Biblioteca Digital | FCEN-UBA

Biblioteca Digital ¿Por qué?
Objetivos
Impactos
Estadísticas
Documentos
Presentaciones
Notas
Autores y derechos
¿Por qué depositar?
¿Cómo depositar?
Autorización
Depositar y publicar
Editoriales
Publicar mi tesis Formulario Tesis Posgrado
Formulario Tesis Grado
Normativa
Res. CD 2053/05
Res. CD 2533/09
Res. CD 0272/13
Res. CD 2793/15

Colecciones Tesis Doctorales
Fotografías
Publicaciones
Archivo
Libros
Reportes Técnicos

Tesis > AUTOR

A B C D E F G H I J K L M N O P Q R S T U V W X Y Z

Da Re, Cristina Verónica. "Relevamiento de cepas argentinas de hongos ligninolíticos para su aplicación en procesos biotecnológicos ligados a la industria celulósico-papelera" (2016-04-15). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los materiales lignocelulósicos dan origen a múltiples industrias, siendo la fabricación de pulpa y papel una actividad económica de importancia global. Estudios previos demostraron que las enzimas de hongos ligninolíticos podrían resultar útiles en distintas etapas del procesamiento de la madera, así como en la biorremediación de los efluentes. El presente trabajo se centró en el relevamiento y la caracterización enzimática de 35 cepas de hongos causantes de pudrición blanca de la República Argentina y en su posible utilización en tres etapas específicas de la producción de pulpa y papel: biopulpado, bioblanqueo y degradación del licor negro. Los resultados de esta investigación permitieron identificar una cepa con potencial para el biopulpado de madera de Pinus taeda. Pycnoporus sanguineus no sólo fue capaz de reducir el contenido de lignina un 11% en 14 días de tratamiento, sino que también produjo cambios estructurales notables en la lignina y la hemicelulosa, incrementando la porosidad 15%. Además de la modificación química causada por delignificación selectiva, los cambios físicos producidos, como el aumento del tamaño de poro, afectan directamente la penetración de productos químicos de cocción, reduciendo el consumo de energía en el proceso. En referencia al bioblanqueo, se lograron resultados promisorios mediante una secuencia sencilla, totalmente libre de cloro, que involucró sobrenadantes de cultivo de Trametes trogii y Coriolus antarcticus, y posterior blanqueo con peróxido de hidrógeno. La misma funcionó aun en condiciones moderadas (28°C) lo que permite minimizar el consumo de energía y la pérdida de pulpa. La utilización de crudos enzimáticos evita el costo elevado de la purificación enzimática y el uso de mediadores adicionales. Entre las cepas investigadas para su posible uso en el tratamiento del licor negro, Lenzites elegans fue capaz de lograr buenos porcentajes de decoloración, y sólo requirió para ello de la disminución del pH del efluente con el agregado de ácido cítrico. Irpex lacteus también resultó capaz de decolorarlo, pero fue necesario un dializado previo. Como resultado de esta investigación, se identificaron nuevas cepas de hongos ligninolíticos con potencial en biopulpado, bioblanqueo y decoloración del licor negro y se analizaron condiciones a ser tenidas en cuenta a la hora de utilizar a estos organismos o sus enzimas en dichos procesos.

Abstract:
Lignocellulosic materials give rise to multiple industries, being the pulp and paper an economic activity of global importance. Previous studies demonstrated that fungal ligninolytic enzymes may be useful in various stages of wood processing and effluents bioremediation. This work focuses on the screening and enzymatic characterization of 35 strains of Argentinean white-rot fungi and their possible use in three specific stages of pulp and paper elaboration: biopulping, biobleaching and black liquor degradation. As a result of this research a strain with potential for biopulping Pinus taeda wood was identified. Pycnoporus sanguineus was not only able to reduce the lignin content 11% in 14 days of treatment, but also caused significant structural changes in lignin and hemicellulose, increasing the porosity of treated wood 15%. In addition to the chemical modification caused by selective delignification, the produced physical changes such as increased pore size, directly affect the penetration of cooking chemicals, reducing energy consumption in the process. Promising results were achieved through a totally chlorine free biobleaching sequence, involving culture supernatants of Trametes trogii and Coriolus antarcticus and a subsequent step of hydrogen peroxide bleaching. This sequence was functional even under mild conditions (28°C), thus minimizing power consumption and pulp loss. Using crude enzyme avoids the high cost of enzyme purification and the need of additional mediators. Among the strains investigated for their potential use in the treatment of black liquor, Lenzites elegans was able to attain good levels of decolorization, and only required lowering the pH of the effluent with citric acid addition. An important decolorization was also achieved by Irpex lacteus but only after the dialyzation of the effluent. As a result of this research, new strains of ligninolytic fungi with potential for biopulping, biobleaching and black liquor decolorization were identified, and several parameters that may affect the use of these organisms or their enzymes in the pulp and paper industry, were optimized.

Dada, Laura Andrea. "Mecanismos de transducción de receptores de hormonas proteicas : Relación entre sistemas adenilato ciclasa dependientes e independientes" (1996). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Dadon, José Roberto. "Pteropoda euthecosomata del mar epicontinental argentino y adyacencias" (1989). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Daicz, Sergio. "Estructura electrotónica de neuronas motoras de sanguijuela" (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Las neuronas son células con estructuras tridimensionales complejas adaptadas a su función. Poseen extensos árboles neuríticos, en los que pueden recibir señales de otras neuronas en distintos puntos de su estructura. Las neuritas funcionan como cables, cuyas propiedades morfológicas y las propiedades eléctricas de la membrana determinan cómo se propagarán las señales. Los registros electrofisiológicos intracelulares nos permiten conocer con gran precisión la evolución en el tiempo del potencial de membrana para un punto de la neurona. La actividad registrada puede provenir desde distintos puntos del árbol neurítico. Las señales originadas en el punto de registro o cerca de él serán registradas con gran fidelidad, mientras que las señales originadas en puntos lejanos sufrirán una atenuación. Dada la extensión de los árboles neuríticos, las complejas transformaciones que sufren las señales al propagarse por ellos, y nuestra limitada capacidad de observación, un modelo biofísico puede resultar muy útil para entender e interpretar las observaciones realizadas. El efecto de la atenuación de señales dentro de una neurona es particularmente notable en el caso de las neuronas motoras de la sanguijuela, en las que los potenciales de acción que se registran en el soma llegan con una amplitud de unos pocos milivolts. En este trabajo estudiamos la transmisión de señales graduales dentro de las neuronas motoras AE, a partir de la construcción de modelos morfoeléctricos de las mismas. En los Capítulos 2 y 3 analizamos su anatomía y fisiología, obteniendo los modelos morfológicos detallados y los parámetros necesarios para construir un modelo biofísico. En el Capítulo 4 construimos modelos a partir de los datos obtenidos. Simulamos la propagación de corriente a lo largo del tronco principal de la neurona y analizamos su atenuación en ambos sentidos. A través de alteraciones en la morfología analizamos qué aspectos de la misma son los más relevantes en determinar la atenuación. En el Capítulo 5 desarrollamos una técnica novedosa de deconvolución del potencial observado que nos permite estimar la corriente en un punto remoto que dio lugar a la observación, y la aplicamos a los potenciales de acción registrados para estimar su forma en el origen. Nuestros resultados sugieren que la morfología puede ser responsable de gran parte de la atenuación observada.

Abstract:
Neurons are cells with complex three dimensional structures adapted to their function. They have extensive neuritic trees, in which they can receive signals from other neurons at different points of their structure. Neurites function as cables, whose morphology and the electrical properties of the membrane establish how signals propagate. Intracellular electrophysiological recordings allow us to know with great precision the temporal evolution of the membrane potential at a point of the neuron. The recorded activity may come from different points of the neuritic tree. Signals originated at the recording point or near it will be recorded with great fidelity, while signals originated in distal points will suffer attenuation. Given the extent of neuritic trees, the complex transformations that signals suffer when they propagate through them, and our limited capacity of observation, a biophysical model can be a very useful tool to understand and interpret the observations made. The effect of signal attenuation within a neuron is particularly notable in the case of the motor neurons of the leech, where action potentials reach the soma with an amplitude of only a few millivolts. In this work, we study gradual signal transmission within the AE motor neurons, basing us on the construction of morphoelectrical models of the neurons. In Chapters 2 and 3 we analyze their anatomy and physiology, obtaining detailed morphological models and the parameters necessary for building a biophysical model. In Chapter 4 we build models using the data obtained. We simulate current propagation through the main trunk of the neuron and we analyze its attenuation in both directions of propagation. Using variations of the morphology we analyze what aspects of it are most relevant in establishing the attenuation. In Chapter 5 we develop a novel technique consisting in deconvolving the observed potential, which allows us to estimate the current at a remote point where the signal originated. We apply it to the recorded action potentials to estimate their shape at the origin. Our results suggest that morphology may be responsible for most of the observed attenuation.

Daleo, Gustavo Raúl. "Propiedades bioquímicas de los microtúbulos : Asociación de componentes lipídicos y actividades enzimáticas relacionadas" (1976). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Dalvit, Pedro. "Levaduras vínicas de las uvas de Mendoza" (1940). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Damonte, Elsa Beatriz. "Arenavirus : Persistencia de los virus Junín (FHA) y Tacaribe en células cultivadas in vitro" (1978). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Daneri, María Florencia. "Aprendizaje espacial en el anfibio anuro Bufo arenarum. Estrategias, fenómenos y bases neurales" (2010). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La presente tesis es un estudio de las estrategias, los fenómenos y las bases neurales del aprendizaje espacial en el sapo común Bufo arenarum. El análisis de las estrategias de aprendizaje espacial demuestra que estos animales son capaces de orientarse utilizando tanto una estrategia de guía (mediante el uso de claves visuales ambientales) como una estrategia de giro (tomando como referencia su propio cuerpo). Además, que esta última estrategia es la predominante si las claves ambientales brindan información contradictoria. También se pudo determinar la presencia de cuatro fenómenos del aprendizaje: el efecto de la distancia de la clave visual al refuerzo, el bloqueo y el ensombrecimiento entre claves y la inhibición latente. Estos fenómenos fueron ampliamente descriptos en otras clases de vertebrados, y por primera vez observados en anfibios en este trabajo. Al explorar las bases neurales de este tipo de aprendizaje, se pudo establecer el papel fundamental del pallium medial (área homóloga al hipocampo) para la orientación en el espacio, tanto mediante el uso de claves visuales como mediante el uso de la estrategia de giro. Estos resultados revelan que el hipocampo de los mamíferos y el pallium medial de los anfibios no tienen una equivalencia funcional completa.

Abstract:
This thesis is a study of the strategies, phenomena and neural basis of the spatial learning in the common toad Bufo arenarum. The analysis of the strategies of the spatial learning shows that these animals are capable of orientation using both a guide strategy (using environmental visual cues) as a turn strategy (taking their own body as a reference). Furthermore, the latter is the preferred strategy if the environmental cues provide contradictory information. The presence of four learning phenomena has been also determined: the effect of the distance between the visual cue and the reinforcer, blocking and overshadowing between visual cues and latent inhibition. These phenomena have been previously described in other classes of vertebrates, and first time observed in amphibians in this work. By exploring the neural basis of this type of learning, the key role of the medial pallium (mammalian hippocampus homologue area) for spatial orientation has been established, both for the use of visual cues as for the use of a turn strategy. These results reveal that the mammalian hippocampus and the amphibian medial pallium do not have a complete functional equivalence.

Dans, Silvana L.. "Ecología poblacional del delfin oscuro Lagenorhynchus obscurus (Gray, 1828) en el Litoral Patagónico, Atlántico SudOccidental" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo general de esta Tesis comprende el estudio de la biología y ecología de la población de delfines oscuros. Lagenorhynchus obscurus, en Patagonia, Argentina, y particularmente la obtención de los parámetros necesarios para evaluar el estado y tendencia de la población y los efectos dela captura incidentalen pesquerias. Con el objetivo de analizar el rango de distribución de la especie en el litoral patagónico, se recopiló información a partir de: observadores entrenados a bordo de buques pesqueros y oceanográficos o ejemplares capturados accidentalmente en redes de pesca; observadores entrenados durante relevamientos aéreos; capitanes, patrones y marineros de buques pesqueros durante actividades de pesca; observadores menos entrenados y registros previos disponibles en la literatura. Los delfines oscuros se distribuyen desde Porto Alegre, Brasil (30°S), hasta Bahía Nassau (55°26'S 67°18'W), cerca de Cabo de Hornos, y desde la linea de costa hasta las 200mn (límite de la Zona de Exclusión Económica). El tamaño medio de las manadas avistadas en los relevamientos aéreos fue de 3,85 delfines/grupo, y aproximadamente el 95% de las manadas estuvieron formadas por menos de 10 individuos. Los pescadores por el contrario avistaron una mayor proporción de manadas formadas por 20-50 delfines y de más de 50 delfines. Se estudió la abundancia de los delfines oscuros entre los paralelos 40°44' y 47°S, estimando la densidad mediante transectas de línea desde una aeronave, analizando los datos con el programa DISTANCE2.2. La densidad fue estimada en 1.259 delfines/mn2 para el área comprendida entre Punta Ninfas e Isla Rasa (43° a 45°S), y en 0,219 delfines/mn2 en el Golfo San Jorge, y la diferencia fue estadisticamente significativa. El número de individuos y sus coeficientes de variación para los dos estratos fueron 4.570 (CV=32,88%) y 2.058 (CV=31,84%), respectivamente, con una estimación para las dos áreas agrupadas de 6.628 individuos (CV=25.54%). La distribución espacial de los avistajes sugiere la concentración de los animales en determinadas zonas. Se analizaron datos de edad, talla y estado reproductivo de 50 ejemplares de delfines oscuros, provenientes de la captura incidental o hallados muertos en las playas. La edad máxima registrada fue de 27 años en un individuode sexo desconocido. Las longitudes máximas registradas fueron 174 y 173cm en las hembras y en los machos respectivamente. La longitud asintótica en las hembras fue estimada en 167cm. A partir del análisis de gónadas, la edad de madurez sexual en las hembras fue estimada alrededor de los 6 años. La tasa de ovulación fue constante respecto de la edad, y estimada en 0.40 ovulaciones/año. El 45% de las hembras eran maduras, del cual el 44% estaban preñadas. Estos resultados sugieren un ciclo de cria bianual. Con el objetivo de caracterizar a la población de delfines oscuros del litoral patagónico, se analizó la estructura de la comunidad de parásitos gastrointestinales, a partir de una muestra de 23 delfines capturados incidentalmente en la pesquería de arrastre de Patagonia. Todos los delfines estaban infectados con un total de 3.936 individuos. Solamente cinco especies estuvieron presentes, de las cuales tres fueron clasificadas como componentes (Prevalencia ≥ 10%): Anisakis simplex, Braunina cordifonnis y Hadwenius sp. A. símplex presentó una prevalencia de 100%, y mostró las máximas abundancia e intensidad media (104,87 ind./hosp. infectado). B. cordiformis presentó una alta prevalencia de 86,96%. mientras que Hadwenius sp. se presentó con una prevalencia de 52.17%. El indice de diversidad de Brillouinpara la comunidad de helmintos intestinales fue 0,329 nit/individuo, con una equitatividad de 0,393. La diversidad y riqueza de las infracomunidades intestinales están dentro del rango de las de otros pequeños cetáceos. Las más altas tasas de captura incidental de delfines oscuros en la costa de Patagonia, han sido registradas en artes de arrastre pelágico para la pesca de langostino. El uso de este arte comenzó en 1982. Durante 1984, el esfuerzo de pesca ejercido alcanzó su valor máximo y el número de delfines capturados durante ese año fue estimado en 442-560 individuos, disminuyendo paulatinamente luego de este período. El uso de las redes pelágicas fue registrado hasta 1994, cuando las estimaciones de capturas anuales alcanzan un valor minimo igual a 36 delfines. La composición de edades de la muestra de la captura incidental presentó una mayor proporción de hembras que de machos, y la edad media de las hembras fue de 6 años y con poca dispersión. Esta muestra no sería representativa de la estructura de edades de la población, existiendo posiblemente mortalidad selectiva hacia los individuos cercanos a la madurez sexual. La estmctura de edades a la muerte, obtenida de individuosmuertos hallados en las playas, sugiere un patrón de mortalidad edad-especifica constante con la edad. Como último objetivo, se analizó la capacidad potencial de la población de revertir una posible declinación. La Comisión Ballenera Internacional recomienda establecer valores críticos en función de la tasa máxima de incremento poblacional expresada como R=λ-1,donde λ es la tasa finita o anual de incremento. La obtención de este parámetro se basó en la utilizaciónde tablas de vida modelo de otras especies de grandes mamíferos. Se utilizó una simulación de Monte Carlo para incorporar la incertidumbre en los parámetros (edad de primera reproducción, patrón de supervivencia, tamaño poblacional, capturas incidentales). La tasa de incremento se calculó a partir de un modelo basado en la matriz de Leslie, considerando solamente la fracción hembra de la población. Para la fertilidad se asumió una tasa anual de preñez constante can la edad correspondiente a un ciclo de cría de 2 o de 3 años y una relación de sexos al nacer de 1:1. Se consideró la edad de primera reproducción a los 7 años. En el caso de la supervivencia edad-específica, del espacio definido por el conjunto de curvas de supervivencia modelo se seleccionaron al azar curvas para el delfín oscuro. Mediante esta aproximación, se obtuvo una distribución de probabilidades de la tasa anual o finita de incremento. Los valores medianos fueron estimados en 1,79% para un ciclo de cria de 3 años y en 4,30% para un ciclo de cria de 2 años. Los valores obtenidos de tasa potencial de incremento poblacional se compararon con las tasas de captura, teniendo en cuenta las estimaciones de densidad para 1994-1995 y las capturas anuales mínimas y máximas estimadas para el período 1982-1995. Considerando como valor crítico a 1/2R, la tasa máxima de extracción se encontrarla en el orden del 2% del tamaño poblacional, y según el criterio 1/4R seria del 1% del tamaño poblacional, en las mejores condiciones reproductivas y el escenario más optimista de un ciclo de cria de 2 años. La incorporación de la incertidumbre tanto de los parámetros demográficos como de las tasas de captura, permite concluir que existe una probabilidad de 0,56 de que las capturas (estimadas para 1994), excedan el valor criticomás conservador, aún en las mejores condiciones reproductivas. Estos resultados, junto con el carácter dinámico de la pesqueria, la cual incluye un aumento en el esfuerzo de pesca con redes pelágicas, permiten sugerir que la especie presenta un carácter de vulnerable, requiriendo un seguimiento y evaluación continuos, y estimaciones precisas de tasas de captura.

Abstract:
The general objective of this work is the study of the biology and ecology of the dusky dolphin population off the coast of Patagonia, Argentina. In particular the objective included the estimation of parameters needed for the evaluation of the status and trend of the population and the effects of incidental catches in fisheries. Distribution of dusky dolphins off the coasts of Patagonia were reviewed by analysing information gathered by trained observers onboard vessels and aeroplanes, fishermen, entanglements in fishing gears and previous records in the literature. Dusky dolphins have been sighted from Porto Alegre, Brazil (30°S), to Bahía Nassau (55°26'S 67°18'W), near Cape Horn, and from the coast to the 200nmiles. The mean school size sighted from aerial surveys was of 3.42 dolphins/group and nearly 95% of herds (n=64) were equal to or less than 10 individuals. Fishermen sighted a larger proportion of schools ranging from 20 to 50 dolphins or more than 50 dolphins. The abundance of the species along the coasts of Patagonia was studied between 40°44'S and 47°. Line transect methods by means of aerial surveys, were applied to estimate the density of dolphins, and the data were analyzed using the program DISTANCE 2.2. Density was estimated in 1.259 dolphins/nm2 from Punta Ninfas to Isla Rasa (43° to 45°S), and 0.219 dolphins/nm2 for Golfo San Jorge, and they were significantly different. The total number of dolphins were 4,570 (CV=32.88%) and 2.058 (CV=31.84%), for the two areas respectively, with a pooled estimate of 6,628 (CV=25.54%). The spatial distribution of sightings suggests concentration of animals in some areas. A sample of 50 specimens found on the beaches or entangled in fishing gears were used to study age, length and reproductive status. The maximum age was 27 years old recorded in an individual of unknown sex. Maximum length were 174 and 173cm in females and males respectively. Asympthotic length of females was estimated in 167cm. By means of age determination and gonads analysis the age at sexual maturity was estimated close to six years old in the females. Mature females showed an ovulation rate of 0.40 ovulations/year, and 45% of the females were mature and 44% of them were pregnant. These results suggest a calving interval of 2 years. The structure of gastrointestinal helminth community was studied in order to improve the knowledge about population identity. The stomachs and intestines of 23 dusky dolphins were surveyed for helminths. All the dolphins were parasitized, with a total of 3.936 helminth individuals. Only five species occurred. of which three were common (Prevalence ≥ 10%): Anisakis simplex. Braunina cordifonnis and Hadwenius sp. A. simplex was present in all the dolphins and showed the highest abundance and mean intensity (104.9 individuals/infected host). B. cordiformis was next most common (87%). and Hadwenius sp. third (52.2%). Brillouin's diversity and evenness indices for the intestinal helminth community were 0.329 and 0.393. respectively. The diversity values and species richness were within the range for other small cetaceans. Highest rates of incidental catches of dusky dolphins off Patagonian coast, mostly occur in mid-water trawling for shrimp. At present, this fishing type is declining in use, but it was wider used during 80's. The use of this gear for shrimp began in 1982. During 1984, the fishing effort reached a peak and the number of dolphins caught was estimated in 442-560, decreasing during the following years. The use of mid-water nets for shrimp was recorded up to 1994. when mortality estimates by this gear reached a minimum value equal to 36 dolphins per year. The sample recovered from the fishery seems to be biased toward females and young mature classes, showing a mean age of 6 years in the females. This sample would not be representative of the age distribution in the population, suggesting selective mortality of young classes close to sexual maturity. The structure of the ages at death, collected from dead individuals found on the beaches, would suggest constant age-specific mortality pattern. Incidental mortality rates were evaluated by comparing them with critical values established by the International Whaling Commission by means of the potential rates of increase R=λ-1,where λ is the annual or finite rate of increase. This parameter was obtained by means of model life tables from other mammals with similar life histories. A Monte Carlo approach was used for taking into account the uncertainty in the parameters (age of first reproduction, survival rates, population size and incidental mortality rates). The rate of increase was computed by a Leslie matrix population model. Reproductive parameters of the projection matrix were obtained from the estimates of the calving interval and age at sexual maturity, considering two possible scenarios: a calving interval of 2 and 3 years. The space of model life tables was randomly sampled to obtain a survival pattern for the dusky dolphin. A probability distribution of the potential rate of increase was obtained. Median values were estimated in 1.79% if the calving interval is 3 years, and 4.30% if the calving interval is 2 years. Taking into account the criterion of 1/2R, maximum removal rate is 2% of the population size, and 1% for the other criterion 1/4R, if the calving interval is 2 years, representing the best scenario. Taking into account the uncertainty in parameters estimation, the probability that mortality rates estimated for 1994. which can be considered the current rates, exceeds the more conservative critical value were estimated in 0.56 in the best scenario of reproduction. These results suggest that incidental mortality in fisheries is a cause for concern in dusky dolphin population off Patagonia. The monitoring of this population and the improving of catch rate estimates are recommended, taking into account the dynamics of the fishery. which includes the possibility of an increase in the effort of mid-water gears and consequently a potential increase in dolphins mortality.

Dansey, María Virginia. "Síntesis y actividad biológica de análogos de esteroides neuroactivos y hormonas esteroidales" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En esta tesis se detallan los resultados obtenidos en la síntesis, actividad biológica y la relación estructura-actividad de nuevos análogos de esteroides bioactivos. Por un lado, se sintetizó un análogo no hidrolizable del 21-hemisuccinoiloxi-6,19-epoxiprogesterona (21HS-6,19OP), para lo cual se desarrolló una metodología one-pot sencilla de alquilación para la posición C-21 de 20- ceto pregnanos que consiste en la formación del sililenoléter, seguido de la condensación de Mukaiyama con un aldehído. El análogo obtenido resultó ser biológicamente inactivo a diferencia de su líder. Por otro lado, se diseñaron y sintetizaron cuatro A-homoanálogos del neuroesteroide allopregnanolona. A partir de progesterona comercial, se preparó un ciclopropilcarbinol que fue sometido a un reordenamiento catiónico catalizado por ácidos y promovido por microondas para dar un A-homo-3,5-pregnadieno. Este se epoxidó regioselectivamente con dioxiranos generados in situ, con un derivado de fructosa como catalizador y oxone® como oxidante para dar los análogos. Uno de ellos resultó tener una actividad in vitro sobre el receptor GABAA similar a la pregnanolona; los otros tres resultaron levemente activos demostrando que la libertad conformacional del anillo A de 7 miembros les permitiría a los análogos alcanzar conformaciones activas. A dos de los A-homoesteroides intermediarios de la síntesis, que por poseer una funcionalidad ceto en el anillo A son análogos de progesterona, se les ensayó la actividad sobre el receptor progestágeno (PR) y mineralocorticoide (MR), encontrando que estos actúan selectivamente sobre el primero, probablemente debido a un aumento en la hidrofobicidad del anillo A.

Abstract:
This thesis describes the synthesis, biological activity and structure-activity relationships of seven novel bioactive steroid analogues. In the first part, a non hydrolyzable analogue of 21- hemisuccinoyloxy-6,19-epoxyprogesterone (21HS-6,19OP) was synthesized. To achieve this goal, a straightforward one-pot alkylation methodology at C-21 of 20-keto pregnanes was developed, consisting of silylenol ether formation followed by a Mukaiyama aldol reaction. In contrast with the lead compound, the resulting analogue was biologically inactive. In the second part, four Ahomo neurosteroids analogues where designed and synthesized. Starting from commercially available progesterone, a ciclopropylcarbinol derivative was prepared, which was subjected to an acid catalyzed-microwave promoted cationic rearrangement to give an A-homo-3,5-pregnadiene. This diene was regioselectively epoxydized with a bulky dioxirane generated in situ from a fructose derivative and Oxone®. One of the analogues exhibited an in vitro activity on the GABAA receptor similar to pregnanolone; the other three analogues where only slightly active, proving that the conformational freedom provided by the seven membered A ring would allow the compounds to explore active conformations. Two A-homo synthetic intermediates with a ketone functionality on the A ring proved to be selective progesterone receptor (PR) agonists, lacking mineralo/antimineralocorticoid activity. The selectivity achieved might be due to the enhanced hydrofobicity of the expanded A ring.

Daponte, María Cristina. "Familia Salpidae (Tunicata, Thaliacea) con especial énfasis en aspectos de la reproducción" (1994). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Darino, Martín Alejandro. "Estudio de las resistencias a roya común del maíz y a roya de la hoja del trigo" (2015-03-09). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La roya común, causada por el hongo biótrofo Puccinia sorghi Schwein. es una importante enfermedad del maíz. En la Argentina poco se conoce acerca de fuentes de resistencia, no existen híbridos comerciales identificados como portadores de resistencia durable a la enfermedad y se desconoce acerca de la estructura poblacional de P. sorghi presente en la zona núcleo de cultivo. Los objetivos del presente trabajo consistieron en: la identificación de fuentes de resistencia a la enfermedad mediante la evaluación de un set de líneas de maíz con 66 aislamientos del patógeno y con infecciones naturales a campo; evaluación de la variabilidad patogénica y molecular de los 66 aislamientos; y profundizar en el conocimiento acerca de las bases genéticas que controlan la resistencia durable en cereales para poder implementarlas en programas de mejoramiento de maíz, mediante el estudio de una variedad de trigo llamada Buck Poncho que fue identificada como portadora de resistencia durable a roya de la hoja (Puccinia triticina Erikss.). Las líneas de maíz Rp3-A, Rp1-K, Rp-GI, Rp-G5, Rp-G5JD, PIO19802, PIO28760 y PIO17570 resultaron resistentes a más del 75% de los aislamientos y en más del 78% de las localidades evaluadas. En las líneas PIO68752, PIO28427 y PIO36420 se identificó un nuevo tipo de resistencia cuya expresión comenzó en el estadio V4. Las líneas PIO12345 y PIO74876 mostraron resistencia parcial en el estadio V2. Se identificaron en la población de P. sorghi por lo menos 3 grupos de virulencia y 26 fenotipos de virulencia o razas que podrían ser 40 razas si se consideran los genotipos de AFLP. En Buck Poncho se detectaron la existencia de por lo menos tres genes de resistencia LrBP1, LrBP2 y LBP3. La combinación de los genes de resistencia detectados en las distintas líneas de maíz podría generar variedades comerciales que posean resistencia más durable. Los grupos de virulencia identificados en la población de P. sorghi no mostraron diferencias en el nivel molecular indicando que aislamientos pertenecientes a un mismo grupo de virulencia pueden tener distintos orígenes dentro de la población. La resistencia durable observada en Buck Poncho se puede explicar en parte por los efectos combinados de los genes LrBP1, LrBP2 y LrBP3 aunque no puede descartarse la presencia de genes menores y/o QTLs menores cuyos efectos sean detectados con poblaciones segregantes de mayor tamaño a la utilizada en este estudio.

Abstract:
Common rust caused by the biotrofic fungus Puccinia sorghi Schwein. is an important disease of maize. In Argentina little is known about maize lines carrying resistance to the disease, the existence of corn hybrids with durable resistance and about the existence of distinct virulence groups in the P. sorghi population. The objectives of this work were: the evaluation of a set of maize lines with 66 isolates of the pathogen and with natural pathogen population present in field in order to identify resistance sources to the diseases; the study of the population structure of P. sorghi population; and in order to deepen the knowledge about the genetic basis that control durable resistance, genetic and molecular studies of a wheat variety called Buck Poncho that was identified as durable resistance to wheat leaf rust (Puccinia triticina Erikss.) were performed. Maize lines Rp3-A, Rp1-K, Rp-GI, Rp-G5, Rp-G5JD, PIO19802, PIO28760 and PIO17570 were resistant over the 75% of the isolates and over the 78% of the field locations where they were evaluated. A new class of resistance was identified in maize lines PIO68752, PIO28427 and PIO36420 whose expression of the resistance began at leaf stage V4. In inbred lines PIO12345 and PIO74876 showed partial resistance at leaf stage V2. At least, 3 virulence groups were identified, 26 virulent phenotypes or races were distinguished that could become 40 races if AFLPs genotypes are considered. Three leaf rust resistance genes, LrBP1, LrBP2 and LrBP3 were identified in Buck Poncho. Pyramiding the resistant genes detected in maize lines could be a useful strategy to increase durability of the resistance. The virulence groups identified in P. sorghi population did not differ at genetic level, indicating that isolates from each group could have different origins within the population. The durable resistance observed in Buck Poncho could be explained in part by the combination effects of LrBP1, LrBP2 and LrBP3 genes and the presence of minor genes or minor QTLs whose effects could perhaps be detected in segregant populations bigger than the one that was used in this study.

Darnet, Leda María. "Sobre la composición química del aceite de semillas de "Maytenus Disticha"" (1945). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Daroqui, María Cecilia. "Caracterización del sistema TGF-ß/TßRs en carcinomas de mama y pulmón murinos. Rol en la progresión tumoral" (2004). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo analizamos el rol de TGF-β en la progresión tumoral, empleando dos modelos de adenocarcinoma murino, de mama y de pulmón. Nuestro modelo de tumor de mama está constituido por los tumores parentales M3 y MM3, poco y altamente metastásicos, respectivamente, y por las lineas celulares derivadas LM3 y LMM3, altamente invasivas y metastásicas. Todas las células de nuestro modelo expresan el sistema completo TGF-β y sus receptores específicos TβRs, y éste es funcional. Además, mediante estudios in vitro determinamos que TGF-β activa la vía de transducción de señales Smads y otras vias, como p38Mapk y MEK/ERK, en las células de carcinoma de mama de nuestro modelo. En cuanto a su acción biológica, TGF-β tiene un efecto antiproliferativo sobre los cultivos primarios de M3 y MM3, mientras que las líneas son resistentes a dicho efecto. Por otra parte, TGF-β induce la actividad de MMP-9 en todas las células de nuestro modelo. Determinamos por primera vez que las vías de señalización p38Mapk y MEK/ERK bloquean la inducción de MMP-9 por TGF-β y que los receptores de señalización TβRI y TβRII son esenciales en esta respuesta. Además, estudiamos el rol de TGF-β sobre la expresión y/o actividad de distintos componentes del sistema de activación del plasminógeno, incluyendo activadores como el uPA y el uPA unido a membrana, e inhibidores como PAI-1. Detectamos que TGF-β inhibe el balance neto de este sistema en las células poco metastásicas, mientras que lo estimula en las células de fenotipo más agresivo. Por otro lado, analizamos la función de TGF-β en la reorganización del citoesqueleto de acfina y determinamos que TGF-β no modula las tropomiosinas ni la proteina HSP27, moléculas relacionadas con actina. Sin embargo, demostramos por primera vez que la actividad del complejo Arp2/3, fundamental en la polimerización de actina, aumenta en respuesta a TGF-β,si bien su consecuencia biológica debe aún esclarecerse mediante otros estudios. Además, TGF-β induce una leve remodelación de la actina cortical en nuestro modelo, sin producir cambios fenotípicos como la formación de fibras de stress y la transición epitelio-mesenquimática como ocurre en sistemas epiteliales no-tumorigénicos. Asimismo, determinamos que la via de señaligación MEK/ERK bloquea la formación de fibras de stress en las células tumorales en estudio y que además está involucrada en la inducción de la migración celular por TGF-β, junto con la vía p38Mapk. Por otra parte, TGF-β estimula la capacidad invasiva in vitro de todas las células de nuestro modelo de tumor de mama. Observamos que la presencia de TβRI y TβRII funcionales, así como las vías de señalización p38Mapk y MEK/ERK, son esenciales en este proceso. Estos datos son muy novedosos, ya que no ha sido descripto previamente un mecanismo de acción de TGF-β en la invasión celular. Mediante estudios in vivo determinamos que TGF-β no modula la capacidad angiogénica en nuestro modelo. Por otro lado, empleando células LM3 transfectadas con formas dominantes negativas de los receptores de señalización de TGF-β, encontramos que la tasa de crecimiento tumoral y la capacidad metastásica de las células de adenocarcinoma mamario en estudio dependen de un sistema funcional TGF-β/TβRs. Por otro lado, estudiamos el sistema TGF-β/TβRs en la línea de adenocarcinoma de pulmón LP07, altamente metastásica. Encontramos que estas células han perdido la capacidad de expresar la proteina TGF-β, respecto del tumor P07 que le dio origen. Además, determinamos que las células LP07 expresan los receptores de señalización TβRI y TβRII. Por medio de estudios in vitro detectamos que si bien las células LP07 no producen TGF-β, la via de Smads y otras vías de transducción de señales pueden ser activadas por TGF-β, por lo que son capaces de responder a la citoquina. Así, TGF-β es un potente inhibidor del crecimiento de LP07. Además, TGF-β inhibe marcadamente la actividad de las proteasas uPA y MMP-2 en las células LPO7 y controla su motilidad in vitro. Y también es capaz de inhibir la angiogénesis in vivo de LP07. De este modo, nuestros resultados indican que TGF-β podría funcionar como un supresor tumoral en nuestro modelo de adenocarcinoma de pulmón, y que la pérdida de funcionalidad del sistema TGF-β/TβRs podria contribuir a la progresión tumoral en estas células.

Abstract:
In the present work we have studied the role of TGF-β in tumor progression, by using a mammary and a lung murine adenocarcinoma experimental models. The mammary tumor model is composed by two closer related tumors, the poorly metastatic M3 and the highly metastatic MM3 ones, as well as the derived highly invasive and metastatic cell lines, LM3 and LMM3. We determined that all these cell types express both TGF-β and its receptors (TβRs), so they present the complete TGF-β/TβRs system. By in vitro studies we found that TGF-β induces the activation of different signaling pathways in our model, including Smads, p38Mapk and MEK/ERK. Besides, TGF-β exerts an antiproliferative action on M3 and MM3 primary cultures while the derived cell lines are resistant to this effect. On the other hand, TGF-β estimulates MMP-9 activity in all the cell types of our tumor model. We show here for the first time that p38Mapk y MEK/ERK pathways block MMP-9 by TGF-β, as well as that the TGF-β signaling receptors, TβRI and TβRII, are key components of this response. We also studied the role of TGF-β on the expression and/or activity of distinct components of the plasminogen activation system, including activators like uPA and membrane-bound uPA and inhibitors like PAI-1. We found that TGF-β inhibits the net balance between activators and inhibitors in the poorly metastatic cells, enhancing it in those cells with the more aggressive phenotype. On the other hand, we studied TGF-β action on actin cytoskeleton reorganization and we determined that TGF-β is not able to modulate the actin-related molecules tropomyosins and HSP27. However, we show here for the first time that TGF-β enhances Arp2/3 complex activity, although its biological significance remains to be fully determined. Besides, we found that TGF-β induces only a slight remodelling on the cortical actin in our tumor model, without affecting the cellular phenotype like the formation of stress fibers and the epithelial-to-mesenchymal transition showed by some normal epithelial cells. We also demonstrate that the MEK/ERK pathway blocks stress fiber formation in the tumor cells studied here, and that this pathway is also implicated in TGF-β-mediated cell migration, together with the p38Mapk pathway. Besides, we found that TGF-β induces the in vitro invasive ability of all the cell types studied here, and that this effect requires TβRI and TβRII activity as well as p38Mapk and MEK/ERK pathways. This is the first time that a signaling pathway is implicated in TGF-β-induced cellular invasion. By in vivo studies we showed that TGF-β is not able to modulate the angiogenic ability of the mammary tumor cells studied here. Finally, by using LM3 cells stably transfected with dominant negative forms of TGF-β signaling receptors, we determined that the tumor growth rate as well as the ability to form metastases depend on a functional TGF-β/TβRs system. On the other hand, we studied the role of the TGF-β/TβRs system in the highly metastatic lung tumor LP07 cell line. We found that LP07 cells do express TβRs but they have lost the ability to express TGF-β at the protein level showed by P07 parental cells. Using in vitro studies we detected that despite LP07 cells do not produce TGF-β, Smads and other signaling pathways can be activated by TGF-β, so these cells are able to respond to the cytokine. Besides, TGF-β markedly inhibits the activity of proteases like uPA and MMP-2 in LP07 cells as well as it reduces the in vivo angiogenic ability of these cells. So, our data suggest that TGF-β could function as a tumor suppressor in our lung tumor model, and that a disruption in the TGF-β/TβRs system regulation may thus contribute to tumor progression.

Dassen, Claro Cornelio. "Metafísica de los conceptos matemáticos fundamentales (espacio, tiempo, cantidad, límite) y del análisis llamado infinitesimal" (1901). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Dasso, Sergio. "Emisión de ondas por Resonancia Iónica Ciclotrónica en Plasmoides Interplanetarios expulsados por el sol" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En esta tesis se realiza un estudio teórico de las condiciones de excitación de las ondas electromagnéticas iónicas ciclotrónicas (EICWs) en los plasmoides interplanetarios expulsados por el Sol (o eyecciones de masa coronal, CMEs). Cuando el viento solar es perturbado por estas eyecciones de plasma provenientes del Sol, la actividad de ondas cambia radicalmente. Mientras que en las condiciones típicas correspondientes al viento solar rápido están dadas las condiciones para la actividad de las ondas de polarización izquierda, cuando el viento es reemplazado por plasmoides interplanetarios de origen solar, el cambio de los parámetros físicos relevantes favorece la actividad de la rama de polarización derecha. Hemos caracterizado el espacio de parámetros típico de estos plasmoides y estudiamos, mediante la teoría cinética en plasmas magnetizados, las condiciones para la emisión y absorción de estas ondas. Hemos determinado fronteras del espacio de parámetros entre regiones estables e inestables. Para considerar la presencia de partículas supratérmicas hemos modelado la función de distribución de una fracción de la población de partículas del plasma con funciones Kappa. En un plasma de protones y electrones la inestabilidad resonante de las EICWs requiere ordinariamente grandes valores para el beta del plasma (beta aproximadamente 1 o mayor), sin embargo, hemos encontrado que las CMEs a pesar de su bajo valor de P son objetos con otras propiedades cinéticas favorables para el desarrollo de esta inestabilidad. Dada la gran heterogeneidad que caracteriza a estos objetos no todos ellos serán emisores de EICWs, sino que existe un subconjunto de CMEs con propiedades térmicas propicias para la amplificación de estas ondas. Se han encontrado configuraciones de parámetros, consistentes con las observaciones, en las que los tiempos característicos de crecimiento de la inestabilidad son mucho menores que los tiempos típicos de la evolución de la estructura interplanetaria, y en las cuales es posible la amplificación de las ondas en tiempos en los que la configuración de parámetros de la estructura interplanetaria se mantiene esencialmente constante. Estos resultados son de gran importancia para comprender la microturbulencia que ha sido observada en estos objetos por el satélite Wind. Hemos realizado un estudio estadístico de los parámetros de configuración de los CMEs, con el objetivo de seleccionar aquellos eventos con propiedades favorables para el desarrollo de la inestabilidad de los EICMs. Se analizaron datos aún no publicados de la sonda espacial Wind y específicamente se estudiaron: un conjunto de Halo-CMEs y un conjunto de nubes magnéticas interplanetarias. Los eventos que se consideran para este estudio han sido observados en forma continuada por la sonda Wind desde diciembre de 1996 hasta noviembre de 1997 (para Halo-CMEs) y desde febrero de 1995 hasta noviembre de 1998 (para nubes magnéticas). Finalmente, en base a los resultados de nuestro estudio estadístico, se selecciona la nube magnética que observó Wind el 7 y 8 de agosto de 1996 y se examinan las posibilidades de emisión de EICWs en este evento.

Davies Sala, Carol G.. "Desarrollo de nuevas estrategias antimicrobianas: silenciamiento de genes bacterianos mediante tecnología antisentido" (2016-03-28). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La emergencia de enfermedades infecciosas causadas por bacterias multiresistentes y la falta de antibióticos para su tratamiento constituyen una amenaza para la salud global. Ante la necesidad de desarrollo de nuevos antimicrobianos se ha considerado la posibilidad de emplear técnicas de silenciamiento génico mediado por ARNs antisentido. Una de estas estrategias de silenciamiento es la denominada tecnología EGS, que se encuentra mediada por la Ribozima P o ARNasa P, una ribozima presente en todos los dominios y que en bacterias Gram negativas está conformada por una subunidad ARN-catalítica y por otra proteica. La ARNasa P participa en la maduración de los ARN de transferencia generando el extremo 5´ maduro por un corte simple endonucleolítico de su precursor. Esta propiedad puede emplearse para mediar el corte de una molécula de ARN blanco - cuya expresión quiera ser silenciada- en presencia de un oligorribonucleótido complementario, conocido como External Guide Sequence (EGS). Una vez formado el dúplex ARN blanco : EGS, este complejo puede ser reconocido por la ARNasa P como sustrato y entonces promover el corte endonucleolítico del ARN blanco, inactivándolo. El objetivo global en el que se enmarca este trabajo de tesis consiste en evaluar estrategias de silenciamiento génico mediante tecnología antisentido como posibles antimicrobianos o para prolongar el uso de los antibióticos ya existentes. En este trabajo de tesis doctoral se exploró la posibilidad de inhibir la expresión de genes bacterianos a través del uso de tecnología EGS antisentido. Inicialmente se trabajó con cepas de Escherichia coli y como blanco se eligió al ARN mensajero del gen ftsZ cuyo producto, la proteína FtsZ es un análogo bacteriano de la tubulina y esencial para la división celular. Tanto la expresión de estos pequeños ARNs antisentido dirigidos contra el mensajero ftsZ como la administración exógena de análogos de ácidos nucleicos no hidrolizables por nucleasas bacterianas, generaron una inhibición de la división celular, originando un cambio en la morfología de las bacterias y una disminución de la viabilidad de las células tratadas. Estos resultados apoyan la idea que los EGSs dirigidos contra genes vitales bacterianos podrían considerarse como potenciales antimicrobianos. Con la intención de explorar la aplicación de esta tecnología de silenciamiento génico a una especie bacteriana de importancia clínica creciente, se logró identificar, clonar, transcribir y purificar los componentes de la ribozima P de Acinetobacter baumannii. Posteriormente, la ribozima se reconstituyó in vitro, presentando actividad tanto en presencia de un sustrato natural (pre-ARNtTyr) como de un sustrato bimolecular compuesto por una dupla ARNm-EGS. De esta manera, se generó un sistema de evaluación in vitro de EGSs candidatos para Acinetobacter baumannii, paso previo a la realización de ensayos in vivo sobre esta especie bacteriana.

Abstract:
The emergence of infectious diseases caused by multi-resistant bacteria and the lack of traditional antibiotics for its treatment are a concerning threat for global health. Facing the need for development of new antimicrobials, gene silencing through antisense RNAs have been considered as a viable solution. One of these antisense strategies is called EGS technology which is mediated by ribozyme P or RNase P, a ribozyme present in all domains of life that in Gram negative bacteria is composed of two subunits: one catalytic – RNA and another peptidic. The RNase P processes pre-transfer RNA, maturating the 5´end by a simple endonucleolitic cut of its precursor. This property can be used to cut any other target RNA molecule in the presence of a complementary oligoribonucleotide, known as External Guide Sequence (EGS). Once the duplex target-RNA: EGS is formed can be recognized by the ribozyme P as a substrate and hence cut the RNA target, leading to its inactivation. The general purpose in which this thesis work is immersed consists on the evaluation of different gene silencing strategies through antisense technology and their use as possible antimicrobial agents or to extend the usage of already existent antibiotics. In this thesis work the possibility of inhibiting bacterial gene expression through EGS antisense technology was explored. Initially, strains of Escherichia coli were employed and ftsZ mRNA was selected as target. FtsZ protein is a bacterial tubulin analogue essential for cell division. Expression of RNA-EGSs targeting ftsZ mRNA as well as exogenous administration of EGSs composed of nucleic acid analogues non hydrolysable by bacterial nucleases, led to a change in bacterial morphology and a decrease in cell viability, elicited by an impaired cell division. These results support the idea that EGSs targeting bacterial vital genes could be considered as potential antimicrobial agents. Pursuing the intention to apply this gene silencing technology to a bacterial species with growing clinical importance, the components of the ribozyme P from Acinetobacter baumannii were identified, cloned, transcribed and purified. Then, the RNase was reconstituted in vitro, showing activity in the presence of a natural substrate such as pre-tRNATyr and also with a bimolecular substrate conformed by mRNA and EGS. Thereby an in vitro evaluation system was generated in order to select candidate EGSs for Acinetobacter baumannii, previous procedure to in vivo assays.

De Agostini, Heberto Ruben. "Separación toxicológica de algunos barbitúricos por electrodiálisis" (1950). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Las tóxicos se dividen desde el punto de vista de la electrodiálisis en: tóxicos rápidos, como son el arseniato de sodio, sulfato de ectricnina y en general los electrolitos fuertes, y en tóxicos lentos, como el Veronal, Luminal y en general los electrolitos dábiles. La velocidad de electrodiálisis del veronal y luminal, puede ser aumentada considerablemente, si ce loa alcaliniza con una base débil, pues de esta manera aumenta su grado de disociación. Cuando se emplea un aparato de tres compartimientos es necesario alcalinizar con gran cantidad de base débil, para de esta manera evitar la eliminación demasiado rápida del catión y el retorno del veronal a ácido poco disociado; además esta variación de pH que se produce en el compartimiento central hace variar por accióh de masa el equilibrio del tóxico y actúa además sobre la permeabilidad de la membrana. Se llegó además al resultado experimental de que la electrodiálisis es el resultado de dos fenómenos opuestos, la electroforesis y la diálisis; pero mientras que la cantidad de sustancia transportada por electroforesis es mayor cuanto mayor es el grado de disociación de la sustancia, la cantidad de sustancia transportada por diálisis es menor, pués esta es proporcional al número de moléculas. La diálisis cuando ella provoca un transporte de sustancia en un sentido opuesto al del transporte eléctrico, alarga el fin de la electrodiálisis y puede hacerla detener, manifestándose este efecto inhibidor a un potencial llamado "potencial mínimo de electrodiálisis", para una sustancia, para una temperatura y una concentración determinada. Cuando se pasa de ln electrodiálisis de soluciones acuosas a la de medios biológicos, aparecen dos fenómenos retardadores; el primero debido e los electrolitod dializables presentes en el tejido o extracto de órganos y segundo las proteínas. Estudiando las curvas de 1 f(t) que se obtiene en estos casos, nos ha permitido aumentar la velocidad de electrodiálisis, efectuando primeramente una experiencia de una duración aproximada de 10 horas, al llegar a este punto se cambia la membrana por una nueva y se renuevan los líquidos anódicos y estódicos, siguiéndose con la operación. De esta manera se eliminan dos causas retardadoras; los electrolitos dializables y laa proteínas por un lado y la diálisis inversa por otro. Los líquidos obtenidos en esta operación son límpidos, ligeramente amarillentos los del compartimiento anódico, y de una pureza tal que al tóxico se le pueda extraer fácilmente. Las reacciones secundarias que pueden tener lugar en los electrodos que traería como consecuencia una destrucción del tóxico, son en general nulos para los derivados estudiados. Las condiciones más importantes que es necesario obeservar para llegar a resultados satisfactorios en el trabajo de electrodiálisis de tóxicos como el Veronal y Luminal son0: 1 ) Alcanilizar el compartimiento central con gran cantidad de una base débil. 2 ) Evitar aumentos de temperatura que se producen en el curso de la operación. 3 ) Renovar por lo menos unn vez la solución anódica, para eliminar en lo posible el fenómeno de la diálisis inversa. Como últimas palabras diremos, que la electrodiálisis es un método bastante conveniente para ser aplicado al análisis químico, teniendo como principal dificultad, en los casos en que se electrodializan iones muy lentos, como son los de Veronal y Luminal, su duración, que es quizá demasiado prolongada.

De Biase, Pablo Martín. "Efecto del campo eléctrico en la reactividad de porfirinas y hemoproteínas" (2008). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En la presente tesis se ha estudiado cómo afecta el campo eléctrico a las reacciones rédox y de coordinación de ligandos en hemoproteínas de membrana y en porfirinas aisladas. Las porfirinas fueron utilizadas como sistemas modelo del sitio activo de estas proteínas. En principio, a través de cálculos de estructura electrónica, se determinó cómo incluye el campo eléctrico en la energía de reacciones rédox y de coordinación de ligandos en sistemas modelos de sitios activos de hemoproteínas típicas. Con el fin de realizar un estudio experimental, se escogió una reacción en la cual se predijo computacionalmente que el efecto del campo eléctrico sería importante. Por medio de la técnica SERRS (Surface Enhanced Resonance Raman Scattering ), se midió para este sistema la constante de equilibrio de coordinación de un ligando soluble a una porfirina inmovilizada en superficie a distintos potenciales eléctricos aplicados. Posteriormente, utilizando dos estrategias distintas, se estimó la magnitud del campo eléctrico presente a cada potencial de estos experimentos. Finalmente, se estudió utilizando dinámica molecular clásica, el efecto del campo eléctrico en la reacción de disociación de un ligando en la hemoproteína completa citocromo c. Se encontró que no existe efecto del campo eléctrico sobre el sitio activo pero si sobre el resto de la proteína. Se pudo comprender como actúa un campo eléctrico modulando una reacción química tanto en sistemas pequeños y rígidos como las porfirinas, y en sistemas grandes y flexibles como las proteínas. Se identificaron cuáles son las características que debe poseer tal proceso para que sea afectado por el campo eléctrico

Abstract:
The goal of this thesis was to investigate how an electric field affects redox and ligands coordination reactions in membrane hemeproteins and in porphyrins as model systems of the active site of these proteins. In the first place, by means of quantum calculations, it was determined the influence of the electric field over redox and ligands coordination reactions energies in model systems of typical hemeprotein active sites. It was selected a reaction affected by the electric field to prove experimentally the predicted effects. Using the SERRS (Surface Enhanced Resonance Raman Scattering) tecnique, it was measured, for this chosed system, equilibrium constants of ligands coordination to surfaces immobilized porphyrins while applying different electric potentials. Then, using two different strategies, it was determined the electric field magnitudes present in the previous experiments. Finally, it was studied by means of classical molecular dynamics the electric field effects in a ligand disociation reaction in cytochrom c where it was found that there was no electric field effect at the active site but there were significant effects on the protein conformation and dynamics. It was concluded how an electric field modulates a chemical reaction in small and rigid systems as porphyrins, and in big and flexible systems as proteins. It was found which are the characteristics that a process should have to be affected by the field.

De Brasi, Carlos Daniel. "Marcadores genéticos ligados al gen del factor VIII de coagulación : Su utilidad diagnóstica en hemofilia y en el estudio del mecanismo molecular de la recombinación homóloga en meiosis humanas" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La hemofiliaA (HA)es una enfermedad hemorrágica hereditaria, ligada al sexo, causada por deficiencia del factor VIIIde coagulación (FVIII). La ruta preferida para la provisión de datos para diagnóstico molecular es la detección directa de mutaciones. Entre las mutaciones que afectan al gen del FVIII, la inversión del intrón 22 (inv22) constituye la causa de casi la mitad de las HA severas (SHA). Mediante análisis de Southern blot fueron estudiadas 47 familias Argentinas con SHA. En cercano acuerdo a lo reportado series internacionales, 19 de ellas (40%) resultaron informativas para la Inv22 y pudo proveerse diagnóstico molecular por el método directo. Dentro de éstas, 14 (79%) resultaron Inv22 tipo distal y las restantes 5 (21%), proximal. No fueron encontradas significativas asociaciones entre la presencia o no de la Inv22 en SHA, y el origen de la enfermedad (esporádica o familiar), ni tampoco con la propensión o no a desarrollar anticuerpo inhibidor neutralizante contra el FVIII terapéutico. El camino alternativo para el diagnóstico es por vía indirecta usando polimorfismos ligados a la enfermedad. Entre los polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción (RFLP) ubicados dentro del gen del FVIII, el marcador Xbal A del intrón 22 a pesar de proveer una alta informatividad en los distintos ganos étnicos analizados, fue casi excluido de la rutina diagnóstica por la lentitud y laboriosidad de su detección. Aquí se describen dos métodos rápidos, no-radioactivos, basados en PCR de larga distancia (LDPCR), para genotipificación del RFLP Xbal A. Los amplimeros de 6,6 y 6,9 kb incluyen el sitio polimórfico y un sitio constante de Xbal que provee control de digestión. La especificidad del método fue desafiada en experimentos a ciegas de muestras previamente genotipificadas por Southern blot, obteniéndose una perfecta correlación entre ambos métodos. Mediante este método, 53 cromosomas X de la población Argentina general fueron genotipificados para Xbal A, lo que permitió proyectar una informatividad de aproximadamente el 47%. Los estudios de asociaciones alélicas entre Xbal A (X) y el polimorfismo Bc/l (B) del intrón 18 del gen del FVIII, determinaron un alto, pero no-completo desequilibrio de ligamiento entre los marcadores, proyectando una informatividad combinada (X+B) del 55%. A 737 bp rio abajo del RFLP Xbal, fue localizado y caracterizado un nuevo polimorfismo bialélico, de cambio de nucleótido que afecta el sitio de reconocimiento de la enzima Mspl (CCg/aG). La genotipificación especifica del RFLP Mspl A se realiza utilizando la LD PCR específica para Xbal A como primera vuelta. seguida por una PCR anidada de 176 bp que incluye al sitio polimórfico y uno constante de Mspl para proveer control de digestión. Su análisis en las poblaciones nomiales Argentina y Británica permitió estimar una heterocigocidad de 49 y 46%, respectivamente. A pesar de su proximidad física y su desequilibrio de ligamiento, X y M proyectan una informatividad conjunta del 62% para población Argentina y 59% para la Británica. Ambos RFLPs (X y M) están incluídos en una región de 9,5 kb dentro del intrón 22 del gen del FVIII(int22h-1), que se encuentra repetida por lo menos 2 veces fuera del gen del FVIII, también sobre Xq28 (int22h-2 y -3). Para investigar los sitios correspondientes de X y M sobre los homólogos extragénicos fueron diseñados abordajes específicos similares a aquellos usados para los sitios intragénicos. Los sitios Mspl extragénicos (B y C) resultaron polimórficos en población Argentina y Británica aunque con frecuencias del alelo mucho menores a las intragénicas. La Inv22 es originada por un evento de entrecruzamiento recíproco intracromosómico por recombinación homóloga entre las secuencias int22h descriptas resultando en la interrupción inactivante del gen del FVIII en su intrón 22. Debido a (1) que los marcadores X y M ubicados dentro de int22h permiten mediante sus frecuencias alélicas diferenciar las copias intra de las extragénicas y (2) que en el cromosoma X de varones de la población normal podemos estimar el estado de estos marcadores antes del evento y en los hemofílicos con la Inv22 podemos analizar el estado de estos marcadores después del evento; se diseño una estrategia para recabar datos del mecanismo molecular que origina la Inv22 como modelo de entrecruzamiento recíproco en meiosis humanas. La aplicación del método planteando nueve hipótesis de posibles intermediarios moleculares de la Inv22 asociadas a la predicción de resultados numéricos utilizando las estimaciones sobre población de varones normales y su comparación con los datos obtenidos en el grupo de afectados con la Inv22, permitió determinar que el evento molecular de recombinación meiótica está acoplado a la conversión génica del marcador Xbal, con la secuencia extragénica como dadora de la información. El mismo análisis sobre Mspl si bien proyecta resultados similares, no permite determinado con significación estadística. El aumento de la población hemofílica para la obtención de resultados más precisos además de los estudios de mapeo de puntos calientes para rupturas meióticas de doble cadena dentro de las secuencias int22h permitirá la elucidación específica del mecanismo de la Inv22 como modelo de recombinación homóloga en meiosis humanas.

Abstract:
Haemophilia A (HA) is a sex linked inherited haemorragic disorder characterised by deficiency in the coagulation factor VIII (FVIII). Direct mutation detection in the gene is the best choice to obtain data for molecular diagnosis. Intron 22 FVIII gene inversion (Inv22) is involved in almost half of severe HA (SHA). It has been studied by Southern blot 47 Argentinean families with SHA and found inversions in 19 (40%), 15 (32%) with distal and 4 (8%) with proximal pattern. In this group of Inv22 informative families definitive information for molecular diagnosis could be provided. No significant correlation between the inheritance of the disease (either familiar or sporadic haemophilia) and the presence of inversions was found. The development of therapeutic-FVIII inhibitor in inv22-positive SHA-affected families was found increased but not significantly. The alternative route to obtain molecular information for genetic counselling is gene tracking using DNA polymorphisms. Among the restriction fragment length polymorphisms (RFLPs) in the FVIII gene, the Xbal A (intron 22) (X) despite its high informativity in almost all ethnic groups analysed, has not been frequently used in the routine because its reliable detection is tedious and labour-intensive. Two rapid, non-radioactive, long distance PCR-based methods (LD PCR) to genotype the X RFLP are described. The amplimers of 6.6 and 6.9 kb long include both the polymorphic and a constant Xbal site, which provides a digestion control. The specificity of the method was challenged by a blind experiment with genomic DNA samples previously genotyped using Southern blot analysis: a perfect correlation was obtained using both approaches. Fifty-three alleles from the Argentinean normal population were Xbal A genotyped. The results predict an informativity of 47%. Despite the high degree of allelic associations found between X and Bc/l (intron 18) (B), they predicts a combined heterozygocity (X+B) of 55%. A new polymorphism in the human FVIII gene has been localised and characterised. It is a bi-allelic single nucleotide polymorphism which affects an Mspl site (CCg/aG)located 737 bp downstream frorn the Xbal marker. The specific genotyping of the so termed Mspl A RFLP (M) requires a nested PCR approach using the X-specific LD PCR as first round and a 176 bp-long second round which includes both the polymorphic and a constant control digestion Mspl site. M genotyping from the Argentinean and the British normal population estimate an informativityof 49 and 46%, respectively. Despite their close proximity, the X and M polymorphisms are not in complete linkage disequilibnum: haplotype analysis from Argentinean and British population predict a combined informativity (X+M)of 62 and 59%, respectively. The markers X and Mare located in intron 22 of the FVIII gene within a 9.5 kb int22h-1segment. Int22h is duplicated at least twice extragenically at Xq28. Both extragenic copies (int22h-2 and —3) are also polymorphic with respect to X. There have been designed LDPCR-based methods to specifically genotype these extragenic X and M sites. The extragenic sites of both X and M resulted also polymorphic in Argentinean and British normal populations but with much lower frequencies of the allele than those obtained frorn int22h-1. Inv22 originates by an intrachromosomic crossing over due to homologous recombination between int22h-1 and int22h-2 or —3. The molecular inversion interrupts the normal sequence of the intron 22 of the FVIII gene causing SHA. Due to (1) X and M enable the discrimination of the intra from the extragenic copies of int22h by means of differences in their allelic frequencies, and (2) that there can be estimated these frequencies before the event in males from the normal population and the frequencies after the event in the Inv22-SHA population; it was possible to design an genetic testing strategy to address the molecular mechanism of the Inv22 as a model for homologous recombination in human meiosis. The inspection of the literature prompts the design of 9 possible hypothesis of the intermediaries of the mechanism involved. Each hypothesis was associated with numerical values calculated from the parameters estimated in the normal populations, to predict the results to be obtained from the Inv22-affected population. This analysis allowed us to conclude that the molecular inversion is coupled to the gene conversion from a DNA segment including the Xbal extragenic site to its intragenic homologue. The results obtained using Mspl, although similar than those using Xbal, are not statistically significant. The increase in the number of the haemophilic population in order to gain precision in the test and the investigation of meiotic double-strand-breaks hot spots within int22h would allow further insights in the molecular mechanism of the Inv22 as a model for homologous recombination in human meiosis.

De Brodtkorb, Milka K.. "Mineralogía y génesis del Yacimiento Huemul" (1963). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

De Cristóforis, Pablo. "Sistema de navegación monocular para robots móviles en ambientes interiores/exteriores" (2013). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Uno de los desafíos actuales de la robótica móvil es alcanzar el mayor grado de autonomía, es decir, lograr que un robot desarrolle sus tareas sin la necesidad de un operador humano. El objetivo principal de este trabajo es el desarrollo de un nuevo sistema de navegación autónomo basado en visión para robot móviles en entornos interiores/exteriores. El sistema propuesto utiliza sólo una cámara y sensores de odometría, no depende de ningún sistema de localización externo o infraestructura similar. Además, es capaz de tratar con variaciones en el ambiente (por ejemplo, cambios de iluminación o estaciones del año) y satisface las restricciones para guiar al robot en tiempo real. Para alcanzar el objetivo de este trabajo, se propone un enfoque híbrido que hace uso de dos técnicas de navegación visual: una basada en segmentación de imágenes y otra basada en marcas visuales. Para representar el ambiente se construye un mapa topológico que puede ser interpretado como un grafo, donde las aristas corresponden a caminos navegables y los nodos a espacios abiertos. Para recorrer los caminos (aristas) se desarrolló un método original basado en segmentación y para navegar por los espacios abiertos (nodos) se realizó una mejora y adaptación de un método basado en marcas visuales. Se evaluaron diversos algoritmos de extracción de características distintivas de las imágenes para determinar cuál representa la mejor solución para el caso de la navegación basada en marcas visuales, en términos de performance y repetibilidad. El sistema desarrollado es robusto y no requiere de la calibración de los sensores. La convergencia del método de navegación se ha demostrado tanto desde el punto de vista teórico como práctico. Su complejidad computacional es independiente del tamaño del entorno. Para validar el método realizamos experiencias tanto con sets de datos como con el robot móvil ExaBot, que se presenta como parte de este trabajo. Los resultados obtenidos demuestran la viabilidad del enfoque híbrido para abordar el problema de la navegación basa en visión en entornos complejos interiores/exteriores.

Abstract:
One of the current challenges of mobile robotics is to achieve complete autonomy, i.e. to develop a robot that can carry out its tasks without the need of a human operator. The main goal of this work is to develop a new vision-based mobile robot system for autonomous navigation in indoor/outdoor environments. The proposed system uses only a camera and odometry sensors, it does not rely on any external localization system or other similar infrastructure. Moreover, it can deal with real environmental changing conditions (illumination, seasons) and satisfies motion control constraints to guide the robot in real time. To achieve the goal of this work, a hybrid method is proposed that uses both segmentation-based and landmark-base navigation techniques. To represent the environment, a topological map is built. This map can be interpreted as a graph, where the edges represent navigable paths and the nodes open areas. A novel segmentation-based navigation method is presented to follow paths (edges) and a modifed landmark-based navigation method is used to traverse open areas (nodes). A variety of image features extraction algorithms were evaluated to conclude which one is the best solution for landmark-based navigation in terms of performance and repeatability. The developed system is robust and does not require sensor calibration. The convergence of the navigation method was proved from theoretical and practical viewpoints. Its computational complexity is independent of the environment size. To validate the method we perform experiments both with data sets and with the mobile robot ExaBot, which is presented as part of this work. The results demonstrate the feasibility of the hybrid approach to address the problem of vision based navigation in indoor/outdoor environments.

De Gennaro, Diego. "Revisión del género Sacciolepis (Poaceae: panicoideae: paniceae) en sus aspectos taxonómicos, histofoliares y filogenéticos" (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El género Sacciolepis, perteneciente a la tribu Paniceae, fue segregado del género Panicum por Nash en 1901. Hasta el momento, sus especies fueron tratadas en floras regionales o en revisiones parciales del género en América, África, Asia y Australia. El propósito de este trabajo es realizar una revisión taxonómica completa del género, acompañada de un detallado análisis histofoliar y filogenético. Para llevar a cabo la revisión taxonómica, se estudiaron ejemplares de herbario, provenientes de instituciones de Argentina y del extranjero. Como resultado, se reconocen 23 especies, se proporciona una clave para identificar los taxones, descripciones detalladas de las especies, ilustraciones de los caracteres de importancia taxonómica, sinonimia actualizada y lectotipificaciones cuando fue necesario. Las especies de Sacciolepis se hallan distribuidas en regiones tropicales y subtropicales de África (continente en donde se halla más representado), Asia, Oceanía y América. Por otra parte, los estudios histofoliares revelaron 3 tipos anatómicos: mesófilo, xerófilo e hidrófilo, y corroboraron la naturaleza fotosintética C3. Asimismo, se estudiaron los microcaracteres de la lemma de los antecios superiores, caracterizándose Sacciolepis por la presencia de micropelos y cuerpos de sílice, y en menor frecuencia, de aguijones. También se observaron antecios superiores estipitados, característica novedosa para el género. El análisis filogenético reveló que Sacciolepis constituye un grupo monofilético, sustentado por una serie de sinapomorfías, que difieren de los caracteres considerados diagnósticos del género (gluma superior sacciforme y panícula espiciforme).

Abstract:
The genus Sacciolepis belongs to the tribe Paniceae and was segregated from the genus Panicum by Nash in 1901. Sacciolepis has only been taxonomically reviewed in regional floras (América, Africa, Asia and Australia). The purpose of this work is to accomplish a complete taxonomic revision of the genus, including detailed phylogenetic and anatomical analyses. In order to perform the taxonomic revision, herbarium specimens from argentinean and foreign herbaria were studied. As a result, 23 species are recognized, and a key to identify the different taxa, detailed descriptions of the species, ilustrations of characters with taxonomic value, updated sinonimy and lectotypifications when necessary are provided. The species of Sacciolepis are distributed in tropical and subtropical regions of Africa (where this genus shows the richest diversity of species), Asia, Oceania and America. Moreover, anatomical studies revealed 3 different histofoliar types: mesophytic, xeric and hydrophytic, and corroborated the C3 photosynthetic nature. Microcharacters of the lemma in the upper anthecia were also studied, showing that Sacciolepis is characterized by the presence of microhairs and silica bodies and less frequently hooks. Stipitate upper anthecia were also observed, a novel feature for the genus. The phylogenetic analysis revealed that Sacciolepis is a monophyletic group, supported by a number of synapomorphies, other than those characters usually considered diagnostic to the genus (saccate upper glume and spiciform panicle).

De Larminat, María Ana. "Regulación hormonal de la función epididimaria" (1981). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En vista de la importancia de los andrógenos 5α-reducidos para el adecuado funcionamiento de las estructuras epididimarias involucradas en la maduración de los espermatozoides, se estudiaron las características de la enzima 5α-reductasa en el epidídimo de la rata. Se determinó su localización subcelular, con la ayuda de marcadores específicos, y los parámetros de su actividad in vitro. Se pudo demostrar la disminución de la actividad (específica y total) luego de la castración, o sea al ser removida la fuente de andrógenos endógenos. Dicha disminución fue proporcional al tiempo transcurrido entre la castración y el análisis de la actividad de la 5α-reductasa: 83, 63, 38, y 13% de la actividad específica control a los 2, 4, 8, y 14 días después de la orquidectomía. Al tratar con testosterona animales castrados 30 días antes, se observó una clara recuperación de la actividad in vitro de la 5α -reductasa; 12 días de terapia (200 ug de TP al día) devuelven la actividad nuclear en un 83%, mientras 8 días de terapia bastan para recobrar los niveles control detectados en la enzima microsomal. Demostrada la andrógeno-dependencia de la enzima 5α-reductasa en el epidídimo adulto, se pasó a estudiar el desarrollo ontogénico de esta actividad en el epidídimo de ratas de 15 a 40 días. También se determinó el de la enzimas 3-hidroxiesteroide deshidrogenasa, que metaboliza la 5α-dihidrotestosterona a 5α-androstandioles, los cuales podrían también tener actividad biológica. Mientras no se registraban mayores cambios respecto del órgano adulto en lo que concierne a localización subcelular y parámetros cinéticos, se encontró un pico en la actividad específica de las dos enzimas alrededor de los 25 días de edad. Además, la relación diol/DHT se hallaba aumentada entre 2 y 5 veces durante el período de 20-25 días. Por último, se midieron en ratas prepúberes de distintas edades algunos parámetros morfológicos y bioquímicos relacionados con la función epididimaria, con el objeto de investigar sobre eventuales correlaciones entre metabolización de testrosterona y desarrollo del órgano. Fueron medidos: los niveles tisulares de andrógenos, la incorporación de 14C Timidina, el contenido en ADN, proteínas totales, humedad, y sustancias específicas como ácido siálico, glicerilfosforilcolina, cinc, y proteínas específicas epididimarias (PEE). También se realizaron cortes histológicos para evaluar en cada edad el desarrollo del conducto epididimario. Los resultados indican que la edad prepuberal se caracteriza por una muy activa metabolización epididimaria de la testosterona a DHT y dioles, coincidente con una intensa proliferación celular. En tanto, la mayoría de las actividades diferenciativas, tales como la secreción de productos específicos (Andrógeno- dependientes en el adulto), quedan relativamente postergadas en esta etapa.

De Las Heras, Marcelo Antonio. "Regulación hormonal del metabolismo de poliaminas en tejidos testicular y epididimario" (1989). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

De Lella Ezcurra, Ana Laura. "La sobre-expresión crónica del factor de necrosis tumoral alfa en la substantia nigra induce neurodegeneración y síntomas motores" (2010). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La neuroinflamación es considerada una característica neuropatológica de la enfermedad de Parkinson. Se ha observado activación de microglía y niveles elevados de citoquinas pro-inflamatorias, entre las que se encuentra el factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α), en la substantia nigra, una de las principales regiones del cerebro afectadas en esta enfermedad. Sin embargo, el rol funcional de la activación microglial y la sobre-expresión de TNF-α no es claro en la enfermedad de Parkinson. El objetivo de este trabajo fue determinar los efectos de la sobre-expresión crónica de TNF-α en la substantia nigra, e identificar moléculas candidatas a mediar ese efecto. Para ello, se inyectó en la substantia nigra de ratas adultas un adenovector que expresa TNF-α (AdTNFα), pudiendo detectarse la citoquina recombinante hasta 14 días p.i. La expresión crónica de TNF-α indujo una pérdida progresiva de neuronas en la substantia nigra, que comenzó el día 14 y se acentuó a los 21 y 28 días p.i., comparado con animales controles inyectados con un adenovector que expresa β- galactosidasa (Adβgal). La sobre-expresión de TNF-α produjo la aparición de síntomas motores a los 14 días p.i.; y la activación de la microglía y/o reclutamiento de macrófagos de la periferia desde el día 7 luego de la inoculación. No se pudo detectar inducción de IL-1β ni evidencias de apoptosis. En cambio, se observó un aumento en los niveles de ciclooxigenasa tipo 2 (COX-2) y en la actividad de la óxido nítrico sintasa (NOS) en los animales que sobre-expresan TNF-α, por lo que dichas moléculas podrían estar participando de la muerte neuronal inducida por la citoquina. Por otro lado, se llevó a cabo un estudio de los genes regulados por TNF-α utilizando la técnica de microarrays. Entre los genes que se encontraron diferencialmente expresados entre los animales tratados con AdTNFα y Adβgal, estaban significativamente representados procesos relacionados con la respuesta inmune y el metabolismo. Se validó por RT- PCR en tiempo real la expresión disminuida de la proteína quinasa C tipo delta (nPKC- delta) y el regulador de la señalización por proteína G 3 (RGS3) en los animales que sobre-expresan TNF-α con respecto a los controles. En conclusión, podemos decir que la expresión prolongada de niveles pro- inflamatorios de TNF-α es suficiente para producir un efecto tóxico en las neuronas de la substantia nigra, con la aparición de síntomas motores y una respuesta glial característica. Los niveles y la duración de la expresión de esta citoquina son variables importantes para que ejerza un efecto neurodegenerativo. Se generó un modelo animal que permite estudiar los mediadores del efecto tóxico de TNF-α como lo demuestran los resultados de genómica funcional, sentando las bases para estudios futuros que puedan identificar blancos para una posible terapia contra la enfermedad de Parkinson.

Abstract:
Neuroinflammation is regarded as a neuropathological characteristic of Parkinson’s disease. Microglia activation and high levels of pro-inflammatory cytokines, such as tumor necrosis factor alpha (TNF-α), have been reported in the substantia nigra, one of the main brain regions affected in this disease. The aim of this study was to determine the effects of the chronic overexpression of TNF-α in the substantia nigra, and to identify candidates to mediate that effect. To achieve this, an adenovector expressing TNF-α (AdTNFα) was injected in the substantia nigra of adult rats. We have been able to detect the recombinant protein until 14 days p.i. The chronic expression of TNF-α induced a progressive loss of neurons in the substantia nigra, which started 14 days p.i. and was more evident at 21 and 28 days p.i., compared to control animals injected with an adenovector expressing β-galactosidase (Adβgal). Chronic overexpression of TNF-α caused motor symptoms, appearing at 14 days p.i.; and activation of microglia and/or recruitment of macrophages form the periphery from day 7 after adenoviral inoculation. We could not detect induction of IL-1β expression, or evidences of apoptosis. On the other hand, we could observe increased levels of cyclooxygenase type-2 (COX-2) and increased activity of nitric oxide synthase (NOS) in animals overexpressing TNF-α, which suggests that these molecules could participate in the neuronal death induced by the cytokine. On the other hand, we studied the genes regulated by TNF-α using microarrays technology. We found that processes related to immune response and metabolism were significantly represented among de genes differentially expressed in AdTNFα and Adβgal injected animals. Using real time RT-PCR, we validated the downregulation of protein kinase C delta type (nPKC-delta) and regulator of G-protein signaling 3 (RGS3) in animals over-expressing TNF-α, compared to controls. Thus, we conclude that long-lasting expression of pro-inflammatory levels of TNF-α is sufficient to produce a toxic effect on neurons in the substantia nigra, as well as motor symptoms and a characteristic glial response. Levels and duration of TNF-α expression are important variables to establish its neurodegenerative effect. This study provides an animal model to study the mediators of the toxic effect of TNF-α as shown by the results of functional genomics, laying the foundations for future studies with the final objective of identifying possible therapeutic targets for Parkinson’s disease.

De Lorenzo, Mariana S.. "Acción del antiestrógeno Nafoxidina y del inhibidor tisular de metaloproteinasas-1 (TIMP-1) en la angiogénesis tumoral" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La terapia antiangiogénica se basa en estrategias moleculares que intentan bloquear la neovascularización tumoral y así detener la progresión de la masa neoplásica. Las células endoteliales suelen responder al estímulo estrogénico. La angiogénesis implica la proliferación del endotelio junto a la remodelación de la matriz extracelular, donde participan, las metaloproteinasas (MMPs) y sus inhibidores (TIMPs). En el presente trabajo se investigaron los posibles mecanismos antiangiogénicos del potente antiestrógeno nafoxidina y el intrincado papel del TIMP-1 en la vascularización y progrésión tumoral. Se encontró que el tratamiento in vitro de células endoteliales humanas de vena umbilical (HUVEC) con dosis no citotóxicas de nafoxidina disminuye de manera dosis-dependiente la proliferación. Nafoxidina redujo también la adhesión, la capacidad de extensión sobre el sustrato y la migración de las células endoteliales, e indujo un aumento en la activación de la MMP-2 y en la secreción de TIMP-1. Además, inhibió significativamente la invasión y la formación de cordones endoteliales sobre Matrigel. La acción antiangiogénica de nafoxidina podría asociarse a acciones indirectas, mediadas a través del aumento del TIMP-1, como también a efectos directos del antiestrógeno sobre las células HUVEC. Los cotratamientos in vitro con nafoxidina y el éster de forbol PMA indicaron que la acción antiangiogénica podría estar relacionada con la inhibición de vías de señalización intracelular dependientes de la proteína quinasa C. El cotratamiento con el inhibidor de fosfodiesterasas IBMX y el derivado de CAMP dbcAMP sugirieron la participación de múltiples vías de señales en la acción antiangiogénica de nafoxidina. Otros ensayos in vitro con el inhibidor de fosfolipasa D n-butanol, el ionósforo A23187 y el bloqueante de canales de calcio verapamilo indicaron la importancia de estas vías de señales en la formación de capilares endoteliales. Finalmente, se exploraron in vivo los efectos de nafoxidina y TIMP-1, empleando un modelo singénico de carcinoma mamario en ratones BALB/c y un melanoma murino inoculado en hídridos C57BL/6j-CBA transgénicos que sobrexpresan TIMP-1 humano en hígado y lo vuelcan a la circulación. Los datos obtenidos en animales ratifican La complejidad de los mecanismos regulatorios que operan in vivo durante la vascularización tumoral y diseminación metastásica. Este trabajo aporta elementos útiles para el futuro diseño de ensayos clínicos con nuevos agentes antiangiogénicos para el tratamiento del cáncer.

Abstract:
Antiangiogenic therapies use molecular strategies to block tumor neovascularization and arrest neoplasic progression. Endothelial cells respond to estrogenic stimulation. Angiogenesis involves endothelial cell proliferatíon and extracellular matrix remodeling, in which take part metalloproteinases (MMPs) and their inhibitors (TIMPs). In this present study it was investigated the potential antiangiogenic mechanisms of the antiestrogen nafoxidine and the intrincate role of TIMP-1 in vascularization and tumor progression. It was found that teatment in vitro with non citotoxic doses on human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) decreased endothelial growth in a dose manner dependent. Nafoxidine reduced adhesion, spreading and migration of endothelial cells and induced an increment in MMP-2 activation and TIMP-1 secretion. Invasion and endothelial tube formation on Matrigel were inhibited. Antiangiogenic effect of nafoxidine could be associate with indirect actions, mediated by TIMP-1 increment, or also with direct effects of the antiestrogen on HUVEC. In vitro cotreatments with nafoxidine and phorbol ester PMA indicated that antiangiogenic action could be related with inhibition of PKC intracellular signalling pathways. Cotratments with phosphodiesterases inhibitor IBMX and cAMP derivative dbcAMP suggested the involvement of multiple signalling pathways. Other in vitro assays with phospholipase D inhibitor n-butanol, ionosphore A23l87 and L-type Ca2+ channels blocker veraparnil indicated that their pathways are important in endothelial tube formation. Finally, it was investigated the in vivo effects of nafoxidine and TIMP-1, using a murine mammary carcinoma in BALB/c mice and a murine melanoma inoculated in hybrid C57BL/6j-CBA transgenic mice that overexpress human TIMP-1 in liver and overturn it at circulation. The results in animals ratify the complexity of regulating mechanisms that act in vivo during tumor vascularization and metastatic dissemination. The present study supplies useful elements to future clinic trials designs with new antiangiogenic agents for cancer treatment.

De Luca, Paola. "Rol de BRCA1 en la regulación de la transcripción en cáncer de próstata" (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El gen de susceptibilidad al cáncer de mama (BRCA1) es un supresor tumoral. Las mutaciones germinales en este gen confieren predisposición al cáncer de mama, ovario y están asociadas con una mayor agresividad del cáncer de próstata (PCa). Varias evidencias demuestran que BRCA1 tiene numerosas funciones, sin embargo, no se conoce aún cuál es el rol de este supresor tumoral en el PCa. En esta tesis determinamos por primera vez que BRCA1 regula directamente su propia transcripción y la de otros genes que intervienen en la respuesta al daño en el ADN, el ciclo celular y la apoptosis en el PCa. Establecimos un mecanismo por el cual la regulación de la transcripción de BRCA1 es una característica fundamental en la modulación de la sensibilidad a los agentes genotóxicos. Comprobamos que BRCA1 forma un complejo multriproteico integrado por E2F1 y Rb, que se asocia a su promotor autorreprimiéndolo. Luego del estrés genotóxico generado por doxorrubicina, BRCA1 se libera activando su transcripción y asociándose a los promotores de otros genes, entre ellos GADD153. Así, BRCA1 induce la transcripción de GADD153 aumentando la apoptosis y el arresto del ciclo celular. Además, generamos un modelo in vivo de xenotransplantes de PCa que poseen disminuída la expresión de BRCA1. Con este modelo demostramos que la disminución de la expresión de BRCA1 aumenta el desarrollo tumoral de próstata. Considerando que los agentes quimioterapéuticos utilizados comúnmente en el tratamiento del cáncer causan daño en el ADN, en este trabajo proponemos que el PCa asociado a mutaciones en BRCA1 presentaría una respuesta alterada a la quimioterapia, representando un nuevo subgrupo de pacientes que podrían requerir terapias alternativas. Los tumores de próstata avanzados se tornan rápidamente resistentes a todos los agentes quimioterapéuticos actualmente utilizados. Así, el entendimiento de los mecanismos de resistencia en tumores con mutaciones en BRCA1 ayudará a desarrollar mejores opciones de tratamiento, como por ejemplo, terapias personalizadas para el PCa.

Abstract:
Breast Cancer susceptibility gene (BRCA1) is a tumor suppressor. Germline mutations in BRCA1 gene increase breast and ovarian cancer risks, and are associated to high grade prostate tumors. Evidence demonstrates that BRCA1 has several functions mainly through interaction with key proteins in several cellular processes; however, BRCA1 role in prostate cancer (PCa) is poorly understood. In this doctoral thesis we determined for the first time that BRCA1 directly regulates its own and other genes transcription in PCa. These genes are involved in DNA damage response, cell cycle and apoptosis. We established one mechanism in which the co- regulator BRCA1 function is a key feature in the modulation of genotoxic sensitivity. We showed that BRCA1 form a multiprotein complex with E2F1 and Rb that associates to its own promoter auto-repressing its expression. After genotoxic stress induced by doxorubicin, BRCA1 is released activating its transcription and associating to other promoters, as GADD153. Thus, BRCA1 induces GADD153 transcription increasing apoptosis and arresting cell cycle. Furthermore, we developed a BRCA1 depleted in vivo xenograft model of PCa. Using this model we could demonstrate for the first time that BRCA1 depletion increases prostate tumor growth in mice. Due to chemotherapeutic agents frequently used in cancer therapy cause DNA damage, in this work we propose that BRCA1 mutations associated to PCa will show different chemotherapy response. This will create a new subset of patients that requires alternative therapies. Advanced PCa rapidly acquire resistance to chemotherapy. Based on this, our model gains high significance. Knowing the mechanisms for BRCA1 associated tumor resistance will help to develop better therapy options, as personalized therapies for PCa.

De Magistris, Alberto A.. "Anatomía de la corteza de las Cupressaceae nativas y cultivadas de la Argentina" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La corteza comprende todos los tejidos existentes por fuera del cámbium vascular. Está compuesta por floema y peridermis y su renovación depende de la actividad del cámbium y el felógeno. Constituye, a la vez, una vía de transporte eficaz, un sitio de almacenamiento y una capa aislante y protectora que, en conjunto, permiten a los vegetales leñosos prosperar en variados ambientes. Tres especies de Cupressaceae son nativas de los bosques australes patagónicos de la Argentina. Austrocedrus chilensis es una de las especies leñosas argentinas más estudiadas en los últimos años. Fitzroya cupressoides y Pilgerodendron uviferum, ahora protegidas en distintos puntos, son reliquias vivientes que fueron llevadas hasta el borde de la extinción por su valiosa madera. La información referente a la corteza de estas especies es muy escasa. Otras 25 especies de la familia están introducidas y se cultivan en zonas del pais con variadas condiciones climáticas y edáficas, tanto en el ámbito rural como en el urbano. En esta tesis se abordó el estudio de la corteza de 13 géneros con 23 especies y 2 variedades de Cupressaceae, desde varios puntos de vista: a) macroscópico: exomorfología, textura y espesor, b) microscópico: anatomía estructural y ultraestructural, c) polución ambiental: utilización de la corteza como potencial biomonitor de contaminantes. La exomorfología es variada y denota una marcada influencia del medio ambiente sobre su diseño, espesor y textura. A través de los datos anatómicos estructurales del floema vivo es posible obtener una serie de caracteres diagnósticos propios para cada género y la mayoría de las especies. La citología permite incluir varios taxones no estudiados previamente en el grupo que posee en las células cribosas los plastidios tipo S. Finalmente, las especies de la familia ampliamente cultivadas en sitios urbanos, suburbanos e industriales ofrecen la posibilidad de utilizar su corteza para el monitoreo de la contaminación ambiental. Datos e interpretaciones inéditos completan la información concerniente a la anatomía de Cupressaceae y las coniferas en general. Constituyen éstos, además, un medio de referencia para esclarecer la sistemática de este grupo y para conocer aspectos necesarios en su uso industrial. Las posibilidades de utilización de las cortezas para productos como tableros aislantes o principios activos de uso farmacéutico, ubican a este recurso no maderero entre los principales componentes del aprovechamiento sustentable de los bosques y plantaciones.

Abstract:
The bark includes all tissues existing outside the vascular cambium. It consists of phloem and periderm, and its renovation depends on the cambium and phellogen activity. The bark constitutes in tum an effective conducting way, a storage site and an insulating and protective layer that, as a whole, allow life of the woody plants in different environments. Three Cupressaceae species are indigenous from the southern patagonic forest of the Argentina; one of them, Austrocedrus chilensis is the more studied native tree in the last years. Fitzroya cupressoides and Pilgerodendron uviferum, now protected in several areas, are living relics and due to its valuable wood, exploitation was carried out it close to extinction. Information about the bark of these species is very scarce. Another 25 introduced species of the family grown in both rural and urban areas of the country with different climatic and edaphic conditions. In this Thesis, the bark of the family was approached from three view points: a) macroscopic: exomorphology, texture and depth, b) microscopio: structural and ultrastructure anatomy, and c)environmental pollution: utilisation of the bark as a bioimonitor of contaminants. The exomorphology is diverse and its pattern design, texture and depth denote a high influence of the environmental conditions. The anatomy of the secondary phloem shows the main diagnostic features useful to identification genera and the most of the species. TEM observations allow corroborate the inclusion of various taxa not previously studied in the group that posses the type S plastids in sieve cells. Finally, the bark of these wider spreaded trees offers the possibility of utilise it as a biomonitoring of common and harmful elements deposited from air and soil. New records and descriptions complete the information concerning to the anatomy of the Cupressaceae familyand other conifers. The research contribute to clarify the systematic questions of the group and to understand necessary aspects for its industrial use. The potential utilisation of the barks for different purposes such as insulating boards or pharmaceutical Chemicals places this non-woody resource among the mean components of the sustainable exploitation of the forests and plantations.

De Maio, Federico Andrés. "Relevancia de la variabilidad genética del HIV-1 y del hospedador en el SIDA pediátrico: sistema Vif-APOBEC3" (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Las proteínas APOBEC3 son citidina deaminasas que pueden determinar cambios G→A en la secuencia codificante de HIV-1, propiedad que les confiere una capacidad antiviral. Esta actividad puede ser contrarrestada por el virus al expresar la proteína Vif, la cual recluta un complejo ubiquitina ligasa basado en Culina5 que desestabiliza a las moléculas APOBEC3. La variabilidad genética tanto del virus como del hospedador puede afectar la eficiencia con la que se desarrollan estos procesos. Una elevada edición G→A puede resultar en la restricción de HIV-1 (fenómeno de mutagénesis letal denominado hipermutación), aunque cambios en niveles subletales podrían favorecer a la diversificación viral. El objetivo del presente trabajo fue estudiar la variabilidad del sistema Vif-APOBEC3 en niños perinatalmente infectados por HIV-1, determinando su relevancia para el desarrollo de SIDA infantil. Los polimorfismos APOBEC3G H186R, APOBEC3G C40693T y CUL5 SNP6 no parecieron modificar el curso clínicos de la infección. En cambio, mutaciones en Vif (inserción de un aminoácido en posición 61 y las sustituciones V13I, V55T, A62D/N/S, L81M y Q136P) sí se relacionaron con diferencias en los tiempos de progresión a SIDA. Se hallaron además evidencias de que ciertos alelos de APOBEC3G/CUL5 seleccionarían variantes particulares de Vif. Se determinó una baja frecuencia de casos con una población proviral constituida mayoritariamente por formas de HIV-1 hipermutadas. El grado de edición en niveles subletales exhibió diferencias entre variantes de CUL5 y Vif. En conclusión, la variabilidad del sistema Vif-APOBEC3 afectaría los tiempos de desarrollo de SIDA pediátrico y también los niveles de edición sufridos por HIV-1.

Abstract:
The APOBEC3 proteins are cytidine deaminases able to determine G→A changes in the HIV-1 coding sequence, a property that confers them antiviral capacity. This activity can be counteracted by the virus through the expression of the Vif protein, which recruits a Cullin5- based ubiquitin ligase complex that destabilizes APOBEC3 molecules. The genetic variability of both virus and host may affect the efficiency of these processes. A high G→A editing can result in the restriction of HIV-1 (phenomenon of lethal mutagenesis called hypermutation), although changes at sublethal levels could favor viral diversification. The aim of the present work was to study the variability of the Vif-APOBEC3 system in perinatally HIV-1 infected children and to asses its relevance to the pediatric AIDS development. The APOBEC3G H186R, APOBEC3G C40693T and CUL5 SNP6 polymorphisms did not seem to modify the clinical course of infection. In contrast, Vif mutations (a one-amino-acid insertion at position 61 and substitutions V13I, V55T, A62D/N/S, L81M and Q136P) were related to different times of progression to AIDS. Evidences suggesting that certain APOBEC3G/CUL5 alleles could select for particular Vif variants were also found. Cases showing a proviral population mainly composed by hypermutants were observed in a low frequency. The grade of editing at sublethal levels exhibited differences linked to CUL5 and Vif variants. In conclusion, the variability of the Vif-APOBEC3 system could affect the time of progression to pediatric AIDS and also the level of editing carried by HIV-1.

De Marco, Rodrigo. "Obtención de néctar, trofalaxia, y comunicación en Apis mellífera" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Cuando una sociedad carece de soluciones técnicas adecuadas para explotar recursos variables, compromete su supervivencia. Sabemos que como sistemas orgánicos, las colonias de abejas Api (Apis mellifera) responden eficientemente al arreglo corriente de la oferta melífera, y que las soluciones técnicas que exhiben a escala colectiva emergen de la actividad conjunta de los individuos. Sin embargo, en una colonia las recolectoras poseen información limitada sobre los recursos, y la commicación resulta fundamental para optimizar la explotación colectiva de la oferta. Así, los parámetros individuales que regulan el comportamiento recolector son alterados no sólo por ciertas caracteristicas propias de las flores sino también por algunos estímulos disponibles en el nido. Entre los mecanismos que subyacen a la comunicación en las colonias, la danza de las recolectoras (un notable despliegue motor que se libera frente a una oferta abundante, y que exhibe además claras correlaciones con algunas características de las flores) ha sido investigada de manera casi excluyente durante los últimos 50 años. Las danzas, sin embargo, son esporádicas bajo condiciones naturales (lo cual indica a su vez que las recolectoras se benefician de la comunicación aún en su ausencia) y desconocemos los mecanismos adicionales que aseguran el flujo normal de información. La trofalaxia es el intercambio de alimento líquido entre los miembros de la colonia, y el néctar constituye la principal fuente energética de las abejas. Así, tras considerar 1) las capacidades sensoriales de las recolectoras y la habilidad que exhiben para percibir el olor y el sabor del néctar, 2) la forma en que utilizan estas claves para localizar, identificar, y reconocer las diversas especies florales, y 3) el hecho de que las interacciones trofalácticas permiten el intercambio de las claves olfativas y gustativas del néctar; a lo largo del presente estudio examinamos el potencial de la trofalaxia como mecanismo capaz de asegurar el flujo de información sobre la oferta melífera. Los resultados señalan que la experiencia recolectora afecta rápidamente tanto la danza como la frecuencia de interacciones trofalácticas, y sugieren que las interacciones trofalácticas “breves”, aquellas que sólo permiten el intercambio de las claves olfativas y gustativas del néctar, podrian conformar un módulo conductual independiente para el intercambio de información sobre la oferta melífera. Es decir, un sub-sistema autorregulado que facilita, junto a la danza, la explotación coordinada y eficiente de una oferta fluctuante. Por otra parte, los resultados sugieren que la transferencia efectiva del néctar colectado opera como un canal de comunicación a través del cual las recolectoras adquieren información sobre la actividad global. Y como resultado del proceso, la información adquirida podría determinar, al menos parcialmente, la selectividad que exhiben las colonias frente a una oferta diversa.

Abstract:
Without the proper technical solutions to face fluctuating resources, any society will surely compromise its survival. We already know that, as highly integrated systems, honeybee colonies (Apis mellifera) are able to exploit efficiently a nectar offer that is in turn extremely variable. Moreover, while facing unpredictable foraging conditions the whole set of technical solutions that they exhibit at the group-level is clearly defined by the synchronized activities of each of its members. Nevertheless, within a colony, each forager has only limited information about the totality of the nectar sources exploited by the colony as a whole. Communication thus becomes essential to optimise collective decision making processes aimed toward exploiting selectively the most profitable nectar sources at any moment. As a result, individual parameters which regulate the honeybee foraging behaviour are naturally modified by several features of the flowers as well as some stimuli available within the colony. Among the mechanisms underlying communication within the colonies, the “dance language” (i.e.a remarkable motor display which presents features that are undoubtedly correlated to some characteristics of the highly profitable food sources) has been the main subject of scientific research during the last fifty years. However, “dances” are clearly unusual in nature. Thus, taking into account that communication serves foragers in any case, it becomes clear that some additional mechanisms must guarantee the flow of information within the colonies. Nevertheless, the current knowledge about these mechanisms remains larger unknown. Trophallaxis is the exchange of liquid food by mouth between the members of the same colony and, in addition, nectar serves bees as their main source of energy. Accordingly, we first considered 1) the honeybee sensory capabilities which allow foragers to perceive the odour and taste of the nectar collected, 2) the way in which foragers use these skills to search and recognize their foraging targets, and 3) the fact that trophallactic interactions allow the exchange of nectar olfactory and gustatory cues; and afterwards, we examined whether the forager trophallactic behaviour may guarantee the flow of information on nectar sources. Results indicate that the foraging experience affects rapidly the dance and trophallactic behaviour of single foragers, and they suggest as well that brief trophallactic interactions, which allow only the exchange of chemosensory cues, may represent an independent mechanism for the exchange of information. That is, a self-regulated system which may promote, together with the dance language, a well-organized exploitation of nectar sources. Results also indicate that the transfer of the collected nectar may allow foragers to acquire information derived from the foraging activity of the colony as a whole. Moreover, the information acquired may partially explain the colony skills to track highly profitable nectar sources.

De Matos, Daniel Gustavo. "Producción de embriones de bovinos in vitro : Estimulación de la síntesis de glutation durante la maduración in vitro de ocitos y su efecto sobre el desarrollo de los embriones" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Durante la maduración in vivo de oocitos existe una activa síntesis de glutation (GSH) y cumple un rol importante en la fecundación y en el desarrollo embrionario, mediante su mecanismo de oxidación y reducción. En los sistemas de producción de embriones in vitro (PIV) la síntesis de GSH se encuentra disminuida. Por ello, el objetivo de la presente tesis fue estimular su síntesis durante la maduración in vitro (MIV) de oocitos bovinos y evaluar su efecto en el desarrollo de los embriones. Para esto se puso a punto la técnica de PIV. Los resultados demostraron que: l) Durante la MIV de bovinos existe síntesis de GSH. 2) Dicha síntesis se puede incrementar con el agregado de cisteamina, β-mercaptoetanol, cistina o cisteína al medio de MIV. 3) Esto generó incrementos del orden del 70% al 100 % en los porcentajes de desarrollo hasta blastocistos. 4) Se aumentó la velocidad de desarrollo encontrándose más blastocistos al dia 6; siendo estos los mejores embriones para congelar. 5) Los niveles intracelulares de GSH generados durante la MIV, se mantienen durante la fecundación y recién desaparecen luego de los primeros estadios de desarrollo. 6) El desarrollo de los embriones es altamente dependiente de los niveles intracelulares de GSH alcanzados durante la MIV. 7) La cisteamina y la cisteína demostraron ser capaces de estimular la síntesis de glutation aún en oocitos que carecen de células del cumulus. En conclusión, la estimulación de la síntesis de glutation durante la maduración in vitro de oocitos bovinos incrementó tanto la tasa como la velocidad de desarrollo, obteniéndose más blastocistos al día 6 de cultivo in vitro siendo estos los más aptos para el congelamiento. Más aún, la cisteína o la cisteamina estimularon la síntesis de GSH en oocitos sin cumulus y en ausencia de un co-cultivo de células del cumulus. Esto es útil ya que aumenta la eficiencia de la técnica de PIV cuando se tienen oocitos con muy pocas células del cumulus y se trabaja sin co-cultivo.

Abstract:
There is an active synthesis of glutathione (GSH) during in vivo maturation and plays an important rol during fertilisation and embryo development due to its redox cycle. However, this synthesis is impaired during in vitro embryo production (IVP). Due to this, the objective of the present thesis was to evaluate the effect of stimulating GSH synthesis during bovine in vitro maturation (IVM) on embryo development. To do this, first of all we made the setup of the IVP technique. The experimental results demonstrate that: l) Glutathione synthesis exists during IVM. 2) The addition of cysteamine, β-mercaptoethanol, cystine or cysteine to the IVM medium stimulates GSH synthesis. 3) An increase on embryo development (70-100%) was observed when GSH synthesis was stimulated during IVM. 4) Due to this stimulation, more embryos appeared at day 6 and these embryos were the best for cryopreservation. 5) The intracellular GSH levels obtained after stimulation its synthesis during IVM, continue after fertilisation and disappeared during the first stages of embryo development. 6) Embryo development depends on the intracellular oocyte GSH levels after IVM. 7) Moreover, cysteamine and cysteine can stimulate GSH synthesis in oocytes without cumulus cells. In conclusion, GSH synthesis stimulation during bovine oocyte IVM increases the rate of embryo development and more embryos developed faster and reached the blastocyst stage at day 6 of cultured being these the most suitable for freezing. Moreover, these results demonstrate that cysteine or cysteamine stimulate GSH synthesis in oocytes without cumulus mass and in the absence of a cumulus cell monolayer. This may be useful to increase the efficacy of IVM of those oocytes having few cumulus cell layers, in a system without co-culture.

De Meio, Romano Humberto. "El S no proteico sanguíneo" (1935). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

De Micheli, Raúl Enrique. "Ultraorientación de polímeros" (1985). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

De Miranda, Rosalía D. M.. "El Lab - fermento" (1922). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

De Nápoli, Pablo Luis. "Soluciones de ecuaciones no lineales del tipo p-Laplaciano." (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

De Panis, Diego Nicolás. "Estudios genómicos y transcriptómicos de la adaptación al ambiente de cría en un modelo de especiación por especialización ecológica en Drosophila" (2017-03-27). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los estudios de secuenciación de alto rendimiento están abriendo nuevos caminos para investigar las respuestas adaptativas que los organismos despliegan en entornos alternativos. Sin embargo, mucho queda por entender sobre las bases genéticas de la adaptación a las plantas hospedadoras. La especies cactófilas de Drosophila que se encuentran en América del Sur tienen distinto grado de divergencia y especialización en la explotación de los cactus que habitan. La utilización de tejidos necróticos como hospedadores ha ligado su historia evolutiva a la expansión, retracción y diversificación de las cactáceas durante los cambios climáticos promovidos por los periodos glaciales del cuaternario. Las especies hermanas D. buzzatii y D. koepferae divergieron hace unos cinco millones de años y actualmente muestran una marcada diferenciación en caracteres de historia de vida, morfología y hábito, que aparentemente habrían evolucionado como adaptaciones a las distintas plantas hospedadoras. En su región simpátrica, ubicada en el noroeste Argentino, utilizan alternativamente cardones (Trichocereus terscheckii) y tunas (Opuntia sulphurea) como recursos de cría, donde el hospedador primario de una resulta en el secundario de la otra. Sin embargo, el cambio de hospedador afecta seriamente los componentes del fitness cuando ambas especies son criadas en el recurso secundario, lo que sugiere un importante papel de los metabolitos secundarios en el proceso de especialización ecológica. En la presente tesis, se estudiaron las particularidades genómicas de estas especies hermanas, así como la expresión génica en diferentes aproximaciones a las condiciones naturales de cría. A partir de los resultados, se desprenden diferencias entre ambas especies, tanto en su arquitectura genética como en su modulación transcripcional. Precisamente la mayor diferencia se encontró en la modulación transcripcional que llevan a cabo en los diferentes recursos de cría, aunque en ambos casos los genes diferencialmente expresados estuvieron principalmente relacionados con detoxificación, óxido-reducción y respuesta a estrés, pero también con desarrollo y procesos neurobiológicos. Esta trabajo aporta nuevos datos sobre el rol de la plasticidad transcripcional y las bases genómicas de estrategias adaptativas a ambientes de cría alternativos.

Abstract:
High-throughput sequencing studies are breaking new ground to investigate the adaptative responses that organisms deploy in alternative environments. Nevertheless much remains to be understood about the genetic basis of host plant adaptation. The cactophilic species of Drosophila that are found in South America have different degrees of divergence and specialization in the exploitation of the cactus they inhabit. The use of necrotic tissue as hosts has linked its evolutionary history to the expansion, contraction and diversification of cacti during climate changes promoted by Quaternary glacial periods. The sister species D. buzzatii and D. koepferae diverged about five million years ago and currently show a marked difference in life history traits, morphology and habit, which apparently have evolved as adaptations to different host plants. In its sympatric region located in northwestern Argentina, they alternatively use cardones (Trichocereus terscheckii) and prickly pears (Opuntia sulphurea) as breeding resources, where the primary host for one results in the secondary of the other. However, the host change seriously affects fitness components when both species are raised in the secondary resource, suggesting an important role of secondary metabolites in the process of ecological specialization. In this thesis, the genomics particularities of these sister species were studied, along with the genetic expression in different approaches to natural breeding conditions. From the results, differences arose between species, both in the genetic architecture as in the transcriptional modulation. Precisely, the biggest difference was found in transcriptional modulation carried out in the different breeding resources, although in both cases the differentially expressed genes were mainly related to detoxification, oxidation-reduction and response to stress, but also with development and neurobiological processes. This work contributes new data onto the role of transcriptional plasticity and the genomic bases of adaptive strategies to alternative rearing environments.

De Pino, Verónica. "Estudio de la función de los polipéptidos reversiblemente glicosilados (Reversibly Glycosylated Polypeptide) en plantas de interés agro-económico" (2010). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Las plantas explotan una variedad de mecanismos para regular la producción y el acceso a los azúcares en respuesta al desarrollo, al ambiente, y al estado metabólico. La síntesis de polisacáridos a partir de fotosintatos, como la sacarosa, es un proceso muy regulado en el que están involucradas invertasas y glicosiltransferasas. La estructura y destino de los polisacáridos es bien conocida, pero el mecanismo de biosíntesis particularmente la síntesis de novo y las enzimas que transfieren los azúcares siguen siendo un enigma a resolver. En este trabajo de tesis nos focalizaremos en unas proteínas muy particulares que fueron descubiertas intentando identificar componentes de la pared celular. Estas proteínas se denominan RGP, por “reversibly glycosylated polypeptide”, y tienen capacidad de autoglicosilarse, a partir de UDP-Glc, UDP-Gal, UDP-Xyl y UDP-Ara dando como producto la proteína glicosilada y regenerando el nucleótido azúcar. Las RGPs están presentes en plantas superiores tanto en monocotiledóneas como en dicotiledóneas, pero están ausentes en otras especies, lo que indicaría que su función está muy conservada en las plantas, aunque se sabe poco de su rol fisiológico (Moreno & Tandecarz 1982; Moreno et al. 1986; Delgado et al. 1998; Bocca et al. 1999). Un análisis filogenético (Wald et al. 2003) muestra que hay dos clases, clase 1, la mayoría de las RGps pertenece a esta clase, que es muy activa, y la clase 2, a la cual no se le asoció actividad, pero sí capacidad de interactuar con la clase 1. Se encontró una multiplicidad de isoformas en todas las especies donde está presente, aspecto asociado con su capacidad de formar homo y heterodímeros. Anteriormente se demostró que la expresión de la RGP se produce en los tejidos donde hay activa síntesis de pared celular, durante este trabajo mostramos que la expresión esta modulada por el desarrollo, la inducción hormonal y el estrés, clarificando el rol fisiológico de la RGP en la remodelación/reconstrucción de novo de la pared celular vegetal, en donde uno de los caminos metabólicos claves en dicho proceso de la célula vegetal es la síntesis de polisacáridos.

Abstract:
Plants exploit diversity of mechanisms to regulate the production and the access to sugars in response to developmental cues, the environment and to the metabolic sate. Polysaccharide synthesis upon photosynthates as sucrose is a highly regulated process, in which invertases and glycosyltransferases are implicated. Although the structure and destination of polysaccharides is well established, mechanisms of de novo synthesis as well as the identification of glycosyltransferases are yet an enigma to be resolved. This work is focused on a group of proteins called reversibly glycosylated polypeptide, RGP which have the unique capability to perform self-glycosylation upon incubation with UDP-Glc, UDP-Gal, UDP-Xyl and UDP-Ara given as product the glycosylated protein and the regeneration of the nucleotide diphosphate. RGPs are present in higher plants; in monocotyledons as well as in dicotyledons, indicating that their functions is highly conserved, although little is known about their physiological role (Moreno & Tandecarz 1982; Moreno et al. 1986; Delgado et al. 1998; Bocca et al. 1999). A phylogenetic analysis of RGP (Wald et al. 2003) showed that there are two classes, class 1, the majority of RGP belongs to this class, which is highly active, and class 2, which is inactive but it has the capability to interact with the class 1 forming heteromultimers. It was found a multiplicity of forms of RGP in all species; this fact is associated with its ability to form homo and heterodimers. Previously, it was found that the expression of the RGP is particularly relevant in tissues where an active synthesis of cell wall take place. Here we demonstrate that the expression of the RGP is modulated by development, elongating involved hormones, germination as well by stress, clarifying the physiological role of the RGP in the remodeling/de novo synthesis of the plant cell wall, where the synthesis of polysaccharide is a key metabolic pathway.

De Rossi, María Cecilia. "Dinámica y transporte de organelas en células vivas estudiados por técnicas de partícula única" (2016-03-17). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La organización intracelular depende de motores moleculares, proteínas que transportan diversos componentes celulares con una alta precisión espacio-temporal. En los últimos años, el desarrollo de nuevas técnicas de molécula y partícula única aplicadas a motores aislados han provisto información valiosa sobre las propiedades biomecánicas de estas proteínas. Sin embargo, el mecanismo de acción de las mismas en las células aún se desconoce. El objetivo general del presente trabajo es comprender los principios que gobiernan la dinámica de organelas en células vivas. Utilizando técnicas avanzadas de microscopía y de seguimiento de partícula única, estudiamos los procesos difusivos y activos que experimentan las organelas en el entorno citoplasmático. Por un lado, exploramos cómo diversos componentes del citoesqueleto influyen en el transporte conducido por motores moleculares en la célula. En una segunda instancia, evaluamos cómo se ve afectada la dinámica del transporte bidireccional al variar las propiedades biofísicas de los motores moleculares involucrados. Los resultados obtenidos nos permitieron construir un modelo teórico para comprender ciertos aspectos claves del transporte activo en células vivas.

Abstract:
Molecular motors transport a wide variety of cellular components in the cytoplasm with high spatio-temporal accuracy ensuring the correct organization within the cell. In recent years, the development of new single molecule and single particle techniques applied to isolated motors have provided valuable information on the biomechanical properties of these proteins. However, the mechanism of action of motors in living cells is still poorly understood. The aim of this study was to understand the principles that govern the intracellular dynamics of organelles in living cells. We used advanced optical microscopy and single particle tracking techniques to study the diffusive and active processes experienced by organelles in the complex cytoplasmic environment. First, we explored how different cytoskeleton components influence the transport driven by molecular motors in the cell. Then, we assessed how the biophysical properties of molecular motors affect the dynamics of transport. The obtained results allowed us to construct a theoretical model to understand certain key aspects of transport in living cells.

De Ruschi, Juan B. A. E.. "Secantividad de los aceites" (1941). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El presente trabajo ea una contribución experimental al estudio de los métodos que sirven para determinar la secantividad de loa aceites. Además de los métodos usuales, llamados directos, fundados por lo general en la apreciación de la adherencia de la capa de aceite, existen o pueden excogitarse otros, llamados indirectos, fundados en propiedades y fenómenos que guardan estrecha conexión con el proceso químico del secado. Salta a la vista la superioridad de estos últimos. Si se logra determinar los factores que intervienen en un fenómeno y establecer la dependencia que entre ellos existe, queda abierto el camino para llegar a la apreciación y a la medida exacta de las cualidades del sistema donde el fenómeno se desarrolla.- Tal es al punto de vista del presento ensayo, que, debo desde abora confesar abiertamente, dista muchisimo de la bella concepción que lo inspira.- Porque el secado de los aceites es un proceso sumamente intrincado, de cuyos factores no solo se desconoce la dependencia mutua, pero ni siquiera se conoce el número. El presente ensayo, ofrece así lo espero, un doble interes: teórico y práctico. Teórico, por la misma orientación que lo inspira; práctico, por la utilidad que reportan a la industria de los aceites, barnices y pinturas los datos exactos que puede proporcionar el estudio de la secantividad, toda vez que las referidas industrias necesitan tener una garantia experimental de la bondad de sus productos. Entre los aceites que he utilizado en los ensayos predominan los nacionales: " Lino ", " Ting ", " Perilla " y " Soja ". Hubiera deseado hacer un estudio comparativo de estos cuatro aceites nacionales con los análogos extranjeros: pero me ha sido imposible obtener muestras de ellos, salvo del de " Tung " . También tiene cabida en mi estudio el aceite de " Oiticica " extranjero, no existiendo en nuestro país plantas productoras del mismo. Siendo al aceite de " Lino " el de mayor importancia para nosotros, debido a la gran producción del mismo, hubiera deseado realizar ensayos con los aceites de las distintas zonas productoras de nuestro país. Pero ello me ha sido del todo imposible, no disponiendo de tiempo para trasladarme a las regiones productoras de las muestras. Sabido es que las semillas que llegan a las industrias de Bs. Aires, o bien los aceites que éstas producen, son una mezcla de los productos de varias regiones productoras .De ahí que los datos referentes al aceite de " Lino " representen valores medios de un " Lino " que podríamos llamar Nacional.

De Siervi, Adriana. "Genética molecular de la porfiria aguda intermitente : primer estudio en la población argentina" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

De Simone, Corina. "Inactivación de la tita-Hemolisina del clostridium welchii tipo A, por mecanismos biológicos" (1944). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

De Soriano, Angela Misa. "Estudio sistemático de algunas bacterias esporuladas aerobias" (1934). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

De Titto, Ernesto Horacio. "Regulación de la respuesta inmune en la enfermedad de Chagas" (1983). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

De la Serna, Carlos Santiago. "Comparación del punto del balance material de la glucosa de cepas de comportamiento intermedio con Escherichia Coli y Aerobacter Aerogenes" (1934). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Defays, Raquel. "Base genética de la respuesta a diferentes agentes de estrés ambiental y de la longevidad en el organismo modelo Drosophila" (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La expectativa de vida de una especie puede evolucionar a través de los genes que están involucrados en la reparación del soma, tales como los sistemas de la respuesta al estrés, según lo propone la teoría del soma desechable o genes con mutaciones perjudiciales o deletéreas de efecto tardío. En los ambientes naturales, los organismos frecuentemente soportan condiciones de estrés por falta de alimento y por baja temperatura. Como la energía ocupa un rol central en la vida de los organismos, mejorar la resistencia al estrés involucra cambios fenotípicos a diferentes niveles, desde señalización intracelular hasta caracteres de historia de vida. La resistencia al hambre severo se define como el tiempo de sobrevida a la privación total de alimento y sus valores fenotípicos rondan entre 20 a 200 horas en esa condición. La resistencia al estrés por baja temperatura es un carácter ecológicamente relevante que puede regular el nivel de actividad bajo condiciones de frío en la naturaleza. Este carácter adaptativo puede tener múltiples correlatos a nivel de otros caracteres de historia de vida. En la presente tesis con el objetivo general de elucidar la base genética y molecular que relaciona el proceso de envejecimiento, y los mecanismos de la respuesta al estrés ambiental, se estudiaron caracteres de historia de vida como la longevidad, la resistencia a la falta de alimento y al frío y la relación entre ellos mediante dos metodologías: mapeo de QTL y utilización de isolíneas en los organismos modelo Drosophila melanogaster y D. buzzatii, respectivamente. Se estudió la longevidad a 25°C en condiciones de control como así también luego de un pre-tratamiento de estrés por calor en líneas recombinantes endogámicas (RIL) de D. melanogaster. También se estudió la resistencia a la inanición o al hambre (RH) en adultos y pre-adultos mediante un mapeo por intervalo compuesto sobre líneas RIL de D. melanogaster. Todos estos caracteres resultaron variables en las RIL analizadas. Se identificaron varios QTL que mapean sobre los tres cromosomas mayores de Drosophila melanogaster que explican gran parte de la variabilidad en la longevidad. El tratamiento de calor redujo el número de QTL significativos, encontrando solo dos QTL para la longevidad (rangos 3C1-4F2 y 38E1-42A) en esta condición. Estos QTL, serían QTL generales de la longevidad más bien que QTL específicos de una condición. Con respecto a la resistencia al hambre, encontramos QTL que explican la variabilidad de la RH tanto en adultos como en pre-adultos. Una región de QTL, 16F3-19F6, resultó significativa tanto en machos como en hembras adultas y en el estadio pre-adulto. Se observó una correlación positiva en machos entre la longevidad de moscas tratadas y la RH de adultos, en uno de los paneles de RIL. A su vez, las regiones 16F3-19F6, 42A- 49C y 67A-86E3 corresponden a QTL que colocalización entre el estudio de mapeo de la longevidad y de la RH. Esta colocalización entre caracteres está en concordancia con la teoría del soma desechable. Con un abordaje diferente, la utilización de isolíneas de D. buzzatii se estudió la variabilidad de caracteres de historia de vida y sus posibles correlaciones, se continuó con el estudio de la base genética de la respuesta al estrés y la senescencia. Para ello se midió la longevidad a 25ºC, la resistencia al hambre (RH), la resistencia a la desecación (RD) y dos caracteres de resistencia al frío (RF). Todos los caracteres resultaron variables en las isolíneas de D. buzzatii, con una varianza entre líneas varía desde un 14% hasta un 38 a través de los diferentes caracteres medidos. Se encontró una correlación positiva entre la RH y la RF, sin embargo no comprobamos una correlación entre la RH y la longevidad o la RD. Las isolíneas mostraron una clara correlación positiva entre estos dos caracteres (RH y RF), en contraposición a la hipótesis del tradeoff planteada por Hoffmann et al (2005). También encontramos una correlación positiva entre la longevidad y RD y RF. Las correlaciones positivas entre los diferentes tipos de caracteres estudiados y también con la longevidad están en concordancia con la teoría del soma desechable, que propone justamente que las respuestas a los diversos tipos de estresores y la longevidad pueden evolucionar a través de los mismos genes. De acuerdo a esta teoría, los individuos que soporten mejor el estrés ambiental serán a la vez los más longevos.

Abstract:
Life span of different species can evolve through genes that are involved in soma reparation, such as stress response systems as proposed by the disposable soma theory and also through genes with harmful or deleterious late effect mutations. In nature organisms often support r stress condition as lack of food and low temperature. Energy plays a central role in organisms life, increased resistance to stress involves phenotypic changes at different levels, from intracellular signaling to life history characters. Starvation resistance is defined as the survival time in conditions of total food deprivation and its phenotypic values are between 20 to 200 hours in that condition. The resistance to low temperature is an ecologically relevant character that can regulate the insect activity level under cold conditions in nature. Adaptive characters are expected to be correlated to other life history characters. The aim of my thesis is to investigate the genetic basis that links aging with mechanisms of response to environmental stress. For this purpose we studied life history characters such as longevity, starvation and cold resistance and the relationship between characters following two different methodologies: QTL mapping and isofemales lines in the model organisms D. melanogaster and D. buzzatii, respectively. Longevity was measured at 25 °C under controlled conditions and also after a pre-treatment of heat stress on a set recombinant inbred lines (RIL) of D. melanogaster. The starvation resistance (SR) phenotypes of pre-adults and adults were used in a composite interval mapping of RIL lines of D. melanogaster. We identified several QTL that map on the three major chromosomes of Drosophila melanogaster that explain part of the variance in longevity. The heat treatment reduced the number of significant QTL, finding only two QTL for longevity (3C1-4F2 and 38E1-42A ranges) for this condition. These QTL, would be general longevity-QTL rather than specific of a condition. We found QTL that explain the variance of RH both in pre-adults and adults individuals. The QTL region, 16F3-19F6, was significant in both adult (males and females) and in the pre-adult stage of the life cycle. There was a positive correlation between longevity in treated male flies and adults-SR, in a RIL panels. In turn, 16F3- 19F6, 42A-49C and 67A-86E3 regions correspond to QTL that colocalized between both characters mapped, longevity and SR. This colocalization between characters is consistent with the disposable soma theory. With a different approach, using isofemales lines of D. buzzatii, we continued studying the genetic basis of stress response and senescence. In this way, we analyzed the variability of life history characters and their putative correlations, measuring longevity at 25 °C, starvation resistance (SR), desiccation resistance (DR) and two coldresistance traits (RF). All characters were variable in the isofemales lines of D. buzzatii, with a variance component between lines from 14% to 38 through the different characters measured. We found a positive correlation between SR and RF, but we found no correlation between SR and longevity or DR. The isofemales lines show a clear positive correlation between these two characters, as opposed to the trade-off hypothesis proposed by Hoffmann et al 2005.We also found a positive correlation between longevity and RD and also between longevity and RF. The positive correlations between the different characters studied and longevity are also consistent with the disposable soma theory, which proposes that the response to different kind of stressors and longevity could evolve through the same genes. According to this theory, individuals with enhanced environmental stress-resistance will be also the longer-lived.

Degese, María Sol. "Estudio de los caminos de señalización involucrados en la terminación de la señal de c-fos. Apagado de la activación a nivel del ARN mensajero" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La llegada de distintos tipos de señales a la superficie de las células altera la expresión génica mediante la activación de distintos caminos de transducción de señales. En este trabajo, nos enfocamos en el estudio de estímulos proliferativos y en como estos alteran la expresión del gen de respuesta inmediata, c-fos, factor de transcripción considerado como un proto-oncogén. Si bien tanto mensajero como la proteína Fos están ausentes en la mayor parte del ciclo celular, ambos aparecen y desaparecen rápidamente luego del estímulo. Nos hemos propuesto investigar la regulación de la estabilidad del ARN mensajero de c-fos dada por MAPKs. Una de las proteínas reguladoras de la estabilidad de los ARNm en la que centramos nuestro estudio es HuR, la cual se une al mensajero de c-fos en su región ARE o rica en adeninas y uracilos presente en la parte 3´UTR. Encontramos que p38 SAPK regula la asociación de HuR promoviendo su liberación del ARNm y llevándolo a degradación. Además p38 SAPK inhibe la fosforilación de HuR, sugiriendo la posible acción de alguna fosfatasa p38 dependiente. Encontramos también que KSRP se uniría al ARE de c-fos en los mismos sitios que HuR y su asociación puede revertir la estabilización dada por HuR o por la inhibición de p38, sugiriendo un rol positivo en la degradación del ARNm de c-fos.

Abstract:
Signals arriving to the cell surface may alter gene expression through the activation of different signaling pathways. In this work we focus in the study of proliferative stimuli and how they alter the expression of the immediate-early responsive gene c-fos, a transcription factor considered, as well, a proto-oncogene. Both messenger RNA and Fos protein are absent in most of the cell cycle, but they appear and disappear very fast upon stimulation. We have proposed to investigate the MAPKs´-dependent mRNA stability regulation. One of the most important regulators of the mRNA stability in which we focus our study is HuR that binds to the c-fos mRNA´s ARE (Adenine and uracil rich region) present in its 3´UTR. We found that p38 SAPK regulates the binding of HuR, promoting its dissociation from the mRNA and leading it to degradation. Besides, p38 SAPK inhibits HuR phosphorylation, suggesting a possible action of a p38 dependent phosphatase. We also found that KSRP may be binding to the c-fos ARE in the same sites as HuR and its association to this region is sufficient to revert the stabilization due both to HuR binding and to p38 activity inhibition, suggesting a positive role in c-fos mRNA degradation process.

Del Pezzo, Leandro M.. "Algunos problemas de optimización para el p-Laplaciano" (2009). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Del Ponte, Eduardo. "Contribución al estudio del género Triatoma Lap." (1920). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Del Valle Paz, Cristina. "Mecanismo de acción de ACTH : purificación, caracterización y función del sustrato endógeno de la Proteína Quinasa AMPc dependiente" (1996). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Trabajos previos sugerían la presencia en tejidos esteroidogénicos de una proteína soluble ACTH-y AMPc-dependiente capaz de estimular la síntesis de esteroides. En este trabajo se describe la purificación a homogeneidad de esta proteína y su caracterización. Apartir de zona fasciculata de adrenales de ratas tratadas con ACTH, y mediante cromatografías en columnas de DEAE-celulosa, Sephadex G-100, Mono Q-HPLC y Superosa-HPLC y un procedimiento de elución de proteínas de geles de poliacrilamida, se purificó una proteína de 43 kDa (p43) capaz de estimular "in vitro" la síntesisde esteroides. El efecto de p43 es dosis dependiente y es bloqueado por inhibidores de la fosfolipasa A2 (PLA2). La microsecuenciación peptídica demostró que p43 es una proteína novel. Anticuerpos anti-péptidos sintéticos bloquearon la actividad esteroidogénica de p43, lo que demuestra que la secuencia determinada corresponde a la proteína bioactiva. Ademas todos los anticuerpos obtenidos reconocieron a la proteina desnaturalizada. p43 es una fosfoproteína con varios sitiosde fosforilación y el grado de fostorilación de la misma se halla bajo control hormonal, lo cual sugiere que la fosforilación de p43 se produce a través de mecanismos que involucran la activación de la proteína quinasa AMPc dependiente (PKA) mediada por ACTH. p43 puede ser fosforilada "in vitro" por PK A, lo cual refuerza la hipótesis planteada. Se concluye que p43 es una novel fosfoproteína intermediaria en la estimulación de la sintesis de esteroides inducida por ACTH y que su mecanismo de acción posiblemente involucre, directa o indirectamente, la activación de una PLA2.

Abstract:
Previous reports have suggested the presence of a soluble protein that responds to CAMP signals to induce steroid synthesis in adrenocortical tissue. This work describes the purification of this protein from adrenal zone fasciculata cells and its characterisation. A five-step procedure that includes DEAE-cellulose, gel filtration, Mono Q and Superose-HPLC, and elution of the protein from SDS-PAGE was used. This procedure results in the purification to homogeneity of a protein of 43 kDa molecular mass which retains the capacity to stimulate steroid synthesis in an "in vitro" recombination assay. The stimulatory effect of p43 is dose-dependent and is inhibited by the use of phospholipase A2 inhibitors. p43 was subjected to aminoacid microsequencing. A series of antibodies was generated against synthetic peptides that match some of the partial sequences obtained from p43. Some of the antibodies block the steroidogenic activity of p43, demonstrating that the sequence corresponds to the bioactive protein. The antibodies bind also to the protein in its denatured form. p43 is a phosphoprotein exhibiting various phosphorylation sites, and its phosphorylation status is under hormonal control. These observations sustained by the fact that p43 can be phosphorylated "in vitro" by cAMP dependent protein kinase. It is concluded that p43 is a novel phosphoprotein, intermediary in the stimulation of steroid synthesis induced by ACTH, and that its mechanism of action involves, either directly or indirectly, the activation of PLA2.

Delfino, Cecilia María. "Virus de hepatitis B (HBV) y virus de hepatitis D (HDV) en Argentina: epidemiología molecular y variabilidad viral" (2013). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo principal de esta tesis fue estudiar la epidemiología molecular de la infección por HBV y HDV, determinar los genotipos y analizar la variabilidad genética de los aislamientos detectados en distintas poblaciones y regiones de Argentina. Se estudiaron donantes de sangre de Buenos Aires y Misiones, y Amerindios de cuatro comunidades originarias: Mbyá-guaraníes (Misiones), Kollas (Jujuy), Sagua-Huarpes (San Juan) y Wichis (Formosa). Las cifras de prevalencia para el HBsAg variaron de 0,2 a 0,73% para donantes y de 1,4 a 1,7% para originarios. El análisis filogenético de las secuencias de HBV determinó la circulación en ambas poblaciones de los subgenotipos A2, B2, C2, D3, D3/D6, F1b y F4. En las secuencias de HBV se detectaron mutaciones en regiones regulatorias asociadas a mayor severidad de la enfermedad hepática y en las proteínas del pre-Core (productoras de fenotipo e minus), del Core (dentro de los epítopes para linfocitos T), preS1-S2 (posiblemente asociadas a infección oculta por HBV), S (mutantes de escape a la respuesta inmune humoral), P (asociadas a resistencia antiviral) y X (implicadas en el desarrollo del hepatocarcinoma celular). Se describe por primera vez la circulación del genotipo 1 de HDV en donantes de sangre de Buenos Aires y en originarios de Misiones; con el interesante hallazgo de la detección de este virus en casos de infección oculta por HBV. Además, se identificaron mutaciones en el antígeno Delta que podrían justificar la no detección de anticuerpos anti-HDV (infección “oculta”) en estos casos.

Abstract:
The main objective of this thesis was to study the molecular epidemiology of HBV and HDV infection, to determine the genotypes and to analyze the genetic variability of the isolations detected in different populations and regions of Argentina. Blood donors from Buenos Aires and Misiones, and Amerindians from four original communities were studied: Mbyá-guaraníes (Misiones), Kollas (Jujuy), Sagua-Huarpes (San Juan) and Wichis (Formosa). The prevalence of HBsAg ranged from 0.2 to 0.73% in blood donors and from 1.4 to 1.7% for aborigines. The phylogenetic analysis of the HBV sequences revealed the circulation of A2, B2, C2, D3, D3/D6, F1b and F4 genotypes in both populations. In HBV sequences, mutations in the regulatory regions associated to more severe hepatic desease and in the pre-Core proteins (e minus producers), the Core (among the epitopes for T cells), preS1-S2 (possibly associated to occult HBV infection), S (escape mutants to the humoral immune response), P (associated to antiviral resistance) and X (implicated in the development of hepatocellular carcinoma). We describe for the first time the circulation of HDV genotype 1 among blood donors of Buenos Aires and aborigines of Misiones; only among those with occult HBV infection. Moreover, we identified mutations in the Delta antigen which could explain the non-detection anti-HDV antibodies (“occult” infection) in these cases.

Delgadin, Tomás Horacio. "Respuesta del eje hormona de crecimiento (GH)/factor de crecimiento tipo insulina-I (IGF-I) a alteraciones en la ingesta en el pez cíclido Cichlasoma dimerus" (2016-03-30). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El eje hormona de crecimiento (GH)/ factor de crecimiento tipo insulina 1 (IGF-1) es clave en la regulación del crecimiento somático en los vertebrados. Existen dos tipos de receptores para GH (GHR1 y GHR2), aunque actualmente no hay consenso sobre su especificidad. Cichlasoma dimerus en un pez cíclido social capaz de crecer a una tasa elevada en condiciones de laboratorio, pero la regulación de su crecimiento aún no ha sido estudiada. Esta Tesis se propone evaluar el crecimiento somático y su relación con el eje GH/IGF-1 bajo condiciones de ayuno y realimentación. Para ello en una primera etapa se caracterizó a GHR2, ya que en esta especie no estaba descripto. Se obtuvo una secuencia parcial que incluye parte de la región extracelular, el dominio transmembrana y parte de la región intracelular. Cuatro semanas de ayuno resultaron en un arresto del crecimiento somático, un incremento de la expresión de GHR2 en hígado y músculo y una disminución de IGF-1 muscular, sin variaciones en GHR1 ni en IGF-2 en ambos tejidos. Tres semanas de realimentación restituyeron completamente el estado nutricional y condujeron a un estado de “crecimiento acelerado” asociado a un incremento en la eficiencia de conversión alimentaria (FCE) sin observarse hiperfagia. Además, se restablecieron los niveles de expresión de GHR2 e IGF-1 a valores controles. Interesantemente la expresión de GH se incrementó a los 3 días de realimentación. Estos resultados muestran que no sólo hay una recuperación rápida del estado nutricional debido a la realimentación tras el ayuno prolongado, sino que se verifica una fase de crecimiento compensatorio asociado a cambios en el eje GH/IGF-1. Esto resultados nos permiten tener un conocimiento a nivel molecular de los cambios asociados al ayuno-realimentación que puede tener implicancias al momento de diseñar estrategias de crecimiento en acuicultura.

Abstract:
Growth hormone (GH)/insulin-like growth factor 1 (IGF-1) axis is the key regulator of somatic growth in vertebrates. Two types of growth hormone receptors have been described in teleost fish (GHR1 and GHR2) although its specificity is under debate. Cichlasoma dimerus is a social cichlid fish capable of growing at high rates under laboratory conditions, but knowledge on somatic growth regulation is still unclear. The aim of this study was to evaluate the somatic growth and changes in the GH/IGF-I axis after 4 weeks of food deprivation and refeeding in C. dimerus. As a first step, we obtained a partial sequence of GHR2, consisting of a fragment of the extracellular domain, the transmembrane domain and a region of the intracellular domain. Fasting impaired body growth and increased liver and muscle GHR2 expression along with a reduction in muscle IGF-1 mRNA levels. Additionally, no changes were observed in liver IGF-1, muscle and liver GHR1 and IGF-2 expression. Three weeks of refeeding completely restored nutritional status of fish and led to a fast growing period during the first week associated with higher feed conversion efficiency values but surprisingly, with no hyperphagia. In addition, expression of GHR2 and IGF-1 was recovered to control levels after three days of refeeding. Interestingly, GH mRNA levels were increased at day 3 of refeeding. These results not only show a complete recovery of nutritional status of fish with refeeding but also demonstrate a compensatory growth period associated with alterations on the GH/IGF-1 axis. Taken together, these results allow us to get knowledge on molecular aspects related to fasting-refeeding in fish that may have implications on feeding manipulation in aquaculture.

Della Penna, Angela Beatriz. "Impacto del herbicida paraquat sobre invertebrados acuáticos" (2004). Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El paraquat es un herbicida, ampliamente usado en ambientes terrestres y acuáticos. El objetivo del presente trabajo fue investigar algunos efectos tóxicos del paraquat en dos especies no blanco de invertebrados acuáticos. Especificamente se emplearon ejemplares adultos del oligoqueto Lumbriculus variegatus J. y moluscos gastrópodos pigmentados y no pigmentados de Biomphalaria glabrata S. En primer término se determinaron los valores de CL50, exponiendo ambos organismos en condiciones agudas. El paraquat presente en un producto formulado comercial resultó ser más tóxico para la especie L. variegatus que la solución conteniendo el compuesto puro. Para organismos de L. variegatus la toxicidad del paraquat formulado comercial aumenta con el aumento de temperatura y disminuye por el efecto de material particulado presente en el medio del bioensayo. Los valores de CL50 (96 horas y 25 +/- °C) resultaron similares para L. variegatus y ejemplares pigmentados de B. glabrata resultaron ser considerablemente más sensibles. En segundo lugar, se efectuaron bioensayos subletales a fin de investigar diversas respuestas bioquímicas. En este trabajo se reportan, por primera vez según nuestro conocimiento, valores de los niveles de las poliaminas putrescina, espermidina y espermina, en organismos controles de las dos especies de agua dulce en estudio. Por tratamiento a un nivel de 0,5 mg/L se observó que los niveles de poliaminas resultaron ser modificados por acción del paraquat producto comercial en L. variegatus. En cambio no se observaron diferencias significativas, con respecto a los controles, en organismos pigmentados y no pigmentados de B. glabrata. Los organismos de L. variegatus. al igual que ejemplares pigmentados de B. glabrata, no evidenciaron cambios en los procesos de peroxidación lipídica por acción del paraquat formulado comercial a un nivel de exposición de 0,5 mg paraquat/L. En cambio, tras 48 horas de exposición los organismos no-pigmentados de B. glabrata presentaron un aumento significativo en la peroxidación de lípidos. Los resuñtados que se obtuvieron en el presente trabajo permiten proponer tanto el análisis de niveles de poliaminas como la investigación de procesos de lipoperoxidación como posibles parámetros biomarcadores de contaminación por paraquat

Dellarole, Mariano. "E2, regulador de transcripción y replicación del papilomavirus humano: interacción con ADN, dinámica conformacional y divergencia evolutiva" (2010). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Más de 50 tipos de papilomavirus humanos (HPV) infectan epitelio mucoso causando una variedad de lesiones benignas y malignas. El dominio C-terminal de la proteína E2 de HPV (E2C) discrimina entre cuatro sitios de ADN altamente similares regulando el ciclo de vida del virus vía la activación de la replicación y la activación y/o represión de la transcripción. Con el fin de tratar de entender la naturaleza de la interacción entre E2C y ADN, realizamos un análisis detallado del complejo utilizando herramientas bioinformáticas y el contenido de información en las secuencias proteicas y nucleotídicas y usando técnicas biofísicas, proteínas E2C recombinantes y sitios sintéticos de ADN específicos y no-específicos. Antes de estudiar el rol de la interacción E2C-ADN, nos focalizamos en el proceso de polimerización no-funcional de E2C dado que su desarrollo es reprimido por la presencia de ADN específico. Inducida por temperatura, la polimerización de E2C se desencadena mediante la formación de un núcleo estructurado y finaliza en un paisaje morfológico de oligómeros solubles con propiedades amiloideas. El estudio computacional de la interacción E2-ADN de todos los tipos de HPV mucosos indica que las proteínas E2 de distintos tipos poseen propiedades de discriminación de ADN similares. Las diferencias en la interacción E2-ADN se encuentran principalmente en la secuencia de ADN específico, en acuerdo con el análisis de la unión de E2C a diferentes sitios mediante titulaciones isotérmicas de calorimetría. Basado solamente en la secuencia de ADN, logramos predecir diferencias en la energía de unión las cuales se ordenaron en seis grupos de afinidades discretas. Ciertas jerarquías de afinidades como también distancias entre sitios y presencia de sitios de metilación se encontraron estadísticamente asociados con tipos de HPV propensos a ser malignos. Estudiamos la estabilidad y la propiedad de discriminación de secuencia de cinco proteínas E2C homólogas de identidad de secuencia proteica en el rango 44% al 77%. La desnaturalización al equilibrio y la cinética de desplegado en cloruro de guanidinio mostró que todos los dominios son homodímeros estables que se desnaturalizan vía un mecanismo de dos estados. Medimos la unión a distintos sitios de ADN y confirmamos que el mecanismo de unión para todos los complejos es el mismo en base a una genuina compensación entropico-entálpica. Nuestros resultados muestran que la inusual estructura de barril-beta de E2C puede acomodarse a numerosas mutaciones manteniendo las propiedades cruciales de conformación y función. Pero la unión cooperativa a sitios adyacentes de ADN mostró que los componentes entálpicos-entrópicos de la reacción como la deformación del ADN puede divergir entre distintas homólogas en acuerdo con un fuerte acoplamiento entre la dinámica global de la proteína y el reconocimiento del ADN.

Abstract:
More than 50 Human papillomavirus (HPV) types infect mucosal epithelia causing a variety of benign and malign lesions. The C-terminal domain of HPV E2 protein (E2C) discriminates between four highly similar cognate DNA sites in order to regulate the virus life cycle by activating replication and repressing and/or activating transcription. In order to try to understand the nature of the interaction between E2C and DNA, we performed a detailed analysis of the complex using bioinformatics tools and the information content on DNA sequences and using biophysical techniques and recombinant engineered and homologous E2C proteins and synthesized specific and nonspecific DNA sites. Before studying the role of the E2C-DNA interaction, we focused on the nonfunctional polymerization process of E2C as its development is repressed by the presence of DNA binding sites. Triggered by heat, the polymerization of E2C starts by formation of a stable and structured nucleus and ends in an organized morphology landscape of soluble amyloid-like oligomers. The computational study of the E2-DNA interaction of all mucosal HPV types, indicates that E2 proteins have similar DNA discrimination properties. Differences in E2-DNA interaction among HPV types lie mostly in the target DNA sequence, in agreement with the analysis of binding of E2C to different sites using isothermal titration calorimetry. Based on DNA sequences only, we could predict differences in binding energies which clustered into six discrete affinity hierarchies. Finally, certain distances between sites, affinity hierarchies and their eventual changes upon methylation, are statistically associated with high-risk types. We studied the stability and DNA discrimination properties of five homologous E2C proteins with sequence identities ranging from 45% to 77%. Equilibrium denaturation and unfolding kinetics in guanidinium chloride showed that all five domains are very stable homodimers that unfold via a two-state mechanism. We used isothermal titration calorimetry to follow binding of the five proteins to three different DNA sites. Genuine enthalpy-entropy compensation confirms that the binding mechanism is the same for all complexes. The five domains have nearly identical capacities for DNA sequence discrimination despite the high degree of sequence divergence. Our results show that the unusual E2C beta-barrel can accommodate many mutations while retaining its crucial conformational and functional properties. But cooperative binding to tandem DNA E2 site showed that the enthalpic-entropic components of the reaction and DNA deformation can diverge in agreement with a strong coupling between global dynamics and DNA recognition.

Delle Donne, Diego Andrés. "Estudios poliedrales de problemas de coloreo de grafos" (2016-10-11). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los problemas de coloreo de vértices surgen en una amplia gama de situaciones de la vida real. Ejemplos de ellos son los problemas de asignación de frecuencias en redes de telecomunicaciones, problemas de asignación de aulas a las materias de una universidad e incluso algunos problemas de planificación (scheduling). En general, cualquier problema de asignación de recursos a tareas que contemple incompatibilidades entre pares de tareas para usar el mismo recurso, puede ser visto como un problema de coloreo de los vértices de un grafo. Existen muchas variantes de problemas de coloreo de grafos motivadas generalmente por restricciones reales, tales como Precoloring extension, μ-coloring, (γ, μ)-coloring y List-coloring, entre otras. La programación lineal entera (PLE) ha demostrado ser una herramienta muy adecuada para resolver problemas de optimización combinatoria. En los últimos 15 a˜nos la PLE fue aplicada con éxito a problemas de coloreo de vértices recurriendo a distintas formulaciones para el problema clásico de coloreo tales como el modelo estándar, la formulación por representantes, el orientation model y la formulación por conjuntos independientes, entre otras. Si bien muchos problemas de coloreo de grafos pueden ser resueltos en tiempo polinomial en ciertas familias de grafos, la mayoría de estos problemas no está “bajo control” desde el punto de vista poliedral. Es decir, no se conocen formulaciones de programación lineal entera con descripciones completas de los poliedros asociados. En el contexto de la teoría poliedral, la equivalencia entre los problemas de optimización y separación sugiere que para estos problemas debería existir alguna formulación cuyo problema de separación asociado pueda ser resuelto en tiempo polinomial y, más aun, tal que el poliedro asociado admita una caracterización “elegante”, en términos de desigualdades lineales. La búsqueda de tales caracterizaciones es el objetivo principal del presente trabajo de tesis. El objetivo teórico es completar la contraparte poliedral de aquellos problemas de coloreo de grafos que se encuentren ya bien resueltos por medio de técnicas combinatorias. El estudio de estos poliedros puede llevarnos a un mejor entendimiento de sus estructuras permitiéndonos de esta forma encontrar nuevas familias de grafos para las cuales algunos problemas de coloreo tengan resoluci ón polinomial, aportando así nuevos resultados útiles en la práctica. De este estudio surgen también nuevas familias de desigualdades válidas que pueden incorporarse a algoritmos de planos de corte para contribuir así a mejorar su performance en la práctica. Con estos objetivos, en esta tesis estudiamos los poliedros asociados a cuatro formulaciones distintas para el problema clásico de coloreo: el modelo estándar, la formulación por representantes, el orientation model y la formulación por conjuntos independientes. Presentamos adaptaciones de algunas de estas formulaciones para distintas variantes de coloreo y en algunos casos mostramos que los problemas de optimización en los poliedros asociados son polinomialmente equivalentes al problema de optimización sobre el poliedro de coloreo clásico. Damos caracterizaciones completas de los poliedros de coloreo para grafos que surgen de ciertas operaciones. Para algunas de las formulaciones estudiadas, hallamos descripciones completas de los poliedros asociados a distintas familias de grafos, entre ellas los árboles, grafos block, split y co-interval, entre otras. Estudiamos también la relaci ón entre los poliedros de coloreo Pcol y el poliedro de conjuntos independientes STAB y mostramos que en algunos casos, el primero es una cara del segundo (o hasta coincide con éste) para un grafo asociado al grafo original. Estos resultados nos permiten obtener nuevas familias de desigualdades válidas para Pcol basadas en desigualdades válidas conocidas para STAB. Más aun, a raíz de estos resultados hallamos descripciones completas de Pcol para algunas familias de grafos en las que se conoce una descripción de STAB para el grafo asociado. Presentamos también un estudio poliedral clásico para el orientation model en el cual describimos algunas familias de desigualdades válidas que definen facetas del poliedro asociado. Basados en la estructura de estas familias, presentamos el procedimiento de path lifting, que combina dos desigualdades válidas genéricas y un camino entre dos vértices particulares y genera una familia infinita de desigualdades válidas. Mostramos que este procedimiento puede generar facetas del poliedro de coloreo asociado y damos condiciones suficientes para que esto ocurra.

Abstract:
Vertex coloring problems arise in a wide range of real-life situations. Some common examples are frequency assignment problems in telecomunication networks, classroom assignment problems at universities and even certain scheduling problems. In general, any problem consisting in the assignment of some resources to jobs with incompatibility conditions among these jobs to use the same resource can be seen as a vertex coloring problem on some graph. There exist many variants of the vertex coloring problem, usually motivated by real restrictions, such as Precoloring extension, µ-coloring, (ɣ, µ)-coloring and List-coloring, among others. Integer linear programming (ILP) has prooved to be a powerful tool to solve combinatorial optimization problems. In the last 15 years it has been successfully applied to vertex coloring problems by resorting to different formulations for the classical coloring problem such as the standard model, the representatives formulation, the orientation model and the independent set formulation, among others. Despite the fact that many vertex coloring problems are polynomially solvable on certain graph classes, most of these problems are not “under control” from a polyhedral point of view. This is, we don’t know integer programming formulations with complete descriptions for the associated polytopes. In the context of polyhedral theory, the equivalence between optimization and separation suggests for these problems the existence of integer programming formulations with polynomially-solvable separation problems and, moreover, whose associated polytopes admit elegant characterizations, in terms of linear inequalities. The search for such characterizations is the main goal of this thesis. The theoretical goal is to complete the polyhedral counterpart of those coloring problems which we know can be solved in polynomial time by means of combinatorial techniques. The study of these polytopes can lead us to a better understanding of their structures revealing some insight by which we can find new classes of graphs where vertex coloring problems are polynomial, thus contributing with new practical results. This study also yields new families of valid inequalities which may be used in cutting plane schemes, thus improving the performance on the resolution of vertex coloring problems. With these objectives, in this thesis we study four different known formulations for the classical graph coloring problem: the standard model, the representatives formulation, the orientation model and the independent set formulation. We present adaptations of some of these formulations for several variants of vertex coloring and, in some cases, we show that the optimization problems associated with the corresponding polytopes are polynomially equivalent to the optimization problem associated to the polytope for the classical vertex coloring problem. We give complete characterizations of coloring polytopes for graphs that are the product of some graph operators. For some of the studied formulations, we found complete descriptions for the associated polytopes to several classes of graphs such as trees, block, split and co-interval graphs, among others. We further study the relation between coloring polytopes Pcol and stable set polytopes STAB and we show that, in some cases, the coloring polytope for a graph G corresponds to a face of (or even coincides with) STAB( ˜G ) for a particular graph ˜G. These results allowed us to deduce new families of valid inequalities for Pcol based on valid inequalities known for STAB. Furthermore, from these results we found complete descriptions for Pcol for some classes of graphs for which STAB is known for the associated graph. We also present a classical polyhedral study of the orientation model, where we introduce new families of facet-inducing valid inequalities. Based on the structure of these families, we introduce the path lifting procedure, which combines two generic valid inequalities and a path between two particular vertices and generates an infinite family of valid inequalities for the associated polytope. We show that this procedure is able to generate facets of the polytope and we give sufficient conditions for this to occur.

Dellepiane, Nora Ida. "Estudio de las cepas de virus rábico utilizadas en la preparación de vacuna de cerebro de ratón lactante (tipo Fuenzalida - Palacios)" (1984). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo se comparó la capacidad inmunogénica de la vacuna antirrábica del cerebro de ratón lactante (CRL) trivalente con la de tres vacunas monovalentes elaboradas con cada una de las cepas virales que componen antigénicamente la vacuna clásica. Tanto la vacuna trivalente, como las monovalente CVS y 51, alcanzaron valores antigénicos elevados en pruebas de potencia NIH. No ocurrió lo mismo con la vacuna monovalente 91, que mostró ser un inmunógeno pobre. La vacuna trivalente fue superior a todas las monovalentes cuando se compararon la velocidad en inducir la respuesta de anticuerpos y los títulos alcanzados al administrarlas en diluciones crecientes. Los títulos de anticuerpos obtenidos con las vacunas trivalente y monovalentes CVS y51, así como su duración en el tiempo, fueron comparables; la vacuna 91 en cambio, indujo bajos títulos de anticuerpos neutralizantes. El estudio de la capacidad de neutralización cruzada de los anticuerpos inducidos, mostró que el virus 91 difiere antigénicamente de los virus CVS y 51. Al compararse la eficacia de cada vacuna en proteger a ratones inmunizados con ellas del desafío intracerebral con los virus fijos CVS, 51 y 91 y los virus calle 1026/80 y 1426/79, se comprobó que excepto la 91, todas protegían frente a todos estos virus con excepción del 91, frente al cual lo hacían sólo parcialmente. En contraposición, la vacuna 91 fue la única realmente eficaz para proteger a los ratones del posterior desafío con la cepa de virus homóloga, y fue ineficiente para protegerlos del desafío con los virus CVS, 51 y 1426/79. Los resultados de los tratamientos postexposición mostraron que tanto la vacuna trivalente como las monovalentes CVS y 51, a diferencia de la 91, protegen de la infección letal por vía parenteral con virus calle. No se pudo detectar interferón en el suero de los ratones inmunizados con ninguna de las vacunas. Por consiguiente no se pudo establecer que exista una relación directa entre producción de interferón y protección en tratamientos postexposición. Se demostró que la técnica de CIE utilizada para cuantificar anticuerpos en el suero de ratones inmunizados, daba títulos de anticuerpos correlacionados con los obtenidos con la prueba in vivo.

Delorenzi, Alejandro. "Modulación de la memoria y osmorregulación en chasmagnathus : relación funcional y papel del sistema angiotensinérgico" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Delprat, María Alejandra. "Estudio de reordenamientos polimórficos e inducidos en los cromosomas politénicos de la mosca del Mediterráneo: Ceratitis capitata" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La mosca del Mediterráneo, Ceratitis capitata, es una de las plagas más perjudiciales, pero como modelo experimental es aún poco conocido. Para erradicarla se aplica la Técnica del Insecto Estéril empleando líneas de sexado genético. Uno de los problemas de estas líneas es la pérdida del ligamiento entre el gen separador y el cromosoma Y, debido a eventos de recombinacíón. El siguiente trabajo se propuso aportar información a través de los cromosomas politénicos para implementar mejoras en la estabilidad de las líneas autosexantes Muestras de distintas poblaciones naturales de Argentina fueron estudiadas en busca de reordenamientos espontáneos que pudieran introducirse en las líneas autosexantes como supresores de la recombinacíón. Se localizó la posición del locus sw empleado como gen separador en las líneas obtenidas en nuestro laboratorio y se estudiaron además 17 nuevas líneas de sexado genético para caracterizar el tipo de reordenamiento producido por la radiación y seleccionar así aquellas con menores probabilidades de recombinacíón. Por último, se realizaron ensayos de Hibridación in situ, ajustando una técnica directa de sondas fluorescentes, tanto para cromosomas politénicos de glándulas salivares como para cromosomas mitóticos. Este trabajo en conjunto, aporta información novedosa que permitirá implementar mejoras en las líneas de sexado genético.

Abstract:
Although the Mediterranean fruit fly (Ceratitis capitata) is an important pest of many crops around the world, some aspects of its biology are still unknown. Currently, the Sterile Insect Technique is used to control or eradicate this pest. Genetic Sexing strains are being reared to release only males. One of the problems of such strains are recombination that end in the separation of the male—determining Y chromosome and the sexing gene. The aim of this study was to analyse aspects of the cytology of this species to implement improvements in the stability of these sexing strains. Samples from different localities of Argentina were analysed in order to detect spontaneous rearrangements that could suppress recombination. The sexing gene sw, isolated in this laboratory, was localised by means of polytenic chromosomes analyses. Moreover, 17 new strains were analysed to select those with lower recombination probabilities. Finally the In Situ Hybridisation direct technique was used to analyse both polytenic and mitotic chromosomes. To sum up this work provides novel information that will improve the genetic sexing strains and hence the eradication of such important pest.

Deluca, Mónica Eva. "Uso de ácidos biliares como precursores sintéticos de pregnanos con aplicación en el estudio del mecanismo de hidroxilación biológica en Carbono 14 de cardenólidos" (1985). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La biosíntesis de los glicósidos cardenólidos ha sido estudiada en sus aspectos primarios y se conoce muy poco acerca de la hidroxilación en posición 14 con configuración β. Hubo varias hipótesis para este mecanismo que aún no ha sido aclarado. Debido a que existían datos contradictorios relacionados con la participación de un doble enlace en posición 8(14), se decidió sintetizar e inocular |21- 14C| 3 β-hidroxi-5β-pregn-8(14)-en-20-ona. simultaneamente se desarrolló la síntesis de |21-14C| 3β -hidroxi-5β-pregnan-20-ona, que es un precursor conocido del camino biosintético de cardenólidos, con el fin de usarlo como control en los ensayos de inoculación en plantas del género Digitalis. Para preparar ambos compuestos se usaron ácidos biliares como material de partida porque además de presentar las características estructurales necesarias para realizar las síntesis, resultaron ser materias primas económicas y fácilmente accesibles. Sobre los esteroides de partida se efectuaron las siguientes modificaciones: 1) Degradación de la cadena lateral del ácido biliar a una cadena de tipo ácido etiánico. 2) Inversión de la configuración del carbono 3. 3) Deshidratación del hidroxilo de carbono 7 e isomerización del doble enlace formado a la posición 8(14). (Esta modificación sólo se aplicó en una de las síntesis). 4) Construcción de una cadena lateral del tipo 20-ceto pregnano a partir de un ácido etiánico. El sustrato a investigar se administró a plantas de D. purpurea no siendo incorporado por las mismas. Como fue notoria la falta de datos de RMN-13C de los compuestos 5β-esteroidales sintetizados, se asignaron los espectros de una serie de esteroides de este tipo que están estructuralmente relacionados. Estos se obtuvieron como intermediarios en los caminos de síntesis, se adquirieron comercialmente o se prepararon especialmente para el estudio. Con los valores obtenidos se analizó la influencia de los cambios configuracionales y funcionales en el carbono 3, de la introducción de un doble enlace en la posición 8(14) y de la presencia de diferentes cadenas laterales.

Dengra, Silvina. "Estudios experimentales y teóricos del transporte iónico en electrodeposición en celdas delgadas" (2004). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se estudió el transporte iónico y la morfología de crecimiento en depósitos ramificados en celdas delgadas a través de mediciones experimentales y teóricas, y el modelado computacional. Se usaron en forma simultánea las técnicas de Schlieren y partículas trazadoras para seguir la evolución de los frentes de concentración y los rollos convectivos en regímenes gravitoconvectivos y electroconvectivos dominantes. El modelo teórico macroscópico se basa en primeros principios, la ecuación de Nernst- Planck para el transporte de iones, la ecuación de Poisson para el potencial electrostático y la ecuación de Navier-Stokes para el flujo de fluido. Se presentan simulaciones numéricas para configuraciones de celdas reales usando computación en serie y paralela. En las simulaciones numéricas en paralelo, se hizo uso de técnicas de descomposición por dominios y métodos fuertemente implícitos para su implementación en un cluster tipo Beowulf con MPI bajo Linux. Esto permitió la utilización de mallas muy finas en dorninios distorsionados que se acercan más a la realidad de los experimentos físicos realizados, con el beneficio de un speed up casi lineal para algunos casos. La teoría y las simulaciones numéricas predicen la completa interacción de los frentes, la generación de vértices y una correcta evolución espacio-temporal, en concordancia con los resultados experimentales observados.

Abstract:
Ion transport and growth morphology in ramified deposits in thin-layer cells are studied through experimental measurements and theoretical and computational modeling. Simultaneous Schlieren and particle image velocimetry techniques are used to follow front development of concentration fields and convection rolls in gravitoconvection and electroconvection prevailing flows. The theoretical macroscopic model is based on first principles, using the Nernst-Planck equations for ion transport, the Poisson equation for the electrostatic potencial and the Navier-Stokes equations for the fluid flow. Numerical simulations in realistic cell configurations using serial and parallel computing are presented. In the parallel simulations, use is of domain decomposition techniques with a strongly implicit iterative method and its implementation in a Beowulf cluster under MPI and Linux. This allows the utilization of very fine grids in highly distorted domains with a more realistic physical parametrization and results in a robust algorithm attaining almost linear speed up. Theory and simulations predict full front interaction, vortex generation and merging, and a space-time fronts evolution, in close agreement with the results observed in the experiments.

Denis, Alicia. "Problemas de difusión y de frontera móvil en aleaciones de uso nuclear" (1992). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Depetris Chauvin, Ana. "Análisis de la transmisión de la información circadiana en Drosophila" (2013-07-11). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El control rítmico del comportamiento depende de la actividad de la red circadiana en el cerebro. En Drosophila existen dos modelos que dan cuenta del origen de las oscilaciones circadianas, uno basado en las oscilaciones moleculares de proteínas específicas y otro basado en la actividad de membrana. Por otra parte, desde el marcapasos central (las neuronas s-LNvs) la información circadiana es transmitida hacia el organismo a través de vías de salida entre las que se destaca el neuropéptido PDF. A su vez, las terminales dorsales de las s-LNvs presentan remodelamiento estructural diario pudiendo esto implicar cambios circadianos en los contactos sinápticos. En esta tesis probamos la validez del modelo basado en las oscilaciones moleculares como generador de las oscilaciones circadianas, mientras que determinamos a la actividad eléctrica de membrana como una importante vía de salida desde el marcapasos central. Demostramos que la actividad eléctrica de las neuronas PDF es crucial para determinar los niveles del neuropéptido en las terminales axonales, la plasticidad estructural y de las zonas sinápticas, con el consiguiente efecto sobre el comportamiento locomotor rítmico. Por otra parte, la realización de un screen de circuitos postsinápticos a las neuronas PDF utilizando la técnica de GRASP arrojó resultados que apoyan fuertemente nuestra hipótesis de cambios circadianos en la conectividad. En paralelo, determinamos a las metaloproteasas de matriz (MMPs) como reguladores claves de la plasticidad estructural de las neuronas PDF, así como a moléculas implicadas en fasciculación axonal y podado de neuritas. Como resultado de este análisis identificamos a MMP1 como un modulador del neuropéptido PDF, demostrando la importancia de MMP1 en el control de los ritmos circadianos.

Abstract:
Circadian control of behavior depends on the activity of clock neurons in the brain. Two models have been proposed for the generation of circadian oscillations in Drosophila, one based on the molecular oscillation of clock genes and the other one on cyclic membrane activity. Although most of the evidence supports a transcriptional/translational negative feedback loop as the most important one, its relevance has recently been questioned. From the master clock, localized in the s-LNv neurons in the fly brain, circadian information is transmitted through output signals such as the neuropeptide pigment dispersing factor (PDF). In addition, axonal terminals of the s-LNvs display daily structural plasticity and such remodeling could imply circadian changes on synaptic contacts of PDF neurons. In this thesis we demonstrated that molecular oscillations of clock genes are the basis of the circadian oscillator, and that the electrical activity coordinates output signals from the master clock. We also showed that electrical activity of PDF neurons affects the levels of the neuropeptide, abrogates the remodeling of the terminals and even reduces the number of synaptic active zones, ultimately controlling circadian locomotor activity. On the other hand, through a screen of postsynaptic targets using the GRASP technique we obtained data that strongly supports our hypothesis of circadian changes in connectivity. In parallel we investigated the relevance of matrix metalloproteinases (MMPs) in the control of the structural plasticity of the PDF neurons, as well as the importance of molecules involved in axonal fasciculation and pruning. As a result, we identified MMP1 as a new modulator of the neuropeptide PDF highlighting the relevance of MMP1 in the control of circadian locomotor behavior.

Depine, Ricardo Angel. "Teoría de eficiencia de redes de difracción" (1982). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Depino, Amaicha Mara. "Estudio de la interleuquina-1 en modelos fisiológicos y patológicos del sistema nervioso central" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Las citoquinas pro-inflamatorias son inducidas en condiciones patológicas en el sistema nervioso central (SNC) en situaciones de trauma o infección, y se ha demostrado que son capaces de exacerbar y/o disminuir una lesión (Rothwell and Luheshi, 2000). Asimismo, son expresadas de manera constitutiva e inducible por las células del SNC y actúan fisiológicamente sobre las neuronas en el cerebro normal adulto, modulando la plasticidad sináptica, la transmisión sináptica, etc. (Vitkovic et al., 2000). El sistema de la interleuquina-l (IL-1) juega un rol decisivo en la respuesta inflamatoria. La expresión de sus ligandos (IL-1α, lL-1β e IL-1ra) y de sus receptores ha sido demostrada en varias regiones del SNC y bajo diversas condiciones (Rothwell and Luheshi, 2000). Otros trabajos han demostrado no sólo una variedad de efectos de la lL-1 en el cerebro o en neuronas y glia in vitro, sino que los resultados publicados hasta la fecha resultan muchas veces contradictorios, demostrando efectos opuestos en el mismo sistema de estudio. El objetivo general de esta tesis es estudiar de manera sistemática y profunda los roles fisiológicos y los efectos farmacológicos de la IL-1 en el cerebro. Para ello se investigó a la molécula en cuatro modelos diferentes en los cuales se estudiaron las respuestas de la glia, las citoquinas, la neurodegeneración y las variaciones en el comportamiento, de forma de obtener una visión global de la fisiología de la IL-1 en el SNC. (1) Observamos similitudes y diferencias regionales en la respuesta aguda a la IL-1β. Por ejemplo, detectamos reclutamiento de neutrófilos en todas las regiones inyectadas, pero neurodegeneración sólo en el giro dentado. (2) En un modelo en rata de la enfermedad de Parkinson observamos Ia activación atípica de la microglia en la región lesionada, con una regulación particular de la expresión de citoquinas. (3) Demostramos que la neurogénesis en el mesencéfalo no es un fenómeno fisiológicamente relevante. (4) Demostramos que la IL-1α endógena hipocampal tiene un rol modulador del aprendizaje aversivo. De esta manera, caracterizamos funciones y/o efectos de la IL-1 en el SNC, obteniendo evidencia empírica no sólo de funciones especificas de la IL-1 sino también de características más generales de la gliosis/inflamación en el SNC. Así, observamos que los efectos de la IL-1 dependen tanto de las concentraciones utilizadas como de la región que se está estudiando y, probablemente, de la densidad glial en la misma. Por ejemplo, observamos que la IL-1 endógena modula el aprendizaje, pero que, cuando se inoculan cantidades farmacológicas de la misma, causa degeneración en la misma región (hipocampo).

Abstract:
Pro-inflammatory cytokines are induced in pathological conditions of the central nervous system (CNS) both after trauma and infection, and it was shown that they can exacerbate and/or diminish the lesion (Rothwell and Luheshi, 2000). Moreover, they are expressed by brain cells both constitutiver and after induction, and act physiologically on neurons in the adult nonnal brain, modulating synaptic plasticity, synaptic transmission, etc. (Vitkovic et al., 2000). The interleukin-l (IL-l) system plays an important role in the inflammatory response. The ligands (IL-1α, IL-1β and IL-1ra) and their receptors are expressed in many regions of the CNS and under different conditions (Rothwell and Luheshi, 2000). IL-l agonists have many effects both in the brain and in neurons and glia in vitro. Nevertheless, many reported effects are contradictory and even opposing. The main aim of this thesis is to gain a deep insight into the physiological roles and pharrnacological effects of IL-l in the brain. We used four different models to study the glial response, cytokine expression, neurodegeneration and behavior, to achieve a global idea of the physiology of IL-l in the CNS. (l) We observed similarities and differences in the regional response of the CNS to the acute administration of IL-1β. For example, we detected neutrophil recruitment in all injected regions, but neurodegeneration only in the dentate gyrus. (2) ln a rat model of Parkinson's disease we observed an atypical microglial activation in the lesioned region, with a tight regulation of cytokine expression. (3) We showed that there is no physiologically relevant neurogenesis in the adult rat mesencephalon. (4) We demonstrated a modulatory role of endogenous hippocampal IL-1α in aversive learning. In summary, we characterized the function and/or effects of IL-l in the brain, finding evidence not only for specific functions of IL-l but also for more general effects of gliosis/inflammation in the CNS. Indeed, we observed effects of IL-l that depend both on the concentration used and on the region under study, and probably on the glial density in it. For example, we observed that the endogenous IL-l modulates learning but exogenous IL-l causes degeneration in the same region (the hippocampus).

Desbats, María Andrea. "Estudio de la dinámica y función de la ¨Proteína Heterocromática 1 gama¨ durante el proceso de diferenciación celular" (2010). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La diferenciación celular es un proceso complejo en el cuál un grupo específico de genes se activa y el resto permanece silenciado. HP1γ se asocia a genes activos, pero se desconoce su rol durante la diferenciación celular. En los preadipocitos HP1γ localiza tanto en heterocomo eucromatina, pero cuando se induce la diferenciación HP1γ rápidamente se concentra en un polo del núcleo excluyéndose de regiones heterocromáticas. La polarización de HP1γ no se observa en células que no se diferencian. La fosforilación de HP1γ en Ser93 se induce durante la adipogénesis y también se localiza polarizadamente. La polarización de HP1γ depende de la transcripción, de la integridad del RNA y DNA, y de la señalización por PKA. Interesantemente, marcas epigenéticas que marcan activa transcripción y la RNA pol II colocalizan con HP1γ en dicho polo nuclear. Este dominio muestra altos niveles de incorporación de BrUTP y de acumulación de mRNAs. La inhibición de HP1γ con siRNAs disminuye la incorporación de BrUTP y la expresión de marcadores de diferenciación adipocítica. Este dinámico patrón nuclear polarizado no se ha descripto antes, y proponemos que podría constituir un nuevo mecanismo para regular la expresión de genes requeridos durante el inicio de la diferenciación celular.

Abstract:
Cell differentiation is a complex process in which a specific subset of genes is activated while the rest of genes are silenced. HP1γ is associated to actively transcribed genes, however little is known about its role during cell differentiation. In preadipocytes HP1γ localizes in heterochromatic and euchromatic domains, but when preadipocytes are induced to differentiate HP1γ rapidly concentrates in one pole of the nucleus being transiently excluded from heterochromatin. HP1γ polarization is not observed in cells that do not differentiate. HP1γ PSer93 is induced upon adipogenesis and also concentrates in a polarized manner. HP1γ polarization depends on transcription, RNA and DNA integrity, and on PKA signalling. Noteworthy, epigenetic marks that correlate with active transcription and RNA polymerase II co-localizes with HP1γ in the nuclear pole. This domain shows high level of BrUTP incorporation and mRNAs accumulation. Knock down of HP1γ by siRNAs causes a decrease in BrUTP incorporation and a decrease in the expression of markers of adipocyte differentiation. Importantly, to our knowledge this dynamic nuclear polarization has not been described before, and we propose that it may constitute a novel mechanism for regulating the expression of a determined subset of genes required during the initial steps of cell differentiation.

Descotte, María Emilia. "Una teoría de 2-pro-objetos, una teoría de 2-categorías de 2-modelos y la estructura de 2-modelos para 2-Pro (C)" (2015-07-07). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En los 60, Grothendieck desarrolla la teoría de pro-objetos de una categoría. La propiedad fundamental de Pro(C) es que se tiene un embedding C→Pro(C), Pro(C) tiene límites cofiltrantes peque˜nos, y estos son libres en el sentido de que para cualquier otra categoría E con límites cofiltrantes peque˜nos, la precomposición con c determina una equivalencia de categorías Cat(Pro(C); E)+ ≈ Cat(C; E), (el “+” indica la subcategoría plena formada por los funtores que preservan límites cofiltrantes). En este trabajo, desarrollamos la teoría de pro-objetos “2-dimensional”. Dada una 2-categoría C, definimos la 2-categoría 2-Pro(C) cuyos objetos llamamos 2-pro-objetos. Probamos que 2-Pro(C) tiene todas las propiedades b´asicas esperadas relativizadas adecuadamente al caso 2-categórico, incluyendo la propiedad universal correspondiente. Damos una definición de “closed 2-model 2-category” adecuada y demostraciones de sus propiedades básicas. Dejamos para un trabajo futuro la construcción de su categoría homotópica. Finalmente, probamos que nuestra 2-categoría 2-Pro(C) tiene una estructura de “closed 2-model 2-category” si C la tiene. Parte de la motivación de este trabajo fue desarrollar un contexto teórico para manipular el nervio de Čech en teoría de homotopía, , en particular en teoría de la forma fuerte, . El nervio de Čech está indexado por las categorías de cubrimientos e hipercubrimientos con morfismos dados por los refinamientos, que no son categorías filtrantes pero sí determinan 2-categorías 2-filtrantes en las cuales el nervio de Čech también está definido, manda las 2-celdas en homotopías, y determina un 2-pro-objeto sobre los conjuntos simpliciales. Usualmente, el nervio de Čech debe ser considerado como un 2-pro-objeto en la categoría homotópica, perdiendo la información codificada en las homotopías explícitas.

Abstract:
In the sixties, Grothendieck developed the theory of pro-objects over a category. The fundamental property of the category Pro(C) is that there is an embedding C→Pro(C), Pro(C) is closed under small cofiltered limits, and these are free in the sense that for any category E closed under small cofiltered limits, pre-composition with c determines an equivalence of categories Cat(Pro(C); E)+ ≈ Cat(C; E), (the “+” indicates the full subcategory of the functors that preserve cofiltered limits). In this work we develop a “2-dimensional” pro-object theory. Given a 2-category C, we define the 2-category 2-Pro(C) whose objects we call 2-pro-objects. We prove that 2-Pro(C) has all the expected basic properties adequately relativized to the 2-categorical setting, including the corresponding universal property. We give an adecuate definition of closed 2-model 2-category and demonstrations of its basic properties. We leave for a future work the construction of its homotpy 2-category. Finally, we prove that our 2-category 2-Pro(C) has a closed 2-model 2-category structure provided that C has one. Part of the motivation of this work was to develop a conceptual framework to handle the Čech nerve in homotopy theory, , in particular in strong shape theory, . The Čech nerve is indexed by the categories of covers and of hypercovers, with cover refinments as morphisms, which are not filtered categories, but determine 2-filtered 2-categories on which the Čech nerve is also defined, sends 2-cells into homotopies, and determines a 2-pro-object of simplicial sets. Usually, the Čech nerve has to be considered as a pro-object in the homotopy category, loosing the information encoded in the explicit homotopies.

Despósito, Marcelo Arnaldo. "Estocasticidad en sistemas armónicos cuánticos bajo interacciones lineales y no lineales con termostatos extensos" (1991). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Destaillats, Hugo. "Interacciones moleculares y procesos de transferencia de carga en fluidos supercríticos" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo se estudiaron propiedades termodinámicas de soluciones diluidas en la cercanía del punto crítico del solvente. La construcción de una celda espectrofotométrica de alta presión permitió determinar la solubilidad de I2 (s) en Xe y SF6 supercríticos. Se estudiaron dos isotermas con Xe, de 300.79 K y de 318.80 K en el ámbito de presiones de 5 a 10 MPa, y tres con SF6, de 323.95 K, 330.00 K y 340.55 K, en el rango de 2 a 10 MPa. En ambos solventes, las isotermas estudiadas corresponden a un intervalo de hasta 25 K por encima de las temperaturas críticas de los solventes puros. En esas condiciones se obtuvieron grandes variaciones de la densidad del sistema a través de pequeños cambios de la presión. Se observó en todos los casos un fuerte incremento de la solubilidad de I2 en la zona crítica. A partir de la variación de la solubilidad con la densidad del sistema, se calcularon el volumen parcial molar a dilución infinita del soluto, V2∞, y la derivada (∂p/∂x)t.v∞. Estas cantidades, lo mismo que el factor de incremento de la solubilidad E, permitieron comparar cualitativamente la magnitud de la interacción soluto-solvente en los sistemas estudiados. La incorporación de un cosolvente aromático (benceno o mesitileno) produjo un incremento moderado de la solubilidad de I2, que pudo ser explicado utilizando una ecuación de estado sencilla y potenciales intermoleculares de Lennard-Jones, sin necesidad de postular la formación de un complejo entre I2 y el areno. No obstante ello, la existencia de una banda de transferencia de carga en la región ultravioleta del espectro permitió cuantificar los pares donor-aceptor formados, y observar la disminución del cociente de equilibrio Kc a medida que se incrementó la densidad del sistema. El mismo comportamiento se observó al calcular Kc por un método alternativo, sin recurrir a la banda de transferencia de carga. No se observó evidencia de la existencia de clustering crítico en estos sistemas.

Abstract:
The thermodynamical properties of dilute solutions near the critical point of the solvent have been the subject of this study. The solubility of I2 (s) in supercritical Xe and SF6 has been measured using a high pressure spectrophotometric cell. Two isotherms have been measured xith Xe, at 300.79 K and 318.70 K over the pressure range from 5 to 10 MPa, and three with SF6, at 323.95 K, 330.00 K y 340.55 K over the pressure range from 2 to 10 MPa. In both solvents, the isotherms were within 25 K over the critical temperatures of the pure solvents. In those conditions, important variations of fluid density were obtained with small changes in pressure. A large increment of the solubility of I2 in the critical region was observed in every case. The partial molar volume of the solute at infinite dilution, V2∞, and the derivative (∂p/∂x)t.v∞ have been calculated from the variation of the solubility with the solvent density. The solute-solvent interaction forces present in the systems have been qualitatively compared from their values, and also from the solubility enhancement factor E. The addition of an aromatic cosolvent (benzene or mesitylene) produced a moderate enhancement of the solubility of I2. This fact was explained simply using an equation of state for mixtures and Lennard-Jones potentials, without any assumption of complex formation. Nevertheless, the concentration of donor-acceptor pairs has been calculated using the charge-transfer band in the ultraviolet region of the spectrum. A decrease in the equilibrium concentrations quotient Kc was observed with increasing solvent density. The same behaviour was observed when Kc was calculated with an alternative method. No evidence of the existence of critical clustering have been observed.

Deulofeu, Venancio. "Degradaciones en el grupo de las Monosas" (1930). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Devescovi, Francisco. "Estudios sobre el superparasitismo de larvas de la mosca del Mediterráneo Ceratitis capitata (Diptera: Tephritidae) por el parasitoide Diachasmimorpha longicaudata (Hymenoptera: Braconidae)" (2015-03-26). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El endoparasitoide solitario larval Diachasmimorpha longicaudata ha sido ampliamente utilizado como agente de control de moscas de la fruta que generan grandes pérdidas económicas. Con el objetivo general de conocer los procesos que influyen en su desarrollo y ciclo de vida utilizando Ceratitis capitata como especie hospedadora, en esta tesis se evaluaron los efectos del fenómeno conocido como superparasitismo (i.e. oviposición en un hospedador previamente parasitado por la misma u otra hembra de la misma especie) sobre parámetros relacionados al éxito reproductivo y aspectos del comportamiento, genética y electrofisiología. El superparasitimo resultó ser un fenómeno común en la cría experimental del IGEAF (INTA, Castelar). En aquellos niveles de superparasitismo en los que fue posible un completo desarrollo del adulto, no se registraron consecuencias asociados al éxito reproductivo. La eliminación de las larvas competidoras durante el primer estadio larval permitiría que la mayor parte del desarrollo se produzca sin competencia, explicando la falta de efecto sobre el adulto. Estudios comportamentales mostraron que algunas hembras evitan superparasitar mientras que otras oviponen al azar, sugiriendo en éstas últimas, una incapaciadad para discriminar larvas parasitadas y no parasitadas. Al evaluar un posible componente genético en hembras con y sin esa habilidad no se encontró una correlación con sus respectivas hijas (análisis de correlación e isolineas). Estimulaciones en el extremo del ovipositor mediante técnicas de electrofisiología no evidenciaron una habilidad de discriminación entre larvas parasitadas y no parasitadas por parte del adulto. En conjunto, los resultados de esta tesis aportan nueva información sobre la biología básica de D. longicaudata, y contribuyen a futuros estudios dirigidos a una mejora en el proceso de cría artificial de este agente de control biológico de moscas de los frutos.

Abstract:
The solitary larval endoparasitoid Diachasmimorpha longicaudata has been widely used as a biological control agent against fruit flies of economic importance. With the aim of assessing processes affecting its development and life cycle when artificially reared on Ceratitis capitata as host species, in the current thesis the effects of the phenomenon known as superparasitism (i.e. oviposition in a previously parasitized host) on fitness related parameters and several aspects regarding behavior, genetics and electrophysiology were studied. Superparasitism was a common phenomenon in the experimental rearing located at IGEAF (INTA, Castelar). For those levels in which a full development was possible, no negative consequences on the adult fitness were recorded. Elimination of supernumerary larvae during the first instar probably allowed to the surviving larva an almost normal development without the effects of a prolonged competition. Behavioral studies showed that some individually tested females avoid superarasitism, while other females laid their eggs randomly, suggesting a lack of host discrimination ability for the latter. When the possible genetic component of females´ oviposition behavior regarding host discrimination and superparasitism was studied, neither a correlation with their respective daughters nor differences between isofemales strains were observed. Stimulations on the ovipositor apex using electrophysiological techniques did not provide a sensory basis for discrimination among parasitized and unparasitized larvae. In all, the results of this thesis contribute with new information about the basic biology of D. longicaudata for future studies aimed to improve artificial rearing processes of this important biological control agent.

Devia Cubillos, Alfonso. "Flujos MHD de fluidos conductores entre paredes caladas" (1996). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se tiene un canal bidimensional de paredes caladas a través de las cuales se inyecta o succiona continuamente un fluido conductor. El flujo dentro del canal es tal que se produce un punto de estancamiento en el centro del mismo. El movimiento es restringido por un campo magnético. Se hace un análisis teórico magnetohidrodinámico de las soluciones de equilibrio para valores asintóticos de los tres parámetros adimensionales de los que depende el problema Re, Rm y MA (Re es el número de Reynolds viscoso, Rm es el número de Reynolds magnético, MA número de Mach Alfvénico). Se estudia la formación de capas límites viscosas y resistivas para los casos de paredes dieléctricas y conductoras, así como también la dependencia del gradiente de presiones con los parámetros adimensionales. Para fluidos altamente conductores (Rm>>l) se encuentra que el campo magnético restringe la salida del fluido cuando MA <1, mientras que favorece el escape cuando MA >1. En el caso de baja conductividad (Rm<<1) el campo magnético controla la salida o entrada del fluido. Para el caso de succión el flujo es inestable a partir de un valor crítico de los parámetros adimensionales. Se encuentran bifurcaciones tipo pitchfork para diferentes valores de los parámetros Re, Rm, MA cuando hay el cambio de estabilidad. Para el caso de inyección el flujo siempre es estable.

Abstract:
A conducting fluid is continuously injected through a pair of parallel porous walls and escapes in both directions along the channel. The flow forms a stagnation point at the center and the effluence is restricted by a magnetic field. A theoretical analysis of the steady state solutions of the MHD equations in the incompressible case is given as a function of three parameters: Re, Rm, and MA (Re: Reynolds number, Rm: magnetic Reynolds number, MA : Alfvenic Mach number) for all the significant asymptotic limits. The resistive and viscous boundary layer are examined (both for dielectric and conducting walls) as well as the dependence of the pressure gradient that drives the flow on the non-dimensional parameters. For highly conducting plasma (Rm >> 1) it is found that the magnetic field restrains the outflow for MA <1 and drives the escape for MA >1. In motions of low conductivity (Rm <<1) the magnetic field contains (and can be used for controlling) the eflluence. In the case of suction, critical values of the parameters are found for which there are bifurcations in the stability of the system. Such bifurcations are of pitchfork type. In the case of injection, the flux is always stable.

Di Chenna, Pablo Héctor. "Síntesis de análogos de esteroides neuroactivos" (2002). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En esta tesis se describe la síntesis de análogos de esteroides neuroactivos por dos vías: i) reordenamiento aniónico y radicalario de anillos ciclopropánicos,que llevó a la obtención de D-homo pregnanos conformacionalmente mhs flexibles. ii) introducción de un anillo aziridina en el esqueleto esteroidal, que permitió la preparación de un análogo conformacionalmente más rigido de minaxolona, un anestésico esteroidal. A partir de 11 α-hidroxiprogesterona se preparó la 11α-hidroxi-17β,18-ciclopregn-4-en-3,20-diona, ésta se transformó en los 3α-hidroxi-18-nor-D-homopregnanos con fusión de anillos A/B cis y trans por reducción del anillo A con Ni/Al/NaOH, seguido de oxidación, y tratamiento con NaOH/metanol. Se desarrolló la metodología de reordenamiento radicalario de ciclopropilcetonas vía hidruros de alquilmercurio aplicándola a distintos sustratos: ciclopropilcarvona, 3 β-acetoxi- 16α, 17α-metilenpregn-5-en-20-ona, 20β-hidroxi-4β,5βmetilenpregnan- 3-ona y 20-acetoxi-3α,5α-ciclopregnan-6-ona. Partiendo de 3β-acetoxi- 16α, 17α-metilenpregn-5-en-20-ona se obtuvo como producto principal el correspondiente D-homo pregnano (expansión del anillo) en un solo paso. Los resultados obtenidos demostraron la utilidad de los reordenamientos con hidruros de alquilmercurio como un método alternativo de reordenamiento radicalario de ciclopropilcetonas y especialmente útil en el caso de cetonas altamente impedidas donde los métodos tradicionales no dan buenos resultados. Se estudió también la posibilidad de realizar los reordenarnientos de ciclopropanos vía complejos de alquilcobalto a partir de ciclopropilalcoholes. Como estudio preliminar se sintetizó el primer complejo de alquilcobalto esteroidal, 3β- -pregn-5-en-20-ona,a partir de pregnenolona. Los intentos por tratar de introducir un buen grupo saliente en posición α al ciclopropano llevaron al reordenamiento catiónico. Finalmente se describe la aziridinación de pregn-11-eno-3,20-diona y 3α-acetoxipregn- 11-eno-20-ona mediante el uso de SesN=IPh y CuOTf que llevó a la formación de las N-Ses aziridinas esteroidales correspondientes; luego de desprotección y metilación se obtuvo la N-metil-11α, 12α-aziridino-5β-H-pregnano-3,20-diona y el análogo de minaxolona 3-α-hidroxi-N-metil-11α, 12α-aziridino-5β-H-pregnan-20-ona.

Abstract:
In this thesis the synthesis of analogues of neuroactive steroids is described i) by anionic and radical rearrangements of ciclopropane rings, that lead to cornformationally more flexible D-homopregnanes. ii) by introduction of an aziridine ring in the steroidal skeleton, that allowed the preparation of a rigid analogue of minaxolone, a steroidal anaesthetic. 11α- Hydroxy- 17β, 18-cyclopregn-4-ene-3,20-dione was prepared from 11α-hydroxy progesterone, and transformed into 3α-hydroxy-18-nor-D-homopregnanes with both cis and trans A/B ring fusion by reduction of ring A with Ni/Al/NaOH, followed by oxidation and treatment with NaOH/methanol. The radical rearrangement of cyclopropylketones via alkylrnercury hydrides was developed and used on a variety of substrates: cyclopropylcarvone, 3 β-acetoxy- 16α, 17α-methylenepregn-5-en-20-one, 20 β-hydroxy- 4β,5β-methylenepregnan-3-one and 20-acetoxy-3α,5α-cyclopregnan-6-one. 3β-Acetoxy- 16α, 17α-methylenepregn-5-en-20-one gave the D-homopregnane skeleton as the main product in one step (ring expansion). The results demostrated the usefullness of alkylmercury hydrides as an alternative method for the radical rearrangement of cyclopropylketones, especially with highly hindered ketones where the traditional methods fail. The possibility of radical rearrangement via alkylcobalt complexes from cyclopropyl alcohols was also explored. As a preliminary study 3β-pregn-5-en-20-one was prepared fiom pregnenolone. However, attempts to introduce a good leaving group next to the cyclopropane ring lead to a cationic rearrangement. Finally, the preparation of steroidal aziridines obtained by aziridination of 11-pregnene-3,20-dione and 3a-acetoxy- 11-pregnene-20-one with SesN=IPh and CuOTf is described; after deprotection and methylation N-methyl- 11α, 12α-aziridine-5β-H-pregnan-3,2O-dione and 3α-hydroxy-Nmethyl- 11α ,12α-aziridino-5β-H-pregnan-20-one(analogue of minaxolone) were obtained.

Di Fiori, Eugenia. "Impacto conjunto de dos agentes antropogénicos de cambio ambiental: efecto del herbicida glifosato y del mejillón invasor Limnoperna fortunei en ecosistemas de agua dulce" (2014-05-16). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El hombre ha generado durante las últimas décadas un importante cambio en los ecosistemas que lo sostienen. En la naturaleza los agentes de impacto ambiental no actúan de forma aislada sino por el contrario operan de manera conjunta, pudiendo provocar importantes cambios sobre las comunidades afectadas. En este sentido, el objetivo de la tesis fue analizar el efecto de la interacción de dos factores de cambio introducidos por la actividad humana sobre los ecosistemas de agua dulce: el herbicida glifosato y el molusco invasor Limnoperna fortunei. Se estudió el impacto conjunto sobre la estructura de las principales comunidades microbianas y sobre la calidad del agua mediante aproximaciones en ensayos controlados de laboratorio y a escala ecosistémica en microcosmos al aire libre. Se encontró que bajo las mismas condiciones, la presencia de L. fortunei acelera la disipación del glifosato en agua en casi 4 veces, con una velocidad de hasta 50,2 ± 3,4 gs por gramo de peso seco del tejido blando de mejillones por día, excretando fosfatos como producto de su degradación. Asimismo, pudimos detectar que tanto el mejillón íntegro como sus valvas por separado participan en la reducción del glifosato disuelto, determinando de forma más precisa el modo de acción de este factor sobre el herbicida. Si bien la presencia del molusco favorece la disipación del glifosato, la acción conjunta del agroquímico y L. fortunei sería perjudicial para los ecosistemas de agua dulce ya que presentan un efecto sinérgico, producto de su interacción. El aporte de nutrientes a partir de la degradación del herbicida promueve el desarrollo del bacterioplancton, estimula el crecimiento de algas filamentosas y aumenta la turbidez acelerando el deterioro de la calidad del agua en el corto plazo. Los estudios a escala ecosistémica sobre el impacto de agentes de estrés ambiental y su interacción sobre comunidades en microcosmos a la intemperie permiten predecir con mayor grado de realismo los efectos de la actividad del hombre sobre el ambiente natural.

Abstract:
During the past decades human activity has created a major shift in surrounding ecosystems. In nature, the environmental impact agents do not act separately but rather interact and operate together, being able to generate major changes on affected communities. Accordingly, the aim of this Thesis was to analyze the effect of the interaction of two environmental impact agents introduced by human activity on freshwater ecosystem: the glyphosate herbicide and the invasive mussel Limnoperna fortunei. We studied the joint impact on the structure of the main microbial communities and on water quality through experimental approaches in laboratory and in outdoor microcosms. We found that under the same conditions, the presence of L. fortunei accelerates glyphosate dissipation in water at about 4 times, with a speed of up to 50,2 ± 3,4 gs per gram of mussell dry weight per day, excreting phosphates as a breakdown product. Moreover, we detected that both the entire mussel as well as its empty valves participate in glyphosate dissipation in water column, determining more accurately its mode of action on the herbicide. Although mussels’s presence favours glyphosate dissipation, the combined effect of the agrochemical and L. fortunei would be detrimental to freshwater ecosystems as they present a synergic effect, due to their interaction. Nutrient overload due to herbicide degradation accelerated bacterioplankton development, stimulates the growth of filamentous algae and enhances water turbidity through time, promoting the impoverishment of the water quality in the short term. Ecosystem-scale studies on the impact of environmental stressors and their interaction on outdoor microcosms communities become more realistic approaches when predicting the effect of human activity on natural environment.

Di Giacomo, Adrián Santiago. "Ecología y conservación del Yetapá de Collar (Alectrurus risora, Tyrannidae)" (2010-07-19). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En los últimos 100 años el Yetapá de collar (Alectrurus risora, Tyrannidae) ha reducido su distribución original en un 90% debido a la desaparición de los pastizales naturales de Argentina. En la actualidad persisten algunas poblaciones en las provincias de Formosa, Chaco y Corrientes, está considerada globalmente amenazada de extinción (categoría Vulnerable), y se esperan más disminuciones poblacionales debido a la intensificación agrícola. El conocimiento de la reproducción y uso de hábitat de las especies amenazadas es necesario para estimar el riesgo de extinción y efectuar acciones de conservación. Este estudio describe la selección de sitio de nido, la biología reproductiva, los factores que afectan la supervivencia de nidos y la respuesta al fuego de esta especie en la provincia de Formosa. La especie tiene un sistema de apareamiento poligínico, con machos manteniendo territorios contiguos con hasta tres hembras, y el cuidado parental es realizado exclusivamente por la hembra. La supervivencia de nidos es de 0.23 y disminuye con la edad del nido. Los machos y hembras crían 2.6 y 1.5 pichones respectivamente por año. Los patrones de selección de sitio de nido y de respuesta al fuego proveen evidencias del efecto negativo de la ganadería tradicional en los pastizales naturales donde persisten las últimas poblaciones.

Abstract:
The strange-tailed tyrant, Alectrurus risora, is a tyrant flycatcher that inhabits wet grasslands in north-east Argentina. During the last century, its original range has contracted by 90% in association with conversion of natural grasslands to agriculture. At present, it is classified as ‟vulnerable” and further decline in range and number is expected because suitable habitat is subject to current extensive agricultural intensification. Knowledge of the factors that affect the reproductive success and habitat use of threatened species is necessary for accurate assessments of the extinction risk and conservation of their populations. This study shows nest site selection, breeding biology, factors that affect nest survival and fire response of strange-tailed tyrants in a protected area of the humid Chaco, Formosa Province, Argentina. This species has a social polygynous mating system, with males owning contiguous territories with up to three females and parental care is provided exclusively by females. Nest survival was 0.23 and decreased with age of the nest. Males and females fledged 2.6 and 1.6 chicks respectively per breeding season. Nest site selection and fire response patterns provide evidence of the negative effect of the traditional livestock grazing practices in the natural grasslands where last populations remain.

Di Gianni, Pedro D.. "Factores inductores del estado de tumor dormido" (1996). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Observaciones clínicas y experimentales han demostrado que en muchas ocasiones la extirpación de un tumor va seguida de un rápido desarrollo de metástasis que no eran aparentes al tiempo de la misma. Esto sugiere que la presencia de un tumor primario ejerceria un control inhibitorio sobre las metástasis. El modelo experimental para el estudio de este fenómeno es conocido como resistencia concomitante. En este trabajo hemos demostrado que ratones portadores de un tumor LB eran capaces de inhibir el crecimiento de metástasis experimentales del propio tumor LB y metástasis espontáneas de otro tumor no relacionado (el altamente metastásico C7HI). La presencia del tumor LB induce en estas metástasis un verdadero estado de tumor dormido en el que las células metastásicas permanecen vivas pero sin crecimiento aparente; reciprocamente cuando el tumor LB es extirpado, su acción desaparece y ello ocasiona un rápido desarrollo de las metástasis. Presumiblemente las metástasis son inhibidas por dos mecanismos diferentes pero complementarios, a saber: un mecanismo directo que afecta la proliferación de las propias células tumorales y un mecanismo indirecto que afecta la neovascularización tumoral. Ambos mecanismos estarian mediados por un factor de bajo peso molecular (800-1200 D) hallado en el suero de ratones portadores de LB. Este factor probó ser resistente al calor y a amplias variaciones de pH, con máximos de absorción a 215 y 266 nm. Esta molécula parece poseer en su estructura una tirosina libre seguida de otra/s tirosinas modificadas, posiblemente por azúcares. Su origen parece estar asociado más a la respuesta inflamatoria que monta el huésped en presencia del tumor LB que al tumor LB por sí mismo. La definitiva caracterización de este factor podría eventualmente ser de valor en el futuro para ensayar nuevas terapéuticas en la lucha contra el cáncer.

Abstract:
Observations from both clinical and experimental oncology have demonstrated that surgical removal of a primary tumor is usually followed by an explosive growth of metastases which were not apparent at the time of excision. These observations suggest that the primary tumor may prevent or retard the development of its own metastases. The experimental model for the study of this phenomenon is known as concomitant resistance. In this work we have shown that LB tumor-bearing mice were able to inhibit the growth of experimental and spontaneous metastases from both the proper LB and the unrelated highly metastatic C7HI tumor. The presence of the LB tumor induced a tumor dormant state in which metastatic cells remained a live but without apparent growth; reciprocally, when the LB tumor was removed the suppression exerted by the local LB tumor disappeared and metastatic growth was rapidly evident. Presumably, metastases were inhibited by two different but complementary mechanisms: a direct one, affecting the proliferation of the tumor cells themselves and an indirect one affecting tumor vascularization. Both mechanisms would be mediated by a low molecular weight factor (800-1200 D) found in the serum of LB tumor-bearing mice. This factor proved to be resistant to heat and to variations of pH, exhibiting two peaks of absorption at 215 and 266 nm. This molecule would have a free tyrosine followed by one or more glycosilated tyrosine. Origin of this factor is apparently associated with the inflammatory response mounted by the host against the tumor. The final characterization of this factor could be eventually of some value to assay in the future new therapeutic approaches against cancer.

Di Giorgio, Noelia Paula. "GABA y receptores GABA B en el eje reproductivo: su relación con GnRH y kisspeptinas" (2013). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Kisspeptina, GnRH y GABA juegan un papel fundamental en la regulación del eje gonadotrófico, si bien la interacción entre ellos está poco caracterizada. Estudios previos en ratones carentes del RGABAB funcional (GABAB1KO) sugerían alteraciones reproductivas, principalmente en la hembra. Nuestra hipótesis fue que GABA, a través de sus RGABAB, interviene en la regulación de la reproducción impactando sobre los sistemas GnRH/kisspeptina en el cerebro, durante el desarrollo y en la adultez. Demostramos por primera vez la co‐localización del RGABAB1 en neuronas Kiss1 del AVPV/PeN y ARC. La falta de un RGABAB funcional impacta diferencialmente según la edad evaluada. En ratones de 4 días de edad los cambios se observan en el hipotálamo medio basal, mientras que en ratones adultos aparecen en el hipotálamo anterior. Sin embargo, no se deberían a alteraciones hipotalámicas de Kiss1 ni a los niveles de esteroides circulantes. Además, los ratones GABAB1KO adultos presentaron un aumento drástico de Kiss1 en áreas extra hipotalámicas (MeA, BNST y Septum) relacionadas con la reproducción y la conducta sexual. En conclusión, GABA, a través de sus RGABAB, interactuaría con GnRH y kisspeptina en la regulación del eje gonadotrófico de manera diferencial durante el desarrollo y entre los sexos, alterando la reproducción.

Abstract:
Kisspeptin, GnRH and GABA play an important role in the control of the gonadotrophic axis, although the interaction between them is not well known. Previous studies in mice which lack of functional GABAB receptors (GABAB1KO) point to reproductive alterations, mainly in females. Our hypothesis was that GABA, through GABAB receptors (GABABRs), acts in the regulation of reproduction and impacts on the GnRH/Kisspeptin systems in the brain, along development and in adulthood. We demonstrated for the first time the co-localization of the RGABAB1 subunit in AVPV/PeN and ARC Kiss1 neurons. The lack of functional GABABRs impact differentially according to the stage of life evaluated. While at postnatal day 4 we observed changes in the medial basal hypothalamus, in adulthood we found them in the anterior hypothalamus. However, these changes were not due to alterations in hypothalamic Kiss1 or serum steroid levels. Moreover, adult GABAB1KO mice showed a dramatic increase in Kiss1 expression in extra-hypothalamic areas (MeA, BNST y Septum), which are related to reproduction and sexual behaviour. In conclusion, GABA, through GABABR, interacts with GnRH and kisspeptin in the regulation of the gonadotrophic axis in a different way between sexes and along development. Lack of GABABRs impairs normal reproduction in females.

Di Guilmi, Mariano Nicolás. "Alteraciones en la transmisión sináptica en ratones transgénicos modelo de migraña (S218L) y su modulación por drogas antiepilépticas" (2012-03-02). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Ratones transgénicos (knock-in, KI) con mutaciones del canal de calcio P/Q fueron utilizados como modelos murinos de Migraña Hemipléjica Familiar tipo I. Se estudiaron mediante técnicas de patch-clamp (whole cell) las corrientes de calcio presinápticas (IpCa) en los terminales nerviosos gigantes del caliz de Held y las corrientes postsinápticas en las neuronas que este inerva. En los KI S218L se observo la activación de las IpCa hacia potenciales más hiperpolarizados y una reducción de la amplitud de la corriente de calcio siendo esto ultimo dependiente de la duración de la repolarizacion del potencial de acción. A pesar de la reducción de las IpCa las corrientes postsinápticas evocadas están incrementadas así como la frecuencia pero no la amplitud de las espontaneas indicando la existencia de un ingreso continuo de calcio al terminal presinápticos, posible generador de cambios en la maquinaria de liberación responsable de la ganancia de función observada. La droga antiepiléptica pregabalina estudiada sobre ratones normales mostró ser efectiva en disminuir la liberación evocada a través de la reducción de la amplitud de las IpCa y de la remoción de su inactivación. La mayor tasa de inactivación observada en el KI R192Q fue absolutamente removida por la pregabalina.

Abstract:
Transgenic mice models (knock-in, KI), with the human mutation on the P/Q calcium channels were used as model of Familial Hemiplegic Migraine type-1. Using patchclamp (whole-cell) recordings, it was studied presynaptic calcium currents (IpCa) at the calyx of Held and postsynaptic currents onto principal cells of the MNTB. It was observe a shift of the I-V curve to more negative potentials on KI mice and a reduction of calcium currents (IpCa) depending on the shape of action potentials. Despite the reduction of IpCa, both amplitude of excitatory postsynaptic currents and frequency of miniature events were enhanced (without changes on its amplitude). These data suggest a continuous calcium influx at resting membrane potential which might be responsible to enhance transmitter release and its possible gain of function. The anticonvulsant medication pregabalin was tested on WT mice showing a reduction of postsynaptic currents by reduction of IpCa and removing its inactivation. It was observed that inactivation rate of IpCa in KI R192Q was larger in KI than WT and it was completely recovered after PGB application.

Di Iorio y Lucero, María Eugenia. "Espacios métricos homogéneos de Lie-Banach" (2013-03-27). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Di Iorio, Osvaldo R.. "Biología de Cerambycidae (Coleóptera) de la Argentina" (1996). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se estudiaron 256 especies de Cerambycidae (Coleoptera) de la Argentina, la biología de las larvas y de los adultos. Para las larvas se estudiaron las plantas hospedadoras de especies de Cerambycidae que desarrollan en madera seca del noreste, noroeste y centro de Argentina, Espinal, Buenos Aires y Entre Ríos, y las especies de Cerambycidae que desarrollan en plantas vivas y en frutos. Se incluye una revisión bibliográfica crítica de las plantas hospedadoras para la Argentina. Se describen las galerías larvales, cámaras pupales y galerías de emergencia (incluyendo orificios de emergencia) de Parandra tucumana Zikán, Mallodon spinibarbis (L.), Callipogon armillatus (L.), Psalidognathus germaini durnfordi Burm., Deltosoma lacordairei (Gah.), Deltosoma xerophila Di Iorio, Compsocerus violaceus (White), Paromoeocerus barbicornis (F.), Criodion torticolle Bates, Chrysoprasis aurigena (Germ.), Ischionodonta semirubra (Burm.), Megacyllene spinifera (Newm.), Megacyllene mellyi Chevr., Neoclytus sobrinus (Lap. & Gory), Compsa nebulosa Martins, Retrachydes thoracicus (Oliv.), Dorcacerus barbatus (Oliv.), Sobralia superba NEW ICHNOGENUS, NEW SPECIES, Dragomiris major Monné & Martins, Torneutes pallidipennis Reich, Oncideres germari Thoms., Trachysomus buqueti Thoms., Alphus guaraniticus Lane, Alphus subsellatus montanus Di Iorio, Unelcus pictus Thomson, Coccoderus novempunctatus (Germ.), Diploschema rotundicolle (Serv.), Praxithea derourei (Chabrill.), Emphytoeciosoma daguerrei Melzer, Apagomerella versicolor (Boh.). Se comentan las defensas químicas de las plantas (alcaloides, limonoides, saponinas y taninos), parasitoides, predadores (Coleoptera , Diptera , Planipennia ) y vertebrados predadores de larvas. Para los aduItos de Cerambycidae se estudiaron los períodos de emergencia (emergencias en masa y emergencias constantes), duración del ciclo de vida, las fechas de emergencia y su relación con las plantas hospedadoras y la localidad, la influencia de factores meteorológicos (temperatura y lluvias), los períodos de vuelo, atracción a la luz y horarios de captura. Se observó la cópula y oviposición de Pathocerus wagneri, Psalidognathus germaini durnfordi, Achryson surinamum, Dorcacerus barbatus, Oxymerus spp., Ethemon basale y Oncideres germari. Se estudió la selección de la planta hospedadora, alimentación sobre flores, frutos, savia, corteza y cariopses; la polinización, morfología floral, mecanismo de polinización y visitantes florales en Clematis montevidensis; las defensas químicas (olores y sabores desagradables); las especies de Cerambycidae con el mismo patrón de coloración que emergen simultáneamente de la misma planta hospedadora y que visitan simultáneamente las mismas flores; la predación y el subsocialismo. Como modalidades particulares de desarrolo, se estudiaron Cerambycidae cortadores de ramas y otros Cerambycidae y Coleoptera asociados a ramas cortadas por Oncideres germari. A partir del estudio de los items previamente enunciados, se llegó a las conclusiones que se consignan a continuación. Los registros de plantas hospedadoras deben estar acompañados de localidad: las plantas hospedadoras de una especie cambian de una localidad a otra. Las familias y/o especies de plantas de mayor cobertura son las utilizadas como hospedadoras por las mayores cantidades de especies de Cerambycidae. En consecuencia, el cambio de planta hospedadora en cada localidad esta dado, en primer lugar, por la abundancia de la planta y/o su disponibilidad. En segundo lugar, por la elección de hospedadores alternativos, menos abundantes si el hospedador principal no esta disponible. Las plantas hospedadoras exóticas deben verse desde el punto de vista de cuales especies de Cerambycidae se han adaptado luego del reemplazo del bosque natural por otro de composición florística totalmente diferente. Las fechas o períodos de emergencia de cada especie de Cerambycidae son independientes de las plantas hospedadoras en las cuales haya desarrollado (el período de emergencia de cada especie es el mismo entre plantas hospedadoras diferentes). Las fechas o períodos de emergencia de cada especie de Cerambycidae son independientes de las localidades de procedencia de las plantas hospedadoras (el período de emergencia de cada especie es el mismo entre localidades diferentes). Las fechas o períodos de emergencia de cada especie de Cerambycidae guardan relación con la climatología de la región y, en cierta medida, están sincronizadas con las estaciones seca y húmeda. Las especies de Cerambycidae con períodos de emergencia restringidos generalmente presentan picos de emergencia. Los picos de emergencia suelen repetirse para cada especie en la misma época del año durante años sucesivos. En algunas especies de Cerambycidae hay una relación entre el o los picos de emergencia con las temperaturas mínimas y máxima. A temperaturas mínimas bajas cesan las emergencias; las temperaturas máximas altas ocasionan picos de emergencia. Variaciones adversas diarias del clima (bajas temperaturas, lluvias) afectan las emergencias durante los días que duran pero influyen muy poco en el período de emergencia de cada especie. Si se restringen las plantas hospedadoras a nivel de familia (a veces tribu y/o género), la mayoría de las especies de Cerambycidae son oligófagas a monófagas, pero a nivel de especie de planta son polífagas. Se presentan pocos casos de especies de Cerambycidae monófagas a nivel de especie de planta hospedadora, aunque se necesitan mayores datos de colecta. La mayoría de las especies de Cerambycidae desarrollan en madera muerta, seca y estacionada. Las fuentes de madera son de orígenes muy diversos: desde ramas secas en la copa del árbol vivo, el duramen expuesto por la rotura de una rama durante una tormenta y aún la misma rama quebrada y caída, árboles secos en pie (posiblemente por descenso de la capa freática en tiempos de sequía) o árboles quemados o talados por el hombre. Una mínima cantidad de especies desarrolla en tejidos vivos de plantas vivas como una adaptación secundaria o especialización para evitar la competencia por madera seca con otras Cerambycidae. Las especies del género Oncideres presentan un comportamiento que les permite independizarse de la disponibilidad de madera seca en el lugar y evitar también la competencia con otras Cerambycidae. Ecologicamente, las Cerambycidae son las primeras en acudir a una planta muerta, iniciando la sucesión cadavérica que permite su degradación. Las especies diurnas de Cerambycidae generalmente poseen colores llamativos (negros y rojos, metálicos), se alimentan al estadio adulto y poseen una mayor sobrevida en ese estadio. Las principales fuentes de alimentación son néctar y/o polen de flores, frutos maduros, savia y corteza. Las flores mas visitadas por Cerambycidae corresponden a las Umbelliferae y Asteraceae. En estas plantas podrían actuar como polinizadores, intermedios entre la efectividad de las moscas y las avispas. En las especies diurnas, las fuentes de alimentación funcionan como lugares de encuentro entre los sexos y de cópula. La mayor sobrevida del estadio adulto en especies diurnas permite separar el lugar de cópula del de oviposición, tanto en el tiempo como espacialmente (el lugar de cópula es diferente del de oviposición). La coloración de algunas especies diurnas de Cerambycidae es verdaderamente aposemática: al ser capturados, los adultos emiten olores que, muy probablemente, causen rechazo en los predadores. Las especies nocturnas son crípticas, de colores grisáceos o pardos, y no se alimentan en el estadio adulto (las observaciones en Clematis montevidensis fueron excepcionales). La sobrevida del estadio adulto de las especies crípticas es corta (solo unos pocos días); se limita a la búsqueda de la planta hospedadora, la cópula y la oviposición. En las especies crípticas, la cópula y la oviposición se efectúan sobre el mismo lugar y separada por pocos minutos una de otra, es decir, sobre la planta hospedadora. Las especies de Cerambycidae atraídas por trampas de luz son nocturnas y crípticas, pero no todas las especies nocturnas y crípticas acuden a la trampa de luz. El horario de captura en trampa de luz siempre comenzó luego de las 21 hs, cuando la oscuridad es total. La finalización de las capturas siempre coincidió con la aparición del rocío. La intercepción, atracción y captura a la luz permite conocer el período de vuelo de muchas especies de las cuales no se conoce ninguna planta hospedadora. El período de vuelo es inmediatamente posterior al período de emergencia de cada especie. Las fechas de rótulos de ejemplares de colecciones entomológicas corresponden a fechas del período de vuelo. Las poblaciones de Cerambycidae son reguladas principalmente por parasitismo y predación. Particularmente en Oncideres las poblaciones son reguladas por factores climáticos: cantidad de días con temperaturas de O C o inferiores en invierno para las larvas de los primeros estadios y las lluvias producidas en primavera-verano para las larvas de los últimos estadios. Los principales parasitoides de Cerambycidae son Hymenoptera de la familia Braconidae y en menor medida, Ichneumonidae y otras familias. Los principales predadores son Coleoptera de las familias Cleridae y Temnochilidae y, en menor medida, algunas Elateridae. Las mismas especies de parasitoides y predadores pueden emerger de diferentes plantas infestadas con diferentes especies de Cerambycidae. Del punto anterior se desprende que los parasitoides y predadores no son especie-específicos sino ecológico-específicos. Las larvas de Cleridae y de Temnochilidae son predadoras sobre las larvas de Cerambycidae, mientras que sus adultos predan a los adultos de Cerambycidae. Las larvas de Cleridae y de Temnochilidae consumen una gran cantidad de sus presas buscando activamente a las larvas que predan, saliendo y entrando de la madera repetidas veces. Hay una relación directa entre tamaño de las larvas de los predadores y de las larvas de las Cerambycidae: las especies mas pequeñas son predadas por especies pequeñas de Cleridae (Corinthiscus tarsalis, C. fossipenne y C. amoenus), las medianas por Temnochilidae y especies mas grandes de Cleridae (Axina analis, Corinthiscus geniculatus) y las más grandes de Cerambycidae (Dryoctenes scrupulosus, Lochmaeocles sladeni, Mallodon spinibarbis) por grandes especies de Elateridae. Los vertebrados predadores de Cerambycidae están escasamente estudiados, y entre los cuales se cuentan a los pájaros carpinteros y los peludos para las larvas; para los adultos son principalmente aves, aunque se conocen datos de reptiles y anfibios.

Abstract:
Larval and adult biology of 256 species of Cerambycidae (Coleoptera) from Argentina were studied. Larval host plants (dry wood) were collected from northeastern, northwestern and central Argentina, Espinal biogeographic province (including Buenos Aires and Entre Ríos). Also, larvae in live plants and fruits were investigated. A bibliographic revision of larval host plants of Argentina is included. Larval galleries, pupal chambers and emergence galleries and holes are described for Parandra tucumana Zikán, Mallodon spinibarbis (L.), Callipogon armillatus (L.), Psalidognathus germaini durnfordi Burm., Deltosoma lacordairei (Gah.), Deltosoma xerophila Di Iorio, Compsocerus violaceus (White), Paromoeocerus barbicornis (F.), Criodion torticolle Bates, Chrysoprasis aurigena (Germ.), Ischionodonta semirubra (Burm.), Megacyllene spinifera (Newm.), Megacyllene mellyi Chevr., Neoclytus sobrinus (Lap. & Gory), Compsa nebulosa Martins, Retrachydes thoracicus (Oliv.), Dorcacerus barbatus (Oliv.), Sobralia superba NEW ICHNOGENUS, NEW SPECIES, Dragomiris major Monné & Martins, Torneutes pallidipennis Reich, Oncideres germari Thoms., Trachysomus buqueti Thoms., Alphus guaraniticus Lane, Alphus subsellatus montanus Di Iorio, Unelcus pictus Thomson, Coccoderus novempunctatus (Germ.), Diploschema rotundicolle (Serv.), Praxithea derourei (Chabrill.), Emphytoeciosoma daguerrei Melzer, Apagomerella versicolor (Boh.). Observations, descriptions and comments concerning the larvae are made for chemical defenses of plants (alcaloids, limonoids, saponins, tannins), parasitoids, predators (Coleoptera , Diptera , Planipennia ) and vertebrate predators. For adults were studied emergence periods, life cycle duration, dates of emergences and their relation with host plants, localities and meteorological factors affecting them (temperatures, rainfalls), flight periods, atraction to lights, and times of captures. Copula and oviposition are described for Pathocerus wagneri, Psalidognathus germaini durnfordi, Achryson surinamum, Dorcacerus barbatus, Oxymerus spp., Ethemon basale y Oncideres germari. Host plants selection, ingestion of food (on flowers, fruits, bark, sap and cariopses), pollination, floral morphology and floral visitors of Clematis montevidensis; chemical defenses (disagreable odours and taste), species of Cerambycidae with the same coloration pattern that emerges simoultaneously from the same host plant and visits the same flowers; predation and subsocialism are studied in adults. Branch girdlers and their associated taxocoenosis of Cerambycidae are described in detail.

Di Marco, Alejandro Carlos. "Metalogénesis de los depósitos de cobre-hierro y otros elementos metálicos asociados en anfibolitas de las fajas central y oriental del centro sur de las Sierras de Córdoba" (2002). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Di Martino, Carla. "Estudio de bacterias del género Pseudomonas en la degradación de hidrocarburos y síntesis de biosurfactantes: análisis del efecto de los polihidroxialcanoatos" (2015-04-29). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Uno de los problemas ecológicos más relevantes en la actualidad es la contaminación ambiental. La biorremediación se ha convertido en una estrategia de gran utilidad, la cual requiere de microorganismos capaces de sobrevivir y adaptarse a estos ambientes contaminados. Ha sido descrito, que la acumulación de polihidroxialcanoatos (PHA) mejora la sobrevida, competitividad y la tolerancia al estrés. Debido a esto, se analizaron microorganismos capaces de acumular PHA aislados de ambientes naturales: P. extremaustralis, aislada de la Antartida; y Pseudomonas sp. KA-08 y Pseudomonas sp. KB- 08, aisladas de ambientes con presencia de altas concentraciones de hidrocarburos. Pseudomonas sp. KA-08 se destacó por su capacidad de degradar hidrocarburos monoaromáticos (BTEX), tolerar altas concentraciones de los mismos y sintetizar compuestos tensioactivos. La búsqueda de los genes claves involucrados en la degradación de BTEX mostró la presencia de las vías TOL y TOD lo cual es un evento poco frecuente en el género Pseudomonas, alcanzando una alta tasa de degradación de xileno como ejemplo de BTEX. Este resultado la destaca como agente degradador de dicho contaminante. Finalmente se decidió analizar la resistencia y capacidad complejante de esta cepa metales pesados como el cobre el cual puede coexistir en algunos sitios contaminados con hidrocarburos. KA-08 toleró concentraciones cercanas a 4 mM de cobre y presentó una alta biosorción que ajusta al modelo de Langmuir. Dado que la presencia de PHA favorece la adaptabilidad bacteriana al ambiente, se analizó el efecto que este polímero posee sobre diversas variables involucradas en la capacidad biorremediadora las cepas KA-08 y Pseudomonas extremaustralis. Los resultados de estos ensayos demostraron que la presencia de PHA en los inóculos de P. extremaustralis favorece la disgregación de biofilms e incrementa la producción de agentes que disminuyen la tensión superficial (TS). En concordancia con esto, se observó que en KA-08 el PHA también afecta favorablemente la síntesis de compuestos que disminuyen la TS. También se determinó que la acumulación de PHA afecta a la adherencia bacteriana al xileno y que dicho efecto podría ser extrapolable a otras Pseudomonas. Así mismo, la acumulación del polímero modificaría características de la superficie celular y produciría un efecto pequeño pero significativo sobre la degradación de xileno especialmente en su isómero más recalcitrante: o- xileno. Los resultados presentados en este trabajo muestran por primera vez la implicancia de la capacidad de acumular PHA sobre características deseables en organismos biorremediadores y evidencian la potencialidad de Pseudomonas sp. KA-08 para ser utilizada como un nuevo agente de degradación de xileno y remoción de cobre de ambientes contaminados.

Abstract:
One of the most important environmental problems is pollution. Bioremediation has become a useful strategy, which requires microorganisms that can survive and adapt to these contaminated environments. It has been reported that the accumulation of polyhydroxyalkanoates (PHAs) improves survival, competitiveness and stress tolerance. Because of this, microorganisms capable of accumulating PHA isolated from natural environments were analyzed: P. extremaustralis, isolated from Antarctica; and Pseudomonas sp. KA-08 and Pseudomonas sp. KB-08, isolated from hydrocarbon contaminated environment. Pseudomonas sp. KA-08 exhibits a high ability to degrade monoaromatic hydrocarbons (BTEX), to tolerate high concentrations thereof and synthesize surfactants. Searching of key genes involved in BTEX degradation showed the presence of both TOD and TOL pathways, which is a rare event in the genus Pseudomonas. Copper tolerance and complexing ability was also tested in KA-08 showing a MIC of 4 mM and high biosorption levels that fits the Langmuir model. Due to PHA promotes bacterial adaptability to the environment; the effect of this polymer was analyzed. Our results showed that the presence of PHA in P. extremaustralis’ inocula promotes biofilms dispersion and increases the production of biosurfactants. In concordance, we observed that PHA synthesis also increase biosurfactant production in KA-08. It was also determined that the accumulation of PHA affects bacterial adherence to xylene. This effect could be extrapolated to other Pseudomonas. Finally, polymer accumulation induced cell surface modifications and produced a small but significant effect on xylene degradation, especially the most recalcitrant isomer: o- xylene. The results presented in this study showed for the first time the implication of PHA accumulation on bioremediation agents‟ desirable characteristics, and showed the potential of Pseudomonas sp. KA-08 as a new agent of xylene degradation and removal of copper from contaminated environments.

Di Mauro, Rosana P.. "Variación interanual del mesozooplancton de la plataforma bonaerense en primavera : Introducción de las nuevas metodologías para su análisis." (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se analizó la distribución y abundancia del mesozooplancton (con énfasis en copépodos, cladóceros y apendicularias) de la plataforma bonaerense obtenido en primavera durante los años 2002, 2003 y 2004. Se utilizó un muestreador Minibongo provisto de mallas de 67 y 220 μm para lograr una completa representación del espectro de tamaños del mesozooplancton. El análisis incluyó el método óptico tradicional y un método automático basado en el análisis de imágenes denominado ZooImage. Los resultados se relacionaron con las condiciones oceanográficas, las cuales, en general, no mostraron desviaciones respecto de las condiciones medias para el área de estudio. La malla fina (67 μm) permitió una estimación más precisa de la abundancia y biomasa de pequeñas especies de copépodos (menores a 1 mm de largo total), dado que la malla gruesa (220 um) produjo una subestimación superior al 90 % en los adultos y/o estadios de desarrollo de especies dominantes en la comunidad como los copépodos Oithona nana, Paracalanus parvus, Euterpina acutifrons y Parvocalanus crassirostris. La subestimación de la abundancia y biomasa de apendicularias con la malla gruesa fue mayor al 86 % en los individuos con el largo del tronco menor que 600 μm. Las especies pequeñas dominaron el área y las variaciones interanuales de su abundancia, en líneas generales, no fueron significativas. Se definieron 3 áreas faunísticas caracterizadas por especies clave. Las pequeñas especies Acartia tonsa, P. crassirostris, P. parvus y Podon polyphemoides caracterizaron el área estuarial. O. nana, Microsetella norvegica, Evadne nordmanni y Oikopleura dioica, definieron el área costera, y los copépodos más grandes (> 1 mm de largo total) como Calanoides carinatus, Drepanopus forcipatus, Centropages brachiatus, Clausocalanus brevipes, Ctenocalanus vanus, y el ciclopoido O. helgolandica definieron el área de plataforma. Las elevadas abundancias de presas zooplanctónicas potenciales en los sectores donde se registraron mayores densidades de larvas de Engraulis anchoita, hacen suponer que el alimento no es una limitante para el crecimiento y supervivencia de éstas. El método ZooImage, empleado por primera vez en el Mar Argentino, presentó una exactitud equivalente al método tradicional de recuento en la determinación de la abundancia y biomasa de copépodos y apendicularias. Por la rapidez en la obtención de resultados, este tipo de análisis constituye una herramienta muy útil, adecuada a las demandas de los proyectos de evaluación pesquera.

Abstract:
The distribution and abundance of mesozooplankton (specially copepod, cladoceran and appendicularian species) of the Buenos Aires shelf obtained in spring, during the years 2002, 2003 and 2004, were analysed. A small bongo net provided with 67 and 220 μm meshes, was employed in order to obtain a complete representation of the size spectrum of the mesozooplankton. The analysis included both the traditional optical method and the a new automatic image analysis (ZooImage). The results were related with the oceanographic conditions, which were, in general similar to the mean conditions for the study area. The finer mesh (67 μm) allowed a more accurate estimation of the abundance and biomass of small copepod species (1mm total length), producing the tick mesh (220 μm) more than 90 % of underestimation for adults and/or development stages of dominant species like the copepods Oithona nana, Paracalanus parvus, Euterpina acutifrons and Parvocalanus crassirostris. The underestimation of appendicularians abundance and biomass with the tick mesh was higher than 86 % in individuals with trunk length smaller than 600 μm. Small species dominated the area with non significant interannual differences of their abundance, in most of cases. Three faunistic areas were defined, which were characterized by key species. Acartia tonsa, P. crassirostris, P. parvus y Podon polyphemoides caracterized the Estuarine Area. O. nana, Microsetella norvegica, Evadne nordmanni y Oikopleura dioica, defined the Coastal Area, and the large copepods (> 1 mm of total length) such as Calanoides carinatus, Drepanopus forcipatus, Centropages brachiatus, Clausocalanus brevipes, Ctenocalanus vanus, and the cyclopoid O. helgolandica defined the Shelf Area. High abundance of potential zooplanktonic prey in sectors where highest densities of Engraulis anchoita larvae were recorded, allow to suppose that food is not limitant for larval growth and survival. ZooImage method, employed for the first time in the Argentine Sea, presented an accuracy similar to the traditional optical method for the abundance and biomass estimation of copepods and appendicularians. Due to the quicky obtention of results, this kind of analysis represent a very useful tool, adequate to the fisheries programs requirements.

Di Napoli, Jennifer. "Rol del sistema Eph/ephrinas en el desarrollo del sistema nervioso central y su posible utilidad en estrategias de regeneración de las conexiones topográficamente ordenadas" (2016-04-08). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo central de este trabajo es estudiar los mecanismos moleculares que regulan la potencialidad evolutiva de las células madre/progenitoras de la retina, haciendo hincapié en el rol del sistema Eph/ephrinas. Se pretende que los hallazgos de este trabajo aporten: a) conocimientos básicos sobre los mecanismos celulares y moleculares del desarrollo del SNC y del sistema visual y b) conocimientos que sirvan de base para el diseño de estrategias de terapias regenerativas en la retina. Para tal efecto se emplea el sistema retinotectal del embrión de pollo como modelo experimental. El principal nicho de células madre/progenitoras de la retina reside en un anillo tisular que rodea a la retina llamado margen ciliar (MC). Éste contiene a las células madre/progenitoras del cuerpo ciliar (CC) y las células madre/progenitoras localizadas en la zona marginal ciliar (ZMC). Esta zona provee células retinianas durante la vida postnatal en peces y anfibios, permitiendo el crecimiento de la retina y su regeneración. Las aves y los mamíferos en cambio, pierden esta capacidad regenerativa. En aves, donde el crecimiento retiniano se produce durante el desarrollo, un pequeño MC persiste postnatalmente pero carece de la potencialidad evolutiva para aportar todos los tipos celulares de la retina. Las células madre/progenitoras del MC son capaces de 1) proliferar in vitro formando neuroesferas ó 2) de proliferar in vivo al ser estimuladas formando nueva retina neural. Sin embargo, se ha mostrado que no todas las células madre “son iguales” y que varían en su potencialidad evolutiva. En el presente trabajo: 1. Se evalúa si las células madre del MC se diferencian in vitro en células ganglionares de la retina (CGR) que posean información posicional y que sean competentes para responder a las moléculas del sistema Eph/ephrinas que guían el crecimiento axonal durante la formación del mapa retinotectal. 2. Se investiga si las retinas regeneradas a partir del MC y de la transdiferenciación expresan las moléculas del sistema Eph/ephrinas y presentan información posicional. 3. Se determina si la estimulación de la vía de señalización de Shh con su análogo activador SAG permite obtener retinas con regeneración completa a partir de las células madre/progenitoras del MC. En este trabajo se han establecido las condiciones in vitro que permiten obtener un alto grado de diferenciación de CGR a partir de células madre provenientes del MC. Estas CGR expresan moléculas del sistema Eph/ephrinas en forma topográficamente específica y son competentes para responder a moléculas del sistema Eph/ephrinas que guían a los axones durante la formación del mapa retinotectal. Se ha demostrado que la activación de la vía canónica de Shh con SAG induce la regeneración completa de la retina a partir de las células madre/progenitoras del MC in vivo y que las CGR de la misma tienen información posicional expresando el sistema Eph/ephrinas en forma de gradiente como las retinas en desarrollo. Nuestros resultados aumentan las probabilidades de obtener una eferencia que establezca conexiones topográficamente ordenadas en el tectum.

Abstract:
The central aim of this work is to study the molecular mechanisms that regulate the evolutionary potential of the stem/progenitor cells of the retina, focusing on the role of the Eph/ephrin system. It is intended for the findings on this work to provide: a) basic knowledge on the cellular and molecular mechanisms of the CNS and visual system development, and b) knowledge to be used to design of regenerative therapy strategies for the retina. For this work we used the chick embryo retinotectal system is used as experimental model. The retina stem/progenitor cell niche resides in a ring around the retina called the ciliary margin (CM), which holds the stem/progenitor cells of the ciliary body (CB) and of the ciliary margin zone (CMZ). This zone provides retinal cells during the postnatal life in fish and amphibians, allowing for retinal growth and regeneration. However, avian and mammals have lost this regenerative capability. In avian, where retina growing takes place during development, a small CM persists postnatally, but it lacks of potenctial to generate all the cellular types of retina. The stem/progenitor cells of the CM are capable of 1) proliferating in vitro forming neurospheres, or 2) proliferating in vivo when stimulated forming new neural retina. However, it has been shown that not all the stem cells are ‘equal’ and that they vary in their evolutionary potentiality. In the present work: 1. Stem/progenitor cells of the CM are evaluated for their differentiation potential in vitro into retinal ganglion cells (RGC) which have positional information and are competent to respond to molecules of the Eph/ephrin system which guies axonal growth during the retinotectal map formation. 2. The expression patterns of Eph/ephrin and their positional information are studied during retina regeneration initiated from the CM and from retinal pigmented epithelium (RPE) transdifferentiation. 3. The sonic hedgehog (Shh) pathway and its analog activator SAG are evaluated for their potential to induce complete retina regeneration from the stem/progenitor cells of the CM. In this work we defined in vitro conditions that optimized for a high degree of RGC differentiation from the stem/progenitor cells present in the CM. These RGCs express molecules of the Eph/ephrin system in a topographic specific way and respond to the cues that guide the axons during the formation of the retinotectal map. We also show that activating the Shh canonical with SAG induces the complete retina regeneration from the CM stem/progenitor cells in vivo and that the RGCs from this regenerated retina have the same positional information expressing the Eph/ephrin system in a gradient form just as the retinas during development. Our results increase the probability of obtaining an efference that establishes a topographic order of connections in the tectum.

Di Nardo, Christián Esteban. "Síntesis de productos naturales, fragmentos y análogos a partir de D-Glucoheptonolactona" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Las aldonolactonas son moldes quirales versátiles para la sintesis de una variedad de productos naturales. En este trabajo, se estudió la selectividad de reacciones efectuadas sobre el sistema carbonílico α,β-insaturado presente en derivados de la D-glicero-D-gulo-heptono-1,4-lactona (1). Los compuestos resultantes, enantioméricamente puros, se utilizaron en la síntesis de moléculas biológicamente activas, como cadenas de 1,3-polioles, ambos enantiómeros del ácido cis-4-hidroxipipecólico y análogos de ácidos 2-ceto-3-desoxialdónicos. Los derivados diinsaturados de 1 (4-ilidén-2-butenólidos) poseen un centro quiral en C-6, que controla la selectividad en la hidrogenación de los dobles enlaces. Las 3,5-didesoxiheptonolactonas resultantes presentaban una relación cis para los sustituyentes de C-2 y C-4 del anillo lactónico, obteniéndose únicamente los isómeros D-xilo y D-arabino, en proporciones que dependían del catalizador utilizado en la hidrogenación. Ambos diastereoisómeros fueron intermediarios clave en la síntesis de meso- y D-arabino-3,5-didesoxiheptitoles, estructuras presentes en antibióticos macrólidos poliénicos. Las 3,5-didesoxilactonas se usaron también como precursores quirales de los ácidos (2S,4R)- y (2R,4S)-4-hidroxipipecólicos. El primero se aisló de plantas y es un constituyente del palinavir, un poderoso inhibidor de La proteasa del HIV. Finalmente, se estudió la adición electrofílica de bromo al doble enlace de un derivado monoinsaturado de 1. La reacción fue altamente diastereoselectiva y se obtuvo un solo isómero, aunque se generaban dos centros quirales. El producto dihalogenado está estructuralmente relacionado con los ácidos 2-ceto-3-desoxialdónicos. Se realizó también la bromación de la enonolactona derivada de D-glucono-1,5-lactona.Se obtuvo un único diastereoisómero, cuya estereoquímica se confirmó por cristalografía de rayos X. A partir de la α,β-dibromolactona se sintetizaron análogos 3-bromados del ácido 2-ceto-3-desoxi-D-glucónico (KDG, un metabolito de bacterias) y se prepararon derivados marcados isotópicamente.

Abstract:
Aldonolactones are versatile chiral templates for the synthesis of non carbohydrate natural products. In this work, the selectivity of reactions performed on the α.β-unsaturated carbonyl system in unsaturated derivatives of D-glycero-D-gulo- heptono-1,4-lactone (1) were studied. The resulting enantiomerically pure compounds were employed in the synthesis of different biologically active molecules, such as 1,3-polyol chains, both enantiomers of cis-4-hydroxypipecolic acid and 2-keto-3-deoxyaldonic acid analogs. Diunsaturated derivatives of 1 (4-yliden-2-butenolides) possess a chiral center at C-6, which controls the selectivity in the hydrogenation of the double bonds. The resulting 3,5-dideoxyheptonolactones bear a cis relationship for the substituents of the lactone ring at C-2 and C-4. Therefore, the D-xylo and D-arabino isomers were obtained, in proportions which depended on the catalyst employed in the hydrogenation. Both diastereoisomers were the chiral key intermediates in the synthesis of the meso- and D-arabino-3,5-dideoxyheptitols, structures present in the polyol chain of polyene macrolide antibiotics. The diastereoisomeric 3,5-dideoxylactones were also used as chiral precursors of (2S,4R)- and (2R,4S)-4-hydroxypipecolic acids. The former was isolated from plants and it is a constituent of palinavir, a powerful inhibitor of the HIV protease. Finally, we studied the electrophilic addition of bromine to the double bond of a monounsaturated derivative of 1. The reaction was highly diastereoselective and a single isomer was obtained, although two chiral centers were generated. The dihalogenated product is structurally related to the 2-keto-3-deoxyaldonic acids. The bromination was also applied to the enonolactone derived from D-glucono- 1,5-lactone. The stereochemistry of the single diastereoisomer obtained was determined by X-ray crystallography. The α,β-dibromo lactone was readin converted into 3-bromo analogs of 2-keto-3-deoxy-D-gluconic acid (KDG, a metabolite from bacteriae), and isotopically labeled derivatives were prepared.

Di Noia, Javier Marcelo. "Familias de genes que codifican proteínas de tipo mucina en Trypanosoma cruzi" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Las mucinas son glicoproteínas cuyo esqueleto proteico está densamente cubierto por oligosacáiidos unidos a Thr y Ser. Los azúcares representan hasta un 80% de la molécula, confiriéndole una estructura extendida y un fuerte carácter hidrofílico. Participan en procesos de protección, lubricación y adhesión. Trypanosoma cruzi posee proteínas de tipo mucina en la superficie en todos sus estadios. En por lo menos dos de ellos las mucinas son las principales glicoproteínas de membrana y funcionan como aceptores de ácido siálico, azúcar que el parásito obtiene de glicoconjugados del medio mediante la trans-sialidasa, una enzima solo presente en Tripanosomátidos. Dado que el ácido siálico es importante en diversos procesos relacionados con la infección del parásito a vertebrados, el objetivode esta tesis fue caracterizar los genes de las mucinas de T. cruzi. Se describieron dos familias de genes tipo mucina en el parásito. La primera, denominada TcMUC, es muy compleja y polimórfica con unos 500 genes por genoma haploide. Esta familia puede dividirse en tres grupos de genes que comparten las regiones correspondientes al amino y carboxilo terminal del producto deducido, y que codifican para un péptido señal y para una señal de anclaje por glicosilfosfatidil inositol (GPI), pero difieren en su región central. El grupo I posee un número variable de repeticiones con la secuencia T8KP2 como región central. El grupo II posee regiones centrales no repetitivas pero diferentes para cada miembro, seguidas por repeticiones degeneradas ricas en Thr. El grupo III es homogéneo y no posee repeticiones de ningún tipo. Los productos derivados de los genes del grupo I y II presentan una región hipervariable en su amino terminal debida a la acumulación localizada de mutaciones. El análisis de la expresión de los genes mostró que los ARNm del grupo I se expresan en mayor abundancia en el estadío de tripomastigote mientras que los del grupo II pueden variar según cada miembro. Los productos de los genes del grupo I se identificaron como mucinas ancladas en la membrana por GPI. Sueros de ratones infectados reconocieron proteínas recombinantes del grupo I, indicando que las mucinas codificadas están efectivamente presentes en los estadios relacionados con la infección. De la misma forma, sueros de infección de ratones, humanos y conejos reconocieron algunas regiones hipervariables de mucinas del grupo I indicando que están presentes en la proteína madura y que más de una puede expresarse durante el curso de la infección. Dado que las repeticiones están muy O-glicosiladas deben adoptar una estructura extendida, con el N-terminal hipervariable como extremo externo y su C-terminal anclado a la membrana por GPI. La segunda familia, denominada TcSMUG, es mucho menos compleja, con alrededor de 70 genes por genoma haploide. Está compuesta por dos grupos de genes, denominados S y L, dispuestos en tándems independientes en el genoma. Los productos S y L están estructuralmente muy relacionados pero poseen una regulación diferencial específica de estadío de la abundancia del ARNm, ejercida al nivel de la estabilidad del mensajero. El ARNm del grupo S esta presente en los estadios relacionados con el insecto vector. El ARNm del grupo L está presente en todos los estadios pero es mucho más abundante en los estadios capaces de replicarse. Las proteínas deducidas de esta familia poseen regiones centrales compuestas por repeticiones (grupo L) o no repetidas (grupo S), pero ambas con un contenido alrededor del 50% en Thr y con una estructura muy similar a una apomucina. Sus productos poseen un peso molecular alrededor de 7.000 descontando las señales de importación al reticulo endoplasmático y de anclaje por GPI. La secuencia deducida de las proteinas del grupo S coincide con secuencias de péptidos obtenidos en otro laboratorio a partir de mucinas purificadas del estadio epimastigote. Se identificaron entonces genes que codifican mucinas de los estadios trlpomastigote sanguíneo (TcMUC grupo I) y epimastigote (TcSMUG grupo S). Si bien ambos grupos están estructuralmente muy relacionados, el parásito regula la expresión de ambos de acuerdo al hospedador y, mientras que las mucinas expresadas en el insecto son homogéneas en secuencia aquellas expresadas en el vertebrado poseen en la región más expuesta epitopes que varían entre los diferentes miembros de la familia.

Abstract:
Mucins are glycoproteins whose protein core is densely O-glycosylated in Thr and Ser residues. Sugars account for up to the 80% of the molecular mass, conferring it an extended structure and a strong hydrophilic character. They can be a protective barrier. serve for lubrication and act as adhesion molecules. Trypanosoma cruzi has mucin-type molecules on the surface of all its stages. In at least two of them, mucins are the main surface glycoproteins and sialic acid acceptors. This sugar is transferred to the parasite mucins from glycoconjugates at the medium by a unique Trypanosomatids-specific enzyme called trans-sialidase. Given that sialic acid is important in infection related processes the main objective of this Thesis was to characterize mucin genes in T. cruzi. Two mucin-type gene families were described. The first one, named TcMUC, is very complex and polymorphic with about 500 genes per haploid genome. There are three groups of genes within this family that share the regions corresponding to N and C termini of the deduced product, encoding a signal peptide and a GPI anchor signal respectively, but that differ in their central region. Group I central region is composed of a variable number of tandem repeats with the consensus sequence T8KP2. Each member of Group II has unique non-repetitive central regions followed by degenerated Thr-rich repeats. Group III is homogeneous and has no Thr runs. The products derived from Groups I and II have a hypervariable mature N-terminus due to the localized accumulation of mutations. Gene expression analyses showed that Group I is highly expressed in the cell-derived trypomastigote stage while Group II can vary in abundance among stages depending on the studied member. Group I gene products were identified as mucins GPI anchored to the parasite membrane. Infected mice sera recognized recombinant Group I proteins, indicating that mucins encoded by them are present in the stages of the parasite present during the infection. In the same way, mice, human and rabbit infection sera recognized some hipervariable regions from Group I mucins suggesting that they are present in the mature protein and that more than one can be expressed during the infection. Given that the Thr-rich repeats are highly O-glycosylated they must adopt an extended structure. with the hypervariable N-terminus as external end and GPI anchored to the membrane by its C-terminal end. The second family, named TcSMUG, is much less complex with about 70 genes per haploid genome. It is composed of two groups of genes, named S and L, arranged in independent tandems in the genome. The S and L products are structurally related but have differential stage-specific regulation of their mRNA abundance determined by mechanisms affecting their mRNA stability. Group S mRNA is present in the insect related stages. Group L mRNA is present in all the stages but is much more abundant in the replicative ones. Deduced proteins have central regions composed of tandem repeats (group L) or non-repeated sequences (group S) but both with about 50% Thr content. and with an apomucin-like structure. Their products have a molecular mass around 7 kDa without the signal and GPI anchor peptides. The sequence deduced from proteins of the group S matched peptide sequences obtained elsewhere from epimastigote purified mucins so having a positive identification. Then, genes encoding mucins from tripomastigote (TcMUC group I) and epimastigote (TcSMUG group S) stages were identified. Yet both groups are structurally related, their expression is regulated in a stage-specific manner in the parasite, according to the host. While those expressed in the insect are homogeneous in sequence, those expressed in the vertebrate that are targets of the immune response have variant epitopes in their exposed N-temini.

Di Paolo, Nelson César. "Estudio del efecto del factor de Necrosis tumoral -alfa sobre las neuronas dopaminérgicas de la substantia nigra en relación a la enfermedad de Parkinson" (2002). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La enfermedad de Parkinson (PD, “Parkinson Disease”) es una enfermedad neurodegenerativa crónica, de desarrollo muy lento. Su característica neuropatológica sobresaliente es la pérdida de las neuronas dopaminérgicas de la substantía nigra (s.n.) del cerebro. No se conoce la causa cierta, ni existe una cura para esta enfermedad. Las citoquinas inflamatorias han sido halladas en el cerebro de pacientes con diversas enfermedades neurodegenerativas, inclusive con PD. El Factor de Necrosis Tumoral-alfa (TNF) es una citoquina de particular interés, porque puede inducir tanto la sobrevida como la muerte de neuronas. El TNF y sus receptores han sido detectados en la s.n. de pacientes con PD, pero no de personas sanas. Sin embargo, no se tiene ninguna evidencia de cual podría ser la función del mismo en dicha patología. Utilizando ratones knock-in “hipomórficos” y un promotor específico de la s.n. (engrailed), se logró la expresión constitutiva de TNF en la s.n. de ratones. Combinando lo previo con dos elementos más (vectores adenovirales y el sistema Cre-LoxP), se desarrolló un modelo para lograr la expresión crónica de diferentes niveles de TNF en el cerebro de ratones in vivo. El mismo fue utilizado para analizar el papel de esa citoquina en la sobrevida o muerte de las neuronas dopaminérgicas. Realizando una única inyección estereotáxica de vectores adenovirales (Ad), se logró transducir las neuronas dopaminérgicas de la s.n. del ratón casi en un 100%. Así, cuando animales knock-in fueron inoculados en la s.n. con un adenovector codificante para la recombinasa Cre (AdCre), se observó la recombinación y escisión de un cassette que interfería con la expresión del transgén (cassette “PGK-neo”). El mismo estaba flanqueado por sitios llamados Lox-P (“floxeado”), los cuales son reconocidos por la recombinasa Cre. Seguidamente se demostró un aumento específico en la expresión del TNF respecto del basal en la s.n. de los animales knock-in inyectados con el AdCre, pero no cuando fueron inyectados con un Angal, o en animales silvestres (wt) inyectados con cualquiera de los dos adenovectores. Esos resultados demostraron que el mencionado cassette PGK-neo ejerce un efecto de “interferencia transcripcional” sobre el transgen de interés. Así, la combinación de las estrategias mencionadas ha permitido lograr la expresión constitutiva, e inducida, de una proteína de interés (TNF) en la s.n. del ratón. El análisis funcional de estos animales reveló que el TNF crónico inducido en algún momento de la vida adulta del animal provoca la lenta y progresiva desaparición de las neuronas dopaminérgicas de la s.n., representando un nuevo modelo de PD. Por otro lado, fue muy interesante observar que la expresión constitutiva de TNF logró aumentar 3 veces más el número de neuronas sobrevivientes que en los grupos controles ante el tratamiento de los animales con 6-hidroxidopamina (6-OHDa), una droga utilizada para modelar la PD. Estos resultados son un indicio para comenzar a comprender datos previos contradictorios de la literatura, referidos a la muerte o protección de neuronas mediado por TNF (el efecto final en cada caso podría depender de la concentración). La información aquí presentada será útil al considerar la posibilidad de una terapia que de alguna manera u otra afecte al TNF, o a cualquier otra citoquina (anti-inflamatorios, por ejemplo), como se ha realizado recientemente para esclerosis múltiple. Finalmente, la estrategia utilizada permitirá el estudio de las funciones de proteínas expresadas en la s.n. en forma controlada, y abre la posibilidad de establecer nuevos modelos animales de PD. Aún más, utilizando otros promotores endógenos, podrá permitir el estudio de otras patologías crónicas en el cerebro.

Abstract:
Parkinson Disease (PD) is a debilitating, long-term neurodegenerative disease, which most important neuropathological feature is the loss of dopaminergic neurons in the substantia nigra (s.n.) of the brain. It is not known its cause, nor exists a cure for this disease. Immune cytokines have been found in the brain of patients with many neurodegenerative diseases, including PD. Tumor Necrosis Factor-alpha (TNF) is a cytokine of particular interest, because it can induce both the survival or death of neurons. Importantly, it has been found in the s.n. of PD patients, but not in control subjects. Nevertheless, it is not known which function could have TNF in this disease. Combining “hypomorphic” knock-in mice and a promoter specific for the s.n. (engrailed), we obtained constitutive expression of TNF in the s.n. of mice. Combining two more elements (adenoviral vectors and the Cre-LoxP system), we had developed a model to obtain chronic expression of different levels of TNF in vivo in the s.n. of mice. This system was used to study the role of this cytokine in the survival or death of dopaminergic neurons. We found that we could transduce dopaminergic neurons of the s.n. of adult mice with almost 100% efficiency with a single stereotaxic injection of adenoviral vectors. When knock-in mice were inoculated in this brain region with an adenoviral vector coding for Cre recombinase, a “floxed” PGK-neo cassette was recombined. In addition, s.n.-specific TNF expression was up-regulated in the AdCRE-injected knock-in mice but not in knock-in mice injected with Adbetagal or in AdCRE-injected control animals. These results showed that the PGK-neo cassette had a “transcriptional interference” effect on TNF expression. Moreover, the combination of the mentioned strategies allowed for the basal expression, and the temporal onset of an up-regulation, of a protein of interest in the s.n. of mice. When we analyzed the functional effects of TNF on neuronal viability, we found that longterm TNF up-regulation was deleterious, inducing the progressive death of dopaminergic neurons. This has provided us with a new animal model of PD. On the other hand, it was very interesting to observe that the constitutive expression of TNF could protect 3 times more neurons than wt mice in an accepted PD model injecting 6-OHDa, a neurotoxin used as an accepted PD model, into the striatum. These results should help to understand previous contradictory data in the literature related to the neuroprotective or neurodegenerative effects of TNF (the final effect could depend on subtle differences on the TNF concentration). Even more, the information presented here should be considered when designing a possible therapy for PD that could affect cytokines expression (and TNF in particular) in the s.n., as has recently been tested for multiple sclerosis. Finally, the strategy used in this work provides the means to analyze the function of proteins expressed in the s.n. in a temporal and regional controlled manner, and opens up the possibility to establish other new animal models of PD. Even more, using other endogenous promoters, it should facilitate the study of other chronic pathologies in the adult mouse brain.

Di Pasquo Lartigue, María de las Mercedes. "Palinología, bioestratigrafía y correlación de las asociaciones presentes en los grupos Machareti y Mandiyuti, neopaleozoico de la Cuenca Tarija, Provincia de Salta, Argentina" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La Cuenca Tarija se reconoce desde la latitud de Orán, en la provincia de Salta (Argentina), y se prolonga hacia el norte en el territorio boliviano, en la denominada Faja Subandina, hasta alcanzar la latitud de Santa Cruz. Las sedimentitas neopaleozoicas de los Grupos Macharetí y Mandiyuti afloran principalmente en las Sierras Subandinas, encontrándose también, en el este de la Cordillera Oriental y en el subsuelo de la Llanura Chaqueña. El Grupo Macharetí está compuesto por las Formaciones Tupambi, Itacuamí y Tarija, el cual se asienta sobre un basamento devónico en relación de discordancia y subyace al Grupo Mandiyutí, en el cual se reúnen las Formaciones Escarpment y San Telmo. El objetivo principal de esta Tesis consiste en el estudio sistemático de los palinomorfos hallados en 84 muestras fértiles de las citadas unidades litoestratigráficas, provenientes de 6 secciones que afloran en las siguientes localidades, de oeste a este: Sierra de las Pavas (perfil de Balapuca), Sierra de San Antonio (perfil en el anticlinal San Pedro), Sierra Aguaragüe (perfiles del arroyo Tuyunti, quebrada Iquira, río Yacuy, río Caraparí) y del subsuelo de la Llanura Chacosalteña (Pozos Tonono x-l y Fortín Alegre x-l). El análisis palinológico permite reconocer principalmente dos conjuntos de palinomorfos de acuerdo con su probable antigüedad, uno autóctono conformado por granos de polen, esporas y restos de algas, y otro compuesto de especies redepositadas de esporas, acritarcas, prasinofitas y muy escasos quitinozoarios. La determinación de 170 especies autóctonas se realiza utilizando la clasificación parataxonómica clásica y se basa en la comparación del material hallado con la información palinológica conocida de cuencas neopaleozoicas de América del Sur, Gondwana y otras regiones del mundo. Se discuten también, algunos aspectos relacionados con la taxonomía y morfotaxonomia de los granos de polen monosacado, cuya asignación específica se resume en dos láminas con esquemas interpretativos. Entre las especies autóctonas se describen 2 taxa nuevos, Apiculiretusispora ottonei y Cystoptychus azcuyi, mientras que otras 16 especies se mantienen sin asignación específica. Además, se proponen una nueva combinación y una enmienda. Se ilustran todas las especies autóctonas en las cuales se destacan sus principales rasgos diagnósticos. Como resultado del reconocimiento de la extensión estratigráfica de las especies autóctonas halladas en las unidades correspondientes a los Grupos Macharetí y Mandiyuti presentes en las regiones del norte de Argentina y sur de Bolivia, se definen cinco Palinozonas de Intervalo (tipo lª. Aparición), las cuales, en orden de mayor a menor antigüedad, son denominadas formalmente: Palinozona (l) Cystoptychus azcuyi — Apiculiretusispora ottonei, Palinozona (2) Raistrickia radiosa — Apiculatasporites spinulistratus, Palinozona (3) Dictyotriletes bireticulatus — Cristatisporites chacoparanensis, Palinozona (4) Cyclogranisporites microgranulatus — Reticulatisporites reticulatus, Palinozona (5) Marsupipollenites triradiatus Lundbladispora braziliensis. Las cinco palinozonas conforman la Superzona Kraeuselisporites volkheimerii — Circumplicatipollis plicatus, restringida al Carbonífero Tardío en la Cuenca Tarija. Las tres primeras palinozonas son atribuidas al Carbonífero Tardío temprano a medio y las otras dos, al Carbonífero Tardío tardío, esencialmente sobre la base del rango bioestratigráfico de especies clave. La antigüedad de cada palinozona se sustenta también, en su posición estratigráfica y en la estimación de un rango temporal basado en la litología, espesor y tasa de sedimentación promedio. La composición palinológica de las biozonas definidas en la Cuenca Tarija es comparada con otras palinozonas presentes en cuencas neopaleozoicas de América del Sur, principalmente de Argentina y Brasil y de otras regiones del resto del mundo como Australia, Europa Occidental, China, India, Africa, Antártida, de manera que se establece su correlación con aquellas palinozonas más afines basada en especies comunes clave. Entre estas últimas presentan estrechas similitudes con las Palinozonas Ancistrospora, Potonieisporites (Azcuy y Jelin, 1980) y Potonieisporites-Lundblmlíspora (Archangelsky y Gamerro, 1979) definidas en cuencas del Carbonífero Tardío de Argentina. De Io arriba expuesto surge que el Gmpo Macharetí es atribuido al Carbonífero Superior inferior a medio, mientras que el Grupo Mandiyutí inicia su depositación al final del Carbonífero Superior medio y llega hasta el límite con el Pérmico. Los resultados palinológicos obtenidos apoyan la interpretación de una depositación continua de los Grupos Macharetí y Mandiyutí, con posibles discontinuidades paralelas entre las unidades formacionales que los componen, de origen exclusivamente sedimentológico la cuales no involucran hiatos significativos. Con respecto al conjunto de especies redepositadas, se proponen algunos criterios para su distinción del conjunto de especies autóctonas y se ilustran la mayoría de las 150 especies reconocidas, de las cuales 63 corresponden a esporas, 36 son prasinofitas y otras algas, 51 son acritarcas y una especie de quitinozoario. Cabe destacar que, en la mayoria de las muestras estudiadas, el redepósito de palinomorfos es de 30% a 70 %. Tres asociaciones son establecidas informalmente sobre la base de sus registros previos en cuencas principalmente del Devónico s.l y también del Carbonífero Temprano del mundo. La más antigua comprende a la mayoría de las especies paleomicroplanctónicas y esporas de géneros como Geminospora, Grandispora, Emphanisporites, Verrucosisporites, atribuida al Devónico s.l; otra se restringe a especies características del Devónico Tardío como Retispora lepydophyta y Umbellasphaeridium saharicum, mientras que la más joven, corresponde a especies continentales registradas en secuencias del Carbonífero Inferior, como Tumulispora rarituberculata (Luber) Potonié, Verrucosisporites nitidus (Naumova) Playford, Convolutispora circumvallata Clayton, Knoxisporites heredatus (Ishchenko) Playford. El análisis y consideración de las especies redepositadas en los Grupos Macharetí y Mandiyutí, permite confirmar la redepositación de material del Devónico s.l. y del Carbonífero Temprano temprano en depósitos del Carbonífero Superior de la Cuenca Tarija. Estas evidencias palinológicas permiten asegurar que en la parte argentina de la cuenca se depositaron capas equivalentes en antigüedad a las Formaciones Iquirí y Saipurú (=Itacua). En la Argentina, estos estratos no han sido reconocidos ni en superficie ni en subsuelo, por haber sido expuestos a la erosión (principalmente glacial) debido a los movimientos de la fase Chánica. En la parte boliviana de la Cuenca Tarija está documentada palinológicamente una fase inicial al final del Fameniano y una fase final probablemente en el tope del Tournaisiano. En la región argentina de la cuenca, debido principalmente a los efectos de la erosión, no hay elementos de juicio que permitan asegurar la existencia de la segunda pero si de la primera. El estudio palinológico de más de un centenar de especies de miosporas autóctonas halladas en muestras del perfil del rio Caraparí, ubicadas en la transición entre las Formaciones Escarpment y San Telmo (Grupo Mandiyutí), y el reconocimiento de su afinidad botánica, condujo a la definición de cinco comunidades paleofloristicas cada una con requerimientos hidrofiticos diferentes: Paleocomunidad A (licofitas y esfenofitas), Paleocomunidad B (filicofitas), Paleocomunidad C (granos de polen monosacados dominantes), Paleocomunidad D (granos de polen poliplicados) y Paleocomunidad E (Botryococcus y otras probables algas). Sobre la base de datos palinológicos, tafonómicos y sedimentológicos se interpreta que las condiciones de depositación para la sección estudiada correspondiente a la transición entre las Formaciones Escarpment y San Telmo en el perfil del río Caraparí, fueron continentales y habrían evolucionado a partir de un depocentro lacustre en condiciones húmedas. Dos momentos o estadios pueden ser reconocidos en el depocentro: durante el primero, correspondiente a las muestras inferiores, éste habria recibido un caudal casi permanente de sedimentos con cortos periodos en que la descarga era más catastrófica; la ausencia de niveles carbonosos confirma el carácter lacustre permenente del depocentro el cual habría estado siempre en conexión con rios que ayudaron a mantener un nivel hídrico suficiente para impedir el desarrollo de pantanos. El segundo, correspondiente a la muestra superior, parece sugerir una estabilización del nivel de base del sistema fluvial con alternancia de periodos de moderada y escasa sedimentación clástica y la posible colmatación del sistema lacustre. Un reemplazo de las condiciones húmedas por otras semiáridas y más oxidantes es deducido del reemplazo de la Paleocomunidad A de requerimientos hidro-higrófilos por la Paleocomunidad D de características meso-xerófilas. Finalmente, esta evolución paleoclimática transicional observada en esta parte de la Cuenca Tarija para el limite Carbonífero — Pérmico es correlacionable con el mismo cambio transicional en otras cuencas argentinas para ese tiempo.

Abstract:
The Tarija Basin is recognized from the latitude of Orán, in the Salta province (Argentine), and it is prolonged toward the north in the Bolivian territory, in the one denominated Subandinas range, until reaching the latitude of Santa Cruz. The Macharetí and Mandiyutí Groups appear mainly in the Subandinas range, being also, in the east of the Eastern Mountain range and in the subsurface of the Chaco Salteña plain. The Macharetí Group is composed of the Tupambi, Itacuamí and Tarija Formations, which settles on a devonian basement in relationship of unconformity and it underlies to the Mandiyutí Group, in which two Formations, Escarpment and San Telmo meet. The main objective of this Thesis consists on the systematic study of the palynomorphs found in 84 fertile samples of the mentioned lithostratigraphical units. The latter are analysed from 6 sections that appear in the following locations, from west to east: Sierra de las Pavas (profile of Balapuca), Sierra de San Antonio (profile in the San Pedro anticline), Sierra Aguaragüe (profiles of the Tuyunti stream, Iquira creek, Yacuy and Caraparí rivers) and from the subsurface of the Chaco Salteña plain (wells Tonono x-1 and Fortín Alegre x-l). The palynological analysis allows to recognize mainly two groups considering its probable age, one autochthonous conformed by pollen grains, spores and remains of algae, and other made up of spores, acritarchs, prasynophytes and very scarce chitinozoans of reworked origin. The determination of 170 autochthonous species is carried out using the current parataxonomical classification and it is based on the comparison of the material found with the well-known palynological data from the Upper Palaeozoic basins of South America, Gondwana and other regions of the world. It is also discussed, some aspects related with the taxonomy and morphotaxonomy of the monosaccate pollen grains whose specific assignment is summarised in two plates with interpretive outlines. Among the autochthonous species 2 new taxa, Apiculiretusispora ottonei and Cystoptychus azcuyi are described, while other 16 species have been left in open nomenclature. Also, a new combination and an amendment are proposed. All the autochthonous species are illustrated in which stand out the most diagnostic features. Five Interval Palynozones (1st. Appearance type), based on the recognition of the stratigraphic range of the autochthonous species recorded in the units corresponding to the Macharetí and Mandiyutí Groups, that are present in the regions of northern Argentine and southern Bolivia, are defined. They are named formally, in a younger order: Cystoptychus azcuyi-Apiculiretusispora ottonei (l) Palynozone, Raistrickia radiosa-Apiculatasporites spinulistratus (2) Palynozone, Dictyotriletes bireticulatus-Cristatisporites chacoparanensis (3) Palynozone, Cyclogranisporites microgranulatus-Reticulatisporites reticulatus (4) Palynozone and Marsupipollenites triradiatus-Lumlbladispora braziliensis (5) Palynozone. The five palynozones conforms the Kraeuselisporites volkheimerii— Circumplicatipollis plicatus Palynozone restricted to the Late Carboniferous in the Tarija Basin. The first three palynozones are attributed to the early to middle Late Carboniferous and the other two, to the late Late Carboniferous, essentially on the base of the biostratigraphical range of key species. The age of each palynozone is also suggested by its stratigraphical position and by the estimate of spanning time range based on the lithology, thickness and an average of a sedimentation rate. The palynological composition of the palynozones defined in the Tarija Basin is compared with other palynozones found in Upper Palaeozoic basins of South America, mainly of Argentina and Brazil, and from other regions of the rest of the world like Australia, Western Europe, China, India, Africa, Antarctic, so that it is established a correlation with those palynozones that shared more key species. Among these last ones, they present narrow similarities with the Ancistrospora, Potonieisporites (Azcuy and Jelín, 1980) and Potonieisporites-Lundbladispora (Archangelsky and Gamerro, 1979) Palynozones defined in Late Carboniferous Basins of Argentina. Of the above, it arises that the Macharetí Group is attributed to the lower to middle Upper Carboniferous, while the Mandiyutí Group begins at the end of the middle Upper Carboniferous and it reaches the Permian boundary. The palynological results support the interpretation of a continuous deposit of the Macharetí and Mandiyutí Groups, with possible parallel discontinuities among the units that compose them, of only sedimentary origin, which do not involve significant hiatuses. With regard to the reworked assemblage, it is established some approaches for their distinction of the autochthonous species and they are illustrated most of the 150 species recognized, of which 63 correspond to spores, 36 are prasynophyceans and other algae, 51 are acritarchs and one is a chitinozoan. It is necessary to highlight that, in most of the studied samples, the reworked palynomorphs are from 30% to 70%. Three assemblages are established informally on the base of their previous records in basins mainly of the Devonian and also of the Early Carboniferous of the world. The oldest one is composed mainly of paleomicroplanktonic species and spores of several genera like Geminospora, Grandispora, Emphanisporites and Verrucosisporites, attributed to the Devonian. The other is restricted to characteristic species from the Late Devonian as Retispora lepydophyta and Umbellasphaeridium saharicum. While, the youngest corresponds to continental species registered in Lower Carboniferous sequences, such as Tumulispora rarituberculata (Luber) Potonié, Verrucosisporites nitidus (Naumova) Playford, Convalutispora circumvallata Clayton, Knoxisporites heredatus (Ishchenko) Playford. Palynological data obtained from Argentinean region of Tarija Basin, point out that the reworked material in beds of the Upper Carboniferous, includes not only Middle-Upper Devonian (=Givetian-Famennian) elements, but also from Uppermost Devonian (=Strunian) and Lower Carboniferous (=Tournaisian). These evidences enable to assure, at least in the localities of this basin where it has been carried out palynological studies, that the devonian sedimentation reached the limit with the Carboniferous and also occurred in the Lower Carboniferous (=Tournaisian). The analysis and discussion of some palynological and geological evidences which belong to Uppermost Devonian - Lower Carboniferous sections from Tarija Basin (Argentine and Bolivia), allow to reinterpret the chronological location of the movements of the Chanic phase: an initial one at the end of the Strunian, and a final one, at the end of the Tournaisian. The Saipurú, Retama and Cumaná Formations are relocated over the unconforrnity originated by the first movement (initial) of the Chanic phase and are attributed only to the Lower Carboniferous. In the Argentinean region of the Tarija Basin, the lack of deposits of this age only allows to recognize the initial movement of the Chanic phase. The palynological study of more than a hundred of species of autochthonous miospores found in samples of the outcrop of the Caraparí river, that are located in the transition between the Escarpment and San Telmo Formation (Mandiyutí Group), and the recognition of its botanical affinities, led to the definition of five palynofloral communities each one with different hydrophilous requirements. They have been defined as A Paleocommunity (lycophytes-sphenophytes), B Paleocommunity (filicophytes), C Paleocommunity (mainly monosaccate pollen grains), D Paleocommunity (poliplicate pollen grains) and E Paleocommunity (Botryocaccus and other probable algae). A continental condition is interpreted based on palynological, taphonomical and sedimentological analysis from the studied section. A trend of evolution for the depocentre starting with a lacustrine system under humid conditions that ends with a dryer alluvial plain, has been established. This paleoclimatic change is suggested as of the appearance of the Paleocommunity D with Equisetosporites in the sample M445 of the middle section. It is also observed a change in the sediment colour from grey in the lower and middle section to red in the upper palynological barren section. Finally, this transitional paleoclimatic evolution observed in this area of Tarija Basin for the Carboniferous / Permian boundary is correlated with the same transitional change in other Argentinean basins for this period.

Di Santo, Mariana Carolina. "Caracterización de genes codificantes de glicosidasas de pared celular relacionadas al crecimiento y a la maduración de prunoideas" (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La arabinosa es el prinicipal azúcar neutro no celulósico de la pared celular de durazno (Prunus persica (L.) Batsch) y de ciruela japonesa (Prunus salicina Lindl), observándose una pérdida neta de arabinosa tanto durante la maduración y el ablandamiento como en etapas previas a dicho proceso. Las α-L-arabinofuranosidasas y α-L-arabinofuranosidasas/β-D-xilosidasas son enzimas responsables de estas modificaciones en la pared celular de Prunus persica (L.) Batsch y de Prunus salicina Lindl. Se obtuvieron clones completos de ADNc desconocidos de durazno (PpARF1) y de ciruela japonesa (PsARF/XYL). Además, el gen PsARF/XYL fue clonado y secuenciado. PsARF/XYL presentó dos variantes de ARNm maduro, uno completamente spliceado y otro con un intrón terminal retenido, probablemente debido a splicing alternativo. La proteína deducida a partir de este último, resulta en un péptido truncado en su porción carboxi-terminal que podría alterar su funcionalidad pero que no implica la pérdida de los aminoácidos del sitio activo. También se obtuvieron secuencias parciales de un gen de ciruelo japonés denominado PsARF1 (por su homología con PpARF1) el cual fue incluido en los análisis de expresión génica. Reacciones de RT-PCR para el gen PsARF/XYL en distintas fases de la ontogenia y maduración del fruto reveló una expresión diferencial de los dos transcriptos alternativamente spliceados. Aunque PsARF1 se expresa durante el climaterio, se inhibe fuertemente ante tratamientos con etileno. En todos los casos analizados, los transcriptos se detectaron en otros tejidos de la planta, tanto vegetativos como reproductivos. Los resultados sugieren fuertemente que la expresión de estos genes de pared celular se encuentra regulada a nivel transcripcional y post-transcripcional en distintos tejidos y estados de desarrollo y que el etileno, hormona de la maduración en frutos climatéricos, podría participar en esa regulación.

Abstract:
Arabinose es the major non-cellulosic neutral sugar in the peach (Prunus persica (L.) Batsch) and japanese plum (Prunus salicina Lindl) cell wall and a net loss of arabinose residues accurs during ripening and softening and even in stages prior to this process. The α-L-arabinofuranosidases and α-L-arabinofuranosidase/β-D-xylosidases are enzymes responsible for these changes in the cell wall. In this work we characterized genes encoding cell wall glycosidases of Prunus persica (L.) Batsch and Prunus salicina Lindl. We obtained unknown full cDNA clones of peach (PpARF1) and Japanese plum (PsARF1/XYL). In addition, the gene PsARF/XYL was cloned and sequenced. PsARF/XYL presented two variants of the mRNA, a completely spliced and another terminal intron retained probably due to alternative splicing. The protein deduced from the latter, resulting in a truncated peptide at its carboxy-terminal portion tha could affect their functionality but that does not involve the loss of active site amino acids. Partial sequences of a gene called PsARF1 of Japanese plum (given its homology with PpARF1) were also obtained, which was included in the analysis of gene expression. PpARF1 expression was detected in mesocarp throughout development and ripening stages showed a differential expression of two alternatively spliced transcripts. Although PsARF1 is expressed during the climateric stage, it is strongly inhibited when ethylene treatment is applied. In all cases analyzed , transcripts were detected in other vegetative and reproductive tissues. The expression of both PsARF/XYL transcripts was detected in flower organs, roots and leaves. Results strongly suggest that the expression of these cell wall genes is regulated at the transcriptional and postranscriptional level in different tissues and developmental stages and that ethylene, the ripening hormone in climateric fruit, could be involved in the regulation of these enzymes.

Di Yorio, María Paula. "Regulación de la expresión de los receptores de leptina en el eje reproductivo de la rata" (2012-09-14). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Leptina, proteína de 16 kDa sintetizada y secretada principalmente por el tejido adiposo, parece ser un regulador de la función reproductiva. En este trabajo evaluamos la acción de distintos niveles de leptina sobre la expresión de las principales isoformas de su receptor en el eje hipotálamo-hipófisis- ovario, y el efecto de NPY y 17β-estradiol sobre estos receptores en el eje hipotálamo-adenohipófisis, ambos durante el proceso ovulatorio. Utilizamos como modelo biológico ratas inmaduras estimuladas con gonadotrofinas y evaluamos mediante estudios in vivo e in vitro la expresión del mensajero (RTPCR) y de la proteína (western blot) de los receptores de leptina. Encontramos que tanto leptina como las gonadotrofinas son capaces de regular diferencialmente la expresión del mensajero y de la proteína de ambos tipos de isoformas en el eje reproductivo, en forma dosis y tejido dependiente. Por otro lado, NPY y 17β-estradiol fueron capaces de inducir la expresión del mensajero y de la proteína de ambas isoformas en el eje hipotálamo-adenohipófisis a través del receptor de NPY tipo 1 y de los receptores estrogénicos α y/o β, respectivamente. Como el efecto estimulatorio o inhibitorio de leptina sobre la función ovárica podría depender de la activación diferencial de sus receptores, estudiamos las vías JAK2/STAT3 y ERK1/2, y la expresión de SOCS3 (western blot) en el eje reproductivo durante el proceso ovulatorio. Utilizamos ratas estimuladas con gonadotrofinas las que recibieron los siguientes tratamientos: i) tratamiento agudo, las que recibieron 5 dosis de leptina (5 μg c/u) o vehículo durante el proceso ovulatorio, o ii) tratamiento diario, las que recibieron 3 μg de leptina o vehículo por día durante 12 días a partir del destete. Observamos que el tratamiento agudo, que inhibe la función ovárica, i) disminuye la expresión de p-ERK1/2 en hipotálamo, adenohipófisis y ovario; ii) disminuye la expresión de p-STAT3 en adenohipófisis y ovario; y iii) aumenta la expresión de SOCS3 en adenohipófisis y ovario. En el tratamiento diario, que estimula la función ovárica, observamos que i) aumenta la expresión de p-STAT3 y p-ERK1/2 en hipotálamo y en ovario; ii) disminuye la expresión de SOCS3 en ovario; y iii) no hubo cambios en estas vías en adenohipófisis. Al evaluar in vitro la acción directa de leptina sobre estos caminos de señalización en ovario observamos que la presencia de leptina es capaz de aumentar la expresión de p-STAT3 a bajas y altas concentraciones, la expresión de p-ERK1/2 a bajas concentraciones y los niveles de SOCS3 a altas concentraciones. Con estos resultados podemos concluir que las gonadotrofinas, leptina, NPY y 17β-estradiol son capaces de regular la sensibilidad a leptina a lo largo del eje reproductivo por modular la expresión de sus receptores, y que los cambios observados en las distintas vías de señalización inducidos por diferentes niveles de leptina pueden ser, al menos en parte, responsables del efecto positivo o negativo que leptina ejerce sobre el proceso ovulatorio. Palabras claves: receptor de leptina, leptina, NPY, 17β-estradiol, hipotálamo, adenohipófisis, ovario, proceso ovulatorio, JAK2/STAT3, ERK1/2, SOCS3.

Abstract:
Leptin, a 16 kDa protein synthesized and secreted mainly by adipocytes, modulates the reproductive function. The aims of the present work were to investigate the expression of leptin receptors in the hypothalamic-pituitary-ovarian axis, and to assess whether different levels of leptin in this axis were able to modulate the expression of both the long and the shorts isoforms of its receptors. Moreover, we also evaluated the direct effects of some factors involved in the reproductive function, like NPY and 17β-oestradiol, on the expression of these receptors in the hypothalamic-pituitary axis. Immature rats primed with gonadotropins were used and either in vivo or in vitro assays were performed to evaluate the expression of both RNA messenger (RT-PCR) and proteins (western blot) of the leptin receptors. Gonadotropins and leptin were able to regulate the expression of RNA messenger and proteins of both isoforms in the reproductive axis in a differential way and in a dose and tissue dependent manner. Furthermore, NPY and 17β-oestradiol up-regulated the receptor expression in the hypothalamic-pituitary axis by the interaction with the receptor Y type 1 and the oestrogen receptors α and/or β, respectively. Leptin is able to both stimulate and inhibit the ovarian function and this effect could be induced by a differential activation of its receptors. Thus, we investigated whether changes in the signalling pathways, mediated by JAK2/STAT3 or ERK1/2 and the SOCS3 expression (western blot), were involved in this biphasic response in the hypothalamic-pituitary-ovarian axis during the ovulatory process. Immature rats primed with gonadotropins received one of the following treatment: i) acute treatment, in which the rats received five ip injection of leptin (5 μg each) or vehicle during the ovulatory process, and ii) daily treatment, at 22 days of age, in which the rats received an ip injection of leptin (3 μg) or vehicle per day for 12 days. We found that the acute treatment, which inhibits the ovulatory process, caused a reduction in the expression of p-ERK1/2 in hypothalamus, pituitary and ovary; p-STAT3 in pituitary and ovary; and an increase in SOCS3 expression in pituitary and ovary. The daily treatment, which induces the ovulatory process, increased the expression of both p-STAT3 and p-ERK1/2 in hypothalamus and ovary; caused a reduction of SOCS3 expression in the ovary; but no changes were found in pituitary. In vitro studies were performed to evaluate a direct effect of leptin on those signaling pathways in the ovarian tissue. Leptin was able to activate both STAT3 and ERK1/2 in the presence of physiological levels, but only STAT3 at high concentrations. In addition, the expression of SOCS3 protein increased at high levels of leptin. These results indicate that gonadotropins, leptin, NPY and 17β-oestradiol are able to modulate the responsiveness to leptin by regulating the expression of its receptors. Furthermore, changes in different signaling pathways throughout the reproductive axis, induced by different levels of leptin may be, at least in part, responsible for the positive or negative effects of leptin on the ovulatory process. Key words: Leptin receptor, leptin, NPY, 17β-oestradiol, hypothalamus, pituitary, ovary, ovulatory process, JAK2/STAT3, ERK1/2, SOCS3.

Diaz, Héctor. "Algunos estudios químicos sobre la yerba mate" (1941). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Diaz, Marina Vera. "Análisis espacio-temporal del estado nutricional de larvas de anchoíta Engraulis anchoita. Relación con las características hidrográficas y la disponibilidad de alimento." (2010). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El estudio de la condición nutricional de las larvas de peces permite evaluar individualmente el estado fisiológico de los ejemplares y detectar así áreas de cría favorables para la supervivencia y el crecimiento larval. En el presente trabajo se emplearon técnicas morfométricas, histológicas y bioquímicas para determinar la condición nutricional de larvas de anchoíta, Engraulis anchoita, recolectadas en el mar. Los resultados obtenidos fueron complementados con los datos oceanográficos y las abundancias de diferentes componentes del plancton, tanto predadores como presas de las larvas de anchoíta. Se ha observado que los factores que determinan la distribución de las larvas de esta especie serían principalmente de naturaleza físico-química. Si bien no se encontraron diferencias significativas entre áreas, la condición nutricional fue algo mejor en las zonas caracterizadas por aguas de mezcla dentro las estructuras frontales presentes en el área de estudio. Por otra parte, la condición nutricional se vería favorecida durante las estaciones del año en las que no se observan altas densidades larvales. Probablemente las condiciones sean propicias para el crecimiento larval durante todo el año y las densidades bajas o intermedias de larvas de peces permitan a las larvas de anchoíta evitar o reducir la competencia intra e interespecífica por el alimento. Por otra parte, muy pocas larvas presentaron valores bajos de condición nutricional, esto podría indicar que E. anchoita encuentra durante todo el año en la zona estudiada las condiciones ambientales adecuadas para su supervivencia y crecimiento larval.

Abstract:
Nutritional condition studies allow the assessment of physiological state of each larva and thus, the establishment of favourable nursery areas which provide better survival and growth. In the present work, morphometrical, histological and biochemical techniques were employed to assess nutritional condition of anchovy, Engraulis anchoita, larvae captured in the sea. Its results were complemented with oceanographic data and information about zooplankton abundances, both prey and predators of anchovy larvae. Anchovy larvae abundance and distribution would be mainly determined by physico-chemical variables. Even though no significant differences were found in larval nutritional condition among the studied areas, larval condition was slightly better in frontal areas characterized by mixed water masses. On the other hand, anchovy larvae condition seems to be favoured during seasons when larval abundances remain low. Probably, ocean conditions are almost always favourable for larval growth and survival during the whole year, but low or intermediate larval densities allow avoiding both intra and inter-specific competition. As only a small number of anchovy larvae were described as in starving condition, it can be assumed that E. anchoita finds environmental conditions that favour its growth and survival. during all seasons in the studied area.

Diego, Antonio. "Sobre álgebras de Hilbert" (1961). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Hilbert (1923) ha sido el primero en observar que un cierto conjunto de fórmulas del cálculo preposicional clásico, en las que sólo figura el conectivo de implicación, tomadas como axiomas, permitiría desarrollar un fragmento interesante del cálculo proposicional. Ese fragmento es conocido con el nombre de cálculo proposicional implicativo positivo y su estudio se inicia en el primer volumen de los "Grundlagen der Mathematik" de Hilbert y Bernays (1934). Este sistema de la lógica puede ser estudiado con métodos específicamente algebraicos, desde que diSponemos de su contraparte algébrica: la noción de modelo implicativo dada por Henkin (1950). Siguiendo a A.Monteiro llamamos aquí álgebras de Hilbert a las álgebras duales de los modelos implicativos. El objeto de este trabajo es dar solución a un problema relativo a las álgebras de Hilbert libres, planteado por Skolem (1952), el cual consiste en saber si las álgebras de Hilbert libres con número finito de generadores libres son finitas. A esta cuestión damos una respuesta afirmativa e indicamos además, un procedimiento recursivo para la construcción de todas las álgebras libres con número finito de generadores libres, aplicándolo a los únicos casos donde es posible, sin ayuda de máquinas, dar la construcción explícita: el álgebra trivial de un generador libre, la de dos generadores libres -ya calculada por Skolem-y la de tres generadores libres. La idea clave de este procedimiento de construcción se debe a A. Monteiro, quien lo ha aplicado a la determinación de las álgebras de Heyting lineales libres con número finito de generadores libres (1960). En la parte III exponemos el resultado mencionado y damos matrices características para los cálculos implicativos positivos con número finito de variables proposicionales. En la parte I exponemos, sin pretensión de originalidad, algunas nociones y resultados que se necesitan para la comprensión del resto. Indicamos, dando respuesta a un problema que nos planteara A. Monteiro, una definición ecuacional de las álgebras de Hilbert. Una presentación de la teoría de las álgebras de Hilbert a partir de una definición por identidades tiene interés en algunos aspectos, en particular por el hecho de ser inmediatamente aplicables teoremas del álgebra universal válidos para las álgebras ecuacionalmente definibles, por ejemplo el que prueba la existencia de álgebras libres. En la parte I, indicamos como ejemplo de álgebras de Hilbert a los conjuntos ordenados con último elemento, no sabemos si ésto ha sido observado antes. En la parte II damos una caracterización útil de los sistemas deductivos irreductibles y se prueba la existencia de irreductibles minimales, lo que tiene gran interés para el estudio del mencionado problema de Skolem. Los dos teoremas de representación que damos en 3 y 4, parte II, no son necesarios en la parte III. Uno de estos teoremas es de representación topológica "tipo Stone". Contrariamente a lo que sucede para las álgebras de Heyting, no se puede afirmar la casi-compacidad del espacio topológico de representación.

Diehl, Alexandra. "Visualización de datos geoespaciales aplicada a la meteorología" (2016-05-02). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La visualización de datos geoespaciales cubre un gran espectro de técnicas visuales e interactivas para la representación, interacción y análisis de datos geoespaciales. Este tipo de datos se caracteriza por tener una referencia geográfica, también puede contener una componente temporal, y usualmente proviene de fuentes masivas y heterogéneas. El diseño de herramientas efectivas para asistir a los usuarios en el proceso de razonamiento analítico de datos complejos y dinámicos constituye un gran desafío. Un diseño efectivo comprende una combinación correcta de representaciones visuales, mecanismos interactivos, y procesamiento semiautomático. Una selección equilibrada de estos elementos depende del dominio específico de aplicación. Esto puede ser sólo alcanzado por un enfoque integral donde el usuario cumple un rol central, colaborando en cada paso de su diseño y evaluación. Diferentes factores influencian este proceso, por ejemplo, el flujo de trabajo de tareas específico del dominio de aplicación, los requerimientos del usuario, y la complejidad de los datos. La presente tesis conduce al lector a través de diferentes enfoques que abordan el desafío de diseñar soluciones de visualización geoespacial eficientes, con aplicaciones específicas para la meteorología. Estos enfoques combinan distintas estrategias de visualización analítica para asistir a los pronosticadores en el análisis del pronóstico operativo del estado del tiempo. Los pronosticadores necesitan realizar un análisis rápido de la información, en el día a día. Proponemos un diseño novedoso que balancea la experiencia del usuario y el análisis semiautomático. Este diseño permite al usuario identificar tendencias y anomalías, analizar incertidumbre, y detectar errores del modelo numérico en forma ágil. También analizamos la integración de tecnologías de juegos serios y visualización científica. Nuestro diseño incorpora técnicas de visualización y tecnologías de juegos serios, en particular de simuladores de vuelo. El mismo demuestra los beneficios que esta integración puede brindar a la interacción con datos geoespaciales por medio de una aplicación de visualización 3D que explora ambientes topográficos y datos atmosféricos. Hemos evaluado la factibilidad y eficiencia de ambos enfoques por medio de diferentes casos de estudio diseñados en estrecha colaboración con meteorólogos, expertos del dominio. Esta evaluación fue realizada usando una metodología de diseño participativa e iterativa. Las conclusiones discutidas en este trabajo abrirán nuevas oportunidades de investigación para el diseño de soluciones de visualización de datos geoespaciales eficientes en el área de meteorología, en el análisis del estado del tiempo y soporte para la toma de decisiones.

Abstract:
Geospatial data visualization covers a huge scope of visual techniques and interactive mechanisms for the representation, interaction and analysis of geospatial data. This kind of data is characterized for having a geographic reference, it can have a temporal component and often comes from massive and heterogeneous sources. The design of effective tools to assist users on analytical reasoning on these complex and dynamic data constitutes a big challenge. Effective design entails a right combination of visual representations, interactive mechanisms and semi-automatic processing. A carefully chosen selection of these elements depends on the specific domain of application. This can be achieved by an integral approach where the user plays a central role, collaborating in each step of the design and evaluation. Different factors influence this process, for example, the specific domain task workflow, user’s needs and data complexity. This thesis guides readers through different approaches that address the challenge of designing efficient geospatial visualization solutions with specific applications in meteorology. Our approaches face different visual analytical strategies to assist forecasters in the analysis of operational weather forecasts. Forecasters need to perform quick analysis of the data on a daily basis. We propose novel designs that balance user experience and semiautomated analysis. They allow the user to identify trends and anomalies, to analyze uncertainty, and to detect numerical model errors in an agile process. We also analyze the integration of serious games technologies and scientific visualization. Our design combines visualization techniques and serious games technologies, in particular flight simulators. It puts forward the benefits that this integration can bring to the interaction with geospatial data by means of a specific data model design and a 3D visualizer of topographic environments and weather information. We evaluated the feasibility and efficiency of our approaches by means of several case studies designed in close collaboration with meteorologists, who are the domain experts. This evaluation was performed using an iterative and participatory methodology. Conclusions discussed in this work will open new research opportunities to enhance the design of efficient geospatial visualization tools for meteorology, weather analysis and decision-making support.

Dietrich, Sebastián. "Infiltración y recarga a través del suelo y zona no saturada en áreas de llanura. Caracterización en base a la aplicación de tomografía eléctrica y trazadores" (2013). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los sistemas hidrológicos de llanuras son extremadamente complejos y variables en el tiempo y el espacio. Las escasas pendientes superficiales promueven la acumulación de agua en depresiones, lo que favorece los movimientos verticales de agua, es decir, evapotranspiración e infiltración. La cuenca del arroyo del Azul, sitio de estudio de la presente investigación, constituye un caso típico de una cuenca de llanura. A su vez, la presencia de horizontes petrocálcicos someros, comúnmente conocidos como "tosca", adiciona una dificultad extra al estudio de la infiltración a través de la zona no saturada. Estos horizontes tienen cierta continuidad regional pero son heterogéneos en su constitución interna. Dicha heterogeneidad está dada por el mayor o menor contenido de carbonato de calcio que constituye el cemento de estos sedimentos. A raíz de esto se pueden originar sectores con mayor conductividad hidráulica que se conviertan en vías preferenciales de flujo hacia el acuífero. La dificultad radica en poder localizar estas estructuras y evaluar en forma conjunta su comportamiento hidrodinámico. En este contexto, la técnica de la tomografía eléctrica emerge como una herramienta con un alto potencial para poder estudiar simultáneamente las variaciones espaciales en la composición del medio y su funcionamiento como sistema hidrológico. Esto se debe a que ofrece una visualización en 2D sin producir una disturbación en el medio. A través de su aplicación sobre una transecta de estudio, ha sido posible realizar el seguimiento de las variaciones en el contenido de humedad del suelo y la zona no saturada, detectando la presencia de vías preferenciales de flujo y logrando su cuantificación. Los resultados obtenidos han sido respaldados por una cuantiosa instrumentación de campo, aplicación de trazadores y modelación numérica.

Abstract:
Flatland hydrological systems are extremely complex and variable in space and time. These environments are characterized by very flat terrains, with negligible surface slopes, that cause water accumulates in shallow depressions. In this way vertical water movements, i.e., evapotranspiration and infiltration, are favored. The Azul creek basin, where the present research was developed, is a typical example of these kind of systems. In addition, the presence of petrocalcic horizons, locally known as “tosca”, adds supplementary challenges to the study of infiltration through unsaturated zone. Despite their known regional continuity, their internal constitution is not homogeneous, having conspicuous variations in degree of induration. Variation in hardness are mainly due to different amount in calcium carbonate content, which acts as particles cement. Thus, less consolidated zones may turn into preferential pathways of water to the aquifer because carbonate induration influences horizon permeability. In this context, the electrical resistivity tomography arises as a modern tool with a high potential to the assessment of lateral variation in the composition of the system along with its hydrological behavior. This technology offers 2D images of subsurface without causing perturbations of the medium. By means of its application to a study transect it was possible to monitor soil water content changes. This led to the detection of preferential pathway and the estimation of flux velocities. The results were supported by a proper field instrumentation, tracers experiments and mathematical modeling.

Diez, Berenice Andrea. "Estudios sobre la terapia fotodinámica a partir de ALA en células leucémicas sensibles y resistentes a drogas de quimioterapia" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La Terapia Fotodinámica (TFD) es utilizada para el tratamiento del cáncer y otras patologías no malignas. Se basa en la administración un compuesto fotosensibilizante (FS) que se acumula selectivamente en el tejido maligno y al recibir fotones interactúa con el O2 produciendo especies reactivas del oxígeno (ROS), que son altamente tóxicas y desencadenan la muerte celular. La administración exógena del ácido 5-aminolevúlico (ALA), precursor biológico de la síntesis de los tetrapirroles, induce la acumulación de protoporfirina IX (PpIX), un FS muy eficiente. La quimioterapia administrada en altas dosis, seguida del transplante autólogo de médula ósea es una de las modalidades terapéuticas más utilizadas para el tratamiento de la leucemia. Sin embargo, una pequeña proporción de células leucémicas indiferenciadas que se encuentran en un estado quiescente, pueden resultar resistentes a la quimioterapia y ser reinsertadas en el paciente luego del transplante. Por este motivo actualmente se estudian métodos de purgado potencialmente efectivos para eliminar a las células malignas remanentes. Además, el uso de quimioterapia presenta otras limitaciones como el desarrollo de fenotipos celulares resistentes a drogas y efectos secundarios no deseados. En esta tesis hemos estudiado los efectos de la TFD basada en ALA (TFD-ALA) en tres líneas celulares leucémicas murinas, LBR-, sensible a drogas de quimioterapia, LBR-D160 y LBR-V160, resistentes a doxorubicina (DOX) y vincristina (DOX), respectivamente. Para ello evaluamos la síntesis y acumulación de PpIX sintetizada a partir de ALA, y observamos que en las tres líneas estudiadas esta síntesis aumentó en función de la concentración y del tiempo de incubación con ALA. Estudios de microscopía confocal indicaron que las mitocondrias son el principal sitio de localización de PpIX. Mediante estudios de viabilidad celular demostramos la eficacia de la TFD-ALA en las tres líneas celulares, indicando la falta de resistencia cruzada en el caso de las líneas resistentes a drogas de quimioterapia. Por otra parte estudiamos los mecanismos involucrados en la muerte celular producida por la TFD, donde observamos un aumento en los parámetros de estrés oxidativo como la despolarización de la membrana mitocondrial, la producción de oxígeno singulete y de anión superóxido, indicando la importancia de las mitocondrias en los efectos de la TFD. El análisis de parámetros tanto morfológicos como bioquímicos demostró la predominancia de apoptosis como principal mecanismo de muerte, en particular a través de la vía intrínseca, lo que concuerda con el rol activo de las mitocondrias previamente mencionado. Evaluamos además los efectos al combinar la TFD-ALA con los agentes antineoplásicos DOX y VCR, en un modelo in vitro in vivo, utilizando la línea LBR-. En ambos casos observamos un beneficio significativo al utilizar las terapias combinadas, evidenciando la ventaja de esta modalidad frente a las terapias utilizadas en forma independiente. Los resultados obtenidos en esta tesis demuestran el beneficio potencial de utilizar la TFD-ALA como método de purgado de la médula ósea de pacientes con leucemia, especialmente para eliminar fenotipos resistentes a drogas. Además, los estudios utilizando las terapias combinadas indican la posibilidad de disminuir las dosis de drogas de quimioterapia, minimizando así las limitaciones ocasionadas por este tratamiento.

Abstract:
Photodynamic therapy (PDT) is a cancer treatment modality which involves the administration of a given photosensitizing agent (PS), its preferential accumulation in malignant tissue and the subsequent activation by light of appropriate wavelength. Interaction between the excited PS and molecular oxygen produces singlet oxygen as well as other reactive oxygen species (ROS) selectively destroying the target cells. Exogenous administration of 5-aminolevulinic acid (ALA) induces the accumulation of protoporphyrin IX (PpIX), a highly photosensitive compound. Autologous bone marrow transplantation (ABMT) after high dose chemotherapy is a widely accepted therapeutic modality for the management of hematologic malignancies. The major disadvantage of this approach is the possible contamination of the autograft with remaining leukemic cells which leads to recurrence of the disease. Besides, the use of chemotherapy agents promotes the development of drug resistant phenotypes and produces serious side adverse effects in many patients. In this work we studied the effects of ALA-based PDT (ALA-PDT) in three leukemic murine cell lines: LBR-, drug sensitive, LBR-D160 resistant to doxorubicin (DOX) and LBR-V160, resistant to vincristine (VCR). The synthesis and accumulation of PpIX after ALA administration was evaluated, which increased with the concentration and incubation time with ALA. Confocal microscopy studies revealed that PpIX was mainly localized in mitochondria. Cell viability studies demonstrated that ALA-PDT was effective in the three cell lines, indicating the lack of cross-resistance in LBR-D160 and LBR-V160 cells. The mechanisms involved in the death caused by ALA-PDT were also studied. It was observed an increase in oxidative stress parameters, such as mitochondrial membrane depolarization, singlet oxygen and superoxide anion production. Morphological and biochemical studies showed that apoptosis, especially involving intrinsic pathway, was the main death mechanism induced by ALA-PDT. We also evaluated on the LBR- cell line the effects of ALA-PDT combined with DOX or VCR using an in vitro-in vivo model, and a significant benefit for combination therapies, with respect to each one independently, was found. The results obtained in this work show that ALA-PDT could be useful as a purging method during ABMT in leukemia patients, especially to eliminate drug resistant cells. Besides, the use of combined therapies allows the possibility of reducing the doses of chemotherapeutic agents, thus minimizing the limitations of this therapy.

Diharce, Juan Felix. "Sobre un sistema completo de funciones ortogonales de dos variables" (1950). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Dilernia, Darío A.. "Estudio de la evasión de la respuesta inmune citotóxica por el Virus de la Inmunodeficiencia Humana Tipo-1 (HIV-1) y su relación con el tratamiento antirretroviral" (2010). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Introducción. El HIV es el agente causal del SIDA. Entender las formas en las que evade la respuesta inmune del hospedador es crítico para el desarrollo racional de una vacuna efectiva. Aunque la amplia extensión del tratamiento antirretroviral es capaz de impactar significativamente en los procesos naturales de selección y escape, pocos trabajos han estudiado esta temática. El objetivo de esta tesis fue identificar aquellas regiones virales sometidas a presión de selección inmune y evaluar el impacto del tratamiento antirretroviral en su selección y persistencia. Metodología y resultados. Mediante análisis estadístico se identificaron 12 mutaciones virales asociadas a escape inmune, 6 de ellas en regiones no caracterizadas previamente como epítopes. El análisis de secuencias obtenidas en los últimos 20 años de epidemia sugirió que varias de ellas han incrementado su frecuencia hasta estar presentes en la mayoría de las cepas virales actuales. La evaluación de la respuesta inmune péptido específica mostró reconocimiento principalmente de dos péptidos con restricción para el alelo HLA A02 (A02P65 y A02P84), uno para el alelo HLA A03 (A03P28) y uno para el alelo HLA B07 (B07P357). Para los dos últimos y para A02P65 se demostró que la variante de escape disminuía el reconocimiento por la respuesta inmune mientras que, para todos los casos, se evidenció la capacidad de inducir una respuesta polifuncional secretora tanto de IFN como de IL 2 y MIP 1 . Se evaluó también el nivel de agotamiento inmune y, aunque la técnica de tetrámeros presentó varios inconvenientes, se detectó una mayoría de respuesta no exhausta en los casos exitosos. La secuenciación del gen viral gag mostró la presencia de escape viral en la mayoría de los epítopes analizados y sugirió que la positividad de la respuesta inmunológica estaba asociada a una mayor afinidad del epítope por el alelo HLA que lo presenta. Al mismo tiempo, el análisis de secuencia de dicho gen viral en muestras repetidas de 50 pacientes separadas por un promedio de 3 años, demostró la presencia de recambio activo de variantes virales hacia el estado de escape durante el período de muestreo. Se encontró también que la selección activa resulta menos frecuente en los pacientes bajo tratamiento y el análisis del virus en dichos pacientes sugirió que esto sería debido a una reducción significativa de la capacidad evolutiva del virus en el contexto del tratamiento altamente efectivo. Finalmente, un análisis filogenético más profundo de las secuencias estudiadas permitió datar el inicio de la epidemia del HIV 1 en Argentina en la primera mitad de la década de 1970. Conclusiones. El presente trabajo de tesis permitió caracterizar regiones de la proteína viral Gag de frecuente reconocimiento inmune sobre las cepas del HIV 1 circulantes en nuestra región y caracterizar su dinámica a nivel poblacional a lo largo de veinte años de epidemia. El conjunto de datos obtenido de los ensayos inmunológicos confirma la aproximación estadística para identificar sitios de reconocimiento inmune demostrando respuestas citotóxicas polifuncionales mientras que el estudio de muestras seriadas en pacientes, la mayoría de ellos en estados clínicos avanzados, sugiere que la selección del escape viral se extiende más allá de los primeros momentos de la infección. En este sentido, el inicio del tratamiento puede tener un beneficio adicional al prevenir dicho escape por reducción significativa de la evolución viral.

Abstract:
Introduction. HIV is the etiological agent of AIDS. To understand the way the virus evade the immune response of the host is critical for the rational development of an effective vaccine. Although the expansion of treatment access is able to shape the natural process of selection and escape, few studies have analyzed this phenomenon. The objective of the present thesis was to identify viral genomic regions where the virus undergoes selective immune pressure and to evaluate the impact that the antiretroviral therapy may have in their selection and persistence. Methodology and results. A total of 12 viral mutations associated to immune escape were identified, six of them in regions not previously characterized as epítopes. The analysis of a set of viral sequences obtained from samples collected in the last twenty years suggested that many of them have increased their prevalence in time until become the most prevalent state of circulating viral strains. The evaluation of peptide specific immune response showed that the main targets of immune recognition were located in two HLA A02 restricted epítopes (A02P65 and A02P84), in a HLA A03 restricted one (A03P28) and in a HLA B07 restricted one (B07P357). For the last two and also for A02P65 we found that the escape mutations significantly impair recognition by the immune response. For all of them, the capacity of stimulating a polyfunctional response able to release IFN , IL 2 and MIP 1 was shown. Also, the evaluation of immune exhaustion through tetramer technique showed, in spite of many technical inconveniences, a low level of exhaustion in the majority of successfully analyzed samples. The sequencing of viral gene gag showed the presence of escape in the majority of the epítopes analyzed and suggested that detection of immune response was associated to a greater affinity of the epítope for the HLA allele. At the same time, the analysis of the same region in repeated samples collected from 50 patients within a time period of 3 years showed the presence of active replacement of viral sequences toward the escape state. That active replacement seems to be associated to the lack of antiretroviral therapy and the analysis of the virus quasispecies in under therapy patients suggested that the significant reduction of evolutive capacity of the virus in the context of the effective therapy is likely the reason for that observation. Finally, a deeper phylogenetic analysis of the sequences under study allowed us to locate the initiation of the HIV epidemic in Argentina at the first half of the 1970s decade. Conclusions. The present thesis allowed us to characterize the regions of the viral protein Gag under frequent immune recognition at the population level and to characterize their dynamics in the last twenty years of epidemic. The set of data obtained from the immunologic assays confirms the statistical approach of the identification of sites under immune recognition showing polyfunctional cytotoxic responses while the study of repeated samples from patients that were in their majority in advanced stages of infection show that selection of escape not only occurs in the first stages of infection. In this sense, the initiation of treatment could have an additional benefit in preventing the immune escape by significantly reducing the evolutive capacity of the virus.

Dimant, Beatriz. "Comportamiento exploratorio en el cangrejo Chasmagnathus granulatus : habituación y aprendizaje apetitivo" (1991). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Dimant, Verónica. "Bases de Schauder en espacios de polinomios" (1996). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Dados espacios de Banach E1,...,Em con bases de Schauder, se dan condiciones equivalentes a que el espacio de formas m-lineales continuas sobre ellos definido, L(m E1x...xEm), tenga base monomial, relacionándose esto con la reflexividad del espacio. En el caso en que las bases de E1,...,Em sean incondicionales y achicantes, se prueba que la existencia de base monomial en L(m E1x...x Em) equivale a su separabiidad. A partir de los índices inferiores y superiores de los espacios se dan condiciones que permiten generar numerosos ejemplos. En el espacio de polinomios m-homogéneos continuos sobre el espacio de Banach E, P(mE), se estudia la existencia de base monomial (cuando E tiene base de Schauder) o de descomposición monomial (cuando E tiene descomposición de Schauder de dimensión finita). Se relacionan estos hechos con la reflexividad y separabilidad de P(mE) y se construyen variados ejemplos. Por último, se estudia la incondicionalidad de las bases monomiales en Lwsc(mE1 x...x Em) y Pwsc(mE), los espacios de formas m-lineales secuencialmente débil continuas y de polinomios m-homogéneos secuencialmente débil continuos.

Abstract:
Let E1,..., Em be Banach spaces with Schauder bases and L( mE1 x...x Em) the space of continuous m-linear forms over them. Conditions equivalent to the existence of monomial basis in L(mE1 x...x Em) are given and its relationship with the reflexivity of L(mEl x...x Em) is shown. When the bases of E1,..., Em are unconditional and shrinking, it is proved that the existence of monomial basis in L(mE1 x...x Em) is equivalent to its separability. By means of lower and upper indexes of spaces, many examples are constructed. For the space of continuous m-homogeneous polynomials over the Banach space E, P(mE), the existence of monomial basis (when E has Schauder basis) or monomial decomposition (when E has finite dimensional Schauder decomposition) is studied. These facts are related with the reflexivity and separability of P(mE) and some examples are given. Finally, the unconditionality of monomial bases of Lwsc(m E1 x...x Em) and Pwsc(m E), the spaces of weak sequentially continuous m-linear forms and weak sequentially continuous m-homogeneous polynomials, is studied.

Diorio, Luis Alberto. "Factores que afectan el desarrollo de iodophanus carneus" (1994). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Distéfano, Ana Julia. "Caracterización molecular del Mal de Río Cuarto virus (MRCV) del maíz : estudio de los segmentos genómicos S1-S6, S8 y S10 y de las proteínas codificadas por los mismos" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El Mal de Rio Cuarto es la principal enfermedad del maíz en la Argentina. Es causado por el Mal de Río Cuarto virus (MRCV) y transmitido por una chicharrita de la especie Delphacodes kuscheli. El MRCV pertenece a la familia Reoviridae, género Fijivirus, y tiene la propiedad de multiplicar tanto en plantas de maíz como en el insecto vector. Las particulas virales consisten en una cápside icosahédrica formada por una doble capa de proteínas y contiene en su interior lO segmentos genómicos de RNA de doble cadena (dsRNA) llamados Sl a SlO, siendo el tamaño del genoma de aproximadamente 29 kbp. En los últimos años, y en muchos casos en paralelo con el desarrollo de éste trabajo, se han reportado las secuencias de algunos segmentos de virus relacionados: el MRDV (Maize rough dwarf virus), el FDV (Fiji disease virus), el ODSV (Oat sterile dwarf virus), el genoma completo del RBSDV (Rice black streaked dwarf virus) y del NLRV (Nilaparvata lugens reovirus). En este trabajo se clonaron, secuenciaron y analizaron los segmentos genómicos Sl, S2, S3, S4, S5, S6, S8 y SlO completos del MRCV. Se determinó que todos los segmentos genómicos analizados poseen secuencias 5’ y 3’ terminales conservadas y características del serogrupo al cual pertenece el MRCV: 5’AAGUUUUU3’ (extremo 5’) y 5’CAGCUnnnGUC3’ (extremo 3’). Adyacente a los extremos conservados se encuentran repeticiones de 7 a 12 nucleótidos invertidas e imperfectas que son segmento específicas. La predicción de la estructura secundaria de las cadenas codificantes de todos los segmentos estudiados, muestra que las regiones terminales son capaces de formar estructuras secundarias determinadas y estables que fueron propuestas como señales de replicación y empaquetamiento en virus del género Rotavirus. Se compararon las secuencias de nucleótidos obtenidas y las secuencias de aminoácidos deducidas con las secuencias de otros reovirus depositadas en las bases de datos, y se identificó la presencia de motivos característicos, a menudo indicativos de función. Se determinó que el MRCV Sl codifica para una proteína básica de 168,4 kDa que contiene motivos conservados en las RNA polimerasas dependientes de RNA y es homóloga a las RNA polimerasas codificadas por los virus RBSDV, FDV y NLRV, asi como a las codificadas por miembros de otros géneros de la familia Reoviridae. El MRCV S2 codifica para una proteína de 134,4 kDa y posee homología con las proteínas codificadas por el RBSDV S4, el FDV S2 y NLRV S2. En este trabajo presentamos evidencias de que la proteína codificada en éste segmento es no estructural. El MRCV S3 codifica para una proteína de 141,7 kDa, y hemos demostrado que es la proteína mayoritaria de la cápside interna o “core” viral y posee una alta homología con las proteínas correspondientes codificadas por el RBSDV S2 y FDV S3. El MRCV S4 codifica para una proteina de 131,7 kDa y su función se desconoce. Presenta una relativamente alta homología con miembros del género Fijivirus como así también con otros miembros de la familia Reoviridae. El MRCV S5 codifica para una proteína de 106,9 kDa cuya función se desconoce. Esta proteína presenta homología con las proteínas codificadas por los segmentos S5 del RBSDV y del FDV. El MRCV S6 codifica para una proteína de 90 kDa cuya función se desconoce. Esta proteína presenta una llamativa baja homología con las proteínas codificadas por los segmentos S6 del RBSDV y del FDV. El MRCV S8 codifica para una proteína de 68,3 kDa que contiene un motivo de unión de ATP/GTP que es característico de helicasa. Además la proteína es homóloga con las proteínas codificadas por el RBSDV S8, el MRDV S7, el OSDV S9 y el NLRV S7, todas con probable función de helicasa. El MRCV SlO codifica para una proteína de 63,5 kDa y su probable función sería la de proteína de cápside externa. Esta proteína presenta una alta homología con las proteínas correspondientes codificadas por los segmentos SlO de los virus RBSDV, MRDV y FDV. El análisis de los valores de homología encontrados entre los distintos segmentos del MRCV y los segmentos de virus relacionados, apoyaría la idea de evolución independiente de cada segmento viral. El análisis filogenético realizado con las secuencias obtenidas del MRCV permitió proponer que a pesar de que el MRCV está relacionado con el MRDV y el RBSDV, debe ser considerado una especie diferente del género Fijivirus (Distéfano y col., 2002) y no una raza geográfica del MRDV, como había sido inicialmente propuesto. El análisis filogenético realizado con las secuencias de aminoácidos de polimerasas representativas de todos los géneros de la familia Reoviridae mostró la existencia de dos grupos evolutivos separados: uno agrupa a los Orthoreovirus, Aquareovirus, Orbivirus y Rotavirus, y otro agrupa a los Fijivirus, Cypovirus, Olyzavirus y Coltivirus. Se expresaron algunos de los segmentos virales en estudio en bacterias obteniéndose proteínas de fusión con un péptido rico en histidinas que facilita su posterior purificación. Se obtuvieron antisueros policlonales contra las proteínas codificadas por los segmentos S2, S3, S4 y S6. El antisuero obtenido contra la proteína codificada por el MRCV S3 fue capaz de reconocer específicamente una de las proteína estructurales presentes en partículas virales purificadas del MRCV en un ensayo de “Western blot”. Esta proteina correspondería a la proteína mayoritaria de la cápside interna o “core” viral. En un experimento complementario, un antisuero obtenido contra las proteínas de la partícula viral fue capaz de reconocer a la proteína del MRCV S3 expresada en bacterias. Asimismo el antisuero obtenido contra la proteína codificada por el MRCV S3 reconoce una proteína de tamaño similar al esperado en extractos de plantas enfermas. Mediante experimentos de inmunomicroscopía electrónica sobre cortes de hojas de maíz infectadas el con MRCV se confirmó que la proteína codificada por el S3 del MRCV es una proteína estructural del virus y se demostró que forma parte del “core” viral El antisuero obtenido contra la proteína codificada por el MRCV 82, reconoció específicamente a una proteína de menor tamaño al esperado en extractos proteicos totales de plantas enfermas. Mediante experimentos de inmunomicroscopía electrónica sobre cortes de hojas de maíz infectadas el con MRCV se confirmó que la proteína codificada por el S2 del MRCV seria una proteína no estructural presente en los viroplasmas. En experimentos de “Far-Western blot” se observó que la proteína codificada por el MRCV S3 era capaz de interactuar consigo misma, con una proteína de 130 kDa que correspondería a la espícula viral de tipo B y con la RNA polimerasa dependiente de RNA codificada por el MRCV Sl. En Rotavirus se demostró que las proteínas equivalentes interaccionan entre sí. Los resultados presentados en este trabajo contribuyeron al avance en el estudio del virus que causa la enfermedad del Mal de Río Cuarto, a la clasificación taxonómica del mismo y al estudio de su origen evolutivo. Además los datos obtenidos permitieron el diseño de una estrategia de resistencia al MRCV en plantas transgénicas de maíz basada en el desencadenamiento del silenciamiento génico post-transcripcional (PTGS).

Abstract:
Mal de Río Cuarto is the most important maize disease in Argentina. lt is caused by the Mal de Río Cuarto virus (MRCV) and transmitted by the planthopper Delphacodes kuschell. MRCV belongs to the Reoviridae family, Fijivirus genus, and has the interesting feature of being able to multiply both phloem cells of maize plants and in vector insects. The viral icosahedral double-shelled particles contain lO double-stranded RNA segments (dsRNA) called Sl -SlO, with a total genome size of nearly 29 kbp. In the last years, and in many cases simultaneously with this work, the nucleotide sequences of some Fijivirus genome segments have been reported: MRDV (Maize rough dwarf virus), FDV (Fiji disease virus) and ODSV (0at sterile dwarf virus). In addition the entire RBSDV (Rice black streaked dwarf virus) and NLRV (Nilaparvata lugens reovirus) has been published. This work reports the cloning, sequence and analysis of the genomic nucleotide sequences of MRCV Sl, S2, S3, S4, S5, S6, S8 and SlO. All the analyzed segments have the conserved 5’ and 3’ ends that were reported for viruses of the same serogroup to which MRCV belongs: 5’AAGUUUUU3’ and 5’CAGCUnnnGUC3’, respectively. In addition segment-specific imperfect inverted repeats of 7-12 nucleotides were identified immediately adjacent to the conserved sequences. Prediction of the secondary structure of all segments coding strands showed that terminal regions were able to form defined and stable secondary structures that are proposed to be replication and packaging signals in Rotavirus. We compared their nucleotide and amino acidic sequences with the ones deposited in Genebank for other reoviruses. MRCV Sl potentially encodes a 168.4 kDa basic protein that contains RdRp distinctive motifs and has identity with the RdRps encoded by RBSDV, FDV and NLRV as well as with RNA polimerases coded by virus belonging to other genera of the Reovirdae family. MRCV S2 encodes a single 134.4 kDa protein which has and intermediate identity to RBSDV S4, FDV S2 and NLRV S2-encoded proteins. In this work we showed that the protein coded by this segment is a non-structural protein. MRCV S3 codes for a l4l .7 kDa protein and we demonstrated that is the major core protein and has an extremely high homology with the proteins coded by RBSDV S2 and FDV S3. MRCV S4 codes for a 131.7 kDa protein and its function is unknown. It shows identity to members of Fijivirus as well as to two other genera of the Reoviridae family. MRCV S5 codes for a 106.9 kDa protein and its function is unknown. It shows identity with RBSDV SS and FDV S5-encoded protein. MRCV S6 codes for a 90 kDa protein and its function is unknown. It has a very low homology with the proteins coded by RBSDV S6 and FDV S6. MRCV SBcodes for a 68.3 kDa protein Significantly, MRCV S8 encoded protein contains an ATP/GTP-binding site motif that is a common feature of dsRNA helicases. In addition, MRCV S8 revealed identity with the proteins coded by RBSDV S8, MRDV S7, OSDV S9 and NLRV S7, all of them with proposed helicase function. MRCV SlO codes for a 63.5 kDa protein that probably corresponds to the outer capsid protein. This protein shows a high identity with the proteins coded by RBSDV SlO, MRDV SlO and FDV SlO. The comparative level of homology between different MRCV encoded proteins varied noticeably, supporting an independent evolution of the different genome segments. We discussed the evolutionary relationships of MRCV to other Reoviridae, and based on phylogenetic analysis we proposed that although MRCV is related to MRDV and RBSDV, it could be regarded as a new species of the Fijivirus genus and not a geographic race of MRDV as it was previously proposed. Phylogenetic analysis based on RdRps amimo acidic sequences of viruses belonging to all the genus of the Reoviridae family, showed the existence of two major evolutionary divisions of polymerase proteins among them: one grouped Orthoreovirus, Aquareovirus, Orbivirus and Rotavirus, and the second one grouped Fijivirus, Cypovirus , Oryzavirus and Coltivirus. Some of the studied segments were expressed in bacteria as fusion proteins with an histidine-rich peptide. Polyclonal antibodies were raised against S2, S3, S4 and S6 coded proteins. The antiserum obtained against the protein coded by MRCV S3 was able to specifically recognize a single structural protein present in the purified virus particles in a Western blot assay and a 140 kDa protein present in infected plants. This protein corresponds to the major core protein. On the other side, a polyclonal antiserum against the purified virus particle was able to recognize a MRCV S3 fusion protein expressed in bacteria. Inmuno-electron microscopy revealed that antiserum against the protein coded by MRCV S3 reacted with viral cores. The antiserum obtained against the protein coded by MRCV S2 was able to specifically detect a single protein of a smaller size as predicted in total proteins extracts from infected maize plants. Inmuno-electron microscopy revealed that antiserum against the protein coded by MRCV S2 reacted with viroplasms present in the phloem cells of infected maize plants. “Far-Westem blot” experiments showed that MRCV S3 coded protein interacts with itself with a protein of l30 kDa that probably correspond to the B-spike and with the RNA dependent RNA polimerase encoded by MRCV Sl. In Rotavirus the correspondent proteins also interact. The results showed in this work contribute to the understanding of the virus that cause Mal de Rio Cuarto disease, helped redefine the virus taxonomic classification within the genera, and collaborated with the determination of the evolutionary origin of the fijivirus genus. Also these results allowed to the design of a MRCV resistance strategy in trasgenic maize plants based on the triggering of post-transcriptional gene silencing (PTGS).

Diz, Virginia Emilse. "Fotosensibilizadores nanoconfinados. Caracterización fotofísica y fisicoquímica" (2012-12-19). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Do Campo, Margarita Diana. "Mineralogía, geoquímica y geocronología de la Formación Puncoviscana (Neoproterozoico) entre los 23°30’ y 25°50’ de Latitud Sur, Noroeste de Argentina" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La Formación Puncoviscana tiene un amplio desarrollo en el NO de Argentina, principalmente en el ámbito de la Cordillera Oriental y en menor medida en el borde oriental de la Puna; constituyendo el basamento del área. Está compuesta por secuencias clásticas de origen turbidítico, con intercalaciones de rocas volcánicas, calizas y conglomerados. Esta unidad se halla intruída por numerosos plutones y es cubierta en forma discordante por secuencias arenosas de plataforma de edad cámbrica (Grupo Mesón). Sobre la base de la información obtenida en esta Tesis el metamorfismo que afecta a la Formación Puncoviscana es, de acuerdo a los índices de cristalinidad (IC) de la mica blanca, de grado anquizona a epizona. Las características, tanto texturales como composicionales, evidenciadas por los filosilicatos en el estudio con microscopio de electrones de barrido (SEM) y microscopio de electrones de transmisión (TEM) indican un grado metamórfico equivalente. Para las secuencias que afloran en el borde oriental de la Puna, la presencia de biotita prograda indica un grado metamórfico mayor, correspondiente a la facies de esquistos verdes. Para el evento metamórfico, se estiman temperaturas entre 350 y 450 °C, sobre la base de los índices de cristalinidad y las evidencias de puesta a cero del sistema isotópico K-Ar a nivel roca total, en las metapelitas. Las presiones durante dicho evento habrían oscilado entre 5 y 7 Kbar, de acuerdo a los valores de bo registrados para las micas blancas y por la, aplicación del geobarómetro de la fengita. La petrografia, mineralogía e IC indican que las rocas metasedimentarias de muy bajo a bajo grado aflorantes en los cinturones Lules-Puncoviscana y Choromoro integran la misma Formación. El grado de fengitización evidenciado por las micas dioctaédricas de ambas zonas indica que las presiones pueden haber sido algo menores, del orden de 5 Kbar, en el cinturón Lules-Puncoviscana que en el cinturón Choromoro. La esmectita y la corrensita identificadas en numerosas muestras por difracción de rayos-X, SEM y TEM son productos de retrogradación que no reflejan el grado metamórfico alcanzado por las mismas. La anomalía de cerio, así como los altos contenidos de lantano, encontrados en rocas de la Formación Puncoviscana, se explica por la presencia de monacita; la cual habria sido concentrada por procesos de reciclado sedimentario. También son indicativas de reciclado sedimentario las altas relaciones Th/U (> 3,8) que presentan la mayoría de pelitas analizadas; así como los altos contenidos de SiO2 que presentan, tanto las metapelitas como muchas de las metaarenitas. El diagrama de discriminación de Roser y Korsch (1986) indica un ambiente de depositación de margen continental activo para esta secuencia. Los resultados de los análisis isotópicos K-Ar sugieren una edad de 620 ± 25 Ma (Neoproterozoico III) para el evento metamórfico principal que afectó a la Formación Puncoviscana. Los resultados isotópicos obtenidos en este estudio constituyen otro argumento en favor de que tanto las rocas metasedimentarias aflorantes en el cinturón Lules-Puncoviscana como en el cinturón Choromoro forman parte de la misma unidad. Sobre la base los resultados isotópicos y de la proporción de micas politipo 2M/1Md presentes en dos muestras se estima una edad de 670 ± 27 Ma para la diagénesis de las rocas que componen la Formación Puncoviscana. Las ‘edades’ K-Ar menores que 540 Ma indican reaperturas del sistema isotópico producidas por eventos téctono-térmicos ocurridos con posterioridad al episodio principal de deformación que afectó al basamento en el área de estudio.

Abstract:
The Puncoviscana Formation, which constitutes the basement of the area, has a wide development in NW Argentina; mainly in Cordillera Oriental and in lesser extent in the eastern border of Puna. It is composed by a pelite-greywacke turbidite sequence, with subordinate sandstones and locally interbedded conglomerates, limestones and volcanic rocks. This unit is unconformably covered by sandy sequences of Cambrian age (Mesón Group). The metamorphism that affects the Puncoviscana Formation is according to the illite Cristalinity Index (IC) results, medium anchizone to epizone grade. For the outcrops of the eastern border of Puna the presence of prograde biotite in several samples allows to specify that greenschists facies conditions were reached in that region. The textural and compositional characteristics, evidenced by phylosilicates in the study with Scanning Electron Microscopy (SEM) and Transmission Electron Microscopy (TEM) also correspond to a metamorphism of medium anchizone to epizone grade. For the metamorphic event, temperatures between 350 and 450 °C were estimated according to the illite Cristallinity Index and evidences of resetting of the isotopic K-Ar system at whole rock level, in some metapelites. The pressures during this event would have oscillated between 5 and 7 Kbar, according to the b0 parameter of white micas and the application of the phengite geobarometer. The petrography, mineralogy and IC of the metasedimentary rocks of very low to low grade metamorphism outcropping in Lules-Puncoviscana and Choromoro Belts indicates that they belong to the same unit: Puncoviscana Formation. The degree of phengitization evidenced by dioctahedral micas of both areas indicates that pressures would have been something lower in Lules-Puncoviscana than in Choromoro Belt, in the order of 5 Kbar. Smectite and corrensite identified in many samples by X-ray diffraction, SEM and TEM are the results of retrograde reactions that do not reflect the metamorphic degree reached by these rocks. The Cerio anomaly and the high Lantano contents, found in rocks of this unit, is explained by the presence of monacite; which would have been concentrated by sedimentary recycling. Other evidences of sedimentary recycling are the high Th/U ratios (> 3,8) that present most of analyzed metapelites and the high SiO2 contents that present, the metapelites and many sandstones. The discrimination diagram of Roser and Korsch (1986) indicates an active continental margin as the tectonic setting of deposition for this sequence. The geochronological results suggest an age of 620 ± 25 Ma for the main metamorphic event that affected the Puncoviscana Formation. Besides, an age of 670 ± 27 Ma is estimated for the diagenesis of this unit, based on the proportion of 2M/1Md mica polytypes present in two samples. Neoproterozoic ages were recorded for localities belonging to Lules-Puncoviscana and Choromoro Belts: Sierra de Guachipas, Cuesta de Muñano, Punnamarca and Quebrada de El Toro. These ages obtained in representative samples of faraway localities imply that this age corresponds to a geologic event that acted on the whole Puncoviscana Formation. The main deformation and metamorphism of the Puncoviscana through would be connected with the aggregation of Western Gondwana occurred at ca 600 Ma, with the orogeny closing the old, long lived Pan-African-Brasiliano tectonic cycle. The K-Ar dates lower than 540 Ma indicate reopening of the isotopic system produced by tectono-thermal events taken place after the main deformation of the Puncoviscana Formation.

Dodes Traian, Martín Miguel. "Estudio de las interacciones entre fosfolípidos y proteínas integrales de membrana. Efectos sobre la actividad enzimática de una ATPasa transportadora de Ca2+" (2014). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Las membranas celulares son estructuras dinámicas complejas de composición bioquímica muy diversa. Las interacciones específicas lípidolípido y lípido-proteína pueden generar dominios estables o transientes de composición y función biológica diferenciales. En este trabajo, abordamos el estudio de la regulación de la actividad de una proteína integral de membrana, la bomba de calcio de membrana plasmática (PMCA) por anfifilos que integran el sistema en el cual se la reconstituye. En micelas de lípidos y detergente, pudimos verificar que la actividad depende de la proporción relativa de estas especies y postulamos un modelo que explica esta dependencia en base al intercambio de anfifilos a nivel del dominio transmembrana. El análisis realizado con diversos métodos espectroscópicos mostró que los cambios estructurales asociados a la activación por lípidos serían sutiles pero suficientes para transducir una señal de activación al dominio citoplasmático de PMCA. Utilizando espectroscopía de correlación de fluorescencia y la sonda fluorescente Laurdan observamos que la actividad depende además de la fluidez del entorno y del tamaño de las micelas. Para extender este estudio al entorno natural de las proteínas -la membrana celular- evaluamos diversas sondas fluorescentes y pudimos determinar que la sonda C-Laurdan permite estudiar por microscopía confocal la organización de membranas biológicas.

Abstract:
Cellular membranes are dynamic complex structures with a highly diverse biochemical composition. Specific lipid-lipid and lipid-protein interactions can generate transient or stable domains of particular composition and biological function. In this work, we study the regulation of the activity of an integral membrane protein, the plasma membrane calcium pump (PMCA), by phospholipids that make up the reconstitution system. Working in a mixed micelles lipid/detergent system, we verify that the activity depends on the relative proportion of these species and we posited a model that explains this relationship by the exchange between amphiphiles at the protein transmembrane domain. The analysis performed by spectroscopic methods showed that the structural changes associated with the activation by lipids are subtle but enough to transduce an activation signal to the cytoplasmic domain of PMCA. Using fluorescence correlation spectroscopy and the fluorescent probe Laurdan, we observed that the activity is also related to micelle size and the fluidity of the protein lipidic microenvironment. To extend this study to the natural environment of the protein –the cellular membrane- we assayed the performance of several fluorescent probes and we could determine that the probe CLaurdan allows studying the organization of biological membranes by confocal microscopy.

Dogliotti, Ana Inés. "Estimación de la biomasa fitoplanctónica mediante el sensoramiento remoto del color del mar y datos de campo en la plataforma continental patagónica" (2007). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo de tesis se utilizaron imágenes del color del mar para estimar la concentración de clorofila-a (Cla) como indicador de la biomasa fitoplanctónica para caracterizar regiones de importancia biológica en la plataforma continental patagónica (PCP). Se realizó un análisis exhaustivo de los principales pasos necesarios para el procesamiento de las imágenes del color del mar: la corrección atmosférica, la evaluación de la estimación satelital de la Cla, y el análisis de una serie de tiempo de mapas de Cla, como una posible aplicación. Se desarrolló por primera vez un algoritmo para corregir los efectos de la atmósfera de las imágenes de color obtenidas por el sensor MMRS a bordo del satélite argentino SAC-C. La performance teórica del algoritmo fue buena, aunque los valores de reflectancia marina obtenidos resultaron bajos en comparación con los correspondientes al sensor SeaWiFS. Las diferencias pueden estar relacionadas con el no cumplimiento de una de las suposiciones del modelo, errores en la calibración radiométrica de los sensores y ruido en los datos. Se evaluó por primera vez la precisión de tres algoritmos globales y dos regionales, aplicados a imágenes SeaWiFS y MODIS, con datos de campo obtenidos en la PCP durante campañas oceanográficas realizadas en verano y otoño entre los años 2001 y 2004. El algoritmo global OC4v4 fue el que mejor estimó la concentración medida in situ. En general se observó una sistemática sobreestimación a bajas concentraciones y una subestimación en altas concentraciones de Cla para todos los algoritmos evaluados. Un análisis regional mostró que, dependiendo de la región analizada en la PCP, puede existir una diferencia importante en la estimación satelital de la Cla. Se utilizó una serie de 6 años de imágenes SeaWiFS para caracterizar temporalmente la distribución de la Cla pudiéndose identificar cuatro zonas en la PCP. La evolución temporal del promedio espacial de la Cla sobre toda la plataforma mostró la importancia biológica (aumento de biomasa fitoplanctónica) de las zonas frontales, a pesar de su reducida extensión espacial.

Abstract:
In the present thesis ocean color images were used to estimate chlorophyll-a concentration (Chla), as a proxy to phytoplankton biomass, to characterize ecological regions within the Patagonian Continental Shelf (PCS). A comprehensive analysis of the main steps required to process ocean color images was performed, i.e. the atmospheric correction scheme, the evaluation of the satellite-derived Chla, and a temporal series analysis of Chla maps. An algorithm was developed to correct ocean color images from the MMRS sensor, onboard the argentine satellite SAC-C. The theoretical performance was good, but the marine reflectance values obtained after correcting MMRS data were low compared to the corresponding SeaWiFS reflectance. The discrepancies may be due to failure in one of the models assumptions, radiometric calibration errors, and to the large noise in the data. Uncertainties in the retrieval of satellite-derived surface Chla have been evaluated in the Patagonian Continental Shelf for the first time. Two global and two regional ocean color products, applied to SeaWiFS and MODIS imagery, have been compared to in situ Chla measurements collected on summer and autumn oceanographic cruises between 2001 and 2004. The OC4v4 standard global algorithm performed better than the other algorithms analyzed; a systematic error was found in the satellite-derived Chla showing a general overestimation at low Chla and an underestimation at high Chla. A regional analysis showed that there was a substantial difference in the performance of the SeaWiFS and MODIS algorithms regarding the location of the sampled sites. A 6- year time series of SeaWiFS Chla derived images were analyzed in order to characterize the temporal evolution of the Chla. The analyzed images permitted to identify a differential distribution pattern of pigment concentrations in four regions in the PCS. The temporal evolution of the spatial mean Chla values averaged over the PCS showed the biological importance (increased biomass) of the frontal zones, even though restricted to small regions.

Dokmetzian, Diana Ana. "Estudios quimiotaxonómicos en especies del género Ascobolus (Ascobolaceae-Pezizales)" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo del presente trabajo fue la delimitación de doce especies del género Ascobolus a partir de los caracteres morfológicos y de cultivo, los cruzamientos interespecíficos, el crecimiento vegetativo en cultivo y los patrones electroforéticos de isoenzimas intracelulares. Para ello se utilizaron 47 cepas monospóricas y 22 siembras mixtas de cepas sexualmente compatibles. En los cruzamientos interespecíficos de A. immersus x A. bistisii, los oídios colocados sobre el micelio base no gerrninaron y tampoco indujeron la formación de ascogonios. Los cruzamientos entre las demás especies formaron primordios incipientes pero no fértiles. Los resultados sugieren la existencia de una sustancia hormonal responsable en la formación de los apotecios muy similar en estas especies y por tal razón A. fiufuraceus está más relacionada a A. gamundii que a las otras especies. Los resultados obtenidos al estudiar el crecimiento vegetativo en cultivo en medio líquido muestran variación entre las especies, que difieren entre sí en la extensión de las fases de la curva. Considerando la duración de la fase de crecimiento exponencial, se reconocen tres grupos. La fase estacionaria, de variada longitud, frecuentemente es muy corta, entrando rápidamente en la fase de muerte, acompañada por la autólisis del micelio. Se examinaron los caracteres micro y macromorfológicos y se aplicaron técnicas numéricas. En el análisis isoenzimático se utilizaron los patrones de bandas de seis sistemas isoenzimáticos: AAT, EST, ACP, GDH, IDH y SOD. Los fenogramas obtenidos a partir del análisis de agrupamientos (UPGMA) mostraron dos gmpos principales de especies correspondientes a dos secciones del género: secc. Ascobolus y secc. Dasyobolus, con algunas diferencias dentro de cada sección. Aunque existe homogeneidad intraespecífica ya que no se observaron grandes diferencias en los estados de los caracteres entre las cepas monospóricas y siembras mixtas, se encontró variación para EST en A. gamundii y para ACP en A. ferrugineus. Los resultados de este trabajo permitieron establecer que las doce especies estudiadas constituyen unidades taxonómicas independientes.

Abstract:
The aim of this work was the delimitation of twelve species of the genus Ascobolus on the base of the analysis of morphological and cultural characters, the vegetative growth in liquid culture media and electrophoretic patterns of intracellular enzymes. Forty seven monosporic strains and twenty two mixed cultures of compatible strains of the genus were used. In A. immersus x A. bístisii interfertility crossing, when oidia were placed on a block of agar lying on a base mycelium, germination failed and there was no induction of ascogonium formation. Crossing between other species, formed incipient primordia, but none of them were fertile. These results suggest that hormonal substances responsible for apothecial formation are very similar in some of these species being, A. furfuraceus more closely related to A. gamundii than to other species. Vegetative growth of the different species showed variation in the duration of the different phases of the growth cycle. Three groups can be recognised considering the extension of the exponential phase of growth. The stationary phase, which differs in its length, is frequently very short, entering quickly in the phase of death, accompanied by the autolysis of the mycelium. Morphological characters were examined and numerical techniques were used. Six intracellular isozyme systems were analyzed: AAT, EST, ACP, GDH, IDH and SOD. The phenograms obtained from the analysis of grouping (UPGMA) showed two groups of species, corresponding to the two sections of the genus: sec. Ascobolus and sec. Dasyobolus with some differences within of each section. Though a high intraespecific homogeneity was observed since there were not differences in the status of the characters among monosporic strains and mixed cultures some variation was observed in EST patterns of A. gamundii and ACP patterns of A.ferrugineus. The results of this research let establish that the twelve species studied are independent taxonomical entities.

Doldan, María del Socorro. "Patrones y procesos de la dinámica poblacional de la ostra puelche, Ostrea puelchana, (D´Orbigny, 1842)" (2013-09-27). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La detección de los patrones y procesos ecológicos depende de la escala de análisis. Los bivalvos marinos conforman, por lo general, metapoblaciones, conformadas por poblacionales locales discontinuas conectadas entre sí mediante el flujo de larvas pelágicas. La existencia de estadios larvarios pelágicos es un rasgo de la historia de vida que puede generar patrones espaciales complejos que son modificados por procesos que operan a la escala de las poblaciones locales. Las fluctuaciones que experimentan las poblaciones pueden ser comprendidas analizando estos patrones y procesos poblacionales a la escala espacial en la que efectivamente ocurren i) a macroescala: abarcando la dinámica del conjunto de poblaciones locales discontinuas que conforman la metapoblación. Los procesos a esta escala comprenden el grado de conectividad entre los bancos; ii) a mesoescala: la escala de población local, dentro de una metapoblación; el énfasis radica en el cambio del tamaño poblacional en tiempo y espacio; iii) a microescala: es el área de influencia de cada individuo, donde tienen lugar procesos denso-dependientes. El objetivo general de este trabajo fue estudiar los patrones y procesos poblacionales de la ostra puelche Ostrea puelchana bajo la perspectiva de tales escalas espaciales. Para ello, se abordaron aspectos de la historia de vida de las ostras, de la demografía de los bancos, y de la comunidad de la cual forman parte. Han sido estudiadas las fluctuaciones temporales y espaciales de los patrones de distribución de las densidades de ostras en cada banco, las tendencias geográficas de procesos como reclutamiento, portación de machos epibiontes y agregaciones en manojos, las estructuras demográficas (aparente y real), la composición de las comunidades bentónicas, y el efecto de interacciones interespecíficas, de los bancos de ostras del Golfo San Matías (GSM) y del Golfo San José (GSJ). Históricamente, la distribución de la ostra plana nativa, O. puelchana, ha sido mencionada desde Santa Catarina, sur de Brasil, hasta el GSM. Sin embargo, estudios recientes han reportado su presencia en latitudes mayores, indicando una expansión de las poblaciones de O. puelchana hacia el sur durante las últimas décadas. El límite sur actual de la distribución de O. puelchana resultó ser el GSJ, donde esta especie conforma bancos de densidades bajas. La reconstrucción de la presencia de O. puelchana en el GSM se realizó a partir de cuatro fuentes de información, que abarcan períodos muy distintos: el registro fósil en el Holoceno, documentación sobre yacimientos arqueológicos, documentación de las primeras campañas de exploración (iniciadas a finales de siglo XIX y primera mitad del siglo XX) y bases de datos de las prospecciones ecológico-pesqueras realizadas en la zona entre 1970-2006. La presencia de ostras subfósiles del Holoceno en los cordones arenosos de la costa de Puerto Lobos indica que el rango de distribución geográfica en el pasado pudo haber sido similar al actual. Los registros de fin de siglo XIX de esta especie en el GSM, permitieron conformar la persistencia espacial a largo plazo de los bancos. Esta persistencia ocurre a pesar de las fluctuaciones poblacionales, a causa de factores ambientales, biológicos, socio-económicos y antropogénicos. Los bancos de O. puelchana de la costa NO del GSM han experimentado una contracción en los últimos años, con reducción de su abundancia. Por el contrario, los bancos de la costa NE se han consolidando durante los últimos 20 años, experimentando una expansión a lo largo de toda la costa, desde Punta Villarino hasta Caleta de los Loros. La coherencia geográfica en la expansión de los bancos de ostras podría reflejar condiciones adecuadas generales para la supervivencia de las larvas a largo plazo, al menos en la costa NE. Los bancos de la costa NO mostraron un patrón de contracción a menor escala espacial que contrasta con esta coherencia geográfica de expansión de la metapoblación, lo cual indicaría la influencia de otros procesos. Se realizaron prospecciones en cinco bancos del GSM (Banco Reparo, Las Grutas, El Sótano, Bajo Oliveira y Caleta de los Loros), y se analizaron muestras de los bancos de Sierra Grande, Puerto Lobos y de Playa Fracasso, del GSJ. En total, unas 5181 ostras fueron medidas y pesadas. A mesoescala, se observaron cambios en la estructura de los bancos de la costa NO, con disminución de la densidad, coincidentes con la reducción de su extensión. Sin embargo, algunos bancos muestran signos de recuperación. La estructura demográfica de O. puelchana tiene una dinámica que se adapta ante los cambios, como ha sido la epizootia por Bonamia exitiosa a mediados de 1990, entre otros. En la costa NE, pareciera continuar la tendencia de aumento y expansión de los bancos. Se exploraron varias técnicas para la determinación de edad de esta especie: cortes delgados de valvas, moldes de acetato, marcado de valvas con calceína, radiografías, cátodoluminiscencia e isótopos estables. El empleo de la técnica de cátodoluminiscencia, combinada con el análisis de isótopos estables del oxígeno, resultó exitoso en la elucidación del patrón de depositación de la valva en esta especie. La implementación combinada de estas técnicas resulta novedosa, ya que constituye la primera aplicación en moluscos marinos en nuestro país. O. puelchana es una especie sensible a los cambios estacionales de su ambiente, respondiendo a éstos con la depositación de líneas de calcita caliza, durante los meses cálidos (diciembre a marzo). La cantidad de líneas observadas dependió de la talla y de las condiciones ambientales locales de cada sitio, por lo cual no se puede atribuirles a estas líneas el carácter de marcadores esclerocronológicos. Los componentes faunísticos de los bancos de O. puelchana fueron estudiados mediante técnicas uni y multivariadas, siguiendo tres perspectivas diferentes: i) analizar las probables diferencias en la composición y diversidad de las comunidades entre bancos con condiciones diferentes; ii) analizar las diferencias entre bancos de la diversidad de especies que utilizan a la ostra como sustrato, y analizar a ésta como probable organismo estructurador del ambiente. Los bancos de ostra puelche conforman sistemas biodiversos, constituyendo un ensamble único, sin diferencias entre bancos, caracterizado por una dominancia de unas pocas especies. O. puelchana resultó ser un importante sustrato de asentamiento de especies epibiontes. La conformación de manojos no incrementó la diversidad de epibiontes de manera significativa, con respecto a las ostras libres. La probabilidad de albergar epibiontes aumentaría con la edad, o sea, con el tiempo de exposición a este poblamiento. Se analizó el efecto sobre O. puelchana de distintas interacciones interespecíficas a microescala. La presencia del cangrejo comensal Tumidotheres maculatus dentro de O. puelchana, cuya frecuencia varía entre bancos, redujo el índice de condición de las ostras hospedadoras. La infección por Lithophaga patagonica también varió entre bancos. Las ostras desencadenarían una reacción defensiva contra las perforaciones de L. patagonica que sería efectiva una vez que éstas alcanzan la superficie interior de la valva. Las densidades actuales de los quitones del género Chaetopleura sugieren que la regulación post-asentamiento que éstos ejercen sobre las poslarvas mediante el ramoneo opera en todos los bancos de ostras del GSM. Los bancos de O. puelchana del GSM constituyen una metapoblación vinculada mediante deriva de larvas. La dinámica poblacional de O. puelchana es lenta, con una baja resiliencia, en la cual se requieren de al menos 20 años hasta la aparición de signos de recuperación a posteriori de un evento devastador como fue el que ocasionó la epizootia producida por B. exitiosa a mediados de 1990. Este mismo lapso de tiempo es el que requirió el establecimiento de bancos en el GSJ.

Abstract:
The detection of ecological patterns and processes depends on the scale of analysis. Bivalve molluscs usually form metapopulations, formed by local population interconnected by flow pelagic larvae. The existence of pelagic larval stages is a feature of the life history that can generate complex spatial patterns that are modified by processes that operate at the scale of local populations. Fluctuations experienced by populations can be understood by analyzing these patterns and population processes to the spatial scale at which they do occur: i) macroscale: it encompasses the dynamics of the set of discrete local populations that make up the metapopulation. The processes at this scale include the degree of connectivity between beds, ii) mesoscale: the scale of the local population within a metapopulation; the emphasis focus on the change of population size in time and space; iii) microscale: is the area of influence of each individual, within which density-dependent processes ocurrs. The aim of this work was to study the patterns and processes of the population of the puelche oyster Ostrea puelchana through the perspective of spatial scales. Different aspects of the life history of oysters, the demography of the oyster beds, and the oyster community were analyzed. Temporal and spatial fluctuations of the distribution patterns of oyster densities, the geographic trends of processes such as recruitment, dwarf-males carring and cluster aggregation patterns, demographic structures (apparent and real), the benthic community composition, and the effect of interspecific interactions, have been studied in each oyster bed of San Matías Gulf (SMG) and San José Gulf (SJG). Historically, the distribution of the native flat oyster, Ostrea puelchana has been mentioned from Santa Catarina, southern Brazil, to the SMG. However, recent studies have reported its presence at higher latitudes, indicating a southward expansion of the O. puelchana populations during the last decades. The current southern boundary distribution of O. puelchana is the SJG, where the species forms low densities beds. Reconstruction of the occurrence of O. puelchana in SMG was made using four sources, each covering different periods: the fossil record from the Holocene, archaeological documentation, documentation of the early exploration surveys (from the late XIX century to the early XX) and the information from fishing and scientific surveys conducted between 1970-2006. The occurrence of oysters subfossils from the Holocene at the sand ridges on the coast of Puerto Lobos indicates that the geographic distribution range in the past may have been similar to the current. The records of this species from the late century XIX in the SMG, helped establishing the long-term spatial persistence of beds. This persistence occurs despite the population fluctuations due to environmental, biological, socio-economic and anthropogenic factors. O. puelchana beds from the NW coast of the GSM experienced a contraction in recent years, with a reduction of the abundance. By contrast, the NE coast beds have strengthened over the last 20 years, showing an expansion along the coast, from Punta Villarino to Caleta de los Loros. Geographic consistency in the expansion of the oyster beds may reflect a general environment of suitable conditions for longterm larval survival (at least in the NE coast). On the contrary, beds of the NW coast showed a pattern of contraction at a lower spatial scale that contrasts with this geographical coherence of the metapopulation expansion, suggesting the influence of other processes. Surveys were conducted in five SMG beds (Bank Reparo, Las Grutas, The Sótano, Bajo Oliveira and Caleta de los Loros), and samples from Sierra Grande, Puerto Lobos and Playa Fracasso (GSJ) beds were analyzed. Together, about 5181 oysters were measured and weighed. Changes in the structure of NW beds were observed at a mesoscale, with a decreasing trend in the density, together with the reduction of its extension. However, some bed showed signs of recovery. The demographic structure of O. puelchana has a plastic dynamic adaptable to changes, as the case of the Bonamia disease by Bonamia exitiosa in mid-1990, among others. In the NE coast, the trend of expansion of beds seems to continue. We explored several techniques for age determination of this species: thin sections of shell, acetate peels, shell calcein marking, x-rays, cathodoluminescence and stable isotopes. The use of cathodoluminescence technique, combined with the analysis of stable isotopes of oxygen, was successful in elucidating the depositional pattern of the shell in this species. The combined implementation of these techniques is a noveltyl, as it is the first case in application in marine molluscs in our country. O. puelchana senses the seasonal changes of the environment, responding to them with the deposition of a chalky calcite band, during the warmer months (from December to March). The number of bands observed depended on the oyster size and local environmental conditions of each bed, so we cannot consider these bands the as sclerochronological markers. The faunal components of O. puelchana beds were studied by univariate and multivariate techniques, using three different perspectives: i) analyzing the differences in the community composition and diversity between beds with different environmental conditions, ii) analyzing the differences in the diversity of species that use the oyster as a substrate between beds, and evaluating if O. puelchana is an environment structuring organism. The puelche oyster beds form a single diverse system, showing no differences between beds. Beds are dominated by a few species. O. puelchana proved to be an important substrate for settlement of epibionts species. Clusters did not increase significantly the epibionts diversity. The probability of harboring epibionts increases with age, or with the time of exposure to them. The effect of interspecific interactions on O. puelchana at microscale was studied. The presence of commensal Tumidotheres maculatus within oysters, varied between beds. This crab reduced the condition index of the oysters. Lithophaga patagonica infection also differed between beds. Oysters trigger a defensive reaction against Lithophaga patagonica which is effective once they reach the inner surface of the shell. Current densities of chitons of the genus Chaetopleura suggest that the post-settlement regulation that they have over the postlarvae operates in all GSM beds oyster. O. puelchana beds form a metapopulation linked by larval drift. The population dynamics of O. puelchana is slow, with low resilience, which requires at least 20 years before the first signs of recovery appear, as it occurred after a drastic event caused by B. exitiosa disease in mid-1990. This same time period was required for the establishment of beds in the GSJ.

Domaica, Carolina Inés. "Eventos tempranos en la interfase tumor linfocito T y consecuencias sobre la actividad de las células NK" (2009). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Las células NK secretan IFN-g y ejercen citotoxicidad contra tumores que expresan ligandos del receptor NKG2D (NKG2DLs, tales como MICA, MICB y las moléculas ancladas a residuos GPI ULBP-1 a -3) y de los receptores de citotoxicidad natural tales como NKp46 (NKp46Ls, de identidad desconocida). No obstante, desconocemos si las células T son capaces de regular la respuesta anti-tumoral mediada por células NK. En este trabajo, investigamos los eventos tempranos que ocurren la interfase tumor-linfocito T, y su impacto sobre la funcionalidad de células NK. En esta Tesis demostramos que luego del co-cultivo con una línea de melanoma que expresa MICA en superficie, linfocitos T CD4+ o CD8+ activados o en reposo capturaron este NKG2DL de las células tumorales mediante un fenómeno que se denomina trogocitosis. Esta transferencia de membrana entre células fue confirmada mediante la utilización de células marcadas con los fluorocromos CFSE, DiOC18 y PKH26 y fue dependiente del contacto celular. Sin embargo, no fuimos capaces de detectar la transferencia de proteínas ancladas a residuos GPI. Los linfocitos T que estuvieron en contacto con las células tumorales fueron resistentes a la lisis mediada por células NK, pero fueron capaces de promover su degranulación y la secreción de IFN-g en forma dependiente de NKG2D y NKp46, lo que sugiere que además de MICA, otros NKG2DLs y NKp46Ls son capturados por los linfocitos T activados desde la superficie de las células tumorales. Por lo tanto, células de la inmunidad adaptativa (linfocitos T) son capaces de estimular funciones efectoras en células de la inmunidad innata (células NK) a través de la captura de ligandos específicos y en forma independiente del TCR.

Abstract:
NK cells trigger IFN-g secretion and cytotoxicity upon engagement of NKG2D or members of the NCR family such as NKp46 by ligands expressed on tumor cells (such as MICA, MICB, and the GPI-anchored molecules ULBP-1 to -3 for NKG2D, or ligands of unknown identity for NKp46). However, it remains uncertain whether T cells can regulate NK cell-mediated anti-tumor responses. Here, we investigated early events occurring during T lymphocyte-tumor cell interactions, and the impact on NK cell functions. Upon co-culture with MICA+ melanomas, activated CD4+, CD8+, or resting T cells displayed substantial amounts of cell surface MICA due to direct capture (trogocytosis) from the tumor cells. Such transfer was confirmed using CFSE-, PKH26- or DiOC18-labeled cells and required cell-to-cell contact. However, GPI-anchored NKG2DLs were not transferred. Tumor-experienced T lymphocytes remained resistant to NK cell-mediated cytotoxicity, but promoted degranulation and IFN-g secretion by NK cells in a NKG2D- and NKp46-dependent manner, suggesting that additional NKG2DLs and NKp46 ligands were captured by activated T lymphocytes from tumor cells. We conclude that cells from the adaptive immune response (T lymphocytes) support effector functions of innate immune cells (NK cells) through capture of specific ligands in a TCR-independent manner.

Domené, Esteban A.. "Técnica de error de foco para microscopía de expansión y recuperación térmica (ThERM)" (2013). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En esta tesis doctoral se presenta el desarrollo de un accesorio fototérmico capaz de caracterizar propiedades térmicas de una muestra midiendo la curvatura superficial de la expansión térmica inducida. La técnica, denominada ThERM por las siglas en inglés Termal Expansion-Recovery Microscopy (microscopia de expansión y recuperación térmica), permite medir mapas bidimensionales de difusividad la difusividad térmica con una resolución micrométrica. Un haz de excitación modulado calienta la muestra induciendo una respuesta térmica. El esquema de detección consiste en un haz de prueba astigmático y un detector de cuatro cuadrantes. De la diferencia entre las diagonales del detector se genera una señal de error de foco (FE) que resulta proporcional al desenfoque del haz de prueba causado por la curvatura superficial de la muestra. Ajustando barridos en frecuencia con un modelo térmico se obtiene una frecuencia de corte que solo depende de la difusividad térmica de la muestra y el tamaño del haz de excitación. Esto permite caracterizar la difusividad térmica de la muestra de manera simple, con una resolución lateral definida por el tamaño del haz de excitación y resolución axial subnanométrica.

Abstract:
In this doctoral thesis we present the design of a photothermal microscope accessory capable of characterizing thermal properties of a sample by probing the surface curvature of the induced thermal expansion. The technique, called ThERM (Thermal Expansion-Recovery Microscopy), allows the retrieval of the thermal diffusivity at microscopic levels and hence mapping such magnitude over a sample surface. A modulated pump laser beam heats the sample, thus inducing a thermal response. The detection scheme consists of an astigmatic probe laser and a four-quadrant detector. From the difference between the diagonals of the detector, a focus error signal is obtained (FE) which is proportional to the defocusing of the probe beam due to the surface curvature. Nonlinear fitting of frequency sweeps with a thermal model allows the retrieval of a cutoff frequency which only depends on the thermal diffusivity of the sample and the pump beam size. Therefore a straightforward retrieval of the thermal diffusivity of the sample is possible, with a lateral resolution defined by the pump beam size and a sub-nanometer axial resolution.

Domínguez, Marisol. "Estructuración poblacional del Cardenal Amarillo (Gubernatrix cristata): implicancias para su conservación" (2015-12-21). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El Cardenal Amarillo (Gubernatrix cristata) es un passeriforme endémico de América del Sur, que está categorizado como ―En peligro‖ por la Unión Internacional para la Conservación de la Naturaleza como consecuencia de la alta tasa de captura para su comercio ilegal como ave de jaula y la modificación de su hábitat. Su distribución actual es altamente discontinua, con escasas regiones donde se registra la especie, separadas por zonas donde su presencia es muy escasa o nula.Los objetivos del trabajo fueron: 1) Estudiar los principales parámetros reproductivos del Cardenal Amarillo; 2) analizar la estructuración poblacional de la especie en Argentina y Uruguay; y 3) estudiar el efecto que tiene la hibridación con la especie emparentada Diuca diuca minor en la región sur de su distribución. A través de un seguimiento de parejas reproductivas en la provincia de Corrientes se describieron los parámetros reproductivos para el Cardenal Amarillo y se observó una disminución en la supervivencia de los nidos a medida que avanza la temporada reproductiva y como consecuencia del parasitismo por el tordo renegrido Molothrus bonariensis y por larvas de moscas del género Philornis. El impacto del parasitismo no había sido considerado previamente como una posible amenaza para esta especie. Para estudiar la estructuración poblacional se analizaron individuos provenientes de cuatro regiones que se ubican en los extremos norte (Litoral, provincia de Corrientes) y sur (Provincias de Río Negro y La Pampa) y en el centro (Provincia de San Luis) de su distribución en Argentina. Además, se estudiaron individuos de la República Oriental del Uruguay. Las poblaciones fueron analizadas a nivel genético (736 pb de la región control de ADNmt y 10 loci microsatélites), morfológico (11 medidas morfométricas) y comportamental (vocalizaciones). Se encontraron diferencias entre poblaciones en todas las características estudiadas. En base a estos resultados se pudieron definir cuatro unidades de manejo para el Cardenal Amarillo, compuestas por la población de Uruguay, la población de Corrientes, la población de San Luis y norte de La Pampa, y la población de Río Negro y sur de La Pampa. En la población austral, se estudió cómo la hibridación con la Diuca Común (Diuca diuca minor) afecta la variabilidad de estos caracteres y aunque no se encontró una introgresión genética entre especies, se observó una mayor similitud de los cantos de Diuca Común con los de la población sur del Cardenal Amarillo.La caracterización de las poblaciones existentes del Cardenal Amarillo podrá utilizarse para delimitar áreas protegidas que permitan mantener una representatividad adecuada de la variabilidad poblacional a lo largo de su distribución geográfica. Estos resultados permitirán, además, asignar la proveniencia de individuos incautados por las Direcciones de Fauna, lo cual podrá servir como base para delinear futuros programas de reintroducción.

Abstract:
The Yellow Cardinal (Gubernatrix cristata) is an endemic South American passerine, which is categorized as "endangered" by the International Union for Conservation of Nature as a result of illegal traffic and habitat modification. Its current distribution is highly discontinuous, with few areas where the species is present separated by areas with scarce or null records. The objectives of this thesis were to: 1) study the main reproductive parameters of the Yellow Cardinal; 2) analyze the population structure of the species in Argentina and Uruguay; and 3) study the effect of the hybridization with the related species Diuca diuca minor in the southern part of its distribution. Through monitoring of breeding pairs in the province of Corrientes, reproductive parameters were described and a decrease in nest survival was observed as the breeding season advances and as a result of parasitism by the Shiny Cowbird (Molothrus bonariensis) and fly larvae of the genus Philornis. The impact of parasitism had not been previously considered as a potential threat to this species. In order to study Yellow Cardinal population structure individuals from four regions at the extremes and center of the distribution were analyzed. The southern region is located in the provinces of La Pampa and Río Negro, the central region in the province of San Luis and the northern region in the province of Corrientes. In addition, individuals from Uruguay were studied. Populations were analyzed at genetic (736 bp of mtDNA control region and 10 microsatellite loci), morphological (11 morphometric measurements) and behavioral level (vocalizations). Differences between populations were found in all the characters that were studied. Based on these results, it was possible to define four management units for the Yellow Cardinal, composed by the populations of Uruguay, Corrientes, San Luis and northern La Pampa, and Río Negro and southern La Pampa. We also studied whether hybridization with the Common Diuca (Diuca diuca minor) affects the variability of these characters. Even though a genetic introgression between species was not found, a greater similarity of the songs of Common Diucas with the southern Yellow Cardinal population was observed. The description of the remaining populations of the Yellow Cardinal can be used to delineate protected areas in order to maintain a proper representation of population variability throughout its range. These results will also help to identify the origin of confiscated individuals, which may serve as a basis for outlining future reintroduction programs.

Donadío, Sabina. "Filogenia de Tillandsia subgen. Diaphoranthema y evolución de la autogamia y la poliembrionía" (2013-03-21). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Tillandsia subgénero Diaphoranthema comprende 28 de las 540 especies de Tillandsia y está dividido en 6 agregados informales basados en la filotaxis, el color de los pétalos y la pubescencia de las brácteas florales. Si bien Diaphoranthema se distribuye ampliamente desde el sur de Estados Unidos hasta el centro de Argentina y Chile, el área geográfica de mayor diversidad específica se halla en el centro y noroeste de Argentina y en Bolivia. Las especies del subgénero son epífitas o saxícolas, habitan generalmente ambientes áridos y semiáridos, y se caracterizan fundamentalmente por sus inflorescencias reducidas y flores inconspicuas. El subgénero Diaphoranthema se plantea como un interesante modelo de evolución de caracteres tanto vegetativos como reproductivos dado que sus especies presentan una alta variación morfológica vegetativa, son comunes las adaptaciones a ambientes xéricos e incluso se ha propuesto que la evolución de este grupo de especies ha sido marcada por procesos neoténicos que condujeron, entre otras cosas, a un acortamiento del ciclo de vida. En cuanto al aspecto reproductivo, la literatura sugiere para el subgénero una fuerte tendencia a la autogamia y a la poliembrionía. Los antecedentes filogenéticos son, en su gran mayoría, estudios moleculares que demuestran un alto grado de homogeneidad molecular dentro de Tillandsia. El único estudio filogenético a partir de datos morfológicos ha establecido la parafilia del subgénero Phytarrhiza dada la inclusión de 2 especies de Diaphoranthema y a pesar del escaso muestreo de Diaphoranthema lo ha sugerido como un subgénero monofilético en estrecha relación al grupo de especies xéricas de Phytarrhiza. Ante estos antecedentes, se propuso como objetivos para este trabajo realizar un análisis exhaustivo de caracteres morfológicos y generar una hipótesis filogenética robusta del subgénero Diaphoranthema, utilizando caracteres morfológicos y moleculares, sobre la cual poner a prueba su monofilia y la de sus agregados y a su vez interpretar patrones evolutivos en estructuras vegetativas y reproductivas y estudiar en particular la evolución de la autogamia, la poliembrionía y los caracteres relacionados con la hipótesis de neotenia propuesta para el subgénero. El estudio filogenético incluyó a la totalidad de las especies de Diaphoranthema, y para el grupo externo se seleccionaron especies de los subgéneros Anoplophytum y Allardtia, así como también especies xéricas del subgénero Phytarrhiza, y una especie del género Vriesea que fue tomada como raíz para los análisis filogenéticos. Se realizaron análisis de máxima parsimonia sobre la base de la información proporcionada por un marcador nuclear (ETS), un marcador plastídico (matK-trnK) y se estudiaron 87 caracteres morfológicos. Como resultados salientes de esta tesis, se ha resuelto la identidad de T. bryoides y se ha descripto una nueva especie para la ciencia: Tillandsia minutiflora; se ha generado una hipótesis filogenética robusta de Tillandsia subgénero Diaphoranthema a partir de los datos morfológicos y moleculares, en la que el subgénero se resuelve parafilético dado que incluye a especies xéricas de Tillandsia subgen. Phytarrhiza; a su vez, dentro de Diaphoranthema los agregados Loliacea y Rectangula son monofiléticos, los agregados Caliginosa y Myosura son parafiléticos y los agregados Capillaris y Recurvata son polifiléticos pero podrían llegar a definirse como grupos naturales si se reevaluaran sus límites. Los 3 clados principales en los que se divide el subgénero Diaphoranthema están apoyados fundamentalmente por caracteres vegetativos y seminales: filotaxis, forma de la hoja, carena foliar, distribución de los nervios en la vaina foliar, tipo de endostoma y poliembrionía. Dos de los clados principales corresponden a los agregados Loliacea y Rectangula. La poliembrionía ha surgido varias veces independientemente en la evolución de Diaphoranthema mientras que el origen evolutivo de la autogamia no pudo ser determinado aunque sí se evidencia como una fuerte tendencia evolutiva del subgénero. Las modificaciones en estructuras vegetativas y reproductivas relacionadas a la neotenia hipotetizada para Diaphoranthema evidencian la existencia de procesos heterocrónicos en el desarrollo de las especies que no necesariamente implican un acortamiento en el ciclo de vida y se requieren estudios futuros respecto a la naturaleza de estos procesos y su contribución adaptativa. Por último se confirma la necesidad del replanteo de la clasificación subgenérica de Tillandsia y se proponen modificaciones a la clasificación de Diaphoranthema para lo cual los caracteres morfológicos estudiados en esta tesis y la interpretación de su evolución pueden ser de gran utilidad en un futuro.

Abstract:
Tillandsia subgenus Diaphoranthema includes 28 of 540 species of Tillandsia and is divided into 6 informal groups by their phyllotaxy, petal colour and indumentum of floral bracts. Although species of Diaphoranthema are widely distributed from southern U.S. to central Argentina and Chile, the highest diversity of species is found in central and northwestern Argentina and Bolivia. Diaphoranthema species are epiphytic or saxicolous, usually growing in arid and semiarid environments, and characterised by their reduced inflorescences and inconspicuous flowers. Subgenus Diaphoranthema is an interesting case to study the evolution of both vegetative and reproductive characters due to the highly variable vegetative morphology and the adaptations to xeric environments. Beyond this, it has been suggested that the evolution of these species has been driven by neotenic changes that led to a shortening of the life cycle. Concerning reproductive aspects, previous papers suggest a strong tendency to autogamy and polyembryony within the subgenus. Phylogenetic studies are mainly molecular and show low molecular variation within Tillandsia. The only phylogenetic study based on morphological characters, has established that subgenus Phytarrhiza is paraphyletic because of the inclusion of two species of Diaphoranthema, and despite the underrepresentation of Diaphoranthema species, that study suggested the latter as a monophyletic group closely related to the xeric species of subgenus Phytarrhiza. Based on all these data, this thesis focuses in: 1) a deep analysis of the morphology and 2) produce a robust phylogenetic hypothesis for subgenus Diaphoranthema using both morphological and molecular characters, to test its monophyly, the monophyly of its informal aggregates, and at the same time, to interpret the evolutionary patterns of vegetative and reproductive structures, particularly polyembryony, autogamy, and those characters related to the hypothesis of neoteny. The phylonetic analysis included all Diaphoranthema species. Some species of subgenus Anoplophytum and Allardtia were selected as outgroup, as well as xeric species of Phytarrhiza, and one species of genus Vriesea as the root for the analysis. Molecular data from the nuclear ETS and plastidial matKtrnK markers in addition to 87 morphological characters were analized by maximum parsimony. The main results have produced a robust phylogenetic hypothesis: subgenus Diaphoranthema is paraphyletic because of the inclusion of xeric species of subgenus Phytarrhiza; informal aggregates Loliaceae and Rectangula are monophyletic, but Caliginosa and Myosura are paraphyletic, and Capillaris and Recurvata are polyphyletic, however they may become as natural groups considering the reevaluation of their limits. Diaphoranthema can be divided in three main clades supported by vegetative and seminal characters: phyllotaxy, leaf shape, leaf keel, distribution of nerves on the sheath, type of endostome and polyembryony. Two of those three clades correspond to the informal groups Loliacea and Rectangula. Polyembryony has independently arisen several times within Diaphoranthema. The origin of autogamy could not be established; however this reproductive feature appears as a strong tendency within the subgenus. Changes in vegetative and reproductive characters previously related to neoteny within Diaphoranthema suggested heterochronic changes that do not necessarily imply a shortening of the life cycle, and further studies are required concerning the nature of these changes and their adaptative significance. Finally, results confirm the need of changes in the subgeneric classification of Tillandsia in general, and suggest specific changes in Diaphoranthema. The morphological characters used in this thesis and evolutionary interpretations may be useful for future analysis.

Donato, Esteban D.. "Evaluating classification algorithms applied to data streams" (2009-12-21). Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Donato, Juan Santiago Egidio. "Contribución al estudio de las lozas y porcelanas" (1942). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Dorado, Jimena. "Interacciones planta-polinizador desde la perspectiva de los polinizadores: diversidad floral, reproducción de abejas solitarias y su especialización" (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La mayoría de los estudios planta-polinizador se centran en las plantas; en esta tesis fueron estudiadas desde la perspectiva de los polinizadores. Primero se evaluó la relación diversidadestabilidad para la producción floral como recurso para los polinizadores a lo largo de una temporada de floración. Los resultados mostraron una relación positiva que permite evaluar la generalidad de esta relación. Además, se evaluó el efecto de medidas ecológicas simples y comúnmente utilizadas, como la diversidad y abundancia floral, sobre el éxito reproductivo de los polinizadores, obteniéndose una respuesta especie específica. Existen dos mecanismos que explican la ampliación del nicho poblacional, pero solo uno de ellos ha sido evaluado proponiendose como el mecanismo general. Aquí, se evaluaron ambos mecanismos sobre varias especies de abeja con resultados diferentes a los reportados previamente, ya que ambos mecanismos operan. Por último, se evaluó cuán confiables son las inferencias sobre las especies raras en las redes planta-polinizador ya que podrían estar sesgadas por el tipo de muestreo utilizado para construirlas. Este estudio demostró que el sesgo existe y que aumenta con la rareza de las especies. Esta tesis permitió avanzar en el conocimiento de las interacciones planta-polinizador, haciendo desarrollos conceptuales en diferentes áreas de la ecología general.

Abstract:
Most of plant-pollinator interaction studies are centered in plants; in this thesis they were studied from the pollinator's perspective. First, the diversity-stability relationship is evaluated for floral resources throughout a floral season. The results showed a positive relationship that allows to evaluate the generality of this relationship. Also, the effect of some simple and commonly used ecological parameters, like floral diversity and abundance, were evaluated over the pollinator's fitness with species specific results. There are two mechanisms that explain the population niche width, but only one of them had been evaluated before and proposed as the general one between different taxa. Here both mechanisms were tested in multiple bee species with results that differ from previous studies, because both mechanisms operate. Finally, the specialization estimates of rare species were evaluated for plant-pollinator visitation networks, because they could be influenced by a sampling bias. The study showed that the bias exists and that its importance increases with the rarity of the species. The present thesis generated new knowledge about plantpollinator interactions, and it also made conceptual developments in different areas of general ecology.

Dorfman, Verónica Berta. "Neurotransmisores y sus receptores en la médula espinal de ratas diabéticas" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La diabetes es un desorden endócrino-metabólico asociado con alteraciones funcionales que entre otras incluye una disfunción sexual. Un gran porcentaje de pacientes diabéticos de sexo masculino presentan trastornos de disfunción sexual asociados a problemas de impotencia en los estadios avanzados de ésta patología. La región lumbosacra de la médula espinal interviene en la inervación del pene a través de los nervios pélvicos y pudendos regulando de esta manera los mecanismos de erección peneana y de eyaculación. El objetivo de este trabajo fue investigar los factores, que pueden estar modulando este mecanismo en la diabetes experimental. Para ello se estudiaron las características morfológicas y bioquímicas de la región lumbar6/sacro1 de la médula espinal de animales con diabetes inducida por tratamiento con estreptozotocina utilizando además otros modelos que también presentan una disminución en la respuesta sexual. Metodología: Se utilizaron: l- ratas macho con diabetes inducida por estreptozotocina con o sin tratamiento con insulina, 2- ratas con hipogonadismo funcional obtenido mediante tratamiento neonatal con monosodio glutamato (MSG), 3- ratas macho gonadectomizadas (GDX) y/o adrenalectomizadas (ADX) con o sin el tratamiento hormonal correspondiente, y 4- ratas macho intactas desde los 10 dias de vida hasta los 20 meses de edad. La médula espinal fue extraída por laminectomia dorsal y el tejido procesado según correspondiere al tipo de ensayo a realizar. Para los estudios morfológicos de los núcleos motores, se utilizaron técnicas histológicas (tinción de Nissl o tinción con tetraóxido de osmio) seguidas del análisis por microscopía óptica o microscopía electrónica. Los distintos factores probablemente involucrados en la regulación de los mecanismos de erección peneana y eyaculación fueron estudiados utilizando diversas técnicas tales como: autorradiografia cuantitativa para evaluar cambios en los receptores del sistema GABAérgico tipo GABA-B, GABA-A y sitios de unión para benzodiacepinas; los receptores mu- y delta-opioides y los receptores para los neuropéptidos ocitocina y vasopresina. La técnica de cromatografía líquida de alta performance fue utilizada para evaluar los niveles tisulares de los aminoácidos GABA y glutamato. Técnicas de radioinmunoensayo fueron utilizadas para determinar los niveles de testosterona plasmática y los niveles de beta-endorfinas tisulares. La técnicas inmunohistoquímica fue utilizada para determinar la localización y expresión del factor de crecimiento insulinico de tipo l (IGF-I) y la técnica histoquimica de reactividad NADPH diaforasa fue utilizada para el estudio de neuronas nitrérgicas. Resultados: Los animales diabéticos mostraron una reducción significativa del volumen del núcleo espinal del bulbocavemoso (sexualmente dimórfico), respecto al grupo control, como consecuencia de una reducción en el tamaño de sus motoneuronas, que presentaron signos de degeneramiento neuronal. Todas las alteraciones fueron revertidas por insulina. Los sistemas de neuromoduladores estudiados presentaron alteraciones en los animales diabéticos así como en los animales con alteraciones endócrinas. El estudio del sistema GABAéigico presentó marcación específica de los receptores en asta dorsal y región central, con aumento significativo en la densidad de los receptores tipo GABA-B en los animales diabéticos respecto al control, con una disminución en la afinidad y un aumento en el número total de sitios de unión. Los sitios receptores de tipo central para benzodiacepinas presentaron una disminución significativa de su densidad, asociada con disminución en la afinidad y en el número de sitios totales en animales diabéticos. En ambos casos los valores alterados volvieron a su nivel control con el tratamiento de insulina. Los receptores tipo GABA-A presentaron un aumento solo en los animales diabéticos tratados con insulina. El sistema GABAérgico presentó también alteraciones en animales GDX ó ADX y una disminución en los niveles de receptores, progresiva con la edad. Por otro lado los niveles de GABA mostraron una disminución significativa en la médula espinal de ratas diabéticas. En el estudio del sistema opioide se observó presencia de los receptores tipo mu y delta en el asta dorsal, con disminución significativa de los tipo mu, asociada a un aumento en la constante de disociación, en animales diabéticos que fue revertida por tratamiento con insulina. No se evidenciaron cambios en los receptores tipo delta. Los animales con diabetes experimental presentaron un aumento significativo en el contenido de beta-endorfinas en la medula espinal. No se observaron diferencias en los receptores mu-opioides por GDX y/o ADX. El análisis del sistema de receptores para ocitocina y para vasopresina demostró marcación específica para ambos receptores, el primero en asta dorsal y el segundo sobre los núcleos pudendos. El receptor para ocitocina presentó disminución significativa de su densidad en animales diabéticos y en animales MSG respecto a sus grupos control, y el receptor para vasopresina también se mostró alterado con la diabetes. En ambos casos los valores se normalizaron por el reemplazo con insulina. Además los receptores para vasopresina presentaron una disminución significativa en ratas hembras intactas respecto a machos intactos. Los animales GDX y los ADX presentaron disminución de la densidad de los receptores para vasopresina respecto a su control. Además se observaron diferencias significativas entre hembras y machos con menor expresión de estos receptores en los núcleos sexuales dimórficos del primer grupo. El estudio de IGF-I permitió describir la presencia de este factor las láminas IV y V del asta dorsal y en los entrecruzamientos fibrosos de la comisura gris ventral al epéndimo con disminución significativa del área de expresión en animales diabéticos, en animales tratados neonatalmente con MSG y en animales GDX. El estudio de la actividad NADPH-diaforasa demostró la presencia de la NOS en las neuronas de: las astas dorsales, de la región circundante al epéndimo, de la columna celular intermediolateral y de los núcleos motores pudendos, presentando alteraciones morfológicas y de actividad enzimática en los diabéticos y su reversión por tratamiento con insulina. Conclusiones: Los factores neuromoduladores estudiados se ven alterados en la diabetes experimental inducida por estreptozotocina, y esta variación podría ser generada tanto por la falta de insulina per se o por la hiperglucemia crónica, como por las alteraciones de los ejes gonadal y adrenal que ocurren en esta patología. Las alteraciones en los factores neuromoduladores podrían estar involucrados en la regulación de los mecanismos de erección peneana y eyaculación modulando el tono muscular peneano a través del nervio pudendo y/o la dilatación vascular que regula el flujo sanguíneo a través del nervio pélvico. Estos estudios aportan información de importancia para comprensión de la fisiopatología de la disfunción sexual relacionada con la erección peneana ya sea durante estadios avanzados de la diabetes, o en modelos con analogía endócrina, que podrán permitir el desarrollo terapéuticas para un mejoramiento en la.calidad de vida del individuo afectado.

Abstract:
Diabetes is an endocrine-metabolic disorder that has been associated with functional alterations including sexual impotence. A great percentage of male diabetic patients show sexual dysfunction associated to impotence at later stages of this pathology. The lumbosacral region of spinal cord innervates the penis through pelvic and pudendal nerves and regulates the penis erection and ejaculation mechanisms. The aim of this work was to study changes on the possible factors involved in the modulation of these mechanisms in the experimental diabetes model. Morphological and biochemical characteristics of the lumbar6/sacral1 spinal cord were evaluated using streptozotocine (STZ)-induced diabetic rats and other models with a known diminished sexual response. Methods: The animal models used were: 1- STZ- induced diabetic male rats with or without insulin treatment, 2- Animals neonatally treated with glutamate monosodium (MSG), 3- Animals that were gonadectomized (GDX) and/or adrenalectomized (ADX) and then treated or not with the corresponding hormone, and 4- Intact male rats from 1O days old to 20 months old. Spinal cords were removed by dorsal laminectomy and the tissue was processed according to the assay. Histological methods (Nissl or osmium tetroxide staining) were used to evaluate the morphology of the different motor nuclei. Tissue sections were analysed by optical or electronic microscopy. Different factors involved in penile erection and ejaculation were studied using different techniques such as: Quantitative autoradiography to study GABAergic receptors system GABA-B, GABA-A and benzodiazepine receptors sites, mu- and delta-opioid receptors and oxytocin and vasopressin receptors. High performance liquid chromalography to evaluate tissular levels of GABA and glutamate amino acids. Radioimmunoassay techniques were used to determine plasmatic testosterone levels and tissular beta-endorphins. Immunohistochemical technique was used to determine IGF-I, and histochemical NADPH-diaphorase reactivity technique was used to study nitrergic neurons. Results: Diabetic animals showed a significant reduction in the volume of the spinal nucleus of the bulbocavernosus as a consequence of a decrease in motoneuronal size. These neurons also presented some neuronal degeneration signs. All alterations were reverted by insulin treatment. All the studied systems showed changes in the diabetic animals as well as in those animals with endocrine alterations. The evaluation of the GABAergic system showed specific labelling at the dorsal horn and central region of the spinal cord. A significant increase in the GABA-B receptors density was found in diabetic rats, this was associated with a decrease in the affinity and an increase in the total number of binding sites. Moreover GABA levels showed a significant decrease in spinal cord of diabetic rats. The benzodiazepine receptor sites showed a significant density decrease in diabetic animals, associated with a decrease in the affinity and the total binding sites. In both cases insulin treatment was able to restore the altered receptor values. GABA-A receptors showed a significant increase in the diabetic animals that were treated with insulin. The GABAergic system also showed changes in GDX, ADX animals and a time depending decrease of the receptors levels with age. The study of the opioid system showed the presence of mu- and delta-opioid receptor types in the dorsal horn with a significant decrease of the mu receptor type in diabetic rats. These changes were associated with an increase in the dissociation constant that could be reverted with insulin treatment. There were not changes in delta-opioid receptors type density. Experimental diabetic animals showed a significant increase in the beta-endorphins content at spinal cord. No changes were observed on the opioid receptors on GDX and/or ADX animals. Oxytocin receptors were found on the dorsal horn of the spinal cord meanwhile the specific binding for vasopressin was seen on the pudendal nuclei. Receptor binding sites for both neuropeptides showed a significant decrease in diabetic animals and oxytocin showed similar results in MSG animals. In both cases the changes were restored to control values after insulin treatment. Vasopressin binding sites showed a significant decrease on GDX and ADX animals. Moreover, when intact animals of both sexes were compared, females also showed lower amount of vasopressin analogue binding than in male tissue. IGF-I immunoreactivity was observed in layers IV and V of dorsal horn and in the ependimal ventral grey commissure. A significant reduction of the expression area was seen in diabetic animals, as well as in the MSG and GDX animals. The NADPH-diaphorase reactivity showed the presence of nitrergic neurons at: the dorsal horns, the ependimus, the intermediolateral cell column and at the motor pudendal nuclei. Changes on the morphological cell characteristics as well as on the enzymatic activity was seen in diabetics animals being these changes reverted by insulin treatment. Conclusions: The neuromodulator factors evaluated were all altered in the STZ induced diabetic animals and those variations could be generated by insulin lack “per se”, by the chronic hyperglycemia, or by alterations in the gonadal and adrenal axis seen in this pathology. The observed alterations may be involved in the regulation of penile erection and ejaculation mechanisms regulating the penile muscular tone through pudendal nerve or the vascular dilatation regulating the blood flow through the pelvic nerve. These studies provide important information to the comprehension of the pathophysiology of the sexual dysfunction related with the penile erection during advanced stages of diabetes as well as in models with endocrine analogy. They may allow the development of new therapeutic strategies to improve the life quality of affected patients.

Douce, Emilio A. E.. "Determinación de mínimas cantidades de boro" (1946). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Doumic, Lucila Inés. "Nuevas estrategias para la oxidación catalítica de compuestos orgánicos en medio acuoso" (2015-03-27). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo se estudiaron diferentes alternativas de tratamiento de efluentes acuosos que contienen contaminantes orgánicos coloreados, basadas en procesos de oxidación avanzada homogéneos y heterogéneos. Se investigó la eficiencia de los procesos Fenton y foto-Fenton-solar (a escalas laboratorio y piloto) en la degradación de un colorante modelo, el colorante azoico Orange G (OG), y de un efluente textil simulado. Se analizó el efecto de distintas condiciones de operación sobre la eficiencia del proceso Fenton homogéneo en la oxidación de soluciones acuosas de OG, y se propuso un modelo cinético global (“lumped kinetic model”) para estimar la velocidad de eliminación de carbono orgánico disuelto (COD). Se encontró que los procesos Fenton y foto-Fenton tradicionales se ven limitados en su eficiencia para alcanzar la mineralización del efluente textil simulado debido a la precipitación de complejos insolubles entre el Fe y la materia orgánica. Sin embargo, al promover la formación de complejos solubles, estables y fotoactivos de Fe mediante el agregado de ácido oxálico, se lograron niveles satisfactorios de oxidación en escala laboratorio y de planta piloto. Posteriormente, se desarrollaron y caracterizaron catalizadores sólidos con el fin de llevar a cabo un proceso tipo-Fenton heterogéneo que permita eliminar las etapas de remoción de precipitados y catalizador posteriores a los procesos homogéneos. La fase activa de estos catalizadores es azul de Prusia (compuesto de hierro de valencia mixta), y se empleó carbón activado granular o esferas de ɣ-Al2O3 mesoporosa comercial como soportes. Se estudió la influencia del método de preparación sobre la actividad catalítica y estabilidad en la oxidación tipo-Fenton de soluciones de OG. Los mejores resultados se obtuvieron con catalizadores en los que se sintetizaron las nano-partículas de azul de Prusia por un método indirecto y adsorción inmediata de las mismas sobre ɣ-Al2O3. Este catalizador tipo egg-shell demostró ser activo y estable para la oxidación de OG en condiciones suaves de operación. PALABRAS CLAVES: Fenton homogénea, Foto-Fenton-solar, oxidación tipo-Fenton heterogénea, Nanopartículas de azul de Prusia, Orange G, Alúmina, Efluente textil, Carbón activado.

Abstract:
The homogeneous and heterogeneous advanced oxidation processes were studied for the treatment of wastewaters with colored organic pollutants. The efficiency of the Fenton and the solar-photo-Fenton processes (at laboratory and pilot scales) was studied for the degradation of the model azo-dye Orange G (OG), and a simulated textile wastewater. The effect of different operating conditions on the efficiency of the homogeneous Fenton oxidation of aqueous solutions of OG was analyzed, and a lumped kinetic model for the dissolved organic carbon (DOC) removal rate was proposed. The traditional Fenton and photo-Fenton processes are limited in their efficiency to degrade and mineralize the simulated textile wastewater due to precipitation of insoluble iron-organics complexes. However, by promoting formation of soluble, stable and photoactive iron complexes by adding oxalic acid, the simulated effluent could be successfully treated both at laboratory and pilot plant scales. Afterwards, solid catalysts for a Fenton-like heterogeneous process were developed and characterized, to avoid separation stages that are required for homogeneous processes. The active phase for these catalysts is Prussian Blue (a mixed-valent iron compound), and granular activated carbon or ɣ-Al2O3 commercial mesoporous spheres were used as supports. The influence of the preparation method on the catalytic activity and stability in the Fenton-like oxidation of OG aqueous solutions was studied. The best results were obtained with the catalyst containing Prussian Blue nanoparticles synthesized using an indirect method, and immediate adsorption onto ɣ-Al2O3. The resulting egg-shell catalyst proved to be active and stable for the oxidation of model compounds under mild operating conditions. KEY WORDS: Homogeneous Fenton, Solar-photo-Fenton, Heterogeneous Fenton-like oxidation, Prussian Blue nanoparticles, Orange G, Alumina, Textile wastewater, Activated carbon.

Doyle, Moira Evelina. "Algunos factores que determinan la climatología de la precipitación estival en Argentina subtropical" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El trabajo realizado en esta tesis tuvo como fin identificar mecanismos físicos que determinan la climatología de la precipitación y su variabilidad interanual en Argentina subtropical durante los meses de verano. La información proveniente de los pocos radiosondeos realizados sobre Sudamérica no era suficiente para llevar a cabo este estudio. En consecuencia se optó por buscar un conjunto de datos que utilizara esta información, pero que a su vez incorporara otros parámetros, como ser los perfiles de humedad medidos por los satélites. Se partió de un estudio comparativo entre dos bases de datos: agua precipitable entre superficie y 700 hPa proveniente del proyecto NVAP (NASA Water Vapor Project) y humedad específica en distintos niveles de presión pertenecientes al NCEP/NCAR Reanalysis Project. Se concluyó que dada la poca diferencia entre ambos conjuntos y siendo que el segundo conjunto permite extender el período de tiempo hasta 1958 se opta por trabajar con los datos del NCEP/NCAR Reanalysis Project. El área considerada abarca desde 10°N hasta 55°S y se extiende desde 90°O hasta 20°O, es decir cubre la myor parte del continente Sudamericano. Esta área seleccionada permite visualizar con mayor claridad los mecanismos de transporte de humedad que ocurren sobre el continente. A partir del estudio del transporte de vapor de agua se determina que existen dos fuentes que alimentan al continente: el océano Atlántico y la Selva Amazónica. También se pudo establecer que la corriente continental tropical en la cual se encuentra inmersa la corriente en chorro en capas bajas, es quien desempeña el papel principal en este transporte hacia latitudes subtropicales. No obstante, se muestra que estas latitudes se caracterizan por tener una alta variabilidad que no es explicada por los campos medios y a través de un análisis de componentes principales se muestra cuales son los distintos patrones que pueden modificar diariamente en estas latitudes el campo medio del transporte de humedad integrado entre superficie y 700 hPa. Esta variabilidad en el transporte de vapor de agua se ve reflejado en la distribución de la precipitación. Durante los meses de verano las precipitaciones en Argentina subtropical están altamente asociadas al ingreso de vapor desde el Amazonas, mientras que no hay una correlación significativa entre las lluvias y el aporte de humedad desde el Atlántico en esta región. Sin embargo, el vapor en este último caso, en ocasiones penetra hasta la cordillera y favorece las lluvias en la región andina. Las precipitaciones entre 15° - 20°S están asociadas en forma negativa al ingreso de vapor directamente del océano Atlántico en latitudes subtropicales, es decir precipita cuando la humedad viene desde el continente. Surge, por tanto, un comportamiento dipolar entre las precipitaciones en la región de la Zona de Convergencia del Atlántico Sur (ZCAS) y el SE de Sudamérica subtropical. Aplicando un análisis de correlación canónica se estudió la respuesta de la precipitación a otro factor, la temperatura de la superficie del mar (TSM). Durante los meses de verano se observa nuevamente el comportamiento dipolar en las lluvias: anomalías cálidas (frías) están asociadas a mayores (menores) lluvias en el sur de Brasil, Uruguay y el litoral Argentino, mientras que en la región de la ZCAS las precipitaciones son menores (mayores) que el valor medio. A fin de analizar en más detalle este comportamiento dipolar se seleccionaron los Eneros en que la TSM en la región al sur de la ZCAS se encontraba por encima de un desvío estándar y los años en que se encontraba un desvío estándar por debajo del valor medio. El análisis de los campos compuestos para los eventos cálidos y fríos muestra que, durante los eventos cálidos el transporte de humedad se dirige hacia el SE de Sudamérica subtropical debido al gradiente entre la intensa baja del NO argentino y la rama noroccidental del anticiclón del Atlántico que ingresa al continente. En niveles altos esta asociado a una Alta de Bolivia intensa que desplaza la corriente en chorro subtropical hacia el sur. Esta región esta asociada a un núcleo de actividad convectiva, observándose una segunda región sobre el Amazonas. Durante el evento frío el sistema de baja presión se extiende sobre el continente dirigiendo la corriente continental tropical en capas bajas hacia la ZCAS. La circulación debilitada del anticiclón boliviano permite la formación de una vaguada sobre el NE de Brasil. A su vez, la corriente en chorro subtropical se desplaza hacia el norte, ya que es allí donde se registran las mayores precipitaciones, como lo muestra la actividad convectiva. Este comportamiento dipolar no sólo se observa a nivel mensual durante el verano, sino que también se encontró al analizar dos casos en escala diaria. Debe considerarse que los resultados encontrados en esta tesis señalan un comportamiento cualitativo de la precipitación y la circulación estival sobre Argentina subtropical, pero cuantitativamente deberían tomarse con recaudo considerando que la base de datos utilizada no esta libre de errores. En este caso, como en otros trabajos, se pudo observar un error en la posición de los sistemas inmediatamente al este de los Andes, probablemente debido al modelo utilizado por los reanálisis, pero haria falta un estudio profundo que analice las falencias del conjunto de datos sobre la región.

Abstract:
The purpose of this thesis was to identify physical mechanisms, which determine rainfall climatology and its interannual variability in subtropical Argentina, particularly during summer months. The information provided by the few radiosondes over South America was not enough to fulfill this investigation. Consequently, a data set based on this information, but which incorporated other parameters, as humidity profiles from satellites was considered the best option. The first part consists of a comparative study between two data sets: Precipitable water between surface and 700 hPa belonging to NVAP (NASA Water Vapor Project) and specific humidity in different pressure levels resulting from the NCEP/NCAR Reanalysis Project. Due to the small difference between both sets, and considering that the second data set is available for a greater number of years, it was decided to work with the NCEP/NCAR Reanalysis Project data during the period 1958—1992. The area considered extends from lO°N to 55°S and between 90°W and 20°W; i.e. it covers most of the South American continent. This area permits a better visualization of the water vapor transport mechanisms that take place over the continent. Two water vapor sources are established from the analysis of the water vapor transport: the Atlantic Ocean and the Amazon Forest. The principal responsible of the transport from the Amazon towards southern latitudes, is identified as the continental tropical jet, a part of which is the low level jet. Furthermore, it is shown that subtropical latitudes are characterized by presenting a high variability, which is not completely explained by the mean fields. Through Principal Component Analysis the different patterns which daily modify the mean water vapor transport fields in subtropical latitudes are established. This variability in water vapor transport is reflected in the precipitation distribution over South America. During summer months rainfall in subtropical Argentina is highly associated to the entrance of water vapor from the Amazon, while there is no significant correlation between precipitation and advection from the Atlantic Ocean. Nevertheless, the entrance of water from the sea, on some occasions reaches the Andes favoring rainfall in this area. Between 15° and 20°S precipitation is negatively associated to water vapor advection from the ocean, i.e. it rains when humidity is transported from the continent. A dipolar structure in the rainfall pattern is evidenced in this behavior, between the South Atlantic Convergence Zone (SACZ) and SE South America. Canonical Correlation Analysis was applied to study the response of precipitation to the Atlantic sea surface temperature (SST). Once again, during summer, the dipolar structure is present in rainfall fields showing that: cold (warm) SST anomalies are associated to above (below) normal rainfall in southern Brazil, Uruguay and eastern Argentina, while the SACZ area evidences below (above) normal precipitation. In order to study in more detail this dipolar structure, Januarys with SST exceeding one standard deviation and with values colder than one standard deviation were selected. The composite fields, for the denominated warm and cold events, show that, during warm events water vapor transport is directed towards SE South America by the pressure gradient between the low pressure system in NW Argentina and the NW branch of the Atlantic anticyclone entering the continent. In higher levels, an intense Bolivian High is observed, which displaces the subtropical jet southwards. Two centers of convective activity occur during the warm events, one over SE South America and the other over the Amazon Basin. During cold events the low pressure system extends over the continent conducting the continental tropical jet towards the SACZ. A weakened circulation in the Bolivian High is continued into a trough over NE Brazil, while the subtropical jet stream moves up north, towards the precipitation area, as shown by the convective activity. This dipolar behavior was also depicted in the analysis of two daily events. It must be considered that the results presented in this thesis identify a qualitative behavior of summer rainfall and atmospheric circulation over subtropical Argentina, but, quantitatively these results must be look at with caution considering that the data base used is not free of error. In this case, as in other papers, an error can be observed in the position of systems immediately to the east of the Andes, probably due to the model used by the reanalysis, but a complete study of the errors in this data base, over the region is still missing.

Doyle, Patricia Susana. "Las subpoblaciones de Trypanosoma Cruzi presentan diferentes capacidades de penetración : Influencia de factores químicos y biológicos sobre la capacidad de penetración en células de mamífero" (1985). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Dragani, Walter César. "Una explicación del proceso generador de ondas de largo período en la Costa Bonaerense Argentina" (1997). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En las distintas estaciones mareográficas ubicadas en mar libre y en los puertos emplazados en la costa de la provincia de Buenos Aires, frecuentemente se registran oscilaciones del nivel del agua con períodos comprendidos entre algunos minutos hasta casi 3 horas, las cuales son conocidas en la región como ondas de largo período (OLP). Aunque en términos generales las OLP pueden ser generadas por forzantes de origen meteorológico, sísmico u oceánico, los antecedentes y los datos disponibles indican que el origen de las mismas en la zona citada se debe a causas atmosféricas. Entre ellas, los potenciales mecanismos generadores son los pasajes frontales, las líneas de inestabilidad y las ondas de gravedad atmosféricas. En esta tesis se investiga un aspecto particular de la compleja interacción entre la atmósfera y el océano, con El objetivo fundamental de explicar el mecanismo por el cual se generan las OLP en la región costera bonaerense. En primer lugar, se digitalizaron los registros analógicos de marea obtenidos en las estaciones Mar de Ajó, Pinamar y Mar del Plata en 1982, año de mayor medición simultánea. Luego, los datos resultantes se filtraron con el objeto de aislar convenientemente al fenómeno de interés y, mediante la aplicación de técnicas espectrales se determinaron los lapsos temporales de mayor intensidad energética de OLP en la región. Se estableció una cota para delimitar objetivamente los intervalos con presencia de OLP, resultando as¡ siete lapsos activos sobre los cuales se centró el análisis y la discusión referente a la descripción de la variabilidad temporal y espacial de las ondas estudiadas. Del análisis espectral realizado surge que, en las tres estaciones mareográficas citadas precedentemente, la energía total se incrementa desde valores casi nulos hasta máximos, y luego decrece nuevamente hasta casi cero, lo cual evidencia claramente la transitoriedad del fenómeno. Por otro lado, durante los lapsos activos se detecta que las débiles perturbaciones de alta frecuencia sólo ocurren en el momento de mayor intensidad energética y, en cambio, las ondas de mayor período est n presentes antes, durante y después del mismo. Algunos picos espectrales pueden presentarse en una estación y no en otras, consecuencia de que la topografía de cada sitio ofrece su particular amplificación a las diversas frecuencias. Por otra parte, los relativamente altos valores de coherencia estimados entre los registros del nivel del mar correspondientes a las estaciones Mar de Ajó y Mar del Plata muestran claramente la naturaleza regional del fenómeno. En lo que respecta a la información meteorológica, se utilizaron registros horarios de la presión atmosférica y del viento en superficie, obtenidos en las estaciones costeras disponibles y, además, los mapas sinópticos de superficie correspondientes a cada uno de los siete lapsos activos determinados. Del análisis conjunto entre los datos meteorológicos y oceanográficos surge que los eventos de mayor intensidad energética de OLP coinciden siempre con lapsos de mínimos relativos de presión atmosférica. Además, en los mapas sinópticos de superficie correspondientes a cada evento seleccionado se observa sugestivamente el pasaje de frentes por la región marítima de influencia y, en ninguno de ellos, la presencia de líneas de inestabilidad. Dado que durante los lapsos activos los datos horarios mostraban, en general, fluctuaciones de la presión de hasta 2.8 hPa/h y ráfagas de hasta 36 nudos y, por otro lado, que las OLP se manifestaban, en muchos casos, antes que se produjeran los pasajes frontales, la posibilidad que las ondas de gravedad atmosféricas (OGA) en la zona marítima estudiada fuese un mecanismo generador eficaz de OLP cobró un interés relevante. Por esto, se realizó un estudio comparativo entre la presencia de actividad de OLP en Mar del Plata y de OGA en Faro Punta M‚danos, entre los años 1984 y 1986, ya que en 1982 no se tienen datos de microbarógrafos. Del mismo resultó una alta correlación en la ocurrencia simultánea de ambos fenómenos.Por otro lado, el hecho que los espectros de las OGA en la zona mostraban contribuciones energéticas importantes en la misma banda de frecuencias que los de las OLP confirmaron la estrecha vinculación entre ambos fenómenos. Además, la función coherencia estimada entre los niveles del agua en Mar del Plata y las perturbaciones b ricas en Punta Médanos indicaba que los picos de energía de ambos fenómenos se presentan en frecuencias próximas. Finalmente, durante los lapsos de intensa actividad de OLP, el estado de la atmósfera en superficie y la circulación en altura es similar al citado en la bibliografía disponible para los lapsos de actividad de OGA de gran amplitud y de condiciones de propagación favorables. Es decir, en dichos casos se detectaba la presencia de frentes en superficie y de la corriente en chorro en los niveles superiores de la troposfera. Todo lo expresado precedentemente conducía a que la generación de OLP en las aguas de la plataforma continental bonaerense tendría dos potenciales forzantes: los pasajes de frentes y la actividad de las OGA. La efectividad de cada uno se evaluó mediante la utilización de un modelo matemático convenientemente implementado. Para tal fin, se desarrolló uno bidimensional, el cual resuelve numéricamente las ecuaciones de conservación de masa y de cantidad de movimiento verticalmente integradas, y permite la inclusión de batimetría irregular y geografía con gran aproximación a la situación real. Para el estudio de la generación de OLP se representó, analíticamente, un forzante que simulaba el campo b rico y el del viento correspondiente al pasaje de un frente frío por la zona marítima de influencia, y otro, a la actividad de OGA en la región. Luego de numerosas simulaciones numéricas puede concluirse que, tanto El campo b rico, el de viento o la combinación de ambos, asociados a los pasajes frontales no generan OLP en la región, sino que producen perturbaciones con períodos superiores a las cuatro horas. En contraposición, los resultados obtenidos con las OGA en distintos experimentos indican que constituyen un forzante altamente eficaz para la generación de OLP. Dada la simultaneidad en la ocurrencia de actividad de OGA y de OLP, las similitudes en la estructura espectral de ambos fenómenos ondulatorios (ambas características observadas a través del análisis de los datos disponibles) y la alta efectividad en la transferencia energética a través de la interacción atmósfera océano (lo cual surge de las distintas simulaciones realizadas), puede concluirse que en la zona costera bonaerense la generación de ondas de largo período es causada por la actividad de las ondas de gravedad atmosféricas en dicha región.

Abstract:
In different tide stations at the open sea and at the ports on Buenos Aires coast, water level oscillations which are locally known as long ocean waves (LOW) generally range from a few minutes to almost three hours. Although generally LOW may be originated by meteorological, seismic, or oceanic causes, the antecedents and the available data indicate that the origin of said ocean waves in the mentioned area is due to atmospheric causes. Among them, the potential generator mechanisms are passages of fronts, squall lines, and atmospheric gravity waves. In this thesis, the object of investigation is a particular aspect of the complex interaction between the atmosphere and the ocean, and its fundamental aim is explaining the mechanism by means of which the LOW are generated on Buenos Aires coastal area. In the first place, analogous tide measurements taken in Mar de Aj¢, Pinamar and Mar del Plata stations during 1982, year of maximum simultaneous registration, were digitalized. Then, theoutcoming data were filtered with the object of conveniently isolating the phenomenon of interest and, by applying spectral techniques, the temporal lapses of higher energetic intensity of LOW in the area were determined. An energy level was established in order to delimit, in an objective way, the LOW intervals. The result were seven active lapses on which the analysis and the argumentation about the description of the temporal and spatial variability of the studied waves were centred on. Resulting from spectral analysis performed we may say that in the three tide stations previously mentioned, the total energy increases from almost non-existent values to maximum ones, which decrease again to almost zero. These values clearly evidence the temporariness of the phenomenon. On the other hand, during the active lapses, that weak high-frequency disturbances are detected to occur only at the moment of highest energetic intensity and, instead, the longest-period waves are present before, during and after said moment. Some spectral peaks can appear in one station and not in others, this being a consequence of the fact that the topography of each place offers its particular amplification to the various frequencies. Furthermore, the relatively high coherence values estimated between sea level records corresponding to Mar de Aj¢ and Mar del Plata stations, clearly show the regional nature of the phenomenon. In regard to the meteorological information, we used hourly records of atmospheric pressure and surface wind, both of which were gathered at the available coast stations and, from the surface synoptic charts corresponding to each one of the seven active lapses determined. From the joint analysis of the meteorological and oceanographic data, there results that the events of highest energetic intensity of LOW always coincide with the lapses of relative minimum of atmospheric pressure. Furthermore, in surface synoptic charts corresponding to each of the selected events the passage of fronts at the maritime area of influence is suggestively observed and, in none of them the presence of squall lines are observed. Due to the fact that during the active lapses the hourly data showed, in general, pressure fluctuations of up to 2.8 hPa/h and gusts of up to 36 knots and that, on the other hand, the LOW were displayed, in many cases, before the passage of fronts had taken place, the possibility that the atmospheric gravity waves (AGW) in the sea area subject to this study were an effective LOWgenerator, became relevantly interesting. Considering the above said, a comparative study was carried out between the presence of LOW activity in Mar del Plata and the presence of AGW in Punta M‚danos Lighthouse (Faro Punta M‚danos), during the years 1984 and 1986 - for there was no microbarographic data gathered during 1982. The result of the study hereinbefore referred to, was the determination of a high degree of correlation in the simultaneous occurrence of both phenomena. On the other hand, the fact that the AGW spectrum in the area showed relevant energetic contributions in the same frequency band as the LOW ones, confirmed the close relation existing between both phenomena. Furthermore, the coherence function estimated between water levels in Mar del Plata and baric disturbances in Punta M‚danos indicated that the energy peaks of said phenomena were located in close frequencies. Finally, during those lapses of LOW intense activity, the status of the atmosphere in its surface and the circulation in altitude was similar to the one quoted in the available bibliography for those lapses of AGW great comprehensive activity and of propitious propagation conditions. That is to say, in said cases the presence of fronts in the surface and of jet streams in the superior levels of the troposphere were detected. All of the above mentioned led to the fact that the LOW generation in continental shelf waters of the province of Buenos Aires would have two potential causes: the passages of fronts and the AGW activity. The effectiveness of each of them was evaluated by means of the use of a mathematical model conveniently implemented. For said purpose, a bidimensional model, which numerically solved the equations of mass conservation and momentum vertically integrated was developed. Besides, it allowed the inclusion of irregular bathymetry and geography with great approximation to the real situation. For the study of the LOW generation a forcing for simulating a baric field and a wind field corresponding to the passage of a cold front through the sea area of influence, and another one for representing the local AGW activity, were built up in an analytical manner. After numerous numerical simulations, we were able to draw the conclusion that, the baric field, the wind field, or the combination of both, coupled with the passages of fronts, do not generate LOW in the area, but they produce disturbances with periods which exceed the four hours. As a counterpart, the results obtained with the AGW in different experiments showed that they constitute a cause highly effective for the generation of LOW. Due to the simultaneity of occurrence of both the activities of the AGW and of the LOW, the similarities of the spectral structures of both waving phenomena (both characteristics having been observed through an analysis of the available data), and the high effectiveness in the energetic transference by means of the ocean-atmospheric interaction (which derives from the different simulations carried out), it is possible to conclude that in the Buenos Aires coastal area, the generation of long period waves is caused by the activity of the atmospheric gravity waves in said area.

Dran, Graciela Isabel. "Adenocarcinomas de mama murinos inducidos por acetato de medroxiprogesterona (MPA) : modulación hormonal de su crecimiento in vitro" (1994). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Dratman, Ezequiel. "Resolución eficiente de ciertos sistemas no lineales derivados de ecuaciones diferenciales" (2010). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo estudiamos las soluciones estacionarias positivas de una discretización estándar, por medio de diferencias finitas, de la ecuación del calor semilineal con condiciones de borde no lineales de tipo Neumann. Demostramos que, si la difusión es suficientemente grande o suficientemente chica, en comparación con el flujo en los bordes, entonces existe una unica solución de dicha discretización. Esta solución aproxima la unica solución estacionaria positiva de la ecuación “continua”. Además, exhibimos un algoritmo que calcula una ε-aproximación de dicha solución mediante métodos de continuación. El costo de nuestro algoritmo es lineal en el número de nodos involucrados en la discretización y el logaritmo del número de dígitos de aproximación requeridos. En los casos restantes probamos que existen soluciones espurias. Estos resultados nos permiten obtener el panorama global de la comparación entre las soluciones estacionarias del problema diferencial en consideración y su discretización.

Abstract:
We study the positive stationary solutions of a standard finite-difference discretization of the semilinear heat equation with nonlinear Neumann bound- ary conditions. We prove that, if the diffusion is large enough or small enough, compared with the flux in the boundary, there exists a unique solution of such a discretization, which approximates the unique positive stationary solution of the “continuous” equation. Furthermore, we exhibit an algorithm computing an ε-approximation of such a solution by means of a homotopy continuation method. The cost of our algorithm is linear in the number of nodes involved in the discretization and the logarithm of the number of digits of approximation required. In the remaining cases we prove that there exist spurious solutions. From these results we obtain a complete outlook of the comparison between the stationary solutions of the differential problem under consideration and its discretization.

Drelichman, Irene. "Acotaciones con pesos para la integral fraccionaria de funciones radiales y sus aplicaciones" (2010). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Drewes, Susana Inés. "Revisión de las especies argentinas del género Macroptilium (Benth.) Urban (leguminosae-phaseolinae)" (1995). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Du Mortier Podestá, Cecile Marie. "Reacciones de aldonolactonas : Su uso para la síntesis de 3-desoxihexosas y disacáridos" (1989). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Dubos, Roberto A.. "Estudio y selección de levaduras aisladas de uvas y mostos de la Provincia de San Juan" (1940). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En el presente trabajo se han estudiado las levaduras, aisladas por el método de Lindnar, de uvas, mostos y barras de moscatol, criolla y cereza del departamento 25 de mayo de la provincia de San Juan. Se da una breve reseña histórica de la fermentación alcohólica y se consignan los antecedentes sobre los trabajos realizados en el país mereciendo destacarse los de Lojoune L.M. (12), Pazo (18) y Dalvis P. (2). Se hizo el estudio empleando los medios de cultivo y los métodos de investigación clásicos para este tipo de trabajo; algunos de ellos se modificaron convenientemente. De acuerdo con los resultados obtenidos con las 217 cepas aisladas y clasificadas, se obtuvieron: 179 cepas del tipo s. caravisiae-ellipsoideus (81.6%) 12 cepas del tipo ??? (5,5%) 10 cepas del tipo apiculado (4,6%) 10 cepas del tipo Torulopsis (4,6%) 6 cepas del tipo Rhodotorula (2,8%) Pocas fueron las levaduras apiculadas aisladas en el transcurso de las experiencias, por lo cual no se cree que sean estas las que inician la fermentación alcohólica de los mostos en la República argentina. Por la resistencia al alcohol que presentan gran parte de las levaduras consideradas como nada fermentadoras (el 50% resisten superiores a 4°, no creo conveniente la aplicación de la fermentación llamada "supercuatro". Siendo el principal objeto de este trabajo la aplicación posterior a la industria de las buenas levaduras indígenas de fomentación, se hicieron varios ensayos para eterminar el rendimiento alcohólico, la resistencia al alcohol y la resistencia a SO2. Por su alto poder fermentativo y su rápida fermentación, se distinguen las levaduras correspondientesal tipo I de las curvas de fomentación. Todos estos hechos se resumen en Conclusiones, en el capítulo correspondiente. En la parte final del trabajo se dan 24 fichas bibliográficas, además fotografías de los distintos tipos de desarrollo en estría en agar de mosto de malta, dibujos a la pluma de los diferentes tipos de levaduras, y una fotografía del aparato empleado para determinar el rendimiento alcohólico. Por último figuran también 10 gráficos de los correspondientes tipos de curvas de fermentación, los 7 primeros corresponden a levaduras del tipo S. ??? y los tres úñtimos a las restantes.

Duboscq, Cristina. "El sistema fibrinolítico en pacientes sépticos" (1997). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Sepsis es la respuesta inflamatoria sistémica a la infección, que cursa con una lesión endotelial, producto de la activación de diversos sistemas plasmáticos y celulares, los que conducen, entre otras alteraciones, a un desbalance hemostático. Estudios previos de la Dra. Kordich, en un gupo pequeño de pacientes sépticos, han demostrado que los niveles plasmáticos del plasminógeno (Plg) estaban disminuidos, mientras que los de α2-antiplasmina (APL) se mantenían normales. Los objetivos de este trabajo fueron: a) Estudiar en forma seriada los componentes del sistema hemostático (especialmente si el Plg estaba disminuido) y cuáles de ellos estaban relacionados con la probabilidad de sobrevida en 45 pacientes sépticos consecutivos. b) Investigar si la acción de las proteasas leucocitarias ( que degradan in vitro al Plg generando, entre otros fragmentos, miniplasminógeno) podrían ser la causa del descenso de los niveles plasmáticos del plasminógeno. c) Estudiar in vitro si el miniPlg presenta actividad fibrinolítica. La actividad plasmática de Plg fue significativamente menor (p<0,000l) en el plasma de los pacientes sépticos que en los grupos controles. La probabilidad de sobrevida puede expresarse en función de los niveles de Plg o de la relación Plg/APL (p<0,003). La curva ROC permitió establecer un punto de corte para el Plg de 65%, la sensibilidad fue 90% y la especificidad, 66,7%; para un punto de corte Plg/APL=0,65, la sensibilidad fue 95,2% y la especificidad fue 70,8%. La concentración del complejo elastasa - α1-inhibidor de proteinasa fue mayor en los sépticos que en los grupos controles. El Plg humano purificado es degradado in vitro por elastasa leucocitaria, por extracto de enzimas leucocitarias y por polimorfonucleares degranulados. El proceso proteolítico origina fragmentos entre 45 y 30 kD analizados por Western blot. El fragmento de alrededor de 38 kD reacciona con un anticuerpo monoclonal anti-miniPlg. El 33 % de los plasmas de los pacientes sépticos mostraro por Western blot una banda de 38 kD correspondiente a miniPlg, no presente en el plasma normal, sugiriendo la acción in vivo de las proteasas leucocitarias. El miniPlg presentó menor capacidad fibrinolítica en todos los rangos de concentraciones estudiados (0,1-1,3 μM) cuando es activado por el activador tisular del Plg (t-PA). El tiempo de lisis de un coágulo de fibrina fresco fue (2,3 ± 0,06) min. para el Plg y (9,8 ± 0,1)min para el miniPlg. El sistema miniPlg/rt-PA fue incapaz de lisar completamente un coágulo formado por acción de trombina sobre plasma humano depletado de Plg. En resumen los pacientes sépticos presentan un estado hipofibrinolíico, por descenso de los niveles plasmáticos de Plg y porque el miniPlg, generado por acción de las enzimas leucocitarias, es activado sólo parcialmente por el t-PA.

Abstract:
Sepsis is a systemic inflammatory response to infection, with endothelin damage and alteations in the coagulation and fibrinolysis systems. Dr. Kordich previous studies of, in few septic patients, showed low plasminogen levels and normal α2-antiplasmina (APL) levels. The aims of these thesis were: a) To study hemostatic system (specially Plg in the 45 septic consecutive patients during a week) and to investigated propectively which hemostatic parameters has a prognostic value for survival from sepsis. b) To investigate if leukocyte protease action in vitro, (which degrades Plg, producing several fragments one of them called miniplasminogen) causes the decrease of Plg plasmatic levels. c) To study if miniPlg is able to produce clot lysis when it is activated by rt-PA, urokinase and streptokinase. Plasminogen levels were significantly lower (p<0,001) in plasma of septic patients than control group. Plasminogen alone on the ratio ogf Plg/antiplasmin were good markets for survival from septicemia (p<0,03), studing by logistic regression. The ROC curve allows to stablish a cut off value of 65% for the plasminogen with a sensitivity of 95,2% and specificity of 70,8%. Purified human Plg was degraded in vitro by elastase, leucocyte extract and degranulated polymorphonuclear producing several fragments between 45-30 kD studing by Western blot. The band of 38 kD reacts with miniplasminogen selective monoclonal antibody. MiniPlg is less efficient than Plg to produce clot lysis in all the studied concentrations (0,1-2 μM). Clot lysis time was (2,3 ± 0,06) min. for Plg and (9,8 ± O,1) min for miniPlg. In Plg depleted human plasma miniPlg is unable to produce the complete clot lysis in presence of rt-PA. Septic patients show a hipofibrinolytic state due to decreasing of plasmatic Plg levels and because of miniPlg, producing by leukocyte protease Plg digestion, has a poor fibrinolytc activity when it is activated by rtPA.

Ducrey Santopietro, Luis Marcelo. "Estudios genéticos y fisiológicos de Phaffia rhodozyma : control computarizado de la producción de astaxantina" (1995). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Duek, Paula Débora. "Tiorredoxinas cloroplastídicas" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Las Tiorredoxinas (Trxs) son proteínas que se encuentran en todos los sistemas biológicos y poseen una secuencia muy conservada Cys—Gly-Pro—Cys cuyos tioles reducen los puentes disulfuro de una gran variedad de proteínas. En los cloroplastos de los organismos fotosíntéticos oxigénicos la reducción mediada por la Trx modula la actividad proteica ya que este proceso promueve un cambio conformacional en la enzima sustrato. En esta organela se han caracterizado dos Trxs filogenéticamente distantes: la Trx-m tendría un origen procarióticol mientras que la Trx-f presenta gran homologia con la Trx humana. La Trx-f es particularmente eficiente en la modulación in vitro de la actividad la fructosa-1,6-bisfosfatasa (cFBPasa), mientras que la Trx—m es ineficaz. La disponibilidad de las estructuras tridimensionales de las Trxs de diferentes organismos, su pequeño tamaño, gran solubilidad y termoestabilidad hacen de esta proteína un modelo interesante para el estudio de sus características conformacionales. Uno de los objetivos de este trabajo de tesis fue caracterizar estructural y funcionalmente a la Trx— m, y compararla con la Trx de Escherichia coli. La Trx bacteriana se tomó como referencia ya que ha sido ampliamente estudiada y presenta además un alto porcentaje de identidad con la Trx—m.Por otra parte, si bien todas las Trxs comparten el mecanismo catalítico (el intercambio tiol-disulfuro) interaccionan con diferentes proteínas. Las interacciones no covalentes previas a la formación del disulfuro mixto serían las que determinan la especificidad de la Trx por los diferentes sustratos. En este sentido, se analizó la contribución de las interacciones electrostáticas en el reconocimiento Trx-m . cFBPasa. Para realizar estos estudios se aisló la secuencia codificante de la Trx—m de Brassica napus (colza), se sobreexpresó en un sistema heterólogo y se purificó la proteína recombinante. Los aspectos estructurales y funcionales se analizaron mediante mutagénesis sitio-dirigida. A pesar de la gran homología estructural que tienen la Trx—m y la Trx de E. coli, casi todos los estudios realizados mostraron que poseen diferencias fisicoquímicas y funcionales. La Trx—m fue menos eficiente que la Trx de E. coli en la reducción e isomerización de puentes disulfuro. Por otra parte, si bien las Trxs son muy termoestables la Trx—m es aún más estable que la Trx bacteriana. La mutante W17F Trx-m, que conserva los dos triptofanos próximos a las cisteínas catalíticas, permitió establecer que a pesar de que la Trx-m y la Trx bacteriana mantienen la geometría del sitio activol el entorno de estos triptofanos es distinto. Tanto la Trx—m salvaje como la mutante W17F tienen un rendimiento cuántico menor que la proteína bacteriana y la dependencia de la fluorescencia intrínseca con el pH también es distinta. Por otra parte, la mutante Wl7F permitió identificar que el triptofano l7 en la Trx-m es el residuo que más contribuye a la emisión de la fluorescencia intrínseca de la proreína oxidada y contribuye también al espectro de dicroismo circular en el UV lejano. La importancia del triptofano 17 en el núcleo aromático de la proteína se determinó con el reemplazo por un residuo alifático y pequeño (WWA). Esta mutante modificó no sólo las propiedades estructurales (fluorescencia intrínseca y dicroismo circular en el UV lejano) sino también la estabilidad frente a perturbantes físicos y químicos. y la capacidad reductora (insulina y cFBPasa). La prolina en la posición 35 está estrictamente conservada en las Trxs-m y ausente en todas las otras. El reemplazo de esta prolina aumentó la sensibilidad de la molécula a perturbantes químicos y fisicos. La incorporación de una carga positiva en esa posición (P35K) favoreció la interacción con la cFBPasa, mientras que una carga negativa la empeoró (P35E). Estos resultados son congruentes con la densidad de cargas negativas que rodea a las cisteínas de la cFBPasa sujetas a la regulación redox y al contenido de cargas positivas que rodea el sitio activo de la Trx—f,el modulador más eficiente. Por otra parte. altas concentraciones salinas condujeron a todas la Trxs a valores similares de activación. Como conclusión, la cFBPasa discriminaría a las distintas Trxs por interacciones electrostáticas de largo alcance, que determinarían la diferente eficiencia de las Trxs en la modulación de la actividad de esta enzima. Sin embargo, las interacciones electrostáticas no influirían en la interacción entre la Trx y la malato deshidrogenasa, ya que todas las mutantes en la Pro35 resultaron menos eficientes en la acrivación que la Trx-m salvaje El conjunto de estos resultados no sólo establece la participación de las interacciones electrostáticas sino también revela la contribución de otros factores en la formación del complejo no covalente (Trx-m)reducida/(proteína sustrato)oxidada.

Abstract:
Thioredoxins (Trxs) are found in all biological systems. They have a very conserved sequence Cys-Gly-Pro—Cys whose thiols reduce a wide array of protein disulfide bridges. In chloroplasts of oxygenic photosynthetic organism reduction carried out by Trxs modulate protein activity, as this process promotes conformational changes in proteins. In this organelle two phylogenetically divergent Trxs have been charaCterized: Trx—m of prokaryotic origin, while Trx—fdisplays great homology with human Trx. In vitro. Trx—fis particularly efficient modulating fructose—1,6-bisfosfatase (cFBPase) activity, whereas Trx—m is inefficient. The availability of Trx three-dimensional structures from different species, their small size, great solubility and termostability made them an interesting model for studying their Structure. One of the objectives of this thesis was to characterize Trx-m structurally and functionally, and compare it with Escherichiacoli Trx. Prokaryotic Trx was taken as reference since it has been extensively studied and has high identity with Trx-m. On the other hand, although all Trxs share the same catalytic mechanism (thiol—disulfide exchange), they interact with different proteins. Non covalent interactions prior to the formation of the disulfide mixed would determine the specificity of Trx by different substrates. In this context, electrostatic interactions in Trx-m/cFBPase recognition were analyzed. For these purposes the coding sequence of Brassica napus (rapeseed) Trx-m was determined, and the recombinant protein was overexpressed and purified. The study of functional and structural aspects was followed by a site-directed mutagenesis strategy. In spite of the great structural homology shared by Trx—mand E. coli Trx, almost all the studies carried out showed that they possess physicochemical and functional differences. Trx—m was less efficient than E. coli Trx in reduction and isomerization of disulfide bridges. On the other hand, although Trxs are very stable, our studies showed that Trxm is still more stable than prokaryotic Trx. W17F mutant of Trx—m conserves tryptophans near the catalitic cysteines. This mutant established that in spite of the fact that Trx-m and E. coli Trx maintain the geometry of the active site, the environment of these tryptophans is distinct. Both wild type Trx-m and Wl7F mutant have a lower quantum yield than prokaryotic protein and the intrinsic fluorescence in function of pH shows a different behavior. On the other hand, W17F mutant allowed us to identify that triptophan 17 in Trx-m is the residue that contributes more to the fluorescence emission of oxidized protein and also contributes to UV dicroism circular. The role of Trpl7 in the protein aromatic nucleus was determined replacing Trpl7 with a small and aliphatic residue (W17A). This mutant modified not only the structural properties (intrinsic fluorescence and UV circular dicroism) but also the stability towards physical and chemical perturbants. and reducing capacity (insulin and cFBPase). Proline in position 35 is strictly conserved in Trxs-m and absent in all the other. Replacement of proline enlarged the sensibility of the molecule to chemical and physical perturbants. Incorporation of a positive charge in that position (P35K) favored the interaction with cFBPase. while a negative charge impaired it (P35E). These results are congruent with the great negative density of charges that surround the redox regulating cysteins of cFBPase and the major positive charges that surround the active site of Trx—f,the more efficient modulator. On the other hand, high salt concentration conducted to all Trxs to similar values of activation. As conclusion, cFBPase would discriminate distinct Trxs by long—range electrostatic interactions. which would determine the different efficiency of Trxs in modulating enzyme activity. However, interactions would not influence interaction among Trx and malate dehydrogenase, since all mutants in Pr035 resulted less efficient in activation that wild type Trx—m.These results establish the participation of electrostatic interactions but also reveal the contribution of other factors in the formation of the non covalent complex (Trx-m)reduced/(substrate protein) oxidized.

Duffy, Tomás. "Desarrollo y aplicación de estrategias de PCR para la genotipificación y cuantificación de Trypanosoma cruzi" (2010). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La infección por el parásito Trypanosoma cruzi (T. cruzi), causante de la enfermedad de Chagas, sigue siendo un importante problema de salud pública en los 21 países endémicos de América, con una prevalencia estimada de 8 millones de personas infectadas. Esta enfermedad muestra un curso clínico variable, desde asintomática hasta fases crónicas con parasitemias bajas, cuya forma más severa es la cardiopatía. En diferentes regiones endémicas los pacientes se encuentran infectados con distintas poblaciones parasitarias que a su vez podrían desempeñar un papel en la patogenia, las formas clínicas y la gravedad de la enfermedad. Para el tratamiento de la enfermedad actualmente se dispone de quimioterapias que son más eficaces en las infecciones recientes que en la población adulta crónica. A su vez, la evaluación de la eficacia de nuevas drogas se encuentra seriamente comprometida dado que el criterio de cura actualmente se basa en la conversión serológica a negativa, lo que puede ocurrir sólo años después del tratamiento, lo que requiere un largo plazo de seguimiento. En este contexto, nos propusimos desarrollar ensayos de PCR cuantitativa (QPCR) sensibles y precisos para la cuantificación de la carga parasitaria que permitan evaluar tempranamente la eficacia o el fracaso de nuevas drogas tripanocidas, así como monitorear la respuesta al tratamiento con las drogas actuales en casos clínicos. El otro objetivo de la tesis ha sido el desarrollo de estrategias de PCR sensibles y con distintos grados de resolución para la genotipificación de T. cruzi. Estas técnicas permiten tipificar las poblaciones parasitarias directamente a partir de muestras biológicas y por lo tanto establecer asociaciones entre el genotipo del parásito y las formas clínicas de la enfermedad, así como evaluar el rol eco-epidemiológico de las distintas poblaciones parasitarias.

Abstract:
Infection with the parasite Trypanosoma cruzi (T. cruzi), which causes Chagas disease, remains a major public health concern in 21 endemic countries of America, with an estimated prevalence of 8 million infected people. Chagas disease shows a variable clinical course, ranging from asymptomatic to chronic stages with low parasitaemias, whose severest form is heart disease. Individuals from different endemic regions are infected with distinct parasite populations that may play a role in pathogenesis, clinical forms and severity of the disease. Current chemotherapies are unsatisfactory since they are more effective in recent infections than in the chronic adult population, and the criterion of cure relies on serological conversion to negative, which may occur only years after treatment, requiring long-term follow-up, hampering novel drug trails. In this context, we aimed to develop sensitive and accurate quantitative PCR strategies (QPCR) for T. cruzi quantification that may allow an early assessment of efficacy or failure of novel drugs in future trials, as well as to follow-up patients under etiological treatment with the currently available chemotherapies. The second aim of this thesis has been the development of sensitive PCR strategies for genotyping T. cruzi populations. These assays allow us to establish relationships between parasite genotypes and clinical forms of the disease, as well as to evaluate the eco-epidemiological role of distinct parasite populations.

Duprat, Enrique. "Estudio químico de venenos de sapos sudamericanos" (1941). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Durman, Sandra Beatriz. "Grupos de compatibilidad miceliana (MCGs) en poblaciones Bonaerenses de Sclerotinia Sclerotiorum" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este estudio se obtuvieron 142 aislamientos de Sclerotinia sclerotíorum (Lib.) DeBary en un área de 25000 km² dentro de la provincia de Buenos Aires,provenientes de cultivos de soja, lechuga y girasol. Se distinguieron 49 grupos de compatibilidad miceliana (MCGs),de los cuales 28 estaban constituidos por dos o mas aislamientos. Las diferentes poblaciones de S. sclerotíorum estaban compuestas por numerosos MCGsy compartieron un perfil de frecuencias de MCGs similar, independientemente del hospedante o del sitio. La aparición de los MCGs difirió entre los diferentes cultivos, solo se encontraron dos MCGs en común entre los tres hospedantes, y aproximadamente el 60% de los MCGs fueron exclusivos para cada uno de ellos. El índice de diversidad de Shannon para los MCGs fue de 0.314 y el 98.4% de la diversidad total correspondió a variaciones dentro de las poblaciones. Las características morfológicas no fueron significativamente diferentes entre MCGs, excepto por el crecimiento miceliano en medio sólido y en medio liquido, y por la cantidad de esclerocios producidos por caja de Petri. Sin embargo, varios de los caracteres morfológicos pudieron relacionarse con el sitio o el hospedante al cual pertenecían los aislamientos. La fecundidad no fue diferente entre los MCGs, si bien pudieron detectarse aislamientos individuales especialmente fecundos. Sobre la base del ensayo in vitro sobre peciolos de apio, no pudieron detectarse diferencias en la agresividad entre los MCGs, siendo mas agresivos los aislamientos provenientes tanto de cultivos de girasol como los recolectados en 9 de Julio y Otamendi. El viraje del colorante azul de bromofenol (BPB),provocado especialmente por la liberación de ácido oxálico, pudo correlacionarse con la cuantificación de dicho ácido por espectrofotometría. Sin embargo, con las condiciones utilizadas en este trabajo no fue posible asociar la liberación de ácido oxálico con la agresividad. Las diferencias en la capacidad para liberarlo variaron entre los MCGs, y entre los aislamientos según su sitio u hospedante de origen, independientemente del método utilizado. El estudio de diferentes medidas fitosanitarios para el control de este patógeno demostró que aunque el uso de fungicidas de la familia de los bencimidazoles puede resultar muy efectivo, existen MCGs que se ven significativamente menos afectados que otros. Otras medidas menos convencionales, tales como la solarización, el anegamiento o el control biológico, no pudieron establecer efectos diferenciales sobre los MCGs, ni sobre los aislamientos según su origen. Un último análisis utilizando las herramientas de la taxonomía numérica indicó que las variables podian agruparse, en varios casos, coincidiendo con su naturaleza, morfológica o fisiológica. Por otro lado, ese mismo analisis evidenció una interesante asociación entre aquellos MCGs mas frecuentes, indicando que estarían compartiendo varias características en común que los harían altamente exitosos al momento de verse reflejados en mayor número en las muestras. A pesar de que los analisis estadísticos detectaron diferencias significativas entre los MCGs a partir de varios de los caracteres analizados, el gran solapamiento de estas diferencias significativas ha impedido establecer grupos discretos claramente definidos a partir de estos caracteres.

Abstract:
In this study 142 isolates of Sclerotinia sclerotiorum (Lib.)DeBary were obtained in a 25000-km² area of the Buenos Aires province, collected from soybean, Lettuce and sunflower fields. Forty-nine mycelial compatibility groups (MCGs) were distinguished overall, 28 of which consisted of two or more isolates. Each of the S. sclerotiorum populations were made up by numerous MCGsand shared a similar frequency profile regardless the host or the site. The occurrence of the MCGs differed among the crops, it was only found two MCGs shared by the three hosts and approximately 60% of the MCGs were unique for each one. The Shannon diversity index for the MCGs was 0.314 and 98.4% of total diversity corresponded to variations of diversity within populations. Morphological characteristics were not significantly different among MCGs, except for the mycelial growth in solid medium and in liquid medium, and for the number of sclerotia produced by Petri plate. Anyway, some of the morphological characters could be related to the site or the host to which the isolates belonged. Fecundity it was not different among MCGs, though some especially fecund isolates could be detected. On the basis of the detached celery petiole assay, it was detected no differences in aggressiveness among MCGs,being more aggressive isolates from sunflower crops and those collected at 9 de Julio and Otamendi. Turning of bromophenol blue dye (BPB),mainly caused by oxalic acid releasing, could be correlated to the spectrophotometric quantitation. But in the present conditions it was not possible to associate oxalic acid releasing with aggressiveness. Differences in ability to release varied among MCGs,and among isolates according their site or host source, irrespective of the used method. The study of different phytosanitary measures for the control of this pathogen showed that though the use of fungicides from benzimidazol family could be very effective, some MCGs were significantly less affected than the others. Others measures, less conventional, such as solarization, flooding or biologícal control, could set neither differential effects on MCGs,nor on isolates according to their source. A last analysis made with the tools of numeric taxonomy indicated that the variables could be grouped, in many cases, in agreement with their nature, morphological or physiological. In addition to that, the same analysis made evident an interesting association among those more frequent MCGs,painting out that such MCGs could be sharing some common characteristics, that made them more successful as to be the most sampled. In spite of the significant differences detected among MCGsby the statistical analysis in many of the analyzed characters, the high overlapping of these differences has made impossible to establish discrete groups clearly defined from those characters.

Durruty, Carlos Alberto. "Contribución al estudio de la acción catalítica del ácido clorhídrico sobre el sistema acético-alcohol etílico-acetato de etilo-agua" (1930). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Durán, Fernando Javier. "Síntesis de 6-tia, aziridino y sulfamido pregnanos análogos de esteroides neuroactivos" (2005). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
n esta tesis se describe la síntesis de análogos de esteroides neuroactivos por dos vías: i) adición de nitreno a dobles enlaces en C-2/C-3 y C-5/C-6 a partir de un sulfamato en posición 19, ii) síntesis estereoselectiva de 5αH-6tiapregnanos. Se desarrollo la metodología de aziridinación intramolecular, a partir de sulfamatos olefínicos, derivados de alcoholes primarios y secundarios, posteriormente se los sometió condiciones de aziridinación intramolecular en presencia de iodosilbenceno y catálisis de complejos de Cu(II) para la obtención de aziridinas bicíclicas fusionadas. Se realizaron aperturas de las aziridinas con nucleófilos nitrogenados, oxigenados y azufrados, la apertura en todos los casos fue en el carbono más sustituido. Se realizó la segunda sustitución sobre el carbono que contenía al oxígeno mediante activación del nitrógeno del sulfamidato. Se aplicó la metodología en esteroides utilizando como primer sustrato 3β-acetiloxi-19- hidroxi-5-pregnen-20-ona, se sintetizó 3β-acetiloxi-5β,6β-iminopregnan-20-ona N,19- sultona y se realizaron aperturas de la aziridina con fluoruro, cianuro y acetato, observándose la apertura en C-5. En el caso del acetato a altas temperaturas se observó regioselectividad inversa en C-6 debido a la migración del acetato. A partir del 5β,6β- aziridinoesteroide se sintetizó el análogo de neuroesteroide 3α-hidroxi-5β,6β- iminopregnan-20-ona N,19-sultona. Se utilizó también la metodología en 19-hidroxi-2- pregnen-20-ona y se sintetizó el 2β,3β-iminopregnan-20-ona N,19-sultona, a partir del mismo se prepararon los derivados 3α-hidroxi-S,S-dioxo-19,2-(epoxitioimino)-pregnan-20- ona, N,bencil-3α-hidroxi-S,S-dioxo-19,2-(epoxitioimino)-pregnan-20-ona y 3α-fluoro-S,S- dioxo-19,2-(epoxitioimino)-pregnan-20-ona. Para la síntesis de 6-tiapregnanos se partió de la sustitución nucleofílica de un 7-yodo-5,6-seco-6-norpregnano funcionalizado en C- 19, que se obtiene por ruptura de un 5,6-diol esteroidal con HgO y yodo en presencia de luz. El esteroide anterior se sustituyó con tioacetato y luego se hidrolizó. El hemitiocetal resultante se redujo regioselectivamente por la cara α con trietilsilano, luego mediante la reacción de Mitsunobu se epimerizó a 3α y posteriormente fue convertido en 10-metilo mediante la reacción de Barton-McCombie. Por hidrólisis del benzoato se obtuvo 3α- hidroxi-6-tia-5α-pregnan-20-ona y por oxidación con oxone el sulfóxido y la sulfona.

Abstract:
In this thesis the synthesis of analogues of neuroactive steroids is described i) by an intramolecular nitrene addition onto C-2/C-3 and C-5/C-6 double bonds involving a tethered C-19 sulfamoyl moiety, ii) by synthesis of 5αH-6-thiapregnanes. An intramolecular aziridination methodology was developed using olefinic sulfamates derived from primary and secondary alcohols that undergo intramolecular copper-catalyzed aziridination in the presence of iodosylbenzene to afford bicyclic fused aziridines. The latter were opened by various nucleophiles to give the corresponding substituted cyclic sulfamates, which in turn reacted, after nitrogen activation, with a second nucleophile at the carbon atom bearing the oxygen atom. The methodology was applied to 3β-acetyloxy-19-hidroxy-5-pregnen-20- one, the resulting aziridine underwent regioselective nucleophilic ring opening at C-5 at room temperature with cyanide, fluoride, and acetate. In the case of acetate, a reversal of regioselectivity was observed at higher temperatures, a result attributed to a rearrangement process involving aziridine ring opening at the C-5 position and subsequent migration of the acetyl moiety to C-6. Using the 5β,6β-aziridinosteroid, the 3α-hidroxy- 5β,6β-iminopregnan-20-one N,19-sultone was synthesized. 2β,3β-iminopregnan-20-one- N,19-sultone was synthesized from 19-hidroxy-2-pregnen-20-one, nucleophilic opening of the sultone gave 3α-Hidroxy-S,S-dioxo-19,2-(epoxythioimino)-pregnan-20-one, N,benzyl- 3α-hidroxy-S,S-dioxo-19,2-(epoxythioimino)-pregnan-20-one 19,2-(epoxythioimino)-pregnan-20-one. The 6-thia and pregnanes 3α-fluoro-S,S-dioxo were obtained by nucleophilic substitution of a 5-oxo-7-iodo-secopregnane intermediate with thioacetate and hydrolysis. The 6-thiasteroid obtained was converted into 6-thia-allopregnanolone and its sulfoxide and sulfone derivatives. The trans stereochemistry at the A/B ring junction was accomplished by stereoselective reduction of an intermediate hemithioketal with triethylsilane/BF3.Et2O.

Durán, Guillermo Alfredo. "Sobre grafos intersección de arcos y cuerdas en un círculo" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Los grafos arco-circulares son los grafos intersección de arcos alrededor de un círculo. Presentamos en esta tesis los principales resultados conocidos sobre esta clase y definimos las principales subclases. Mostramos como a partir de la caracterización formulada por Tucker para grafos arco-circular propios surgen nuevas caracterizaciones para esta subclase y deducimos características de las estructuras prohibidas minimales para arco-circulares. Se estudian todas las posibles intersecciones de las subclases definidas, mostrando un ejemplo minimal en cada una de las regiones que se generan, excepto en una de ellas que se demuestra que es vacía. Este resultado asegura que dado un grafo arco-circular propio no unitario, si es clique-Helly debe ser arco-circular Helly. Los grafos circulares son los grafos intersección de cuerdas dentro de un círculo. También aquí presentamos una reseña de los resultados más importantes y definimos las principales subclases, demostrando algunas relaciones de inclusión entre ellas. Damos una condición necesaria para que un grafo sea circular Helly y conjeturamos que también es suficiente. De ser correcta esta conjetura tendríamos una caracterización y también un reconocimiento polinomial para esta subclase. Se muestra como a partir de la mencionada caracterización de Tucker para grafos arco-circular propios y de un teorema de caracterización de Bouchet para los circulares surgen estructuras prohibidas minimales para esta clase. Analizamos también todas las posibles intersecciones de las subclases definidas, mostrando un ejemplo minimal en cada una de las regiones que se generan. Estudiamos una superclase de los grafos circulares: los grafos overlap de arcos circulares. Se muestran nuevas propiedades sobre esta clase, poniendo énfasis en su relación con los grafos arco-circulares y los circulares. Damos una condición necesaria para que un grafo sea overlap de arcos circulares. Probarnos la polinomialidad de encontrar una partición en cliques mínima para la clase de grafos que no contienen como subgrafo inducido ciclos inducidos impares de longitud mayor ó igual a 5 ni una rueda de 5 vétices ni un abanico de 5 vértices. Usamos para ello resultados de teoría poliedral para programación lineal entera. Extendemos este mismo resultado para cubrimiento mínimo de cliques por vértices. Aplicamos estos resultados a grafos circular HelIy sin agujeros impares, lo que es interesante pues estos problemas son NP-Hard para la clase general de los grafos y de complejidad desconocida para la clase de los grafos circulares. También demostramos que el problema de cubrimiento mínimo de cliques por vértices es polinomial para grafos arco-circular Helly. Por último, presentamos algunas conclusiones que surgen de este trabajo y las líneas futuras de investigación en estos tópicos, destacando algunos problemas interesantes que permanecen abiertos.

Durán, Hebe Alicia. "Análisis de la promoción y progresión tumoral inducidas por peróxido de benzoílo en el modelo de carcinogénesis en múltiples estadios en piel de ratón" (1994). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Durán, Ricardo Guillermo. "Espacios asociados a funciones maximales parabólicas y potenciales de Hp, O p 1 (p mayor a 0 y menor o igual a 1)" (1981). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

Dus Santos, María José. "Expresión de antígenos del virus de la fiebre aftosa en plantas de alfalfa transgénicas: su utilización como inmunógenos experimentales" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El uso de plantas transgénicas como sistema de expresión de antígenos relevantes ha sido ampliamente evaluado dada la posibilidad de utilizar plantas modificadas genéticamente para la producción de vacunas. Las vacunas a base de plantas serían más baratas y más fáciles de elaborar en grandes cantidades. Estas vacunas se podrían producir en países en desarrollo sin necesidad de instalaciones sofisticadas y costosas como las que se necesitan en la actualidad. Por otra parte, estas vacunas eliminarlanel riesgo de virus contaminantes que existe en las vacunas producidas en líneas celulares de mamíferos ya que los posibles vian de plantas contaminantes no constituyen un peligro potencial ni para el hombre ni para los animales. Adicionalmente, las plantas transgénicas que expresen antígenos en sus tejidos comestibles podrían ser usadas como sistemas de producciónde vacunas de administración oral. Hasta el momento, la mayoría de los antígenos expresados consisten en péptidos, proteínas únicas ó estructuras muy simples. Sin embargo, la producción de antígenos vacunales en sistemas heterólogos requiere, en muchos casos. ía expresión de estructuras antigénicas complejas. EIVirus de la Fiebre Aftosa (VFA)produce una de las enfermedades más temidas del ganado debido a su amplia distribucióngeográfica y por ser altamente contagiosa. La vacuna utilizada actualmente es polivalente y a virus inactivado. El progreso en la producción de vacunas antiaftosas está dirigido hacia el logro de vacunas de elaboración más fácily económica y que eviten la manipulación de grandes cantidades de virus. Una alternativa a las vacunas convencionales es la preparación de cápsides vacías expresando y procesando la poliproteína precursora en un sistema de expresión heterólogo. Se han obtenido cápsides vacías confonnacionalmente correctas de los serotipos A, 0 y C del VFA utilizando sistemas de expresion en E. CoIi, baculovirus o virus vaccinia. Los resultados obtenidos hasta ahora al expresar cápsides vacías del VFA en sistemas heterólogos, con relación a Ia conservación de epitopes protectivos, las convierten en antígenos candidatos para la formulaciónde vacunas. Sin embargo, aún no se ha logrado un método de expresión masiva de un inmunógeno eficaz como para ser utilizado a campo, ya que los sistemas desarrollados hasta ahora resultan costosos y poco aplicables a nivel industrial. Como primer objetivo de este trabajo de tesis se propuso producir plantas de alfalfa transgénicas conteniendo el gen que codifica para la poliproteína P1 precursora de las proteínas estructurales del VFA. Las construcciones utilizadas involucran únicamente a P1 ó a P1 junto con la proteasa SC. La presencia del gen foráneo se detectó, en las plantas transgénicas, por PCR y su actividad transcripcional específica por RT-PCR y Northern blot. Fue posible visualizar por microscopía electrónica estructuras que por su tamaño y morfología podrían corresponder a cápsides vacías del VFA. La inmunogenicidad de los productos expresados fue evaluada en el modelo murino. Ratones adultos inmunizados intraperitonealmente desarrollaron una respuesta de anticuerpos detectada por su reactividad. en ELISA, frente a un péptido sintetico que representa la zona más inmunogénica de VP1 y partículas virales completas; y, en Western blot, frente a las proteínas estructurales del virus nativo. Además, estos animales desarrollaron anticuerpos neutralizantes y resultaron completamente protegidos frente al desafío con virus infeccioso. Estos resultados demuestran la factibilidad de expresar antígenos altamente complejos en plantas transgénicas y su utilizacióncomo efectivos inmunógenos experimentales. Los resultados obtenidos por nuestro y otros grupos de investigación demuestran la factibilidad de la utilización de plantas transgénicas como fuente de producción de antígenos vacunales. Sin embargo, uno de los principales problemas que posee este sistema de expresión es que los niveles de proteína expresada en las plantas transgénicas son relativamente escasos como para extrapolar su uso a una vacuna de aplicabilidad real. De modo que, el desarrollo de estrategias que generen una mayor concentración de la proteína recombinante es sumamente importante, especialmente cuando se desea utilizar los extractos de planta sin ningún proceso de enriquecimiento y/o purificación posterior. Dado que la inserción del transgen en el genoma vegetal es al azar, es altamente probable que los niveles de su expresión varíen entre los individuos producidos. Una alternativa posible, entonces, consiste en poder identificar aquellos individuos que presentan niveles excepcionalmente altos de la proteina foránea. Sin embargo, la identificación de aquellas plantas que expresen cantidades significativas de antígeno por métodos inmunológicos es un proceso lento y labioroso. Teniendo en cuenta lo mencionado anteriormente, y como segunda parte de este trabajo de tesis, hemos desarrollado una metodologia que nos permite evaluar un gran número de individuos y seleccionar de un modo fácil y rápido aquéllos que presentan mayores niveles de expresión de la proteina recombinante. Esta metodologia se basa en la expresión de un gen de interés fusionado a un gen reportero, codificante para la enzima B-Glucuronidasa (B-GUS), cuya presencia puede ser detectada cuantitativamente por colorimetrla. A fin de evaluar el sistema de selección propuesto, utilizamos como antígeno un péptido que comprende los residuos 135 a 160 de la proteina VP1 del VFA para generar la proteina de fusión con la enzima B-GUS.Las plantas transgénicas obtenidas fueron primeramente evaluadas por su actividad enzimática de B-GUS. Fue posible detectar por Western blot la proteina de fusión en aquellas plantas que presentaron mayores niveles de B-GUS. Las plantas seleccionadas expresaron 0.5-1 pglmg de proteina soluble total. El péptido p135-160 expresado como proteina de fusión conservó sus caracteristicas inmunogénicas ya que ratones inmunizados parenteralmente con una vacuna elaborada con extracto foliar desarrollaron una respuesta de anticuerpos especificos detectada por su reactividad en ELISAfrente a p135-160, particulas virales completas y en Western blot frente a VP1. Además, se detectaron anticuerpos neutralizantes que resultaron protectores frente al desafio con virus infeccioso. Estos resultados demuestran la posibilidad de utilizaruna metodologia simple para detectar las plantas que expresan altos niveles del péptido recombinante, el cual conserva sus propiedades antigénicas e inmunogénicas al ser expresado como proteina de fusión.

Abstract:
The use of transgenic plants as a system for expressing recombinant antigens has already been widely evaluated and constitutes a feasible methodology for vaccine production. Plant based vaccines would be less expensive and easier to be produced in large scale. These vaccines could be produced in undeveloped countries without requiring sophisticated facilities, as they are currently needed. On the other hand, the use of these vaccines would eliminate the risk of contaminating viruses present in mammalian cellular lines since the plant contaminating viruses do not constitute an actual risk for animals or humans. Additionally,edible transgenic plants expressing antigens in their tissues could be used as oral vaccines. Up to now, most antigens expressed in plants are peptides, unique proteins or very simple structures. Nevertheless, production of vaccine antigens in heterologous systems often require the expression of complex antigenic structures. Foot and mouth disease virus is the causal agent of a worldwide distributed highly contagious disease of cattle. The currently used vaccine is based in the utilization of polyvalent inactivated virus. In general, progress in the process of FMDV vaccine production are pointed toward the development of simpler and cheaper protocols involving the use of lower amount of virulent viruses. An alternative to the conventional FMDV vaccines are those containing recombinant virus empty capsids after the expression of the precursor polyprotein.In the past, it has been possible to obtain empty capsids of serotypes 0, A and C using as expression systems E. coli, baculovirus and vaccinia virus. Although the products resulted immunogenically efficient, the methodologies for producing them are not suitable to be used at the industrial level. The first objective of this thesis was the production of transgenic plants of alfalfa containing the gene encoding for the polyprotein P1, which is the precursor of all structural FMDV proteins. The transgenic constructs used contained either just P1 nor P1 along with the 3C gene. The presence of the foreign gene in the recombinant plants was detected by PCR and their transcriptional activity analyzed by RT-PCR and Northen blot. Additionally. it was possible to demonstrate, by electron microscopy, the presence of structures with a size and shape resembling those of the FMDV empty capsides. The immunogenicity of the obtained products was evaluated in mice. Intraperitoneally immunized adult mice presented a FMDVantibody response detected by its activity,in ELlSA, against a synthetic peptide representing the major immunogenic area of VP1, and against complete virus particles, and in Western blot, against all the FMDV structural proteins. Additionally, these animals developed a significant neutralizing antibody response and protection when experimentally challenged with the virulent virus. These results demonstrated the feasibility of expressing highly complex structures in transgenic plants and its use as effective experimental immunogens. As stated earlier, results obtained by us and other research groups demonstrated the potential feasibility of using transgenic plants as a source of antigen for vaccine production. Nevertheless, the main problem presented by this approach resides in the relatively low concentration of the recombinant protein in the plant tissues, which hampers its possible utilization at the industrial scale. Thus, the development of strategies which allow the production of transgenic plants expressing high levels of recombinant protein would substantially modify the expectations on the utilization of this system in the future, specially in those cases where no further steps toward the enrichment or purification of the recombinant product will be needed. Due to the fact that the insertion of the transgene in the plant genome is a random process, it is expected the development of individuals presenting very different expression levels of the recombinant protein. An interesting approach could be the identification of those individuals presenting exceptionally high levels of the foreign protein. Nevertheless, the identification of those individuals,using immunological approaches, is usually a laborious and slow process. Focusing in this particular problem, the second part of this thesis deals with the development of a methodology that allows us to evaluate a significant number of individuals and select, in an easy and quick way, those presenting the highest levels of expression of the foreign protein. The methodology is based in the expression of the gene of interest as a fusion protein along with a reporter gene which encodes for the enzyme ß-Glucuronidase (ß-Gus), which could be quantitatively detect by a oolorimetric test. In order to evaluate this methodology, we selected as antigen a peptide which represent the amino acid residues at position 135 to 160 of the structural FMDV protein VP1. This peptide was expressed as a fusion protein along with ß-Gus. The obtained transgenic plants were first evaluated based in their ß-Gus activity. Among those presenting the highest enzymatic activity it was possible to detect, by Western blot, the presence of the FMDV epitope. The selected plants expressed a concentration of the recombinant protein between 0.5 to 1 mg/g of the total soluble protein extracted for the plant tissue. The peptide 135-160 appears as conserving its native immunogenic characteristic since adult mice parenterally immunized with a vaccine prepared with the foliar extracts developed a specific FMDV antibody response detected in ELISA, against the p135-160 synthetic peptide. and complete virus particles, and against native VP1 in Western blot. Additionally,the sera of these animals showed significant neutralizing antibodies titers and the mice resulted protected against the experimental challenge with infectious virus. These results demonstrate the feasibility of using this simple methodology to detect transgenic plants expressing high levels of recombinant peptide, which completely conserves its antigenic and immunogenic properties when expressed as a fusion protein.

Dusetti, Nelson. "Puesta en evidencia y caracterización de una nueva familia multigénica de proteínas asociadas a la pancreatitis : análisis de su expresión y relación evolutiva" (1994). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La "Pancreatitis Associated Protein" (PAP) es una proteína pancreática secretoria, estructuralmente relacionada a las lectinas y secretada durante la pancreatitis aguda por las células acinares pancreáticas. Su expresión muy débil en el páncreas sano, aumenta fuertemente (más de 400 veces) durante la fase aguda de la pancreatitis. En este trabajo de tesis, se puso en evidencia la expresión constitutiva de un transcripto idéntico en el intestino. Se mostró tambien que la PAP proveniente del intestino posee las mismas modificaciones post traduccionales que su homólogo pancreático. Finalmente se estudió su expresión en diferentes situaciones fisiológicas. En el curso de estos trabajos aparecieron una serie de indicios que sugirieron la presencia de otras moléculas estructuralmente emparentadas. La búsqueda de éstas, finalizó con el clonado de los ADNc correspondientes a las PAP II y III. El estudio de la expresión, reveló que la PAP III es indistinguible de la PAP I tanto en su expresión intestinal como pancreática, mientras que la PAP II es específica del páncreas. En busca de las secuencias promotoras responsables de la expresión de estas moléculas, clonamos y secuenciamos los genes que codifican para las 3 PAP y para la Lithostathina en la rata, y la PAP I humana. El análisis de su organización, mostró que todos estos genes, pertenecen a un nuevo grupo de lectinas de tipo C. Esta observación nos llevó a postular un camino evolutivo alternativo para el CRD "Carbohydrate Recognition Domain" característico de este grupo de lectinas. Por otra parte, los genes de rata mostraron una organización intrón-exón muy similar y una localización cromosómica idéntica, sugiriendo un origen común por duplicación génica, a partir de un mismo gen ancestral. Los trabajos realizados sobre el promotor de la PAP I, muestran que la región responsable de la especificidad de tejido se encuentra en las primeras 180 pares de bases. En esta región se encontró un represor capaz de "silenciar" la expresión de este gen en las líneas celulares Rat2 e IEC6 (no pancreáticas). En esta misma región se encuentra un elemento de regulación positiva que sólo es activo en la línea celular pancreática AR-42J. Los primeros indicios de la caracterización de los factores nucleares responsables de estas actividades, muestran la existencia de proteínas expresadas especificamente en cada línea celular, las que serian responsables de otorgar la especificidad de tejido al gen de la PAP I. Finalmente, los trabajos realizados sobre la inducción de la expresión del ARNm de la PAP I en la línea celular pancreática AR-42J, muestran la presencia de factores capaces de inducir específicamente este gen, en el suero de ratas afectadas de pancreatitis aguda. El ARNm de la PAP I se reveló también inducible por algunos de los mediadores generales de las proteínas de estrés celular (IL6, dexametasona, alcohol y agua oxigenada).

Dussel, Guillermo Gaspar. "Efectos de términos anarmónicos de la fuerza cuadrupolar en los isótopos de Cd" (1967). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El presente trabajo ha tenido como objeto extraer conclusiones sobre la influencia de los términos anarmónicos del hamiltoniano cuadrupolar en los núcleos esféricos. Los cálculos se realizaron para los isotopos del Cd por la gran cantidad de información experimental de que ellos se conoce y por la ventaja que representa el hecho que tengan dos protones menos que capa cerradas, lo que permite tratarlos en acoplamiento intermedio. En la introducción y en la primera sección se hace un pequeño resumen del método de cuasibosones, que es el método usual de tratar los estados colectivos de los núcleos esféricos. En la sección 2 se estudia una manera de introducir los términos anarmónicos de tercer orden. En la sección 3 se ve el modelo de Raz como fuente de anarmonicidades, mientras que en la sección 4 se expone una manera alternativa para su tratamiento. Se verifica que ambos métodos, el modelooo de Raz y ldescripciónnfenomenológicaaa presentan ciertacaracterísticasss comunes: tales como el refuerzo entre las transiciones debidas a la partarmónica y a la partanarmónicaaa del operador cuadrupolar para el momentestadísticoco del primer estado dos más, y las contribuciones con signo distinto para las transiciones prohibidas en la aproximación armónica. En la sección 5 se calculan los primeros estados excitados utilizando el modelo de Raz y se verifica que con la excepción del nivel 23 y las transiciones M1 se obtiene un acuerdo muy razonable con los resultados experimentales. A partir de una estructura microscópica se calculan los coeficientes que dan la magnitud de los términos cúbicos; puede observarse que aparecen en un rango razonable, aunque su valor es una función muy dependiente de las energías de los niveles de partícula independiente y por lo tanto no se pueden predecir con certeza cambios de núcleo a núcleo. Se estudia también la posibilidad de superponer el modelo de Raz con términos anarmónicos para los neutrones, y se observa que eso permitiría dar una descripción bastante coherente con los resultados observados al variar el numero de masa A, para ello seria necesario que las energías de los niveles de neutrones fuesen diferentes de los resultados utilizados previamente.

Déboli, Alberto Fernando. "Métodos topológicos para algunas ecuaciones diferenciales funcionales resonantes no lineales" (2014-12-10). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En esta tesis se estudia la existencia de soluciones de dos ecuaciones diferenciales funcionales resonantes no lineales. Por un lado, se estudia existencia de al menos una solución de un problema de segundo orden con condiciones de Neumann bajo diferentes condiciones impuestas a la no linealidad, con la particularidad de que ésta depende de los valores de la solución desconocida en el borde del dominio. Más precisamente, se prueba la existencia de al menos una solución adaptando a este tipo de problemas las condiciones clásicas de Landesman-Lazer para el caso escalar y para el caso de un sistema, la condición de Nirenberg. Por otro lado, se estudia un problema de primer orden con una no linealidad que depende de varios retardos variables. Más precisamente, se prueba un resultado de existencia de al menos una solución periódica positiva para el caso escalar y para un sistema, y un resultado de estabilidad generalizando los obtenidos por otros autores. En todos los problemas estudiados, las no linealidades están condicionadas en sus argumentos y se trata de problemas resonantes en el sentido de que el operador lineal de diferenciación involucrado tiene núcleo no trivial. El principal método que se implementa, en cada caso, para probar existencia de solución se basa en la teoría del grado de coincidencia de Mawhin, el cual es una generalización del grado topológico de Leray Schauder. No obstante, existen problemas resonantes en los que el grado de coincidencia no se aplica; el problema de segundo orden bajo condiciones de Neumann en un dominio no acotado es un caso particular de ese tipo y se aborda recurriendo al método de las sub y super soluciones ordenadas combinado con un argumento del tipo diagonal.

Abstract:
In this work, we study the existence of solutions of two nonlinear resonant ordinary functional differential equations. In the first place, we consider an abstract second order problem under Neumann boundary conditions arising on an electro-diffusion model. This problem has the particularity that the nonlinear term depends on the Dirichlet values of the yet-to-be-determined solution. We shall prove the existence of solutions by adapting the classical Landesman-Lazer conditions for the scalar case, and a condition by Nirenberg for a system of equations. In the second place, we study a first order Nicholson type equation with several delays. We shall prove the existence of a positive periodic solution both for the scalar equation and for a system. Also, we shall prove an stability result. In both cases, the nonlinear term is a functional operator and the problems are resonant in the sense that the associated linear operators have nontrivial kernel. Our main tool for proving existence of solutions shall be Mawhin’s coincidence degree, which is a generalization of Leray-Schauder degree. There are, however, some cases in which this theory cannot be applied: for example, the case of a boundary value problem on the half-line, for which we adapt the method of upper and lower solutions combined with a diagonal argument.

Díaz Añel, Alberto Marcelo. "Caracterización de una ARN Helicasa de Trypanosoma cruzi clonada por el método de Differential Display" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Una de las últimas técnicas aplicadas en biología molecular para detectar diferentes niveles de transcripción en distintos estadios de un mismo tipo celular es el Differential Display. Este ensayo se basa en la técnica de RT-PCR, utilizando un oligo dT “anclado” que se une al nacimiento del pon A+ de los ARN mensajeros, y un oligonucleótido corto de secuencia al azar que, en diferentes combinaciones, van a amplificar un set de bandas característico para cada par de oligos elegidos. Estas reacciones se corren en un gel de poliacrilamida desnaturalizante y se observan por autorradiografía. De esta forma se comparan ambos estadios celulares y se recuperan del gel aquellas bandas que muestren una amplificación diferencial como producto de distintos niveles de ARN mensajeros. Utilizando el Differential Display en los estadios no infectivo (epimastigotes) e infectivo (trypomastigotes metacíclicos) del parásito Trypanosomacruzi, causante de la enfermedad de Chagas, se purificaron varias bandas de expresión diferencial. Una de ellas aplicada como sonda en un Northern-blot demostró tener una transcripción entre 8 y 9 veces mayor en trypomastigotes metacíclicos. A partir de una biblioteca genómica realizada en el bacteriófago A Fix, se aisló un clon positivo para esta banda que, una vez secuenciado y comparado en bancos de datos, dió una homología de hasta el 46 % a nivel de aminoácidos con diferentes ARN helicasas. Estas proteínas pertenecen a la familia de las proteinas DEAD Box y participan en el relajamiento de estructuras de ARN doble cadena. Por lo tanto son importantes en procesos como transcripción, traducción, ensamblado de ribosomas, splicing y editing.Además se ha descripto su participación en diferenciación y desarrollo celular, por lo cual se abre un campo muy importante con en el estudio de la participación de estas proteinas en los procesos de metaciclogénesis e infectividad del Trypanosoma cruzi. Por otro lado se demostró por Southern-blot que, a diferencia de la mayoría de los genes conocidos de Trypanosoma cruzi, el gen de esta ARN helicasa es de única copia en el genoma. Ensayos de Cromo-blot con ia región que codifica al carboxilo terminal de la proteína mostraron que este gen se encuentra representado en por lo menos nueve cepas del parásito. Por último, se demostró que esta ARN helicasa posee una especificidad enzimática con dirección 3’-5’ sobre transcriptos realizados in-vitro, con una aparente independencia de ATP o GTP, como ocurre con algunos miembros de esta familia El descubrimiento de este gen de transcripción diferencial entre ambos estadios de la metaciclogénesis de T. cruzi y la caracterización parcial de su función enzimática, son el principio para estudiar su participación en la diferenciación y/o infectividad de este parásito y nos permitirá conocer un poco más de este proceso del cual se sabe tan poco y que es parte del comienzo de la enfermedad de Chagas en los huéspedes vertebrados, entre ellos el hombre.

Abstract:
One of the last techniques applied in molecular biology to detect different transcription levels in different stages of one cellular type is the Differential Display. This assay is based on the technique of RT-PCR, using an oligo dT “anchored” that anneals to the birth of the messenger RNAs poly A, and a short oligonucleotide of at random sequence that, in different combinations, they will amplify a characteristic set of bands for each couple of selected oligos. These reactions are run on a dennaturing polyacrylamide gel and they are observed by autoradiography. This way both cellular stages are compared and we can recover of the gel those bands that show a differential amplification as product of different levels of messenger RNAs. Using the Differential Display in the stages non infective (epimastigotes) and infective (metaciclic trypomastigotes) of the parasite Trypanosoma cruzi, causing of the Chagas’ illness, we purified several bands of differential expression. One of them applied as probe in a Northern-blot demonstrated to have a transcription level between 8 and 9 times higher in metaciclic trypomastigotes. Starting from a genomic library carried out in A Fix bacteriophage, a positive clone was isolated for this band that, once sequenced and compared in databases, showed an homology of until 46% at level of aminoacids with different RNA helicases. These proteins belong to the family of the DEAD Box proteins and they participate in the relaxing of RNA double chain structures. Therefore they are important in processes like transcription, translation, ribosome assembling, splicing and editing. Also it has been described their participation in diferentiation and cellular development, reason why a very important field opens up with in the study of the participation of these proteins in the metaciclogénesis processes and infectivity of Trypanosoma cruzi. On the other hand it was demonstrated by Southern-blot that, contrary to most of the well-known genes of Trypanosoma cruzi, the gene of this RNA helicase is single copy in the genome. Assays of Chromo-blot with the region that codes to the carboxy terminal of the protein, showed that this gene is represented in at least nine strains of the parasite. Lastly, it was demonstrated that this RNA helicase possesses an enzymatic specificity with 3’-5' direction with transcripts carried out in-vitro, with an apparent independence of ATP or GTP, like it happens with some members of this family. The discovery of this gene of differential transcription between both stages of the T. cruzi metacyclogenesis, and the partial characterization of their enzymatic function, is the principle to study their participation in the diferentiation and/or infectivity of this parasite, and it will allow to us to know a little more about this process of which is known so little and that it is part of the beginning of the Chagas’ illness in the vertebrate guests, among them the man.

Díaz Bessone, María Inés. "Efecto de la sobreexpresión de distintas isoformas de la Proteína Quinasa C (PKC) en la modulación del fenotipo maligno de células mamarias epiteliales. Alteración en la sensibilidad al tratamiento con retinoides" (2016-03-28). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El cáncer de mama representa actualmente el tipo de cáncer más frecuente en mujeres y se calcula que más de un millón de nuevos casos son diagnosticados por año en todo el mundo. Se trata de una enfermedad compleja, que presenta una variedad de subgrupos con características histopatológicas y genéticas diferentes y por lo tanto con diversas respuestas a los tratamientos. De las múltiples vías de señalización comprometidas en la progresión maligna, algunas constituyen prometedores blancos de intervención terapéutica, entre ellas la vía de la proteína quinasa C (PKC), implicada en eventos celulares como proliferación, diferenciación y apoptosis y el sistema retinoideo ampliamente involucrado en diferenciación celular. Dado que los distintos carcinomas mamarios presentan una expresión diferencial de las isoformas de PKC, desarrollamos modelos celulares mamarios (humanos y murinos) que sobreexpresan las isoformas α o δ de PKC. Utilizando estos modelos estudiamos de qué manera la sobreexpresión de PKCα o PKCδ afecta parámetros celulares implicados en la progresión tumoral y diseminación metastásica evaluando al mismo tiempo la respuesta al tratamiento con retinoides (ATRA). Nuestros resultados sugieren que la sobreexpresión de PKCα torna a las células más sensibles a la acción del ácido retinoico, en líneas respondedoras, mediante un arresto en la fase G0/G1 del ciclo celular. La sobreexpresión de PKCδ, en las células MDA-MB231, confirió un fenotipo menos agresivo, disminuyendo significativamente su capacidad invasiva. Por último la falta de respuesta de esta línea celular al ATRA, se debería a la incapacidad de trans-reprimir los sitios AP-1.

Abstract:
Breast cancer represents the most common kind of cancer in women and it is estimated that more than one million new cases are diagnosed each year worldwide. It is a complex disease, which presents a variety of subgroups with different genetic and histopathologic features and therefore with different responses to treatments. Multiple signaling pathways are involved in malignant progression. Some of them are promising targets for therapeutic intervention, including protein kinase C (PKC), involved in cellular events such as proliferation, differentiation and apoptosis and the retinoid system, widely implicated in cell differentiation. Since different mammary malignancies exhibit differential expression of PKC isoforms, we have developed (human and murine) mammary cell models overexpressing α or δ PKC isoforms. Using these models we studied how PKCα or PKCδ alters cell parameters associated with tumor progression and metastatic dissemination while we assessed the response to treatment with retinoids (ATRA). Our results suggest that PKCα overexpression confers to the cells a retinoic acid-sensitive phenotype, through an arrest in the G0 / G1 phase of the cell cycle. Overexpression of PKCδ, in MDA-MB231 cells, induced a less aggressive phenotype, significantly reducing its invasive capability. Finally the lack of response of this cell line to ATRA treatment could be due to the inability to trans-repress AP-1 sites.

Díaz Carrasco, Juan María. "Compartimentación de variantes virales entre plasma y células mononucleares de sangre periférica en pacientes con infección crónica por virus de hepatitis C" (2014-08-19). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El virus de hepatitis C (VHC) afecta al 3% de la población mundial, representando una de las principales causas de hepatitis crónica y trasplante hepático. En el paciente infectado, el virus existe como un espectro de mutantes que difieren en su potencial de replicación, denominado cuasiespecie. La extensa variabilidad del VHC proporciona a la cuasiespecie una alta plasticidad fenotípica y capacidad de adaptación, que favorece el mantenimiento de la infección crónica. Si bien el principal sitio de replicación del VHC es el hígado, numerosos estudios han descripto la replicación del virus en tejidos extrahepáticos, en particular en células mononucleares de sangre periférica (CMSP) y esto se ha asociado con el desarrollo de distintas manifestaciones extrahepáticas. Se ha relacionado a distintos genes del VHC con la compartimentación en CMSP, pero aún no está claro cuáles son los factores celulares y virales requeridos para la infección de las células linfoides, por lo que la búsqueda de patrones moleculares asociados con el linfotropismo podría aportar datos valiosos para la comprensión de este fenómeno. Además, la gran mayoría de los estudios de compartimentación se han realizado en pacientes adultos y se basan únicamente en la región HVR1 de E2. El objetivo del trabajo fue evaluar la compartimentación del VHC en CMSP y su dinámica durante la infección crónica por VHC en pacientes pediátricos mediante el análisis de genes virales involucrados en distintas etapas del ciclo de replicación viral. Se evaluó la compartimentación y la existencia de patrones moleculares asociados con el linfotropismo mediante el análisis filogenético de las secuencias de tres regiones del genoma viral: IRES, E1E2 y NS5B, obtenidas a partir de muestras seriadas de plasma y CMSP de 6 niños. Se demostró estadísticamente que existe compartimentación viral en niños, principalmente en regiones discretas dentro de E1E2 que incluyen sitios de unión a receptores, lo que sugiere que el linfotropismo del VHC podría estar determinado por restricciones en la interacción de las glucoproteínas con factores celulares involucrados en el proceso de adsorción y entrada. Si bien no se evidenció un patrón molecular asociado con el linfotropismo común a todos los casos estudiados, se observó que las regiones identificadas están sujetas a presiones selectivas diferentes en plasma y CMSP y se describieron variaciones aminoacídicas asociadas con las variantes linfotrópicas. Además de contribuir al conocimiento general acerca de la compartimentación del VHC, nuestro trabajo pone de manifiesto el importante papel que juegan las CMSP como reservorios de variabilidad genética y como compartimentos de replicación extrahepática, favoreciendo la persistencia y contribuyendo al mantenimiento de la cronicidad durante la infección por VHC en niños.

Abstract:
Worldwide prevalence of chronic hepatitis C virus (HCV) infection is estimated at 3%, representing the major cause of chronic hepatitis and liver transplantation. Within the infected patient, the virus exists as a spectrum of mutants which differ in their replication potential, termed quasispecies. The large variability of HCV quasispecies provides high phenotypic plasticity and adaptability, which favors the maintenance of chronic infection. Although the primary site of HCV replication is the liver, numerous studies have described replication in extrahepatic tissues, particularly in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and this has been associated with the development of different extrahepatic manifestations. Several viral genes have been linked to HCV PBMCs compartmentalization, but the factors required for the infection of lymphoid cells still remain unclear, and therefore the search for molecular patterns associated with lymphotropism could provide valuable data for the understanding of this phenomenon. In addition, most studies examining compartmentalization have been conducted in adult patients and are based solely on the HVR1 region of E2. The aim of this study was to assess the compartmentalization of HCV in PBMCs and its evolution dynamics during chronic HCV infection in pediatric patients by means of the analysis of certain genes involved in different stages of the viral replication cycle. Compartmentalization and the existence of molecular patterns associated with lymphotropism were evaluated by phylogenetic analysis of the sequences of three viral genes, namely IRES, E1E2 and NS5B, which were obtained from serial samples of plasma and PBMCs of 6 children. We showed that there is statistically significant compartmentalization in children, mainly in discrete regions within E1E2 that includes receptor binding sites, suggesting that HCV lymphotropism could be influenced by restrictions in the interaction of the glycoproteins with cellular factors involved in viral attachment and entry. While a common molecular pattern associated with lymphotropism was not evident in all the studied cases, it was found that the identified regions were influenced by different selective pressures both in plasma and PBMCs. Moreover, amino acid variations associated with lymphotropic variants were described. Besides contributing to general knowledge about the compartmentalization of HCV, our work highlights the important role played by PBMCs as reservoirs of genetic variability and as compartments for extrahepatic replication, favoring persistence and contributing to the maintenance of chronicity during HCV infection in children.

Díaz Costanzo, Guadalupe. "Propiedades ópticas de nanocompuestos poliméricos con nanotubos de carbono" (2013-12-30). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Se han desarrollado y caracterizado nuevos materiales fotosensibles a partir de la incorporación de moléculas de colorante azobenceno en matrices poliméricas. Se estudió cómo la adición de una nanocarga, capaz de mejorar la resistencia a la rotura e incrementar el módulo elástico, modifica las propiedades ópticas del material. En particular, como colorante se empleó Disperse Orange 3 (DO3) y como nanocarga se usaron nanotubos de carbono (CNTs). La familia de colorantes azobenceno se caracteriza por sufrir un proceso de fotoisomerización reversible, que permite inducir ópticamente distintos efectos como birrefringencia y modulación en el índice de refracción cuando se incorporan en un sistema material. La elección de los CNTs como nanocarga se basó en su estructura electrónica, que podría dar lugar a una interacción con los colorantes azobenceno ya que ambos poseen un sistema delocalizado de electrones π. Se evaluaron dos tipos de polímeros como matrices, un polímero termorrígido (resina epoxi) y un polímero termoplástico (ácido poliláctico) con el objeto de determinar cómo el tipo de estructura modifica la respuesta óptica del colorante. En ambos casos se estudiaron materiales con y sin CNTs. En la primera etapa de esta tesis se estudió la interacción entre nanotubos de carbono y moléculas azobenceno utilizando técnicas ópticas y espectroscópicas. Se determinaron las concentraciones CNTs/DO3 para obtener dispersiones en tetrahidrofurano y en cloroformo estables en el tiempo. Con ellas se desarrollaron los diferentes compuestos poliméricos los cuales fueron caracterizados mediante diferentes técnicas espectroscópicas, mecánicas y ópticas. Se encontró que la adición de CNTs en sistemas fotosensibles compuestos por polímero y colorante genera cambios en la respuesta óptica del nanocompuesto que se manifiestan de forma distinta dependiendo fuertemente de la conformación estructural de la matriz que constituye el material. Finalmente se grabaron figuras de interferencia en los diferentes materiales y se evaluó cómo la presencia de los CNTs afecta la eficiencia de difracción de las redes generadas. Este último punto demuestra las potenciales aplicaciones de los materiales desarrollados en el área de óptica y fotónica como dispositivos de almacenamiento óptico de la información.

Abstract:
New photosensitive materials fabricated by the addition of azobenzene dye molecules into polymeric matrixes have been developed and characterized. It was studied how the addition of a nanocharge, also capable of improving the strength at break and the elastic modulus, modify the optical properties of the material. Particularly, as an azobenzene dye it was used Disperse Orange 3 (DO3) and carbon nanotubes (CNTs) as nanocharges. The family of azobenzene dyes are most known for undergoing a reversible photoisomerization process that allows photoinducing different effects such as birrefringence and modulation of the index refraction when oncorporated into a material system. The choice of CNTs as nanocharges finds it basis on their electronic structure that could let an interaction with the azobenzene dyes since both have a delocalized π electron system. Two kinds of polymers have been tested as matrixes, a termorrigid polymer (epoxy resin) and a thermoplastic polymer (polylactic acid), with the aim of determining how the structure modifies the optical response of the dye. In both cases, materials with and without CNTs were studied. On the first stage of this thesis the interaction between carbon nanotubes and azobenzene molecules was studied using optical and spectroscopic techniques. Concentrations CNTs/DO3 were determined to obtain stable dispersions in tethehydrofuran and chloroform. With these dispersions the polymeric compounds were developed and characterized by means of spectroscopic, mechanic and optical techniques. It was found that the addition of CNTs into photosensitive material systems made of polymers and azobenzene dyes produces changes in the optical response that revealed in different ways strongly depending on the structural conformation of the matrix of the material. At last, interference patterns were recorded on the different materials and it was evaluated how the presence of CNTs affects the efficiency of the recorded diffraction gratings. This last point demostrates the potential applications of the developed materials in the area of optics and photonics as optical storage information devices.

Díaz Sylvester, Paula L.. "Mecanismos de control de la acidificación tubular proximal : 1)Regulación parácrina de la función tubular por el endotelio capilar 2) Interacción entre el sistema renina-angiotensina y el óxido nítrico (NO)" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo del presente trabajo fue analizar diferentes mecanismos que modulan la acidificación tubular proximal utilizando dos estrategias: a) la modificación aguda de la viscosidad del fluido peritubular y b) la inhibición crónica del sistema renina-angiotensina (SRA). Se ha informado que el óxido nítrico (NO) estimula la acidificación tubular proximal. Dado que el shear stress es un agonista de la liberación de NO, y que el grado de shear stress es proporcional a la viscosidad (η) de la solución, evaluamos el efecto de aumentos en η de la solución perfusora peritubular (SPP: Ringer HNaPO42- 20 mM, pH 7.4) sobre la acidificación luminal del túbulo contomeado proximal (TCP). Se realizaron experimentos de micropuntura con perfusión luminal y peritubular simultáneas. Se midieron los cambios en el pH de una gota de Ringer HNaPO4- 20mM (pHt=0:7,4) ubicada en el lumen del TCP por medio de un microelectrodo de resina sensible a H+. La viscosidad de la SPP se incrementó por el agregado de dextran neutro (P.M.: 300.000-400.000). Dado que aumentos en el shear tress inducen la liberación de ATP, se evaluó el efecto de ATP (10^-5 M) agregado a la SPP de viscosidad normal. La viscosidad aumentada indujo un aumento en el flujo de H+ (JH+)(85% y 97% con aumentos en η de 30% y 50% respectivamente, sobre el control). Este efecto fue abolido cuando se agregó el inhibidor de la síntesis de NO Nω-nitro-L-arginina (L-NNA, 10^-4 M) o los antagonistas de receptores purinérgicos suramin (10^-4 M) y reactive blue 2 (RB2, 3x10^-5 M). La adición de L-arginina 5x10^-3 M, a la SPP de alta viscosidad conteniendo L-NNA, recuperó el efecto estimulatorio de la alta viscosidad. El ATP indujo un aumento del 80% en JH+ y este efecto se bloqueó con L-NNA. Nuestros resultados sugieren que cambios en η (y consecuentemente en el shear stress) modularían la secreción proximal de de H+, al menos en parte, a través de la liberación de NO dependiente de ATP desde las células endoteliales de los capilares peritubulares. Los cambios en la viscosidad de la sangre que circula por la arteriola eferente y los capilares peritubulares, debidos a la filtración glomerular, podrían participar en el control normal de la reabsorción tubular (es decir, en el control del balance glomérulo-tubular), además de los ya descriptos factores fisicos (presiones oncótica e hidrostática) La segunda parte de este trabajo se centró en el estudio del efecto de la inhibición crónica del SRA sobre la acidificación tubular proximal y de los mecanismos involucrados en tal efecto, haciendo énfasis en la interacción del SRA con el NO. Se utilizó un protocolo de administración crónica de enalapril, un inhibidor de la enzima convertidora de la angiotensina, y losartan, un antagonista de los receptores de tipo ATI para la angiotensina II (10 mg*Kg^-1xdía^-1 durante tres meses, en la bebida). Mediante experimentos de micropuntura se determinó que el JH+aumentó 52% en los tratados con losartan y 87% en los animales tratados crónicamente con enalapril, comparados con animales sin tratamiento. La inhibición de la síntesis de NO con L-NNA (15 mg/kg, IV) durante el experimento, previno los efectos estimulatorios de losartan y enalapril sobre JH+.La actividad de síntesis de NO (NOS) se determinó mediante el dosaje de -L-citrulina formada a partir de -L-arginina. Los homogenatos de corteza renal de animales tratados crónicamente con losartan y enalapril presentaron un aumento en la actividad de NOS de 41% y 46% con respecto al control, respectivamente. Estos resultados sugieren que el efecto estimulatorio del enalapril y del losartan sobre la secreción proximal de H+ podría estar mediado, al menos en parte, por NO. La inhibición crónica del SRA no modificó los niveles de la isoforma inducible de la sintetasa de óxido nítrico (iNOS), indujo un aumento en la abundancia de la isoforma endotelial (eNOS) y una disminución en la expresión de la isoforma neuronal (nNOS). Este resultado sugiere que las diferencias en la actividad de NOS observadas entre los grupos experimentales podrían deberse, en parte, a la variación en el nivel de expresión de la eNOS. Por otra parte, la inhibición crónica del SRA, indujo un aumento en los contenidos de NHE-3 y la H+-ATPasa en membrana apical, analizados por westem blot en vesículas aisladas de ribete en cepillo. Estos resultados sugieren que el efecto estimulatorio de esas drogas sobre la acidificación proximal podría depender, al menos en parte, de los niveles de expresión de dichos transportadores en membrana apical. Por lo tanto, la inhibición crónica del SRA afectaría a la acidificación proximal mediante al menos dos mecanismos: un aumento en la disponibilidad de los transportadores involucrados y la estimulación del intercambio Na+/H+ apical dependiente de la síntesis de NO. En resumen, este trabajo muestra que los mecanismos de control de la acidificación tubular proximal en respuesta al shear stress peritubular y a la inhibición crónica del SRA involucran la síntesis de NO, probablemente en el endotelio de los capilares peritubulares y/o de la arteriola eferente, y la interacción paracrina endotelio — epitelio.

Abstract:
The aim of this work was to study different mechanisms that modulate proximal tubule acidification using two strategies: a) the acute modification of peritubular capillaries fluid viscosity and b) the chronic inhibition of renin angiotensin system (RAS). It has been reported that nitric oxide (NO) stimulates proximal tubule acidification. Since shear stress is a strong agonist for NO release, and the degree of shear stress is proportional to fluid viscosity (η), we evaluated the effects of increasing η in peritubular capillary perfusates (PCP; 20 mM HNaPO42- Ringer, pH 7.4) on proximal convoluted tubule (PCT) acidification. Micropuncture experiments were performed with simultaneous luminal and peritubular perfusion. Changes in pH of a 20 mM HNaPO42- Ringer (pHFO 7.4) droplet placed in PCT lumen were measured with H+-sensitive microelectrodes. Viscosity was increased by adding neutral dextran (molecular wt 300,000-400,000) to the PCP. Since increases in shear stress induce ATP release, the effect of 10^-5 M ATP added to normal-η PCP was evaluated. High η increased H+ flux (JH+)(85 and 97% when η was increased 20 and 30%, respectively, above the control value). This increase was abolished by adding the NO synthesis inhibitor Nω-nitro-L- arginine (L-NNA; 10^-4 M) or the purinoreceptor antagonists suramin (10^-4 M) and reactive blue 2 (3x10^-5 M). Addition of 5x10^-3 M L-arginine to the peritubular perfusate overcame the inhibitory effect of L-NNA on high-η-induced increase in JH+. ATP increased JH+(80%), and this effect was blocked by L-NNA. These results suggest that changes in η (and consequently in shear stress) can modulate proximal JH+, at least in part, through ATP-dependent NO release from the endothelial cells of the peritubular capillaries. The changes in η of postglomerular blood due to glomerular filtration, could participate in the regulation of tubular reabsorption (i.e. in the control of glomerular-tubular balance) and operate in parallel with the already described physic factors (capillary oncotic and hydrostatic pressures). The second part of this work is aimed to study the effect of chronic RAS inhibition on proximal tubule acidification and the mechanisms involved in such effect, including the interaction between RAS and NO. We performed a protocol of chronic oral administration of enalapril, an angiotensin converting enzyme inhibitor and losartan a type AT1 angiotensin receptor antagonist (10 mgxKg^-1 x day^-1, along 3 months). Proximal H+secretion, compared to control values and assessed by micropuncture experiments, was increased 52% and 87% in losartan- and enalapril-treated animals, respectively. NO synthesis inhibition by bolus injection of L-NNA during micropuncture, abolished the stimulatory effects of chronic RAS inhibition. NO synthesis activity was assessed by measurement of conversion of -arginine to -citrulline. NOS activity increased in renal cortex homogenates from animals under chronic RAS inhibition (41% and 46%, compared to control, losartan and enalapril respectively). Our results suggest that the stimulating effect losartan and enalapril on proximal JH+ could be mediated, in part, by NO. Chronic RAS inhibition induced no changes in the levels of the inducible nitric oxide synthase (iNOS), a decrease in neuronal NOS (nNOS) and an increase in endothelial NOS (eNOS), suggesting that the differences in NOS activity among experimental groups might depend, in part, on eNOS protein synthesis. In addition, chronic RAS inhibition increased the abundance of NHE-3 and H+-ATPase in brush border membrane vesicles. These results suggest that the effects of the drugs used in this work on proximal acidification could depend, in part, on the abundance of transporters for apical membrane H+ extrusion. Thus, chronic RAS inhibition would affect proximal acidification through two mechanisms: an increase in the availability of the transporters involved and NO dependent JH+ stimulation. In summary, this work show that proximal tubule acidification mechanisms that involve effects of NO, probably synthesised in peritubular capillaries and/or efferent arteriole endothelium, on proximal tubule function.

Díaz Villanueva, Verónica. "Efecto del pastoreo sobre la estructura y dinámica de la comunidad perifítica de arroyos andinos" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En el presente trabajo se analizó la relación de herbivoría en el bentos de arroyos andino-patagónicos. En estos sistemas lóticos, el perifiton es el principal responsable del aporte de materia orgánica autóctona. El objetivo de este trabajo fue determinar cómo es afectado el perifiton en ambientes lóticos ritrónicos como consecuencia del pastoreo que realizan los macroinvertebrados bentónicos. Para ello se investigó la estructura del perifiton así como también la de los herbivoros en tres arroyos andinos (Ñireco, Casa de Piedra y Gutiérrez) con distintas características en cuanto al orden, sombreado y pendiente. En todos ellos, las diatomeas (Bacillariophyceae) fueron las algas perifiticas más abundantes, contribuyendo con más del 80% del total de las especies algales. El tramo superior del arroyo Ñireco es un ambiente de montaña; está densamente cubierto por bosques caducífolios de Nothofagus pumilio (P.& E.) Krasser (lenga) y sostiene una alta proporción de insectos fragmentadores de materia orgánica particulada gruesa. En cambio, en el tramo inferior del arroyo Casa de Piedra y en el arroyo Gutiérrez, ambos ambientes pedemontanos, abundan los macroinvertebrados herbivoros, tanto insectos como moluscos. El efecto de la herbivoría sobre el perifiton fue analizado en los dos tipos de ambientes: de montaña y pedemontanos. Con tal fin, se llevaron a cabo estudios que incluyeron muestreos del perifiton y de los macroinvertebrados, conjuntamente con estudios morfológicos de las piezas bucales y de dieta. En primer lugar se determinó la dieta de larvas del plecóptero Notoperla archiplatae (Illies), abundantes en la sección superior del arroyo Ñireco. Se realizaron estudios de las piezas bucales, del contenido de los tubos digestivos y de selectividad de los distintos ítems alimentarios. Se determinó que era un herbívoro, pues su dieta estaba constituida principalmente por diatomeas (>50%). Además, se encontró que las diatomeas con hábito arborescente poseían una mayor susceptibilidad a ser ingeridas. Luego se realizó un experimento in situ que permitió calcular sus tasas de remoción, tasa de crecimiento y eficiencia de conversión de alimento. En el mismo experimento se estudió su efecto sobre la biomasa y composición específica del perifiton. N. archiplatae redujo la biomasa perifítica significativamente, y produjo cambios en las frecuencias relativas de las especies más abundantes. La diatomea Melosira varians Ag. fue la especie más negativamente afectada mientras que la abundancia de Achnanthes minutissima Kütz. se incrementó como efecto del pastoreo, con lo cual se generó un perifiton ralo y altamente autotrófico. En segundo lugar se analizó el efecto de pastoreo por parte de larvas del efemeróptero Meridialaris chiloeensis (Demoulin) y del caracol Chilína dombeiana (Bruguiere), siendo ambas especies abundantes en el arroyo Gutiérrez. Se realizaron observaciones de sus piezas bucales y de los mecanismos que utilizan para adquirir el alimento. También se llevaron a cabo experimentos en canales artificiales utilizando clausuras para determinar el efecto de cada especie sobre la biomasa y composición específica del perifiton. Ambos herbívoros redujeron la biomasa perifitica significativamente pero no modificaron sustancialmente las frecuencias relativas de las especies algales. Por lo tanto, se estableció que tanto la rádula del caracol como la batería de cerdas presentes en las piezas bucales del efemeróptero pueden actuar como estructuras raspadoras del perifiton. Por otro lado, se calcularon las tasas de remoción algal para ambos herbívoros, determinando que el efecto individual del caracol es mayor que el del efemeróptero pero que por unidad de biomasa Meridíalaris es capaz de remover mayor cantidad de perifiton. Por lo tanto, dado que la biomasa poblacional del efemeróptero puede superar a la del caracol en el ambiente, la reducción de la biomasa perifitica puede ser mayor por efecto de estos herbívoros. Asimismo se observaron distintos patrones en cuanto al uso del sustrato donde pastorean. El insecto posee un comportamiento altamente dependiente del refugio, permaneciendo debajo del sustrato en horas del día. Por el contrario, el caracol permanece expuesto tanto en el día como en la noche. Estas diferencias se tradujeron en una actividad de pastoreo diferente; restringida a los bordes del sustrato en Meridialaris y a toda la superficie del mismo en el caso del caracol. Se postuló que estas diferencias posibilitarían la coexistencia de estos dos herbívoros que utilizan el mismo recurso en el mismo hábitat. Por otra parte, se evaluó el efecto de las larvas de M. chíloeensís variando las densidades del herbívoro y el tiempo de colonización del perifiton previo a la introducción del pastoreador. Como resultado, se determinó que M. chíloeensis puede alimentarse del perifiton siempre y cuando la biomasa sea mayor a 0.3 g m-2. El efecto sobre la composición específica es leve ya que este herbívoro es capaz de acceder a todas las formas de crecimiento algales presentes en el perifiton ofrecido. En cuanto al efecto sobre la sucesión algal, se planteó la hipótesis de que existe una aceleración debido a que se observó un aumento en la frecuencia relativa de especies más típicas de estadios avanzados, como Nitzschia palea (Kütz.) W. Sm. Por último, se llevó a cabo un experimento con Meridialaris, con el objetivo de analizar la digestibilidad algal a partir de la observación del contenido de las heces. La proporción de células vivas es significativamente menor en las heces que en el perifiton, lo cual indica que Meridialaris posee una alta capacidad de digerir las algas que consume (70%). Sin embargo, se hallaron diferencias en la digestibilidad de las especies algales, que conllevarían a cambios en la composición de la comunidad hacia especies que logran atravesar con vida el tubo digestivo de los pastoreadores. A pesar de que los herbívoros resultaron más abundantes en arroyos pedemontanos que en los de cabecera, en ambos tipos de ambientes desempeñan un papel importante en el control de la biomasa perifitica y pueden influir en la composición específica dominante.

Abstract:
Herbivore-periphyton relationship was analysed in the benthos community of three Andean-Patagonian streams. In these lotic systems, periphyton is the main responsible for the autochthonous organic matter input. The main goal of this work was to determine the way in which periphyton is affected by grazing of benthic macroinvertebrates in these rithronic environments. As a first step, the structure of the periphyton and macroinvertebrate community was investigated in three Andean streams (Ñireco, Casa de Piedra and Gutiérrez), with differences in order, canopy and slope. Diatoms (Bacillariophyceae) were the most abundant periphytic algae in all the streams, constituting more than 80% of the total algal species. The upper section of Ñireco stream is a typical mountain environment; it is densely covered by a deciduous forest of Nothofagus pumilio (P.& E.) Krasser (lenga) and bears a high proportion of Shredder insects. In contrast, Casa de Piedra and Gutiérrez streams are both piedmont environments in which herbivores, in particular insects and molluscs, are abundant. Herbivory on periphyton was studied in a gradient of altitude, from the mountain to the piedmont. Periphyton and macroinvertebrates were surveyed concurrently, and herbivores’ mouthpart morphology and gut content were examined. The feeding habit of Notoperla archiplatae (Illies) larvae, an abundant plecopteran from the upper section of Ñireco stream, was determined combining direct observations and selectivity measurements on different food items. N. archiplatae was found to be an herbivore, since its diet consisted mainly of diatoms (>50%), specially those with an arborescent habit. Field experimental work was performed in order to determine the algae removal rates, growth rates and food conversion efficiency of N. archiplatae. In the same experiment, I analysed the effect of this grazer on biomass and species composition of periphyton. Notoperla reduced significantly periphytic biomass and changed the relative abundance of the dominant species. Melosira varians Ag. was the most negatively affected species while Achnanthes minutissima Kütz, seemed to have been favoured. Notoperla’s grazing led to a thin and highly autotrophic periphyton. Grazing patterns of the mayfly Meridialaris chiloeensis (Demoulin) and the snail Chilina dombeiana (Bruguiere), both abundant species from Gutiérrez stream, were analysed through their mouthpart morphology and feeding mechanisms. I performed a series of experiments to determine the effects of each species on periphytic biomass and specific composition. Accordingly, field experiments were carried out in artificial channels manipulating presence and absence of the macroinvertebrates. Both herbivores reduced algal biomass significantly but species relative abundances were not modified. I found that the radula of the snail and the sets of setae present in the mouthparts of the mayfly act similarly as scraping structures. The removal rates measurement showed that the individual effect of the snail is greater than that of the mayfly. However, in terms of biomass, Meridialaris is able to remove a higher periphytic biomass. In natural environments (Gutiérrez Stream) mayfly population biomass is higher than that of the snail and thus, the greatest reduction of periphytic biomass may be attributed to mayfly grazing. Besides, I observed a differential use of the substrate by M. chiloeensis and Ch. dombeiana. The mayfly sought refuge under the substrate during daytime, while the snail remained on the substrate during day and night. These different behaviours, probably responses to differential vulnerability to visual predators, are related with the particular grazing effect of each herbivore. In addition, I studied the effect of different densities of the grazer M. chiloeensis on periphyton communities of different age. Meridialaris fed on periphyton depressing algal biomass up to 0.3 g m-2 but remarkably, its effect on the species composition was negligible since all algal growth habits were consumed. Algal succession was accelerated resulting in an increment on the relative abundance of late-stage species like Nitzschia palea (Kütz.) W. Sm. Algal digestibility was analysed through examination of Meridialaris faeces. The mayfly showed a high capacity (70%) in digesting the algae consumed, however some species were digested better than other. These differences in species digestibility may drive the species composition of the periphyton towards a higher occurrence of the most resistant species. Although in this study herbivores were found to be more abundant in piedmont streams than in headwaters, they appear to control the periphyton biomass in both type of environments.

Díaz, Emilce Silvina. "Influencia de las proteínas de la matriz extracelular sobre la morfología y funcionalidad de las células de Leydig de rata adulta" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Está ampliamente aceptado que las proteínas de la matriz extracelular (MEC) intervienen en la regulación de la diferenciación, morfogénesis, proliferación y migración celular. La mayor parte de las interacciones célula-MEC están mediadas por las integrinas, las cuales regulan a su vez, la reorganización del citoesqueleto, el transporte intracelular de iones, el metabolismo de los lípidos, la activación de quinasas y la expresión génica. Asimismo, en la última década se ha demostrado que las integrinas ejercen un papel importante en los procesos reproductivos, incluyendo la fertilización, implantación y embriogénesís. En el testículo, la regulación de distintos procesos como el desarrollo, la diferenciación y la esteroidogénesis de las células de Leydig, depende de la acción concertada de las hormonas gonadotróficas y de una gran variedad de factores locales producidos de manera autocrina o paracrina. A pesar de lo mencionado en el párrafo anterior, son pocos los estudios realizados que intentan dilucidar el papel que ejercen las proteínas de la MEC sobre la funcionalidad de las células de Leydig. Estas células están rodeadas por proteínas de la MEC organizadas como una membrana basal continua o discontinua. El objetivo de esta tesis fue estudiar la influencia de las proteínas de la MEC sobre la morfología, la adhesión celular, la expresión de integrinas y la esteroidogénesis de las células de Leydig . Como modelo experimental, se utilizó el cultivo de células de Leydig de rata adulta, utilizando como sustrato, la laminina-l, el colágeno tipo IV y la fibronectina. Nosotros observamos que las células de Leydig cultivadas sobre laminina-l, colágeno tipo IV y fibronectina, presentan un mayor número de prolongaciones cítoplasmáticas que las cultivadas sobre vidrio. Asimismo, demostramos que la adhesión de las células al sustrato es un fenómeno que ocurre rápidamente y que el grado de adhesión a las mismas varía según el sustrato al cual se adhieren. Además, observamos que si bien las integrinas se expresan de manera constitutiva en las células de Leydig, su expresión aumenta en respuesta a la adhesión de las células a las proteínas de la MEC. Con respecto al efecto de las proteínas de la MEC sobre la capacidad esteroidogénica de las células de Leydig, demostramos que el colágeno tipo IV y la fibronectina inhiben la producción de testosterona de las células de Leydig de rata adulta, tanto en condiciones basales como estimuladas con hCG y que este fenómeno no se debe a un efecto citotóxíco. En cambio, la laminina-l utilizada como sustrato, no ejerció un efecto modulador sobre la producción de testosterona. En relación al mecanismo de la esteroidogénesis, demostramos que el efecto inhibitorio del colágeno tipo IV y la fibronectina ocurre en un paso posterior a la producción de AMPc y anterior a la entrada del colesterol a la membrana mitocondrial interna. Por otra parte, demostramos que el colágeno tipo IV es capaz de modular la expresión de la proteína StAR, involucrada en el transporte del colesterol a la membrana mitocondrial interna. Teniendo en cuenta estos resultados, se decidió analizar alguna de las vías de señalización intracelular activadas por el colágeno IV, capaces de regular negativamente la esteroidogénesis de las células de Leydig. Demostramos que la modulación negativa del colágeno tipo IV sobre la esteroidogénesis de las células de Leydig de rata está mediada por la activación de tirosina quinasas. En particular, detectamos que la interacción del colágeno tipo IV con las integrinas de la subfamilia β1, activa la cascada de Ras/MEK/ERK, siendo estas las responsables de la modulación negativa del colágeno tipo IV sobre la esteroidogénesis. Asimismo demostramos que las proteínas ERK 1-2 están involucradas en las adhesiones focales inducidas por la interacción de las integrinas de las células de Leydig con las proteínas de la MEC. Las integrinas tienen la capacidad de activar la vía de señalización de las MAPK a través de distintos mecanismos. Uno de ellos, ocurre a través de la activación de las proteínas Ras, pudiendo ser dependiente o no de la proteína FAK. Nosotros demostramos que en las células de Leydig de rata, la activación de la cascada de las MEK, inducida por el colágeno tipo IV, se desencadena fundamentalmente, a través de un mecanismo FAK independiente. La activación de las proteínas ERK l-2 independiente de FAK, podría estar mediada por una proteína denominada caveolina-1. Nosotros identificamos la proteína caveolina-1 en las células de Leydig y detectamos que su fosforilación es modulada por la interacción del colágeno tipo IV con las integrinas de la subfamilia β1. Por otro lado, observamos que la expresión de la proteína StAR (“steroidogenic acute regulatory”) no solo es modulada por la vía de señalización del receptor de LH/hCG, sino que en su regulación participan las MAPK, en particular las MEK 1-2. Asimismo, demostramos que si bien el colágeno tipo IV, a través de las integrinas, es el principal responsable de la activación de las proteínas ERK 1-2, PKA también interviene en la fosforilación de las mismas, siendo capaz de modular la cascada de señalización de las MAPK en las células de Leydig de rata estimuladas con hCG. En conclusión, los resultados obtenidos en este trabajo, nos demuestran que las proteínas de la MEC, son capaces de modular la adhesión, la diferenciación celular y la expresión de integrinas. El colágeno tipo IV, a través de la interacción con las integrinas de la subfamilia β1 y mediante un mecanismo FAK independiente, activa a las proteínas ERK 1-2, las cuales regulan negativamente la expresión de la proteína StAR, inhibiendo la producción de testosterona. Además, observamos que el estímulo de LH/hCG al aumentar la producción de AMPc, activa a la PKA, la cual interacciona con la cascada de señalización de las MAPK, ejerciendo una regulación dual sobre la esteroidogénesis en las células de Leydig de rata adulta Los resultados presentados en esta tesis contribuyen a ampliar los conocimientos sobre la influencia que las proteínas de la matriz extracelular ejercen sobre la morfología y diferenciación de las células de Leydig. Demuestran además, que el colágeno tipo IV, es capaz de modular, in vitro, la esteroidogénesis de las células de Leydig de la rata adulta.

Abstract:
It is well known that extracellular matrix (ECM) proteins are involved in the regulation of the differentiation, morphogenesis, proliferation and migration of cells. Most cell-ECM interactions are mediated by integrins, which in turn regulate the reorganization of the cytoskeleton, intracellular transport of ions, lipid metabolism, activation of kinases and genic expression. In the last decade, integrins have also been shown to have an important role in reproductive processes including fertilization, implantation and embryogenesis. In the testis, the regulation of different processes as the development, differentiation and steroidogenesis of Leydig cells depends on the concerted action of gonadotrophic hormones and a large variety of local factors produced in an autocrine or paracrine way. In spite of the information in the paragraph above, few studies have attempted to elucidate the role of ECM proteins in the functioning of Leydig cells. These cells are surrounded by ECM proteins organized as a continuous or discontinuous basement membrane. The objective of this thesis was to study the influence of ECM proteins on the morphology, cell adhesion, integrin expression and steroidogenesis of Leydig cells. The experimental model used was the culture of adult rat Leydig cells, using laminin-1 , type IV collagen and fibronectin as substrates. We observed that the Leydig cells cultured on laminin-1, type IV collagen and fibronectin present a larger number of cytoplasmic processes than those cultured on glass. We also demonstrated that the cells adhesion to the substrate occurs rapidly and that their degree of adhesion varies depending on the substrate to which they adhere. We also observed that, although integrins are constitutively expressed in Leydig cells, their expression increases in response to the adhesion of the cells to ECM proteins. In relation to the effect of ECM proteins on steroidogenesis, we demonstrated that type IV collagen and fibronectin inhibit the production of testosterone of the Leydig cells of adult rat, both in basal conditions and when stimulated with hCG, and that this phenomenon does not result from a cytotoxic effect. On the other hand, laminin-1 used as substrate had no modulatory effect on testosterone production. With respect to the mechanism of steroidogenesis, we demonstrated that the inhibitory effect of type IV collagen and fibronectin occurs after AMPc production step and before the entry of cholesterol into the internal mitochondrial membrane. We also demonstrated that type IV collagen is able to modulate the expression of the StAR (steroidogenic acute regulatory) protein, involved in the transport of cholesterol to the internal mitochondrial membrane. In view of these results, we decided to analyze some of the intracellular signal pathways, activated by collagen IV and able to negatively regulate the steroidogenesis of Leydig cells. We demonstrated that the negative modulation of type IV collagen on the steroidogenesis of rat Leydig cells is mediated by the activation of tirosine kinases. In particular, we found that the interaction of type IV collagen with β1 subfamily integrins activates the Ras/MEK/ERK cascade, these being responsible for the negative modulation of type IV collagen in steroidogenesis. We also demonstrated that ERK 1-2 proteins are involved in the focal adhesions induced by interaction between Leydig cell integrins and ECM proteins. Integrins have the capacity to activate the MAPK signal pathway through different mechanisms. One of these occurs through the activation of Ras proteins, and may or may not depend on the FAK protein. We demonstrated that in rat Leydig cells, the activation of the MEK cascade induced by type IV collagen is triggered basically through an independent FAK mechanism. The activation of the ERK 1-2 proteins independent of FAK could be mediated by a protein: caveolin-l. We identified the caveolin-l protein in the Leydig cells and found that its phosphorilation is modulated by the interaction of type IV collagen with β1 subfamily integrins. We also observed that the expression of the StAR protein is not only modulated by the signal pathway of the LH/hCG receptor, but that the MAPK participate in its regulation, particularly MEK 1-2. We also demonstrated that although type IV collagen, through the integrins, is the main factor in the activation of ERK 1-2 proteins, PKA also intervenes in their fosforilation and is able to modulate the MAPK signal cascade in rat Leydig cells stimulated with hCG. In conclusion, the results of this work demonstrate that ECM proteins are able to modulate adhesion, cell differentiation and integrin expression. Type IV collagen, through interaction with β1 subfamily integrins and by an independent FAK mechanism, activates the ERK 1-2 proteins that negatively regulate expression of the StAR protein, inhibiting testerosterone production. We also observed that LH/hCG stimulation, by increasing AMPc production, activates PKA; interacting with the MPAK signal cascade, exerting dual regulation on the steroidogenesis of adult rat Leydig cells. The results presented in this thesis contribute knowledge of the influence of extracellular matrix proteins on the morphology and differentiation of Leydig cells. They also show that type IV collagen is capable of modulating, in vitro, the steroidogenesis of adult rat Leydig cells.

D’Accorso, Norma Beatriz. "Síntesis de algunos aldobiononitrilos benzoilados con unión 1-4, correlaciones espectroscópicas y reacciones de degradación de los mismos" (1987). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El objetivo del presente trabajo fué la síntesis de algunos aldobiononitrilos benzoilados con unión glicosídica 1-4, los estudios espectroscópicos de estos compuestos y la aplicación de las degradaciones de Wohl y de Zemplén a algunos de los mismos. Los antecedentes sobre la síntesis de derivados benzoilados de mono- y disacáridos y de derivados acilados de aldononitrilos y de aldobiononitrilos se agrupan en el CAPITULO I, que consta de 9 páginas. Los CAPITULOS II a V abarcan la discusión de los resultados de este trabajo, con las referencias bibliográficas correspondientes. El CAPITULO II contiene los estudios de los espectros de resonancia magnética nuclear protónica de derivados benzoilados de mono-y disacáridos con la finalidad de determinar su conformación preferencial en solución. Este dato resultaba de gran utilidad para las asignaciones de las señales de r.m.n.-^13C. En literatura existían algunos datos de r.m.n.-^1H de derivados benzoilados de monosacáridos cíclicos, pero los datos sobre derivados benzoilados acíclicos eran escasos. Los compuestos acíclicos perbenzoilados presentan giros que permiten evitar interacciones 1-3, y algunos de estos giros resultan distintos a los abservados en derivados acetilados o libres. A partir de las constantes de acoplamiento se propuso la conformación preferencial en solución de: - algunas penta-O-benzoíl-aldohexosas; - octa-O-benzoíl-derivados de celobiosa, lactosa y maltosa; - hepta-O-benzoíl-3-O-metil- derivados de celobiosa y lactosa; - per-O-benzoíl-alditoles; - per-O-benzoíl-aldononitrilos; - algunos 5-tetrazoles; - algunos 5-tetrazoles; - octa-O-benzoíl-celobiononitrilo, octa-O-benzoíl-lactononitrilo y octa-O-benzoíl-maltononitrilo; - octa-O-benzoíl-3-O-B -D-glucopiranosil-D-arabinitol, octa-O-benzoíl-3-O-6-D-galactopiranosil-D-arabinitol y octa-O-benzoíl-3-O-alfa-D-glucopiranosil-D-arabinitol. (El CAPITULO II consta de 65 páginas). En el CAPITULO III presentamos la asignación de los espectros de r.m.n.-^13c de derivados benzoilados de monosacáridos y de disacáridos. En literatura no se encontraban datos de r.m.n.-^13C de derivados benzoilados de monosacáridos, que nos hubieran permitido llegar a una correcta asignación de los derivados benzoilados de disacáridos, y tuvimos que realizar un estudio exhaustivo de estos compuestos. Algunas de las muestras nos fueron facilitadas, y otras hubo que sintetizarlas. A1 realizar la síntesis de la penta-O-benzoíl-alfa-D-galactopiranosa según la téncica dada en literatura, pudimos demostrar que en realidad se trataba de un estructura furanósica. Este hecho se confirmó también por sus espectros de r.m.n-^1H y de masa. Se estudiaron y asignaron los espectros de r.m.n.-^13C de los per-benzoíl-alditoles, que resultaban de interés para poder predecir los espectros de compuestos estructuralmente relacionados. Se adjudicaron los espectros de los aldononitrilos benzoilados, de los 5-tetrazoles, de los octa-O-benzoí1-aldobiononitrilos, de los octa-O-benzozíl-3-O-hexopiranosil-D-arabinitoles y de los 5-tetrazoles. Es importante destacar que se presentan correlaciones entre los grupos de compuestos, muchas de ellas de utilidad para la predicción de otros espectros, algunas de las cuales se presentan en esta tesis. Es válido destacar que el estudio conformacional resultaba indispensable para las predicciones de los espectros de r.m.n. -^13C, ya que los cambios conformacionales afectan a1 espectro en muchos casos en mayor medida que un cambio configuracional. (El CAPITULO III consta de 82 páginas). En el CAPITULO IV se presentan los estudios de los espectros de masa de derivados benzoilados de hidratos de carbono. En literatura existía abundante información sobre derivados metilados y acetilados, pero no existían datos sobre derivados benzoilados. Se iniciaron los estudios de los espectros de monosacáridos cíclicos perbenzoilados, piranosas y furanosas. Se proponen los esquemas de fragmentación y se reacionalizaron sus pérdidas y se proponen los iones diagnósticos que permiten diferenciar aldohexopiranosas, aldohexofuranosas y aldopentopiranosas perbenzoiladas. Se analizaron los espectros de masa de octa-O-benzoíl-disacáridos con unión glicosídica 1-4 y se proponen los esquemas de fragmentación de los mismos, que involucran la ruptura de la unión glicosídica, además de la fragmentación de los iones que se dan con un esquema similar a1 planteado para los monosacáridos. Se analizaron también los espectros de derivados parcialmente benzoilados de disacáridos. Se analizaron los espectros de masa de perbenzoíl-alditoles y se proponen los esquemaa de fragmentación de los mismos. Se correlacionaron los espectros de masa de los per-benzoíl aldononitrilos y 5-tetrazoles. Se remarcan aquellos iones que se presentan en ambos grupos de compuestos. A partir de todos estos antecedentes pudimos analizar los espectros de masa de los octa-O-benzoíl-aldobiononitrilos y de los octa-O benzoíl-3-O-hexosil-D-arabinitoles. En muchos casos las fragmentaciones de estos compuestos conducen a iones cuyas fragmentaciones se habían analizado para los monosacáridos, y se hace referencia a las mismas, sin dar su detalle. Se indican las fragmentaciones generales que no habían sido detalladas anteriormente. El análisis del espectro de masa del 1,1-bis(benzamido)-1-desoxi-3-O-beta-D-galactopiranosi-D-arabinitol llevó a plantear un esquema de fragmentación que es extensible a otros compuestos estructuralmente relacionados. (El CAPITULO IV consta de 85 páginas y contiene 51 esquemas de fragmentación) En el CAPITULO V se presenta el análisis de los resultados experimentales de las síntesis y las reacciones de degradación. Las síntesis de octa-O-benzoíl-aldobiononitrilos dieron altos rendimientos. Las reacciones de degradación de los mismos condujeron a mezclas complejas de piranosas y furanosas. Su análisis se realizó por reducción a 3-0-hexapiranosil-D-arabinitoles y el estudio espectroscópico de los mismos y sus derivados benzoilados. La reacción de Wohl se aplicó a1 octa-O-benzoíl-lactononitrilo que dió un bajo rendimiento en 1,1-bis(benzamido)-1-desoxi-3-O-beta-D-galactopiranosil-D-arabinitol y trazas de N-benzoíl-aldobiosilaminas. La reacción con el octa-O-benzoíl-maltononitrilo solo dio trazas de productos nitrogenados. También se indica aquí la síntesis de algunos derivados benzoilados de monosacáridos cíclicos y acíclicos que se realizaron y para obtener las sustancias de referencia. En el CAPITULO VI se presenta la parte experimental. Los datos se tratan de agrupar en forma de tablas. En el INDICE se indica el contenido de cada capítulo. Para encontrar los datos referentes a una dada sustancia se presenta un índice agrupado en forma de tablas. En un volúmen aparte se adjuntan los espectros de r.m.n.-^1H y ^13C. Esto facilita a1 lector la observación del espectro simultaneamente con el análisis de los datos de tablas o la discusión.(Consta de 109 espectros) En este mismo APENDICE agregamos fotocopias de los trabajos hasta ahora publicados, que se listan a continuación. - SINTESIS DEL 5-TETRAZOL Y DEL 5-TETRAZOL. N. B. D'Accorso,B. N. Zuazo e I M. E Thiel. Anales de la Asoc. Quím. Argent.,70, 793-799 (1982). - MASS SPECTRA OF SOME BENZOYLATED, ACYCLIC-MONOSACCHARIDES. N. B. D'Accorso and I. M. E. Thiel. Carbohydrate Research, 117, 55-68 (1983). - PROTON AND C-13 NUCLEAR MAGNETIC RESONANCE SPECTRA OF SOME BENZOYLATED ALDOHEXOSES. N. B. D'Accorso, I. M. E. Thiel and M. Schüller. Carbohydrate Research 124,177-184 (1983). - ^1H-N.M.R. SPECTRA OF SOME BENZOYLATED DERIVATIVES OF 1-4 LINKED DISACCHARIDES. I. M. Vazquez, N. B. D'Accorso, I. M. E. Thiel and A. M. Schüller. Anales de la Asoc. Quím. Argent., 72 (3), 239-246 (1984). - ^1H-N.M.R. SPECTRA AND CONFORMATION OF SOME PENTA-O-BENZOILHEXONONITRILES AND SOME 5-(PENTA-O-BENZOYL-PENT-1-YL)TETRAZOLES. I. M. Vazquez, N. B. D'Accorso,I. M. E Thiel and A M. Schüller. Anales de la Asoc. Quím. Argent., 72 (6), 583-589 (1984) - MASS SPECTRA OF SOME PER-O-BENZOYLATED ALDOPYRANOSES AND ALDOFURANOSES. N. B. D'Accorso and I. M. E. Thiel. Carbohydrate Research, 129, 43-53 (1984). - ^1H-N.M.R. SPECTRA AND CONFORMATION OF SOME BENZOYL ALDITOLS. N B. D'Accorso and I. M. E. Thiel. Rev. Latinoamericana de Química, 17, 39-41 (1986). - ^13C-N.M.R. SPECTRA OF SOME BENZOYLATED DERIVATIVES OF CELLOBIOSE, LACTOSE, AND MALTOSE. N. B. D'Accorso, I. M. Vazquez and I. M. E. Thiel. Carbohydrate Research, 156, 207-213 (1986).

D’Adamo, Paola. "Claves utilizadas por la avispa social Vespula germanica durante el forrajeo" (2002). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
La avispa social Vespula germanica es una especie invasora exitosa. En la mayoría de los países que ha invadido, se la considera perjudicial por causar daños económicos y ecológicos, además de ser una especie molesta y poseer una picadura dolorosa. Con el objeto de describir la situación de la especie en nuestro país y ahondar en las causas para su éxito de invasion, en primero lugar realizamos estudios de dieta y de su distribución, utilizando para esto último, un modelo ecoclimático. Los resultados indican que la avispa chaqueta amarilla se encuentra establecida en la Patagonia, donde es considerada plaga, a pesar de que desde el punto de vista ecoclimático ésta no seria un área muy favorable para la especie. Dadas las características de la especie y de los ambientes invadidos, es probable que su comportamiento de forrajeo constituya un factor relevante en su éxito colonizador. Para V.germanica se demostró la existencia de incremento local, un tipo de facilitación social por medio del cual, durante el forrajeo, las avispas son atraídas por conespecíficas a explotar una fuente de alimento. Estudios realizados previamente en la especie han propuesto a las claves visuales como principales responsables del proceso. Sin embargo, a través de varios experimentos nosotros demostramos que las claves olfativas serían las que prevalecen. Las avispas forrajeadoras son atraídas por el olor que emana de sus con-especificas. Los machacados de cabezas de estas avispas atraen conespecíficas desencadenando el aterrizaje y la remoción de fragmentos de cabezas. Los extractos de cabeza, aplicados sobre un papel de filtro desencadenan la atracción y aterrizaje de avispas, y la respuesta comportamental difiere de acuerdo a si el experimento es realizado cerca del nido o en condiciones de forrajeo. Postulamos que existe una feromona vinculada al forrajeo que se encuentra en las cabezas de las obreras de V. germanica. A nivel individual analizamos qué claves (visuales o de micro localización) prevalecen al re-localizar una fuente de alimento. Encontramos diferencias según el origen proteico o carbohidratado de la fuente explotada.

Abstract:
Vespula germanica is a social wasp that has successfully colonized many parts of the world. It affects economic activities and natural communities in invaded countries, and is responsible of painful sting. In order to describe the species situation in our country, we did studies on its diet and on its distribution using an ecoclimatic model. Our results show that yellow jackets are well established in Patagonia, where it is considered a pest, although according to ecoclimatic model this would not be a suitable place for the species establishment. Foraging behaviour probably constitutes a relevant characteristic for wasp invasion success. Local enhancement is a variant of social facilitation in which foragers are attracted by conspecifics exploiting a feeding source. Through a series of experiments we show that odour cues mediate this process. Forager wasps are attracted by the odour elicited by conspecifics. Wasps head squashes attract conspecifics eliciting landing and removal of head fragments. Head extract applied on filter paper attracts forager wasps eliciting landing, but behaviour differs according to the context of proximity to the nest or foraging conditions. We propose that a foraging related pheromone exists on Vespula germanica workers’ heads. We also analysed the cues used by an individual forager to relocate a feeding source. We found differences between the visual and micro-location cues utilised, depending on the type of food (protein or carbohydrates) offered during training sessions.

D’Agostino, Agata Magdalena. "Estudio de los mecanismos moleculares de patogénesis del sarcoma de Kaposi mediados por el Herpesvirus Humano-8/KSHV y su oncogén, el receptor acoplado a proteína G (vGPCR), en modelos animales" (2004). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
KSHV es un oncovirus implicado en Sarcoma de Kaposi (KS) y otros cánceres asociados a SIDA. KS es un neoplasma caracterizado por la proliferación de células ahusadas y la intensa angiogénesis. Los mecanismos a través de los cuales KSHV causa la respuesta angioproliferativa de KS se desconocen y la reproducción de todos los aspectos de KS mediante infección experimental por KSHV aún no ha podido ser demostrada. El receptor acoplado a proteína-G (vGPCR) de KSHV puede estimular cascadas de señalización que inducen angiogénesis y transformación celular. Identificar estas cascadas puede tener significancia terapéutica. Ciclooxigenasa-2 (COX-2) es un medidor involucrado en angiogénesis tumoral que puede ser regulada por antinflamatorios (AINEs). En la primera parte de este trabajo demostramos que vGPCR regula la actividad y la expresión de COX-2 vía ERK-1/2. Encontramos que la inhibición de COX-2 impide la angiogénesis inducida por vGPCR y que la administración del AINE Celecoxib retarda el crecimiento tumoral con disminución en la vascularata y producción de VEGF. Así, COX-2 sería uno de los componentes moleculares del cambio angiogénico de vGPCR y un posible blanco terapéutico. En la segunda parte mostramos que la transfección con KSHV clonado en un Cromosoma Artificial Bacteriano (KSHVBac36) en preparaciones de médula ósea murinas enriquecida en precursores de células endoteliales (mEC) es suficiente para inducir tumorigénesis y llevar al cambio fenotípico angiogénico. Las células mEC transfectadas con KSHVBac36 (mECK36) estaban infectadas con KSHV, secretaban VEGF, eran angiogénicas in vivo e indujeron en ratones inmunodeficientes la formación de sarcomas de células ahusadas vascularizados que expresaban LANA y marcadores característicos de KS. La inhibición de la expresión de vGPCR en las mECK36 utilizando siRNA condujo a la inhibición de su angiogenicidad y tumorigenicidad. Estos resultados definen un modelo animal para estudiar la patogénesis de KS mediada por KSHV y señalan a vGPCR como uno de sus principales oncogenes angiogénicos.

Abstract:
KSHV ia a human oncovirus associated with Kaposi´s sarcoma (KS) an AIDS associated cancer. KS is a neoplasm characterized by proliferation of spindle-shaped cells and intense angiogenesis. The mechanisms whereby KSHV causes KS angioproliferative response are not well defined and the reproduction of KS by experimental KSHV infection has not yet been shown. vGPCR is a G protein-coupled receptor encoded by KSHV that subverts host´s signaling pathways to induced cell transformation and angiogenesis. Cyclooxygenase-2 (COX-2) is a mediator involved in tumor angiogenesis that can be inhibited by NSAIDS. We demonstrated that vGPCR upregulates COX-2 activity and expression, and we found that inhibition of COX-2 by the NSAID Celecoxib impairs vGPCR-driven angiogenesis and tumorigenesis. Taken together these results show that COX-2 is a molecular mediator of vGPCR angiogenicity and potential target for KS therapy. On the second part we show that transfection of KSHV cloned in a Bacterial artificial chromosome (Bac36) into mouse Bone marrow preparations enriched in endothelial cells and its progenitors (mEC) is sufficient to induce tumorigenesis and angiogenesis. mEC transfected with KSHVBac36 (mECK36) were infected with KSHV, displayed high levels of VEGF secretion, were angiogenic in vivo and induced spindle-cell sarcomas expressing KSHV LANA and KS phenotypic markers. The inhibition of vGPCR expression mediated by siRNA led to inhibition of mECK36 angiogenesis and of tumor growth. These results define an animal model of KSHV-mediated KS pathogenesis in vivo and point to vGPCR as one of its major angiogenic oncogenes.

D’Alessio, Ana S. Weber de. "Contribución al estudio de los venenos de serpientes del género Bothrops" (1938). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

D’Alessio, Cecilia. "Rol de los oligosacáridos monoglucosilados en el plegamiento de glicoproteínas en Schizosacchatomyces pombe" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
El retículo endoplasmático (RE) es el compartimiento de varias modificación post-traduccionales y plegamiento de proteínas destinadas a secreción, a membrana plasmática o a organelas del sistema endocítico. Una de las modificaciones post-traduccionales mas frecuentes, la N-glicosilación, está relacionada con el plegamiento de las proteínas ya que sin la adición de N-glicanos, numerosas especies proteicas son incapaces de alcanzar su conformación nativa. Los intermediarios de plegamiento, las proteínas oligoméricas no totalmente ensambladas, las proteínas mal plegadas y los agregados son selectivamente retenidos en el RE. El transporte hacia el aparato de Golgi ocurre solamente cuando las proteínas se han plegado y ensamblado correctamente. El mecanismo que asegura la funcional de las proteínas que salen del RE, ha sido denominado “control de calidad del plegamiento de glicoproteínas". En la mayoría de los eucariotas la N-glicosilación comienza con la transferencia de un oligosacárido de composición Glc3Man9GlcNAc2 desde un intermediario lipídico (dolicol difosfato) a la secuencia Asn-X-Ser/Thr de proteínas nacientes en el RE. Las tres glucosas terminales del oligosacárido transferido son inmediatamente removidas pordos glucosidasas del RE, I y II (GI y GII). Parodi y colaboradores demostraron la existencia de una reglucosilación transitoria de los N-oligosacáridos libres de glucosa dentro del RE por la acción de la enzima luminal UDP-Glc:glicoproteína glucosiltransferasa (GT). Esta enzima glucosila glicoproteínas, en ensayos libres de células, sólo si éstas han sido previamente desnaturalizadas. Por esta característica especial se ha propuesto a la GT como posible sensor del estado conformacional de las glicoproteínas en el RE. Los oligosacáridos monoglucosilados, que se generan por la deglucosilación parcial por la GI (encargada de remover la glucosa más externa) y GII (encargada de remover las dos glucosas más internas) y por la actividad de la GT, permiten la interacción de las glicoproteínas con dos lectinas del RE, la calreticulina (CRT) y/o calnexina (CNX). Esta interacción facilita el plegamiento de las glicoproteínas, evita la formación de agregados, permite la interacción de las glicoproteínas unidas a CNX con otras chaperonas del RE y constituye un mecanismo para retener en el RE las estructuras proteicas mal plegadas. En la levadura de fisión Schizosaccharomyces pombe existen todos los componentes del modelo de control de calidad de glicoproteínas en el RE, ya que esta levadura expresa actividad GT y posee un homólogo de CNX. Además, el oligosacárido transferido a polipéptidos nacientes es Glc3Man9GlcNAc2 y este compuesto es procesado en el RE a Man9GlcNAc2, indicando la presencia de actividades GI y GII. La disrupción del gen que codifica la CNX en S. pombe ha resultado ser letal para estas células. Sin embargo una mutante deficiente en actividad GT (mutante gpt1) obtenida en nuestro laboratorio no posee ningún fenotipo distintivo. Esto planteó el interrogante de cuál es la importancia y el rol de la formación de oligosacáridos monoglucosilados en el plegamiento de glicoproteínas en estas levaduras. En este trabajo se realizaron además experimentos destinados a analizar si una conformación mal plegada es condición suficiente para para la glucosilación de todos los olgosacáridos N-unidos a proteínas por la GT in vivo, tal como ocurre in vitro. En este trabajo de Tesis se presentan evidencias genéticas de la estructura heterodimérica propuesta para la GII. La GII de S. pombe está compuesta de dos subunidades GIIα y GIIβ. La actividad catalítica está presente en la subunidad GIIα, que carece de señal conocida para permanecer en el RE. La subunidad GIIβ posee en el extremo C-temiinal el tetrapéptido VDEL, homólogo a conocidas señales de retención/recuperación en el lumen del RE. En S. pombe la CNX es esencial para la viabilidad celular. Sin embargo, la disrupción del gen que codifica para GIIα abolió totalmente la formación de oligosacáridos monoglucosilados, tanto por deglucosilación del compuesto transferido a las proteinas como por reglucosilación mediada por la GT. Estas mutantes de S. pombe resultaron viables a todas las temperaturas ensayadas. Esto significa que la CNX y no los oligosacáridos monoglucosilados son esenciales para esta levadura en condiciones normales de crecimiento. Si bien la formación de oligosacáridos monoglucosilados no es esencial para la viabilidad celular, células defectivas total (mutantes GIIα-) o parcialmente (mutantes GIIβ- o GT-) en la formación de oligosacáridos monoglucosilados presentaron una acumulación de proteínas mal plegadas en el RE en ausencia de estrés adicional. Esto se evidenció por la inducción de mensajeros que codifican para chaperonas del RE (respuesta a proteínas mal plegadas o UPR). La acumulación de proteínas mal plegadas en estas mutantes se evidenció además por la presencia en sus glicoproteínas de una mayor proporción de oligosacáridos con estructuras específicas del RE y no del aparato de Golgi. Los glicanos sintetizados por estas mutantes son similares a los obtenidos cuando se agregó a células salvajes un agente reductor que provoca un mal plegamiento en las glicoproteínas que se están sintetizando en el RE. Tal como fue descripto para células de mamifero, en células intactas de S. pombe la formación de oligosacáridos monoglucosilados reduce la velocidad de plegamiento, pero incrementa su eficiencia. Esto fue evidenciado por una comparación de la cantidad de carboxipeptidasa y la velocidad de llegada a la vacuola de esta proteína en células salvajes y GIIα-. Este resultado indicó que los oligosacáridos monoglucosilados están involucrados en la facilitación del plegamiento de las glicoproteínas de S. pombe. La formación de proteínas mal plegadas causada tanto por el agregado de una agente que impide la formación de puentes disulfuro (ditiotreitol) a células intactas, como por un shock de calor, no fueron condiciones suficientes para la glucosilación in vivo mediada por la GT. dichos tratamientos no resultaron en un aumento generalizado de la glucosilación. La explicación para este resultado podría estar en las restricciones de la GT para reconocer sus sustratos: aparentemente la GT sólo glucosilaría glicoproteínas que presentan una estructura parcial o un intermediario del plegamiento con flexibilidad limitada, ausente en las formas completamente desplegadas. Estos resultados sugieren que las glicoproteínas que se pliegan en el RE son sometidas al sistema de control de calidad del plegamiento en las etapas finales del proceso de plegamiento.

Abstract:
The endoplasmic reticulum (ER) is the intracellular location of some post-translational modifications and folding of proteins destined to secretion, to the plasma membrane or to organelles of the endocytic system. N-glycosylation is one of the most frequent modifications. This modification is related to protein folding, as many species are unable of properly fold without N-glycan addition. Folding intermediates, incomplete assembled oligomers, misfolded proteins and aggregates are selectively retained in the ER. Transport to Golgi compartments takes place only if proteins are in their native conformation and properly assembled. The mechanism that ensures the functionality of proteins that exit the ER, is the so called “quality control of glycoprotein folding”. In most eucariotic cells, N-glycosylation is initiated on transfer of an oligosaccharide (Glc3Man9GlcNAc2)from a lipid-carrier (dolichyl diphosphate), to the sequence Asn-X-Ser/Thr in nascent proteins in the ER. The three terminal glucose residues of the transferred oligosaccharide are irnmediately trimmed by two ER glucosidases, I and II (GI and GII). Parodi and coworkers demonstrated the occurrence of transient reglucosylation of glucose-free N-linked oligosaccharides in the ER by a lumenal enzyme, the UDP-Glc:glycoprotein glucosyltransferase (GT). This enzyme glucosylates glycoproteins in a cell-free assay, only if they have been previously denatured. For this especial feature, GT has been proposed as a possible sensor of glycoprotein conformation in the ER. Monoglucosylated oligosaccharides can be generated by partial deglucosylation by of GI (that removes the most terminal glucose) and GII (that trims both inner glucose residues), or by GT. Monoglucosylated oligosaccharides allow interaction of glycoproteins with two ER lectins, calnexin (CNX) and/or calreticulin (CRT). This interaction facilitates glycoprotein folding, avoids aggregation of glycoproteins, allows interaction of bound glycoproteins with the ER chaperone system and constitutes a retaining mechanism of misfolded glycoproteins in the ER. The fission yeast Schizosaccharomyces pombe has the three elements of the quality control of glycoprotein folding in the ER as this yeast expresses a GT activity and a CNX homologue. In addition, the oligosaccharide transferred to nascent polypeptides is Glc3Man9GlcNAc2 and this compound is processed in the ER to Man9GlcNac2 indicating the presence of both GI and GII activities. The disruption of the gene encoding CNX in S. pombe has been shown to be lethal. However, a mutant lacking GT activity (gpt1) obtained in our laboratory had no discernible phenotype. This raised the question of the actual importance of monoglucosylated oligosaccharide formation in glycoprotein folding in this yeast and its role in glycoprotein folding. Further work reported here was performed in order to test whether a misfolded conformation is a sufficient condition for in vivo glucosylation of all N-linked oligosaccharides by GT as was observed in vitro. Results presented herein provide genetic support for a proposed heterodimeric structure of GII. S. pombe GII appears to be composed by two subunits GIIα and GIIβ. Catalytic activity is contained in GIIα subunit, which in turn lacks any known ER retrieval signal. GIIβ has in its C-terminal sequence the tetrapeptide VDEL, homologous to known lumenal ER retrieval signal. A model is proposed in which GII β-subunit functions as the retrieval element of GII α-subunit to the ER. CNX resulted essential for S. pombe viability. However, GIIα subunit disruption completely abolished the formation of monoglucosylated oligosaccharides, both by deglucosylation of the transferred compound as by GT-mediated reglucosylation. This mutant was viable at all temperatures tested. It was concluded that CNX but not monoglucosylated oligosaccharides is essential for this yeast. Although monoglucosylated oligosaccharide formation is not essential for cell viability, cells totally (GIIα minus) or partially (GIIβ or GT minus) defective in monoglucosylated oligosaccharide formation showed accumulation of misfolded proteins in the ER in the absence of any exogenous stress. This was evidenced by the induction of mRNAs encoding ER chaperones (unfolded protein response). Besides, misfolding of glycoproteins in those mutants was reveled by the much higher proportion of protein-linked oligosaccharides having ER-specific structures and lacking Golgi-specific modifications. Glycans synthesized by the mutants displayed sizes similar to those found when a reducing agent that prevents proper protein folding in the ER was added to wild type cells. As was described for mammalian cells, also in intact S. pombe cells formation of monoglucosylated oligosaccharide decreased the folding rate but increased the folding efficiency as judged by comparison of amounts and rates of arrival of carboxypeptidase Y to the vacuole in wild type and GIIα minus cells. This result indicated that monoglucosylated glycans are indeed involved in glycoprotein folding facilitation in the fission yeast. Protein misfolding caused both by addition of a reagent that prevents disulfide bond formation (dithiothreitol) to intact cells as well as by a heat shock treatment were not conditions sufficient for in vivo GT-mediated glucosylation. Those treatments did not result in a generalized glycoprotein glucosylation. The explanation for this result may lie in GT restrictions to recognize its substrates. Apparently GT only glucosylates partially structured conformers or folding interrnediates bearing a limited flexibility that is absent in less structured species. These results suggest that glycoproteins are mainly subjected to ER quality control in the last folding stages.

D’Alessio, Juan T.. "Sobre mediciones de la tensión superficial" (1939). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Registro Cita

D’Andrea, Carlos Antonio. "Fórmulas explícitas para el cálculo de resultantes y aplicaciones" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
Presentamos fórmulas para calcular resultantes ralas como cociente de dos determinantes, que extienden a las fórmulas de Macaulay clásicas. En el caso homogéneo, presentamos fórmulas a la Macaulay más compactas. Mostramos además que estas fórmulas explicitan el único morfismo no trivial de un complejo cuyo determinante es la resultante. Además, se exploran las extensiones a resultantes ralas en dos variables. Como aplicaciones, se obtiene una familia de operadores de proyección aplicando perturbaciones a resultantes ralas, que proveen de un método general para calcular todas las raíces aisladas de sistemas polinomiales, aún ante la presencia de componentes de dimensión positiva. También, se estudia la validez de la implicitación de superficies racionales por el método de superficies móviles, mostrando relaciones entre resultantes y algunos determinantes que se usan en la formulación del método, y consiguiendo extenderlo al case de superficies no propiamente parametrizadas, en ausencia de puntos base.

Abstract:
We present formulas for computing sparse resultants as a quotient of two determinants, which extend the classical Macaulay formulas. In the homogeneous case, we present compact Macaulay style formulas. We show that these latter make explicit the unique non trivial morphism of a complex whose determinant equals the resultant. We also explore the extensions of these formulas to bivariate sparse resultants. As applications, we obtain a family of projection operators applying perturbations on sparse resultants, which yield a general method for computing all isolated roots of polynomial systems, even in the presence of excess components or other degenerate inputs. In addition, we study the validity of the implicitization of rational surfaces by the method of moving surfaces, give some relationships among resultants and some determinants arising in the formulation of that method, and extend it to the case of not properly parametrised surfaces without base points.

D’Angelo, Maximiliano A.. "Identificación y caracterización de enzimas involucradas en la regulación de los niveles de AMPc en Trypanosoma cruzi" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo se caracterizó la adenilil ciclasa TczAC. Se determinó que el gen que codifica para esta enzima se encuentra altamente conservado con los genes de adenilil ciclasas identificados en otros tripanosomátidos, es parte de una familia multigénica y se expresa en todos los estadios del ciclo de vida de T. cruzi. Se determinó que el producto de este gen es una enzima funcional capaz de complementar una cepa de levaduras carente de actividad adenilil ciclasa. Esta enzima es específica para AMPc, presenta una mayor actividad en presencia de Mn+2 que de Mg+2 y es inhibida por Zn+2 y el inhibidor del sitio P, 2'-deoxy-3'AMP. Por otro lado, el Ca+2 estimula la actividad de la misma manera independiente de calmodulina. Utilizando la técnica de doble híbrido en levaduras se demostró que TczAC dimeriza a través de su dominio catalítico y se identificaron 13 clones capaces de interaccionar específicamente con la misma. En particular se analizó la interacción de TczAC con el clon correspondiente a la proteína de flagelo paraflagellar rod. Asimismo, TczAC fire expresada en una cepa mutante de levaduras S. pombe. Los resultados obtenidos con estos experimentos sugieren que este sistema de expresión podría ser de gran utilidad para la búsqueda de inhibidores específicos. Por otra parte, se identificó y caracterizó el gen TczPDE que codifica para la primer fosfodiesterasa de AMPc de T. cruzi. Se determinó que este gen es parte de una familia multigénica y codifica para una proteína que presenta un posible péptido señal, dos dominios GAF de unión a GMPc y un dominio catalítico altamente conservado. La funcionalidad de esta proteína se confirmó por ensayos de complementación en levaduras carentes de actividad fosfodiesterasa. En dichas levaduras TczPDE se encontró asociada a la fracción particulada, mostró una alta afinidad por el AMPc y no fue capaz de hidrolizar GMPc. Por ensayos de Western blot se confirmó la asociación de TczPDE a la membrana de las levaduras y se observó que esta se encuentra fuertemente asociada a la misma. La localización subcelular de TczPDE en T. cruzi se estudió por fraccionamiento subcelular e inmunolocalización. Estos experimentos demostraron que TczPDE se encuentra localizada en la membrana plasmática del parásito y concentrada en el flagelo.

Abstract:
In this work we have characterized TczAC adenylyl cyclase. The gene encodes an enzyme which is highly conserved with the adenylyl cyclase genes identified in other trypanosomatids, is part of a multigene family and is expressed in all the stages of T. cruzi life cycle. The product of this gene is a functional enzyme that can complement a yeast strain deficient in adenylyl cyclase activity. The enzyme is specific for cAMP, has a higher activity in the presence of Mn+2 instead of Mg 2+, and is inhibited by Zn+2 and the P-site inhibitor, 2'-deoxy-3 'AMP. On the other hand, Ca+2 stimulates its activity in a calmodulin independent manner. Using the yeast two-hybrid technique it was demonstrated that TczAC dimerizes through its catalytic domains, and 13 clones that interact with this protein were identified. In particular, the interaction of TczAC with the flagellar protein paraflagellar rod was analyzed. Besides, TczAC was expressed in a S. pombe mutant strain. The results obtain in these experiments suggest that this expression system could be useful for the identification of specific inhibitors. Apart from that, the gene TczPDE that codes for the first cAMP phosphodiesterase of T. cruzi was identified and characterized. It was found that this gene is part of a mutligene family and encodes a protein that presents a putative signal peptide, two GAF domains for cGMP binding and a highly conserved catalytic domain. The functionality of this protein was confirmed by complementation assays in yeasts lacking phosphodiesterase activity. In these yeasts TczPDE was found to be associated to the particulate fraction, showed a high affinity for CAMP and was not able to hydrolyze cGMP. By Western blot analysis, the association of TczPDE to the yeast membrane was confirmed, and it was observed that this enzyme is strongly associated to it. The subcellular localization of TczPDE in T. cruzi was studied by subcellular fractionation and immunolocalization. These experiments demonstrated that TczPDE is localized in the plasma membrane of the parasite and concentrated in the flagellum.

D’Onofrio, Alejandro. "Dispersión de trazadores en flujos de soluciones poliméricas en medios porosos" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

pdf

Resumen Registro Cita

Resumen:
En este trabajo se presenta el estudio de las propiedades de transporte a través de un medio poroso de un trazador salino diluido en una solución de polímero. Los medios porosos son fabricados a partir de microesferas de vidrio y pueden ser de simple o doble porosidad. El objetivo del trabajo es utilizar las caracteristicas reofluidizantes de las soluciones de polímero para aumentar la influencia de las heterogeneidades del medio poroso sobre el campo de velocidades de flujo y reforzar el contraste entre las zonas de alta y baja velocidad en el medio. Los experimentos consisten en la inyección de una solución salina de NaNO3 en el medio. La concentración de polímero permanece constante durante los mismos. En la entrada del medio se induce una variación abrupta de concentración de sal. A la salida del mismo se obtienen las curvas de dispersión (variación de la concentración de sal en función del tiempo) por medio de medidas conductimétricas. El análisis de las curvas se realiza por medio de ajustes con modelos teóricos (en ciertos casos mediante la evaluación directa del ancho del frente) para determinar un coeficiente de dispersión (la dispersividad es igual a la relación entre el coeficiente de dispersión y la velocidad media del flujo). Los experimentos han sido realizados tanto con la técnica clásica de “transmisión”, donde se deja que el frente de variación de concentración atraviese completamente la muestra, como con la técnica de “eco” en la cual se invierte la velocidad de flujo antes que el frente de variación de concentración llegue a la salida del medio y en ese caso se detecta la variación de concentración en la entrada de la muestra porosa. Esta ultima técnica nos provee información complementaria sobre la presencia eventual de heterogeneidades a gran escala (zonas estratificadas o canales de diferente permeabilidad) donde la contribución al aumento de la dispersividad es particularmente reversible en relación al cambio de la dirección del flujo. En este trabajo fueron usadas soluciones reofluidizantes de un polisacárido neutro (escleroglucano) de diferentes concentraciones: el exponente característico del decrecimiento de la viscosidad con la velocidad de deformación varió entre 0.4 y 0.8 en el rango donde la variación puede ser aproximada por una ley de potencia. Las medidas de esfuerzos normales muestran que estas soluciones son muy poco elásticas. Los medios porosos de simple porosidad utilizados están formados por empaquetamientos dc esferas de vidrio de un diámetro típico de l mm. Los medios de doble porosidad están formados por granos porosos de diámetro dg= 500 μm y de porosidad 30% que se obtiene por medio del sinterizado de esferas de vidrio de diámetro 110 μm (los blocs sinterizados son partidos y tamizados para obtener el grano poroso). Debido al pequeño contrataste de densidad asociado a la presencia del trazador, podemos observar inestabilidades inducidas por la gravedad según el sentido del contraste de densidad entre el fluido inyectado y desplazado (el flujo es dirigido hacia arriba). Las medidas de dispersividad, realizadas con las soluciones Newtonianas, confirman la existencia de un aumento mucho mas fuerte de la dispersividad con el numero de Péclet, para medios de doble porosidad que para los de simple. Esto se observa para Pe del orden de 10 (el numero de Péclet Pe = Udg/Dm caracteriza la relación entre los efectos de la convección y la difusión molecular). Este aumento es debido a la transición entre los regímenes de transporte convectivo y difusivo en el interior de los granos y al hecho que a velocidades elevadas, donde el transporte convectivo es dominante, el contraste de velocidad entre el interior y el exterior de los granos aumenta la dispersión en relación al los medios de simple porosidad. Esta característica de aumento neto de la dispersividad con el número de Péclet son globalmente conservadas para los medios de doble porosidad que hemos utilizado con soluciones poliméricas (siempre en el caso de configuración de desplazamiento estable). Para las soluciones de polímero, el resultado mas marcado es el hecho que, a un numero de Péclet dado, observamos un aumento neto de la dispersividad con la concentración de polímero (es decir con el exponente característico n de la variación de la viscosidad). Este resultado es atribuido a las características reofluidizantes de la solución que incrementa el contraste entre los caminos de alta y baja velocidad que pudieran encontrarse dentro de un medio poroso. El aumento es particularmente importante a números de Péclet intermedios (del orden de algunas decenas) y, en este dominio de velocidades, las curvas de dispersión se apartan notablemente de las predicciones clásicas de la ecuación de convección - difusión Gaussiana. Observamos un arribo anticipado del frente de variación de concentración - índice de la presencia posible de caminos de flujo preferencial en el interior del medio -. Una primer explicación natural es pensar en un aumento del contraste de velocidad entre el interior y exterior de los granos debido a las soluciones de polímero. Este aumento debería, sin embargo, en este caso ser particularmente fuerte a números de Péclet muy elevados lo cual no se observa experimentalmente. Por otra parte, este aumento significativo de la dispersividad se observa igualmente en los medios de doble porosidad y simple porosidad. Una hipótesis complementaria es la presencia de heterogeneidades a gran escala (canales preferenciales, estratificación, capas sobre las paredes ...) pero corresponden a contrastes relativamente débiles de permeabilidad. La influencia de las mismas pueden ser considerablemente amplificadas por las soluciones reofluidizantes. Esta hipótesis a sido evaluada comparando los resultados de las mediciones de dispersión en transmisión y eco: la dispersividad medida con esta ultima técnica puede en efecto ser reducida por la reversibilidad parcial del escalamiento del frente de concentraciones asociado a presencia de heterogeneidades a gran escala. Hemos efectivamente observado una reversibilidad parcial neta de la dispersión para las soluciones de polímero mas concentradas (η = 0.6) y mas débil para las menos concentradas (η = 0.4) y despreciable para las soluciones newtonianas. Estos resultados tienden a confirmar la influencia - al menos parcial - de grandes heterogeneidades. Ello indica igualmente que un aumento considerable de la sensibilidad de las medidas de dispersión a la presencia de heterogeneidades débiles pudo ser obtenida utilizando soluciones reofluidizantes en lugar de fluidos newtonianos elegidos en primer lugar para el transporte del trazador. Los electos de inestabilidad inducidos por gravedad en las configuraciones de flujo gravitacionalmente inestable son, sobre todo, importantes cuando las velocidades del flujo son bajas y los poros de gran tamaño. Para las soluciones newtonianas las inestabilidades no son observables para números de Péclet superiores a 200: las variaciones de concentración verifican la ecuación de convección - difusión clásica (curvas de dispersión Gaussiana) y el coefieiente de dispersión medido es el mismo en la configuración estable e inestable de desplazamiento de los fluídos. Para los números de Péclet entre 50 y 200, las curvas poseen forma Gaussiana pero la dispersividad es superior en el caso inestable. Para números de Péclet inferiores a 50, las curvas de dispersión se apartan sensiblemente de la solución de la ecuación de convección - difusión . Para los fluídos newtonianos (agua y solución de glicerol de viscosidad 7x10ˉ³ Pa.s), los valores de dispersividad dependen únicamente del número de Péclet tanto en el caso estable como en el caso inestable. Para los experimentos realizados con las soluciones de polímero reofluidizante, las inestabilidades aparecen para un número de Péclet mas bajo que para las soluciones newtonianas. La diferencia es mas notoria cuando el exponente característico de la viscosidad es mas elevado. Este resultado indica que el parámetro dominante que controla la aparición de las inestabilidades es la viscosidad de los fluídos y no la difusión molecular (esta posee el mismo valor para las soluciones poliméricas que para el agua, mientras que la viscosidad aumenta). Ha sido posible definir un criterio de aparición de las inestabilidades a partir del parámetro G que representa la relación entre los gradientes de presión de origen hidrostático y viscoso (en el caso de soluciones reofluidizantes, el termino de viscosidad es calculado a partir del valor de la viscosidad efectiva en el medio poroso, valor deducido de medidas de gradientes de presión en función del caudal). Hemos encontrado un valor único critico Gc que caracteriza la apararon de las inestabilidades para diferentes soluciones Newtonianas y no-Newtoniana utilizadas en nuestros experimentos.

Abstract:
In this work the study of the transport properties of a saline tracer diluted in a polymer solution through a porous medium is presented. The porous media are manufactured with glass micro-spheres and they can be of simple or double porosity. The aim of this work is to use the characteristic non-newtonian of the shear thinning polymer solution to increase the influence of the heterogeneities of the porous media on the flow velocity field, and to reinforce the contrast between the high and the low velocity zones in the media. The experiments consist of the injection of a saline solution of NaNO3 in the media. The polymer concentration remains constant during the experiences. At the inlet of the sample an abrupt variation of the salt concentration is induced. At the outlet of the sample the dispersion curves are obtained (variation of the salt concentration as a function of the time) by conductimetric measures. The analysis of the curves is carried out by means of adjustments with theoretical models (in certain cases by means of the direct evaluations of the Width of the front) to determine a dispersion coefficient (The dispersivity is the ratio between the dispersion coefficient and the flow velocity average). The experiments have been carried out whith the classic "transmission" technique, where the concentration variation front is allowed to cross the sample completely, and with the " echo " technique in which the flow velocity is inverted before the front of concentration variation arrives at the exit of the media, and in that case the concentration variation is detected at the inlet of the porous sample. The last technique provides us complementary information on the eventual presence of heterogeneities on a great scale (stratified areas or channels with different permeability) where the contribution to the increase of the dispersivity is particularly reversible in relation to the change of the flow direction. In this work shear thinning solutions of a neuter polysaccharide (escleroglucano) with different concentrations were used: the characteristic exponent of the viscosity decay with the deformation velocity varied between 0.4 and 0.8 in the range where the variation can be approached by a power law. The measures of normal efforts show that these solutions are not greatly elastic. The simple porosity media used are formed by packagings of glass spheres with a typical diameter of l mm. The double porosity media are formed by porous grains with diameter dg = 500 mm and with porosity 30% that one obtains by grinding sintered glass spheres with diameter 11O mm (the sintered blocks are left and sifted to obtain the porous grain). due to the small density contrast associated with the presence of the saline tracer, we can observe instability induced by the gravity according to the sense of the density contrast between the injected fluid and the displaced fluid (the flow is directed up). The dispersivity measures carried out with the Newtonian solutions, confirm that the increase of the dispersivity with the Péclet number for double porosity media is stronger than for those of simple porosity. This is observed for Pe of the order of 10 (the Péclet number, (Pe = Udg/Dm). this Pe characterises the ratio between the convection effects and the molecular diffusion effects). This increase is due to the transition between the convective transport and diffusive transport inside the grains and to the fact that high velocities, where the convective transport is dominant, the velocity contrast between the inside and the outside of the grains increases the dispersion in relation to the simple porosity media. This Characteristic, the net dispersivity increase with the Péclet number is globally conserved for the double porosity media that we have used (always in the stable displacement cases). The result, for polymer solutions, remarked the fact that, to a given Péclet number, we observe an increase of the dispersivity with the polymer concentration (with the characteristic exponent "n" ofthe viscosity variation). This result is attributed to the shear thinning character of the solution that increases the contrast between the high velocity and low velocity paths inside the porous media. The increase is particularly important to Péclet numbers of the order of dozens, and in this velocity domain the dispersion curves move notably away from the classic predictions of the convection-diffusion equation. We observe a premature arrival of the concentration variation front, index of the possible presence of preferential paths flow in the media. We find a first natural explanation in the increase of the velocity contrast between the inlet and the outlet of the grains due to the polymer solutions. This increase, however, would have been particularly strong to a high Péclet number that which is not observed experimentally. On other hand. this significant dispersivity increase is observed equally in the double and simple porosity media. A complementary hypothesis is the presence of heterogeneities on a great scale (preferential channels, stratification, layers on the walls...) but they correspond to relatively weak permeability contrast. The influence of the same ones can be amplified considerably by the shear thinning solutions. This hypothesis had been evaluated comparing the results of the dispersion measurements in transmission and echo: the dispersivity measured with the echo technique can be reduced by the partial reversibility of the scaling from the concentration front associated with the heterogeneities presence on a great scale. We have observed net partial dispersion reversibility indeed for the polymer solution more concentrated (n=0.6) and weak for the less concentrated ones (n=0.4) and worthless for the newtonian solutions. These results confirm -at least partially- big heterogeneities. It indicates that a considerable sensibility increase of the dispersion measures is due to the presence of weak heterogeneities that are observed using shear thinning solutions. The instabilities driven by gravity effects in the flow configurations are mainly important to a low flow velocity and for great pore size. For the newtonian solutions the unstable effects are not observable for Péclet numbers superior to 200: the concentration variation verifies the classic convection-diffusion equation (gaussian form ofthe curves) and the dispersion coefficient measured is the same for unstable and stable configuration of the fluid displacement. For Péclet numbers between 50 and 200, the curves have a gaussian form but the dispersivity is superior in the unstable cases. For Péclet numbers inferior to 50, the dispersion curves move sensibly away from the gaussian form. For newtonian fluid (glicerol solution in water with viscosity 0.007 Pas), the dispersivity values depend only on the Péclet number as much in the stable case as the unstable case. For the experiment carried out with shear thinning polymer solution, the instabilities appear for a Péclet number lower than the newtonian case. The difference is more notorious in high values of the characteristic exponent "n" of the polymeric solutions. This result indicates that the dominant control parameter of the appearance of the instabilities is the fluid viscosity and not the molecular diffusion. It has been possible to define an approach of appearance of the instabilities starting from the parameter G that represents the ratio among the gradients of hydrostatic pressure and the viscous pressure (in the case of shear thinning fluid, the viscosity is calculated starting from the effective viscosity value in the porous media, deduced from the pressure gradients measurements as a function of the flow). We have found a unique value of G that characterizes the appearance of instabilities as much for newtonian as non-newtonian fluids used in our experiences.

http://digital.bl.fcen.uba.ar

Biblioteca Central Dr. Luis Federico Leloir - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales - Universidad de Buenos Aires
Intendente Güiraldes 2160 - Ciudad Universitaria - Pabellón II - C1428EGA - Tel. (54 11) 4789-9293 int 34