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Tesis > AUTOR

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Babaro, Juan Pablo. "Teorías de campos conformes no racionales formuladas en variedades de topología no trivial" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis estudiamos una familia de teorías conformes no-racionales en dos dimensiones formuladas sobre supeficies de Riemann de topología no-trivial. Más precisamente, nos dedicamos en superficies con bordes a y superficies cerradas con número de género mayor que uno. Este conjunto de teorías corresponden a una generalización de otras teorías de campos conformes importantes, tales como la teoría de campos de Liouville y el modelo deWess-Zumino- Novikov-Witten, los cuales tienen importantes aplicaciones en materia condensada y teorías de cuerdas. Calculamos valores de expectación de campos primarios en el disco y funciones de correlación en el toro, relacionando estas cantidades con observables de la teoría de Liouville. El desarrollo de estos cálculos se realizó empleando tanto el formalismo de integral funcional como el formalismo del gas de Coulomb, siempre chequeando la consistencia de ambos métodos. También discutimos dos aplicaciones para nuestros resultados: su uso en el estudio de D-branas en teoría de cuerdas en dos y tres dimensiones, y su uso como herramienta para realizar cálculos en teorías superconformes en cuatro dimensiones con supersimetría N = 2. Los resultados de esta tesis están basados en trabajos del autor.

Abstract:
In this thesis we study a family of non-rational conformal field theories in two dimensions formulated on Riemann surfaces of non-trivial topology. More precisely, we study surfaces with boundaries and closed manifolds with genus number grater than zero. This set of theories generalizes important conformal theories, such as Liouville Field Theory and the Wess-Zumino- Novikov-Witten model, which have important applications in condensed matter and string theory. We compute expectation values for primary operators in the disk and correlation functions in the torus, relating these quantities with observables of the Liouville theory. The computations are done both in the path integral formalism and in the Coulomb Gas formalism, then checking their consistency. We also discuss two applications for ours results: their use in the study of D-branes in string theory in two and three dimensions, and their use as a tool to perform computations in four dimensional super-conformal field theories with N = 2 supersymmetry. The results of this thesis are based on works of the author.

Baccarini, Leticia Cecilia. "Interacción de la proteína quinasa dependiente de cAMP con sus genes blanco en Saccharomyces cerevisiae" (2014-03-20). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La regulación de la expresión génica mediada por proteínas quinasas es esencial para la correcta adaptación celular frente a un estímulo extracelular. En S. cerevisiae, la PKA está formada por tres subunidades catalíticas: Tpk1, Tpk2 y Tpk3 y una subunidad regulatoria: Bcy1. Existen antecedentes que indican la asociación de Tpk1 y Tpk2 a la cromatina durante el crecimiento en glucosa, glicerol y estrés oxidativo (Pokholok et al, 2006). El rol de la vía cAMP/PKA sobre la expresión génica en glucosa ha sido ampliamente estudiado (Livas et al, 2011). Por otro lado, se ha descripto, que la activación de la PKA limita la expresión de genes de respuesta a estrés (Leadsham et al, 2010; Ferretti et al, 2012). Durante el desarrollo de esta tesis analizamos la unión de Bcy1, Tpk1 y Tpk2 a diferentes regiones génicas en respuesta a estrés osmótico y oxidativo. Describimos que tanto las subunidades catalíticas como la subunidad regulatoria de la PKA se encuentran asociadas tanto a regiones transcriptas como a promotores de los genes blancos de manera estrés-dependiente. Además analizamos el requerimiento de la actividad quinasa y el papel de Bcy1 en la asociación de las Tpks a la cromatina. Versiones inactivas de Tpk1 y Tpk2 no se asociaron a la cromatina. La deleción de Bcy1 promueve una mayor asociación de Tpk1, mientras que anuló la asociación de Tpk2. Luego analizamos el posible rol de las Tpk en el remodelado de la cromatina en respuesta a estrés a través del análisis de la cinética de unión de factores remodeladores de la cromatina a las regiones donde encontramos asociadas a Tpk1 y Tpk2. Observamos unión transitoria a la cromatina de Arp8, Rsc1 y Snf2 seguido temporalmente por la asociación de las Tpk. Observamos también, la ocupación concomitante de Tpk2 y el factor de transcripción de unión al DNA Rap1. En conjunto los datos existentes y los resultados obtenidos en esta tesis sugieren que la PKA podría participar en la expresión génica mediante fosforilación in situ de los reguladores transcripcionales o de la cromatina. La distribución núcleo-citoplasmática permite regular la actividad diferencial de muchas proteínas quinasas. Hemos analizado la localización subcelular de las subunidades de PKA y su mecanismo de transporte durante estrés. Hemos observado que Tpk1-GFP y Tpk3-GFP acumulan en el núcleo post-estrés oxidativo y osmótico, sin embargo Tpk2- GFP y Bcy1-GFP no cambian su acumulación nuclear. El análisis cinético de la acumulación nuclear de Tpk1 mostró mayor velocidad en respuesta a estrés osmótico versus oxidativo. Hemos determinado que la acumulación nuclear de Tpk1, Tpk2, Tpk3 y Bcy1 es un mecanismo de transporte activo. Sorprendentemente, cada una de las subunidades de PKA es importada al núcleo por diferentes carioferinas. Por otra parte, las cepas defectivas en carioferinas las cuales impiden la acumulación nuclear específicamente de Tpk1 o Tpk2 no mostraron asociación a la cromatina las Tpks, lo que sugiere el requerimiento de acumulación nuclear de las subunidades catalíticas para la asociación a sus genes blancos.

Abstract:
Regulation of gene expression by intracellular stimulus-activated protein kinases is essential for cell adaptation to environmental changes. There are three PKA catalytic subunits in S. cerevisiae: Tpk1, Tpk2 and Tpk3 and one regulatory subunit: Bcy1. Previous data indicates that Tpk1 and Tpk2 were found associated to the chromatin during growth on glucose, glycerol and oxidative stress (Pokholok et al, 2006). Using ChIP-real time assay we analyzed the Bcy1, Tpk1 and Tpk2 association to 5 genes regions in response to osmotic and oxidative stresses. We had demonstrated that both catalytic and regulatory subunits of PKA were associated to transcribed regions and promoters of target genes in a stress dependent manner. Furthermore we analyze the requirement of kinase activity and the role of Bcy1 protein on Tpk chromatin association. Inactive versions of Tpk1 and Tpk2 do not associate to chromatin. Deletion of BCY1 promotes higher Tpk1 association, whereas it abolished Tpk2 association. We then analyze the possible role of Tpk on chromatin remodeling in response to stress conditions. We analyze the kinetics of binding chromatin remodelers in the regions bound by Tpk1 and Tpk2 in response to stress. During stress stimulus there is a transient binding to chromatin of Arp8, Rsc1 and Snf2 - chromatin remodelers followed temporarily by Tpk association. We also observe cooccupancy of Tpk2 and DNA-binding transcription factor Rap1. The role of cAMP / PKA on gene expression in glucose has been extensively studied (Livas et al, 2011). However PKA activation limits the expression of stress responsive genes (Leadsham et al, 2010; Ferretti et al, 2012). These results suggest that PKA could participate in gene expression by in situ phosphorylation of transcriptional or chromatin regulators. Actually it is known that a single protein kinase distributed dynamically between cytoplasm and nucleus, can regulate target genes expression by both nuclear and cytoplasmic signaling mechanisms. Thus, the nucleus-cytoplasmic kinases transport would be important to regulate differential activity in both compartments. Here we analyze stress subcellular localization of PKA subunits and their transport mechanism, using fluorescence microscopy. We observed that Tpk1 and Tpk3 accumulate in the nucleus post-oxidative and osmotic stress however Tpk2 and Bcy1 not change their nucleus-cytoplasmic distribution, staying preferentially nuclear. Our results over Tpk1 stress re-localization kinetics suggest that under osmotic stress is necessary its faster nuclear accumulation. We determined that Tpk1, Tpk2, Tpk3 and Bcy1 nuclear accumulation is ATP dependent suggesting an active transport mechanism. Surprisingly, we found that each PKA subunits is transported into the nucleus by different karyopherins. Moreover, karyopherin mutant strains which prevent nuclear accumulation of Tpk1 or Tpk2 prevented its association with chromatin, suggesting that nuclear accumulation of catalytic subunits to association to their targets genes is required.

Bach, Ana Josefina. "Descubrimiento de patrones temporales en un corpus de letras de música folklórica y del rock rioplatense" (2016-10-07). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bach, José María. "Ensayos de eliminación de fluor y vanadio, en aguas de consumo, empleando bauxita activada" (1939). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bachmann, Sandra D.. "Caracterización bioquímica y molecular de nucleósido difosfato quinasas de Solanum tuberosum (StNDPKs): análisis de su expresión en la planta de papa en respuesta a estreses" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La capacidad de respuesta de una planta ante los cambios ambientales circundantes asegura su supervivencia. Los mecanismos de respuesta a estres biótico y abiótico están regulados por vías que dependen de la activación de genes en la cual una red de transducción de señales abarca desde la percepción de las señales hasta la expresión de genes de respuesta permitiendo la adaptación de la planta a su entorno, debiendo para ello integrar las señales externas e internas. Las nucleosido di fosfato quinasas (NDPKs) son enzimas que transfieren el fosfato γ de nucleósidos tri fosfatos (NTPs) a nucleósidos di fosfatos (NDPs) a través de un intermediario fosforilado en una histidina conservada, participando de la red de comunicación energética intracelular y pudiendo alterar el pool de NTPs. En plantas se han visto recientemente involucradas en varias cascadas de señalización. El objetivo general del trabajo es caracterizar las isoformas de NDPK en plantas de papa (S. tuberosum, var. Spunta) y estudiar su participación en la percepción de señales ambientales, analizando su expresión en respuesta a señales de estrés biótico y abiótico. La hipótesis planteada es que, dado que en toda situación de estrés subyace un compromiso energético y considerando que las NDPKs poseen actividad de fosfo-transferasa, éstas podrían estar involucradas en las respuestas a estímulos ambientales. A partir de los EST correspondientes a isoformas de NDPKs (STMED71, STMHY37) detectados en los microarreglos TIGR 10K de ARNm de brotes de papa cultivados en luz/oscuridad, se clonó de la secuencia codificante completa de StNDPK1 (GB FJ743686) a partir de brotes de papa y se sub-clonó un fragmento de la secuencia codificante de StNDPK2 (GB JF832386) a partir de una biblioteca de estolones. Se comparó la expresión de ambas en los distintos tejidos vegetativos y reproductivos de la planta y en tres estadios de tuberización por RT-PCR semi cuantitativa. StNDPK1 se expresa con distintos niveles de ARNm tanto en los tejidos como en los estadios de tuberización, mientras que StNDPK2 se expresaría en algún estadio de estolón tuberizante que no se pudo determinar. El análisis in silico de la secuencia aminoacidica de StNDPK1 muestra que tiene 238 amino ácidos de longitud, un peso molecular aproximado de 26 kDa y un punto isoeléctrico de 9.24. Codificaría para una proteína mitocondrial, el péptido señal comprendería los primeros 56 aa y el PM de la proteína madura sería de aprox. 20 kDa. La proteína recombinante StNDPK1 marcada con seis histidinas (6xHis) en su N-terminal producida se analizó por Western blot. Un anticuerpo anti-His detectó una banda de 26 kDa, mientras que un anticuerpo anti-NDPK1 dirigido contra el extremo Cterminal de la proteína reveló la banda de 26 kDa y una banda de 18kDa que podría corresponder a la proteína madura. Se detectó actividad de NDPK en extractos crudos y fracciones mitocondriales de brotación tubérculos, pero no en fracciones de cloroplastos. Además, los ensayos de Western blot realizados con el anticuerpo específico antiNDPK1 detectó la enzima en la fracción mitocondrial. El análisis filogenético de la proteína muestra que StNDPK1 está directamente emparentada con NDPK de Spinacia olaracea (que localiza en cloroplastos) y que posee un ancestro común con las otras isoformas de NDPKs de localización mitocondrial (AtNDPK3, BrNDPKIII y PsNDPK3). Además se pudo clonar la secuencia genómica completa de Stndpk1 (GB GU144806) de 3358 nts, posee 7 exones y 6 intrones. El Southern Blot usando como sonda la secuencia codificante de StNDPK1 sugiere que este gen pertenece a una familia multigénica. Por otro lado, se obtuvo el promotor de éste gen de 2385 pb cuyo análisis in silico revela la presencia de elementos regulados por luz, frío, daño mecánico, respuesta a defensa y dos sitios reguladores de los niveles transcripcionales (CAATbox y 5UTR Py-rich stretch). Dado que se disponía de mayor información respecto de la estructura del gen y de los elementos regulatorios que contiene la isoforma 1 de StNDPK y considerando que ésta tenía un perfil de expresión menos complejo que la isoforma 2, se realizaron los estudios de expresión en condiciones de estrés abiótico y biótico sólo para la isoforma 1. Los resultados de las RT-PCR semi-cuantitativas muestran que el nivel de ARNm de StNDPK1 aumenta en la exposición de plantas a oscuridad por tiempos cortos, mientras que en la exposición a bajas temperaturas se produce una disminución inicial de la expresión para luego recuperar los niveles normales. Se observó que tanto en el tratamiento con daño mecánico como el agregado de AJ (10μM) producen un aumento del mensajero de StNDPK1. Por otro lado, se midió actividad de NDPK en extractos de proteínas nativas de fracciones mitocondriales y de cloroplastos; tanto el extracto crudo, como la fracción mitocondrial presentan actividad de NDPK, sin embargo en la fracción de cloroplastos no se detectó actividad alguna. El análisis bio-informático sugiere que las dos isoformas, son de localización sub-celular. Pero en particular, StNDPK1 fue detectada por Western blot en la fracción mitocondrial donde también se midió la actividad enzimática; por lo que StNDPK1 sería una isoforma que localiza en la mitocondria. Al menos dos isoformas de NDPK en plantas de papa muestran un patrón muy diferente de expresión, StNDPK1 tiene diferentes niveles de expresión en tejidos, pero su expresión es ubicua, mientras StNDPK2 muestra un patrón más restringido y sólo se expresa en ciertas etapas de estolones, lo que sugiere que posiblemente su expresión esté asociada a ciertas etapas del desarrollo del tubérculo. Nuestros resultados sugieren fuertemente que StNDPK1 está dirigida a la mitocondria. El análisis de los datos de Stndpk1 promotor es consistente con los resultados de la expresión, lo que sugiere que StNDPK1 podrían estar involucrados en las respuestas ambientales a la disponibilidad de luz, temperaturas bajas o ataque herbívoro.

Abstract:
The responsiveness of a plant to environmental changes ensures its survival. Response mechanisms to biotic and abiotic stresses are regulated by signal transduction networks that extend from signal perception to gene activation allowing the plant´s adaptation to the environment through a process that integrates external and internal signals. Nucleoside diphosphate kinases (NDPKs) participate in the intracellular energy communication network by altering the nucleoside triphosphates (NTPs) pool; they catalyze the transfer of γ phosphates from NTPs to nucleoside diphosphate (NDPs) through a phosphorylated protein intermediary at a conserved histidine. NDPKs have been involved in several signaling cascades in plants. The overall aim of this study is to characterize NDPK isoforms in potato (S. tuberosum, var. Spunta) plants and to study their involvement in the perception of environmental signals by analyzing their expression in response to biotic and abiotic stress signals. Our hypothesis is that, as in all stress situations there is an underlying commitment to energy; NDPKs could be involved in responses to environmental stimuli. ESTs from NDPKs isoforms (STMED71, STMHY37) were detected in a TIGR 10K microarray probed with total RNA from potato sprouts grown under different conditions (light/dark). StNDPK1 complete coding sequence (GB FJ743686) was cloned using total RNA from potato sprouts while a fragment of StNDPK2 coding sequence (GB JF832386) was amplified from a cDNA library from tuberizing stolons. Bioinformatic analysis suggested that both isoforms have a sub-cellular localization because they don´t have the characteristic YE motif present in cytosolic NDPKs. Phylogenetic analysis shows that StNDPK1 protein is directly akin of Spinacia olaracea NDPK (which is located in chloroplasts) and shares a common ancestor with other NDPK isoforms with mitochondrial localization (AtNDPK3, BrNDPKIII and PsNDPK3). In silico analysis of StNDPK1 sequence shows that it encodes a protein of 238 aminoacids (aa) with a molecular weight of 26 kDa and an isoelectric point of 9.24. A mitochondrial signal peptide of 56 aa was predicted, thus the mature protein would be of approx. 20 kDa. The recombinant StNDPK1protein tagged with six histidines (6xHis) in its N-terminus was produced and analyzed by Western blot. An anti-His antibody detected a 26 kDa band while an anti-NDPK1 antibody directed against the C-terminus of the protein revealed the 26 kDa band and an 18kDa band that could correspond to the mature protein. NDPK activity was detected in crude extracts and mitochondrial fractions from sprouting tubers, but not in chloroplast fractions. In addition, Western blot assays performed with the specific antiNDPK1 antibody detected the enzyme in the mitochondrial fraction. A Southern blot probed with StNDPK1 complete coding sequence suggests that this gene belongs to a multigene family. The complete genomic sequence of Stndpk1 (GB GU144806) and its promoter region (2385 bp) were cloned. Stndpk1 is 3358 bp long and has seven exons and six introns. In silico analysis of the promoter region reveals the presence of elements regulated by light, cold, wounding, defense and two regulatory sites of transcriptional levels (CAATbox and Py-rich 5UTR stretch). We compared the expression of both isoforms in various vegetative and reproductive tissues of the plant and in three stages of tuberization by semiquantitative RT-PCR. StNDPK1 is expressed in all tissues and tuberization stages being most abundant in shoot apex, flowers and leaves, while StNDPK2 expression was undetectable in the tissues analyzed. Expression studies under abiotic and biotic stress conditions were performed only for StNDPK1. Semiquantitative RT-PCR results show that StNDPK1 transcripts increased in plants exposed to short periods of darkness, while exposure to low temperatures produced an initial decrease in the expression recovering after 6hs. Both, mechanical wounding or the addition of 10μM jasmonic acid (JA) produced an increase in StNDPK1´s mRNA. According to our results we propose that at least two NDPK isoforms are present in potato plants that show different expression patterns, StNDPK1 is ubiquitous being most abundant in aerial tissues, while StNDPK2 is restricted to tuberizing stolons. Our results strongly suggest that StNDPK1 is targeted to mitochondria. The data analysis of Stndpk1 promoter is consistent with the expression results, suggesting that StNDPK1 could be involved in environmental responses to light availability, low temperatures or herbivore attack.

Bachrach, Estanislao. "Targeting celular utilizando retrovirus recombinantes : Un estudio "fundamental" y un modelo "aplicado" (O...de como usar el mal para hacer el bien)" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La entrada de los retrovirus a la célula es mediada por interacciones específicas entre la glicoproteina retroviral Env y moléculas de superficie celular expresadas en la membrana. A la hora actual, muy pocos datos concernientes a la cuantificación de este proceso son disponibles. En una primera serie de experimentos, utilizando un sistema de expresión inductible, hemos expresado diferentes cantidades de Env en la superficie de vectores retrovirales derivados del Virus Moloney de la Leucemia Murina (MoMLV) y de vectores lentivirales derivados de HIV-I. Estos vectores han sido utilizados para determinar su capacidad de infección. Los resultados muestran que pocas moléculas Env son suficientes para infectar una célula. Sin embargo, incrementando la densidad de Env se acelera claramente el proceso de infección. Además, a bajas concentraciones de Env expresadas en la superficie viral los datos sugieren que estas moléculas podrian actuar en forma cooperativa. Estas observaciones tienen importantes consecuencias con respecto a la mejor comprensión del proceso natural de infección retroviral, pero también a la hora de diseñar vectores retrovirales aplicados a la transferencia de genes o terapia génica. Por otro lado, con la idea de poner a punto un sistema de targeting celular in vivo, hemos diseñado un vector retroviral competente para la replicación que permite infectar la mayoría de las células del bazo de ratones Swiss recién nacidos, durante la primera semana de infección. Estos vectores serán utilizados proximamente para una primera serie de experiencias de targeting. Estos resultados confirman un modelo de transducción eficaz de células del bazo de ratón en una ventana de tiempo determinada. No pudiendo todavia aplicar estos vectores en clínica, resultan al menos interesantes para análisis de diferenciación y proliferación de células hematopoyéticas en modelos animales, como asi también el estudio del desarrollo y la evaluación de diferentes moléculas que puedan interferir con este proceso.

Badano, María Noel. "Regulación de la linfopoyesis B por la cisteín proteasa catepsina-L" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La catepsina-L (CTSL) es una proteasa lisosomal de expresión ubicua que presenta funciones diversas y específicas. Entre ellas, participa en la selección positiva de las células T CD4+ y en la homeostasis de las células T. Utilizando como modelo experimental ratones CTSLnkt/nkt, portadores de una deleción en el gen que codifica para la CTSL, estudiamos la influencia de la CTSL sobre la homeostasis de las células B. Observamos un incremento en el número de células B en los ganglios linfáticos (GL), el bazo y la sangre periférica (SP) de los ratones CTSLnkt/nkt. En el bazo, este incremento estuvo restringido a las células B transicionales T1 y T2 y a las células B de la zona marginal (ZM). No se detectaron alteraciones en los niveles de proliferación y apoptosis basales de las células B periféricas en los ratones CTSLnkt/nkt. La frecuencia y el número de células B en los distintos estadios de maduración de la médula ósea (MO) en los ratones CTSLnkt/nkt resultó normal. Sin embargo, experimentos in vitro e in vivo demostraron que la linfopoyesis B se encuentra incrementada en los ratones CTSLnkt/nkt. Tanto los precursores de las células B como el microambiente de la MO de los ratones CTSLnkt/nkt contribuyen a dicho incremento. Además la emigración de células B de la MO hacia el bazo se encuentra incrementada en los ratones CTSLnkt/nkt. El conjunto de estos resultados indica que la CTSL regula negativamente la producción y exportación de los linfocitos B por la MO y el número de células B periféricas.

Abstract:
Cathepsin-L (CTSL) is an ubiquitously expressed lysosomal cysteine protease with diverse and highly specific functions. The involvement of CTSL in thymic CD4+ T-cell positive selection and T-cell homeostasis has been previously documented. Using CTSLnkt/nkt mice that lack CTSL activity, we investigated the influence of CTSL activity on B-cell homeostasis. B-cell numbers were increased in lymph nodes (LN), spleen and blood from CTSLnkt/nkt mice. Increases in splenic B-cell numbers were restricted to transitional T1 and T2 cells and to the marginal zone (MZ) cell subpopulations. No alterations in the proliferative or apoptosis levels were detected in peripheral B-cell populations from CTSLnkt/nkt mice. In the bone marrow (BM), the percentage and the absolute number of B cells precursors and mature B cells were not altered. However, in vitro and in vivo experiments showed that BM B-lymphopoiesis was markedly increased in CTSLnkt/nkt mice. Both BM microenvironment and B-cells progenitors would contribute to the increased Blymphopoiesis in CTSLnkt/nkt mice. Besides, BM B-cell emigration to the spleen was increased in CTSLnkt/nkt mice. Overall, our data clearly demonstrate that CTSL negatively regulates BM B-cell production and output and the number of peripheral B cells.

Badin, Pedro Antonio. "Estudio de los ácidos clorogénicos y sustancias relacionadas de la yerba mate" (1961). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se trató de aclarar la estructura de una sustancia cristalina que fué aislada por primera vez de la yerba mate por Hauschild (1935) Y posteriormente por Deulofeu, Fondovilla, Díaz, Mendive (1943). El trabajo se encaminó primero hacia la identificación de la Sustancia Tánica de Hauschild por cromatografía en papel. Se encontró de esta manera que sus Rf no coincidían con los ácidos clorogénico, isoclorogénico, neoclorogénico y cafeico. Por hidrólisis enérgica en medio ácido la Sustancia Tánica de Hauschild produce los ácidos cafeico y quínico, los cuales se reconocieron por cromatografía en papel. Se efectuó la determinación del equivalente de neutralización de la Sustancia Tánica de Hauschild y la curva obtenida demostró que no era un ácido carboxílico. Después de la hidrólisis alcalina suave, en cambio se pudo determinar un equivalente de neutralización 347, que coincide con el de una lactona del grupo de los ácidos clorogénicos. La Sustancia Tánica de Hauschild es por lo tanto una lactona que no es idéntica a la lactona del ácido isoclorogénico, descrita en la literatura. Para poder estudiar los productos de hidrólisis con álcalis diluídos ae hicieron experiencias de distribución en contracorriente con los ácidos clorogénico, isoclorogénico, neoclorogénico y cafeico que permitieron conocer sus máximos de distribución en condiciones experimentales bien normalizadas. Aplicando la partición en contracorriente se pudo comprobar que por tratamiento alcalino suave de la Sustancia Tánica de Hauschild aparecen dos sustancias distintas. La primera de ellas resultó ser ácido neoclorogénico. La segunda no pudo obtenerse en cantidades suficientes como para estudiarla a fondo, pero pudo demostrarse que contenía ácido cafeico en su molécula Provisoriamente se llamó a esta sustancia "sustancia tubos 19-20". Se encontró que la "sustancia T 19-20" es un producto vinculado con el ácido neoclorogénico porque también se lo obtiene al someter a este ácido al mismo tratamiento alcalino. Para su identificación, además de la distribución en contracorriente, se determinaron sus Rf por cromatografía en papel. Por otra parte se realizaron experiencias para comprobar si la "sustancia T 19-20" ya existía como tal en las hojas de yerba mate. El estudio por cromatografía en papel de diferentes extractos reveló que contenían ácido clorogénico, ácido isoclorogénico, ácido neoclorogénico y la "sustancia T 19-20". En ningún caso se pudo encontrar la Sustancia Tánica de Hauschild en cantidades apreciables en alguno de los extractos estudiados. Aplicando la técnica de Sondheimer (1958), con columna de Sílicagel embebida en ácido sulfúrico 0,5 normal, se pudieron separar los ácidos clorogénico, isoclorogénico, neoclorogénico y la "Sustancia T 19-20" de extracto de yerba mate. Las identificaciones se hicieron por cromatografía en papel de cada una de las fracciones recogidos.

Bado, Atilio A.. "Tratamiento de los minerales auríferos refractarios y en especial los de las minas del Intiguasi" (1909). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bado, Silvina G.. "Efectos biológicos de withanólidos de solanaceae sobre plagas agrícolas" (2004). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En la búsqueda de hallar nuevas sustancias con la actividad insecticida de bajo impacto ambiental se estudiaron los efectos biológicos de un grupo de metabolitos secundarios, denominados withanólidos, extraidos de Salpichroa origanifolia, Jaborosa odonelliana y Nicandra physaloides (Solanaceae), así como de compuestos análogos obtenidos por síntesis química a partir del withanólido mayoritario de S. origanifolia (Salpicrólido A), y de los extractos crudos de Physalis peruviana (Solanaceae) sobre las siguientes plagas agrícolas: Tribolium castaneum (Herbst) (Coleoptera: Tenebrionidae); Ceratitis capitata (Wiedemann (Diptera: Tephritidae); Anticaesia gemmatalis (Hûbner) (Lepidoptera: Noctuidae) y Diabrotica speciosa (Germar) (Coleoptera: Chrysomelidae). Los estudios se llevaron a cabo a través de bioensayos que comprendieron la incorporación de los productos en alimento (dieta artificial, discos foliares y bebederos de adultos, según especie insectil) y por aplicación tópica de larvas. Se realizaron observaciones periódicas registrándose el estado morfológico de los individuos, lo que permitió detectar la aparición de demoras en el desarrollo de los individuos tratados mediante la obtención de los parámetros Tiempo de pupación 50% y Tiempo de desarrollo 50% por el método Probit. Otros datos registrados fueron la presencia de alteraciones morfológicas, mortalidad y talla de los individuos, siendo estos sometidos a análisis de varianza y test de Tukey (p ≤ 0,05). Se realizaron bioensayos de preferencia alimentaria de Lema bilineata (Germar) (Coleoptera: Chrysomelidae) con las solanáceas Salpichroa origanifolia, Physalis peruviana y Solanum gilo, analizándose los resultados teniendo en cuenta la constitución química de metabolitos de las tres especies vegetales. Los resultados obtenidos son producto de una interacción química planta-insecto de alta especificidad, considerándose de gran interés la continuación de estudios acerca de su bioactividad.

Abstract:
In the search of new substances with insecticidal activity of low environmental impact, my dissertation focuses on a new group of secondary metabolites group, named withanolides. The withanolides were exracted from Salpichroa odonelliana, Jaborosa odonelliana and Nicandra physaloides (Solanaceae), and analogue compounds were synthesized from the major natural Salpichroa origanifolia withanolide (salpichrolidae A). Their biological effects of these withanolides and from Physalis peruviana (Solanaceae) crude extracts, were studied on the following agricultural pests: Tribolium castaneum (Herbst) (Coleptera: Tenebrionidae), Ceratitis capitata (Wiedemann) (Diptera: Tephritidae); Anticarsia gemmetalis (Hûbner) (Lepidoptera: Noctuidae) and Diabrotica speciosa (Germar) (Coleptera: Chrysomelidae). The studies involved biotests which consisted in the incorporation of the products into food (artificial diet, foliar discs, adult drinking vessels, depending on insect species) and topic application on larvae. Periodical observations of individual morphological stage registered development delays of treated individuals by fifty percent population time and fifty percent development time through Probit method. Other data obtained were morphological alterations, mortality and individual lenght, which were submitted to variance analysis and Tukey tests (p≤0,05). Preference alimentary biotests of Lema bilineata Germar(Coleoptera: Chrysomelidae), with Salpichroa origanifolia, Physalis peruviana and Solanum gilo solanaceae were caried out, whose results were analyzed taking into account the chemical constitution of these three plant species. The information here obtained indicates a high specificity in chemical plant-insect interaction, which could be considered of great interest for further bioactivity studies.

Baeza, Rosa Isabel. "Interacciones entre ß-lactoglobulina y polisacáridos en coloides alimentarios" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se estudió el efecto de diferentes polisacáridos en las propiedades de gelificación y espumado de la β-lg en condiciones de limitada compatibilidad termodinámica (pH > pI). En presencia de polisacáridos no gelificantes (λ-C, XAN y PGA) se observó una disminución en la concentración mínima de proteína necesaria para gelificar y una modificación en la dinámica de gelificación (tiempo de gelificación y velocidad de desarrollo del gel). La presencia de polisacáridos afectó principalmente la etapa de agregación de la proteína, limitante del proceso de gelificación, obteniéndose en presencia de los PS grandes agregados que permitieron la formación de un gel. Se observó en general un aumento en la estabilidad térmica de los sistemas mixtos β-lgPS (6%/0,5%) en relación a la β-lg sola. Esto se manifestó en un aumento de las temperaturas de inicio de desnaturalización y del cambio de entalpía total. Las propiedades de los geles mixtos fueron muy diferentes de acuerdo al polisacárido utilizado. En los geles mixtos β-lg/PGA se observó la mayor variación en las propiedades micro y macroestructurales con el pH, T, concentración de sólidos totales y relación PS/proteína. Las propiedades de las interfases y espumas en sistemas mixtos estarían controladas por la proteína, debido a su mayor actividad interfacial. El efecto de los polisacáridos en las propiedades interfaciales de una proteína es complejo debido a la existencia de por lo menos tres fenómenos: (a) Incompatibilidad entre los biopolímeros (b) fenómenos competitivos o cooperativos (c) interacciones específicas de complejamiento a través de ciertas regiones de la molécula del PS y de la proteína. Al estudiar el efecto de los polisacáridos en monocapas esparcidas de β-lg se observó en general un aumento de la presión superficial y una disminución de la elasticidad y módulo dilatacional elástico. El Manucol ester mostró una mayor actividad superficial que los otros PGA (K-0 y K-LVF) dado que produjo el mayor aumento de la presión superficial. En los estudios de adsorción dinámica (tensiómetro de gota) se observó que el Manucol ester debido a su mayor adsorción entre los PGA es el que produce películas con menor estructuración. Esto se observó en los ensayos dinámicos (G’max más bajo), como en los estudios de monocapas esparcidas donde el Manucol dió los menores valores de módulo dilatacional elástico y de elasticidad. En presencia de la goma xántica los resultados muestran que aún sin penetrar en la interfase, este polisacárido tiene una enorme influencia en la misma, derivada principalmente de un posible complejamiento sobre la proteína en la monocapa y de fenómenos de limitada incompatibilidad tanto en el seno de la solución como en la interfase. Las características reológicas de la película interfacial tienen una profunda influencia en la estabilidad de las espumas

Abstract:
In the present work, the effect of polysaccharides on the properties of β-lg gels and foams was studied in conditions of limited thermodynamic compatibility (pH > pI). In the presence of non-gelling polysaccharides (λ-C, XAN and PGA) it was observed a decrease in the critical concentrations for β-lg gelation and a modification in the dynamic of protein gelation (gel time, rate of development of the gel structure). The presence of polysaccharides greatly affected the aggregation of β-lg, that constituted the limiting step in the rate of gelation process. In the presence of PS large aggregates were formed during heat treatment, that allowed gel formation at low β-lg concentration. In general, the presence of PS increased the thermal stability of B-Ig, as we observed an increase in the onset temperature and enthalpy change of the denaturation process in the mixed systems. The properties of mixed gels were totally different according to the polysaccharide present in the mixed gel. In the presence of PGA it were observed the greatest variations in macro and microstructural properties of gels with pH, T, solids content and PS/β-lg ratio. The properties of β-lg interfaces and foams would be controlled by protein, due to its highest surface activity. The effect of polysaccharide on β-lg interfacial properties is complex due to the existence of the following phenomena: (a) incompatibility between biopolymers, (b) cooperative or competitive adsorption (c) complexation through specific interactions between polar regions on the protein and polysaccharide molecules. In the study of spread monolayers, it was observed an increase in surface pressure and a decrease in elastic dilatational modulus and elasticity. MAN showed the highest increase in surface elasticity, as a consequence of its high surface activity. In the dynamic adsorption experiments (drop tensiometer) MAN was the polysaccharide that produced the less structurated films in the presence of β-lg due to its higher adsorption at the interface in comparison with K-0 and K-LVF. This was manifested by low G’max and the lowest G’ and elasticity obtained in spread monolayers. The presence of XAN produced a large effect in the film properties, even without presenting surface activity by itself. This effect would be due to complexation with protein adsorbed at the interface and limited incompatibility in the bulk solution and in the interface. Rheological characteristics of the film have a large influence on foam stability.

Bagalá, Liria Gabriela. "Las fulguraciones solares como manifestación de reconexión magnética" (1997). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se acepta generalmente que el campo magnético juega un rol fundamental en la física del Sol y de otros objetos astrofísicos, confinando el plasma y acumulando enormes cantidades de energia que luego será liberada en los llamados eventos catastróficos. Las fulguraciones solares son fenómenos que nos brindan una gran oportunidad para comprender cómo actúa el campo magnético durante estos eventos. La comparación entre las manifestaciones de estos fenómenos impulsivos y el modelado del campo magnético de la región activa donde tuvieron lugar, es uno de los tópicos fundamentales de la física solar. Este trabajo nos lleva a analizar las diferentes señales de la actividad de la fulguración, usando observaciones simultáneas en un amplio rango del espectro electromagnético como rayos X, ultravioleta (UV), y diferentes lineas espectrales en el visible, así como magnetogramas vectoriales. Para entender las condiciones que conducen a una dada región activa a producir una fulguración, hemos considerado en esta Tesis el modelado del campo magnético, analizando luego la relación entre su topología y las emisiones radiativas en las diferentes regiones espectrales. La visión convencional de la reconexión magnética está basada principalmente en el estudio en dos dimensiones (2-D) de un punto neutro del tipo X, o en la extensidn de este estudio a 3-D, suponiéndose que en este punto se produce el transporte de flujo magnético a través de las separatrices (lugares donde el mapeo de las líneas de campo es discontinuo). Esta visión resulta demasiado restrictiva cuando se observa la gran variedad de configuraciones magnéticas que se han visto abrillantar. En esta Tesis hemos diseñado un algoritmo, llamado Método de Fuentes (MF), para determinar la topología del campo magnético de las Regiones Activas (ARs). El campo fotosférico observado fue extrapolado hacia la corona usando fuentes magnéticas subfotosféricas, y la topología fue definida a través de la conexión entre las fuentes. Hemos encontrado que los abrillantamientos en Ha, UV y'rayos X estaban ubicados en la intersección de la cromósfera con las separatrices ya definidas. Estos resultados y el conocimiento adquirido sobre las propiedades de la conexión de las líneas de campo, nos permitió generalizar el concepto de separatrices al de "cuasi-separatrices" (CS), y diseñar el nuevo Método de las Cuasi-Separatrices (MCS) para determinar la topología del campo magnético de las ARs. Las CS son regiones donde el mapeo de las líneas de campo cambia drásticamente (y en forma discontinua para el caso particular en el que se comportan como separatrices). El MCS puede ser aplicado a las ARs cuando el campo magnético fotosférico ha sido extrapolado a través de cualquier clase de técnica. Hemos aplicado el MCS a varias fulguracioncs, ocurridas en regiones activas que presentaban muy diferentes configuraciones magnética. Hemos encontrado que la ubicación de los abrillantamientos de la fulguración están relacionados con las propiedades de las conexiones entre las líneas de campo de la configuración magnética subyacente, como se esperaba a través de los desarrollos teóricos en reconexión magnética en 3-D. Las líneas de campo coronal extrapolado que representan a las estructuras involucradas en los eventos analizados tienen sus extremos fotosféricos localizados a ambos lados de las CS. Nuestros resultados apoyan categóricamente que la reconexión magnética es la responsable de este fenómeno coronal.

Abstract:
It is widely admitted that the magnetic field plays a fundamental role in the physics of the Sun and other astrophysical objects, confining the plasma an storing huge amounts of energy that is released in the so called catastrophic events. Solar flares give us the best opportunity to understand how the magnetic field acts during such events. The comparision between observations of these impulsive phenomena, and modeling the magnetic field of the active region is a central topic. This leads us to analyze different manifestations of flare activity using simultaneous observations in a wide range of the electromagnetic spectrum as x-rays, UV (ultraviolet), and different spectral lines in the visible, as well as vector magnetograms. To understand the conditions that lead to flare activity in a given active region, we have considered in this Thesis the modeling of its magnetic field, analyzing afterwards the relationship between its topology and the radiative emissions in different spectral regions. A conventional view of magnetic reconnection is mainly based on dhe two dimensional (2-D) picture of an x-type neutral point, or on its extension to 3-D, and it is thought to be accompanied by flux transport across separatrices (places where the field-line mapping is discontinuous). This view is too restrictive when we realize a variety of solar magnetic configurations that have been seen flaring. We have designed an algorithm, called Source Method (Método de Fuentes, MF), to determine the magnetic topology of Active Regions (ARs). The observed photospheric field was extrapolated to the corona using subphotospheric sources, and the topology was defined by the link between these sources. Hα, UV and X-ray flare brightenings were found to be located at the intersection with the chromosphere of the separatrices previously defined. These results and the knowledge we adquired on the properties of magnetic field-line linkage, led us to generalize the concept of separatrices to "quasi-separatrix layers" (quasi-separatrices, CS), and to design a new method (Método de las Cuasi-Separatrices, MCS) to determine the magnetic topology of ARs. CS are regions where the magnetic field-line linkage changes drastically (and discontinuously when the field-lines behave like separatrices). The MCS can be applied to ARs when the photospheric fields has been extrapolated using any kind of technique. We have applied the MCS to observed flaring regions presenting very different magnetic configurations. We have found that the locations of flare brightenings are related to the properties of the field-line linkage of the underlying magnetic region, as expected from the recent development in 3-D magnetic reconnection. The extrapolated coronal field lines representing the structures involved in the analyzed events have their photosperic footpoints located at both sides of the CS. Our results strongly support the idea that magnetic reconnection is at work in this coronal phenomena.

Baggio, Celia Alcira. "Contribución al estudio de Foeniculum vulgare (hinojo)" (1931). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Baidembaum de Petroni, Ana. "Velocidad de disolución (influencia de la forma del cuerpo utilizado y la temperatura)" (1947). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Baigun, Claudio Rafael Mariano. "Ecología pesquera de lagos y embalses patagónicos (Argentina)" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Esta tesis presenta un análisis de las características ecológico-pesqueras en 54 lagos y embalses patagónicos de Argentina. Mediante Análisis de Componentes Principales se realizó un ordenamiento de los ambientes basado en diferentes características limnológicas, definiéndose tres tipologías básicas de lagos y embalses que definieron ambientes de ecotono, andinos y de meseta, estos dos últimos grupos conteniendo, a su vez, subcategorías. Los lagos y embalses patagónicos exhibieron diferencias a lo largo de un gradiente ambiental definido por las caracteristicas tróficas y edáficas, principalmente y secundariamente por factores morfométricosy climáticos. La composición y abundancia relativa de especies se obtuvieron mediante muestreos intensivos y extensivos, utilizando una batería experimental de enmalladoras. Se analizó el comportamiento de las redes en función de la longitud y peso de los ejemplares capturados y se corrigieron por selectividad, las estructuras de tallas de las especies en aquellos ambientes con muestreos estacionales. Se identificó un total de 10 especies a saber. Odontesthes microlepidotus (pejerrey patagónico), O. bonariensis (pejerrey bonaerense), Percichthys trucha (perca boca chica), P. colhuapiensis (perca bocona), Oncorhynchus mykiss (trucha arco iris), Salmo trutta (trucha marrón), Salvetinus fontinalis (trucha de arroyo), S. namaycush (trucha de lago), Salmo salar sebago (salmón encerrado), Galaxias platei (puyen grande) y Aplochiton sp. (peladila) Los saimónidos, que son especies exóticas en la Patagonia, representaron el 53 % de las capturas experimentales. Los percíctidos, a su vez, constituyeron el 22 % de la captura, mientras el pejerrey patagónico representó el 19 % de las capturas. Dado la importancia que poseen los salmónidos en Patagonia, se analizó el proceso de su introducción y las caracteristicas de sus siembras por tipo de ambiente (lagos, laguna, río y arroyo), provincia y año. Mediante Análisis de Correspondencia se determinó que la trucha de lago y el salmón encerrado estuvieron muy asociados a los ambientes lénticos de grandes dimensiones, mientras la trucha de arroyo resultó caracteristica de los ambientes lóticos de bajo órden y la trucha marrón de ambientes tipo laguna o lénticos someros. La trucha arco iris fue la mas ubicua de las especies. En todos lo ambientes se determinó la longitud y peso medio de las especies y en ambientes con muestreos intensivos se estimaron los factores de condición relativa. Utilizando estructuras de tallas se establecieron los parámetros de crecimiento, tasas de mortalidad natural, edades y longitudes críticas. Tanto la longitud media como infinita estuvieron relacionadas con los niveles de nitrógeno y fósforo total, transparencia y profundidad media, si bien no siempre de manera lineal, sugiriendo la existencia de óptimos ambientales. Para una misma especie, se encontró además, que estos parámetros variaron entre ambientes. El Análisis de Correspondencia mostró la existencia de ambientes con comunidades dominadas por salmónidos y perclctidos-atherínidos respectivamente y también de carácter mixto. La riqueza de especies estuvo correlacionada con el área de los ambientes y se determinó que la abundancia de peces correlacionó positivamente con nitrógeno orgánico total, fósforo total y clorofila y negativamente con la profundidad media y transparencia. Al aplicarse Análisis Discriminante se estableció que la conductividad, temperatura media anual del aire, transparencia del agua, fósforo total y profunddad media resultaron ser las variables que contribuyeron a expficar un 81 % de la variación entre las medas de las abundancias de las especies de las comunidades tipo, siendo el porcentaje de ambientes correctamente clasificado por la función discriminante del 74 %. Los rendimientos pesqueros se obtuvieron mediante el empleo de modelos empíricos derivados de pesquerias deportivas y comerciales de lagos y embalses del hemisferio norte y utizando modelos de producción en aquellos ambientes con mayor información poblacional para estimar el máximo rendimiento sostenible. Se consideró que los ambientes cordileranos generan un rendimiento anual de hasta 5 kg/ha, los de ecotono entre 20-40 kg/ha y los de la meseta de 20a30 kg/ha. Sobre la base de la tipología lacustre desarrollada y de las comunidades definidas se proponen pautas para una gestión que contemple asignar distintas estrategias de uso y aprovechamiento de los recursos, mantener un uso sustentable de aquellas pesquerías con mayor demanda y conservar y mejorar las poblaciones de peces nativos. Se concluyó que la gestión y manejo de los recursos pesqueros patagónicos, a escala regional, debe apoyarse en criterios ambientales y utilizar, a escala local, la información derivada del análisis de poblaciones y de las pesquerías existentes. Asimismo, es necesario modificar los paradigmas de manejo tradicionales que existen en Patagonia, incorporando la conservación dela biodiversidadcomo eje central del uso sustentable de los recursos, así como para desarrollar estrategias de manejo adecuadas.

Abstract:
This thesis presents an analysis of fisheries ecology on 54 Argentine patagonian lakes and reservoirs. An ordination of lakes and reservoirs based on different limnological characteristics was performed using Principal Component Analysis. Three basic types of environments: located on the ecotone, Andean mountains and plateau were defined, having the last two types subcategories. Patagonian lakes and reservoirs exhibited differences across a gradient defined mainly by trophic and edaphic characteristics, and secondarily by morphometry and climatic factors. Species composition and relative abundance were obtained by extensive and intensive sampling designs using experimental gill net gangs. Gill net captures were analyzed as function of length and weight and for those lakes with seasonal information, length structures were corrected by selectivity for the different species. A total 10 species were identified: Odontesthes hatcheri (pejerrey patagónico), O. bonariensis (pejerrey bonaerense), Percichthys trucha (perca boca chica), P. colhuapiensis (perra bocona), Oncorhynchus mykiss (trucha arco iris), Salmo trutta (trucha marrón), Salvelinus fontinalis (trucha de arroyo), S. namaycush (trucha de lago), Salmo salar sebago (salmón encerrado), Galaxias platei (puyen grande) and Aplochiton sp. (peladilla). Salmonids are exotic species in Patagonia and represented 53 % of experimenta capturas. In turn, percictids comprised 22 %, whereas 19 % corresponded to Patagonian pejerrey. Due to the importance of salmonids in Patagonia, the introduction process and stocking characteristics in dfferent waterbodies types (large and small lakes, rivers and creeks) were analyzed. Using Corrrespondence Analysis it was found that S. namaycush and S. salar sebago were strongly associated with large lakes, whereas S. trutta was mostly related to small lakes size. In turn. S. fontinalis appeared mostly associated with creeks, while O. mykiss was the most ubiquitous of the salmonid species. Species mean length and mean weight were estimated for all lakes and reservoirs where extensive information was available and relative condition was determined in those environments with intensive samplings. Using length structure analysis growth parameters, natural mortality rates and critical age and length were estimated. Both mean and infinite length were related to total nitrogen, total phosphorous, transparency and mean depth, although not linearly in all cases, suggesting the existence of ecological optima. It was noted that for same species, natural mortality and critical length varied among environments. Community patterns were analyzed using Correspondence Analysis and showed that several communities were dominated by only salmonids and atherinopsids-percicitids respectively, but other were mixed. Species richness was related to surface lakes and fish abundance was correlated with total organic nitrogen, total phosphorous and clorophyil and negativer with mean depth and transparency. Use of Discriminant Analysis showed that conductivity, mean annual air temperature, transparency and mean depth were the variables that accounted by for 81 % of differences between mean species abundance at each community type. Discriminant function correctly classified 74 % of environments Fish yield were estimated applying empirical models derived from sport and commercial fisheries from Northern Hemisphere lakes and reservoirs. Also production models were used and maximum sustainable yield was estimated for those environments with suitable fishery information. Such estimations allowed to predict that Andean lakes yield up to 5 kg/ha, ecotone lakes may range between 20 and 40 kg/ha and plateau lakes and reservoirs will yield between 20 to 30 kg/ha on annual basis. Based on lake typology and community types, several guidelines were proposed to develop strategies for resource exploitalion, to maintain sustainable use of those fisheries with high fishing pressure and to preserve and enhance natives pecies populations. It was concluded that management of Patagonian fisheries resources requires the application of environmental criteria at a regional scale and use of population parameters and fishery information at a local scale. It is also necessary to modify traditional management paradigms, encompassing the conservation of biodiversity as a main goal for a sustainable resource use and for developing sound management strategies.

Bais, Carlos E.. "El receptor acoplado a proteína G del herpes virus asociado al sarcoma de Kaposi (Kaposi’s Sarcoma associated herpevirus o KSHV) es una oncoproteína viral y un activador angiogénico" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Abstract:
The Kaposi's Sarcoma-associated herpesvirus (KSHV-HHV-8)is a γ-2 herpesvirus that is implicated in the pathogenesis of Kaposi's sarcoma and of primary effusion B-cell lymphomas (PELs), it encode putative oncogenes, and genes that may cause Kaposi's sarcoma lesions by stimulating angiogenesis. The G-protein-coupled receptor encoded by an open reading frame (ORF 74) of KSHV is expressed in Kaposi's Sarcoma lesions and in PELs, and stimulates signaling pathways linked to cell proliferation in a constitutive (agonist-independent) way. Here we show that signaling by this G-Protein Coupled Receptor leads to cell transformation an tumorigenicity, and induces a switch to an angiogenic phenotype mediated by vascular endothelial growth factor (VEGF), an angiogenesis and Kaposi's-spindle cell growth factor. We find that this receptor can activate ( in HEK293T) two protein kinases, JNK/SAPK and p38MAPK, by triggering signaling cascades like the ones induced by inflammatory cytokines that are angiogenic activators and mitogens for Kaposi's sarcoma-cells and B cells. Although this is a suggestive result, when we express KSHV-GPCR in different cell types it activate different signaling cascades, and induces different phenotypes. Using pathway specific dominant negatives and pharmacological inhibitors we show that, in the cell line NIH3T3, the activation of JNK and p38 play a major rol in the molecular mechanism of KSHV-GPCR induced cell transformation. Endothelial cells play a central rol in kaposi's sarcoma pathogenesis. KSHV infects endothelial cells and spindle-like cells, of suspected endothelial origin, wich are present in the kaposi's sarcoma lesions. Therefore, in the context of viral infection, KSHV-GPCR is expressed in endothelial cells. As the expression of KSHV-GPCR has different biological and biochemical effects in different cell types we decide to study the consecuences of KSHV-GPCR expression in human primary endothelial cells. KSHV-GPCR expression in endothelial cells induce strong morphologic changes, modifications in the citoskeleton structure, secretion of metaloproteases and resistence to serum starvation mediated by activation of the PI3K/AKT pathway's. All those changes are reminiscent of the transformed phenotype. Usually, the expression of transforming oncogenes in primary cells induces shortage of telomeres, premature senescence, and cell death. In sharp contrast the expression of KSHV-GPCR in primary endothelial human cells stabilize telomere length, by an alternative mechanism independent of telomerase activity (Alternative Lengthening of Telomeres or ALT ), and inmortalize endothelial cells. To our knowledge this is the first demostration that a protein encoded by KSHV is able to inmortailize primary human cells. Thus using a KSHV oncogenic protein we created a new inmortilized endothelial cell line that we call Ecs-KSGPCR. As predicted by the multistep carcinogenesis hypotesis, our preliminary experiments suggest that the mechanisms of Terminal Proliferation Arrest (TPA) are not completelly supressed by KSHV-GPCR and that additional oncogenic events are necessary in order to fully transform human primary endothelial cells. Further research will determine wether other KSHV's oncogenes can cooperate oncogenicaly with KSHV-GPCR. KDR/VEGFR-2 and Tie-2 are endothelial specific tyrosine kinase receptors that play key roles in vascular biology. These two receptors regulate cell survival and proliferation of endothelial cells during angiogenesis, as a consequence of this they appear to be minimally expressed in quiescent endothelium in vivo, and they are down regulated after a few passages, in vitro, of primary endothelial cells. Surprisingly KDR and Tie-2 are overexpressed in long term cultures of Ecs-KSGPCR. Altough in this work we show that the sustained expression of those receptors is functional, further experiments are required to determine if they play any rol in the inmortalization process. We conclude that KSHV-GPCR is a viral oncogene that can exploit cell signaling pathways to induce oncogenesis and angiogenesis in KSHV-mediated oncogenesis.

Balañá, María Eugenia. "Receptores con actividad de tirosina-quinasa tipo I (erbB-2, erbB-3 y erbB-4) y su ligando, heregulina, en modelos experimentales de carcinogénesis mamaria" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La alta incidencia de cáncer de mama ha creado la necesidad de comprender el funcionamiento de las vias regulatorias de la glándula mamaria. Las alteraciones en la expresión y vias de señalización de los factores de crecimiento parecen críticas en el desarrollo y progresión de las neoplasias de mama. El conocimiento de los circuitos regulatorios del crecimiento celular en la glándula mamaria es de suma importancia para la prevención, diagnóstico y tratamiento del cáncer de mama. Con este objetivo, se ha prestado significativa atención a los miembros de la familia de ligandos de los erbBs y sus receptores con actividad de tirosina-quinasa en células mamarias tanto normales como transformadas. En el presente estudio se demostró la existencia de interacciones entre las vías de señalización de los progestágenos y las vias de la heregulina (HRG) y los erBs en tumores mamarios. Se utilizó un modelo de carcinogénesis hormonal, en el cual el progestágeno sintético acetato de medroxiprogesterona (MPA) indujo la aparición de adenocarcinomas mamarios en hembras vírgenes de la cepa Balb/c. Los estudios de los receptores con actividad de tirosina quinasa tipo I (erbB-2, erbB-3 y erbB-4 ) y de su ligando, HRG, fueron realizados utilizando tres tipos de tumores del modelo de carcinogenesis inducida por MPA: tumores ductales progestágeno- dependientes (HD) con altos niveles de receptores para estrógenos (RE) y progesterona (RP), las variantes tumorales progestágeno - independientes (HI) de los anteriores, que si bien conservan los RE y RP proliferan de manera MPA- independiente y tumores hormono- independientes de origen lobulillar que carecen de RE y RP. Se encontró sobreexpresión de erbB-2 y erbB-3 y bajos niveles de expresión de erbB-4 en todos los tumores estudiados. En todos los tumores lobulillares y en uno de los ductales la sobreexpresión del erbB-4 se debió a amplificación génica. Los mismos patrones de expresión se mantuvieron en los cultivos primarios de células epiteliales provenientes de estos tumores. El MPA indujo una regulación positiva de la expresión de ARNm de HRG, erbB-2 y erbB-3 en las líneas tumorales HD. La progresión hacia un fenotipo progestágeno independiente (HI) se acompañó de una mayor expresión constitutiva de HRG, erbB-2 y erbB-3. La expresión de HRG se detectó en las células tumorales epiteliales, indicando que la HRG actuaría a través de un mecanismo autocrino en cancer de mama. Al tratar células epiteliales malignas con oligodeoxinucleótidos antisentido (ASODN-1) al ARNm del erbB-2, se encontró una inhibición del crecimiento inducido por MPA en las líneas tumorales HD y del crecimiento autónomo de las líneas tumorales HI. Los mismos niveles de inhibición se obtuvieron usando ASODN-2 dirigidos a la secuencia consenso de tirosina- quinasa. El hecho de no haber encontrado efectos sinérgicos al tratar con una combinación de ambos ASODNs y MPA, otorgaria al oncogen erbB-2 una participación crítica en la proliferación mediada por MPA y el crecimiento autónomo de células HI. La HRG indujo un potente efecto proliferativo en en cultivos primarios de células HD y potenció el efecto mitogénico del MPA. En las células HI, que exhibieron fosforilación constitutiva del receptor erbB-2 , el tratamiento con HRG no tuvo efecto alguno sobre la proliferación, aportando evidencias de que la sobreexpresión del erbB-2 y su activación constitutiva conferida a estas células una ventaja proliferativa. El bloqueo de la síntesis endógena de HRG con ASODNs al ARNm de HRG en células HD inhibió el crecimiento inducido por MPA. El tratamiento de estas células tanto con HRG como con MPA resultó en la fosforilación en tirosina del erbB-2 y el erbB-3. Estos resultados indican que la HRG actuaría como mediador del efecto proliferativo del MPA. Se encontraron los mismos resultados in vivo, en tumores proveniente de ratones tratados con MPA. Además, los efectos proliferativos tanto del MPA como de HRG, fueron abolidos cuando las células se trataron con ASODNs al ARNm del erbB-2, otorgando al erbB-2 una participación fundamental en el crecimiento inducido por HRG. Finalmente, el bloqueo de la expresión del receptor tipo l de IGF (IGF-R I) con ASODNs especificos resultó en la completa inhibición de los efectos proliferativos de HRG, demostrando que la presencia de un IGF-R I funcional es esencial para la actividad mitogénica de HRG. Estos resultados aportan la primera evidencia de interacciones entre las vias de transducción de progestágenosy de HRG/erbBs en cáncer de mama y la primera demostración de que los efectos proliferativos de HRG requieren de IGF- R I.

Abstract:
The high incidence of breast cancer has created a compelling need to understand the growth regulatory pathways that function in the mammary gland. Alterations of growth factor pathways appear to be important in the development of breast cancer. The knowledge of the regulatory circuits for cell growth in the mammary gland will help us in prevention, diagnosis and treatment of the disease. The members of the erbB family of ligands and the receptor tyrosine kinases have received significant attention because of their involvement in proliferation of normal and transformed mammary cells. The present study addressed links between progestin and heregulin (HRG)/erbBs signaling pathways in mammary tumors. An experimental model of hormonal carcinogenesis, in which the synthetic progestin medroxyprogesterone acetate (MPA) induced mammary adenocarcinomas in female Balb/c mice, was used. Three types of tumors from the MPA-induced model of mammary carcinogenesis were included in this study. The first type were ductal progestin-dependent (HD) tumor lines that require MPA administration for their in vivo growth and express high levels of ER and PR content. The second were their progestin-independent (HI) variants, that are able to grow in absence of MPA administration. These HI tumors, in spite of an MPA independent pattern of growth, retain ER and PR expression. The third type of tumors analyzed were MPA-induced mammary carcinomas of lobular origin that lack ER and PR expression and evidence a HI behavior. Overexpression of erbB-2 and erbB-3 and low levels of erbB-4 expression were found in all tumors studied. In all HI-lobular tumors and in a HD-tumor the erbB-2 overexpression was due to a gene amplification. The same pattern of expression was maintained in primary cultures of epithelial cells from these tumors. MPA induced an in vivo up-regulation of HRG, erbB-2 and erbB-3 expression in HD tumor lines. Mammary tumor progression to a progestin-independent (HI) phenotype was accompanied by a high constitutive expression of HRG, erbB-2 and erbB-3. The HRG message arose from the tumor epithelial cell, indicating that HRG could play an autocrine role in mammary cancer. Incubation of malignant epithelial cells from HD tumors with antisense oligodeoxynucleotides to erbB-2 mRNA (ASODN-1) resulted in the complete inhibition of MPA-induced growth. Autonomous growth of HI cells was also inhibited by ASODN-1. The same level of inhibition was found using ASODN-2 to a tyrosine kinase consensus domain. The fact that we did not found synergistic effects of antisense oligonucleotides when we treated the cells with the combination of both ASODNs and MPA might confer to erbB-2 protein a pivotal role in tumor MPA-mediated proliferation. Primary cultures of malignant epithelial cells from a HD tumor line were used to investigate HRG involvement on cell proliferation. HRG induced a potent proliferative effect on these cells and potentiated MPA mitogenic effects. In HI cells, that exhibited a constitutive activation of erbB-2 receptor, treatment with HRG did not have effect on cell proliferation, providing evidence that erbB-2 overexpression and constitutive activation confers a proliferative advantage to these cells. Blocking endogenous HRG synthesis by ASODNs to HRG mRNA inhibited MPA-induced cell growth, indicating that HRG acts as a mediator of MPA-induced growth. Treatment of these cells with either MPA or HRG resulted in tyrosine phosphorylation of both erbB-2 and erbB-3. The same results were found in tumors growing in MPA-treated mice. Furthermore, both HRG and MPA proliferafive effects were abolished when cells were treated with ASODNs to erbB-2 mRNA, providing evidence for a critical role of erbB-2 in HRG-induced growth. Finally, blocking type I insulin-like growth factor receptor (IGF-IR) expression with ASODN resulted in the complete inhibition of HRG proliferative effect, demonstrating that a functional IGF-R I is required for HRG mitogenic activity. These results provide the first evidence of interactions between progestins and HRG/ErbB signal tranduction pathways in mammary cancer and the first demonstration that IGF-R I is required for HRG proliferative effects.

Balboa, Luciana. "Alteraciones de las células presentadoras de antígenos en pacientes con tuberculosis pulmonar" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La tuberculosis (TB) es considerada la segunda causa de muerte por infección, causando 1.7 millones de muertes al año. Se estima que un tercio de la población mundial está actualmente infectada con Mycobacterium tuberculosis (Mtb) y que sólo entre el 5‐10% de aquellos infectados desarrollarán la enfermedad, siendo desconocidos los mecanismos que conducen al establecimiento de la enfermedad tuberculosa latente o activa. El éxito de la infección depende principalmente de las estrategias de evasión de la respuesta inmune y de la capacidad de las células presentadoras de antígeno (CPA) de iniciar una eficiente respuesta. En este sentido, las células dendríticas (CD) son críticas para el desarrollo de la respuesta inmune antibacteriana y, por lo tanto, constituyen un blanco fundamental en la inmuno‐evasión inducida por Mtb. Nuestra hipótesis de trabajo es que durante la infección con Mtb se inducirían alteraciones en las CPA determinando la eficiencia de la respuesta inmune así como el curso de la infección; teniendo en cuenta esto, nuestro objetivo fue investigar las alteraciones en la generación de las CPA y su impacto en el desarrollo de la respuesta inmune en pacientes con TB. Para ello, caracterizamos el efecto de la bacteria sobre la diferenciación de monocitos (Mo) en controles sanos, observando que Mtb altera la diferenciación hacia CD a través de la secreción de IL‐10 y la activación de TLR‐2. Las células obtenidas presentaron baja expresión de receptores de entraba para la bacteria, baja capacidad de presentación de antígenos micobacterianos en el contexto de moléculas CD1 y mayor proliferación de clones T específicos de perfil TH2. Por otro lado, caracterizamos el fenotipo y la función de las CD obtenidas a partir de los Mo de pacientes con TB, las cuales presentaron alteraciones en la expresión de los marcadores típicos de CD así como una baja capacidad de presentación de antígenos micobacterianos. Finalmente, los Mo de los pacientes con TB mostraron un alto grado de activación y un enriquecimiento en la población de Mo CD16+, la cual fue previamente descripta como proinflamatoria. Esta población resultó ser menos eficiente para diferenciarse hacia CD y ha sido asociada a la severidad radiológica de la TB y a los niveles plasmáticos de TNF‐α, poniendo de manifiesto la relevancia clínica del hallazgo. En conclusión, en este trabajo de Tesis describimos un nuevo paso en la regulación de la respuesta inmune contra Mtb a través de la modulación de la capacidad de diferenciación de los Mo. Nuestros resultados amplian el conocimiento de los mecanismos involucrados en la evasión de la respuesta inmune ejercida por Mtb y, de ese modo, podrían contribuir al desarrollo de nuevos tratamientos y vacunas en esta enfermedad re‐emergente tanto a nivel local como mundial.

Abstract:
Tuberculosis (TB) is the second most common cause of death from infectious diseases in the world and it causes an estimated 1.7 million deaths worldwide. Overall, one‐third of the world's population is currently infected with the TB bacillus (Mycobacterium tuberculosis) and 5‐10% of those infected individuals may develop TB disease. The exact mechanism leading to latent or acute TB disease is unknown, but it mainly depends on immune evasion strategies displayed by M. tuberculosis and the efficiency of the immune response initiated by antigen presenting cells (APC). As dendritic cells (DC) are critical for initiating a M. tuberculosis‐specific T‐cell response, they may represent a crucial target of M. tuberculosis immune evasion. Our hypothesis is that M. tuberculosis infection could induce alterations in APC, determining the outcome of the infection. Therefore, our aim was to evaluate the impact of M. tuberculosis infection on the generation of APC and on the host immune response. Thus, we characterized the effect of M. tuberculosis in the differentiation of monocytes (Mo) from healthy donors into DC. We determined that M. tuberculosis alters Mo differentiation through IL‐10 release and TLR‐2 activation, promoting the generation of cells with a low expression of M. tuberculosis pattern recognition receptors, a reduced specific CD1‐restricted lymphocytes proliferation, and a preferential polarization towards a TH2 pattern. In this line, the phenotype and function of DC from Mo in TB patients also showed alterations in DC loyal markers and a reduced antigenpresenting capacity. Finally, we found that circulating Mo from TB patients presented an activated phenotype with an enrichment of the proimmflamatory CD16+ subset, being this subset less prone to differentiate into DC. Moreover, the percentages of CD16+ Mo correlated with disease severity and with TNF‐α plasma levels, highlighting the clinical relevance of this finding. In conclusion, we have described a new step in the regulation of the immune response to M. tuberculosis through modulation of Mo differentiation. Our results may contribute to a better understanding of the immune evasion strategies of M. tuberculosis, therefore facilitating the development of effective therapeutic and prophylactic approaches for controlling M. tuberculosis infection.

Balbuena, María Sol. "El uso de información olfativa durante la recolección colectiva de recursos en la abeja Apis mellifera" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En insectos sociales como la abeja Apis mellifera, una eficiente recolección colectiva de recursos requiere de una precisa transferencia de información. La ubicación, productividad y tipo floral a explotar son esenciales para poder encontrar rápidamente el alimento descubierto. Las abejas combinan la transmisión de señales acústico-vibratorias y olfativas con la transferencia de información quimio-sensorial para alcanzar ese objetivo. En esta Tesis se evaluó la correlación entre las interacciones sociales que ocurren durante el reclutamiento hacia un nuevo tipo floral (nueva información olfativa) con las preferencias recolectoras de las abejas reclutadas. Se observó que el tipo de interacción más frecuente es el contacto corporal y que, incluso, no es necesario un contacto trofaláctico directo (transferencia de alimento boca a boca) con la reclutadora para que las abejas reclutadas arriben a la fuente de alimento señalada, como se sugería hasta el presente. Además, las abejas reclutadas mostraron una alta preferencia por aterrizar en los alimentadores que presentaron el mismo olor que el llevado por la danzarina. Por otro lado, con el fin de vincular semioquímicos cuticulares y actividad recolectora, se analizaron los perfiles de los compuestos cuticulares presentes en abejas recolectoras de néctar expuestas a fuentes de alimento de productividad variable. Estos perfiles variaron con la productividad de la fuente explotada, lo cual podría tener implicancias en el reclutamiento de nuevos individuos al sitio recolector. Además, se propuso desarrollar un bioensayo que permita cuantificar la sensibilidad quimiosensorial de abejas de colmena que pueden ser potencialmente activadas por abejas recolectoras a salir al exterior en busca de recursos. Estas abejas fueron capturadas en la colmena y tanto sus umbrales de respuestas al azúcar como sus respuestas espontáneas a olores cuantificadas. Finalmente, se estudió el rol de las experiencias olfativas, adquiridas a edades pre recolectoras dentro de la colmena, sobre el subsiguiente proceso de reclutamiento. Estos resultados indican que las memorias de abejas que aprendieron la asociación olor-recompensa dentro de la colmena, durante el desempeño de tareas de colmena, no relacionadas con la recolección, pueden ser evocadas incluso 8 días después de haber ocurrido el aprendizaje olfativo. En resumen, la transferencia y propagación de información referida al recurso afectaron a distintos grupos operativos de obreras, incluso a los que no estaban involucrados en la recolección. Esto permite suponer que la información floral puede persistir por periodos prolongados dentro de la colonia. A partir de estos resultados se concluye que la abeja Apis mellifera resulta un buen modelo para evaluar el establecimiento de información social a corto y largo término.

Abstract:
Social insects such as the honey bee Apis mellifera rely on accurate information transfer to collectively achieve an efficient gathering of resources. Location, productivity and floral type are essential for finding known food sources rapidly. Honey bees achieve this by combining the transmission of acoustic-vibratory and olfactory cues with the transfer of quimio-sensory information. In this thesis, the correlation between social interactions during recruitment involving new olfactory information and the gathering preferences of the recruited bees was studied. The most frequent type of interaction resulting of recruitment to a novel food source was found to be body contact with the recruiter. This is contrary to what had been previously suggested, direct trophallactic contact (mouth to mouth food transfer) is apparently not necessary. Recruited honey bees showed high preference for landing on feeders that presented the same odor as that borne by the dancer. I also analyzed the profiles of cuticular compounds present in bees from sources with different productivity, aiming to relate recruitment activity with cuticular semiochemicals. These cuticular profiles varied with the productivity of the exploited food source. This could have an effect on the recruitment of new individuals to the gathering site. Furthermore, I proposed the development of a bioassay to quantify the quimiosensory sensitivity of hive bees, taken as the likelihood to leave the hive in search of resources due to activation by foragers. Hive bees were captured and their sugar response thresholds and spontaneous response to odors quantified. Finally, I studied the role of olfactory experiences, acquired inside the hive at preforaging ages in the recruitment process. The results imply that odor-reward associative memories established inside the hive whilst carrying out hive tasks unrelated to gathering can be evoked even 8 days after the olfactory learning occurs. In summary, transfer and propagation of information related to the resource affected different operative groups of worker bees, even those that were not involved in food gathering. Thus, it can be assumed that floral information can persist for prolonged periods inside the colony. In conclusion, the honeybee Apis mellifera is an excellent model for the study of short and long term establishment of social information.

Baldessari, Alicia. "Síntesis de (alquilaminoalquil)-N-Bencilamidas de fórmula general y estudios preliminares de sus propiedades farmacológicas" (1986). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Baldoni, Luciana. "Herramientas sintéticas para la caracterización de galactofuranosiltransferasas y galactofuranosidasas. Glicosidaciones via ioduros de D-galactofuranosilo" (2012-03-23). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La síntesis de oligosacáridos y glicoconjugados con unidades de Dgalactofuranosa (D-Galf) es un área de investigación activa, ya que dicho azúcar se encuentra en glicoconjugados de bacterias, hongos y parásitos, muchos de ellos patógenos, y no se presenta en eucariotas superiores. Dado que en muchos casos se ha demostrado que las unidades de D-Galf son esenciales para la supervivencia o virulencia de los microorganismos mencionados, los glicoconjugados y oligosacáridos sintéticos que contienen D-Galf son herramientas valiosas para la elucidación de los mecanismos de acción de las enzimas relacionadas con la glicobiología de este azúcar, y para la identificación y el diseño de nuevos agentes terapéuticos. Sin embargo, a pesar de las diversas estrategias que se han desarrollado para la obtención de precursores de D-Galf y de los distintos métodos de glicosidación descriptos para la síntesis de oligogalactofuranósidos, aún es necesario el desarrollo de nuevos precursores de estas unidades, de donores de galactofuranosilo y de nuevas metodologías de glicosidación eficientes. En este trabajo de Tesis, se desarrolló la síntesis de per-O-tert-butildimetilsilil-β-Dgalactofuranosa como un nuevo precursor de unidades de D-galactofuranosilo, y se estudió la reacción de O-glicosidación de este derivado por activación in situ como ioduro de glicosilo, constituyéndose en la primera referencia en la literatura sobre el uso de ioduros de D-Galf. Se evaluó la eficiencia de este método de glicosidación para la obtención de diferentes precursores de disacáridos de relevancia biológica. Posteriormente, se extendió el estudio de la reacción de glicosidación de per-Otert- butildimetilsilil-β-D-galactofuranosa via ioduro de glicosilo a la síntesis de C- y Sglicósidos y de derivados nitrogenados, y se investigó la reacción de glicosidación via ioduros a partir de donores peracilados.

Abstract:
The synthesis of D-galactofuranose (D-Galf) containing oligosaccharides and glycoconjugates is an area of active investigation, since this sugar is present in glycoconjugates of bacteria, fungi and parasites, many of them pathogenic, but is absent in higher eukaryotes. Given the fact that in many cases the D-Galf units are essential for the survival or virulence of the mentioned microorganisms, synthetic D-Galf containing oligosaccharides and glycoconjugates are valuable tools for the elucidation of the action mechanisms of the enzymes related to the glycobiology of this sugar, and for the identification and design of new therapeutic agents. However, despite the varied strategies developed for obtaining D-Galf precursors and the several glycosylation methods described for oligogalactofuranosides synthesis, it is still necessary to develop new precursors of these units and of galactofuranosyl donors, as well as new efficient glycosylation methodologies. In this Thesis, the synthesis of per-O-tert-butyldimethylsilyl-β-D-galactofuranose as a new precursor of D-galactofuranosyl units has been developed, and the Oglycosylation reaction of this derivative activated in situ as glycosyl iodide has been studied. This is the first time that this rather unstable intermediate is employed in glycosylation reactions. The efficiency of the glycosylating method for obtaining different precursors of disaccharides of biological relevance has been evaluated. The study of the glycosylation reaction of per-O-tert-butyldimethylsilyl-β-Dgalactofuranose via galactofuranosyl iodide has been extended to C- and S-glycosides and nitrogenated derivatives synthesis, and the glycosylation reaction via iodides from peracylated donors has been investigated.

Balenzuela, Pablo. "Criticalidad y No-linealidad en fragmentación" (2002). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis estudiamos el comportamiento crítico y las propiedades no lineales en la evolución de sistemas de 147 partículas que interactúan mediante un potencial de Lennard-Jones. Analizamos dos tipos distintos de procesos: el de gotas que se expanden libremente y se fragmentan, y el de sistemas confinados a volumenes esféricos de distintos radios. Mediante la técnica de dinámica molecular resolvimos las ecuaciones de movimiento clásicas de manera de tener las posiciones y velocidades de las partículas a todo instante. El comportamiento crítico de los sistemas lo estudiamos a partir de analizar las distribuciones de fragmentos. En el caso de las gotas que se expanden libremente, encontramos que tanto las distribuciones calculadas a tiempo de fragmentación (definidas en el espacio de fases) como las obtenidas a tiempos asintóticos (accesibles experimentalmente) pueden ser descriptas en términos de la ley de escala que describe el comportamiento critico en el problema de percolación. Esta ley de escalas nos permitió obtener el punto crítico como aquel en el cual se maximizan ciertas fluctuaciones y aparecen distribuciones tipo ley de potencias, así como también los exponentes críticos que la caracterizan. Encontramos que tanto las señales de criticalidad como los exponentes obtenidos de las distribuciones asintóticas reflejan apropiadamente el comportamiento crítico a tiempo de fragmentación, lo que da un sustento a los esfuerzos experimentales en este sentido. En el caso de los sistemas confinados, encontramos evidencia de una transición de fase de primer orden a muy bajas densidades. Por otra parte, mediante el análisis de las distribuciones de fragmentos definidos en el espacio de fases encontramos exponentes críticos compatibles con una transición de segundo orden líquido-gas para un dado rango de densidades. Las propiedades no-lineales del sistema las estudiamos mediante el análisis del máximo exponente de Lyapunov (MLE). Para la gota libre, definimos los exponentes de Lyapunovs locales en el tiempo lo cual nos permitió seguir la evolución dinámica de la gota en su proceso de fragmentación. Encontramos que el sistema evoluciona de un estado muy caótico a otro mas ordenado y obtuvimos los tiempos característicos a partir de los cuales el sistema está ’ordenado’. Encontramos además que el MLE toma su valor máximo a aquellas energías para la cual la gota alcanza su máxima temperatura sin fragmentarse. Para el sistema confinado, estudiamos la dependencia del MLE con la energía y la densidad y su posible vinculación con la transición de fase definida mas arriba. Encontramos que el MLE es un indicador sensible de dicha transición y que su comportamiento esta altamente relacionado con las fluctuaciones de energia potencial/cinética del sistema.

Abstract:
In this thesis we study the critical behavior and non-linear properties of highly excited systems composed by 147 particles interacting via a Lennard-Jones potential. We analize two different processes: the evolution of free expanding drops that undergo fragmentation and the evolution of systems confined to espherical volumens of differents sizes. This calculations are performed by using Molecular Dynamics techniques. The critical behavior of the systems was studied by the analysis of the fragment mass distributions. In the case of free expanding drops, we found that the fragment distributions obtained at fragmentation time (in phase space) as well as those calculated at asymptotic time (in configurational space) follow the scaling hypothesis that describes critical behavior in the percolation problem. In this way, we could obtain the critical point by looking for the energy at which certain fluctuations have a maximum and power laws in the mass distributions appear. We also extracted the critical exponents that describe the transition. We found that critical exponents obtained from the asymptotic fragment mass spectra properly characterize the critical behavior of the system at fragmentation time. This results support current experimental efforts toward the analysis of asymptotic mass dsitributions. In the case of confined systems, we found strong evidency of a first order phase transition at very low densities. On the other hand, by analizing the cluster distributions obtained in phase space, we found critical exponents corresponding to a second order phase transitions in at large densities. The non-linear properties of the system were studied by the analysis of the maximum Lyapunov exponent (MLE). In the free expanding drop case, we defined the maximum local (in time) Lyapunov exponent which allowed us to follow the dynamical evolution of the fragmentation process in phase space. We found that the system evolves from a very chaotic state to a more ordered one and we calculated the characteristic of this process. We found that the MLE is maximum at the energies for which the drop have its maximum size and temperature. For the confined systems, we studied the dependence of the MLE with the energy and the density and the possible link with the phase transition described above. We found that the MLE is quite sensitive to this transition and its behavior is highly related to the with the potential/kinetic energy fluctuations of the system.

Bali, Juan Lucas. "Métodos robustos de estimación de componentes principales funcionales y el modelo de componentes principales comunes" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En muchas situaciones prácticas, los datos se registran sobre un período de tiempo o corresponden a imágenes. Por esta razón, conviene considerarlos como realizaciones de un proceso estocástico en lugar de discretizarlos y estudiarlos como realizaciones de datos multivariados. Un método ampliamente usado para describir los principales modos de variación de las observaciones es el de componentes principales funcionales. Sin embargo, los procedimientos clásicos basados en el desvío estándar o el operador de covarianza muestral son muy sensibles a datos atípicos. Para resolver este problema, en esta tesis, se introducen estimadores robustos para las componentes principales mediante un enfoque basado en el método de projection–pursuit. Estimadores de projection–pursuit, para el caso finito– dimensional, fueron inicialmente propuestos en Huber (1981) como una forma de obtener estimadores robustos de la matriz de covarianza. Posteriormente, fueron considerados por Li y Chen (1985) para el problema de componentes principales como una aproximación directa al problema sin necesidad de obtener estimadores robustos de la matriz de escala (ver, también Huber, 1985). En esta tesis, se extiende dicha propuesta al caso funcional. Por otra parte, se consideran diversas variaciones de la misma que permiten obtener estimadores suaves mediante una penalización en la escala o en la norma, o bien, mediante una aproximación finito–dimensional sobre una base con elementos suaves. Bajo condiciones débiles de regularidad, se obtiene la continuidad del funcional asociado, de lo que se deduce la consistencia de los estimadores sin suavizar. Por otra parte, se prueba la consistencia de los estimadores que penalizan la norma y/o la escala así como la de una propuesta basada en aproximaciones por subespacios crecientes, bajo condiciones débiles. Mediante un estudio de simulación, se compara la performance de las propuestas clásicas y robustas bajo diferentes tipos de contaminación. Se complementa el estudio de los estimadores de proyección de las direcciones principales, obteniendo una expresión para la función de influencia del funcional asociado a la dirección principal y su tamaño. Las propuestas anteriores de estimación se extendieron al caso de k poblaciones que cumplen un modelo de componentes principales comunes funcional. Bajo dicho modelo, las diversas poblaciones presentan una estructura común en cuanto a su operador de dispersión compartiendo sus autofunciones y el orden de las mismas. Para ser más precisos, se definen estimadores robustos de projection–pursuit de las direcciones principales bajo un modelo de componentes principales comunes. Para las distintas propuestas, algunas de las cuales incluyen como antes diversos tipos de penalización, se prueba su consistencia, bajo condiciones débiles. Por otra parte, mediante un estudio de Monte Carlo, se estudia el comportamiento de los estimadores introducidos para muestras finitas, bajo diferentes modelos y tipos de contaminación. Finalmente, se proponen algoritmos que permiten calcular aproximaciones de cada una de las propuestas dadas. Se prueba la consistencia del estimador obtenido a través de dicho algoritmo. Mediante un estudio Monte Carlo, se analiza la velocidad de convergencia de dicha propuesta en el caso de procesos con trayectorias suaves e irregulares. Para estas últimas, se propone un método alternativo de cálculo.

Abstract:
In many practical situations, data are recorded over a period of time or may correspond to images. In these situations, it is preferable to consider them as samples of an stochastic process instead of discretizing and studying them as multivariate data samples. A technique widely used to describe the observations principal modes of variations is the functional principal components analysis. The classical procedures based on the standard deviation or the sample covariance are very sensitive to atypical data. To overcome this problem, in this thesis, we introduce robust estimators for the principal components using a projection–pursuit approach. In the multivariate setting, projection–pursuit estimators were initially proposed in Huber(1981) as a way to obtain robust estimators of the covariance matrix. They were then considered by Li and Chen (1985) to perform a robust principal component analysis without passing by a robust estimate of the covariance matrix (see also, Huber, 1985). In this thesis, we extend that proposal to the functional case. On the other hand, we consider other alternatives which allow us to obtain smooth estimators of the principal directions using either a penalization on the scale or the norm or through a sieve approach which consists in considering an increasing sequence of finite–dimensional spaces spanned by a basis with smooth elements. Under mild regularity conditions, we derive the continuity of the associated functional which entails the consistency of the non–smoothed estimators. On the other hand, we show that the estimators defined penalizing the norm and/or the scale and those based on the sieve approach are consistent. Through a simulation study, we compare the performance of the classical and robust proposals under different contamination models. We complete the study of the projection–based estimators of principal directions, obtaining an expression for the influence function of the functional related to the principal direction and its size. The previous proposals are extended to k populations satisfying a functional common principal component model. Under this model, the populations have a common dispersion structure, since the dispersion operators share the same eigenfunctions and their order. More precisely, we introduce robust projection– pursuit estimators of the principal directions under functional common principal components model. We derive the consistency of the the different proposals, some of which include penalization terms. On the other hand, through a Monte Carlo study, we the performance of the robust estimators is compared to that of the classical one, under different models and contaminations. Finally, we propose algorithms that allow to compute approximations for each of the robust proposals given. The estimators obtained through that algorithm turn out to be consistent. Using a Monte Carlo study, we analyse the convergence rate of the proposals when the observations have smooth or rugged trajectories. For the latter, we propose an alternative method of computation.

Ballaré, Cecilia J.. "Heterogeneidad celular en carcinomas mamarios humanos" (1997). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Dos objetivos principales fueron planteados en este trabajo: 1) investigar la heterogeneidad celular en carcinomas mamarios humanos, caracterizando distintas subpoblaciones celulares respecto a proliferación y expresión de diversos marcadores tumorales; 2) obtener anticuerpos monoclonales (AMC) contra estos tumores, con propiedades citotóxicas, que reconozcan células indiferenciadas, de alto potencial proliferativo. Los estudios de heterogeneidad celular fueron realizados utilizando muestras tumorales humanas, la proliferación evaluada mediante incorporación de Timidina y marcadores por inmunohistoquímica. Los resultados permitieron establecer una secuencia de expresión de marcadores a medida que progresa la diferenciación celular y disminuye la capacidad proliferativa. Pudieron identificarse marcadores asociados a distintas etapas de la diferenciación (NCA90, receptor estroncio, receptor de progesterona, TAG72, CaMBr1, CEA) y otros que comienzan a expresarse en células indiferenciadas, altamente proliferativas, y continuarían durante todo el proceso de diferenciación (Ag2.15, PEM). Se investigaron también las propiedades del AMC FC-2.15 (anti-Ag2.15) desarrollado utilizando como inmunogeno un carcinoma mamario humano indiferenciado. FC-2.15 presento una potente citotoxicidad contra células Ag2.15+ mediando lisis por complemento humano, reconocio un antígeno presente en membrana plasmática en alta densidad (2,8x10 6 /célula) y fue lentamente internalizado. Los resultados presentados en este trabajo sugieren que FC-2.15 podría ser útil en inmunoterapia de pacientes con neoplasias Ag2.15+.

Abstract:
The main purposes of this study were: 1) to investigate the cell heterogeneity in human breast cancer and characterize the different cell subpopulations with regard to proliferation and expression of tumor markers; 2) to obtain monoclonal antibodies (MAb) against these tumors which recognize highly undifferentiated (stem) cells, and mediate specific cytotoxicity. Cell heterogeneity was studied in human tumor samples, proliferation was evaluated by thymidine incorporation and markers by immunohistochemistry. According to the results, it could be defined a regular sequence of marker expression as cell differentiation proceeds and proliferation decreases. Some markers were identified which are expressed in different stages of the differentiation pathway (NCA90, estrogen receptor, progesterone receptor, TAG72, CaMBr1, CEA). Conversely, the expression of other markers (Ag2.15, PEM) would start in undifferentiated-highly proliferative cells and remain throughout the whole differentiation process. It was also investigated the properties of MAb FC-2.15 (anti-Ag2.15) generated using an undifferentiated human breast carcinoma as immunogen. Results showed that FC-2.15 exhibits strong human complement-mediated cytotoxicity against Ag2.15+ cells. It recognizes a high-density antigen (2.8x10 6/cell) in the cell membrane and is slowly internalized. The results obtained in this study suggest that FC-2.15 could be a useful agent for passive immuntherapy.

Ballestero, Jimena A.. "Modulación de la actividad de las células ciliadas del órgano de Corti por el sistema eferente olivococlear" (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el órgano de Corti, el epitelio sensorial del sistema auditivo de los mamíferos, las células ciliadas internas (CCIs) transducen los estímulos sonoros a señales eléctricas que son enviadas al sistema nervioso central, mientras que las células ciliadas externas (CCEs) participan del proceso de amplificación y sintonización fina de estos estímulos. La actividad de las CCEs es modulada por una inervación eferente que proviene del tallo cerebral, el sistema olivococlear medial (MOC). Durante el desarrollo, previo al comienzo de la audición, estas fibras eferentes hacen contactos transitorios con las CCIs. En ambos casos, la sinapsis entre las fibras MOC y las células ciliadas es colinérgica, rápida e inhibitoria y está mediada por la activación conjunta del receptor colinérgico nicotínico (nAChR) α9α10 y el canal de potasio SK2. La inervación transitoria a las CCI desaparece completamente luego del comienzo de la audición, así como la expresión de la subunidad α10 y la del canal SK2. En el presente trabajo se estudiaron las características moleculares y funcionales de la sinapsis entre estas fibras MOC y las células ciliadas de la cóclea. Para esto se realizaron registros electrofisiológicos en las CCIs y CCEs presentes en preparaciones del órgano de Corti del ratón en distintos periodos postnatales. En primer lugar, se estudió el rol de la subunidad α10 en las respuestas colinérgicas de las células ciliadas. Se realizó la caracterización biofísica, farmacológica y funcional de estas corrientes en ratones modificados genéticamente que carecían de la subunidad α10 o que la expresaban en forma constitutiva. Se demostró que la subunidad α10 es necesaria para la expresión de las respuestas colinérgicas normales tanto antes como después del comienzo de la audición. Se demostró también que la expresión constitutiva de esta subunidad no es suficiente para mantener las respuestas colinérgicas en las CCIs luego del comienzo de la audición. Estos resultados indican que en este período del desarrollo postnatal, existirían factores que regulan negativamente la expresión funcional del nAChR α9α10 en las CCIs. Por otro lado, se estudiaron las propiedades de la transmisión sináptica entre las fibras MOC y las CCEs mediante la estimulación eléctrica de estas fibras eferentes. Se demostró que la eficacia de la sinapsis MOC-CCEs es muy baja a frecuencias bajas de estimulación (1 Hz) pero que la tasa de respuestas aumenta significativamente al aumentar la frecuencia de estimulación (50-100Hz) debido a la acción conjunta de los procesos de facilitación presináptica y sumación de las corrientes postsinápticas. Esta característica de la sinapsis MOC-CCEs es consistente con la dependencia que presentan las respuestas a nivel del nervio auditivo con la frecuencia de activación del sistema eferente MOC y sugiere que la dinámica de esta sinapsis modula la magnitud del efecto inhibitorio producido por este sistema. Esta hipótesis es sustentada, además, por los resultados obtenidos en ratones que poseen una mutación puntual (L9’T) en la subunidad α9 que le confiere al nAChR α9α10 una ganancia de función, a saber, tiene una afinidad aparente mayor por la acetilcolina y un tiempo de actividad más prolongado. Consistentemente, la cinética de las respuestas sinápticas producidas por estimulación de alta frecuencia en la sinapsis MOC-CCIs de los ratones L9’T resultó significativamente más lenta que la de los ratones salvajes y esto se correlaciona con el cambio en la cinética de inhibición de la función coclear ante la activación del sistema eferente observado in -vivo en estos animales.

Abstract:
In the Organ of Corti, the sensory epithelia of the of the mammalian auditory system, inner hair cells (IHCs) transduce sound stimuli into electrical signals that are conveyed to the central nervous system, while outer hair cells (OHCs) participate in the amplification y fine tuning of these stimuli. OHC’s activity is modulated by an efferent innervation that projects from the brainstem, the medial olivocochlear system (MOC). During development, before the onset of hearing, these efferent fibers make transient contacts with the IHCs. In both cases the synapse between the MOC fibers y the hair cells is cholinergic, fast y inhibitory y is mediated by the combined activation of the α9α10 cholinergic nicotinic receptor (nAChR) y the SK2 potassium channel. The transient innervation to the IHCs completely disappears after the onset of hearing, as does the expression of the α10 subunit y the SK2 channel. In the present work we studied the functional y molecular characteristics of the synapse between the MOC fibers y the hair cells. To accomplish this, electrophysiological recordings were carried out in IHCs y OHCs present in acutely isolated organs of Corti from mice at different postnatal ages. First, we studied the role of the α10 subunit in the hair cell’s cholinergic responses. A biophysical, pharmacological y functional characterization of these currents was carried out in genetically modified mice that either lacked the α10 subunit or expressed it constitutively. It was demonstrated that the α10 subunit is necessary for the expression of normal cholinergic currents both before y after the onset of hearing. It was also shown that the constitutive expression of this subunit is not sufficient to maintain cholinergic responses in IHCs after the onset of hearing. These results indicate that in this period of postnatal development, there might be factors that down-regulate the functional expression of the α9α10 nAChR in the IHCs. In addition, the properties of synaptic transmission between the MOC fibers y the OHCs were studied by electrical stimulation of the efferent fibers. It was demonstrated that the synaptic efficacy of the MOC-OHC synapse is very low at low stimulation frequencies (1 Hz) but that the response rate increases significantly when the stimulation frequency is increased (50-100 Hz), due to the combined effect of presynaptic facilitation y summation of the postsynaptic currents. This characteristic of the MOC-OHC synapse is consistent with the dependence of the auditory nerve responses with the frequency of activation of the MOC efferent system y suggests that the dynamics of this synapse modulates the magnitude of the inhibitory effect exerted by this system. This hypothesis is further supported by the results obtained using mice that bear a point mutation in the α9 subunit (L9’T) that confers a gain of function to the α9α10 nAChR, namely, an increased affinity for acetylcholine y a longer period of activity. Consistently, the kinetics of the synaptic responses evoked by high frequency stimulation at the MOC-IHC synapse in the L9’T mice was significantly slower than that of the wild type mice. This is in agreement with the change in the kinetics of cochlear function inhibition by the efferent system observed in-vivo.

Balonga, Pablo Enrique. "El efecto overhauser nuclear ante relajación escalar : análisis y aplicaciones" (1984). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Baltanás, Rodrigo. "Estudio integrativo de vías de señalización de MAP quinasas de Saccharomyces cerevisiae" (2012-07-27). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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El objetivo principal de esta tesis fue estudiar la interacción entre las vías de MAP quinasas de Saccharomyces cerevisiae. Estas vías están representadas en humanos, donde su mal funcionamiento puede conducir a patologías tales como cáncer o problemas en el desarrollo. La complejidad de los circuitos de señalización de MAP quinasas en células de mamíferos dificulta la comprensión de como estas integran las señales que los activan. Para resolver este problema, una estrategia es analizar sistemas biológicos más simples que comparten propiedades con los más complejos. En este sentido, nos propusimos caracterizar exhaustivamente sistemas de señalización de MAP quinasas en un sistema biológico simple, la levadura S. cerevisiae. En esta tesis decidimos determinar los puntos de flujo de información entre las vías de "Respuesta a Shock Hiperosmótico" (HOG) y de "Respuesta a Feromona" (PR) de levaduras, ya que estas vías comparten componentes en sus vías de señalización y existe controversia sobre sus interacciones. A su vez, estudiamos estas vías en células individuales, estimulando las mismas controlando la dosis de los estímulos utilizados y en una variada serie de condiciones experimentales. Finalmente, medimos las respuestas de estas vías de un modo cuantitativo, estudiando su dinámica temporal y analizando el mayor número de respuestas posible en cada célula. Resumiendo los resultados obtenidos, podemos decir, que la vía de HOG no presenta osmoadaptación perfecta como se había afirmado previamente y permanece activa en estado estacionario. Su activación es mayor cuanto mayor es la osmolaridad externa, y también depende del gradiente químico de glicerol. Además, vemos una alta variabilidad de la respuesta de HOG en células individuales. A nivel de las interacciones entre las vías de MAP quinasas, determinamos que la vía PR es capaz de activar a la vía HOG en células adaptadas a alta osmolaridad. Esta compleja activación requiere de la MAPK de la vía de integridad de la pared celular (CWI) Slt2/Mpk1 y del polarisoma. La activación de HOG es pulsátil y presenta una alta variabilidad en células individuales. Los picos de actividad de HOG coinciden con eventos morfogenéticos inducidos por PR en los cuales se activa Slt2/Mpk1. La vía PR induce una salida de glicerol, que estaría mediada por Slt2/Mpk1, y este sería el mecanismo que llevaría a la activación de la vía HOG. La inducción de HOG también puede lograrse a través de la activación de Slt2/Mpk1 mediante shock térmico. Ambos tipos de activaciones (por feromona o alta temperatura) son proporcionales a la osmolaridad externa y dependen del gradiente químico de glicerol. Una consecuencia fisiológica de esta activación de HOG promovida por la vía PR es que las células en estas condiciones presentan una mejor capacidad de osmoadaptación. Finalmente, podemos agregar que los shocks hiperosmóticos inhiben a la vía PR durante la etapa de respuesta aguda, pero no hemos establecido aún los actores moleculares que median esta inhibición. Sin embargo, podemos descartar algunos componentes de la vía de HOG como Sho1, Ssk1 y Hog1. Para terminar, la alta osmolaridad, a largo plazo, en células ya adaptadas, cambia la dinámica de la respuesta de la vía PR reduciendo su sensibilidad a α factor. Esta reducción es proporcional a la osmolaridad externa. Esperamos que los resultados encontrados en este sistema biológico sean de utilidad, para pensar de una manera más integrativa, como se comporta la dinámica de la respuesta en un dado sistema frente a múltiples señales externas, de acuerdo a como el mismo las integra globalmente.

Abstract:
The main objective of this thesis was to study the interaction between MAPK signaling pathways in Saccharomyces cerevisiae. These pathways are represented in humans, were the malfunction of them can lead to pathologies such as cancer or developmental problems. The complexity of MAPK signaling circuits in mammalian cells difficult the understanding of how they integrate the signals activating them. As a means to solve this problem, one strategy is to analyze simpler biological systems that share properties with the more complex ones. In these sense, we ought to characterize thoroughly MAPK signaling pathways in a simple biological system, the yeast S. cerevisiae. In this thesis we decided to determine the points of information flow between the yeast "High Osmolarity" (HOG) and the "Pheromone Response" (PR) pathways, because they share components in their signaling cascades and there is controversy in how they interact. In addition to these, we studied these pathways in individual cells, stimulating them by controlling the stimulus doses and under a several experimental conditions. Finally, we measured the output of these pathways in a quantitative way, studying their temporal dynamics and analyzing the most number of possible readouts. Summing up the results obtained, we can say that, the HOG pathway does not present perfect adaptation as it was previously stated and it remains active in steady state. Its activation is higher the higher the external osmolarity and it also depends on the chemical gradient of glycerol. Besides, we see high variability in the HOG output of individual cells. At the level of interactions between the MAPK pathways, we determined that the PR pathway can activate the HOG pathway in cells adapted to high osmolarity. This complex activation requires the Cell Wall Integrity (CWI) MAPK Slt2/Mpk1 and the polarisome. This HOG activation occurs in pulses and presents high variability in single cells. The peaks of HOG activity coincide with PR induced morphogenetical events where Slt2/Mpk1 is activated. The PR pathway induces a glycerol efflux, which would be controlled by Slt2/Mpk1, and that would be the mechanism leading to HOG pathway activation. HOG induction can also be achieved through Slt2/Mpk1 heat shock activation. Both kinds of activations (by pheromone or high temperature) are proportional to the external osmolarity and depend on the glycerol chemical gradient. One physiological consequence of these PR promoted HOG activation is that the cells present a better osmoadaptation capacity in these conditions. Finally, we can add that hyperosmotic shocks inhibit PR pathway during the acute hyperosmotic phase, but we have not established yet the molecular actors that mediate this inhibition. However, we can rule out some of HOG pathway components like, Sho1, Ssk1 and Hog1. To finish, high osmolarity, at longer times in cells already adapted, changes the dynamics of PR response reducing its sensitivity to α factor. This reduction is proportional to the external osmolarity. We hope the results found in this biological system are helpful, to think in a more integrative way, how the output dynamics of a system behaves, facing multiple external signals, depending on how it integrates them globally.

Barabas, Federico M.. "Nanoscopía de fluorescencia por localización estocástica de moléculas individuales" (2017-03-27). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Hasta hace unos 20 años se creía que la difracción de la luz imponía un límite fundamental de unos 200 nm a la resolución espacial de un microscopio óptico. Las nanoscopías de fluorescencia, también llamadas microscopías de superresolución, han quebrado esta barrera y permiten en teoría alcanzar la máxima resolución espacial con sentido físico, es decir el tamaño mismo de la fuente de luz. En la práctica, sin embargo, la resolución se ve limitada a unos 20 nm por efecto de variables experimentales como la relación señal-ruido y el fotoblanqueo de los marcadores fluorescentes. Además, las nanoscopías de fluorescencia mantienen las ventajas de la microscopía de fluorescencia tradicional, como el acceso poco invasivo y la alta sensibilidad y especificidad. Se denomina "localización de una molécula individual" al proceso numérico por el cual se extrae la posición de un emisor único a partir de la medición de su patrón de intensidad. La nanoscopía por localización estocástica de moléculas individuales (o simplemente "nanoscopía por localización") consiste en la adquisición secuencial de imágenes en las que en cada una un subconjunto estocástico de los fluoróforos de una muestra son resueltos individualmente. Como los patrones de emisión no se superponen, la precisión de localización solo depende del número de fotones detectados de cada emisión. La imagen final se construye con las posiciones de cada fluoróforo previamente localizado. Para obtener una imagen de superresolución es necesario que los marcadores estén separados por distancias menores a su imagen limitada por difracción y que éstos emitan de manera intermitente (que se enciendan y apaguen), de manera que en algún momento puedan observarse individualmente. La nanoscopía por localización comprende a un conjunto de técnicas diferenciadas entre sí de acuerdo al mecanismo que permite el encendido y apagado de los marcadores fluorescentes. En la presente Tesis se estudian aspectos fundamentales e instrumentales de la nanoscopía por localización y se la aplica al estudio de preguntas biológicas. En el Capítulo 1 se desarrollan los conceptos fundamentales y limitaciones de la microscopía de uorescencia, y se introducen las técnicas de superresolución. En el Capítulo 2 se detallan los métodos y estado del arte de la nanoscopía por localización. En el Capítulo 3 se caracteriza el nanoscopio por localización con posibilidad de obtener imágenes en 3D y a dos colores de emisión, que fuera construido como parte del trabajo de Tesis. Finalmente, en los Capítulos 4 y 5 se describen aplicaciones de dicho nanoscopio en dos proyectos de relevancia biológica: el estudio en neuronas hipocampales de la estructura periódica de espectrina y la distribución espacial de proteínas presentes en la membrana del Trypanosoma cruzi que median la interacción entre el parásito y el huésped.

Abstract:
Until twenty years ago it was considered that the diffraction of light imposed a fundamental limit of around 200 nm to the resolution of an optical microscope. Fluorescence nanoscopy, also known as super-resolution uorescence microscopy, has overcome this limit. It achieves the theoretical maximum spatial resolution, which is the size of the light source itself. In practice, however, the resolution is limited to around 20 nm by experimental factors like the signal-to-noise ratio and the photobleaching of uorescent markers. Besides, fluorescence nanoscopy maintains the advantages of traditional fluorescence microscopy, like its low invasivity and its high sensitivity and specificity. Single-molecule localization is the numerical process that extracts the single molecule position from measuring its emission pattern. Sigle-molecule stochastic localization nanoscopy (or simply "localization nanoscopy") consists of the sequential acquisition of images of well separated fluorophores from a stochastic subset of all fluorophores in the sample. As their emission patterns do not overlap, the position of each molecule can be determined with a precision only limited by the number of detected photons. A final super-resolved image is reconstructed from the localizations of all the fluorophores of the sequence of images. In order to obtain a super-resolved image, it is essential to have fluorescent markers closer to each other than the diffraction limit. Also, they must intermittently switch on and off, so that at a given point in time they can be imaged individually. Stochastic localization nanoscopy denotes a group of techniques each with a different mechanism for the on-off switching of the fluorophores. In this thesis we study fundamental and instrumental aspects of localization nanoscopy and we apply it to the study of biological questions. In Chapter 1 the fundamental concepts, potential and limitations of fluorescence microscopy are presented, followed by an introduction to super-resolution techniques. The fundamental principles and methods of single-molecule localization fluorescence nanoscopy are explained in detail in Chapter 2. Chapter 3 gives a complete description of the nanoscope built as part of this thesis work at the Centro de Investigaciones en Bionanociencias (CIBION), along with guidelines for its operation and an illustration of its performance. In Chapters 4 and 5 two biological applications of the nanoscope are presented, that address nanoscale organization proteins: firstly, the quantification of the periodic spectrin structure present in hippocampal neurons and secondly, the spatial distribution of proteins on the outer membrane of the Trypanosoma cruzi that mediate the parasite-host interaction. Finally, the conclusions of this thesis and future perspectives are unfolded in Chapter 6.

Baraldo Victorica, Luis Mario. "Síntesis, estructura y propiedades físico-químicas de complejos cianurados del grupo ocho" (1994). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Barbará, Adolfo. "La industria vitivinícola en la Provincia de Mendoza : su progreso en los últimos diez años" (1922). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Barber, Matías Ernesto. "Parametrización y optimización de modelos de inversión para la obtención de humedad del suelo a partir de datos satelitales de Radares de Apertura Sintética" (2013). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Dentro del Plan Espacial Nacional (PEN), la Comisión Nacional de Actividades Espaciales (CONAE) tiene previsto el lanzamiento de la misión satelital SAOCOM, un radar de apertura sintética (SAR) que opera en microondas (λ = 23cm) y cuyo principal objetivo es la estimación de humedad del suelo sobre Pampa Húmeda. El problema de la estimación de variables biogeofísicas a partir de imágenes SAR es un problema mal condicionado, donde con frecuencia existen muchas combinaciones de parámetros de la superficie que producen las mismas observaciones SAR. Por esta razón, existen diversas técnicas de inversión, las cuales deben tener en cuenta lo siguiente: 1. la dificultad en la parametrización de los modelos de dispersión que rigen la respuesta del blanco ante un onda electromagnética incidente sobre él, 2. las incertezas en la medición del radar proveniente de ruido de origen coherente (conocido como ruido speckle), 3. las incertezas provenientes de la ingeniería del sensor, 4. las incertezas provenientes de la variabilidad espacial de las variables del blanco, en particular de la humedad del suelo. En este trabajo de tesis se desarrolló un esquema de inversión bayesiano que toma en cuenta todos estos temas. Dicho esquema se evaluó con datos SAR y mediciones de campo provenientes de varias campa˜nas con sistemas aerotransportados y satelitales. El esquema bayesiano considera todas las dificultades encontradas en el desarrollo de un producto operativo de humedad del suelo y puede resultar en un algoritmo alternativo al desarrollado por CONAE para la misión satelital SAOCOM.

Abstract:
Within the framework of the Argentinean Space Plan (PEN), the National Space Activities Commission (CONAE) plans to launch the SAOCOM mission, which involves a synthetic aperture radar (SAR) operating in the microwave region (λ = 23cm) and whose main goal is the estimation of soil moisture over the Pampas Plains. Estimation of biogeophysical variables through radar images is an ill-posed problem, where there are often many combinations of surface parameters that produce the same SAR observations. For this reason, there are various retrieval techniques, which should take into account 1. the difficulty of parameterizing the scattering models which govern the response of the target to an electromagnetic wave impinging on it, 2. uncertainties in the radar measurement due to speckle noise, 3. instrumental noise from the sensor, 4. uncertainties from the spatial variability of the target variables, in particular of soil moisture. In this thesis a Bayesian retrieval scheme was developed, which takes into account all these issues. This scheme is assessed with SAR data and field measurements from various campaigns involving airborne and satellite systems. Also, the Bayesian scheme considers all the difficulties encountered in the development of an operational soil moisture product and can lead to an alternative algorithm to that developed by CONAE for the SAOCOM mission.

Barcelona, Hernán. "Caracterización del sistema geotermal de Valle del Cura, San Juan" (2015-04-17). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Esta Tesis se enfoca en las manifestaciones geotermales del Valle del Cura, ubicado a los 29,5°S y 69,5°O en la Cordillera Frontal de los Andes y sobre el segmento de subducción subhorizontal pampeano-chileno. Se realizó un estudio de prospección geotérmica que incluyó métodos geofísicos (especialmente magnetotelúrica), análisis de la composición química e isotópica de fluidos (fase liquida y gaseosa), modelado geoquímico de los fluidos termales profundos, mediciones de gases en suelos, dataciones radiocarbono, análisis morfoestructural y geomorfológico, litoestratigráfico mediante testigos de pozos y de isotermas locales. Se pudo caracterizar los reservorios, zona de recarga y surgencia, tipo de fluidos, procesos profundos y controles principales y con los resultados integrados al contexto geológico-estructural se confeccionó un modelo conceptual de un sistema geotermal que incluyo su variabilidad espacial y clasificación. Los fluidos termales en Valle del Cura son de origen meteórico y el principal aporte proviene del deshielo (según δ18O, δD y Tritio). Las zonas de recarga tienen un fuerte control estructural-litoestratigráfico y la infiltración puede ser somera o hasta niveles basales de la cuenca (anomalía conductiva identificada a 5 km de profundidad infiere la presencia de salmueras), activando un sistema de circulación profunda conductivo-dominado. El reservorio está constituido por rocas volcaniclásticas del Grupo Choiyoi, es del tipo líquido-dominado y su temperatura alcanza los 180°C y hacia el sur de Despoblados experimenta un incremento en su profundidad, en la fugacidad de CO2 y una disminución de la permeabilidad. Los modelos magnetotelúricos muestran imágenes de la geometría de las zonas de surgencia: están controladas por estructuras permeables enraizadas en la corteza que actúan como conductos de circulación de fluidos termales profundos hasta niveles superficiales fríos. Durante el ascenso, los fluidos termales interactúan con acuíferos someros saturados en componentes atmosféricas a partir de procesos de mezcla, dilución y precipitación de fases minerales (más intensamente en Gollete y Bañitos). Los fluidos termales que alcanzan la superficie descargan aguas cloruradas sódicas con pH neutro y forman manantiales, suelos calcretizados y terrazas de travertino. Los manantiales están comúnmente asociados a intensa emanación de gases (principalmente CO2; mayor a 96%) y se destaca la ausencia de vapor de agua (por enfriamiento conductivo durante el ascenso) y de especies acidas en general (p.ej. H2S). Se propone la existencia de una anomalía térmica que activa la convección local, posiblemente vinculada a cuerpos subvolcánicos recientes con características similares a los emplazados en Despoblados durante el Cuaternario. La magnitud del flujo de CO2, de He y de actividad de Rn es consistente con sistemas convectivos-volcánicos. Además, el aporte de CO2 magmático al sistema geotermal fue confirmado con las composiciones isotópicas del Carbono y del Helio de las manifestaciones termales de Valle del Cura (δ13C ~-6‰ vs. PDB y R/Ra~1,45). La permeabilidad efectiva y el gradiente térmico local controlan selectivamente el dominio de la convección térmica sobre la conducción térmica de las áreas termales estudiadas. La dinámica del sistema es más intensa en Despoblados (mayor complejidad estructural, relación e interacción fluido-roca, temperatura del reservorio y aguas menos evolucionadas, con menor shift de δ18O y un reservorio más superficial) que en Gollete y Bañitos. El área de Bañitos es considerada una posición distal del sistema convectivo y no se descartan celdas de circulación de fluidos parcialmente compartimentalizadas por los lineamientos N120° del basamento. Las características químicas de los fluidos termales y del reservorio son típicas de un sistema geotermal evolucionado –maduro- y consistentes con un cuerpo magmático desgasado que originó la anomalía térmica. La neotectónica regional moderada asegura un ambiente geológicoestructural y magmático suficientemente activo para imponer una evolución del sistema geotermal mediante pulsos de actividad. Como conclusión, el sistema geotermal de Valle del Cura está caracterizado por a) una leve anomalía térmica local que vigoriza una convección tenue sobreimpuesta al sistema termal conductivo-dominado, b) reservorios de media a alta entalpía, líquido-dominados y por debajo de los 800 m de profundidad y c) una dinámica modulada por la permeabilidad efectiva y por la cercanía a la anomalía térmica, con mayor intensidad en Despoblados y que se atenúa hacia el sur. En general, se comprobó que un sistema de fallas enraizados en niveles corticales medios que favorecen la infiltración de agua en profundidad sumado a pequeñas anomalías térmicas vinculadas a la actividad magmática modulada por la neotectónica pueden generar sistemas hidrotermales profundos y sistemas geotermales de alta entalpía. Por consiguiente, el ejemplo del sistema geotermal de Valle del Cura fuerza a reevaluar el potencial geotérmico de los segmentos de subducción subhorizontal actuales, hasta el momento considerado de baja entalpía-conducción-dominados, y abre nuevas perspectivas en la exploración de estos recursos a lo largo de los Andes en zonas previamente desestimadas.

Abstract:
This thesis focuses on the geothermal manifestations of the Valle del Cura, located at 29.5°S and 69.5°W, on the Cordillera Frontal and on the Pampean-Chilean flat-slab subduction segment. A study of geothermal exploration including geophysical methods (especially magnetotellurics), analysis of the chemical and isotopic composition of fluids (liquid and gaseous phases), geochemical modeling of the deep thermal fluids, measurements of soil flux gases, radiocarbon dating, and morphostructural, geomorphological and lithostratigraphic analysis of core samples and local isotherms was carried out. The reservoirs, refilling and upwelling areas, type of fluids, deep processes and key controls were characterized. The results were constrained by the geological-structural framework, and then a conceptual model of a geothermal system that included its spatial variability and classification was made. It was concluded that the thermal fluids in Valle del Cura are of meteoric origin and that the main contribution comes from thawing (according to δ18O, δD and tritium). The recharging areas have a strong structurallithostratigraphic control and infiltration may be shallow or up to the basal levels of the basin (the conductive anomaly identified at a depth of 5 km allows inferring the presence of brines), activating a conductive-dominated deep circulation system. The reservoir consists of volcaniclastic rocks of the Choiyoi Group, is of the liquid-dominated type and its temperature reaches 180°C. South of Despoblados, it experiences an increase in its depth and in the CO2 fugacity and a decrease in permeability. The magnetotelluric models show images of the geometry of the upwelling zones that indicate that they are controlled by permeable structures rooted in the cortex which act as a circulation conduit of deep thermal fluids to cold surface levels. During the ascent, the thermal fluids interact with shallow aquifers saturated in atmospheric components from mixing, dilution and precipitation processes of mineral phases (more intensely in Gollete and Bañitos). The thermal fluids that reach the surface discharge sodium-chloride waters with neutral pH and form springs, calcretized soils and travertine terraces. The springs are commonly associated with intense emission of gases (mainly CO2; higher than 96%) and characterized by the absence of steam (by conductive cooling during the ascent) and generally acid species (e.g. H2S). There seems to exist a thermal anomaly that slightly activates local convection, possibly linked to recent subvolcanic bodies with characteristics similar to those located in Despoblados during the Quaternary period. The magnitude of the CO2 and He flux and Rn activity is consistent with convective-volcanic systems. In addition, the contribution of magmatic CO2 to the geothermal system was confirmed with the isotopic compositions of carbon and helium thermal manifestations of Valle del Cura (δ13C ~-6‰ vs. PDB and R/Ra ~ 1.45). The effective permeability and the local thermal gradient selectively control the convectivedomain over the conductive-domain of the thermal areas studied. The dynamics of the system is more intense in Despoblados (greater structural complexity, fluid-rock relationship and interaction, temperature of the reservoir and less evolved water, lower δ18O shift and a more surface reservoir) than in Gollete and Bañitos. The area of Bañitos is considered a distal position of the slightly convective system. In addition, cells of fluid circulation partially compartmentalized by the N120° lineaments of the basement cannot be discarded. The chemical characteristics of the thermal fluid and the reservoir are typical of an evolved -i.e. maturegeothermal system and consistent with a degassed magmatic body that originated the thermal anomaly. The moderate regional neotectonics ensures a geological-structural and magmatic environment sufficiently active to impose an evolution of the geothermal system using pulses of activity. In conclusion, the geothermal system of Valle del Cura is characterized by: a) a mild local thermal anomaly that invigorates a convection overimposed to the conductive-dominated circulation system, b) reservoirs of medium to high enthalpy, liquid-dominated and below 800 m depth, and c) dynamics modulated by the effective permeability and proximity to the thermal anomaly, with greater intensity in Despoblados, which decreases to the south. In general, it was shown that a system of failures rooted in crust levels that favor the infiltration of water in depth, together with small thermal anomalies related to the magmatic activity modulated by the neotectonics, can generate deep hydrothermal systems and high-enthalpy geothermal systems. Accordingly, the example of the geothermal system of Valle del Cura forces to re-evaluate the geothermal potential of the current flat-slab subduction segments, so far considered of low enthalpy and conductive-dominated, and opens up new perspectives in the exploration of these resources throughout the Andes in previously ignored areas.

Barderi, Patricia Alejandra. "Clonado, organización genómica y expresión de la glutamato dehidrogenasa NADP dependiente (GluDH-NADP) de Trypanosoma Cruzi" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Epimastigotes de Trypanosoma cruzi, el protozoo parásito que causa la enfermedad de Chagas, contienen dos glutamato dehidrogenasas diferentes (GluDHs), NAD y NADP dependientes. En este sentido los parásitos se asemejan a las bacterias, hongos y plantas y se diferencian de animales superiores que poseen sólo una enzima inespecífica para coenzima. La GluDH-NADP dependiente (EC 1.4.1.4) es un hexámero formado por subunidades idénticas de 47kDa, mostrando ser muy semejante a la correspondiente enzima de E. coli en cuanto a la secuencia de aminoácidos del extremo N-terminal. La forma NADP dependiente podría ser biosintética mientras la forma NAD dependiente podría tener un rol catabólico. La GluDH-NADP dependiente fue purificada a homogeneidad proteica a partir de epimastigotes de Trypanosoma cruzi mediante un protocolo mejorado que incluye cromatografía de afinidad en Blue Sepharose. Se determinó la secuencia de aminoácidos de 11 péptidos internos, obtenidos por digestión con BrCN, tripsina, endopeptidasa Arg-C o endopeptidasa Lys-C. Dichas secuencias, correspondientes aproximadamente al 30% de la molécula, mostraron una identidad del 74% con la enzima similar de E. coli. Utilizando un suero policlonal monoespecífico producido contra la proteína purificada se realizó el rastreo de una biblioteca de expresión genómica de T. cruzi en el vector λgt11. De esta forma pudo seleccionarse un único clon conteniendo 270 pb correspondientes al extremo 3' del gen que fue secuenciado completamente. Reacciones de PCR usando iniciadores construídos de acuerdo a la secuencia de aminoácidos del extremo N-terminal de la enzima madura y con la secuencia del clon correspondiente al extremo C-terminal pudieron clonarse y secuenciarse dos ORFs completos (TcGluDH1 y TcGluDH2). Las secuencias obtenidas muestran mayor homología con la enzima de Escherichia coli (70-72% de identidad), y menor homologia (52-57%)con la correspondiente enzima de eucariontes inferiores. A partir de la secuencia de ADN se predijo una proteína que contiene 446 aminoácidos. Usando el gen TcGluDH1 como sonda se realizaron experimentos de Southern blot, usando fragmentos de restricción o cromosomas enteros separados por electroforesis en campo pulsado, indicando variaciones entre los diferentes clones y cepas de parásitos, sugiriendo la presencia de varios genes codificando para la GluDH-NADP. La expresión de la enzima resultó ser diferente en los distintos estadíos del desarrollo. La forma epimastigote presenta mayor cantidad de ARNm y proteína (a juzgar por la actividad enzimática y ensayos de Western blot), en comparación con otras formas del parásito. El gen clonado TcGluDH1 fue expresado en E. coli, produciendo una enzima recombinante activa con constantes cinéticas similares a la enzima natural. A pesar de que las evidencias bioquímicas sugieren que la enzima se localiza tanto en el citoplasma como en la mitocondria, nuestros resultados indican una localización exclusivamente citosólica para la GluDH-NADP.

Abstract:
Epimastigotes of Trypanosoma cruzi, the parasitic protozoan which causes Chagas disease, contain two different glutamate dehydrogenases (GluDHs), one NADP-linked and one NAD-linked. The parasite therefore resembles bacteria, fungi and plants in this respect, and clearly differs from higher animals, which possess only one, coenzyme-unspecific, GluDH. The NADP-GluDH (EC 1.4.1.4), which is an hexamer made up of identical subunits of Mr 47.000, seems to be very similar to the enzyme from E. coli in terms of amino acid composition and N-terminal sequence. The HADP-GluDH might be biosynthetic, whereas the NAD-linked enzyme might have a catabolic role. The NADP-linked glutamate dehydrogenase has been purified to homogeneity from epimastigotes of Trypanosoma cruzi by an improved procedure using Blue Sepharose affinity chromatography. The amino acid sequences of 11 internal peptides obtained by digestion with CHBr, trypsin, Arg-C endopeptidase or LysC endopeptidase, showed 74% identity with the similar enzyme from E. coli, over about 30% of the molecule. Apolyclonal monoespecific antiserum against the purified enzyme was used for screening a genomic expression library of T.cruzi in λgt11. A clone containing 270 bps at the 3'-end of the gene was selected, and completely sequenced. Using PCR reactions with oligonucleotide primers synthesized according to the amino acid sequence of the N-terminus of the mature enzyme, and to the nucleotide sequence of a clone corresponding to the C-terminus, two complete ORFs (TcGluDH1 and TcGluDH2) were isolated and sequenced. The sequences obtained are most similar to that of the NADP-GluDH of Escherichia coli (70-72% identity), and less similar (52-57%) to those of lower eukaryotes. The protein predicted from DNA sequence contains 446 amino acids residues. Using TcGluDH1 as a probe, Southern blot experiments of both, restriction fragments and whole chromosomes separated by pulsed-field electrophoresis, indicated variations among different parasite strains and clones, and evidence for the presence of several genes. The expression of the enzyme was shown to be developmentally regulated, the epimastigote stage having a considerably larger amount of both, mRNA and protein (as judged from enzyme activity and Western blots), as compared with the other parasite forms. The cloned gene TcGluDH1 was expressed in E. coli, producing active recombinant enzyme with kinetic constants similar to those of the natural NADP-GluDH. Although biochemical evidence had previously suggested that the enzyme has a multiple localization (cytosolic and mitochondrial localization), our results suggested an exclusively cytosolic localization for NADP-GluDH.

Barg, Monica Viviana. "Osteología y relaciones filogenéticas de los anuros neobatracios del género Pseudis" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los pseudidos constituyen un grupo de neobatracios acuáticos conocidos por el gran tamaño de sus larvas, el dedo dos de la mano oponible y la presencia de elementos intercalares largos entre la última y la penúltima falange de cada dedo. Las relaciones filogenéticas del grupo son controvertidas y las interrelaciones entre las especies de Pseudis desconocidas. Se describe aquí la osteología adulta de Pseudis minuta, una especie tomada como base del análisis de caracteres. Además, se presentan datos sobre la osteogénesis de esta especie y se compara con la información disponible para otras especies de Pseudis. Estas comparaciones sugieren que en la evolución del género pudieron haber intervenido cambios en la trayectoria ontogenética ancestral. Con el objeto de estimar la ubicación taxonómica de los pséudidos se realizó un análisis de parsimonia basado en 35 taxa y 69 caracteres de adultos. Los dos árboles maximamente parsimoniosos resultantes concuerdan en la exclusión de los centrolénidos de una cercana relación con los pseudidos, la monofilia de estos últimos, y la naturaleza parafilética de los hílinos respecto a los pséudidos. Ambos árboles muestran la misma topología interna del clado de los pséudidos, con Pseudis minuta y Pseudis cardosoi como taxones hermanos con una posición basal con respecto a otras especies del género.

Abstract:
Pseudids constitute an aquatic neobatrachian group widely known because of their large tadpoles, they opossable thumb, and the presence of an intercalary cartilage between their two last phalanges of each finger. The phylogenetic relationships of this group are controversial and the interrelationships among Pseudis species are unknown. The adult osteology of Pseudis minuta, a species taken as the basis of the character analysis, is described herein. In addition, data on the osteogenesis of this species are presented and compared with the available information for other species of Pseudis. This comparisons suggest that changes in the ancestral ontogenetic trajectory may have operated in the evolution of the genus. In order to assess the taxonomic placement of pseudids parsimony analysis based on 35 taxa and 69 adult characters was performed. The resulting two most parsimonius trees agree in the exclusion of centrolenids from a close relationship with pseudids, the monophyly of the latter, and the paraphyletic nature of hylines with respect to pseudids. Both trees show the same internal topology of the pseudid clade, with P. minura and P.cardosoi as sister taxa having a basal position with respect to other species of the genus.

Barja, Beatriz Carmen. "Interacción química del herbicida glifosato y compuestos relacionados con Fe (III)" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En este trabajo se realizó el estudio de las reacciones químicas en solución acuosa y en estado sólido del herbicida glifosato (N-fosfonometilglicina, (PMG)) y compuestos relacionados (ácidos metilfosfónico (MPA), aminometilfosfónico (AMPA), sarcosina (N-metilglicina (MG)) con Fe(III) así como el de las reacciones de adsorción sobre la superficie de óxidos en suspensión acuosa. Se evaluaron los espectros ATR-FTIR en solución acuosa de los cuatro ligandos y se determinaron las constantes ácido-base del MPA y del PMG. Se estudiaron las interacciones químicas del PMG,el MPA y el AMPA con Fe (III) en solución acuosa obteniéndose un complejo de relación 1:1 metal:ligando. Para la Sarcosina no se observo formación del complejo en las condiciones del presente trabajo. Se sintetizaron los complejos en estado sólido del MPA,AMPA, y PMG con Fe(III), Al(III) y Co(III). Se obtuvieron compuestos de relación 2:3, 1:2 y 1:1 para Fe(III):MPA, Fe(III):AMPA y Fe(III):PMG respectivamente; 1:2 para Co(III):PMG y 1:1 para Al(III):PMG. Se estudiaron e interpretaron los espectros interfaciales de los complejos superficiales formados por los diferentes ligandos sobre la goethita. Se propusieron tres estructuras para los complejos con MPA y AMPA a las que se agrega una cuarta para el caso del PMG. Se midieron las movilidades electroforéticas de MPA/goethita y PMG/goethita para evaluar las cargas superficiales remanentes sobre el óxido de hierro debidas a la presencia de los complejos superficiales propuestos. Se realizó un estudio detallado de las isotermas de adsorción sobre goethita en función del pH y concentraciones variables de MPA,AMPA y PMG. Se determinaron las constantes de complejación superficial utilizando el modelo de la capacitancia constante.

Abstract:
The study of the chemical reactions in aqueous solution and solid state of glyphosate (N-phosphonomethylglycine, (PMG)) and related compounds (methylphosphonic acid (MPA), aminomethylphosphonic acid (AMPA), sarcosine (N-methylglycine (MG)) with Fe(III) was performed. The adsorption processes onto iron (III) oxides are also presented. The ATR-FTIR spectra of the four ligands were evaluated and the acid-base constants for MPA and PMG were calculated. The chemical interactions in aqueous solutions of PMG, MPA and AMPA with Fe (III) were evaluated. A 1:1 metal:ligand ratio complex was obtained for each ligand. The sarcosine complex formation was not observed for our experimental conditions. The complexes of MPA, AMPA, and PMG with Fe(III) in solid state were synthesized. A metal:ligand ratio of 2:3, 1:2 and 1:1 for Fe(III):MPA, Fe(III):AMPA and Fe(III):PMG respectiver are reported. The complexes of PMG with Co(III) and Al(III) were also obtained with a metal:ligand ratio of 1:2 and 1:1 respectively. The interfacial spectra of the surface complexes onto goethite were studied. Three surfaces complexes were postulated for MPA and AMPA, while a fourth one was necessary to explain the PMG/goethite adsorption behaviour. Electrophoretic mobilities were measured for MPA/goethite and PMG/goethite systems. The surface charge on iron oxide due to the presence of the surface complex was evaluated. The adsorption isotherms were studied for MPA,AMPA and PMG. The pH and concentration dependence was measured and the surface complexes formation constants were calculated using the constant capacitance model.

Barmak, Daniel Hernán. "Rol de la movilidad humana sobre epidemias de dengue en ciudades con clima templado (Buenos Aires)" (2015-06-02). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo principal de esta tesis es explorar los efectos producidos sobre una epidemia vectorial debido a los patrones de desplazamiento humanos. En particular se trabaja con la dispersión del virus del Dengue, mediado por el mosquito Aedes aegypti, en una ciudad de clima templado como Buenos Aires. Los análisis se realizan mediante simulaciones numéricas, basadas en modelos computacionales de carácter estocástico y que tienen en cuenta la espacialidad explícitamente. La dinámica poblacional del Aedes aegypti está basada en un modelo preexistente, el cual tiene sólo dos parámetros ajustables: la temperatura ambiental y la densidad de sitios de cría. Sobre este modelo base, se superimpone una dinámica para la movilidad humana, basada en patrones de movilidad observados experimentalmente. Luego se acoplan estas dinámicas poblacionales para permitir la transmisión del virus entre ellas. En primera instancia, se analiza el efecto que produce la elección de los tiempos característicos de los estadios humanos frente al virus. En dichos análisis se considera que los humanos no tienen movilidad alguna. Se observa que la sensibilidad del tama˜no final (cantidad de recuperados totales), la probabilidad de ocurrencia y la duración de las epidemias con la distribución del período de latencia del virus en el humano es baja, sin embargo, el tiempo de aparición del primer caso secundario o también llamado tiempo de generación es sensible a la distribución elegida. Luego se procede a analizar el efecto de los patrones de movilidad humanos. Esto está motivado por la evidencia experimental de la existencia de m´ultiples focos de dispersión en epidemias de Dengue, característica ausente en el caso de modelar la difusión del virus por el vuelo de los mosquitos ´unicamente. La movilidad humana está modelada siguiendo evidencia experimental, la cual sugiere que la distribución de distancias recorridas por los individuos sigue distribuciones de Levy-flight. Los análisis espacio-temporales permiten concluir que la movilidad humana es esencial para la descripción de las epidemias y que los modelos que no la toman en cuenta, solamente permiten describir correctamente el comienzo de la epidemia, sin embargo no permiten predecir el tama˜no final de epidemia ya que lo subestima y no permite explicar adecuadamente la evolución espacio-temporal. Habiendo introducido la movilidad, se analizan posibles intervenciones de importancia en salud publica, destinadas a reducir el impacto de las epidemias. Se consideran básicamente tres estrategias: Restricción de movimiento, que consiste en restringir la movilidad de los individuos sintomáticos. Aislamiento, que los aísla de las picaduras de los mosquitos. Y en tercer lugar fumigaciones, que consisten en la disminución de mosquitos en ubicaciones infestadas. Se observa que la primera de las estrategias es totalmente inefectiva y se recomienda combinar el aislamiento y la fumigación para lograr una mayor eficiencia aún en casos de baja eficiencia individual. Para concluir se analizan sendas situaciones que contemplan escenarios mas heterogéneos espacial y temporalmente. Situaciones donde la densidad de humanos no es homogénea en toda la ciudad, ya sea por la existencia de zonas más densamente pobladas, o por la existencia de un hospital donde concurren los individuos infectados. Además se consideran situaciones donde la resolución temporal del movimiento humano y las picaduras de los mosquitos es mayor a la descripción mínima utilizada hasta este punto.

Abstract:
The main objective of this thesis is to explore the effects produced on a vector epidemic due to human movement patterns. In particular we work with the dispersal of the Dengue virus, mediated by the Aedes aegypti mosquito, on a city with temperate weather such as Buenos Aires. Analyses were performed using numerical simulations based on computer models of stochastic nature which explicitly take spatiality into account. The population dynamics of the Aedes aegypti is based on an existing model, which has only two adjustable parameters: ambient temperature, and breeding sites density. On top of this base model, a human dynamic is superimposed, based on experimentally observed mobility patterns. These populations dynamics are then coupled to allow transmission of the virus between them. At first, the effect of the choice of the characteristic times of the human stages on the virus is analyzed. In such analysis it is considered that humans do not have any mobility for simplicity. Final size epidemics (total recovered individuals), probability of occurrence, and duration of epidemics are observed to be mildly sensitive to the distribution of the human latent period, however the time of appearance of the first secondary case (also called generation time) is sensitive to the chosen distribution. Then we proceed to analyze the effect of human mobility patterns. This is motivated by the experimental evidence for the existence of multiple foci of dispersion in Dengue epidemics, feature absent in the case of modeling the spread of the virus by the mosquito flight only. Human mobility is modeled after experimental evidence, which suggests that the distribution of distances traveled by individuals follows Levy-flight distributions. The spatiotemporal analysis allow us to conclude that human mobility is essential for the description of the epidemics, and that the models that do not take it into account allow only properly describe the beginning of the epidemic, however can not predict the final size of an epidemic since underestimate it, and can not adequately explain the spatiotemporal evolution. Having introduced mobility, possible public health measures aimed at reducing the impact of epidemics are discussed. Basically three strategies are considered: Restriction of movement, which is to restrict the mobility of symptomatic individuals. Isolation, insulating them from mosquito bites. And last, mosquito spraying, consisting of mosquito abatement on infested locations. It is observed that the first of these strategies is entirely ineffective, and that it is advisable to combine the isolation and spraying for greater efficiency even in cases of low individual efficiency. To conclude some situations that include spatial and temporally more heterogeneous scenarios are analyzed. Scenarios where human density is not uniform throughout the city, either by the existence of more densely populated areas, or the existence of a hospital where infected individuals concur. We also consider scenarios where the temporal resolution of human movement and mosquito bites is greater than the minimum description used to this point.

Baron, Walter Helmut. "Cuerdas y D-branas en espacio-tiempos curvos" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis estudiamos el modelo AdS3 Wess-Zumino-Novikov-Witten. Calculamos la Expansión en Producto de Operadores de campos primarios y de sus imágenes bajo el automorfismo de flujo espectral en todos los sectores del modelo considerado como una rotación de Wick del modelo coset H3+ . Argumentamos que las simetrías afines del álgebra requieren un truncado que determina la clausura de las reglas de fusión del espacio de Hilbert. Estos resultados son luego utilizados para discutir la factorización de las funciones de cuatro puntos con la ayuda del formalismo conocido como bootstrap.También realizamos un estudio de las propiedades modulares del modelo. Los caracteres sobre el toro Euclídeo divergen de una manera poco controlable. La regularización propuesta en la literatura es poco satisfactoria pues elimina información del espectro y se pierde así la relación uno a uno entre caracteres y representaciones del ́álgebra de simetría que forman el espectro. Proponemos estudiar entonces los caracteres definidos sobre el toro Lorentziano los cuales están perfectamente definidos sobre el espacio de funcionales lineales, recuperando así la biyección entre caracteres y representaciones. Luego obtenemos las transformaciones modulares generalizadas y las utilizamos para estudiar la conexión con los correladores que determinan los acoplamientos a las branas simétricas en tal espacio de fondo, obteniendo que en los casos particulares de branas puntuales o dS2 branas se recuperan resultados típicos de Teoría de Campos Conformes Racionales como soluciones tipo Cardy o fórmulas tipo Verlinde.

Abstract:
In this thesis we study the AdS3 Wess-Zumino-Novikov-Witten model. We compute the Operator Product Expansion of primary fields as well as their images under the spectral flow automorphism in all sectors of the model by considering it as a Wick rotation of the H3+ coset model. We argue that the symmetries of the affine algebra require a truncation which establishes the closure of the fusion rules on the Hilbert space of the theory. These results are then used to discuss the factorization of four point functions by applying the bootstrap approach. We also study the modular properties of the model. Although the Euclidean partition function is modular invariant, the characters on the Euclidean torus diverge and the regularization proposed in the literature removes information on the spectrum, so that the usual one to one map between characters and representations of rational models is lost. Reconsidering the characters defined on the Lorentzian torus and focusing on their structure as distributions, we obtain expressions that recover those properties. We then study their generalized modular properties and use them to discuss the relation between modular data and one point functions associated to symmetric D-branes, generalizing some results from Rational Conformal Field Theories in the particular cases of point like and dS2 branes, such as Cardy type solutions or Verlinde like formulas

Barquero, Andrea A.. "Actividad antiviral presente en hojas de Melia azedarach L.: modelo de acción contra el virus de la estomatitis vesicular" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Meliacina (MA), un principio antiviral presente en las hojas de la planta Melia azedarach L., es capaz de inhibir in-vitro la multiplicación de un amplio espectro de virus, algunos patógenos para el hombre como HSV-1 y el virus Junín (agente de la fiebre hemorrágica argentina), entre otros. El tratamiento con MA de células en cultivo antes de la infección (pretratamiento) también desencadena un estado antiviral que afecta la multiplicación de diferentes virus. En el presente trabajo de tesis los objetivos planteados fueron, caracterizar el establecimiento del estado refractario a la infección viral en células Vero y determinar el mecanismo de acción de MA sobre el virus de la estomatitis vesicular (VSV), elegido como modelo de estudio. Los resultados obtenidos al utilizar inhibidores de diferentes funciones o procesos celulares permiten concluir que para inducir el estado antiviral MA no requiere de los mecanismos de transcripción y traducción celulares activos; ni de la paiticipación de la PKR ni the ninguna otra quinasa o fosfatasa de Ser/Thr, mientras que, tanto la actinomicina D como el vanadato y la tirfostina B46 potenciaron su establecimiento. Al estudiar el efecto de MA sobre distintos pasos del ciclo de multiplicación de VSV se logró identificar al desnudamiento y al transporte de la glicoproteína G cómo los blancos de acción del pre y del post-tramiento, respectivamente. Considerando que, ambos procesos tienen lugar en compartimentos celulares ácidos (endosomas y sistema de Golgi) y que hay una correlación entre la acción antiviral y la basificación que MA provoca en los endosomas, se plantea la hipótesis de que la acción antiviral de MA es una consecuencia directa de su efecto sobre la ATPasa vacuolar responsable de la acidificación de dichas organelas.

Abstract:
Meliacine (MA), an antiviral compound present in purified leaf extracts of Melia azedarach L., exhibits a broad range of virus inhibition in-vitro. Besides, the pretreatment of cells with MA induces an antiviral state refractory to viral infection. The objectives of the present thesis work was to characterize the antiviral state triggers in cells by MA and to reveal the stage of VSV virus replication in Vero cells, used as a model system, affected by the antiviral. Using several inhibitors to characterize the induction of the antiviral state, we have found that transcription and translation protein processes are not necessary. The enzymatic activity of PKR, Ser/Thr kinases or phosphatases are not required for the stablishment of the anviral state. Whereas. actinomycin D, sodium vanadate and tyrphostin B46 used in combination with MA during pre-treatment significantly enhance the antiviral activity against VSV. The antiviral effect of MA in Vero or BHK-21 cells pre or post-treated prevents virus uncoating and blocks the transport of VSV-G protein to the plasma membrane. It was found that MA raised the pH within the endosomes, this effect was in correlation with the antiviral state duration. Taking into account that vacuolar type ATPase is responsible for maintaining the lower intraluminal pH in endosomes and Golgi complex we propose here that the inhibition of VSV uncoating and the block in the transport of G protein may be related to the effect of MA on the V-ATPase-mediated acidification

Barradas, José Sebastián. "Síntesis de azoles derivados de hidratos de carbono con potencial actividad biológica" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los “azoles” son compuestos que contienen un anillo heterocíclico de cinco o seis miembros con dos o más nitrógenos. Teniendo en cuenta su interés biológico, en este trabajo se planteó la síntesis y caracterización de una serie de azoles como agentes antivirales. Se sintetizaron compuestos pertenecientes a las siguientes familias heterocíclicas: 1,2,4-triazolil-3-tionas, 1,3,4-oxadiazoles y imidazotiazoles, así como los pirrolotiazoles análogos isostéricos de imidazotiazoles, todos ellos sustituidos con un residuo glicosídico y un anillo aromático halogenado. Primeramente, se llevó a cabo la síntesis de derivados fúranósicos protegidos, donde los heterocíclicos antes mencionados se formaban mediante la funcionalización del carbono exocíclico. Este objetivo también involucró la búsqueda y optimización de condiciones de halogenación y oxidación quimioselectivas. Además, se estudió la influencia de la estereoquímica del carbohidrato sobre los rendimientos de reacción para la síntesis de los precursores. Los compuestos fueron evaluados por colegas contra virus Junín y virus Dengue, siendo los imidazotiazoles los derivados más promisorios. Posteriormente y gracias a la versatilidad de la estrategia sintética utilizada, se extendió la síntesis de imidazotiazoles que presentan variaciones en la posición relativa de los sustituyentes sobre el heterociclo. Se compararon condiciones de calentamiento térmico y por microondas, logrando con esta última minimizar tiempos de reacción. Los estudios de actividad antiviral indicaron que los derivados bromados y clorados resultaron los más activos. Para evaluar la hidrofilia en la actividad, se sintetizaron derivados análogos donde el hidrato de carbono estuviese desprotegido. Para cumplir con este objetivo se evaluaron distintos grupos protectores siendo el p-metoxibencilo aquel que permitió obtener los compuestos deseados. La evaluación antiviral de los mismos indicó que la mayor hidrofília resultaba en desmedro de la actividad.

Abstract:
The "azoles" is a class of five or six-membered heterocyclic ring compounds containing two or more nitrogens. This work was focused in the synthesis and characterization of a series of azoles as antiviral agents. The following heterocyclic families were synthesized: 1,2,4-triazolyl-3-thiones, 1,3,4-oxadiazoles, imidazothiazole and pyrrolothiazoles, isosteric compounds of the imidazothiazoles, substituted with a glycosidic residue and a halogenated aromatic ring. Firstly, we performed the synthesis of furanosic-protected derivatives, the abovementioned heterocyclic rings where formed by functionalization of exocyclic carbon. To achieve this goal, the search and optimization of chemoselectivity halogenation and oxidation conditions was also involved. Furthermore, we assessed the influence over the reaction yields of carbohydrate stereochemistry involved in the precursors synthesis. The obtained compounds were evaluated by colleagues against Junín virus and Dengue virus being the imidazothiazoles the most promising derivatives. Subsequently, thanks to the versatility of the synthetic strategy used, we spread the imidazothiazole synthesis with variations in the relative position of heterocycle’s substituents. Classic and microwave heating conditions were compared, achieving with microwave heating an important reduction of reaction time. Finally, studies of antiviral activity showed that brominated and chlorinated derivatives were the most active. To evaluate the hydrophilicity in the antiviral activity, the synthesis of the analogous derivatives with unprotected carbohydrate residue was planned. To achieve this objective, different protecting groups were evaluated. The optimal reaction yields were obtained when p-methoxybenzyl was used as protective group. However antiviral evaluation of these new family members indicated that, an increase in compound´s hydrophilicity produce a decrease the antiviral activity.

Barrantes, María Eugenia. "Influencia de la calidad del hospedador y de la competencia por recursos energéticos durante la ontogenia sobre el estado fisiológico y el éxito reproductivo del parasitoide Mallophora ruficauda (Diptera: Asilidae)" (2015-03-30). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Mallophora ruficauda es un ectoparasitoide solitario de larvas de coleópteros Scarabaeidae, con una alta preferencia por Cyclocephala signaticollis. La hembra ovipone fuera del hospedador y la larva busca, encuentra y parasita al hospedador actuando como el equivalente ecológico de la hembra adulta de los parasitoides tradicionales. En un contexto de forrajeo, las larvas pueden reconocer y orientarse a C. signaticollis frente a otras especies potenciales, y poseen la capacidad de discriminar a los hospedadores parasitados, sin embargo en la naturaleza el superparasitismo es frecuente. Al tener una única oportunidad de parasitismo, el fitness del parasitoide dependerá completamente de este evento, por lo que el costo de elegir un hospedador de baja calidad (pequeño, parasitado o estresado) es alto. Se desconoce si las larvas pueden evaluar parámetros del hospedador indicadores de su condición corporal, así como la influencia que tiene la toma de decisiones de las larvas sobre la condición o desempeño del adulto que emerge. En esta Tesis se estudió la influencia de la calidad del hospedador seleccionado y de la competencia intraespecífica de las larvas sobre el éxito reproductivo del parasitoide adulto. Se encontró que la probabilidad de ganar la competencia en larvas que están superparasitando a un hospedador son independientes del orden de llegada en que las larvas atacaron al hospedador y del tiempo transcurrido entre el aferramiento de la primera larva y la siguiente, lo que explica en parte la ocurrencia natural del superparasitismo. Al evaluar la orientación de las larvas en parches de hospedadores sanos o parasitados que diferían en tamaño y número se observó que la distribución de larvas entre hospedadores no presentó un patrón definido, a pesar que las larvas detectaron a sus coespecíficos en el parche, sugiriendo que elegir un hospedador de alta calidad en recursos energéticos carecería de importancia en interacciones prolongadas en el tiempo. Por otro lado, se encontró que las larvas pueden discriminar y seleccionar a los hospedadores en función del grado de estrés, utilizando una clave de naturaleza química, y que eligen parasitar al menos perturbado o de mejor calidad. Finalmente, el peso del hospedador y el superparasitismo serían factores importantes que tienen influencia sobre la condición corporal de los parasitoides adultos de la nueva generación.

Abstract:
Mallophora ruficauda is a solitary ectoparasitoid of Scarabaeidae beetle larvae, with a high preference for Cyclocephala signaticollis. The female oviposits outside of the host and the larva seeks, finds and parasitizes the host acting as the ecological equivalent of the adult female in traditional parasitoids. In a foraging context the larvae can recognize and orient towards C. signaticollis against other potential species, and possess the ability to discriminate parasitized hosts, but in nature super-parasitism is common for this species. By having a single opportunity to parasitize, parasitoid fitness depends entirely on this event, therefore the cost of choosing a host of low quality (small, parasitized, or stressed) is high. It is unknown whether larvae can evaluate parameters of the host indicative of its bodily condition, as well the influence these decisions can have on the condition when the adult emerges. In this thesis we studied the influence of the quality of the selected host and larval intraspecific competition on the reproductive success of the adult parasitoid. We found that the probability of winning the competition in larvae that are superparasitizing a host is independent of the order of arrival, where on its body the larvae attacks the host and the time between the attachment of the first larva and the next, which explains in part the natural occurrence of super-parasitism. In assessing the orientation of larvae in patches of healthy or parasitized hosts that differed in size and number we observed no clear pattern in the distribution of larvae between hosts, even though larvae detected conspecifics in the patch, which suggests that choosing a host with high quality energy resources would be irrelevant in prolonged interactions. Furthermore, it was found that the larvae can discriminate and select the host according to its degree of stress, using a chemical cue, and choose to parasitize the least disturbed or of better quality. Finally, the weight of the host and super-parasitism would be important factors influencing the body condition of adult parasitoids of the new generation.

Barraza Bernadas, Verónica D.. "Modelos y aproximaciones basadas en información satelital en microondas pasivas para la estimación de la evapotranspiración en áreas boscosas de la Cuenca del Río Bermejo" (2015-02-15). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La evapotranspiración (ET), proceso simultaneo entre la evaporación del agua de la superficie del suelo y de la cubierta vegetal, es una variable de interés para diversas disciplinas, entre ellas la climatología, la ecología, la agronomía y la hidrología. Dada la gran oferta de datos de sistemas satelitales en microondas pasivas (AMSR-E, AMSR-2, Windsat, SMMI, SAC-D/ Aquarius y MWR, SMOS) operativos en la última década (2002-2013), esta tesis planteó el aprovechamiento sinérgico de datos de sistemas pasivos en microondas, ópticos y datos meteorológicos a fin de obtener información relevante para la estimación de la evapotranspiración en áreas boscosas. La metodología se basó en la estimación de la conductancia superficial a partir de datos satelitales multisensor y luego se combinaron dichas estimaciones con variables meteorológicas (obtenidas de estacione meteorológicas o datos de re-análisis) en el marco del algoritmo de Penman-Monteith. Se utilizaron índices ópticos (como ser, el índice de vegetación normalizado (EVI) y el índice de agua normalzado (NDWI)) e índices de microondas pasivas (como ser, el índice de frecuencia (FI) y el índice de polarización (PI)) para estimar tanto la conductancia superficial como la ET. Para evaluar la relación entre los índices de microondas y ópticos con variables biofísicas de relevancia para estimar la ET, como ser el contenido de agua del dosel y las hojas, se utilizaron modelos de transferencia electromagnético del óptico (PROSAILH) y microondas (Modelo de Tor Vergata). Para la validación in situ de esta metodología, se utilizaron datos de torres de flujo de covarianza de torbellino de diversas áreas boscosas que forman parte de las redes de torres de flujo FLUXNET (www.fluxnet.ornl.gov) y OZflux (www.ozflux.org.au). El rendimiento del modelo se evaluó cuantitativamente mediante el uso del coeficiente de regresión (r2), y la raíz del error cuadrático medio (RMSE). Se compararon los resultados obtenidos con otros productos de evapotranspiración, como ser el producto MODIS MOD16A2, la capa de información del modelo de superficie GLDAS-NOAH (Global Land Data Assimilation System) y del set de datos de re-análisis MERRA (Modern-era retrospective analysis). Estos resultados son de interés especialmente para muchos ecosistemas a nivel mundial que carecen de datos meteorológicos de terreno espacialmente distribuidos, convirtiéndose en una alternativa robusta para la estimación de la ET. Finalmente, se comparó la estimación de la ET utilizando la metodología desarrollada para una de las principales áreas boscosas de la cuenca del río bermejo (bosque Chaqueño) que carece de datos de terreno, con otros productos de ET (MOD16A2, MERRA, GLDAS-NOAH).

Abstract:
In this study, we evaluated and compared optical and passive microwave indices based on retrievals of surface conductance (Gs) and evapotranspiration (ET) following the Penman-Monteith (PM) approach. Given the wide range of satellite data from passive microwave systems available in the last decade (2002-2013) (AMSR-E, AMSR-2, Windsat, SMMI, SAC-D / Aquarius and MWR, SMOS), this thesis used data from passive microwave systems, optical and meterological data to obtain relevant infomation to estimate ET over forest areas. The methodology was based on the estimation of surface conductance from multisensor satellite data and then these estimates were combined with meteorological variables (obtained from meteorological station or re-analysis data) under the Penman-Monteith algorithm. Optical indices (such as, enhaced vegetation index (EVI) and normalized water index (NDWI)) and passive microwave indices (such as, frecuency index (FI) and polarization index (PI)) were used to estimate both surface conductance (Gs) and then ET. To evaluate the relationship between microwave and optical indices with biophysical variables relevant to estimate ET, such as the water content of the leaf canopy, two electromagnetic models were used (PROSAILH and Tor Vergata model). For the validation we used data from Eddy covariance flux tower of several forest types from FLUXNET (www.fluxnet.ornl.gov) and OZflux network (www.ozflux.org.au). Model performance was evaluated using the regression coefficient (r2), and the root mean square error (RMSE). The results obtained was compared to other ET products, such as MODIS MOD16A2, GLDAS/NOAH (Global Land Data Assimilation System) and MERRA (Modern-era retrospective analysis). These results are of particular interest to many ecosystems worldwide due to the spatially distributed meteorological data, becoming a robust alternative to estimate ET. Finally, ET was estimated for the northern Chaco forest using equations obtained in this thesis, combined with reanalysis data and surface models information.

Barredo, Silvia Patricia. "Análisis estructural y tectosedimentario de la subcuenca de rincón blanco, precordillera occidental, provincia de San Juan" (2004). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En la región del río Los Patos, provincia de San Juan, aflora un serie triásica asociada al hemigraben mas septentrional de la cuenca Cuyana. Este ha sido identificado como Rincón Blanco y reúne los depósitos de Barreal, Hilario, Rincón Blanco, quebradas El Salto, El Tigre y Cerro Puntudo. El área de estudio forma parte de la faja corrida y plegada de la Precordillera en donde la deformación compresiva dio lugar al desarrollo de estructuras complejas y fenómenos de inversión tectónica que dificultan el análisis del rift, la historia de su relleno y consecuentemente la correlación a través de la subcuenca. Sin embargo, el mapeo detallado de las estructuras, el estudio cinemático de las fallas y el análisis de la evolución de los ambientes sedimentarios posibilitaron la elaboración de un modelo simplicado del período extensional de la subcuenca. La sedimentación fue continental, epiclástica y piroclástica y tuvo lugar en depocentros aislados que formaron un hemigraben asimétrico con polaridad este. El margen activo corresponde a la zona de Rincón Blanco mientras que la rampa corresponde a la zona de Barreal - Hilario. La evolución del relleno estuvo marcada por un fuerte control tectónico y climático que le imprimieron a las secuencias rasgos distintivos. Estas características permitieron aplicar los conceptos de la estratigrafía secuencial, así se identificaron tres secuencias depositacionales en términos de espacio de acomodación, que representan dos estadíos de rifting (sinrift I y II) y sus correspondientes sags. Los resultados obtenidos correlacionan muy bien con lo observado en la rampa y con lo propuesto por otros autores para el depocentro Uspallata. El interesante contenido fósil compuesto por flora, fauna invertebrada, en especial de trazas fósiles, y vertebrada dada por la presencia de icnitas de tetrápados se utilizó para reconstruir la paleogeografía de la cuenca, al mismo tiempo que constituyó una herramienta de gran valor para ajustar la propuesta estratigráfica secuencial lograda a través de los conceptos tectosedimentarios. El estudio detallado de la asociación de tetrápodos de la Formación Corral de Piedra, asimismo señala que por sus características constituyen hasta el momento el registro más antiguo de este grupo de dinosaurios en el mundo. Finalmente el análisis estructural y tectosedimentario permitieron ver que la secuencia aflorante sobre la margen oriental de la cuenca no está directamente relacionada al Grupo Rincón Blanco y hasta tanto no se cuente con un dato preciso de edad, se la ha identificado como Unidad Marachemill.

Abstract:
A series of Triassic rocks related to the infilling of the northernmost portion of the Cuyana basin outcrop in the surroundings of Los Patos river, in the San Juan province. The corresponding depocenter has been identified as Rincón Blanco subbasin and it is proposed here to involve the Barreal, Hilario, Rincón Blanco, El Salto, El Tigre creeks and the Cerro Puntudo sites. The studied area is part of the Precordillera fold and thrust belt where complex structures and diverse inversion tectonics phenomena have occurred as result of the cenozoic compressional deformation. Consequently the understanding of the rift evolution, the history of its infilling and the correlation throughout the basins require a deep analysis. A detailed mapping of the structures, the kinematic study of the faults and the examination of the sedimentary environments evolution made it possible to build a simplified model for the extensional period of the basin. Continental, epiclastic and pyroclastic sedimentation took place in isolated depocenters which built an asymmetric halfgraben with its deepest portion to the east-northeast, in the Rincón Blanco region, and the ramp to the west in the Barreal - Hilario towns. The infilling was strongly controlled by tectonic and climatic parameters which in term produced distinctive features along the whole sequence. These letter made it possible to applied the so extended sequence stratigraphy concepts and thus recognised three depositional sequences according to the accommodation space. They can be associated with two rifting stages (synrift I and II) and their corresponding sag phases. This evolutive scheme most correlates with the ramp record and with several models proposed by other authors for the Uspallata subbasin. The worthfull fossil record mainly composed of flora, invertebrates, specially trace fossils, and vertebrates consisting of tetrapod tracks were applied to make a paleogeographical model for the basin. Furthermore, it was used as a tool to calibrate the sequence stratigraphic model achieved by using tectosedimentary elements. Comparative study of the tetrapod association of the Corral de Piedra Formation proved that it is the oldest one registered up to now around the world. Finally and in spite of the lack of age data, the structural and tectosedimentary analysis held here permitted to see that the sequence outcropping along the east margin of the basin is not related to the Rincón Blanco Group as previously proposed and hence it has been distinguished here as Unidad Marachemill.

Barreira, Sandra C. B.. "Variabilidad espacial y temporal de la concentración del hielo marino antártico y su relación con la circulación atmosférica" (2008). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Existen numerosos estudios en la literatura que sugieren algún tipo de conexión entre los campos de hielo marino de las regiones polares y el clima global pero, la naturaleza específica y los mecanismos a través de los cuales las variaciones en los campos de hielo marino están relacionadas con el clima global o de latitudes medias están todavía pobremente definidos. La presente tesis pretende completar los estudios realizados previamente por otros autores y mejorar los conocimientos existentes sobre conexiones entre el hielo marino en la Antártida y el clima global, a la vez que evaluar su significado enfocándose en la región antártica donde se producen las mayores variaciones del campo de hielo marino, tanto temporal como espacialmente, que es sobre los mares de Amundsen, Bellingshausen y Weddell. Específicamente, lo que se intentó realizar fue cuantificar la variabilidad tanto espacial como temporal del campo de hielo marino, identificar las relaciones que existen entre la variabilidad del hielo marino y el clima tanto polar, de latitudes medias como global, señalar la significancia de estas relaciones e identificar regiones geográficas que puedan mostrar las conexiones más fuertes, teniendo en cuenta que la identificación de las conexiones entre la región polar y el resto de las regiones terrestres es el primer paso para determinar los mecanismos responsables de las mismas. Para examinar las variaciones espaciales del hielo marino antártico, determinar cuando se da una cierta estructura de anomalía espacial e investigar su relación con el clima tanto polar como de Sudamérica, se analizaron los datos de concentración de hielo marino en modo-T y se confeccionaron mapas de composiciones de distintas variables atmosféricas. Para examinar las variaciones temporales, y encontrar las áreas donde las mismas resultan homogéneas así como ver la forma en que se relacionan con la variabilidad del clima global, se analizaron los datos de concentración de hielo marino en modo-S y se confeccionaron mapas de correlación entre distintas variables atmosféricas y las series patrón encontradas así como correlogramas cruzados entre dichas series y algunos índices atmosféricos.

Abstract:
There are numerous studies in the literature that suggest some kind of connection between sea ice fields of the polar regions and global climate but, the specific nature and the mechanisms through which the variations in sea ice fields are related to global or midlatitudes climate are still poorly defined. The present thesis tries to complete previous studies done by other authors and to improve the existing knowledge on connections between sea ice in the Antarctica and the global climate, simultaneously with the evaluation of its meaning focusing in the Antarctica region where the greater variations of sea ice field take place, temporary as well as spatially, that is on the Amundsen, Bellingshausen and Weddell Seas. Specifically, what was tried to be done was to quantify sea ice spatial and temporary variability, to identify the relations that exist between sea ice variability and polar, mid-latitudes and global climate, to indicate the significance of these relations and to identify the geographic regions which show the strongest connections, considering that the identification of the connections between the polar region and the rest of the terrestrial regions is the first step to determine the mechanisms that are responsible for them. In order to examine the space variations of Antarctic sea ice, to determine when a certain structure of space anomaly occurs and to investigate its relation with polar and South America climate, the sea ice concentration data were analyzed in T-mode and composite maps of different atmospheric variables were made. In order to examine the temporary variations, and to find the areas where the same ones turn out homogenous as well as to see the form they are related to the variability of the global climate, sea ice concentration data were analyzed in S-mode and correlation maps between different atmospheric variables and the found pattern series, as well as cross-correlograms between these series and some atmospheric indexes were made.

Barrera, Daniel Florencio. "Análisis climático-estadístico de las estructuras temporales y espaciales de la precipitación diaria en meso-escala : Aplicación al filtrado y corrección de errores de observación" (1988). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Barrera, Viviana Andrea. "El género Hypocrea Fr. (Hypocreales, Ascomycota) en la Argentina. Estudio de la variabilidad molecular de su estado anamórfico Trichoderma" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En la presente tesis se informan los resultados de un estudio polifásico integral del género Hypocrea/Trichoderma de Argentina. El estudio se encaró desde varios puntos de vista: biodiversidad, morfología, filogenia, incluyendo el análisis de la variabilidad de cepas biocontroladoras de T. harzianum. Para mostrar los resultados de forma ordenada se ha organizado el texto en dos capítulos. El Capítulo I trata sobre la identificación de ejemplares coleccionados y depositados en herbarios nacionales e internacionales. En el Capítulo II se analiza una colección de cepas bicontroladoras nativas de T. harzianum para reconocer caracteres útiles para su aplicación en el campo del control biológico. Como consecuencia de este estudio se identificaron 38 especies de las cuales se incorporan 4 especies nuevas para la ciencia, 2 especies que se citan por primera vez para Sudamérica, 17 especies que se citan por primera vez para la Argentina y por primera vez se cita la relación teleomorfo-anamorfo para T. longibrachiatum. Se caracterizaron 25 cepas nativas biocontroladoras de T. harzianum, se observaron diferencias en cuanto a sus requerimientos nutricionales y alta similitud entre sus caracteres genéticos. Se encontraron 291 marcadores moleculares polimórficos de RAPD de los cuales 15 fueron específicos para 5 cepas y 58 marcadores moleculares polimórficos de UP-PCR de los cuales 5 resultaron específicos para una cepa.

Abstract:
In this thesis we report the results of a comprehensive multi-phase study of the genus Hypocrea/Trichoderma in Argentina. The study was faced from several points of view: biodiversity, morphology and phylogeny, including analysis of the variability of biocontrol strains of T. harzianum. To display the results in an orderly way, the text is organized into two chapters. Chapter I deals with the identification of specimens collected and deposited in national and international herbaria. Chapter II discusses a collection of native biocontrol T. harzianum strains to recognize characters useful for application in the field of biological control. As a result of this study 38 species were identified of which are incorporated 4 new species to science. Two species are recorded for the first time for South America, 17 species recorded for the first time for Argentina and for the first time cited the teleomorph-anamorph relationship to T. longibrachiatum. Twenty five native biocontrol T. harzianum strains were characterized, showing differences in their nutritional requirements and high genetic similarity between their characters. We found 291 polymorphic RAPD molecular markers of which 15 were specific for 5 strains and 58 polymorphic molecular markers of UP-PCR of which 5 were specific for one strain.

Barrero, Paola Roxana. "Secuencia nucleotídica completa del Adenovirus 7h: análisis de los polimorfismos del gen del hexón de los Adenovirus circulantes en Buenos Aires entre los años 1990-2002" (2004). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los Adenovirus circularon en el período 1999-2002 durante todo el año, registrándose un mayor número de casos en el período invernal de baja temperatura y primaveral con cambios de temperatura frecuentes. El diagnóstico virológico se realizó tempranamente luego de la internación siendo la bronquiolitis el diagnóstico clínico al ingreso más frecuente. Se registró un mayor número de casos en menores de 12 meses y la evolución en general fue favorable registrándose 9 casos fatales en un total de 362 muestras analizadas. Se encontró una correlación negativa de grado medio con respecto a la temperatura, indicando un aumento en el número de casos cuando el registro térmico desciende. En cuanto a la humedad relativa y el índice UVB, la relación no es tan clara aunque es siempre de grado menor. Este parece ser un parámetro no necesariamente asociado a la aparición de casos de Adenovirus. El análisis filogenético del hexón completo permitió agrupar las muestras fatales y las separó de las graves y leves en el periodo 1990-1999. El análisis de las regiones hipervariables en el período 1990-2002 posicionó a las muestras analizadas en el cluster GTC2 junto al AV7h. La secuencia completa del AV7h se llevó a cabo por una estrategia de ensamblado de 8 contigs que permitieron elaborar una secuencia consenso de 35259 pb. con un porcentaje G+C del 51%. Se conservaron intactos los genes para las regiones tempranas, intermedias y tardías. El análisis filogenético ubicó al genoma AV7h junto con el AVB con el que tiene una homología del 84%. Se hallaron ORFs relacionados con proteínas pulmonares que podrían inducir autoanticuerpos o daño pulmonar crónico postviral.

Abstract:
In Argentina, Adenovirus 7h (AV7h) has been frequently associated with fatal cases and chronic lung disease. In to order to understand the characteristics of AV7h we accomplished the entire reference sequencing and analysed sample polymorphism in the hexon gene from a twelve-year period (1990-2002). Nasopharyngeal aspirates from children with acute lower respiratory infections were characterized by multiplex-PCR. Primers were designed and PCRs were performed to obtain the full genome for the reference 7h strain 87-922 and the entire hexon gene or hipervariable regions for samples. Amplicons were sequenced, contigs were aligned, a consensus full-length sequence was obtained for the reference strain 87-922 and phylogenetic relationships for hexon gene were inferred by maximum-likelihood criteria. Overall differences between AV7h hexon gene and prototype for serotype 7 (Gomen) sequence were <4% at nucleotide level and <3.5% at amino acid level. Phylogenetic analysis clustered together fatal cases apart from severe and mild cases. The entire genome was completed in 8 contigs with 44, 16, 7, 15, 14, 26, 18 and 15 primer reactions respectively. AV7h was 35263 bp in length and had a GC content of 51% and genes from the early, intermediate, and late regions were present in the expected human adenovirus locations. The genome differs from prototype strain for AVB (subspecie B2) in 16%, and 4% from vaccinal strain AV7(subspecie B1). This work constitutes the first attempt to elucidate intragenotypic variations within AV7h and to reveal particular features of this strain.

Barrio, María Marcela. "Obtención y caracterización del anticuerpo monoclonal Fc-5.01, reactivo con cáncer de mama, melanoma y otros tumores humanos" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Con el objeto de producir anticuerpos monoclonales (AMCs) dirigidos contra antígenos (Ags) expresados por células tumorales indiferenciadas, los cuales podrían ser comunes a varias neoplasias, se utilizaron las células IIB-BR-G como inmunógeno. Esta línea celular de carcinoma mamario presenta características sumamente indiferenciadas y fue derivada de un tumor primario de mama altamente indiferenciado, que no expresa receptores hormonales. Se seleccionó un AMC denominado FC-5.01 (lgG2a), el cual reconoce distintos carcinomas humanos y el 100% de los melanomas malignos. Su reactividad con la mayoría de los tejidos normales es escasa, ya que FC-5.01 reconoce algunas células del sistema neuroendócrino, macrófagos y algunos túbulos contorneados proximales en el riñón, mayormente con un patrón intracelular. A nivel bioquímico, el Ag reconocido por FC-5.01 es una glicoproteína heterogénea (banda ancha con un peso molecular de 30-60 kDa) en melanomas y carcinomas humanos. El epitope reside en el núcleo protéico (25kD) y es presumiblemente conformacional, con puentes disulfuro implicados en el reconocimiento del AMC. En esta Tesis se demuestra que FC-5.01 reacciona con el Ag CD63, inicialmente descripto como un Ag asociado a melanoma, y miembro de la superfamilia Tetraspan o Tetraspaninas. La reactividad de FC-5.01 con CD63 se demostró por Western blot, con ensayos de inmunodepleción con otro anticuerpo anti-CD63 y por análisis de FACS (fluorescence activated cell sorting) de la línea celular de melanoma KM3 (CDGB-negativa) luego de la transfección con la copia genómica de CD63. El epitope reconocido por el AMC FC-5.01 es diferente del reconocido por otro AMC anti-CD63 (ME491), como se demostró por un radioimmunoensayo de inhibición cruzada. Opuestamente a lo propuesto para el AMC ME491, no se observaron diferencias significativas en Ia expresión de CD63 entre melanomas primarios y metastásicos usando AMC FC-5.01, por medio de inmunohistoquímica. Por inmunofluorescencia indirecta realizada a 4°C con células vivas, se determinó que el Ag reconocido por FC-5.01 está presente en las membranas plasmáticas de células IIB-BR-G y otras células neoplásicas. En células permeabilizadas, FC-5.01 co-localiza con el colorante naranja de acridina en vesículas acídicas (compartimiento lisosomal/endosomal). Por análisis de Scatchard realizado con células IB-BR-G, se calculó una constante de afinidad de 1.4 ± 0.4 x 10^7 M^-1 y 2.1 x 10^6 sitios antigénicos por célula. El AMC FC-5.01 no media reacciones citotóxicas contra células CD63+ (fijación de complemento ni ADCC= antibody dependent cellular cytotoxicity), pero el complejo FC-5.01-CD63 es eficientemente internalizado hacia vesículas intracitoplasmáticas, como se observó en un ensayo de inmunofluorescencia posterior a la incubación a 37°C. El catabolismo celular del AMC unido por las células IIB-BR-G se estudió usando -FC-5.01. Luego de 18 hs a 37°C, >70% de la radioactividad se encontró en el sobrenadante del cultivo como fragmentos degradados (TCA-solubles). En células IIB-BR-G se demostró rápida re-expresión del Ag luego de la internalización. El AMC FC-5.01 disminuyó la migración de células CD63+ en un ensayo de cámara de Boyden. Estas propiedades permitirían el uso del AMC FC-5.01 como un vehículo para dirigir diferentes compuestos dentro de células CD63+. Luego de haber logrado la radioinmunolocalización de xenotransplantes de carcinoma mamario humano creciendo en ratones nude (IIB-BR-GNUDE ) con -FC- 5.01, se formuló un kit de marcación en un paso, para obtener -FC-5.01, con posible utilidad en diagnóstico por imágenes. Este kit se preparó por reducción del AMC con 2-mercaptoetanol y la adición de difosfonato de metileno (MDP) como ligando transquelante. Luego de la marcación con eluído de generador, las especies marcadas se analizaron por ITLC (instant thin layer chromatography) y HPLC (high performance liquid chromatography). La eficiencia de marcación fue superior al 90% y la conservación de la inmunoreactividad se verificó con células IIB-BR-G. En el modelo IIB-BR-GNUDE se realizaron biodistribuciones e imágenes en cámara gamma con -FC-5.01. A las 24 hs la radioactividad se incrementó en los tumores (14.4 ± 5.3 % de la dosis inyectada/ gr tumor) y disminuyó en la sangre y los principales órganos, y los tumores se radioinmunodetectaron perfectamente en la cámara gamma. Los controles de calidad demostraron que el kit resulta estable por un período de hasta 120 días. Alícuotas de este mismo kit se inyectaron a dos pacientes con melanoma maligno (0.5 mCi/paciente), y en uno de ellos fue posible localizar, a las 24 hs, una metástasis en un gánglio linfático axilar, que ya había sido detectada por medio de tomografía computada. Este kit preparado para radioinmunodetección (RID) in vivo podría ser utilizado en el futuro con fines diagnósticos en pacientes con melanoma u otros tumores CD63+. Dados estos resultados, se utilizó el mismo modelo in vivo para experimentos de radioinmunoterapia (RIT). Se investigó la capacidad de -FC-5.01 para controlar el crecimiento de los tumores IIB-BR-GNUDE. En un primer experimento de RIT se observó una inhibición significativa del crecimiento tumoral (p<0.05) en animales portadores de tumor, tratados con -FC-5.01(900 μCi) fraccionados en tres dosis semanales, respecto de los animales control. Se observó cierto grado de toxicidad hematológica (pérdida de peso corporal, hipoplasia de la médula ósea, bajos recuentos de leucocitos totales). No se observaron regresiones o curas. También se observó incremento de la probabilidad de supervivencia debida al tratamiento con -FC-5.01 en uno de los experimentos. El nivel de toxicidad fue disminuído reduciendo la dosis de -FC-5.01 y por administración de G-CSF (granulocyte-colony stimulating factor) como complemento de la RIT.

Abstract:
In a research project directed to produce monoclonal antibodies (mAbs) towards undifferentiation antigens (Ags), which could be common to several tumors, immunization with extremely undifferentiated tumor cells was attempted. One of such cells is the human breast cancer cell line, IIB-BR-G, developed in our laboratory and derived from a highly undifferentiated breast tumor. A mAb designated FC-5.01(IgG2a) was selected, that binds to several human carcinomas and malignant melanoma. It has null or very low reactivity with most human normal tissues, with the exception that FC-5.01 binds to some cells from the neuroendocrine system, macrophages and some renal proximal convolute tubules. Biochemical studies indicate that FC-5.01 recognizes an heterogeneous glycoprotein (broad band between 30-60 kDa) in melanoma tumors. The epitope resides in the protein core and is presumably conformational, with disulphide bonds implicated in mAb recognition. In this Thesis it is demonstrated that mAb FC-5.01 reacts with CD63 Ag, which has been initially described as a melanoma-associated Ag, and is a member of the tetraspan superfamily. Reactivity of mAb FC-5.01 with CD63 was demonstrated by Western blot, immunodepletion assays and FACS analysis of the CD63-negative melanoma cells (KM3) after transfection with the genomic copy of CD63. The epitope recognized by mAb FC-5.01 is different from the epitope recognized by another anti-CD63 mAb, ME491, as shown by an inhibition radioimmunoassay. Opposite to what has been stated for mAb ME491, no significant differences were found in CD63 expression between primary and metastatic melanoma using mAb FC-5.01. The Ag recognized by mAb FC-5.01 is located in the plasma membranes of IIB-BR-G and other neoplastic cells, as detected by indirect immunofluorescence performed at 4°C on live cells. When the cells are permeabilized, mAb FC-5.01 recognizes acidic vesicles which colocalize with acridine orange (lysosomal/ endosomal compartment). Scatchard plot analysis performed on IB-BR-G cells demonstrated a 1.4 ± 0.4 x 10^7 M^-1 affinity constant and 2.1 x 10^6 antigenic sites per cell. mAb FC-5.01 is not able to mediate C (complement) fixation or antibody dependent cellular cytotoxicity (ADCC) towards CD63+ cells, but the FC-5.01-CD63 complex is efficiently internalized into cytoplasmic vesicles, as shown by an acid wash immunofluorescence assay. Cellular catabolism of the bound antibody by IIB-BR-G cells was studied using -FC-5.01. At 18 hs, >70% of the radioactivity was present in the supernatant as degraded fragments (TCA-soluble). After internalization, rapid Ag re-expression could be demonstrated in IIB-BR-G cells. mAb FC-5.01 diminished migration of CD63+ cells, in a Boyden chamber assay. These properties would enable to use mAb FC-5.01 as a vehicle to target different compounds inside CD63+ cells. After demonstrating positive radioimmunolocalization with -FC-5.01 of human breast growing in nude mice, a one-step labelling kit was specially formulated for this mAb in order to obtain -FC-5.01. This kit was produced by mAb reduction with 2-mercaptoethanol and by adding methylene diphosphonate (MDP) as the transchelating ligand. The labeled species were analyzed by instant thin layer chromatography (ITLC) and high performance liquid chromatography (HPLC). Labeling efficiency was greater than 90%. Immunoreactivity was assessed on IIB-BR-G cells. Biodistribution of -labeled mAb FC-5.01 and tumor imaging were performed in nude mice bearing breast cancer IIB-BR-GNUDE xenografts. At 24 hs accumulation of increased in tumor (14.4 ± 5.3 % injected dose/ gr tumor) and decreased in blood and most organs. Quality control tests demonstrated that the kit was stable for up to 120 days. Therefore, animal studies demonstrated good and specific in vivo tumor targeting. Given these results, the ability of -FC-5.01 to influence tumor growth in vivo was further investigated. Preliminary radioimmunotherapy (RIT) experiments showed that there was a significative tumor growth inhibition (p<0.05) in animals treated with 900 μCi fractionated into three doses (one week apart), respect to control mice. Some degree of hematological toxicity was observed (bone marrow hipoplasia, low white blood cell counts). Increase in survival probability due to FC-5.01 treatment was also evident in one of such experiments. We did not observe tumor regressions or cures. Hematological toxicity was decreased by reducing -FC-5.01 dose and by administration of granulocyte-colony stimulating factor (G-CSF) as a complement for RIT.

Barrionuevo, Melina. "Inversión parental en el Pingüino de Magallanes (Spheniscus magellanicus): asincronía de eclosión, causas próximas y últimas" (2015-06-25). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Durante los años 2010 a 2013 se estudió la biología reproductiva del Pingüino de Magallanes (Spheniscus magellanicus) que se reproduce en la Isla Quiroga, Santa Cruz, Argentina (47°45´S, 65°53´W). Investigando la inversión parental que realizan los padres en los huevos de una misma nidada, y las consecuencias que esa inversión y otras variables provocan en el crecimiento y mortalidad de los pichones. Además, se investigó la asincronía de eclosión mediante tres aproximaciones diferentes: a) cómo se establece; b) las consecuencias que genera en el crecimiento y la mortalidad de los pichones; y c) el valor adaptativo de la asincronía, poniendo a prueba la “Hipótesis de Reducción de Nidada” a través de manipulaciones de las asincronía de eclosión. Se encontró que las hembras en mejor condición física pusieron segundos huevos más grandes que primeros, y que en el año “bueno” el tamaño de la yema de los segundos huevos fue más grande que la de los primeros. La condición física de los machos determinó la cantidad de pichones criados y el crecimiento del pichón en nidadas con un pichón independizado. Además, el crecimiento también se relacionó con el volumen del huevo y en nidadas tardías los pichones crecieron más rápido cuando los padres fueron de mejor condición. La yema y el año influyeron en la supervivencia, en el año “malo” los segundos pichones murieron más. El grado de asincronía de eclosión dependió de la temperatura del primer huevo durante la puesta, de la diferencia de temperatura entre los segundos y primeros huevos a lo largo de la incubación y del tamaño inicial del parche de incubación. A pesar de no tener un rol en los nidos controles, la asincronía de eclosión en los nidos manipulados afectó el peso y la supervivencia de los pichones en función de su orden de eclosión y el año de estudio. En las nidadas asincrónicas durante el año “malo”, los segundos pichones murieron en mayor proporción que los primeros. En este año, los pichones de las nidadas asincrónicas murieron antes y pesaron más a la independencia que los pichones de las nidadas sincrónicas. Si bien estos son indicios a favor de la “Hipótesis de Reducción de Nidada” en esta especie, no se puede aseverar que así sea debido a que los segundos pichones de nidadas asincrónicas no murieron más en proporción que los segundos de nidadas sincrónicas. La asincronía de eclosión pareciera ser el resultado de una limitación fisiológica a nivel del parche de incubación que provoca un retraso en el comienzo de la incubación y que su efecto sobre los pichones tendría importancia durante años “malos”. PALABRAS CLAVES—Asincronía de eclosión, crecimiento de pichones, incubación, inversión parental, Pingüino de Magallanes, reproducción, Spheniscus magellanicus, temperatura de los huevos.

Abstract:
During the years 2010-2013, we studied the breeding biology of Magellanic Penguin (Spheniscus magellanicus) at Quiroga Island, Santa Cruz, Argentina (47 ° 45'S, 65 ° 53'W). We investigated parental investment between and within clutches of eggs, and the consequences of that investment and other variables in nestling growth and survival. In addition, we explore hatching asynchrony through three different approaches: a) the mechanisms through which it is established; b) the consequences it has on the growth and mortality of chicks; c) the adaptive significance of asynchrony, by testing the "Brood Reduction Hypothesis" through a manipulation of the hatching asynchrony. We found that females in better body condition laid larger second eggs than females in bad body condition and in the "good" year second laid eggs had larger yolk areas than first eggs. The body condition of males determinates the number of nestlings that fledge per nest, and, in those nests where only one chick fledge, the growth of nestlings. Moreover, nestling growth was also associated with egg volume and late-breeders had nestlings that grew faster when parents were in better condition. Yolk and year influenced nestling survival, in the "poor" year second nestlings died more often than first. Hatching asynchrony depended on the egg temperature during the laying period, on the temperature difference between the second and first eggs along the incubation period, and on brood patch area. Although hatching asynchrony did not influence nestling performance in control nests, it do affected the weight and survival of chicks in manipulated nests, according to their hatching order and the study year. In those nests, hatching asynchrony was manipulated and forced. In asynchronous clutches during the "poor" year, the second chick died more often than the first. This year, the chicks died before in asynchronous clutches and nestlings weight at fledging was heavier than in synchronous clutches. While these are evidence in favor of the "Brood Reduction Hypothesis", it is not totally fulfill because the second nestling of asynchronous clutches did not die more often or weight less at fledging than the second nestling of synchronous clutches. Hatching asynchrony seems to be the result of a physiological constraint of the brood patch that causes a delay in the onset of incubation and would affect the nestlings mostly in "bad" years. KEY WORDS— breeding biology, egg temperature, hatching asynchrony, incubation, Magellanic Penguin, nestling growth, parental investment, Spheniscus magellanicus.

Barrionuevo, Paula. "Efecto de los complejos inmunes sobre las moléculas de histocompatibilidad (MHC) y otras moléculas asociadas a fenómenos inflamatorios en monocitos humanos" (2004). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Un fenómeno inflamatorio se produce la migración unidireccional (quimiotaxis) de los polimorfonucleares neutrófilos (PMN) hacia el foco inflamatorio, seguidos luego por los monocitos sanguíneos. Esta migración es la respuesta al gradiente de concentración de un agente quimiotáctico determinado, como el leucotrieno B4 o las quimioquinas. También existen productos como los complejos inmunes (Cl), que son quimiotácticos para monocitos y neutrófilos. La formación de Cl circulantes es la consecuencia fisiológica de la respuesta de anticuerpos contra microorganismos u otros antígenos, o bien el resultado de enfermedades autoinmunes como artritis reumatoidea, o lupus eritematoso sistémico. Los Cl son los ligandos fisiológicos de los receptores para la porción Fc de las IgG (FcγRs) y la interacción entre éstos, dispara una variedad de funciones regulatorias y efectoras. Las moléculas de histocompatibilidad (MHC) son glicoproteínas presentes en la superficie celular que participan en la presentación de péptidos antigénicos para la activación de los linfocitos T. Existen dos tipos de moléculas presentadoras de antígenos: las MHC de clase I (MHC-I) y las de clase II (MHC-II). Estas moléculas se expresan constitutivamente en la superficie de los fagocitos mononucleares y su expresión es aumentada por citoquinas como el interferón -γ (IFN-γ). En este trabajo, se ha demostrado que la preincubación de los monocitos humanos con Cl formados por Ovoalbúmina (OA)- IgG anti-OA fue capaz de disminuir la expresión basal e inducida por IFN-γ de las MHC-I y las MHC-II. El efecto de los Cl sobre la expresión de las MHC es mediado a través de la interacción de los Cl con el FcγRI y el FcγRII. La disminución de la expresión de las MHC en los monocitos correlacionó directamente con la capacidad de presentación antigénica de dichas células. Similares resultados fueron obtenidos con sobrenadantes de monocitos tratados con Cl. La inhibición del efecto de los SN sobre las MHC-II por pepstatin y phosphoramidon sugiere que la secresión se proteasas aspárticas y metaloproteasas constituye un mecanismo posible en la regulación de las MHC-II por parte de los Cl. Por otra parte, la inhibición por phosphoramidón para las MHC-I sugiere la participación de metaloproteasas en la regulación de las MHC-I. Además, los sobrenadantes de PMN tratados con el Cl también fueron capaces de disminuir la expresión de las MHC. En el modelos murino de inflamación crónica, los Cl también disminuyeron la expresión basal e inducida por IFN-γ de las MHC-II en macrófagos murinos. Además, los Cl disminuyeron la expresión de otras moléculas de relevancia inmunológica tales como CD14, ICAM-1 y CD40. La disminución de la expresión de CD14 mediada por Cl va acompañada de la inhibición de la producción de factor de necrosis tumoral α (TNF-α) inducida por lipopolisacáridos (LPS). En cuanto al mecanismo, observamos que el efecto de los Cl sobre CD14 podía ser atribuido a la liberación de serinproteasa(s) con especificidad tipo tripsina por parte de los monocitos humanos. Por último, encontramos una forma soluble de CD14 en el sobrenadante de monocitos tratados con Cl, confirmando que la distribución de CD14 en superficie se debe al clivaje y la liberación de la molécula al medio extracelular. Este trabajo contribuye a la comprensión global de los mecanismos mediante los cuales agentes conocidos como pro-inflamatorios pueden tener funciones anti-inflamatorias en determinadas circunstancias. Este efecto anti-inflamatorio de los Cl podría funcionar como mecanismo de atenuación de una respuesta inflamatoria exacerbada por parte del huésped.

Abstract:
Inthe course of the inflammatory phenomenon, polymorphonuclear neutrophils (PMN) migrate unidirectionally (chemotaxis) towards the inflammatory focus, followed by monocytes. This migration occurs in response to the concentration gradient of a chemotactic agent, such as leukotriene B4 or chemokines. Molecules such as inmune complexes (IC) are chemotactic for neutrophils and monocytes. The information of circulating IC is the physiological consequence of antibody response to different antigens, including microorganisms, or lupus erythematosus. IC are the endogeneous agonists of the receptors for the Fc portion of IgG (FCγRs) and their interaction triggers a variety of regulatory and effectors functions. The histocompatibility molecules (MHC) are cell-surface glycoproteins involved in the presentation of peptides for the activation of T lymphocytes. There are two classes of molecules for antigen presentation: the MHC class I (MHC-I) and class II (MHC-II). This molecules are constitutively expressed on the surface of phagocytic mononuclear cells and their and their expression is induced by cytokines such as interferon-γ (IFN-γ). In this study, it has been demonstrated that pre-incubation of human monocytes with ovalbumin (OA)- rabbit IgG anti-OA immune complexes exerted an inhibition of basal and IFN-γ-induced expression of MHC-I and MHC-II. The effect of IC on MHC expression was mediated by the interaction of IC with FcγRI and FcγRII. The down-regulation of MHC expression on monocytes correlated directly with the antigen presentation capacity of this cells. Similar results were obtained with supernatants from IC-treated monocytes. The inhibition of the effects of supernatants on MHC-II by pepstatin and phosphoramidon suggests that the secretion of aspartic proteases and metalloproteases is a possible mechanism that regulates MHC-II. On the other hand, the inhibition of the effect on MHC-I by phosphoramidon supports the role of metalloproteases in this case. In addition, supernatants from IC-treated PMN were also able to reduce the expression of MHC. In a murine model of chronic inflammation, IC also down-regulated the basal and IFN-γ-indiced expression of MHC-II on murine macrophages. In addition, IC down-regulated the expression of other immunologically relevant molecules such as CD14, ICAM-1, and CD40. The down-regulation of CD14 expression mediated by IC correlated with the inhibition of lipopolisacarides (LPS)-induced tumor necrosis factor α (TNF-α) production. Regarding the mechanism, we demostrated that the effect of IC on CD14 could be ascribed to the secretion of serinproteases tripsina-like by human monocytes. Finally, we found a soluble form of CD14 in supernatants from IC-treated monovytes, confirming that the reduction of CD14 on the cell-surface is due to cleavage and release of the molecule into extracellular medium. This study contributes to the understanding of inflammatory phenomena. We have demonstrated that well-known pro-inflammatory molecules could behave, under certain circunstances, as anti-inflammatory agents. This anti-inflammatory effect of IC would attenuate an exacerbated host immune response.

Barros, Vicente Ricardo. "El espectro y los procesos no-lineales de la energía en el movimiento atmosférico de gran escala" (1973). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Barrozo, Romina Beatriz. "Orientación al hospedador en la vinchuca Triatoma infestans (Heteroptera : Reduviidae) : claves sensoriales responsables" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se analizó la orientación de larvas de Triatoma infestans a varias señales relacionadas con sus hospedadores. A distancias cortas, el vapor de agua resultó ser atractivo para las vinchucas. Además, la humedad incrementó significativamente la respuesta de estos insectos a estímulos térmicos. No obstante, la humedad de una corriente de aire no afectó el comportamiento anemotáctico positivo espontáneo de esta especie. La respuesta anemotáctica no fue influenciada por el equilibrio hídrico de los insectos. Con respecto a las señales olfativas, las larvas de T. infestans se orientaron siguiendo corrientes de aire enriquecidas con dióxido de carbono, situándose el umbral comportamental entre 300 y 400 ppm sobre el fondo de CO2 del ambiente. La precisión de la respuesta orientada hacia el dióxido de carbono se incrementó con el aumento en la intensidad del estímulo. Notablemente, los insectos no cambiaron su umbral de sensibilidad al dióxido de carbono con el tiempo de inanición. La atracción por el dióxido de carbono dependió del momento del día. Es decir, estos insectos nocturnos sólo se orientaron hacia corrientes de aire cargadas con dióxido de carbono durante las primeras horas de la noche. La persistencia del ritmo en condiciones de oscuridad constante reveló la existencia de un control endógeno de este comportamiento. La respuesta de los insectos fue afectada por la estructura temporal de la pluma de olor transportadora de CO2 de maneras diferentes, dependiendo de la frecuencia de pulsos de la corriente de aire ofrecida. Los insectos mostraron respuestas al ácido L-láctico, l-octen-3-ol y ácidos grasos de cadena corta de manera dosis-dependiente a nivel sensorial, tal como revelaron los electroantennogramas (EAGs). Al nivel comportamental, las chinches mostraron una orientación positiva a corrientes de aire cargadas con l-octen-3-ol. Esta respuesta no se modificó por la adición de dióxido de carbono. El L-ácido láctico no evocó respuestas orientadas cuando se presentó como un estímulo único, para una gama amplia de concentraciones. Sin embargo, un marcado sinergismo se hizo evidente cuando el L-ácido láctico se combinó con el dióxido carbono a una concentración subumbral. En esta condición, el umbral de respuesta al dióxido carbono disminuyó a valores de 75-150 ppm sobre el fondo ambiental de CO2. Aunque los ácidos grasos de cadena corta no evocaron una respuesta en los insectos al ser ofrecidos como estímulos únicos, éstos interactuaron de forma sinérgica con el L- ácido láctico. Una mezcla de ácidos grasos, ácido L-láctico y C02 mostró ser capaz de atraer a las vinchucas bichos de manera similar que un hospedador vivo.

Abstract:
The orientation of larvae of Triatoma infestans to several host-related cues was analysed. At short distances, water vapour revealed as attractive for T. infestans. Besides, the humidity improved significantly the response of these bugs to thermal stimulation. Nevertheless, the humidity content of an airstream did not affect the spontaneous positive anemotactic behaviour of this species. The anemotactic behaviour was also not influenced by the water balance of the bugs. Regarding olfactory cues, T. infestans oriented towards airstreams enriched with carbon dioxide, laying the behavioural threshold response between 300 and 400 ppm above the ambient CO2 background. The accuracy of the oriented response to carbon dioxide increased with the stimulus intensity. Remarkably, insects did not change their sensitivity threshold to carbon dioxide with the starvation time. The attractiveness to carbon dioxide depended on the time of the day, i.e., these nocturnal bugs only oriented towards carbon dioxide-loaded airstreams during the first hours of the night. The persistence of the rhythm under constant darkness revealed the existence of an endogenous control of this behaviour. The response of the insects showed to be affected by the temporal structure of the odour plume carrying CO2 in different ways, depending on the frequency of pulses of the offered airstream. Bugs showed sensory responses to L-lactic acid, l-octen-3-ol and shortchain fatty acids in dose-dependent manner, as revealed by electroantennograms (EAGs). At the behavioural level, the bugs showed positive orientation to airstreams loaded with l-octen-3- ol. This response was not modified by the addition of carbon dioxide. L-Lactic acid did not evoke oriented responses when presented as a single stimulus in a wide range of concentrations. However, a marked synergism was evident when L-lactic acid was combined with carbon dioxide at a sub-threshold concentration. Under this condition, the threshold response to carbon dioxide decreased to 75-150 ppm above ambient CO2 background. Although short-chain fatty acids as single stimulus did not evoke attraction for bugs, they interacted synergistically with L-lactic acid. A blend mixture of fatty acids, L-lactic acid and CO2 showed to attract these bugs in a similar way than a live host.

Barrucand, Mariana Graciela. "Extremos de temperaturas en Argentina: cambios observados en la variabilidad espacio-temporal y su relación con otras características del sistema climático" (2008). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El presente trabajo de tesis estudia la variabilidad en la frecuencia de temperaturas extremas en la Argentina durante el período 1959-2003 Se analizan tres aspectos específicos: la homogeneidad espacial que tienen los extremos de temperatura en Argentina, la variabilidad temporal de los mismos y la relación con otras características del sistema climático. El análisis de homogeneidad espacial mostró algunas diferencias respecto al tipo de extremo analizado y permitió la selección de estaciones de referencia para estudios ulteriores. El análisis de variabilidad temporal mostró tendencias significativas negativas (positivas) en la frecuencia de noches frías (cálidas) entre los meses de octubre y marzo, siendo estos últimos los de mayores cambios. Esto indica una extensión de las condiciones cálidas desde los comienzos de la primavera hasta el comienzo del otoño. En los meses de época fría (abril a septiembre) se destaca un aumento en la frecuencia de noches cálidas, excepto en julio que presenta una tendencia negativa en el centro-este del país. En términos generales, se observa una disminución en la frecuencia de días cálidos en gran parte del año. Las excepciones están dadas para los meses de agosto y octubre. Los resultados encontrados son congruentes con una disminución en la amplitud térmica observada en todo el país durante todo el año, a excepción del mes de julio y en algunas estaciones del sur del país. Se encontró un aumento en el porcentaje de días con cielo cubierto, y mayor disponibilidad de humedad en el aire. El principal modo de variabilidad encontrado corresponde a una onda de 8 años en los índices de extremos de temperatura (especialmente en la frecuencia de noches frías), en la temperatura superficial del mar (TSM) y en el Modo Anular del Sur (SAM), que actuaría como modulador de la variabilidad de los extremos de temperatura y las TSM en dicha escala temporal. Este modo de variabilidad común aparece más fuertemente en primavera en las estaciones situadas al norte de los 40 ºS. La señal se debilita a principios de los 90, momento a partir de cual empieza a reflejarse más al sur. Esto plantea la hipótesis sobre un posible cambio en las relaciones del sistema climático en la década del 90.

Abstract:
This thesis is about the variability of temperature extreme frequencies in Argentina during 1959-2003. Three specific aspects are analysed: the spatial homogeneity of temperature extremes in Argentina, its temporal variability, and the relationship with other characteristics of the climatic system. The spatial homogeneity analysis showed some differences depending on the extreme variable analysed and it permitted to select some reference stations for other studies. The temporal variability analysis showed significant negative (positive) trends in the cold (warm) night series between October and March. These months were the most affected by these changes. These features indicate an extension of the warm conditions towards the early spring and the beginning of autumn. An increase of warm nights is noticeable during the cold season (April to September), except for July, which showed a negative trend in the centre-east of the country. In general terms, a decrease of warm days is observed all year round, except for August and October. The results are consistent with a decrease in the diurnal temperature range in the country all year round, except for July and some stations in the south of Argentina. An increase of the percentage of days with covered sky and humid conditions were also found. The principal variability mode found in this analysis was an 8 year signal in the temperature indices (specially in the cold night frequencies), the sea surface temperature (SST) and the Southern Annular Mode (SAM).This mode would act as a modulator of the temperature extreme frequencies and the TSM at that temporal scale. This common variability mode appears strongly during spring at those stations northward of 40ºS. The signal vanishes at the earlier 90’s, when it begins to be reflected to the south. It raises the hypothesis about a possible change in the climatic system relationships during the 90’s.

Baró, Gregorio Bonifacio. "Estado químico del arsénico formado por transformaciones nucleares en compuestos inorgánicos de germanio, selenio, bromo y arsénico" (1961). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Abstract:
The distribution of radioactive arsenic among trivalent and pentavalent states of arsenic produced by nuclear transformations has been investigated in simple inorganic compounds of germanium, selenium, bromine and arsenic. In some cases we have studied the change of this distribution by annealing processes. The nuclear transformations we have studied are the following: Ge77-—β—> As77 Se76 (n,p) As76 Br81 (n,α) As78 Br79 (n,α) As76 As75 (n,γ) As76 The compounds were irradiated with neutrons in the RAI reactor in Buenos Aires and later with neutrons obtained by bombarding beryllium with 26 MeV deuterons in the Philips synchrocyclotron of Amsterdam. The chemical separations used consisted of the dissolution of the irradiated compound in a solution containing AsIII and AsV carriers. The arsenate fractions were separated from the arsenite fractions by precipitation as magnesium ammonium arsenate. The arsenite was then oxidized to arsenate which in turn was precipitated as magnesium ammonium arsenate. All fractions were converted to magnesium piro-arsenate. The radioactive samples were counted with an end-window G.M. counter under conditions of standard geometry. Annealing was carried out in constant-temperature baths during specified periods of time. It is evident from our experimental results that chemical conditions in the aqueous medium, and specially the pH, have little or no influence on the distribution of the arsenic activity among the two oxidation states. This suggests that the final form in which the radioactive arsenic will be found is already determined inside the target lattice. It is even more striking that the distribution observed in GeO2 is very nearly equal to that in SeO2. This suggests that the structure of the oxide is the determining factor for the distribution of the arsenic activity among arsenite and arsenate fractions. It is very curious that the AsV: total As of radioactive arsenic in the oxides of germanium and selenium and in the oxides of arsenic may be represented as a linear function of the oxygen: parent element ratio for the irradiated compound. This is true for some other compounds as Na2Se04 and Na2Ge03. In the other compounds that we have investigated the linear relationship does not hold very well. In part this maybe the reflection of the differences in the lattice arrangement, but reducing and oxidizing tendencies of the irradiated compounds may also possibly play a role. The differences found between Na2Se03 and H2Se03 can be ascribed to bound hydrogen present inside the latter compound. The results in the bromine compounds indicate that the distribution of radioactive arsenic among the arsenite and arsenate fractions depends on the amount of oxygen contained in the irradiated compounds. Even in the bromides the percentage of radioarsenic is fairly directly correlated with the oxygen present as water in the crystal. Annealing turned out to be quite slow, even at temperatures appreciably higher than those required to increase the retention in most neutron irradiated solid salts. The first part of this thesis presents a survey of the field of Szilard-Chalmers and similar phenomena with emphasis on inorganic systems. It will not cite all the literature published until now, but will try to review some of the most significant recent work.

Basanta, María Florencia. "Estudio químico y funcional de pectinas y glicanos entrecruzantes de paredes celulares de prunoideas" (2013). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se han realizado estudios tanto de naturaleza química como funcional de pectinas y glicanos entrecruzantes de las paredes celulares de prunoideas, apuntando fundamentalmente a estudiar como ellos cambian según la variedad y grado de madurez. En primer término se estudió el método extractivo de las pectinas débilmente unidas de ciruelas japonesas (Prunus salicina variedad ‘Roysum’), analizando las variables tiempotemperatura. Se pudo determinar que el procedimiento extractivo habitual que demora 24 h a temperatura ambiente puede acortarse a 2 h sin afectar los rendimientos ni las características del producto. Posteriormente se realizó el fraccionamiento completo de la pared celular de cinco variedades de cerezas (Prunus avium L.) en el primer y último estadío de madurez. Se pudieron correlacionar la composición y características macromoleculares de las pectinas y glicanos entrecruzantes con el grado de madurez del fruto y con la diferencia de firmeza entre las variedades. No se encontró un patrón relacionado con la susceptibilidad al cracking. A partir de dos variedades de cereza de firmeza contrastante, se evaluó el desempeño reológico de las fracciones de polisacáridos solubles en H2O, CDTA y Na2CO3 así como las propiedades de hidratación de los residuos insolubles parciales y final, identificándose patrones de composición y características macromoleculares relacionadas con la firmeza, maduración y funcionalidad biológica. Como se determinó que las paredes celulares de prunoideas son fuente de biopolímeros útiles y que el aprovechamiento de los subproductos agrícolas permite agregar valor a las materias primas es que, finalmente, se aislaron fibras a partir de residuos de la cosecha de tres variedades de cerezas dulces, determinándose su potencial utilidad como ingrediente funcional para la formulación de alimentos.

Abstract:
Cell wall pectins and crosslinking glycans of the Prunoideae were analyzed both from their chemical and functional points of view aiming mainly at understanding how they are modified according to ripeness and variety. First, the time and temperature variables on the extractive method of the weakly bonded pectins was studied using Japanese plums (Prunus salicina). It has been determined that the usual 24 h procedure at room temperature can be reduced to 2 h with no major effect on the yield or product characteristics. The next analysis was a complete fractionation of the cell wall of five different varieties of cherries (Prunus avium L.) at two different developmental stages, i.e. unripe and ripe. A correlation of the composition and the macromolecular characteristics of the pectins and matrix glycans with the stage of ripeness and the difference in firmness between varieties was encountered. However, no pattern was found regarding the cracking susceptibility. Starting from two f varieties with contrasting firmness, the rheological performance of the polysaccharides extracted by H2O, CDTA and Na2CO3 was evaluated as well as the hydration properties of the insoluble residues isolated at some steps of the sequential extraction, thus allowing to identify patterns relating the composition and the macromolecular characteristics with the firmness, ontogeny and biological functionality. As the cell walls of the Prunoideae are a useful source of biopolymers, and the use of agricultural subproducts may add value to the raw material, fibers of the residue of three sweet cherries varieties were isolated, showing their potential usefulness as functional ingredients for food formulations.

Basavilbaso, Felipe Carlos. "Estudio sobre la formación de algunos nucleos heterocíclicos y sus reacciones" (1940). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Basile, Laura Ana. "Estructura y dinámica de comunidades bacterianas en sistemas de barros activados que degradan fenol" (2009). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La forma en la que las comunidades responden a las alteraciones suelen manifestarse a través de cambios en la composición o en la abundancia relativa de las especies. Frecuentemente estos cambios pueden ser atribuídos a caracteres funcionales o adaptativos. La búsqueda de modelos que expliquen los patrones de composición de especies y la coexistencia de especies similares dentro de comunidades ecológicas, pueden aportar datos sobre los mecanismos subyacentes que regulan la biodiversidad y su relación con el funcionamiento del ecosistema. En este trabajo se estudió la dinámica de las comunidades bacterianas, a nivel taxonómico y funcional, y el funcionamiento de sistemas de barros activados especializados en la degradación de fenol. Se evaluó en primer lugar la dinámica de las comunidades bacterianas en función del tiempo de aclimatación al fenol, operando bioreactores a escala de laboratorio bajo condiciones constantes a lo largo de 9 meses. En una segunda etapa se analizó el modo en que las comunidades bacterianas respondían a un aumento escalonado en la concentración de fenol. El funcionamiento de los reactores se analizó por mediciones de biomasa, niveles de turbidez y de fenol en el sobrenadante y velocidades de degradación de fenol. La estructura de la comunidad bacteriana se estudió por medio de geles de gradiente desnaturalizantes (DGGEs) del dominio variable V3 del ADN ribosomal 16S. La estructura a nivel funcional se determinó mediante la cuantificación por ensayos de PCR en tiempo real de las distintas variantes del gen de la subunidad mayor de la enzima fenol hidroxilasa multicomponente (LmPH), que cataliza la oxidación de fenol a catecol, paso limitante de la vía de degradación de fenol. Finalmente, buscando relacionar los patrones de abundancia de los grupos LmPH con sus propiedades cinéticas, se estudiaron representantes de los grupos LmPH obtenidos mediante técnicas de cultivo y aislamiento. Los resultados demuestran que la actividad de degradación de fenol en el sistema es debida a la acción combinada de un número de organismos funcionalmente redundantes. La comparación de los patrones de abundancia de las poblaciones que degradan fenol sugiere un grado de determinismo considerable, donde la abundancia relativa de cada especie parece determinada por la concentración de fenol en el alimento. Las características cinéticas de representantes de siete de los ocho genotipos LmPH, obtenidos utilizando un amplio rango de condiciones de cultivo, exhibieron un intervalo relativamente acotado de variabilidad fisiológica, indicando que la capacidad de una bacteria particular de volverse un miembro predominante de la comunidad bajo condiciones ambientales cambiantes no puede ser inferida únicamente de las propiedades de degradación de fenol.

Abstract:
Communities' responses to disturbance are commonly manifested as changes in species composition or relative species abundances. These changes are often attributed to functional or adaptive traits. The understanding of the patterns of species abundance, and the coexistence of similar species within ecological communities can provide important insights into the underlying mechanisms that regulate biodiversity and its relationship with ecosystem function. In this work we studied bacterial communities dynamics, using both taxonomic and functional approaches, and its relationship with the activity of phenol degrading acitvated sludge systems. Firstly, we evaluated bacterial communities dynamics as a function of phenol acclimation time, over 9 months of reactor operation under constant conditions. In a second stage, we analyzed the responses of bacterial communities to a step-increase in phenol concentration. Reactors performance was analyzed by biomass concentration, turbity and phenol concentration in supernants, and degradation rates. The structure of bacterial communities was studied using denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) of the variable domain V3 of PCR-amplified 16S ribosomal DNA. Functional structure was determined by real time quantitative PCR on different gene variants of the major subunit of the multicomponent phenol hydroxylase enzyme (LmPH), which catalyzes the oxidation of phenol to catechol, the rate limiting step in phenol biodegradation pathway. Finally, looking for a relationship between LmPH abundance patterns and kinetic properties, we studied representatives of LmPH groups, which were obtained through cultivation and isolation techniques. We concluded that phenol degradation activity in our systems depend on the combinated action of a number of functional redundant organisms. Comparison of the abundance patterns of phenol degrading populations suggests a considerable degree of determinism, where the relative abundance of each species seems to be determined by the concentration of phenol in the feed. The kinetics characteristics of representatives of seven from eight LmPH groups, obtained using a wide range of culture conditions, exhibited a rather narrow range of physiological variability, suggesting that the ability of a particular bacteria to became a predominant member of the community under changing ambiental conditions cannot be infered exclusively from the phenol-degrading properties.

Basilio, Alicia Mabel. "Estudio melitopalinológico de los recursos alimentarios y de la producción de un colmenar en la región del Delta del Paraná (Argentina)" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Este trabajo estudia el contenido polínico de los recursos de la colmena (cargas corbiculares y miel inmadura) de un colmenar y de la producción de miel del mismo colmenar en la región del Delta del Río Paraná. El colmenar produce dos cosechas de miel anuales. La variabilidad intra-anual esta relacionada con la sucesión fenológica de las floraciones, y la inter-anual con el clima. El contenido de la miel inmadura refleja la floración de la vegetación que rodea las colmenas. La miel madura muestra un enriquecimiento en el polen de las floraciones tardías. El origen floral de las cargas corbiculares varió a Io largo de la temporada, en cantidad, diversidad y calidad de la cosecha. Un incremento de la densidad de 0,5 a 12,5 colmenas por hectarea no produjo diferencias ni en el contenido polínico de las cargas ni en el de la miel con respecto al histórico del colmenar. El trabajo permitió establecer el momento de la temporada en que los apicultores podrian trabajar en la producción de mieles monoflorales. La variabilidad de las floraciones de una temporada a otra hace difícilpredecir la magnitud de estas cosechas.

Abstract:
This work studied pollen content in the food (pollen loads and immature honey -or nectar inside hive-) of an apiary and the honey production from the same apiary, in the Delta region of the Parana River, along six seasons. The apiary produced two honey harvest a year. Intra-anual variability was found to be related to seasonal blossoms replacement and inter-anual variability to climatic effects. The origin of corbicular pollen loads varied throughout season in volume, diversity and quality. Pollen content of immature honey followed the floral phenology of the vegetation surrounding hive, while mature honey showed an increase in pollen from late florations. When compared with the apiary record of pollen contents, an increase in hive density from 0,5 to 12,5 hives /hectarea did not bring about significant differences in the pollen content of loads or in honey. As a practical application of this research, we established the time at season when beekeepers could work on monofloral honeys production. Inter-anual variability in blossoms makes it difficult to predict the magnitude of the annual harvest for every kind of monofloral honey type.

Bassi, Daniel Ernesto. "Biosíntesis de succinoglicano y de compuestos relacionados en Agrobacterium radiobacter" (1996). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Agrobacterium radiobacter produce un polisacárido extracelular (EPS), el succinoglicano, cuya unidad repetitiva (U.R.) es un octasacárido constituído por Glc, Gal, piruvato y succinato en relación 7:1:1:1 (Amemura et al; 1981, Carbohydr. Res. 91:59-65): Glcß1--3Glcß1--3Glcß1--6Glcß1-- 6Glcß1--4Glcß1--4Glcß1--4Glcß1--3Gal—4-6-4Pyr (ver en versión PDF). Este polisacárido tiene gran importancia en la industria del petróleo, y el producto comercial, se extrae de la bacteria en estudio debido a que lo produce en cantidades elevadas. En otros sistemas, se ha demostrado que la biosíntesis de EPS se realiza fundamentalmente en cuatro etapas (Ielpi et al, 1993, J. Bacteriol, 175: 2490-2500). En la primera, se sintetizan los nucleótido-azúcares precursores. En una segunda etapa, se forma la U.R. por transferencia secuencial de los distintos monosacáridos que la componen a partir de los respectivos nucleótido-azúcares a un prenil-fosfato aceptor ubicado en la membrana plasmática. Estas reacciones están catalizadas por enzimas específicas, las glicosiltransferasas. Una vez completada la U.R., ésta actúa como monómero en una reacción de polimerización, siendo el producto final el EPS. Es probable que la polimerización y el transporte al exterior celular (cuarta etapa) del polímero sean simultáneos. En este estudio, se describe la biosíntesis "in vitro" del succinoglicano en A. radiobacter. Se obtuvieron y caracterizaron algunos prenil difosfato azúcares intermediarios y el producto final, es decir el succinoglicano sintetizado "in vitro". Para estudiar la posible formación de compuestos relacionados con la síntesis de EPS, se realizaron incubaciones con células permeabilizadas con EDTA (García et al, 1974, Eur. J.Biochem. 43:93-105) en presencia de UDP-Glc y/o UDP-Gal uno de los dos marcado con -Glc. La mezcla de incubación se centrifugó y el precipitado de células se lavó con buffer acuoso y luego se trató con solventes orgánicos, que extraen los lípido-azúcares formados. Los lavados se unieron al sobrenadante y en esta fracción se investigó la presencia de EPS. Al realizar incubaciones con células provenientes de la cepa silvestre en presencia de UDP--Glc, si bien se observó la síntesis de numerosos compuestos, algunos de ellos de propiedades novedosas, ninguno presentó las propiedades esperables para los compuestos intermediarios, es decir, los prenil fosfo-azúcares. Sin embargo, fue posible observar polímero en los lavados acuosos aunque en muy baja cantidad. En caso de incubar en presencia de UDP--Gal se pudieron obtener algunos compuestos de interés, uno de ellos liberaba Gal, pero en cantidades no adecuadas como para ser analizadas. Cuando se incubó en presencia de ambos dadores, uno de ellos radioactivo, se obtuvo menor cantidad de radioactividad en los extractos orgánicos que en el caso de incubar en presencia de un solo nucleótido. Este hecho se atribuyó a la dilución de la marca radioactiva, debido a que la cepa silvestre contiene la UDP-Gal-4-epimerasa, enzima que cataliza la interconversión de UDP-Glc en UDP-Gal. Se buscó, entonces resolver el problema utilizando una mutante, defectiva en la síntesis de esta enzima, de forma tal de poder realizar incubaciones con ambos nucleótidos sin observar el efecto de dilución mencionado anteriormente. En efecto, al utilizar la cepa SGN-1, defectiva en la síntesis de la epimerasa, se pudo lograr la síntesis de los siguientes compuestos: Gal-P-P-prenol, celobiosil- galactosa-P-P-prenol y los prenil difosfato derivados de un octasacárido y de su derivado piruvilado, estrechamente relacionados con la U.R. del succinoglicano. La cantidad de polímero obtenida fue sensiblemente mayor que en el caso de la cepa silvestre. Mediante incubaciones en dos etapas, se demostró también que los prenilfosfo-azúcares analizados eran los precursores del polisacárido. Por otro lado, se estudió el efecto de los dadores de grupos no glicosídicos sobre la síntesis del polímero. El PEP estimula discretamente la formación de polímero, probablemente por un aumento en la piruvilación de la U.R., que es, aparentemente un sustrato mas adecuado para la polimerasa, es decir la enzima o grupo de enzimas que catalizan la polimerización de la U.R. El SuccCo-A ejerce un efecto dual. A una concentración de 0,1 mM estimula en forma notoria la polimerización, mientras que a una concentración diez veces mayor se observó una reducción gradual en dicha estimulación. Finalmente, estos estudios se extendieron a una bacteria estrechamente relacionada, patógena de plantas, Agrobacterium tumefaciens que también produce succinoglicano. En esta cepa, se habían aislado y caracterizado parcialmente varios prenil-fosfo-azúcares, pero no se había logrado su polimerización (Staneloni et al, 1984, J. Gen. Microbiol., 130: 869-879). Con la experiencia lograda en A. radiobacter, se logró obtener succinoglicano "in vitro"también en A. tumefaciens.

Abstract:
Agrobacterium radiobacterium produces an extracellular polysaccharide (EPS), succinoglycan, containig an octasaccaharide repeating unit (R.U.) constituted with Glc, Gal, piruvate and succinate in a 7:1:1:1 molar ratio (Amemura et al; 1981, Carbohydr. Res. 91:59-65): Glcß1--3Glcß1--3Glcß1--6Glcß1-- 6Glcß1--4Glcß1--4Glcß1--4Glcß1--3Gal--4-6-4Pyr. This polysaccharide is widely used in the oil industry, and Agrobacterium radiobacter is regularly employed to produce it because of the good yields reached. As it was demonstrated for other systems, the biosynthesis of the EPS takes place mainly in four stages (Ielpi et al, 1993, J.Bacteriol. 175:2490-2500). In the first one, the donor sugar nucleotides are synthesized. In a second stage, the R.U. is made by the secuential transfer of the different monosaccharides that constitute it, from the proper sugar nucleotides, to a plasmatic membrane bound prenyl phosphate. Once the R.U. is completed, it acts as a monomer in a polymerization reaction, the EPS being the final product. It is likely that polimerization and the transport to the extracellular compartment (fourth stage) are simultaneous. In this study, the "in vitro" biosynthesis of succinoglycan in A. radiobacter is described. Some intermediate prenyl phospho sugars and the final product, the "in vitro" synthesised succinoglycan were obtained. In order to search for the posible formation of compounds related to the synthesis of polysaccharide, incubations with EDTA permeated cells (García et al., 1974, Eur. J. Biochem.43:93-105) in the presence of UDP-Glc and/or UDP-Gal, one of them radioactively labelled, were performed. The reactions were ended by dilution and centrifugation and the cell pellet was washed several times with buffer and then extracted with organic solvents, that dissolve the lipid-sugars. The presence of EPS was investigated in the combined supernatants and washings. When the incubations were done using wild type cells, in the presence of UDP--Glc several lipidic compounds were obtained, some with unusual properties, but none of them behaved as expected for prenyl-phospho-sugars. However, polymer was observed in the aqueous supernatant though in very low amounts. When incubating in the presence of UDP--Gal, it could be found some compounds of our interest, one of them liberating Gal, but in quantities not suitable to be analized. Incubations done in the presence of both nucleotides, one of them radioactively labelled, yielded smaller amounts of radioactivity soluble in organic solvents, probably because of the dilution of the labell, due to the activity of UDP-Gal-4-epimerase, the enzime which catalizes the interconversion of UDP-Glc into UDP-Gal. The idea was then to look for a mutant defective in this enzyme activity to be able to perform incubations in the presence of both sugar nucleotides, one of them labelled, in order to avoid this dilution effect. As expected, the synthesis of compounds with the properties of prenylphosphosugars was achieved when the SGN-1 strain, a mutant not able to synthesise the UDP-Gal-4-epimerase, was used as enzime source. The following compounds were characterized: Gal-P-P-prenol; (cellobiosyl)-galactose-P-P- prenol , and the prenyl diphosphate derivatives of an octasaccharide and of its pyruvilated octasaccharide closely related to the structure of the R.U. of succinoglycan. The amount of radioactive labelled polymer was significatively higher and could be identified as succinoglycan. Performing two steps incubations, it was demonstrated that the prenyl-phospho-sugars were the precursors of the EPS. On the other hand, the effects of the non glycosidic donors on the polymer synthesis was studied. Phosphoenolpyruvate stimulates moderately polymer formation, probably due to the rise in the amounts of the pyruvulated R.U., which is apparently a more adequate sustrate for the polimerase. Succinyl coenzyme A excerts a dual effect. At concentrations of 0,1 mM greatly enhances the polimerization, but with a tenfold increase (1 mM) a reduction in the activation was observed. Finally these studies were extended to the plant pathogen Agrobacterium tumefaciens, a closely related bacteria that also produces succinoglycan. Enzymatic preparations from this strain allowed the synthesis of several prenyl-phospho sugars, but no polymerization was observed (Staneloni et al, 1984 J. Gen. Microbiol, 130: 869- 879). With the experience acquired with A. radiobacter system, "in vitro" succinoglycan synthesis was also obtained.

Basso, María Cecilia. "Tratamiento de aguas contaminadas mediante biosorbentes y carbones activados sintetizados a partir de un precursor lignocelulósico renovable" (2004). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se sintetizan carbones activados a partir de un precursor lignocelulósico renovable, la especie herbácea Arundo donax l., mediante el proceso de activación química. Se emplean una solución de ácido H3PO4 como agente activante, condiciones moderadas de operación (500 °C, 0.5 h) y distintas atmósferas de activación (autogenerada, bajo flujo de aire, CO2 y N2, separadamente). Se explora sistemáticamente la incidencia de la atmósfera de activación sobre las características fisicoquímicas y texturales-morfológicas de los carbones activados resultantes y sobre su performance en la adsorción de algunos metales pesados y compuestos orgánicos volátiles representativos, a partir de soluciones acuosas diluidas empleadas como modelo de aguas con bajas concentraciones de estos contaminantes. La activación promueve transformaciones en el precursor, que conducen al desarrollo de las redes porosas que conforman los carbones activados y de la quimica de su superficie. La atmósfera de activación incide sobre las características químicas de los carbones activados. En particular, el contenido total de los grupos funcionales oxigenados ácidos/polarizables superficiales se incrementa conforme resultan más severas las condiciones oxidantes de la atmósfera de activación. En cambio, su influencia no resulta decisiva en el desarrollo de las matrices porosas; éstas se caracterizan por áreas específicas BET y volúmenes totales de poro similares (1100 m²/g y 1 cm³/g), y son predominantemente microporosas. El comportamiento de los carbones activados en la adsorción de las especies metálicas y orgánicas depende de la atmósfera de activación empleada. Las funcionalidades oxigenadas ácidas/polarizables parecen ejercer una influencia predominante sobre la adsorción de las especies metálicas, que resulta favorecida al usar los carbones con mayor contenido total de las mismas. Las muestras obtenidas bajo flujo de aire presentan, en condiciones de equilibrio pre-establecidas, la mayor eficiencia en la remoción de las especies metálicas a partir de soluciones diluidas monosoluto, incluso superior a la de un carbón comercial empleado como referencia. En oposición, la capacidad de los carbones activados de adsorber los compuestos orgánicos se incrementa al disminuir el contenido total de grupos ácidos/polarizables. Para estos compuestos, los carbones sintetizados bajo flujo de N2 resultan los más efectivos. La cinética de adsorción de las especies metálicas y orgánicas, para las muestras que presentan la mejor performance, se describe satisfactoriamente mediante una expresión cinética de pseudo - segundo orden, mientras que las isotermas de adsorción se representan en forma adecuada y similarmediante modelos convencionales de dos y tres parámetros. Se determinan efectos de adsorción competitivos y diferencias en la selectividad al evaluar la performance de las mismas muestras empleando soluciones bi y trisoluto. Además, los carbones saturados con las especies metálicas y orgánicas resultan regenerables mediante tratamientos químico y/o térmico, respectivamente, conservando prácticamente inalterada su capacidad adsortiva original. En forma complementaria, se investiga la potencialidad de algunos materiales lignocelulósicos como biosorbentes de bajas concentraciones de metales pesados en medio acuoso. Se determinan las curvas de dosaje y las isotermas de sorción de los materiales seleccionados y de muestras de lignina pura, empleadas con fines comparativos, a partir de soluciones diluidas modelo. La efectividad de las muestras lignocelulósicas depende del contenido de los biopolímeros constituyentes, encontrándose una tendencia creciente entre la máxima capacidad de sorción, evaluada a partir de las isotermas y su modelado, y el contenido de lignina presente en las mismas. Los materiales lignocelulósicos con altos contenidos de lignina resultan potencialmente aptos para su empleo como sorbentes alternativos de bajas concentraciones de especies metálicas a partir de aguas contaminadas.

Abstract:
Activated carbons are synthesized by chemical activation of a rapidly renewable lignocelullosic precursor, the herbaceous species Arundo donax l., using a solution of H3PO4 acid as activating agent, moderate process conditions (500 °C, 0.5 h) and different activation atmospheres (either self-generated or under a flow of air, C02 and N2, separately). The incidence of the activation atmosphere on chemical and textural-morphological features of the resulting carbons as well as on their performance to uptake some representative heavy metals and volatile organic compounds is systematically explored by using dilute aqueous solutions as models of wastewater with low concentrations of these pollutants. Activation promotes transformations in the precursor, which lead to the development of carbons porous networks and of surface chemistry. The activation atmosphere affects chemical features of the carbons. In particular, the total content of polar or acidic oxygen functional groups developed on the carbons’ surface increases as more severe the oxidation conditions of the activation atmosphere. However, its effect on the porous networks’ development is almost irrelevant. The carbons show similar BET surface area and total pore volume (1100 m²/g and 1 cm³/g) and are dominantly microporous. The behaviour of the activated carbons in adsorbing metallic and organic species is found to be influenced by the activation atmosphere. The carbons obtained under flowing air exhibit the best effectiveness to capture metal ions from dilute single-solute solutions, under pre-established equilibrium conditions, even superior to that determined for a commercial sample used as a reference. Acidic/polar oxygen groups seem to affect predominantly metal adsorption, taking place in a greater extent or the carbons possessing a larger content of these functionalities. In contrast, the capability of the activated carbons to adsorb the organic compounds decreases as smaller the content of acidic/polar oxygen groups. For the organic compounds, the carbons derived under flowing N2 are the most effective ones. A pseudo-second order rate expression is found to represent properly adsorption kinetics for metal and organic species on the carbons showing the best performance, whereas conventional two, three-parameters models describe satisfactorily, in a similar manner, the isotherms obtained for the same systems. Adsorption competitive effects and differences in selectivity are also determined for the best performing carbons using binary and ternary solutions. Furthermore, the spent carbons loaded with metallic and organic species are regenerated through chemical and/or low temperature thermal treatments, respectively, with the samples almost keeping their original adsorptive capacity. Complementary, the potential of ligno cellulosic materials as biosorbents of low-metal concentration from aqueous environment is examined. Dosage curves as well as biosorption isotherms are assessed using some selected materials and model dilute solutions. Pure lignin is additionally employed, for the sake of comparison. Effectiveness of the lignocellulosic samples depends on their content of constituent biopolymers. An increasing trend between maximum sorption capacities, as evaluated from isotherms modeling, and the lignin content of the samples is determined. Accordingly, lignocellulosic materials with larger lignin contents are found potentially adequate as alternative sorbents for metal species removal from dilute wastewater.

Battista, Ariadna Gabriela. "Las señales purinérgicas como reguladores de la proliferación y muerte celular durante la regeneración de la retina de pez cebra" (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La retina de los peces óseos, a diferencia de la retina de los mamíferos, posee células progenitoras multipotentes que proliferan a lo largo de toda la vida del animal, originando todos los tipos celulares retinianos, que se agregan al tejido diferenciado a medida que éste crece. Este crecimiento ocurre en una región histológicamente distinguible, ubicada entre la retina neural y el epitelio ciliar, denominada zona ciliar marginal (CMZ), cuyas células poseen capacidad proliferativa. Esta zona representa un anillo de tejido, alrededor de la retina madura, donde existe un gradiente de diferenciación celular, que comprende tanto stem cells (más periféricas) como células progenitoras ya comprometidas con determinados fenotipos retinianos (más centrales). Una característica sorprendente de la retina adulta de pez es que posee la capacidad de regenerarse completamente en respuesta al daño. Por consiguiente, la retina de este vertebrado ofrece características únicas para el estudio de los factores extracelulares e intracelulares que dirigen la proliferación celular y que llevan a la regeneración del tejido adulto. Tanto algunas neuronas como células gliales de la retina, así como también las células del epitelio pigmentario, liberan ATP hacia el espacio extracelular, donde éste, o sus productos de hidrólisis, actúan como neurotransmisores, o neuromoduladores, a través de su unión a receptores purinérgicos específicos. La liberación de ATP puede producirse en respuesta a diversos estímulos fisiológicos, ya sea mecánicos, químicos, osmóticos o eléctricos, o en respuesta a condiciones patológicas como la hipoxia, deshidratación, neurodegeneración o frente a una lesión. Los nucleótidos extracelulares, además de interactuar de manera autócrina o parácrina con receptores purinérgicos de membrana, son hidrolizados por ectonucleotidasas presentes en la membrana plasmática. Entre estas enzimas, una familia importante se denomina ectonucleósido trifosfato difosfohidrolasa (E-NTPDasa). La actividad de estas enzimas no sólo garantiza la finalización del estímulo inducido por los nucleótidos extracelulares, sino que además posibilita la conversión de unos nucleótidos en otros, por ejemplo, ATP a ADP, éste a AMP y luego a adenosina, o UTP a UDP. Estos productos de hidrólisis, a su vez, presentan diferente afinidad por distintos receptores, provocando diversas respuestas intracelulares. El conjunto de nucleótidos y nucleósidos extracelulares, receptores y NTPDasas se conoce como sistema de señalización purinérgica. En esta tesis doctoral, se realizó una caracterización detallada del posible rol regulatorio de las señales purinérgicas sobre la capacidad proliferativa y regenerativa de la retina adulta de pez cebra en respuesta al daño. Se utilizaron dos modelos de daño de tipo citotóxico, uno que provoca una lesión parcial del tejido, generando muerte celular solamente en las capas internas de la retina (interneuronas y células ganglionares), y otro que causa una lesión global, que involucra a todos los tipos celulares retinianos, incluyendo a los fotorreceptores. En primer lugar, se describió que una lesión citotóxica con ouabaína, ya sea parcial o global, indujo la activación mitótica de las células proliferativas presentes tanto en el tejido maduro diferenciado como en la CMZ, alcanzándose un pico de máxima proliferación a los 7 días luego de la lesión. Además, se evidenció un importante rol de los nucleótidos extracelulares en la regulación de esta activación mitótica luego de la inducción de ambos tipos de lesión, ya que el tratamiento con un exceso de enzimas que hidrolizan nucleótidos extracelulares disminuyó significativamente el máximo aumento de proliferación celular. Asimismo, el tratamiento con MRS2179 (un antagonista de los receptores purinérgicos metabotrópicos P2Y1 con alta afinidad por el ADP) disminuyó significativamente el pico de proliferación celular inducido por la lesión (tanto parcial como global) de la retina. Es interesante destacar que retinas no lesionadas y tratadas con un análogo poco hidrolizable del ADP presentaron un aumento significativo de la actividad proliferativa tanto en las capas de tejido maduro como en la CMZ. Estos resultados indicaron que el ADP es una señal suficiente para inducir activación mitótica de los precursores retinianos aún en ausencia de daño. El efecto del ADP en el tejido intacto fue también inhibido completamente por un antagonista del receptor P2Y1. Se observó también que los nucleótidos extracelulares son fundamentales para la reparación del tejido, ya que retinas lesionadas y posteriormente tratadas con apirasa o MRS2179 mostraron un mayor grado de desorganización tisular y desaparición nuclear en todas las capas retinianas, en comparación con retinas lesionadas. El grado de regeneración de las retinas dañadas y sometidas posteriormente a los tratamientos mencionados exhibió un retardo con respecto al tejido lesionado y en regeneración en presencia de señalización purinérgica endógena. Asimismo, se observó que el tratamiento de retinas lesionadas con ARL67156, un inhibidor selectivo de las ecto-ATPasas, disminuyó significativamente el incremento de proliferación celular, evidenciando la importancia de la actividad de las NTPDasas en la regulación de la proliferación celular inducida por la lesión del tejido. Por otra parte, se evidenció un importante rol de los nucleótidos extracelulares en la regulación de la muerte celular inducida por la lesión, ya que la remoción enzimática de estos nucleótidos incrementó significativamente este proceso. Este efecto fue reproducido al bloquear los receptores P2Y1, sugiriendo un rol neuroprotector del ADP, particularmente sobre los fotorreceptores retinianos. Estos resultados sugirieron que las señales purinérgicas son capaces de atenuar significativamente los efectos de la lesión citotóxica sobre la muerte neuronal y glial. Posteriormente, se observó que el nivel de expresión del ARNm de las NTPDasas 1, 2mq, 2mv, y 3 aumentó significativamente luego de inducida la lesión. En concordancia, el patrón espacial de expresión de la proteína NTPDasa2 sufrió importantes cambios luego de la inducción de la lesión. Finalmente, se describió la expresión del receptor P2Y1 en la retina de pez cebra. El nivel de su ARNm, así como su expresión proteica, aumentaron de manera significativa luego de inducida la lesión citotóxica con ouabaína. Se observó además, mediante la técnica de western blot, un cambio en el patrón de expresión en las etapas de degeneración y proliferación, luego de lesionar el tejido retiniano. En conjunto, estos resultados demuestran un rol fundamental, necesario y suficiente del sistema de señalización purinérgica en el control de los mecanismos de proliferación y muerte celular que ocurren durante el proceso de regeneración de la retina adulta de pez cebra.

Abstract:
Teleost fish retina, in contrast with mammal retina, has multipotent progenitor cells that proliferate throughout the animal life, giving rise to all cell types of mature retina, which are added to the differentiated tissue whereas it grows. Moreover, teleost fish retina has a ciliary marginal zone (CMZ) with proliferative capacity, localized around the mature retina, where there is a gradient of cell differentiation, including stem cells, progenitor cells committed to specific retinal phenotypes, and fully differentiated neurons. Remarkably, in teleost fish mechanical, chemical, laser or light damage of the mature retina activates regenerative mechanisms. Regeneration and growth that occur in the adult teleost retina by neurogenesis have been helpful in identifying molecular and cellular mechanisms underlying cell proliferation and differentiation. In the retina, ATP is released from neurons and glia (and also from the retinal pigmented epithelium) to the extracellular milieu where this nucleotide, or its hydrolysis products, acts as a neurotransmitter or neuromodulator by binding to purinergic receptors. ATP release can occur in response to physiological stimuli or to pathological conditions, including retinal damage. Extracellular nucleotides such as ATP, ADP, and UTP are extracellularly dephosphorylated by ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolases (NTPDases) localized in the cell membrane. The activity of these enzymes not only guarantees the completion of a specific stimulus, but allows the conversion of some agonists to other, with different specificity for different receptors. Extracellular nucleotides and nucleosides, receptors and NTPDases are known as purinergic signaling system. In the present work, we performed a characterization of the possible regulatory role of purinergic signals on the capacity of the zebrafish retina to regenerate in response to damage. We use two different models of cytotoxic lesion: a partial lesion, which produces damage only in the inner layers of the retina, and a global injury, which involves all retinal layers, including photoreceptors. We described that cytotoxic lesion with ouabain, either partial or global, increases cell proliferation both in the mature retina and in the CMZ, with a maximum at 7 days post injury (dpi). Moreover, we demonstrated an important role for extracellular nucleotides in regulating injury-induced cell proliferation, regardless the magnitude of the injury, because treatment with enzymes that hydrolyze extracellular nucleotides significantly decreased the peak of cell proliferation. In addition, treatment with MRS2179 (an ADP-activated P2Y1 receptor selective antagonist) provoked a significant decrease in the injury-induced cell proliferative peak normally observed 7 dpi both in the CMZ and the mature retina. Interestingly, ADPβS significantly increased cell proliferation in intact retinas both at the CMZ and mature retina. Moreover, the selective antagonist MRS2179 of the metabotropic ADP- activated receptor P2Y1 significantly inhibited the increment in cell proliferation induced by ADPβS. We also demonstrated that extracellular nucleotides play a crucial role in retinal repair, since retinas treated with apirase or MRS2179 after lesioning were damaged at a higher level than control ouabain-treated retinas. Additionally, we observed that treatment with ARL67156, which has been shown to inhibit NTPDase activity, significantly reduced injury-induced cell proliferation, showing a role for the enzymes that catalyze the extracellular hydrolysis of ATP as well as other nucleotides in controlling cell proliferative activity in lesioned retinas. On the other hand, we described an important role for purinergic signals in regulating cell death induced by injury, since scavenging of extracellular nucleotides significantly increased cell death. This effect is partially reproduced by blocking P2Y1 receptors suggesting a neuroprotective function for ADP. Furthermore, lesioned retinas showed a significant increase of NTPDase1, 2mq, 2mv and 3 following injury. In accordance with this result, expression pattern of NTPDas2 changed after injury. Lesioned retinas also showed a significant increase of P2Y1 receptor mRNA expression relative to undamaged retinas in the proliferative phase. P2Y1 receptor protein, when assessed by western blot and immunocytochemistry, showed a lesion-induced change in its expression pattern as well as an increase and modified distribution on damaged retinal layers. In summary, this study demonstrated a crucial role for endogenous purinergic signals regulating cell proliferation, as well as cell death, induced by a cytotoxic injury of the adult zebrafish retina, which underlays retinal repair.

Bauleo, Pablo M.. "TANGO ARRAY : un experimento de rayos cósmicos en el rango de energía entre 10" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los rayos cósmicos inciden sobre la Tierra desde todas las direcciones y con un flujo medio que es extremadamente constante en el tiempo. Su espectro de energía cubre desde los ~ 100 keV hasta ~ 10(20) eV. Si la energía del rayo cósmico es lo suficientemente elevada, al incidir sobre la atmósfera terrestre genera una cascada de partículas secundarias. Estas partículas pueden ser registradas por un conjunto de detectores ubicados en el nivel del suelo. para medir la cascada y obtener información sobre la dirección del rayo cósmico y su energia. Por otra parte, estas partículas secundarias al desplazarse por la atmósfera inducen la omisión de fotones de fluorescencia en el nitrógeno atmosférico. Estos fotones pueden ser colectados también ser usados para la detección de la cascada. Actualmente se encuentra en construcción el Observatorio Pierre Auger, cuyo objetivo es el estudio de rayos cósmicos con energías mayores a ~ 5 x 1018 eV. El método de detección propuesto incluye detectores de superficie (detectores de Efecto Cerenkov en agua) para el registro de las partículas secundarias y telescopios para la detección de los fotones de fluorescencia. Este trabajo presenta el diseño y los resultados obtenidos mediante dos sistemas de monitoreo de la transparencia atmosférica para el Observatorio Auger, así como diversos estudios realizados sobre un detector de superficie prototipo, el estudio del lóbulo de reflexión difusa del recubrimiento interno de los detectores, la propuesta de un método de calibración para todos los detectores del Observatorio, una configuración alternativa para el recubrimiento interno, etc. El principal esfuerzo de este trabajo estuvo dirigido al montaje, en Buenos Aires, de un mnjunto de 4 detectores de partículas para la detección de cascadas generadas por rayos cósmicos con energías del orden de ~ 10 15 eV. En este trabajo se describen las detalladas simulaciones numéricas realizadas para caracterizar la respuesta del conjunto de detectores frente al arribo de una cascada de partículas. Estas simulaciones incluyen el desarrollo de la cascada cn la atmósfera, la detección por parte de los detectores de la misma y la digitalización de la señal. Se describen los códigos que se desarrollaron para la reconstrucción de la dirección de arriba y estimación de la energia del rayo cósmico primario, los cuales fueron comparados con los datos simulados y empleados en el analisis de los resultados obtenidos con el conjunto de detectores. También se incluyo una descripción del diseño, construcción y operación del conjunto de detectores, incluyendo el sistema de toma de datos especialmente desarrollado para el mismo evaluando la estabilidad de funcionamiento del sistema lo largo del tiempo de operación. Finalmente, el análisis de los datos obtenidos con el arreglo de detectores incluye la asignación dc energías para los rayos cósmicos registrados, el estudio de anisotropías en la dirección dc arribo de los mismos y la determinación del flujo de rayos cósmicos en el rango de energias entre 10 14 eV y 7 x 10 15 eV.

Abstract:
The cosmic rays hit the Earth from all directions with a mean flux that is extremely constant in the time. Its energy spectrum range from ~ 100 keV to ~ 10 20 eV; If energy of the cosmic ray is high enough, its interaction with the Earth’s atmosphere originates a cascade of secondary particles. If these particles are recorded by an array of detectors located at ground level, the information can be used to obtain the cosmic ray’s arrival direction and energy. On the other hand, those particles moving trough the atmosphere, induce fluorescence photons in the atmospheric nitrogen. These photons also, can be used to detect and reconstruct the cascade Currently the Pierre Anger Observatory is under construction. Its objective is the study of cosmic rays with energies higher than ~ 5 x 10 18 eV by by measuring the secondary particles cascades produced by the cosmic ray. The proposed detection method includes surface detectors (water Cerenkov detectors) and telescopes for detection of the fluorescence photons. This work describes the design and characteristics results of two atmospheric monitoring systems for the Auger Observatory as well as several studies performed with a surface detector prototype, such as characterization of the difuse reflectivity lobe of the internal liner, the develpment and proposal of an an absolute calibration method for all detectors of the Observatory, an alternative configuration of the internal liner, etc. The main effort of this work was focused on an array of 4 detectors, installed in Buenos Aires for detection of the secondary particles of the cascades generated by cosmic rays with energies ~ 10 15 eV. The results of the detailed numerical simulations performed to characterize the performance of the array are presented. These simulations include the development of the cascade through the atmosphere, the response of the detectors to the secondary particles and the digitalization of their signals. Reconstruction codes to obtain the energy and arrival direction of the cosmic rays have been developed and are described in this report. They were tested with the simulated data and later used in the analysis of the cosmic ray data obtained with the array. A description of the design, construction and operation of the array is reported, including the data adquisition system which has been developed for the present work. The time stability of the array is discussed. Finally. the data analysis includes the energy asignement of the detected cosmic ray, the study of anistropies in the arrival directions of the cosmic rays and their energy spectrum.

Bava, José. "Metodologías de procesamiento de imágenes NOAA-AVHRR y su utilización en aplicaciones oceanográficas y biológico-pesqueras en el Atlántico Sudoccidental" (2004). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo consistió en utilizar la capacidad sinóptica de las imágenes satelitales NOAA-AVHRR,y las variables físicas medidas mediante éstas, para efectuar análisis espacio-temporales que permitan asociar las variables satelitales con procesos oceanográficos e información biológico-pesquera. Se desarrollaron metodologías de procesamiento que permiten el uso de la información AVHRR para la generación estandarizada y confiable de imágenes de TSM (utilizando las bandas 3 a 5 del infrarrojo térmico) e imágenes de reflectancia del agua como indicadoras del grado de turbidez superficial en zonas costeras (empleando las bandas ópticas 1y 2). Se generó una metodología para derivar imágenes de gradientes a partir de las imágenes de TSM, las cuales son utilizadas para la identificación de frentes oceanográficos. Finalmente, se generaron distintos procedimientos para analizar la coherencia y calidad de una serie de 800 imágenes de TSM para el ASO, las cuales abarcan un período de 11 años (1985-1995) de información AVHRR de TSM. La serie temporal de 11 años de datos de TSM se utilizó para describir las condiciones medias de esta variable en el ASO, la amplitud térmica del ciclo anual y las fechas de ocurrencia de las TSM máximas y mínimas, análisis que complementan y refuerzan trabajos previos efectuados. Sin embargo, debido al mayor grado de detalle en relación con mapas climatológicos preexistentes, las distribuciones mensuales y estacionales medias de TSM, pueden ayudar a comprender con mayor detalle el patrón anual de la TSM, el cual resulta de suma importancia para la interpretación de muchos eventos biológicos en esta extensa región. La serie temporal permitió identificar y caracterizar temporalmente las zonas de ocurrencia de frentes oceanográficos en el ASOa partir de imágenes de gradientes de TSM. La considerable extensión espacial de las imágenes permitió una perspectiva a gran escala de los frentes imposible de obtener mediante campañas oceanográficas. Los datos AVHRR de turbidez se utilizaron en la zona del Río de la Plata. Se estableció una metodología que permite estimar la distribución de sedimentos superficiales a partir de la correlación entre la concentración de sedimentos en superficie y los valores de reflectancia. Por otro lado, se analizó la importancia relativa de la distribución de los frentes de salinidad y turbidez en relación con el patrón de distribución de clases de edades de corvina rubia (Micropogonias furnierü en el estuario. La TSM se asoció con las capturas de caballa (Scomberjaponicus) en la zona costera marplatense (38°S) y merluza de cola (Macruronus magellanicus) en la zona del talud continental. La TSM obtenida a partir de datos AVHRR mostró ser útil para analizar la relación entre esta propiedad y las capturas, sugiriendo que metodologías de análisis de la capa superficial de temperatura mediante información satelital AVHRR pueden ayudar en el ahorro de tiempos de búsqueda del cardumen y costos de navegación.

Abstract:
The objective was to use the synoptic capability of NOAA-AVHRR images, and the physical variables inferred from them, in order to achieve spatial and temporal analyses that may allow correlating the satellite variables with oceanographic processes and biological or fishing data. Methodologies of image processing were developed that make possible the use of AVHRR information for the standardized and reliable generation of SSTimages (using bands 3 to 5 in the thermal infrared), and water reflectance images (using optic bands 1 and 2) as an index of surface turbidity in coastal zones. A methodology was also generated in order to obtain gradients images derived from SST images, which allow for the identification of oceanographic fronts. Finally, different procedures were created in order to analyze the coherence and quality of a temporal series made up of 800 SST images for the period 1985-1995. The temporal 11 years series of SST data was utilized to describe the mean conditions of this variable in the SWAO, the thermal amplitude of the annual cycle, and the day of the year in which the maximal and minimal SST are expected to occur. These analyses complement and reinforce previous works carried out in the region. However, due to the improved spatial resolution when compared with available climatologic maps, the satellite images of monthly and seasonal SST distributions could help to a better understanding of the annual pattern, significant for the interpretation of many biological events in this wide region. The temporal series also allowed the identification and characterization of several zones in the SWAO where oceanographic fronts take place, but considering in this case SST gradients images. The considerable extension of the area covered by each single image provided a synoptic perspective of the fronts impossible of getting by means of oceanographic campaigns. Turbidity images were utilized in the Rio de la Plata estuary for two purposes. A methodology involving an atmospheric correction of the AVHRR images was developed for correlating surface sediments concentrations and reflectance values. In addition, the significance of bottom salinity and surface turbidity fronts was analyzed in connection with the spatial distribution pattern of whitemouth croacker (Micropogonias furnieri)age-classes within the estuary. Satellite SST was associated with catches of mackerel (Scomber japonicus) in the coastal zone near Mar del Plata city (38°S), and with catches of long tail hake (Macruronus magellanicus) in the continental shelf break zone. The SST derived from AVHRR data showed to be useful in order to analyze the relationship between this variable and the catches, suggesting that methodologies involving the analysis of the sea surface temperature by means of AVHRR information could help in time saving and costs of sailing when fishing activities are considered.

Bavassi, Mariana Luz. "Sincronización sensomotora en humanos: modelos matemáticos y experimentos" (2013). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La representación de la información temporal es uno de los tópicos más elusivos en la neurobiología. La percepción y la producción del tiempo en el rango que abarca cientos de milisegundos, conocido como millisecond timing, es crucial para el control motor, producción y reconocimiento del habla, música y baile, y secuenciación rápida de operaciones cognitivas como la actualización de memoria de trabajo. La sincronización sensomotora es uno de los comportamientos paradigmáticos en el millisecond timing. La sincronización de un movimiento a un ritmo, como aplaudir al ritmo de la música, parece ser una tarea sumamente sencilla que demanda poco esfuerzo cognitivo. Sin embargo, involucra maquinaria cerebral compleja de funciones distribuidas y circuitos neuronales cuyas funciones abarcan desde potenciales motores básicos hasta procesamientos temporales complejos. Una de las tareas más simples para estudiar este comportamiento es la de finger tapping, donde una persona aprieta un botón en forma sincronizada con un estímulo externo, como siguiendo el pulso de la música. Prácticamente todas las personas pueden lograr una sincronización promedio a un est ímulo externo, lo que dice que debe haber un mecanismo activo con una mínima regla determinista para la corrección del error de sincronía. En este trabajo de tesis se propuso un nuevo modelo matemático para el mecanismo de corrección del error. El modelo tiene en cuenta los tres tipos de perturbaciones de finger tapping más comunes en igualdad de condiciones, prediciendo la evolución de las asincronías después de todos los tipos y magnitudes de perturbación con un solo conjunto de parámetros y un número fijo de términos. El modelo propuesto se puso a prueba frente a un experimento puramente comportamental, donde quedó demostrada la importancia de la inclusión de términos no lineales. Más aún, el módelo sirvió como guía en la búsqueda de estructuras en dos experimentos de sincronización donde se capturaron los potenciales evocados con electroencefalograma (EEG) de alta resolución. Haciendo uso del Análisis de Componentes Principales, se pudo determinar los marcadores neurofisiológicas que codifican las asincronías (diferencias de tiempo entre las respuestas y los estímulos), así como que al menos 300ms son necesarios para la evaluación de los errores y la determinación de la respuesta futura.

Abstract:
The representation of time is one of the most elusive topics in neurobiology. Time perception and production in the range of hundreds of milliseconds, known as millisecond timing, is crucial for motor control, speech production and recognition, music and dancing, and rapid sequencing of cognitive operations such as updating working memory. The sensorimotor synchronization is a paradigmatic behavior in millisecond timing. The synchronization of a movement to a rhythm, like clapping to the music, seems to demand little cognitive effort. However, this task involves complex brain machinery of distributed functions and neuronal circuits that include classical motor potentials and complex temporal processes. Finger tapping is one of the simplest ways to study this behavior, where a subject taps in synchrony with an external stimulus, as when keeping pace with music. Almost everybody can achieve average syncronization to an external stimulus, and therefore there must be an active mechanism with a minimal deterministic rule for error correction. This thesis proposed a new mathematical model for the error correction mechanism. The model takes into account the three most common types of perturbations of finger tapping on equal terms, and predicts the evolution of the asynchronies after all perturbation types and magnitudes with a single set of parameters and a fixed number of terms. The proposed model was tested in a behavioral experiment, which demonstrated the importance of including nonlinear terms. Moreover, the model was used as guide in the search for structures in two experiments of synchronization where evoked potentials were recorded with a high-resolution electroencephalogram (EEG). Principal Component Analysis unveiled the neurophysiological markers encoding the asynchronies (differences between response occurrence and stimuli occurrence), and allowed us to determine that error evaluation and future response determination are performed during at least the first 300 ms after each stimulus.

Bavera, Francisco Pedro. "Tipos para seguridad basada en flujo de información y computación auditada" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Garantizar la confidencialidad de la información restringiendo su acceso sólo a usuarios autorizados es uno de los pilares de la seguridad informática actual. Sin embargo, una vez otorgado dicho acceso no se conserva control alguno sobre cómo se utiliza. El Análisis del Flujo de Información (IFA) estudia cómo se transmite la información por diferentes mecanismos. Para ello se vale de políticas de flujo de información previamente establecidas. IFA vela por el cumplimiento de las mismas, a través de técnicas de análisis estático de programas o a través de monitores de ejecución. De esta manera se logra un control sobre el uso de los datos, que aplica más allá del momento en que se otorga el acceso a los mismos. Una alternativa a esta modalidad de control de uso de los datos es utilizar computación auditada. En este caso, las operaciones sobre los datos son permitidas pero también auditadas. Las contribuciones de esta tesis son dos. En primer lugar, presentamos un sistema de tipos para Bytecode JVM que garantiza que el flujo de la información sea seguro, incluso en el caso en que diferentes instancias de una clase puedan tener atributos cuyo nivel de seguridad varía de acuerdo al contexto en el cual han sido instanciados. La seguridad viene dada por la propiedad de no-interferencia: una formulación rigurosa de la ausencia de filtraciones de información sensible. Si bien esta propiedad es técnicamente viable, en la práctica hay muchos programas que permiten revelar intencionalmente cierta información sensible. Esto nos motiva a extender el Bytecode JVM con un mecanismo de "desclasificación" que permite liberar información sensible. El riesgo que introduce es que el mismo pueda ser abusado, permitiendo desclasificar más información sensible de la que originalmente se tenía prevista. Por tal motivo, extendemos el sistema de tipos para garantizar que estas situaciones no sucedan. Dicha extensión satisface "desclasificación robusta": un atacante no puede deducir ninguna información adicional a la permitida por la política de seguridad ni tampoco puede influir en los datos que serán desclasificados. En segundo lugar, presentamos un análisis teórico de un modelo computacional funcional que mantiene un registro de su historia de computación. A partir de un fragmento de la Lógica de Justificación (JL) de Artemov y el isomorfismo de Curry-de Bruijn-Howard obtenemos un cálculo lambda que modela unidades auditadas de computación. Reducción en estas unidades auditadas genera trazas que están confinadas a cada unidad auditada. Asimismo, estas unidades auditadas pueden consultar sus trazas para tomar decisiones en base a las mismas. Probamos seguridad de tipado y normalización fuerte para una restricción del mismo. Este cálculo lambda puede ser utilizado para definir programas que refuerzan una variedad de políticas de seguridad basadas en computación auditada.

Abstract:
One of the pillars of computer security is to ensure the confidentiality of information restricting its access to authorized users. Information Flow Analysis studies how information is transmitted by different mechanisms or channels. An attacker can obtain confidential information by observing the output (of any particular channel) of the system. However, while information flow policies are useful and important, there are other proposed mechanisms such as access control or stack inspection. We want a programming language that can enforce a wide range of policies while providing the assurance that programs enforce their policies correctly. An alternative is to use audited trails (logs). Informally, a program is auditable if, at any audit point, an impartial judge is satisfied with the evidence produced by the program. The contributions of this dissertation are twofold. Firstly, we present a type system for ensuring secure information flow in a JVM-like language that allows instances of a class to have fields with security levels depending on the context in which they are instantiated. We prove that the type system enforces noninterference. Although noninterference is an appealing formalisation for the absence of leaking of sensitive information, its applicability in practice is somewhat limited given that many systems require intensional release of secret information. This motivates our extension of a core JVM-like language with a mechanism for performing downgrading of confidential information. We discuss how the downgrading mechanism may be abused in our language and then extend our type system for ensuring it captures these situations. It is proved that the type system enforces robustness of the declassification mechanism: attackers may not affect what information is released or whether information is released at all. Secondly, we present a proof theoretical analysis of a functional computation model that keeps track of its computation history. A Curry-de Bruijn-Howard isomorphism of an affine fragment of Artemov's Justification Logic yields a lambda calculus λh which models audited units of computation. Reduction in these units generates audit trails that are confined within them. Moreover, these units may look-up these trails and make decisions based on them. We affirm that the computational interpretation of JL is a programming language that records its computation history. We prove type safety for λh and strong normalisation for a restriction of it. λh can be used for writing programs that enforce a variety of security policies based on audited trails.

Bayer, José Rodolfo. "El empleo de mercurio y difenilcarbazida en la determinación volumétrica de ión cloruro" (1950). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Baylé, Federico. "Detección de villas y asentamientos informales en el Partido de La Matanza mediante teledetección y sistemas de información geográfica" (2016-12-20). Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bazzalo, Mariel. "Comportamiento social, uso de hábitat e impacto antrópico en el delfín gris Sotalia fluviatilis (Gervais, 1853) en Santa Catarina (Brasil) extremo austral de su distribución" (2016-05-23). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La unidad de manejo poblacional más austral del delfín gris Sotalia guianensis (anteriormente denominado S. fluviatilis), en la Bahía Norte de la Isla de Santa Catarina, Brasil, se encuentra en el Área de Protección Ambiental de Anhatomirim (APAA), creada para la protección de este cetáceo. El estatus de la especie de acuerdo a la UICN era deconocido en los años del inicio de la esta tesis y en la actualidad se registra con datos insuficientes. El hábitat del delfín gris en dicha bahía se encuentra bajo la presión de acciones antrópicas desarrolladas por la importante población humana costera en la zona. Sobre la base de estudios preliminares se observó un cambio en la distribución en el uso del hábitat en el área de estudio. Esta investigación evaluó aspectos de abundancia y comportamiento del delfín gris, así como la influencia de variables ambientales y acciones antrópicas en la distribución de uso del hábitat. Entre los años 1996 y 2005 se realizaron recorridos en una embarcación en el área previamente zonificada empleando marcas del terreno. Una vez avistado el grupo de delfines se registraron cada 5 minutos la posición geográfica, la zona, la estructura y el comportamiento social. Se calculó la abundancia por diferentes índices. El uso del hábitat fue calculado a nivel zonal, en celdas de 0,25 km2 y por el método de Kernel, caracterizados a partir de las variables ambientales y acciones antrópicas. Entre los años 2002 al 2005 en total fueron registrados 175 avistajes en la margen oeste de la Bahía Norte, en 397 horas de esfuerzo de búsqueda y en 329 horas de observación directa; se avistó un único grupo en 95% de las salidas. La abundancia no presentó variación anual aunque tuvo una tendencia a aumentar en verano, y siendo las zonas EDC y BDA las de mayor abundancia. Los grupos más frecuentes estuvieron formados por 61 a 80 individuos (adultos, juveniles y crías); se encontraron principalmente en alimentación y desplazamiento, sin presentar variacion estacional, mientras que los comportamientos de socialización, reposo y nado errático fueron registrados en menos del 5% del tiempo. El uso del hábitat fue más frecuente en aguas playas de menos de 5 metros de profundidad, a menos de 1 km de la costa oeste, alejadas del área urbanizada y dentro del APAA. El modelo que explicó mejor las variaciones en el uso de hábitat dentro de las celdas incluyó cinco variables explicativas de manera individual: profundidad, distancia a la costa, distancia al área urbanizada, año, presencia del APAA, y la interacción entre estos dos últimos. Estos resultados sugieren que no existe una única variable ambiental que determina el uso de hábitat por parte de los delfines sino que depende de una combinación de factores que establecen una condición particular del hábitat. Al mismo tiempo, se evidencia la variación temporal en el uso. En relación a las acciones antrópicas, el modelo que explicó mejor las variaciones en el uso de hábitat incluyó todas las consideradas: contaminación, turismo de observación de delfines, maricultura y pesca artesanal, pero la interacción únicamente entre estas dos últimas. A partir del modelo de Kernel se pudo apreciar la gran superposición del hábitat principalmente con el turismo y la pesca artesanal. Estos resultados sugieren que el uso de hábitat por parte de los delfines depende de una combinación de efectos de las acciones antrópicas que pueden determinar el estado de conservación del hábitat. Estas acciones tienen un efecto sinérgico con el deterioro y la fragmentación del hábitat del delfín gris. Debido a que aún no existen datos suficientes para la conservación del delfín gris los resultados de este estudio sobre el comportamiento y el uso de hábitat en la unidad poblacional ubicada en el extremo de su distribución resultan de gran importancia para el manejo y conservación de la especie, principalmente por hallarse en un área de protección.

Abstract:
The southernmost population of the gray dolphin Sotalia guianensis (formerly S. fluviatilis ) inhabit in the ‘Bahía Norte’ zone, in the Island of Santa Catarina, Brazil, inside the area of Environmental Protection Anhatomirim (APAA in Portuguese), created for the protection of this cetacean. The species status was unknown whenthesis begun, but according to the IUCN is registered as ‘data deficient’. The anthropogenic actions of the coastal human population impact in the habitat use of this dolphin. Anthropogenic activities such as tourism, fishing, water contamination and aquiculture mussel have been proposed as important factors affecting the habitat use in preliminary studies. This research evaluates abundance, behavior, and the potential effects of anthropogenic actions on the distribution on the habitat use by the grey dolphin. From 1996 to 2005, surveys were conducted on a boat in the area previously zoned using landmarks. Once the group of dolphins was sighted, environmental variables were recorded and, every 5 minutes, also the geographical position, the zone, the social structure and group behaviour. Abundance was calculated for different indixes and models were used to predict the size of the groups. The habitat use was calculated at zonal level and cells as 0,25 km2 that were characterized by environmental varaibles and anthropogenic actions. Kernel analyses were used to analyze overlyaing between habitat use and any considered variable and activity. In totally were recorded 272 sightings of grey dolphin, meanwhile 175 sightings were recorded between 2002 to 2005 in 397 hours of research survey effort, and 329 hours of focal observation time, with only one sighting in the 95% of de surveys. Sightings were registered in shallow (<5 m), turbid (>90 cm) and warm waters (mean 22°C), similar for the same species in others bays. Abundance showed low variation in the time, but realtively higher in summer and the EDC and BDA zones. Most frequent group size included 61 to 80 adult, juvenile and calf individuals.The more frequent behaviors were feeding and bay travelling, whereas socialization, resting and erratic swimming were registered in <5% of total time. Habitat use was simoultaneously related to all five environmental variables: water deep, distance to seashore, distance to the urban zone, and APAA presence.Habitat use was more frecuent in shallow waters (<5 m deep), near to the West seashore (<1 km), but also away from urban zones, and also inside the APAA. It was related with time, decreasing in some zones (i.e. EDC) but increasing in others (i.e. BDA). Habitat use was also related to anthropogenic activities such eswater contamination, tourism activity, fishing, and aquiculture mussel farm. However, Kernel analysis showed that habitat use is particularly not ovelyaing with fishing and tourism. These activities could have synergic effects with fragmentation and deterioration of the grey dolphin habitat. The result of this study about behavior and the habitat use of this species in the southern distribution are important for management and conservation of this species in the AEPA.

Becher, Verónica Andrea. "Funciones binarias para el cambio de teorías" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Beckwith, Esteban Javier. "La vía de BMP modula las propiedades básicas del reloj circadiano de Drosophila" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El reloj circadiano controla los ritmos comportamentales, fisiológicos y metabólicos en todos los organismos en los que se lo ha estudiado. Este oscilador, cuya periodicidad es cercana a las 24 hs, se mantiene sincronizado gracias a diversas claves ambientales. En Drosophila, como en otros organismos, se han identificado algunos de los componentes responsables de generar y mantener las oscilaciones moleculares. Asimismo se han caracterizado circuitos neuronales en los que componentes del reloj fluctúan con un período cercano a 24 hs. A lo largo de esta tesis se estudió el rol de la vía de bone morphogenetic protein (BMP) en Drosophila en el circuito neuronal que controla el comportamiento rítmico. Esta vía de señalización, además de estar involucrada en la organogénesis y el crecimiento, funciona como una señal sináptica retrógrada involucrada en la sinaptogénesis, la morfología sináptica y el control de la homeostasis en Drosophila y en otros organismos. La alteración de esta vía en el circuito PDF en estadios adultos conlleva un alargamiento del período endógeno de la actividad locomotora, que correlaciona con el ritmo de acumulación y localización subcelular de period, un componente central del reloj molecular. Los resultados obtenidos a lo largo de este trabajo permiten proponer que la vía de BMP es capaz de modular la trascripción de genes centrales del reloj molecular y que schnurri podría constituir un regulador negativo determinante del nivel de expresión de los genes reloj en Drosophila.

Abstract:
The circadian clock controls rhythms in behavior, physiology and metabolism in all living organisms. This internal timekeeping system is entrained by environmental cues such as light and temperature. In Drosophila and other species some of the molecular components as well as the neuronal network responsible to generate and sustain this process have been identified. The long term goal of this thesis has been to study the role of the the bone morphogenetic protein (BMP) in Drosophila in the neural circuit that controls circadian locomotor activity rhythms. This signal transduction pathway is a general regulator of organogenesis and growth in Drosophila and other species, but specifically in the nervous system it constitutes a retrograde signal crucial for processes like synaptogenesis, synaptic morphology and the homeostatic response. Adult-specific alteration of this pathway within the fly circadian network produces a long period phenotype in locomotor behavior, that correlates with an altered (i.e. delayed) accumulation and subcelular localization of PERIOD, a core component of the molecular clock. Our results lend support to the view that the BMP pathway modulates transcription of clock genes, and more specifically, that schnurri could be a negative regulator crucial to determine clock gene expression levels in Drosophila.

Beconi, Martha Teresa. "Actividad de oxidasa alternativa y respiración mitocondrial en plantas superiores" (1981). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se estudió la actividad de oxidasa alternativa y la respiración mitocondrial en mitocondrias aisladas de diferentes tejidos de plantas superiores. Incubando tejido de tubérculos de papa en una cámara húmeda (envejecimiento) durante 24 y 48 horas se observó un incremento de la proteína mitocondrial con un concomitante aumento en la actividad de oxidasa alternativa. Además en dichas mitocondrias se observó un incremento en el consumo de oxígeno y una disminución en el control respiratorio con el tiempo de incubación. Al determinar la producción de anión superóxido en mitocondrias aisladas de tubérculos de papa se encontró que representa una pequeña fracción del consumo de oxígeno total y que no se incrementa con el envejecimiento. El envejecimiento del tejido produce un considerable incremento en la actividad de superóxido dismutasa citosólica (enzima Cu-Zn) lo cual es consistente con un incremento en la producción citosólica de Ō¯2̄ en condiciones fisiológicas. En la determinación de la actividad de oxidasa alternativa en mitocondrias aisladas de ejes embrionarios de semillas de soja no se observó una actividad apreciable de oxidasa alternativa durante los primeros estadíos de incubación como habían propuesto Yentur y Leopold (1976) y su nivel se mantuvo bajo entre las 2 y las 14 horas de imbibición. En embriones de soja se observó un incremento en el consumo de oxígeno que es paralelo al observado en el peso fresco entre las 2 y las 14 horas de imbibición. En mitocondrias aisladas de ejes embrionarios de soja se observó un incremento en la respiración por el agregado de citocromo c exógeno, y una disminución del efecto del citocromo c con el tiempo de imbibición. Al medir la respiración de embriones de soja se observó que el 46-50% del consumo de oxígeno total es de origen mitocondrial siendo el resto del consumo de oxígeno extramitocondrial y debido a la actividad de otras enzimas como oxidasas, oxigenasas (por ej. tirosinasa, lipoxigenasa, etc.). Esto coincide con trabajos realizados con quimioluminiscencia (Boveris y col., 1980) donde se obtiene una gran actividad de lipoxigenasa en homogenados de semillas de soja. Esta actividad de lipoxigenasa es insensible al cianuro y a la antimicina, pero es sensible al SHAM, similarmente a la oxidasa alternativa que es sensible al SHAM e insensible a los otros dos inhibidores. En mitocondrias de raíces de maiz que crecen en una solución nutritiva, se encontró una actividad de oxidasa alternativa que da cuenta del 41% del consumo de oxígeno total. En dichas mitocondrias la actividad de la oxidasa alternativa parece asociarse a la denominada "respiración salina" donde se produce exceso de ácidos orgánicos cuya función es mantener la electroneutralidad frente a la absorción de iones. Se observó con el uso de inhibidores de la respiración, que en mitocondrias de raíces de maíz, el SHAM y la antimicina actúan en sitios separados, pero que muestran una ligazón cooperativa entre ambos sitios. Los estudios realizados sobre la actividad de oxidasa alternativa y su papel fisiológico se han hecho sobre tejidos y mitocondrias aisladas de los mismos. En los trabajos realizados con tejidos enteros, no se puede afirmar que la actividad medida sea la que corresponde a la oxidasa alternativa, porque hay que considerar otros factores que pueden influir en su determinación. En el trabajo realizado para esta tesis utilizando tejidos y mitocondrias aisladas de los mismos permite concluir que para determinar la actividad de la oxidasa alternativa de un tejido hay que aislar las mitocondrias del mismo.

Beguet, Adolfo J. L.. "Dosaje fotocolorimétrico del ión ferroso" (1944). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Beigier Bompadre, Macarena. "Efecto de los péptidos formilados en la regulación del receptor para el fragmento Fc de inmunologlobulina G de tipo I (FcyRI) en monocitos humanos" (2002). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En un fenómeno inflamatorio se produce la migración unidireccional (quimiotaxis) de los polimorfonucleares neutrófilos hacia el foco inflamatorio, seguidos luego por los monocitos sanguíneos. Esta migración es la respuesta al gradiente de concentración de un agente quimiotáctico determinado, como el leucotrieno B4 o las quimioquinas. También existen productos como los péptidos formilados, que son quimiotácticos para monocitos y neutrófilos. Estos péptidos formilados son productos de clivaje de proteínas bacterianas o mitocondriales. Los receptores para la porción Fc de lgG (FcγRs) son capaces de interconectar la especificidad de los anticuerpos con las funciones efectoras de los monocitos y neutrófilos. Tres clases de FCyRshan sido identificados en los leucocitos humanos: FcγRI, FcγRII y FcγRIII. El FcγRI es un receptor de alta afinidad capaz de mediar Ia fagocitosis y Ia citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC). Este receptor se expresa constitutivamente en la superficie de los fagocitos mononucleares y su expresión es aumentada por citoquinas como el interferón-γ (IFN-γ)y la interleukina-10 (IL-10). En este trabajo, se ha demostrado que la preincubación de los monocitos humanos con el péptido formilado prototipo N-formil-metionil-leucil-fenilalanina (FMLP) fue capaz de inhibir la expresión del FcγRI inducida por IFN-γ e IL-10. Esta inhibición se correlacionó con la inhibición de funciones dependientes del FcγRI como la ADCC y Ia fagocitosis, pero el FMLP no afectó otras funciones mediadas por el IFN-γ o la IL-10. El mecanismo de acción del FMLP cuando fue agregado antes que las citoquinas, involucraría la activación de las Mitogen Activated Kinases (MAPKs) p38 y Erk1/2, pero no de la proteín kinasa C (pKC). A su vez, el FMLP no modificó ni la expresión de los receptores para IFN-γ o IL-1O ni la fosforilación del factor de transcripción STAT-1. Por otra parte, el FMLP también inhibió la expresión del FcγRI en monocitos humanos previamente activados con IFN-γ. Sin embargo, en este caso, el FMLP no modificó la expresión del FcγRI en células pretratadas con IL-10. Sobrenadantes obtenidos de monocitos tratados primero con IFN-γ y luego con FMLP, indujeron la disminución de la expresión del FcγRI en monocitos naive. Este efecto estaria mediado por serin y metaloproteasas. A su vez, sobrenadantes provenientes de neutrófilos tratados con FMLP también fueron capaces de inducir la disminución del FcγRI en monocitos naive. En un modelo murino de inflamación crónica, el FMLP indujo la disminución de la expresión de FcγRs en macrófagos activados con IFN-γ. En pacientes con tuberculosis pulmonar activa, el IFN-γ y la IL-1O indujeron el aumento en la expresión del FCγRI en los monocitos. Sin embargo, el FMLP no fue capaz de disminuir la expresión del FCγRI inducida por estas citoquinas. Además, sobrenadantes de neutrófilos tratados con FMLP provenientes de estos pacientes no alteraron la expresión del FCγRI en monocitos naive. Este trabajo contribuye a la comprensión global de los mecanismos mediante los cuales agentes conocidos como pro-inflamatorios pueden tener funciones anti-inflamatorias en determinadas circunstancias. Este efecto antiinflamatorio del FMLP funcionaría como mecanismo de atenuación de una respuesta inflamatoria exacerbada por parte del huésped. El hecho de que los monocitos de los pacientes con tuberculosis pulmonar activa no presenten estos mecanismos concuerda con esta interpretación.

Abstract:
In the course of the inflammatory phenomenon, polymorphonuclear neutrophils migrate unidirectionally (chemotaxis) towards the inflammatory focus, followed by monocytes. This migration occurs in response to the concentration gradient of a chemotactic agent, such as leukotriene B4 or chemokines. Molecules such as formylpeptides are chemotactic for neutrophils and monocytes. These peptides are cleavage products of bacterial and mitochondrial proteins. The receptors for the Fc portion of IgG (FCγRs) act as a bridge between the specificity of antibodies and the effector functions of monocytes and neutrophils. Three classes of FcγRs have been identified on human leukocytes: FcγRI, FcγRII and FcγRIII. FcγRI is a high affinity receptor that mediates phagocytosis and antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC). This receptor is constitutively expressed on mononuclear phagocytes and its expression is enhanced by interferon-γ (IFN-γ) and interleukine-1O (IL-10). In this study, it has been demonstrated that pre-incubation of human monocytes with the prototypic formyl peptide N-formyI-methionyl-leucyl-phenylalanine (FMLP) inhibited the expression of FcγRI induced by IFN-γ or IL-10. This inhibition correlated with the inhibition of FcγRI-dependent functions such as ADCC and phagocytosis. However, FMLP did not affect other functions modulated by IFN-γ or IL-10. When FMLP was added to human monocytes before these cytokines, Mitogen Activated Kinases (MAPKs) p38 and Erk1/2, but not protein kinase C (pKC), were involved in the FMLP-mediated inhibition. FMLP altered neither the expression of IFN-γ/IL-10 receptors nor the phosphorylation of the transcription factor STAT1. On the other hand, FMLP also inhibited the expression of FcγRI in human monocytes that had been previously treated with IFN-γ. However, FMLP did not alter the expression of FcγRI in monocytes previously treated with IL-10. Supernatants obtained from monocytes treated first with IFN-γ and later with FMLP downregulated the expression of FcγRI on naive human monocytes. This effect was mediated by serine and metalloproteases. Moreover, this effect was also observed when using supernatants from FMLP-treated human neutrophils. In a murine model of chronic inflammation, FMLP downregulated the expression of FcγRd on IFN-γ-activated macrophages. In patients with active pulmonary tuberculosis, IFN-γ and IL-1O upregulated the expression of FcγRI. However, FMLP was not capable of downregulating the expression FcγRI induced by these cytokines. Besides, FMLP-treated neutrophils from these patients did not modify the expression of FcγRI on naive monocytes. This study contributes to the understanding of inflammatory phenomena. We have demonstrated that well-known pro-inflammatory molecules could behave, under certain circumstances, as anti-inflammatory agents. This antiinflammatory effect of FMLP would attenuate an exacerbated host immune response. The fact that monocytes from tuberculosis patients lack these antiinflammatory mechanisms is in agreement with this interpretation.

Bejarano, Cecilia Soledad. "Estudio teórico y numérico de inestabilidades Hall-MHD en flujos tipo shear" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La presente Tesis se propone, como objetivo general, contribuir al estudio de los plasmas astrofísicos que conforman diversas configuraciones en el Universo; mientras que, como objetivo específico, se plantea investigar el desarrollo de inestabilidades en la microescala de plasmas completamente ionizados. En concreto, se analiza el rol del efecto Hall en la dinámica microscópica asociada a pequeñas parcelas de fluido inmersas en un flujo macroscópico tipo shear. A tal fin, se utiliza como marco teórico las ecuaciones de la teor´ıa magnetohidrodinámica, en la aproximación shearing-box, teniendo en cuenta los términos adicionales correspondientes a las corrientes de Hall. Puntualmente, se estudia la evolución de una nueva inestabilidad a la cual se nombra Hall-MSI (Hall Magneto-Shear Instability). Con este propósito, se desarrolla un modelo analítico que proporciona una descripción del comportamiento de esta inestabilidad en el régimen lineal. Los resultados teóricos obtenidos se corroboran a su vez mediante cálculos numéricos. Asimismo, las simulaciones numéricas son fundamentales para abordar el estudio de la evolución no lineal del sistema. La comprensión de los procesos físicos involucrados en la microescala, responsables de los mecanismos de transporte, presumiblemente permitirá desarrollar modelos macroscópicos que profundicen los conocimientos de distintos fenómenos astrofísicos. En este contexto, el trabajo efectuado en esta Tesis resulta especialmente importante en el análisis de los procesos de acreción y de los mecanismos de eyección, sustentación y colimación de los denominados jets. Por un lado, el efecto Hall ciertamente modifica la inestabilidad magneto-rotacional, principal candidato para explicar el origen de la microturbulencia en discos de acreción. Por el otro, el desarrollo de la inestabilidad Hall magneto-shear podría afectar la evolución de la inestabilidad de Kelvin-Helmholtz, particularmente relevante en la interfaz entre jet y medio circundante.

Abstract:
The present Thesis aims to contribute to the study of astrophysical plasmas which are ubiquitous in the Universe in several configurations, dealing with the development of micro instabilities in fully ionized plasmas. It specifically adresses the role of the Hall effect in the dynamics of the micro-scale associated to small parcels of fluids embedded in a macroscopic shear flow. For this purpose, the framework of magnetohydrodynamics in the shearing-box approximation is adopted, with additional terms related to the Hall currents. Moreover, it studies the evolution of a new instability called Hall-MSI (Hall Magneto-Shear Instability). To this end, an analitical model is developed in order to describe the linear behavior of this instability. Furthermore, the theoretical results are corroborated by numerical simulations. In addition, the numerical approach allows to extend the evolution into the non-linear regime. The comprehension of the physical processes involved in the microscopic scales, which are responsible for the transport mechanisms, will hopefully contribute to develop macroscopic models to improve the knowledge of many astrophysical phenomena. In this context, the results reported in this Thesis may be important to enhance the understanding of the physics regarding accretion processes and launching, collimation and sustain mechanisms of astrophysical jets. On the one hand, the Hall effect certainly modifies the magneto-rotational instability, which is the main candidate to explain the origin of the microscopic turbulence in accretion disks. On the other hand, the Hall magneto-shear instability might affect the development of the Kelvin- Helmholtz instability, which is relevant at the interface between the jet and the surrounding environment.

Bejarán, Rubén Aníbal. "Factores que afectan a la temperatura media mensual en Argentina subtropical" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo principal de esta Tesis es avanzar en el conocimiento de los factores que determinan la temperatura media mensual en Argentina subtropical a través del análisis de las relaciones de dicha variable con la nubosidad, la humedad del suelo, la temperatura de los océanos Atlántico y Pacífico y la circulación atmosférica. A través de este estudio se busca establecer en qué medida, desde el punto de vista estadístico, las relaciones físicas conocidas a nivel diario pueden ser transferidas a escalas temporales mayores. Del análisis de correlación entre la temperatura media mensual y la nubosidad se encuentra que el signo es distinto según la época del año. Durante el semestre cálido (octubre a marzo) predominan las correlaciones negativas mientras que entre abril y septiembre dominan las correlaciones positivas. La relación inversa observada durante los meses cálidos se debería a que domina el efecto de la nubosidad previniendo la ocurrencia de temperaturas máximas elevadas mientras que la relación directa que se encuentra en el semestre frío estaría asociada al efecto de la nubosidad moderando las temperaturas mínimas. Con respecto a la relación entre el contenido de humedad en el suelo, calculado a través del Indice de Precipitación Estandarizado (SPI), y las temperaturas mínima, máxima y media en Argentina subtropical, los resultados obtenidos muestran que existen correlaciones débiles de signo positivo entre la humedad del suelo y la temperatura mínima y correlaciones más altas en valor absoluto y de signo contrario entre la humedad del suelo y la temperatura máxima. La temperatura media muestra un comportamiento similar al de la máxima, principalmente durante el verano, reflejando que el efecto de la humedad del suelo sobre la temperatura media es una consecuencla de la utilización del calor disponible en el ambiente en el proceso de evaporación. En invierno no se encontraron correlaciones significativas indicando que la mayor o menor capacidad calorífica de los suelos debido a su mayor o menor contenido de humedad, no es un factor importante en la regulación la temperatura media. La relación entre la temperatura media mensual en Argentina subtropical y la posición de los vientos máximos en 200 hPa muestra que cuanto más al norte se encuentra la posición de los vientos zonales máximos, menores son las temperaturas medias en la mayoría de las estaciones de la región analizadas. Durante los meses de invierno y primavera la correlación es mayor que para el trimestre de verano y los primeros meses del otoño así como el área donde alcanza valores significativos. Las débiles correlaciones obtenidas para los meses estivales se deben a que la región está caracterizada por una marcada barotropía y los vientos máximos superiores se encuentran desplazados hacia la Patagonia. Existe una correlación negativa entre el número de pasaje de perturbaciones (N) en Santa Rosa, Paraná y Posadas y la temperatura media que es mayor en valor absoluto en el otoño y comienzo del invierno en Posadas y Paraná y más irregular espacial y temporalmente en Santa Rosa. Estas correlaciones indican que la relación entre la temperatura media y N es tal que, a escala mensual, el mayor pasaje de perturbaciones está asociado a menores temperaturas. Los resultados obtenidos del análisis de la relación entre la temperatura del mar del océano Atlántico (TSMAtlántico)la temperatura media mensual en Argentina subtropical (Tsup) muestra que en los meses de verano, anomalías frías (cálidas) en Argentina subtropical están asociadas a anomalías cálidas (frías) en el Atlántico en la banda 20°S-30°S. Estos resultados se deberían a que anomalías negativas de Tsup podrían ser consecuencia del aumento de la precipitación y por ende de la nubosidad asociadas a un desplazamiento hacia el sur de la Zona de Convergencia del Atlántico Sur (ZCAS) como resultado de un calentamiento en el Atlántico hacia el sur de la ZCAS. Durante el otoño se encuentra una relación directa entre Tsup y TSMAtlántico que se debería a que el flujo en superficie en Argentina subtropical durante esa época del año es predominantemente del este mientras que no se encuentran señales claras en la relación entre Tsup y TSMAtlántico durante el invierno. Del análisis de la relaclón entre Tsup y la temperatura del océano Pacífico (TSMPacífico) se encuentra que los patrones correspondientes al verano, asociados a eventos El Niño/La Niña muestran una relación inversa entre la temperatura del mar del Pacífico tropical y la temperatura en el noreste de Argentina. Las anomalías negativas en la temperatura en el noreste de Argentina durante eventos cálidos se deberían al aumento de la nubosidad debido a la mayor precipitación. En las componentes de otoño en las que no aparece el modo Niño/Niña, se observa que es significativa la región del Pacífico subtropical próximo a la costa sudamericana de forma que se encuentra una relación directa entre TSMPacífico y Tsup. Esta relación podría deberse a que esa región del Pacífico es donde en general tienen origen los sistemas frontales que ingresan al continente y por lo tanto su temperatura aparece condicionando la advección térmica. Durante el invierno se observa una relación directa entre las anomalías de TSMPacíflco en la región ecuatorial y Tsup en Argentina subtropical de forma que eventos El Niño están asociados a anomalías cálidas de Tsup y eventos La Niña a anomalías frías. Esto se debería a la modificación de la circulación regional durante eventos cálidos (fríos) que implica una menor (mayor) frecuencia de irrupciones de frentes fríos y una mayor (menor) permanencia del aire cálido advectado desde el norte en Argentina subtropical. Durante la primavera se encuentra una relación directa entre la temperatura del Pacífico ecuatorial y la temperatura en Argentina subtropical, confirmando que eventos cálidos (fríos) están asociados a una intensificación (debilitamiento) de la advección de aire cálido y húmedo sobre el sudeste de Sudamérica. El Pacífico subtropical muestra una relación inversa con la temperatura en Argentina subtropical, con diferencias entre los distintos meses de la primavera pero que en general es significativa en la región este. Se formula un modelo de estimación de la temperatura media mensual para tres subregiones de Argentina subtropical (oeste, noreste y sudeste) en función de la nubosidad, humedad del suelo, posición de los vientos máximos en 200 hPa, número de pasaje de perturbaciones y temperatura de la superficie del mar de los océanos Atlántico y Pacífico y pesando la importancia relativa de cada uno de ellos. Los resultados obtenidos a partir de la aplicación del método de regresión múltiple muestran que existe disparidad en la bondad del ajuste entre las diferentes subregiones. En general, la zona oeste es la que presenta la menor proporción de varianza explicada. Con respecto a las variables que se incorporan a los modelos, los resultados son en general bastante dispares y no se observan variables que expliquen individualmente la variabilidad interanual de la temperatura mensual. Los resultados obtenidos a lo largo de los diferentes capítulos permitieron establecer relaciones importantes entre la temperatura media mensual en Argentina subtropical y un conjunto de variables atmosféricas y oceánicas. Si bien estos factores no alcanzan para explicar la totalidad de la variabilidad de la temperatura media mensual en la región, se ha demostrado que según la época del año y la subregión, la varianza explicada por los factores analizados puede superar el 50%. A través de este estudio de diagnóstico se demuestra que la temperatura media mensual en Argentina subtropical depende un conjunto de factores que varían según la época del año y la subregión considerada y que ninguno de los factores es capaz de explicar individualmente la variabilidad interanual de la temperatura poniendo de esta forma de manifiesto la complejidad del pronósüco climático de la temperatura mensual en la región.

Abstract:
The main objective of this Thesis is to advance in die knowledge of the factors that determine monthly mean temperatures in subtropical Argentina through the analysis of the relations with a set of variables as cloudiness, soil humidity, Atlantic and Pacific sea surface temperature and atmospheric circulation. Through this study we look for to establish to what extent, from the statistical point of view, the physical daily level relations can be transferred to larger temporary scales. From the analysis of correlation between the monthly mean temperature and total cloudiness, it can be appreciated that the sign is different according to the time of the year. During the warm semester (October to March) the negative correlations predominate whereas between April and September the positive correlations are dominant. The observed inverse relation during the warm months indicates that the effect of the cloudiness preventing high maxima temperatures is the most important whereas the direct relation during the cold semester could be associated to the modulation of minimum temperature by cloudiness. With respect to the relation between the ground humidity content, calculated through the Standarized Precipitation Index (SPI), and the minimum, maximum and mean temperature in subtropical Argentina, the results show weak positive correlations between the soil humidity and minimum temperature and higher correlations in absolute value and of opposite sign between soil humidity and maximum temperature. The mean temperature shows a similar behavior to the one of the maximum, mainly during the summer, reflecting that the effect of the soil humidity on the mean temperature is a consequence of the use of the heat available in the atmosphere in the evaporation process. In winter not significant correlations were found indicating that the greater or smaller heat capacity of grounds due to its greater or smaller humidity content, is not an important factor in the regulation the average temperature. The relation between the monthly mean temperature in subtropical Argentina and the position of maximum winds in 200 hPa shows that the most to the north is the position of maximum zonal winds, smaller is the mean temperatures in most of the analyzed stations of the region. During the winter and spring months the correlation is greater than for the trimester of summer and the first months of the autumn as well as the area where it reaches significant values. The weak correlations obtained for the summer months are probably a consequence of the noticeable barotropy of the region and that the superior maximum winds are moved towards the Patagonia. A negative correlation between the number of passage of disturbances (N) in Santa Rosa, Paraná and Posadas and the mean temperature is greater in absolute value in the autumn and beginning of the winter in Posadas and spatially and temporally more irregular in Paraná and Santa Rosa. These correlations indicate that the relation between temperature average and N is so that, on monthly scale, the greater passage of disturbances is associate to smaller temperatures. The results of the analysis of the relation between the Atlantic sea surface temperature (SSTAtlantic) and monthly mean temperature in subtropical Argentina (Tsup) shows that in summer months, cold (warm) anomalies in subtropical Argentina are associate to warm (cold) anomalies in the Atlantic band 20°S-30°S. Negative anomalies of Tsup could be consequence of the increase of the precipitation and therefore of the cloudiness associated to a displacement towards the south of the South Atlantic Convergence Zone (SACZ) as a result of a heating in the Atlantic towards the south of the SACZ. During the autumn there is a direct relation between Tsup and SSTAtlantic because the surface flow in subtropical Argentina during that time of me year is predominantly of the east whereas there are not clear signals in the relation between Tsup and SSTAtlantic during winter. The analysis of the relation between Tsup and the Pacific sea surface temperature (SSTPacific) shows that the patterns corresponding to the summer, associated to El Niño/La Niña events present an inverse relation between the tropical SSTPacific and the mean temperature in northeastern Argentina. The negative temperature anomalies in the northeast of Argentina during warm events could be due to the increase of the cloudiness associated to greater precipitation. In autumn, components in which it does not appear the El Niño/La Niña signal, it is observed that the region of me subtropical Pacific next to the South American coast is significant with a direct relation between SSTPacific and Tsup. This relation could be due to that that region of the Pacific is where in general the frontal systems that enter the continent have their origin and therefore its temperature appears conditioning the thermal advection. During winter, a direct relation between the anomalies of the equatorial SSTPacific and Tsup in subtropical Argentina is observed so that El Niño events are associated to warm anomalies of TSup and La Niña events to cold anomalies. This could be related to the modification of the regional circulation during warm (cold) events that imply a minor (greater) frequency of irruptions of cold fronts and a greater (smaller) permanence of the warm air advected from the north in subtropical Argentina. During the spring, there is a direct relation between the equatorial Pacific temperature and the temperature in subtropical Argentina, confirming that warm (cold) events are associate to an intensification (weakening) of the warm and humid air advection over Southeastern South America. The subtropical Pacific shows an inverse relation with the temperature in subtropical Argentina, with differences between the different months from the spring but that in general is significant in the east region. A model of estimation of the monthly mean temperature for three subregions of subtropical Argentina (the West, Northeast and Southeast) on the cloudiness, soil humidity, position of maximum winds in 200 hPa, number of passage of disturbances and Atlantic and Pacific sea surface temperature is formulated. The results obtained from the application of a multiple regression method show disparity in the goodness of the adjustment between the different subregions. In general, the West zone is the one that presents the smaller proportion of explained variance. With respect to the variables that are included into the models, the results are, in general quite different and none of the variables explain individually the interannual variability of the mean monthly temperature.

Belforte, Juan E.. "Participación del estriado de la rata en los mecanismos de la analgesia endógena" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los ganglios de la base están constituidos por una serie de núcleos subcorticales bilaterales que forman un circuito altamente interconectado; poseen una estrecha relación anatómica y funcional con el tálamo y la corteza cerebral y han sido clásicamente involucrados en el control de la función motora. Los componentes principales de los ganglios de la base son el globo pálido, la sustancia negra, el núcleo subtalámico y el estriado. Este último es el principal núcleo de entrada de información a los ganglios de la base. Recibe aferencias glutamatérgicas excitatorias, topográficamente organizadas de prácticamente toda la corteza cerebral y varios núcleo talámicos. A su vez, la sustancia nigra pars compacta ejerce, mediante la proyección dopaminérgica nigroestriatal, un papel regulatorio sobre la actividad del estriado. Recientemente han surgido evidencias electrofisiológicas, comportamentales, bioquímicas y clinicas que sugieren la participación de los ganglios de la base en la nocicepción y específicamente en los mecanismos de modulación del dolor. Es asi que, con el objeto de ampliar los conocimientos referentes al rol funcional de los ganglios de la base en la neurofisiología del dolor, el objetivo de esta tesis doctoral fue el de estudiar la participación del estriado de la rata en el control de la nocicepción y los mecanismos de analgesia endógena. Para ello trabajamos sobre un modelo de dolor que caracterizamos y validamos: el reflejo de abertura bucal evocado por la estimulación nociceptiva de los incisivos inferiores en ratas anestesiadas. Empleando dicho modelo, pudimos demostrar que la activación tanto eléctrica como química (mediante microinyecciones intraestriatales de glutamato) de determinadas regiones del mismo resulta en una disminución significativa en la amplitud del reflejo. Por medio de registros extracelulares de neurona única (single unit) en los núcleos motor y sensorial del trigémino se pudo analizar el efecto inhibitorio del estriado sobre neuronas de la via del reflejo. De esta manera, demostrarnos que el efecto inhibitorio generado por la estimulación del estriado se debe a la modulación de las aferencias sensoriales y no a un efecto motor, como podría esperarse al tratar con los ganglios de la base. El análisis conjunto de los resultados expuestos en esta tesis nos lleva a considerar fuertemente la participación de los ganglios de la base en la modulación del dolor y en los mecanismos de analgesia endógena. De esta manera, los ganglios de la base no solo estarían involucrados en la coordinación e integración de la función motora con aspectos motivacionales y afectivos; sino que además, podrían promover respuestas fisiológicas adaptativas consecuentes con el plan motor seleccionado. La activación de los mecanismos de analgesia endógena podría formar parte de este proceso.

Abstract:
The basal ganglia consist of a number of highly interconnected nuclei that conform a closed cortico-basal ganglia-thalamo-cortical loop. The principal components of the basal ganglia are the striatum, the globus pallidus, the substantia nigra and the subthalamic nucleus. The most abundant inputs to the basal ganglia arise from the cortex in the form of topographically organized excitatory glutamatergic cortico-striatal projection. Dopamine, released from endings of neurons that are located in the substantia nigra pars compacta, modulates the activity of striatal cells and therefore of the whole circuit. The involvement of the basal ganglia in motor functions has been well studied. However, several lines of evidence have implicated the basal ganglia with autonomic, affective and cognitive function. In addition, recent electrophysiological, pharmacological, behavioral and clinical experiments indicate that the basal ganglia also process noxious somatosensory information. The basal ganglia receive noxious somatosensory inputs from several sources such as the cerebral cortex, intralaminar nuclei of thalamus, raphé nuclei and amygdala. The noxious inputs produce activation or inhibition of a high proportion of the striatal, globus pallidus and substantia nigra neurons in anesthetized animals. Studies made in human volunteers have demonstrated that thermal painful stimulation of the hand increased the blood flow within the contralateral striatum. In addition, many patients with Parkinson diseases complain of pain dysfunctions not related to the motor disturbances. The objective of my doctoral thesis was to determine whether the striatum could be involved in the modulation of nociceptive inputs. We worked with 300-450 g Sprague-Dawley rats anesthetized with urethane 1.2 g/kg and s.c. local anesthetic, in which painful responses were evoked by electrical stimulation of the tooth pulp of lower incisors. The jaw opening reflex was measured as the peak to peak amplitude of the electromyographic response evoked in the digastric muscle by means of bipolar Stainless steel twisted electrodes. The head of the animals was fixed to a stereotaxic frame and different regions of the striatum were electrical or chemical stimulated during the experiments. In addition, in a second set of experiments extracellular single unit activity was recorded by mean of glass microelectrodes (l-lOMΩ), filled with 2% Pontamine Sky Blue in 2M NaCl. Spontaneous neural activity and evoked by dental nociceptive stimulation was recorded within the spinal trigeminal nucleus pars eaudalis and motor trigeminal nucleus and off-line quantified using post-stimulus time histograms. The striatum was stimulated with a microinjection of glutamate (82 nmol/0.5 μl). The present study demonstrates that unilateral electrical and chemical stimulation of some regions of the medial striatum (between bregma +0.1 and +0.6 approximately) could inhibit the nociceptive reflex.. The activation of striatal neurons mainly inhibited the responses evoked by tooth pulp stimulation in second order neurons of the sensory trigeminal nucleus without affecting the motor response directly. In conclusion, our results provide evidence that the striatum is involved in the modulation and control of nociceptive inputs and suggest an involvement of the striatum in the regulation of endogenous analgesic systems.

Belforte, Nicolás Adalberto. "Desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas para el tratamiento del glaucoma" (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En este Trabajo de Tesis se demostró que la hipertensión ocular inducida por inyecciones semanales intracamerales de ácido hialurónico provocó un aumento significativo en la actividad del sistema nitrérgico retiniano. La melatonina moduló los sistemas glutamatérgico, GABAérgico, nitrérgico y antioxidante endógeno retinianos en forma opuesta a la inducida por la hipertensión ocular crónica. Un tratamiento crónico con melatonina disminuyó las alteraciones funcionales e histológicas provocadas por el glaucoma experimental. Hemos desarrollado un modelo de glaucoma experimental a través de la administración semanal de condroitín sulfato (CS) en la cámara anterior del ojo de rata que reproduce características centrales del glaucoma humano. La inducción de tolerancia isquémica provocó una preservación significativa en la función retiniana y en la estructura de la retina y del nervio óptico en ojos con hipertensión ocular inducida por la administración de CS. Asimismo, hemos demostrado que la neurotomía óptica radial, que no provocó daño per se, previno y redujo los cambios inducidos por el glaucoma experimental, tanto a nivel funcional como histológico.

Abstract:
In this Thesis, we have demonstrated that ocular hypertension induced by weekly intracameral injections of hyaluronic acid provoked a significant increase in the retinal nitridergic pathway activity. Melatonin modulated the retinal glutamatergic, GABAergic, nitridergic and endogenous antioxidant systems in an opposite way to that induced by chronic ocular hypertension. Moreover, a chronic treatment with melatonin decreased functional and histological alterations provoked by experimental glaucoma. We have developed an experimental model of glaucoma in rats induced by weekly injections of chondroitin sulfate (CS) in the eye anterior chamber, which reproduces central features of human glaucoma. The induction of ischemic tolerance provoked a significant preservation of retinal function and retinal and optic nerve structure in eyes with ocular hypertension induced by CS. In addition, we have demonstrated that radial optic neurotomy, which did not cause damage per se, prevented and reduced functional and histological alterations in the retina induced by experimental glaucoma.

Belgorosky, Denise. "Rol del óxido nítrico en la progresión del cáncer de vejiga" (2016-03-18). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El óxido nítrico (NO) es un radical libre altamente reactivo, que puede actuar como mensajero intracelular e influir en el desarrollo tumoral. Resultados de nuestro grupo de investigación indican que la expresión de la enzima óxido nítrico (NO) sintasa inducible (iNOS) en tumores vesicales humanos es un factor de mal pronóstico que se asocia con recurrencias más tempranas y con un mayor grado histológico. Teniendo en cuenta que iNOS no se expresa en el urotelio vesical de individuos sanos, y que es una entidad clave del proceso inflamatorio, característico del cáncer de vejiga (CaV), surgió la hipótesis de que la inhibición de esta enzima puede ser un blanco terapéutico para pacientes cuyos tumores expresen iNOS. Para analizar esta hipótesis comenzamos estudiando el rol del NO como consecuencia de la expresión de iNOS, en la progresión del CaV. Para ello utilizamos un modelo murino de CaV que imita muy bien la patología en humanos. Cuando las líneas celulares MB49 y MB49-I son inoculadas en la vejiga de ratones singeneicos generan tumores no invasores del musculo (NMI) y tumores invasores del músculo detrusor (MI), respectivamente. La línea invasora MB49-I, expresa altos niveles de iNOS, y en consecuencia mayores niveles de NO, comparado con la línea MB49. Asimismo, posee incrementados varios pasos del proceso de invasión y metástasis como es su capacidad de migración e invasión, la actividad de enzimas proteolíticas, y la capacidad de generar metástasis pulmonares. Detectamos que el NO es un factor de sobrevida para células de CaV, que expresan iNOS y que al inhibirlo, se reduce la activación de vías de proliferación como la vía de las MAPK, y parámetros de progresión tumoral como la producción de enzimas proteolíticas, migración, angiogénesis y el crecimiento metástatico en pulmón. Analizamos, por otra parte las consecuencias de la inhibición de iNOS en el crecimiento tumoral empleando tres estrategias. La primera fue evaluar la actividad de L-NAME (inhibidor farmacológico pan NOS) de manera sistémica en ratones portadores de tumores de vejiga creciendo en el subcutáneo o en la vejiga de ratones singeneicos. La segunda, fue también una inhibición farmacológica, utilizando el inhibidor específico de iNOS 1400w, en forma local, y la tercera aproximación involucró el silenciamiento genético de la enzima iNOS en la línea invasora. Las tres estrategias mostraron resultados similares demostrando que tanto L-NAME sistémico, como 1400w local y la ablación genética reducen significativamente el crecimiento tumoral de células que expresan iNOS. Asimismo, hemos demostrado que los niveles urinarios de NO, determinados como nitrito, son un marcador de seguimiento en tumores de vejiga, y que la disminución de dichos niveles está asociado a una respuesta a tratamiento. Es así que proponemos que la inhibición de la actividad iNOS sería una terapia promisoria para pacientes cuyos tumores expresen la enzima.

Abstract:
Nitric oxide (NO) is a highly reactive free radical, which may act as an intracellular messenger and influence tumor development. Results of our research group indicate that the nitric oxide (NO) production through inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression is a poor prognostic factor associated to earlier recurrences and progression in patients with bladder cancer (Bca). Since iNOS it is not express in bladder urothelium of healthy individuals, and it is a key on inflammatory processes, -characteristic of Bca-, we hypothesize that the inhibition of this enzyme may be a therapeutic target for Bca patients whose tumors express iNOS. To test this hypothesis we began studying the role of NO produced by iNOS, in Bca progression. We used a murine Bca model that mimics well the pathology in humans. When Bca cell lines MB49 and MB49-I were inoculated in bladders of syngeneic mice, non-muscle invasive tumors (NMI) and invasive muscle tumors (MI), respectively, were generated. Invasive MB49-I cell line expressed high levels of iNOS and therefore higher levels of NO, compared with MB49. Several properties involved in metastases and invasion such as the activity of proteolytic enzymes, migration ability and angiogénesis were higher in the invasive line. We detected that NO is a survival factor for Bca cells that express iNOS, and that inhibition of NO, reduced proliferation pathways, such as MAPK and parameters involved in tumor progression, like the activity of metalloproteinase, migration, angiogénesis and metastases development. We also analyze the consequences of iNOS inhibition in tumor growth, using three different strategies. The first one was administered systemically, L-NAME (pan NOS pharmacological inhibitor). The second one consisted on using 1400w (specific pharmacological iNOS inhibitor) directly on the bladder, and the third approach involved iNOS gene silencing in the invasive line. The three strategies showed similar results, demonstrating that systemically L-NAME, intravesical 1400w and iNOS genetic ablation, significantly reduced tumor growth of Bca cells. Several substances have been described as markers to monitor or predict patients with Bca, but none of them has proved to be useful enough. We have shown urinary levels of NO determined as nitrite, are a marker for monitoring bladder tumors and their reduction is associated with response to treatment. In conclusion, we propose iNOS inhibition as a promising therapy for Bca patients whose tumors express the enzyme.

Belingheri, Ana Verónica. "Endocitosis rápida en células cromafines de ratón: mecanismos asociados, su regulación por Ca2+ y su participación en el reciclado vesicular" (2016-09-22). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En las células cromafines se han descripto varios tipos de endocitosis (clatrina dependiente, kiss and run, bulk endocitosis), las cuales contribuyen a la recuperación y el reciclado de la membrana plasmática, de sus proteínas, y de las vesículas que se han fusionado por exocitosis. En esta Tesis doctoral se ha medido electrofisiológicamente la endocitosis rápida en células cromafines de ratón, observándose dos modalidades. Por un lado, una endocitosis compensatoria que evoluciona con una única constante temporal rápida de ~8 seg, e internaliza aproximadamente la misma cantidad de membrana que fue exocitada durante la estimulación. Esta modalidad se dispara en respuesta a una entrada de Ca2+ menor a 79 pC (grupo LCG, por “low current group”). Por otro lado, se identificó una endocitosis en exceso que internaliza una cantidad de membrana mayor a la exocitada previamente, evolucionando con dos constantes temporales, una rápida de cinética similar a la del LCG y una ultra-rápida de ~0,6 seg. Esta última modalidad es disparada por una entrada de Ca2+ mayor a 79 pC (grupo HCG, por “high current group”). Por medio de la utilización de fármacos específicos, se demuestra en esta Tesis que la endocitosis rápida depende específicamente tanto de la entrada de Ca2+ a través de canales dependientes de voltaje (CCDV) de tipo L como del Ca2+ liberado desde el retículo endoplasmático. Además, la utilización de BAPTA demostró que la endocitosis rápida sería dependiente de una señal de Ca2+ localizada. Por otro lado, dos inhibidores del reclutamiento de clatrina inhibieron totalmente la endocitosis en el grupo LCG, y parcialmente en el grupo HCG. Esto sugiere que en este último grupo, se activaría un mecanismo clatrino-independiente. En HCG ambos componentes cinéticos se vieron afectados por los inhibidores de clatrina, sugiriendo que cuando la entrada de Ca2+ es muy alta la endocitosis clatrina-dependiente puede evolucionar a velocidades aún no reportadas en la literatura. Finalmente, experimentos de imaging con FM1-43 mostraron que la endocitosis en exceso inducida por una despolarización con alto K+ se compone de una fracción reciclable a vesículas liberables y de otra no reciclable en un período de 30 minutos, siendo la primera inhibida parcialmente por un bloqueante del reclutamiento de clatrina. Estos resultados en su conjunto nos permiten sugerir un modelo en el cual: (a) la entrada localizada de Ca2+ por CCDV tipo L induce la liberación de más Ca2+ del retículo endoplásmico. (b) El consecuente aumento de este catión induce la activación de una endocitosis clatrina dependiente, que debido a su Ca2+ dependencia se muestra muy rápida al comienzo mientras el Ca2+ alto persiste en el citosol, y más lenta luego de que la concentración citosólica del catión ha disminuido. Esto explicaría la clatrino dependencia de ambos componentes. (c) Esta endocitosis clatrina dependiente resulta parcialmente en la generación de nuevas vesículas liberables. (d) La gran entrada de Ca2+ en el grupo HCG induciría además la activación de un proceso clatrina independiente, que no se recicla en vesículas liberables en los tiempos del experimento.

Abstract:
Chromaffin cells have various types of endocytosis (clathrin-dependent, kiss and run, bulk endocytosis), which allow the recovery and recycling of membrane and proteins of the previously fused vesicles. We measured two modes of rapid endocytosis in mouse chromaffin cells. On one hand, compensatory endocytosis (compensates approximately the same amount of membrane that was added during stimulation) is associated with a Ca2+ entry lower than 79 pC (LCG group) and a single time constant of ~8 sec. On the other hand, excess retrieval (the endocytosis surpasses the amount of the previously exocytosed membrane), is triggered by a Ca2+ entry bigger than 79 pC (HCG group) and has two time constants, a fast one (~8 sec) and an ultrafast one (~0,6 sec). The results of this Thesis show that the activation of rapid endocytosis is dependent on a localized Ca2+ signal, and specifically depends on Ca2+ influx through L-type voltage dependent Ca2+ channels (VDCC) and Ca2+ released from the endoplasmic reticulum. Additionally, we found that rapid endocytosis is clathrin dependent, almost entirely for the LCG group, and partially for the HCG group. Particularly in HCG, it is interesting that clathrin specific blockers inhibited the fast, but also the ultrafast component, what suggests that clathrin dependent endocytosis can progress at rapid speeds not previously reported when the Ca2+ entry is very big. The electrophysiological study on endocytosis was complemented with experiments of imaging using the membrane fluorescent probe FM1-43. After applying a high K+ depolarization that allows a large Ca2+ influx, we recorded an endocytosis that surpassed the previous exocytosis. We found that the internalized membrane was partially recycled to releasable vesicles, by a mechanism that is at least in part clathrin dependent. There was also a large internalized membrane fraction which was not releasable during the experimental period. We propose a tentative model in which: (a) Ca2+ entry through L-type VDCC triggers the release of more Ca2+ from endoplasmic reticulum; (b) the resulting increase of Ca2+ activates a rapid clathrin dependent endocytosis, and particularly in HCG the higher Ca2+ concentration during the first hundreds of milliseconds after the stimulus provokes the appearance of the ultrafast component; (c) clathrin dependent endocytosis partially results in the generation of new releasable vesicles in less than 30 min; (d) in HCG, the high Ca2+ entry also provokes the activation of a clathrin independent endocytosis that does not produce releasable vesicles in the experimental period.

Bellani, Marina. "Replicación de plásmidos en Escherichia coli recBC sbcBC" (2002). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Este trabajo estudia la replicación de plásmidos en Escherichia coli recBC sbcB sbcCD, un contexto Rec+, en el cual se amplifican procesos de recombinación que involucran intermediarios conteniendo extremos doble cadena (en función de la deficiencia en RecBCD). En este contexto genético, plásmidos con diversos origenes de replicación acumulan multimeros lineales de muy alto peso molecular denominados HMW Se re-evaluó el proceso de generación de multimeros HMW en el contexto recBC sbcBC, a la luz de los nuevos conceptos vigentes acerca de la interrelación replicación / recombinación. Durante la primer etapa del trabajo, se utilizó el sistema de recombinación especifico-de-sitio del transposón γδ para poner a punto un sistema de complementación regulable, que permitiera generar células conteniendo un mínimo porcentaje de multimeros, para analizar luego la síntesis de HMW a lo largo de la curva de crecimiento. Utilizando este sistema, se demostró que las células recBC sbcBCD pueden sintetizar multimeros del plásmido descontroladamente, durante las primeras horas de la fase estacionaria. La capacidad de replicar descontroladamente el plásmido durante la fase estacionaria está determinada por las condiciones de cultivo y depende en parte de la respuesta de fase estacionaria, gobernada por el regulador de la respuesta general al estrés σˢ. Una vez establecida la cinética de acumulación de HMW, se realizó un análisis genético para individualizar las funciones celulares involucradas en la síntesis de estos multímeros. Se analizó la incidencia de anular funciones de recombinación (RecA, RecF, RecR, LexA) y funciones involucradas en el re-inicio de la replicación sobre una horquilla restaurada (PriA, PriC, Rep), sobre la capacidad de las células de sintetizar HMW. La comprobación de que PriA resulta indispensable para la generación de HMW en un contexto RecBC- SbcBC-, constituye una evidencia de que la generación de HMW involucra el colapso de intermediarios normales de replicación del plásmido y el reinicio de la replicación por un mecanismo alternativo. En base a los resultados reportados, se proponen dos modelos para explicar el mecanismo de generación de HMW, que involucran el colapso de un intermediario de replicación y el restablecimiento de la replicación por un mecanismo de invasión/replicación entre multimeros lineales (similar al que utiliza T4 en su etapa tardía de replicación) o por un mecanismo de tipo círculo rodante (equivalente al utilizado por el fago ʎ para generar concatémeros).

Abstract:
This work studies plasmid replication in Escherichia coli recBC sbcBC, a Rec+ background, in which recombination processes involving linear DNA (or DNA molecules containing a double strand end) are amplified, given the deficiency in RecBCD characteristic of this genetic context. In recBC sbcBC cells, plasmids with diverse replication origins, were reported to accumulate high molecular weight linear multimers (HMW). During the course of this work we have re-evaluated the phenomenon of HMW synthesis, in terms of the current understanding of the link between replication, recombination and repair. Acomplementation system was designed, based on the site-specific recombination system from transposon γδ, which permitted the reduction of the percentage of HMW in the culture to a minimum, in order to analyze the kinetics of HMW accumulation along the growth curve. This system allowed us to demonstrate that recBC sbcBC cells can synthesize plasmid multimers in an unregulated manner, during the first hours of stationary phase. The ability of non-growing cells to replicate the plasmid in an uncontrolled manner during stationary phase is determined by growth conditions and depends in part on the stationary phase response, which is regulated by σˢ (the regulator of the general stress response). A genetic analysis was performed in order to characterize the cellular functions involved in HMW synthesis. We analyzed the effect of inactivating recombination functions (RecA, RecF, RecR, LexA) or genes involved in re-initiating replication upon replication fork repair (PriA, PriC, Rep), on the ability of the cells to synthesize HMW. PriA proved to be essential for HMW synthesis in a RecBC- SbcBC- strain, providing strong evidence for a model for HMW synthesis involving replication fork collapse and re-initiation of plasmid replication through an alternative mechanism. We postulate two models to explain the alternative mechanisms to initiate the synthesis of HMW in a recBC sbcBC context.

Bellesi, Fernando Alberto. "Comportamiento de interfases y emulsiones submicrónicas estabilizadas por biopolímeros en simulaciones de procesos de digestión gastroduodenal in vitro" (2016-11-24). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En años recientes un gran número de trabajos se han enfocado a estudiar la forma de reducir la elevada absorción de lípidos, asociada a numerosos problemas de salud, tales como obesidad y problemas cardiovasculares. Si bien las metodologías para abordar el tema son variadas, al ser la lipólisis una reacción interfacial (la lipasa debe adsorberse a la interfase para llevar a cabo la digestión de los lípidos), las interfases aceite/agua (tanto la estructura como el área interfacial) resultan un punto crítico a estudiar. Por tal motivo, el objetivo del presente trabajo consiste en evaluar el impacto que presentan diferentes estructuras interfaciales en el proceso digestivo con el propósito de encontrar aquella que retarde (o inhiba) la acción digestiva llevada a cabo por la lipasa pancreática. Se analizaron estructuras interfaciales y emulsiones estabilizadas por: proteínas (β-lactoglobulina (βlg) y aislado proteico de soja (SPI)) y polisacáridos (hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC)). Se desarrolló un modelo de digestión in vitro constituido por dos etapas: gástrica (1h, pH 2,5) y duodenal (1h, pH 7), que contemplan la presencia de las principales enzimas y biopolímeros a concentraciones fisiológicas. El estudio se realizó en dos niveles: (1) Estudios de digestión de interfases aceite/agua (tensiómetro interfacial de gota) para obtener información sobre cómo los fluidos característicos de la digestión perturban tales películas interfaciales, caracterizándolos mediante los parámetros: tensión interfacial y módulo dilatacional interfacial; (2) Estudios de digestión de emulsiones estabilizadas por los mismos emulsionantes obtenidas mediante la técnica de ultrasonidos de alta intensidad. Se analizaron los cambios microestructurales de las gotas de aceite (microscopía óptica y técnicas de dispersión de luz) y se monitoreó el porcentaje de ácidos grasos liberados (% AGL) por acción de la lipasa pancreática. Se comprobó que tanto las estructuras interfaciales como las emulsiones presentan diferencias en cuanto a la resistencia a la acción digestiva llevada a cabo por la lipasa. Estas vienen determinadas por la naturaleza de cada estructura y las características interfaciales de cada una. Las emulsiones estabilizadas por SPI y HPMC mostraron los menores % AGL en comparación con las emulsiones de βlg. El comportamiento observado no presentó relación con el área interfacial expuesta a la lipasa, sino más bien a la capacidad que presenta cada emulsionante en dificultar la acción de las sales biliares (SB), agentes indispensables para la acción de la lipasa. De esta manera, los resultados permitieron identificar a las SB como un factor clave en la regulación del proceso. En términos generales, los resultados contribuyen al mayor entendimiento sobre los mecanismos involucrados en la digestión de emulsiones y del rol crucial que juegan las estructuras interfaciales en el control de la lipólisis.

Abstract:
In recent years an important number of works have been focused on modulating the lipid digestion, since the high lipid absorption has been associated with an important number of health problems, such as obesity and cardiovascular diseases. Although different methodologies exist to evaluate the lipolysis process that is an interfacial reaction (pancreatic lipase has to bind to the oil-water (o/w) interface), o/w interfaces (both structure and interfacial area) suppose a critical issue to study. So, the objective of the present work is to evaluate the impact of different interfacial structures in the digestion in order to find the interfacial film that could retard (or inhibit) the pancreatic lipase activity. Different interfacial structures and proteins (ß-lactoglobulin (ßlg) and soy protein isolate (SPI)) and polysaccharides (hydroxypropylmethylcelullose (HPMC)) stabilized emulsions were analyzed. An in vitro digestion protocol was developed consisting of two stages: gastric (1h, pH 2.5) and duodenal phase (1h, pH 7.0), in the presence of the main enzymes and biopolymers at physiological concentrations. The investigation was carried out at two levels: (1) interfacial digestion of the different interfacial films formed (using a pendant drop tensiometer) to understand the way the digestive fluids affect the interfacial films, thus analyzing the evolution of interfacial tension and the dilatational interfacial modulus; (2) analysis of the behavior of emulsion (formed by using ultrasound techniques) stabilized by each emulsifier under in vitro gastrointestinal digestion. The microstructural changes of the oil droplets (optical microscopy and light scattering techniques) were analyzed and it was also monitored the free fatty acid release (% FFA) due to the pancreatic lipase activity. Both the interfacial structures as well as the o/w emulsions showed different resistance to the lipolysis. These differences depended on the nature of the interfacial structure and the interfacial properties formed by the emulsifiers. SPI and HPMC stabilized o/w emulsions presented the lowest % FFA values in comparison to ßlg stabilized emulsions. No correlation did exist with the interfacial available area for the lipase adsorption. It was the capacity of the different emulsifiers to reduce the bile salts (BS) activity (essential molecules for the lipase activity) the reason of the existing differences. The results allowed to identify the BS as the key molecules in the lipolysis modulation. These results have contributed to a better understanding of the mechanisms affecting the digestion of the emulsions and the important role of the interfacial structures in the vitro lipolysis control.

Bello Gay, Estefanía Pilar. "Estudio funcional del receptor dopaminérgico D2 en el sistema nervioso central mediante el uso de ratones mutantes inducibles" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Liberaciones subóptimas o excesivas de dopamina son rasgos característicos de varias patologías muy frecuentes que incluyen a la enfermedad de Parkinson, esquizofrenia, desorden de déficit atencional e hiperactividad (ADHD) y autoadministración compulsiva de drogas de abuso. En este trabajo se estudió el rol del D2R mediante la generación de ratones mutantes condicionales. En primer lugar, generamos ratones deficientes de D2R en las neuronas dopaminérgicas (autorreceptores). Estos ratones tienen la síntesis y liberación de dopamina aumentada, son hiperactivos e hipersensibles a los efectos psicomotores de la cocaína, y tienen mayor motivación para trabajar por la comida. En segundo lugar, estudiamos los efectos de la pérdida de D2Rs en animales adultos que se habían desarrollado normalmente en comparación con ratones deficientes en D2Rs constitutivos que desarrollan programas compensatorios tempranos. La abrupta remoción de los D2R en la adultez provocó una marcada disminución de la locomoción, problemas severos en el aprendizaje y la coordinación de rutinas motoras. En algunos casos, se observó rigidez y temblor en los animales en reposo con características de parkinsonismo. Los resultados obtenidos, demostraron la importancia de la estricta regulación mediada por los D2R (pre y postsinápticos) en el control de la actividad locomotora, la sensibilidad a drogas de abuso y el estado motivacional de los animales.

Abstract:
Suboptimal or excessive dopamine (DA) release are characteristic of a number of very common diseases, including Parkinson's disease, schizophrenia, attention deficit disorder with hyperactivity (ADHD) and compulsive self-administration of drugs of abuse. In this paper, we study the role of D2R by generating mutant mice. First, we generated mice lacking D2R in dopaminergic neurons (autoreceptors). These mice have increased dopamine synthesis and release, are hyperactive and hypersensitive to the psychomotor effects of cocaine, and show enhanced motivation to work for food. Second, we generated a model that allows us to eliminate D2R of adult animals normally developed. The abrupt removal of the D2R in adulthood causes a marked decrease in locomotion, severe learning problems and motor coordination routines. In some cases, it can induce rigidity and tremor at rest. These results demonstrate the importance of the strict regulation mediated by the D2R (pre and postsynaptic) in the control of locomotor activity, sensitivity to drugs of abuse and particularly in the motivational state of animals.

Bello, Marcelo Oscar. "Procesamiento hidrotérmico de arroz cáscara. Efecto de las condiciones de hidratación y cocción en el remdimiento, textura y propiedades térmicas del grano elaborado" (2009). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El procesamiento hidrotérmico de arroz cáscara tiene como objetivo la gelatinización parcial o total del almidón contenido en el endosperma, buscando provocar cambios físicos, químicos y organolépticos en el grano que otorguen al producto final características distintivas a las del grano de arroz pulido convencional. El presente trabajo analiza las distintas etapas del tratamiento hidrotérmico poniendo especial relieve en el estudio de la cinética de hidratación utilizando un modelo de difusión con y sin reacción química. Distintos agentes como la temperatura, presión, aditivos químicos y grado de molienda del grano mostraron influencias sobre la hidratación del grano abriendo la posibilidad de desarrollar nuevas tecnologías tendientes a mejorar dichos procesos mediante una aceleración en los tiempos de hidratación sin afectar la calidad del grano. A partir del desarrollo de un método de hidrotratamiento a presión atmosférica se estudió la influencia de variables operativas tales como temperatura, tiempo y atemperado, sobre las propiedades del grano de arroz procesado. Se establecieron las condiciones óptimas del proceso hidrotérmico propuesto que permiten asegurar, en el rango de trabajo estudiado, el mejor rendimiento de molienda y el mayor grado de gelatinización. Se caracterizó el producto final por medición de distintos parámetros de calidad que mostraron un producto de características diferenciadas de las actualmente existentes en el mercado.

Abstract:
The purpose of the hydrothermal process of rough rice is total of partial gelatinization of rice endosperm, in order to produce physical, chemical and organoleptic changes of the rice grain that gives a product of different characteristics of milled rice. The present work studies the different steps of hydrothermal process with special emphasis on hydration kinetics and the mathematical models used to describe water absorption with and without starch gelatinization. It was also studied the effects of temperature, pressure, chemical reagents and degree of milling on rice water absorption kinetics. Such analysis would allow to develop and to improve hydrothermal treatment of rough rice to reduce the soaking time and to avoid grain deterioration. It was developed a hydrothermal process of rough rice at atmospheric pressure analyzing the effect of variables such as temperature, time and tempering, on two quality indexes: degree of gelatinization and head rice yield. It was determining the optimal process conditions that produce the highest head rice yield and gelatinization level. The final product was described by means of several quality indexes (thermal and textural properties among others) which presented different characteristics from commercial milled and parboiled rice grain.

Bellusci, Carolina Paula. "Implicancias de la farmacogenética en la infección pediátrica por HIV-1" (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El gen de resistencia a múltiples drogas (MDR1) codifica para la Glicoproteína P (P-gp), que bombea diversos sustratos hacia el exterior de la célula, entre ellos los antirretrovirales: inhibidores de proteasa (PI). Además, el nivel de expresión de MDR1 está regulado por el receptor nuclear PXR. En el presente trabajo de Tesis Doctoral evaluamos la influencia de los polimorfismos de nucleótido simple (SNP) de MDR1 (T-129C, C1236T y C3435T) y PXR (C63396T) en la infección pediátrica por HIV-1, la respuesta al tratamiento antirretroviral y la expresión de P-gp. Los SNPs C1236T y C3435T cumplirían un rol protector retrasando la progresión a SIDA pediátrico, pero no afectarían la transmisión vertical por HIV-1. Además, evaluamos el efecto de los SNPs en la respuesta antirretroviral al PI lopinavir, demostrando que el SNP C1236T se asocia con una menor concentración plasmática de la droga y una mayor carga viral. Por otra parte, analizamos si los niveles de expresión de P-gp en linfocitos CD4+ se asocian con los SNPs de MDR1 o PXR, sin hallar diferencias entre los distintos genotipos. Sin embargo, observamos que el nivel de expresión de P-gp en linfocitos CD4+ aumenta con la edad y la infección pediátrica por HIV-1. En conjunto, nuestros resultados sugieren que P-gp es un factor clave tanto en la modulación de la infección por HIV-1, independientemente de su función en el transporte de drogas, como en la respuesta a la terapia antirretroviral.

Abstract:
The multidrug resistant gene (MDR1) encodes for P-glycoprotein (P-gp), which pumps several substrates out of the cell, such as the antiretroviral protease inhibitors (PI). In addition, the MDR1 expression level is regulated by the nuclear receptor PXR. In the present PhD Thesis we evaluated the influence of the single nucleotide polymorphisms (SNP) T-129C, C1236T y C3435T of MDR1 and C63396T of PXR in HIV-1 pediatric infection, response to antiretroviral therapy and P-gp expression. The SNPs C1236T and C3435T may play a protective role delaying progression to pediatric AIDS, but we did not observe an effect HIV-1 vertical transmission. In addition, we evaluated the effect of SNPs on antiretroviral response to the PI lopinavir, demonstrating that the SNP C1236T is associated with a lower drug plasma concentration and a higher viral load. We analyzed whether P-gp expression levels in CD4+ lymphocytes are associated with the SNPs of MDR1 or PXR, but no differences between the genotypes were found. However, we observed that P-gp expression levels in CD4+ lymphocytes increase with the age and the HIV-1 pediatric infection. Our results suggest that P-gp is a key factor either in the modulation of the HIV-1 infection, independently of its function in drug transport, or in the response to antiretroviral therapy.

Belluscio, Laura María. "Malnutrición proteica como modelo de adversidad perinatal y su influencia sobre el desarrollo de capacidades cognitivas y socioemotivas" (2014). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El desarrollo perinatal representa un período crítico en la vida de un individuo caracterizado por una sensibilidad extrema a experiencias e interacciones con el medio ambiente que originan efectos duraderos, y muchas veces permanentes, sobre la estructura y función del cerebro. La calidad del período embrionario como la calidad del ambiente y experiencias postnatales tempranas tienen una enorme influencia sobre el desarrollo emocional y cognitivo con consecuencias que se extienden durante toda la vida. Una de las causas más difundidas entre la población mundial y con consecuencias más deletéreas sobre el desarrollo y la plasticidad neuronal es la que proviene de la desnutrición o la malnutrición. Esta provoca, según su severidad, desde problemas y retardos en el aprendizaje hasta retrasos mentales con profundas consecuencias en la sociabilidad del sujeto a lo largo de toda su vida. Los modelos en roedores han demostrado ser útiles ya que se observaron alteraciones neuroanatómicas comparables y deficiencias similares en las capacidades de aprendizaje y memoria(1). Estas evidencias convergentes sugieren una relación causal entre malnutrición proteica y alteraciones neurofisiológicas. Sin embargo, y pese a los avances realizados al respecto en los últimos años, diversos interrogantes permanecen aún sin respuesta. Algunas de estas cuestiones abiertas se refieren a cuales son las alteraciones conductuales y cognitivas afectadas por la malnutrición en la etapa perinatal, si las deficiencias observadas presentan dimorfismo sexual, cuáles son los mecanismos moleculares que median los efectos permanentes de la malnutrición en etapas tempranas de la vida y si los efectos observados son transmitidos a las siguientes generaciones que no hayan sido sometidas a esta adversidad perinatal. En este trabajo de tesis nos centramos en el establecimiento de un modelo de malnutrición proteica perinatal en ratones, estudiando el efecto sobre el comportamiento de las crías a diferentes edades, con el fin de dilucidar si las diferencias encontradas en la bibliografía se debían a la edad a la que se realizaron los estudios. Además se trabajó con crías machos y hembras con el objeto de identificar posibles efectos diferenciales de la dieta de acuerdo al sexo. Nuestra evaluación inicial del desarrollo morfológico y neurológico de las crías reveló un claro retraso en el grupo cuyas madres sufrieron una reducción del 55% en el contenido proteico de la dieta. Estas últimas sufrieron una alteración en su comportamiento tanto en lo referido al cuidado dedicado a las crías como en la presencia de un comportamiento de tipo ansioso. Este comportamiento de tipo ansioso también fue observado en las crías mediante los test de laberinto elevado en cruz y de campo abierto, junto con una menor motivación exploratoria revelada por el test de escape de la jaula. En relación a las capacidades cognitivas de las crías se encontró un defecto en la memoria declarativa de largo término y la memoria espacial de corto término solamente en machos. En hembras se evidenció además un mayor componente de comportamiento tipo depresivo, que no fue observado en machos. Con el fin de develar las bases moleculares de los defectos observados, realizamos un análisis de la expresión de génica y de los niveles de modificaciones epigenéticas, a diferentes edades en ambos sexos. Encontrando una disminución en la cantidad de mensajero de la neurotrofina BDNF y una acetilación diferencial global de las histonas 3 y 4. Este hallazgo resulta interesante debido a que está ampliamente documentado que BDNF es fundamental para el desarrollo del sistema nervioso y cumple diversos roles en procesos de aprendizaje y memoria. Además se ha visto que su expresión se encontraba disminuida en ratones que sufrieron de un estrés perinatal (como períodos de separación materna), y en modelos de enfermedades neurológicas y psiquiátricas. Por otro lado, la expresión de este gen es finamente regulada a través de diversas modificaciones epigenéticas por lo que es sensible a factores ambientales. En nuestro modelo, la acetilación anormal observada en ratones malnutridos perinatalmente podría producir un desbalance general en la expresión de diversos genes que podría llevar a una menor expresión de BDNF. Ambas alteraciones moleculares observadas podrían formar parte de los mecanismos moleculares causantes de las deficiencias cognitivas y conductuales observados. Finalmente, los diferentes niveles de acetilación observados, posibilitarían la herencia de las diferencias observadas a una generación sucesiva que nunca fue expuesta a este tipo de malnutrición. Un estudio preliminar realizado a partir de la descendencia de ratones que sufrieron de una malnutrición hipoproteica perinatal, mostró una tendencia hacia un retraso en el desarrollo de estas crías y a una alteración en la conducta motivacional, tal como se había visto en sus progenitores. En resumen, los resultados aquí presentados demostraron que una malnutrición materna durante una etapa perinatal afecta la maduración del sistema nervioso, provocando cambios que perduran a lo largo de la vida, más allá del tiempo de exposición a la dieta deficiente. Estos cambios se pueden observar a nivel molecular y en un amplio rango de comportamientos. Cabe destacar también que el trabajo de la presente tesis permitió establecer dicho modelo de estrés perinatal, el cual servirá de base para futuros estudios en el laboratorio y que podrá utilizarse para generar y responder numerosas preguntas.

Abstract:
Perinatal development represents a critical period in the life of an individual. It is characterized by extreme sensitivity to experiences and environmental interactions which may cause lasting and often permanent changes in brain’s structure and function. The quality of the embryonic period as the quality of the environment and early postnatal experiences, have a huge influence on emotional and cognitive development with consequences that extend throughout life. A common cause of poor development that has deep deleterious effects on brain’s growth and plasticity is that which comes from under nutrition or malnutrition. This provokes from problems and delays in learning to mental retardation with profound consequences for the sociability of the subject throughout his life. Rodents have proven useful as a model as they mimic the neuroanatomical disturbances and the learning and memory deficiencies observed in humans. These multiple evidences point to a causal relationship between protein malnutrition and neurophysiological alterations. However, despite the progress made in recent years in this regard, many questions remain unanswered. Some of these open questions concern which are the behavioral and cognitive alterations affected by malnutrition in the perinatal period, if these deficiencies are sexually dimorphic, which are the molecular mechanisms that mediate the permanent effects of malnutrition in early stages of life and whether the observed effects are transmitted to subsequent generations that have not been subjected to perinatal adversity. During this thesis we focused on the establishment of a perinatal protein malnutrition (pregnancy and lactation) model in mice, and studied the effect on the offspring behavior at different ages, in order to determine whether the differences found in the literature were due to the age at which the studies were conducted. We analyzed male and female offspring in order to identify possible differential effects of diet according to sex. Our initial evaluation of the offspring morphological and neurological development revealed a clear delay in the group whose mothers experienced a 55% reduction in the protein content of the diet. The latter suffered an alteration in their behavior both in terms of the care dedicated to the pups and in the presence of an anxiety-like behaviour. This anxiety-like behaviour was also observed in the offspring through the elevated plus maze and open field tests, along with a smaller exploratory motivation revealed by the cage escape test. We also found a defect in long-term declarative memory and spatial short-term memory, restricted to male individuals of the offspring. There was also evidence of a depression-like behaviour restricted to females. In order to unravel the molecular basis of the defects observed we analyzed gene expression and epigenetic modifications levels at different ages in both sexes. We found reduced BDNF mRNA levels and a differential global acetylation of histones 3 and 4. This is an interesting finding because it has been extensively reported that BDNF is crucial for brain development and has different roles in memory and learning. A reduced expression of BDNF has also been described in mice that had suffered from maternal separation during lactation, and for several neurological and psychiatric diseases models. Furthermore, BDNF expression is tightly regulated by epigenetic modifications so it is sensitive to environmental factors. In our model, the abnormal acetylation observed in perinatally malnourished mice could produce an overall imbalance in the expression of various genes that could lead to a lower expression of BDNF. Together, these molecular alterations could be part of the molecular mechanisms causing the cognitive and behavioral deficits observed. Finally, the different levels of acetylation observed would enable the inheritance of the observed differences to a later generation that was never exposed to this type of malnutrition. A preliminary study from the offspring of mice who suffered perinatal lowprotein malnutrition, showed a trend towards a delay in the development of these offspring and an alteration in motivational behavior, as was seen in their parents. In summary, the results presented here demonstrate that the quality of maternal nutrition during the perinatal stage affect maturation of the nervous system and causes changes that persist throughout life, even long after the exposure to the poor diet. These changes can be observed at the molecular level and in a wide range of behaviors. It is also noteworthy that the work of this thesis allowed us to establish a model of perinatal stress, which will be the basis for future studies in the laboratory and can be used to generate and answer many questions.

Beltran, Faustino Francisco. "Determinación colorimétrica de molibdeno en suelos por ensayos directos y en relación con su importancia biológica" (1961). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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A.- Introducción 1.- El molibdeno. Acción biológica. Importancia de su determinación en suelos. El Mo se presenta en la naturaleza principalmente como molibdenita (S2Mo), wulfenita (MoO4Pb)y powellita (MoO4Ca). Si bien su reconocimiento data de mediados del siglo XVIII su importancia biológica ha sido apreciada recién en las últimas décadas. a) Acción sobre la vida vegetal: El Mo es uno de los micronutrientes indispensables. Su proporción en los vegetales es influenciada por el contenido de Mo del suelo, su pH y porcentaje de fósforo, nitrógeno y sulfatos. El contenido promedio de Mo en suelos es 2,5 ppm. Su exceso en general disminuye las cosechas pero su falta produce fenómenos mucho más graves caracterizados por: a) clorosis, caida de las hojas y escasez de flores; b) acumulación de nitratos y disminución del tenor proteico y del nitrógeno orgánico soluble cuando la planta debe tomar N de los nitratos, ya que el Mo forma parte de la enzima Nitrato-reductasa; c) disminución de clorofila, de ácido ascórbico y posiblemente también del contenido de azúcares; d) aumento de la relación fosfatos inorgánicos/fosfatos orgánicos. b) Acción sobre la vida animal: El exceso de Mo en los pastos produce la enfermedad diarreica conocida como "acedosis". Especialmente en vacas de cria y terneros ocurre un rápido desmejoramiento del animal, la piel pierde color, disminuye el rendimiento lácteo y puede producirse la muerte. En los ovinos los vellones de lana se deslustran. Existe interacción entre el Mo y el Cu de las pasturas y se ha observado que también influye el contenido en sulfatos de las mismas. Otros tipos de ganado son poco o nada afectados por el exceso de Mo y en general no se acepta que el mismo sea indispensable para la vida animal si bien estimula la acción de la xantino oxidasa intestinal. La importancia de cuidar el tenor de Mo en los suelos surge evidente del conocimiento de los inconvenientes que ocasiona su falta para la vida vegetal y su exceso para el ganado, principalmente vacuno y ovino. Como su absorción por los vegetales depende no solo de su proporción en el suelo, sino también de otros factores que hemos señalado, puede determinarse también el valor del llamado Mo absorbible por varios métodos de los cuales el considerado más exacto es el que extrae la muestra con solución de Tamm (ácido oxálico oxalato de amonio). La determinación del Mo total o absorbible presente en un suelo dado es por lo tanto fundamental antes de recomendar su agregado a los fertilizantes usados en el lugar, muy especialmente si se desarrolla alli una explotación mixta (agricola y ganadera). 2.- Determinación colorimétrica con técnica de ensayos directos. Conveniencias en general y para este caso en particular. De entre las reacciones de Mo de interés analítico la más apropiada para su determinación en suelos deberá ser: a) altamente selectiva, evitándose separaciones engorrosas de los múltiples elementos existentes en la muestra. b) muy sensible, ya que en caso de Mo absorbible deberá poder determinarse hasta 0,1 ppm de Mo. c) simple y rápida, requiriendo el minimo de instrumentos de laboratorio para poder efectuarse lo más cerca posible del campo a analizar. Las TECNICAS DE ENSAYOS DIRECTOS proporcionan una solución ideal para la primera condición enunciada y hemos buscado a través de un método colorimétrico apropiado el cumplimiento de las otras dos. Además, el grado de exactitud obtenible por la apreciación visual del color es ampliamente satisfactorio para el fin buscado. 3.- Alunas reacciones de Mo de importancia analítica. De la revisión efectuada de diversas reacciones de Mo descartamos las que no son aplicables para colorimetria. De las restantes, seleccionamos finalmente como la más apropiada a la reacción del tiocianato. Su sensibilidad supera la de muchas otras consideradas y ese factor fué importante para desechar las del ferrocianuro, SH2, S2O3Na2 (técnica de Falciola) y fenilhidrazina. Su mayor selectividad la hizo preferible a las del ácido tioglicólico, ferrocianuro, SH2 y dietil ditiocarbamato sódico. La fácil conservación y disponibilidad de los reactivos necesarios hace a la reacción del tiocianato superior a la generalidad de las demás, particularmente a las del ditiol y xantato. h.- Reacción seleccionada: tiocianato Una solución clorhídrica de molibdato, reducida por el ión Sn++ u otro reductor apropiado produce con SCNˉ un complejo rojo soluble en agua y extraible por diversos solventes orgánicos. La bibliografia revisada estudia la influencia de diversos factores y principalmente son ellos: a) ACIDEZ: habitualmente de ClH 3-7%. b) CONCENTRACIÓN DE SCNˉ que debe ser finalmente de mínimo 0,6%. c) CONCENTRACIÓN DE Cl2Sn: tiene poca importancia y la cantidad usada debe aumentarse en presencia de mucho Fe. Se han propuesto otros reductores que no hemos considerado preferibles. d) SOLVENTES ORGANICOS USADOS ya sean solubles en agua o no miscibles (para extraer el complejo de Mo-tiocianato). e) CONCENTRACIÓN DE N03ˉ Y DE Fe+++ que en ciertas técnicas se agregan para favorecer el desarrollo del color. La reacción se ha aplicado también con técnica de "ensayo a la gota" y utilizando resinas de intercambio iónico. Se describen interferencias y aplicaciones citadas por la bibliografía. B.- ESTUDIO EXPERIMENTAL a) De distintos solventes ensayados (alcoholes butílico, isopropílico, isoamílico, ciclohexílico y bencílico; acetatos de etilo, butilo y amilo; fosfato tributílico, éter etílico, carbitol, cellosolve, butil cellosolve y mezclas de algunos de ellos entre si y con C0l4 6 CHCl3) se eligieron finalmente 3: acetatos de butilo y de etilo y butanol. Los mismos extraen con eficiencia satisfactoria el complejo de Mo-tiocianato, proporcionan una sensibilidad de 0,75 y separan sin dificultad de la fase acuosa. b) De diversas variantes ensayadas en los reactivos y técnica de la reacción del tiocianato, resultó como la más apropiada la siguiente: En un tubo de ensayo se introduCen 1 ml de solución de Mo + 3,5 ml solución ClH al 1/3 + 0,5 m1 solución Cl2Sn.2H20 10% en ClH 1 N + l ml SCNK 10%. Se agita con 2 ml de uno de los tres disolventes elegidos y se compara el color de la fase orgánica con los patrones. Para solucionar la dificultad en la obtención de patrones permanentes dadas las variaciones de color que se producen con el correr del tiempo, se propone la preparación de los mismos con Cl2Co.6H2O y C13Fe.6H2O en solución acuosa acidulada con ClH hasta pH 2,0 o menor. c) Interferencias: Se ensayó 1a técnica propuesta en presencia de 5 mg de diversos iones. Se halló que pueden interferir los de pocos elementos: Ag- Hg- Cu- Fe- Ti- W- V. Centrifugando los precipitados producidos se elimina el inconveniente con los tres primeros. La presencia de cantidad grande de Fe requiere el aumento del Cl2Sn y es preferible en este caso utilizar solución de Cl2Sn al 40% para no diluír excesivamente la fase acuosa. La interferencia del W se elimina complejándolo con tartrato de sodio y potasio antes de acidular con ClH y la del Ti haciendo otro tanto en cualquiera de los pasos de la reacción pero con FNa. Para el V en cambio, los complejantes ensayados nos dieron resultados inferiores al método que propone Grigg de lavar la fase orgánica con solución de Cl2Sn. El Co, que interfiere utilizando acetato de etilo o butano no molesta con acetato de butilo siempre que este no esté impurificado por butanol sin esterificar. Se aplicó la técnica propuesta a muestras de suelos para determinar Mo total y absorbible. Para Mo total se trabajó con 1,5 g de muestra fundiéndola en crisol de Pt con CO3Na2. El residuo se disgregó con agua y se filtró antes de llevar a sequedad con ClH. El Mo absorbible se determinó previa extracción con solución de Tamm. Puede trabajarse bien con 12 g de muestra. C.- DISCUSIÓN DE RESULTADOS En párrafos anteriores se ha señalado el porqué de la elección de la reacción del tiocianato para resolver el problema planteado. De los distintos reductores utilizables en dicha reacción preferimos el Cl2Sn al S2O3Na2 que precipita azufre coloreando de amarillo la fase orgánica y al sistema Iˉ/SO3˭ que no mejora la sensibilidad y tiene entre otros inconvenientes el peligro de la formación del ácido iodosulfínico. De los tres solventes que hemos hallado más adecuados el acetato de butilo es menos volátil y menos hidrolizable que el de etilo y no presenta el inconveniente del butanol de permitir el desvanecimiento del color del complejo de Mo-tiocianato. Además, en presencia de W, V o Co, el acetato de butilo es superior a los otros dos solventes por colorearse menos con sus iones. D.- CONCLUSIONES La reacción del tiocianato es la más apropiada para la resolución del problema planteado por reunir las siguientes caracteristicas: alta sensibilidad, buena selectividad, sencillez, rapidez y por requerir poco material de laboratorio y reactivos analíticos, todos ellos accesibles. La técnica propueSta consiste en agregar en tubo de ensayo a 4,5 ml del extracto clorhídrico de la muestra a investigar, 0,5 ml de ClgSn.2H2O al 10% en ClH l N, 1 ml de SCNK 10% y agitarlo con 2 ml de acetato de butlo (o eventualmente de acetato de etilo o butanol). Teniendo los reactivos indicados y el solvente en buretas apropiadas el número de reacciones que puede efectuarse en una jornada de trabajo es extraordinario. El límite de identificación es de 0,75 de Mo.

Beltrán González, Andrea Natalia. "Modulación de los receptores GABA Ap1 por especies reactivas del oxígeno y benzodiazepinas" (2015-03-26). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Las especies reactivas del oxígeno (ROS) se asocian generalmente con estrés oxidativo celular, pero también tienen un importante rol como mensajeros celulares en la señalización redox, por ejemplo, modulando la actividad de los receptores de neurotransmisores y canales iónicos. Hasta el momento no se habían demostrado acciones directas de las ROS sobre los receptores GABAA. En este trabajo se estudiaron los efectos de las ROS sobre la función del receptor GABAAρ1. Se expresaron receptores homoméricos GABAAρ1 humanos en oocitos de Xenopus laevis y se registraron electrofisiológicamente las respuestas evocadas por GABA en presencia o ausencia de ROS. Las respuestas GABAAρ1 se potenciaron significativamente en presencia de H2O2, en forma reversible y dosis dependiente. Los efectos potenciadores se atenuaron en presencia de un scavenger de radicales libres, ácido lipoico, y un inhibidor de la reacción de Fenton, deferoxamina. Para identificar los residuos involucrados en las acciones de las ROS se realizaron ensayos de protección química de cisteínas con agentes selectivos de sulfhidrilos y mutagénesis sitio dirigida. Cada subunidad ρ1 contiene solo tres residuos de cisteína, dos extracelulares en el Cys-loop (C177 y C191) y una intracelular (C364) en el bucle TM3-TM4. La sustitución de la C364 por alanina o serina generó receptores mutantes completamente insensibles a la potenciación por ROS. Las cisteínas del Cys-loop no resultaron esenciales para la modulación por ROS. Nuestros resultados muestran que las ROS potencian la función de los receptores de GABAAρ1 y que la cisteína intracelular C364 es el sensor para las acciones de ROS. Por otro lado, varios subtipos de receptores GABAA son modulados alostéricamente por benzodiazepinas (BZD), drogas ampliamente usadas como ansiolíticos, hipnóticos sedantes y anticonvulsivos. Se identificó un sitio de unión a BDZs de alta afinidad y al menos tres sitios adicionales de baja afinidad en variantes heteroméricos y homomericos de receptores GABAA. Sin embargo, nunca se había reportado la modulación de receptores GABAAρ1 por BDZs y durante mucho tiempo se los asumió como completamente insensibles. En el presente estudio, se expresaron heterólogamente receptores GABAAρ1 en oocitos y se registraron las respuestas evocadas por GABA en presencia y ausencia de BDZs. El diazepam y 4'-Cl diazepam modularon las respuestas GABAAρ1 en el rango micromolar de forma reversible, dependiente de la concentración e independiente del voltaje. El diazepam potenció las corrientes de Cl- evocadas por GABA y el 4'- Cl diazepam produjo efectos bifásicos dependiendo de la concentración de GABA, mientras que Ro15-4513 y alprazolam actuaron como moduladores negativos. Las acciones de las BDZs resultaron insensibles a flumazenil. Otras BZDs no mostraron actividad significativa en condiciones experimentales equivalentes. Nuestros resultados sugieren que las BZDs pueden modular la función del receptor GABAAρ1 de forma selectiva y diferencial.

Abstract:
Reactive oxygen species (ROS) are normally involved in cell oxidative stress but also play a role as cellular messengers in redox signaling, for example modulating the activity of neurotransmitter receptors and ion channels. However, the direct actions of ROS on GABAA receptors were not previously demonstrated. In the present work, we studied the effects of ROS on GABAAρ1 receptor function. Human homomeric GABAAρ1 receptors were expressed in Xenopus laevis oocytes and GABA-evoked responses electrophysiologically recorded in the presence or absence of ROS. GABAAρ1 receptor-mediated responses were significantly enhanced in a dose-dependent and reversible manner by H2O2. Potentiating effects were attenuated by a free radical scavenger, lipoic acid, or an inhibitor of the Fenton reaction, deferoxamine. Chemical protection of cysteines by selective sulfhydryl reagents and site-directed mutagenesis studies were used to identify protein residues involved in ROS actions. Each ρ1 subunit contains only three cysteine residues, two extracellular at the cys loop (C177 and C191) and one intracellular (C364) at the TM3-TM4 linker. Mutant GABAAρ1 receptors in which C364 was exchanged by alanine or serine were completely insensitive to ROS potentiation implying that this site, rather than a cystein in the Cys-loop, is essential for ROS modulation. Our results show that the function of GABAAρ1 receptors is enhanced by ROS and that the intracellular C364 is the sensor for ROS actions. On the other hand, many GABAA receptor subtypes are allosterically modulated by benzodiazepines (BDZs), which are drugs extensively used as anxiolytics, sedative-hypnotics and anticonvulsants. One high-affinity site and at least three additional low-affinity sites for BDZ recognition have been identified in several heteromeric and homomeric variants of the GABAA receptors. However, the modulation of homomeric GABAAρ1 receptors by BDZs was not previously revealed, and these receptors, for a long a time, were assumed to be fully insensitive to the actions of these drugs. In the present study, GABAAρ1 receptors were heterologously expressed in oocytes and GABA-evoked responses electrophysiologically recorded in the presence or absence of BDZs. GABAAρ1 receptor-mediated responses were modulated by diazepam and 4´-Cl diazepam in the micromolar range, in a concentration-dependent, voltage-independent and reversible manner. Diazepam produced potentiating effects on GABA-evoked Cl- currents and 4´-Cl diazepam induced biphasic effects depending on the GABA concentration, whereas Ro15-4513 and alprazolam were negative modulators. BDZ actions were insensitive to flumazenil. Other BDZs showed negligible activity at equivalent experimental conditions. Our results suggest that GABAAρ1 receptor function can be selectively and differentially modulated by BDZs.

Ben-Dov, Claudia Paola. "Regulación post-transcripcional en Trypanosoma cruzi : regiones intergénicas y elementos repetidos" (2002). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Trypanosoma cruzí es un parásito protozoario causante de Ia enfermedad de Chagas, cuya regulación de la expresión génica se da casi exclusivamente a nivel post-transcripcional. Los objetivos de la presente tesis fueron estudiar las regiones intergénicas y la influencia del elemento repetido SIRE en las mismas. Se determinó la presencia del elemento SIRE en regiones no codificantes del genoma del parásito . Se estableció que SIRE se asocia a una amplia variedad de genes implicados en distintos procesos metabólicos. Másaún, se determinó la relevancia que esta asociación tiene en la regulación de la expresión génica del parásito, dado que SIRE pude disminuir la estabilidad y la traductibilidad del ARNm al estar en regiones 3’ UTR, o bien aumentar la traductibilidad del ARNm al incluirse los últimos nucleótidos de SIRE en regiones 5' UTR. A su vez se estudió en profundidad las secuencias requeridas en el transsplicing y se definió la existencia de elementos reguladores del mencionado proceso y al mismo tiempo de la traductibilidad del ARNm correspondiente. Por último los resultados determinan la falta de consensos estrictos para las señales reconocidas en los primeros pasos del trans-splicing.

Abstract:
Trypanosoma cruzi is a parasitic protozoan that causes Chagas disease. The regulation of gene expression occurs mainly at a post-transcriptional level. The aims of this thesis were to study the role of intergenic regions and the influence of the repetitive element SIRE. The results demonstrate that SIRE is present in non-coding regions of the genome. Moreover, the results reveal that SIRE is associated to a wide variety of genes involved in different metabolic processes. Also, the results determine the relevance of this association to the regulation of gene expression given that SIRE, when present in 3’ UTR regions, down regulates the stability of the mRNA as well as its translation. In addition, the last nucleotides of SIRE can stimulate translation when present in the 5' UTR region. Furthermore, we study which are the most important sequences for the trans-splicing reaction. We defined new elements that are able to up regulate not only trans-splicing but also the translation of the corresponding mRNA. Finally, the results determine that there is no need of consensus sequences to achieve the early steps of the trans-splicing process.

Benavente, Cecilia Andrea. "Microbialitas lacustres de secuencias triásicas de Argentina" (2014-03-06). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las sucesiones triásicas Cerro de las Cabras y Cerro Puntudo corresponden al relleno sedimentario de la Cuenca Cuyana de rift. La cuenca presenta dos hemigrábenes asimétricos, uno ubicado al norte y otro al sur de polaridad opuesta y desvinculados por un alto topográfico. Los depocentros estudiados son Cerro Puntudo que forma parte del hemigraben norte en donde aflora la Formación Cerro Puntudo; y el depocentro Potrerillos que forma parte del hemigraben sur en el que aflora la Formación Cerro de las Cabras. Ambas unidades contienen depósitos enteramente continentales y presentan las típicas secuencias tripartitas de sedimentación aluvialesfluviales- lacustres en ambientes de rift. Los sistemas palustre-lacustre son carbonáticos y estos sedimentos presentan desarrollo de microbialitas. En ambos casos, trabajos previos han aportado dataciones absolutas para las sucesiones corroborando su correspondencia estratigráfica (Anisiano) y permitiendo el análisis comparativo de los resultados. El análisis sedimentológico de la Formación Cerro de las Cabras revela dos asociaciones de facies que caracterizan dos subambientes: Planicie arenosa y de finos conformada por las facies Areniscas conglomerádicas, Areniscas masivas intraclásticas y Fangolitas masivas; y Calizas palustres formada por las facies Calizas moteadas-nodulares y Calizas estromatolíticas. Estos ambientes formaron parte de un sistema depositacional de lago de barreal alcalino efímero, con frecuente exposición subaérea y abundante desarrollo de pedogénesis. Los datos de isótopos estables del carbono (C) y del oxígeno (O) han permitido determinar la paleohidrología del paleolago Cerro de las Cabras que resultó ser un sistema hidrológicamente abierto que actuó como zona de recarga del acuífero subterráneo. Además en la señal isotópica se han detectado efectos biológicos sobre el reservorio de C inorgánico total disuelto en el sistema lacustre. Este efecto se manifiesta como una tendencia altamente negativa de la señal isotópica del C y corresponde a efectos de bacterias heterótrofas descomponedoras de materia orgánica (MO). La señal isotópica del O refleja fluctuaciones entre valores negativos, interpretados como picos de aporte de aguas meteóricas, y valores menos negativos que indican tendencias evaporíticas. En la Formación Cerro de las Cabras la evidencia de desarrollo de biota se observa en la fábrica de las calizas estromatolíticas que indican la precipitación de carbonato de calcio por medio de acción biológica. A su vez las calizas palustres presentan abundantes rizohalos y rizolitos resultantes de paleosuelos vegetados. En la Formación Cerro Puntudo se han determinado cinco asociaciones de facies: Abanico aluvial, conformada por las facies Conglomerado matriz sostén y Areniscas intraclásticas estratificadas; Planicie arenosa, formada por las facies Areniscas masivas y Areniscas laminadas; Planicie de finos, en la que se reconocen las facies Fangolitas laminadas y Limolitas laminadas; Canales carbonáticos, en los que se determinaron las facies Fangolitas oncolíticas y Areniscas oncolíticas laminadas; Calizas palustres, con las facies Calizas moteadas, Calizas nodulares y Calizas estromatolíticas; y finalmente la asociación de facies Calizas lacustres, con las facies Margas laminadas y Boundstones oncolíticos. Estos subambientes conformaron un sistema depositacional de barreal alcalino en el que el aporte superficial era efímero. El principal sustento hídrico fue el aporte de agua subterránea a través de una tabla de agua elevada. Algunos rasgos sedimentológicos han permitido detectar una probable zona de surgencia de aguas subterráneas en el depocentro. Aún así, los subambientes excepto el lacustre presentan abundantes rasgos que indican exposición subaérea y pedogénesis. Los datos de isótopos estables del C y del O señalaron que el paleolago Cerro Puntudo era un sistema hidrológicamente abierto y que actuó como barreal de tipo through flow. La señal del C refleja excursiones negativas que se han asociado con blooms algales que implican incremento en la actividad fotosintética y se vinculan con cambios climáticos estacionales. La señal isotópica del O presenta tendencias muy similares a las observadas para el paleolago Cerro de las Cabras (evaporación-dilución) lo que avala una impronta climática regional en las señales isotópicas. En el caso de los carbonatos de Cerro Puntudo se analizó la relación isotópica 87Sr/86Sr para precisar la proveniencia de las calizas. Se determinó que el aporte dominante de Sr a las calizas triásicas provino del vulcanismo permo-triásico del Choiyoi. En el paleolago Cerro Puntudo las microbialitas presentan un ensamble paleontológico que refleja un paleoecosistema acuático complejo con una red trófica sencilla. El mismo está caracterizado por algas filamentosas y cocoides de afinidad con Cyanophyta que constituyen los productores primarios y que formaron las estructuras por precipitación biológicamente inducida. También se ha identificado representantes de algas Charophyta en el mismo rol. Además se hallaron invertebrados ostrácodos heterótrofos detritívoros y bacterias heterótrofas descomponedoras de MO. El hallazgo de algas carófitas tiene implicancias paleobiogeográficas ya que constituye el primer registro del taxón para el hemisferio sur durante el Triásico lo que permite ampliar su distribución a Gondwana. Los resultados sedimentológicos, paleontológicos y geoquímicos de esta contribución permitieron caracterizar a los sistemas lacustres estudiados como lagos de tipo balanceados, cuya evolución y sedimentación evidencia un control mixto tectónico y climático. El análisis comparativo con los depocentros del rift jurásico de la Cuenca Cañadón Asfalto demuestra que en zonas tectónicamente análogas, dominarán patrones similares de sedimentación. Esto permite el modelado de facies a futuro para sistemas de sedimentación lacustres carbonáticos en cuencas de rift.

Abstract:
The Triassic Cerro de las Cabras and Cerro Puntudo Formations represent the sedimentary infilling of the Cuyana rift basin. The basin is composed of two asymmetric half-grabens, situated from north to south and linked by a topographic high. These half-grabens are the Cerro Puntudo subbasin, in the north containing the Cerro Puntudo Formation and the Potrerillos sub-basin, in the south containing the Cerro de las Cabras Formation. Both formations contain continental deposits and conform to the typical alluvial-fluvial-lacustrine sequences of rift basins. Previous work has provided absolute dates, confirming that the deposits are coeval in age (Anisian). Most significantly, carbonate deposits with abundant microbialites are present in both units, allowing a comparative analysis across the Cuyana Basin. Sedimentologic studies in the Cerro de las Cabras Formation reveal two facies associations that characterize two subenvironments: (1) Sandflat and Mudflat facies association represented by the coarse sandstones, massive intraclastic sandstones, and massive mudstones facies, and (2) Palustrine limestone facies association represented by mottled-nodular limestones and stromatolitic limestones facies. These subenvironments are interpreted to represent an ephemeral playa lake depositional system with common features of subaerial exposure and pedogenesis. Carbon (C) and oxygen (O) stable isotopes data permit the determination of the paleohydrology of the paleolakes in the sub-basins. The Cerro de las Cabras paleolake was a hydrologically open system that functioned as the recharge zone of the regional groundwater. Also, the isotopic signature indicated biologic effects over the total dissolved inorganic C (TDIC) in the paleolake that has been attributed to heterotrophic bacteria, organic matter (OM) decomposers. The O isotope reflected a signature of the groundwater supply into the paleolake and fluctuation between evaporative and dilution tendencies. In the Cerro de las Cabras Formation evidence for biota in the stromatolitic limestone facies indicates induced precipitation of carbonate. Also the palustrine limestones facies with abundant rhizohaloes and rhizoliths indicate vegetated paleosols. Sedimentologic studies of the Cerro Puntudo Formation reveal six facies associations: (1) Alluvial fan with matrix-supported conglomerates and stratified intraclastic sandstones facies; (2) Sandflat represented by massive sandstones and laminated sandstones facies; (3) Mudflat with laminated mudstones and laminated siltstones facies; (4) Carbonate channelswith oncolitic mudstones and oncolitic laminated sandstones facies; (5) Palustrine limestones with mottled limestones, nodular limestones, and stromatolitic limestones facies; and (6) Lacustrine limestones with laminated mudrocks and oncolitic boundstones facies. These subenvironments formed part of an alkaline playa lake system fed mainly by groundwater and with ephemeral surface water supply. Some sedimentary features suggest the presence of an apron discharge area in the subbasin. All the facies associations except for the Lacustrine limestones show abundant subaerial exposure and pedogenesis. Carbon (C) and oxygen (O) stable isotopes data for the Cerro Puntudo paleolake indicate hydrologically open conditions and the system functioning as a through flow playa lake. The C isotopic signature shows negative excursions interpreted as the result of algal blooms with increased photosynthetic activity. This may correlate with seasonal climate fluctuations. The O isotopic signature presents hydrologic tendencies (evaporative and dilution) similar to the Cerro de las Cabras paleolake. This supports regional climate fluctuations imprinted in the isotopic signatures of both paleolakes. For the limestones of the Cerro Puntudo Formation, 87Sr / 86Sr data were analyzed to determine provenance. This confirmed that the dominant supply for Sr to the Triassic limestones was related to the Permian- Triassic Choiyoi volcanism in West Gondwana and the marine limestones in the drainage area. The Cerro Puntudo paleolake contains a microbialite assemblage that reflects a simple aquatic paleoecosystem with a simple trophic network. This is composed of filamentous and coccoid algae with Cyanophyta affinities that constitute the primary producers with lithified structure through bio-mediated carbonate precipitation. Also, charophytes have been identified fulfilling the same task. As heterotrophs, ostracodes were found probably feeding from detritus and bacteria as OM decomposers. The discovery of charophytes has paleobiogeographic implications since this is the first record for the group in the South Hemisphere in the Triassic, extending its distribution into Gondwana. The sedimentary, paleontologic, and geochemical data obtained allowed the characterization of the two lacustrine depositional systems containing balanced-filled lakes reflecting sedimentation controlled by tectonics (synrift stage) as well as climate (groundwater and surface water input). The comparison of these Triassic systems with the deposits of the Cañadón Asfalto Rift Basin of the Jurassic in West Gondwana shows that in the same tectonic frameworks similar sedimentary patterns prevail. This allows for future facies models development for carbonate lake systems in rift basins.

Bender, Laurence E.. "Procesos disipativos rápidos en magnetohidrodinámica" (1997). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se investiga en forma analítica y numérica la evolución temporal de láminas de corriente en configuraciones de aniquilación magnética forzadas por un flujo con un punto de estancamiento. Se muestran las importantes consecuencias físicas de la etapa de formación de la lámina de corriente, que se puede originar a partir de una "semilla" inicial de campo magnético o mediante la inyección continua de flujo magnético. La convección y amplificación del campo magnético en un flujo de estancamiento genera una disipación Joule muy intensa dentro de la lámina de corriente en escalas de tiempo hidrodinámicas. Estos efectos pueden dar lugar a la aniquilación rápida del campo magnético, a la formación de estructuras disipativas estacionarias o a soluciones que crecen indefinidamente con el tiempo, dependiendo del balance entre la disipación y el ingreso de flujo magnético. Los elementos básicos del proceso de amplificación de la energía magnética se examinan usando argumentos físicos sencillos basados en consideraciones de orden de magnitud. Se obtienen soluciones analíticas dependientes del tiempo que describen la evolución del campo magnético en flujos con geometría plana. Suponiendo condiciones iniciales y de contorno generales para la componente de campo magnético contenida en el plano del movimiento, se demuestra que la capa en donde el campo magnético cambia de signo tiende a desaparecer durante la formación de la lámina de corriente. Por otra parte, la componente de campo magnético normal al flujo de estancamiento siempre se extingue rápidamente. En consecuencia, las configuraciones estacionarias de campo magnético con cambio de signo que se consideran habitualmente en los estudios de procesos de reconexión magnética e inestabilidades resistivas, resultan ser casos excepcionales en lugar de estructuras magnéticas genéricas. Se obtienen soluciones autosimilares que describen la amplificación y el decaimiento del campo magnético en flujos planos y axialmente simétricos. En flujos con un punto de estancamiento tridimensional las láminas de corriente se aniquilan completamente a menos que sean sostenidas por una inyección continua de energía magnética. Se consideran aplicaciones de estos modelos a la magnetósfera terrestre, a la formación de estructuras disipativas en el Plasma Focus y al calentamiento de la corona solar. Se estudia la influencia del flujo de estancamiento, que tiende a oponerse a la permanencia de configuraciones con campo magnético reconectado, sobre la estabilidad de la lámina de corriente. Simulaciones numéricas de reconexión magnética en dos dimensiones muestran la formación y consolidación de la lámina de corriente. El incremento de la conductividad provocado por el aumento de la temperatura en la lámina de corriente puede acelerar los procesos de amplificación y decaimiento del campo magnético. Estos efectos térmicos se ilustran mediante soluciones numéricas. Los límites del modelo incompresible debidos al calentamiento y a las variaciones de densidad se discuten brevemente. En el último capítulo se estudia en forma numérica la evolución de láminas de corriente en flujos compresibles.

Abstract:
The time evolution of current sheets under the influence of driven stagnation point flows is studied. It is shown that significant physical processes occur during the formation of the current sheet, originated from a sparse magnetic seed field or from an external continuous injection of magnetic flux. The advection and amplification of the magnetic field at a stagnation flow can give rise to large amounts of Joule dissipation over hydrodynamic time scales. These effects may lead to an accelerated annihilation of the magnetic field, or to steady state dissipative layers, depending on the balance between the incoming magnetic flux and the dissipation rate. The basic elements of the flow enhanced dissipation mechanism are discussed using order of magnitude considerations. Analytic time dependent solutions that describe the evolution of the magnetic field are obtained for planar flows. Starting from generic initial and boundary conditions for the magnetic field component lying on the plane of the flow, it is shown that the sublayer in which a change of sign of the magnetic field occurs tends to vanish in a short time during the formation of the current sheet. On the other hand, the magnetic field component normal to the flow plane is always rapidly extinguished. Thus, configurations commonly considered as models for steady state reconnection or tearing instability studies, are exceptional cases rather than generic magnetic structures. Self similar solutions that describe the amplification and decay of the magnetic field for planar and axial-symmetric flows are also obtained. In three dimensional stagnation point flows, current sheets that are not sustained by a continuous injection of magnetic energy are completely annihilated in a few hydrodynamic times. Several applications, including coronal heating, the dayside magnetospheric stagnation point, and the formation of hot spots in the Plasma Focus experiments, are discussed. The influence of stagnation flows on the stability of these dissipative structures is studied. These flows tend to oppose the permanence of a reconnected configuration. Numerical simulations of two-dimensional magnetic reconnection show the build up and consolidation of the current sheet. Thermal effects due to the rise of temperature in the current sheath and the resulting conductivity increment, enhance the amplification and extinction processes. These effects are illustrated with numerical solution examples. The heating and compressibility limits of the model are briefly outlined. Finally, the effect of density variations during the evolution of current sheets in compressible stagnation point flows is also studied numerically.

Bendersky, Ariel Martín. "Nuevos algoritmos cuánticos para tomografía de procesos y estados" (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Benedetti, Hector. "Significado de la presencia de aldehido fórmico en productos conservados" (1939). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Benedetti, Lorena Gabriela. "Rol de la proteína de matriz extracelular SPARC en el crecimiento y diseminación metastásica del cáncer de mama" (2011-12-21). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El crecimiento tumoral resulta de la interacción de la célula neoplásica y su entorno. SPARC “Secreted Protein Acid and Rich in Cystein” es una proteína de matriz extracelular cuya expresión normal se asocia al desarrollo y a tejidos en remodelación. En la mayoría de las neoplasias el aumento de la expresión de SPARC se asocia con un mal pronóstico. Sin embargo, en cáncer de mama la función que cumple la expresión de esta proteína en relación al crecimiento del tumor primario y la diseminación metastásica es controvertida. En este trabajo nos propusimos profundizar las funciones de SPARC, proveniente tanto del estroma como de las células epiteliales en la biología del cáncer de mama. A partir de los estudios realizados con animales transgénicos (SP-/-) que no expresan SPARC en ninguna de sus células, diferentesmodelos de cáncer de mama humanos con distintos niveles de expresión de SPARC, y la cuantificación de la expresión de la proteína en muestras de pacientes con cáncer de mama, determinamos que la expresión de SPARC en ambos componentes tumorales, epitelio y estroma, favorece el fenotipo maligno. Mientras que la elevada expresión en el epitelio tumoral resultó ser más relevante, encontramos que la expresión de SPARC en el estroma tumoral favorece el crecimiento del tumor sólo si el epitelio es negativo. Por otro lado, mediante la utilización del modelo murino 4T1, representativo de un tumor humano estadio IV, pudimos establecer una relación positiva entre la expresión de SPARC y la etapa metastásica de la enfermedad. A partir de la tecnología de microarreglos de ADN, encontramos que SPARC es un importante modulador transcripcional del espacio extracelular y de la proliferación celular, así como también de la respuesta inmune. Finalmente identificamosalgunos genes como posibles efectores de SPARC, favorecedores del crecimiento tumoral y la diseminación metastásica.

Abstract:
Tumor growth is the result of the crosstalkbetween neoplastic cells and theirmicroenvironment.SPARC “Secreted Protein Acid and Rich in Cystein” is a matricellular protein whose normal expression is associated with remodeling tissues. Despite some authors describe this protein as a marker of bad prognosis, its role during development and breast cancer progression remains controversial.Our goal was to understand the role of SPARC expressed either by the epithelial cells or by the surrounding stroma in tumor growth and metastatic dissemination of breast cancer. Using SPARC KO mice (SP-/-), human breast cancer lines with different SPARC expression levels, and the quantification of SPARC expression in human breast cancer samples, we were able to determine that both, epithelial and stromal SPARC contributes to tumor progression. While high epithelial SPARC expressionis more relevant, stromal SPARC only facilitates tumor growth in the presence of a SPARC negative epithelium. Moreover, using 4T1 murine model that very closely models a stage IV human breast carcinoma, we established a positive relation between SPARC expression and the metastatic stage of the disease. DNA microarray data revealed SPARC as an important transcriptional regulator of the extracellular region part, cellular proliferation and an immune response modulator. We identified some new genes as possible effectors of SPARC that regulate tumor growth and metastatic dissemination.

Benedetti, Rubén Mariano. "Inducción, producción y mantenimiento de la respuesta inmune sistémica por inmunización oral" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Tradicionalmente se pensaba que las mucosas poseían un sistema inmune propio y común con pocos puntos de contacto con el resto del sistema inmune. Esto se fundamentaba en que las mucosas se caracterizan por (l) el predominio de la IgA, (2) la dificultad de obtener respuesta inmune en las mucosas con una inmunización sistémica y (3) que con una inmunización por una mucosa es posible dar protección en otras mucosas distantes. Con posterioridad, se encontraron varias interacciones entre los tejidos linfoides de las mucosas y los sistémicos que llevan a pensar que en realidad no hay una clara separación en dos sistemas inmunes, sino que constituyen una unidad. El fenómeno de la tolerancia oral, la posibilidad (en algunos casos) de inducir la respuesta inmune sistémica por inmunización por la vía de las mucosas y el transporte hepatobiliar de IgA polimérica desde el suero al intestino son ejemplos de esa comunicación. Otra conexión posible es que la médula ósea reciba células productoras de anticuerpos luego de una inmunización sistémica. Es bien conocido que en la médula ósea aparecen células plasmáticas luego de una inmunización sistémica. La médula ósea es el principal productor de anticuerpos en la respuesta secundaria. Pese a esto, no era claro si una inmunización por las mucosas podía llevar a que la médula ósea se convierta en productora de anticuerpos especificos. En este trabajo efectuarnos inmunizaciones orales (intragástricas e intra-placas de Peyer) utilizando toxina colérica, uno de los más potentes antígenos y adyuvante por las mucosas, para observar la cinética de aparición de las células plasmáticas antitoxina en el intestino, el bazo y la médula ósea. También observamos la respuesta de memoria. En estas condiciones encontramos que: - Tanto durante el primado como en la memoria, en la médula ósea aparecen células plasmáticas y este es el principal órgano productor de anticuerpos destinados a la circulación sanguínea. - La médula ósea es, además, el único órgano que mantiene células secretoras de anticuerpos muchos meses después de la inmunización oral, cuando consideramos que ya no queda antígeno en el organismo. - Existe una muy temprana presentación antigénica en el bazo, paralela a la que ocurre en el intestino. - La médula ósea posee linfocitos T y B de memoria, aunque el ganglio mesentérico y el bazo tienen mayor concentración de células de memoria. Todas estas observaciones contribuyen al mejor conocimiento de la amplia comunicación entre el llamado sistema inmune de las mucosas y el central y sostienen la idea de la unidad del sistema inmune.

Abstract:
Traditionally it was thought that the mucosae had a common immune system with few meeting points with the rest of the immune system. This was based on that the mucosae are characterized by (l) the predominance of the IgA, (2) the difficulty to obtain immune response in the mucosae with a systemic immunization and (3) that with a mucosal immunization is possible to give protection in other distant mucosae. Later, several interactions between the mucosal and systemic lymphoid tissues were found wich led to think that in fact there is no clear separation between the two immune systems, but that they constitute a unit. The phenomenon of oral tolerance, the possibility (in some cases) of inducing a systemic immune response by immunization by the route of the mucosae and hepatobiliar transport of polimeric IgA from serum to intestine are examples of that communication. Another possible connection is that the bone marrow receives antibody producing cells after a systemic immunization. It is well known that in the bone marrow plasma cells appear after a systemic immunization. The bone marrow is the main antibody producing site in the secondary response. In spite of this, it was not clear whether an immunization by the mucosae could make the bone marrow become a producer of specific antibodies. In this work we carried out oral immunizations (intragastric and intra-Peyer patches) using cholera toxin, one of the most powerful antigens and adjuvant by the mucosae, to observe the kinetics of appearance of the antitoxin plasma cells in the intestine, spleen and bone marrow. We also observed the memory response. In these conditions we found that: - During the priming as well as during the memory, plasma cells appear in the bone marrow and this is the main organ producing antibodies destined to blood circulation. - The bone marrow is, in addition, the only organ that maintains antibody secreting cells many months after oral immunization, when we consider there is no more antigen left in the organism. - A very early antigenic presentation in spleen exists, parallel but independent from what happens in the intestine. - The bone marrow does have memory T and B cells, although the mesenteric lymph node and spleen have greater concentrations of memory cells. All these observations contribute to the best knowledge of the extensive communication between the so called mucosal immune system and the central immune system and support the idea of the unit of the immune system.

Benencia, Fabián. "Efectos inmunomoduladores del extracto acuoso de hojas de Trichilia Glabra" (1996). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bengochea, Gabriel R.. "Modelos para la expansión acelerada del universo" (2009). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El descubrimiento de una disminución inesperada en los flujos de energía provenientes de supernovas del tipo Ia ha abierto uno de los problemas más enigmáticos y profundos en la cosmología actual. Estas observaciones han si- do interpretadas como evidencia sólida de que la expansión actual del univer- so es acelerada por algo que genéricamente se ha denominado energía oscura. A pesar de que la constante cosmológica parece ser la explicación más sim- ple y más favorecida observacionalmente para el fenómeno de la aceleración, otros escenarios se han estado desarrollando desde el hallazgo en 1998. En esta Tesis se presenta, primeramente, un análisis de modelos elec- trodinámicos no lineales mediante lagrangianos de Born-Infeld aplicados a la propagación de un rayo de luz en un contexto cosmológico, en donde se halla una corrección a la distancia luminosa a una fuente puntual como una manera de estudiar posibles contribuciones al momento de realizar estas ob- servaciones para supernovas del tipo Ia; y en la segunda parte de este trabajo se realiza un repaso de los rasgos carácterísticos de las llamadas teorías f(R) y se presenta una nueva clase de teorías de gravedad modificada, a las que lla- mamos teorías f(LT ), para explicar la aceleración del universo recientemente detectada sin la necesidad de energía oscura. Esta clase de teorías surge a partir de una modificación del lagrangiano del equivalente Teleparalelo de la Relatividad General (TEGR), cuyas ecuaciones de movimiento son siempre de segundo orden en contraste con las ecuaciones de cuarto orden que la mayoría de las mencionadas teorías f(R) posee. Se muestra además que la solución cosmológica estudiada presenta las tres últimas fases cosmológicas esperadas, y a través de un análisis conjunto de datos provenientes de las observaciones más recientes de supernovas del tipo Ia, Radiación Cósmica de Fondo (CMB) y Oscilaciones Acústicas de Bariones (BAO), se ponen cotas para el valor del único parámetro adicional que poseen estas teorías.

Abstract:
The discovery of an unexpected diminution in the observed energy fluxes coming from type Ia supernovae has opened one of the most puzzling and deepest problems in cosmology today. These observations have been inter- preted as solid evidence for an accelerating universe dominated by something called dark energy. Although the cosmological constant seems to be the sim- plest explanation for the phenomenon, several dynamical scenarios have been tried out since 1998. In this Thesis we present, in first place, an analysis of non-linear electro- dynamic models by employing Born-Infeld type lagrangians. We obtain exact solutions of the Born-Infeld theory for electromagnetic plane waves propa- gating in the presence of static background fields. After that, we use these results to show how the luminosity distance to a point-like source such as type Ia supernovae is modified when a static magnetic background is present in an expanding universe. In second place, we carried out a review of the char- acteristic features of f(R) theories and we present a new class of modified gravity theories, namely f(LT ) theories, to explain the recently discovered acceleration of the universe without the need for dark energy. This class of theories arises from a modification of the teleparallel equivalent of general relativity (TEGR) whose field equations are always second order equations in contrast to the fourth-order equations that most of f(R) theories holds. It is also shown that the cosmological solution has the last three expected cosmological phases, and finally we perform a joint analysis with measure- ments of the most recet type Ia supernovae, baryon acoustic oscillation peak, and estimates of the cosmic microwave background shift parameter data to constrain the only new parameter this theory has.

Benites, María del Pilar. "Análisis de las diferencias de coloración y vocalizaciones en especies de aves cercanamente emparentadas y simpátricas, y su importancia como mecanismos de aislamiento reproductivo" (2012-03-29). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las diferencias interespecíficas en caracteres que evolucionaron a través de procesos de selección sexual pueden ser importantes barreras para mantener el aislamiento reproductivo entre especies cercanamente emparentadas viviendo en simpatría. Se estudiaron en este trabajo las diferencias existentes en el canto y la coloración de especies cercanamente emparentadas y simpátricas, evaluando la importancia que estas diferencias puedan tener en mantener a las especies aisladas. Estos se realizó sobre dos grupos de aves presentes en Argentina, donde coexisten en parte de su rango de distribución: los Pechos colorados (Sturnella superciliaris, S. defilippii y S. loyca) y los Capuchinos del sur (Sporophila hypoxantha, S. hypochroma, S. cinnamomea, S. ruficollis, S. palustris, S. zelichi y S. bouvreuil). La coloración del plumaje se medió a través de espectrofotometría de reflectancia y un modelo fisiológico de la visión de las aves, y las diferencias en el canto se analizaron midiendo variables directamente sobre los espectrogramas de sonido. Se encontraron diferencias consistentes en la coloración y en el canto entre las especies de estos dos grupos. Las diferencias en la coloración involucraron tanto la parte visible como la UV del espectro, y son potencialmente percibidas por las aves, ya que superan ampliamente el umbral de discriminabilidad de dos colores en el modelo perceptual. Las diferencias en el canto involucran parámetros estructurales, temporales y de frecuencia. Experimentos de playback a campo diseñados para analizar la respuesta al canto en machos de S. hypoxantha y S. palustris mostraron que estas especies responden diferencialmente frente al canto homoespecífico y al canto heteroespecífico, virtualmente ignorando a este último. Esto muestra que las diferencias interespecíficas en el canto encontradas son percibidas como tales por los receptores, y sugiere la posible función del canto en el reconocimiento de especies en este grupo. Se compararon poblaciones simpátricas y alopátricas de Pechos colorados y de Capuchinos del sur, en cuanto a variables del canto y la coloración, investigando la posibilidad que las diferencias en estos caracteres hayan evolucionado para mantener a las especies separadas. Se encontraron ciertos indicios de desplazamiento de caracteres de canto y coloración; aún así, los mismos fueron escasos y por momentos contradictorios. Finalmente, discutimos los resultados obtenidos, evaluando la importancia que las diferencias interespecíficas en la coloración y el canto puedan tener como mecanismos de aislamiento reproductivo en estas especies.

Abstract:
Interspecific differences in characters that have evolved through sexual selection processes may be important barrier that keep reproductive isolation among closely related species that occur in sympatry. In this study, existing differences in the song and color of closely related sympatric bird species was analyzed, evaluating the importance that these differences might have in maintaining species apart. This was done on two groups of passerines birds present in Argentina that are sympatric in part of their distribution range: the red breasted meadowlarks (Sturnella superciliaris, S. defilippii y S. loyca) and the southern Capuchinos (Sporophila hypoxantha, S. hypochroma, S. cinnamomea, S. ruficollis, S. palustris, S. zelichi y S. bouvreuil). In these groups we studied plumage coloration through spectrophotometry and the use of a physiological model of avian visual system, and we studied differences in song measuring variables directly on the sound spectrograms. Consistent differences in coloration and song were found in these two groups. Color differences involved not only the visual part of the wavelength spectrum but also the UV, and are potentially discernable by birds as values in avian visual space were considerably higher than the threshold for color discrimination. Differences in song involved structural, temporal and frequency parameters. Playback field experiments design to test the response to homospecific and to heterospecific song in males of S. hypoxantha y S. palustris show that these species respond differentially to homospecific and to heterospecific song, virtually ignoring the latter. This shows that the differences in song found are perceived as such by the receptors, and suggests that song might function in species recognition in this group. Sympatric and allopatric populations of red breasted meadowlarks and southern Capuchinos were compared in song and coloration, studying the possibility that these differences have evolved as mechanism that maintain species apart. Some evidence of character displacement in song and coloration was found; yet, this evidence were weak and in some cases, contradictory. Finally, we discuss the results obtained, evaluating the importance that the differences in color and song might have as reproductive isolation mechanism in these species.

Benyacar, Isaac. "Resinas de intercambio iónico: preparación de una resina sulfónica a partir de la resina de aldehído" (1952). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Berbery, Ernesto Hugo. "Estudio de los efectos de la orografía sobre la circulación atmosférica sinóptico-planetaria, en casos marcadamente barotrópicos y baroclínicos" (1987). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis se estudian las características más sobresalientes de la circulación general de la atmósfera en el hemisferio sur en la que hace a la dinámica de los efectos orográficos, particularizando en los fenómenos de naturaleza marcadamente barotrópica por un lado y marcadamente baroclínica por el otro. Para ello se desarrolla un modelo barotrópico con el esquema de Arakawa y Lamb, el cual tiene la capacidad de conservar la energía total y la enstrofía potencial del sistema y es estable aún en presencia de pendientes abruptas del terreno . El objeto de desarrallar este madelo es estudiar el efecto dinámico de la Cordillera de los Andes en dos fenómenos de estructura marcadamente barotrópica: las ondas estacianarias y los anticiclones de bloqueo. Se modifica también un madelo baroclínico en ecuaciones primitivas y coordenadas esféricas con la coordenada σ en la vertical: se ha extendido el recinto de integración a un hemisferio, incluyéndosele un filtro de Fourier para las altas latitudes, se le han modificado las condiciones de borde y se le ha incorporado la difusión horizontal y vertical. En este modelo, de 5 niveles en la vertical, se ha incorporado a la topografía como regiones de aire estanco y es empleado para la simulación de desarrollos ciclogenéticos. Las experiencias realizadas con estos modelos muestran que para lograr una correcta representación de los fenómenos es necesario emplear una orografía realzada (conocida como "envelope orography"). Las simulaciones de las ondas estacionarias indican que la orografía produce campos semejantes a los observados al sur de 45º S para invierno y al sur de 35º S para verano. Esta comparación es desde el punto de vista espectral. Regionalmente, los campos simulados coinciden cualitativamente con los observados entre 110/120º O y 10º E y al norte de 70º S para ambas estaciones, aunque la coincidencia es más pronunciada para el verano. De todos los continentes, América del Sur (con la cordillera de los Andes) es el más importante para definir la configuración de los campos simulados. La Antártida, entre 50 y 70º S también hace un aporte a las ondas. Las simulacianes de bloqueos muastran que el mecanismo de Kalnay-Rivas y Merkine (1981) mantiene su validez al ser extendido a un hemisferio con geometría esférica y con una topografía realiata. Este mecanismo, más que la iniciación del bloqueo, explicaría su intensificación y mantenimiento. La ciclogénesis a sotavento de los Andes resulta más profunda y más al norte que en el caso de ausencia de orografía. La orografía tendría el efecto de aumentar principalmente la acción ciclogenética del término de la advección de espesores en la ecuación del desarrollo, debido al bloqueo del flujo en las capas bajas.

Berdicever, Mauricio. "Obtención electrolítica del amarillo de cromo" (1950). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Berenstein, Ariel José. "Análisis de redes complejas en sistemas biomoleculares" (2014-12-22). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Dentro de una célula coexisten diferentes tipos de biomoléculas que participan en intrincadas redes de interacciones físicas y bioquímicas. Las mismas facilitan la supervivencia de la célula y hacen de ella un sistema extremadamente complejo. La descripción de estas interacciones bajo la perspectiva de redes complejas ofrece la posibilidad de estudiar propiedades colectivas emergentes, detectar patrones de organización y proveer una visión global de la célula como sistema. Estas redes presentan estructura modular no trivial. Numerosos trabajos han puesto esfuerzos en correlacionar esta estructura modular con grupos de biomoléculas que llevan a cabo funciones biológicas específicas. No obstante, un problema de ese enfoque es el hecho de que la estructura modular observada en una red depende de la escala adoptada así como de los algoritmos de agrupamiento utilizados. Esta tesis hace especial énfasis en comprender cómo distintos algoritmos de agrupamiento y sus niveles de resolución implícitos pueden afectar a los análisis biológicos subsecuentes. Se consideró una red de interacción de proteínas, y distintos conjuntos de proteínas involucradas en procesos de envejecimiento celular y vías de se˜nalización. Se emplearon dos algoritmos de agrupamiento ampliamente reconocidos, uno basado en teoría de información y otro en optimización de la modularidad de la red. Mientras que el primer tipo es capaz de detectar estructuras topológicas libres de escala característica, el segundo tiene límite de resolución bien definido. Los resultados obtenidos sugieren que si bien ambos algoritmos obtienen particiones de similar modularidad, las mismas difieren significativamente en el nivel de congruencia biológica, el grado de granularidad de las descripciones modulares y en la capacidad para detectar asociaciones estadísticamente significativas entre los conjuntos de proteínas considerados y los respectivos roles cartográficos de la red. Por otro lado se abordó el problema de reposicionamiento de fármacos en el contexto de enfermedades tropicales desatendidas. Para ello, se construyó y caracterizó una red multicapa compuesta por fármacos, proteínas de múltiples especies y diversos tipos de relaciones estructurales, químicas, metabólicas y de bioactividad. Empleando técnicas de priorización en redes complejas se abordaron dos problemas biológicos de interés. Por un lado la priorización de potenciales blancos de droga en un organismo patógeno de interés. Por otro lado la búsqueda de blancos de drogas con actividad probada sobre un organismo, pero cuyos mecanismos y blancos de acción permanecen desconocidos. Los resultados fueron validados computacionalmente y discutidos desde un punto de vista biológico en base a bibliografía reciente. En suma los resultados indican que el enfoque adoptado resulta de gran utilidad para guiar experimentos que busquen entender los mecanismos de acción de drogas que aún permanecen desconocidos.

Abstract:
Inside a cell different types of biomolecules coexist, which are involved in intricate networks of physical and biochemical interactions. They facilitate the cell survival and make it an extremely complex system. The description of these interactions from complex network perspective allows to study emerging collective properties, to detect organization patterns and provides an overview of the cell as a system. These networks have nontrivial modular structure. Several works have concentrated on correlating this modular structure with groups of biomolecules that carry out specific biological functions. However, a concerning issue of this approach is that observed modular structure in a network depends on the adopted scale as well as the clustering algorithms used. This thesis is focused on understanding how different clustering algorithms and their implicit resolution levels may affect subsequent biological analysis. To this end, a protein-protein interaction network was considered and examined several protein sets related to cell aging and signaling pathways. Two clustering algorithms widely recognized were considered, one based on information theory and other based on network modularity optimization. While the first one is capable of scale-free recognition of topological structure, the second one has a well-defined resolution limit. The results suggest that although both algorithms result in partitions of similar modularity, they differ significantly on its biological congruence, the granularity of modular descriptions and its ability to detect statistically significant associations between considered protein sets and network cartographic roles. On the other hand the problem of drug repositioning is addressed in context of neglected tropical diseases. To achieve this, a multilayer network consisting of chemical compounds, proteins from multiple species and several classes of structural, chemical, and metabolic relationships as well as bioactivities between them was constructed and characterized. Taking advantage of prioritization techniques in complex networks, two interesting biological issues were addressed. Firstly, the prioritization of putative drugtargets in a given pathogenic species was tackled. Secondly, protein targets were looked for on tested active compounds whose mechanisms of action and targets remained unknown. The results were validated computationally and discussed from a biological point of view taking into account recent literature. In summary, the results suggest that the approach is useful for guiding experiments that seek to understand drugs mechanisms of action that are still unknown.

Berenstein, Mariana G.. "Diseño, caracterización, producción y utilización de vectores virales y plasmídicos para terapia génica del cáncer" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La transferencia in vivo del gen de la timidina kinasa del virus herpes-1 seguido por la administración de la prodroga ganciclovir (HSV-tk/GCV) y su posterior activación in situ, surgió como una estrategia de terapia génica eficaz para el tratamiento de tumores experimentales y humanos. Se había demostrado la existencia de un efecto “bystander” por el cuál las células no modificadas por el gen también eran eliminadas por GCV activado por el gen HSV-tk. Sin embargo, su validez fue cuestionada desde diferentes perpectivas, entre ellas el sistema de transferencia y el modelo tumoral utilizado. Dada la disparidad de resultados en diferentes modelos experimentales, construimos un vector retroviral conteniendo el gen de HSV-tk y obtuvimos células productoras de vectores retrovirales (VPC). Utilizando dichas células como fuente de tranferencia génica, estudiamos la eficiencia de transducción in vivo en células malignas sobre tres modelos tumorales distintos: melanoma murino B16, melanoma humano IIB-MEL-LES y glioblastoma de rata C6. En estudios in vitro pudimos observar un efecto bystander sólo en células C6. Los estudios in vivo mostraron una inhibición del crecimiento tumoral en los dos modelos de melanoma cuando las células eran co-inoculadas con VPC productoras de vectores retrovirales portando el gen HSV-tk (VPC-tk) y tratadas con GCV. Sin embargo, el 100% de los animales fue capaz de desarrollar tumores en ambos modelos . Bajo las mismas condiciones experimentales, 70% de las ratas fueron capaces de rechazar células de glioma C6 transferidas de modo intracraneal por técnicas estereótaxicas y el 50% de los animales mostró un aumento significativoen el tiempo de sobrevida. El tratamiento de tumores C6 establecidos con VPC-tk y GCV, llevó a la cura del 33% de los animales. Las ratas que rechazaron el tumor primario fueron capaces de desarrollar una respuesta inmune de memoria que lleva al rechazo de desafíos contralaterales con células parentales. A los efectos de aumentar el efecto terapéutico estudiamos el efecto antitumoral de la tranferencia del gen de interleuquina-12 solo o en combinación con el gen HSV-tk y tratamiento con GCV, sobre tumores de cerebro intracraneales y los mecanismos involucrados en el rechazo tumoral. Luego de la transferencia i.c.de células productoras VPC-IL12, se lograba suprimir el crecimiento de tumores C6, aún en tumores establecidos de 10 días. La combinación con células VPC-tk y GCV tuvo mejor efecto terapéutico que los dos tratamientos por separado sobre tumores incipientes. Los estudios de los mecanismos asociados a la respuesta antitumoral demostraron la participación de eventos inmunológicos y no inmunológicos. Secciones histológicas de cerebros con expresión local de IL-12 mostraron una activación inmediata de macrófagos/microglia y su reclutamiento a áreas intratumorales. La expresión de IL-12 también fue capaz de estimular un reclutamiento de PMN e inducir necrosis de vasos tumorales, mientras los vasos del parénquima normal no se vieron afectados. Por otro lado, el tratamiento con HSV-tk/GCV mostró un infiltrado mayoritario de células CD5+. Además, únicamente la combinación de IL-12 y HSV-tk/GCV fue capaz de reclutar células CD4+ y CD8+ cuando el tratamiento era aplicado a tumores de gran tamaño. Los animales sobrevivientes desarrollaron una inflamación crónica en el sitio de inyección primario compuesto de macrófagos y linfocitos en distintas proporciones según el tipo de terapia inicial aplicado. Este infiltrado crónico no fue perjudicial para el cerebro ya que no se observaron evidencias de desmielinización ni tampoco daños neurológicos asociados. Por lo tanto este estudio provee las bases para comprender los mecanismos involucrados en la respuesta antitumoral inducida por IL-12, sola o en combinación con el sistema del gen suicida y apoya el uso de la terapia combinada para el tratamiento de tumores de cerebro. Un clon de VPC terapéutico portando el gen de HSV-tk fue también seleccionado para su utilización en protocolos clínicos. Este clon mostró una mayor eficacia antitumoral que la preparación original. Finalmente, se construyeron y caracterizaron nuevos vectores para su uso en terapia génica, basados en sistemas regulables e inducibles por condiciones exógenas (tetraciclina) y endógenas del tumor (hipoxia tumoral).

Abstract:
In vivo transfer of the herpes simplex virus thymidine kinase gene followed by ganciclovir administration (HSV-tk/GCV) and in situ activation of the prodrug, has evolved as an effective approach to the treatment of tumors of experimental and human origin. In vitro studies were able to demonstrate the development of a“bystander effect" that led to the death of cells that do not express the gene, in the presence of GCV activated by HSV-tk modified cells. However, several studies have questioned the validity of this approach, mainly in terms of the gene transfer system being used and the experimental model to which they applied. Considering the different results that were reported on different experimental tumor models, we made a retroviral vector containing the HSV-tk gene and retroviral vector producer cells (VPC) were obtained. By using these (VPC) as a source for in vivo gene transfer we evaluated the efficacy of in vivo transduction of malignant cells using three different tumor cell models: 816 murine and IIB-MEL-LES human melanomas, and C6 rat glioblastoma. In vitro studies have shown a bystander effect only in C6 cells. In vivo studies showed an inhibition of tumor growth in the two melanoma models when tumor cells were co-injected with VPC producing retroviral vectors carrying the HSV-tk gene (VPC-tk), followed by GCV treatment, but 100% of mice developed tumors in both models. Under similar experimental conditions, 70% of syngeneic rats completely rejected stereotactically transferred C6 tumor cells and 50% of them showed a prolonged_survival. Treatment of established C6 tumors with VPC-tk and GCV led to cure of 33% of the animals. Rats which rejected tumor growth developed an anti-tumor immune memory leading to rejection of a stereotactic contralateral challenge with parental cells. In order to increase the therapeutic efficacy of the system we studied the antitumoral response after interleukin-12 (IL-12) gene transfer alone or in combination with the herpes virus thymidine kinase gene/gancyclovir (HSVtk/GCV), on i.c. implanted brain tumors and the underlying mechanisms mediating tumor rejection. Following i.c. transplantation of retroviral vector producer cells (VPC) VPC-IL12 were able to suppress rat C6 glioma tumor growth even when rats carried 10 days-old tumors. Its combination with VPC-tk had better therapeutic effect than each single treatment on incipient tumors. The study of the mechanisms involved in the antitumoral response, clearly showed that it was mediated by immune and no immune mechanisms. IL-12 expression was characterized by the immediate activation of microglia/macrophage and their recruitment to the intratumoral area. IL-12 expression also stimulated PMN recruitment and induced tumor vessel necrosis, while normal brain vessels remained intact. Conversely, CD5+ lymphocytes were the main immune cell type recruited by HSV-tk/GCV. In addition, only the combination of IL-12 and HSV-tk/GCV was able to recruit CD4+ and CD8+ when large tumors were treated. Surviving rats developed a chronic inflammation at the site of injection composed of macrophages and lymphocytes which was not harmful to the brain since no demielynization or neurological signs were observed. The present study provides a basis to understand the mechanisms underlying the antitumor response induced by IL-12 alone and in combination with HSV-tk/GCV and supports their use in combination therapy of brain tumors We also selected a therapeutic clone of VPC carrying the HSV-tk gene for its clinical application. This clone showed a higher antitumor efficacy than the original cell preparation. Finally, new gene therapy vectors, based on systems regulated by exogenous (tetracycline) and endogenous (tumor hypoxia) conditions, were developed and further characterized

Berensztein, Esperanza Beatriz. "Cultivo primario de células testiculares prepúberes humanas: Cambios madurativos de la regulación de la esteroidogénesis" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La regulación de la fase postnatal temprana de activación testicular así como de la posterior quiescencia en humanos es poco conocida. Tanto la secreción de hormonas hipofisarias como la composición celular del testículo correspondiente a la fase postnatal temprana son diferentes al testículo adulto. El objetivo fundamental del presente trabajo de tesis fue desarrollar el cultivo primario de células testiculares humanas provenientes de necropsia. Se estudiaron 50 testículos de pacientes neonatales (grupo 1, G1), de la etapa de activación postnatal (G2), de la etapa de quiescencia testicular (G3) y puberales (G4). El estudio de la secreción de testosterona (T), marcador de células de Leydig, en función del tiempo post mortem (tpm) encontró que el tpm debe ser de hasta 24 horas, ya que a tpm mayores no hay T y se activa la enzima aromatasa. Se comparó la T basal y la respuesta a gonadotrofinas en los 4 grupos, hallándose que la T basal es significativamente mayor en G1 y G2 que en G3 (p<0.05) y que sólo GZ responde a gonadotrofinas. Se encontró que Ia actividad estimada de las enzimas 17β-HSD, 3β-HSD y 17,20 liasa de la P450c17, fue significativamente mayor en G2 que en G3 y que 17β-HSD y 3β-HSD están más activas que 17,20 liasa. Por análisis con precursores tritiados de las vias Δ4 y Δ5 e identificación de metabolitos producidos por cromatografía en capa delgada se observó que la vía Δ5 es preferencial en testículo humano prepúber. Se observó un aumento de T en ausencia de gonadotrofinas bajo GH en G2 y bajo IGF-1 en los 4 G. Se estudió la secreción de inhibina-B, marcador de célula de Sertoli, encontrándose una disminución con la edad durante la prepubertad, un aumento en paralelo a la T y un efecto estimulador de FSH. Por el método de subcultivos y criopreservación de células testiculares humanas de necropsia, se encontró T, bajo colesterol ó pregnenolona, indicando que las enzimas esteroidogénicas están preservadas. El modelo experimental desarrollado ha demostrado además ser útil para estudiar la fisiopatogenia de diversas alteraciones de la función testicular en los niños.

Abstract:
The regulation of the ear1y postnatal activation and subsequent quiescence in human testicular development is poorly understood. The secretion of pituitary hormones and the testicular cell composition in prepubertal are different than adult men. The main aim of this study was to develop the primary culture of human testicular cells obtained from necropsy. A total of fifty testes was studied and divided into: neonatal stage or group 1 (G1), postnatal activation stage (G2), stage of quiescence (G3) and pubertal stage (G4). Testosterone secretion (T), as marker of Leydig cell function, was related with post mortem hours (pmh). It was found that pmh must be less than 24 hours, because at pmh a higher T dissapeared and aromatase activity increased. Basal T and response to gonadotrophins were analyzed in the 4 groups. Basal T was significantly higher in G1 and G2 than in G3 (p<0.05), and only in G2 an increment of T was found under LH/FSH. Seventeenβ-HSD, 3β-HSD and the 17,20 lyase of P450c17 activities were estimated in G2 and G3 and it was found that the three activities were higher in G2 than in G3, and 17β-HSD, 3β-HSD were more activated than 17,20 lyase. The analysis of the two pathways of steroidogenesis Δ5 and Δ4, studied after the incubation with radiolabeled precursors and the identification of products by TLC, showed that the preferential pathway is the Δ5. The stimulating effect of factors other than gonadotrophins was studied. An increment of T under GH in G2 and under IGF-1 in the four groups in the abscence of LH/FSH was observed. Inhibin-B secretion, as marker of Sertoli cells, was studied. A negative correlation between Inhibin-B secretion and age during prepuberty was found. Moreover, a positive correlation between Inhibin-B and T and a stimulating effect of FSH on Inhibin-B secretion was also shown. Human testicular cells obtained from necropsies were subcultured and cryopreserved and their ability to secrete T was maintained, under cholesterol or pregnenolone, showing that steroidogenic enzymes were preserved. The present model of human testicular cells in culture was found to be useful to study the physiopathogenesis of some alterations of testicular function in boys.

Bergé, Analía. "Un estudio de la evolución del pensamiento matemático : el ejemplo de la conceptualización del conjunto de los números reales y de la noción de completitud en la enseñanza universitaria" (2004). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis, enmarcada dentro del campo de Didáctica de la Matemática, se estudia la evolución en la conceptualización del conjunto de los números reales por parte de los estudiantes de nivel universitario. Se toma como referencia las carreras de Licenciatura y Profesorado en Matemática de la Universidad de Buenos Aires. ¿Qué se quiere expresar con “el estudio de la evolución..."? Los alumnos establecen un primer contacto con los números reales temprano en su escolaridad. En un primer momento los ven en las soluciones de problemas geométricos, como raíces cuadradas, como raíces de polinomios, estudian sus desarrollos decimales, etcétera. Pero más adelante, al comenzar los estudios en el área del análisis matemático, cuando el conjunto de los números reales se vuelve el dominio natural de las funciones, ¿qué conocimientos tienen los alumnos acerca de las propiedades de ese dominio? ¿cuáles son las propiedades que ellos reconocen de este conjunto, sobre las que descansan los aprendizajes en análisis? Ha sido de interés focalizar este estudio en una propiedad del conjunto de los números reales central para el trabajo en esa área: la completitud. La tesis tiene seis capítulos. El primero es un estudio histórico-epistemológico del surgimiento del conjunto de los números reales. Varios investigadores en Didáctica de la Matemática han señalado la relevancia del análisis epistemológico para el análisis didáctico, sus potencialidades y sus alcances (Artigue, 1990, 1992, 1995), han analizado la relación entre epistemología, matemática y educación (Sierpinska & Lerman, 1996), han estudiado ciertos aportes específicos del conocimiento de la historia a la práctica docente (Bkouche, 1997) y han alertado acerca de la utilización ingenua de la historia de la matemática en la enseñanza (Radford, 1997). El análisis hecho ha llevado a delinear una reconstrucción de la génesis histórica de la noción conjunto de los números reales, ligando problemas y preguntas de determinados períodos históricos con el estado de conocimientos y las herramientas disponibles en esos momentos, y con las diferentes conceptualizaciones producidas. La manera en la que se ha jugado la correspondencia entre números y puntos de una recta en diferentes periodos de la historia (y más generalmente, como ha evolucionado la relación entre números y magnitudes), cómo era el trabajo de los matemáticos en temas de análisis antes de que la noción de completitud del sistema de los números reales fuera enunciada, qué condiciones hicieron necesaria la formalización de esta noción, cuáles fueron las distintas respuestas que se dieron a este problema y cómo se llega a las formulaciones actuales, son las preguntas que guían este capítulo. Para aportar respuestas, se examinan diferentes momentos particularmente significativos de la historia matemática: el período euclidiano, el intermediario árabe y la Europa Medieval, el desarrollo del cálculo, los comienzos del siglo XIX y la aritmetización del análisis, el fin del mismo siglo que ve diferentes construcciones de un sistema numérico y finalmente la axiomatización de R con los trabajos de Hilbert. En las conclusiones de este capítulo se aborda el papel del método axiomático en matemática y en la enseñanza de las matemáticas, se hace una reflexión alrededor de la evolución del estatuto de una misma afirmación matemática, se analiza la relación modelo matemático —objeto modelizado, que puede representar para el trabajo matemático tanto un punto de apoyo como un obstáculo, y se analiza también la evolución de los argumentos que se consideran suficientes para validar el trabajo matemático. Con este primer capítulo se ha buscado mostrar la complejidad de las relaciones que se han dado a lo largo de la historia entre las nociones de continuidad y de completitud, y los motores principales de las evoluciones, y dar argumentos que faciliten entender la posible existencia de varios tipos de equilibrios cognitivos y niveles de conceptualización acerca de estas nociones, cuidando no caer en una visión ingenua de las relaciones entre ontogénesis y filogénesis. Este estudio también muestra que los comienzos del cálculo y su desarrollo durante tres siglos se llevaron a cabo teniendo como soporte un dominio numérico cuyas propiedades no habían sido explicitadas. La explicitación de esas propiedades supuso transitar una ruptura y una reconstrucción de la noción. La ruptura se produjo en la historia de la matemática como consecuencia de un cambio de racionalidad a partir del cual se reconoció que la base del trabajo matemático había sido empírica, y se deseó superar esa situación. El problema era entonces encontrar cómo expresar la propiedad de completitud. Dedekind encontró una manera, procurando obtener para los números algo análogo a la continuidad de la recta. Para lo cual hubo de precisar —necesariamente como un axioma- en qué consistía dicha continuidad. Cantor por su parte, así como otros matemáticos de la época, expresó la completitud vía la convergencia de sucesiones fundamentales, estableciendo además una correspondencia entre los números y los puntos de la recta y reconociendo el carácter axiomático de dicha correspondencia. Ese fue el sentido que tuvo, para los matemáticos del siglo XIX la construcción de un dominio numérico completo. A lo largo de la tesis se analiza el sentido que tiene para los alumnos y la organización institucional actuales. El segundo capitulo es una puesta al día de las investigaciones didácticas hechas por otros investigadores relacionadas con el tema, y el posicionamiento de la propia problemática. Los trabajos comentados acerca del conjunto de los números reales tratan didácticamente cuestiones vinculadas a la existencia de números irracionales, su desarrollo ilimitado y no periódico, su representación uno a uno en la recta numérica, su aparición en los cálculos de raíces, logaritmos, cálculos trigonométricos, etc. Estas cuestiones están ligadas al hecho de que con los racionales no alcanza para dar respuesta a diversos problemas que aparecen, aun tempranamente, en la escolaridad, y se requiere por lo tanto de la existencia de otros números. Otro nivel de problematización se pone de relevancia al estudiar las propiedades de R cuando se lo ve como el dominio natural del análisis matemático. Éstas se despliegan cuando se sale de lo estrictamente numérico y se trabaja con funciones, sucesiones, etc. y el interés está puesto en fundamentar las afirmaciones y en caracterizar ciertos atributos que tiene R como conjunto. Efectivamente, la completitud no es una propiedad que concierne a un número sino a un conjunto de números. Los trabajos analizados contemplan el primer nivel y no el segundo, que por otra parte es propio de la enseñanza a nivel superior. Más allá de los diferentes marcos teóricos y metodológicos que han sido tomados como referencia en los trabajos, es posible reunir al menos dos puntos de consenso entre ellos. El primero es que en los alumnos de distintos niveles de escolaridad conviven concepciones contradictorias, en cuanto a la densidad, al significado de los desarrollos infinitos, la existencia de números que verifican determinadas condiciones, la irracionalidad, la idecimalidad. Algunas de las investigaciones han mostrado que las mismas nociones funcionan bien en ciertas preguntas y no en otras. El segundo es que la representación de los números en la recta, no contribuye necesariamente a solucionar esas dificultades: muchas veces este objeto suma sus propias dificultades, las investigaciones nos han mostrado que los alumnos conceptualizan de diferentes maneras la recta numérica, por lo cual la referencia a sus atributos y propiedades no es un punto de apoyo seguro, y en algunos casos modifica completamente la problemática en juego. Los trabajos analizados constituyen en cierto modo un mapa de los conocimientos didácticos previosexistentes a esta tesis alrededor de este tema, se han tomado como punto de partida para avanzar en la caracterización de aquello que hace evolucionar las conceptualizaciones de los alumnos en relación con el segundo nivel de propiedades de R que se ha mencionado. El tercer capítulo consiste en el análisis de los aspectos matemáticos y cognitivos vinculados a la completitud de R. En el mismo se profundizan distintas vías matemáticas de entrada y de desarrollo de esa noción, dando lugar a lo que ha sido llamado Panorama Matemático; y se separan ficticiamente los aspectos cognitivos involucrados estructurándolos en seis ejes variables, con el objetivo de modelizar distintos estados de conceptualización de esta noción. Estos ejes vistos globalmente en conjunto con su estado inicial, han recibido el nombre de Panorama Cognitivo. Los mismos no son exclusivos de este concepto, pueden pensarse para otros conceptos matemáticos, pero han podido ser delineados como producto del trabajo realizado sobre la completitud, especialmente del análisis epistemológico. El Panorama Cognitivo consta de seis ejes con un origen en común, como un estado inicial o punto de partida en el cual la completitud es vista como evidente, con un apoyo fuerte en la representación gráfica o mental. A ese nivel la completitud no es identificada como un objeto matemático. Los seis ejes que admiten distintos estados se describen brevemente a continuación. Disponibilidad Técnica: este eje incluye los diferentes grados de dominio técnico sobre los elementos matemáticos, a modo de ejemplo, distintos valores en este eje son : el dominio de demostraciones de teoremas simples en los que se pone en juego la completitud, el manejo de varias caracterizaciones del supremo, el manejo de diferentes maneras de caracterizar la completitud y el conocimiento de su equivalencia, la manipulación de los objetos que le están asociados, como ser, sucesiones, sucesiones de Cauchy, encajes, cortaduras, etc., la completitud de espacios más generales. Instrumentalidad/ Objetivación: este eje valora la percepción de la completitud como una herramienta que posibilita definir números bajo ciertas condiciones, así como su reconocimiento como parte de los objetos que hacen al análisis. Necesidad: Se refiere a la comprensión de un sujeto respecto de la necesidad de incluir el axioma de completitud. De modo más general alguien que percibe que es necesario añadir un axioma para desarrollar una teoría es alguien que ha hecho una reflexión sobre la reorganización de los saberes matemáticos. Valoración/fundamentación: valora el nivel de consciencia de un sujeto acerca de la necesidad de validar en matemática, de lo que es aceptado como válido por su comunidad, de cómo se va modificando lo que es considerado como válido, de cómo esto depende de la institución en la que se lleve a cabo. Flexibilidad: Este eje valora la capacidad de un sujeto de usar una u otra caracterización de la completitud según la tarea a realizar. Posición frente a las construcciones: Este eje valora la comprensión que puede tener un sujeto acerca del sentido de que R sea construido a partir de Q, y acerca del rol de modelo que adquieren esas construcciones con relación a la construcción axiomática. El Panorama Cognitivo fue utilizado como instrumento de análisis en la realización de los últimos tres capítulos. El cuarto capítulo es un Análisis Institucional, que básicamente consiste en el análisis praxeológico (Chevallard, 1998) de cuatro materias y en su puesta en relación con el Panorama Cognitivo. Para su realización se han tenido en cuenta las preguntas siguientes: ¿Qué tipo de apariciones hace la completitud en las tareas, en las técnicas, cómo aparece, cómo se usa? ¿Qué técnicas se utilizan en la resolución de las tareas? ¿Cuánta tecnología y cuánta teoría requieren esas técnicas? ¿Se trata de técnicas que consisten en la aplicación aislada de un teorema o propiedades? En ese caso, la utilización de propiedades ¿“es llamada” desde la formulación de la tarea o permanece implícita? ¿En qué medida es necesario para desplegar la técnica el proceso de demostración de las propiedades o teoremas, en qué medida solamente el enunciado de los mismos? Con respecto al género de tareas y a su formulación, se ha tenido en cuenta si favorecen un funcionamiento del conocimiento más a nivel técnico (“hallar", “resolver”, “calcular”, ítems aislados), a nivel movilizable (“demostrar usando tal resultado", varios ítems secuenciados) o a nivel disponible (“estudiar", “analizar”, “demostrar”, etc.). En el análisis se ha buscado identificar los momentos en los que las técnicas usadas se vuelven insuficientes, así como también los puntos de equilibrio, las continuidades, rupturas y falsas continuidades. Con respecto al grado de problematización de aquello que parece evidente u observable, se tomó en cuenta la presencia de tareas que involucran un trabajo de demostración de propiedades o resultados “observables”, “evidentes” y en qué medida hay una problematización. Se analizó el papel de las representaciones utilizadas. Se hizo una interpretación de a qué parte del Panorama Matemático parece apuntar cada materia, y se analizó en qué medida las tareas contribuyen a hacer evolucionar los ejes del Panorama Cognitivo. El estudio praxeológico muestra que el tipo de tareas que llevan a cabo los alumnos en la primera materia de análisis matemático en Ia universidad en relación a la completitud, se apoya tanto en las representaciones y en la información que éstas proveen como en el uso de teoremas fuertes de cuya fundamentación pueden no preocuparse. Los alumnos en este nivel operan como si las propiedades se verificasen naturalmente, la fundamentación de las mismas les resulta un problema externo. La completitud permanece entonces en estado de preconstrucción, su explicitacíón no es requerida ni utilizada en los problemas y ejercicios. El análisis praxeológico en relación a las otras materias analizadas muestra que hay una ruptura de contrato didáctico que se produce al pasar a Análisis I de Exactas, en donde, las representaciones ya no constituyen un soporte para las argumentaciones, pero el tipo de tareas en relación a la completitud es esencialmente la misma que en la materia anterior. Los alumnos no comprenden las razones de este cambio en la medida que no se les plantean nuevas tareas en relación con este tema, asumen que deben demostrar más debido a la exigencia de sus docentes que por ser algo interesante para ellos desde el punto de vista matemático. En la materia Complementos de Análisis II hay ejercicios en los que aparecen el supremo y el ínfimo en carácter de objeto (equivalencia entre distintas definiciones, aritmética de supremos e íntimos) y también en un rol más instrumental al definir distancias. En Cálculo Avanzado hay un ejercicio en el que hay que demostrar la equivalencia entre diferentes caracterizaciones de la completitud de R, y hay ejercicios clásicos de espacios métricos completos, que pueden ser hechos sin que eso involucre hacer una reflexión. Del análisis hecho se desprende que los ejes Necesidad, Flexibilidad y Posición frente a las construcciones quedan vacantes desde la oferta de la institución, quedando, si esto ocurre, reservados para el trabajo privado del alumno. Los capitulos quinto y sexto constituyen la parte experimental de esta tesis. El quinto contiene los análisis a priori y a posteriori de varias entrevistas clínicas hechas a alumnos de las materias Análisis I, Complementos de Análisis II y Cálculo Avanzado, con el objetivo de identificar su rapport personal a la completitud (Chevallard, 1992) en términos del Panorama Cognitivo y de ponerlo en relación con los resultados del Análisis Institucional. Las preguntas que sirvieron de guión para las entrevistas tenían como objetivo acceder a: en qué medida los estudiantes piensan que es necesario demostrar el Teorema de Bolzano, y en qué medida consideran que la completitud es una herramienta necesaria para probarlo; qué piensan los estudiantes acerca de qué es la completitud, con qué problemas, teoremas, ejercicios la relacionan y cómo evoluciona esta visión a medida que avanzan por las materias; cómo interpretan el hecho de que hay distintas maneras de introducir la completitud y si las tienen disponibles; cómo interpretan el estudio de las construcciones por cortaduras de Dedekind o por sucesiones de Cauchy y cómo lo relacionan con sus conocimientos previos sobre R. El sexto capítulo releva las respuestas dadas por escrito por la mayoría de los alumnos de Análisis I, Complementos de Análisis II y Cálculo Avanzado a dos preguntas: cómo explicaría a un alumno más joven el hecho de que una sucesión creciente y acotada de números reales tiene límite y qué interpreta por completitud de R. La parte experimental que hemos llevado a cabo en este estudio muestra que la resolución de los ejercicios correspondientes a las materias y la aprobación de los parciales no alcanza para hacer que los alumnos perciban a la completitud como una condición necesaria para desarrollar el análisis matemático. Entender la completitud como una propiedad o un axioma que responde a un verdadero problema requiere situarse en cierta perspectiva que no es la mas natural, requiere también de una reflexión que no surge espontáneamente de la resolución de los ejercicios, y no parece propia de la posición de estudiante. Para la mayoría de los alumnos el hecho de hacer los problemas y ejercicios típicos de supremo no tiene por consecuencia la comprensión de que R se distingue por ser el conjunto que contiene todos los supremos de sus subconjuntos superiormente acotados. Pocos alumnos pueden percibir que las sucesiones de Cauchy provienen de la necesidad de caracterizar el tipo de sucesiones que es preciso que converja para poder desarrollar el análisis y que la completitud del conjunto tiene que ver con que el límite pertenezca al conjunto. Poquísimos encuentran sentido en la construcción de R por cortaduras de Dedekind o por sucesiones de Cauchy, y en general cuando lo encuentran, es para considerar el rol de modelo del sistema axiomático que describe a los reales. Las construcciones quedan entonces, un poco desprovistas de sentido. Uno de los objetivos de la parte experimental era identificar el rapport personal de los alumnos a la completitud en términos del Panorama Cognitivo. - El eje de Disponibilidad Técnica es el que queda menos indagado en esta tesis, por no haber incluido explícitamente en las entrevistas preguntas con resoluciones concretas, salvo el pedido a cuatro de los cinco entrevistados de Cálculo Avanzado de demostrar el teorema de Bolzano. Del estado de esos alumnos sobre este eje se puede decir que la noción de completitud no está muy presente para los alumnos a la hora de hacer esa demostración. - Con respecto al eje Instrumentalidad / Objetivación, en particular, en relación al carácter de objeto, hemos encontrado tres tipos de respuestas: respuestas dadas en términos de imágenes o representaciones, respuestas en términos de propiedades que R verifica aunque no caracterizan verdaderamente al conjunto ni son equivalentes a la completitud, respuestas en las que se caracteriza a R y a la completitud correctamente. Alumnos de las tres materias responden en términos de imágenes y en términos de propiedades que no caracterizan la completitud, en el caso de las últimas dos materias también hay respuestas en términos de ciertas propiedades que si la caracterizan: el axioma de supremo en el caso de los alumnos de Complementos y la existencia de limite de sucesiones de Cauchy en el caso de algunos alumnos de Cálculo Avanzado. La concentración de las respuestas en términos de estas últimas dos caracterizaciones es coherente con el análisis praxeológico. Queda un poco débil el carácter de objeto de la completitud por parte de los alumnos de Cálculo Avanzado, de quienes puede esperarse que tengan disponible una mayor cantidad de caracterizaciones. Parece particularmente interesante el caso de un alumno de Cálculo Avanzado, quien nos resulta un buen exponente del hecho que hacer los ejercicios de las prácticas y aprobar los parciales no necesariamente requiere ni implica que se haga una reflexión sobre lo que se está haciendo. Este alumno ha trabajado mucho con el axioma de supremo, con la propiedad de encaje, con sucesiones de Cauchy, solo por el hecho de haber hecho las prácticas de Complementos de Análisis II y de Cálculo Avanzado, pero eso no alcanza para que pueda identificar las completitud de R, ni siquiera puede decir qué es R. Con respecto al carácter de instrumento, no se ve una tendencia al avanzar con las materias en cuanto a la identificación de la completitud como herramienta necesaria en la demostración del teorema de Bolzano. También en este caso queda un poco débil el carácter de instrumento de la completitud por parte de los alumnos de Cálculo Avanzado. Nos parece pertinente relacionar esta “debilidad” con la manera en la que se expresan los alumnos en varios tramos de las entrevistas: las caracterizaciones en términos de imágenes o la idea de “completo es que no tiene huecos” para referirse a la completitud así como también la idea de “acercarse”, son un reflejo débil y no operacional de definiciones matemáticas que no favorece el trabajo matemático, aun si en parte este lenguaje pudo haber sido inducido por la situación no muy formal de entrevista. - Las posiciones sobre el eje de Necesidad fueron indagadas solamente a alumnos de Cálculo Avanzado. Las distintas caracterizaciones de la completitud no son vistas por todos los alumnos como una condición necesaria para definir a R, en algún caso no se las vincula con R, en otros casos son vistas como una condición que R verifica, en otros casos son vistas como una parte constitutiva de la definición de R. - El acceso al eje Validación/Fundamentación estuvo dado fundamentalmente dado por las respuestas a la pregunta que esencialmente indagó sobre los motivos por los cuales demostrar el teorema de Bolzano y los posibles usos de la demostración. Los alumnos de las tres materias manifestaron que en algún momento de su formación vieron como obvio este teorema, y la pregunta nos permite conocer en qué medida y cómo fueron ellos saliendo de esa situación. La heterogeneidad de las respuestas hace dificil estructurar este eje en términos de distintos niveles por materia. Esencialmente hemos encontrado tres tipos de respuestas en relación a este eje: demostrar “porque es lo que se debe hacer” (privilegiando el aspecto normativo), demostrar para convencer o convencerse separándose de la representación, demostrar para comprender la matemática en juego. Podemos suponer que el orden de estos tipos de respuesta es un orden que muestra una evolución en la racionalidad, y sería esperable que el paso por las materias siguiera esa tendencia. No es ese el resultado que obtuvimos. La mayoría de las respuestas de las tres materias están repartidas en los dos primeros tipos. Muy pocas respuestas (una por cada materia) dan razones que nos hacen ubicarlos en “demostrar para comprender mejor”. Hay varios alumnos, aun avanzados que no saben por qué es necesario demostrar el teorema de Bolzano. - No hubo suficientes respuestas que nos permitan establecer estados para el eje Flexibilidad, pero sí es interesante un pasaje de entrevista en el que se muestra que la declaración por parte de uno de los entrevistados de dos formas de expresar la completitud de R (vía el axioma de supremo y via la convergencia de sucesiones de Cauchy) no basta para que él suponga que esas dos formas son condiciones matemáticamente equivalentes. - Como tema de estudio, las construcciones de R fueron parte de los contenidos de la materia Cálculo Avanzado. Para los alumnos las construcciones cumplen roles diferentes, que reflejan distintas posiciones de la comunidad de docentes y matemáticos: en un caso parecen quedar al margen de lo que hay que saber para aprobar los trabajos prácticos de la materia, en otros se toma a las construcciones como un modelo para el sistema axiomático que define a R, en otros se recupera el sentido de construir un conjunto que sea completo. En este último caso es más fácil separarse de una visión natural y preconstruida de R y comprender el papel del axioma de completitud, que en la versión que sea dada, habilita esencialmente a definir números bajo ciertas condiciones. Otro de los objetivos de la parte experimental era analizar si subsisten las contradicciones detectadas por otros investigadores y caracterizar el conjunto que los alumnos creen utilizar. El análisis de las respuestas en entrevistas muestra claramente que muchos alumnos, casi la mitad de los entrevistados de las tres materias, asocian la noción de continuo y de completitud con la de densidad. En el caso de alumnos más avanzados ante una repregunta recuperan la respuesta, en el caso de alumnos principiantes una repregunta puede servir para poner en evidencia la confusión pero no necesariamente alcanza para remediar la situación. Hay otros casos un poco más aislados, a modo de ejemplos, para uno de los alumnos de Cálculo Avanzado alcanza con los números algebraicos para desarrollar el análisis, otro alumno duda acerca de si la completitud podría ser equivalente a densidad más no numerabilidad... estas ideas que tienen los alumnos conviven con muchas otras buenas ideas. La experimentación presentada en el Capitulo VI permite afirmar en primer lugar, que la gran mayoría de alumnos de Análisis I y una proporción importante de alumnos de Complementos de Análisis II parecen no identificar la completitud en el enunciado “toda sucesión creciente y acotada converge”, más bien parecen percibirlo como un enunciado evidente. Esto puede estar ligado al hecho de que los alumnos pueden usar teoremas fuertes derivados de la completitud, y en consecuencia no la enfrentan de modo personal. Del análisis de las dos preguntas, se puede afirmar que la mayoría de los alumnos de Complementos de Análisis II expresan la completitud de un modo que no resulta operatorio: o mediante el uso cotidiano de la palabra completo, o mediante imágenes. Este resultado muestra un desfasaje con las praxeologías a las que los alumnos se enfrentan. Será interesante pensar que tipo de ejercicios y problemas pueden generar la necesidad de adquirir otras caracterizaciones que sí sean operatorias y cómo favorecer la capacidad de reflexión y síntesis sobre lo hecho. Entre los alumnos de Cálculo Avanzado, la existencia de límite de sucesiones de Cauchy, es la caracterización de la completitud que aparece con más frecuencia, respuesta que interpretamos ocurre debido a que los alumnos han trabajado con la completitud de espacios métricos generales y pueden entonces reconocer esa característica de R. Esta tesis es un lugar en donde se ha estudiado didácticamente algo mas amplio que el aprendizaje de R y su completitud: R es un contexto, un lugar en donde estudiar un tipo de racionalidad matemática y su evolución. Cuando se habla de racionalidad, se piensa en abarcar el grado de reflexión y profundización de un sujeto sobre la matemática como disciplina, sus motores de producción, sus elementos de validación y sus modos de comunicación. Se ha elegido especialmente este contenido (la completitud de R) porque está implicado en muchas instancias que hacen a la formación de un matemático y de un profesor de matemática. Y más allá de el estudio de R, sus propiedades reflejan principios más generales que atraviesan toda la matemática: la construcción de objetos por la aproximación de otros de tipo particular, la completación de espacios métricos, la individualización de un elemento mediante un encaje, la realización de extremos, etc. El tipo de análisis y estudio llevado a cabo en esta tesis no es estadístico, es un estudio cualitativo que muestra las sutilezas de los fenómenos ligados a la enseñanza y el aprendizaje. Los alumnos entrevistados son pocos en número pero en sus respuestas se ve que aunque aprueban parciales exigentes, y lo hacen con buenas notas, dudan a la hora de saber por qué demostrar, confunden en un primer momento las nociones de densidad y completitud, sostienen que con los de “aproximarse”, es decir de plantear la distancia entre dos objetos menor que algún valor positivo. números algebraicos alcanza para desarrollar el análisis, utilizan expresiones para referirse a los objetos que no les favorece avanzar en lo operacional, no reconocen el sentido de la equivalencia de dos enunciados, aunque la hayan demostrado... Esto no debe interpretarse como una crítica al sistema, sino como un estudio que muestra la complejidad de ese sistema, poniendo de relevancia la existencia de varios estadios en la adquisición de las nociones, y varios tipos de equilibrios cognitivos conviviendo en el mismo sujeto mientras aprende.

Abstract:
In this thesis, framed within the field of Didactics of Mathematics, the evolution in the conceptualization of the real numbers set is studied in a group of students at a university level. The university courses of Licentiate and Professor in Mathematics of the University of Buenos Aires were taken as reference. What do we mean by “study of evolution”....? Students establish a first contact with real numbers early along their scholastic path. At the beginning, they come accross real numbers in the solutions to geometrical problems, as square roots, polinomial roots, by studying their decimal development, etc. Though further on, when studies in mathematical analysis start, when the real numbers set turn into the natural domain of the functions, what knowledge do students have regarding the properties of this domain? Which are the properties students recognize in this set on which analysis learning lies? It was interesting to focus this study within a property of real numbers set essential to carry out analysis work: completeness. The thesis has six Chapters. The first one is a historic-epistemological study about the emergence of the real numbers set. Several researchers about Didactics of Mathematics have pointed out the relevance of epistemological analysis in the didactic analysis, its potentiality and scope (Artigue, 1990, 1992, 1995); they have analysed the relationship among epistemology, mathematics and education (Sierpinska & Lerman, 1996); they have studied certain specific contributions to the knowledge of history of educational practice (Bkouche, 1997) and have warned about the naive use of history of mathematics in teaching (Radford, 1997). The analysis performed allowed a delineation of a reconstruction of the historical genesis about the notion of real numbers set linking problems and questions of specific historical periods with the state of knowledge and available tools in those times, and to the different generated conceptualizations. The leading questions to this chapter are: in which way the correspondence between numbers and points in a line was performed along different historical periods (and more generally, how the relationship between numbers and magnitudes has evolved); how the work of mathematicians in analysis was before the notion of completeness of the real numbers set was stated; which conditions made necessary the formalization of this notion; which were the different answers given to this problem and how present formulations are reached. In order to contribute with answers, different moments particularly significant in the history of mathematics have been examined, such as the Euclidian period, the intermediate Arab period and the Mediaeval European one, the development of calculus at the beginning of the XIXͭͪ century and the arithmetization of the analysis, the end of the same century that sees different constructions of a numerical system, and finally the R axiomatization in Hilbert’s works. In the conclusions to this chapter, the role that the axiomatic method has played in mathematics as well as in the teaching of mathematics are broached; a reflection is made regarding the evolution of the statute of the same mathematical affirmation, the relationship between mathematical model-modelled object that may represent a fulcrum as well as an obstacle are analysed as well as the evolution of the arguments that are considered sufficient to validate the mathematical work. In this chapter we have attempted to show the complexity of relationships arisen along history between the notions of continuity and completeness, and the main engines of its evolution, and also, to establish arguments that case the understading of the feasible existence of different types of cognitive balances and conceptualization levels regarding these notions, avoiding to fall in a naive view of the relationships between ontogenesis and phylogenesis. Also, this study shows that the beginning of calculus and its development along three centuries were carried out being supported by a numerical domain which properties had not been made explicit. The explanation of these properties assumed to pass through a rupture and reconstruction of the notion. The rupture occurred in the history of mathematics as a consequence of a change in rationality from which the basis of the mathematical work as empirical was recognized and the wish to overcome this situation thus arose. Then, the problem was to find how to express the property of completeness. Dedekind found a way to do so by trying to obtain for numbers something analogous to the continuity of the line. To achieve this he had to specify — necessarily as an axiom- what was the meaning of this continuity. At his turn, Cantor as well other mathematicians of the time, stated completeness by means of the convergence of fundamental sequences, likewise stating a correspondence between numbers and the points of the line and recognizing the axiomatic character of this correspondence. This was the sense that the construction of a complete numerical domain had for the mathematicians of the XIXͭͪ century. Along this thesis the sense that it has, at present, for students as well as for the institutional organization is analyzed. The second chapter updates the didactic researchs performed by other researchers related to the subject, and the position of our own problematics. The works of reference about the real numbers set didactically deal with matters related to the existence of irrational numbers, their ilimited and nonperiodic development, their one-by-one representation along the numerical line, their appearance in root calculation, logarithms, trigonometric calculus, etc. These matters are linked to the fact that the rational numbers are not sufficient to give answers to the different problems that arise early still in scholastic learning and, the existence of other numbers is therefore required. Another level of problematization becomes relevant when studying R properties regarded as the natural domain of mathematical analysis. These are displayed when one is outside the strictly numerical field and works with functions, sequences, etc., and the interest lies on demonstrating the affirmations and characterizing certain attributes that R has as a set. Certainly, completeness is not a property that a number but a set of numbers have. Analyzed works behold the first and not the second level, which, on the other hand, is specific of teaching at a higher level. Beyond the different theoretical and methodological frames taken as a reference in the works, it is possible to gather at least two points of consensus between them. The first one is that the students at different scholastic level coexist with contradictory conceptions regarding density, meaning of infinite development, existence of numbers that verify certain conditions, irrationality, non-decimality. Some researches have shown that the same notions work well in certain answers and not in others. The second one is that the representation of numbers on a line does not necessarily contribute to solve these difficulties: many times this object adds its own difficulties, and research has shown that students conceptualize the numerical line in different ways, therefore the reference to its attributes and properties is not a safe support, and in some cases, it completely modifies the problematics into play. In a certain way, the analysed works represent a map of didactical knowledge about this matter previous to this thesis. They were taken into account as starting point to proceed to the characterization of those elements that make evolve students’ conceptualizations about the above mentioned second level of R’s properties. The third chapter consists on the analysis of the mathematical and cognitive characteristics linked to R completeness. In it, the different mathematical input and development means of this notion are deepened, giving place to what has been named the Mathematical Panorama; and the involved cognitive characteristics are divided and restructured in six variable axes to model different conceptualization states of this notion. Globally, these axes together with their initial state have been named as Cognitive Panorama. These axes are not exclusive of this concept, they can be applied to other mathematical concepts, though they were delineated as the result of the work performed about completeness, mainly from the epistemological analysis. The Cognitive Panorama has six axes with a common origin, as an initial state or starting point where completeness is seen as evident, with a strong support in the graphic or mental representation. At this level, completeness is not identified as a mathematical object. The six axes that allow different states are briefly described herein after. Technical Availability: this axis includes different degrees of technical domain about mathematical elements, e.g., different values on this axis are: the domain of demonstration of simple theorems where completeness is in play, several handling characterizations of the supremum, handling of different ways to characterize completeness and knowledge of its equivalence, handling of objects associated to it such as sequences, Cauchy sequences, nested intervals, Dedekind’s cuts, etc., completeness of more general spaces. Instrumentality/Objectivation: this axis estimates the perception of completeness as a tool that allows to define numbers under certain conditions as well as its recognition as a part of the objects of the analysis. Necessity: it refers to the understanding a subject has, regarding the need to include the completeness axiom. In a more general way, somebody that perceives that it is necessary to add an axiom to develop a theory is somebody who has carried out a reflection about the reorganization of mathematícal knowledge. Validation/Fundamentation: it estimates the level of conscience of a subject regarding the need to validate in mathematics, of what is accepted as valid in his community, of how what is considered as valid is being modified, of how this depends upon the institution it carries it out. Flexibility: this axis estimates the capacity of a subject to use one or other completeness characterization in accordance with the task to be developed. Position in front of constructions: this axis estimates the understanding of the subject regarding IR meaning whether it is constructed from Q, and about the model role that those constructions attain in relation with axiomatic construction. The Cognitive Panorama was used as an analysis tool when writing the last three Chapters. The fourth chapter is an Institutional Analysis that basically consists in the praxeological analysis (Chevallard, 1998) of four subjects and their relationship with the Cognitive Panorama. To perform this, the folowing questions were taken into account: What type of appearances do completeness make in the tasks —technical ones? How does it appear? How is it used? Which techniques are used to solve tasks? How much technology and theory do those techniques require? Do these techniques consist on the isolated application of a theorem or properties? If so, is the use of properties “called” from the formulation of the task or does it remain implicit? Up to what extent is it necessary the demonstration process of properties or theorems in order to display the technique? Up to what extent only their enunciation? With regard to the gender of tasks and their formulation it has been taken into account if they favor the performance of knowledge at a more technical level (“find”, “solve”, “calculate”, isolated items), at a mobilizable level (“demonstrate using that result", several sequenced items) or as an available level (“study”, “analyse”, “demonstrate”, etc.). In the analysis, the moments when the techniques used become insufficient as well as the points of balance, continuities, ruptures and false continuitites have been attemped to be identified. Regarding the degree of problematization of that which seems evident or observable, tasks involving a demonstration work of properties or results that are “observable”, “evident”, were taken into account as well as up to what extent is there a problematization. The role of used representations was analyzed. An interpretation of to which part of the Mathematical Panorama every subject aims was performed, and the extent up to which the tasks contribute to make evolve the axis of the Cognitive Panorama was analyzed. The praxeological study shows that the type of tasks performed by the students in the first subject of the mathematical analysis at the university in relation to completeness lies on representations and the information they provide as well as on the use of strong theorems which principles are not a concern for them. Students at this level work as if the properties verify naturally, their fundamentation is an external problem. Then, completeness remains in a pre-construction state, its explicit explanation is neither required nor used in problems and practices. The praxeological analysis in relationship with the other analyzed subjects shows that there is a breach in the didactic contract that arises when passing to Analysis l of Exact Sciences, where representations are not longer a support for arguments though the type of tasks regarding completeness is essentially the same as in the previous subject. The students do not understand the reasons of this change to the extent that no new tasks are required regarding this subject, they assume that they have to demonstrate more due to their teachers’ demands instead of being something interesting for them from the mathematical point of view. In the subject Complements of Analysis II there are exercises where the supremum and the infimum appear as object (equivalence among different definitions, arithmetic of supremums and infrmums), and a more instrumental role when defining distances. In Advanced Calculus there is an excercise in which the equivalence among different characterizations of R completeness must be demonstrated, and there are classical exercises of complete metric spaces that can be performed without doing a reflection. From the analysis carried out we have two axes, Necessity, Flexibility and Position before constructions that are left vacant from the offer of the institution, if so, they are set aside for the student’s private work. Chapters fifth and sixth involve the experimental pan of this thesis. The fifth chapter bears the a priori and a posteriori analyses of several clinical interviews carried out with students from Analysis l, Complements to Analysis II and Advanced Calculus, with the purpose of identifying their personnal rapport regarding completeness (Chevallard, 1992) in terms of the Cognitive Panorama and to verify this with the results from the Institutional Analysis. The questions that guided the interviews had as objective to approach the following matters: up to what extent students think it is necessary to demonstrate Bolzano’s Theorem, and up to what extent they consider completeness as a necessary tool to test it; what do the students think about completeness; with which problems, theorems, practice do they relate it and how this view evolves along their progress per subject; how to interpret the fact that there are different ways to introduce completeness and if they have them available; how is the study of construction by Dedekind’s cuts or by Cauchy’s sequences understood and how do they relate them with their preceding konwledge about R. The sixth chapter surveys the answers given on writing by the majority of the students from Analysis l, Complements of Analysis II and Advanced Calculus to the following two questions: How would you explain to a younger student the fact that an increasing and limited sequence of real numbers has a limit? What do you interpret by IR completeness? The experimental part that we have carried out in this study shows that solving the corresponding excercises and the approval of midterm examinations are not sufficient enough to make the students become aware of completeness as a necessary condition to develop mathematical analysis. Understanding completeness as a property or axiom that answers to a genuine problem demands the student to place himself in a certain perspective that is not the most natural one, it also requires a reflection that does not arise spontaneously from solving excercises and it does not seem to belong to the student’s position. For the majority of the students the fact of solving typical problems and excercises of the supremum does not mean the understanding that R outstands for being the set that contains all the supremums of its sub-sets superiorly limited. Few students can perceive that Cauchy’s sequences come from the need for characterizing the type of sequences that is necessary to make converge in order to develop the analysis and that the completeness of the set means that the limit belongs to the set. A small number of students find sense in R construction by means of Dedekind’s cuts or Cauchy’s sequences, and, in general, when they find a meaning is to consider the role of model of the axiomatic system that describes real numbers. Therefore, constructions remain partially devoided of meaning. One of the objectives of the experimental part was to identify the student’s personal rapport regarding completeness in terms of the Cognitive Panorama. - The axis of Technical Availability is the least ascertained one, since questions with precise resolutions were not explicitly included in the interviews, except for the request to four of the five interviewed students of Advanced Calculus to demonstrate Bolzano’s theorem. From the student’s state regarding this axís we can say that completeness notion is not present for them at the time of performing a demonstration. - Regarding the Instrumentality/Objectivation axis, mainly, in relation with the object character, we have found three types of answers: answers given in terms of images or representations; answers given in terms of properties verified by R though they neither characterize truthfully the set nor they are equivalent to completeness, and answers where R and completeness are correctly characterized. Students from the three subjects answer in terms of images and properties that do not characterize completeness; in the case of the last two subjects there are also answers in terms of certain properties that do characterize it: the supremum axiom in the case of students of Complements and limit existence in Cauchy’s sequences in the case of some of the students of Advanced Calculus. The concentration of answers in terms of these two last characterizations is coherent with the praxeological analysis. The object character of completeness is a little weak in the students of Advanced Calculus, of whom we can expect to have a greater amount of available characterizations. It seems particularly interesting the case of a student from Advanced Calculus who is a good example of the fact that doing practice excercises and passing midterm examinations necessarily does neither require nor implies that a reflection is performed about what he is doing. This student worked really hard on the supremum axiom, with the nested intervals property, with Cauchy’s sequences, only from the fact of having carried out the practices of Complements of Analysis II and Advanced Calculus, though this is not enough for him to identify R completeness, and he could not even say what R is. Conceming the instrument character, a tendency to progress in the subjects with regard to completeness identification as a necessary tool in the Bolzano’s theorem is not observed. Likewise, in this case, the instrument character of completeness in students from Advanced Calculus is also a little weak. We find relevant to relate this “weakness” to the way in which students express themselves in several sections of the interviews: characterizations in terms of images or ideas such as “complete means that it has no voids” when referring to completeness, as well as the idea of “approaching”, replicate weakly and not operationally mathematical definitions that do not favor mathematical work, still if in part this language could have been induced by the non-formal situation of the interview. - The position about the Necessity axis were checked up only in students from Advanced Calculus. The different characterizations of completeness are not viewed by all students as a necessary condition to define R, in some cases they are not linked to R, in other cases they are seen as a condition verified by R, and still in others are considered as a constituent part of IR definition. - The way towards the Validation/Fundamentation axis was attained basically from the answers to the question that essentially investigated the reasons by which demonstrate Bolzano’s theorem and the feasible uses of that demonstration. Students from the three subjects expressed that at some point of their university training they considered obvious this theorem, and the question allows us to know up to what extent and how were they coming out of this situation. The heterogeneity of the answers turns difficult the structurization of this axis in terms of different levels per subject. Essentially we have found three types of answers with reference to this axis: demonstrate “why is it what should be done” (by privileging the normative characteristic), demonstrate to convice others or convince yourself by detaching from the representation, demonstrate to understand the mathematics in play. We can assume that the order of these types of answers is an order that shows an evolution of rationality, and it could be expected that the pass along the subjects followed this tendency. This was not the result obtained. The majority of the answers from the three subjects are distributed in the two first types. Very few answers (one per each subject) state the grounds to locate them within “demonstrate for a better understanding”. There are several students, still the advanced ones, that do not know why it is necessary to demonstrate Bolzano’s theorem. - There were not enough answers that allowed us to establish states for the Flexibility axis though it is interesting a passage of interview where a declaration by one of the interviewed students is depicted, two ways of expressing R completeness (by means of the supremum axiom and by means of the convergence of Cauchy’s sequences) are not suffice for him to assume that they are mathematically equivalent conditions. - As study subject the R constructions were a part of the contents of Advanced Calculus. For the students, construction plays different roles reflecting different positions in the community of teachers and mathematicians: in one case they seem to stay out from what is the required knowledge to pass work assignments of the subject; in other cases, constructions are taken as a model for the axiomatic system defining R; and still in others, the sense of constructing a complete set is recovered. In the latter is much easier to separate from a natural and preconstructed view of R and understand the role of the completeness axiom, that in the given version allows essentially to define numbers under certain conditions. Another objective from the experimental part was to analyse if the contradictions detected by other researchers remain and characterize the set the students believe they are using. The analysis from the answers in the interviews clearly shows that many students, almost half of the interviewed ones from the three subjects, associate this notion of continuum and completeness with density. In the case of more advanced students, by a new question, they recover the answer; in the case of beginners a new question may work to put in evidence the confusion though not necessarily remedies the situation. There are other more isolated cases, for example, for one of the students of Advanced Calculus algebraic numbers are enough to develop the analysis; other students doubt about if completeness could be equivalent to density plus not numerability these ideas from the students coexist with many other good ideas. The experimentation set out in Chapter VI allows to assert, in the first place, that the great majority of students from Analysis I and an important proportion of students from Complements to Analysis II seem not to identify completeness in the enunciation “every increasing and limited sequence converges”; it seems though they recognize it as an evident enunciation. This can be linked to the fact that the students may use strong theorems derived from completeness, and in consequence, they do not face it in a personal way. From the analysis of the two question we can assert that the majority of the students from Complements of Analysis II express completeness in a way that it is not operative: or by means of the daily use of the word complete, or by means of images. This result shows a nonsynchronicity with the praxeologies faced by the students. It will be interesting to think what type of excercises and problems may generate the need to acquire other characterizations that will be operative and how to favor the reflection and synthesis capacity about what has been done. Among the students from Advanced Calculus, the limit existence in Cauchy’s sequences is the completeness characterization that appears more frequently; we interpret that this answer arises due to the fact that the students have worked with completeness in general metric spaces and can recognize this R characteristic. In this thesis we have didactically studied something larger than the learning of R and its completeness: R is a context, a place where to study a type of mathematical rationality and its evolution. When speaking about rationality it is thought to encompass the degree of reflection and deepness of a subject regarding mathematics as a discipline, his production engines, his validation elements and his ways of communication. This content has been specially chosen -R completeness since it is included in many instances along a mathematician’s and a mathematics professor’s training. And further than the study of IR, its properties reflect more general principles that go through all mathematics: the construction of objects by approximation of other objects of a particular type; the completition of metrical spaces, the individualization of an element by means of a nested sequence of closed sets, the attainment of extremes, etc. The type of analysis and study carried out in this thesis is not an statistical one, it is a qualitative study showing the subtleties of phenomena linked to teaching and learning. Interviewed students are few in number though by their answers we can see that notwithstanding they pass demanding midterm examinations while achieving good grades, they hesitate at the time of demonstration wondering why should they do so; they are confused, at a first instance, about the notions of density and completeness; they affirm that with algebraic numbers is enough to develop the analysis; they use expressions to refer to objects that do not favor a progress in their Operational process; they do not recognize the sense of equivalence of two enunciations, despite the fact they had demonstrated them. This should not be understood as a criticism to the system but as a study that shows the complexin of this system, highlighting that there are several stages in the acquisition of notions, and several types of cognitive balances coexisting in the same subject while learning takes place.

Berini, Carolina Andrea. "Virus linfotrópico T-humano tipo 1 y 2 (HTLV-1/2): optimización del diagnóstico y epidemiología molecular en distintas poblaciones de Argentina" (2010). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo principal de esta tesis es ampliar los conocimientos sobre el diagnóstico, la prevalencia y la epidemiología molecular del HTLV-1/2 y brindar datos que permitan un diagnóstico más eficiente en Argentina. Con tal fin, se analizaron equipos de tamizaje frecuentemente utilizados en nuestro país, y se demostró la importancia de confirmar los resultados seroindeterminados por WB mediante una técnica molecular para obtener un diagnóstico final. En cuanto a la prevalencia de HTLV-1/2 en las distintas poblaciones estudiadas, hemos demostrado que ambos virus se encuentran circulando con prevalencias altas en poblaciones de riesgo y bajas en las de no riesgo en la mayor parte del país, manteniendo la característica epidemiológica de su restricción étnico/geográfica ya demostrada. Es por ello, que debemos considerar también el riesgo de infección en aquellos casos que presenten antecedentes de riesgo como, por ejemplo, haber nacido, ser descendientes o haber sido pareja sexual de individuos provenientes de áreas endémicas. Mediante estudios filogenéticos se demostró que todas las cepas estudiadas del HTLV-1, resultaron subtipo a subgrupo A, mientras que para el HTLV-2 el subtipo b fue el mayoritario ambos en poblaciones no originarias sugiriendo que estos subtipos han sido introducidos en nuestra población caucásica a partir de la interacción con comunidades originarias.

Abstract:
The main objectives of this thesis work were to widen the knowledge about the molecular epidemiology of HTLV-1/2 infection in Argentina and to collaborate with the implementation of an optimal algorithm for its diagnosis. Therefore, different commercial kits frequently used in blood banks along South America were analyzed, showing their efficiency and demonstrating that the further molecular confirmation of seroindeterminate results by WB is an important tool for obtaining a final diagnosis and the real serostatus of this infection. Regarding the prevalence of HTLV-1/2 in the different study populations, we demonstrated that both circulating viruses have high prevalence in at-risk populations and low prevalence in non at-risk populations in most of the country, maintaining the epidemiologic characteristics according to the ethnic/geographic restriction areas already demonstrated. In relation to HTLV- 1/2 infection risk, this data should be considered especially in the cases that have risk antecedents such as being born, being descendent or being a sexual partner of an individual coming from endemic areas. As for HTLV-1 phylogeny, all the circulating strains belong to subtype a subgroup A while for HTLV-2 the major subtype in non-aboriginal populations was b suggesting that these subtypes (HTLV-1aA and HTLV-2b) have been introduced to the general population due to closer interactions with aboriginal communities.

Berinzaghi, Blanca G.. "Estudio de las fagarinas" (1942). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Berlín, Guido. "Efectos cuánticos en la interacción entre átomos con radiación en cavidades" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La idea central de la presente tesis es poner de manifesto efectos cuánticos que aparecen en la interacción entre átomos de pocos niveles con radiación electromagnética y entre modos de radiación entre sí considerando la radiación cuantificada. Se trataron diferentes sistemas de interés en el ámbito de la elcctrodinámica cuántica de cavidades, utilizando técnicas como la de hallar los operadores relevantes en el marco de la teoría de álgebras dinámicas y también utilizando ecuación maestra para la evolución del operador densidad. Se estudió el problema de un átomo de dos niveles interactuando con dos modos de radiación en presencia de un medio no lineal. Para este sistema se encontró que la presencia del medio no lineal inhibe los efectos típicos de estos sistemas como ser los colapsos y resurrecciones de la inversión de población, y también el antiagrupamiento. También se estudió un hamiltoniano de Jaynes-Cummings generalizado que no toma en cuenta la aproximación de onda rotante y además en presencia de un campo externo. Se pudo encontrar un conjunto de operadores adecuado para estudiar este sistema que permite evaluar la evolución temporal del valor medio de cualquier cantidad de relevancia. En la presente tesis se hace una propuesta para poder utilizar un divisor dc haz como discriminador de entrelazamiento entre dos modos del campo electromagnético; además en algunos casos podemos identificar diferentes elementos de la base de Bell. También en este trabajo se hace un estudio de factibilidad de una propuesta para generar en forma condicional estados de Fock en una cavidad. Para ello se relajan aproximaciones y se tienen en cuenta las pérdidas dentro de la cavidad, encontrándose que el esquema es robusto antes condiciones reales, siendo entonces promisoria su realización experimental.

Abstract:
The main idea of this thesis is to expose quantum effects that appear on the interaction between few level atoms and electromagnetic radiation, and between radiation modes, considering that the electromagnetic field is quantized. Different problems of interest on the field of Cavity Quantum Electrodynamics were studied, using techniques such us finding the relevant operators in the scenario of dynamical algebras theory, and also the density matrix approach. We studied the problem of a two level atom interacting with two modes of radiation in the presence of a non-linear medium. We found that, for this particular system, the nonlinear medium inhibits the decay of the population of the excited level, and the antibunching effect on the radiation field. We also studied a generalized Jaynes-Cummings hamiltonian that does not take into account the Rotating Wave Approximation, and also in the presence of an external driving field. We found a set of relevant operators suitable for studying this problem, that allows us to solve the temporal evolution of the mean value of the mean value of any quantity of interest. In this thesis, a proposal is made for using a beam-splitter as a state and entanglement detector between two modes of the electromagnetic field. We also found that in some cases we can discriminate between different elements of the Bell basis. We also tackle the problem of the factibility of a proposal for conditionally generating Fock states of the radiation in a cavity. We modified a previously proposed model, account for cavity losses, take into account levels that were adiabatiacally eliminated, and concluded that the proposal is robust under experimental conditions.

Berman, Ana Laura. "Análisis de la variabilidad climática en la Patagonia Argentina" (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta Tesis se analizan diversos aspectos de la variabilidad climática en la Patagonia Argentina. Se investiga la homogeneidad espacial de temperatura y precipitación y los mecanismos físicos capaces de modular su variabilidad. También se estudian las posibles conexiones entre la temperatura y precipitación de Patagonia con la de otras áreas del sur de Sudamérica. La temperatura registrada en diferentes áreas de Patagonia tiene importante covariabilidad en oscilaciones menores a 4 años pero se detectan claros desacoples en oscilaciones más largas. La estructura de circulación atmosférica que conduce a un aumento (disminución) de la temperatura en Patagonia es también capaz de producir enfriamiento (calentamiento) en áreas subtropicales de Sudamérica originando una estructura dipolar de temperatura con centros opuestos en Patagonia y sur de Brasil. La precipitación sobre áreas del sur de Patagonia está estrechamente conectada con el dipolo de precipitación característico de latitudes subtropicales en Sudamérica debido a que la estructura de circulación atmosférica que origina el dipolo subtropical también afecta la precipitación en el sur del continente. Los mecanismos físicos involucrados en las conexiones subpolar-subtropical de precipitación y temperatura podrían explicar la ocurrencia de condiciones hidroclimáticas opuestas en ambas regiones de Sudamérica detectadas durante los últimos 10 mil años.

Abstract:
This Thesis discusses different aspects of the climatic variability in the Patagonia Argentina. The spatial homogeneity of temperature and precipitation and the physical mechanisms able to modulate its variability are analyzed as well as the possible connections between temperature and precipitation of Patagonia with other areas of southern South America. The temperature in different areas of Patagonia has strong covariability in oscillations shorter than 4 years but important disconnections are clearly detected in longer oscillations. The structure of atmospheric circulation associated to an increment (diminution) of temperature in Patagonia is also able to produce cooling (heating) in subtropical areas of South America generating a dipolar structure of temperature with centers over Patagonia and southern Brazil. The precipitation over areas of southern Patagonia is closely connected with the typical dipole of precipitation of subtropical latitudes in South America due to the structure of atmospheric circulation that produce the subtropical dipole also affects the precipitation over the southernmost continent. The physical mechanisms involved in the subpolar-subtropical connections of precipitation and temperature could explain the occurrence of contrasting hydroclimatic conditions in both regions of South America detected during the last 10.000 years.

Bermudez Moretti, Mariana. "Transporte de ácido delta-aminolevulínico en Saccharomyces cerevisiae" (1994). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La estructura tetrapirrólica de las porfirinas es la base química de una serie de compuestos imprescindibles para la vida, involucrados en los procesos fundamentales de respiración y fotosíntesis, a través del hemo y la clorofila, respectivamente. Los tetrapirroles también participan en otras reacciones metabólicas importantes como transportadores de electrones, energía y gases, oxidaciones biológicas, fijación de nitrógeno, etc. La secuencia de eventos enzimáticos que conducen a la biosíntesis de estos compuestos está hoy día, muy bien documentada y se ha comprobado que es prácticamente idéntica en todas las células vivientes. Sin embargo, aún queda bastante por esclarecer acerca del mecanismode acción de las enzimas involucradas, y es aún poco lo que se sabe en cuanto a los procesos de entrada de los precursores de esta vía, ácido 8-aminolevulínico (ALA) y porfobilinógeno (PBG), a la célula. El transporte de un metabolito a través de la membrana plasmática puede ser un paso limitante en su metabolización intracelular. El ALA, primer compuesto específico de la via del hemo, se forma en la mitocondria y para su posterior metabolización a PBG en el citosol debe atravesar la membranade esta organela. Durante muchos años se ha hablado de la existencia de una permeasa de ALA, sin embargo, como se ha señalado es amy limitada la información sobre este aspecto tan importante en la síntesis de porfirinas. Existen cepas de Saccharomyces cerevisiae deficientes en la actividad de ALA-Sintetasa que son capaces de crecer utilizando el ALA provisto por el medio de cultivo. Teniendo en cuenta esta capacidad, además del hecho de que la levadura es un importante modelo experimental de organismo eucariótico, se decidió estudiar el transporte de ALA en S. cerevisiae. Los resultados de esta investigación contribuirán sin lugar a dudas a un mejor y más profundo conocimiento de la via metabólica de las porfirinas y de su regulación. El objetivo fundamental de este trabajo fue caracterizar exhaustivamente el sistema de transporte de ALA en S. cerevisiae, asi como identificarlo, determinar su especificidad y sus mecanismos de regulación. Debemostener presente que en las porfirias agudas, por fallas en la regulación del caminode las porfirinas, se acumula ALA en las células, incluyendo las del sistema nervioso, al cual se le atribuye el conocido sindrome neurológico que caracteriza a estas enfermedades. La caracterización y conocimiento del sistema de transporte de ALA a través de membrana no sólo es de gran interés por estas causas sino que podrá contribuir al control y posiblemente al desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas. Sobre estas bases, para lograr los propósitos de este trabajo, empleando cepas silvestres y mutantes de S. cerevisiae se han de determinar en primer lugar las condiciones de crecimiento que permitan el óptimo estudio del sistema de transporte de ALA. Para su caracterización, se han de establecer sus requerimientos en cuanto a las fuentes de carbono y de nitrógeno, las condiciones para que una vez transportado ocurra un minimode metabolización, asi como eflujo e intercambio con ALA extracelular. Es importante establecer la dependencia energética del proceso y su especificidad, además de la influencia de la concentración de protones sobre este sistema. La cinética del proceso ha de indicar tanto la afinidad como el número de sistemas de transporte posibles. Es asimismo fundamental, tratándose como probablemente sea, de un transportador activo, definir su control por el mismo ALA. Por otra parte, como se conoce y se ha indicado que el ALA puede interferir con la acción del GABA, dada su similitud estructural, se ha de estudiar en particular la acción del GABA sobre el sistema de transporte de ALA. Se ha de caracterizar además el sistema de transporte de GABA en S. cerevisiae, en forma similar al del ALA en cuanto a requerimientos, especificidad, regulación por GABA y ALA y cinética. Finalmente se han de relacionar los sistemas de transporte de ALA y GABA y se intentará hallar evidencias de que podría existir una permeasa común.

Bernabó, Guillermo. "Caracterización de genes nuevos involucrados en neurodegeneración en Drosophila melanogaster" (2014-12-22). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo de esta tesis es identificar nuevos genes involucrados en neurodegeneración en Drosophila melanogaster y comprender su función y el mecanismo por el cual provoca dicha patología. En particular, se hizo foco en orsai. Encontramos que adultos envejecidos con la expresión de orsai reducida en las neuronas que controlan el comportamiento rítmico locomotor presentaban una caída en la ritmicidad y un alargamiento del período. La reducción de ORSAI en el cerebro adulto envejecido provoca que estos presenten signos de neurodegeneración más severos que sus controles. También se encontró que la reducción de los niveles de este gen en larvas provoca arresto en el segundo estadio y la consiguiente letalidad temprana. Estas larvas tienen un comportamiento anómalo frente a la comida, alejándose de la misma y reptando en un modo de clásico forrajeo, a pesar de tener alimento disponible, hasta su muerte. Encontramos que acotando la reducción de ORSAI a las tráqueas fenocopia al mutante. También determinamos que la respiración mitocondrial está severamente reducida en el mutante. La alteración de los niveles de ORSAI en distintos tejidos, tanto larvales como adultos, provoca diversos fenotipos, lo que demuestra la importancia de este gen para la homeostasis celular. El fenotipo en las tráqueas podría, a través de procesos hipóxicos, explicar el comportamiento de forrajeo en larvas y, sumando a esto la disfunción mitocondrial, los fenotipos observados en adultos.

Abstract:
The goal of this thesis was to identify new genes involved in neurodegeneration in Drosophila melanogaster and to understand their function and the mechanisms triggered upon their deregulation. In particular, we focused on orsai. We found that aged adult flies with reduced orsai expression in neurons that control rhythmic locomotor behavior showed declined rhythmicity and a lengthened period. Reduced ORSAI levels in aged adult brains correlate with signs of neurodegeneration more severe than controls. We also found that reduced orsai levels cause second instar developmental arrest and the ensuing early mortality. These larvae display an anomalous feeding behavior; they crawl away from the food source as if were foraging, and, despite food availability, they do so until their death. We found that limiting ORSAI depletion to the tracheal system phenocopies the mutant behavior. We also determined that mitochondrial respiration is severely reduced in the mutant. Importantly, reducing ORSAI levels in different tissues, both larval as well as adult, triggers diverse phenotypes, highlighting its relevance in cellular homeostasis. The tracheal phenotype could, through hypoxic processes, account for the abnormal larval foraging behavior and, taking into account the mitochondrial dysfunction, the observed adult phenotypes.

Bernaola, Víctor J.. "Contribución al estudio de los feldespatos y arcillas : algunos datos sobre materiales arcillosos y silíceos de la República Argentina" (1911). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Berretta, Marcelo Facundo. "Dos nuevos genes de Beauveria bassiana : Una quitonasa y una proteína de transporte que podrían estar relacionados con la patogenicidad" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La búsqueda de genes relacionados con la patogenicidad de Beauveria bassiana, se llevó a cabo siguiendo la estrategia de estudiar la expresión de una cepa virulenta del hongo, cultivada in vitro, en condiciones nutricionales similares a las que este patógeno se encuentra sometido durante la penetración del hospedante. Para ello se utilizó como única fuente orgánica de crecimiento, una preparación de la cutícula del insecto Diatraea saccharalis, el sustrato natural cuya degradación es requerida para el establecimiento de la infección. Se aplicó la técnica de Differential display para la detección de genes que se expresaran en forma diferencial bajo esta condición. Por comparación entre los productos de amplificación de ADNc, obtenidos por RT-PCR del ARN extraído del hongo cultivado con cutícula, o sin ella, se detectaron fragmentos únicamente presentes en el primer caso. Los patrones de bandas se obtuvieron utilizando un primer oligo-dT, en combinación con decámeros de secuencia arbitraria. Se desarrolló una metodologia que consistió en la marcación de los productos de PCR con grupos fluorescentes, y su análisis en un sistema de secuenciación automática. Los fragmentos amplificados diferencialmente fueron utilizados como sondas, para estudiar el nivel de expresión de los transcriptos correspondientes, por la técnica de northern. Paralelamente, se determinó el número de copias de los genes respectivos, en el genoma de B. bassiana, mediante la técnica de southern. Se construyó una genoteca de ADN genómico de B. bassiana en un vector de sustitución derivado del fago λ. El screening de la misma con una sonda de expresión diferencial, permitió identificar un gen que codifica para una proteína deducida de 495 aminoácidos. La secuencia de la misma, presentó homología con una familia de proteínas de transporte a través de membrana, de especificidades diversas. Adyacente a dicho gen, en posición aguas arriba de la secuencia genómica, se identificó otro gen de copia única y de expresión concertada con el anterior, que codifica para la enzima quitosanasa. Con la secuencia del ADNc se comprobó la existencia de dos intrones en la estructura primaria del gen. La proteína deducida, de 232 aminoácidos, presenta 74% de identidad de secuencia con la misma enzima de otro hongo entomopatógeno, Metarhizium anisopliae. Otras tres secuencias fúngicas completan el grupo de quitosanasas eucariotas conocidas, separado de las enzimas de origen bacteriano, por análisis de agrupamiento en base a similitud de secuencia. Se propone la participación de esta enzima en la degradación de la cutícula de los insectos, por parte de los hongos entomopatógenos.

Abstract:
A virulent strain of the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana was cultured in vitro under nutritional conditions resembling those encountered by the pathogen during penetration of the host. This strategy was followed to study the expression of fungal genes related to pathogenicity. The fungus was grown with the cuticle of the insect Diatraea saccharalis as the sole source of carbon and nitrogen. The degradation of this substrate is needed for the infection to be accomplished. The Differential display technique was used to detect genes that were differentially expressed under this culture condition. The cDNA amplification products obtained by RT-PCR of the mRNA extracted from the fungus cultured with, or without cuticle, were compared. By this means, fragments only present in the former condition, were detected. The banding patterns were obtained by using an oligo-dT primer in combination with 10-mer primers of arbitrary sequence. Original protocols were developed to perform the analysis on an automated DNA sequencer, through the incorporation of fluorescent labels in the PCR products. The differentially amplified fragments were used as probes to study the expression level of the corresponding genes by northern. The southern technique was used to estimate the copy number of the genes within the genome. A λ derived cloning vector was employeed in the construction of a genomic library of the fungus. The screening of this library with a differential probe allowed for the detection of a gene encoding a protein of 495 amino acids. The deduced sequence of this protein shows similarity to members of a family of membrane transporters with diverse specificities. Another gene is located immediately upstream. This one was also found to be overexpressed in culture on cuticle. It encodes the enzyme chitosanase. The cDNA sequence evidenced the existence of two introns in the primary structure of the gen. The deduced protein has 232 amino acids, and it shows 74% identity with the same enzyme of the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae. The other three chitosanase genes from eukaryotic origin, which are known to date, belong to fungi. They cluster together and remain separate from the bacteria] proteins, when their sequences are compared. The enzyme produced by entomopathogenic fungal species is a good candidate to participate in the degradation of the insect cuticle

Berri, Guillermo Jorge. "Estudio del comportamiento termohidrodinámico de la capa límite atmosférica sobre el Río de la Plata y sus inmediaciones, mediante un modelo de simulación numérica" (1987). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se presenta un modelo de simulación numérica, en tres dimensiones y no estacionario en mesoescala, de la capa límite atmosférica. Se aplica el modelo al estudio de la circulación de brisa sobre el Río de la Plata y su zona de influencia. Se trata de un modelo en ecuaciones primitivas y no lineal que consta de ambas ecuaciones horizontales de movimiento, la ecuación hidrostática, la ecuación de continuidad para un fluído incompresible, la ecuacidn termodinámica y la ecuación de estado de los gases ideales. El dominio horizontal del modelo es aproximadamente de 200 x 200 km y el vertical de 2 km. Con el objeto de tomar en cuenta especialmente la influencia que la irregularidad de la costa ejerce sobre la capa límite, se propuso la aplicación de un método de transforrnación de las coordenadas horizontales como solución al difícil problema que plantea en el modelado numérico tal condición de frontera superior. La transforrnación introduce una de las coordenadas horizontales paralela a las costas uruguaya y argentina mientras que la otra coordenada horizorital es localmente casi perpendicular a la anterior y la coordenada vertical ,sigue un espaciamiento de tipo logarítmico-lineal. Esta transformación permite obtener mayor resolución sobre las costas donde la separación entre puntos es aproximadamente 5 a 10 km, mientras que en las zonas más alejadas, donde se precisa menor resolución, la separación entre puntos es aproximadamente de 20 a 30 km. Similar ventaja se obtiene en la vertical. El sistema de ecuaciones ahora transformado se resuelve por diferencias finitas en el nuevo recinto regular. Para la integración del modelo se utiliza un método explícito y condicionalmente estable, de tipo adelantado en el tiempo, corriente arriba en el espacio para los términos advectivos y centrado en el espacio para los difusivos. Para verificar las soluciones que brinda el modelo se realizan experiencias de comparación con los modelos de McPherson y Pielke quienes simulan la brisa sobre costas que presentan cierta similitud con la del Rio de La Plata. Los resultados de ambas comparaciones son muy buenos y en particular aquella realizada con el modelo de Pielke arroja ademas coincidencias numéricas en los valores de la velocidad vertical. La falta de datos apropiados para una comprobación de los resultados del estudio de brisa sobre el Río de la Plata obliga a la adopción de la simulación numérica como alternativa para verificar la bondad del método utilizado. Para realizar tal simulación se introduce como forzante en superficie una perturbación en la temperatura que es función del tiempo y del espacio. Con el objeto de tomar en cuenta la parte mas definida de un ciclo de brisa, se extendió la simulación durante 14 horas a partir de un instante definido como 2 horas despues de la salida del sol. Tal instante representa, aproximadamente, el momento de mayor homogeneidad horizontal, en todo el dominio de la temperatura en superficie . El método de la transformación de coordenadas además de mostrar condiciones de estabilidad, reproduce las caracteristicas más notables de la brisa como cabría esperar en el Río de la Plata . Entre los resultados obtenidos con el modelo cabe destacar una respuesta correcta del rnismo al forzante introducido en la ternperatura de superficie; la rotacion del viento inducida por la perturbación de la presión es correcta; los campos de convergencia y divergencia horizontal y su movimiento vertical asociado son consistentes con los resultados anteriores; el efecto de la advección horizontal y vertical sobre los ejes verticales de máxima convergencia y divergencia y el movirniento vertical asociado coincide con lo hallado por otros autores; se establece una zona preferencial de convergencia horizontal y movimientos de ascenso sobre la parte oeste de la costa uruguaya y su inmediata adyacencia continental; sobre el resto del dominio predomina la divergencia y los movimientos de descenso; sobre toda la costa uruguaya el viento rota rapidarnente hacia el este y este- sudeste y permanece así durante el resto del día y , por último, sobre la costa de la provincia de Buenos Aires el viento es, sin mayores cambios, del sector noreste y este-noreste durante todo el día.

Bertello, Laura Elena. "Inositolfoslípidos libres y como anclas de glicoproteínas en Trypanosoma cruzi : estructura y biosíntesis" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En este trabajo se presenta un análisis detallado de los inositolfosfolípidos (IPLs) de células epimastigotes de T. cruzi y de la variación de lípidos libres durante el proceso de diferenciación celular de trypomastigotes a amastigotes y a epimastigotes. Los IPLs están formados por dos componentes que se caracterizaron como fosfatidilinositol (PI) e inositolfosfoceramida (IPC). El PI está constituido por diacilglicerol y 1-0-alquil-2-acilglicerol y la IPC por N-palmitoildihidroesfingosina, N-palmitoilesfingosina, N-estearoildihidroesfingosina y N-estearoilesfingosina. Testigos de alquilacilgliceroles, no disponibles comercialmente, fueron sintetizados por dos métodos, uno enzimático y otro químico. Durante la diferenciación de trypomastigotes a amastigotes hay un aumento de la ceramida libre, principalmente palmitoildihidroesfingosina, que coincide con la liberación progresiva de la glicoproteína Ssp-4, antígeno de superficie específico de células amastigotes, que se encuentra anclado por GPI. La porción lipídica del ancla de esta glicoproteína se identificó como la palmitoildihidroesfingosina; lo que abre la posibilidad de que la ceramida juegue algún rol en la diferenciación celular. Se determinó la presencia en membranas de T. cruzi de fosfolipasas A1, A2, C y de aciltransferasas. También se estudió el primer paso de la biosíntesis de las anclas GPI, es decir, la incorporación de GlcNH2 a partir de UDP-GlcNAc y se descartó a la IPC como aceptora de GlcNH2 para la formación de anclas con ceramida. Este resultado indicaría que las fosfolipasas identificadas estarían involucradas en procesos de remodelación de los lípidos de los GIPLs que son utilizados para la construcción de anclas GPI. Este trabajo contribuye al conocimiento de las estructuras y del camino biosíntético de los GPI de T. cruzi que anclan, a la membrana, glicoproteínas involucradas en procesos de diferenciación, reconocimiento y penetración celular. La inhibición del anclaje de estas glicoproteínas a la membrana constituye una alternativa atractiva como quimioterapia contra la enfermedad de Chagas.

Abstract:
A detailed analysis of inositolphospholipids (IPLs) from epimastigote cells of T. cruzi, and the regulated expression of free lipids during the cellular differentiation process from trypomastigotes to amastigotes and epimastiogtes is presented. The IPLs are formed by two components that were characterized as phosphatidylinositol (PI) and inositolphosphoceramide (IPC). The PI has a diacylglycerol and an l-O-alkyl-2-acylglycerol, and the IPC is constituted by N-palmitoyldihydrosphingosine, Npalmitoylsphingosine, N-stearoyldihydrosphingosine and N-stearoylsphingosine as the lipid moiety. The alkylacylglycerols needed as standards were synthesized by two different chemical and enzymatic methods. During the differentiation of trypomastigotes to amastigotes, there is an increase of free ceramides, mainly palmitoyldihydrosphingosine. This is coincident with the progressive shedding of the Ssp-4 glycoprotein, a surface antigen specific of amastigote cells, that is anchored through GPI. The lipid moiety of this glycoprotein anchor was identified as palmitoyldihydrosphingosine, which suggests that ceramide plays a role in cellular differentiation. The presence of phospholipases Al, A2,C and acyltransferases in T. cruzi membranes was ascertained. The two latter activities were also proved on IPC. The incorporation of GlcNH2 from UDP--GlcNAc, the first step of the GPI anchor biosynthesis, was also studied. The possibility of IPC acting as acceptor of GlcNH2 to form anchors with ceramides was disproved suggesting that the identified phospholipases may be involved in the process of remodelling GIPLs used in the formation of GPI anchors. This thesis contributes to the knowledge of structures and biosynthetic pathways of T. cruzi GPIs that anchor membrane glycoproteins involved in cellular differentiation, recognition and penetration processes. Inhibition of the anchoring to membranes, is an atractive alternative in Chagas disease chemoterapy.

Bertinetti, Brenda Verónica. "Búsqueda de agroquímicos naturales con potencial uso en agricultura sustentable a partir de cultivos de hongos" (2012-05-11). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis se detalla el aislamiento y la elucidación estructural de productos naturales a partir de cultivos de hongos, realizado mediante una búsqueda bioguiada utilizando ensayos de actividad antifúngica y antibiótica. También se describe la preparación y el estudio de la actividad en invernadero frente a hongos patógenos de soja, de una familia de compuestos derivados de un producto natural proveniente de un cultivo fúngico. Además, se presenta el estudio del comportamiento de esa familia de compuestos por espectrometría de masa, y el análisis de la presencia de determinados metabolitos de extractos fúngicos por HPLC-EM. Se trabajó con las especies fúngicas Penicillium canescens, Gliocladium catenulatum y Fusarium oxysporum. La especie Penicillium canescens se aisló de polen de colmenas ubicadas en el apiario del INTA (Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria) de la ciudad de Balcarce, Buenos Aires, Argentina. Las especies Gliocladium catenulatum y Fusarium oxysporum se aislaron de suelo de plantaciones de lechuga en Las Heras (Provincia de Buenos Aires). A partir de P. canescens se aislaron decetopiperazinas, pseurotina A y un tetrapéptido que no había sido descripto con anterioridad. Algunas de las dicetopiperazinas fueron responsables de la actividad antibiótica y el péptido fue responsable de la actividad antifúngica frente a Fusarium virguliforme. De G. catenulatum se aisló un nuevo metabolito 1H, 1ˈH-biindol junto con dos epipolitiodioxopiperazinas que habían sido aisladas previamente de una cepa marina de Gliocladium. Además, el compuesto 1H, 1ˈH-biindol se preparó mediante un camino sintético y mostró una actividad notable como antiparasitario frente a T. cruzi. De los compuestos indólicos sintéticos ensayados en experimentos de actividad en invernadero se obtuvieron muy buenos resultados con dos análogos que disminuyen la incidencia y la severidad del síndrome de muerte súbita en soja, comparado con un control. En los extractos de F. oxysporum se determinó la presencia de diversas ciclosporinas, además de tres depsipéptidos cíclicos, dos conocidos y uno no informado con anterioridad.

Abstract:
This PhD thesis details the isolation and structural characterization of natural products from fungi. The isolation was performed looking for antifungal and antibiotic compounds by bioguided assays. The preparation of a group of compounds related to a natural one isolated from a fungal strain and their activity against soybean fungi pathogens in greenhouse experiments are also described. In addition many compounds from the mentioned family were studied by high resolution mass spectrometry, and chemical diversity from fungal extracts was analyzed by HPLC-MS. The strains studied are Penicillium canescens, Gliocladium catenulatum and Fusarium oxysporum. Penicillium canescens strain was isolated from beehives pollen from INTA apiary in Balcarce, Buenos Aires, Argentina. Gliocladium catenulatum and Fusarium oxysporum strains were acquired from lettuce fields soil in Las Heras, Buenos Aires. Diketopiperazines, pseurotin A and a tetrapeptide were isolated from P. canescens. The tetrapeptide was unknown until now. Some diketopiperazines found were responsible for the antibiotic activity showed by the extract and the tetrapeptide showed antifungal activity against Fusarium virguliforme. G. catenulatum culture yielded a new metabolite 1H, 1ˈH-biindole and two epipolitiodioxopiperazines that have been isolated before from a marine strain of Gliocladium. Compound 1H, 1ˈH-biindole was prepared synthetically and showed interesting activity as antiparasitic against T. cruzi. Good results were obtained from greenhouse experiments with two indolic synthetic analogues which diminish incidence and severity of sudden death syndrome in soybean compared to a control compound. Several cyclosporines were found in F. oxysporum extracts apart from three cyclic depsipeptides, two already known and a new one.

Bertinetti, Cristina M.. "Aspectos bioquímicos y moleculares de la interacción sclerotinia sclerotiorum-Daucus Carota" (1996). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las plantas están expuestas a microorganismos en todos los estadios de su ciclo de vida. Si bien cada especie vegetal solo es susceptible a un número reducido de ellos, en condiciones fisiológicas adecuadas, las infecciones pueden ejercer sobre los sistemas graves daños y pérdidas desvastadoras de las cosechas. Para prevenir y controlar las infecciones, las plantas han desarrollado mecanismos de resistencia basados en la capacidad para mantener o crear un ambiente desfavorable para el crecimiento y la acción de microorganismos fitopatógenos. Los mecanismos básicos de la resistencia involucran la existencia de barreras físicas y químicas preformadas que impiden el ingreso del agente infeccioso al interior del huésped, así como también mecanismos que implican respuestas inducibles, que llevan a la inhibición de la invasión y a la eliminación de los patógenos dentro de la planta. Los eventos que llevan ala inducción de las respuestas de defensa incluyen la percepción de una señal por parte de la planta, la transducción intracelular de la señal recibida y la síntesis de moléculas de defensa, como fitoalexinas, quitinasas, glucanasas, proteínas relacionadas a la patogénesis y moléculas que intervienen en la modificación estructural de las paredes celulares (Chasan, 1994; Mahé et al, 1993; Scheel et al, 1991). Los compuestos provenientes de las paredes de los microorganismos que tienen la propiedad de inducir alguna de estas respuestas en las plantas reciben el nombre de elicitor (Dixon et al., 1994). El aislamiento y la caracterización de esta clase de moléculas y la búsqueda sistemática de genes que se induzcan o repriman en respuesta a ellas, permitirá en el futuro comprender los mecanismos moleculares que gobiernan la compleja interacción entre las plantas y los microorganismos. Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary es el agente causal de diversas enfermedades en plantas de interés agronómico. Hasta el presente no se dispone de tratamientos químicos efectivos que las prevengan, así como tampoco se han encontrado variedades que sean totalmente resistentes a la infección entre las numerosas especies vegetales que forman parte del rango de huéspedes de este hongo extremadamente virulento. Con respecto a los mecanismos de defensa de los distintos huéspedes frente a S. sclerotiorum, es muy escasa la información disponible (Sutton y Deverall, 1984; Bazzalo et al, 1985; Mouly et al., 1992). La mayor parte de los estudios llevados a cabo en relación a la interacción entre S. sclerotiorum y plantas susceptibles se han orientado al análisis de los mecanismos de virulencia del hongo. Se ha propuesto que las numerosas enzimas hidrolíticas que produce tendrían un rol importante en el proceso de invasión de los tejidos vegetales y que la toxina que libera —ácido oxálico- se acumularía en el follaje, siendo la responsable de la marchitez foliar (Hancock, 1966; Hancock 1967; Bauer, 1977; Noyes y Hancock, 1980; Marciano et al, 1982; Riou et al, 1991; Favaron et al, 1992). En el presente trabajo se emplearon cultivos en suspensión de zanahoria como modelo experimental para analizar los mecanismos moleculares de la interacción entre las plantas y S. sclerotiorum. Cuando los cultivos fueron incubados con extractos de pared fúngica se observó la inducción de la síntesis de compuestos fenólicos y cambios en el patrón de proteínas solubles, indicando que el extracto de pared inducía importantes alteraciones en el metabolismo de las células de zanahoria. La inducción de la actividad de la fenilalanil amonio-liasa (PAL), considerada como marcador de respuestas de defensa de las plantas frente a los microorganismos fitopatógenos, fue utilizada como test biológico para seguir el aislamiento de fracciones de pared de S. sclerotiorum con actividad elicitor para las células de zanahoria. Para la obtención de moléculas presentes en la superficie de la pared fúngica se utilizó un método originalmente empleado para aislar antígenos de superficie de levaduras (Raschke y Ballou, 1972). Este extracto de pared fue fraccionado en base a su tamaño (Bio-Gel A 0.5 M) y su afinidad por una columna de intercambio aniónico (DEAE-Sephadex) y por una columna de Concanavalina A-Sepharosa. Como resultado de estos pasos de purificación se obtuvieron dos elicitors, un glucano y un manano, encontrándose cantidades equivalentes de ambos en la preparación de pared fúngica. Por otra parte, con el propósito de identificar genes de zanahoria cuya expresión se induce en respuesta al elicitor fúngico se utilizó el método de «differential display» (Liang y Pardee, 1992). El análisis de la expresión diferencial de genes entre cultivos inducidos con el elicitor y cultivos controles no inducidos condujo al aislamiento y clonado de tres fragmentos que representarían probables mRNAs cuya síntesis es inducida por el elicitor de S. sclerotiorum. A partir de uno de los fragmentos se obtuvo la secuencia completa del cDNA. La proteína deducida mostró una identidad de casi el 100% con una glicoproteína denominada EP4a, aislada a partir de sobrenadantes de cultivos de zanahoria por Van Engelen y colaboradores (1995) y un 55% de identidad con el producto deducido del gen ENOD 8 de alfalfa (Dickstein et al, 1993). Otro de los fragmentos clonados (pCB 19) mostró un 73% de identidad y un 82% de homología con el fragmento carboxi terminal de la β-D-glucanoexohidrolasa de Hordeum vulgare (Hrmova et al, 1996). Dado el grado de identidad encontrado, es altamente probable que el fragmento contenido en el pCB 19 corresponda a una β-glucanasa de zanahoria. Considerando además que las células de zanahoria mostraron degradar activamente los polisacáridos presentes en el extracto de pared de S. sclerotiorum, así como también a un β-glucano de características similares al glucano descripto por Jones en 1970 como componente de la pared de S. sclerotiorum, se podría especular que, a semejanza de lo descripto en otros sistemas, las células de zanahoria degradarían estos polisacáridos de gran tamaño a moléculas mas pequeñas, quienes serían en última instancia reconocidas por las células, desencadenando la cascada de eventos relacionados a la defensa ante las infecciones.

Bertolesi, Gabriel Esteban. "Acción de la heparina y glicosaminoglicanos relacionados en el desarrollo tumoral" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se estudió el efecto de los mastocitos (MC), la heparina y heparinas sin actividad anticoagulante sobre el desarrollo tumoral. Empleando el fluorocromo tris (2,2’-bipiridina) rutenio (II), que se une a los grupos sulfatos de la heparina, se realizó la identificación citoquímica de MC de cavidad peritoneal y se cuantificó comparativamente el contenido de heparina de los gránulos de MC de ratones portadores de tumor (MCP) y de ratones normales (MCN) mediante análisis de imagen. Los MCN que poseen el doble de heparina que los MCP inhibieron la proliferación in vitro y la incidencia tumoral in vivo de un adenocarcinoma mamario murino de moderada capacidad metastásica en pulmón (M3). Observamos que las células M3 poseen receptores para heparina de alta afinidad, a los que pueden también unirse una heparina parcialmente N-desulfatada N-Acetilada (N-des N-Ac). Ambas heparinas inhibieron la proliferación de las células tumorales in vitro e incrementaron la adhesión celular mientras que otras heparinas modificadas (parcialmente O-desulfatada (Odes), N-desulfatada (N-des), O/N-desulfatada N-Acetilada (O/N-des N-Ac)) no se unen a los receptores y no tuvieron efecto sobre la proliferación y la adhesión. Estos resultados muestran que la unión de la heparina a los receptores se correlaciona con el efecto antiproliferativo y el aumento de la adhesión celular. Solamente la heparina inhibió la formación de metástasis experimentales en pulmón, siendo el efecto revertido por un inhibidor selectivo del activador de plasminógeno de tipo uroquinasa (uPA) (el compuesto B623). Para determinar el mecanismo por el cual la heparina posee efecto antimetastásico se estudió: a) el efecto fibrinolítico de las heparinas mediado por uPA; b) la actividad procoagulante de ratones portadores de tumor y el efecto de las heparinas en la coagulación y c) la producción de actividad heparinasa por parte de las células tumorales M3 y la susceptibilidad de las heparinas a ser degradadas por esta enzima. El análisis global de los resultados sugiere que el efecto antimetastásico se asocia a la actividad anticoagulante.

Abstract:
We have investigated the effect of mast cells (MC), heparin and chemically modified heparins, without anticoagulant activity, on tumoral development. We describe the use of tris (2,2’-bipyridine) ruthenium (II) (Rubipy) fluorochrome, which binds to N and O-sulfate grups of heparin, for MC cytochemical identification. Peritoneal cavity MC from normal mice (NMC) showed two-fold increase of heparin content than tumor-bearing mice (TMC), as measured by image analysis. NMC inhibited in vitro M3 cell proliferation (murine mammary adenocarcinoma with moderate metastatic lung capacity) and in vivo tumoral incidence, while TMC had not effect. Specific M3 cell-membrane heparin-receptors were described. Heparin and partially N-desulfated N-acetylated heparin (N-des N-Ac) had the capability of binding to heparin receptor, inhibited cell proliferation and increased cell adhesion. Chemically modified heparins without heparin-receptor interaction capacity, lacked the antiproliferative and adhesive cell effect. These results suggest that heparin-receptor interaction mediated the antiproliferative effect and the increase of cell adhesion. Heparin decreased M3 cells experimental lung metastasis. This effect was reverted by a selective inhibitor (B623) of the plasminogen activator type-urokinase (uPA). In order to know the mechanism by which heparin inhibit M3 metastasis formation, we studied a) heparins fibrinolytic activity mediated by uPA, b) procoagulant activity of M3 cells and tumor-bearing mice, as well as the heparins effect on coagulation, and c) the presence of heparinase activity produced by M3 cells and heparins susceptibility to this enzyme activity. The analysis of result suggests that antimetastatic effect was related to the anticoagulant activity.

Bertoli, Carlos Ignacio. "Exploración de la arquitectura genética para la respuesta al frío y al etanol en el modelo Drosophila: líneas de selección y mapeo de QTL" (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las respuestas de los organismos a los distintos factores de estrés han sido objeto de estudio desde hace varias décadas. El interés que despertó esta área de conocimiento ha llevado a tomar diferentes enfoques para abordar un tema sumamente complejo como es la respuesta de un organismo a un factor de estrés. Tanto aspectos fisiológicos, como moleculares y genéticos entre otros aspectos, han sido considerados en estudios recientes para develar como es que los organismos responden a la presencia de un estresor. En esta tesis colaboramos, desde la genética cuantitativa, en la búsqueda de la base genética que permita entender más acabadamente que factores intervienen en la recuperación de un individuo cuando se lo expone al frío, así como cuales son los factores que permiten la recuperación y la tolerancia cuando son expuestos a altas concentraciones de etanol. También se buscan posibles correlaciones genéticas entre la recuperación al frío y otros caracteres de historia de vida así como de resistencia a distintas formas de estrés. Hemos hecho uso de un organismo experimental ampliamente utilizado en el área de la genética, Drosophila melanogaster. Asimismo, algunos experimentos también fueron desarrollados en otra especie del mismo género Drosophila, Drosophila buzzatii, que es una especie cactófila. En primer lugar, desarrollamos, mediante selección artificial, líneas para alta y baja velocidad de recuperación al coma por enfriamiento, ambas en Drosophila buzzatii. Una vez constatada la heredabilidad del caracter y la diferenciación significativa entre los fenotipos de ambas líneas evaluamos la posible correlación de este régimen selectivo con distintos caracteres adaptativos, como ser el tiempo de desarrollo, resistencia al golpe de calor, tamaño corporal, resistencia a la inanición, resistencia a los vapores de etanol. También desarrollamos un programa que permite mejorar la eficiencia y precisión de la medición. En segundo lugar, realizamos, mediante la utilización de líneas RIL (líneas recombinantes endocriadas) de Drosophila melanogaster pertenecientes al laboratorio GERES, un mapeo genético para localizar la posible existencia de QTL (loci de caracter cuantitativo) vinculados con las diferencias fenotípicas para la recuperación al frío presentes en las líneas RIL antes mencionadas. En tercer lugar, utilizando estas mismas líneas de Drosophila melanogaster se 4 mapearon tres caracteres vinculados a la respuesta a la exposición al etanol (recuperación y tolerancia en adultos y supervivencia en larvas). Por último, se comparan los resultados obtenidos en los mapeos para la recuperación al frío con los obtenidos en la respuesta al etanol. Si bien se pudo constatar que en Drosophila buzzatii la heredabilidad de la recuperación al coma por enfriamiento es significativa en un régimen selectivo de múltiples generaciones, no se pudo establecer correlaciones genéticas entre este régimen y otros caracteres medidos (tamaño corporal, tiempo de desarrollo, resistencia al calor o resistencia a la inanición). El único caracter que mostró una correlación con el régimen selectivo fue la tolerancia a la exposición al etanol. El mapeo de QTL para la recuperación al frío permitió identificar 3 QTL para los cuales fue posible detectar algunos genes candidatos. Algunos de estos QTL solapan con QTL identificados por otros autores para el mismo caracter de resistencia al frío así como también para otros caracteres de resistencia al calor. Para el caso del mapeo de QTL para la exposición al etanol se encontraron 13 QTL, muchos de estos específicos según el caracter analizado. La superposición de los QTL correspondientes a la respuesta al etanol con los QTL encontrados para la recuperación al frío fue casi nula, así como la superposición entre los mismos caracteres vinculados a la respuesta al etanol. En conjunto, los resultados indican que la arquitectura genética es diferente entre la resistencia al frío y los caracteres mapeados de tolerancia al etanol en el modelo Drosophila. Debido a esto es que podemos decir que la correlación detectada en Drosophila buzzatii parece ser dependiente de la población, lo que nos lleva a plantear que los vínculos entre la respuesta al frío y la respuesta al etanol son débiles y dependientes de la población en estudio.

Abstract:
The responses of organisms to diferent stress factors have been studied for several decades. The interest in this topic has been illustrated from different approaches to address a very complex issue, which is the response of an organism to a stressor. Both physiological and molecular mechanisms, as well as the genetic variation among other issues, have been considered in recent studies to reveal how the organisms respond to the presence of a stressor. In this thesis a quantitative genetic approach is followed to search for the genetic basis of stress resistance to test for factors that are potentially involved in the recovery of an individual when it is exposed to cold stress, and what is the genetic basis for recovery and stress tolerance when exposed to high concentrations of ethanol. This work also test for possible correlations between chill- coma recovery and other adaptive characters, including some life history traits as well as other traits of stress resistance. We made use of an experimental organism widely used in the area of genetics, Drosophila melanogaster. Likewise, another species of the same genus Drosophila is used in other experiments, the cactophilic species Drosophila buzzatii. Firstly, artificial selection was applied to select for both increased and reduced times of chill-coma recovery in Drosophila buzzatii. After constructing divergent lines for chill-coma recovery by artificial selection in D. buzzatii, the possible genetic correlations were tested between this trait and other adaptive traits such as development time, resistance to heat stroke, body size, starvation resistance, resistance to ethanol vapors. I also developed a program that improves the efficiency and precision of measurement. Second, recombinant inbred lines (RIL) of Drosophila melanogaster were used to identify QTL (quantitative trait loci) for chill-coma recovery. Third, the same RIL were used to also map traits of tolerance to ethanol in adults and larvae. Finally, the results are compared between traits of cold and ethanol tolerance. After applying artificial selection for chill-coma recovery in Drosophila buzzatii, replicated lines obtained were divergent for this trait indicating the the trait is heritable. These divergent lines were used to test for any possible genetic correlations between chill-coma recovery and other adaptive traits such as body size, development 6 time, heat-stress resistance and starvation resistance. In these experiments with D. buzzatii, the only character that showed a correlation with selective regime for chill- coma recovery was tolerance to ethanol. QTL mapping for the chill-coma recovery allowed to reveal the presence of 3 QTL where some candidate genes are allocated. Some QTL for chill-coma recover overlapped with QTL with QTL regions detected in previous studies with other mapping populations for both chill-coma recovery and heat-stress resistance. In the case of the QTL mapping for ethanol resistance traits, a total of 13 QTL were identified. There was no consistent overlapping between QTL for chill-coma recovery and QTL for ethanol tolerace. Overall, the results indicate that the genetic architecture of the mapped traits is different between chill-coma recovery and ethanol resistance in the Drosophila model. Because of this we can say is that the correlation detected in Drosophila buzzatii seems to be dependent on the population, which leads us to propose that the ties between the response to cold and response to ethanol are weak and dependent on the study population.

Bertoni, María Helena. "Semi - micro determinación volumétrica de Mg como oxinato" (1945). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bertora, Pedro Antonio. "Determinación analítica de los productos resultantes de la cloración del fenol para obtener 2-4 diclorofenol" (1961). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bertrand de Nevrezé, Andrés Pablo. "Determinación de la composición de un aceite esencial de Mentha piperita cultivada en la Provincia de Mendoza" (1950). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bertucci, Paola Yanina. "Efectos del receptor de progesterona sobre la elongación transcripcional del gen bcl-x humano" (2012-08-06). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los Receptores de Esteroides (SRs) regulan la expresión génica mediante su interacción con Elementos de Respueta a Hormona (HREs) ubicados en las regiones promotoras de sus genes blanco. Según el modelo clásico de activación transcripcional, los SRs reclutan complejos que relajan el estado de la cromatina favoreciendo, así, los pasos tempranos de la transcripción. Sin embargo, a partir del uso de la técnica de inmunoprecipitacion de cromatina seguida de secuenciación masiva (ChIP-seq), se encontró que una gran parte de los sitios de unión de los SRs al ADN se encuentra ubicada en regiones intragénicas. Adicionalmente, algunos de los complejos modificadores de la cromatina asociados a los efectos de los SRs en las regiones promotoras de sus genes blanco, también fueron encontraron favoreciendo la elongación transcripcional a lo largo de las regiones transcribibles. El objetivo de esta tesis es estudiar el posible efecto de los SRs unidos a las regiones intragénicas sobre la elongación de la Pol II en genes endógenos. Para ésto se utilizaron células humanas T47D tratadas con el progestágeno sintético R5020 y al gen bcl-x como modelo de estudio. Los resultados mostraron que el Receptor de Progesterona (PR) se recluta únicamente a sitios intragénicos, conjuntamente con las histonas acetiltransferasas CBP y GCN5 y el factor positivo de elongación P-TEFb. El reclutamiento de estos factores correlaciona con un aumento en la acetilación de las histonas, el desplazamiento parcial de los nucleosomas, un aumento en la abundancia de la Pol II principalmente en el extremo 3´del gen y una mayor procesividad de la Pol II a lo largo del mismo. En su conjunto los resultados presentados en este trabajo sugieren que la modulación de elongación de la Pol II en bcl-x humano supondría un nuevo mecanismo de regulación de la expresión génica mediada por el PR.

Abstract:
Steroid Receptors (SRs) regulate gene expression througth their interaction with the Hormone Response Elements (HREs) located in the promoter regions of their target genes. The classical mechanism of SR transcriptional activation explains that the SRs recruit modifying complexes to these regions, which in turn open the target chromatin thus, favoring the first steps of gene transcription. However, recently developed genome wide technologies, as ChIP-seq, revealed that a main part of SRs binding sites are located in intragenic regions. Additionaly, some chromatin modifying complexes classically found in the promoter regions of the SRs target genes were also found favoring the elongation process. In this sense, it was propossed that changes in the chromatin context in intragenic regions would affect Pol II elongation. The aim of this thesis is to analyze the putative effect of the SRs bound to their intragenic sites on Pol II elongation in hormone-regulated endogenous genes. To tackle this, we used T47D human breast cancer cell line treated with the synthetic progestin R5020 and bcl-x as a gene model. The results showed that, after the progestin addition, the Progesterone Receptor (PR) is recruited together with the acetyltransferases CBP and GCN5 and with the elongation factor PTEFb to different binding sites distributed along the intragenic region of bcl-x gene. The recruitment of these factors correlates with an increase of histone acetylation levels, the pantial decrease in nucleosome occupancy and the improvement of Pol II processivity along this gene. All together, these results suggest a new mechanism which involves the PR control of endogenous Pol II elongation.

Berón de Astrada, Martín. "Caracterización de interneuronas visuales y su relación con el aprendizaje en el cangrejo Chasmagnathus granulatus" (2005). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La formación y mantenimiento de la memoria tienen lugar como resultado de procesos fisiológicos que ocurren en el ámbito de neuronas individuales. Sin embargo, los modelos experimentales para el estudio de la memoria no permiten investigar estos procesos en el animal vivo en momentos en que se encuentra aprendiendo. El propósito de este trabajo fue desarrollar una preparación experimental que permitiese indagar los cambios neurofisiológicos que ocurren en las neuronas de un animal intacto en el momento mismo del aprendizaje. La preparación desarrollada se basa, por un lado, en la capacidad del cangrejo Chasmgnathus para formar diferentes tipos de memorias visuales y retenerlas por largo tiempo, y por otro lado en que la rigidez del caparazón del animal y la fácil accesibilidad a buena parte de su cerebro ofrecen importantes ventajas metodológicas para la realización de registros intracelulares estables en el animal intacto. Al tratarse de un animal intacto, pudimos investigar el funcionamiento de diversos tipos de neuronas cerebrales frente a la presentación de estímulos casi naturales y biológicamente relevantes. Además, la estabilidad de los registros intracelulares nos permitió teñir las neuronas y estudiar su ubicación y morfología. Efectuamos una caracterización funcional de las neuronas de los primeros neuropilos visuales, realizada en base a la respuesta frente a un pulso de luz, que incluye tanto elementos con respuestas pasivas (depolarizantes e hiperpolarizantes) como neuronas que disparan potenciales de acción. Elementos que a su vez pueden presentar respuestas tónicas o fásicas. Una caracterización morfológica de estos tipos celulares incluye tanto interneuronas locales como de proyección. La comparación de estos resultados con los de otros estudios en insectos y crustáceos apoya la hipótesis de que en los artrópodos los elementos que conforman los primeros neuropilos del sistema visual estarían evolutivamente conservados. El paradigma de memoria visual ampliamente caracterizado en Chasmagnathus implica una modificación duradera de la respuesta de escape del animal frente a un estimulo visual de peligro (EVP) consistente en el movimiento de un objeto por sobre el animal. En el cerebro del cangrejo encontramos interneuronas visuales especializadas en responder al mismo EVP que provoca la respuesta de escape del cangrejo, a las que denominamos neuronas detectoras de movimiento (NDM). Una caracterización de las NDM en función de sus propiedades biofísicas intrínsecas, como también de sus campos receptivos, direccionalidad, adaptabilidad, capacidad de integración multimodal, sensibilidad por el contraste, etc., indican que se trata de un grupo heterogéneo de neuronas. No obstante, todas las NDM se ubican en la lóbula (tercer neuropilo óptico) y proyectan al cerebro medio. La morfología general de las NDM esta representada en dos tipos de patrones de arborización, ambos definidos por la típica disposición colectora de neuronas detectoras de movimiento descriptas en insectos. Encontramos que la presentación repetida del EVP produce modificaciones en la respuesta de las NDM que reflejan de manera muy ajustada las modificaciones comportamentales que ocurren durante el aprendizaje. Más aún, las modificaciones ocurridas como resultado del aprendizaje permanecen en las NDM por largo tiempo, reflejando la memoria de larga duración observada 24 hs luego de la adquisición. Los artrópodos hacen uso de importantes habilidades cognitivas para ejecutar un rico repertorio de comportamientos, muchos de los cuales están dirigidos visualmente. No obstante, el presente constituye el primer trabajo en el que se identifican neuronas individuales que sirven a un aprendizaje visual en un artrópodo. La ubicación y morfología de estas neuronas indican que, contrariamente a la idea general presupuesta, la lóbula de los artrópodos constituye un núcleo cerebral superior involucrado en funciones de aprendizaje y memoria. Los resultados se discuten también en función de su aporte a la fisiología comparada de la visión.

Abstract:
Memory formation and its maintenance result from physiological processes that take place in individual neurons. Nevertheless, due to methodological limitations current experimental models do not allow to investigate these processes while they occur in the living animal. The aim of the present study was to develop an experimental model to overcome such limitations. A model that will allow us to assess the changes occurring in individual cells during learning by recording their activity intracellularly in the intact animal. The model was based on the visual memory abilities of the crab Chasmagnathus, and on the advantages this animal offers to perform in vivo intracellular recordings from its brain neurons. Because the animal is intact and awaken, we were able to investigate the functioning of many different classes of neurons by their responses to cuasi-natural and biologically relevant stimuli. The neurons were dye filled intracellularly, which allowed us to describe their morphologies. A physiological characterization based upon the neuronal responses to a pulse of light revealed many different cellular classes. There are spiking and non-spiking neurons, some of which respond to the light stimulus with depolarization while others show hiperpolarization. In addition, their responses can be either tonic or phasic. On the other hand, the morphological study of these cells reveals that they can be local or projecting interneurons. The comparison of these results with those obtained from insects and other crustaceans supports the idea that neuronal element of the first visual neuropils are largely conserved among arthropods. The memory paradigm studied in Chasmagnathus implies a long-term change of the animal escape response occurred upon the repeated presentation of a visual danger stimulus (VDS), which consists of an object moving overhead. Recording from the brain we found neurons that respond to the same VDS that elicits the escape response. We termed these elements movement detector neurons (MDN). A characterization of MDN based on their intrinsic properties and also on parameter such as their receptive field, direction and contrast sensitivity, multimodal integration abilities, etc., indicates that the group of MDNs is formed by several neuronal subclasses. Yet, all stained MDNs were found to be localized in the lobula (third optic neuropil) and project to the midbrain. Their general morphologies resemble the collator neurons described in insects. Upon repeated VDS presentations, the response of MDNs shows changes that are remarkably identical to the modifications that are observed at the behavioral level. Moreover, the long-lasting behavioral changes, i. e. the long-term memory, are fully acquainted by the changes of performance retained by MDNs. Arthropod are now known to posses important cognitive abilities, many of which are based on the visual sense. Surprisingly enough, the brain areas involved in the visual memories of these animals were completely ignored. Here, we show the first identification of individual neurons involved in the memory of an arthropod. In contradiction with the general assumption, our results point to the lobula of arthropods as a higher brain center involved in learning and memory. The results are also discussed in terms of their contribution to the comparative physiology of vision.

Bessega, Cecilia. "Estructura poblacional y relaciones filogenéticas (Distancia y Parsimonia) en especie de Prosopis (Leguminosae) en base a marcadores moleculares" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Prosopis es un género que presenta gran importancia desde el punto de vista económico, ecológico y evolutivo. Habita en las principales zonas áridas y semiáridas del mundo y en base a su morfología ha sido dividido en cinco secciones denominadas Prosopis, Anonychium, Monilicarpa, Strombocarpa y Algarobia. Esta última incluye 30 especies de las cuales la mayor parte habitan en América, con el principal centro de diversidad en Argentina. Algunas especies de esta sección hibridan frecuentemente en la naturaleza dando lugar a individuos con fenotipos intermedios, difíciles en algunos casos de determinar. En este trabajo se analizaron marcadores bioquímicos y moleculares en poblaciones de P. glanadulosa, P. velutina, P. alba, P. nigra, P. vinalillo, P. alpataco, P. caldenia, P. ruscifolia, P. flexuosa, P. chilensis, P. affinis, P. kuntzei de Algarobia, P. reptans de Strombocarpa y P. argentina de Monilicarpa. Se estudiaron poblaciones naturales mediante las técnicas de electroforesis de isoenzimas y RAPD con el objeto de identificar loci diagnóstico, estimar la variabilidad y analizar la estructura poblacional. Se compararon poblaciones naturales de diferente subcontinentes pertenecientes a Algarobia junto con P. reptans (Strombocarpa) y P. argentina (Monilicarpa). Los resultados señalaron que P. velutina y P. kuntzei son las únicas que presentaron loci isoenzimóticos diagnósticos. Las especies Norteamericanas P. grandulosa y P. velutina no presentaron bandas RAPD diagnósticas con los “primers” ensayados. Los niveles de variabilidad genética estimados en las poblaciones Norteamericanas son semejantes a los de las especies Sudamericanas de la misma sección; y las poblaciones presentan las misma variantes isoenzimóticas. Los niveles de variabilidad genética de P. reprans (Strombocarpa) y P. argentina (Monilicarpa) no difieren entre sí, aunque son significativamente menores que las de las especies de Algarobia. La diferenciación genética entre las poblaciones de la sección Monilicarpa es menor a la presentada por las especies de Algarobia estudiadas. Como consecuencia, el flujo génico estimado entre las poblaciones de P. argentina es mayor que el de las especies de Algarobia. Un estudio de individuos agrupados por familias fue realizado mediante electroforesis de isoenzimaspara inferir el sistema de apareamiento en siete especies de la sección Algarobia. Los resultados mostraron que las especies presentan en la mayoría de los casos fecundación cruzada pero que hasta un 28% de autofecundación puede ocurrir (tm varió entre 0.72 y 1). El valor promedio en todas las especies aquí estudiadas es de 15%. Las tasas de fecundación cruzada variaron entre los árboles dentro de las poblaciones y la mayoría de los individuos analizados (semillas) dentro de cada familia eran hermanos completos. Se realizó un estudio de RFLP utilizando como sonda 27.7 kb de cpDNA heterólogo de Nicotina tabacum en 11 especies del género. Los resultados no mostraron variación intraespecífica en ningún caso y sólo permitieron diferenciar a P. reptans y a P. kuntzei de las restantes especies de Algarobia estudiadas (P. alba, R nigra, P. vinalillo, P. alpataco, P. caldenia, P. ruscifolia, P. flexuosa, P.glandulosa, P. affinis). Por último, las relaciones filogenéticas entre las especies fueron reconstruidas mediante métodos de distancia y parsimonia a partir de las frecuencias alélicas isoenzimáticas, de las secuencias correspondientes al intergén TrnD-TrnT(cpDNA) y de las secuencias de los espaciadores internos transcriptos de ADN ribosómico (ITS-1 e ITS-2). Los fenogramas obtenidos a partir de los datos de enzimas señalaron que P. reptans (Strombocarpa), P argentina (Monilicarpa) y P. kuntzei son las especies mas diferenciadas. A pesar de que los cladogramas de cpDNA y de ADNr resultaron incongruentes, presentan consistencia. El orden relativo de divergencia señalado en ambos cladogramas concuerda con el nivel de diferenciación genética en los fenogramas. Además, ni los fenogramas ni los cladogramas están de acuerdo con la clasificación morfológica en series propuesta para este grupo.

Abstract:
Prosopis is a very important genus from the economic, ecological and evolutionary point of view. It occupies the main arid and semi-arid areas of the world and, based on the morphology, its species have been divided into five sections denominated Prosopis, Anonychium,Monilicarpa, Strombocarpa and Algarobia. The latter includes 30 species, most of which are American, with the main diversity center in Argentina. Some species of this section frequently hibridise in the nature producing individuals with intermediate phenotypes that sometimes are difficult to determine. In this work biochemical and molecular markers were analyzed in populations of P. glandulosa, P. velutina, P. alba, P. nigra, P. vinalillo, P. alpataco, P. caldenia, P. ruscifolia, P. flexuosa, P. chilensis, P. affinis, P. kuntzei of Algarobia, P. reptans of Strombocarpa and P. argentina of Monilicarpa. Natural populations were studied by means of isoenzyme electrophoresis and RAPD techniques, in order to identify diagnostic loci, to estimate the variability and to analyze the structure of populations. Populations of species from different subcontinents belonging to Algarobia were compared, together with P. reptans (Strombocarpa) and P. argentina (Monilicarpa).The results indicated that P. velutina and P. kuntzei are the only ones which showed isoenzymatic diagnostic loci. The North American species, P. glandulosa and P. velutina, did not present diagnostic RAPD bands with the primers here used. Genetic variability estimates in populations of North American species of Algarobia are similar to those of the South American ones of the same section, and they share most isoenzymatic alleles. P. reptans (Strombocarpa) and P. argentina (Monilicarpa)do not differ from each other in genetic variability, but their variability is significantly lower than that of species of Algarobia. The genetic differentiation among populations in the section Monilicarpa is lower than in the species studied of Algarobia. Thus, the estimated gene flow among populations of P. argentina is higher than those of Algarobia species. A study of individuals grouped by families was carried out by isoenzyme electrophoresis to estimate parameters of the mating system in seven species of the section Algarobia. The results showed that species are mostly outcrosser but up to 28% of selfing can occurs (tm varied between 0.72 and 1). The average value in all the species here studied is of 15%. Outcrossing rates vary among the trees within the populations and most of the analyzed individuals(seeds) within each family are full sibs. A study of RFLP using a heterologous cpDNA probe of Nicatiana tabacum (27.7 kb) was carried out in 11 species of the genus. The results did not show intraspecific variation in any of the species studied. Only P. reptans and P. kuntzei could be distinguished from the remaining studies species of Algarobia (P. alba, P. nigra, P. vinalilla, P. alpataco, P. caldenia, P. ruscifolia, P. flexuosa, P.glandulosa, P. affinis). Finally, the phylogenetic relationships among species were reconstructed through distance and parsimony methods from isoenzymatic allelic frequencies, the sequences corresponding to the intergenic region TrnT-TrnD(cpDNA) and the sequences of internal transcribed spacers from ribosomic DNA (ITS-1 and ITS-2). The phenograms obtained from the enzyme data indicated that P. reptans (Strombocarpa), P. argentina (Monilicarpa)and P. kuntzei are the most differentiated species. Although the cpDNA and rDNA cladograms were incongruent, they present some consistence. The relative divergences of basal nodes in both cladograms are consistent with the level of genetic differentiation in the phenograms. Furthermore, none of the trees agrees with the morphological classification of proposed series for this group.

Bestach, Yesica Soledad. "Estudios genéticos y citogenéticos en Aplasia Medular" (2015-03-26). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La Aplasia Medular o Anemia Aplásica adquirida (AA) es una insuficiencia medular global cuantitativa, caracterizada por una médula ósea hipo-celular, pancitopenia y riesgo de progresión a Síndromes Mielodisplásicos (SMD). El 80% de los casos de AA son de etiología idiopática, vinculados a un desorden autoinmune subyacente. Los principales mecanismos relacionados a la supresión hematopoyética en AA involucran un incremento de las citoquinas TNF-α e IFN-γ producidas por linfocitos T citotóxicos y T helper (Th) 1, y el consecuente aumento de la apoptosis. También se observa un desbalance entre los diferentes subsets de linfocitos T y la desregulación de otras citoquinas como IL-6 y TGF-β1. El objetivo fue estudiar polimorfismos asociados con la expresión diferencial de los genes TNF, IFNG, IL6 y TGFB1, y establecer su relación con susceptibilidad y/o características clínico-patológicas en pacientes con AA y SMD. Además, determinar los niveles de expresión de estas citoquinas y de los factores de transcripción Foxp3, T-bet, GATA-3 y RORγt en AA, a fin de caracterizar el desbalance entre los linfocitos T regulatorios (Treg), Th1, Th2 y Th17, respectivamente. Los resultados sugieren que los polimorfismos estudiados no estarían asociados con susceptibilidad a AA; mientras que, existiría una relación entre los polimorfismos de los genes TNF e IL6 y riesgo a SMD, en nuestra población. Las variantes polimórficas estudiadas estarían relacionadas con la severidad de las citopenias tanto en AA como en SMD, pudiendo actuar como modificadores genéticos de la enfermedad. Los hallazgos del análisis de expresión en AA muestran un incremento de TNF e IL6, y una disminución de TGBF1. La relación entre los factores de transcripción reflejaría una disminución en la diferenciación y/o función de células Treg favoreciendo un estado pro-inflamatorio, principalmente Th1 y Th2, lo cual podría contribuir con los mecanismos patogénicos relacionados a la falla medular en los pacientes con AA.

Abstract:
Acquired aplastic anemia (AA) is a marrow failure characterized by a hypocellular bone marrow, pancytopenia and risk of progression to Myelodysplastic Syndromes (MDS). Around 80% of AA cases are idiopathic, linked to an underlying autoimmune disorder. The main mechanisms related to the hematopoietic suppression in AA involve an increase of the cytokines TNF-α and IFN-γ produced by cytotoxic T and T helper (Th) 1 cells and, therefore, an apoptosis rise. Furthermore, perturbations of the T cell balance and abnormal regulation of other cytokines such as IL-6 and TGF-β1 play important roles to the development of immune disorders in AA. The aim of this work was to study the polymorphisms associated with differential expression of TNF, IFNG, IL6 and TGFB1 genes and to establish its relationship with susceptibility and/or clinic-pathologic features in patients with AA and MDS. In addition, to determine the expression levels of these cytokines and of the transcription factors Foxp3, T-bet, GATA-3 and RORγt in AA, in order to characterize the imbalance among regulatory T cells (Treg), Th1, Th2 and Th17, respectively. The obtained results suggest that, in our population, the studied polymorphisms would not be associated with susceptibility to AA; while polymorphisms in TNF and IL6 genes may increase propensity to MDS. Furthermore, these polymorphic variants could be related to severity of the cytopenias in AA and MDS, and may act as genetic modifiers of the diseases. Moreover, the analysis of cytokine expression in AA shows an increase of TNF and IL6, and a decreased of TGBF1. Finally, the ratio among transcription factors might reflect a Treg deficiency impairment, supporting a proinflammatory state, mainly Th1 and Th2, which may contribute to the pathogenic mechanisms related to the bone marrow failure observed in patients with AA.

Betti, Paola. "Ecomorfología de larvas y prerreclutas de merluza (Merluccius hubbsi) como aporte a su conservación" (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se describió la ontogenia de la cavidad oromandibular, tubo digestivo, ojos y vejiga gaseosa de larvas y prerreclutas de merluza colectados en la plataforma norpatagónica argentina, entre 1998 y 2009. Para describir el desarrollo de la cavidad oromandibular, se realizó una coloración diferencial de cartílago y hueso, y en el de la vejiga gaseosa, ojo y tubo digestivo, se utilizaron cortes histológicos, registrándose la aparición de las distintas estructuras u órganos que componen estos cuatro sistemas. Todos los eventos se referenciaron a la talla y edad de los individuos. Durante la transición entre la alimentación endógena y exógena, en individuos de 3 mm LS, se registró el comienzo de la funcionalidad de la boca, tubo digestivo y ojos. Entre los 5,5 y 6 mm LS, las larvas dejan de utilizar el mecanismo hiodeo para emplear el opercular, en la alimentación. Asimismo, el inicio de la funcionalidad de la vejiga gaseosa se detectó en ejemplares de 3,50 a 4,00 mm LS. En resumen, el desarrollo de las larvas de merluza es relativamente rápido, evidenciando una temprana adaptación a la autopropulsión y a una alimentación eficiente, permitiéndole una gran autonomía desde tallas pequeñas, aumentando así las probabilidades de supervivencia de la especie.

Abstract:
The ontogeny of the oral cavity, digestive tract, eyes and gas bladder were described in hake larvae and prerecruits collected on the Northern-patagonian Argentine shelf, from 1998 to 2009. In order to describe the oral cavity development, differential staining of cartilages and bones was performed while for the gas bladder, eye and digestive tract, histological sections were used, registering the appearance of the different structures or organs that compose these four systems. All the events were correlated to the size and age of the individuals. During the transition between the endogenous and exogenous feeding (3 mm SL), the beginning of the functionality of the mouth, digestive tract and eyes was registered. Between 5.5 and 6 mm SL, the larvae stop using the hyoid mechanism in the feeding to use the opercular one. Morover, the beginning of the functionality of the gas bladder was detected in individuals of 3.5 to 4 mm LS. In summary, the development of the hake larvae is relatively fast, demonstrating an early adaptation to the self-propulsion and an efficient feeding, allowing a great autonomy since small sizes, and therefore increasing the probabilities of survival of the species.

Bey, Paula. "Optimización de la expresión de un amplicón viral basado en PVX en plantas de tabaco. Caracterización funcional de la proteína de 15 kDa del Garlic mite-borne filamentous virus" (2010). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Con el objetivo de optimizar la producción de proteínas heterólogas en plantas se desarrolló un sistema de expresión basado en un amplicón derivado del genoma del PVX. Se diseñaron distintos amplicones virales que permiten la expresión, tanto constitutiva como inducible, de proteínas recombinantes. La utilización del amplicón constitutivo permitió obtener, por primera vez, plantas transgénicas que sobrexpresan altos niveles de proteínas virales. Además, se logró expresar exitosamente GFP a partir de un amplicón inducible, tanto en ensayos de expresión transitoria como en plantas transgénicas. Uno de los problemas que dificultan la producción de proteínas de interés en plantas utilizando vectores virales es el establecimiento de respuestas de silenciamiento génico postraduccional (PTGS) en respuesta a la replicación viral. Para intentar superar esta dificultad, se propuso co-expresar un amplicón viral junto con una proteína supresora del PTGS. Se caracterizó la actividad de una nueva proteína supresora del PTGS, la proteína 15K codificada en el genoma del Garlic mite-borne filamentous virus (GmbFV). Si bien esta proteína muestra una actividad supresora débil en plantas silenciadas por agroinfiltración con transgenes u horquillas de silenciamiento, presenta la ventaja de no producir fenotipos aberrantes en plantas transgénicas. Mediante la co-agroinfiltración con construcciones que expresan la proteína 15K y el amplicón PVX-2aA (amplicón que expresa el epítope 2aA del virus de aftosa) se lograron obtener altos niveles de una fusión del epítope de interés a la cápside viral en plantas de Nicotiana benthamiana en un corto período de tiempo. Este resultado sugiere que es posible generar sistemas estables que permitan obtener altos niveles de expresión mediante el cruzamiento entre plantas transgénicas que expresen la proteína supresora 15K y amplicones de interés.

Abstract:
In order to optimize the production of heterologous proteins in plants, an expression system based on the PVX genome has been developed. Several viral amplicons have been designed with the purpose of expressing recombinant proteins, either constitutively or in an inducible manner. The use of constitutive amplicons led, for the first time, to the generation of transgenic plants which over-express high levels of viral proteins. Moreover, GFP protein was successfully expressed from an inducible amplicon, both in transient expression assays and in transgenic plants. One of the problems that hinder the production of heterologous proteins using plant viral vectors is the establishment of post-transcriptional gene silencing (PTGS) in response to viral replication. In an attempt to overcome this restriction, the co-expression of PTGS- suppressor proteins and viral amplicons was explored. The 15K protein of Garlic mite-borne filamentous virus (GmbFV) has been characterized as a new PTGS-suppressor. Although this protein shows suppressor activity in agroinfiltration assays triggered by both transgenes or silencing hairpins, it has the advantage of avoiding the development of aberrant phenotypes in transformed plants. Co-agroinfiltration of the 15K protein and the PVX-2aA amplicon (harbouring the 2aA epitope of Foot and mouth disease virus) yielded high levels of a fusion comprising the epitope of interest and the PVX coat protein in N. benthamiana. This result suggest that stable expression systems could be developed by crossing of transgenic plants carrying the 15K suppressor protein and plant viral amplicons.

Bianchi, José Antonio. "Determinación de selenio en azufre : contenido de selenio en azufre argentino" (1944). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bianchi, María Silvia. "Receptores GABAB en el eje hipotálamo-hipofisario:ontogenia, regulación de su expresión y mecanismo de acción" (2004). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo de esta tesis fue el estudio de los receptores GABAb en la pituitaria anterior y el hipotálamo de ratas hembras y machos durante el desarrollo y en la adultez. Observamos un patrón de expresión ontogénico, con una disminución de la expresión de ambas subunidades del receptor GABAb (RGABAb) a lo largo del desarrollo, encontrándose sus niveles más bajos en la adultez. En la hipófisis anterior determinamos, además, una clara expresión secualmente dimórfica, siendo los niveles del receptor significativamente más abundantes en ratas hembras que en machos en edades tempranas del desarrollo. Esta diferencia sexual depende del nivel de andrógenos presente durante etapas críticas de diferenciación sexual, ya que la supresión de los dos picos androgénicos en el macho lleva a una expresión alta, tipo hembra, mientras que la administración neonatal de testosterona a las hembras disminute la expresión del RGABAb1 a niveles de macho. Los niveles hipotalámicos de GABA siguen el mismo patrón que la expresión de los RGABAb1 hipofisiarios y este neurotransmisor es capaz de inducir la expresión de RGABAb1 exclusivamente en células adenohipofisiarias de hembras. Los andrógenos, por su parte, inducen la expresión de la subunidad RGABAb2 en ambos sexos, marcando así una regulación diferencial para cada subunidad del RGABAb. Los RGABAb hipofisiarios están acoplados a proteínas G i/o, y su activación disminuye los niveles de AMPc y lleva al cierre de los canales de calcio, de calcio dependientes del voltaje, modulando así la secresión hormonal. Los RGABAb en el hipotálamo muestran patrones ontogénicos similares a los hipofisiarios, sin evidenciarse diferencias sexuales en su expresión en edades tempranas del desarrollo.

Abstract:
The aim of the present thesis was the study of GABAb receptors (RGABAb) in the anterior pituitary and the hypothalamus in adult and developing male and female rats. We observed an ontogenic expression pattern for this receptors, showing a decrease in both subunits along development, with the lowest levels being detected at adulthood. Furthermore, in the anterior pituitary, we described a clear sexually dimorphic expression of GABAb. These receptors are significantly more abundant in females than in males early in development. This sex difference depends on androgen levels present in the male in critical stages of differentiation, as suppression of both androgenizing peaks in males leads to high, female-like expression levels, while neonatal testosterone administration to female decreases pituitary RGABAb expression to male titers. Hypothalamic GABA titers follow the same pattern as pituitary RGABAb expression levels and this neurotransmitter induces an increase in RGABAb1 expression exclusively in female anterior pituitary cells. Moreover, androgens induce RGABAb2 expression in pituitary cells of both sexes, demonstrating a differential regulation in the expression of each RGABAb subunit. Pituitary GABAb receptors are coupled to G i/o proteins and their activation lead to a decrease in cAMP levels and to the closure of voltage sensitive calcium channels, modulating, this, hormonal secretion. Hypothalamic RGABAb follow ontogenic expression patterns similar to the hypophysis, without evidencing sex differences at early stages of development.

Bianchi, Micaela. "Mecanotransducción celular. Correlación entre las propiedades mecánicas y la organización-dinámica de proteínas de adhesión focal en células vivas" (2016-03-28). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las células pueden detectar, generar y responder a un amplio rango de señales externas, químicas y físicas, integrar y analizar esta información y, en consecuencia, cambiar su morfología, dinámica, comportamiento y, eventualmente, destino. A nivel celular, las respuestas biológicas a fuerzas externas se originan en dos tipos de estructuras especializadas: adhesiones focales (célula-matriz extracelular) y uniones adherentes (célula-célula). Las adhesiones focales son complejos de proteínas dispuestos en ensamblados multi-moleculares que unen la matriz extracelular, a través de receptores integrales de membrana, a componentes del citoesqueleto. Estos sitios de adhesión son estructuras planas, alargadas de unos pocos micrones cuadrados que a menudo están localizadas en la periferia de las células, y que además funcionarían como organelas de señalización en el proceso de mecanotransducción celular. Uno de los retos que se presenta para estudiar el sistema es el de poder integrar y combinar distintas técnicas que nos permitan analizar la dinámica intracelular, la biomecánica de la célula/sustrato, detección de las fuerzas generadas en/por la célula, y observar la respuesta global de la célula en las distintas condiciones. Entonces, el estudio de la estructura, mecánica y dinámica de las proteínas de adhesiones focales en respuesta a un estímulo mecánico en células vivas requiere de técnicas que permitan visualizar y caracterizar en forma integrada la dinámica de eventos localizados en la célula. Estos métodos deben contar con una resolución espacio-temporal alta, de forma tal que permitan detectar eventos transientes y altamente localizados. En este contexto, se han implementado, en este trabajo de Tesis, distintas microscopías y espectroscopías de alta resolución espacial y temporal, en combinación con técnicas de biología molecular y celular. Con el objetivo de caracterizar las propiedades mecánicas de sustratos y células, en una primera etapa se implementó un modo de operación avanzado en microscopía de fuerza atómica (AFM), denominado PF-QNM (del inglés, Peak Force Quantitative Nanomechanical Property Mapping). Este modo permite obtener simultáneamente la imagen de topografía, junto con los mapas cuantitativos sobre las propiedades de elasticidad, adhesión, dureza, disipación de energía y deformación superficial. Se utilizaron sistemas modelo con distintas propiedades mecánicas de manera tal de cubrir el amplio rango que va desde GPa a kPa, y estudiar las propiedades de sustratos (vidrio, membranas de silicona y geles de poliacrilamina), así también como la línea celular utilizada en la Tesis. A nivel de adhesión focal, la estrategia fue transfectar células de epitelio mamario de ratón (HC11), con proteínas componentes de la adhesión (por ejemplo, zixina, FAK, vinculina, paxilina) fusionadas a proteínas fluorescentes visibles. De esta forma, empleando microscopías y espectroscopías de fluorescencia, es posible visualizar la expresión de las proteínas, registrar su localización y evolución en el tiempo y, mediante diferentes análisis, extraer información cuantitativa de dinámica, cinética y organización de los complejos de adhesión focal. El análisis de la dinámica y difusión de los complejos de adhesión focal y sus interacciones, fueron realizados mediante la espectroscopía por correlación de fluorescencia (FCS). Se caracterizaron los coeficientes efectivos de difusión de las proteínas mencionadas. El análisis de la correlación cruzada de las fluctuaciones de fluorescencia de pares de proteínas de adhesión focal (FCCS) permitió evidenciar la interacción entre distintas proteínas adhesivas de la adhesión focal. La cinética de disociación de proteínas desde la adhesión focal fue evaluada mediante la recuperación de la fluorescencia luego del fotoblanqueo (FRAP) en diferentes condiciones. Para estudiar los cambios generados en la organización y dinámica de adhesiones focales en células vivas en respuesta a un estímulo mecánico externo global, se empleó un dispositivo de tracción equibiaxial adaptado para ser usado en simultáneo con el microscopio confocal FV1000. La tensión mecánica aplicada por el dispositivo de tracción es capaz de inducir cambios en el área de las células vivas al igual que en las adhesiones focales. En respuesta al estiramiento mecánico se observó un mayor reclutamiento y translocación de la proteína zixina acompañado de una disminución significativa de su constante de disociación. Con el fin de correlacionar las propiedades mecánicas del sustrato y la fuerza de tracción generada por la célula a nivel de las adhesiones focales, sin perder de vista la organización y dinámica de las proteínas en la adhesión focal, se implementó la Microscopía de Fuerzas de Tracción (TFM). Esta técnica posee la sensibilidad necesaria para medir la fuerza de tracción generada por la célula sobre un sustrato elástico y transparente, la cual se puede combinar con otras técnicas de microscopía de fluorescencia como FRAP o FCS. El análisis de los datos TFM para la proteína zixina permitió obtener los mapas de deformación y de fuerzas de tracción, a la vez que se evaluó la cinética de disociación mediante FRAP.

Abstract:
Cells can detect, generate and respond to a wide range of external, chemical and physical signals, integrate and analyze this information and, consequently, change their morphology, dynamics, behavior and, eventually, their fate. At the cellular level, biological responses to external forces are originated from two types of specialized structures: focal adhesions (cell-extracellular matrix) and adherens junctions (cell-cell). Focal adhesions are protein complexes arranged in multi-molecular assemblies that bind extracellular matrix, through integral membrane receptors, to cytoskeletal components. These adhesion sites are flat, elongated and few square microns which are often located in the periphery of the cells, and also function as signaling organelles in the cellular mechanotransduction process. One of the challenges presented to study the system is to be able to integrate and combine different techniques that allow us to analyze the intracellular dynamics, biomechanics of the cell/substrate, detection of the forces generated in/by the cell, and observing the global response of the cell in different conditions. Thus, the study of the structure, mechanics and dynamics of focal adhesion proteins in response to a mechanical stimulus in living cells requires to visualize and characterize in an integrated way the dynamics of events located in the cell. These methods must have a high spatial and temporal resolution, so as to detect transients and highly localized events. In this context, they have been implemented in this thesis, different microscopies and spectroscopies with high spatial and temporal resolution, combined with the techniques of molecular and cell biology. In order to characterize the mechanical properties of substrates and cells, in a first step, an advanced mode operation was implemented in atomic force microscopy (AFM), called PF- QNM (Peak Force Quantitative nanomechanical Property Mapping). This mode allows simultaneously obtaining the topography, together with quantitative maps of the properties such as elasticity, adhesion, hardness, energy dissipation and surface deformation. Various systems were used with different mechanical properties so as to cover the wide range from GPa to kPa, and study the properties of substrates (glass, silicone membranes and polyacrylamide gels), as well as the cell line used in the Thesis. At focal adhesion level, the strategy was to transfect mouse mammary epithelial cells (HC11), with adhesion proteins (eg zixina, FAK, vinculin, paxillin) fused to visible fluorescent proteins. Thus, using fluorescence microscopy and spectroscopy, it is possible to visualize the expression of proteins, register their location and evolution over time and through different analysis, extract quantitative information about the dynamics, kinetics and organization of focal adhesion complexes. The analysis of the dynamics and distribution of focal adhesion complexes and their interactions were performed by fluorescence correlation spectroscopy (FCS). The effective diffusion coefficients of the proteins mentioned were characterized. The analysis of the crosscorrelation of fluorescence fluctuations of pairs of focal adhesion proteins (FCCS) allowed to demonstrate the interaction between various adhesive proteins in focal adhesion. The dissociation kinetics of proteins from the focal adhesion was evaluated by fluorescence recovery after photobleaching (FRAP) under different conditions. To study the changes generated in the organization and dynamics of focal adhesions in living cells, in response to a global external mechanical stimulus, an equibiaxial traction device adapted to be used simultaneously with the FV1000 confocal microscope was used. Mechanical tension applied by the pulling device is able to induce changes in the area of living cells as well as in focal adhesions. In response to mechanical stretch increased, the recruitment and translocation of the protein zyixin accompanied by a significant decrease in the dissociation constant was observed. To correlate the mechanical properties of the substrate and the traction force generated by the cell at a focal adhesions level, without losing sight of the organization and dynamics of proteins in focal adhesion, traction force microscopy was implemented (TFM). This technique has the sensitivity necessary to measure the traction force generated by the cell on an elastic and transparent substrate, which can be combined with other fluorescence microscopy techniques such as FRAP or FCS. Analysis of TFM data for zyxin yielded deformation and traction forces maps, while the dissociation kinetics was evaluated by FRAP.

Bianchini, Graciela Mabel. "Estudio del AMP cíclico en sistemas fotosintéticos" (1988). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Biggeri, Carlos. "Singularidades de las funciones analíticas de una y de varias variables y el problema general de la prolongación analítica" (1936). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bigi, Fabiana. "Identificación y caracterización de antígenos de Mycobacterium bovis" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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von Bilderling, Catalina. "Detección, localización y análisis de eventos singulares de reconocimiento molecular mediante microscopías avanzadas" (2013). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las células pueden ser concebidas como dispositivos capaces de procesar información bioquímica, cuya respuesta al entorno depende del estado funcional de proteínas organizadas espacialmente en una compleja red. Entender la función celular integrando la actividad molecular con la organización espacial representa un gran desafío para la biología moderna. Las fuerzas mecánicas tienen un papel importante en la organización, crecimiento, maduración y función de los tejidos. A nivel celular la transmisión de las fuerzas externas, a través de las adhesiones focales (FAs) y uniones adherentes, parece controlar la maduración o el ensamblado de estas adhesiones e iniciar las cascadas de señalización. En respuesta a las fuerzas aplicadas externamente, las células reacondicionan activamente la organización y la actividad contráctil del citoesqueleto y redistribuyen sus fuerzas intracelulares. Con el objetivo de estudiar la regulación dinámica de los contactos adhesivos y la arquitectura del citoesqueleto de la célula así como su influencia en la señalización celular, en este trabajo de Tesis se estudió la relación entre una fuerza (local o global) aplicada a la célula y el ensamblado, mecánica y dinámica de las adhesiones focales. El objetivo principal de este trabajo fue estudiar la respuesta dinámica de las proteínas de las FAs ante un estímulo mecánico controlado. En este contexto, se implementaron y desarrollaron técnicas de Microscopía de Fluorescencia, Microscopía de Fuerza Atómica (AFM) y Espectroscopía de Fuerza (FS) aplicadas a distintos sistemas biomoleculares, desde plataformas biomiméticas hasta células vivas. Se optimizaron las mediciones de fuerza a nivel intermolecular y se investigaron la dinámica de las proteínas y las interacciones proteína-proteína en las FA de células vivas. Se implementó la FS mediante el estudio de las fuerzas de interacción entre grupos funcionales químicos y el sistema modelo ligando-receptor, biotina-estreptavidina. Se logró caracterizar la fuerza de interacción a nivel de moléculas individuales entre el sitio de unión RGD de la fibronectina y su receptor, la proteína integrina, en la membrana de células HC11 in vivo. Se obtuvo una fuerza característica de ruptura del complejo RGD-integrina de (37.6 ± 0.7) pN. Se expresaron las proteínas de las FAs zixina, vinculina, FAK, paxilina, integrina y actina unidas a proteínas fluorescentes visibles (VFPs) en células epiteliales mamarias de ratón HC11. Se diseñó y construyó un dispositivo estirador de células, para explorar la relación entre un estímulo mecánico global y los cambios en la dinámica y en las interacciones entre las proteínas. Mediante técnicas de microscopía de fluorescencia como FRAP (Recuperación de la Fluorescencia luego del Fotoblanqueo), FRET (Transferencia de Energía Resonante de Förster) y N&B (Número y Brillo), se estudió el estado mecánico general de las FAs, determinando la tasa de disociación de las proteínas a las FAs (koff) y el estado de agregación de las mismas. Se trabajó en la adaptación de un microscopio combinado AFM/ Fluorescencia desarrollado en el Laboratorio de Electrónica Cuántica (FCEN-UBA) para su utilización en condiciones fisiológicas y con células vivas. Se demostró que dicho microscopio es capaz de obtener imágenes combinadas en condiciones fisiológicas, con alta calidad óptica y con un rango vertical para AFM que permite que la visualización de células in vivo sea de rutina. Mediante la medición de las fuerzas de interacción entre el par ligando-receptor biotina-estreptavidina, se corroboró que el microscopio combinado alcanza la resolución requerida para cuantificar fuerzas de interacción entre moléculas individuales. Utilizando este nuevo microscopio combinado, se estudió mediante fluorescencia la evolución temporal de las proteínas de las FAs, zixina y vinculina, en respuesta a un estímulo mecánico local aplicado por AFM con un sensor de fuerza funcionalizado. Se observó el remodelado de las FAs maduras y el reclutamiento de la proteína vinculina para la formación de nuevas FAs en respuesta a la fuerza local aplicada. En este contexto, se presenta una estrategia novedosa que permite obtener imágenes de alta resolución y medir fuerzas al nivel de moléculas individuales en tiempo real. Nuestra estrategia combina metodologías de alta resolución para sensar y caracterizar cambios físicos/bioquímicos en células vivas. En conclusión, se implementaron técnicas de AFM y fluorescencia para estudiar algunos aspectos de la compleja maquinaria celular. De la correlación directa de estas técnicas en el nuevo microscopio combinado estaríamos en condiciones de abordar nuevos desafíos fundamentales en el entendimiento de la biofísica y la biología celular.

Abstract:
The cell can be conceived as a biochemical information-processing device whose response to the environment depends on the state of spatially organized networks of protein activities. Understanding cell function by integrating molecular activities with spatial organization is an important challenge for modern biology. Mechanical forces play an important role in the organization, growth, maturation, and function of living tissues. At the cellular level, many of the biological responses to external forces originate at two types of specialized structures: focal adhesions and adherent junctions. In order to explore the dynamic regulation of adhesive contacts and of the cytoskeleton architecture of cells, as well as its resultant influence on cellular activities, we are focused on the relationship between local force applied to the cell and the assembly, mechanics and dynamics of focal adhesions (FA). The goal of our work is to study the dynamic response of FA proteins when a precise and punctual force is applied. In this context, we have applied Fluorescence Microscopy (FM), Atomic Force Microscopy (FM) and Force Spectroscopy (FS) techniques on different biomolecular systems -from biomimetic platforms to living cells- in order to optimize force measurements at the intermolecular level and investigate protein dynamics and protein-protein interactions on FA of living cells. We have implemented FS measurements by studying the interaction forces between chemical functional groups and the well known ligand-receptor pair, biotinstreptavidin. We were able to characterize the fibronectin binding site RGD-integrin interaction at the single molecule level by measuring rupture forces between RGD functionalized probe-tips and the integrin receptors in the membrane of living HC11 cells. We found a characteristic interaction force of (37.6 ± 0.7) pN for the single RGDintegrin complex. We have expressed in HC11 epithelial mammalian living cells the FA component proteins zyxin, vinculin, FAK, paxilin, integrin and actin tagged with visible fluorescent proteins (VFPs), and also designed and constructed a cell stretching device to explore the relationship between a global mechanical stimulus and changes in protein dynamics and interactions. By fluorescence techniques such as fluorescence recovery after photobleaching (FRAP), Förster Resonance Energy Transfer (FRET) and Number and Brightness (N&B), we studied the mechanical state of the FAs, determining the dissociation rate constant parameter (kOFF) and the aggregation state of different FAs proteins. We worked on the adaptation of a combined AFM/Fluorescence microscope, designed and assembled at the Quantum Electronics Lab (FCEyN-UBA) for working under physiological conditions in liquid environments. The combined microscope was tested and validated by successfully imaging of living cells. We also validated the possibility of measuring interaction forces based on molecular recognition of the pair biotin-streptavidin. With this novel combined microscope we studied by fluorescence the temporal evolution of the FAs proteins, vinculin and zyxin, in response to a mechanical local and functional stimulus applied with an AFM force-probe. We were able to observe the remodeling of mature FAs and the recruitment of vinculin to form nascent FAs in response to the locally applied force. In this context, we present a new approach that can be employed for real-time, high-resolution imaging and measurements of forces at the single molecule level. Our strategy combines very highly sensitive technologies for probing and detection of biochemical/physical changes within living cells. In summary, we implemented both AFM and fluorescence techniques to study some aspects of the complex molecular machinery of the cell. From the direct correlation of these techniques in the new combined microscope we may now afford a new level of insight into cell biology and biophysics.

Billerbeck, Miguel Angel. "Presencia de Tocoferol y Quinonas Isoprenoides en la fracción de lípidos insaponificables de levaduras" (1975). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bilotti, Luis Gustavo. "Evaluación de triticale, trigo y centeno como sustratos para la producción de aflatoxinas" (1999). Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El triticale, cereal sintético derivado del cruzamiento del trigo con centeno, es un cultivo con promisorias perspectivas en cuanto a satisfacer las necesidades del hombre de más y mejores alimentos. Además de su buen rendimiento, ya sea como forrajera o para la producción de grano, el triticale parece combinar algunas de las mejores cualidades de sus antecesores. Junto con las aptitudes del trigo para la elaboración de diferentes tipos de alimentos, posee la capacidad que tiene el centeno de adaptarse a ambientes adversos, así como la resistencia a diversas plagas y enfermedades. La información existente sobre la contaminación de este cereal con micotoxinas es muy escasa. El principal objetivo de este trabajo de Tesis fue evaluar el comportamiento del triticale como sustrato para la biosíntesis de aflatoxinas, en comparación con los cultivos parentales. Para ello se obtuvieron las curvas de acumulación de aflatoxinas B1, B2, GI y G; en función del tiempo para los tres sustratos inoculados con una cepa toxicogénica (Aspergillus parasiticus NRRL 2999) e incubados en condiciones ambientales controladas (25°C y actividad acuosa 0,925) durante 10 semanas. Los parámetros cinéticos obtenidos de estas curvas ( Pi: período de iniciación de la producción de aflatoxinas; Am: máxima concentración acumulada; Tm: tiempo necesario para alcanzar la acumulación máxima) permitieron comprobar que los dos cereales progenitores se comportan de manera diferente. Las concentraciones máximas de aflatoxinas fueron mayores en el centeno que en el trigo (de 5 a 10 veces para las diferentes toxinas), observándose también en el centeno una rápida coloniución por parte del hongo toxicogénico. El triticale mostró un comportamiento similar al del trigo y ambos, también en comparación con otros granos como maíz y girasol, parecen ser sustratos poco propensos a la contaminación con aflatoxinasla diferencia de comportamiento no parece estar relacionada con el tamaño de los granos, como se ha sugerido, sino con algunos de los constituyentes de la composición química que podrían tener influencia en la biosíntesis de las aflatoxinas. Otro aporte del presente trabajo es la puesta a punto de un método modificado de análisis de aflatoxinas que demostró poseer adecuadas caracteristicas de ejecución en los tres sustratos estudiados.

Abstract:
Triticale is a hybrid resulting from crossing wheat and rye. It combines many of the best qualities of both its prodigious parents. It can have most of wheat’s qualities for making various types of noodles, pastries and some breads; and it can have most of rye’s disease resistance, drought tolerance and adaptability to harsh environments. Little is known about mycotoxins contamination in this promising crop. The main purpose of this Thesis was to evaluate the triticale as substrate for aflatoxin accumulation in comparison with its parents. Aflatoxins (B1, B2, G, and G2 ) accumulation curves were obtained for the three substrates inoculated with Aspergillus parasiticus NRRL 2999 and incubated at 25°C and water activity 0,925 for 10 weeks. Kinetic parameters from the accumulation curves (Pi: initiation period; Am: maximum accumulation ; Tm: time for maximum accumulation) were analyzed. Rye was more prone than wheat to a fast colonization by A. parasiticus and accumulated larger aflatoxins quantities over the whole incubation period. Maximum aflatoxins concentrations on rye were larger (5 to 10 times for each toxin) than those obtained on wheat. Triticale behaved similarly to wheat: both of them were poor substrates for aflatoxins production, also in comparison with other grains such as corn and sunflower. It is well known that, in general, natural incidence of aflatoxins is low in small grains, but this behaviour seems to bc more related with chemical composition than with the size of the seeds. In this work a modified method was proposed for the aflatoxin analysis. According to its analytical attributes, this method is suitable for aflatoxins analysis on wheat, rye and triticale.

Binaghi, María. "Rol de la fosforilación en la regulación funcional de la proteína de movimiento TGBp1 del potato virus X" (2012-08-21). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El Potato virus X (PVX) es un virus de plantas perteneciente al género Potexvirus. Su genoma está compuesto por una única molécula de ARN que codifica una replicasa viral, tres proteínas de movimiento (MPs: TGBp1, TGBp2 y TGBp3) y la proteína de la cápside (CP). La proteína TGBp1 es una proteína multifuncional requerida para el movimiento viral célula a célula en la planta hospedera. Se ha demostrado que esta MP es fosforilada en los residuos T193 y T214 por una quinasa tipo CK2. Diferentes líneas de investigación sugieren que la fosforilación de las proteínas virales puede regular la replicación y el movimiento viral. El objetivo de este trabajo fue estudiar el rol de la fosforilación en la regulación funcional de la proteína de movimiento TGBp1 de PVX y en su interacción con la proteína de plantas remorina (REM). Para ello se construyeron por mutagénesis dirigida versiones de TGBp1 no fosforilables (T193A y T214A) y otras que simulan la fosforilación (T193D y T214D). En ensayos de transcomplementación de la movilización célula a célula de un virus defectivo para dicha función, se demostró que las modificaciones en ambas treoninas resultan perjudiciales en la complementación del movimiento viral. Se determinó que la fosforilación de TGBp1 en la T193 regula la estabilidad de esta proteína viral por medio de un mecanismo que involucra la presencia de una secuencia de degradación tipo PEST en el extremo C-terminal de dicha proteína. A través de la combinación de estudios que involucran el análisis comparativo in silico de varias TGBp1s de virus de los géneros Alpha y Betaflexiviridae y de estudios por mutagénesis dirigida, se determinó que la T193 y la secuencia PEST C-terminal se encuentran conservadas en todas las TGBp1s analizadas, sugiriendo que la fosforilación en la T193 de estas MPs sería un mecanismo regulatorio de la estabilidad de dichas proteínas. Por otra parte, el análisis funcional de las fosfomutantes T193 y T214 de TGBp1 determinó que la fosforilación en dichos residuos afecta negativamente la actividad supresora del PTGS de TGBp1. Los ensayos de interacción entre TGBp1 de PVX y la proteína REM determinaron que tanto el dominio N- como el C-terminal de TGBp1 son necesarios para la interacción y que la misma no es regulada por fosforilación en los residuos T193 y T214 de TGBp1. Por otro lado, este trabajo presenta las primeras evidencias que la interacción entre distintas proteínas TGBp1s y REM se encontraría conservada entre los virus que utilizan estrategias de movilización del tipo Triple Bloque de Genes (TGB). Los análisis realizados para determinar el efecto biológico de REM sobre la TGBp1 de PVX demostraron que la proteína REM no interfiere en la actividad del PTGS de esta proteína viral. Finalmente estudios de localización subcelular determinaron que la localización subcelular de TGBp1 es influenciada por la presencia de las otras proteínas virales y que a su vez varía según si la proteína se encuentra fusionada en su extremo N- o C- terminal a GFP.

Abstract:
Potato virus X (PVX) is the type member of the Potexvirus genus. Its genome is based on a single RNA molecule encoding one viral replicase protein, three movement proteins (MPs: TGBp1, TGBp2 and TGBp3) and the capsid protein (CP). In particular, TGBp1 is a multifunctional protein required for virus cell-to-cell movement inside the host plant. Previously it has been demonstrated that TGBp1 is phosphorylated by a CK2-like kinase in T193A and T214 residues. Recent works on other plant viruses have indicated that viral protein phosphorylation by host kinases can regulate processes such us viral replication and mobilization. The aim of this work is to evaluate the role of phosphorylation in regulating the functional activities of the movement protein TGBp1 of PVX and its interaction with the protein Remorin (REM). For this aim different TGBp1 mutants have been developed by direct mutagenesis where the identified threonines have been replaced by alanine (T193A and T214A) or aspartate (T193D and T214D) residues. The virus movement function of the phosphomutants was assessed by complementation of PVX cell-to-cell movement in trans. It was shown that all mutants were non-functional for virus movement, and that phosphorylation of T193 is essential for stability of the MP by a degradation mechanism that involves a PEST sequence at the C-terminus of TGBp1. Several experimental approaches involving sequence comparison among TGBp1 homologues from viruses belonging to the Alpha and Betaflexiviridae genera and direct mutagenesis show that the T193 residue and the PEST sequence are conserved among all TGBp1 analyzed, suggesting that phosphorylation of T193 in these MPs could be a mechanism by which protein stability is regulated in several viruses. The results obtained in this work also have shown that phosphorylation of T193 and T214 of TGBp1 negatively affects the PTGS suppression activity of this MP. Two-hybrid assays and pull down experiments demonstrated that the N- and C-term domain of TGBp1 are involved in the interaction between PVX TGBp1 and REM and that this interaction is not regulated by TGBp1 phosphorylation. In addition, this work presents the first evidence that the interaction between REM and other TGBp1s could be a conserved mechanism used by different TGB-containing viruses. The studies conducted to determine the biological effect of REM on TGBp1 from PVX showed that REM protein does not interfere with PTGS- suppressing activity of TGBp1. Finally, sub-cellular localization studies demonstrated that TGBp1 localization is influenced by the presence of other viral proteins and by the use of N- or C-terminal GFP fusion proteins.

Binaghi, Ruben A.. "Estudio sobre la constitución de los peróxidos de zinc" (1946). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Binda, María Mercedes. "Factores reguladores de la angiogénesis en el fenómeno de resistencia antitumoral concomitante" (2002). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La resistencia antitumoral concomitante (RC) describe el fenómeno mediante el cual individuos portadores de un tumor son capaces de inhibir implantes tumorales secundarios o metástasis. En esta tesis se analizaron cinco modelos tumorales, tres derivados a partir de tumores mamarios murinos en ratones singenéicos y dos líneas de carcinoma de pulmon humano en ratones nude, el objeto de saber que factores angiogénicos/angiostáticos regulaban el fenómeno. Una de las líneas humanas generó una fuerte RC frente a un inóculo tumoral secundario subcutáneo (s.c.) en ratones nude, así como lo hicieron dos de los modelos tumorales murinos frente a inóculos s.c. y endovenosos (i.v.) de sus respectivas celulas. Se analizaron dos inhibidores (angiostatina y endostatina) y dos inductores (factor de crecimiento fibroblástico basico o bFGP y factor de crecimiento endotelial vascular o VEGF) de la angiogenesis, en sueros de animales portadores y en los medios condicionados (MCs) provenientes de los distintos tumores cultivados in vitro. Aunque no se pudo detectar angiostatina in vivo en los sueros de ratones portadores, si se detecto la conversion de plasminogeno a angiostatina in vitro por MCs en aquellos casos que mostraban capacidad de generan RC. El estudio con diferentes tipos de inhibidores de proteasas demostro que la enzima involucrada en esta conversión era una serinoproteasa. El uso de inhibidores del activador del plasminogeno de tipo uroquinasa (uPA) inhibio la generacion de angiostatina, a excepcion de una de las líneas murinas (M3MC) que posiblemente utilice una serinoproteasa distinta de uPA. Ademas, en general, se observo una baja concentración de VEGF y una alta concentración de endostatina en los sueros de animales portadores inductores de RC, respecto de sus controles y de los restantes grupos experimentales incapaces de desarrollar RC. Los resultados hallados permiten comprender mas profundamente el mecanismo de RC, a la vez aportan información que podría ser de utilidad para un eventual futuro tratamiento del cáncer basado en el uso de reguladores de la angiogenesis tumoral.

Abstract:
The term "concomitant antitumoral resistance” (CR) describes the phenomenon by which tumor-bearing hosts are capable of inhibiting secondary tumor implants or metastases. In order to elucidate whether the phenomenon under study is dependent on the capacity of tumor cells to generate different angiogenic and/or antiangiogenic factors, we used in this thesis three murine mammary adenocarcinomas and two human lung cancer cell lines. One of the human lung cancer cell lines revealed a strong CR against secondary subcutaneous (s.c.) tumor implants in nude mice, as well as two of the murine mammary tumors against secondary s.c. and intravenous (i.v.) tumor inoculations in syngeneic hosts did. Two angiogenesis inhibitors. (angiostatin and endostatin) and two angiogenic inducers (basic fibroblast growth factor or bFGF and vascular endothelial growth factor or VEGF)were analyzed in tumor-bearing mice sera and in conditioned media (CM)derived from the different tumor cells grown in vitro. Angiostatin could not be detected in either of the tumor-bearing mice sera analyzed. However, the CMs derived from those tumor cells that were capable to induce CR, showed in vitro conversion of plasminogen into angiostatin. The use of different types of protease inhibitors revealed that the conversion could be due to a serine protease. The use of urokinase type plasminogen activator (uPA) inhibitors could abrogate the generation of angiostatin, except for one of the murine mammary cancer cells lines, namer M3MC, that might utilize a serine protease other than uPA for the cleavage of plasminogen into angiostatin. Furthermore, a low VEGF concentration and a high endostatin concentration were usually found in sera from tumor-bearing mice, with respect to their controls and other experimental groups that did not induce CR. The results found herein lead to a more profound understanding of the CR mechanism, providing new information that could be useful for a future treatment of cancer based on the use of angiogenesis regulators.

Binstok, Guillermo Francisco. "Reacciones entre sorbatos y nitritos en sistemas cárnicos" (1998). Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Biondi, Ricardo M.. "Aislamiento, purificación y caracterización de la nucleósido difosfato quinasa del hongo patógeno Candida albicans : Comparación con otras especies" (1996). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La enzima nucleósido difosfato quinasa (NDP quinasa) es ubicua y cataliza la síntesis de NTPs a partir de sus correspondientes NDPs y un NTP dador (fisiológicamente el ATP). La reacción sigue una cinética de ping-pong con la formación del intermediario de alta energía (P)NDP quinasa. Aparte de su rol fundamental en la síntesis de NTPs, se ha relacionado a esta enzima con a) la activación de proteínas G en la transducción de señales, b) la diferenciación de Drosophila y distintas líneas celulares, c) inhibición de metástasis (nm23), y recientemente ha sido identificada como d) un factor de transcripción. En el presente trabajo se presentan resultados de la purificación y caracterización de la NDP quinasa de Candida albicans, un hongo patógeno oportunista de vertebrados. Se caracterizó la enzima bioquímicamente, en cuanto a su tamaño, al número de subunidades, su punto isoeléctrico, su estabilidad térmica, y la posibilidad de usar distintos NTPs y NDPs como dadores y aceptores de la reacción. A través de dos enfoques experimentales diferentes se demostró que los nucleótidos de guanina y adenina son los mejores aceptores de la reacción (Arch). Biochem. Biophys. (1995), 187-194). Se evaluó a su vez, la capacidad de NDP quinasas de distinto origen de fosforilar a análogos de nucleótidos utilizados en terapias antivirales; para ello, se desarrolló la metodología para medir la actividad NDP quinasa con estos sustratos (J. Biol. Chem. (1996), 271, en prensa). Se estudió la actividad y la presencia de la enzima durante el crecimiento y la morfogénesis del hongo; la actividad específica máxima se encontró durante el crecimiento logarítmico (An. Asoc. Quím. Argent. (1993), 81, 4-5, 359-366). Se realizó un estudio detallado del proceso de autofosforilación de la NDP quinasa, y se encontró que sólo se encuentra autofosforilada en residuos de histidina. La autofosforilación de la enzima también se realizó en extractos crudos de C. albicans y de Escherichia coli. Dado que la NDP quinasa se autofosforila en residuos de histidina como parte de su mecanismo de acción, los ensayos para estudiar la posible regulación de la enzima por fosforilación a través de alguna quinasa necesitan de una metodología que pueda distinguir la fosforilación en histidina de aquella en serina o treonina. Se desarrolló entonces una metodología sobre membranas de Immobilon con el uso de buffers de pH 1 y 14 con el agregado de 5 por ciento metano. Esta metodología se utilizó para estudiar la fosforilación in vivo en C. albicans y en células HeLa en cultivo. Se discuten las posibles implicancias de la fosforilación en serina in vivo.

Abstract:
Nucleoside diphosphate kinase (NDP kinase) is a ubiquitous enzyme catalysing the synthesis of NTPs from its corresponding NDPs using a NTP donor (physiologically ATP). The reaction follows a ping-pong mechanism of catalysis with a (P)NDP kinase high energy intermediate. Apart of its essential role in the synthesis of NTPs, this enzyme has been related to a) G-protein interaction in signal transduction, b) differentiation in Drosophila and different cell lines, c) inhibition of metastasis (nm23), and has recently been identified to d) a transcription factor. In the present work, data are presented on the purification of Candida albicans NDP kianse as well as a biochemical characterization of the enzyme, number and type of subunits, pI, thermal stability and the possibility to use as substrates different NTPs and NDPs. By two different approaches, guanine and adenine di and triphosphates were found to be the better acceptors and donors of the reaction (Arch. Biochem. Biophys. (1995), 187-194). The ability of NDP kinase to phosphorylate different anti-HIV nucleotide analogs was addressed, and a methodology was developed to measure the enzyme activity with these substrates (J. Biol. Chem. (1996), 271, in press). The specific activity of the enzyme during the growth and morphogenesis of C. albicans was studied; the specific activity was found to be maximal during logarithmic growth (An. Asoc. Quím. Argent. (1993), 81, 4-5, 359-366). Using purified enzyme, a detailed study of the pure enzyme autophosphorylation was carried out; the results indicated that only histidine autophosphorylation was found. Autophosphorylation in C. albicans and Escherichia coli crude extracts was also performed. As NDP kinase autophosphorylates in a histidine residue as part of its kinetic mechanism of action, the studies of phosphorylation by other kinases need to discriminate between phosphorylation on serine/threonine and histidine residues. A method on Immobilon membranes using 5 per centum methanol in buffers of pH 1 and 14 is described. This method was used to study the in vivo phosphorylation of the enzyme in C. albicans and in HeLa cells in culture. Possible implications of in vivo NDP kinase serine phosphorylation are discussed.

Biondic, Miriana Carla. "Fotoquímica de ß-Carbolinas en soluciones orgánicas diluidas" (1996). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bisceglia, Silvina Beatriz Catalina. "Los efectos de los cambios en las condiciones climáticas y ambientales sobre un ensamble de roedores sigmodontinos y la respuesta de sus principales depredadores en un área protegida de la ecorregión del Monte" (2014). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las interacciones inter-específicas y las condiciones ambientales (climáticas y de vegetación) son consideradas los principales factores que estructuran los ensambles de mamíferos del desierto. En esta tesis se evaluaron la abundancia y la estructura de los ensambles de micromamíferos de un área protegida en la ecorregión del Monte y su relación con los factores antes mencionados. El estudio se realizó en el Parque Nacional Lihué Calel (La Pampa, Argentina) durante cuatro años (2008-2011). Se describieron los principales parámetros climáticos y de vegetación. Se estimó la composición y la abundancia de las distintas especies que caracterizan el ensamble de micromamíferos presente y, en simultáneo, se estudiaron las composiciones dietarias del zorro gris pampeano (Pseudalopex gymnocercus) y del gato montés (Leopardus geoffroyi). Los resultados mostraron que la riqueza, abundancia y diversidad que caracterizan al ensamble de micromamíferos, presentaron variaciones abruptas debido a las variaciones contrastantes que se registraron en el régimen de precipitaciones ocurridas durante los primeros dos años del estudio (período relativamente más seco) con respecto a los dos últimos (período relativamente más húmedo). Se encontró que la variabilidad en la abundancia de los roedores cricétidos dependió, principalmente, de la continuidad de las precipitaciones y de la intensidad de la evapotranspiración. Sin embargo la relación entre dichas variables climáticas y la abundancia poblacional fue diferente para cada una de las especies estudiadas. La presencia de las distintas especies de roedores, en todos los tipos de ambientes estudiados (arbustales, pastizales y bosques), estuvo principalmente relacionada con el porcentaje de cobertura de las formas de vida que se encontraban en los estratos bajos y, por lo tanto, con el porcentaje de suelo desnudo. En cuanto a los depredadores, los zorros y los gatos respondieron diferencialmente ante los cambios en los niveles de abundancia de los roedores. El consumo por parte de los gatos aumentó mientras que el de los zorros se mantuvo constante ante el aumento de la abundancia. De esta manera, se pudo inferir que los gatos ejercen un mayor impacto sobre la estructura del ensamble de roedores al presentar una respuesta inmediata ante las variaciones de abundancia. Los resultados de esta tesis mostraron la respuesta de algunos de los componentes del ecosistema ante los cambios ambientales que ocurren en los ambientes del Monte y la interpretación de los mismos como una primera aproximación al grado de vulnerabilidad y resiliencia de estos ecosistemas áridos. Se considera que la infomación generada resulta de utilidad para implementar medidas de manejo tendientes a mantener la estabilidad ecológica en el área protegida mencionada.

Abstract:
The inter-specific interactions and environmental conditions (climate and vegetation) are considered the main factors in structuring the desert small mammal assemblages. In this work, the abundance and structure of small mammal assemblages of a protected area in the Monte ecoregion and its relationship with the cited factors were evaluated. The study was carried out in Lihue Calel National Park (La Pampa, Argentina) during four year (2008-2012). The main climate and vegetation parameters were described. The composition and abundance of the different species that characterize the small mammal assemblage were estimated and, simultaneously, the dietary compositions of the pampa gray fox (Pseudalopex gymnocercus) and the geoffroy´s cat (Leopardus geoffroyi) were studied. The results showed that the richness, abundance and diversity that characterize the mammal assemblage showed abrupt changes due to contrasting variation of the registred precipitation patterns occurred during the first two years (relatively drier) in comparison with the latter two (relatively wet). It was found that the variability in the abundance of rodent cricetids depended mainly on the continuity of rainfall and on the evapotranspiration intensity. However, the relationship between these climatic variables and population abundance was different for each species studied. The presence of different species of rodents, in every type of environment studied (shrublands, grasslands and forests), was mainly related to the cover of life forms found in the lower strata and, therefore, to the percentage of bare soil. Regarding predators, foxes and cats had different responses to the changes in the rodent abundance levels. The consumption by cats increased while the consumption by foxes remained constant when the abundance increased. Thus, it could be inferred that cats have a greater impact on rodent assemblage structure by presenting an immediate response to abundance changes. The results of this thesis showed the response of some of the components of the ecosystem to environmental changes that take place on Monte regions and their interpretation as a proxy for the degree of vulnerability and resilience of arids ecosystems. It is considered that the generated data are useful for the implementation of environmental management measures tending to keep the ecological stability in the protected area.

Bison, Federico Marcelo. "La fabricación del azul de ultramar" (1961). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Este trabajo tiene por objeto primordial, demostrar la posibilidad de fabricar el pigmento mineral azul ultramar con materias primas argentinas. Luego de una reseña historica ganeral, desde su descubrimiento por Vauquelin en el año 1814 hasta la fecha indicandose las principales teorías sobre la constitución y fórmula del ultramar, se encaró la parte experimental según se resume a continuación. Se fijó el método de trabajo que puede ser en mufla o en crisoles. Se adopto este último, pués permite tratar todo tipo de mezclas, no ocurriendo lo mismo con el de mufla, pues las preparaciones ricas en sílice solo pueden ser tratadas en crisoles. Acontinuación se efectuaron los análisis de materias primas, para pasar luego a la preparación de mezclas a fin de obtener el pigmento. Se prepararon cuatro tipos de mezclas, dos ricas en Sílice y dos pobres en dicho elemento. A su vez entre las dos pobres y las dos ricas en sílice se formuló una pobre y otra rica en azufre, abarcandose así todas las posibilidades. Se llamó a las mezclas M1, M2, M3 y M4 respectivamente. En el capitulo siguiente se estudió la influencia de la temperatura de cocción en cada una de las mezclas, fijandose las temperaturas optimas de reacción que quedaron fijadas en las siguientes cifras M1,720-740 °C, M2,680-690 °C, M3,760-780 y M4,830-850 °C. En el capitulo comentado se observó que la formación del pigmento quedaba incompleta sobre todo hacia el centro de la masa del crisol. Así pues, seguidamente se estudió la influencia de la temperatura de enfriamiento o sea el período de oxídación, en el cual los productos intermedios, que llegan a la temperatura de cocción al verde de ultramar, pasan al color azul. En este capítulo se demostro que el tiempo de temperatura de enfriamiento deben ser lo suficientemente prolongados como para permitir que la oxidación sea completa. Todas las mezclas se prepararon con dos tipoe de caolin, una con 35% de alumina y el otro con 42% de este componente. Se observó en todas las mezclas una mayor capaciadad de reacción en el caolín con mayor tenor de alúmina, aún en los casos de mezclas ricas en sílice y que llevan agregados de este compuesto. Así pués en el capítulo siguiente se estudió la influencia de los distintos componentes. Se verificó que el caolín de 35% de alúmina por agregado de sulfato de aluminio se volvía más reactivo, aunque sin llegar al grado logrado con el caolín que tiene por naturaleza un tenor mayor. Se evidenció pués la importancia primordial que tiene, en la obtención del pigmento, el contar con la arcilla adecuada. El resto de los componentes no tiene mayor significación, siempre que cumplen una serie de especificaciones no rigurosas para los tipos corrientemente usados en la industria. A continuación se demostró que para obtener un pigmento con buen poder cubriente y tintoreo, es necesario lograr una buena granulometría en los diversos componentes de las mezclas. Ambas cualidades del pigmento poder cubriente y tintoreo, mejoran con una mejor molienda de los componentes; la relación no es directamente proporcional y es suficiente llegar en cada caso a la granulometría adecuada. Por último se estudió la influencia de las masas reaccionantes. Se determinó que los crisoles no deben ser muy pequeños pues dificultan la formación de productos intermedios (sulfuros y polisulfuros de sodio) que a la postre deben reaccionar en el caolín. Tampoco el tamaño debe ser demasiado grande, pues en ese caso la faz oxidante del proceso se hace demasiado larga. Termina la parte experimental, esbozando los métodos de purificación que consisten en un lavado para eliminar las sales solubles, para proceder luego a la molienda que se realiza en húmedo. Si se quiere clasificar el pigmento en distintas calidades, ello se logra por levigación. Aposteriori se indican los métodos de análisis y como se efectuan los ensayos de aplicación que se efectuan en forma comparativa con productos comerciales de plaza. Como punto final, se arriba, despuós de los ensayos efectuados a las siguientes conclusiones. l) Contamos en nuestro suelo con caolines de excelentes calidad para la obtención del azul de ultramar. 2) La constricción de crisoles para esta industria, con arcillas argentinas, no ofrece dificultades. 3) Es posible la obtención de todos los tipos de ultramar pobres en Si02 y azufre, pobres en Si02 y ricos en azufre y ricos en ambos componentes. 4) Una vez logrado la temperatura adecuada de cocción es suficiente regular el tiempo de calentamiento inicial y final para obtener un buen pigmento. 5) Es fundamental paro lograr buen poder tintoreo y cubriente, la buena molienda y homogeneidad de las mezclas preparadas. 6) Son más reactivos y dan mejor resultado los caolines con alto contendio en alúmina, aún en el caso de mezclas ricas en sílice.

Blanco, Jorge Carlos Gustavo. "Purificación de taquizoitos de Toxoplasma gondii, clonado y caracterización de secuencias repetitivas del parásito" (1992). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Blanco, Manuel Carlos. "Aislamiento y caracterización de sustancias presentes en extractos de especies del género Morrenia (Asclepiadaceas)" (1976). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El presente trabajo, comprende el estudio químico de los componentes aislados y caracterizados en Morrenia brachystephana Griseb. (Asclepiadácea), y su extensión al estudio de otras 5 especies del mismo género. En el mismo se describen: I. La familia de las Asclepiadáceas incluyendo al género Morrenia, su abundancia y distribución geográfica y una enumeración de las sustancias aisladas de la familia registradas en la literatura, que en algunos casos se hallan concentradas en la misma. II. Los antecedentes sobre la acción biológica de M. brachystephana, "tasi", desde la pintoresca narración de Alcalde Espejo en 1871 hasta nuestros días, en que se corroboró la actividad mencionada mediante ensayos modernos con animales de laboratorio. III. Los alcanos de Asclepiadáceas, con una introducción en la que se indican las características de estos compuestos de interés quimiotaxonómico, su abundancia y variaciones estructurales, y el análisis comparativo de los resultados encontrados en las 6 especies de Morrenia estudiadas. IV. Los flavonoides, también de interés quimiotaxonómico, sus variaciones estructurales, interrelaciones y biosíntesis de los distintos tipos. V. El triterpeno germanicol, componente mayoritario de los extractos en éter de petróleo de las especies estudiadas, una revisión bibliográfica de su aislamiento de fuentes vegetales, su determinación estructural, tranformaciones en medio ácido y biosíntesis de triterpenos pentacíclicos. VI. La discusión de los resultados obtenidos, indicando cómo se efectuó la separación y determinación estructural de las sustancias halladas. Estudio de los espectros de resonancia magnética de hidrógeno y de masa del germanicol y derivados. Se analiza la distribución de los flavonoides en las especies de Morrenia, frente a posibles relaciones taxonómicas, y se indican otros flavonoides aislados de Asclepiadáceas. También se comenta la evolución de los flavonoides en plantas superiores. VIII. La Parte Experimental, en la que se detallan las técnicas empleadas y los procedimientos seguidos en el aislamiento y cracterización de los distintos compuestos en los extractos en éter de petróleo y metanol en M. brachystephana. Posteriormente, se indican los datos obtenidos en la ampliación de este estudio a otras especies de Morrenia. Finalmente en un Apéndice se dan los datos de recolección de cada una de las especies estudiadas. Las referencias bibliográficas están ordenadas según orden alfabético del primer autor del trabajo y año del mismo, y aparecen al final de la Tesis.

Blaustein Kappelmacher, Matías. "Regulación post-transcripcional de la expresión génica por señales extracelulares" (2007). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El splicing alternativo del precursor del RNA mensajero es una fuente extraordinaria de diversidad proteica y la regulación de este proceso es crucial para diversas funciones celulares tanto en situaciones fisiológicas como patológicas. Sin embargo, poco se sabe acerca de las señales y vías que regulan el splicing alternativo. Un modelo relevante de este proceso es provisto por la fibronectina, que contiene tres regiones de splicing alternativo conocidas como EDI, EDII y IIICS. Encontramos que diferentes factores de crecimiento estimulan la inclusión de EDI y de IIICS pero no la de EDII en el RNA maduro de la fibronectina en diferentes líneas celulares, favoreciendo isoformas de fibronectina asociadas con la proliferación, migración y remodelado de tejidos. Caracterizamos a la vía de supervivencia Ras-fosfatidilinositol 3-quinasa-AKT/Proteína quinasa B como la principal responsable de esta regulación. Mostramos que los factores de crecimiento gatillan la fosforilación de proteínas ricas en serina/arginina tales como SF2/ASF y 9G8, las cuales son importantes reguladores del splicing y probamos que AKT/Proteína quinasa B funciona como una proteína quinasa de proteínas ricas en serina/arginina. Asimismo, mostramos que los factores de crecimiento no sólo modifican el patrón de splicing alternativo de la fibronectina sino que también alteran la traducción de RNAs reporteros conteniendo una secuencia de EDI responsable de la unión de proteínas ricas en serina/arginina, sugiriendo dos niveles co-regulados de amplificación específica de isoforma. Tanto la regulación del splicing como la de la traducción en respuesta a factores de crecimiento son inhibidas por RNAs pequeños de interferencia contra SF2/ASF y 9G8. Finalmente, mostramos que SF2/ASF es capaz de regular la diversidad proteómica alterando el balance entre diferentes mecanismos de iniciación de la traducción, expandiendo aún más su ya descripto potencial para aumentar el repertorio proteico.

Abstract:
Alternative splicing of messenger RNA precursors is an extraordinary source of protein diversity and the regulation of this process is crucial for diverse cellular functions in both, physiological and pathological situations. However, little is known about signals and pathways regulating alternative splicing. A relevant model of this process is provided by fibronectin, which contains three alternatively spliced regions known as EDI, EDII and IIICS. We found that different growth factors stimulate EDI and IIICS but not EDII inclusion into fibronectin mature RNA in different cell lines, favoring fibronectin isoforms associated with proliferation, migration and tissue remodeling. We characterized the Ras-phosphatidylinositol 3-kinase-AKT/Protein kinase B survival pathway as the main contributor to this regulation. We show that growth factors trigger phosphorylation of serine/arginine-rich proteins such as SF2/ASF and 9G8, which are important regulators of splicing and prove that AKT/Protein kinase B functions as a serine/arginine-rich protein kinase. We also show that growth factors not only modify fibronectin alternative splicing pattern but also alter translation of reporter RNAs containing an EDI sequence responsible for serine/arginine-rich binding, suggesting two co-regulated levels of isoform-specific amplification. Both, regulation of splicing and translation by growth factors are inhibited by small interfering RNAs against SF2/ASF and 9G8. Finally, we show that SF2/ASF regulates proteomic diversity by altering the balance between different translation initiation mechanisms, expanding its already described potential to increase protein repertoire even further.

Bley, Miguel Andrés. "Regulación de la síntesis de ADN en células de la granulosa de rata cultivadas en medio definido" (1995). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Blidner, Ada G.. "Efecto del antiinflamatorio no esteroideo indometacina sobre las células mieloides supresoras en microambientes inflamatorios normales y tumorales" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las células mieloides supresoras (CMS) constituyen una población de células con actividad regulatoria que controla las respuestas inflamatorias crónicas y promueve el escape tumoral. En este proyecto de tesis mostramos que el efecto del antiinflamatorio no esteroide indometacina (Indo) sobre las CMS es dependiente del contexto en el que se diferencie esta población celular. Ratones BALB/c inoculados con el adenocarcinoma de pulmón singeneico LP07 (3x105 células) se trataron in vivo con una dosis de 10 μM de Indo en el agua de beber. El tratamiento inhibió la acumulación de CMS en el tumor y en órganos linfáticos secundarios producida durante la progresión tumoral, inhibió la actividad supresora de las CMS esplénicas sobre la respuesta linfocitaria a un aloantígeno e inhibió el crecimiento tumoral en un ensayo de transferencia adoptiva, p<0.001. En línea con estos resultados, observamos la misma actividad en las CMS cuando se trataron in vitro con Indo (10 μM) en presencia de medio condicionado de células LP07, simulando el microambiente tumoral. Sin embargo, en ausencia del microambiente tumoral, la administración de Indo generó un aumento en la capacidad supresora (MLR; p< 0.05) y pro-tumoral (transferencia adoptiva, p<0.01) de las CMS. Además, las CMS de ratones normales tratadas con Indo en ausencia del microambiente tumoral suprimieron el desarrollo de la encefalomielitis aguda experimental (EAE), un modelo de esclerosis múltiple en ratones C57BL/6, mientras que las CMS tumorales tratadas con Indo aumentaron la severidad de los síntomas e impidieron su resolución (p<0.05). Analizando los mecanismos de inmunosupresión, Indo redujo la actividad arginasa (4,794 vs 2,077 μg urea/ mg total proteína, p<0.001) y la producción de óxido nítrico (9.2 vs 4.4 μM; P<0,05) y de especies reactivas de oxígeno (124 vs 87 MFI P<0.05) en CMS tumorales pero no en CMS normales. Este estudio revela el rol dual de un agente antiinflamatorio en el control de una población celular regulatoria con implicancias críticas en cáncer y en desórdenes autoinmunes.

Abstract:
Myeloid-derived suppressor cells (MDSCs) have emerged as a regulatory cell population that controls chronic inflammatory responses and promotes tumor-immune escape. To date no specific immunomodulatory drug has proven efficacy in targeting the expansion and/or function of these cells. Here we show a context-dependent effect of the non-steroidal antiinflammatory drug indomethacin (Indo) on MDSCs. BALB/c mice were injected with 3x105 LP07 lung adenocarcinoma cells and treated with a non-cytotoxic dose of Indo (10 μM; IC50 LP07: 60 μM). Indo treatment inhibited the suppressive activity of splenic MDSCs in mixed lymphocyte reactions (MLR) (p<0.05), and restrained tumor growth in adoptive transfer experiments (p<0.001). Accordingly, the same effect was observed when MDSCs were treated with Indo in vitro (10 μM; IC50 MDSCs: 125 μM) in the presence of conditioned media from LP07 cells. However, in the absence of a tumoral context, Indo administration increased the suppressive activity of these cells (MLR; p< 0.05) and their pro-tumoral effect (p<0.01). In keeping with these observations, Indo-treated normal MDSCs suppressed the development of Experimental Autoimmune Encephalomyelitis (EAE), a model of multiple sclerosis in C57BL/6 mice, while Indo-treated tumoral MDSCs enhanced the severity of EAE and delayed its resolution (p<0.05). Mechanistically, Indo reduced arginase activity (4,794 vs 2,077 μg urea/ mg total protein,p<0.001) and production of nitric oxide (9.2 vs 4.4 μM; p<0,05) and reactive oxygen species (ROS) (124 vs 87 MFI P<0.05) in tumoral MDSCs, but not in normal MDSCs. Our study unveils the dual role of a widely used anti-inflammatory agent in the control of regulatory cell compartments with critical therapeutic implications in cancer and autoimmune disorders.

Blázquez, Josefina. "Proyecciones climáticas sobre Sudamérica utilizando modelos climáticos globales. Análisis de incertidumbres" (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis se analizan proyecciones climáticas sobre Sudamérica y sus incertidumbres asociadas utilizando modelos climáticos globales. Es ampliamente conocido que en los últimos años se ha producido un aumento en la temperatura del aire de superficie que no tiene registros históricos comparables y que además, se ha demostrado que ese incremento es debido al aumento antropogénico de los gases de efecto invernadero. Dicho incremento en la temperatura media global, trajo como consecuencias cambios en algunos patrones de circulación de gran escala y por lo tanto en otras variables atmosféricas. Según el último informe del IPCC (Intergovernmental Panel on Climate Change), dicho aumento va a seguir en las próximas décadas. Es por eso que en esta tesis se estudian cómo serán las proyecciones futuras a partir de experimentos del modelo climático global JMA/MRI (de alta resolución). Previo al estudio de las proyecciones futuras, se realizó una evaluación del clima presente, utilizando datos de estaciones meteorológicas, para identificar regiones en donde el modelo reproduce de manera adecuada los principales patrones de circulación, y los valores medios y la variabilidad de la temperatura y la precipitación. Es ampliamente conocido que las proyecciones climáticas del clima futuro generan incertidumbres que provienen de diferentes fuentes. Su importancia relativa puede cambiar debido al tiempo de proyección y a la variable, así como también a la escala (global o regional) en la cual se analizan dichas incertidumbres. Por lo tanto, en esta tesis se estudiarán además, las incertidumbres de las proyecciones del conjunto de modelos WCRP-CMIP3 y WCRP-CMIP5 con el objetivo de poder identificar las regiones en donde las proyecciones son más robustas.

Abstract:
Climate projections over South America and their associated uncertainties using global climate models are analysed in this thesis. It is widely known that in recent years has been occurred an increment in the global air surface temperature that has no historical records. Besides it has been shown that this increment is due to increasing anthropogenic greenhouse gases. This increase in global average temperature, resulted in changes in some patterns of large-scale circulation and therefore in others atmosphere variables. According to the latest assessment report of IPCC (Intergovernmental Panel on Climate Change), this increase will continue in the coming decades. For this reason, this thesis studies how future projections will be, using experiments of the global climate model MRI/JMA (high-resolution), with emphasis in the southern part of South America. Prior to the study the future projections, there was a present climate assessment, using meteorological stations data, to identify areas where the model reproduces adequately the main patterns of atmospheric circulation, and the mean and variability of temperature and precipitation. It is widely known that climate projections generate uncertainties which come from different sources, and their relative importance may change due to time projection and the variable, as well as due to the scale (global or regional) in which these uncertainties are analysed. Therefore, this thesis examines the uncertainties of the projections of WCRPCMIP3 and WCRP-CMIP5 models in order to identify regions where the projections are more robust.

Blüguermann, Carolina. "Estudio de la participación de la citoquina LIF en el proceso de diferenciación de células madre embrionarias humanas a cardiomiocitos" (2015-06-29). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las células madre embrionarias humanas (CMEh) se caracterizan por su capacidad para auto-renovarse, sin perder sus propiedades, casi ilimitadamente. Una de las principales propiedades de estas células es la pluripotencia, es decir la capacidad para diferenciarse y dar origen a las tres capas germinales: ectodermo, mesodermo y endodermo. Debido a su capacidad de autorenovación y a su naturaleza pluripotente las CMEh representan un modelo experimental único para numerosas áreas de investigación en biología y medicina. Estudios recientes realizados para dilucidar los mecanismos que dirigen la diferenciación de CMEh a cardiomiocitos in vitro, han recapitulado muchos de los procesos que ocurren in vivo durante el desarrollo cardíaco temprano. Numerosos trabajos han demostrado que el factor inhibitorio de leucemia (LIF por su nombre en inglés) puede promover la proliferación o inducir la diferenciación celular de manera específica, dependiendo del tipo celular o estadío del desarrollo en el que actué. No obstante, poco se sabe acerca de la relevancia biológica de esta citoquina durante el proceso de diferenciación cardíaca humana. El objetivo principal de nuestro proyecto de investigación consistió en estudiar el rol de LIF durante la generación y el mantenimiento de cardiomiocitos a partir de CMEh. Para ello, en primera instancia, desarrollamos un nuevo protocolo de diferenciación de CMEh a cardiomiocitos, que incluye el uso de un medio de composición definida y el agregado secuencial de factores específicos que dirigen la diferenciación hacia mesodermo cardíaco. A continuación, evaluamos el efecto del agregado de LIF en diferentes etapas de la diferenciación cardiaca. Nuestros resultados nos permiten postular que la presencia de LIF a lo largo de la diferenciación cardíaca ejerce un efecto citoprotector que estaría asociado a una diminución de los niveles de apoptosis. En una segunda etapa logramos generar en nuestro laboratorio una línea de células pluripotentes inducidas (CMPIs) a partir de la reprogramación de fibroblastos dérmicos y evaluamos su rendimiento al ser sometidas al protocolo de diferenciación cardíaca. Las CMPIs presentan expresión génica, proteica y modificaciones epigenéticas muy similares a las CMEh. Estas características las equiparan a las CMEh, y por ende son vistas como substitutos accesibles. Palabras clave: Células madre embrionarias humanas, mesodermo, diferenciación cardíaca, LIF, gp130/STAT3, células madre pluripotentes inducidas.

Abstract:
Human embryonic stem cells (hESCs) are commonly defined as undifferentiated cells that can proliferate indefinitely and have the capacity of both self-renewal and differentiation, giving rise to all three germ layers: ectoderm, mesoderm and endoderm. Because of their capacity for self-renewal and their pluripotent nature, hESCs represent a unique experimental model for many areas of research in biology and medicine. Recently, numerous studies on the mechanisms that direct the differentiation of hESCs into cardiomyocytes in vitro, have recapitulated many of the processes that occur in vivo during early cardiac development. However, one of the most important challenges that the application of stem cells in cardiovascular regenerative medicine faces, is the great difficulty to obtain these specialized cells in sufficient quantity and purity. Numerous studies have shown that leukemia inhibitory factor (LIF) can promote proliferation or induce cell differentiation, depending on the cell type or stage of development in which it acts. However, little is known about the biological relevance of this cytokine during human cardiac differentiation. The main objective of our research was to study the role of LIF in the generation and maintenance of cardiomyocytes from hESCs. To this end, we developed a new differentiation protocol of hESCs into cardiomyocytes, which includes the use of a defined composition medium and the sequential addition of specific factors (in restricted time windows) that direct differentiation into cardiac mesoderm. Finally, we evaluated the effect of the addition of LIF at various stages of cardiac differentiation. Our results allow us to postulate that the presence of LIF during cardiac differentiation exerts a cytoprotective effect as a consequence of the reduction in the level of apoptosis. As a second objective, we generate in our laboratory, a line of induced pluripotent stem cells (hiPSC) from dermal fibroblasts and evaluate its performance when subjected to the cardiac differentiation protocol. hiPSC have very similar gene, protein and epigenetic expression profile when compared to hESCs, and therefore, are considered as accessible substitutes. Key words: Human embryonic stem cell, mesoderm, cardiac differentiation, LIF, gp130/STAT3, Induced pluripotent stem cells.

Bocanera, Laura Viviana. "Rol de la Guanilil Ciclasa y el GMPc en el metabolismo de la tiroides" (1996). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El presente trabajo de tesis tienen como objetivo estudiar el rol en la glándula tiroides de la enzima guanilato ciclasa (GC) y el producto de la reacción catalizada por esta: el GMPc. En la primera sección se detalla la caracterización parcial de la enzima en tiroides bovinas. Los resultados obtenidos, demuestran la presencia de dos tipos de GC: una soluble y una particulada, predominando la actividad soluble (79%) sobre la actividad asociada a membrana (8%). El tratamiento con Tritón X-100 incrementa la actividad de ambas enzimas (350% GC particulada, 70% GC soluble). Con el objeto de descartar cualquier posible contaminación de la fracción soluble con la fracción particulada y viceversa, se determinó las actividades de las enzimas en ambos preparados, previamente tratados con activadores específicos para cada una de ellas: Pépitido natriurético atrial (ANP) para la GC particulada y nitroprusiato de sodio (NP) para la GC soluble. El ANP incrementó la actividad en la fracción de membrana y el NP activó la GC de la fracción soluble, sin observarse ningún efecto del ANP y NP sobre la enzima soluble y particulada respectivamente, descartando una contaminación de las fracciones entre si. Para estudiar el grado de interacción entre la enzima particulada y la membrana, se sometió al precipitado de la centrifugación de 105.000 x g a tratamientos con NaCl 0.5 mM, deoxicolato 1%, o Lubrol PX 1%, obteniéndose mayor actividad en las muestras tratadas con Lubrol PX indicando que la proteína se encuentra fuertemente asociada a la membrana. Cuando se estudió el comportamiento cinético considerando el complejo MnGTP como sustrato, la cinética fue michaelina para la GC soluble con un Km de 0.036 mM, mientras que la enzima particulada mostró un comportamiento alostérico positivo con un S0.5 de 0.230 mM y un coeficiente de Hill de 1.9, indicando que existen en la enzima, por lo menos dos sitios de unión para el sustrato. Con el objeto de estudiar el efecto de diferentes concentraciones de manganeso, se determinó la actividad enzimática trabajando en condiciones de exceso de Mn2+ respecto de la concentración de GTP. Los resultados obtenidos en esta serie de experimentos, muestra un comportamiento alostérico positivo para la enzima soluble con un S0.5 de 1.2 mM y un coeficiente de Hill de 2.9. La cinética para la enzima particulada ensayada en las misma condiciones, resultó michaeliana con un Km de 0.280 mM. Si bien la actividad enzimática es altamente dependiente de manganeso, resultó de interés investigar el efecto sobre la enzima de otros cationes divalentes: Mg2+ y Ca2+. Reemplazando el Mn2+ por Mg2+ en el medio de reacción, no se observó actividad de la enzima asociada a la fracción particulada, obteniéndose con la enzima particulada, sólo un 15% de la actividad determinada en presencia de manganeso. El calcio en ausencia o presencia de concentraciones óptimas de manganeso, no tuvo efecto sobre la actividad de ninguno de los dos tipos de GC. Con concentraciones subóptimas de Mn2+, se observó un aumento de la actividad en la GC soluble a altas concentraciones de calcio. Este este estímulo sólo representa aproximadamente el 20% de los valores obtenidos con concentraciones de manganeso óptimas. Con la GC particulada en las mismas condiciones experimentales se observó una ligera pero significativa inhibición a concentraciones altas de Ca2+. La segunda parte de este trabajo está dedicada a determinar el posible rol biológico asociado a la GC soluble en la glándula tiroides. Para este fin se utilizó como modelo experimental cultivos primarios de tiroides bovinas. La primera serie de experimentos tuvo como objetivo verificar que en el modelo experimental utilizado, la GC soluble es activable por el nitroprusiato de sodio (NP). Los resultados obtenidos indican que el NP produce un incremento en la actividad enzimática que es dependiente de la y del tiempo de tratamiento, incrementando correlativamente los niveles de GMPc. Dado que el transporte de ioduro, constituye el paso inicial y limitante en la síntesis de las hormonas tiroideas, se estudió el efecto del NP sobre la incorporación del halógeno. Se observó una inhibición significativa de la capitación de yoduro a las 2 hs de tratamiento con 5 mM de NP en células previamente tratadas con TSH por 72 hs, sin variaciones sobre los basales (células sin TSH). Este efecto fue reproducido por un análogo del GMPc (8Br-GMPc), y bloqueado por hemoglobina reducida, sugiriendo que este se encuentre mediado por la vía GC-GMPc. La inhibición producida por el NP fue también observada cuando las células son tratadas con activadores del sistema adenilil ciclasa-AMPc tales como forskolina y análogos del AMPc, indicando que el compuesto nitrogenado podría estar inhibiendo un efecto de la TSH desencadenado a través de este sistema de transducción de señales. Sin embargo, el punto de acción sería distal a la formación de AMPc, dado que los niveles del nucleótido no se encuentra disminuidos. Dado que la incorporación de iodo a la célula tiroidea se encuentra determinada por un equilibrio entre la entrada y la salida o eflujo, se consideró de ínterés evaluar que mecanismo se encontraba afectado por el NP. En una primera instancia se estudió el efecto del compuesto nitrogenado sobre la salida o eflujo de iodo, no observándose diferencias significativas en las células tratadas con NP respecto al control. Teniendo en cuenta que la incorporación de yoduro en la célula tiroidea se encuentra inequivocamente ligada a la actividad de la ATPasa Na+/K+ estimulable, se investigó la acción del NP sobre esta enzima. Los resultados obtenidos indicaron una marcada inhibición en la actividad de la enzima en células previamente tratadas con TSH por 72 hs sin efectos significativos sobre los cultivos en condiciones basales. Este efecto es reproducido por 8Br-GMPc confirmando que la inhibición se encuentra mediada por el sistema GC-GMPc.

Abstract:
The present Doctoral Thesis work had as an aim to study the role of guanylil cyclase (GC) and its product, cyclic GMP (cGMP), in the regulation of thyroid function. In the first section the partial characterization of the enzyme in calf thyroid is presented. The results obtained showed the presence of two types of GC: one is soluble and comprises around 79% of total activity, while the remaining is particulate. Treatment with Triton X-100 increases both activities (350% increase for the particulate, 70% for the soluble enzyme). In order to rule out the possibility of a contamination of the soluble fraction with the particulate, and vice-versa, the activity of each of the enzymes was determined after stimulation with specific activators for each one. The atrial natriuretic peptide (ANP) for the particulate GC and sodium nitroprusside (NP) for the soluble enzyme. Both compounds increased their respective effectors and no cross stimulation was observed. In order to analyze the interaction between the particulate enzyme and the membranes the pellet obtained after centrifugation at 105,000 x g was treatedwith either 0.5 mM NaCl, 1% sodium deoxycholate or 1% Lubrol PX 1%. The highest activity was obtained after treatment with Lubrol, suggesting that the enzyme is strongly associated to the membrane. When the kinetics of the enzyme was analyzed, taking the complex MnGTP as a substrate, the results showed a Michaelis type kinetics for the soluble GC, with a Km of 0.036 mM, whereas the particulate GC showed a positive allosteric behaviour with a S0.5 of 0.230 mM and a Hill coefficient of 1.9, indicating that the enzyme has at least two binding sites for the substrate. When the influence of different Mn2+ concentrations was studied, under excess with respect to GTP, apositive allosteric behaviour for the soluble GC was found, with an S0.5 of 1.2 mM and a Hill coefficient of 2.9 The kinetic of the particulate enzyme under similar conditions was of Michaelis type, with a Km of 0.280 mM. Although the enzyme is highly dependent of Mn2+, it was of interest to investigate the possible effects of other divalent cations, such as Ca2+ and Mg2+. The replacement of Mn2+ for Mg2+ caused a complete disappearance of the particulate enzyme, while the soluble activity decreased by 85%. Addition of Ca2+ had no effect on either GC. However, with suboptimum concentrations of Mn2+, high Ca2+ concentrations caused an increase in soluble activity, but it comprised only 20% of maximum activity with optimal Mn concentrations. With the particulate enzyme a slight but significant inhibition was observed. The second part of this study examines the role of GC and cGMP in thyroid regulation. Primary cultures of calf thyroid cells were used as a model. In the first studies the stimulation of soluble GC by NP was confirmed. This increase is time and concentration- dependent, with a correlative increase in cGMP concentrations. Iodide uptake is the limiting step in thyroid hormone biosynthesis and a typical functional parameter. Therefore it was determined as an index of thyroid function. In cells treated with TSH for 72 h, addition of 5 mM NP for the last 2 h caused a significant inhibition of iodide uptake, without change in cells not treated with TSH. This action was mimicked by an analogue of cGMP, 8Br-cGMP, and blocked by reduced haemoglobin, thus suggesting that it is mediated by GC-cGMP pathway. NP also inhibited the stimulation caused by forskolin or analogues of cAMP, indicating that the effect takes place at this pathway, which would be distal to cAMP generation, since cAMP are not decreased by NP. The accumulation of radioiodine by thyroid cells is the consequence of the balance between uptake and efflux. In order to rule out an effect on this last parameter a series of studies were conducted. The results failed to demonstrate that NP affects iodide efflux, therefore concluding that it inhibits uptake. Since iodide transport across the membrane depends of the energy supplied by the Na+/K+ ATPase the possible effect of NP on the enzyme was analyzed. The results showed a significant inhibition of the ATPase by NP in cells treated for 72 h with TSH. This action was reproduced by 8Br-cGMP, thus confirming the role of GC and cGMP in this process.

Bocca, Silvia N.. "Caracterización bioquímica y molecular de la enzima UDP-glucosa: proteína transglucosilasa de Solanum tuberosum" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La enzima UDP-glucosa: proteína transglucosilasa (UPTG) es una glicosiltransferasa autocatalítica descripta inicialmente en tubérculo de papa (Solanum tuberosum L.). Se había propuesto que la UPTG era capaz de iniciar la síntesis de α-glucanos unidos a proteína in vitro y que tendría una función de proteína iniciadora de la biosíntesis del almidón. La UPTG de tubérculo de papa se purificó hasta aparente homogeneidad, se desarrollaron anticuerpos policlonales específicos contra la misma y se clonaron cADNs correspondientes a la UPTG por screening de genotecas de expresión de papa. Ensayos de Northern blot y Western blot mostraron que tanto el ARN mensajero como la proteína UPTG están presentes en un nivel semejante en todos los tejidos de la planta. Algunas de las secuencias clonadas se expresaron en E. coli obteniéndose UPTG recombinante enzimáticamente activa. Se encontró que tanto las proteínas recombinantes como la purificada de tubérculo pueden ser glicosiladas a partir de UDP-Glc, UDP-Xil o UDP-Gal y que la glicosilación es reversible. Dos cADNs obtenidos fueron secuenciados totalmente, esto permitió detectar un muy alto grado de identidad (~ 90%) entre la secuencia de la UPTG y varias secuencias de proteínas vegetales de función aún no determinada que localizan específicamente en la región trans del aparato de Golgi. La secuencia de la UPTG no presenta zonas hidrofóbicas que puedan corresponder a regiones transmembrana ni un posible péptido señal que permita su entrada a plástidos o al sistema de endomembranas de la célula. Estos resultados sugieren que la enzima localizaría en el lado citoplásmico del aparato de Golgi y no en los plástidos en donde ocurre la síntesis del almidón, por lo tanto están en contra de un posible rol de la UPTG en la síntesis de este polisacárido. En ningún organismo que no sea vegetal se encontró una proteína que pueda considerarse homóloga a la UPTG. Esta característica, sumada a su localización indicarían una posible función relacionada con la síntesis de los polisacáridos complejos de la pared, función exclusiva del aparato de Golgi de las células vegetales. La especificidad de la UPTG por distintos nucleótidos azúcares y la reversibilidad de la reacción de glicosilación hacen pensar que la UPTG podría estar formando parte de un sistema complejo que acople el transporte de nucleótidos azúcares con la síntesis de polisacáridos estructurales.

Abstract:
The enzyme UDP-glucose: protein transglucosylase (UPTG) is an autocatalytic glycosyltransferase reported in potato tuber (Solanum tuberosum L.). It was suggested that UPTG could in vitro initiate protein-bound α-glucan synthesis and postulated as the protein that primes starch biosynthesis. UPTG was purified to apparent homogeneity from potato tubers, polyclonal antibodies were raised against the protein and cDNAs coding for UPTG were cloned screening potato expression libraries. RNA hybridization studies and Western blot analysis indicated that UPTG mRNA and polypeptide are expressed in all potato tissues. When the cloned sequences were expressed in E. coli, the recombinant UPTG was enzymatically active. It was determined that purified as well as recombinant UPTG can be glycosylated by UDP-Glc, UDP-Xyl or UDP-Gal and that glycosylation is reversible. The complete sequence of two cDNAs was obtained and compared with the sequences present in the databanks. UPTG shows a high degree of similarity (~ 90%) with several plant sequences. The function of these sequences remains to be determined but it was demonstrated their specific localization in the trans-Golgi cisternae. UPTG sequence do not present hydrophobic segments that could correspond to transmembrane regions. The amino terminal sequence lacks a signal peptide that could allow the protein to enter into plastids or into endomembrane system of the cell. These results suggest that the enzyme localizes at the cytoplasmic face of the Golgi apparatus, and not in plastids were starch synthesis occurs, and are against a possible role of UPTG in starch synthesis. In no organism other than plants a sequence homologous to UPTG could be detected. This fact, added to its Golgi localization suggests a role in cell wall polysaccharide synthesis, a function present exclusively in the Golgi apparatus of plant cells. The specificity of UPTG for different sugar-nucleotides and the reversibility of the glycosylation might correspond to UPTG being part of a complex system that couples sugar-nucleotide transport with the synthesis of cell wall polysaccharides.

Bochicchio, Roberto Carlos. "Una investigación sobre los operadores densidad reducidos y sus aplicaciones a diferentes particiones de la densidad electrónica en sistemas moleculares" (1988). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se utiliza el operador estadístico o densidad reducido de orden q como herramienta matemática para generar rigurosamente y de forma absolutamente general, una serie de posibles análisis poblacionales, para las densidades de carga asociadas con los electrones (q=1), "patrones" (q=2) y, en el caso más general, q-ones. En todos los casos anteriores, es posible definir un análisis poblacional lineal y otro no-lineal (en este trabajo, en particular, desarrollamos el que denominamos estadístico), de acuerdo a la funcional generadora que actúa obre el operador densidad. Si q=1, el análisis lineal reobtiene la conocida partición de Mulliken, aunque a partir de un púnto de vista distinto al original. Una particular elección de la funcional generadora, en el caso no lineal, nos conduce a una partición del tipo Armstrong, Perkins y Stewart, pero ahora estamos en condiciones de dar expresiones explícitas para las funciones de onda más generales del tipo MC-SCF y CI. Se definen expresiones de la valencia atómica, el grado de ligadura biatómico (multiplicidad de la unión), que reproducen los valores clásicos, aún cuando éstos no pueden anticiparse. En el caso q=2, el análisis lineal nos conduce a la generalización de la partición de la densidad de patrones, debido a K.Ruedenberg. El análisis no-lineal es un camino completamente novedoso de particionar la densidad parónica, y permite la definición de nuevas magnitudes. Para este caso, presentamos expresiones explícitas sólo para el formalismo SCF de capa cerrada. Finalmente, además de los resultados numéricos sobre sistemas moleculares aislados, se presenta una amplia gama de sistemas reactivos, donde se muestra la bondad del análisis poblacional estadístico para explicar y describir el mecanismo de reordenamiento de la nube electrónica durante dicha reacción. Además se presentan las conclusiones en forma explícita sobre la teoría en general y algunas sobre casos particulares que ayudan a proponer líneas de investigación para el futuro.

Boechi, Leonardo. "Estudio computacional de la relación estructura-función en globinas" (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las globinas son una familia de proteínas solubles, que poseen un grupo hemo unido generalmente de manera no covalente a la proteína. Sus representante má famosos son la hemoglobina y la mioglobina, responsables del transporte y almacenamiento de oxígeno en mamíferos Las globinas se clasifican en varias subfamilias, una de ellas se denominan hemoglobinas truncadas (trHb) y se las ha encontrado en plantas, hongos y bacterias. En muchos casos pertenecen a microorganismos patógenos para el hombre como M. tuberculosis, M. leprae, y C jejuni entre otros. Las globinas poseen la capacidad de reaccionar frente a ligandos diatómicos (O 2, NO, etc) que les permite actuar como reservorios de dichos ligandos, transporte o detección de los mismos o realizando reacciones de óxido reducción en procesos fundamentales para la supervivencia de los microorganismos patógenos en los organismos donde se alojan. Por esta razón, en la presente tesis se estudiaron los determinantes moleculares que regulan la reactividad de las globinas (fundamentalmente trHbs) frente a ligandos diatómicos, utilizando métodos de simulación computacional. Por un lado se realizaron estudios de los diferentes mecanismos mediante los cuales se regula la migración de los ligandos hacia el sitio activo. Y por el otro, los mecanismos de estabilización de los ligandos cuando se encuentran coordinados al grupo hemo, dentro de la proteína. El estudio de ambos procesos mencionados, resulta fundamental para comprender la función que estas proteínas desempeña en los organismos a los cuales pertenecen. Con el objeto de alcanzar una visión global de los fenómenos estudiados, se investigaron diferentes miembros de la misma sub familia, emparentados evolutivamente entre si. De esta forma se logró una comprensión más amplia de cada uno de los fenómenos. Las herramientas computacionales utilizadas están basadas principalmente en dos metodologías: aquellas basadas en la mecánica clásica para analizar procesos dinámicos de los sistemas, combinado con un novedoso esquema (teorema de Jarzynski) que permite obtener perfiles de energía libre de los procesos; y esquemas híbridos clásico/cuánticos (QM/MM) que permiten simular reactividad química en sistemas grandes como son las hemoproteínas. Dado que las simulaciones computacionales son herramientas muy poderosas cuando se las encuentran combinadas con resultados experimentales, se ha trabajado en colaboración con grupos experimentales para potenciar los alcances de las simulaciones, y a su vez validar los modelos utilizados. Los resultados de la presente tesis, permitieron comprender la estructura de canales internos que poseen las globinas; así como también, la dinámica del sitio activo que regula la afinidad y la reactividad en las mismas. En particular, se reconciliaron resultados aparentemente contradictorios, respecto de la relación entre la estructura de canales internos y las constantes cinéticas de asociación; se identificaron residuos críticos altamente conservados en esta familia, que resultan fundamentales para los procesos de migración de ligandos; se encontraron y caracterizaron fenómenos de hexacoordinación interna dual en una trHb de una bacteria antártica; se caracterizó la estabilización de diferentes ligandos (CO, O2 SH, F) en estas proteínas; y finalmente se encontró una relación muy importante entre la protonación de un residuo de histidina y la migración de O2 en la mioglobina.

Abstract:
Globins are soluble proteins that have a heme prosthetic group non covalently bound to the protein matrix. The most important members are hemoglobin and myoglobin, which are responsible for the oxygen transport and storage in mammals. The globin family is classified in different sub families: one of them is called truncated hemoglobin (trHb) and its members are widely distributed in plants, fungi and bacteria kingdoms. In many cases, these proteins belong to pathogen microorganism like M. tuberculosis, M. leprae, y C jejuni among others. These proteins are able to react with diatomic ligands like O2 and NO. This confers upon them the ability to act as storage, transporters or ligand detectors. In many cases they are also involved in redox processes which are critical for the survival of the microorganism in the host organism. In the present Thesis we studied the molecular basis of globins reactivity (mainly trHbs) with diatomic ligands. Specifically, we studied both the different mechanisms used by these proteins to control ligand migration to the active site, and the stabilization of the coordinated ligand once the ligand is inside. These processes are crucial to understand the role of these proteins in the organisms to which they belong. In order to reach a global vision of the processes, we studied different members of the same family, which are evolutively related. The computational tools used in the present Thesis are mainly based on two approaches. Those based on classical mechanics, to study processes associated with the dynamics of the system, combined with “State of the Art” techniques (Jarzynski's equation) that provide us with the free energy profile of the process desired. We also used a novel quantum/classical approach (QM/MM) reactive processes in large systems. Since computer simulations are very powerful tools combined with experimental results, different collaborations were made with experimental groups to reach a better understanding of the processes, and even as an important way to validate our models. The overall results provide new insight into the structure of internal tunnels for ligand migration, as well as the active site dynamics. In particular, we conciliated controversial results about the relationship of the structure of internal tunnels and the association kinetic constants; we identified critical residues highly conserved in this family involved in the ligand migration process; we found internal hexacoordination phenomena in an antarctic bacteria trHb; we also characterized the stabilization of different ligands such as CO, O2 SH, F coordinated to the heme group; and finally we found an important relationship between the protonation of a particular histidine and the O2 uptake in myoglobin

Boffi, Juan Carlos. "Receptor nicotínico colinérgico alfa9alfa10: propiedades funcionales y farmacológicas" (2014-03-31). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La activación del receptor nicotínico colinérgico α9α10 presente en los contactos sinápticos entre las fibras colinérgicas eferentes olivococleares y las células ciliadas del órgano de Corti puede prevenir el trauma acústico. En consecuencia, incrementar su activación mediante el uso de potenciadores farmacológicos, conocer las condiciones en las cuales este receptor alcanza una activación óptima o estudiar su mecanismo de activación, podría tener un potencial valor terapéutico para la prevención de la pérdida de audición causada por exposición a intensidades altas de sonido. Por lo tanto, los objetivos de este trabajo fueron: caracterizar nuevos moduladores positivos para el receptor α9α10, estudiar las condiciones en las que alcanza una activación óptima y describir los requerimientos estructurales para su activación. En relación a la búsqueda de potenciadores farmacológicos, en este trabajo caracterizamos al ácido ascórbico (ASC) como modulador positivo de receptores recombinantes α9α10 expresados en oocitos de Xenopus laevis, mediante fijado de voltaje con dos electrodos. Evidenciamos que la potenciación por ASC de α9α10 no afecta la afinidad aparente por acetilcolina (ACh) ni la sensibilidad al voltaje del receptor, pero si incrementa significativamente las amplitudes máximas de corriente evocada. Este efecto es estereoespecífico de la forma L y reducida de ASC. Nuestros resultados sugieren que el mecanismo de potenciación involucraría una interacción alostérica estereoespecífica. Para caracterizar las condiciones en las cuales el receptor α9α10 alcanza una activación óptima, estudiamos la influencia del Ca2+ extracelular en la activación del receptor recombinante α9α10. Este receptor es potenciado a concentraciones sub-mM de Ca2+ y es bloqueado a concentraciones superiores. La incorporación de la subunidad α10 al pentámero es responsable de la potenciación a concentraciones sub-mM de Ca2+. Mediante mutagénesis dirigida y generación de receptores quiméricos, evidenciamos que las interfaces entre los dominios extracelulares de una subunidad α9 y otra α10 adyacente son clave en este proceso. Finalmente, estudiamos el proceso de activación de receptores recombinantes α9α10, caracterizando la importancia de cada subunidad en la formación de sitios de unión a ACh funcionales. Evidenciamos que los componentes principales del sitio de unión a ACh de tanto las subunidades α9 como de las α10 son necesarios para la activación del receptor α9α10 y que los componentes complementarios de α9 son indispensables para este proceso.

Abstract:
The activation of the α9α10 nicotinic cholinergic receptor present at the synaptic contacts between efferent olivocochlear cholinergic fibers and hair cells of the organ of Corti can prevent acoustic trauma. In consequence, to enhance its activation by means of a pharmacological potentiator, to know the conditions in which it reaches maximal activation or to study its activation mechanism, could have a potential therapeutic use in the prevention of noise induced hearing loss. Hence, the aims of this work were to characterize new positive modulators of the α9α10 receptor, to study the conditions in which it reaches optimal activation and to describe its structural requirements for activation. Searching for new positive modulators of α9α10, in this work we characterized ascorbic acid (ASC) as a potentiator of recombinant α9α10 receptors expressed in Xenopus laevis oocytes by two electrode voltage clamp recordings. We evidenced that the potentiation produced by ASC does not affect the receptor’s apparent affinity for acetylcholine (ACh) or its voltage sensitivity, but it significantly increases the maximal evoked current amplitudes (Imax). This effect is stereospecific of the reduced L stereoisomer of ASC. Our results suggest that the potentiation mechanism could involve a stereospecific allosteric interaction. To characterize the conditions in which the receptor reaches optimal activation, we studied the influence of extracellular Ca2+ on the activation levels of the recombinant α9α10 receptor. This receptor is potentiated at sub-mM Ca2+ concentrations and is blocked by higher concentrations. The incorporation of α10 subunits to the pentamer is responsible for the potentiation observed at sub-mM Ca2+ concentrations. Using site directed mutagenesis and generating chimeric receptors, we evidenced that the interphase between the extracellular domains of adjacent α9 and α10 subunits is a key structural determinant in this process. Finally, we studied the process of activation of recombinant α9α10 receptors characterizing the importance of each subunit in the conformation of functional ACh binding sites. We evidenced that the principal components of the ACh binding site provided by both α9 and α10 subunits are necessary for the activation of α9α10 receptors and that the complementary components provided by α9 subunits are essential for this process.

Bogetti, María Eugenia. "Neurotrofinas y neuroprotección en el SNC en desarrollo: rol del NGF y sus receptores tras un evento de hipoxia perinatal" (2015-04-09). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los eventos hipóxicos que ocurren sobre el SNC en desarrollo, poseen consecuencias nocivas dada la alta vulnerabilidad del tejido nervioso a la falta de oxígeno. El presente trabajo estudia los efectos sobre el Téctum óptico en desarrollo de un evento hipóxico agudo normobárico sobre embriones de aves. Encontramos que la disminución de oxígeno en tales condiciones produce una discreta pero significativa muerte neuronal de fenotipo mayoritariamente apoptótico. Mediante la inmunomarcación observamos que existe un aumento en la expresión de NGF como estrategia de rescate celular frente a la injuria, mientras que ésta produce paralelamente una disminución en la activación del receptor TrkA. Este fenómeno es correlacionado con la muerte apoptótica observada a las 6 horas de reoxigenación. Observamos además un efecto neuroprotector por parte del NGF sobre las neuronas sometidas a hipoxia, efecto que se ve abolido en presencia de un inhibidor de la activación del receptor TrkA. Concluimos que el efecto neuroprotector ejercido por el NGF ante un evento de injuria hipóxica, posee al receptor TrkA como una molécula iniciadora clave y consideramos el momento de finalización de la hipoxia, como un período de susceptibilidad y regulación en el que el balance y estado de receptores, serían críticos en el destino de las células que sufren daño por hipoxia.

Abstract:
Hypoxic insults during CNS development have deleterious outcomes due to high vulnerability of nervous tissue to low oxygen concentration. In the present thesis, we analize the effects of a normobaric acute hypoxic event in the chick Optic Tectum embryo. We find that the low oxygen produces a discrete but significative neuronal death whose fenotype is mainly apoptotic. By immunohistochemistry technique, we determine that there is a significative increase in the NGF expression as a neuronal rescue strategy. In addition, the hypoxic injury produces a decrease in the TrkA receptor activation. This fact is correlationed with the apoptotic neuronal death observated 6 hours after reoxigenation. Additionally, we determine a NGF neuroprotector effect over neurons subject to hypoxic conditions. This condition is suppressed in presence of a TrkA activation inhibitor. We conclude that the NGF neuroprotector effect in presence of a hypoxic insult has the TrkA receptor, like an essential and initial molecule and we consider the hypoxia end like a susceptibility and regulation period. In this time, the receptors balance and state would be critic in the damaged neurons destiny in a hypoxic acute insult.

Boggiano, César. "Uso de bibliotecas sintéticas combinatorias para el desarrollo de vacunas y antirretrovirales para el tratamiento y prevención del SIDA" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el año 2002, 3 millones de personas murieron como consecuencia del síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) y se estima que 5 millones se infectaron con el virus de la inmunodeficiencia adquirida humana (HIV). Hasta la fecha no existe un tratamiento que pueda erradicar la infección en todos los pacientes HIV+ y tampoco una vacuna efectiva profiláctica o terapéutica. Las bibliotecas sintéticas combinatorias (BSCs) son colecciones de compuestos orgánicos, peptidomiméticos o peptídicos. Debido a su alta complejidad (miles a millones de compuestos diferentes) son excelentes herramientas para la identificación de compuestos capaces de alterar diferentes eventos biológicos. En primer lugar, se estudió la capacidad de las bibliotecas de inhibir el primer evento del ciclo replicativo de HIV-1, adsorción y entrada, en un sistema de fusión de membranas dependiente de HIV-1 Env y receptores celulares. Los compuestos individuales derivados de bibliotecas de piperazinas y triaminas, mostraron actividad inhibitoria de la fusión aunque con elevada toxicidad. También se identificaron D-decapéptidos capaces de inhibir en el rango micromolar, la replicación de cepas de laboratorio HIV-1 y un aislamiento clínico resistente a AZT. El mecanismo inhibitorio de la replicación involucra la entrada viral. Además, se descubrieron compuestos antagonistas de la quiomiotaxis inducida por SDF-1α en células CXCR4+, aunque este mecanismo no parece estar involucrado en la inhibición de la replicación. Por otra parte, una BSC de L-nonápeptidos fue utilizada para identificar inmunógenos naturales y sintéticos específicos para un clon de células T citotóxicas derivadas de un paciente HIV+. Se identificaron superagonistas capaces de estimular no sólo el clon original mejor que el péptido natural (Gag77-85), sino también clones con la misma especificidad aislados de otro paciente HIV+. También se identificaron por primera vez, secuencias derivadas de virus heterólogos que son capaces de estimular un clon específico para HIV-1 Gag77-85.

Bogo, Horacio Alejandro. "Monitoreo y análisis de la contaminación atmosférica en la Ciudad de Buenos Aires" (2004). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En este trabajo se monitorearon gases contaminantes, particularmente CO, NO, NO2 y O3, y material particulado por periodos prolongados en distintos puntos de la Ciudad Autónoma de Buenos Aires y algunos puntos del AMBA. Éste es el primer estudio sistemático realizado en la zona usando monitores automáticos e incluyendo diseño y modificación de equipamiento, técnicas y software. Los datos recogidos durante seis años en extensos períodos de monitoreo en sitios de características complementarias, representativos de situaciones típicas de la región, fueron analizados en forma comparativa. Se consideraron los promedios horarios y mensuales de los parámetros químicos de interés y se correlacionaron con variables meteorológicas, tratando de establecer tendencias estacionales y de verificar su repetitividad anual. Se analizaron las mediciones realizadas mediante modelos estadísticos y de dispersión. Se comenzó un estudio de caracterización de material particulado mediante microscopias óptica, de fuerza atómica y de barrido electrónico, espectroscopías de superficie y cromatografía iónica, obteniéndose información sobre la morfología de las partículas su distribución de tamaños y su composición. Los resultados indican que la principal fuente de CO, NOx y partículas es el tránsito vehicular. La concentración de O3 es generalmente baja, como resultado de la mezcla de emisiones primarias conteniendo NO con masas de aire limpio. Se establecieron correlaciones entre contaminantes gaseosos y material particulado. Se evaluó la actividad fotoquímica en espacios sin tránsito (área verde), hallándose una relación directa entre la radiación solar total medida y la velocidad de fotólisis de NO2 en verano. Los resultados obtenidos poseen validez como diagnóstico de la situación de la atmósfera de Buenos Aires y pueden usarse con fines predictivos.

Abstract:
Gaseous pollutants, particularly CO, NO, NO2 y O3, and atmospheric particulates were monitored through extended periods in different points of the Ciudad Autónoma de Buenos Aires and the Área Metropolitana de Buenos Aires. This is the first systematic study performed in the area using automatic monitoring and including the design and the improvement of equipment, techniques and software. Data obtained during six years in sites with complementary characteristics were analyzed and compared. Hourly and monthly averages of selected chemical parameters were correlated with meteorological data in order to establish seasonal tendencies and test their yearly repetitivity. Results were analyzed by means of statistical and dispersion models. Studies on the characterization of particulate matter through optical, atomic force and electronic scanning microscopies, surface spectroscopies and ion chromatography were initiated, obtaining information about particle morphology, size distribution and chemical composition. Results show that the main source of CO, NOx and particles are motor vehicles. The O3 concentration is generally low and is determined by the mixing of primary emissions containing NO with clean air masses. Correlations between gaseous and particulate pollutants were established. Photochemical activity was monitored in green areas free of traffic, obtaining a direct relationship between measured overall solar radiation and NO2 photolysis rates in summer. The summarized results constitute a diagnostic on the quality of the atmosphere in Buenos Aires and may be used with forecasting purposes.

Bolcic, Federico Martín. "Coinfección HIV-Hepatitis C: análisis molecular de factores genéticos del HCV que influyen sobre la respuesta al interferón" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El virus de la hepatitis C y el HIV comparten las mismas vías de transmisión, lo que conlleva a una elevada tasa de coinfección. En este escenario, la tasa de respuesta al peg-IFN+RBV es más baja que en pacientes monoinfectados con HCV. El objetivo central de este trabajo fue estudiar si diferentes proteínas del HCV, estructurales (E2) y no estructurales del HCV (NS5A), son capaces de interrumpir las acciones antivirales desencadenadas por el IFN, contribuyendo hacia una respuesta disminuida a la terapia. El genotipo de HCV implicado en la infección denotó una prevalencia elevada del 1a así como un crecimiento del 4. Ambos son conocidos por su baja tasa de respuesta al IFN. Se encontró una relación temporal en la introducción en Argentina del genotipo 1a del HCV y el subtipo BF de HIV. La glicoproteína E2 no dio evidencia de rol alguno en la respuesta al tratamiento. Dominios definidos de la proteína NS5A arrojaron resultados encontrados dependiendo de la población bajo estudio. La co-presencia de HIV no parece impactar en la génesis de variantes de escape de HCV, ni modificar la composición de cuasiespecies. No obstante el HCV tendría capacidad replicativa en sitios extrahepáticos aunque las variantes virales halladas en células mononucleares de sangre periférica no exhibieron diferencias con las presentes en plasma. La menor respuesta al tratamiento con peg-IFN+RBV en la coinfección guardaría relación con la mayor presencia de genotipos 1a y 4. La proteína NS5A podría contribuir en tal sentido. Es necesario analizar el rol que desempeñan factores inherentes al hospedador.

Abstract:
The HIV and HCV share the same transmission routs which lead to a high prevalence of coinfection. In this scenario, the rate of response to peg-IFN + RBV is lower than in HCV monoinfected patients. The aim of this work was to analyze whether different HCV proteins, structural (E2) and nonstructural HCV (NS5A), are able to disrupt viral actions triggered by IFN, contributing to a decreased response to therapy. The HCV genotype infection epidemiology denoted that the most prevalent was 1a and growth of 4. Both are known for their low response rate to IFN. We found a temporal relationship in the introduction in Argentina of HCV genotype 1a and BF subtype of HIV. The E2 glycoprotein gave no evidence of any role in the response to treatment. Defined domains of the NS5A protein yielded results depending on the population under study. The co-presence of HIV does not appear to impact the selection of HCV resistant variants, or modify the composition of quasispecies. However, the HCV may have replicative capacity in extrahepatic compartments but viral variants found in peripheral blood mononuclear cells did not differ with those present in plasma. The lower response to treatment with peg-IFN + RBV in HIV coinfected patients would be related to the increased presence of genotypes 1a and 4. NS5A protein could contribute to this effect. It is necessary to analyze the role that factors inherent to the host.

Bolognini, Héctor. "Los métodos de análisis de las aguas minerales : Estudio de los manantiales de "La Laja" (San Juan)" (1912). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bombelli, Angel A.. "Los Espumígenos en Bromatología" (1932). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bonazzola, Cecilia. "Estudio espectro-electroquímico de flavinas en diferentes matrices poliméricas" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se estudió comparativamente el comportamiento electroquímico de flavinas en solución acuosa, en hidrogeles redox de poli-alilamina altamente hidratados, y como anión dopante de polipirrol. Se utilizaron técnicas electroquímicas y espectroscópicas uv-visible de absorción y emision simultánea a la oxidación-reducción de las flavinas. En solución acuosa se encontró que la disproporcionación de la semiquinona de la flavina conduce a una complicación cinética respecto de un mecanismo simple de transferencia de dos electrones y dos protones. En los electrodos modificados se observó que los hidrogeles de poli-alilamina brindan un ambiente altamente hidratado y la electroquímica y la espectroscopía son similares a las soluciones acuosas. Sin embargo, la protonación de aminos primarios fijos en la caden polimérica afecta la energía libre del proceso redox a través de un potencial de membrana. Los electrodos modificados por polipirrol con flavina atrapada son los que se presentan como más complejos. La matriz rígida del polímero, que en este caso puede oxidarse y reducirse en la misma ventana de potencial que la flavina lleva a un comportamiento electroquímico y espectrocópico bien diferenciado. Se encuentran cambios espectrocópicos de la flavina y del polipirrol al cambiar el estado de oxidación. Además, las especies redox de ambos sistemas pueden interactuar por reacciones químicas acopladas.

Abstract:
The electrochemical behaviour of flavins has been studied comparatively in aqueous solutions, in highly hydrated redox hydrogels of poly-(allylamine), and as a dopant anion of polypyrrole. In aqueous solutions, it was found that the disproportionation of flavin simiquinone leads to a kinetic complication with respect to a simple two electron two proton electron transfer mechanism. In modified electrodes it was found that poly-(allylamine) hydrogels yield a highly hydrated environment and the electrochemistry and spectroscopy are similar than in aqueosus solutions. However, protonation of primary amine groups fixed to the polymer backbone affects the redox process free energy through a membrane potential. Modified electrodes with polypyrrole and trapped flavin are the more complex ones. The rigid polymer matrix, which in this case can be oxidised and reduced in the same potential window that flavin gives a distinct electrochemical and spectrocopic behaviour. Spectroscopic changes due to flavin and polypyrrole are observed when the oxidation state changes. Besides, both systems' redox species can interact through coupled chemical reactions.

Bonelli, Eduardo. "Reescritura de términos y sustituciones explícitas" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La operación de sustitución constituye un engranaje básico en los fundamentos de la teoría de lenguajes de programación. Juega un rol central en el lambda cálculo (por ende, en lenguajes de programación funcional), en unificación de primer orden y de orden superior (por ende, en lenguajes de programación basados en el paradigma lógico), en modalidades de pasaje de parámetros (por ende, en lenguajes de programación imperativos), etc. Recientemente, investigadores en informática se han interesado en el pasaje de la noción usual de la sustitución, atómica, y de gruesa granularidad, hacia una noción más refinada, de más fina granularidad. La noción de sustitución es transportada del metalenguaje (nuestro lenguaje de discurso) al lenguaje objeto (nuestro lenguaje de estudio). Como consecuencia de ello se obtienen los llamados cálculos de sustituciones explícitas. Estos son de sumo interés a la hora de estudiar la interpretación operacional de los formalismos en cuestión y constituyen los objetos de interés de esta tesis. Se desarrollan los siguientes tres ejes de estudio: Primero, se consideran estrategias de reescritura perpetuas en lambda cálculos con sustituciones explícitas. Estas son estrategias de reescritura que preservan la posibilidad de reducciones infinitas. Se propone una caracterización inductiva del conjunto de términos que no poseen reducciones infinitas (los llamados fuertemente normalizantes). Un lambda cálculo polimórfico con sustituciones explícitas también es analizado, incluyendo propiedades tales como subject reduction y normalización fuerte. Segundo, colocamos el ς-cálculo de M. Abadi and L. Cardelli enriquecido con sustituciones explícitas bajo el microscopio. Este cálculo se encuentra en un nivel semejante de abstracción al lambda cálculo pero se basa en objetos en lugar de funciones. Propiedades tales como simulación del lambda cálculo, confluencia y preservación de la normalización fuerte (aquellos términos que son fuertemente normalizantes en ς también lo son en ς con sustituciones explícitas) son consideradas. Finalmente, dirigimos nuestra atención a la tarea de relacionar la reescritura de orden superior con aquella de primer orden. Fijamos una variante de los ERS (apodados SERSdb) de Z. Khasidashvili como nuestro formalismo de orden superior de partida y definimos un proceso de conversión que permite codificar cualquier SERSdb como un sistema de reescritura de primer orden. En este último, cada paso de reescritura se lleva a cabo módulo una teoría ecuacional determinada por un cálculo de sustituciones explícitas. La misma se formula de manera genérica a través de una presentación de cálculos de sustituciones explícitas basada en macros y axiomas sobre estas macros, parametrizando de esta manera al procedimiento de conversión sobre cualquier cálculo de sustituciones explícitas que obedece la presentación basada en macros. El procedimiento de conversión se encarga de codificar pattern matching de orden superior y sustitución en el entorno de reescritura de primer orden. Asimismo, propiedades que relacionan la noción de reescritura en el orden superior con aquella de primer orden son analizadas en detalle. Se identifica una clase de SERSdb para los cuales el sistema de primer orden resultante de su conversión no requiere una teoría ecuacional para implementar pattern matching de orden superior, bastando para ello matching sintáctico. También se argumenta que esta clase de sistemas de orden superior es apropiada para transferir resultados del entorno de reescritura de orden superior a aquella de primer orden. A modo de ejemplo no-trivial de ello, estudiamos la transferencia del teorema de standarización (fuerte).

Abstract:
Substitution spans many areas in programming language theory. It plays a central role in the lambda calculus (hence functional programming), in first and higher-order unikation (hence logic programming), parameter passing methods (hence imperative programming), etc. Recently researchers became interested in shifting from the usual atomic, coarse grained view of substitution to a more refined, fine grained one. Substitution is promoted from the metalevel (our language of discourse) to the object-level (our language of study). This is interesting when studying the operational interpretation of the formalisms in question. Calculi of object-level or explicit substitution is the concern of this thesis. The following three study axes are developed. First we consider perpetual rewrite strategies in lambda calculi of explicit substitutions. These are rewrite strategies that preserve the possibility of inhite derivations. Also, we study how to characterize inductively the set of terms that do not possess infinite derivations (the strongly normalizing terms). Polymorphic lambda calculus with explicit substitutions shall receive our attention too, including properties such as subject reduction and strong normalization. Secondly, we put the ς-calculus of M.Abadi and L.Cardelli augmented with explicit substitutions under the microscope. This calculus is at the level of the lambda calculus but is based on objects instead of functions. Properties such as simulation of the lambda calculus, confluence and preservation of strong normalization (terms which are strongly normalizing in ς are also strongly normalizii in ς with explicit substitutions) are considered. Finally, we address the task of reducing higher-order rewriting to first-order rewriting. We fix a variant of Z-Khasidashvili's ERS (dubbed SERSdb) as our departing formalism and provide a conversion procedure to encode any ERS as a first-order rewrite system in which a rewrite step takes place modulo an equational theory determined by a calculus of explicit substitutions. The latter is achieved with the aid of a macro-based presentation of calculi of explicit substitutions, thus parametrizing the conversion procedure over any calculus of explicit substitutions in compliance with the aforementioned presentation. The conversion procedure is in charge of encoding higherorder pattern matching and substitution in the first-order framework. Properties relating the rewrite relation in the higher-order framework and that of the resulting first-order system are studied in detail. We then identify a class of SERSdb for which the resulting first-order system does not require the equational theory to implement higher-order pattern matching, thus contenting itself with syntactic matching. It is argued that this class of systems is appropriate for transferring results from the first-order framework to the higher-order one. As a non-trivial example we study the transfer of the (strong) standardization theorem.

Bonesi, Sergio Mauricio. "Comportamiento fotoquímico del carbazol, N-acetil carbazol y N-benzoíl carbazol en solución, en presencia de halometanos" (1995). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bonetti, María Ida Rosa. "Contribución al conocimiento de la flora fósil de Barreal, Departamento Calingasta (Provincia San Juan)" (1963). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El presente estudio tuvo por finalidad principal estudiar la flora fosil de la Serie triásica de Barreal (San Juan), tendiendo a alcanzar un mejor conocimiento de la misma y a definir sus relaciones con otras del Mesozoico bajo argentino. Además de sintetizarse la información geológica de la zona, se aportan nuevos datos sobre la Serie de Barreal y sus niveles plantíferos. Por otra parte, se hizo imprescindible aclarar minuciosamente ciertos problemas de nomenclatura topográfica, a los efectos de ubicar con exactitud los puntos de procedencia de valiosas colecciones floristicas debida a STAPPENBECK, DU TOIT, y FRENGUELLI, cuya dudosa ubicación geográfica y estratigráfica dieron origen a conclusiones y correlaciones erróneas. En ingual sentido, se depuran referencias sobre nomenclatura estratigráfica de la región, la que se había hecho confusa por la repetición de nombres para distintas unidades y la diversificación de denomicaciones para una sola. Se dedica un capitulo a discutir la validez de las correlaciones entre las floras fósiles del Mesozoico bajo argentino, demostrándose y ejemplificando que el número o proporcion de especies comunes no es de por si un factor concluyente para sostener paralelismos Floristicos. Asimismo, se evidencia que varias especies consideradas como tipicas para determinados niveles en realidad no lo son, pues poseen un "biochron" suficientemente extenso como para aparecer en horizontes bien separados en el tiempo (Dicroidium odontopteroides, Dicroidium lancifolium, Dicroidium feistmanteli, etc). Se sintetizan los conceptos seguidos hasta la fecha en cuanto a asignación cronológica de las series triásicas argentinas se refiere, distinguiéndose las distintas tendencias que prevalecieron en nuestro ambiente. El problema de la edad de la Serie de Barreal y de otras aproximadamente sincrónicas se encaró sobre dos haces distintos: a) Los argumentos que brindan las faunas de vertebrados de Ichigualasto y la relación de las mismas con las de Santa María (Brasil), y b) los datos que brinda la sucesión estratigráfica de la costa chilena, en la cual se hace necesario revisar las determinaciones de las amonitas y la edad conferida a las faunas integrantes. Partiendo de esos dos enfoques distintos se llega prácticamente a la misma conclusión: que en el estado actual de nuestros conocimientos, las evidencias mas seguras indican que los niveles que en muchas cuencas triásicas argentinas llevan la tipica "flora de Dicroidium" son keuperianos y muy posiblemente carnenses, puiendo entrar en el Norense los términos mas altos ("Red beds"). Además, resultaría que el denominado "Choiyoilitense" de Chile debería ubicarse en el Ladinense(Mesotriásico), edad que también habría que comunicar a los términos equivalentes de dicha formación en la Argentina, cuyos límites y composición deben ser revisados, pues es posible que la misma comprenda varias unidades de distintas edades. En base a las relaciones litológicas y florísticas, se brinda un ensayo de correlación entre las distintas series triásicas argentinas, el que se concreta en un cuadro. desde el punto de vista paleontológico, se estudiaron los elementos integrantes de la flora fósil de Barreal, resultando necesario ampliar el análisis a la revisión de otras colecciones, como la de Liantenes y Cacheuta (Mendoza) y de Ischigualasto (La Rioja), para dilucidar problemas sobre los límites específicos de algunas formas (p. ej. Dicroidium y Xyloptorio). Se reconocieron 80 entidades vegetales distintas para la flora Barreal, de las cuales 72 no pudieron determinar al nivel específico, quedando las 8 restantes clasificadas al rango teórico. De las 72 especies reconocidas, 52 se determinaron sobre el material de las colecciones disponibles y las 20 restantes responden a clasificaciones o citas de otros autores. El estudio del material de Barreal y del usado para comparación (Llantenes, Cacheuta e Ischigualasto) dio como resultado la creación, combinación o enmienda de varias unidades: 6 especies nuevas para Barreal; 2 para otras series; 3 especies enmendadas para Barreal; 3 variedades nuevas para otras colecciones; 5 combinaciones nuevas para Barreal y 3 para otros puntos. La flora estudiada muestra un neto predominio de representantes de las Dipteridacone, Pteridospermae , Cycadophyta y Ginkgophyta. Dentro de ellas, por su importancia, se prestó especial atención a: a) Las Corystospermaceae, por su dominio en la vegetación del Triásico gondwánico, siguiéndose los conceptos anatómicos de GOTXAN y TOWNROW, que indican la conveniencia de incluir en el género Dicroidium a especies referidas a Zuberia, Dicroidiopsis, Diplasiophyllum y Johnstonia. b) La Cycadophyta, por la aparición de un número remarcable de especies de Pseudoctenis, Pterophyllum, Anomazamites y Taeniepteris, formas poco abundantes o desconocidad en otras floras triásicas argentinas. c) Las Ginkgophyta, por la ocurrencia en Barreal de numerosos individuos asignables al género Saportaea, hasta el presente sólo conocido en el Pérmico inferior de E.U.A. y China, con muy escasos ejemplares. La mayor semejanza de la flora fósil de Barreal se encuentra con las de Ischigualasto-Ischichuca (La Rioja - San Juan); de Hilario (San Juan) y Potrerillo-Cacheuta (Mendoza).

Bonetto, María Celina. "Desarrollo de biosensores/bioensayos para la determinación rápida de parámetros indicadores de calidad de agua : Técnicas electroquímicas, BOD y toxicidad" (2013-12-03). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta Tesis se presenta un bioensayo microbiano amperométrico para la determinación rápida de BOD (demanda bioquímica de oxígeno) en muestras de agua basado en la utilización de ferricianuro como aceptor de electrones del metabolismo bacteriano. Se logró simplificar la metodología generalmente utilizada en este tipo de bioensayos y el rango lineal obtenido representa una gran mejora frente al rango lineal que presenta el ensayo BOD5. Mediante este bioensayo se determinó la BOD de varias muestras de agua obteniéndose una buena correlación con los resultados del test BOD5 y un RSD ≤ 10%. De manera de diseñar un sistema portátil a partir de este bioensayo amperométrico, se obtuvieron cultivos liofilizados de K. pneumoniae metabólicamente activos, hasta 35 días después de realizar la liofilización y se estudió la posibilidad de utilizar electrodos de tinta de Au descartables realizados por screen-printing, en ensayos de convección forzada. Otra alternativa analizada para la determinación rápida de BOD de muestras reales fue el desarrollo de un biosensor potenciométrico basado en el empleo de un electrodo potenciométrico sensible a CO2 y la inmovilización en membrana de distintos microorganismos. Este biosensor también permitió determinar la BOD de muestras de agua reales obteniéndose una buena correlación con los resultados del test BOD5. Como último trabajo de esta Tesis, se desarrolló un bioensayo para la determinación de toxicidad aguda de nanopartículas de Ag, basado en la técnica de espectroscopía de impedancia electroquímica, empleando electrodos interdigitados de Au y células NHDF (normal human dermal fibroblasts) como material biológico. Este trabajo se realizó en parte en el Austrian Institute of Technology (AIT) bajo la dirección del Dr. Peter Ertl.

Abstract:
In this Thesis, we propose an amperometric microbial bioassay for the rapid determination of BOD (biochemical oxygen demand) in water samples based on the use of ferricyanide as electron acceptor of bacterial metabolism. The methodology generally used in this type of bioassays has been successfully simplified and the linear range obtained represents a great improvement over the linear range that the BOD5 test presents. Through this bioassay, the BOD of real wastewater samples was determined, obtaining a good correlation with the results of the BOD5 test and a RSD ≤ 10%. In order to design a portable system from this amperometric bioassay, freeze-dried cultures from K. pneumoniae, metabolically active, were obtained up to 35 days after freeze drying and it was studied the possibility of using disposable ink electrodes of gold made by screen-printing in forced convection assays. Another alternative analyzed for the rapid determination of BOD of real wastewater samples was the development of a potentiometric biosensor, based on the employment of a potentiometric electrode sensitive to CO2, and the immobilization of diverse microorganisms in membrane. This biosensor has also allowed us to determine the BOD of real wastewater samples obtaining a good correlation with the results of the BOD5 test. The last work of this Thesis has been the development of a bioassay for the determination of acute toxicity of Ag nanoparticles, based on the technique of electrochemical impedance spectroscopy, using interdigitated electrodes of Au and NHDF cells (normal human dermal fibroblasts) as biological material. This work was carried out in part, at the Austrian Institute of Technology (AIT) under the direction of Dr. Peter Ertl.

Bonfiglio, Juan José. "Mecanismos moleculares involucrados en la señalización celular de la hormona CRH en el sistema nervioso central" (2013). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La hormona liberadora de corticotrofina (CRH) juega un rol clave en la coordinación de la respuesta neuroendocrina, autonómica, inmune y comportamental frente al estrés. Se ha visto que el receptor de CRH de tipo 1 (CRHR1) estimulado por CRH activa ERK1/2 en función del contexto celular. En trabajos previos realizados en nuestro laboratorio, demostramos que CRH activa ERK1/2 en zonas límbicas del cerebro de ratón (hipocampo y amígdala basolateral). ERK1/2 es un mediador esencial de los procesos fisiológicos del hipocampo, incluyendo el comportamiento emocional, la plasticidad sináptica, el aprendizaje y la memoria. Para dilucidar los mecanismos moleculares mediante los cuales CRH activa ERK1/2 en neuronas del hipocampo, utilizamos una línea celular ampliamente empleada como modelo neuronal hipocampal, las HT22. En este trabajo demostramos por primera vez que la activación de ERK1/2 en respuesta a CRH es de tipo bifásica, con una primera fase mediada por cAMP y B-Raf, y una segunda fase que depende fundamentalmente de la proteína β-arrestina2 y de la internalización de CRHR1. Teniendo en cuenta el hecho de que las interacciones biomoleculares juegan un papel crucial en la mayoría de los procesos celulares, decidimos analizar el interactoma de B-Raf mediante estudios de espectrometría de masa. En una primera etapa describimos el interactoma de B-Raf en células en estado basal. Habiendo encontrado interactores de esta MAPKKK que podrían ser componentes clave en la regulación de la señalización vía B-Raf- MEK1/2-ERK1/2, nos propusimos, en una segunda etapa, estudiar complejos proteicos asociados a B-Raf después de la activación de CRHR1 a tiempos cortos, donde B-Raf juega un rol clave. Usando herramientas farmacológicas y moleculares, evaluamos el impacto funcional de algunas de las proteínas identificadas en asociación a B-Raf en dichos tiempos cortos. Nuestros resultados indican que las proteínas 14-3-3, PKA, y Rap1, son esenciales para la etapa temprana de activación de ERK1/2 inducida por CRH, mientras que dinamina y vimentina son necesarias para la fase dependiente de la internalización de CRHR1. Demostramos que ambas fases de pERK1/2 dependen de la entrada de calcio y se ven afectadas por la inhibición de la CaMKII. Por lo tanto, este trabajo describe la dinámica y la naturaleza bifásica de la activación de ERK1/2 río abajo CRHR1 en un contexto neuronal e identifica nuevos componentes críticos de la maquinaria de señalización de CRHR1 que controlan selectivamente, o bien la fase temprana, o bien la fase tardía de la activación de ERK1/2, proporcionando así nuevos posibles blancos terapéuticos para trastornos relacionados con el estrés.

Abstract:
Corticotropin-releasing hormone (CRH) is a key regulator of neuroendocrine, immune, autonomic and behavioral response to stress. CRH-stimulated CRH receptor 1 (CRHR1) activates ERK1/2 depending on intracellular context. In a previous work from our laboratory, we demonstrated that CRH activates ERK1/2 in limbic areas of the mouse brain (hippocampus and basolateral amygdala). ERK1/2 is an essential mediator of hippocampal physiological processes including emotional behavior, synaptic plasticity, learning and memory. To elucidate the molecular mechanisms by which CRH activates ERK1/2 in hippocampal neurons, we employed the mouse hippocampal cell line HT22, widely used as a model of hippocampal neuronal cells. We document for the first time that ERK1/2 activation in response to CRH is biphasic, involving a first cAMP and B-Raf-dependent early phase, and a second phase that critically depends on CRHR1 internalization and β-arrestin2. Considering the fact that biomolecular interactions play a crucial role in many cellular processes, we decided to analyze the B-Raf interactome by means of mass spectrometry analysis. In a first step, we described the B-Raf interactome in non-stimulated cells. Having found interactors of this MAPKKK which could be key components in the regulation of the B-Raf-MEK1/2-ERK1/2 signaling pathway, we decided, in a second stage, to study the B-Raf partners after CRHR1 activation at short times, where B-Raf plays a key role. Using molecular and pharmacological tools, the functional impact of selected B-Raf partners in CRH-dependent ERK1/2 activation was dissected. Our results indicate that 14-3-3 proteins, PKA, and Rap1, are essential for early CRHinduced ERK1/2 activation, whereas dynamin and vimentin are required for CRHR1 internalization-dependent phase. Both phases of ERK1/2 activation depend on calcium influx and are affected by CaMKII inactivation. Thus, this report describes the dynamics and biphasic nature of ERK1/2 activation downstream neuronal CRHR1 and identifies several new critical components of the CRHR1 signaling machinery that selectively controls the early and late phases of ERK1/2 activation, thus providing new potential therapeutical targets for stress-related disorders.

Bonifazi, Carla Brenda. "Instrumentación, calibración y simulación de detectores de superficie del observatorio Pierre Auger" (2004). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El entendimiento de la física de los rayos cósmicos es aún una de las metas más importantes de la comunidad científica para construir su conocimiento acerca del Universo. Su estudio a lo largo de los años ha permitido avances importantes tanto en las ramas de la física de partículas como de la astrofísica. Para su estudio se han desarrollado muchas técnicas experimentales desde las primeras cámaras de niebla utilizadas en los ascensos en globo hasta el desarrollo de observatorios gigantes dedicados al estudio de las partículas de más alta energía. El espectro de energías de los rayos cósmicos va desde los ~ 100keV hasta ~ 10^20 eV. Estos inciden sobre la tierra en todas las direcciones y con un flujo constante en el tiempo. Los rayos cósmicos de energía superior a los PeV que inciden en la atmósfera producen una cascada de partículas secundarias. Estas partículas inducen la emisión de luz de fluorescencia por parte del nitrógeno atmosférico, que puede ser registrada para la detección del chubasco producido. A su vez, las partículas secundarias que alcancen la Tierra pueden ser registradas por detectores ubicados al nivel del suelo. El observatorio Pierre Auger, que actualmente se encuentra en construcción y funcionamiento parcial, tiene por objetivo el estudio de los rayos cósmicos de energía ultra elevada, mayor a 10^19 eV. Para ello utiliza un sistema híbrido de detección de las partículas secundarias formado por un detector de superficie (detectores de efecto Čerenkov en agua) y telescopios de fluorescencia. En este trabajo se realiza una descripción completa de ambos detectores. Para el detector de fluorescencia se presentan estudios de la luz de fondo de noche que sirvieron para el diseño de la electrónica de los mismos. Para el detector de superficie se presentan trabajos realizados con el objetivo de contribuir con su montaje, instalación y puesta en funcionamiento. Durante la primera etapa de construcción del Observatorio se desarrollaron las técnicas y procedimientos para garantizar el correcto funcionamiento del mismo. Previamente al comienzo de la construcción del Observatorio se realizaron estudios sobre un detector prototipo de efecto Čerenkov en agua emplazado en el Laboratório TANDAR, tales como la caracterización de respuesta frente a distintas direcciones de ingreso de las partículas y el desarrollo de un método de calibración del detector. A continuación se montó un conjunto de cuatro detectores para la medición de rayos cósmicos con energías del orden de ~10^15 eV. En este trabajo se describen el diseño, la construcción y la operación de este arreglo de detectores. También se incluye el desarrollo del sistema de toma de datos y los análisis de estabilidad de su funcionamiento. Finalmente se muestran algunos eventos típicos registrados. Se presenta además el desarrollo del actual método de calibración de los detectores de superficie del Observatorio Pierre Auger. Junto a éste, las diferencias técnicas y estudios realizados para garantizar el correcto funcionamiento de los detectores y para validar el sistema de adquisición de los datos. Finalmente, toda la experiencia adquirida se volcó en un programa de simulaciones del detector de efecto Čerenkov en agua, que esta disponible para ser utilizado pela Coloaboración Pierre Auger.

Abstract:
Understanding the physics of cosmic rays is still a major goal of science in order to build our knowledge of the Universe. Research on Cosmic Rays over the last years has provided important improvements in particle physics and astrophysics by making use of different experimental techniques from the early cloud chambers carried in airborne ballon experiments to gigantic observatories specifically designed to study cosmic rays of the highest energies. The cosmic ray energy spectrum ranges from ~ 100 keV to ~10^20 eV, impinging on the top of the Earth atmosphere from all directions with a constant flux. Those with energy in excess to ~1 PeV produce, when traversing the atmosphere, a cosmic air-shower of secondary particles. These particles induce fluorescence light emission from the atmosphere nitrogen, which may be detected. They may as well be directly detected on reaching the Earth surface by the so-called surface detectors. The Pierre Auger Observatory, which is presently under construction and data taking, has as prime objective to detect cosmic rays with energy in excess to 10^19 eV. In order to achieve this aim it makes use a hybrid detection technique: a surface detector array (water Čerenkov detectors) and fluorescence telescopes. A complete description of both detector systems is performed in this thesis work. For the fluorescence detector, background light measurements were done in order to help designing the telescope electronic system. A further and exhaustive work has been performed for the surface detectors, geared towards their deployment, installation and commissioning. Related to this latter point and during the initial phases of the Project construction, techniques and procedures were developed in order to guarantee the correct functioning of the detector system. In the years prior to commencing the Observatory construction, efforts were committed in experiments with a prototype water Čerenkov detector emplaced at the TANDAR Laboratory, such as the characterization of the detector response to different entry points of impinging particles and the development of an innovative calibration method. At a later stage, an array of four water Čerenkov detectors, was instrumented with a view on the detection of cosmic rays of energy ~10^15 eV. The design, construction and commissioning of this array is described in this thesis. Reference is made to the development of its data acquisition system and to its operation stability analyses. Some typical detected events are shown. Also shown in this thesis are the different surface detector calibration approaches, with special emphasis on the one currently adopted at the Observatory. In adition to contributing towards the development of this calibration procedure, different techniques and studies were performed in an effort to assure the correct detector functioning and to validate the data acquisition system. Finally, all the acquired expertise provided a solid basis on which a water Čerenkov detector simulation computer code was written, which is available to the Auger Collaboration.

Bonifazi, Evelyn Lucía. "Síntesis de naftoquinonas relacionadas a lapachol y ß-lapachona. Evaluación como agentes antitumorales" (2012-03-27). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Este trabajo de tesis describe la síntesis de naftoquinonas relacionadas a las quinonas naturales lapachol y β-lapachona, que presentan una amplia variedad de actividades biológicas entre las cuales se destaca su actividad antitumoral. El fin fue lograr compuestos con acción citotóxica mejorada y poder determinar los requerimientos estructurales de este tipo de quinonas, para facilitar así el racional desarrollo de nuevos compuestos específicos. Se llevó a cabo la síntesis de 1,2 y 1,4-naftoquinonas dihidropirano y dihidrofurano con modificaciones en el anillo aromático, principalmente con la introducción de un grupo hidroxilo. En primer lugar se obtuvieron derivados hidroxilados de lapachol y dunniol, para luego mediante reacciones de ciclación adecuadas obtener las naftoquinonas tricíclicas deseadas. Se exploraron distintas metodologías para lograr una síntesis más eficiente de los hidroxilapacholes de interés. Con el fin de sintetizar el derivado 10-hidroxi-β-lapachona mediante la ciclación de 5-hidroxilapachol en medio ácido, se realizó una amplia búsqueda de condiciones, que luego fue extendida hacia la síntesis eficiente de derivados de β- lapachona sustituidos en el anillo aromático. En dicho contexto se ensayó la reacción de ciclación en distintas condiciones ácidas de derivados de lapachol sustituidos en C-5 por diferentes grupos funcionales, con el fin de esclarecer la influencia de dichos sustituyentes y del ácido utilizado en los productos obtenidos. Los compuestos sintetizados en esta tesis fueron evaluados como agentes antiproliferativos contra un panel representativo de cuatro líneas celulares de tumores sólidos humanos. En función de la actividad biológica se establecieron relaciones de estructura-actividad para el diseño y síntesis de nuevos compuestos con actividad mejorada. El compuesto 7-hidroxi-β-lapachona resultó ser el más activo presentando mejor actividad que el compuesto líder β-lapachona.

Abstract:
This thesis describes the synthesis of naphthoquinones related to the natural quinones β-lapachone and lapachol, featuring a wide variety of biological activities among which highlights its antitumor activity. The aim was to obtain compounds with enhanced cytotoxic activity and to shed light on the structural requirements of these quinones, thereby facilitating the rational development of new specific compounds. The synthesis of 1,2-and 1,4-naphthoquinones fused to dihydropyran and dihydrofuran rings carrying modifications on the aromatic ring, mostly the introduction of a hydroxyl group, was performed. First hydroxylated derivatives of dunniol and lapachol were obtained and then, by appropriate cyclization reactions, the desired tricyclic naphthoquinones were synthesized. Different methodologies were explored to achieve a more efficient synthesis of hydroxylapachol analogues. In order to synthesize 10-hydroxy-β-lapachone by cyclization of 5- hydroxylapachol in acid media, an extensive search of reaction conditions was carried out, which was later extended for the efficient synthesis of β-lapachone derivatives substituted on the aromatic ring. In this context the cyclization reaction of lapachol derivatives substituted at C-5 by different moieties, was tested under different acidic conditions in order to elucidate the influence of these substituents and the acid employed. The compounds obtained in this thesis were evaluated as anti-proliferative agents against a representative panel of four cell lines of human solid tumors. According to the biological activity, structure-activity relationships were established aimed at the design and synthesis of new compounds with improved activity. The compound 7-hydroxy-β-lapachone was the most active showing better activity than the lead compound β-lapachone.

Bonomi, Hernán Ruy. "Rol del metabolismo de flavinas en la virulencia de Brucella abortus" (2010). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Brucella spp. son las bacterias causantes de la brucelosis, la enfermedad zoonótica con más incidencia en el mundo. Brucella es un patógeno exitoso que probablemente infecta animales desde hace millones de años, y se encuentra extremadamente adaptado al estilo de vida intracelular. La virulencia de este patógeno reside en su capacidad de invadir al hospedador, resistir los mecanismos de defensa y, establecerse y replicar en el inhóspito nicho replicativo. El nicho replicativo se caracteriza por ser escaso en nutrientes, tener baja tensión de O2 y someter a Brucella al daño oxidativo. A pesar de que Brucella no posee factores de virulencia “clásicos” posee una batería de mecanismos fisiológicos y adaptaciones metabólicas que en definitiva son los que le permiten sortear las defensas de los hospedadores y adaptarse a la vida intracelular. En este trabajo de tesis, se ha caracterizado y estudiado una parte de la fisiología básica de Brucella, como lo es el metabolismo de las flavinas. Se ha hecho foco en los genes rib, en particular en ribH2 que codifica una enzima lumazina sintasa (LS) que cataliza el penúltimo paso la ruta biosintética de la riboflavina. Se describió la regulación de la expresión de ribH2 por el elemento regulatorio riboswitch FMN, y se identificaron posibles proteínas que interactúan con RibH2 en Brucella. También, se estableció una relación directa entre virulencia y el metabolismo de flavinas en Brucella, resaltando la importancia de RibH2 para la supervivencia, tráfico y persistencia de las bacterias durante la infección en los modelos in vitro e in vivo. El rol de las flavinas en la simbiosis de Rhizobium leguminosarum con plantas, también fue estudiado. Los resultados muestran que el papel que juegan las proteínas RibH2 en el establecimiento bacteriano con el hospedador eucariota no está restricto sólo a Brucella, sino que parece ser compartido por otros Rhizobiales. Los hallazgos de este trabajo de tesis pueden dar lugar a nuevos estudios que lleven al desarrollo de vacunas y drogas contra la brucelosis y mejoras en las cepas bacterianas de inoculantes para uso agronómico.

Abstract:
Brucella spp. are the bacteria responsible for brucellosis, the most widespread zoonotic disease in the world. Brucella is a successful pathogen that has been infecting animals probably for millions of years and it is extremely adapted to the intracellular lifestyle. Its virulence lays in its ability to invade the host, resist defense mechanisms, establish and replicate in the inhospitable replicative niche. The replicative niche exhibits limited nutrients availability, low O2 tension and exposes Brucella to oxidative damage. In spite of the fact that Brucella does not possess “classic” virulence factors, it displays a variety of physiological mechanisms and metabolic adaptations that let these bacteria cope with the host’s defenses and adapt to live inside the cell. During this Thesis, part of the basic physiology of Brucella, the flavin metabolism, has been studied and characterized. The focus was laid on the rib genes, in particular on ribH2 which codes for a lumazine synthase (LS), the enzyme that catalyses the penultimate step in the riboflavin biosynthetic pathway. The regulation of the ribH2 gene expression by the FMN riboswitch was described, and some proteins that may interact with RibH2 were identified in Brucella. The direct relation between flavin metabolism and virulence was also established, highlighting the importance of RibH2 for survival, trafficking and persistence during infection in both in vitro and in vivo models. The role of flavins in the Rhizobium leguminosarum-plant symbiosis was also addressed. The results show that the part that RibH2 plays in the bacterial establishment in the eukaryotic host is not restricted only to Brucella, but it is shared with other Rhizobiales. The findings of this PhD Thesis, can lead to deeper and more specific studies culminating in the development of vaccines and drugs against brucellosis as well as improvements in the bacterial inoculants of agronomic use.

Bonomo, Flavia. "Sobre subclases y variantes de los grafos perfectos" (2005). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los grafos perfectos fueron definidos por Claude Berge en 1960. Un grafo G es perfecto cuando para todo subgrafo inducido H de G, el número cromático de H es igual al tamaño de un subgrafo completo máximo de H. Los grafos perfectos son de gran interés desde el punto de vista algoritmo: si bien los problemas de determinar la clique máxima y el número cromático de un grafo son NP-completos, éstos se resuelven en tiempo polinomial para grafos perfectos. Desde entonces, fueron definidas y estudiadas gran cantidad de variantes de los grafos perfectos. Entre ellas, los grafos clique-perfectos. Una clique en un grafo es un subgrafo completo maximal con respecto a la inclusión. Un transversal de las cliques de un grafo G es un subconjunto de vértice que interseca a todas las cliques de G. Un conjunto de cliques independientes es un conjunto de cliques disjuntas dos a dos. Un grafo G es clique-perfecto si el tamaño de un transversal de las cliques mínimo coincide con el de un conjunto de cliques independientes máximo, para cada subgrafo inducido de G. El término "clique-perfecto" fue introducido por Guruswami y Pandu Rangan en 2000, pero la igualdad de esos parámetro fue estudiada previamente por Berge en el contexto de hipergrafos balanceados. En 2002, Chudnovsky, Robertson, Seymour y Thomas demostraron una caracterización de los grafos perfectos por subgrafos prohibidos minimales, cerrando una conjetura abierta durante 40 años. También durante el año 2002 fueron presentados dos trabajos, uno de ellos de Chudnovsky y Seymour, y el otro de Cornuéjols, Liu y Vuskovic, que mostraban que el reconocimiento de esta clase era polinomial, resolviendo otro problema abierto formulado mucho tiempo atrás. La lista de subgrafos prohibidos minimales para la clase de grafos clique-perfectos no se conoce aún, y También es una pregunta abierta la complejidad del problema de reconocimiento. En esta tesis presentamos resultados parciales en estas direcciones, es decir, caracterizamos los grafos cliqueperfectos por subgrafos prohibidos minimales dentro de ciertas clases de grafos, a saber,

Abstract:
Perfect graphs were defined by Claude Berge in 1960. A graph G is perfect whenever for every induced subgraph H of G, the chromatic number of H equals the cardinality of a maximum complete subgraph of H. Perfect graphs are very interesting from an algorithmic point of view: while determining the clique number and the chromatic number of a graph are NP-complete problems, they are solvable in polynomial time for perfect graphs. Since then, many variations of perfect graphs were defined and studied, including the class of clique-prefect graphs. A clique in a graph is a complete subgraph maximal under inclusion. A clique-transversal of a graph G is a subset of vertices meeting all the cliques of G. A clique-independent set is a collection of pairwise vertex-disjoint cliques. A graph G is clique-perfect if the sizes of a minimum clique-transversal and a maximum clique-independent set are equal for every induced subgraph of G. The term clique-perfect" was introduced by Guruswami and Pandu Rangan in 2000, but the equality of these parameters had been previously studied by Berge in the context of balanced hypergraphs. A characterization of perfect graphs by minimal forbidden subgraphs was recently proved by Chudnovsky, Robertson, Seymour and Thomas, and a polynomial time recognition algorithm for this class of graphs has been developed by Chudnovsky, Cornuéjols, Liu, Seymour and Vusković. The list of minimal forbidden induced subgraphs for the class of clique-perfect graphs is not known. Another open question concerning cliqueperfect graphs is the complexity of the recognition problem. In this thesis, we present partial results in these directions, that is, we characterize clique-perfect graphs by a restricted list of forbidden induced subgraphs when the graph is either a line graph, or claw-free hereditary clique-Helly, or diamond-free, or a Helly circular-arc graph. Almost all of these characterizations lead to polynomial time recognition algorithms for clique-perfection in the corresponding class of graphs. Berge defined a hypergraph to be balanced if its vertex-edge incidence matrix is balanced, that is, if it does not contain the vertex-edge incidence matrix of an odd cycle as a submatrix. In 1998, Dahlhaus, Manuel and Miller consider this concept applied to graphs, defining a graph to be balanced when its vertex-clique incidence matrix is balanced. Balanced graphs are an interesting subclass in the intersection of perfect and clique-perfect graphs. We give two new characterizations of this class, the first one by forbidden subgraphs and the second one by clique subgraphs. Using domination properties we define four subclasses of balanced graphs. Two of them are characterized by 0-1 matrices and can be recognized in polynomial time. Furthermore, we propose polynomial time combinatorial algorithms for the stable set problem, the clique-independent set problem and the clique-transversal problem in one of these subclasses. Finally, we analyze the behavior of balanced graphs and these four subclasses under the clique graph operator.

Bonomo, Néstor Eduardo. "Haces electromagnéticos espacialmente limitados : estudio vectorial de la dispersión en superficies" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bordenave, César Daniel. "Estudio de los mecanismos de respuesta a la infección causada por la bacteria fitopatógena Pseudomonas syringae en la leguminosa modelo Lotus japonicus" (2015-12-15). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Lotus japonicus es una legumbre modelo ampliamente utilizada para el estudio de procesos importantes como la nodulación y la respuesta al estrés salino. Sin embargo, existen pocos estudios sobre la respuesta defensiva de esta especie contra microorganismos patógenos. Comprender como se protege esta especie modelo contra patógenos podría ayudar a desarrollar cultivares más tolerantes en especies de Lotus de relevancia agronómica, así como también en otros géneros de legumbres. Para poder dilucidar los mecanismos de defensa más importantes en esta leguminosa, en este trabajo se exploraron las principales respuestas de dos ecotipos fenotípicamente contrastantes, Miyakojima MG-20 y Gifu B-129, a la inoculación con la bacteria Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000. Las respuestas de defensa activadas en ambos ecotipos fueron considerablemente diferentes. Así, en Miyakojima MG-20 se observó una interacción compatible caracterizada por una rápida multiplicación de la bacteria, acompañada por un descenso en la eficiencia del fotosistema II, la aparición de clorosis, desecación y defoliación, así como un moderado pero sostenido aumento en los niveles de especies reactivas del oxígeno (EROs). Estos fenómenos sólo fueron observados en los folíolos inoculados y no afectaron el desarrollo normal de la planta. Por su parte, en Gifu B-129 la interacción fue incompatible, los síntomas fueron en general imperceptibles, la bacteria fue incapaz de multiplicarse en los tejidos de la planta y existió un aumento notable de las EROs durante las primeras horas luego de la inoculación con la bacteria. A partir de estudios transcripcionales utilizando microarreglos de ADN, pudieron identificarse alrededor de 3000 genes regulados diferencialmente frente a la inoculación con la bacteria en el ecotipo Miyakojima MG-20 y alrededor de 300 genes en el ecotipo Gifu B-129. Además, se comparó la expresión génica basal de estas líneas, observándose diferencias en genes relacionados con estrés biótico y abiótico, metabolismo hormonal, estado redox y procesos fotosintéticos. Por otro lado se realizó un estudio del metaboloma, en el cual también se observó un comportamiento contrastante entre ambos ecotipos, detectándose un conjunto diferente de metabolitos que se modifican frente a la inoculación con la bacteria. Integrando los resultados del transcriptoma y del metaboloma se pudieron identificar numerosas vías metabólicas afectadas de manera diferencial en respuesta al ataque bacteriano, lo que permite explicar las diferencias de comportamiento observadas entre ambos ecotipos. Entre estas vías se destacan el sistema de antioxidantes (ascorbato y glutatión), el metabolismo del ácido γ-aminobutírico, la síntesis y degradación de componentes de la pared celular, la síntesis y degradación lípidos y el metabolismo hormonal. Posteriormente, sobre la base del análisis transcriptómico se seleccionaron distintas líneas mutantes insercionales del ecotipo Gifu B-129 para un conjunto de genes que podrían jugar un rol importante en la defensa vegetal. La mayoría de tales líneas demostró una tolerancia equivalente a la observada en la línea salvaje, sugiriendo que los genes mutados no son esenciales en la respuesta de defensa en estos ecotipos. Sin embargo, una línea incapaz de expresar el gen de la enzima Poliamina Oxidasa I demostró una mayor tolerancia durante la patogénesis, lo que indicaría que la expresión de este gen afecta negativamente la respuesta defensiva de la planta. Este trabajo permitió describir de manera global las principales vías metabólicas reguladas en dos ecotipos de L. japonicus durante la respuesta a la bacteria P. syringae pv. tomato DC3000. Las diferencias entre las respuestas inducidas en el ecotipo Gifu B-129 (interacción incompatible) con las observadas en el ecotipo Miyakojima MG-20 (interacción compatible) permitieron discernir cuales son los mecanismos de defensa más efectivos entre los presentadaos por los ecotipos evaluados. Estos resultados podrían ser extrapolados a otras especies de leguminosas de interés agronómico.

Abstract:
Lotus japonicus is a model legume widely used for the study of important processes such as nodulation and response to salt stress. However, there are few works focusing on the defensive response of this species against pathogenic microorganisms. Understanding how this model species responds against plant pathogens could help to develope more tolerant cultivars in agronomically important Lotus species as well as in other legume genera. In order to elucidate the most important defensive mechanisms in this legume, in this work it was explored the main responses of two phenotypically contrasting L. japonicus ecotypes, Miyakojima MG-20 and Gifu B-129, to the inoculation with the bacterial species Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000. The defensive responses activated in both ecotypes were considerably different. Thus, in Miyakojima MG-20 was observed a compatible interaction, characterized by a rapid multiplication of the bacteria in infiltrated tissues, along with a decrease in the efficiency of the photosystem II, the appearance of chlorosis, desiccation and defoliation, as well as a moderate but steady increase in the levels of reactive oxygen species (ROS). All these symptoms were observed only in the inoculated leaflets, and never affected the normal development of the plant. In contrast, the interaction was incompatible in Gifu B-129 , where symptoms were rather imperceptible, the bacterium was unable to multiply in leaf tissues, and a critical increase in ROS accumulation was observed during the first few hours after bacterial infiltration. Based on DNA microarrays, were identified about 3,000 differentially regulated genes, upon infiltration with the bacteria in Miyakojima MG-20, and about 300 genes of this type in Gifu B-129. Moreover, it was posible to compare the basal gene expression between these lines, which showed differences in genes related to biotic and abiotic stresses, hormonal metabolism, redox state, and photosynthetic processes. A metabolomic study on these samples was also performed, revealing that a different set of metabolites in each ecotype was modified in response to the bacteria. By integrating the transcriptomic and metabolomic data, several metabolic pathways affected differentially in response to bacterial attack were identified , which helps to explain the observed differences in behavior between both ecotypes. Among these pathways stand out those of the antioxidants system (ascorbate and glutathione), the γ-aminobutyric acid metabolism, the synthesis and degradation of cell wall components, the synthesis and degradation of lipids, and hormone metabolism. Finally, several insertional mutants of the Gifu B-129 ecotype were selected for a set of genes that could play an important role in plant defense. Most of them showed a level of tolerance to the bacteria similar to that of the wild type, suggesting that this genes are not essentials in the defense response in these ecotypes. However, one line defective in the Polyamine Oxidase I gene showed higher tolerance, indicating that the expression of this gene during the plant response to the bacterial attack. negatively affects the defense of the plant. This work globally describes the main metabolic pathways regulated in response to P. syringae pv. tomato DC3000 in two ecotypes of L. japonicus. The differences between the responses triggered in the ecotype Gifu B-129 (incompatible interaction) and Miyakojima MG-20 (compatible interaction) let us to unravel the most effective defense mechanisms among those presented by the evaluated ecotypes. These results could be extrapolated to other agronomical important legumes.

Bordenave, Martín Diego. "Mediciones con resolución nanométrica mediante depleción por emisión estimulada" (2016-11-14). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Desde los estudios de Ernst Abbe, a finales del siglo XIX, se dio por aceptado que la microscopía óptica de campo lejano tenía un límite en su poder de resolución espacial: objetos que se encontraran más cercanos entre sí que media longitud de onda de la luz utilizada no podrían distinguirse. Sin embargo, en las últimas dos décadas se han desarrollado un número de técnicas basadas en fluorescencia que mantienen las ventajas de la microscopía óptica de campo lejano, y proporcionan una resolución espacial limitada únicamente por el tamaño del marcador fluorescente. Estas técnicas se denominan microscopías de superresolución o nanoscopías de fluorescencia e involucran la transición entre estados moleculares de los fluoróforos que permitan o no la emisión de fluorescencia. En particular, en la nanoscopía STED (Stimulated Emission Depletion), se produce esta transición mediante depleción por emisión estimulada, con el fin de desactivar fluoróforos en regiones controladas del espacio y de esta forma reducir el volumen efectivo de observación. En el marco de esta tesis, y gracias a una colaboración formal y activa con Stefan W. Hell (Department of NanoBiophotonics, Max Planck Institute for Biophysical Chemistry, Göttingen, Germany), galardonado en 2014 con el premio Nobel de Química por su trabajo pionero en las nanoscopías de fluorescencia, se construyó el primer nanoscopio STED de Argentina (Grupo de Nanofísica Aplicada, Centro de Investigaciones en Bionanociencias (CIBION), Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), Buenos Aires (BA), Argentina). El nanoscopio STED se aplicó para indagar y dilucidar problemas biofísicos con resolución nanométrica. En colaboraciones interdisciplinarias se estudió: (a) la organización de proteínas en la membrana del Trypanosoma cruzi, en colaboración con el Grupo de Inmunología Molecular, Instituto de Investigaciones Biotecnológicas (IIB), Universidad Nacional de San Martín (UNSAM), CONICET, BA, Argentina; (b) procesos de reestructuración del citoesqueleto de los conos de crecimiento durante la polarización neuronal, en colaboración con el Laboratorio de Neurobiología, Instituto de Investigación Médica de Córdoba (INIMEC), CONICET, Córdoba, Argentina; y (c) la formación y estabilidad de estructuras periódicas de actina en procesos de degeneración axonal, en colaboración con el Laboratorio de Neurobiología, INIMEC, CONICET, Córdoba, Argentina y el Grupo de Neurobiología Molecular, Instituto de Investigación en Biomedicina de Buenos Aires (IBIOBA), CONICET, BA, Argentina. Asimismo, se desarrolló un nuevo esquema de implementación de la nanoscopía STED que expande considerablemente su campo de aplicación. Generalmente, luz de longitud de onda situada en la zona roja lejana del espectro de emisión del fluoróforo es utilizada para inducir el fenómeno de emisión estimulada. En esta tesis, se demuestra que STED continuo (CW) también es posible utilizando longitudes de onda de STED ubicadas en el máximo de emisión, donde la sección eficaz de emisión estimulada puede ser hasta 10 veces mayor. Como resultado, es posible obtener imágenes de STED utilizando potencias proporcionalmente menores. Además, fluoróforos que se consideraban inadecuados para ciertas configuraciones espectrales de nanoscopía STED, pueden ser utilizables.

Abstract:
Since the studies made by Ernst Abbe, by the end of the XIXth century, it was accepted that far field optical microscopy had a limit in its spatial resolution: objects found closer together than half the wavelength of the light used would not be distinguished apart. However, in the last two decades, a number of techniques based on fluorescence have been developed, that keep all the advantages of far-field optical microscopy and provide spatial resolution only limited by the size of the fluorescent marker. These techniques are called super-resolution fluorescence microscopies or fluorescence nanoscopies and they involve the transition between molecular states of the fluorophores that allow or not fluorescence emission. Particularly, in STED (Stimulated Emission Depletion) nanoscopy, this transition is produced by stimulated emission depletion, in order to disable fluorophores in controlled regions of space and thereby reduce the effective volume of observation. In the framework of this thesis, and supported by a formal and active collaboration with Stefan W. Hell (Department of NanoBiophotonics, Max Planck Institute for Biophysical Chemistry, Göttingen, Germany), awarded in 2014 with the Nobel Prize in Chemistry for his pioneering work in fluorescence nanoscopies, the first STED nanoscope of Argentina was built (Grupo de Nanofísica Aplicada, Centro de Investigaciones en Bionanociencias (CIBION), Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), Buenos Aires (BA), Argentina). The STED nanoscope was applied to investigate and elucidate biophysical questions with nanometric resolution. In interdisciplinary collaborations it was studied: (a) the organization of proteins in the membrane of Trypanosoma cruzi, in collaboration with the Group of Molecular Immunology, Instituto de Investigaciones Biotecnológicas (IIB), Universidad Nacional de San Martín (UNSAM), CONICET, BA, Argentina; (b) processes of cytoskeleton restructuring in growth cones during neuronal polarization, in collaboration with the Laboratory of Neurobiology, Instituto de Investigación Médica de Córdoba (INIMEC), CONICET, Córdoba, Argentina; and (c) the formation and stability of periodic structures of actin in the process of axonal degeneration, in collaboration with the Laboratory of Neurobiology, INIMEC, CONICET, Córdoba, Argentina and the Group of Molecular Neurobiology, Instituto de Investigación en Biomedicina de Buenos Aires (IBIOBA), CONICET, BA, Argentina. Also, a new implementation scheme of STED nanoscopy was developed, which expands considerably its field of application. Generally, light of a wavelength located in the far-red zone of the emission spectrum of the fluorophore is used to induce stimulated emission. In this thesis, it is shown that continuous wave STED (CW), is also feasible using STED wavelengths located at the maximum of emission, where the stimulated emission cross section can be up to 10 times higher. As a result, super-resolved STED images are obtained using proportionally less power. Also, fluorophores considered unsuitable for certain spectral configurations of STED nanoscopy, may become usable with this scheme.

Bordone, Melina Paula. "Estudio de las vías visuales superiores en el glaucoma experimental" (2015-03-20). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El glaucoma, una de las principales causas de ceguera irreversible, se caracteriza por una pérdida progresiva de las funciones visuales, que se asocia a la muerte de células ganglionares retinianas (CGRs) y atrofia de la cabeza del nervio óptico (NO). El principal factor de riesgo es el aumento de la presión intraocular (PIO). Aunque el glaucoma fue concebido como una enfermedad limitada al ojo, los axones de las CGRs son extraoculares, con componentes intraorbitales e intracraneales. En este trabajo de Tesis se examinaron los efectos del glaucoma experimental agudo y crónico sobre el sistema visual consciente (SV-C) y el sistema visual no formador de imagen (SV-NFI). El SV-C en la rata, se compone de las CGRs clásicas y sus axones que proyectan al colículo superior (CS) y al núcleo geniculado lateral (NGL). El SV-NFI se compone por las CGRs intrínsecamente fotosensibles que expresan melanopsina (CGRsm) y proyectan a los núcleos supraquiasmáticos (NSQ), al núcleo pretectal olivar (NPO) y al intergeniculado (IG), que participan en la sincronización del reloj circadiano y el reflejo pupilar, entre otros. El modelo de glaucoma agudo consistió en un aumento de la PIO a 70 mm de Hg durante 90 min (hipertensión ocular aguda, HOA), en tanto que el glaucoma crónico se indujo a través de inyecciones intracamerales de condroitín sulfato (CSU), una vez por semana, durante 15 semanas. A los 7 días post-HOA se observó una alteración significativa de la función y estructura retinianas, con una pérdida significativa de CGRs, así como cambios astro- y microgliales en el CS y una disminución en el transporte anterógrado desde la retina al CS y NGL, pero no a los NSQ y al NPO. El número de CGRsm, los niveles de melanopsina y el reflejo pupilar consensual permanecieron inalterados aún a las 4 semanas post-HOA. La administración de CSU por 6 semanas indujo alteraciones en la función retiniana y en la vía visual, una disminución en el transporte anterógrado a todas las áreas de proyección y cambios gliales a nivel del NO, el CS y la retina. En el CS, estas alteraciones incluyeron una marcada respuesta micro- y oligodendroglial y una moderada respuesta astrocitaria, que se acompañaron de una disminución del contenido lipídico. A las 15 semanas de glaucoma crónico, estas alteraciones fueron más marcadas e incluyeron alteraciones en los axones, sin afectar el número de neuronas coliculares. La minociclina previno algunas de las alteraciones inducidas por la hipertensión ocular crónica, como el déficit en el transporte anterógrado desde la retina al CS. En cuanto al SV-NFI, el glaucoma crónico indujo una caída significativa en el número de CGRsm y los niveles de melanopsina, así como en el transporte desde la retina a los NSQ y el NPO, con una disminución en el reflejo pupilar consensual. En suma, los resultados obtenidos en esta Tesis aportan datos de relevancia respecto a la participación de las áreas visuales post-retinianas en el daño glaucomatoso. Palabras clave: células ganglionares, glaucoma, glía, hipertensión ocular, minociclina, sistema visual consciente, sistema visual no formador de imagen, transporte axonal.

Abstract:
Glaucoma, one of the main causes of irreversible blindness, is characterized by a progressive loss of visual functions, which is associated to retinal ganglion cell (RGCs) death and optic nerve (NO) atrophy. The increase in intraocular pressure (IOP) is one of the main risk factors. Classically, glaucoma has been conceived as a disease limited to the eye, but axons of RGCs have extraorbital and intracranial components. In this Thesis work, the effects of acute and chronic experimental glaucoma on the conscious visual system (C-VS) and the non-image forming visual system (NIF-VS) were examined. The C-VS in rats includes classical RGCs and their axons that project to the superior colliculus (SC) and the lateral geniculate nucleus (LGN). The NIF-VS is composed by intrinsically photosensitive RGCs expressing melanopsin (mRGCs) that project to the suprachiasmatic nuclei (SCN), pretectal olivary nucleus (OPN) and intergeniculate leaflet (IG), which drive circadian rhythms and pupillary light reflex (PLR), among others. The acute glaucoma model was induced by increasing IOP to 70 mm Hg for 90 min (acute ocular hypertension, AOH), whereas chronic glaucoma was induced by intracameral injections of chondroitin sulfate (CSU), once a week, for 15 weeks. At seven days post-AOH, a significant impairment of retinal function and structure, with a significant RGCs loss, and astro- and microglial changes were observed in the CS. At the same time, a marked reduction in anterograde transport to the SC and LGN, but not to the SCN and the OPN, was observed. At 4 weeks post-AOH, mRGCs cell number, melanopsin levels, and consensual PLR remained unchanged. CSU administration for 6 weeks induced alterations in retinal and visual pathway function, a decrease in anterograde transport to all of the RGCs projecting areas, and glial changes at the level of the retina, ON, and SC. In the SC, these alterations included a marked microand oligodendroglial response and a moderate astrocytic response, which were accompanied by a decrease in lipid content. At 15 weeks of chronic glaucoma, these changes were more intense and included axonal changes, without affecting collicular neuron number. Minocycline prevented some of the alterations induced by chronic ocular hypertension, and the anterograde transport deficit to the CS. As for the NIF-VS, chronic glaucoma induced a significant reduction of mRGCs number, melanopsin levels, and anterograde transport to the SCN and OPN, as well as a decrease in consensual PLR. In summary, the results obtained in this Thesis work provide relevant information regarding the participation of post-retinal visual areas in glaucomatous damage. Keywords: retinal ganglion cells, glaucoma, glia, ocular hypertension, minocycline, conscious visual system, non-image forming visual system, axonal transport.

Bordoni, Andrea Verónica. "Herramientas sintéticas para la caracterización de glicofuranosidasas. Desoxigenación fotoinducida por transferencia electrónica en derivados de hidratos de carbono" (2010). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La desoxigenación de alcoholes es una transformación importante en síntesis orgánica, especialmente en el área de la química de productos naturales. Desde su desarrollo en 1975, el método de desoxigenación de Barton-McCombie ha sido muy utilizado. Sin embargo, esta estrategia involucra el uso hidruros de estaño, los cuales son tóxicos, costosos y difíciles de eliminar. Por este motivo, es deseable el desarrollo de procedimientos alternativos, libres de hidruros metálicos. En este trabajo de Tesis, se estudió una reacción por transferencia electrónica fotoinducida (PET) para la reducción de grupos hidroxilos en posición-alfa a carbonilos de grupos ésteres y lactonas. La eficiencia de esta reacción reside en la estabilización del radical intermediario producto de la ruptura homolítica de dicho hidroxilo, derivatizado adecuadamente. La desoxigenación PET se utilizó como reacción clave en la síntesis de 2-desoxi y 5-desoxiazúcares. La glicobiología de D-Galf es un tema de gran interés ya que éste azúcar únicamente se encuentra en glicoconjugados de bacterias, protozoarios y hongos, muchos de ellos patógenos, mientras que en mamíferos se presenta sólo en configuración piranósica. Por lo tanto, la caracterización de las enzimas relacionadas con la biosíntesis y el metabolismo de D-Galf son consideradas blancos importantes para el desarrollo de agentes terapéuticos. En este contexto, los 5-desoxigalactofuranósidos sintetizados fueron evaluaron como sustrato y/o inhibidores de la exo beta-D-galactofuranosidasa de Penicillium fellutanum, y mostraron que la ausencia de HO-5 disminuye drásticamente la interacción con la enzima. Por otro lado, se desarrolló una secuencia muy directa para la síntesis de galactofuranósidos marcados radioactivamente, como herramientas sensibles para la detección de alfa- y beta-D-galactofuranosidasas.

Abstract:
The deoxygenation of alcohols is an important process in organic synthesis, especially in the area of natural product chemistry. Since its development in 1975, the Barton-McCombie deoxygenation method has been widely employed. However, this procedure involves the use of organotin compounds, which are toxic, expensive and difficult to remove. Therefore, the development of alternative procedures avoiding the use of metal hydrides is a desired achievement. In this Thesis, a photoinduced electron-transfer (PET) reaction for the reduction of hydroxyl groups vicinal to the carbonyl functions of lactones or esters is studied. The effectiveness of this reaction relies on the stabilization by the vicinal carbonyl group of the intermediate radical formed by homolytic the cleavage of the hydroxyl group, conveniently derivatized. The PET deoxygenation was employed as key step in the synthesis of 2-deoxy- and 5- deoxy sugars. The glycobiology of D-Galf is a topic of great interest since its presence is restricted to glycoconjugates of bacteria, protozoa and fungi, many of them patogenic, whereas in mammals is found only in the pyranose form. Therefore, the enzymes involved in the biosynthesis and metabolism of D-Galf are considered important targets for the development of therapeutic agents. In this framework, the 5-deoxy galactofuranosides synthetized were evaluated against the exo beta-D-galactofuranosidase from Penicillium fellutanum, showing that the absence of HO-5 drastically diminishes the affinity for the enzyme. In addition, a straightforward procedure for the synthesis of radiolabeled galactofuranosides, as sensitive tools for detection of alfa- and beta- galactofuranosidases, was developed.

Borge, Mercedes. "Leucemia linfocítica crónica de células B: el papel de las señales del microambiente en la patogénesis de la enfermedad" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las células leucémicas de pacientes con Leucemia Linfocítica Crónica de células B (LLC) proliferan en los órganos linfoides, donde la quimiocina CXCL12 proveniente de células estromales y de células de tipo nodriza (NLC), y moléculas como CD40L e IFNγ producidas por linfocitos T CD4+ activados, favorecen su expansión y sobrevida. Existen numerosos estudios donde se evalúa el efecto del CXCL12 sobre el clon leucémico, pero no había sido estudiado hasta el momento el impacto de dicha quimiocina en la fisiología de los linfocitos T de pacientes con LLC. Los resultados presentados en este trabajo demuestran que el CXCL12 induce la migración de linfocitos T de pacientes LLC, aunque en menor medida que la de linfocitos T de dadores sanos, hecho que se correlaciona con una menor polimerización de actina en respuesta al CXCL12. Además, observamos que los linfocitos T de pacientes de buen pronóstico migran menos en respuesta al CXCL12 en comparación a linfocitos T de pacientes de mal pronóstico debido a señales provenientes del clon leucémico. También demostramos que el CXCL12 actúa como un factor coestimulante de linfocitos T CD4+ de pacientes LLC, incrementando su activación y proliferación, y que los linfocitos T activados en presencia de CXCL12 inducen una mayor proliferación del clon leucémico. Por último, demostramos que las NLC contactan con linfocitos T CD4+ y aumentan su activación y proliferación, en parte, a través del receptor para CXCL12, el CXCR4. Como conclusión, nuestros resultados demuestran que el CXCL12 tiene un rol dual sobre los linfocitos T de pacientes LLC, induciendo la migración y también aumentando su activación y proliferación, favoreciendo en última instancia la expansión del clon leucémico. Considerando que la presencia de los linfocitos T en los órganos linfoides favorece que las células leucémicas sobrevivan y proliferen, la menor migración al CXCL12 de los linfocitos T de pacientes de buen pronóstico podría estar involucrada en el curso clínico indolente característico de esos pacientes.

Abstract:
Leukemic cells from patients with B-cell chronic lymphocytic leukemia (CLL) proliferate in lymphoid organs in close contact with activated T cells and CXCL12`s producer stromal and nurse like cells (NLC). CD4+ T cells induce CLL cell proliferation and survival mainly trough CD40L and IFNγ production, and CXCL12 enhances CLL survival. While a number of reports have evaluated the impact of CXCL12 on the leukemic clone, there is no information about the role of this chemokine in T cell physiology. Our results here show CXCL12 induces the migration of T cells from CLL patients, although in a lesser extend than T cells from healthy donors. The low migratory response of T cells from CLL patients was correlated with an actin polymerization defect in response to CXCL12. Moreover, we found that T cells from CLL patients with good prognosis have a lower migratory response to CXCL12 than T cells from CLL patient with worst prognosis, due to signals delivered by leukemic cells. We also found that CXCL12 costimulates the activation and proliferation of activated CD4+ T cell from CLL patient, and that activated T cells in the presence of CXCL12 enhance the activation and proliferation of the leukemic clone. Finally we demonstrated that autologous NLC establish a close contact with CD4+ T cells and increase their activation and proliferation partially through a CXCR4-dependent mechanism. In conclusion, our results suggest that CXCL12 production by lymphoid tissue microenvironment in CLL patients might play a key dual role on T cell physiology, functioning not only as a chemoattractant but also as a costimulatory factor for activated T cells, which finally improves CLL cell proliferation. Since T cells in lymphoid organs may help CLL cells to survive and proliferate, the low migratory response to CXCL12 in T cells from CLL patients with good prognosis might favor the indolent clinical course of the disease in these patients.

Borges da Silveira, Rosa Mara. "Contribución al conocimiento del género Polyporus s. str. (Basidiomycetes) en el Cono Sur de América en base a sus características morfológicas, biológicas y moleculares" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el presente trabajo se estudió el género Polyporus s. str. en el Cono Sur de América. Para ello, se dividió su tratamiento en 4 partes: l) morfología; 2) ensayos de compatibilidad; 3) estudios isoenzimáticos y 4) taxonomía numérica. Se analizaron los caracteres macro- y micromorfológicos de 350 colecciones y 88 holotipos de los Herbarios K, PC, UPS, LPS, BAFC, ICN y SP. Se hicieron cruzamientos intra- y interespecificos de l44 cultivos monospóricos y lO cultivos polispóricos. Se estudiaron 42 aislamientos dicarióticos, 42 monocarióticos y 34 cruzamientos entre ellos mediante la electroforesis horizontal en geles de poliacrilamida, para seis actividades enzimáticas: EST, 6PGD, IDH, MDH, SHDH y SOD. Se analizaron 44 bandas totales. Por otra parte, se hizo un análisis numérico de los patrones de bandas isoenzimáticas y de los caracteres morfológicos. Los resultados de los ensayos de compatibilidad y estudios isoenzimáticos corroboraron aquellos obtenidos en el análisis morfológico. Además, en el análisis numérico se pudo establecer buena correlación entre los datos moleculares y los morfológicos. Este trabajo permitió identificar 20 especies y una variedad en el área estudiada. Estas fueron separadas en 5 subgéneros: Polyporus, Melanopus, Polyporellus, Favolus y Austropolyporus subgen. nov.

Abstract:
In the present work, the genus Polyporus s. str. in the “Southern Cone of America was studied. For this, the analysis was divided into 4 parts: l) morphology; 2) compatibility tests; 3) isoenzymatic studies and 4) numerical analysis. The macro and microscopic characters of 350 collections and 88 holotypes from the Herbaria K, PC, UPS, LPS, BAFC, ICN and SP were examined. Intra- and interspecífic pairings of l44 single-Spore cultures and 10 polyspore cultures were made. Forty two dikaryotic isolates, 42 monokaryotic isolates and 34 pairings were examined by horizontal polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) for six enzymatic activities: EST, 6PGD, IDH, MDH, SHDH and SOD. A total of 44 bands were analysed. On the other hand, a numerical analysis of the isoenzymatic patterns and the morphological characters was undertaken. The results of the compatibility tests and isoenzymatic studies, corroborated those furnished by morphological characters. By analysing numerically the isoenzymatic patterns and the morphological characters, a good correlation between molecular and morphological data was established. This research allowed us to identify 20 species and one variety in the area under study. These were distributed among 5 subgenera: Polyporus, Melanopus, Polyporellus, Favolus and Austropolyporus subgen. nov.

Borodinsky, Laura Noemí. "Influencia de la actividad neuronal sobre el desarrollo y trofismo de las células granulares del cerebelo en cultivo" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En este trabajo de tesis se presenta un estudio sobre los mecanismos por los cuales la actividad neuronal modularía el desarrollo y el trofismo del Sistema Nervioso Central. Se evaluó la influencia de concentraciones despolarizantes de KCI y de GABA sobre la proliferación de células granulares del cerebelo inmaduras y sobre la morfología y la supervivencia de neuronas diferenciadas in Vitro. Se disecaron cerebelos de ratas de 6 a 8 días de edad, y se obtuvieron suspensiones celulares que fueron sembradas en medio de cultivo libre de suero o bien en medio suplementado con un 10% de suero fetal bovino. Apartir de los estudios de incorporación de timidina ³H se observó que las células una vez sembradas poseen un pico proliferativo en las primeras 24 horas de cultivo, que desciende significativamente a las 48 horas y alcanza valores blanco luego de las 72 horas. El agregado de KCl 25 mM en el momento de la siembra conduce a un aumento de la síntesis de ADN del 34 ± 4% (n: 14), y este efecto es completamente bloqueado por MgCl2 10 mM y por nifedipina 10 μM (bloqueante de canales de Ca²+ tipo L). El GABA(0.1-100μM) también induce un incremento de la proliferación de las células granulares inmaduras (23 ± 1%, n: 10) y dicho efecto también es bloqueado por MgCl2 10 mM y por nifedipina 10 μM así como por bicuculina (antagonista de receptores GABAa) y picrotoxina (bloqueante del canal de Clˉ). La preincubación con un inhibidor de la quinasa -MEK1- de la proteína quinasa activada por mitógeno (MAPK), PD98059, bloquea en forma efectiva la proliferación celular inducida por KCl 25 mM y GABA. El efecto proliferativo del KCl parece ser debido a una directa activación de los canales de Ca²+ que se produce como consecuencia de la despolarización y no requiere de sustancias tróficas presentes en el suero o de glutamato que se podría liberar como consecuencia de Ia despolarización. Por el contrario, el mecanismo por el cual el GABA aumenta la proliferación es más complejo pues requiere de una membrana despolarizada y de la interacción de sustancias tróficas presentes en el suero. Al evaluar la influencia del GABA y de concentraciones despolarizantes de KCl sobre la neuritogénesis, se observó que ambos agentes producen un aumento de la complejidad de la red neurítica, cuantificada a través de la medición de la dimensión fractal de neuronas aisladas sembradas por 48 horas en cultivos de baja densidad. Este efecto es bloqueado por el agregado de nifedipina 10 μM. El tratamiento de los cultivos con KCl 25 mM promueve la supervivencia neuronal a los 7 días de la siembra, produciendo un incremento de la misma del 100 ± 20% (n: 6) cuando se la compara con la supervivencia celular en cultivos crecidos en KCl 5 mM (condiciones de reposo). Este aumento fue bloqueado por MgCl2 y nifedipina, pero no fue bloqueado por PD98059. Por el contrario, el tratamiento con GABA no afecta la supervivencia neuronal. Se concluye que altas concentraciones de KCl y el agregado de GABA inducen un aumento de la proliferación y de la complejidad neuronal debido al influjo de calcio a través de canales voltaje dependientes de tipo L y la consecuente activación de la cascada de la MAPK. El hecho de que el GABA no afecte la supervivencia neuronal parece estar relacionado con la pérdida de la capacidad del GABA para activar un influjo de calcio ya que el KCl sí aumenta la supervivencia. A diferencia de lo que sucede en el caso de la proliferación, el aumento de la supervivencia neuronal debido a concentraciones despolarizantes de KCl no parece ser mediado por la cascada de la MAPK.

Boschiroli, María Laura. "Identificación, caracterización molecular y mutagénesis insercional de genes codificantes para antígenos proteicos de Brucella Abortus" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Brucella abortus, el agente etiológico de la brucelosis bovina, es una bacteria intracelular que replica en células fagocíticas y que también infecta a humanos, por lo que la enfermedad es considerada una zoonosis. Esta enfermedad produce grandes pérdidas en el sector pecuario y de salud pública del país y del mundo. Los factores de virulencia de esta bacteria son pobremente conocidos, y el diagnóstico de la enfermedad es aún dificultoso y poco confiable. Una manera de sobrellevar estas dificultades es por medio del estudio genético de la bacteria. En este trabajo se caracterizaron tres genes y las proteínas que éstos codifican de B.abortus S19, la cepa vacunal bovina. La estrategia para conocer el rol en la fisiología bacteriana fue por un lado obtener la de los genes y buscar homologías en bancos de datos, y por otro lado mutagenizartos por intercambio alélico y estudiar el comportamiento de las cepas mutantes in vivo e in vitro. Se lograron identificar genes del operón 2-oxoglutárico deshidrogenasa y la enzima superóxido dismutasa dependiente de cobre y zinc. En el primer caso, las mutantes muestran claras diferencias con respecto a la cepa salvaje, demostrando un rol fundamental de estas proteínas en la fisiología bacteriana. En el segundo caso, la cepa mutante no muestra diferencias significativas, confirmando resultados previos, por lo que se demuestra que esta proteína no es un factor de virulencia.

Abstract:
Brucella abortus, the causative agent of bovine brucellosis, is an intracellular bacteria which can replicate within phagocytic cells and can also infect humans, therefore the disease is considered a zoonosis. Brucellosis produces great economical and public health losses not only in our country but worldwide. Brucella’s virulence factors are poorly understood, and diagnosis is difficult and unreliable. A means to overcome this drawbacks is studying the bacterial genetics. In this work 3 genes from Brucella abortus vaccine Strain 19, and the proteins they codify for, were studied. In order to understand their physiological role, genes sequences were determined and compared to other known sequences in databases. On the other hand, these genes were knocked out by allelic replacement and mutant strains’ behavior was studied in vitro and in vivo. Genes from 2-oxoglutarate dehydrogenase operon and Cu/Zn superoxide dismutase were identified. Mutants for the former genes showed clear differences compared to the wild type strain, demonstrating an important physiological role in the bacteria. Confirming pre-existing results, mutants for the latter gene showed no significant differences, hence this protein is not a real virulence factor.

Bossi, Mariano L.. "Fotocromismo en cristales líquidos nemáticos y colestéricos" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo de esta tesis es el estudio de la interacción de compuestos fotocrómicos con cristales líquidos de bajo peso molecular, encarado desde dos aspectos principales. Por un lado las modificaciones que genera la absorción de luz por parte de la sonda en el entorno ordenado que la roda y por el otro, la influencia de la anisotropia del medio sobre la reacción fotocrómica, especialmente el decaimiento térmico del fotoisómero. Se eligieron dos fases mesogénicas: una fase nemática y una colestérica presentes en un intervalo de temperaturas que incluye temperatura ambiente. La fase nemática se obtiene de una mezcla comercial de cianofenilbiciclohexilos (ZLI1132) y la fase colestérica se prepara por agregado de un inductor quiral (5811) a dicha mezcla. Los compuestos fotocrómicos incluidos en estas mesofases pertenecen a tres familias. Se utilizaron tres azobencenos, dos espirocompuestos (un espiropirano y una espirooxacina) y dos fulgidas, compuestos puramente fotocrómicos. Las dos fulgidas y uno de los azobencenos fueron sintetizados. La sondas se incluyeron en concentraciones de 0.5 a 10% p/p. Todos los azobencenos exhibieron alta afinidad por la fase nemática y la fotoisomerización produjo un marcado descenso en el orden del cristal líquido. Los espirocompuestos presentaron baja afinidad con esta fase. En esta familia, la isomerización produjo un aumento significativo en el orden del medio pero dicho cambio fue menor que el observado para los azobencenos. Las fiilgidas presentaron fotocromismo altamente reproducible en fase nemática, pero ninguno de sus fotoisómeros mostró alta afinidad por la mesofase, por lo que la fotoisomerización no produjo una perturbación medible del orden. Las propiedades de la fase colestérica estuvieron regidas principalmente por el inductor quiral y la fotoisomerización no produjo grandes perturbaciones en esta mesofase. En la ventana de tiempos medidos (hasta algunos milisegundos), la dinámica del sistema estuvo regida por la reacción fotocrómica. El medio se reacomodó instantáneamente a la composición relativa de los isómeros. La cinética de la recuperación térmica del estado inicial presentó un decaimiento monoexponencial en ambas fases, excepto el espiropirano que mostró un decaimiento biexponencial. Los parámetros de activación fueron en general similares en ambas mesofases y en algunos casos presentaron diferencias respecto a su comportamiento en solución. Este hecho se explica por la influencia que ejerce el medio ordenado sobre la reacción, que es tanto energética como entrópica. Palabras clave: fotocromismo, termocromismo, azobencenos, fulgidas, espiropiranos, espirooxacinas, merocianinas, cristales líquidos, nemática, colestérico, birrefringencia, dicroísmo.

Abstract:
The aim of this work is to study the interaction between photochromic compounds and low molecular weight liquid crystals frorn two points of view. On one hand, the perturbations in the media produced by light absorption by the probe, and on the other hand the influence of anisotropic media on the photochromic reaction, specially on the thermal decay of the photoisomer. Two mesogenic phases were used: a nematic phase and a cholesteric phase, stable in a temperature range including room temperature. The nematic phase is a cyanophenylbícyclohexyl commercial mixture (ZLIl 132) and the cholesteric one is prepared by addition of a chiral inductor (SSI 1) to the nematic mixture. The photochromic compounds belong to three families. The probes were three azobenzenes, two spirocompounds (a spiropyran and a spirooxazine) and two fulgides, the latter purer photochromic. One of the azobenzenes and both fiilgides were synthesized . All compounds were used in a 0,5 to lO % w/w concentration range. All azobenzenes showed high affim'ty for the nematic phase and its photoisomerization caused an important decrease in liquid crystal order. Spírocompounds exhibited low compatibility with this phase. In this family isomerization produced a significant increase in the order of the medium but smaller than the one observed for azobenzenes. Fulgides showed a highly reproducible photochromism in the nematic phase, but none of the photoisomers presented high aflinity for the mesophase. Thus, photoisomerisation showed negligible perturbation of-the liquid crystal. The photoisomerisation didn’t produce large perturbations in the cholesteric phase, because its properties were mainly governed by the chiral inductor. In the time window explored (up to a few milliseconds) the dynamics of the medium changes were controlled by the isomerization. The mesophase reoriented itself fast enough to follow the decay process. The kinetics of the thermal recovering showed monoexponential behavior in both phases, except for spiropyran, whose decay was biexponential. The values of the activation parameters were similar in both mesophases, but in some cases they were different to values in solution. These differences were accounted for by the influence of the ordered medium on the reaction, which is both energetic and entropic. Keywords: photochromism, thermochromism, azobenzenes, fulgides, spiropyrans, spirooxazines, merocyanines, liquid crystals, nematic, cholesteric, bire‘i'ingence, dichroism.

Botbol, Nicolás S.. "Implicitación de aplicaciones racionales" (2010). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Botek, Edith Lilián. "Análisis CLOPPA-RPA de propiedades de respuesta lineal usando funciones de onda ab initio y semiempíricas" (1998). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el presente trabajo de tesis, por un lado, se analizan en forma teórica diversos problemas relacionados con el estudio de parámetros espectroscópicos de RMN y de polarizabilidades moleculares con el método IPPP-CLOPPA (Inner Projection of the Polarization Propagator-Contributions from Localized Orbitals to the Polarization Propagator Approach). Por el otro, se presentan modificaciones y/o nuevas implementaciones que son particularmente apropiadas para tratar algunos de estos problemas. Se analizan diferentes efectos electrónicos y estructurales en fenetoles en base al apantallamiento magnético. Se propone una modificación (AM1*) de los parámetros para Sn en el método RPA AM1 que mejora significativamente el cálculo de acoplamientos indirectos de espin nuclear J(XSn). Se presenta la implementación del método IPPP-CLOPPA en el contexto de cálculos semiempíricos INDO/S para el análisis tanto del tensor de acoplamiento de espin nuclear como del tensor de polarizabilidad estática molecular, lo que resulta muy promisorio dada la flexibilidad de dicho método semiempírico. Se obtienen, así, resultados de acoplamientos J(XSn) donde se produce una notable mejora con respecto a los hallados con el método AMI*. En lo referente a la polarizabilidad molecular, se comparan los valores de esta propiedad en la serie etano, etileno y acetileno con distintas bases a nivel semiempírico, agregándose orbitales de polarización, con un estudio similar a nivel ab initio para analizar la aplicabilidad del método. Se aplica luego al estudio de moléculas de interés biológico. La interrelación entre el efecto de sustituyente en acoplamientos ³J(C1M)α y la polarizabilidad del enlace C3—Mα en l-X-3-M-biciclopentanos sustituidos (X=H y M=H, F y CH3) se discute con los métodos mencionados tanto a nivel ab initio como INDO/S. Los métodos presentados demuestran ser una herramienta interesante para el análisis de diversos problemas en el campo de la química cuántica.

Abstract:
On the one hand, different problems related to the study of NMR parameters and molecular polarizabilities with IPPP-CLOPPA (Inner Projection of the Polarization Propagator - Contributions from Localized Orbitals to the Polarization Propagator Approach) method are analyzed. On the other hand, modifications and/or implementations particularly appropriated to deal with some of these problems are presented. Different electronic and structural effects in phenetols are analyzed with the magnetic shielding tensor. A modification (AM1*) of Sn parameters in RPA AM1 method is proposed, which significantly improves indirect nuclear coupling constants calculations J(XSn). Implementation of IPPP-CLOPPA method with INDO/S semiempirical approach is presented for the analysis of indirect nuclear coupling and static molecular polarizability tensors that results to be very promising taking account the flexibility of this semiempirical method. Results from J(XSn) couplings are obtained where a notable improvement is obtained over the results with AM1*. Values from semiempirical molecular polarizabilities with different basis adding polarization orbitals in the series ethane, ethylene and acetylene are compared with a similar ab initio study to analyze the applicability of the method. It is applied later to the study of molecules of biological interest. The relation between substituent effects in ³J(C1M)α and the polarizability of C3—Mα bond in 1-X-3-M-biciclo pentanes (X=H y M=H, F y CH3) is discussed with mentioned ab initio and semiempirical INDO/S methods. The methods presented here are a useful tool for the analysis of different problems related to Quantum Chemistry.

Bottini, María Cecilia J.. "Estudios multidisciplinarios en las especies Patagónicas Argentinas del género Berberis L. (Berberidaceae)" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La familia Berberidaceae está integrada por 14 géneros que habitan Norteamérica. Sudamérica, Europa, Asia y Norte de Africa, de los cuales sólo Berberis extiende su distribución al Hemisferio Sur. El género Berberis esta representado en la Patagonia Argentina por 16 especies. Algunas de ellas presentan: delimitación morfológica inequívoca que pueden o no hibridar en zonas ecotonales y/o marginales sin perder su identidad; adaptación a ambientes muy contrastantes (rangos de precipitación, tipos de suelos. etc); distribución muy restringida a condiciones ambientales especificas; características de habitat similares a pesar de presentar un amplio rango de distribución. Se realizaron estudios multidisciplinarios con la finalidad de caracterizar y delimitar los taxa que componen al género y analizar los mecanismos de especiación del grupo con especial referencia a la "Especiación Hibrida Homoploide y Poliploide". A partir de diferentes metodologías (morfología, citogenetica, proteinas seminales, isoenzimas, AFLP e ITS) se analizaron numerosas poblaciones de las siguientes especies: B. bidentata, B. buxifolia, B. cabrerae, B. chillanensis, B. comberi, B. copahuensis, B. darwinii, B. empetrifolia, B. heterophylla, B. ilicifolia, B. linearifolia, B. michay, B. montana, B. parodii y B. serrato-dentata. Los principales resultados obtenidos a partir de las diferentes técnicas sugieren que: En Berberis se encontró que el contenido de ADN está fuertemente asociado con un conjunto de variables ambientales y ecológicas, apoyando la hipótesis del "nucleotipo". B. bidentata, B. darwinii y B. linearifolia conformarían un Complejo Hibrido Homogámico. B. buxifolia, B. heterophylla y B. parodii constituirian un Complejo Híbrido Poliploide. El proceso de especiación de B. montana, B. chillanensis y B. cabrerae no estaría completo y estas tres entidades podrian tratarse de semiespecies.

Abstract:
The Berberidaceae are a family of about 14 genera, widespread in Northern Hemisphere and with a single genus, Berberis, extending into South America. In the Argentinian Patagonian region there are 16 species of Berberis. Some of them present: sharp morphological discontinuities, although there are intermediate forms among some of the species indicating the probable ocurrence of hybridization; adaptation to very different habits (rainfall range. soil types, etc); restricted geographic range to specific environmental conditions; widespread distribution maintaing similar type of habit. Multidisciplinary studies were made wiht the aim to analyze the boundaries among the taxa of the genus. Moreover there studies could help to delimitate the mechanism of speciation of there taxa, with special enphasis in "Homoploid and Polyployd Hybrid Speciation". Morphological, cytogenetical, seed proteins and isozymes electrophoresis, AFLP and ITS studies were done to analize the relationships among several populations of: B. bidentata, B. buxifolia, B. cabrerae, B. chillanensis, B. comberi, B. copahuensis, B. darwinii, B. empetrifolia, B. heterophylla, B. ilicifolia, B. linearifolia, B. michay, B. montana, B. parodii and B. serratodentata. The principal conclusions suggest that: Berberis' DNA content is strongly associated with geographical and ecological variables, this data would support the nucleotype hypotesis. B. bidentata, B. darwinii and B. Linearifolia would constitute an Homogamic Hybrid Complex. B. buxifolia, B. heterophylla and B. parodii would conform a Polyployd Hybrid Complex. The speciation process of B. montana, B. chillanensis and B. cabrerae would not be complete being considered as semispecies.

Bottino, María Cecilia. "Efectos genómicos y no genómicos de progestágenos en carcinomas mamarios murinos en estadíos diferentes de hormono-dependencia" (2008). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los estrógenos y la progesterona se unen a sus respectivos receptores para ejercer su acción. Los receptores para hormonas esteroides fueron históricamente considerados nucleares, sin embargo existen evidencias en la actualidad de un rol no-genómico de los mismos, ejercido a través de su localización en membrana. Si bien ya se ha descripto la presencia de receptores clásicos en membrana para estrógenos y glucocorticoides, aún no se han encontrado para la progesterona. El estudio del mecanismo de acción de los hormonas esteroideas sexulaes así como también de sus receptores específicos, receptores de estrógenos (RE) y de progesterona (RP), es sumamente importante en el campo de la oncología mamaria ya que en la clínica, la expresión de estos receptores es un parámetro esencial para determinar el tratamiento a seguir. En nuestro laboratorio se ha desarrollado el modelo experimental de obtención de adenocarcinomas mamarios murinos de origen ductal inducidos por administración prolongada de acetato de medroxiprogesterona (MPA) en ratones hembra BALB/c. Se establecieron líneas tumorales hormono-dependientes (HD) y hormono-independientes (HI) que expresan altos niveles de RE y RP. En estudios previos describimos dos sitios de unión a progesterona, el sitio clásico de alta capacidad, y otro nóvel de mayor afinidad y baja capacidad. El objetivo de este trabajo fue estudiar la presencia de los RP en la membrana celular de tumores HD y HI, y su participación en efectos genómicos y no- genómicos. Observamos la localización en membrana de ambas isoformas del RP y demostramos que, tanto agonistas como el antagonista RU-486, regulan por igual la distribución de los RP en la membrana y en el núcleo celular a tiempos cortos. Además, demostramos la expresión de los receptores nóveles para progesterona, recientemente descriptos, que también tienen localización en la membrana: mPRα, mPRβ y mPRγ. Se ha demostrado que la activación de los mismos induce una disminución de AMPc. Estudiamos dos vías paradigmáticas de señalización, como la activación de ERK 1/2 y la regulación de AMPc, que resultaron ser activadas tanto por MPA como por RU-486. Teniendo en cuenta que los receptores nóveles no se activan con estos ligandos, se sugiere la participación del RP clásico localizado en la membrana celular. Además detectamos que la progesterona, el agonista natural del RP, es capaz de desencadenar los mismos efectos que el MPA. Por último, analizamos el efecto biológico desencadenado por el antagonista y observamos que el tratamiento de un cultivo primario con RU-486 a concentraciones menores al Kd del receptor generó un efecto proliferativo, mientras que a concentraciones iguales o mayores que el Kd clásico, su efecto fue inhibitorio. Resumiendo, los efectos finales de la activación de RP localizado en la membrana celular difieren según la concentración de la hormona utilizada. En el caso del MPA, su efecto biológico es siempre proliferativo, sin importar la concentración utilizada. Cuando el tratamiento se realiza con RU-486, el resultado de la activación de estas vías depende de la concentración de hormona utilizada. Los resultados obtenidos en esta tesis sugieren el uso de dosis de antiprogestágenos en el tratamiento del cáncer que garanticen la obtención de efectos genómicos.

Abstract:
Estrogen and progesterone bind to their respective receptors to initiate their action. The steroid receptors were historically considered as nuclear, however, nowadays, many evidences suggest they may play a non-genomic role through their membrane localization. The understanding of the mechanisms related to hormone action has become a very important issue in the breast cancer field since the level of estrogen (ER) and progesterone receptors (PR) determine the therapy selection. In our laboratory, we have developed an experimental model of murine ductal mammary adenocarcinomas induced by the administration of medroxyprogesterone acetate (MPA), in BALB/c mice. We have established hormone-dependent (HD), and hormone-independent (HI) lines, both expressing high levels of ER and PR. In previous studies, we have described two binding sites to progesterone, the classical one, with a high capacity, and a novel site with higher affinity and lower capacity. The aim of this work was to study the presence of PR at the cell membrane of HD and HI tumors, and to study their role mediating genomic and non-genomic effects. We have detected both PR isoforms located at the cell membrane. We also demonstrated a similar distribution of membrane and nuclear PR after priming with MPA or with the antagonist RU-486. We have also detected the presence of the novel progesterone receptors mPR α, mPR β and mPR γ. The activation of these receptors has been reported to be associated with a decrease in cAMP levels. We have studied two paradigmatic signaling pathways, ERK 1/2 activation and cAMP regulation, that were similarly activated by MPA and RU-486, suggesting that the classical PR located at the cell membrane might be responsible for this effect. Progesterone was as efficient as MPA inducing ERK activation. These data, showing similar rapid effects mediated by agonist and antagonist prompted us to investigate the role of low concentrations of antagonist in cell proliferation. As expected, concentrations of RU-486 lower than those able to bind the classical PR to elicit the genomic effects, were able to stimulate cell proliferation, while higher concentrations were inhibitory. To sum up, our results suggest the presence of classical PR at the cell membrane of murine mammary carcinomas. The activation of these receptors with agonists or antagonists regulates non genomic pathways and PR distribution. In the case of MPA and progesterone, their biological effect is always proliferative, no matter the concentration used to treat the cells. RU-486, on the other hand, at low concentrations, not high enough to activate the classical binding site, will elicit only the proliferative signals, at higher concentrations, in spite of activating MAPK it will induce an inhibition of cell proliferation. These results suggest that in the clinic, concentrations high enough to activate the classic nuclear PR should be use to inhibit tumor growth.

Bourguignon, Nadia Soledad. "El arsenito de sodio, un disruptor endócrino que afecta el eje reproductivo y la homeostasis de la glucosa" (2014-12-18). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La contaminación con As (As) en el agua de bebida se considera una amenaza para la salud en todo el mundo, ya que está asociado a un mayor riesgo de contraer enfermedades como cáncer de piel y pulmón, provocar efectos indeseables sobre el desarrollo, la reproducción las secreciones internas y alteraciones cardiovasculares. Debido a que el As puede actuar como un disruptor endócrino aquí investigamos el efecto de la exposición a As, durante períodos críticos del desarrollo neuroendócrino como es la gestación y las semanas postparto, sobre el eje reproductivo y el metabolismo de la glucosa, en las madres y sus crías. Se administraron 5 (A5) o 50 ppm (A50) de arsenito de sodio en el agua de bebida a ratas Sprague Dawley preñadas, desde el día 1 de gestación hasta el sacrificio (2 meses postparto). Al destete, se dividieron las crías en dos grupos: uno continuó recibiendo el mismo tratamiento que la madre y el otro recibió agua destilada hasta el día del sacrificio (4 meses). En las madres, la exposición a As produjo alteraciones en la homeostasis de la glucosa durante la preñez, probablemente alterando la funcionalidad de las células β, incrementando el riesgo de desarrollar diabetes gestacional. Además, alteró la fisiología reproductiva, sugiriendo el desarrollo de una falla ovárica prematura. Las crías expuestas a As durante el desarrollo presentaron alteraciones en la fisiología reproductiva, principalmente las hembras, mientras que el metabolismo de la glucosa no se vio afectado.

Abstract:
Arsenic contamination in drinking water is considered a worldwide threat to health, that is associated with an increased risk of diseases such as skin and lung cancer, cause undesirable effects on development, internal reproduction secretions and cardiovascular disorders. Because As can act as an endocrine disruptor, here we investigated the effect of As exposure, during critical periods of neuroendocrine development as gestation and postnatal weeks, on the reproductive axis and metabolism of glucose in dams and their offspring. We administered 5 (A5) or 50 ppm (A50) of sodium arsenite in drinking water to Sprague Dawley rats from gestational day 1 until sacrifice (two months postpartum). At weaning the offspring were divided in two groups: one of each continued to receive the same treatment and the other one received distilled water until sacrifice (4 months of age). In dams, As exposure induces glucose homeostasis alterations during pregnancy, probably by altering β-cell function, increasing the risk of developing gestational diabetes. In addition, profoundly impaired reproductive physiology, suggesting premature ovarian failure due to arsenic exposure, may have developed. Offspring rats exposed to arsenic during development present altered reproductive physiology, mainly females, while metabolism is not affected.

Bouvier, León Alberto. "Estudio de adenilato quinasas de tripanosomas. Desarrollo de herramientas de manipulación genética" (2010). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las adenilato quinasas son fosfotransferasas que participan en la homeostasis intracelular de nucleótidos de adenosina. Se postula que constituyen los componentes clave de las redes enzimáticas de fosfotransferencia. Las mismas comunicarían, de forma espacial, los sitios de generación con los de consumo de ATP. Los kinetoplástidos, entre los que se incluye el parásito causante del mal de Chagas, el Trypanosoma cruzi, representan a los organismos con mayor número de isoformas de adenilato quinasas del que se tenga conocimiento. En este trabajo se desarrolló una herramienta de rastreo de bases de datos con la que se pudo identificar a seis isoenzimas codificadas en el genoma de Trypanosoma cruzi. Se estudiaron diferentes aspectos de cada una de las mismas. Algunas variantes fueron localizadas en la estructura flagelar, en el lumen glicosomal, solubles en el citosol y posiblemente asociadas a reservosomas. Adicionalmente se estudiaron los dominios y motivos responsables de su respectiva localización. Por otro lado se investigaron tres de las isoformas presentes en Trypanosoma brucei. Se determinó la esencialidad de la isoforma candidata mitocondrial, los patrones de expresión estadío específicos para la isoenzima glicosomal y además la potencial presencia de una señal críptica de localización a esta organela, en otra de las variantes. Finalmente se evaluaron metodologías de reemplazo génico dirigido en Trypanosoma cruzi y se desarrollaron numerosas herramientas que permiten la manipulación genética de este tripanosoma. Entre estas se encuentran vectores de expresión con diferentes marcadores de selección, plásmidos mínimos con marcadores de selección de sencilla transferencia y secuencias codificantes para múltiples epítopes, proteínas fluorescentes y sitios de proteasas. Se espera que estas herramientas sean de utilidad para futuras investigaciones de tripanosomas y otros organismos.

Abstract:
Adenylate kinases are phosphotransferases involved in intracellular homeostasis of adenosine nucleotides. They are thought to be key components of enzymatic phosphotransfer networks. These would spatially communicate sites of ATP synthesis with those involved in the consumption of this molecule. To the present knowledge kinetoplastids, which include the causative agent of Chagas' disease, Trypanosoma cruzi, are among the organisms with the highest number of adenylate kinase isoenzymes. In this work, a database screening tool was developed, which allowed us to identify six different isoenzymes present in the genome of Trypanosoma cruzi. For every one identified, various aspects where analyzed. Some variants where localized to the flagellum, inside the glycosomal lumen, soluble in the citosol and possibly associated to reservosomes. Additionally the domains and motifs responsible for their respective localization where studied. On the other hand three variants present in Trypanosoma brucei where investigated. The mitochondrial candidate was determined to be an essential enzyme, stage specific expression patterns for the variant localized inside glycosomes where established and the presence of a putative cryptic glycosomal targeting signal where found in another isoform. Finally methodologies for targeted gene replacement in Trypanosoma cruzi where evaluated and numerous tools for the genetic manipulation of this trypanosome where developed. Among them, expression vectors with different selectable markers, minimal plasmids with easy to transfer selectable markers and sequences which code for multiple epitopes, fluorescent proteins and protease cleavage sites. Hopefully these tools will be useful in future investigations regarding trypanosomes and other organisms.

Bouza, Pablo José. "Evolución de pavimentos de desierto y costras superficiales en un sector del Noreste del Chubut : Su relación con las propiedades físico-químicas y micromorfológicas del suelo superficial" (1995). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En la Patagonia árida del Chubut existen amplios sectores de suelo desnudo cubiertos por pavimentos de desierto y costras superficiales asociadas. El estudio de estos signos de degradación edáfica superficial constituye un tema de interés para el manejo y la recuperación de los pastizales naturales. Los objetivos de este trabajo son: 1) establecer, en base a atributos superficiales fácilmente reconocibles en el campo, una clasificación de condiciones superficiales y con ello el grado de desarrollo de pavimentos y costras. 2) para cada clase de condicidn superficial, determinar aquellas variables físicas y químicas que controlen o no la degradación del suelo superficial. 3) determinar el posible mecanismo de formación para cada categoria de costra 4) establecer una clasificación morfogenética de costras y capas superficiales y subsuperficiales basada principalmente en estudios micromorfológicos y en su posición microtopográfica. 5) determinar, en base a los estudios de suelos y a los rasgos morfológicos superficiales, una clasificación genética de los pavimentos de desierto. El Brea de estudio, denominada Bajo de la Suerte, se encuentra ubicada a 90Km al oeste de la ciudad de Puerto Madryn. El microrelieve está dado por montículos de suelo asociados a la vegetación arbustiva que alternan con Breas de suelo desnudo, estas últimas con desarrollo de pavimentos de desierto y costras superficiales. Los suelos del área de estudio fueron clasificados como un complejo de Natrargides tipicos y Haplargides tipicos y arénicos. Se identificaron al menos cuatro clases de condiciones superficiales, desde suelo intacto o de clase 1 hasta suelo con extrema degradación o de clase 4, pasando por estados intermedios. Además se observaron dos clases más, ambas relacionadas a pequeños cursos efímeros: la clase 5 definida por las formas de acumulación arenosa y la clase 6 por formas de erosión encauzada. Las clases de condiciones superficiales constituyen una secuencia espacial de deterioro de la superficie del suelo. La desagregación del suelo superficial es causada principalmente por: 1) dispersión quimica de las arcillas debido a1 elevado valor de PSI; 2) dispersión mecánica por impacto de las precipitaciones y por incremento de la presión de los poros del suelo cuando el mismo es saturado y 3) sucesivos ciclos de congelamiento-descongelamiento y/o desecación. La dispersión química de las arcillas puede tomar valores críticos de PSI al menos del orden del 10%. Las clases de condiciones superficiales fueron descriptas micromorfológicamente, definiendo las siguientes capas y costras: capas masivas de grano suelto, costras sedimentarias y costras estructurales vesiculares. Las capas masivas de grano suelto corresponden a los montículos de origen eólico de la clase 1. Las costras sedimentarias se presentan en la clase 2 e indican un microambiente de sedimentación por escurrimiento superficial. Las costras estructurales vesiculares se desarrollan en las clases 3 y 4. Las costras estructurales de la clase 3 son interpretadas como un estado inicial de formación del horizonte Av. Las cavidades y las vesiculas que presentan estas costras se forman por colapso de la estructura debido a los procesos de desagregación. El horizonte argilico en los suelos del Brea de estudio indica un periodo de mayor humedad y estabilidad que el actual ocurrido durante el Holoceno medio. Los signos de aridización creciente que presenta este horizonte son: 1) revestimientos arcillosos fragmentados por sucesivos ciclos de expansión-contracción; 2) destrucción y obliteración de revestimientos arcillosos por el crecimiento autigénico de carbonato 3) presencia de costras estructurales sobreyacentes 4) asentamiento de la estructura original; 5) relleno de grietas de desecación con material proveniente de las capas superiores. Los pavimentos de desierto del Bajo de la Suerte son clasificados como de tipo mixto, debido a que presentan caracteristicas autóctonas y alóctonas. Los procesos de concentración de partículas gruesas que generan los pavimentos de tipo autóctonos son: 1) eliminación de particulas finas por la acción hídrica y por sucesivos ciclos de congelamiento-descongelamiento; 2) migración de gravas hacia la superficie por sucesivos ciclos de congelamiento-descongelamiento y humedecimiento-desecación y por acreción vertical dada por el aporte de material eólico e hidrico. La concentración y redistribución de los fragmentos gruesos por flujo laminar generan pavimentos de tipo alóctono.

Bover, Laura del Carmen. "Establecimiento de la línea celular IIB-BR-G como modelo para el estudio del carcinoma de mama humano" (1995). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En esta tesis se investigaron algunas características de las células stem de cáncer de mama humano, para lo cual se utilizaron diversos sistemas de estudio: a) cortes histológicos de tumores. b) biopsias frescas de tumores. c) líneas celulares tumorales. Sobre cortes histológicos de tumores de mama humanos se investigó la relación entre la síntesis de ADN y la expresión de un antígeno de diferenciación (antígeno carcinoembrionario, CEA), observándose que el índice de marcación con timidina (TLI), resultó inversamente proporcional a la presencia de CEA y al grado de diferenciación del tumor. Aún en los tumores CEA-positivos, la mayoría de las células que estaban sintetizando ADN fueron CEA-negativas. Utilizando células obtenidas por disgregación enzimática de tumores de mama y mediante un sistema de centrifugación en gradientes de densidad, se logró separar subpoblaciones celulares en las que se analizó la capacidad clonogénica como indicativa de célula stem. En base a los resultados obtenidos con los tumores y teniendo en cuenta distintas características de los mismos (grado de diferenciación, tamaño, etc.), se seleccionó uno de ellos para establecer una línea celular a la que se denominó IIB-BR-G. Con la inyección subcutánea de células de dicha línea en ratones atímicos, se logró también establecer una línea in vivo (IIB-BR-Gnude). La línea in vitro presentó características de indiferenciación y agresividad, además de ser negativa su expresión de receptores hormonales, lo que resultó particularmente interesante, teniendo en cuenta que no es demasiada la información disponible sobre los mecanismos que gobiernan el crecimiento de las líneas celulares que no expresan receptores hormonales. Por lo tanto, se estudió su perfil antigénico, la expresión de diversos oncogenes asociados con carcinomas mamarios, la citogenética de la misma y su morfología ultramicroscópica. Además, ambas líneas fueron utilizadas para diversos proyectos del laboratorio a saber: 1) ensayo de drogas que inhiben proliferación celular; 2) radioinmunolocalización de tumores IIB-BR-Gnude mediante la utilización de AcM; 3) obtención de nuevos AcM utilizando como inmunógeno células enteras de IIB-BR-G; 4) establecimiento de metástasis experimentales mediante la inyección de células IIB-BR-G en el bazo de ratones atímicos.

Braberman, Víctor Adrián. "Modelando y verificando diseños de sistemas de tiempo real" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Abstract:
Real-time systems are found in an increasing variety of application fields. Usually, they are embedded systems controlling devices that may risk lives or damage properties: they are safety critical systems. Hard Real-Time requirements (late means wrong) make the development of such kind of systems a formidable and daunting task. The need to predict temporal behavior of critical real-time systems has encouraged the development of an useful collection of models, results and tools for analyzing schedulability of applications (e.g., ). However, there is no general analytical support for verifying other kind of high level timing requirements on complex software architectures. On the other hand, the verification of specifications and designs of real-time systems has been considered an interesting application field for automatic analysis techniques such as model-checking. Unfortunately, there is a natural trade-off between sophistication of supported features and the practicality of formal analysis. To cope with the challenges of formal analysis real-time system designs we focus on three aspects that, we believe, are fundamental to get practical tools: model-generation, modelreduction and model-checking. Then, firstly, we extend our ideas presented in and develop an automatic approach to model and verify designs of real-time systems for complex timing requirements based on scheduling theory and timed automata theory (a wellknown and studied formalism to model and verify timed systems). That is, to enhance practicality of formal analysis, we focus our analysis on designs adhering to Fixed-Priority scheduling. In essence, we exploit known scheduling theory to automatically derive simple and compositional formal models. To the best of our knowledge, this is the first proposal to integrate scheduling theory into the framework of automatic formal verification. To model such systems, we present I/O Timed Components, a notion and discipline to build non-blocking live timed systems. I/O Timed Components, which are build on top of Timed Automata, provide other important methodological advantages like influence detection or compositional reasoning. Secondly, we provide a battery of automatic and rather generic abstraction techniques that, given a requirement to be analyzed, reduces the model while preserving the relevant behaviors to check it. Thus, we do not feed the verification tools with the whole model as previous formal approaches. To provide arguments about the correctness of those abstractions, we present a notion of Continuous Observational Bismulation that is weaker than strong timed bisimulation yet preserving many well-known logics for timed systems like TCTL . Finally, since we choose timed automata as formal kernel, we adapt and apply their deeply studied and developed analysis theory, as well as their practical tools. Moreover, we also describe from scratch an algorithm to model-check duration properties, a feature that is not addressed by available tools. That algorithm extends the one presented in .

Bracco, Mariana. "Caracterización genética del germoplasma de razas de maíz autóctonas provenientes del noreste argentino" (2012-11-13). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El maíz, Zea mays ssp. mays, se cultiva en todo el mundo y ocupa el tercer lugar entre los destinados al consumo alimentario. La Argentina es el segundo exportador mundial, precedida por los Estados Unidos. Esto coloca a la producción de maíz como una de las actividades económicas más rentables para nuestro país. En el norte de la Argentina habitan comunidades aborígenes que cultivan razas nativas de maíz. La caracterización genética del germoplasma autóctono de las razas de la región noreste de la Argentina (NEA) ha sido prácticamente nula hasta la concreción de esta Tesis. Con el fin de aportar al conocimiento de la diversidad genética y la estructura poblacional de las razas nativas del NEA, contribuir a su conservación y evaluar su potencial como reservorio de nuevos alelos, se evaluaron 15 loci microsatélites nucleares en 572 individuos. Los resultados del presente estudio permiten concluir que: 1) las razas de Misiones se encuentran constituidas por acervos génicos diferentes, que concuerdan con el tipo de grano que poseen (harinosos y córneo-harinosos vs. reventadores), éstos deberían ser considerados como unidades de conservación diferentes; 2) las razas nativas del NEA constituyen una reserva de diversidad significativa, con potencial para ampliar la base genética de los programas de fitomejoramiento; 3) las razas de Misiones no parecen haber sufrido un proceso de erosión genética severo en tiempos recientes, ya que los ejemplares actuales conservan gran parte de la diversidad detectada en las colecciones del NEA de los años 1977 y 1978; 4) la comparación entre las razas del NEA y del NOA apoyan la existencia de dos centros de diversidad diferentes en Sudamérica; la comparación con otras razas del Continente Americano avala la hipótesis de ocurrencia de una via de introducción del germoplasma nativo del NEA a través del este de Sudamérica; 5) la ausencia de cromosomas B en las razas del NEA coincide con la constitución cromosómica esperada para el grupo de las razas de regiones bajas.

Abstract:
Zea mays ssp. mays is cultivated worldwide and ranks third in importance among crops for human consumption. Argentina is the second largest exporter, preceded by the United States. Corn production is one of the most profitable economic activities in our country. Northern aboriginal communities from Argentina cultivate maize landraces for self-sufficiency. Genetic characterization of indigenous germplasm from the northeastern region of Argentina (NEA) was practically nil until the completion of this Thesis. To contribute to the knowledge and conservation of the genetic diversity of native maize landraces from NEA and to assess their potential as a reservoir of novel alleles, 572 individuals were evaluated using 15 nuclear microsatellite loci. The results of this study allow to conclude that: 1) landraces from Misiones can be divided into two different gene pools, which are consistent with the type of corn (flints and flours vs. popcorns), these should be regarded as different conservation units; 2) NEA landraces represent a significant reservoir of diversity, useful to broaden the genetic base of breeding programs; 3) landraces from Misiones do not seem to have undergone a severe genetic erosion in recent times, since much of the extant diversity is detected in NEA seed bank collections from 1977-1978; 4) the comparison between landraces from NEA and NOA support the existence of two different centers of diversity in South America; the comparison with other races of the Americas supports the hypothesis of the introduction of NEA germplasm through eastern South America; 5) the absence of B chromosomes in NEA landraces agrees with the expected chromosomal constitution of the landraces from lowland South America.

Braga Gomes, Paula. "Estudio de la Vicariancia en alguna especies de anémonas de mar (CNIDARIA, ACTINIARIA) del intermareal de Brasil y Argentina con el uso de datos morfológicos y genéticos" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Estudio de la vicariancia en algunas especies de anémonas de mar (Cnidaria, Actiniaria) del interrnareal de Brasil y de Argentina con el uso de datos morfológicos y genéticos. Se realizaron estudios morfológicos y genéticos con la anémona de mar Bunadosoma cangicum de Brasil. Para los estudios morfológicos se utilizaron cuatro poblaciones provenientes de: Piedade y Tamandaré en Pemambuco, Aracruz en Espírtu Santo y Buzios en Río de Janeiro. Se estudiaron 14 caracteres morfológicos cuyas variaciones fueron analizadas con el test no parametrico de Kruskal-Wallis. Siete variables no presentaron la misma media en las cuatro localidades: número de vesículas por fila, número de tentáculos y de acrorhagi, diámetro de los acrorhagi, peso húmedo, altura de la columna y diámetro del margen. La población de Buzios fue la que más se diferenció, indicando la presencia de ecotipos. Se utilizó el test de correlación de Pearson para evaluar si los caracteres variaban de forma concomitante. Entre los caracteres estimadores de la talla, el peso húmedo fue el que mejor se correlacionó oon los demás, resultando ser éste el carácter más representativo del tamaño real del individuo. El largo y ancho del esfinter se relacionaron significantemente entre sí pero con independencia de la talla. Asimismo se realizaron estudios genéticos comparando las especies B. cangícum de Brasil (Buzios y Tamandaré), B. zamponianum n. sp. de Argentina (Santa Clara del Mar y Punta Cantera), B. caissarum de Brasil (Buzios) y B. granuliferum de Curacao (Caracas baai y Boka Saint Mitchel). Los estudios aloenzimátieos confirmaron que B. zamponianum pertenece al género en estudio, y es diferente de todas las demás especies. Esta especie y B. cangicum mostraron la identidad génica más elevada. Considerando las similitudes morfológicas y ecológicas, se discute la posible vicariancia de estas dos especies.

Abstract:
Studies on vicariance of some sea anemone species (Cnidaria: Actiniaria) from the intertidal zone of Brazil and Argentina using morphologic and genetic data. The present work carries out a morphologic and genetic study on Bunodosoma cangicum, a species of sea anemone from Brazil. Four populations were used for the morphologic studies: Piedade and Tamandaré in Pemambuco, Aracruz in Espírito Santo and Buzios in Rio de Janeiro. Fourteen characters were studied and the results analized by the Kruskall-Wallis Test. Seven characters did not present the same average in the four localities: number of vesicles by row, number of tentacles and acrorhagi, acrorhagi diameter, wet weight, height of the column and diameter of the margin. The population of Buzios was the most different, indicating the presence of ecotypes. The Pearson Correlation Test was used to evaluate whether the characters varied in a concomitant way. The wet weight related positiver to all the other characters estimators of the stature, verifying itself to be the most representative character of the real size of the individual. The length and width of the sphincter were related significantly, but independent of the stature. Genetic studies were also done comparing the species, B. cangicum from Brazil (Buzios and Tarmndaré), B. zamponianum (new species described in this work) from Argentina (Santa Clara del Mar and Punta Cantera), B. caissarum from Brazil (Buzios) and B. granuliferum from Curacao (Caracas Baai and Boka Saint Mitchel). The allozyme analysis confirmed that B. zamponianum belongs to the genus under study, and it is different from all the other species. In addition, this species and B. cangicum had the highest genetic identity. Thus, considering the morphological and ecological similarities, the possibility of these two species to be vicariants is discussed.

Bragas, Andrea Verónica. "Interacciones de la luz con una unión túnel (en un Microscopio de Efecto Túnel)" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Brandani, Aldo Ansano. "La distribución de nichos ecológicos de las especies vegetales en un ecosistema de bosque de la región andino-patagónica" (1977). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Para una comunidad de bosque de la cuenca del Río Manso Superior se ha estudiado: a) su composición específica, grado de asociación entre especies, estructura horizontal y vertical y b) la aplicación de la teoría del nicho ecológico a la misma. Para ambos aspectos se ha analizado la comunidad bajo el efecto del ramoneo por grandes herbívoros, comparándola con la parte de la comunidad protegida del mismo. Para el estudio de nichos se analizaron las variables ambientales en función de las cuales ocurre la separación de nichos y las distintas estrategias de distribución de recursos y disminución de competencia interespecífica. La comunidad es definida en base a las asociaciones de Nothofaqus antarctica con distintas especies de arbustos y, en menor grado, de hierbas. Ocurren además otras dos especies arbóreas: Maytenus boaria y Schinus patagonicus. Cada una de estas especies determina una subasociación al interior de la comunidad, con especies que les son características. De las variables ambientales estudiadas, las que condicionan porciones del nicho total características para cada especie, son en orden de importancia: la intensidad luminosa, la profundidad de arraigamiento y el período de desarrollo vegetativo y reproductivo. Los nichos ecológicos se caracterizan en función de las medidas de amplitud, superposición, forma y desplazamiento. Todas estas medidas son útiles para identificar distintos aspectos de las relaciones de competencia interespecífica. La intensidad lumínica es variable al interior de la comunidad y está determinada por la posición y tamaño de las copas de árboles y de los claros entre ellas. La profundidad de arraigamiento está condicionada por la humedad del suelo y en menor grado por la disponibilidad de nutrientes. El período de desarrollo estaría determinado por factores climáticos. El pastoreo es, en la zona de estudio, moderado. Aún así provoca la modificación de las asociaciones espaciales, relaciones de dominancia, abundancia de especies, estructura vertical y características microtopográficas. Asimismo se convierte en el factor principal de la determinación de nichos en la comunidad coaccionada.

Braverman, Mara S.. "Historia de vida temprana de la corvina rubia (Micropogonias furnieri, Sciaenidae) en el estuario del Río de la Plata" (2011-07-11). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se estudiaron las interacciones bio-físicas de los estadios tempranos de corvina rubia en el estuario del plata para entender como toman ventaja de la dinámica estuarina mientras viajan desde el área de puesta a la de cría, durante la transición de larvas plantónicas a juveniles bentónicos. Los análisis usados incluyeron estudios de la distribución espacio-temporal; del crecimiento en busca de marcas de asentamiento en otolitos y del desarrollo relacionado con la metamorfosis y variaciones de la dieta y el nivel trófico. Las muestras y los datos provienen de muestreos verticales estratificados de 3 campañas oceanográficas (2005, 2006 y 2009). Los datos sobre distribución provienen también de una base de datos histórica. Los resultados demuestran que mecanismos de retención mantienen a las larvas y juveniles tempranos de corvina rubia (3-45 mm LE) moviéndose alternativamente a lo largo del frente salino de fondo, mezclando las clases de tallas. Las larvas (<16 mm LE) pasan 30-50 días en el plancton. La metamorfosis y el asentamiento ocurren simultáneamente entre los 9 y 18 mm LE. La dieta cambia significativamente de copépodos a mysidaceos 20 días después del asentamiento (20-22 mm LE). En el marco de una teoría de la ontogenia saltatoria, estos eventos significan la existencia de un umbral en esta etapa de vida de la especie. Respecto de los procesos espaciales, la retención en el frente permitiría a los estadios tempranos de corvina beneficiarse de la acumulación de alimento, estar protegidos contra predadores (alta turbidez) y permanecer cerca de la principal área de cría. La dinámica de este sistema estuarino y la estrategia reproductiva de la especie podrían ser una de las razones de su gran abundancia poblacional.

Abstract:
This study encompasses the bio-physical interactions of whitemouth croaker early life stages living in La Plata estuary to understand how they take advantage of the estuarine dynamics while traveling from spawning to nursery areas and undergoing ontogenetic and associated ecological changes. The analyses used include studies of spatio-temporal distribution length-dependant patterns; growth patterns looking for settlement marks in otoliths and development related to metamorphosis and ontogenetic variations of the diet and trophic level. Samples and data come from vertically stratified samplings from cruises (2005, 2006 and 2009). Distributional data also comes from an historic database. Results demonstrate that retention mechanisms mantain croaker early-life stages (3-45 mm SL) alternatively moving horizontally along the bottom salinity front, mixing the length classes. Planktonic larvae (<16 mm SL) have a life span of 30-50 days. Metamorphosis and settlement occurs simultaneously from 9 to 18 mm SL. The diet changes significantly from copepod to mysids 20 days after settlement (20-22 mm SL). In the context of saltatory ontogeny, these events represent the treshold in the species' early-life history . Regarding spatial processes, retention in the front would allow larvae and early juveniles to benefit from food accumulation in the region; the high turbidity as shelter against predators, and the closeness to the species' reproductive strategy may be the reason of the high population abundance.

Bravo, Lilia Dora. "Estudio morfológico y taxonómico del género Cassia (Leguminosae) en la Argentina : Sección Chamaesenna, serie Aphyllae y serie Pachycarpae" (1977). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El género Cassia L. posee representantes en casi todos los continentes con clima tropical, subtropical y templado. El número de especies destriptas y consideradas válidas hasta el presente es de aproximadamente 600, es el más grande género de las Leguminosas Caesalpinóideas y se encuentra entre los 25 géneros con mayor número de especies de las Dicotilédoneas. En nuestro país está representado por alrededor de 35 especies y numerosas variedades distribuídas en todas las regiones subtropicales y templadas desde los confines del norte hasta la patagonia septentrional. En este trabajo se han estudiado en detalle las especies argentinas de la Serie Aphyllae y de la Serie Pachycarpae de la Sección Chamaesenna, del subgénero Senna. El motivo por el cual se seleccionaron estos grupos, es el hecho de que las dos Series y en especial la Serie Aphyllae poseen especies con una amplia distribución pero en muchos casos restringida a la república Argentina. Sobre la Serie Aphyllae existe un trabajo preliminar del Ing. Agr. Arturo Burkart (1946), que contiene fundamentalmente una clave para diferenciar las especies y variedades. Luego en 1952 en la segunda edición de Las Leguminosas Argentinas, silvestres y cultivadas, este mismo autor publica una clave para diferenciar todas las especies del género presentes en nuestro país. El grupo de las especies áfilas con tan amplia distribución en todas las regiones áridas y semiáridas se encontraba aún en estado muy confuso y dado la escasez de caracteres morfológicos diagnósticos requería un exhaustivo estudio de todo el material coleccionado y en especial estudios en los ambientes naturales para poder dilucidar problemas indisolubles con estudios de laboratorio. Fueron estos los motivos que impulsaron al Ing. Agr. Arturo Burkart a sugerirme el estudio de estos grupos como tema de Tesis para la Carrera de Doctorado en Ciencias Biológicas. Este trabajo se realizó durante los años 1972-1977, período durante el cual se hicieron numerosos viajes por las regiones donde existían problemas de índole taxonómica difíciles de resolver; se realizaron colecciones que permitieron tras el estudio de campo continuar con el análisis de los materiales en el laboratorio y así resolver los problemas existentes.

Bravo, Susana Patricia. "Efecto de Carayá (Alouatta caraya) en la dinámica y regeneración de las selvas de inundación del Paraná medio" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Entre Julio de l996 y Mayo de 2002 estudié el comportamiento de carayá (Alouatra caraya, Primate, Cebidae) y su papel como dispersor de semillas en la selva de inundación de la Isla Brasilera (Prov. del Chaco, Argentina), una de las tantas islas ubicadas a lo largo del Río Paraná. Comencé describiendo los tres tipos de bosques que conforrnaban la selva, y estudiando la fenología de las especies arbóreas con fruto carnoso, potencialmente dispersables por carayá. El bosque que encontré en los albardones más antiguos fue el Bosque de Laureles, tuvo la mayor diversidad y abundancia de especies con fruto carnoso y tres estratos, dos arbóreos y uno herbáceo. El Bosque de Sangre de Drago y Timbó crecía en albardones de similar altura al anterior pero de más reciente formación y el Bosque de Palo itá crecía en los albardones más bajos y era prácticamente monoespecífico. En cuanto a la fenología pude distinguir dos grupos de especies, las que producían frutos en mayor o menor cantidad todo el año y aquellas que tenían la fructificación temporalmente acotada. El segundo paso fue estudiar la dieta, el comportamiento y el uso del espacio que realizaba carayá en cl Bosque de Laureles. La dieta fue rica en frutos flores y hojas nuevas, además un cuarto de los registros de alimentación fueron sobre estructuras vegetales infestadas por artrópodos. Todo esto hizo que carayá no estuviese limitado energéticamente para desplazarse y pudiera utilizar con alta frecuencia todo su territorio. Luego estudié mediante ensayos de laboratorio la germinación de las semillas dispersadas, y en el campo el patrón espacial de la dispersión. Encontré que el pasaje de las semillas por el tracto digestivo de carayá no afectaba la capacidad de germinación y para algunas especies aumentó la velocidad de germinación. Carayá depositó semillas en las zonas de sus dorrmideros y en los bosteaderos puntuales, que a causa de las confrontaciones entre grupos se ubicaban principalmente en los límites de los territorios. Continue estudiando el impacto de la dispersión en este bosque (i. e. escala local) a lo largo de los años, para ello realicé conteos de juveniles y renovales arbóreos en los sitios donde carayá deposita las semillas y fuera de ellos. Así encontré que la mayoría de las especies dispersadas se establecían tanto en los dormideros como en los bosteaderos puntuales, y no lograban hacerlo fuera de ellos. Con muestreos similares, evalue el impacto de la dispersión de larga distancia en los tres tipos de bosque de la isla y el crecimiento de los juveniles con mediciones sucesivas a lo largo de dos años. Observe que la dispersión de semillas que realiza carayá es fundamental para la colonización de los bosques jóvenes por parte de las especies del Bosque de Laureles, principalmente Ocotea diospyrifolia, Eugenia punicifolia y Psychotria carthagenensis. Mientras que estas mismas especies no pueden establecerse en el Bosque de Palo itá, posiblemente por la mayor frecuencia de inundación que presenta. Por último, para conocer si el reclutamiento en los bosteaderos se debía a la ausencia de predadores y patógenos, a la saturación de los mismos debido al gran número de semillas que arribaban, o a una serie de interrelaciones más complejas entre distintos factores. Evalué los daños que sufrían los juveniles, determine que artrópodos visitaban los bosteaderos, la disponibilidad de nitrógeno y fósforo, y la remoción de semillas. Esto me permitió arribar a la conclusión de que sumado al alto número de semillas que arribaban, el mecanismo por el cual se produce el establecimiento de los renovales a lo largo de los años se debería a una baja tasa de remoción de semillas, una disminución de la herbivoría por la presencia de artrópodos predadores y un aumento en la velocidad de crecimiento por una mayor disponibilidad de nitrógeno que facilitaría el escape a la mortalidad por ataque de los patógenos. El efecto de carayá como dispersor de semillas no sólo acelera la regeneración del Bosque de Laureles y la maduración de los bosques jóvenes de la isla, sino que esta aceleración va en aumento debido a que se genera una retroalimentación positiva entre el aumento en la densidad de las especies dispersadas y la densidad del dispersor. Esta puede ser una explicación para la rápida recuperación de estos bosques que se observa luego de las inundaciones extraordinarias.

Abstract:
I studied black howler (Alouatta curaya. Primate, Cebidae) behavior and its role as seed disperser in the flooded forest of Brasilera Island (Chaco, Argentina), one of Paraná River‘s islands, between July l996 and May 2002. I began by describing of the three kinds of forests which make up the flooded forest and by studying the phenology of trees with fleshy fruits. In the oldest and highest areas of Brasilera Island I found the “Laurel Forest", which was the most diverse and had the greatest fleshy fruits species abundance. This forest had three strata, two of them arboreal and one herbaceous. The “Sangre de Drago and Timbó Forest" grew on areas of similar height which had recently been incorporated to the island. The “Palo itá Forest" grew on low areas and had the lowest diversity. I could found two phenological sets of species, one set offered fruits throughout the year, while the other set concentrated its fruit production in only in one or two months. The second step was the study of the black howler's diet, behavior and spatial use, in the Laurel Forest. Fruits, flowers and new leaves represented a high proportion of the diet all year long, and 25 % of feeding records were on arthropods infested items. Thus, black howler's travel distances were not energetically constrained, and groups could use their whole territory with high frequency. Then, I studied dispersed seed germination in the laboratory and the spatial pattern of seed dispersal in the field. I found that passage through black howler's digestive tract did not affect seed germination, but ingested seeds of some species germinated faster than not ingested seeds. Black howlers transported seeds from the parent tree to sleeping trees and to latrines. As black howler groups confronted and defecated with high frequency within their territory limits, latrines were more abundant in these areas. I evaluated the impact of seed dispersal over several years in the Laurel Forest (i. e., local scale) by sampling tree juveniles and renewals in latrines, and around sleeping trees, and outside these areas. In general, trees could grow in the latrines, and around the sleeping trees, but did not grow outside them. I evaluated long distance dispersion between the three kinds of forests with similar methods as the ones used in the Laurel Forest, and the growth of juveniles for two years. Seed dispersal by black howler is fundamental for the colonization of new forests by Laurel Forest species, specially Ocotea diospyrifolia, Eugenia punicifolia y Psychotria carthagenensis. These species could not grow in Palo itá Forest, possibly because of a higher flood frequency. Finally, I studied whether the recruitment of trees was due to the absence of predation and pathogens in the latrines, the saturation by the great number of seeds that arrive, or an growth related to a higher nitrogen availability in the latrines, are important latrines, nitrogen and phosphorus availability, and Seed removal in the latrines. I concluded that added to the great number of seeds that arrived to the latrines, the low rate of seed removal, the attenuated herbivory by the presence of arthropods predators, and the faster for trees recruitment are important as well for trees recruitment. Fast growth could help juveniles to escape at mortality by pathogens. Acceleration in Laurel Forest regeneration and in maturation of new forests is an effect of black howler seed dispersal, Also, as in Brasilera lsland there are a positive feedback between the increase in dispersed species density and disperser density, the acceleration is increasing. It could be an explication for the highest restoration of flooded forest after an extraordinary flood.

Braz, Bárbara Yael. "Rol de la dopamina en la maduración postnatal del sistema córticoestriatal y conductas dependientes del mismo" (2016-03-29). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los ganglios de la base (BG) son núcleos subcorticales interconectados con la corteza cerebral que están involucrados en el control motor voluntario y distintos aspectos de la conducta y el aprendizaje. La dopamina es un regulador clave del flujo de información desde la corteza al estriado, el principal núcleo de entrada de los BG. Algunas de las alteraciones conductuales observadas en desórdenes neuropsiquiátricos tales como el síndrome de Tourette, el trastorno de déficit de atención con hiperactividad y el desorden obsesivo compulsivo, son atribuidas a alteraciones madurativas de los circuitos córticoestriatales y su modulación dopaminérgica. Sin embargo, poco se sabe acerca del desarrollo funcional de estos circuitos y del rol de la dopamina en este proceso. El objetivo general de esta tesis es estudiar los mecanismos postnatales de la maduración del sistema córticoestriatal y su conexión con la adquisición de conductas normales y patológicas. Nuestra hipótesis es que las neuronas dopaminérgicas son importantes durante el desarrollo postnatal para el desarrollo funcional y anatómico de la conectividad córticoestriatal, y que alteraciones en este proceso dan lugar a condiciones neuropsiquiátricas. En este trabajo encontramos que la lesión neonatal de neuronas dopaminérgicas ocasiona déficits duraderos en el balance entre la búsqueda de recursos, tanto nutricionales como sociales, y el aprovechamiento de los mismos. Estos déficits emergen temprano en el desarrollo y empeoran en la vida adulta, en particular aquellos relacionados a la exploración global de ambientes complejos. Por otro lado, estudios electrofisiológicos in vivo y reconstrucciones morfológicas de las neuronas de proyección estriatales revelaron alteraciones córticoestriatales asociadas al fenotipo comportamental. Más específicamente, en los animales con lesión neonatal de neuronas dopaminérgicas se observó una reducción de la conectividad funcional córticoestriatal que afecta las entradas provenientes de la corteza prelímbica más marcadamente que las provenientes de las corteza cingular y motora. La atenuación en la conectividad observada para los inputs prelímbicos es más marcada en el adulto lesionado respecto del juvenil, se relaciona con una mayor susceptibilidad por sufrir procesos de depresión sináptica córticoestriatal, y se asocia a una contracción del árbol dendrítico de las neuronas de proyección estriatales, sin cambios en la densidad de espinas dendríticas. En conjunto, estos resultados son consistentes con la idea de que las neuronas dopaminérgicas son esenciales durante el desarrollo postnatal para la maduración funcional y estructural del sistema córticoestriatal. Desde una perspectiva bottom-up, nuestros hallazgos sugieren que condiciones neuropsiquiátricas presumiblemente relacionadas a alteraciones dopaminérgicas tempranas podrían presentar alteraciones en el reclutamiento de los circuitos córticoestriatales durante tareas de exploración y sociales.

Abstract:
Basal Ganglia (BG) comprise multiple subcortical nuclei involved in voluntary motor control and several aspects of behavior and learning. Dopamine is a key regulator of cortical information flow through the striatum, which is the main input nucleus of the BG. Some of the behavioral alterations observed in neuropsychiatric disorders such as Tourette syndrome, Attention Deficit Hyperactivity Disorder (ADHD) and Obsessive Compulsive Disorder have been attributed to developmental alterations in dopaminergic and corticostriatal circuits function. However, little is known about the functional development of these circuits and dopamine involvement in it. The general aim of this thesis is to study corticostriatal postnatal maturation and its connection with the acquisition of normal and pathological behaviors. Our hypothesis is that dopaminergic neurons activity is important during infancy and adolescence for the functional and anatomical development of corticostriatal connectivity, and that alterations in this process may lead to neuropsychiatric conditions. We found that early postnatal dopaminergic lesions cause long-lasting deficits in exploitation of shelter, social and nutritional resources, and an imbalanced exploratory behavior, where non-directed local exploration is exacerbated while sophisticated search behaviors involving sequences of goal directed actions are degraded. Importantly, some behavioral deficits do not diminish after adolescence but instead worsen or mutate, particularly, those related to the exploration of wide and spatially complex environments. In vivo electrophysiological recordings and morphological reconstructions of striatal medium spiny neurons reveal corticostriatal alterations associated to the behavioral phenotype. More specifically, we found an attenuation of corticostriatal functional connectivity affecting medial prefrontal inputs more markedly than cingulate and motor inputs. The reduction of prefrontostriatal inputs is more marked in adult lesioned mice compared to juvenile mice, and is related to an increase of corticostriatal long term depression. Moreover, these changes are accompanied by a contraction of the dendritic arbor of striatal projection neurons without changes in spine density. Thus, dopaminergic neurons are essential during postnatal development for the functional and structural maturation of corticostriatal connections. From a bottom-up viewpoint of neuropsychiatric disease modelling, our findings suggest that neuropsychiatric conditions presumably linked to developmental alterations of the dopaminergic system should be evaluated for deficits in foraging decision making, alterations in the recruitment of corticostriatal circuits during foraging and social tasks, and structural disorganization of the frontostriatal connections.

Brenner, Ernesto G.. "Composición química de aceites de oliva argentinos" (1946). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bressan, Juan Carlos. "Sistemas axiomáticos para la convexidad" (1976). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Brieux, Jorge A. L.. "Velocidad de reacción de derivados halogenados aromáticos con la piperidina en benceno" (1950). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Brignoni, Mirtha. "Proteínas apicales en células epiteliales : rol de segundos mensajeros en la exocitosis" (1994). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Brion, Laura. "Regulación hormonal y papel funcional de la map quinasa fosfatasa-1 (MKP-1) en células esteroidogénicas" (2010). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las MAP quinasas fosfatasas (MKPs) son componentes regulatorios importantes en aquellos procesos fisiológicos en los cuales participan las MAPKs debido a su capacidad de inactivar específicamente a estas enzimas. En este trabajo se analizó el rol funcional y la regulación transcripcional y post-traduccional de MKP-1 en células esteroidogénicas. Demostramos que hCG y AMPc incrementan los niveles de MKP-1 por mecanismos transcripcionales y post-traduccionales. Los resultados obtenidos indican que hCG/AMPc promueven la fosforilación de MKP-1 por acción de PKA y ERK1/2 y que esta modificación promueve su estabilización. También demostramos que esta fosfatasa se localiza tanto en núcleo como en mitocondrias. En lo que respecta al papel funcional de MKP-1, se comprobó que la expresión de MKP-1 inhibe la producción de esteroides por su capacidad de interferir con la inducción de StAR, una proteína clave para la esteroidogénesis. En conclusión, en este trabajo demostramos que LH/ACTH, además de promover la activación de enzimas necesarias para la síntesis de esteroides como ERK1/2, también dispara la activación de mecanismos que contribuyen a la inactivacion de esta enzima. Se concluye que el aumento en la expresión de MKP-1 y la estabilización de la proteína por acción de hCG/AMPc es un mecanismo clave para el cierre de la acción hormonal sobre la esteoidogénesis.

Abstract:
MAP kinase phosphatases (MKPs) are important regulatory components in the physiological processes in which the MAPKs are involved, due to its ability to inactivate specifically these enzymes. In this study we have analyzed the functional role and transcriptional and post-translational regulation of MKP-1 in steroidogenic cells. We show that hCG and cAMP increase MKP-1 levels by transcriptional and posttranslational mechanisms. The results indicate that hCG/cAMP promotes MKP-1 phosphorylation by PKA and ERK1/2 action and that this modification promotes its stabilization. We also show that this phosphatase is localized in nucleus and mitochondria. Regarding the functional role of MKP-1, it was found that the expression of MKP-1 inhibits the production of steroids by its ability to interfere with the induction of StAR, a key protein for steroidogenesis. In conclusion, in this work we demonstrate that LH/ACTH, in addition of promoting the activation of ERK1/2, which is necessary for steroid synthesis, also triggers the activation of mechanisms that contribute to the inactivation of this enzyme. We show the increased expression of MKP-1 and stabilization of the protein by hCG/cAMP action, as a key mechanism for the closure of hormone action on steroidogenesis.

Briozzo, Jorge Emilio. "Efecto de diversos factores de "stress" en el Clostridium botulinum con particular referencia al efecto de la actividad acuosa y el pH en el crecimiento y producción de toxina por el tipo G" (1985). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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de Brito Sanchez, María Gabriela. "Estudios electrofisiológicos de estructura-actividad de la célula antenal receptora del ácido benzoico de la hembra de Bombyx mori L" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo de este trabajo fue caracterizar las respuestas electrofisiológicas de la célula receptora olfativa al ácido benzoico, presentes en las hembras de la mariposa del gusano de la seda Bombyx mori. Nuestros estudios permiten concluir que la célula receptora al ácido benzoico es un receptor especialista ya que responde máximamente a su compuesto llave y tiene un espectro idéntico para compuestos menos efectivos. Mediante estudios de estructura-actividad con substituyentes halogenados del ácido benzoico, se determinó que un factor crítico para el reconocimiento del sitio receptor es la generación de un efecto inductivo por el halógeno substituyente. Este efecto es mayor para halógenos más electronegativos (flúor) y para la posición meta. Cuando fue estimulada con iodo benzeno, la célula receptora al ácido benzoico respondió con una inhibición durante el estímulo y con una excitación post-estímulo. En base a diversos experimentos propusimos un modelo para la acción de sustancias excitatorias e inhibitorias a nivel receptor olfativo. En dicho modelo, sustancias como el iodo benceno actuarían directamente sobre los canales iónicos (proceso inhibitorio rápido y transitorio, no dependiente de segundos mensajeros), o sobre el sitio receptor del ácido benzoico (proceso excitatorio posterior y dependiente de segundos mensajeros). La célula receptora al ácido benzoico mostró un aumento de su actividad basal en el aire del laboratorio sin filtrar. Por medio de experimentos combinados de cromatografía gaseosa- electroantenograma y registro de células únicas encontramos que dicho aire contenía ácido benzoico y benzaldehido (estimulantes de la célula receptora al ácido benzoico en la sensilia tricodea) y nonanal (estimulante de la sensilia coelocónica). El umbral de la célula receptora al ácido benzoico se halla por debajo de una carga de estímqu de 0.01 μg de ácido benzoico por papel de filtro. Se analizó la composición química del meconio, producto de excreción de la pupa y único estímulo natural capaz de activar a la célula receptora del ácido benzoico. El meconio está compuesto por una gran cantidad de ácido succínico y ácido benzoico y cantidades menores de otros ácidos. La cantidad estimada de ácido benzoico presente en el meconio de machos y hembras fue 8.4 μg y 4.2 μg por 100 μl de meconio, respectivamente. De los componentes hallados, el único componente activador de la célula receptora al ácido benzoico fue el ácido benzoico. Sin embargo cuando éste fue adicionado al meconio, la respuesta disminuyó significativamente. Concluimos que el meconio obstruye estructuralmente el papel activador del ácido benzoico. Así, el ácido benzoico relevante para la hembra de B. mori no es aquel que está presente en el meconio. Fuentes alternativas de ácido benzoico en la planta de mora serían los frutos mismos de la mora y/o la reacción de defensa de la hoja que resulta en la producción de ácido benzoico como fitolexina. En ambos casos el ácido benzoico sería señal de buena “calidad”de planta y por ende de sustrato adecuado para la oviposición. Estas respuestas pueden sin embargo haber sido modificadas por innumerables generaciones de selección y cultivo de B. mori en sericultura.

Abstract:
The aim of this work was to characterize the electrophysiological responses of the olfactory benzoic-acid receptor cell, present in the females of the silk moth Bombyx mori. Our studies allow to characterize the benzoic-acid cell as a specialist as it responds maximally to its cue compound and has a similar response spectrum for less effective compounds. By means of studies of structure-activity relationships performed with halogenated substitutes of benzoic acid, we determined that the generation of an inductive effect by the halogen is a critical factor for the recognition of the odor molecule by the receptor site. Such an effect increased for the more electronegative halogens (fluoride) and for the meta position. When the benzoic-acid receptor cell was stimulated with iodine benzene, it was first showed inhibition during the stimulation and then an excitation post-stimulation. On the basis of various experiments we sμggested a model for the action of excitatory and inhibitory substances at the olfactory receptor level. In such a model, substances like the iodine benzene would act directly on the ion channels (inhibitory,fast, transient process that would not depend on second messengers), or on the benzoic-acid receptor site (excitatory, post-stimulation process that would depend on second messengers). The benzoic-acid receptor cell showed an increase of its basal activity when exposed to the unfiltered air of the laboratory. By means of experiments combining gas chromatography, electroantenograms and single-cell recordings we determined that the air of the laboratory contained benzoic acid and benzaldehyde (stimulants of the benzoic-acid cell in the sensilla trichoidea), and nonanal (stimulant of the sensilla coeloconica). The response threshold of the benzoic-acid receptor cell for was estimated to be below 0.01 μg of benzoic acid per filter paper. We analyzed the chemical composition of the meconium, an excretion product of the pupae and the only stimulus known capable of activating the benzoic-acid cell. It is constituted by large amounts of succinic and benzoic acid and by minor quantities of other acids. The amount of benzoic acid estimated per 100 μl meconium was 8.4 μg and 4.2 μg for the males and for the females, respectively. From the substances found, the only one capable of activating maximally the benzoic acid cell was benzoic acid. However, when it was added to or mixed with meconium, the response of the benzoic-acid cell significantly decreased. We concluded that the meconium structurally obstructs the excitatory role of benzoic acid. Thus, the benzoic acid that is relevant for the female of B. mori is not that naturally occurring in the meconium. Alternative sources of benzoic acid in the mulberry are the fruits themselves and/or the defense reaction to fungal infection of the leaves, which result in the release of benzoic acid as a phytolexin. In both cases the benzoic acid would signalize a plant of “good quality” and therefore an appropriated oviposition substrate. However, these responses may have been lost due to the innumerous generations of selection and domestication related to the exploitation of B. mori in sericulture.

Broggi, Leticia Elvira. "Productos agrícolas de la provincia de Entre Ríos: contaminación potencial por mohos y micotoxinas e influencia de los procesos de molienda regional" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La producción agrícola en Entre Ríos alcanza el 40 % del total de los ingresos, resultando relevantes las cosechas de soja, maíz, trigo, arroz y sorgo. Solamente existen estudios previos de contaminación por micotoxinas y flora fúngica en arroz. Se evaluaron las micotoxinas de aparición probable en dichos sustratos en esta provincia y se estimó el efecto de los procesos de la molienda regional en maíz y arroz. Entre los hongos potencialmente toxicogénicos prevalece Fusarium verticillioides en maíz; en trigo, sorgo, arroz y soja, se observa una predominancia de Alternaria alternate, situación no observada anteriormente en otras regiones del país. Debido a la alta prevalencia de A. alternate, se estudió su capacidad toxicogénica. Cepas de esta especie fueron productoras de alternariol monometileter, alternariol, altertoxina-l y ácido tenuazónico. En maíz, tanto en la cosecha como elaborado, no se observó co-ocurrencia de ocratoxina A, zearalenona ni deoxinivalenol y una sola muestra del año 1.999 fue positiva de aflatoxina B1. Se comprobó la presencia de fumonisinas B1, B2 y B3. tanto en el maíz recientemente cosechado, almacenado y en todas las fracciones de la molienda. En arroz con cáscara y en los subproductos de elaboración, no se detectó la contaminación por estas toxinas En los dos procesos industriales de molienda y para las micotoxinas estudiadas (fumonisinas en maíz y toxinas de Alternaria en arroz), se estimó la reducción en las fracciones destinadas a consumo humano (harina de maiz y arroz pulido) y el incremento en las correspondientes a consumo animal.

Abstract:
Agricultural production in Entre Ríos represents about 40 % of the total income in the province. The most relevant crop species are soybean, corn, wheat, rice and sorghum. Previous studies dealing with mycotoxin production and fungal contamination have only been carried out in rice. For that reason, the present work has evaluated those mycotoxins of liker occurrence in such grains. Additionally, the effects of the regional milling processes in corn and rice on mycotoxin contamination were also analyzed. Among potentially toxigenic fungi, Fusarium verticillioides was prevalent in corn, and Alternaria alternata was predominant in wheat, sorghum, rice and soybean. This situation has not been previously reported for other Argentinean regions. Due to the prevalence of A. alternata, its toxigenic ability was studied: the strains collected were found to be able to produce alternariol monomethyleter, alternariol, altertoxin-l and tenuazonic acid. In corn, both at harvest and in different milling fractions, no co-occurrence of ochratoxin A, zearalenone or deoxynivalenol was observed. Just one sample (year 1999) resulted positive for aflatoxin B1. The presence of fumonisins B1, B2 and B3 was determined in all freshly harvested, stored and corn milling fractions. No mycotoxin contamination was detected on hulled rice or its milling fractions. Finally, reduction in mycotoxin contamination (fumonisins in corn and Alternaria toxins in rice) for those milling fractions aimed at human consumption was studied, as well as the increment in those fractions destined to animal feed.

Broggi, Leticia Elvira. "Estudio de la distribución de la micoflora contaminante de arroz recién cosechado : Riesgo potencial de aparición de micotoxinas en la Región Arrocera Argentina" (1998). Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Broitman, Esteban D.. "Propiedades estructurales, eléctricas y mecánicas de películas delgadas obtenidas por métodos de evaporación asistidos por plasma" (1997). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se estudiaron las propiedades estructurales, eléctricas y mecánicas de películas delgadas obtenidas por dos métodos de evaporación asistidos por plasma: "thermal ion plating" y "sputter-ion-plating". Con la primera configuración se estudió la influencia de un plasma en la microestructura de películas metálicas. El flujo de partículas bombardeantes del sustrato y la película, con energía media del orden de los cientos de electron-volt, produce varias características únicas de nucleación y crecimiento, obteniéndose una película de granos pequeños y uniformes en tamaño y forma, con crecimiento epitaxial a temperatura ambiente. El tamaño final de grano no depende del espesor y puede ser controlado variando la tensión de polarización, por lo que es posible depositar películas metálicas policristalinas con una resistividad determinada por dicha tensión. El incremento de la adherencia de películas metálicas depositadas sobre vidrio y la disminución del coeficiente de fricción de películas de plata sobre sustratos cerámicos también pudo explicarse en términos de factores inherentes al método. Los resultados fueron utilizados para el desarrollo de dos aplicaciones tecnológicas. Se hizo un cálculo teórico acerca de la validez de la regla de Matthiessen en películas delgadas contínuas. La segunda configuración se utilizó para tratar de obtener la fase b -C3N4 por el depósito reactivo de carbono en presencia de un plasma de nitrógeno. La tensión de polarización no influye en la concentración de nitrógeno de la película pero determina la proporción de enlaces híbridos sp2 y sp3. El aumento de presión produce una modificación de la estructura y un aumento de la concentración de nitrógeno presente en la película, pero no llega a ser la estequiométrica. La temperatura del sustrato mostró ser el factor de mayor influencia en la estructura de las películas, que pueden ser amorfas con pequeños agregados cristalinos a bajas temperaturas, tipo fullereno a 350 °C y con enlaces bidimensionales a mayor temperatura. Las tensiones internas, dureza y elasticidad dependen de la estructura. Si bien no se pudo obtener la fase b -C3N4, las películas tipo fullereno mostraron propiedades mecánicas muy interesantes.

Abstract:
Structural, electrical and mechanical properties of thermal ion-plated and sputter ion-plated thin films were investigated. The influence of the plasma on the microstructure of metallic thermal ion-plated films was examined. Substrate and film bombardment by particles with mean energies of hundred of eV, induces unique nucleation and growth features and yields films of small, uniformly shaped and sized grains, with epitaxial growth on substrates at room temperature. Final grain size is not thickness dependent and can be controlled with the polarization voltage, to obtain predictable resistivity in polycrystalline metallic thin films. Increased adherence on glass substrates and reduced friction coefficients on ceramic substrates of metallic films can be justified by inherent method factors. Two technological applications of these results are described. A theoretical calculation on the validity of Matthiessen’s rule in continuous thin films is presented. Sputter ion-plated technique was employed to attempt the b -C3N4 phase synthesis by reactive carbon deposition in a nitrogen plasma. Substrate bias has no influence on film nitrogen concentration but determines the ratio of sp2 to sp3 hybrid bonding. Increased pressure modifies the structure and increases nitrogen content in the film which never achieves full stoichiometry. Substrate temperature proved to be the most influential factor on film structure, which can be amorphous with small crystalline aggregates at low temperature, fulllerene-like at 350 °C and bidimensionally bonded at higher temperature. Internal stress, hardness and elasticity are structure dependent. Although the b -C3N4 phase was unattainable, fullerene-like coatings displayed very interesting mechanical properties.

Brunetti, Andrés E.. "Comunicación química de anuros: una perspectiva integral a partir de aspectos comportamentales, morfológicos y químicos en dos especies de Hypsiboas (Amphibia: Anura: Hylidae)" (2014-12-19). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La piel de los anfibios es un órgano dinámico con una enorme diversidad de funciones. Una característica compartida por prácticamente todas las especies de anfibios es la presencia de dos tipos de glándulas dérmicas, mucosas y serosas. A pesar de la similitud estructural, estas glándulas pueden presentar una gran variabilidad morfológica alcanzando un alto grado de especialización en el cumplimiento de dos funciones, la comunicación química y la defensa contra predadores. Desde un aspecto bioquímico, el análisis de las secreciones glandulares posee un potencial enorme dado la diversidad de compuestos. Los estudios desarrollados en algunos de ellos (i.e., péptidos, alcaloides, aminas biogénicas) permite tener una idea aproximada de la variación estructural y funcional. Sin embargo, es limitado el conocimiento que se tiene sobre la química de los compuestos volátiles y de los componentes secretados por las glándulas de la piel sexualmente dimórficas (SDSGs); fuente potencial de feromonas. Tradicionalmente los estudios de comunicación en los anuros se focalizaron en el análisis de las señales acústicas, aunque existían reportes aislados de la participación de otras señales (i.e., visual, química, táctil) en algunas especies. Los trabajos recientes muestran que estas señales tienen una distribución taxonómica mucho mayor a la considerada inicialmente, en tanto que la co-ocurrencia de distintas señales sugieren la existencia de comunicación multimodal en algunas especies. En la presente tesis se abordaron aspectos morfológicos, químicos y comportamentales de las secreciones glandulares en dos especies de Hypsiboas, considerando un contexto reproductivo en H. punctatus y un contexto defensivo en H. pulchellus. Se analizó la estructura y la ultraestructura de la piel de las regiones mental, lateral, dorsal y ventral en machos y hembras de H. punctatus. Se identificaron dos tipos de SDSGs, en las regiones mental y lateral de los machos, representando el primer caso de co-ocurrencia de diferentes SDSGs en una misma especie de anuro. A partir de estos resultados se caracterizó la variación estructural e histoquímica, y se estudió la evolución de las glándulas mentales y laterales en 28 especies de Cophomantini, incluyendo representantes de prácticamente todos los grupos de especies. La ocurrencia de estas glándulas, al igual que la variación morfológica, presenta una distribución taxonómica compleja con diferentes niveles de homoplasia. A partir del análisis de las secreciones de las glándulas dorsales de machos y hembras se determinó la estructura primaria de 13 péptidos y se identificaron dos compuestos relaciones con alcaloides. Se identificó un péptido presente exclusivamente en las secreciones de las glándulas mental y lateral de los machos. Los estudios comportamentales en el campo y en condiciones controladas de laboratorio, mostraron que los machos de H. punctatus son territoriales y poseen un repertorio vocal complejo con al menos siete cantos diferentes asociados a contextos particulares. Las hembras elegirían a los machos en base a la información de las señales acústicas y químicas, lo que sugiere la existencia de comunicación multimodal en esta especie. El estudio morfológico e histoquímico de las glándulas de H. pulchellus evidenció la presencia de las dos glándulas comunes de los anfibios (mucosas y serosas). Sin embargo, los análisis de estructura, ultraestructura y de los mecanismos fisiológicos de descarga permiten inferir que las glándulas serosas cumplirían diversas funciones, entre ellas almacenar los componentes volátiles secretados en situaciones de estrés. Estas glándulas presentan una mayor concentración en la región escapular, lo que podría relacionarse con estrategias defensivas. A partir del análisis de las secreciones de las glándulas dorsales de machos y hembras se determinó la estructura primaria de 17 péptidos y se identificaron dos compuestos relaciones con alcaloides. Las secuencias peptídicas de H. pulchellus e H. punctatus presentan una gran variabilidad. Estos compuestos no fueron publicados anteriormente, aunque algunos de los péptidos presentaron una gran similitud con los descriptos en otras especies de Cophomantini. Se compararon las secuencias de todos los péptidos identificados hasta el momento en esta tribu. El solapamiento de las secuencias de los péptidos de H. pulchellus e H. punctatus con partes de péptidos mayores de otras especies sugiere la existencia de endopeptidasas específicas. Se caracterizó la fracción volátil de las secreciones de la región dorsal y lateral en H. pulchellus e H. riojanus. Se identificaron 42 compuestos (40 en H. pulchellus y 37 en H. riojanus) pertenecientes a nueve grupos funcionales, lo que constituye la mayor diversidad de compuestos volátiles identificados en una especie de anfibio. Los diferentes componentes tendrían distinto origen y función.

Abstract:
The skin of amphibians is a dynamic organ with diverse functions. Almost all the species of this group of vertebrates possess two types of dermal glands, mucous and serous glands. Despite the structural similarities within each glandular type, they may have a great morphological variation getting a high degree of specialization related to chemical communication and defense against predators. From a biochemical perspective, and given the high diversity of their compounds, researches on the glandular secretions have an enormous potential. In particular, the studies performed on some of them (i.e., peptides, alkaloids, biogenic amines) allowed a general understanding of their structural and functional diversity. However, knowledge of the chemical composition of the volatile secretions, as well as from the secretion of sexually dimorphic skin glands (SDSGs; a likely source of sexual pheromones) in anurans, is very limited. Although there are isolated reports of the existence of different signals used for communication in some species (i.e., visual, chemical, tactile), studies of communication in anurans have traditionally focused in the analysis of acoustic signals. Nonetheless, recent investigations show that those considered rare signals have a wide taxonomic distribution, whereas the simultaneous occurrence of some of them suggest the existence of multimodal communication in several species. In this thesis are examined morphological, chemical and behavioral aspects from de glandular secretions of two species of Hypsiboas, considering a reproductive context in H. punctatus, and a defensive context in H. pulchellus. The structure and ultrastructure of skin from mental, lateral, dorsal, and ventral regions, was examined in males and females of H. punctatus. Two types of SDSGs were identified en mental and lateral regions of males. These results represent the first case of co-occurrence of different SDSGs in a single species. The structural and histochemical variation, as well as the evolution, of mental and lateral glands was analyzed in Cophomantini from samples of 28 species including at least a representative of almost all group of species of this clade. The occurrence of mental and lateral glands and their morphological variation have an intricate taxonomic distribution with different levels of homoplasy. Thirteen peptides and two compounds related with alkaloids were identified from dorsal secretions of males and females. One peptide was found exclusively from mental and lateral secretions of males. Behavioral studies performed in the field and under laboratory controlled conditions showed that males are territorial. They emit at least seven different type of calls associated to specific biological contexts. Females would choose their mates on acoustic and chemical signals, which suggest the existence of multimodal communication in this species. Morphological and histochemical studies of the skin of H. pulchellus revealed the presence of the two typical mucous and serous glands of amphibians. However, a detailed structural and ultrastructural analysis, as well as the physiological assessment of the release mechanism of gland secretion, suggests that serous glands have several functions. One of these functions is to accumulate, and under stress situations, secrete volatile compounds. These glands are highly concentrated in the scapular region, which is possible related to defensive strategies. Seventeen peptides and two compounds related with alkaloids were identified from dorsal secretions of males and females. The peptide sequences of H. pulchellus and H. punctatus are highly variable. These compounds have not been published before, but some of them showed great similarities with peptides described in other species of Cophomantini. All peptides reported so far in species of this tribe were compared through sequence alignments. The sequences of H. pulchellus and H. punctatus overlapped longer sequences of other species suggesting the existence of specific endopeptidase. The volatile secretions of H. pulchellus and H. riojanus were characterized from dorsal and lateral skin by a simulated stress situation. Forty-two compounds (40 in H. pulchellus and 37 in H. riojanus) from nine different functional groups were identified in all samples. This represent the highest number of volatile compounds identified in a species of amphibian. The components would have different origin and functions.

Bruno, Gabriela Alejandra. "Aportes al conocimiento del Aullador Negro y Dorado (Alouatta caraya): un análisis de historia de vida fuera de su distribución natural" (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Los monos aulladores son primates neotropicales ampliamente distribuidos en el continente americano, en territorios forestales desde los 18° N, en el estado mexicano de Veracruz y 20° N en la península de Yucatán, México, hasta los 21° S en la provincia de Corrientes, Argentina. De estas especies dos llegan en su distribución geográfica natural a la Argentina: Alouatta caraya y Alouatta fusca clamitans. Alouatta caraya con una amplia distribución en Sudamérica, es adaptable a distintos tipos de hábitat naturales. Si bien su aclimatación a las condiciones de cautiverio no es sencilla, paradójicamente responde satisfactoriamente, a las variables longevidad y reproducción, en condiciones ambientales fuera de su área de distribución natural. En este Trabajo de Tesis, se analizaron indicadores demográficos, genéticos y eto-ecológicos, (basados en patrón de actividad, alimentación y conducta social) que puedan tener efecto sobre el ajuste de los ejemplares a las condiciones de ambientes antropogénicos fuera del área geográfica de distribución del taxón. Los indicadores anteriormente mencionados se analizaron en grupos de Alouatta caraya que provienen del mascotismo y en un paraje cercano a La Cumbre, Córdoba. Los hallazgos obtenidos avalarían el desarrollo de un proceso de rehabilitación en los ejemplares analizados ya que los mismos han podido sobrevivir exitosamente, aclimatándose a los bosques exóticos y expresando un repertorio de conductas especie-específicas.

Abstract:
Howler monkeys are widely distributed neotropical primates in the Americas, ranging from forest lands 18 ° N in the Mexican state of Veracruz, and 20 ° N on the peninsula Yucatan, to 21 ° S in the province of Corrientes, Argentina. Two species reach Argentina in their natural geographic distribution: Alouatta caraya and A. guariba clamitans. Alouatta caraya has a wide distribution in South America, being adaptable to different types of habitats. While its acclimatization to captivity conditions is not easy, paradoxically the species responds satisfactorily, with respect to longevity and reproductive variables, to different environmental conditions outside their natural geographic distribution. In this dissertation we analyzed demographic, genetic and ecological variables (based on activity pattern, feeding and social behavior) that could have an effect on the adjustment of the individuals to the conditions found in anthropogenic forest environments outside the geographic distribution of the taxon. The above indicators were analyzed in groups of Alouatta caraya rescued from pet trade, living in a man-modified forest environment near La Cumbre, Cordoba. The evaluation of these indicators suggested an adaptive response corresponding to the one expected for the species in its natural habitat. These findings would support a process of rehabilitation of the studied individuals since they could successfully survive and, acclimated to exotic forests, expressing a repertoire of species-specific behaviors.

Bruttomesso, Andrea Claudia. "Síntesis estéreoselectivas de (20S) 3 beta,16 beta-dihidroxi-5 -pregnan-20,16-carbolactona (Tigogeninlactona) y (20S) 3 beta, 16 beta-dihidroxi-5-pregnen-20,16-carbolactona (Diosgeninlactona) : Aplicaciones de reacciones biocatalíticas a la preparación de derivados esteroidales relacionados" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se llevaron a cabo las síntesis estéreoselectivas de (20S)-3β,16β-dihidroxi-5α- pregnan-20,16-carbolactona (Tigogeninlactona) y de (20S)-3β,16β-dihidroxipregn-5- en-20,16-carbolactona (Diosgeninlactona), con excelente rendimiento utilizando 3β-hidroxi- 5α-androstano ó 3β-hidroxi-5-androsteno, respectivamente como materiales de partida. Ambas lactonas son posibles intermediarios catabólicos en la transformación de esteroides alcaloidales en 3β-hidroxi-5α-pregn-16-en-20-ona. Para obtener el anillo E γ-lactónico β-fusionado se estudiaron varias estrategias. La clave del éxito fue la construcción de una cadena lateral de 2 átomos de carbono en C-l7, previamente a la oxigenación de la posición alílica C-16. Por posterior adición de Michael de cianuro a una cetona conjugada y lactonización se obtuvieron las mencionadas lactonas. Estudios anteriores que involucraban la construcción de una cadena lateral de tres átomos de carbono sobre el C- l7 de un derivado l7-oxo-l6β-hidroxi, dieron por resultado la obtención de la γ-lactona epímera en C-16 y C-l7. La síntesis de Tigogeninlactona realizada en este trabajo es la primera de alto rendimiento mientras que la de Diosgeninlactona, producto natural aislado de Solanum vespertilio, constituye la primera síntesis informada. Por último se realizó la desacetilación regioselectiva en solventes orgánicos de una serie de derivados di y triacetilados de androstanos utilizando diferentes lipasas. Los mejores resultados se obtuvieron con las lipasas de Candida cylindracea (CCL) y de Candida antarctica (CAL). En algunos derivados dichas enzimas actuaron en forma complementaria y regioselectiva removiendo el grupo acetilo de la posición 3β o l7β.

Abstract:
(20S)-3β,16β-dihydroxy-5α-pregnan-20,l6-carbolactone (tigogeninlactone) and (20S)-3β,16β-Dihydroxypregn-5-en-20, 16-carbolactone (Diosgeninlactone) were stereoselectively synthesized in high yield from 3β-hydroxy-5α-androstane or 3β-hidroxi- 5-androsteno respectively. Both lactones are possibly intermediaries on the catabolic pathway from steroidal alkaloid to 3β-hydroxy-5α-pregn-16-en-20-one. Many strategies have been explored for the construction of the β-fused γ-lactonic ring E. The attachment of a 2-carbon side chain on C-17 previously to the allylic oxidation of C-16 was the key step in the synthesis. The above lactones were finally obtained by a Michael addition of cyanide to a conjugated ketone and lactonization. Early studies involving the connection of a 3-carbon side chain on C-17 of a l7-oxo- l6β-acetoxyandrostane led to the epimeric α-oriented lactone. This is the first high efficient stereoselective protocol for the preparation of Tigogeninlactone and is the first synthesis of Diosgeninlactone, natural product from Solanum vespertilio. Finally, a series of di and triacetoxy derivatives of androstane was regioselectively deacetylated in organic solvents by several lipases. The most satisfactory results were obtained with lipase from Candida cylindracea (CCL) and Candida antarctica (CAL). In some derivatives, CCL and CAL acted in a complementary and regioselective manner, removing the 3β- or the l7β-acetyl group.

Bruzzo Iraola, Juan. "Rol de la inflamación sistémica en la patología generada por tumores murinos" (2014-04-24). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La asociación entre cáncer e inflamación en un órgano o tejido se encuentra sólidamente establecida. En efecto, se sabe que ciertos tumores, tienen una mayor probabilidad de originarse en sitios de inflamación crónica y que procesos inflamatorios locales pueden acelerar el crecimiento de tumores preexistentes en animales y seres humanos. Por otro lado, la relación entre cáncer e inflamación sistémica no ha sido particularmente estudiada. En esta tesis, demostramos que durante el crecimiento de 4 tumores murinos, de diferente origen, estirpe histológico e inmunogenicidad y de un tumor humano creciendo en ratones nude, se generaron 2 picos temporalmente separados de inflamación sistémica. El primer pico fue relativamente pequeño y transitorio ya que fue detectado durante la primera semana luego de la inoculación del tumor. Tal vez represente, en parte, una respuesta del organismo al trauma mecánico de la inoculación de elementos extraños, ya que la inoculación de fibroblastos murinos normales también produjo una manifestación de inflamación sistémica, aunque menor, que la observada después de la inoculación de células tumorales. Por otro lado, el inicio del segundo pico de inflamación sistémica fue observado cuando el volumen tumoral fue mayor que 500 mm3 y coincidente con el inicio del crecimiento exponencial de cada tumor. Este segundo pico de inflamación sistémica fue significativamente más prominente que el primero y su intensidad aumentó en relación directa con el incremento de la masa tumoral. Estos resultados sugieren que la inflamación sistémica podría ser un fenómeno general de la patología neoplásica y su importancia se puso de manifiesto en el hecho de que, en nuestra colección de tumores, se observó, sorpresivamente, una correlación directa entre la magnitud de la inflamación sistémica generada por cada tumor y su agresividad, correlación que no se observó con la capacidad de generar metástasis. Esto indica, al menos en los tumores analizados por nosotros, que la capacidad de generar una potente respuesta inflamatoria sistémica, produce más efectos deletéreos sobre el organismo que la propia capacidad metastásica, disminuyendo de este modo la sobrevida. En este sentido, se encontró gran infiltración de neutrófilos y alteraciones estructurales en diferentes órganos, que son compatibles con disminución y aún pérdida de función, independiente de la capacidad metastásica de cada tumor. La inflamación sistémica generada por el tumor exacerba el propio crecimiento tumoral estableciendo un circuito de retroalimentación positivo entre ambos, al menos en parte por la activación del receptor TLR-4. Además, la disminución de las manifestaciones de inflamación sistémica mejoró los efectos anti-tumorales obtenidos con quimioterapia y radioterapia, aunque estos resultados fueron relativamente modestos. Esto se debe a que el tumor cuando supera los 1500 mm3, comienza un crecimiento exponencial, generando un fenómeno de inflamación sistémica progresivo, a pesar de que se continúan administrando las drogas antiinflamatorias, que hasta ese momento habían sido bastante efectivas para limitar la naciente inflamación sistémica y para retardar el crecimiento tumoral. En cambio, un excelente resultado terapéutico fue alcanzado cuando se realizó el tratamiento antiinflamatorio junto con la escisión quirúrgica de tumores > 2000 mm3. En este caso, la eliminación quirúrgica de la fuente principal de inflamación sistémica y de posible refractariedad, permitió al tratamiento antiinflamatorio tener muchas más chances de actuar, contra la inflamación sistémica residual, pero aún deletérea, que perdura al menos 2 semanas después de la extirpación del tumor. Si esta condición inflamatoria sistémica fuera una característica distintiva de muchos canceres avanzados, un conocimiento más preciso de los mecanismos por los cuales esta inflamación sistémica promueve el crecimiento tumoral y produce múltiples daños en el organismo y la búsqueda de sustancias antiinflamatorias más efectivas y con menores efectos adversos, serían muy importantes para complementar y mejorar las terapias actuales contra el cáncer.

Abstract:
The link between cancer and inflammation in an organ or tissue has firmly been established on the basis that cancer tends to occur at sites of chronic inflammation and that local inflammatory processes can accelerate the growth of preexisting tumors in both animals and human beings. In contrast, the relationship between cancer and systemic inflammation has been less studied. In this work, we demonstrated that during the growth of 4 murine tumors of different origin, histological type and immunogenicity and 1 human tumor in nude mice, two temporally separate peaks of systemic inflammation were detected. The first peak was relatively small and transient detected during the first week after tumor inoculation. It probably represented, at least in part, the response of the organism to the mechanical trauma of inoculation of foreign bodies, because the inoculation of normal fibroblasts produced a rather similar manifestation of systemic inflammation than that observed after the inoculation of tumor cells. On the other hand, the onset of the second peak was observed when the tumor was 500 mm3, coincidental with the beginning of the exponential tumor growth. This second peak of systemic inflammation was significantly more prominent than the first one and its magnitude increased progressively in parallel with the increase of tumor mass. These results suggest that systemic inflammation could be a general phenomenon of neoplastic pathology and its importance became manifest in the fact, that in our tumor collection, was observed, surprisely, a direct correlation between the magnitude of systemic inflammation generated by each tumor and its aggressiveness. On the other hand, in our tumor models, tumor aggressiveness did not correlate to the tumor´s ability to disseminate or metastasize, suggesting that the magnitude of systemic inflammation rather than the metastatic ability produce more deleterious effects in the organism, diminishing survival. In fact, was observed a large number of PMN and damage in tissues and organs, that are compatible with impair function, indepently of tumor´s metastatic ability. The systemic inflammation generated by tumor enhance tumor growth, establishing a positive feedback between both, at least in part, by activation of TLR-4 receptor. In addition, the attenuation of the manifestations of systemic inflammation improves the anti-tumor effects obtained with radiotherapy and chemotherapy. However, this results were relatively modest. This is probably due to the fact that when tumor surpass 1500 mm3, begins an exponential growth, generating a systemic inflammation which magnitude increase progressively, even though the continue inoculation of the anti-inflammatory drugs. Instead, an excellent therapeutic result was obtained when the anti-inflammatory treatment schedule was combined with surgery. In this case, the surgery eliminated the main source of systemic inflammation and in consequence an anti-inflammatory treatment had a better chance to act against the residual, but still deleterious, systemic inflammation. If a systemic inflammatory condition were a hallmark of many advanced cancers, a more accurate knowledge of the underlying mechanisms by which systemic inflammation promotes tumor growth and produces multiple deleterious effects on the organism and the search for new more effectives and with lesser side effects anti-inflammatory factors will help to design new strategies to complement and to improve the current therapies against cancer.

Bruzzone, Horacio. "Foco de plasma producido mediante un sistema de electrodos coaxiales" (1976). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Bruzzoni, Pablo. "Efectos de superficie en la difusión de hidrógeno en hierro y aleaciones ferrosas" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se ha estudiado el intercambio de hidrógeno entre un medio hidrogenante y láminas de hierro cubiertas de delgadas películas de níquel o paladío. Para tal fin se usaron técnicas de permeacíón de hidrógeno y análisis de respuesta en frecuencias, ya sea empleando carga catódica modulada o carga en fase gaseosa con presión modulada. Las películas de Ni y Pd fueron caracterizadas por diversas técnicas en cuanto a sus propiedades fisicas y su interacción con el hidrógeno. El intercambio de hidrógeno entre el medio y el sustrato de hierro es un proceso en varias etapas que incluye la difusión en el interior de la película metálica y el pasaje a través de las interfases. El pasaje a través de la interfase medio hidrogenante-material de la película juega un papel clave y se han determinado los coeficientes de transferencia correspondientes. Esta velocidad de transferencia finita, combinada con la capacidad de retención de hidrógeno de la propia película, determina en gran medida la respuesta del sistema en estado transitorio. Se propone que la transición de estado adsorbido a estado absorbido o soluto intersticial es la etapa determinante de la velocidad de pasaje a través de la interfase medio hidrogenante-material de la película. En el caso de la película de paladio, dicha velocidad de transferencia se reduce marcadamente con largos tiempos de exposición de la película al medio hidrogenante, lo cual se atribuye a la acumulación de hidrógeno subsuperficial. Finalmente se discuten estos resultados en relación con la técnica de permeacíón de hidrógeno aplicada a aleaciones de base hierro.

Abstract:
Hydrogen exchange between a hydrogenating medium and iron membranes covered with thin palladium or nickel films has been studied. For this purpose, techniques of hydrogen permeation and frequency response analysis were used, either with modulated cathodic chargíng or modulated gas phase chargíng. The nickel and palladium films were characterised through different techniques regarding their physical properties and their interaction with hydrogen. Hydrogen exchange between the medium and the iron substrate is a process of several steps that includes both the bulk diffusion in the metallic film and the transfer across the interphases. The transfer of hydrogen across the hydrogenating medium - film material interphase plays a key role; the corresponding transfer coefficient has been determined. This finite transfer rate, combined with the hydrogen retention capacity of the film itself, determines the transient response of the system to a great extent. It is proposed that the transition between adsorbed state and absorbed state or interstitial solute is the rate determining step for he transfer across the hydrogenating medium-film material interphase. In the case of the palladium film, this transfer rate is markedly reduced after long exposures of the film to the hydrogenating medium, which is attributed to subsurface hydrogen. Finally, these results are discussed in relation with the hydrogen permeation technique applied to iron base alloys.

Bucci, Sandra Janet. "Arquitectura hidráulica y relaciones hídricas de árboles de sabanas neotropicales : efectos de la disponibilidad de agua y nutrientes" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las sabanas neotropicales se caracterizan por tener una matriz herbácea continua con árboles y arbustos aislados. El objetivo de este estudio fue evaluar el significado funcional de las respuestas morfológicas y fisiológicas de especies leñosas a variaciones espacio-temporales en la disponibilidad de recursos en una de las sabanas neotropicales más importantes (el Cerrado en el Centro de Brasil). Las variaciones en los recursos disponibles para los árboles de estas sabanas, están determinadas por factores tales como la estacionalidad en las precipitaciones, el déficit de saturación del aire (DSA) y la disponibilidad de nutrientes en el suelo, así como por variaciones espaciales en la densidad de árboles. Las densidades aumentan desde campo sujo (960 individuos por ha) hasta el cerradão (3343 individuos por ha), pasando por el cerrado en sentido estricto con densidades intermedias. Se observaron fluctuaciones estacionales promedios de un 10 % en el contenido de agua del suelo en los primeros 300 cm de profundidad y también en la demanda evaporativa del aire. Como respuesta a estos cambios, los árboles de varias especies tuvieron potenciales hídricos foliares menores en la estación seca, con disminuciones de hasta 2,6 MPa entre las estaciones húmeda y seca. En ambas estaciones, los árboles del Cerrado mostraron un fuerte control estomático de la transpiración, pero las conductancias estomáticas fueron casi el 50% menores en la estación de sequía. A pesar de este cierre estomático parcial, las tasas diarias de transpiración fueron similares entre estaciones, mientras que los flujos diarios por individuos tendieron a ser menores en la estación seca. La reducción en el área foliar total durante la estación seca provocó una disminución de la razón entre el área foliar y el área de xilema activo (AF/AX); esto condujo a una mayor eficiencia en el sistema de transporte de agua. Como consecuencia de DSA altos durante las horas de la noche, los flujos nocturnos fueron relativamente altos, en especial durante la estación seca, observándose que hasta un 24 % del consumo diario de agua ocurre durante la noche. Los árboles en el cerradão, que dispusieron de una menor cantidad de agua por debajo de los 100 cm de la superficie del suelo debido a la alta densidad de árboles, experimentaron ajustes osmóticos pasivos como consecuencia de la disminución del contenido simplástico de agua, sin que los potenciales hídricos foliares mínimos cambiaran, en comparación a los árboles en el campo sujo. Las propiedades específicas de cada individuo, relacionadas con la eficiencia en el transporte de agua y el tamaño de los reservorios internos de agua influyeron significativamente en la economía de agua de los árboles. Los árboles que tuvieron tasas diarias de transpiración altas no experimentaron déficit hídricos significativos debido a que tienen reservorios de agua relativamente grandes y una mayor eficiencia del sistema de transporte de agua. Se observaron cambios diurnos en la conductividad específica, lo que sugiere que en el sistema de conducción de agua existen procesos continuos y dinámicos de formación y reparación de vasos embolizados, que ocurren a una escala temporal menor a 24 hs. Como resultados de fertilizaciones con N y P se produjeron cambios sustanciales en la arquitectura hidráulica de las plantas debido a modificaciones en el área foliar total y en el diámetro de los troncos. Estos cambios fueron más favorables desde el punto de vista de las relaciones hídricas en los árboles de sitios con fertilizaciones con P. En este tratamiento los cambios produjeron un aumento en la capacidad de transporte de agua en relación al área foliar total (AF/AX), lo que les permitió mantener potenciales hídricos mayores (más positivos). Los árboles en sitios fertilizados con N tuvieron respuestas opuestas. Toda estas series de combinaciones de características morfológicas y funcionales, así como las respuestas fisiológicas de aclirnatación, que ocurren cuando se producen cambios en condiciones ambientales, les permiten a los árboles del Cerrado mantener flujos de agua altos durante el año, sin que experimenten déficit hídricos, lo cual posibilita que una gran cantidad de especies leñosas pueda expandir sus hojas durante la estación seca.

Abstract:
The neotropical savannas are characterized by a continuous herbaceous layer with isolated trees and shrubs. The objective of this study was to assess the functional significance of morphological and physiological traits of woody species in response to temporal and spatial variation in resource availability. This study was carried out in one of the most important neotropical savannas, the Brazilian Cerrado. The variations in resource availability in Cerrado ecosystems are determined by factors such as seasonal precipitation and changes in the air saturation deficit (ASD), soil nutrient content and tree density which affect soil water availability. Tree density increases from campo sujo (960 individuals per ha) to cerradão (3343 individuals per ha), with other physiognomies containing intermediate tree densities. Soil water content differed by about 10% between wet and dry seasons in the upper 300 cm of soil. Air saturation deficits were substantially higher during the dry season. Leaf water potentials of several tree species were more negative during the dry season compared to the wet season. In some cases 2,6 MPa water potential differences were observed between both seasons. Also in both seasons the trees exhibited a strong stomatal control of transpiration. Average stomatal conductance, however, was 50 % lower during the dry season. Despite lower stomatal conductance during this period total daily sap flow per unit leaf area tended to be similar among plants but daily water loss per individuals was significantly lower. As a consequence of a lower total leaf surface area during the dry season, the ratio between leaf area and sapwood cross sectional area (LA/XA) was also lower, resulting in an increase in the water transport efficiency from soil to leaves. Nocturnal transpiration was relatively high due to high ASD, particularly during the dry season. Nocturnal transpiration accounted up to 24% of the total daily water use per tree. Soil water availability was lower in the cerradão below the first 100 cm soil depth compared to the campo sujo sites. The cerradão trees experience passive osmotic adjustment due to the decrease in the symplastic water content. However the leaf water potentials were not different between both sites. The water transport efficiency in each individual tree, and therefore their water economy, were influenced by the size of the internal water storages. Trees with higher transpiration rates did not experienced larger water deficits due to the relatively larger water storages and more efficient water transport system. Diurnal changes in specific hydraulic conductivity observed in two tree species suggest that embolism formation and repair occurred on a daily basis. N and P fertilizations resulted in substantial changes in the hydraulic architecture of trees due to variations in total leaf surface area and stem diameter. Trees in P fertilized sites improved their water relations due to an enhancement of the water transport efficiency (lower LA/XA) which allowed them to maintain higher leaf water potentials. Trees in N fertilized sites had opposite responses in terms of water transport efficiency. The morphological and physiological acclimation responses observed in Cerrado trees have an adaptive value allowing the trees to maintain high flow rates even during the dry season without experiencing water deficits, which allow them to expand new leaves during this unfavorable period for growth.

Buemi, María Elena. "Tratamiento de imágenes de radar de apertura sintética mediante filtros stack" (2012). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
En el tratamiento de imágenes que se apartan del modelo Gaussiano aditivo, en particular aquellas que además exhiben una baja relación se nalruido o presentan ruido impulsivo, la aplicación de filtros lineales generalmente no da buenos resultados, siendo los problemas típicos el borroneo de bordes o una pobre atenuación del ruido. Por otro lado, la aplicación de filtros no-lineales a este tipo de imágenes logra filtrar los valores de los pixels más afectados por el ruido y al mismo tiempo preservar los bordes. Las imágenes de Radar de Apertura Sintética (Synthetic Aperture Radar, SAR en inglés) poseen un tipo de ruido llamado speckle, el cual no es ni Gaussiano ni aditivo, y que posee una baja relación se~nal-ruido. Esto hace que la aplicación de filtros no-lineales resulte atractiva para este tipo de datos. Dentro de los filtros no lineales existe la clase de los filtros stack la cual es muy amplia y permite el diseño de filtros óptimos, desde el unto de vista del Error Absoluto Medio (Mean Absolute Error, MAE en inglés), y además permiten el procesamiento paralelo. Es por estas razones que esta tesis se dedica al estudio de la aplicación de esta clase de filtros a imágenes de Radar de Apertura Sintética. Para la evaluación de la efectividad de los filtros stack se utilizaron imágenes SAR simuladas bajo el modelo G0 e imágenes reales. Este modelo fue adoptado debido a su buen comportamiento para diversos tipos de target y su tractabilidad computacional. Se recurrió a evaluaciones de parámetros estadísticos, performance en la clasificación y calidad perceptual. También se estudió la utilización del modelo Gh en segmentación de imágenes SAR utilizando conjuntos de nivel y competencia de regiones.

Abstract:
In the treatment of images that do no follow the Gaussian additive model, particularly those that exhibit a low signal to noise ratio, or are affected by impulsive noise, the use of linear filters usually does not yield good results, being edge blurring or poor noise attenuetion the most common problems. On the other hand, the use of non-linear filters with this type of images, filters out the values of the most noisy pixels while, preserving the edges at the same time. Synthetic Aperture Radar (SAR) images possess a noise called speckle which is neither Gaussian nor additive, and which exhibits a low signal to noise ratio. This makes atractive the use of non-linear filters with this type of data. Within the class of non-linear filters, the stack filters represent a wide and flexible class that allows the design of optimal filters which minimize the Mean Absolute Error, and also allow to perform parallel processing. This is the reason why this thesis is devoted to the study of the application of stack filters to SAR images. To evaluate the effectivity of stack filtering, simulated SAR images under the G0 law and real SAR images, were used. This model has been adopted here due to its good behavior for different types of target and its computational tractability. Evaluation of statistical parameters, classification performance and perceptual quality assessment were performed. The suitability of the Gh modeling SAR images for segmentation, using level sets and region competition, has also been studied.

Buenhombre, Ana Josefa. "Diseño y evaluación biológica de un alimento destinado a mejorar el estado nutricional proteico-energético, de niños de 10 años, de Colombia" (2016-06-30). Tesis de maestría. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo del presente trabajo fue diseñar y elaborar una colación con alimentos Colombianos típicos, que cubriera 25% de las necesidades de energía y de proteínas de escolares. Se diseñaron 2 preparaciones: F1: plátano maduro, polvo de hornear, canela, esencia de vainilla, huevo entero, leche en polvo semi descremada, azúcar, manteca, miel, y harina de trigo; F2: caseína vs leche en polvo, aceite alto oleico vs manteca y sin miel. Se realizó el análisis proximal (AOAC 1990). Se evaluó la calidad proteica en ratas Wistar, determinando relación proteica neta (RPN) y digestibilidad. La composición química fue, para F1 y F2, respectivamente, g/100 g: humedad: 23,20 y 32,00; proteína: 9,69 y 13,15; lípidos: 10,35; carbohidratos digeribles 48,4 y 36,15; cenizas: 2,75; fibra: 4,30 y 3,80, aportando por colación de 160 g 24 % y 22% del requerimiento energético de un escolar de 10 años. Las colaciones presentaron sabor a plátano, tradicional en alimentos colombianos. Los ensayos biológicos indicaron en ambos casos un deterioro importante de la proteína (47 a 31% c/r a caseína), cubriendo de 24 a 22% del requerimiento del escolar. Sería de interés futuro estudiar condiciones industriales que minimicen la reacción de Maillard en relación al proceso casero de elaboración de las formulaciones diseñadas.

Abstract:
The objective of the present research was to design, with Colombian food products, a cake, covering 25% of energy and protein requirements of children. Two formulas were formulated which composition was: F1: ripe banana, baking powder, canela, vanila, whole egg, sugar, semi skimmed milk, butter, honey and wheat flour. F2: casein vs milk powder, high oleic oil vs butter and without honey. Proximal composition was determined (AOAC, 1990). Protein biologic evaluation was carried out in rats. Proximal composition was, for F1 y F2, respectively, g/100 g: humidity: 23,20 y 32,00; protein: 9,69 and 13,15; lipids: 10,35; digestible carbohydrates: 48,4 and 36,15; ashes: 2,75; fiber: 4,30 and 3,80. A serving size of 160 g provides 24% y 22% of energy requirements. Protein quality evaluation indicated, in both formulas, a biologic value regarding casein of 47 a 31%, covering 24 - 22 % from protein recommended allowances. Cakes presented the banana flavour accepted by colombian children. It would be of interest to study the possibility to decrease Maillard reaction applying industrial processes of preparation.

Bueno, Carlos Alberto. "Un terpenoide natural con actividades inmunomoduladora y antiangiogénica como potencial agente antiherpético" (2010). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La Queratitis Estromal Herpética (QH) se produce por una respuesta inflamatoria que ocurre en el ojo humano como secuela de la infección causada por el virus Herpes simplex tipo 1 (HSV-1), siendo la primera causa epidemiológica de ceguera infecciosa en los países desarrollados. Uno de eventos característicos de la evolución de la QH es la neovascularización. Para limitar la progresión de la enfermedad se utilizan los corticosteroides y el aciclovir (ACV) que mitigan la inflamación e impiden la diseminación viral, respectivamente. Teniendo en cuenta los efectos adversos generados por los corticoides y el fenómeno de emergencia de mutantes del HSV-1 resistentes al ACV, se pone de relieve la necesidad de encontrar nuevas drogas antivirales. La búsqueda no sólo debería estar orientada a la obtención de compuestos que interfieran con alguna etapa del ciclo de multiplicación viral, sino que también contemple el hecho que la droga en cuestión interfiera con alguna señal intracelular, produciendo un efecto final tanto antiviral como inmunomodulador. En nuestro laboratorio se ha demostrado que un extracto parcialmente purificado obtenido a partir de hojas de Melia azedarach L., denominado meliacina (MA), inhibe la multiplicación de virus pertenecientes a distintas familias, en condiciones in vitro y en ausencia de citotoxicidad. In vivo, MA inhibe la incidencia y la severidad de la QH murina, lo cual sugiere que ejercería un efecto antiinflamatorio, además de actuar como antiviral. Uno de los principios antivirales presentes en dichos extractos es el tetranortriterpenoide 1-cinamoil-3,11-dihidroximeliacarpina (CDM), que inhibe la multiplicación del HSV-1 in vitro, basifica los endosomas, y afecta el transporte de las glicoproteínas virales a la membrana plasmática. En el presente trabajo de tesis se investigó el mecanismo de acción antiviral e inmunomodulador de CDM en células epiteliales del tejido ocular y en células inflamatorias, así como también el efecto antiangiogénico del compuesto en células endoteliales. Así fue posible avanzar en la comprensión de mecanismos moleculares y celulares que podrían explicar el efecto curativo de MA en la enfermedad ocular inducida por HSV-1 en ratón.

Abstract:
Ocular Herpes Simplex virus type 1 (HSV-1) infection may result in a inflammatory lesion in the eye termed Herpetic stromal keratitis (HSK). Such HSK lesions represent the commonest infectious cause of blindness in developed countries. Neovascularization stands for a major step in HSK pathogenesis. The current standard of care includes topical corticosteroids and acyclovir (ACV). Corticosteroids are used to combat the inflammatory component of the disease, and the antiviral prevents viral disemination. Considering the adverse effects caused by steroids and the phenomenon of emergence of mutant HSV-1 strains resistant to ACV, highlights the need for new antiviral drugs. The search should not only be aimed at obtaining compounds that interfere with some stage of viral multiplication cycle, but should also affect an intracellular signal, gathering together both antiviral and immunomodulatory effects. Our laboratory has demonstrated that a partially purified extract obtained from leaves of Melia azedarach L., called meliacine (MA), inhibits the multiplication of viruses belonging to different families in the absence of cytotoxicity, in vitro. In vivo, MA inhibits the incidence and severity of the murine HSK, suggesting that it exerts an anti- inflammatory effect in addition to its antiviral action. One of the main antiviral principles obtained in these extracts is the 1-cinnamoyl-3,11-dihydroxymeliacarpin (CDM), which inhibits HSV-1 multiplication in vitro provokes the basification of the endosomal vesicles, and affects the trafficking of viral glycoproteins. In this thesis we investigated the antiviral and immunomodulatory activities of CDM in epithelial cells of ocular tissue and inflammatory cells, as well as its antiangiogenic effect in endothelial cells. Thus, it was possible to advance in the understanding of the molecular and cellular mechanisms involved in the healing effect of MA in the ocular HSV-1 infection in mice.

Burgin, María José. "Estudio del fotocontrol de la germinación de semillas de Datura Ferox : Aspectos fisiológicos y moleculares" (2002). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Dependiendo del nivel de dormición la germinación de semillas de Datura ferox puede ser estimulada por la luz mediante una LFR o una VLFR. En ambos casos, esta promoción involucra el aumento de la fuerza expansiva del eje embrionario y el ablandamiento del endospenna micropilar, este último, asociado al aumento de las actividades endo-β-mananasa y β-manosidasa en ese tejido. El análisis del nivel de transcriptos relacionados con la germinación, revela la existencia de puntos en común y diferencias importantes entre la LFR y la VLFR. La LFR produce en embriones un incremento en el nivel de transcriptos para GA 3β-hidroxilasa, DfGA3β-hy, y una reducción en aquellos que codifican para GA 20 oxidasa, DfGA20-ox, indicando un probable aumento en el contenido de giberelinas. En respuesta a la LFR, y posiblemente a la acción de las giberelinas, se observa en el endosperma micropilar un aumento en el nivel de mensajeros para endo-β-mananasa y expansinas, y en embriones un aumento de la acumulación de transcriptos para expansinas. En semillas sensibles a la VLFR, el requerimiento de luz solo se mantiene para el aumento del nivel de transcriptos de DfGA3β-hy, mientras que la acumulación de los otros mensajeros analizados se produce independientemente de la luz. La germinación de D.ferox inducida por una VLFR, o una LFR, puede ser inhibida por una HIR. En ninguno de estos casos la HIR afecta el potencial de crecimiento del eje embrionario, siendo el blanco de la inhibición el ablandamiento del endosprmna micropilar. El antagonismo LFR-HIR involucra una disminución de la actividad de endo-β-mananasa, mientras que en la inhibición de la VLFR por una HIR, la promoción de las actividades endo-β-mananasa y β-manosidasa se encuentra bloqueada. A nivel de los distintos transcriptos analizados, tanto en el antagonismo LPR-HIR como en el VLFR-HIR, se observa una fuerte relación entre nivel de mensajeros de DfGA3β-hy y los valores de germinación. En el caso de inhibición de la VLFR por la HIR, la inhibición de la actividad endo-β-mananasa se encuentra asociada a una disminución en el nivel de los mensajeros para esta enzima. Los resultados obtenidos indican que los efectos de la HIR sobre la actividad de endo-β-mananasa pueden deberse, tanto a una reducción en el nivel de mensajeros para esta enzima (VLFR), como a algún proceso posterior al establecimiento de dichos niveles, que determina una disminución de esta actividad enzimática (LFR).

Abstract:
Datura ferox seed germination can be promoted by a LFR or a VLFR, according to dormancy levels. In both cases, this promotion involves an increase in embryo growth potential and endosperm softening. Endosperm weakening is related to an increase in endo-β- mannanase y β-mannosidase activities. The analysis of transcript levels related to germination, reveal some common points but also differences between germination induced by a LFR, or by a VLFR. In response to the LFR, transcript accumulation for GA 3 β-hydroxylase, DfGA3β-hy, is promoted in embryos, while a reduction in those for GA 20 oxidase, DfGA20-ox, is observed, suggesting an increase in gibberellin content. An increase in transcript levels for endo-β-mannanase and expansins, in endosperm caps, and for expansins in embryos, is promoted by the LFR and gibberellins. In seeds sensible to the VLFR, the light requirement is only maintained for the rise in DfGA3β-hy transcripts level, while the other analyzed transcripts accumulated independently of the light. Germination of D.ferox induced by a LFR, or a VLFR, can be inhibited by a HIR. It could not be detected any affect of HIR on embryo growth potential. Endosperm softening is the target of the inhibition by the HIR. Endo-β-mannanase activity promoted by LFR is deeply diminished by HIR. In the VLFR, the promotion of endo-β-mannanase y β-mannosidase activities is cancelled by the HIR. HIR inhibition of germination, promoted by VLFR or LFR, is linked to the pattern of GA 3 β-hydroxylase transcript accumulation. In the VLFR-HIR antagonism, endo-β-mannanase activity inhibition is related to a decrease in the transcripts level for this enzyme. These results indicated that endo-β-mannanase activity could be affected by HIR by a lowering on its transcripts level (VLFR), or by some other process given after the establishment of this transcripts level, determining a drop in enzyme activity.

Burgos, Valeria Laura. "Estudio de la expresión de glicanos y glicosiltransferasas en el cerebro de ratas expuestas a paradigmas de aprendizaje" (2011). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Dado el carácter dinámico de la maquinaria de glicosilación y su participación en el sistema nervioso, en la presente Tesis estudiamos la expresión de estructuras oligosacáridas y la expresión génica de glicosiltransferasas en el cerebro de ratas luego de la exposición a dos modelos inductores de plasticidad neural: el Enriquecimiento Ambiental y el aprendizaje de Evitación Inhibitoria.. La estimulación ofrecida por el Enriquecimiento Ambiental claramente modificó el perfil génico de algunos componentes de la O-glicosilación tipo mucina. Por otra parte, luego del entrenamiento en Evitación Inhibitoria la expresión génica de varias O-glicosiltransferasas pareció ser regulada de manera diferencial en respuesta al aprendizaje. Además, los perfiles génicos de algunas de estas glicosiltransferasas parecieron estar diferencialmente reguladas dependiendo de qué fase de la formación de la memoria estaba siendo estudiada. Esta tesis doctoral se ha enfocado principalmente en la O-glicosilación del cerebro de rata y se han observado resultados interesantes sobre el perfil de algunos genes de glicosiltransferasas asociados previamente a patologías en humanos, como distrofias musculares congénitas. El entendimiento de los factores que modulan a los glicanos neurales en respuesta a modelos inductores de plasticidad podría aportar una mayor comprensión sobre la fisiología de un organismo, especialmente en casos de deficiencias en la glicosilación que involucran defectos y anormalidad en el cerebro.

Abstract:
Given the highly dynamic character of the glycosylation machinery and its involvement in the nervous system, in the present dissertation we studied the expression of oligosaccharide structures and gene expression of O-glycosyltransferases in the rat brain after exposure to two neural plasticity-inducing models, the Environmental Enrichment model and the Inhibitory Avoidance Task. The stimulation offered by the Enriched Environment clearly modified the gene profile of some components of the mucin-type O-glycosylation, some of which were previously known to be involved in certain pathological conditions of neural plasticity. On the other hand, after training in the Inhibitory Avoidance task the gene expression of several O-glycosyltransferases seemed to be differentially regulated in response to learning. Furthermore, the gene profiles of some of these glycosyltransferases seemed to be differentially regulated depending on which phase of memory formation was being studied (consolidation or reconsolidation). This dissertation has focused mainly on the O-glycosylation in the rat brain and interesting results have been obtained regarding the gene profile of some glycosyltransferases known to be associated to neural pathological conditions in humans, such as congenital muscular disorders. Understanding the regulation of the brain glycosylation pathways in response to plasticity-inducing models could provide mechanistic insights into the physiology of an organism, especially in those cases where glycosylation deficits engage abnormal brain defects.

Burton, Gerardo. "Síntesis del ácido 3ß-hidroxi-col-5-énico-24-14C y su aplicación al estudio de la biosíntesis de bufadienólidos en sapos" (1977). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El presente trabajo tuvo por objeto la síntesis del ácido 3β-hidroxi-col-5-énico-24-14C, y la aplicación del mismo al estudio de la biosíntesis de los bufadienólidos en sapos. En el mismo se describen: a. Los métodos de síntesis previamente utilizados para la obtención del ácido 3β-hidroxi-col-5-énico y los métodos generales para marcación de ácidos biliares en el carbono 24. b. Los estudios realizados en el campo de la biosíntesis de los cardenólidos, y de los bufadienólidos de orígen vegetal y animal, con los respectivos esquemas biosintéticos posibles. c. Las reacciones realizadas en esta tesis para la síntesis del ácido 3β-hidroxi-col-5-énico a partir de acetato de pregnenolona. El procedimiento elegido permitiría marcar los átomos de carbono 22, 23 y 24 de la cadena lateral del ácido, ya que se realizó mediante la homologación en dos átomos de carbono a partir del carbono 20 (carbono carbonílico) del acetato de pregnenolona, utilizando la reacción de Reformatsky entre el intermediario tipo pregnano y bromoacetato de etilo. La elección de acetato marcado en carbono 1 ó carbono 2 permitiría marcar selectivamente el carbono 23 ó el carbono 22 respectivamente. El producto homologado (el éster de un ácido tipo norcolánico) fue deshidratado obteniéndose una mezcla de ésteres insaturados, cuya composición se determinó por métodos espectroscópicos. De dicha mezcla se aisló el éster etílico del ácido 3β-acetoxi-23-norcola-5,(E)20(22)- diénico, el cual fue reducido al dihidroxi-intermediario; la oxidación y posterior hidrogenación selectivas del mismo condujeron al 3β-acetoxi-24-norcol-5-en-23- al que fue reducido al 23-hidroxi-compuesto correspondiente. Sobre este ' producto se aplicó la secuencia halogenación, cianuración e hidrólisis, obteniéndose el ácido 3β-hidroxi-col-5-énico. La cianuración con cianuro de potasio marcado con carbono-14 dió lugar luego de la hidrólisis a dicho ácido con la marcación radiactiva en la posición 24 ( carbono carboxílico). d. Las propiedades espectroscópicas (espectros de resonancia magnética protónica y masa) de los compuestos sintetizados y su interpretación, que permitieron confirmar las estructuras de los mismos, dándose en énfasis especial a la utilización de los espectros de resonancia magnética protónica para determinar la configuración del carbono 20 de aquellas sustancias obtenidas como mezclas de los epímeros 20R y 20S. e. Los resultados obtenidos en la inoculación del ácido 3β-hidroxi-col-5-énico-24-14C a sapos Bufo parachemis. Habiéndose determinada que dicho ácido es un precursor poco eficiente de los bufadienólidos en sapos, se postula un posible esquema biosintético de los mismos, a través de derivados del ácido colánico donde la saturación del doble enlace en posición 5(6) ocurriría con anterioridad a la ruptura oxidativa de la cadena lateral, ya sea por adición de agua para dar un 5β-hidroxi-derivado o por reducción al 5β-H-compuesto a través de un 3-ceto-4-en-intermediario.

Burín, Leila. "Reacciones químicas en sistemas lácteos de humedad reducida y su relación con transformaciones físicas del medio" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El objetivo fue investigar la influencia de las propiedades físicas de las matrices (grado de compactación, transición vítrea, cristalinidad), con cambios a nivel molecular, evaluados a través de la determinación del grado de avance de reacciones químicas: pardeo no enzimático (PNE), actividad enzimática, resistencia térmica enzimática y su relación con la composición, los cambios de pH y la humedad. Los sistemas empleados consistieron en matrices de baja humedad con componentes de suero lácteos. Tanto el PNE como la inactivación enzimática tuvieron lugar en muestras en estado vítreo. La velocidad a la que ocurrieron las reacciones químicas (PNE, actividad enzimática, resistencia térmica enzimática) en matrices amorfas estuvo afectada por modificaciones en las matrices que no se manifestaron en cambios en el valor de la temperatura de transición vítrea de los sistemas. En sistemas vítreos, las muestras comprimidas desarrollaron mayor velocidad de PNE que las muestras en polvo, para todas las composiciones estudiadas. La cristalización (parcial o total) de las matrices provoca un incremento de la velocidad de reacciones químicas debido a la concentración de reactivos en las regiones amorfas excluidas del cristal. Estas observaciones llevan a distinguir entre fenómenos que ocurren a un nivel supramolecular, e involucra aspectos cooperativos entre las moléculas (como lo es la transición vítrea) de fenómenos que ocurren a un nivel molecular, como las reacciones de PNE,actividad enzimática o resistencia térmica enzimática. Es importante notar que ambos tipos de fenómenos se desarrollan en diferentes escalas de espacio y tiempo, y esto lleva a que las reacciones químicas puedan no estar gobernadas por las propiedades macroscópicas del medio.

Abstract:
The objective of the present work was to investigate the influence of physical properties of the system (porosity degree, glass transition, crystalline state) with molecular changes evaluated through measurements of chemical reactions: non-enzymatic browning (NEB),enzyme activity and enzyme thermal resistance, and its relationship with the system composition, changes on pH and moisture content. The systems consisted in low moisture matrices composed mainly of dairy components. NEB and enzyme inactivation were observed to occur in the glassy state. The rate at which the chemical reactions (NEB, enzyme activity and enzyme thermal resistance) were performed in amorphous matrices were affected by matrices modifications, not manifested as changes in the value of the glass transition temperature. Glassy compressed samples developed higher NEB rates than porous samples at all studied compositions. System crystallization (partial or total) promoted an increase of chemical reactions due to the reactants concentration at the amorphous regions, excluded from the crystal. These observations able us to distinguish between supramolecular phenomena, which involucrate cooperative mechanisms between molecules (like the glass transition), from a molecular level, as NEBreactions, enzyme activity or enzyme thermal resistance. It’s important to note that both phenomena developed at different time/space scales, accordingly, chemical reactions may not be governed by the macroscopic properties of the system.

Busaniche, Manuela. "Variedades de BL-álgebras generadas por BLn-cadenas" (2003). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Buscaglia, Carlos Andrés. "Análisis funcional del antígeno repetitivo presente en la trans-sialidasa de Trypanosoma cruzi" (2000). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El protozoario Trypanosoma cruzi, agente etiológico de la enfermedad de Chagas, expresa en su superficie moléculas con actividad trans-sialidasa. Esta actividad novedosa constituye la única vía de captación de residuos de ácido siálico en el parásito. La adquisición de estos azúcares en glicoconjugados aceptores de superficie es indispensable para el reconocimiento y/o la infección de células de mamífero. La trans-sialidasa presente en el estadío infectivo de T cruzi tiene una estructura quimérica, compuesta por una región responsable de la actividad catalítica y un dominio repetitivo altamente inmunogénico (SAPA). Esta proteína es también secretada espontáneamente a sangre del hospedador mamífero con propósitos inciertos. En el transcurso de la presente Tesis, hemos realizado un análisis funcional del antígeno SAPA. Más precisamente, hemos evaluado el rol que podría estar cumpliendo este dominio en la interacción de la trans-sialidasa con el sistema inmune y en la biodisponibilidad de la molécula secretada. Con este propósito, generamos y expresamos en bacterias distintas trans-sialidasas recombinantes conteniendo o no al dominio SAPA. Las mismas fueron administradas en ratones siguiendo distintos protocolos de inmunización a fin de analizar el curso de la respuesta inmune humoral contra uno y otro dominio. Por otro lado, realizamos un análisis farmacocinético de las distintas enzimas purificadas. De tal manera, demostramos que la presencia del dominio SAPA cumpliría un rol dual durante la infección; en un primer momento, estabilizando la actividad trans-sialidasa en sangre, lo cual podría estar asociado al mecanismo de infección y/o a las alteraciones del sistema inmune que se verifican durante la fase aguda de la enfermedad. En etapas más tardías, la presencia del dominio SAPA induce la formación de anticuerpos capaces de neutralizar la actividad trans-sialidasa. La respuesta inmune inicial dirigida contra el dominio SAPA y/o la estabilización en sangre de la molécula secretada en su conformación nativa podrían estar mediando la difusión de la respuesta humoral hacia epitopes presentes en la región catalítica. De hecho, también demostramos que los anticuerpos inhibitorios de trans-sialidasa están dirigidos contra epitope/s discontinuo/s en la secuencia primaria de la enzima. Estos resultados son coincidentes con los datos clínicos, en los que se observa una fase inicial de la infección en la que puede llegar a detectarse actividad trans-sialidasa en circulación (asociado a altos niveles de parasitemia) y una fase tardía caracterizada por la presencia de anticuerpos inhibitorios de dicha actividad (asociado a bajas o nulas parasitemias). La inducción de anticuerpos inhibitorios mediada por SAPA contradice el rol inmunodistractor propuesto para este antígeno repetitivo, y sugiere un mecanismo seleccionado en la interacción parásito-hospedador para el establecimiento de una infección crónica. La estabilización de la actividad trans-sialidasa en sangre requiere de un número mínimo de unidades repetitivas y no depende de las secuencias no repetitivas presentes en el antígeno SAPA. El mecanismo molecular por el cual estas repeticiones aumentan la vida media de la transsialidasa en circulación no ha podido ser dilucidado, aunque no está mediado por una mayor resistencia a la degradación por proteasas séricas ni por unión de estas repeticiones a alguna proteína endógena. De manera interesante, el dominio SAPA es también capaz de estabilizar la conformación nativa de otra proteína en sangre, en absoluto relacionada a la trans-sialidasa, por lo cual se sugiere una posible aplicación biotecnológica.

Abstract:
The protozoan Trypanosoma cruzi, the etiologic agent of Chagas' disease, expresses trans-sialidase molecules on its surface. The acquisition of sialic acid residues in T. cruzi could only be accomplished by virtue of this novel enzymatic activity. The sialylation of surface glycoconjugates is required in order to interact with and/or to infect mammalian cells. The trans-sialidase displayed by the infective form of the parasite resembles a naturally occurring chimera, made up of a catalytic region and a highly immunogenic, repetitive domain (SAPA). This protein is also spontaneously shed into the bloodstream of the mammalian host with unknown purposes. In the course of the present PhD work, we have performed a functional analysis of the antigen SAPA. In this respect, we have evaluated the possible role of this repetitive domain on the interaction between trans-sialidase and the immune system and on the bioavailability of the secreted molecule. For this purpose, we have constructed and expressed in bacteria different recombinant transsialidases, either containing or lacking the repetitive extension. These enzymes were used to perform different immunization protocols in mice in order to analyze the humoral immune response against each region. On the other hand, we have analyzed the pharmacokinetics of the purified trans-sialidases. We demonstrate that SAPA have a dual effect, first stabilizing the enzymatic activity in blood, which might be related to the infectious process and/or the modulation of the immune system. On a second step, the presence of SAPArepeats in cis promotes the generation of antibodies able to neutralize the trans-sialidase activity. The early immune reSponse against SAPA and/or the stabilization in blood of the enzyme on its native conformation might be involved in the spreading of the humoral response towards epitopes present on the catalytic region. In fact, we also demonstrate that antibodies able to inhibit trans-sialidase activity recognize discontinuous epitope(s) within the enzymatic region. These results are similar to those obtained in vivo during the course of infection. After an initial phase characterized by trans-sialidase activity in blood (and high levels of parasitemia) circulating antibodies able to inhibit trans-sialidase could be detected. The appearance of these antibodies correlate with the establishment of an indeterrninate phase where parasites are barely detected in blood. At variance with present views, SAPA does not act as an immunodistractor but instead promote the generation of inhibitory antibodies. This mechanism could have been selected for in the parasite-host interaction to modulate the infection. The stabilization of trans-sialidase activity in blood depends on a minimum number of repetitive units and not on non-repetitive sequences present in SAPA. The molecular basis of this stabilization are not yet understood. Even though, SAPA repeats do not protect the catalytic domain against serum proteases neither mediate the binding to an endogenous molecule. Interestingly, SAPA repeats also increases the half-life in blood of a protein unrelated to trans-sialidase. Thus, its biotechnological potential could be envisaged.

Busch, Rodolfo H.. "Sobre la absorción de soluciones de perclorato de plomo" (1940). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Buschiazzo, Alejandro. "Estudios moleculares de sialidasas de Trypanosomátidos : relación estructura/función" (1999). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La trans-sialidasa de Trypanosoma cruzi es una enzima cuya existencia fue postulada en 1985 cuando se probó que este parásito intracelular de células de mamífero, posee ácido siálico conjugado a sus propias moléculas de superficie. La trans-sialidasa fue posteriormente purificada, caracterizada enzimáticamente y su gen clonado. Así se demostró en primer lugar, que era una actividad novedosa como transglicosidasa, ya que no utiliza como sustrato un dador nucleótido-azúcar, que en todas las otras sialiltransferasas cucarióticas conocidas, es el CMP-siálico. En segundo lugar, el análisis de secuencia reveló una lejana pero evidente homología con varias sialidasas bacterianas, y no con las sialiltransferasas eucariotas. En los últimos años han surgido distintos tipos de evidencias experimentales, que involucran a la trans-sialidasa en los mecanismos de adhesión/invasión de T. cruzi a las células del mamífero huésped, en el escape temprano de parásitos invasivos de la vacuola parasitófora de la célula hospedadora y en la evasión del camino alternativo de fijación del complemento. La actividad de trans-sialidasa, ha sido detectada hasta el momento sólo en T. cruzi y en dos parásitos tripanosomátidos emparentados, T. brucei y Endotrypanum sp. En algunos otros tripanosomátidos se han encontrado sialidasas, pero sin actividad de transferasa detectable, como en el caso de T. rangeli. Hasta ahora no se sabía si la sialidasa de este parásito no patogénico, estaba relacionada con la trans-sialidasa. Con el objetivo de comprender el(los) mecanismo(s) en el(los) que la trans-sialidasa está involucrada, en relación a la interacción huésped/parásito, en este trabajo de Tesis se ha avanzado en distintos aspectos del estudio molecular de la trans-sialidasa de T. cruzi y la sialidasa de T. rangeli: 1. Se optimizaron los sistemas de expresión y purificación de la trans-sialidasa recombinante con el fin de obtener grandes cantidades de proteína >95% pura. 2. Se utilizó trans-sialidasa recombinante pura como material inicial para cristalizar y comenzar estudios cristalográficos por difracción de rayos X, tendientes a resolver la estructura tridimensional de la misma. Además de las variaciones convencionales en los métodos y condiciones de cristalización, y mientras no se obtengan cristales adecuados, se procedió a buscar la separación de dominios parciales de la proteina para cristalizar de forma independiente. 3. En paralelo con los puntos anteriores, se demostró que la sialidasa de T rangelí es homóloga a la trans-sialidasa dc T. cruzi. Para ello se purificó la sialidasa nativa a partir de sobrenadantes de cultivo de T. rangeli, se microsecuenció y se logró clonar trece genes homólogos, miembros de lo que hemos denominado la familia multigénica de la sialidasa de T. rangeli. 4. Tres de los genes clonados codifican proteínas recombinantes con actividad de sialidasa comparable a la de la enzima nativa cuando se expresan en Escherichia coli. Uno de ellos fue secuenciado completamente, revelando una identidad en aminoácidos de 68.9% cuando se lo compara con la trans-sialidasa de T. cruzi, aumentando a una similitud dc 86.7% si se admiten sustituciones conservativas. 5. Se cristalizó la enzima nativa de T.rangeli sola y ligada a un inhibidor competitivo. Se resolvió su estructura tridimensional a partir del patrón de difracción de rayos X, hasta una resolución de 2.2Å. En paralelo se resolvió la estructura tridimensional de la misma proteína acomplejada al inhibidor hasta 2.9Å. 6. Se modelizó la estructura tridimensional de la trans-sialidasa, tomando como referencia inicial las coordenadas atómicas de la sialidasa, dada la gran homología entre las dos proteínas. 7. Se construyeron y expresaron moléculas quiméricas entre ambas enzimas con el objetivo de avanzar en la definición de regiones y/o residuos claves en la transglicosilación.

Abstract:
The trans-sialidase from Trypanosoma cruzi is an enzyme, which was predicted to exist in 1985, in order to explain the presence of sialic acid bound to surface molecules of this intracellular parasite of mammalian cells. Trans-sialidase was later purified, enzymatically characterized and its gene cloned. In this way it was shown in the first place, that it is a novel type of transglycosidase, since it does not use a sugar-nucleotide as the donor substrate, which is CMP-sialic acid in all the other known cukaryotic sialyltransferases. In the second place, the sequence analysis revealed a low level of homology with several bacterial sialidases, and not with eukaryotic sialyltransferases. Over the last few years different types of experimental evidence have appeared. involving the trans-sialidase of T. cruzi in the adhesion/invasion mechanisms that the parasite uses in the interaction with mammalian host cells, in the early escape of invasive parasites from the parasitophorous vacuole in recently invaded host cells and in the parasite evasion from the alternative pathway of complement activation. Trans-sialidase activity has been detected only in T. cruzi and in two related Trypanosomatidae parasites. T. brucei and Endotrypunum sp. Sialidases have been identified in some other Trypanosomatidae, but lacking detectable transferase activity, as in the case of T. rangeli. Until now it was not known if the sialidase from this non-pathogenic parasite, was related with trans-sialidase. In order to understand the mechanism(s) in which trans-sialidase is involved, with respect to hostcell/ parasite interaction, this PhD Thesis has contributed to advance in different aspects of the molecular study of the trans-sialidase from T. cruzi and the sialidase from T. rangeli: 1. The systems ofexpression and purification of recombinant trans-sialidase were optimized with the purpose of obtaining great quantity of highly pure (>95%) protein. 2. Pure recombinant trans-sialidase was used as the starting material in crystallization screenings, looking for suitable crystals to perform crystallographic studies by X ray diffraction, that would render its three-dimensional structure. Added to the conventional matrix variations in the crystallogonesis screenings, and until suitable crystals appear, a simultaneous approach was performed, searching for the separation of partial domains of the protein that could be crystallized independently. 3. In parallel with these points, it was demonstrated that the sialidase from T rangei is homologous to the the trans-sialidase of T. cruzi. With this purpose, the native sialidase was purified from culture supernatants of T. rangeli, and microsequenced. Thereafter, thirteen homologous genes were cloned, and grouped in what we have denominated the multigenic sialidase family of T. rangeli. 4. Three of the cloned genes encode recombinant proteins with sialidase activity, similar to the native enzyme's, when they are expressed in Escherichia coli. One of them was completely sequenced, showing an overall identity of 68.9% at the amino acid level, compared to the trans-sialidase from T cruzi. The similarity increases to 86.7% if conservative substitutions are admitted. 5. The T. rangeli native enzyme was crystallized, alone and complexed with a competitive inhibitor. Its three-dimensional structure was solved by X ray diffraction pattern analysis, up to 2.2Å resolution. The three-dimensional structure of the complex with the inhibitor was solved simultaneously to 2.9Å. 6. The three-dimensional structure of the trans-sialidase from T. cruzi was modelled, taking the atomic coordinates of the sialidase, as initial reference, given the high homology level between both proteins. 7. Chimeric molecules between both proteins were constructed and expressed. with the purpose of advancing in the definition of key regions and/or residues responsible for the transglycosylation activity.

Bush, Alan. "Robustez y sensibilidad en la respuesta a feromona de Saccharomyces cerevisiae" (2016-03-18). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las células deben sensar y responder a cambios en su ambiente para poder sobrevivir, reproducirse y desempeñar sus funciones fisiológicas. En particular, las células eucariotas usan muchos y variados mecanismos a en de transducir señales del exterior al interior de la célula. Uno muy importante es el que involucra a receptores acoplados a proteínas G heterotriméricas. Estos receptores de siete pasos de membrana, al ser ocupados por sus ligandos, catalizan el intercambio de GDP por GTP en la subunidad Gα de la proteína G asociada, lo que causa la disociación de la proteína G heterotrimérica en Gα y Gβγ. La respuesta a feromona sexual de levaduras es un sistema prototípico de este tipo de mecanismos, muy estudiado bioquímica y genéticamente. En esta vía de transducción de señales, la proteína de andamiaje Ste5 se une a Gβγ libre, lo que causa su reclutamiento a membrana y la activación de una cascada de MAP kinasas, resultando en arresto del ciclo celular y cambios en el patrón de expresión génica. Las curvas dosis-respuesta (DoR) a feromona medidas en distintos puntos de la vía de transducción, como ocupación del receptor, fosforilación de la MAPK del sistema o inducción transcripcional, muestran una sensibilidad muy similar, un fenómeno al que llamamos alineamiento de las curvas dosis-respuesta (DoRA). En esta tesis estudiamos de manera cuantitativa los primeros pasos en la activación de la respuesta a feromona en levaduras; la ocupación del receptor, la activación de la proteína G heterotrimérica y el reclutamiento a membrana de Ste5. Encontramos que el sistema es notablemente robusto a variaciones en la cantidad de receptores, algo que no es fácilmente explicable por la teoría clásica de receptores. Estudiamos el mecanismo responsable de esta robustez, cuyo punto de acción pudimos mapear río arriba del reclutamiento de Ste5. Construimos un modelo matemático completo de la interacción entre el receptor y la proteína G: el modelo Carrousel. El análisis del mismo nos sugirió un mecanismo por el cuál el sistema puede medir la fracción de receptores ocupados en lugar de la cantidad de los mismos, lo que además explica el fenómeno de DoRA. Este mecanismo depende de la interacción fósica reportada entre la proteína RGS (reguladora de la señalización por proteína G, que inactiva al sistema) y el receptor (que lo activa). Pudimos probar que cepas mutantes en las que esta interacción no está presente, no muestran robustez a la cantidad de receptores. Por otro lado medimos curvas DoR del cambio de localización de Ste5 en células con cantidades variables de Ste5. En base a esta información pudimos estimar la afinidad entre esta proteína de andamiaje y sus sitios de unión a membrana en células vivas, y cómo esta afinidad se modula durante la respuesta. Además, estudiamos el efecto de cambios en la abundancia de Ste5 sobre la respuesta, encontrando que la cantidad de esta proteína es un parámetro crítico del sistema.

Abstract:
Cells need to respond to changes in their environment to be able to survive and proliferate. Here, we study in a quantitative manner the pheromone response pathway in Saccharomyces cerevisiae, a canonical GPCR signal transduction system. Upon activation of the pathway, occupied receptors increase the exchange rate of GDP for GTP in the Gα subunit of the heterotrimeric G protein. This causes the dissociation of the G protein, liberating free Gβγ, which in turn recruits to the membrane the scaffold protein Ste5, activating the MAP kinase cascade and downstream effectors. Dose-response (DoR) curves measured at different activation steps of this pathway show very similar sensitivity, a phenomena we call dose-response alignment (DoRA). In this thesis we study the first activation steps of the pheromone response; receptor occupation by ligand, activation of the G protein and recruitment of Ste5. We found the system to be notoriously robust to changes in the levels of the receptors, something not easily explained by classical receptor theory. We mapped the mechanism responsible for this robustness upstream of Ste5 membrane recruitment. Therefore, we built a complete mathematical model of the G protein activation process: the Carrousel model. This model suggested that the system responds to the fraction of occupied receptor and not to the absolute amount of ligand-receptor complexes. As predicted by the model, this mechanism requires the reported physical interaction between the RGS of the system and the receptor, since disruption of this interaction abolishes robustness to receptor abundance. We also determined the affinity with which Ste5 binds to free Gβγ, causing its membrane recruitment. We determined this in live cells, and studied the way in which the affinity is modulated during the response. Furthermore, we studied the effect of changes in the abundance of Ste5, finding that the expression level of this protein is critical for a normal sensitivity of the response.

Bustamante, Juan Pablo. "Estudio fisicoquímico y bioinformático de la familia de hemoglobinas truncadas" (2015-11-13). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Las hemoproteínas son proteínas que poseen un grupo hemo unido generalmente de forma covalente. Participan en transporte de gases, en reacciones de transferencia de electrones y catálisis de reacciones redox. Un grupo muy particular dentro de estas proteínas son las hemoglobinas truncadas (trHbs), que constituyen una familia interesante de referencia para estudios de estructura y función de proteínas, debido a su plegado conservado y pequeño tamaño. Las trHbs están presentes en los tres super reinos de la vida, bacteria, arquea y varios organismos eucariotas. Han sido clasificadas en tres grupos, conocidos como N, O y P. Si bien la mayoría de trHbs no poseen una función asignada, se conoce que ésta generalmente depende de su afinidad por ligandos pequeños, es decir, de la relación entre la velocidad a la cual captan y liberan ligandos, caracterizadas por constantes de velocidad kon y koff, respectivamente. De allí la relevancia de abocarse al estudio de los determinantes moleculares de tal afinidad. Los procesos de captación y liberación de ligandos han sido extensamente estudiados durante los últimos años por diferentes grupos de investigación, incluido el grupo donde se desarrolló la presente tesis, utilizando enfoques teóricos y experimentales. Sin embargo, solo se estudiaron algunos de los procesos involucrados, tales como el rol de túneles e interacciones de puentes de hidrógeno, encontrándose únicamente tendencias cualitativas respecto a constantes kon y koff. En la presente tesis, a través de la aplicación de diversas técnicas computacionales, se profundizó en la descripción anterior mediante la inclusión de dos determinantes moleculares cruciales en el proceso de captación de ligandos: las cavidades internas de las proteínas y el rol de las moléculas de agua presentes en el sitio activo. Adicionalmente, se construyó un modelo matemático, validado a través de un riguroso análisis estadístico, que permite predecir de manera cuantitativa las constantes kon y koff de O2. Dado que la mayoría de trHbs no poseen una función asignada, se extendió el alcance del modelo propuesto a toda la familia de trHbs, prediciendo valores para una gran cantidad de trHbs (sobre un total de ~1100 secuencias proteicas). Se asignaron posibles funciones moleculares y se analizó a esta familia de proteínas en un contexto evolutivo-funcional, caracterizando a cada grupo filogenético. De manera adicional, el estudio evolutivo reveló que hay un grupo de trHbs que comparte características comunes que lo diferencian significativamente del resto de los grupos conocidos (N, O y P), por lo que se lo clasificó como un cuarto grupo, denominado Q. Finalmente, puesto que una de las proteínas más estudiadas durante el desarrollo de la presente tesis (la trHb O de Thermobifida fusca, Tf-trHbO) es una proteína termoestable perteneciente a una actinobacteria termófila, se estudiaron las bases moleculares de su termoestabilidad comparándola con una trHb mesoestable: la trHb O de Mycobacterium tuberculosis. Se encontró que la alta estabilidad térmica de la Tf-trHbO se explica, en gran parte, por el cambio de un único aminoácido que altera la estructura de un loop, haciéndolo más flexible y promoviendo la formación de puentes salinos. En su conjunto, esta tesis presenta una profunda caracterización de dos factores cruciales en el proceso de captación de ligandos en hemoglobinas truncadas, que, incluidos en un modelo matemático junto a una descripción del proceso de liberación de ligandos como ha sido previamente descripta, permiten explicar valores experimentales de kon y koff de O2 con una precisión muy alta. La extensión del modelo a toda la familia de trHbs ha permitido asignar posibles funciones moleculares a una gran cantidad de miembros de estas globinas. Complementado con un análisis evolutivo y bioinformático, se ha logrado además obtener una detallada caracterización de cada grupo de trHbs, descubriendo incluso un grupo nuevo. Por último, el estudio teórico sobre la termoestabilidad de la Tf-trHbO abre las puertas a posteriores estudios que analicen las bases moleculares de la adaptación a condiciones extremas. Palabras clave: hemoglobinas truncadas, cavidades internas, sitios de hidratación, dinámica molecular, QM/MM, predicción de constantes cinéticas, predicción secuencia-estructura-función, filogenia, evolución molecular, bioinformática, termoestabilidad.

Abstract:
Hemeproteins are proteins that possess a heme group generally covalently bound. They participate in gas transport, electron transfer reactions and catalysis of redox reactions. A particular group within these proteins is the truncated hemoglobins (trHbs), which constitute an interesting benchmark group for structure-to-function studies, due to its conserved fold and small size. The trHbs are present in all three superkingdoms of life, bacteria, archeas and several eukaryotes. They have been classified into three groups, labeled as N, O and P. While most trHbs do not have an assigned function, it is well known that generally their function depends on their affinity for small ligands, i.e. the balance between capture and release ligand rates, characterized by the kon and koff rate constants, respectively. Hence, the importance of focusing on the study of the molecular determinants of this affinity. The ligand capture and release processes have been extensively studied throughout in the last several years, by different research groups, including the group in which this thesis has been developed, with theoretical and experimental approaches. However only some involved processes, such as the role of tunnels and hydrogen bond interactions, were studied finding merely qualitative trends in kon y koff rate constants. In the present thesis, through the application of a variety of computational techniques, we incorporated to the previous description two key determinant factors of the ligand capture process: protein internal cavities and the role of water molecules in the active site. Additionally, validated through a rigorous statistical analysis, a mathematical model for the quantitative prediction of O2 kon y koff rate constants was built. Due to the fact that most trHbs do not have an assigned function, we extended our proposed model to the whole family, predicting values for a large amount of trHbs (over ~1100 protein sequences). In this context, possible molecular functions were assigned, as well as a protein family analysis in an evolutionary-functional scenario, characterizing each phylogenetic group. Furthermore, the evolutionary study revealed a novel trHb group that shares common features that differentiate it from the rest known groups (N, O and P), so it was classified in a fourth group, labeled as Q. Finally, given that one of the most studied proteins along this thesis (the trHb O from Thermobifida fusca, Tf-trHbO) is a thermostable protein from a thermophilic actinobacteria, the molecular basis of its thermostability was studied, comparing it with a mesostable trHb: the trHb O from Mycobacterium tuberculosis. It has been found that the high thermal stability of TftrHbO, is mainly explained by a single amino acid change that alters a loop structure making it more flexible, which also promotes the formation of salt bridges. Overall, in this thesis we present for the truncated hemoglobin family a deep characterization of two key determinant factors of the ligand capture process that, included in a mathematical model together with a description of the ligand release process that has been previously made, allows us to explain experimental O2 kon y koff values with high precision. The extension of the model to the whole trHb family enabled putative molecular function assignments. Complemented by an evolutionary and bioinformatics analysis, a detailed characterization of each trHb group was also achieved, describing a novel group. Last but not least, the theoretical study of the Tf-trHbO thermostability is a first step towards further indepth studies of the molecular basis of adaptation to extreme conditions. Keywords: truncated hemoglobins, internal cavities, hydration sites, molecular dynamics, QM/MM, kinetic constants prediction, sequence-structure-function prediction, phylogeny, molecular evolution, bioinformatics, thermostability.

Butler, Matías. "Desarrollo de metodologías para la diferenciación de compuestos aromáticos isómeros por espectrometría de masa empleando técnicas de ionización a presión atmosférica" (2013-08-09). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
Se realizaron estudios para diferenciar isómeros de posición en compuestos aromáticos, empleando un espectrómetro de masa híbrido cuadrupolo/tiempo de vuelo acoplado con distintas fuentes de ionización a presión atmosférica, en modo positivo. Se utilizaron inicialmente dos N-óxidos isómeros de hidroxipiridina comerciales, que sirvieron luego como sistema modelo para el análisis de una serie de 1- y 4- N-óxidos de pirazinas monosustituídas sintetizados. Se investigaron dos metodologías para la diferenciación. La primera metodología consideró el comportamiento disociativo, comparando la relación de intensidades entre los iones observados en los espectros de iones producto de cada isómero a diferentes energías de colisión. En la otra metodología, la formación de iones aducto a partir del empleo de soluciones de cationes metálicos por electrospray, permitió identificar especies características en los espectros de masa obtenidos para cada N-óxido isómero. Los alcances de esta metodología fueron evaluados con isómeros de dihidroxiarenos comerciales, siendo aplicable como método de detección postcolumna para una mezcla de los mismos separada por cromatografía líquida. La complementación con cálculos computacionales permitió interpretar y analizar las diferencias observadas en los espectros de masa, en términos energéticos y estructurales de los iones. Además, se pudo confirmar la correcta asignación de las estructuras calculadas para los iones aducto de uno de los compuestos estudiados por medio de espectroscopía de disociación multifotónica infrarroja. Se desarrolló una metodología alternativa para determinar la posición del grupo N-óxido en pirazinas sustituídas, empleando espectroscopía de resonancia magnética nuclear de carbono-13, a través del cálculo de un índice derivado del análisis quimiométrico de los datos.

Abstract:
Differentiation studies among positional isomers in aromatic compounds were carried out with a hybrid quadrupole/time-of-flight mass spectrometer coupled with different atmospheric pressure ionization sources in positive ion mode. Firstly, two commercial isomeric hydroxypyridine N-oxides were used, which were useful later as a model system for the analysis of a set of monosubstituted pyrazine 1- and 4- N-oxides synthesized. Two methodologies for the differentiation were investigated. The first methodology considered the dissociative behavior, by comparing the ratio of intensities between the ions observed in the product ion spectra of each isomer at different collision energies. In the other methodology, upon adduct ions formation from metallic cations solutions by electrospray, the identification of characteristic species in the mass spectra obtained for each isomeric N-oxide was possible. The scope of this methodology was assessed using commercial isomers of dihydroxyarenes, being applicable as a postcolumn detection method to a mixture of them separated by liquid chromatography. Complementary computational calculations made possible the interpretation and analysis of the differences observed in the mass spectra in terms of the energetics and structures of ions. In addition, the correct assignment of the calculated structures of the ion adducts of one of the studied compounds could be confirmed by means of infrared multiphoton dissociation spectroscopy. An alternative methodology was developed to determine the position of the N-oxide moiety in substituted pyrazines, employing carbon-13 nuclear magnetic resonance spectroscopy, through the computation of an index derived from the chemometric analysis of the data.

Buzzi, Lucila Inés. "Caracterización bioquímica y funcional de las dos UDP-Glc: glicoproteína glucosiltransferasas codificadas en el genoma de C. elegans" (2013). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
La UDP-Glc:glicoproteína glucosiltransferasa (UGGT) es el sensor de la conformación de las glicoproteínas en el “Control de Calidad de Plegamiento de Glicoproteínas” ya que sólo presenta actividad sobre glicoproteínas que no se encuentran en su conformación nativa. Las glicoproteínas que presentan oligosacáridos monoglucosilados interaccionan con lectinas-chaperonas presentes en el Retículo endoplásmico (RE) como Calnexina y Calreticulina lo cual previene que los intermediarios de plegamiento inmaduros continúen su camino hacia el Aparato de Golgi. En C. elegans existen dos genes, uggt-1 y uggt-2, homólogos a los que codifican para las UGGT en diferentes organismos. La expresión de las proteínas UGGT-1 y UGGT-2 en S. pombe alg6 gpt1-, que carece de actividad de UGGT, permitió demostrar que uggt-1 codifica para una UGGT activa (CeUGGT-1), mientras que la proteína codificada por uggt-2 carece de actividad de UGGT (CeUGGT-2). Mediante la construcción de proteínas quiméricas, se determinó que el dominio C-terminal de CeUGGT-2 es incapaz de transferir glucosa a proteínas mal plegadas. El estudio del gusano mutante de uggt-2 (VC1961) reveló que CeUGGT-2 es esencial para la viablidad del nematodo ya que los gusanos uggt-2 -/- se arrestan en estadíos embrionarios y en L1 mostrando un tamaño menor y posibles defectos en la cutícula. Mediante Real Time PCR observamos que ambos genes se expresan durante todo el ciclo de vida de C. elegans. Mediante la construcción de gusanos transgénicos pudimos detectar expresión de CeUGGT-1 en todas las células y tejidos del nematodo. uggt-1 se induce en condiciones de estrés de RE a través de la vía de señalización de ire-1 en la respuesta a proteínas mal plegadas (UPR), mientras que uggt-2 no lo hace. El silenciamiento de la expresión de la proteína UGGT-1 y UGGT-2 por ensayos de RNAi produjeron un retraso en el desarrollo en gusanos uggt-1(RNAi) y uggt-2(RNAi) y resultaron en una disminución de la sobrevida de gusanos uggt-1(RNAi). CeUGGT-1 y CeUGGT-2 juegan un rol protector ante condiciones de estrés de RE ya que con 10 μg/ml de Tunicamicina (TN) se arrestó el crecimiento de gusanos uggt-1(RNAi) y uggt-2(RNAi) en L2/L3 pero no el de gusanos control. Además ensayos de RNAi a bajas concentraciones de TN en ausencia de ire-1, sugirieron que CeUGGT-2 es importante para aliviar los bajos niveles de estrés de RE en ausencia de esta vía de la UPR. Estos resultados indicarían que ambos homólogos de UGGT de C. elegans poseerían distintas funciones biológicas.

Abstract:
The UDP-Glc:glycoprotein glucosyltransferase (UGGT) is the sensor of glycoprotein conformations in the glycoprotein folding quality control as it exclusively glucosylates glycoproteins not displaying their native conformations. Monoglucosylated glycoproteins thus formed may interact with the lectin-chaperones calnexin and calreticulin. This interaction prevents premature exit of folding intermediates to the Golgi. Bioinformatic analysis showed that in C. elegans there are two genes, uggt-1 and uggt-2, coding for UGGT homologues. Expression of both genes in S. pombe mutants devoid of UGGT activity showed that uggt-1 codes for an active UGGT protein (CeUGGT-1). On the other hand, uggt-2 coded for a protein (CeUGGT-2) apparently not displaying a canonical UGGT activity and conversely to what happens in humans, the C-terminal domain of CeUGGT-2 is inactive. However, uggt-2 is not a pseudogene as we can detect its expression along the entire development. The study of the mutant worm VC1961 revealed that CeUGGT-2 is essential for viability. Worms uggt-2 -/- were arrested in embryonic and L1 stages and they showed smaller size and possible defects in the cuticle. Furthermore, Real-time PCR analysis showed that both uggt-1 and uggt-2 genes are expressed during the entire C. elegans life cycle. Moreover, transgenic worms constructed by fosmid recombineering technique carrying the gfp under the control of uggt-1 promoter indicated that that CeUGGT-1 is expressed in all cells and tissues of the nematode. uggt-1, but not uggt-2, is upregulated under ER stress through the ire-1 arm of the unfolded protein response (UPR). RNAi-mediated depletion of CeUGGT-1 but not of CeUGGT-2 resulted in a reduced lifespan and that of CeUGGT-1 and CeUGGT-2 in a developmental delay. We found that both CeUGGT1 and CeUGGT2 play a protective role under ER stress conditions, since 10 μg/ml tunicamycin (TN) arrested development at the L2/L3 stage of both uggt-1(RNAi) and uggt-2(RNAi) but not of control worms. Furthermore, we found that the role of CeUGGT-2 but not CeUGGT-1 is significant in relieving low ER stress levels simulated with TN in the absence of the ire-1 unfolding protein response signaling pathway. Our results indicate that both C. elegans UGGT homologues may have distinct biological functions.

Buzzola, Fernanda Roxana. "Aislamiento, caracterización e identificación clonal de mutantes auxótrofas de Staphylococcus aureus : aplicación al desarrollo de vacunas" (2001). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Béguelin, Wendy. "Definición de una nueva clase de complejo transcripcional: ErbB2 actúa de coactivador de Stat3 promoviendo la proliferación en tumores mamarios" (2010). Tesis doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.

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Resumen:
El receptor con actividad de tirosina quinasa ErbB2 y la proteína transductora de señales y activadora de la transcripción 3 (Stat3) juegan un rol importante en el desarrollo del cáncer de mama. Distintas evidencias sugieren la existencia de interacciones cruzadas entre ErbB2 y Stat3. Sin embargo, los mecanismos moleculares que subyacen a esta interacción en tumores mamarios permanecen poco estudiados. En este trabajo identificamos un nuevo mecanismo de interacción entre ErbB2 y Stat3 que involucra la translocación nuclear de ErbB2 y la formación de un complejo en el que ErbB2 actúa como coactivador transcripcional de Stat3. Mostramos que la formación de este complejo es inducida tanto por el ligando de los receptores ErbBs, heregulina, como por los progestágenos a través del receptor de progesterona (PR). Demostramos también que la función de ErbB2 como coactivador de Stat3 promueve la activación del promotor de ciclina D1. Cuando la formación del complejo Stat3/ErbB2 es inducida por progestágenos, encontramos al PR co-reclutado en el promotor de ciclina D1, revelando un nuevo mecanismo de acción genómico no clásico del PR. Demostramos que la presencia de ErbB2 en el núcleo celular ejerce un rol fundamental en la proliferación in vitro e in vivo en tumores mamarios. Estos hallazgos revelan una posible intervención terapéutica nueva en tumores de mama que sobreexpresan ErbB2, mediante la inhibición de la translocación nuclear de ErbB2, dado que esta estrategia es efectiva en células tumorales resistentes a las terapias anti ErbB2 convencionales.

Abstract:
ErbB2 tyrosine kinase receptor and Signal Transducer and Activator of Transcription 3 (Stat3) have been unraveled as two major players in breast cancer growth. In spite of all the accumulating evidence suggesting a crosstalk between ErbB2 and Stat3, the molecular mechanisms underlying ErbB2 and Stat3 interaction in breast tumor remain poorly explored. In this work, we identified a new mechanism of ErbB2 and Stat3 interaction, which involves ErbB2 nuclear translocation and the assembly of a complex in which ErbB2 acts as a transcriptional coactivator of Stat3. We showed that the assembly of this complex is induced by heregulin, a ligand of the ErbBs receptors, as well as by ligand bound progesterone receptor (PR). We also highlighted that ErbB2 function as Stat3 coactivator drives cyclin D1 promoter activation. When the assembly of Stat3/ErbB2 complex is induced by progestins, we found PR recruitment together with Stat3 and ErbB2 to the cyclin D1 promoter, unraveling a new nonclassical PR genomic mechanism. We found that the nuclear Stat3/ErbB-2 transcriptional complex plays a key role in in vitro and in vivo proliferation of breast tumors. Our findings reveal a novel therapeutic intervention in ErbB2-overexpressing breast tumors, by inhibition of ErbB2 nuclear translocation, since this strategy has proven effective in tumor cells which are resistant to conventional anti ErbB2 therapies.

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