the first part of this work, this objects were studied and we explored some computational techniques. After describing standard procedures, we centered the discussion in the study of integration by parts identities (IBP) and the differential equations method. These techniques allow to rewrite Feynman integrals in terms of a coupled system of first-order differential equations. Under certain circumstances, it is easy to work out boundary conditions and to solve the system, which constitutes a powerful tool for treating this problem. On the other hand, we also studied tensor integrals and reduction techniques in order to express them using only scalar integrals. The following step was studying the collinear limit of scattering amplitudes through the computation of NLO splitting functions. Due to the existence of singularities when treating these limits, it is mandatory to complement the theory with a regularization method. Moreover, the particular implementation of a regularization technique defines a scheme. Using dimensional regularization (DREG), we started with the analysis of the scheme dependence in the computation of splitting functions in the double-collinear limit. This led us to deepen into the definitions and conventions of DREG, besides of introducing some artificial particles (i.e. scalar gluons) with the objetive of connecting different schemes through physical arguments. After investigating the double-collinear limit, we treated the computation of NLO corrections to splitting functions when three particles become collinear. These results are crucial to carry on the computation of hadronic cross sections at higher orders. In fact, many computational techniques and simulators take advantage of collinear factorization properties to obtain approximations of some experimentally relevant observables. In particular, in this work we limited ourselves to calculate splitting functions for processes involving at least one photon. Applying tensorial reduction techniques analyzed in the first part, we were able to calculate polarized Altarelli-Parisi kernels, which are essential to give a complete description of the collinear limit of processes with intermediate vector particles. All the results provided in this thesis have practical applications in the context of hadron colliders phenomenology, since they point to improve theoretical accuracy. The knowledge of higher-order splitting functions is crucial in order to move forward on the description of multiparticle processes at next-to-next-to-next-to-leading order (NNNLO) or even higher accuracy.

"Comportamiento social, uso de hábitat e impacto antrópico en el delfín gris Sotalia fluviatilis (Gervais, 1853) en Santa Catarina (Brasil) extremo austral de su distribución" (2016-05-23). Bazzalo, Mariel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La unidad de manejo poblacional más austral del delfín gris Sotalia guianensis (anteriormente denominado S. fluviatilis), en la Bahía Norte de la Isla de Santa Catarina, Brasil, se encuentra en el Área de Protección Ambiental de Anhatomirim (APAA), creada para la protección de este cetáceo. El estatus de la especie de acuerdo a la UICN era deconocido en los años del inicio de la esta tesis y en la actualidad se registra con datos insuficientes. El hábitat del delfín gris en dicha bahía se encuentra bajo la presión de acciones antrópicas desarrolladas por la importante población humana costera en la zona. Sobre la base de estudios preliminares se observó un cambio en la distribución en el uso del hábitat en el área de estudio. Esta investigación evaluó aspectos de abundancia y comportamiento del delfín gris, así como la influencia de variables ambientales y acciones antrópicas en la distribución de uso del hábitat. Entre los años 1996 y 2005 se realizaron recorridos en una embarcación en el área previamente zonificada empleando marcas del terreno. Una vez avistado el grupo de delfines se registraron cada 5 minutos la posición geográfica, la zona, la estructura y el comportamiento social. Se calculó la abundancia por diferentes índices. El uso del hábitat fue calculado a nivel zonal, en celdas de 0,25 km2 y por el método de Kernel, caracterizados a partir de las variables ambientales y acciones antrópicas. Entre los años 2002 al 2005 en total fueron registrados 175 avistajes en la margen oeste de la Bahía Norte, en 397 horas de esfuerzo de búsqueda y en 329 horas de observación directa; se avistó un único grupo en 95% de las salidas. La abundancia no presentó variación anual aunque tuvo una tendencia a aumentar en verano, y siendo las zonas EDC y BDA las de mayor abundancia. Los grupos más frecuentes estuvieron formados por 61 a 80 individuos (adultos, juveniles y crías); se encontraron principalmente en alimentación y desplazamiento, sin presentar variacion estacional, mientras que los comportamientos de socialización, reposo y nado errático fueron registrados en menos del 5% del tiempo. El uso del hábitat fue más frecuente en aguas playas de menos de 5 metros de profundidad, a menos de 1 km de la costa oeste, alejadas del área urbanizada y dentro del APAA. El modelo que explicó mejor las variaciones en el uso de hábitat dentro de las celdas incluyó cinco variables explicativas de manera individual: profundidad, distancia a la costa, distancia al área urbanizada, año, presencia del APAA, y la interacción entre estos dos últimos. Estos resultados sugieren que no existe una única variable ambiental que determina el uso de hábitat por parte de los delfines sino que depende de una combinación de factores que establecen una condición particular del hábitat. Al mismo tiempo, se evidencia la variación temporal en el uso. En relación a las acciones antrópicas, el modelo que explicó mejor las variaciones en el uso de hábitat incluyó todas las consideradas: contaminación, turismo de observación de delfines, maricultura y pesca artesanal, pero la interacción únicamente entre estas dos últimas. A partir del modelo de Kernel se pudo apreciar la gran superposición del hábitat principalmente con el turismo y la pesca artesanal. Estos resultados sugieren que el uso de hábitat por parte de los delfines depende de una combinación de efectos de las acciones antrópicas que pueden determinar el estado de conservación del hábitat. Estas acciones tienen un efecto sinérgico con el deterioro y la fragmentación del hábitat del delfín gris. Debido a que aún no existen datos suficientes para la conservación del delfín gris los resultados de este estudio sobre el comportamiento y el uso de hábitat en la unidad poblacional ubicada en el extremo de su distribución resultan de gran importancia para el manejo y conservación de la especie, principalmente por hallarse en un área de protección.

Abstract:
The southernmost population of the gray dolphin Sotalia guianensis (formerly S. fluviatilis ) inhabit in the ‘Bahía Norte’ zone, in the Island of Santa Catarina, Brazil, inside the area of Environmental Protection Anhatomirim (APAA in Portuguese), created for the protection of this cetacean. The species status was unknown whenthesis begun, but according to the IUCN is registered as ‘data deficient’. The anthropogenic actions of the coastal human population impact in the habitat use of this dolphin. Anthropogenic activities such as tourism, fishing, water contamination and aquiculture mussel have been proposed as important factors affecting the habitat use in preliminary studies. This research evaluates abundance, behavior, and the potential effects of anthropogenic actions on the distribution on the habitat use by the grey dolphin. From 1996 to 2005, surveys were conducted on a boat in the area previously zoned using landmarks. Once the group of dolphins was sighted, environmental variables were recorded and, every 5 minutes, also the geographical position, the zone, the social structure and group behaviour. Abundance was calculated for different indixes and models were used to predict the size of the groups. The habitat use was calculated at zonal level and cells as 0,25 km2 that were characterized by environmental varaibles and anthropogenic actions. Kernel analyses were used to analyze overlyaing between habitat use and any considered variable and activity. In totally were recorded 272 sightings of grey dolphin, meanwhile 175 sightings were recorded between 2002 to 2005 in 397 hours of research survey effort, and 329 hours of focal observation time, with only one sighting in the 95% of de surveys. Sightings were registered in shallow (<5 m), turbid (>90 cm) and warm waters (mean 22°C), similar for the same species in others bays. Abundance showed low variation in the time, but realtively higher in summer and the EDC and BDA zones. Most frequent group size included 61 to 80 adult, juvenile and calf individuals.The more frequent behaviors were feeding and bay travelling, whereas socialization, resting and erratic swimming were registered in <5% of total time. Habitat use was simoultaneously related to all five environmental variables: water deep, distance to seashore, distance to the urban zone, and APAA presence.Habitat use was more frecuent in shallow waters (<5 m deep), near to the West seashore (<1 km), but also away from urban zones, and also inside the APAA. It was related with time, decreasing in some zones (i.e. EDC) but increasing in others (i.e. BDA). Habitat use was also related to anthropogenic activities such eswater contamination, tourism activity, fishing, and aquiculture mussel farm. However, Kernel analysis showed that habitat use is particularly not ovelyaing with fishing and tourism. These activities could have synergic effects with fragmentation and deterioration of the grey dolphin habitat. The result of this study about behavior and the habitat use of this species in the southern distribution are important for management and conservation of this species in the AEPA.

"Composición de mezclas de glicéridos ricas en monoglicéridos - Influencia de las condiciones operatorias de obtención - Ensayos de acetilación" (1961). Rotsztein de Cymeryng, Fanny. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se presente una revisión acerca de los distintos procedimientos para la obtención de productos ricos en monoglicéridos de ácidos grasos. Se hace una discusión de las técnicas mencionadas en ls literatura que operan por glicerolisis de triglicéridos en presencia de distintos catalizadores y en sistemas homogéneos y heterogéneos. Se presente una información resumida acerca de la utilización de productos ricos en monoglicéridos y sobre la producción, propiedades y usos de las llamadas grasas acetiladas ("acetin fate"). Como contribución experimental se aborda la producción, en escala de laboratorio, de productos ricos en monoglicéridos de ácidos grasos saturados puros y de mezclas de monoglicéridos de ácidos monoetilénicos. Con este fin y tomando como base la técnica descriptiva por Mattil y Sims, se realizan los siguientes ensayos: OBTENCION DE ESTERES METILICOS PUROS DE LOS ACIDOS CAPRILICO, LAURICO, PALMITICO Y ARAQUIDICO. Se obtienen los esteres metílicos puros de los ácidos caprílico, láurico, palmítico y araquídico. Operando con ácidos técnicos, se esterifican con metanol y ácido sulfúrico como catalizador; los ésteres metílicos obtenidos se fraccionan por destilación en columna, en vacío variable según los casos. Se obtienen fracciones de destilación de por sí puras o que se redestilsn. Los productos finales se controlan en su pureza por determinación de algunas de sus constantes químicas y por cromatografía gas-líquido. GLICEROLISIS DE LOS ESTERES METILICOS. Se realizan las glicerolisis de los ésteres metílicos puros operando a 96-98 °C, en sistema homogéneo (piridina) y en presencia de metóxido de sodio como catalizador. Los productos brutos de glicerolisis se aislan por extracción con éter etílico luego de salificar con ácido clorhídrico el catalizador y la piridina. Tales productos se analizan, determinando principalmente sus valores de acidez libre y sus contenidos en l-monoglicéridos (Bohle y Mehlenbacher). Se ha podido establecer que, con esta técnica de preparación, los productos brutos de glicerolisis contienen entre 52,5 y 63,0 % de l-monoglicéridos y una acidez libre que varía entre 3,6 y 10,2 % (expresada en los ácidos respectivos). Los valores de acidez libre son función de la cantidad de catalizador presente. FRACCIONAMIENTO CON HEXANO TECNICO. Con el objeto de obtener productos de alta concentración en monoglicéridos y luego de considerar los antecedentes bibliográficos existentes, se resuelve proceder por cristalización fraccionada con hexano técnico de los productos brutos de las glicerolisis. Estos se disuelven por reflujo o a la temperatura ambiente (según los casos) en suficiente cantidad de hexano para obtener soluciones saturadas en esas condiciones, estacionando luego por 24 a 48 horas a las temperaturas de 20 o de 7°C, según el peso molecular del ácido considerado. Los insolubles obtenidos se analizan, habiéndose podido establecer que representan entre el 42,3 y el 67,4 % de los productos brutos de glicerolisis. Los contenidos en l-monoglicéridos de estos insolubles oscilan entre 83,3 y 94,6 %. Los l-monoglicéridos contenidos en los insolubles representan el 63 al 99% de los l-monoglicéridos de partida (en tres de los cuatro casos considerados estos valores fueron: 92,0; 95,8 y 99,3%). Los valores de acidez libre son nulos o despreciables. Los índices de acetilo y de saponificación coinciden con los valores teóricos correspondientes a los monoglicéridos puros, de lo que se deduce la presencia de 2-monoglicéridos. La temperatura de fusión de cada uno de estos monoglicéridos, solidificados previa fusión u obtenidos por recristalización de solventes, parece confirmar lo señalado en la bibliografía en el sentido de que las velocidades de transformación de las formas más inestables hacia las más estables, decrecen sensiblemente al aumentar el peso molecular del ácido. Por aplicación de la técnica de isomerización con ácido perclórico (Brokaw, Perry y Lyman) seguida de determinación de l-monoglicéridos, se confirma la existencia de 2-monoglicéridos en aproximadamente un 10% de los monoglicéridos totales, en las condiciones de equilibrio. GLICEROLISIS DE ESTERES METILICOS DE ACIDOS EN C20 _ 22 DE ACEITE DE NABO. Partiendo de los ácidos totales de un aceite de semilla de nabo fraccionados según Twitchell (Jabones de plomo en etanol), se aislan los ácidos "sólidos", que se transforman en sus ésteres metílicos y fraccionan por destilación en vacío. Se reúnen fracciones principalmente formadas por eicosenoato y docosenoato de metilo, que se someten a glicerolisis según el procedimiento anterior. Los productos brutos de glicerolisis se analizan y fraccionan por hexano. Los resultados obtenidos con ácidos monoetilénicos son similares a los observados con ácidos saturados puros. FRACCIONAMIENTO POR HEXANO DE UN MONOESTEARATO DE GLICERILO TECNICO DEL COMERCIO. Operando con un monoglicérido técnico del comercio obtenido por glicerolisis de un aceite vegetal parcialmente hidrogenado, se ensaya su enriquecimiento en monoglicéridos por cristalización en hexano. Luego de dos recristalizaciones se obtiene un producto con 80% de l-monoglicéridos (monoglicéridos % en el producto inicial: 36,5), con un valor de recuperación del 40% respecto de los monoglicéridos iniciales. El bajo rendimiento observado se atribuye a la complejidad del producto de partida, ya que su alto índice de iodo (73,8) indicaba que era muy rico en ácidos no saturados, sin duda monoetilénicos y constituidos por un gran número de isómeros de posición y por los respectivos isómeros geométricos cis-trans. ENSAYOS DE FORMACION DE ADUCTOS CON UREA A PARTIR DE MONOGLICERIDOS ACETILADOS. Operando con monoglicéridos puros acetilados de ácidos saturados en C8 a C2o se establece que tales productos no producen compuestos de inclusión con urea. Del mismo modo se comportan los monoglicéridos acetilados de ácidos monoetilénicos en C20 y C22.

"Composición del aceite de Eucaliptus citriodora procedente de Puerto Istueta, Gobernación de Misiones" (1951). Ragusa, Ricardo F.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Composición en ácidos grasos de ácidos esteáricos comerciales nacionales" (1955). Casal, María Nélida. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Composición química de aceites de oliva argentinos" (1946). Brenner, Ernesto G.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Composición química de aceites de oliva argentinos : composición química de un aceite de oliva elaborado con frutos cosechados en Ledesma, Provincia de Jujuy" (1946). Rooney, Heriberto A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Composición química de aceites de oliva argentinos : composición química de un aceite de oliva elaborado con frutos cosechados en la Provincia de La Rioja" (1946). Paladini, Ricardo A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Composición química de algunas plantas forrajeras de la zona Pampeana subhúmeda con relación a su ciclo normal y a distintos manejos" (1963). Laksman, Gerardo Mario. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La valoración de una planta forrajera depende dal volumen de forraje que produce por unidad de área y de su calidad. La determinación de la producción por unidad de superficie es relativamente sencilla, no asi la de la calidad forrajera, que está en función de la especie vegetal y de otras condiciones, como ambiente y manejo de la pastura, entre otras. La forma más simple de determinarla seria valorar la cantidad de carne o de leche o de lana producida con un volumen dado de alimento consumido. Las dificultades y limitaciones que se oponen a las valoraciones experimentales comparativas obligan, sin embargo, a determinaciones del valor forrajero por métodos indirectos. Cuando se creó el Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria, I.N.T.A., se habilitó en la Estación Experimental Agropecuaria de Pergamino, un Laboratorio dedicado a este tipo de trabajo. Fué asi que, conocidas las especies vegetales que mejor se comportan bajo las condiciones de pastoreo en Pergamino, que se dispuso la realización de un ensayo que ilustrara en forma comparativa sobre la calidad del forraje de esas especies mediante métodos indirectos de análisis quimicos. La experiencia abarcó el estudio de 18 especies y variedades de plantas forrajeras anuales y perennes, de gramineas y leguminosas, sembradas en 1961. La siembra conjunta se realizó en un suelo representativo de una amplia región del Partido de Pergamino. Este terreno estuvo sometido previamente a cultivos de sorgo y de vicia consociada con centeno. Su fertilidad media es representativa de los suelos de pequeñas explotaciones rurales donde se contemplan rotaciones con leguminosas y gramíneas anuales. El suelo, previo a la siembra, fué sometido a un barbecho estival de 2 1/2 meses. Las malezas se eliminaron a mano, durante los primeros tiempos, para evitar la competencia de ellos con las forraleras sembradas. Con prioridad a los cortes se realizaron las observaciones agronómicas de rigor. El material se cosechó usando guadaña como elemento cortante. La oportunidad del momento del corte se determinó así: si se trataba de estudiar la evolución de la composición química en función de la edad del vegetal, la cosecha se realizó en tiempos elegidos arbitrariamente; en tanto que los talados posteriores a los anteriores se hacian en las épocas en que los rebrotes correspondientes estaban en condiciones de ser pastoreados, es decir, cuando un chacarero procedería a echar sus animales para que hicieran pastoreo directo. Las muestras se guardaron en bolsas de polietileno y luego se mantuvieron a -10°C a -5°C en conservadora apropiada. El secado de las muestras se realizó en estufa a 100-110°C y la posterior molienda se hizo en molino forralero Shulman, a martillos locos. La muestra asi preparada y secada posteriormente se procesó químicamente. Las determinaciones de laboratorio fueron las correspondientes a los siguientes principios inmediatos: cenizas totales, extracto etéreo, celulosa bruta, proteína bruta, sílice, calcio y fósforo. Los resultados se procesaron según las indicaciones que permiten su introducción en la Computadora Electrónica Ferranti- Mercury. Como medida de localización se empleó la media y como medida de dispersión la desviación standard. Los resultados se procesaron según el test de Bartlett de homogeneidad de varianciaa. Cuando éste acusaba significancia al nivel de probabilidad del 5%, se hizo la transformación arco seno de la raiz cuadrada del porcentaje. En todos los casos se hicieron los correspondientes análisis de la variancia y cuando el test de la F de Fisher daba significación estadística se hacia el test de la delta de Tukey. Se calcularon los intervalos de confianza a los niveles de probabilidad del 5% y del 1%. Los nombres de las especies y variedades ensayadas, como asi mismo los correspondientes valores extremos hallados, figuran en la tabla adjunta. Los interrogantes planteados fueron los siguientes: TABLA l): En que medida varía la composición química de la planta, en distintas etapas de su ciclo vegetativo? 2): En que medida varía la composición quimica de los rebrotes sucesivos sobre la planta talada a distintas edades? 3): En que medida varía la composición química de las distintas especies entre si en relación a la edad de la planta y en relación a los rebrotes sobre el talado de plantas a distintas edades? 4): En que medida varía la composición quimica dentro de variedades correspondientes a la misma especie de cereales forrajeros, a través de la edad de la planta y de los rebrotes sobre plantas taladas a distintas edades? En forma general se comprueba que los cortes jóvenes poseen menor contenido de celulosa y mayor de proteína que los cortes posterieres. Cuando se introduce como variable el número de cortes previos, es decir al modificar el crecimiento normal del vegetal, se obtienen resultados dietintos, que pueden ser aprovechados en un manejo racional de las pasturas.- En términos generales, si el talado se realiza a edad temprana, el rebrote es de buena calidad y en muchos casos supera al corte de igual edad que no ha sufrido cortes previos. Para algunas instancias se comprueba que es necesario aumentar la precisión de la experiencia, lo que puede hacerse incrementando el número de tratamientos (cortes) de modo de aumentar el número de grados de libertad del error. Para algunas gramíneas un segundo rebrote a casi 4 meses de edad de la germinación presenta mayores valores de celulosa y menores de proteína que el corte de igual edad, que no ha sufrido talados previos.- Cuando las gramineas superan los 200-210 días proporcionan forrajes toscos, cualesquiera sea el número de cortes previos que se haya realizado.- Para las leguminosas perennes estudiadas, excepto el loto, el mayor número de cortes influye positivamente sobre la composición química, aumentando la calidad forrajera del pasto que proporcionan. No ocurre lo mismo con la vicia.- El contenido porcentual de cenizas totales tiende a disminuir con la edad, excepciones hechas de la festuca, del centeno Pico y del falaris bulbosa.- El contenido graso tiende a disminuir cuando aumenta la edad del forraje. La excepción más notable corresponde a la cebada Bordenave Banquelina.- La sílice tiende a acumularse, salvo para vicia (no hay datos) y centeno Pico.- El calcio tiende a disminuir su concentración, salvo para loto y vicia (no hay datos).

"Composición química del aceite de gérmen de trigo argentino" (1945). Guitarte, Estela J.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Compositos elastoméricos estructurados: estudio de los efectos magneto-piezoresistivos y su aplicación en dispositivos piezométricos" (2016-07-01). Mietta, José Luis. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Los Compositos Elastoméricos Estructurados (SEC, por sus siglas en inglés) están formados por dispersiones de material inorgánico en una matriz elastomérica, en la cual se inducen propiedades anisotrópicas. La presente Tesis consta de un estudio experimental y teórico de sistemas SEC. En los sistemas experimentales estudiados, partículas que son simultáneamente magnéticas y conductoras de la electricidad se encuentran dispersas en polidimetilsiloxano (PDMS). La estructuración del material (por formación de cadenas de material inorgánico en la matriz polimérica) se logra curando la dispersión en presencia de un campo magnético intenso. El estudio experimental comenzó con la síntesis y caracterización de nanopart ículas de magnetita (NPs) y la formación de agregados micrométricos NPs/plata, que están en estado superparamagnético y son conductores óhmicos. El sistema SEC obtenido luego del curado presenta piezoresistividad (la resistividad eléctrica, ρ, es función de la tensión mecánica aplicada) y magnetoresistencia (ρ es función del campo magnético aplicado luego del curado del material). En esta Tesis se ha desarrollado también un sensor de tensión mecánica basado en dicho SEC, incluyendo la implementación de contactos, encapsulamiento y la calibración de su respuesta. Estos sistemas pueden presentar Anisotropía Eléctrica Total (TEA, por sus siglas en inglés), es decir, conductividad eléctrica apreciable únicamente en una dirección espacial, la de aplicación del campo magnético durante la preparación. El estudio teórico comienza con el análisis mediante simulaciones Monte Carlo de cómo los parámetros estructurales de los sistemas SEC influyen en la probabilidad de obtener TEA. En dichas simulaciones se comput ó la probabilidad de percolación en cada una de las direcciones características del material estructurado. En la segunda etapa teórica se desarrolló un modelo constitutivo de la respuesta piezoresistiva anisotrópica bajo la condici ón de TEA. Finalmente, se extendió dicho modelo con el fin de predecir la respuesta magnetoresistiva observada.

Abstract:
Elastomeric Structured Composites (SEC) are formed by inorganic material dispersions in an elastomeric matrix, in which anisotropic properties are induced. This Thesis presents an experimental and theoretical study of SEC systems. In the studied experimental systems, particles which are simultaneously magnetic and electrically conductive are dispersed in polydimethylsiloxane (PDMS). The structuring of the material (by formation of chains of inorganic material in the polymer matrix) is achieved by curing it in the presence of an intense magnetic field. The experimental study started with the synthesis and characterization of magnetite nanoparticles (NPs) and aggregate formation of micrometer NPs/silver, which are in a superparamagnetic state and are ohmic conductors. The SEC system obtained after curing has piezoresistivity (the electrical resitivity, ρ, is a function of applied stress) and magnetoresistance (ρ is a function of a magnetic field applied after curing). In this Thesis it has been developed also a mechanical stress sensor based on that SEC, including the implementation of contacts, encapsulation and calibration of the response. These systems may present Total Electrical Anisotropy (TEA), that is, appreciable electrical conductivity only in one spatial direction, the one of application of the magnetic field during preparation. The theoretical study starts with the analysis by Monte Carlo simulations of how the structural parameters of SECs ifluence the probability of TEA. In these simulations the percolation probability in each of the characteristic directions is computed. In the second theoretical stage a constitutive model of the anisotropic piezoresistive response under conditions of TEA has been developed. Finally, this model is extended in order to predict the observed magnetoresistance response.

"Compositos elastoméricos multiferroicos: aplicaciones en electrónica flexible" (2016-12-02). Saleh Medina, Leila María. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los materiales multiferroicos poseen simultáneamente al menos dos órdenes ferroicos (por ejemplo, ferromagnético y ferroeléctrico), observándose acoplamiento cruzado entre propiedades. Dicha característica está presente en sistemas monofásicos o multifásicos de varios componentes. Las ferritas de bismuto son cerámicos multiferroicos a temperatura ambiente, si bien es difícil obtenerlas con alta pureza y el acoplamiento magneto-eléctrico suele ser bajo. El primer objetivo de la presente tesis ha sido sintetizar y caracterizar ferritas de bismuto de estequiometría definida (BiFeO3), excelente pureza, y sustituidas parcialmente con itrio como estrategia para modificar los órdenes magnéticos y eléctricos. Se observaron variaciones de las propiedades magnetoeléctricas que se correlacionan con cambios de tamaño de partícula e inducción de nuevas fases. El segundo objetivo fue desarrollar y caracterizar películas flexibles con propiedades dieléctricas que permitan su uso como capacitores multiferroicos para electrónica flexible. Se prepararon compositos flexibles, dados por dispersiones de BiFeO3 en diferentes elastómeros: caucho sintético (SBR, no ferroeléctrico) y difluoruro de polivinilideno (PVDF, ferroeléctrico). Se prepararon películas micrométricas flexibles que presentan altas constantes dieléctricas, ferroelectricidad y acoplamiento magneto-eléctrico. La respuesta dieléctrica se caracterizó en función del contenido de BiFeO3. En SBR estas propiedades se incrementan al preparar los compositos en presencia de campos magnéticos o eléctricos. También se sintetizaron ferritas de cobalto (ferromagnéticas), observándose acoplamiento magneto-eléctrico al ser dispersadas en PVDF. Se demostró que los compositos basados en SBR y PVDF pueden ser empleados como filtros de alta frecuencia en circuitos eléctricos, cuyo comportamiento puede regularse variando el contenido de cerámico.

Abstract:
Multiferroic materials have simultaneously at least two ferroic orders (e.g. ferromagnetic and ferroelectric), that allows cross coupling of properties. This characteristic is present in single-phase or multiphase (made of several components) systems. Bismuth ferrites are multiferroic ceramics at room temperature, although it is difficult to obtain them with high purity and they generally present low magnetoelectric coupling. The main objective of this thesis has been synthesising and characterising bismuth ferrite of defined stoichiometry (BiFeO3), excellent purity and partially substituted with yttrium in order to modify the magnetic and electric structural orders. Changes in magnetoelectric properties, that can be attributed to particle size and new phase induction, have been found. The second objective was to develop and characterise flexible films with dielectric properties that allow their use as multiferroic capacitors for flexible electronics. Flexible composites were prepared by adding BiFeO3 dispersions into different elastomers: synthetic rubber (SBR, non-ferroelectric) and polyvinylidene difluoride (PVDF, ferroelectric). Flexible micrometric films were obtained with large values of dielectric constant, ferroelectricity and magnetoelectric coupling. Dielectric response was characterised as a function of BiFeO3 content. These properties were enhanced in SBR films prepared under the application of electric or magnetic fields. Cobalt ferrites (ferromagnetic) were also synthesised. Magnetoelectric coupling was observed when they were dispersed in PVDF. It has been demonstrated that SBR and PVDF composites can be used as high frequency filters, whose behaviour can be adjusted by modifying the ceramic content.

"Compresión sin pérdida de imágenes satelitales multiespectrales e hiperespectrales" (2011). Acevedo, Daniel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis se presentan nuevas técnicas de compresión sin pérdida tendientes a reducir el espacio de almacenamiento requerido por imágenes satelitales. Dos tipos principales de imágenes son tratadas: multiespectrales e hiperespectrales. En el caso de imágenes multiespectrales, se desarrolló un compresor no lineal que explota tanto las correlaciones intra como interbanda presentes en la imagen. Este se basa en la transformada wavelet de enteros a enteros y se aplica sobre bloques no solapados de la imagen. Diferentes modelos para las dependencias estadísticas de los coeficientes de detalle de la transformada wavelet son propuestos y analizados. Aquellos coeficientes que se encuentran en las subbandas de detalle fino de la transformada son modelados como una combinación afín de coeficientes vecinos y coeficientes en bandas adyacentes, sujetos a que se encuentren en la misma clase. Este modelo se utiliza para generar predicciones de otros coficientes que ya fueron codificados. La información de clase se genera mediante la cuantización LloydMax, la cual también se utiliza para predecir y como contextos de condicionamiento para codificar los errores de predicción con un codificador aritmético adaptativo. Dado que el ordenamiento de las bandas también afecta la precisión de las predicciones, un nuevo mecanismo de ordenamiento es propuesto basado en los coeficientes de detalle de los últimos dos niveles de la transformada wavelet. Los resultados obtenidos superan a los de otros compresores 2D sin pérdida como PNG, JPEG-LS, SPIHT y JPEG2000, como también a otros compresores 3D como SLSQ-OPT, JPEG-LS diferencial y JPEG2000 para imágenes a color y 3D-SPIHT. El método propuesto provee acceso aleatorio a partes de la imagen, y puede aplicarse para la compresión sin pérdida de otros datos volumétricos. Para las imágenes hiperespectrales, algoritmos como LUT o LAIS-LUT que revisten el estado del arte para la compresión sin pérdida para este tipo de imágenes, explotan la alta correlación espectral de estas imágenes y utilizan tablas de lookup para generar predicciones. A pesar de ello, existen casos donde las predicciones no son buenas. En esta tesis, se propone una modificación a estos algoritmos de lookup permitiendo diferentes niveles de confianza a las tablas de lookup en base a las variaciones locales del factor de escala. Los resultados obtenidos son altamente satisfactorios y mejores a los de LUT y LAIS-LUT. Se han diseñado dos compresores sin pérdida para dos tipos de imágenes satelitales, las cuales tienen distintas propiedades, a saber, diferente resolución espectral, espacial y radiométrica, y también de diferentes correlaciones espectrales y espaciales. En cada caso, el compresor explota estas propiedades para incrementar las tasas de compresión.

Abstract:
In this thesis, new lossless compression techniques aiming at reducing the size of storage of satellite images are presented. Two type of images are considered: multispectral and hyperspectral. For multispectral images, a nonlinear lossless compressor that exploits both intraband and interband correlations is developed. The compressor is based on a wavelet transform that maps integers into integers, applied to tiles of the image. Different models for statistical dependencies of wavelet detail coefficients are proposed and analyzed. Wavelet coefficients belonging to the fine detail subbands are successfully modelled as an affine combination of neighboring coefficients and the coefficient at the same location in the previous band, as long as all these coefficients belong to the same landscape. This model is used to predict wavelet coefficients by means of already coded coefficients. Lloyd-Max quantization is used to extract class information, which is used in the prediction and later used as a conditioning context to encode prediction errors with an adaptive arithmetic coder. The band order affects the accuracy of predictions: a new mechanism is proposed for ordering the bands, based on the wavelet detail coefficients of the 2 finest levels. The results obtained outperform 2D lossless compressors such as PNG, JPEG-LS, SPIHT and JPEG2000 and other 3D lossless compressors such as SLSQ-OPT, differential JPEG-LS, JPEG2000 for color images and 3D-SPIHT. Our method has random access capability, and can be applied for lossless compression of other kinds of volumetric data. For hyperspectral images, state-of-the-art algorithms LUT and LAIS-LUT proposed for lossless compression, exploit high spectral correlations in these images, and use lookup tables to perform predictions. However, there are cases where their predictions are not accurate. In this thesis a modification based also on look-up tables is proposed, giving these tables different degrees of confidence, based on the local variations of the scaling factor. Our results are highly satisfactory and outperform both LUT and LAIS-LUT methods. Two lossless compressors have been designed for two different kinds of satellite images having different properties, namely, different spectral resolution, spatial resolution, and bitdepth, as well as different spectral and spatial correlations. In each case, the compressor exploits these properties to increase compression ratios.

"Compuestos enjaulados para la regulación de la expresión de genes" (2011). Filevich, Oscar. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo se extiende la tecnología de fotoliberadores de moléculas biológicamente interesantes activables con luz visible basados en bipiridinas de rutenio, inicialmente desarrollada en nuestro laboratorio. Se caracterizan algunas propiedades de fotoliberadores de moléculas de importancia biológica, coordinados a rutenio a través de grupos poco básicos como nitrilos o tioéteres. Se describen algunas propiedades de dos de ellos: Un fotoliberador de un fluoróforo derivado de rodamina cuya fluorescencia disminuye en su estado coordinado y es recuperada al ser fotoliberado; y un fotoliberador de una molécula pequeña capaz de controlar la síntesis de proteínas por el operón lactosa, como demuestran los bioensayos en E. coli. La capacidad para proteger y fotoliberar estos grupos funcionales junto con la posibilidad de funcionalizar superficies con fotoliberadores y microirradiarlas a escala subcelular con un microscopio adaptado a tal fin, extienden la utilidad de estas herramientas para responder preguntas actuales y relevantes.

Abstract:
In this work we further extend the technology of visible-light phototriggers for biologically relevant biomolecules, which was originally developed in our lab. We characterize some properties of molecules with biological importance which, through low-basicity groups like nitriles or thioethers, coordinate ruthenium-bipyridine complexes yielding caged-compounds which can be released with low-energy visible light. The properties of two of them are studied to some detail: a phototrigger of a modified rhodamine that is a fluorescence quencher: rhodamine's full fluorescence is recovered upon photorelease. The second one is a phototrigger for a small-molecule which can control genetic systems under lac operon regulatory elements, as shown by E. coli bioassays. As a proof-of-concept, the chemical modification of surfaces with a ruthenium caged-compound is shown, toghether with the optical instrument constructed for controlling photouncageing at a sub-cellular scale. These ruthenium- bipyridine based tools extend the functions available through biomolecule and small-molecule visible-light phototriggers.

"Comunicación química de anuros: una perspectiva integral a partir de aspectos comportamentales, morfológicos y químicos en dos especies de Hypsiboas (Amphibia: Anura: Hylidae)" (2014-12-19). Brunetti, Andrés E.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La piel de los anfibios es un órgano dinámico con una enorme diversidad de funciones. Una característica compartida por prácticamente todas las especies de anfibios es la presencia de dos tipos de glándulas dérmicas, mucosas y serosas. A pesar de la similitud estructural, estas glándulas pueden presentar una gran variabilidad morfológica alcanzando un alto grado de especialización en el cumplimiento de dos funciones, la comunicación química y la defensa contra predadores. Desde un aspecto bioquímico, el análisis de las secreciones glandulares posee un potencial enorme dado la diversidad de compuestos. Los estudios desarrollados en algunos de ellos (i.e., péptidos, alcaloides, aminas biogénicas) permite tener una idea aproximada de la variación estructural y funcional. Sin embargo, es limitado el conocimiento que se tiene sobre la química de los compuestos volátiles y de los componentes secretados por las glándulas de la piel sexualmente dimórficas (SDSGs); fuente potencial de feromonas. Tradicionalmente los estudios de comunicación en los anuros se focalizaron en el análisis de las señales acústicas, aunque existían reportes aislados de la participación de otras señales (i.e., visual, química, táctil) en algunas especies. Los trabajos recientes muestran que estas señales tienen una distribución taxonómica mucho mayor a la considerada inicialmente, en tanto que la co-ocurrencia de distintas señales sugieren la existencia de comunicación multimodal en algunas especies. En la presente tesis se abordaron aspectos morfológicos, químicos y comportamentales de las secreciones glandulares en dos especies de Hypsiboas, considerando un contexto reproductivo en H. punctatus y un contexto defensivo en H. pulchellus. Se analizó la estructura y la ultraestructura de la piel de las regiones mental, lateral, dorsal y ventral en machos y hembras de H. punctatus. Se identificaron dos tipos de SDSGs, en las regiones mental y lateral de los machos, representando el primer caso de co-ocurrencia de diferentes SDSGs en una misma especie de anuro. A partir de estos resultados se caracterizó la variación estructural e histoquímica, y se estudió la evolución de las glándulas mentales y laterales en 28 especies de Cophomantini, incluyendo representantes de prácticamente todos los grupos de especies. La ocurrencia de estas glándulas, al igual que la variación morfológica, presenta una distribución taxonómica compleja con diferentes niveles de homoplasia. A partir del análisis de las secreciones de las glándulas dorsales de machos y hembras se determinó la estructura primaria de 13 péptidos y se identificaron dos compuestos relaciones con alcaloides. Se identificó un péptido presente exclusivamente en las secreciones de las glándulas mental y lateral de los machos. Los estudios comportamentales en el campo y en condiciones controladas de laboratorio, mostraron que los machos de H. punctatus son territoriales y poseen un repertorio vocal complejo con al menos siete cantos diferentes asociados a contextos particulares. Las hembras elegirían a los machos en base a la información de las señales acústicas y químicas, lo que sugiere la existencia de comunicación multimodal en esta especie. El estudio morfológico e histoquímico de las glándulas de H. pulchellus evidenció la presencia de las dos glándulas comunes de los anfibios (mucosas y serosas). Sin embargo, los análisis de estructura, ultraestructura y de los mecanismos fisiológicos de descarga permiten inferir que las glándulas serosas cumplirían diversas funciones, entre ellas almacenar los componentes volátiles secretados en situaciones de estrés. Estas glándulas presentan una mayor concentración en la región escapular, lo que podría relacionarse con estrategias defensivas. A partir del análisis de las secreciones de las glándulas dorsales de machos y hembras se determinó la estructura primaria de 17 péptidos y se identificaron dos compuestos relaciones con alcaloides. Las secuencias peptídicas de H. pulchellus e H. punctatus presentan una gran variabilidad. Estos compuestos no fueron publicados anteriormente, aunque algunos de los péptidos presentaron una gran similitud con los descriptos en otras especies de Cophomantini. Se compararon las secuencias de todos los péptidos identificados hasta el momento en esta tribu. El solapamiento de las secuencias de los péptidos de H. pulchellus e H. punctatus con partes de péptidos mayores de otras especies sugiere la existencia de endopeptidasas específicas. Se caracterizó la fracción volátil de las secreciones de la región dorsal y lateral en H. pulchellus e H. riojanus. Se identificaron 42 compuestos (40 en H. pulchellus y 37 en H. riojanus) pertenecientes a nueve grupos funcionales, lo que constituye la mayor diversidad de compuestos volátiles identificados en una especie de anfibio. Los diferentes componentes tendrían distinto origen y función.

Abstract:
The skin of amphibians is a dynamic organ with diverse functions. Almost all the species of this group of vertebrates possess two types of dermal glands, mucous and serous glands. Despite the structural similarities within each glandular type, they may have a great morphological variation getting a high degree of specialization related to chemical communication and defense against predators. From a biochemical perspective, and given the high diversity of their compounds, researches on the glandular secretions have an enormous potential. In particular, the studies performed on some of them (i.e., peptides, alkaloids, biogenic amines) allowed a general understanding of their structural and functional diversity. However, knowledge of the chemical composition of the volatile secretions, as well as from the secretion of sexually dimorphic skin glands (SDSGs; a likely source of sexual pheromones) in anurans, is very limited. Although there are isolated reports of the existence of different signals used for communication in some species (i.e., visual, chemical, tactile), studies of communication in anurans have traditionally focused in the analysis of acoustic signals. Nonetheless, recent investigations show that those considered rare signals have a wide taxonomic distribution, whereas the simultaneous occurrence of some of them suggest the existence of multimodal communication in several species. In this thesis are examined morphological, chemical and behavioral aspects from de glandular secretions of two species of Hypsiboas, considering a reproductive context in H. punctatus, and a defensive context in H. pulchellus. The structure and ultrastructure of skin from mental, lateral, dorsal, and ventral regions, was examined in males and females of H. punctatus. Two types of SDSGs were identified en mental and lateral regions of males. These results represent the first case of co-occurrence of different SDSGs in a single species. The structural and histochemical variation, as well as the evolution, of mental and lateral glands was analyzed in Cophomantini from samples of 28 species including at least a representative of almost all group of species of this clade. The occurrence of mental and lateral glands and their morphological variation have an intricate taxonomic distribution with different levels of homoplasy. Thirteen peptides and two compounds related with alkaloids were identified from dorsal secretions of males and females. One peptide was found exclusively from mental and lateral secretions of males. Behavioral studies performed in the field and under laboratory controlled conditions showed that males are territorial. They emit at least seven different type of calls associated to specific biological contexts. Females would choose their mates on acoustic and chemical signals, which suggest the existence of multimodal communication in this species. Morphological and histochemical studies of the skin of H. pulchellus revealed the presence of the two typical mucous and serous glands of amphibians. However, a detailed structural and ultrastructural analysis, as well as the physiological assessment of the release mechanism of gland secretion, suggests that serous glands have several functions. One of these functions is to accumulate, and under stress situations, secrete volatile compounds. These glands are highly concentrated in the scapular region, which is possible related to defensive strategies. Seventeen peptides and two compounds related with alkaloids were identified from dorsal secretions of males and females. The peptide sequences of H. pulchellus and H. punctatus are highly variable. These compounds have not been published before, but some of them showed great similarities with peptides described in other species of Cophomantini. All peptides reported so far in species of this tribe were compared through sequence alignments. The sequences of H. pulchellus and H. punctatus overlapped longer sequences of other species suggesting the existence of specific endopeptidase. The volatile secretions of H. pulchellus and H. riojanus were characterized from dorsal and lateral skin by a simulated stress situation. Forty-two compounds (40 in H. pulchellus and 37 in H. riojanus) from nine different functional groups were identified in all samples. This represent the highest number of volatile compounds identified in a species of amphibian. The components would have different origin and functions.

"Comunicación sexual en triatominos (Heteroptera: Reduviidae): claves químicas asociadas al vuelo y al apareamiento" (2011-03-21). Zacharias, Claudia Andrea. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se analizó el papel de las claves químicas en la comunicación sexual de las vinchucas Rhodnius prolixus y Triatoma infestans. Se evaluó la existencia de claves químicas que fueran capaces de disparar el vuelo en R. prolixus en el contexto sexual. Las observaciones del comportamiento de vuelo mostraron que una corriente de aire limpio es suficiente para orientar el inicio del vuelo de hembras y machos. El agregado de olores de hembras a dicha corriente provocó un incremento en la frecuencia de activación de vuelo de machos. Se analizó la fuente de las claves químicas que promovían el vuelo de los machos por medio de oclusiones alternadas de las glándulas de Brindley y/o metasternales. La oclusión de las glándulas metasternales de las hembras implicó un descenso en los niveles de vuelo de los machos. Además, los extractos naturales de estas glándulas promovieron el vuelo de los machos demostrando su relevancia en la estimulación del vuelo, lo que sugiere un posible papel en la comunicación sexual de R. prolixus. Los volátiles de las glándulas metasternales de la hembra fueron puestos a prueba sobre la antena de machos de R. prolixus y T. infestans por medio de cromatografía gaseosa acoplada a electroantenografía (CG-EAG). La estimulación de las antenas de machos de R. prolixus mostró que responde al 2-metil-3-buten- 2-ol, 2-metil-1-butanol y (2S)-pentanol. En T. infestans las antenas de los machos sólo respondieron consistentemente a la 3-pentanona. La presentación de volátiles de 2-metil-1- butanol estimuló el vuelo de machos de R. prolixus del mismo modo que lo hicieron las hembras presentadas como estímulo. Finalmente, se exploró la función de los lípidos cuticulares en la comunicación sexual de T. infestans. La remoción de estos compuestos en las hembras implicó una reducción de los intentos de cópula de los machos. Los machos mostraron una recuperación de los intentos de cópula cuando se reconstituyó artificialmente dichos lípidos sobre la cutícula de las hembras.

Abstract:
The role of chemical cues in the sexual communication of the kissing bug Rhodnius prolixus and Triatoma infestans was analysed. Chemical cues capable of triggering flying behaviour of R. prolixus were evaluated in the sexual context. Observations of flying behaviour showed that a clean airstream guides the takeoffs of males and females by itself. The addition of odors of females to this airstream caused an increase in the frequency of flight activation of males. The source of the chemical cues that promoted takeoffs in males was analysed by alternate occlusion of Brindley and metasternal glands orifices. Metasternal gland occlusion caused a decrease of flight activity in males. Besides, metasternal natural extracts promoted takeoff activity in males revealing their relevance in promoting the males flight behaviour and suggesting their participation in the sexual communication of R. prolixus. Antenna of R. prolixus and T. infestans males were stimulated with metasternal glands volatiles of females by using electrophysiological techniques. Antenna of males of R. prolixus responded to 2- methyl-3-buten-2-ol, 2-methyl-1-butanol and (2S)-pentanol. Antenna of males of T. infestans responded to 3-pentanone. The presentation of 2-methyl-1-butanol volatiles stimulated the flight of males of R. prolixus in the same way as the females presented as stimulus did. Finally, we explored the role of cuticular lipids in the sexual communication of T. infestans. The removal of these compounds in females resulted in a reduction of mating attempts by males. Males showed a recovery of copulation attempts when these lipids were artificially reconstituted on the cuticle of females.

"Comunidades bacterianas en suelos bajo siembra directa en la región agropecuaria pampeana. Influencia del manejo y propuesta de nuevos indicadores biológicos" (2012). Guerrero, Leandro Demián. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los suelos son considerados uno de los ambientes más diversos y heterogéneos que se conocen. En ellos se producen innumerables procesos que permiten el reciclado y transformación de sustancias esenciales para la vida de plantas y animales. La mayoría de estos procesos son realizados por bacterias, y se ven afectados por distintos factores en el ambiente. Una de las principales causas que modifican estos ecosistemas es la producción agrícola. En los últimos tiempos el desarrollo de nuevas tecnologías, como la siembra directa podrían atenuar parcialmente el impacto de esta explotación. Sin embargo, el uso sustentable implica también la aplicación de prácticas de manejo, que incluyen rotaciones de cultivos, reposición de nutrientes y manejo integral de plagas. En este trabajo estudiamos la composición y dinámica de las comunidades de bacterias bajo prácticas contrastantes en siembra directa, con los objetivos de determinar de qué manera las prácticas agrícolas impactan sobre el suelo, y encontrar variaciones en las comunidades que puedan servir como indicadores de biológicos de calidad del suelo. Para el estudio se analizaron ambientes naturales y dos tratamientos de siembra directa que difieren principalmente en el régimen de rotación de cultivos, y otras características que los separan en Buenas y Malas prácticas agrícolas. Se tomaron datos de cuatro localidades diferentes de la región que abarca desde la provincia de Córdoba hasta Entre Ríos durante un periodo de dos años. Mediante la utilización de herramientas moleculares encontramos que las diferencias entre los distintos ambientes a nivel de las comunidades de bacterias y los taxones mayoritarios se ven influenciadas en primer lugar por las diferencias geográficas y en menor medida por los efectos del uso del suelo. A medida que aumentamos el nivel de resolución taxonómica encontramos que existen diferencias para determinados grupos que pueden separar las Buenas de las Malas prácticas. El número de bacterias pertenecientes al grupo de Acidobacteria Gp1 y al género Rubellimicrobium varían de forma dependiente de los tratamientos, por lo cual son potenciales candidatos como indicadores de calidad de suelos. Para esto proponemos la confección de un índice calculado como el cociente entre la proporción de bacterias de cada grupo encontradas en la muestra (Acidobacteria Gp1/Rubellimicrobium), respecto del número encontrado en un ambiente natural próximo.

Abstract:
The soil is considered one of the most diverse and heterogeneous environments. They produce many processes that enable the recycling and transformation of substances essential for plant life and animals. Most of these processes are performed by bacteria, and are affected by different factors in the environment. One of the main causes that modify these ecosystems is agricultural production. The recent development of new technologies, such as no-till crop could reduce the impact of this exploitation. However, the sustainable use also involves the implementation of management practices, including crop rotations, nutrient replenishment and integrated pest management. In this work we have studied the composition and dynamics of bacterial communities under contrasting no-till crop systems in order to determine how impacts on soil, and to find variations in the communities that can serve as biological indicators of soil quality. For the study, two tillage treatments that differ mainly in the rotation regime and other features that separate into good and poor agricultural practices were analyzed. Data were collected from four different locations in the region from the province of Cordoba to Entre Rios for a period of two years. Using molecular tools we found that the differences between the different environments at the level of bacterial communities and major taxa, are influenced primarily by geographic differences and in lesser extent by the effects of land use. As we increased the level of taxonomic resolution, we found that there were differences for certain groups that can separate good from poor practices. The number of bacteria belonging to the Acidobacteria Gp1 group and the genus Rubellimicrobium varied depending on the treatments, suggesting that they could be potential candidates indicators of soil quality. To this end we propose the confection of an index calculated as the ratio (Acidobacteria Gp1/Rubellimicrobium) between the proportion of each group of bacteria found in the sample and the number found in a nearby grassland soil.

"Condensación de aldehidas aromáticas con los tres ácidos nitro hipúricos isomeros" (1946). Ortega, Fernando A. F.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Condensación de la creatinina con aldehidas aromáticas : nueva síntesis de la N-metil-3,4-dioxi-fenil-alanina" (1936). Guerrero, Tito Héctor. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Condensación de la creatinina con aldehidas aromáticas a distintas temperaturas" (1937). Cattáneo, Pedro. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Conductores mixtos nanoestructurados para electrodos de celdas de combustible de óxido sólido de temperatura intermedia" (2012). Acuña, Leandro Marcelo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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En el presente trabajo de tesis doctoral se estudiaron propiedades morfológicas, estructurales y eléctricas de óxidos nanoestructurados para ser empleados como electrodos en celdas de combustible de óxido sólido de temperatura intermedia (IT‐ SOFCs). En particular, se estudiaron soluciones solidas nanoestructuradas de ZrO2‐CeO2 aplicables como ánodo y nanopolvos de cobaltitas de La0,6Sr0,4CoO3‐δ y Sm0,5Sr0,5CoO3‐δ (LSC y SSC, respectivamente) aplicables como cátodo en este tipo de dispositivos. Se sintetizaron polvos nanoestructurados homogéneos en composición de ZrO2‐CeO2 en el rango de composiciones de 50 ‐ 90 % molar CeO2 empleando los métodos de gelificación‐ combustión, complejación de cationes y mojado de poros de membranas poliméricas para la síntesis de nanotubos. Para la síntesis de los polvos de LSC y SSC se emplearon los métodos de complejación de cationes, liofilización y gelificación‐combustión. La morfología de los productos sintetizados se estudió por medio de microscopía electrónica de barrido y de transmisión (SEM y TEM) y análisis de área superficial específica (BET). Los estudios sobre las propiedades estructurales se realizaron por medio de las técnicas de difracción de rayos‐X y espectroscopía de absorción de rayos‐X empleando radiación sincrotrón (DRX‐RS y XAS, respectivamente). El estudio del rendimiento electrocatalítico de cátodos de película gruesa preparados a partir de polvos nanoestructurados de LSC y SSC se realizó en celdas simétricas mediante la técnica de espectroscopía de impedancia electroquímica (EIS). En el caso del sistema ZrO2‐CeO2 los estudios realizados permitieron determinar la influencia del tamaño nanométrico de las cristalitas en las propiedades estructurales de los nanomateriales. En particular, a partir de los estudios por DRX‐RS se construyó un diagrama de fases metaestables para polvos nanoestructurados de ZrO2‐CeO2 homogéneos en composición. Por otro lado, mediante la técnica de XAS se pudieron hallar modelos de orden local para el Zr a partir de los cuales fue posible proponer mecanismos de retención de las fases de alta temperatura a temperatura ambiente en forma metaestable. Estudios de XAS in situ en atmósfera reductora permitieron establecer la relación entre morfología y estado de oxidación del Ce. Por otra parte, con el objeto de obtener morfologías controladas de alta área especifica, se reportó por primera vez la síntesis de nanotubos de ZrO2‐CeO2. Se demostró por primera vez la retención de la fase cúbica de alta temperatura de LSC a temperatura ambiente en polvos nanoestructurados. Los estudios electrocatalíticos indicaron que los cátodos nanoestructurados preparados con nanopolvos de LSC o SSC presentaron un rendimiento muy superior al de los cátodos microestructurados. Se determinó que el proceso limitante en los cátodos nanoestructurados es el de difusión de O2- en el material. Además, los cátodos nanoestructurados presentan mayor difusividad de aniones O2-. Los estudios realizados demostraron que los materiales nanoestructurados presentan características morfológicas, estructurales y eléctricas que los convierte en muy buenos candidatos para ser aplicados como electrodos en IT-SOFCs.

"Confinamiento de iones metálicos en multicapas autoensambladas para la formación de nanopartículas con aplicación en hidrogenación electrocatalítica" (2015-03-27). Villalba, Matías Ariel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La reacción de hidrogenación es frecuentemente utilizada en Química Orgánica para la producción de compuestos con alto valor agregado, por ejemplo fármacos y agroquímicos. Debido a la baja efectividad y el elevado costo de realizarlo a partir de reductores químicos es que se prefiere emplear método electroquímico para producir hidrógeno adsorbido, el cual es utilizado como agente reductor in situ. En este trabajo de tesis se ha estudiado el proceso de hidrogenación de cetonas orgánicas en forma sistemática para distintas superficie de paladio: i) metal puro, ii) depósito masivo sobre fieltros de carbono y iii) depósito de escala nanométrica confinados dentro de una película autoensamblada electrostáticamente. Se estableció también un análisis comparativo de inclusión y selectividad entre un autoensamblado electrostático puro y una multicapa fabricada a partir de uniones covalentes. Se realizaron experimentos electroquímicos donde se encuentra el hidrógeno adsorbido en exceso o donde la molécula orgánica es la predominante en el sistema para estudiar la cinética de reacción así como también el mecanismo involucrado en la generación de productos de hidrogenación de cetonas. Se abordó también la disposición espacial de ambos reactivos como condición para que la reacción se produzca efectivamente y un modelo que ajusta adecuadamente los resultados experimentales de selectividad de productos. Para generar estructuras de tamaño nanométrico se ha determinado la manera más eficiente de confinar aniones metálicos electroactivos sobre la superficie de un sustrato conductor. Mediante experimentos de espectroelectroquímica se logró determinar el alcance de la transferencia electrónica así como también la estabilidad de la sonda a los sucesivos ciclos de óxido-reducción. Teniendo en cuenta el conocimiento previo, se generaron nanopartículas de Pd0 sobre fieltros de carbono de tamaños entre 10 y 30 nm a partir de sucesivos ciclos de inclusión-reducción electroquímica de un precursor cloro-metálico. Las selectividades y eficiencias para cada tamaño de partícula sobre la reacción de hidrogenación de cetonas y el intermediario alcohólico de la reacción fueron obtenidas a partir de electrólisis cuantitativa de los reactivos orgánicos (conversión del 80-90 %). Se encontró que la presencia de la película multicapa sobre/alrededor de las nanopartículas metálicas es crucial en la selectividad y eficiencia de la reacción. Esto se contrastó con experimentos análogos usando partículas tratadas térmicamente, en ausencia de oxígeno, a modo de eliminar la materia orgánica. Finalmente, se construyeron películas compuestas únicamente de ácido poliacrílico químicamente modificado, cuyas capas están unidas entre sí mediante anillos 1,2,3-triazol. Estos enlaces se formaron mediante la generación electroquímica de Cu (I) y su reacción con una azida y un alquino terminal, lateralmente unidos a la cadena polimérica (reacción de “Click”). Además, se compararon las masas incluidas selectivamente de dos sondas electroactivas (una positiva y una negativa) y un único complejo de Pd cargado positivamente dentro de los dos sistemas autoensamblados estudiados. Palabras claves: electrodos modificados, autoensamblado capa por capa, reacción click, inclusión en multicapas, nanopartículas metálicas, mecanismo de hidrogenación, electrosíntesis, selectividad.

Abstract:
The hydrogenation reaction is frequently employed in Organic Chemistry in order to produce high value-added compounds such as pharmaceuticals and agrochemicals. This reaction has low effectivity and it is expensive when chemical reagents are used. On the other hand, an electrochemical method produces adsorbed hydrogen, which is preferentially used as in situ reducing agent. In this work it was studied the hydrogenation electrocatalytic process of organic ketones on different Palladium surfaces: i) bulk metal, ii) covered carbon felts partially and iii) nanoparticles embedded within a self-assembled electrostatic film. It was also established a comparative analysis of metal complexes inclusion and selectivity between the last film and a chemical-bounded multilayer film. Both allow the confinement of functionalities close to the electrode. The kinetics and mechanism reaction were studied by performing electrochemical experiments under adsorbed hydrogen conditions or organic ketones excess. The spatial disposition of both reactants was analyzed as requirement of effective reactivity as well as a simplified model for fit reactant and product concentrations as a function of time. In order to generate nanometric metal structures, one practical method for electroactive metal anions incorporation within multilayer film close to the electrode surface was determined. The possible charge transfer distance and the stability over oxidation-reduction cycles of the probe were determined by spectroelectrochemical experiments. Taking into account the previous knowledge, Pd0 nanoparticles with different sizes (6 – 30 nm) were generated over carbon felts via consecutives inclusion-electrochemical reduction cycles of the tetrachloropalladate complex. The selectivity and current efficiency of the electrocatalytic hydrogenation reaction for each particle size were obtained by quantitative consumption (80-90 %) of the organic reagents: organic ketones and their corresponding secondary alcohols. It was found that the presence of the organic multilayer over/around the nanocatalysts also influences the product selectivity and the reaction efficiency. This was corroborated with analogous experiments employing thermally treated nanoparticles in order to eliminate the organic film. Finally, films of one chemically modified polielectrolyte (polyacrilic acid) were generated by covalent crosslink with 1,2,3-triazole rings. These bonds were formed by reaction of alkyne and azide laterally attached to the polymer chain with Cu (I) electrogenerated at the electrode surface (“Click Chemistry”). The implementation of microelectrodes allows a focused construction of the film over different substrates. Also, the amount of two electroactives molecules and one positive palladium complex selectively included in this film were compared with the inclusion capacity of the previous film (two components). Key words: modified electrodes, layer by layer self-assembled, Click chemistry, inclusion within multilayers, metallic nanoparticles, hydrogenation reaction mechanism, electrosynthesis, and selectivity.

"Congruencias entre formas modulares modulo potencias de primos" (2015-12-11). Camporino, Maximiliano. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
A lo largo de esta tesis hemos trabajado fundamentalmente en el problema de congruencias entre formas modulares módulo potencias de primos. La pregunta disparadora del trabajo realizado fue la siguiente: dada una forma modular f, autoforma para los operadores de Hecke, y una potencia de un número primo pn, >existe una autoforma g, distinta de f, de modo tal que f y g sean congruentes módulo pn?. El enfoque utilizado para dar respuesta a esta pregunta fue la adecuación de las ideas de los trabajos y , en los que por métodos algebraicos se intenta levantar representaciones de Galois con imagen en anillos de torsión a anillos de característica 0. Mediante la adaptación de estos métodos a las representaciones asociadas a f módulo pn se logra dar una respuesta exhaustiva a la pregunta inicial en la mayoría de los casos. La presente tesis se divide en dos capítulos. En el primero se estudia el problema correspondiente al caso en el que el anillo generado por los coeficientes de la forma f es no ramificado en el primo p. En este caso las ideas de y se logran adaptar sin mayores inconvenientes. En el segundo capítulo se aborda el caso en el que p ramifica en el anillo de coeficientes de f. Este escenario plantea un problema técnico que solo pudo ser resuelto cuando la forma f es ordinaria. Si bien ambos capítulos giran en torno a la misma idea central, los problemas técnicos que aparecen en cada uno de los casos requieren emplear estrategias esencialmente distintas para su resolución.

Abstract:
Along this thesis we have worked fundamentally on the problem of congruences between modular forms modulo prime powers. The motivating problem of this work was the following one: given a modular form f, eigenform for the Hecke operators, and a prime power pn, does another eigenform g, different from f, such that f and g are congruent modulo pn exist?. Our approach used to solve this problem is to adapt the ideas of and , where Galois representations with image in torsion rings are lifted to rings of characteristic 0 applying strictly algebraic methods. The adaptation of the methods employed in these works to the representations attached to f modulo pn enable us to exhaustively answer our initial question in most of the cases. The present thesis is divided into two chapters. In the first one we study the problem corresponding to the case in which the ring generated by the coefficients of the form f is unramified at p. In this case we are able to adapt the ideas of and to our setting. In the second chapter we study the case in which p ramifies in the ring generated by the coefficients of f. In this scenario we face some technical problems that we can only solve when f is ordinary. While both chapters revolve around the same main idea, the technical problems appearing in each of them require strategies that are essentially different.

"Conjuntos y operadores A-compactos, propiedades de aproximación e ideales de funciones entre espacios de Banach" (2014-12-17). Turco, Pablo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El objetivo principal de esta tesis es llevar a cabo el estudio de un método general para comprender una amplia clase de propiedades de aproximación de espacios de Banach y de diferentes ideales de operadores compactos que pueden ser modelados por igual una vez que se ha elegido el sistema de conjuntos compactos. Para ello, usamos la noción de conjunto A-compacto definido por Carl y Stephani, donde A es un ideal de operadores. Relacionado con los conjuntos A-compactos surge el concepto de operadores A-compactos (aquellos operadores que aplican conjuntos acotados en A-compactos). En el caso de que A sea un ideal de operadores de Banach, introducimos una forma de medir a los conjuntos A-compactos que nos permitirá estudiar al espacio de operadores A-compactos como un espacio de Banach. La estrecha relación que hay entre conjuntos y operadores A-compactos nos permitirá aplicar la teoría operadores para formular distintas propiedades de los conjuntos A-compactos. El sistema de conjuntos A-compactos induce de forma natural dos clases distintas de propiedades de aproximación. La primera se obtiene de considerar que el operador identidad se aproxime uniformemente sobre conjuntos A-compactos por operadores de rango finito. Esta propiedad la llamaremos la propiedad de aproximación KA-uniforme. La otra clase de propiedad de aproximación que consideramos se obtiene de considerar la medida de conjunto A-compacto y se denomina la KA-propiedad de aproximación. En este contexto entra en juego la geometría del espacio de operadores A-compactos. El enfoque que damos nos permite estudiar ambas propiedades de aproximación en tandem. Además, estudiamos como "pasan" estas propiedades de aproximación de los espacios duales a los espacios subyacentes. Luego examinamos la interacción entre estas dos propiedades de aproximación y el espacio polinomios homogéneos y de funciones holomorfas entre espacios de Banach. Para ello, introduciremos las nociones de polinomios y funciones holomorfas A-compactas. Si bien el espacio de polinomios A-compactos tiene una estructura similar al espacio de operadores lineales A- compactos, el espacio de funciones holomorfas A-compactas tiene una estructura muy distinta. Para mostrar esto, expondremos ejemplos que clarifican los resultados obtenidos.

Abstract:
The main objective of this thesis is to undertake the study of a general method to understand a wide class of approximation properties and different ideals of compact operators which can be equally modeled once the system of compact sets has been chosen. To this end, we use the notion of A-compact sets introduced by Carl and Stephani, which is determined by an operator ideal A. In relation with A-compact sets, we have the concept of A-compact operators (those operators which sends bounded sets into A-compact sets). In the case that A is a Banach operator ideal, we introduce a measure for the A-compact sets and we use it to study the A-compact operatos as a Banach space. The close relationship between A-compact sets and operators allows us to apply the operator theory to develop various properties of the A-compact sets. The system of A-compact sets leads naturally two types of approximation properties. The first one is obtained by considering that the identity operator can be uniformly approximated by finite rank operators over A-compact sets. This property is called the uniform KA-approximation property. The other type of approximation property is obtained by considering the measure of A-compact sets and it is called the KA-approximation property. In this context, it comes into scene the geometry of the Banach space of A-compact operators. The approach that we make allows us to study both approximation propertis in tandem. In addition, we study how these approximation properties on a dual space affect to the underlying spaces. Then we examine the interaction between these two types of approximation properties and the spaces of homogeneous polynomials and holomorphic functions between Banach spaces. To this end, we introduce the concept of A-compact polynomials and A-compact holomorphic functions. While the space of A-compact polynomials has a similar structure to the space of A- compact operators, the space of A-compact holomorphic function has a very diferent structure. To show this, we will present some examples that clarify our results.

"Conocimiento hortícola y de recolección de recursos silvestres en comunidades rurales y semi-rurales del Noroeste de la Patagonia: Saber-cómo (know-how) y resiliencia" (2011). Eyssartier, Cecilia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la presente tesis estudiamos el conocimiento ecológico tradicional, ligado a la horticultura y recolección de plantas silvestres, en cuatro comunidades locales del Noroeste patagónico. Dado que la actividad de cultivar y recolectar implica procesos cognitivos asociados a patrones de percepción-acción, íntimamente imbricados en contextos ecológicos y socio-culturales dinámicos, abordamos esta temática considerando el marco teórico de la cognición corporizada y la resiliencia. Se indagó sobre plantas recolectadas y cultivadas en huertas, invernaderos y jardines, denominación local de especies, origen biogeográfico, categorías de uso, estructura de áreas cultivadas, procedencia de semillas, cultivos preferidos, mediante entrevistas semi-estructuradas. Los resultados muestran que los pobladores de las comunidades más aisladas, con menor influencia occidental, cultivan y recolectan una mayor riqueza de plantas y presentan las huertas más extensas. En contraste, los habitantes de poblaciones semi-rurales, cultivan en invernaderos en una mayor proporción y en huertas más pequeñas. Observamos que las poblaciones más alejadas del centro urbano, conservan la tradición de cosechar sus propias semillas; mientras que la población más cercana, ha abandonado esta costumbre donde tampoco hay intercambio de germoplasma. La presente tesis además de indicar que la influencia occidental acentúa la erosión de conocimientos ecológicos tradicionales, brinda aportes para comprender la dinámica de estos procesos, propiciando herramientas que favorezcan la resiliencia de los pobladores locales. Dados los profundos cambios que estas comunidades están atravesando, el enfoque de la resiliencia y la cognición corporizada, son abordajes útiles para ilustrar estos procesos de transformación.

Abstract:
We investigated traditional ecological knowledge, related to horticultural and gathering practices, in four communities of Northwestern Patagonia, Argentina. As the activity of cultivating and gathering involves cognitive processes associated with perception-action patterns in intimate intricacy with dinamic ecological and socio-cultural contexts, we utilized the embodied cognition theory and resilient approach. By means of semi-structured interviews and field visits to the cultivated areas we analyzed floristic composition and structure of vegetable-gardens, greenhouses and gardens. We evaluated cultivated and gathered species, local names of plants, categories of use, seed origin, favourite crops, geographical origin, etc. Results showed that the inhabitants of isolated communities cultivate and gather a greater richness of plants using greater extensions of vegetable-gardens. In contrast, locals of semi-rural populations cultivate in greenhouses in a higher proportion using smaller vegetable-gardens. Moreover, the most isolated communities still maintain collection of seeds from their own production; whereas in the closer population this custom seems to be abandoned as well as germplasm exchange. This study not only indicates that conspicuous western influence increases traditional ecological knowledge erosion, but also provides evidence showing how resilient mechanisms could be promoted. Given the profound changes these populations are undergoing, we consider that the frame theory of resilience and embodied cognition are interesting tools to illustrate the dynamic of these transformations.

"Consecuencias ambientales de la producción de carne bovina en sistemas intensivos confinados (Feedlots)" (2002). Maisonnave, Roberto Carlos. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se estudiaron variables fisicas y químicas de importancia ambiental en un Establecimiento dedicado al Engorde Bovino Intensivo en Confinamiento, comúnmente llamado feedlot, con el objetivo de determinar si esta actividad generó contaminación ambiental tras diez años de existencia. Se determinaron las concentraciones de distintas especies químicas utilizando métodos estandarizados de recolección y acondicionamiento de muestras, como así también métodos quimicos y fisicos normalizados de determinación. La especie química contaminante y la magnitud de su acumulación es función del recurso bajo análisis —suelo o agua subterránea- y de la ubicación relativa del sitio de muestreo según un gradiente de paisaje. Los contaminantes más importantes fueron nitratos, arsénico, cadmio y níquel en aguas subterráneas. En suelos, si bien no existe una variable química o fisica cuyo estado permita asegurar que la capacidad productiva del recurso ya ha sido afectada, la magnitud de los cambios operados sobre este recurso como consecuencia de la actividad productiva Ganaderia Intensiva alertan sobre el estado actual y los usos potenciales futuros para los suelos estudiados. Analizando el estado de los recursos Agua Subterránea y Suelos, y realizando comparaciones con aguas superficiales y sedimentos de obras de captación y almacenamiento de efluentes, quedó demostrado que la actividad Ganadería Intensiva a Corral genera contaminación ambiental. Todos los patrones de uso de la tierra mostraron una relación clara con la dinámica de las variables fisicas y químicas bajo estudio. Esto permitió establecer un análisis comparativo del estado de los recursos en fimción del patrón de uso de la tierra en cada caso. Se demostró que la ganaderia intensiva es una actividad que conlleva cierto riesgo ambiental, más localizado y concentrado que en el caso de agricultura, y este efecto de polución se potencia si no se aplican ciertas pautas de manejo. El diseño correcto y el mantenimiento de las obras de captación de efluentes resultan fundamentales para poder conducir y almacenar los contaminantes con un criterio de cuidado ambiental a favor de la prevención de episodios de contaminación. Son imprescindibles nuevas investigaciones en el área de diagnóstico del estado de los recursos bajo condiciones de producción en feedlots para distintas zonas geográficas. La profundización de los estudios realizados es indispensable para poder definir valores guía de calidad ambiental adaptados al modo de producción y condiciones de los recursos naturales en Argentina.

"Consecuencias de mutaciones y polimorfismos sobre la actividad de ADAMTS13" (2013). Calderazzo Pereyra, Julio César. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los objetivos de esta tesis fueron: 1- Optimizar la amplificación de los 29 exones correspondientes al gen de ADAMTS13 y realizar la secuenciación completa del gen en pacientes con PTT congénita y 2- Realizar la expresión “in vitro" de la primera nueva mutación descripta en Argentina A4085T (sustitución de un ácido aspártico (D) por una valina (V) en la posición 1362). Evaluar la actividad proteolítica intra y extracelular de la ADAMTS13 resultante para analizar cómo impacta sobre los mecanismos de biosíntesis y secreción de la ADAMTS13. Los experimentos se realizaron en cultivos de células HEK 293 transfectadas con las construcciones plasmídicas de la secuencia WT y del mutante A4085T sintetizado a partir del plásmido WT por mutagénesis sitio-dirigida para evaluar cuál es el dominio afectado y cómo impacta sobre los mecanismos de biosíntesis y secreción de la ADAMTS13. Estos estudios ayudaron a una mejor evaluación del exón 29 del dominio CUB-2. Para medir el antígeno y la actividad de ADAMTS13 en células, sobrenadantes y células transfectadas con vector de expresión de ADAMTS13 WT y de A4085T, se utilizaron técnicas de ELISA con sustratos cromogénicos, técnicas de SDS-PAGE, inmuno-transferencia y microscopia de inmunofluorescencia. Se observó que la mutación produce acumulación intracelular de ADAMTS13. La nueva mutación D1362V identificada en el dominio CUB-2 codificada por el exón 29, donde aún no se han reportado mutaciones de sentido erróneo, produce una deficiencia plasmática de ADAMTS13 que estaría inducida por una secreción reducida de la proteasa a la circulación.

Abstract:
The aims of this thesis were: 1- To optimize the amplification of the ADAMTS13 gene 29 exons, and to perform the complete sequencing of this gene in patients with hereditary TTP, and 2- To perform the in vitro expression of the first new mutation described in Argentina, A4085T (substitution of an aspartic acid for valine at position 1362). The resulting ADAMTS13 intra and extracellular proteolytic activity will be evaluated to analyze its impact on ADAMTS13 biosynthesis and secretion mechanisms. The experiments were performed in cultures of HEK 293 cells transfected with plasmid constructions of the WT sequence, and of the A4085T mutant synthesized from the WT plasmid through site-directed mutagenesis, in order to evaluate which the affected domain is and how it impacts on ADAMTS13 biosynthesis and secretion mechanisms. These studies have helped to improve the evaluation of exon 29 at CUB-2 domain. ADAMTS13 antigen and activity on cells, supernatants and cells transfected with expression vector of ADAMTS13 WT and of A4085T, were measured by ELISA with chromogenic substrates, SDS-PAGE, immune transference technics applied and immunofluorescence microscopy. It was observed that the mutation produces intracellular accumulation of ADAMTS13. The new D1362V mutation identified in CUB-2 domain and encoded by exon 29, where no missense mutations have been reported yet, produces a plasmatic deficiency of ADAMTS13 that could be induced by a reduced secretion of circulating protease.

"Consecuencias del estrés postnatal repetido y la exposición a etanol sobre la actividad del transportador de glutamato y la conducta en ratas" (2015-03-30). Odeon, María Mercedes. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La exposición a situaciones de estrés durante los primeros años de vida ha demostrado tener profundas consecuencias en el crecimiento y en el desarrollo de un individuo. Los efectos adversos tempranos aumentan el riesgo de sufrir estrés postraumático, depresión y adicción a las drogas de abuso, como el alcohol. Nuestro objetivo fue evaluar las consecuencias a nivel conductual, bioquímico y molecular del estrés postnatal crónico (EPC) y su posible reversión por un ambiente enriquecido en ratas adultas enfocándonos en la ingesta voluntaria de alcohol. Nuestros resultados mostraron que el EPC indujo la ingesta de etanol en ratas adultas, comportamiento que fue revertido por un ambiente enriquecido. Una vez puesto a punto este modelo experimental, se realizaron estudios de los parámetros bioquímicos y conductuales que lo subyacen. El EPC y la ingesta de etanol modificaron la captación de glutamato en dos áreas cerebrales y alteraron la expresión de los transportadores de glutamato, tanto gliales como neuronales. Los niveles basales de la hormona liberadora de corticotrofina, de la hormona adrenocorticotrofina y de la corticosterona también se vieron modificados en nuestro modelo. Por último, el EPC alteró la conducta de los animales en pruebas de conflicto, aumentando significativamente la exploración de los ambientes aversivos. En conclusión, el EPC induce la ingesta voluntaria de etanol y tiene consecuencias a nivel conductual afectando claramente al sistema glutamatérgico y al eje hipotálamo-hipófisis-adrenal.

Abstract:
Exposure to stress during the first years of life has been shown to have profound effects on the growth and development of an individual. Early adverse effects increase the risk of postraumatic disorder, depression and addiction to drugs of abuse, such as alcohol. Our objective was to assess the consequences on a behavioral, biochemical and molecular level of chronic postnatal stress (CPS) and its possible reversion by an enriched environment in adult rats focusing on voluntary alcohol intake. Our results showed that CPS induced ethanol intake in adult rats, a behavior that was reversed by an enriched environment. Once we got this model we wanted to begin the study of biochemical and behavioral parameters that underlie them. CPS and ethanol intake altered glutamate uptake in two different brain areas as well as the expression of glial and neuronal glutamate transporters. The basal levels of corticotrophin-releasing-hormone, adrenocrticotrophic hormone and corticosterone were also modified in our model. Finally, the CPS altered the animal’s behavior in conflict tests, increasing significantly the exploration of aversive environments. In conclusion, CPS induces voluntary ethanol intake and has consequences on a behavioral level and induces clearly alterations in the glutamatergic system and in hypothalamic-pituitary-adrenal axis

"Consecuencias funcionales de la evolución adaptativa del receptor nicotínico alfa 9 alfa 10" (2011). Lipovsek, María Marcela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El receptor nicotínico de acetilcolina (nAChR) α9α10 media la inhibición eferente de las células ciliadas del oído interno en vertebrados. La inhibición es el resultado de la entrada de Ca2+ a través del nAChR, que activa una corriente de K+ dependiente de Ca2+. El análisis de secuencias utilizando modelos de máxima probabilidad basados en codones mostró evidencias de selección positiva en el gen CHRNA10, codificante para la subunidad α10, en el linaje de mamíferos (Franchini y Elgoyhen, 2006). Proponemos que, como resultado de sustituciones no-sinónimas, los receptores α9α10 de mamíferos y no-mamíferos presentarían propiedades funcionales diferentes. Para poner a prueba esta hipótesis, estudiamos receptores recombinantes α9α10 de un mamífero (Rattus novergicus), un ave (Gallus gallus) y un anfibio (Xenopus tropicalis) expresados en oocitos de Xenopus laevis. Encontramos que los cambios ocurridos a lo largo de la evolución alteraron dramáticamente las propiedades de los receptores. A diferencia de la subunidad de rata, la subunidad α10 de pollo fue capaz de conformar receptores funcionales. Sorprendentemente, la permeabilidad al calcio del receptor α9α10 de pollo resultó significativamente menor que la del receptor de rata. Además, cambios en la subunidad α9 (y no la α10) resultaron responsables de las diferencias descriptas en la permeabilidad al Ca2+. El análisis de secuencias de los genes codificantes para todas las subunidades nicotínicas mostró que únicamente la subunidad α10 se encuentra bajo selección positiva en el linaje de mamíferos. Los resultados presentados demuestran una historia evolutiva diferente para los receptores α9α10 de mamíferos y no-mamíferos, con consecuencias funcionales de notable importancia para el funcionamiento del sistema eferente olivococlear.

Abstract:
The α9α10 nicotinic acetylcholine receptor (nAChR) mediates efferent inhibition of cochlear hair cells in vertebrates. This inhibition results from a Ca2+-dependent K+ current activated by Ca2+ entry through α9α10 nAChRs. Sequence analysis using codonbased maximum likelihood models showed evidence of positive selection in the CHRNA10 gene within the mammalian lineage (Franchini and Elgoyhen, 2006). We propose that, as a result of non-synonymous substitutions, mammalian and nonmammalian α9α10 nAChRs should present differential functional properties. To test this hypothesis, we studied recombinant mammalian (Rattus novergicus), avian (Gallus gallus) and amphibian (Xenopus tropicalis) α9α10 nAChRs expressed in Xenopus laevis oocytes. We found that these evolution-driven modifications dramatically changed the receptor’s properties. Unlike rat, chicken α10 subunits formed a functional receptor. Strikingly, the Ca2+ permeability of the avian α9α10 nAChR was substantially lower than that of its mammalian counterpart. Moreover, changes in the α9 subunit (and not α10) were responsible for the encountered differences in Ca2+ permeability. Sequence analysis of the genes coding for all the nAChR subunits showed that only the α10 subunit was under positive selection within the mammalian lineage. These results indicate a different evolutionary history of mammalian versus non-mammalian α9α10 nAChRs, with important functional implications for the operation of the efferent system in each species.

"Conservación del Macá Tobiano (Podiceps gallardoi): factores que afectan la viabilidad de sus poblaciones" (2016-03-15). Roesler, Carlos Ignacio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La tasa actual de extinción de especies ha aumentado al menos dos órdenes de magnitud respecto a los valores históricos del registro fósil por lo que la conservación de la biodiversidad se ha vuelto prioritaria en Biología. El Macá Tobiano se encuentra entre las c. 220 especies de aves enpeligro crítico de desaparecer y es la única que se distribuye casi exclusivamente en Argentina. Fue descubierto por la ciencia occidental en 1974 en las mesetas de altura del oeste de la provincia de Santa Cruz, donde se reproduce. Durante el invierno migra hacia las rías y estuarios de los grandes ríos de la misma provincia. Hasta mediados de la década de 1990’s se estimaba que la población incluía entre 3000 y 5000 individuos, pero a mediados del 2000’s se detectó una importante reducción poblacional. El objetivo de esta Tesis fue evaluar la viabilidad de las poblaciones y generar información que permita realizar acciones de conservación y manejo con base científica. Se estudió la historia natural, tendencias poblacionales recientes, éxito reproductivo, comportamiento migratorio y su consecuencias en la estructuración genética (ADNmt), y el impacto de las especies invasoras sobre la especie. Se realizaron un total 1041 días/hombre de trabajo de campo, en c. 450 lagunas de nueve mesetas de altura del oeste de Santa Cruz. Se realizaron censos poblacionales, seguimiento regular de las colonias de nidificación, se marcaron y se tomaron muestras de sangre de individuos y se evaluó la presencia de tres especies invasoras que constituyen una amenaza para el Macá Tobiano (el Visón Americano Neovison vison, la Trucha Arcoíris Oncorhynchus mykiss y la Gaviota Cocinera Larus dominicanus). Se encontró que la población global del Macá Tobiano se redujo mas de un 80% en 25 años, que la reducción no fue homogénea en toda su distribución y que los factores causales de esta heterogeneidad varían de meseta a meseta. El éxito de reclutamiento (juveniles que llegan a la edad de la migración por intento de nidificación) fue variable entre temporadas y estuvo muy influenciado por las características de las lagunas en las que ocurrió la nidificación. Las causas principales que afectaron el éxito reproductivo fueron de origen climático, principalmente las tormentas de viento, aunque todos los factores de amenaza detectados tienen un efecto negativo sobre el reclutamiento. El marcado de individuos y los censos poblacionales mostraron que existe un comportamiento migratorio de tipo filopátrico. Esta filopatría se vio además reflejada en una estructuración genética de las poblaciones de distintas mesetas. Las especies invasoras afectaron al macá en distintas etapas del ciclo de vida y en diferentes zonas de la distribución. Los resultados indican que la población se habría reducido como resultado de una multiplicidad de factores, por lo que deben desarrollarse una variedad de acciones de manejo para proteger las poblaciones remanentes. Estas acciones deben realizarse diferencialmente en las distintas etapas del ciclo de vida y en las distintas mesetas. En función de las primeras experiencias de medidas de manejo aplicadas, se concluye que la conservación del Macá Tobiano depende hoy de la aplicación de acciones de conservación directa. Asimismo, resulta muy importante continuar con los estudios sobre las principales amenazas que enfrentan las poblaciones del Macá Tobiano y de los aspectos aún desconocidos de su biología.

Abstract:
The extinction rate of the species has increased by at least two orders of magnitude compared to the historical values of fossil records, which is why the conservation of biodiversity has become a priority in biology. The Hooded Grebe is among the c. 220 critically endangered bird species and it is the only one with a distribution almost exclusively within Argentina. It was discovered in 1974 in the highland plateaus of the western Santa Cruz province, where it reproduces. During winter it migrates to the estuaries of the same province. During the mid 1990’s the population was estimated at 3000 to 5000 individuals, but by mid 2000’s, a drastic reduction of the population was detected. The objective of this Thesis was to assess the viability of the populations and to generate information that will lead to conservation actions and management with a scientific basis. Studies on its natural history, recent population trends, reproductive success, migratory behavior and its consequences in the genetic structure of the population were carried out, as well as the impact of alien species on the viability of the populations. A total amount of 1041 man-days of fieldwork was carried out on the c. 450 lakes of nine highland plateaus in west Santa Cruz province, including population censuses, regular monitoring of the breeding colonies, marking of individuals, blood samples collection and evaluation of the presence of invasive species which present a threat to the Hooded Grebe: the American Mink Neovison vison, the Rainbow Trout Oncorhynchus mykiss, and the Kelp Gull Larus dominicanus. Results showed that the global population of the Hooded Grebe was reduced by more than 80% in the past 25 years, that this reduction was not homogeneous in all its distribution and that the causing factors of this heterogeneity varied from one plateau to another. The recruitment rate (juveniles that reach to migration per reproductive pair) varied between seasons and was influenced heavily by the characteristics of the lakes where breeding had occurred. The main causes that affected the reproductive success had climatic origins (such as windstorms), but all threat factors found were shown to have a negative impact on recruitment. The marking of individuals and population censuses showed the existence of a philopatric migratory behavior. This philopatry was also reflected in the genetic structure among populations in different plateaus. Each of the invasive species affected the Hooded Grebe in different stages of its lifecycle and on different areas of its distribution. The results indicate that the population has been reduced as a result of a multiplicity of factors, which is why a variety of management actions need to be developed in order to protect the remaining populations of the Hooded Grebe. These actions must be carried out differently in the distinct lifecycle stages and plateaus. According to the first management measures applied, it can be concluded that the conservation of the Hooded Grebe nowadays depends on the implementation of direct conservation actions. Also, it will be very important to carry out further studies on the main threats that the Hooded Grebe populations face and the yet unknown aspects of its biology.

"Construcción de funciones de estimación múltiple protegidas en modelos con verosimilitud factorizada" (2013). Molina, Fernanda Julieta. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En los últimos años, los métodos de estimación doble protegidos dieron lugar al desarrollo de propuestas múltiple protegidas. Diversos autores han presentado estimadores consistentes en más escenarios que los contemplados por los estimadores doble protegidos. Estas propuestas de estimación, lejos de construirse bajo una teoría general, son el resultado de procedimientos ad-hoc creados para cada modelo considerado. En este trabajo, desarrollamos un marco teórico que explica la existencia de estimadores múltiple protegidos en varias de las propuestas de estimación múltiple protegidas ya existentes, en modelos donde la verosimilitud se factoriza. Dicha teoría provee condiciones suficientes bajo las cuales es posible la construcción de ecuaciones de estimación que, bajo condiciones de regularidad, tienen soluciones que constituyen estimadores múltiple protegidos. Presentamos también condiciones suficientes bajo las cuales estimar de manera múltiple protegida ciertos parámetros de ruido, cuya estimación es necesaria para poder estimar de manera múltiple protegida al parámetro de interés. Además, aplicamos los métodos desarrollados para estimar en forma cuádruple protegida la componente lineal bajo un modelo de regresión parcialmente lineal con datos faltantes, ya que dicho modelo se inscribe en el marco de la teoría desarrollada. Incluimos también, los resultados de un estudio de Monte Carlo realizado bajo el modelo mencionado.

Abstract:
In recent years, double robust procedures have led to the development of multiple robust approaches. Different authors have shown consistent estimators that confer even more protection than double robust estimators. These estimation proposals, far from being constructed under a general theory, are the result of ad-hoc procedures created for each model considered. In this work, we develop a theoretical framework that explains the existence of multiple robust estimators in many of the multiple robust procedures existing in factorized likelihood models. This theory provides sufficient conditions for the construction of multiple robust estimating equations for the parameter of interest. We also provide sufficient conditions under which it is possible to construct multiple robust estimators for certain parameters needed for the estimation of the parameter of interest. We apply this procedure to obtain a multiple robust estimator for the linear component under a partial lineal regression model with missing outcomes, since this model fits in the framework of the developed theory. Also, we present the results of a Monte Carlo simulation study performed under the same model.

"Construcción de un espectrómero superheterodino en banda X para resonancia paramagnética electrónica y su posterior aplicación al estudio de los mecanismos de relajación espin-red, a temperaturas ambiente y del helio líquido sobre los cristales paramagnéticas Mn2+:OMg y Gd3+:F2Ca, mediante experimentos de tensiones uniaxiales y relajación con microondas pulsadas" (1970). Rettori, Carlos. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En síntesis, los trabajos llevados a ocho han dudo lugar a la construcción y puesta en funcionamiento do los medios por los cuales es posible realizar experimentos tendientes a obtener una mejor comprensión de los fenómenos de interacción entre el sistema de espinas, correspondientes a los electrones no apareados de ciertos tipos de iones, y los átomos que componen la red cristalina donde se encuentra ubicado dicho ion. Los experimetos realizados utilizan la técnica de Resonancia Electrónica (RPE).- Con éste motivo, la primera etapa del trabajo consistió en la construcción de un espectrómetro con dotección superheterodina, trabajando a banda X y una frecuencia intermedia (FI) do 60 MHs, que permita la obtención del espetro de absorción o dispersión entre niveles Zooman de elementos o compuestos que posean uno o varios electrones no no apareados. Este espectrómetro de alta sensibilidad , además de ser utilizado para los experimentos aqui realizados, puede fácilmente ser adaptado y empleado en otros tipos de estudios tales como radicales libres, resonancia ciclotrónica, experimentos de doble resonancia (RNDOR ) etc.- Los detalles de construcción son tratados en el capítulo uno.- Los experimentos realizados con el objeto do obtener mayor información acerca de la interacción entro un sistema de espinas y la red cristalina, consisten por un lado en la observación del corrimiento de la línea de absorción de estructura fina de un ion paramagnético cuando el cristal, donde está ubicado el ión, es deformado por una presión externa y por otro en la observación de la recuperación de la línea de absorción después de haber sido saturada. El primer tipo de experimento es tratado en el capítulo dos con el título Tensiones Uniaxiales.- Allí podrán verse los detalles de la construcción y realización de la experiencia, asi como el resultado de la medición del coeficiente de in-red de segundo orden c3g(²) para el sistema Mn²+, Omg a temperatura ambiente.- El segundo tipo de experimento es tratado en el capítulo tres con el título Relajación in-Red.- Alli podrán observarse los detalles de construcción y realización de la experiencia, así cono los resultados de la medición del tiempo de relajación in-red T1, dado por el tiempo de recuperación de una línea de absorción previamente saturada, del Cdᶟ+ ubicado en lugares con simetría tetragonal del F2Ca a temperatura del helio liquido.-

"Construcción y caracterización de estructuras complejas de biomoléculas con aplicación en el diseño de biosensores" (2003). Otero, Marcelo Javier. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Un biosensor es un dispositivo de reconocimiento molecular donde una biomolécula interactúa en forma altamente específica con un analito y donde el cambio químico producido en presencia del analito se traduce en una señal eléctrica procesable. Una de las etapas más importantes en el diseño de un biosensor es la de generar una estructura o superestructura, en la cual estén insertas las biomoléculas responsables de la respuesta del sensor. De esta etapa dependerán la actividad de la biomolécula, la sensibilidad, la especificidad y el ámbito de uso del biosensor. En este trabajo de tesis se estudiaron diversos aspectos de la inmovilización de enzimas y anticuerpos en el contexto de la construcción de electrodos enzimáticos para la detección de glucosa y de la construcción de sensores inmunológicos para detectar moléculas pequeñas a través de un ensayo competitivo. Para ello se utilizaron en forma complementaria distintas técnicas como la Microbalanza de Cristal de Cuarzo (QCM), la Elipsometría, la Microscopía de Fuerza Atómica (AFM)y diversas Técnicas Electroquímicas. Como técnicas de inmovilización se utilizaron la funcionalización covalente de superficies, el autoensamblado electrostático, el empleo de uniones de importancia biológica como avidina-biotina o antígeno-anticuerpo en la inmovilización de enzimas y el uso de proteínas orientadoras como proteína A y proteína G para la inmovilización de anticuerpos. En primer lugar se describe el uso de la microbalanza de cristal de cuarzo para estudiar sistemas autoensamblados en multicapas de glucosa oxidasa (GOx)y polialilamina derivatizada covalentemente con un complejo de Os: +, (PAH-Os), depositadas sobre superficies de oro modificadas con ácido 3-mercaptopropansulfónico (MPS). Las etapas de adsorción del polímero y la glucosa oxidasa se repitieron alternadamente obteniendo cristales de cuarzo modificados hasta con 14 bicapas de polímero-enzima. El espesor elipsométrico, determinado a tres longitudes de onda, y la masa de las películas autoensambladas, determinadas por QCM en condiciones gravimétricas, se determinaron en contacto con solución de electrolito y en condiciones de sequedad y se estimó a partir de dichas mediciones la densidad de la película en ambas condiciones. Se plantea en esta tesis una estrategia general para la extracción de las propiedades viscoelásticas de peliculas autoensambladas por combinación de QCM y elipsometría. Por combinación del espesor y densidad estimados de la película, la expresión de la impedancia mecánica superficial del cristal de cuarzo, y la viscosidad y densidad del electrolito, se pudieron estimar los valores de los módulos de almacenamiento (G') y perdida (G") a 10 MHz para una película autoensamblada como función del espesor y el potencial de electrodo durante dos tipos de perturbaciones electroquímicas: voltametría cíclica y saltos de potencial. Una vez planteada la utilidad de ambas técnicas, QCM y elipsometría en el estudio de la construcción de películas autoensambladas, éstas se emplearon para el estudio del crecimiento de películas autoensambladas de glucosa oxidasa biotinizada y PAH-Os utilizando dos estrategias distintas de inmovilización de la enzima: la formación de una unión antígeno-anticuerpo y la formación de una unión avidina-biotina. Se estudió la cinética de adsorción de las biomoléculas y el grado de inespecificidad de las interacciones durante la inmovilización de la enzima. Se estudió además el comportamiento biocatalítico de la glucosa oxidasa biotinizada inmovilizada en las distintas estructuras autoensambladas y se llegó a la conclusión de que la eficiencia de la comunicación eléctrica entre las enzimas y el mediador se ve afectada tanto por el tipo de inmovilización de la enzima, como por la cantidad de centros redox del polímero de osmio por cada molécula de enzima. Las enzimas redox inmovilizadas en estructuras autoensambladas no solamente tienen aplicación en el diseño de electrodos enzimáticos, sino también en el desarrollo de biosensores inmunológicos. La formación de una unión antígeno-anticuerpo no genera una señal medible por lo cual se recurre al uso de sustancias marcadoras. La mayor parte de los inmunoelectrodos desarrollados últimamente están basados en el uso de enzimas oxidoreductasas como marcadoras. Además de los marcadores es necesario utilizar mediadores redox para transferir la carga entre el electrodo y el sitio redox de la enzima y revelar la actividad enzimática a través de la señal del mediador. De este modo la superficie del electrodo representa, tanto el transductor para la detección enzimática, como el soporte inerte sobre el cual se inmovilizan los antígenos o los anticuerpos. En este contexto se construyeron multicapas autoensambladas de PAH-Os y un anticuerpo, IgG antibiotina, con el objetivo de construir un biosensor modelo para la detección de moléculas pequeñas (como la biotina) a través de un ensayo competitivo, utilizando un marcador enzimático basado en peroxidasa de rábano, HRP-biotina. Con la técnica de EQCM se estudió la deposición de las multicapas, es decir la cantidad de IgG depositada en cada capa, los cambios viscoelásticos durante la adsorción, la cinética de adsorción para distintas concentraciones de IgG y el pegado del marcador o conjugado HRP-biotina. Con la técnica de AFM se observó la estructura y orientación de las moléculas de IgG adsorbidas sobre el polímero y finalmente con las técnicas electroquímicas se estudió el crecimiento de las bicapas y la utilidad de la supraestructura como biosensor, a través del estudio de la catálisis enzimática del conjugado. Finalmente se describen resultados preliminares sobre el uso de proteínas orientadoras, proteína A y G’, utilizadas para disminuir la inespecificidad del sensor y favorecer la reacción entre el antígeno y el anticuerpo inmovilizado. En conclusión, los resultados obtenidos confirman que la inmovilización de biomoléculas es por cierto una de las etapas más importantes en el desarrollo de un biosensor al afectar la respuesta del mismo. Además se muestra la necesidad de recurrir a distintas técnicas para su estudio y de este modo contrarrestar las limitaciones propias de cada técnica.

Abstract:
A biosensor is a molecular recognition device, in which a biomolecule interacts high specifically with an analyte and where the chemical change produced by its presence is transduced into a processable electric signal. One of the most important stages of biosensor design is the generation of a structure or superstructure that contains the biomolecules responsible of the sensor response. The biomolecule activity, the sensibility, the specificity and the use of the biosensor depend on this stage. ln this thesis were studied different aspects of the enzymes and antibodies immobilization in the context of the development of enzymatic electrodes for glucose detection and the construction of immunosensors for the detection of small molecules through a competitive assay. For this purpose several complementary techniques were used such as Quartz Crystal Microbalance (QCM), Ellipsometry, Atomic Force Microscopy (AFM) and electrochemical techniques. Different types of immobilization were used namely electrostatic self-assembly, covalent functionalization of surfaces, the use of biological unions like avidin-biotin or antigen-antibody for the immobilization of enzymes and the use of binding proteins like protein A and protein G for the immobilization of antibodies. First of all have been described the used of the Quartz Crystal Microbalance for the study of layer by layer self assembled multilayers of glucose oxidase (GOx) and a redox polymer polyallylamine-Os(bpy)2ClPyCH2NH (PAH-Os), deposited on to thiol modified gold surfaces. The alternate adsorption steps of the polymer and the enzyme were repeated, reaching up to 14 polymer-enzyme bilayers. The ellipsometric thickness and the QCM gravimetric response were determined for the self-assembly films under electrolyte solution and in air. The density of the films was estimated in both environmental conditions. In this thesis a general strategy for the determination of the viscoelastic properties of self-assembled multilayers with the combination of QCM and ellipsometry has been suggested. By combininig the estimated film thickness and density, the expression of the electrical impedance of the modified quartz crystal surface and the properties of the solution, it was possible to estimate the storage (G’) and loss gear (G”) moduli at 10 MHz for a self-assembled film as a function of the thickness and electrode potential under two different electrochemical perturbations: Cyclic Voltammetry and Potential Steps. Once the combination of both techniques proved to be useful in the study of film construction, they were used to study the growth of self-assembled monolayers of biotinylated glucose oxidase and PAH-Os by using two different approaches of enzyme immobilization: the antigen-antibody binding and the avidin-biotin binding. The adsorption kinetics, the specificity of the interactions, and the biocatalytical behaviour of the immobilized enzyme in the different strategies were studied. It was concluded that not only is the electrical wiring efficiency between the enzyme and the mediator affected by the immobilization strategy, but also by the relationship between the concentration of redox centers and the concentration of enzyme. It is currently widely known that the immobilized redox enzymes in self-assembled structures can be applied in the design of enzymatic electrodes, but also in the development of immunological biosensors. The binding between an antigen and the specific antibody does not generate a measurable signal, and therefore a marker must be used. Many of the recently developed immunoelectrodes use an oxidoreductase enzyme marker. Apart from the marker, it is also necessary to use a redox mediator in order to transfer the redox charge between the electrode and the redox sites and to detect the enzyme activity through the mediator signal. The electrode surface has two different functions: as inert substrate for the antibodies and as enzymatic detection transducer. Self assembled multilayers of PAH-Os and an antibody, IgG antibiotin, were constructed in order to develop a biosensor for the detection of small molecules such as biotin through a competitive assay, using an enzymatic marker or conjugate: horseradish peroxidase-biotin (HRP-biotin). By use of the QCM technique it was possible to investigate the adsorption of IgG in the multilayers, the viscoelastic changes during the protein uptake, the adsorption kinetics for different antibody concentrations and the conjugate adsorption. The structure and orientation of the IgG molecules on the polymer modified surface were studied with AFM. And finally the growth of the layers and the utility of the superstructure as biosensor were studied with electrochemical techniques. Preliminary results of the use of binding proteins like protein A and protein G’, used in order to improve the immunological reaction, were also described. In conclusion, the obtained results confirm that the biomolecule immobilization is one of the most critical stages in the development of a biosensor, since it affects the biosensor use and response. It has also been shown the need for the use of different complementary techniques in order to characterize the construction of self-assembled multilayers.

"Construcción y evaluación de virus MVA recombinantes que expresan la glicoproteína D del virus BoHV-1" (2010). Ferrer, María Florencia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El virus vaccinia Ankara modificado (MVA) es un virus altamente atenuado que se utiliza eficientemente como vector viral no replicativo para el desarrollo de nuevas vacunas. En este trabajo de Tesis se desarrolló un nuevo inmunógeno basado en MVA que expresa como antígeno de interés la glicoproteína D (versión secretada, gDs) del virus herpes bovino tipo I (BoHV-1), un agente infeccioso ampliamente distribuido en Argentina. Primeramente, se diseñó y construyó el vector de transferencia para obtener MVA recombinantes utilizando como sitio blanco de inserción el gen no esencial MVA086R. Se obtuvieron virus MVA-gDs recombinantes y se demostró la correcta expresión, antigenicidad y N-glicosilación de la glicoproteína D expresada a partir de dichos virus. Posteriormente, se evaluó la capacidad inmunogénica de los virus MVA-gDs en animales de experimentación (ratones y conejos). En el modelo de ratón, se observó que los virus MVA-gDs desencadenaron una respuesta inmune específica, de tipo humoral, que se mantuvo en niveles similares durante un período de siete meses (luego de la aplicación de dos dosis del inmunógeno). Además, se demostró que la síntesis de novo de la glicoproteína D a partir del vector viral no replicativo MVA-gDs fue la responsable de la respuesta inmune específica. La inoculación de conejos con virus MVA-gDs (por vía intramuscular o subcutánea) desencadenó una respuesta inmune específica de tipo humoral, observándose la máxima respuesta a los 9 días post dosis de refuerzo. En un ensayo de desafío de conejos con el virus BoHV-1, se observó que la inmunización por vía intramuscular de los animales con virus MVA-gDs disminuyó la excreción del virus de desafío. Finalmente, se demostró que la inmunización de ratones por vía intranasal con virus MVA-gDs adicionados con toxina colérica indujo respuestas inmunes humorales específicas de tipo IgA en muestras de lavados nasales y broncopulmonares y de tipo IgG en muestras de suero. De esta forma, se obtuvo, caracterizó y evaluó un nuevo inmunógeno denominado MVA- gDs que, en el futuro, podría ser evaluado como candidato a vacuna contra el virus BoHV-1 en bovinos.

Abstract:
Modified vaccinia virus Ankara (MVA) is a highly attenuated virus. During the past years, non-replicative recombinant MVA vectors have gained major interest in the development of new veterinary vaccines. Bovine herpesvirus 1 (BoHV-1) infection is widely distributed in Argentina and there are no efficacious vaccines to prevent the diseases caused by this virus. In order to develop a candidate vaccine for BoHV-1, the secreted version of glycoprotein D (gDs) was selected as the antigen to be expressed in new recombinant MVA non-replicative based vectors. First, the design and construction of the transference vector necessary to obtain recombinant MVA viruses was achieved using the non-essential gene MVA086R. Recombinant MVA-gDs virus was obtained and molecularly characterized, confirming the correct expression, antigenicity and N-glycosilation of glycoprotein D. Then, immunogenicity of recombinant MVA-gDs viruses was assessed in experimental animals (mice and rabbits). Mice immunized with MVA-gDs viruses developed a specific humoral immune response that was maintained for seven months and was dependent on the booster dose. In addition, mice immunized with MVA-gDs virus demonstrated that MVA-gDs non-replicative viral vector was responsible for the de novo synthesis of glycoprotein D and, consequently, for the immune response induced in animals immunized with not inactivated MVA-gDs virus. Intramuscular and subcutaneous rabbit inoculation with MVA-gDs virus was immunogenic and induced a specific humoral immune response. In a rabbit BoHV-1 challenge assay, diminished viral excretion was observed in those animals intramuscularly immunized with recombinant MVA-gDs. Finally, in order to evaluate MVA-gDs virus as a mucosal vaccine, two doses of MVA-gDs supplemented with cholera toxin were delivered by intranasal immunization of mice. These immunizations induced anti-gD IgA humoral immune responses in nasal and bronchopulmonar lavages as well as anti-gD IgG antibodies in serum samples. In conclusion, the new immunogen designated MVA-gDs was developed, characterized and evaluated in experimental animals. In the future, it could be evaluated in cattle as a candidate bovine vaccine for BoHV-1.

"Consumo materno de alcohol: impacto en el desarrollo embrio-trofoblástico temprano y en la gestación a término" (2014-12-22). Pérez Tito, Leticia Gabriela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El consumo de alcohol durante la gestación produce el Síndrome de Alcoholismo Fetal. Postulamos que el consumo perigestacional de alcohol hasta períodos periimplantatorios, en el ratón, induce alteraciones embrio-trofoblásticas que resultan en defectos feto-placentarios a largo plazo. Utilizando modelos murinos (CF-1 y CD-1) y la administración oral de etanol (10%) previo a la fecundación y hasta los días 4, 5 u 8 de gestación (dg), los objetivos fueron: 1) analizar parámetros biométricos y el ciclo estral frente a la exposición pregestacional (17 días previos a la gestación); 2) evaluar la diferenciación, crecimiento embrionario y capacidad invasiva trofoblástica luego del consumo de alcohol hasta la etapa periimplantatoria (días 4 y 5 dg) y postimplantatoria temprana (día 8 dg); 3) analizar la incidencia de malformaciones fetales y anomalías placentarias en la gestación a término (día 18 dg). La exposición pregestacional a alcohol en CF-1 indujo interrupción del ciclo estral, resultados que determinaron la inducción de la ovulación. Al día 4 dg (preimplantación) en CF-1 y CD-1 se evidenció retraso en la diferenciación y crecimiento embrionario, alteración de la expresión y localización de moléculas de adhesión (ZO-1, E-cadherina) y aumento de apoptosis. Al día 5 dg (implantación), además de retraso de diferenciación, se halló desregulación en la dinámica de crecimiento y expansión trofoblástica durante la implantación in vitro. Al día 8 dg, se evidenció menor grado de diferenciación embrionaria, alteraciones histológicas junto a una alta tasa de apoptosis. La reducida expresión de E-cadherina en ectodermo embrionario e incremento de metaloproteasas -2 y -9 posiblemente se relaciona con la expansión trofoblástica anómala observada en cultivos de conos ectoplacentarios. Al día 18 dg, luego del consumo de alcohol hasta el día 4, 8 o 10 dg, se encontró aumento de reabsorciones embrionarias, alta incidencia de malformaciones craneofaciales, osificación fetal incompleta y alteraciones histológicas placentarias. La ingesta perigestacional de alcohol hasta la preñez temprana altera la dinámica de diferenciación y crecimiento del embrión periimplantatorio, las uniones celulares y la expresión de metaloproteasas en los tejidos embrionarios conduciendo a malformaciones fetales y posible restricción del crecimiento intrauterino al día 18 dg. La desregulación de la invasividad trofoblástica al día 5 y 8 dg podría vincularse con pérdida temprana de la gestación y con alteraciones placentarias observadas en la gestación a término.

Abstract:
Alcohol consumption during pregnancy causes Fetal Alcohol Syndrome. We postulate that perigestational consumption of alcohol to periimplantational periods in mouse, induces embryonic and trophoblast changes that result in fetal-placental defects at long term. Using murine models (CF-1 and CD-1) and oral administration of ethanol (10%) previously to fertilization and up to days 4, 5 or 8 of gestation (g), the objectives were: 1) to analyze biometric parameters and the estrous cycle upon pre-gestational exposure (17 days prior to gestation), 2) to evaluate the differentiation, the embryo growth and trophoblast invasiveness after alcohol drinking up to stages of peri-implantation (days 4 and 5 g) and early post-implantation (day 8 g), 3) to analyze the incidence of fetal malformations and placental abnormalities in pregnancy to term (day 18 g). The pregestational exposure to alcohol in CF-1 induced disruption of the estrous cycle, results that determined the induction of ovulation. By day 4 g (preimplantation) in CF- 1 and CD-1 delayed embryo differentiation and growth, disruption of expression and localization of adhesion molecules (ZO-1, Ecadherin) and increased apoptosis were evidenced. By day 5 g (implantation), besides the delayed differentiation, deregulation of trophoblast growth and expansion dynamics was found during in vitro implantation. At 8th gd, it were evidenced lower degree of embryonic differentiation, and histological anomalies with a high rate of apoptosis. The reduced E-cadherin expression in embryonic ectoderm and metalloproteases -2 and -9 increase possibly is related to abnormal trophoblast expansion observed in cultures of ectoplacental cones. At day 18 g, after alcohol consumption up to 4, 8 or 10 g, increased embryo resorptions, high incidence of craniofacial malformations, incomplete fetal ossification and placental histological abnormalities were found. The perigestational alcohol intake up to early pregnancy alters the dynamics of differentiation and growth of periimplantational embryo, the cell junctions and the expression of metalloproteinases in embryonic tissues leading to fetal malformations and possible intrauterine growth restriction day 18 g. Deregulation of trophoblast invasiveness on day 5 and 8 g could be linked to early pregnancy loss and placental alterations observed in the pregnancy to term.

"Contaminación antrópica de los cuerpos de agua. Estudio de su efecto sobre organismos del fitoplancton a escala ecológica y de bioensayos de laboratorio" (2016-09-23). Nannavecchia, Paula Silvia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis se evaluó el impacto de la contaminación sobre organismos del fitoplancton, a nivel ecológico e in vitro. Se caracterizaron las condiciones ecológicas del arroyo Carabassa, contaminado por efluentes industriales y urbanos. Se analizó la composición del fitoplancton y biomarcadores de estrés oxidativo, determinándose un elevado deterioro de sus aguas. Los sitios más contaminados presentaron altas concentraciones de metales y materia orgánica, excediendo los niveles permitidos. Los grupos más abundantes fueron las Chlorophyceae, Cyanobacteria y Euglenophyceae y los parámetros de estrés oxidativo mostraron los valores más altos en el fitoplancton de los sitios más contaminados. Se realizaron bioensayos toxicológicos con microalgas aisladas de un río contaminado por exceso de materia orgánica (MO) y metales pesados (río Matanza). Se estudió la respuesta de Phacus brachykentron a diferentes concentraciones de MO. El aumento de MO determinó una menor tasa de crecimiento y deformaciones celulares. Se modificaron características sistemáticas específicas, lo que implica que organimos considerados como otras especies pueden ser ecomorfos del mismo taxón. Se analizó el efecto del arsenito de sodio sobre el crecimiento, morfología y parámetros de estrés oxidativo de dos cepas de Euglena gracilis, especie cosmopolita que también habita relaves mineros con altas concentraciones de arsénico. Se emplearon cultivos de dos cepas: UTEX (de una colección de cultivos) y MAT (aislada del río Matanza), en medio mineral y orgánico. El arsenito inhibió el crecimiento de manera dosis dependiente, independientemente del medio. Aumentó el contenido de la sustancia de reserva y el diámetro celular. Los resultados sugieren la participación de estrés oxidativo en la toxicidad del arsenito y diferencias en la respuesta antioxidante de ambas cepas.

Abstract:
The impact of contamination on phytoplankton organisms at an ecological scale and in laboratory bioassays was evaluated. The ecological conditions of the Carabassa stream, which is contaminated by urban and industrial effluents, were characterized. The analysis of the phytoplankton composition and oxidative stress biomarkers determined a high deterioration of its waters. The most contaminated sites had a high concentration of metals and organic material, which exceeded the maximum permitted levels. The most abundant groups were the Chlorophyceae, Cyanobacteria, and Euglenophyceae. The highest oxidative stress responses were measured on the most contaminated sites. Toxicological bioassays were performed in Phacus brachykentron, a microalgae strain isolated from a river contaminated with excess of organic matter (MO) and heavy metals (Matanza River). An increase in MO in the bioassays decreased the growth rate of the organisms and increased cellular deformations. Specific characteristics used to identify this species were modified, thus, organisms that might be consider a different species in the wild might be ecomorphs of the same taxa. The effect of sodium arsenite on the growth, morphology, and the oxidative stress response of Euglena gracilis were analyzed. This species has worldwide distribution and also inhabits mine tailings with high arsenic concentrations. Bioassays were performed in mineral and organic media in two strains: one from a culture collection (UTEX) and another isolated from the Matanza River (MAT). Regardless of the medium the experiments were performed, the arsenic inhibition on the growth rate of both strains was concentration dependent. The cellular reserves and the cellular diameter increased with increased arsenic concentration. The results suggest that oxidative stress could be involved in the toxicity of arsenite in Euglena, with differences in the antioxidant response between both strains.

"Contaminación del aire por material particulado en la Ciudad de Buenos Aires" (2005). Martin, Paula Beatriz. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El proceso de urbanización origina grandes transformaciones en el medio ambiente. El deterioro de la calidad del aire en las grandes ciudades es un problema mundial que se incrementa con el crecimiento de la población. Entre los contaminantes del aire urbano, el material particulado en suspensión es considerado uno de los más importantes, por sus posibles efectos sobre la salud de las personas. La mayor peligrosidad está relacionada con su capacidad de ingresar en los pulmones, alojándose allí y dañando los tejidos involucrados en el intercambio de gases. Otros efectos del material particulado en suspensión están relacionados con la reducción de la visibilidad, con el aumento de la dispersión y/o de la absorción de la radiación solar afectando la radiación de onda corta y con el aumento del número de núcleos de condensación en la atmósfera. También, existen evidencias de los daños originados por el depósito de material particulado sobre edificios y monumentos. En este trabajo se estudian algunas características de la concentración de fondo de material particulado en suspensión total y PM10 en la atmósfera de la Ciudad de Buenos Aires. Además, se obtuvieron estimaciones del depósito de material particulado en la ciudad y se analizan sus distribuciones espacial y temporal. Fundamentalmente, se desarrolló y utilizó el modelo de dispersión-depósito DAUMOD-D, para estimar la concentración en aire y el depósito de material particulado en áreas urbanas y se lo aplicó a las emisiones de material particulado en la Ciudad de Buenos Aires. Este modelo incluye una parametrización de los procesos de depósito seco y húmedo de material particulado en un área urbana. Se describe la metodología utilizada para evaluar la “velocidad de depósito” en función de la distribución del tamaño de las partículas, de las condiciones atmosféricas y de la rugosidad de la superficie. Asimismo, se presenta la parametrización del “coeficiente de lavado” de partículas por la precipitación, en función de la distribución del tamaño de las partículas, de la eficiencia de colisión de las gotas de lluvia y de la intensidad de la precipitación. Para la aplicación del modelo desarrollado a la Ciudad de Buenos Aires, se presentan los resultados de un inventario de emisiones de material particulado en la ciudad. Los valores de las concentraciones de fondo de material particulado y del flujo de partículas sedimentables estimados por el modelo desarrollado han sido comparados con las observaciones realizadas por el Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires en diferentes zonas de la ciudad. Los resultados del modelo sobre-estimaron levemente el flujo de partículas sedimentables: el error cuadrático medio normalizado fue 37%, el error fraccional –9.1% y la varianza fraccional 1.8%. El 72% de las estimaciones resultó dentro de un factor 2 de las observaciones. Por otra parte, los valores estimados de la concentración de fondo de material particulado en suspensión resultaron algo inferiores a los observados: el error cuadrático medio normalizado fue 20.0%, el error fraccional 21.5%, la varianza fraccional 7.7% y el 87% de las estimaciones resultaron dentro de un factor 2 de las observaciones. De esta forma, los resultados obtenidos por el modelo DAUMOD-D para la ciudad de Buenos Aires pueden considerarse satisfactorios. Se estudió la variación mensual de la distribución espacial del depósito de material particulado en la ciudad, encontrándose que pueden existir zonas donde el depósito mensual de material particulado supere 1 mg/(cm2.30d) (límite establecido por la Ley 1356, de la Ciudad de Buenos Aires). Se presentan distribuciones horizontales de la concentración de fondo de material particulado en suspensión total en la ciudad para diferentes tiempos de promedio. Las zonas de la ciudad con los mayores valores de concentraciones horarias varían con las condiciones atmosféricas y la hora del día. Por otra parte, las máximas concentraciones mensuales de material particulado en suspensión pueden superar los 0.15mg/m3, principalmente en los meses invernales. Las zonas de la ciudad que presentan los mayores valores de concentración de material particulado en suspensión incluyen los barrios de Constitución-Retiro, Palermo, y alrededor de la Autopista 25 de Mayo y la Avenida Rivadavia. Asimismo, se estimaron las concentraciones de fondo , diaria y anual, de material particulado PM10 en la Ciudad de Buenos Aires. La concentración media anual de PM10 presentó valores superiores a 0.05 mg/m3 (límite establecido por la Ley 1356, Ciudad de Buenos Aires) en el microcentro y en los barrios de Constitución y Retiro. Las concentraciones medias diarias de PM10 superaron los 0.15 mg/m3 (límite establecido por la Ley 1356, Ciudad de Buenos Aires) en Constitución, Retiro y en los alrededores del Aeroparque y la Autopista 25 de Mayo. Estas situaciones pondrían en riesgo al 51.6 % de la población total de la ciudad al menos 1 vez/año. Además, se estudió la ocurrencia consecutiva de concentraciones diarias altas, obteniéndose 3 rachas de 3 días de duración, que pondrían en riesgo al 0.6 % de la población menor que 14 años y al 0.7 % de la población mayor que 65 años. Se evaluó el aporte relativo de las diferentes fuentes de emisión a la contaminación por material particulado en diferentes zonas de la ciudad. Los automotores contribuyen con más del 60% de la concentración estimada y en segundo lugar se encuentra el aporte del transporte automotor de pasajeros (con alrededor del 20%) a la concentración estimada.

Abstract:
The urbanization process causes large environmental changes. The deterioration of the air quality in big cities is a world problem, aggravated by demographic growth. Among urban air pollutants, suspended particulate matter is considered to be one of the most important because of its effect on human health. The greatest risk is related to its capacity of entering the lungs, depositing there and injuring the tissues involved in gas exchange. Other effects of these particles are related to decreased visibility, greater scattering and/or absorption of solar radiation, affecting short wave radiation and increasing the number of atmospheric condensation nuclei. There is also evidence about the damage caused by particle deposition on buildings and monuments. This study reports some characteristics of the background concentration of total and PM10 suspended particulate matter in the atmosphere of Buenos Aires. Particulate matter deposition in the city was estimated and an analysis was made of its spacial and temporal variations. Basically, the DAUMOD-D dispersion-deposition model was developed and used to determine particulate matter air concentration and deposition in urban areas and it was applied to particulate matter emissions in Buenos Aires. This model includes a parameterization of dry and wet deposition of particles in an urban area. The methodology used to assess the “deposition velocity” in function of particles size distribution, atmospheric conditions and surface roughness is described. The parameterization of the “scavenging coefficient” for particles, that describes the rate of removal of particles by rain, includes particle size distribution, raindrop collision efficiency and rainfall intensity. The results of an emission inventory for particulate matter in Buenos Aires is presented for the application of the model. The particulate matter background concentration values and particle deposition flux, estimated using the developed model have been compared with observations obtained by the City Government of Buenos Aires at different sites. The results of the model slightly over-estimated the deposition flux the normalized mean square error was 37%, fractional error –9.1% and fractional variance 1.8%. A 72% of the estimations were within a factor of 2 the observed values. On the other hand, the estimated background concentration values of suspended particles were found to be slightly lower than those observed: the normalized mean square error was 20%, the fractional error 21.5%, fractional variance 7.7% and a 87% of the estimates were within a factor of 2 the observations. In this way, the results obtained with the DAUMOD-D model for Buenos Aires may be considered satisfactory. The monthly spatial variation of particulate matter deposition is studied and it is found that there may be zones where the monthly particle deposition flux is greater than 1 mg/(cm2.30d) (air quality standard value set by Buenos Aires City Law 1356). Horizontal distributions of total suspended particles background concentrations for different averaging time are presented. The areas in the city with the highest hourly concentration vary according to atmospheric conditions and the time of day. On the other hand, maximum monthly-suspended particulate matter concentrations may exceed 0.15 mg/m3, particularly during winter months. The areas of the city with the highest suspended particulate matter concentrations include Constitución-Retiro, Palermo and along the 25 de Mayo Highway and Rivadavia Avenue. Daily and annual PM10 particulate matter background concentrations in Buenos Aires were also estimated. The mean annual concentration of PM10 exceeded 0.05 mg/m3 (air quality standard value set by Buenos Aires Law 1356) in the area of downtown, Constitución and Retiro. Daily mean concentrations of PM10 exceeded 0.15 mg/m3 (air quality standard value set by Buenos Aires City Law 1356) in Constitución, Retiro, in the surrounding of the Domestic Airport and the 25 de Mayo Highway. These risky situations could expose 51.6% of total population in the city once a year. The persistence of risky situations of daily mean concentrations was studied. Results showed that a persistence of 3 days might occur. This condition could expose 0.6% of children up to 14 years old and 0.7% of elderly people greater than 65 years old during three times a year. It was also estimated the relative contribution of the different emission sources to total suspended particles concentration in different locations of the city. Results show the contribution of vehicles is greater than 60 % and around 20 % of the concentration value can be allocated to public buses.

"Contaminación en suelos de la provincia de Buenos Aires con el herbicida organofosforado (glifosato) : impacto sobre la comunidad de hongos filamentosos" (2014-03-31). Fernández Di Pardo, Agustina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El herbicida más utilizado en Argentina es el N-phosphonomethylglycine (nombre comercial: Glifosato). Éste puede ser rápida y completamente degradado por los microorganismos, por lo que el tiempo de vida en el suelo es bajo. Sin embargo, el comportamiento del glifosato puede variar en función de las características físicas y químicas del suelo sobre el que se aplique. Por lo tanto, el tiempo de permanencia en el suelo podría ser mayor. Es importante estudiar el comportamiento de este herbicida dada las potenciales alteraciones que puede provocar en las comunidades de microorganismos que viven en el suelo y en algunos de sus procesos. La contaminación de los suelos no sólo está afectando su biodiversidad microbiana sino también a su fertilidad, dado que los microorganismos son fundamentales para el proceso de reciclaje de nutrientes. En este trabajo, se compararon comunidades de hongos filamentosos provenientes de suelos con y sin historia de aplicación de glifosato y se evaluó la capacidad de los hongos filamentosos en la recuperación de suelos contaminados por el herbicida glifosato. Para ello, se aislaron y caracterizaron hongos filamentosos del suelo en dos sitios con distinta historia de aplicación de glifosato utilizando dos técnicas distintas (método tradicional de lavado de muestras múltiples y siembra de partículas de suelo y el método de pirosecuenciación). Se seleccionaron cepas tolerantes a glifosato, se estudiaron los efectos del glifosato sobre los hongos luego de una aplicación puntual y se evaluó la presencia de glifosato en el suelo. Se observó que las poblaciones fúngicas del suelo varían en su composición específica y en su biomasa en suelos expuestos a glifosato en comparación con suelos sin exposición. La mayor riqueza específica y los mayores valores de ergosterol, como medida indirecta de biomasa, se obtuvieron en suelos sin historia de prácticas agrícolas. Se lograron obtener cepas tolerantes al glifosato: T. harzianum; F. oxysporum; P. lilacinus; C. didymum. Finalmente, los valores de concentración de glifosato en suelos fueron bajos y prácticamente nulos luego de 3 meses de la aplicación en la mayoría de los casos.

Abstract:
The most widely used herbicide in Argentina in de N-phosphonomethylglycine (glyphosate). Because it can be rapidly and completely degraded by microorganisms, it disappears quickly from soil. However, the destiny of glyphosate in soil may vary depending on the physical and chemical soil characteristics. It is important to study the behavior of this herbicide given the potential changes that may produce in the communities of microorganisms and in the processes that involves them. The soil contamination with this herbicide no only affects the microbial biodiversity, but also its fertility, considering that microorganisms are a fundamental part of the nutrient recycling process in soil. In this study, changes in filamentous fungi communities’ from soils that were previously or not exposed to the herbicide and the capacity of some strains of remediating contaminated soils were evaluated. Soil fungi were isolated and communities were characterizes in two sites with different history of exposure to glyphosate, using two techniques: traditional isolation method (morphological) and pyrosequencing (molecular). Tolerant strains of fungi were selected; effects of recent glyphosate application on soils fungal communities was evaluated and remnant glyphosate in soil was quantified. In conclusion, soil fungal community changes and fungal biomass reduction were observed after glyphosate application. Six tolerant strains were obtained: T. harzianum; F. oxysporum; P. lilacinus; C. didymum. The concentration of glyphosate in soil was practically zero after 3 month from application.

"Contaminantes metálicos en el Río de la Plata : monitoreo del sistema acuático y estudio de algunos efectos tóxicos en moluscos bivalvos por medio de bioensayos" (1995). Verrengia Guerrero, Noemí Rosario. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contenido de ácido nicotínico en harinas del comercio" (1945). Laurnagaray, Roberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contenido en vitamina C de vegetales argentinos comestibles y leches de consumo" (1938). Repetto, Osvaldo M.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contenido en ácido nicotínico de ciertas harinas argentinas" (1944). Josem, Syma. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribuciones al estudio de la climatología sinóptica en la Argentina" (1998). Alessandro, Adelia Perla. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El tema central de esta tesis es determinar en la Argentina, la influencia de una situación persistente en una escala mayor sobre el desarrollo de los sistemas migratorios, y la asociación de la misma con las variaciones de temperatura y precipitación. Para su estudio, se han utilizado datos y cartas sinópticas del Servicio Meteorológico Nacional y los valores diarios de 12 UTC de los análisis del Centro Europeo de Pronóstico de Mediano Plazo, de los años 1980-1988 en los niveles de 500 y 1000 hPA. Con estos datos se han obtenido los campos medios, base para el cómputo de las anomalías en casos particulares y para ver la influencia del continente sudamericano. La situación sinóptica en la escala regional se halla dominada por la posición y amplitud de las ondas largas en los oestes. A fin de cuantificar este aspecto se han seleccionado índices regionales de circulación meridional, zonal y de curvatura en 1000 y 500 hPA como también del espesor de 500/1000 hPA. La marcha anual del índice meridional entre 40 y 90°O en 40°S y el zonal entre 35 y 55°S en 60°O, coinciden en general con lo ya estudiado para el Hemisferio Sur, en cambio el índice de curvatura muestra una fuerte influencia térmica del continente sudamericano en 40°S. El espectro de ondas en el Hemisferio Sur, es suficientemente continuo como para no poder distinguir con claridad las ondas largas de las cortas como en el Hemisferio Norte, ocasionando considerable 'ruido' en los índices. Para caracterizar la posición de las ondas largas se han promediado los índices por períodos de 5, 10 y 30 días. En estos períodos se halló la asociación de estos últimos con el comportamiento de los sistemas sinópticos y con las variaciones de temperatura y precipitación. De este análisis surge en respuesta a anomalías del meridional, que una cuña de onda larga en el Pacífico o una vaguada en el Atlántico se asocia al desarrollo de una serie de anticiclones con trayectoria SO-NE y a anomalías negativas de temperatura y precipitación. Una vanguardia en el Pacífico o una cuña en el Atlántico se asocia a una serie de depresiones con trayectoria NO-SE, a una depresión del noroeste argentino profunda y anomalías positivas de las variables citadas anteriormente. Similarmente se obtienen claras relaciones entre estas últimas y las anomalías del índice zonal y de curvatura. Los campos de anomalías de temperatura y precipitación podrían ser transformados en campos pronosticados a medio y largo plazo, una vez establecidos los métodos de pronóstico hemisféricos de las ondas largas. Un comienzo ya está dado con los pronósticos de la Oscilación del Sur-el Niño, relacionados con los índices de circulación elegidos.

"Contribución a la industrialización de la lignina" (1943). Mondelli, Alexis R.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución a la sistemática y ecología de los dictiostélidos del Parque Nacional Iguazú, Misiones, Argentina" (2003). Vadell, Eduardo Miguel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La selva subtropical húmeda en el P.N. Cataratas del Iguazú, Pcia. de Misiones, Argentina, contiene en sus suelos y broza una comunidad de dictiostélidos y taxones afines de alta diversidad. Ésta riqueza es la consecuencia de un conjunto de factores ambientales y biológicos favorables, entre los que se cuentan la diversidad florística, los vectores de dispersión, la fertilidad del suelo y el régimen hídrico-térmico del clima. Se aislaron 32 taxones mediante una técnica de dilución a partir de muestras de la broza y suelo superficial de distintas zonas de muestreo, realizadas durante cuatro años. Algunas zonas con disturbios antrópícos considerables mostraron diferencias importantes en abundancia y riqueza específica, comparativamente con las zonas semi-prístinas. Las especies clasificadas, con excepción de tres, pertenecen a las familias Dictyosteliaceae y Acytosteliaceae dentro de la Subclase Dictyostelidae. Las caracteristicas morfológicas, de crecimiento y desarrollo de cada taxón fueron descriptas, registradas en dibujos, y microfotografiadas. Se anotaron las condiciones óptimas de cultivo en el laboratorio, flora del sitio de muestreo y otros parámetros climáticos y edáficos, registrándose las posibilidades de su conservación permanente por líofilizado, entre otras técnicas. Se valoraron críticamente los caracteres taxonómicos, así como los criterios de clasificación. Se realizó la observación y registro de las interacciones con algunos organismos de la selva. Los nuevos taxones descriptos e ilustrados son Dictyostelium nanopodium, D. schizocaule, D. caulicarpum, D. dichotomum, D.jesuiticum, D. microcaule, Polysphondylium ñandutensis, P. iguazuensis y las nuevas variedades D. quercibrachium var. misionense. P. asymetricum var. diversisporum y D. lavandulum var. apodum. La dominancia de D. macrocephalum, D. giganteum y del género Polysphondylium en la mayoria de las áreas, en términos de Valor de Importancia, y la subdominancia de D. monochasioides, D. polycephalum y D. purpureum, entre otras, muestran un sistema comparable a la de otros trópicos y subtrópicos del mundo, en que la diversidad de taxones es alta pero la densidad es baja. Las bajas densidades respecto a otros biomas comparables, y las variaciones de frecuencias sugieren que existen factores adversos, identificados para otros habitantes de la selva, de distinto origen, que pueden poner en riesgo la riqueza de estas comunidades microbianas.

"Contribución al conocimiento de la composición petrográfica de las arenas de los diferentes horizontes petrolíferos explotados en la región del Golfo de San Jorge" (1943). Ruiz Germain de Saintout, Maruche. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al conocimiento de la familia Diatrypaceae, biodiversidad y Taxonomía" (2003). Carmarán, Cecilia C.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La familia Diatrypaceae (actualmente, orden Xylariales) incluye a los géneros Eutypella, Eutypa, Diatrype, Cryptosphaeria, Echinomyces, Leploperidia, Dothideovalsa, con ascos octosporados y a los géneros Diatrypella y Cryptovalsa con ascos poliesporados. De los géneros considerados dentro de la familia, estudiaremos en este trabajo, especies pertenecientes a 5 de ellos, siendo estos los más representativos de los géneros octosporados en la familia: Diatrype con 56 especies, Eutypa con 26 , Eutypella con 76, Cryptosphaeria con 5 y Echinomyces con 2. Los objetivos de este estudio, son: -identificar caracteres fenotípicos diagnósticos para cada jerarquía taxonómica, contribuir al conocimiento de la biodiversidad de la familia Diatrypalceae en la República Argentina, -aplicar técnicas numéricas, para elaborar una clasificación genérica e infragenérica que permita el reconocimiento de las especies o grupos taxonómicos afines, -aplicar técnicas cladísticas para analizar las relaciones filogenéticas entre las especies y/o grupos taxonómicos definidos. Se realizaron colecciones en diferentes localidades de las provincias de Jujuy, Salta, Tucumán, Misiones, Mendoza, San Juan, Tierra del Fuego, Entre Ríos, Corrientes y Buenos Aires. Como consecuencia de este trabajo se reconocen 80 entidades taxonómicas (especies y/o complejos taxonómicos), distribuidos en tres géneros: Clavipella nom. nov., Diatrype y Peroneutypa; se proponen 4 especies nuevas y 4 nuevas variedades; l nombre nuevo, l7 nuevas combinaciones y 7 nuevas primeras citas para nuestro país.

Abstract:
The family Diatrypaceae (at present, in Xylariales) includes the genera: Eutypella, Eutypa, Diatrype, Cryptosphaeria, Echinomyces, Leptoperidia, Dothideovalsa (with octosporic asci) and the genera: Diatrypella and Cryptovalsa (with polysporic asci). Among these genera, Diatrype (56 species), Eutypa (26 species), Eutypella (76 species), Cryptosphaeria (5 species) and Echinomyces (2 species) were studied, being the most representative octosporic genera of the family. The objectives of this study are: -to identify diagnostic phenotypic characters for each taxonomic hierarchy, -to contribute to the knowledge of the biodiversity of the Diatrypaceae in the Argentina Republic, -to apply numerical techniques to elaborate generic and infrageneric classifications which allow to distinguish the different species and/or taxonomic groups, -to apply cladistic techniques to analyze the phylogenetic relations among the defined species and /or taxonomic groups. The samples were collected in different localities of the following provinces: Jujuy, Salta, Tucumán, Misiones, Mendoza, San Juan, Tierra del Fuego, Entre Ríos, Corrientes and Buenos Aires. As conclusion of this work: 80 taxonomic entities were recognized (species and/or taxonomic complexes), distributed in 3 genera: Clavipella nom. nov., Diatrype and Peroneutypa; 4 new species and 4 new varieties were proposed; l new name, l7 new combinations and 7 were recorded for first time for our country.

"Contribución al conocimiento de la flora fósil de Barreal, Departamento Calingasta (Provincia San Juan)" (1963). Bonetti, María Ida Rosa. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El presente estudio tuvo por finalidad principal estudiar la flora fosil de la Serie triásica de Barreal (San Juan), tendiendo a alcanzar un mejor conocimiento de la misma y a definir sus relaciones con otras del Mesozoico bajo argentino. Además de sintetizarse la información geológica de la zona, se aportan nuevos datos sobre la Serie de Barreal y sus niveles plantíferos. Por otra parte, se hizo imprescindible aclarar minuciosamente ciertos problemas de nomenclatura topográfica, a los efectos de ubicar con exactitud los puntos de procedencia de valiosas colecciones floristicas debida a STAPPENBECK, DU TOIT, y FRENGUELLI, cuya dudosa ubicación geográfica y estratigráfica dieron origen a conclusiones y correlaciones erróneas. En ingual sentido, se depuran referencias sobre nomenclatura estratigráfica de la región, la que se había hecho confusa por la repetición de nombres para distintas unidades y la diversificación de denomicaciones para una sola. Se dedica un capitulo a discutir la validez de las correlaciones entre las floras fósiles del Mesozoico bajo argentino, demostrándose y ejemplificando que el número o proporcion de especies comunes no es de por si un factor concluyente para sostener paralelismos Floristicos. Asimismo, se evidencia que varias especies consideradas como tipicas para determinados niveles en realidad no lo son, pues poseen un "biochron" suficientemente extenso como para aparecer en horizontes bien separados en el tiempo (Dicroidium odontopteroides, Dicroidium lancifolium, Dicroidium feistmanteli, etc). Se sintetizan los conceptos seguidos hasta la fecha en cuanto a asignación cronológica de las series triásicas argentinas se refiere, distinguiéndose las distintas tendencias que prevalecieron en nuestro ambiente. El problema de la edad de la Serie de Barreal y de otras aproximadamente sincrónicas se encaró sobre dos haces distintos: a) Los argumentos que brindan las faunas de vertebrados de Ichigualasto y la relación de las mismas con las de Santa María (Brasil), y b) los datos que brinda la sucesión estratigráfica de la costa chilena, en la cual se hace necesario revisar las determinaciones de las amonitas y la edad conferida a las faunas integrantes. Partiendo de esos dos enfoques distintos se llega prácticamente a la misma conclusión: que en el estado actual de nuestros conocimientos, las evidencias mas seguras indican que los niveles que en muchas cuencas triásicas argentinas llevan la tipica "flora de Dicroidium" son keuperianos y muy posiblemente carnenses, puiendo entrar en el Norense los términos mas altos ("Red beds"). Además, resultaría que el denominado "Choiyoilitense" de Chile debería ubicarse en el Ladinense(Mesotriásico), edad que también habría que comunicar a los términos equivalentes de dicha formación en la Argentina, cuyos límites y composición deben ser revisados, pues es posible que la misma comprenda varias unidades de distintas edades. En base a las relaciones litológicas y florísticas, se brinda un ensayo de correlación entre las distintas series triásicas argentinas, el que se concreta en un cuadro. desde el punto de vista paleontológico, se estudiaron los elementos integrantes de la flora fósil de Barreal, resultando necesario ampliar el análisis a la revisión de otras colecciones, como la de Liantenes y Cacheuta (Mendoza) y de Ischigualasto (La Rioja), para dilucidar problemas sobre los límites específicos de algunas formas (p. ej. Dicroidium y Xyloptorio). Se reconocieron 80 entidades vegetales distintas para la flora Barreal, de las cuales 72 no pudieron determinar al nivel específico, quedando las 8 restantes clasificadas al rango teórico. De las 72 especies reconocidas, 52 se determinaron sobre el material de las colecciones disponibles y las 20 restantes responden a clasificaciones o citas de otros autores. El estudio del material de Barreal y del usado para comparación (Llantenes, Cacheuta e Ischigualasto) dio como resultado la creación, combinación o enmienda de varias unidades: 6 especies nuevas para Barreal; 2 para otras series; 3 especies enmendadas para Barreal; 3 variedades nuevas para otras colecciones; 5 combinaciones nuevas para Barreal y 3 para otros puntos. La flora estudiada muestra un neto predominio de representantes de las Dipteridacone, Pteridospermae , Cycadophyta y Ginkgophyta. Dentro de ellas, por su importancia, se prestó especial atención a: a) Las Corystospermaceae, por su dominio en la vegetación del Triásico gondwánico, siguiéndose los conceptos anatómicos de GOTXAN y TOWNROW, que indican la conveniencia de incluir en el género Dicroidium a especies referidas a Zuberia, Dicroidiopsis, Diplasiophyllum y Johnstonia. b) La Cycadophyta, por la aparición de un número remarcable de especies de Pseudoctenis, Pterophyllum, Anomazamites y Taeniepteris, formas poco abundantes o desconocidad en otras floras triásicas argentinas. c) Las Ginkgophyta, por la ocurrencia en Barreal de numerosos individuos asignables al género Saportaea, hasta el presente sólo conocido en el Pérmico inferior de E.U.A. y China, con muy escasos ejemplares. La mayor semejanza de la flora fósil de Barreal se encuentra con las de Ischigualasto-Ischichuca (La Rioja - San Juan); de Hilario (San Juan) y Potrerillo-Cacheuta (Mendoza).

"Contribución al conocimiento de la flora mesozoica de la formación Llantenes, Provincia de Mendoza" (1950). Menéndez, Carlos Alberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los sedimentos portadores de la flora cuyo estudio abordamos, afloran en el arroyo Llantenes (x),(69° de lat. S,35° de long. W.), parte del arroyo Tronquimalal y alrededores del Cerro Chihuiu (xx) situados al Sur de Malargüe o Malalhue. En la hoja 3569-26-4, en escala 1:50000 del Instituto Geográfico Militar, no aparece el nombre del arroyo Llantenes, sino el del puesto instalado sobre el mismo, con la denominación "Agua de los Llantenes". Dicho puesto ha sido abandonado hace tiempo por falta de agua potable, por lo tanto debimos acampar en el puesto de José Cara, situado a 5,5 km al Sur del primero y a 2 km al W de la Ruta Nacional N°40, indicado sin nombre en la hoja 3569-32-2 del Instituto Geográfico Militar. El trabajo de campo lo realizamos a fines del año 1949 y principios de 1950 y consistió en un relevamiento geológico expeditivo, levantamiento de perfiles y recolección de material fosilífero. Parte del material que estudiamos nos fue cedido por el Dr. P. N. Stipanicic. El hallazgo de nuevos niveles con plantas fósiles, nos permitieron conocer mejor el grado de relación que los estratos portadores guardan con los de las cuencas precordilleranas poseedoras de flora semejante y con las formaciones de Sud Africa, Queensland, Nueva Gales del Sur, Tasmania y Chile. En el presente trabajo describimos 42 especies de plantas fósiles, de las cuales, 9 son nuevas para la Argentina 22 son ya conocidas, 6 son especies nuevas con una variedad y el resto corresponde a especies indeterminadas. El trabajo de gabinete consistió principalmente, en el estudio del citado material paleontológico para los cuales, aparte de los métodos corrientes de identificación por sus caracteres morfológicos, hemos ensayado el reconocimiento de la estructura epidérmica en aquellas improntas, cuyo estado de conservación lo ha permitido, Para ello nos hemos valido del método del "peel" que consiste en el uso de una solución de una sustancia plástica, en un solvente de evaporación rápida, la cual se aplica sobre la superficie cuyo detalle del relieve se quiera conocer, una vez seca esta solución, queda como una película transparente que llevada al microscopio permite ver reproducidos en relieve inverso los detalles de la superficie a estudiar.

"Contribución al conocimiento de la geología e hidrogeología del sistema acuífero termal de la Cuenca Chacoparanense Oriental Argentina" (1999). Silva, Adrian Angel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El alumbramíento de aguas termales de la región oriental de la Cuenca Chacoparanense (sector uruguayo) es conocido desde mediados de la década del 40 a consecuencia de la prospección en busca de petróleo. Las posibilidades de alumbramíento en el sector argentino han sido motivo de diversas especulaciones geológicas hasta mediados de la década del 90 donde las perforaciones en busca de aprovechar el recurso se sucedieron en pocos años con diversos resultados. En la República Oriental del Uruguay se ha realizado con anterioridad estudios parciales tendientes a la cuantificación del Recurso Hidrotennal y sus posibilidades, (TAHAL, 1986, HIDROSUD, 1988, entre otros). El objetivo de este estudio es la correlación e interpretación geológica e hidrogeológica, en un contexto regional, a consecuencia del alumbramíento en el sector Argentino Las Formaciones continentes y/o relacionadas con el Sistema Acuífero Termal de la Cuenca Chacoparanense Oriental son las denominadas Formación Piramboiá (Tacuarembó), Formación Botucatú (Rivera) y Formación Serra Geral, (Arapey), ampliamente estudiadas en afloramiento y que tienen continuidad en el subsuelo argentino. En el área de estudio han caracterizadas y correlacionadas en este estudio. El Sistema Acuífero Termal ha sido definido en función de sus características litológicas, hidráulicas e hidroquímicas relacionándolo con sus áreas de recarga en el Uruguay y diferenciándolo hidrogeologicamente de los acuíferos que en unidades las misma Formaciones se hayan en el subsuelo en brasileño. Se presentan aquí, la geofrsica de prospección, la geología de las perforaciones y cinco años de control hidráulico e hidroquímico del recurso que permitió confeccionar el mapa hidrogeológico del Sistema Acuífero Termal y la cartografia temática relacionada incluyendo una evaluación estimativa del recurso.

Abstract:
The presence of thermal water in the eastern area of Chacoparanense bowl (República Oriental del Uruguay) is known since the decade of 1940 because of the researches in search of petroleum. Although some institutions made studies to quantify the hydrothermal system, they said nothing about regional aspects. The possibility of finding hydrothermal groundwater in Argentina has motivated speculations until 1990. The formations which constitute the thermal system of the Chacoparanense bowl are: Piramboiá, Botucatú (Rivera) y Serra Geral (Arapey). This research characterize and correlate the continuity of them in Argentina. Their litology, hydraulics and hydrchemistry characteristics have been related to the areas in Uruguay y Brasil. The following thesis shows the geophisical exploration, geologic drilling and five years of hydraulics and hydrochemistry which let us made the Hydrogeological Map and the thematic mapers. It is included a evaluation about the amount of water that it could be found.

"Contribución al conocimiento de los yacimientos de minerales de las rocas de aplicación de la Provincia de Jujuy" (1939). Sgrosso, Pascual. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al conocimiento del género Polyporus s. str. (Basidiomycetes) en el Cono Sur de América en base a sus características morfológicas, biológicas y moleculares" (2001). Borges da Silveira, Rosa Mara. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo se estudió el género Polyporus s. str. en el Cono Sur de América. Para ello, se dividió su tratamiento en 4 partes: l) morfología; 2) ensayos de compatibilidad; 3) estudios isoenzimáticos y 4) taxonomía numérica. Se analizaron los caracteres macro- y micromorfológicos de 350 colecciones y 88 holotipos de los Herbarios K, PC, UPS, LPS, BAFC, ICN y SP. Se hicieron cruzamientos intra- y interespecificos de l44 cultivos monospóricos y lO cultivos polispóricos. Se estudiaron 42 aislamientos dicarióticos, 42 monocarióticos y 34 cruzamientos entre ellos mediante la electroforesis horizontal en geles de poliacrilamida, para seis actividades enzimáticas: EST, 6PGD, IDH, MDH, SHDH y SOD. Se analizaron 44 bandas totales. Por otra parte, se hizo un análisis numérico de los patrones de bandas isoenzimáticas y de los caracteres morfológicos. Los resultados de los ensayos de compatibilidad y estudios isoenzimáticos corroboraron aquellos obtenidos en el análisis morfológico. Además, en el análisis numérico se pudo establecer buena correlación entre los datos moleculares y los morfológicos. Este trabajo permitió identificar 20 especies y una variedad en el área estudiada. Estas fueron separadas en 5 subgéneros: Polyporus, Melanopus, Polyporellus, Favolus y Austropolyporus subgen. nov.

Abstract:
In the present work, the genus Polyporus s. str. in the “Southern Cone of America was studied. For this, the analysis was divided into 4 parts: l) morphology; 2) compatibility tests; 3) isoenzymatic studies and 4) numerical analysis. The macro and microscopic characters of 350 collections and 88 holotypes from the Herbaria K, PC, UPS, LPS, BAFC, ICN and SP were examined. Intra- and interspecífic pairings of l44 single-Spore cultures and 10 polyspore cultures were made. Forty two dikaryotic isolates, 42 monokaryotic isolates and 34 pairings were examined by horizontal polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) for six enzymatic activities: EST, 6PGD, IDH, MDH, SHDH and SOD. A total of 44 bands were analysed. On the other hand, a numerical analysis of the isoenzymatic patterns and the morphological characters was undertaken. The results of the compatibility tests and isoenzymatic studies, corroborated those furnished by morphological characters. By analysing numerically the isoenzymatic patterns and the morphological characters, a good correlation between molecular and morphological data was established. This research allowed us to identify 20 species and one variety in the area under study. These were distributed among 5 subgenera: Polyporus, Melanopus, Polyporellus, Favolus and Austropolyporus subgen. nov.

"Contribución al conocimiento del paleozoico inferior del norte de la Argentina : observaciones en el cerro San Bernardo (Salta)" (1935). Muhlmann, Paulina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
De las observaciones efectuadas en el terreno y de la tentativa de reconstrucción por medio de fotografías y apuntes de campaña, resulta que la parte occidental del cerro San Bernardo está constituido por una serie de estratos de orientación relativamente uniforme que se hunden de un modo bastante fuerte al oeste dande la impresión de una estructura homoclinal. En realidad hay grandes complicaciones por efecto de varias fallas cuyas direcciones coinciden aproximadamente con la de los estratos, aunque las superficies de fallas tienen buzamientos mucho más fuertes que la superficie de estratificación.. De estas fallas han sido marcadas en el mapa solamente dos, cuyo recorrido se puede ver o entrever en ciertos trechos; con seguridad hay otras fallas más porque he observado los efectos de las mismas en varios puntos pero no me ha sido posible seguirlas y por lo tanto su representación sería arbitraria. Además de estas dislocacionee que a veces están puestas en evidencia por la presencia de brechas de fallas, hay pruebas de las grandes presiones y tensiones padecidas durante las épocas geológicas; tales son los sistemas de diaclasas indicados en el mapa, que atraviesan las cuarcites en 1a parte superior de 1a senda, como la division espontánea en peralepípedos que se observan en algunos afloramientos del camino comose ven en algunas fotografías. Los tipos principales de recae son dos; cuarcitas o areniscas cuarcíticas y esquistos. A1 parecer cada una de estas rocas caracteriza en 1a zona estudiada a una formación geológica distinta. La edad de los esquistos puede considerarse con seguridad Ordoviciano y con toda probabilidad del 0rdoviciano inferior. Archibald Geikie basándose en los trabajos de D. Forbes, Q.J.G.S. XVII (1861), pag. 53; de Kaiser z.D.G.G. XLII (1897). pag. 274 y (1898) pag. 423; de E.T.Newton, Geol. Meg, 1901, pag. 195; J.M.Clarke, Archiv.Mus.Nac.Rio de Janeiro. x. 1899, dice: "Los fósiles del Silúrico inferior que se han obtenido en" "Bolivia, Perú y Argentina y la extensión de este sistema en la" "parte central y sur de este continente. Sus rocas corresponden" "a las formaciones europeas del Arenig o al Llandulo, que con-" "tienen Asaphus, Bathyurus, Ampyk, Magalispis, Illaenus, Li-" "trutes, Maclurea, Orthis calligrana y el característico Didy-" "mograptus Murchisoni." En cuanto a los trilobites que he recogido pertenecen a 1a familia Asaphidae en sentido estricto (es decir con exclusión de Illaenus y sus géneros afines que en conjunto constituyen, según paleontólogos modernos, la familia Illaenidae), sabiéndose que las Asaphidae florecieron en el Ordoviciano inferior y medio y son: Ogygia Ligensis Hoek, Thysanopige argentina Kaiser, Megalaspis Brackebuschi Kaiser y varios pigidios pertenecientes al género Megalaspis. Otros fósiles: Beyrichia sp., Cyrtolites, lamelibranquios (5 formas), Lingulidae, Orthis, Crinoideos, Didymograptus sp., rastros indeterminables, Cruzianas. En las cuarcitas no he logrado hallar fósiles, sino tan solo impresiones problemáticas que pueden hacer pensar en un fondo arenoso de un antiguo mar, poblado por anélidos u otros animales reptantes, pero no sirve para orientarnos sobre lo probable. Es posible que en aquellas arenas hayan vivido moluscos, braquiópodos, trilobites, etc....pero las condiciones locales, como ser el movimiento de las olas y la arena arrastrada por ellas, el alto tenor de oxígeno en las aguas, la falta de impermeabilidad de los estratos de arena que se iban depositando, deben haber sido marcadamente desfavorables para la concertación de restos calcáreos, fosfáticos, etc. La posición relativa de las cuarcitas con relación a los esquistos no ofrece ningún criterio seguro para juzgar la edad por cuanto en una región tan dislocada es posible que la serie estratigráfica se halle invertida, descansando los estratos más antiguos sobre los más jóvenes. Es claro que esta dificultad que me impide sacar conclusiones no constituiría un obstáculo tan grave para un geólogo dotado de amplios conocimientos regionales, por cuanto podría reconocer una u otro formación por su aspecto litológico característico sin necesitar la demostración que proporcionan los fósiles, pero en mi caso particular mis conocimientos se limitan a las inmediaciones de la ciudad de Salta y unos cortes naturales en los alrededores de Perico del Carmen; por esta causa no puedo intentar comparaciones. Sin embargo debo recordar que han sido referidas al Cámbrico superior cuarcitas rosados cuyas descripciones sumarias podrían aplicarse a aquellas que afloran en el cerro San Bernardo. De ser ellas cámbricas 1a sucesión estratigráfica estaría invertida, cosa que en esta region no tendría nada de extraordinario por conocer ya muchos casos de inversión de series de capas paleozoicas como el observado por Bonarelli en las inmediaciones de la estación Mojotoro (Salta). A este propósito es importante hacer notar que Bonarelli reconoció la posición invertida de los estratos de areniscas cuarcíticas porque presentaban las anigmáticas impresiones llamadas Cruzianas en relieve, mientras los paleontólogos que han estudiado estos restos han afirmado que aquellas impresiones se han formado originariamente como dobles surcos estriados diagonalmente. No pude aplicar este criterio en el cerro San Bernardo porque nunca he hallado dichas impresiones en los estratos que afloran, aunque he podido recoger algunos ejemplares, pero como fósiles encontrados sueltos en el talud.

"Contribución al conocimiento petrográfico de los estratos con dinosaurios de la Patagonia" (1934). Chiesa, Zulema C.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio analítico de las aguas : datos de significación en las contaminaciones" (1921). Vanossi, Reinaldo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio analítico de los colorantes de azúcar de distinto origen" (1939). Mendivelzúa, Germán. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de Foeniculum vulgare (hinojo)" (1931). Baggio, Celia Alcira. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de algunas bacterias aerobias aisladas de aguas del Río de La Plata" (1944). Peso, Osvaldo A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de algunas materias primas nacionales para la fabricación de gas" (1922). Richaud, Guillermo José. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de jarabes de sorgo argentinos" (1950). Achard Wells, Nelly B.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de la acción catalítica del ácido clorhídrico sobre el sistema acético-alcohol etílico-acetato de etilo-agua" (1930). Durruty, Carlos Alberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de la alunita argentina" (1961). Wertheim, Jorge Federico. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Parte Teórica.- No habiéndose hasta el momento encontrado yacimientos de bauxita en el país, se justifica que todo otro mineral rico en Al203 se estudie con vistas a su posible explotación. La alunita pura, es un sulfato dibásico de aluminio y potasio, en que son frecuentes los reemplazamientos isomorfos, presentándose generalmente con impurezas como sílice, óxido férrico, dióxido de titanio etc. Las propiedades químicas comunes a todas las alunitas son su insolubilidad en los ácidos a temperaturas ordinarias, la pérdida de sus 6 moléculas de agua si se calienta a temperaturas entre 500 y 600 grados C. y subsiguiente solubilización, y la pérdida del trióxido de azufre por descomposición del sulfato de aluminio formado si se calienta hasta 950 grados C.- Su origen se supone volcánico o a partir de soluciones frias de sulfatos. En cuanto a los yacimientos de alunita se encuentran distribuidos en todo el mundo y en nuestro país están localizados en Camarones, Gob. Militar de Comodoro Rivadavia. Los usos que se pueden dar al mineral dependen de varios factores. los principales productos obtenidos son: Alumbre potásico, sulfato de aluminio, sulfato de potasio y materiales refiractarios.- Los metodos de explotación lógicamente han cambiado con el tiempo y de rudimentarios en La Tolfa y Lieja han pasado a ser más perfectos en E.E.U.U. y en la U.R.S.S. Pueden ser - previa calcinación - basicos o ácidos. La importancia de encontrar un proceso económicamente realizable está dada sencillamente por el hecho de carecer la Rep. Argentina hasta el momento de yacimientos de bauxita. Las consecuencias de esta falta afloraron especialmente durante la segunda guerra mundial. Por otra parte debido a su economía preferentemente agropecuaria, puede absorber bien los fertilizantes potásicos obtenidos. Parte práctica. De acuerdo a las directivas recibidas del Dr. E.Cataleno, como primer paso se efectuó el análisis químico racional de la alunita. Se encontraron dos fracciones distintas de alunita, según su mayor o menor impurificación con sílice. En los ensayos subsiguientes se trabajó con el material más impurificado con sílice. Aparte se realizó también un análisis espectrofotométrico de orientación. Luego se procedió a la molienda y al tamizado del mineral molido, previa depuración del Fe metálico introducido durante la Operación de molienda del material. Se separaron once fracciones de diferente granulometría, que se sometieron a tres series de calcinaciones. La última de 132 calcinaciones fué en definitiva la que se tomó en cuenta. Las temperaturas de trabajo fueron 500, 550 y 600°C y los tiempos variaron desde l hasta 6 horas. Se tomaron las precauciones de rigor durante y después del calentamiento para evitar pérdidas y aumentos en el peso, debidas a la decrepitación e higroscopicidad del material calcinado respectivamente. Acto seguido se procedió a la solubilización del mismo. Para ello se usó como solución de ataque ClH (aq.) de normalidad 2,205 que agregada al mineral en un Erlenmeyer, se calentaba durante un tiempo de 20 minutos en un mecanismo de agitación tipo Burrell. En el líquido filtrado se efectuaba después le determinación del R203 mientras que sobre el residuo se determinaba la pérdida por calcinación doble a 600 y 1000 °C. ( Diferencia ) Esto último sirve de control para conocer el grado de solubilización alcanzado en una calcinación. Cuanto mayor es aquella, menor debe ser la diferencia entre las calcinaciones a 600 y 1000 °C. Los mejores resultados se obtienen para las fracciones de 100 - 120 y 170 - 200 mallas Tyler, calcinadas a 600 °C. durante 1 hora. El análisis diferencial térmico se aplicó al mineral de Camarones constatándose que su comportamiento revela la existencia de alunita reflejada por la forma de la curva en el gráfico correspondiente , lo mismo que el análisis termogravimétrico. Estas dos partes del trabajo se efectuaron bajo la supervisión del Dr. A. Menucci de " LEMIT" de La Plata. Como tercer método de comprobación y para seguir cualitativamente las fases del proceso de calcinación de la alunita de Camarones, se utilizó el Kristalloflex 3 de Siemens Halske, que mediante los diagramas de rayos X reveló la existencia de alumbre deshidratado, sulfato de aluminio y de potasio en el material calcinado. Referente a la comparaciónde los distintos tipos de hornos industriales factibles de ser utilizados para la calcinación de la alunita, puede decirse que de los dos tipos ortodoxos prepuestos, el rotatorio y el a platos tipo Lürgi o Humboldt, el último es el que presenta las mayores ventajas para este proceso pues utiliza mejor la energia calorífica suministrada; la cantidad de alunita calcinada por unidad de superficie del horno también es mayor; la inversión por ton./año, de mineral calcinado es menor y ante todo permite mantener mejor la temperatura entre los límites prefijados Sin embargo antes de decidirse definitivamente por cualquiera de los dos, convendría efectuar ensayos en escala planta piloto con un horno tipo Winkler de lecho fluidificado por las múltiples ventajas que en principio ofrece.

"Contribución al estudio de la caña de Java en la República Argentina" (1920). Griet, Francisco P.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de la citología de las bacterias" (1950). Spedalieri, Nydia Yolanda. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de la cloroacetofenona como agresivo de instrucción" (1944). Mermoz, Jorge Alberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de la constitución de la gamma Fagarina : intercambio del alcoxilos en la beta y gamma Fagarina" (1941). Muruzabal, Angela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de la hidrología de Bahía Blanca" (1904). Raffo, Jacinto T.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de la hormona hipertensora de la glándula suprarrenal" (1935). Knopoff, Rosa. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de la industria del caucho" (1956). Lantos, Federico Esteban. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de la reacción de Tistschenko en la Acroleina" (1933). Labriola, Rafael A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de las Daturas Argentinas" (1930). Pérez, María Pilar. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de las Escrofulariáceas bonaerenses : Clave para las especies existentes en la Capital Federal y sus alrededores" (1912). Acevedo, Lía. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de las arenas argentinas : su aplicación en la fabricación de vidrios" (1910). Grianta, Luis. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de las lozas y porcelanas" (1942). Donato, Juan Santiago Egidio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de los derivados quinónicos y afines en la serie del fluoreno" (1927). Ruíz, Celestino L.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de los espacios abstractos" (1943). Ferrari Descole, Esther. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de los feldespatos y arcillas : algunos datos sobre materiales arcillosos y silíceos de la República Argentina" (1911). Bernaola, Víctor J.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de los fenómenos de coloración de las soluciones salinas" (1912). Wernicke, Raúl Ernesto Alberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de los glucósidos cianogenéticos y el Holocalyx Balansae Mich." (1920). Pelïsch, Juan. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de los humos de tabaco : determinación de algunos elementos tóxicos, (nicotina y alcohol metílico) en humo de cigarrillos manufacturados en el país con tabaco rubio" (1938). Gómez, Julio César. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de los métodos clínicos de dosaje de urea en sangre" (1920). Clariá, César David. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de los streptomyces" (1950). Polichenco, Marta. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de los trigos argentinos : relación entre la aptitud panadera y el contenido en bromo natural de las harinas" (1941). Montero, Leopoldo M.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio de los venenos de serpientes del género Bothrops" (1938). D’Alessio, Ana S. Weber de. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio del Baccharis Cordifolia (D. C.)" (1918). Arreguine, Victor. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio del Poder calorífico industrial : Rendimiento práctico y poder vaporizador" (1919). Landeira, Pedro. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio del bacilo búlgaro y su adaptación al ácido fénico" (1922). Michel, Zacarías. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio del grupo Coli-Aerogenes en las heces humanas" (1944). Kempny, José Carlos. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio del género Triatoma Lap." (1920). Del Ponte, Eduardo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio del hidroperóxido de zinc" (1950). Crespi, Martín Bartolomé Antonio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio fisiológico y sistemático de algunas Chlamydobacteriales" (1939). Cataldi, María. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo se relata el resultado del estudio fisiológico de algunas Chlamydobacteriales orden de las Schizomycetes, cuya característica principal es la de poseer una vaina que rodea a los elementos celulares. Representantes de este grupo fueron descriptos por Kützing en 1833 y en 1843; Cohn en 1870; ZOPF en 1882 y otros. Winogradsky, en 1888, estudió algunos representantes de este orden y les dió el nombre de bacterias del hierro o ferrobacterias debido a la afinidad con este metal. En su estudio experimental, dedujo que, a semejanza de las plantas verdes, podían vivir y desarrollarse en ausencia de materia orgánica, efectuando la síntesis de la materia carbonada a partir del anhídrido carbónico del aire. Consiguió cultivarlas con heno hervido e hidróxido férrico. Büsgen, en 1894, cultiva y aísla Sphaerotilus dichotomus; Molisch, en 1910, y Lieske, en l911, obtienen los primeros cultivos puros con material de fuentes ferruginosas naturales en medios puramente orgánicos. Comprobó ademas Molisch que la presencia o ausencia de manganeso no era indispensable para el desarrollo de estas bacterias, siendo estas dos razones las que condujeron a este autor a oponerse a la teoría de Winogradsky. El material usado en estas investigaciones ha consistido en muestras provenientes de diversos orígenes para poder establecer la posible relación entre la vida de estas bacterias y su « habitat ». Todas las muestras (100 en total) llegadas al laboratorio en frascos estériles, fueron primeramente sometidas a un examen microscópico y luego se sembraron en diversos medios de cultivo. De los cultivos de enriquecimiento ensayados, el que ha dado mejores resultados ha sido el del heno hervido en una concentración de 10 a 20 ‰ más carbonato de manganeso; habiendo determinado previamente que el heno debe tener un grado de maceración avanzado y hervirse en una gran cantidad de agua (más o menos 0,5‰). El aislamiento de los representantes de este grupo de bacterias especialmente los del género Leptothrix resultó una tarea muy complieada al principio por no conocerse un medio seguro para aislarlas en cultivo puro. Después de numerosos ensayos con numerosos medios de cultivo se consiguió modificar el medio de Büsgen para el aislamiento de Sphaerotilus dichotoma mediante el agregado de carbonato de manganeso. El medio de Lieske sólo pudo usarse para obtener desarrollo modificando la fórmula original. Más tarde, con un medio de citrato de hierro y amonio y agar se consiguió aislar las distintas especies del género Leptothrix de una manera rápida y segura. La fórmula empleada es la siguiente: Citrato de hierro y amonio (0,75 gr); Agar (10 gr); Agua corriente 1 (litro). Sphaerotilus dichotoma pudo aislarse también con facilidad en el medio anteriormente citado y en el agar de Büsgen siguiente: Extracto de carne (0,5 gr); Agar (10 gr); Agua (1 litro). El material ensayado ha permitido aislar un total de 255 cepas identificadas más tarde como: Sphaerotilus dichotomus (Cohn) Migula 1900. Leptothrix ochracea Kützing 1843. Leptothrix sideropous Molisch 1910. Leptothrix crassa Cholodny 1926. Leptothrix winogradskii n. sp. El estudio de las cepas aisladas está basado en observaciones morfológicas, en preparados directos, en cultivos en cámara húmeda, en preparados coloreados; los caracteres de cultivo fueron observados en siembras hechas en agar en caja de Petri, en agar estría, en agua de peptona más acetato de manganeso y en el medio de Busgen. El estudio fisiológico de las mismas planteó como problema previo el hallazgo de un medio que permitiera cultivarlas en estado puro y en suficiente cantidad como para llevar a cabo las experiencias sistemáticas y en serie indispensables para poder comprobar la influencia de diversos agentes sobre los gérmenes en estudio. Conjuntamente se investigó también la capacidad de desarrollo en medios minerales y, según la teoría de Winogradsky, la influencia de las sales de hierro y manganeso en el metabolismo de las mismas. Con respecto al primer problema los resultados obtenidos han sido los siguientes: Leptothrix desarrolla preferentemente en peptona como materia orgánica y acetato de manganeso, como sal de manganeso en las proporciones siguientes: Peptona (0,5 gr); Acetato de manganeso (0,1 gr); Agua corriente (l litro). Sphaerotilus dichotoma desarrolla muy bien en extracto de carne al 0,5 ‰ (medio de Büsgen). Los ensayos hechos con medios minerales dieron todos resultados negativos a pesar de haber ensayado el medio mineral de Lieske para Leptothrix ochracea y aún previendo todas las posibles causas de error. De las sales de hierro y manganeso puede decirse que en algunos casos favorecen el desarrollo de estas bacterias, en otros la acción es completamente nula y en algunos parecería perjudicial (ver detalle en el cuadro n° 3). Se ha podido observar además que en ninguna de las experiencias efectuadas en cultivos puros, el hierro ha sido oxidado por estas bacterias mientras que el manganeso lo ha sido en la mayoría de los casos; pudiéndose comprobar que en los casos en que el manganeso no es oxidado ello es debido a la composición del medio de cultivo, mientras que en el caso del hierro éste no es oxidado por efectuarse la oxidación a un pH mayor que 6,8. En ese punto las sales ferrosas son tan inestables que prácticamente son convertidas a férricas. Además la oxidación puede producirse con células muertas. Estos resultados conducirían a sospechar la posibilidad de que estas bacterias no fueran autótrofas facultativas. Hecho éste que estaría corroborado con las dudas que sobre la autotrofía de estas bacterias han expresado ya Baas-Baking y Park. Las otras investigaciones fisiológicas consistieron en determinar la influencia del anhídrido carbónico, temperatura, relación con el oxígeno, reacción del medio, poder de reducción de nitratos, formación de hidrógeno sulfurado, de acetil-metil-carbinol, de indol, licuación de gelatina, poder de esporulación e influencia de la luz. En capítulo aparte se agrupan los resultados de estas investigaciones, que permitieron identificar las cepas antes mencionadas. La parte sistemática está precedida por la diagnosis de los distintos géneros de las Chlamydobacteriales y un breve comentario acerca del género Leptothrix y Sphaerotilus que son los estudiados en esta investigación. Además han sido descriptos los géneros y especies por separado, ilustrándolos con fotografías y con dibujos obtenidos con cámara clara.

"Contribución al estudio para obtener alúmina a partir de arcillas o caolines" (1955). Adler, María Luisa A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Considerando la importancia industrial que actualmente tiene el aluminio, y que se lo obtiene a partir de la alúmina, es de interés fundamental obtener la misma por métodos económicos. Actualmente aún esté ampliamente difundido el método Bayer, que utiliza como materia prima la bauxita. La existencia de este mineral es reducida y los yacimientos que actualmente no explotan contienen un alto tenor en sílice. Como ésto molesta en forma considerablo, se han ideado mejoras como sea elaboración posterior do los residuos. Pero aún así es de importancia encontrar un método racional que permita trabajar con los abundantes materiales como ser arcillas, caolines, etc. De los distintos métodos encontrados en la literatura, nos ha parecido que el único racional, que permite utilizar el sub-producto y recuperar los reactivos es el método cal-soda. Se basa en la calcinación del material con carbonato de calcio y de sodio de manera de obtener el ortosilicato de calcio cuyas relaciones molares son CaO:SiO2 = 2:1 y el aluminio con Na20 : Al2O3 igual a l:l. El producto, previa molienda, es tratado con agua para extraer el aluminato formado y éste es sometido a los procedimientos usuales. E1 sub-producto puede ser elaborado para obtener cemento portland y se puede prever una recuperación alta de carbonato de sodio. Es importante señalar que las variables estudiadas indican que es éste un método que requiere un control estricto para evitar variaciones notables en los resultados. Como materia prima sa utilizaron caolines y arcillas argentinas, muy abundantes por cierto. Se obtuvieron mejores resultados con las últimas. Del estudio de laa condiciones de calcinación en lo que se refiere a temperatura y tiempo, se ve que el mejor dato es obtenido trabajando durante una hora a 1300°C. Las relaciones molares se hicieron variar en el entorno de las teóricas, obteniéndose muy buenos resultados para la muestra que tenía CaO:SiO2 = 2,1 y Na2O:Al2O3 igual a 0.9. Respecto a la lixiviación, conviene efectuarla durante una hora a 60°C. So trabaja con una cantidad do agua igual a 3 veces el peso original del producto calcinado, lavándose luego 3 veces con una cantidad igual, en total, a la empleada en la lixiviación. Esta se efectúa añadiendo carbonato de sodio a fin de llevar la relación Na2O:Al2O3 a 1.6 para evitar una prematura hidrólisis. Pero en el caso de la arcilla persiste aún así el peligro de que el aluminato se descomponga antes del tiempo oportuno. Para evitarlo, se estudiaron sustancias orgánicas conteniendo grupos oxhidrilos. De todas ellas el mejor resultado lo dió el azúcar común (sacarosa), por lo cual se añade este tanto al agua do lixiviación como a las de lavado en un 1%. Loa resultados obtenidos son muy satisfactorios y recomendamos el estudio de este método, que puede ser la solución del problema de obtención de alúmina en el futuro, en una planta semi-industrial.

"Contribución al estudio sistemático de algunas Actinomycetales" (1942). Iaconis, Celina Leonor. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio sobre oleaginosas" (1944). Liñeiro, Beatriz Dora. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio taxonómico de las diatomeas (Bacillariophyceae) de la Provincia de Misiones, República Argentina" (1985). Maidana, Nora Irene. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución al estudio y el diseño de funciones de refuerzo" (1999). Santos, Juan Miguel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Contribución de los estudios cromosómicos a la comprensión de los mecanismos de la carcinogénesis hormonal: estudio citogenético de carcinomas mamarios murinos inducidos por progestágenos" (2003). Fabris, Victoria T.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El tratamiento prolongado con acetato de medroxiprogesterona (MPA) en ratones de la cepa BALB/c induce carcinomas mamarios de histología ductal, que expresan receptores de estrógenos y progesterona, y son metastásicos en pulmón y ganglio linfático. Estos tumores se mantienen in vivo por pasajes singeneicos, siendo hormono-dependientes (HD) ya que requieren del agregado exógeno del MPA para crecer, y no crecen en animales sin tratar con MPA. Se seleccionaron variantes hormono-independientes (HI) a partir de los tumores HD que comenzaron a crecer en los animales sin MPA. Estos tumores HI son capaces de crecer en animales sin tratar con MPA, pero mantienen los receptores hormonales. Los tumores HI presentan una respuesta diferencial a1 tratamiento con l7-ᵝ-estradiol (E2) y los antiprogestágenos mifepristona y onapristona. Se los clasifica en respondedores, aquellos tumores HI que inhiben su crecimiento in vivo por el tratamiento hormonal, y no respondedores a aquellos que no regresionan por el tratamiento. En la primera parte de este trabajo se estudió el cariotipo de los tumores HD (n=5) y sus variantes HI (n=ll) con técnicas de citogenética clásica (bandeo G) y molecular (hibridación in situ fluorescente, FISH), con el objetivo de relacionar el número de cromosomas y las alteraciones del cariotipo presentes con las características biológicas de los tumores. Tres de los 5 tumores HD (60%) presentaron un número de cromosomas en el rango diploide (ratón normal, 2n=40), mientras que los tumores HD que presentaron números modales en el rango triploide a tetraploide fueron estudiados en pasajes muy avanzados. Los tumores HI en pasajes tempranos presentaron números modales diploides. En pasajes tardíos la mayoría de los tumores HI (8 de los ll estudiados) presentaron cariotipos en el rango triploide a tetraploide. Todos los tumores presentaron alteraciones numéricas y estructurales de sus cromosomas. No se observó una alteración común a todos los tumores, o que estuviera asociada con la dependencia hormonal. Sin embargo, podemos inferir que los tumores con números modales diploides responderán al tratamiento con E2 y antiprogestágenos. Las alteraciones más frecuentes fueron ganancia de los cromosomas 3, 4 y 6 (entre el 50% y 60% de los tumores) y pérdida de los cromosomas 16 y X (en el 70% y 100% de los tumores, respectivamente). En un análisis global, la pérdida del cromosoma X resultó significativa. Se observaron numerosas translocaciones, que involucraron a los cromosomas 4 y 7 con mayor frecuencia (presentes en tres de las cuatro familias tumorales con alteraciones evaluables), observándose el mismo punto de ruptura para el cromosoma 7. Por otra parte, las alteraciones presentes en los tumores HD se conservan en los pasajes tempranos del crecimiento autónomo. En base a estos resultados podemos concluir que los tumores inducidos por el MPA serían diploides, y que con el continuo pasaje in vivo puede aumentar el número de cromosomas. La adquisición de la hormono-indepedencia no es causada por el aumento de la ploidía, y los tumores HI conservarían el cariotipo diploide de los tumores HD en los pasajes tempranos. El aumento del número de cromosomas y la adquisición de nuevas alteraciones sería posterior a la adquisición de la hormono-independencia y ocurriría como consecuencia del aumento de los pasajes. La ocurrencia en pasajes más tempranos de variaciones en el cariotipo observada en los tumores HI con p53 mutado, respecto de los tumores HI con p53 normal, podría estar asociada a las mutaciones en p53. Sin embargo, en el tumor HD la presencia de p53 mutado no está acompañada de inestabilidad cromosómica, sugiriendo que serían necesarios otros factores además de dichas mutaciones. En la segunda parte del trabajo se estudiaron los cambios del cariotipo durante el establecimiento de líneas celulares a partir de carcinomas mamarios murinos HD y HI. Se analizaron las variaciones en ploidía y de las alteraciones cromosómicas a lo largo de los repiques de las 8 líneas celulares obtenidas. Las líneas celulares conservaron el número de cromosomas diploide de los tumores parentales en los primeros repiques, este número de cromosomas aumentó con los posteriores pasajes in vitro, y se estabilizó en el rango triploide en 5 de las 8 líneas celulares, sugiriendo que éste les daría cierta ventaja para el crecimiento en cultivo. Sin embargo, una de las líneas celulares mantiene su cariotipo diploide hasta repiques avanzados. Todas las líneas celulares conservan los cromosomas marcadores de los tumores parentales a través de los repiques, pero 7 de las 8 líneas adquieren alteraciones nuevas desde repiques muy tempranos. Podemos concluir que el aumento de la ploidía se vería favorecido por el avance de los repiques. Por otra parte, los cromosomas marcadores del tumor no se pierden por el continuo cultivo in vitro, pero se favorece la formación de nuevas alteraciones. El conocimiento del cariotipo permitió, además de caracterizar las líneas celulares, discernir sobre el origen de una de las líneas establecidas. En resumen, en este trabajo de tesis se investigó la evolución cariotípica de diferentes tumores mamarios murinos en su evolución desde la hormono-dependencia hacia la independencia, y de las líneas celulares derivadas. En nuestro conocimiento, este es el primer informe del estudio citogenético en relación con la independencia hormonal en tumores mamarios murinos. Los genes ubicados en los sitios de ruptura de las translocaciones observadas, como por ejemplo Aurora C, merecen ser estudiados en investigaciones futuras.

Abstract:
Medroxyprogesterone acetate treatment in BALB/c female mice leads to the development of ductal mammary carcinomas which express estrogen and progesterone receptors and are metastatic in axilar lymph nodes and lungs. They are maintained by syngeneic transplantation in progestin treated female mice disclosing a hormone dependent (HD) pattern of tumor growth. Occasionally hormone independent (HI) variants have been selected. These HI tumors are able to grow without exogenous hormone supply. Some of them are able to regress completely afier l7-ᵝ-estradiol or antiprogestin administration and are so called responsive HI tumors while others are unresponsive to both treatments. In the first part of this study we have investigated the karyotype of 5 HD tumors and of ll HI variants using classic cytogenetic techniques as G banding and molecular approaches as fluorescence in situ hybridization (FISH). The aim of this study was to evaluate possible relationships between ploidy, chromosome markers and acquisition of hormone independence. A near diploid karyotype (2n=40) was found in 3/5 HD while a triploid to tetraploid karyotype was observed in the other two HD tumors which were studied in late passages. In early passages from HI tumors we obtained diploid karyotypes while in advanced passages they were mainly poliploid (8/11 tumors). All tumors showed number and structural chromosomal rearrangements. The tumors studied did not share chromosomal abnormalities neither chromosome markers could be related to HD or HI tumors. However, it seems that in this experimental model it can be inferred that a diploid tumor will be responsive to hormones whereas a poliploid tumor may be HD, responsive HI or unresponsive to hormone treatments. The most frequent chromosomal rearrangements found in individual tumors were gains in chromosomes 3, 4 and 6 (in 50 and 60% of the tumors) and loses in chromosomes 16 and X (70% and 100% respectively). In a global analysis of frequencies only loses of chromosome X were statistically significant. Nearly all tumors disclosed several translocations (22 in 9 tumors studied). Chromosomes 4 and 7 were involved independently in 3 of the 4 tumor families which could be studied. Twice they were together, and in the case of chromosome 7, in the same breakpoint. Abnormalties present in HD tumors were maintained in early passages of HI tumors although later on new rearrangements were observed. It can be concluded that MPA dependent tumors are probably diploid and polyploidy arises by continuous in vivo transplantation. The acquisition of hormone independence is not caused by an increase in ploidy. Conversely, HI tumors may maintain the same diploid karyotype in early passages while progressively losing and acquiring new markets in later passages. SSCP revealed a point mutation in p53 in 4/5 tumors of the same family. The parental HD tumor showed a diploid stable karyotype while the HI variants were poliploid and did not share common markers suggesting that mutated p53 is not uniquely involved in chromosome instability. HI variants may have acquired other alterations that together with mutated p53 may confer this phenotype. In the second part of this study the karyotype of 8 cell lines derived from 2 of these diploid tumors was investigated. Cell lines maintained the diploid karyotype during the early passages and nearly all of them after passage 35 changed to a stable triploid karyotype. Only one cell line, the MC4-L5 remained diploid for more than 45 passages. All cell lines maintained the same chromosome markers than the parental tumors and 7/8 acquired new markers which were different for each cell line and were characterized in this study. It can be concluded that the onset of the cell lines are not defined by increases in ploidy but that in vitro culturing favors their evolution towards a triploid state. The fact that the onset of the cell lines were associated with new different rearrangements suggests that these may favor this event. Thus cytogenetic analysis is extremely important to identify cell lines. In addition, cytogenetic studies helped to determine if one of the cell lines could have been originated as a consequence of an epithelial mesenchymal transition from the same cells or if it could have been originated from a different cell. Summing up, in this thesis we have investigated the evolution of karyotypes of different mammary tumors from a hormone dependent to a hormone independent state and in their derived cell lines. To our knowledge this is the first report on the field studying cytogenetics in relation to hormone independence in mouse mammary tumors. Genes located in breakpoints, such as Aurora C in chromosome 7, deserve further investigations.

"Contribución de los perros a la transmisión de Trypanosoma cruzi en un área rural de Argentina: demografía, rol centinela y modelado matemático" (1999). Castañera, Mónica Beatriz. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los perros son los principales reservorios domésticos de Trypanosoma cruzi, el agente causal de la Enfermedad de Chagas. Con el objetivo de estudiar la dinámica poblacional de los perros de Amamá y localidades vecinas (Provincia de Santiago del Estero, Argentina), se realizaron 8 censos cada 6 meses desde Mayo de 1994 a Diciembre de 1997. La abundancia varió muy poco entre años desde 294 hasta 345 perros. La tasa instantánea de crecimiento poblacional (r = 0,016/semestre) no fue significativamente diferente de 0. El 96% de las viviendas habitadas tenían uno o más perros (media, 3,1 perros por casa). La distribución de edades presentó una estructura estable, con un 76% de perros con 3 o menos años de edad, y un 75% de machos. Un 34% de las hembras tuvieron al menos una parición en los 6 meses previos, con una camada promedio de 5,1 cachorros que no fluctuó estacionalmente. En un análisis de factores clave de mortalidad, el sacrificio de los cachorros fue el único factor estadísticamente significativo, pero no se halló evidencia de que actuara en forma densodependiente. La probabilidad de morir específica por edades tuvo la típica forma en U de los mamíferos grandes, y fue superior en las hembras que en los machos. La población de perros se hallaría en estado estacionario y regulada por los propietarios mediante la manipulación de la tasa de mortalidad de los cachorros recién nacidos, especialmente hembras. La reacción de inmunoensayo enzimático (ELISA)fue utilizada para detectar anticuerpos específicos anti-T. cruzi en sueros de 182 perros mestizos rurales también analizados por hemoaglutinación e inmunofluorescencia indirectas. El 86% de los sueros tuvieron resultados concordantes para todas las técnicas serológicas. La especificidad de ELlSA fue del 96,2%. Entre 34 perros adultos con xenodiagnóstico positivo, la sensibilidad estimada fue del 94% para ELlSA e IFI. ELISA es la técnica de elección para la vigilancia serológica de infecciones por T. cruzi en poblaciones de perros de áreas que han sido rociadas con insecticidas. Se investigó si el perro podría ser un eficaz centinela de la transmisión vectorial de T. cruzi en el contexto de la fase de vigilancia. La seroprevalencia global de T. cruzi en la población canina disminuyó del 65,0% (54/83) en 1992, antes de un rociado con deltametrina, al 38,5% (70/182) en 1994, y al 15.2% (36/237) en 1996. Se registraron 12 cachorros nativos infectados nacidos después del rociado. De 13 variables consideradas en un análisis por regresión logística múltiple, las que resultaron significativamente asociadas con la probabilidad de estar infectado fueron (i) el número de Triatoma guasayana capturado en el domicilio para el período 1993-94, y (ii) la seropositividad a T. cruzi de la madre, y el número de perros cohabitantes infectados para 1995-96. La evidencia sugiere que los casos nuevos de infección podrían explicarse por diferentes rutas de transmisión que implicarían a T. guasayana como un vector secundario durante la vigilancia. Con el objetivo de investigar la contribución de los animales domésticos a la transmisión vectorial de T. cruzi, se construyó un modelo matemático de la dinámica poblacional de Triatoma infestans estructurado por estadios, a tiempo continuo, con una dependencia respecto de la temperatura en el tiempo de desarrollo de cada estadio y en la tasa de oviposición de las hembras. y que incorpora estocasticidad demográfica. La abundancia de T. infestans presentó fluctuaciones estacionales con un pico de densidad en los meses de verano. La abundancia promedio de triatominos en la vivienda y la amplitud de las oscilaciones dependió del tipo y número de hospedadores presentes. La incorporación de una gallina durante la estación cálida produjo un incremento del 40% en la densidad promedio de triatominos y oscilaciones de mayor amplitud. Cuando se enfrentó a humanos y perros susceptibles a distintas prevalencias de infección por T. cruzi en el vector, los perros se infectaron más rápidamente que los humanos. La inclusión de estocasticidad demográfica permitió una buena descripción de la evolución del sistema, estimar la probabilidad de que el sistema persista y de la ocurrencia de un evento de infección.

Abstract:
Dogs are the main domestic reservoirs of Trypanosoma cruzi, the causal agent of Chagas disease. To study the population dynamics of dogs from Amamá and neighboring villages (Province of Santiago del Estero, Argentina), 8 censuses were carried out each 6 months from May 1994 to December 1997. The abundance varied very little over years, from 294 to 345 dogs. The instantaneous rate of population increase (r = 0.016/semester) was not significantly different from 0. Ninety nine percent of the inhabited houses owned at least a dog (mean, 3.1 dogs per house). The age distribution was stable, with 76% of dogs aged 3 or less years, and 75% of males. One-third of the females had at least one litter in the preceding 6 months, with a mean litter size of 5.1 pups that did not fluctuate seasonally. Key factor analysis showed that slaughtering of newborn pups was the sole statistically significant factor, but no evidence of a density-dependent relationship was found. The age-specific probability of dying had the typical U-shape of large mammals, and was greater in females than in males. The dog population was in a stationary state, regulated by the owners through manipulation of the mortality rate of recently born pups, especially females. An immunosorbent enzymatic assay (ELISA) was used to detect specific antibodies against T. cruzi in sera from 182 rural dogs that were also examined by indirect hemagglutination and immunofluorescence (IFI). 86% of sera showed concordant results for all serologic techniques. ELISA specificity was 96.2%. Among 34 adult dogs with a positive xenodiagnosis, a 94% sensitivity was estimated for ELISA and IFI. ELISA is the assay of choice for serological surveillance of T. cruzi infection in dog populations residing in areas that had been sprayed with insecticides. I investigated whether the dog could be an effective sentinel of the vectorial transmission of T. cruzi during the surveillance phase. The overall seroprevalence of T. cruzi in the dog population decreased from 65.0% (54/83) in 1992, before the deltamethrin spraying, to 38.5% (70/182) in 1994, and 15.2% (36/237) in 1996. A total of 12 pups infected with T. cruzi were detected among native pups born after the spraying. Of 13 variables considered in logistic multiple regression analysis, those that were significantly related to the likelihood of being infected were (i) the number of Triatoma guasayana captured in domestic areas during 1993-94, and (ii) seroreactivity to T. cruzi of the mother, and the number of infected dogs in the household during 1995-96. The evidence suggests that the occurrence of new cases might be explained by different transmission routes that would also implicate T. guasayana as a secondary vector during the surveillance phase. To investigate the contribution of domestic animals to the vectorial transmission of T. cruzi, a mathematical model of the stage-structured population dynamics of Triatoma infestans was built. The model included temperature-dependent developmental times for each stage and female fecundity, and demographic stochasticity. The abundance of T. infestans fluctuated seasonally with a peak in the summer. The mean abundance of bugs in the house and the amplitude of oscillations depended on the type and number of available hosts. Introduction of a hen during the warm season produced a 40% increase in the mean density of bugs and oscillations of greater amplitude. When susceptible humans and dogs faced different prevalence rates of T. cruzi infection in the bugs, the dogs acquired the infection sooner than humans. Inclusion of demographic stochasticity allowed a good description of the system evolution, estimation of the probability of persistence, and the occurrence of an infection event.

"Control adaptativo de sistemas no lineales a tiempo discreto" (1997). González, Graciela Adriana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Control adaptivo de sistemas lineales en tiempo discreto parcialmente conocidos" (1995). Troparevsky, María Inés. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El Control Adaptivo comprende el desarrollo de técnicas para controlar sistemas cuyas ecuaciones son sólo parcialmente conocidas. Este tipo de técnicas, cuyo análisis y desarrollo data ya de mas de tres décadas, apunta a la solución de problemas presentes en distintas disciplinas en las que intervengan sistemas de control. Una realidad a la que se enfrentan aquellos que trabajan con sistemas reales de control es el problema de diseñar modelos para estos sistemas. El hecho de no conocer exactamente las ecuaciones que rigen su evolución nos obliga a proponer un modelo paramétrico para representar al sistema y calcular el control necesario para alcanzar el objetivo propuesto sobre ese modelo. Si el modelo elegido se asemeja al sistema real, esperamos que el control que calculamos sobre el primero, tenga sobre el sistema el efecto deseado. Para que el modelo represente lo mas fielmente posible al sistema, no elegimos valores fijos para los parametros del modelo sino que, a partir de uno inicial actualizamos el valor de esos parametros a traves de algún algoritmo de estimación. De esta manera, los algorilmos de Control Adaptivo, y en particular los que desarrollamos en la presente tesis, se componen de.un algoritmo de estimación de parámetros combinado con alguna estrategia de control. En el caso de sistemas de control en tiempo discreto, su análisis se puede realizar desde distintos ángulos; ya sea desde la teoria abstracta de sistemas dinámicos libres como desde el análisis de las series generatrices de los mismos. Pero, cualquiera sea el ángulo elegido, cuando los modelos que representan a los sistemas no se conocen con exactitud, como menciona ramos en el parrafo anterior, la cantidad de herramientas de las cuales uno dispone se reduce notablemente. Si bien se han desarrollado herramientas de control para esle lipo de sistemas de ecuaciones parcialmente conocidas en tiempo discreto, ellas se refieren a situaciones ideales o a casos particulares. Situaciones mas generales no aparecen contenidas en la teoria existente. Algunas de estas situaciones más generales son las que analizamos en el presente trabajo: la posible aparición de perturbaciones afectando al sistema, la existencia de términos no modelados o la variación de los parametros del sistema a través del tiempo. El objetivo de este trabajo es el de analizar el control de sistemas lineales en tiempo discreto cuyas ecuaciones de evolución son sólo parcialmente conocidas por medio de técnicas de Control Adaptivo. Estudiamos en él las distintas situaciones que describimos en el parrafo anterior y que suelen aparecer cuando intentamos controlar efectivamente este tipo de sistemas, introducimos algoritmos que resuelvan satisfactoriamente tales situaciones y finalmente comprobamos su eficacia en ejemplos tanto teóricos como practicos.

"Control biológico de enfermedades causadas por Sclerotinia Sclerotiorum en el girasol y estudio del rol de las poliaminas en las distintas etapas del ciclo de vida de este patógeno" (2002). Pieckenstain, Fernando Luis. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Control climático e interacciones permafrost-volcanismo, Isla Decepción, Antártida" (2015-03-18). Goyanes, Gabriel Alejandro. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El programa de monitoreo de capa activa de la International Permafrost Association (CALM) fue desarrollado en las últimas décadas con la finalidad de comprender el impacto del cambio climático sobre los ambientes con permafrost. A partir del Año Polar Internacional (2007-2008), se han incrementado los estudios en la temática en la región de la Península Antártica en un esfuerzo realizado a nivel mundial (CALM-S), debido al reducido conocimiento del comportamiento del mismo. A su vez, debido a la complejidad de instalar y mantener equipos de monitoreo en la zona, y con la finalidad de extender los resultados obtenidos en estos sitios puntuales, ha habido un incremento de estudios correlacionando la presencia y/o degradación de estos suelos congelados con los procesos que ocurren en superficie. En este trabajo se analizan los resultados obtenidos de los sitios CALM-S Irizar, Cráter Lake y Refugio Chileno, ubicados en Isla Decepción, uno de los volcanes activos localizados en el Continente Antártico. La relevancia del estudio en este sitio es que allí se produce la interacción entre procesos ligados a la ocurrencia de permafrost, al cambio en las condiciones climáticas y al vulcanismo activo, siendo que además, la isla es una de las áreas protegidas por el Tratado Antártico. En estos sitios de monitoreo se ha medido el espesor, el estado térmico y la distribución espacial de la capa activa, como así también se ha analizado su interacción con la temperatura del aire y el espesor y distribución de la cubierta nival y sus tendencias. Con la finalidad de extender estos resultados, se ha realizado un relevamiento geomorfológico de detalle de la isla. Con él, se efectuó un modelado geomórfico con base en el método estadístico de Valor Informativo, a fin de analizar la distribución espacial de las geoformas mapeadas e inferir sus posibles factores condicionantes. Además, con base en relatos históricos y en trabajos de investigación antiguos, se ha construido la historia volcánica de la isla desde el punto de vista de la evidencia geomorfológica hallada. En el sitio Irizar la evolución del espesor de capa activa varió interanualmente entre los valores de 67 y 45 cm, sin mostrar una clara tendencia dentro del corto período analizado; por el contrario, el sitio Cráter Lake evidenció una tendencia significativa a la disminución de espesor entre los años 2006 y 2014, de 35,5 a 23,1 cm. La distribución espacial, el espesor y el régimen térmico de esta capa, en los sitios de monitoreo, mostraron estar condicionados principalmente por la potencia de la cubierta de nieve, la granulometría/litología y la exposición frente a los vientos. La ausencia de potentes espesores de nieve durante el invierno, como lo ocurrido en el 2011 y en el 2012, favoreció la libre interacción suelo-atmósfera permitiendo alcanzar las temperatura más frías observadas en los sondeos, siendo inferiores a los -10 ºC. Por el contrario, la presencia de espesores de nieve superiores a los 20 cm, como lo ocurrido durante el invierno del 2010, inhibió el enfriamiento del suelo, el cual alcanzó solamente los -3 ºC. Durante el verano, debido a la ausencia de una cubierta nival, los primeros 60 cm de los sondeos alcanzaron temperaturas cercanas a los 4 ºC, mientras que su parte inferior permaneció a 0 ºC durante el período analizado. Esto permite suponer la presencia del tope del permafrost a esta profundidad. Por su lado, los sitios expuestos a los vientos y con mayor granulometría, desarrollaron los mayores espesores de deshielo superficial debido a que favorecen la rápida conductividad térmica al comienzo de la época de fusión. El relieve, la topografía de detalle y la orientación de las laderas frente a la radiación solar incidente, solamente ejercieron un control menor sobre la distribución de esta capa superficial. Pese a tratarse de un volcán activo con procesos geotérmicos e hidrotermales superficiales puntuales, la dinámica de la capa activa solamente ha evidenciado una influencia de los mismos muy reducida y solamente cercana a los sitios anómalos. Allí, la interacción local entre el flujo geotérmico anómalo y la ocurrencia de permafrost controlan la hidrología del sitio provocando el desarrollo de movimientos de remoción en masa. El modelado geomorfológico de susceptibilidad de ocurrencia utilizando el método estadístico de Valor Informativo, mostró buenos resultados al considerar a las geoformas analizadas como polígonos. Por otro lado, al considerarla como puntos, el modelado arrojo resultados excelentes, con niveles de predicción y validación superiores al 80 %. De esta forma, fue posible aproximar la distribución de las geoformas de acuerdo a los factores condicionantes considerados (elevación, pendiente, exposición, curvatura total, radiación solar potencial, índice de humedad, litología, permeabilidad y temperatura del aire). A su vez se ha realizado una correlación de esta aproximación con los datos meteorológicos locales y regionales, permitiendo aproximar la génesis de cada una.

Abstract:
The Circumpolar Active Layer Monitoring (CALM) program developed over the last two decades has a leading edge in comprehensive efforts to study the impacts of climate change in permafrost environments. Since the International Polar Year (2007-2008), an increase in the permafrost studies in the Antarctic Peninsula region has developed as an international effort to bridge the gap on the understanding of regional permafrost and active layer conditions. In turn, in order to overcome limitation due the complexity of installing and maintaining monitoring equipment and, in order to extend the observations besides specific monitoring sites, there has been an increase in studies analyzing frozen ground and its degradation in relation to the surface processes. In this work, data from Irizar, Crater Lake and Refugio Chileno CALM-S sites, located in Deception Island, one of the active volcanoes in the Antarctic region, are analyzed. The site is especially relevant due to the widespread occurrence of permafrost and active volcanism, in a setting of strong climate warming in the last decades. Furthermore, the island is an Antarctic Treaty protected site. Active layer thickness, thermal regime and distribution, as well as its interaction with air temperature and snow were analyzed at the monitoring sites. In order to obtain a better spatial understanding of active layer dynamics and its impact, a detailed geomorphological survey of Deception Island at scale of 1:15.000 was made. A statistical modeling of geomorphic processes based on Information Value method was performed in order to understand spatial distribution and triggering factors. Historical accounts and research papers have been analyzed in order to review the volcanic history of the island based on geomorphological evidence. In Irizar CALM-S site the active layer depth varied interannually between 67 and 45 cm without a clearly trend over the short record available. By contrast, Crater Lake CALM-S showed a significant thinning trend over the period 2006-2014, from 35.5 to 23.1 cm. In all sites, the spatial patterns of thaw, the active layer thickness and thermal regime were mainly controlled by snow cover conditions, grain-size/lithology and wind exposure. The occurrence of thin snow thickness during the winter, as in 2011 and 2012, favored the ground-atmosphere interaction allowing to reach the coldest borehole temperatures observed, still lower than -10 ºC. On the contrary, snow depths greater than 20 cm, as in 2010 winter, inhibited ground cooling reaching only -3 ºC. During the summer, due to snow cover absence, the first 60 cm of the boreholes reached temperatures close to 4 ºC meanwhile the bottom of them remained at 0 ºC during the period analyzed. This suggests the presence of the top of permafrost at this depth. On the other hand, the sites with larger grain sizes and exposed to the wind action, developed greater active layer thickness due to higher thermal conductivity at the beginning of melt season. The relief, the detailed topography and solar radiation also exerted a local control over the spatial patterns. Despite being an active volcano surficial geothermal anomalies and hydrothermal processes are local phenomena and as such, active layer dynamics, is only impacted in their vicinity. There, local interaction between high geothermal flux and permafrost occurrence at depth control the hydrology of the site resulting in the mass wasting landforms generation. Susceptibility modeling of geomorphological process distribution using the Information Value statistical method showed good results when analyzing landforms as polygons. However, when considering landforms as point features, the modeling results were excellent, with both prediction and success rates up to 80 %. This allowed to identify the effects of independent variables such as elevation, slope, aspect, total curvature, total solar radiation, moisture index, lithology, permeability and air temperature, on landform distribution. These results were discussed accounting for both local and regional meteorological data, allowing to infer causal effects.

"Control cuántico coherente mediante transiciones de Landau-Zener" (2010). Murgida, Gustavo Ezequiel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo proponemos un método para controlar de una manera extremadamente simple el estado de un sistema cuántico. La estrategia de control está basada en el modelo de Landau-Zener y consiste esencialmente en emplear los cruces evitados para alcanzar diferentes niveles de energía y en recorrer lentamente las curvas adiabáticas del espectro,hasta arribar al estado deseado. La simpleza del método proviene de suponer que el sistema se comporta localmente, cerca de cada anticruce, como un sistema de dos niveles de Landau-Zener. Sin embargo, mediante simulaciones numéricas en diferentes sistemas realistas comprobamos que nuestra estrategia de control posee una eficiencia sorprendente. Las primeras aplicaciones numéricas fueron realizadas en un sistema de dos puntos cuánticos acoplados con dos electrones intearactuantes en su interior. Empleando un campo eléctrico externo como parámetro de control y partiendo del estado fundamental a campo E /0, logramos localizar ambos electrones en un mismo punto cuántico, construir estados entrelazados, recorrer en forma eficiente caminos complejos en el espectro para conectar niveles de energía lejanos y construir superposiciones coherentes de varios autoestados. El método tambié fue aplicado en otro sistema muy diferente al anterior, la molécula de LiCN. Nuevamente pudimos controlar exitosamente el estado del sistema y además encontramos una solución al problema de isomerizar la molécula. Para ello también empleamos como parámetro de control un campo eléctrico externo. De esta manera mostramos que nuestro método puede ser aplicado eficientemente en diferentes sistemas complejos y creemos que posee un importante potencial en el campo del control coherente.

Abstract:
In this work we propose a method to control the state of a quantum system in a extremely simple way. The control strategy is based on the Landau-Zener model and consist essentially in using the avoided crossings to reach different energy levels and walking slo- wly the adiabatic curves of the spectrum, in order to reach the target state. The simplicity of the method came from the hypothesis that the system evolves locally, near each avoided crossing, as a two levels Landau-Zener system. However, through numerical simulations in different systems we prove that our control strategy has a surprising efficiency. The first numerical applications were realized on a double quantum with two inter- acting electrons inside. Using an external electric field as control parameter and starting from the ground state at field E / 0, we were able to localize both electrons in the same dot, to construct entangled states, to connect distant energy levels by following complex paths on the spectrum in a efficient way, and to construct coherent superposition of several eigenstates. The method was also applied to a very different system, the LiCN molecule. Again we were able to control successfully the state of the system, and moreover we found a solution for the problem of isomerizing the molecule. Also in this case we used an electric field as control parameter. In this way we have shown that our method can be successfully applied to different complex systems, and we believe that it has a great potential in the field of coherent control

"Control de calidad de Hibiscus sabdariffa L. (Malvaceae): estudio farmacobotánico, análisis de polifenoles y actividad antioxidante aplicables en un laboratorio de baja complejidad" (2014-12-10). Vivas Leguizamón, Laura Vanessa. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Hibiscus sabdariffa L. (Malvaceae), conocida como “Hibiscus” y “Flor de Jamaica”, es empleada en la elaboración de té y de bebidas refrescantes libres de cafeína. El objetivo del trabajo fue determinar los parámetros farmacobotánicos y fitoquímicos (polifenoles) aplicables al control de calidad de muestras de “Hibiscus” en el marco de un laboratorio de baja complejidad. Se analizaron muestras comerciales de “Hibiscus” y se realizaron disociados leves, infusiones y extractos etanólicos. El análisis microscópico permitió observar la presencia de una epidermis con estomas anomocíticos; tricomas eglandulares cónicos y flexuosos; tricomas glandulares no capitados y capitados; tráqueas espiraladas y drusas. El análisis fitoquímico permitió determinar un perfil de antocianos caracterizado por la presencia de delfinidina-3-sambubiósido y cianidina-3-sambubiósido. En algunas muestras se detectó un tercer compuesto, en baja concentración, que correspondería a cianidina-3-glucósido. Estos compuestos se presentaron como importantes marcadores fitoquímicos permitiendo determinar su presencia en muestras complejas. Si bien el perfil de polifenoles se presentó sin modificaciones entre las diversas muestras analizadas, se observó una marcada variación cuantitativa entre las mismas. Tanto los extractos acuosos como los etanólicos presentaron importantes contenidos de polifenoles y una promisoria actividad antioxidante. En líneas generales, en el extracto etanólico se determinaron las mayores concentraciones de fenoles, flavonoides, ácidos hidroxicinámicos y particularmente de antocianos, como así también una mayor actividad antioxidante, respecto de los valores obtenidos en los extractos acuosos. Las técnicas empleadas son de rápida realización y bajo costo, aplicables en laboratorios de baja complejidad. PALABRAS CLAVES: Hibiscus sabdariffa, “Hibiscus”, “Flor de Jamaica”, tricomas, antocianos, delfinidina-3-sambubiósido, cianidina-3-sambubiósido, flavonoides, ácidos hidroxicinámicos, fenoles totales.

Abstract:
Hibiscus sabdariffa L. (Malvaceae), known as “Hibiscus” and “Jamaica flower”, is employed in the making of tea and refreshing caffeine-free beverages. The aim of this study was to determine the pharmacobotanical and phytochemical (polyphenols) parameters applicable to the quality control of “Hibiscus” samples in a low complexity laboratory. Commercial samples of “Hibiscus” were analyzed, and mild dissociation, infusions, and ethanol extracts were performed. Microscopic analysis revealed the presence of an epidermis with anomocitic stomata; conic and flexuous eglandular trichomes; non-capitated and capitated glandular trichomes; spiral trachea and druses. Phytochemical analysis helped identify an anthocyanin profile characterized by the presence of delphinidin-3-sambubioside, and cyanidin-3-sambubioside. In some samples, a third compound was identified, in low concentration, which would agree with cyaniding-3- glucoside. Given that these compounds were significant phytochemical indicators, their presence was allowed to be determined in complex samples. Even though polyphenol profile showed no modifications in the different analyzed samples, a strong quantitive variation was observed among them. Both aqueous, and ethanol extracts, showed high content of polyphenols, and a promising antioxidant activity. In general, the highest concentration of phenols, flavonoids, hydroxycinnamic acids, and specifically anthocyanins were determined in ethanol extract, as well as, higher antioxidant activity compared to the values obtained in aqueous extract. The techniques employed are low cost and can be performed rapidly, applicable in low complexity laboratories. KEYWORDS: Hibiscus sabdariffa, “Hibiscus”, “Flor de Jamaica”, trichomes, anthocyanins, delphinidin-3-sambubioside, cyanidin-3-sambubioside, flavonoids, hydroxycinnamic acids, total phenols.

"Control de calidad de ¨Maíz Morado¨ (Zea Mays L.- Poaceae, raza ¨Culli¨): estudio farmacobotánico, análisis de antocianos y actividad antioxidante" (2016-08-26). Carmona Córdova, Sandra Juliana. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El “maíz morado”, es la variedad morada de Zea mays L. originaria de Perú, Bolivia y del Nordeste Argentino. Es empleada en la elaboración de “chicha morada”, “mazamorra morada” y “api”. El objetivo del trabajo fue determinar los parámetros farmacobotánicos y fitoquímicos (polifenoles) aplicables al control de calidad de muestras de “maíz morado” en el marco de un laboratorio de baja complejidad. Se analizaron muestras vegetales y muestras industrializadas que indicaban al “maíz morado” como parte de su composición. Se realizaron disociados y cortes en el estudio farmacobotánico y cocimientos (extracto acuoso), extractos etanólicos y metanólicos para el estudio de polifenoles. El análisis microscópico para las muestras vegetales nos permitió observar caracteres presentes en el grano, como almidón (de estructura característica para la especie), esclereidas y tricomas de diferentes tipos en la gluma y marlo, como así también tráqueas anilladas en éste último. Para las muestras industrializadas, solamente en una de ellas se observó la presencia del almidón característico de Zea mays. El análisis fitoquímico en las muestras vegetales permitió determinar un perfil de antocianos caracterizado por la presencia de cianidina-3-glucósido en mayor proporción y en menor proporción pelargonidina-3-glucósido y peonidina-3-glucósido. Aunque el perfil de polifenoles se presentó sin modificaciones entre las diversas muestras vegetales analizadas, se observó una marcada variación cuantitativa entre las mismas. En el caso de las muestras industrializadas, sólo se detectó la presencia de cianidina-3-glucósido en una muestra, mientras que en el resto no se pudo observar ningún carácter fitoquímico relacionado con el “maíz morado”, ya que en su composición sólo se observaron colorantes artificiales. Las técnicas empleadas son de rápida realización y bajo costo, aplicables en laboratorios de baja complejidad.

Abstract:
The "purple corn" is the purple variety of Zea mays L., originating in Peru, Bolivia and the northeastern of Argentina. It is used in the preparation of "chicha morada", "mazamorra morada" and “api”. The objective of this study was to determine the pharmacobotanical and phytochemical (polyphenols) parameters applicable to quality control samples of "purple corn" in the context of a low-complexity laboratory. Plant samples (corn) and industrial samples that indicated "purple corn" as part of their composition were analyzed. Macerations and sections for the pharmacobotanical analysis were performed and decoctions (aqueous extract), ethanolic and methanolic extracts for the polyphenols study. Microscopic analysis of plant samples allowed us to observe characters present in the grain, such as starch (characteristic structure for this species), sclereids and trichomes of different types in the glume and cob, as well as spiral tracheas in the latter. For industrial samples, in only one of them the presence of characteristic starch of Zea mays was observed. Phytochemical analysis in plant samples allowed us to determine an anthocyanins profile characterized by the presence of cyanidin-3-glucoside on a greater extent and lesser pelargonidin-3- glucoside and peonidin-3-glucoside. Although the profile of polyphenols showed no changes between different plant samples analyzed, a strong quantitative variation was observed between them. In the case of industrialized samples, only in one of them cyanidin-3-glucoside was detected while in the remainder no phytochemical character related to the "purple corn", could be observed, because in its composition only artificial coloring were observed. The techniques used are of fast implementation and low cost, applicable in low complexity laboratories.

"Control de la expresión génica en Trypanosoma Cruzi : proteínas que participan en la regulación del procesamiento de pre-RNA mensajeros" (2002). Portal, Daniel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El Trypanosoma cruzi. es el parásito protozoario flagelado responsable de la enfermedad de Chagas en Latinoamérica. Esta enfermedad produce miles de muertes y un costo elevado para los países de la región. El mecanismo de control de la expresion génica en el parásito es objeto de fuertes estudios, ya que éste procesa sus pre-RNA mensajeros de manera diferente a la forma en que lo hacen sus hospedadores, mediante un mecanismo conocido como trans-splicing. Por lo tanto, entender las bases moleculares de dicho control es importante para encontrar puntos potenciales para el desarrollo de drogas terapéuticas que puedan interrumpir el ciclo vital del parásito. Presentamos aquí el clonado y la caracterización de dos proteínas importantes para la catálisis y el control del procesamiento de los pre-RNAm jamás descriptas anteriormente en ningún protozoario poseedor del sistema de trans-splicing. Estas proteínas, llamadas TcSR, perteneciente a la familia de factores de splicing ricas en serina y arginina y su quinasa asociada, TcSRPK mostraron un altísimo grado de conservación a todo nivel con sus contrapartes de eucariotas superiores tanto en ensayos in vivo como in vitro. Si bien esto las descarta, en principio, como base para el desarrollo de drogas terapéuticas, ilustra sobre el grado de conservación que pueden tener dos vias aparentemente discímiles como el cis- y el trans-splicing. Además, los resultados sugieren que los mecanismos de control de la expresión génica a nivel del procesamiento del RNA están altamente conservados a pesar de la distancia evolutiva, demostrando la enorme presión de selección a la que está expuesto dicho mecanismo.

Abstract:
The Trypanosome cruzi, is a flagellate protozoan parasite responsible for the Chagas' disease in Latin America. The mechanisms of control of gene expression are not well understood, since the parasite processes nearly all of its pre-mRNAs by trans-splicing which is different from cis-splicing, in their insect and mammalian hosts. Understanding the molecular basis of such mechanism is important in order to develop drugs that could interrupt the parasite's vital cycle. Here we present for the first time in a trans-splicing performing organism, the cloning and characterization of two important proteins involved in the catalysis and control of pre-mRNA processing. These proteins, called TcSR, a member of the serine-arginine (SR) protein family of splicing factors and its associated kinase. TcSRPK, showed a highly conserved activity both in vitro and in vivo, in a variety of functional assays. Although this discards the proteins as potential targets for therapeutic drug development, it illustrates on the striking conservation that two apparent different pathways like cis- and trans-splicing can show. Moreover, the results suggest that the mechanisms of control of gene expression at the pre-mRNA processing level are highly conserved despite the evolutionary distance that separates the organisms. This demonstrates the huge selection pressure to which pre-mRNA processing is exposed.

"Control de la función reproductiva en el hamster macho" (1997). Frungieri, Mónica Beatriz. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El hamster es una especie con reproducción estacional controlada fotoperiódicamente. La exposición de animales adultos a fotoperíodos cortos produce marcadas alteraciones en el eje hipotálamo-hipófiso-gonadal, que resultan en una fase inicial de quiescencia (regresión), y una posterior recuperación de la actividad sexual (recrudescencia espontánea). Los resultados presentados en esta Tesis han permitido: a) realizar un estudio comparativo sobre distintos aspectos de la función sexual, en dos especies de hámsteres: Dorado y Djungarian; b) establecer semejanzas y diferencias entre el proceso de desarrollo puberal y la transición fotoperiódica regresión recrudescencia; c) estudiar el metabolismo de las poliaminas en testículos y vesículas seminales, y su correlación con el trofismo del órgano; d) establecer una dependencia diferencial de la actividad secretoria gonadal de inhibina B respecto de FSH, según el tiempo de permanencia en fotoperíodo corto; e) evaluar la presencia de GABA y Serotonina en gónadas y glándulas sexuales accesorias; y f) determinar la participación de la Serotonina en la modulación local del proceso esteroidogénico, y su mecanismo de acción a través de una inhibición en la actividad adenilato ciclasa. Dichos resultados contribuyen al conocimiento de los mecanismos que controlan la función reproductiva en el hamster macho, los cuales se manifiestan sobre los distintos niveles que conforman el eje hipotálamo-hipófiso-gonadal.

Abstract:
The hamster is a seasonal breeder. The exposure of hamsters to short fotoperiods causes a severe alteration of the hypothalamic-pituitary-gonadal axis, including an early quiescence phase (regression), and a later recovery of the sexual activity(spontaneous recrudescence). The results of this Thesis permited: a) to make a comparative study about the different aspects of the sexual function between two species of hamsters: Golden and Djungarian; b) to establish similitudes and differences between the sexual development and the regression-recrudescence transition; c) to study polyamine metabolism in testes and seminal vesicles, and its correlation with organ growth; d) to establish a differential dependency of the gonadal secretion of inhibin type B with respect to FSH, in relation with the time of permanence in short photoperiod; e) to determine the presence of GABA and Serotonin in testes and accessory sexual glands; and f) to establish the role of Serotonin in the local modulation of steroidogenesis, and its action mechanism through the inhibition of adenylate cyclase activity. These results contribute to the knowledge of the mechanisms regulating the reproductive function in the male hamster, manifested at different levels of the hypothalamic-pituitary-gonadal axis.

"Control de la respuesta transcripcional a hipoxia en Drosophila melanogaster, por las proteínas de la familia bHLH-PAS: Similar y Tango" (2004). Lavista Llanos, Sofía. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En mamíferos, se ha demostrado que el factor de transcripción hetero-dimérico bHLH-PAS - Hypoxia Inducible Factor (HIF) - es un regulador clave de la respuesta a hipoxia induciendo la expresión de genes regulada por oxígeno. En esta tesis demostramos la existencia de un sistema homólogo en Drosophila, y caracterizams su actividad in vivo durante el desarrollo. Usando reporteros transcripcionales en moscas transgénicas mostramos que la actividad trancripcional inducible por hipoxia aumenta a lo largo del desarrollo resultando máxima hacia el final de la embriogénesis. Mostramos que los diferentes tipos celulares tienen distintos niveles de sensibilidad a hipoxia y que las células traqueales son más sensibles respondiendo a hipoxia suaves. Mostramos que las proteínas bHLH-PAS Similiar (Sima) y Tango funcionan como los homólogos de HIF-α y β respectivamente, y demostramos un modo conservado de regulación por oxígeno para Sima. La proteína Sima se indujo en hipoxia, mientras el nivel de su ARN mensajero no varió con la concentración de oxígeno. En experimentos de un pulso de expresión ectópica de Sima seguidos de una curva de tiempo vimos que Sima se estabiliza en hipoxia y que su degradación depende de oxígeno. La expresión ectópica continua de Sima superó su tasa de degradación permitiéndonos estudiar el control de su localización subcelular. Sima es mayormente citoplasmática en normoxia y la proteína transloca al núcleo únicamente en hipoxia, revelando una segunda etapa de activación regulada por oxígeno. Describimos que la localización subcelular de Sima se encuentra modulada por parámetros del desarrollo. Caracterizamos el mecanismo que gobierna la localización subcelular dependiente de oxígeno de Sima. Mostramos que Sima entra y sale continuamente del núcleo al citoplasma y caracterizamos la exportación nuclear de Sima, cuyo mecanismo involucra al receptor de exportación nuclear CRM-1/Embargoed y es dependiente de oxígeno. Mostramos que el factor supresor de tumores deVon Hippel Lindau (VHL) modula la exportación nuclear de Sima, la cual requiere la hidroxilación de un residuo de prolina específico (Pro850). Proponemos que la localización núcleo-citoplasmática de HIFα/Sima resulta de un quilibrio dinámico entre la importación y la exportación nuclear, siendo este último un proceso modulado por oxígeno.

Abstract:
In mammalian systems, the heterodimeric bHLH-PAS transcription factor - Hypoxia Inducible Factor (HIF) - has emerged as the key regulator of responses to hipoxia. In this thesis we defined a homologous system in Drosophila, and characterise its activity in vivo during development flies we show that hypoxia inducible activity rises to peak levels in late embryogenesis, and is most pronounced in tracheal cells. We show that the bHLH-PAS protein Similar (Sima) and Tango function as HIF-α and β homologues respectively, and demonstrate a conserved mode of regulation for Sima by oxygen. Sima protein, but not its mRNA, was upregulated in hypoxia. Time course experiments following pulsed ectopic expression demonstrated that Sima is degraded in normoxia. Continuous ectopic expression over-rode Sima degradation which remained cytoplasmic in normoxia, and translocated to the nucleus only in hypoxia, revealing a second oxygen regulated activation step. We also show that Sima shuttles continuously between the nucleus and the cytoplasm. We characterized nuclear export of Sima which occurs through a mechanism that involves the nuclear export receptor CRM1/Embargoed and is oxygen-dependent. The Von Hippel Lindau (VHL) tumor suppressor factor modulates nuclear export of Sima, which requires hydroxylation of a specific prolyl residue (Pro850). We propose that HIFα/Sima nucleo-cytoplasmic localization is the result of a dynamic equilibrium between nuclear import and nuclear export, being the latter process modulated by oxygen tension.

"Control de la transferencia electrónica en compuestos de valencia mixta" (2000). Parise, Alejandro Rubén. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta Tesis se investiga el efecto del solvente en la estructura electrónica de los complejos n-, y en las propiedades de valencia mixta de dímeros binucleares conteniendo fragmentos n- y n-. También se estudia el proceso de transferencia electrónica en dímeros de intervalencia asimétricos. Los coligandos CN- participan de interacciones ácido base con el solvente. En los complejos n-, este fenómeno incrementa el grado de mezcla π entre el Fe y el ligando L, reduce la energía de las transferencias de carga metal-ligando y vuelve más negativos los potenciales redox de las cuplas n-. La espectroscopía Stark de estos complejos permite cuantificar el grado de mezcla π metal-L, dentro del modelo de dos estados electrónicos. Se determina que los ligandos L más pequeños permiten un mayor solapamiento con el metal que los grandes, e inducen mayor mezcla. Para interpretar teóricamente el efecto del solvente en los espectros electrónicos y el grado de interacción π se usa el método semiempírico ZINDO junto con un modelo de cargas puntuales que rodean al complejo y simulan la presencia del solvente. Se estudia el mecanismo de oxidación del n- con S2O82- en el dímero -, mediado por el isómero electrónico -. El fragmento n+ participa de interacciones específicas con el S2O82-.Esta interacción, junto con la isomerización, es responsable de la mayor velocidad de reacción en comparación con el ataque directo del S2O82- al centro n-. El efecto de los solventes apróticos sobre los dímeros de intervalencia 5- también fomenta mezcla π entre los metales y el ligando puente L. En acetonitrilo, el dímero con M = Fe y L = piracina presenta un comportamiento cercano al de Clase III (Robin y Day). El espectro IR en la zona de VC=N de este dímero es dependiente del tipo de solvente, puesto que el tiempo de la isomerización electrónica es variable (10^-10 a 10^-12 s) e interfiere con las vibraciones de los cianuros. Se usa un modelo de tres estados electrónicos para interpretar el efecto del solvente en las propiedades de intervalencia, en especial el ensanchamiento de las bandas vibracionales.

Abstract:
This thesis is about how the solvent affects the electronic structure of n- complexes and the mixed valence properties on the binuclear dimers with n- and n- fragments. The electron transfer process in intervalence asymmetric dimers is also investigated. CN- coligands participate in acid-base interactions with the solvent. In n- complexes, this effect increases the degree of π mixing between the Fe and the ligand L, reducing the energy of the metal-to-ligand charge transfer, and shifting the redox potential of the n- process to more negative values. The Stark spectroscopy of these complexes allows measuring the degree of π mixing metal-L, under two electronic states model framework. Smaller ligands L allow a better overlap with the metal than bigger ones. In order to understand theoretically the solvent effect on the electronic spectra and degree of mixing ZINDO method is used with a point charge model that simulates the solvent. The oxidation of n- in - with S2O82- is also investigated. The reaction is mediated by the electronic isomer -. The n+ fragment participates in specific interactions with S2O82- This interaction and the isomerization, is responsible of the bigger reaction rate compared with the direct attack to the n-. The effect of aprotic solvents on the intervalence dimers of the type 5- also induces π mixing between metals and bridge ligand L. In acetonitrile the dimer with M = Fe and L = pirazine presents a near Class III (Robin and Day) behavior. The IR spectrum around VC=N stretching depends on the solvent, because the electronic isomerization time is variable (10^-10 a 10^-12) and interferes with the cyanide vibrations. A three-state model is used to explain the solvent effect of mixed valence properties, specially the vibrational bands broadening.

"Control de poblaciones de Cydia pomonella L.(Lepidoptera : Tortricidae) mediante la técnica de la confusión sexual en el Alto Valle del Río Negro y Neuquén" (2004). Cichón, Liliana Isabel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En el presente trabajo se evalúa la eficacia y sustentabilidad del empleo de la Técnica de la Confusión Sexual (TCS) para el control de la plaga Cydia pomonella (Insecta Lepidoptera: Tortricidae) conocida como gusano de la pera y la manzana o “carpocapsa”, en montes de manzanos del Alto Valle de Río Negro y Neuquén con diferentes niveles de infestación y conducidos bajo diferentes programas de producción, Producción Frutícola Integrada (PFI) y Producción Orgánica (PO). Carpocapsa, es una especie nativa de Eurasia que se ha distribuido ampliamente en todo el mundo acompañando a su principal hospedero, Malus domestica B. Sin embargo, en algunas regiones de la China, Corea y Japón, no se observa su presencia, mientras que en el SO de Australia, a través de campañas de exterminación y un estricto control, se ha impedido su establecimiento. En la Argentina, carpocapsa se ha adaptado exitosamente a las condiciones agro-ecológicas de la región del Alto Valle del Río Negro y Neuquén, pudiendo desarrollar 3-4 generaciones al año, lo que implica un alto riesgo para los cultivos frutícolas y para la economía de la zona. Esto ha llevado a la necesidad de estudiar estrategias de control adecuadas a las características locales, que permitan evitar porcentajes de daño en frutos que comprometan la producción regional. El presente trabajo es una contribución para la búsqueda y evaluación de estas herramientas de control en el Alto Valle de Río Negro y Neuquén, Argentina. Con el objeto de evaluar las diferentes estrategias de control de carpocapsa, fue necesario en primer lugar, medir los niveles de infestación en los montes frutales bajo ensayo. Se estudiaron 2 sistemas de monitoreo de la densidad poblacional de carpocapsa en montes frutales de esta región argentina: el método de captura de adultos en trampa y el de muestreo de frutos caídos. Con el primer método se evaluó la eficacia de captura de los cebos cargados con 1 mg y 10 mg de feromona (codlemone) en montes frutales con baja y con media a alta densidad poblacional de carpocapsa. Los datos obtenidos indican que las trampas con cebos de 10 mg son una herramienta más confiable que las cebadas con cápsulas de 1 mg en montes con densidades de población baja de la plaga. En cambio, no se registraron diferencias en las capturas entre ambos tipos de trampas en montes con densidades poblacionales medias y altas de la plaga. Mediante el segundo método se estudió la posibilidad de reemplazar la evaluación habitual del porcentaje de frutos dañados en planta por el muestreo de frutos dañados en suelo. Los resultados muestran que para un porcentaje de frutos dañados en planta ≤ 1%, el número de frutos caídos dañados por hectárea es ≤ 20 (p< 0,05). Por medio de electro-antenogramas se estudió el desempeño de distintos tipos de emisores de feromonas (Check Mate WS®, Isomate CPlus®) así como la influencia de distintos factores ambientales (viento, temperatura y humedad relativa ambiente) en la distribución y concentración de estas sustancias en relación con las barreras rompeviento en los montes de manzanos. Se observó una menor respuesta de los machos de carpocapsa a los compuestos presentes en la atmósfera de los montes tratados con emisores Check Mate WS® (codlemone puro en membrana) respecto a los tratados con el Isomate CPlus® (codlemone + dodecanol + tetradecanol en tubo de polietileno). Sin embargo, serán necesarios algunos estudios complementarios para determinar si la menor respuesta de los machos se debe a la composición feromonal de los 2 emisores estudiados o a diferencias en la tasa de emisión como consecuencia de los distintos materiales con los que éstos están diseñados. Mediciones por EAG en montes frutales bajo condiciones de viento diferentes, permitieron determinar que la concentración de feromona sigue una evolución inversamente proporcional a la velocidad del viento. A velocidades de viento inferiores a 0,5 m/seg, las concentraciones de feromona resultaron al menos dos veces mayores que las registradas con velocidades mayores, entre 0,5 y 1m/seg. La turbulencia del aire y la temperatura son factores que afectan a la concentración de la feromona en los diferentes puntos de los montes tratados, aunque no afectaron su valor promedio. Por otra parte, se demostró una relación directa entre la humedad relativa ambiente y la concentración de feromona. Se determinó además, que bajo las condiciones del Alto Valle del Río Negro y Neuquén el restablecimiento de la nube de feromona se produce en forma rápida cuando la velocidad del viento decae gradualmente, por debajo de 0,5 m/seg, manteniéndose hasta aproximadamente 1 hora después de que la velocidad del viento alcanza valores por debajo de 0,25 m/seg. La sustentabilidad del uso de la TCS quedó en evidencia al combinar esta técnica con otras herramientas complementarias como insecticidas botánicos y biológicos en un sistema de producción orgánica (PO). El uso combinado de la TCS con el insecticida botánico Ryania speciosa fue la táctica de control de carpocapsa más eficaz, que provocó un cambio sanitario relevante a partir del primer año de su implementación. Se puso además en evidencia la importancia de efectuar un adecuado control de la primera generación de carpocapsa cuando se emplea la TCS como herramienta conjunta con insecticidas de acción larvicida. El empleo de esta táctica de control permitió sanear un monte frutal orgánico que presentaba en la cosecha previa a la implementación del tratamiento, altos porcentajes de frutos dañados por carpocapsa (> 20%). Debido al empleo de tácticas con diferente nivel de selectividad en el control de carpocapsa en los montes orgánicos, se produjo un incremento indeseado de las poblaciones de otro tortrícido, grafolita, que pudo ser controlado eficazmente con la TCS para grafolita. Los resultados obtenidos en áreas donde se implementaron tácticas de control aprobadas para la Producción Frutícola Integrada (PFI) indican que la TCS empleada en grandes áreas (mayores de 30 ha) y en conjunción con insecticidas de síntesis química de probada eficacia (metil azinfos), produjo la reducción de las densidades poblacionales de carpocapsa en un lapso de tiempo acorde con los tratamientos con insecticidas. Se determinó además que, con el solo empleo de insecticidas de síntesis química no es posible reducir el porcentaje de frutos dañados por debajo de 0,5%. La selectividad de la TCS sumada a la reducida eficacia del insecticida sobre algunos insectos enruladores de hojas, determinaron el establecimiento y crecimiento poblacional de Argyrotaenia pomililiana en el monte frutal PF1. Afortunadamente, dicha plaga es de fácil control con RCI y Bacillus thuringiensis var. Kurstaki). La disminución drástica de las densidades de población de carpocapsa por medio del empleo combinado de la TCS con aplicaciones de insecticidas de probada eficacia, determinó en el largo plazo (luego del tercer año), una reducción de 86-90% de los volúmenes de insecticidas por unidad de superficie a emplear, manteniendo los niveles de infestación de frutos por debajo de 0,2%.

Abstract:
The efficacy and sustainability of the Mating Disruption control technique (MDT) for the “codling moth” (CM) were investigated in apple tree orchards. The study was developed in the High Valley of Río Negro and Neuquén, in orchards infested with CM and managed with Integrated Fruit Production and Organic Production programs. The codling moth Cydia pomonella (Lepidoptera, Insecta : Tortricidae), is a species native to Eurasia that has spread worldwide, associated with its main host, Malus domestica B. Nevertheless, the CM is not present in some regions of China, Korea and Japan. Moreover, in Southeastern Australia, by means of eradication actions and strict control measures, the occurrence of this pest has been prevented. In Argentina, codling moth has adapted well to the agro-ecological conditions of the High Valley, developing up to 3-4 generations a year, which entails a serious risk for the crop and for the regional economy. For this reason, in order to avoid damage percentages that may jeopardize regional production, different suitable CM control strategies have been evaluated. This study is a contribution to the CM control technology and to the efficacy assessment of specific insect pest control strategies in the High Valley of Río Negro and Neuquén - Argentina. In order to evaluate properly the different CM control strategies currently in use in the High Valley, it was necessary, at first, to measure accurately the infestation levels in the trial plots. Two population monitoring systems for CM were evaluated: pheromone traps and fruit shedding. The efficacy of pheromone traps in fruit orchards with low, medium, and high CM population densities was assessed. The results show that traps baited with 10 mg codlemone constitute a much more reliable sampling tool than traps baited with 1 mg of codlemone, in orchards with low population densities of the pest. On the other hand, in orchards with medium to high CM population densities, captures in 1 mg and 10 mg traps show no statistical significant differences. An auxiliary CM population density monitoring system, that allows a fast and easy CM infestation judgment, was the counting of shedded-damaged fruit. This method is an alternative to the classic method of calculating the percentage of damaged fruit on the tree. Results of the shedded-damaged fruit counting show that infestation rates ≤1% assessed by counting infested fruits on the tree compares with ≤ 20 damaged-shedded fruits per hectare (p< 0.05). The performance of different types of pheromone dispensers (Check Mate WS®, Isomate C Plus®) and the influence of different environmental and structural factors (wind, temperature, relative humidity and wind-breaks) in the distribution and concentration pheromone in apple tree orchards were analyzed by means of electroantenograms. By the use of this technique, males show a lower response in orchards treated with Check Mate WS® dispensers than those exposed to treated Isomate C Plus® orchards. However, further studies will be necessary to find out if the differences in the response are due to the pheromone composition of the two dispensers analyzed, or to differences in the dispenser emission rate, as a consequence of the different dispenser constituents. EAG gauging in fruit orchards with different wind speeds, show that pheromone concentration performs inversely proportional to wind speed. At a wind speed below 0.5 m/s, pheromone concentrations were at least twice as high than those registered at wind speeds between 0.5 m/s, and 1 m/s. Additionally, when wind speed drops below 0.5 m/s, the reestablishment of the pheromone cloud occurs rapidly and persists for approximately 1 hour after wind speed reaches values below 0.25 m/s. Air turbulence and temperature influences directly the pheromone concentration at the different spots of the treated orchard, although these do not affect the average concentration of pheromone in the field. Also, in fruit orchards, a direct relationship between wind speed, relative humidity and pheromone concentration was established. The successful combination of the MD-Technique with other CM control tools such as biopesticides evidenced sustainability of the MDT in organic production systems. The combination of MDT with the botanic pesticide Ryania speciosa was the most effective CM control strategy, showing a major reduction in fruit damage after one year of having put it into practice. Also, it was proven that an adequate control of the first generation of CM, by using MDT together with pesticides, is essential to sanitize an fruit orchard which had a high percentage damage by CM in the previous season (> 20%). It was shown as well that the total number of diapausing larvae per hectare is key information to define the MDT management. In organic orchards, the use of strategies with different selectivity for CM control causes drawbacks such as the occurrence of another tortricid, Grapholita molesta, which was effectively controlled during the field trials by the use of specific MDT. Besides, the selectivity of the MDT together with the reduced efficacy of some OP's insecticides caused the take over of Argyrotaenia pomililiana in the IFP fruit orchard, which was controlled by IGR's and Bacillus thuringiensis var. Kurstaki during field trials. In the framework of large area Integrated Fruit Production management, it was shown that the MDT in combination with effective insecticides like azinphos-methyl, cutback CM populations during a time span that is linked directly to the number of sprayings. Besides, it was shown that the sole use of synthetic insecticides for CM control is not enough to achieve fruit damage lower than 0.5%. The substantial decrease of CM population densities when using jointly the MDT and insecticides of known efficacy, leads to a long term reduction of 86-90% in the volume of pesticides, keeping the CM infestation levels below 0.2%.

"Control del crecimiento y desarrollo de las plantas por la luz: Funciones fotoperceptivas y mecanismos de acción del fitocromo A" (1999). Yanovsky, Marcelo Javier. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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La luz es un factor ambiental crítico para el crecimiento y desarrollo de las plantas. Provee no solo la energía lumínica necesaria para el proceso fotosíntético, sino también señales informativas que las plantas utilizan para coordinar su crecimiento y desarrollo con el ambiente circundante. La percepción de las señales lumínicas esta mediada por fotorreceptores específicos como los fitocromos. Estos son una pequeña familia de proteínas codificada por cinco genes en Arabidopsis thaliana, FITOCROMO A-E (PHY A-E). El objetivo de esta tesis es dilucidar las funciones sensoriales y los mecanismos de acción de uno de los fitocromos más abundantes, el fitocromo A (phy A). Las funciones fotosensorias del phy A en condiciones naturales de radiación fueron investigadas comparando el comportamiento de plantas con niveles normales de phy A y de plantas mutantes y/o transgénicas con niveles incrementados o reducidos de este fotorreceptor. De los experimentos se puede concluir que el phy A actúa como un sensor de cambios en la irradiancia. En plantas etioladas el phy A es el único fotorreceptor que permite a las plantas distinguir la transición entre la oscuridad reinante bajo la superficie del suelo y la escasa luz presente bajo canopeos muy densos. Los cambios morfológicos y fisiológicos desencadenados por el phy A en respuesta a la percepción de dicho cambio en el ambiente lumínico incrementan notablemente la supervivencia de las plantas emergidas en tales condiciones. El phy A, además, está involucrado en la percepción de los cambios en el ambiente lumínico producidos por la presencia de plantas vecinas: percibe directamente la disminución de la cantidad de luz roja (R) y rojo lejana (RL) que se produce por el sombreado y modula, indirectamente, la sensibilidad a reducciones de la relación R/RL que se producen por la relexión selectiva de RL en las hojas de plantas vecinas. Estas acciones del phy A conducen finalmente a un incremento en la tasa de alargamiento del tallo que disminuyen el riesgo de sombreado. En plantas verdes el phy A también está involucrado en la percepción de las transiciones cotidianas oscuridad/luz que se producen al amanacer. En respuesta a la percepción de dicha señal el phyA sincroniza al reloj endógeno que controla el movimiento de las hojas y probablemente la actividad de numerosos procesos vitales en las plantas. El phy A actúa a través de dos modos de acción, el VLFR (por Very Low Fluence Responses) que se satura con muy bajos flujos de luz, y el HIR (por High Irradiance Responses) que se satura con altas irradiancias de RL. Aquí presento evidencias genéticas que indican que 1aacción del phy A en el VLFR y el HIR involucra dos mecanismos moleculares diferentes. Por un lado se identificaron dos loci, vlf1 (en el cromosoma 2) y vlf2 (en el cromosoma 5), polimórficos entre los ecotipos Landsberg erecta y Columbia de Arabidopsis thaliana, que afectan las respuestas VLFR pero no las HIR. También se caracterizaron las respuestas VLFR y HIR en dos mutantes de transducción de señales del phy A previamente identificados y se observó que uno de ellos, el fhy1, afectaba de manera similar las respuestas VLFR y HIR mientras que el otro, el fhy3, afectaba mucho más las respuestas HIR que las VLFR. En conjunto, estos resultados sugieren que el phy A desencadena las respuestas VLFR y HIR a través de dos vías de transducción de señales diferentes que poseen algunos elementos en común. Por otro lado, utilizando una estrategia novedosa de búsqueda, se identificaron dos mutantes débiles de phy A, denominadas phy A-301 y phy A-302, que afectaban mucho más las respuestas HIR que las VLFR. Tanto la mutante phy A-301 como la mutante phy A-302 presentaron niveles reducidos de phy A en ensayos de inmunodetección. La secuenciación del gen PH YAen el mutante phy A-301, reveló una mutación que da lugar a una proteína truncada que carece de 142 aa del extremo C-terminal. La secuenciación del gen PHYA en el mutante phyA-302 reveló una mutación puntual que convierte el glutamato 778 en lisina. Esta mutación se encuentra en una región previamente descripta como importante para la actividad regulatoria de los fitocromos. Estos resultados indican que las respuestas a muy bajos flujos, es decir las VLFR, y las respuestas a altas irradiancias, es decir las HIR, se diferenciarían en los niveles de phyA y/o en los dominios de ésta molécula necesarios para inducir cada una de las respuestas. En resúmen, hemos demostrado que el phyA está involucrado en la percepción de diferentes cambios en el ambiente lumínico durante distintas etapas del ciclo de vida de las plantas y hemos encontrado evidencias genéticas que indican que el phyA actuaría a través de dos vías de transduccíón de señales distintas, una inducida en respuesta a muy bajos flujos de luz y otra inducida en respuesta a altas irradiancias.

Abstract:
Light is a critical enviromental factor for plants. It provides not only the radiant energy for photosynthesis, but also the informational signals that plants use to adapt and optimize their growth and development in response to the ambient conditions. Perception of light signals is mediated by specific photoreceptors such as phytochromes. Phytochromes are a small family of proteins encoded by five genes in Arabidopsis thaliana (PHYA-PHYE). The aim of this thesis is to investigate the photosensory functions of phytochrome A (phyA) and to improve our understanding of the mechanisms by which this photoreceptor transduces different light signals. The photoperceptive functions of phyA were analyzed by comparing the behavior of mutant and transgenic plants with either reduced or increased phyA levels to that of wild type (WT) plants that have normal levels of this photoreceptor. It can be concluded, from the experimental results, that phyA acts as a sensor of irradiance. In etiolated plants phyA is the only photoreceptor capable of perceiving the transition from the dark envirnonment present below the earth surface to the low light levels present beneath very dense canopies. In response to the perception of that signal phyA induces several changes in the developmental pattern that are crucial for seedling survival. In light-grown plants phyA is directly involved in the perception of changes in the amount of red light (R) and far-red light (FR) produced as a consequence of vegetation shading, and modulates the sensitivity to changes in the R/FR ratio produced by the selective reflection of FR in the leaves of nearby plants. These actions of phyA lead to an increment in stem elongation that helps preventing future shading. In light-grown plants phyA is also involved in the perception of the dark/light transitions that occure daily at dawn. In response to such signal phyA sinchronizes the endogenous clock that controls the rhythm of leaf movement, and probably the activity of other vital processes. PhyA acts through two different action modes. The first, VLFR (for Very Low Fluence Responses) is saturated with very low fluences of either R or FR light. The second, HIR (for High Irradiance Reactions) is only saturated with high irradiances of FR. Here I present genetic evidence indicating that the action of phyA in the VLFR and HIR involve two different molecular mechanisms. First, I have identified two loci polyrnorphic between ecotypes Landsberg erecta and Columbia of Arabídopsis thalíana, vlf1 (on chromosome 2) and vlf2 (on chromosome 5), that affect VLFR but not HIR. Second, I have characterized two previously identified phyA signal transduction mutants, fhy1 and fhy3, and found that fhy3 is more affected in the HIR than in the VLFR, while fhy1 is similarly affected in both phyA action modes. These results suggest that phyA elicits VLFR and HIR through two different signal transduction pathways that have some common component(s). Finally, using a novel screening strategy, I have identified two mutants lacking HIR but retaining VLFR. The genetic complementation analysis indicated that they were weak alleles of phyA and therefore they were named phyA-301 and phyA-302. Western blott analysis revealed that both mutants had reduced phyA levels. The sequence analysis of the phyA-301 mutant indicated that the PHYA gene beared a mutation leading to a truncated phyA protein, lacking 142 aa from the C-terminal domain. The sequence analysis of the phyA-302 mutant revealed a mutation that converted glutamic acid 778 into lysine. These results indicate that the responses to very low fluences of light and the responses to high irradiances of FR are different either in the levels of phyA or in the domains of this molecule that are necessary to induce each type of response. In summary, we have shown that phyA is involved in the perception of different changes in the light environment during the whole life cycle of plants and we have found genetic evidence supporting the hypothesis that phyA activates two different signal transduction pathways, one in response to very low fluences of light and the other in response to high irradiances.

"Control genético de la división y forma celular en bacterias" (1995). Costa, Cristina Susana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En este trabajo se investigaron las funciones esenciales de los genes involucrados en el mantenimiento de la forma bacilar en Salmonella typhimurium a través del estudio de las alteraciones que provocan en el crecimiento bacteriano mutaciones que inactivan totalmente a dichos genes. Se aislaron inserciones del transposón Tn10∆16∆17 correspondientes a 3 de los 4 tipos de mutantes de forma conocidos: rodA, mre y divD. Las mutaciones rodA y mre no pudieron transducirse eficientemente a cepas salvajes, pero fueron toleradas por derivados resistentes al antibiótico β-lactámico mecilinam (Mec-R). y por mutantes cya o crp. Por otra parte, la única inserción divD obtenida pudo ser transducida con alta eficiencia a cualquier tipo de cepa. Estos resultados indican que los tres tipos de genes controlan la forma celular pero, además, rodA y mre llevan a cabo alguna función esencial en bacterias salvajes cuya falta es tolerada por cepas Mec-R, cya o crp. Se estudió uno de los mecanismos involucrados en la resistencia a mecilinam y tolerancia a mutaciones letales de forma mediante la caracterización de la cepa DA1138. Se determinó que esta cepa presenta una mutación condicional en el gen de la alanil-tARN sintetasa (alaS206) que es responsable de la resistencia a dicho antibiótico y tolerancia termosensibles. Ambas características dependen del efector de la respuesta estricta ppGpp, cuyo nivel se eleva al expresarse, a 41°C, la mutación alaS206. Se construyeron derivados de la cepa DA1138 portadores de las mutaciones rodA22::Tn10∆16∆17, mre-17::Tn10∆16∆17 y divD135::Tn10∆16∆17 para el estudio de su crecimiento en fase exponencial en condiciones de ausencia de tolerancia a mutaciones letales de forma (30°C). En dicha condición, los derivados rodA22 y mre-17 mostraron inhibición de la división celular y pérdida de la capacidad de formación de colonias a pesar de mantener las células sus signos vitales. Por el contrario, el derivado divD135 creció normalmente a 30°C. Los resultados obtenidos indican que la ausencia de los productos RodA y Mre (no así DivD)altera seriamente la división celular y la capacidad de formación de colonias en cepas salvajes durante la fase logarítmica. Dado el normal crecimiento de los tres derivados en condiciones de tolerancia (41°C), se concluye que las alteraciones ocasionadas por la falta de los productos RodA o Mre son compensadas por mutaciones que elevan el nivel del efector transcripcional ppGpp, probablemente a través de la inducción de algún mecanismo alternativo de división celular. Se demostró que la inhibición de la capacidad de formación de colonias del derivado rodA22 en condiciones de no-tolerancia puede revertirse en tres casos: a) con la llegada a la fase estacionaria, caracterizada por la inducción del gen rpoS, que codifica el factor σs, b) en fase logarítmica, en presencia de acetato o benzoato, posibles inductores del gen rpoS, y, c) en fase logarítmica, en ausencia del producto σs. Sin embargo, en ninguno de los tres casos se normaliza la división celular. No se observó resistencia a mecilinam ni tolerancia a mutaciones letales de forma en una cepa portadora de una mutación nula rpoS, lo que indica que la recuperación de la capacidad de formación de colonias es por sí sola insuficiente para conferir tolerancia y que este fenómeno requiere la restauración de la división celular. Los resultados obtenidos permitieron postular un modelo según el cual el regulador global σs actuaría controlando la capacidad de formación de colonias de mutantes letales de forma celular por medio de la transcripción diferencial de genes con funciones opuestas.

"Control microbiano de Bemisia tabaci (mosca blanca) madiante el uso de hongos entomopatógenos" (2016-12-20). Aguilera Sammaritano, Juan Alberto. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los hongos entomopatógenos constituyen un grupo de organismos de gran importancia como bio-controladores de insectos plaga. En este estudio se obtuvieron aislamientos de suelos áridos de la Argentina utilizando Tenebrio molitor como método cebo. Los aislamientos seleccionados se cultivaron a 30 °C y 45-65% de humedad relativa. Los objetivos de este estudio fueron aislar hongos entomopatógenos del orden Hypocreales de suelos áridos y probar su comportamiento biológico a elevadas temperaturas y baja humedad relativa. Dentro de las variables fisiológicas se midió el crecimiento radial a 30 °C para seleccionar los aislamientos termo-tolerantes. Se llevaron a cabo ensayos de porcentaje de germinación en aceites vegetales a distintas concentraciones para evaluar su compatibilidad con formulaciones líquidas. Además, para demostrar su patogenicidad y su potencial como controladores de plagas, se realizaron bio-ensayos contra las ninfas de segundo instar de B. tabaci con las formulaciones de aceites seleccionadas. Se realizó la identificación molecular de los aislamientos seleccionados mediante las amplificaciones de segmentos de ADN específicos. Por último, se realizaron algunas pruebas anexas, como la producción de bio-polímeros relacionados a la tolerancia térmica y análisis de susceptibilidad a los fungicidas de uso común. Los aislamientos del género Metarhizium CEP401 (52,6 mm) y CEP381 (44,98 mm) mostraron los valores más altos de crecimiento a 30 °C. Los aislamientos de Metarhizium sp. CEP381 (Aceite de girasol 10% v/v), CEP401 (aceite de oliva 10% v/v), CEP413 (Aceite de oliva 10% v/v) y CEP 409 (aceite de maíz 10% v/v) tuvieron porcentajes de germinación similares a tratamientos control. Los ensayos de patogenicidad que se realizaron en ninfas de B. tabaci (CEP 381, CEP401, CEP409 y CEP413) arrojaron valores de mortalidad cercanos al 50%. Los valores más altos se encontraron en CEP381 (aceite de girasol) y CEP401 (aceite de oliva), siendo 46,94% y 45,83%, respectivamente. La identificación molecular de los aislamientos se realizó con primers ITS4-5. Todos los aislamientos pertenecen al género Metarhizium. Se han caracterizado aislamientos de hongos entomopatógenos capaces de crecer e infectar a ninfas de B. tabaci bajo condiciones de estrés térmico utilizando algunos aceites vegetales como portadores naturales. Este estudio proporciona nuevas posibilidades para el Manejo Integrado de Plagas tanto a nivel local y regional.

Abstract:
Entomopathogenic fungi are a group of organisms of great importance as bio-controllers agents of insect pests. In this study entomopathogenic fungi were isolated from arid soils in Argentina using Tenebrio molitor as bait method. Selected isolates were grown at 30 °C and 45-65% relative humidity. The objectives of this study were to isolate entomopathogenic Hypocreales of arid soils and test their biological performance at high temperatures and low relative humidity. Within physiological variables radial growth was measured at 30 °C to select the thermo-tolerant isolates. Tests of germination percentage in vegetable oils at different concentrations were carried out to evaluate their compatibility with liquid formulations. In addition, to demonstrate their pathogenicity and their potential as insect pest controllers, bioassays against second instar nymphs of B. tabaci with the selected oils formulations were made. Molecular identification of isolates were performed by amplification of specific DNA segments. Finally, some evidence as production of biopolymers related to thermal tolerance and susceptibility analysis fungicides commonly used were performed. All Metarhizium isolates CEP401 (52,6 mm) and CEP381 (44,98 mm) showed the highest values of radial growth at 30 °C. Isolates CEP381 (Sunflower oil 10% v/v), CEP401 (olive oil 10% v/v), CEP413 (Olive oil 10% v/v) and CEP409 (maize oil 10% v/v) had similar percentages of germination with control treatments. Pathogenicity tests performed on B. tabaci nymphs (CEP 381, CEP401, CEP409 and CEP413), yielded mortality values of close to 50%. The highest values were found in CEP381 (sunflower oil) and CEP401 (olive oil), 46,94% and 45,83%, respectively. The molecular identification of isolates was performed with primers ITS4-5. All isolates belong to the Metarhizium core group. A group of entomopathogenic fungi have been characterized. These isolates can grow and infect whitefly nymphs under heat stress conditions using some vegetable oils as natural carriers. This study provides new possibilities for Integrated Pest Management both locally and regionally.

"Controles tectónicos de las principales secuencias volcano-sedimentarias del Cenozoico en la Cordillera Nordpatagónica" (2015-03-19). Ramos, Miguel Esteban. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta Tesis se presenta un estudio detallado de las principales secuencias oligo-miocenas en dos segmentos del sector norte de los Andes Nordpatagónicos. Estos segmentos ubicados a 39° y 42°S, respectivamente, se corresponden con el desarrollo de los sistemas morfoestructurales de los Andes Nordpatagónicos, la Precordillera Nordpatagónica y la región del antepaís. Estas secuencias sinorogénicas se encuentran representadas por las Formaciones Ventana, Ñirihuau y Collón Cura en la región sur y por las Formaciones Auca Pan y Chimehuín en el sector norte. Datos gravimétricos y sísmicos permiten reconocer y diferenciar los principales depocentros de esta región, los cuales albergan a las secciones clásticas, piroclásticas y volcánicas que integran a estas secuencias oligo-miocenas. Las evidencias de campo constreñidas por datos gravimétricos y sísmicos, permiten reconocer una fase extensional representada por las rocas volcánicas oligocenas (~29,6 Ma K/Ar). La química de estos materiales indica que los magmas que les dieron origen se equilibraron en una corteza levemente atenuada sin fraccionamiento de mineralogías de alta presión. La inversión parcial de estos depocentros a fines del Mioceno define una estructura compleja en el frente orogénico que se interpreta como asociada a la interferencia entre el sistema de Huincul desarrollado principalmente en subsuelo en el área del antepaís y los Andes Nordpatagónicos, con rampas oblicuas de orientación NO segmentadas por sistemas de transferencia NE. La descripción de una serie de discordancias progresivas desarrolladas en el tope de cuña de la cuenca de antepaís, acotadas por nuevas edades U/Pb, permite discriminar diferentes pulsos de deformación para el Mioceno medio. Por otra parte, el análisis de las poblaciones de circones detríticos obtenidas de estas dataciones, junto con las de trabajos previos, proporciona información fundamental para reconstruir la historia y evolución tectónica de los Andes Nordpatagónicos con un episodio de rápida expansión del frente orogénico hasta el Macizo Nordpatagónico, presuntamente el desarrollo de un límite mecánico a dicha expansión y la deformación de la cuña orogénica mediante el desarrollo de corrimientos fuera de secuencia que levantan la Precordillera Nordpatagónica a mediados y finales del Mioceno. Las edades máximas de sedimentación obtenidas para la Formación Ñirihuau (~13,5 y ~12,9 Ma) y la Formación Collón Cura (~11,3 Ma) evidencian un carácter diacrónico en la depositación de estas unidades, así como también indicarían edades de sedimentación más jóvenes que las precedentemente establecidas. De esta forma se concluye a partir de los casos analizados, que las secciones oligocenas corresponden a típicas secciones de origen tafrogénico, mientras que las del Mioceno temprano a superior se han acumulado en una cuenca de antepaís, ejemplificándose de esta manera el patrón evolutivo cenozoico que caracteriza a los Andes Nordpatagónicos. Así, los Andes Norpatagónicos son el resultado de una fase de relajamiento extensional paleógena seguida de un episodio de reconstrucción que progresa en secuencia hasta que sufre un episodio de reestructuración del sector interno a través de una fase fuera de secuencia.

Abstract:
This work presents a detailed study of the main Oligo-Miocene successions of two different segments of the northern sector of the North Patagonian Andes. These two segments located in the 39º and 42º S respectively, coincide with the development of a series of morphostructural systems, the Northpatagonian Andes, the Northpatagonian Precordillera and the foreland area. These successions are represented by the Ventana, Ñirihuau and Collón Cura Formations in the southern region and by the Auca Pan and Chimehuín Formations in the north. Gravity and seismic data allowed recognizing and differentiating the main depocenters in this region, which hold the clastic, pyroclastic and volcanic facies. Field evidences supported by gravity and seismic data, provide the primary source of information to determine the Northpatagonian Andes structural framework. Thus, an extensional phase is recognized represented by the volcanic stage corresponding to the Oligocene sections (~29,6 My K/Ar). Geochemistry of these rocks indicates that the magmas that originated them were equilibrated in a slightly attenuated crust without fractionation of high pressure mineralogies. The partial inversion of these late Miocene depocenters defines a complex structure in the orogenic front interpreted as related to an interference between the Huincul system developed mainly in the subsurface in the foreland area and the Northpatagonian Andes, with oblique ramps NW oriented, segmented by NE transfer systems. The description of a series of progressive unconformities developed in the foreland area, dated by new U/Pb ages allows discriminating different pulses of deformation during the middle Miocene. Otherwise, the dating of the detrital zircons provides basic information to reconstruct the Oligo- Miocene tectonic evolution of the Northpatagonian Andes. This started with an episode of rapid expansion of the orogenic front to the Northpatagonian Massif, presumably finding a mechanical limit to such expansion and the orogenic wedge restructuration by out of sequences thrusts at the middle and late Miocene that uplifted the Northpatagonian Precordillera. Maximum ages of sedimentation obtained for the Ñirihuau Formation (~13,5 y ~12,9 My) and the Collón Cura Formation (~11,3 My) evidence a diachronic behavior in these units during depositation across the basin, and also indicate younger sedimentation ages than the previously expected. Thus it is concluded from the analyzed cases that the Oligocene sections correspond to typical taphrogenic successions, while Miocene ones have accumulated in a foreland basin. Thus, the Northpatagonian Andes are characterized during their Cenozoic evolution as a fold and thrust belt that suffered an extensional relaxation period followed by a Neogene reconstruction, characterized by an in-sequence progression of the structure followed by an out-of-sequence period.

"Convección extrema sobre Sudamérica: estructura interna, ciclos de vida e influencia de la topografía en la iniciación" (2014-09-01). Vidal, Luciano. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El conocimiento de las áreas donde se inicia y desarrolla la convección húmeda profunda es de crucial importancia para la comprensión del tiempo y clima en Sudamérica debido a que está relacionada con fenómenos de alto impacto social (inundaciones, vientos severos, granizo, tornados). El objetivo de esta tesis se centra en la caracterización de los sistemas convectivos de mesoescala con propiedades extremas que se desarrollan en la región del sudeste de Sudamérica (SESA), avanzando en la comprensión de sus ciclos de vida y las áreas de iniciación. A fin de avanzar en el conocimiento de los procesos involucrados en el disparo de la convección se analizan los rasgos más sobresalientes que pre-condicionan el entorno y se indagan posibles mecanismos en relación con la topografía. Para alcanzar dicho objetivo se utilizan datos de distintos sensores remotos (TRMM y GOES) en combinación con los reanálisis NCEP-CFSR para el período 1998-2010. Los resultados encontrados muestran que en la región tropical del continente predominan los sistemas con convección chata y de poca extensión horizontal, mientras que sobre SESA los sistemas convectivos presentan un predominio de celdas convectivas profundas, para luego desarrollar amplias regiones de precipitación estratiforme. En particular, en esta última dos regiones con topografía compleja son muy favorables para el inicio de los sistemas convectivos: las Sierras de Córdoba (CBA) y el Noroeste Argentino (NOA). Los sistemas en CBA se inician preferencialmente hacia el final del día, resultando ser más grandes (~240.000 km2 en promedio) y longevos (~22 horas en promedio), con una dirección preferencial de desplazamiento hacia el noroeste. En cambio sus pares del NOA, se inician mayormente en horas de la tarde en fase con el calentamiento radiativo y mostrando un comportamiento más estacionario, además de ser más chicos (~140.000 km2) y durar menos horas (~14 horas). La circulación y la estructura termodinámica de la atmósfera previo al desarrollo de los MCSs en el área de CBA en las primeras horas de la tarde (18Z) presenta un máximo extremo de condiciones inestables sobre la pendiente de los Andes. Estas condiciones termodinámicas ideales se combinan con una zona frontal que ayuda a la convergencia en niveles bajos cercano a la topografía por debajo de los 1000 metros promoviendo la iniciación de la convección. Los sistemas que se inician en las últimas horas del día (00Z) lo hacen en un entorno sinóptico débil donde dominan las circulaciones locales asociadas con el máximo calentamiento radiativo y el flujo hacia la topografía. En cambio, los sistemas que se inician en NOA lo hacen en un entorno dominado por un flujo anticiclónico en niveles altos (Alta Boliviana), una débil zona frontal estacionaria y un marcado flujo del noroeste en capas bajas. En esta región las circulaciones locales dominan el inicio de la convección.

Abstract:
Due to the high socio-economic impact of severe weather events like floods, strong winds, hail, and tornadoes the study of the areas that are most frequently affected by deep moist convection and where the convection initiation takes place is of paramount importance. The main goal of this Thesis is to characterize extreme mesoscale convective systems that develop over southeastern South America (SESA), through the analysis of their life cycle and their genesis region. In order to advance in the understanding of synoptic and mesoscale processes involved in the triggering of convection, the environment associated to the genesis of these systems is characterized. Particular attention is paid to the role of mesoscale circulations associated to the topography. This goal is achieved combining remote sensing data collected by two satellites: TRMM and GOES; with the NCEP-CFSR reanalysis for the period 1998-2010. Results show that over SESA, deep moist cells predominate during the early stages of the life of the system, while a broad stratiform structure is usually found after maturity. Most of the analyzed mesoscale convective systems originate over the eastern slopes of the Andes where two main genesis regions are identified: Sierras de Córdoba (CBA) and Northwestern Argentina (NOA). Most systems that originated in CBA, initiate around sunset, tend to last longer (~22 hours on average) and reach larger sizes (~240,000 km2 on average) than their NOA counterparts. Most systems that originated over NOA, initiate during the afternoon in phase with the radiative heating. Most of them show a stationary behavior, reach an average size of 140,000 km2 and last for 14 hours on average. Composites for several variables have been constructed to characterize the synoptic and mesoscale circulation associated with the initiation of convective systems in both regions. The pre-storm environments, corresponding to convective systems that originated in CBA in the early afternoon (18Z), are characterized by extreme convective instability over the eastern slopes of the Andes. A frontal zone helps to generate low-level convergence close to the topography thus promoting convection initiation. The systems that start near sunset (00Z) do so in a weaker synoptic environment, at this time, local circulations associated with heating over a sloping terrain enhances low level convergence, playing a fundamental role in the initiation of convection. Systems that start over NOA do so in an environment dominated by upper level anticyclonic flow (Bolivian High), a weak stationary frontal zone and a strong low-level northwesterly flow. In this region, mesoscale circulations dominate the initiation of convection.

"Coordinates : Un Lenguaje para el modelado de empresas" (2001). Mannarino, Gabriela S.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Correlaciones periodístico-legislativos en la Argentina durante los años 2006-2011" (2013). Lenton, Antonio A.. Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Correlación entre las propiedades morfológicas, estructurales y catalíticas de soluciones sólidas nanoestructuradas de GdxCe1-xO2-x/2" (2014-08-14). Muñoz, Fernando Francisco. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En la presente tesis de doctorado se llevó a cabo el estudio de soluciones sólidas nanoestructuradas de ceria dopada con gadolinia, GdxCe1-xO2-x/2 (GDC), con el objetivo principal de correlacionar las propiedades morfológicas, estructurales, óxido-reductoras y catalíticas de este tipo de compuestos. El control de estas propiedades es fundamental para su aplicación en dispositivos tecnológicos, ya sea como catalizadores para diferentes reacciones o como materiales para la generación de energía, mediante su empleo como ánodo en celdas de combustible de óxido sólido (SOFC). La síntesis de soluciones sólidas GDC se realizó mediante el empleo de diferentes métodos, especialmente aquellos que permiten un amplio control sobre la morfología de los productos finales. En particular, para la obtención de polvos nanoestructurados se utilizaron los métodos de complejación de cationes y microemulsión inversa. En el caso de nanoestructuras con morfología tubular se empleó el método de llenado de moldes poliméricos, mientras que para la obtención de esferas nanoestructuradas se usó el método de síntesis hidrotérmica asistida por microondas. Las soluciones sólidas de GDC fueron caracterizadas mediante difracción de rayos X (XRD), análisis de área superficial específica (isoterma de adsorción BET) y microscopía electrónica de barrido y transmisión (SEM y TEM). El estudio de las propiedades estructurales y físicoquímicas se realizó mediante en el empleo de técnicas de radiación sincrotrón, tales como XRD y espectroscopia de absorción de rayos X (XANES), tanto en atmósferas oxidantes como reductoras a diferentes temperaturas. En todos los casos se comprobó la formación de soluciones sólidas de Gd-Ce-O, las cuales estaban compuestas por cristalitas de tamaño nanométrico, exhibiendo la fase cúbica (estructura tipo fluorita). En particular, se reportó por primera vez la obtención de GDC nanostructurada con morfología tubular, la cual exhibió los más altos valores de área específica (100 m2.g-1) respecto de las otras morfologías. Se estudió la adición de pequeñas cantidades de Pd por distintas vías de síntesis en muestras de GDC. Las muestras obtenidas se caracterizaron con las técnicas citadas y se determinó que el Pd puede encontrarse tanto distribuido homogéneamente en la red cristalina como en forma de una fase segregada, PdO, según el método de síntesis. Mediante estudios realizados por XANES en el borde Ce-L3 en atmósferas reductoras, se mostró que la incorporación de Pd afecta notoriamente el comportamiento de la cupla Ce3+/Ce4+ de las soluciones sólidas de GDC. Finalmente, estudios de la actividad catalítica frente a la combustión de CH4 usando como catalizadores GDC puro o dopado con Pd mostraron que la adición de bajas cantidades de Pd conduce a una mayor combustión de CH4 a más bajas temperaturas. Los estudios aquí realizados mostraron que los óxidos mixtos nanoestructurados de GDC presentan propiedades que los convierten en muy buenos candidatos para ser empleados como ánodos en dispositivos SOFC.

Abstract:
In the present doctoral thesis work, nanostructured solid solutions of gadolinia doped ceria, GdxCe1-xO2-x/2 (GDC), were studied with the aim of correlating their morphological, structural, catalytic and redox properties. It is fundamental to control these properties, since they are strictly related to the uses of these compounds and their applications in technological devices, i.e. several applied catalytic reactions, as well as clean energy generation in the form of anodes for solid oxide fuel cells (SOFCs). GDC synthesis was carried out via different methods, especially those that allow good control over the final product morphology. Specifically, nanostructured powders were obtained by the cation complexation and reverse microemulsion methods. For tubular nanostructured morphologies, the polymeric template-filling method was employed; while nanostructured spheres were obtained by microwave assisted hydrothermal synthesis. GDC characterisation were carried out using X-ray diffraction (XRD), specific surface analysis (BET adsorption isotherm), and scanning and transmission electronic microscopy (SEM and TEM). Physico-chemical characterisation involved synchrotron radiation techniques, particularly XRD and X-ray absorption spectroscopy (XANES), taking measurements under controlled reducing or oxidizing atmospheres, as well as at controlled applied temperatures. Gd-Ce-O solid solutions were observed in all above cases, which exhibited fluorite type cubic crystalline structure, made up of nanometric size crystallites. Particularly, nanostructured GDC materials with tubular morphology, which exhibited the highest specific surface areas (100 m2.g-1) compared with the other morphologies, was reported for the first time. Small Pd additions TO GDC samples were MADE using several synthesis methods. The samples so obtained were characterized with the procedures already mentioned, and it was found that the Pd can be found not only homogeneously distributed in the crystal lattice but also as a segregated secondary PdO phase, depending on the synthesis method. Ce L3–edge XANES measurements carried out under reducing atmosphere showed that Pd noticeably affects the Ce3+/Ce4+ couple behaviour in the GDC solid solutions. Finally, catalytic studies on CH4 combustion were performed, using pure or Pd-doped GDC as catalysts. Those studies showed that small Pd additions lead to an improved CH4 combustion, that is, at lower temperatures for the total CH4 conversion than for conventional materials. The studies here performed showed that GDC nanostructured mixed oxides exhibit properties that make them suitable as candidates for anodes in SOFC devices.

"Correspondencia de Dold-Kan para anillos" (2003). Castiglioni, José Luis. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La correspondencia (dual) de Dold-Kan establece que hay una equivalencia de categorías K : Ch≥o —>UbΔ entre los complejos de cocadenas no negativamente graduados y los grupos abelianos cosimpliciales, que es inverso del funtor normalización. Mostramos que la restricción de K a DGR*, la categoría de anillos diferenciales graduados con diferencial de grado +1, o anillos diferenciales de cocadenas, se puede equipar con un producto asociativo, y que el funtor resultante DGR* —> RingsΔ, si bien no es una equivalencia, induce una a nivel de categorías de homotopía. Es decir, tanto DGR* como RingsΔ son categorías de modelo cerrado de Quillen y el funtor derivado total a izquierda de K es una equivalencia: LK : HoDGR* → Ho RingsΔ El dual de este resultado para anillos diferenciales de cadenas y anillos simpliciales fue obtenido, de forma independiente, por S. Schwede and B. Shipley mediante métodos diferentes (Equivalences of monoidal model categories. Algebraic and Geometric Topology 3 (2003), 287-334). Nuestra demostración está basada en un funtor Q : DGR* → RingsΔ, naturalmente homotópicamente equivalente a K, y que preserva la estructura de modelo cerrado. Este funtor tiene otras aplicaciones interesantes. Por ejemplo, usamos Q para probar una versión no conmutativa de los teoremas de Hochschild-Konstant-Rosenberg y Loday-Quillen. Nuestra versión se aplica al módulo cíclico → ЦnR S que se obtiene a partir de un homomorfismo de anillos no necesariamente conmutativos R → S, usando el coproducto ЦR. También como aplicación de las propiedades de Q obtenemos una descripción sencilla, que no involucra trenzas, de un producto en la potencia tensorial SxR, definido originalmente por P. Nuss, utilizando trenzas (Noncommutative descent and nonabelian cohomology, K-theory 12 (1997) 23-74.). Palabras clave: formas diferenciales no commutativas, anillos cosimpliciales, categoría de modelos.

Abstract:
The (dual) Dold-Kan correspondence says that there is an equivalence of categories K : Ch≥o —>UbΔ between nonnegatively graded cochain complexes and cosimplicial abelian groups, which is inverse to the normalization functor. We show that the restriction of K to DG-rings can be equipped with an associative product and that the resulting functor DGR* —> RingsΔ, although not itself an equivalence, does induce one at the level of homotopy categories. In other words both DGR* and RingsΔ are Quillen closed model categories and the total left derived functor of K is an equivalence: LK : HoDGR* → Ho RingsΔ The dual of this result for chain DG and simplicial rings was obtained independently by S. Schwede and B. Shipley through different methods (Equivalences of monoidal model categories. Algebraic and Geometric Topology 3 (2003), 287-334). Our proof is based on a functor Q : DGR* → RingsΔ, naturally homotopy equivalent to K , and which preserves the closed model structure. It also has other interesting applications. For example, we use Q to prove a noncommutative version of the Hochschild-Konstant-Rosenberg and Loday-QuilLen theorems. Our version applies to the cyclic module → ЦnR S that arises from a homomorphism R —>S of not necessarily commutative rings, using the coproduct ЦR of associative R-algebras. As another application of the properties of Q, we obtain a simple, braid-free description of a product on the tensor power SxnR originally defined by P. Nuss using braids (Noncommutative descent and nonabelian cohomology, K-theory 12 (1997) 23-74.). Keywords: noncommutative differential forms, cosimplicial rings, model category.

"Corrimientos en las frecuencias de cruce en la región de las tierras raras pesadas" (1996). Somacal, Héctor R.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Corrosión bajo tensiones del circonio y de sus aleaciones en presencia de cloruros" (1975). Cragnolino, Gustavo A.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Conociendo que el Circonio experimenta picado cuando es sometido a una corriente anódica, alcanzando un potencial estacionario, el potencial de picado, el presente trabajo se orientó a determinar si en las mismas condiciones de potencial, tanto el metal como el Zircaloy-4 resultaban susceptibles a la corrosión bajo tensiones. Se debió determinar el potencial de picado de la aleación empleando técnicas potenciostáticas y galvanostáticas, así como utilizando el electrodo en deformación con el potencial controlado. Para tratar de estudiar con más detalles el picado se trazaron curvas de carga anódicas. Se comprobó la susceptibilidad a la corrosión bajo tensiones del Zircaloy-4 con potenciales superiores al de picado, mediante ensayos en los cuales se lo sometía a la acción de un esfuerzo de tracción constante. Mediante la técnica del electrodo en deformación, variando la velocidad de tracción dentro de un rango muy amplio, se pudo confirmar el resultado anterior. Además se estableció la influencia de la velocidad de deformación sobre la velocidad de propagación de las fisuras. Tanto en el metal como en la aleación se observaron dos etapas que preceden a la rotura mecánica final. La primera se pudo caracterizar como un proceso de disolución anódica, localizado y estimulado por la tensión aplicada, mientras que para la segunda etapa no se logró esclarecer el proceso determinante. La primera etapa presenta una morfología diferente en el Zircaloy-4 con respecto a la observada en la aleación, siendo en ambos la etapa controlante del proceso global. Las diferencias se atribuyen a las características microestructurales de la aleación que facilitan una disolución intergranular. El trabajo fué desarrollado en tres capítulos. En el Capítulo 1 se efectuó una reseña de los principales modelos propuestos para determinados sistemas específicos a fin de explicar la corrosión bajo tensiones, así como los factores que influyen en el fenómeno. Se resumió el comportamiento electroquímico del Circonio, junto con un examen de las propiedades fisico-metalúrgicas de sus aleaciones que tienen más importancia con relación a la corrosión bajo tensiones, comentando también los medios corrosivos en los cuales se la ha detectado. En el Capítulo 2 se reseñan los detalles experimentales, los métodos empleados y los resultados obtenidos. En el capítulo 3 se analizan los mencionados resultados, puntualizando las conclusiones a las que se arribó. Se incluyen tres apéndices, dos de ellos dedicados al cálculo de variables que interesaban en el desarrollo del trabajo y un tercero, destinado a modificar el diagrama de Pourbaix contemplando la formación de un hidruro de Circonio.

"Corrosión del hierro por agua en presencia de silicato de sodio" (1937). Veronelli, Dante J. E.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Crecimiento de películas de dióxido de titanio con un arco catódico: funcionalización de superficies" (2011). Kleiman, Ariel Javier. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El dióxido de titanio es extensamente investigado debido a sus excepcionales propiedades eléctricas, ópticas y físico-químicas que lo convierten en un material apto para una gran variedad de aplicaciones. El empleo de películas delgadas de TiO2 como material sensitivo en sensores de gases tóxicos, y su utilización como fotocatalizadores para la degradación de contaminantes en agua, se encuentran entre las áreas más investigadas sobre este material semiconductor. El TiO2 cristaliza principalmente en tres estructuras diferentes: rutilo, anatasa y brookita; siendo la anatasa, fase meta-estable, la que presenta mejor rendimiento en las aplicaciones mencionadas. La producción de films de TiO2 ha sido desarrollada mediante una gran variedad de técnicas de deposición, entre las cuales se encuentran los arcos catódicos. En estos equipos se genera una descarga de alta corriente y baja tensión entre dos electrodos inmersos en una cámara de vacío. Material del cátodo es ionizado y eyectado hacia adelante, formando un haz de iones metálicos. Al inyectar gases reactivos a baja presión, los iones metálicos pueden combinarse químicamente con las partículas del gas. Colocando un sustrato frente al cátodo, una variedad de recubrimientos pueden ser obtenidos. La estructura de las películas de TiO2 obtenidas con esta técnica depende fuertemente de la temperatura del sustrato durante el crecimiento del film y de la energía de los iones involucrados. En el presente trabajo se obtuvieron, por arco catódico, películas delgadas de TiO2 sobre sustratos de vidrio y de silicio. Los films resultaron uniformes, compactos y con buena adhesión al sustrato. Los mismos fueron crecidos en fase anatasa a 400 oC, o en fase amorfa a temperatura ambiente, y luego cristalizados en fase anatasa mediante un tratamiento térmico. La estructura de las películas fue analizada por difracción de rayos X y espectroscopía Raman. El espesor y la densidad de los recubrimientos fueron determinados mediante reflectometría de rayos X (XRR). Para las densidades se obtuvieron valores en el rango 3,88 – 4,13 g/cm3, cercanos al valor tabulado para la anatasa. Los espesores dependieron del tiempo de exposición a la descarga, observándose una tasa de deposición de ~ 2,7 nm/s. Las señales de XRR fueron ajustadas, con buen acuerdo, por señales simuladas considerando una capa de agua adsorbida sobre los films. La morfología superficial de los recubrimientos fue estudiada por microscopía de barrido electrónico y de fuerza atómica. Los films crecidos a 400 oC presentaron un menor tamaño de grano, y una menor rugosidad, que los films obtenidos a temperatura ambiente. Asimismo, estas magnitudes resultaron menores en los recubrimientos realizados sobre vidrio respecto de los depositados sobre silicio. Considerando todos los casos, los tamaños de grano estuvieron en el rango 15 – 100 nm. Se estudiaron también propiedades ópticas de los films en el rango visible, sin observarse diferencias significativas entre las muestras crecidas a diferentes temperaturas. La transmitancia media fue de ~ 80 %, la reflectancia difusa de ~ 5 %, el índice de refracción de ~ 2,8 y el band-gap de ~ 3,4 eV. La adhesión se analizó mediante los tests de la cinta adhesiva y de rayado, mostrando mejores resultados los films crecidos a alta temperatura. Se estudiaron también las propiedades del plasma generado por la descarga, relacionándolas con las características observadas en los films. El análisis se realizó a partir de mediciones con una sonda electrostática y empleando un modelo uni- dimensional que considera las interacciones del plasma metálico con el O2. A los films crecidos sobre vidrio se les realizó también una caracterización orientada a su empleo en sensado de gases y en purificación de agua por fotocatálisis. Se estudió la respuesta de la resistencia eléctrica de los films ante variaciones en la presión ambiente, en aire y O2, observándose una disminución de la sensibilidad al aumentar la temperatura. La sensibilidad fue mayor en los films depositados con calentamiento in-situ, y aumentó al incrementarse el espesor de la película. La respuesta fotocatalítica de los films fue evaluada a través la eficiencia en la reducción Cr(VI), en presencia de EDTA, asistida por irradiación UV. No se observaron diferencias en los rendimientos de las películas crecidas a distintas temperaturas. Por otro lado, los films crecidos por arco mostraron una menor actividad que películas de TiO2 P-25, obtenidas por dip-coating, utilizadas como referencia. Sin embargo, la eficiencia de las películas depositadas por arco aumentó al incrementarse el espesor, llegando a lograrse un 100 % de reducción de Cr(VI) luego de 6 horas de irradiación.

Abstract:
Titanium dioxide has been widely investigated due to its outstanding electrical, optical and physicochemical properties that make it a suitable material for a wide range of applications. The uses of thin films of TiO2 as sensitive material in toxic gas sensors and as photocatalyst for pollutants reduction in water are among the more investigated areas on this semiconductor. TiO2 crystallized in three major structures: rutile, anatase and brookite; being anatase, a meta-stable phase, which presents the best performance in the above applications. The production of TiO2 films has been developed by several deposition techniques, among which are the cathodic arcs. In such devices a high current-low voltage discharge is generated between two electrodes immersed in a vacuum chamber. The cathode material is ionized and ejected forward, forming a metallic ion beam. If a reactive gas is injected at a low pressure into the chamber, metallic ions can be chemically mixed with the gas. Placing a substrate in front of the cathode, several compounds can be deposited. The structure of films grown with cathodic arcs strongly depends on the substrate temperature during deposition process and on the energy of the involved ions. In this work, TiO2 thin films were deposited by a cathodic arc on glass and silicon substrates. The films were compact and uniform and showed good adhesion properties. These coatings were grown in anatase phase at 400 oC, or in amorphous phase at room temperature, and then crystallized during post-annealing. The crystalline structure of the films was analyzed by X-ray diffraction and Raman spectroscopy. The film density and thickness were determined by means of X-ray reflectometry (XRR). The densities were in the range 3.88 – 4.13 g/cm3; these values are close to the tabulated for anatase. The thicknesses depended on the deposition times; the deposition rate was ~ 2.7 nm/s. XRR measurements were fitted, with good agreement, by simulated signals considering an adsorbed water layer over the TiO2 films. The surface morphology was studied by scanning electron and atomic force microcopy. The films grown at 400 oC presented a lower grain size and a lower roughness than that of films obtained at room temperature. Moreover, these magnitudes were lower for films deposited on glass respect to those grown on silicon substrates. Among all the samples, the grain size was found to be in the range 15 – 100 nm. Optical properties of the films in the visible range were also studied; significant differences between films grown at both temperatures were not found. The mean transmittance was ~ 80 %, the diffuse reflectance ~ 5 %, the refractive index ~ 2.8 and the band-gap energy ~ 3.4 eV. Adhesion to the substrates was analyzed by scotch and scratch tests; showing the films grown at high temperature better results. Properties of the plasma generated by the discharge and their connection with the characteristics observed for the films were also studied. This analysis was made by means of electrostatic probe measurements and using a one-dimensional plasma model which considers interactions between the metallic plasma and the gas particles. The films deposited on glass substrates were also characterized toward their use in gas sensing and in photo-assisted water purification. The response of the electrical resistance of the films to changes in air and O2 pressure was studied. The sensitivity of the films decreases with the increasing of the work temperature, and was high for films deposited with in-situ heating. Moreover, thicker films showed high sensitivity. The photocatalytic response of the coating was evaluated through the efficiency in UV- assisted Cr(VI) reduction, in the presence of EDTA. Significant differences between films grown at different temperatures were not observed. In the other hand, films deposited by cathodic arcs showed a lower activity than that of TiO2 P-25 films, obtained by dip-coating immersion, used as a reference. However, the efficiency of cathodic arc-deposited films was enhanced by increasing the film thickness, reaching a 100 % Cr(VI) reduction after 6 hours irradiation.

"Crecimiento de tejidos normales y neoplásicos, "in vitro" : modificación en la reserva alcalina del medio" (1940). Ezeyza Cutó, Susana. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Criterios basados en abstracciones de comportamiento para testing de conformidad de protocolos" (2015-04-14). Czemerinski, Hernán. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Los artefactos de código que tienen requerimientos no triviales con respecto al orden en el que sus métodos o procedimientos deben ser invocados son comunes y aparecen, por ejemplo, como implementaciones de APIs y objetos. El testeo de que dichos artefactos se ajusten a su protocolo esperado es un problema importante y desafiante. En esta tesis se proponen y estudian criterios de adecuación de testing de conformidad basados en cubrir una abstracción de la semántica del comportamiento esperado. Por lo tanto, los criterios son independientes tanto del lenguaje de especificación y las estructuras sintácticas usadas para describir el protocolo esperado como del lenguaje utilizado para implementarlo. En consecuencia, los resultados pueden ser de utilidad para diversos enfoques de caja negra para el testeo de conformidad de protocolos. Los resultados experimentales muestran que los criterios propuestos son buenos predictores de detección de fallas de conformidad y de criterios de cobertura estructurales clásicos como cobertura de sentencias y ramas. Además, también muestran que la división del dominio derivado de los criterios propuestos produce subdominios densos en fallas, y que al priorizar casos de test de acuerdo con los criterios propuestos se tiende a producir ordenamientos que generan una detección temprana de fallas de conformidad de protocolos.

Abstract:
Code artefacts that have non-trivial requirements with respect to the ordering in which their methods or procedures ought to be called are common and appear, for instance, in the form of API implementations and objects. Testing such code artefacts to gain confidence in that they conform to their intended protocols is an important and challenging problem. In this thesis we propose and study experimentally conformance testing adequacy criteria based on covering an abstraction of the intended behavior's semantics. Thus, the criteria are independent of the specification language and structure used to describe the intended protocol and the language used to implement it. As a consequence the results may be of use to black box conformance testing approaches in general. Experimental results show that the criteria are a good predictor for fault detection for protocol conformance and for classical structural coverage criteria such as statement and branch coverage. Additionally, they also show that the division of the domain derived from the criterion produces subdomains such that most of its inputs are fault-revealing, and that prioritising test cases according to the abstraction coverage achieved tends to produce orderings that lead to earlier detection of protocol conformance failures.

"Criterios teóricos y experimentales para identificar interacciones moleculares" (2002). Peralta, Juan E.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta Tesis se analizan criterios para poder comprender cómo se pueden emplear los parámetros de resonancia magnética nuclear de alta resolución para identificar interacciones moleculares. Desde el punto de vista metodológico, se implementó el cálculo de las cuatro contribuciones a la constante de acoplamiento isótropa empleando la teoría de la funcional de la densidad y se desarrolló un criterio para descomponer el término de contacto de Fermi en contribuciones por orbitales. Esta descomposición provee contribuciones de las capas internas, los pares no ligantes y los enlaces. Estos métodos son muy eficientes por lo que pueden utilizarse para analizar problemas de interés químico y biológico que contienen hasta aproximadamente 30 átomos (tanto de la primera fila de la Tabla Periódica como hidrógenos) empleando recursos computacionales modestos. Desde el punto de vista práctico, en esta Tesis se utilizan estos logros para analizar acoplamientos caracterizados por distintos mecanismos de transmisión. Se analizan también cómo influencian determinadas interacciones moleculares a las constantes de apantallamiento magnético. Se presta especial atención a las interacciones de origen electrostático y a las de transferencia de carga. Para describir a estas últimas se utiliza el análisis NBO, Natural Bond Orbitals.

Abstract:
In this Thesis several criteria to understand how the nuclear magnetic resonance high resolution parameters can be employed to identify molecular interactions are analyzed. From a methodological point of view, the calculation of the four contributions to NMR spin-spin coupling constants employing density functional theory was implemented and a criterion to dissect into orbital contributions the Fermi contact term was developed. This dissection provides core, lone pairs and bonds contributions. By applying this methods it is possible to analyze chemical and biological interesting problems in compounds containing about 30 atoms (first row and hydrogen atoms) using modest computational facilities. In this work such a method is applied to study molecular problems where coupling constants are characterized by different transmission mechanisms. The influence of several molecular interactions on magnetic shielding constants is also analyzed. Special attention is paid to electrostatic interaction sand charge transfer interactions. The latter are described by means of the NBO, Natural Bond Orbitals, analysis.

"Criticalidad y No-linealidad en fragmentación" (2002). Balenzuela, Pablo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis estudiamos el comportamiento crítico y las propiedades no lineales en la evolución de sistemas de 147 partículas que interactúan mediante un potencial de Lennard-Jones. Analizamos dos tipos distintos de procesos: el de gotas que se expanden libremente y se fragmentan, y el de sistemas confinados a volumenes esféricos de distintos radios. Mediante la técnica de dinámica molecular resolvimos las ecuaciones de movimiento clásicas de manera de tener las posiciones y velocidades de las partículas a todo instante. El comportamiento crítico de los sistemas lo estudiamos a partir de analizar las distribuciones de fragmentos. En el caso de las gotas que se expanden libremente, encontramos que tanto las distribuciones calculadas a tiempo de fragmentación (definidas en el espacio de fases) como las obtenidas a tiempos asintóticos (accesibles experimentalmente) pueden ser descriptas en términos de la ley de escala que describe el comportamiento critico en el problema de percolación. Esta ley de escalas nos permitió obtener el punto crítico como aquel en el cual se maximizan ciertas fluctuaciones y aparecen distribuciones tipo ley de potencias, así como también los exponentes críticos que la caracterizan. Encontramos que tanto las señales de criticalidad como los exponentes obtenidos de las distribuciones asintóticas reflejan apropiadamente el comportamiento crítico a tiempo de fragmentación, lo que da un sustento a los esfuerzos experimentales en este sentido. En el caso de los sistemas confinados, encontramos evidencia de una transición de fase de primer orden a muy bajas densidades. Por otra parte, mediante el análisis de las distribuciones de fragmentos definidos en el espacio de fases encontramos exponentes críticos compatibles con una transición de segundo orden líquido-gas para un dado rango de densidades. Las propiedades no-lineales del sistema las estudiamos mediante el análisis del máximo exponente de Lyapunov (MLE). Para la gota libre, definimos los exponentes de Lyapunovs locales en el tiempo lo cual nos permitió seguir la evolución dinámica de la gota en su proceso de fragmentación. Encontramos que el sistema evoluciona de un estado muy caótico a otro mas ordenado y obtuvimos los tiempos característicos a partir de los cuales el sistema está ’ordenado’. Encontramos además que el MLE toma su valor máximo a aquellas energías para la cual la gota alcanza su máxima temperatura sin fragmentarse. Para el sistema confinado, estudiamos la dependencia del MLE con la energía y la densidad y su posible vinculación con la transición de fase definida mas arriba. Encontramos que el MLE es un indicador sensible de dicha transición y que su comportamiento esta altamente relacionado con las fluctuaciones de energia potencial/cinética del sistema.

Abstract:
In this thesis we study the critical behavior and non-linear properties of highly excited systems composed by 147 particles interacting via a Lennard-Jones potential. We analize two different processes: the evolution of free expanding drops that undergo fragmentation and the evolution of systems confined to espherical volumens of differents sizes. This calculations are performed by using Molecular Dynamics techniques. The critical behavior of the systems was studied by the analysis of the fragment mass distributions. In the case of free expanding drops, we found that the fragment distributions obtained at fragmentation time (in phase space) as well as those calculated at asymptotic time (in configurational space) follow the scaling hypothesis that describes critical behavior in the percolation problem. In this way, we could obtain the critical point by looking for the energy at which certain fluctuations have a maximum and power laws in the mass distributions appear. We also extracted the critical exponents that describe the transition. We found that critical exponents obtained from the asymptotic fragment mass spectra properly characterize the critical behavior of the system at fragmentation time. This results support current experimental efforts toward the analysis of asymptotic mass dsitributions. In the case of confined systems, we found strong evidency of a first order phase transition at very low densities. On the other hand, by analizing the cluster distributions obtained in phase space, we found critical exponents corresponding to a second order phase transitions in at large densities. The non-linear properties of the system were studied by the analysis of the maximum Lyapunov exponent (MLE). In the free expanding drop case, we defined the maximum local (in time) Lyapunov exponent which allowed us to follow the dynamical evolution of the fragmentation process in phase space. We found that the system evolves from a very chaotic state to a more ordered one and we calculated the characteristic of this process. We found that the MLE is maximum at the energies for which the drop have its maximum size and temperature. For the confined systems, we studied the dependence of the MLE with the energy and the density and the possible link with the phase transition described above. We found that the MLE is quite sensitive to this transition and its behavior is highly related to the with the potential/kinetic energy fluctuations of the system.

"Cromatografía en papel de proteínas" (1951). Cabib, Enrique. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Cromosomas B : Meiosis y herencia en razas nativas de maíz" (1997). Chiavarino, Amílcar Mauricio. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Cromosomas, contenidos de ADN y cromatografía de compuestos fenólicos en Bulnesia y géneros afines (Zygophyllaceae)" (1977). Poggio, Lidia. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La familia Zygophyllaceae se encuentra actualmente dividida en 7 subfamilias, siendo la Zygophylloideae la que contiene el mayor número de géneros. En el presente trabajo se dan a conocer los números cromosómicos de doce especies en seis géneros de esta subfamilia, once de los cuales son recuentos originales. Porlieria microphylla sería tetraploide con 2n = 52 (x = 13). Plectrocarpa tetracantha es diploide con n = 13 (x = 13) mostrando una meiosis regular con formación de 13 bivalentes. Sericodes greggii posee 2n = 30 (x = 15), este dato indicaría que este género no estaría muy relacionado con Larrea (x = 13) como lo sugiere la exomorfología de las flores y los frutos. El género sudafricano Sisyndite posee un número básico x = lO al igual que Pintoa chilensis. Si bien ambos géneros poseen el mismo número básico, Pintoa chilensis posee cromosomas de mayor tamaño. En el género Bulnesia se han estudiado los cromosomas somáticos en siete especies, seis de ellas son diploides con 2n = 26 (x = 13): B. arborea, B. carrapo, B. foliosa, B. retama, B. sarmientoi y B. schickendantzii. La especie restante (B. bonariensis) sería tetraploide con 2n = 52. La polisomatía es bastante frecuente dentro de este género. Se estudió además, el comportamiento de los cromosomas meióticos en cinco de las especies de Bulnesia (B. arborea, B. carrapo, B. foliosa, B. retama y B. schickendantzii) el cual fue regular en todas ellas, con la formación de 13 bivalentes. B. retama presenta cromosomas de tamaño considerablemente mayor que las otras especies, lo que se debería a un mayor contenido de DNA (Ẋ = 2.44 ± 0.072). Por medio de citoespectrofotometría se ha determinado que esta especie posee cuatro veces más DNA que la especie diploide B. foliosa (Ẋ = 0.63 ± 0.029) y casi el doble que la tetraploide B. bonariensis (Ẋ = 1.41 ± 0.053). El aumento significativo de DNA observado en B. retama jugaría un papel equivalente a la poliploidía dentro del proceso de especiación. El cariótipo de esta es pecie está formado por 4 m + 12 sm + 10 st. El resto de las especies parecen poseer cariótipos más simétricos que el de B. retama, aunque no ha sido posible determinarlos completamente dado el tamaño pequeño de sus cromosomas; B. schickendantzii poseería un cariótipo formado por 14 m + 12 sm. La asimetría del cariótipo, el mayor tamaño de los cromosomas y el mayor contenido de DNA observado en B. retama parecerían concordar con una mayor especialización y adaptación a ambientes áridos, ya que esta especie es la más xerofila del género (Solbrig, 1972) y la xerofita arbustiva mas extrema en la Argentina (Hunziker, com. verbal). B. sarmientoi, en cambio, poseería el menor contenido de DNA del grupo. Según Crisci et al. (en preparación) esta especie arborea mostraría una extrema reducción en el número de folíolos, carpelos, tamaño de flores, etc. y sería la más aislada de todas las especies. En consecuencia, en la evolución de las especies del género Bulnesia se habría producido tanto aumento como disminución en el contenido de DNA nuclear. Sobre la base de los números básicos mencionados podría suponerse una mayor relación entre el género Larrea con los sudamericanos Porlieria, Plectrocarpa y Bulnesia que con Sericodes, Sisyndite y Pintoa. Se realizó, además, estudios de compuestos fenólicos en hojas mediante cromatografía bidimensional en capa delgada en los géneros Bulnesia, Porlieria y Plectrocarpa. Mediante este estudio se pudieron diferenciar los tres géneros y las siete especies de Bulnesia a través de sus perfiles cromatográficos. Técnicas de taxonomía numérica aplicadas a los resultados de cromatografía mostrarían la existencia de tres grupos fenéticos: uno constituído por B. arborea, B. carrapo, B. bonariensis, B. schickendantzii y B. foliosa, otro por B. sarmientoi y el último por B. retama. Los géneros Porlieria y Plectrocarpa poseen algunos compuestos comunes entre sí y con Bulnesia. Estos compuestos, que también se encuentran en Larrea podrían ser indicadores importantes en el estudio de relaciones supragenéricas y su estudio ayudaría a definir y establecer una clasificación mas natural de la subfamilia Zygophylloideae.

"Cross-talks entre las vías de señalización del transductor de la señal y activador de la transcripción 3 (Stat3) y el receptor de progesterona en células de cáncer de mama" (2006). Proietti, Cecilia Jazmín. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Se han descripto interacciones entre las vías de los receptores de hormonas esteroideas y de las proteínas transductoras de señales y activadoras de la transcripción (Stats). En este trabajo, se exploró la capacidad de los progestágenos de modular la activación transcripcional de Stat3 en un modelo experimental de carcinogénesis hormonal en donde el progestágeno sintético acetato de medroxiprogesterona (MPA) indujo adenocarcinomas mamarios en ratones hembras de la cepa BALB/c y en la línea celular de cáncer de mama humano, T47D. Se encontró que las células epiteliales C4HD, del modelo tumoral C4HD inducido por MPA, expresan Stat3 y que el tratamiento de las células C4HD con MPA aumenta la expresión de la proteína Stat3. Además, el MPA induce un efecto no genómico, rápido de fosforilación en tirosina de Stat3, Jak1 y Jak2 en las células C4HD y en las T47D. El tratamiento con MPA de las células C4HD también resultó en una rápida fosforilación en tirosina de c-Src. Estos efectos fueron completamente inhibidos por el antagonista de progestágenos RU486. El bloqueo de las actividades de Jak1 y Jak2 mediante la transfección transiente de las células C4HD con vectores dominantes negativos (DN) para Jak1 o Jak2, o la inhibición de la actividad de c-Src con el inhibidor selectivo de quinasas de la familia Src, PP2, bloqueó la capacidad del MPA de inducir la fosforilación de Stat3. El tratamiento de las células C4HD con MPA indujo la unión de Stat3 al ADN. También, el MPA promovió una fuerte activación transcripcional de Stat3 en las células C4HD y en las T47D, la cual fue inhibida por RU486 y por el bloqueo de las actividades de Jak1, Jak2 y Src. Para investigar la correlación entre la activación de Stat3 inducida por MPA y el crecimiento celular, las células C4HD fueron transfectadas con un vector de expresión para una forma DN de Stat3, Stat3Y705-F, o con un mutante de Stat3 constitutivamente activo, Stat3-C. Mientras que la expresión del mutante Stat3Y705-F ejerció un efecto inhibitorio en el crecimiento celular inducido por MPA de las células C4HD, la transfección con el vector de Stat3 constitutivamente activo, provocó proliferación independiente del MPA. Finalmente, se investigó el efecto de bloquear la activación de Stat3 en el crecimiento in vivo de los tumores mamarios C4HD. La inhibición de la activación de Stat3 mediante la transfección de las células C4HD con el vector de expresión para DN Stat3Y705-F, inhibió significativamente la habilidad de estas células de formar tumores en ratones singeneicos. Estos resultados demuestran por primera vez, que los progestágenos son capaces de inducir la activación transcripcional de Stat3, la cual es un requisito obligatorio para la estimulación del crecimiento inducido por MPA de las células tumorales mamarias, tanto in vivo como in vitro.

Abstract:
Interactions between steroid hormone receptors and signal transducers and activators of transcription (Stats)-mediated signaling pathways have already been described. In the present study, we explored the capacity of progestins to modulate Stat3 transcriptional activation in an experimental model of hormonal carcinogenesis in which the synthetic progestin medroxyprogesterone acetate (MPA) induced mammary adenocarcinomas in female Balb/c mice, and in the human breast cancer cell line T47D. We found that C4HD epithelial cells, from the MPA-induced mammary tumor model, expressed Stat3 and that MPA treatment of C4HD cells up-regulated Stat3 protein expression. In addition, MPA induced rapid, nongenomic, Stat3, Jak1, and Jak2 tyrosine phosphorylation in C4HD and T47D cells. MPA treatment of C4HD cells also resulted in rapid c-Src tyrosine phosphorylation. These effects were completely abolished by the progestin antagonist RU486. Abrogation of Jak1 and Jak2 activity by transient transfection of C4HD cells with dominant negative (DN) Jak1 or DN Jak2 vectors, or inhibition of Src activity by preincubation of cells with the Src family kinase inhibitor PP2, blocked MPA capacity to induce Stat3 phosphorylation. Treatment of C4HD cells with MPA induced Stat3 binding to DNA. In addition, MPA promoted strong Stat3 transcriptional activation in C4HD and T47D cells, which was inhibited by RU486 and by blockage of Jak1, Jak2 and Src activities. To investigate the correlation between MPA-induced Stat3 activation and cell growth, C4HD cells were transiently transfected with a DN Stat3 expression vector, Stat3Y705-F, or with a constitutively activated Stat3 mutant, Stat3-C. While expression of Stat3Y705-F mutant had an inhibitory effect on MPA-induced growth of C4HD cells, transfection with the constitutively activated Stat3-C vector resulted in MPA-independent proliferation. Finally, we addressed the effect of targeting Stat3 in in vivo growth of C4HD breast tumors. Blockage of Stat3 activation by transfection of C4HD cells with the DN Stat3Y705-F expression vector significantly inhibited these cells ability to form tumors in syngeneic mice. Our results have for the first time demonstrated that progestins are able to induce Stat3 transcriptional activation, which is in turn an obligatory requirement for progestin stimulation of both in vitro and in vivo breast cancer growth.

"Cuantificación de sistemas con covariancia general" (2000). Sforza, Daniel Marcelo. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis se estudia la cuantificación de sistemas con covariancia general. En el marco de los formalismos BRST y de cuantificación canónica de Dirac, se estudian modelos de dimensión finita que emulan la estructura de vínculos de la Relatividad General. Se comienza con el estudio de un sistema sujeto a un vínculo cuadrático en los momentos y un conjunto de vínculos lineales en los momentos (correspondientes respectivamente a los vínculos "super-Hamiltoniano" y de "supermomentos" de Relatividad General). El punto de partida es discernir que las contribuciones no hermíticas de los fantasmas a los vínculos de supermomento pueden leerse en términos del volumen natural inducido por los vínculos sobre las órbitas. Este volumen juega luego un papel fundamental en la construcción del sector cuadrático de la carga BRST nilpotente. A nivel cuántico, la teoría permanece invariante ante transformaciones de escala del vínculo super-Hamiltoniano. En el caso en que el sistema posee un tiempo intrínseco, esta propiedad se traduce en una contribución del potencial al término cinético. En este aspecto el resultado difiere sustancialmente del tratamiento usual, donde la invariancia ante transformaciones de escala se fuerza con la introducción de un acoplamiento con la curvatura. Dicha contribución lejos de ser antinatural, se justifica elegantemente a la luz del principio variacional de Jacobi. Luego, el tratamiento se extiende al caso de sistemas con tiempo extrínseco. En este caso, dado que la métrica posea un vector de Killing temporal conforme y el potencial se comporte de manera adecuada respecto al mismo, el rol jugado por el potencial en el caso con tiempo intrínseco aquí es tomado por el módulo del vector de Killing de la teoría. Finalmente, los resultados obtenidos se extienden para un sistema con dos vínculos super-Hamiltonianos. Este paso es sumamente importante ya que la Relatividad General posee una infinidad de tales vínculos, con un álgebra entre ellos no trivial.

Abstract:
In this Thesis it is studied the quantization of generally covariant systems. Finite dimensional models which mimic the constraint structure of Einstein's General Relativity theory are studied in the framework of BRST formalism and Dirac's canonical quantization. First, it is studied a system featuring a quadratic constraint in the momenta and a set of linear constraints in the momenta (the "super-Hamiltonian" and "supermomentum" constraints of General Relativity respectively). The starting point is to realize that the ghost contributions to the supermomentum constraint operators can be read in terms of the natural volume induced by the constraints in the orbits. This volume plays a fundamental role in the construction of the quadratic sector of the nilpotent BRST charge. It is shown that the quantum theory is invariant under scaling of the super-Hamiltonian constraint. As long as the system has an intrinsic time, this property translates in a contribution of the potential to the kinetic term. In this aspect, the results substantially differ from other works where the scaling invariance is forced by introducing a coupling to the curvature. The contribution of the potential, far from being unnatural, is beautifully justified in light of the Jacobi's principle. Then, it is shown that the obtained results can be extended to systems with extrinsic time. In this case, if the metric has a conformal temporal Killing vector and the potential exhibits a suitable behavior with respect to it, the role played by the potential in the case of intrinsic time is now played by the norm of the Killing vector. Finally, the results for the previous cases are extended to a system featuring two super- Hamiltonian constraints. This step is extremely important due to the fact that General Relativity features an infinite number of such constraints satisfying a non trivial algebra among themselves.

"Cuantización semiclásica de mapas ergódicos" (1995). Vallejos, Raúl Oscar. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El límite semiclásico de la mecánica cuántica de sistemas caóticos constituye un tema de investigación de considerable interés en la actualidad. En particular, se ha prestado especial atención al estudio de los mapas ergódicos del toro, en sus versiones clásica y cuántica; estos son modelos sencillos que no presentan otras dificultades que aquellas ligadas a su propia caoticidad. Este trabajo de tesis trata de aplicar a la mecánica cuántica las técnicas de la dinámica simbólica. A nivel clásico la dinámica simbólica introduce las coordenadas apropiadas para la descripción efectiva del comportamiento caótico; en cambio, a nivel cuántico no existe una descripción semejante (aparte de algunos importantes tratamientos a nivel semiclásico). El objetivo final, aun lejano, de este tipo de investigaciones es reescribir las ecuaciones de la mecánica cuántica en términos de símbolos apropiados para cada problema. Atacamos el problema estudiando los apectos cuánticos de algunos modelos donde la dinámica simbólica clásica es especialmente sencilla. Nos concentramos en la construcción de objetos que hemos llamado rectángulos cuánticos y que presentan efectos de difracción característicos de los fenómenos ondulatorios: son los equivalentes cuánticos de las particiones de Markov clásicas. Investigamos sus propiedades espectrales y distintas posibilidades de construcción. Se concluye que es posible construir una partición generatriz cuántica y con ella realizar una descomposición simbólica de los propagadores que resulta formalmente idéntica a la construcción clásica. Como paso previo a la aplicación de estos métodos se han realizado estudios clásicos, cuánticos y semiclásicos de los siguientes modelos: (cada uno de los cuales presenta aspectos distintos) a) el mapa del panadero, b) el mapa D (una versión conservativa de la herradura de Smale) y c) el mapa del gato de Arnold. Analizamos en detalle el esquema de cuantización de Van Vleck en relación al mapa del panadero y al mapa D. Mostramos que, en estos casos, el esquema de Van Vleck produce familias de mapas cuánticos muy similares y con el mismo límite clásico.

"Cuerdas y D-branas en espacio-tiempos curvos" (2012). Baron, Walter Helmut. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis estudiamos el modelo AdS3 Wess-Zumino-Novikov-Witten. Calculamos la Expansión en Producto de Operadores de campos primarios y de sus imágenes bajo el automorfismo de flujo espectral en todos los sectores del modelo considerado como una rotación de Wick del modelo coset H3+ . Argumentamos que las simetrías afines del álgebra requieren un truncado que determina la clausura de las reglas de fusión del espacio de Hilbert. Estos resultados son luego utilizados para discutir la factorización de las funciones de cuatro puntos con la ayuda del formalismo conocido como bootstrap.También realizamos un estudio de las propiedades modulares del modelo. Los caracteres sobre el toro Euclídeo divergen de una manera poco controlable. La regularización propuesta en la literatura es poco satisfactoria pues elimina información del espectro y se pierde así la relación uno a uno entre caracteres y representaciones del ́álgebra de simetría que forman el espectro. Proponemos estudiar entonces los caracteres definidos sobre el toro Lorentziano los cuales están perfectamente definidos sobre el espacio de funcionales lineales, recuperando así la biyección entre caracteres y representaciones. Luego obtenemos las transformaciones modulares generalizadas y las utilizamos para estudiar la conexión con los correladores que determinan los acoplamientos a las branas simétricas en tal espacio de fondo, obteniendo que en los casos particulares de branas puntuales o dS2 branas se recuperan resultados típicos de Teoría de Campos Conformes Racionales como soluciones tipo Cardy o fórmulas tipo Verlinde.

Abstract:
In this thesis we study the AdS3 Wess-Zumino-Novikov-Witten model. We compute the Operator Product Expansion of primary fields as well as their images under the spectral flow automorphism in all sectors of the model by considering it as a Wick rotation of the H3+ coset model. We argue that the symmetries of the affine algebra require a truncation which establishes the closure of the fusion rules on the Hilbert space of the theory. These results are then used to discuss the factorization of four point functions by applying the bootstrap approach. We also study the modular properties of the model. Although the Euclidean partition function is modular invariant, the characters on the Euclidean torus diverge and the regularization proposed in the literature removes information on the spectrum, so that the usual one to one map between characters and representations of rational models is lost. Reconsidering the characters defined on the Lorentzian torus and focusing on their structure as distributions, we obtain expressions that recover those properties. We then study their generalized modular properties and use them to discuss the relation between modular data and one point functions associated to symmetric D-branes, generalizing some results from Rational Conformal Field Theories in the particular cases of point like and dS2 branes, such as Cardy type solutions or Verlinde like formulas

"Cultivo de Ganoderma lucidum (Curtis) P. Karst. y evaluación de su aplicación a la biorremediación" (2013-03-20). Kuhar, José Francisco. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Ganoderma lucidum (Curtis) P. Karst es un hongo causante de pudrición blanca y por consiguiente es capaz de degradar la lignina de la madera y otros sustratos sobre los que crece. Se evaluó su capacidad de producir las enzimas ligninolíticas Lacasa, Manganeso peroxidasa y lignin peroxidasa, encontrándose que sólo la lacasa se produce con una actividad apreciable. Se evaluó la inducción con metales pesados y compuestos fenólicos y se determinó que entre las sustancias ensayadas, el cobre y el ácido ferúlico son los mejores inductores de la lacasa. Se evaluaron fuentes de carbono y nitrógeno a fines de proponer un medio consistente en glucosa, peptona, extracto de levadura, cobre ya ácido ferúlico óptimo para la producción de esta enzima y a través de diseños factoriales se obtuvieron optimizaron las concentraciones de los mismos. Se encontró además que los dos tipos de inductores (fenólicos y metálicos) producen distintos patrones electroforéticos de actividad lacasa. Se optimizó la producción de cuerpos fructíferos en medios basados en aserrín de pino y álamo con y sin chips de esas maderas, concluyendo que la mayor bioconversión (peso seco de fructificaciones / peso seco de sustrato) se encuentra sobre aserrín de álamo con chips. Se evaluaron los componentes de los sustratos nuevos y gastados así como también los de la fructificación para caracterizar la bioconversión y se cuantificaron las actividades enzimáticas ligninolíticas e hidrolíticas. Se estudió la degradación de colorantes industriales por medios líquidos y sólidos y se evaluó el efecto de los mediadores de oxidorreducción HBT y ABTS. Se encontró que los compuestos fenólicos vainilloides producen un efecto protector sobre el micelio contra distintos xenobióticos por vías distintas de la inducción enzimática y se concluyó que el mecanismo consiste en la alteración de la matriz extracelular del micelio incrementando su capacidad para retener los tóxicos.

Abstract:
Ganoderma lucidum (Curtis) P. Karst is a white rot fungus and therefore is able to degrade the lignin of wood and other substrates on which it grows. The ability to produce the ligninolytic enzymes laccase, lignin peroxidase and manganese peroxidase were assessed. It was found that only laccase occurs with appreciable activity. Induction with heavy metals and phenolic compounds was evaluated and it was found that among the tested substances, copper and ferulic acid are the best inductors of laccase. Carbon and nitrogen sources were evaluated and an optimal medium consisting of glucose, peptone, yeast extract, ferulic acid and copper was proposed for production of this enzyme. Optimized concentrations were obtained through a factorial design. It was also found that the two types of inductors (phenolic and metallic) produce different electrophoretical patterns of laccase activity. Production of fruit bodies in media based on poplar pine sawdust with and without wood chips of those species were optimized. We concluded that the most efficient bioconversion (dry weight of fruit bodies / dry weight of substrate) is achieved on poplar sawdust with wood chips. Chemical composition of fresh and wasted substrates as well as of fruit bodies were analyzed to characterize the bioconversion. Hydrolytic and ligninolytic enzyme activities were quantified. Degradation of industrial dyes for liquid and solid media were studied and the effect of redox mediators HBT and ABTS was evaluated. It was found that the vanilloid phenolic compounds exert a protective effect on the mycelium against various xenobiotics by pathways which are different from that of enzyme induction and it was concluded that the mechanism involves the alteration of the extracellular matrix of mycelium by increasing its ability to retain toxic substances.

"Cultivo primario de células testiculares prepúberes humanas: Cambios madurativos de la regulación de la esteroidogénesis" (1998). Berensztein, Esperanza Beatriz. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La regulación de la fase postnatal temprana de activación testicular así como de la posterior quiescencia en humanos es poco conocida. Tanto la secreción de hormonas hipofisarias como la composición celular del testículo correspondiente a la fase postnatal temprana son diferentes al testículo adulto. El objetivo fundamental del presente trabajo de tesis fue desarrollar el cultivo primario de células testiculares humanas provenientes de necropsia. Se estudiaron 50 testículos de pacientes neonatales (grupo 1, G1), de la etapa de activación postnatal (G2), de la etapa de quiescencia testicular (G3) y puberales (G4). El estudio de la secreción de testosterona (T), marcador de células de Leydig, en función del tiempo post mortem (tpm) encontró que el tpm debe ser de hasta 24 horas, ya que a tpm mayores no hay T y se activa la enzima aromatasa. Se comparó la T basal y la respuesta a gonadotrofinas en los 4 grupos, hallándose que la T basal es significativamente mayor en G1 y G2 que en G3 (p<0.05) y que sólo GZ responde a gonadotrofinas. Se encontró que Ia actividad estimada de las enzimas 17β-HSD, 3β-HSD y 17,20 liasa de la P450c17, fue significativamente mayor en G2 que en G3 y que 17β-HSD y 3β-HSD están más activas que 17,20 liasa. Por análisis con precursores tritiados de las vias Δ4 y Δ5 e identificación de metabolitos producidos por cromatografía en capa delgada se observó que la vía Δ5 es preferencial en testículo humano prepúber. Se observó un aumento de T en ausencia de gonadotrofinas bajo GH en G2 y bajo IGF-1 en los 4 G. Se estudió la secreción de inhibina-B, marcador de célula de Sertoli, encontrándose una disminución con la edad durante la prepubertad, un aumento en paralelo a la T y un efecto estimulador de FSH. Por el método de subcultivos y criopreservación de células testiculares humanas de necropsia, se encontró T, bajo colesterol ó pregnenolona, indicando que las enzimas esteroidogénicas están preservadas. El modelo experimental desarrollado ha demostrado además ser útil para estudiar la fisiopatogenia de diversas alteraciones de la función testicular en los niños.

Abstract:
The regulation of the ear1y postnatal activation and subsequent quiescence in human testicular development is poorly understood. The secretion of pituitary hormones and the testicular cell composition in prepubertal are different than adult men. The main aim of this study was to develop the primary culture of human testicular cells obtained from necropsy. A total of fifty testes was studied and divided into: neonatal stage or group 1 (G1), postnatal activation stage (G2), stage of quiescence (G3) and pubertal stage (G4). Testosterone secretion (T), as marker of Leydig cell function, was related with post mortem hours (pmh). It was found that pmh must be less than 24 hours, because at pmh a higher T dissapeared and aromatase activity increased. Basal T and response to gonadotrophins were analyzed in the 4 groups. Basal T was significantly higher in G1 and G2 than in G3 (p<0.05), and only in G2 an increment of T was found under LH/FSH. Seventeenβ-HSD, 3β-HSD and the 17,20 lyase of P450c17 activities were estimated in G2 and G3 and it was found that the three activities were higher in G2 than in G3, and 17β-HSD, 3β-HSD were more activated than 17,20 lyase. The analysis of the two pathways of steroidogenesis Δ5 and Δ4, studied after the incubation with radiolabeled precursors and the identification of products by TLC, showed that the preferential pathway is the Δ5. The stimulating effect of factors other than gonadotrophins was studied. An increment of T under GH in G2 and under IGF-1 in the four groups in the abscence of LH/FSH was observed. Inhibin-B secretion, as marker of Sertoli cells, was studied. A negative correlation between Inhibin-B secretion and age during prepuberty was found. Moreover, a positive correlation between Inhibin-B and T and a stimulating effect of FSH on Inhibin-B secretion was also shown. Human testicular cells obtained from necropsies were subcultured and cryopreserved and their ability to secrete T was maintained, under cholesterol or pregnenolone, showing that steroidogenic enzymes were preserved. The present model of human testicular cells in culture was found to be useful to study the physiopathogenesis of some alterations of testicular function in boys.

"Cálculo de formas de Hilbert de pesos entero y medio entero" (2013). Sirolli, Nicolás. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
En esta tesis hemos trabajado en dos temas distintos relacionados con el cálculo de formas modulares de Hilbert: el problema de calcular representantes para clases de ideales en álgebras de cuaterniones totalmente definidas, y el problema de calcular preimágenes para el mapa de Shimura en formas modulares de Hilbert. Aunque los dos temas pueden ser considerados por separado, por lo cual hemos dividido esta tesis en dos capítulos, ambos están estrechamente relacionados: el método que damos para calcular preimágenes para el mapa de Shimura depende fuertemente de la posibilidad de calcular representantes para clases de ideales. Capítulo 1: Cálculo de representantes para clases de ideales en álgebras de cuaterniones La teoía de álgebras de cuaterniones sobre cuerpos de números juega un rol central en varios cálculos relacionados con formas modulares. La idea de obtener formas modulares como series theta asociadas a ciertos retículos en álgebras de cuaterniones se retrotrae a Hecke (ver ). Eichler y otros (ver , , ) probaron que toda forma modular cuyo nivel no sea un cuadrado puede ser obtenida como una combinaci´on lineal de estas series theta, usando como retículos los ideales para cierto orden en un álgebra de cuaterniones definida. Como ideales equivalentes dan la misma serie theta, para este propósito alcanza con considerar clases de ideales. Pizer dio en un algoritmo para calcular los órdenes de Eichler y sus clases de ideales, el cual consiste en precalcular el número de clases del orden y luego empezar a calcular ideales (de una manera bastante aleatoria) hasta que el número de clases es alcanzado. El cálculo de formas modulares de Hilbert ha sido un tema de intensa investigación en los últimos años. Poder calcularlas es crucial para obtener evidencias numéricas para comprobar la veracidad de ciertas construcciones de la Teoría de Números que son bien conocidas sobre los números racionales pero que son todavía conjeturales sobre otros cuerpos de números, como la teoría de Eichler-Shimura. Las clases de ideales para órdenes de Eichler en álgebras de cuaterniones totalmente definidas sobre cuerpos de números totalmente reales pueden ser utilizadas para calcular formas modulares de Hilbert, como se explica en para formas modulares de Hilbert sobre Q y en sobre otros cuerpos cuadráticos reales, siguiendo las ideas de Pizer Todos estos métodos requieren primero encontrar un orden apropiado en una tal álgebra, y luego calcular representantes para sus clases de ideales. El propósito de nuestro trabajo es calcular ambas cosas de una manera eficiente, y en un contexto general. Concretamente, dada un álgebra de cuaterniones totalmente definida B sobre un cuerpo totalmente real F, damos un algoritmo para calcular representantes para clases de ideales para cualquier orden de Bass en B. Consideramos una vasta familia de órdenes, los órdenes de Bass. Además de los bien conocidos órdenes de Eichler, esta familia incluye los órdenes de nivel p2r+1 considerados por Pizer en , los órdenes utilizados en para calcular formas modulares de nivel p2, y los órdenes considerados en para calcular preimágenes para tales formas bajo la correspondencia de Shimura. El resto de los órdenes de Bass son incluidos por completitud. Nuestro algoritmo, en contraste con los métodos á la Pizer, no requiere conocimientos sobre número de clases, evita el cálculo aleatorio de ideales, y evita el uso repetido de la forma norma para chequear equivalencia entre ideales, todo lo cual hace que el método sea eficiente. Como la implementación completa (en SAGE) de nuestro algoritmo está aún bajo desarrollo, no podemos hacer una comparación sistemática a gran escala de tiempos de ejecución; de todas maneras, en hay un algoritmo, que puede ser considerado como un caso particular del nuestro, que calcula representantes para clases de ideales para ´ordenes de nivel p2 en el álgebra sobre Q ramificada exactamente en p y en infinito. Este algoritmo tiene un rendimiento mucho mejor que el de MAGMA en algunos casos sencillos. Por ejemplo, al calcular representantes para clases de ideales para un orden de discriminante 1032 en el álgebra sobre Q ramificada exactamente en 103 e infinito, con una computadora Intel CoreTM2 CPU 6600 con 2 Gb de memoria RAM, MAGMA (V2.16-6) necesita 1254,96 segundos, mientras que las rutinas en PARI/GP (V2.5.0) tardan 0,00218 segundos. Los resultados obtenidos en este capítulo fueron enviados y aceptados para su publicación en la revista Mathematics of Computation, en un trabajo conjunto con mi director de tesis, Ariel Pacetti. Ver . Capítulo 2: Preimágenes para el mapa de Shimura en formas modulares de Hilbert El mapa de Shimura es un mapa Hecke lineal entre formas modulares de peso medio entero y formas modulares de peso entero, introducido en para formas modulares clásicas y generalizado en a formas modulares de Hilbert, así como al contexto automorfo en trabajos de Waldspurger, Flicker y otros. Calcular preimágenes para el mapa de Shimura comenzó a ser un tema de interés a partir de las fórmulas dadas por Waldspurger, Kohnen-Zagier, Gross y otros, relacionando los valores centrales de twists de la serie L asociada a una forma modular de peso entero f con los coeficientes de una forma de peso medio entero g correspondiendo a f por el mapa de Shimura (por ejemplo, ver ). Estas fórmulas fueron utilizadas por Tunnell en para resolver el clásico problema de los números congruentes. Fueron generalizadas para formas modulares de Hilbert en y . El problema de calcular preimágenes para el mapa de Shimura para formas modulares clásicas ha sido considerado, por ejemplo, en y . Nuestro método para calcular preimágenes en el caso de formas modulares de Hilbert se basa en las ideas presentes en , las cuales a su vez generalizan el método de Gross. Las preimágenes son obtenidas considerando ciertas series theta ternarias asociadas a ideales en álgebras de cuaterniones. Específicamente, damos un mapa Hecke lineal del espacio generado por las clases de ideales para un orden de discriminante D en un álgebra de cuaterniones totalmente definida al espacio de formas modulares de Hilbert de peso paralelo 3=2 y nivel 4D. Poder calcular estas clases de ideales, problema considerado en el Capítulo 1 de esta tesis, es por lo tanto crucial para nuestro método. La correspondencia entre clases de ideales en álgebras de cuaterniones y formas modulares de peso medio entero tiene su contraparte automorfa, que fue estudiada en sobre cuerpos de números cualesquiera, y en particular en el contexto de formas modulares de Hilbert. La ventaja de nuestro m´etodo es que, siendo más explícito, permite calcular efectivamente los coeficientes de las formas modulares de Hilbert de peso medio entero, los cuales aparecen en las fórmulas de tipo Waldspurger. Hasta donde sabemos, es el único resultado existente sobre cálculos con coeficientes de formas de Hilbert de peso medio entero. En este artículo el autor también sigue el método de Gross para calcular estos coeficientes con el objetivo de probar una fórmula de tipo Waldspurger, pero con varias restricciones como trabajar con formas de nivel potencia de primo y sobre un cuerpo base con número de clases impar, y sin considerar los operadores de Hecke ni la correspondencia de Shimura. Los resultados obtenidos en este capítulo fueron enviados para su publicación, de la cual se puede encontrar una versión preliminar en .

Abstract:
In this thesis we have worked in two different subjects related to the computation of Hilbert modular forms: the problem of computing ideal classes representatives in totally definite quaternion algebras, and the problem of computing preimages for the Shimura map on Hilbert modular forms. Though both subjects can be considered separately, and because of that we have split this work in two chapters, they are closely related: the method we give for computing preimages for the Shimura map relies heavily on the possibility of computing ideal classes representatives. Chapter 1: Computing ideal classes representatives in quaternion algebras The theory of quaternion algebras over number fields plays a central role in many computations related to modular forms. The idea of obtaining modular forms as theta series attached to certain lattices in quaternion algebras goes back to Hecke (see ). Eichler and others (see , , ) proved that every modular form whose level is not a square can be obtained as a linear combination of such theta series, using as lattices the ideals for a certain order in a definite quaternion algebra. Since equivalent ideals yield the same theta series, it suffices to consider ideal classes. Pizer gave in an algorithm for computing the Eichler order and its ideal classes, which consists in precomputing the class number of the order and then start computing ideals (in a rather random way) until the class number is reached. Computing Hilbert modular forms has been a subject of intense research during the last years. Their knowledge is crucial for obtaining numerical evidence for certain constructions in number theory that are well known over the rational numbers but still conjectural over other number fields, such as the Eichler-Shimura theory. Ideal classes for Eichler orders in totally definite quaternion algebras over totally real fields can be used to compute Hilbert modular forms, as explained in for Hilbert modular forms over Q and in over other real quadratic fields, following the ideas of Pizer. All these methods require first to find a suitable order in such an algebra, and then compute representatives for its ideal classes. The purpose of our work is to compute both things in an efficient way, and in a rather general setting. Concretely, given a totally definite algebra B over a totally field F, we give an algorithm for computing ideal classes representatives for any Bass order in B. We consider a broad family of orders, namely the Bass orders. Besides the well known Eichler orders, this family includes the orders considered by Pizer in , the orders used in for computing modular forms of level p2, and the orders considered in for computing preimages for such forms under the Shimura correspondence. The rest of the Bass orders are included for completeness. Our algorithm, in contrast with the methods á la Pizer, does not require any knowledge of class numbers, avoids the random computings of ideals, and avoids the repeated usage of the norm form for checking equivalences between ideals, thus making the method efficient. Although in the authors, using a smart cohomological trick, manage to compute Hilbert modular forms for any level using just maximal orders (which avoids computing representatives for other orders), their approach can not be used for computing preimages for the Shimura map on Hilbert modular forms of half-integral weight, subject that we consider in Chapter 2 of this thesis. Since the full implentation (in SAGE) of our algorithm is still in progress, we can not make a systematic large scale comparision of running times; however, in there is an algorithm, which can be considered as a special case of ours, that computes ideal classes representatives for orders of discriminant p2 in the algebra over Q ramified exactly at p and at infinity. This algorithm has a much better performance than MAGMA’s in some simple cases. For example, when computing ideal representatives for an order of discriminant 1032 in the algebra over Q ramified exactly at 103 and at infinity, with an Intel CoreTM2 CPU 6600 with 2 Gb of RAM memory, MAGMA (V2.16-6) needs 1254,96 seconds, whereas the routines in PARI/GP (V2.5.0) take 0,00218 seconds. The results obtained in this chapter were sent and accepted for their publication in the journal Mathematics of Computation, in a joint work with my thesis advisor, Ariel Pacetti. See . Chapter 2: Preimages for the Shimura map on Hilbert modular forms The Shimura map is a Hecke linear map between half-integral weight modular forms and integral weight ones, introduced in in the classical setting and generalized in to Hilbert modular forms, as well as to the automorphic setting by the work ofWaldspurger, Flicker and others. Computing preimages for the Shimura map became an interesting subject after the formulas given by Waldspurger et al. relating the central values of twists of the L-series associated to an integral weight modular form f with the coefficients of a half-integral weight form g mapping to f by the Shimura map (for example, see ). These formulas were used by Tunnell in for solving the classical congruent number problem. They were generalized to the Hilbert setting in and . The problem of computing preimages for the Shimura map in the classical setting has been considered, for example, in and . Our method for computing preimages in the Hilbert setting relies in the ideas present in , which in turn generalize the method of Gross. The preimages are obtained by considering certain ternary theta series associated to ideals in quaternion algebras. Specifically, we give a Hecke linear map from the space generated by the ideal classes of an order of discriminant D in a totally definite quaternion algebra to the space of Hilbert modular forms of parallel weight 3=2 and level 4D. The problem of computing these ideal classes, considered in Chapter 1 of this thesis, is thus crucial for our method. The correspondence between ideal classes in quaternion algebras and half-integral weight modular forms has its automorphic counterpart, and was studied in over any number field, and in particular in the Hilbert setting. The advantage of our method is that, being more explicit, it allows to compute effectively the coefficients of the half-integral weight Hilbert modular forms, which appear in Waldspurger’s type formulas. As far as we know, is the unique existing result regarding computations with coefficients of half-integral weight Hilbert modular forms. In this article the author also follows the method of Gross for computing these coefficients to prove a Waldspurger’s type formula, but with several restrictions such as working with level a power of a prime and odd class number of the base field, and with no focus on Hecke operators nor the Shimura correspondence. The results obtained in this chapter were sent for their publication; there is a preprint available at .

"Cálculo perturbativo de los momentos de inercia nucleares" (1985). Acosta de Mehr, María Teresa. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Cálculo y Tabulación de funciones determinantes" (1932). Mírcoli de Luchini, Laura. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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"Cálculo y verificación de una columna para la rectificación del sistema n butanol- agua" (1955). Cosarinsky, Gastón O.. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
CAPÍTULO I - EL BUTANOL - USO INDUSTRIAL Se reseñan los usos industriales del Butanol como solvente de lacas, como intermediario en la producción de plastificantes, de agentes de flotación y de herbicidas. Se señala su utilidad como deshidratante azeotrópico y su empleo en la manufactura de antibióticos. CAPITULO II - PROPIEDADES FÍSICAS DEL n-BUTANOL Y SUS SOLUCIONES ACUOSAS Se ha agrupado en este capítulo una recopilación de propiedades físicas del n-butanol y del sistema n-butanol-agua que tienen relación con el cálculo y operación de una unidad destiladora. Se destaca la propiedad del n-butanol y agua de ser parcialmente miscibles y de formar heteroazeotropo. CAPÍTULO 3 - CÁLCULO DEL NÚMERO DE PLATOS DE LA COLUMNA RECTIFICADORA A- Descripción del Proceso Se describe el proceso tal como se prevé que va a ocurir en una unidad de destilación discontinua. La composición del contenido de 1a caldera va variando a medida que la destilación progresa y pasa desde butanol saturado con agua que es la carga a butanol anhidro. La composición del destilado también varia, comenzandose por recibir el heteroazeotropo que se reordena en dos capas inmiscibles, luego se recibe butanol húmedo y finalmente anhidro. Asi es como se divide la destilación en tres etapas bien definidas cuyas caracteristicas se dan. B - Cálculo del número de platos para una unidad de destilación discontínua. Se reseña el método gráfico de McCabe-Thielo para el cálculo del número de platos teóricos y se lo aplica a1 caso particular de esta destilación discontinua teniendo en cuenta la variación continua de la relación de reflujo en primera etapa y la variación continua de composición del destilado y reflujo en segunda etapa. Se tiene en cuenta las Curvas de Equilibrio reales calculadas según las razones de enriquecimiento posibles encontradas en experiencias anteriores. C - Conclusiones Se concluye que serían necesarios once platos desde el punto de vista puramente teórico de la destilación. Considerando el factor económico pensamos que podria reducirse a seis el número de platos. CAPÍTULO IV - CÁLCULOS DE DIMENSIONES A - Cálculo del decantador Se dimensiona mediante una serie de ensayos el decantador necesario para separar en forma continua las dos capas en que se reordena el azeotropo. Mediante esos ensayos se establece que el tiempo de inducción no varía prácticamente con el diámetro del decantador ni con el tenor en agua, pero si disminuye al aumentar 1a temperatura. Asimismo se verifica que la velocidad de decantación aumenta con la temperatura y disminuye cuando el porcentaje de capa acuosa se hace menor. La velocidad de decantación resultó independiente del diámetro del decantador dentro do los límites de la práctica. B - Cálculo de 1a cantidad de calor necesaria para la evaporación del n- Butanol agua. Se calcula en primara etapa (450 1/hora) llegando a la conclusión de que se necesita 105.300 Cal/hora, lo que representa un consumo teórico de 196 kg/hora de vapor de calor latente útil de 537 Cal/Kg. (vapor de 3,5 kg./cm²). Se midió en la práctica este consumo y resultó de 192 Kg/hora. C - Cálculo del elemento calefactor. Se calcula el elemento calefactor necesario para dicho intercambio. Para esto se calcula el valor del coeficiente total en bese a datos de tablas y valores medidos y resulta de 364 Cal/m².h.°C. Se verifica este valor con el obtenido en la práctica que es de 370 Cal/m² h °C. Se calcula una superficie de 6.5 m² a la que corresponde 107 metros de caños de 3/4 y adoptamos por seguridad 150 m. D - Cálculo del Condensador Se calcula el condensador necesario en la tercer etapa que es cuando se opera con butanol anhidro porque no hay datos de coeficiente de transmisión para la mezcla de butanol húmedo y agua butílica (1ª etapa) ni para el butanol húmedo solo (2ª etapa). Se supone una destilación de 720 1/hora, o sea que hay que eliminar 97.500 Cal/hora para obtener el butanol frío. Calculamos el coeficiente de conductibilidad total con tablas de Stoever y nos da 662 Cal/m² h °C para la condensación y 125 Cal/m² h °C para el enfriamiento. Así resulta una superficie condensadora de 1.28 m² y una superficie refrigerante de 0,45 m² y su suma 1,78 m². Por razones de seguridad se adopta un condensador de 5 m² ya que será de tubos horizontales y no trabajará inundado y entonces la superficie que intercambia con el líquido es el hilo que se desliza por la parte inferior de los tubos. Se calcula también el caudal de salmuera necesario para 1a velocidad adoptada que resulta de 14.100 l/hora. E - Cálculo de las dimensiones de la columna. Se calcula el volumen de vapor generado por hora que resulta ser de 92 dm³/seg en 1ª etapa y 71 dm³/seg. en 3a. etapa. Como se elige un espaciamiento grande entre platos (400 mm) para evitar todo posible arrastre; la velocidad máxima de pasaje de vapores debe ser de 0,9 m/seg y nosotros elegimos 0,4 m/seg. por seguridad. El diámetro resulta entornos de 0,48 m. Se adoptan campanas de burbuja de 75 mm de diámetro y distancia entre centros de 140 mm. F - Dimensiones de la Caldera. Se adopta una caldera de 3500 l de capacidad con un diametro de 160cm para evitar una altura excesiva, ya que esto no favorece las corrientes de convección de la calefacción para el caso particular de nuestro calefactor. CAPÍTULO V - VERIFICACIONES DE LA COLUMNA Se realizaron determinaciones que según su objetivo dividimos en cuatro grupos. 1 - PRIMER GRUPO Se estudió en la práctica lo que ocurre en la primera etapa, tratando de hallar una expresión matemática que lo represente y permita calcular el rendimiento de esta etapa. Así se encuentra que la velocidad de producción de agua butílica es V Agua But. (1/h) = V total (0,260 - 0,03 t) También se deduce que el volumen de agua butílica producido en función del tiempo es: Vol. Agua But. (1) = Veloc.de dest.total (1/h) (0,26 t-0,03 t²/2)) 2 - SEGUNDO GRUPO Se tomó datos periódicos de peso específico del destilado y de la caldera para construir la curva 1/XE-XF que una vez integrada nos da las curvas de capacidad de la unidad destiladora. 3 - TERCER GRUPO Se verificó las razones de enriquecimiento para lo cual se tomó series de muestras para peso específico de todos los platos simultáneamente y periódicamente durante las dos primeras etapas, pudiéndose así reconstruir con datos prácticos el diagrama de McCabe y Thiele y además estudiar el comportamiento de cada plato durante toda la destilación. 4 - CUARTO GRUPO Estuvo destinado a encontrar las condiciones óptimas de trabajo en cuanto a velocidad de destilación y relación de reflujo. Se encontró que la mejor es la velocidad que corresponde a una calefacción con vapor de 3,5 Kg/cm² y el mejor rendimiento se obtiene con un reflujo de 2:1. VI - PLANOS Se incluye un esquema de un plato rectificador y otro del destilador con todos sus accesorios.

"Cáncer hepatocelular y porfirinas : Regulación del camino del Hemo durante el estadío de iniciación de la Carcinogénesis química" (2000). Gerez, Esther Noemí. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
El principal objetivo de esta tesis ha sido el estudio de los cambios bioquímicos, histológicos y moleculares, que ocurren en las etapas tempranas de la hepatocarcinogénesis inducida químicamente. Se trabajó con ratones CF1 machos que recibieron p-dimetilaminoazobenzeno (DAB 0,5% p/p) en la dieta durante un período total de 184 días. En estos animales se estudió el sistema metabolizante de drogas, la regulación metabólica del hemo, y el equilibrio entre la formación de radicales libres y los sistemas de defensa antioxidante. Se observó que a partir de los 35 días el higado sufre cambios significativos tanto a nivel molecular como morfológicos. La administración del carcinógeno produjo un gran aumento en el contenido del P450 con la consecuente inducción de la síntesis y disminución de la degradación del hemo. A su vez, se comprobó una desregulación en esta vía metabólica, por la falta de respuesta a agentes porfirinogénicos. La disminución de las actividades de las enzimas de defensa antioxidante aumentó el grado de estrés oxidativo provocado por la metabolización del carcinógeno. Los antioxidantes ensayados previnieron parcialmente las alteraciones bioquímicas detectadas. El modelo experimental mostró dos patrones de comportamiento bioquímico diferentes según el tiempo de intoxicación. Esto nos llevó a proponer un probable mecanismo para la gestación del proceso hepatocarcinogénico que considera la existencia de un estado primario activante del hígado en su totalidad, referido como estadio de preiniciación, caracterizado por un patrón de alteraciones bioquímicas necesarias para la instauración del estadio de iniciación de la hepatocarcinogénesis.

Abstract:
The aim of this thesis has been to study the biochemical, histological and molecular aspects of the changes occurring during the onset of the chemically induced hepatocarcinogenesis. Male CF1 mice were fed with a diet supplemented with p- dimethylaminoazobenzene (DAB, 0.5% w/w) during a whole period of 184 days. Then, the drugs metabolizing enzyme system, the regulation of heme metabolic pathway, and the balance between free radicals production and the antioxidant defense system were investigated. Significant hepatic changes at the molecular and the morphological level were detected from day 35 of intoxication onwards. The carcinogen administration greatly increased P450 content with the consequent enhancement of heme synthesis and diminution of heme degradation. The lack of response to some porphyrinogenic agents showed the deregulation of this metabolic pathway in the animals exposed to the carcinogen. The decrease in the activities of the antioxidant defense enzymes further increased the oxidative stress provoked by the carcinogen metabolization. The antioxidants assayed partially prevented the observed biochemical alteration. This experimental model showed two different biochemical patterns during the course of the intoxication. This led us to propose the hypothesis about a probable mechanism for the onset of hepatocarcinogenesis that considers a primary activating liver state involving the whole organ, the so-called pre-initiation stage, resulting in a biochemical aberration which then leads to the actual initiation stage.

"Células dendríticas en la inmunoterapia del cáncer : desarrollo de una vacuna anti-melanoma en un modelo experimental" (2003-12). Goldszmid, Silvana Romina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
La incidencia del melanoma aumenta a mayor velocidad que la de otros cánceres y la sobrevida de pacientes con metástasis distantes es generalmente < l año. Con el avance en la comprensión de los requerimientos para inducir inmunidad las CD se han convertido en atractivos vectores para la inmunoterapia del cáncer. Consideradas las más potentes células presentadoras de Ag (APC), las células dendríticas (CD) actúan como centinelas del sistema inmune, patrullando a través de la sangre, tejidos periféricos, linfa y órganos linfoides secundarios alertando al sistema inmune y controlando sus decisiones más tempranas. En la periferia las CD inmaduras capturan antígenos (Ag) y migran hacia los órganos linfoides secundarios donde presentan dichos Ag a linfocitos T naïve induciendo la activación de la respuesta inmune. El objetivo del presente trabajo de Tesis fue estudiar desarrollar una vacuna anti-melanoma utilizando CD cargadas con células tumorales apoptóticas y estudiar los mecanismos involucrados en la respuesta inducida contra el tumor. Para ello, se utilizó el modelo de melanoma murino B16. El melanoma B16 es un tumor de origen espontáneo, débilmente inmunogénico y por lo tanto provee un marco adecuado para el estudio de la modulación de la respuesta inmune anti-tumoral. Las CD aisladas a partir de precursores de médula ósea fueron cultivadas en presencia de sobrenadante de cultivo de la línea productora de GM-CSF establecida mostraron un fenotipo inmaduro con baja expresión de moléculas MHC I y II y coestimulatorias y alta capacidad de captación antigénica tanto por fagocitosis de Ag particulados como endocitosis de macromoléculas. Luego de inducir la maduración con LPS se observó un marcado aumento en la expresión de moléculas MHC I y II y coestimulatorias y un aumento en la capacidad estimulatoria en cultivos mixtos alogeneicos. Ensayos de migración in vitro mostraron la alta capacidad migratoria de las CD inmaduras en respuesta a estímulos inflamatorios y de CD maduras en respuesta a quimioquinas constitutivamente secretadas en los ganglios linfáticos. Se comprobó también, mediante la realización de ensayos de migración in vivo, que las CD inyectadas subcutáneamente eran capaces de migrar hacia los ganglios linfáticos de drenaje. Estos resultados reflejaron el potencial de las CD obtenidas para su utilización en el diseño de una vacuna anti-tumoral. La apoptosis de las células B16 fue inducida por radiación y y evidenciada por tinción con Anexina V / IP. 48 hs después de la irradiación se observaron 70 —80 % de células apoptóticas caracterizadas por la tinción Anexina +/ IP - comparadas con lO—12 % en las células sin tratar. Las células Bl6 apoptóticas fueron eficientemente fagocitadas por CD inmaduras. Luego de 24 hs de cocultivo gran proporción (> 50 %) de CD había incorporado material apoptótico según se evidenció por FACS, microscopía confocal y microscopía electrónica. El cocultivo con células tumorales apoptóticas indujo la maduración de las CD, evidenciada por un aumento en la expresión de MHC II y CD86 respecto a CD inmaduras cultivadas en ausencia de células apoptóticas. Dicho aumento se observo principalmente en la población de CD que había incorporado material apoptótico. Otra evidencia de la maduración de las CD, fue la marcada disminución de la capacidad endocítica con respecto a CD inmaduras (intensidad de fluorescencia media 35,8 vs. 192,5). Luego de ser inyectadas subcutáneamente, CD cocultivadas con células apoptóticas o CD solas migraron hacia los ganglios linfáticos en forma comparable. Las CD encontradas en los ganglios correspondían a ~0.5% del inoculo original y en ambos casos se observo una expresión uniforme de MHC II y CD86 equivalente a la observada en CD maduras. La vacunación con CD cargadas con células tumorales apoptóticas (CD-Apo) indujo un alto nivel de protección contra el desarrollo del melanoma B16: 80 % de los animales permanecieron libres de tumor 12 semanas después del desafió. Dicha protección fue especifica para el melanoma B16, ya que todos los animales vacunados desarrollaron tumor cuando fueron desafiados con un tumor singeneico no relacionado. 80 % de los animales vacunados con CD-Apo y desafiados 10 semanas después de la inmunización permanecieron libres de tumor, consistente con la inducción de memoria inmunológica. Estudios de depleción in vivo de subpoblaciones linfocitarias demostraron que tanto linfocitos T CD4+ como CD8+ son son necesarios para la efectiva vacunación con CD-Apo. Se evidenció que ambas poblaciones linfocitarias son activadas para la producción de IFNy cuando son estimuladas con CD-Apo y CD-TRP-2. Además, los linfocitos CD8+ son capaces de reconocer células Bl6 intactas in vitro y de lisar células pulsadas con TRP-2 in vivo. El estudio de la inmunidad humoral demostró la presencia de anticuerpos específicos dirigidos contra las ce'lulas B16. Por último, en el análisis del sitio de inyección del tumor se observó un importante infiltrado de neutrófilos a tiempos muy tempranos, siendo máximo seis días después de la inyección del tumor. La presencia de linfocitos en el sitio de inyección se observó más tardíamente. Esto podría indicar que los neutrófilos también juegan un rol importante en el rechazo tumoral. En el presente trabajo de Tesis se ha demostrado por primera vez, que la vacunación con CD cargadas con células tumorales apoptóticas (CD-Apo) induce inmunidad a largo plazo dependiente de la acción combinada de linfocitos T CD4+ y CD8+ contra el melanoma B16 débilmente inmunogénico. Este modelo preclínico provee el marco necesario para la realización de estudios clínicos comparables utilizando CD-Apo como adyuvante para la inmunización activa contra el cáncer.

Abstract:
Melanoma is the cancer with the fastest increasing incidence, and survival of patients with distant metastases is generally < l year. With increased understanding of the requirements for initiating immunity, dendritic cells (DCs) have become attractive vectors for immunotherapy of this and other cancers. Considered the most potent antigen presenting cells (APC), DC act as sentinels of the immune system, they patrol trough the blood, periphery, lymph and lymphoid organs, alerting the immune system and controlling its early decisions. At the periphery immature DC capture antigens (Ag) and migrate to the secondary lymphoid organs where they present those Ag to naïve T cells and therefore inducing the immune response. The aim of this Thesis work was to develop an anti-melanoma vaccine using DC loaded with apoptotic tumor cells and to study the mechanisms underlying the induced anti-tumor response. In order to do that, we used the B16 melanoma. The B16 melanoma is a poorly immunogenic tumor of spontaneous origin, thus providing the adequate background to explore maneuvers to increase host defenses against it. The DC obtained from bone marrow precursors were cultured in the presence of GM-CSF containing supematant from the previously established GM-CSF producing cell line, showed an immature phenotype with low expression of MHC II and I and co-stimulatory molecules and high Ag capture capacity. After LPS induced maturation DC showed an up-regulated expression of MHC I and II and co-stimulatory molecules and high T cell activation capacity in the mixed leukocyte reaction. DC also showed a high migratory activity as evidenced by in vitro migration assays. Furthermore, it has also been shown that after s.c. injection DC migrated to the draining lymph nodes. These observations pointed out the potential of DC for the design of anti- tumor vaccines. To induce apoptosis, B16 cells were irradiated (70 Gy) and cultured for 48 h. Apoptosis was documented by AnexinV / PI staining. After 48 h, cultured unirradiated cells contained 10-12% early apoptotic cells characterized by AnnexinV + / PI —staining. In contrast, 70-80% of irradiated cultured tumor cells had undergone early apoptotic death. 12-19% of the cells displayed AnnexinV + / PI + staining, indicating secondary necrosis in both unirradiated and irradiated cultures. Then DCs were cultured apoptotic tumor cells for 24h. At 37°C, over 50% of immature DCs phagocytosed apoptotic material, as confirmed by FACS, confocal fluorescence microscopy and electron microscopy. After coculture a large fraction of the tumor-exposed DCs upregulated CD86 as well as MHC II. Another evidence of the induced maturation was the down-regulated capacity to endocytose FITC-Dextran as compared with immature DC(mean fluorescence 35,8 vs 192, 5). Following injection, DCs migrated to the draining lymph nodes comparably to control DCs at a level corresponding to ~0.5% of the injected inoculum and uniformly expressed high levels of CD86 and MHC II molecules comparable to fully mature and immunogenic DC. Mice vaccinated with tumor-loaded DCs (DC-Apo) showed a strong protection against an intracutaneous challenge with B16: 80% of the mice remaining tumor-free 12 weeks after challenge. This protection was not observed when vaccinated mice were challenged with a nonrelated syngeneic tumor. 80 % of mice receiving a tumor challenge 10 weeks after vaccination were also protected, consistent with the induction of tumor-specific memory. When either CD4+ or CD8+ T cells were depleted in vivo at the time of challenge, the protection was completely abrogated, indicating that both CD4+ and CD8+ T cells are necessary for the effective anti-tumor response induced DC-Apo vaccination. CD4+ and CD8+ T cells were efficiently primed in vaccinated animals, as evidenced by interferon-y secretion after in vitro stimulation with DC-Apo or DCs pulsed with TRP-2. In addition, B16 melanoma cells were recognized by immune CD8+ T cells in vitro, and cytolytic activity against TRP-2(180-188) pulsed target cells was observed in vivo. The study of the humoral response showed the presence of anti-B16 specific antibodies. Finally, when the tumor injection site was analyzed a large amount of neutrophils were observed at very early time points and being maximum six days following tumor challenge. The presence of lymphocytes at the injection site was observed only at later time points. This could indicate tha neutrophils also play an important role in the tumor rejection. In the present Thesis work it has been shown for the first time, that DCs phagocytosing apoptotic tumor cells (DC-Apo) elicit long-lived combined CD4+ and CD8+ immunity against the poorly immunogenic B16 melanoma. This preclinical model sets the stage for comparable studies in humans with DC-Apo as adjuvants for active immunization against cancer.

"Células dendríticas humanas : caracterización de su interacción con proteínas de matriz extracelular y de su capacidad inmunoreguladora" (2002). Jancic, Carolina Cristina. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Las células dendríticas (DC) son las más eficientes células presentadoras de antígenos y cumplen un rol central en la inducción de la respuesta inmune primaria. El objetivo del presente trabajo fue estudiar la interacción de las DC con otros tipos celulares y con la matriz extracelular (MEC); los factores que modulan dicha interacción; y la capacidad de las DC para inducir la proliferación de células T. Para ello se utilizaron DC obtenidas a partir de monocitos de sangre periférica (moDC) empleando interleuquina (IL) 4 y el factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF), en presencia de suero humano (SH) o suero bovino fetal (SBF). Las moDC fueron capaces de adherirse a células endoteliales obtenidas a partir de vena de cordón umbilical humano (HUVEC) y a distintas proteínas de MEC. Esta adhesión fue modulada por citoquinas como el TNFα y la IL1β. Mientras que el tratamiento de las células endoteliales con TNFα indujo una mayor adhesión y migración de moDC, el tratamiento de las moDC con dicha citoquina provocó una disminución en la adhesión tanto a endotelio como a fibronectina (FN) y laminina (LM), pero no a colágeno tipo IV (Col tipo IV). Los efectos de esta citoquina fueron mediados por el receptor de tipo 11, cuya expresión disminuyó cuando las células se trataron con TNFα. La interacción de las moDC con HUVEC no activado fue parcialmente mediada por CD18, C029, CD49e y CD31. Por otro lado, la adhesión a proteínas de MEC fue mediada por las integrinas CD49e (para FN), CD49c y CD49f (para LM). La expresión de estas moléculas no se modificó con el tratamiento de las moDC con TNFα. Sin embargo, la activación de las integrinas con PMA revirtió el efecto inhibitoriodel TNFα sobre la adhesión a FN. Además de disminuir la adhesión a proteínas de MEC, el tratamiento de las moDC con TNFα e IL1β disminuyó el contenido intracelular de AMPc. Las células no adherentes a FN presentaron menores niveles de AMPc, mayor expresión de IL12 y mejor capacidad estimuladora de linfocitos T, comparadas con las células adherentes. En estas moDC el aumento del contenido de AMPc utilizando un inhibidor de la fosfodiesterasa o análogos de AMPc, revirtió el efecto del TNFα sobre la adhesión a FN y sobre su capacidad inmunoestimuladora. Por otro lado, estímulos “no clásicos” como el aumento de la osmolaridad extracelular modifican ciertas propiedades de las moDC, disminuyendo su capacidad endocítica. su adhesión a proteínas de MEC y su habilidad para inducir la proliferación de linfocitos T alogeneicos. El tratamiento hiperosmolar, además, provocó una disminución en el contenido de IL12, sin modificar la expresión de las moléculas HLA-I, HLA-DR, CD18, CD54 y CD86. Las moDC generadas bajo diferentes condiciones de cultivo presentaron características particulares. Las células cultivadas en presencia de SBF (moDC-SBF) expresaron CD80 en la superficie celular a diferencia de las células cultivadas en presencia de SH (moDC-SH). Estas últimas presentaron reservorios intracelulares de dicha molécula. Además, las moDC-SBF mostraron una mayor expresión de IL12 y una alta eficiencia para inducir la proliferación de células T durante una respuesta inmune antígeno específica, comparadas con las moDC-SH. Los resultados obtenidos en el presente trabajo sugieren que el TNFα actuaría sólo sobre la población de moDC que expresa el RTNF tipo II, posiblemente inactivando las integrinas que participan en la interacción con las proteínas de MEC, lo que resulta en una menor adhesión. Además, existiría una correlación entre el contenido de AMPc y los cambios inducidos por el TNFα en las moDC, tanto en la adhesión a FN como en su capacidad inmunoestimuladora. Por otro lado, el aumento en la osmolaridad extracelular podría generar moDC con baja habilidad para estimular la proliferaciónde células T, lo cual podría estar en parte debido a la menor producción de IL12 y la menor capacidad para incorporar antígenos bajo condiciones hiperosmolares. Finalmente, la expresión de CD80 podría depender de factores presentes en el suero utilizado durante el cultivo de las moDC. Resumen

Abstract:
Dendritic cells (DC) are professional antigens presenting cells that play a critical role in the induction of acquired immune responses. The aim of the present study was to analyze the cell-DC and extracellular matrix (ECM) proteins-DC interactions. The factors that modulate this interactions and the immunostimulatory capacity of DC were further examined. Monocytes derived DC (moDC) were used for these experiments. MoDC were able to adhere to endothelial cells obtained from human umbilical vein (HUVEC) and to ECM proteins. This adhesion was modulated by cytokines such as TNFα and IL1β. TNFa treated HUVEC increased moDC adhesion and migration. In contrast, TNFα treated moDC were less adherent to endothelium, fibronectin (FN) and laminin (LM), but not to collagen type IV (Col type IV). TNFα effect was mediated through TNF receptor II, which was downmodulated on TNFα-treated moDC. The moDC-HUVEC interaction was partially mediated by CD18, CD29, CD49e and CD31. The moDC adhesion to ECM proteins was mediated by CD49e for FN, and CD49c and CD49f for LM. The expression of these molecules did not change on TNFα treated moDC. However, PMA reversed the inhibitory effect of TNFα on FN adhesion, probably by integrin inactivation. TNFα also decreased the cAMP levels on moDC. Indeed, TNFα treated cells non-adhered to FN showed lower levels of cAMP, higher IL12 expression and better immunostimulatory capacity compared with FN adhered moDC. By increasing the cAMP content with a phosphodiesterase inhibitor (IBMX) or cAMP analogues (8Br-cAMP) was possible to reverse the TNFα effect on adhesion and T-cell stimulatory capacity. Alternatively, moDC incubated with high extracellular osmolarity detached from ECM proteins and showed lower immunostimulatory capacity, compared with cells in iso-osmolar conditions. The effect of hiperosmolarity could be mediated by IL12, since those treated moDC showed lower level of IL12 without changes in the expression of surface molecules. Some features of moDC were modified depending on the culture conditions. Cells cultured in the presence of fetal bovine serum (FBS) (moDC-FBS) expressed CD80 while CD80ˉ moDC were generated by using human serum (HS) (moDC-HS). However, the moDC-HS showed intracellular expression of this molecule. Other differences observed between these two moDC were the higher IL12 production and the capacity to stimulate antigen-specific T cells of moDC-FBS, compared with moDC-HS. Overall, these results suggest that TNFα and other non-classical stimuli act on some moDC decreasing the adhesion, probably by modulating the activation state of integrins. Furthermore, cAMP levels correlate with TNFα-induced changes of moDC adhesion and allostimulatory capacity. Finally, expression of CD80 on cellular membrane may depend on different factors present in serum, being FBS able to generate CD80+ moDC with better immunostimulatory capacity.

"Cómo se altera el metabolismo y transporte de glucosa en porfiria experimental crónica y aguda. Una aproximación mecanística" (2013-02-26). Lelli, Sandra Marcela. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Este trabajo de Tesis fue realizado utilizando ratas Wistar como animales de experimentación y drogas tales como el hexaclorobenceno para inducir una porfiria crónica, y la 2-alil-2-isopropilacetamida junto con el 3´,5´-dietoxicarbonil-1,4- dihidrocolidina, para modelar una porfiria aguda. Se logró así relacionar ambas patologías modeladas con importantes alteraciones en diversos aspectos del metabolismo de los hidratos de carbono (rutas anabólicas y catabólicas del glucógeno, de la glucosa y su transporte), del metabolismo oxidativo (que lleva a la producción de especies reactivas de oxígeno, ROS), del triptófano (TRP) y de los glucocorticoides (GC) (niveles, síntesis y receptores), todos ellos campos que han sido muy poco estudiados en las porfirias. Se establecen además inter-relaciones e inter-regulaciones metabólicas y hormonales entre el metabolismo del hemo (que es donde las fallas generan la porfiria), los metabolismos recién mencionados, el de los GC y la insulina, con particular atención en la actividad de la fosfoenolpiruvato-carboxiquinasa (PEPCK), enzima regulatoria clave de la gluconeogénesis. Así los disturbios hormonales y metabólicos encontrados en los modelos tanto de porfiria crónica como aguda, confluyen y dan cuenta de un descenso en la disponibilidad de glucosa en el hepatocito que modularía la porfiria, exacerbando la enzima regulatoria del camino del hemo, ALA-sintetasa. Por otro lado sustentarían el porqué del efecto benéfico de la administración de glucosa en la terapia de las porfirias, especialmente de la porfiria aguda, que es la más crítica y provoca un riesgo de vida. Asimismo, es de destacar el efecto benéfico de la melatonina, reportado en el presente trabajo, en los tres metabolismos investigados para la porfiria aguda. Así como la importante disrupción hormonal que se reporta a nivel de los GC tanto a nivel plasmático como en su síntesis adrenal y receptores hepáticos en el modelo crónico de porfiria cutanea tarda. También es mencionable la contribución de las ROS, TRP y GC al descenso de la PEPCK. Los resultados de esta Tesis tienen implicancias en el campo de la toxicología, medicina y de la química biológica.

Abstract:
This Thesis work was performed using Wistar rats as experimental animals and drugs such as hexachlorobenzene to induce chronic porphyria, and 2-allyl-2- isopropylacetamide combined with 3',5'-diethoxycarbonyl-1,4-dihydrocollidine to model acute porphyria. Thus, both modeled pathologies were related with significant alterations in several aspects of carbohydrates metabolism (catabolic and anabolic pathways of glycogen, glucose and its transport), of oxidative metabolism (which leads to production of reactive oxygen species, ROS), of tryptophan (TRP) and glucocorticoids (GC) (levels, synthesis and receptor), all fields that have been very poorly studied in porphyrias. In addition, metabolic and hormonal inter-relations and inter-regulations were established between heme metabolism (where defects generate porphyria), the metabolisms above mentioned, that of GC and insulin, with particular attention on phosphoenolpyruvate carboxykinase (PEPCK) activity, key regulatory enzyme of gluconeogenesis. Thus, hormonal and metabolic disturbances found in experimental models of both chronic and acute porphyria, converge and account for a decrease in the availability of glucose in the hepatocyte that would modulate the porphyria, exacerbating the regulatory enzyme of heme pathway, ALA-synthase. Furthermore they could explain why the beneficial effect of the glucose administration in the therapy of porphyrias, especially of acute porphyria, which is the most dangerous since it is a life-threatening disease. It is also noteworthy the beneficial effect of melatonin, observed in three metabolisms investigated in acute porphyria, here reported. Just as the important hormonal disruption found at the level of GC, both in plasma as well as in the adrenal synthesis and hepatic receptors in chronic model of porphyria cutanea tarda. Also worth of mentioning is the contribution of ROS, TRP and GC to the PEPCK decrease. The results of this Thesis have implications in fields of toxicology, medicine and biological chemistry.

"Cómputo secuencial eficiente de cotas ajustadas, y su impacto en la performance de los análisis de programas basados en SAT" (2014-06-13). Ponzio, Pablo Daniel. Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires

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Resumen:
Dada una descripción formal de los estados válidos del heap -por ejemplo, un invariante de una estructuras de datos- las cotas ajustadas para los campos del heap son el conjunto de los valores que pueden tomar los campos en alguna instancia válida. Así, los valores de campos que no pertenecen a las cotas ajustadas pueden ser ignorados por los análisis automáticos (acotados) de código, reduciendo así el espacio de estados a explorar, y mejorando la performance del análisis. Sin embargo, el cómputo de cotas ajustadas es costoso. El único enfoque conocido que computa estas cotas en un tiempo aceptable, TACO+, es intrínsecamente paralelo, y requiere de un cluster con varias computadoras para su ejecución eficiente. En este trabajo se aborda el problema de computar eficientemente cotas ajustadas en entornos de ejecución secuenciales. Así, se presentan dos nuevos enfoques para resolver este problema. El primero, denominado bottom-up, utiliza un procedimiento de decisión basado en SAT para visitar instancias válidas del heap, y computa cotas ajustadas usando los valores de los campos de estas instancias. bottom-up, al igual que TACO+, requiere de una especificación en algún lenguaje declarativo de alto nivel -como JML para JAVA- de los estados válidos del heap. De esta manera, bottom-up y TACO+ generan cotas ajustadas equivalentes. El segundo, SLBD, se basa en una especificación del heap en términos de un predicado inductivo de la lógica de separación. Este enfoque computa cotas ajustadas mientras realiza (un número finito de) desplegados del predicado inductivo de entrada. En algunos casos SLBD puede producir cotas ajustadas diferentes a las de TACO+ (y bottom-up). Se evaluaron experimentalmente los enfoques bottom-up, SLBD y la técnica relacionada TACO+, en la generación de cotas ajustadas para varias clases contenedoras JAVA. Los resultados muestran que, en un ambiente de ejecución secuencial, bottom-up es un orden de magnitud más rápido que TACO+ (secuencializado), y que SLBD es dos órdenes de magnitud más rápido que bottom-up. Además, se evaluó el impacto de las cotas ajustadas generadas por nuestros enfoques en la veri ficación de código y en la generación exhaustiva de estructuras (que satisfacen un predicado) basados en SAT. Los resultados indican que los enfoques que computan cotas ajustadas secuencialmente (vía bottom-up o SLBD), y luego las aprovechan durante el análisis, son significativamente más eficientes que los análisis convencionales, que no explotan la idea de cotas ajustadas. Además, para los análisis basados en SAT mencionados, los resultados muestran que las cotas ajustadas computadas por SLBD tienen un impacto similar a las computadas por TACO+ y bottom-up.

Abstract:
Given a formal description of the feasible heap states -for example, an invariant for a data structure-, tight field bounds for heap fields are the set of values that the fields can take in any valid instance. Thus, field values that do not belong to the tight field bounds can be safely ignored by automated (bounded) program analyses, reducing the state space to be explored, and improving the performance of the analysis. However, computing tight field bounds is an expensive process. The only known approach to compute these bounds that performs reasonably, TACO+, is intrinsically parallel, and it requires a cluster of several computers to run efficiently. In this work we address the problem of computing tight field bounds efficiently under a secuential execution environment. Thus, we introduce two novel approaches to solve this problem. The first, called bottom-up, uses a SAT based decision procedure to traverse valid heap instances, and computes tight field bounds using the field values of the visited instances. bottom-up, like TACO+, requires a description of the feasible heap states in a high level declarative language -like JML for JAVA-. In this way, bottom-up and TACO+ yield equivalent tight field bounds. The second, SLBD, is based on a specification of the valid heap states in terms of a separation logic's inductive predicate. This approach computes tight field bounds during the process of unfolding its input's inductive predicate (a finite number of times). In some cases, the tight field bounds computed by SLBD and TACO+ (and bottom-up) might differ. We assessed bottom-up, SLBD and the related technique TACO+ experimentally, in generating tight field bounds for several JAVA container classes. The results show that, under a secuential execution environment, bottom-up is an order of magnitude faster than TACO+ (secuentialized), and that SLBD is two orders of magnitude faster than bottom-up. Moreover, we assesed the impact of the tight field bounds produced by our approaches in SAT based code analysis and in exhaustive bounded generation of structures (satisfying a predicate). The results show that the approaches that compute tight field bounds secuentially (via bottom-up or SLBD), and subsecuently exploit them during analysis, are significatively faster than the more conventional analyses that do not take advantage of tight field bounds. Furthermore, for the aformentioned SAT based analyses, the experiments show that the tight field bounds computed by SLBD have a similar impact to those computed by TACO+ and bottom-up.

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